TWI245041B - C-4 carbonate taxanes - Google Patents

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1245041 A7 B7 五、發明説明（1 ) 發明背景 發明領域 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明係有關抗腫瘤化合物。更特定言之，本發明提 出新穎抗口服活性紫杉酚（paclitaxel)衍生物，其醫藥調合 物，及彼等作爲口服抗腫瘤劑之用途。 背景技藝 紫杉酚爲從太平洋紫杉，太平洋短葉紫杉（Taxus breWfoHa)，的樹皮萃取出之天然物且爲抗癌藥TAXOL®的 活性組成分。其業經證明在活體內（in vivo)動物模型中具有 優良的抗腫瘤活性，且最近的硏究已解開其不特的作用方 式，其中涉及異常性微管蛋白聚合和有絲分裂的破壞。其 在臨床上用來對抗許多種人類癌症。其在治療上與商業上 都是重要的癌症藥。有眾多的臨床實驗正進行著以期擴展 及增加此藥劑對於治療人類增生性疾病之能力。TAXOL® 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 床硏究的結果已爲許多學者所評述過。一份由許多不同學 者的文章之非常近時編撰包含在Seminars in Oncology 1 999, 26 (1，Suppl 2)的整個發行本中。其他例子爲例如Rowinsky et al. in TAXOL®: A Novel Investigational Antimicrotubule Agent, J. Natl. Cancer Inst, 82:pp 1247-1259, 1990; by Rowinsky and Donehower in”The Clinical Pharmacology and Ues of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics, ”Pharmac. Ther.，52:35-84，19 91; by Spencer and Faulds in” P ac lit axel, A Reriew of its Pharmacodynamic and 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -4- 1245041 A7 B7 五、發明説明b )

Pharmacokinetic Properties and Therapeutic Potential in the Treatment of Cancer, Drugs, 48(5)794-847, 1994; by K.C. Nicolaou et al. In”Chemistry and Biology of TAX〇L®， “Angew. Chem·，Int. Ed. Engl” 33: 1 5-44, 1 994; by F. A. Holmes, A. P. Kudelka, J. J. Kavanaugh, Μ. H. Huber, J. A. Ajani, V. Valero in the book “Taxane Anticancer Agents Basic Science and Current Status” edited by Gunda I. Georg,

Thomas T. Chen, Iwao Ojima, and Dolotrai M. Vyas, 1 995, American, American Chemical Society, Washington，DC，31-57; by Susan G. Arbuck and Barbara Blaylock in the book ”丁AX〇L® Science and Applications” edited by Mathew Suffiness, 1995，CRC Press Inc.，Boca Raton, Florida, 379-4 16;以及其中所引述的參考文獻。 紫杉酚的一種半合成類似物，稱爲do ce tax el者也經發 現具有良好的抗腫瘤活性且爲市售抗癌藥TAXOTERE®的活 性成分。參看，Bioligically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substituents and Variable C-2’ Configuration, J. Med. Chem., 34, pp 1176-1184(1991); Relationships between the Structure of Taxol Analogues and Their Antimitotic Acitivity, J. Med. Chem., 34, pp 992-998 (1991)•一份爲 Jorge E. Cortes and Richard Pazdur 所做的對 於TAXOTERE®所具臨床活性之評論載於Journal of Clinical Oncology 1 995，13(10)，264 3 to 2 6 55 之中。下面顯示出紫杉 酚和docetaxel的構造及傳統上對屬於此類分子的編號系統 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ #·. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -5- 1245041 A7 B7 五、發明説明) ;此等編號系統也用於本申請案中。 0

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 紫杉酚（TAXOL®): R = Ph; R，=乙醯基 docetaxel(TAX〇TERE®): R =第三丁氧基；r，=氫 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 證明紫杉酚不具有口服活性的充足證據可從下面發明 人 Samuel Broder，Kenneth L. Duchin and Sami Selim 的 PCT 專利申請案W098/538 1 1及其中所引參考文獻脂引文中找到 ，其述及”紫杉酚於口服時的吸收非常地差（低於1 %)” ；參 看 Eisemann et al·，Second NCI Workshop on Taxol and Taxus (Sept. 1 9 92); Suffness et al·，In TAX〇L Science and Applications (CRC Press 1995)· Eisemann et al.指出紫杉酚 於經口給用時具有0%的生物利用率且Suffness et al.報導出 用紫杉酚經口投藥似乎是不可行者，因爲在經口投以高達 160毫克/公斤/天仍未有抗腫瘤活性之跡象之故。再者，至 今仍未開發出有效的方法來有效地給用口服紫杉酚或展現 出抗腫瘤活性的其他紫杉烷類或紫杉酚類似物例如 doce tax el (亦即，增加紫杉酚口服生物利用率的方法）。爲 此之故，紫杉酚至今尙未經口給人類患者服用，且確定仍 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) -6- 1245041 A7 B7 五、發明説明㉘） 未用於治療紫杉酚-反應性疾病的過程中”。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 另一份由 J. Terwogt et al.在 The Lancet，July 25th 1 99 8, Vol. 45 2 page 285中的報導也述及紫杉酚在經口投藥 後的低生物利用率。而在我們自己的硏究中，將紫杉酚已 高達1 60毫克/公斤/注的劑量給鼠類（小鼠）腫瘤模型（sc ¥109)經口投藥也沒有任何效力跡象因而斷定，如31^〖1^83 所作者一般，進一步的劑量也不會提供效力，即使尙未達 到毒性劑量亦然。更且，我們自己也嘗試過經給用紫杉酚 來對抗經移植到無胸腺小鼠或大鼠體內的人類.腫瘤異體移 植物，至今仍未成功過。· 本發明的意圖爲說明C-4甲基碳酸酯紫杉烷類似物， 其具有驚人的口服活性且因而可用來在口服之後對抗增生 性疾病。下面述及有關本發明的某些背景技藝。 於技藝中述及在C-4羥基改質的某些紫杉烷衍生物。 給Poss et al.的美國專利第5,808，102號及PCT公開的 專利申請案W0 94/14787包含在C-4位置有改質的紫杉爲類 似物。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Gunda I. Georg et al.在 Tetrahedron Letters, 1 994, 3 5(48) 893 1 -8 934中述及C-4酯類似物的合成。 S. Chen et al.,在 Journal of Organic Chemistry 1 9 94, 59(21)，6156-8中述及C-4環丙基酯酯類似物的合成。 在1 998，十一月24日核發給Chen, Shu-Hui的美國專 利第5,840,929號涵蓋C4甲氧基醚衍生物。一份相同主題的 文章出現於： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X297公釐） 一 1245041 A7 B7 五、發明説明)

Chen，Shu-Hui. First syntheses of C-4 methyl ether paclitaxel analogs and the unexpected reactivity of 4-deacetyl -4-methyl ether baccatin III. Tetrahedron Lett. 1 996，37(23), 3935-3938. 下列參考文獻討論到許多C-4酯或碳酸酯類似物：

Chen, Shu-Hui; Wei, Jian-Mei; Long, Byron H.; Fairchild, Craig A.; Carboni, Joan; Mamber, Steven W.; Rose, William C.; Johnston, Kathy; Casazza, Anna M.; et al. Novel C-4 Paclitaxel (Taxol) analogs: potent antitumor agents. Bioorg. Med. Chem. Lett· 1 995, 5(22), 274 1 -6. C-4氮丙啶基胺基甲酸酯類似物在下文中述及：Chen, Shu-Hui; Fairchild, Craig ; Long, Byron H. Synthesis and Biological Evaluation of Novel C-4 Aziridine-Bearing Paclitaxel (Taxol) analogs. J. Med. Chem. 1995，3 8(12), 2263-7. 下列論文述及據稱對C-4類似物製備有潛在用處的反 應或轉換： A new method to modify the C-4 position of 10-deacetyl baccatin III. Uoto, Kouichi; Takenoshita, Haruhiro ; Ishiy ama, Takashi; Terasawa, Hirofumi; Soga, Tsunehiko. Chem. Pharm. Bull·· 1 997, 45(1 2)，2093-2095.

Samaranayake Gamini; Neidigh，Kurt A.; Kingston,

David. G.; I. Modified taxols, 8. Deacylation and reacylation of Baccatin III. J. Nat. Prod. 1 993, 56(6), 884-98. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX 297公釐） - m n.^ Jii ϋϋ - J— ϋϋ ϋϋ I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -8- 1245041 A7 B7 五、發明説明（6 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

Datta, Apurba; Jayasinghe, Lalith R.; Georg, Gunda I. 4-Deacetyltaxol and 10-Acetyl-4-deaacetyltaxoltere: Synthesis and Biological Evaluation. J. Med. Chem. 1 994, 37(24), 4258-60. 即使有上述C-4類似物或製備彼等的方法，仍未提出 口月艮活1生C-4類仏J物之證據者。TAXOL®禾口 TAXOTERE®兩 者在人類和動物模型中都沒有口服活性，如下面述及紫杉 烷和口服調制劑的先前技藝所提及者。因此，技藝中至今 爲止都沒有提及C-4紫杉烷應該不同於其他紫杉烷且因而 彼等不應具有口服活性，就我們所知，技藝中都沒有特定 地鑑定出可能具有口服用處的任何C-4類似物者。本發明 於本專利申請案中鑑定出新穎的C - 4類似物，其由於彼等 的獨特取代而令人訝異地具有口服活性。 下列參考文獻述及口服活性紫杉烷的方法或可行方法 〇 也有報導在調制劑存在中給用紫杉烷之方法用以在口 服後增加血漿中的紫杉烷含量： 經濟部智慧財產局員X消費合作社印製

Terwogt, Jetske M. Meerum; Beijnen, Jos H.; Ten Bokkel Huinink, Wim W.; Rosing, Hilde; Schellens, Jan Η. M. Coadministration of cyclosporin enables oral therapy with paclitaxel. Lancet (1998), 352(9124), 285.

Terwogt, Jetske M. Meenim; Malingre, Mirte M.; Beijnen, Jos H.; '、

Huinink, Wim W. ten Bokkel; Rosing, Hilde; Koopman, Franciska J.; Van Tellingen, Olaf; Swart, Martha; Schellens, Jan Η. M. Coadministration of oral cyclosporin A enables oral therapy with paclitaxel. Clin. Cancer Res. (1999), 5(11), 3379-3384. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2l〇x 297公釐） -9- 1245041 A7 B7 _—— 五、發明説明6 )

Hansel, Steven B. A method of making taxanes orally bioavailable by coadministration with cinchonine. PCT Int. Appl. WO 9727855 published August 7, 1997. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Broder, Samuel; Duchin, Kenneth L.; Selim, Sami. Method and compositions for administering taxanes orally to human patients using a cyclosporin to enhance bioavailability. PCT Int. Appl. WO 9853811 published December 3, 1998. 這些報導都不包含抗腫瘤效力數據，但紫杉烷在血漿中的 存在可以外推而顯示彼等對於抗癌症用處的潛在性。 於先前技藝中出現至少一份報告係提及前體藥物 (prodrugs)在臨床前動物模型中的口服活性者：Scola，Paul M.; Kadow, John F.; Vyas, Dolatrai M. Preparation of paclitaxelprdrug derivatives.歐洲專利申請 EP 747385 ’ 1 996，十二月11日公開。具有口服效力的前體藥物所具口 服生物利用率並未揭示出且沒有出現這些化合物進展到人 類之進一步報導。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 最近，有一篇述及在小鼠體內具有口服抗腫瘤活性的 紫杉烷類似物（IDN-5109)的摘要揭示於the American Association of Cancer Researchers in Philadelphia in 1 9 99 之 中。該摘要的參考文獻爲：

Pratesi G. Polizzi D, Totoreto M, Riva A，Bombardelli E，Zumino F: IDN5109 a new taxane acative after oral administration. Proc. Am. Assoc Cancer Res 1999 40 Abs 1 905，Istituto Nazionale Tumori, 20 1 33 Milan and Indena SpA，20 139, Milan Italy.該化合物的構造頗不同於本發明所 述化合物。不同於本發明所涵蓋的化合物者，IDN-5109係 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） '' -10- 1245041 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（δ ) 衍生自14- /3 -羥基漿果赤黴素ΠΙ且在其C_位置的羥基上有 一乙酸酯。 爲完整起見提出下面兩份有關此化合物所具丨V活丨生之 參考文獻： 4 \ Nicoletti ML, Rossi C, Monardo C, Stura S, Morazzoni Bombardelli E, Valoti G, Giavazzi R.: Antitumor efficacy of a paclitaxel analogue, IDN5109, on human ovarian carcinoma xenografts with different sensitivity to paclitaxel. Proc Am Assoc Cancer Res 1999 40 Abs 1910 [Evals+citations]. Polizzi, Donatella; Pratesi, Graziella; Tortoreto, Monica; Supino, Rosanna; Riva, Antonella; Bombardelli, Ezio; Zunino, Franco. A novel taxane with improved tolerability and therapeutic activity in a panel of human tumor xenografts. Cancer Res. 1999, 59(5), 1036-1040. 雜 紫杉酚爲一種高度時程依賴性藥物，其在傳統上受益 於延長的腫瘤暴露時間。此點係與紫杉酣的作用機制相關 ，因紫杉烷只辨識且結合到微管蛋白的聚合狀態，而其僅 發生於癌症細胞循環的短暫期間。目前所用的靜脈內注輸 (1 -3小時）如今已被順利地接受而有效益且免除拖長的（>24 小時）連續時程。不過，口服紫杉烷可以提供一種令人順應 且具有成本效益的完成此種延長暴露持續期之方法。最近 ，經由使用重複的每週一次給用中等（而非最大可耐受）劑量 TAX0L®也已經證明有臨床用處而口服紫杉烷對於此種拖長 式服藥法應該是理想者。紫杉烷甩途的其他可疑臨床徵狀（ 亦即，風濕性關節炎、複發性硬化症）也將受益於口服紫杉 烷的可取用性。一經口給藥有效型紫杉烷因爲有許多時程 安排途徑可再探討，而可同時提供作爲現行臨床紫杉烷用 -1 I — — -I · (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 續衣. 订填寫太

、1T ¢. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -11 - 1245041 A7 B7 五、發明説明) 法的非經腸方式之吸引性替代法，及潛在的治療優點。 因此’顯然地，有極大的需要來鑑定出相對於非經腸 給藥的紫杉酚而言同時具有良好α服生物利用率及良好口 服效益之紫杉院。 發明槪述 本發明係有關式I所表新穎抗腫瘤化合物，或其醫藥可 接受鹽類 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) R1 R2

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 其中 R爲苯基、異丙基、或第二丁基； R1 爲 _C(〇）RZ 其中 Rz 爲（CH3)3C〇-、（CH3)3CCH2-、 CH3(CH2)3〇-、環丁基、環己氧基、或（2-呋喃基）； R2爲。113以〇）〇_。 本發明的另一部份爲提出一種抑制哺乳動物宿主體內 腫瘤生長之方法，其包括給該哺乳動物服用一抗腫瘤有效 量的是I化合物，或其醫藥可接受鹽類。較佳者，該給藥方 法係口服。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -12- 1245041 Λ7 B7 五、發明説明（10 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明的又另一部份爲提出一種醫藥調合物，其包括 一抗腫瘤有效量的是I化合物，或其醫藥可接受鹽類，組合 著一或多種醫藥可接受的載劑、賦形劑、稀釋劑或佐劑。 發明之詳細說明 於本發明此揭示內容中，除非文中另外明確地載明， 否則都採用下面的定義。於本申請案中，一旦定義好的符 號’除非後來另外重新定義，否則在本申請案全文中都保 持相同的定義' . 符號” C ”後面的下附數字係界定一特別的基可能含有的 碳原子數。例如，”CΗ烷基”意指具有1至6個碳原子的直 鏈型或支鏈型飽和碳鏈；其例子包括甲基、乙基、正丙基 、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁塞、正戊 基、第一戊基、異戊基和正己基。依上下文而定，” C 1 _ 6院 基”也可能指稱橋聯著兩個基的”cv6伸烷基”；其例子包括丙 院-1，3 -一基、丁院-1，4 -二基、2 -甲基-丁院-1，4 -二基、等。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ”C2_6烯基”意指具有至少一個碳-碳雙鍵，且具有2至6個碳 原子的直鏈型或支鏈型碳鏈；其例子包括乙烯基、丙烯基 、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基和己烯基。依上 下文而定，”Cu烯基”也可能指稱橋聯著兩個基的”Cu伸烯 基”；其例子包括伸乙-1,2-二基（乙烯基）、2-甲基-2-丁烯-1，4-二基、2-己烯-1，6-二基、等。”C2_6炔基”意指具有至少 一個碳-碳參鍵，且具有2至6個碳原子的直鏈型或支鏈型 碳鏈；其例子包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、和己炔基。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） -13- 1245041 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（n ) 如本文中所用者，第三基氧基（t-butyloxy)與第三丁氧基（t-butoxy)係可互換地使用者。 “芳基”指具有6至1 0個碳原子的芳族烴；其例子包括 苯基和萘基。”經取代芳基”係指獨立地含有1至5個（但較 佳者1至3個）選自下列之中的取代基之芳基：Cu烷醯氧基 、羥基、鹵素、CV6烷基、三氟甲基、CV6院氧基、芳基、 C2-6烯基、Cm烷醯基、硝基、胺基、氰基、疊氮基、Cm 烷胺基、二-CV6烷胺基、和醯胺基。”鹵素”意爲氟、氯、 漠和職。 “雜芳基”意指至少一個且多達4個選自氧、硫和氮之中 的非-碳原子之五-或六-員芳族環。雜芳基的例子包括噻吩 基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噚唑 基、異噚唑基、三唑基、噻二唑基、噚二唑基、四唑基、 噻三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡哄基、嗒畊基、三畊基、 四畊基、和類似的環。 “羥基保護基”包括，但不限於、醚類例如甲基、第三丁 基、苄基、對-甲氧基苄基、對-硝基苄基、烯丙基、三苯甲 基、甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、乙氧基乙基、1_甲 基-1-甲氧基乙基、四氫哌喃基、四氫硫哌喃基、二烷基矽 烷基醚、例如二甲基矽烷基懂、與三烷基矽烷基醚、例如 •三甲基矽烷基醚、三乙基矽烷基醚、和第三丁基二甲基矽 烷基醚、二烯丙基烷氧基矽烷基醚，例如二異丙基甲氧基 矽烷基醚等醚基；酯類例如苯甲醯基、乙醯基、苯乙醯基 、甲醯基、一-、二-、和三-鹵素乙醯基；及碳酸酯例如甲 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -14- 1245041 A7 _ B7 五、發明説明（12 ) 基、乙基、2，2，2-三氯乙基、烯丙基、；基、和對-硝基苯 基。羥基保護基的其他例子可在標準參考著作找到例如 Greene and Wut s, Protective Groups in Organic Synthesis, 3 rd Ed·，1999，John Wiley & Sons，New York。 “Ph”意指苯基；”iPr”意指異丙基。 本文所述經取代烷基、烯基、炔基、芳基和雜芳基及 部份體所含取代基可以爲烷基、烯基、炔基、芳基和雜芳 基及/或可以含有氮、氧、硫.、鹵素且包括’例如，低碳數 烷氧基如甲氧基、乙氧基、丁氧基，鹵素如氯或氟，硝基 ，胺基，和酮基。 ‘ 較佳的具體實例爲下面表I所示的式I化合物，或其醫 藥可接受的鹽類。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 張 紙 本 A4 \)/ Ns C /_\ 準 標 家 國 國 中 用 適 一衊 7^ 9 2 1245041 A7 ___ B7 五、發明説明（14 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 具有通式I的化合物針對異常性細胞增生顯示出明顯的 抑制效應，且具有治療性質而使其能夠治療具有與異常性 細胞增生相關的病學狀況之患者。此外，彼等化合物擁有 明顯的口服生物利用率因而能夠在經口給藥之後又發出彼 等的正面治療效用。 病學狀況包括在各種組織及/或器官內的惡質性或非-惡 質性細胞增生，包括在，非限制地，肌肉、骨骼、及/或結 締組織；皮膚、腦、肺、和性器官；淋巴及/或腎系統；乳 房細胞及/或血細胞；肝、消化系統、和胰臟；以及甲狀腺 及/或腎上腺。彼等病學狀況也可以包括牛皮廯；固體腫瘤 ;卵巢、乳房、腦、前列腺、結腸、胃、腎及/或睪九癌， 卡波西（Karposi’s)肉瘤；膽管癌；絨毛膜癌；神經母細胞瘤 ;Wilm’s腫瘤；Hodgkin’s病；黑瘤；複發性骨髓瘤；慢 性淋巴細胞性白血症；以及急性或慢性粒性細胞性淋巴瘤 〇 經濟部智慧財產局員X消費合作社印製 本發明新穎化合物特別可用來治療非-Hodgkin’s淋巴 瘤、複發性骨髓瘤、黑瘤、及卵巢、尿道上皮、食道、肺 ..、和乳癌。該化合物可用來預防或延緩彼等病學狀況的出 現或復發’或予以治療。該等化合物可作爲抗血管生成抑 制劑而用爲抗癌活性或異常性創口癒合或與血管形成相關 的其他過度增生性疾病。 此外，式I化合物可以用來治療及/或預防多囊性腎病 (PDK)和風濕性關節炎。本發明化合物也可以用來治療阿茲 海默爾氏症（Alzheimer’s disease)或帕金森氏症或複發性硬 本紙張尺度適财關家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 师 -17- 1245041 A7 B7 五、發明説明（16 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 漿果赤黴素III衍生物（II)可以經由使用目前已爲技藝 中熟知的任合方法接著到側鏈上。在本發明揭示內容和 Tetrahedron, 48, No. 34, pp 6985-70 1 2 ( 1 992)中引述的許多 參考文獻都述及多種方法藉以用式IV氮雜環丁烷酮類與漿 果赤黴素III衍生物的（C) 13-羥基或其金屬烷氧化物反應以 得到具有各種（O—丨3側鏈的紫杉烷類似物。於流程1的步驟 (a)中，有利者爲在偶合之前將在（C )-13碳上的羥基轉化爲 金屬院氧化物。合意金屬烷氧化物的形成可以經由將式II 化合物與強金屬鹼例如二異丙基胺化鋰、C1-6烷基鋰、雙（ 三甲基矽烷基）胺化鋰或鈉或鉀、苯基鋰、氫化鈉、氫化鉀 、氫化鋰，或類似的鹼等反應而完成。例如在需要烷氧化 鋰時，可以用式II化合物與正丁基鋰在惰性溶劑例如四氫 呋喃中反應。透過Holton方法將經取代漿果赤黴素與經適 當取代內醯胺連接的例子可參看U.S. 5，1 75,3 25; U.S. 5,466,834;U.S. 5,229,526; U.S. 5,274,124; U.S. 5,243,045; U.S. 5,227,400; U.S. 5,3 36,785;和 U.S.專利 5,274,580; U.S. 5,294,637;或EP 0 5 90 267 A2。使用/3 -內醯胺來製備其他 .經取代紫杉烷衍生物的其他例子載於PCT W094/14787之中 。該專利也述及將經取代異絲胺酸側鏈接著到可用於本發 明化合物中的經取代漿果赤黴素上之其他方法。相同的替 代方法載於 Kingston et al. Tetrahedron Lett. (1994)，35(26), 44 8 3 _4的另一文章中。有關將側鏈接著到漿果赤黴素上的 其他方法之進一步資訊載於10/2/96公開的Thottathil, et al· 歐洲專利申請EP 735036之中。 本紙張尺度適用中周國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) -19- 1245041 A7 B7 五、發明説明（17 ) 流程1 R2

、、、R -N 、R1 步驟（a

步驟(b ) 步驟（c ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) R2

ocooch3 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -20- 1245041 A7 B7 五、發明説明（18 流程2

解保護 步驟d R2

R1連接

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 如本文中所用者，^和R4皆爲習用的羥基保護基。習 用的羥基保護基爲可以用來阻斷或保護住羥基官能的部份 體’且彼#皆爲誰於此技者所熟知者。較佳者，該等基爲 可以用不會導致分子的其餘部份有明顯破壞之方法予以移 除掉者。此等可輕易移除掉的羥基保護基之例子包括氯乙 醯基、甲氧基甲基、1-甲基-1-甲氧基乙基、四氫哌喃基、 四氫硫哌喃基、二烷基矽烷基醚、例如二甲基矽烷基醚、 與三烷基矽烷基醚、例如三甲基矽烷基醚、三乙基矽烷基 醚、和第三丁基二甲基矽烷基醚、二烯丙基烷氧基矽烷基 醚，例如二異丙基甲氧基矽烷基醚等醚基；2,2,2-三氯乙氧 基甲基、2,2,2-三氯乙氧羰基（或簡言之三氯乙氧羰基），苄 氧羰基和類似者。可以使用的其他適當羥基保護基載於 ”Protecting Groups in Organic Synthesis”，Third Ed., by 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -21 - 1245041 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

五、發明説明（19 ) Theodora W. Greene and Peter G. M. ( 1 999, John Wiley & Sons，New York)的第2章中。在文獻中常用到的式IV化合 物之保護基爲三院基砂院基。R3的最佳保護基包括1 -甲基-1-甲氧基乙基（MOP)、一種三烷基矽烷基醚，或二烷基烷氧 基矽烷基醚例如二異丙基甲氧基矽烷基醚。R4的最佳保護 基包括二烷基烷氧基矽院基醚例如二異丙基甲氧基矽烷基 醚，不過三烷基矽烷基醚或碳酸酯例如苄基碳酸酯也可爲 較佳者。於步驟（b)中，將保護基R3或R4或可能兩者移除掉 。若R3或R4爲以系烷基爲基礎的保護基時，係經由用三乙 胺三-氫氟酸鹽在THF溶劑內完成該移除。也可以採用其他 的氟離子來源。例如，可以用氟化四丁銨、吡啶氫氟酸鹽 、氟化鉀、或氟化鉋。氟化鉀可以和錯合劑例如18-冠醚-6 或類似者組合使用來幫助去矽烷基化。於此等狀況中典型 地係使用溶劑例如乙腈。其它條件例如弱鹽酸水溶液或三 氟乙酸與共溶劑例如乙腈或THF可用於系烷基的解保護。 相同的酸性條件對於移除掉1-甲基-1_甲氧基乙基（MOP)保 護基也有良好的作用。 實際所用的條件決定於對R3和R4所用的保護基。例如 ，一種較佳的途徑爲對R3使用MOP而對R4使用二異丙基甲 氧基矽烷基醚。於此種情況中，步驟b可包括使用鹽酸水 溶液和一有機溶劑的溫和酸性收拾處理。所得2’解保護化 合物可於步驟c中暴露於氟離子源例如三乙胺三-氫氟酸鹽 /THF溶劑內而在層析純化或結晶學純化之後產生化合物I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -22- 1245041 A7 B7 五、發明説明（20 ) 流程 較佳的經保護C-4甲基碳酸酯漿果赤黴素之合成 1. i-PR2SiCI2 1G-DAB 咪 π坐，DMF 2.MeOH 85% DIPMS =* (i-Pr2(MeO)Si DIPMSO DIPMSOll

(Me)2SiHCI

咪唑 DMF DMS=(Me)2SiH

DIPMSO

Red-Al· 甲苯85% 1 -- —m *-- -—.1— ϋ— I — (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

DIPMSO

LiHMDS

MeOCOCI THF 75%

訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -23- 1245041 A7 B7 五、發明説明（21 ) 流程3(續）

TEA.3HF

1. i.Pr2SICl2 η。§ 咪唑，DMF 〇=C y°\ 2.MeOH 85% THF 90%

1. LIHMDS 1-醯基咪唑 THF 85% (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本發明的另一部份包括在c-10位置具有新穎取代基R2 的化合物I之合成。這些化合物可經由接著不是流程3中所 接的乙酸酯的替代酯而製得。 流程2示出化合物I的另一製備法。其涉及化合物V的 轉化，其中R’形成氮保護基，諸如！611〇(00)七6〇〇或 PhCmOCCOMCBZ) 〇這些基可經由酸性水解而移除或在 CBZ情況下經由氫解作用脫去。胺中間體VI的製備係在實 施例中說明，且係用技藝中熟知的方法來完成。將胺中間 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -24- 1245041 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A 7 B7 _五、發明説明（22 ) 體VI溶解在惰性溶劑中，諸如乙酸乙酯並加入鹼，諸如碳 酸氫鈉。將化學計算量或略微較大量的醯基氯（亦即尺’-C(〇）C1)、氯甲酸酯或另外者，酸酐，加入用來直接製得化 合物I。 結構II的漿果赤黴素衍生物（如流程1所示，其中R2是 Ac〇-)的製備示於流程3中，且在製備例7中闡述。接下來 的特殊實施例示範說明本發明化合物的合成’但不可視爲 用來限制本發明的範圍者。採用的方法可適應各種變異， 以製得本發明範圍所涵蓋但沒有特別揭示出來的化合物。 另外，用赂爲不同的方式製造出同樣化合物的方法變異， 對諳於此技者而言係顯而易知者。 在以下的實驗程序中，於沒有特別指定時，所有的溫 度都知悉爲攝氏溫度（C)。核磁共振（NMR)光譜特性指的是 化學位移（5 )，以相對於作爲參考標準的四甲基矽院之份數 每百萬份（ppm)表出。報告在質子核磁共振光譜數據中的各 種位移之相對面積係與分子中具特別官能基類型的氫原子 之數量相對應。有關多重性的位移本質係表爲寬獨線（bs或 brs)，寬雙重線（bd或brd)，寬三重線（bt或brt)，寬四重線 (bq或brq)，獨線（s)，多重線（m)，雙重線（d)，四重線（q)， 三重線（t)，雙重線的雙重線（dd)，三重線中的二重線（dt)以 及四重線中的雙重線（dq)。用來獲得核磁共振光譜的溶劑爲 丙酮- d6(氖化丙酮DMSO-d6(全箫二甲亞硕），D2〇(氣化水） ，CDCh(氘化氯仿）和其他習用的氘化溶液。紅外線（IR) 光譜說明只包括具有官能基鑑定用處的吸收波數(cnT1)。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -25- 1245041 A7 B7 五、發明説明（23 )

Celite 是 Johns-Manville Products Corporation 對於石夕藻 土的註冊商標。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 用在以下實驗中的矽膠是得自EM Separations Technology的顆粒大小爲230-400篩目之矽膠60。 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 使甩在本文中的縮寫是廣泛地用在技藝中的習用縮寫 。其中一部分是：DAB(去乙醯基漿果赤黴素瓜）；MS(質譜 測定術）；HRMS(高解析度質譜儀）；Ac(乙醯基）；Ph(苯基） ;V/V(體積/體積）；FAB(快速原子轟擊）；ΝΟΒΑ(硝基苄醇 );min(分鐘（s)); h或hr(s)(小時）；DCC(1，3-二環已基碳化 二酿亞胺）；B〇C(第三丁氧羰基）；CBZ或Cbz(苄氧羰基）； Bn(苄基）;Bz (苯甲醯基）；Troc(2,2,2-三氯乙氧羰基）； DMS(二甲基矽烷基）；TBAF(氟化四丁銨）；DMAP(4-二甲胺 基吡啶）；TES(三乙基矽烷基）；DMS◦(二甲亞硕）；THF(四 氫呋喃）；HMDS(六甲基二矽胺烷）；Me〇Tf(甲基三氟甲烷 磺酸酯）；NM〇（嗎啉-N-氧化物）；（DHQ)2PHAL(氫化喹啉 1,4-吹哄二基二醚）。Tf = triflate =三氟甲院磺酸酯；LRMS( 低解析度質譜儀）；ESI(電噴佈游離）；TEMT〇（2,2,6,6-四甲 基-1-哌啶氧基，自由基）；DBU(二氮雜雙環十一碳烯）； M〇MC1(氯甲基甲基醚）；Ac(乙醯基）；Ar(芳基）；Bz(苯甲 醯基）；Cbz(苄氧羰基）；DCI(解吸化學電離）；DMF(二甲基 甲醯胺）；FAB(快速原子轟擊）；Η(小時）；HRMS(高解析度 質譜法）；LiHMDS(六甲基二矽胺烷鋰或二（三甲基矽烷基） 胺化鋰）；MS(質譜法）；Ph(苯）；rt(室溫）；tBu(第三丁基） ;TES(三乙基矽院基），TLC(薄層層析術），Y(產率）， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ~ -26: 1245041 A7 B7 五、發明説明（24 ) TPAP(過釕酸四丙基銨）；MCPBA(間氯過氧基苯甲酸）； LDA(二異丙基胺化鋰）；TBS(第三丁基二甲基矽烷基）；18-冠醚- 6(1，4,7，1 0,13,16-六氧雜環十八烷）；DEAD(二乙基偶 氮二羧酸酯）；Red-Al® (Aldnch Catalogue)是 65 +重量 ％氫化 二（2 -曱氧基乙氧基）鋁鈉/甲苯溶液；DCM意爲二氯甲烷； “ sat.”意爲飽和的。 製備例： 製備例1 · (± )-順-4-第三丁基小第三丁氧羰基-3-三乙基矽烷氧基-氮 雜環丁烷-2-酮 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 將三甲基乙醛（20.3毫升，1.25當量）在室溫下加到對-甲氧基苯胺（18.4克，0.150莫耳）和無水Na2S〇4(l 50克）在無 水DCM(250毫升）中的攪拌懸浮液內。兩小時後予以過濾， 並用另外的無水DCM洗固體。脫除濾液中的溶劑，並將結 晶剩餘物溶解在無水DCM(750毫升）中，並放置在氮氣圍中 。加入三乙胺（48.0毫升，2.3當量），並將反應冷卻到-78 。(：。逐滴加入；氧基乙醯基氯（27.2毫升，1.15當量），並且 接著使反應增溫至室溫。24小時後，用0.5M HC1 (兩次）， 飽和NaHCCh水溶液，鹽水萃洗，並且將其脫水（Na2S〇4)。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -27- 1245041 A7 B7 五、發明説明（25 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 除去溶劑，在矽膠管柱上（用20%DCM在己烷中包含0-20% 的EtOAc梯度溶析）層析分離剩餘物，而得（土）-順-4-第三丁 基-3-苄氧基-1-對-甲氧基苄基-氮雜環丁烷-酮，爲結晶固體 (46.9 毫克，92%) : 4 NMR(CDCL3) 5 1.09 (s，9H)，3.81(s， 3.H)，4.15(d，1H，J = 5.5Hz)，4.77(d，1H, J=11.9Hz)，4.81(d，1H ,J = 5.5Hz), 5.03 (d, 1H, J= 1 1.9Hz), 6.87-0.43(m, 9Hz);LRMS (ESI) 3 40([M + H] + )。將硝酸銨鈽（60.4 克，3.6 當量）/900 毫 升水溶液於1小時期間加到置於冰浴中充分攪拌的氮雜環 丁院-酮（10.38克，30.6毫莫耳）/乙腈（600毫升.）溶液內。接 著用EtOAc萃取反應兩次*並用飽和NaHCCh水溶液（兩次）， 20%NaHS〇3水溶液，飽和NaHCCh水溶液和食鹽水萃洗合倂 有機萃取液。脫水（Na2SO〇後，除去溶劑，並在矽膠管柱上 (用數份含10%到40%Et〇Ac之己烷梯度溶析）層析分離剩餘 物而得5.64克略微不純的（± )-順-3-苄氧基-4-第三丁基氮雜 環丁烷-2-酮：4 NMR(CDCL3) (5 1.04 (s，9H)，3.51(d，1H， 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 J = 5.2Hz), 4.71(m，2H)，4.96(d，lH，J = 11.9Hz)，6.10(brs，1H)， 7.35(m，5H)。將此物質（5.54克，23.8毫莫耳）和2.5克10% 披鈀碳在絕對EtOH(100毫升）中的懸浮液氫化（34psi H2 ’ Parr裝置）23小時。加入另一份2毫克鈀催化劑，在50pS1 H2下繼續進行氫化17小時。過濾除去催化劑，並將脫除濾 液中的溶劑而留下粗製（± )-順-3-羥基-4-(第三丁基）-氮雜環 丁烷-2-酮·· 4 NMR (CDC13+1 滴 D2〇) (5 1.05 (s，9H)，3.48 (d，1H，Γ=5·0Ηζ)，4.98(d，1H, J = 5.0Hz)。將此物質溶解在無 水DMF(40毫升）中，並且加入咪唑（3.24克，2當量）和三乙 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -28- 1245041 A7 B7 五、發明説明（26 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 基矽烷基氯（4.0毫升，1當量）。10分鐘後，在水與含 Et〇Ac和己烷（1:1)的混合物之間將反應分配。用水（兩次）、 食鹽水萃洗有機相，接著將其脫水（Na2S〇4)。去除溶劑，並 在矽膠管柱上（用20%到25%EtOAc/己烷梯度溶析）層析分離 剩餘物而得（土）-順-4-第三丁基-4-三乙基矽烷氧基-氮雜環 丁烷-2'酮（3.86 克）：4 NMR (CDCh) δ 0.7 0(m，6H)， 0.98(m，18H)，3.39(d，1H，J = 5.0Hz)，4.88 (dd，1H，J = 2.1，5.0 Hz)，6.08 (brs，1H)。將此氮雜環丁烷-酮（2.04克，7.92毫莫 耳）、二異丙基乙基胺（1.66毫升，1.2當量），二-第三丁基 二碳酸酯（1.90克，1.1當量）和對-二甲胺基吡啶（194毫克， 0.2當量）在無水DCM(24毫升）中的溶液置於室溫下攪拌3小 時。用DCM稀釋反應，用食鹽水萃洗並將其脫水（Na2S〇〇 。去除溶劑後用矽膠管柱層析術（用0到20%Et〇Ac/己烷梯 度溶析）而得2.71克（96%)標題化合物，爲油狀物：iH NMR(CDCLs) ά 0.70 (m，6H), 1.0 (m，9H)，1.09(s, 9H)， 1.53(s，9H)，3.90(d，1H, J二6.5Hz)，4.93(d, 1H, J二6.5Hz)。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 製備例2 (± )-順-1-第三丁氧羰基-4-異丙基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜 環丁烷_2_酮 〇 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -29- 1245041 A7 B7 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 五、發明説明（27 ) 在室溫下，將異丁醛加到攪拌的對-茴香胺（5.00克， 40.7毫莫耳）和無水Na2S〇4(25毫克）於無水DCM(80毫升）中 的懸浮液中。1小時後’將其過濾並且用另外的無水DCM 洗固體。除去濾液中的溶劑並將剩餘物溶解在無水DCM (200毫升）中，且將其置於氮氣圍下。加入三乙基胺（13.1毫 升，2.3當量）並將反應冷卻至-78 °C。逐滴加入乙醯氧基乙 醯氯（5.00毫升，1.15當量）並使反應熱至室溫。20小時後 ，用0.5M HC1 (兩次），飽和NaHC〇3水溶液、食鹽水萃洗， 並將其脫水（Na2S04)。去馀溶劑，在矽膠管柱.（用20至30% EtOAc/己烷梯度溶析）上層析分離剩餘物而得（土）-順_3_乙醯 氧基-4-異丙基-1-對-甲氧基苄基-氮雜環丁烷-2-酮爲固體 (7.15 克，63%) : 4 NMR(CDCl3) 5 0.99 (d，3H, J = 7.0Hz)， 1.02(d，3H，J = 7.0Hz)，2.20 (s，3H)，3.82 (s，3H)，4.24 (t，1H， J = 5.6Hz)，6.06 (d，1H，J = 5.3Hz)，6.88-7.38(m，4H)。將硝酸 銨鈽（51.3克，3.6當量）/750毫升水溶液於1小時期間加到 置於冰浴中充分攪拌的氮雜環丁烷-酮（7.20克，26.0毫莫耳 )/乙腈（5 00毫升）溶液內。接著用EtOAc萃取反應兩次並用 飽和NaHC〇3水溶液（兩次），20% NaHS〇3水溶液，飽和 NaHCCh水溶液和食鹽水萃洗合倂有機萃取液。脫水 (Na2S〇4)後，除去溶劑而得4.26克粗製（ + )-順-3-乙醯氧基-4-異丙基-氮雜環丁烷-2-酮：lHNMR(CDCl3)(50.86(d，3H， J二6.6Hz)，0.99(d，3H，J = 6.6Hz)，1.89 (m，1H), 2.17 (s，3H)， 3.52(dd，1H，J = 4.8, 9.0Hz)，5.96 (dd，1H，J = 2.5, 4.6Hz)，6.38 (br s, 1H)，LRMS(負 ESI)170〔（M-H)-〕。將此物質（4.26 克 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ~~— (請先閲讀背面之注意事項再 -- 填寫本頁) #1 * i— ϋ J— -30- 1245041 A7 B7 五、發明説明（28 ) f請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁j 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 ’ 2 4.9毫莫耳）和K2CCMIO2毫克，〇.〇3當量）在“6〇11(40毫 升）中的懸浮液置於室溫下攪拌1.5小時。接著加入 Amberlhe IR-20以中和反應◦過濾後，從濾液中除去溶劑 ，留下粗製（+)-順-3-羥基-4-異丙基-氮雜環丁烷-2-酮。將 此物質溶於無水DMF(40毫升）中，並加入咪唑（3.39克，1 當量）和三乙基矽烷基氯。10分鐘後，將該反應置於水與含 Et〇Ac和乙烷的混和物（1:1)之間分配。用水（兩次）、食鹽水 萃洗有機相，接著將其脫水（Na2S〇4)。去除溶劑後，在矽膠 管柱上（用25 — 35 % EtOAc/已烷梯度溶析）層析分離剩餘物 而得(± )-順-4-異丙基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜環丁烷-2-酮 (4.63 克，77 % ):屯 NMR(CDCb) 5 0.65- 1.03 (m，21H), 1.93(m,lH), 3.29 (dd, 1H, J = 4.8, 9.1Hz), 4.87(dd ,1H, J-2.8, 4.7Hz)，6.05(brs, 1H)。將此氮雜環 丁烷酮（1·〇5 克，4.32 毫 莫耳），二異丙基乙基胺（0.90毫升，1.2當量）’二-第三丁 基二碳酸酯（1.04毫克，1.1當量），和對-二甲胺基吡啶（106 毫克，0.2當量）在無水DCM(10毫升）中的溶液置於室溫下 攪拌30分鐘。用DCM稀釋反應，用食鹽水萃洗和脫水 (Na2S〇4)。去除溶劑並用矽膠層析術（用1〇 — 20 %的Et〇Ac/ 己烷梯度溶析）而得1.31克（88 % )標題化合物，爲油狀物： 'H NMR(CDC13)(5 0.66 - 1.07(m, 21H), 1.53(s, 9H), 2.1 5 (m，1H)，3.87(t，1H，J = 6.4Hz)，4.88(d，1H，J = 6.1Hz); LRMS (ESI) 344 [(M + H)]+ 。 製備例3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） -31 - 1245041 A7 __ B7 _--- 五、發明説明（29 ) (土）-順-1-苯甲醯基-4-異丙基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜5展丁 烷-2-酮

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 將（+)-順-4-異丙基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜環丁院 酮（486毫克，2.00毫莫耳）、苯甲醯氯（0.255毫升’ U當 量）、二異丙基乙基胺（0.346毫升，1.2當量）和對-二甲胺基 吡啶（244毫克，1當量）在無水DCM(6毫升）中的溶液在0 °C 下攪拌6小時。移除浴器，將反應繼續攪拌一整夜。接著 用DCM稀釋，並用水，HC1水溶液（0.1N)，飽和NaHCCh水 溶液、食鹽水沖洗，並脫水（Na2S〇4)。將溶液去除後用矽膠 管柱層析術（0 - 5 % Et〇 Ac/己烷梯度溶析）而得標題化合物 :NMR(CDCls)5 0.47 - 0.94(m, 21H), 2.09(m, 1H), 4.07(m, 1H), 4.75(m，1H), 7.24-7.66(m, 5H)。 維濟部智慧財產局員工消費合作社印製 製備例4 (3R，4R)-1-新戊基羰基-4-苯基-3-三乙基矽烷氧基·氮雜環丁 烷-2-酮

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -32- 1245041 A7 B7 五、發明説明（30 ) 按上述程序式並使用新戊基羰基氯，將（3R，4R)-4 -苯基-3 -三乙基矽烷氧基-氮雜環丁烷-2 -酮轉化成標題產物：1Η NMR(CDCls)(5 0.19 - 0.62 (m, 15H), 0.88 (s, 3H), 2.43 (d, 1H，J=13.8Hz)，2.62 (d，1H，J = 14.1Hz)，4.90 (d，1H，J= 5.7 Hz), 4.95 (d, 1H, J = 6.0Hz)，7.05-7.17(m，5H)。 製備例5 (3 R，4R)-卜環丁基羰基-4-苯棊-3-三乙基矽烷氧基-氮雜環丁 烷-2-酮 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 按上述程序式並使用環丁基羰基氯，將（3R，4R)-4-苯基-3-三乙基矽烷氧基·氮雜環丁烷-2-酮轉化成標題產物：4 NMR(CDCl3)(5 0.18 - 0.61(m, 15H), 1.66-2.22 (m, 6H), 3.61(m, 1H), 4.89(d, 1H, J = 5.7Hz), 4.94 (d, 1H, J = 5.7Hz), 7.03-7，18(m，5H)。 製備例6 (3R，4R) -1 -新戊基氧簾基-4-苯基-3-三乙基砂院氧基-氮雜環 丁烷-2-酮 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -33- 1245041 A7 B7 五、發明説明（31 按上述程序式並使用新氯甲酸戊基酯，將（3R，4R)-4-苯 基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜環丁烷-2-酮轉化成標題產物： 'H NMR(CDCls)5 0.39 - 0.97(m, 24H), 3.73(d, 1H, J= 10.2 Hz)，3.90(d，1H，J = 10.2Hz)，5.10 (m，2H)，7.31(m，5H)。 製備例7 1)漿果赤黴素衍生物1的合成

MeO(i-Pr)2SiO q MeO(i-Pr)2SiO*

HO Bz0a〇0UO (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) OSi(i-Pr)2〇Me 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在周溫下，將咪唑（47克，691毫莫耳）加到10-去乙醯 基漿果赤黴素（47.4克，87毫莫耳）/無水N，N-二甲基甲醯胺 (5 00毫升）溶液中。攪拌該溶液10 - 15分鐘，直到獲得透 明溶液爲止。逐滴地將二異丙基二氯矽烷（58毫升，322毫 莫耳）加到反應混合物中。在周溫下攪拌反應混合物16小時 。將另外數量的二異丙基二氯矽烷（6毫升)加到溶液中，攪 拌反應60分鐘，在此點的HPLC顯示出反應完全。將甲醇 (36毫升）加到混合物中，並且攪拌溶液60分鐘。將反應停 止，並用第三丁基甲基酮（TBME)(500毫升）和水（200毫升） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -34- 1245041 Α7 Β7 五、發明説明（32 ) 的混合物稀釋。分離液層並用食鹽水（250毫升）萃洗有機相 ，脫水（硫酸鈉），並蒸發而得三矽烷基化的漿果赤黴素衍生 物1(91克，> 100 %產率），爲白色非晶態化合物，其不再 進一步純化即用在下一步驟中。. ESILRMS C5〇H84〇13Si3 Μ + 計算値：977。實側値 _· 977 2)漿果赤黴素衍生物2的合成 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

MeO(i-Pr)2SiO Me2HSiO:

MeO(i-Pr)2SiO 〇

pSi(i.Pr)2OMe 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 在0 °C下，於漿果赤黴素衍生物1 (90克，92毫莫耳 )/DMF(500毫升）的溶液中加入咪唑（22克，320毫莫耳）。在 〇 °C下逐滴加入二甲基氯矽烷（35毫升，320毫莫耳）。在此 點可觀察到化合物的沈澱。在0 t下，攪拌反應混合物（漿 液）0.5小時。過濾固體，並用冷的DMF(3 X 150毫升）洗淸 。空氣乾燥後，將固體重新溶解在TBME(700毫升）中，並 用水（3 X 200毫升）、食鹽水（250毫升）萃洗溶液且脫水乾燥 (硫酸鈉）。將該溶液濾過短矽膠墊。在真空下去除溶劑而得 77 %產率（70.克）的2。 ESILRMS C5〇H9〇〇nSi4 Μ + 計算値：1 035。實側値： 1035 本紙張尺度適用中周國家榉準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -35- 1245041 A7 B7 五、發明説明（33 ) 3)漿果赤黴素衍生物3的合成

OSi(i-Pr)2OMe Bz0h0U0

MeO(i-Pr)2SiO (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

MeO(i-Pr)2SiO·

Me2HSiO， 在-34 °C下，於10分鐘期間，將Red-Al(50毫升，160 毫莫耳，65重量％氫化（2-甲氧基乙氧基）鋁鈉/甲苯溶液） 逐滴加到攪拌的2 (66.3克，64毫莫耳）/甲苯（680毫升）溶液 中。將反應化合物增溫至-2 5 °C，並攪拌1.5小時。將甲醇 (62毫升）逐滴加到反應化合物中，保持內部溫度在-20至-25 t：之間。用TBME (500毫升）稀釋溶液，接著加入1N氫 氧化鈉溶液(60毫升）和食鹽水（60毫升）。攪拌溶液30分鐘 。將Celite(12克）加到混合物中，攪拌10分鐘，並且通過 Celite墊過濾。分離液層。用水、食鹽水萃洗有機層，並且 脫水（硫酸鈉）。接著，在去除溶劑前將溶液通過一短矽膠墊 。獲得97 %產率（62克）的化合物，爲白色固體。 ESILRMS C5〇H88〇12Si4 Μ + 計算値：993。實側値：993 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 4)漿果赤黴素衍生物4的合成

MeO(i-Pr)2SiO 〇 〇Si(i-Pr)2〇Me

MeO(i-Pr)2SiO-(_^//^

Me2HSi0^^〇 o 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) 36- 1245041 A7 B7 五、發明説明（34 ) 在氬氣圍下，將LHMDS(125毫升，125毫莫耳在THF 中的1M溶液），於-60 °C下逐滴加到3 (62克，62毫莫耳）/ 無水四氫呋喃（THF)(600毫升）溶液中。將溶液攪拌15分鐘 ，接著加入氯甲酸甲酯（9毫升，1 1 6毫莫耳）；溶液的內部 溫度保持在-60 °C。慢慢地將反應加溫到0 °C，並攪拌混合 物3小時。於反應完成後，加入飽和氯化銨（300毫升）。用 TBMEUOO毫升）萃取反應混合物。用飽和的氯化銨（200毫升 )、水（200毫升）、食鹽水（200毫升）萃洗有機層，脫水（硫酸 鈉）並蒸發而得4爲油狀物（67克，大於100%)。此粗製物 質不再純化即用在下一步驟中。 ESILRMS C52H9〇〇14Si4 計算値：1051。實側値：1051 5)槳果赤黴素衍生物5的合成 HO 〇

·1— I = I ί I 丨 i -1 ------- n (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 _· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在周溫下，將三乙基胺.氫氟酸複合物（56毫升，344毫 莫耳）加到漿果赤黴素衍生物4 (62克，59毫莫耳）/無水 丁册（260毫升.）溶液中。攪拌反應3小時。用乙酸乙酯（3 5 0 毫升）稀釋反應混合物，用水（250毫升）、食鹽水（250毫升） 萃洗，脫水(硫酸鈉）並且蒸發，而得5 (43克，大於100 % 粗產率）。在熱的乙酸乙酯（350毫升）和己烷（5〇毫升）混合物 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4規格(210X297公釐）> -37- 1245041 Α7 Β7 五、發明説明（35 ) 中將該粗製化合物重新打漿’而得90 %產率的純5 ° ESILRMS C”H36〇u Μ + 計算値：560。實側値：5 60。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 6)漿果赤黴素衍生物6的合成

在氬氣下，於-65 °C，將二異丙基二氯矽烷（26.8毫升） 加到漿果赤黴素5 (32克，57毫莫耳）和咪唑（11.7克，117 毫莫耳)在DMF(220毫升）中的溶液中。將反應混合物的溫度 保持在-60 °C，並攪拌混合物2小時。反應完成（HPLC)後， 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 加入咪唑/甲醇（11.7克的咪唑溶解在35毫升的甲醇中）溶液 ，並在0 °C下，攪拌溶液30分鐘。用TBME(500毫升）萃取 該混合物。用水（4 X 100毫升）萃洗有機相，脫水（硫酸鈉） 並蒸發，而得粗製6 (45克）。將粗製物質進一步溶解在乙 腈中（150毫升），並且用己烷（3 X 100毫升）萃洗該溶液。去 除乙腈而得純6，爲白色固體（34克，84 %產率）。 ESILRMS C36H52〇12Si Μ + 計算値：704。實側値：704 7)漿果赤黴素衍生物7的合成. 4-去乙醯基-7-[二異丙基（甲氧基）]矽烷氧基-4-甲氧羰基·漿 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ^ -38- 1245041 A7 B7 五、發明説明（36 果赤黴素

AcO η

在-43 t：下，逐滴將LHMDS(61.2毫升，61.2毫莫耳）加 到漿果赤黴素6 (33.2克，47毫莫耳）/DMF(200毫升）溶液中 。將反應攪拌15分鐘後加入乙酸酐（5.8毫升，· 63毫莫耳） 。在-40 °C下，攪拌反應30分鐘。加入乙酸（3.6毫升）並移 去冷卻浴。用TBME(300毫升）萃取反應混合物。分出有機 層並用水（3 X 150毫升），食鹽水（150毫升）萃洗，脫水（硫 酸鈉）並蒸發，而得粗產物。用THF··庚烷（1:6)混合物結晶而 完成此化合物的純化。4 0克原料得到2 1克結晶漿果赤黴素 衍生物7 (60%產率）。 ESILRMS CssHwOuSi M +計算値：746。實側値：746 m· Bn— Ln am —Jr— —ϋ «ϋ . (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 實施例1 化合物1 a 3第三丁基-3’-N-第三丁氧羰基-4-去乙醯基-3’-去苯基-3，-N-去苯甲醯基-4-〇-甲氧羰基-紫杉酚 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X297公釐） -39- 1245041 A7 B7 五、發明説明（37 )

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 將（± )-順-4-第三丁基_4-(第三丁氧羰基）-3_三乙基矽烷 氧基-氮雜環丁烷-2-酮（2.71克，5當量）和4-去乙醯基-7-[二 異丙基（甲氧基）矽烷氧基-4-甲氧羰基-漿果赤黴素（1.13克， 1.52毫莫耳）在無水THF( 100毫升）中的溶液於氮氣下冷卻到 -50°C後加入丄111^^8八溶液（1.97毫升，1.3當量，1.0M於 THF中)。5分鐘後將其轉移到一浴內，包持在-35至-30 °C 下20小時，接著在-25 °C下24小時。然後用飽和NKUC1溶 液驟止反應並用EtOAc/己烷（1:1)混合物萃取。將有機層用 食鹽水萃洗並脫水（Na2S〇4)。去除溶劑並層析分離剩餘物（ 徑向層析術；6毫米矽膠片；0 — 50 % EtOAc/己烷梯度溶 析），而得1.55克3’-第三丁基-3’·Ν-第三丁氧羰基-7-[二異 丙基(甲氧基）]矽烷氧基-4-去乙醯基_3’_去苯基- 3’-Ν-去苯甲 醯基-4-0-甲氧羰基-2、三乙基矽烷氧基-紫杉酚，爲2’，3’-非 鏡像異構物的混合物。將此混合物溶解在無水THF(60毫升） 並加入三乙胺三氫氟酸鹽（0.92毫升，4當量）。於室溫下22 小時之後，用飽和NaHCCh水溶液中和反應物並用EtOAc萃 取。將有機萃取液用食鹽水萃洗，脫水（Na2S〇4)並移除溶劑 。層析分離剩餘物（徑向層析術；2毫米矽膠片；1 0 - 5 0 % EtOAc/己烷梯度溶析），而得（按溶析順序）：210毫克 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X297公釐) -40- 1245041 A7 B7 五、發明説明（38 ) (18%)2’，3’-第三丁基-3’-屮第三丁氧羰基-4-去乙醯基-3’-去 苯基-3’-N-去苯甲醯基-4-0-甲氧羰基·紫杉酚ΓΗ NMR (CDCls) 5 1.04 (s, 9H), 1.13 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.37(s, 9H)，1.65 (s，1H)，1·66 (s，3H)，1.84- 1.93 (m，2H)，2.17(s， 3.H)，2.25 (s，3H), 2.55 (m，3H)，3.00 (d，1H，J = 6.5Hz)， 3.74(d，1H，J二 10.8Hz)，3.79 (b，1H，J二6.9Hz)，3.92 (s，3H)， 4.16 (b, 1H, J = 8.5Hz), 4.33 (d, 1H, J = 8.5Hz), 4.42 (m, 1H), 4.54 (d, 1H, J = 6.5Hz)，4.87 (b, 1H，J二 10.6Hz), 5.01(d,lH,J = 7.7Hz), 5.68(d, 1H,J = 7.0Hz), 5.76<m,lH), 6.32 (s，1H)，7.44-8.05(m，5H) ; LRMS(ESI) 846 [(M + H) + ]}和 668 毫克（5 6 % )的標題化合物 ΓΗ NMR(CDCl3) (5 1.07(s，9H)， 1.14(s, 3H)，1.24(s，3H)，1.33(s, 9H)，1.66(s，4H)，2.23(s， 3H)，2.3 8-2.5 9 (m，4H)，3.11 (d，1H，J = 5.8 Hz)，3.77( d，1H， J = ll.lHz), 3.82(d，1H，J二7.0Hz)，3.96(s，3H)，4.20(d，1H， J = 8.6Hz), 4.33 (d, 1H, J = 8.6Hz), 4.39(m, 1H), 4.53(d, 1H, J = 5.4Hz), 4.88(d, 1H, J = 10.6Hz), 4.98 (d, 1H, J = 7.9Hz), 5.69 (d, 1H, J = 7.1Hz), 6.03 (m, 1H), 6.28 (s, 1H), 7.40-8.11(m, 5H) ； LRMS (ESI) 846 [(M + H) + ]}。 實施例2化合物lb 3’-N-第三丁氧羰基-4-去乙醯基-3’-去苯基-3’-N-去苯甲醯基_ 3’-異丙基-4-0-甲氧羰基—紫杉酚 在進行以上程序後，將（土）-順-1-第三丁氧羰基-4-異丙 基-3-三乙基矽烷氧基-氮雜環丁烷-2-酮與4-去乙醯基-7-[二 本紙張尺度適用中周國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）~ 一 -41 - ；-I；---丨| (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1245041 A7 _ B7 _ 五、發明説明（39 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 異丙基（甲氧基）]矽烷氧基-4-◦-甲氧羰基-漿果赤黴素偶合。 解保護接著層析術，而得標題化合物：iH NMR (CDC13 + D2〇）（5 1.03 (d，3H，J = 6.7Hz)，1.09 (d，3H，J = 6.7Hz)，1.14 (s， 3H)，1.24 (s，3H)，1.31 (s，9H)，1.66 (m，3H)，1.83-2.02 (m， 5H)，2.24 (s，3H), 2.25-2.59(m，3H)，3.68 (dd，1H，J二2.0， 9.2Hz)，3.82 (d，1H，J二6.9Hz)，3.98(s，3H)，4.19 (d，1H， J二8.6Hz)，4.34 (d，1H，J = 8.6Hz)，4.39 (m，1H)，4.43 (d，1H， J = 2.0Hz)，4.82 (br，s，1H)，4.98 (d，1H，J = 7.8Hz)，5.69 (d， 1H，J = 7.0Hz)，6.ll(m，1H)，6.28(s，1H)，7.45-8..12 (m，5H)， LRMS (ESI) 832 [(M + H)”·。 實施例3 化合物lc 3’-N-新戊基羰基-4-去乙醯基-3 乂N-去苯甲醯基-4-〇-甲氧羰 基-紫杉酚 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 將（3R，4R)-1-新戊基氧羰基-4-苯基-3-二乙基砂院氧基· 氮雜環丁烷-2-酮（5 25毫克，1.4當量）和4-去乙醯基-7-[二 異丙基（甲氧基）矽烷氧基-4-0-甲氧羰基-漿果赤黴素（5 23毫 .克，0.700毫莫耳）在無水THF(15毫升）中的溶液冷卻到-50 °C後加入LiHMDSA溶液（0.84毫升，1.2當量，1.0M於 THF中）並予以攪拌。40分鐘後始反應熱至製〇 °C。1.5小 時後，用飽和NHUC 1溶液驟止反應並用Et〇Ac萃取。將有 機萃取液用飽和NH4C 1溶液、水、食鹽水萃洗並脫水 (Na2S.〇4)。去除溶劑接著矽膠管柱層析術（〇 — 20 % EtOAc/ 己烷混合物梯度溶析）而得2.78毫克3’-新戊氧羰基-7-[二異 本紙張尺度適用中國國家標準（ CNS ) A4規格（210X297公釐） -42- 1245041 A7 ___ B7 _ 五、發明説明（40 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 丙基（甲氧基）]矽烷氧基-4-去乙醯基-3’-N-去苯甲醯基- 4-0-甲氧羰基-2’-三乙基矽烷氧基-紫杉酚。將此物質直接使用 並用三乙胺三氫氟酸鹽（0.161毫升，4當量）/無水THF(6毫 升）處理且在室溫下攪拌整夜。於用飽和NaHC〇3水溶液中 和後，用EtOAc萃取反應物。將有機萃取液用食鹽水萃洗 ，並脫水（Na2S〇4)。移除溶劑接著矽膠管柱層析術（20 - 50 % EtOAc/己烷混合物梯度溶析）而得而得151毫克（71%)標題 產物：NMR(CDCl3) 5 0·96-2·5 8[32Η，包括 0.96(s，9H)， 1.14(s，3H)，1.24(s，3H)(剪貼原稿 P.32/1.24-28)。 實施例4化合物I d 3-N-環丁基-4-去乙醯基-3’-N-去苯甲醯基-4-0-甲氧羰基-紫 杉酚 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經由使用上述程序並用（3R，4R)-1-環丁基-4-苯基-三乙 基甲矽烷氧基-氮雜環丁烷-2-酮，將4-去乙醯基-7-[二異丙 基（甲氧基）矽烷氧基-4-0-甲氧羰基-漿果赤黴素轉化爲標題 產物。4 NMR(CDCl3)5 1.14_2.53[m，27H，包括：1.14(剪 貼原稿 P.32/1.36-P.33/1.1-5)。 實施例5化合物Ie 3-N-環丁基-4-去乙醯基-3’-N-去苯甲醯基-4-Ό-甲氧羰基-紫 杉酚 經由使用上述程序並用氯甲酸環己氧基酯，將3’-第三 丁基-3’-N-第三丁氧羰基-4-去乙醯基- 3’-去苯基-3’-N-去苯甲 本紙張尺度適用中國國家標準( CNS ) A4規格（210X297公釐） " ' 43- 1245041 A7 B7 五、發明説明（41 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 醯基_4_ ◦-甲氧羰基-紫杉酚轉化爲標題產物。1NMR (CDCI3+ D2〇）5 1.10-2·61[38Η ，包括：l.l〇(s，9H)， 1.16(s，3H), 1.26(s，3H)，1.69(s，3H)，1.95(s，3H)，2.26(s，3H)]， 3.84(m，2H)，3.99(s,3H)，4.23(d，lH,J = 8.6Hz)，4.40(m，3H)， 4.57(s，lH)，5.02(m，2H)，5.7(d，lH，J = 7.08Hz)，6.06(m，lH), 6.30(s，lH), 7.46-8.13(m,5H); LRMS(ESI)872 [(M + H) + ]。 實施例6化合物If 3第三丁基-4·去乙醯基- 3’-去苯基-3’-N-去苯甲醯基-3’-N-新戊基羰基-4-〇-甲氧羰基-紫杉酚 經由使用上述程序並用第三丁基乙醯基氯，將3’-第三 丁基-3’-N-第三丁氧羰基-4-去乙醯基- 3’-去苯基-3’-N-去苯甲 醯基-4-0-甲氧羰基-紫杉酚轉化爲標題產物。1Η ’ NMR(CDCl3+ D2〇）5 1·00·2·56[39Η ，包括·· 1.00(s，9H), l.ll(s,9H), 1.16(s,3H), 1.26(s,3H), 1.69(s,3H), 1.91(s,3H), 2.26(s,3H)], 3.83(d,lH, J = 7.1Hz), 3.98(s,3H), 4.17(d,lH, J-10.0 Hz), 4.26(d,lH,J = 8.8Hz), 4.37(m,2H), 4.55(s,lH), 經濟部智慧財4局員工消費合作社印製 .5.00(d，lH，J = 7.5Hz)，5.73(m，2H)，6.02(m，lH)，6.29(s，lH), 7.45-8.13(m，5H); LRMS(ESI)844[(M + H) + ]。 實施例7化合物I g 4-去乙醯基-3’-N-去苯甲醯基-3’-N-第三丁氧羰基-4·0-甲氧 羰基-紫杉酚 經由使用上述程序並用（3R，4R)-1-第三丁氧羰基-4-苯基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -44 - 1245041 A7 B7 五、發明説明（42 ) -二乙基甲砂丨兀莉基_ 隹ί哀丁院-2 -醒，製得化合物I g ◦ 1 η NMR(300MHz ’ CDC 13) δ 8 · 1 3 - 8 · 1 0(m，2H)，7 · 6 1-7.26 (m， 8H)，6.27(s，lH)，6.19(m，lH)，5.68(d，J = 6.9Hz,lH)，5.35- 5.29(m, 2H), 4.97 (d, J = 7.7Hz, 1H), 4.63 (d, J = 3.9Hz, 1H), 4.42-4.37(m, 1H), 4.25(AB q, J = 8.8Hz, J = 47.7Hz, 1H), 3.85- 3.81(m，4H)，3.40(d，J = 5.1Hz，1H)，2.59- 1.03 (m，30H，包括 .在 2.24，1.87，1.71，1.27，1.Γ4 上的獨線，各 3H，在 1.32，— 9H) 〇 實施例8化合物Ih · 4-去乙醯基-3’-N-去苯甲醯基-3’-N-正丁氧羰基-4-0-甲氧羰 基-紫杉酚。 經由使用上述程序，用（3R，4R)-1-丁氧羰基-4-苯基- 3-三乙基甲矽烷氧基-氮雜環丁烷-2-酮，製得化合物Ih。 NMR(300MHz，CDC 13) 5 8 · 1 1 (d，2H，J二7 ·4Hz)，7 · 62-7 · 29(m， 10H)，6.27(s，1H)，6.27(m，1H)，5.69(d，1H，J = 7.0Hz)， 5.41(abq，2H，J = 47.4, 9.4Hz)，4.97 (d，1H，J = 7.0Hz)，4.66 (brs, 1H)，4.3 8-4.32(m，1H)，4.26(abq，45.0，8.6Hz，2H)，3.83 (s，3H)，3.42(brd，J二4.1Hz，1H)，2.59-2.35(m，4H)，2.24(m， 3H)，1.86(s，3H)，1.67(s，3h)，1.65(d，J = 33.0Hz，3H)，1.51-1.47(m，2H)，1.24(s，3H)，1.14(s，3H)，0.83(m，3H)。 元素分析 C45H55N〇i6 計算値：C，62·42;Η，6.40;N，1.62. 實側値：C，62.28;H，6·45:Ν, 1.55. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） .....-- = = I 惨 11— —-Γ- I ϋ . (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 - 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -45- !245〇41 -^ ___B7___ 五、發明説明（43 )

實施例9化合物U (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 3’-N-去苯甲醯基-3、N-環丁基羰基- 3，-去苯基-3’第三丁 基-4-去乙醯基-4-甲氧羰基-紫杉酚 用三氟乙酸（15.0毫升）處理3,-N-去苯甲醯基-3,-N第 三丁基-4-去乙醯基-4-甲氧羰基-紫杉酚（2.30克，2.72毫莫 耳）/ DCM( 15.0毫升）溶液並在〇。(：下攪拌1.5小時。用100 毫升DCM稀釋混合物，並倒在由50.0毫克NaHC〇3在150 毫升水中組成的冷（0°C )溶液。分開液相，並將有機層真空 濃縮。經由在矽膠上用管柱層析術以4 %甲醇7DCM溶析， 可純化該產物，但通常沒有純化即使用。將粗製3’-N-去苯 甲醯基-3’-去苯基-3’-第三丁基-4-去乙醯基-4-甲氧羰基-紫 杉酚溶解在乙豫乙酯（15.0毫升）中，並用飽和NaHC〇3(15.0 毫升）處理。加入環丁烷羰基氯（460.0微升，4.08毫莫耳， 1.5當量），並在周溫下劇烈地攪拌該雙相混合物20分鐘。 用乙酸乙酯稀釋混合物，並且分開液相。用飽和NaHC〇3， 接著食鹽水萃洗有機相。用無水Na2 S〇4將有機溶液脫水， 經濟部智慧財產局員X消費合作社印製 過濾並真空濃縮。用製備性逆相層析術以20 %乙腈/水溶析 5分鐘，直跳6 0 %乙腈/水4 5分鐘，接著以2 5 0毫升/分的 流速等溶液組成溶析45分鐘進行純化而得標題化合物（1.47 克，65 %產率，HOLC純度97 % )，爲白色、非晶態固體， 其顯示出以下物理特性：4 NMR (300MHz，CDCl3)(5 8.08 (d，2H，J = 7.1Hz)，7.62-7.55 (m，1H)，7.48-7.43(m，2H)，6.27(s， 1H)，5.99(dd，J = 7.8Hz，J:9.0Hz，1H)，5.69(m，2Ή)，4.98(dd， J = 2.0Hz，J:9.5Hz，1H)，4.55(dd，J二 1.1Hz, J = 5.2Hz，1H)，4.40- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 O X 297公釐） -46- 1245041 A7 B7 五、發明説明（44 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 4.32(bm, 2H), 4.22(d, J = 8.4Hz, 1H), 4.14(d, J=10.2Hz, 1H), 3.98(s，3H)，3.80 (d，1H，J = 7.0Hz)，3.30(d，J二5·1Ηζ，1H)， 2.97(p, J = 7.9Hz, 1H), 2.58-2.36(bm, 4H), 2.23(s, 3h), 2.19-2.03(bm, 4H), 1.92- 1.76(bm, 3H), 1.88(s, 3H), 1.66(s, 3H), 1.24(s, 3H), 1.14(s, 3H), 1.06(s, 9H) ； 13C NMR (CDCls > 75MHz)5 203.7, 1 74.99, 1 74.93, 1 7 1.46, 1 66.89, 1 53.2 1, 142.54， 133.74, 133.20, 130.22, 129.81, 128.72, 84.13, 83.21, 78.92, 76.09, 75.68, 74.94, 73.39, 72.06, 70.17, 58.36, 57.73, 56.03, 51.07, 45.74, 43.34, 39.91, 35.94, 35.47, 27.37, 26.85, 25.60, 25.44, 22.12, 20.95，18.29，14.95, 9.72 ； LRMS(EST) :828.5 1 (M+1) +，100%)，886.57((M + NH4 + ACN) +，15%); 826.48 ((M-Ι)', 100%) ° 實施例10化合物Ik 3’_屮去苯甲醯基_3’-1(2-糠醯基）-3’-去苯基-3’-第三丁基-4-去乙醯基-4-甲氧羰基-紫杉酚 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 以與上面實施例9相似的方法製備。得到標題化合物 (2.13克，73 %產率，HPLC純度98%)，爲白色非晶態固體 ，其顯示出以下物理特性：4 NMR(300MHz，CDC13) 5 8.15-8.08(m,2H), 7.64-7.56(m, 1H), 7.52-7.25(m,3H), 7.03(dd,J = 0.6Hz,J = 3.4Hz,lH), 6.7 8 (d, J = 1 0.2Hz, 1H), 6.48(dd,J二 1.8Hz，J = 3.5Hz，lH)，6.25(s,lH), 6.0 6(ddJ = 7.6Hz,J = 8.9Hz,lH), 5.7 0(d,J = 7.0Hz, 1Ή), 5.00(dd，J = l .9Hz，J二9.4Hz，lH), 4.40-4.3 2(m，3H), 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -47- 1245041 A7 B7 五、發明説明) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 4.23(d，J = 7.6Hz，lH)，4.05(s，3H)，3.48(d，J = 4.5Hz，lH)，2.60-2.50(m,2H), 2.3 8(dd, J = 3.3Hz, J = 8.8Hz, 1 Η), 2.23(s,3H), 2.05(s,lH), 1.95- 1.85 (m,lH), 1.81(s,3H), 1.68(s,3H), 1.21(s,3H)，1.14(s，12H); 13C NMR(CDCh，75MHz)5 203.7 1, 1.7 4.23, 171.55,167.06, 158.22 153.06, 147.65, 1 4 4.30, 1 42.53，1 33.93, 1 33.36, 1 30.32, 1 29.42,1 28.88, 1 1 4.95, 112.51, 84.20, 83.48, 79.06, 77.65, 76.20, 75.81， 75.05， 72.96, 70.55, 58.50, 57.97, 56.40, 46.07, 43.33, 36.09, 35.55, 27.53, 27.05, 22.00, 2 1.25, 2 1.06, 1 4.97, 1 4.39, 9.83; LRMS (ESI):8 40.4 3((M+l) +，100%;83 8.4 3((M-l；r,100%)。 生物學數據 本發明另一部份係有關一種抑制人類或其他哺乳動物 腫瘤之方法，其包括給載有腫瘤的宿主經口服用一抗腫瘤 有效量之式I化合物。 口服紫杉烷活體內抗腫瘤試驗所用物質和方法係下面 所槪述者。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 物質 動物·習用的或無胸腺的（“裸（nude)’)小鼠，及裸大鼠 ，經用腫瘤漿或片段予以皮下Uc)移植。鼠腫瘤係經移植到 習用小鼠，而人類腫瘤係經移植到裸小鼠或大鼠。 腫瘤.最常用的腫瘤包括鼠肺癌、Ml 09，鼠乳癌、 MAM 16/C，人類卵巢癌、A2780，人類結腸腫瘤、HCT- 本紙張尺度適用中周國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） '' -48 - 1245041 A7 B7 五、發明説明（46 ) 11 6/pk。化合物I在一或多種前述腫瘤模型中口服之後展現 出抗腫瘤活性。 表3結果所用的方法 使用無胸腺（“nude”）老鼠進行實驗。典型地，對於 A27 80人類卵巢腫瘤異體移植摸型，當腫瘤在大小爲100-5 00毫克之間時（典型者後-腫瘤移植第7至第12天），開始 處理。在小鼠實驗中，組的大小典型者爲8隻每處理組和 對照組。按照表3中指出的劑量服用化合物，.亦即，5處理 組每隔一天每天一次（亦即，q2dx5)。 用由10 %乙醇加上10 % Cremophor EL + 80%水組成的媒 液以管飼法進行口服紫杉烷處理。液體用量是0.01毫升每 克小鼠體重。典型的老鼠實驗包括每種試驗化合物以三種 不同劑量水平的評估。 抗癌活性係由測定所有處理組和對照組實驗動物腫瘤 隨著時間的大小來評估。每隻動物都分別做上標記，並使 用測徑器每星期測量一至二次移植到每一動物體內的腫瘤 之成長。計算處理組（T)和對照組（C)中達到預定大小（例如 5 00或1000毫克）的腫瘤所需中間時間的差異，並以達到預 定的腫瘤目標大小所需時間上的延遲爲基礎，作出的絕對 和相對的抗癌效果（例如化合物之間）之評估。在實驗的最後 ，具有35毫克或更小的腫瘤之動物經定爲”治癒”。實驗典 型地係在每一實驗中，對照組動物在腫瘤達到預定的腫瘤 標的大小之前所評估的中間腫瘤生長所需腫瘤體積兩倍化 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -" 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -49 - 1245041 A7 B7 五、發明説明（47 ) 時間（TVDT)的至少十倍長之一段後-處理時間之後才終止。 試驗組中的活性係經定義爲相對於並行的對照組腫癌生長 可導致3.32倍TVDT之腫癌生長（達到腫瘤標的大小的中間 時間）延遲（亦即T-C)者。活性係表爲”對數細胞殺死値”，其 等於（T-C)/(TVDT X 3.3 2)。毒性係經由測量所有實驗中動物 在實驗中的任何處理之前、與之後立即的平均體重來測定 。另外，若動物在其腫瘤小於目標尺寸的對照組小鼠死亡 之前死亡，即認爲是由治療誘導傷害所致死亡。若在該組 中不止一動物是由於經鑑定爲依處理誘導方式死亡，則對 該特別處理組不使用或做出治療結果及活性聲明。 於移植在小鼠體內的ScM 109腫瘤模型中顯示出口服抗 腫瘤活性的表3中所列全部化合物都經判斷等於根據其給 藥和劑量的最隹時間安排靜脈內給用的紫杉酚所具抗腫瘤 活性。

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁J 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙珉尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210 X297公釐） -50- 1245041 A7 B7 五、發明説明（48 ) 表3 口服活性C-4甲基碳酸酯紫杉烷類的活體內活性vs Sc A2780 化合物 口服劑量a 時間表 口 服藥效 vs. ScA2780 對數細胞殺死値^ (治癒7處理）b 1 a 65 q2dx5 4.4(0/8) lb 28 q2dx5 3.0(0/8)** 1 c 100 q2dx5 3.8(.0/8) Id 140 q2dx5 4.1(0/8) 1 e 55 q2dx5 1.5(0/8) If 36 q2dx5 1.8(0/8) lg 32 q2dx5 0.9(0/8) lh 100 q2dx5 7.0(1/8) lj 120 q2dx5. 2.1(0/8) lk 130 q2dx5 2.2(0/8) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財1局員工消費合作社印製 a.最適或最大可容耐劑量水平，以毫克每公斤測試。 給出的劑量是用於單次服藥且於五次服藥中重複者。治療 全程所給的化合物總量，因此是五倍於表3所示口服劑量。 * *8隻受測老鼠中有一隻經治癒。 b. 經判斷治癒的（按照以上定義者）小鼠的數目除已受 處理小鼠的總數即爲“治癒/處理”的意思，其在表格3中 顯示於小括號內。 c. “對數細胞殺死値”已經在上文中定義。 本紙張尺度4用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -51 - 1245041 A7 B7 五、發明説明“9 ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 如從表3中的結果可以看出者，所有的化合物Ia-Ik顯 示出明顯的口服抗腫瘤活性。明顯的抗腫瘤活性係經定義 爲接近一個對數細胞殺死値（l〇g cell kill)。這可以與沒有口 服活性的化合物，諸如紫杉酚（亦即具有接近於零的對數細 胞殺死値者）觀察到的結果相比。應該確認者，紫杉酚，其 爲商業可取得的抗癌藥物，TAXOL®，的活性成份），爲一 種注射用藥，且不用於經口服用，因其不具有口服效用。 用於治療各種腫癌時，本發明式I化合物可以用類似於 紫杉酚的方式使用，例如可參看Physician’s Desk Reference, 4 9th Edition, Medical Economics，P 682，1995。本發明化合 物的用藥劑量、方式和時間安排沒有特別的限制；在癌症 治療技藝中熟練的腫瘤專家可以在不用到過當實驗之下確 定出給用本發明化合物的恰當治療方案。因此式‘I化合物可 以經由任何合適的給藥途徑用藥，非經腸地或口服地。非 經腸給藥包括靜脈內、腹膜內、肌肉內和皮下給藥。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 用來實施本發明方法的劑藥爲可使預防性治療或引起 最大治療反應成爲可能的劑量。劑量可依給藥的類型、所 選特別產品以及接受治療個人的特點等而變異。通常，劑 量是對那些由反常的細胞增生引起的疾病具有治療藥效者 。本發明產品可視需要經常給用以期獲得理想治療效果。 某些病人可能對相當高或低的劑量迅速反應，並且接著要 求輕微的維繫劑量或根本都不需要維繫劑量。經由靜脈內 路徑時，劑量可以爲，例如，在1到100小時間，約20到 約500 mg/m2的範圍。經由口服途徑時，劑量可爲5- 1000毫 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -52- !245〇41 A7 B7 五、發明説明fe〇 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 克/公斤體重/每天的範圍。實際的劑量可以根據所調配的組 成物、給藥途徑以及特別的部位、宿主以及所治療的腫瘤 類型而改變。決定劑量時需考慮改變藥物作用的許多因素 ’包括病人的年齡、重量、性別、飮食和身體狀況。 經濟部智慧財度局員Η消費合作社印製 本發明也提出醫藥調合物（組成物），其包括一抗腫瘤有 效量的式I化合物，組合著一或更多種的醫藥可接受載劑、 賦形劑、稀釋劑或輔助劑。該組成物可以用傳統的方法來 製造。調配紫杉酚或其衍生物的例子可以參看，例如，美 國專利第4,960,790和4,8 14,470號，且可以按照這些例子來 調配本發明化合物。紫杉酚調合物的其他例子可以在前文 背景技藝中引用的一般參考文獻中找到。例如，式I化合物 可以調配成錠劑、九劑、散劑混合物、膠囊、注射劑、溶 液、栓劑、乳劑、分散液、食物預混物、膠體溶液以及其 他合適的形式。其也可經製造成無菌固體組成物的形式， 例如，冷凍乾燥者，若需要時，與其他醫藥可接受的賦形 劑組合。這種固體組成物可以在非經腸給藥之前，用無菌 水，生理食鹽水或水與有機溶劑混合物，諸如，丙二醇、 乙醇，以及相似之物或某些其他的無菌可注射介質，予以 重調。 典型醫藥可接受載劑是，例如，甘露醇、尿素、葡聚 糖、乳糖、馬鈴薯澱粉和玉米澱粉、硬脂酸鎂、滑石粉、 植物油、聚烷二醇、乙基纖維素、聚（乙烯基吡咯烷酮）、碳 酸鹽鈣、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙基酯、苯甲酸苄酯、碳 酸鈉、明膠、碳酸鹽鉀、矽酸。藥物製備也可包含無毒性 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（210 X297公釐) ""~ -53- 1245041 A7 B7 五、發明説明（51 ) 的輔助物質，諸如乳化劑、防腐劑、濕潤劑，及相似物， 例如山梨糖醇一月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯，聚氧化乙烯 一硬脂酸酯、甘油三棕櫚酸酯、磺酸基琥珀酸二辛酯鈉及 相似之物。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -54-

Claims (1)

1. Ι245Θ4Ϊ ‘ Λ:…4:」

   .AJL '申請專利範圍 附件4Α : 種式I化合物或其醫藥可接受鹽類 r，Β8/ |!f~~j£~^ 第9 0 1 ο 1 6 9 0號專利申請案 中文申請專利範圍替換本 民國94年5月4日修正

   其中： R爲苯基、異丙基、或第三丁基； R1 爲-C(〇)Rz 其中 RZ 爲（Ch3)3c〇 …（CH3)3CCH2· ch3(ch2)3〇…環丁基、環己氧基、或（2·呋喃基）； R2 爲 ch3c(o)o… (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 所 列 下 0 選 係 其 物 合 化 之 項 11 第 圍 /S-E : r 利者 專中 請之 申合 如組 2 的 成 構 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（2ΐ〇χ 297公釐） 1245041 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 R R1 R2 化合物 (ch3)3c- (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- la (ch3)2ch- (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- lb 苯基 (CH3)3CCH2C(0)- ch3c(o)o- Ic 苯基 環丁基c(0)- CH3C(0)0- Id (ch3)3c- 環己基oc(o)- ch3c(o)o- Ie (ch3)3c- (ch3)3cch2c(o)- ch3c(o)o- If 苯基 (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- Is 苯基 ch3(ch2)3oc(o)- CH3C(0)0- Ih (ch3)3c- 環丁基c(o)- ch3c(o)o- ii (ch3)3c- (2-呋喃基）c(0)- ch3c(o)o- Ik (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 3 .如申請專利範圍第2項之化合物，其爲化合物i a。 4 .如申請專利範圍第2項之化合物，其係選自下列所 構成的組合之中者： R R1 R2 (ch3)3c- (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- (ch3)3c- (CH3)3CCH2C(0)- ch3c(o)o- (ch3)3c- 環丁基c(0) ch3c(o)o- (ch3)3c- (2-呋喃基）C(0)- ch3c(o)o- 5 ·如申請專利範圍第1項之化合物，其中R爲第三 , 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -2 - 1245041 A8 B8 C8 D8 、申請專利範圍 基。 $ j_組合 6 . —種用以抑制哺乳動物宿主的腫瘤生長^ W -- • - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) @ 1率5 Ϊ苜中 物，包括腫瘤生長抑制量的如申請專利範® _ ^ 任一項所述化合物。 7 .如申請專利範圍第6項之醫藥組合物’其係，經D ’給 用者。 8 .如申請專利範圍第7項之醫藥組合物’其中該化$ 物係選自下列： —R R1 R2 化合物 _LCH3)3C- (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- la Ich3)2Ch- (ch3)3coc(o)- CH3C(0)0- lb _苯基 (ch3)3cch2c(o)- ch3c(o)o- I c 苯基 環丁基c(o)- CH3C(0)0- Id _JCH3)3c- 環己基oc(o)- ch3c(o)o- I e _ (CH3)3C- (CH3)3CCH2C(0)- ch3c(o)o- If 苯基 (ch3)3coc(o)- ch3c(o)o- Ig 苯基 ch3(ch2)3oc(o)- ch3c(o)o- Ih (CH3)3C- 環丁基c(o)- ch3c(o)o- Ii (ch3)3c- (2-呋喃基）c(0)- ch3c(o)o- Ik 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 9 .如申請專利範圍第8項之醫藥組合物，其中該化合 物爲化合物I a。 本紙張尺度適用中國國家禕準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -3 -