[go: up one dir, main page]

ME02755B - Monociklički derivat piridina - Google Patents

Monociklički derivat piridina

Info

Publication number
ME02755B
ME02755B MEP-2017-130A MEP2017130A ME02755B ME 02755 B ME02755 B ME 02755B ME P2017130 A MEP2017130 A ME P2017130A ME 02755 B ME02755 B ME 02755B
Authority
ME
Montenegro
Prior art keywords
group
compound
mixture
mmol
reaction
Prior art date
Application number
MEP-2017-130A
Other languages
German (de)
English (en)
French (fr)
Inventor
Setsuo Funasaka
Toshimi Okada
Keigo Tanaka
Satoshi Nagao
Isao Ohashi
Yoshinobu Yamane
Yusuke Nakatani
Yuki KAROJI
Original Assignee
Eisai R&D Man Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eisai R&D Man Co Ltd filed Critical Eisai R&D Man Co Ltd
Publication of ME02755B publication Critical patent/ME02755B/me

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

EP2960238
MONOCIKLIČKI DERIVAT PIRIDINA
Opis
Tehnička oblast
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na monocikličke derivate piridina koji poseduju inhibitorno delovanje protiv FGFR ili na neku njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i na njihovu medicinsku upotrebu.
Stanje tehnike
[0002] FGF (faktor rasta fibroblasta) je poznat kao faktor rasta koji kontroliše brojne fiziološke funkcije poput ćelijskog rasta, ćelijske migracije, ćelijske infiltracije, ćelijskog preživljenja, diferencijalne indukcije, zaceljivanje rana i angiogeneze.
[0003] FGF kontroliše brojne fiziološke funkcije preko FGF receptora (razni FGFR: FGFR1, FGFR2, FGFR3 i FGFR4), odnosno, receptorskih tirozin kinaza. Svaki FGFR sadrži tri tipa domena, izvan-ćelijski domen, trans-membranski domen i intra-ćelijski domen tirozin kinaze. Kada se FGF veže na izvan-ćelijski domen FGFR nastaje dimer receptora. Nakon toga se aktiviše intra-ćelijska tirozin kinaza, koje dovodi do prenosa intra-ćelijskog signala uglavnom preko MAPK puta (mitogen-aktivisana protein kinaza)/ERK (kinaza koja je regulisana uz pomoć izvan-ćelijskog signala) ili preko PI3K puta (fosfatidilinozitol 3-kinaza)/Akt.
[0004] U međuvremenu je bilo pronađeno da razni tipovi raka, poput raka dojke, bešike, EMS (8p11 mijeloproliferativni sindrom), želuca, raka tela materice i raka prostate, su uzrokovani indukovanjem poremećaja FGF/FGFR signala koje prati pojačavanje proizvodnje FGF, amplifikacija FGFR gena, prekomerna ekspresija FGFR, proizvodnja FGFR fuzione belančevine, FGFR mutacije i slično (Ne-patentna Literatura 1). Nadalje, sledeći tipovi raka su primeri tumora koje prati poremećaj FGF/FGFR signala: nesitnoćelijski karcinom pluća, sitnoćelijski karcinom pluća, rak jajnika, sarkom, rak debelog creva, melanom, glioblastom, astrocitom, rak glave i vrata (Ne-patentna Literatura 2 i 3), rak štitaste žlezde (Ne-patentna Literatura 4), rak pankreasa (Ne-patentna Literatura 5 i 6), rak jetra (Ne-patentna Literatura 7), rak kože (Ne-patentna Literatura 8), rak bubrega (Ne-patentna Literatura 9), i karcinom skvamoznih ćelija pluća (Ne-patentna Literatura 10, 11, i 12).
[0005] Osim toga, FGF/FGFR signal je jedan od glavnih angiogenih signala u ćelijama endotela zajedno sa signalom VEGF (faktor rasta vaskularnog endotela)/KDR (receptor koji sadrži domen sa kinaznim insertom) za kojeg se zna da je uključen u interakciji između tumorskih stromalnih ćelija (fibroblasti) i ćelija raka (Ne-patentna Literatura 1).
[0006] Prema tome, inhibitor FGFR koji cilja FGF/FGFR signal se očekuje da deluje kao antitumorski lek protiv tumora koje prati poremećaj FGF/FGFR signala, na osnovu svojeg delovanja koje inhibira poremećeni signal i svojeg delovanja koje inhibira angiogeni signal. Nedavno je otkriven selektivni inhibitor FGFR za kojeg se smatra da nije osetljiv na delovanje konfrontirajućeg efekta drugog signala, poput selektivnog inhibitora FGFR koji je usmeren protiv FGFR1, FGFR2 ili FGFR3, koji je očito strukturno različit u odnosu na ovaj pronalazak. Tokom razvoja antitumorskog leka za ljude, međutim, selektivni inhibitor FGFR dolazi iza antitumorskog leka koji istovremeno cilja oba signala, FGF/FGFR i VEGF/KDR, a na tržište još nije stavljen (Ne-patentna Literatura 13 i 14; Patentna Literatura 1 i 2). Patentna Literatura 3 opisuje derivate pirimidina, ali ne spominje bilo kakvo inhibitorno delovanje protiv abnormalnog FGF/FGFR signala. Patentna Literatura 4 opisuje derivate piridina ili derivate pirimidina koji inhibiraju angiogenezu koja je indukovana sa VEGF i FGF. Niti jedan od pomenutih literaturnih navoda, međutim, ne opisuje jedinjenja iz ovoga pronalaska.
Lista citirane literature
Patentna Literatura
[0007]
[Patentna Literatura 1] Internacionalna publikacija br. WO 2008/075068
[Patentna Literatura 2] Internacionalna publikacija br. WO 2006/000420
[Patentna Literatura 3] Internacionalna publikacija br. WO 2002/032872
[Patentna Literatura 4] Internacionalna publikacija br. WO 2004/020434
Ne-patentna Literatura
[0008]
[Ne-patentna Literatura 1] Nicholas et al., "Fibroblast growth factor signalling: from development to cancer", Nature Reviews Cancer. 2010; 10: 116-129
[Ne-patentna Literatura 2] Joergen WESCHE et al., Fibroblast growth factors and their receptors in cancer, Biochem J. 2011: 437;199-213
[Ne-patentna Literatura 3] Gennaro Daniele et al., FGF Receptor Inhibitors: Role in Cancer Therapy, Curr Oncol Rep. 2012; 14:111-119
[Ne-patentna Literatura 4] Rosanne St. Bernard et al., Fibroblast Growth Factor Receptors as Molecular Targets in Thyroid Carcinoma, Endocrinology. 2005; 146: 1145-1153
[Ne-patentna Literatura 5] Toshiyuki Ishiwata et al., Enhanced Expression of Fibroblast Growth Factor Receptor 2 IIIc Promotes Human Pancreatic Cancer Cell Proliferation, Am J Pathol. 2012; 180: 1928-1941
[Ne-patentna Literatura 6] G Chen et al., Inhibition of endogenous SPARC enhances pancreatic cancer cell growth: modulation by FGFR1-III isoform expression, Br J Cancer. 2010;102:188-195
[Ne-patentna Literatura 7] Dorothy M. French et al., Targeting FGFR4 Inhibits Hepatocellular Carcinoma in Preclinical Mouse Models, PLoS One. 2012; 7: e36713
[Ne-patentna Literatura 8] Armelle Logie et al., Activating mutations of the tyrosine kinase receptor FGFR3 are associated with benign skin tumors in mice and humans, Hum Mol Genet 2005;14:1153-1160
[Ne-patentna Literatura 9] Tsimafeyeu I et al., Overexpression of fibroblast growth factor receptors FGFR1 and FGFR2 in renal cell carcinoma, Scand J Urol Nephrol 2011; 45: 190-195
[Ne-patentna Literatura 10] Jonathan Weiss et al., Frequent and Focal FGFR1 Amplification Associates with Therapeutically Tractable FGFR1 Dependency in Squamous Cell Lung Cancer, Sci Transl Med. 2010; 2: issue 62 62-93
[Ne-patentna Literatura 11] Hidefumi Sasaki et al., Increased FGFR1 copy number in lung squamous cell carcinomas, Mol Med Report. 2012; 5: 725-728
[Ne-patentna Literatura 12] The Cancer Genome Atlas Research Network, Comprehensive genomic characterization of squamous cell lung cancers, Nature 2012; 489: 519-525
[Ne-patentna Literatura 13] Paul R Gavine et al., AZD4547: An Orally Bioavailable, Potent, and Selective Inhibitor of the Fibroblast Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Family, Cancer Res. 2012; 72: 2045-2056
[Ne-patentna Literatura 14] Vito Guagnano et al., Discovery of 3-(2,6-Dichloro-3,5-dimethoxy-phenyl)-1-{6-[4-(4-ethyl-piperazin-1-yl)-phenylamino]-pyri midin-4-yl}-1-methyl-urea (NVP-BGJ398), A Potent and Selective Inhibitor of the Fibroblast Growth Factor Receptor Family of Receptor Tyrosine Kinase, J Med Chem. 2011; 54: 7066-7083
Rezime pronalaska
Tehnički problem
[0009] Prema tome, predmet ovoga pronalaska je da obezbedi novo jedinjenje koje inhibira delovanje FGFR ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutsku kompoziciju koja ih sadrži.
Rešenje problema
[0010] Ovi pronalazači su ozbiljno razmotrili malopre pomenuta saznanja, a kao rezultat su uspeli da sintetizuju novi monociklički derivat predstavljen sa sledećom formulom (IA) (nadalje označen kao jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska), a uz to su još pronašli da takvo jedinjenje deluje inhibitorno na FGFR1 i na FGFR2 pri čemu su, na taj način, ostvarili ovaj pronalazak. Nadalje, ovi pronalazači su pronašli da jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska poseduje mogućnost selektivne inhibicije FGF/FGFR signala u odnosu na VEGF/KDR signal, posebno selektivno delujući protiv delovanja FGFR1, FGFR2 ili FGFR3.
[0011] Specifično, ovaj pronalazak obezbeđuje sledeće, [1] do [26].
[1] Jedinjenje koje je predstavljeno sa sledećom formulom (IA) ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so:
u kojoj
n je 0 do 2;
A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu;
G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-;
E predstavlja C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot;
R1 predstavlja cijano grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C2-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili sa jednom hidroksilnom grupom, C1-6 alkoksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma;
R2 predstavlja atom vodonika, halogen atom, hidroksilnu grupu, C2-6 acilnu grupu opciono supstituisanu sa jednim supstituentom izabranim iz grupe S koja je opisana ispod, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot;
R3 predstavlja atom vodonika, okso grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma;
R4 predstavlja C1-6 alkilnu grupu, pod uslovom da kada E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 su prisutni na azotnom atomu iz pomenutog azetidinskog prstena, pomenuti R2 ili R3 nisu atomi vodonika; a
grupa S predstavlja grupu koja sadrži hidroksilnu grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C1-6 alkoksi grupu i C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot.
[2] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa tačkom [1] predstavljeno sa sledećom formulom (IB):
u kojoj
n je 0 do 2;
A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu;
G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-;
E predstavlja C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot;
R1 predstavlja C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili sa jednom hidroksilnom grupom, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma;
R2 predstavlja atom vodonika, halogen atom, hidroksilnu grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot; a
R3 predstavlja atom vodonika, okso grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, pod uslovom da kada E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 su prisutni na azotnom atomu iz pomenutog azetidinskog prstena, tada pomenuti R2 ili R3 nisu atomi vodonika.
[3] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa tačkom [1] predstavljeno sa sledećom formulom (IB):
u kojoj
n je 0 do 2;
A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu;
G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-;
E predstavlja C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot;
R1 predstavlja C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma;
R2 predstavlja atom vodonika, halogen atom, hidroksilnu grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot; a
R3 predstavlja atom vodonika, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, pod uslovom da kada E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 su prisutni na azotnom atomu iz pomenutog azetidinskog prstena, R2 ili R3 nisu atomi vodonika.
[4] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom od tačaka od [1] do [3], pri čemu A predstavlja C6-10 arilensku grupu.
[5] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [4], pri čemu G predstavlja jednostruku vezu ili atom kiseonika.
[6] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [3], pri čemu
A predstavlja fenilensku grupu, tienilensku grupu, pirazolilensku grupu ili piridilensku grupu; a
E predstavlja azetidinski prsten, pirolidinski prsten, piperidinski prsten ili piperazinski prsten.
[7] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [3], pri čemu
A predstavlja fenilensku grupu; a
E predstavlja azetidinski prsten ili piperidinski prsten.
[8] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [3], pri čemu
A predstavlja fenilensku grupu; a
E predstavlja piperidinski prsten.
[9] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [6] do [8], pri čemu
n je 0; a
G predstavlja jednostruku vezu.
[10] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [9], pri čemu
R1 predstavlja C1-6 alkoksi grupu ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu;
R2 predstavlja atom vodonika, hidroksilnu grupu, C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C1-6 alkilnu grupu; a
R3 predstavlja atom vodonika.
[11] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [10], pri čemu R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu.
[12] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [3] predstavljeni sa sledećom formulom (II):
u kojoj
R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu; a
R2 predstavlja atom vodonika, C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu.
[13] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [3] predstavljeni sa sledećom formulom (III):
u kojoj
R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu; a
R2 predstavlja C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu.
[14] 5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
[15] 6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
[16] 5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
[17] 6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
[18] 6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-etilazetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
[19] Farmaceutska kompozicija koja sadrži pomenuto jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18].
[20] Terapeutski agens protiv raka želuca, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, raka bešike ili raka tela materice koji, kao aktivni sastojak, sadrži pomenuto jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18].
[22] Terapeutski agens protiv nesitnoćelijskog karcinoma pluća koji, kao aktivni sastojak, sadrži pomenuto jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18].
[23] Terapeutski agens protiv karcinoma skvamoznih ćelija koji, kao aktivni sastojak, sadrži pomenuto jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18].
[24] Inhibitor FGFR koji se koristi za tretman nesitnoćelijskog karcinoma pluća, koji, kao aktivni sastojak, sadrži pomenuto jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18].
[25] Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18], koji se koriste kao terapeutski agens protiv raka želuca, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, raka bešike ili raka tela materice.
[26] Upotreba pomenutog jedinjenja ili neke njegove farmaceutski prihvatljiva soli u skladu sa bilo kojom tačkom od [1] do [18] za proizvodnju terapeutskog agensa protiv raka želuca, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, raka bešike ili raka tela materice.
Korisni efekti ovoga pronalaska
[0012] Jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so deluju inhibitorno prema FGFR1, FGFR2 i FGFR3 kao šta je pokazano u podacima za aktivnost koji su dobivenu u primerima sa farmakološkim testom koji su opisani ispod. Nadalje, jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so deluju selektivno inhibitorno prema FGFR1, FGFR2 ili FGFR3 u odnosu na KDR ili HUVEC. Prema tome, jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu da se potencijalno koriste kao terapeutski agens protiv raka želuca, nesitnoćelijskog karcinoma pluća uključujući tumore poput karcinoma plućnih skvamoznih ćelija, raka bešike ili raka tela materice.
Opis i izvedbe
[0013] Sada će ovaj pronalazak biti detaljno opisan uz pomoć definisanja simbola i termina koji se ovde koriste i uz pomoć opisivanja izvedaba (i slično) ovoga pronalaska.
[0014] U ovom opisu, strukturna formula nekog jedinjenja može da prikazuje određenog izomera (ako je prikladno), ali jedinjenje iz ovoga pronalaska uključuje sve izomere, poput svih geometrijskih izomera koji strukturno nastaju iz pomenutog jedinjenja, optičkih izomera na bazi asimetričnog ugljenika, stereoizomera, rotamera i tautomera, i smeše pomenutih izomera, pa prema tome nije ograničeno na prikazanu formulu, već može da bude u formi bilo kojeg od pomenutih izomera i smeša. Prema tome, jedinjenje iz ovoga pronalaska može da sadrži asimetrične ugljenikove atome (jedan ili više) u svom molekulu, a moguća je i optički aktivna supstanca i racemat, a ovaj pronalazak nije ograničen već uključuje sve pomenuto. Podrazumeva se, međutim, da neki izomeri, racemati i smeše izomera mogu da poseduju jače delovanje od ostalih. Nadalje, može da postoji i kristalni polimorfizam, koje takođe ne ograničava sam pronalazak, a jedinjenje iz ovoga pronalaska može da bude u formi pojedinačnog kristala ili u formi smeše dva ili više kristala, pri čemu jedinjenje iz ovoga pronalaska uključuje i amorfnu formu, i obuhvata i anhidrid i solvat poput hidrata.
[0015] Ovaj pronalazak uključuje jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska i neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so koji su označeni izotopom. Jedinjenje označeno izotopom je ekvivalentno jedinjenju sa formulom (IA) osim šta je jedan ili više atoma zamenjeno sa atomom(ima) koji imaju različitu atomsku masu ili maseni broj od onih koji se uobičajeno nalaze u prirodi. Primeri za izotope koji mogu da se ugrade u jedinjenje iz ovoga pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora, joda, broma i hlora, poput 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 18F, 35S, 123I i 125I.
[0016] Jedinjenje označeno sa izotopom, poput jedinjenja u koje je ugrađen radioaktivni izotop, na primer, 3H i/ili 14C, je korisno kod ogleda za ocenjivanje distribucije nekog leka i/ili matrice u telu. Izotopi 3H i 14C se smatraju korisnima jer se mogu lako pripremiti i detektovati. Izotopi 11C i 18F su korisni za PET (pozitronska emisijska tomografija), izotop 125I je koristan za SPECT (emisijska kompjuterska tomografija jednog fotona), zbog čega su korisni kod snimanja mozga. Zamena sa težim izotopom poput 2H daje, zbog svoje veće metaboličke stabilnosti, neke prednosti u nekim tretmanima, na primer, poput produženja polu-života in vivo ili smanjivanja potrebne doze, pa prema tome, se smatra korisnim u određenim situacijama. Jedinjenje označeno izotopom može da se pripremi na sličan način uz pomoć lako dostupnih reagenasa označenih sa izotopom umesto reagenasa koji nisu označeni sa izotopom i uz provođenje procesa koji su opisani u shemama i/ili primerima ispod.
[0017] Jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska može da se koristi kao hemijska proba za zarobljavanje ciljane belančevine uz pomoć biološki aktivnog jedinjenja male molekularne mase. Specifično, jedinjenje iz ovoga pronalaska može da se transformiše u afinitetnu hromatografsku probu, fotoafinitetnu probu i slično uz pomoć uvođenja grupe za označavanje, linkera i slično u ostatak koji je različit od strukturnog ostatka koji je neophodan za delovanje samog jedinjenja uz pomoć primene postupka koji je opisan u radu J. Mass Spektar. Soc. Jpn. Vol. 51, Br. 5, 2003, str. 492-498, dokumentu WO2007/139149 i slično.
[0018] Primeri za grupu za označavanje, linker i slično koji se koriste u takvoj hemijskoj probi uključuju grupe koje pripadaju sledećim tačkama, (1) to (5).
(1) Grupe za označavanje belančevina poput fotoafinitetnih grupa za označavanje (poput benzoila, benzofenona, azida, karbonil azida, diaziridina, enona, diazo i nitro grupe), i hemijski afinitetnih grupa (poput ketona u kojem je alfa ugljenik supstituisan sa halogenim atomom, karbamoila, estera, alkiltio grupe, Michael-ovog receptora α, β-nezasićenog ketona, estera i slično, i oksirana);
(2) linkeri koji mogu da se pocepaju poput -S-S-, -O-Si-O-, monosaharid (poput glikozne grupe ili galaktozne grupe) i disaharid (poput laktoze), i oligopeptidni linkeri koji mogu da se pocepaju uz pomoć nekog encima;
(3) gripe sa privescima za hvatanje poput biotina i 3-(4,4-difluoro-5,7-dimetil-4H-3a,4a-diaza-4-bora-s-indacen-3-il)propionilne grupe;
(4) radioaktivne grupe za označavanje poput 125I, 32P, 3H i 14C; fluorescentne grupe za označavanje poput fluoresceina, rodamina, danzila, umbeliferona, 7-nitrofurazanila, i 3-(4,4-difluoro-5,7-dimetil-4H-3a,4a-diaza-4-bora-s-indacen-3-il)propionilne grupe; hemiluminiscentne grupe poput luciferina i luminola; i markeri koji mogu da detektuju jone teških metala poput jona lantanoida i jona radijuma; i
(5) grupe koje se vežu na nosilac čvrste faze poput staklenih kuglica, staklene podloge, mikrotitarske pločice, agaroznih kuglica, agarozne podloge, polistirenskih kuglica, polistirenske podloge, najlonskih kuglica i najlonske podloge.
[0019] Proba koja je pripremljena uz pomoć uvođenja, u jedinjenje iz ovoga pronalaska, grupe za označavanje i slično iz malopre pomenutih grupa, (1) do (5), primenom postupaka opisanih u bilo kojoj gore pomenutoj literaturi i slično mogu da se koriste kao hemijska proba za identifikovanje marker-belančevine koja je korisna za istraživanje novih potencijalnih lekova.
[0020] "Halogen atom", koji se koristi u ovom opisu, označava atom fluora, atom hlora, atom broma ili atom joda.
[0021] "Heteroatom", koji se koristi u ovom opisu, označava atom azota, atom sumpora ili atom kiseonika.
[0022] "C1-6 alkilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava linearnu ili razgranatu alkilnu grupu koja sadrži 1 do 6 atoma ugljenika tj. monovalentnu grupu indukovanu odstranjivanjem jednog arbitrarnog atoma vodonika iz alifatskog ugljovodonika koji sadrži 1 do 6 atoma ugljenika. Primeri takve grupe uključuju metilnu grupu, etilnu grupu, n-propilnu grupu, izopropilnu grupu, n-butilnu grupu, izobutilnu grupu, sek-butilnu grupu, tert-butilnu grupu, n-pentilnu grupu, izopentilnu grupu, sek-pentilnu grupu, neopentilnu grupu, 1-metilbutilnu grupu, 2-metilbutilnu grupu, 1,1-dimetilpropilnu grupu, 1,2-dimetilpropilnu grupu, n-heksilnu grupu, izoheksilnu grupu, 1-metilpentilnu grupu, 2-metilpentilnu grupu, 3-metilpentilnu grupu, 1,1-dimetilbutilnu grupu, 1,2-dimetilbutilnu grupu, 2,2-dimetilbutilnu grupu, 1,3-dimetilbutilnu grupu, 2,3-dimetilbutilnu grupu, 3,3-dimetilbutilnu grupu, 1-etilbutilnu grupu, 2-etilbutilnu grupu, 1,1,2-trimetilpropilnu grupu, 1,2,2-trimetilpropilnu grupu, 1-etil-1-metilpropilnu grupu, 1-etil-2-metilpropilnu grupu i slično. Još specifičnije, to je metilna grupa, etilna grupa, n-propilna grupa, izopropilna grupa, n-butilna grupa, izobutilna grupa, sek-butilna grupa, tert-butilna grupa i slično, a preferirano to je metilna grupa, etilna grupa ili izopropilna grupa.
[0023] "C1-6 alkilna grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu C1-6 alkilnu grupu u kojoj arbitrarno 1 do 3 atoma vodonika može da bude supstituisano sa halogenim atomom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju monofluorometilnu grupu, difluorometilnu grupu, trifluorometilnu grupu, 2-fluoroetilnu grupu, 2,2-difluoroetilnu grupu, 2,2,2-trifluoroetilnu grupu, monohlorometilnu grupu, dihlorometilnu grupu, trihlorometilnu grupu, 2-hloroetilnu grupu, 2,2-dihloroetilnu grupu, 2,2,2-trihloroetilnu grupu, 3-fluoropropilnu grupu i slično. Kao halogeni atom koji se koristi za supstituciju, specifično su preferirani, na primer, atom fluora, atom hlora i slično, pri čemu atom fluora je više preferiran.
[0024] "C2-6 alkilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava linearnu ili razgranatu alkilnu grupu koja sadrži 2 do 6 atoma ugljenika tj. to je monovalentna grupa indukovana uz pomoć odstranjivanja jednog arbitrarnog atoma vodonika iz alifatskog ugljovodonika koji sadrži 2 do 6 atoma ugljenika. Primeri za takvu grupu uključuju etilnu grupu, n-propilnu grupu, izopropilnu grupu, n-butilnu grupu, izobutilnu grupu, sek-butilnu grupu, tert-butilnu grupu, n-pentilnu grupu, izopentilnu grupu, sek-pentilnu grupu, neopentilnu grupu, 1-metilbutilnu grupu, 2-metilbutilnu grupu, 1,1-dimetilpropilnu grupu, 1,2-dimetilpropilnu grupu, n-heksilnu grupu, izoheksilnu grupu, 1-metilpentilnu grupu, 2-metilpentilnu grupu, 3-metilpentilnu grupu, 1,1-dimetilbutilnu grupu, 1,2-dimetilbutilnu grupu, 2,2-dimetilbutilnu grupu, 1,3-dimetilbutilnu grupu, 2,3-dimetilbutilnu grupu, 3,3-dimetilbutilnu grupu, 1-etilbutilnu grupu, 2-etilbutilnu grupu, 1,1,2-trimetilpropilnu grupu, 1,2,2-trimetilpropilnu grupu, 1-etil-1-metilpropilnu grupu, i 1-etil-2-metilpropilnu grupu. Još specifičnije, to je etilna grupa, n-propilna grupa, izopropilna grupa, n-butilna grupa, izobutilna grupa, sek-butilna grupa ili tert-butilna grupa, a preferirana je etilna grupa.
[0025] "C2-6 alkilna grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atom", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu C2-6 alkilnu grupa u kojoj arbitrarno 1 do 3 atoma vodonik može da bude supstituisano sa halogenim atomom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena, a specifični primeri takve grupe uključuju 2-fluoroetilnu grupu, 2,2-difluoroetilnu grupu, 2,2,2-trifluoroetilnu grupu, 2-hloroetilnu grupu, 2,2-dihloroetilnu grupu, 2,2,2-trihloroetilnu grupu, i 3-fluoropropilnu grupu. Kao halogen atom korišćen za supstituciju, specifično su preferirani, na primer, atom fluora, atom hlora i slično, pri čemu je atom fluora više preferiran.
[0026] "Hidroksi C1-6 alkilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu C1-6 alkilnu grupu u kojoj je jedan arbitrarni atom vodonika supstituisan sa hidroksilnom grupom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa hidroksilnom grupom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju hidroksimetilnu grupu, 2-hidroksietilnu grupu, 1-hidroksietilnu grupu, 3-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksipropilnu grupu, 1-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilnu grupu i slično. Preferirana je 2-hidroksietilna grupa, 2-hidroksipropilna grupa ili 2-hidroksi-2,2-dimetiletilna grupa.
[0027] "Hidroksi C2-6 alkilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava linearnu ili razgranatu alkilnu grupa koja sadrži 2 do 6 atoma ugljenika tj. to je monovalentna grupa indukovana uz pomoć odstranjivanja jednog arbitrarnog atoma vodonika iz alifatskog ugljovodonika koji sadrži 2 do 6 atoma ugljenika, u kojem je jedan arbitrarni atom vodonika supstituisan sa hidroksilnom grupom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa hidroksilnom grupom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju 2-hidroksietilnu grupu, 1-hidroksietilnu grupu, 3-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksipropilnu grupu, 1-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilnu grupu i slično. Preferirana je 2-hidroksietilna grupa, 2-hidroksipropilna grupa ili 2-hidroksi-2,2-dimetiletilna grupa.
[0028] "Hidroksi C1-6 alkilna grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu hidroksi C1-6 alkilnu grupu u kojoj arbitrarno 1 do 3 atoma vodonika može da bude supstituisano sa halogenim atomom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena. Kao halogeni atom korišćen za supstituciju, specifično i preferirano se koristi, na primer, atom fluora, atom hlora i slično, pri čemu je atom fluora više preferiran.
[0029] "C1-6 alkoksi grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu "C1-6 alkilnu grupu" koja sadrži atom kiseonika koji je vezan na njen terminal, a primeri za takvu grupu uključuju metoksi grupu, etoksi grupu, n-propoksi grupu, izopropoksi grupu, n-butoksi grupu, izobutoksi grupu, sek-butoksi grupu, tert-butoksi grupu, n-pentiloksi grupu, izopentiloksi grupu, sek-pentiloksi grupu, neopentiloksi grupu, 1-metilbutoksi grupu, 2-metilbutoksi grupu, 1,1-dimetilpropoksi grupu, 1,2-dimetilpropoksi grupu, n-heksiloksi grupu, izoheksiloksi grupu, 1-metilpentiloksi grupu, 2-metilpentiloksi grupu, 3-metilpentiloksi grupu, 1,1-dimetilbutoksi grupu, 1,2-dimetilbutoksi grupu, 2,2-dimetilbutoksi grupu, 1,3-dimetilbutoksi grupu, 2,3-dimetilbutoksi grupu, 3,3-dimetilbutoksi grupu, 1-etilbutoksi grupu, 2-etilbutoksi grupu, 1,1,2-trimetilpropoksi grupu, 1,2,2-trimetilpropoksi grupu, 1-etil-1-metilpropoksi grupu, 1-etil-2-metilpropoksi grupu i slično, a još specifičnije, to je metoksi grupa, etoksi grupa, n-propoksi grupa, izopropoksi grupa, n-butoksi grupa, izobutoksi grupa, sek-butoksi grupa, n-pentiloksi grupa, izopentiloksi grupa, n-heksiloksi grupa, izoheksiloksi grupa i slično, pri čemu je preferirana metoksi grupa, etoksi grupa ili izopropoksi grupa.
[0030] "C1-6 alkoksi grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-pomenutu C1-6 alkoksi grupu u kojoj arbitrarno 1 do 3 atoma vodonika je supstituisano sa halogenim atomom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju monofluorometoksi grupu, difluorometoksi grupu, trifluorometoksi grupu, 2-fluoroetoksi grupu, 2,2-difluoroetoksi grupu, 2,2,2-trifluoroetoksi grupu, monohlorometoksi grupu, dihlorometoksi grupu, trihlorometoksi grupu, 2-hloroetoksi grupu, 2,2-dihloroetoksi grupu, 2,2,2-trihloroetoksi grupu, 3-fluoropropoksi grupu i slično.
[0031] "C1-6 alkoksi grupa opciono supstituisana sa jednom hidroksilnom grupom", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu C1-6 alkoksi grupu u kojoj jedan arbitrarni atom vodonika može da bude supstituisan sa hidroksilnom grupom. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa hidroksilnom grupom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju 2-hidroksietoksi grupu, 2-hidroksipropoksi grupu i 3-hidroksipropoksi grupu. Preferirano, to je 2-hidroksietoksi grupa.
[0032] "C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-definisanu "C1-6 alkoksi grupu" u kojoj je jedan arbitrarni atom vodonika supstituisan sa gore-definisanom "C1-6 alkoksi grupom", a specifični primeri za takvu grupu uključuju metoksimetoksi grupu, etoksimetoksi grupu, n-propoksimetoksi grupu, 2-metoksietoksi grupu, 2-etoksietoksi grupu, 3-metoksipropoksi grupu i slično. Preferirano, to je 2-metoksietoksi grupa, 2-etoksietoksi grupa ili 3-metoksipropoksi grupa.
[0033] "C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma", koja je koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu "C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu" u kojoj arbitrarni 1 do 3 atoma vodonika može da bude supstituisan sa halogenim atomima. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju monoflurometoksimetoksi grupu, difluorometoksimetoksi grupu, monofluoroetoksimetoksi grupu, difluoroetoksimetoksi grupu, monofluorometoksietoksi grupu, trifluorometoksietoksi grupu, difluorometoksietoksi grupu, monofluoroetoksietoksi grupu, difluoroetoksietoksi grupu i slično.
[0034] "C1-6 alkoksi C1-6 alkilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-definisanu "C1-6 alkilnu grupu" u kojoj je jedan arbitrarni atom vodonika supstituisan sa gore-definisanom "C1-6 alkoksi grupom", a specifični primeri za takvu grupu uključuju metoksimetilnu grupu, etoksimetilnu grupu, n-propoksimetilnu grupu, 2-metoksietilnu grupu, 2-etoksietilnu grupu i 3-metoksipropilnu grupu. Preferirano, to je metoksimetilna grupa.
[0035] "C1-6 alkoksi C1-6 alkilna grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma", koja se koristi u ovom opisu, označava gore-opisanu C1-6 alkoksi C1-6 alkilnu grupu u kojoj su arbitrarni 1 do 3 atoma vodonika supstituisana sa halogenim atomima. Pozicija koja treba da bude supstituisana sa halogenim atomom nije posebno ograničena, a specifični primeri za takvu grupu uključuju monofluorometoksimetilnu grupu, difluorometoksimetilnu grupu, monofluoroetoksimetilnu grupu, difluoroetoksimetilnu grupu, monofluorometoksietilnu grupu, trifluorometoksietilnu grupu, difluorometoksietilnu grupu, monofluoroetoksietilnu grupu i difluoroetoksietilnu grupu.
[0036] "Mono-C1-6 alkilamino grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava amino grupu u kojoj je jedan atom vodonika supstituisan sa gore-definisanom "C1-6 alkilnom grupom", a specifični primeri za takvu grupu uključuju metilamino grupu, etilamino grupu, n-propilamino grupu, izopropilamino grupu, n-butilamino grupu, izobutilamino grupu, sek-butilamino grupu, tert-butilamino grupu, n-pentilamino grupu, izopentilamino grupu, sek-pentilamino grupu, neopentilamino grupu, 1-metilbutilamino grupu, 2-metilbutilamino grupu, 1,1-dimetilpropilamino grupu, 1,2-dimetilpropilamino grupu, n-heksilamino grupu, izoheksilamino grupu, 1-metilpentilamino grupu, 2-metilpentilamino grupu, 3-metilpentilamino grupu, 1,1-dimetilbutilamino grupu, 1,2-dimetilbutilamino grupu, 2,2-dimetilbutilamino grupu, 1,3-dimetilbutilamino grupu, 2,3-dimetilbutilamino grupu, 3,3-dimetilbutilamino grupu, 1-etilbutilamino grupu, 2-etilbutilamino grupu, 1,1,2-trimetilpropilamino grupu, 1,2,2-trimetilpropilamino grupu, 1-etil-1-metilpropilamino grupu i 1-etil-2 metilpropilamino grupu, a preferirana je metilamino grupa ili neka slična.
[0037] "Di-C1-6 alkilamino grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava amino grupu u kojoj su dva atoma vodonika supstituisana sa istim ili različitim "C1-6 alkilnim grupama" koje su definisane iznad, a specifični primeri za takvu grupu uključuju N,N-dimetilamino grupu, N,N-dietilamino grupu, N,N-di-n-propilamino grupu, N,N-di-izopropilamino grupu, N,N-di-n-butilamino grupu, N,N-di-izobutilamino grupu, N,N-di-sek-butilamino grupu, N,N-di-tert-butilamino grupu, N-etil-N-metilamino grupu, N-n-propil-N-metilamino grupu, N-izopropil-N-metilamino grupu, N-n-butil-N-metilamino grupu, N-izobutil-N-metilamino grupu, N-sek-butil-N-metilamino grupu i N-tert-butil-N-metilamino grupu, a preferirana je N,N-dimetilamino grupa ili neka slična.
[0038] "C2-6 acilna grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava grupu koja sadrži neku atomsku grupu koja je dobivena uz pomoć odstranjivanja OH-grupe iz karboksilne grupe neke alifatske karboksilne kiseline koja sadrži 2 do 6 atoma ugljenika, a specifični primeri za takvu grupu uključuju acetilnu grupu, propionilnu grupu i butiloilnu grupu.
[0039] "Okso grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava supstituenta u kojem je atom kiseonika vezan na atom ugljenika ili na atom azota, a specifični primer za strukturu u kojoj je atom kiseonika spojen na atom ugljenika uključuje karbonilnu grupu, dok specifični primer za grupa u kojoj je atom kiseonika spojen na atom azota uključuje N-oksid.
[0040] "C3-5 heteroarilenska grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava bivalentnu grupu koja sadrži 3 do 5 atoma ugljenika koji formiraju prsten koji je indukovan uz pomoć odstranjivanja 2 arbitrarna atoma vodonika iz hetero-aromatskog jedinjenja koje sadrži 1 do 2 heteroatoma kao atomi koji formiraju pomenuti prsten, a specifični primeri za takvu grupu uključuju furilensku grupu, tienilensku grupu, pirolilensku grupu, imidazolilensku grupu, tiazolilensku grupu, pirazolilensku grupu, oksazolilensku grupu, izooksazolilensku grupu, izotiazolilensku grupu, furazanilensku grupu, piridilensku grupu, pirazinilensku grupu, piridazinilensku grupu, pirimidinilensku grupi i slično, a preferirane su piridilenska grupa, pirazolilenska grupa ili tienilenska grupa.
[0041] "C3-5 ne-aromatska heterociklična grupa koja sadrži azot", koja se koristi u ovom opisu, označava monovalentnu ne-aromatsku cikličku grupu koja sadrži 3 do 5 atoma ugljenika koji formiraju prsten i koja sadrži 1 do 2 atoma azota među atomima koji formiraju pomenuti prsten, a specifični primeri za takvu grupa uključuju azetidinilnu grupu, pirolidinilnu grupu, pirazolidinilnu grupu, imidazolidinilnu grupu, piperidinilnu grupu, piperazinilnu grupu, izooksazolidinilnu grupu, izotiazolidinilnu grupu, morfolinilnu grupu, tiomorfolinilnu grupu i slično.
[0042] "C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot", koji se koristi u ovom opisu, označava ne-aromatski prsten koji sadrži 3 do 5 atoma ugljenika koji formiraju pomenuti prsten i koji sadrži 1 do 2 atoma azota među atomima koji formiraju pomenuti prsten, a specifični primeri za takvu grupu uključuju azetidinski prsten, pirolidinski prsten, pirazolidinski prsten, imidazolidinski prsten, piperidinski prsten, piperazinski prsten, izooksazolidinski prsten, izotiazolidinski prsten, morfolinski prsten, tiomorfolinski prsten i slično.
[0043] "C6-10 arilenska grupa", koja se koristi u ovom opisu, označava bivalentnu grupu koja je indukovana uz pomoć odstranjivanja dva arbitrarna atoma vodonika iz aromatskog ugljovodonika koji sadrži 6 do 10 atoma ugljenika, a specifični primeri za takvu grupu uključuju fenilensku grupu, naftilensku grupu, indenilensku grupu, azulenilensku grupu, heptalenilensku grupu i slično, a preferirana je fenilenska grupa.
[0044] U formuli koja se koristi u ovom opisu, n je 0 do 2. Preferirano, n je 0 ili 1, a još bolje n je 0.
[0045] U formuli koja se koristi u ovom opisu, A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu, preferirano fenilensku grupu, tienilensku grupu, piridilensku grupu ili pirazolilensku grupu, a bolje fenilensku grupu.
[0046] U formuli koja se koristi u ovom opisu, G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-, preferirano jednostruku vezu ili atom kiseonika, a bolje jednostruku vezu.
[0047] U formuli koja se koristi u ovom opisu, E predstavlja gore-opisani C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot, a specifično, na primer, azetidinski prsten, pirolidinski prsten, piperidinski prsten ili piperazinski prsten, preferirano azetidinski prsten ili piperidinski prsten, a bolje piperidinski prsten.
[0048] U formuli koja se koristi u ovom opisu, R1 predstavlja cijano grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C2-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili jednom hidroksilnom grupom, C1-6 alkoksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma. Preferirano, to je C1-6 alkoksi grupa ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupa. Specifični primeri za takvu grupu uključuju cijano grupu, metilamino grupu, N,N-dimetilamino grupu, etilnu grupu, n-propilnu grupu, izopropilnu grupu, metoksi grupu, etoksi grupu, n-propoksi grupu, izopropoksi grupu, n-butoksi grupu, izobutoksi grupu, sek-butoksi grupu, n-pentiloksi grupu, izopentiloksi grupu, n-heksiloksi grupu, izoheksiloksi grupu, monofluorometoksi grupu, difluorometoksi grupu, trifluorometoksi grupu, 2-fluoroetoksi grupu, 2,2-difluoroetoksi grupu, 3-fluoropropoksi grupu, 2-hidroksietoksi grupu, metoksimetilnu grupu, etoksimetilnu grupu, n-propoksimetilnu grupu, etoksimetoksi grupu, n-propoksimetoksi grupu, 2-metoksietoksi grupu, 2-etoksietoksi grupu, 3-metoksipropoksi grupu, monofluorometoksimetoksi grupu, difluorometoksimetoksi grupu, monofluoroetoksimetoksi grupu, difluoroetoksimetoksi grupu, monofluorometoksietoksi grupu, difluorometoksietoksi grupu, trifluorometoksietoksi grupu, monofluoroetoksietoksi grupu i difluoroetoksietoksi grupu. Preferirani primeri uključuju cijano grupu, N,N-dimetilamino grupu, etilnu grupu, metoksi grupu, etoksi grupu, izopropoksi grupu, 3-fluoropropoksi grupu, 2-hidroksietoksi grupu, metoksimetilnu grupu, 2-metoksietoksi grupu, 2-etoksietoksi grupu i 3-metoksipropoksi grupu, među kojima metoksi grupa, 2-metoksietoksi grupa, 2-etoksietoksi grupa i slične grupe su preferirane, a 2-metoksietoksi grupa i 2-etoksietoksi grupa su najpoželjnije.
[0049] U formuli koja se koristi u ovom opisu, R2 predstavlja atom vodonika, halogeni atom, hidroksilnu grupu, C2-6 acilnu grupu opciono supstituisanu sa jednim supstituentom koji je izabran iz grupe S, C1-6 alkilne grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilne grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatske heterociklične grupe koja sadrži azot. Ovde, grupa S predstavlja grupu koja sadrži hidroksilnu grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C1-6 alkoksi grupu i C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot. Preferirano, to je atom vodonika, halogeni atom, hidroksilna grupa, C1-6 alkilna grupa ili hidroksi C1-6 alkilna grupa, a bolje to je atom vodonika, hidroksilna grupa, C1-6 alkilna grupa ili hidroksi C1-6 alkilna grupa. Specifični primeri za R2 uključuju atom vodonika, atom fluora, atom hlora, atom broma, atom joda, hidroksilnu grupu, metilnu grupu, etilnu grupu, n-propilnu grupu, izopropilnu grupu, n-butilnu grupu, izobutilnu grupu, sek-butilnu grupu, tert-butilnu grupu, monofluorometilnu grupu, difluorometilnu grupu, trifluorometilnu grupu, 2-fluoroetilnu grupu, 2,2-difluoroetilnu grupu, 2,2,2-trifluoroetilnu grupu, monohlorometilnu grupu, dihlorometilnu grupu, trihlorometilnu grupu, 2-hloroetilnu grupu, 2,2-dihloroetilnu grupu, 2,2,2-trihloroetilnu grupu, 3-fluoropropilnu grupu, hidroksimetilnu grupu, 2-hidroksietilnu grupu, 1-hidroksietilnu grupu, 3-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksipropilnu grupu, 1-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilnu grupu, azetidinilnu grupu, pirolidinilnu grupu, piperidinilnu grupu i piperazinilnu grupu. Preferirano, to je atom vodonika, atom fluora, hidroksilna grupa, metilna grupa, etilna grupa, n-propilna grupa, izopropilna grupa, hidroksimetilna grupa, 2-hidroksietilna grupa, 1-hidroksietilna grupa, 3-hidroksipropilna grupa, 2-hidroksipropilna grupa, 1-hidroksipropilna grupa, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilna grupa, azetidinilna grupa, pirolidinilna grupa ili piperidinilna grupa, a bilje to je metilna grupa, etilna grupa ili 2-hidroksietilna grupa.
[0050] U formuli koja se koristi u ovom opisu, R3 predstavlja atom vodonika, okso grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma. Preferirano, to je atom vodonika, C1-6 alkilnu grupu ili C1-6 alkoksi grupu. Specifično, preferirani su atom vodonika, metilna grupa ili etilna grupa, a najbolji izbor je atom vodonika.
[0051] U formuli koja se koristi u ovom opisu, R4 predstavlja C1-6 alkilnu grupu. Preferirano, to je metilna grupa.
[0052] Međutim, ako E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 su prisutni na atomu azota iz azetidinskog prstena, tada R2 ili R3 nisu atomi vodonika. Osim toga, svaki od R2 i R3 je atom ili grupa supstituisana na arbitrarnoj poziciji u E, naime, na arbitrarnoj poziciji u C3-5 ne-aromatskom heterociklu koji sadrži azot.
[0053] U sledećoj formuli (IB),
delomična struktura predstavljena sa sledećom formulom (IV) je preferirano delomična struktura predstavljen sa sledećom formulom, (V) ili (VI), a preferirano to je delomična struktura predstavljena sa formulom (V).
[0054] U formuli (V), R2 predstavlja atom vodonika, C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu, a specifični primeri uključuju atom vodonika, metilnu grupu, etilnu grupu, propilnu grupu, izopropilnu grupu, 2-hidroksietilnu grupu, 3-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilnu grupu i slično. Preferirane su metilna grupa, etilna grupa, 2-hidroksietilna grupa, 2-hidroksipropilna grupa ili 2-hidroksi-2,2-dimetiletilna grupa.
[0055] U formuli (VI), R2 predstavlja C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu, a specifični primeri uključuju metilnu grupu, etilnu grupu, propilnu grupu, izopropilnu grupu, 2-hidroksietilnu grupu, 3-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksipropilnu grupu, 2-hidroksi-2,2-dimetiletilnu grupu i slično. Preferirane su metilna grupa, etilna grupa, 2-hidroksietilna grupa, 2-hidroksipropilna grupa ili 2-hidroksi-2,2-dimetiletilna grupa.
[0056] Jedinjenje iz ovoga pronalaska preferirano je jedno od sledećih jedinjenja (ili sličnih jedinjenja) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli:
5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid;
6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid;
5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid;
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid;
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-etilazetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid.
[0057] Primeri za "so", koja se koristi u ovom opisu, uključuju soli sa anorganskim kiselinama, soli sa organskim kiselinama, i soli sa kiselim amino-kiselinama, a naročito su preferirane farmaceutski prihvatljive soli. Osim toga, so jedinjenja iz ovoga pronalaska obuhvata anhidrid neke njegove farmaceutski prihvatljive soli i solvat, poput hidrata, pomenute farmaceutski prihvatljive soli.
[0058] Preferirani primeri za so sa anorganskom kiselinom uključuju soli sa hidrovodoničnom kiselinom, bromovodoničnom kiselinom, sumpornom kiselinom, azotnom kiselinom, fosfornom kiselinom i slično, a preferirani primeri za so sa organskom kiselinom uključuju soli sa sirćetnom kiselinom, sukcinskom kiselinom, fumarnom kiselinom, maleinskom kiselinom, vinskom kiselinom, limunskom kiselinom, mlečnom kiselinom, stearinskom kiselinom, benzojevom kiselinom, metansulfonskom kiselinom, etansulfonskom kiselinom, p-toluensulfonskom kiselinom i slično.
[0059] Preferirani primeri za so sa nekom kiselom amino-kiselinom uključuju soli sa asparaginskom kiselinom i glutaminskom kiselinom i slično.
[0060] Jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu da se formulišu primenom opšteg postupka, a dozna forma može da bude, na primer, oralna formulacija (poput tablete, granula, praha, kapsule, sirupa i slično), formulacija za injekciju (za intravenozno administriranje, intramišićno administriranje, supkutano administriranje, intraperitonealno administriranje i slično), ili formulacija za spoljnu upotrebu (poput transdermalnog leka koji se apsorbuje (uključujući mast, nalepnicu i slično), kapi za oči, kapi za nos, čepiće i slično).
[0061] Za proizvodnju čvrste oralne formulacije, prenosnik, veznik, sredstvo za rahljenje, lubrikant, kolorant i slično mogu da se dodaju, ako je potrebno, u jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili u neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, a nastala smeša može da se primenom konvencionalnog postupka oblikuje u tablete, granulate, razne prahove, ili kapsule. Nadalje, ako je potrebno, pomenute tablete, granulati, prahovi, kapsule i slično mogu da se omotaju sa filmom.
[0062] Primeri za pomenuti prenosnik uključuju laktozu, skrob od kukuruza, kristalnu celulozu i slično, primeri za pomenuti veznik uključuju hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metil celulozu i slično, primeri za pomenuto sredstvo za rahljenje uključuju kalcijum karboksimetilcelulozu, natrijum kroskarmelozu i slično, primeri za pomenuti lubrikant uključuju magnezijum stearat, kalcijum stearat i slično, primer za pomenuti kolorant uključuje titanijum oksid i slično, a primeri za pomenuti agens za prekrivanje filmom uključuju hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metil celulozu, metil celulozu i slično, ali ove komponente nisu ograničene samo na pomenute primere.
[0063] Čvrsta formulacija poput tablete, kapsule, granule ili praha može da sadrži jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u opštoj količini od 0.001 do 99.5% po težini, a specifično od 0.001 do 90% po težini.
[0064] Za proizvodnju formulacije za injekciju (za intravenozno administriranje, intramišićno administriranje, supkutano administriranje, intraperitonealno administriranje i slično), agens za podešavanje pH, pufer, agens za suspendovanje, agens za rastvaranje, antioksidans, konzervans (antiseptički agens), agens za podešavanje toniciteta i slično se dodaje, ako je potrebno, u jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili u neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, a nastala smeša može da se oblikuje u formulaciju za injekciju primenom konvencionalnog postupka. Nadalje, nastala smeša može da se smrzne-osuši sa ciljem da se koristi kao liofilizovani produkt koji treba da se rastvori neposredno pre upotrebe.
[0065] Primeri za agens za podešavanje pH i za pufer uključuju organske kiseline ili anorganske kiseline i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, primeri za agens za suspendovanje uključuju metil celulozu, Polisorbat 80, natrijum karboksimetilcelulozu i slično, primeri za agens za rastvaranje uključuju Polisorbat 80, polioksietilen sorbitan monolaurat i slično, primer za antioksidane uključuje α-tokoferol i slično, primeri za konzervans uključuju metil paraoksibenzoat, etil paraoksibenzoat i slično, a primeri za agense za podešavanje toniciteta uključuju šećer od pomorandže, natrijum hlorid, manitol i slično, ali pomenute komponente nisu ograničene samo na malopre navedene primere.
[0066] Takva formulacija za injekciju može da sadrži jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u opštoj količini od 0.000001 do 99.5% po težini, a specifično od 0.00001 do 90% po težini.
[0067] Za proizvodnju formulacije za spoljnu upotrebu, materijal za bazu se dodaje u jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili u neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, a ako je potrebno još se dodaju, na primer, konzervans, stabilizator, agens za podešavanje pH, antioksidans, kolorant i slično, a nastala smeša se primenom konvencionalnog postupka oblikuje u, na primer, lek za transdermalnu apsorpciju (poput neke pomade ili nalepnice), kapi za oči, kapi za nos, čepiće i slično.
[0068] Kao materijal za bazu mogu da se koriste razni materijali koji se uobičajeno koriste, na primer, za lekove, kvazi-lekove i kozmetiku. Specifični primeri za pomenuti materijal uključuju životinjska i biljna ulja, mineralna ulja, esterska ulja, razne voskove, agense za emulziju, više alkohole, masne kiseline, silikonska ulja, surfaktante, fosfolipide, alkohole, šećerne alkohole, polimere topive u vodi, minerale iz gline, prečišćenu vodu i slično.
[0069] Takva formulacija za spoljnu upotrebu može da sadrži jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u opštoj količini od 0.000001 do 99.5% po težini, a specifično od 0.00001 do 90% po težini.
[0070] Doza jedinjenja (IA) iz ovoga pronalaska ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli zavisi o ozbiljnosti simptoma, dobi pacijenta, polu i težini, formama za administriranje i vrstama soli, specifičnog tipa bolesti i slično, a nije posebno ograničena osim ako prevazilazi maksimalnu dozu leka koja može da se daje bez da uzrokuje neprihvatljive štetne reakcije, a kod odraslog pacijenta se administrira jednom dnevno ili nekoliko puta na dan podeljena u nekoliko doza, pri čemu se doza za oralno administriranje generalno kreće od približno 30 µg do 10 g, specifično od 100 µg do 5 g, a bolje od 100 µg do 1 g, dok se doza za administriranje injekcijom generalno kreće približno od 30 µg do 1 g, specifično od 100 µg do 500 mg, a bolje od 100 µg do 300 mg.
[Opšti sintetski postupak]
[0071] Sad će biti opisan proizvodni postupak za jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska. Jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska može da bude sintetizovano primenom opštih postupaka organske sinteze, a neki primeri jedinjenja (IA) iz ovoga pronalaska, na primer, jedinjenja (1-1), (1-2), (1-3), (1-4), (1-5), (1-6), (1-7), (1-8), (1-9) i (1-10) mogu da budu sintetizovani primenom postupaka opisanih u [Proizvodnom Postupku 1] i sličnim postupcima opisanim ispod. Ako se u proizvodnim postupcima navedenim u ovom opisu koristi zaštitna grupa, poznate zaštitne grupe, na primer, poput onih opisanih od autora Green u PROTECTIVE GROUP IN ORGANIC CHEMISTRY, četvrto izdanje, JOHN WILEY & SONS, INC. se odgovarajuće izaberu i uvedu, a njihovo otklanjanje može da se provede primenom odgovarajućeg poznatog postupka.
[Proizvodni Postupak 1]
[0072] Reprezentativni proizvodni postupak za jedinjenje (IA) iz ovoga pronalaska
gde R1, R2, R3, A, E, G i n su definisanu iznad.
[Proizvodni Postupak 1-1]
[0073] Proizvodni postupak za jedinjenje (1-1), (1-2), (1-3), (1-6) ili (1-7)
[0074] U gornjoj formuli, R1, R3 (okso grupa je isključena), R4, A, E, G i n su definisani iznad; R2a i R2b svaki predstavljaju atome vodonika, C1-5 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena, ili hidroksi C1-5 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma; R2c i R2d svaki predstavljaju atome vodonika ili C1-4 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma; R2e predstavlja C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ako R2e sadrži hidroksilnu grupu, pomenuta hidroksilna grupa može da bude zaštićena sa poznatom prikladnom zaštitnom grupom; X1 predstavlja halogeni atom poput atoma hlora, atoma broma, ili atoma joda, ili izlaznu grupu sulfonata poput metansulfonata ili p-toluensulfonata; R2f predstavlja C1-5 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa C1-6 alkoksi grupom; R2g predstavlja hidroksi grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu ili C1-5 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa di-C1-6 alkilamino grupom, ako R2g sadrži hidroksilnu grupu ili mono-C1-6 alkilamino grupu, pomenute hidroksilna grupa ili mono-C1-6 alkilamino grupa mogu da budu zaštićene sa poznatom prikladnom zaštitnom grupom.
[0075] Jedinjenje (2) može takođe da se proizvede uz pomoć postupka koji je opisan u proizvodnom primeru iz bilo kojeg od primera koji su opisani ispod, [Proizvodni Postupak 2] ili neki slični.
[0076] Jedinjenja (2A), (2B), (2C), (2D) i (2E) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, ova jedinjenja mogu da se proizvedu primenom postupaka opisanih u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od dole-opisanih primera. Jedinjenje (2A) može da se nalazi u bilo kojoj formi, od dimera do mulputara.
[Proces 1-1-1]
[0077] U ovom procesu, jedinjenje (2) i jedinjenje (2A) reaguju međusobno u prisutnosti agensa za redukovanje koje daje jedinjenje (1-1). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, i može da se koristi, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, nitril poput acetonitrila, karboksilna kiselina poput sirćetne kiseline, aromatski ugljovodonik poput benzena ili toluena, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, voda, ili smeša već pomenutih rastvarača. Kao agens za redukovanje u ovoj reakciji može da se koristi metalno-hidrogenski kompleks poput natrijum borohidrida, natrijum cijanoborohidrida ili natrijum triacetoksiborohidrida, ili supstituisani boran poput diborana ili kompleksa piridin-boran. Osim toga, može da se koristi katalizator za katalitičko redukovanje poput paladijum-ugljenika u atmosferi vodonika. Jedinjenje (2A) može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi količina od 1 do 2 ekvivalenta. Agens za redukovanje može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi u količini od 1 do 5 ekvivalenata. U ovoj reakciji, kiselina poput sirćetne kiseline može da se doda u količini od 0 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od 20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 1-1-2]
[0078] U ovom procesu, jedinjenje (2) i jedinjenje (2B) međusobno reaguju kako bi se dobilo jedinjenje (1-2). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina, aromatski amin poput piridina, ili anorganska baza poput kalijum karbonata. Jedinjenje (2B) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 0 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (2). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do 200° C, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 1-1-3]
[0079] U ovom procesu, jedinjenje (2) i jedinjenje (2C) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-3). Rastvarač u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina, aromatski amin poput piridina, ili anorganska baza poput natrijum hidrogen karbonata, kalijum karbonata ili cezijum karbonata. Jedinjenje (2C) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi u količini od 1 do 3 ekvivalenta. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (2). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Ukoliko je hidroksilna grupa u R2e zaštićena, zaštita može da se otkloni primenom poznatog postupka.
[Proces 1-1-4]
[0080] U ovom procesu, jedinjenje (2) i jedinjenje (2D) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-6). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, ester poput etil acetata, etar poput tetrahidrofurana, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeše već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza može da se koristi alkil amin poput trietilamina, aromatski amin poput piridina, ili anorganska baza poput natrijum hidrogen karbonata, kalijum karbonata ili cezijum karbonata. Jedinjenje (2D) može da se koristi u količina od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi u količini od 1 do 3 ekvivalenta. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (2). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 1-1-5]
[0081] U ovom procesu, jedinjenje (2) i jedinjenje (2E) međusobno reaguju, uz pomoć agensa za kondenzovanje, sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-7). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeše već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, može da se koristi agens za kondenzovanje poput O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfata ili 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida. Nadalje, 1-hidroksibenzotriazol i slično može da se koristi kao aditiv. U ovoj reakciji, kao baza može da se koristi alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili kombinacije već pomenutih. Jedinjenje (2E) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (2), a preferirano se koristi u količini od 1 do 3 ekvivalenta. Agens za kondenzovanje može da se koristi u istoj količini (ekvivalenata) kao i jedinjenje (2E), a baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (2). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Ako je R2g zaštićen sa hidroksilnom grupom ili mono-C1-6 alkilamino grupom, zaštita može da se otkloni primenom poznatog postupka.
[Proizvodni Postupak 1-2]
[0082] Proizvodni postupak za jedinjenje (1-4)
[0083] U gornjoj formuli, R1, R2, R3, R4, A, E, G i n su definisani iznad; a X2 predstavlja halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma, ili izlaznu grupu sulfonata poput metansulfonata ili p-toluensulfonata.
[0084] Jedinjenja (3) i (4) mogu takođe da se proizvedu uz pomoć postupaka opisanih u [Proizvodnom Postupku 3], proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera navedenih ispod.
[0085] Jedinjenja (3A) i (4-1) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, ova jedinjenja mogu da se proizvedu primenom postupaka opisanih u [Proizvodnom Postupku 6], proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera navedenih ispod.
[Proces 1-2-1]
[0086] U ovom procesu, jedinjenje (4) i jedinjenje (4-1) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (3). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeše već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili neka kombinacija pomenutih baza. Jedinjenje (4-1) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (4), a preferirano se koristi u količini od 2 do 3 ekvivalenta. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. U ovom procesu, može da se pojavi diacilna forma, koja nastaje nakon reagovanja 2 ekvivalenta jedinjenja (4-1), ali pomenuta može da se direktno koristi u sledećoj reakciji.
[Proces 1-2-2]
[0087] U ovom procesu, jedinjenje (3) i jedinjenje (3A) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-4). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, ili anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata. Jedinjenje (3A) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (3), a preferirano se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (3). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 1-3]
[0088] Proizvodni postupak za jedinjenje (1) ili (1-5)
[0089] U gornjoj formuli, R1, R2, R3, R4, A, E, G i n su definisani iznad; X3 predstavlja halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma; a Pro1 predstavlja poznatu zaštitnu grupu za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe.
[0090] Jedinjenje (4) može da se proizvede primenom postupka koji je opisan u proizvodnom primeru iz bilo kojeg ispod opisanog primera, [Proizvodni Postupak 3] i slično.
[0091] Jedinjenja (4-2), (4-3), (4-4) i (4-5) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Pomenuta jedinjenja mogu takođe da se proizvedu primenom postupaka opisanih u [Proizvodnom Postupku 5], proizvodnim primerima iz bilo kojeg primera opisanog ispod.
[Proces 1-3-1 ili 1-3-3]
[0092] U ovom procesu, jedinjenje (4) i jedinjenje (4-2) ili (4-4) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (1) ili (1-5). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koristi, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili neka anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili neka kombinacija pomenutih baza. Jedinjenje (4-2) ili (4-4) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (4), a preferirano se koristi u količini od 2 do 3 ekvivalenta. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. U ovom procesu može da se proizvede diacilna forma kao rezultat reakcije 2 ekvivalenta jedinjenja (4-2) ili (4-4). U tom slučaju, pomenuta diacilna forma može da se promeni u željenu monoacilnu formu uz pomoć tretmana sa amonijakom ili sa primarnim ili sekundarnim alkil aminom poput metil amina ili piperidina.
[0093] U procesu 1-3-3, zaštitna grupa za atom azota može naknadno da se odstrani primenom poznatog postupka. Ako je Pro1, na primer, tert-butoksikarbonilna grupa, otklanjanje zaštite može da se provede primenom rastvarača koji ne inhibira reakciju poput, na primer, halogenovanog ugljovodonika poput dihlorometana, estera poput etil acetata, alkohola poput metanola, ili smeše pomenutih rastvarača, i uz pomoć korišćenja kiseline poput trifluorosirćetne kiseline ili hidrovodonične kiseline.
[Proces 1-3-2 ili 1-3-4]
[0094] U ovom procesu, jedinjenje (4) i jedinjenje (4-3) ili (4-5) međusobno reaguju, uz primenu agensa za kondenzovanje, sa ciljem da se dobije jedinjenje (1) ili (1-5). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao agens za kondenzovanje mogu da se koriste O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat ili 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid. Nadalje, kao aditiv može da se koristi 1-hidroksibenzotriazol i slično. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili neka anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili neka kombinacija već pomenutih baza. Jedinjenje (4-3) ili (4-5) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (4), a preferirano se koristi u količini od 2 do 3 ekvivalenta. Agens za kondenzovanje može da se koristi u istoj količini (isti broj ekvivalenata) kao i jedinjenje (4-3) ili (4-5), a baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. U ovom procesu može da se proizvede diacilna forma koja se pojavljuje nakon reagovanja 2 ekvivalenta jedinjenja (4-3) ili (4-5). U tom slučaju, pomenuta diacilna forma može da se promeni u željenu monoacilnu formu uz pomoć tretmana sa amonijakom ili primarnim ili sekundarnim alkil aminom poput metil amina ili piperidina. Ako je R2 zaštićen sa poznatom zaštitnom grupom, pomenuta može da se otkloni primenom poznatog postupka.
[0095] U procesu 1-3-4, zaštitna grupa za atom azota može naknadno da se odstrani primenom poznatog postupka. Ako je Pro1, na primer, tert-butoksikarbonilna grupa, otklanjanje zaštite može da se provede primenom rastvarača koji ne inhibira reakciju poput, na primer, halogenovanog ugljovodonika poput dihlorometana, estera poput etil acetata, alkohola poput metanola, ili smeše pomenutih rastvarača, i uz pomoć korišćenja kiseline poput trifluorosirćetne kiseline ili hidrovodonične kiseline.
[Proizvodni Postupak 1-4]
[0096] Proizvodni postupak za jedinjenje (1-8)
[0097] U gornjoj formuli, R1, R2, R4, A, E, G i n su definisani iznad.
[0098] Jedinjenje (1-1-1) može takođe da se proizvede primenom postupka koji je opisan u proizvodnom primeru iz bilo kojeg od primera koji su navedeni ispod, [Proizvodni Postupak 1-1] i slično.
[Proces 1-4]
[0099] U ovom procesu, jedinjenje (1-1-1) i agens za oksidiranje su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-8). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, alkohol poput metanola ili t-butanola, organska kiselina poput sirćetne kiseline, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao agens za oksidiranje mogu da se koriste vodeni vodonik peroksid, organski peroksid, ili organska peroksi-kiselina poput 3-hloroperoksibenzojeve kiseline. Agens za oksidiranje može da se koristi u količini od 0.5 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (1-1-1). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 1-5]
[0100] Proizvodni postupak za jedinjenje (1-10)
[0101] U gornjoj formuli, R2, R4, A, E, G i n su definisani iznad; a m je ceo broj od 2 do 6.
[0102] Jedinjenje (1-9) može takođe da se proizvede primenom postupka koji je opisan u proizvodnom primeru iz bilo kojeg od primera koji su opisani ispod, [Proizvodni Postupak 1-1], [Proizvodni Postupak 1-2], [Proizvodni Postupak 1-3] i slično.
[Proces 1-5]
[0103] U ovom procesu, jedinjenje (1-9) i boron tribromid su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (1-10). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma. Boron tribromid koji se koristi u ovoj reakciji može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (1-9). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 2]
[0104] Proizvodni postupak za jedinjenje (2)
[0106] Jedinjenja (4-6) i (4-7) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Ova jedinjenja mogu takođe da se proizvedu primenom postupaka koji su opisani u proizvodnim primerima iz bilo kojeg primera opisanog ispod. Jedinjenje (4-6) može takođe da se proizvede primenom postupaka opisanih u [Proizvodnom Postupku 5] i slično.
[Proces 2-1]
[0107] U ovom procesu, jedinjenje (4) i jedinjenje (4-6) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (2). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili neka anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili neka kombinacija pomenutih baza. Jedinjenje (4-6) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (4), a preferirano se koristi u količini od 2 do 3 ekvivalenta. Baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. U ovom procesu može da se proizvede diacilna forma nakon reagovanja 2 ekvivalenta jedinjenja (4-6). U tom slučaju, pomenuta diacilna forma može da se promeni i željenu monoacilnu formu uz pomoć tretmana sa amonijakom ili primarnim ili sekundarnim alkil aminom poput metil amina ili piperidina. Zaštitna grupa za atom azota može naknadno da se odstrani primenom poznatog postupka. Ako je Pro1, na primer, tert-butoksikarbonilna grupa, otklanjanje zaštite može da se provede uz korišćenje rastvarača koji ne inhibira reakciju poput, na primer, halogenovanog ugljovodonika poput dihlorometana, estera poput etil acetata, alkohola poput metanola, ili smeše ovih rastvarača, i uz korišćenje kiseline poput trifluorosirćetne kiseline ili hidrovodonične kiseline.
[Proces 2-2]
[0108] U ovom procesu, jedinjenje (4) i jedinjenje (4-7) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (2). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, nitril poput acetonitrila, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana ili hloroforma, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili neka smeša već pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao agens za kondenzovanje mogu da se koriste O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat ili 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid. Nadalje, kao aditiv može da se koristi 1-hidroksibenzotriazol i slično. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste alkil amin poput trietil amina ili N,N-diizopropiletilamina, aromatski amin poput 4-dimetilaminopiridina, ili neka anorganska baza poput kalijum karbonata ili cezijum karbonata, ili neka kombinacija pomenutih baza. Jedinjenje (4-7) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (4), a preferirano se koristi u količini od 2 do 3 ekvivalenta. Baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. U ovom procesu može da se proizvede diacilna forma nakon reagovanja 2 ekvivalenta jedinjenja (4-7). U tom slučaju, pomenuta diacilna forma može da se promeni u željenu monoacilnu formu uz pomoć tretmana sa amonijakom ili sa primarnim ili sekundarnim alkil aminom poput metil amina ili piperidina. Zaštitna grupa za atom azota može naknadno da se odstrani primenom poznatog postupka. Ako je Pro1, na primer, tert-butoksikarbonilna grupa, otklanjanje zaštite može da se provede uz pomoć korišćenja rastvarača koji ne inhibira reakciju poput, na primer, halogenovanog ugljovodonika poput dihlorometana, estera poput etil acetata, alkohola poput metanola, ili smeše pomenutih rastvarača, i uz korišćenje kiseline poput trifluorosirćetne kiseline ili hidrovodonične kiseline.
[Proizvodni Postupak 3]
[0109] Proizvodni postupak za jedinjenje (4)
[0110] U gornjoj formuli, R1, R4 su definisani iznad; Pro2 je zaštitna grupa za atom azota poput acetilne grupe; Pro3 je zaštitna grupa za atom kiseonika iz fenola poput benzilne grupe; a X3 je halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma.
[0111] Jedinjenja (7), (8), (9), (10) i (11) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Ova jedinjenja mogu takođe da se proizvedu primenom postupaka koji su opisani u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera koji su opisani ispod. Jedinjenja (5) i (6) mogu takođe da se proizvedu primenom postupaka opisanih u proizvodnim primerima iz bilo kojeg primera koji je opisan ispod i slično.
[0112] Jedinjenja (5A), (6A) i (11A) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, ova jedinjenja mogu da se proizvedu primenom postupaka opisanih u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera opisanih ispod i slično.
[Proces 3-1]
[0113] U ovom procesu, jedinjenje (11) i jedinjenje (11A) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (10). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, nitril poput acetonitrila, keton poput acetona, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (11A) može da se koristi u količini od 1 do 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (11), a može da se doda i 1 do 5 ekvivalenata baze, poput natrijum hidrogen karbonata, kalijum karbonata, natrijum metoksida, natrijum hidrida ili diizopropiletilamina. Osim toga, kao aditiv mogu da se dodaju natrijum jodid ili kalijum jodid. Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 3-2]
[0114] U ovom procesu, jedinjenje (10) i nitrometan su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (9). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničena sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, alkohol poput metanola, organska kiselina poput sirćetne kiseline, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, nitrometan se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata, a kao aditiv može da se doda 0.1 do 10 ekvivalenata amonijum acetata, etilendiamin-N,N'-disirćetne kiseline i slično. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 100 h.
[Proces 3-3]
[0115] U ovom procesu, jedinjenje (9) je nitrirano sa ciljem da se dobije jedinjenje (8). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, organska kiselina poput sirćetne kiseline, sumporna kiselina, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji kao aditiv može da se doda dimeća azotna kiselina, koncentrovana azotna kiselina ili azotna kiselina, i sirćetni anhidrid i slično. Azotna kiselina, i slično, koja se koristi u ovoj reakciji može da se koristi u količini od 1 do 100 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (9). Reakciona temperature se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 100 h.
[Proces 3-4]
[0116] U ovom procesu, jedinjenje (8) je ciklizovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (7). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, aromatski ugljovodonik poput benzena ili toluena, ugljovodonik poput cikloheksana, voda, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji se koristi neki teški metal poput gvožđa ili cinka, a kao aditiv mogu da se dodaju kiselina poput sirćetne kiseline, so poput amonijum hlorida, baza poput natrijum hidroksida, anorgansko jedinjenje poput silika-gela ili smeša pomenutih. Pomenuti teški metal poput gvožđa može da se koristi u količini od 5 do 20 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (8). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 3-5]
[0117] U ovom procesu, zaštitna grupa Pro3 iz jedinjenja (7) je otklonjena sa ciljem da se dobije jedinjenje (6). Zaštitna grupa Pro3 može da se otkloni primenom poznatog postupka, a ako Pro3 je benzil, tada korišćeni rastvarač nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, aromatski ugljovodonik poput benzena ili toluena, sirćetna kiselina, voda, ili smeša pomenutih rastvarača. Reakcija može da se provede u atmosferi vodonika uz pomoć katalizatora za katalitičko redukovanje poput paladijum-ugljenika. Pritisak vodonika se kreće od normalnog pritiska do 20 atm, a katalizator može da se koristi u količini od 0.001 do 1 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (7). Osim toga, može da se doda kiselina poput hidrovodonične kiseline. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 3-6]
[0118] U ovom procesu, jedinjenje (8) je ciklizovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (6). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput metanola, aromatski ugljovodonik poput benzena ili toluena, sirćetna kiselina, voda, ili smeša pomenutih rastvarača. Ova reakcija može da se provede u atmosferi vodonika uz pomoć katalizator za katalitičko redukovanje poput paladijum-ugljenika. Pritisak vodonika se kreće od normalnog pritiska pa do 20 atm, a pomenuti katalizator može da se koristi u količini od 0.001 do 1 ekvivalent u odnosu na jedinjenje (8). Kao aditiv može da se doda kiselina poput hlorovodonične kiseline. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 3-7]
[0119] U ovom procesu, jedinjenje (6) i jedinjenje (6A) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (5). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste kalijum karbonat, cezijum karbonat ili kalijum tert-butoksid. Baza može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (6), a preferirano se koristi u količini od 1 do 2 ekvivalenta. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Zaštitna grupa Pro2 može da se otkloni primenom nekog poznatog postupka, a ako Pro2 je acetilna grupa, otklanjanje zaštite može da se provede primenom rastvarača koji ne inhibira reakciju, poput alkohola poput metanola, i uz korišćenje neke baze poput kalijum karbonata, natrijum hidroksida ili natrijum metoksida, ili može da se provede uz korišćenje rastvarača koji ne inhibira reakciju, poput etra kao 1,4-dioksan, i uz korišćenje kiseline poput hlorovodonične kiseline. Alternativno, ovaj proces može da se provede uz pomoć korišćenja jedinjenja koje nije zaštićeno sa Pro2 poput jedinjenja (6A).
[Proces 3-8]
[0120] U ovom procesu, jedinjenje (5) i jedinjenje (5A) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (4). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao baza mogu da se koriste natrijum hidroksid ili kalijum tert-butoksid. Jedinjenje (5A) može da se koristi u količini od 1 ekvivalenta ili više u odnosu na jedinjenje (5), a preferirano se koristi u količini od 1 do 2 ekvivalenta. Pomenuta baza može da se koristi u količini od 1 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (5). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 4]
[0121] Proizvodni postupak za jedinjenje (11-1)
[0122] U gornjoj formuli, R1a predstavlja C1-6 alkilnu grupu koja je opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkilnu grupu koja je opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena atoma; a X3 predstavlja izlaznu grupu od nekog halogenog atoma poput atoma broma ili atoma joda.
[0123] Jedinjenje (12) može da se nabavi komercijalno, ili da se proizvede iz komercijalno dostupnog produkta primenom nekog poznatog postupka.
[0124] Jedinjenje (12A) može da se nabavi komercijalno, ili da se proizvede iz komercijalno dostupnog produkta primenom nekog poznatog postupka.
[Proces 4-1]
[0125] U ovom procesu, jedinjenje (12) i jedinjenje (12A) međusobno reaguju sa ciljem da se dobije jedinjenje (11-1). Rastvarač koji se koristi ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, nitril poput acetonitrila, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (12A) se koristi u količini od 0.5 do 1.5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (12), a kao aditiv može da se doda 0.5 do 1.5 ekvivalenata neke baze poput natrijum hidrogen karbonata, kalijum karbonata, natrijum metoksida ili natrijum hidrida. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 100 h.
[Proizvodni Postupak 5]
[0126] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-2), (4-4) ili (4-6)
[0127] U gornjoj formuli, R2, R3, A, E, G i n su definisani iznad; X3 je halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma; a Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe.
[0128] Jedinjenja (4-3), (4-5) i (4-7) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, ova jedinjenja mogu takođe da se proizvedu primenom postupaka koji su opisani u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera koji su opisani ispod ili postupaka koji su opisani u [Proizvodnom Postupku 7], [Proizvodnom Postupku 9] i slično.
[Proces 5-1, 5-2 ili 5-3]
[0129] U ovom procesu, jedinjenje (4-3), (4-5) ili (4-7) je reagovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-2), (4-4) ili (4-6). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, etar poput tetrahidrofurana, nitril poput acetonitrila, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, se koristi kiseli halid poput oksalil hlorida ili anorgansko halogeno jedinjenje poput tionil hlorida u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4-3), (4-5) ili (4-7), a kao aditiv može da se doda 1 do 10 ekvivalenata baze poput benzotriazola. Nadalje, može da se doda i katalitička količina N,N-dimetilformamida, N-metilpirolidinona i slično. Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 6]
[0130] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-1)
[0131] U gornjoj formuli, A, G i n su definisani iznad; m je 0 ili 1; a X3 je halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma.
[0132] Jedinjenja (4AA), (4AB) i (4B) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, ova jedinjenja mogu da se proizvedu primenom postupaka koji su opisani u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera opisanih ispod slično.
[Proces 6-1]
[0133] U ovom procesu, jedinjenje (4AA) je reagovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (4AB). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, alkohol poput etanola, ili smeše pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kao agens za redukovanje može da bude korišćen natrijum borohidrid u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4AA). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 6-2 ili 6-3]
[0134] U ovom procesu, jedinjenje (4AB) ili (4B) je reagovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-1). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, etar poput tetrahidrofurana, nitril poput acetonitrila, ili smeše pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, kiseli halid poput oksalil hlorida ili anorgansko halogeno jedinjenje poput tionil hlorida mogu da se koriste u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4AB) ili (4B), a kao aditiv može da se doda katalitička količina N,N-dimetilformamida, N-metilpirolidinona i slično. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proizvodni Postupak 7]
[0135] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-3g)
[0136] U gornjoj formuli, R2, R3, A, E, G i n su definisani iznad; X4 je halogeni atom poput atoma hlora, atoma broma ili atoma joda, ili neka izlazna grupa, sulfonat, poput metansulfonata, p-toluensulfonata ili trifluorometansulfonata; a Pro4 je poznata zaštitna grupa za karboksilnu kiselinu poput etilne grupe.
[0137] Jedinjenje (4CB) može da se nabavi komercijalno, ili može da se proizvede iz komercijalno dostupnog produkta primenom nekog poznatog postupka. Alternativno, može da se proizvede primenom postupka koji je opisan u nekom proizvodnom primeru u bilo kojem od primera opisanih ispod i slično.
[0138] Jedinjenje (4CA) ili (4D) može da se nabavi komercijalno, ili može da se proizvede iz nekog komercijalno dostupnog produkta primenom poznatog postupka.
[Proces 7-1]
[0139] U ovom procesu, jedinjenje (4CA) je reagovano sa reagensom za halogenovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4CB) ili je reagovano sa reagensom za sulfonovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4CB). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, nitril poput acetonitrila, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, voda, ili smeša pomenutih rastvarača. Tokom reakcije halogenovanja može da se kristi višak hidrohalne kiseline poput hlorovodonične kiseline ili bromovodonične kiseline. U tom slučaju može da se koristi anorganski hlorid poput cink hlorida ili litijum bromida, ali i katalizator za transfer faze i slično. Osim toga, ova reakcija može da se provede uz pomoć reagenasa za halogenovanje poput halogenovanog fosfornog jedinjenja poput fosfor trihlorida. U tom slučaju, N,N-dimetilformamid može da deluje kao iminijumova so. Alternativno, kao reagens za halogenovanje može da se koristi kombinacija organskog fosfornog jedinjenja, poput trifenilfosfina, i ugljenik tetrahalida. Alternativno, kao reagens za halogenovanje može da se koristi tionil hlorid. U tom slučaju, baza poput piridina može da se koristi kao aditiv. Reagensi za halogenovanje mogu da se koriste u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Tokom reakcije sulfonacije, reagens za sulfonovanje poput p-toluensulfonilhlorida može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata, a baza poput trietilamina ili piridina, u svojstvu aditiva, može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 7-2]
[0140] U ovom procesu, jedinjenje (4CB) je reagovano sa jedinjenjem (4D) sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-3g). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, za kondenzovanje može da se koristi organska baza poput trietilamina ili anorganska baza poput cezijum karbonata. Jedinjenje (4D) se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4-CB), a baza može da se doda u količini od 0 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Zaštitna grupa Pro4 može da se odstrani primenom poznatog postupka za otklanjanje zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 8]
[0141] Proizvodni postupak za jedinjenje (4CB-1)
[0142] U gornjoj formuli, A i n su definisani iznad; X3 je halogeni atom poput atoma hlora ili atoma broma; X5 je halogeni atom poput atoma broma ili atoma joda; a Pro4 je poznata zaštitna grupa koja štiti karboksilnu kiselinu poput etilne grupe.
[0143] Jedinjenja (4E) i (4F) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka.
[Proces 8-1]
[0144] U ovom procesu, jedinjenje (4E) je reagovano sa jedinjenjem (4F) sa ciljem da se dobije jedinjenje (4CB-1). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, organska baza poput trietilamina ili anorganska baza poput kalijum karbonata mogu da se koriste za kondenzovanje. Jedinjenje (4F) se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4E), a baza može da se doda u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro4 takođe može da se otkloni uz pomoć poznatog postupka otklanjanja zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 9]
[0145] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-3b), (4-5a), (4-5b), (4-5c), (4-5d), (4-5e) ili (4-5f)
[Proizvodni Postupak 9-1]
[0146] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-3b)
[0147] U gornjoj formuli, R2, R3, A i E su definisani iznad; X6 je halogeni atom poput atoma hlora, atoma broma ili atoma joda, ili je izlazna grupa, sulfonat, poput trifluorometansulfonata; a Pro4 je poznata zaštitna grupa, koja štiti karboksilnu kiselinu, poput etilne grupe.
[0148] Jedinjenja (4GA) i (4GB) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, jedinjenje (4GB) može da se proizvede primenom postupka koji je opisan u proizvodnom primeru iz bilo kojeg od primera opisanih ispod i slično.
[Proces 9-1-1]
[0149] U ovom procesu, jedinjenje (4GA) je reagovano sa reagensom za halogenovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4GB) ili je reagovano sa reagensom za sulfonovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4GB). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, nitril poput acetonitrila, ili smeša pomenutih rastvarača. Tokom reakcije halogenovanja, fosforni halid poput fosfor pentabromida ili reagens za halogenovanje poput trifenilfosfindibromida mogu da se koriste u količini od 1 do 5 ekvivalenata. Tokom reakcije sulfonacije, reagens za sulfonovanje poput trifluorometansulfonskog anhidrida može da se koristi u količini od 1 do 5 ekvivalenata, a baza poput trietilamina ili piridina može da se koristi, kao aditiv, u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 9-1-2]
[0150] U ovom procesu, jedinjenje (4GB) je reagovano sa jedinjenjem (4D) sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-3b). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, dimetilsulfoksid, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, organska baza poput trietilamina ili anorganska baza poput cezijum karbonata mogu da se koriste za kondenzovanje. Jedinjenje (4D) može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4GB), a baza može da se doda u količini od 0 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Nadalje, u ovu reakciju može da se doda teški metal poput bakra, a može da se doda i organometalni katalizator koji sadrži paladijum i organofosforni ligand. Pro4 može da se odstrani primenom poznatog postupka za otklanjanje zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni postupak 9-2]
[0151] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-5a)
[0152] U gornjoj formuli, R2, R3, A, E i n su definisani iznad; Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe; a Pro5 je poznata zaštitna grupa za karboksilnu kiselinu poput etilne grupe ili benzilne grupe.
[0153] Jedinjenja (4H) i (4I) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka.
[Proces 9-2-1]
[0154] U ovom procesu, jedinjenje (4H) i jedinjenje (4I) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5a). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, aromatski ugljovodonik poput toluena, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, ester poput etil acetata, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (4H) može da se koristi u količini od 0.5 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4I). U ovoj reakciji, azodikarboksilat poput diizopropil azodikarboksilata, i trifenilfosfin mogu da se koriste u količini od 1 do 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenja (4H) i (4I). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro5 može da se otkloni primenom poznatog postupka otklanjanja zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 9-3]
[0155] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-5b) ili (4-5c)
[0156] U gornjoj formuli, R2, R3, A i E su definisani iznad; X5 je halogeni atom poput atoma broma ili atoma joda; X7 je halogeni atom poput atoma broma ili atoma joda, ili je izlazna grupa, sulfonat, poput metansulfonata ili trifluorometansulfonata; M je izlazna grupa borat ester i slično; Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe; a Pro5 je poznata zaštitna grupa za karboksilnu kiselinu poput etilne grupe ili benzilne grupe, a karboksilna kiselina može, ali ne mora, biti zaštićena tokom ove reakcije.
[0157] Jedinjenja (4J), (4K) i (4L) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka.
[Proces 9-3-1]
[0158] U ovom procesu, jedinjenje (4J) i jedinjenje (4K) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5b). Rastvarač koji je korišćen u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, aromatski ugljovodonik poput toluena, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (4K) može da se koristi u količini od 0.5 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4J). U ovoj reakcijin, kao katalizator može da se koristi paladijum-kompleks koji sadrži organo-fosforno jedinjenje kao ligand. Katalizator može da se pripremi unutar samog reakcionog sistema. U ovoj reakciji, cinkov prah može da se koristi u količini od 0.5 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4J). Osim toga, bakar halid, dihalogenovani alkil, halogenovani organo-silikon i slično može da se doda kao aditiv. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro5 može da se otkloni primenom poznatog postupka otklanjanja zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proces 9-3-2]
[0159] U ovom procesu, jedinjenje (4J) i jedinjenje (4L) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5c). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput 1,4-dioksana, aromatski ugljovodonik poput toluena, alkohol poput etanola, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (4L) može da se koristi u količini od 0.5 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4J). U ovoj reakciji, paladijum-kompleks koji sadrži organo-fosforno jedinjenje kao ligand može da se koristi kao katalizator. Ovaj katalizator može da se pripremi u samom reakcionom sistemu. U ovoj reakciji, baza poput natrijum karbonata može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4J). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 9-3-3]
[0160] U ovom procesu, jedinjenje (4-5c) je redukovano pa mu je otklonjena zaštita sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5b). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, alkohol poput etanola, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, katalizator za katalitičko redukovanje poput paladijum-ugljenika može da se koristi u količini od 0.001 do 1 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4-5c). Osim toga, reakcija može da se provede u atmosferi vodonika pod pritiskom koji se kreće od normalnog pritiska pa do 20 atm. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro5 može da se otkloni primenom poznatog postupka za otklanjanje zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 9-4]
[0161] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-5d) ili (4-5e)
[0162] U gornjoj formuli, R3, A i E su definisani iznad; X8 je halogeni atom poput atoma fluora; Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe; a Pro4 je poznata zaštitna grupa za karboksilnu kiselinu poput etilne grupe, pri čemu u ovoj reakciji, karboksilna kiselina može, ali ne mora, da bude zaštićena.
[0163] Jedinjenje (4-5c) može da se nabavi komercijalno, ili može da se proizvede iz komercijalno dostupnog produkta primenom poznatog postupka. Alternativno, može da se proizvede primenom postupka koji je opisanu u proizvodnom primeru u bilo kojem od primera koji su opisani ispod i slično.
[Proces 9-4-1]
[0164] U ovom procesu, jedinjenje (4-5c) je reagovano sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5d). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a može da se koristi, na primer, etar poput tetrahidrofurana. U ovoj reakcijin, boran-kompleks poput kompleksa boran-metil sulfida može da se koristi u količini od 1 do 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4-5c). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Naknadno, uz korišćenje vodenog rastvora natrijum hidroksida u količini od 1 do 10 ekvivalenata i rastvora vodonik peroksida u količini od 1 do 10 ekvivalenata, nastaje hidroksilna grupa. Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
[Proces 9-4-2]
[0165] U ovom procesu, hidroksilna grupa u jedinjenju (4-5d) je supstituisana sa halogenim atomom kako bi se dobilo jedinjenje (4-5e). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, etar poput tetrahidrofurana, ester poput etil acetata, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, reagens za halogenovanje poput [bi-(2-metoksietil)-amino]sumpor trifluorida može da se koristi u količini od 1 do 10 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4-5d). Reakciona temperatura se kreće od 0° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro4 može da se odstrani primenom poznatog postupka za otklanjanje zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 9-5]
[0166] Proizvodni postupak za jedinjenje (4-5f)
[0167] U gornjoj formuli, R2, R3, A i E su definisani iznad; X7 je halogeni atom poput atoma broma ili atoma joda, ili je izlazna grupa, sulfonat, poput metansulfonata ili trifluorometansulfonata; Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe; a Pro4 je poznata zaštitna grupa za karboksilnu kiselinu poput etilne grupe, pri čemu u ovoj reakciji, karboksilna kiselina može, ali ne mora, da bude zaštićena.
[0168] Jedinjenja (4-5b) i (4K) mogu da se nabave komercijalno, ili mogu da se proizvedu iz komercijalno dostupnih produkata primenom poznatih postupaka. Alternativno, pomenuta jedinjenja mogu da se proizvedu primenom postupaka koji su opisani u proizvodnim primerima iz bilo kojeg od primera koji su opisani ispod i slično.
[Proces 9-5-1]
[0169] U ovom procesu, jedinjenje (4-5b) i jedinjenje (4K) su međusobno reagovani sa ciljem da se dobije jedinjenje (4-5f). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, ili smeša pomenutih rastvarača. U ovoj reakciji, jedinjenje (4K) može da se koristi u količini od 0.5 so 2 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (4-5b). Osim toga, baze poput natrijum hidrida ili kalijum tert-butoksida mogu da se koriste u količini od 1 do 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (4-5b). Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h. Pro4 može da se odstrani primenom poznatog postupka za otklanjanje zaštite sa karboksilne kiseline.
[Proizvodni Postupak 10]
[0170] Proizvodni postupak za jedinjenje (4K)
[0171] U gornjoj formuli, R2, R3 i E su definisani iznad; X7 je halogeni atom poput atoma broma ili atoma joda, ili je izlazna grupa, sulfonat, poput metansulfonata ili trifluorometansulfonata; a Pro1 je poznata zaštitna grupa za atom azota poput tert-butoksikarbonilne grupe.
[0172] Jedinjenje (5K) može da se nabavi komercijalno, ili može da se proizvede iz komercijalno dostupnog produkta primenom poznatog postupka.
[Proces 10]
[0173] U ovom procesu, jedinjenje (5K) je reagovano sa reagensom za halogenovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4K), ili je reagovano sa reagensom za sulfonovanje sa ciljem da se dobije jedinjenje (4K). Rastvarač koji se koristi u ovoj reakciji nije posebno ograničen sve dok dovoljno dobro rastvara početni materijal i ne inhibira reakciju, a mogu da se koriste, na primer, etar poput tetrahidrofurana, halogenovani ugljovodonik poput dihlorometana, amid poput N,N-dimetilformamida ili N-metilpirolidinona, nitril poput acetonitrila, ili smeša pomenutih rastvarača. Tokom reakcije halogenovanja, fosforni halid poput fosfornog pentabromida ili reagens za halogenovanje poput trifenilfosfindibromida mogu da se koriste u količini od 1 do 5 ekvivalenata. Tokom reakcije sulfonacije, reagens za sulfonovanje poput metansulfonil hlorida ili trifluorometansulfonskog anhidrida mogu da se koriste u količini od 1 do 5 ekvivalenata, dok baza poput trietilamina ili piridina može da se koristi, kao aditiv, u količini od 1 do 10 ekvivalenata. Reakciona temperatura se kreće od -20° C do temperature refluksa, a reakciono vreme od 10 min do 24 h.
Primer
[0174] Jedinjenja u skladu sa ovim pronalaskom mogu da se proizvedu primenom postupaka opisanih u Proizvodnim Primerima i Primerima koji su opisani ispod, na primer. Međutim, ovi postupci su opisani samo kao prikladni primeri, pa prema tome proizvodnja jedinjenja u skladu sa ovim pronalaskom nije ograničena samo na navedene specifične primere koji su opisani ispod.
[0175] U Proizvodnim Primerima i Primerima, silika-gel 60 (Kanto Chemicals) ili Presep silika-gel (WAKO) je korišćen za prečišćavanje uz pomoć kolonske hromatografije osim ako je drugačije navedeno. Osim toga, NH silika-gel (Fuji Silysia Chemical LTD.) ili Hi-Flash Column Amino (YAMAZENE CORPORATION) su korišćeni za prečišćavanje uz pomoć kolonske hromatografije na NH silika-gelu, a TLC Plates NH (20 cm x 20 cm, Fuji Silysia Chemical LTD.) je korišćen kao pločica za tanko-slojnu hromatografiju (TLC – Thin Layer Chromatography) na NH silika-gelu.
[0176] Spektrometri tipa Varian Mercury 400, Varian Mercury Plus 400, Varian INOVA 500 ili Avance 600 MHz (Bruker) su korišćeni za merenje spektara protonske nuklearne magnetne rezonancije, a spektari su izmereni na 400 MHz osim ako je drugačije navedeno. Hemijski pomaci u spektarima protonske nuklearne magnetne rezonancije su snimljeni u jedinicama δ (ppm) u odnosu na tetrametilsilan, a konstante kuplovanja su snimljene u jedinicama Hz. Skraćenice za obrasce razdvajanja su sledeće: s: singlet; d: dublet; t: triplet; q: kvartet; kvin: kvintet; spt: septet; m: multiplet; i brs: široki singlet.
[0177] Instrumenti Waters Micromass ZQ 2000, Waters SQ Detector 2, ili Thermo Fisher Scientific LCQ su korišćeni za merenje masenih spektara. Kod jonizacijskog postupka za merenje je korišćen metod jonizacije elektrosprejom (ESI).
[0178] U Proizvodnim Primerima i Primerima komercijalno dostupni produkti su korišćeni kao odgovarajuće komercijalno dostupna jedinjenja. U opisu ispod, termin "BOC" se odnosi na tert-butoksikarbonil, a termin "T" se odnosi na Tert.
[Primer 1]
6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0179]
[0180] tert-butil 4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-8 (3.42 g, 5.70 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (45 mL) pa je dodana trifluorosirćetna kiselina (15 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 min, tada je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, a produkt je prečišćen uz pomoć hromatografije na koloni od NH silika-gela (etil acetat:metanol = 97:3 – 4:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen uz pomoć filtracije pa je ispran sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (2.61 g, 92%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.55-1.70 (2H, m), 1.78-1.88 (2H, m), 2.62-2.80 (3H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.15-3.24 (2H, m), 3.86 (3H, s), 5.52-5.61 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.28-7.35 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.53 (1H, brs).
[0181] Početni materijal, tert-butil 4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 1-1]
(E)-2-(benziloksi)-1-metoksi-4-(2-nitrovinil)benzen
[0182]
[0183] Komercijalno dostupan 3-benziloksi-4-metoksibenzaldehid (30 g, 124 mmol) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (100 mL), tada su dodani amonijum acetat (10.8 g, 140 mmol) i nitrometan (16.8 mL, 310 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2 h i 20 min. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etanolom koje daje jedinjenje iz naslova (28.5 g, 81%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.95 (3H, s), 5.18 (2H, s), 6.93 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.03 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.17 (1H, dd, J = 8.4, 2.2 Hz), 7.30-7.47 (6H, m), 7.91 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 1-2]
(E)-1-(benziloksi)-2-metoksi-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzen
[0184]
[0185] 69% azotna kiselina (10 mL, 155 mmol) je dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-metoksi-4-(2-nitrovinil)benzena, koji je opisan u Proizvodnom Primeru 1-1 (10 g, 35.1 mmol), i sirćetne kiseline (70 mL) u atmosferi azota na 25° C, a smeša je mešana na 40° C tokom 3 h. Reakciona smeša je izlivena u led, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa etanolom koje daje jedinjenje iz naslova (10.5 g, 91%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 4.02 (3H, s), 5.28 (2H, s), 6.93 (1H, s), 7.22 (1H, d, J = 13.5 Hz), 7.35-7.48 (5H, m), 7.75 (1H, s), 8.58 (1H, d, J = 13.2 Hz).
[Proizvodni Primer 1-3]
6-metoksi-1H-indol-5-ol
[0186]
[0187] (E)-1-(benziloksi)-2-metoksi-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzen, opisanu u Proizvodnom Primeru 1-2 (9.4 g, 28.5 mmol), je suspendovan u metanolu (300 mL) pa mu je dodan 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode je 50%) (3.09 g), a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 3 h. Katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit pa je ispran sa metanolom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 3:7). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje the jedinjenje iz naslova (2.12 g, 46%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.92 (3H, s), 5.45 (1H, s), 6.39-6.44 (1H, m), 6.88 (1H, s), 7.08 (1H, t, J = 2.9 Hz), 7.14 (1H, s), 7.95 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 1-4]
4-((6-metoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0188]
[0189] 6-metoksi-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 1-3 (2.86 g, 17.6 mmol), N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (8.98 g, 52.7 mmol), i kalijum tert-butoksid (3.94 g, 35.1 mmol) su rastvoreni u dimetilsulfoksidu (45 mL) u atmosferi azota, a smeša je grejana i mešana na 160° C tokom 12.5 h. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature, a voda i etil acetat su dodani sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa vodom dva puta, a tada i sa zasićenim salinim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1). Smeša je koncentrovana u vakuumu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 - 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 - 9:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (3.88 g).
[0190] Sirovi produkt (3.88 g) je rastvoren u metanolu (75 mL), pa je dodan 28% natrijum metoksid (14 mL, 68.6 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 5.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pa su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan jednom sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.97 g, 44%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.82 (3H, s), 4.29 (2H, brs), 5.89-5.92 (1H, m), 6.30 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.49 (1H, ddd, J = 3.2, 2.2, 0.9 Hz), 7.01 (1H, s), 7.17 (1H, dd, J = 3.1,2.4 Hz), 7.33 (1H, s), 7.89 (1H, d, J = 6.0 Hz), 8.19 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 1-5]
N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid
[0191]
[0192] Komercijalno dostupan 2-amino-4-hloropiridin (50 g, 389 mmol) je rastvoren u sirćetnom anhidridu (500 mL), pa je dodan trietilamin (271 mL, 1.94 mol) na 20° C, a smeša je mešana na 60° C tokom 12 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a rastvarač je isparen. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (66 g, 99%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.21 (3H, s), 7.05 (1H, dd, J = 5.4, 1.9 Hz), 8.15 (1H, d, J = 5.4 Hz), 8.30 (2H, brs).
[Proizvodni Primer 1-6]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0193]
[0194] 4-((6-metoksi-1H-indol-5 il)oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 1-4 (1.7 g, 6.66 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (25 mL), tada je dodan 50-72% uljani natrijum hidrid (424 mg) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 min. Smeša je ponovo ohlađena do 0° C, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (1.64 g, 10.8 mmol), a produkt je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, voda, i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan jednom sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim salinim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (1.37 g, 66%). Smeša je koncentrovana u vakuumu pa je prečišćena kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan: etil acetat = 3:7 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran dva puta sa etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (387 mg, 19%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.07 (3H, d, J = 4.6 Hz), 3.86 (3H, s), 4.31 (2H, brs), 5.44-5.56 (1H, m), 5.89 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.27 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.25-7.28 (1H, m), 7.89 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.01 (1H, brs).
[0195] Reagens fenil metilkarbamat je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 1-7]
Fenil metilkarbamat
[0196]
[0197] Smeša komercijalno dostupnog metilamin hidrohlorida (50 g, 0.74 mol), piridina (124 mL, 1.53 mol), i N,N-dimetilformamida (500 mL) je mešana na 5° C, pa je kap po kap dodana komercijalno dostupan fenil hlorokarbonat (94 mL, 0.75 mol) tokom 2 h. Nakon završetka nakapanja, smeša je mešana u atmosferi azota na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je dodana u ledenu vodu (2 L) pa je dva puta ekstrahovana sa etil acetatom (1.5 L). Organski sloj je ispran sa vodom (1 L) i sa zasićenim salinim rastvorom (300 mL). Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a rastvarač je isparen. U koncentrovani talog su dodani n-heptan i etil acetat, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa n-heptanom i tert-butil metil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (74.2 g, 66%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.90 (3H, d, J = 4.9 Hz), 4.95 (1H, brs), 7.08-7.16 (2H, m), 7.16-7.24 (1H, m), 7.31-7.41 (2H, m)
[Proizvodni Primer 1-8]
tert-butil 4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0198]
[0199] Benzotriazol (2.32 g, 19.5 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (100 mL), pa je dodan tionil hlorid (1.4 mL, 19.2 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, smeša je mešana tokom 5 min. 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (5.4 g, 17.7 mmol), je dodana u reakcionu smešu na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 25 min. Reakciona smeša je odstranjena filtriranjem kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom, nakon čega je bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom, a filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, koji je opisan u Proizvodnom Primeru 1-6 (2.5 g, 8.01 mmol), trietilamina (11 mL, 79.4 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (101 mg, 0.827 mmol) u tetrahidrofuranu (80 mL) na 0° C. Produkt je mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 h, a reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. U talog su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata i odstranjen filtriranjem. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u tetrahidrofuranu, dodana je prekomerna količina od 9.8 M metilamin metanola (rastvor) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 50 min. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:3 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (3.15 g, 66%). Filtrat je spojen sa frakcijom smeše, smeša je koncentrovana u vakuumu pa je rastvorena u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:3 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (264 mg, 5.5%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (9H, s), 1.55-1.69 (2H, m), 1.77-1.87 (2H, m), 2.64-2.89 (3H, m), 3.02-3.07 (3H, m), 3.86 (3H, s), 4.26 (2H, brs), 5.62 (1H, brs), 6.50-6.55 (1H, m), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.27-7.33 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.90 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.04 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.54 (1H, brs).
[0200] 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina je sintetizovana primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 1-9]
1-(4-fenilpiperidin-1-il)etanon
[0201]
[0202] Smeša komercijalno dostupnog 4-fenilpiperidina (10 g, 62 mmol), piridina (5.7 mL, 70.5 mmol), i tetrahidrofurana (80 mL) je mešana na 0° C, a tada je nakapana smeša acetil hlorida (5 mL, 70.3 mmol) i tetrahidrofurana (20 mL) tokom 10 min. Smeša je mešana u atmosferi azota na 25° C tokom 14 h. U reakcionu tečnost su dodani etil acetat (100 mL) i voda (100 mL) sa ciljem odvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (100 mL), organski slojevi su spojeni, produkt je ispran sa zasićenim vodeni rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL), vodom (100 mL), a tada i sa zasićenim salinim rastvorom (50 mL). Organske sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a rastvarač je isparen koje daje jedinjenje iz naslova (12.3 g, 98%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.52-1.78 (2H, m), 1.81-1.99 (2H, m), 2.14 (3H, s), 2.63 (1H, td, J = 12.9, 2.7 Hz), 2.74 (1H, tt, J = 12.1, 3.7 Hz), 3.17 (1H, td, J = 13.2,2.6 Hz), 3.84-4.02 (1H, m), 4.69-4.89 (1H, m), 7.08-7.43 (5H, m).
[Proizvodni Primer 1-10]
4-(1-acetilpiperidin-4-il)benzojeva kiselina
[0203]
[0204] Smeša aluminijum hlorida(III) (26 g, 195 mmol) i dihlorometana (200 mL) je mešana na 0° C, a tada je nakapan oksalil hlorid (20 mL, 228 mmol) tokom 10 min. Tada je nakapana i smeša 1-(4-fenilpiperidin-1-il)etanona, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-9 (12.3 g, 60.5 mmol), i dihlorometana (50 mL) tokom 30 min. Smeša je mešana u atmosferi azota na 25° C tokom 14 h. Reakciona tečnost je izlivena u led, a tada su dodani etil acetat (1 L) i voda (1 L) sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa etil acetatom (1 L), organski sloj je dva puta ispran sa vodom (1 L), a tada i sa zasićenim salinim rastvorom (500 mL). Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a rastvarač je isparen. U koncentrovani talog je dodan etil acetat, a produkt je sakupljen filtracijom i ispran sa etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (9.09 g, 61%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.49-1.82 (2H, m), 1.92 (2H, t, J = 13.2 Hz), 2.15 (3H, s), 2.65 (1H, t, J = 11.7 Hz), 2.75-2.94 (1H, m), 3.08-3.30 (1H, m), 3.97 (1H, d, J = 13.2 Hz), 4.82 (1 H, d, J = 12.8 Hz), 7.30 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.05 (2H, d, J = 8.1 Hz).
[Proizvodni Primer 1-11]
Hidrohlorid 4-(piperidin-4-il)benzojeve kiseline
[0205]
[0206] Smeša 4-(1-acetilpiperidin-4-il)benzojeve kiseline, opisane u Proizvodnom Primeru 1-10 (4.50 g, 18.2 mmol), i 5 M hlorovodonične kiseline (50 mL, 250 mmol) je mešana u atmosferi azota na 140° C tokom 18 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa vodom koje daje jedinjenje iz naslova (3.77 g, 86%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.60-2.15 (4H, m), 2.76-3.16 (3H, m), 3.27-3.45 (2H, m), 7.36 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.92 (2H, d, J = 8.1 Hz), 8.65-9.04 (2H, m), 12.89 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 1-12]
4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina
[0207]
[0208] Smeša hidrohlorida 4-(piperidin-4-il)benzojeve kiseline, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-11 (2.00 g, 8.27 mmol), 1 M rastvora natrijum hidroksida (25 mL, 25 mmol), i acetona (50 mL) je mešana na 25° C, a tada je dodan rastvor di-tert-butil dikarbonata (1.9 g, 8.71 mmol) u acetonu (25 mL), kap po kap tokom 10 min. Smeša je mešana u atmosferi azota na 25° C tokom 18 h. Uz hlađenje na 0° C je dodana 1 M hlorovodonična kiselina (17 mL). Smeša je dva puta ekstrahovana sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a tada je koncentrovan u vakuumu. U koncentrovani talog su dodani n-heptan i tert-butil metil etar, a produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa n-heptanom koje daje jedinjenje iz naslova (2.30 g, 91%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 1.57-1.76 (2H, m), 1.84 (2H, d, J = 13.5 Hz), 2.62-2.97 (3H, m), 4.27 (2H, brs), 7.28-7.36 (2H, m), 7.98-8.10 (2H, m).
[Primer 2]
5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0209]
[0210] Acetaldehid (0.677 mL, 12.1 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (2.57 g, 12.1 mmol) su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (3.03 g, 6.06 mmol), i tetrahidrofurana (80 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Etil acetat, zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata, i voda su dodani u reakcionu smešu sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a talog je sakupljen filtracijom i ispran sa n-heptanom i dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (2.61 g, 82%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.12 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.77-1.90 (4H, m), 1.98-2.07 (2H, m), 2.45 (2H, q, J = 7.1 Hz), 2.52-2.62 (1H, m), 3.05-3.12 (5H, m), 3.83 (3H, s), 5.50-5.58 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9, 2.4 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.30-7.35 (3H, m), 7.79 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.7 Hz), 8.50 (1H, brs).
[Primer 3]
5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0211]
[0212] Komercijalno dostupan 2-hidroksiacetaldehid (110 mg, 1.83 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (382 mg, 1.80 mmol), i sirćetna kiselina (103 µL, 1.80 mmol) su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (300 mg, 0.601 mmol), i tetrahidrofurana (15 mL) u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 99:1 – 4:1). Ciljna frakcija i frakcija smeše su koncentrovane u vakuumu, a talog u frakciji smeše je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 97:3 – 19:1 – 23:2). Spojena ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (209 mg, 64%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.70-1.90 (4H, m), 2.14-2.25 (2H, m), 2.53-2.65 (3H, m), 2.97-3.09 (2H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.63 (2H, t, J = 5.3 Hz), 3.86 (3H, s), 5.51-5.60 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.29-7.35 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.04 (1H, s), 8.10 (1H, d,J = 5.9 Hz), 8.51 (1H, brs).
[Primer 4]
(S)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksipropil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0213]
[0214] Komercijalno dostupan (S)-(-)-propilen oksid (233 mg, 4.00 mmol) je dodan u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (400 mg, 0.801 mmol), i etanola (10 mL), a smeša je grejana i mešana u zatvorenoj tubi na 60° C tokom 1 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature pa je dodan tetrahidrofuran (5.0 mL), a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (347 mg, 78%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.14 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.66-1.89 (4H, m), 1.98-2.09 (1H, m), 2.21-2.45 (3H, m), 2.52-2.64 (1H, m), 2.88-2.96 (1H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.10-3.17 (1H, m), 3.57 (1H, brs), 3.80-3.92 (1H, m), 3.86 (3H, s), 5.52-5.59 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9,2.6 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.29-7.35 (3H, m), 7.78-7.83 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.53 (1H, brs).
[Primer 5]
5-((2-(4-(1-(3-fluoropropil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0215]
[0216] Trietilamin (11.8 µL, 0.085 mmol) i 3-fluoropropil 4-metilbenzensulfonat, opisan u Proizvodnom Primeru 5-1 (16.1 mg, 0.069 mmol), su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (14.1 mg, 0.028 mmol), i N,N-dimetilformamida (0.5 mL), smeša je grejana i mešana na 50° C tokom 1 h, a tada je mešana na sobnoj temperaturi tokom 13 h. U reakcionu smešu su dodani trietilamin (11.8 µL, 0.085 mmol) i 3-fluoropropil 4-metilbenzensulfonata (16.1 mg, 0.069 mmol), a smeša je grejana i mešana na 50° C tokom 3 h. Produkt je ohlađen do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim salinim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (10.2 mg, 65%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.72-2.00 (6H, m), 2.02-2.13 (2H, m), 2.47-2.62 (3H, m), 3.01-3.09 (2H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.86 (3H, s), 4.47 (1H, t, J = 6.0 Hz), 4.59 (1H, t, J = 6.0 Hz), 5.48-5.58 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.30-7.34 (3H, m), 7.77-7.82 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 6.2 Hz), 8.50 (1H, brs).
[0217] Reagens 3-fluoropropil 4-metilbenzensulfonat je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 5-1]
3-fluoropropil 4-metilbenzensulfonat
[0218]
[0219] Trietilamin (11 mL, 79.4 mmol), 4-dimetilaminopiridin (390 mg, 3.19 mmol), i p-toluensulfonil hlorid (13.4 g, 70.4 mmol) su dodani u smešu komercijalno dostupnog 3-fluoropropan-1-ol (5.0 g, 64 mmol) i tetrahidrofurana (120 mL) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 90 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim salinim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu i n-heptanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 10:1 – 2:1) koje daje jedinjenje iz naslova (12.7 g, 85%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.97-2.15 (2H, m), 2.46 (3H, s), 4.16 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.49 (2H, dt, J = 46.8,5.6 Hz), 7.36 (2H, dd, J = 8.4,0.6 Hz), 7.75-7.85 (2H, m).
[Primer 6]
5-((2-(4-(3-fluoropiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0220]
[0221] tert-butil 3-fluoro-4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, opisan in Proizvodnom Primeru 6-5 (29.1 mg, 0.047 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (4 mL), tada je dodana trifluorosirćetna kiselina (0.8 mL, 10.4 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 30 min. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu (4 mL), dodan je trietilamin sa ciljem da se neutralizuje prekomerna količina trifluorosirćetne kiseline. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1, etil acetat:metanol = 97:3 – 19:1) koje daje jedinjenje iz naslova (16.8 mg, 69%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.71-1.80 (2H, m), 1.89-1.97 (1H, m), 2.63-2.70 (1H, m), 2.70-2.76 (1H, m), 2.79-2.89 (1H, m), 3.05 (3H, d, J = 4.9 Hz), 3.09 (1H, d, J = 11.2 Hz), 3.48 (1H, dt, J = 11.3, 4.1 Hz), 3.87 (3H, s), 4.58 (1H, dtd, J = 50.0, 9.9, 4.6 Hz), 5.58 (1H, q, J = 4.7 Hz), 6.54 (1H, d, J = 3.4 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.6, 2.2 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.32 (1H, s), 7.38 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.04 (1 H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.57 (1H, s).
[0222] Početni materijal, tert-butil 3-fluoro-4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 6-1]
tert-butil 4-(4-(metoksikarbonil)fenil)-5,6-dihikapiridin-1(2H)-karboksilat
[0223]
[0224] Toluen (20 mL), etanol (6 mL), i voda (2 mL) su dodani u komercijalno dostupan 1-N-BOC-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin (1.00 g, 3.23 mmol), metil 4-bromobenzoat (695 mg, 3.23 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2',6'-dimetoksi bifenil (266 mg, 0.65 mmol), paladijum(II) acetat (73 mg, 0.32 mmol), i trikalijum fosfat (2.06 g, 9.70 mmol) u atmosferi azota, a smeša je mešana na 90° C tokom 5 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom, a organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 13:7) koje daje jedinjenje iz naslova (0.99 g, 96%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 2.55 (2H, brs), 3.65 (2H, t, J = 5.9 Hz), 3.92 (3H, s), 4.10 (2H, brs), 6.16 (1H, brs), 7.43 (2H, d, J = 8.3 Hz), 8.00 (2H, d, J = 8.8 Hz).
[Proizvodni Primer 6-2]
tert-butil 3-hidroksi-4-(4-(metoksikarbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0225]
[0226] tert-butil 4-(4-(metoksikarbonil)fenil)-5,6-dihikapiridin-1(2H)-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 6-1 (776 mg, 2.45 mmol), je rastvoren u tetrahidrofuranu (10 mL), tada je dodan rastvor kompleksa boran-metil sulfid (0.269 mL, 2.69 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na sobnoj temperaturi tokom 3 min, a smeša je mešana tokom 13 h. Reakciona tečnost je ohlađena do 0° C pa je dodan 1 M rastvor natrijum hidroksida (6.12 mL, 6.12 mmol) tokom 1 min. Dodan je 30% tečni vodonik peroksid (0.625 mL, 6.12 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 min. U reakcionu smešu uzastopno su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum tiosulfata (20 mL), voda, i etil acetat. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni, osušeni preko bezvodnog magnezijum sulfata i filtrirani. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:4) koje daje jedinjenje iz naslova (518 mg, 63%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 1.59 (1H, d, J = 2.9 Hz), 1.69-1.88 (2H, m), 2.57-2.71 (2H, m), 2.77 (1H, brs), 3.67-3.82 (1H, m), 3.91 (3H, s), 4.22 (1H, brs), 4.42 (1H, brs), 7.34 (2H, d, J = 8.3 Hz), 8.02 (2H, d, J = 8.3 Hz).
[Proizvodni Primer 6-3]
tert-butil 3-fluoro-4-(4-(metoksikarbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0227]
[0228] tert-butil 3-hidroksi-4-(4-(metoksikarbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 6-2 (518 mg, 1.54 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (15 mL), dodan je [bi-(2-metoksietil)amino]sumpor trifluorid (0.313 mL, 1.70 mmol) na -78° C tokom 3 min, a smeša je mešana tokom 1 h uz grejanje do sobne temperature. U reakcionu smešu uzastopno su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i filtrirani. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 3:2) koje daje jedinjenje iz naslova (402 mg, 77%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 1.64-1.81 (1H, m), 1.86-2.01 (1H, m), 2.72-2.94 (3H, m), 3.91 (3H, s), 4.19 (1H, brs), 4.44-4.66 (2H, m), 7.33 (2H, d, J = 8.3 Hz), 8.02 (2H, d, J = 8.3 Hz).
[Proizvodni Primer 6-4]
4-(1-(tert-butoksikarbonil)-3-fluoropiperidin-4-il)benzojeva kiselina
[0229]
[0230] tert-butil 3-fluoro-4-(4-(metoksikarbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 6-3 (402 mg, 1.19 mmol), je rastvoren u tetrahidrofuranu (18 mL), metanolu (6 mL), i vodi (4 mL), tada je dodan 2 M vodeni rastvor litijum hidroksida (4.17 mL, 8.34 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 3 h. Tetrahidrofuran i metanol su ispareni u vakuumu pa je u preostao rastvor dodana 1 M hlorovodonična kiselina sa ciljem neutralizovanja. Vodeni sloj je ekstrahovan četiri puta sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i filtrirani. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:4) koje daje jedinjenje iz naslova (347 mg, 90%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.50 (9H, s), 1.77 (1H, qd, J = 13.0, 3.9 Hz), 1.92 (1H, d, J = 14.1 Hz), 2.72-2.95 (3H, m), 4.21 (1H, brs), 4.46-4.67 (2H, m), 7.37 (2H, d, J = 8.3 Hz), 8.09 (2H, d, J = 8.3 Hz).
[Proizvodni Primer 6-5]
tert-butil 3-fluoro-4-(4-((4-((6-metoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0231]
[0232] Tionil hlorid (30 µL, 0.319 mmol) je dodan u smešu benzotriazola (49.3 mg, 0.414 mmol) i dihlorometana (4 mL) u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 min. Dodana je 4-(1-(tert-butoksikarbonil)-3-fluoropiperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 6-4 (103 mg, 0.319 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Reakciona tečnost je filtrirana kroz bezvodnog natrijum sulfata, pomenuti bezvodni natrijum sulfat je ispran sa dihlorometanom (4 mL) koje daje sirovi produkt u rastvoru od dihlorometana.
[0233] Malopre pomenuti dihlorometanski rastvor sa sirovim produktom (4 mL, 0.16 mmol) je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (25.0 mg, 0.080 mmol), trietilamina (56 µL, 0.40 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1.0 mg, 0.008 mmol), i dihlorometana (1 mL) na 0° C, smeša je mešana na 0° C tokom 10 min, a tada opet na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Dodan je 40% vodeni rastvor metilamina (138 µL, 1.60 mmol), smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom dodatna 2 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i filtrirani. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat =1:1-0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (29.1 mg, 59%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 1.65-1.82 (1H, m), 1.91 (1H, brs), 2.69-2.93 (3H, m), 3.04 (3H, d, J = 4.9 Hz), 3.86 (3H, s), 4.18 (1H, brs), 4.42-4.66 (2H, m), 5.65 (1H, q, J = 4.4 Hz), 6.53 (1H, d, J = 3.4 Hz), 6.62 (1H, dd, J = 5.9,2.4 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.31 (1H, s), 7.36 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.05 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.63 (1H, s).
[Primer 7]
5-((2-(4-(4-fluoropiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0234]
[0235] Benzotriazol (33.2 mg, 0.278 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (10 mL) u atmosferi azota, pa je dodan tionil hlorid (20 µL, 0.278 mmol), a smeša je mešana na 20° C tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-(1-tert-butoksikarbonil)-4-fluoropiperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 7-4 (60 mg, 0.186 mmol), a smeša je mešana na 20° C tokom 2 h. Reakciona smeša je filtrirana, a dihlorometan je isparen u vakuumu dok se količina smeše nije smanjila na približno 5 ml. U nastalu reakcionu smešu uzastopno su dodani 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-6 (25 mg, 0.08 mmol), trietilamin (55 µL, 0.40 mmol), i 4-dimetilaminopiridin (1.96 mg, 0.016 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. U reakcionu smešu je dodan A 2 M rastvor metilamin tetrahidrofurana (120 µL, 0.24 mmol), smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a tada su dodani etil acetat i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen u vakuumu, a nastao talog je rastvoren u dihlorometanu (5 mL), tada je dodana trifluorosirćetna kiselina (1 mL) na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je isparen u vakuumu nakon čega se pojavila azeotropna smeša nastalog taloga sa toluenom koja je bila osušena u vakuumu. Nastao talog je rastvoren u smeši rastvarača (dihlorometan i trietilamin), a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 17:3). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (11.8 mg, 29%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.73-2.01 (4H, m), 2.91- 3.23 (7H, m), 3.86 (3H, s), 5.76-5.91 (1H, m), 6.44-6.52 (1H, m), 6.64 (1 H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.31 (1H, s), 7.48 (2H, d, J = 8.4 Hz) 7.81-7.97 (3H, m), 8.02-8.14 (2H, m), 8.74 (1H, brs).
[0236] Početni materijal, 4-(1-tert-butoksikarbonil)-4-fluoropiperidin-4-il)benzojeva kiselina, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 7-1]
1-benzil-4-(4-(4,4-dimetil-4,5-dihidrooksazol-2-il)fenil)piperidin-4-ol
[0237]
[0238] Magnezijum (3.10 g, 127 mmol), jod (135 mg, 0.531 mmol), i 2-(4-bromofenil)-4,5-dihidro-4,4-dimetiloksazol (27 g, 106 mmol) su dodani u tetrahidrofuran (120 mL), a smeša je grejana pod refluksom tokom 1 h. Ova reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, pa je dodan 1-benzil-4-piperidon (21.7 mL, 117 mmol), a smeša je grejana pod refluksom tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i etil acetata sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni i uzastopno isprani sa vodom i zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen u vakuumu, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (13.4 g, 35%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.37 (6H, s), 1.67-1.76 (2H, m), 2.16 (2H, td, J = 13.1, 4.5 Hz), 2.47 (2H, td, J = 12.0, 2.5 Hz), 2.79 (2H, d, J = 11.4 Hz), 3.58 (2H, s), 4.09 (2H, s), 7.23-7.40 (5H, m), 7.55 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.91 (2H, d, J = 8.6 Hz).
[Proizvodni Primer 7-2]
Etil 4-(1-benzil-4-hidroksipiperidin-4-il)benzoat
[0239]
[0240] 1-benzil-4-(4-(4,4-dimetil-4,5-dihidrooksazol-2-il)fenil)piperidin-4-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 7-1 (13.4 g, 36.8 mmol), je rastvoren u etanolu (300 mL), dodana je sumporna kiselina, a smeša je mešana na 90° C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a rastvarač je isparen u vakuumu. Nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je ispran sa zasićenim vodeni rastvorom natrijum bikarbonata, a organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen u vakuumu, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (7.23 g, 58%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.39 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.59-1.85 (2H, m), 2.17 (2H, td, J =13.1, 4.5 Hz), 2.47 (2H, td, J =12.0, 2.5 Hz), 2.72-2.93 (2H, m), 3.59 (2H, s), 4.37 (2H, q, J = 7.0 Hz), 7.14-7.44 (5H, m), 7.59 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.02 (2H, d, J = 8.4 Hz).
[Proizvodni Primer 7-3]
tert-butil 4-(4-(etoksikarbonil)fenil)-4-fluoropiperidin-1-karboksilat
[0241]
[0242] Etil 4-(1-benzil-4-hidroksipiperidin-4-il)benzoat, opisan u Proizvodnom Primeru 7-2 (6.23 g, 18.4 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (200 mL) u atmosferi azot, pa je dodan dietilaminosumpor trifluorid (2.89 mL, 22.0 mmol) na -78° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu je dodan dihlorometan, a smeša je isprana sa vodom pa je osušena preko bezvodnog magnezijum sulfat i filtrirana. Rastvarač je isparen u vakuumu koje daje sirovi produkt A (6.13 g).
[0243] Sirovi produkt A (6.13 g) je rastvoren u dihlorometanu (100 mL) u atmosferi azota, pa je dodan 1-hloroetil hloroformat (2.13 mL, 19.8 mmol), a smeša je mešana na 20° C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, nastao talog je rastvoren u metanolu (100 mL), a produkt je grejan pod refluksom tokom 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, u nastao talog je dodan dietil etar, precipitat je sakupljen filtracijom, a produkt je ispran sa dietil etrom koje daje sirovi produkt B (4.72 g).
[0244] Sirovi produkt B (4.72 g) je rastvoren u dihlorometanu (50 mL), dodani su trietilamin (5.24 mL, 37.6 mmol) i di-tert-butil dikarbonat (4.92 g, 22.5 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa etil acetatom, a organski slojevi su spojeni i isprani sa vodom pa sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfat pa je filtriran. Rastvarač je isparen u vakuumu, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (3.74 g, 58%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.24-1.34 (1H, m), 1.40 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.50 (9H, s), 1.86-2.14 (2H, m), 2.54 (1H, brs), 3.18 (1H, brs), 3.65 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.00-4.26 (2H, m), 4.38 (2H, qd, J = 7.1, 3.1 Hz), 7.43 (2H, dd, J = 8.6, 1.3 Hz), 8.03 (2H, dd, J =18.1, 8.6 Hz).
[Proizvodni Primer 7-4]
4-(1-tert-butoksikarbonil)-4-fluoropiperidin-4-il)benzojeva kiselina
[0245]
[0246] tert-butil 4-(4-(etoksikarbonil)fenil)-4-fluoropiperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 7-3 (3.74 g, 10.6 mmol), je rastvoren u smeši rastvarača, tetrahidrofuran (10 mL) i metanol (5 mL), pa je dodan 1 M rastvor natrijum hidroksida (42.6 mL), a smeša je mešana na 50° C tokom 4 h. U reakcionu smešu je dodana 1 M hlorovodonična kiselina, precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa vodom, a produkt je osušen primenom agensa za sušenje po principu through-flow koje daje jedinjenje iz naslova (1.33 g, 39%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.43 (9H, s), 1.83-2.15 (4H, m), 3.06 (2H, brs), 3.99 (2H, d, J = 10.3 Hz), 7.50 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.92 (2H, d, J = 8.4 Hz).
[Primer 8]
6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0247]
[0248] Oksalil hlorid (27 µL, 0.321 mmol) i N,N-dimetilformamid (1.24 µL, 0.016 mmol) su dodani u rastvor 4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzojeve kiseline, opisane u Proizvodnom Primeru 8-2 (44 mg, 0.16 mmol), u dihlorometanu (2 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pa su u rastvor sa talogom u dihlorometanu (2 mL) uzastopno dodani trietilamin (112 µL, 0.80 mmol), 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-6 (50 mg, 0.16 mmol), i 4-dimetilaminopiridin (3.91 mg, 0.032 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. U reakcionu tečnost je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata, a tada i etil acetat sa ciljem razređivanja. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat =1:1-0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (3.6 mg, 4.0%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.18-1.38 (2H, m), 1.84 (4H, brs), 1.95-2.11 (2H, m), 2.24-2.38 (1H, m), 2.70 (4H, brs), 2.82-2.96 (2H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.80-3.91 (5H, m), 5.52-5.68 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 6.89 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.32 (1H, s), 7.75 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.90 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.02 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.56 (1H, brs).
[0249] Početni materijal, 4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzojeva kiselina, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 8-1]
Metil 4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzoat
[0250]
[0251] Komercijalno dostupan metil 4-fluorobenzoat (1.5 g, 9.73 mmol) je dodan u rastvor komercijalno dostupnog 4-(1-pirolidinil)piperidina (3.0 g, 19.5 mmol) u dimetilsulfoksidu (15 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana u atmosferi azota i uz mikrotalasnu radijacija na 150° C tokom 4 h. Reakciona tečnost je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a tada je razređena sa vodom i etil acetatom. Organski sloj je ispran sa vodom, a tada je osušen primenom nekog konvencionalnog postupka. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.06 g, 73%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.54-1.70 (2H, m), 1.74-1.88 (4H, m), 1.93-2.06 (2H, m), 2.12-2.26 (1H, m), 2.53-2.65 (4H, m), 2.90 (2H, td, J =12.4, 2.6 Hz), 3.74-3.97 (5H, m), 6.86 (2H, d, J = 9.2 Hz), 7.89 (2H, d, J = 9.2 Hz).
[Proizvodni Primer 8-2]
4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzojeva kiselina
[0252]
[0253] 5 M rastvor natrijum hidroksida (15 mL, 75.0 mmol) je dodan u rastvor metil 4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzoata, opisanog u Proizvodnom Primeru 8-1 (2.06 g, 7.14 mmol), u tetrahidrofuranu (10 mL) i metanolu (10 mL). Reakciona tečnost je mešana na 50° C tokom 4 h. Reakciona tečnost je ohlađena do 0° C, a tada je nakapana 5 M hlorovodonična kiselina do postizanja pH = 1. Tečna smeša je razređena sa etil acetatom. Organske sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.61 g, 82%).
ESI-MS(m/z):297[M+H]+.
[Primer 9]
5-((2-(4-((4-hidroksipiperidin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0254]
[0255] Trietilamin (1.6 mL, 11.5 mmol) i komercijalno dostupan 4-(hlorometil)benzoil hlorid (1.37 g, 7.25 mmol) su dodani u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (905 mg, 2.90 mmol), i tetrahidrofurana (28 mL) u atmosferi azota na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 100 min, tada su dodani trietilamin (1.6 mL, 11.5 mmol) i 4-(hlorometil)benzoil hlorid (0.90 g, 4.76 mmol) na 0° C, a produkt je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda, tetrahidrofuran, i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Produkt je odstranjen filtriranjem na NH silika-gelu (etil acetat), a tada je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt.
[0256] Sirovi produkt je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (15 mL), tada je dodan komercijalno dostupan 4-hidroksipiperidin (1.48 g, 14.6 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 16 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 9:1; 7:3 – 4:1). Ciljni produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (1.30 g, 84%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.32-1.44 (2H, m), 1.64-1.74 (2H, m), 1.97-2.09 (2H, m), 2.59-2.69 (2H, m), 2.86 (3H, d, J = 4.2 Hz), 3.39-3.50 (3H, m), 3.76 (3H, s), 4.54 (1H, d, J = 4.2 Hz), 6.63 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.65 (1H, dd, J = 5.7, 2.2 Hz), 7.37 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.44 (1H, s), 7.66 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.78 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.92 (2H, d, J = 8.2 Hz), 8.10 (1H, s), 8.15-8.22 (2H, m), 10.68 (1H, s).
[Primer 10]
5-((2-(4-(((3S,4S)-3-hidroksi-4-metoksipirolidin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0257]
[0258] Sirovi produkt opisan u Primeru 9 (20.2 mg, 0.033 mmol) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (0.5 mL), tada je dodan (3S,4S)-4-metoksipirolidin-3-ol (55.9 mg, 0.477 mmol) (opisan u dokumentu EP 1375465) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 200 min. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 19:1 – 9:1). Talog je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (13.8 mg, 77%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.32 (1H, dd, J = 10.1, 4.2 Hz), 2.61-2.68 (1H, m), 2.70-2.77 (1H, m), 3.03-3.16 (4H, m), 3.36 (3H, s), 3.62-3.76 (4H, m), 3.87 (3H, s), 4.12-4.19 (1H, m), 5.42-5.51 (1H, m), 6.56 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.59-6.62 (1H, m), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.32 (1H, s), 7.42 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.81 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.03 (1H, s), 8.11 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.48 (1H, brs).
[Primer 11]
5-((2-(4-(2-(4-etilpiperazin-1-il)etil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0259]
[0260] Tionil hlorid (0.116 mL, 1.60 mmol) je dodan u smešu komercijalno dostupne 4-(2-hloroetil)benzojeve kiseline (88 mg, 0.479 mmol) i 1,2-dihloroetana (1.0 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana pod refluksom na 90° C tokom 1.5 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, rastvarač je isparen, a produkt je rastvoren u tetrahidrofuranu (1.0 mL) čime je pripremljen rastvor kiselog hlorida. Trietilamin (0.443 mL, 3.20 mmol) je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (49.9 mg, 0.160 mmol), i N,N-dimetilformamida (0.5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je ohlađena do 0° C. Prethodno pripremljeni rastvor tetrahidrofurana u kiselom hloridu je dodan na istoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 0:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuum koje daje sirovi produkt (48.9 mg).
[0261] Sirovi produkt (48.9 mg) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (0.25 mL), tada su dodani komercijalno dostupan N-etilpiperazin (129 µL, 1.02 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (26.6 µL, 0.153 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 60° C tokom 16 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, u reakcionu smešu su tada dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 -19:1). Frakcija sa smešom je koncentrovana u vakuumu, a talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (7.03 mg, 16%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.10 (3H, t, J = 7.3 Hz), 2.44 (2H, q, J = 7.0 Hz), 2.35-2.70 (10H, m), 2.81-2.90 (2H, m), 3.07 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.86 (3H, s), 5.43-5.51 (1H, m), 6.56 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9, 2.6 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.28-7.33 (3H, m), 7.78 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.46 (1 H, brs).
[Primer 12]
5-((2-(4-(2-(4-hidroksipiperidin-1-il)etoksi)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0262]
[0263] Oksalil hlorid (44 µL, 0.513 mmol) i katalitička količina N,N-dimetilformamida su dodani u smešu 4-(2-hloroetoksi)benzojeve kiseline, opisanu u Proizvodnom Primeru 12-1 (51.2 mg, 0.255 mmol), i dihlorometana (2.0 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 45 min. Oksalil hlorid (44 µL, 0.513 mmol) je dodan u reakcionu smešu na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 30 min. Rastvarač je isparen, produkt je rastvoren u tetrahidrofuranu (0.5 mL), čime je pripremljen rastvor kiselog hlorida. Trietilamin (89 µL, 0.64 mmol) je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (40 mg, 0.128 mmol), i N,N-dimetilformamida (0.5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Prethodno pripremljeni tetrahidrofuran u rastvoru kiselog hlorida je dodan na istoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 80 min. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Produkt je odstranjen filtriranjem na NH silika-gelu (etil acetat), a tada je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt (80.6 mg).
[0264] Sirovi produkt (80.6 mg) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (0.7 mL), pa je dodan komercijalno dostupan 4-hidroksipiperidin (93 mg, 0.919 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 80° C tokom 12 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, pa su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a vodeni sloj je jednom ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat:metanol = 9:1). Nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (10.8 mg, 30%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.55-1.67 (2H, m), 1.86-1.97 (2H, m), 2.31 (2H, t, J = 9.5 Hz), 2.78-2.92 (4H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.67-3.77 (1H, m), 3.86 (3H, s), 4.14 (2H, t, J = 5.7 Hz), 5.50-5.59 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 6.95 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.32 (1H, s), 7.81 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.88 (1H, d, J = 1.8 Hz), 8.03 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.47 (1H, brs).
[0265] Reagens, 4-(2-hloroetoksi)benzojeva kiselina, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 12-1]
4-(2-hloroetoksi)benzojeva kiselina
[0266]
[0267] Kalijum karbonat (7.27 g, 52.6 mmol) i komercijalno dostupan 1-hloro-2-jodoetan (3.6 mL, 39.5 mmol) su dodani u tečnu smešu komercijalno dostupnog metil p-hidroksibenzoata (2.0 g, 13.1 mmol) i N,N-dimetilformamida (50 mL) u atmosferi azot na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 60° C tokom 12 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, voda, i dietil etar sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran i koncentrovan u vakuumu. Tetrahidrofuran (25 mL), metanol (10 mL), i 2 M rastvor natrijum hidroksida (10 mL) su dodani u talog na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 80° C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do 0° C, zakiseljena sa 5 M hlorovodoničnom kiselinom, a tada je razređena sa etil acetatom sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, precipitat je odvojen filtracijom sa tečnom smešom etil acetata i tetrahidrofurana, produkt je ispran, a filtrat je koncentrovana u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 2:1 – 1:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (278 mg, 11%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 3.92-3.98 (2H, m), 4.26-4.35 (2H, m), 6.96-7.06 (2H, m), 7.82-7.91 (2H, m), 12.68 (1H, brs).
[Primer 13]
5-((2-(1-(1-etilpiperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0268]
[0269] Acetaldehid (8.9 mg, 0.202 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (43.9 mg, 0.207 mmol) su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(1-(piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 13-4 (20.3 mg, 0.041 mmol), i tetrahidrofurana (1.0 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 2.5 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, i filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat). Produkt je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (9.3 mg, 43%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.11 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.94-2.24 (6H, m), 2.46 (2H, q, J = 7.4 Hz), 3.03-3.11 (5H, m), 3.86 (3H, s), 4.09-4.19 (1H, m), 5.49-5.56 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 2.9 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9,2.4 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.31 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.85 (1H, d, J = 0.7 Hz), 7.96 (1H, s), 8.02 (1H, s), 8.08 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.17 (1H, brs).
[0270] Početni materijal, 6-metoksi-N-metil-5-((2-(1-(piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 13-1]
tert-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilat
[0271]
[0272] Komercijalno dostupan metansulfonil hlorid (6.35 mL, 82.0 mmol) i trietilamin (26.0 mL, 186 mmol) su dodani u smešu komercijalno dostupanog tert-butil 4-hidroksi-1-piperidin karboksilata (15 g, 74.5 mmol) i tetrahidrofurana (200 mL) na 0° C, a smeša je mešana tokom 30 min. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je osušen i filtriran primenom konvencionalnih postupaka. Rastvarač je isparen, a talog je sakupljen filtracijom pa je ispran sa n-heptanom koje daje jedinjenje iz naslova (19.8 g, 95%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.46 (9H, s), 1.72-1.88 (2H, m), 1.90-2.04 (2H, m), 3.03 (3H, s), 3.24-3.36 (2H, m), 3.64-3.77 (2H, m), 4.80-4.94 (1H, m).
[Proizvodni Primer 13-2]
tert-butil 4-(4-(etoksikarbonil)-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-karboksilat
[0273]
[0274] tert-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 13-1 (2.7 g, 9.67 mmol), i komercijalno dostupan etil 4-pirazol karboksilat (1.49 g, 10.6 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (30 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (570 mg) na 0° C, a smeša je grejana i mešana na 60° C tokom 11 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pa su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je dva puta ispran sa vodom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:1 – 1:3 – 0:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.11 g, 68%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.34 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.47 (9H, s), 1.82-1.96 (2H, m), 2.10-2.18 (2H, m), 2.82-2.96 (2H, m), 4.19-4.34 (3H, m), 4.29 (2H, q, J = 7.1 Hz), 7.91 (1H, s), 7.92 (1H, s).
[Proizvodni Primer 13-3]
1-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina
[0275]
[0276] tert-butil 4-(4-(etoksikarbonil)-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 13-2 (2.11 g, 6.53 mmol), je rastvoren u metanolu (60 mL), dodan je kalijum hidroksid (1.46 g, 26.1 mmol) rastvoren u vodi (16 mL), a smeša je mešana tokom 27 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu pa je dodan dietil etar sa ciljem razdvajanja slojeva. Etil acetat je dodan u vodeni sloj radi razređenja, tada je dodan 5% vodeni rastvor kalijum hidrogensulfata zbog zakiseljavanja, a smeša je ekstrahovana dva puta sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen koje daje jedinjenje iz naslova (1.58 g, 82%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (9H, s), 1.84-1.98 (2H, m), 2.11-2.20 (2H, m), 2.81-2.97 (2H, m), 4.18-4.36 (3H, m), 7.97 (1H, s), 7.98 (1H, s).
[Proizvodni Primer 13-4]
6-metoksi-N-metil-5-((2-(1-(piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0277]
[0278] Benzotriazol (97 mg, 0.813 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (4.0 mL), dodan je tionil hlorid (59 µL, 0.813 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min u atmosferi azota. U reakcionu smešu je dodana 1-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina, opisan u Proizvodnom Primeru 13-3 (200 mg, 0.677 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 25 min. Reakciona smeša je odstranjena filtriranjem kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom nakon čega je pomenuti bezvodni natrijum sulfat ispran uz pomoć dihlorometana, filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (102 mg, 0.327 mmol), trietilamina (0.453 mL, 3.27 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (3.99 mg, 0.033 mmol) u tetrahidrofuranu (5.0 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, dodani su voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u tetrahidrofuranu pa je dodana prekomerna količina 9.8 M rastvora metilamin metanola na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:9 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (170 mg).
[0279] Pomenuti sirovi produkt (170 mg) je rastvoren u dihlorometanu (1.8 mL) pa je dodana trifluorosirćetna kiselina (0.5 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 80 min pa je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 49:1 – 4:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (81.2 mg, 51 %).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.78-1.91 (2H, m), 2.11-2.19 (2H, m), 2.75 (2H, td, J =12.3, 2.3 Hz), 3.05 (3H, d, J = 4.6 Hz), 3.19-3.27 (2H, m), 3.85 (3H, s), 4.16-4.26 (1H, m), 5.53-5.63 (1H, m), 6.53 (1H, d, J = 3.5 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.8, 2.5 Hz), 7.22 (1H, d, J = 3.8 Hz), 7.30 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.86 (1H, s), 7.96 (1H, s), 8.03 (1H, s), 8.08 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.22 (1H, brs).
[Primer 14]
5-((2-(4-((1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)oksi)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0280]
[0281] Benzotriazol (34.1 mg, 0.286 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1.5 mL), pa je dodan tionil hlorid (20 µL, 0.274 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-((1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)oksi)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 14-1 (79.3 mg, 0.247 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 25 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom nakon čega je pomenuti bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom, a filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6 (35.6 mg, 0.114 mmol), trietilamina (0.158 mL, 1.14 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (1.39 mg, 0.011 mmol) u tetrahidrofuranu (1.1 mL) na 0° C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h, dodani su voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u tetrahidrofuranu pa je dodana prekomerna količina 9.8 M rastvora metilamin metanola na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:3 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt A (41.1 mg).
[0282] Pomenuti sirovi produkt A (41.1 mg) je rastvoren u dihlorometanu (0.6 mL) pa je dodana trifluorosirćetna kiselina (0.2 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 75 min, produkt je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 49:1 – 4:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt B (34 mg).
[0283] Natrijum triacetoksiborohidrid (17.5 mg, 0.082 mmol) i komercijalno dostupan 2-hidroksiacetaldehid (4.95 mg, 0.082 mmol) su dodani u smešu sirovog produkta B (8.5 mg, 0.016 mmol) i tetrahidrofurana (0.5 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 2 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slani rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat). Talog je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (6.4 mg, 40%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.78-1.90 (2H, m), 1.95-2.06 (2H, m), 2.35-2.47 (2H, m), 2.57 (2H, t, J = 5.6 Hz), 2.72-2.83 (2H, m), 3.07 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.62 (2H, t, J = 5.3 Hz), 3.86 (3H, s), 4.38-4.48 (1H, m), 5.45-5.54 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.59 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 6.94 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.32 (1H, s), 7.81 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.89 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.03 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.5 Hz), 8.45 (1H, brs).
[0284] Početni materijal, 4-((1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)oksi)benzojeva kiselina, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 14-1]
4-((1-(tert-butoksikarbonil)piperidin4-il)oksi)benzojeva kiselina
[0285]
[0286] Diizopropil azodikarboksilat (9.65 mL, 1.9 M, 18.3 mmol) je dodan u smešu komercijalno dostupnog benzil 4-hidroksi benzoata (3 g, 13.1 mmol), komercijalno dostupnog tert-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (2.77 g, 13.8 mmol), trifenilfosfina (4.81 g, 18.3 mmol), i tetrahidrofurana (150 mL) na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim vodeni rastvorom natrijum bikarbonata pa sa zasićenim slanim rastvorom nakon čega je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (3.8 g).
[0287] Jedan deo pomenutog sirovog produkta (500 mg, 1.22 mmol) je rastvoren u etanolu (5 mL), pa je dodan 5 M rastvor natrijum hidroksida (0.729 mL, 3.65 mmol), a smeša je grejana i mešana na 50° C tokom 7 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pa su dodani 5 M hlorovodonična kiselina i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je osušen i filtriran primenom konvencionalnih postupaka. Rastvarač je isparen, a produkt je sakupljen filtracijom i ispran sa n-heptanom koje daje jedinjenje iz naslova (343 mg, 62%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.47 (9H, s), 1.65-1.84 (2H, m), 1.87-2.07 (2H, m), 3.30-3.51 (2H, m), 3.60-3.80 (2H, m), 4.50-4.66 (1H, m), 6.87-7.03 (2H, m), 7.98-8.14 (2H, m).
[Primer 15]
6-etoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0288]
[0289] tert-butil 4-(4-((4-((6-etoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil )piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 15-8 (3.35 g, 5.46 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (45 mL) pa je dodana trifluorosirćetna kiselina (15 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 110 min pa je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 97:3 – 4:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.41 g, 86%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.25 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.50-1.70 (2H, m), 1.79-1.88 (2H, m), 2.63-2.80 (3H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.16-3.24 (2H, m), 4.11 (2H, q, J = 7.0 Hz), 5.46-5.54 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9,2.6 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.29-7.34 (3H, m), 7.78-7.83 (2H, m), 7.92 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.00 (1H, s), 8.08-8.11 (1H, m), 8.50 (1H, brs).
[0290] Početni materijal, tert-butil 4-(4-((4-((6-etoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 15-1]
4-etoksi-3-hidroksibenzaldehid
[0291]
[0292] Komercijalno dostupan 3,4-dihidroksi benzaldehid (35.8 g, 259 mmol) i kalijum karbonat (37.6 g, 272 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (150 mL), dodan je komercijalno dostupan jodoetan (22 mL, 275 mmol) u atmosferi azota na 0° C, a tada je smeša mešana tokom 2 dana. Rastvarač je isparen u vakuumu, produkt je ohlađen do 0° C, a tada su dodani 5 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je dva puta ispran sa vodom pa sa zasićenim slanim rastvorom, a smeša je osušena preko bezvodnog magnezijum sulfat pa je filtrirana. Rastvarač je isparen, dodan je dihlorometan, a precipitat je sakupljen filtracijom koje daje jedinjenje iz naslova (25.8 g, 60%). Filtrat je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 4:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, u talog su dodani dietil etar i dihlorometan, a precipitat je sakupljen filtracijom koje daje jedinjenje iz naslova (3.45 g, 8.0%).
1H-NMR Spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.50 (3H, t, J = 7.1 Hz), 4.22 (2H, q, J = 7.0 Hz), 5.75 (1H, s), 6.95 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.39-7.45 (2H, m), 9.84 (1H, s).
[Proizvodni Primer 15-2]
3-(benziloksi)-4-etoksibenzaldehid
[0293]
[0294] Kalijum karbonat (19.8 g, 143 mmol) i benzil hlorid (16.5 mL, 143 mmol) su dodani u suspenziju 4-etoksi-3-hidroksibenzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 15-1 (20 g, 120 mmol), u etanolu (200 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 90° C tokom 2.5 h. Smeša je ohlađena do 0° C, pa su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 4:1 – 3:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (28.5 g, 92%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.51 (3H, t, J = 7.0 Hz), 4.20 (2H, q, J = 7.0 Hz), 5.19 (2H, s), 6.98 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.29-7.34 (1H, m), 7.35-7.41 (2H, m), 7.43-7.49 (4H, m), 9.81 (1H,s).
[Proizvodni Primer 15-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-etoksi-4-(2-nitrovinil)benzen
[0295]
[0296] 3-(benziloksi)-4-etoksi benzaldehid, opisan u Proizvodnom Primeru 15-2 (14.5 g, 56.4 mmol), je rastvoren u sirćetnoj kiselini (45 mL), dodani su amonijum acetat (5.22 g, 67.7 mmol) i nitrometan (7.5 mL, 138 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2.5 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etanolom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.50 (3H, t, J = 7.0 Hz), 4.17 (2H, q, J = 7.2 Hz), 5.17 (2H, s), 6.92 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.04 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 8.6, 2.0 Hz), 7.29-7.51 (6H, m), 7.90 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 15-4]
6-etoksi-1H-indol-5-ol
[0297]
[0298] Dimeća azotna kiselina (13 mL, 289 mmol) je polako dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-etoksi-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 15-3 (16.9 g, 56.6 mmol), i sirćetne kiseline (160 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 6 h. Reakciona smeša je izlivena u led, precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa tečnom smešom sirćetne kiseline i etanola koje daje sirovi produkt (19.5 g).
[0299] Pomenuti sirovi produkt (19.5 g) je suspendovan u metanolu (500 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (vodeni sadržaj: 50%) (6.85 g), a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 17 h. Katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit, a produkt je ispran sa metanolom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je rastvoren u tetrahidrofuranu i apsorbovan silika-gelom. Apsorbovani silika-gel je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 13:7). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a talog je sakupljen filtracijom i ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (3.78 g, 38%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (3H, t, J = 6.9 Hz), 4.13 (2H, q, J = 6.8Hz), 5.50 (1H, s), 6.39-6.43 (1H, m), 6.87 (1H, s), 7.05-7.09 (1H, m), 7.13 (1H, s), 7.91 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 15-5]
N-(4-((6-etoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid
[0300]
[0301] 6-etoksi-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 15-4 (7.0 g, 39.5 mmol), je rastvoren u dimetilsulfoksidu (40 mL) u atmosferi azota, dodani su N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (8.09 g, 47.4 mmol), i kalijum tert-butoksid (4.88 g, 43.5 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 160° C tokom 4 h. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je dva puta ispran sa vodom pa sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 2:1 – 3:2 – 1:3 – 1:4 – 0:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (7.16 g, 58%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.23 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.14 (3H, s), 4.02 (2H, q, J = 7.0 Hz), 6.46-6.49 (1H, m), 6.54 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 7.01 (1H, s), 7.13-7.16 (1H, m), 7.35 (1H, s), 7.74 (1H, brs), 7.87 (1H, brs), 8.02 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.10 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 15-6]
4-((6-etoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0302]
[0303] N-(4-((6-etoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 15-5 (7.16 g, 23.0 mmol), je rastvoren u metanolu (50 mL), dodan je 2 M rastvor natrijum hidroksida (50 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 75° C tokom 2.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, produkt je odstranjen filtriranjem pa je koncentrovan u vakuumu. Tečna smeša dietil etra i etil acetata je dodana u talog, a smeša je sakupljena filtracijom i isprana koje daje jedinjenje iz naslova (5.35 g, 86%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.28 (3H, t, J = 7.0 Hz), 4.02 (2H, q, J = 7.0 Hz), 4.28 (2H, brs), 5.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.29 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.46-6.50 (1H, m), 7.00 (1H, s), 7.15-7.18 (1H, m), 7.33 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.13 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 15-7]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-etoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0304]
[0305] 4-((6-etoksi-1H-indol-5-il)-oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 15-6 (6.44 g, 23.9 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (80 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (1.41 g) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 min. Smeša je ponovo ohlađena do 0° C, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (5.78 g, 38.3 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, voda, i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je dva puta ispran sa vodom pa sa zasićenim slani rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Tečna smeša dietil etra i etil acetata je dodana u talog, precipitat je sakupljen filtracijom, a produkt je ponovo ispran sa etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (4.24 g, 54%). Filtrat je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol =1:0-9:1), ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a talog je sakupljen filtracijom i ispran sa tečnom smešom dietil etra i etil acetata koje daje jedinjenje iz naslova (1.58 g, 20%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.29 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.07 (3H, d, J = 4.8 Hz), 4.09 (2H, q, J = 7.0 Hz), 4.29 (2H, brs), 5.42-5.51 (1H, m), 5.90 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.27 (1H, dd, J = 6.2, 2.2 Hz), 6.55 (1H, dd, J = 3.7, 0.7 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.27 (1H, s), 7.89 (1H, d, J = 5.9 Hz), 7.98 (1H, s).
[Proizvodni Primer 15-8]
tert-butil 4-(4-((4-((6-etoksi-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0306]
[0307] Benzotriazol (1.92 g, 16.1 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (80 mL), dodan je tionil hlorid (1.15 mL, 15.8 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (4.1 g, 13.4 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 25 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom koji je nakon toga ispran sa dihlorometanom, a filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-etoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 15-7 (2 g, 6.13 mmol), trietilamina (8.5 mL, 61.3 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (75 mg, 0.613 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 h, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a produkt je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u tetrahidrofuranu, dodana je prekomerna količina 9.8 M rastvora metilamin metanola na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, dihlorometan je dodan u talog, nakon čega su dodani i dietil etar i etil acetat, a tada je produkt sakupljen filtracijom i ispran koje jedinjenje iz naslova (3.08 g, 82%). Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:9). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (273 mg, 7.3%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.25 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.48 (9H, s), 1.50-1.70 (2H, m), 1.78-1.87 (2H, m), 2.64-2.87 (3H, m), 3.07 (3H, d, J = 4.8 Hz), 4.11 (2H, q, J = 7.0 Hz), 4.16-4.33 (2H, m), 5.45-5.52 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.6 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9,2.3 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.28-7.33 (3H, m), 7.79-7.83 (2H, m), 7.92 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.00 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.51 (1H, brs).
[Primer 16]
6-etoksi-5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0308]
[0309] Natrijum triacetoksiborohidrid (1.36 g, 6.43 mmol) je dodan u smešu 6-etoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 15 (2.2 g, 4.28 mmol), i tetrahidrofurana (33 mL) na sobnoj temperaturi, dodan je tetrahidrofuranski rastvor (11 mL) komercijalno dostupnog acetaldehida (283 mg, 6.43 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfat pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a tako dobiveni talog je spojen sa talogom koji je dobiven iz sličnog početnog materijala, 6-etoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid (200 mg, 0.389 mmol), primenom sličnog postupka. Etil acetat je dodan u spojeni talog, a produkt je sakupljen filtracijom koje daje jedinjenje iz naslova (2.20 g, 87%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.15 (3H, t, J = 7.2 Hz), 1.25 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.82-1.92 (4H, m), 2.01-2.13 (2H, m), 2.43-2.62 (3H, m), 3.04 (3H, d, J = 4.6 Hz), 3.08-3.17 (2H, m), 4.10 (2H, q, J = 6.8 Hz), 5.55-5.62 (1H, m), 6.53 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.7,2.2 Hz), 7.23 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.30-7.35 (3H, m), 7.79 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.00 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.7 Hz), 8.53 (1H, brs).
[Primer 17]
6-izopropoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0310]
[0311] Benzotriazol (88.7 mg, 0.745 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (4.0 mL), dodan je tionil hlorid (52 µL, 0.707 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (180 mg, 0.589 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 55 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom koji je nakon toga ispran sa dihlorometanom, a filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-izopropoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 17-7 (77 mg, 0.226 mmol), trietilamina (0.314 mL, 2.26 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (2.76 mg, 0.023 mmol) u tetrahidrofuranu (2.0 mL), dihlorometana (5.0 mL), i N,N-dimetilformamida (0.2 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 140 min, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u tetrahidrofuranu, dodana je prekomerna količina rastvora metilamin tetrahidrofurana na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat =1:1 – 1:3 – 0:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (111 mg).
[0312] Pomenuti sirovi produkt (111 mg) je rastvoren u dihlorometanu (1.8 mL), dodana je trifluorosirćetna kiselina (0.65 mL) na 0° C. Smeša je mešana tokom 90 min na sobnoj temperaturi nakon čega je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 17:3 – 4:1) koje daje jedinjenje iz naslova (85.4 mg, 92%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.22 (6H, d, J = 6.0 Hz), 1.55-1.71 (2H, m), 1.79-1.88 (2H, m), 2.62-2.80 (3H, m), 3.05 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.15-3.25(2H, m), 4.52-4.64 (1H, m), 5.49-5.57 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.58 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.24 (1H, d, J = 3.8 Hz), 7.29-7.35 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.93 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.01 (1H, s), 8.08 NH, d, J = 5.9 Hz), 8.51 (1H, brs).
[0313] Početni materijal, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-izopropoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 17-1]
3-hidroksi-4-izopropoksi benzaldehid
[0314]
[0315] Komercijalno dostupan 3,4-dihidroksibenzaldehid (5 g, 36.2 mmol) i kalijum karbonat (5.15 g, 37.3 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (20 mL), dodan je 2-bromopropan (3.5 mL, 37.3 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 40° C tokom 2.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organske sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, a produkt je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, dihlorometan je dodan u talog, precipitat je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 13:7), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.84 g, 28%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.42 (6H, d, J = 5.9 Hz), 4.73 (1H, spt, J = 6.1 Hz), 5.78 (1H, s), 6.95 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.41 (1H, dd, J = 8.2,2.0 Hz), 7.44 (1H, d, J = 1.8 Hz), 9.83 (1H, s).
[Proizvodni Primer 17-2]
3-(benziloksi)-4-izopropoksibenzaldehid
[0316]
[0317] Kalijum karbonat (1.83 g, 13.2 mmol) i benzil hlorid (1.55 mL, 13.5 mmol) su dodani u suspenziju 3-hidroksi-4-izopropoksibenzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 17-1 (1.84 g, 10.2 mmol), u etanolu (20 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 90° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, produkt je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a tada je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 3:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.59 g, 94%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.42 (6H, d, J = 6.0 Hz), 4.69 (1H, spt, J = 6.1 Hz), 5.18 (2H, s), 7.00 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.29-7.41 (3H, m), 7.43-7.48 (4H, m), 9.81 (1H, s).
[Proizvodni Primer 17-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-izopropoksi-4-(2-nitrovinil)benzen
[0318]
[0319] 3-(benziloksi)4-izopropoksibenzaldehid, opisan u Proizvodnom Primeru 17-2 (2.59 g, 9.59 mmol), je rastvoren u sirćetnoj kiselini (7.5 mL), dodani su amonijum acetat (887 mg, 11.5 mmol) i nitrometan (1.25 mL, 23.1 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etanolom koje daje jedinjenje iz naslova (2.20 g, 73%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.41 (6H, d, J = 6.2 Hz), 4.55-4.71 (1H, m), 5.15 (2H, s), 6.94 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.05 (1H, d, J=1.8 Hz), 7.15 (1H, dd, J = 8.4,1.8 Hz), 7.29-7.48 (6H, m), 7.90 (1H, d, J=13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 17-4]
6-izopropoksi-1H-indol-5-ol
[0320]
[0321] Dimeća azotna kiselina (1.5 mL, 33.3 mmol) je polako dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-izopropoksi-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 17-3 (2.20 g, 7.02 mmol), i sirćetne kiseline (20 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 7.5 h. Reakciona smeša je izlivena u led, precipitat je sakupljen filtracijom, a produkt je ispran sa tečnom smešom sirćetne kiseline i etanolom koje daje sirovi produkt (2.28 g).
[0322] Pomenuti sirovi produkt (2.28 g) je suspendovan u metanolu (60 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (677 mg), a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 14.5 h. Katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit, a produkt je ispran sa metanolom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu pa je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (475 mg, 35%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.40 (6H, d, J = 6.2 Hz), 4.57 (1H, spt, J = 6.1 Hz), 5.55 (1H, s), 6.38-6.44 (1H, m), 6.90 (1H, s), 7.08 (1H, t, J = 2.7 Hz), 7.13 (1H, s), 7.90 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 17-5]
N-(4-((6-izopropoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid
[0323]
[0324] 6-izopropoksi-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 17-4 (165 mg, 0.863 mmol), i N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (442 mg, 2.59 mmol), su rastvoreni u dimetilsulfoksidu (2.0 mL) u atmosferi azota, dodan je kalijum tert-butoksid (194 mg, 1.73 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 160° C tokom 3 h. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature pa su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:2 – 1:3), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (116 mg, 41%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.21 (6H, d, J = 6.2 Hz), 2.14 (3H, s), 4.34-4.48 (1H, m), 6.45-6.53 (2H, m), 7.03 (1H, s), 7.16 (1H, t, J = 2.7 Hz), 7.35 (1H, s), 7.77 (1H, brs), 7.85-8.05 (2H, m), 8.10 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 17-6]
4-((6-izopropoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0325]
[0326] N-(4-((6-izopropoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 17-5 (116 mg, 0.357 mmol), je rastvoren u metanolu (2.5 mL), dodan je 28% natrijum metoksid (0.728 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:7 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1), ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (66.3 mg, 66%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.22 (6H, d, J = 5.9 Hz), 4.28 (2H, brs), 4.36-4.47 (1H, m), 5.89 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.29 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.46-6.51 (1H, m), 7.04 (1H, s), 7.18 (1H, t, J = 2.9 Hz), 7.34 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.12 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 17-7]
5-((2-aminopiridin4-il)oksi)-6-izopropoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0327]
[0328] 4-((6-izopropoksi-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 17-6 (65.6 mg, 0.232 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (1.5 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (16.7 mg) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 50 min. Smeša je ponovo ohlađena do 0° C, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (69.2 mg, 0.458 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, voda, i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa vodom pa sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:7 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (77.0 mg, 98%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.24 (6H, d, J = 6.0 Hz), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 4.32 (2H, brs), 4.56 (1H, spt, J = 6.1 Hz), 5.50-5.61 (1H, m), 5.89 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.27 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.55 (1H, dd, J = 3.6, 0.6 Hz), 7.24-7.28 (2H, m), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.00 (1H, s).
[Primer 18]
(R)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksipropil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-izopropoksi -N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0329]
[0330] Komercijalno dostupan (R)-(+)-propilen oksid (20.5 mg, 0.353 mmol) je dodan u smešu 6-izopropoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4il)benzamid)piridin-4-il) oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 17 (12.7 mg, 0.024 mmol), i etanola (0.5 mL), a smeša je grejana i mešana u zatvorenoj tubi na 80° C tokom 3 h i 40 min. Smeša je ohlađena do sobne temperature pa je koncentrovana u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (8.28 mg, 59%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.15 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.22 (6H, d, J = 6.2 Hz), 1.70-1.90 (3H, m), 2.00-2.09 (1H, m), 2.21-2.46 (3H, m), 2.53-2.64 (1H, m), 2.92 (1H, d, J = 11.0 Hz), 3.07 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.14 (1H, d, J = 11.3 Hz), 3.80-3.91 (1H, m), 4.53-4.64 (1H, m), 5.44-5.52 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.58 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 7.25 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.30-7.36 (3H, m), 7.81 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.93 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.49 (1H, s).
[Primer 19]
6-(difluorometoksi)-5-((2-(4-((4-hidroksipiperidin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0331]
[0332] Trietilamin (17 µL, 0.123 mmol) i komercijalno dostupan 4-(hlorometil)benzoil hlorid (11.5 mg, 0.061 mmol) su dodani u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(difluorometoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 19-7 (4.3 mg, 0.012 mmol), i tetrahidrofurana (0.5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 h, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a produkt je odstranjen filtriranjem kroz NH silika-gel (etil acetat) pa je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt (6.18 mg).
[0333] Pomenuti sirovi produkt (6.18 mg) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (0.5 mL), dodan je komercijalno dostupan 4-hidroksipiperidin (17.7 mg, 0.175 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 14 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen primenom NH silika-gela (TLC; etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (6.0 mg, 86%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.50-1.66 (2H, m), 1.83-1.94 (2H, m), 2.16 (2H, t, J = 9.7 Hz), 2.67-2.78 (2H, m), 3.08 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.54 (2H, s), 3.62-3.77 (2H, m), 5.46-5.57 (1H, m), 6.53 (1H, t, J = 73.9 Hz), 6.61 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.64 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.38-7.46 (4H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.15 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.24 (1H, s), 8.53 (1H, brs).
[0334] Početni materijal, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(difluorometoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 19-1]
4-(difluorometoksi)-3-hidroksibenzaldehid
[0335]
[0336] Komercijalno dostupan 3,4-dihidroksibenzaldehid (5 g, 36.2 mmol) i komercijalno dostupan natrijum hlorodifluoroacetat (5.57 g, 36.5 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (45 mL) i vodi (905 µL), dodan je natrijum hidroksid (1.48 g, 37.0 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 120° C tokom 2 h. Rastvarač je isparen u vakuumu, talog je ohlađena do 0° C, pa su dodani 5 M hlorovodonična kiselina i dietil etar sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, a rastvarač je isparen. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 7:3), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.66 g, 39%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.69-5.74 (1H, m), 6.65 (1H, t, J = 72.5 Hz), 7.23-7.31 (1H, m), 7.46 (1H, dd, J = 8.4,1.8 Hz), 7.54 (1H, d, J = 1.8 Hz), 9.92 (1H, s).
[Proizvodni Primer 19-2]
3-(benziloksi)-4-(difluorometoksi)benzaldehid
[0337]
[0338] Kalijum karbonat (3.91 g, 28.3 mmol) i benzil bromid (2.5 mL, 21.1 mmol) su dodani u rastvor 4-(difluorometoksi)-3-hidroksibenzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 19-1 (2.66 g, 14.2 mmol), u acetonitrilu (50 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je filtrirana, a rastvarač je isparen. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu čime je dobivena kvantitativna količina jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.21 (2H, s), 6.68 (1H, t, J = 74.3 Hz), 7.31-7.51 (7H, m), 7.57 (1H, d, J=1.8 Hz), 9.92 (1H, s).
[Proizvodni Primer 19-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-(difluorometoksi)-4-(2-nitrovinil)benzen
[0339]
[0340] 3-(benziloksi)4-(difluorometoksi)benzaldehid, opisan u Proizvodnom Primeru 19-2 (3.94 g, 14.2 mmol), je rastvoren u sirćetnoj kiselini (11 mL), dodani su amonijum acetat (1.27 g, 16.4 mmol) i nitrometan (1.9 mL, 35.1 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature pa je ponovo grejana i mešana na 130° C tokom 1 h. Precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa tečnom smešom sirćetne kiseline i etanola koje daje jedinjenje iz naslova (2.36 g, 52%). Filtrat je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 4:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu. Precipitat je ispran sa etanolom koje daje jedinjenje iz naslova (406 mg, 8.9%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.18 (2H, s), 6.65 (1H, t, J = 74.3 Hz), 7.12-7.19 (2H, m), 7.21-7.29 (1H, m), 7.32-7.45 (5H, m), 7.48 (1H, d, J = 13.9 Hz), 7.92 (1H, d, J = 13.9 Hz).
[Proizvodni Primer 19-4]
5-(benziloksi)-6-(difluorometoksi)-1H-indol
[0341]
[0342] Dimeća azotna kiselina (6.0 mL, 133 mmol) je polako dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-(difluorometoksi)-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 19-3 (2.77 g, 8.61 mmol), i sirćetne kiseline (36 mL) u ledenoj banji, a smeša je mešana tokom 7.5 h. Deo reakcione smeše je grejan i mešan na 50° C tokom 30 min, a tada na 70° C tokom 40 min, pa na 75° C tokom 165 min. Deo reakcione smeše je izliven u led, a produkt je razređen sa etil acetatom sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a rastvarač je isparen. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 17:3 – 3:1), ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a tada je talog sakupljen filtracijom i ispran sa dietil etrom koje daje sirovi produkt A (23.6 mg). Preostala reakciona smeša je grejana i mešana na 65° C tokom 3 h, produkt je izliven u led, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa tečnom smešom sirćetne kiseline i etanola koje daje sirovi produkt B (603 mg). Etil acetat je dodan u filtrat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, odstranjen filtriranjem, a rastvarač je isparen. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:1), ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, dietil etar je dodan u talog, a precipitat je sakupljen filtracijom koje daje sirovi produkt C (73.3 mg).
[0343] Pomenuti sirovi produkti A, B, i C (550 mg) su suspendovani u etanolu (5.5 mL), sirćetnoj kiselini (5.5 mL), i vodi (676 µL), dodano je gvožđe u prahu (419 mg, 7.51 mmol) u atmosferi azota, a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani etil acetat i vodeni rastvor natrijum disulfita sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, filtriran, a rastvarač je isparen. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (245 mg, 13%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.15 (2H, s), 6.45-6.49 (1H, m), 6.58 (1H, t, J = 76.0 Hz), 7.19-7.22 (1H, m), 7.23 (1H, s), 7.24-7.27(1H, m), 7.29-7.43 (3H, m), 7.44-7.50 (2H, m), 8.12 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 19-5]
6-(difluorometoksi)-1H-indol-5-ol
[0344]
[0345] 5-(benziloksi)-6-(difluorometoksi)-1H-indol, opisan u Proizvodnom Primeru 19-4 (245 mg, 0.847 mmol), je rastvoren u etanolu (8.0 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (90 mg) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 75 min. Reakciona smeša je razređena sa etil acetatom, a katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a tada je filtriran kroz silika-gel (etil acetat). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.15 (1H, s), 6.41-6.49 (1H, m), 6.53 (1H, t, J = 74.1 Hz), 7.15-7.24 (3H, m), 8.06 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 19-6]
4-((6-(difluorometoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0346]
[0347] 6-(difluorometoksi)-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 19-5 (35.1 mg, 0.176 mmol), N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (89.0 mg, 0.522 mmol), i kalijum tert-butoksid (44.0 mg, 0.392 mmol) su rastvoreni u dimetilsulfoksidu (500 µL) u atmosferi azota, a smeša je grejana i mešana na 160° C tokom 80 min. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (12.5 mg).
[0348] Pomenuti sirovi produkt (12.5 mg) je rastvoren u metanolu (500 µL), dodan je 28% natrijum metoksid (39 µL, 0.382 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 65° C tokom 1 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, dodan je 28% natrijum metoksid (39 µL, 0.382 mmol), a smeša je grejana i mešana na 65° C tokom 2.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 97:3 – 9:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (4.4 mg, 8.6%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 4.48 (2H, brs), 5.91 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.28 (1H, dd, J = 5.9, 1.8 Hz), 6.45 (1H, t, J = 74.5 Hz), 6.52-6.58 (1H, m), 7.30 (1H, t, J = 2.9 Hz), 7.36 (1H, s), 7.41 (1H, s), 7.90 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.35 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 19-7]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(difluorometoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0349]
[0350] 4-((6-(difluorometoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 19-6 (4.4 mg, 0.015 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (500 µL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (4.1 mg) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Smeša je ponovo ohlađena do 0° C, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (16.4 mg, 0.108 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 50 min. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (4.3 mg, 82%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.08 (3H, d, J = 4.8 Hz), 4.44 (2H, brs), 5.49 (1H, brs), 5.91 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.26 (1H, dd, J = 6.2,2.2 Hz), 6.50 (1H, t, J = 74.0 Hz), 6.61 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.35 (1H, s), 7.41 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.92 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.23 (1H, s).
[Primer 20]
6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0351]
[0352] Benzotriazol (609 mg, 5.11 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (25 mL), dodan je tionil hlorid (373 µL, 5.11 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (1.3 g, 4.26 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 30 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom koji je nakon toga ispran sa dihlorometanom, filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 20-7 (0.95 g, 2.67 mmol), trietilamina (1.86 mL, 13.3 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (16 mg, 0.133 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 mL) i dihlorometanu (20 mL) na 0° C tokom 5 min, smeša je isprana sa dihlorometanom (10 mL), a tada je mešana na istoj temperaturi tokom 5 min. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, dodan je 40% vodeni rastvor metilamina (2.3 mL, 26.7 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. U reakcionu smešu je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata sa ciljem razdvajanja slojeva, a vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1 – 23:2) koje daje sirovi produkt (1.11 g).
[0353] Pomenuti sirovi produkt (1.11 g) je rastvoren u dihlorometanu (50 mL) pa je dodana trifluorosirćetna kiselina (5.0 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, produkt je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu i trietilaminu, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol =1:0 – 22:3) koje daje jedinjenje iz naslova (829 mg, 57%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.59-1.69 (2H, m), 1.83 (2H, d, J = 14.1 Hz), 2.68 (1H, tt, J = 12.0, 3.6 Hz), 2.75 (2H, td, J = 12.2, 2.4 Hz), 3.04 (3H, d, J = 4.9 Hz), 3.17-3.23 (2H, m), 3.26 (3H, s), 3.55-3.61 (2H, m), 4.15-4.21 (2H, m), 5.57-5.65 (1H, m), 6.53 (1H, d, J = 3.4 Hz), 6.62 (1H, dd, J = 5.8, 2.4 Hz), 7.25 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.30-7.34 (3H, m), 7.77-7.82 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.02 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.50 (1H, brs).
[0354] Početni materijal, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 20-1]
3-hidroksi-4-(2-metoksietoksi)benzaldehid
[0355]
[0356] Komercijalno dostupan 3,4-dihidroksibenzaldehid (39.3 g, 285 mmol) i natrijum karbonat (45.2 g, 427 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (400 mL), dodan je komercijalno dostupan 2-bromoetil metil etar (26.7 mL, 285 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 dana. Smeša je ohlađena do 0° C pa su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a tada je filtriran. Rastvarač je isparen, dodan je dihlorometan, precipitat je odvojen filtracijom, a nastao filtrat je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 17:3 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (12.9 g, 23%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.47 (3H, s), 3.76-3.80 (2H, m), 4.25-4.29 (2H, m), 6.40 (1H, brs), 7.01 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.41 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz), 7.45 (1H, d, J = 1.8 Hz), 9.85 (1H, s).
[Proizvodni Primer 20-2]
3-(benziloksi)-4-(2-metoksietoksi)benzaldehid
[0357]
[0358] Kalijum karbonat (11.8 g, 85.7 mmol) i benzil hlorid (10 mL, 86.9 mmol) su dodani u tečnu smešu 3-hidroksi-4-(2-metoksietoksi)benzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 20-1 (12.9 g, 65.9 mmol), u etanolu (130 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 90° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, a tada je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (17.6 g, 93%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.46 (3H, s), 3.79-3.85 (2H, m), 4.24-4.30 (2H, m), 5.18 (2H, s), 7.03 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.29-7.35 (1H, m), 7.35-7.41 (2H, m), 7.43-7.50 (4H, m), 9.82 (1H, s).
[Proizvodni Primer 20-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-(2-metoksietoksi)-4-(2-nitrovinil)benzen
[0359]
[0360] 3-(benziloksi)4-(2-metoksietoksi)benzaldehid, opisan u Proizvodnom Primeru 20-2 (17.6 g, 61.5 mmol), je rastvoren u sirćetnoj kiselini (49.3 mL), dodani su amonijum acetat (5.69 g, 73.8 mmol) i nitrometan (8.32 mL, 154 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etanolom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.46 (3H, s), 3.78-3.84 (2H, m), 4.21-4.27 (2H, m), 5.16 (2H, s), 6.97 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.06 (1H, d, J=1.8 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 8.4,2.2 Hz), 7.30-7.48 (6H, m), 7.91 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 20-4]
6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-ol
[0361]
[0362] 69% azotna kiselina (15 mL, 233 mmol) je dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-(2-metoksietoksi)-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 20-3 (20.2 g, 61.5 mmol), i sirćetne kiseline (120 mL) na 25° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Reakciona smeša je izlivena u led, precipitat je sakupljen filtracijom, a tada je ispran sa vodom koje daje sirovi produkt (23.0 g).
[0363] Pomenuti sirovi produkt (23.0 g) je suspendovan u metanolu (500 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (8 g) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 6 h. Katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (3.94 g, 31%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.48 (3H, s), 3.69-3.78 (2H, m), 4.16-4.23 (2H, m), 6.24 (1H, s), 6.41 (1H, ddd, J = 3.1, 2.1, 0.8 Hz), 6.97 (1H, s), 7.10 (1H, dd, J = 3.2, 2.5 Hz), 7.15 (1H, s), 7.94 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 20-5]
N-(4-((6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid
[0364]
[0365] 6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 20-4 (3.94 g, 19.0 mmol), i N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (3.25 g, 19.0 mmol), su rastvoreni u dimetilsulfoksidu (25 mL), dodan je 97% kalijum tert-butoksid (2.20 g, 19.0 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 150° C tokom 13 h. U reakcionu tečnost su dodani voda i etil acetat na sobnoj temperaturi sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa vodom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a tada je produkt prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (3.45 g, 53%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 2.13 (3H, s), 3.27 (3H, s), 3.54-3.58 (2H, m), 4.07-4.11 (2H, m), 6.46-6.50 (1H, m), 6.54 (1H, dd, J = 5.8,1.9 Hz), 7.05 (1H, s), 7.14-7.17 (1H, m), 7.36 (1H, s), 7.75 (1H, brs), 8.02 (1H, d, J = 5.8 Hz), 8.10 (1H, brs), 8.19 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 20-6]
4-((6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0366]
[0367] N-(4-((6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 20-5 (3.45 g, 10.1 mmol), je rastvoren u metanolu (50 mL), dodan je 2 M rastvor natrijum hidroksida (50 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:7 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1 – 24:1). Ciljna frakcija i frakcija smeše su odvojeno koncentrovani u vakuumu, frakcija sa smešom je ponovo prečišćena kolonskom hromatografijom na silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 9:1), a produkt je spojen sa gore-opisanom ciljnom frakcijom koje daje jedinjenje iz naslova (2.60 g, 86%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 3.31 (3H, s), 3.58-3.63 (2H, m), 4.08-4.11 (2H, m), 4.28 (2H, brs), 5.90 (1H, d, J = 2.4 Hz), 6.29 (1H, dd, J = 6.1, 2.2 Hz), 6.44-6.52 (1H, m), 7.06 (1H, s), 7.15-7.20 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.8 Hz), 8.22 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 20-7]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0368]
[0369] 4-((6-(2-metoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 20-6 (2.60 g, 8.67 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (50 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (499 mg) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (1.97 g, 13.0 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa etil acetatom, dodan je natrijum hlorid u vodeni sloj, a produkt je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1 – 24:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu, dodan je etil acetat, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran koje daje jedinjenje iz naslova (2.23 g, 72%).
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 3.06 (3H, d, J = 4.9 Hz), 3.29 (3H, s), 3.59-3.63 (2H, m), 4.14-4.17 (2H, m), 4.30 (2H, brs), 5.52-5.59 (1H, m), 5.89 (1H, d, J = 2.4 Hz), 6.27 (1H, dd, J = 5.8,1.9 Hz), 6.55 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.27-7.29 (2H, m), 7.89 (1H, d, J = 5.9 Hz), 7.99 (1H, s).
[Primer 21]
6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0370]
[0371] 35% vodeni rastvor formaldehida (186 µL, 2.36 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrida (200 mg, 0.946 mmol) su dodani u smešu 6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 20 (257 mg, 0.473 mmol), i tetrahidrofurana (30 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 min. U reakcionu smešu je dodana sirćetna kiselina (54 µL, 0.946 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 23:2). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (500MHz, CDCl3) δ (ppm): 1.75-1.88 (4H, m), 2.02-2.11 (2H, m), 2.33 (3H, s), 2.49-2.59 (1H, m), 2.99 (2H, d, J = 11.2 Hz), 3.05 (3H, d, J = 4.9 Hz), 3.26 (3H, s), 3.56-3.60 (2H, m), 4.15-4.21 (2H, m), 5.52-5.58 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.9 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.8,2.4 Hz), 7.25-7.27 (1H, m), 7.30-7.34 (3H, m), 7.79 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.8 Hz), 8.48 (1H, brs).
[Primer 22]
5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0372]
[0373] Natrijum triacetoksiborohidrid (286 mg, 1.35 mmol) i komercijalno dostupan 2-hidroksiacetaldehid (86.1 mg, 1.43 mmol) su dodani u smešu 6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 20 (250 mg, 0.46 mmol), i tetrahidrofurana (10 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i 45 min. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 97:3 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa tečnom smešom dietil etra i n-heksana koje daje jedinjenje iz naslova (236 mg, 87%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.70-1.92 (4H, m), 2.14-2.25 (2H, m), 2.53-2.64 (3H, m), 3.01-3.08 (5H, m), 3.26 (3H, s), 3.56-3.60 (2H, m), 3.63 (2H, t, J = 5.4 Hz), 4.15-4.20 (2H, m), 5.50-5.59 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 7.24-7.28 (1H, m), 7.30-7.35 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.50 (1H, brs).
[Primer 23]
5-((2-(4-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0374]
[0375] Aceton (54 µL, 0.736 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (62.4 mg, 0.294 mmol), i sirćetna kiselina (17 µL, 0.294 mmol) su dodani u rastvor 6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 20 (20 mg, 0.037 mmol), u tetrahidrofuranu (3 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na istoj temperaturi preko noći. U reakcionu tečnost su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat na sobnoj temperaturi sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (6.6 mg, 31%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 0.99 (6H, d, J = 6.6 Hz), 1.54-1.68 (2H, m), 1.70-1.81 (2H, m), 2.16-2.26 (2H, m), 2.44-2.57 (1H, m), 2.66-2.76 (1H, m), 2.82-2.91 (5H, m), 3.12 (3H, s), 3.45-3.52 (2H, m), 4.05-4.13 (2H, m), 6.63 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.67 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 7.33 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.45 (1H, s), 7.69 (1H, d, J = 2.6 Hz), 7.78 (1H, d, J = 4.0 Hz), 7.89 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.08 (1H, s), 8.14-8.21 (2H, m), 10.64 (1H, s).
[Primer 24]
6-(2-etoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0376]
[0377] Trifluorosirćetna kiselina (1.79 mL, 23.2 mmol) je dodana u rastvor tert-butil 4-(4-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-9 (382 mg, 0.581 mmol), u dihlorometanu (10 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na istoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona tečnost je koncentrovana u vakuumu, a trifluorosirćetna kiselina je odstranjena. Talog je razređen sa dihlorometanom, a tada je dodan trietilamin sa ciljem neutralizovanja pomenute trifluorosirćetne kiseline. Rastvor je koncentrovan u vakuum, a talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 49:1 – 17:3) koje daje jedinjenje iz naslova (276 mg, 85%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 0.94 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.44-1.57 (2H, m), 1.63-1.72 (2H, m), 2.47-2.69 (3H, m), 2.85 (3H, d, J = 4.4 Hz), 2.97-3.05 (2H, m), 3.29 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.47-3.58 (2H, m), 4.04-4.13 (2H, m), 6.57-6.73 (2H, m), 7.31 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.45 (1H, s), 7.70 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.78 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.90 (2H, d, J = 8.8 Hz), 8.08 (1H, s), 8.13-8.24 (2H, m), 10.64(1H, s).
[0378] Početni materijal, tert-butil 4-(4-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 24-1]
4-(2-etoksietoksi)-3-hidroksibenzaldehid
[0379]
[0380] Komercijalno dostupan 2-bromoetil etil etar (33.8 g, 221 mmol) je dodan u rastvor komercijalno dostupnog 3,4-dihidroksibenzaldehida (30.5 g, 221 mmol) i natrijum karbonata (35.1 g, 331 mmol) u N,N-dimetilformamidu (310 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 dana. Reakciona tečnost je ohlađena do 0° C pa je razređena sa 2 M hlorovodoničnom kiselinom, etil acetatom, i vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran serijski sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. The nerastvorljive materije su odvojene filtracijom sa dihlorometanom, a grubi materijal je odstranjen. Filtrat je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 17:3 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (13.2 g, 28%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.27 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.63 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.80-3.85 (2H, m), 4.24-4.30 (2H, m), 6.65 (1H, s), 7.02 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.38-7.42 (1H, m), 7.45 (1H, d, J = 2.2 Hz), 9.85 (1H, s).
[Proizvodni Primer 24-2]
3-(benziloksi)-4-(2-etoksietoksi)benzaldehid
[0381]
[0382] Kalijum karbonat (11.3 g, 81.5 mmol) i benzil hlorid (9.5 mL, 82.6 mmol) su dodani u rastvor 4-(2-etoksietoksi)-3-hidroksibenzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-1 (13.2 g, 62.7 mmol), i etanola (130 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana uz grejanje na 90° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ohlađena do 0° C, a tada je razređena sa 2 M hlorovodoničnom kiselinom, etil acetatom, i vodom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (13.5 g, 72%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.22 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.63 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.82-3.90 (2H, m), 4.23-4.30 (2H, m), 5.18 (2H, s), 7.03 (1H, d, J = 7.7 Hz), 7.28-7.34 (1H, m), 7.35-7.42 (2H, m), 7.43-7.50 (4H, m), 9.82 (1H, s).
[Proizvodni Primer 24-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-(2-etoksietoksi)-4-(2-nitrovinil)benzen
[0383]
[0384] Amonijum acetat (4.16 g, 53.9 mmol) i nitrometan (6.1 mL, 113 mmol) su dodani u rastvor 3-(benziloksi)-4-(2-etoksietoksi)benzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-2 (13.5 g, 45.0 mmol), u sirćetnoj kiselini (36 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je grejana i mešana pod refluksom na 130° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature. Precipitat je sakupljen uz pomoć filtracije pa je ispran sa etanolom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.22 (3H, t, J = 7.1 Hz), 3.62 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.82-3.88 (2H, m), 4.21-4.26 (2H, m), 5.16 (2H, s), 6.97 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.06 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 8.3,2.1 Hz), 7.29-7.50 (6H, m), 7.91 (1H, d, J = 13.6 Hz).
[Proizvodni Primer 24-4]
(E)-1-(benziloksi)-2-(2-etoksietoksi)-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzen
[0385]
[0386] Azotna kiselina (11 mL, 69%, 171 mmol) je dodana u rastvor (E)-2-(benziloksi)-1-(2-etoksietoksi)-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-3 (15.4 g, 44.9 mmol), i sirćetne kiseline (100 mL) na 25° C, a smeša je mešana tokom 6 h. Reakciona tečnost je izlivena u led. Suspenzija je podvrgnuta filtraciji usisavanjem, a produkt je ispran sa vodom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.23 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.62 (2H, q, J = 6.9 Hz), 3.84-3.90 (2H, m), 4.29-4.34 (2H, m), 5.27 (2H, s), 6.93 (1H, s), 7.23 (1H, d, J = 13.6 Hz), 7.35-7.50 (5H, m), 7.84 (1H, s), 8.57 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 24-5]
6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-ol
[0387]
[0388] 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (6 g) je dodan u rastvor (E)-1-(benziloksi)-2-(2-etoksietoksi)-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-4 (17.5 g, 44.9 mmol), u metanolu (180 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi. Nakon 6 h, katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (3.28 g, 33%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.29 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.63 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.73-3.80 (2H, m), 4.16-4.24 (2H, m), 6.41 (1H, td, J = 2.1, 1.1 Hz), 6.46 (1H, s), 6.99 (1H, s), 7.10 (1H, dd, J = 3.1, 2.4 Hz), 7.15 (1H, s), 7.93 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 24-6]
N-(4-((6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid
[0389]
[0390] Dimetilsulfoksid (20 mL) je dodan u smešu 6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-ol, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-5 (3.28 g, 14.8 mmol), N-(4-hloropiridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-5 (2.78 g, 16.3 mmol), i kalijum tert-butoksida (1.83 g, 16.3 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana na 150° C preko noći. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, a tada je razređena sa vodom i etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a tada je agens za sušenje odstranjen filtracijom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.5 g, 48%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.09 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.14 (3H, s), 3.41 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.56-3.66 (2H, m), 4.05-4.13 (2H, m), 6.44-6.50 (1H, m), 6.53 (1H, dd, J = 5.9, 2.6 Hz), 7.05 (1H, d, J = 0.7 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 3.3,2.6 Hz), 7.36 (1H, s), 7.75 (1H, brs), 8.01 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.11 (1H, brs), 8.19 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 24-7]
4-((6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0391]
[0392] 2 M rastvor natrijum hidroksida (20 mL) je dodan u rastvor N-(4-((6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-6 (2.5 g, 7.04 mmol), u metanolu (20 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana pod refluksom na 75° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, a tada je razređena sa etil acetatom i vodom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:9 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1 – 24:1) koje daje jedinjenje iz naslova (1.92 g, 87%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.12 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.45 (2H, q, J = 7.2 Hz), 3.60-3.72 (2H, m), 4.03-4.13 (2H, m), 4.29 (2H, s), 5.89 (1H, d, J = 1.8 Hz), 6.29 (1H, dd, J = 6.2,2.2 Hz), 6.44-6.54 (1H, m), 7.05 (1H, s), 7.18 (1H, dd, J = 3.1, 2.4 Hz), 7.34 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.25 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 24-8]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0393]
[0394] 50-72% uljani natrijum hidrid (265 mg) je dodan u rastvor 4-((6-(2-etoksietoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amina, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-7 (1.92 g, 6.13 mmol), u N,N-dimetilformamidu (20 mL) u atmosferi azota na 0° C. Reakciona tečnost je mešana na istoj temperaturi tokom 10 min. U reakcionu tečnost je dodan fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (1.20 g, 7.97 mmol), a smeša je ugrejana na sobnoj temperaturi i mešana tokom 1 h. U reakcionu tečnost su dodani voda i etil acetat. Organski sloj je ispran serijski sa vodom i sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (rastvor: n-heptan:etil acetat = 9:1 – 0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (1.97 g, 87%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.01 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.84 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.37 (2H, q, J = 7.1 Hz), 3.54-3.59 (2H, m), 4.02-4.10 (2H, m), 5.69 (1H, d, J = 2.2 Hz), 5.77 (2H, s), 6.09 (1H, dd, J = 5.9, 2.2 Hz), 6.60 (1H, d, J = 3.3 Hz), 7.35 (1H, s), 7.71-7.77 (2H, m), 8.04 (1H, s), 8.09-8.17 (1H, m).
[Proizvodni Primer 24-9]
tert-butil 4-(4-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0395]
[0396] Tionil hlorid (370 µL, 5.06 mmol) je dodan u rastvor benzotriazola (603 mg, 5.06 mmol) u dihlorometanu (20 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 min, dodana je 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (1.03 g, 3.38 mmol), smeša je mešana tokom 1 h. Reakciona tečnost je filtrirana kroz bezvodni natrijum sulfat na staklenom filteru nakon čega je pomenuti bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom. Trietilamin (1.87 mL, 13.5 mmol), 4-dimetilaminopiridin (16.5 mg, 0.135 mmol), i rastvor 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8 (500 mg, 1.35 mmol), u tetrahidrofuranu (5 mL) je serijski dodan u nastao filtrat u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. U reakcionu tečnost je dodana prekomerna količina metilamina, a produkt je razređen sa etil acetatom i vodom sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a agens za sušenje je odstranjen filtracijom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (383 mg, 43%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 0.94 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.42 (9H, s), 1.43-1.60 (2H, m), 1.69-1.84 (2H, m), 2.75 (3H, brs), 2.85 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.29 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.47-3.58 (2H, m), 3.98-4.16 (4H, m), 6.56-6.71 (2H, m), 7.34 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.45 (1H, s), 7.70 (1H, d, J = 2.6 Hz), 7.78 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.90 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.08 (1H, s), 8.12-8.24 (2H,m), 10.66 (1H, s).
[Primer 25]
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0397]
[0398] Komercijalno dostupan 2-hidroksiacetaldehid (48.5 mg, 0.807 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (91 mg, 0.43 mmol), i sirćetna kiselina (25 µL, 0.43 mmol) su dodani u suspenziju 6-(2-etoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 24 (30 mg, 0.054 mmol), u tetrahidrofuranu (3 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. U reakcionu tečnost je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata na sobnoj temperaturi, a smeša je razređena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a rastvarač je koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (20.1 mg, 62%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.67-1.99 (4H, m), 2.20 (2H, td, J = 11.7, 2.6 Hz), 2.53-2.66 (3H, m), 2.98-3.11 (5H, m), 3.40 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.59-3.69 (4H, m), 4.16-4.20 (2H, m), 5.02 (1H, s), 5.69-5.80 (1H, m), 6.51 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.62 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.25 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.28-7.36 (3H, m), 7.76-7.83 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.02 (1 H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.62 (1H, s).
[Primer 26]
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-etilazetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0399]
[0400] Natrijum triacetoksiborohidrid (172 mg, 0.812 mmol) i acetaldehid (51.2 mg, 1.16 mmol) su dodani u smešu 5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 26-6 (215 mg, 0.406 mmol), i tetrahidrofurana (4.0 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. U reakcionu smešu su dodani zasićenim vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slani rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, i filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a talog je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (180 mg, 79%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.00 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.51 (2H, q, J = 7.1 Hz), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.09-3.16 (2H, m), 3.40 (2H, q, J = 7.1 Hz), 3.60-3.65 (2H, m), 3.71-3.80 (3H, m), 4.15-4.20 (2H, m), 5.47-5.57 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.24-7.27 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.36-7.40 (2H, m), 7.77-7.83 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.47 (1H, brs).
[0401] Početni materijal, 5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 26-1]
tert-butil 3-(4-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)azetidin-1-karboksilat
[0402]
[0403] Benzotriazol (335 mg, 2.81 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (20 mL), dodan je tionil hlorid (200 µL, 2.74 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smešu je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)azetidin-3-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 26-5 (650 mg, 2.34 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 25 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter koji je bio potpuno prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom nakon čega je bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom, a filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8 (300 mg, 0.810 mmol), trietilamina (1.3 mL, 9.38 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (9.9 mg, 0.081 mmol) u tetrahidrofuranu (16 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h, u reakcionu smešu su tada dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u tetrahidrofuranu, dodana je prekomerna količina 9.8 M rastvora metilamin metanola na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 75 min. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 1:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 9:1). Frakcija sa smešom je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 1:3 – 0:1; etil acetat:metanol = 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (279 mg, 76%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.47 (9H, s), 2.81 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.40 (2H, q, J = 6.8 Hz), 3.60-3.65 (2H, m), 3.73-3.83 (1H, m), 3.93-4.01 (2H, m), 4.15-4.20 (2H, m), 4.35 (2H, t, J = 8.6 Hz), 5.44-5.54 (1H, m), 6.56 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9, 1.8 Hz), 7.23-7.29 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.42 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.85 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.55 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 26-2]
tert-butil 3-((metilsulfonil)oksi)azetidin-1-karboksilat
[0404]
[0405] Metansulfonil hlorid (2.57 mL, 33.3 mmol) i trietilamin (11.6 mL, 83.1 mmol) su dodani u rastvor komercijalno dostupnog N-BOC-3-hidroksi azetidina (4.8 g, 27.7 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. U reakcionu tečnost je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata na sobnoj temperaturi, a smeša je razređena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.45 (9H, s), 3.07 (3H, s), 4.03-4.18 (2H, m), 4.22-4.36 (2H, m), 5.12-5.27 (1H, m).
[Proizvodni Primer 26-3]
tert-butil 3-jodoazetidin-1-karboksilat
[0406]
[0407] Kalijum jodid (51.0 g, 307 mmol) je dodan u rastvor tert-butil 3-((metilsulfonil)oksi)azetidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 26-2 (7.72 g, 30.7 mmol), u dimetilsulfoksidu (80 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na 140° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je razređena sa dietil etrom i vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dietil etrom. Spojeni organski sloj je ispran serijski sa vodenim rastvorom natrijum pirosulfita i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (5.91 g, 68%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.44 (9H, s), 4.25-4.33 (2H, m), 4.42-4.51 (1H, m), 4.61-4.69 (2H, m).
[Proizvodni Primer 26-4]
tert-butil 3-(4-(etoksikarbonil)fenil)azetidin-1-karboksilat
[0408]
[0409] 1,2-dibromoetan (0.286 mL, 3.32 mmol) je dodan u suspenziju cinkovog praha (2.12 g, 32.4 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana na 65° C tokom 10 min. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, dodan je hlorotrimetilsilan (0.400 mL, 3.13 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. U reakcionu tečnost je dodan rastvor tert-butil 3-jodoazetidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 26-3 (5.91 g, 20.9 mmol), u tetrahidrofuranu (10 mL) tokom 5 min, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 min (rastvor A). Rastvor tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (382 mg, 0.418 mmol) i tri-2-furilfosfina (402 mg, 1.73 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) je mešan u atmosferi azota na sobnoj temperaturi tokom 15 min, a tada je dodan prethodno pripremljeni rastvor A na sobnoj temperaturi. Naknadno je dodan rastvor etil 4-jodobenzoata (6.92 g, 25.1 mmol) u tetrahidrofuranu (18.5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na 65° C preko noći. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, pa je filtrirana kroz celit, a produkt je ispran sa etil acetatom. Filtrat je ispran serijski sa zasićenim vodeni rastvorom natrijum bikarbonata i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 4:1) koje daje jedinjenje iz naslova (4.35 g, 68%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.40 (3H, t, J = 8.0 Hz), 1.47 (9H, s), 3.71-3.84 (1H, m), 3.95-4.02 (2H, m), 4.32-4.44 (4H, m), 7.34-7.42 (2H, m), 7.98-8.07 (2H, m).
[Proizvodni Primer 26-5]
4-(1-(tert-butoksikarbonil)azetidin-3-il)benzojeva kiselina
[0410]
[0411] 2 M rastvor natrijum hidroksida (28.5 mL, 57.0 mmol) je dodan u rastvor tert-butil 3-(4-(etoksikarbonil)fenil)azetidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 26-4 (4.35 g, 14.2 mmol), u tetrahidrofuranu (32 mL) i metanolu (7 mL) na 25° C. Reakciona tečnost je mešana na 60° C tokom 1 h. U reakcionu tečnost je dodana 2 M hlorovodonična kiselina (28.5 mL), a smeša je razređena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (3.4 g, 86%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (9H, s), 3.71-3.88 (1H, m), 3.96-4.04 (2H, m), 4.37 (2H, t, J = 8.6 Hz), 7.42 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.09 (2H, d, J = 8.3 Hz).
[Proizvodni Primer 26-6]
5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0412]
[0413] tert-butil 3-(4-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)azetidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 26-1 (279 mg, 0.443 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (8.0 mL), a tada je dodana trifluorosirćetna kiselina (1.6 mL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 min, tada je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu i trietilaminu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 97:3 – 4:1) koje daje jedinjenje iz naslova (215 mg, 92%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.05 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.40 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.61-3.65 (2H, m), 3.81 (2H, t, J = 7.0 Hz), 3.93-4.09 (3H, m), 4.15-4.20 (2H, m), 5.51-5.63 (1H, m), 6.53 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.24-7.28 (1H, m), 7.33 (1H, s), 7.40 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.82 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.5 Hz), 8.52 (1H, brs).
[Primer 27]
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0414]
[0415] Komercijalno dostupan 2-hidroksiacetaldehid (45.9 mg, 0.765 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (86 mg, 0.408 mmol), i sirćetna kiselina (23 µL, 0.408 mmol) su dodani u rastvor 5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 26-6 (27 mg, 0.051 mmol), u tetrahidrofuranu (2 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 2 h. U reakcionu tečnost je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata na sobnoj temperaturi, a smeša je razređena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (20.0 mg, 68%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.08 (3H, t, J = 7.0 Hz), 2.68-2.76 (2H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.27-3.34 (2H, m), 3.40 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.55-3.67 (4H, m), 3.71-3.94 (3H, m), 4.15-4.22 (2H, m), 5.53-5.65 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.62 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.23-7.29 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.38 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.83 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.01 (1H, s), 8.09 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.63 (1H, brs).
[Primer 28]
6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(6-(1-etilpiperidin-4-il)nikotinamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0416]
[0417] Acetaldehid (38 µL, 0.671 mmol), sirćetna kiselina (20 µL, 0.358 mmol), i natrijum triacetoksiborohidrid (76 mg, 0.358 mmol) su dodani u rastvor 6-(2-etoksietoksi)-N-metil-5-((2-(6-(piperidin-4-il)nikotinamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 28-5 (25 mg, 0.045 mmol), u tetrahidrofuranu (3 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 1 h. U reakcionu tečnost je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata na sobnoj temperaturi, a smeša je razređena sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (13.6 mg, 52%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.13 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.78-1.93 (2H, m), 1.94-2.15 (4H, m), 2.46 (2H, q, J = 7.3 Hz), 2.74-2.86 (1H, m), 3.00-3.17(5H, m), 3.40 (2H, q, J = 7.1 Hz), 3.63 (2H, t, J = 4.8 Hz), 4.18 (2H, t, J = 4.8 Hz), 5.45-5.57 (1H, m), 6.56 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,1.5 Hz), 7.20-7.39 (3H, m), 7.84-7.92 (1H, m), 8.02 (1H, s), 8.05-8.15 (2H, m), 8.49 (1H, s), 8.93-9.07 (1H, m).
[0418] Početni materijal, 6-(2-etoksietoksi)-N-metil-5-((2-(6-(piperidin-4-il)nikotinamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 28-1]
1'-tert-butil 5-metil 5',6'-dihidro-[2,4'-bipiridin]-1',5(2'H)-dikarboksilat
[0419]
[0420] N,N-dimetilformamid (100 mL) je dodan u komercijalno dostupan 1-N-BOC-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin (4.68 g, 15.1 mmol), komercijalno dostupan metil 6-hloronikotinat (2.81 g, 16.4 mmol), 1,1'-bi(difenilfosfino)ferocendihloropaladijum(II) (1.17 g, 1.60 mmol), i kalijum karbonat (7.02 g, 50.8 mmol). Reakciona tečnost je mešana u atmosferi azota na 100° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, a tada je razređena sa etil acetatom i vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran serijski sa razređenim vodenim rastvorom amonijaka i zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (1.07 g, 22%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.49 (9H, s), 2.59-2.73 (2H, m), 3.66 (2H, t, J = 5.5 Hz), 3.95 (3H, s), 4.17 (2H, d, J = 2.9 Hz), 6.79 (1H, dt, J = 3.4, 1.8 Hz), 7.44 (1H, d, J = 8.4 Hz), 8.25 (1H, dd, J = 8.4, 2.2 Hz), 9.15 (1 H, dd, J = 2.2,0.7 Hz).
[Proizvodni Primer 28-2]
Metil 6-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)nikotinat
[0421]
[0422] 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (213 mg) je dodan u rastvor 1'-tert-butil 5-metil 5',6'-dihidro-[2,4'-bipiridin]-1',5(2'H)-dikarboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 28-1 (1.06 g, 3.33 mmol), u etanolu (71 mL) i tetrahidrofuranu (12 mL), a smeša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je filtrirana, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1) koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (9H, s), 1.73 (2H, qd, J = 12.6, 4.4 Hz), 1.88-1.97 (2H, m), 2.76-2.98 (3H, m), 3.94 (3H, s), 4.27 (2H, brs), 7.22-7.26 (1H, m), 8.23 (1H, dd, J = 8.4,2.2 Hz), 9.09-9.18 (1H, m).
[Proizvodni Primer 28-3]
6-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)nikotinska kiselina
[0423]
[0424] 2 M rastvor natrijum hidroksida (20 mL) je dodan u rastvor metil 6-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)nikotinata, opisanog u Proizvodnom Primeru 28-2 (1.07 g, 3.32 mmol), u etanolu (5 mL), a smeša je mešana tokom 1 h. U reakcionu tečnost je dodana 2 M hlorovodonična kiselina na 0° C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (534 mg, 52%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.42 (9H, s), 1.58 (2H, qd, J = 12.6, 4.4 Hz), 1.77-1.89 (2H, m), 2.67-3.04 (3H, m), 3.95-4.17 (2H, m), 7.40 (1H, d, J = 7.7 Hz), 8.16 (1H, dd, J = 8.1, 2.2 Hz), 8.97 (1H, dd, J = 2.2,0.7 Hz).
[Proizvodni Primer 28-4]
tert-butil 4-(5-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)piridin-2-il)piperidin-1-karboksilat
[0425]
[0426] Oksalil hlorid (74 µL, 0.864 mmol) i jedna kap N,N-dimetilformamida su dodani u rastvor 6-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)nikotinske kiseline, opisane u Proizvodnom Primeru 28-3 (80 mg, 0.216 mmol), u dihlorometanu (2 mL) na 0° C, a smeša je mešana tokom 30 min. Reakciona tečnost je koncentrovana u vakuumu. Talog je rastvoren u tetrahidrofuranu (2 mL), dodani su trietilamin (301 µL, 2.16 mmol) i 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, opisan u Proizvodnom Primeru 24-8 (80 mg, 0.216 mmol), a smeša je mešana tokom 5 h. U reakcionu tečnost je dodana prekomerna količina metilamina, a smeša je razređena sa vodom i etil acetatom sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (80 mg, 56%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.04 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.45 (9H, s), 1.68 (2H, qd, J = 12.6,4.4 Hz), 1.83-1.93 (2H, m), 2.69-2.92 (3H, m), 2.96 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.37 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.56-3.63 (2H, m), 4.11-4.15 (2H, m), 4.21 (2H, brs), 6.10-6.20 (1H, m), 6.44 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.58 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 7.21 (1H, d, J = 7.7 Hz), 7.24-7.31 (2H, m), 7.86 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.95 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.02 (1H, s), 8.07 (1H, dd, J = 8.2, 2.4 Hz), 8.96-9.02 (1H, m), 9.20 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 28-5]
6-(2-etoksietoksi)-N-metil-5-((2-(6-(piperidin-4-il)nikotinamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0427]
[0428] Trifluorosirćetna kiselina (374 µL, 4.86 mmol) je dodana u rastvor tert-butil 4-(5-((4-((6-(2-etoksietoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)piridin-2-il)piperidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 28-4 (80 mg, 0.121 mmol), u dihlorometanu (3 mL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 1.5 h. Reakciona tečnost je koncentrovana u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, a tada je dodan trietilamin sa ciljem neutralizovanja trifluorosirćetne kiseline. Rastvor je koncentrovan u vakuumu, a talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 49:1 – 17:3) koje daje jedinjenje iz naslova (51.3 mg, 76%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.72 (2H, qd, J =12.4, 4.0 Hz), 1.87-1.97 (2H, m), 2.76 (2H, td, J = 12.3, 2.6 Hz), 2.84-2.95 (1H, m), 2.99 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.16-3.28 (2H, m), 3.40 (2H, q, J = 7.1 Hz), 3.59-3.68 (2H, m), 4.14-4.20 (2H, m), 6.04-6.17 (1H, m), 6.48 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.62 (1H, dd, J = 5.7,2.4 Hz), 7.23-7.29 (2H, m), 7.31 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.98-8.05 (2H, m), 8.10 (1H, dd, J = 8.2,2.4 Hz), 9.02 (1H, dd, J = 2.6, 0.7 Hz).
[Primer 29]
(S)-6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-((2-hidroksimetil)pirolidin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0429]
[0430] Komercijalno dostupan L-prolinol (31.3 mg, 0.309 mmol) je dodan u smešu 5-((2-(4-(hlorometil)-N-(4-(hlorometil)benzoil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 29-1 (19.6 mg, 0.029 mmol), i N,N-dimetilformamida (500 µL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana u atmosferi azota tokom 17.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i odstranjen filtriranjem. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat), a produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (13.3 mg, 78%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.08 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.65-1.99 (5H, m), 2.23-2.32 (1H, m), 2.71-2.79 (1H, m), 2.92-2.99 (1H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.37-3.48 (4H, m), 3.61-3.69 (3H, m), 4.03 (1H, d, J = 13.5 Hz), 4.16-4.20 (2H, m), 5.48-5.56 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9, 2.6 Hz), 7.24-7.28 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.41 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.79-7.84 (2H, m), 7.91 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.5 Hz), 8.50 (1H, brs).
[0431] Početni materijal, 5-((2-(4-(hlorometil)-N-(4-(hlorometil)benzoil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 29-1]
5-((2-(4-(hlorometil)-N-(4-(hlorometil)benzoil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0432]
[0433] Trietilamin (300 µL, 2.16 mmol) i komercijalno dostupan 4-(hlorometil)benzoil hlorid (221 mg, 1.17 mmol) su dodani u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8 (107 mg, 0.289 mmol), i tetrahidrofurana (8.0 mL) u atmosferi azota na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a tada su u reakcionu smešu dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriranjem kroz NH silika-gel. Filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.11 (3H, t, J = 7.0 Hz), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.43 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.56-3.60 (2H, m), 4.08-4.12 (2H, m), 4.56 (4H, s), 5.41-5.49 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.67 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.71 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.24 (1H, s), 7.25-7.28 (1H, m), 7.34-7.39 (4H, m), 7.69-7.75 (4H, m), 7.98 (1H, s), 8.17 (1H, d, J = 5.9 Hz).
[Primer 30]
5-((2-(4-(((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0434]
[0435] Komercijalno dostupan cis-2,6-dimetilpiperazin (32.5 mg, 0.285 mmol) je dodan u smešu 5-((2-(4-(hlorometil)-N-(4-(hlorometil)benzoil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 29-1 (21.1 mg, 0.031 mmol), i N,N-dimetilformamida (500 µL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana u atmosferi azota tokom 13 h i 20 min. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat), a produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (14.4 mg, 77%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.02 (6H, d, J = 6.2 Hz), 1.07 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.63 (2H, t, J = 10.6 Hz), 2.69-2.76 (2H, m), 2.89-2.99 (2H, m), 3.07 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.40 (2H, q, J = 7.0 Hz), 3.52 (2H, s), 3.61-3.65 (2H, m), 4.16-4.20 (2H, m), 5.45-5.52 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.25-7.27 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.43 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.79-7.83 (2H, m), 7.92 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.01 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.47 (1H, brs).
[Primer 31]
(R)-6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(5-((3-hidroksipirolidin-1-il)metil)tiofen-2-karboksamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0436]
[0437] Tionil hlorid (2.8 mL, 38.4 mmol) i N,N-dimetilformamid (5.87 µL, 0.076 mmol) su dodani u 5-(hidroksimetil)tiofen-2-karboksilnu kiselinu, opisanu u Proizvodnom Primeru 31-1 (120 mg, 0.759 mmol), a smeša je grejana i mešana na 90° C tokom 2 h. Reakciona smeša je isparena u vakuumu koje daje sirovi produkt A (148 mg).
[0438] Deo sirovog produkta A (74.0 mg, 0.379 mmol), u rastvoru trietilamina (191 µL, 1.38 mmol) i tetrahidrofurana (1.0 mL), je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8 (51.1 mg, 0.138 mmol), i tetrahidrofurana (1.4 mL) u atmosferi azota na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 170 min, a tada su u reakcionu smešu dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran kroz NH silika-gel, a produkt je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt B (86.7 mg).
[0439] Deo sirovog produkta B (17.3 mg) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (1.0 mL), dodan je komercijalno dostupan (R)-3-hidroksi pirolidin (24.4 mg, 0.28 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 17 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat), a produkt je sakupljen filtracijom pa je ispran sa n-heksanom koje daje jedinjenje iz naslova (9.0 mg, 56%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.07 (3H, t, J = 6.8 Hz), 1.71-1.81 (1H, m), 2.13-2.24(1H, m), 2.34-2.43 (1H, m), 2.57-2.64 (1H, m), 2.69-2.76 (1H, m), 2.87-2.97 (1H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.39 (2H, q, J = 7.3 Hz), 3.59-3.64 (2H, m), 3.84 (2H, s), 4.14-4.19 (2H, m), 4.31-4.37 (1H, m), 5.48-5.55 (1H, m), 6.54 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,2.4 Hz), 6.91 (1H, d, J = 3.5 Hz), 7.24-7.28 (1H, m), 7.32 (1H, s), 7.47 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.78-7.82 (1H, m), 7.99 (1H, s), 8.08 (1H, d, J = 5.7 Hz), 8.34 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 31-1]
5-(hidroksimetil)tiofen-2-karboksilna kiselina
[0440]
[0441] Natrijum borohidrid (218 mg, 5.76 mmol) je dodan u rastvor komercijalno dostupne 5-formil-2-tiofenkarboksilne kiseline (599 mg, 3.84 mmol) u metanolu (19 mL), a smeša je mešana u atmosferi azota na sobnoj temperaturi tokom 4 h i 30 min. U reakcionu smešu je dodan aceton, a smeša je koncentrovana u vakuumu. U talog su dodani 2 M hlorovodonična kiselina i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organski sloj je ispran sa vodom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a precipitat je ispran sa dietil etrom i n-heksanom koje daje jedinjenje iz naslova (529 mg, 87%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 4.61-4.74 (2H, m), 5.65-72 (1H, m), 6.97-7.7.03 (1H, m), 7.55-7.62 (1H, m), 12.92 (1H, brs).
[Primer 32]
6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilazetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0442]
[0443] Formaldehid (12 µL, 0.425 mmol), sirćetna kiselina (13 µL, 0.227 mmol), i natrijum triacetoksiborohidrid (48.0 mg, 0.227 mmol) su dodani u rastvor 5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog in Proizvodnom Primeru 32-10 (15 mg, 0.028 mmol), u tetrahidrofuranu (2 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. U reakcionu tečnost su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat na sobnoj temperaturi. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (8.8 mg, 57%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.76 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.25 (3H, s), 2.85 (3H, d, J = 4.4 Hz), 3.02-3.13 (7H, m), 3.54-3.65 (3H, m), 3.99 (2H, t, J = 6.2 Hz), 6.64 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.69 (1H, dd, J = 5.9, 2.6 Hz), 7.42 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.46 (1H, s), 7.69 (1H, d, J = 2.6 Hz), 7.77 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.92 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.06 (1H, s), 8.14-8.19 (1H, m), 8.21 (1H, d, J = 5.9 Hz), 10.70 (1H, s).
[0444] Početni materijal, 5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 32-1]
3-hidroksi-4-(3-metoksipropoksi)benzaldehid
[0445]
[0446] Komercijalno dostupan 1-bromo-3-metoksipropan (24.0 g, 157 mmol) je dodan u rastvor komercijalno dostupnog 3,4-dihidroksibenzaldehida (21.7 g, 157 mmol) i natrijum karbonata (25.0 g, 236 mmol) u N,N-dimetilformamidu (50 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana i 4 h. U reakcionu tečnost su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda na 0° C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom. Spojeni organske sloj je ispran serijski sa vodom i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Nerastvorljive materije su odstranjene filtracijom uz pomoć dihlorometana, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 17:3 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (17.2 g, 52%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.07-2.18 (2H, m), 3.38 (3H, s), 3.59 (2H, t, J = 5.9 Hz), 4.26 (2H, t, J = 6.2 Hz), 6.21 (1H, s), 7.00 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.35-7.48 (2H, m), 9.85 (1H, s).
[Proizvodni Primer 32-2]
3-(benziloksi)-4-(3-metoksipropoksi)benzaldehid
[0447]
[0448] Kalijum karbonat (14.7 g, 106 mmol) i benzil hlorid (12.2 mL, 106 mmol) su dodani u rastvor 3-hidroksi-4-(3-metoksipropoksi)benzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-1 (17.2 g, 81.7 mmol), u etanolu (200 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana uz grejanje na 90° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ohlađena do 0° C, a smeša je razređena sa 2 M hlorovodoničnom kiselinom, etil acetatom, i vodom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odvojen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 3:7) koje daje jedinjenje iz naslova (19.8 g, 81%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.10-2.20 (2H, m), 3.35 (3H, d, J = 0.7 Hz), 3.59 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.21 (2H, t, J = 6.4 Hz), 5.18 (2H, s), 6.95-7.09 (1H, m), 7.28-7.50 (7H, m), 9.76-9.87 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-(3-metoksipropoksi)-4-(2-nitrovinil)benzen
[0449]
[0450] Amonijum acetat (6.10 g, 79.1 mmol) i nitrometan (8.93 mL, 165 mmol) su dodani u rastvor 3-(benziloksi)-4-(3-metoksipropoksi)benzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-2 (19.8 g, 65.9 mmol), u sirćetnoj kiselini (52.8 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana uz grejanje na 130° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etanolom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenje iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.07-2.17 (2H, m), 3.35 (3H, s), 3.59 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.19 (2H, t, J = 6.4 Hz), 5.16 (2H, s), 6.96 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.05 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 8.4,1.8 Hz), 7.29-7.47 (6H, m), 7.91 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 32-4]
(E)-1-(benziloksi)-2-(3-metoksipropoksi)-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzen
[0451]
[0452] 69% azotna kiselina (16 mL, 249 mmol) je dodana u tečnu smešu (E)-2-(benziloksi)-1-(3-metoksipropoksi)-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-3 (22.6 g, 65.9 mmol), u sirćetnoj kiselini (150 mL) na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Reakciona tečnost je prenesena u ledu banju, a precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa vodom koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.10-2.13 (2H, m), 3.36 (3H, s), 3.59 (2H,t, J = 5.9 Hz), 4.25 (2H, t, J = 6.4 Hz), 5.27 (2H, s), 6.93 (1H, s), 7.24 (1H, d, J = 13.6 Hz), 7.34-7.46 (5H, m), 7.78 (1H, s), 8.52-8.62 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-5]
6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-ol
[0453]
[0454] 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (8 g) je dodan u rastvor (E)-1-(benziloksi)-2-(3-metoksipropoksi)-4-nitro-5-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-4 (19.6 g, 50.5 mmol), u metanolu (300 mL) na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Reakciona tečnost je filtrirana kroz celit, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1 – 1:1) koje daje jedinjenje iz naslova (3.81 g, 34%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.05-2.13 (2H, m), 3.40 (3H, s), 3.61 (2H,t, J = 6.0 Hz), 4.16 (2H, t, J = 6.0 Hz), 5.97-6.05 (1H, m), 6.36-6.46 (1H, m), 6.92 (1H, s), 7.08 (1H, t, J = 2.8 Hz), 7.14 (1H, s), 7.26 (1H, s), 7.82-8.06 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-6]
N-(4-((6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamid
[0455]
[0456] Dimetilsulfoksid (25 mL) je dodan u smešu 6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-ol, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-5 (3.81 g, 17.2 mmol), N-(4-hloropiridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-5 (3.23 g, 18.9 mmol), i kalijum tert-butoksida (2.12 g, 18.9 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana na 150° C tokom 14 h. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani etil acetat i voda. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.83 g, 46%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.85-1.91 (2H, m), 2.13 (3H, s), 3.20 (3H, s), 3.24 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.02 (2H, t, J = 6.2 Hz), 6.44-6.49 (1H, m), 6.51-6.56 (1H, m), 6.95-7.02 (1H, m), 7.10-7.18 (1H, m), 7.31-7.38 (1H, m), 7.71-7.82 (1H, m), 7.97-8.06 (1H, m), 8.20-8.30 (1H, m), 8.36-8.52 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-7]
4-((6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0457]
[0458] 2 M rastvor natrijum hidroksida (30 mL) je dodan u rastvor N-(4-((6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-6 (2.8 g, 7.88 mmol), u metanolu (30 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je mešana pod refluksom uz grejanje na 75° C tokom 2 h. Reakciona tečnost je ostavljena da stoji kako bi se ohladila do sobne temperature, a tada su dodani etil acetat i voda. Organski sloj je ispran sa zasićenim slani rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:9 – 0:1; etil acetat:metanol = 49:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.24 g, 91 %).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.75-1.92 (2H, m), 3.23 (3H, s), 3.28 (2H,t, J = 6.0 Hz), 4.03 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.30 (2H, s), 5.89 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.29 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 6.46-6.53 (1H, m), 7.01 (1H, s), 7.16 (1H, dd, J = 3.3,2.6 Hz), 7.35 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.14-8.26 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-8]
5-((2-aminopiridin4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0459]
[0460] 50-72% uljani natrijum hidrid (308 mg) je dodan u rastvor 4-((6-(3-metoksipropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amina, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-7 (2.23 g, 7.12 mmol), u N,N-dimetilformamidu (30 mL) u atmosferi azota na 0° C. Reakciona tečnost je mešana tokom 10 min, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (1.40 g, 9.25 mmol), a produkt je dodano mešan na istoj temperaturi tokom 30 min. U reakcionu tečnost su dodani voda i etil acetat. Organski sloj je ispran serijski sa vodom i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.44 g, 93%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.73-1.86 (2H, m), 2.81-2.87 (3H, m), 3.12 (3H, d, J = 1.8 Hz), 3.16-3.24 (2H, m), 3.98 (2H, t, J = 5.7 Hz), 5.62-5.71 (1H, m), 5.78 (2H, s), 6.06-6.15 (1H, m), 6.61 (1H, dd, J = 3.5,1.7 Hz), 7.36 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.71-7.78 (2H, m), 7.98-8.04 (1H, m), 8.10-8.22 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-9]
tert-butil 3-(4-((4-((6-(3-metoksipropoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)azetidin-1-karboksilat
[0461]
[0462] Tionil hlorid (118 µL, 1.62 mmol) je dodan u rastvor benzotriazola (193 mg, 1.62 mmol) u dihlorometanu (5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu tečnost je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)azetidin-3-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 26-5 (300 mg, 1.08 mmol), a smeša je dodatno mešana tokom 1 h. Reakciona tečnost je filtrirana kroz bezvodni natrijum sulfat na staklenom filteru, nakon čega je pomenuti bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom. U dihlorometanski rastvor produkta je dodan rastvor trietilamina (748 µL, 5.40 mmol), 4-dimetilaminopiridina (6.60 mg, 0.054 mmol), i 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-8 (200 mg, 0.54 mmol), u tetrahidrofuranu (10 mL) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana tokom 4 h i 20 min. Reakciona tečnost je razređena sa etil acetatom i vodom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. U talog su dodani tetrahidrofuran i prekomerna količina rastvora metilamin tetrahidrofurana, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Tečna smeša je koncentrovana u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 0:1) koje daje jedinjenje iz naslova (146 mg, 43%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.43-1.51 (9H, m), 1.80-1.95 (2H, m), 2.95 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.17 (3H, s), 3.20-3.27 (2H, m), 3.69-3.82 (1H, m), 3.95 (2H, dd, J = 8.6, 6.0 Hz), 4.05-4.17 (2H, m), 4.33 (2H, t, J = 8.6 Hz), 6.13-6.25 (1H, m), 6.44 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.63 (1H, dd, J = 5.7, 2.4 Hz), 6.97 (1H, s), 7.24 (2H, d, J = 3.7 Hz), 7.38 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.83 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.88 (1H, d, J = 2.6 Hz), 8.01-8.09 (2H, m), 8.79-9.00 (1H, m).
[Proizvodni Primer 32-10]
5-((2-(4-(azetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0463]
[0464] Trifluorosirćetna kiselina (713 µL, 9.25 mmol) je dodana u rastvor tert-butil 3-(4-((4-((6-(3-metoksipropoksi)-1-(metilkarbamoil)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-il)karbamoil)fenil)azetidin-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-9 (146 mg, 0.231 mmol), u dihlorometanu (5 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona tečnost je mešana tokom 1.5 h, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu i trietilaminu sa ciljem neutralizovanja trifluorosirćetne kiseline, a produkt je koncentrovan u vakuumu. Talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 49:1 – 17:3) koje daje jedinjenje iz naslova (96.2 mg, 79%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.82-1.95 (2H, m), 3.06 (3H, d, J = 4.8 Hz), 3.19 (3H, s), 3.24 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.79-4.00 (5H, m), 4.11 (2H, t, J = 6.0 Hz), 5.56-5.64 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.7 Hz), 6.61 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.21-7.29 (1H, m), 7.34 (1H, s), 7.41 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.00 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.56-8.68 (1H, m).
[Primer 33]
5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(3-fluoropropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0465]
[0466] Benzotriazol (37.8 mg, 0.317 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2.0 mL), dodan je tionil hlorid (24 µL, 0.322 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 5 min. U reakcionu smeša je dodana 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (82 mg, 0.269 mmol), na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 20 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz stakleni filter koji je bio prekriven sa bezvodnim natrijum sulfatom, nakon čega je pomenuti bezvodni natrijum sulfat ispran sa dihlorometanom, filtrat je dodan u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-fluoropropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 33-6 (34.4 mg, 0.096 mmol), trietilamina (133 µL, 0.960 mmol), i 4-dimetilaminopiridina (1.17 mg, 0.0096 mmol) u tetrahidrofuranu (1.5 mL) na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 320 min. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u tetrahidrofuranu, dodana je prekomerna količina 9.8 M rastvora metilamin metanola na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 50 min. Reakciona smeša je koncentrovan u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 3:7 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuum koje daje sirovi produkt A (46.3 mg).
[0467] Sirovi produkt A (46.3 mg) je rastvoren u dihlorometanu (1.25 mL), a tada je dodana trifluorosirćetna kiselina (250 µL) na 0° C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 min pa je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometan-trietilaminu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 97:3 – 4:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt B (35.8 mg).
[0468] Natrijum triacetoksiborohidrid (10.4 mg, 0.049 mmol) i acetaldehid (2.17 mg, 0.049 mmol) su dodani u smešu jednog dela sirovog produkta B (9.0 mg, 0.016 mmol) i tetrahidrofurana (500 µL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 140 min. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat). Čvrsti produkt je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (6.7 mg, 49%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.14 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.76-1.91 (4H, m), 1.93-2.12 (4H, m), 2.41-2.64 (3H, m), 3.03-3.17 (5H, m), 4.16 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.24 (1H, t, J = 5.9 Hz), 4.36 (1H, t, J = 5.7 Hz), 5.46-5.57 (1H, m), 6.55 (1H, d, J = 3.3 Hz), 6.58 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 7.24 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.31-7.36 (3H, m), 7.80 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.90 (1H, d, J = 2.2 Hz), 8.02 (1H, s), 8.10 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.49 (1H, brs).
[0469] Početni materijal, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-fluoropropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 33-1]
4-(3-fluoropropoksi)-3-hidroksibenzaldehid
[0470]
[0471] Komercijalno dostupan 3,4-dihidroksibenzaldehid (6.5 g, 47.1 mmol) i kalijum karbonat (6.83 g, 49.4 mmol) su suspendovani u N,N-dimetilformamidu (30 mL), dodan je 3-fluoropropil 4-metilbenzensulfonat, opisan u Proizvodnom Primeru 4-1 (11.3 g, 48.4 mmol), u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 37 h. Smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 2:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (4.62 g, 50%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.23 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 2.30 (1H, kvin, J = 5.8 Hz), 4.31 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.60 (1H, t, J = 5.6 Hz), 4.72 (1H, t, J = 5.6 Hz), 5.70 (1H, s), 6.99 (1H, d, J = 8.2 Hz), 7.41-7.47 (2H, m), 9.85 (1H, s).
[Proizvodni Primer 33-2]
3-(benziloksi)-4-(3-fluoropropoksi)benzaldehid
[0472]
[0473] Kalijum karbonat (3.87 g, 28.0 mmol) i benzil hlorid (3.2 mL, 27.8 mmol) su dodani u suspenziju 4-(3-fluoropropoksi)-3-hidroksibenzaldehida, opisanog u Proizvodnom Primeru 33-1 (4.62 g, 23.3 mmol), u etanolu (46 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na 90° C tokom 1.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani 2 M hlorovodonična kiselina, etil acetat, i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (6.14 g, 91%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.22 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 2.29 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 4.25 (2H, t, J = 6.2 Hz), 4.62 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.74 (1H, t, J = 5.7 Hz), 5.18 (2H, s), 7.02 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.29-7.50 (7H, m), 9.83 (1H, s).
[Proizvodni Primer 33-3]
(E)-2-(benziloksi)-1-(3-fluoropropoksi)-4-(2-nitrovinil)benzen
[0474]
[0475] 3-(benziloksi)-4-(3-fluoropropoksi)benzaldehid, opisan u Proizvodnom Primeru 33-2 (6.14 g, 21.3 mmol), je rastvoren u sirćetnoj kiselini (17.0 mL), dodani su amonijum acetat (1.97 g, 25.6 mmol) i nitrometan (2.8 mL, 51.7 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 130° C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, precipitat je sakupljen filtracijom pa je ispran sa malom količinom etanola koje daje kvantitativnu količinu jedinjenje iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.21 (1H, kvin, J = 6.0 Hz), 2.28 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 4.22 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.62 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.73 (1H, t, J = 5.7 Hz), 5.15 (2H, s), 6.95 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.06 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.17 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz), 7.29-7.49 (6H, m), 7.91 (1H, d, J = 13.5 Hz).
[Proizvodni Primer 33-4]
6-(3-fluoropropoksi)-1H-indol-5-ol
[0476]
[0477] Dimeća azotna kiselina (4.80 mL, 107 mmol) je dodana u smešu (E)-2-(benziloksi)-1-(3-fluoropropoksi)-4-(2-nitrovinil)benzena, opisanog u Proizvodnom Primeru 33-3 (7.06 g, 21.3 mmol), i sirćetne kiseline (61 mL) u ledenoj banji, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 h. Reakciona smeša je izlivena u led, precipitat je sakupljen filtracijom, a produkt je ispran sa tečnom smešom male količine sirćetne kiseline i etanola koje daje sirovi produkt (8.02 g).
[0478] Pomenuti sirovi produkt (8.02 g) je suspendovan u metanolu (150 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (2.27 g), a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 6 h. Unutrašnjost reakcionog sistema je supstituisana sa azotom, a smeša je razređena sa metanolom. Katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.47 g, 33%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.22 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 2.29 (1H, kvin, J = 5.9 Hz), 4.23 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.62 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.74 (1H, t, J = 5.7 Hz), 5.42 (1H, s), 6.42 (1H, ddd, J = 3.1, 2.2, 0.9 Hz), 6.91 (1H, s), 7.09 (1H, dd, J = 3.1, 2.4 Hz), 7.15 (1H, s), 7.94 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 33-5]
4-((6-(3-fluoropropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin
[0479]
[0480] 6-(3-fluoropropoksi)-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 33-4 (1.47 g, 7.04 mmol), N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (1.32 g, 7.74 mmol), i kalijum tert-butoksid (864 mg, 7.70 mmol) su rastvoreni u dimetilsulfoksidu (7.0 mL), a smeša je grejana i mešana u atmosferi azota na 160° C tokom 4.5 h. Reakciona tečnost je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt (177 mg).
[0481] Nastali sirovi produkt (177 mg) je rastvoren u metanolu (2.5 mL), dodan je 2 M rastvor natrijum hidroksida (2.5 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 70° C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a tada su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom pa je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:3 – 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 19:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (49.4 mg, 2.3%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.95-2.11 (2H, m), 4.07 (2H, t, J = 5.9 Hz), 4.28-4.47 (4H, m), 5.88 (1H, d, J = 2.2 Hz), 6.28 (1H, dd, J = 5.9,2.2 Hz), 6.48-6.52 (1H, m), 7.02 (1H, s), 7.16-7.20 (1H, m), 7.35 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 5.9 Hz), 8.25 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 33-6]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-fluoropropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0482]
[0483] 4-((6-(3-fluoropropoksi)-1H-indol-5-il)oksi)piridin-2-amin, opisan u Proizvodnom Primeru 33-5 (49.4 mg, 0.164 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (1.6 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (14.9 mg) u atmosferi azota na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Smeša je ponovo ohlađena do 0° C, dodan je fenil metilkarbamat, opisan u Proizvodnom Primeru 1-7 (62.0 mg, 0.41 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida, voda, i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Agens za sušenje je odstranjen filtriranjem, filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:4 – 0:1; etil acetat:metanol = 99:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (34.4 mg, 59%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.95-2.11 (2H, m), 3.07 (3H, dd, J = 4.7, 1.2), 4.12-4.17 (2H, m), 4.29 (1H, t, J = 5.8 Hz), 4.38-4.52 (3H, m), 5.50 (1H, brs), 5.87 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.26 (1H, dd, J = 6.0, 2.1 Hz), 6.56 (1H, d, J = 3.7 Hz), 7.23-7.27 (1H, m), 7.29 (1H, s), 7.87 (1H, d, J = 6.0 Hz), 8.00 (1H, s).
[0484] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabelama 1 i 2 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-6.
[Tabela 1]
Primer 34
Primer 42
Primer 50
Primer 35
Primer 43
Primer 51
Primer 36
Primer 44
Primer 52
Primer 37
Primer 45
Primer 53
Primer 38
Primer 46
Primer 54
[Tabela 2]
Primer 39
Primer 47
Primer 55
Primer 40
Primer 48
Primer 56
Primer 41
Primer 49
Primer 57
[0485] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 3 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-etoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 15-7.
[Tabela 3]
Primer 58
Primer 61
Primer 64
Primer 59
Primer 62
Primer 65
Primer 60
Primer 63
[0486] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 4 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-izopropoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 17-7.
[Tabela 4]
Primer 66
Primer 68
Primer 70
Primer 67
Primer 69
[0487] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 5 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-fluoropropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 33-6.
[Tabela 5]
Primer 71
Primer 73
Primer 75
Primer 72
Primer 74
Primer 76
[0488] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 6 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 20-7.
[Tabela 6]
Primer 77
Primer 83
Primer 89
Primer 78
Primer 84
Primer 90
Primer 79
Primer 85
Primer 91
Primer 80
Primer 86
Primer 92
Primer 81
Primer 87
Primer 93
Primer 82
Primer 88
[0489] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabelama 7 i 8 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8.
[Tabela 7]
Primer 94
Primer 102
Primer 110
Primer 95
Primer 103
Primer 111
Primer 96
Primer 104
Primer 112
Primer 97
Primer 105
Primer 113
[Tabela 8]
Primer 98
Primer 106
Primer 114
Primer 99
Primer 107
Primer 115
Primer 100
Primer 108
Primer 101
Primer 109
[0490] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 9 su sintetizovana iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(3-metoksipropoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 32-8.
[Tabela 9]
Primer 116
Primer 121
Primer 126
Primer 117
Primer 122
Primer 127
Primer 118
Primer 123
Primer 128
Primer 119
Primer 124
Primer 129
Primer 120
Primer 125
Primer 130
[Primer 131]
6-metoksi-5-((2-(4-(1-(2-metoksiacetil)piperidin4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0491]
[0492] Trietilamin (33 µL, 0.237 mmol) i metoksiacetil hlorid (12.5 mg, 0.115 mmol) su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (13.4 mg, 0.027 mmol), i tetrahidrofurana (1.0 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a čvrsta materija je isprana sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (10.2 mg, 67%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.50-1.73 (2H, m), 1.87-1.98 (2H, m), 2.62-2.75 (1H, m), 2.76-2.89 (1H, m), 3.02-3.19 (4H, m), 3.45 (3H, s), 3.86 (3H, s), 3.97-4.03 (1H, m), 4.06-4.21 (2H, m), 4.71-4.81 (1H, m), 5.47-5.55 (1H, m), 6.55 (1H, d, J=3.7 Hz), 6.60 (1H, dd, J=5.8, 2.3 Hz), 7.23 (1H, d, J=3.8 Hz), 7.27-7.34 (3H, m), 7.81 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.03 (1H, s), 8.10 (1H, d, J=5.7 Hz), 8.49 (1H, brs).
[0493] U skladu sa Primerom 131, jedinjenje ilustrovano u Tabeli 10 je sintetizovano iz 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1.
[Tabela 10]
Primer 132
[Primer 133]
5-((2-(4-(1-(2-(dimetilamino)acetil)piperidin-4-il)benzamid)piridin4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0494]
[0495] N,N-dimetilformamid (0.5 mL) i N,N-diizopropiletilamin (24 µL, 0.137 mmol) su dodani u smešu 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1 (13.7 mg, 0.027 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (16.3 mg, 0.043 mmol) i N,N-dimetilglicina (5.5 mg, 0.053 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a čvrsta materija je isprana sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (13.7 mg, 85%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.49-1.74 (2H, m), 1.85-1.97 (2H, m), 2.32 (6H, s), 2.60-2.71 (1H, m), 2.76-2.87 (1H, m), 3.04-3.26 (6H, m), 3.87 (3H, s), 4.20-4.32 (1H, m), 4.71-4.83 (1H, m), 5.45-5.54 (1H, m), 6.54-6.57 (1H, m), 6.60 (1H, dd, J=5.8, 2.3 Hz), 7.24 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.28-7.34 (3H, m), 7.82 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.92 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.04 (1H, s), 8.10 (1H, d, J=5.7 Hz), 8.49 (1H, brs).
[0496] U skladu sa Primerom 133, jedinjenje ilustrovano u Tabeli 11 je sintetizovano iz 6-metoksi-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 1.
[Tabela 11]
Primer 134
[Primer 135]
6-etil-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0497]
[0498] 2-hidroksiacetaldehid (9.41 mg, 0.157 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (33.2 mg, 0.157 mmol) i sirćetna kiselina (8.97 µL, 0.157 mmol) su dodani u smešu 6-etil-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida (15.6 mg, 0.031 mmol) i tetrahidrofurana (1.0 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h i 50 min. U reakcionu smešu su dodani zasićenim vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0 – 9:1 – 17:3). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (13.2 mg, 78%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.24 (3H, t, J=7.5 Hz), 1.71-1.92 (5H, m), 2.16-2.26 (2H, m), 2.55-2.72 (5H, m), 3.01-3.13 (5H, m), 3.64 (2H, t, J=5.3 Hz), 5.46-5.53 (1H, m), 6.52 (1H, dd, J=5.9, 2.2 Hz), 6.56 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.24-7.29 (1H, m), 7.34 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.37 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.82 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.98 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.10 (1H, d, J=5.9 Hz), 8.12 (1H, s), 8.49 (1H, brs).
[0499] Početni materijal, 6-etil-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 135-1]
6-etilindolin
[0500]
[0501] Komercijalno dostupan 3-etilanilin (10.1 g, 83.3 mmol) je rastvoren u etanolu (40 mL), dodani su natrijum hidrogen karbonat (7.00 g, 83.3 mmol) i bromoacetaldehid dietil acetal (8.44 mL, 54.8 mmol), a smeša je grejana i mešana na 80° C tokom 80 h. U reakcionu smešu je dodana voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt A (11 g).
[0502] Deo nastalog sirovog produkta A (10 g) je rastvoren u trifluorosirćetnoj kiselini (45 mL), dodana je bezvodna trifluorosirćetna kiselina (45 mL) na 4° C, a smeša je mešana tokom 30 min. U reakcionu smešu je dodana trifluorosirćetna kiselina (60 mL), a smeša je mešana na 75° C tokom 2.5 h. Nakon koncentrovanja u vakuumu, vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt B (3 g).
[0503] Deo nastalog sirovog produkta B (1.5 g) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (50 mL), dodan je natrijum cijanoborohidrid (1.30 g, 20.7 mmol) na 0° C, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. U reakcionu smešu je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (560 mg, 15%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.20 (3H, t, J=7.6 Hz), 2.55 (2H, q, J=7.7 Hz), 2.99 (2H, t, J=8.4 Hz), 3.54 (2H, t, J=8.3 Hz), 3.72 (1H, brs), 6.43-6.61 (2H, m), 6.93-7.07 (1H, m).
[Proizvodni Primer 135-2]
6-etil-1H-indol-5-ol
[0504]
[0505] Kalijum nitrozodisulfonat (6.82 g, 25.4 mmol) je rastvoren u 0.1 M puferu kalijum fosfata (450 mL), dodan je 6-etilindolin rastvoren u acetonu (150 mL), opisan u Proizvodnom Primeru 135-1 (1.7 g, 11.5 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h. U reakcionu smešu je dodan 2 M natrijum hidroksid sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovan u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (560 mg, 30%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.29 (3H, t, J=7.5 Hz), 2.74 (2H, q, J=7.5 Hz), 4.50 (1H, s), 6.34-6.43 (1H, m), 6.99 (1H, s), 7.07-7.18 (2H, m), 7.95 (1H, brs).
[0506] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 12, koja prikazuje početni materijal iz Primera 135, 6-etil-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, su sintetizovana iz 6-etil-1H-indol-5-ol, opisanog u Proizvodnom Primeru 135-2, i iz N-(4-hloropiridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-5.
[Tabela 12]
Primer 136
Primer 137
Primer 138
Primer 139
[Primer 140]
5-((2-(4-((4-hidroksipiperidin-1-il)metil)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(metoksimetil)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0507]
[0508] Trietilamin (20 µL, 0.144 mmol) i komercijalno dostupan 4-(hlorometil)benzoil hlorid (16.6 mg, 0.088 mmol) su dodani u smešu 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(metoksimetil)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida (5.5 mg, 0.017 mmol) i tetrahidrofurana (450 µL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 70 min. U reakcionu smešu su dodani tetrahidrofuran, voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran kroz NH silika-gel, a produkt je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt.
[0509] Nastao sirovi produkt je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (500 µL), dodan je 4-hidroksipiperidin (16.5 mg, 0.163 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 12 h i 50 min. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran, pa je koncentrovan u vakuumu. Talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat) koje daje jedinjenje iz naslova (7.6 mg, 83%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.38-1.67 (2H, m), 1.83-1.95 (2H, m), 2.10-2.25 (2H, m), 2.68-2.79 (2H, m), 3.10 (3H, d, J=4.8 Hz), 3.37 (3H, s), 3.56 (2H, brs), 3.62-3.77 (2H, m), 4.52 (2H, s), 5.60-5.69 (1H, m), 6.55 (1H, dd, J=5.9, 2.2 Hz), 6.58 (1H, dd, J=3.7, 0.7 Hz), 7.30 (1H, s), 7.44 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.50 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.82 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.97 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.09 (1H, d, J=5.5 Hz), 8.21 (1H, s), 8.60 (1H, brs).
[0510] Početni materijal, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(metoksimetil)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 140-1]
Benzil 5-amino-2-(benziloksi)-4-bromobenzoat
[0511]
[0512] Benzil 5-amino-2-(benziloksi)benzoat (5 g, 15.0 mmol), koji je dobiven uz pomoć benzilovanja i redukovanja komercijalno dostupne 5-aminosalicilne kiseline primenom konvencionalnog postupka, je rastvoren u dihlorometanu (100 mL) i metanolu (50 mL), dodan je tetra-N-butilamonijum tribromid (7.25 g, 15.0 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 4 h. U reakcionu smešu su dodani vodeni rastvor natrijum hidrogen sulfita i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 4:1 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (3.58 g, 58%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.88 (2H, s), 5.04 (2H, s), 5.31 (2H, s), 7.15 (1H, s), 7.27-7.43 (11H, m).
[Proizvodni Primer 140-2]
Benzil 5-amino-2-(benziloksi)-4-((trimetilsilil)etinil)benzoat
[0513]
[0514] Benzil 5-amino-2-(benziloksi)-4-bromobenzoat, opisan u Proizvodnom Primeru 140-1 (3.58 g, 8.68 mmol), je rastvoren u tetrahidrofuranu (20 mL) i trietilaminu (40 mL), dodani su trimetilsililacetilen (2.5 mL, 17.7 mmol), bi(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (304 mg, 0.434 mmol) i bakar jodid(I) (165 mg, 0.868 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana na 70° C tokom 6 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 4:1 – 7:3). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.75 g, 74%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 0.25-0.35 (9H, m), 4.03 (2H, s), 5.03 (2H, s), 5.31 (2H, s), 7.00 (1H, s), 7.20 (1H, s), 7.28-7.47 (10H, m).
[Proizvodni Primer 140-3]
Benzil 5-(benziloksi)-1H-indol-6-karboksilat
[0515]
[0516] Benzil 5-amino-2-(benziloksi)-4-((trimetilsilil)etinil)benzoat, opisan u Proizvodnom Primeru 140-2 (2.75 g, 6.40 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (30 mL), dodan je bakar jodid(I) (610 mg, 3.20 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosfera azota, a smeša je grejana i mešana na 100° C tokom 3 h. U reakcionu smešu je dodan etil acetat, a nastala smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 17:3 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.83 g, 80%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.18 (2H, s), 5.37 (2H, s), 6.44-6.50 (1H, m), 7.22 (1H, s), 7.27-7.38 (7H, m), 7.40-7.46 (2H, m), 7.47-7.53 (2H, m), 7.99 (1H, d, J=0.7 Hz), 8.25 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 140-4]
(5-(benziloksi)-1H-indol-6-il)metanol
[0517]
[0518] Litijum aluminijum hidrid (239 mg, 6.30 mmol) je suspendovan u tetrahidrofuranu (22 mL), dodan je rastvor benzil 5-(benziloksi)-1H-indol-6-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 140-3 (1.5 g, 4.20 mmol), rastvoren u tetrahidrofuranu (11 mL) na 0° C u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. U reakcionu smešu su dodani voda (0.24 mL), 5 M vodeni rastvor natrijum hidroksida (0.24 mL) i voda (0.72 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Suspenzija je filtrirana kroz celit, pa je isprana sa tetrahidrofuranom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 1:1 – 1:3). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 2.95 (1H, t, J=6.4 Hz), 4.81 (2H, d, J=6.6 Hz), 5.17 (2H, s), 6.46-6.50 (1H, m), 7.16-7.21 (2H, m), 7.30-7.43 (4H, m), 7.44-7.50 (2H, m), 8.11 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 140-5]
tert-butil 5-(benziloksi)-6-(hidroksimetil)-1H-indol-1-karboksilat
[0519]
[0520] tert-butil dimetilhlorosilan (280 mg, 1.86 mmol) je dodan u rastvor (5-(benziloksi)-1H-indol-6-il)metanola, opisanog u Proizvodnom Primeru 140-4 (392 mg, 1.55 mmol), i imidazola (158 mg, 2.32 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3.8 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 70 min. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt A.
[0521] Dobiveni sirovi produkt A je rastvoren u dihlorometanu (6.0 mL), dodani su di-tert-butil dikarbonat (538 mg, 2.47 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (18.9 mg, 0.155 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 1.5 h. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt B.
[0522] Nastao sirovi produkt B je rastvoren u tetrahidrofuranu (6.0 mL), dodan je 1 M tetrabutilamonijum fluorid (3.0 mL, 3.00 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 6 h. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 1:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.66 (9H, s), 2.42 (1H, t, J=6.6 Hz), 4.82 (2H, d, J=6.6 Hz), 5.17 (2H, s), 6.49 (1H, dd, J=3.7, 0.7 Hz), 7.09 (1H, s), 7.30-7.49 (5H, m), 7.56 (1H, d, J=3.7 Hz), 8.09 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 140-6]
tert-butil 5-(benziloksi)-6-(metoksimetil)-1H-indol-1-karboksilat
[0523]
[0524] Metil jodid (290 µL, 4.66 mmol) i 50-72% uljani natrijum hidrid (122 mg) su dodani u rastvor tert-butil 5-(benziloksi)-6-(hidroksimetil)-1H-indol-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 140-5 (547 mg, 1.55 mmol), u N,N-dimetilformamidu (10 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 3 h i 15 min. Reakciona smeša je ugašena sa vodom, a tada je razređena sa etil acetatom sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je dva puta ispran sa vodom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 19:1 – 4:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (487 mg, 86%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.67(9H, s), 3.45 (3H, s), 4.65 (2H, s), 5.14 (2H, s), 6.47 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.06 (1H, s), 7.29-7.50 (5H, m), 7.55 (1H, d, J=3.7 Hz), 8.17 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 140-7]
6-(metoksimetil)-1H-indol-5-ol
[0525]
[0526] 28% natrijum metoksid (4.0 mL, 19.6 mmol) je dodan u rastvor tert-butil 5-(benziloksi)-6-(metoksimetil)-1H-indol-1-karboksilata, opisanog u Proizvodnom Primeru 140-6 (427 mg, 1.16 mmol), u metanolu (4.0 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 2.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu koje daje sirovi produkt (301 mg).
[0527] Nastao sirovi produkt (301 mg) je rastvoren u metanolu (11 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (12.0 mg) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 3 h u atmosferi vodonika. Smeša je razređena sa metanolom, a katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 2:3). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (156 mg, 76%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 3.43 (3H, s), 4.73 (2H, s), 6.43-6.47 (1H, m), 6.91 (1H, s), 7.10 (1H, s), 7.13 (1H, s), 7.17 (1H, t, J=2.7 Hz), 8.00 (1H, brs).
[0528] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 13, koja prikazuje početni materijal iz Primera 140, 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(metoksimetil)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, su sintetizovana iz 6-(metoksimetil)-1H-indol-5-ol, opisanog in Proizvodnom Primeru 140-7, i N-(4-hloropiridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-5.
[Tabela 13]
Primer 141
Primer 142
[Primer 143]
6-cijano-5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0529]
[0530] Natrijum triacetoksiborohidrid (10.7 mg, 0.05 mmol) i acetaldehid (5.6 mg, 0.127 mmol) su dodani u smešu 6-cijano-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida (3.9 mg, 7.89 mmol) i tetrahidrofurana (1.0 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 1 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; hloroform:metanol = 49:1) koje daje jedinjenje iz naslova (2.54 mg, 62%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.16 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.81-1.96 (4H, m), 2.06-2.20 (2H, m), 2.47-2.65 (3H, m), 3.01-3.08 (3H, m), 3.16 (2H, d, J=11.7 Hz), 5.82 (1H, brs), 6.59-6.65 (1H, m), 6.76 (1H, dd, J=5.7, 2.4 Hz), 7.33 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.41 (1H, s), 7.57 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.78 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.93 (1H, s), 8.20 (1H, d, J=5.5 Hz), 8.60-8.68 (2H, m).
[0531] Početni materijal, 6-cijano-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 143-1]
1-(benziloksi)-2-hloro-4-nitrobenzen
[0532]
[0533] Komercijalno dostupan 2-hloro-4-nitrofenol (10 g, 57.6 mmol) i benzil bromid (7.6 mL, 63.9 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (100 mL), dodan je kalijum karbonat (9.56 g, 69.1 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3.5 h. U reakcionu smešu je dodana voda, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Nastala čvrsta materija je filtrirana, isprana sa tert-butil metil etrom, pa je osušena preko agensa za sušenje koje daje kvantitativnu količinu jedinjenja iz naslova.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.28 (2H, s), 7.03 (1H, d, J=9.2 Hz), 7.33-7.48 (5H, m), 8.12 (1H, dd, J=9.2,2.9 Hz), 8.32 (1H, d, J=2.6 Hz).
[Proizvodni Primer 143-2]
2-(5-(benziloksi)-4-hloro-2-nitrofenil)acetonitril
[0534]
[0535] 1-(benziloksi)-2-hloro-4-nitrobenzen, opisan u Proizvodnom Primeru 143-1 (5 g, 19.0 mmol), i 4-hlorofenoksiacetonitril (3.50 g, 20.9 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (35 mL), a tada je dodan kalijum tert-butoksid (2 g, 17.8 mmol) na -30 do -40° C u atmosferi azota. Na istoj temperaturi je dodan kalijum tert-butoksid (2.32 g, 20.7 mmol). Smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 45 min, a tada je dodana 1 M hlorovodonična kiselina. Nakon izvođenja ekstrakcije sa etil acetatom, organski sloj je dva puta ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Nakon izvođenja filtracije, filtrat je koncentrovana u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:1 – 1:1). Frakcija sa smešom je koncentrovana u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 4:1 – 13:7). Nastala čvrsta materija je isprana sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (1.04 g, 18%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 4.24 (2H, s), 5.33 (2H, s), 7.29 (1H, s), 7.34-7.52 (5H, m), 8.34 (1H, s).
[Proizvodni Primer 143-3]
6-hloro-1H-indol-5-ol
[0536]
[0537] 2-(5-(benziloksi)4-hloro-2-nitrofenil)acetonitril, opisan u Proizvodnom Primeru 143-2 (1.04 g, 3.45 mmol), je suspendovan u etanolu (40 mL), dodan je 5% rodijum-ugljenik (355 mg) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 39 h i 20 min u atmosferi vodonika. U reakcionu smešu je dodan metanol, a nastala smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a nastala čvrsta materija je filtrirana i isprana sa etil acetatom. Filtrat je koncentrovan, talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt.
[0538] Nastao sirovi produkt je rastvoren u etanolu (20 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (367 mg) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 50 min u atmosferi vodonika. U reakcionu smešu je dodan metanol, a nastala smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a nastala čvrsta materija je filtrirana i isprana sa dihlorometanom. Filtrat je koncentrovan, talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 3:1 – 3:2), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (193 mg, 33%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.25 (1H, s), 6.41-6.47 (1H, m), 7.19 (1H, t, J=2.7 Hz), 7.24 (1H, s), 7.37 (1H, s), 8.02 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 143-4]
5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-1H-indol-6-karbonitril
[0539]
[0540] 6-hloro-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 143-3 (137 mg, 0.817 mmol), je rastvoren u dimetil sulfoksidu (1.0 mL), dodani su N-(4-hloropiridin-2-il)acetamid, opisan u Proizvodnom Primeru 1-5 (181 mg, 1.06 mmol), i kalijum tert-butoksid (110 mg, 0.981 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azot, a smeša je grejana i mešana na 150° C tokom 6.5 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat =1:1 – 1:3 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt A (96.6 mg).
[0541] Deo nastalog sirovog produkta A (57.4 mg) je rastvoren u metanolu (2 mL), dodan je 2 M rastvor natrijum hidroksida (2 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je grejana i mešana na 65° C tokom 2 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, a tada je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje sirovi produkt B (34.7 mg).
[0542] Deo nastalog sirovog produkta B (10.4 mg), bi(tri-t-butilfosfin)paladijum(0) (8.19 mg, 0.016 mmol) i cink cijanid (9.4 mg, 0.08 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilacetamidu (500 µL), a smeša je grejana i mešana u atmosferi azota i uz mikrotalasnu radijacija na 150° C tokom 1 h. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i voda sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen na silika-gelu (TLC; n-heptan:etil acetat = 1:3) koje daje jedinjenje iz naslova (5.0 mg, 14%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 4.57 (2H, brs), 5.97 (1H, d, J=2.2 Hz), 6.31 (1H, dd, J=6.2,2.2 Hz), 6.56-6.63 (1H, m), 7.41 (1H, s), 7.48 (1H, t, J=3.0 Hz), 7.77 (1H, s), 7.92 (1H, d, J=5.9 Hz), 8.98 (1H, brs).
[0543] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenje ilustrovano u Tabeli 14, koja prikazuje početni materijal iz Primera 143, 6-cijano-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovano iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-1H-indol-6-karbonitrila, opisanog u Proizvodnom Primeru 143-5.
[Tabela 14]
Primer 144
[Primer 145]
6-(dimetilamino)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid)piridin4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid
[0544]
[0545] 36.5% vodeni rastvor formaldehida (7.95 µL, 0.105 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (14 mg, 0.066 mmol) i sirćetna kiselina (3.02 µL, 0.053 mmol) su dodani u smešu 6-(dimetilamino)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamida (5.4 mg, 10.5 µmol) i tetrahidrofurana (300 µL) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 2 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u hloroformu, a produkt je prečišćen na NH silika-gelu (TLC; etil acetat). Nastala čvrsta materija je isprana sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (3.31 mg, 60%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.77-1.88 (4H, m), 2.01-2.11 (2H, m), 2.33 (3H, s), 2.48-2.60 (1H, m), 2.79 (6H, s), 2.95-3.03 (2H, m), 3.07 (3H, d, J=4.8 Hz), 5.48 (1H, brs), 6.47 (1H, dd, J=5.9, 2.6 Hz), 6.52 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.22-7.25 (2H, m), 7.33 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.78-7.84 (2H, m), 7.96 (1H, s), 7.99 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.06 (1H, d, J=5.9 Hz), 8.49 (1H, brs).
[0546] Početni materijal, 6-(dimetilamino)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 145-1]
4-(benziloksi)-3-nitroanilin
[0547]
[0548] Komercijalno dostupan 4-amino-2-nitrofenol (5 g, 32.4 mmol) i trifenilfosfin (10.2 g, 38.9 mmol) su rastvoreni u dihlorometanu (200 mL), dodan je benzil alkohol (4.0 mL, 38.7 mmol) na 0° C, dodan je rastvor diizopropil azodikarboksilata (7.87 g, 38.9 mmol) u dihlorometanu (50 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 21.5 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, talog je rastvoren u dihlorometanu, produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 2:3), a ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (7.26 g, 92%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 5.09 (2H, s), 5.25 (2H, s), 6.81 (1H, dd, J=9.0, 2.7 Hz), 7.01 (1H, d, J=2.9 Hz), 7.13 (1H, d, J=9.2 Hz), 7.25-7.44 (5H, m).
[Proizvodni Primer 145-2]
4-(benziloksi)-2-bromo-5-nitroanilin
[0549]
[0550] 4-(benziloksi)-3-nitroanilin, opisan u Proizvodnom Primeru 145-1 (2.9 g, 11.9 mmol), je rastvoren u dihlorometanu (80 mL) i metanolu (40 mL), dodan je tetra-N-butilamonijum tribromid (5.73 g, 11.9 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana tokom 50 min. Reakciona smeša je razređena sa vodeni rastvorom natrijum hidrogen sulfita i dihlorometanom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, pa je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata. Nakon izvođenja filtracije, filtrat je koncentrovan u vakuumu, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.59 g, 67%) sa čistoćom od 84%.
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 4.06 (2H, brs), 5.12 (2H, s), 7.25 (1H, s), 7.31 (1H, s), 7.32-7.47 (5H,m).
[Proizvodni Primer 145-3]
4-(benziloksi)-5-nitro-2-((trimetilsilil)etinil)anilin
[0551]
[0552] 4-(benziloksi)-2-bromo-5-nitroanilin, opisan u Proizvodnom Primeru 145-2 (2.59 g, 8.01 mmol), je rastvoren u tetrahidrofuranu (20 mL) i trietilaminu (40 mL), dodani su trimetilsililacetilen (2.26 mL, 16.0 mmol), bi(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (291 mg, 0.415 mmol) i bakar jodid(I) (164 mg, 0.861 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 60° C u atmosferi azota. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, a tada je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 9:1 – 3:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (2.19 g, 80%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 0.28 (9H, s), 4.19 (2H, brs), 5.11 (2H, s), 7.09 (1H, s), 7.21 (1H, s), 7.29-7.48 (5H, m).
[Proizvodni Primer 145-4]
5-(benziloksi)-6-nitro-1H-indol
[0553]
[0554] 4-(benziloksi)-5-nitro-2-(trimetilsilil)etinil)anilin, opisan u Proizvodnom Primeru 145-3 (2.19 g, 6.44 mmol), je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (20 mL), dodan je bakar jodid(I) (1.23 g, 6.44 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je grejana i mešana na 100° C. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa vodom i zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 4:1 – 7:3 – 3:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (1.23 g, 71%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 5.24 (2H, s), 6.49-6.56 (1H, m), 7.27-7.46 (5H, m), 7.49-7.57 (2H, m), 8.06 (1H, d, J=1.1 Hz), 8.39 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 145-5]
6-amino-1H-indol-5-ol
[0555]
[0556] 5-(benziloksi)-6-nitro-1H-indol, opisan u Proizvodnom Primeru 145-4 (400 mg, 1.49 mmol), je suspendovan u metanolu (10 mL) i tetrahidrofuranu (5 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (159 mg) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 50 min u atmosferi vodonika. U reakcionu smešu je dodan metanol, a nastala smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a nastala čvrsta materija je isprana sa dietil etrom i etil acetatom koje daje jedinjenje iz naslova (168 mg, 76%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 4.31 (2H, brs), 6.05 (1H, t, J=2.0 Hz), 6.59 (1H, s), 6.74 (1H, s), 6.88 (1H, t, J=2.8 Hz), 8.48 (1H, brs),10.25 (1H, brs).
[Proizvodni Primer 145-6]
6-(dimetilamino)-1H-indol-5-ol
[0557]
[0558] 6-amino-1H-indol-5-ol, opisan u Proizvodnom Primeru 145-5 (80 mg, 0.54 mmol), je rastvoren u tetrahidrofuranu (5.4 mL), dodani su 36.5% vodeni rastvor formaldehida (122 µL, 1.62 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (343 mg, 1.62 mmol) i sirćetna kiselina (93 µL, 1.62 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana tokom 2 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 7:3 – 1:4). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (62.0 mg, 65%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ(ppm): 2.70 (6H, s), 6.42 (1H, ddd, J=3.0, 2.1, 1.1 Hz), 7.11-7.15 (2H, m), 7.21 (1H, s), 7.94 (1H, brs).
[0559] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenja ilustrovana u Tabeli 15, koja prikazuje početni materijal iz Primera 145, 6-(dimetilamino)-N-metil-5-((2-(4-(piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid, su sintetizovana iz 6-(dimetilamino)-1H-indol-5-ol, opisanog u Proizvodnom Primeru 145-6, i iz N-(4-hloropiridin-2-il)acetamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 1-5.
[Tabela 15]
Primer 146
Primer 147
[Primer 148]
5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)-2-oksopiperidin-4-il)benzamid)piridin4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0560]
[0561] 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, opisan u Proizvodnom Primeru 20-7 (460 mg, 1.29 mmol), 4-(1-(2-((tert-butildimetilsilil)oksi)etil)-2-oksopiperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 148-4 (585 mg, 1.55 mmol), i 4-dimetilaminopiridin (315 mg, 2.58 mmol) su rastvoreni u 1,2-dimetoksietanu (6 mL), dodani su trietilamin (360 µL, 2.58 mmol) i 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (495 mg, 2.58 mmol), smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a tada i na 55° C tokom 2 h. U reakcionu smešu je dodana 2 M hlorovodonična kiselina (5 mL, 10.0 mmol), a smeša je mešana tokom 3 h. U reakcionu smešu je dodan etil acetat, produkt je neutralizovan sa 2 M rastvorom natrijum hidroksida, a tada je ekstrahovan sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 1:1 – 0:1; etil acetat:metanol= 24:1 – 9:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, čvrsta materija je dobivena primenom dihlorometana i tert-butil metil etra, a tada je filtrirana koje daje jedinjenje iz naslova (632 mg, 81%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.98-2.10 (1H, m), 2.11-2.22 (1H, m), 2.54 (1H, dd, J=17.6,11.0 Hz), 2.71-2.81 (1H, m), 3.06 (3H, d, J=4.4 Hz), 3.15-3.23 (2H, m), 3.26 (3H, s), 3.39-3.48 (1H, m), 3.49-3.61 (4H, m), 3.63-3.71 (1H, m), 3.84 (2H, d, J=4.8 Hz), 4.08-4.26 (2H, m), 5.60 (1H, brs), 6.55 (1H, d, J=3.3 Hz), 6.62 (1H, dd, J=5.7, 2.4 Hz), 7.26-7.35 (4H, m), 7.85 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.91 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.02 (1H, s), 8.09 (1H, d, J=5.9 Hz), 8.56 (1H, brs).
[0562] Početni materijal, 4-(1-(2-((tert-butildimetilsilil)oksi)etil)-2-oksopiperidin-4-il)benzojeva kiselina, je sintetizovan primenom sledećeg postupka.
[Proizvodni Primer 148-1]
tert-butil 4-(4-(benziloksi)karbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat
[0563]
[0564] 4-(1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il)benzojeva kiselina, opisana u Proizvodnom Primeru 1-12 (3.0 g, 9.82 mmol), je rastvorena u N,N-dimetilformamidu (15 mL), dodani su kalijum karbonat (1.63 g, 11.8 mmol) i benzil bromid (1.29 mL, 10.8 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. U reakcionu smešu su dodani voda i etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (3.83 g, 99%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.48 (9H, s), 1.58-1.70 (2H, m), 1.82 (2H, d, J=12.4 Hz), 2.56-2.96 (3H, m), 4.17-4.39 (2H, m), 5.36 (2H, s), 7.25-7.29 (3H, m), 7.31-7.50 (4H, m), 8.02 (2H, d, J=8.4 Hz).
[Proizvodni Primer 148-2]
Benzil 4-(2-oksopiperidin-4-il)benzoat
[0565]
[0566] tert-butil 4-(4-((benziloksi)karbonil)fenil)piperidin-1-karboksilat, opisan u Proizvodnom Primeru 148-1 (3.83 g, 9.68 mmol), je rastvoren u etil acetatu (90 mL), dodani su rutenijum oksid(IV) hidrat (44.0 mg, 0.29 mmol), rastvoren u vodi (270 mL), i natrijum perjodat (8.29 g, 38.7 mmol) na sobnoj temperaturi, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 h. U reakcionu smešu je dodan etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u dihlorometanu (30 mL), dodana je trifluorosirćetna kiselina (15 mL, 202 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Produkt je koncentrovan u vakuumu, a u talog je dodan zasićeni vodeni rastvor natrijum karbonata. Dodan je etil acetat sa ciljem razdvajanja slojeva, a organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a talog je ispran sa dietil etrom koje daje jedinjenje iz naslova (2.03 g, 68%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 1.88-2.05 (1H, m), 2.06-2.17 (1H, m), 2.41-2.58 (1H, m), 2.64-2.78 (1H, m), 3.10-3.26 (1H, m), 3.33-3.52 (2H, m), 5.37 (2H, s), 5.71-5.83 (1H, m), 7.27-7.50 (7H, m), 8.01-8.10 (2H, m).
[Proizvodni Primer 148-3]
Benzil 4-(1-(2-((tert-butildimetilsilil)oksi)etil)-2-oksopiperidin-4il)benzoat
[0567]
[0568] Benzil 4-(2-oksopiperidin-4-il)benzoat, opisan u Proizvodnom Primeru 148-2 (1.3 g, 4.20 mmol), je rastvoren u dimetil sulfoksidu (20 mL), dodan je 50-72% uljani natrijum hidrid (218 mg) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Naknadno je dodan tert-butil(2-jodoetoksi)dimetilsilan (1.92 g, 6.27 mmol) rastvoren u dimetil sulfoksidu (10 mL), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 h. U reakcionu smešu su dodani zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i etil acetat na 0° C sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, a spojeni organski sloj je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog magnezijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 10:1 – 1:2). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (920 mg, 47%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 0.06 (6H, d, J=1.8 Hz), 0.89 (9H, s), 1.87-2.03 (1H, m), 2.07-2.18 (1H, m), 2.50 (1H, dd, J=17.4,11.2 Hz), 2.63-2.81 (1H, m), 3.09-3.20 (1H, m), 3.46-3.59 (4H, m), 3.82 (2H, t, J=5.3 Hz), 5.36 (2H, s), 7.27-7.50 (7H, m), 8.01-8.08 (2H, m).
[Proizvodni Primer 148-4]
4-(1-(2-((tert-butildimetilsilil)oksi)etil)-2-oksopiperidin-4-il)benzojeva kiselina
[0569]
[0570] Benzil 4-(1-(2-((tert-butildimetilsilil)oksi)etil)-2-oksopiperidin-4-il)benzoat, opisan u Proizvodnom Primeru 148-3 (920 mg, 1.97 mmol), je rastvoren u metanolu (20 mL), dodan je 10% paladijum-ugljenik (sadržaj vode: 50%) (209 mg), a smeša je mešana u atmosferi vodonika tokom 3 h. Unutrašnjost reakcionog sistema je zamenjena sa azotom, katalizator je odstranjen filtriranjem kroz celit, a produkt je ispran sa metanolom. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (n-heptan:etil acetat = 2:1 – 0:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu koje daje jedinjenje iz naslova (592 mg, 80%).
1H-NMR spektar (CDCl3) δ (ppm): 0.07 (6H, d, J=1.5 Hz), 0.90 (9H, s), 1.96-2.02 (1H, m), 2.10-2.16 (1H, m), 2.52 (1H, dd, J=17.6,11.0 Hz), 2.72-2.80 (1H, m), 3.10-3.24 (1H, m), 3.47-3.60 (4H, m), 3.83 (2H, t, J=5.5 Hz), 7.31 (2H, d, J=8.1 Hz), 8.06 (2H, d, J=8.4 Hz).
[0571] U skladu sa Primerima 1 do 33, jedinjenje ilustrovano u Tabeli 16 je sintetizovano iz 5-((2-aminopiridin-4-il)oksi)-6-(2-etoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Proizvodnom Primeru 24-8.
[Tabela 16]
Primer 149
[Primer 150]
5-((2-(((4-(cis-1-(2-hidroksietil)-1-oksidpiperidin-4-il)fenil)karbonil)amino)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0572]
[0573] 3-hloroperoksibenzojeva kiselina (229 mg, 0.864 mmol) (čistoća: 65%) je dodana u smešu 5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 22 (508 mg, 0.864 mmol), i dihlorometana (25 mL) u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. U reakcionu smešu su dodani etil acetat i 10% vodeni rastvor natrijum sulfita sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je zasićen sa natrijum hloridom, ekstrahovan primenom mešanog rastvarača etil acetata, tetrahidrofurana i metanola. Spojeni organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, nastao talog je rastvoren u metanolu i dihlorometanu, a produkt je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (hloroform:metanol = 49:1 – 4:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a nastala čvrsta materija je rastvorena u etil acetatu, tetrahidrofuranu i metanolu. Nastala čvrsta materija je filtrirana i isprana sa etil acetatom koje daje filtrat. Filtrat je koncentrovan u vakuumu (168 mg), suspendovan u tetrahidrofuranu, etil acetatu i izopropanolu, a produkt je mešan na 60° C tokom 20 min. Produkt je ohlađen do sobne temperature, a nastala čvrsta materija je filtrirana i isprana sa etil acetatom koje daje filtrat. Filtrat je koncentrovan u vakuumu (62.4 mg), a deo pomenutog filtrata (10.4 mg) je prečišćen ODS kolonskom hromatografijom (0.5% trifluorosirćetna kiselina/voda:acetonitril = 37:13) sa ciljem da se odvoje cis-forma (retenciono vreme: 73-75 min) i trans-forma (retenciono vreme: 65-67 min). U produkte su dodani puferi, a nakon ekstrakcije sa butanolom, rastvarači su koncentrovani u vakuumu, nakon čega su produkti prečišćeni sa ODS kolonskom hromatografijom (metanol:voda = 1:9, acetonitril:voda = 1:9, a nakon toga eluirani sa acetonitrilom i metanolom) koje daje cis-formu jedinjenja iz naslova (1.1 mg) kao visoko-polarnu komponentu i nisko-polarnu komponentu iz Primera 151.
cis-forma
1H-NMR spektar (600MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1.68 (2H, d, J=13.0 Hz), 2.32-2.63 (2H, m), 2.72-2.81 (1H, m), 2.85 (3H, d, J=4.2 Hz), 3.06-3.56 (11H, m), 3.86-3.97 (2H, m), 4.03-4.14 (2H, m), 6.63 (1H, d, J=3.5 Hz), 6.67 (1H, dd, J=5.7, 2.4 Hz), 7.37 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.45 (1H, s), 7.64-7.72 (1H, m), 7.75-7.82 (1H, m), 7.93 (2H, d, J=8.2 Hz), 8.08 (1H, s), 8.11-8.24 (2H,m), 10.65 (1H, s).
[Primer 151]
5-((2-(((4-(trans-1-(2-hidroksietil)-1-oksidpiperidin-4-il)fenil)karbonil)amino)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0574]
[0575] Trans-forma (1.3 mg) je dobivena kao nisko-polarna komponenta iz Primera 150.
trans-forma
1H-NMR spektar (600MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 1.85-2.03 (4H, m), 2.85 (3H, d, J=4.2 Hz), 2.90-3.02 (1H, m), 3.05-3.63 (11H, m), 3.72-3.91 (2H, m), 3.99-4.18 (2H, m), 6.63 (1H, d, J=3.5 Hz), 6.68 (1H, dd, J=5.8, 2.1 Hz), 7.34-7.53 (3H, m), 7.68 (1H, d, J=2.1 Hz), 7.78 (1H, d, J=3.5 Hz), 7.92 (2H, d, J=8.2 Hz), 8.08 (1H, s), 8.12-8.25 (2H, m), 10.65 (1H, s).
[Primer 152]
6-(2-hidroksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin4-il)benzamid)piridin4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid
[0576]
[0577] Boron tribromid (2.55 mL, 2.55 mmol) je dodan u smešu 5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamida, opisanog u Primeru 22 (500 mg, 0.851 mmol), i dihlorometana (5 mL) na 0° C u atmosferi azota, a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do 0° C, a tada su dodani metanol i zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata sa ciljem razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom, organski slojevi su spojeni, a produkt je ispran sa zasićenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, pa je filtriran. Rastvarač je isparen, a nastao talog je prečišćen kolonskom hromatografijom na NH silika-gelu (etil acetat:metanol = 1:0-5:1). Ciljna frakcija je koncentrovana u vakuumu, a nastala čvrsta materija je isprana sa dihlorometanom koje daje jedinjenje iz naslova (97 mg, 20%).
1H-NMR spektar (DMSO-d6) δ (ppm): 1.58-1.79 (4H, m), 2.00-2.11 (2H, m), 2.41 (2H, t, J=6.4 Hz), 2.52-2.59 (1H, m), 2.85 (3H, d, J=4.4 Hz), 2.97 (2H, d, J=11.7 Hz), 3.46-3.58 (4H, m), 3.96-4.01 (2H, m), 4.37 (1H, t, J=5.3 Hz), 4.72 (1H, t, J=5.5 Hz), 6.63 (1H, d, J=3.5 Hz), 6.66 (1H, m), 7.33 (2H, m), 7.43 (1H, s), 7.70 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.78 (1H, d, J=3.7 Hz), 7.85-7.96 (2H, m), 8.10 (1H, s), 8.13-8.26 (2H, m), 10.65 (1H, brs).
[0578] Maseni spektari (ESI-MS (m/z)) jedinjenja iz Primera 34 do 130, Primera 132, Primera 134, Primera 136 do 139, Primera 141, Primera 142, Primera 144, Primera 146, Primera 147 i Primer 149 su ilustrovani u Tabelama 17 i 18.
[Tabela 17]
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer 34
536[M+H]+
Primer 70
558[M+H]+
Primer 106
574[M+H]+
Primer 35
536[M+H]+
Primer 71
562[M+H]+
Primer 107
590[M+H]+
Primer 36
549[M+H]+
Primer 72
562[M+H]+
Primer 108
601[M+H]+
Primer 37
549[M+H]+
Primer 73
576[M+H]+
Primer 109
630[M+H]+
Primer 38
536[M+H]+
Primer 74
604[M+H]+
Primer 110
600[M+H]+
Primer 39
572[M+H]+
Primer 75
604[M+H]+
Primer 111
616[M+H]+
Primer 40
542[M+H]+
Primer 76
560[M+H]+
Primer 112
616[M+H]+
Primer 41
574[M+H]+
Primer 77
587[M+H]+
Primer 113
586[M+H]+
Primer 42
574[M+H]+
Primer 78
573[M+H]+
Primer 114
572[M+H]+
Primer 43
544[M+H]+
Primer 79
588[M+H]+
Primer 115
588[M+H]+
Primer 44
548[M+H]+
Primer 80
574[M+H]+
Primer 116
588[M+H]+
Primer 45
548[M+H]+
Primer 81
574[M+H]+
Primer 117
588[M+H]+
Primer 46
532[M+H]+
Primer 82
580[M+H]+
Primer 118
588[M+H]+
Primer 47
514[M+H]+
Primer 83
580[M+H]+
Primer 119
588[M+H]+
Primer 48
544[M+H]+
Primer 84
566[M+H]+
Primer 120
574[M+H]+
Primer 49
500[M+H]+
Primer 85
566[M+H]+
Primer 121
574[M+H]+
Primer 50
530[M+H]+
Primer 86
580[M+H]+
Primer 122
588[M+H]+
Primer 51
530[M+H]+
Primer 87
530[M+H]+
Primer 123
572[M+H]+
Primer 52
516[M+H]+
Primer 88
558[M+H]+
Primer 124
558[M+H]+
Primer 53
516[M+H]+
Primer 89
544[M+H]+
Primer 125
616[M+H]+
Primer 54
558[M+H]+
Primer 90
602[M+H]+
Primer 126
616[M+H]+
Primer 55
573[M+H]+
Primer 91
602[M+H]+
Primer 127
600[M+H]+
Primer 56
544[M+H]+
Primer 92
572[M+H]+
Primer 128
602[M+H]+
Primer 57
514[M+H]+
Primer 93
574[M+H]+
Primer 129
586[M+H]+
Primer 58
586[M+H]+
Primer 94
601[M+H]+
Primer 130
572[M+H]+
Primer 59
556[M+H]+
Primer 95
602[M+H]+
Primer 132
597[M+H]+
Primer 60
572[M+H]+
Primer 96
588[M+H]+
Primer 134
558[M+H]+
Primer 61
572[M+H]+
Primer 97
588[M+H]+
Primer 136
528[M+H]+
Primer 62
583[M+H]+
Primer 98
594[M+H]+
Primer 137
498[M+H]+
Primer 63
558[M+H]+
Primer 99
594[M+H]+
Primer 138
512[M+H]+
Primer 64
528[M+H]+
Primer 100
580[M+H]+
Primer 139
526[M+H]+
Primer 65
544[M+H]+
Primer 101
594[M+H]+
Primer 141
542[M+H]+
Primer 66
586[M+H]+
Primer 102
544[M+H]+
Primer 142
558[M+H]+
[Tabela 18]
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer Br.
ESI-MS (m/z)
Primer 67
572[M+H]+
Primer 103
572[M+H]+
Primer 144
525[M+H]+
Primer 68
556[M+H]+
Primer 104
588[M+H]+
Primer 146
541[M+H]+
Primer 69
542[M+H]+
Primer 105
574[M+H]+
Primer 147
557[M+H]+
Primer 149
587[M+H]+
[Primeri sa farmakološkim ogledima]
1. Ogled sa FGFR1 kinazom
[0579] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance protiv tirozin-kinaze (FGFR1 belančevina).
[0580] U svaku rupicu bele pločice sa ravnim dnom i 96-rupica (Sumitomo Bakelite Co., Ltd., MS-8496W) je dodano 10 µl rastvora sa FGFR1 belančevinom (Karna Biosciences, Inc., 08-133), razređen do 1 µg/mL uz pomoć oglednog-pufera (20 mM HEPES-NaOH, 0.01% Triton X-100, 2 mM DTT, i 5 mM MgCl2), 10 µL rastvora oglednog-pufera koji je sadržavao CSK-tide supstrat (Ana Spec Inc., 63843) u konačnoj koncentraciji od 1000 nM, i ATP (Promega Corporation, V9102) u konačnoj koncentraciji od 58.3 µM, i 5 µl testirane supstance razređene sa oglednim-puferom, a reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Za potrebe merenja kinazne aktivnosti je korišćen test ADP-Glo (TM) Kinase Assay (Promega Corporation, V9102). Nakon toga, u svaku rupcu iz pločice je dodano 25 µL ADP-Glo reagensa, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min, delovanje kinaze je zaustavljeno, a preostao ATP je potrošen. Nakon toga je dodan reagens za detektovanje kinaze, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min sa ciljem da se omogući konverzija ADP u ATP, reakcija kuplovanja luciferaza/luciferin i luminiscentna reakcija uz pomoć ATP-a. Količina luminiscencije u svakoj rupici je izmerena uz pomoć aparata Envision (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.) koji evaluira aktivnost encima. Pod pretpostavkom da je količina luminiscencije, koja se dobija kada se dodaje belančevina kinaze bez dodavanja testirane supstance, jednaka 100% i da količina luminiscencije, koja se dobija kada se ne dodaje testirana supstanca niti belančevina kinaze, jednaka 0% utvrđen je omer količine luminiscencije u prisutnosti testirane supstance. Na bazi pomenutoga omera količine luminiscencije izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira delovanje kinaze za 50% (tj., vrednost IC50), a na taj način izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabelama 19, 20 i 21.
<Podaci inhibicije kinaze FGFR1 u testu bez ćelija>
[0581]
[Tabela 19]
Primer Br.
FGFR1 (IC50 (nM))
Primer Br.
FGFR1 (IC50 (nM)
Primer 1
9.8
Primer 66
10.3
Primer 2
10.1
Primer 67
11.2
Primer 3
7.9
Primer 68
11.7
Primer 4
7.2
Primer 69
12.4
Primer 5
12.0
Primer 70
32.0
Primer 6
11.0
Primer 71
18.4
Primer 7
11.6
Primer 72
22.5
Primer 8
13.2
Primer 73
24.2
Primer 9
30.0
Primer 74
8.5
Primer 10
37.7
Primer 75
8.0
Primer 11
18.0
Primer 76
10.4
Primer 12
19.9
Primer 77
19.1
Primer 13
31.2
Primer 78
20.2
Primer 14
10.9
Primer 79
8.5
Primer 15
12.5
Primer 80
8.5
Primer 16
11.5
Primer 81
7.0
Primer 17
14.6
Primer 82
6.4
Primer 18
12.7
Primer 83
10.2
Primer 19
13.5
Primer 84
8.6
Primer 20
5.6
Primer 85
6.7
Primer 21
5.7
Primer 86
6.5
Primer 22
5.8
Primer 87
7.1
Primer 23
5.3
Primer 88
6.7
Primer 24
4.4
Primer 89
5.7
Primer 25
5.2
Primer 90
7.0
Primer 26
6.3
Primer 91
5.0
Primer 27
8.0
Primer 92
5.4
Primer 28
11.2
Primer 93
14.9
Primer 29
10.0
Primer 94
10.6
Primer 30
14.5
Primer 95
5.7
Primer 31
6.5
Primer 96
11.0
Primer 32
10.9
Primer 97
7.2
Primer 33
8.5
Primer 98
6.6
[Tabela 20]
Primer Br.
FGFR1 (IC50 (nM))
Primer BR.
FGFR1 (IC50 (nM))
Primer 34
12.3
Primer 99
5.1
Primer 35
10.8
Primer 100
5.4
Primer 36
11.2
Primer 101
5.6
Primer 37
10.9
Primer 102
6.5
Primer 38
10.5
Primer 103
5.0
Primer 39
7.9
Primer 104
12.1
Primer 40
8.9
Primer 105
8.6
Primer 41
10.6
Primer 106
8.9
Primer 42
13.0
Primer 107
16.1
Primer 43
12.5
Primer 108
11.5
Primer 44
22.8
Primer 109
3.9
Primer 45
26.5
Primer 110
5.4
Primer 46
24.1
Primer 111
4.2
Primer 47
12.8
Primer 112
3.4
Primer 48
12.1
Primer 113
4.2
Primer 49
11.7
Primer 114
3.7
Primer 50
32.3
Primer 115
10.3
Primer 51
18.3
Primer 116
22.3
Primer 52
23.7
Primer 117
10.7
Primer 53
23.4
Primer 118
7.0
Primer 54
5.5
Primer 119
11.5
Primer 55
34.1
Primer 120
16.6
Primer 56
24.2
Primer 121
16.1
Primer 57
10.0
Primer 122
17.9
Primer 58
9.8
Primer 123
8.9
Primer 59
8.7
Primer 124
8.5
Primer 60
9.6
Primer 125
5.2
Primer 61
8.9
Primer 126
6.4
Primer 62
18.8
Primer 127
7.1
Primer 63
10.0
Primer 128
6.1
Primer 64
11.8
Primer 129
7.0
Primer 65
33.8
Primer 130
6.2
[Tabela 21]
Primer Br.
FGFR1 (IC50(nM))
Primer BR.
FGFR1 (IC50(nM))
Primer 131
18.1
Primer 142
12.1
Primer 132
44.5
Primer 143
19.2
Primer 133
9.0
Primer 144
47.7
Primer 134
12.0
Primer 145
45.6
Primer 135
12.3
Primer 146
42.9
Primer 136
34.2
Primer 147
48.3
Primer 137
17.5
Primer 148
13.2
Primer 138
10.9
Primer 149
20.5
Primer 139
15.7
Primer 150
10.7
Primer 141
49.1
Primer 151
8.0
Primer 152
11.0
2. Ogled sa FGFR2 kinazom
[0582] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance protiv tirozin kinaze FGFR2.
[0583] U svaku rupicu bele pločice sa ravnim dnom i 96 rupica (Sumitomo Bakelite Co., Ltd., MS-8496W) je dodano 10 µl rastvora FGFR2 belančevine (Karna Biosciences, Inc., 08-134) razređene do 1 µg/mL sa oglednim puferom (20 mM HEPES-NaOH, 0.01% Triton X-100,2 mM DTT, i 5 mM MgCl2), 10 µL rastvora oglednog pufera koji je sadržavao CSK-tide supstrat (Ana Spec Inc., 63843) u finalnoj koncentraciji od 1000 nM i ATP (Promega Corporation, V9102) u finalnoj koncentraciji od 35 µM, i 5 µl testirane supstance razređene sa oglednim puferom, a reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Za potrebe merenja aktivnosti kinaze je korišćen test ADP-Glo (TM) Kinase Assay (Promega Corporation, V9102). Nakon toga je dodano 25 µL ADP-Glo reagensa u svaku rupicu na ploči, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min, kinazna reakcija je zaustavljena, a preostao ATP je potrošen. Dodan je reagens za detektovanje kinaze, a reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min sa ciljem da se uzrokuje konverzija ADP u ATP, reakcija kuplovanja luciferaza/luciferin i luminiscentna reakcija uz pomoć ATP-a. Količina luminiscencije u svakoj rupici je izmerena uz pomoć aparata Envision (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.) koji evaluira aktivnost encima. Pod pretpostavkom da je količina luminiscencije, koja se dobija kada se koristi kinazna belančevina bez testirane supstance, jednaka 100%, a da je istovremeno količina luminiscencije, koja se dobija kada se ne koristi testirana supstanca niti kinazna belančevina, jednaka 0%, određen je omer količine luminiscencije u prisutnosti testirane supstance. Na bazi pomenutog omera količine luminiscencije izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira aktivnost kinaze za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 22.
<Podaci za inhibiranje aktivnosti kinaze FGFR2 u testu bez ćelija>
[0584]
[Tabela 22]
Primer Br.
FGFR2 (IC50 (nM))
Primer 2
6.4
Primer 21
5.1
Primer 22
4.5
3. Ogled sa FGFR3 kinazom
[0585] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance protiv tirozin kinaze FGFR3.
[0586] U svaku rupicu bele pločice sa ravnim dnom i 96 rupica (Sumitomo Bakelite Co., Ltd., MS-8496W) je dodano 10 µl rastvora FGFR3 belančevine (Karna Biosciences, Inc., 08-135) razređene do 1 µg/mL sa oglednim puferom (20 mM HEPES-NaOH, 0.01% Triton X-100, 2 mM DTT, i 5 mM MgCl2), 10 µL rastvora oglednog pufera koji je sadržavao CSK-tide supstrat (Ana Spec Inc., 63843) u finalnoj koncentraciji od 1000 nM i ATP (Promega Corporation, V9102) u finalnoj koncentraciji od 16.7 µM, i 5 µl testirane supstance razređene sa oglednim puferom, a reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Za potrebe merenja aktivnosti kinaze je korišćen test ADP-Glo (TM) Kinase Assay (Promega Corporation, V9102). Nakon toga je dodano 25 µL ADP-Glo reagensa u svaku rupicu na pločici, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min, aktivnost kinaze je zaustavljena, a preostao ATP je potrošen. Dodan je reagens za detektovanje kinaza, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min sa ciljem da se uzrokuje konverzija ADP u ATP, reakcija kuplovanja luciferaza/luciferin i luminiscentna reakcija uz pomoć ATP-a. Količina luminiscencije u svakoj rupici je izmerena uz pomoć aparata Envision (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.) za evaluiraje aktivnosti encima. Pod pretpostavkom da je količina luminiscencije, koja se dobija kada se koristi belančevina kinaze bez testirane supstance, jednaka 100%, a količina luminiscencije, koja se dobija kada se ne koristi testirana supstanca niti belančevine kinaze, jednaka 0% određen je omer količine luminiscencije u prisutnosti testirane supstance. Na bazi pomenutog omera količine luminiscencije izračunata je koncentracija testirane supstance koja je neophodna za inhibiranje aktivnosti kinaze za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstanca su prikazane u Tabeli 23.
<Podaci za inhibiranje aktivnosti kinaze FGFR3 u testu bez ćelija>
[0587]
[Tabela 23]
Primer Br.
FGFR3 (IC50 (nM))
Primer 2
7.9
Primer 21
6.0
Primer 22
5.4
4. Ogled sa FGFR4 kinazom
[0588] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance protiv tirozin kinaze FGFR4.
[0589] U svaku rupicu bele pločice sa ravnim dnom i 96 rupica (Sumitomo Bakelite Co., Ltd., MS-8496W) je dodano 10 µl rastvora FGFR4 belančevine (Karna Biosciences, Inc., 08-136) razređene do 1 µg/mL sa oglednim puferom (20 mM HEPES-NaOH, 0.01% Triton X-100, 2 mM DTT, 5 mM MgCl2 i 2 mM MnCl2), 10 µL rastvora oglednog pufera koji je sadržavao CSK-tide supstrat (Ana Spec Inc., 63843) u finalnoj koncentraciji od 1000 nM i ATP (Promega Corporation, V9102) u finalnoj koncentraciji od 75 µM, i 5 µl testirane supstance razređene sa oglednim puferom, a reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Za potrebe merenja aktivnosti kinaze je korišćen test ADP-Glo (TM) Kinase Assay (Promega Corporation, V9102). Nakon toga je dodano 25 µL ADP-Glo reagensa u svaku rupicu na pločici, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min, aktivnost kinaze je zaustavljena, a preostao ATP je potrošen. Dodan je reagens za detektovanje kinaze, reakcija je provedena na sobnoj temperaturi tokom 40 min sa ciljem da se uzrokuje konverzija ADP u ATP, reakcija kuplovanja luciferaza/luciferin i luminiscentna reakcija uz pomoć ATP-a. Količina luminiscencije u svakoj rupici je izmerena uz pomoć aparata Envision (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.) za evaluiranje aktivnosti encima. Pod pretpostavkom da je količina luminiscencije, koja se dobija kada se doda belančevina kinaze bez dodavanja testirane supstance, jednaka 100%, a količina luminiscencije, koja se dobija kada se ne dodaje testirana supstanca niti belančevina kinaze, jednaka 0% određuje se omer količine luminiscencije u prisutnosti testirane supstance. Na bazi pomenutog omera količine luminiscencije izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna za inhibiranje aktivnosti kinaze za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti za odgovarajuće testirane supstance su prikazane u Tabeli 24.
<Podaci za inhibiranje aktivnosti kinaze FGFR4 u ogledu bez ćelija>
[0590]
[Tabela 24]
Primer Br.
FGFR4 (IC50 (nM))
Primer 2
651.1
Primer 21
683.3
Primer 22
644.5
5. Ogled inhibiranja rasta SNU-16 ćelija
[0591] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim ćelijama raka želuca sa amplifikacijom FGFR2 gena.
[0592] Poznato je da humana ćelijska linija raka želuca SNU-16 (ATCC Broj CRL-5974) sadrži amplifikaciju FGFR2 gena (Cancer Res. 2008. 68: 2340-2348). SNU-16 ćelije su održavane u kulturi u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS i penicilin/streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije sa SNU-16 ćelijama u koncentraciji od 1x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, a kultura je uzgajana preko noći u inkubatoru na 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem da se uzrokuje kolorna reakcija. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja je dobivena kada je dodana testirana supstanca, jednaka 100%, a apsorbancija, koja je dobivena kada rupica nije sadržavala ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Određena je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira ćelijski rast za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti za odgovarajuće testirane supstance su prikazane u Tabelama 25, 26 i 27.
<Podaci za evaluaciju inhibiranja rasta SNU-16 ćelija>
[0593]
[Tabela 25]
Primer Br.
SNU-16 (IC50 (nM))
Primer Br.
SNU-16 (IC50 (nM))
Primer 1
7.5
Primer 66
16.1
Primer 2
6.2
Primer 67
17.6
Primer 3
7.7
Primer 68
20.0
Primer 4
6.9
Primer 69
17.5
Primer 5
13.4
Primer 70
22.4
Primer 6
9.1
Primer 71
17.0
Primer 7
9.6
Primer 72
17.1
Primer 8
15.4
Primer 73
17.4
Primer 9
24.0
Primer 74
8.4
Primer 10
28.7
Primer 75
7.3
Primer 11
14.5
Primer 76
7.5
Primer 12
13.0
Primer 77
9.6
Primer 13
10.9
Primer 78
6.2
Primer 14
9.5
Primer 79
4.6
Primer 15
9.7
Primer 80
3.8
Primer 16
12.2
Primer 81
3.8
Primer 17
17.7
Primer 82
6.2
Primer 18
13.9
Primer 83
10.2
Primer 19
14.1
Primer 84
6.2
Primer 20
7.5
Primer 85
6.9
Primer 21
4.2
Primer 86
6.2
Primer 22
3.0
Primer 87
3.9
Primer 23
6.5
Primer 88
6.9
Primer 24
6.2
Primer 89
6.5
Primer 25
3.8
Primer 90
6.1
Primer 26
5.6
Primer 91
5.3
Primer 27
6.2
Primer 92
5.8
Primer 28
7.3
Primer 93
17.6
Primer 29
8.8
Primer 94
7.9
Primer 30
14.5
Primer 95
5.1
Primer 31
4.7
Primer 96
6.4
Primer 32
6.8
Primer 97
3.6
Primer 33
8.1
Primer 98
6.3
[Tabela 26]
Primer Br.
SNU-16 (IC50 (nM))
Primer Br.
SNU-16 (IC50 (nM))
Primer 34
14.0
Primer 99
6.3
Primer 35
9.8
Primer 100
5.8
Primer 36
11.0
Primer 101
6.8
Primer 37
9.4
Primer 102
3.7
Primer 38
8.0
Primer 103
5.4
Primer 39
7.8
Primer 104
13.7
Primer 40
8.3
Primer 105
7.8
Primer 41
9.3
Primer 106
9.0
Primer 42
14.1
Primer 107
22.0
Primer 43
11.8
Primer 108
14.7
Primer 44
16.3
Primer 109
6.7
Primer 45
15.5
Primer 110
5.8
Primer 46
17.4
Primer 111
5.1
Primer 47
13.1
Primer 112
3.8
Primer 48
11.7
Primer 113
5.7
Primer 49
9.6
Primer 114
4.7
Primer 50
16.6
Primer 115
11.4
Primer 51
12.5
Primer 116
22.6
Primer 52
14.4
Primer 117
16.6
Primer 53
14.5
Primer 118
8.6
Primer 54
6.4
Primer 119
11.9
Primer 55
20.8
Primer 120
16.7
Primer 56
15.0
Primer 121
14.9
Primer 57
7.6
Primer 122
11.3
Primer 58
10.0
Primer 123
8.5
Primer 59
14.5
Primer 124
8.9
Primer 60
14.7
Primer 125
7.2
Primer 61
10.7
Primer 126
6.6
Primer 62
27.4
Primer 127
7.1
Primer 63
9.6
Primer 128
6.4
Primer 64
10.3
Primer 129
7.7
Primer 65
23.6
Primer 130
6.8
[Tabela 27]
Primer Br.
SNU-16 (IC50(nM))
Primer Br.
SNU-16 (IC50(nM))
Primer 131
17.9
Primer 142
9.6
Primer 132
48.6
Primer 143
17.1
Primer 133
7.1
Primer 144
45.6
Primer 134
16.2
Primer 145
34.3
Primer 135
17.9
Primer 146
42.0
Primer 136
44.8
Primer 147
37.6
Primer 137
18.7
Primer 148
8.6
Primer 138
17.2
Primer 149
18.4
Primer 139
18.2
Primer 150
33.0
Primer 141
24.8
Primer 151
48.0
Primer 152
5.9
6. Ogled inhibiranja rasta HUVEC ćelija
[0594] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance na rast ćelija vaskularnog endotela indukovanih sa VEGF.
[0595] Normalne ćelije endotela pupčane vene (HUVEC) su izolovane poznatim postupkom (Shin Seikagaku Jikken Koza "Saibo Baiyo Gijutsu" (New Lectures on Biochemical Experiments "Cell Culture Techniques" (na japanskom), str. 197-202). Ćelije su uzgajane do stepena konfluentnog rasta u medijumu EGM-2 (LONZA Inc., CC-3162) u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu na pločici sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 100 µl suspenzije sa HUVEC ćelijama u koncentraciji od 1.5x104 ćelija/mL u medijumu EGM-2 koji je sadržavao 2% fetalni kravlji serum (FBS: Cell Culture Technologies, CC3008-504), a kultura je uzgajana preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu su dodani testirana supstanca razređena sa medijumom EGM-2 koji je sadržavao 2% FBS, i 50 µL VEGF (R & D Sistems, 293-VE-010) do finalne koncentracije od 10 ng/mL u medijumu EGM-2 koji je sadržavao 2% FBS, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 20 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 3 do 4 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem izazivanja kolorne reakcije. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja je dobivena bez dodavanja testirane supstance, ali uz dodavanje VEGF, jednaka 100%, a da je apsorbancija, koja je dobivena kada nisu dodane ni testirana supstanca niti VEGF, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Na bazi omera apsorbancije izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira rast HUVEC ćelija za 50% u prisutnosti VEGF (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti za odgovarajuće testirane supstance su prikazane u Tabelama 28, 29 i 30.
<Podaci evaluacije inhibiranja rasta HUVEC ćelija>
[0596]
[Tabela 28]
Primer Br.
HUVEC (IC50 (nM))
Primer Br.
HUVEC (IC50 (nM))
Primer 1
98.7
Primer 66
203.4
Primer 2
130.5
Primer 67
223.3
Primer 3
95.0
Primer 68
255.6
Primer 4
93.0
Primer 69
214.2
Primer 5
386.7
Primer 70
609.9
Primer 6
180.1
Primer 71
647.8
Primer 7
205.3
Primer 72
681.4
Primer 8
139.9
Primer 73
702.8
Primer 9
645.8
Primer 74
198.0
Primer 10
350.2
Primer 75
211.1
Primer 11
131.5
Primer 76
247.5
Primer 12
141.2
Primer 77
1029.4
Primer 13
396.5
Primer 78
835.4
Primer 14
169.0
Primer 79
88.5
Primer 15
168.3
Primer 80
181.5
Primer 16
165.3
Primer 81
126.2
Primer 17
292.8
Primer 82
263.7
Primer 18
179.7
Primer 83
309.5
Primer 19
151.1
Primer 84
255.3
Primer 20
459.3
Primer 85
235.3
Primer 21
225.0
Primer 86
250.3
Primer 22
189.5
Primer 87
259.4
Primer 23
300.4
Primer 88
357.8
Primer 24
237.2
Primer 89
416.2
Primer 25
191.0
Primer 90
203.1
Primer 26
258.1
Primer 91
191.1
Primer 27
217.8
Primer 92
182.2
Primer 28
663.7
Primer 93
886.9
Primer 29
600.1
Primer 94
606.8
Primer 30
565.5
Primer 95
116.4
Primer 31
186.3
Primer 96
179.2
Primer 32
203.3
Primer 97
158.7
Primer 33
273.6
Primer 98
228.3
[Tabela 29]
Primer Br.
HUVEC (IC50 (nM))
Primer Br.
HUVEC (IC50 (nM))
Primer 34
194.8
Primer 99
224.4
Primer 35
139.1
Primer 100
207.1
Primer 36
135.7
Primer 101
181.6
Primer 37
79.1
Primer 102
226.4
Primer 38
137.3
Primer 103
295.5
Primer 39
124.1
Primer 104
599.6
Primer 40
162.3
Primer 105
687.3
Primer 41
178.8
Primer 106
726.4
Primer 42
183.9
Primer 107
906.7
Primer 43
165.6
Primer 108
362.8
Primer 44
392.4
Primer 109
186.5
Primer 45
379.4
Primer 110
233.7
Primer 46
402.3
Primer 111
195.0
Primer 47
174.0
Primer 112
201.7
Primer 48
77.8
Primer 113
195.9
Primer 49
162.8
Primer 114
201.4
Primer 50
393.6
Primer 115
615.6
Primer 51
410.1
Primer 116
520.1
Primer 52
388.3
Primer 117
534.0
Primer 53
400.6
Primer 118
183.4
Primer 54
86.7
Primer 119
241.7
Primer 55
201.4
Primer 120
457.1
Primer 56
96.8
Primer 121
517.9
Primer 57
126.9
Primer 122
494.3
Primer 58
251.6
Primer 123
156.1
Primer 59
252.7
Primer 124
196.7
Primer 60
178.1
Primer 125
202.8
Primer 61
181.9
Primer 126
197.1
Primer 62
222.9
Primer 127
226.2
Primer 63
170.4
Primer 128
216.7
Primer 64
175.4
Primer 129
248.5
Primer 65
575.0
Primer 130
253.8
[Tabela 30]
Primer Br.
HUVEC (IC50(nM))
Primer Br.
HUVEC (IC50(nM))
Primer 131
162.7
Primer 142
96.4
Primer 132
221.8
Primer 143
336.3
Primer 133
121.5
Primer 144
855.5
Primer 134
165.8
Primer 145
719.8
Primer 135
82.3
Primer 146
657.1
Primer 136
190.3
Primer 147
828.7
Primer 137
114.2
Primer 148
203.4
Primer 138
81.7
Primer 149
882.9
Primer 139
115.8
Primer 150
1201.7
Primer 141
383.2
Primer 151
1438.2
Primer 152
126.2
7. Ogled inhibiranja rasta NCI-H1581
[0597] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim ćelijama raka pluća koje sadrže amplifikaciju FGFR1 gena.
[0598] Poznato je da humana ćelijska linija raka pluća NCI-H1581 (ATCC Broj CRL-5878) sadrži amplifikaciju FGFR1 gena (PLoS One, 2011; 6: e20351, Sci Transl Med 2010; 2: 62ra93). NCI-H1581 ćelije su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS i penicilin/streptomicin. U svaku rupicu na pločici sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije NCI-H1581 ćelija u koncentraciji od 1.3x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, a kultura je uzgajana preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µl testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubator sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 2 do 3 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem uzrokovanja kolorne reakcije. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja se dobija kada nije dodana testirana supstanca, jednaka 100%, a da je apsorbancija, koja se dobija u rupicama bez ćelija, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Izračunata je koncentracija svake testirane supstance koja je potrebna za inhibiranje ćelijskog rasta za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 31.
<Podaci za evaluaciju inhibiranja rasta NCI-H1581 ćelija>
[0599]
[Tabela 31]
NCI-H1581 (IC50 (nM))
Primer 2
8.5
Primer 3
7.6
Primer 4
9.4
Primer 9
18.1
Primer 16
18.4
Primer 21
4.5
Primer 22
4.4
8. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu sa supkutanim implantom SNU-16 ćelija
[0600] Humane ćelije raka želuca (linija SNU-16), koje su bile uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS i penicilin/streptomicin, su pripremljene u koncentraciji od 1x108 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020), a kultura je pomešana sa MATRIGEL (BD Biosciences, Kat# 354234) u omeru 1:1 kako bi se priredila ćelijska suspenzija sa koncentracijom od 5x107 ćelija/ml. Ova suspenzija je implantirana (u volumenu od 100 µL) u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starosti 6 do 7 sedmica. Sedam dana nakon implantacije, u svakom mišu je izmeren najkraći i najduži dijametar nastalih tumora uz pomoć elektronskog digitalnog šestara (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se odredi volumen tumora prema sledećoj formuli:
[0601] Na bazi volumena tumora izmerenih prvoga dana administiranja, miševi su grupirani tako da su prosečni volumeni tumora bili približno podjednaki među grupama. Svaka testirana supstanca je rastvoren u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem da se pripremi rastvor sa koncentracijom od 10-puta, a tako pripremljeni rastvor je uskladišten smrzavanjem. Neposredno pre administriranja je dodan 5% rastvor glikoze čime je pripremljen rastvor za finalno administiranje (u kojem je omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosio 3.5:6.5:90). Svaki evaluirani primerak je administriran oralno u dozi od 20 mL/kg jednom dnevno tokom 11 dana, a kontrolnoj grupi je oralno administriran rastvarač u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama do kojih je svaka sadržavala 5 miševa.
[0602] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testiranih supstancija izračunat je omer težine izmerene tokom zadnjeg dana u odnosu na težinu izmerenu tokom prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Kada je omer RBW u grupama za administriranje testirane supstancije/RBW u kontrolnoj grupi bio jednak 0.9 ili veći, odgovarajuća grupa sa administriranje testiranih supstancija je označena kao bezbedna grupa za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstancija koja je označena kao bezbedna za administriranje je određen omer volumena tumora, koji je dobiven nakon administriranja testirane supstancije, u odnosu na volumen tumora, koji je dobiven u kontrolnoj grupi tokom poslednjeg dana (T/C) (%), a tako dobiveni omeri za odgovarajuće testirane supstance su prikazane u Tabeli 32.
<Podaci za evaluaciju anti-tumorskog efekta u modelu koji ima supkutani implant SNU-16 ćelija>
[0603]
[Tabela 32]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C (%)
Primer 2
6.25
51
12.5
28
25
18
Primer 3
6.25
45
12.5
27
25
19
Primer 4
6.25
40
12.5
27
25
15
Primer 9
25
55
50
39
100
30
Primer 16
6.25
39
12.5
21
25
15
Primer 21
6.25
49
12.5
26
25
16
50
7
Primer 22
6.25
49
12.5
26
25
17
50
18
Primer 25
6.25
31
12.5
23
25
14
50
12
Primer 26
6.25
45
12.5
36
25
22
50
27
9. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu koji ima supkutani implant NCI-H1581 ćelija
[0604] Humane ćelije raka pluća iz linije NCI-H1581 (ATCC broj CRL-5878), koje su uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, su pripremljene kao ćelijska suspenzija u koncentraciji od 1x108 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020). Nadalje, nastala suspenzija je pomešana sa MATRIGEL u omeru 1:1 sa ciljem da se pripremi ćelijska suspenzija u koncentraciji od 5x107 ćelija/mL. Ova ćelijska suspenzija je implantirana u volumenu od 100 µL u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starog od 6 do 7 sedmica. 10 do 11 dana nakon implantacije su izmereni najkraći i najduži dijametar tako dobivenog tumora u svakom miš uz pomoć elektronskog digitalnog šestara (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se izračuna volumen tumora prema sledećoj formuli:
[0605] Na bazi volumena tumora izmerenih tokom prvog dana administracije, goli miševi su bili grupirani tako da su prosečni tumorski volumeni bili približno podjednaki među grupama. Svaka testirana supstanca je rastvorena u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem da se pripremi rastvor za skladištenje u koncentraciji od 10-puta evaluiranog primerka, a tako pripremljeni rastvor je uskladišten smrzavanjem do upotrebe. Neposredno pre administriranja, uskladišteni rastvor je razređen sa 5% rastvorom glikoze čime se dobija primerak za evaluaciju (u kojem omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosi 3.5:6.5:90). U grupi za administriranje testirane supstance, primerak za evaluaciju je oralno administriran u dozi od 0.4 mL na 20 g telesne težine jednom na dan tokom 11 dana, a u kontrolnoj grupi je oralno administriran rastvarač u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama od kojih je svaka sadržavala 5 miševa.
[0606] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testiranih supstancija izračunat je omer težine izmerene zadnjeg dana u odnosu na težinu izmerenu prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Ako je omer RBW u grupi za administriranje testirane supstance/RBW u kontrolnoj grupi bio jednak 0.9 ili veći, odgovarajuća grupa za administriranje testirane supstance je označena kao bezbedna za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstance koja je označena kao bezbedna za administriranje je izračunat omer tumorskog volumena, dobivenog nakon administriranja testirane supstance, u odnosu na tumorski volumen kontrolne grupe, dobiven tokom zadnjeg dana (T/C) (%), a tako izračunati omeri odgovarajućih testiranih supstancija su prikazani u Tabeli 33.
<Podaci za evaluaciju anti-tumorskog efekta u modelu koji ima supkutano implantirane NCI-H1581 ćelije>
[0607]
[Tabela 33]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C (%)
Primer 2
6.25
36
12.5
19
25
11
Primer 16
6.25
50
12.5
25
25
15
Primer 21
6.25
36
12.5
18
25
10
50
6
Primer 22
6.25
46
12.5
21
25
13
50
8
10. Ogled inhibicije rasta AN3CA ćelija
[0608] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim tumorskim ćelijama endometrijuma iz linije koja eksprimira N549K-varijantu FGFR2 gena.
[0609] Poznato je da humane tumorske ćelije endometrijuma iz linije AN3CA (ATCC Broj HTB-111) eksprimiraju N549K-varijantu FGFR2 gena (Proc Natl Acad Sci USA, 2008, 105:8713-8717). AN3CA ćelije su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije AN3CA ćelija u koncentraciji od 1.3x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem da se izazove kolorna reakcija. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja je dobivena u rupicama koje sadrže ćelije, ali ne sadrže testiranu supstancu, jednaka 100%, a da je apsorbancija, koja je dobivena u rupicama koje ne sadrže ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije dobivene u prisutnosti testirane supstancije. Izračunata je koncentracija testirane supstancije koja je potrebna da se inhibira ćelijski rast za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti su prikazane u Tabeli 34.
<Podaci evaluacije inhibiranja rasta AN3CA ćelija>
[0610]
[Tabela 34]
Primer Br.
AN3CA (IC50(nM))
Primer 2
25.1
Primer 21
24.6
Primer 22
11.0
11. Ogled inhibiranja rasta MFE296 ćelija
[0611] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim tumorskima ćelijama endometrijuma iz linije koja eksprimira N549K-varijantu FGFR2 gena.
[0612] Poznato je da humane tumorske ćelije endometrijuma iz linije MFE296 (DSMZ Broj ACC-419) eksprimiraju N549K-varijantu FGFR2 gena (Proc Natl Acad Sci USA, 2008, 105:8713-8717). MFE296 ćelije su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije MFE296 ćelija u koncentraciji od 1.3x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dan u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem uzrokovanja kolorne reakcije. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja se dobija u rupicama koje sadrže ćelije, ali ne sadrže testiranu supstanciju, jednaka 100%, a da je apsorbancija, koja se dobija u rupicama koje ne sadrže ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstancije. Izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira rast ćelija za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 35.
<Podaci za evaluaciju inhibicije rasta MFE296 ćelija>
[0613]
[Tabela 35]
Primer Br.
MFE296 (IC50(nM))
Primer 2
10.4
Primer 21
8.8
Primer 22
12.2
12. Ogled inhibiranja rasta MFE280 ćelija
[0614] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim tumorskim ćelijama endometrijuma iz linije koja eksprimira S252W-varijantu FGFR2 gena.
[0615] Poznato je da humane tumorske ćelije endometrijuma iz linije MFE280 (DMSZ Broj ACC-410) eksprimiraju S252W-varijantu FGFR2 gena (Proc Natl Acad Sci USA, 2008, 105:8713-8717). MFE280 ćelije su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije MFE280 ćelija u koncentraciji od 3.3x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem uzrokovanja kolorne reakcije. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, koja se dobija u rupicama koje sadrže ćelije, ali ne sadrže testiranu supstancu, jednaka 100%, a da je apsorbancija, koja se dobija u rupicama koje ne sadrže ćelije, jednaka 0%, može da se izračuna omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna da se inhibira ćelijski rast za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako izračunate IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 36.
<Podaci za evaluaciju inhibicije rasta MFE280 ćelija>
[0616]
[Tabela 36]
Primer Br.
MFE280 (IC50(nM))
Primer 2
44.1
Primer 21
27.6
Primer 22
17.1
13. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu sa supkutanim implantom AN3CA ćelija
[0617] Humane tumorske ćelije endometrijuma iz linije AN3CA (ATCC Broj HTB-111), koje su uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, su pripremljene kao ćelijska suspenzija u koncentraciji od 1x108 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020). Nastala ćelijska suspenzija je pomešana sa MATRIGEL (BD Biosciences, Kat# 354234) u omeru od 1:1 sa ciljem da se pripremi ćelijska suspenzija u koncentraciji od 5x107 ćelija/ml. Ova ćelijska suspenzija je implantirana u volumenu od 100 µL u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starog 7 sedmica. Jedanaest dana nakon implantacije su izmereni najkraći i najduži dijametar tako dobivenih tumora uz pomoć elektronskog digitalnog šestra (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se izračuna volumen tumora u skladu sa sledećom formulom:
[0618] Na bazi volumena tumora izmerenih tokom prvog dana administriranja, goli miševi su se grupirali tako da su prosečni tumorski volumeni bili približno podjednaki među grupama. Svaka testirana supstanca je rastvorena u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem da se pripremi rastvor za skladištenje u koncentraciji od 10-puta od primerka za evaluaciju, a tako pripremljeni rastvor je uskladišten smrzavanjem do upotrebe. Neposredno pre administriranja, rastvor za skladištenje je razređen sa 5% rastvorom glikoze koje daje primerak za evaluaciju (u kojem je omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosio 3.5:6.5:90). U grupi za administriranje testiranih supstancija, primerak za evaluaciju je oralno administriran u dozi od 0.4 mL na 20 g težine jednom na dan tokom 14 dana, a u kontrolnoj grupi je administriran rastvarač oralno u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama od kojih se svaka sastojala od 5 miševa.
[0619] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testiranih supstancija izračunat je omer težine izmerene zadnjeg dana u odnosu na težinu izmerenu tokom prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Ako je omer RBW grupe za administriranje testirane supstance/RBW kontrolne grupe bio 0.9 ili veći, odgovarajuća grupa za administriranje testirane supstance je označena kao bezbedna za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstance koje je označena kao bezbedna za administriranje je izračunat omer tumorskog volumena, dobivenog nakon administriranja testirane supstance, u odnosu na tumorski volumen kontrolne grupe, dobiven zadnjeg dana (T/C) (%), a tako izračunati omeri odgovarajućih testiranih supstancija su prikazani u Tabeli 37.
<Podaci za evaluaciju anti-tumorskog efekta u mišjem modelu sa supkutanim implantom AN3CA ćelija>
[0620]
[Tabela 37]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C(%)
Primer 22
6.25
29
12.5
11
25
4
50
2
14. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu sa supkutanim implantom MFE296 ćelija
[0621] Humane tumorske ćelije endometrijuma iz linije MFE296 (DSMZ Broj ACC-419), koje su bile uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, su pripremljene kao ćelijska suspenzija u koncentraciji od 1x108 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020). Nastala ćelijska suspenzija je pomešana sa MATRIGEL (BD Biosciences, Kat# 354234) u omeru 1:1 sa ciljem da se pripremi ćelijska suspenzija u koncentraciji od 5x107 ćelija/ml. Ova ćelijska suspenzija je implantirana u volumenu od 100 µL u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starog 7 sedmica. Dvanaest dana nakon implantacije su izmereni najkraći i najduži dijametar tako dobivenih tumora u svakom mišu uz pomoć elektronskog digitalnog šestara (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se izračuna volumen tumora u skladu sa sledećom formulom:
[0622] Na bazi tumorskih volumena određenih tokom prvog dana administriranja, goli miševi su grupirani tako da su prosečni tumorski volumeni približno podjednaki između grupa. Svaka testirana supstanca je rastvorena u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem pripremanja rastvora za skladištenje u koncentraciji od 10-puta od primerka za evaluaciju, a tako pripremljeni rastvori su smrznuti za daljnu upotrebu. Neposredno pre administriranja, rastvor za skladištenje je bio razređen sa 5% rastvorom glikoze čime je dobiven primerak za evaluaciju (u kojem je omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosio 3.5:6.5:90). U grupi za administraciju testirane supstance, primerak za evaluaciju je oralno administriran u dozi od 0.4 mL na 20 g težine jednom na dan tokom 14 dana, a u kontrolnoj grupi je oralno administriran rastvarač u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama od kojih je svaka sadržavala 5 miševa.
[0623] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testirane supstance izračunat je omer težina izmerenih tokom zadnjeg dana u odnosu na težine izmerene tokom prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Ako je omer RBW iz grupe za administriranje testirane supstance/RBW kontrolne grupe bio jednak 0.9 ili veći, odgovarajuća grupa za administriranje testirane supstance je označena kao bezbedna za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstance koja je bila označena kao bezbedna za administriranje određen je omer tumorskog volumena, dobivenog nakon administriranja testirane supstance, u odnosu na tumorski volumen kontrolne grupe, koji je dobiven tokom zadnjeg dana (T/C) (%), a tako izračunatu omeri odgovarajućih testiranih supstancija su prikazani u Tabeli 38.
<Podaci za evaluaciju anti-tumorskog efekta u mišjem modelu sa supkutanim implantom MFE296 ćelija>
[0624]
[Tabela 38]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C(%)
Primer 22
6.25
91
12.5
85
25
60
50
54
15. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu sa supkutanim implantom MFE280 ćelija
[0625] Humane tumorske ćelija endometrijuma iz linije MFE280 (DMSZ Broj ACC-410), koje su bile uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, su pripremljene kao ćelijska suspenzija u koncentraciji od 4.7x107 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020). Nastala ćelijska suspenzija je pomešana sa MATRIGEL (BD Biosciences, Kat# 354234) u omeru 1:1 sa ciljem da se pripremi ćelijska suspenzija u koncentraciji od 2.4x107 ćelija/ml. Ova ćelijska suspenzija je implantirana u volumenu od 100 µL u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starog 7 sedmica. Tridesetpet dana nakon implantacije su određeni najkraći i najduži dijametar tako dobivenih tumora u svakom mišu uz pomoć elektronskog digitalnog šestara (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se odredi volumen tumora u skladu sa sledećom formulom:
[0626] Na bazi tumorskih volumena određenih tokom prvog dana administriranja, goli miševi su grupirani tako da su prosečni tumorski volumeni bili približno podjednaki između grupa. Svaka testira supstanca je rastvoren u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem da se pripremi rastvor za skladištenje u koncentraciji od 10-puta od primerka za evaluaciju, a tako pripremljeni rastvori su smrznuti za daljnju upotrebnu. Neposredno pre administriranja, rastvor za skladištenje je razređen sa 5% rastvorom glikoze čime se dobija primerak za evaluaciju (u kojem omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosi 3.5:6.5:90). U grupi za administraciju testirane supstance, primerak za evaluaciju je oralno administriran u dozi od 0.4 mL na 20 g težine jednom na dan tokom 14 dana, a u kontrolnoj grupi oralno je administriran rastvarač u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama od kojih je svaka sadržavala 5 miševa.
[0627] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testirane supstance izračunat je omer težine, izmerene tokom zadnjeg dana, u odnosu na težinu izmerenu tokom prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Ako je omer RBW u grupi za administriranje testirane supstance/RBW kontrolne grupe bio jednak 0.9 ili veći, odgovarajuća grupa za administriranje testirane supstance je označena kao bezbedna za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstance koja je označena kao bezbedna za administriranje izračunat je omer tumorskog volumena, dobiven nakon administriranja testirane supstance, u odnosu na tumorski volumen kontrolne grupe dobiven tokom prvog dana (T/C) (%), a takvo izračunati omeri odgovarajućih testiranih supstancija su prikazani u Tabeli 39.
<Podaci za evaluaciju anti-tumorskog efekta u mišjem modelu sa supkutanim implantom MFE280 ćelija>
[0628]
[Tabela 39]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C(%)
Primer 22
6.25
72
12.5
57
25
31
50
11
16. Ogled inhibicije rasta RT112/84 ćelija
[0629] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim ćelijama raka bešike iz linije koja eksprimira FGFR3-TACC3 fuzionu-belančevinu.
[0630] Humane ćelije raka bešike iz linije RT112/84 (ECACC Broj EC85061106-F0) su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije ćelija RT112/84 u koncentraciji od 1.3x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL rastvora testirane supstance razređenog sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Nakon toga u svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem uzrokovanja kolorne reakcije. Za merenje apsorbancije (na 450) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, dobivena u rupici sa ćelijskom suspenzijom, ali bez testirane supstance, jednaka 100%, a da je apsorbancija, dobivena u rupici koja nije sadržavala ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Određena je koncentracija testirane supstance koja je potrebna za inhibiranje ćelijskog rasta za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako određene IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 40.
<Podaci za evaluaciju inhibiranja rasta RT112/84 ćelija>
[0631]
[Tabela 40]
Primer Br.
RT 112/84 (IC50(nM))
Primer 2
42.3
Primer 21
19.4
Primer 22
19.0
17. Ogled inhibicije rasta SW780
[0632] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim tumorskim ćelijama bešike iz linije koja eksprimira FGFR3-BAIAP2L1 fuzionu belančevinu.
[0633] Poznato je da humane tumorske ćelije bešika iz linije SW780 (ATCC Broj CRL-2169) eksprimiraju FGFR3-BAIAP2L1 fuzionu belančevinu (Hum Mol Genet. 2013, 22:795-803). SW780 ćelije su uzgajane u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije SW780 ćelija u koncentraciji od 2.6x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 1% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 1% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubator sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano deset µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem da se uzrokuje kolorna reakcija. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, dobivena u rupici koja je sadržavala ćelije, ali ne i testiranu supstancu, jednaka 100%, a da je apsorbancija, dobivena u rupici koja nije sadržavala ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna za inhibiranje ćelijskog rasta za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako dobivene IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 41.
<Podaci za evaluaciju inhibiranja rasta SW780 ćelija>
[0634]
[Tabela 41]
Primer Br.
SW780 (IC50(nM))
Primer 22
20.3
18. Ogled inhibicije rasta RT4 ćelija
[0635] U ovom ogledu je merena inhibitorna aktivnost testirane supstance u humanim tumorskim ćelijama bešike iz linije koja eksprimira FGFR3-TACC3 fuzionu belančevinu.
[0636] Poznato je da humane tumorske ćelije bešike iz linije RT4 (ATCC Broj HTB-2) eksprimiraju FGFR3-TACC3 fuzionu belančevinu (Hum Mol Genet. 2013, 22:795-803). RT4 ćelije su uzgajane u inkubator sa 5% CO2 (37° C) u medijumu RPMI-1640 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 187-02021) koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 168-23191). U svaku rupicu iz pločice sa 96 rupica (Becton, Dickinson and Company, 35-3075) je dodano 150 µL suspenzije RT4 ćelija u koncentraciji od 2.6x104 ćelija/mL u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a ćelije su uzgajane preko noći u inkubatoru sa 5% CO2 (37° C). Sledećeg dana u svaku rupicu je dodano 50 µL testirane supstance razređene sa medijumom RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, a kultura je uzgajana tokom 3 dana u inkubator sa 5% CO2 (37° C). U svaku rupicu je dodano 10 µL Cell Counting Kit-8 (Dojindo Laboratories, CK04), a kultura je uzgajana tokom 1 do 2 h u inkubator sa 5% CO2 (37° C) sa ciljem da se uzrokuje kolorna reakcija. Za merenje apsorbancije (na 450 nm) je korišćen aparat ENVISION (TM) (PerkinElmer Co., Ltd.). Pod pretpostavkom da je apsorbancija, dobivena u rupici koja sadrži ćelije, ali ne i testiranu supstancu, jednaka 100%, a da je apsorbancija, dobivena u rupicu koja je sadrži ćelije, jednaka 0%, može da se odredi omer apsorbancije u prisutnosti testirane supstance. Izračunata je koncentracija testirane supstance koja je potrebna za inhibiranje ćelijskog rasta za 50% (tj., IC50 vrednost), a tako dobivene IC50 vrednosti odgovarajućih testiranih supstancija su prikazane u Tabeli 42.
<Podaci za evaluacija inhibiranja rasta RT4 ćelija>
[0637]
[Tabela 42]
Primer Br.
RT4 (IC50(nM))
Primer 22
16.4
19. Anti-tumorski efekt u mišjem modelu sa supkutanim implantom RT112/84 ćelija
[0638] Humane tumorske ćelije iz linije RT112/84 (ECACC Broj EC85061106-F0), koje su uzgajane u medijumu RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS, penicilin i streptomicin, su pripremljene kao suspenzija ćelija u koncentraciji od 1x108 ćelija/mL uz pomoć Hanks-ovog balansiranog rastvora soli (GIBCO #24020). Nastala suspenzija je pomešana sa MATRIGEL (BD Biosciences, Kat# 354234) u omeru 1:1 sa ciljem da se pripremi ćelijska suspenzija u koncentraciji od 5x107 ćelija/ml. Ova ćelijska suspenzija je implantirana u volumenu od 100 µL u supkutani deo desnog boka svakog golog miša (BALB/cAJcl-nu/nu, ženka, Clea Japan Inc.) starog 7 sedmica. Deset dana nakon implantacije su izmereni najkraći i najduži dijametar tako dobivenog tumora u svakom mišu uz pomoć elektronskog digitalnog šestara (Digimatic TM caliper, Mitutoyo Corporation) sa ciljem da se izračuna volumen tumora u skladu sa sledećom formulom:
[0639] Na bazi volumena tumora koji su dobiveni tokom prvog dana administriranja, goli miševi su grupirani tako da su prosečni tumorski volumeni bili približno podjednaki između grupa. Svaka testirana supstanca je rastvorena u DMSO, dodan je Tween 80 sa ciljem da se pripremi rastvor za skladištenje u koncentraciji od 10-puta od primerka za evaluaciju, a tako pripremljeni rastvor je uskladišten smrzavanjem do upotrebe. Neposredno pre administriranja, rastvor za skladištenje je razređen sa 5% rastvorom glikoze čime se dobija primerak za evaluaciju (u kojem je omer u % između DMSO, Tween 80 i 5% rastvora glikoze iznosio 3.5:6.5:90). U grupi za administriranje testirane supstance, primerak za evaluaciju je oralno administriran u dozi od 0.4 mL na 20 g težine jednom na dan tokom 14 dana, a u kontrolnoj grupi oralno je administriran rastvarač u istim uslovima. Nasumično, eksperiment je proveden u grupama od kojih je svaka sadržavala 5 miševa.
[0640] Uzimajući u obzir svaku kontrolnu grupu i grupe za administriranje testirane supstance izračunat je omer težina izmerenih zadnjeg dana u odnosu na težine izmerene tokom prvog dana (relativna telesna težina: RBW). Ako je RBW grupa za administriranje testirane supstance/RBW kontrolne grupe iznosio 0.9 ili više, odgovarajuća grupa za administriranje testiranih supstanca je označena kao bezbedna za administriranje. U grupi za administriranje testirane supstance koja je bila označena kao bezbedna za administriranje je izračunat omer tumorskog volumena, dobivenog nakon administriranja testirane supstance, u odnosu na tumorski volumen kontrolne grupe koji je dobiven zadnjeg dana (T/C) (%), a tako dobiveni omeri odgovarajućih testiranih supstancija su prikazani u Tabeli 43.
<Podaci za evaluacija anti-tumorskog efekta u mišjem modelu sa supkutanim implantom RT112/84 ćelija>
[0641]
[Tabela 43]
Primer Br.
Doza (mg/kg)
T/C(%)
Primer 22
25
62
50
33

Claims (16)

1.Jedinjenje, naznačeno time, što je predstavljeno sa sledećom formulom (IA) ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u kojoj n predstavlja 0 do 2; A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu; G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-; E predstavlja C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot; R1 predstavlja cijano grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C2-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili sa jednom hidroksilnom grupom, C1-6 alkoksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma; R2 predstavlja atom vodonika, halogen atom, hidroksilnu grupu, C2-6 acilnu grupu opciono supstituisanu sa jednom supstituentom izabranim iz grupe S opisane ispod, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot; R3 predstavlja atom vodonika, okso grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma; R4 predstavlja C1-6 alkilnu grupu, pod uslovom da kada E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 je prisutan na atomu azota iz azetidinskog prstena, pomenuti R2 ili R3 nisu atomi vodonika; a grupa S predstavlja grupu koja sadrži hidroksilnu grupu, mono-C1-6 alkilamino grupu, di-C1-6 alkilamino grupu, C1-6 alkoksi grupu i C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot.
2.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1, naznačeno time, što je predstavljeno sa sledećom formulom (IB): u kojoj n predstavlja 0 do 2; A predstavlja C6-10 arilensku grupu ili C3-5 heteroarilensku grupu; G predstavlja jednostruku vezu, atom kiseonika ili -CH2-; E predstavlja C3-5 ne-aromatski heterocikal koji sadrži azot; R1 predstavlja C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma ili sa jednom hidroksilnom grupom, ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma; R2 predstavlja atom vodonika, halogeni atom, hidroksilnu grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, hidroksi C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C3-5 ne-aromatsku heterocikličnu grupu koja sadrži azot; a R3 predstavlja atom vodonika, okso grupu, C1-6 alkilnu grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, ili C1-6 alkoksi grupu opciono supstituisanu sa 1 do 3 halogena atoma, pod uslovom da kada E predstavlja azetidinski prsten, a R2 ili R3 su prisutni na atomu azota iz azetidinskog prstena, pomenuti R2 ili R3 nisu atomi vodonika.
3.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačeno time, što A predstavlja C6-10 arilensku grupu.
4.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 3, naznačeno time, što G predstavlja jednostruku vezu ili atom kiseonika.
5.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačeno time, što A predstavlja fenilensku grupu, tienilensku grupu, pirazolilensku grupu ili piridilensku grupu; a E predstavlja azetidinski prsten, pirolidinski prsten, piperidinski prsten ili piperazinski prsten ili gde A predstavlja fenilensku grupu; a E predstavlja azetidinski prsten ili piperidinski prsten ili gde A predstavlja fenilensku grupu; a E predstavlja piperidinski prsten.
6.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 5, naznačeno time, što n je 0; a G predstavlja jednostruku vezu.
7.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 6, naznačeno time, što R1 predstavlja C1-6 alkoksi grupu ili C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu; R2 predstavlja atom vodonika, hidroksilnu grupu, C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C1-6 alkilnu grupu; a R3 predstavlja atom vodonika.
8.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojem od zahteva 1 do 7, naznačeno time, što R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu.
9.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačeno time, što je predstavljeno sa sledećom formulom (II): u kojoj R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu; a R2 predstavlja atom vodonika, C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu ili je predstavljeno sa sledećom formulom (III): u kojoj R1 predstavlja C1-6 alkoksi C1-6 alkoksi grupu; a R2 predstavlja C1-6 alkilnu grupu ili hidroksi C2-6 alkilnu grupu.
10.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1, naznačeno time, što pomenuto jedinjenje je 5-((2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-metoksi-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so: ili 6-(2-metoksietoksi)-N-metil-5-((2-(4-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formula, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so: ili 6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid, predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so: ili 6-(2-etoksietoksi)-5-((2-(4-(1-etilazetidin-3-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
11.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa zahtevom 1, naznačeno time, što pomenuto jedinjenje je 5-((2-(4-(1-(2-hidroksietil)piperidin-4-il)benzamid)piridin-4-il)oksi)-6-(2-metoksietoksi)-N-metil-1H-indol-1-karboksamid predstavljen sa sledećom strukturnom formulom, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so:
12.Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 11.
13.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 11, naznačeno time, što se upotrebljava kao terapeutski agens.
14.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 11, naznačeno time, što se upotrebljava u postupku za tretman raka želuca, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, raka bešike ili raka endometrijuma.
15.Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 11, naznačeno time, što se upotrebljava u postupku za tretman nesitnoćelijskog karcinoma pluća.
16. Jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 11, naznačeno time, što se upotrebljava u postupku za tretman karcinoma skvamoznih ćelija.
MEP-2017-130A 2013-02-20 2014-02-18 Monociklički derivat piridina ME02755B (me)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361766922P 2013-02-20 2013-02-20
EP14754294.8A EP2960238B1 (en) 2013-02-20 2014-02-18 Monocyclic pyridine derivative
PCT/JP2014/053819 WO2014129477A1 (ja) 2013-02-20 2014-02-18 単環ピリジン誘導体

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ME02755B true ME02755B (me) 2018-01-20

Family

ID=51351646

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MEP-2017-130A ME02755B (me) 2013-02-20 2014-02-18 Monociklički derivat piridina

Country Status (35)

Country Link
US (1) US8933099B2 (me)
EP (1) EP2960238B1 (me)
JP (2) JP5600229B1 (me)
KR (1) KR102050128B1 (me)
CN (1) CN105073730B (me)
AR (1) AR094812A1 (me)
AU (1) AU2014219811B2 (me)
BR (1) BR112015019790B1 (me)
CA (1) CA2901585C (me)
CL (1) CL2015002311A1 (me)
CY (1) CY1119220T1 (me)
DK (1) DK2960238T3 (me)
ES (1) ES2628495T3 (me)
HR (1) HRP20170873T1 (me)
HU (1) HUE032931T2 (me)
IL (1) IL240623B (me)
JO (1) JO3261B1 (me)
LT (1) LT2960238T (me)
ME (1) ME02755B (me)
MX (1) MX361870B (me)
MY (1) MY178760A (me)
NZ (1) NZ711101A (me)
PE (1) PE20151509A1 (me)
PH (1) PH12015501813A1 (me)
PL (1) PL2960238T3 (me)
PT (1) PT2960238T (me)
RS (1) RS56064B1 (me)
RU (1) RU2645352C2 (me)
SG (1) SG11201506488WA (me)
SI (1) SI2960238T1 (me)
SM (1) SMT201700288T1 (me)
TW (4) TWI672139B (me)
UA (1) UA116794C2 (me)
WO (1) WO2014129477A1 (me)
ZA (1) ZA201505941B (me)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016027781A1 (ja) * 2014-08-18 2016-02-25 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 単環ピリジン誘導体の塩およびその結晶
RU2712222C2 (ru) * 2015-03-25 2020-01-27 Нэшнл Кэнсер Сентер Терапевтическое средство против рака желчных протоков
AU2016374441B2 (en) * 2015-12-17 2021-10-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Therapeutic agent for breast cancer
CN107098884A (zh) * 2016-02-19 2017-08-29 中国科学院上海药物研究所 一类取代的氨基吡啶类化合物及其制备和用途
SG11202001481PA (en) * 2017-10-12 2020-03-30 Eisai R&D Man Co Ltd Pharmaceutical composition comprising fgfr selective tyrosine kinase inhibitor
BR112020017922A2 (pt) 2018-03-28 2020-12-22 Eisai R&D Management Co., Ltd. Agente terapêutico para carcinoma hepatocelular
EP3942045A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Onxeo A dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
KR20220098759A (ko) 2019-11-08 2022-07-12 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) 키나제 억제제에 대해 내성을 획득한 암의 치료 방법
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
EP4122465A4 (en) 2020-04-17 2024-03-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. THERAPEUTIC AGENT AGAINST BREAST CANCER
CA3185174A1 (en) * 2020-07-31 2022-02-03 Eisai R&D Management Co., Ltd. Therapeutic agent for breast cancer
CN116390757A (zh) 2020-10-28 2023-07-04 卫材R&D管理有限公司 用于治疗肿瘤的药物组合物
US20240294496A1 (en) * 2021-08-31 2024-09-05 Eisai R&D Management Co., Ltd. Production method for synthetic intermediate of monocyclic pyridine derivative
CN117715902A (zh) 2021-08-31 2024-03-15 卫材R&D管理有限公司 单环吡啶衍生物的制造方法
US20250171415A1 (en) * 2022-03-18 2025-05-29 Shanghai Runshi Medical Technology Co., Ltd. Salt of substituted amino six-membered nitric heterocyclic compound, crystal form thereof, method for preparing same, and use thereof
CN120021412A (zh) * 2023-09-18 2025-05-20 上海润石医药科技有限公司 包含杂芳基氧基萘类化合物的药物组合物及其制备方法和应用

Family Cites Families (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10006139A1 (de) * 2000-02-11 2001-08-16 Merck Patent Gmbh Indol-3-yl-Derivate
EP1415987B1 (en) 2000-10-20 2007-02-28 Eisai R&D Management Co., Ltd. Nitrogenous aromatic ring compounds as anti cancer agents
WO2002081420A1 (en) 2001-04-03 2002-10-17 Eisai Co., Ltd. Cyclooctanone derivative and cyclodecanone derivative, and use thereof
US20030187026A1 (en) * 2001-12-13 2003-10-02 Qun Li Kinase inhibitors
CN100339376C (zh) 2002-08-30 2007-09-26 卫材R&D管理有限公司 含氮芳环衍生物
US7098332B2 (en) 2002-12-20 2006-08-29 Hoffmann-La Roche Inc. 5,8-Dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ones
MXPA05010765A (es) 2003-04-10 2005-12-12 Hoffmann La Roche Compuestos pirimido.
US20050256154A1 (en) 2004-05-04 2005-11-17 Kin-Chun Luk 4-Amino-thieno[3,2-c]pyridine-7-carboxylic acid amides
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
FR2883286B1 (fr) 2005-03-16 2008-10-03 Sanofi Aventis Sa NOUVEAUX DERIVES D'IMIDAZO[1,5-a]PYRIDINES, INHIBITEURS DE FGFs, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES LES CONTENANT
AU2006249847B2 (en) * 2005-05-23 2012-12-20 Novartis Ag Crystalline and other forms of 4-amino-5-fluoro-3-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-quinolin-2-one lactic acid salts
MEP3808A (xx) 2005-12-21 2010-02-10 Novartis Ag Derivati pirimidinil aril uree kao fgf inhibitori
JP2009184924A (ja) 2006-05-31 2009-08-20 Eisai R & D Management Co Ltd 生物学的試薬用化合物
TW200811134A (en) 2006-07-12 2008-03-01 Irm Llc Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
EP1891955A1 (en) 2006-07-24 2008-02-27 Sanofi-Aventis Use of 1,2,3-substituted indolizine derivatives, inhibitors of FGFs, for the preparation of a medicament intended for the treatment of degenerative joint diseases
US7737149B2 (en) 2006-12-21 2010-06-15 Astrazeneca Ab N-[5-[2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethyl]-2H-pyrazol-3-yl]-4-(3,5-dimethylpiperazin-1-yl)benzamide and salts thereof
US8131527B1 (en) 2006-12-22 2012-03-06 Astex Therapeutics Ltd. FGFR pharmacophore compounds
JP5442449B2 (ja) 2006-12-22 2014-03-12 アステックス、セラピューティックス、リミテッド 新規化合物
US8895745B2 (en) 2006-12-22 2014-11-25 Astex Therapeutics Limited Bicyclic heterocyclic compounds as FGFR inhibitors
EP2158471A1 (en) 2007-06-25 2010-03-03 Qinetiq Limited Heater suitable for use in a preconcentrator device
WO2009019518A1 (en) 2007-08-09 2009-02-12 Astrazeneca Ab Pyrimidine compounds having a fgfr inhibitory effect
GB0720038D0 (en) 2007-10-12 2007-11-21 Astex Therapeutics Ltd New compounds
GB0720041D0 (en) 2007-10-12 2007-11-21 Astex Therapeutics Ltd New Compounds
WO2009056886A1 (en) 2007-11-01 2009-05-07 Astrazeneca Ab Pyrimidine derivatives and their use as modulators of fgfr activity
WO2009076660A2 (en) * 2007-12-13 2009-06-18 Tyratech, Inc. Organic absorbent material and uses thereof
CL2008003675A1 (es) * 2007-12-13 2009-03-20 Wyeth Corp Compuestos derivados de 5-alquil o alquenil 3-cianopiridinas, procedimiento de preparacion, composicion farmaceutica, util para reducir la actividad incrementada de una enzima en un mamifero, en donde dicha enzima es una proteina quinasa, destinado al tratamiento de la inflamacion, asma, colitis, esclerosis multiple, soriasis, artritis reumatoide.
ES2554513T3 (es) 2008-05-23 2015-12-21 Novartis Ag Derivados de quinolinas y quinoxalinas como inhibidores de la proteína tirosina quinasa
GB0810902D0 (en) 2008-06-13 2008-07-23 Astex Therapeutics Ltd New compounds
WO2009153592A1 (en) 2008-06-19 2009-12-23 Astrazeneca Ab Pyrazole compounds 436
WO2010078427A1 (en) 2008-12-30 2010-07-08 Arqule, Inc. Substituted pyrazolo [3, 4-b] pyridine compounds
CN102325755B (zh) 2008-12-30 2015-07-01 艾科尔公司 取代的5,6-二氢-6-苯基苯并[f]异喹啉-2-胺化合物
WO2010078430A1 (en) 2008-12-30 2010-07-08 Arqule, Inc. Substituted 1h-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine-6-amine compounds
US9002427B2 (en) 2009-03-30 2015-04-07 Lifewave Biomedical, Inc. Apparatus and method for continuous noninvasive measurement of respiratory function and events
GB0906470D0 (en) 2009-04-15 2009-05-20 Astex Therapeutics Ltd New compounds
GB0906472D0 (en) 2009-04-15 2009-05-20 Astex Therapeutics Ltd New compounds
EP2270043A1 (en) 2009-07-03 2011-01-05 Sanofi-Aventis Extracellular allosteric inhibitor binding domain from a tyrosine kinase receptor
FR2947546B1 (fr) 2009-07-03 2011-07-01 Sanofi Aventis Derives de pyrazoles, leur preparation et leur application en therapeutique
AR084370A1 (es) 2009-08-07 2013-05-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Derivados de aminopirazol
KR20120101367A (ko) 2009-10-30 2012-09-13 노파르티스 아게 3-（2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐）-1-｛6-［4-（4-에틸-피페라진-1-일）-페닐아미노］-피리미딘-4-일｝-1-메틸-우레아의 ｎ-옥시드
AR079257A1 (es) 2009-12-07 2012-01-04 Novartis Ag Formas cristalinas de 3-(2,6-dicloro-3-5-dimetoxi-fenil)-1-{6-[4-(4-etil-piperazin-1-il)-fenil-amino]-pirimidin-4-il}-1-metil-urea y sales de las mismas
GB201007286D0 (en) 2010-04-30 2010-06-16 Astex Therapeutics Ltd New compounds
FR2962437B1 (fr) 2010-07-06 2012-08-17 Sanofi Aventis Derives d'imidazopyridine, leur procede de preparation et leur application en therapeutique
GB201020179D0 (en) 2010-11-29 2011-01-12 Astex Therapeutics Ltd New compounds
WO2012088266A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of fgfr3
EP2548877A1 (en) * 2011-07-19 2013-01-23 MSD Oss B.V. 4-(5-Membered fused pyridinyl)benzamides as BTK-inhibitors
GB201118675D0 (en) 2011-10-28 2011-12-14 Astex Therapeutics Ltd New compounds
GB201118652D0 (en) 2011-10-28 2011-12-07 Astex Therapeutics Ltd New compounds
GB201118654D0 (en) 2011-10-28 2011-12-07 Astex Therapeutics Ltd New compounds
GB201118656D0 (en) 2011-10-28 2011-12-07 Astex Therapeutics Ltd New compounds
FR2984325A1 (fr) 2011-12-14 2013-06-21 Sanofi Sa Derives de pyrazolopyridine, leur procede de preparation et leur application en therapeutique
AU2013210403B2 (en) 2012-01-19 2016-01-14 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. 3,5-disubstituted alkynylbenzene compound and salt thereof
AU2013227139B2 (en) 2012-02-28 2017-02-16 Astellas Pharma Inc. Nitrogen-containing aromatic heterocyclic compound
GB201209609D0 (en) 2012-05-30 2012-07-11 Astex Therapeutics Ltd New compounds
NZ702747A (en) 2012-06-13 2017-03-31 Incyte Holdings Corp Substituted tricyclic compounds as fgfr inhibitors
CN104540809B (zh) 2012-07-11 2018-12-11 蓝印药品公司 成纤维细胞生长因子受体的抑制剂
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
WO2014044846A1 (en) 2012-09-24 2014-03-27 Evotec (Uk) Ltd. 3-(aryl- or heteroaryl-amino)-7-(3,5-dimethoxyphenyl)isoquinoline derivatives as fgfr inhibitors useful for the treatment of proliferative disorders or dysplasia
WO2014048878A1 (en) 2012-09-26 2014-04-03 Evotec (Uk) Ltd. Phenyl- or pyridyl- pyrrolo[2,3b]pyrazine derivatives useful in the treatment or prevention of proliferative disorders or dysplasia
ES2643571T3 (es) 2012-09-27 2017-11-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Gen de fusión FGFR3 y fármaco que se dirige al mismo
TWI628176B (zh) 2013-04-04 2018-07-01 奧利安公司 蛋白質激酶抑制劑

Also Published As

Publication number Publication date
WO2014129477A1 (ja) 2014-08-28
EP2960238A4 (en) 2016-08-17
LT2960238T (lt) 2017-07-10
NZ711101A (en) 2018-08-31
TW201900169A (zh) 2019-01-01
ES2628495T3 (es) 2017-08-03
SMT201700288T1 (it) 2017-07-18
HK1215949A1 (en) 2016-09-30
CL2015002311A1 (es) 2016-02-05
CN105073730A (zh) 2015-11-18
AU2014219811B2 (en) 2017-09-28
RU2645352C2 (ru) 2018-02-21
ZA201505941B (en) 2016-07-27
HRP20170873T1 (hr) 2017-09-08
BR112015019790A2 (pt) 2017-07-18
US8933099B2 (en) 2015-01-13
AU2014219811A1 (en) 2015-09-03
PE20151509A1 (es) 2015-10-18
AR094812A1 (es) 2015-08-26
TWI672139B (zh) 2019-09-21
MY178760A (en) 2020-10-20
TWI641602B (zh) 2018-11-21
IL240623A0 (en) 2015-10-29
PL2960238T3 (pl) 2017-09-29
TW201900168A (zh) 2019-01-01
JP2014237707A (ja) 2014-12-18
EP2960238A1 (en) 2015-12-30
BR112015019790B1 (pt) 2020-12-01
PH12015501813A1 (en) 2015-12-07
TWI672140B (zh) 2019-09-21
US20140235614A1 (en) 2014-08-21
KR102050128B1 (ko) 2019-11-28
JP5600229B1 (ja) 2014-10-01
IL240623B (en) 2019-03-31
UA116794C2 (uk) 2018-05-10
RU2015134558A (ru) 2017-03-24
TWI672296B (zh) 2019-09-21
TW201902889A (zh) 2019-01-16
PT2960238T (pt) 2017-06-05
TW201439085A (zh) 2014-10-16
CY1119220T1 (el) 2018-02-14
CA2901585C (en) 2019-09-24
RS56064B1 (sr) 2017-10-31
HUE032931T2 (en) 2017-11-28
CN105073730B (zh) 2017-10-13
JO3261B1 (ar) 2018-09-16
MX361870B (es) 2018-12-18
MX2015010698A (es) 2016-04-11
DK2960238T3 (en) 2017-06-26
CA2901585A1 (en) 2014-08-28
KR20150118151A (ko) 2015-10-21
SG11201506488WA (en) 2015-09-29
SI2960238T1 (sl) 2017-07-31
EP2960238B1 (en) 2017-04-05
JPWO2014129477A1 (ja) 2017-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2960238T3 (en) MONOCYCLIC PYRIDINE DERIVATIVE
KR102644788B1 (ko) Erk1 및 erk2의 헤테로사이클릭 억제제 및 암 치료에서 이의 용도
TW200815417A (en) New compounds II
KR20180041112A (ko) Cdk 억제제로서의 치환된 헤테로사이클릴 유도체
TW201219383A (en) Chemical compounds
JP2021515767A (ja) Ｅｒｋ５阻害剤の同定及び使用
EP2627650A2 (en) N-phenyl imidazole carboxamide inhibitors of 3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1
ES2926518T3 (es) Compuestos de pirazolopiridinona
ES2996878T3 (en) New quinolinone compounds
KR20210110288A (ko) 치환된 아릴 화합물, 및 이의 제조 방법 및 이의 용도
JP2017206437A (ja) ４−アミノピリジン誘導体
HK1215949B (en) Monocyclic pyridine derivative
WO2024254490A1 (en) Pyrazolo-pyrimidinone compounds for use in methods of inhibiting wee1 a kinase
BR112017025356B1 (pt) Composto, composição farmacêutica, e, uso para a fabricação de um medicamento