UA45339C2 - Нуклеозидмонофосфатні похідні, спосіб їх отримання та фармацевтична композиція, що має протипухлинну активність - Google Patents

Abstract

Цей винахід стосується нових нуклеозід-монофосфат похідних із залишками ліпідних складних ефірів загальної формули (1): , у якій: R1 являє собою необов'язково заміщений алкільний ланцюжок, що містить 1-20 атомів вуглецю; R2 являє собою водень, або необов'язково заміщений алкільний ланцюжок, що містить 1-20 атомів вуглецю; R3, R4 и R5 являють собою водень, гідроксильні групи, азідогрупи, аміногрупи, ціаногрупи, або атоми галогену; Χ показує валентний зв'язок, атом кисню, атом сірки, сульфінільну або сульфонільну групу; Y являє собою валентний зв'язок, атом кисню, атом сірки; В представляє собою пуринову і/або пірімідинову основу за умови, що принаймні один із залишків R3 або R5 являє собою водень; до їх таутомерів і їх фізіологічно прийнятних солей неорганічних і органічних кислот і/або основ, а також до способів їх отримання і до лікарських засобів, що містять вказані сполуки.

Description

Опис винаходу

Настоящее изобретение относится к новьім нуклеозидмонофосфатнь!м производньїм с остатками липидньх 2 сложньх зфиров общей формуль! (1) є и 8-Х шк 2 вА-у- СН (1) " сн, -0-8-0- сн, дБ 2 4 ре ре с в которой о

В" может представлять собой линейную или разветвленную, насьщенную или ненасьщенную алкильную цепь, содержащую 1 - 20 атомов углерода, необязательно моно- или полизамещенную галогеном, (С4-Св)-алкоксигруппой, (С4-Св)-алкилмекаптогруппой, (С4-Св)-алкоксикарбонилом, (С.4-Св)-алкилсульфинильной или (С4-Св)-алкилсульфонильной группами; (о)

В? может представлять собой водород, линейную или разветвленную, насьщенную или ненасьщенную с алкильную цепь, содержащую 1 - 20 атомов углерода, необязательно моно- или полизамещенную галогеном, (С4-Св)-алкоксигруппой, (С4-Св)-алкилмеркаптогруппой, (С4-Св)-алкоксикарбонилом или (С4-Св)-алкилсульфонильной группой; ю

ВЗ, представляєт собой водород, гидроксильную группу, азидогруппу, аминогруппу, цианогруппу или

Зо галоген; «

В" представляеєт собой гидроксильную группу, азидогруппу, аминогруппу, цианогруппу или галоген;

ВЕ? представляеєт собой водород, гидроксильную группу, азидогруппу, аминогруппу, цианогруппу или галоген;

Х представляет собой валентную связь, атом кислорода, атом серьі, сульфинильную или сульфонильную « 20 группу; -о

У представляет собой валентную связь, атом кислорода или атом серь; с В представляет собой пуриновое и/или пиримидиновое основание формуль! І! (а - г) з й МН», 1 1 (95) ре ! ( сю 20 3е) т- - (На) (ій 6) р! (0; г о

Ф)

Н р ю й у бо во А -о ру ев: (Ії в) (пе) в которьх бо 2? может представлять собой водород; алкильную цепь, содержащую 1 - б атомов углерода, которая может бьть замещена галогеном; алкенильную и/или алкинильную группу, содержащую 2 - б атомов углерода,

необязательно замещенную галогеном; или галоген; 29 может представлять собой атом водорода, или бензил, или фенилтиогруппу;

В" может представлять собой водород; алкильную цепь, содержащую 1 - 6 атомов углерода, которая может бьть замещена галогеном; или галоген; 28 может представлять собой водород; алкильную цепь, содержащую 1 - б атомов углерода, галоген или гидроксильную или аминогруппу; 2? может представлять собой водород, аминогркппу или атом галогена; и

ВО может представлять собой водород, галоген, меркаптогруппу, гидроксильную группу, (С.-С)-алкоксигруппу, (С1-Св)-алкилмеркаптогруппу или аминогруппу, которая может бьть моно- или дизамещена (С.і-Св)-алкилом, (С1-Св)-алкоксигруппой, гидрокси-(Со-Св)-алкилом и/или (С3-Св)-циклоалкилом, арилом, гетероарилом, аралкилом или гетероарилалкильной группой, необязательно замещенньіми в арильном или гетероарильном остатке одной или несколькими меркаптогруппами, гидроксильньми группами, /5 (С1-Св)-алкоксигруппами или (С. "Св)-алкильньми группами или галогенами; или (Со-Св)-алкенил, необязательно замещенньй моно- или диалкильной группой или алкоксигруппой; при условий, что по крайней мере один из остатков ВЗ или В? представляет собой водород; к их таутомерам и их физиологически приемлемьм солям неорганических и органических кислот и/или оснований, а так же к способам их получения и к лекарственньм средствам, содержащим упомянутье гр боединения.

Так как соединения общей формуль! 1 содержат асимметричнье атомь! углерода, настоящее изобретение также относится ко всем оптически активньім формам и рацемическим смесям упомянутьїх соединений.

В у. ВіоЇ Спет. 265, 6112 (1990), и в европейском патенте ЕР 0350287 описьіваєется получение и применение липонуклеотидов в качестве противовирусньїх лекарственньїх средств. Однако, в зтих работах проверень и сч ов бинтезировань! только соединения, в которьх димиристоилфосфатидильньйй и дипальмитоилфосфатидильньйй остатки сочетаются с семействами нуклеозидов, такими как А7Т (азидотимидин) и аас (2",3'-дидезоксицитидин), о включающие в свою структуру остатки сложньїх зфиров жирньх кислот.

В 9. Мед. Спет. 33, 1380 (1990), описьяваются нуклеозиднье коньюгать! липидов - простьїх тиозфиров - с цитидиндифосфатом, которье обладают противоопухолевой активностью и могут найти применение в Фу зр Онкологи. В Спет. Ріагт. Виї. 36, 209, (1988), описьіваются 5'-(3-зп-фосфатидил)нуклеозидьі, обладающие противолейкозной активностью, а таюже их ферментативньй синтез из соответствующих нуклеозидов и фосфохолинов в присутствий фосфолипазь! О с активностью трансферазьі. Подобньім образом, в У. Мед. Спет со 34, 1408 (1991), описьиваются нуклеотиднье коньюгатьї, обладающие активностью против ВИЧ 1, которье замещеньії метокси- или зтоксигруппами в зп-положении липидной части. В заявке на патент ВОИС 92/03462 Іс) з5 Описьваются коньюгать тиозфирньїх липидов, обладающие противовирусной активностью, в частности, для « лечения ВИЧ-инфекций.

Соединения настоящего изобретения обладают ценньіми фармакологическими свойствами. В частности, они пригодньї для лечения и профилактики злокачественньїх опухолей, таких как неоплазмьї, карциномь!, саркомь, или лейкозов. Кроме того, соединения обнаруживают иммунодепрессивную активность и, следовательно, могут « 70 Применяться при лечений органоспецифических или системньх аутоиммунньїх заболеваний, таких как -о ревматоидньй артрит, системная красная волчанка, хроническая гомологичная болезнь, рассеянньй склероз, и с т. п., или для предупреждения отторжения аллотрансплантата или полуаллотрансплантата, например, почек, :з» печени, легких, сердца, и т. п. Кроме того, соединения обладают противовирусной, противоретровирусной или противоопухолевой активностью и, таким образом, являются также подходящими средствами при профилактике

М лечений заболеваний, индуцированньїх/вьізванньїх вирусами и онкогенно (таких как СПИД и т. п.). По їз сравнению с соединениями, используемьіми до настоящего времени при лечений злокачественньїх опухолей, соединения по настоящему изобретению обладают повьішенной зффективностью или меньшей токсичностью, 1 и, таким образом, имеют более широкий терапевтический спектр действия. По зтой причине, они имеют то с преимущество, что введение лекарственньїх средств, содержащих зти соединения, может продолжаться 5р Непрерьввно в течение продолжительного периода времени, и можно избежать синдрома отмень!ї препарата или о дробного введения, которое в настоящее время часто используется с цитостатическими средствами при с лечениий опухолей, или бьівает необходимь/м вследствие их нежелательньх побочньїх действий.

Соединения по настоящему изобретению свободнь от таких недостатков. Их действие в фармакологически необходимьх дозах является иммуносупрессивньм или противовирусньмм, не будучи неспечифическим ов ЦИТОТОКСИЧНЬМ.

Подобньім образом, соединения настоящего изобретения и содержащие их фармацевтические составь (Ф. могут использоваться в сочетаний с другими лечебньіми средствами для лечения и профилактики упомянутьсмх г вьше заболеваний. Примерами таких других лекарственньїх средств являются такие средства, как, например, ингибиторь! митоза, такие как колхицин, митоподозид, винбластин, алкилирующие цитостатические средства, бр такие как циклофосфамид, мелфалан, милеран или цисплатин, антиметаболить, такие как антагонисть фолиевой кислоть! (метотрексат) и антагонистьь пуриновьїх и пиримидиновьїх оснований (меркаптопурин, 5-фторуридин, цитарабин), цитостатически активнье антибиотики, такие как антрациклинь! (например, доксорубицин, даунорубицин), гормонь, такие как фосфзстрол, тамоксифен, другие цитостатически/цитотоксически активнье химиотерапевтические средства и другие иммунодепрессивнье де /лекарственнье средства (такие как циклоспоринь, ЕК 506, рапамицинь, дезоксиспергуалин, и т. п.).

Возможнье соли соединений общей формуль 1 представляют собой, прежде всего, соли щелочньйх и щелочноземельньїх металлов и аммония фосфатной группьі. Предпочтительньіми солями щелочньїх металлов являются литиевне, натриевне и калиевье соли. Возможньми солями щелочноземельньїх металлов являются магниевье и кальциевье соли, в особенности. В соответствии с изобретением, под аммониевьми солями подразумеваются соли, содержащие аммониевьй йон, которьій может замещаться до четвертой степени алкильньмми остатками, имеющими 1-4 атома углерода, и/или аралкильньми остатками, предпочтительно, бензильньїми остатками. Заместители могут бьіть одинаковьми или различньми.

Соединения общей формуль! 1 могут содержать группьі основного характера, в частности, аминогруппь, которье могут бьіть превращеньі в соли присоединения кислот с помощью соответствующих неорганических 7/0 ли органических кислот. В таком случає, подходящими кислотами являются, в частности, хлористоводородная кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, винная кислота, лимонная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота или метансульфоновая кислота.

В общей формуле 1 В", предпочтительно, представляет собой линейную (С в-Сі5)-алкильную группу, которая также может бьіть замещена (С 4-Св)-алкоксигруппой или (Сі-Св)-алкилмеркапрогруппой. Точнееє, В! 75 представляет собой нонильную, децильную, ундецильную, додецильную, тридецильную или тетрадецильную группу. Метоксигруппа, зтоксигруппа, бутоксигруппа и гексилоксигруппа являются, предпочтительно, возможньми (С4-Св)-алкоксизаместителями К!. В случає, когда ЕК! замещен (С1-Св)-алкилмеркаптогруппой, подразумевается, что зта группа представляет собой, в частности, метилмеркатогруппу, зтилмеркаптогруппу, пропилмеркаптогруппу, бутилмеркаптогруппу и гексилмеркаптогруппу. 20 22, предпочтительно, представляет собой линейную (Св-Сі5)-алкильную группу, которая также может бьть замещена (С1-Св)-алкоксигруппой или (Сі-Св)-алкилмеркаптогруппой. Конкретнее, 2 представляєт собой октильную, нонильную, децильную, ундецильную, додецильную, тридецильную или тетрадецильную группу.

Метоксигруппа, зтоксигруппа, пропоксигруппа, бутоксигруппа и гексилоксигруппа являются предпочтительнь!ми 25 (Сі-Св)-алкоксизаместителями Б 2. В случає, когда БК? замещен (С.-Сбв)-алкилмеркаптогруппой, сч подразумевается, что зта группа представляет собой, в частности, метилмеркатогруппу, зтилмеркаптогруппу, Го) бутилмеркаптогруппу и гексилмеркаптогруппу.

Предпочтительно, Х представляет собой атом серьї, сульфинильную или сульфонильную группу, й У представляет собой кислород. ФУ 30 Подобньім образом, предпочтительньми являются соединения, в которьїх Х и у представляют собой валентнье связи, 2 представляет собой водород, и в' представляет собой (С 1-Сод)салкильную цепь, ме) необязательно замещенную (С4-Сев)-алкоксигруппой или (С4-Св)-алкилмеркаптогруппой. с

Предпочтительно, КЕ? представляет собой водород, азидогруппу, цианогруппу или галоген, такой как фтор, хлор или бром. юю 35 Предпочтительно, каждьй из КЗ и 7 представляеєет собой гидроксильную группу, или цианогруппу, или «І азидогруппу, или атом галогена, такого как фтор, хлор, бром или азидогруппу, или атом галогена, такого как фтор, хлор, бром или йод, при зтом группь! могут бить одинаковьіми или разньми.

Особенно предпочтительньмми являются соединения, в которьїх В ? представляет собой атом водорода, и «

ЕЗ, и В" являются гидроксильньіми группами, циангруппами, азидогруппами или атомами фтора. т0 На основаниях общей формуль (ІІ) группьі ВЗ и В", предпочтительно, представляют собой атомь! водорода, 8 с метильнье, трифторметильньсе, зтильнье, пропильнье или бутильньсе группьї, или атомь! галогена, такие как з» атомь! фтора, хлора, брома или йода, а также алкенильньсе группь, которье могут бьіть замещень! галогеном.

Особенно предпочтительньми значениями БК ЗУ и К'/ являются атомь водорода, метильньеє, трифторметильнье или зтильнье группьї, и атомь! фтора, хлора или брома, и/или винильнье, пропенильньеєе, 1» зтинильнье или пропинильньсе группьї, необязательно замещеннье галогеном.

Группа КУ, предпочтительно, представляет собой атом водорода, метильную, зтильную, пропильную или о бутильную группу, аминогруппу или атом галогена, такого как фтор, хлор, бром или йод, предпочтительно - атом о хлора или брома.

ВО, предпочтительно, представляет собой атом водорода, фтора или брома, (С 4-Св)-алкоксигруппу, о конкретнее - метоксигруппу, зтоксигруппу, пропоксигруппу, бутоксигруппу или гексилоксигруппу, меркаптогруппу,

Ге) (С41-Св)-алкилмеркаптогруппу, точнее - метилмеркаптогруппу, зтилмеркаптогруппу, бутилмеркаптогруппу или гексилмеркаптогруппу, или аминогруппу, которая может бьть моно- или дизамещенной (С 41-Св)-алкильной группой, такой как метильная, зтильная, бутильная или гексильная группа, гидрокси-(С 5-Св)-алкильной группой, дв такой как гидроксизтильная, гидроксипропильная, гидроксибутильная или гидроксигексильная группа, (С3-Св)-циклоалкильной группой, такой как циклопропильная, циклопентильная или циклогексильная группа,

Ф) арилом, предпочтительно - фенилом, аралкильной группой, такой как, в частности, бензил, необязательно ка замещенньй одной или несколькими гидроксильньми или метоксильньми группами, (С4-Св)-алкильнь!ми группами, такими как метильная, зтильная, пропильная, бутильная или гексильная группьії, или атомами бо галогена, такими как атомь! фтора, хлора или брома. Подобньм образом, аминогруппа может бьіть замещена гетероалкильной или гетероарильной группой, такой как, в частности, тиенильная, фурильная или пиридильная группа, например. Под гетероарильной группой подразумевается, предпочтительно, тиенилметильная, фурилметильная или пиридилметильная группа.

Нуклеозидами, подходящими в качестве компонентов сочетания для получения липид-нуклеотидньх 65 Коньюгатов формуль! (1), являются б-меркаптопурин-9- дД-Ю-рибофуранозид,

5-фторуридин, инозин, 5-метилуридин, 2,3-дидезокси-2,3'-дифтортимидин, 5-хлоруридин, 5-трифторметилуридин, 5-зтинилуридин,

Б-зтинилцитидин, 70 5-проп-1-енилуридин, 5-проп-2-енилуридин, аденозин, гуанозин, 2,6-диаминопурин-9-Д-ЮО-рибофуранозид, 2-амино-6-меркаптопурин-9- дД-Ю-рибофуранозид, 2-амино-6-меркаптометилпурин-9- д-Ю-рибофуранозид, 2-амино-6-хлорпурин-9- дД-Ю-рибофуранозид, 2'-дезокси-2--аминоаденозин, 2'-дезокси-2'--азидоаденозин, 2'-дезокси-2'-азидоцитидин, 2'-дезокси-5-фторуридин, 2-хлораденозин, 2-бромаденозин, 3З'-дезокси-3'і-фтораденозин, са б-метилмеркаптопурин-9- Д-О-рибофуранозид, (5) 2-фтораденозин, 2-фтор-2'--дезоксиаденозин.

Соединения общей формульї (1) могут бьіть получень 1) взаимодействием соединения общей формуль! У (є) в-х -сн, о со п -у-сН ? ю

І сн, -0-р -он (у), З

ОН ' « дю в которой В", Б, Х и У имеют установленньсе вьіше значения, с соєдинениєм общей формуль МІ з с н-о т й в "» о. ре Н (У1) 7 ї з ре і-й в которой КУ, К7, ЕР, и В имеют установленнье вьіше значения, или представляют собой гидроксильную о группу, защищенную защитной для гидроксильной функциональности группой, привьічной для специалиста, в присутствий активного хлорангидрида, такого как хлорид 2,4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислоть, и

Мамі четвертичного азотистого основания, например, пиридина или лутидина, в инертном растворителе, таком как (Че) толуол, или непосредственно в безводном пиридине, и, необязательно, с последующим гидролизом, удаляющим защитньсе группьї, в соответствии со способами, принятьіми в химии нуклеозидов, или 2) взаимодействием соединения общей формульї МІ! зв Ді Хх- сн, о в х- сн у Сна м | | Й й сСв- осесосенетовт усе й Сні в которой В, В, Х и У имеют установленньсе вьіше значения, с соеєдинениєм общей формуль Мі, в которой

ВЗ, 27, 25 и В имеют вьішеустановленнье значения, в присутствий фосфолипазь О из Зігеріотусевз инертном б5 растворителе, таком как флороформ, в присутствий подходящего буфера, и, необязательно, с последующей реакцией, удаляющей защитньсе группьї, в соответствии с методами, принятьми в химии нуклеозидов.

Получение соединений общих формул М и МІЇ осуществляют по аналогии с методами в І іІріав. 22, 947 (1987), и в). Мей. Спет. 34, 1377 (1991).

Получение соединений общей формуль! МІ описано, например, в ЕР-А-0286028 и в ВОМС 90/08147.

Некоторне из перечисленньїх нуклеозидов являются коммерчески доступньіми соединениями.

Соединения, подобнье соединениям формуль 1, описьваются в ЕР-А-0350287. В зтом патенте описьіваются соответствующие сложнье 1,2-дизфирь! глицерина.

Лекарственнье средства для лечения вирусньїх инфекций, содержащие соединения формуль! 1, могут применяться в жидкой или твердой формах интестинальньм или парентеральньм способом. Возможно 7/0 использование обьічньїх форм, таких как таблетки, капсульї, таблетки с покрьітием, сиропь, растворь! или суспензии. В качестве иньекционной средьі! применяют, предпочтительно, воду, содержащую такие добавки, как стабилизаторьії, солюбилизаторьй и буферьі, которье обьічньї для растворов для иньекций. Такие добавки представляют собой, например, тартратнье или цитратнье буферньсе растворьї, зтанол, комплексообразующие агентьї, такие как зтилендиаминтетрауксусная кислота и ее не токсичнье соли, вьісокомолекулярнье полимерьї, /5 такие как жидкие полизтиленоксидьі для регулирования вязкости. Жидкие носители для растворов для иньекций должнь! бьіть стерильньіми, и, предпочтительно, разливаются в ампульі. Твердьми носителями являются, например, крахмал, лактоза, маннит, метилцеллюлоза, тальк, вьісокодисперснье кремниевье кислотьі, внісокомолекулярньюе жирнье кислотьї, такие как стеориновая кислота, желатин, агар-агар, фосфат кальция, стеарат магния, животнье и растительнье жирь!ї, твердье вьісокомолекулярнье полимерь!, такие как полизтиленгликоль, и т. п. Если желательно, составь), пригоднье для перорального применения, могут включать корригенть! и подслащиватели.

Дозировка может зависеть от различньїх факторов, таких как способ введения, вид, возраст или индивидуальное состояние. Обьічно, соединения по настоящему изобретению применяют в количестве 0,1 - 10Омг, предпочтительно - 0,2 - 8Омг, в сутки и на кг массь! тела. Предпочтительно разделять суточную дозу на 2 сч ов 7 З применений, причем при каждом применений принимают таблетки, имеющие содержание активного ингредиента 0,5 - 500мг. Подобньм образом, таблетки могут обладать продолжительньм вьіделением (8) лекарственного средства, что снижает число приемов до 1 - З раз в сутки. Содержание активного ингредиента в таблетках с длительньмм вьіделением может составлять 2 - 100Омг. Активньій ингредиент также может вводиться непрерьівньіми инфузиями, при которьїх обьічно достаточньїм является количество 5 - 100Омг в сутки. Ге! зо Помимо соединений, упомянутьїх в примерах, для целей настоящего изобретения можно использовать соединения формульї! 1, перечисленнье ниже. і, 1. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-хлор-уридин)-5'-фосфорной кислоть с 2. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-трифторметилуридин)-5'-фосфорной кислоть!

З. (3-Додецилмеркапто-2-дециклоси)пропиловьй зфир о (6б-меркаптопурин-9- Д-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть «І 4. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-фтор-уридин)-5'-фосфорной кислоть 5. (З-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-проп-1-енилуридин)-5'-фосфорной кислоть! 6. (З-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьїй зфир (5-зтинил-цитидин)-5'-фосфорной кислоть! « 7. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьй зфир (2-амино-6-меркаптопурин-9- Д-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть - с 8. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьй зфир ч (2,6-диаминопурин-9- Д-Ю-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть "» - - 9. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-проп-2-енилуридин)-5'-фосфорной кислоть! 10. (3-Додецилсульфонил-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-фтор-уридин)-5'-фосфорной кислоть 11. (3-Додецилсульфонил-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-хлор-уридин)-5'-фосфорной кислоть пи 12. (3-Додецилсульфонил-2-децилокси)пропиловьй зфир «сл (б-меркаптопурин-9- Д-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть 13. (3-Додецилокси-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-фтор-уридин)-5'-фосфорной кислоть о 14. (3-Додецилокси-2-децилокси)пропиловьій зфир (б-меркаптопурин-9-р-О)-рибофуранозид)-5'-фосфорной

ОО 250 КИСлОТЬІ 15. (3-Додецилмеркапто-2-децилмеркапто)пропиловьій зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть с 16. (3-Унде -2- Й - -5- Й . цилмеркапто-2-ундецилокси)пропиловьій зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть 17. (3-Ундецилмеркапто-2-ундецилокси)пропиловьій зфир (5-трифторметилуридин)-5'-фосфорной СП кислоть 18. (3-Ундецилмеркапто-2-ундецилокси)пропиловьй зфир (б-меркаптопурин-9- Д-Ю-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть (Ф) 19. (3-Децилмеркапто-2-додецилокси)пропиловьій зфир (5-трифторметилуридин)-5'-фосфорной кислоть

Ге 20. (3-Ундецилмеркапто-2-додецилокси)пропиловьій зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть 21. (3-Ундецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-трифторметилуридин)-5'-фосфорной кислоть во 22. (3-Тетрадецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьй зфир (б-меркаптопурин-9- Д-Ю-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть 23. (3-Тридецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть 24. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (2-фтораденозин)-5'-фосфорной кислоть! 25. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (2-дезокси-2-фтораденозин)-5'-фосфорной кислоть 65 26. Додециловьй зфир (б-меркаптопурин-9-р-ЮО-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть 27. Гексадециловьіїй зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть!

28. Зйкозиловьій зфир (5-трифторметилуридин)-5'-фосфорной кислоть! 29. Додециловьїй зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть!

ЗО. Додециловьй зфир (б-меркаптопурин-9-8-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть

Пример 1 (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть!

Обрабатьвают 3,6бг (6б,1ммоль) (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира фосфорной кислоть, дваждь), ЗОмл безводного пиридина, и концентрируют путем упаривания. Остаток растворяют в ЗОмл безводного пиридина, обрабатьівают в атмосфере оазота 2,7бг (9ммоль) хлорангидрида 70. 2.4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислотьі и перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляют 1,6б0г (6б,1ммоль) 5-фторуридина (Рішка), и загрузку оставляют стоять в атмосфере М 2 в течение 24 часов.

Гидролиз осуществляют, используя 15мл водьі, смесь перемешивают еще в течение 2 часов при комнатной температуре, освобождают от растворителя в вакууме, и дваждьій очищают от растворителя, используя 75 небольшое количество толуола. Остаток очищают колоночной хроматографией на ІІСпгоргер? ВР-18 с линейньм градиентом злюента от метанола с водой (7/1) до метанола. Вьїход составляет З3,1г (6995 от теоретического количества); масло. КІ - 0,24 (СнНоСІ»/мМеон 8/2); КГ - 0,55 (СНЬСІ»/Меон/НьЬО 6,5/2,5/0,4) на пластинах для ТХС Метгк 5715, силикагель бОБК. (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир фосфорной окислотьі получают в соответствии с 20 описанием в ВОЙИС 92/03462.

Пример 2 (3-Додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьій зфир (б-меркаптопурин-9-4-ЮО-рибофуранозид)-5'-фосфорной кКИслОтЬІ

Обрабатьівают 6,2г (12,5ммоль) (З-додецилмеркапто-2-децилокси)упропилового зфира фосфорной кислоть! СМ 25 5,їг (18,75ммоль) хлорангидрида 2,4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислотьі, как описано в примере 1, и (5) затем 3,55г (11,25ммоль) б-меркаптопурин-9-р4-0)-рибофуранозида, и через 24 часа осуществляют гидролиз водой.

Затем к полученной смеси постепенно прикальвают раствор 2,85г ацетата кальция в 15мл водь,, осаждая сьірую кальциевую соль коньюгата. После продолжительного перемешивания с ацетоном (1/10) получают бг (о) 30 сірого аморфного продукта, имеющего площадь в 7295 по ВОЖХ. со

Кальциевую соль суспендируют в З5Омл метанола, обрабатьшвают 150г амберлита ІК 120 в форме Ма", и перемешивают в течение 2 суток. ме)

После зтого удаляют ионообменную смолу, фильтрат упаривают, и остаток очищают колоночной ю хроматографией на І іСпгоргер? ВР-18 с линейньм градиентом метанола с водой от 5 / 1 до 9 / 1. Фракции, 3о содержащие продукт, упаривают в вакууме, и остаток перемешивают с ацетоном и сушат. Вьіход 3,52г (4195 от М теоретического количества).

ОС: кг - 0,45 (изопропанол/бутилацетат/конц. аммиак/вода 50/30/5/15).

Пример З «

Натриевая соль (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира (б-меркаптопурин-9- Д-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть не с Аналогично примеру 2, в 400мл безводного опиридина овводят ово взаймодействие 41,4г :з» (3-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира фосфорной о окислотьії со 42,9г хлорангидрида 2,4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислоть, и затем - с 23,7г 6б-меркаптопурин-9-8-О-рибофуранозида.

Сьрую кальциевую соль, которую отфильтровьівают отсасьванием после гидролиза и осаждения 25г ацетата ї» кальция в 1бб0мл водьії, распределяют между 500мл МТБ (метилтретбутиловьій зфир) и 25О0мл 2М НОЇ, и перемешивают до полного растворения в органической фазе. Органическую фазу отделяют, промьівают 1 насььщенньм раствором хлорида натрия и концентрируют в роторном испарителе. Остаток вносят в 80г со ПСгоргер? ЕР-18 (обрабатьввают БЕР-18 раствор сьірого продукта в МТБ, упаривают и сушат), и разделяют на части на форколонке с КР-18. Каждьй раз в качестве злюента служит смесь 3,7л метанола, 400мл водь, Змл і ледяной уксусной кислоть! и 2г ацетата натрия. Фракции, содержащие продукт, обеединяют, осаждают нужное

Ге соединение путем добавления 20г оцетата кальция в 100мл водьї, и фильтруют отсасьіванием. Вьїход 32г (4390 от теоретического количества).

Кальциевую соль суспендируют в 250мл МТБ, зкстрагируют 8Омл 2М НСІ путем встряхивания, и в Органическую фазу дваждь промьшванию насьщенньм раствором хлорида натрия. После удаления растворителя остаток растворяют в 200мл толуола, и доводят рН до 7 против РЕгізсоїуїЇ злектрода 3090 (Ф) раствором метилата натрия. Натриевую соль осаждают путем перемешивания в 200мл ацетона, фильтруют ко отсасьвванием и сушат в печи для вакуумной сушки. Вьход 29г (3795 от теоретического количества).

Величина НІ 0,18 (силикагель; злюент изопропанол/бутилацетат/вода/конц.аммиак 50/30/15/5). во Пример 4

Натриевая соль (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира (б-меркаптопурин-9- Д-Ю-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть

Аналогично примеру 3, получают сьірой коньюгат из 40г б-меркаптопурин-9-4-О-рибофуранозида. Сьрой продукт очищают колоночной хроматографией, используя каждьй раз 8г, на колонке с фазой ОІОЇ. (диаметр 65 4см, длина 25см) (детекция при 254нм; злюент: метанол/мтВ 10/4). Внесенньій образец образует в злюенте прозрачньій раствор. Фракции из различньїх вьіделений, содержащие продукт, обьединяют, упаривают и осаждают в виде натриевой соли из толуола и ацетона, как в при мере 3. Вьіход 64,5г (5195 от теоретического количества).

Значение КІ 0,85 (фаза ІСІ; злюент метанол).

Пример 5

Натриевая соль (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира (б-метилмеркаптопурин- рД-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть

Аналогично примеру 1, вводят во взаймодействие 14,9г б-метилмеркаптопурин-9- Д-Ю-рибофуранозида (Бббммоль) со смешанньм ангидридом, полученньм из 27,3г (З-додецилмеркапто-2-децилокси)-пропилового 70 зфира фосфорной кислотьї и 25г хлорангидрида 2,4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислоть! в 250мл безводного пиридина, гидролизуют и концентрируют путем вьіпаривания. Аналогично примеру 3, сьірой продукт (ВЗЖХ: 6795 площадь) очищают хроматографией на КР-18, осаждают в виде кальциевой соли, и превращают в натриевую соль. Вьход 15,2г (3895 от теоретического количества).

Значение НІ 0,22 (силикагель; злюент изопропанол/бутилацетат/вода/конц.аммиак 50/30/15/5).

Пример 6

Натриєвая соль (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира (5-фторуридин)-5'-фосфорной кКИслОтЬІ

Аналогично примеру 1, 50г 5-фторуридина превращают в сьірой коньюгат, осаждают в виде кальциевой соли, как описано в примере 3, и затем, чтобьі конвертировать ее в свободную кислоту, очищают сьірой продукт хроматографией, аналогично примеру 4, на фазе ОІОЇ, используя в качестве злюента метанол/мтВ 10/4.

Натриевую соль, полученную как в примере 3, извлекают с вьіходом 69905.

Значение КІ 0,35 (пластинь! БІОЇ; злюент метанол/мтВ 10/4).

Пример 7

Значения ІСво (мкг/мл) для азатиоприна, б-меркаптопурина (6-МР), б-меркаптопуринрибозида, ВМ 92.0729 и Ге доксорубицина при анализах КОЕ-З и КОЕ-ГМ о

В таблице зтого примера приводятся величинь ІС во), мкг/мл, для азатиоприна, б-меркаптопурина (6-МР) и б-меркаптопуринрибозида в сравнений с (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьм зфиром (б-меркаптопурин-9-дД-О-рибофуранозид)-5'-фосфорной кислоть! - ВМ 92.0729 - для цитотоксичности іп мйго для стволовьїх муриновьїх клеток костного мозга, полученньіе при анализах отношений колониеобразующих единиц /Ф)

Кк зритроцитам (КОЕ-3) и колонигобразующих единиц к гранулоцитам-макрофагам (КОЕ-ГМ). В качестве с вещества для сравнения также включено цитостатическое-цитотоксическое соединение доксорубицин. Все соединения проверяются при З - б различньїх концентрациях при, по крайней мере, двух- трехкратном (зе) повторенийи для каждой проверяемой концентрации. ю

Как можно видеть из результатов ВМ 92.0729 значительно лучше переносится стволовьми клетками костного мозга по сравнению со всеми другими тестируемьми соєдинениями, в частности, по сравнению со 00-Х б-меркаптопуринрибозидом.

Значения ІСво (мкг/мл) для азатиоприна, б-меркаптопурина (6-МР), б-меркаптопуринрибозида, ВМ 92.0729 и доксорубицина при анализах КОЕ-З и КОЕ-ГМУ « - с Соединение КОЕ-З КОБ-ГМ . о Азатиоприн 0,0004 3 0,0001 (4) 0,0043 - 0,0019 (3) ч 45 6-МР 0,0003 - 060001 (4) 0,0023 3 0,00009 (3) г! 6-МР-рибозид 0,0003 ж 0,0001 (4) 0,0023 3 0,00013 (3) я 50 вм 92:0729 0,056 0,013 (5) 0,247 - 0,044 (6) с Доксорубицин 0,0017 ж 0,0005 (4) 0,050 0,004 (4) а среднее х ст. отклонение; п - число разньїх зкспериментов. о Пример 8

Токсичность ВМ 92.0729, азатиоприна, б-меркаптопурина и б-меркаптопуринрибозида для костного мозга у їмо) самок мьішей Ваїр/с, на 4 сутки (зксп. 930740)

Зксп. 930740 показьшвает токсичность для костного мозга ВМ 92.0729, азатиоприна, б-меркаптопурина и бо 6-меркаптопуринрибозида іп мімо на самках мьішей Ваїр/с, которьім препарать! давались один раз в сутки, р. о., четьіре дня подряд (сутки 0 - сутки - 3). Животньх умерщвляют на 4 сутки (сутки 14), и определяют насьшщенность клетками костного мозга (клетки/бедр. кость). Результать! показьвают отсутствие токсичности для костного мозга в случаеє коньюгата б-меркаптопуринрибозида с простьім зфиром липида ВМ 92.0729 вплоть до самьїх вьісоких проверенньїх доз, т. е., до 10Омг.кг сутки", что соответствует, в молярном отношений, бо ЗОмг.кг сутки"! б-меркаптопуринрибозида. Зто последнеє соединениє, в отличие от простого зфирного липидного коньюгата ВМ 92.0729, показьшваєт отчетливое, зависящее от дозь, снижение насьшщенности клетками костного мозга. Такие же результать! получают для других веществ, в том числе, для азатиоприна и б-меркаптопурина.

Токсичность ВМ 92.0729, азатиоприна, б-меркаптопурина и б-меркаптопуринрибозида для костного мозга у самок мьішей Ваїр/с, на 4 сутки (зксп. 930740) 0 Совдинение |Доза(мгкг- сутки") Клетки/бедр. кость(109) 8-Меркаптопуринрибозид а среднее «5 ст. откл.; обработка один раз в сутки, р. о., сутки 0 - сутки 43; умерщвление на 4 сутки (сутки 4) но р 0,05 тест Мапп- Мне пед, с хи р їх 0,01 (о) (о)

Пример 9 со

Токсичность ВМ 92.0729, азатиоприна, б-меркаптопурина, б-меркаптопуринрибозида и циклоспорина А для с костного мозга у самок мьішей Ваїр/с, на 4 сутки (зксп. 940026)

Зксп. 940026 является зкспериментом с целью воспроизведения результатов, полученньїх в зксп. 930740 юю (пример 8). В зтот зксперимент в качестве соединения для сравнения так же включен циклоспорин А. «

Результать! зксп. 940026 подтверждают результать!, полученньсе в зксп. 930740 іп уімо.

Токсичность ВМ 92.0729, азатиоприна, б-меркаптопурина, б-меркаптопуринрибозида и циклоспорина А для костного мозга у самок мьішей Ваїр/с, на 4 сутки (зксп. 940026) « с що ЩІ 6 що оединение |Доза(мг.кг"Осутки"!) Клетки/бедр. кость(109) с Контроль овж тою) 10 пветов| (0) а г» плов 0, порт 6-Меркаптопурин 10,9.-0,9 пФ г 5 Меркаптогури п б-Меркаптопуринрибозид 000) 13,7 514 пот о вмемоге зо, лаз (б

Зотоя по 3») по а среднее «5 ст. откл.; обработка один раз в сутки, р. о., сутки 0 - сутки 43; умерщвление на 4 сутки (сутки 4) но р 0,05 тест Мапоп- МН пе іме) хх - 0,01 бо во-

Пример 10 бо Токсичность (мкм) ВМ 92.07 и 5-РО при анализах КОЕ-З и КОБЕ-ГМ для костного мозга

В приведенной о ниже таблице даются значения ІС Бо для 5-фторуридина (5-БО) и (3-додецилмеркапто-2-децилокси)пропилового зфира (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислотьі ВМ 92.0700) для токсичности для костного мозга при анализах іп міго КОЕ-З и КОЕ-ГМ. Условия испьтаний см. в примере 7.

Результать! показьівают, что коньюгат простого зфира липида и 5-фторуридина ВМ 92.0700 в 610 раз и в 238 раз менее токсичен для зритроцитньїх и гранулоцитньїх/макрофаговьх стволовьх клеток костного мозга, соответственно, чем сам 5-Е.

Токсичность (мкм) ВМ 92.0700 и 5-РО при анализах КОЕ-З и КОБЕ-ГМ для костного мозга

Й

ОО вюх| 0 ззвх а среднее; п - число зкспериментов

Пример 11

Влияние коньюгата простого зфира липида с БР (ВМ 92.0700) (рис. 1) и 5-РШ (рис. 2) на лейкоз ГІ. 1210 іп міо: время жизни

Мьішей инокулируют клетками лейкоза І 1210 в день 0 (п - 10 животньх/группу), и затем дают лечебнье препарать один раз в сутки, ір., от дня 0 (41 час) до дня 41 (б недель) еженедельньми циклами, указанньіми на рис. 1 и рис. 2, соответственно.

Из графиков времени вьїживания контрольньїх и обрабатьвваемьїх групп, приведенньх на рис. 2, очевидно, что 5-Р), как сообщалось в литературе, имеет весьма узкий профиль зависимости доза-зффективность, т. е., сч об увеличение дозь,, например, от 2х107/5 х Обмг.кг" Осутки"! до 2 х 10 / 5 х 0,Змг.кг" Осутки"! или даже до более вьісоких доз ведет к пониженньім козффициентам вьіживаемости. і)

Напротив, в случае коньюгата 5-Р и простого зфира липида (ВМ 92.0700) получают отчетливое, зависящее от дозьі возрастание времени жизни, по сравнению с контролем 1 и 11 (рис. 1), указьівающее, что зквимолярнье дозьі ВМ 92.0700 являются явно более зффективньми, при сравнений дозьі ВМ 92.0700 являются явно более Ге! зо зффективньми, при сравнений со стандартньім соединением 5-РУ, в зтой модели лейкоза.

Учитьівая, что ВМ 92.0700 является более зффективнь!м (рис. 1 и 2) и значительно менее токсичньім для о клеток костного мозга, можно сделать вьівод, что ВМ 92.0700 обладаєт значительно более вьІісокКим с терапевтическим индексом/козффициентом, чем стандартньїй цитостатический 5-Б. ою

Зо

Claims (13)

Формула винаходу М

1. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формульі ві-х--сн, ч | що с кут ї з стор 6; ї» он в нн 1 (95) се 70 ю з 3е) І в которой В представляєт собой линейную или разветвленную насьщенную алкильную цепь, содержащую 1-20 о атомов углерода, В? представляєет особой линейную или разветвленную насьщенную алкильную цепь, содержащую 1-20 о атомов углерода, ВЗ представляет собой водород или гидроксильную группу, 60 В" представляеєт собой гидроксильную группу, ВЕ? представляеєт собой водород или гидроксильную группу, Х представляет собой атом серьі, сульфинильную или сульфонильную группу, У представляет собой атом кислорода, ве В представляет собой пуриновое или пиримидиновое основание формуль! Ша или ПШг р с Ж о М в Ша во М | У зл М М , Шг в которьх сч - 29 представляеєт собой водород или галоген, о 2?" представляет собой атом водорода, Гези представляет собой водород, ВО представляеєт собой водород, меркаптогруппу, (С4-Св)-алкилмеркаптогрупу, (о) при условии, что по крайней мере один из остатков КЗ или 2? представляет собой водород, их таутомерь, с их оптически активнье формьї и рацемические смеси, или их физиологически приемлемьсе соли неорганических и органических кислот или оснований. со

2. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль! І по п. 1, отличающиеся тем, что В! представляєт ю собой линейную (Св-С15)-алкильную группу. Зо

3. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формульи і! по п. 1 или 2, отличающиєеся тем, что Б? М представляет собой линейную (Св-С15)-алкильную группу.

4. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль І по любому из пп. 1-3, отличающиеся тем, что В? представляет собой водород. «

5. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль | по любому из пп. 1-4, отличающиеся тем, что ВЗ представляєт собой гидроксильную группу. З с

6. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль | по любому из пп. 1-5, отличающиеся тем, что Б "» представляет собой атом водорода.

"

7. Нуклеозидмонофосфатнье производньюе формуль І по любому из пп. 1-6, отличающиеся тем, что БО представляет собой атом водорода или (С1-Св)-алкилмеркаптогруппу.

8. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль І по любому из пп. 1-7, отличающиеся тем, что е В" представляеєт собой линейную (Сое-С13)-алкильную группу, 1 В? представляеєт собой линейную (Св-С14)-алкильную группу, с ВЗ представляет собой гидроксильную группу, В" представляеєт собой гидроксильную группу, о В? представляет собой водород, іЧе) 25 представляет собой водород или атом фтора, хлора или брома, В? представлет собой атом водорода, ВО представляет собой водород, меркаптогруппу, метилмеркаптогруппу, зтилмеркаптогруппу, бутилмеркаптогруппу, гексилмеркаптогруппу. ГФ)

9. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формуль ! по любому из пп. 1-8, отличающиеся тем, что юю нуклеозидную часть вьібирают из группьі, в которую входят б-меркаптопурин-9- В -ЮВ-рибофуранозид, 5-фторуридин, 5-хлоруридин, б-метилмеркаптопурин-9- Я -ЮВ-рибофуранозид,2'-дезокси-5-фторуридин. 60

10. Нуклеозидмонофосфатное производное формуль! | по любому из пп. 1-9, отличающееся тем, что оно является (З-додецилмеркапто-2-децилокси)пропиловьїм зфиром (5-фторуридин)-5'-фосфорной кислоть! или его солью.

11. Нуклеозидмонофосфатнье производнье формульй по любому из пп. 1-10, обладающие 65 противоопухолевой активностью.

12. Способ получения нуклеозидмонофосфатньїх производньїх о формульй 1 по любому из пп.

1-11, отличающийся тем, что вводят во взаймодействие соединение общей формуль! М курю 2 куті ЇЇ настотт тон з в которой В, В2, Х, у имеют вьішеуказаннье значения, с соединением общей формуль МІ т5 НОо--СН. о В н З 4 КЕ Кк

Ь. У сч У в которой В", В2, В? и В имеют вьішеуказанньсе значения, (о) в присутствий активного хлорангидрида, такого, как хлорангидрид 2,4,6-триизопропилбензолсульфоновой кислотьі, и азотистого основания, например, пиридина или лутидина, в инертном растворителе, таком как толуол, или непосредственно в безводном пиридине. ФУ

13. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, отличающаяся тем, что содержит по крайней мере одно соеєдинениє формуль! 1 по любому из пп. 1-11 в зффективном количестве, а (9 также фармацевтические адьюванть! или носители. с юю «І -

с . а т» 1 (95) се 70 (Че) ко бо б5