ME01128B - Upotreba 7-hlor-n,n,5-trimetil-4-okso-3-fenil- 3,5-dihidro-4h-piridazino [4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za nivoe perifernih benzodiazepinskih receptora - Google Patents
Upotreba 7-hlor-n,n,5-trimetil-4-okso-3-fenil- 3,5-dihidro-4h-piridazino [4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za nivoe perifernih benzodiazepinskih receptoraInfo
- Publication number
- ME01128B ME01128B MEP-2011-72A MEP7211A ME01128B ME 01128 B ME01128 B ME 01128B ME P7211 A MEP7211 A ME P7211A ME 01128 B ME01128 B ME 01128B
- Authority
- ME
- Montenegro
- Prior art keywords
- pbr
- indole
- phenyl
- pyridazino
- oxo
- Prior art date
Links
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 title claims description 13
- 102000004300 GABA-A Receptors Human genes 0.000 title description 4
- 108090000839 GABA-A Receptors Proteins 0.000 title description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 48
- HJSQVJOROCIILI-UHFFFAOYSA-N ssr-180,575 Chemical compound O=C1C=2N(C)C3=CC(Cl)=CC=C3C=2C(CC(=O)N(C)C)=NN1C1=CC=CC=C1 HJSQVJOROCIILI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims abstract description 43
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 41
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims description 38
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 26
- OKTJSMMVPCPJKN-BJUDXGSMSA-N carbon-11 Chemical compound [11C] OKTJSMMVPCPJKN-BJUDXGSMSA-N 0.000 claims description 22
- 101710166801 Translocator protein Proteins 0.000 claims description 21
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 20
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims description 14
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 claims description 10
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 claims description 9
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 claims description 9
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 claims description 8
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 8
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 claims description 5
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 claims description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 claims description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 2
- YCKRFDGAMUMZLT-BJUDXGSMSA-N fluorine-18 atom Chemical compound [18F] YCKRFDGAMUMZLT-BJUDXGSMSA-N 0.000 claims 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 39
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 39
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 32
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 27
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- YMWUJEATGCHHMB-DICFDUPASA-N dichloromethane-d2 Chemical compound [2H]C([2H])(Cl)Cl YMWUJEATGCHHMB-DICFDUPASA-N 0.000 description 24
- RAVIZVQZGXBOQO-KTXUZGJCSA-N n-butan-2-yl-1-(2-chlorophenyl)-n-methylisoquinoline-3-carboxamide Chemical compound N=1C(C(=O)N([11CH3])C(C)CC)=CC2=CC=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1Cl RAVIZVQZGXBOQO-KTXUZGJCSA-N 0.000 description 21
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 20
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 20
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 19
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 19
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 19
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 18
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 15
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 15
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N ac1l2y5h Chemical compound [18FH] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 13
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-M fluorine-18(1-) Chemical compound [18F-] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-M 0.000 description 13
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- 208000036110 Neuroinflammatory disease Diseases 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 9
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 9
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 9
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 8
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical class C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 8
- RAVIZVQZGXBOQO-UHFFFAOYSA-N PK-11195 Chemical compound N=1C(C(=O)N(C)C(C)CC)=CC2=CC=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1Cl RAVIZVQZGXBOQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 8
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 208000004605 Persistent Truncus Arteriosus Diseases 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 208000037258 Truncus arteriosus Diseases 0.000 description 7
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 7
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 7
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 6
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 6
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 6
- GJAWHXHKYYXBSV-UHFFFAOYSA-N quinolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1C(O)=O GJAWHXHKYYXBSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 6
- UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N (S)-AMPA Chemical compound CC=1ONC(=O)C=1CC(N)C(O)=O UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LDBZRFQWKQUHFF-UHFFFAOYSA-N 5h-pyridazino[4,5-b]indole Chemical class N1=NC=C2C3=CC=CC=C3NC2=C1 LDBZRFQWKQUHFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 5
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 5
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- CPELXLSAUQHCOX-AHCXROLUSA-N ac1l4zwb Chemical compound [76BrH] CPELXLSAUQHCOX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 5
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 5
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 5
- XMBWDFGMSWQBCA-OIOBTWANSA-N iodane Chemical compound [124IH] XMBWDFGMSWQBCA-OIOBTWANSA-N 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 5
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 208000011990 Corticobasal Degeneration Diseases 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N Gallium-68 Chemical compound [68Ga] GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 4
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 4
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 4
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 4
- 206010063897 Renal ischaemia Diseases 0.000 description 4
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 4
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 4
- 239000004060 excitotoxin Substances 0.000 description 4
- OFBIFZUFASYYRE-UHFFFAOYSA-N flumazenil Chemical compound C1N(C)C(=O)C2=CC(F)=CC=C2N2C=NC(C(=O)OCC)=C21 OFBIFZUFASYYRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004381 flumazenil Drugs 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 4
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 4
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- -1 t1/2=68 min) Chemical compound 0.000 description 4
- SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 1h-1,2-benzodiazepine Chemical compound N1N=CC=CC2=CC=CC=C12 SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-IGMARMGPSA-N copper-64 Chemical compound [64Cu] RYGMFSIKBFXOCR-IGMARMGPSA-N 0.000 description 3
- INQOMBQAUSQDDS-BJUDXGSMSA-N iodomethane Chemical compound I[11CH3] INQOMBQAUSQDDS-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 3
- 208000012947 ischemia reperfusion injury Diseases 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 210000002442 prefrontal cortex Anatomy 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 229940056501 technetium 99m Drugs 0.000 description 3
- 230000009529 traumatic brain injury Effects 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- BLRHMMGNCXNXJL-UHFFFAOYSA-N 1-methylindole Chemical group C1=CC=C2N(C)C=CC2=C1 BLRHMMGNCXNXJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZCVLYJVVCABBV-UHFFFAOYSA-N 2-hydrazinylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound NNC1=NC=CC=C1C(O)=O IZCVLYJVVCABBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 2.2.2-cryptand Chemical compound C1COCCOCCN2CCOCCOCCN1CCOCCOCC2 AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010175 APPswe/PSEN1dE9 Methods 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001640 Fibromyalgia Diseases 0.000 description 2
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N Gallium Chemical compound [Ga] GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031274 Translocator protein Human genes 0.000 description 2
- 102000009206 Translocator proteins Human genes 0.000 description 2
- 108050000091 Translocator proteins Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000007336 electrophilic substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000003682 fluorination reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 2
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- OIRDBPQYVWXNSJ-BJUDXGSMSA-N methyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound [11CH3]OS(=O)(=O)C(F)(F)F OIRDBPQYVWXNSJ-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 2
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 2
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M potassium fluoride Chemical compound [F-].[K+] NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- OLBCVFGFOZPWHH-UHFFFAOYSA-N propofol Chemical compound CC(C)C1=CC=CC(C(C)C)=C1O OLBCVFGFOZPWHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002637 putamen Anatomy 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 2
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium hydroxide Chemical compound [OH-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDSFGYBJMBTKMN-UHFFFAOYSA-N 1,4,7,10,13-pentaoxacyclooctadecane Chemical compound C1CCOCCOCCOCCOCCOCC1 RDSFGYBJMBTKMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WMCUHRDQSHQNRW-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-4-fluorobutane Chemical compound FCCCCBr WMCUHRDQSHQNRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VQTKDNCYXCDOSB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-fluoroethoxy)ethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)OCCOCCF)C=C1 VQTKDNCYXCDOSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LZIPBJBQQPZLOR-UHFFFAOYSA-N 2-(4-methylphenyl)sulfonyloxyethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)OCCOS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 LZIPBJBQQPZLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJSQVJOROCIILI-BJUDXGSMSA-N 2-(7-chloro-5-methyl-4-oxo-3-phenylpyridazino[4,5-b]indol-1-yl)-n,n-di(methyl)acetamide Chemical compound O=C1C=2N(C)C3=CC(Cl)=CC=C3C=2C(CC(=O)N([11CH3])C)=NN1C1=CC=CC=C1 HJSQVJOROCIILI-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- HJSQVJOROCIILI-KTXUZGJCSA-N 2-(7-chloro-5-methyl-4-oxo-3-phenylpyridazino[4,5-b]indol-1-yl)-n,n-dimethylacetamide Chemical compound O=C1C=2N([11CH3])C3=CC(Cl)=CC=C3C=2C(CC(=O)N(C)C)=NN1C1=CC=CC=C1 HJSQVJOROCIILI-KTXUZGJCSA-N 0.000 description 1
- MHUIIHOKCRBQES-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-fluoroethoxy)ethoxy]ethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)OCCOCCOCCF)C=C1 MHUIIHOKCRBQES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXACEEPNTRHYBQ-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[2-[(2-sulfanylacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CS RXACEEPNTRHYBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNRDLSNSMTUXBV-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroethyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)OCCF)C=C1 XNRDLSNSMTUXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYCKJIAEKJWSKM-UHFFFAOYSA-N 3-fluoropropyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)OCCCF)C=C1 PYCKJIAEKJWSKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZNGTBLWFCRXKR-UHFFFAOYSA-N 3-phenyl-1h-indole Chemical group C=1NC2=CC=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1 XZNGTBLWFCRXKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 102000013138 Drug Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010065556 Drug Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101100192145 Homo sapiens PSEN1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100356345 Homo sapiens RETREG2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004286 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000895 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052765 Lutetium Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150009428 MAG2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-BJUDXGSMSA-N Nitrogen-13 Chemical compound [13N] QJGQUHMNIGDVPM-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 102100024733 Reticulophagy regulator 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101150052863 THY1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001515 alkali metal fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000211 autoradiogram Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000000749 benzodiazepine receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 208000025698 brain inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 210000003618 cortical neuron Anatomy 0.000 description 1
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000002739 cryptand Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229940072271 diprivan Drugs 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000006005 fluoroethoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- UKOAOXYMPSILTM-UHFFFAOYSA-N gadolinium(3+);trisilicate Chemical compound [Gd+3].[Gd+3].[Gd+3].[Gd+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-].[O-][Si]([O-])([O-])[O-].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] UKOAOXYMPSILTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000004914 glial activation Effects 0.000 description 1
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003447 ipsilateral effect Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N lutetium atom Chemical compound [Lu] OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- JQAACYUZYRBHGG-QHTZZOMLSA-L magnesium;(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound [Mg+2].[O-]C(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1.[O-]C(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 JQAACYUZYRBHGG-QHTZZOMLSA-L 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000013160 medical therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- MCLGZNGDLWVKKA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethyl-2-(5-methyl-4-oxo-3-phenylpyridazino[4,5-b]indol-1-yl)acetamide Chemical compound O=C1C=2N(C)C3=CC=CC=C3C=2C(CC(=O)N(C)C)=NN1C1=CC=CC=C1 MCLGZNGDLWVKKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAVIZVQZGXBOQO-NIQXDKTISA-N n-[(2r)-butan-2-yl]-1-(2-chlorophenyl)-n-methylisoquinoline-3-carboxamide Chemical compound N=1C(C(=O)N([11CH3])[C@H](C)CC)=CC2=CC=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1Cl RAVIZVQZGXBOQO-NIQXDKTISA-N 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003955 neuronal function Effects 0.000 description 1
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 1
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037000 normothermia Effects 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-BJUDXGSMSA-N oxygen-15 atom Chemical compound [15O] QVGXLLKOCUKJST-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000004560 pineal gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 1
- 235000003270 potassium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011698 potassium fluoride Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960004134 propofol Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 238000012292 receptor occupancy assay Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000003752 saphenous vein Anatomy 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000003497 sciatic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 125000005207 tetraalkylammonium group Chemical group 0.000 description 1
- DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N tetrabutylammonium Chemical compound CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 125000005424 tosyloxy group Chemical group S(=O)(=O)(C1=CC=C(C)C=C1)O* 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007794 visualization technique Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0459—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, e.g. piperazine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/60—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Upotreba radioobeleženog oblika 7-hlor- N,N, 5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4 H -piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim i patološkim stanjima kod pojedinaca. Postupak za određivanje nivoa PBR u vezi sa normalnim i patološkim stanjima. Dijagnostički k omplet .
Description
Predmetni pronalazak se odnosi na upotrebu 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za detekciju nivoa PBR (perifernog benzodiazepin receptora) povezanog sa normalnim i patološkim stanjima, kod pojedinaca. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na postupak za detekciju nivoa PBR u ove svrhe.
Pod normalnim fiziološkim uslovima, PBR, takođe poznat kao translokator protein od 18kDa (TSPO) (Papadopoulos, B. i saradnici (2006) Trends Pharmacol. Sci. 27: 402-409), se eksprmira u niskim nivoa ma u mozgu, uglavnom u mikroglijalnim ćelijama, a u većem broju se eksprimira u brojnim perifernim tkivima, kao što su nadbubrežne žlezde, epifiza, pljuvačne žlezde, gonade, bubrezi, pluća, srce i skeletni mišići (Chen, M-K. and Guilarte, T. (2008) Pharmacology and Therapeutics 118: 1-17; Venneti, S. i saradnici (2006) Progress in Neurobiol. 80: 308-322). Ispitivanja subcelularne lokacije u vezi sa ligandom PBR, [3H]PK11195, su pokazale da se PBR nalazi u spoljašnjoj membrani mitohondrija (Anholt, R.R. i saradnici (1986) J. Biol. Chem. 261: 576583; Antkiewicz-Michaluk, L. i saradnici (1988) Mol. Pharmacol. 34: 272-278). Međutim, imunohistohemijska ispitivanja su takođe pokazala da se PBR eksprimira u krvnim ćelijama (bez mitohondrija) (Olson, J.M. i saradnici (1988) Eur. J. Pharmacol. 152: 47-53) i mogu da se nalaze u membrani plazme (O'Beirne, G. i saradnici (1990) Eur. J. Biochem. 188: 131-138; Woods, M.J. i saradnici (1996) Biochem. Pharmacol. 51: 1283-1292). Takođe je zapažena nuklearna ili peri-nuklearna lokacija PBR u slučaju kancera dojke (Hardwick, M. i saradnici (1999) Cancer Res. 59: 831-842), u humanim glioma ćelijama (Brown, R.C. i saradnici (2000) Cancer Lett. 156: 125-132), ćelijama hepatičnog tumora (Corsi, L. i saradnici (2005) Life Sci. 76: 2523-2533) i glijalnim ćelijama (Kuhlmann, A.C. and Guilarte, T.R. (2000) J. Neurochem. 74: 1694- 1704).
Značajno povećanje nivoa PBR je zapaženo nakon oštećenja ćelije, inflamacije ili proliferacije i povezano je sa brojnim akutnim i hroničnim patološkim stanjima (Chen, M-K. and Guilarte, T. (2008) Pharmacology and Therapeutics 118: 1-17; Venneti, S. i saradnici (2006) Progress in Neurobiology 80: 308-322). Ovo obuhvata: oštećenja mozga, kao što su šlog i ishemijske –reperfuzione povrede (Gerhard, A. i saradnici (2000) Neuroreport 11: 2957-2960; Gerhard, A. i saradnici (2005) Neuroimage 24: 404-412), traumatiska povreda mozga (Raghavendra, R. i saradnici (2000) Exp. Neurol. 161: 102-114); infekcije mozga, kao što je encefalitis (Banati, R.B. i saradnici (1999) Neurology 53: 2199-2203; Cagin, A. i saradnici (2001) Brain 124: 2014-2027); neurološka oboljenja, kao što je multiple skleroza (Banati, R.B. i saradnici (2000) Brain 123: 2321-2337), Alzheimer-ova bolest i demencija (Cagnin, A. i saradnici (2001) Lancet 358: 461-467; Versijpt, J.J. i saradnici (2003) Eur. Neurol. 50: 39-47), Parkinson-ova bolest (Ouchi, Y. i saradnici (2005) Ann. Neurol. 57: 168-175; Gerhard, A. i saradnici (2006) Neurobiol. Dis. 21: 404-412), amiotrofična lateralna skleroza (Turner, M.R. i saradnici (2004) Neurobiol. Dis. 15: 601-609), kortiko-bazalna degeneracija (Gerhard A. i saradnici (2004) Mov. Disord. 19: 1221-1226; Henkel, K. i saradnici (2004) Mov. Disord. 19: 817-821), Huntington-ova bolest (Messmer, K. and Reynolds, G.P. (1998) Neurosci. Lett. 241: 53-56; Pavese, N. i saradnici (2006) Neurology 66: 1638-1643) i epilepsija (Sauvageau, A. i saradnici (2002) Metab. Brain Dis. 17: 3-11). Povećani nivoi PBR u patologijama CNS su uglavnom uočene u mikroglijalnim ćelijama (Chen, M-K. and Guilarte, T. (2008) Pharmacology and Therapeutics 118: 1-17; Venneti, S. i saradnici (2006) Progress in Neurobiology 80: 308-322). Veliko povećanje PBR je takođe uočeno kod kancera (Cornu, P. i saradnici (1992) Acta. Neurichir. 119: 146-152; Hardwick, M. i saradnici (1999) Cancer Res. 59: 831-842; Maaser, K. i saradnici (2002) Cancer Res. 8: 3205-3209), pulmonarne inflamacije (Audi, S.H. i saradnici (2002) Lung. 180: 241250; Hardwick, M.J. i saradnici (2005) Mol. Imaging. 4: 432-438), srčane ishemije (Mazzone, A. i saradnici (2000) J. Am. Coll. Cardiol. 36: 746-750), renalne ishemije (Zhang, K. i saradnici (2006) J. Am. Coll. Surg. 203: 353-364), reumatizma (fibromialgije) (Faggioli, P. i saradnici (2004) Rheumatology (Oxford) 43: 1224-1225), regeneracije išijatičnog nerva (Mills, CD. i saradnici (2005) Mol. Cell. Neurosci. 30: 228-237), psorijaznog artritisa (Guisti, L. i saradnici (2004) Clin. Biochem. 37: 61-66) i ateroskleroze (Fujimura, Y. i saradnici (2008) Atherosclerosis, 201: 108-111; Laitinen, I. i saradnici (2008) Eur. J. Nuc. Med. Mol. Imaging 36: 73-80).
Suprotno tome, smanjenje nivoa PBR je uočeno u mozgu pacijenata sa šizofrenijom (Kurumaji, A. i saradnici (1997) J. Neural. Transm. 104: 1361-1370; Wodarz, N. i saradnici (1998) Psychiatry Res. 14: 363-369) i sa reumatoidnim artritisom (Bribes, E. i saradnici (2002) Eur. J. Pharmacol. 452: 111-122) i osteoartritisa (Bazzichi, L. i saradnici (2003) Clin. Biochem. 36: 57-60).
Sposobnost da se in vivo vizuelizaciju nivoi PBR u mozgu i drugim tkivima bi, prema tome, mogla da služi kao važan biomarker za progresiju bolesti, za određivanje i procenu efikasnosti terapeutskog tretmana i za procenu in vivo popunjenosti (zauzetosti) receptora PBR.
Referentni PET PBR ligand, [11C]PK11195, je široko korišćen za in vivo vizuelizaciju (imidžing) novoa PBR u brojnim neuropatološkim stanjima (Chen, M-K and Guilarte, T. (2008) Pharmacology and Therapeutics 118: 1-17; Venneti, S. i saradnici (2006) Progress in Neurobiology 80: 308-322). Međutim, [11C]PK11195 pokazuje se relativno slabu apsorpciju u mozgu, pokazuje značajno ne-specifično vezivanje i slab odnos signala i šuma. Ove osobine ograničavaju osetljivost [11C]PK11195 za PET vizuelizaciju nivoa PBR i studije popunjenosti u CNS. Razvoj poboljšanih PBR PET liganda sa većom specifičnošću vezivanja i većom osetljivošću od [11C]PK11195 bi stoga obezbedio značajnu prednost za vizuelizaciju nivoa PBR u mozgu i drugim tkivima.
Od jedinjenja koja su opisana i za koje se traži zaštita u dokumentima WO99/06406 i WO00/44384, derivat piridazino[4,5-b]indola, 7-hlor-N,N,5-tnmetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je naznačen kao posebno interesantan za upotrebu kao PET (ili SPECT) liganda za PBR. Ovo jedinjenje ima veliki afinitet za PBR in vitro i in vivo (Ferzaz, B. i saradnici (2002) J. Pharm. Exp. Therap. 301:1067-1078).
Kratak opis pronalaska
Predmetni pronalazak se odnosi na upotrebu radio-obeleženog oblika 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim stanjima i nivoa PBR povezanih sa patološkim stanjima.
Predmetni pronalazak se takođe odnosi na postupak za određivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim stanjima i nivoa PBR povezanih sa patološkim stanjima koristeći radio-obeležen 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid.
Predmetni pronalazak se takođe odnosi na dijagnostički komplet za detekciju nivoa PBR.
Definicije
Iz razloga pogodnosti i omogućavanja lakšeg čitanja, jedinjenje 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je u nekim delovima ove prijave označeno kao "A".
Shodno tome, u predmetnom pronalasku treba na odgovarajući način razumeti sledeće termine.
-Biomarker: karakteristika koja može objektivno da se izmeri (tj, sa prihvatljivom preciznošću i reproduktivnošću) i koristi se kao indikator normalnih fizioloških ili patoloških procesa i za procenu delovanja medicinskih terapija. Biomarker može da bude biološki, anatomski, fiziološki, biohemijski ili molekularni parametar koji se može detektovati u tkivu ili biološkoj tečnosti.
-Inflamacija: odgovor na povredu ili oštećenje tkiva. Na periferiji, akutna inflamacija sadrži infiltrate leukocita koji su okarakterisani polimorfonuklearnim ćelijama (neutrofili), i hronična inflamacija sadrži mononuklearne ćelije (makrofagi, limfociti, plazma ćelije). U mozgu, inflamacija inkorporira širok spektar ćelijskih odgovora koji uključuju aktiviranje mikroglija i astrocita i učešće citokina i hemokina, komplement proteina, akutnu fazu proteina, oksidativnu povredu i povezane molekularne procese. Ovi događaji mogu da imaju štetne efekte na funkciju neurona dovodeći do oštećenja neurona i dalje aktivacije glijala i na kraju do neurodegeneracije. U odgovoru na inflamaciju mozga, glijalne ćelije (uglavnom mikroglije) se aktiviraju i prekomerno ekrpimiraju PBR. Stoga su nivoa PBR u mozgu indikator neuroinflamacije i mogu da se smatraju biomarkerima neuroinflamacije za predmetni pronalazak.
-Patološka stanja: ova stanja mogu da obuhvate neurološka oboljenja: bilo koje oštećenje, poremećaj ili oboljenje koje ometa funkciju centralnog nervnog sistema. Ovim mogu da budu obuhvaćena akutna oštećenja mozga, kao što su šlog, ishemijsko-reperfuzione povrede i traumatska povreda mozga; infekcije mozga, kao što je encefalitis; neurološka oboljenja, kao što je multipla skleroza, Alzheimer-ova bolest, Parkinson-ova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, demencija, kortiko-bazalna degeneracija, Huntington-ova bolest i epilepsija; patološka stanja mogu takođe da uključe psihijatrijska oboljenja, kao što je šizofrenija; periferne inflamatorne procese, kao što su pulmonarna inflamacija, ateroskleroza, kardijačna ishemija, renalna ishemija, reumatizam (fibromialgija), psorijazni artritis, reumatoidni artritis i osteoartritis; proliferativna oboljenja, kao što je kancer.
- Zauzetost (popunjenost) receptora: mera količine vezivanja za biohemijski cilj ili receptor. Nivo zauzetosti receptora za lek može se meriti poređenjem merenja vremenske aktivnosti dobijenih sa sâmim radio-obeleženim PET ligandom i kada je PET ligand dat nakon administracije neobeleženog leka. PET ligand mora da se veže za isti receptor kao neobeleženi lek. Količina radioobeleženog PET liganda koji se vezuje za receptor se smanjuje u prisustvu povećanih koncentracija neobeleženog leka. Magnituda ovog smanjenja je definisana kao zauzetost receptora neobeležnim lekom.
-PET vizuelizacija: pozitronska emisiona kompjuterska tomografija koja daje trodimenzionalnu vizuelizaciju (imidž/sliku) ili mapu funkcionalnih procesa u organizmu. Sistem detektuje parove gama zrakova koji su indirektno emitovani pomoću pozitron- emitujućeg radionuklida ( radiofarmak; engl.tracer), koji se ubaci u telo na biološki aktivnom molekulu. Vizuelizacija koncentracije radiofarmaka u 3-dimenzionalnom prostoru unutar tela se zatim rekonstruišu kompjuterskim analizama. Materijali koji se koriste za PET su scintilatori, kao što su bizmut germanat, lutecijum oksi-ortosilikat ili gadolinijumortosilikat, zbog svoje visoke snage zaustavljanja γ-zraka i brzine konverzije signala. Mikro PET je PET aplikacija za vizuelizaciju malih životinja.
-SPECT vizuelizacija: jednofotonska pozitronska emisiona kompjuterizovana tomografija je još jedna tehnika vizuelizacije koja daje trodimenzionalni imidž/sliku ili mapu funkcionalnih procesa u telu. Sistem direktno detektuje emitovane gama zrake pomoću radionuklida koji emituje foton (radiofarmak; engl.tracer), koji je uveden u organizam na biološki aktivnom molekulu. Vizuelizacije koncentracije izotopa u 3-dimenzionalnom prostoru u telu se takođe nakon toga rekonstruišu kompjuterskim analizama.
-Radioobeleženi oblik: moguća je detekcija bilo kog molekula u kome je jedan ili više atoma zamenjeno izotopima. Najčešće korišćeni radioizotopi koji emituju pozitrone za PET vizuelizaciju su: ugljenik-11 (ili 11C, t1/2=20 min), azot-13 (ili 13N, t1/2=10 min), kiseonik-15 (ili 15O, t1/2=2 min). Takođe treba imati u vidu molekule u koje su uključeni dodati atomi kako bi se obeležili derivati sa drugim radioizotopima koji emituju pozitrone za PET vizuelizaciju, kao što su fluor-18 (ili 18F, t1/2=110 min), ali takođe galijum-68 (68Ga, t1/2=68 min), bakar-64 (64Cu, t1/2=12.7 sati), brom-76 (ili 76Br, t1/2=16.1 sati) i jod-124 (ili 124l, t1/2=4.2 dana). Završno, takođe treba razmotriti molekule u koje su uključeni dodati atomi kako bi se obeležili derivati sa jednofotonskim emitujućim radioizotopima za SPECT vizuelizaciju, kao što su jod-123 (ili 123l, t1/2=13.1 sati) ili tehnicijum-99m (ili 99mTc, t1/2=6.0 sati).
Sinteze radioobeleženih liganda i supstitucija atoma sa izotopom mogu da se izvrše različitim tehnikama koje su poznate prosečnim stručnjacima. Na primer, za supstituciju atoma ugljenika ugljenikom-11, mogu da se koriste različiti derivati kao što su [11C]metil jodid ili [11C]metil triflat (Welch M.J. i saradnici (2003) u Handbook of Radiopharmaceuticals - Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 1-848). U slučaju A, nekoliko metil grupa može da se obeleži sa ugljenikom-11, kao što su N,N-dimetilacetamid ili N-metilindol funkcionalne grupe.
U slučaju obeležavanja fluorom-18, radioizotop se može direktno vezati za jezgro strukture (A) nukleofilnom alifatičnom ili aromatičnom (uključujući heteroaromatičnu (Dolle F. i saradnici (2005) Curr. Pharm. Design 11: 3221-3235)) supstitucijom ili elektrofilnom supstitucijom ili vezivanjem preko dodatne spejser grupe, pri čemu su obe tehnike poznate prosečnim stručnjacima. (Kilbourn MR. (1990) u Fluorine-18 Labeling of Radiopharmaceuticals, Nuclear Science Series (Kilbourn MR Ed.), National Academy Press, Washington, D.C., 1-149; Lasne M.-C. i saradnici (2002) Topics in Current Chemistry 222: 201-258; Cai L. i saradnici (2008) Eur. J. Org. Chem. 17: 2853-2873; Dolle F. i saradnici (2008) u Fluorine and Health: Molecular Imaging, Biomedical Materials and Pharmaceuticals, Tressaud A, Haufe G (Eds). Elsevier: Amsterdam-Boston-Heidelberg-London-New York-Oxford-Paris-San Diego-San Francisco-Singapore-Sydney-Tokyo, 3-65). Od posebnog interesa je upotreba alkil, alkenil ili alkinil linkera za dodavanje atoma fluor-18 (Damont A. i saradnici (2008) J. Label. Compds Radiopharm. 51: 286-292; Dolle F. i saradnici (2006) Bioorg. Med. Chem. 14: 1115-1125; Dolle F. i saradnici (2007) J. Label. Compds Radiopharm. 50: 716-723).
U slučaju obeležavanja sa nekim drugim halogenom (kao što su brom-76, jod-123 ili jod-124), radioizotop može takođe da bude direktno vezan nukleofilnim ili elektrofilnim supstitucijama za jezgro strukture (A) ili vezan preko dodavanja spejser grupe, pri čemu su obe tehnike poznate prosečnim stručnjacima (Maziere B. i saradnici (2001) Curr. Pharm. Des. 7: 1931-1943; Coenen H.H. i saradnici (2006) u Radioiodination reactions for pharmaceuticals - Compendium for effective sinteza strategies, Coenen H.H., Mertens J., Maziere B. (Eds), Springer Verlag, Berlin-Heidelberg, 1-101).
U slučaju obeležavanja sa metalnim radioizotopima (kao što su galijum-68, bakar-64 ili tehnicijum-99m), poželjni pristup, koji će se razmatrati prosečan stručnjak, je upotreba bifunkcionalnog helatnog agensa na bazi, na primer, poliaminokarboksilat etilendiamin tetrasrićetne kiseline otvorenog lanca (EDTA) i dietilentriamin pentasirćetne kiseline (DTPA), makrociklične poliaminokarboksilne 1,4,7,10-tetraazaciklododekan-1,4,7,10-tetrasirćetne kiseline (DOTA), merkaptoacetildi- i triglicin (MAG2, MAG3), bis-(S-benzoil-tioglikoloil)diaminopropanoata ((SBT)2DAP) i hidrazinonikotinatne kiseline (HYNIC), koje grade komplekse sa katjonom radiometala na jednoj funkcionalnoj grupi i kovalentnu vezu sa jezgrom molekule na drugoj (Brunner U.K. i saradnici (1995) Radiotracer production - Radiometals and their chelates In Principle of Nuclear Medecine, Wagner H.N. (Ed). Saunders: Philadelphia, 220-228; Weiner R.E. i saradnici (2003) Chemistry of gallium and indium radiopharmaceuticals u Handbook of Radiopharmaceuticals -Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 363-400; Anderson C.J. i saradnici (2003) Chemistry of copper radionucleides and radiopharmaceutical products u Handbook of Radiopharmaceuticals - Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 401-422; Mahmood A. i saradnici (2003) Technetium radiopharmaceuticals u Handbook of Radiopharmaceuticals -Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 323-362).
Direktna adicija atoma fluor-18 (ili brom-76, jod-123 ili jod-124) može da se izvede, na primer, na 3-fenil i/ili piridazino[4,5-b]indol aromatičnim prstenovima, kao i na bilo kom drugom hemijski prihvatljivom položaju (kao što je acetamidna funkcionalna grupa). Indirektna adicija ovih radiohalogena (upotrebom spejser grupe), ili adicija prethodno pomenutih radioaktivnih izotopa metala (galijum-68, bakar-64 ili tehnicijum-99m, upotrebom helatnog sredstva) može takođe da se izvrši na bilo kom hemijski prihvatljivom položaju jezgra N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida (A) (videti prethodne reference).
- Administracija: poželjna adminsitracija radioobeleženih biomarkera je intravenozni način admisnitracije.
Prva realizacija je upotreba 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR (perifernog benzodiazepinskog receptora) i inflamacije povezane sa patološkim stanjima kod pojedinca, pri čemu je ovo jedinjenje radioobeleženo, gde je radioobeležavanje odabrano od ugljenika-11, radiohalogena i radiometala. Poželjno, ovo jedinjenje je radioobeleženo ugljenikom-11, a još bolje, radioobeleženo ugljenikom-11 na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 jezgra indola.
Sledećoj realizaciji, 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen sa radiometalima, poželjno na 3-fenil prstenu u para položaju na položaju 7 piridazino[4,5-b]indola kao zamena za atom hlora (sa ili bez spejser molekula, vide infra), ili na bilo kom N-metil položaju (N,N-dimetilacetamidne funkcionalne grupe ili metil grupe koja se nalazi na položaju 5 jezgra indola).
Sledećoj realizaciji, 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen sa radiohalogenima, poželjno radioobeležen sa radiohalogenom fluorom-18, poželjno na 3-fenil prstenu u para položaju, na položaju 7 piridazino[4,5-b]indola kao zamena za atom hlora (sa ili bez spejser molekula, vide infra), ili na bilo kom N-metil položaju (N,N-dimetilacetamidne funkcionalne grupe ili metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra).
U nekim realizacijama, detekcija nivoa PBR i inflamacije se izvodi PET vizuelizaicjom (pozitronska emisiona tomografija) ili SPECT vizuelizacijom (jednofotonska pozitronska emisiona kompjuterizovana tomografija).
U nekim aspektima pronalaska, radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida se koristi kao biomarker za otkrivanje promena nivoa PBR i inflamacije povezane sa patološkim stanjima, pri čemu su ta patološka stanja odabrana od oštećenja mozga kao što su šlog, ishemijska-reperfuziona povredai traumatsko oštećenje mozga; infekcije mozga kao što je encefalitis; neuroloških oboljenja kao što su multiple skleroza, Alzheimer-ova bolest, Parkinson-ova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, demencija, koritiko-bazalna degeneracija, Huntington-ova bolest i epilepsija; psihijatrijskih oboljenja kao što je šizofrenija; perifernih inflamatornih procesa kao što su pulmonarna inflamacija, ateroskleroza, kardijačna ishemija, renalna ishemija, reumatizam (fibrimijalgija), psorijatični artritis, reumatoidni artritis i osteoartritis; proliferativnih oboljenja kao što je kancer.
U nekim realizacijama pronalaska, radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida se koristi kao biomarker nivoa PBR i inflamacije, pri čemu inflamacija je neuroinflamacija.
U nekim aspektima pronalaska, radioobeležni oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida se koristi za procenu efikasnosti terapeutskog tretmana (lečenja).
Predmetni pronalazak takođe razmatra postupak za utvrđivanje PBR i inflamacije povezane sa patološkim stanjima koristeći radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida.
Sledećoj realizaciji, radioobeležni oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida sadrži radioobeleživač izabran između ugljenika-11, radiohalogena i radiometala. U nekim aspektima, radioobeležni oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida je obeležen sa ugljenikom-11.
U nekim ralizaicjama, radioobeležni oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida je radioobeležen na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra.
U sledećoj realizaciji, 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen sa radiometalima, poželjno na 3-fenil prstenu u para položaju, na položaju 7 piridazino[4,5-b]indola kao zamena za atom hlora (sa ili bez spejser molekula, vide infra), ili na bilo kom N-metil položaju (N,N-dimetilacetamidne funkcionalne grupe ili metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra).
U nekim realizacijama, 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen sa radiohalogenima, poželjno radioobeležen sa radiohalogenom fluorom-18, poželjno na 3-fenil prstenu u para položaju, na položaju 7 piridazino[4,5-b]indola kao zamena za atom hlora (sa ili bez spejser molekula, vide infra), ili na bilo kom N-metil položaju (N,N-dimetilacetamidne funkcionalne grupe ili metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra).
U nekim realizacijama pronalaska, patološka stanja su izabrana od oštećenja mozga kao što su šlog, oštećenje ishemijom-reperfusijom i traumatično oštećenje mozga; infekcije mozga kao što je encefalitis; neuroloških oboljenja kao što su multiple skleroza, Alzheimer-ova bolest, Parkinson-ova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, demencija, koritiko-bazalna degeneracija, Huntington-ova bolest i epilepsija; psihijatrijskih oboljenja kao što je šizofrenija; perifernih inflamatornih procesa kao što su pulmonarna inflamacija, ateroskleroza, kardijačna ishemija, renalna ishemija, reumatizam (fibrimijalgija), psorijatični artritis, reumatoidni artritis i osteoartritis; proliferativnih oboljenja kao što je kancer.
Još jedan aspekt u skladu sa pronalaskom je postupak za detekciju PBR i inflamacije povezane sa patološkim stanjima, pri čemu inflamacija je neuroinflamacija.
Još jedan aspekt u skladu sa pronalaskom je postupak za detekciju PBR i inflamacije povezane sa patološkim stanjima, koji se vrši za studije popunjenosti (zauzetosti).
Još jedan aspekt je postupak za utvrđivanje PBR i inflamacije povezane sa patološkim stanjima, gde ovaj postupak uključuje sledeće faze:
a) Adminsitraciju u radioobeleženog oblika 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida ;
b) Dobijanje slika u regionu od interesa u mozgu ili drugim perifernim tkivima korišćenjem PET (ili SPECT) tehnike ;
c) Kvantifikaciju nivoa PBR u regionu od interesa kvantifikacijom PET signala povezanog sa radioobeleženim oblikom 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida u ovom regionu od interesa;
d) Upoređivanje PET (SPECT) signala dobijenog u fazi c) sa signalom dobijenim u kontrolnom regionu od interesa;
e) Određivanje prisustva inflamacije povezane sa patološkim stanjima.
Predmetni pronalazak se takođe odnosi na dijagnostički omplett za određivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim stanjima i promenama u nivoima PBR povezanih sa patološkim stanjima, koji sadržiradioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida.
Primeri koji slede ilustruju predmetni pronalazak i nemaju za cilj da ograniče obim pronalaska. Iz razloga praktičnosti i lakšeg čitanja, jedinjenje 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida je u slikama i rezultatima označeno kao "A".
Slika 1: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A i [11C]PK11195 u oštećenom i intaktnom striatumu pacova. Vrednosti za nivoe su date kao procenat injektirane doze po kubnom centimetru u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 2: Odnos apsorpcije [11C]-A i [11C]PK11195 u povređenom vs. u intaktnom kontrolateralnom striatumu pacova.
Slika 3: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A u oštećenom (ipsi) i intaktnom striatumu pacova (contro). Strelica pokazuje daodato više od 1mg/kg PK11195 20 min nakon injektiranja [11C]-A u oštećeni (ipsi + PK) i intaktni kontralateralni (contro + PK) striatum pacova. Vrednosti nivoa su date kao procenat injektirane doze po kubnom centimetru u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 4: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A u oštećenim (ipsi A) i intaktnom striatumu pacova (contro A). Strelica pokazuje dodatak više od 1mg/kg A 20 min nakon injektiranja [11C]-A u oštećeni (ipsi A+ A) i intaktni kontralateralni (contro A + A) striatum pacova. Vrednosti nivoa su date kao procenat injektirane doze po kubnom centimetru u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 5: [11C]-A (18 nM) autoradiografija u delovima mozga pacova (20 µm) 7-8 dana nakon oštećenja. Ne-specifično vezivanje je određeno korišćenjem ili neobeleženog PK11195 (23 µM)ili A (22 µM), u višku. Specifičnost za PBR vs. na mesta vezivanja središnjeg (centralnog) benzodiazepina se procenjuje koristeći neobeleženi Flumazenil (27 µM) u višku Vrednosti nivoa su date kao dpm po arbitrarnoj jedinici oblasti. * označava značajnu razliku u odnosu na vezivanje [11C]-A (18 nM) u oštećenom striatumu.
Slika 6: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A i [11C]PK11195 u celom mozgu (isključen je cerebelum) 11-12 meseci starih APP/S1 i transgenskih miševa PS1 divljeg tipa. Vrednosti nivoa su date kao procenat injektirane doze po kubnom centimetru u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 7: [11C]-A (18 nM) autoradiografija u presecima celog mozga 20-23 meseca starih APP/PS1 i transgenskih miševa PS1 divljeg tipa. Ne-specifično vezivanje je određeno korišćenjem ili neobeleženog PK11195 (23 µM) ili A (22 µM), u višku. Specifičnost za PBR u odnosu na mesta vezivanja središnjeg (centralnog) benzodiazepina se određuje upotrebom neobeleženog Flumazenila (27 µM), u višku. Vrednosti nivoa su date kao dpm po arbitrarnoj jedinici oblasti/regiona.
Slika 8: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A u 4 različita regiona mozga ne-humanih primata (desni i levi striatum, prefrontalni korteks, cerebelum) i odgovarajućih PET zbirnihslika izabranih koronalnih isečaka mozga u toku 120 min u različitim vremenskim tačkama studije: početak (A,B) i 24 časa nakon oštećenja u desnom striatumu (C,D). Panel (E,F) pokazuje krive vreme-aktivnost za [11C]-A za 48 sati nakon oštećenja u levom striatumu i za 7 meseci nakon oštećenja u desnom striatumu. Vrednosti nivoa su date kao procenat injektirane doze po 100 mL (%ID/100 mL) u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 9: Krive vreme-aktivnost za [11C]-A u 4 različita regiona mozga (desni i levi striatum, prefrontalni korteks, cerebelum) i odgovarajućih PET zbirnih slika izabranih koronalnih isečaka mozga u toku 120 min u različitim vremenskim tačkama ispitivanja: početak (A,B) i 48 sati nakon oštećenja (C,D), 9 dana nakon ozlede (E,F) i 16 dana nakon oštećenja u levom striatumu i 48 sati nakon oštećenja u desnom striatumu (G,H). Strelica pokazuje vreme primene neobeleženog PK1195 (1 mg/kg) u višku. Nivoa su izražene kao procenat injektirane doze po 100 mL (%ID/100 mL) u funkciji vremena nakon injektiranja (min).
Slika 10: Analiza metabolita [11C]-A u plazmi i mozgu.
Slika 11: Izabrani ugljenik-11-obeleženi i fluor-18-obeleženi oblik A.
Postupci
Radioosinteze liganda
Obeležavanje ugljenikom-11
[11C]PK11195 ((R)-N-[11C]Metil-N-(1-metilpropil)-1-(2-hlorfenil)izohinolin-3-karboksamid, R-enantiomer). Dobijanje [11C]PK11195 se bazira na manjim modifikacijama objavljenih procesa (Camsonne C. i saradnici (1984) J. Label. Comp. Radiopharm 21: 985-991; Cremer J.E. i saradnici (1992) Int. J. Rad. Appl. Instrum. B. 19: 159-66; Boutin, H. i saradnici (2007) Glia 55: 1459-68; Boutin, H. i saradnici (2007) J. Nucl. Med. 48: 573-581) i obuhvata sledeće faze : (1) hvatanje, na -10°C, [11C]metil jodida u DMF/DMSO (2/1 (v:v), 300 µL) koji sadrži 1.5 do 2.0 mg prekursora za obeležavanje i 15-20 mg praškastog hidroksida (u višku); (2) zagrevanje na 110°C u toku 3 min; (3) rastvaranje smeše u 0.5 mL mobilne faze HPLC i (4) prečišćavanje pomoću semi-preparativne HPLC. Kontrole kvaliteta, posebno određivanja radiohemijske i hemijske čistoće, izvode se na alikvotama serija krajnjeg proizvoda.
[11C]-A obeležavanje na N-metilindol funkcionalnoj grupi: 7-hlor-N,N-dimetil-5-[11C]metil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid). Dobijanje [11C]-A obuhvata sledeće faze: (1) zadržavanje na -10°C [11C]metil triflata u DMF (300 µL) koji sadrži 0.2 do 0.3 mg prekursora za obeležavanje i 4 mg praškastog kalijum karbonata (u višku); (2) zagrevanje 3 min na 120°C; (3) prenošenje smeše u 0.5 mL mobilne faze HPLC i (4) prečišćavanje pomoću semi-preparativne HPLC. Kontrole kvaliteta, posebno određivanja radiohemijske i hemijske čistoće, izvode se na alikvotama serija krajnjeg proizvoda.
[11C]-A (Obeležavanje na N,N-dimetilacetamid funkcionalnoj grupi: 7-Hlor-N-[11C]metil-N,5-dimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid).
Dobijanje [11C]-A takođe obuhvata sledeće faze : (1) hvatanje na -10°C [11C]metil jodida u 1/2 (v:v) smeši DMF i DMSO (100/200 µL) koja sadrži 0.5 do 1.0 mg prekursora za obeležavanje i 5 µL 1M rastvora tetrabutilamonijumhidroksida u metanolu; (2) zagrevanje 3 min na 120°C; (3) rasstvaranje smeše u 0.5 mL mobilne faze u HPLC i (4) prečišćavanje pomoću semi-preparativne HPLC. Kontrole kvaliteta, posebno određivanja radiohemijske i hemijske čistoće, izvode se na alikvotama serija krajnjeg proizvoda.
Obeležavanje fluorom-18
Dobijanje svih fluorom-18-obeleženih derivata A uključuje najmanje sledeće faze : (1) fluorovanje pomoću izvora [18F]fluorida na umerenoj do visokoj temperaturi u odabranom rastvaraču (300 do 900 µL) koji sadrži 1 do 10 mg odgovarajućeg prekursora za obeležavanje i (2) prečišćavanje koristeći, na primer, semi-preparativnu HPLC. Kako je prethodno opisano, kontrole kvaliteta, posebno određivanja radiohemijske i hemijske čistoće, izvode se na alikvotama serija krajnjeg proizvoda.
Ne postoji posebno ograničenje za prirodu izvora anjona [18F]fluorida koji se koriste u ovoj reakciji i bilo koji izvori anjona [18F]fluorida koji se uobičajeno koriste u reakcijama ovog tipa mogu ovde podjednako da seupotrebe, pod uslovom da izvor nema neželjeno dejstvo na druge delove molekula. Primeri pogodnih izvora anjona [18F]fluorida su: [18F]fluoridi alkalnih metala, kao što su natrijum [18F]fluorid, kalijum [18F]fluorid, cezijum [18F]fluorid; amonijum [18F]fluorid, tetraalkilamonijum [18F]fluoridi, kao što je tetrabutilamonijum [18F]fluorid. Od ovih su poželjni [18F]fluoridi alkalnih metala, a posebno kalijum fluorid. Izvor anjona [18F]fluorida može da se aktivira prisustvom liganda koji je sposoban da stvara kompleks sa kontra katjonskim vrstama u izvoru anjona [18F]fluorida. Ligand može posebno da bude ciklični ili policiklični multidentatni ligand. U primere pogodnih liganda posebno spadaju krunski etri kao što je 1,4,7,10,13-pentaoksaciklooktadekan (18-C-6) ili kriptandi kao što je 4,7,13,16, 21,24-heksaoksa-1,10-diazabiciklo-[8,8,8]heksakozan, poznat kao K222®. Poželjno, izvor [18F]fluorid anjona je kompleks alkalni metal [18F]fluorid-kriptat, posebno kompleks kalijum [18F]fluorid-kriptat, a poželjno kalijum [18F]fluorid -4,7,13,16,21,24-heksaoksa-1,10-diazabiciklo-[8,8,8]heksakozan (K[18F]/K222). Kompleks K[18F]/K222® može da se dobije bilo kojim uobičajenim postupkom (Dolle F. i saradnici (1999) J. Med. Chem. 42: 2251-2259 ili Dolci L. i saradnici (1999) Bioorg. Med. Chem. 7: 467-479). Reakcija fluorinacije može da se izvrši u različitim rastvaračima i može da se obavi u širokom temperaturnom opsegu. Generalno, uobičajeno je da se reakcija izvodi na temperaturi od oko 50°C do oko 200°C, i češće korišćeni rastvarači su dimetilsulfoksid (DMSO), dimetilformamid (DMF) i acetonitril. Vreme potrebno za reakciju može takođe da varira u širokom opsegu (na primer od oko 5 min do 15 min), u zavisnosti od brojnih faktora, posebno od temperature reakcije, prirode reagenasa i rastvarača i količine upotrebljenog prekursora za obeležavanje (Kilbourn MR. (1990) u Fluorine-18 Labeling of Radiopharmaceuticals, Nuclear Science Series (Kilbourn MR Ed.), National Academy Press, Washington, D.C., 1-149; Lasne M.-C. i saradnici (2002) Topics in Current Chemistry, 222: 201-258; Dolle F. i saradnici (2005) Curr. Pharm. Design 11: 3221-3235; Cai L. i saradnici (2008) Eur. J. Org. Chem. 17: 2853-2873; Dolle F. i saradnici (2008) u Fluorine and Health: Molecular Imaging, Biomedical Materials and Pharmaceuticals, Tressaud A, Haufe G (Eds). Elsevier: Amsterdam-Boston-Heidelberg-London-New York-Oxford-Paris-San Diego-San Francisco-Singapore-Sydney-Tokyo, 3-65). Ovako dobijena radiofluorovana jedinjenja se obično prečišćavanju pomoću HPLC kako je opisano za ugljenik-11-obeležene derivate, ali mogu takođe da se regenerišu ili prethodno prečiste iz reakcione smeše upotrebom drugih poznatih tehnika hromatografije ili jednostavno filtriranjem kroz prethodno pripremljenu kolonu za razdvajanje.
[18F]Fluoroetoksi-A (7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-(4-[18F]fluoroetoksi)-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid)
Dobijanje [18F]fluoroetoksi-A obuhvata sledeće faze : (1) rastvaranje K[18F]F-Kryptofix®222 kompleksa ua DMSO rastvoru (600 µL) koji sadrži toziloksi prekursor za obeležavanje (2.0-8.0 mg); (2) zagrevanje 3-10 min na 165°C; (3) prethodno prečišćavanje pomoću C-8 ili C-18 PrepSep kartridža i (4) prečišćavanje pomoću semi-preparativne HPLC. Kontrole kvaliteta, posebno određivanja radiohemijske i hemijske čistoće, izvode se na alikvotama serija krajnjeg proizvoda.
Obeležavanje sa drugim halogenima (brom-76, jod-123, jod-124)
Za dobijanje svih drugih radiohalogenizovanih derivata (brom-76, jod-123, jod-124) koriste se standardne tehnike i procedure koje su poznate prosečnim stručnjacima (Maziere B. i saradnici (2001) Curr. Pharm. Des. 7: 1931-1943; Coenen H.H. i saradnici (2006) u Radioiodination reactions for pharmaceuticals - Compendium for effective sinteza strategies, Coenen H.H., Mertens J., Maziere B. (Eds), Springer Verlag, Berlin-Heidelberg, 1-101).
Obeležavanje sa radiometalima (galijum-68, bakar-64 i tehnicijum-99m)
Za dobijanje derivata obeleženih sa radiometalima (galijum-68, bakar-64 i tehnicijum-99m) se takođe koriste standardne tehnike koje su poznate prosečnim stručnjacima (Brunner U.K. i saradnici (1995) Radiotracer production - Radiometals and their chelates u Principle of Nuclear Medecine, Wagner H.N. (Ed). Saunders: Philadelphia, 220-228; Weiner R.E. i saradnici (2003) Chemistry of gallium and indium radiopharmaceuticals u Handbook of Radiopharmaceuticals - Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 363-400; Anderson C.J. i saradnici (2003) Chemistry of copper radionucleides and radiopharmaceuticals products u Handbook of Radiopharmaceuticals - Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 401-422; Mahmood A. i saradnici (2003) Technetium radiopharmaceuticals u Handbook of Radiopharmaceuticals -Radiochemistry and Applications (Welch MJ, Redvanly CS Eds.), New York-Chichester-Brisbane-Toronto, Wiley-lnterscience Pub., 323-362).
Formulacija
Formulacija [11C]PK11195, [11C]-A ili bilo kog drugog radioobeleženog A derivata u obliku i.v. rastvora za injekcije često uključuje Waters SepPak® kertridž za uklanjanje HPLC rastvarača i/ili jednostavno razblaživanje sa 0.9% vodenim rastvorom NaCl (fiziološki rastvor) do koncentracije etanola ispod 10%.
Modeli životinja
Sve studije su sprovedene u skladu sa francuskim zakonskim propisima i evropskim smernicama.
Model neuroinflamacije kod pacova
Wistar pacovi (prosečne telesne težine 300 g, centre d'Elevage Rene Janvier, France) se čuvaju u termoregulisanim uslovima sa kontrolisanom vlagom u 12h/12h dan/noć ciklusima (dan između 7h pre podne i 7h posle podne) i dozvoljen im je slobodan pristup hrani i vodi. Neuroinflamacija je indukovana stereotaksičnom injekcijom AMPA (alfa-amino-3-hidroksi-5-metil-4-izoksazolpropionat) (15 mM u PBS puferu, Sigma®) koristeći mikrošpric od 1 µL i mikropumpu (brzina injektiranja: 0.5µL/min, UltraMicroPump II® and Micro4® Controller, WPI Inc., USA), kako je prethodno opisano (Boutin, H. i saradnici (2007) Glia 55: 1459-68.; Boutin, H. i saradnici (2007) J. Nucl. Med. 48: 573-581). AMPA (0.5 µL) se injektira u desni striatum (Bregma +0.7 mm, od sagitalne suture: 2.7 mm, dubina od površine mozga: 5.5 mm). Životinje se održavaju u stanju normotermije (telesna temperatura: 36.7±0.5°C, srednja vrednost±SD) u toku intervencije upotrebom pokrivača za zagrevanje (Homeothermic Blanket Control Unit, Harvard Apparatus Limited®, Edenbridge, Kent, UK).
Model neuroinflamacije kod primata
Cynomolgus macaques (Macaca fascicularis) težine 4-5 kg se čuvaju u termoregulisanim uslovima sa kontrolisanom vlagom u 12h/12h dan/noć ciklusima (svetlo između 7h pre podne i 7h posle podne) i dozvoljen im je slobodan pristup hrani i vodi. Neuroinflamacija se indukuje lokalnim stereotaksičnim injekcijama hinolinske kiseline (hinolinska kiselina, Sigma, St. Louis, MO; rastvorena u 0.1 M PBS, pH 7.2) u striatum primata (1 mesto uboda u kaudat i 2 mesta uboda u putamen) u toku dve različite hirurške intervencije, pri čemu se hinolinska kiselina injektira u jednu hemisferu na dan 1, a u drugu hemisferu 2 nedelje ili 7 meseci kasnije (Slike 8 i 9). U toku svake hirurške intervencije životinje primaju 60nmol hinolinske kiseline injektirane na tri različita mesta striata, na jedno mesto 5 µL u kaudat i na dva mesta po 10 µL u putamen, koristeći špric Hamilton od 10 µL sa iglom od 26 godža. Stereotaktične koordinate, određene u skladu sa stereotaktičnim atlasom Swabo and Cowan (1984), su kako sledi: mesto na kaudatu [AP +19 mm, ML ±6 mm, DV -14 mm od sinusa] ; mesto 1 na putaminalu [AP: +19 mm, ML: ±12 mm, DV: -17 mm od stereotaksične nule]; mesto 2 na putaminalu [AP: +17 mm, ML: ±13 mm, DV: -16 mm od sinusa]. Ekscitotoksin se injektira brzinom od 0.1 µL/min a injekciona igla se ostavi na mestu još 5 minuta da se izbegne povratni protok toksina. U toku intervencije, temperatura primat se održava na normotermičkoj temperaturi (rektalna temperatura, 36 °C ± 0.6°C, srednja vrednost ± SD). Nakon uklanjanja igle, koža se ušije i životinje ostave da se oporave od anestezije i vrate u svoje kaveze kada su potpuno budne.
Transgenski miševi
Postignuto je generisanje i karakterizacija pojedinačnih PS1M146L (PS1) i dvostrukih APP751SLxPS1M146L (APPxPSI) transgenskih miševa, kako je prethodno opisano (Blanchard, V. i saradnici (2003) Exp. Neurol. 184: 247-263). Kod ovih životinja APP se pojavljuje u visokoj nivoa u svim kortikalnim neuronima pod kontrolom promotora Thy-1. Humani PS1 sa mutacijom M146L se pojavljuje pod kontrolom promotora HMG-CoA reduktaze. Nađeno je da nivo stvaranja amiloida potpuno odgovara starosti jedinke. I pojedinačni PS1 i dvostruki APPxPSI miševi, dobijeni od Sanofi-Aventis, su korišćeni za PET oslikavanje u starosti od 11-12 meseci, a za autoradiografiju u starosti od 20-23 meseca.
Dobijanje mikro PET snimaka i nivoa
Pacovi i transgenski miševi
MicroPET oslikavanje se izvodi 7 dana nakon AMPA injekcije kod pacova i kod 11-12 meseci starih transgenskih miševa. I kod miševa i kod pacova, anestezija se indukuje 5% izofluranom, i nakon toga se održava sa 2-2.5% izoflurana u smeši sa 70%/30% NO2/O2. Za PET sknerianje, glava pacova se stavi u ručno rađeni stereotaksični okvir kompatibilan sa dobijanjem PET i pacovi se održavaju u normotermičkom stanju (rektalna temperatura: 36.7±0.5°C, srednja vrednost±SD). Miševi se postave na krevet opremljen maskom za anesteziju koja dozvoljava zagrevanje vazduha koji protiče a rektalna temperatura se prati pomoću Homeothermic Blanket Control Unit. Svi protokoli prikazivanja se izvode sa Concorde Focus 220 PET skenerom koristeći ili [11C]PK11195 ili [11C]-A.
Kod pacova, radioobeležena jedinjenja i neobeleženi ligandi se injektiraju u kaudalnu venu preko katetera od 24 godža. Radioobeležena jedinjenja se injektiraju istovremeno sa početkom dobijanja PET, a neobeležena jedinjenja se injektiraju 20 minuta nakon injektiranja radiofarmaka. Nivoa PET su dobijene u toku 80 minuta. Kod miševa, radioobeležena jedinjenja se injektiraju u kaudalnu venu preko igle od 28 godža neposredno pre početka snimanja PET. Nivoa PET su dobijene u toku 60 minuta.
Primati
Sesije vizuelizacije se izvode pre i u različito vreme posle injekcije hinolinske kiseline (24 sata, 48 sati, 9 dana, 16 dana i 7 meseci nakon ozlede). [11C]-A se injektira, a kinetike mozga se prate 90 minuta pomoću PET.
Jedan sat pre PET vizuelizacije, životinje se anesteziraju intramuskularnom injekcijom smeše ketamin / ksilazin (15 mg/kg /1.5 mg/kg) i intubiraju. Nakon toga se kateteri postave u safenoznu venu zainjekciju izotopa i u femoralnu arteriju zbog uzimanja uzoraka krvi. Životinje se održavaju anesteziji intravenoznom injekcijom propofola (Diprivan® 1%; 0.05
mg.kg-1.min-1).
Kako bi se osigurala pravilan položaj životinje u aparatu, glave životinja se postave u ručno napravljen stereotaktični okvir. PET skeniranje se izvodi pomoću Focus micro-PET visoke rezolucije (CTI-Siemens, Knoxville, TN), koji snima 95 dodirnih (graničnih) ravni istovremeno. Kako bi se umanjila korekcija, prvo se izvrši transmisija snimka pomoću izvora 68Ge, rotirajuće šipke . Macaques se intravenozno injektira 192.29 ± 33.67 MBq [11C]-A i snimanje se izvodi u toku 90 minuta. Sve PET akvizicije se izvode u obliku liste (3D oblik) a prikazi se rekonstruišu sledećim vremenskim okvirima: (4 slika za 25 s) + (4 slika za 30 s) + (2 slika za 1 min) + (5 slika za 2 min) + (3 slika za 5 min) + (3 slika za 10 min) i (1 slika za 15 min), za ukupno 90 min za [11C]-A.
Analize vizuelizacije
Analize PET vizuelizacije se vrše pomoću ASIPro VM™ (CTI Concorde Microsystems' Analysis Tools and System Setup/Diagnostics Tool) i Brainvisa/Anatomist (http://brainvisa.info/).
Analize metabolita u krvi i mozgu pacova
Prirodnim ili operisanim odraslim mužjacima Wistar pacova (telesne težine 300-400 g) se injektira i.v u repnu venu [11C]-A. Životinje se uspavaju 10, 20 ili 30 minuta kasnije. Uzimaju se uzorci krvi i plazma izdvoji centrifugiranjem (5 min, 3000 rpm). Proteini plazme se istalože iz 400 µL seruma dodavanjem 400 µL acetonitrila. Nakon centrifugiranja (5 min, 3000 rpm), supernatant se nanese na HPLC kolonu. Mozak pacova se odvoji i hemisfere se razdvoje. Izvrši se homogenizacija sonikacijom u 1 mL acetonitrila po hemisferi. Nakon brzog centrifugiranja, supernatant se odvoji od pelete i koncentruje pod sniženim pritiskom pre nanošenja na HPLC (videti deo radiohemije za HPLC uslove).
Autoradiografija
[11C]-A autoradiografija se izvodi koristeći 20 µm dela mozga pacova (7-8 dana nakon ozlede) ili miševa (20-23 meseci). Ne-specifično vezivanje se procenjuje koristeći ili neobeleženi PK11195 ili A u višku. Specifičnost za PBR u odnosu na mesta vezivanja centralnog benzodiazepina se procenjuje koristeći neobeleženi Flumazenil u višku. Delovi se inkubiraju 20 minuta u Tris puferu (TRIZMA pre-set Crystals, Sigma®, podešen na pH 7.4 pri 4°C, 50 mM sa NaCl 120 mM), nakon toga se isperu 2 puta u toku 2 minuta sa hladnim puferom, a nakon toga brzo isperu u hladnoj destilovanoj vodi. Delovi se nakon toga postave u direktan kontakt sa Phosphor-Imager skrinom i ostave izloženi u toku noći. Autoradiogrami se analizirani pomoćuImageQuant™ softver.
PRIMER 1
[11C]PK11195 radiosinteze: Završno HPLC prečišćavanje [11C]PK11195 se izvodi na semi-preparativnoj Waters Symmetry® C-18 HPLC koloni (eluent: voda / acetonitril / TFA : 40 / 60/0.1 [v:v:v] ; brzina protoka : 7 mL/min), a sakuplja se pik koji odgovara radiohemijski čistom [11C]PK11195 (Rt : 6.5-7.0 min). Uobičajeno, polazećii od 55.5 GBq [11C]CO2 ciklotron proizvodne serije, dobija se približno 4.5-5.0 GBq [11C]PK11195 u toku 30 min radiosinteze (uključujući HPLC prečišćavanje i formulaciju). Radiohemijska čistoća (određena analitičkom HPLC na Waters Symmetry-M® C-18 koloni) je veća od 95%, i specifična radioaktivnost je u rasponu od 50 do 90 GBq/µmol (na kraju radiosinteze).
PRIMER 2
[11C]-A radiosinteze (Obeležavanje na N-metilindol funkcionalnoj grupi): Završno HPLC prečišćavanje [11C]-A se izvodi na semi-preparativnoj Zorbax® SB-C-18 HPLC koloni (eluent: 0.9% vodeni rastvor NaCl / EtOH / 1M vodeni rastvor fosfatnog pufera (pH 2,3): 50 / 50 / 0.1 [v:v:v]; brzina protoka : 6 mL/min), a beleži se pik koji odgovara radiohemijski čistom [11C]-A (Rt : 8.0-8.5 min). Uobičajeno, počevši od 55.5 GBq [11C]CO2 ciklotron proizvodne serije, dobija se približno 4.5-6.0 GBq [11C]-A u toku 25 min radiosinteze (uključujući HPLC prečišćavanje i formulaciju). Radiohemijska čistoća (određena analitičkom čistoćom HPLC na Waters Symmetry-M® C-18 koloni) je veća od 95% a specifična radioaktivnost je u rasponu od 50 do 90 GBq/µmol (na kraju radiosinteze).
PRIMER 3
[11C]-A radiosinteze (Obeležavanje na N,N-dimetilacetamid funkcionalnoj grupi): Završno HPLC prečišćavanje [11C]-A se izvodi na semi-preparativnoj SymmetryPrep® C-18 HPLC koloni (eluent: voda / acetonitril / TFA : 50 / 50 / 0.1 [v:v:v] ; brzina protoka : 5 mL/min) a beleži se pik koji odgovara radiohemijski čistom [11C]-A (Rt: 8.0-8.5 min). Uobičajeno, polazeći od 55.5 GBq [11C]CO2 ciklotron proizvodne serije, dobija se približno 3.5-5.0 GBq of [11C]-A u toku 25 min radiosinteze (uključujući HPLC prečišćavanje i formulaciju). Radiohemijska čistoća (određena analitičkom čistoćom HPLC na Waters Symmetry-M® C-18 koloni) je veća od 95% a specifična radioaktivnost je u rasponu od 50 do 90 GBq/µmol (na kraju radiosinteze).
PRIMER 4
i) sinteza 4-hidroksi-A. 4-Hidroksi-A može da se resintetiše u skladu sa WO00/44384. Rf: 0.15 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (DMSO-d6) δ 9.71 (s, 1H), 7.94 (s, 1H),7.86 (d, 1H, J: 8.4 Hz), 7.39 (d, 1H, J: 8.4 Hz), 7.32 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 6.84 (d, 2H, J: 8.8 Hz),4.27 (s, 3H), 4.20 (s, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.84 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d6) δ 168.6 [C], 157.1 [C], 154.8 [C], 141.2 [C], 140.9 [C], 133.6 [C], 132.1 [C], 130.9 [C], 127.8 [2.CH], 124.0 [CH], 122.6 [CH], 118.9 [C], 117.3 [C], 115.3 [2.CH], 111.6 [CH], 40.0 [CH2], 37.4 [CH3], 35.4 [CH3], 32.0 [CH3].
ii) radiosinteza [11C]Metoksi-A. Obeležavanje sa ugljenikom-11 i završno HPLC prečišćavanje može da se izvrši kako je opisano za dobijanje [11C]-A (primer 2 / primer 3) koristeći 4-hidroksiderivat prethodno date sinteze za A (primer 4i).
PRIMER 5
Opšta procedura za sintezu (fluoro)alkoksi-A i tosiloksialkoksi-A. U suspenziju K2CO3 (101 mg, 0.73 mmol) u bezvodnom DMF (8-12 mL) se doda 4-hidroksiderivat od A (150 mg, 0.36 mmol, videti WO00/44384), kao rastvor u bezvodnom DMF (2 mL). Reaktivna smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi, a nakon toga se postepeno dodaje odgovarajući reagens za alkilaciju (2 eq.) u obliku rastvora u DMF (2 mL). Dobijena smeša se meša 2 sata na 70°C i meša još jedan sat na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga neutrališe dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl i ekstrahuje sa CH2Cl2. Organski slojevi se kombinuju, isperu sa rastvorom soli, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju do sušenja.
Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša CH2Cl2/MeOH 98:2 do 95:5 v/v kao eluent) da se dobije očekivani (fluoro)alkoksi-A u obliku belog praška ili bele pahuljaste čvrste supstance.
PRIMER 6
Sinteza metoksi-A. Upotrebljena je prethodno data opšta procedura (primer 5) sa metiljodidom pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 40%. Rf : 0.35 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (CDCl3) δ 7.94 (d, 1H, J: 8.4 Hz), 7.53 (m, 3H), 7.33 (dd, 1H, J: 8.4, 1.6 Hz), 7.00 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 4.32 (s, 3H), 4.18 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.00 (s, 3H). 13C NMR (CDCl 3) δ 168.4 [C], 158.9 [C], 155.3 [C], 141.6 [C], 140.1 [C], 134.6 [C], 133.2 [C], 131.3 [C], 127.3 [2.CH], 123.3 [CH], 123.0 [CH], 119.0 [C], 117.4 [C], 113.9 [2.CH], 110.6 [CH], 55.5 [CH3], 39.6 [CH2], 37.6 [CH3], 35.7 [CH3], 31.6 [CH3].
PRIMER 7
Sinteza Fluoroetoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa 2-fluoroetil-4-metilbenzensulfonatom (sintetizovano kako su opisali Damont A. i saradnici (2008) J. label. Compds Radiopharm. 51: 286-292) pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 63%. Rf: 0.38 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.89 (d, 1H, J: 8.8 Hz), 7.58 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.54 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 7.34 (dd, 1H, J: 8.8, 1.6 Hz), 7.03 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 4.78 (dt, 2H, J2H-F: 47.6, J3h-h : 4.0 Hz), 4.32 (s, 3H), 4.27 (dt, 2H, J3H-F: 28.4 Hz, J3H-H: 4.0 Hz), 4.16 (s, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.96 (s, 3H). 13C NMR (CD2Cl2) δ 168.2 [C], 157.6 [C], 155.1 [C], 141.3 [C], 140.7 [C], 140.3 [C], 135.4 [C], 132.8 [C], 127.4 [2.CH], 123.2 [CH], 122.6 [CH], 118.9 [C], 117.2 [C], 114.3 [2.CH], 110.7 [CH], 82.0 [d, J1C-F: 169 Hz, CH2], 67.5 [d, J2C-F: 20 Hz, CH2], 39.5 [CH2], 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.6 [CH3]. izračunato za C23H22ClFN4O3.0.15 H20: C, 60.11, H, 4.89, N, 12.19, dobijeno : C, 60.00, H, 4.96, N, 12.18.
PRIMER 8
Sinteza fluoropropoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa 3-fluoropropil-4-metilbenzensulfonatom pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 58%. Rf : 0.39 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.89 (d, 1H, J: 8.4 Hz), 7.58 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.52 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 7.34 (dd, 1H, J: 8.4, 1.6 Hz), 7.01 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 4.67 (dt, 2H, J2H-F: 46.8 Hz, J3H-H : 6.0 Hz), 4.31 (s, 3H), 4.16 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 2.20 (dq5, 2H, J3H-F: 26.0 Hz, J3H-H: 6.0). 13C NMR (CD2Cl2) δ 168.2 [C], 158.0 [C], 155.1 [C], 141.3 [C], 140.3 [C], 135.0 [C], 132.8 [C], 131.3 [C], 127.3 [2.CH], 123.2 [CH], 122.5 [CH], 119.0 [C], 117.2 [C], 114.2 [2.CH], 110.7 [CH], 80.8 [d, J1C-F: 163 Hz, CH2], 63.9 [d, J3C-F: 6.0 Hz, CH2], 39.5 [CH2], 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.5 [CH3], 30.3 [CH2, J2C-F: 20.0 Hz].
PRIMER 9
Sinteza fluorobutoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa 4-fluorobutilbromidom pri čemu se dobija traženo jedinjenje uprinosu od 70%. Rf : 0.40 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.90 (d, 1H, J: 8.8 Hz), 7.58 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.51 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 7.34 (dd, 1H, J: 8.8, 1.6 Hz), 6.99 (d, 2H, J: 9.2 Hz), 4.54 (dt, 2H, J2H-F: 47.2 Hz, J3H-H : 5.6 Hz), 4.33 (s, 3H), 4.16 (s, 2H), 4.08 (t, 2H, J: 5.6 Hz), 3.19 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 1.97-1.85 (m, 4H). 13C NMR (CD2Cl2) δ 168.2 [C], 158.2 [C], 155.1 [C], 141.3 [C], 140.2 [C], 134.9 [C], 132.8 [C], 131.4 [C], 127.3 [2.CH], 123.2 [CH], 122.5 [CH], 119.0 [C], 117.2 [C], 114.2 [2.CH], 110.7 [CH], 83.8 [d, J1c-f: 163 Hz, CH2], 67.6 [CH2], 39.5 [CH2], 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.5 [CH3], 27.1 [CH2, J2C-F: 20.0 Hz], 25.1 [CH2, J3C-F: 5.0 Hz].
PRIMER 10
Sinteza 2-(Fluoroetoksi)etoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa 2-(2-fluoroetoksi)etil-4-metilbenzensulfonatom pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 69%. Rf : 0.45 (SiO2-TLC (CH2Cl2/aceton: 80/20 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.91 (d, 1H, J: 8.4 Hz), 7.60 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.54 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 7.36 (dd, 1H, J: 8.4, 1.6 Hz), 7.04 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 4.61 (dt, 2H, J2H-F: 48.0 Hz, J3H-H : 4.0 Hz), 4.34 (s, 3H), 4.22 (t, 2H, J: 4.8 Hz), 4.17 (s, 2H), 3.91 (t, 2H, J: 4.8 Hz), 3.83 (dt, 2H, J3H-F: 30.0, J3H-H: 4.0 Hz), 3.21 (s, 3H), 2.98 (s, 3H). 13C NMR (CD2Cl2) δ 168.2 [C], 157.9 [C], 155.1 [C], 141.3 [C], 140.3 [C], 135.1 [C], 132.8 [C], 131.4 [C], 127.3 [2.CH], 123.2 [CH], 122.5 [CH], 119.0 [C], 117.2 [C], 114.3 [2.CH], 110.7 [CH], 83.2 [d, J1c-F: 167 Hz, CH2], 70.4 [d, J2C-F: 19 Hz, CH2], 69.7 [CH2], 67.8 [CH2], 39.5 [CHJ, 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.6 [CH3].
PRIMER 11
Sinteza 2-(2-(Fluoroetoksi)etoksi)etoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa 2-(2-(2-fluoroetoksi)etoksi)etil-4-metilbenzensulfonatom pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 63%. Rf: 0.32 (SiO2-TLC (CH2Cl2/aceton: 80/20 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.91 (d, 1H, J: 8.8 Hz), 7.60 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.54 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 7.36 (dd, 1H, J: 8.8, 1.6 Hz), 7.04 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 4.57 (dt, 2H, J2H-F: 47.6 Hz, J3H-H : 4.4 Hz), 4.33 (s, 3H), 4.21 (t, 2H, J: 4.4 Hz), 4.17 (s, 2H), 3.88 (t, 2H, J: 4.8 Hz), 3.80-3.65 (m, 6H), 3.21 (s, 3H), 2.98 (s, 3H). 13C NMR(CD2Cl2) δ 168.2 [C], 158.0 [C], 155.1 [C], 141.3 [C], 140.3 [C], 135.1 [C], 132.8 [C], 131.4 [C], 127.3 [2.CH], 123.2 [CH], 122.5 [CH], 119.0 [C], 117.2 [C], 114.3 [2.CH], 110.7 [CH], 83.2 [d, J1c-F: 167 Hz, CH2], 70.7 [CH2], 70.6 [CH2], 70.3 [d, J2C-F: 19 Hz, CH2], 69.6 [CH2], 67.8 [CH2], 39.5 [CH2], 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.6 [CH3].
PRIMER 12
Sinteza tosiloksietoksi-A. Upotrebljena je prethodno opšta procedura (primer 5) sa etan-1,2-diil bis(4-metilbenzensulfonatom) (sintetizovano kako su opisali Damont A. i saradnici (2008) J. label. Compds Radiopharm. 51: 286-292) pri čemu se dobija traženo jedinjenje u prinosu od 45%. Rf: 0.72 (SiO2-TLC (CH2Cl2/MeOH: 95/5 v:v)). 1H NMR (CD2Cl2) δ 7.89 (d, 1H, J: 8.8 Hz), 7.84 (d, 2H, J: 8.4 Hz), 7.60 (d, 1H, J: 1.6 Hz), 7.53 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 7.41 (d, 2H, J: 8.4 Hz), 7.36 (dd, 1H, J: 8.8, 1.6 Hz), 6.91 (d, 2H, J: 8.8 Hz), 4.40 (t, 2H, J: 4.4 Hz), 4.32 (s, 3H), 4.22 (t, 2H, J: 4.4 Hz), 4.17 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.98 (s, 3H), 2.48 (s, 3H). 13C NMR (CD2Cl2) δ 168.1 [C], 157.2 [C], 155.0 [C], 145.2 [C], 141.2 [C], 140.3 [C], 135.5 [C], 132.8 [C], 132.7 [C], 131.3 [C], 129.9 [2.CH], 127.9 [2.CH], 127.4 [2.CH], 123.2 [CH], 122.6 [CH], 118.9 [C], 117.2 [C], 114.4 [2.CH], 110.7 [CH], 68.3 [CH2], 65.8 [CH2], 39.5 [CH2], 37.4 [CH3], 35.2 [CH3], 31.6 [CH3], 21.3 [CH3]. Tosiloksipropoksi-A, tosiloksibutoksi-A, 2-(tosiloksietoksi)etoksi-A i 2-(2-(tosiloksietoksi)etoksi)etoksi-A kao prekursorsi za obeležavanje sa fluorom-18 prethodno opisanih fluoroalkoksi-A derivata mogu da se izrade kako je prethodno opisano sa odgovarajućim reagensom za alkilaciju.
PRIMER 13
Radiosinteza [18F]Fluoroetoksi-A: Završno HPLC prečišćavanje [11C]-A se izvodi na semi-preparativnoj Symmetry® C-18 HPLC koloni (eluent: voda / acetonitril / TFA : 60/40/0.1 [v:v:v] ; brzina protoka : 5 mL/min), a beleži se pik koji odgovara radiohemijski čistom [18F]fluoroetoksi-A (Rt: 11.0-13.0 min). Počevši od 37 GBq [18F]fluorid ciklotron proizvodne serije, približno 3.7 GBq [18F]fluoroetoksi-A je dobijeno u toku 90 min radiosinteze (uključujući HPLC prečišćavanje i formulaciju). Radiohemijska čistoća (određena analitičkom čistoćom HPLC na Waters Symmetry-M® C-18 koloni) je veća od 95% a specifična radioaktivnost veća od 50 GBq/µmol (na kraju radiosinteze). [18F]Fluoropropoksi-A, [18F]fluorobutoksi-A, 2-([18F]fluoroetoksi)etoksi-A i 2-(2-([18F]fluoroetoksi)etoksi)etoksi-A mogu da se izrade kako je prethodno opisano od odgovarajućih tosiloksialkoksi-A derivata (primer 12) kao prekursorsa za fluor-18-obeležavanje.
PRIMER 14
Apsorpcija [11C]-A je značajno veća u oštećenom striatumu AMPA-injektiranih pacova (region u kome je indukovana ekspresija PBR) u poređenju sa intaktnim kontrolateralnim striatumom gde se ne očekuje ili se očekuje eksprimiranje neznatnih količina PBR (Slika 1). Apsorpcija [11C]-A je takođe značajno veće nego apsorpcija dobijeno sa odgovarajućim PBR PET ligandom, [11C]PK11195, u oštećenom striatumu (Slika 1). Odnos apsorpcije u oštećenom u odnosu na intaktni striatum je takođe značajno veći za [11C]-A nego za [11C]PK11195 (Slika 2). Potencijal vezivanja i R1 su značajno veći za [11C]-A nego za [11C]PK11195 (BP = 1.65 ± 0.36 u odnosu na 0.66 ± 0.15; R1 = 1.26 ± 0.08 u odnosu na 1.10 ± 0.05).
I neobeleženi PK11195 (Slika 3) i A (Slika 4) (1 mg/kg i.v.; 20 min nakon [11C]-A injekcije) značajno smanjuju apsorpciju [11C]-A u oštećenom striatumu mozga. Oba neobeležena jedinjenja indukuju malo povećanje u vezivanju [11C]-A u kontrolateralnom delu, što je verovatno zbog povećanja koncentracije [11C]-A u krvi do koga dolazi zbog oslobađanja [11C]-A iz ekstra-cerebralnih mesta vezivanja.
Analiza metabolita koji se nalazi u krvi i plazmi pacova 10 i 20 min nakon injekcije [11C]-A i metabolita koji se nalaze u mozgu pacova 10, 20 i 30 min nakon injekcije[11C]-A u osnovi registruju samo osnovno jedinjenje (Slika 10).
Dodatno, autoradiografija vezivanja [11C]-A na delovima mozga preslikava rezultate slika od visoko ipsilateralnog do kontralateralnog odnosa (3.8), koji je poništen viškom neobeleženog PK11195 ili A (Slika 5). Mala, ali značajna redukcija vezivanja [11C]-A je uočena sa neobeleženim flumazenilom, antagonistom benzodiazepina (Slika 5)
PRIMER 15
I kod APPxPSI i divljeg tipa PS1 transgenskih miševa, apsorpcija [11C]-A u celom mozgu (izuzev cerebeluma) je veće nego apsorpcija [11C]PK11195 (Slika 6). Međutim, apsorpcija i [11C]-A i [11C]PK11195 nije značajno veće kod APPxPSI u odnosu na divlji tip PS1. Nasuprot tome, specifično vezivanje [3H]-A je približno 2-puta veće u sekcijama celog mozga kod APPxPSI miševa u poređenju sa divljim tipom PS1 miševa (Slika 7).
Ovi rezultati pokazuju da [11C]-A može specifično da detektuje povećanje vezivanja PBR i inflamacije u modelu akutne neuroinflamacije kod pacova i u modelu Alzheimer-ove bolesti kod miševa. In vivo, PET oslikavanje povrđuje da [11C]-A može da se koristi za prikaz prekomernog pojavljivanja PBR receptora i neuroinflamacije kod glodara. Osim toga, vezivanje PBR receptora uočeno PET vizuelizacijom sa [11C]-A je veće nego što je uočeno sa referentnim PET ligandom PBR receptora, [11C]PK11195.
PRIMER 16
Apsorpcija [11C]-A je značajno veća u oštećenom desnom striatumu primata koji je primio injekciju hinolinske kiseline u poređenju sa apsorpcijam [11C]-A u kontralateralnom striatumu bez injekcije i u dva kontrolna regiona mozga bez injekcije (cerebelum, prefrontalni korteks) 24 sata nakon injekcije eksitotoksina (Slika 8). Apsorpcija [11C]-A u kontralateralnom striatumu bez injekcije ostaje stabilno i na istom nivou kao apsorpcija [11C]-A u regionima mozga primata bez injekcije (Slika 8). Povećanje u apsorpciji [11C]-A može još da se vizualizuje 48 sati nakon injekcije ekscitotoksina (u levu hemisferu), dok je apsorpcija [11C]-A 7 meseci nakon injekcije ekscitotoksina (kinetika u desnom striatumu oštećenom 7 meseci ranije) vraćeno na početne nivoa . Detaljnija karakterizacija rane faze neuroinflamacije pokazuje da povećanje apsorpcije [11C]-A može da se vizualizuje od 24 sata pa do 16 dana (Slika 9). Sistemska primena velikog viška neobeleženog PK11195 30 minuta nakon injekcije radioizotopa ima za rezultat specifično pomeranje vezivanja [11C]-A u oštećenom striatumu bez primetnih promena uočenih u ne-oštećenim kontrolnim regionima mozga (Slika 9).
Primena:
Predmetni pronalazak može da se primeni kao dijagnostičko sredstvo i kao sredstvo za praćenje razvoja i progresije patoloških stanja u kojima su izmenjene nivoa PBR i u kojima je prisutna inflamacija. Pronalazak može takođe da se primeni na isptivanja popunjenosti receptora i za procenu efikasnosti terapeutskih tretmana u patološkim stanjima i kao translacioni biomarker za istraživanja od modela životinja do ljudi.
PATENTNI ZAHTEVI
1. Upotreba radioobeleženog 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR povezanih normalnim i patološkim stanjima kod pojedinaca, pri čemu je radioobeleživač odabran od ugljenika-11, radiohalogena i radiometala.
2. Upotreba prema patentnom zahtevu 1, naznačena time, što 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen ugljenikom-11.
3. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 i 2, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen ugljenikom-11 na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra.
4. Upotreba prema patentnom zahtevu 1, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen radiohalogenima.
5. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 ili 4, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen radiohalogenom fluorom-18.
6. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 ili 5, naznačena time što, je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen sa fluorom-18 na para položaju 3-fenil prstena.
7. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-6, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR i inflamacije izvodi PET vizuelizacijom (pozitronska emisiona tomografija) ili SPECT vizuelizacijom (jednofotonska pozitronska emisiona kompjuterizovana tomografija).
8. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-7, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR i inflamacije vrši oslikavanjem PET (tomografija emisije pozitrona).
9. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time što, su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od oštećenja mozga, infekcije mozga i neuroloških oboljenja.
10. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od psihijatrijskih oboljenja.
11. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od proliferativnih oboljenja.
12. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od perifernih inflamatornih procesa.
13. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR vrši zbog ispitivanja popunjenosti.
14. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR vrši zbog procene efikasnosti terapeutskog tretmana.
15. Postupak za određivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim stanjima i promenama u nivou PBR povezanih sa patološkim stanjima, naznačen time, što se određivanje vrši upotrebom radioobeleženog oblika 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida, pri čemu je radioobeleživač izabran od ugljenika-11, radiohalogena i radiometala.
16. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida sadrži ugljenik-11.
17. Postupak prema patentnim zahtevima 15-16, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen ugljenikom na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra.
18. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen fluorom-18.
19. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen fluorom-18 na para položaju 3-fenil prstena.
20. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od oštećenja mozga, infekcije mozga i neuroloških oboljenja.
21. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od psihijatrijskih oboljenja.
22. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od proliferativnih oboljenja.
23. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od perifernih inflamatornih procesa.
24. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što se određivanje nivoa PBR izvodi zbog ispitivanja propunjenosti.
25. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što se određivanje nivoa PBR izvodi zbog procene efikasnosti terapeutskog tretmana.
26. Dijagnostički kompletza određivanje nivoa PBR povezanog sa normalnim stanjima i promena u nivoa PBR povezanog sa patološkim stanjima, naznačen time što sadrži radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida.
APSTRAKT
UPOTREBA 7-HLOR-N,N,5-TRIMETIL-4-OKSO-3-FENIL-3,5-DIHIDRO-4H-PIRIDAZINO[4,5-B]INDOL-1-ACETAMIDA
KAO BIOMARKERA ZA NIVOE PERIFERNIH BENZODIAZEPINSKIH RECEPTORA
Upotreba radioobeleženog oblika 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim i patološkim stanjima kod pojedinaca. Postupak za određivanje nivoa PBR u vezi sa normalnim i patološkim stanjima. Dijagnostički komplet.
kontralateralna strana
oštećeni i striatum
kontralateralni striatum
oštećeni striatum
vreme (min)
SLIKA 1
MIN
odnos ipsi/kontrola
SLIKA 2
vreme (min)
SLIKA 3
vreme (min)
SLIKA 4
kontralateralni striatum (n=5)
Sham (n=1)
ozleđeni striatum (n=5)
dpm /oblast
SLIKA 5
vreme (min)
SLIKA 6
dpm/ jedinica arbitrarne oblasti mesec
WT/PS1 (20-23 meseci), n=2
APP/PS1 (20-23 meseci), n=2 meseci),n=2
SLIKA 7
Aktivna akumulacija (%ID/100 ml)
Vreme nakon injektiranja (min)
Aktivna akumulacija (%ID/100 ml)
TACs [11C]-A 7 meseci (desno) i 48 sati (levo) posle QUIN injekcije
Aktivna akumulacija (%ID/100 ml)
Vreme nakon injektiranja (min)
TACs [11C]-A 24 sata nakon QUIN injekcije
Vreme nakon injektiranja (min)
TACs [11C]-A pre QUIN injekcije
SLIKA 8
TACs [11C]-A 9 dana posle QUIN injekcije
Aktivna akumulacija
(%ID/100 ml)
Vreme nakon injektiranja (min)
Vreme nakon injektiranja (min)
Aktivna akumulacija
(%ID/100 ml)
TACs [11C]-A 16 dana (levo) i
48 sati (desno) posle QUIN ozlede
Aktivna akumulacija
(%ID/100 ml)
TACs [11C]-A 48 sati posle QUIN ozlede
Vreme nakon injektiranja (min)
Aktivna akumulacija
(%ID/100 ml)
Vreme nakon injektiranja (min)
TACs [11C]-A pre QUIN injekcije
SLIKA 9
Plazma Mozak
Ligand
Uspavljivanje (min posle injekcije)
odnos plazme/ krvi
% HPLC intaktnog oblika
Broj metabolita
Prinos ekstrakcije
% HPLC intaktnog oblika
Broj metabolita
Prinos ekstrakcije
-A
10
0.1
100
0
89
100
0
99
-A
20
0.1
100
0
n.d.
100/100*
0
n.d.
-A
30
0.1
Nemerljiva vrednost
100/100*
0
n.d.
* oštećeni/kontralateralni deo
Slika 10
[18F/11C]-A-derivati
[acetamid-N-metil-11C]-A
[indol-N-metil-11C]-A
SLIKA 11
C7999.DOC
April/2011
Claims (26)
1. Upotreba radioobeleženog 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za utvrđivanje nivoa PBR povezanih normalnim i patološkim stanjima kod pojedinaca, pri čemu je radioobeleživač odabran od ugljenika-11, radiohalogena i radiometala.
2. Upotreba prema patentnom zahtevu 1, naznačena time, što 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid je radioobeležen ugljenikom-11.
3. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 i 2, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen ugljenikom-11 na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra.
4. Upotreba prema patentnom zahtevu 1, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen radiohalogenima.
5. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 ili 4, naznačena time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen radiohalogenom fluorom-18.
6. Upotreba prema patentnim zahtevima 1 ili 5, naznačena time što, je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen sa fluorom-18 na para položaju 3-fenil prstena.
7. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-6, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR i inflamacije izvodi PET vizuelizacijom (pozitronska emisiona tomografija) ili SPECT vizuelizacijom (jednofotonska pozitronska emisiona kompjuterizovana tomografija).
8. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-7, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR i inflamacije vrši oslikavanjem PET (tomografija emisije pozitrona).
9. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time što, su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od oštećenja mozga, infekcije mozga i neuroloških oboljenja.
10. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od psihijatrijskih oboljenja.
11. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od proliferativnih oboljenja.
12. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR izabrana od perifernih inflamatornih procesa.
13. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR vrši zbog ispitivanja popunjenosti.
14. Upotreba prema patentnim zahtevima 1-8, naznačena time, što se određivanje nivoa PBR vrši zbog procene efikasnosti terapeutskog tretmana.
15. Postupak za određivanje nivoa PBR povezanih sa normalnim stanjima i promenama u nivou PBR povezanih sa patološkim stanjima, naznačen time, što se određivanje vrši upotrebom radioobeleženog oblika 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida, pri čemu je radioobeleživač izabran od ugljenika-11, radiohalogena i radiometala.
16. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida sadrži ugljenik-11.
17. Postupak prema patentnim zahtevima 15-16, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen ugljenikom na ugljeniku metil grupe koja se nalazi na položaju 5 indolnog jezgra.
18. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen fluorom-18.
19. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamid radioobeležen fluorom-18 na para položaju 3-fenil prstena.
20. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od oštećenja mozga, infekcije mozga i neuroloških oboljenja.
21. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od psihijatrijskih oboljenja.
22. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od proliferativnih oboljenja.
23. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što su patološka stanja povezana sa promenama u nivoa PBR odabrana od perifernih inflamatornih procesa.
24. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što se određivanje nivoa PBR izvodi zbog ispitivanja propunjenosti.
25. Postupak prema patentnim zahtevima 15-19, naznačen time, što se određivanje nivoa PBR izvodi zbog procene efikasnosti terapeutskog tretmana.
26. Dijagnostički komplet za određivanje nivoa PBR povezanog sa normalnim stanjima i promena u nivoa PBR povezanog sa patološkim stanjima, naznačen time što sadrži radioobeleženi oblik 7-hlor-N,N,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4H-piridazino[4,5-b]indol-1-acetamida.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP08291013A EP2181717A1 (en) | 2008-10-28 | 2008-10-28 | Use of 7-chloro-N,N,5-trimethyl-4-oxo-3-phenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[4,5-B]indole-1-acetamide as a biomarker of peripheral benzodiazepine receptor levels |
| EP09760593.5A EP2349352B1 (en) | 2008-10-28 | 2009-10-27 | Use of 7-chloro-N,N,5-trimethyl-4-oxo-3-phenyl-3,5-dihydro-4H-pyridazino[4,5-b]indole-1-acetamide as a biomarker of peripheral benzodiazepine receptor levels |
| PCT/IB2009/007562 WO2010049819A1 (en) | 2008-10-28 | 2009-10-27 | Use of 7-chloro-n,n,5-trimethyl-4-oxo-3-phenyl-3,5-dihydro-4h-pyridazino[4,5-b]indole-1-acetamide as a biomarker of peripheral benzodiazepine receptor levels |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ME01128B true ME01128B (me) | 2013-03-20 |
Family
ID=40262247
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MEP-2014-31A ME01819B (me) | 2008-10-28 | 2009-10-27 | Upotreba 7-hloro-n,n,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4h-piridazino[4,5-b]indol-1- acetamida kao biomarkera nivoa perifernih benzodiazepinskih receptora |
| MEP-2011-72A ME01128B (me) | 2008-10-28 | 2009-10-27 | Upotreba 7-hlor-n,n,5-trimetil-4-okso-3-fenil- 3,5-dihidro-4h-piridazino [4,5-b]indol-1-acetamida kao biomarkera za nivoe perifernih benzodiazepinskih receptora |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MEP-2014-31A ME01819B (me) | 2008-10-28 | 2009-10-27 | Upotreba 7-hloro-n,n,5-trimetil-4-okso-3-fenil-3,5-dihidro-4h-piridazino[4,5-b]indol-1- acetamida kao biomarkera nivoa perifernih benzodiazepinskih receptora |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20120039816A1 (me) |
| EP (2) | EP2181717A1 (me) |
| JP (1) | JP5743894B2 (me) |
| KR (2) | KR20160070846A (me) |
| CN (1) | CN102223899B (me) |
| AR (1) | AR073983A1 (me) |
| AU (1) | AU2009309339C1 (me) |
| BR (1) | BRPI0920412A2 (me) |
| CA (1) | CA2741620C (me) |
| CL (2) | CL2011000954A1 (me) |
| CO (1) | CO6382141A2 (me) |
| CY (1) | CY1115211T1 (me) |
| DK (1) | DK2349352T3 (me) |
| EA (1) | EA020612B1 (me) |
| ES (1) | ES2452665T3 (me) |
| HR (1) | HRP20140250T1 (me) |
| IL (1) | IL212473A (me) |
| MA (1) | MA32803B1 (me) |
| ME (2) | ME01819B (me) |
| MX (1) | MX2011004420A (me) |
| MY (1) | MY152968A (me) |
| NZ (1) | NZ592479A (me) |
| PL (1) | PL2349352T3 (me) |
| PT (1) | PT2349352E (me) |
| RS (1) | RS53273B (me) |
| SI (1) | SI2349352T1 (me) |
| SM (1) | SMT201400070B (me) |
| TW (1) | TWI450728B (me) |
| UY (1) | UY32206A (me) |
| WO (1) | WO2010049819A1 (me) |
| ZA (1) | ZA201103082B (me) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB201016038D0 (en) * | 2010-09-24 | 2010-11-10 | Ge Healthcare Ltd | In vivo imaging method |
| GB201016411D0 (en) | 2010-09-30 | 2010-11-10 | Ge Healthcare Ltd | In vivo imaging method for cancer |
| US12068061B2 (en) * | 2021-01-15 | 2024-08-20 | Minnetronix Neuro, Inc. | Systems and methods for managing, monitoring, and treating patient conditions |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2766823B1 (fr) | 1997-07-30 | 1999-10-08 | Synthelabo | Derives de 4-oxo-3,5-dihydro-4h-pyridazino[4,5-b] indole-1-acetamide, leur preparation et leur application en therapeutique |
| FR2788696B1 (fr) * | 1999-01-26 | 2004-03-05 | Synthelabo | Utilisation de derives de pyridazino [4,5-b] indole-1-acetamide pour la preparation de medicaments destines aux maladies du systeme nerveux central |
| JP4362457B2 (ja) * | 2005-04-26 | 2009-11-11 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 神経因性疼痛治療剤 |
| KR20090063220A (ko) * | 2006-08-24 | 2009-06-17 | 오스트레일리언뉴클리어사이언스앤드테크놀로지오거나이제이션 | 말초 벤조디아제핀 수용체를 표적화하기 위한 플루오르화된리간드 |
| CA2680762A1 (en) * | 2007-03-12 | 2008-09-25 | National Institute Of Radiological Sciences | Pet visualization of amyloid-associated neuroinflammation in the brain |
| EP1997515A1 (en) * | 2007-05-30 | 2008-12-03 | Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft | Use of radiolabelled phenyloxyaniline derivatives for imaging diseases associated with peripheral benzodiazepin receptor's activation |
-
2008
- 2008-10-28 EP EP08291013A patent/EP2181717A1/en not_active Withdrawn
-
2009
- 2009-10-27 RS RS20140138A patent/RS53273B/sr unknown
- 2009-10-27 WO PCT/IB2009/007562 patent/WO2010049819A1/en not_active Ceased
- 2009-10-27 DK DK09760593.5T patent/DK2349352T3/da active
- 2009-10-27 KR KR1020167015060A patent/KR20160070846A/ko not_active Ceased
- 2009-10-27 MY MYPI20111854 patent/MY152968A/en unknown
- 2009-10-27 US US13/126,648 patent/US20120039816A1/en not_active Abandoned
- 2009-10-27 ME MEP-2014-31A patent/ME01819B/me unknown
- 2009-10-27 CA CA2741620A patent/CA2741620C/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-10-27 CN CN200980143233.4A patent/CN102223899B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-10-27 PT PT97605935T patent/PT2349352E/pt unknown
- 2009-10-27 MX MX2011004420A patent/MX2011004420A/es active IP Right Grant
- 2009-10-27 PL PL09760593T patent/PL2349352T3/pl unknown
- 2009-10-27 AR ARP090104122A patent/AR073983A1/es unknown
- 2009-10-27 KR KR1020117009627A patent/KR20110098711A/ko not_active Ceased
- 2009-10-27 BR BRPI0920412A patent/BRPI0920412A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-10-27 AU AU2009309339A patent/AU2009309339C1/en not_active Ceased
- 2009-10-27 ES ES09760593.5T patent/ES2452665T3/es active Active
- 2009-10-27 NZ NZ592479A patent/NZ592479A/xx not_active IP Right Cessation
- 2009-10-27 EA EA201170613A patent/EA020612B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-10-27 JP JP2011533855A patent/JP5743894B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-10-27 EP EP09760593.5A patent/EP2349352B1/en active Active
- 2009-10-27 SI SI200930891T patent/SI2349352T1/sl unknown
- 2009-10-27 ME MEP-2011-72A patent/ME01128B/me unknown
- 2009-10-27 HR HRP20140250AT patent/HRP20140250T1/hr unknown
- 2009-10-28 TW TW098136524A patent/TWI450728B/zh not_active IP Right Cessation
- 2009-10-28 UY UY0001032206A patent/UY32206A/es not_active Application Discontinuation
-
2011
- 2011-04-26 IL IL212473A patent/IL212473A/en not_active IP Right Cessation
- 2011-04-26 ZA ZA2011/03082A patent/ZA201103082B/en unknown
- 2011-04-27 CO CO11051319A patent/CO6382141A2/es active IP Right Grant
- 2011-04-28 CL CL2011000954A patent/CL2011000954A1/es unknown
- 2011-05-19 MA MA33858A patent/MA32803B1/fr unknown
-
2013
- 2013-04-15 CL CL2013001041A patent/CL2013001041A1/es unknown
-
2014
- 2014-03-24 CY CY20141100222T patent/CY1115211T1/el unknown
- 2014-06-12 SM SM201400070T patent/SMT201400070B/xx unknown
-
2016
- 2016-11-10 US US15/347,965 patent/US20170160287A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xia et al. | [18F] T807, a novel tau positron emission tomography imaging agent for Alzheimer's disease | |
| Ono et al. | Development of novel 123I-labeled pyridyl benzofuran derivatives for SPECT imaging of β-amyloid plaques in Alzheimer’s disease | |
| Ono et al. | Synthesis and evaluation of novel chalcone derivatives with 99mTc/Re complexes as potential probes for detection of β-amyloid plaques | |
| RS61810B1 (sr) | Deuterisana heterociklična jedinjenja i njihova upotreba kao sredstva za snimanje | |
| JPWO2009054496A1 (ja) | 新規アミロイド親和性化合物 | |
| Kassenbrock et al. | Selected PET radioligands for ion channel linked neuroreceptor imaging: focus on GABA, NMDA and nACh receptors | |
| Kil et al. | Radiosynthesis of N-(4-chloro-3-[11C] methoxyphenyl)-2-picolinamide ([11C] ML128) as a PET radiotracer for metabotropic glutamate receptor subtype 4 (mGlu4) | |
| Berroterán-Infante et al. | (R)-[18F] NEBIFQUINIDE: A promising new PET tracer for TSPO imaging | |
| US20170160287A1 (en) | Use of 7-chloro-n,n,5-trimethyl-4-oxo-3-phenyl-3,5-dihydro-4h-pyridazino[4,5-b] indole-1-acetamide as a biomarker of peripheral benzodiazepine receptor levels | |
| Xu et al. | Preclinical and clinical study on [18F] DRKXH1: a novel β-amyloid PET tracer for Alzheimer’s disease | |
| Schmaljohann et al. | Imaging of central nAChReceptors with 2-[18F] F-A85380: optimized synthesis and in vitro evaluation in Alzheimer's disease | |
| Noguchi et al. | In vitro binding of [11C] raclopride with ultrahigh specific activity in rat brain determined by homogenate assay and autoradiography | |
| Hostetler et al. | [18F] Fluoroazabenzoxazoles as potential amyloid plaque PET tracers: synthesis and in vivo evaluation in rhesus monkey | |
| Pike et al. | Radioiodinated SB 207710 as a radioligand in vivo: imaging of brain 5-HT4 receptors with SPET | |
| US20100216994A1 (en) | Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same | |
| US20100249408A1 (en) | Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same | |
| Yang et al. | Synthesis and bioevaluation of technetium-99 m/rhenium labeled phenylquinoxaline derivatives as Tau imaging probes | |
| Rui et al. | Development of a novel radioiodinated compound for amyloid and tau deposition imaging in Alzheimer's disease and tauopathy mouse models | |
| Gulyás et al. | Distribution and binding of 18F-labeled and 125I-labeled analogues of ACI-80, a prospective molecular imaging biomarker of disease: a whole hemisphere post mortem autoradiography study in human brains obtained from Alzheimer’s disease patients | |
| HK1161686B (en) | Use of 7-chloro-n, n,5-trimethyl-4-oxo-3-phenyl-3,5-dihydro-4h-pyridazino[4,5-b]indole-1-acetamide as a biomarker of peripheral benzodiazepine receptor levels | |
| Andersson | Development of PET radioligands synthesized from in-target produced [11C] methane | |
| Hicks | Development and Preclinical Evaulation of Novel Enzyme-targeting Radiotracers for Positron Emission Tomography |