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WO2019087280A1 - 筋肉増量用組成物 - Google Patents

筋肉増量用組成物 Download PDF

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WO2019087280A1
WO2019087280A1 PCT/JP2017/039273 JP2017039273W WO2019087280A1 WO 2019087280 A1 WO2019087280 A1 WO 2019087280A1 JP 2017039273 W JP2017039273 W JP 2017039273W WO 2019087280 A1 WO2019087280 A1 WO 2019087280A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
bifidobacterium
muscle
bacteria
culture
bacterium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2017/039273
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English (en)
French (fr)
Inventor
一弥 戸田
淳一 南
裕 松永
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Morinaga Milk Industry Co Ltd
Original Assignee
Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Morinaga Milk Industry Co Ltd filed Critical Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority to PCT/JP2017/039273 priority Critical patent/WO2019087280A1/ja
Priority to JP2019550030A priority patent/JP7193469B2/ja
Priority to CN201780095598.9A priority patent/CN111212575A/zh
Priority to EP17930603.0A priority patent/EP3704958A4/en
Priority to US16/648,175 priority patent/US20200261516A1/en
Priority to AU2017438436A priority patent/AU2017438436B2/en
Publication of WO2019087280A1 publication Critical patent/WO2019087280A1/ja
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K2035/11—Medicinal preparations comprising living procariotic cells
    • A61K2035/115—Probiotics

Definitions

  • the present technology relates to a composition for muscle weight increase containing a bifidobacteria bacterium and / or a culture of the bacteria as an active ingredient, and a pharmaceutical composition for muscle weight increase and a food and drink composition for muscle weight increase.
  • Muscles generally account for about 40% of body weight, 70 to 80% of which is water, and the rest are mostly composed of protein and free amino acids. Therefore, proteins or amino acids are important as nutrients for increasing or maintaining muscle, even from the composition thereof. As for amino acids, branched-chain amino acids (especially leucine) are being clarified not only as materials for protein synthesis but also as stimuli to promote protein synthesis. Therefore, supplements containing various proteins and amino acids are used for the purpose of increasing muscle mass (Non-patent Document 1). However, the mechanism of action of muscle mass increase still has many unknown points, as nutrient and protein synthesis systems are also related in a complex manner. For this reason, since there exist various approaches for increasing the amount of muscle, search for substances capable of further increasing the amount of muscle has been intensively conducted.
  • the main object of the present technology is to provide a composition for increasing the amount of muscle, which has less side effects, is highly safe, and can effectively increase the amount of muscle.
  • the present invention has the following configuration.
  • a composition for increasing muscle mass comprising a Bifidobacterium bacterium and / or a culture of the bacterium as an active ingredient.
  • a method for increasing muscle by administering Bifidobacterium bacteria and / or a culture of the bacteria as an active ingredient.
  • a method for ameliorating or treating a myopathy or a symptom thereof which comprises administering a Bifidobacterium bacterium and / or a culture of the bacterium as an active ingredient.
  • the composition may be a pharmaceutical composition or a food and drink composition.
  • the present technology it is possible to provide a composition for increasing the amount of muscle which can increase the amount of muscle effectively with less side effects and high safety.
  • the effect described here is not necessarily limited and may be any effect described in the present technology.
  • FIG. 1 is a photograph of microscopic tissue of the gastrocnemius muscle of the mouse (Bifidobacterium-administered group) in Test Example 3.
  • symbol 1 in FIG. 1 shows myotube.
  • FIG. 2 is a photograph when microscopically observing the tissue of gastrocnemius muscle of the mouse (control group) in Test Example 3.
  • symbol 1 in FIG. 2 shows myotube, and the code
  • the composition for increasing the amount of muscle according to the present technology has a muscle hypertrophying action or a muscle enlargement action, and contains Bifidobacterium bacteria and / or a culture of the bacteria as an active ingredient.
  • muscle hypertrophy means that the muscle capacity (size) is increased by thickening of a myotube or muscle fiber.
  • muscle gain refers to an increase in muscle volume and / or an increase in muscle weight.
  • the Bifidobacterium bacteria used in the present technology is not particularly limited as long as the effects of the present invention are not impaired, and known Bifidobacterium bacteria can be used.
  • known Bifidobacterium bacteria can be used.
  • the Bifidobacterium bacteria used in the present technology those having the ability to produce a substance that expresses a muscle hypertrophy action or a substance (including a cell component) that expresses a muscle increase action are preferable.
  • Bifidobacterium bacteria for example, Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve), Bifidobacterium longum subspecies longum (Bifidobacterium longum subsp. Longum) Bifidobacterium bifidum (Bifidobacterium bifidum) Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium animalis subsp.
  • Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve
  • Bifidobacterium longum subspecies longum Bifidobacterium longum subsp. Longum
  • Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium adolescentis
  • Bifidobacterium pseudoronum subsp. Globossum (Bifidobacte) rium pseudolongum subsp. globosum, Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum, Bifidobacterium thermophilum, and the like.
  • Bifidobacterium longum subspecies longum may be simply described as Bifidobacterium longum.
  • Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve
  • Bifidobacterium longum subspecies longum Bifidobacterium longum subsp. Longum
  • Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium bifidum
  • Bifidobacterium adolescentis Bifidobacterium dentium
  • Globosum (Bifidobacterium pseudolongum subsp. Globosum), Bifidobacterium pseudoronum subsp. Pseudonumum (Bifidobacterium pseudolongum subsp. Pse) More preferably, it is either udolongum or Bifidobacterium thermophilum.
  • Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve
  • Bifidobacterium breve Bifidobacterium breve ATCC 15700
  • Bifidobacterium longum subspecies Longum Bifidobacterium longsp. Longum
  • ATCC 15707 Bifidobacterium bifidum
  • AT Bifidobacterium adolescentis ATCC 15703
  • Lactis DSM 10 140 Bifidobacterium pseudoloum Gum subspecies globossum (Bifidobacterium pseudolongum subsp. Globosum) JCM 5820, Bifidobacterium pseudolongum subsp. Pseudolongum ATCC 25526, or Bifidobacterium thermophilum thermidium Even more preferably, it is ATCC 25525.
  • 1 type or 2 types or more can be selected from the above-mentioned group, 1 type may be used for Bifidobacterium bacteria used for this technique, and 1 type may be used and even if it uses arbitrary 2 or more types. Good.
  • ATCC 15700 ATCC (R) 15700 TM
  • ATCC 15707 ATCC (R) 15707 TM
  • ATCC 29521 ATCC (R) 29521 TM
  • ATCC 15703 ATCC (R) 15703 TM
  • ATCC 27535 ATCC (R) 27535 TM
  • ATCC27919 ATCC (R) 27919 TM
  • ATCC25526 ATCC (R) 25526 TM
  • it is possible to obtain ATCC25525 ATCC (R) 25525 TM ) or the like (Https://Www.Atcc.Org/products / all /, [online]: search on October 17, 2017).
  • DSMZ German Collection of Microorganisms and Cell Cultures
  • DSM 20436 DSM No: 20436
  • DSM 10140 DSM No: 10140
  • bacteria with a JCM number are known bacteria that can be obtained from JCM (Address: 3-1904 Takanodai, Tsukuba, Ibaraki Prefecture, National Research and Development Corporation RIKEN BioResource Center, Microbial Material Development Section). is there.
  • the Bifidobacterium bacteria used in the present technology may be mutant strains of the above Bifidobacterium bacteria as long as they have properties (for example, muscle increasing effect) that can achieve the object of the present invention. Since Bifidobacterium is an anaerobic bacterium, it can be grown under anaerobic conditions and can not grow in air. In addition, it is preferable that the mutant strain has the same bacteriological properties as that of the above-mentioned Bifidobacterium bacteria, and has an effect of promoting muscle mass increase equal to or more than that of the above Bifidobacterium bacteria.
  • mutant strains may be constructed by introducing mutations artificially into the above-mentioned Bifidobacterium bacteria.
  • the above bacteria may be constructed by introducing a mutation into the above-mentioned bacteria by treatment with a mutagen such as UV, or may be constructed by introducing a mutation into the above-mentioned strain by various gene manipulation methods.
  • the Bifidobacterium bacteria and / or the culture of the bacteria used in the present technology can be easily obtained by culturing Bifidobacterium bacteria by a conventional method.
  • the product for example, a microbial cell component, a metabolite, etc.
  • the said bacteria produced, etc. are also included in the culture of Bifidobacterium genus bacteria and / or the said bacteria, and as said products, Separated and purified products (for example, supernatants, extracts and the like) from bacterial cultures and / or cell treated products (for example, cell components and the like such as peptidoglycan and the like) can be mentioned.
  • the method for culturing the bacteria is not particularly limited as long as Bifidobacterium bacteria can grow, and the culturing can be performed under appropriate conditions according to the nature of the bacteria.
  • the culture temperature may be 25 to 50 ° C., preferably 35 to 42 ° C.
  • the culture is preferably performed under anaerobic conditions, and can be performed, for example, while aerating an anaerobic gas such as carbon dioxide gas.
  • the medium for culturing Bifidobacterium bacteria used in the present technology is not particularly limited, and a medium usually used for culturing Bifidobacterium bacteria can be used. That is, as the carbon source, for example, saccharides such as glucose, galactose, lactose, arabinose, mannose, sucrose, starch, starch hydrolysate, waste molasses and the like can be used according to assimilability. As a nitrogen source, for example, ammonium salts such as ammonia, ammonium sulfate, ammonium chloride, ammonium nitrate and nitrates can be used.
  • the carbon source for example, saccharides such as glucose, galactose, lactose, arabinose, mannose, sucrose, starch, starch hydrolysate, waste molasses and the like can be used according to assimilability.
  • a nitrogen source for example, ammonium salts such as ammonia, am
  • inorganic salts for example, sodium chloride, potassium chloride, potassium phosphate, magnesium sulfate, calcium chloride, calcium nitrate, manganese chloride, ferrous sulfate and the like can be used.
  • organic components such as peptone, soybean powder, defatted soybean meal, meat extract, and yeast extract may be used.
  • the Bifidobacterium bacterium used in the present technology is a bacterium itself, a culture of the bacterium or a dried product thereof, a separated and purified product from the culture of the bacterium (eg, culture supernatant) Alternatively, it can be used in the form of a treated product of the bacteria. That is, Bifidobacterium bacteria itself may be used, a culture obtained by culturing Bifidobacterium bacteria may be used as it is, or only the culture supernatant may be separated from the culture and used. The culture or culture supernatant may be used after dilution or concentration, or cells collected from the culture may be used.
  • the product of the bacteria may be recovered from the culture by separation and purification.
  • the culture or culture supernatant may be dried.
  • the Bifidobacterium bacteria used in the present invention may be living bacteria or dead bacteria, and may contain both living bacteria and dead bacteria.
  • separation and purification from the culture may be performed by centrifuging, salting out, solvent extraction (a polar solvent, a nonpolar solvent, or a mixed solvent thereof (eg, water, ethanol, hexane, etc.)) of a product having a muscle-gaining effect.
  • solvent extraction a polar solvent, a nonpolar solvent, or a mixed solvent thereof (eg, water, ethanol, hexane, etc.)
  • Gel filtration, HPLC separation, filtration membrane separation, etc. can be performed by known separation and purification methods.
  • examples of the treated product of bacteria of the bacteria include cell debris in which cell walls and cell membranes of the bacteria are partially or completely disrupted by a conventional method such as sonication or homogenizer treatment.
  • the cell debris may be the whole fraction or a part of the fraction after the disruption, the supernatant after centrifugation, the fraction obtained by partially purifying the supernatant by ammonium sulfate treatment, or the like. It may be a concentrated solution.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria can increase the thickness of myotubes or myofibers, increase the muscle hypertrophy, or increase the muscle, as shown in the Examples below.
  • promoting the synthesis of muscle proteins is said to increase the thickness of myotubes or muscle fibers. It is also said that thickening of the myotubes or myofibers leads to an increase in muscle volume (size) or muscle weight.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria can be prevented or ameliorated or treated by increasing the amount of muscle (eg, muscle disease due to muscle wasting or muscle degeneration or the like)
  • muscle diseases in the present specification for example, hypotonia (atony), muscular atrophy (muscular atrophy), muscular dystrophy (musular dystrophy), muscle degeneration, myasthenia, sarcopenia and the like are mentioned.
  • muscle disease occurs due to genetic factors, acquired factors, aging and the like, and muscle wasting is characterized by a novel loss of muscle mass, muscle weakness and regression.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the above-mentioned bacteria have an action of increasing the thickness of myotubes or muscle fibers, a muscle hypertrophy action, or a muscle increasing action, and the muscle is Although it does not limit fast and / or slow muscles, it tends to exert an increasing effect on muscles that work well during sports.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria can increase the muscle even in normal life and can also increase the muscle by exercise.
  • the bacteria of the genus Bifidobacterium and / or the culture of the bacteria used in the present technology have low side effects and high safety, they can be continuously taken for a long time.
  • the present technology can also be used for the purpose of enlarging the muscle with less side effects by promoting the synthesis of muscle protein and thickening the myotube.
  • the present technology can also be effectively used to increase the muscle strengthening effect by training; to prevent or ameliorate sarcopenia, flail, locomotive syndrome; to prevent, ameliorate or treat a muscle atrophy-related disease or condition;
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria can be contained as an active ingredient in a composition for increasing the amount of muscle, and since their safety is high, pharmaceuticals, foods, cosmetics, cosmetics , Can be used for a wide range of products such as feed. These products can be manufactured by a known manufacturing method adapted to each use, using optional components adapted to each use as appropriate.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria can be used as it is as it is, or a physiological, pharmaceutical or food-acceptable ordinary carrier or diluent. It can also be mixed and used with etc.
  • Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or cultures of the bacteria can be used for the production of these various preparations, various compositions and the like.
  • the present technology can also be used as cultures of Bifidobacterium bacteria for muscle expansion and / or said bacteria.
  • Administration or ingestion of the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of said bacteria is preferably continued for at least 4 weeks, more preferably for at least 8 weeks, and preferably daily.
  • the amount of Bifidobacterium bacteria used in the present technology is not particularly limited because of high safety, but it is preferably 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / kg body weight / day, for example, 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / kg body weight / day is more preferable, and 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / kg body weight / day is further preferable.
  • the use amount (dosage amount) per body is preferably 10 7 to 10 14 CFU / day, more preferably 10 8 to 10 13 CFU / day, and 10 9 to 10 12 CFU / day Is more preferred.
  • the amount of the culture of Bifidobacterium bacteria or an isolated and purified product derived therefrom is preferably 0.01 to 100 mL / kg body weight / day, preferably 0.1 to 10 mL More preferably, it is / kg of body weight / day.
  • CFU means Colony forming unit and represents a colony forming unit. When the bacteria are killed, CFU can be replaced with cells.
  • the Bifidobacterium bacteria of the present technology and / or the culture of the bacteria may be used for humans or non-human animals (suitable mammals) to which the present invention is applied, preferably humans and pets, and more preferably It is a human.
  • the application target is not particularly limited as long as it is a person who wants to increase the amount of muscle, and examples include infants, children, adults, healthy people, athletes, middle and old people, elderly people, and people with symptoms of muscle disease.
  • Non-therapeutic purpose is a concept that does not include medical practice, that is, treatment of the human body by treatment. For example, health promotion, beauty practice, etc. may be mentioned.
  • “Amelioration” refers to the amelioration of a disease, condition or condition; prevention or delay of deterioration of a disease, condition or condition; reversal, prevention or delay of progression of a disease or condition.
  • “Prevention” refers to preventing or delaying the onset of a disease or condition in a subject of application, or reducing the risk of a disease or condition of interest.
  • the muscle boosting composition of the present technology can be used as a pharmaceutical composition.
  • the pharmaceutical composition of the present technology can be used for the prevention, amelioration and / or treatment of muscle diseases or their symptoms, muscle atrophy-related diseases or their symptoms.
  • the present technology is preferably used particularly for the purpose of increasing the number of muscles. Disuse muscle atrophy associated with fixation of limbs performed by sarcopenia, bed rest, no exercise, weightless flight, treatment of injury etc.
  • muscle atrophy-related diseases or symptoms thereof amyotrophic lateral sclerosis (ALS), spinal cord Neurogenic muscle atrophy such as progressive progressive muscle atrophy, acute myelokeratitis (polio), Guillain-Barre syndrome, etc .; and myogenic muscle atrophy such as muscular dystrophy.
  • ALS amyotrophic lateral sclerosis
  • spinal cord Neurogenic muscle atrophy such as progressive progressive muscle atrophy, acute myelokeratitis (polio), Guillain-Barre syndrome, etc .
  • myogenic muscle atrophy such as muscular dystrophy.
  • the pharmaceutical composition of the present technology can be obtained by using a Bifidobacterium bacterium and / or a culture of the bacterium (for example, a culture supernatant of the culture of the bacterium and / or the above) which has been used as an oral composition component for many years. Since the treated product of bacteria and the like is used as an active ingredient, it can be administered safely to patients suffering from various diseases. In addition, since Bifidobacterium bacteria are also present in the intestines of animals, this technology is expected to be less likely to cause side effects even when administered continuously for a long period of time. In addition, Bifidobacterium bacteria and / or cultures of said bacteria can be safely administered to infants and children. Therefore, the present technology is also suitable for the prevention, amelioration and / or treatment of a disease or a symptom thereof for infants and children.
  • the pharmaceutical composition may be either oral administration or parenteral administration, and is appropriately formulated into a desired dosage form according to the administration method. be able to.
  • oral administration it can be formulated into solid preparations such as powders, granules, tablets and capsules; and liquids such as solutions, syrups, suspensions and emulsions.
  • parenteral administration they can be formulated into suppositories, ointments and the like.
  • ingredients such as excipients, pH adjusters, coloring agents, and flavoring agents that are generally used for formulation can be used in the pharmaceutical composition according to the present technology.
  • the pharmaceutical composition according to the present technology is effective for preventing, improving and / or treating known or future muscle diseases, muscle atrophy-related diseases or symptoms thereof. It is also possible to use a component having In addition, formulation can be carried out according to known methods, depending on the dosage form.
  • a formulation carrier may be appropriately blended and formulated.
  • the intake or dosage of the pharmaceutical composition of the present technology can be appropriately selected according to the dosage form, for example, the intake or dosage of Bifidobacterium bacteria per 1 kg body weight can be 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / kg body weight / day is preferable, 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / kg body weight / day is more preferable, 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / kg body weight / Day is more preferred.
  • the intake or dosage per body weight is preferably 10 7 to 10 14 CFU / day, more preferably 10 8 to 10 13 CFU / day, and 10 9 to 10 12 CFU / day. More preferable.
  • the amount of intake or administration of a culture of Bifidobacterium bacteria, an isolated and purified product derived from a culture of the bacterium (for example, culture supernatant), or a treated product of the bacteria of the bacterium may be selected from bifido It is preferable that the above intake or dose is obtained when converted to the intake or dose of a bacterium belonging to the genus bacteria.
  • the dose is 0.01 as a daily dose per 1 kg of body weight. It is preferably -100 mL, more preferably 0.1-10 mL.
  • the isolated and purified product of the bacteria for example, culture supernatant
  • the isolated and purified product of the bacteria is prepared using a known medium such that the number of Bifidobacterium bacteria is 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / mL. It is preferable that the isolated and purified product (eg, supernatant) obtained from the cultured culture, and the isolated and purified product obtained from the culture cultured to be 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / mL ( For example, culture supernatants) are more preferred.
  • the pharmaceutical composition of the present technology is preferably taken continuously at least for 4 weeks, preferably continuously for at least 8 weeks, more preferably for at least 12 weeks, at the intake or dose. It is preferable to be taken continuously every day.
  • the content of Bifidobacterium bacteria in the pharmaceutical composition of the present technology can be appropriately selected based on the intake or the dose.
  • 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / g or 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / mL preferably 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / g or 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇
  • It can be 10 11 CFU / mL, more preferably 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / g or 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / mL.
  • CFU can be replaced with cells.
  • the content of the culture of Bifidobacterium bacteria, an isolated and purified product derived from the culture of the bacteria (for example, culture supernatant) and the content thereof when using the bacterial cell-treated product of the bacteria is It is preferable that it will be said content, when converted into content of bacteria.
  • various organic or inorganic carriers can be used depending on the dosage form.
  • Carriers in the case of solid preparations include, for example, excipients, binders, disintegrants, lubricants, stabilizers, flavoring agents and the like.
  • Excipients include, for example, sugar derivatives such as lactose, sucrose, glucose, mannitol, sorbite, starch derivatives such as corn starch, potato starch, ⁇ -starch, dextrin, carboxymethyl starch, etc.
  • binder examples include gelatin, polyvinyl pyrrolidone, macrogol and the like in addition to the above-mentioned excipients.
  • disintegrant examples include, in addition to the above-mentioned excipients, chemically modified starch or cellulose derivatives such as croscarmellose sodium, sodium carboxymethyl starch and crosslinked polyvinyl pyrrolidone.
  • Lubricants include, for example, talc; stearic acid; metal salts of stearic acid such as calcium stearate and magnesium stearate; colloidal silica; waxes such as pea gum and geew wax; boric acid; glycols; carboxylic acids such as fumaric acid and adipic acid Sodium carboxylic acid sodium salts such as sodium benzoate; sulfuric acid salts such as sodium sulfate; leucine; lauryl sulfates such as sodium lauryl sulfate and magnesium lauryl sulfate; silicic acids such as anhydrous silicic acid and silicic acid hydrate; starch derivatives etc.
  • Be talc
  • stearic acid metal salts of stearic acid such as calcium stearate and magnesium stearate
  • colloidal silica waxes such as pea gum and geew wax
  • boric acid glycols
  • carboxylic acids such as fumaric acid and a
  • the stabilizer examples include p-hydroxybenzoic acid esters such as methylparaben and propylparaben; alcohols such as chlorobutanol, benzyl alcohol and phenylethyl alcohol; benzalkonium chloride; acetic anhydride; sorbic acid and the like.
  • flavoring agents include sweetening agents, acidulants, flavors and the like.
  • solvents such as water, flavoring agents and the like can be mentioned.
  • the composition for increasing the amount of muscle of the present technology can be used as a food and drink composition.
  • the food and drink composition according to the present technology is known to be a bacterium of the genus Bifidobacterium and / or a culture of the bacterium (for example, a culture supernatant of the culture of the bacterium and / or a treated bacterial cell of the bacterium).
  • It may be produced by adding to food and drink, or a culture of a bifidobacteria bacteria and / or the bacteria (eg, culture supernatant of the culture of the bacteria and / or a treated bacterial cell of the bacteria Etc.) can be mixed into the raw material of food and drink to produce a new food and drink composition.
  • a culture of a bifidobacteria bacteria and / or the bacteria eg, culture supernatant of the culture of the bacteria and / or a treated bacterial cell of the bacteria Etc.
  • the food and drink composition in the present technology may be in any form such as liquid, paste, solid, powder, etc., in addition to tablets, liquid food, feed (including for pets), etc., for example, flour products, instant foods, agricultural products Processed products, processed fish products, processed livestock products, milk and dairy products such as fermented milk or cheese, oils and fats, basic seasonings, combined seasonings / foods, frozen foods, confectionery, beverages, or other commercial products Etc.
  • the food or drink composition in the present technology can use a known or future component having a muscle-growing effect or a component that supports a muscle-growing activity.
  • the food and drink composition in the present technology includes various proteins such as whey protein, casein protein, soy protein, or pea protein (pea protein) or a mixture thereof, decomposition products; amino acids such as leucine, valine, isoleucine or glutamine; Vitamins such as vitamin B6 or vitamin C; creatine; citric acid; or components such as fish oil can be prepared by combining Bifidobacterium bacteria and / or a culture of the bacteria.
  • the food and drink composition defined in the present technology may be used for the prevention of muscle disease or muscle atrophy related disease or these symptoms, reduction in risk of disease or symptoms, alleviation of disease symptoms, and / or treatment of disease or its symptoms, etc. It can be provided and sold as food and drink whose use (including health use) is displayed.
  • the athlete "one who wants to increase muscles”, “one who is anxious about the weakness of muscle strength with lack of exercise”, “one who is anxious to muscle that declines by aging” as food and drink intake target , "If you are concerned about muscle strength that declines with age,””If you want to improve the flail,” etc. can be displayed and offered and sold.
  • Display acts include all acts to inform consumers of the application, and if it is an expression that can recall or analogize the application, the purpose of the display, the content of the display, the display Regardless of the target object, medium, etc., they all fall under the "display” action of the present invention.
  • "display” is performed by the expression which a consumer can recognize the said application directly. Specifically, the goods or goods packaging pertaining to food and drink are transferred to those which describe the use, and displayed for delivery, transfer or delivery, and the act of importing, advertisement for goods, price list or transaction documents The above-mentioned use is described and displayed, or it distributes, or the above-mentioned use is described in the information which makes these contents, and the action etc. which are provided by an electromagnetic (the Internet etc.) method etc. are mentioned.
  • the display content is a display approved by the administration or the like (for example, a display etc. which is approved on the basis of various systems defined by the administration and performed in a mode based on such authorization).
  • a display etc. which is approved on the basis of various systems defined by the administration and performed in a mode based on such authorization.
  • Indication as health food, functional food, enteral nutrition food, special purpose food, health functional food, food for specified health, nutritional functional food, functional display food, quasi-drugs etc. There is also a display.
  • the indication approved by the consumer agency for example, the indication approved by the system concerning the food for specified health, the nutritive function food, or the functional indication food, or the system similar thereto is mentioned.
  • labeling as food for specific health labeling as food for conditional health, labeling indicating that the structure or function of the body is affected, disease risk reduction labeling, functionality based on scientific evidence
  • the Cabinet Office Ordinance on the Permitting of Special Use Indications Specified in the Health Promotion Act August 31, 2011 Cabinet Office Ordinance No. 57
  • Indications as food for specified health use are typical examples.
  • the intake amount of the food and drink composition of the present technology can be selected appropriately, for example, the intake amount of Bifidobacterium bacteria per 1 kg body weight is 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU, for example. / Kg body weight / day is preferable, 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / kg body weight / day is more preferable, and 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / kg body weight / day is further preferable.
  • the intake or dosage per body weight is preferably 10 7 to 10 14 CFU / day, more preferably 10 8 to 10 13 CFU / day, and 10 9 to 10 12 CFU / day. More preferable. When the bacteria are killed, CFU can be replaced with cells.
  • the intake thereof is the above intake when converted to the intake of Bifidobacterium bacteria.
  • the amount of intake or dose thereof is 0. 1 as a daily dose per 1 kg of body weight.
  • the volume is preferably 01 to 100 mL, more preferably 0.1 to 10 mL.
  • the isolated and purified product for example, the culture supernatant derived from the culture of the above-mentioned bacteria is 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / mL of Bifidobacterium bacteria using a known medium.
  • it is an isolated and purified product (for example, culture supernatant) obtained from a culture cultured to give a concentration of 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / mL. More preferably, they are isolated and purified (for example, culture supernatant).
  • the food or drink composition of the present technology is preferably continuously taken at the intake or dose for at least 4 weeks, more preferably continuously for at least 8 weeks, at least 12 It is further preferable that the food be taken continuously every day for a week.
  • the content of Bifidobacterium bacteria in the food and drink composition of the present technology can be appropriately selected based on the intake amount, and for example, 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / g Or 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / mL, preferably 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / g or 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 11 CFU / mL, more preferably 1 ⁇ 10 8 to It can be 1 ⁇ 10 10 CFU / g or 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 CFU / mL.
  • CFU can be replaced with cells.
  • the culture of Bifidobacterium bacteria or the treated product of the bacteria when used, the content thereof becomes the above content when converted to the content of Bifidobacterium bacteria. preferable.
  • a separation product eg, culture supernatant
  • a composition for increasing a muscle comprising a Bifidobacterium bacterium and / or a culture of the bacterium as an active ingredient.
  • the composition is preferably for oral ingestion.
  • the composition is preferably a pharmaceutical composition or a food and drink composition.
  • the administration is preferably oral.
  • a method for ameliorating or treating muscle disease or a symptom thereof which comprises administering a Bifidobacterium bacterium and / or a culture of the bacterium as an active ingredient.
  • the administration is preferably oral.
  • the muscle disease or the condition thereof is preferably a muscle atrophy related disease or a condition thereof.
  • the composition is preferably for oral ingestion.
  • the composition is preferably a pharmaceutical composition or a food and drink composition.
  • the said food-drinks composition is a manufacturing method of the bifidobacteria genus bacteria and / or the culture of the said bacteria as an active ingredient.
  • the food and drink composition is preferably a nutritive food and a fermented food and drink (for example, fermented milk).
  • Said Bifidobacterium bacteria are Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve), Bifidobacterium longum subspecies longum (Bifidobacterium longum subsp. Longum) Bifidobacterium bifidum (Bifidobacterium bifidum), Fidobacterium adolescentis, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium animalis subsp. Lactis, Bifidobacterium pseudotronum b. Subspecies globossum (Bifidobacterium pseudolongum subsp.
  • Bifidobacterium pseudolongum subspecies pseudolongum Bifidobacterium pseudolongum subsp. Pseudolongum
  • Bifidoba The composition, the bacterium, or the culture of the bacterium or the bacterium according to any one of the above [1] to [7], which is one or more selected from the group consisting of B. thermophilum (Bifidobacterium thermophilum) Or method.
  • Said Bifidobacterium bacteria are Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve) FERM BP-11175, Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve) ATCC 15700, Bifidobacterium longum subspecies longum (Bifidobacterium longum) subsp.
  • the amount of Bifidobacterium used is 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 12 CFU / kg body weight / day, or the amount of the culture used is 0.01 to 100 mL / kg body weight / day.
  • [12] The composition, the bacterium, or the culture of the bacterium or the bacterium according to any one of the above [1] to [11], wherein the culture is an isolated and purified product (preferably a culture supernatant) .
  • MRS liquid medium 5.5 g of Difco Lactobacilli MRS Broth (manufactured by BD) and 50 mg of L-Cysteine Monohydrochloride, Monohydrate (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) are dissolved in pure water so as to be 100 mL, and The pH was adjusted to 6.5 and prepared by sterilizing at 121 ° C. for 15 minutes. Then, each culture solution was centrifuged at 4 ° C. under 8000 ⁇ g for 10 minutes, and then the culture supernatant was recovered. The obtained culture supernatant was pH-adjusted with sodium hydroxide such that the pH was in the range of 7.0 ⁇ 0.05.
  • Test Example 2 In the same manner as in Test Example 1, cell culture tests were conducted after preparing culture supernatants for nine Bifidobacterium bacteria shown in Table 2 below. Using a sample cultured without addition of culture supernatant as a control, the thickness of 250 myotubes was randomly measured under microscopic observation, and statistically significant differences were analyzed by Dunnett's test.
  • Bifidobacterium bacteria are known bacteria available from ATCC, DSM, JCM agencies.
  • the diameter (average value) of myotubes of each sample is as shown in Table 2, and in the system to which the culture supernatant of Bifidobacterium sp. The fact that the diameter is increased is suggested that muscle mass is increased in all bacterial species.
  • the tissue weight (weight ratio) of each muscle was as shown in Table 3.
  • administration of Bifidobacterium breve FERM BP-11175 increased the tissue weight (body weight ratio) compared to the control.
  • administration of Bifidobacterium breve FERM BP-11175 increases the tissue weight by at least 0.05 mg / g body weight in the plantar muscle relative to the control, and in the gastrocnemius muscle relative to the control The tissue weight was confirmed to increase near 0.2 mg / g body weight, which confirmed muscle gain.
  • FIG. 1 (Bifidobacterium administration group) and FIG. 2 (control group), Bifidobacterium breve FERM BP-11175 administration group compared with the control group Then, it was confirmed that the diameter of the myotubes was increased, and it was found that the muscles were increased.
  • the daily intake of bacteria, or placebo capsules (0.373 g of corn starch (made by Matsutani Chemical Co., Ltd.) per daily intake) was taken daily, and muscle mass and skeletal muscle mass were measured at 4 and 8 weeks of intake. .
  • the measurement was performed using a body composition meter InBody 770 (manufactured by Inbody Japan), and statistically significant differences were analyzed by t test.
  • comparison between groups was evaluated by covariance analysis using pre-intake values as covariates at each evaluation time point after intake.
  • Bifidobacterium breve FERM BP-11175 is added to 3 mL MRS liquid medium, anaerobically cultured at 37 ° C. for 16 hours, the culture solution is concentrated, freeze-dried and the freeze-dried powder (fungal powder) of the bacteria is used. obtain.
  • the bacterial powder and whey protein concentrate (WPC) are homogeneously mixed to obtain a composition. 20 g of the composition is dissolved in 200 g of water to obtain a muscle boosting composition. This can be taken as a food for increasing the amount of muscle, and the effect of increasing the amount of muscle can be expected.
  • Bifidobacterium breve FERM BP-11175 is added to 3 mL MRS liquid medium, anaerobically cultured at 37 ° C. for 16 hours, the culture solution is concentrated, freeze-dried and the freeze-dried powder (fungal powder) of the bacteria is used. obtain.
  • the composition for increasing the amount of muscle according to the present technology is effective for the purpose of increasing the muscle strengthening effect by training; improvement of flail or locomotive syndrome; prevention, improvement or treatment of sarcopenia, muscle disease or muscle atrophy related disease or its symptoms, etc. It can be used.

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Abstract

副作用が少なく安全が高く、効果的に筋肉を増量させることができる筋肉増量用組成物等を提供すること。　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物；ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋肉増量方法；ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋疾患若しくはその症状の改善若しくは治療方法；　筋疾患又はその症状の改善又は治療用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物；筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用；ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物の製造のための、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。

Description

筋肉増量用組成物
　本技術は、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物、並びに筋肉増量用医薬組成物及び筋肉増量用飲食品組成物に関する。
　筋肉は、立つ、歩く、姿勢を維持するといった日常の基盤となっているため、生活の質を維持するため、できるだけ筋肉量を維持し、可能であれば筋肉を増量させたいという要望が老若男女を問わずある。また、積極的に運動を好むヒトやアスリート（例えば、運動選手、スポーツ愛好家、競技者等）は、成績を上げるため、できるだけ筋肉を増量させたいという要望がある。
　さらに、健康志向が強まるなか、クオリティ・オブ・ライフ（quality of life：略称：ＱＯＬ）の向上、フレイル（健常な状態と、要介護状態(日常生活で介護サポートが必要な状態)との中間の状態）の改善や「ロコモティブシンドローム（locomotive syndrome、運動器症候群：略称：ロコモ）」対策において、いかにして筋肉を増量させるかが課題となっている。
　筋肉は、一般的に体重の４０％程度の割合を占め、その７０～８０％が水分で、残りのほとんどがタンパク質と遊離アミノ酸で構成される。したがって、筋肉を増量又は維持するための栄養素としては、その組成からしてもタンパク質又はアミノ酸が重要である。アミノ酸については、分岐鎖アミノ酸（特にロイシン）がタンパク質合成の材料としてだけではなく、タンパク質合成を促進する刺激になっていることが明らかにされつつある。そのため、種々のタンパク質やアミノ酸を含有するサプリメントが、筋肉量を増加させる目的で使用されている（非特許文献１）。
　しかしながら、筋肉増量の作用機構は、栄養素及びタンパク質合成系等も複雑に関連し合っているので、依然不明な点が多い。このため、筋肉増量のアプローチは種々存在するので、さらなる筋肉増量可能な物質の探索が鋭意行われている。
下村吉治著、スポーツと健康の栄養学（第３版）、２０１０年１２月１５日第３版第１刷
　上記事情に鑑みて、筋肉増量の効果を得るために長期間持続的に摂取する場合も考えられるため、副作用が少なく安全性が高く、効果的に筋肉を増量させることができる物質が望まれている。
　本技術は、副作用が少なく安全性が高く、効果的に筋肉を増量させることができる筋肉増量用組成物を提供することを主な目的とする。
　本発明者等が、鋭意研究を進めた結果、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物が、筋管を太くする作用があること、さらに被験者試験においても筋肉増量作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
　本発明は、以下の構成を有する。
［１］ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物。
［２］　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋肉増量方法。
［３］ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法。
［４］筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物。
［５］筋疾患又はその症状の改善又は治療用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物。
［６］筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。
［７］ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物の製造のための、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。
［８］前記組成物が、医薬組成物又は飲食品組成物であってもよい。
　本技術によれば、副作用が少なく安全性が高く、効果的に筋肉を増量させることができる筋肉増量用組成物を提供することができる。
　なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本技術中に記載されたいずれかの効果であってもよい。
図１は、試験例３におけるマウス（ビフィドバクテリウム投与群）の腓腹筋の組織を顕微鏡観察したときの写真である。図１中の符号１は筋管を示す。 図２は、試験例３におけるマウス（コントロール群）の腓腹筋の組織を顕微鏡観察したときの写真である。図２中の符号１は筋管を示し、符号２は結合組織を示す。
　次に、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。
　本技術の筋肉増量用組成物は、筋肥大作用、又は筋肉増量作用を有するものであり、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含む。
　なお、本明細書において「筋肥大」とは、筋管又は筋繊維が太くなることによって、筋肉の容量（大きさ）が増加することをいう。本明細書において「筋肉増量」とは、筋肉の容量が増加すること及び／又は筋肉の重量が増加することをいう。
＜ビフィドバクテリウム属細菌＞
　本技術に用いるビフィドバクテリウム属細菌は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されず、公知のビフィドバクテリウム属細菌を用いることができる。本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、筋肥大作用を発現させる物質又は筋肉増量作用を発現させる物質（菌体成分も含む）の生産能を有するものが好適である。
　当該ビフィドバクテリウム属細菌として、例えば、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・アンギュラツム（Bifidobacterium angulatum）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラータム（Bifidobacterium pseudocatenulatum）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum）、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）等が挙げられる。なお、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムは、単にビフィドバクテリウム・ロンガムと表記される場合もある。
　さらに、上記ビフィドバクテリウム属細菌のうち、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum）、又はビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）の何れかであるのが、より好ましい。
　さらに、上述した各ビフィドバクテリウム属細菌のうち、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）ＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）ＡＴＣＣ１５７００、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）ＡＴＣＣ１５７０７、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）ＡＴＣＣ２９５２１、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）ＡＴＣＣ１５７０３、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）ＤＳＭ２０４３６、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）ＤＳＭ１０１４０、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum）ＪＣＭ５８２０、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum）ＡＴＣＣ２５５２６、又はビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）ＡＴＣＣ２５５２５であることが、さらにより好ましい。
　また、本技術に用いるビフィドバクテリウム属細菌は、上述の群から１種又は２種以上を選択することができ、１種のみを用いてもよいし、任意の２種以上を用いてもよい。
　なお、ＡＴＣＣ番号が付与された細菌は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる公知細菌である。例えば、ＡＴＣＣ１５７００（ATCC(R)15700TM）、ＡＴＣＣ１５７０７（ATCC(R)15707TM）、ＡＴＣＣ２９５２１（ATCC(R)29521TM）、ＡＴＣＣ１５７０３（ATCC(R)15703TM）、ＡＴＣＣ２７５３５（ATCC(R)27535TM）、ＡＴＣＣ２７９１９（ATCC(R)27919TM）、ＡＴＣＣ２５５２６（ATCC(R)25526TM）、ＡＴＣＣ２５５２５（ATCC(R)25525TM）等を入手することができる(https://www.atcc.org/products/all/,[online]:2017年10月17日検索)。
　また、ＤＳＭ番号が付された細菌は、ＤＳＭＺ(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)（Inhoffenstr.7B, D38124 Braunschweig, GERMANY）から入手することができる公知細菌である。例えば、ＤＳＭ２０４３６（DSM No:20436）、ＤＳＭ１０１４０（DSM No:10140）等を入手することができる(https://www.dsmz.de/catalogues/catalogue-microorganisms.html,[online]:2017年10月17日検索)。
　また、ＪＣＭ番号が付された細菌は、ＪＣＭ（住所：3050074　茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所　バイオリソースセンター 微生物材料開発室）から入手することができる公知細菌である。例えば、ＪＣＭ５８２０（JCM 5820T ,http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=5820,[online]:2017年10月17日検索)等を入手することができる。
　ＦＥＲＭ　ＢＰ‐１１１７５の受託番号が付与された細菌は、２００９年８月２５日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（現　独立行政法人製品評価技術基盤機構（NITE）特許生物寄託センター（IPOD）（NITE-IPOD）、郵便番号：292-0818、住所：千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室）にブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている。
　本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、本発明の目的を達成できる特性（例えば、筋肉増量効果）を有する限り、上記ビフィドバクテリウム属細菌の変異株であってもよい。ビフィドバクテリウム属細菌は嫌気細菌であるので嫌気的条件にて生育可能であり、空気中では生育できないとされている。また、当該変異株は、上記ビフィドバクテリウム属細菌と同一の菌学的性質を有し、かつ、上記ビフィドバクテリウム属細菌と同等以上の筋肉増量促進効果を有するものが好ましい。ある変異株が上記ビフィドバクテリウム属細菌と「同等以上の筋肉増量効果」を有するか否かは、例えば、後述する試験例の方法により確認することができる。
　このような変異株は、上記ビフィドバクテリウム属細菌に非人為的に変異が導入されることで構築されてもよい。また、ＵＶ等の変異原を用いた処理により上記細菌に変異を導入して構築してもよく、種々の遺伝子操作法により上記株に変異を導入して構築してもよい。
　本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、常法によりビフィドバクテリウム属細菌を培養することにより容易に取得できる。
　なお、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物には、当該細菌が生産した生産物（例えば、菌体成分や代謝産物等）も含まれる意味であり、当該生産物として、前記細菌の培養物からの分離精製物（例えば、上清、抽出物等）及び／又は菌体処理物（例えば、ペプチドグリカンや細胞壁等の菌体成分等）等が挙げられる。
　前記細菌の培養方法は、ビフィドバクテリウム属細菌が増殖できる限り特に限定されず、細菌の性質に応じた適当な条件下で培養を行うことができる。例えば、培養温度は２５～５０℃でよく、３５～４２℃であることが好ましい。また培養は嫌気条件下で行うことが好ましく、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養してもよい。
　本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌を培養する培地としては、特に限定されず、ビフィドバクテリウム属細菌の培養に通常用いられる培地を用いることができる。すなわち、炭素源としては、例えば、グルコース、ガラクトース、ラクトース、アラビノース、マンノース、スクロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を使用できる。また、無機塩類としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。
　本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、これまでの説明のとおり、細菌そのもの、前記細菌の培養物若しくはその乾燥物、前記細菌の培養物からの分離精製物（例えば、培養上清）又は前記細菌の菌体処理物の形態で用いることができる。
　すなわち、ビフィドバクテリウム属細菌そのものでもよく、ビフィドバクテリウム属細菌を培養して得られた培養物をそのまま用いてもよく、培養物から培養上清のみを分離して用いても良く、培養物や培養上清を希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。また、培養物から分離精製により前記細菌の生産物を回収してもよい。また、培養物又は培養上清を乾燥させたものであってもよい。また、本発明に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、生菌であっても死菌であってもよく、生菌と死菌との両方を含むものでもよい。
　また、前記培養物からの分離精製は、筋肉増量作用のある生産物を、遠心分離、塩析、溶媒抽出（極性溶媒、非極性溶媒又はこれら混合溶媒（例えば、水、エタノール、ヘキサン等））、ゲルろ過分離、ＨＰＬＣ分離、濾過膜分離等の公知の分離精製方法により行うことができる。
　また、前記細菌の菌体処理物としては、例えば、菌体の細胞壁及び細胞膜が超音波処理やホモジナイザー処理等の常法により一部又は完全に破砕された細胞破砕物等が挙げられる。さらに、前記細胞破砕物は前記破砕後の全画分でもよく一部の画分でもよく、前記破砕後の遠心分離上清、その上清を硫安処理等で部分精製した画分、又は前記上清を濃縮したものであってもよい。
　本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、後記〔実施例〕に示すように、筋管又は筋繊維の太さの増大作用、筋肥大作用、又は筋肉増量作用を有する。
　一般的に、筋タンパク質の合成を促進させることで、筋管又は筋繊維が太くなると云われている。また、筋管又は筋繊維が太くなることによって、筋肉の容量（大きさ）又は筋肉の重量が増加すると云われている。
　このため、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、筋肉増量によって予防、改善又は治療できる症状又は疾患（例えば、筋肉消耗又は筋肉退化等による筋疾患又はその症状）に使用することも可能である。本明細書における筋疾患として、例えば、緊張減退症（atony）、筋萎縮症（muscular atrophy）、筋異栄養症（musular dystrophy）、筋肉退化、筋無力症及び筋肉減少症（sarcopenia）等が挙げられる。本明細書において、筋疾患は、遺伝的要因、後天的要因、老化等を原因として発生し、また、筋肉消耗は筋肉量の斬新的損失、筋肉の弱化及び退行を特徴とする。
　また、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、筋管又は筋繊維の太さの増大作用、筋肥大作用、又は筋肉増量作用を有し、筋肉はその種類（速筋及び／又は遅筋）を制限しないが、スポーツ時によく働く筋肉に増量作用を発現しやすい。
　また、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、通常の生活でも筋肉増量が可能であり、運動によっても筋肉増量が可能である。
　また、本技術に用いられるビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、当該細菌は副作用が少なく安全性が高いので、継続して長期間摂取することも可能である。
　本技術は、筋タンパク質の合成を促進して筋管を太くすることで、副作用が少なく筋肉を肥大させる目的に使用することもできる。本技術は、トレーニングによる筋肉増強効果の増大；サルコペニア、フレイル、ロコモティブシンドロームの予防又は改善；筋萎縮関連疾患若しくは症状の予防、改善又は治療；に有効に使用することもできる。
　従って、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、有効成分として筋肉増量用組成物に含有させることができ、また、安全性が高いので、医薬品、飲食品、化粧品、飼料等の幅広い用途の製品に使用できる。これらの製品は、各用途に適合した任意成分を適宜用い、各用途に適合した公知の製造方法によって、製造することができる。
　本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、これ自体をそのまま用いることが可能であり、又は生理的、医薬品的若しくは飲食品的に許容される通常の担体若しくは希釈剤等と共に混合して用いることもできる。
　また、本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、これら各種製剤又は各種組成物等の製造のために使用することができる。また、本技術は、筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物として使用することも可能である。
　本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の投与又は摂取は、少なくとも４週間継続することが好ましく、少なくとも８週間継続することがより好ましく、毎日継続することが望ましい。
　本技術のビフィドバクテリウム属細菌の使用量は、安全性が高いので特に制限されないが、例えば、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｋｇ体重／日が好ましく、１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がより好ましく、１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がさらに好ましい。または、１個体（Ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ）あたりの使用量（投与量）としては、１０７～１０１４ＣＦＵ／日が好ましく、１０８～１０１３ＣＦＵ／日がより好ましく、１０９～１０１２ＣＦＵ／日がさらに好ましい。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物又はそれ由来の分離精製物（例えば培養上清）の使用量は、０．０１～１００ｍＬ／体重ｋｇ／日であることが好ましく、０．１～１０ｍＬ／体重ｋｇ／日であることがより好ましい。
　なお、本技術において、ＣＦＵとは、Colony forming unitの意味であり、コロニー形成単位を表す。前記細菌が死菌の場合、ＣＦＵは、個細胞（cells）と置き換えることができる。
　本技術のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、適用対象であるヒト又は非ヒト動物（好適には哺乳類）に使用してもよく、ヒト及びペットが好ましく、より好ましくはヒトである。
　適用対象者は、筋肉増量を望む者であれば特に限定されず、例えば、乳幼児、小児、大人、健常者、アスリート、中高年、高齢者、及び筋疾患の症状を有する者等が挙げられる。
　また、本技術は、治療目的使用であっても、非治療目的使用であってもよい。
　「非治療目的」とは、医療行為、すなわち、治療による人体への処置行為を含まない概念である。例えば、健康増進、美容行為等が挙げられる。
　「改善」とは、疾患、症状又は状態の好転；疾患、症状又は状態の悪化防止、遅延；疾患又は症状の進行の逆転、防止又は遅延をいう。
　「予防」とは、適用対象における疾患若しくは症状の発症の防止や遅延、又は適用対象の疾患若しくは症状の危険性の低下をいう。
＜医薬組成物＞
　本技術の筋肉増量用組成物は、医薬組成物として用いることができる。本技術の医薬組成物は、筋疾患又はその症状、筋萎縮関連疾患又はその症状に対する予防、改善及び／又は治療に使用することができる。本技術は、特に筋肉を増量させる目的で使用することが好適である。筋萎縮関連疾患又はその症状として、サルコペニア、寝たきり、無運動、無重力飛行、怪我の治療等で行われる四肢の固定に伴う廃用性の筋萎縮；筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、脊髄性進行性筋萎縮症、急性脊髄前角炎（ポリオ）、ギランバレー症候群等の神経原性筋萎縮；筋ジストロフィー等の筋原性筋萎縮を例示することができる。
　また、本技術の医薬組成物は、経口組成物成分として長年使用されているビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物（例えば、前記細菌の培養物の培養上清及び／又は前記細菌の菌体処理物等）を有効成分とするため、種々の疾患を罹患した患者に対しても安心して投与できる。また、ビフィドバクテリウム属細菌は、動物の腸内にも存在するため、本技術は、長期間、連続的に投与しても副作用が生じにくいことが期待される。また、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物は、乳幼児や小児にも安全に投与することができる。したがって、本技術は、乳幼児や小児に対する疾患又はその症状の予防、改善及び／又は治療にも好適である。
　本技術に係る筋肉増量用組成物を医薬組成物として利用する場合、当該医薬組成物は、経口投与及び非経口投与のいずれでもよく、投与方法に応じて、適宜所望の剤形に製剤化することができる。例えば、経口投与の場合、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。また、非経口投与の場合、座剤、軟膏剤等に製剤化することができる。
　また、製剤化に際しては、本技術に係る医薬組成物には、通常製剤化に用いられている賦形剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味剤等の成分を用いることができる。また、本発明の効果を損なわない限り、本技術に係る医薬組成物には、公知の又は将来的に見出される筋疾患、筋萎縮関連疾患又はこれらの症状に対する予防、改善及び／又は治療の効果を有する成分を使用することもできる。
　加えて、製剤化は剤形に応じて適宜公知の方法により実施できる。製剤化に際しては、適宜、製剤担体を配合して製剤化してもよい。
　本技術の医薬組成物の摂取量又は投与量は、剤形に合わせて適宜選択することができるが、例えば、体重１ｋｇあたりの１日のビフィドバクテリウム属細菌の摂取量又は投与量は、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｋｇ体重／日が好ましく、１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がより好ましく、１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がさらに好ましい。または、１個体（Ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ）あたりの摂取量又は投与量としては、１０７～１０１４ＣＦＵ／日が好ましく、１０８～１０１３ＣＦＵ／日がより好ましく、１０９～１０１２ＣＦＵ／日がさらに好ましい。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその摂取量又は投与量は、ビフィドバクテリウム属細菌の摂取量又は投与量に換算された場合に上記摂取量又は投与量となることが好ましい。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）を用いる場合、その投与量は、体重１ｋｇあたりの１日の量として、０．０１～１００ｍＬであることが好ましく、０．１～１０ｍＬであることがより好ましい。この際、前記細菌の分離精製物（例えば培養上清）は、公知の培地を用いて、ビフィドバクテリウム属細菌の菌数が１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｍＬとなるように培養した培養物から得られた分離精製物（例えば上清）であることが好ましく、１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｍＬとなるように培養した培養物から得られた分離精製物（例えば培養上清）であることがより好ましい。
　さらに、本技術の医薬組成物は、前記摂取量又は投与量で、少なくとも４週間毎日継続して摂取されることが好ましく、少なくとも８週間毎日継続して摂取されることがより好ましく、少なくとも１２週間毎日継続して摂取されることが好ましい。
　また、本技術の医薬組成物中のビフィドバクテリウム属細菌の含有量は、前記摂取量又は投与量に基づいて適宜選択することができる。例えば、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｇ又は１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｍＬ、好ましくは１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｇ又は１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｍＬ、より好ましくは１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｇ又は１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｍＬとすることができる。該細菌が死菌の場合、ＣＦＵは、個細胞（cells）と置き換えることができる。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその含有量は、ビフィドバクテリウム属細菌の含有量に換算された場合に上記含有量となることが好ましい。さらに、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物、前記細菌の培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）を用いる場合、０．０１～１００ｍＬ含有されることが好ましく、０．１～１０ｍＬ含有されることが好ましい。
　また、前記製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機又は無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
　賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α‐デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
　結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等が挙げられる。
　崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
　滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。
　安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。
　矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
　なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
＜飲食品組成物＞
　さらに、本技術の筋肉増量用組成物は、飲食品組成物として用いることができる。本技術の飲食品組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物（例えば、前記細菌の培養物の培養上清及び／又は前記細菌の菌体処理物等）を公知の飲食品に添加することによって製造してもよいし、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物（例えば、前記細菌の培養物の培養上清及び／又は前記細菌の菌体処理物等）を飲食品の原料中に混合して新たな飲食品組成物として製造することもできる。
　本技術における飲食品組成物は、液状、ペースト状、固体、粉末等の形態を問わず、錠菓、流動食、飼料（ペット用を含む）等のほか、例えば、小麦粉製品、即席食品、農産加工品、水産加工品、畜産加工品、発酵乳若しくはチーズ等の乳・乳製品、油脂類、基礎調味料、複合調味料・食品類、冷凍食品、菓子類、飲料、又はこれら以外の市販品等が挙げられる。
　また、本技術における飲食品組成物には、本発明の効果を損なわない限り、公知の又は将来的に見出される筋肉増量作用を有する成分又は筋肉増量作用を補助する成分を使用することができる。例えば、本技術における飲食品組成物は、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、大豆タンパク質、若しくはエンドウ豆タンパク質（ピープロテイン）等の各種タンパク質若しくはその混合物、分解物；ロイシン、バリン、イソロイシン若しくはグルタミン等のアミノ酸；ビタミンＢ６若しくはビタミンＣ等のビタミン類；クレアチン；クエン酸；又はフィッシュオイル等の成分と、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物とを組合せて調製することができる。
　また、本技術で定義される飲食品組成物は、筋疾患若しくは筋萎縮関連疾患又はこれら症状の予防、疾患又は症状のリスク低減、疾患の症状緩和、及び／又は疾患若しくはその症状の治療等の用途（保健用途を含む）が表示された飲食品として提供・販売されることが可能である。また、飲食品の摂取対象として、「アスリートの方」、「筋肉を増やしたい方」、「運動不足に伴う筋力の衰えが気になる方」、「加齢によって衰える筋肉が気になる方」、「年齢とともに衰える筋力が気になる方」、「フレイルを改善したい方」等と表示して提供・販売されることが可能である。
　「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明の「表示」行為に該当する。
　また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。
　一方、表示内容としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等）であることが好ましい。また、そのような表示内容を、包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等へ付することが好ましい。
　また、「表示」には、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、医薬用部外品等としての表示も挙げられる。この中でも特に、消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、若しくは機能性表示食品に係る制度、又はこれらに類似する制度にて認可される表示等が挙げられる。具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク減少表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を挙げることができ、より具体的には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）及びこれに類する表示が典型的な例である。
　本技術の飲食品組成物の摂取量は、適宜選択することができるが、例えば、体重１ｋｇあたりの１日のビフィドバクテリウム属細菌の摂取量は、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｋｇ体重／日が好ましく、１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がより好ましく、１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日がさらに好ましい。または、１個体（Ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ）あたりの摂取量又は投与量としては、１０７～１０１４ＣＦＵ／日が好ましく、１０８～１０１３ＣＦＵ／日がより好ましく、１０９～１０１２ＣＦＵ／日がさらに好ましい。該細菌が死菌の場合、ＣＦＵは、個細胞（cells）と置き換えることができる。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその摂取量は、ビフィドバクテリウム属細菌の摂取量に換算された場合に上記摂取量となることが好ましい。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物又はその培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）を用いる場合、その摂取量又は投与量は、体重１ｋｇあたりの１日の量として、０．０１～１００ｍＬであることが好ましく、０．１～１０ｍＬであることがより好ましい。この際、前記細菌の培養物由来の分離精製物（例えば培養上清）は、公知の培地を用いて、ビフィドバクテリウム属細菌の菌数が１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｍＬとなるように培養した培養物から得られた分離精製物（例えば培養上清）であることが好ましく、１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｍＬとなるように培養した培養物から得られた分離精製物（例えば培養上清）であることがより好ましい。
　さらに、本技術の飲食品組成物は、前記摂取量又は投与量で、少なくとも４週間毎日継続して摂取されることが好ましく、少なくとも８週間毎日継続して摂取されることがより好ましく、少なくとも１２週間毎日継続して摂取されることがさらに好ましい。
　また、本技術の飲食品組成物中のビフィドバクテリウム属細菌の含有量は、前記摂取量に基づいて適宜選択することができるが、例えば、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｇ又は１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｍＬ、好ましくは１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｇ又は１×１０７～１×１０１１ＣＦＵ／ｍＬ、より好ましくは１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｇ又は１×１０８～１×１０１０ＣＦＵ／ｍＬとすることができる。該細菌が死菌の場合、ＣＦＵは、個細胞（cells）と置き換えることができる。
　また、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物や前記細菌の菌体処理物を用いる場合のその含有量は、ビフィドバクテリウム属細菌の含有量に換算された場合に上記含有量となることが好ましい。さらに、ビフィドバクテリウム属細菌の培養物由来の分離生成物（例えば培養上清）を用いる場合、０．０１～１００ｍＬ含有されることが好ましく、０．１～１０ｍＬ含有されることがより好ましい。
　本技術は、以下の構成を採用することも可能である。
　［１］
　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物。当該組成物は、経口摂取用が好適である。当該組成物は、医薬組成物又は飲食品組成物が好適である。
　［２］
　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋肉増量方法。当該投与は、経口摂取が好適である。
　［３］
　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法。当該投与は、経口摂取が好適である。前記筋疾患又はその症状は、筋萎縮関連疾患又はその症状が好適である。
　［４］
　筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物、又はその使用。
　［５］
　筋疾患又はその症状の改善又は治療用の、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物、又はその使用。
　［６］
　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物の製造のための、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。当該組成物は、経口摂取用が好適である。当該組成物は、医薬組成物又は飲食品組成物が好適である。
　［７］
　筋肉増量用飲食品組成物の製造方法であり、前記飲食品組成物が、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有するものである、製造方法。前記飲食品組成物は、栄養補強食品、発酵飲食品（例えば発酵乳）が好適である。
　［８］
　前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum）、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）からなる群から選択される一種又は複数種である、前記［１］～［７］の何れか１つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
［９］
　前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）ＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）ＡＴＣＣ１５７００、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）ＡＴＣＣ１５７０７、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）ＡＴＣＣ２９５２１、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）ＡＴＣＣ１５７０３、ビフィドバクテリウム・デンティウム（Bifidobacterium dentium）ＤＳＭ２０４３６、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）ＤＳＭ１０１４０、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・グロボッサム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum）ＪＣＭ５８２０、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム・サブスピーシーズ・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum）ＡＴＣＣ２５５２６、及びビフィドバクテリウム・サーモフィラム（Bifidobacterium thermophilum）ＡＴＣＣ２５５２５からなる群から選択される一種又は複数種である、前記［１］～［７］の何れか１つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
［１０］
　投与又は摂取期間が、少なくとも４週間以上である、前記［１］～［９］の何れか１つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
［１１］
　前記ビフィドバクテリウム属細菌の使用量が、１×１０６～１×１０１２ＣＦＵ／ｋｇ体重／日、又は前記培養物の使用量が、０．０１～１００ｍＬ／ｋｇ体重／日である、前記［１］～［１０］の何れか１つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
［１２］
　前記培養物が、分離精製物（好適には培養上清）である、前記［１］～［１１］の何れか１つ記載の、組成物、細菌若しくは前記細菌の培養物、使用、又は方法。
　以下に実施例を用いて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
［試験例１］
（１）ビフィドバクテリウム属細菌培養物の調製
　脱脂粉乳１０％を含む水溶液にて凍結保存された、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５（受託番号　FERM BP-11175：ＮＩＴＥ－ＩＰＯＤより入手可能）の菌液９０μＬをＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養した。ＭＲＳ液体培地は、Difco Lactobacilli MRS Broth（BD社製）５．５ｇ、及びL-Cysteine Monohydrochloride, Monohydrate（和光純薬工業社製）５０ｍｇを、１００ｍＬとなるように純水に溶解させ、ＨＣｌ水溶液でｐＨ６．５に調整し、１２１℃で１５分間滅菌することによって調製した。次いで、各培養液を４℃、８０００×ｇの条件下にて１０分間遠心処理した後、培養上清を回収した。得られた培養上清は、ｐＨが７．０±０．０５の範囲内になるように、水酸化ナトリウムによりｐＨ調整を行った。
（２）細胞培養試験
　Ｃ２Ｃ１２細胞を１．５×１０４ ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２になるように６ウェルプレートに播種し、１０％Fetal Bovine Serum及び１％Penicillin Streptomycin含有DMEM培地で２４時間培養した。その後、前記（１）で調整した、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の培養上清を２％Horse Serum及び１％Penicillin Sterptomycin含有DMEM培地に添加した。前記培養上清を添加せずに培養した試料をコントロールとして、２日毎に新鮮な培地に交換し、７日間培養した。その後、ヘマトキシリン・エオジン染色（ＨＥ染色）を行い、顕微鏡観察下で筋管の太さを１００本無作為に測定し、Ｄｕｎｎｅｔｔ検定にて統計学的有意差を解析した。
（３）結果
　その結果、それぞれの試料の筋管細胞の直径（平均値）は、表１の通りとなり、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の培養上清を添加した系では、コントロールに比して筋管細胞の直径が３μｍ以上太くなり、有意に筋量が増加することが確認された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
［試験例２］
　試験例１と同様の手順にて、以下の表２に示す９種のビフィドバクテリウム属細菌について培養上清を調製した上で細胞培養試験を実施した。培養上清を添加せずに培養した試料をコントロールとして、顕微鏡観察下で筋管の太さを２５０本無作為に測定し、Ｄｕｎｎｅｔｔ検定にて統計学的有意差を解析した。
　下記のビフィドバクテリウム属細菌は、ＡＴＣＣ、ＤＳＭ、ＪＣＭの機関から入手可能な公知細菌である。
・Bifidobacterium longum subsp. longum ATCC15707
・Bifidobacterium breve ATCC15700
・Bifidobacterium bifidum ATCC29521
・Bifidobacterium adolescentis ATCC15703
・Bifidobacterium dentium DSM20436
・Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM10140
・Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum JCM5820
・Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum ATCC25526
・Bifidobacterium thermophilum ATCC25525
　その結果、それぞれの試料の筋管細胞の直径（平均値）は、表２の通りとなり、ビフィドバクテリウム属の培養上清を添加した系では、コントロールに比して有意に筋管細胞の直径が太くなることが確認されたことから、全ての菌種で筋量が増加することが示唆された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
［試験例３］
　Ｃ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールズ・リバー社：健常マウス）を実験動物として用い、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の培養上清の４週間継続摂取による筋肉増量への影響を評価した。
　実験動物は、９週齢で入荷後、Ｆ－２飼料（フナバシファーム社製）および水道水を自由摂取させた。１週間の馴化後、実験動物をコントロール群（水道水を１０ｍＬ／ｋｇ体重投与）、ビフィドバクテリウム投与群（試験例１の（１）で調整したビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の培養上清１０ｍＬ／ｋｇ体重投与）、ロイシン投与群（ロイシンを１．５ｇ／ｋｇ体重投与）の３群（ｎ＝７／群）に分け、各マウスに１日１回経口ゾンデを用いた経口投与を４週間継続した。最終投与終了後に実験動物を３時間絶食させ、その後セボフルラン麻酔下で処置して、足底筋、腓腹筋を摘出し、各組織の湿重量（体重比）を測定した。腓腹筋については薄切した組織をＨＥ染色した後に顕微鏡下で組織を観察した。
　その結果、各筋肉の組織重量（体重比）は、表３の通りとなった。足底筋及び腓腹筋では、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の投与により、組織重量（体重比）がコントロールに比べて増加することが確認された。具体的には、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の投与により、足底筋では、コントロールに比して組織重量が０．０５ｍｇ／ｇ体重以上増加し、腓腹筋では、コントロールに比して組織重量が０．２ｍｇ／ｇ体重近く増加することが確認され、これにより、筋肉増量が確認された。
　さらに、腓腹筋の組織を顕微鏡観察した結果では、図１（ビフィドバクテリウム投与群）及び図２（コントロール群）のとおり、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５投与群では、コントロール群に比較して、筋管の直径が大きくなっていることが確認され、筋肉が増量していることが分かった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
［試験例４］
　肥満１度（ＢＭＩ２５以上３０未満）の健常成人８０名を対象としたランダム化二重盲検プラセボ対照並行群間比較試験を行い、ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５の継続摂取による筋肉増量への影響を評価した。
　８０名の被験者は、ランダムに２群に分け、それぞれビフィドバクテリウム属細菌（ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５）含有カプセル（１日摂取量当たり２００億ＣＦＵ相当のビフィドバクテリウム属細菌を含有）、又はプラセボカプセル（１日摂取量当たり０．３７３ｇのコーンスターチ（松谷化学社製）を含有）を毎日摂取し、摂取４週、及び８週に筋肉量及び骨格筋量を測定した。測定は体組成計ＩｎＢｏｄｙ７７０（インボディジャパン社製）を用いて測定し、ｔ検定により統計学的有意差を解析した。なお、群間比較は摂取後の各評価時点において摂取前値を共変量とした共分散分析で評価を行った。
　その結果、筋肉量の変化は表４に、骨格筋量の変化は表５に記載のとおりとなった。ビフィドバクテリウム属細菌（ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５）含有カプセルの投与により、摂取８週後においてプラセボ群と比べて筋肉量が有意に高値を示した。８週目の筋肉量の変化量は、プラセボ群が－０．３３ｋｇと摂取開始前よりも低下したのに対し、ビフィドバクテリウム属細菌含有カプセル投与群（ビフィドバクテリウム投与群）では、０．２２ｋｇの増加が観察された。筋肉量と同様に、骨格筋についても、摂取８週においてプラセボ摂取群より有意に高値を示した。８週目の変化量は、プラセボ群が－０．１９ｋｇと低下したのに対し、ビフィドバクテリウム投与群では、０．１９ｋｇ増加した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
［製造例１］
　ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５をＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、ホエイタンパク質濃縮物（Whey protein concentrate；ＷＰＣ）とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物２０ｇを２００ｇの水に溶かし、筋肉増量用組成物を得る。これは、筋肉増量用飲食品としても摂取可能であり、また筋肉増量効果が期待できる。
［製造例２］
　ビフィドバクテリウム・ブレーベＦＥＲＭ　ＢＰ－１１１７５をＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、乳タンパク質濃縮物の乾燥粉末（ＭＰＣ４８０、フォンテラ社製、タンパク質含量８０質量％、カゼインタンパク質：ホエイタンパク質＝約８：２）とを均一に混合して、組成物を得る。当該組成物２０ｇを２００ｇの水に溶かし、筋肉増量用組成物を得る。これは、筋肉増量用飲食品としても摂取可能であり、また筋肉増量効果が期待できる。
　以上のことから、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はその培養物の投与又は摂取により、筋管が太くなることによって筋肥大が促進されること、及び筋肉の重量が増加することも確認された。よって、本技術の筋肉増量用組成物は、トレーニングによる筋肉増強効果の増大目的；フレイル又はロコモティブシンドロームの改善；サルコペニア、筋疾患若しくは筋萎縮関連疾患又はその症状の予防、改善又は治療等に有効に使用することができる。
　１　筋管；２　結合組織

Claims (8)

  1. 　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として含有する筋肉増量用組成物。
  2. 　前記組成物が、医薬品組成物である、請求項１記載の組成物。
  3. 　前記組成物が、飲食品組成物である、請求項１記載の組成物。
  4. 　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋肉増量方法。
  5. 　ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物を有効成分として投与する、筋疾患又はその症状の改善又は治療方法。
  6. 　筋疾患又はその症状の改善又は治療用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物。
  7. 　筋肉増量用のビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。
  8. 　請求項１～３の何れか１項記載の筋肉増量用組成物の製造のための、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又は前記細菌の培養物の使用。
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