TWI702047B - 芒果果實萃取物及由其所得生物活性物質減少肝脂肪累積及氧化傷害的用途 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種芒果果實萃取物用於製備減少肝細胞脂肪累積及氧化傷害之組合物之用途。本發明亦提供一種該芒果果實萃取物所包含的生物活性物質，且該生物活性物質包含一水解單寧化合物用於製備減少肝臟脂肪累積之組合物之用途。
Description
本發明係關於一種芒果早摘果萃取物及由其獲得的生物活性物質所包含之水解單寧化合物之用途，特別係關於一種芒果早摘果萃取物用於製備減少肝細胞脂肪累積及氧化傷害之組合物之用途，以及該水解單寧化合物用於製備減少肝細胞脂肪累積之組合物之用途。
肝臟是身體中負責消化食物、儲存能量、及移除毒素的重要器官。當肝臟脂肪含量超過肝臟重量的5%，臨床上就會被判斷為脂肪肝。由於成因不同，脂肪肝又分為酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver disease)與非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)，其中非酒精性脂肪肝是全球最常見的慢性肝臟疾病。非酒精性脂肪肝依肝臟是否發炎又分為單純性脂肪肝及非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)。非酒精性脂肪肝炎患者的肝細胞因為發炎而受損，造成肝臟纖維化(fibrosis)，嚴重者甚至會導致肝硬化(cirrhosis)或肝癌。
非酒精性脂肪肝的危險因子包含肥胖、第二型糖尿病、高血脂、特定藥物使用、及環境毒素。因此，預防或治療非酒精性脂肪肝的方法包括減少熱量攝取、提升運動量、及停止特定藥物使用。然而，工作繁忙的現代人不易落實這些改變生活型態的方法。另外，在醫藥領域，目前尚無能有效治療非酒精性脂肪肝的藥物。儘管已有糖尿病藥物可否用於治療非酒精性脂肪肝的研究，這類研究仍在探索階段。
有鑑於此，為預防或逆轉脂肪肝，特別是非酒精性脂肪肝，甚至進一步減少肝細胞與肝功能損傷，開發一種可抑制肝脂肪累積與損傷的組合物，實有其必要。
緣此，本發明之一目的在提供一種芒果早摘果萃取物用於製備減少肝細胞脂肪累積或氧化傷害之組合物之用途，其中該芒果早摘果萃取物係以一溶劑萃取一芒果早摘果而獲得，其中該芒果早摘果係指於幼果期或快速生長期，且果皮未轉黃的芒果果實。
在本發明之一實施例中，該溶劑與該芒果早摘果之重量比範圍為20：1至1：1，且該萃取係在55℃至100℃進行。
在本發明之一實施例中，該溶劑為水，且該芒果早摘果萃取物之濃度為至少1mg/mL。
在本發明之一實施例中，該芒果早摘果萃取物所減少肝細胞氧化傷害包括細胞凋亡。
本發明之另一目的在提供一種包含式(I)化合物之生物活性物質用於製備減少肝細胞脂肪累積之組合物之用途：
其中R1為單羥基苯甲醯基或多羥基苯甲醯基。
在本發明之一實施例中，該R1為單羥基苯甲醯基，例如對羥基苯甲醯基或間羥基苯甲醯基。在另一實施例中，該R1為多羥基苯甲醯基，包括二羥基苯甲醯基，例如3,4-二羥基苯甲醯基，3,5-二羥基苯甲醯基；及三羥基苯甲醯基，例如3,4,5-三羥基苯甲醯基(即沒食子醯基)。
在本發明之一實施例中，式(I)化合物係分離自前述芒果早摘果萃取物，但該化合物不限於來自芒果早摘果或其他天然來源，亦可由化學合成方法而製得。
在本發明之一實施例中，該式(I)化合物之濃度為至少10μg/mL。
本發明揭露芒果早摘果萃取物能減少肝細胞脂肪累積及氧化傷害，因此具備抑制脂肪肝形成與維持正常肝功能的潛力。此外，本發明亦揭露一種包含顯著減少肝細胞脂肪累積的式(I)化合物的生物活性物質。因此，前述芒果早摘果萃取物及該生物活性物質基於其特性可用於製備減少肝細胞脂肪累積及/或氧化傷害之組合物。該組合物可為粉末、顆粒、溶液、膠體或膏體，且可製成醫藥品、食品、飲品、或營養補充劑，藉由口服或其他方式給予一個體。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明之特點及應用，而非用以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1顯示本發明一實施例之芒果早摘果萃取物的高效液相層析(HPLC)指紋圖譜。
圖2A顯示HepG2細胞以油酸單獨處理後的油紅O染色顯微照片；比例尺表示50μm。
圖2B顯示HepG2細胞以油酸及本發明一實施例之芒果早摘果萃取物處理後的油紅O染色顯微照片；比例尺表示50μm。
圖2C顯示圖2A及圖2B所示HepG2細胞的油紅O相對含量。
圖3顯示本發明一實施例之芒果早摘果萃取物對過氧化氫(H2O2)刺激下HepG2細胞釋放丙胺酸轉氨酶(ALT)的抑制效果。
圖4顯示HepG2細胞的Hoechst 33342/PI螢光染色顯微照片，該細胞係以過氧化氫(H2O2)單獨處理、以過氧化氫及本發明一實施例之芒果早摘果萃取物共同處理、或不予處理(對照組)；各照片中比例尺表示50μm。
圖5顯示本發明一實施例之芒果早摘果萃取物及其二次萃取物對油酸處理之HepG2細胞的脂肪累積的抑制效果；MI表示芒果早摘果萃取物，MIE表示乙酸乙酯層萃取物，MIB表示正丁醇層萃取物，MIW表示水層萃取物。
圖6顯示化合物1之質譜圖。
圖7A顯示化合物1之氫核磁共振(1H-NMR)光譜。
圖7B顯示化合物1之碳核磁共振(13C-NMR)光譜。
圖7C顯示化合物1之氫-氫關聯性(correlation spectroscopy，COSY)光譜。
圖7D顯示化合物1之碳-氫異核單量子相關(heteronuclear single quantum correlation，HSQC)光譜。
圖7E顯示化合物1之碳-氫異核多鍵相關(heteronuclear multiple bond correlation，HMBC)光譜。
圖8顯示式(Ia)化合物對油酸處理之HepG2細胞的脂肪累積的抑制效果。
圖9顯示式(Ib)化合物對油酸處理之HepG2細胞的脂肪累積的抑制效果。
除非另有說明，本文中所使用之「一」、「該」及類似用語應理解為包含單數及複數形式。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在20%的範圍內，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。
本文所述的組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而製備成一適合於非經腸道地(parenterally)或口服地(orally)投藥的劑型(dosage form)，其包括但不限於：注射品(injection)[例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、粉末(sterile powder)、錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pill)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)、細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。
本文所述的組合物可由非經腸道途徑(parenteral routes)來投藥，其包括但不限於：腹膜內注射(intraperitoneal injection)、皮下注射(subcutaneous
injection)、肌肉內注射(intramuscular injection)、及靜脈內注射(intravenous injection)。
本文所述的組合物可包含一廣泛使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。該醫藥上可接受的載劑可包含一或多種選自於由下列所構成之群組中的試劑：溶劑(solvent)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。該些試劑的選用與數量落在熟習此項技術者的專業素養與例行技術範疇內。
前述醫藥上可接受的載劑包含一選自於由下列所構成之群組中的溶劑：水、生理鹽水(normal saline)、磷酸緩衝鹽溶液(phosphate buffered saline，PBS)、含糖溶液、含醇水溶液(aqueous solution containing alcohol)、及它們的組合。
自Thermo Fisher Scientific購買DMEM培養基(Gibco Dulbecco's modified Eagle’s medium)、胎牛血清(Gibco fetal bovine serum，FBS)、青黴素/鏈黴素(Gibco penicillin/streptomycin)、磷酸緩衝鹽溶液(Gibco PBS)、及Hoechst 33342染液。自Sigma購買油紅O(oil reod O)及油酸(oleic acid)。自Echo chemical購買甲醛(fomaldehyde)、異丙醇(isopropanol)、及二甲基亞碸(dimethyl sulfoxide，DMSO)。自Bio Basic公司購買牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)。自BD Biosciences購買碘化吡啶(propidium iodide，PI)染液。
溶劑係購自台灣默克公司，包括正己烷(n-hexane)、乙酸乙酯(ethyl acetate)、丙酮(acetone)、甲醇(methanol)、乙醇(ethanol)、乙腈(acetonitrile)、氯仿-d 1 (氘化程度99.5%)、甲醇-d 6 (氘化程度99.5%)、重水(deuterium oxide，氘化程度>99.8%)、及二甲基亞碸-d 6 (dimethyl sulfoxide-d 6 ，氘化程度>99.9%)。
化合物分離係利用管柱層析法(column chromatography)及薄層層析法(thin layer chromatography，TLC)。中壓液相層析(medium pressure liquid chromatography，MPLC)系統係為CombiFlash ® Rf+(Teledyne ISCO)；管柱係選用自Sephadex LH-20(Amersham Biosciences)、Diaion HP-20(Mitsubishi Chemical)、Merck Kieselgel 60(40-63μm，Art.9385)、及Merck LiChroprep® RP-18(40-63μm，Art.0250)。高效液相層析(high performance liquid chromatography，HPLC)系統裝配Hitachi L-2310系列幫浦、Hitachi L-2420 UV-VIS偵測器(偵測波長為200nm至380nm)、及D-2000 Elite資料處理軟體；管柱係選用自分析級Discovery® HS C18(250×4.6mm，5μm；SUPELCO)與Mightysil RP-18 GP 250(250×4.6mm，5μm；Kanto Chemical)，以及半製備級Discovery® HS C18(250×10.0mm，5μm；SUPELCO)與製備級Discovery® HS C18(250×21.0mm，5μm；SUPELCO)。層析系統配備紫外燈UVP UVGL-25(波長為254nm及365nm)。薄層層析片係塗覆矽膠60 F254(0.25mm；Merck)或RP-18 F254S(0.25mm；Merck)之鋁片。
化合物的化學結構係以質譜法(mass spectrometry，MS)及核磁共振光譜法(nuclear magnetic resonance spectrometry，NMR)確定。具體而言，使用二維離子阱串聯傅立葉轉換質譜(Bruker amaZon SL system)及電噴灑離子化串聯質譜(ESI-MS/MS；Thermo Scientific Orbitrap Elite system)；並使用400MHz Varian 400 FT-NMR取得一維與二維NMR光譜，以四甲基矽烷(tetramethylsilane，TMS)作為內部標準品(δ=0)。
以下實施例所用細胞包括購自美國典型培養物保存中心(American Type Culture Collection，ATCC)之人類肝癌細胞株HepG2(ATCC HB-8065)。HepG2細胞在37℃、5%二氧化碳的條件下培養於添加10% FBS及1%青黴素/鏈黴素的DMEM培養基，以下稱DMEM細胞培養基。
為配製油紅O染液，先將染劑油紅O徹底溶解於100%異丙醇以配製30mg/mL之油紅O儲備溶液。為獲得可使用的油紅O染液，於使用前即時將該儲備溶液以二次水稀釋至濃度18mg/mL並以0.22μm濾膜過濾。
為獲得含油酸-牛血清白蛋白接合物之DMEM培養基，將10mg/mL牛血清白蛋白及28μg/mL油酸添加至含2% FBS及1%青黴素/鏈黴素
DMEM培養基，並攪拌所得混合物約30分鐘，以利油酸與牛血清白蛋白的接合反應及接合物生成。
細胞中的脂肪含量係藉由油紅O染色測定。染色前，使用PBS溶液清洗經指定處理的細胞，再以10%甲醛固定該細胞30分鐘。該固定的細胞經PBS溶液清洗1次後，以50%異丙醇潤洗15秒。其後，以油紅O染液對細胞染色1小時。染色後細胞經PBS溶液清洗即以顯微鏡(ZEISS Axio Vert.A1)觀察，或以100%異丙醇溶解細胞內染劑再以分光光度計定量。
細胞凋亡與死亡以Hoechst 33342/PI螢光染色偵測。經指定處理的細胞使用PBS溶液清洗及再懸浮後，先加入PI染液(稀釋250倍)以對死細胞的去氧核醣核酸(DNA)染色15至30分鐘，再加入Hoechst 33342染液(稀釋20000倍)以對所有細胞的DNA染色3分鐘。染色後細胞經PBS溶液清洗即以螢光顯微鏡觀察，PI的激發波長與偵測波長分別約為535nm及615nm，Hoechst 33342的激發波長與偵測波長分別約為346nm及460nm。
數據表示為平均值±標準差(SD)。使用Excel軟體進行統計分析，數據間差異在統計上的顯著性係以學生t檢驗(student's t-test)判定。
本文所述的芒果(Mangifera indica)係指產地為台灣之芒果品種，但不以此為限。一般而言，芒果果實的生長發育分為四f個階段，依次為(1)幼果期：芒果花謝後，果實開始緩慢生長且呈綠色；(2)快速生長期：果實快速肥大，果肉中澱粉逐漸累積；(3)成熟期：果實的內果皮硬化後即進入成熟期，此時果實外型變化不大但果實重量仍持續增加，一些物理性、化學性的變化仍在進行，例如果實硬度下降、糖度增加、果皮轉黃，使果實接近完熟可食階段；(4)老化期：果實完熟後即開始老化。本文所述的芒果早摘果係指於幼果期或快速生長期且果皮未轉黃的芒果果實。
為獲得一芒果早摘果萃取物，將長度約為3至7公分的未成熟芒果果實以均質機磨碎。其後，以水、醇類、或醇水混合物為溶劑對芒果早摘果均質物進行萃取，且該溶劑可添加0.1%至5%有機酸(如醋酸及檸檬酸)與氫氯酸之混合酸，其中，該溶劑與該芒果早摘果均質物之重量比為20：1至1：1。萃取溫度為介於55℃至100℃，較佳為55℃至85℃。以下實施例2-4所述芒果早摘果萃取物皆為以含0.1至0.5%醋酸、檸檬酸與氫氯酸之水溶液萃取芒果早摘果，萃取時間為0.5至3小時。該芒果早摘果水萃取物以下列條件進行高效液相層析可獲得一如圖1所示的HPLC指紋圖譜：樣品濃度為50mg/mL，體積為20μL；管柱為Mightysil RP-18 GP 250；依表1之梯度程式混合各含0.1%甲酸的水與甲醇作為移動相；流速為1.0mL/min；偵測波長為280nm。
經上述萃取步驟所得芒果早摘果萃取物冷卻至室溫後，可進一步以3000至5000rpm之轉速在室溫離心5至10分鐘而獲得一上清液，且該上清液可使用400目(mesh)之濾網過濾，以移除殘餘固體物。該過濾後的芒果早摘果萃取物可進一步在45℃至70℃進行減壓濃縮而獲得一濃縮產物。為獲得固態的芒果早摘果萃取物，可將前述濃縮的芒果早摘果萃取物以例如冷凍乾燥、噴霧乾燥等乾燥方式去除溶劑，因此獲得粉末狀的芒果早摘果萃取物。
為檢驗芒果早摘果萃取物對肝臟脂肪含量的影響，利用油紅O染色分析人類肝癌細胞株HepG2以實施例1所述芒果早摘果萃取物處理後，其脂肪含量的變化。簡言之，將HepG2細胞依5×105個細胞/孔接種於6孔培養盤，各孔含有3mL DMEM細胞培養基。在37℃培養細胞隔夜後，移除該細胞培養基，並以不含或含有1mg/ml芒果早摘果萃取物且添加2%FBS之2mL DMEM培養基處理各孔細胞。在37℃培養細胞24小時後，移除該培養基，並以下列方式處理各孔細胞：(a)未經芒果早摘果萃取物預處理的細胞培養於添加2%FBS及1%青黴素
/鏈黴素之2mL DMEM培養基(對照組)；(b)未經芒果早摘果萃取物預處理的細胞培養於含有油酸-牛血清白蛋白接合物之2mL對照組培養基(油酸組)；或(c)經芒果早摘果萃取物預處理的細胞培養於含有油酸-牛血清白蛋白接合物及1mg/mL芒果早摘果萃取物之2mL對照組培養基(油酸+芒果早摘果萃取物組)。前述三組細胞在37℃培養24小時後以PBS溶液清洗並進行油紅O染色。
圖2A及圖2B分別顯示單獨以油酸或進一步以芒果早摘果萃取物處理的HepG2細胞在油紅O染色後的顯微照片。比較圖2A與圖2B，可觀察HepG2細胞單獨以油酸處理後帶有大量被染成紅色的油滴，但額外以芒果早摘果萃取物處理後呈現明顯較少量的染色區域。將油紅O染色後的細胞進一步用於染劑定量分析，所得結果如圖2C所示，圖中油紅O相對含量表示相對於對照組細胞的油紅O含量(100%)的百分比，**表示相比油酸組p<0.01。依據圖2C，油酸之單獨處理使HepG2細胞的油紅O或脂肪相對含量增加至約139.6%，相對地，額外施以芒果早摘果萃取物明顯減少油紅O或脂肪相對含量至約107.7%。此結果說明芒果早摘果萃取物能減少脂肪累積於肝臟細胞，因此具備抑制脂肪肝形成的潛力。
為檢驗芒果早摘果萃取物保護肝細胞免於氧化傷害的作用，利用丙胺酸轉氨酶(alanine aminotransferase，ALT；亦稱GPT)分析及螢光染色，評估對人類肝癌細胞株HepG2預先施以實施例1所述芒果早摘果萃取物再予以過氧化氫處理後，其細胞損傷與存活狀況。簡言之，將HepG2細胞依2×104個細胞/孔接種於24孔培養盤，各孔含有500μL DMEM細胞培養基。在37℃培養細胞隔夜後，移除該細胞培養基，將不含或含有1mg/mL芒果早摘果萃取物之200μL DMEM細胞培養基添加至各孔細胞。在37℃培養細胞24小時後，以下列方式處理該細胞：(a)未經芒果早摘果萃取物預處理的細胞在無過氧化氫刺激下培養6小時(對照組)；(b)未經芒果早摘果萃取物預處理的細胞以500μM過氧化氫處理6小時(過氧化氫組)；或(c)經芒果早摘果萃取物預處理的細胞進一步以500μM過氧化氫處理6小時(芒果早摘果萃取物+過氧化氫組)。其後，各組細胞用於Hoechst 33342/PI螢光染色，或依據廠商使用說明以ALT之ELISA套組(ELISA Kit for Alanine
Aminotransferase；USCN SEA207Hu)及ELISA讀盤機(BioTek)分析各組細胞培養上清液的ALT含量。
圖3顯示HepG2細胞培養上清液的ALT相對含量，此係相對於對照組細胞培養上清液的ALT含量。依據圖3，相比對照組，過氧化氫之處理會誘導HepG2細胞產生活性氧物質，因此造成細胞損傷及大量釋放ALT，但預先施予芒果早摘果萃取物會明顯減少細胞損傷與ALT釋放。此外。圖4顯示HepG2細胞的Hoechst 33342/PI螢光染色顯微照片。依據該圖，相比對照組，過氧化氫之處理增加HepG2細胞的PI螢光量，指示細胞凋亡增加，但預先施予芒果早摘果萃取物卻減少PI螢光量及提升細胞存活率。該些結果顯示芒果早摘果萃取物之施用使肝細胞具有對氧化壓力的抵抗力，因此能減少肝細胞損傷及有益於維持正常肝功能。
為獲取芒果早摘果萃取物中減少肝細胞脂肪累積的活性成分，首先，依實施例1所述方法製備1L芒果早摘果萃取物，藉由乙酸乙酯與水等比例液相分配的方式萃取該萃取物三次。將所得乙酸乙酯層萃取液合併，再經減壓濃縮乾燥可得到乙酸乙酯層萃取物約4.7g。其後，餘下水層萃取液以正丁醇與水等比例液相分配的方式萃取三次。將所得正丁醇層萃取液及水層萃取液分別合併，再經減壓濃縮乾燥可得到正丁醇層萃取物及水層萃取物。
該芒果早摘果萃取物及其二次萃取物(乙酸乙酯層萃取物、正丁醇層萃取物及水層萃取物)分別用於類似實施例2所述的肝細胞脂肪累積試驗，其結果如圖5所示。依據該圖，乙酸乙酯層萃取物表現出較芒果早摘果萃取物更顯著的脂肪累積抑制效果。因此，進一步自乙酸乙酯層萃取物中分離出具有減脂活性的成分。
依據生物活性導引分離方法(bioassay guided fractionation)，使用Diaion HP-20管柱及水與甲醇漸減極性梯度混合之沖提液，對乙酸乙酯層萃取物(約4.7g)進行管柱層析，分離得到3個劃分層(分別標記為F1至F3)。其後，使用Sephadex LH-20管柱及甲醇沖提液，對F2或F3劃分層進行管柱層析，所得流出液再經薄層層析片分離，可分別得到3個劃分層(分別標記為F2-1至F2-3及F3-1至
F3-3)。F3-2劃分層進一步以水與甲醇依體積比1：1之混合液作為移動相進行高效液相層析(使用C18管柱)，可分離得化合物1約13.0mg。此外，F2-1劃分層進一步以水與甲醇依體積比2：1之混合液作為移動相進行高效液相層析(使用C18管柱)，可分離得化合物2約23.0mg。
化合物1及化合物2的化學結構係以質譜法及核磁共振光譜法(NMR)確定。化合物1是一種淡褐色油狀物，由圖6所示之質譜圖觀察到一偽分子離子峰m/z 907[M-H]-，故推測化合物1的分子量為908Da。依據圖7A所示之氫核磁共振光譜，化合物1具有一個醣基及五個芳香環構成的主體結構。依據圖7B所示之碳核磁共振光譜，化合物1造成共41個碳吸收訊號，分別為5個羰基吸收訊號、5個苯環吸收訊號、及1組醣基吸收訊號。此外，依據圖7C至7E所示之二維核磁共振光譜(COSY、HSQC、及HMBC)，可推知化合物1中單一醣基及五個芳香環的連接方式及取代基位置，因此確認化合物1是一種未曾被報導的水解單寧，其具有如式(Ia)所示之結構。化合物2以其質譜及核磁共振光譜經文獻比對確認是一種水解單寧，其具有如式(Ib)所示之結構，化學名稱為1,2,3,4,6-五-O-沒食子醯基-吡喃葡萄糖苷。
依據類似實施例2及3所述的方法測試式(Ia)及(Ib)化合物(濃度各為10μg/mL；先溶於DMSO再加入細胞培養基)減少肝細胞脂肪累積的活性，其結果如圖8及圖9所示。依據圖8及9，相比單獨施予油酸，額外施以式(Ia)或(Ib)化合物顯著減少HepG2細胞之脂肪累積分別約33%及44%。鑒於式(Ia)及(Ib)化合物皆屬如下所示之式(I)化合物，且該二者的R1分別為對羥基苯甲醯基及
沒食子醯基，此結果顯示本文揭露之式(I)化合物，其中R1為單羥基苯甲醯基或多羥基苯甲醯基者，具備減少肝細胞脂肪累積的活性及抑制脂肪肝形成的潛力。
綜上所述，本發明揭露芒果早摘果萃取物能減少肝細胞脂肪累積及氧化傷害，因此具備抑制脂肪肝形成與維持正常肝功能的潛力。此外，本發明亦揭露一種包含顯著減少肝細胞脂肪累積的式(I)化合物之生物活性物質。因此，前述芒果早摘果萃取物及該生物活性物質基於其特性可用於製備減少肝細胞脂肪累積及/或氧化傷害之組合物。
Claims (9)
- 一種芒果早摘果萃取物用於製備減少肝細胞脂肪累積或氧化傷害之組合物之用途，其中該芒果早摘果萃取物係以一溶劑萃取一芒果(Mangifera indica)之早摘果而獲得，其中該芒果(Mangifera indica)之早摘果係指於幼果期或快速成長期的芒果(Mangifera indica)果實，且該溶劑為水。
- 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該溶劑與該芒果(Mangifera indica)之早摘果之重量比範圍為20：1至1：1。
- 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該萃取係在55℃至100℃進行。
- 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該芒果(Mangifera indica)之早摘果萃取物之濃度為至少1mg/mL。
- 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該芒果(Mangifera indica)之早摘果萃取物抑制肝細胞受氧化傷害而凋亡。
- 一種如下所示之化合物用於製備減少肝細胞脂肪累積之組合物之用途：
- 如申請專利範圍第6項所述之用途，其中R1為對羥基苯甲醯基。
- 如申請專利範圍第6項所述之用途，其中R1為沒食子醯基。
- 如申請專利範圍第6項所述之用途，其中該式(I)化合物之濃度為至少10μg/mL。
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2019
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Non-Patent Citations (1)
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|---|
| Yean-Yean Soong, Philip J. Barlow, "Antioxidant activity and phenolic content of selected fruit seeds", Food Chemistry 88 (2004) 411–417 * |
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