MX2013003795A

MX2013003795A - Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-receptor de interleucina-4 (il-4r).

Info

Publication number: MX2013003795A
Application number: MX2013003795A
Authority: MX
Inventors: Daniel B Dix; Xiaolin Tang
Original assignee: Regeneron Pharma
Priority date: 2010-10-06
Filing date: 2011-10-05
Publication date: 2013-06-24
Also published as: EA201390494A1; US20160102147A1; JP2013543505A; PH12013500672A1; EA201791328A1; JP5918246B2; US20120097565A1; JP2018048164A; SG189220A1; CN103501814B; EP2624865B1; US20260022182A1; US9238692B2; MX344294B; EP3354280B1; MY158130A; CN106267189A; CA2813587C; MX2019008084A; BR112013008366A2

Abstract

La presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 humano (hlL-4R). Las formulaciones pueden contener, además de un anticuerpo anti-hlL-4R, al menos un aminoácido, al menos un carbohidrato, o al menos un tensoactivo no iónico. Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención exhiben un grado sustancial de estabilidad del anticuerpo después del almacenamiento durante varios meses.

Description

FORMULACIONES ESTABILIZADAS QUE CONTIENEN ANTICUERPOS ANTI- RECEPTOR DE INTERLEUCINA-4 (IL-4R) CAMPO La presente invención se refiere al campo de las formulaciones de anticuerpos terapéuticos. Más específicamente, la presente invención se refiere al campo de las formulaciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 humano.

LISTADO DE SECUENCIAS Se presenta un archivo de texto conforme a ST.25 de un listado de secuencias al mismo tiempo que la presente memoria descriptiva. El contenido del archivo de texto se incorpora en la presente memoria como referencia. Se incluye una copia en papel del listado de secuencias, que es idéntica en su contenido al archivo de texto conforme a ST.25, como parte de la presente memoria descriptiva.

ANTECEDENTES Las macromoléculas terapéuticas (p.ej., anticuerpos) se deben formular de una manera que no solamente haga que las moléculas sean adecuadas para la administración a los pacientes, sino que también mantenga su estabilidad durante el almacenamiento y el uso posterior. Por ejemplo, los anticuerpos terapéuticos en disolución liquida tienen tendencia a la degradación, la agregación o a modificaciones químicas indeseadas, a menos que la disolución se formule de manera adecuada. La estabilidad de un anticuerpo en una formulación líquida depende no solamente de los tipos de excipientes usados en la formulación, sino también de las cantidades y proporciones de los excipientes entre sí. Además, se deben tener en cuenta otras consideraciones, además de la estabilidad, cuando se prepara una formulación líquida de anticuerpos. Los ejemplos de tales consideraciones adicionales incluyen la viscosidad de la disolución y la concentración de anticuerpo que se puede acomodar en una formulación dada, y la calidad visual o aspecto de la formulación. Así, cuando se formula un anticuerpo terapéutico, se debe tener mucho cuidado para conseguir una formulación que permanezca estable, que contenga una concentración adecuada de anticuerpo, y que posea una viscosidad adecuada, así como otras propiedades que permitan que la formulación se administre convenientemente a los pacientes.

Los anticuerpos hacia el receptor de interleucina-4 alfa humano (hlL-4Ra) son un ejemplo de una macromolécula terapéuticamente relevante que requiere una formulación adecuada. Los anticuerpos anti-hlL-4Ra son clínicamente útiles para el tratamiento o la prevención de enfermedades tales como dermatitis atópica y asma alérgica, y otras afecciones. Los anticuerpos anti-IL-4Ra ejemplares se describen, entre otros, en las patentes de EE.UU. n°s 7.605.237; 7.608.693; 7.465.450; y 7.186.809; y las solicitudes de patente de EE.UU. n°s 2010-0047254 y 2010-0021476.

Aunque se conocen los anticuerpos anti-hlL-4Ra, sigue existiendo la necesidad en la técnica de formulaciones farmacéuticas nuevas que comprendan anticuerpos anti-hlL-4Ra que sean lo suficientemente estables y adecuadas para la administración a los pacientes.

SUMARIO La presente invención satisface la necesidad anteriormente mencionada proporcionando formulaciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 alfa humano (hlL-4Ra).

En un aspecto, se proporciona una formulación farmacéutica liquida, que comprende: (i) un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 alfa humano (hlL-4Ra); (ii) un tampón; (iíi) un codisolvente orgánico; (iv) un estabilizador térmico; y (v) un reductor de la viscosidad.

En una realización, el anticuerpo se proporciona a una concentración de alrededor de 150 mg/ml + 50 mg/ml. En otra realización, el anticuerpo se proporciona a una concentración de alrededor de 150 mg/ml ± 15 mg/ml. En una realización específica, el anticuerpo se proporciona a una concentración de alrededor de 150 mg/ml.

En una realización, el anticuerpo comprende una o más de una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1-8. En una realización, el anticuerpo comprende (a) una región variable de la cadena pesada (HCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada 1 , 2 y 3 (HCDR1 -HCDR2-HCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:2, SEQ ID N°:3 y SEQ ID N°:4, respectivamente; y (b) una región variable de la cadena ligera (LCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena ligera 1 , 2 y 3 (LCDR1- LCDR2-LCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:6, SEQ ID N°:7 y SEQ ID N°:8, respectivamente. En una realización especifica, el anticuerpo comprende una HCVR y una LCVR, y cada una comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1 y SEQ ID N°:5, respectivamente.

En una realización, el anticuerpo comprende una o más de una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:9-16. En una realización, el anticuerpo comprende (a) una región variable de la cadena pesada (HCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada 1 , 2 y 3 (HCDR1 -HCDR2-HCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:10, SEQ ID N°:1 1 y SEQ ID N°:12, respectivamente; y (b) una región variable de la cadena ligera (LCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena ligera 1 , 2 y 3 (LCDR1-LCDR2-LCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:14, SEQ ID N°:15 y SEQ ID N°:16, respectivamente. En una realización específica, el anticuerpo comprende una HCVR y una LCVR, y cada una comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:9 y SEQ ID N°:13, respectivamente.

En una realización, el anticuerpo comprende una o más de una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°: 17-24. En una realización, el anticuerpo comprende (a) una región variable de la cadena pesada (HCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada 1 , 2 y 3 (HCDR1 -HCDR2-HCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:18, SEQ ID N°:19 y SEQ ID N°:20, respectivamente; y (b) una región variable de la cadena ligera (LCVR) que comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena ligera 1 , 2 y 3 (LCDR1-LCDR2-LCDR3), y cada una comprende una secuencia de SEQ ID N°:22, SEQ ID N°:23 y SEQ ID N°:24, respectivamente. En una realización específica, el anticuerpo comprende una HCVR y una LCVR, y cada una comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:17 y SEQ ID N°:21 , respectivamente.

En una realización, el pH de la formulación líquida es un pH de alrededor de 5,9 ± 0,5. En una realización específica, el pH de la formulación líquida es un pH de alrededor de 5,9 ± 0, 1. En una realización, el tampón farmacéutico líquido comprende uno o más tampones, que pueden tamponar de alrededor de pH 5,6 a alrededor de pH 6,2.

En una realización, la formulación farmacéutica líquida comprende un sistema de tampones que comprende al menos dos tampones. En una realización, el sistema de tampones comprende un primer tampón que tiene un intervalo de pH efectivo de 3,6 - 5,6 y un segundo tampón que tiene un intervalo de pH efectivo de 5,5 - 7,4. En una realización, el primer tampón tiene un pKa de alrededor de 4,8 ± 0,3 y el segundo tampón tiene un pKa de alrededor de 6,0 ± 0,3. En una realización específica, el primer tampón es un tampón de acetato y el segundo tampón es un tampón de histidina. En una realización específica, el acetato está a una concentración de 12,5 mM ± 1 ,9 mM y la histidina está a una concentración de 20 mM ± 3 mM.

En una realización, el codisolvente orgánico es un polímero no iónico que contiene un resto de polioxietileno. En ciertas realizaciones, el codisolvente orgánico es uno o más de polisorbato 20, poloxámero 181 y polietilen glicol 3350. En una realización específica, el copolímero orgánico es polisorbato 20.

En una realización, el codisolvente orgánico está a una concentración de alrededor del 0,2% ± 0,03% a alrededor del 1 % ± 0, 5% "peso respecto del volumen" o "p/v", en el que, p.ej., 0,1 g/ml = 10% y 0,01 g/ml = 1 %). En una realización específica, el codisolvente orgánico es polisorbato 20, que está a una concentración de alrededor del 0,2% ± 0,03% p/v.

En una realización, el estabilizador térmico es un carbohidrato. En una realización, el carbohidrato se selecciona del grupo que consiste en sacarosa, manitol y trehalosa. En una realización específica, el estabilizador térmico es sacarosa.

En una realización, el estabilizador térmico está a una concentración de alrededor del 0,9% ± 0,135% p/v a alrededor del 10% ± 1 ,5% p/v. En una realización específica, el estabilizador térmico es sacarosa a una concentración de alrededor del 5% ± 0,75% p/v.

En una realización, el reductor de la viscosidad es una sal seleccionada del grupo que consiste en hidrocloruro de arginina, tiocianato sódico, tiocianato amónico, sulfato amónico, cloruro amónico, cloruro cálcico, cloruro de zinc y acetato sódico. En una realización específica, el reductor de la viscosidad es hidrocloruro de L-arginina.

En una realización, el reductor de la viscosidad está a una concentración que no es mayor de 100 mM. En una realización, el reductor de la viscosidad está a una concentración de 50 mM ± 7,5 mM. En otra realización, el reductor de la viscosidad está a una concentración de 25 mM ± 3,75 mM. En una realización específica, el reductor de la viscosidad es hidrocloruro de L-arginina 25 mM ± 3,75 mM.

En una realización, la viscosidad de la formulación farmacéutica líquida es menor o igual a alrededor de 35 ± 3,5 cPoise. En una realización, la viscosidad es de alrededor de 21 ,5 ± 13,5 cPoise, alrededor de 1 1 ± 1 ,1 cPoise o alrededor de 8,5 ± 0,85 cPoise. En una realización específica, la viscosidad de la formulación farmacéutica líquida es de alrededor de 8,5 ± 0,85 cPoise.

En una realización, la osmolalidad de la formulación farmacéutica líquida es menor de alrededor de 450 mOsm/kg. En una realización, la osmolalidad de la formulación farmacéutica líquida es de alrededor de 290 ± 20 mOsm/kg.

En una realización, se recupera al menos un 90% o al menos un 95% de la forma nativa del anticuerpo anti-hlL-4Ra de la formulación farmacéutica líquida después de seis meses de almacenamiento de la formulación farmacéutica líquida a 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños. En una realización específica, se recupera al menos un 98% de la forma nativa del anticuerpo después de seis meses de almacenamiento a 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, se recupera al menos un 90% de la forma nativa del anticuerpo de la formulación farmacéutica líquida después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, menos del 45% del anticuerpo, que se recupera de la formulación farmacéutica líquida después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, es una forma ácida, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico.

En una realización, menos de alrededor del 4% del anticuerpo, que se recupera de la formulación farmacéutica líquida después de seis meses de almacenamiento a 25 °C, está agregado, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio de exclusión por tamaños.

En un aspecto, se proporciona una formulación farmacéutica líquida, que comprende: (i) alrededor de 150 mg/ml ± 50 mg/ml de un anticuerpo humano que se une específicamente a hlL-4Ra, en el que el anticuerpo comprende una región variable de la cadena pesada (HCVR) y una región variable de la cadena ligera (LCVR) que comprenden una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1 y SEQ' ID N°:5, respectivamente; (ii) alrededor de 12,5 mM ± 2 mM de acetato; (iii) alrededor de 20 mM ± 3 mM de histidina; (iv) alrededor del 5% ± 0,75% (p/v) de sacarosa; (v) alrededor del 0,2% ± 0,03% (p/v) de polisorbato 20; y (vi) alrededor de 25 mM ± 3,75 mM de arginina, a un pH de alrededor de 5,9 ± 0,5.

En una realización, la formulación farmacéutica líquida tiene una viscosidad de alrededor de 8,5 ± 0,85 cPoise a alrededor de 1 1 ± 1 ,1 cPoise. En una realización específica, la viscosidad de la formulación farmacéutica líquida es de alrededor de 8,5 ± 0,85 cPoise.

En una realización, la formulación farmacéutica líquida es fisiológicamente isotónica. En una realización, la osmolalidad de la formulación farmacéutica líquida es de alrededor de 290 ± 20 mOsm/kg.

En una realización, se recupera al menos alrededor del 98% de la forma nativa del anticuerpo anti-hlL4-Ra de la formulación farmacéutica líquida después de seis meses de almacenamiento a 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, se recupera al menos alrededor del 90% de la forma nativa del anticuerpo anti-hlL4-Ra de la formulación farmacéutica líquida después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, menos de alrededor del 45% del anticuerpo, que se recupera de la formulación farmacéutica líquida después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, es una forma ácida, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico.

En una realización, menos del 4% del anticuerpo, que se recupera de la formulación farmacéutica líquida después de seis meses de almacenamiento a 25 °C, está agregado, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio de exclusión por tamaños.

En un aspecto, se proporciona una formulación farmacéutica líquida isotónica de baja viscosidad estable, que contiene al menos 100 mg/ml de un anticuerpo aiit¡-hll_4-Ra estable. En una realización, el anticuerpo está a una concentración de alrededor de 150 mg/ml ± 50 mg/ml. En una realización específica, la concentración del anticuerpo es de alrededor de 150 mg/ml + 15 mg/ml.

En una realización, el anticuerpo comprende una o más de una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1-8. En una realización, el anticuerpo comprende una región variable de la cadena pesada (HCVR) y una región variable de la cadena ligera (LCVR), en el que la combinación HCVR / LCVR comprende regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada y ligera (HCDR1 -HCDR2-HCDR3 / LCDR1-LCDR2-LCDR3), que comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID N°s:2 - 3 - 4 / SEQ ID N°s:6 - 7 - 8, respectivamente. En una realización específica, el anticuerpo comprende una HCVR y una LCVR, y cada una comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1 y SEQ ID N°:5, respectivamente.

En ciertas realizaciones, la formulación tiene una viscosidad menor de 35 ± 3,5 cPoise, menor de 20 ± 2 cPoise, menor de 15 ± 1 ,5 cPoise, o menor de 10 ± 1 cPoise. En una realización específica, la formulación líquida tiene una viscosidad de alrededor de 8,5 ± 2,5 cPoise.

En una realización, la formulación tiene una osmolaridad que es fisiológicamente compatible. En una realización específica, la formulación comprende una osmolalidad de 290 ± 20 mOsm/kg.

En una realización, el anticuerpo es estable durante al menos alrededor de seis meses a alrededor de 5 °C. En una realización específica, al menos alrededor del 98% del anticuerpo mantiene su conformación nativa tras alrededor de seis meses de almacenamiento a 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, el anticuerpo es estable durante al menos alrededor de ocho semanas de almacenamiento a alrededor de 45 °C. En una realización específica, al menos alrededor del 90% del anticuerpo mantiene su conformación nativa tras alrededor de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, tal como se determina medíante cromatografía de exclusión por tamaños. En una realización específica, menos de alrededor del 45% del anticuerpo comprende una forma acida tras alrededor de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico.

En una realización, el anticuerpo es estable durante al menos alrededor de seis meses de almacenamiento a alrededor de 25 °C. En una realización específica, menos de alrededor del 4% del anticuerpo comprende una forma agregada tras alrededor de seis meses de almacenamiento a 25 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

En una realización, la formulación comprende un tampón y tiene un pH de alrededor de 5,9 ± 0,5. En una realización, el tampón comprende un tampón de acetato y un tampón de histidina. En una realización específica, el acetato está a una concentración de 12,5 mM + 1 ,9 mM y la histidina está a una concentración de 20 mM ± 3 mM.

En una realización, la formulación comprende un codisolvente orgánico a una concentración de alrededor del 0,2% ± 0,03% a alrededor del 1 % ± 0,15% p/v. En una realización, el codisolvente orgánico es un polímero no iónico que contiene un resto de polioxietileno. En ciertas realizaciones, el codisolvente orgánico es uno o más de polisorbato 20, poloxámero 181 y polietilen glicol 3350. En una realización específica, el codisolvente orgánico es polisorbato 20 a una concentración de alrededor del 0,2% ± 0,03% p/v.

En una realización, la formulación comprende un estabilizador térmico a una concentración de alrededor del 0,9% ± 0,135% p/v a alrededor del 10% ± 1 ,5% p/v. En una realización, el estabilizador térmico es un carbohidrato. En una realización, el carbohidrato se selecciona del grupo que consiste en sacarosa, manitol y trehalosa. En una realización específica, el estabilizador térmico es sacarosa a una concentración de alrededor del 5% ± 0,75% p/v.

En una realización, la formulación comprende un reductor de la viscosidad a una concentración que no es mayor de alrededor de 100 mM. En una realización, el reductor de la viscosidad es arginina. En una realización especifica, el reductor de la viscosidad es hidrocloruro de L-arginina a 25 mM ± 3,75 mM.

En una realización específica, la formulación farmacéutica líquida isotónica de baja viscosidad estable tiene una viscosidad de alrededor de 8,5 ± 2,5 cPoise y una osmolalidad de alrededor de 290 ± 20 mOsm/kg, y comprende: (i) 150 mg/ml ± 15 mg/ml de un anticuerpo antí-hll_4-Ra, en el que el anticuerpo comprende una HCVR y una LCVR, cada una de las cuales comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:1 y SEQ ID N°:5, respectivamente; (ii) 12,5 mM ± 1 ,9 mM de acetato; (iii) 20 mM ± 3 mM de histidina; (iv) 0,2% ± 0,03% p/v de polisorbato 20; (v) 5% ± 0,75% p/v de sacarosa; y (vi) 25 mM ± 3,75 mM de hidrocloruro de L-arginina. Según esta realización, (i) al menos alrededor del 98% del anticuerpo mantiene su conformación nativa, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños, cuando se almacena a 5 °C durante al menos alrededor de seis meses, (ii) al menos alrededor del 90% del anticuerpo mantiene su conformación nativa, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños, cuando se almacena a 45 °C durante al menos alrededor de ocho semanas, (iii) menos de alrededor del 45% del anticuerpo comprende una forma ácida, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico, cuando se almacena a 45 °C durante alrededor de ocho semanas, y (iv) menos de alrededor del 4% del anticuerpo comprende una forma agregada, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños, cuando se almacena a 25 °C durante alrededor de seis meses.

En un aspecto, se proporciona una formulación farmacéutica líquida de cualquiera de los aspectos precedentes en un recipiente. En una realización, el recipiente es un vial de vidrio. En otra realización, el recipiente es un microinfusor. En otra realización, el recipiente es una jeringa. En una realización específica, la jeringa comprende un émbolo revestido con fluorocarbono. En una realización específica, la jeringa es una jeringa con contenido bajo de tungsteno.

Otras realizaciones de la presente invención serán evidentes a partir de la revisión de la descripción detallada siguiente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA Antes de describir la presente invención, se debe entender que esta invención no se limita a los métodos y condiciones experimentales particulares descritos, ya que tales métodos y condiciones pueden variar. También se debe entender que la terminología utilizada en la presente memoria tiene el propósito de describir solamente las realizaciones particulares, y no pretende ser limitante, ya que el alcance de la presente invención estará limitado solamente por las reivindicaciones adjuntas.

A menos que se defina de otra manera, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente memoria tienen el mismo significado que comprende habitualmente un experto en la técnica a la que pertenece esta invención. Tal como se usa en la presente memoria, la expresión "alrededor de", cuando se usa con referencia a un valor o intervalo de valores numéricos citado particular, significa que el valor puede variar desde el valor citado en no más del 1 %. Por ejemplo, tal como se emplea en la presente memoria, la expresión "alrededor de 100" incluye 99 y 101 , y todos los valores intermedios (p.ej., 99,1 , 99,2, 99,3, 99,4, etc.).

Aunque se pueden usar métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en la presente memoria en la práctica o en el ensayo de la presente invención, a continuación se describen los métodos y materiales preferidos. Todas las publicaciones mencionadas en la presente memoria se incorporan en la presente memoria como referencia en su totalidad.

FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Tal como se usa en la presente memoria, la expresión "formulación farmacéutica" significa una combinación de al menos un ingrediente activo (p.ej., una molécula pequeña, macromoíécula, compuesto, etc. que es capaz de ejercer un efecto biológico en un ser humano o en un animal que no es humano), y al menos un ingrediente inactivo que, cuando se combina con el ingrediente activo o uno o más ingrediente inactivos adicionales, es adecuado para la administración terapéutica a un ser humano o a un animal que no es humano. El término "formulación", tal como se usa en la presente memoria, significa "formulación farmacéutica", a menos que se indique específicamente de otra manera. La presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas que comprenden al menos un polipéptido terapéutico. Según ciertas realizaciones de la presente invención, el polipéptido terapéutico es un anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor de interleucina-4 alfa humano (hlL-4Ra). Más específicamente, la presente invención incluye formulaciones farmacéuticas que comprenden: (i) un anticuerpo humano que se une específicamente a hll_-4Ra; (ii) un sistema de tampones de acetato/histidina; (iii) un codisolvente orgánico que es un tensoactivo no iónico; (iv) un estabilizador térmico que es un carbohidrato; y (v) un reductor de la viscosidad. Los componentes y formulaciones ejemplares específicos incluidos en la presente invención se describen con detalle más adelante.

ANTICUERPOS QUE SE UNEN ESPECÍFICAMENTE A hll_-4R Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender un anticuerpo humano, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, qüe se une específicamente a hlL-4Ra. Tal como se usa en la presente memoria, el término "hlL-4Rct" significa un receptor de citocinas humano que se une específicamente a interleucina-4 (IL-4). En ciertas realizaciones, el anticuerpo contenido en las formulaciones farmacéuticas de la presente invención se une específicamente al dominio extracelular de hlL-4Ra. Se describe una secuencia de aminoácidos del receptor de IL-4 alfa humano (hlL-4Ra) ejemplar en SEQ ID N°:25. Los anticuerpos hacia hlL-4Ra se describen en las pat. de EE.UU. n°s 7.605.237 y 7.608.693. El dominio extracelular de hlL-4Ra está representado por la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N°:26.

El término "anticuerpo", tal como se usa en la presente memoria, pretende hacer referencia en general a moléculas de inmunoglobulina que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro, así como multímeros de las mismas (p.ej., IgM); sin embargo, las moléculas de ¡nmunoglobulinas que consisten solamente en cadenas pesadas (es decir, que carecen de cadenas ligeras) también están incluidas en la definición del término "anticuerpo". Cada cadena pesada comprende una región variable de la cadena pesada (abreviada en la presente memoria como HCVR o VH) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena pesada comprende tres dominios, CH1 , CH2 y CH3. Cada cadena ligera comprende una región variable de la cadena ligera (abreviada en la presente memoria como LCVR o VL) y una región constante de la cadena ligera. La región constante de la cadena ligera comprende un dominio (CL1 ). Las regiones VH y VL se pueden subdividir además en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDRs), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones estructurales (FR). Cada VH y VL está compuesta por tres CDRs y cuatro FRs, dispuestas desde el extremo amino al extremo carboxilo en el siguiente orden: FR1 , CDR1 , FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

A menos que se indique específicamente de otra manera, el término "anticuerpo", tal como se usa en la presente memoria, se debe entender que abarca moléculas completas de anticuerpo, así como fragmentos de unión al antígeno de los mismos. Las expresiones "porción de unión al antígeno" o "fragmento de unión al antígeno" de un anticuerpo (o simplemente "porción de anticuerpo" o "fragmento de anticuerpo"), tal como se usan en la presente memoria, se refieren a uno o más fragmentos de un anticuerpo que mantienen la capacidad de unirse específicamente a hlL-4Ra o un epítopo del mismo.

Un "anticuerpo aislado", tal como se usa en la presente memoria, pretende referirse a un anticuerpo que está sustancialmente exento de otros anticuerpos que tienen especificidades antigénicas diferentes (p.ej., un anticuerpo aislado que se une específicamente a hlL-4Ra está sustancialmente exento de anticuerpos qué se unen específicamente a antígenos distintos de hlL-4Ra).

La expresión "se une específicamente", o similares, significa que un ánticüerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo forma un complejo con un antígeno que es relativamente estable en condiciones fisiológicas. La unión específica se puede caracterizar por una constante de disociación de al menos aproximadamente 1x10"6 M o mayor. Los métodos para determinar si dos moléculas se unen específicamente se conocen bien en la técnica e incluyen, por ejemplo, diálisis en equilibrio, resonancia de plasmones superficiales, y similares. Un anticuerpo aislado que se une específicamente a hlL-4Ra, sin embargo, puede tener reactividad cruzada hacia otros antígenos, tales como moléculas de IL-4R de otras especies (ortólogos). En el contexto de la presente invención, los anticuerpos multiespecíficos (p.ej., biespecíficos) que se unen a hlL-4Ra así como a uno o más antígenos adicionales se considera que "se unen específicamente" a hlL-4Ra.

Además, un anticuerpo aislado puede estar sustancialmente exento de otros materiales celulares o productos químicos.

Los anticuerpos anti-hlL-4Ra ejemplares que se pueden incluir en las formulaciones farmacéuticas de la presente invención se exponen en los documentos US 7.605.237 y US 7.608.693, cuyas descripciones se incorporan como referencia en su totalidad.

Según ciertas realizaciones de la presente invención, el anticuerpo anti-hlL-4Ra es una lgG1 humana que comprende una región variable de la cadena pesada que es del subtipo IGHV3-9 y una región variable de la cadena ligera que es del subtipo IGKV2-28 (véase Barbie y Lefranc, The Human Immunoglobulin Kappa Variable (IGKV) Genes and Joining (IGKJ) Segments, Exp. Clin. Immunogenet. 1998; 15:171-183; y Scaviner, D. et al., Protein Displays of the Human Immunoglobulin Heavy, Kappa and Lambda Variable and Joining Regions, Exp. Clin. Immunogenet., 1999; 16:234-240).

En ciertas realizaciones, el anti-hlL-4Ra comprende al menos una sustitución de aminoácidos, que da como resultado un cambio de cargas en una superficie expuesta del anticuerpo respecto de la secuencia de IGHV3-9 de la línea germinal o la secuencia de IGKV2-28 de la línea germinal. Las secuencias de IGHV3-9 e IGKV2-28 de la línea germinal, y los números de asignación de la posición de los aminoácidos presentados en la presente memoria concuerdan con el International ImMunoGeneTics (IMGT) Information System, como se describió en Lefranc, M.-P., et al., IMGT®, the international ImMunoGeneTics information system®, Nucí. Acids Res, 37, D1006-D1012 (2009). En ciertas realizaciones, la superficie expuesta comprende una región determinante de la complementariedad (CDR). En ciertas realizaciones, la sustitución o sustituciones de aminoácidos se seleccionan del grupo que consiste en (a) un aminoácido básico sustituido por un aminoácido neutro en CDR2 (p.ej., en la posición 58) de IGHV3-9, (b) un aminoácido neutro sustituido por un aminoácido ácido en CDR3 (p.ej., en la posición 107) de IGHV3-9, y (c) un aminoácido neutro sustituido por un aminoácido básico en CDR1 (p.ej., en la posición 33) de IGKV2-28. Se supone que las permutaciones únicas en la distribución de cargas de un anticuerpo, en especial en una interfase con el medio (tal como, p.ej., en una CDR), crearían condiciones impredecibles para la estabilidad del anticuerpo en disolución.

En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-hlL-4Ra comprende al menos una sustitución de aminoácidos, que crea un cambio en la tensión torsional en una región estructural de una región variable del anticuerpo respecto de la secuencia de IGHV3-9 de la línea germinal o la secuencia de IGKV2-28 de la línea germinal. En ciertas realizaciones, la sustitución o sustituciones de aminoácidos se seleccionan del grupo que consiste en (a) una prolina sustituida por un aminoácido que no es prolina en la región estructural 3 (FR3) (p.ej., en la posición 96) de IGHV3-9, y (b) un aminoácido que no es prolina sustituido por una prolina en la región estructural 2 (FR2) (p.ej., en la posición 46) de IGKV2-28. Se supone que los cambios en la capacidad de rotar de la cadena peptídica, en especial en una región estructural, que afectan a la inferíase de la CDR con el disolvente, crearían condiciones impredecibles para la estabilidad del anticuerpo en disolución.

Según ciertas realizaciones de la presente invención, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende una región determinante de la complementariedad de la cadena pesada (HCDR) 1 de SEQ ID N°: 2, una HCDR2 de SEQ ID N°:3, y una HCDR3 de SEQ ID N°: 4. En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende un HCVD de SEQ ID N°:1.

Según ciertas realizaciones de la presente invención, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende una región determinante de la complementariedad de la cadena ligera (kappa) (LCDR) 1 de SEQ ID N°: 6, una LCDR2 de SEQ ID N°: 7, y una LCDR3 de SEQ ID N°: 8. En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende un LCVD de SEQ ID N°:5.

Según otras realizaciones de la presente invención, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende una HCDR1 de SEQ ID N°: 10, una HCDR2 de SEQ ID N°:1 1 , una HCDR3 de SEQ ID N°: 12, una LCDR1 de SEQ ID N°: 14, una LCDR2 de SEQ ID N°:15, y una LCDR3 de SEQ ID N°: 16. En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende un HCVD de SEQ ID N°:9 y un LCVD de SEQ ID N°:13.

Según otras realizaciones de la presente invención, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende una HCDR1 de SEQ ID N°: 18, una HCDR2 de SEQ ID N°:19, una HCDR3 de SEQ ID N°: 20, una LCDR1 de SEQ ID N°: 22, una LCDR2 de SEQ ID N°:23, y una LCDR3 de SEQ ID N°: 24. En ciertas realizaciones, el anticuerpo anti-hlL-4Ra, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, comprende un HCVD de SEQ ID N°:17 y un LCVD de SEQ ID N°:21.

El anticuerpo ejemplar no limitante usado en los Ejemplos de la presente memoria se denomina "mAb1 ". Este anticuerpo también se denomina H4H098P en el documento US 7.608.693. mAb1 (H4H098P) comprende un par de secuencias de aminoácidos de HCVR/LCVR que tienen las SEQ ID N°s:1/5, y dominios HCDR1 -HCDR2-HCDR3 / LCDR1-LCDR2-LCDR3 representados por SEQ ID N°s:2 - 3 - 4 / SEQ ID N°s:6 - 7 - 8.

Otro anticuerpo ejemplar no limitante que se puede usar en la práctica de esta invención se denomina "mAb2". Este anticuerpo también se denomina H4H083P en el documento US 7.608.693. mAb2 (H4H083P) comprende un par de secuencias de aminoácidos de HCVR/LCVR que tienen las SEQ ID N°s:9/13, y dominios HCDR1-HCDR2-HCDR3 / LCDR1 -LCDR2-LCDR3 representados por SEQ ID N°s:10 - 1 1 - 12 / SEQ ID N°s:14 - 15 - 16.

Aún otro anticuerpo ejemplar no limitante que se puede usar en la práctica de esta invención se denomina "mAb3". Este anticuerpo también se denomina H4H095P en el documento US 7.608.693. mAb3 (H4H095P) comprende un par de secuencias de aminoácidos de HCVR/LCVR que tienen las SEQ ID N°s: 17/21 , y dominios HCDR1-HCDR2-HCDR3 / LCDR1 -LCDR2-LCDR3 representados por SEQ ID N°s:18 - 19 - 20 / SEQ ID N°s:22 - 23 - 24.

La cantidad de anticuerpo, o fragmento de unión al antígeno del mismo, contenida en las formulaciones farmacéuticas de la presente invención puede variar dependiendo de las propiedades específicas deseadas de las formulaciones, así como de las circunstancias y objetivos particulares para los que se van a usar las formulaciones. En ciertas realizaciones, las formulaciones farmacéuticas son formulaciones líquidas que pueden contener de alrededor de 100 ± 10 mg/mL a alrededor de 200 ± 20 mg/mL de anticuerpo; alrededor de 1 10 ± 1 1 mg/mL a alrededor de 190 + 19 mg/mL de anticuerpo; alrededor de 120 ± 12 mg/mL a alrededor de 180 ± 18 mg/mL de anticuerpo; alrededor de 130 ± 13 mg/mL a alrededor de 170 ± 17 mg/mL de anticuerpo; alrededor de 140 ± 14 mg/mL a alrededor de 160 ± 16 mg/mL de anticuerpo; o alrededor de 150 ± 15 mg/mL de anticuerpo. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden comprender alrededor de 90 mg/mL; alrededor de 95 mg/mL; alrededor de 100 mg/mL; alrededor de 105 mg/mL; alrededor de 110 mg/mL; alrededor de 115 mg/mL; alrededor de 120 mg/mL; alrededor de 125 mg/mL; alrededor de 130 mg/mL; alrededor de 131 mg/mL; alrededor de 132 mg/mL; alrededor de 133 mg/mL; alrededor de 134 mg/mL; alrededor de 135 mg/mL; alrededor de 140 mg/mL; alrededor de 145 mg/mL; alrededor de 150 mg/mL; alrededor de 155 mg/mL; alrededor de 160 mg/mL; alrededor de 165 mg/mL; alrededor de 170 mg/mL; alrededor de 175 mg/mL; alrededor de 180 mg/mL; alrededor de 185 mg/mL; alrededor de 190 mg/mL; alrededor de 195 mg/mL; o alrededor de 200 mg/mL de un anticuerpo o un fragmento de unión al antígeno del mismo, que se une específicamente a hlL-4Ra.

EXCIPIENTES Y pH Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención comprenden uno o más excipientes. El término "excipiente", tal como se usa en la presente memoria, significa cualquier agente no terapéutico añadido a la formulación para proporcionar una consistencia, viscosidad o efecto estabilizante deseados.

En ciertas realizaciones, la formulación farmacéutica de la invención, comprende al menos un codisolvente orgánico de un tipo y en una cantidad que estabiliza el anticuerpo hacia hlL-4Ra en condiciones de manipulación agresiva, tales como, p.ej., la agitación en vórtex. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa la prevención de la formación de más de un 2% de anticuerpos agregados respecto de la cantidad total de anticuerpo (en proporción molar) a lo largo del transcurso de la manipulación agresiva. En ciertas realizaciones, la manipulación agresiva es la agitación en vórtex de una disolución que contiene el anticuerpo y el codisolvente orgánico durante alrededor de 120 minutos.

En ciertas realizaciones, el codisolvente orgánico es un tensoactivo no iónico, tal como un alquil poli(óxido de etileno). Los tensoactivos no iónicos específicos que se pueden incluir en las formulaciones de la presente invención incluyen, p.ej., polisorbatos tales como polisorbato 20, polisorbato 28, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 65, polisorbato 80, polisorbato 81 , y polisorbato 85; poloxámeros tales como poloxámero 181 , poloxámero 188, poloxámero 407; o polietilen glicol (PEG). El polisorbato 20 se conoce también como TWEEN 20, monolaurato de sorbitán y monolaurato de polioxietilensorbitán. El poloxámero 181 se conoce también como PLURONIC F68.

La cantidad de codisolvente orgánico contenida en las formulaciones farmacéuticas de la presente invención puede variar dependiendo de las propiedades específicas deseadas de las formulaciones, así como de circunstancias y objetivos particulares para los que se van a usar las formulaciones. En ciertas realizaciones, las formulaciones pueden contener de alrededor del 0,1 % ± 0,01 % a alrededor del 2% ± 0,2% de tensoactivo. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden comprender alrededor del 0,09%; alrededor del 0,10%; alrededor del 0,1 1%; alrededor del 0,12%; alrededor del 0,13%; alrededor del 0,14%; alrededor del 0,15%; alrededor del 0,16%; alrededor del 0,17%; alrededor del 0,18%; alrededor del 0,19%; alrededor del 0,20%; alrededor del 0,21 %; alrededor del 0,22%; alrededor del 0,23%; alrededor del 0,24%; alrededor del 0,25%; alrededor del 0,26%; alrededor del 0,27%; alrededor del 0,28%; alrededor del 0,29%; o alrededor del 0,30% de polisorbato 20 o poloxámero 181. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden comprender alrededor del 0,5%; alrededor del 0,6%; alrededor del 0,7%; alrededor del 0,8%; alrededor del 0,9%; alrededor del 1 %; alrededor del 1 ,1 %; alrededor del 1 ,2%; alrededor del 1 ,3%; alrededor del 1 ,4%; alrededor del 1 ,5%; alrededor del 1 ,6%; alrededor del 1 ,7%; alrededor del 1 ,8%; alrededor del 1 ,9%; o alrededor del 2,0% de PEG 3350.

Los codisolventes orgánicos ejemplares que estabilizan el anticuerpo hacia hlL-4Ra incluyen un 0,2% ± 0,02% de polisorbato 20, 0,2% ± 0,02% de poloxámero 181 , o 1 % ± 0,1 % de PEG 3350.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender además uno o más estabilizadores térmicos de un tipo y en una cantidad que estabiliza el anticuerpo hacia hlL-4Ra en condiciones de esfuerzo térmico. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa el mantenimiento de más de alrededor del 92% del anticuerpo en una conformación nativa cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el estabilizador térmico se mantiene a alrededor de 45 °C durante hasta alrededor de 28 días. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que menos de alrededor del 5% del anticuerpo está agregado cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el estabilizador térmico se mantiene a alrededor de 45 °C durante hasta alrededor de 28 días.

En ciertas realizaciones, el estabilizador térmico es un carbohidrato o alcohol de carbohidrato seleccionado de sacarosa, trehalosa y manitol, o cualquier combinación de los mismos, y cuya cantidad contenida en la formulación puede variar dependiendo de las circunstancias y objetivos específicos para los que se usa la formulación. En ciertas realizaciones, las formulaciones pueden contener alrededor del 2,5% a alrededor del 10% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 3% a alrededor del 9,5% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 3,5% a alrededor del 9% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 4% a alrededor del 8,5% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 4,5% a alrededor del 8% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 5% a alrededor del 7,5% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; alrededor del 5,5% a alrededor del 7% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato; o alrededor del 6,0% a alrededor del 6,5% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato. Por ejemplo, las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender alrededor del 2,5% ± 0,375%; alrededor del 3% ± 0,45%; alrededor del 3,5% ± 0,525%; alrededor del 4,0% ± 0,6%; alrededor del 4,5% ± 0,675%; alrededor del 5,0% ± 0,75%; alrededor del 5,5% ± 0,825%; alrededor del 6,0% ± 0,9%; alrededor del 6,5% ± 0,975%; alrededor del 7,0% ± 1 ,05%; alrededor del 7,5% ± 1 ,125%; alrededor del 8,0% ± 1 ,2%; 8,5% ± 1 ,275%; alrededor del 9,0% ± 1 ,35%; o alrededor del 10,0% ± 1 ,5% de carbohidrato o alcohol de carbohidrato (p.ej., sacarosa, trehalosa o manitol).

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender además un tampón o sistema de tampones, que sirve para mantener un pH estable y para ayudar a estabilizar el anticuerpo hacia hlL-4Ra. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que menos de alrededor del 3,0% ± 0,5% del anticuerpo está agregado cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 45 °C durante hasta alrededor de 14 días. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que menos de alrededor del 3,7% ± 0,5% del anticuerpo está agregado cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 25 °C durante hasta alrededor de 6 meses. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que al menos un 95% ± 0,5% del anticuerpo está en su conformación nativa tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 45 °C durante hasta alrededor de 14 días. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que al menos un 96% ± 0,5% del anticuerpo está en su conformación nativa tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 25 °C durante hasta alrededor de 6 meses. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que al menos un 62% ± 0,5% del anticuerpo está en su conformación neutra tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 45 °C durante hasta alrededor de 14 días. En ciertas realizaciones, "estabiliza" significa que al menos un 54% ± 0,5% del anticuerpo está en su conformación neutra tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico cuando la disolución que contiene el anticuerpo y el tampón se mantiene a alrededor de 25 °C durante hasta alrededor de 6 meses. "Conformación neutra" significa la fracción de anticuerpo que eluye de una resina de intercambio iónico en el pico principal, que generalmente está flanqueado por picos más "básicos" a un lado y picos más "ácidos" al otro lado.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden tener un pH de alrededor de 5,2 a alrededor de 6,4. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden tener un pH de alrededor de 5,2; alrededor de 5,3; alrededor de 5,4; alrededor de 5,5; alrededor de 5,6; alrededor de 5,7; alrededor de 5,8; alrededor de 5,9; alrededor de 6,0; alrededor de 6, 1 ; alrededor de 6,2; alrededor de 6,3; o alrededor de 6,4. En ciertas realizaciones, el pH es de alrededor de 5,3 ± 0,2; alrededor de 5,9 ± 0,2; o alrededor de 6,0 ± 0,2.

En ciertas realizaciones, el tampón o sistema de tampones comprende al menos un tampón que tiene un intervalo de tamponamiento que coincide completamente o en parte con el intervalo de pH 5,2 - 6,4. En una realización, el tampón o sistema de tampones comprende dos tampones, el primero de los cuales tiene un intervalo de pH efectivo de 3,6 - 5,6 y el segundo de los cuales tiene un intervalo de pH efectivo de 5,5 - 7,4. En una realización, el primer tampón tiene un pKa de alrededor de 4,8 ± 0,3 y el segundo tampón tienen pKa de alrededor de 6,0 ± 0,3. En ciertas realizaciones, el sistema de tampones comprende un tampón de acetato y un tampón de histidina. En ciertas realizaciones, la histidina está presente a alrededor de 1 ,3 - 1 ,9 partes por 1 parte de acetato en moles. En ciertas realizaciones, la histidina está presente a alrededor de 1 ,6 ± 0,25 partes respecto de 1 parte de acetato en moles. En ciertas realizaciones, el acetato está presente a una concentración de alrededor de 2,5 mM a alrededor de 22,5 mM; alrededor de 3,0 mM a alrededor de 22 mM; alrededor de 3,5 mM a alrededor de 21 ,5 mM; alrededor de 4,0 mM a alrededor de 21 ,0 mM; alrededor de 4,5 mM a alrededor de 20,5 mM; alrededor de 5,0 mM a alrededor de 20 mM; alrededor de 5,5 mM a alrededor de 19,5 mM; alrededor de 6,0 mM a alrededor de 19,0 mM; alrededor de 6,5 mM a alrededor de 18,5 mM; alrededor de 7,0 mM a alrededor de 18,0 mM; alrededor de 7,5 mM a alrededor de 17,5 mM; alrededor de 8,0 mM a alrededor de 17 mM; alrededor de 8,5 mM a alrededor de 16,5 mM; alrededor de 9,0 mM a alrededor de 16,0 mM; alrededor de 9,5 mM a alrededor de 15,5 mM; alrededor de 10,0 mM a alrededor de 15,0 mM; alrededor de 10,5 mM a alrededor de 14,5 mM; alrededor de 12,5 mM ± 1 ,875 mM; alrededor de 11 ,0 mM a alrededor de 14,0 mM; alrededor de 1 1 ,5 mM a alrededor de 13,5 mM; o alrededor de 12,0 mM a alrededor de 13,0 mM. En ciertas realizaciones, la histidina está presente a una concentración de alrededor de 10 mM a alrededor de 30 mM; alrededor de 1 1 mM a alrededor de 29 mM; alrededor de 12 mM a alrededor de 28 mM; alrededor de 13 mM a alrededor de 27 mM; alrededor de 14 mM a alrededor de 26 mM; alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM; alrededor de 16 mM a alrededor de 24 mM; alrededor de 17 mM a alrededor de 23 mM; alrededor de 18 mM a alrededor de 22 mM; o alrededor de 19 mM a alrededor de 21 mM. En ciertas realizaciones, el sistema de tampones comprende acetato a alrededor de 12,5 mM e histidina a alrededor de 20 mM, a un pH de alrededor de 5,9.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender además uno o más excipientes, que sirven para mantener una viscosidad reducida o para disminuir la viscosidad de las formulaciones que contienen una concentración elevada de proteína (p.ej., en general > 100 mg/ml de proteína). En ciertas realizaciones, la formulación comprende arginina en una cantidad suficiente para mantener la viscosidad de la formulación liquida por debajo de alrededor de 35 cPoise, por debajo de alrededor de 30 cPoise, por debajo de alrededor de 25 cPoise, por debajo de alrededor de 20 cPoise, por debajo de alrededor de 15 cPoise, por debajo de alrededor de 14 cPoise, por debajo de alrededor de 13 cPoise, por debajo de alrededor de 12 cPoise, por debajo de alrededor de 10 cPoise, o por debajo de alrededor de 9 cPoise.

En ciertas realizaciones, la formulación farmacéutica de la presente invención contiene arginina, preferiblemente en forma de hidrocloruro de L-arginina, a una concentración de alrededor de 25 mM ± 3,75 mM, alrededor de 50 mM ± 7,5 mM, o alrededor de 100 mM ± 15 mM. En ciertas realizaciones, la arginina está de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, alrededor de 21 mM a alrededor de 29 mM, alrededor de 21 ,25 mM a alrededor de 28,75 mM, alrededor de 22 mM a alrededor de 28 mM, alrededor de 23 mM a alrededor de 27 mM o alrededor de 24 mM a alrededor de 26 mM.

FORMULACIONES EJEMPLARES Según un aspecto de la presente invención, la formulación farmacéutica es una formulación liquida, en general fisiológicamente isotónica, de viscosidad baja, que comprende: (i) un anticuerpo humano que se une específicamente a hlL-4Ra (p.ej., mAb1 , mAb2 o mAb3 [anteriormente mencionados]), a una concentración de alrededor de 100 mg/ml o mayor; (ii) un sistema de tampones que proporciona un tamponamiento suficiente a alrededor de 5,9 ± 0,6; (¡ii) un carbohidrato que sirve, entre otros, como estabilizador térmico; (iv) un codisolvente orgánico, que protege la integridad estructural del anticuerpo; y (v) un aminoácido, que sirve para mantener una viscosidad razonable para la inyección subcutánea.

Según una realización, la formulación farmacéutica comprende: (i) un anticuerpo lgG1 humano que se une específicamente a hlL-4Ra y que comprende una región variable de la cadena pesada de tipo IGHV3-9 sustituida y una región variable de la cadena ligera de tipo IGLV2-28 sustituida (p.ej., mAb1 ) a una concentración de alrededor de 100 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml; (ii) un sistema de tampones que comprende acetato e histidina, que tampona de manera eficaz a alrededor de pH 5,9 ± 0,6; (iii) sacarosa como estabilizador térmico; (iv) un polisorbato como codisolvente orgánico; y (v) arginina como reductor de la viscosidad.

Según una realización, la formulación farmacéutica comprende: (i) un anticuerpo lgG1 humano que se une específicamente a hlL-4Ra, y que comprende una HCDR1 de SEQ ID N°:2, una HCDR2 de SEQ ID N°:3, una HCDR3 de SEQ ID N°:4, una LCDR1 de SEQ ID N°:6, una LCDR2 de SEQ ID N°:7, y una LCDR3 de SEQ ID N°:8, a una concentración de alrededor de 150 mg/ml ± 25 mg/ml; (ii) acetato a alrededor de 12,5 mM ± 1 ,9 mM e histidina a alrededor de 20 mM ± 3 mM, que tampona de manera eficaz a alrededor de pH 5,9 ± 0,3; (¡ii) sacarosa a alrededor del 5% p/v ± 0,75% p/v; (iv) polisorbato 20 a alrededor del 0,2% p/v ± 0,03% p/v; y (v) arginina como hidrocloruro de L-arginina a alrededor de 25 mM ± 3,75 mM.

Los ejemplos no limitantes adicionales de las formulaciones farmacéuticas abarcadas por la presente invención se exponen en otra parte en la presente memoria, e incluyen los Ejemplos de trabajo presentados más adelante.

ESTABILIDAD Y VISCOSIDAD DE LAS FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención exhiben en general niveles elevados de estabilidad. El término "estable", tal como se usa en la presente memoria con referencia a las formulaciones farmacéuticas, significa que los anticuerpos de las formulaciones farmacéuticas mantienen un grado aceptable de estructura química o función biológica después del almacenamiento en las condiciones definidas. Una formulación puede ser estable aunque el anticuerpo contenido en ella no mantenga un 100% de su estructura química o función biológica después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo. En ciertas circunstancias, el mantenimiento de alrededor del 90%, alrededor del 95%, alrededor del 96%, alrededor del 97%, alrededor del 98% o alrededor del 99% de la estructura o función de un anticuerpo después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo se puede considerar "estable".

La estabilidad se puede medir, entre otros, determinando el porcentaje de anticuerpo nativo que permanece en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura definida. El porcentaje de anticuerpo nativo se puede determinar, entre otros, mediante cromatografía de exclusión por tamaños (p.ej., cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión por tamaños [SE-HPLC]). Un "grado de estabilidad aceptable", tal como se usa esa frase en la presente memoria, significa que se puede detectar al menos el 90% de la forma nativa del anticuerpo en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura dada. En ciertas realizaciones, se puede detectar al menos alrededor del 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o 100% de la forma nativa del anticuerpo en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura definida. La cantidad definida de tiempo tras la cual se mide la estabilidad puede ser de al menos 2 semanas, al menos 1 mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 4 meses, al menos 5 meses, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos 11 meses, al menos 12 meses, al menos 18 meses, al menos 24 meses, o más. La temperatura definida a la cual se puede almacenar la formulación farmacéutica cuando se estudia la estabilidad puede ser cualquier temperatura de alrededor de -80 °C a alrededor de 45 °C, p.ej., un almacenamiento a alrededor de -30 °C, alrededor de -20 °C, alrededor de 0 °C, alrededor de 4-8 °C, alrededor de 5 °C, alrededor de 25 °C, o alrededor de 45 °C. Por ejemplo, una formulación farmacéutica se puede considerar estable si después de 3 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96%, 97% o 98% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC. Una formulación farmacéutica se puede considerar estable también si después de 6 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96%, 97% o 98% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC. Una formulación farmacéutica se puede considerar estable también si después de 9 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96%, 97% o 98% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC. Una formulación farmacéutica se puede considerar estable también si después de 3 meses de almacenamiento a 25 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96% o 97% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC. Una formulación farmacéutica se puede considerar estable también si después de 6 meses de almacenamiento a 25 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96% o 97% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC. Una formulación farmacéutica se puede considerar estable también si después de 9 meses de almacenamiento a 25 °C, se detecta más de alrededor del 90%, 95%, 96% o 97% de anticuerpo nativo mediante SE-HPLC.

La estabilidad se puede medir, entre otros, determinando el porcentaje de anticuerpo que forma un agregado en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura definida, en la que la estabilidad es inversamente proporcional al porcentaje de agregado que se forma. El porcentaje de anticuerpo agregado se puede determinar, entre otros, mediante cromatografía de exclusión por tamaños (p.ej., cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión por tamaños [SE-HPLC]). Un "grado aceptable de estabilidad", tal como se usa esa frase en la presente memoria, significa que como máximo un 5% del anticuerpo está en una forma agregada detectada en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura dada. En ciertas realizaciones, un grado aceptable de estabilidad significa que se puede detectar como máximo alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo en un agregado en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura dada. La cantidad definida de tiempo tras la cual se mide la estabilidad puede ser de al menos 2 semanas, al menos 1 mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 4 meses, al menos 5 meses, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos 1 1 meses, al menos 12 meses, al menos 18 meses, al menos 24 meses, o más. La temperatura a la cual se puede almacenar la formulación farmacéutica cuando se estudia la estabilidad puede ser cualquier temperatura de alrededor de -80 °C a alrededor de 45 °C, p.ej., un almacenamiento a alrededor de -30 °C, alrededor de -20 °C, alrededor de 0 °C, alrededor de 4-8 °C, alrededor de 5 °C, alrededor de 25 °C, o alrededor de 45 °C. Por ejemplo, una formulación farmacéutica se puede considerar estable si después de 3 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo en una forma agregada. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 6 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1% del anticuerpo en una forma agregada. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 9 meses de almacenamiento a 5 °C, se detecta menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo en una forma agregada. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 3 meses de almacenamiento a 25 °C, menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo se detecta en una forma agregada. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 6 meses de almacenamiento a 25 °C, menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo se detecta en una forma agregada. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 9 meses de almacenamiento a 25 °C, menos de alrededor del 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo se detecta en una forma agregada.

La estabilidad se puede medir, entre otros, determinando el porcentaje de anticuerpo que migra en una fracción más ácida durante el intercambio iónico ("forma acida") que en la fracción principal de anticuerpo ("conformación neutra"), en la que la estabilidad es inversamente proporcional a la fracción de anticuerpo en la forma ácida. Aunque no se desea limitarse por la teoría, la desamidación del anticuerpo puede provocar que el anticuerpo pase a tener una carga más negativa, y así es más ácido respecto del anticuerpo sin desamidar (véase, p.ej., Robinson, N., Protein Deamidation, PNAS, 16 de abril, 2002, 99(8):5283-5288). El porcentaje de anticuerpo "acidificado" o "desamidado" se puede determinar, entre otros, medíante cromatografía de intercambio iónico (p.ej., cromatografía líquida de alto rendimiento de intercambio catiónico [CEX-HPLC]). Un "grado aceptable de estabilidad", tal como se usa esa frase en la presente memoria, significa que como máximo un 45% del anticuerpo está en una forma más ácida detectada en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura definida. En ciertas realizaciones, un grado aceptable de estabilidad significa que como máximo alrededor del 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo se puede detectar en una forma ácida en la formulación después del almacenamiento durante una cantidad definida de tiempo a una temperatura dada. La cantidad definida de tiempo tras la cual se mide la estabilidad puede ser de al menos 2 semanas, al menos 1 mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 4 meses, al menos 5 meses, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos 1 1 meses, al menos 12 meses, al menos 18 meses, al menos 24 meses, o más. La temperatura a la cual se puede almacenar la formulación farmacéutica cuando se estudia la estabilidad puede ser cualquier temperatura de alrededor de -80 °C a alrededor de 45 °C, p.ej., un almacenamiento a alrededor de -30 °C, alrededor de -20 °C, alrededor de 0 °C, alrededor de 4-8 °C, alrededor de 5 °C, alrededor de 25 °C, o alrededor de 45 °C. Por ejemplo, una formulación farmacéutica se puede considerar estable si después de 3 meses de almacenamiento a 5 °C, menos de alrededor del 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5% o 0, 1% del anticuerpo está en una forma mas ácida.

Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 3 meses de almacenamiento a 25 °C, menos de alrededor del 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5% o 0,1% del anticuerpo está en una forma más ácida. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 8 semanas de almacenamiento a 45 °C, menos de alrededor del 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo está en una forma más ácida. Una formulación farmacéutica también se puede considerar estable si después de 2 semanas de almacenamiento a 40 °C, menos de alrededor del 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 1 1 %, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1 %, 0,5%, o 0,1 % del anticuerpo se puede detectar en una forma más ácida.

Se pueden usar otros métodos para determinar la estabilidad de las formulaciones de la presente invención tales como, p.ej., calorimetría de barrido diferencial (DSC) para determinar la estabilidad térmica, agitación controlada para determinar la estabilidad mecánica, y absorbancia a alrededor de 350 nm o alrededor de 405 nm para determinar la turbidez de la disolución. Por ejemplo, una formulación de la presente invención se puede considerar estable si, después de 6 o más meses de almacenamiento de alrededor de 5 °C a alrededor de 25 °C, el cambio de DO405 de la formulación es menor de alrededor de 0,05 (p.ej., 0,04, 0,03, 0,02, 0,01 , o menos) de la DO405 de la formulación a tiempo cero.

La estabilidad se puede determinar también midiendo la actividad biológica o la afinidad de unión del anticuerpo a su objetivo. Por ejemplo, una formulación de la presente invención se puede considerar estable si, después del almacenamiento, p.ej., a 5 °C, 25 °C, 45 °C, etc., durante una cantidad definida de tiempo (p.ej., 1 a 12 meses), el anticuerpo anti-IL-4Ra contenido en la formulación se une a IL-4Ra con una afinidad que es al menos un 90%, 95%, o más, de la afinidad de unión del anticuerpo antes de dicho almacenamiento. La afinidad de unión se puede determinar, p.ej., mediante ELISA o resonancia de plasmones. La actividad biológica se puede determinar mediante un ensayo de actividad de IL-4Ra, tal como, p.ej., poniendo en contacto una célula que expresa IL-4Ra con la formulación que comprende el anticuerpo anti-IL-4Ra. La unión del anticuerpo a tal célula se puede medir directamente, tal como, p.ej., por medio de un análisis de FACS. De manera alternativa, la actividad posterior del sistema de IL-4Ra se puede medir en presencia del anticuerpo y un agonista de IL-4Ra, y compararla respecto de la actividad del sistema de IL-4Ra en ausencia de anticuerpo. En ciertas realizaciones, el IL-4Ra puede ser endógeno respecto de la célula. En otras realizaciones, el IL-4Ra se puede expresar de manera ectópica en la célula.

Los métodos adicionales para estudiar la estabilidad de un anticuerpo en la formulación se demuestran en los Ejemplos presentados más adelante.

Las formulaciones farmacéuticas líquidas de la presente Invención pueden exhibir, en ciertas realizaciones, niveles bajos a moderados de viscosidad. La "viscosidad", tal como se usa en la presente memoria, puede ser "viscosidad cinemática" o "viscosidad absoluta". La "viscosidad cinemática" es una medida del flujo resistivo de un fluido bajo la influencia de la gravedad. Cuando dos fluidos de volumen igual se colocan en viscosímetros capilares idénticos y se dejan fluir por gravedad, un fluido viscoso tarda más que un fluido menos viscoso en fluir a través del capilar. Por ejemplo, si un fluido tarda 200 segundos en completar su flujo y otro fluido tarda 400 segundos, el segundo fluido es el doble de viscoso que el primero en una escala de viscosidad cinemática. La "viscosidad absoluta", a veces denominada viscosidad dinámica o simple, es el producto de la viscosidad cinemática y la densidad del fluido (Viscosidad Absoluta = Viscosidad Cinemática x Densidad). La dimensión de la viscosidad cinemática es L2/T, en la que L es la longitud y T es el tiempo. Habitualmente, la viscosidad cinemática se expresa en centistokes (cSt). La unidad del SI de la viscosidad cinemática es mm /s, que es 1 cSt. La viscosidad absoluta se expresa en unidades de centipoise (cP). La unidad del SI de la viscosidad absoluta es el miliPascal-segundo (mPa-s), en el que 1 cP = 1 mPa-s.

Tal como se usa en la presente memoria, un nivel bajo de viscosidad, en referencia a una formulación líquida de la presente invención, exhibirá una viscosidad absoluta de menos de alrededor de 15 cPoise (cP). Por ejemplo, se considerará que una formulación líquida de la invención tiene una "viscosidad baja", si, cuando se mide mediante el uso de las técnicas de medida de la viscosidad habituales, la formulación exhibe una viscosidad absoluta de alrededor de 15 cP, alrededor de 14 cP, alrededor de 13 cP, alrededor de 12 cP, alrededor de 1 1 cP, alrededor de 10 cP, alrededor de 9 cP, alrededor de 8 cP, o menos. Tal como se usa en la presente memoria, un nivel moderado de viscosidad, en referencia a una formulación líquida de la presente invención, exhibirá una viscosidad absoluta de entre alrededor de 35 cP y alrededor de 15 cP. Por ejemplo, se considerará que una formulación líquida de la invención tiene una "viscosidad moderada", si, cuando se mide mediante el uso de las técnicas de medida de la viscosidad habituales, la formulación exhibe una viscosidad absoluta de alrededor de 34 cP, alrededor de 33 cP, alrededor de 32 cP, alrededor de 31 cP, alrededor de 30 cP, alrededor de 29 cP, alrededor de 28 cP, alrededor de 27 cP, alrededor de 26 cP, alrededor de 25 cP, alrededor de 24 cP, alrededor de 23 cP, alrededor de 22 cP, alrededor de 21 cP, alrededor de 20 cP, alrededor de 19 cP, 18 cP, alrededor de 17 cP, alrededor de 16 cP, o alrededor de 15,1 cP.

Tal como se ilustra en los ejemplos más adelante, los presentes inventores han hecho el descubrimiento sorprendente de que las formulaciones líquidas de viscosidad baja a moderada que comprenden concentraciones elevadas de un anticuerpo anti-hlL-4Ra (p.ej., de alrededor de 100 mg/ml hasta al menos 200 mg/mL) se pueden obtener formulando el anticuerpo con arginina de alrededor de 25 mM a alrededor de 100 mM. Además, también se descubrió que la viscosidad de la formulación se podría disminuir en un grado mayor ajusfando el contenido de sacarosa a menos de alrededor del 10%.

RECIPIENTES PARA LAS FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Y MÉTODOS DE ADMINISTRACIÓN Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención se pueden contener en cualquier recipiente adecuado para el almacenamiento de medicinas y de otras composiciones terapéuticas. Por ejemplo, las formulaciones farmacéuticas se pueden contener en un recipiente de plástico o vidrio sellado y esterilizado que tiene un volumen definido, tal como un vial, ampolla, jeringa, cartucho, o botella. Se pueden usar diferentes tipos de viales para contener las formulaciones de la presente invención que incluyen, p.ej., viales de vidrio o plástico transparentes u opacos (p.ej., ámbar). De forma similar, se puede usar cualquier tipo de jeringa para contener o administrar las formulaciones farmacéuticas de la presente invención.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención se pueden contener en jeringas de "contenido normal de tungsteno" o jeringas de "contenido bajo de tungsteno". Como apreciarán las personas de experiencia habitual en la técnica, el proceso de fabricación de jeringas de vidrio implica generalmente el uso de una varilla de tungsteno caliente que actúa perforando el vidrio, por lo que se crea un orificio por el cual se pueden captar y expulsar líquidos de la jeringa. Este procedimiento da como resultado la deposición de cantidades muy pequeñas de tungsteno en la superficie interior de la jeringa. Se pueden usar etapas de lavado posteriores y otras etapas de procesamiento para reducir la cantidad de tungsteno en la jeringa. Tal como se usa en la presente memoria, la expresión "contenido normal de tungsteno" significa que la jeringa contiene más de 500 partes por billón (ppb) de tungsteno. La expresión "contenido bajo de tungsteno" significa que la jeringa contiene menos de 500 ppb de tungsteno. Por ejemplo, una jeringa con un contenido bajo de tungsteno, según la presente invención, puede contener menos de alrededor de 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 o menos ppb de tungsteno.

Los émbolos de caucho usados en las jeringas, y los tapones de caucho usados para cerrar los orificios de los viales, se pueden revestir para impedir la contaminación del contenido medicinal de la jeringa o del vial, o para preservar su estabilidad. Así, las formulaciones farmacéuticas de la presente invención, según ciertas realizaciones, se pueden contener en una jeringa que comprende un émbolo revestido, o en un vial que está sellado con un tapón de caucho revestido. Por ejemplo, el émbolo o el tapón pueden estar revestidos con una película de fluorocarbono. Los ejemplos de tapones o émbolos revestidos adecuados para el uso con viales y jeringas que contienen las formulaciones farmacéuticas de la presente invención se mencionan, p.ej., en las patentes de EE.UU. n° 4.997.423; 5.908.686; 6.286.699; 6.645.635; y 7.226.554, cuyos contenidos se incorporan como referencia en la presente memoria en su totalidad. Los tapones y émbolos de caucho revestidos ejemplares particulares que se pueden usar en el contexto de la presente invención están disponibles comercialmente con el nombre comercial "FluroTec®", disponible de West Pharmaceutical Services, Inc. (Lionville, PA).

Según ciertas realizaciones de la presente invención, las formulaciones farmacéuticas se pueden contener en una jeringa con un contenido bajo de tungsteno que comprende un émbolo revestido con fluorocarbono.

Las formulaciones farmacéuticas se pueden administrar a un paciente por vías parenterales tales como inyección (p.ej., subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, etc.) o administración percutánea, mucosa, nasal, pulmonar u oral. Se pueden usar numerosos dispositivos de administración de autoinyectores o plumas reutilizables para administrar de manera subcutánea las formulaciones farmacéuticas de la presente invención. Los ejemplos incluyen, pero sin limitación, AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Woodstock, R.U.), pluma DISETRONIC™ (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Suiza), pluma HUMALOG MIX 75/25™, pluma HUMALOG™, pluma HUMALIN 70/30™ (Eli Lilly and Co., Indianápolis, IN), NOVOPEN™ I, II y III (Novo Nordisk, Copenhague, Dinamarca), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Copenhague, Dinamarca), pluma BD™ (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™, y OPTICLIK™ (sanofi-aventis, Frankfurt, Alemania). Los ejemplos de dispositivos de administración de autoinyectores o plumas desechables que tienen aplicación en la administración subcutánea de una composición farmacéutica de la presente invención incluyen, pero sin limitación, la pluma SOLOSTAR™ (sanofi-aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk), y KWIKPEN™ (Eli Lilly), el autoinyector SURECLICK™ (Amgen, Thousand Oaks, CA), PENLET™ (Haselmeier, Stuttgart, Alemania), EPIPEN (Dey, L.P.), y la pluma HUMIRA™ (Abbott Labs, Abbott Park, IL).

También se contempla el uso de un microinfusor para administrar las formulaciones farmacéuticas de la presente invención en la presente memoria. Tal como se usa en la presente memoria, el término "microinfusor" significa un dispositivo de administración subcutánea diseñado para administrar lentamente grandes volúmenes (p.ej., hasta alrededor de 2,5 mL o más) de una formulación terapéutica a lo largo de un periodo prolongado de tiempo (p.ej., alrededor de 10, 15, 20, 25, 30 o más minutos). Véase, p.ej., el documento U.S. 6.629.949; US 6.659.982; y Meehan er a/., J. Controlled Reléase 46:107-1 6 (1996). Los microinfusores son especialmente útiles para la administración de grandes dosis de proteínas terapéuticas contenidas en disoluciones de concentración elevada (p.ej., alrededor de 100, 125, 150, 175, 200 mg/mL o más) o viscosas.

En una realización, la formulación farmacéutica líquida que contiene alrededor de 150 mg/ml ± 15 mg/ml de anticuerpo anti-IL-4Ra se administra de manera subcutánea en un volumen de aproximadamente 1 mi ± 0,15 mi de una jeringa rellenada previamente en un autoinyector. En otra realización, la formulación se administra en un volumen de alrededor de 1 mi a 2,5 mi de un dispositivo microinfusor. La formulación se puede rellenar previamente en una bolsa o en un cartucho para el uso en el microinfusor.

USOS TERAPÉUTICOS DE LAS FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención son útiles, entre otros, para el tratamiento, la prevención y/o la mejora de cualquier enfermedad o trastorno asociado con la actividad de IL-4, que incluye las enfermedades o trastornos mediados por la activación de IL-4Ra. Las enfermedades y trastornos ejemplares no limitantes que se pueden tratar o prevenir mediante la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente invención incluyen diversas enfermedades atópicas tales como, p.ej., dermatitis atópica, conjuntivitis alérgica, rinitis alérgica, asma y otras enfermedades mediadas por lgE/Th2.

Así, la presente invención incluye métodos para el tratamiento, la prevención o la mejora de cualquier enfermedad o trastorno asociado a la actividad de IL-4 o a la activación de IL-4Ra (que incluyen cualquiera de las enfermedades, trastornos y afecciones ejemplares anteriormente mencionadas). Los métodos terapéuticos de la presente invención comprenden administrar a un sujeto cualquier formulación que comprende un anticuerpo anti-hlL-4Ra tal como se describe en la presente memoria. El sujeto al que se administra la formulación farmacéutica puede ser, p.ej., cualquier ser humano o animal no humano que necesite tal tratamiento, prevención o mejora, o que se podría beneficiar de otra manera de la inhibición o la atenuación de la actividad mediada por IL-4 o IL-4Ra. Por ejemplo, el sujeto puede ser un individuo al que se le ha diagnosticado, o que se considera que corre riesgo de padecer cualquiera de las enfermedades o trastornos anteriormente mencionados. La presente invención incluye además el uso de cualquiera de las formulaciones farmacéuticas descritas en la presente memoria en la fabricación de un medicamento para el tratamiento, la prevención o la mejora de cualquier enfermedad o trastorno asociado a la actividad de IL-4 o a la activación de IL-4Ra (que incluye cualquiera de las enfermedades, trastornos y afecciones ejemplares anteriormente mencionadas).

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos se presentan para proporcionar a los expertos en la técnica una descripción completa de cómo hacer y usar los métodos y composiciones de la invención, y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran su invención. Se han realizado esfuerzos para asegurar la precisión con respecto a los números usados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero deben tenerse en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique de otra manera, las partes son partes en moles, el peso molecular es el peso molecular medio, la temperatura está en grados centígrados y la presión es la atmosférica o está próxima a ella.

Las actividades de desarrollo de formulaciones iniciales implicaron el cribado de codisolventes orgánicos, estabilizadores térmicos, y tampones en formulaciones líquidas de mAb1 (anticuerpo anti-IL-4Ra de la invención) para identificar los excipientes que son compatibles con la proteína y que aumentan su estabilidad, a la vez que mantienen la osmolalidad y la viscosidad para la inyección subcutánea. También se examinaron las condiciones de tamponamiento para determinar el pH óptimo para proporcionar una estabilidad máxima a la proteína.

Ejemplo 1. Codisolventes Orgánicos Se observó que mAb1 es inestable cuando se somete a esfuerzo por agitación. Los análisis mediante cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa (RP-HPLC) y cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión por tamaños (SE-HPLC) demostraron una pérdida de proteína y un incremento de agregados de proteína cuando se agitó mAb1 en vórtex a temperatura ambiente (Tabla 1 , véanse los datos de "Sin Codisolvente"). La adición de codisolventes orgánicos a la disolución de mAb1 impidió que la proteína se degradase, tal como se mide mediante SE-HPLC y RP-HPLC (Tabla 1 ). Sin embargo, se observó que la adición de algunos de los codisolventes orgánicos disminuía la estabilidad térmica de mAb1 (Tabla 2). Se observó una pérdida en la recuperación de proteína en las formulaciones que contenían PEG 3350 (3%) y PEG 300 (10% y 20%) tal como se determina mediante RP-HPLC tras esfuerzo térmico (Tabla 2). Además, hubo más formación de agregados en las formulaciones que contenían PLURONIC F68 (poloxámero 181 ) (0,2%), PEG 300 (10% y 20%), y Propilen Glicol (20%) que en la formulación sin codisolvente, tal como se determina mediante SE-HPLC. Polisorbato 20 (0,2%) y polisorbato 80 (0,2%) proporcionaron una estabilidad comparable hacia la agitación y el esfuerzo térmico.

Según la Tabla 1 , 0,3 mi de 15 mg/ml de mAb1 en fosfato 10 mM, pH 6,0, y diversos codisolventes orgánicos en un vial de vidrio de 2 mi se sometieron a agitación en vórtex durante alrededor de 120 minutos. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. Se determinó el porcentaje de mAb1 total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAb1 nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de agitación en vórtex.

Tabla 1 Según la Tabla 2, 0,3 mi de 15 mg/ml de mAb1 en fosfato 10 mM, pH 6,0, y diversos codisolventes orgánicos en un vial de vidrio de 2 mi se mantuvieron a alrededor de 45 °C durante alrededor de 28 días. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. Se determinó el porcentaje de mAb1 total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAb1 nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de esfuerzo térmico.

Tabla 2 Ejemplo 2. Estabilizadores Térmicos Se examinaron diversos estabilizadores térmicos, tales como carbohidratos, aminoácidos, y sales inorgánicas, en función de su capacidad de inhibir la degradación de mAb1 cuando se almacenaban a alrededor de 45 °C. Se presenta un resumen de los estabilizadores térmicos estudiados en la Tabla 3. Las formulaciones que contenían sacarosa o trehalosa tuvieron el mayor efecto estabilizante para mAbt en disolución cuando se incubaron a temperatura elevada (tal como se determina mediante SE-HPLC). Se seleccionó la sacarosa como estabilizante, ya que tiene antecedentes de seguridad en el uso en formulaciones de anticuerpos monoclonales.

Según la Tabla 3, 0,3 mi de 25 mg/ml de mAb1 en acetato 10 mM, pH 5,3, y diversos estabilizadores térmicos en un vial de vidrio de 2 mi se mantuvieron a alrededor de 45 °C durante alrededor de 28 días. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. La turbidez fue insignificante para todas las muestras. Se determinó el porcentaje de mAb1 total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAb1 nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Las especies ácidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAb1 que eluyen de la columna de intercambio catiónico (CEX-HPLC) con tiempos de retención menores o mayores que el pico principal, respectivamente. Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de esfuerzo térmico.

Tabla 3 Ejemplo 3. Tampones y pH También se examinó el efecto del pH y de las especies tamponadoras sobre la estabilidad de mAbl . Se incubaron 15 mg/mL de mAb1 en diferentes tampones a diferentes valores de pH que oscilaban de pH 4,5 a 7,0. Se monitorizó la estabilidad de la proteína mediante SE-HPLC y HPLC de intercambio catiónico (CEX-HPLC): Se observó la estabilidad máxima de la proteína, tal como se determina mediante SE-HPLC y CEX- HPLC, cuando se formuló mAbl a pH 6,0 en tampón de histidina o a pH 5,3 en tampón de acetato (Tabla 4 y Tabla 5). El sistema de tampón de acetato proporcionó un intervalo de estabilidad del pH más amplio y una tasa menor de formación de variantes de carga respecto de la formulación que contenía tampón de histidina (Tabla 5). Por lo tanto, se seleccionó el tampón de acetato, a pH 5,3, en parte para la formulación de la sustancia farmacológica de mAbl .

Según la Tabla 4, 0,3 mi de 15 mg/ml de mAbl , 0,2% de polisorbato 20, combinados con 10 mM de diversos tampones en un vial de vidrio de 2 mi se mantuvieron a alrededor de 45 °C durante alrededor de 14 días. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. La turbidez fue insignificante para todas las muestras. Se determinó el porcentaje de mAbl total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAbl nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Las especies ácidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAbl que eluyen en la columna de intercambio catiónico (CEX-HPLC) con tiempos de retención menores o mayores que el pico principal, respectivamente. Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de esfuerzo térmico.

Tabla 4 Según la Tabla 5, 0,3 mi de 15 mg/ml de mAb1 , 0,2% de polisorbato 20, combinados con 10 mM de diversos tampones en un vial de vidrio de 2 mi se almacenaron a alrededor de 45 °C durante alrededor de 14 días. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. La turbidez fue insignificante para todas las muestras. Se determinó el porcentaje de mAb1 total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAb1 nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Las especies acidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAb1 que eluyen en la columna de intercambio catiónico (CEX-HPLC) con tiempos de retención menores o mayores que el pico principal, respectivamente. Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de esfuerzo térmico.

Los estudios del desarrollo de la formación indicaron que en condiciones básicas (pH = 6,5), el mAb1 en disolución se puede desamidar. A la inversa, por debajo de pH 5,0, se observó que la tasa de formación de variantes de peso molecular de mAb1 se incrementaba. Basándose en estos datos, se mantuvo el pH de la formulación de mAb1 entre pH 5,6 y pH 6,2. Se observó que mAb1 era estable a lo largo de este intervalo de pH.

Tabla 5 El efecto del pH y de las especies del tampón sobre la estabilidad de mAb1 se estudió adicionalmente en formulaciones que contenían histidina 20 mM de pH 6, acetato 12,5 mM de pH 5,3, o una combinación de histidina 20 mM y acetato 12,5 mM de pH 5,9 (Tabla 6). En comparación con el sistema de tampones individuales, mAb1 fue muy estable en una formulación que contenía tanto histidina como acetato a aproximadamente pH 5,9. La tasa de agregación más lenta se detectó cuando se formuló mAb1 en este sistema de tampones combinados (SE-HPLC) (Tabla 6).

Tabla 6 Según la Tabla 6, 0,4 mi de 150 mg/ml de mAb1 , 10% de sacarosa, 0,2% de polisorbato 20, combinados con diversos tampones en un vial de vidrio de 2 mi se mantuvieron a alrededor de 45 °C durante alrededor de 14 días. La turbidez se determinó por medio de la densidad óptica (DO) a 405 nm y se informó como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. La turbidez fue insignificante para todas las muestras. Se determinó el porcentaje de mAb1 total recuperado por medio de HPLC de fase inversa (RP-HPLC). Se determinó el porcentaje de mAb1 nativo y agregado por medio de HPLC de exclusión por tamaños (SE-HPLC). Las especies ácidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAb1 que eluyen de la columna de intercambio catiónico (CEX-HPLC) con tiempos de retención menores o mayores que el pico principal, respectivamente. Los resultados de SE-HPLC presentados en "Material de Partida" son la media de los valores de cada una de las formulaciones en ausencia de esfuerzo térmico.

Ejemplo 4. Control de la Viscosidad y la Tonicidad Se estudiaron las combinaciones de diversos excipientes con concentraciones elevadas de mAb1 (es decir, 150 mg/ml, 175 mg/ml y 200 mg/ml) en función de la viscosidad y la tonicidad (tal como se expresa en la osmolalidad). Se ajustaron los niveles de sacarosa, cloruro sódico e hidrocloruro de L-arginina para desarrollar una formulación que contenía una concentración elevada de mAb1 a una viscosidad baja y a una tonicidad fisiológica para permitir la administración subcutánea sencilla, cómoda y rápida de una cantidad elevada de mAb1 (Tabla 7). La formulación líquida que contiene arginina 25 mM, histidina 20 mM, acetato 12,5 mM, 5% (p/v) de sacarosa, 0,2% (p/v) de Polisorbato 20, y 150 mg/mL de mAb1 , a pH 5,9 (Formulación A) representa una formulación optimizada que tiene una viscosidad baja (alrededor de 8,5 cPoise) y que es fisiológicamente isotónica (alrededor de 293 mOsm/kg), a la vez que se mantiene la estabilidad de mAb1.

Tabla 7 Ejemplo 5. Caracterización de la Formulación A Las vías de degradación principales identificadas durante el desarrollo de la formulación líquida de mAb1 fueron la formación de agregados, productos de escisión, y variantes de carga. La formación de estos productos de degradación se minimizó formulando mAb1 en una formulación que contenía histidina 20 mM, acetato 12,5 mM, 0,2% de polisorbato 20, 5% de sacarosa e hidrocloruro de L-arginina 25 mM a pH 5,9. Se observó que el mAb1 formulado a 150 mg/mL era una disolución líquida clara a ligeramente opalescente, sustancialmente exenta de partículas visibles.

El mAb1 formulado era físicamente y químicamente estable cuando se sometió a diversos esfuerzos (incubación a 25 °C y 45 °C) y condiciones de almacenamiento en tiempo real (5 °C) (Tabla 8). La apariencia no se vio afectada cuando se incubó el mAb1 a 25 °C (3 meses) o se almacenó a 5 °C durante 6 meses. Además, no se observó ningún efecto sobre el pH de la disolución, la turbidez, o sobre la cantidad de mAb1 recuperado. Tras la incubación del mAb1 formulado durante 3 meses a 25 °C, el anticuerpo no se degradó significativamente, tal como se determina mediante SE-HPLC, y estuvo un 3,3% más degradado tal como se determina mediante CEX-HPLC. Hubo una degradación incrementada observada tras la incubación a 45 °C durante 8 semanas, tal como se determina mediante SE-HPLC y CEX-HPLC, lo que indica que la formación de agregados y de variantes de carga son las vías de degradación principales para la molécula de anticuerpo mAb1. No se observó degradación cuando el anticuerpo mAb1 formulado se almacenó durante 6 meses a 5 °C.

Tabla 8 Según la Tabla 8, DO = Densidad óptica; RP-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa; SE-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión por tamaños; y CEX-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de intercambio catiónico. Las especies ácidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAbl que eluyen en la columna de CEX-HPLC con tiempos de retención anteriores o posteriores al pico principal, respectivamente.

Ejemplo 6. Recipientes Se ha determinado que las formulaciones que contienen mAbl son estables cuando se esterilizan mediante filtración. Se usó una unidad de filtración MILLIPAK de Millipore en la fabricación de los suministros clínicos, a la vez que se usó un filtro de composición idéntica en los estudios de investigación (Millipore MILLEX DURAPORE).

Se rellenó un vial de vidrio de 5 mL con un mínimo de 2,5 mL de 150 mg/mL de mAbl , 5% (p/v) de sacarosa, hidrocloruro de L-arginina 25 mM, 0,2% (p/v) de polisorbato 20, acetato 12,5 mM, histidina 20 ml l, pH 5,9. Se aplicó un exceso de 0,5 mL de formulación en el vial de 5 mL para asegurar que se podrían extraer 2,0 mL de la formulación. Este exceso no se diseñó para compensar las pérdidas durante la fabricación del mAbl o de la formulación que contenía el mAbl , la degradación durante la fabricación, la degradación durante el almacenamiento (duración de almacenamiento), o para prolongar el periodo de la fecha de caducidad.

En comparación con el almacenamiento en viales de vidrio, la estabilidad del mAbl formulado (Formulación A) no se vio afectada cuando se almacenó en un tubo de polipropileno, un tubo de poliestireno, un tubo de policarbonato, o en un vial de vidrio que contenía piezas de acero inoxidable (Tabla 9).

Tabla 9 Según la Tabla 9, se incubaron 150 mg/mL de mAb1 , 5% de Sacarosa, Hidrocloruro de Arginina 25 mM, 0,2% de PS-20, Histidina 20 mM, Acetato 12,5 mM, pH 5,9 en diversos materiales a 40 °C durante 14 días. DO = Densidad óptica; RP-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa; SE-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión por tamaños; y CEX-HPLC = Cromatografía líquida de alto rendimiento de intercambio catiónico. La turbidez se informa como el cambio relativo de DO a 405 nm en comparación con el material de partida. Las especies ácidas o básicas se definen como la suma de los picos de mAb1 que eluyen de la columna de CEX-HPLC con tiempos de retención anteriores o posteriores al pico principal, respectivamente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una formulación farmacéutica líquida que comprende: (i) un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 alfa humano (hll_-4Rct); (ii) un tampón a un pH de 5,9 ± 0,5 unidades de pH; (iii) un codisolvente orgánico; (iv) un estabilizador térmico; y (v) un agente reductor de la viscosidad.

2. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 1 , en la que el anticuerpo está a una concentración de 150 mg/ml ± 50 mg/ml.

3. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 1 o 2, en la que el anticuerpo está a una concentración de 150 mg/ml ± 15 mg/ml.

4. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 3, en la que el tampón comprende un primer tampón que tiene un intervalo de pH efectivo de 3,6 - 5,6 y un segundo tampón que tiene un intervalo de pH efectivo de 5,5 - 7,4.

5. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 4, en la que el primer tampón tiene un pKa de 4,8 ± 0,3 y el segundo tampón tiene un pKa de 6,0 ± 0,3.

6. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 5, en la que el primer tampón es acetato y el segundo tampón es histidina.

7. La formulación líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la que el tampón comprende acetato a una concentración de 12,5 mM ± 1 ,85 mM e histidina a una concentración de 20 m ± 0,3 mM.

8. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 7, en la que el codisolvente orgánico se selecciona del grupo que consiste en polisorbato 20, poloxámero 181 y polietilen glicol 3350.

9. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 8, en la que el codisolvente orgánico está a una concentración de alrededor del 0,085% a alrededor del 1 , 15% p/v.

10. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en la que el codisolvente orgánico es polisorbato 20 a una concentración del 0,2% ± 0,03% p/v.

1 1. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en la que el estabilizador térmico se selecciona del grupo que consiste en sacarosa, manitol y trehalosa.

12. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 1 1 , en la que el estabilizador térmico está a una concentración de alrededor del 3,5% a alrededor del 1 1 % p/v.

13. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 12, en la que el estabilizador térmico es sacarosa a una concentración del 5% ± 0,75% p/v.

14. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 13, en la que el agente reductor de la viscosidad está a una concentración que es menor de alrededor de 100 mM.

15. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 15, en la que el agente reductor de la viscosidad es arginina a una concentración de 25 mM ± 3,75 mM o 50 mM ± 7,5 mM.

16. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-15, en la que la viscosidad del líquido es menor o igual a 35 ± 3,5 cPoise.

17. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 16, en la que la viscosidad del líquido es 21 ,5 ± 13,5 cPoise.

18. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-16, en la que la viscosidad del líquido es 1 1 i 1 ,1 cPoise o 8,5 ± 0,85 cPoise.

19. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 18, en la que la osmolalidad del líquido es 290 ± 20 mOsm/kg.

20. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-19, en la que se recupera al menos alrededor del 90% de la forma nativa del anticuerpo después de alrededor de seis meses de almacenamiento a alrededor de 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

21. La formulación farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 1-20, en la que se recupera al menos alrededor del 95% de la forma nativa del anticuerpo después de alrededor de seis meses de almacenamiento a alrededor de 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

22. La formulación farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 1 -21 , en la que se recupera al menos alrededor del 98% de la forma nativa de dicho anticuerpo después de alrededor de seis meses de almacenamiento a alrededor de 5 °C, ta) como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

23. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 22, en la que se recupera al menos alrededor del 90% de la forma nativa del anticuerpo después de alrededor de ocho semanas de almacenamiento a alrededor de 45 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

24. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 23, en la que menos de alrededor del 45% del anticuerpo recuperado después de alrededor de ocho semanas de almacenamiento a alrededor de 45 °C es una forma ácida, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico.

25. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 24, en la que menos de alrededor del 4% del anticuerpo recuperado después de seis meses de almacenamiento a 25 °C está agregado, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio de exclusión por tamaños.

26. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 1 , en la que dicho anticuerpo humano que se une específicamente a ML-4R comprende una región variable de la cadena pesada (HCVR) y una región variable de la cadena ligera (LCVR), en la que (a) la HCVR comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada HCDR1 , HCDR2 y HCDR3 que comprenden la secuencia de aminoácidos de (i) SEQ ID N°:2, SEQ ID N°:3 y SEQ ID N°:4, respectivamente, (ii) SEQ ID N°:10, SEQ ID N°:1 1 y SEQ ID N°:12. respectivamente, o (iii) SEQ ID N°:18, SEQ ID N°:19 y SEQ ID N°:20, respectivamente; y (b) la LCVR comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena ligera LCDR1 , LCDR2 y LCDR3 que comprenden la secuencia de aminoácidos de (i) SEQ ID N°:6, SEQ ID N°:7 y SEQ ID N°:8, respectivamente, (ii) SEQ ID N°:14, SEQ ID N°:15 y SEQ ID N°:16, respectivamente, o (iii) SEQ ID N°:22, SEQ ID N°:23 y SEQ ID N°:24, respectivamente.

27. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 26, en la que la HCVR y LCVR comprenden las secuencias de aminoácidos de SEQ ID N°:1 y SEQ ID N°:5, respectivamente.

28. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1- 27 contenida en un vial de vidrio.

29. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-27 contenida en una jeringa.

30. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 1-27 contenida en un microinfusor.

31. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 29, en la que dicha jeringa comprende un émbolo revestido de fluorocarbono.

32. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 29 o 31 , en la que dicha jeringa es una jeringa con contenido bajo de tungsteno.

33. Una formulación farmacéutica líquida que comprende: (i) 150 mg/ml ± 50 mg/ml de un anticuerpo humano que se une específicamente a hlL-4Ra, en el que dicho anticuerpo comprende un par de secuencias de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada y de la cadena ligera (HCVR / LCVR) de SEQ ID N°s:1/5; (ii) 12,5 mM ± 2 m de acetato; (iii) 20 mM ± 3 mM de histidina; (¡v) 5% ± 0,75% de sacarosa; (v) 0,2% ± 0,03% de polisorbato 20; y (vi) 25 mM ± 3,75 mM de arginina, a un pH de 5,9 ± 0,5.

34. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 33, en la que la viscosidad del líquido es 1 1 ± 1 ,1 cPoise o 8,5 ± 0,85 cPoise.

35. La formulación farmacéutica líquida de la reivindicación 33 o 34, en la que la osmolalidad del liquido es 290 ± 20 mOsm/kg.

36. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 33- 35, en la que se recupera al menos un 98% de la forma nativa de dicho anticuerpo después de seis meses de almacenamiento a 5 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

37. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 33- 36, en la que se recupera al menos un 90% de la forma nativa del anticuerpo después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C, tal como se determina mediante cromatografía de exclusión por tamaños.

38. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 33-37, en la que menos del 45% del anticuerpo recuperado después de ocho semanas de almacenamiento a 45 °C es una forma ácida, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio catiónico.

39. La formulación farmacéutica líquida de cualquiera de las reivindicaciones 33-38, en la que menos de alrededor del 4% del anticuerpo recuperado después de seis meses de almacenamiento a 25 °C está agregado, tal como se determina mediante cromatografía de intercambio de exclusión por tamaños. RESUMEN La presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo humano que se une específicamente al receptor de interleucina-4 humano (hlL-4R). Las formulaciones pueden contener, además de un anticuerpo anti-hlL-4R, al menos un aminoácido, al menos un carbohidrato, o al menos un tensoactivo no iónico. Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención exhiben un grado sustancial de estabilidad del anticuerpo después del almacenamiento durante varios meses.