MX2012007941A - Farmaceutico para impedir o tratar alteraciones acompañadas por angiogenesis ocular y/o permeabilidad vascular ocular elevada. - Google Patents

Abstract

Se describe un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada constituido por una combinación de un agente anti-VEGF y un derivado de hidantoina representado por la fórmula general (I) : (en la fórmula X representa un átomo de halógeno o un átomo de hidrógeno y R1 y R2 simultánea o individualmente representan un átomo de hidrógeno o un grupo C1-6 alquilo opcionalmente sustituido) o una sal aceptable farmacológicamente del mismo.

Description

FARMACÉUTICO PARA IMPEDIR O TRATAR ALTERACIONES ACOMPAÑADAS POR ANGIOGENESIS OCULAR Y/O PERMEABILIDAD VASCULAR OCULAR ELEVADA Campo Técnico La presente invención es concerniente con un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada, que esta compuesto de una combinación de un agente anti-VEGF y un derivado de hidantoina específico.

Antecedentes de la invención El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es el principal responsable por angiogenésis. Ejemplos de agentes anti-VEGF pueden incluir antagonistas de receptor, anticuerpos anti-VEGF, inhibidores de ligando VEGF y fármacos de oligonucleótido concernientes con VEGF como factores angiogenéticos . Ejemplos específicos incluyen bevacizumab sodio, sorafenib, sunitinib, pegaptanib sodio, ranibizumab, aflibercept y VEGF-Trap EYE. Estos son usados como inyecciones intravitreas en el campo de oftalmología. Las acciones farmacológicas principales de estos agentes anti-VEGF son supresión de angiogenésis, supresión de permeabilidad vascular y supresión de la proliferación de células endoteliales vasculares.

Se ha aclarado en años recientes que VEGF esta involucrado en varias enfermedades oculares tales como degeneración macular relacionada con la edad (AMD) , en base a sus acciones fisiológicas tales como angiogenésis, permeabilidad vascular incrementada y proliferación de células endoteliales vasculares. Farmacéuticos que apuntan a VEGF ya han sido usados ampliamente en uso clínico para tratamiento de enfermedades oculares tales como degeneración macular relacionada con la edad (AMD) , oclusión de vena retinal ramal (BRVO) , oclusión de vena retinal central (CRVO) , maculopatía diabética, retinopatía diabética y glaucoma neovascular.

La (2S, 4S) -6-fluoro-2 ' , 5 ' -dioxoespiro[croman-4 , 4 ' -imidazolidin]-2-carboxamida (fidarestat) es un inhibidor de aldosa reduc asa (AR) . Con respecto al compuesto, aplicaciones en complicaciones diabéticas (Documentos de Patente 1) , alteraciones circulatorias (Documentos de Patente 2) , alteraciones asociadas con el enriquecimiento como un inhibidor de reacción de Maillard (Documento de Patente 3) , retinopatía diabética simple (Documentos de Patente 4) , queratopatía diabética (Documento de Patente 5) , maculopatía diabética (Documento de Patente 6) , retinopatía diabética severa (Documento de Patente 7) , alteraciones funcionales cardiacas o alteraciones miocardiacas provocadas por isquemia o reperfusión isquémica (Documento de Patente 8) , insuficiencia renal aguda (Documento de Patente 9), isquemia cerebral o lesión de repercusión isquémica cerebral en apoplejía cerebral (Documento de Patente 10) y un agente para proteger la neurona retinal o nervio óptico (Documento de Patente 11) son descritos en los documentos respectivos. Además, se describe que el compuesto suprime el stress oxidante retinal y la sobre expresión de VEGF en una rata estreptozotocina (STZ) -diabética (Documento no de Patente 1) .

Por otra parte, es conocido que los VEGF son usados en combinación con otros farmacéuticos (Documento de Patente 12 y 13) . Por ejemplo, el uso combinado con el factor de necrosis de tumor (TNFa) (Documento de Patente 14 y 15) ,uso combinado con un inhibidor de cinasa de tirosina tipo receptor (Documento de Patente 16) , uso combinado con un fármaco antihipersensor (Documento de Patente 17) y uso combinado con un fármaco fotosensible usado en terapia fotodinámica (PDT) (Documento de Patente 18) han sido descritos. Sin embargo, todavía no se ha reportado el uso combinado de un agente anti-VEGF con un inhibidor de aldosa reductasa .

Lista de Citas Literatura de Patentes Documento de patente 1: Solicitud de Patente Japonesa abierta al público No. de Publicación 61-200991.

Documentó de patente 2 : Publicación abierta al público de Solicitud de Patente Japonesa No. 4-173791.

Documento de patente 3 : Publicación abierta al público de Solicitud de Patente Japonesa No.6-135968.

Documento de patente 4: Publicación abierta al público de Solicitud de Patente Japonesa No.7-242547.

Documento de patente 5 : Publicación abierta al público de Solicitud de Patente Japonesa No. 8-231549.

Documento de patente 6: Publicación Internacional No. WO 2005/072066 Documento de patente 7: Publicación Internacional No. WO 2005/079792 Documento de patente 8: Publicación Internacional No. WO 2006/090699 Documento de patente 9: Publicación Internacional No. WO 2007/069727 Documento de patente 10: Publicación Internacional No. WO 2007/097301 Documento de patente 11: Publicación Internacional No. WO 2008/093691 Documento de patente 12: Publicación Nacional de Solicitud de Patente Japonesa (abierta al público) No. 2007-505939 Documento de patente 13 : Publicación Nacional de Solicitud de Patente Japonesa (abierta al público) No. 2007-505938 Documento de patente 14 : Publicación Nacional de Solicitud de Patente Japonesa (abierta al público) No. 2009-256373 Documento de patente 15 : Publicación Nacional de Solicitud de Patente Japonesa (abierta al publico) No. 2004-529149 Documento de patente 16: Publicación abierta al público de Solicitud de Patente Japonesa No. 2009-102359 Documento de patente 12 : Publicación Nacional de Solicitud de Patente Japonesa (abierta al público) No. 2008-537538 Documento de patente 18: Publicación Internacional No. WO 2001/74389 Literatura que no es de Patentes Documento 1 que . no es de patente: Diabetes, Vol . 52, 864, 2003.

Breve Descripción de la Invención Problemas Técnicos Como se menciona anteriormente, aunque inyecciones intravitrias de agentes anti-VEGF, agentes terapéuticos que son usados ampliamente en uso clínico, cuando la dosis es incrementada en un paciente que tiene baja satisfacción con el tratamiento, tienden a provocar efectos secundarios como accidentes cerebrovascular . Además, cuando la frecuencia de dosificación se incrementa, las cargas emocionales y físicas de los pacientes y clínicos médicos se incrementan, lo que tiende a conducir a interrupción del tratamiento. Por ejemplo, se reporta que ranibizumab que es un agente anti-VEGF típico tiene una vida media corta y tiene una vida de separación de 9 días cuando es inyectado al cuerpo vitreo de un humano (el inserto de empaque de ranibizumab) . Esto conduce al incremento en la frecuencia de administración ranibizumab, que es fuerte en cargas emocionales, físicas y económicas médicas para pacientes y clínicos médicos. Por consiguiente, una estrategia para incrementar el efecto clínico de un agente anti-VEGF y una estrategia para disminuir la frecuencia de administración y dosis de un agente anti-VEGF son demandadas. Por consiguiente, la presente invención tiene por objetivo disminuir la dosis, disminuir la frecuencia de administración y mejorar la eficiencia de un agente anti-VEGF.

Solución al problema En vista del problema mencionado anteriormente, los presentes inventores han hecho estudios intensos y encontraron que estos objetos pueden ser obtenidos al combinar un agente anti-VEGF y un derivado de hidrantoína representado por la siguiente fórmula general (I) que es conocido como inhibidor de aldosa reductasa, . específicamente fidarestat consumando la invención. Es decir, los constituyentes mayores de la presente invención son como sigue. (1) Un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada que esta compuesto de una combinación de un agente anti-VEGF y un derivado de hidrantoína depositado por la fórmula general (I) : en la fórmula X, representa un átomo de halógeno o un átomo de hidrógeno y R1 Y R2 simultanea o individualmente representan un átomo de hidrógeno o un grupo C1-6 alquilo opcionalmente sustituido o una sal aceptable farmacológicamente del mismo. (2) Un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada que comprende un derivado de hidrantoína representada por la fórmula general (I) o una sal aceptable farmacológicamente del mismo como ingrediente activo y es administrado en combinación con un agente anti-VEGF. (3) El farmacéutico de acuerdo con (1) o (2) , en donde el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) es (2S, 4S) -6-fluoro-2 ' , 5 ' -dioxoespiro [croman-4 , 4 ' -imidazolidin]-2-carboxamida . (4) el farmacéutico de acuerdo con cualquiera de (1) a (3) en donde el agente anti-VEGF es por lo menos una clase seleccionada del grupo que consiste de una anticuerpo anti-VEGF, un inhibidor de Ligando de VEGF, un antagonista de receptor de VEGF y un fármaco de oligonucleótido relacionado con VEGF. (5) El farmacéutico de acuerdo con cualquiera de (l)a (4) , en donde la alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada es seleccionada del grupo que consiste de degeneración macular relacionada con la edad (AMD) , oclusión de vena retinal ramal (BRVO) , oclusión de vena retinal central (CRVO) , maculopatía diabética, retinopatía diabética y glaucoma neovascular. (6) Un kit que comprende- El farmacéutico de acuerdo con (2) ; y Una instrucción escrita que describe un método para administrar el farmacéutico en combinación con un agente anti-VEGF para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada .

Efectos ventajosos de la invención El farmacéutico de la presente invención es efectivo para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular en exceso y/o permeabilidad vascular ocular incrementada y puede disminuir la dosis, mejorar el efeco f rmacodinámico, prolongar los intervalos de administración y mantener el efecto medicional prolongado del agente anti-VEGF.

Breve descripción de las figuras La Figura 1 es una gráfica que muestra el volumen de neovascularización coroidal (C V) a 7 días después de la irradiación de lasér. Los "*" y "#" en las figuras representan la presencia de una diferencia significativa a una proporción de riesgo de 5% y "**" representa la presencia de una diferencia significativa a una proporción de riesgo de 1%.

La Figura 2 es una gráfica que muestra la proporción del número' de lesiones grado 3 en la angiografáa de fondo de fluoresceína-fluprescente (FA) a 7 días después de la irradiación de lasér. Los "***" en las figuras representan la presencia de una diferencia significativa a una proporción de riesgo de 0.1%.

Descripción de las modalidades De aquí en adelante en la presente, las modalidades de la presente invención serán explicadas en mas detalle. Sin embargo, la presente invención no será interpretada para estar limitada por las siguientes modalidades.

La composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención, incluye un derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) o una sal aceptable farmacológicamente del mismo como ingrediente activo. Este farmacéutico es administrado en combinación con un agente anti-VEGF para impedir o trata una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada. En otras palabras, el farmacéutico comprende un derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) o un sal aceptable farmacológicamente del mismo como ingrediente activo es usado por un agente para mejorar el efecto de un agente anti-VEGF para la prevención o tratamiento de una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular incrementada.

El farmacéutico de acuerdo con la presente invención es un farmacéutico que esta constituido por una combinación de un agente anti-VEGF y un derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) o una sal aceptable farmacológicamente del mismo. Este farmacéutico es también administrado para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada .

El derivado de hidantoína de la fórmula general (I) o una sal del mismo es un compuesto que tiene una actividad inhibidora de aldosa reductasa y puede ser producido de acuerdo con el método de síntesis descrito en la publicación abierta al público de la Solicitud de Patente Japonesa No. 63-057588.

X en la fórmula (I) representa un átomo de halógeno o un átomo de hidrógeno, preferiblemente un átomo de halógeno como un átomo de flúor. R1 y R2 en la fórmula (I) simultánea o individualmente representan un átomo de hidrógeno o un grupo Ci-6 alquilo opcionalmente sustituido, preferiblemente un átomo de hidrógeno o un grupo Ci_6 alquilo' y además preferiblemente un átomo de hidrógeno. Específicamente, fidarestat que es un compuesto en el cual X es un átomo de flúor y Rl y R2 son átomos de hidrógeno, es excelente en efecto medicinal y seguridad.

VEGF es un factor de crecimiento que actúa sobre las células endoteliales vasculares. Cuando VEGF se enlaza al receptor de factor de crecimiento celular endotelial vascular (receptor de VEGF) , las células endoteliales vasculares son activadas y las células endoteliales vasculares migran y proliferan a neovascularización. Además, VEGF incrementa la permeabilidad vascular y provoca hemorragia, fuga de los componentes en la sangre y acumulación de exudados.

Los agentes anti-VEGF son medicinas que suprimen la angiogenésis promovida al atenuar la actividad de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Además, en algunos casos, los agentes anti-VEGF también muestran acciones farmacológicas tales como supresión de permeabilidad vascular y supresión de la proliferación de células endoteliales vasculares. Eejemplos de los agentes anti-VEGF pueden incluir anticuerpos anti-VEGF, inhibidores de Ligando de VEGF, antagonistas para receptores de VEGFA y fármacos de oligonucleótidos relacionados con VEGF. Los antagonistas para los receptores de VEGF antagonizan VEGF para inhibir el enlace del VEGF al receptor de VEGF. Los anticuerpos anti-VEGF, inhibidores derivando de VEGF y algunos fármacos de oligonucleótidos relacionados con VEGF y miden el enlace de VEGF al receptor de VEGF al formar un conjugado con el VEGF. Otros fármacos de oligonucleótidos relacionados con VEGF inhiben la síntesis de proteína de VEGF. Los anticuerpos anti-VEGF incluyen anticuerpos anti-VEGF obtenidos al humanizar anticuerpos anti-VEGF de ratón mediante recombinación genética fragmentos de los mismos o aquellos obtenidos al modificar una parte de la secuencia de aminoácidos mismos. Los inhibidores de Ligando de VEGF incluyen proteínas de fusión de receptor de VEGF tipo humano.

Los anticuerpos anti-VEGF, inhibidores de Ligando de VEGF antagonistas de receptor de VEGF y fármacos de oligonucleótidos relacionados con VEGF son comunes en que todos tienen una acción de suprimir la señales de VEGF.

Ejemplos específicos de los inhibidores de Ligando de VEGF incluyen aflibercept (VEGF-Trap) y VEGF-Trap EYE. Ejemplos específicos de los anticuerpos anti-VEGF incluyen bevacizumab sodio, ranibizumab, sorafenib y sunitinib. Ejemplos específicos de los fármacos de oligonucleótidos relacionados con VEGF incluyen pegaptanib sodio que es un aptamero y RTP801Í-14 que es un siARN. Además, bevacizumab sodio, ranibizumab y VEGF-Trap EYE y los semejantes son caracterizados porque inhiben el enlace de isoformas de VEGF a receptores al enlazarse ampliamente a todas las isoformas de VEGF de manera no selectiva. Por otra parte, pegaptanib sodio esta caracterizado porque se enlaza selectivamente a VEGF 165 que es el mas profundamente involucrado en neovascular intraocular patológico.

El efecto medicinal que es ejercido a administrar el derivado de hidantoína de fórmula (I) o una sal del mismo y el agente anti-VEGF en combinación esta dentro de sustancialmente el mismo efecto medicinal que es ejercido al administrar el agente anti-VEGF solo. Una modalidad del farmacéutico de acuerdo con la presente invención es un farmacéutico que es efectivo para alteraciones oculares acompañadas por angiogenésis en exceso, esto es, enfermedades neovasculares oculares. Ejemplos de las enfermedades neovasculares oculares pueden incluir alteraciones angiogénicas oculares tales como degeneración macular relacionada con la edad (húmeda) (ADM húmedas) , oclusión de vena retinal ramal (BRVO) , oclusión de vena retinal central (CRVO) , retinopatía diabética, glaucoma neovascular, neovascularización coroidal miopíca, retinitis pigmentosa, retinopatía de premadurez y neovascularización coroidal fotocoagulacion inducida. Otra modalidad del farmacéutica con la presente invención es un farmacéutico que es también efectivo para alteraciones acompañadas por permeabilidad vascular ocular incrementada. Ejemplos de las alteraciones acompañadas por permeabilidad vascular ocular incrementada pueden incluir degeneración macular relacionada con la edad húmeda (AMD húmeda) , oclusión de vena retinal ramal (BRVO) , oclusión de vena retinal central (CRVO) , maculopatía diabética, retinitis pigmentosa, retinopatía diabética y edema debido a fotocoagulacion retinal (fotocoagulacion panretinal, fotocoagulacion de rejilla, fotocoagulacion de Patrón de Rejillas) . Las alteraciones angiogénicas oculares y alteraciones acompañadas por permeabilidad ocular incrementada no esta limitadas a estas alteraciones. El farmacéutico de acuerdo con la presente invención muestra un efecto medicinal sinergico contra estas alteraciones angiogenicas oculares y alteraciones acompañadas por permeabilidad vascular ocular incrementada para los cuales la administración de un agente anti-VEGF se considera efectiva.

Degeneración macular relacionada con la edad es una enfermedad provocada por la degeneración en la macula asociada con el envejecimiento y es clasificada en "húmeda" y "atrófica" de acuerdo con la presencia o ausencia de neovascülarización que es generada del coroide (neovascularización coroidal) . La presente invención es efectiva específicamente para degeneración macular relacionada con la edad húmeda.

La degeneración macular relacionada con la edad húmeda es provocada por la generación de neovascularización coroidal (C V) anormal en sitios centrados alrededor de un área macular. Estos vasos neovasculares pueden provocar hemorragia o exudación (permeabilidad vascular incrementada) , degeneran el tejido en el área de macula concerniente con la agudeza visual, provocan un mal funcionamiento y conducen a cicatrización del tejido. Se considera que VEGF esta fuertemente involucrado en los vasos neovasculares intraoculares .

La maculopatia diabética es un término genérico que incluye deterioro en el área macular provocada por edema macular debido a permeabilidad macular incrementada y deterioro celular y macular provocados por la oclusión de vasos capilares o deterioro de células epiteliales de pigmento. La lesión mayor es edema macular. Puesto que las cantidades de VEGF son altas en los ojos de un paciente con edema macular y VEGF tiene una acción extremadamente fuerte de elevar la permeabilidad vascular, se considera que VEGF esta fuertemente involucrado en edema macular en maculopatia diabética.

El derivado de hidantoína de fórmula (I) del agente anti-VEGF usado como ingrediente activo del farmacéutico de acuerdo con la presente invención puede ser incorporado respectivamente en una pluralidad de formulaciones separadas o puede ser incorporado en la misma formulación como una formulación. El "farmacéutico compuesto de una combinación (farmacéutica que comprende una combinación)" es un farmacéutico en el cual una pluralidad de fármacos o los ingredientes activos del mismo son administrados en combinación, en otras palabras, administrados mediante uso combinado. En el caso cuando una pluralidad de ingredientes activos va a ser administrados son incorporados en una pluralidad de formulaciones separadas, estas formulaciones no son administradas necesariamente al mismo tiempo a un paciente. De acuerdo con tal administración mediante el uso combinado, el efecto del uso combinado puede ser efectuado suficientemente igual cuando uno de los farmacéuticos (o el ingrediente activo del mismo) no mantiene una concentración efectiva en la sangre o una concentración efectiva en tejido; por consiguiente, es necesario tener el uso de un método de administración en el cual los términos en los cuales los farmacéuticos respectivos mantienen sus concentraciones efectivas en la sangre o concentraciones efectivas en tejido son traslapados. En general, puesto que las formulaciones respectivas son administradas de acuerdo con sus métodos de administración respectivos originales, las formulaciones pueden ser administradas por la misma frecuencia o diferentes frecuencias .

Ejemplos de las maneras de administración de los farmacéuticos mencionados anteriormente pueden ser aquellos como se enlista a continuación: (1) administración de una sola formulación que contiene tanto él agente anti-VEGF como el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) , (2) administración simultanea de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) en la misma ruta de administración, (3) administración escalada de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) en la misma ruta de administración, (4) administración simultanea de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) en diferentes rutas de administración (5) administración escalonada de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) en diferentes rutas de administración, (6) administración de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) en la misma ruta de administración a diferentes intervalos de administración, y (7) administración de dos clases de formulaciones obtenidas al formular separadamente el agente anti-VEGF y el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) en rutas de administración diferentes a diferentes intervalos de administración. Además, ya que la manera de administración de (5) , la administración en el orden que el agente anti-VEGF es administrado primero y luego el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) es administrado después de un cierto periodo de tiempo a transcurrido, o la administración por el orden inverso puede ser ejemplificado. En cuanto a la manera de administración de (6) o (7) , la administración por los siguientes intervalos de administración puede ser ejemplificada: administración al administrar primero el agente anti-VEGF y luego administrar el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) cada día, hasta la siguiente administración del agente anti-VEGF o administración al administrar primero el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) cada día, luego administrar el agente anti-VEGF y subsecuentemente administrar el derivado de hidantoína descrito anteriormente cada día.

El farmacéutico de acuerdo con la presente invención es ya sea un farmacéutico que comprende una pluralidad de ingredientes activos en una pluralidad de formulaciones separadas o una sola formulación que incluye los ingredientes activos en la misma formulación formulados en por ejemplo una tableta, un agente de capsula, un polvo, un agente granular, un agente liquido o un agente de jarabe mediante una técnica de formulación general. El farmacéutico formulado puede ser administrado oral o parentalmente como una inyección o un colirio o los semejantes.

En el caso de un agente solido, excipientes, que son aceptables farmacológicamente en la formulación, por ejemplo almidón, lactosa, azúcar blanda blanca purificada, glucosa, celulosa cristalina, carboxilcelulosa, carboximetilcelulosa, carboxietilcelulosa, fosfato de calcio, estereato de magnesio y goma arábica y en donde sea necesario, un lubricante, un aglutinante, un agente desintegrante, un agente de recubrimiento y un colorante y los semejantes pueden ser incorporados. En el caso de un agente liquido, un estabilizador, un auxiliar de disolución, un agente de suspensión, un agente de emulsión, un agente regulador del pH y un conservador y los semejantes pueden ser usados.

La dosis del farmacéutico de acuerdo con la presente invención puede ser seleccionada apropiadamente de acuerdo con la dosis general del agente anti-VEGF o el derivado de hidantoína representado por la formula general (I) dependiendo del sujeto a ser administrado, la ruta de administración, enfermedad propuesta, forma de dosificación y los semejantes.

El derivado de hidantoína representado por la formula general (I) , específicamente fidarestat, es administrado diariamente a una vez por varias porciones en general de 0.1% mg/día a 450 mg/día, preferiblemente de 1 mg/día a 300 mg/día por paciente adulto, dependiendo del síntoma, edad, método de administración, forma de dosificación los semejantes. La dosis en el caso de la administración oral es en general de 0.1 mg/día a 450 mg/día, preferiblemente de 1 mg/día a 400 mg/día, mas preferiblemente de 1 mg/día a 200 mg/día por paciente adulto.

La dosis del agente anti-VEGF difiere dependiendo del agente. La dosis de bevacizumab sodio es de 0.1 mg/tiempo a 2.5 mg/tiempo por paciente adulto mediante administración intravitria. La dosis de pegaptanib es en general de 0.1 mg/tiempo a 3 mg/tiempo, preferiblemente 0.3 mg/tiempo por paciente adulto mediante administración intravitria. La dosis de ranibizumab es en general de 0.1 mg/tiempo a 0.5 mg/tiempo, preferiblemente 0.5 mg/tiempo por paciente adulto mediante administración intravitria. La dosis de VEGF-T AP EYE es generalmente de 0.1 mg/tiempo a 4 mg/tiempo por un paciente adulto mediante administración intravitria. El agente anti-VEGF es administrado esencialmente una vez al mes a una vez dos a tres meses en el caso de administración intravitria. Alternativamente, el agente es administrado como sea necesario, en el caso cuando la lesión deteriora o recae. Para administrar el agente anti-VEGF en combinación con el derivado de hidantoina de formula general (I) , la dosis del agente anti-VEGF puede ser disminuida y la frecuencia de administración puede ser reducida en comparación con el caso cuando el agente anti-VEGF es administrado solo.

El farmacéutico de la presente invención puede también constituir un kit del farmacéutico que comprende el derivado de hidantoina de formula general (I) e instrucciones que describen el método para administrar el farmacéutico en combinación con el agente anti-VEGF para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada. Las instrucciones descritas en el kit incluyen textos descriptivos con respecto al uso y dosificación y los semejantes, en el caso cuando el farmacéutico que comprende el derivado de hidantoína de formula general (I) es administrado en combinación con el agente anti-VEGF. El uso y dosificación de los mismos son como se menciona anteriormente.

Ejemplos La presente invención será explicada en más detalle por los siguientes ejemplos experimentales. Sin embargo, estos no limitan la presente invención y pueden ser modificados a la extensión de que no se desvíen del propósito de la presente invención.

Experimento 1 : efecto preventivo concerniente con la supresión de angiogenésis y permeabilidad vascular incrementada Efecto del uso combinado del anticuerpo de VEGF anti-ratón y fidarestat Utilizando un modelo de ratón en el cual neovascularización coroidal (denominado posteriormente en la presente como modelo de "CNV") es inducido experimentalmente mediante irradiación por láser (modelo de CNV) , se evaluó la efectividad contra el volumen de C V. En el modelo de C V los macrófagos migran por el inicio de una inflamación mediante irradiación de láser. Puesto que se produce VEGF, se generan vasos neovasculares y se observa permeabilidad vascular incrementada como resultado del mismo, el modelo de CNV es uno de los módulos que producen VEGF. En otras palabras, el modelo de CNV es un modelo experimental que muestra efectividad contra alteraciones acompañadas por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada por medio de VEGF.

Método Ambos ojos de un ratón C57BL/6J macho que tiene un peso corporal de aproximadamente 20 g (6 semanas de edad) fueron irradiados con láser (irradiados por 4 a 6 puntos por ojo) para inducir CV experimentalmente . Como se menciona posteriormente en la presente, un anticuerpo anti-VEGF y/o fidarestat fueron administrados con fármaco. La dosis de fidarestat fue de 32 mg/kg/día y fidarestat muestra el efecto medicinal máximo a esta dosis. Como el anticuerpo anti-VEGF, se uso un anticuerpo de VEGF anti-ratón comprado de R & D Systems. El número de ejemplos fue de tres o cuatro por grupo y los siguientes cuatro grupos fueron establecidos. (1) Grupos sin tratar (2) Grupo administrado con fidarestat: ingestión libre de un alimento en polvo que comprende 32 mg/kg/día de fidarestat . (3) Grupo administrado con anticuerpo neutralizante del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) : administración de un 1 ng del anticuerpo anti-VEGF en el cuerpo vitreo. (4) Grupo de uso combinado: ingestión de fidarestat de la misma manera como en "(2) Grupo administrado con Fidarestat" + administración de 1 ng de el anticuerpo anti-VEGF al cuerpo vitreo.

Fidarestat fue administrado de 2 días antes de la irradiación de láser a 7 días después de la irradiación y el anticuerpo anti-VEGF fue administrado en el cuerpo vitreo inmediatamente después de la irradiación por láser. Después de la consumación de la irradiación por láser los ratones fueron sangrados mediante sangrado general por 7 días y después de esto las bolas oculares fueron extirpadas y el volumen de CNV que apareció en el coroide fue medido. El método para inducción y evaluación de CNV es como sigue.

Inducción de CNV experimental mediante irradiación por láser Los ratones fueron anestesiados al administrar 0.30 mi de tribromoetanol. a la cavidad abdominal de los ratones y un midriático y una anestesia local fueron colocados una gota de los ojos. Después de esto, ambos ojos de los ratones fueron irradiados con láser (longitud de onda: 532 nm, salida: 200 mW, tiempo de irradiación: 100 ms, tamaño de punto: 100 mm) por 4 a 6 puntos por ojo utilizando un dispositivo de fotocoagulación por láser (Lumenis) . CNV apareció por la irradiación por láser y después de esto el volumen de CNV fue incrementado .

Evaluación del volumen de CNV A 7 días después de la irradiación por láser, los ratones fueron sometidos a eutanasia utilizando bajo anestesia de tribromoetanol y las bolas oculares izquierda y derecha de los ratones fueron extirpadas. Utilizando las bolas oculares extirpadas, se prepararon montantes planos de acuerdo con el método convencional. CNV fue teñido utilizando isolectina-B4 simplicifolia FITC-Griffonia . El volumen de CNV fue medido al importar una imagen en la vecindad de CNV mediante un microscopio de láser confocal (Zeiss LSM5 Pascal) y utilizando elementos de programación de análisis de imagen (NIH Image J) . El volumen fue representado por µ??3.

Resultados El volumen de neovascularización coroidal (CNV) a 7 días después de la irradiación por láser es mostrado en la Figura 1. No se observo un efecto significativo de suprimir CNV en el grupo administrado con 1 ng de anticuerpo anti-VEGF en comparación con el grupo sin tratar. Se observo un efecto significativo de suprimir C V (p<0.05) en el grupo administrado con fidarestat en comparación con el grupo sin tratar. Por otra parte, se observo un efecto sorprendente de suprimir CNV (p<0.01) en el grupo de uso combinado de fidarestat y 1 ng del anticuerpo anti-VEGF en comparación con el grupo sin tratar.

Cuando se uso fidarestat en combinación con una dosis de 1 ng que fue disminuido a un 10 ng que la dosis a la cual el anticuerpo anti-VEGF muestra el efecto medicinal máximo, el efecto del mismo, fue mejorado significativamente y así se observo un efecto sorprendente de suprimir CNV aun a una baja dosis.

Consideración El resultado en este tiempo muestra que, cuando se usa fidarestat en combinación con una agente anti-VEGF a una baja dosis que no muestra efectividad contra CNV por si mismo, se puede observar un efecto extremadamente sorprendente del uso combinado, en comparación con los casos, cuando cada uno de ellos es administrado solo. Puesto que la dosis a la cual el anticuerpo anti-VEGF muestra el efecto medicinal máximo es de 10 ng, se hace posible disminuir la dosificación del agente anti-VEGF a un 10 mediante este uso combinado y así, se espera que esta disminución conduzca a la disminución de los efectos secundarios del agente anti-VEGF.

El resultado presente también muestra que el efecto es mejorado aun cuando fidarestat es usado en combinación en el estado que el efecto clínico ha sido atenuado o disminuido debido a la disminución en la concentración en la sangre o concentración en tejido del anticuerpo anti-VEGF. Este resultado significa que el efecto no es atenuado al usar fidarestat en combinación a un cuando la concentración del agente anti-VEGF en el cuerpo vitreo es disminuida a un décimo o menos. De acuerdo con la mejora del efecto de tal uso combinado, el mantenimiento del efecto medico prolongado del agente anti-VEGF y el intervalo de tiempo hasta que la atenuación del efecto o re-administración debido a la recrudescencia es extendida, lo que conduce a la disminución en la frecuencia de inyección del agente anti-VEGF al cuerpo vitreo. Es decir, el resultado en el grupo de uso combinado en este tiempo mejora adicionalmente la efectividad en un paciente para el cual un efecto terapéutico ha sido observado clínicamente y consecuentemente conduce a la extensión del intervalo de tiempo hasta la re-administración del agente anti-VEGF, esto es, mantenimiento del efecto medico prolongado. Además, se puede esperar un efecto excelente de suprimir la angiogenésis mediante el uso combinado aun en un paciente para el cual el efecto de un tratamiento con un agente anti-VEGF existente es insuficiente. Alternativamente, se puede esperar que un efecto terapéutico suficiente sea obtenido aun cuando la dosis del agente anti-VEGF es disminuida.

Mientras tanto, el anticuerpo de VEGF anti-ratón usado en el experimento presente es común con los anticuerpos anti-VEGF usados clínicamente en que inhibe todas las isoformas de VEGF. Por consiguiente, el efecto del anticuerpo de VEGF anti-ratón puede ser leído como el efecto de un anticuerpo anti-VEGF tipo humano cuando es usado en un humano.

Experimento 2: efecto terapéutico contra permeabilidad vascular incrementada Efecto del uso combinado del anticuerpo de VEGF anti-ratón y fidarestat Método Un anticuerpo anti-VEGF y/o fidarestat fueron administrados a un ratón que había sido tratado para inducir C V de manera similar al experimento 1. 10 ng del anticuerpo anti-VEGF es la dosis a la cual el anticuerpo muestra el efecto medicinal máximo. El número de efectos fue de tres o cuatro por grupo y los siguientes cinco grupos fueron establecidos : (1) Grupo sin tratar (2) Grupo administrado con fidarestat: administración oral forzada de 15 mg/kg de fidarestat 2 veces al día (32 mg/kg/día) (3) Grupo administrado con anticuerpo anti-VEGF 2 ng: Administración de 2 ng de el anticuerpo anti-VEGF al cuerpo vitreo. (4) Grupo administrado con 10 ng de anticuerpo anti- VEGF: administración de 10 ng del anticuerpo anti-VEGF al cuerpo vitreo. (5) Grupo de uso combinado: administración de 2 ng del anticuerpo anti-VEGF al cuerpo vitreo mas administración de fidarestat (administración oral forzada de 16 mg/kg 2 veces al día (32 mg/kg/día)).

Fidarestat fue administrado desde el día de irradiación con láser (20 a 30 minutos después de la irradiación) a 7 días después de la irradiación y el anticuerpo anti-VEGF fue administrado en el cuerpo vitreo inmediatamente después de la irradiación de láser. Después de la consumación de la irradiación del láser, los ratones fueron sangrados mediante sangrado general por 7' días y la angiografía de fondos de fluoresceína (FA) fue fotografiada. El método para angiografía de fondos de fluoresceína-fluorescentes es como ' sigue : Angiografía de fondo de fluoresceína-fluorescentes A 7 días después de la irradiación de láser, 0.1 mi de fluoresceína al 1 % fueron administrados intraperitonealmente bajo anestesia de tribromoetanol . Ambos ojos fueron fotografiados por una cámara de ojo- fondo y la imagen de ojo-fondo obtenida fue evaluada de manera secada de acuerdo con los siguientes criterios.

Grado 0: sin fuga, sin fuga de vaso sanguíneo Grado 1: fugas cuestionables, se observaron fugas débiles Grado 2: fuga, se observaron fugas Grado 3: fugas patológicamente significativas, se observaron fugas claras en un área amplia.

La proporción del número de lesiones de FA grado 3 (%) en cada ojo fue calculada y el valor promedio de las proporciones calculadas en cada grupo fue obtenido. Cuando una imagen de ojo-fondo fue fotografiada después de la administración de fluorocromo (fluoresceína) , la red vascular puede ser observada claramente. En un caso normal las fugas del componente sanguíneo del vaso sanguíneo no son observadas, mientras que cuando el vaso sanguíneo es anormal, se observan fugas del vaso sanguíneo.

Resultados La proporción de el número de lesiones de FA grado 3 (%) en la angiografía de fondo de fluoresceína- fluorescente es mostrada en la Figura 2. En el grupo administrado con anticuerpo anti-VEGF, se observo disminución significativa en la proporción del número de lesiones (p<0.001) de manera dependiente de la dosis. En el grupo administrado con 10 ng de anticuerpo anti-VEGF, la proporción del número de lesiones fue de 6 %. Por consiguiente, se comprende que la permeabilidad vascular en el modelo presente es un modelo al cual VEGF contribuye. Por otra parte, en el grupo administrado con 2 ng de anticuerpo anti-VEGF, la proporción del mismo fue de 26 %. Aunque también se observo disminución significativa en el grupo administrado con fidarestat, mostró aproximadamente la misma proporción como aquella en el grupo administrado con 2 ng de anticuerpo anti-VEGF. En el grupo de uso combinado de 2 ng de anticuerpo anti-VEGF + fidarestat, el efecto del mismo fue mejorado por tres veces o mas y se observo un efecto de supresión similar a aquel en el grupo administrado con 10 ng de anticuerpo anti-VEGF.

Consideración Se demostró que, a pesar del hecho de que la proporción del número de lesiones FA grado 3 en el grupo administrado con fidarestat fue aproximadamente el mismo como aquel en el grupo administrado con 2 ng de anticuerpo anti-VEGF, cuando son usados en combinación, la proporción fue disminuida a un tercio o menos de aquella en el grupo administrado con 2 ng de anticuerpo anti-VEGF. El efecto de disminuir la proporción del número de lesiones de FA grado 3 mediante este uso combinado fue un efecto casi completo de suprimir la permeabilidad vascular que es comparable con el efecto máximo del anticuerpo anti-VEGF. Se espera en general que cuando dos clases de agentes anti-VEGF son usados en combinación por dosis a las cuales se muestran efectos de disminución similares, la proporción del número de lesiones de FA grado 3 es disminuido a solamente la mitad en comparación con el caso cuando una clase del agente anti-VEGF es administrado, mientras que en el resultado presente, la proporción fue disminuida a una proporción que va mas allá de lo esperado. Además, es sorprendente que el resultado mostrara un efecto similar al efecto medicinal máximo del anticuerpo anti-VEGF pueda ser obtenido mediante el uso combinado con fidarestat a un cuando la dosis del anticuerpo anti-VEGF es disminuida a una quinta parte.

El resultado presente muestra que un efecto de supresión excelente contra no solamente angiogenésis sino también la extravasación puede ser obtenido al usar el agente anti-VEGF y fidarestat en combinación. La extravasación, esto es, permeabilidad vascular incrementada significa la aparición de edema y la supresión de esta sugiere fuertemente la efectividad sobre lesiones de edema. Específicamente, puesto que la vida media de eliminación del agente anti-VEGF en el cuerpo vitreo es corta, tiene un problema en el mantenimiento de un efecto clínico prolongado y necesita ser inyectado frecuentemente en el cuerpo vitreo. Se sugirió que el efecto sobre lesiones de edema basadas en permeabilidad vascular incrementada es obtenido al usar fidarestat en combinación,' lo que consecuentemente permite la extensión del intervalo de tiempo hasta la re-administración del agente anti-VEGF mediante inyección vitria, esto es, permite la disminución de la frecuencia de la re-administración.

Resumen El efecto del agente anti-VEGF se vuelve máximo al tiempo cuando la producción de VEGF anormal ha sido suprimida completamente o cuando las señales de VEGF han sido suprimidas completamente. Es decir, se considera que el efecto se vuelve máximo si uno del sistema de producción o el sistema de señal es suprimido completamente y mejora adicional del efecto no puede ser esperado aun cuando otro sistema es suprimido adicionalmente en este tiempo. 10 ng del anticuerpo anti-VEGF se considera una dosis a la cual el efecto medicinal máximo es demostrado cuando las señales de VEGF son suprimidas. Además, 32 mg/kg de fidarestat son también considerados una dosis a la cual el efecto medicinal máximo es demostrado cuando la producción de VEGF anormal es suprimida. Por consiguiente, las personas experimentadas en el arte esperarían que, aun cuando el anticuerpo anti-VEGF es agregado a por ejemplo, 32 mg/kg de fidarestat, el efecto del mismo no es mejorado.

Sin embargo, contrario a tal expectación, un efecto fuerte adicional fue observado mediante el uso combinado de fidarestat y el anticuerpo anti-VEGF en los experimentos 1 y 2, en comparación con el grupo en el cual fidarestat fue administrado por una dosis a la cual fidarestat solo muestra el efecto medicinal máximo. Este resultado muestra que un efecto que no puede ser obtenido al solamente incrementar la dosis de un solo fármaco puede ser obtenido mediante el uso combinado .

El hecho de que tal efecto se ha ejercido no puede ser explicado por solamente el efecto de suprimir VEGF. Se considera que alguna clase de acción para suprimir el mecanismo de angiogenésis y/o permeabilidad vascular incrementada, que es diferente de VEGF, opera. Tal acción es igual a o más que el efecto medicinal máximo contra VEGF va mas allá de la esperanza de las personas experimentados en el arte en cualquiera de las enfermedades no diabéticas y diabetes mellitus.

Claims (6)

REIVINDICACIONES

1. Un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular incrementada, caracterizada porque esta compuesto de una combinación de un agente anti-VEGF y un derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) : en la fórmula X representa un átomo halógeno o un átomo de hidrógeno y R1 y R2 simultánea o individualmente representan un átomo de hidrógeno o un grupo Ci-6 alquilo opcionalmente sustituido o una sal aceptable farmacológicamente del mismo.

2. Un farmacéutico para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular incrementada, caracterizado por que comprende un derivado de hidantoína representada por la fórmula general (I) : 3. En la fórmula, X representa un átomo de halógeno o un átomo de hidrógeno y R1 y R2 simultánea o individualmente representan un átomo de hidrógeno o un grupo Ci-6 alquilo opcionalmente sustituido o una sal aceptable farmacológicamente del mismo como ingrediente activo y el farmacéutico es administrado en combinación con un agente anti-VEGF

3. El farmacéutico de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque el derivado de hidantoína representado por la fórmula general (I) es (2S, 4S) -6-fluoro-2' , 5 ' dixoespiro[croman-4 ' , 4 ' -imidazolidin]-2-carboxamida . }

. El farmacéutico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque el agente anti-VEGF es por lo menos de una clase seleccionada del grupo que consiste de un anticuerpo anti-VEGF, un inhibidor de Ligando de VEGF, un antagonista de receptor de VEGF y un fármaco de oligonucleótido relacionado con VEGF.

5. El farmacéutico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque la alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada es seleccionada del grupo que consiste de degeneración macular relacionada con la edad, oclusión de vena retinal ramal, oclusión de vena retinal central, maculopatía diabética, retinopatía diabética y glaucoma neovascular .

6. Un kit caracterizado porque comprende: el farmacéutico de acuerdo con la reivindicación 2 y instrucciones escritas que describen un método para administrar el farmacéutico en combinación con un agente anti-VEGF para impedir o tratar una alteración acompañada por angiogenésis ocular y/o permeabilidad vascular ocular incrementada .