TWI285206B

TWI285206B - 13-substituted milbemycin derivatives, their preparation and their use against insects and other pests

Info

Publication number: TWI285206B
Application number: TW090109990A
Authority: TW
Inventors: Akio Saito; Yoko Sugiyama; Toshimitsu Toyama; Toshihiko Nanba
Original assignee: Sankyo Lifetech Company Ltd
Priority date: 2000-04-27
Filing date: 2001-04-26
Publication date: 2007-08-11
Also published as: KR100711931B1; NO323751B1; HUP0301040A2; IL152449A0; NO20025141L; KR20020087987A; NZ522247A; WO2001083500A8; CN1247607C; US6653342B2; MXPA02010587A; CZ20023565A3; RU2226531C1; PL357598A1; ZA200208630B; RU2002131794A; AU2001252613B2; ES2254400T3; CN1439016A; EP1276748B1

Description

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五、發明説明（1 ) 發明背景本發明係關於一系列新穎之13-取代米貝黴素衍生物，其具有有價値之殺蟎、殺昆蟲與驅蟲活性，使其對於保護植物與動物（可爲人類或非人類）免受寄生蟲危害極爲有用。有許多種具有基於1 6 -員巨環內酯環結構之已知化合物 ’其可藉各種微生物之發酵或藉此天然發酵產物之化學衍生而半合成地得到，而且其呈現殺蟎、殺昆蟲、驅蟲與防寄生蟲活性。米貝黴素及阿佛梅克汀（avermectins) 爲兩種此類已知化合物之實例，但仍存在其他的且通常在先行技藝中以不同之名稱或代碼辨認。這些各種巨環內酯化合物之名稱通常取自產生各類天然發生成員之微生物之名稱或代碼，而且這些名稱已延伸涵蓋同類之化學衍生物，結果通常對此種化合物已無標準化系統性命名法。爲了避免混淆，在此使用一種命名法之標準化系統，其依照如國際純與應用化學聯盟（IUPAC )，有機化學部，有機化學命名委員會推薦之將有機化合物之衍生物命名之通則，而且其基於定義爲”米貝黴素"之假設母化合物，其爲下式（A)代表之化合物： 1285206 五、發明説明（2 )

其中Ra與Rb均代表氫原子。爲了避免困擾，上式（A)亦顯示應用於本發明化合物之最相關位置之巨環內酯環系統之位置標號。天然產生之米貝黴素爲已知具有驅蟲、殺蟎與殺昆蟲活性之一系列巨環內酯化合物。米貝黴素D揭示於美國專利4,346，171，其稱爲”化合物B-41D”，及米貝黴素八3與& 揭示於美國專利3,950,3 60。這些化合物均以上式（A)代袠，其中位置13 2Ra爲氫及位置25之以爲甲基、乙基或異丙基，這些化合物各稱爲米貝黴素八3、米貝黴素A4與米貝黴素D。位置13具有氫原子且位置25具有二級丁基之米貝黴素同系物揭示於美國專利4, 1 73,57 1，其在此以"13-去氧基- 22, 23 -二氫阿佛梅克汀Bu配基"而得知。繼而製備原始米貝黴素與阿佛梅克汀之各種衍生物，及調查其活性。例如，5 -酯化米貝黴素已揭示於美國專利 4,201，861 、 4,206,205 、 4，173,571 、 4，171，314、 -4- 1285206 五、發明説明（3 ) 4,203,976、 4,289,760、 4,457,920、 4,579,864、與 4,547,491，歐洲專利公告 0008184、01 02721、0115930、 01 805 39、與01 84989，及日本專利申請案Kokai(即，公開大眾檢視）57 - 1 20589 與 59 - 1 6894。 1 3 -羥基-5 -酮基米貝黴素衍生物已揭示於美國專利 4,42 3,209。米貝黴素5-肟衍生物揭示於美國專利 4,547,520及歐洲專利公告0203832。在13-位置具有酯鍵之米貝黴素對本發明具有特別之相關性，而且許多已將上式（A)之13-羥基酯化之化合物揭示於歐洲專利公告01 86043，其敘述如烷屬酸之各種羧酸之酯。在13-位置具有酯鍵之其他米貝黴素衍生物，其大槪代表最接近之先行技藝，敘述於歐洲專利公告 0246739、0675 1 33與0765 879。然而，其異於本發明化合物在於13-位置之基之本性，及在歐洲專利公告0765879 之情形爲5-位置之基之本性。上述各類米貝黴素相關巨環內酯化合物均揭示爲具有一或更多型作爲抗生、驅蟲、殺外寄生蟲、殺蟎或其他殺害蟲劑之活性。然而，仍有提供具有防除一或更多種農業與園藝害蟲之改良活性之試劑之持續需求。現在已發現此米貝黴素相關衍生物之活性可藉由適當地選擇巨環內酯環系統上之取代基之組合而改良，特別是位置1 3。特別地，現在已發現，化合物之活性可藉由位置1 3 之特定高特異性酯基之適當選擇而改良，如以下所指定。已發現本發明化合物具有比其他先行技藝化合物較佳之除 1285206 五、發明説明（4 ) 害蟲活性，而且許多本發明化合物具有實質上非常較佳之活性。發明槪要因此，本發明之目的爲提供此種具有改良活性之米貝黴素衍生物。本發明之另一個目的爲提供製備此化合物之方法。本發明之另一個目的爲提供使用該化合物之殺蟎、殺昆蟲與驅蟲組成物及方法。其他之目的與優點由以下之說明而變爲明顯。本發明因此提供式（I)化合物及其農業、園藝、醫藥、與獸醫可接受鹽：

R1代表甲基、乙基、異丙基或二級丁基； R2代表氫原子或具有1至6個碳原子之烷基； R3代表氫原子、具有1至6個碳原子之烷醯基（其可視情況地以1或2個獨立地選自以下定義之取代基A之取代基取代）、具有3至5個碳原子之烯醯基（其可視情況地以1或2 個獨立地選自以下定義之取代基A之取代基取代）、具有3 -6- 1285206 五、發明説明（5 ) 至5個碳原子之炔醯基（其可視情況地以1或2個獨立地選自以下定義之取代基A之取代基取代）、其中烷基部份具有 1至6個碳原子之烷基磺醯基、或其中烷氧基部份具有1至 6個碳原子之烷氧基羰基，或 R2與R3與其連接之氮原子一起形成飽和4_至6_員雜環基，其含1個環氮原子且視情況地含1個選自包括硫原子、氧原子與氮原子之其他環雜原子，該飽和雜環視情況地以1或2個獨立地選自以下定義之取代基B之取代基取代； -a-部份與其連接之碳原子一起形成3-至6-員環烷基；取代基A選自包括鹵原子、氰基、羥基、具有1至6個碳原子之烷氧基、具有1至6個碳原子之烷硫基、具有1至 6個碳原子之烷醯氧基、胺基（其可視情況地以1或2個選自包括具有1至6個碳原子之烷基之取代基取代）、具有1至6個碳原子之烷醯基、其中烷基部份具有1至6個碳原子之烷基磺醯基、與其中烷氧基部份具有1至6個碳原子之烷氧基羰基，及飽和4 -至6 -員雜環基（其含1個環氮原子且視情況地含1個選自包括硫原子、氧原子與氮原子之其他環雜原子，該雜環基視情況地以1或2個獨立地選自以下定義之取代基B之取代基取代）；取代基B選自包括鹵原子、氰基、羥基、具有1至6個碳原子之烷氧基、具有1至6個碳原子之烷硫基、具有1至6個碳原子之烷醯氧基、胺基（其可視情況地以1或2個選自具有1至6個碳原子之烷基之取代基取代）、具有1至6個碳原子之烷醯 1285206 五、發明説明（6 ) 基、其中烷基部份具有1至6個碳原子之烷基磺醯基、與其中烷氧基部份具有1至6個碳原子之烷氧基羰基、及氧基。本發明更提供一種包括驅蟲、殺蟎及殺昆蟲化合物摻合農業、園藝、醫藥或獸醫可接受載體或稀釋劑之驅蟲、殺蟎及殺昆蟲組成物，其中該化合物選自包括式（I)化合物及其農業、園藝、醫藥或獸醫可接受鹽。本發明更提供一種保護植物與動物（可爲人類或非人類）免受選自包括蟎、線蟲與昆蟲之寄生蟲危害之方法，其包括將活性化合物應用於該植物或動物或該植物之部份或再製物質（例如，籽），或包括該植物、該動物或該植物之部份或該植物之再製物質之處所，其中活性化合物選自包括式（I)化合物及其農業、園藝、醫藥或獸醫可接受鹽。本發明更提供式（I)化合物或其醫藥或獸醫可接受鹽製造保護動物（可爲人類或非人類）免受選自包括蟎、線蟲與昆蟲之寄生蟲危害之醫藥劑之用法。以上，驅蟲、殺蟎及殺昆蟲劑用法包括： (1)獸醫應用，特別是防除寄生於哺乳動物之線蟲、蟎或昆蟲，特別是防除跳蚤，而且最特別是防除貓蚤 (Ctenocephalides felis)與狗 ^(Ctenocephaides canis); (ii)排除危害農作物之有害昆蟲之農業應用； (i i i )防除如白蟻之有害食木昆蟲之應用；及 (iv)防除對人類有害之昆蟲之預防與治療應用。 1285206 五、發明説明（7 ) R2定義中之烷基、及其爲取代基A與B定義中胺基上之選用取代基之烷基，爲具有1至6個碳原子之直鏈或分支烷基，其實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、異戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、異己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3， 3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1， 2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2, 3-二甲基丁基、及 2-乙基丁基。具有1至3個碳原子之烷基較佳，而且甲基最佳。 R3定義中可視情況地以1或2個取代基A取代之烷醯基、及其爲取代基A與B定義中胺基上之選用取代基之烷醯基，爲具有1至6個碳原子之直鏈或分支烷醯基，其實例包括甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基、異丁醯基、戊醯基、異戊醯基、三甲基乙醯基、及己酯基。具有1至4 個碳原子之烷醯基較佳，而且乙醯基最佳。 R3定義中可視情況地以1或2個取代基A取代之烯醯基爲具有3至5個碳原子之直鏈或分支烯醯基。這些基之實例包括丙烯醯基、丁烯醯基及戊烯醯基，其中4-戊烯醯基特佳。 R3定義中可視情況地以1或2個取代基A取代之炔醯基爲具有3至5個碳原子之直鏈或分支炔醯基。這些基之實例包括丙炔醯基、丁炔醯基及戊炔醯基，其中4-戊炔醯基特佳。 1285206 五、發明説明（10) 其中取代基A或取代基B代表烷醯氧基之處，其爲經以上定義及例示之具有1至6個碳原子之直鏈或分支烷醯基取代之氧原子。此烷醯氧基之實例包括甲酯氧基、乙醯氧基、丙醯氧基、丁醯氧基、及異丁醯氧基，其中較佳爲乙醯氧基。其中取代基A或取代基B代表經1或2個取代基取代之胺基之處，較佳實例包括以1或2個選自包括具有1至3 個碳原子之烷基、具有1至4個碳原子之烷醯基、具有1 至3個碳原子之烷基磺醯基、及具有2至5個碳原子之烷氧基羰基之取代基取代之胺基。經取代胺其中，特佳爲乙醯基胺基、N-甲烷磺醯基胺基、N-甲氧基羰基胺基、及N-乙醯基-N-甲基胺基。本發明之式（I )化合物可藉由使用對應酸之習知處理，轉化成其農業、園藝、醫藥或獸醫可接受鹽，而且這些鹽亦形成本發明之一部份。例如，式（I)化合物可在室溫在溶劑（例如，醚、酯或醇，較佳爲醚或醇，如二乙醚或甲醇）中以酸處理1至30分鐘，繼而將反應混合物過濾或濃縮以提供對應鹽。此鹽之實例包括無機酸鹽，如氫鹵酸鹽（例如，氫氯鹽、氫溴鹽與氫酸鹽）、硝酸鹽、過氯酸鹽、硫酸鹽、與磷酸鹽；有機酸鹽，如低碳烷屬磺酸鹽（例如，甲烷磺酸鹽、三氟甲烷磺酸鹽、與乙烷磺酸鹽）、芳基磺酸鹽（例如，苯磺酸鹽與對-甲苯磺酸鹽）、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、羥丁二酸鹽、反丁烯二酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽、與順 -12- 1285206

五、發明説明（11 ) 丁烯二酸鹽；及胺基酸鹽，如甘胺酸鹽、離胺酸鹽、筋胺酸鹽、鳥胺酸鹽、麩胺酸鹽、與天冬胺酸鹽。本發明式（I )化合物之鹽如果不爲比式（I )自由化合物不可接受地較不活性，而且不比式（I )自由化合物不可接受地較爲毒性，則爲農業、園藝、醫藥或獸醫可接受鹽。其可易由式（I )化合物之比較性活性與毒性試驗決定。本發明之式（I )化合物及其鹽具有不對稱碳，因此其如光學異構物而存在。對於本發明之化合物，各該異構物及該異構物之混合物以單一公式表示，即，式（I )。因此，本發明涵蓋個別異構物及其任何比例之混合物，包括消旋混合物。式（I)化合物之特定立體異構物可使用光學活性起始材料藉習知技術製備，或可藉習知光學解析法由藉非立體特異性合成法得到之立體異構物之混合物隔離。本發明之式（I)化合物及其鹽在暴露放大氣時，或在再結晶吸收水時，有時吸收水或形成水合物，而且此水合物亦包括於本發明之範圍內。此外，特定之其他溶劑可溶解本發明而製造溶劑合物，其亦形成本發明之一部份。本發明化合物之較佳種類爲以下之式（I )化合物及其農業、園藝、醫藥或獸醫可接受鹽，其中： (A) R1爲甲基或乙基； (B) R2爲氫原子或具有1至3個碳原子之烷基； (C) R2爲氫原子或甲基； (D) R2爲氫原子； (E) R3爲氫原子，具有1至4個碳原子之烷醯基，其可視情況地以1或2 -13- 1285206 五、發明説明（14) 接之氮原子如以上（K)所定義，及-a-部份與其連接之碳原子如以上（Μ)所定義者。較佳化合物爲其中R1如以上（Α)所定義，R2如以上（Β)所定義，R3如以上（Ε)所定義，及-a-部份與其連接之碳原子如以上（L )所定義者。更佳化合物爲其中R1如以上（A)所定義，R2如以上（C) 所定義，R3如以上（F)所定義，及- a-部份與其連接之碳原子如以上（M)所定義者。更佳化合物爲其中R1如以上（A)所定義，R2如以上（D) 所定義，R3如以上（G)所定義，及-a-部份與其連接之碳原子如以上（M)所定義者。最佳化合物爲其中R1如以上（A)所定義，R2如以上（D) 所定義，R3如以上（H)所定義，及-a-部份與其連接之碳原子如以上（Μ )所定義者。下表意圖描述本發明之代表性化合物而且不意圖限制本發明之範圍。在下表1中，使用以下之簡稱：

Bu :丁基 iBu :異丁基 sBu :二級丁基 t Bu :三級丁基 Et :乙基 Me :甲基 Pr :丙基 -16- 1285206 五、發明説明（15) iPr :異丙基 0ΡΑ : 2 -氧吡咯啶-1 -基乙醯華 Pyl : 4-戊醯基 -17- 1285206 五、發明説明) 表1 化合物1 號碼\ R1 R2 R3 -3· 1 Et H H -(CH2)4- 2 Et II McCX) -((ΊΙ：),- 3 Et H CF3CO -(CH2)4- 4 Et H CICH2CO -(CH2)4- 5 Et H BrCH2CO •(CH2)4- 6 Et H NCCH2CO -(CH2)4- 7 Et H HOCH2CO -(CH2)4- 8 Et H MeOCH2CO -(CH2)4- 9 Et H EtOCH2CO -(CH2)4- 10 Et H PrOCH2CO -(CH2)4- 11 Et H iPrOCH2CO •(CH2)4· 12 Et H MeSCH2CO -(CH2)4- 13 Et H EtSCH2CO -(CH2)4- 14 Et H PrSCH2CO -(CH2)4- 15 Et H iPrSCH2CO -(CH2)4- 16 Et H MeCOOCH2CO -(CH2)4- 17 Et H EtCOOCH2CO -(CH2)4- 18 Et H PrCOOCH2CO -(CH2)4- 19 Et H iPrCOOCH2CO -(CH2)4- 20 Et H MeS02 •(CH2)4- 21 Et H EtS02 -(CH2)4- 22 Et H PrS02 -(CH2)4· 23 Et H iPrS02 -(CH2)4- 24 Et H MeOCO -(CH2)4- 25 Et H EtOCO -(CH2)4- 26 Et H PrOCO -(CH2)4- 27 Et H iPrOCO -(CH2)4· 28 Et H BuOCO -(CH2)4- 29 Et H iBuOCO -(CH2)4- 30 Et H sBuOCO -(CH2)4-

-18 1285206 五、發明説明（〆） 130 sBu H H -(CH2)r 131 sBu H MeCO -(CH2)4- 132 sBu H CF3CO -(CH2)4- 133 sBu H C1CH2C0 -(CH2)4- 134 sBu H BrCH?CO 135 sBu H NCCH2CO -(CH2)4· 136 sBu H HOCH2CO •(CH2)4- 137 sBu H MeOCH2CO -(CH2)4- 138 sBu H EtOCH2CO -(CH2)4- 139 sBu H PrOCH2CO -(CH2)4- 140 sBu H iPrOCH2CO _(CH2)4· 141 sBu H MeSCH2CO -(CH2)4- 142 sBu H EtSCH2CO -(CH2)4- 143 sBu H PrSCH2CO -(CH2)4- 144 sBu H iPrSCH2CO -(CH2)4. 145 sBu H MeCOOCH2CO -(CH2)4· 146 sBu H EtCOOCH2CO -(CH2)4· 147 sBu H PrCOOCH2CO -(CH2)4- 148 sBu H iPrCOOCH2CO -(CH2)4- 149 sBu H MeS02 -(CH2)4· 150 sBu H EtS02 -(CH2)4- 151 sBu H PrS02 -(CH2)4- 152 sBu H iPrS02 -(CH2)4- 153 sBu H MeOCO -(CH2)4· 154 sBu H EtOCO -(CH2)4- 155 sBu H PrOCO -(CH2)4- 156 sBu H iPrOCO -(CH2)4- 157 sBu H BuOCO -(CH2)4- 158 sBu H iBuOCO -(CH2)4- 159 sBu H sBuOCO -(CH2)4- 160 sBu H tBuOCO -(CH2)4- 161 sBu Me MeCO -(CH2)4- 162 sBu Me CF3CO -(CH2)4-

-22 1285206 五、發明説明（蚪） 262 iPr H ClCHjCO -(CH2)r 263 iPr H BrCH2CO -(CH2)3· 264 iPr H NCCH2CO -(CH2)r 265 iPr H HOCH2CO -(CH2)r 266 iPr H MeOCH?CO •(rm- 267 iPr H EtOCH2CO •(CH2)r 268 iPr H PrOCH2CO -(ch2)3· 269 iPr H iPrOCH2CO _(CH2)r 270 iPr H MeSCH2CO -(ch2)3- 271 iPr H EtSCH2CO -(CH2)r 272 iPr H PrSCH2CO -(CH2)r 273 iPr H iPrSCH2CO •(CH2)r 274 iPr H MeCOOCH2CO -(CH2)r 275 iPr H EtCOOCH2CO -(CH2)3- 276 iPr H PrCOOCH2CO -(CH2)r 277 iPr H iPrCOOCH2CO -(CH2)3· 278 iPr H MeS02 -(CH2)3- 279 iPr H EtS02 -(CH2)3- 280 iPr H PrS02 -(ch2)3- 281 iPr H iPrS02 •(CH2)r 282 iPr H MeOCO hch2)3- 283 iPr H EtOCO -(CH2)3. 284 iPr H PrOCO -(CH2)3- 285 iPr H iPrOCO -(CH2)3- 286 iPr H BuOCO -(CH2)3· 287 iPr H iBuOCO -(CH2)r 288 iPr H sBuOCO -(CH2)3- 289 iPr H tBuOCO ，(CH2)r 290 iPr Me MeCO -(CH2)r 291 iPr Me CF3CO -(ch2)3- 292 iPr Me HOCH2CO -(CH2)r 293 iPr Me MeOCH2CO -(CH2)r .:^4 iPr Me MeSCH2CO -(ch2)3_

—26 1285206 五、發明説明（27) 較佳之本發明式（I )化合物其化合物號碼1，2 , 3 , 6，7，8 ，12,16,20,24,35,41，42,44,45,46,50,51，55,59,63,67， 78,84,85,86,87,92,93,94,98,102,106, 1 10, 130, 131，132 ,1 36,1 37，141，145，1 49,1 53，1 74,1 75，1 78,1 79,180,1 84， 188,192,196,207,213,214,217,218,222,223,227,231， 235,239,250,256,257,258,259,264,265,266,270,274， 278，282，30 3，304，3 08,309,3 1 3，317,321，325，346,349 及 353 ° 更佳之本發明式（I )化合物其化合物號碼1，2，6，7，8，1 2 ，16,20,24,35,42,44,45,46,50,5 1，55,59,63,67,1 74, 1 75 ，179,180,184,188,192,196,217,218,222,223,227,231， 235,239,346,349 及 353 。最佳之本發明式（I )化合物其化合物號碼1，2，6，7，8，20 ，50,51，63,179,1 80, 192,222,223,235 及 3 46。本發明之式（I)化合物可易藉習知技術製備，例如，依照以下反應略圖A所示之合成步驟： -29- 1285206

1285206 五、發明説明（29) 在上式中，R1、R2與-a-如以上所定義，X爲硝基或式 -NR2R3之基，其中R2與R3如以上所定義，及尺^與R3相同但除了氫原子。起始式（III)化合物爲此技藝已知之15-羥基米貝黴素衍生物。其製造揭示於，例如，日本專利申請案公告號碼 Sho-60- 1 581 91 及 EP-A-01 47 852 專利。以下之起始式（VIb)化合物（其中R2、R3與-a-如以上所定義）可使用下式（VI a )之已知化合物藉已知技術製備。

例如，可如下製備式（VI b)化合物，其中R2爲烷基及R3 爲如以上所定義之式R3a之基：首先，將式（VI a)化合物酯化以保護羧基。生成之酯化化合物然後接受催化還原以將硝基轉化成胺基。此胺基化合物然後醯化或磺化以將胺基轉化成式-NHR3a之醯胺基，其中R3a如以上所定義。生成之醯胺化合物然後在如氫化鈉之鹼存在下以如甲基碘之烷化劑處理，以將式-NHR3a之基轉化成式-NR2R3a之基，其中R2爲烷基及R3a如以上所定義。最後，將此醯胺化合物之酯基水解以提供所需式 (VIb)化合物，其中R2爲烷基及R3爲如以上所定義之式 R3a之基。在希望合成式（VI b)化合物，其中R2與R3與其連接之氮 -31- 1285206 五、發明説明（3〇) 原子一起形成飽和4 -至6-員雜環之處，可修改以上之合成方法。在此情形，依照以上合成方法之前三步驟產生具有式-NHR3a之醯胺基之醯胺衍生物。此醯胺衍生物然後以反應烷化劑，其中烷基經如鹵原子之親核脫離基取代，繼而加入如氫化鈉之鹼產生分子內環循環反應，以提供具有所需飽和雜環之式（VI b )化合物。反應略圖A之步驟更詳細地，述於下。

步驟A 在此步驟，在如三氟甲烷磺酸或三氟磺酸三甲基矽烷酯之有機酸存在下，藉式（III)化合物與式（Via)或（VIb)化合物之反應得到式（IV)化合物。有機酸作爲觸媒，如三氟甲烷磺酸或三氟磺酸三甲基矽烷酯，因此使用之酸量原則上不需要超過催化量。然而，需要之量視使用之式（Via) 或（VI b)羧酸之反應性而相當廣泛地變化。然而，使用之有機酸量通常不超過式（Via)或（VIb)起始材料之等莫耳數。在某些情形，將粉狀無機化合物加入反應混合物可將反應加速。具有此性質之適合無機化合物之實例包括：金屬鹽，如三氟甲烷磺酸銅、碘化亞銅、碘化錫、碘化鈷、或碘化鎳；Ce 1 i t eTM ;矽膠或氧化鋁。其中，較佳爲銅鹽，如三氟甲烷磺酸銅或碘化亞銅，而且最佳爲碘化亞銅。其中式（Via)或（VIb)羧酸衍生物僅稍微溶解之處，可使用該對應羧酸衍生物之矽烷酯。例如，起始式（11 I )化合 •32- 1285206 五、發明説明（31) 物可以式（VI a )或（VI b )之對應羧酸化合物之三甲基矽烷酯之溶液處理，其在作爲觸媒之三氟甲烷磺酸或三氟甲烷磺酸三甲基矽烷酯存在下，藉該羧酸化合物與等量炔丙基三甲基矽烷之反應製備。反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：芳族烴，如苯、甲苯或二甲苯；及乳化烴，如二氯甲烷、1，2 -二氯乙烷或氯仿。反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在一0°C至 100°C，更佳爲至5(TC之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素廣泛地變化，其顯然爲反應溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲5分鐘至6小時，更佳爲10分鐘至2小時。步驟B1與B2 在步驟B1與B2，使用還原劑將在以上步驟A製造之式 (W)化合物之5-位置之羰基還原，以產生在5-位置具有羥基之式（V)(步驟B1)或（la)(步驟B2)化合物。對於還原劑之本性並無特別之限制，其條件爲式（IV) 化合物之其他部份不受其影響。此還原劑之實例包括硼氫化鈉與硼氫化鋰，其中較佳爲硼氫化鈉。反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此 -33- 1285206 五、發明説明（32) 反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：低碳醇，如甲醇、乙醇或丙醇；及醚衍生物，如四氫呋喃或二甲氧基乙烷。反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在-50°C至 50°C之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素廣泛地變化，其顯然爲反應溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲1小時至10小時。

步驟C 在步驟C，在苯基之4-位置具有胺基之式（lb)化合物藉由將以上步驟B1製備之式（V)化合物之硝基還原而製備。硝基之還原可以習知方式完成。例如，其可使用貴重金屬作爲觸媒藉催化還原實行。較佳之觸媒包括鈀於碳上、鈀於硫酸鋇上、及氧化鈀。反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：醇，如甲醇或乙醇；醚衍生物，如四氫呋喃或二噚烷；及酯衍生物，如乙酸乙酯。反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起 -34- 1285206 五、發明説明（33) 始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在l〇°C至80°c 之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素廣泛地變化，其顯然爲反應溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲30分鐘至5小時。至於替代方案，式（V)化合物之硝基之還原可在乙酸中使用鋅粉完成。反應在廣泛範圍之溫度及時間發生，而且精確之反應溫度及時間並不重要。較佳之反應溫度及時間視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在至室溫之溫度及以30分鐘至12小時之反應時間實行反應爲方便的。至於其他之替代方案，式（V)化合物之硝基之還原可在鎳觸媒存在下使用硼氫化鈉完成。這些鎳觸媒爲鎳鹽，如氯化鎳或溴化鎳，較佳爲該鎳鹽之三苯膦錯合物。反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：醇，如甲醇或乙醇；及醚衍生物，如四氫呋喃或二噚烷。反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在〇°C至室溫之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素廣泛地變化，其顯然爲反應 -35- 1285206 五、發明説明（34) 溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲1 0分鐘至2小時。

步驟D 在步驟D，式（Ic)化合物藉由如上步驟C所述而製備之式（lb)化合物與式R3a0H之酸（其中R3a如以上所定義）或其反應性衍生物之反應製備。式R3a0H化合物之反應性衍生物包括，例如，酸鹵化物 (酸氯、酸溴等）、酸酐、混合酸酐、活性酯、及活性醯胺，其均習知上用於縮合反應。在使用式R3a0H之酸時，脫水劑可用於縮合反應。可使用習知用於此種縮合反應之任何脫水劑，而且實例包括二環己基羰二醯亞胺（DCC )、2 -氯-1 -甲基吡啶碘、對-甲苯磺酸、及硫酸，其中較佳爲2-氯-4 -甲基吡啶碘。脫水劑之量通常爲酸之1至5莫耳當量，而且較佳爲1至2莫耳當量。使用式R3a0H之酸之縮合反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：烴，如己烷、石油醚、苯或甲苯；鹵化烴，如甲基氯、1，2 -二氯乙烷或氯仿；醚衍生物，如二乙醚或四氫呋喃.；醯胺衍生物，如N，N-二甲基甲醯胺；亞碾衍生物，如二甲基亞礪；腈衍生物，如乙腈；或其混合物。較佳爲，使用之 i谷劑爲一氣甲院或1 , 2 -二氯乙院。 -36- 1285206 五、發明説明（35) 反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在-70°C至 90°C，較佳爲0°C至60°C之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素虜泛地變化，其顯然爲反應溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲1 5分鐘至24小時，較佳爲30分鐘至6小時。在使用具有式R3a〇H之酸之反應性衍生物（較佳爲酸鹵化物）時，反應較佳爲在鹼存在下進行。可使用習知用於此種縮合反應之任何鹼，而且實例包括：有機鹼，如三乙胺、N，N-二甲基苯胺、吡啶、4-甲基胺基吡啶、1，5-二氮雙環[4.3.0]壬-5-烯（DBN)、及 1，8·二氮雙環[5.4.0] 十一碳-7-烯（DBU)。式R3aOH之酸鹵化物衍生物之使用量通常爲式（lb)化合物之1至10莫耳當量，及鹼之使用量通常爲式（lb)化合物之1至10莫耳當量。反應通常而且較佳爲在溶劑存在下實行。對於用於此反應之溶劑本性並無特別之限制，其條件爲其對反應或涉及之試劑無負面影響，及其可至少某些程度地溶解試劑。適合溶劑之實例包括：烴，如己烷、石油醚、苯或甲苯；鹵化烴，如二氯甲烷、1，2 -二氯乙烷或氯仿；醚衍生物，如二乙醚或四氫呋喃；醯胺衍生物，如N，N-二甲基甲醯胺；亞楓衍生物，如二甲基亞®;腈衍生物，如乙腈；或其混合物。較佳爲，使用之溶劑爲二氯甲烷或1，2 -二 37- 1285206 五、發明説明（36) 氣乙院。反應可在廣泛範圍之溫度發生，而且精確之反應溫度並不重要。較佳之反應溫度視如溶劑本性、及使用之起始材料或試劑之因素而定。然而，通常發現在-7(TC至9(TC，較佳爲Ot至50°C之溫度實行反應爲方便的。反應所需時間亦視許多因素廣泛地變化，其顯然爲反應溫度及使用之起始材料與溶劑之本性。然而，反應時間通常爲5分鐘至24小時，較佳爲5分鐘至6小時。在以上步驟A至D所述之各反應完成後，可以習知方式由反應混合物隔離所需化合物。例如，其可藉由如所需中和反應混合物，藉過濾去除不溶物質（如果有任何存在），加入不彼此互溶之有機溶劑，如水與乙酸乙酯，以水等淸洗，分離含所需化合物之有機層，以無水硫酸鎂等乾燥，然後將溶劑蒸餾。如果需要，如此得到之所需化合物可藉由使用習知方法隔離及純化，如再結晶或沈澱，或藉層析法。層析法之實例包括使用如矽膠、氧化鋁或鎂-矽膠型F 1 〇 r i s Π之載劑之吸附管柱層析術，使用合成吸附劑之層析術，例如，使用如 Sephadex LH- 20( Pharmacia 公司之產品）、Ambe r 1 i t e 乂八0-11(1?〇11111&[^38公司之產品）、或〇丨&丨〇11肝-20(三菱化學公司之產品）之載劑之分配管柱層析術，使用矽膠或烷化矽膠之離子交換層析術與正相·反相管柱層析術（高性能液態層析術）。如果需要，二或更多種這些技術可組合使用以隔離及純化所需化合物。 -38- 1285206 五、發明説明（37) 起始式（III)化合物爲天然米貝黴素或其衍生物，其爲發酵產物。式（III)化合物可如純單一化合物或具有不同取代基R 1之混合物而存在。式（I )化合物亦製備成純單一化合物或具有不同取代基R1之混合物。描述性實例以下之實例、參考例及試驗例意圖進一步描述本發明，而且並不意圖在任何方面限制本發明之範圍。實例1 13-Π-(4 -甲氧基乙醯基胺某苯基）環戊烷羰氣基1-5 -羥基米貝黴素 A4(I) : R^Et，R2二 H，R3 = CH3OCH2CO， a =環戊基，（化合物8號）1 1(a) 13-[1-(4-硝基苯某）環戊烷羰氧某1-5-羥基米貝黴素 A4「（V) : R^Et，X=N〇2，a =環戊基] 在室溫在氮氣氛下將0 . 1 8毫升之三氟甲烷磺酸加入 10. 13克（40.0毫莫耳）之1-(4-硝基苯基）環戊烷羧酸於 150毫升之二氯甲烷之懸浮液。生成混合物在相同之溫度攪拌20分鐘。結束時，加入5 . 57克（10.0毫莫耳）之15-羥基-5-氧米貝黴素A4,然後生成混合物在室溫攪拌30分鐘。結束時，將反應混合物倒入4%碳酸氫鈉水溶液中然後以乙酸乙酯萃取。有機萃取物連續地以4%碳酸氫鈉水溶液及水萃取，然後以無水硫酸鎂乾燥。藉低壓蒸餾去除乙酸乙酯產生粗13-[1-(4-硝基苯基）環戊烷羰氧基]-5-氧米貝黴素A4[(IV) : 1?、丑13：^〇2^ =環戊基]，其然後無進一步純化用於次一步驟。 -39- 1285206 五、發明説明（38) 將1 . 52克（40.0毫莫耳）之硼氫化鈉及2滴之三氟化硼二乙醚化物加入如上所述製備之13-[1-(4-硝基苯基）環戊院烷羰氧基]-5-氧米貝黴素A4於200毫升之甲醇同時在-40°C 攪拌之攪拌溶液，而且混合物攪拌1 0分鐘。結束時，將 400毫升之乙酸乙酯加入反應混合物。乙酸乙酯以水淸洗3 次，以無水硫酸鎂乾燥然後藉低壓蒸餾去除。生成之殘渣在矽膠管柱上使用1 : 1體積比之乙酸乙酯與己烷混合物作爲溶離劑藉層析術純化產生6.79克（8 · 75毫莫耳，產率 87.5% )之標題化合物如非晶固體。 lH 核磁共振光譜（ 400MHz，CDCl3；i (5 ppm : 8· 16(2H，雙線，J=7.9Hz); 7.53(2H，雙線，J=7.9HZ); 5.70 - 5.90( 2H，多線）； 5.37(1H，單線）； 5·25-5·40(3Η，多線）； 4.84( 1H，雙線，J = l〇.6Hz); 4.67 與 4·63(2Η，ΑΒ-四線，J = u.4Hz); 4.28(1H，多線）； 4.07(1H，單線）； 3·94(1Η，雙線，J=6.4Hz); 3.55(1H，多線）； 3·25(1Η，多線）； 3.02(1Η，多線）； 1 ·88(3Η，單線）； -40- 1285206 五、發明説明（39) 1 ·29(3Η，單線）； 0·99(3Η，三線，J = 7.3Hz); 0.82(3H，雙線，J=6.5Hz); 〇·77(3Η，雙線，；ί=6.4Ηζ)。 1 ( b ) 1 3 -「1 - ( 4 -胺基苯某）環戊烷羰氣某1 - 5 -羥基米貝黴素A4[(Ib) : R、Et，a =環戊某，（化合物1號）] 將100毫升之甲醇及1.12克（1.7毫莫耳）之氯化鎳（II) 之三苯膦錯合物加入6.79克（8. 75毫莫耳）之如以上實例 1(a)所述製備之13-[1-(4 -硝基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素八4於100毫升之乙酸乙酯之溶液。在冰浴將 1000毫克（26.5毫莫耳）之硼氫化鈉經10分鐘以小部份加入生成混合物，然後在相同之溫度攪拌又10分鐘。結束時，將70毫升之乙酸乙酯加入反應混合物，然後以水淸洗3次且以無水硫酸鎂乾燥。乙酸乙酯藉低壓蒸餾去除，而且生成之殘渣由乙酸乙酯與己烷之混合物再結晶產生 5.87克（7.87毫莫耳，產率89.8% )之標題化合物如白色結晶固體。熔點：235 - 239°C。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDCh) 5 ppm : 7· 16(2H，雙線，J=8.6Hz); 6.65(2H，雙線，J=8.6Hz); 5 . 77-5 · 84(2H，多線）； 5·44(1Η，單線）； 5·32-5·43(3Η，多線）； -41- 1285206 五、發明説明（4Q) 4.84(1H，雙線，J = l〇.5Hz); 4.70 與 4.73(2H，AB-四線，J==14.5Hz); 4.33(1H，多線）； 4. 13( 1H，單線）； 4.00(1H，雙線，J=6.2Hz); 3.54(1H，多線）； 3.30(1H，多線）； 3.09( 1H，多線）； 1 .92(3H，單線）； 1 ·36(3Η，單線）； 1 ·01(3Η，三線，J = 7.3Hz); 0.87(3H，雙線，J=6.5Hz); 0.82(3H，雙線，：[=6·5Ηζ)。 1(c) 13-Π-(4 -甲氣基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基1 -5 -經基米貝黴素 Α4 [ (I) : R1：=E t，R2=H，R3=CH3〇CH2CO， a =環戊基，（化合物8號）] 將0.52克（6.4毫莫耳）之吡啶及0.58毫升（6. 2毫莫耳）之甲氧基乙醯氯加入4.48克（6 . 0毫莫耳）之如以上實例 1(b)所述製備之13-[1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4於60毫升之四氫呋喃同時在-30°C攪拌之溶液，生成之混合物然後在相同之溫度攪拌又10分鐘。結束時，將250毫升之乙酸乙酯加入反應混合物，其然後連續地以0.5M檸檬酸溶液、水、4%碳酸氫鈉水溶液、及水淸洗，然後以無水硫酸鎂乾燥。乙酸乙酯然後藉低壓 -42- 1285206 五、發明説明（41) 蒸餾去除，而且生成之殘渣在矽膠管柱上使用2: 1體積比之乙酸乙酯與己烷混合物作爲溶離劑藉層析術純化產生 4.38克（5.35毫莫耳，產率89.2%)之標題化合物如白色結晶固體。熔點：1 76- 1 78°C。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDC13) (5 ppm : 8 . 2 ( 1 Η，單線）； 7.49(2H’ 雙線 ’ J：=8.6Hz); 7·29(2Η，雙線，J=8.6Hz); 5.77(1H，多線）； 5.74(1H，多線）； 5·39(1Η，單線）； 5.27-5·37(3Η，多線） 4·80(1Η，雙線，h1〇 5Hz); 4.68 與4·64(2Η，AB-四線，jz：i4.5Hz); 4·28(1Η，多線）； 4·〇8(1Η，單線）； 4·〇1(2Η ’ 單線）； 3·95(1Η，雙線， 3.54(1Η，多線）； 3.51(3Η ’ 單線）； 3·25(1Η，多線）； 3·〇1(1Η，多線）； 2·64(2Η，多線）； -43- 1285206 五、發明説明（42) 2.32(1H，雙線，J = 8. 1Hz); 1 .87(3H，單線）； 0·96(3Η ，三線，】=7.3Hz); 0·82(3Η，雙線，J=6.5Hz); 0.76(3H，雙線，J = 6.5Hz); MS(FAB) ： 818 (M+H+，ΜΚοΗμΝΟ! ^)。實例2 13 -「1-(4 -乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基卜5 -羥某米貝黴素 A4 ( I ) : R^Et，R2 = Η，R3 = CH3C0，a =環戊基，（化合物2號）] 如以上實例1 ( a )與1 ( b )所述製備之1 3 - [ 1 - ( 4 -胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4使用以上實例1(c)所述之類似步驟以乙酸酐處理，產生標題化合物（產率89.8% ) 如非晶固體。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDCl3) 5 ppm : 7.41(2H，雙線，J = 8.6Hz); 7.27(2H，雙線，J = 8.6Hz); 5.70 - 5.80( 2H，多線）； 5 . 39( 1H，單線）； 5.25 - 5.40( 3H，多線）； 4.80(1H，雙線，J = 10.6Hz); 4.64 與 4.68(2H，AB-四線，J = 14.2Hz); 4.28(1H，雙線之雙線，J=6.3 與 8.4Hz); 4.07( 1H，單線）； -44- 1285206 五、發明説明（43) 3.95(1H ，雙線，】=6.3Hz); 3·54(1H ，多線）； 3 . 25(1H，多線）； 3·01(1H ，多線）； 2.61(2H ，多線）； 2 . 33(1H，雙線，J = 8.4Hz); 1·87(3Η ，卓線）； 1.58(3H ，單線）； 0.96(3H ，三線，J=7 . 3Hz); 0.82(3H ，雙線，】=6·5Ηζ); 0.76(3H ，雙線，】=6·5Hz); MS(FAB) ·· 788(M+H+，M=C46H6iNOi〇)。實例3 13-「l-(4- 氰基乙醯某胺基苯基）環戊烷羰氧基卜米貝黴素 A4「（ I ) : R^Et ,R2=H，R3=NCCH2C〇，a =環戊甚，（化合物 6號）] 如以上實例1(a)與1(b)所述製備之Π-[1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4使用以上實例i(c)所述之類似步驟以氰基乙醯氯處理，產生標題化合物（產率 89. 8%)如非晶固體。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDC13) 6 ppm : 7.68(1H，單線）； 7.42(2H，雙線，J=8.7Hz); 7·33(2Η，雙線，J = 8.7Hz); -45- 1285206 五、發明説明Oh ) 5.72 - 5.77 ( 2H，多線）； 5 . 39( 1H，單線）； 5.28-5·37(3Η，多線）； 4.81(1Η，雙線，J-l〇.6Hz); 4.64 與 4·68(2Η，ΑΒ-四線 ’ J = 14.5Hz); 4.29(1H，多線）； 4 . 〇7( 1H，單線）； 3 . 95 ( 1H，雙線，· 2Hz ); 3.55(2H，多線）； 3 . 52( 1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.01(1H，多線）； 2.62(2H，多線）； 2·32(2Η，雙線’〗=8·2Ηζ); 1 .87(3Η，單線）； 0.96(3Η ，三線，〗=7.3Ηζ); 0.82(3Η，雙線，J=6.5Hz); 〇.76(3H ，雙線，】=6·5Ηζ); MS(FAB) ·· 813(M+H+，M=C47H6〇N〇i〇) 0 實例4 甲院磺醯基胺基苯基）環戊院鑛氧基卜5_經_基~ 米貝黴素 AU ( I ) : R^Et ,R2=H ,R3=CH3SCh，a =環戊基.二 (化，合物20號如以上實例1 ( a )與1 ( b )所述製備之1 3 - [ 1 - ( 4 -胺基苯基） -46- 1285206 五、發明説明（45) 環戊烷羰氧基]-5_羥基米貝黴素A4使用以上實例1(c)所述之類似步驟以甲烷磺醯氯處理，產生標題化合物（產率 88.2%)如非晶固體。 4 核磁共振光譜（400MHz,CDCl3) 5 ppm : 7.32(2H，雙線，J=8.7Hz); 7· 14(2H，雙線，J=8.7Hz); 6.47(1H，單線）； 5.70- 5.80( 2H，多線）； 5.39(1H，單線）； 5.25-5·37(3Η，多線）； 4.80(1Η’ 雙線 ’ J：=i〇.6Hz); 4.64 與 4·68(2Η，ΑΒ-四線，Jz：14.0Hz); 4·28(1Η，雙線之雙線，jmjhz’ujhz); 4.07( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J = 6.4Hz); 3.54(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.01(1H，多線）； 2.93(3H，單線）； 2.62(2H，多線）； 2.33(1H，雙線，J = 8.2Hz); 1 .87(3H，單線）； 0·96(3Η，三線，】=7.3Hz); 0·82(3Η’ 雙線， -47- 1285206 五、發明説明（46) 〇·74(3Η，雙線，J=6.5Hz); MS(FAB) ： 824(M + H+,M=C45H6iNOnS) 實例5 13-「1-(4-羥某乙醯某胺基苯基）環戊烷羰氧基1-5-羥基米貝黴素 A4「（ I ) : R、Et ,R2 = H，R3 = HOCH2CO，a =環戊基，（化合物7號）] 388毫克（0.5毫莫耳）之如以上實例1(a)與1(b)所述製備之13-[ 1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4使用以上實例1 ( c )所述之類似步驟以1 1 4毫克（0 . 6 毫莫耳）之三級丁基二甲基矽烷氧基乙酸與153毫克（0.6毫莫耳）之2 -氯-1 -甲基吡啶碘處理，提供中間產物1 3 - [ 1 - [ 4 _ (三級丁基二甲基矽烷氧基）乙醯基胺基苯基]環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4，其無進一步純化用於次一步驟。將0 · 5毫升之1N氫氯酸溶液加入中間產物於5毫升之甲醇之溶液，而且生成之混合物在室溫攪拌5小時。結束時，將25毫升之乙酸乙酯加入反應混合物，然後連續地以4% 碳酸氫鈉水溶液及水淸洗，然後以無水硫酸鎂乾燥。乙酸乙酯然後藉低壓蒸餾去除，而且生成之殘渣在矽膠管柱上使用3 : 2體積比之乙酸乙酯與己烷混合物作爲溶離劑藉層析術純化產生標題化合物（產率78 . 7%)如非晶固體。體。沱核磁共振光譜（ 400MHz，CDC D (5 ppm : 8.26(1H，單線）； 7·49(2Η，雙線，；ί=8·5Ηζ); 48- 1285206 五、發明説明（47) 7.30(2H，雙線，J = 8.5Hz); 5.70- 5.80( 2H，多線）； 5 . 39( 1H，單線）； 5.25 - 5.37 ( 3H，多線）； 4.80(1H，雙線，J = 10.4Hz); 4.64 與 4·68(2Η，ΑΒ-四線，J = 14.4Hz); 4.28(1H，雙線之雙線，J = 6.4Hz，J = 8.1Hz); 4.25(2H，雙線，J = 5.2Hz); 4.08( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.4Hz); 3.54(1H，多線）； 3 . 25( 1H，多線）； 3·02(1Η，三線之雙線，J = 2.2Hz，〗=9,2Hz); 2.69(1H，多線，J = 5.2Hz); 2.62(2H，多線）； 2·35(1Η，雙線，J=8. 1Hz); 1 .86(3H，單線）； 0.96(3H，三線，J = 7.3Hz); 0.82(3H ，雙線，】=6.5Hz); 0.76(3H，雙線，J=6.5Hz); MS(FAB) : 842(M + K，M = C46H6iN〇i 丨，+KI) 實例6 13-{l-f4-(N-乙醯基-N-甲基甘胺醯基胺基）苯基1環戊烷羰氧基卜5 -羥基米貝黴素A4[ ( I ) : R^Et，R2 = H, -49- 1285206 五、發明説明（48) j_3=CH3CON(CH3)CH2CO，a =環戊基，（化合物 346 號）] 如以上實例1(a)與1(b)所述製備之388毫克（0.5毫莫耳）之13-[1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4使用以上實例1(c)所述之類似步驟以79毫克（0.6毫莫耳）之N-乙醯基-N-甲基甘胺酸與85毫克（0.6毫莫耳）之 1-甲基- 3- (3 -二甲基胺基丙基）羰二醯亞胺於5毫升之四氫呋喃處理，混合物在室溫攪拌30分鐘，產生標題化合物（產率87.0% )如非晶固體。 4 核磁共振光譜（400MHz，CDCl3) 5 ppm : 8 . 5 1 ( 1Η，單線）； 7.42(2Η，雙線，J = 8.5Hz); 7.26(2H，雙線，J = 8.5Hz); 5,70-5·80(2Η，多線）； 5 . 39( 1Η，單線）； 5.25 - 5.40( 3H，多線）； 4.80(1H，雙線，J = 10.6Hz); 4.64 與 4·68(2Η，ΑΒ-四線，J = 14.5Hz); 4.28(1H，雙線之雙線，】=6.1Hz，J=8.2Hz); 4.09(2H，單線）； 4.08( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J = 6. 1Hz); 3.54(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3. 19(3H，單線）； -50- 1285206 五、發明説明（5G) 5.72 - 5.79 ( 2H，多線）； 5 . 39( 1H，單線）； 5.28 - 5.37 ( 3H，多線）； 4.81(1H，雙線，J = 10.6Hz); 4.65 與 4.68(2H，AB-四線，J = 14.4Hz); 4.27(1H，雙線之雙線，〗= 6.3Hz，J=8.3Hz); 4.08( 1H，單線）； 4.04(2H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.3Hz); 3.59(2H，三線，J = 7.2Hz); 3.54(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.01(1H，多線）； 2.60 (2H，多線）； 2·33(1Η，雙線，J=8.3Hz); 1 .87(3H，單線）； 0·96(3Η，三線，J=7.3Hz); 0·82(3Η，雙線，J=6.5Hz); 0·76(3Η，雙線，J=6.5Hz); MS(FAB) : SYKM + HKwHhNWh)。實例8 13-「1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基卜5-羥基米貝黴素八3[ ( I ) : I^^Me，R2 = H，R3 = CH3C〇CH2C〇，a = 環戊基，（化合物5 1號）] -52- 1285206 五、發明説明（51) 8(a) 13 -「1-(4 -胺基苯基）環戊烷羰氧基1-5 -羥基米貝黴 *_ Α3Γ(Ι) ： R^Me,R2z：H,R3 = H - a = ig jjc S M ^ ^ 44 號）] 採用如以上實例1(a)與1(b)所述之類似步驟，但是使用15-羥基-5-氧米貝黴素A3代替15-羥基-5-氧米貝黴素 A4作爲起始材料，提供標題化合物（產率67.5%)如非晶固體，其無進一步純化用於次一步驟。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDC13) δ ppm : 7.11(2H，雙線，；ί=8.5Ηζ); 6·60(2Η，雙線，〗=8·5Ηζ); 5.71-5·78(2Η，多線）； 5.38(1H，單線）； 5.25 - 5.40 ( 3H，多線）； 4.80(1H，雙線，J = 10.6Hz); 4.65與4.68(211，八8-四線，】二13.91^); 4.28( 1H，多線）； 4.08(1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6. 1Hz); 3.59(2H，寬單線）； 3.52(1H，多線）； 3. 18-3.26(2H，多線）； 2.57(2H，多線）； 1 .87(3H，單線）； 1 .31(3H，單線）； -53- 1285206 五、發明説明（52) 1 . 13(3H，雙線，J = 6.4Hz); 〇.83(3H，雙線，J=6.5Hz); 〇·77(3Η，雙線，J=6.5Hz)。 L_b) 13-Π-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基- 5-羥基米貝黴素 A3[(I) : Ri=Me，R2 = H，R3=CH3〇CH2CO，a =環 1基，（化合物5 1號）] 如以上實例8(a)所述製備之13-[1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A3使用以上實例1(c)所述之類似步驟以甲氧基乙醯氯處理，產生標題化合物，其由甲醇與水再結晶產生純化之標題化合物（產率92 . 3% )如白色結晶固體。

熔點 239 - 242°C 屮核磁共振光譜（ 400MHz, CDC h) 5 ppm : 8·21(1Η，單線）； 7·49(2Η，雙線，了:ζ8.6Ηζ); 7·29(2Η，雙線，j=8.6Hz); 5.71·5·78(2Η，多線）； 5.38(1H，單線）； 5.24·5.36(3Η，多線）； 4.80( 1Η，雙線，J = 1〇.6Hz); 4.64 與 4.68(2H，AB-四線，J = 13.7Hz); 4.2 8 ( 1Η ’ 多線）； 4.07(1Η，單線）； 4.01(2Η，單線）； -54- 1285206 五、發明説明（53) 3.95(1H，雙線，J = 6.3Hz); 3.51(3H，單線）； 3.50(1H，多線）； 3. 18-3.26(2H，多線）； 2.61(2H，多線）； 1 .87(3H，單線）； 1 .28(3H，單線）； 1 . 13(3H，雙線，J=6.3Hz); 0.83(3H，雙線，J = 6.6Hz); 0.76(3H，雙線，J=6.5Hz); MS(FAB) : δΟΜΜ + ΗΚαί^ιΝΟΗ)。實例9 13-Π-(4-甲烷磺醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基卜5-羥基米貝黴素 A3「（ I ) : RkMe，R2 = H,R3 = CH3S〇2，a =環戊基，化合物6 3號）] 如以上實例8(a)所述製備之13-[1-(4_胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素As使用以上實例1(c)所述之類似步驟以甲烷磺醯氯處理，產生標題化合物（產率 88.9%)如非晶固體。熔點 239 - 242°C。 4 核磁共振光譜（400MHz，C DC h)5 ppm : 7_33(2H，雙線，j = 8.6Hz); 7· 14(2H，雙線，υ.6Ηζ); 6.40(1H，單線）； -55- 1285206 五、發明説明（54) 5.73-5·80(2Η，多線）； 5 . 3 8 ( 1Η，單線）； 5.25 - 5.40( 3Η，多線）； 4.80(1Η，雙線，J = 10.6Hz); 4.64 與 4.68( 2H，AB-四線，J = 14.4Hz); 4.28( 1H，雙線之雙線，J = 6.4Hz，J = 8.4Hz); 4.07( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.4Hz); 3 . 5 1 ( 1 Η，多線）； 3. 17-3.25(2H，多線）； 2.97(3H，單線）； 2.63(2H，多線）； 2.32(1H，雙線，J=8.4Hz); 1 .87(3H，單線）； 1 .29(3H，單線）； 1 · 13(3H，雙線，J=6. 1Hz); 0.82(3H，雙線，J=6.5Hz); 0.74(3H，雙線，J=6.6Hz); MS(FAB) : SlCHM + H'MAdwNOiiS) ° 實例10 13-去氧基-13/3 - Π-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基1_ 22,23 _二氫阿佛梅克汀Bu配基 [(Π ： r^s-bu,r2^h?r3^ch3〇ch2cq ^ 物137號）] -56- 1285206 五、發明説明（55 ) (a)〗3-去氬某-13占-Π-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基丄 - 22.23 -二氤阿佛梅克汀Bu配基 [(Π : R、s-Bu,R2=H，R3=H，a =環戊基，（化合物 130 號）1 採用如以上實例1(a)與1(b)所述之類似步驟，但是使用13-外-5-氧- 22,23 -二氫阿佛梅克汀Bu代替15-羥基 -5-氧米貝黴素A4，得到標題化合物，其在矽膠管柱上使用3 : 2體積比之乙酸乙酯與己烷混合物作爲溶離劑藉層析: 術純化產生純化之標題化合物（產率48.5%)如非晶p。屮核磁共振光譜（ 400MHz,CDCl3) (5 ppm : 7. 11(2H，雙線，J = 8.6Hz); 6·60(2Η，雙線，J=8.6Hz); 5,72- 5.80( 2H，多線）； 5.41(1H，單線）； 5.23-5·36(3Η，多線）； 4.80(1Η，雙線，；ί = 10.4Ηζ); 4.65 與 4·68(2Η，ΑΒ·四線，；i = 14.4Hz); 4.28(1H，雙線之雙線，J = 6.4Hz，J = 8.1Hz); 4.01 ( 1Η，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.4Hz); 3.59(2H，寬單線）； 3.56(1H，多線）； 3.14(1H，多線）； 2.58(2H，多線）； 2·33(1Η，雙線，J = 8. 1Hz); 1285206 五、發明説明（56) 1 .87(3H，單線）； 1 .31(3H，單線）； 0·93(3Η，三線，〗= 7.4Hz); 0·84(3Η，雙線，J=6.7Hz); 0.78(3H，雙線，〗= 5·4Ηζ); 0·77(3Η，雙線，J=6.6Hz)。 (b) 13 -去氧基-13/3 -「1-(4·•甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基1- 22,23 -二氤阿佛梅克汀Bla配基 [(I) ·· ，a =環戊基如以上實例10(a)所述製備之13-去氧基-[l-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]- 22,23 _二氫阿佛梅克汀Bla配基使用以上實例1(c)所述之類似步驟以甲氧基乙醯氯處理，產生標題化合物（產率86.0% )如非晶固體。屮核磁共振光譜（ 400MHz，CDCh) 5 ppm : 8 . 2 1 ( 1 Η，單線）； 7.49(2H，雙線，J=8.7Hz); 7.30(2H，雙線，J = 8_7Hz); 5.72 - 5.80( 2H，多線）； 5.4 1 ( 1 Η，單線）； 5·22 - 5.3 5 ( 3Η，多線）； 4.81(1H，雙線，J = 10.4Hz); 4.65與4.68(211，八8_四線，1 = 14.41^); 4·29(1Η，雙線之雙線，〗= 6.3Hz,J=8.3Hz); 4.01(2H，單線）； -58- 1285206 五、發明説明（57 ) 4·00(1Η，單線）； 3·95(1Η，雙線，J=6.3Hz); 3.56(1H，多線）； 3.51(3H，單線）； 3·25(1Η，多線）； 3.13-3.24(1H，多線）； 2·62(2Η，多線）； 2.32(111，雙線，；[=8.31^); 1 .87(3Η，單線）； 1 .28(3Η，單線）； 0·94(3Η，三線，J = 7.4Hz); 0.84(3H，雙線，J=6.9Hz); 0.78(3H，雙線，J = 5.6Hz); 0·76(3Η，雙線，J = 6.6Hz)。 MS(FAB) : 846(M+H+，M=C49H67N〇丨丨）。實例11 13-去氧基-13/3 -Π-(4-甲烷磺醯基胺基苯基）環戊烷锶氧基卜22,23 -_二氫阿怫栴京汀Bia配基 f(I) : Rks-B—i^RkH.R^CHhSCh，a 二環戊基，（化合物 149 號）1 如以上實例10(a)所述製備之13-去氧基-13 Θ - [1-(4-胺基苯基）環戊烷羰氧基]- 22,23 -二氫阿佛梅克汀Bla配基使用以上實例1(c)所述之類似步驟以甲烷磺醯氯處理，題化合物（產率87.4%)如非晶固體。沱核磁共振光譜（ 400MHz，CDCh) 5 ppm : 1285206 五、發明説明（58) 7·33(2Η，雙線，J = 8.5Hz); 7. 14(2H，雙線，J = 8.5Hz); 6.36(1H，單線）； 5.73 - 5.80( 2H，多線）； 5.40(1H，單線）； 5·22 - 5.36 ( 3Η，多線）； 4.81( 1Η，雙線，J = 10.4Hz); 4.64 與 4.67(2H，AB-四線，J = 14.5Hz); 4.29(1H，雙線之雙線，J=6.3Hz，J=8. 1Hz); 4.0 1 ( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J = 6.3Hz); 3.56(1H，多線）； 3.26(1H，多線）； 3 . 14( 1H，多線）； 2.97(3H，單線）； 2.63(2H，多線）； 2.32(1H，雙線，J=8. 1Hz); 1 .86(3H，單線）； 1 .29(3H，單線）； 0.94(3H ，三線，]=7·3Ηζ); 0.84(3H，雙線，J = 7.0Hz); 0.78(3H，雙線，J = 5.6Hz); 0.74(3H，雙線，了 =6.5Hz); MS(FAB) ： 852(M + H+，M = C47H65NOhS)。 -60- 1285206 五、發明説明（59) 龍12 ϋ-Π-「4-(Ν -甲氧基乙醯基-N-甲基苯基）苯基1環戊烷羰氣基卜5-羥基米貝黴素A4「（I) : R^ElR^Me, gj=CH3〇CH2CO，a =環戊基，（化合物35號）] 使用如以上實例1(a)所述之類似步驟，但是使用1-[4-(N-甲氧基乙醯基-N-甲基胺基）苯基]環戊烷羧酸代替1-(4-硝基苯基）環戊烷羧酸，提供標題化合物（產率48.0% ) 如非晶固體。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDCl3) 5 ppm : 7·40(2Η ，雙線，〗=8·6Ηζ); 7. 12(2Η，雙線，J=8.6Hz); 5.70-5·80(2Η，多線）； 5·39(2Η，單線）； 5·25 - 5.40( 3Η，多線）； 4.81(111，雙線，】：=1〇.51^); 4.68 與 4.64(2H，AB-四線，】 = 14·5Ηζ); 4.28(1H，多線）； 4·〇8(1Η，單線）； 3·94(1Η，雙線，J=6.3Hz); 3.67(2H，單線）； 3.54(1H，多線）； 3.33(3H，單線）； 3,25(1H，多線）； 3.24(3H，單線）； -61 - 1285206 五、發明説明（6C)) 3.01(1H，多線）； 2.64(2H，多線）； 1 .87(3H，單線）； 0·96(3Η，三線，J=7.3Hz); 0·82(3Η，雙線，了 = 6.5Hz); 0.76(3H，雙線，J=6.6Hz)。 MS(FAB) : 832(M + H+，M=C48H65N0u)。實例13 13-U -「4-(2曙哔啶-3-基）苯基1環戊烷羰氧基卜5-羥基_ 米貝黴素Α4Π) : RkElR2、R3 = 2-噚唑啶-3-基，a二環戊基，（化合物42號）] 使用如以上實例1(a)所述之類似步驟，但是使用1_[4_ (2 _噚唑啶-3_基）苯基]環戊烷羧酸代替1_(4_硝基苯基）環戊烷羧酸，提供標題化合物（產率34.2% )如非晶固體。沱核磁共振光譜（ 400MHz，CDCh) 5 ppm : 7·46(2Η，雙線，J = 8.7Hz); 7·34(2Η，雙線，；ί=8.7Ηζ); 5,70 - 5.80( 2Η，多線）； 5.39(1Η，單線）； 5 . 25 - 5.40( 3Η，多線）； 4·81(1Η’ 雙線 ’ J = iq.4hz). 4.68 與 4.64(2H，AB-四線，j = 14.6Hz); 4.49(2H，多線）； 4.28(1H，雙線之雙線，J = 61Hz , J=8 3Hz); -62- 1285206 五、發明説明（61 ) 4·08(2Η ’ 多線）； 4·07(1Η，單線）； 3·95(1Η，雙線，j=6. 1Hz ); 3·54(1Η，多線）； 3.25(1Η，多線）； 3·01(1Η，多線）； 2·61(2Η，多線）； 2.33UH，雙線，；[=8_ ,3Hz); 1·87(3Η，單線）； 0·96(3Η，三線，J = .3 H z ); 〇·82(3Η，雙線，J=6 .3 H z ); 0·76(3Η，雙線，J=6 .5Hz); MS(FAB) : 815(M+H+,M=C47H61NOh)。實例14 11- [ 1 - ( 4 -甲氧基乙醯基胺基苯某）環戊烷羰氣基1 - 5 -羥基米―貝黴素 A4(I) : R、Et,R2=H,R3=CH3〇CH2CO，a=環戊基，（化合物8號）1 I4_(a) 13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯某）環戊烷羰氣基1 二g-氧米貝黴素 A4 ( IV) : RkEt ,X=d〇nCONH，a =環戊基1 在室溫將3.16毫升（20.0毫莫耳）之烷基三甲基矽烷與〇·6毫升之三氟甲烷磺酸三甲基矽烷酯加入8.28克（30毫莫耳）之1-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羧酸（如以下參考例1所述而製備）於1 20毫升之二氯甲烷之懸浮液 -63- 1285206 五、發明説明（62) ，而且生成混合物在室溫在氮氣氛下攪拌20分鐘。結束時，在室溫將5.57克（10.0毫莫耳）之15-羥基-5-氧米貝黴素A4加入生成之透明混合物，而且此混合物在相同之溫度攪拌60分鐘。結束時，反應混合物在4%碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯之間分布。乙酸乙酯層連續地以4%碳酸氫鈉水溶液與水淸洗，以無水硫酸鎂乾燥，然後乙酸乙酯藉低壓蒸餾去除提供標題化合物，其無進一步純化用於次一反應步驟。 14(b) 13 -「1-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基1 -5-羥基米貝黴素A4 在-4(TC將1 . 52克（40毫莫耳）之硼氫化鈉與2滴之三氟化硼二乙醚化物加入以上實例14(a)製備之5-氧衍生物於 200毫升之甲醇之溶液，而且生成混合物在相同之溫度攪拌10分鐘。反應結束時，將400毫升之乙酸乙酯加入反應混合物，而且乙酸乙酯層以水淸洗3次，以無水硫酸鎂乾燥然後乙酸乙酯藉低壓蒸餾去除，生成之殘渣在矽膠管柱上使用1 : 1體積比之乙酸乙酯與己烷混合物作爲溶離劑藉層析術純化產生5.32克（產率65% )之標題化合物。其由異丙醇與水之混合物再結晶提供具有1 76 - 1 78°C之熔點之結晶。此產物之物理化學性質，如1Η核磁共振光譜，與以上實例1得到之化合物相同， C47H63BOH · Η2〇分析計算値：C: 67.53%，Η: 7·84%，Ν: 1.68% 實驗値：C: 67.80%，Η: 7.49%，Ν: 1.75%. -64- 1285206 五、發明説明（《 ) 實例1 5至1 9 以下實例20製備之化合物使用以上實例1 ( c )所述之類似步驟以以下實例1 5至9提及之試劑處理’提供以下實例 1 5至1 9之標題化合物。實例15 Π-「1-(4 -甲氧基乙醯某胺基苯某）環丁烷羰氧基1-5 -羥基_ 米貝黴素八4「（1) ·· R^Et-R^I^RkCHsOCIhCO’ a =環丁基 i一 (化合物180號）1 試劑··甲氧基乙醯氯產率：74 . 3% 屮核磁共振光譜（ 400MHz，CDCl3) δ ppm ·· 8.23(1H，單線）； 7 . 52(2H，雙線，〗=8·6Hz); 7.24(2H，雙線，；ί=8·6Ηζ); 5.75 與 5.79(2Η，多線）； 5.39(1Η，單線）； 5.29 - 5.36 ( 3Η，多線）； 4.8 4 ( 1Η，雙線，J = 1 〇 · 5 Η ζ ); 4.65 與 4.68(2Η,ΑΒ-四線，J = 13.7Hz); 4.28(1H，多線）； 4.06(1H，單線）； 4.02(2H，單線）； 3 . 95( 1H，雙線，J = 6 . 1Hz); 3.55(1H，多線）； 3.51(3H，單線）； -65- 1285206 五、發明説明（64) 3 . 25( 1H，多線）； 3.02( 1H，多線）； 1 .87(3H，單線）； 1 .33(3H，單線）； 0.97(3H，三線，J = 7.3Hz); 0·82(3Η，雙線，J=6.5Hz); 0_76(3H，雙線，J=6.5Hz)。 MS(FAB) ·· 804(M + H+，M = C46H6丨N〇h)。實例16 13-「1-(4-乙醯基胺基苯基）環丁烷羰氧基1-5-羥基米貝黴素 Α4Π) : R^Et，R2 = H，R3 = CH3CO，a =環丁基，（化合物 174 號）] 試劑：乙酸酐產率：83.2% 屮核磁共振光譜（4〇0MHz，CDCl3) 5 ppm : 7.44(2H，雙線，J=8.3Hz); 7·22(2Η，雙線，J=8.3Hz); 7 . 14( 1H，單線）； 5.75 - 5.78 ( 2H，多線）； 5.39(1H，單線）； 5.29 - 5.37 ( 3H，多線）； 4·84(1Η，雙線，J = 10.5Hz); 4.65 與 4.68(2H，AB-四線，J = 14.0Hz); 4.28(1H，多線）； -66 1285206 五、發明説明（μ ) 4.06(1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.3Hz); 3.54(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.02(1H，多線）； 2. 18(3H，單線）； 1 .87(3H，單線）； 1 .33(3H，單線）；〇.97(3H，三線，〗=7·3Ηζ); 0.82( 3Η，雙線，J = 6 · 5Hz ); 0.76(3Η，雙線，：Ι=6·5Ηζ)。 MS(FAB) : 774(Μ + Η+，Μ = 〇45Η59Ν〇1〇)。實例17 H μ W 4 -甲烷磺醯某胺某苯某）環丁烷羰氧基1- 5 - mM 米目黴素 AU ( I ) ·· R^Et ,R2 = H,R3 = CH3S〇2，a =環丁基二 Π,合物192號）1 試劑：甲烷磺醯氯產率：70.5% 屮核磁共振光譜（400MHz，CDC13) (5 ppm ·· 7.27(2H，雙線，J=8.6Hz); 7. 17(2H，雙線，I=8.6Hz); 6.43(1H，單線）； 5.76 - 5.78( 2H，多線）； 5.39(1H，單線）； -67- 1285206 五、發明説明（μ ) 5.28 - 5.37 ( 3H，多線）； 4.84( 1H，雙線，】=1〇 . 6Hz ); 4.65 與 4.69( 2H，AB-四線，J = 1 3.4Hz); 4.29( 1H，多線）； 4.0 6 ( 1Η，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.4Hz); 3.55(1H，多線）； 3 . 2 5 ( 1Η，多線）； 3 . 02( 1Η，多線）； 2.98(3H，單線）； i .87(3H，單線）； 1 .33(3H，單線）；〇.97(3H，三線，J=7.3Hz); 0.82( 3H，雙線，J = 6 . 5Hz ); 0.76(3H，雙線，：F=6.5Hz)。 MS(FAB) ·· 810(M+H+，M=C44H59NOi〇S)。實例18 η _ Μ - ( 4 -三氟7」醯基胺某苯基）環丁烷羰氧基卜5 -羥蓋米目 p 素 AU ( I) ·· RLEt ,R2=H,R3=CF3CQ，a =環丁基..二 (化，合物1 7 5號）1 試劑：三氟乙酸酐產率：70.7% 屮核磁共振光譜（400^11^，〔0(：13)(5??111·· 7 · 8 5 ( 1Η，單線） -68- 1285206 五、發明説明（67) 7.52(2H，雙線，J = 8.5Hz); 7. 30(2H，雙線，；ί=8,5Ηζ); 5.76 - 5.79 ( 2Η，多線）； 5.39(1H，單線）； 5.27 - 5.37 ( 3H，多線）； 4.85(1H，雙線，J = 10.4Hz); 4.65 與 4.68(2H，AB-四線，J = 13.7Hz); 4.28(1H，多線）； 4.06( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，J=6.2Hz); 3.54(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.0 1 ( 1H，多線）； 1 .87(3H，單線）； 1 .33(3H，單線）； 0.97(3H，三線，J=7.3 Hz); 0.82(3H，雙線，J=6.5Hz); 0.76(3H，雙線，J=6.5Hz)。 MS(FAB) : 828(M + H+，M二CdFsNOio)。實例19 i 3-Π _(4-戊炔醯基胺基苯基）環丁烷羰氧基1-5-羥基米貝黴素 A4[ ( I ) : RLEt，R2 = H，R3 = CH三 CCH2CH2C〇，a =環丁基，（化合物354號）] 試劑：4 -戊炔酸/ 2 -氯-1 -甲基吡啶碘 -69- 1285206 五、發明説明Us ) 產率：37 . 9% 4 核磁共振光譜（400MHz，CDCl3) δ ppm : 7.46(2H，雙線，；ί=8·5Ηζ); 7.34(1Η，單線）； 7.23(2Η，雙線，J=8.5Hz); 5.72 - 5.79 ( 2H，多線）； 5.39(1H，單線）； 5.29 - 5.37 ( 3H，多線）； 4.84(1H，雙線，J = l〇.4Hz); 4.65 與 4.68(2H，AB-四線，J = 13.5Hz); 4.28(1H，多線）； 4.05( 1H，單線）； 3.95(1H，雙線，；i=6.1Hz); 3.55(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3.02(1H，多線）； 2.56 - 2.66( 4H，單線）； 1 .87(3H，單線）； ' 1 .34(3H，單線）； 0·97(3Η，三線，J=7.3Hz); 0.82(3H，雙線，〗=6·5Ηζ); 0.77(3Η，雙線，J=6.5Hz); MS(FAB) : 812(M+H+，M = C48H6iN〇i〇) 0 實例20 Η - Μ - ( 4 -胺某苯基）環丁烷羰氧基卜5 -羥基米貝黴素

-70- 1285206

五、發明説明（69 ) 採用如實例1 ( a )、（ b )與（c )所述之類似步驟，但是使用1-(4-硝基胺基）環丁烷羧酸代替1-(4-硝基胺基）環戊烷羧酸，以59.8%之產率提供標題化合物如非晶固體。 4 核磁共振光譜（ 400MHz，CDC1 〇 5 ppm : 7·10(2Η’ 雙線，J = 8.5Hz); 6·74(2Η，雙線，J=8.5Hz); 5.75 與 5.79(2H，多線）； 5.39(1H，單線）； 5·29-5·38(3Η，多線）； 4.84( 1H，雙線，J = i〇.4Hz); 4.68 與 4.65 (2H，AB-四線，J = 1 4.5Hz ); 4.28(1H，多線）； 4.06(1H，單線）； 3·95(1Η，雙線，j=6.4Hz); 3.55(1H，多線）； 3.25(1H，多線）； 3·02(1Η，多線）； 1 ·87(3Η，單線）； 1 ·35(3Η，單線）； 0·97(3Η，三線 ’ ；[=7.3Hz); 0·82(3Η，雙線，j=6.5Hz); 0·78(3Η’ 雙線，】=6.5Ηζ); MS(FAB) : 732(M+H_，M=C43H57N〇9)。實例21 1 3 - 4 -甲氧某乙醯某胺某某基）鼠虚葱 -71- l2852〇6 立、發明説明（7〇) 進·貝黴素A4W 13-Π-(4 -甲氧基乙醇某胺基苯基）環戊烷羰氢Α__] -5-羥基米貝黴素Α3之8 : 2混合物[(I ) : R、Et : Me 1L: 2)，R2 = H,R3=CH3〇CH2C〇，a =環戊基，（化合物 8 與 51 ^11 使用以上實例1所述之本質上相同步驟，但是使用1 5 -羥基-5-氧米貝黴素A4與15-羥基-5-氧米貝黴素A3之8:2 (質量比）混合物代替1 5 -羥基-5 -氧米貝黴素A4作爲起始材料，得到13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷碳氧基]_5_羥基米貝黴素A4與13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥基米貝黴素As之8: 2(質量比）混合物。參考例1 1^14-甲氧基乙醯基胺某茏某）環戊烷羧酸將13克（20毫莫耳）之氯化鎳（Π)之三苯膦錯合物加入 25.3克（100毫莫耳）之1-(4-硝基苯基）環戊酸於200毫升之甲醇與四氫呋喃在冰浴之1 :丨體積比混合物。將1 〇克之硼氫化鈉經10分鐘以小部份加入冷卻之混合物。生成混合物然後在室溫攪拌20分鐘，結束時，將反應混合物倒入500毫升之水中，然後以濃氫氯酸將pH調整至4。如此造成1-(4-胺基苯基）環戊烷羧酸結晶之沈澱，其藉過濾收集。然後將22.2克（150毫莫耳）之碳酸鉀及100毫升之四氫呋喃加入結晶產物於100毫升之水之懸浮液，其已在冰浴中冷卻，然後加入9.0毫升（100毫莫耳）之甲氧基乙醯氯。生成混合物在相同溫度攪拌30分鐘後，加入200 -72- 1285206 五、發明説明（71) 毫升之水’混合物以醚淸洗然後以濃氫氯酸將醚萃取液之pH調整至4。此混合物在室溫靜置2小時，而且藉過濾收集生成結晶提供25.4克（產率91 .6%)之所需化合物如白色結晶。熔點：1 62 - 1 63X：沱核磁共振光譜（ 400MHz，CDCl3) (5 ppm : 8.24(1H，單線） 7·50(2Η，雙線，J = 8.7Hz); 7·35(2Η，雙線，J=8.7Hz); 4.00(1H，單線）； 3.49(3H，單線）； 2.63(2H，多線）； 1 .90(2H，多線）； 1 ·73(4Η，多線）。試驗例1 防除貓蚤之殺昆蟲效果之試驗準備其中跳蚤之活動空間與牛血漿使用通常作爲人造皮膚之ParafilmTM.(得自Aldrich化學有限公司）隔離之試驗容器。將被試驗之化合物以其濃度足爲lppm之量加入牛血漿，而且在37°C使跳蚤經ParafilmTM吸取血漿樣品。各組包括20隻跳蚤。由48小時後死亡之跳蚤數量評估試驗化合物防除跳蚤之殺昆蟲效果，藉由計算無試驗化合物之對照組之死亡跳蚤，修正死亡率。結果示於表2。 -73- 1285206 五、發明説明（72) 表2

化合物死亡率（％ ) 實例 Kb) 95.0 實例 1(c) 90.2 實例 2 95.0 實例 3 81.4 實例 4 100.0 實例 5 74.4 實例 6 79.5 實例 8 87.6 實例 9 83.2 米貝黴素a4 20.9 比較化合物A 2.4 應注意，上表之化合物A爲EP-A- 0 246739專利所揭示且具有下式之化合物：試驗例2 自狗排除跳蛋之g式驗 -74- 1285206 五、發明説明（73) 提供用於試驗之小獵犬在試驗開始前以貓蚤感染。計算感染後3天由狗體表面收集之跳蚤數量，並且對各狗計算感染率，其計算爲感染後3天計算之跳蚤對用以感染狗之起初數量之比例。將如以上實例1(c)所述而製備之試驗化合物13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥基米貝黴素 Α4溶於苄醇與碳酸丙二酯之9 .· 1體積比混合物，產生試驗化合物以10%(w/v)之濃度存在之試驗溶液。生成之試驗溶液以5毫克/體重公斤數之劑量對各4隻試驗之小獵犬（4至 7個月大）之兩肩之間區域逐滴施藥，在試驗化合物施藥後之第7日、第21日及第28日，以100隻貓蚤感染各隻狗。計算感染後3天由狗體表面收集之跳蚤數量。測定在施藥前後得到之跳蚤數量以產生排除比例。在此試驗中，在第7日、第21日及第28日均未由以跳蚤感染3天後之狗體表面收集到跳蚤。因此，即使是在試驗化合物施藥28日後，排除率仍爲100%。在對照中，硏究4隻未以試驗化合物施藥之狗。在與試驗組同時對此對照組進行感染試驗時，經過試驗期’ 未觀察到感染率之顯著變化。試驗例3 自狗排除跳蚤之試驗使用如以上實例21所述而製備之13-[1-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素八4與13-Π-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥基米貝黴 -75- 1285206 五、發明説明（74) 素A 3之8 : 2混合物於苄醇與碳酸丙二酯之9 : 1體積比混合物之10%(w/v)溶液作爲試驗溶液’重複以上試驗例 2之步驟。在此試驗中，在第7日、第21曰及第28日均未由以跳蚤感染3天後之狗體表面收集到跳蚤’因此’即使是在試驗化合物施藥28日後，排除率仍爲1〇〇% ° 試驗例4、5與6 試驗例4 :防除迴蟲（Toxocara canis)之效果之試驗試驗例5 :防除鉤蟲（Ancy 1 os t 〇ma can i num)之效果之試驗試驗例6 :防除鞭蟲（Tri chur is vul pis)之效果之試驗將如以上實例1(c)所述而製備之13-[l-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素纟4溶於苄醇與碳酸丙二酯之9 : 1體積比混合物，產生10%(w/v)試驗溶液，其以5毫克/體重公斤數之劑量對各自然被迴蟲、鉤蟲或鞭蟲感染之試驗狗（即，將狗保持在寄生蟲存在之環境且選擇被感染之狗用於試驗）之選擇區域逐滴施藥。對於這三種寄生蟲，測量在試驗化合物施藥前及第7曰與第9日後，每克排泄狗屎之卵數（EPG)。測量試驗化合物施藥及試驗結束之間之狗屎中排泄之蟲數（WEF )。在試驗完成時，各試驗狗接受後死亡率以計算消化道中存活之蟲數（SWDT)。結果示於表3。 -76- 1285206 五、發明説明（75 ) 表3 狗號碼施樂則 7-9日後之EPG 之EPG WEF SWDT 排除率 (%) 試驗 4(迴蟲排除試驗） 1 6,800 〇 3 0 100 2 2,400 〇 5 0 100 3 40,400 〇 8 0 100 試驗 5 (鉤蟲排除試驗） 4 ,200 〇 - 0 100 5 3,000 〇 - 0 100 6 200 〇 - 0 100 試驗 6(鞭蟲排除試驗） 7 34 0 - 0 100 8 5 0 - 0 100 如由以上所見到，試驗化合物任由試驗狗排除迴蟲顯示優良之活性。在試驗化合物逐滴施藥前，EPG程度非常高。然而，在試驗化合物施藥後7至9日，EPG程度降至0 。試驗狗消化道之後死亡率硏究發現無存活之蟲。試驗化合物之效果亦在硏究自試驗狗排除鉤蟲與鞭蟲之試驗中證明。在施藥後7至9日，EPG程度降至0且在消化道中未發現存活之鉤蟲或鞭蟲。如由以上之結果所了解，試驗化合物顯示在消化道防除試驗寄生蟲之優良驅蟲活性，試驗例7 -77- 1285206 五、發明説明（76 ) 防除穿洞济癬（S a r c 〇 t e s s c a b i e i )之交女果之試驗提供被疥癬感染之狗與貓用於試驗。製備如以上實例 1(c)所述而製備之13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥基米貝黴素A4於苄醇與碳酸丙二酯之 9 : 1體積比混合物之10%(w/v)試驗溶液。其以5毫克/體重公斤數之比率對試驗動物之選擇區域施藥•在施藥前然後在試驗化合物施藥後3週，自其耳朵與前後肢刮下試驗動物之表皮。然後將如此得到之表皮裝在10%氫氧化鉀溶液，而且以顯微鏡觀察蟲體與卵之數量。結果示於表4。表4 被試驗之動物施藥前施藥後（3過後）蟲體卵蟲體卵狗 70 11 9 0 猫 35 86 0 0 以上之結果顯示，在將試驗化合物逐滴施藥於證實被疥廯感染之各狗與貓之選擇區域時，證實防除疥廯之明確效果。被試驗之狗在3週殘留之疥癖數量僅爲9且其產卵被完全防止。另一方面，在貓觀察到100%之效果及100% 之產卵防止效果。因此，結果明確地證明試驗化合物具有防除疥癣之優良效果。試驗例8 防除絲蟲之活件之試驗自被Dirofilaria immitis感染之狗收集微絲蟲（mf)。 -78- 1285206 五、發明説明（77 ) 藉由培養mf、13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基卜5-羥基米貝黴素/V4( 100奈克/毫升）與嗜中性球，硏究如以上實例1(c)所述而製備之13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4防除mf 之抑制效果。藉由使由感染之狗得到之血接受以皂角苷溶血而得到mf。藉由將酪蛋白腹膜內注射至老鼠中以引發其轉移，繼而密度梯度離心而得到嗜中性球。製備含 mf單獨、mf加嗜中性球、mf加試驗化合物、及mf加試驗化合物加嗜中性球之膠，其然後在37°C在5% C〇2培育器中培養。對含嗜中性球，試驗化合物、及試驗化合物加嗜中性球之膠，測量在比較試驗結束時僅含mf之膠中存在之m f時m f之減少％，結果示於表5。表5 條件微絲蟲減少百分比 m f +嗜中性球 6.0 m f +試驗化合物 0.02 mf +嗜中性球+試驗化合物 53.8 防除m f (線蟲之幼蟲前階段）之活性作爲試驗此試驗化合物防除被Dir of i lari a i_it is感染之活性之模型。至於試驗化合物在本試驗系統中之硏究結果，可見到試驗化合物在嗜中性球存在下具有良好之防除mf活性。由這些結果可推論，試驗化合物具有防除被D^on Una i mm i t i s感染之防止效果。 -79- 1285206 五、發明説明Ο ) 試驗例9 防除二斑葉蟎之鉛蟎效果之試驗將其上具有觸寄生蟲之婉·&葉浸於含l〇〇PPm之如以上實例1(c)所述而製備之13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4之溶液約10秒，該溶液藉由將含lOOOOppm之該化合物溶於丙酮與水之95:5體積比混合物之溶液然後以水稀釋而製備。去除殘餘之試驗化合物溶液且經處理之葉在培養皿中靜置，其含以浸於水之濾紙覆蓋之海棉。在葉上之試驗化合物溶液乾燥後，標記蟎之卵。然後葉子在25°C在無蓋之培養皿中靜置。以試驗化合物處理2日後，測定蟎之死亡率（以總蟎數之百分比表示）。處理後7至10日，估計蟎卵之"死亡率" (以未孵化之總蟎卵數之百分比表示）及孵化之死亡率（以被殺死之總孵化數之百分比表示）：試驗以不同之試驗化合物濃度重複。此試驗之”未處理”表示使用水代替試驗化合物溶液之對照試驗。結果示於表6及7。表6 化合物濃度二斑葉蟎（2 日後）蟎之死亡率 (ppm) 總共死亡掙扎逃逸 (%) 試驗 100 48 48 100 化合物 10 39 39 - 100 溶液 °〇, 55 55 — 100 65 64 1 98.5 未處理 - 37 0 0 -80- 1285206 五、發明説明Ο ) 表7 化合物濃度二斑葉蟎之卵蟎卵之孵化之 (ppm) (7日後）死亡率死亡率總共死亡（％ ) (% ) 試驗 100 20 18 90 100 化合物 10 20 5 25 100 溶液 1 20 0 0 30 未處理 - 20 0 0 0 由這些結果可見到，試驗化合物具有殺蟎活性，包括防除成蟎、卵及孵化之活性。試驗例10 防除南方根瘤線蟲之殺昆蟲效果之試驗在容器（ 70x 70x 20毫米）中準備瓊脂板（80毫升：含 1.25ppm之卡那黴素、1.25ppm之鏈黴素、與0.8585ppm 之盤尼西林）。此板種植子葉生長階段之黃瓜。將濾紙碟 (具有8毫米直徑之薄型）浸於含lOOppm之如以上實例1(c) 所述而製備之13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4於丙酮與水之95 : 5體積比混合物之溶液。將如此處理之紙碟之一置於瓊脂板中且以2張其他之經處理紙碟置於子葉上。處理後，容器以丙烯酸酯板覆蓋以防止水蒸發。4日後，將約2 . 5毫升之含南方根瘤線蟲之500秒幼蟲階段之懸浮液逐滴加入瓊脂板。加入幼蟲後10日，估計線蟲之卵瘤數。各試驗在25°C之溫度及65%之濕度進行。此試驗之 _ -81- 1285206 五、發明説明（8〇 ) ”未處理”爲使用水代替試驗化合物溶液浸漬濾紙之對照。使用以下之標準判斷得到之結果： 0 :等於無處理組（5 1至1 50個卵瘤） 1 :稍微少於無處理組（36至50個卵瘤） 2 :少於無處理組（21至35個卵瘤） 3 :顯著少於無處理組（0至20個卵瘤）結果示於表8。表8 化合物濃度（ppm) 卵瘤數效果（結果）試驗化合物 1000 6 3 未處理 - 115 0 由這些結果可見到，試驗化合物在排除南方根瘤線蟲爲有效的。試驗例11 防除白蟻之殺昆蟲效果之試驗將試驗濾紙以20微升之含預定濃度之如以上實例21所述而製備之13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4與13-[1-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A3之8 : 2混合物之丙酮溶液處理，然後在空氣中乾燥。將樣品管裝以試驗濾紙及10隻工白蟻，然後置於26± PC之暗處。處理4日後，測定白蟻之死亡率。"對照"爲以無試驗化合物存在之丙酮處理然後在空氣中乾燥之濾紙。結果示於表9。表9 -82- 1285206 五、發明説明（81 ) 死亡率（％ ) 5 OOppm 250ppm 125ppm 62 . 5ppm 試驗化合物 100 100 100 100 對照 0 由這些結果可下結論，試驗化合物在排除白蟻爲有效的。試驗例12 防除貓蚤之殺昆蟲效果之試驗準備其中跳蚤之活動空間與牛血漿使用通常作爲人造皮膚之Para filmTM(得自Aldrich化學有限公司）隔離之試驗容器。將被試驗之化合物以其濃度足爲1 ppm之量加入牛血漿，而且在37°C使跳蚤經ParafilmTMl取血漿樣品。各組包括20隻跳蚤。由48小時後死亡之跳蚤數量評估試驗化合物防除跳蛋之殺昆蟲效果。藉由I十算無試驗化合物之對照組之死亡跳蚤，修正死亡率。結果示於表1 0。表10 化合物死亡率（％ ) 實例15 100 實例1 6 92.9 實例17 94.9 實例18 91.5 實例19 90.7 米貝黴素八4 20.9 化合物A 2.4 •83- 1285206 五、發明説明（^ ) 化合物A爲試驗例1所述之相同化合物。工業應用件依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其農業、園藝、醫藥、與獸醫可接受鹽具有優良之殺昆蟲、驅蟲及殺蟎活性，而且更具有防除昆蟲及其他寄生於動物（包括人類）之寄生蟲造成之各種疾病之優良預防活性。其防除寄生於馴服動物或人類之跳蚤[例如，貓蚤（CtenocephaHdes £61丨$)與狗蛋（(^611〇〇601131丨(^8〇&11丨3)]之殺昆蟲效果特別良好。依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其鹽亦可作爲農業化學物、用於防除有害食木昆蟲之殺昆蟲劑、及作爲衛生殺昆蟲劑。依照本發明之式（I)米貝黴素衍生物及其獸醫可接受鹽在獸醫醫學之領域具有優良之殺昆蟲活性，例如，防除對動物有害之昆蟲[例如，胃蠅科、皮蠅科、狂蠅科、蠅科、血虱、長顎虱、虱科、短角鳥虱科、長角鳥虱科、嚼虱科、臭蟲科、或獵蜂科]，而且防除各種其他有害之動物寄生蟲亦顯示良好之活性，如蟲[例如，如硬蜱科、喘蟎科、刺皮蟎科、隱喙蜱科、脂蟎科、痒蟎科、疥蟎科之外部寄生蟲]。依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其園藝可接受鹽在控制園藝害蟲造成之待極疾病亦非常有效。特別地，本發明之化合物具有優良之殺蟎活性，不僅防除如葉蟎科、癭蟎科等之葉蟎之成蟲或卵，亦防除已對現有殺蟎劑獲得抗性因此近年來呈現嚴重問題之蟎。其亦具有防除在土壤及樹幹與樹皮發現之根結線蟲屬、 -84- 1285206 五 '發明説明（83)

Bursapholenchus、Phizoglyphus 等之優良殺蟎活性。依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其農業與園藝可接受鹽具有優良之殺昆蟲活性，因此可作爲殺昆蟲劑。本發明之化合物呈現防除有害昆蟲之強效防止效果，但未顯示毒性，使得可有效地處理農作物而不造成任何損壞。依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其農業與園藝可接受鹽亦具有排除各種害蟲之用途，其包括因吸取或咬食而損壞植物之有害昆蟲、其他之植物寄生蟲、對儲存產物有害之昆蟲、有害之食木昆蟲、及衛生原因之昆蟲。此害蟲之實例包括鞘翅目，如Callosobruchus chinens i s, Si tophi lus zeamais,Tribolium cas taneum,Epi lachna vigi tioctomaculata,Agriores fuscicollis,Anoma1 a rufocuprea,Leptinotarsa decemkineata ,Diabrot ica s pp. , Monochamus alternatus,Lissorhoptrus o ryzoph i 1 u s 與 Lyctusbruneus ;鱗翅目，如 Lymantria dispar, Malacosoma neus t r i a ,Pi e r i s r apae , Spodp t era litura,Mamestra brassicae,Chilosuppressal is , Pyrausta nub i 1 a 1i s,Ephe s t i a c au t e11 a , Adoxophye s orana,Carpocapsa pomone11 a , Ag ro t i s fucosa，Galleria me 1 1 one 1 1 a 與 P1 u t e 1 1 a my 1 os t e 1 1 a ;半翅目，如 Nephotettix cincticeps,Ni laparvata lugens, Pseudococcus cornstocki，Unaspis yanonensis,

Myzus persicae，Aphis pom i , Aphis possypii， -85- 1285206 五、發明説明（84 )

Rhopa1〇 s i phum pseudobrassicas ,Stephanitis nashi , Nazara s pp. ,C i mex lectularius,Trialeurodes vaporariorum 與 Psylla spp;直翅目，如 Blatella germanica,Periplaneta americana,Periplaneta fuliginosa,Gryl lotalpa africana 與 Locus t a migratoria migratoriodes ;等翅目，如 Deucotermes speratus 與 Coptotermes formosamus;及雙翅目，如 Musca domestica，Aedes aegypti, Hylemia platura，

Cu1 ex pipiens, Anopheles sinensis, Fann i a canicularis 與 Cu 1 ex t r i t aen i o rhynchus 。依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其醫藥與獸醫可接受鹽具有優良之殺寄生蟲活性，而且可作爲防除動物與人類之寄生蟲之驅蟲劑。特別地，其呈現防除寄生於馴服動物、家禽、及具有農業重要性之動物（如豬、綿羊、山羊、牛、馬、狗、貓、或雞）之線蟲之優良殺寄生蟲活性[例如，屬於血矛線蟲屬、毛圓線蟲屬、胃線蟲屬、細頸線蟲屬、庫珀屬、迴蟲屬。仰口屬、結節線蟲屬、夏氏線蟲屬、鞭蟲屬、後圓線蟲屬、圓線蟲屬、毛線蟲屬、網尾屬、毛細線蟲屬、異刺屬、弓迴蟲屬、迴屬、類圓線蟲屬、原圓屬、吸吮線蟲屬、胃線蟲屬、旋尾線蟲屬、膨首屬、筒線蟲屬、顎口線蟲屬、泡翼屬、尖尾線蟲屬、鉤口屬、鉤蟲屬、毒迴蟲屬、與副迴蟲屬之線蟲]。本發明之化合物防除攻擊消化道之屬於細頸線蟲屬、 -86- 1285206 五、發明説明（85) 庫珀屬或結節線蟲屬之特定寄生蟲，在胃中發現之屬於血矛線蟲屬或胃線蟲屬，及在肺中發現之屬於網尾屬非常有效。其防除在其他組織或器它（如心臟、血管、及皮下與淋巴組織）發現之屬於絲蟲科與腹腔絲科之寄生蟲亦呈現非常優良之殺寄生蟲活性。本發明之化合物防除在人體發現之寄生蟲亦有效，因此防除常在人類消化道觀察到之寄生蟲呈現優良之殺寄生蟲活性，如屬於鉤口屬、板口線蟲屬、蛔蟲屬、類圓線蟲屬、毛線蟲屬、毛細線蟲屬、鞭蟲屬、或蟯蟲屬。本發明之化合物防除在血液，或在消化道以外之組織與器官發現，而且其爲醫學上重要之寄生蟲，甚至呈現優良殺寄生蟲活性，例如，屬於P a r a f i 1 a r i a，W u c h e r e r i a ,Brugia,Li tomosoides,Onchocerca,Elaeophara, Dirofilaria,or Loa spp.of Filariidae,Neurofilaria, Setaria,Dipetalonema,Stephanofi laria,Neurofilaria of Setariidae 與 Aproctidae，屬於 Dracunculus spp. of Dracunculidae，及屬於 Strongyloides 或 Trichinella s pp ·之寄生蟲’其爲在非腸胃寄生條件下例外地存在之消化道寄生蟲。在依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其醫藥與獸醫可接受鹽作爲動物（不論是人類或非人類）之驅蟲劑時，其可以單位劑量形式口服地。例如，如液體飮料或如乾燥固體，或爲動物飼料之分散液之形式；以溶解或分散於液態載體賦形劑之化合物之注射液形式非經腸胃地； -8 7- 1285206

五、發明説明（86 ) 或溶於溶劑之化合物之局部應用之形式局部地施藥。液體飮料可包括活性化合物於適當非毒性溶劑或水中之溶液、懸浮液或分散液，其通常摻合如膨土之懸浮劑、濕潤劑或其他賦形劑，而且更視情況地摻合防沬劑。液體飮料調配物一般合約0.01至0.5重量％，較佳爲〇.〇1至〇 . 1重量％之量之活性成分。對於口服施藥，通常可使用如含所需量活性成分之乾燥固體、膠囊、藥丸、或錠劑之單位劑量形式。這些組成物可藉由均勻地混合活性成分及適當之粉碎稀釋劑、塡料、分解劑及/或黏合劑（例如，澱粉、乳糖、滑石、硬脂酸鎂、蔬菜橡膠等）而製備。製品之重量及內容可如所需視被治療動物之本性、感染之嚴重性、寄生蟲之本性、及被治療動物之體重而改變。在本發明之化合物如動物飼料之添加物而施藥時，其可爲飼料之均勻分散液、表面裝飾、或顆粒形式。所需之殺寄生蟲效果可藉由在飼料中加入0.0001至0.02重量％之量之本發明化合物而得到。在溶解或分散於液態載體賦形劑時，依照本發明之式 (I)米貝黴素衍生物及其獸醫可接受鹽可藉前胃、肌內、支氣管內、或皮下注射而對動物非經腸胃地施藥。對於非經腸胃施藥，本發明之化合物較佳爲混合蔬菜油，如花生油或棉子油。所需之驅蟲效果通常可藉由加入注射調配物之0.05至50重量％之量之本發明化合物而得到。 -88- 1285206 五、發明説明（87 ) 在本發明之活性成分溶於溶劑以對所需之局部位置直接施藥時，可使用已知提高經皮吸收力之溶劑。實例包括醇衍生物，如乙醇、異丙醇、油醇、與苄醇；羧酸衍生物，如月桂酸與油酸；酯衍生物，如肉豆蔻酸異丙酯與碳酸丙二酯；亞珮衍生物，如二甲基亞碾；或醯胺衍生物，如N -甲基吡咯啶酮；或以上例示之溶劑之混合物。在治療動物之寄生蟲感染峙，依照本發明之式（I )米貝黴素衍生物及其醫藥與獸醫可接受鹽用於得到最佳結果之量視被治療動物之本性、及感染之嚴重性而不同。對於口服施藥，在劑量爲每1公斤動物體重爲約〇 . 〇 1至 100毫克，較佳爲0.5至50.0毫克峙。得到令人滿意之結果。化合物一般可在1至5日之期間每日施藥i至6份。然而，精確之施藥本性必需考慮被治療動物之精確病況。 -89-

Claims

六、申請專利範圍第90109990號「13 -取代米貝黴素衍生物，其製法及其用於防除昆蟲及其他害蟲」專利案 (2005年7月28日修正） A申請專利範圍： 1. 一種式（I)化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，

其中： R1代表甲基、乙基、異丙基或第二丁基； R2代表氫原子或Ci-C6烷基； R3代表氫原子、Ci-Q烷醯基（可選擇性以1或2個各選自以下定義之取代基A之取代基取代）、C3-C5炔醯基 (可選擇性以1或2個各選自以下定義之取代基A之取代基取代）、具有（^-匕烷基部份之烷基磺醯基，或 R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮-3-基； -a -部份與其連接之碳原子一起形成3 -至6 -員環烷基； 1285206 六、申請專利範圍取代基A選自包括鹵原子、氰基、羥基、^-匕烷氧基、胺基（可選擇性以1或2個選自烷基之取代基取代）、Ci-q烷醯基、及2-酮基吡咯啶-1 -基。 2 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R1代表甲基或乙基。 3 .如申請專利範圍第1或2項之式（I )化合物或其農業、

園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R2代表氫原子或 CVC3烷基。 4 .如申請專利範圍第1或2項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R2代表氫原子或甲基。 5 .如申請專利範圍第1或2項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R2代表氫原子。 6 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園

藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R3代表：氫原子，烷醯基，其可選擇性以1或2個各選自鹵原子、氰基、羥基、G-C3烷氧基、胺基（可選擇性以1或 2個選自烷基之取代基取代）、（:丨-^烷醯基、及 2 -酮基吡咯啶-1 -基之取代基取代， C3 -C5炔醯基，或具有烷基部份之烷基磺醯基。 1285206 六、申請專利範圍 7 ·如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R3代表氫原子或乙醯基，其選擇性以選自鹵原子、氰基、羥基、〇1-〇3烷氧基、CVC3烷硫基、CVC4烷醯氧基、胺基、經1或2 個選自Ci-q烷基之取代基取代之胺基、（:丨-匕烷醯基、及2 -酮基吡咯啶-1-基之取代基取代。 8 ·如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R3代表氫原子、乙醯基、羥基乙醯基、甲氧基乙醯基、乙氧基乙醯基、或三氟乙醯基。 9 ·如申請專利範圍第1項之式（n化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R3代表甲氧基乙醯基〇 1 〇 ·如申請專利範圍第丨或2項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮-3-基。 m 11 ·如申請專利範圍第1項之式（I)化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中- a-部份與其連接之碳原子一起形成環丁基或環戊基。 1 2 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中- a-部份與其連接之碳原子一起形成環戊基。 1 3 .如申請專利範圍第1項之式（1)化合物或其農業、園 1285206 六、申請專利範圍藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基、乙基、異丙基或第二丁基； R2代表氫原子或Ci-h烷基； R3代表氫原子， G-C4烷醯基，其可選擇性以1或2個各選自鹵原子、氰基、羥基、CrG烷氧基、胺基（可選擇性以1或 2個選自烷基之取代基取代）、及2-酮基吡咯啶· 1-基之取代基取代， C3-C5炔醯基，具有<^-(：3烷基部份之烷基磺醯基，或 R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮- 3-基，及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環丁基或環戊基。 14.如申請專利範圍第1項之式（I)化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基、乙基、異丙基或第二丁基； R2代表氫原子或Ci-C3烷基； R3代表氫原子，烷醯基，其可選擇性以1或2個各選自鹵原子、氰基、羥基、烷氧基、胺基（其可選擇性以1 或2個選自Ci-C3烷基之取代基取代）、^:丨-“烷醯基、 1285206 六、申請專利範圍及2 -酮基吡咯啶-1 -基之取代基取代， (：3-(：5炔醯基，具有烷基部份之烷基磺醯基，或 R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮-3-基；及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環丁基或環戊基；其條件爲R2與R3均不代表氫原子。

1 5 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基或乙基； R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮-3-基；及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環丁基或環戊基。 1 6 ·如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中：

R1代表甲基或乙基； R2與R3與其連接之氮原子一起形成2-噚唑啶酮-3-基；及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環戊基。 1 7 ·如申請專利範圍第1項之式（I)化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基或乙基； R2代表氫原子或（VC3烷基； 1285206 六、申請專利範圍 R3代表氫原子，烷醯基，其可選擇性以1或2個各選自鹵原子、氰基、羥基、匕-(：3烷氧基、胺基（可選擇性以1或 2個選自烷基之取代基取代）、Ci-Q烷醯基、及 2 -酮基吡咯啶-1 -基之取代基取代， C3-C5炔醯基，或

具有烷基部份之烷基磺醯基；及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環丁基或環戊基。 1 8 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基或乙基； R2代表氫原子或甲基；

R3代表氫原子或乙醯基，其選擇性以選自鹵原子、氰基、羥基、CVC3烷氧基、胺基、經1或2個選自CVG 烷基之取代基取代之胺基、CrQ烷醯基、及2-酮基吡咯啶-1-基之取代基取代；及 -a -部份與其連接之碳原子一起形成環戊基。 1 9 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基或乙基； R2代表氫原子； R3代表氫原子、乙醯基、羥基乙醯基、甲氧基乙醯 1285206 六、申請專利範圍基、乙氧基乙醯基、或三氟乙醯基；及 -a_部份與其連接之碳原子一起形成環戊基。 2〇 .如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中： R1代表甲基或乙基； R2代表氫原子； R3代表甲氧基乙醯基；及

-a-部份與其連接之碳原子一起形成環戊基。 2 1 ·如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其選自以下： 13-[1-(4 -胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥基米貝黴素 A 4 » 13-[1-(4·乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4;

13-[1-(4-氰基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4 ; 13-[1-(4-羥基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4 ; 仁甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4 ; 13-[1-(4-甲烷磺醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素Α4 ; 13-[1·(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5 -羥 1285206 六、申請專利範圍基米貝黴素A3; Π-[1-(4-甲烷磺醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基羥基米貝黴素A3; 13-[l-(4 -甲氧基乙醯基胺基苯基）環丁烷羰氧基羥基米貝黴素A4; 13-[l-(4-甲烷磺醯基胺基苯基）環丁烷羰氧基]-5_羥基米貝黴素A4; 13-U-[4-(N-乙醯基-N-甲基甘胺醯基胺基）苯基]環戊烷羰氧基卜5-羥基米貝黴素A4。 2 2 ·如申請專利範圍第1項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中此化合物爲13-[1· (4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基]-5-羥基米貝黴素A4。 23 ·如申請專利範圍第丨項之式（1 )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其中此化合物爲13-Π-(4-甲氧基乙醯基胺基苯基）環戊烷羰氧基卜5_羥基米貝黴素A3。 24 ·如申請專利範圍第1項之式（1 )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，用於保護植物與動物（可爲人類或非人類）免受選自包括蟎、線蟲與昆蟲之寄生蟲危害之方法，其包括將活性化合物應用於該植物或動物或該植物之部份或繁殖本體，或包括該植物、該動物或該植物之部份或該植物之繁殖本體之處所，其中活性 1285206 六、申請專利範圍化合物選自如申請專利範圍第1至23項中任一項之式 (I)化合物及其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽。 2 5 ·如申請專利範圍第2 4項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其用於保護哺乳動物免受寄生於哺乳動物之線蟲、蟎或昆蟲危害。 26 ·如申請專利範圍第24項之式（I )化合物或其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，其用於保護動物免受貓蚤 (Ctenocephalides felis)或狗蚤（Ctenocephalides c an i s )危害。 2 7 · —種驅蟲、殺觸及殺昆蟲組成物，包括一有效化合物選自如申請專利範圍第1至23項中任一項之式（I )化合物及其農業、園藝、醫藥、或獸醫可接受鹽，摻合其農業、園藝、醫藥或獸醫可接受載體或稀釋劑。 28.如申請專利範圍第27項之組成物，其適合用於防除寄生於哺乳動物之線蟲、蟎或昆蟲之獸醫應用。 29·如申請專利範圍第27項之組成物，其適合作爲防除貓蚤（Ctenocephalides felis)或狗 S (Ctenocephalidescanis)之殺昆蟲劑。