MXPA04003854A - Composicion antihelmintica. - Google Patents

Abstract

Una composicion antihelmintica que contiene como ingredientes activos el primer componente que consiste de uno o mas miembros seleccionados entre los compuestos representados por la formula general(I):(Ver formula I)etc., y el segundo componente consiste de uno o mas miembros seleccionados de entre prazinquantelos etc., en donde R1 es metilo o similares; y R2 es acetilo o similares.

Description

COMPOSICION ANTIHELMINTICA CAMPO TECNICO La presente invención describe una composición antihelmíntica que comprende derivados de miibemicina (el primer ingrediente) y el segundo ingrediente como el ingrediente activo; y un método para el uso de esto.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Se ha sabido que la miibemicina o compuestos de la serie de avermectina, tienen excelentes actividades insecticidas contra una amplia variedad de parásitos, sin embargo, el derivado de miibemicina representado por la siguiente fórmula (I) de la presente invención, una composición que comprende el mismo y bioactívidades de lo mismo han sido convencionalmente desconocidos.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Los inventores de la presente invención han realizado extensos estudios a fin de obtener una composición que exhibe una fuerte actividad contra una amplia variedad de endo- y ectoparásitos que incluyen ectoparásitos tal como pulgas, parásitos en el tracto digestivo tal como lombriz intestinal, y endoparásitos tal como filariae en la administración oral y la administración local, y como un resultado, se ha encontrado que una composición que comprende un derivado de milbemicina específico y un segundo ingrediente tal como praziquantel, como los ingredientes activos, exhiben una excelente actividad antihelmíntica, y así lograr terminar la presente invención. La presente invención describe una composición antihelmíntica que comprende uno o más tipos del primer ingrediente seleccionado de los derivados de milbemicina constituidos de un compuesto representado por la fórmula (I): [en donde, R representa un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo isopropilo o un grupo s-butilo; y R2 representa un grupo acetilo, un grupo metoxiacetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo cianoacetilo o un grupo metanosulfonilo] o sales de lo mismos, y, uno o más tipos de los segundos ingredientes seleccionados del grupo que consta de praziquantelos, fipronilos, benzimidazoles y neonicotinoides, como ingredientes activos, y un método para el uso de esto.

El compuesto que es un ingrediente activo de la presente invención y que está representado por la fórmula anterior (I), es un compuesto que exhibe una fuerte actividad contra una amplia variedad de endo- y ectoparásitos incluyendo ectoparásitos tal como pulgas, parásitos en el tracto digestivo tal como la lombriz intestinal, y endoparásitos tal como filariae en una administración local y una administración oral. En el compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención, (1 ) R1 es preferiblemente un grupo metilo o un grupo etilo, y (2) R2 preferiblemente es un grupo metoxiacetilo. En el compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención, se prefiriere que R sea un grupo metilo o un grupo etilo, y R2 sea un grupo metoxiacetilo. Como compuestos representativos de la fórmula (I) los cuales son ingredientes activos de la presente invención, por ejemplo, los compuestos descritos en el siguiente cuadro se pueden citar, sin embargo, el compuesto (I) no se limita a estos compuestos. A propósito, en el cuadro 1 , "Me" representa un grupo metilo, "Et" representa un grupo etilo, "¡Pr" representa un grupo isopropilo y "sBu" representa un grupo sec-butilo, respectivamente.

CUADRO 1 No. de compuesto R1 1 Et MeCO 2 Et CF3CO 3 Et NCCH2CO 4 Et MeOCH2CO 5 Et MeS02 6 Me MeCO 7 Me CF3CO 8 Me NCCH2CO 9 Me MeOCh CO 10 Me MeS02 11 iPr MeCO 12 iPr CF3CO 13 iPr NCCH2CO 14 ¡Pr MeOCH2CO 15 iPr MeSO2 16 sBu MeCO 17 sBu CF3CO 18 sBu NCCH2CO 19 sBu MeOCH2CO 20 sBu MeSO2 En el compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención, los compuestos preferibles son compuestos del número de compuesto ejemplificado 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 10, 13, 14, 15,16, 17, 19, y 20, más preferiblemente compuestos del número de compuesto ejemplificado 1 , 3, 4, 5, 6, 7, 9 y 10, y más específicamente compuestos del número de compuesto ejemplificado 1, 3, 4, 5, 9 y 10. Cuando el compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención o la sal de éste, tiene un átomo de carbono asimétrico dentro de la molécula, un estereoisómero que tiene la configuración R o la configuración S puede estar presente, y el isómero individual y el compuesto del mismo en cualquier proporción, está incluido en la presente invención. Tal estereoisómero puede ser, por ejemplo, sintetizado al usar un compuesto de inicio ópticamente separado o un compuesto (I) sintetizado ópticamente separado, usando un método de separación óptico o método de aislamiento, si se desea. El compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención o la sal del mismo se puede formar en un solvato, y tal sal de solvato también está incluida en el ingrediente activo de la presente invención. Por ejemplo, el compuesto (I) puede absorber agua cuando se deja en la atmósfera o cuando se vuelve a cristalizar para obtener agua absorbida o para formar un hidrato, y la sal de tal compuesto que contiene agua también está incluido en los derivados de milbemicina que son ingredientes activos de la presente invención. Los praziquantelos que son ingredientes activos de la presente invención son efectivos contra Cestoidea en donde las milbemicinas o avermectinas tienen menos efecto (Parasitology Today, Vol 1 , No. 1, 10-17, 985), y son compuestos representados por la siguiente fórmula: [en donde n es 1, el compuesto es un praziquantel, y cuando n es 2, el compuesto es un epsiprantel]. Los fipronilos son ingredientes activos de la presente invención, y son compuestos que tienen un efecto instantáneo contra los artrópodos tal como insectos y garrapatas, por ejemplo fipronilo (véase, publicación de patente provisional Japonesa No. 63-316771) representados por la siguiente fórmula: vaniliprol (véase, publicación de patente provisional Japonesa No. 10-338678) es representado por la siguiente fórmula: [en donde R es un grupo metilo y X es un átomo de cloro, el compuesto es acetprol, y cuando R es un grupo etilo y X es un grupo trifluorometilo, el compuesto es etiprol] es conocido. Entre otros, los compuestos descritos en WO98/40359, WO98/02042, W098/45274, W098/28277, W098/28278, W098/28279, WO99/31070, WO00/62616, WO01/07413, o WO01/00614 pueden sobresalir. Entre estos, se prefieren fipronilo y vaniliprol. Los bencimidazoles que son ingredientes activos de la presente invención, se usan como antihelmínticos contra parásitos en el tracto digestivo y, por ejemplo, albendazol, flubendazol y mebendazol son conocidos (The benzimidazol anthelmintics-chemistry and biological activity, S. Sharma and S. Auzar, Progress in Drug Research Vol 27, 85-16).

En cuanto a los neonicotinoides que son ingredientes activos de la presente invención, por ejemplo, imidacloprid, tiametoxam, nitenpiram y acetamiprid son conocidos. Entre estos, imidacloprid se usa como un exterminador de pulgas para la administración local en forma similar a fipronilos. El segundo ingrediente de la presente invención preferiblemente son praziquantelos o fipronilos, más preferiblemente praziquantel, epsiprantei o fipronilo. Los derivados de milbenicina que son ingredientes activos de la presente invención se pueden preparar mediante el método de las etapas A a D que se muestran posteriormente. en donde R1 y R2 representan el mismo significado que se describió anteriormente, y X representa un grupo nitro o un grupo representado por la fórmula -NR2H. El derivado de 15-hidroxi milbemicina que tiene la fórmula (III), como el compuesto de inicio, es un compuesto conocido públicamente descrito en la solicitud de patente japonesa No. 60-158191.

Etapa A La etapa A es una etapa en donde reacciona un compuesto (III) con un ácido carboxílico representado por la fórmula: en un solvente inactivo en presencia de ácido trifluorometanosulfónico que es un ácido orgánico fuerte o trifiuorofosfonato de trimetilsililo para producir un compuesto representado por la fórmula (IV). La cantidad de ácido trifluorometanosulfónico o trifiuorofosfonato de trimetilsililo que se usa, es una cantidad catalítica en principio, y no debe necesitarse un peso equivalente con respecto al compuesto (III). Sin embargo, la cantidad puede variar drásticamente dependiendo de la reactividad del ácido carboxílico empleado. Además, cuando un polvo de un compuesto inorgánico se añade al sistema de reacción, una reacción puede ser acelerada y se puede obtener un buen resultado. Como tal, los compuestos inorgánicos, la sales metálicas tal como trifluorometanosulfonato de cobre, yoduro cuproso, yoduro de zinc, yoduro de cobalto y yoduro de níquel; Celita; gel de sílice y alúmina se pueden citar, una sal de cobre tal como trifluorometanosulfonato de cobre o yoduro cuproso es preferible, y todavía más preferible es el yoduro cuproso.

Cuando el ácido carboxílico que se va a usar es fuertemente soluble en un solvente, un éster silílico de un ácido carboxílico se puede usar. En este caso, se puede usar un método en donde el ácido carboxílico reacciona con una cantidad equivalente de aliltrimetilsilano en presencia de ácido trifluorometanosulfónico o éster trimetilsilílico del mismo como un catalizador y se añade el compuesto (III) a la solución obtenida del éster trimetilsilílico. El solvente que se usará en la reacción no es particularmente limitado debido a que no inhibe la reacción y disuelve los materiales de inicio, en un grado. Adecuadamente, los hidrocarburos aromáticos tal como el benceno, tolueno y xileno; e hidrocarburos halogenados tal como el cloruro de metíleno, 1 ,2-dicloroetano y cloroformo se pueden enfatízar. La temperatura de reacción es de -10°C a 100°C, preferiblemente de 0°C a 50°C. El tiempo de reacción varía principalmente, dependiendo de la temperatura de reacción, de los compuestos de inicio o el tipo de solvente que se usa, y en general siempre es de 5 minutos a 6 horas, preferiblemente de 10 minutos a 2 horas.

Etapa B La etapa B es una etapa en donde reacciona el compuesto (IV) con un agente de reducción tal como el borohidruro de sodio en un solvente inactivo para convertir el grupo carbonilo en la posición 5 en un grupo hidroxi para producir un compuesto representado por la fórmula (V) o un compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención. El agente de reducción que es usado no es limitado particularmente ya que es un agente de reducción conocido porque reduce el grupo carbonilo a un grupo hidroxi, por ejemplo, puede ser un borohidruro de metal tal como el borohidruro de sodio o borohidruro de litio, preferiblemente el borohidruro de sodio. Como un solvente reactivo, cualquiera se puede usar sin una limitación particular ya que no está involucrado en la reacción, y particularmente el uso de un alcohol inferior tal como el metanol, etanol o propanol, o éteres tal como el tetrahidrofurano o dimetoxietano es preferible. La temperatura de reacción normalmente es de cerca de 0o a 50°C y el tiempo de reacción normalmente es de 1 hora a 10 horas.

Etapa C La etapa (C) es una etapa de reducción del grupo nitro del compuesto (V) en un solvente inactivo para producir un compuesto que tiene un grupo amino, que es representado por la fórmula (VI). Para la reducción del grupo nitro, usualmente se puede usar un método. Como uno de tales métodos, la reducción catalítica que usa un catalizador de metal precioso se puede enfatizar. Como ejemplos preferidos para el catalizador empleado en la reacción, se pueden mencionar paladio sobre carbono, paladio sobre sulfato de bario, óxido de platino y lo similar.

Como un solvente adecuado que se usará en la reacción, un alcohol tal como el metanol o etanol, un éter tal como el tetrahidrofurano o dioxano, y un éster tal como el acetato de etilo, se pueden mencionar. La temperatura de reacción normalmente es de cerca de 10°C a 80°C, y el tiempo de reacción normalmente es de 10 minutos a 5 horas. Como otro método de reducción preferido, la reducción con polvo de zinc en un solvente de ácido acético se puede citar. La temperatura de reacción normalmente es de cerca de 0°C a temperatura ambiente, y el tiempo de reacción normalmente es de 30 minutos a 12 horas. Como un método de reducción más preferido, la reducción con borohidruro de sodio en presencia de un catalizador de níquel se puede citar. Como un catalizador de níquel, una sal de níquel tal como el cloruro de níquel o bromuro de níquel, se puede usar. Se prefieren los complejos de trifenilfosfina de estas sales de níquel. Como solventes adecuados se pueden usar en esta reacción, por ejemplo, alcoholes tal como el metanol o etanol, y éteres tal como el tetrahidrofurano o dioxano, se pueden mencionar. La temperatura de reacción normalmente es de 0°C a temperatura ambiente, y el tiempo de reacción normalmente es de cerca de 10 minutos a 120 minutos.

Etapa D La etapa D es una etapa de reacción de un grupo amino del compuesto representado por la fórmula (VI) con un ácido representado por la fórmula R2-OH (en donde R2 representa el mismo significado mencionado anteriormente) o derivados reactivos del mismo en un solvente inactivo para producir un compuesto representado por el compuesto (I) que es un ingrediente activo de la presente invención. Como derivados reactivos del ácido representado por la fórmula R2-OH, que normalmente es usado en una reacción de condensación, tal como los haluros de ácido (cloruro de ácido, bromuro de ácido, etc.) un anhídrido ácido, un anhídrido ácido mezclado, un éster activo o una amida activa, se pueden citar. Cuando el ácido representado por la fórmula R2-OH se usa, un agente de deshidratación tal como diciclohexilcarbodiimida (DCC), yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio, ácido p-toluenosulfónico o ácido sulfúrico se usa, y preferiblemente un agente de deshidratación es el yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio. La cantidad de agente de deshidratación empleado normalmente es de 1 a 5 equivalentes, preferiblemente de 1 a 2 equivalentes, para el ácido representado por la fórmula R2-OH. El solvente que será usado no es particularmente limitado ya que no inhibe la reacción y disuelve el material de inicio en algún grado, por ejemplo, puede ser un hidrocarburo tal como el hexano, éter de petróleo, benceno o tolueno; un hidrocarburo halógenado tal como el cloroformo, cloruro de metileno, o 1,2-dicloroetano; un éter tal como etiléter o tetrahldrofurano; una amida tal como ?,?-dimetilformamida; un sulfóxido tal como sulfóxido de dimetilo; un nitrilo tal como acetonitrilo; y una mezcla de estos solventes. El preferido es el diclorometano o 1 ,2-dicloroetano. La temperatura de reacción normalmente es de -70°C a 90°C, preferiblemente de 0CC a 60°C. El tiempo de reacción varía principalmente de acuerdo a la temperatura de reacción, los compuestos de inicio, los reactivos de reacción o el tipo de solvente empleado, y normalmente es de cerca de 15 minutos a un día total o la noche, y preferiblemente de 30 minutos a 6 horas. Cuando el derivado del reactivo descrito anteriormente es un haluro de ácido, la reacción preferiblemente se lleva a cabo en presencia de una base. Como bases preferidas, por ejemplo, bases orgánicas, tal como trietilamina, ?,?-dimetilanilina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, 1,5-diazabiciclo[4.3.0]noneno-5 (DBN) y 1 ,8-diazabiciclo [5.4.0]undeceno-7 (DBU), se pueden mencionar. La cantidad del haluro de ácido que se usarán normalmente es de 1 a 10 equivalentes, y aquella de la base empleada normalmente es de 2 a 8 equivalentes, para el compuesto (VI). Los solventes usados en la reacción, la temperatura de reacción, el tiempo de reacción y lo similar son lo mismo como cuando se usa por sí mismo el ácido carboxílico. La temperatura de reacción normalmente es de 0°C a 50°C, y el tiempo de reacción normalmente es de 5 minutos a 2 horas.

Después de terminar cada etapa descrita anteriormente, cada compuesto deseado, los compuestos (IV), (V) y (I) son aislados de la mezcla de reacción a través de un método comúnmente conocido y, si es necesario, purificado por un método conocido, tal como cromatografía en columna. Las milbemicinas naturales y derivados de la misma, que son materiales de inicio del compuesto (III), son productos de fermentación y pueden ser cualquiera de un compuesto individual o una mezcla de los mismos. Por lo tanto, el compuesto (I) también se puede preparar como un compuesto individual o como una mezcla del mismo. Un derivado de milbemicina que es un ingrediente activo de la presente invención se puede mezclar con un segundo ingrediente que es otro ingrediente activo en una cierta relación y se puede preparar en una formulación adecuada para administración oral o administración local. Como combinaciones de los derivados de milbemicina y el segundo ingrediente se pueden emplear el compuesto (I) y praziquantelos, el compuesto (I) y fipronilos y el compuesto (I), praziquantelos y filpronilos. Adicionalmente, cuando se utilizan una pluralidad de compuestos como el segundo ingrediente, la relación de mezclado de los compuestos puede variar dependiendo del método de combinación y el propósito buscado. Por ejemplo, se puede utilizar una combinación en la que el fipronilo sea 0.2 y el praziquantel sea 0.5 en términos de una relación de peso, cuando el compuesto (I) se reconoce como 1.

En la composición de la presente invención, la relación de mezclado del segundo ingrediente con el compuesto (I) varía dependiendo del tipo y uso del segundo ingrediente a ser empleado. Por ejemplo, cuando el segundo ingrediente es fipronilo, la relación es normalmente de 0.1 a 5, preferiblemente de 0.2 a 1.0. Cuando el segundo ingrediente es praziquantel, la relación normalmente se encuentra de 0.1 a 2, preferiblemente de 0.2 a 0.5. Cuando el segundo ingrediente es bencimidazol, la relación normalmente se encuentra de 1.0 a 100, preferiblemente de 2.0 a 20. Cuando el segundo ingrediente es neonicotinoide, la relación normalmente se encuentra de 0.2 a 10, preferiblemente de 0.5 a 2.0. Adicionalmente, cuando se utilizan una pluralidad de compuestos como el segundo ingrediente, la relación de mezclado de cada ingrediente se puede preparar para que se encuentren dentro de las escalas descritas anteriormente, respectivamente. Cuando se utiliza la composición de la presente invención como endo y ectoantihelmíntico en un animal o en un humano, se puede administrar oralmente como una bebida líquida. La bebida líquida es un solvente no tóxico o solución apropiada, suspensión o dispersión con un agente de suspensión como bentonita y un agente humectante u otros excipientes. La bebida líquida, en general, también puede contener un agente antiespuma. El contenido del componente activo en una formulación de bebida como una bebida líquida generalmente se encuentra de 0.01 a 0.5% en masa, preferiblemente de 0.01 a 0.1 % en masa.

Cuando se desea administrar oralmente, normalmente se emplea la composición de la presente invención en una forma de dosis unitaria como un sólido seco, cápsulas, pildoras o tabletas que contienen la cantidad deseada del ingrediente activo. Estas formas de dosis se preparan al mezclar el ingrediente activo de manera uniforme con diluyentes pulverizados, llenadores, desintegradores y/o agentes aglutinantes adecuados, por ejemplo almidón, lactosa, talco, estearato de magnesio, goma vegetal y similares. Dichas formulaciones de dosis unitaria pueden variar ampliamente respecto al peso y contenido del insecticida dependiendo de las especies del animal hospedero a ser tratado, el grado de la infección, las especies de parásitos y el peso corporal del hospedero. Cuando se administra la composición de la presente invención mediante alimentos para animal, la composición se dispersa de manera uniforme en los alimentos, utilizado como un aposito o empleado en la forma de pellas. El contenido de ingrediente activo en el alimento en general está usualmente en la escala de 0.0001 a 0.02% en masa, para lograr el efecto antihelmíntico deseado. Además, se puede administrar a un animal un producto disuelto o disperso en un excipiente portador líquido de manera parenteral en el proventrículo, el músculo o en la tráquea o mediante inyección hipodérmica. Para administración parenteral, el ingrediente activo preferiblemente se mezcla con un aceite vegetal adecuado como aceite de cacahuate o aceite de semilla de algodón. El contenido del ingrediente activo en dicha formulación generalmente es de 0.05 a 50% en peso. Adicionalmente, otra forma de administración deseable es un método en el que las preparaciones se disuelven en un solvente y se administran directamente en un sitio local. Para dicho solvente, se prefiere el uso de un alcohol como etanol, isopropanol, alcohol oléico o alcohol bencílico; un ácido carboxílico como ácido láurico o ácido oléico; un éster como lactato de etilo, miristato de isopropilo o carbonato de propileno; un sulfóxido como sulfóxido de dimetilo; o una amida como N-metilpirrolidona, que se conoce elevan el carácter de absorción percutáneo, individualmente o como un solvente mezclado del mismo. En la presente invención, la cantidad del ingrediente activo a ser utilizado varía dependiendo de la especie del animal a ser tratado y el tipo y grado de infección parasitaria y usualmente está en la escala de 0.01 a 100 mg, preferiblemente de 0.5 a 50.0 mg, por 1 kg de peso corporal del animal y se desea la administración oral. Dicha dosis se puede administrar en una dosis individual o en dosis divididas durante un período relativamente corto como de alrededor de 1 a 5 días. La composición de la presente invención tiene una alta actividad antihelmíntica contra una amplia escala de endo o ectoparásitos y muestra efectos de control excelentes contra diversas enfermedades ocasionadas por insectos y parásitos que son parasitarios sobre animales.

Es decir, la composición de la presente invención ejerce un efecto insecticida excelente contra pulgas que son parasitarias en una mascota o en un humano y extremadamente efectiva como antihelmíntico contra éstas. Como pulgas meta, se pueden utilizar Ctenocephalides felis, Ctenocephalides canis, etc. En el campo de la medicina veterinaria, se puede utilizar la composición de la presente invención contra diversos parásitos dañinos de animales (endo y ectoparásitos), por ejemplo insectos y helmintos. Como ejemplos de estos parásitos de animales, se pueden criar Gasterophiíus spp., Stomoxys spp., Trichodectes spp., Rhodnius spp., Hypoderma spp., Oestrus spp., Haematopinus spp etc. además, la composición de la presente invención tiene una excelente actividad miticida contra Ixodidae, Dermanyssid-ae, Sarcoptidae, Argasidae, Der.anyssid y Psoroptidae, que son parásitos en animales. La composición de la presente invención tiene una excelente actividad parasiticida como antihelmíntico para un animal y un humano, y en particular es efectivo contra nemátodos que infectan el ganado, aves de corral y animales mascota como cerdos, borregos, cabras, vacas, caballos, perros, gatos y pájaros. Se pueden mencionar como tales nemátodos, por ejemplo, Haemonchus, Trichostrongylus, Ostertagia, Nematodirus, Cooperia, Ascaris, Bunostomun, Oesophagostomun, Chabertia, Trichuris, Storongylus, Trichonema, dictyocaulus, Capillaria, Heterakis, Toxocara, Ascaridia, Oxyuris, Ancylostoma, Uncinaria, Toxascaris, y Parascaris. En particular, ciertas especies de los géneros Nematodirus, Cooperia y Oesophagostomum atacan los intestinos, mientras que los del género Haemonchus y Ostertagia viven como parásitos en el estómago, y se pueden encontrar parásitos del género Dictyocaulus en los pulmones, y la composición de la presente invención también exhibe actividad contra éstos. Adicionalmente, se pueden encontrar parásitos que pertenecen a las familias Filariidae y Setariidae en otros tejidos u órganos como el corazón, vasos sanguíneos y tejidos subcutáneo y linfático. La composición de la invención también exhibe actividad contra estos parásitos. La composición de la presente invención exhibe actividad también contra cestoides y tremátodos. Como cestoides, se pueden emplear contra Dipylidium caninum, Taenia taeniaeformis, Taenia solium, Taenia saginata, Hymenolepis diminuta, Moniezia benedeni, Diphyllobothrium latum, Diphyllobothrium erinacei, Echinococcus granulosus, y Echinococcus multilocularis, así como tremátodos, Fasciola hepática, F. gigantica, Paragonimus westermanii, Fasciolopsic bruski, Eurytrema pancreaticum, E.coelomaticum, Clornorchis sinensis, Schistosoma japonicum, S.haematobium y S. Mansoni. La composición de la presente invención también es útil contra parásitos que infectan un humano y como parásitos del sistema digestivo humano, por ejemplo Ancylostoma, Necator, Asdaris, Strongyloides, Trichinella, Capillaria, Trichuris y Enterobius.

El compuesto de la presente invención también muestra la actividad contra parásitos de los géneros Wuchereria, Brugia, Onchoceca, Dirofilaria, Loa, y Dracunculidae de la familia Filariidae, que se encuentran en la sangre u otros tejidos y órganos diferentes al tracto digestivo y que son médicamente importantes, parásitos del género Dracunclidae de la familia Deacunculus y parásitos de los géneros Strongyloides y Trichinella, que en un estado particular pueden ser parásitos fuera del tracto intestinal, aunque esencialmente son parásitos del intestino.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Aunque la composición de la presente invención se explica a continuación a mayor detalle al hacer referencia a los ejemplos de referencia y ejemplos de prueba, la composición de la presente invención no se limita a éstos.

EJEMPLO DE REFERENCIA 1 13-ri-(4-metoxiacetilaminofenil)ciclopentanocarboniloxi1-5-hidroxi- milbemicina A4 (I: R1=Ex R2=MeOCH^CO, compuesto No. 4) (1) 13-G1 -(4-nitrofenil)c¡clopentanocarboniloxn-5-oxomilben¡cina Se añadió ácido trifluorometanosuifónico (0.18 mi) a una suspensión de ácido 1-(4-nitrofenil)ciclpentanocarboxílico (10.13 g, 40.0 mmoles) en diclorometano (150 mi) y se agitó durante 20 minutos en una corriente de nitrógeno. A la solución de reacción transparente obtenida se añadió 15-hidroxi-5-oxomilbemicina A4 (5.57 g, 10.0 mmoles) y posteriormente se continuó agitando durante 30 minutos. Después de completar la reacción, la solución de reacción se vertió en una solución acuosa de carbonato ácido de sodio al 4% y posteriormente se extrajo con acetato de etilo. La solución extraída se lavó con una solución acuosa de carbonato ácido de sodio al 4% y agua, se secó sobre sulfato de magnesio y posteriormente se removió el solvente. Se utilizó el residuo obtenido que contenía 13-[1-(4-nitrofenil)ciclopentanocarboniloxi]-5-oxomilbemicina A4 sin una purificación adicional. (2) 13-? -í4-nitroferi)l)ciclopentanocarbon¡loxil-5-hidroximilbemicina A4 (V: R1=Et, etapa B) Se disolvió el derivado 5-oxo obtenido en la etapa A en metanol (200 mi), al cual se añadieron borohidruro de sodio (1.52 g, 40 mmoles) y aducto de trifluoruro de boro - éter (2 gotas) a -40°C y se agitó durante 10 minutos. Después de completar la reacción, se añadió acetato de etilo (400 mi). La solución mezclada se lavó tres veces con agua y posteriormente se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Se removió el solvente bajo una presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía sobre una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo/hexano=1/1 ) para generar 6.79 g de 13-[1-(4-mnitrofenil)ciclopentanocarboniloxi]-5-hidroximilbemicina A4. Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 8.16 (2H, d, 7.9 Hz), 7.56 (2H, d, J=7.9 Hz), 5.70-5.90 (2H, m), 5.37 (1 H, s), 5.25-5.40 (3H, m), 4.84 (1 H, d, J=10.6 Hz), 4.67 y 4.63 (2H, AB-q, J=14.4 Hz), 4.28 (1 H, m), 4.07 (1 H, s), 3.94 (1 H, d, J=6.4 Hz), 3.55 (1 H, m), 3.25 (1 H, m), 3.02 (1 H, m), 1 .88 (3H, s), 1 .29 (3H, s), 0.99 (3H, t, J=7.3Hz), 0.82 (3H, d, J=6.5Hz), 0.77 (3H, d, J=6.4 Hz). (3) 13-H -(4-aminofenil)ciclopentanocarboniloxn-5-hidroximilbemicina A4 (VI: R =Et. etapa C). El derivado nitro obtenido en el (2) se disolvió en acetato de etilo (100 mi) y metanol (100 mi) y se añadió un complejo de trifenilfosfina de cloruro de níquel (II) (1.12 g, 1 .7 mmoles) a la solución, a la cual se añadió gradualmente nitruro de sodio (100 mg, 2.6 mmoles) durante 10 minutos, bajo enfriamiento con hielo. Después de ser agitado durante 10 minutos, se añadió acetato de etilo (70 mi) a la solución de reacción y la cual fue lavada posteriormente tres veces con agua y se secó sobre sulfato de sodio anhidro y el solvente se removió bajo presión reducida. El residuo obtenido se cristalizó al añadir acetato hexano de etilo para generar 5.87 g de 13-[1-(4-aminofenil)ciclopentanocarboniloxi]-5-hidroximilbemicina A4 como cristal. Punto de fusión: 235-239°C Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 7.16 (2H, d, J=8.6 Hz), 6.65 (2H, d, 8.6 Hz), 5.77-5.84 (2H, m), 5.44 ( H, s), 5.32-5.43 (3H, m), 4.84 (1 H, d, J=10.5 Hz), 4.70 y 4.73 (2H, AB-q, J=14.5 Hz), 4.33 ( H, m), 4.13 (1 H, s), 4.00 (1 H, d, J=6.2 Hz), 3.54 (1 H, m), 3.30 (1 H, m), 3.09 (1 H, m), 1.92 (3H, s), 1.36 (3H, s), 1.01 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.87 (3H, d, J=6.5 Hz), 0.82 (3H, d, J=6.5 Hz). (4) 13-f1-(4-metoxiacetilaminofenil)ciclopentanocarboniloxil-5-hidroximilbemicina A4 (I: R1=Et, R2=MeOCH?CO, compuesto No. 4, etapa D) Se disolvió el derivado amino obtenido en el (3) en tetrahidrofurano (60 mi), seguido por la adición de piridina (0.52 mi, 6.4 mmoles) y cloruro de metoxiacetilo (0.58 mi, 6.2 mmoles) a -30°C y se agitó durante 10 minutos. Después de completar la reacción, se añadió acetato de etilo (250 mi) a la solución de reacción, la cual se lavó sucesivamente con una solución de ácido cítrico de 0.5 moles/L, agua, una solución acuosa de carbonato ácido de sodio 4% y agua, y luego se lavó sobre sulfato de sodio anhidro y el solvente posteriormente se removió bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía sobre una corona de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo/hexano=2/1 ) para generar 4.38 g del compuesto deseado. Espectro R N (400MHz) d (ppm): 8.20 (1 H, s), 7.49 (2H, d, J=8.6 HZ), 7.29 (2H, d, J=8.6 Hz), 5.77 (1 H, m), 5.74 (1 H, m), 5.74 (1 H, m), 5.39 (1 H, s), 5.27-5.37 (3H, m), 4.80 (1 H, d, J=10.5 Hz), 4.68 y 4.64 (2H, AB-q, J=14.5 Hz), 4.28 (1 H, m), 4.08 (1 H, s), 4.01 (2H, s), 3.95 (1 H, d, J=6.4 Hz), 3.54 (1H, m), 3.51 (3H, s), 3.25 (1 H, m), 3.01 (1 H, m), 2.64 (2H, m), 2.32 (1 H, d, J=8.1 Hz), 1.87 (3H, s), 0.96 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.82 (3H, d, J=6.5 Hz), 0.76 (3H, d, J=6.5 Hz).

EJEMPLO DE REFERENCIA 2 13-ri-(4-acetilaminofenil)cic>opentanocarboniloxn-5-h¡droximilbemicina A4 (I: R1=E R2=MeCO, Compuesto No. 1) En la misma manera como en el ejemplo de referencia 1 (4) excepto por el uso de anhídrido acético en lugar de cloruro de metoxiacetílo en el ejemplo de referencia 1 (4), se produjo el compuesto de título (producción en la etapa D: 89.8%). Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 7.41 (2H, d, J=8.6Hz), 7.27 (2H, d, 8.6 Hz), 5.70-5.80 (2H, m), 5.39 (1 H, s), 5.25-5.40 (3H, m), 4.80 (1 H, d, J=10.6 Hz), 4.64 y 4.68 (2H, AB-q, J=14.2 Hz), 4.28 (1H, dd, J=6.3 y 8.4 Hz), 4.07 (1H, s), 3.95 (1H, d, J=6.3 Hz), 3.54 (1 H, m), 3.25 (1 H, m), 3.01 (1 H, m), 2.61 (2H, 2), 2.33 (1H, d, J=8.4 Hz), 1.87 (3H, s), 1.58 (3H, s), 0.96 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.82 (3H, d, J=6.5 Hz), 0.76 (3H, d, J=6.5 Hz).

EJEMPLO DE REFERENCIA 3 13-n-(4-cianoacet¡laminofenil)ciclopentanocarboniloxil-5- hidroximilbemicina A4 (I: R =E R2=NCCH?CO, Compuesto No. 3) En la misma manera que en el ejemplo de referencia 1 (4) excepto por el uso de cloruro de cianoacetilo en lugar de cloruro de metoxiacetilo en el ejemplo de referencia 1 (4), se produjo el compuesto de título (producción en la etapa D: 89.8%). Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 7.68 (1 H, s), 7.42 (2H, d, J=8.7 Hz), 7.33 (2H, d, 8.7 Hz), 5.72-5.77 (2H, m), 5.39 (1H, s), 5.28-5.37 (3H, m), 4.81 (1H, d, J=10.6 Hz), 4.64 y 4.68 (2H, AB-q, J=14.5 Hz), 4.29 (1H, m), 4.07 (1 H, s), 3.95 (1H, d, J=6.2 Hz), 3.55 (2H, s), 3.52 (1H, m), 3.25 (1H, m), 3.01 (1H, m), 2.62 (2H, 2), 2.32 (1H, d, J=8.2 Hz), 1.87 (3H, s), 0.96 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.82 (3H, d, J=6.5 Hz), 0.76 (3H, d, J=6.5 Hz).

EJEMPLO DE REFERENCIA 4 13-G1 -(4-metanosulfonilaminofenil)ciclopentanocarboniloxn-5- hidroximilbemicina A4 (l: R =E R2=MeSOg, Compuesto No. 5) En la misma manera que en el ejemplo de referencia 1 (4) excepto por el uso de cloruro de metanosulfonilo en lugar del cloruro de metoxiacetilo en el ejemplo de referencia 1 (4), se provee un compuesto de título (producción en la etapa D: 88.2%). Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 7.32 (2H, d, J=8.7 Hz), 7.14 (2H, d, 8.7 Hz), 6.47 (1 H, s), 5.70-5.80 (2H, m), 5.39 (1 H, s), 5.25-5.37 (3H, m), 4.80 (1 H, d, J=10.6 Hz), 4.64 y 4.68 (2H, AB-q, J=14.0Hz), 4.28 (1H, dd, J=6.4 y 8.2Hz), 4.07(1 H, s), 3.95 (1 H, d, J=6.4Hz), 3.54 (1 H, m), 3.25 (1 H, m), 3.01 (1 H, m), 2.93 (3H, s), 2.62(2H, 2), 2.33 (1 H, d, J=8.2 Hz), 1.87(3H, s), 0.96 (3H, t, J=7.3Hz), 0.82(3H, d, J=6.5Hz), 0.74 (3H, d, J=6.5 Hz).

EJEMPLO DE REFERENCIA S 13-G1 -(4-metoxicetilaminofenil)ciclopentanocarbon¡lox¡1-5- (1)13-f 1 -(4-aminofenil)c¡clopentanocarboniloxn-5-hidroximilbemicina A3 (VI: R1= e, etapas A a C) De la misma manera que en los ejemplos de referencia 1 (1) a (3) excepto por el uso de 15-hidroxi-5-oximilbemicina A3 en vez de 15-hidroxi-5-oxomilbermicina A4 en el ejemplo de referencia 1 , se obtuvo T3-[1-(4-aminofeniI)ciclopentanocarboniloxi]-5-hidroximilbemicina A3. Espectro RMN (400MHz) d (ppm): 7.11(21-1, d, J=8.5Hz), 6.60(2H, d, J=8.5Hz), 5.71-5.78 (2H, m), 5.38 (1 H, s), 5.25-5.40 (3H, m), 4.80 (1 H, d, J=10.6Hz), 4.65 y 4.68 (2H, AB-q, J=13.9Hz), 4.28 (1H, m), 4.08 (1H, s), 3.95 (1H, d, J=6.1Hz), 3.59 (2H, broad-s), 3.52 (1H, m), 3.18-3.26 (2H, m), 2.57 (2H, m), 1.87 (3H, s), 1.31 (3H, d, J=6.4Hz), 0.83 (3H, d, J=6.5Hz), 0.77 (3H, d, J=6.6Hz). ( 1 )13-f 1 -(4-aminofeni0ciclopentanocarboniloxn-5-hidroximilbemicina A3 (VI: R1=Me R2=MeOCH?CO, compuesto No. 9, etapa D) Utilizando el derivado amino que se obtuvo en (1) se obtuvo el compuesto del título en la misma manera que el ejemplo de referencia 1 (4) (producción: 92.3%).

Espectro R N (400MHz) d (ppm):8.21 (1 H, s), 7.49(2H, d, J=8.6Hz), 7.29(2H, d, J=8.6Hz), 5.71-5.78 (2H, m), 5.38 (1H, s), 5.25-5.36 (3H, m), 4.80 (1 H, d, J=10.6Hz), 4.64 y 4.68 (2H, AB-q, J=13.7Hz), 4.28 (1 H, m), 4.07 (1 H, s), 4.01 (2H, s), 3.95 (1H, d, J=6.3Hz), 3.51 (3H, s), 3.50 (1 H, m), 3.18-3.26 (2H, m), 2.61 (2H, m), 1.87 (3H, s), 1.28 (3H, s), 1.13 (3H, d, J=6.3Hz), 0.83 (3H, d, J=6.6Hz), 0.76 (3H, d, J=6.5Hz).

EJEMPLO DE PRUEBA 1 Prueba oral Se encapsularon el compuesto (5 mg/kg) del ejemplo de referencia 1 y praziquantel (1.25 mg/kg) en una gelatina a una cantidad predeterminada para preparar una formulación para la prueba oral. Por otra parte, se prepararon formulaciones como controles para utilizar cada uno de los compuestos del ejemplo referencia 1 solo y fipronilo solo para llevar a cabo la prueba. La formulación se administró oralmente una vez a perros (dos perros en cada ubicación de prueba) infectados naturalmente con Dipilidium caninum y Toxocara canis. Por otro lado, se confirmó la infección con Dipilidium caninum mediante la excreción del proglótido de Dipilidium caninum en las heces tres días antes de la administración de los fármacos. Se confirmó la infección con Toxocara canis mediante la excreción de huevos de Toxocara canis en las heces inmediatamente antes de la administración de los fármacos. En el décimo día después de la administración de los fármacos, los perros fueron sometidos a postmortem para contar el número de Dipilidium caninum y Toxocara canis sobrevivientes. Como resultado, el uso simultáneo del compuesto en el ejemplo de referencia 1 y praziquantelos fue efectivo para exterminar dos tipos de parásitos de Dipilidium caninum y Toxocara canis. En contraste, el uso individual del compuesto en el ejemplo de referencia 1 fue efectivo para exterminar Toxocara canis; sin embargo, fue inefectivo para exterminar Dipilidium caninum. Adicionalmente, el uso individual de praziquantelos fue efectivo para exterminar Dipilidium caninum; sin embargo, fue inefectivo para exterminar Toxocara canis.

EJEMPLO DE PRUEBA 2 Prueba en punto específico (prueba de exterminación en garrapatas) Se mezclaron los compuestos (10 g) del ejemplo de referencia 1 y fipronilo (3.8g). Esta mezcla se disolvió en un solvente mezclado (9:1 ) de alcohol bencílico y carbonato de propileno para que totalizar un volumen de 100 mi, y además se adicionó 0.05% de BHT para preparar una formulación para la prueba en el punto especifico. Adicionalmente, se prepararon formulaciones al utilizar cada uno de los compuestos del ejemplo de referencia 1 y fipronilo independíente para llevar a cabo la prueba.

La formulación descrita anteriormente para la prueba en el sitio específico se proporcionó en gotas en la parte posterior del cuello de cada perro (dos perros en cada ubicación de prueba) infectados naturalmente con garrapatas con una dosis de 5 mg/kg del compuesto del ejemplo de referencia 1. En cada perro, se examinó la infección con garrapatas tres días después de la administración gota a gota. Como resultado, el uso simultáneo del ejemplo de referencia 1 y fipronilo fue efectivo para tratar la infección con garrapatas a pesar de una pequeña dosis terapéutica en fipronilo. En contraste, el uso individual del compuesto del ejemplo de referencia 1 fue inefectivo para tratar la infección con garrapatas. Adicionalmente, el uso individual de fipronilo en el que la dosis terapéutica fue pequeña, fue inefectiva para tratar la infección con garrapatas.

EJEMPLO DE PRUEBA 3 Prueba en el sitio específico (exterminación sobre pulgas) Se utilizaron perros beagle (4 a 7 meses de edad, cuatro perros) infectados previamente con pulgas de gato para contar el número de pulgas recolectadas de la superficie del cuerpo de cada perro tres días después de la infección y para determinar la relación de infección (usualmente 70 a 90%) de cada perro. De la misma manera que en el ejemplo de prueba 2, la formulación para la prueba de sitio específico se administró gota a gota en la parte interescapular de cada perro con una dosis de 5 mg/kg del compuesto del ejemplo de referencia 1. En el 7o día, día 21 y 28 después de la administración, cada perro fue infectado con 100 pulgas de gato y se contó el número de pulgas recolectadas de la superficie del cuerpo del perro en el tercer día después de la infección. Se determinó una relación de exterminación a partir de una relación entre las relaciones de recolección antes y después de la administración. Como resultado, no se recolectaron pulgas de la superficie del cuerpo del perro las pruebas en el día 7, 21 y 28 después de la administración, y la relación de exterminación fue de 100% incluso 28 días después de la administración. En contraste, no se observó un cambio significativo de la relación de infección para los cuatro perros en un grupo que no recibió administración llevada a cabo simultáneamente.

Aplicabilidad industrial La composición de la presente invención tiene una alta actividad de exterminación contra una amplia escala de endo y ectoparásitos y muestra efectos de control excelentes contra diversas lesiones para enfermedades ocasionadas por insectos y parásitos que son parasitarios en animales.

Claims (6)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Una composición antihelmíntica que comprende uno o más tipos de primeros ingredientes seleccionados a partir de derivados de milbemicina que consisten de un compuesto representado por la fórmula (I): en donde R1 representa un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo isopropilo o un grupo s-butilo; y R2 representa un grupo acetilo, un grupo metoxiacetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo cianoacetilo o un grupo metanosulfonilo o sales de los mismos, y uno o más tipos de segundos ingredientes seleccionados del grupo que consiste de prazinquantelos, fipronilos, bencimidazoles y neonicotinoides, como ingredientes activos.

2.- La composición antihelmíntica de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque R1 es un grupo metilo o un grupo etilo.

3. - La composición antihelmíntica de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada además porque R2 es un grupo metoxiacetilo.

4. - La composición antihelmíntica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque los segundos ingredientes son praziquantelos o fipronilos.

5. - La composición antihelmíntica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque los segundos ingredientes son praziquantel, epsiprantel o fipronilo.

6. - El uso de la composición antihelmíntica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para la preparación de un medicamento oral o local para exterminar endo y ectoparásitos.