TW201317223A

TW201317223A - 噻吩化合物

Info

Publication number: TW201317223A
Application number: TW101127011A
Authority: TW
Inventors: Brian Luisi; David Willcox; Stefanie Roeper; Kan-Nian Hu; Hoa Q Luong
Original assignee: Vertex Pharma
Priority date: 2011-07-26
Filing date: 2012-07-26
Publication date: 2013-05-01
Also published as: US20140235704A1; AR087346A1; AR087344A1; WO2013016490A1; WO2013016501A1; AU2012286853A1; WO2013016492A1; US20140235703A1; TW201313697A; EP2736893A1; US20140235705A1; WO2013016491A1; AR087345A1

Abstract

本發明描述由以下結構式表示之化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X及多晶形式ZA：□。製備化合物(1)之多晶形式M的方法包括在10℃至47℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式M，該溶劑系統包括異丙醇、乙酸乙酯、乙酸正丁酯、乙酸甲酯、丙酮、2-丁酮(甲基乙基酮(MEK))或庚烷或其組合。製備化合物(1)之多晶形式H的方法包括在48℃至70℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)之溶液以形成化合物(1)之形式H。製備化合物(1)之多晶形式P的方法包括在室溫下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式P，該溶劑系統包括選自由二氯甲烷及四氫呋喃(THF)及其混合物組成之群的溶劑。製備化合物(1)之多晶形式X的方法包括自化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G中移除乙酸乙酯。製備化合物(1)之多晶形式ZA的方法包括自化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A中移除乙酸正丁酯。

Description

噻吩化合物

相關申請案

本申請案主張以下臨時申請案之優先權：2011年7月26日申請之美國臨時申請案第61/511,643號、2011年7月26日申請之美國臨時申請案第61/511,648號、2011年7月26日申請之美國臨時申請案第61/511,647號、2011年7月27日申請之美國臨時申請案第61/512,079號、2011年7月26日申請之美國臨時申請案第61/511,644號、2011年10月11日申請之美國臨時申請案第61/545,751號、2012年4月12日申請之美國臨時申請案第61/623,144號。該等申請案之全部教示內容係以引用的方式併入本文中。

C型肝炎病毒(HCV)為屬於黃病毒科(Flaviviridae)之正股RNA病毒，且與包括豬瘟病毒及牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)在內之瘟病毒屬具有最近的親緣關係。咸信HCV係經由產生互補的負股RNA模板來複製。由於缺乏用於該病毒之有效的培養複製系統，故HCV粒子係自混合人血漿中分離且藉由電子顯微術顯示直徑為約50 nm至60 nm。HCV基因體為具有約9,600鹼基對編碼具有3009至3030個胺基酸之聚合蛋白質的單股正義RNA，其在轉譯時及轉譯後裂解為成熟病毒蛋白(核心、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)。咸信結構醣蛋白E1及E2係包埋至病毒性脂質包膜中且形成穩定的雜二聚體。亦咸信結構核心蛋白與病毒RNA基因體相互作用形成核衣殼。命名為NS2至NS5之非結構蛋白包括具有參與病毒複製及蛋白質加工之酶功能的蛋白質，包括聚合酶、蛋白酶及解螺旋酶。

受HCV污染之主要來源為血液。HCV感染作為健康問題之規模係由在高危群體中之發病率來說明。舉例而言，在西方國家中，60%至90%之血友病患者及超過80%之靜脈內藥物濫用者慢性感染HCV。對於靜脈內藥物濫用者，視所研究群體而定發病率介於約28%至70%之間。由於用於篩選供血者之診斷工具的進步，近來與輸血後有關之新HCV感染的比例已顯著降低。

聚乙二醇化干擾素加病毒唑之組合為用於慢性HCV感染之首選療法。此療法不在大多數感染最普遍基因型(1a及1b)之患者中提供持續病毒反應(SVR)。此外，顯著副作用阻礙對當前療法之順應性且對於一些患者可能需要減少或停止給藥。

針對HCV感染之抗病毒劑通常可以各種不同形式製備。可製備該等藥劑以便具有包括化學衍生物或鹽在內之各種不同化學形式或具有不同物理形式。舉例而言，其可為非晶形的，可具有不同結晶性多晶型物，或可以不同溶劑合或水合狀態存在。藉由改變形式，有可能改變其物理性質。該等不同形式可具有不同性質，尤其作為口服調配物。特定而言，可能需要鑑別展示諸如以下之改良性質的改良形式：增加之水溶性及穩定性、醫藥調配物之較佳可加工性或製備及經口投與之組合物之生物可用性增加。以上討論之該等改良性質可以對特定治療效果有益之方式來改變。

抗病毒劑形式之改變可為調節該種抗病毒劑之物理性質以更適用於治療HCV感染的多種方法之一。

本發明大體上係關於化合物(1)之多晶形式，使用化合物(1)之多晶形式來抑制或降低生物活體外樣本中或個體中HCV聚合酶之活性及治療個體中之HCV感染的方法，及製備該等形式之方法。

在一個實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式M。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式H。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式P。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之非晶形式。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式X。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式ZA。

在另一實施例中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含：選自由化合物(1)之形式M、形式H及形式P組成之群的多晶形式；或化合物(1)之非晶形式，及至少一種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

在另一實施例中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含：選自由化合物(1)之形式X及形式ZA組成之群的多晶形式；及至少一種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

在另一實施例中，本發明係關於一種抑制或降低生物活體外樣本中HCV聚合酶之活性的方法。該方法包括向樣本投與有效量之選自由化合物(1)之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA組成之群的多晶形式或化合物(1)之非晶形式。

在另一實施例中，本發明係關於一種抑制或降低個體中HCV聚合酶之活性的方法。該方法包括向個體投與有效量之選自由化合物(1)之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA組成之群的多晶形式或化合物(1)之非晶形式。

在另一實施例中，本發明係關於一種治療個體中之HCV感染的方法。該方法包括向個體投與有效量之選自由化合物(1)之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA組成之群的多晶形式或化合物(1)之非晶形式。

亦提供製備化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X及多晶形式ZA之方法。製備化合物(1) 之多晶形式M的方法包括在10℃至47℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式M，該溶劑系統包括異丙醇、乙酸乙酯、乙酸正丁酯、乙酸甲酯、丙酮、2-丁酮(甲基乙基酮(MEK))或庚烷或其組合。製備化合物(1)之多晶形式H的方法包括在48℃至70℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)之溶液以形成化合物(1)之形式H。製備化合物(1)之多晶形式P的方法包括在室溫下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式P，該溶劑系統包括選自由二氯甲烷、四氫呋喃(THF)及其混合物組成之群的溶劑。製備化合物(1)之多晶形式X的方法包括自化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G中移除乙酸乙酯，其中化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5及12.1，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。製備化合物(1)之多晶形式ZA的方法包括自化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A中移除乙酸正丁酯，其中化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：9.7及16.5，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

亦提供本文中描述之化合物(1)之多晶形式用於抑制或降低生物活體外樣本或個體中HCV聚合酶之活性的用途。亦提供化合物(1)之多晶形式用於治療個體中之HCV感染的用途。

本文中亦提供化合物(1)之非晶形式用於抑制或降低生物活體外樣本或個體中HCV聚合酶之活性的用途。亦提供非晶化合物(1)用於治療個體中之HCV感染的用途。

本發明亦提供本文中描述之化合物(1)之多晶形式或非晶化合物(1)在製造用於治療個體中之HCV感染的藥物中之用途。

由以下結構式表示之化合物(1)及其醫藥學上可接受之鹽為NS5B聚合酶抑制劑，且亦描述於WO 2008/058393中：

化合物(1)可以不同多晶形式存在。如在此項技術中已知，多晶型性為化合物結晶為超過一種不同結晶或「多晶型」物質之能力。多晶型物為化合物的一種固體結晶相，其具有呈固態之彼化合物分子之至少兩種不同排列或多晶形式。任何指定化合物之多晶形式係由相同化學式或組成來定義，且化學結構就如同兩種不同化合物之晶體結構一般不同。不同多晶型物通常可藉由諸如X射線粉末繞射(XRPD)圖、熱解重量分析(TGA)及差示掃描熱量測定(DSC)之分析方法或由其熔點或此項技術中已知之其他技術來表徵。如本文中所用之術語「多晶形式」意謂不具有任何溶劑合物之純多晶形式。

在一個實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式M。在一個特定實施例中，多晶形式M之特徵為具有在以2θ±0.2表示之19.6處出現最強特徵峰的X射線粉末繞射圖。在另一特定實施例中，多晶形式M之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：19.6、16.6、18.1、9.0、22.2及11.4。在另一實施例中，多晶形式M之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：19.6(100.0%)、16.6(72.4%)、18.1(59.8%)、9.0(47.6%)、22.2(39.9%)及11.4(36.6%)，圓括號中為相對強度。在另一實施例中，多晶形式M之特徵為具有實質上與圖2中所示相同的X射線粉末繞射圖。X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

在另一實施例中，多晶形式M之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在230±2℃下具有吸熱峰。在另一實施例中，多晶形式M之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在177.3、134.3、107.4、56.5、30.7及25.3下出現波峰。在另一實施例中，多晶形式M之特徵為具有實質上與圖6中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式H。在一個特定實施例中，多晶形式H之特徵為具有在以2θ±0.2表示之6.6及17.3處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中在6.6處之峰為最強峰。在另一特定實施例中，多晶形式H之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：6.6、18.7、8.5、17.3、15.8及19.4。在另一實施例中，多晶形式H之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：6.6(100.0%)、18.7(87.8%)、8.5(66.7%)、17.3(58.4%)、15.8(39.9%)及19.4(29.8%)，圓括號中為相對強度。在另一實施例中，多晶形式H之特徵為具有實質上與圖3中所示相同的X射線粉末繞射圖。X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

在另一實施例中，多晶形式H之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在238±2℃下具有吸熱峰。在另一實施例中，多晶形式H之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在162.2、135.9、131.1、109.5、45.3及23.9處出現波峰。在另一實施例中，多晶形式H之特徵為具有實質上與圖7中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。

在另一實施例中，本發明係關於化合物(1)之多晶形式P。在一個特定實施例中，多晶形式P之特徵為具有在以2θ±0.2表示之7.0及15.8處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中在7.0處之峰為最強峰。在另一實施例中，多晶形式P之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.0、15.8、9.8、19.3、8.5及21.9。在另一實施例中，多晶形式P之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.0(100%)、15.8(21.9%)、9.8(14.6%)、19.3(11.9%)、8.5 (10.5%)及21.9(9.5%)，圓括號中為相對強度。在另一實施例中，多晶形式P之特徵為具有實質上與圖4中所示相同的X射線粉末繞射圖。X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

在另一實施例中，多晶形式P之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在160±2℃下具有吸熱峰。在另一實施例中，多晶形式P之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在161.5、133.6、105.8、44.4、31.1及22.1處出現波峰。在另一實施例中，多晶形式P之特徵為具有實質上與圖8中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。

在另一實施例中，多晶形式X之特徵為具有在以2θ±0.2表示之7.5及12.1處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在另一實施例中，多晶形式X之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5、12.1、13.0、13.8、16.2及19.7，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在另一實施例中，多晶形式X之特徵為具有實質上與圖9中所示相同的X射線粉末繞射圖。

在另一實施例中，多晶形式ZA之特徵為具有在以2θ±0.2表示之5.2及10.2處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在另一實施例中，多晶形式ZA之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：5.2、10.2、 16.5、18.6、19.8及20.3，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在另一實施例中，多晶形式ZA之特徵為具有實質上與圖10中所示相同的X射線粉末繞射圖。

在另一實施例中，本發明係關於非晶化合物(1)。在一個特定實施例中，化合物(1)之非晶形式之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在161.1、132.9、106.5、43.3、31.2及23.3處出現波峰。在另一實施例中，非晶形式之特徵為具有實質上與圖9中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。

在另一實施例中，本發明係關於製備化合物(1)之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA之方法。化合物(1)之形式M可藉由採用在10℃至47℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式M的方法來製備，該溶劑系統包括異丙醇、乙酸乙酯、乙酸正丁酯、乙酸甲酯、丙酮、2-丁酮或庚烷或其組合。在一個特定實施例中，溶劑系統包括：異丙醇；乙酸乙酯；乙酸正丁酯；乙酸正丁酯與丙酮之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸正丁酯與5 wt%至95 wt%之丙酮，諸如90 wt%之乙酸正丁酯與10 wt%之丙酮)；乙酸正丁酯與乙酸甲酯之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸正丁酯與5 wt%至95 wt%之乙酸甲酯，諸如50 wt%之乙酸正丁酯與50 wt%之乙酸甲酯)；丙酮；2-丁酮(甲基乙基酮(MEK))；乙酸正丁酯與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸正丁酯與5 wt%至95 wt%之庚烷，諸如50 wt%之乙酸正丁酯與50 wt%之庚烷)；丙酮與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之丙酮與5 wt%至95 wt%之庚烷，諸如50 wt%之丙酮與50 wt%之庚烷)；或乙酸乙酯與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸乙酯與5 wt%至95 wt%之庚烷，諸如50 wt%之乙酸乙酯與50 wt%之庚烷)。在另一特定實施例中，化合物(1)之形式M可藉由採用在以下條件下攪拌化合物(1)來製備：i)在異丙醇中，在10℃至47℃範圍內之溫度下；ii)在乙酸乙酯中，在45℃至47℃範圍內之溫度下；iii)在乙酸正丁酯中，在35℃至47℃範圍內之溫度下；iv)在乙酸正丁酯與丙酮之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸丁酯與5 wt%至95 wt%之丙酮，諸如90 wt%之乙酸丁酯與10 wt%之丙酮)中，在30℃至47℃範圍內之溫度下；v)在乙酸正丁酯與乙酸甲酯之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸正丁酯與5 wt%至95 wt%之乙酸甲酯，諸如50 wt%之乙酸正丁酯與50 wt%之乙酸甲酯)中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；vi)在丙酮中，在20℃至47℃範圍內之溫度下；vii)在2-丁酮(MEK)中，在30℃至47℃範圍內之溫度下；viii)在乙酸正丁酯與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸正丁酯與5 wt%至95 wt%庚烷，諸如50 wt%乙酸正丁酯與50 wt%之庚烷)中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；ix)在丙酮與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之丙酮與5 wt%至95 wt%之庚烷，諸如50 wt%之丙酮與50 wt%之庚烷)中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；x)或在乙酸乙酯與庚烷之混合物(例如5 wt%至95 wt%之乙酸乙酯與5 wt%至95 wt%之庚烷，諸如50 wt%之乙酸乙酯與50 wt%之庚烷)中，在25℃至47℃範圍內之溫度下。

化合物(1)之形式H可藉由採用在48℃至70℃範圍內之溫度下(諸如在50℃至70℃或55℃至70℃範圍內之溫度下)攪拌化合物(1)之溶液的方法來製備。在一個特定實施例中，將化合物(1)與包括乙酸乙酯之溶劑系統之混合物在50℃至70℃範圍內之溫度下攪拌一段時間以形成形式H。在另一特定實施例中，將化合物(1)與包括乙酸乙酯之溶劑系統之混合物在55℃至70℃範圍內之溫度下攪拌一段時間以形成形式H。在另一特定實施例中，將化合物(1)與包括乙酸乙酯之溶劑之混合物在65±2℃之溫度下攪拌一段時間以形成形式H。

化合物(1)之形式P可藉由採用在室溫下加熱化合物(1)與溶劑系統之混合物的方法來製備，該溶劑系統包括選自由二氯甲烷及四氫呋喃(THF)及其混合物組成之群的溶劑。在一個特定實施例中，將化合物(1)與包括二氯甲烷之溶劑系統的混合物在室溫下攪拌一段時間以形成形式P。

化合物(1)之形式X可藉由採用自化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G中移除乙酸乙酯的方法來製備。典型地，化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5及12.1，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在一個特定實施例中，乙酸乙酯溶劑合物G之特徵進一步為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5、12.1、13.0、13.7、16.2及19.7，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

化合物(1)之形式ZA可藉由採用自化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A中移除乙酸正丁酯的方法來製備。典型地，化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：9.7及16.5，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。在一個特定實施例中，乙酸正丁酯溶劑合物A之特徵進一步為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：9.7、14.9、16.5、19.6、20.0及21.0，其中X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。

典型地，化合物(1)之溶劑合物可藉由在適合溫度(例如室溫、10℃至35℃或20℃至25℃)下攪拌化合物(1)與所需溶劑之混合物足夠時間以形成所要化合物(1)之溶劑合物來製備。舉例而言，化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物可藉由在5℃至50℃(例如5℃至35℃或10℃至50℃)範圍內之溫度下攪拌化合物(1)與乙酸乙酯之混合物來製備，而化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物可藉由在室溫下攪拌化合物(1)與乙酸正丁酯之混合物來製備。

在另一實施例中，本發明係關於製備非晶化合物(1)之方法。非晶化合物(1)可藉由採用噴霧乾燥結晶化合物(1)之溶液來製備。在一個特定實施例中，結晶化合物(1)為形式A、形式M、形式P或形式H。在另一特定實施例中，結晶化合物(1)為形式A。在另一特定實施例中，方法採用噴霧乾燥結晶化合物(1)於乙醇中之溶液。用於噴霧乾燥之任何適合條件皆可用於本發明。特定例示性條件描述於以下例示部分中。

本發明涵蓋呈經分離純形式或呈與其他物質(例如化合物(1)之其他已知多晶形式(亦即非晶形式、化合物(1)之形式A或其他形式)或任何其他物質)混合時之固體組合物形式之混合物形式的上述化合物(1)之多晶形式及非晶化合物(1)。

因此，在一態樣中，提供呈經分離固體形式之化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X及多晶形式ZA。在另一態樣中提供呈經分離固體形式之非晶化合物(1)。

在另一態樣中，提供呈純形式之化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X及多晶形式ZA。純形式意謂化合物(1)之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA超過95%(w/w)，例如超過98%(w/w)、超過99%(w/w%)、超過99.5%(w/w)或超過99.9%(w/w)。在另一態樣中，提供呈純形式之非晶化合物(1)。純形式意謂非晶化合物(1)超過95%(w/w)，例如超過98%(w/w)、超過99%(w/w%)、超過99.5%(w/w)或超過99.9%(w/w)。

更特定而言，本發明提供呈多晶形式與一或多種其他結晶形式、溶劑合物、非晶形式或其他多晶形式或其組合之組合物或混合物形式的化合物(1)之各多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X及多晶形式ZA。舉例而言，該種組合物可包含多晶形式M以及化合物(1)之一或多種其他多晶形式，諸如非晶形式、水合物、溶劑合物、多晶形式A、形式H、形式P及/或其他形式或其組合。類似地，該種組合物可包含多晶形式H以及化合物(1)之一或多種其他多晶形式，諸如非晶形式、水合物、溶劑合物、多晶形式A、形式M、形式P及/或其他形式或其組合。另外，該種組合物可包含多晶形式P以及化合物(1)之一或多種其他多晶形式，諸如非晶形式、水合物、溶劑合物、多晶形式A、形式M、形式H及/或其他形式或其組合。更特定而言，以組合物中化合物(1)之總量計，組合物可包含痕量至100重量%，或例如在0.1重量%至0.5重量%、0.1重量%至1重量%、0.1重量%至2重量%、0.1重量%至5重量%、0.1重量%至10重量%、0.1重量%至20重量%、0.1重量%至30重量%、0.1重量%至40重量%或0.1重量%至50重量%範圍內的任何數量之化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H或多晶形式P。或者，以組合物中化合物(1)之總量計，組合物可包含至少50重量%、60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、95重量%、97重量%、98重量%、99重量%、99.5重量%或99.9重量%之化合物(1)之多晶形式M、多晶形式H或多晶形式P。

出於本發明之目的，化學元素係根據第75版化學與物理手冊CAS版本元素週期表來確定。另外，有機化學之一般原理係描述於「Organic Chemistry」,Thomas Sorrell, University Science Books,Sausolito：1999及「March's Advanced Organic Chemistry」，第五版，編者：Smith,M.B.及March,J.,John Wiley & Sons,New York：2001中，其全部內容係以引用的方式併入本文中。

除非另外指明，否則本文中描述之結構亦意謂包括該結構之所有異構(例如對映異構、非對映異構、順式-反式、構形及旋轉)形式。舉例而言，除非特定地繪製僅一種異構體，否則本發明中包括各不對稱中心之R及S組態、(Z)及(E)雙鍵異構體及(Z)及(E)構形異構體。如熟習該項技術者應瞭解，取代基可繞任何可旋轉鍵自由旋轉。舉例而言，繪製為之取代基亦表示。

因此，本發明化合物之單一立體化學異構體以及對映異構、非對映異構、順式/反式、構形及旋轉混合物皆在本發明之範疇內。

除非另外指明，否則本發明之化合物的所有互變異構形式皆在本發明之範疇內。

另外，除非另外指明，否則本文所述之結構亦意謂包括僅在一或多種同位素富集原子之存在方面不同之化合物。舉例而言，具有本發明結構但氫經氘或氚置換或碳經¹³C或¹⁴C富集碳置換之化合物皆在本發明之範疇內。此類化合物例如適用作生物檢定中之分析工具或探針。此類化合物，尤其氘(D)類似物亦可在治療上適用。

本文中描述之化合物在本文中係由其化學結構及/或化學名稱來定義。當由化學結構及化學名稱來提及化合物且化學結構與化學名稱相矛盾時，化學結構決定化合物之身分。

熟習此項技術者將瞭解本發明之化合物可以立體異構體(例如光學異構體(+及-)、幾何異構體(順式及反式)及構形異構體(軸型及赤道型))之形式存在。所有此類立體異構體皆包括在本發明之範疇內。

熟習此項技術者應瞭解本發明之化合物可含有對掌中心。因此，式(1)之化合物可呈兩種不同光學異構體(亦即(+)或(-)對映異構體)之形式存在。所有此類對映異構體及其混合物(包括外消旋混合物)皆包括在本發明之範疇內。單一光學異構體或對映異構體可藉由此項技術中熟知之方法(諸如對掌性HPLC、酶法解析及對掌性助劑)來獲得。

在一個實施例中，本發明之化合物係以至少95%、至少97%及至少99%不含對應對映異構體之單一對映異構體之形式提供。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少95%不含對應(-)對映異構體之(+)對映異構體之形式。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少97%不含對應(-)對映異構體之(+)對映異構體之形式。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少99%不含對應(-)對映異構體之(+)對映異構體之形式。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少95%不含對應(+)對映異構體之(-)對映異構體之形式。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少97%不含對應(+)對映異構體之(-)對映異構體之形式。

在另一實施例中，本發明之化合物呈至少99%不含對應(+)對映異構體之(-)對映異構體之形式。

化合物(I)之多晶型物及非晶形式(下文中為「活性化合物」)可藉由向主體投與治療有效量之至少一種本文中描述之本發明之活性化合物來用於治療或預防主體中之黃病毒科病毒感染。

術語「個體」、「主體」或「患者」包括動物及人類(例如男性或女性，例如兒童、青少年或成人)。「個體」、「主體」或「患者」較佳為人類。

在一個實施例中，病毒感染係選自黃病毒屬感染。在一個實施例中，黃病毒屬感染為C型肝炎病毒(HCV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬瘟病毒、登革熱病毒(dengue fever virus)、日本腦炎病毒或黃熱病毒。

在一個實施例中，黃病毒科病毒感染為C型肝炎病毒感染(HCV)，諸如HCV基因型1、基因型2、基因型3或基因型4感染。

在一個實施例中，活性化合物可用於治療HCV基因型1感染。HCV可為基因型1a或基因型1b。

在一個實施例中，活性化合物可用於治療或預防主體中之黃病毒科病毒感染，其包含向主體投與治療有效量之至少一種本文中描述之本發明之活性化合物，且進一步包含投與至少一種選自以下之其他藥劑：病毒絲胺酸蛋白酶抑制劑、病毒聚合酶抑制劑、病毒解螺旋酶抑制劑、免疫調節劑、抗氧化劑、抗菌劑、治療性疫苗、保肝劑、反義藥劑、HCV NS2/3蛋白酶抑制劑及內部核糖體進入位點(IRES)抑制劑。

在一個實施例中，提供一種抑制或降低主體中病毒聚合酶之活性的方法，其包含投與治療有效量之本文中描述之本發明之活性化合物。

在一個實施例中，提供一種抑制或降低主體中病毒聚合酶之活性的方法，其包含投與治療有效量之本文中描述之本發明之活性化合物且進一步包含投與一或多種病毒聚合酶抑制劑。

在一個實施例中，病毒聚合酶為黃病毒科病毒聚合酶。

在一個實施例中，病毒聚合酶為RNA依賴性RNA聚合酶。

在一個實施例中，病毒聚合酶為HCV聚合酶。

在一個實施例中，病毒聚合酶為HCV NS5B聚合酶。

在一個實施例中，本發明提供醫藥組合物，其包含本文中描述之本發明之活性化合物及至少一種醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑，其包括適合於所要特定劑型之任何溶劑、稀釋劑或其他液體媒劑、分散或懸浮助劑、表面活性劑、等張劑、增稠或乳化劑、防腐劑、固體黏合劑、潤滑劑及其類似物。Remington's Pharmaceutical Sciences，第十六版，E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1980)揭示用於調配醫藥學上可接受之組合物的各種載劑及用於其製備之已知技術。除非任何習知載劑介質與本發明化合物不相容，諸如產生任何不當的生物效應或另外以有害方式與醫藥學上可接受之組合物的任何其他組分相互作用，否則預期其使用在本發明之範圍內。

醫藥學上可接受之載劑可含有不會不恰當地抑制化合物之生物活性的惰性成分。醫藥學上可接受之載劑在投與個體後應具生物相容性，例如無毒、非發炎性、非免疫原性或無其他不當反應或副作用。可採用標準醫藥調配技術。

可充當醫藥學上可接受之載劑之材料的一些實例包括(但不限於)離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；血清蛋白(諸如人血清白蛋白)；緩衝物質(諸如twin 80、磷酸鹽、甘胺酸、山梨酸或山梨酸鉀)；飽和植物脂肪酸之偏甘油酯混合物；水；鹽或電解質(諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、或鋅鹽)；膠狀二氧化矽；三矽酸鎂；聚乙烯吡咯啶酮；聚丙烯酸酯；蠟；聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物；甲基纖維素；羥丙基甲基纖維素；羊毛脂；糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；粉末狀黃蓍；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；油，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；二醇，諸如丙二醇或聚乙二醇；酯，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；褐藻酸；無熱原質之水；等張鹽水；林葛爾氏溶液 (Ringer's solution)；乙醇及磷酸鹽緩衝溶液；以及其他無毒相容性潤滑劑，諸如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂；以及著色劑；釋放劑；包衣劑；甜味劑；調味劑及芳香劑，根據調配者之判斷，防腐劑及抗氧化劑亦可存在於組合物中。

視所處理感染之嚴重程度而定，可以經口、經直腸、非經腸、腦池內、陰道內、腹膜內、表面(如由粉末、軟膏或滴劑)、經頰(如經口或經鼻噴霧)或其類似方式向人類及其他動物投與上述活性化合物及其醫藥學上可接受之組合物。如本文中所用之術語「非經腸」包括(但不限於)皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內及顱內注射或輸注技術。特定而言，組合物係經口、腹膜內或靜脈內投與。

包括(但不限於)膠囊、錠劑、水性懸浮液或溶液之任何經口可接受劑型皆可用於經口投與。在供經口使用之錠劑之情況下，通常使用之載劑包括(但不限於)乳糖及玉米澱粉。亦典型地添加諸如硬脂酸鎂之潤滑劑。對於呈膠囊形式之經口投藥，適用之稀釋劑包括乳糖及乾燥玉米澱粉。當需要水性懸浮液以供經口使用時，將活性成分與乳化劑及懸浮劑組合。需要時，亦可添加某些甜味劑、調味劑或著色劑。

供經口服投與的液體劑型包括(但不限於)醫藥學上可接受的乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性化合物外，液體劑型可含有此項技術中通常使用之惰性稀釋劑，諸如水或其他溶劑；增溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺、油(尤其棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇及脫水山梨糖醇之脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀釋劑，口服組合物亦可包括佐劑，諸如潤濕劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑及芳香劑。

用於經口投與之固體劑型包括膠囊、錠劑、丸劑、粉劑及顆粒劑。在此類固體劑型中，活性化合物可與以下物質混合：至少一種惰性、醫藥學上可接受之賦形劑或載劑，諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，及/或a)填充劑或增量劑，諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及矽酸，b)黏合劑，諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯膠，c)保濕劑，諸如甘油，d)崩解劑，諸如瓊脂-瓊脂，碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉，e)阻溶劑，諸如石蠟，f)吸收促進劑，諸如第四銨化合物，g)潤濕劑，諸如十六醇及單硬脂酸甘油酯，h)吸收劑，諸如高嶺土及膨潤土，及i)潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，劑型亦可包含緩衝劑。

亦可採用相似類型之固體組合物作為使用諸如乳糖以及高分子量聚乙二醇及其類似物之賦形劑的軟填充及硬填充明膠膠囊中之填充劑。錠劑、糖衣藥丸、膠囊、丸劑及顆粒劑的固體劑型可製備成具有包衣及外殼(諸如腸溶衣及醫藥調配技術中熟知之其他包衣)。其可視情況含有遮光劑，且可具有使其僅在或較佳地在腸道特定部分中視情況以延遲方式釋放活性成分之組成。可使用之包埋組合物之實例包括聚合物質及蠟。亦可採用相似類型之固體組合物作為使用諸如乳糖以及高分子量聚乙二醇及其類似物之賦形劑的軟填充及硬填充明膠膠囊中之填充劑。

上述活性化合物亦可呈具有一或多種以上所指出之賦形劑的微囊封形式。錠劑、糖衣藥丸、膠囊、丸劑及顆粒劑之固體劑型可製備成具有包衣及外殼(諸如腸溶衣、控釋包衣及醫藥調配技術中熟知之其他包衣)。在該等固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性稀釋劑(諸如蔗糖、乳糖或澱粉)混合。作為慣例，該等劑型亦可包含除惰性稀釋劑之外的其他物質，例如製錠潤滑劑及其他製錠助劑，諸如硬脂酸鎂及微晶纖維素。在膠囊、錠劑及丸劑的情況下，該等劑型亦可包含緩衝劑。其可視情況含有遮光劑，且亦可具有使其僅在或較佳地在腸道之特定部分中視情況以延遲方式釋放活性成分的組成。可使用之包埋組合物之實例包括聚合物質及蠟。

可注射製劑(例如無菌可注射水性或油性懸浮液)可根據已知技術使用適合之分散劑或潤濕劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒、非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液、懸浮液或乳液，例如呈於1,3-丁二醇中之溶液形式。可採用的可接受之媒劑及溶劑有水、林葛爾氏溶液(U.S.P.)及等張氯化鈉溶液。此外，習知採用無菌不揮發性油作為溶劑或懸浮介質。為此目的，可採用任何溫和不揮發性油，包括合成單甘油酯或二甘油酯。此外，在製備可注射製劑時使用脂肪酸，諸如油酸。

可注射調配物可例如藉由經由細菌截留過濾器過濾來滅菌，或藉由併入滅菌劑呈可在使用前溶解或分散於無菌水或其他無菌可注射介質中之無菌固體組合物形式來滅菌。

無菌可注射形式可為水性或油性懸浮液。該等懸浮液可根據此項技術中已知之技術使用適合之分散劑或濕潤劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒、非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如呈於1,3-丁二醇中之溶液形式。可採用的可接受之媒劑及溶劑中有水、林葛爾氏溶液及等張氯化鈉溶液。此外，習知採用無菌不揮發性油作為溶劑或懸浮介質。為此目的，可採用任何溫和不揮發性油，包括合成單甘油酯或二甘油酯。脂肪酸(諸如油酸及其甘油酯衍生物)適用於製備可注射製劑，醫藥學上可接受之天然油(諸如橄欖油或蓖麻油)亦如此，尤其呈其聚氧乙烯化型式。該等油溶液或懸浮液亦可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，諸如羧甲基纖維素或類似分散劑，其通常用於調配醫藥學上可接受之劑型，包括乳液及懸浮液。其他通常使用之界面活性劑(諸如吐溫(Tween)、司盤(Span))及其他通常用於製造醫藥學上可接受之固體、液體或其他劑型之乳化劑或生物可用性增強劑亦可用於調配之目的。

為了延長所投與活性化合物之作用，通常需要減緩化合物自皮下或肌肉內注射的吸收。此舉可藉由使用具有不良水溶性之結晶或非晶物質之液體懸浮液來實現。化合物之吸收速率則取決於其溶解速率，而溶解速率又可取決於晶體尺寸及結晶形式。或者，藉由將化合物溶解或懸浮於油性媒劑中來延遲非經腸投與之化合物的吸收。可注射積存形式係藉由形成活性化合物於諸如聚丙交酯-聚乙交酯之可生物降解聚合物中之微囊基質來製備。視活性化合物與聚合物之比率及所採用特定聚合物之性質而定，可控制化合物釋放速率。其他可生物降解聚合物之實例包括聚(原酸酯)及聚(酸酐)。積存可注射調配物亦係藉由將化合物包覆於與身體組織相容之脂質體或微乳液中來製備。

需要時可採用適用於提供活性成分之持續釋放的上述調配物。

用於直腸或陰道投與之組合物特定言之為栓劑，其可藉由將活性化合物與適合之非刺激性賦形劑或載劑(諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟)混合來製備，該等賦形劑或載劑在環境溫度下為固體但在體溫下為液體且因此在直腸或陰道空腔中融化並釋放活性化合物。

用於局部或經皮投與之劑型包括軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、粉末、溶液、噴霧、吸入劑或貼片。在無菌條件下將活性組分與醫藥學上可接受之載劑及任何所需防腐劑或緩衝劑按要求混合。眼用調配物、滴耳劑及滴眼劑亦涵蓋在本發明之範疇內。另外，亦可使用經皮貼片，其具有使化合物受控傳遞至身體之附加優勢。該等劑型可藉由將化合物溶解或分配於適當介質中來製備。亦可使用吸收增強劑來增加化合物穿過皮膚之流量。可以通過提供速率控制膜或將化合物分散在聚合物基質或凝膠中來控制速率。

或者，活性化合物及其醫藥學上可接受之組合物亦可藉由經鼻氣溶膠或吸入來投與。該等組合物係根據醫藥調配技術中熟知之技術來製備，且可採用苄醇或其他適合之防腐劑、增強生物可用性之吸收促進劑、氟碳化合物及/或其他習知的增溶或分散劑來製備為鹽水溶液。

活性化合物及其醫藥學上可接受之組合物可調配成單位劑型。術語「單位劑型」係指適合作為用於接受治療之個體之單一劑量的物理個別單位，各單位含有經計算產生所要治療效果之預定數量之活性物質，視情況與適合之醫藥載劑締合。單位劑型可呈單一日劑量或多重日劑量(例如每天約1至4次或更多次)。當使用多重日劑量時，各劑量之單位劑型可相同或不同。單位劑型中之活性化合物含量將視例如所治療之主體及特定投藥模式而改變，例如每天每公斤體重0.01 mg至每天每公斤體重100 mg。

應瞭解，本文中描述之本發明之活性化合物用於治療所需的量將不僅隨所選的特定化合物而變化，而且隨給藥途徑、需要治療之病狀性質及患者年齡及病狀而變化，且最終由巡診醫生或獸醫來決定。然而，一般而言，適合之劑量將在每天每公斤體重約0.1 mg至約750 mg範圍內，例如在每天0.5 mg/kg至60 mg/kg範圍內或例如在每天1 mg/kg 至20 mg/kg範圍內。

所要劑量可適宜地以單一劑量或以適當時間間隔投與之分次劑量的形式存在，例如每天兩次、三次、四次或多於四次劑量的形式。

活性化合物可調配為醫藥組合物形式，該醫藥組合物進一步包括一或多種選自以下之其他藥劑：病毒絲胺酸蛋白酶抑制劑、病毒NS5A抑制劑、病毒聚合酶抑制劑、病毒解螺旋酶抑制劑、免疫調節劑、抗氧化劑、抗細菌劑、治療性疫苗、保肝劑、反義藥劑、HCV NS2/3蛋白酶抑制劑及內部核糖體入口位點(IRES)抑制劑。舉例而言，醫藥組合物可包括活性化合物；一或多種選自以下之其他藥劑：非核苷HCV聚合酶抑制劑(例如HCV-796)、核苷HCV聚合酶抑制劑(例如R7128、R1626及R1479)、HCV NS3蛋白酶抑制劑(例如VX-950/特拉匹韋(telaprevir)及ITMN-191)、干擾素及病毒唑(ribavirin)；及至少一種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。

活性化合物可與一或多種選自以下之其他藥劑組合依組合療法形式使用：病毒絲胺酸蛋白酶抑制劑、病毒聚合酶抑制劑、病毒解螺旋酶抑制劑、免疫調節劑、抗氧化劑、抗細菌劑、治療性疫苗、保肝劑、反義藥劑、HCV NS2/3蛋白酶抑制劑及內部核糖體入口位點(IRES)抑制劑。

活性化合物及其他藥劑可依序投與。或者，活性化合物及其他藥劑可同時投與。以上提及之組合可適宜地存在以便以醫藥調配物形式使用，且因此包含如以上所定義之組合以及醫藥學上可接受之載劑的醫藥調配物因此構成本發明之另一態樣。

如本文中所用之術語「病毒絲胺酸蛋白酶抑制劑」意謂有效抑制哺乳動物中之病毒絲胺酸蛋白酶(包括HCV絲胺酸蛋白酶)之功能的藥劑。HCV絲胺酸蛋白酶抑制劑包括例如描述於以下專利中之彼等化合物：WO 99/07733(Boehringer Ingelheim)、WO 99/07734(Boehringer Ingelheim)、WO 00/09558(Boehringer Ingelheim)、WO 00/09543(Boehringer Ingelheim)、WO 00/59929(Boehringer Ingelheim)、WO 02/060926(BMS)、WO 2006039488(Vertex)、WO 2005077969 (Vertex)、WO 2005035525(Vertex)、WO 2005028502(Vertex)、WO 2005007681(Vertex)、WO 2004092162(Vertex)、WO 2004092161(Vertex)、WO 2003035060(Vertex)或WO 03/087092(Vertex)、WO 02/18369(Vertex)或WO 98/17679(Vertex)。

如本文中所用之術語「病毒聚合酶抑制劑」意謂有效抑制哺乳動物中之病毒聚合酶(包括HCV聚合酶)之功能的藥劑。HCV聚合酶之抑制劑包括非核苷，例如描述於以下專利中之彼等化合物：WO 03/010140(Boehringer Ingelheim)、WO 03/026587(Bristol Myers Squibb)、WO 02/100846 A1、WO 02/100851 A2、WO 01/85172 A1(GSK)、WO 02/098424 A1(GSK)、WO 00/06529(Merck)、WO 02/06246 A1(Merck)、WO 01/47883(Japan Tobacco)、WO 03/000254(Japan Tobacco)及EP 1 256 628 A2(Agouron)。

此外，其他HCV聚合酶抑制劑亦包括核苷類似物，例如描述於以下專利中之彼等化合物：WO 01/90121 A2(Idenix)、WO 02/069903 A2(Biocryst Pharmaceuticals Inc.)及WO 02/057287 A2(Merck/Isis)及WO 02/057425 A2(Merck/lsis)。

HCV聚合酶之核苷抑制劑的特定實例包括R1626、R1479(Roche)、R7128(Roche)、MK-0608(Merck)、R1656(Roche-Pharmasset)及伐洛他濱(Valopicitabine)(Idenix)。HCV聚合酶之抑制劑的特定實例包括JTK-002/003及JTK-109(Japan Tobacco)、HCV-796(Viropharma)、GS-9190(Gilead)及PF-868,554(Pfizer)。

如本文中所用之術語「病毒NS5A抑制劑」意謂有效抑制哺乳動物中之病毒NS5A蛋白酶之功能的藥劑。HCV NS5A抑制劑包括例如描述於以下專利中之彼等化合物：WO 2010/117635、WO 2010/117977、WO 2010/117704、WO 2010/1200621、WO 2010/096302、WO 2010/017401、WO 2009/102633、WO 2009/102568、WO 2009/102325、WO 2009/102318、WO 2009020828、WO 2009020825、WO 2008144380、WO 2008/021936、WO 2008/021928、WO 2008/021927、WO 2006/133326、WO 2004/014852、WO 2004/014313、WO 2010/096777、WO 2010/065681、WO 2010/065668、WO 2010/065674、WO 2010/062821、WO 2010/099527、WO 2010/096462、WO 2010/091413、WO 2010/094077、WO 2010/111483、WO 2010/120935、WO 2010/126967、WO 2010/132538及WO 2010/122162。 HCV NS5A抑制劑之特定實例包括：EDP-239(由Enanta研發)；ACH-2928(由Achillion研發)；PPI-1301(由Presido Pharmaceuticals研發)；PPI-461(由Presido Pharmaceuticals研發)；AZD-7295(由AstraZeneca研發)；GS-5885(由Gilead研發)；BMS-824393(由Bristol-Myers Squibb研發)；BMS-790052(由Bristol-Myers Squibb研發)； (Gao M.等人，Nature,465,96-100(2010)；核苷或核苷酸聚合酶抑制劑，諸如PSI-661(由Pharmasset研發)、PSI-938(由Pharmasset研發)、PSI-7977(由Pharmasset研發)、INX-189(由Inhibitex研發)、JTK-853(由Japan Tobacco研發)、TMC-647055(Tibotec Pharmaceuticals)、RO-5303253(由Hoffmann-La Roche研發)及IDX-184(由Idenix Pharmaceuticals研發)。

如本文中所用之術語「病毒解螺旋酶抑制劑」意謂有效抑制哺乳動物中之病毒解螺旋酶(包括黃病毒科解螺旋酶)之功能的藥劑。

如本文中所用之「免疫調節劑」意謂有效增強或加強哺乳動物中之免疫系統反應之彼等藥劑。免疫調節劑包括例如I類干擾素(諸如α干擾素、β干擾素、δ干擾素及ω干擾素、x干擾素、複合干擾素及脫唾液酸干擾素)、II類干擾素(諸如γ干擾素)及聚乙二醇化干擾素。

例示性免疫調節劑包括(但不限於)；沙利度胺(thalidomide)；IL-2；促紅細胞生成素；IMPDH抑制劑，例如美泊地布(Merimepodib)(Vertex Pharmaceuticals Inc.)；干擾素，包括天然干擾素(諸如OMNIFERON，Viragen及SUMIFERON，Sumitomo，天然干擾素之摻合物)、天然干擾素α(ALFERON，Hemispherx Biopharma,Inc.)、來自淋巴母細胞樣細胞之干擾素α n1(WELLFERON，Glaxo Wellcome)、口服α干擾素、聚乙二醇化干擾素、聚乙二醇化干擾素α 2a(PEGASYS，Roche)、重組干擾素α 2a(ROFERON，Roche)、吸入型干擾素α 2b(AERX，Aradigm)、聚乙二醇化干擾素α 2b(ALBUFERON，Human Genome Sciences/Novartis、PEGINTRON，Schering)、重組干擾素α 2b(INTRON A，Schering)、聚乙二醇化干擾素α 2b(PEG-INTRON，Schering、VIRAFERONPEG，Schering)、干擾素β-1a(REBIF，Serono,Inc.及Pfizer)、複合干擾素α(INFERGEN，Valeant Pharmaceutical)、干擾素γ-1b(ACTIMMUNE，Intermune,Inc.)、未聚乙二醇化干擾素α、α干擾素、及其類似物；及合成胸腺素α1(ZADAXIN，SciClone Pharmaceuticals Inc.)。

如本文中所用之術語「I類干擾素」意謂選自均結合至1型受體之干擾素之群的干擾素。其包括天然與合成方式產生之I類干擾素。I類干擾素之實例包括α干擾素、β干擾素、δ干擾素及ω干擾素、τ干擾素、複合干擾素及脫唾液酸干擾素。如本文中所用之術語「II類干擾素」意謂選自均結合至II型受體之干擾素之群的干擾素。II類干擾素之實例包括γ干擾素。

反義藥劑包括例如ISIS-14803。

HCV NS3蛋白酶抑制劑之特定實例包括BILN-2061(Boehringer Ingelheim)SCH-6及SCH-503034/波西普韋(Boceprevir)(Schering-Plough)、VX-950/特拉匹韋(Vertex)及ITMN-B(InterMune)、GS9132(Gilead)、TMC-435350(Tibotec/Medivir)、ITMN-191(InterMune)、MK-7009(Merck)。

內部核糖體入口位點(IRES)之抑制劑包括ISIS-14803(ISIS Pharmaceuticals)及描述於WO 2006019831(PTC therapeutics)中之彼等化合物。

在一個實施例中，用於組合物及組合之其他藥劑包括例如病毒唑、金剛胺、美泊地布、左旋病毒唑(Levovirin)、偉拉咪定(Viramidine)及馬克西明(maxamine)。

在一個實施例中，其他藥劑為干擾素α、病毒唑、水飛薊素(silybum marianum)、介白素(interleukine)-12、金剛胺、核糖核酸酶、胸腺素、N-乙醯半胱胺酸或環孢素。

在一個實施例中，其他藥劑為干擾素α 1A、干擾素α 1B、干擾素α 2A或干擾素α 2B。干擾素可以聚乙二醇化及非聚乙二醇化形式獲得。聚乙二醇化干擾素包括PEGASYS^TM及Peg-intron^TM。

用於慢性C型肝炎之PEGASYS^TM單一療法的推薦劑量為藉由腹部或大腿皮下投與每週一次180 mg(1.0 mL小瓶或0.5 mL預填充注射器)，持續48週。

當與病毒唑組合用於慢性C型肝炎時PEGASYS^TM之推薦劑量為每週一次180 mg(1.0 mL小瓶或0.5 mL預填充注射器)。

病毒唑典型地經口投與，且病毒唑之錠劑形式當前可在市面上購得。病毒唑錠劑(例如約200 mg錠劑)之一般標準日劑量為約800 mg至約1200 mg。舉例而言，病毒唑錠劑對於體重小於75 kg之個體係以約1000 mg投藥，或對於體重大於或等於75 kg之個體係以約1200 mg投藥。然而，在本文中並不將本發明之方法或組合限制於任何特定劑型或方案。典型地，病毒唑可根據其商業產品標籤中所描述之給藥方案來給藥。

PEG-lntron^TM療法之推薦劑量為皮下每週1.0 mg/kg，持續一年。應在每週之同一天投與該劑量。

當與病毒唑組合投與時，PEG-lntron之推薦劑量為每週1.5微克/公斤。

以上提及之組合可適宜地存在以便以醫藥調配物之形式使用，且因此包含如以上所定義之組合以及醫藥學上可接受之載劑的醫藥調配物因此構成本發明之另一態樣。用於本發明之方法或本發明之組合的個別組分可以獨立或組合之醫藥調配物形式依序或同時投與。

在一個實施例中，其他藥劑為干擾素α 1A、干擾素α 1B、干擾素α 2A或干擾素α 2B及視情況選用之病毒唑。

當活性化合物與至少一種針對同一病毒具活性之第二治療劑組合使用時，各化合物之劑量可與該化合物單獨使用時相同或不同。熟習此項技術者將易於瞭解適當劑量。

除非另有規定，否則本文中所用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所瞭解之含義相同的含義。本文提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻皆以其全文引用的方式併入本文中。在出現矛盾的情況下，以本說明書(包括定義)為準。此外，材料、方法及實例僅具說明性，且並不意欲具限制性。

例示 實例1：XRPD、C ¹³ 固態NMR、DSC量測之通用方法

DSC量測

DSC係在TA儀器型號Q2000 V24.3熱量計(資產標籤V014080)上進行。將約1 mg至2 mg之固體樣本置放於具有帶針孔之捲邊蓋的鋁密封DSC盤中。在氮氣吹掃下以每分鐘10℃升至300℃來加熱樣本槽。

SSNMR實驗：

固態核磁光譜(SSNMR)係在Bruker 400 MHz質子頻率寬口徑光譜儀上獲得。形式A係在Bruker 500 MHz光譜儀上獲得。在獲得碳譜之前，藉由用指數函數擬合偵測到之質子飽和恢復數據來確定質子弛豫之縱向弛豫時間(¹H T₁)。該等值用於設定碳交叉極化魔角旋轉實驗(¹³C CPMAS)之最佳再循環延遲，其典型地設定在1.2×¹H T₁與1.5×¹H T₁之間。碳譜係用2毫秒接觸時間使用質子通道上之線性振幅勻變(50%至100%)及100 kHz SPINAL-64去耦來獲得。典型魔角旋轉(MAS)速度為12.5 kHz。為限制因快速旋轉造成之摩擦生熱，將探針溫度維持於275 K。碳譜係藉由將金剛烷固相樣本之高場共振設定為29.5 ppm來作外部參照。使用此程序，碳譜間接參照0 ppm之四甲基矽烷。

Bruker D8 Discover XRPD實驗細節。

XRPD圖係在室溫下使用裝有密封管源及Hi-Star面積偵測器(Bruker AXS，Madison,WI)之Bruker D8 Discover繞射儀(資產標籤V012842)以反射模式獲得。X射線產生器係在40 kV之電壓及35 mA之電流下操作。粉末樣本置放於鋁儲器中。兩個框各自用120秒之曝光時間記錄。隨後在4°至40° 2θ的範圍內以0.02°之步長整合數據，並合併成一個連續圖案。

實例2：化合物(1)之形成：

方法A：

化合物(1)可如WO 2008/058393中所述來製備：

5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸之製備

步驟I

依次用1,4-環己二酮單乙二醇縮酮(11.3 mg，72.0 mmol)及二氯化二丁基錫(1.098 g，3.6 mmol)處理3-胺基-5-溴-噻吩-2-甲酸甲酯(17.0 g，72.0 mmol)於無水THF(21 mL)中之懸浮液。5分鐘後，添加苯基矽烷(9.74 mL，79.2 mmol)並在室溫下攪拌反應混合物隔夜。濃縮後，將殘餘物溶解於EtOAc中，依次用NaHCO₃及鹽水洗滌。分離有機層，經Na₂SO₄乾燥，過濾並濃縮。將粗物質在己烷(500 mL)中稀釋。過濾後，將母液蒸發至乾燥以獲得5-溴-3-(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基胺基)噻吩-2-甲酸甲酯(24.79 g，92%產率)。

參考文獻：WO 2004/052885

步驟II

反-4-甲基環己基甲酸氯化物之製備：

將乙二醯氯(2 M於DCM中，117 mL)逐滴添加至反-4-甲基環己基甲酸(16.6 g，117 mmol)於DCM(33 mL)及DMF(0.1 mL)中之懸浮液中，並在室溫下攪拌反應混合物3小時。在減壓下移除DCM並使殘餘物與DCM共蒸發。將殘餘物溶解於甲苯中以製備1 M溶液。

B-目標化合物之製備：

將1 M之反-4-甲基環己基甲酸氯化物之溶液添加至5-溴-3-(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基胺基)-噻吩-2-甲酸甲酯(24.79 g，65 mmol)於甲苯(25 mL)中之溶液中，隨後添加吡啶(5.78 mL，71.5 mmol)。接著在回流下攪拌所得混合物16小時。反應混合物用甲苯(60 mL)稀釋並冷卻至5℃。添加吡啶(12 mL)及MeOH(5.6 mL)後，在5℃下攪拌混合物2小時。濾出白色懸浮物並添加甲苯至母液中。有機相用10%檸檬酸、飽和NaHCO₃水溶液洗滌，乾燥(Na₂SO₄)並濃縮。將殘餘物在沸騰己烷(1500 mL)中濕磨。使反應混合物冷卻至室溫。將反應燒瓶浸入冰浴中，並攪拌30分鐘；濾出白色固體並用冷己烷(225 mL)洗滌。固體藉由矽膠管柱層析使用20% EtOAc：己烷作為溶離劑進行純化，提供最終化合物5-溴-3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(10.5 g，32%)。

步驟III

將5-溴-3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基環己烷-羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(8.6 g，17 mmol)溶解於四氫呋喃(100 mL)中，並以3 N HCl溶液(50 mL)處理。在40℃下攪拌反應物3小時。使反應混合物在減壓下蒸發。將殘餘物溶解於EtOAc中並用NaHCO₃飽和水溶液洗滌。分離有機層，經Na₂SO₄乾燥，過濾並濃縮，獲得呈固體狀之5-溴-3-[(反-4-甲基-環己羰基)-(4-側氧基-環己基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(7.4 g，95%)。

步驟IV

在N₂氛圍下，向5-溴-3-[(反-4-甲基-環己羰基)-(4-側氧基-環己基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(5.9 g，12.9 mmol)於50 mL MeOH中之冷(0℃)溶液中逐份(約30分鐘)添加NaBH₄(250 mg，6.4 mmol)。添加完成並藉由TLC(己烷：EtOAc 1：1)檢查反應完成後，添加10 mL 2%之HCl並攪拌15分鐘。在真空下將反應混合物濃縮至乾燥。用水(25 mL)使反應混合物復原並以EtOAC萃取。合併有機相並經MgSO₄乾燥且濃縮至乾燥。殘餘物藉由矽膠管柱層析使用EtOAc：己烷(1：1)作為溶離劑進行純化，獲得呈固體狀之5-溴-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己烷-羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(4.5 g，77%產率)。

步驟V

向化合物5-溴-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(500 mg，1.09 mmol)及3,3-二甲基-丁-1-炔(385 mg，4.69 mmol)於DMF(0.5 mL)中之溶液中添加三乙胺(1.06 mL)及參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(70 mg，0.08 mmol)，並在N₂氛圍下在回流條件下攪拌反應混合物16小時。在減壓下移除DMF及三乙胺，並將殘餘物分配於水與乙酸乙酯之間。分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)，濃縮，且殘餘物藉由管柱層析使用乙酸乙酯與己烷(1：2)作為溶離劑進行純化，獲得330 mg(66%)呈固體狀之5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯。

步驟VI

將5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(0.10 g，0.22 mmol)溶解於THF：甲醇：H₂O之3：2：1混合物(5.0 mL)中，並以1 N LiOH.H₂O溶液(0.65 mL，0.65 mmol)處理。在60℃下攪拌2小時後，在旋轉蒸發器上在減壓下濃縮反應混合物。將混合物分配於乙酸乙酯與水之間。使用0.1 N HCl將水層酸化。分離EtOAc層並經Na₂SO₄乾燥。過濾並在旋轉蒸發器上在減壓下移除溶劑，隨後藉由管柱層析使用甲醇及二氯甲烷(1：9)作為溶離劑進行純化，獲得30 mg(30%)呈固體狀之5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸。ESI^-(M-H)：444.3。¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.58(m,1H),0.74(q,J=6.53 Hz,1H),0.81(ddd,J=12.86,12.49,3.19 Hz,1H),1.18(m,5H),1.28(s,3H),1.42(m,1H),1.55(m,3H),1.61(m,1H),1.73(m,2H),1.81(m,2H),3.19(m,1H),4.26(m,1H),4.49(bs,1H),7.14(s,1H),13.45(bs,1H)。

方法B

步驟I

依次用1,4-環己二酮單乙二醇縮酮(5.0 g，32.05 mmol)及二氯化二丁基錫(482 mg，1.59 mmol)處理3-胺基-噻吩-2-甲酸甲酯(5.0 g，31.85 mmol)於無水THF(9 mL)中之懸浮液。5分鐘後，添加苯基矽烷(4.3 mL，34.96 mmol)並在室溫下攪拌反應混合物隔夜。濃縮後，將殘餘物溶解於EtOAc中，並依次用NaHCO₃及鹽水洗滌。分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析使用於己烷中之30%乙酸乙酯作為溶離劑進行純化，獲得3-(1,4-二氧-螺[4.5]癸8-基胺基)-噻吩-2-甲酸甲酯(4.5 g，47%產率)。

替代程序：

將3-胺基-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)溶解於二氯甲烷中，隨後溶解於1,4-環己二酮單乙二醇縮醛(2當量)中以獲得微黃色溶液。將此溶液添加至NaBH(OAc)₃(2.2當量)於二氯甲烷中之懸浮液中。經15分鐘之時間逐滴添加乙酸(2.4當量)。在20℃至25℃下在N₂下攪拌所得懸浮液24小時。藉由添加水淬滅反應並攪拌1小時。分離二氯甲烷層，再用水處理並再攪拌1小時。分離二氯甲烷層並添加至飽和NaHCO₃溶液中，在20℃至25℃下攪拌20分鐘。將一些白色殘餘固體過濾，接著分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)並蒸發。將甲醇添加至殘餘物中並蒸發至乾燥。將殘餘物引入甲醇中並在0℃下攪拌2小時。將懸浮液真空過濾並用冷甲醇洗滌所得濾餅。白色固體在真空下在35℃至40℃下乾燥約20小時以得到標題化合物。

步驟II

A.反-4-甲基環己基甲酸氯化物之製備

將乙二醯氯(2 M於二氯甲烷中，17 mL)逐滴添加至反-4-甲基環己基甲酸(2.3 g，16.2 mmol)於二氯甲烷(5 mL)及DMF(0.1 mL)中之懸浮液中。在室溫下攪拌反應混合物3小時。在減壓下移除揮發物以獲得粗酸氯化物，其直接用於下一反應。

B.將反-4-甲基環己基甲酸氯化物添加至3-(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基胺基)-噻吩-2-甲酸甲酯(2.4 g，8.08 mmol)於甲苯(18 mL)中之溶液中，隨後添加吡啶(0.7 mL)。接著在回流下攪拌所得混合物16小時。反應混合物用甲苯(7 mL) 稀釋並冷卻至5℃。添加吡啶(1.5 mL)及MeOH(0.8 mL)後，在5℃下攪拌混合物2小時。將白色固體過濾並用甲苯洗滌。濾液用10%檸檬酸、飽和NaHCO₃水溶液洗滌，乾燥(Na₂SO₄)並濃縮。固體藉由矽膠管柱層析使用20% EtOAc：己烷作為溶離劑進行純化，獲得3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己羰基-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(2.3 g，68%)。

替代程序：

在氮氣下，將無水DMF添加至反-4-甲基環己基甲酸(1.8當量)於甲苯中之溶液中。攪拌反應混合物並經3分鐘至5分鐘添加亞硫醯氯(2.16當量)。接著在室溫下攪拌混合物3小時。當反應完成時，添加甲苯至反應混合物中。接著在降低之氮氣壓力下使溶液蒸發至其一半體積。將溶液溶解於甲苯中以獲得1 N酸氯化物溶液。

將3-(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基胺基)-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)及吡啶(2當量)添加至酸氯化物(1 N)溶液中。在回流下攪拌反應混合物15小時。一旦反應完成，即將反應混合物冷卻至室溫，接著將甲醇及甲苯添加至其中。在室溫下攪拌反應混合物1小時，並添加NaHCO₃之飽和水溶液。分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)並蒸發至約4份體積之溶劑。在攪拌的同時添加4份體積之庚烷至溶液中。將反應燒瓶浸入冰浴中並攪拌120分鐘；濾出米色固體並用冷庚烷洗滌，接著在真空烘箱中乾燥隔夜以獲得標題化合物。

步驟III

歷時10分鐘將n-BuLi(2當量)逐滴添加至二異丙胺(1當量)於無水THF中之冷(-40℃)溶液中。在相同溫度下攪拌反應混合物30分鐘。接著逐滴(35分鐘)添加3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己烷-羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)於THF中之溶液，保持內部溫度為約-40℃。攪拌反應混合物30分鐘並逐滴添加碘(2當量)於THF中之溶液，在相同溫度下攪拌30分鐘，隨後添加NH₄Cl之飽和溶液。反應混合物用乙酸乙酯及水稀釋。分離有機層並用5%硫代硫酸鈉溶液洗滌。分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)並蒸發至懸浮液，接著添加庚烷。在0℃下攪拌懸浮液30分鐘，過濾並用庚烷洗滌以獲得3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己烷羰基)-胺基]-5-碘-噻吩-2-甲酸甲酯。MS實驗值(電噴霧)：(M+H)：548.21。

步驟IV

在氮氣下，向25 mL RBF中添加3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-5-碘-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)、碘化亞銅(0.025當量)及參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(0.01當量)。添加DMF、三乙胺(2.5當量)及3,3-二甲基-丁-1-炔(2當量)，並在40℃下在N₂氛圍下攪拌反應混合物2小時。在矽藻土上過濾反應混合物並用乙酸乙酯洗滌。用水稀釋溶液並用乙酸乙酯萃取2次。合併有機相並用水洗滌3次。分離有機層，乾燥(Na₂SO₄)，蒸發至約2 mL，接著添加8 mL庚烷。將其蒸發至2 mL至4 mL並在冰浴中冷卻。將所形成之白色固體過濾，用庚烷洗滌並在烘箱中乾燥以獲得5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯。

步驟V

將5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(1,4-二氧-螺[4.5]癸-8-基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)溶解於四氫呋喃中並用3.6 N HCl溶液處理。在40℃下攪拌反應物5小時。接著添加水並將反應混合物冷卻至室溫。反應混合物用乙酸乙酯(2次，50 mL)萃取。經合併之萃取物用25 mL飽和NaHCO₃水溶液及2×50 mL水洗滌。將有機層濃縮為稠油狀物並添加50 mL庚烷至混合物中以使所要化合物沈澱，將其過濾以獲得5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-甲基-環己羰基)-(4-側氧基-環己基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯。

步驟VI

將5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-甲基-環己羰基)-(4-側氧基-環己基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯(1當量)溶液於THF中。將水添加至反應混合物中並冷卻至-25℃。逐份添加NaBH₄(0.5當量)，維持溫度在-20℃以下。在-25℃下攪拌混合物2小時，接著添加2 N HCl並將溶液溫至室溫。分離各相並用EtOAC洗滌水層。合併有機相並用鹽水洗滌且在Na₂SO₄上乾燥並濃縮至乾燥，獲得呈異構體之93：7混合物形式之5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸甲酯。使粗順式/反式混合物在甲醇中再結晶以獲得>99%反式異構體。

步驟VII

隨後進行與早先報導相同之程序(方法A，步驟VI)，獲得5-(3,3-二甲基-丁-1-炔基)-3-[(反-4-羥基-環己基)-(反-4-甲基-環己羰基)-胺基]-噻吩-2-甲酸。MS實驗值(電噴霧)：(M-H)：444.3。¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.58(m,1H),0.74(q,J=6.53 Hz,1H),0.81(ddd,J=12.86,12.49,3.19 Hz,1H),1.18(m,5H),1.28(s,3H),1.42(m,1H),1.55(m,3H),1.61(m,1H),1.73(m,2H),1.81(m,2H),3.19(m,1H),4.26(m,1H),4.49(bs,1H),7.14(s,1H),13.45(bs,1H)。

上述方法A及方法B在使用甲醇及二氯甲烷(1：9)作為溶離劑進行管柱層析(途徑A之步驟VI)之後產生化合物(1)甲醇溶劑合物作為最終產物。

方法C

1.步驟1

將化合物J(50.0 g，1.0當量)、化合物K(52.2 g，1.05當量)及NaBH(OAc)₃(118.0 g，1.75當量)添加至反應器中，隨後添加甲苯(600 mL，12份體積)。開始攪拌接著將內部溫度調整至0℃至5℃。混合物為白色固體之非均質懸浮液。接著經1小時將三氯乙酸(TCA，52.0 g，1.0當量)於甲苯(150 mL，3份體積)中之溶液添加至攪拌中之混合物中，同時將內部溫度控制在0℃至5℃之間。將反應混合物溫至20℃至25℃，接著在20℃至25℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時至4小時。藉由HPLC監測反應進程。

反應完成後，將反應混合物轉移至K₂CO₃(307.7 g，7.0 當量)於去離子水(375 mL，7.5份體積)中之溶液中。攪拌兩相混合物，接著分離各相。有機相用K₂CO₃(175.9 g，4.0當量)於去離子水(375 mL，7.5份體積)中之水溶液洗滌，接著用NaCl(20.4 g，1.1當量)於去離子水(375 mL，7.5份體積)中之水溶液洗滌。分離有機相。藉由蒸餾使批料體積減小(在旋轉蒸發器上在40℃之浴溫下減小至250 mL(5份體積))，並將所得之化合物G於甲苯中之粗溶液用於下一步驟(HPLC：98.29% AUC化學純度)。化合物G：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 1.45(m,2H),1.64(m,4H),1.88(m,2H),3.56(m,1H),3.72(s,3H),3.87(m,4H),6.70(d,J=6.8 Hz,1H),6.90(d,J=4.4 Hz,1H),7.70(d,J=4.4 Hz,1H)。

2.步驟2

2.1.步驟2b：使用反-甲基環己羰基氯化物(化合物F)

向先前步驟所得之化合物G於甲苯中之溶液(94.6 g，250 mL，5.0份體積)中添加甲苯(410 mL，8.2份體積)及吡啶(64.0 mL，2.5當量)。開始攪拌並將內部溫度調節為20℃至25℃。經0.5小時添加化合物F(102.2 g，2.0當量)。一旦添加完成，即將批料加熱至95℃至100℃。藉由HPLC監測反應進程。反應完成後，將批料冷卻至30℃至35℃，接著經45分鐘添加甲醇(189 mL，3.8份體積)並攪拌批料1小時至2小時。在30℃至35℃下，添加去離子水(189 L，3.8份體積)至批料中，接著使其在60℃至70℃下攪拌1小時至2小時。將混合物加熱至55℃至60℃接著攪拌1小時。

分離各相。在55℃至60℃下添加去離子水(189 mL，3.8份體積)，接著攪拌1小時。藉由蒸餾濃縮甲苯相。將批料加熱至78℃至83℃(例如80℃)，接著經1小時至3小時將正庚烷(473 mL，9.5份體積)添加至甲苯溶液中，接著在90℃至95℃下攪拌批料2小時。經5小時將批料冷卻至20℃至25℃，隨後在20℃至25℃下攪拌1小時至12小時。過濾固體。濾餅用正庚烷(190 mL，3.8份體積)洗滌並在真空下在40℃至45℃下乾燥10小時至20小時。經分離之化合物E藉由HPLC、GC及卡費雪滴定(Karl Fischer titration)來分析。步驟1及步驟2之總產量為113.5 g，84.1%。HPLC：99.39% AUC化學純度(典型純度>98.0%)。化合物E：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.48(m,1H),0.63(m,1H),0.74(d,J=6.4 Hz,3H),0.98(m,1H),1.22(m,2H),1.36 (m,1H),1.52-1.67(m,10H),1.77(m,2H),3.75-3.78(m,4H),3.76(s,3H),4.44(m,1H),7.11(d,J=5.2 Hz,1H),8.00(d,J=5.2 Hz,1H)。

2.2步驟2a：使用反-甲基環己烷甲酸(化合物H)

在N₂氛圍下，將化合物H(633 g，2.0當量)饋入反應器1。接著將甲苯(1.33 L，3.8份體積)添加至反應器中，隨後添加DMF(1.73 mL，0.01當量)，接著開始攪拌。經30分鐘緩慢添加SOCl₂(325 mL，2.0當量)。將內部溫度調整至33℃至37℃(例如35℃)。在33℃至37℃下攪拌溶液2小時。將混合物冷卻至20℃至25℃，轉移至旋轉蒸發器中，接著濃縮至3.8份體積(約1.3 L)。接著將甲苯(665 mL，1.9份體積)添加至濃縮物中並將所得批料濃縮至3.8份體積(約1.3 L)。

在N₂氛圍下，將於甲苯中之化合物G(662 g，1.75 L，5.0份體積)饋入反應器2中。將甲苯(4.97 L，14.2份體積)及吡啶(448 mL，2.5當量)添加至反應器2中。開始攪拌並將內部溫度調整至20℃至25℃。

經1小時將於甲苯中之反應器1(上文中獲得之酸氯化物)之溶液添加至反應器2中。一旦添加已完成，即將反應混合物加熱至95℃至105℃。24小時至30小時後取IPC樣本並藉由HPLC分析化合物G消耗量。

接著將反應混合物冷卻至25℃至30℃。經45分鐘將MeOH(665 mL，1.9份體積)添加至反應混合物中。接著在25℃至30℃下將去離子水(1.33 L，3.8份體積)添加至反應混合物中。將混合物加熱至55℃至60℃接著攪拌1小時。停止攪拌並使各相分離10分鐘。分離上部有機層且棄去水層。在55℃至60℃下將去離子水(1.33 L，3.8份體積)添加至反應混合物中，接著攪拌1小時。停止攪拌並使各相分離10分鐘。分離上部有機層且棄去水層。將溶液轉移(同時其保持在約60℃下)至旋轉蒸發器中並濃縮至5.7份體積(約2 L)。接著在約60℃下將庚烷(3.3 L，5.0份體積)添加至懸浮液中。將懸浮液冷卻至20℃至25℃同時攪拌5小時。過濾懸浮液。濾餅用庚烷(665 mL，1.9份體積)洗滌兩次。在過濾器上在真空下乾燥固體。步驟1及步驟2之總產量為805.2 g(85.8%)，呈白色固體狀。HPLC：99.15% AUC化學純度。化合物E：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.48(m,1H),0.63(m,1H),0.74(d,J=6.4 Hz,3H),0.98(m,1H),1.22(m,2H),1.36(m,1H),1.52-1.67(m,10H),1.77(m,2H),3.75-3.78(m,4H),3.76(s,3H),4.44(m,1H),7.11(d,J=5.2 Hz,1H),8.00(d,J=5.2 Hz,1H)。

3.步驟3

將無水THF(1.0 L，2.0份體積)及無水二異丙胺(258 mL，1.55當量)添加至反應器1。將溶液冷卻至-50℃至-40℃。一旦達到所要溫度，即以使得內部溫度保持在-40℃以下之速率添加正丁基鋰於己烷中之1.6 M溶液(1.11 L，1.50當量)。添加完成後，在-50℃至-40℃下再攪拌溶液2小時。

將化合物E(500 g，1.0當量)及無水THF(5.0 L，10.0份體積)饋入反應器2中。以使得內部溫度保持在-40℃以下之速率經1小時將所得溶液添加至反應器1中。以使得內部溫度保持在-40℃以下之速率將碘(361 g，1.20當量)於THF(500 mL，1.0份體積)中之溶液添加至冷反應混合物中。反應混合物在-50℃至-40℃下歷時1小時。藉由HPLC監測反應進程。

在反應完成後，將批料溫至0℃-5℃並轉移至冷卻至0℃-5℃之NaHSO₃(617 g，5.0當量)於去離子水(2.5 L，5.0份體積)中之溶液中。將二氯甲烷(1.5 L，3.0份體積)添加至懸浮液中。攪拌兩相混合物1小時同時溫至20℃至25℃。分離各相。水相用二氯甲烷洗滌。合併有機相，並用NH₄Cl(634 g，10.0當量)於去離子水(1.9 L，5.0份體積)中之水溶液洗滌兩次，隨後用水洗滌。藉由蒸餾減小批料體積。將溶劑轉換為甲苯：再次添加甲苯(1.5 L，3.0份體積)接著濃縮至3.0份體積(約1.5 L)。接著將甲苯(5.0 L，10.0份體積)添加至所得濃縮物中並將混合物加熱至95℃-100℃，直至獲得均質溶液。在95℃-100℃下，添加庚烷(5.0 L，10.0份體積)至甲苯溶液中，接著經6小時將混合物冷卻至20℃至25℃。過濾懸浮液。濾餅用庚烷(500 mL，1.0份體積)洗滌兩次。在過濾器上在真空下乾燥固體。經分離之化合物A藉由HPLC、GC及卡費雪滴定來分析。步驟3之產量為520.5 g(80.2%)，呈米色固體狀。HPLC：典型>97.0% AUC化學純度。化合物A：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.54(m,1H),0.65(m,1H),0.76(d,J=6.8 Hz,3H),1.00(m,1H),1.22(m,2H),1.30(m,1H),1.44-1.68(m,10H),1.60-1.69(m,4H),1.77(m,2H),3.74(s,3H),3.77(m,4H),4.40(m,1H),7.46(s,1H)。

4.步驟4

A.方法A1

將夾套的1 L 3頸反應器裝上氮氣入口，接著饋入化合物(A)(112.7 g，205.9 mmol)。將CuI(1.18 g，6.18 mmol)及Pd(PPh₃)₄(457.9 mg，0.412 mmol)添加至反應器中。以氮氣流吹掃反應器接著添加無水2-甲基四氫呋喃(789 mL)。在20℃至25℃下攪拌混合物15分鐘。將無水二異丙胺(52.09 g，72.15 mL，514.8 mmol)及第三丁基乙炔(18.59 g，27.0 mL，226.5 mmol)添加至反應器中。接著在20℃至25℃下攪拌混合物。根據HPLC，攪拌4小時後已達到完全轉化。將混合物冷卻至10℃。接著有機相用12.6 wt%乙二酸水溶液洗滌至少3小時，接著分離各相。將活性碳(22.5 g)添加至反應混合物中。在20℃至25℃下攪拌懸浮液不少於12小時。使混合物經矽藻土過濾。濾餅用2-丁酮(563.5 mL)洗滌並將濾液添加至有機相中。有機溶液之HPLC分析顯示化合物(B)純度為99.56% AUC。此溶液典型地直接用於下一步驟中。化合物(B)：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.52-0.59(m,1H),0.61-0.70(m,1H),0.76(d,J=6.4 Hz,3H),0.88-1.03(m,1H),1.15-1.37(m,4H),1.31(s,9H)S,1.41-1.68(m,9H),1.74-1.85(m,2H),3.75-3.81(m,4H),3.75(s,3H),4.39-4.42(m,1H),7.27(s,1H)。

B.方法A2

將夾套的1 L 3頸反應器裝上氮氣入口，接著饋入化合物(A)(63.94 g)。將CuI(667.3 mg，0.03當量)及Pd(PPh₃)₄(269.9 mg，0.002當量)添加至反應器中。以氮氣流吹掃反應器，接著添加甲基第三丁醚(MtBE)(7份體積)。在20℃至25℃下攪拌混合物15分鐘。將無水二異丙胺(40.9 mL，2.5當量)添加至攪拌中之混合物中，同時維持內部溫度在20℃至25℃之間並攪拌批料不少於15分鐘。將第三丁基乙炔(16.7 mL，1.2當量)添加至反應器中。接著在20℃至25℃下攪拌混合物。根據HPLC，攪拌4小時後已達到完全轉化。將混合物冷卻至10℃。接著有機相用12.6 wt%乙二酸脫水物水溶液(383.6 mL，6份體積)洗滌，同時將批料溫度維持在20℃至25℃以下。接著，將批料溫度調整至20℃至25℃，並在此溫度下攪拌兩相混合物至少3小時。接著，使各相分離至少30分鐘。接著有機相再次用乙二酸脫水物水溶液(6 wt%，383.6 mL，6份體積)洗滌，同時將批料溫度維持在20℃至25℃以下。在此溫度下攪拌兩相混合物至少1小時。接著分離各相。將活性碳(6.4 g至12.8 g，相對於化合物A 10 wt%至20 wt%)添加至反應混合物中。在20℃至25℃下攪拌懸浮液不少於12小時。混合物經矽藻土過濾。濾餅用MtBE(192 mL，3份體積)洗滌並將濾液添加至有機相中。此溶液典型地直接用於下一步驟中。

C.方法B

將夾套的3 L 3頸反應器裝上氮氣入口，接著饋入化合物(A)(20.00 g，36.53 mmol)。將CuI(208.7 mg，1.096 mmol) 及Pd(PPh₃)₂Cl₂(51.28 mg，0.07306 mmol)添加至反應器中。以氮氣流吹掃反應器接著添加無水2-甲基四氫呋喃(140.0 mL)。在20℃至25℃下攪拌混合物15分鐘。將無水二異丙胺(9.241 g，12.80 mL，91.32 mmol)及第三丁基乙炔(3.751 g，5.452 mL，45.66 mmol)添加至反應器中。接著在20℃至25℃(20.9℃)下攪拌混合物(形成懸浮液)。接著將混合物加熱至45℃持續6小時。HPLC分析顯示轉化率為99.77%。添加庚烷(140.0 mL)同時經4小時冷卻至20℃。過濾懸浮液。濾液用乙二酸二水合物水溶液(120 mL，15 w/v%，142.8 mmol)洗滌。分離各相，接著有機相用NH₄Cl水溶液(120 mL，10 w/v%，224.3 mmol)、NaHCO₃水溶液(120 mL，7 w/w%)及水(120.0 mL)洗滌。藉由添加2.0 g木炭(10 wt%，VRT-0921870)清除殘餘金屬隨後在20℃至25℃下攪拌5小時。接著懸浮液經矽藻土過濾。矽藻土床用2-甲基四氫呋喃(40.0 mL)洗滌。有機溶液之HPLC分析顯示化合物(B)純度為99.47% AUC。

D.方法C

向裝有機械攪拌、N₂鼓泡器及熱電偶之圓底燒瓶中添加化合物(A)[1.0當量]、銅催化劑、Pd(PPh₃)₄[0.002當量]及MEK[7份體積]。將反應溶液在室溫下攪拌至溶解隨後添加iPr₂NH[2.5當量]及第三丁基乙炔[1.1當量]。在20℃至25℃下攪拌反應溶液。經由LC監測反應轉化率(轉化[%])。對於銅催化劑，測試CuI(99.9%)、CuI(98%)、CuCl及CuBr：CuI(對於99.9%與98%)：在0.03當量CuI之情況下，約2小時反應時間後，超過95%轉化為化合物(B)；在0.025當量CuI之情況下，約5小時反應時間後，超過90%轉化為化合物(B)；在0.02當量CuI之情況下，約5小時反應時間後，超過90%轉化為化合物(B)；在0.015當量CuI之情況下，約5小時反應時間後，超過90%轉化為化合物(B)；在0.01當量CuI之情況下，約5小時反應時間後，超過75%轉化為化合物(B)；CuCl：在0.03當量CuCl之情況下，約2小時反應時間後，超過99%轉化為化合物(B)；在0.025當量CuCl之情況下，約2小時反應時間後，約100%轉化為化合物(B)；在0.02當量CuCl之情況下，約2小時反應時間後，超過90%轉化為化合物(B)；在0.015當量CuCl之情況下，約2小時反應時間後，超過95%轉化為化合物(B)；在0.01當量CuCl之情況下，約20小時反應時間後，約100%轉化為化合物(B)；CuBr：在0.03當量CuBr之情況下，約22小時反應時間後，超過99%轉化為化合物(B)；在0.025當量CuBr之情況下，約22小時反應時間後，超過85%轉化為化合物(B)；在0.02當量CuBr之情況下，約22小時反應時間後，超過95%轉化為化合物(B)；在0.015當量CuBr之情況下，約22小時反應時間後，超過70%轉化為化合物(B)；在0.01當量CuBr之情況下，約22小時反應時間後，超過80%轉化為化合物(B)。

5.步驟5

A.方法A

將夾套的1 L 4頸反應器裝上氮氣入口，接著饋入化合物(B)(22.9 g，45.65 mmol)於2-丁酮(約250 mL)中之溶液，接著加熱至60℃。以氮氣流吹掃反應器接著添加2 N HCl水溶液(175 mL)。在60℃下攪拌混合物4小時。停止攪拌並移除下部水相。再次開始攪拌隨後添加2 N HCl新鮮水溶液(175 mL)。混合物在60℃下繼續攪拌直至轉化率(根據HPLC為99%)已達至平衡(約再經2.5小時)。冷卻至20℃後，移除下部水相。接著用10 wt% NH₄Cl水溶液洗滌有機相接著分離各相。接著將有機相蒸餾至約115 mL。添加丙酮(115 mL)，接著將批料濃縮至約115 mL。將此添加丙酮隨後蒸餾之程序再重複兩次。在20℃下將水(57.3 mL)添加至有機相中，接著攪拌混合物2小時。在20℃下經2小時將水添加至有機相中，接著再攪拌混合物1小時。將固體過濾並用1：1 MeOH/H₂O(25 mL)洗滌，接著在60℃下在抽氮之真空烘箱中乾燥24小時，獲得19.8 g(95%產率)之化合物(C)。¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.56-0.68(m,2H),0.76(d,J=6.4 Hz,3H),1.19-1.30(m,4H),1.30(s,9H),1.46-1.60(m,6H),1.83-1.89(m,2H),2.05-2.18(m,3H),2.47-2.55(m,1H),3.76(s,3H),4.77-4.85(m,1H),7.30(s,1H)。

B.方法B

將夾套的1 L 4頸反應器裝上氮氣入口，接著饋入化合物(B)(103.3 g，以步驟4中之100%產率計為1.0當量)於2-丁酮(約1.03 L，約10份總批料體積)中之溶液中，接著加熱至57℃至62℃(例如60℃)。以氮氣流吹掃反應器，接著經約10分鐘添加2 N HCl水溶液(723 mL，以103.3 g化合物(B)計為7份體積)，同時將批料溫度維持在57℃至62℃(例如60℃)。在57℃至62℃(例如60℃)下攪拌混合物5小時。停止攪拌並移除下部水相。再次開始攪拌隨後添加2 N HCl新鮮水溶液(310 mL，以103.3 g化合物(B)計為3份體積)。混合物在57℃至62℃(例如60℃)下繼續攪拌直至轉化率(根據HPLC為99%)已達至平衡(約再經2.5小時)。冷卻至20℃至25℃後，停止攪拌並使各相分離至少30分鐘。接著添加NH₄Cl水溶液(10 wt%，517 mL，5份體積)同時將批料溫度維持在20℃至25℃。在20℃至25℃下攪拌兩相混合物至少 30分鐘。接著分離各相。接著藉由真空蒸餾將有機相蒸餾至約471 mL，其中最大夾套溫度為60℃。添加丙酮(471.1 mL)，接著將批料濃縮至約471 mL。將此添加丙酮隨後蒸餾之程序再重複兩次。在20℃下將水(235.6 mL，2.28份體積)添加至有機相中，接著攪拌混合物2小時。在20℃下經2小時將另外之水(235.6 mL，2.28份體積)添加至有機相中，接著再攪拌混合物1小時。將固體過濾並用丙酮/H₂O之1：1混合物(體積：體積，103 mL：103 mL)洗滌，接著在60℃下在抽氮之真空烘箱中乾燥24小時，獲得19.8 g(99.5%產率)總純度為98.0%之化合物(C)。

6.步驟6

A.方法A：使用LiAlH(OtBu) ₃

將化合物(C)(399 g，1.0當量，限量試劑)饋入12 L反應器中並用N₂吹掃。接著將無水THF(2 L，5.0份體積)饋入反應器中，接著攪拌混合物。將所得溶液冷卻至-65℃至-64℃。

添加LiAlH(OtBu)₃(960 ml，1 M於THF中，2.40份體積或1.1當量)同時將批料溫度維持在不高於-40℃。經2小時15分鐘添加溶液。添加速率為1.45份體積/小時。

在LiAlH(OtBu)₃添加完成後，將批料在-40℃或低於-40℃之溫度下再攪拌1小時。1小時後收集較小IPC樣本並立即以1 N HCl淬滅。分析樣本之化合物(C)消耗量(當根據IPC方法化合物(C)相對於化合物(D)0.5%時認為反應完成)。

若反應未完成，則在-40℃下再攪拌反應物1小時。收集IPC樣本並立即以1 N HCl中止。若反應未完成，則添加額外量之LiAlH(OtBu)₃(例如，若與產物化合物(D)相比殘留1.0%峰面積之未反應化合物(C)，則添加LiAlH(OtBu)₃溶液初始饋入量之2%)。在反應期間將批料保持在-40℃至-50℃或低於-50℃之溫度下。在添加LiAlH(OtBu)₃後，在-45℃至-40℃下攪拌批料1小時。1小時後收集較小IPC樣本並立即以1 N HCl淬滅。

一旦反應完成，即將MTBE(1197 L，3份體積)饋入批料中，接著將批料升溫至0℃。經約10分鐘至15分鐘將所得溶液添加至乙二酸(或酒石酸)水溶液之混合物中，該乙二酸(或酒石酸)水溶液之混合物係藉由將乙二酸(或酒石酸)(9 w/w%，2394 L，6份體積)與MTBE(7 L，2份體積)之混合物冷卻至8℃至10℃而製得。將批料溫度調整至15℃至25℃並將所得混合物攪拌30分鐘至60分鐘。

停止攪拌。收集上部有機相。將水(2.8 L，7份體積)添加至有機相中。在15℃至25℃下攪拌兩相混合物10分鐘。接著停止攪拌。收集上部有機相。

藉由將溶劑轉換為甲醇來進行化合物(D)之結晶。藉由在<60℃下真空蒸餾將批料體積減小至1.2 L或3.0份體積。

將甲醇(4 L，10份體積)添加至批料中(不調整批料溫度)並藉由在<60℃下真空蒸餾將批料體積減小至1.2 L或3.0份體積。重複此步驟。接著，藉由添加479 mL將批料體積調整至3.0份體積。

收集漿液之較小IPC樣本。將固體過濾並藉由氣相層析分析溶液以確定殘餘THF及MTBE相對於甲醇之含量。若溶劑轉換為甲醇完成，則將批料加熱至60℃至65℃並在此溫度下攪拌直至所有固體溶解。添加2份體積之50體積%甲醇/水溶液，將溫度維持在不低於(NLT)50℃。接著，將溫度調整至47℃至53℃(例如50℃)，並將溫度維持4小時以使固體開始結晶。接著將剩餘2份體積之50體積%甲醇/水溶液添加至批料中。接著以每小時約5℃將批料冷卻至15℃至25℃，並在15℃至25℃下保持不少於(NLT)4小時。用1份體積(以化合物5饋入量計)之50體積%甲醇/水洗滌濾餅。

在55℃至65℃下在抽氮之真空下將物質乾燥至少12小時。

若需要，則可藉由將乾燥化合物(D)(1當量)及甲醇(2份體積，相對於化合物(D)饋入量)饋入反應器中來使批料再結晶並將批料加熱至60℃至65℃直至所有固體溶解。接著經3小時時間將批料冷卻至-20℃。將所得固體過濾並在55℃至65℃下在抽氮之真空下乾燥至少12小時。化合物D：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.52-0.69(m,2H),0.75(d,6.4 Hz,3H),0.76-0.86(m,1H),1.11-1.24(m,5H),1.31(s,9H),1.43-1.57(m,6H),1.73-1.83(m,4H),3.17-3.18 (m,1H),3.75(s,3H),4.24-4.30(m,1H),4.49(d,J=4.4 Hz,1H),7.23(s,1H)。

B.方法B：除LiAlH(OtBu) ₃ 以外之還原劑

主要得到所要異構體之除LiAlH(OtBu)₃以外之還原劑為：LiAlH(OiBu)₂(OtBu)₃、DiBAlH、LiBH₄、NaBH₄、NaBH(OAc)₃、Bu₄NBH₄、ADH005 MeOH/KRED再循環混合物A、KRED-130 MeOH/KRED再循環混合物A、Al(Oi-Pr)₃/i-PrOH及(i-Bu)₂AlOiPr。

7.步驟7

將化合物(D)及Me-THF(以化合物6饋入量計之5份體積)添加至反應器中。在15℃至25℃下將NaOH水溶液(2 N，4.0份體積，3.7當量)添加至溶液中。將批料加熱至68℃至72℃並在此溫度下攪拌8小時至16小時。藉由LC監測反應進程。完成後將批料冷卻至0℃至5℃。形成沈澱。經15分鐘至30分鐘添加檸檬酸水溶液(30重量%，3.7當量)，同時將批料溫度維持在25℃以下。分離各相。將水(以化合物6饋入量計之5份體積)添加至有機層中。分離各相。在最高溫度35℃下經由真空蒸餾將批料體積減小至3份體積(以化合物(D)饋入量計)。接著添加無水Me-THF(3份體積，以化合物(D)饋入量計)。藉由卡費雪滴定法測定水含量。若殘餘水量1.0%則認為批料乾燥。

視情況，化合物(1)之最終產物可於EtOAc或nBuOAc與丙酮之混合物中經由以下所述之溶劑轉換進行再結晶，以形成化合物(1)之形式M：

A：於nBuOAc與丙酮之混合物中再結晶：

首先在最高溫度45℃下真空蒸餾將批料體積減小為2份體積至3份體積(以化合物(D)饋入量計)，將溶劑自2-Me-THF轉換至nBuOAc。添加nBuOAc(3份體積，以化合物(D)饋入量計)，並經由在最高溫度45℃下真空蒸餾使批料體積減小至2份體積至3份體積(以化合物(D)饋入量計)。接著添加nBuOAc將批料體積調整至總共5份體積至6份體積。分析溶液中nBuOAc中之2-Me-THF殘餘量。重複此循環直至如藉由GC分析所測定相對於nBuOAc之2-Me-THF殘餘量小於1%為止。一旦符合殘餘2-Me-THF IPC標準且確保總批料體積為6份(以化合物(D)饋入量計)，即將批料溫度調整至40℃至45℃。接著，將丙酮饋入批料中以使得溶劑中具有約10 wt%丙酮。將批料溫度調整至40℃至45℃。添加化合物1晶種(佔化合物(1)總目標重量之1.0重量%)。在40℃至45℃下攪拌批料4小時至8小時。藉由X射線粉末繞射(XRPD)監測再結晶進程。若光譜圖符合所要形式之光譜圖，則以每小時5℃之速率將批料自40℃-45℃冷卻至30℃-35℃(較佳為約35℃)。將批料保持在約35℃至少一小時，接著過濾並用nBuOAc/丙酮之9:1 wt：wt混合物(1份體積)洗滌濾餅。在不高於45℃下在抽氮之真空中將物質乾燥12小時至24小時。以化合物(D)起始，化合物(1)(形式M)之預期分離莫耳產率為80%至85%。化合物(1)：¹H NMR(400 MHz,DMSO-d ₆)δ 0.58(m,1H),0.74(q,J=6.53 Hz,1H),0.81(ddd,J=12.86,12.49,3.19 Hz,1H),1.18(m,5H),1.28(s,3H),1.42(m,1H),1.55(m,3H),1.61(m,1H),1.73(m,2H),1.81(m,2H),3.19(m,1H),4.26(m,1H),4.49(bs,1H),7.14(s,1H),13.45(bs,1H)。

B：於EtOAc中再結晶：

首先在最高溫度35℃下真空蒸餾，將批料體積減小為2份體積至3份體積(以化合物(D)饋入量計)，使溶劑自2-Me-THF轉換為EtOAc。添加EtOAc(10份體積，以化合物(D)饋入量計)，並經由在最高溫度35℃下真空蒸餾，使批料體積減小至2份體積至3份體積(以化合物(D)饋入量計)。分析溶液中EtOAc中之2-Me-THF殘餘量。重複此循環直至如藉由GC分析所測定相對於EtOAc之2-Me-THF殘餘量小於1%。一旦符合殘餘2-Me-THF IPC標準且確保總批料體積為10份(以化合物(D)饋入量計)，即將批料溫度調整至40℃至45℃。添加化合物1晶種(佔化合物(1)之總目標重量之1.0重量%)。在40℃至45℃下攪拌批料12小時。應使用平底反應器(非圓錐形)。藉由X射線粉末繞射(XRPD)來監測再結晶進程。若光譜圖與所要形式之光譜圖匹配，則以每小時5℃之速率將批料自40℃至45℃冷卻至11℃至14℃。將批料過濾並用預先冷卻至11-14℃之EtOAc(1份體積)洗滌濾餅。在不高於45℃下在抽氮之真空中將物質乾燥12小時至24小時。以化合物(D)起始，化合物(1)(形式M)之預期分離莫耳產率為80%至85%。

實例3：化合物(1)之多晶形式之形成

3A：化合物(1)之多晶形式A之形成

化合物(1)之多晶形式A可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

將10 g化合物(1)饋入反應器中。接著將20 g甲醇饋入反應器中。將反應器加熱至60℃以溶解化合物(1)。接著將反應器冷卻至10℃，並放置直至形成化合物(1)之固體。過濾化合物(1)之固體。在25℃下將20 g丙酮添加至化合物(1)之固體中。將丙酮與化合物(1)之混合物攪拌1小時並過濾所得固體。將已過濾固體在75℃下乾燥12小時。

化合物(1)之形式A的特徵：化合物(1)之形式A的XRPD數據及C¹³固態NMR數據分別顯示於圖1及圖5中。化合物(1)之形式A的某些代表性XRPD峰及DSC吸熱(℃)概述於下表1中。

3B：化合物(1)之多晶形式M之形成

1.方法A

化合物(1)之多晶形式M可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

將10 g化合物(1)饋入反應器中。接著將50 g乙酸乙酯饋入反應器中。將反應器加熱至45℃並將混合物攪拌1天至2天直至觀測到形式M。接著將反應器冷卻至25℃，並放置直至形成化合物(1)之固體。將化合物(1)之固體過濾並在35℃下將已過濾固體乾燥24小時。

2.方法B

化合物(1)之多晶形式M亦可以與以上對於方法A所述類似之方式來製備，但使用下表2A中所列之溶劑系統並在表2A中所列之各別溫度範圍下在溶劑系統中攪拌化合物(1)。

化合物(1)之形式M的特徵：化合物(1)之形式M的XRPD數據及C¹³固態NMR數據分別顯示於圖2及圖6中。化合物(1)之形式M的某些代表性XRPD峰及DSC吸熱(℃)概述於下表2B中。

3C：化合物(1)之多晶形式H之形成

化合物(1)之多晶形式H可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

將10 g化合物(1)饋入反應器中。接著將50 g乙酸乙酯饋入反應器中。將反應器加熱至65℃並將混合物攪拌1天至2天直至觀測到形式H。需要時可添加形式H之晶種至反應器中以便大規模生產。接著將反應器冷卻至25℃，並放置直至形成化合物(1)之固體。將化合物(1)之固體過濾並在65℃下將已過濾固體乾燥24小時。

化合物(1)之形式H的特徵：化合物(1)之形式H的XRPD數據及C¹³固態NMR數據分別顯示於圖3及圖7中。化合物(1)之形式H的某些代表性XRPD峰及DSC吸熱(℃)概述於下表3中。

3D：化合物(1)之多晶形式P之形成

化合物(1)之多晶形式P可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

方法A：

將20 mg化合物(1)饋入小瓶中。接著將0.5 mL二氯甲烷饋入小瓶中。在室溫下將混合物攪拌3週直至形成化合物(1)之固體。過濾化合物(1)之固體並將已過濾固體在室溫下乾燥1小時。

方法B：

將500 mg化合物(1)饋入小瓶中。接著將6 mL二氯甲烷饋入小瓶中。在室溫下將混合物攪拌4天直至形成化合物(1)之固體。將化合物(1)之固體過濾並在室溫下將已過濾固體乾燥1小時。

化合物(1)之形式P的特徵：化合物(1)之形式P的XRPD數據及C¹³固態NMR數據分別顯示於圖4及圖8中。化合物(1)之形式P的某些代表性XRPD峰及DSC吸熱(℃)概述於下表4中。

3E：化合物(1)之多晶形式X之形成

化合物(1)之多晶形式X可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

將50 mg EtOAc溶劑合物G置放於在真空烘箱中在60℃下的20 mL開口小瓶中24小時。24小時後移去小瓶並藉由XRPD分析粉末。形式X與EtOAc溶劑合物G為同結構的，故xrpd圖中所列峰之位置彼此相差在0.2度2θ之內。

化合物(1)之形式X的特徵：化合物(1)之形式X的XRPD數據展示於圖10中。化合物(1)之形式X的某些代表性XRPD峰概述於下表5中。

3F：化合物(1)之多晶形式ZA之形成

化合物(1)之多晶形式ZA可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

將3 mg之化合物(1)之n-BuOAc溶劑合物A置放於DSC鋁盤中。以每分鐘10℃之速率將樣本加熱至145℃以自n-BuOAc溶劑合物A中移除n-BuOAc。

化合物(1)之形式ZA的特徵：化合物(1)之形式ZA的XRPD數據展示於圖11中。化合物(1)之形式ZA的某些代表性XRPD峰概述於下表6中。

3G：非晶化合物(1)之形成

藉由以下步驟形成噴霧乾燥之非晶化合物(1)：將結晶藥物物質(化合物(1)：形式A)以約10 w/w%固體負載量溶解於加工溶劑(乙醇)中。此溶液使用設置成閉合迴路組態之Buchi微型噴霧乾燥器(B-290)來噴霧乾燥，使用Buchi冷凝器(B-295)使排出氮氣中之溶劑(乙醇)冷凝。

溶液製備

如表7中所示將20 g化合物(1)溶解於180 g乙醇中。

噴霧乾燥程序

接著使用Buchi B-290微型噴霧乾燥器按表8中所示之噴霧設定來噴霧乾燥最終溶液。

將所得非晶物質在40℃下噴霧乾燥24小時以移除任何殘餘乙醇溶劑。收集乾燥非晶物質並使用粒子x射線繞射在Bruker D8 Discover上測試非晶含量。XRPD數據證實所製備之物質為非晶物質。圖9展示非晶化合物(1)之固態C¹³核磁光譜(SSNMR)。

實例4：化合物(1)之各種溶劑合物的製備

4A：化合物(1)之甲醇溶劑合物(化合物(1)‧MeOH)之形成

化合物(1)之甲醇溶劑合物可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

在室溫下在加蓋HPLC小瓶中將20 mg化合物(1)於500微升MeOH中之漿液攪拌3週以形成化合物(1)‧MeOH。藉由過濾收集固體並藉由XRPD分析。TGA數據指示甲醇溶劑合物之化學計量為約1：1(化合物(1)：甲醇)。

化合物(1)之甲醇溶劑合物的特徵：化合物(1)之甲醇溶劑合物的某些代表性XRPD峰概述於下表9中。

4B：化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物(化合物(1)‧EtOAc)之形成

化合物(1)之EtOAc溶劑合物A至EtOAc溶劑合物F(化合物(1)‧EtOAc)可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

1. EtOAc溶劑合物A：

在室溫下將含有100 mg化合物(1)於EtOAc中之漿液在2 mL小瓶中攪拌隔夜。將溶劑傾出，獲得剩餘濕餅，藉由XRPD分析該濕餅。TGA數據指示EtOAc溶劑合物之化學計量為約3：1(化合物(1)：EtOAc)。

EtOAc溶劑合物A之特徵：EtOAc溶劑合物A之某些代表性XRPD峰概述於下表10中。

2. EtOAc溶劑合物B：

將含有20 mg化合物(1)於500微升EtOAc中之漿液在加蓋小瓶中在室溫下攪拌3週。藉由過濾收集固體並藉由XRPD分析。

EtOAc溶劑合物B之特徵：EtOAc溶劑合物B之某些代表性XRPD峰概述於下表11中。

3. EtOAc溶劑合物C：

將約20 kg化合物(1)添加至反應器中。接著將200 kg 2-MeTHF饋入反應器中。接著將200 kg EtOAc添加至反應器中並將溶液在100 mmHg及30℃下旋轉蒸發，由此獲得油狀物。接著在反應器中饋入591 kg EtOAc，其接著在50 mmHg及30℃下旋轉蒸發。提交固體殘餘物進行XRPD。

EtOAc溶劑合物C之特徵：EtOAc溶劑合物C之某些代表性XRPD峰概述於下表12中。

4. EtOAc溶劑合物D：

將550 mg化合物(1)添加至2 mL EtOAc中。在20℃至25℃下以400 rpm將漿液震盪4天。接著將樣本過濾並分析XRPD。

EtOAc溶劑合物D之特徵：EtOAc溶劑合物D之某些代表性XRPD峰概述於下表13中。

5. EtOAc溶劑合物E：

將60 mg化合物(1)添加至1 mL EtOAc中。將懸浮液冷卻至10℃並攪拌4天。接著將樣本過濾並分析XRPD。

EtOAc溶劑合物E之特徵：EtOAc溶劑合物E之某些代表性XRPD峰概述於下表14中。

6. EtOAc溶劑合物F：

將化合物(1)(30.46 g，66.27 mmol)饋入500 ml圓底燒瓶中。饋入2-Me-THF(182.8 mL)並開始攪拌。接著將氫氧化鈉(122.6 mL，2 M，245.2 mmol)饋入溶液中。將反應混合物加熱至68℃並在70℃下攪拌隔夜。將反應物冷卻至0℃。添加檸檬酸(157.0 mL，30 w/v%，245.2 mmol)。將所得混合物攪拌30分鐘。分離各相並將水(152.3 mL)添加至有機層中。使各相分離。將批料蒸餾減小至3份體積。添加2-MeTHF(91.38 mL)並將批料蒸餾減小至3份體積。將批料蒸餾減小至3份體積。添加2-MeTHF(91.38 mL)並將批料蒸餾減小至3份體積。饋入EtOAc(304.6 mL)並將批料蒸餾減小至2份體積至3份體積。藉由添加7份體積至8份體積EtOAc將批料調整至10份體積。將批料蒸餾減小至2份體積至3份體積。藉由添加7份體積至8份體積EtOAc將批料調整至10份體積。將批料蒸餾減小至2份體積至3份體積。藉由添加7份體積至8份體積EtOAc將批料調整至10份體積。將批料體積調整至總共10份體積並攪拌加熱批料至50℃。在達到50℃之溫度後取小樣本並過濾。

TGA數據指示EtOAc溶劑合物之化學計量為約2：1(化合物(1)：EtOAc)。

EtOAc溶劑合物F之特徵：EtOAc溶劑合物F之某些代表性XRPD峰概述於下表15中。

7. EtOAc溶劑合物G：

將1 g化合物(1)添加至5 mL EtOAc中。在室溫下攪拌懸浮液1天。或者，將100 mg乙酸乙酯溶劑合物晶種添加至化合物(1)於EtOAc中之懸浮液中並將所得混合物在室溫下攪拌一天。接著將樣本過濾並分析XRPD。TGA數據指示EtOAc溶劑合物之化學計量為約1：1(化合物(1)：EtOAc)。

EtOAc溶劑合物G之特徵：EtOAc溶劑合物G之某些代表性XRPD峰概述於下表16中。

4C：化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物(化合物(1)‧nBuOAc)之形成

化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A至乙酸正丁酯溶劑合物C(化合物(1)‧nBuOAc)可藉由遵循如下所述之步驟來製備：

1.乙酸正丁酯溶劑合物A：

將500 mg化合物(1)於5 mL n-BuOAc中之混合物在加蓋20打蘭(dram)小瓶中攪拌3天。藉由過濾收集固體並分析。TGA數據(未圖示)指示n-BuOAc溶劑合物之化學計量為約2：1(化合物(1)：n-BuOAc)。

化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A之特徵：乙酸正丁酯溶劑合物A之某些代表性XRPD峰概述於下表17中。

2.乙酸正丁酯溶劑合物B：

將109 mg化合物(1)溶解於2 mL n-BuOAc中。幾分鐘後開始發生沈澱。接著在周圍條件下蒸發溶劑2週。收集並表徵所得物質。TGA數據(未圖示)指示n-BuOAc溶劑合物之化學計量為約1：1(化合物(1)：n-BuOAc)。

化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物B之特徵：乙酸正丁酯溶劑合物B之某些代表性XRPD峰概述於下表18中。

3.乙酸正丁酯溶劑合物C：

如以上對於乙酸正丁酯溶劑合物A及乙酸正丁酯溶劑合物B所述，類似地在室溫下攪拌化合物(1)與n-BuOAc之混合物。TGA數據指示n-BuOAc溶劑合物之化學計量為約4：1(化合物(1)：n-BuOAc)。

化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物C之特徵：乙酸正丁酯溶劑合物C之某些代表性XRPD峰概述於下表19中。

實例5：包含化合物(1)之多晶形式A之膠囊的製備

如表20a及表20b中所示，製備化合物(1)之形式A的兩種不同口服劑量調配物。

A.濕式造粒及膠囊組合物

如下製備200 mg形式A膠囊。以與如下對於200 mg膠囊所述類似之方式製備50 mg形式A膠囊。用於活性膠囊之濕式造粒與膠囊摻合物之調配組合物描述於表21a及表21b中。

200 mg膠囊強度批料之最終膠囊摻合物中之各成分的實際重量可基於濕式造粒(內相)之產率計算來確定。樣品計算如下：

B.濕式造粒及膠囊製備概述(200 mg)

a)高剪切濕式造粒方法流程

1.稱取過(10%)量之化合物(1)之多晶形式A、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉及聚普維酮K29/32。

2.使用裝有#20目篩之共研磨機將過量之化合物(1)、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188及聚普維酮K29/32在70%速度下過篩。

3.稱取所需量之「經過篩」化合物(1)、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉及聚普維酮K29/32並轉移至V形筒式摻合機(PK 1立方呎)中。

4.將材料在設定速度(典型地為25 RPM)下摻合5分鐘。

5.將鬆散濕式造粒摻合物置放於高剪切造粒機(Vector GMX.01)中。

6.將摻合物造粒。

7.一旦達到造粒終點，即將材料(濕式造粒摻合物)轉移至適合之容器中並乾燥。

8.使用具有#20目篩之共研磨機將所有乾顆粒研磨。

b)膠囊製造方法流程

9.稱取過(10%)量之晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉及硬脂酸鎂。

10.使用裝有#20目篩之共研磨機，將過量之晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉及硬脂酸鎂在70%速度下過篩。

11.稱取所需量之「經過篩」晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂及經研磨顆粒，並將除硬脂酸鎂以外的材料轉移至V形筒式摻合機(PK 1立方呎)。

12.將材料在V形筒式摻合機中摻合。

13.接著將硬脂酸鎂添加至V形筒式摻合機中，並摻合混合物。

14.囊封最終摻合物。

實例6：包含化合物(1)之多晶形式M之錠劑的製備

a.錠劑A

濕式造粒及錠劑組合物

用於活性錠劑之濕式造粒與錠劑摻合物之調配組合物描述於表22a及表22b中。錠劑之總組成規格描述於表22c中。

a)高剪切濕式造粒方法流程

1.稱取過(10%)量之化合物(1)、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉、聚普維酮K12及交聯羧甲基纖維素鈉。

2.使用裝有813 μm目篩之共研磨機，將過量之化合物(1)、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉、聚普維酮K12及交聯羧甲基纖維素鈉在30%速度下過篩。將經過篩材料置放於個別袋或容器中。

3.稱取所需量之「經過篩」化合物(1)、晶性纖維素PH-101、單水合乳糖、泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉、聚普維酮K12及交聯羧甲基纖維素鈉。

4.設定V形筒式摻合機並將步驟3之材料轉移至摻合機中。

5.將材料在V形筒式摻合機中以設定速度(典型地為25 RPM)摻合5分鐘。

6.將V形筒式摻合機之內容物倒入LDPE袋(鬆散濕式造粒摻合物)。

7.設定具有1 L造粒機碗槽之高剪切造粒機(Vector GMX.01)。

8.接著將鬆散濕式造粒摻合物轉移至1 L造粒機碗槽中。

9.根據所規定之濕式造粒參數(表23)將摻合物造粒

‧階段1：使用濕式造粒所需總量之77%的水在規定之製程參數下將材料造粒。一旦水添加完成，即停止造粒。刮擦高剪切造粒機之壁、葉輪及切碎機並檢驗顆粒以確定是否達至目視終點。若是則前往步驟10，若否則進行階段2。

‧階段2：添加剩餘23%之水並在規定之製程參數下將材料造粒。一旦水添加完成，即停止造粒，並刮擦高剪切造粒機之壁、葉輪及切碎機並檢驗顆粒以確定是否達至目視終點。若是則前往步驟10，若否則用2 ml份量之水在前述製程參數下繼續造粒直至達至終點。

10.一旦達至造粒終點，即使材料(濕式造粒摻合物)過#20(850 μm)目篩並將經過篩材料轉移至適合之容器中。

11.根據規定之乾燥參數(總乾燥溫度：30℃至45℃)，將步驟10之過篩材料在烘箱中乾燥。

12.使用具有813 μm目篩之共研磨機將所有乾顆粒在30%速度下研磨。(將共研磨機中留下之任何材料手動過#20(850 μm)目篩並合併經研磨顆粒與經過篩顆粒)。測定經研磨顆粒之重量並將材料封裝於袋中。

b)錠劑製造方法流程

1.稱取過(10%)量之晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉及硬脂酸鎂。

2.使用裝有813 μm目篩之共研磨機，將過量之晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉及硬脂酸鎂在30%速度下過篩。

3.稱取所需量之「經過篩」晶性纖維素PH-102、單水合乳糖、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂及經研磨顆粒。

4.將除硬脂酸鎂以外之材料轉移至V形筒式摻合機中。

5.將材料在V形筒式摻合機中以設定速度(典型地為25 RPM)摻合10分鐘。

6.接著將硬脂酸鎂添加至V形筒式摻合機中。

7.將材料在V形筒式摻合機中以設定速度(典型地為25 RPM)摻合1分鐘。

8.將V形筒式摻合機之內容物倒入袋中。

9.設定具有改良囊片工具(尺寸0.30"×0.60")之GlobePharma製錠機。

10.將最終摻合物壓縮以形成錠劑。

b.錠劑B

預造粒摻合物之調配物組成提供於表24a中。表24b提供造粒黏合劑溶液之組成。理論壓縮摻合物組成提供於表24c中。薄膜包衣懸浮液(包括50%超額用於管線引動及泵校準)之組成及近似批量大小提供於表24d中。錠劑B組成之總規格概述於表24e中。薄膜包衣之目標量為核心錠劑重量之3.0 w/w%。

A.濕式造粒

a)黏合劑溶液製備

黏合劑溶液包括聚普維酮、SLS及泊洛沙姆。該溶液係基於最終乾顆粒之9 w/w%水含量來製備。製備過量100%用於泵校準、引動管線等。

1.稱取所需量之泊洛沙姆188、月桂基硫酸鈉、聚普維酮K12及純化(去離子)水。

2.在恆定攪拌下，添加聚普維酮K12至去離子水中，並攪拌所得混合物。將泊洛沙姆188及月桂基硫酸鈉添加至含有去離子水及已溶解聚普維酮K12之槽中。接著在添加界面活性劑後將攪拌速率調低以使得僅形成局部渦旋。

3.攪拌溶液直至可見所存在之所有固體皆完全溶解。

4.接著將溶液靜置至少2小時直至溶液中之氣泡消失。或者，可對溶液槽抽取部分真空達1小時以使溶液脫氣。

b)濕式造粒製程

1.稱取化合物(1)、交聯羧甲基纖維素鈉、晶性纖維素PH-101及單水合乳糖。

2.使用裝有32R篩及圓形葉輪之U5或U10共研磨機，將稱取出之化合物(1)、乳糖及晶性纖維素分別以4000 rpm在U5中或以2800 rpm在U10中去塊，進入袋中或直接進入200 L Meto摻合機中。

3.將材料自步驟2轉移至200 L Meto箱式摻合機中。

4.在10 RPM下將材料摻合25分鐘。

5.將材料直接自摻合筒饋至失重式粉末進料器或LDPE袋中。

6.設定具有表25a及表25b中規定之所需機筒及螺桿組態的Leistritz 27 mm雙螺桿擠壓機。

7.使用K-Tron失重式進料器將乾摻合物饋至擠壓機中。

8.使用經校準之K-Tron液泵將黏合劑流體注入擠壓機。該泵在操作之前經使用實際流體校準。

9.接著將摻合物造粒。

10.溶液進料速率與粉末進料速率之重量比為0.215以獲得適當最終組合物。為獲得167.00 g min^-1之預定粉末進料，溶液進料速率為35.91 g min^-1。

11.使用具有正方形4 mm篩及圓棒式葉輪之線內U5共研磨機在1000 rpm下研磨來自雙螺桿之濕顆粒。

12.收集並乾燥濕研磨顆粒。水含量不大於3.0%。

B.顆粒外摻合及壓縮製程

1.基於壓縮摻合物組成來稱取顆粒外賦形劑之數量。

2.將顆粒及Cab-O-Sil直接添加至200 L Meto箱式摻合機中並在15 RPM下摻合8分鐘。

3.接著使摻合物通過處於600 rpm下之具有40 G篩及圓棒式葉輪之U10共研磨機，直接進入600 L Meto箱式摻合機或雙LDPE袋中。

4.使用處於600 rpm下之具有32R篩及圓棒式葉輪之U10共研磨機使大致量之晶性纖維素PH-101及Ac-Di-Sol過篩，直接進入600 L Meto箱式摻合機或雙LDPE袋中。

5.將硬脂醯基鈉(SSF)手動過#50目篩至適當容器中。將等於步驟一中計算之SSF質量之大約10倍的一部分顆粒外摻合物與SSF一起置放於容器中並摻合30秒，接著將混合物添加至箱式摻合機中。

6.在15 rpm下將混合物摻合10分鐘。

7.將最終摻合物壓縮。

8.在壓縮製程期間，量測個別及平均錠劑重量、硬度及厚度。

C.薄膜包衣製程

在Vector VPC 1355盤式塗佈機中，以20 wt%歐巴代II白色#85F18378水性懸浮液之形式，將薄膜包衣塗覆於核心錠劑。目標包衣為核心錠劑重量之3.0 w/w%，且可接受範圍為2.5%至3.5%。為實現此目的，噴塗等效於3.2%重量增加之包衣懸浮液的量，假定塗佈效率為95%則此舉將獲得3.0%包衣。如下進行薄膜包衣製程：

1.藉由將錠劑產量除以3(或2，若存在小於75 kg之核心錠劑)來計算盤負荷，且計算所需包衣懸浮液之量(基於3.2%包衣)，包括50%超額用於管線引動、泵速率測試及塗佈盤壁。

2.藉由緩慢添加歐巴代II #85F18378粉末至適當量之去離子水中同時用頂置式攪拌器持續攪拌流體確保充分潤濕粉末來製備包衣懸浮液。一旦所有歐巴代添加至水中，即以較低rpm繼續攪拌60分鐘。噴塗懸浮液之最大保持時間為24小時。

3.用歐巴代藉由噴塗包衣懸浮液5分鐘至10分鐘來將盤預塗。噴塗後將盤乾燥1分鐘至2分鐘。

4.將計算量之錠劑裝載於塗佈盤中。

5.將盤預熱至所需床溫，同時搖動盤。

計算錠劑重量增加並確定塗佈量在2.5%與3.5%之間。一旦噴塗達到該量，即停止噴塗。當塗佈量足夠時，再乾燥錠劑5分鐘。停止加熱並使錠劑冷卻同時搖動盤。當床溫達至35℃(±1℃)時，停止製程。在冷卻期期間，塗佈盤門保持關閉。

實例7：化合物(1)IV調配物

以下提供對製造製程之描述。

1.將待用於製程中之所有設備及組件滅菌。

2.製備10%磷酸及1 M氫氧化鈉溶液用於進行pH值調節

a. 10%磷酸(得到86%)：

將約250 mL之注射用水(WFI)添加至500 mL量瓶中。接著將59 mL磷酸緩慢添加至瓶中。接著將混合物混合。

b. 1 M氫氧化鈉：

將約250 mL之WFI添加至500 mL量瓶中。接著將20 g氫氧化鈉緩慢添加至瓶中。接著將混合物混合。

3.製備具有右旋糖之70 mM磷酸鹽緩衝液-12 L

a.稱取所需數量之右旋糖、磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉。

b.將約10 L冷WFI(15-30℃)添加至混配容器中。

c.接著將混合物混合。

d.將所稱取數量之右旋糖、磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉添加至容器中。接著將混合物混合直至溶液澄清。

e.取10 mL樣本以檢查pH值。需要時用10%磷酸或1 M氫氧化鈉溶液將PH值調整至pH 7.4(範圍：7.2至7.6)。

f.用適量WFI(15℃至30℃)補足至12 L(12.2 kg，在密度為1.013 g/mL之條件下)。混合不少於5分鐘。

4.製備化合物(1)/HPβCD溶液

a.稱取所需數量之HPβCD及化合物(1)之形式M。

b.將約9 kg磷酸鹽/右旋糖緩衝液(15℃至30℃)添加至具有攪拌棒之混配容器中。

c.將所稱取之HPβCD添加至緩衝溶液中並將混合物攪拌不少於5分鐘直至溶液變澄清。

d.接著將化合物(1)添加至混配容器中。流體上方之容器壁用50 mL至100 mL緩衝溶液沖洗以洗掉任何可能在側邊上之殘餘藥物。接著將所得混合物混合不少於2小時直至溶液變澄清。

e.取10 mL樣本並檢查pH值。需要時用10%磷酸或1 M氫氧化鈉溶液將pH值調整至pH 7.0(範圍：7.0至7.4)。

f.用適量磷酸鹽/右旋糖緩衝液(15℃至30℃)補足至10 L(10.2 kg，在密度為1.0218 g/ml之條件下)。混合不少於5分鐘。

5.使用蠕動泵使本體溶液經串聯的2個Millipak 200，0.22微米過濾器過濾至20 L Flexboy無菌袋中。

6.使用Flexicon蠕動填充機將溶液置放於小瓶中。將已填充之小瓶儲存於15℃至30℃下。

實例8：包含化合物(1)之多晶形式M之其他錠劑的製備

a.錠劑C

輥壓及錠劑組合物

錠劑之總組成規格描述於表27中。錠劑調配物以與以上在實例7中所述類似之方式來製備，但使用輥壓替代雙螺桿濕式造粒製程。簡言之，製造製程包括：將化合物(1)(形式M)、微晶纖維素及交聯羧甲基纖維素鈉個別地過篩，添加至摻合機中並摻合。將硬脂酸鎂個別地過篩，添加至以上摻合物中並進一步摻合。接著使用輥壓機將摻合物乾式造粒並研磨成顆粒。接著將顆粒進一步與個別過篩之微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉及硬脂醯硬脂酸鈉摻合。接著將最終摻合物壓縮成錠劑。最終錠劑含有400 mg化合物(1)。壓縮後，測試SDD錠劑之釋放並封裝。

b.錠劑D

濕式造粒及錠劑組合物

使用具有流化床乾燥器之Consigma 1雙螺桿造粒機以與以上實例7中對於錠劑B所述類似之方式製備錠劑調配物。對於HPC 2.25%，錠劑之化合物(1)顆粒總組成提供於表28a及表28b中。

用於預造粒摻合物之調配組成及批量大小提供於表29a中。表29b、表29c、表29d、表29e、表29f及表29g提供造粒黏合劑溶液之組成及批量大小。黏合劑溶液之批量大小包括100%超額用於泵校準及引動溶液管線。

a)黏合劑溶液製備(HPC 1.5%至2.5%)

黏合劑溶液包括HPC黏合劑。該溶液係基於最終乾顆粒之48 w/w%、53 w/w%及58 w/w%水含量來製備。製備過量100%用於泵校準、引動管線等。

1.稱取出所需量(表29b、表29c、表29d、表29e、表29f及表29g)之HPC及純化(去離子)水。

2.在恆定攪拌下，將HPC-SL添加至去離子水中並攪拌直至完全溶解。調低攪拌速率以使得僅形成局部渦旋。

3.攪拌溶液直至可見所存在之所有固體皆完全溶解。

4.覆蓋溶液並使其靜置2小時至4小時直至溶液中之氣泡已消失。或者，可對溶液槽抽取部分真空達1小時以使溶液脫氣。

b)濕式造粒製程

1.根據表29a稱取正確量之化合物(1)、交聯羧甲基纖維素鈉、晶性纖維素PH-101及單水合乳糖。

2.使用裝有32R篩及圓形葉輪之U5或U10共研磨機，使稱取出之化合物(1)、乳糖及晶性纖維素分別以4000 rpm在U5中或以2800 rpm在U10中去塊，進入袋中或直接進入箱式摻合機中。

3.設定摻合機，且若材料經去塊進入袋中則將材料自步驟2轉移至摻合機中。

4.在23 RPM下摻合材料5分鐘。基於0.4 g cc^-1至0.5 g cc^-1之容積密度，摻合機應為59%至74%滿。

5.取兩份1.0 g樣品，一份用於卡費雪(KF)測試而另一份用於LOD測試。該等樣品不必用取樣器取得。

6.直接自摻合筒將5 kg預造粒摻合物饋至失重式粉末進料器中。將剩餘摻合機內容物倒入經標記之LDPE袋中或直接自摻合筒饋至失重式進料器中。

7.如表30中所規定，設定具有標準螺桿組態之Consigma 1雙螺桿造粒機。

8.使用Barbender失重式進料器將乾摻合物饋至擠壓機中。

9.使用經校準之液泵將黏合劑流體注入造粒機中。

10.根據表31中展示之所規定實驗設計將摻合物造粒。

11.造粒約4 kg材料用於實驗1至實驗4(每個實驗1 kg)，且造粒約6 kg材料用於實驗5及實驗6(每個實驗3 kg)。

12.溶液進料速率與粉末進料速率之重量比在不同實驗之間不同(當粉末聯合物(federate)保持恆定於167公克/分鐘時參看表30中所有實驗之溶液聯合物)。

13.將來自各實驗之顆粒收集至獨立LDPE袋中。

c)流化床乾燥製程

14.將約1 kg顆粒饋至流化床乾燥器中並根據表31中所示參數來乾燥。

15.將乾燥顆粒收集至獨立LDPE袋中。

本文中所提供之所有參考文獻皆以其全文引用的方式併入本文中。如本文所用之所有縮寫、符號及慣例與當代科學文獻中所用者一致。參見例如Janet S.Dodd編著之The ACS Style Guide：A Manual for Authors and Editors，第二版，Washington,D.C.：American Chemical Society,1997。

應瞭解，儘管已結合[實施方式]對本發明進行描述，但上述描述意欲說明而非限制本發明之範疇，本發明之範疇係由隨附申請專利範圍之範疇所界定。其他態樣、優勢及修改在以下申請專利範圍之範疇內。

圖1至圖4分別展示化合物(1)之形式A、形式M、形式H及形式P之室溫XRPD圖。

圖5至圖8分別展示化合物(1)之形式A、形式M、形式H及形式P之固態C¹³核磁光譜(SSNMR)。

圖9展示非晶化合物(1)之固態C¹³核磁光譜(SSNMR)。

圖10及圖11分別展示化合物(1)之形式X及形式ZA之室溫XRPD圖。

Claims

一種化合物1之多晶形式，其係由以下結構式表示：其中該多晶形式為多晶形式M、多晶形式H、多晶形式P、多晶形式X或多晶形式ZA。
如請求項1之多晶形式，其中該多晶形式為化合物1之多晶形式M。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為具有在以2θ±0.2表示之19.6處出現最強特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：19.6、16.6、18.1、9.0、22.2及11.4，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為具有實質上與圖2中所示相同的X射線粉末繞射圖。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在230±2℃處具有吸熱峰。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為在固態 C¹³核磁光譜(NMR)中在177.3、134.3、107.4、56.5、30.7及25.3處出現波峰。
如請求項2之多晶形式，其中多晶形式M之特徵為具有實質上與圖6中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。
如請求項1之多晶形式，其中該多晶形式為化合物1之多晶形式H。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為具有在以2θ±0.2表示之6.6及17.3處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得且其中在6.6處之峰為最強峰。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：6.6、18.7、8.5、17.3、15.8及19.4，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為具有實質上與圖3中所示相同的X射線粉末繞射圖。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在238±2℃處具有吸熱峰。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在162.2、135.9、131.1、109.5、45.3及23.9處出現波峰。
如請求項9之多晶形式，其中多晶形式H之特徵為具有實質上與圖7中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。
如請求項1之多晶形式，其中該多晶形式為化合物1之多晶形式P。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為具有在以2θ±0.2表示之7.0及15.8處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得且其中7.0處之峰為最強峰。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.0、15.8、9.8、19.3、8.5及21.9，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為具有實質上與圖4中所示相同的X射線粉末繞射圖。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為在差示掃描熱量測定(DSC)中在160±2℃處具有吸熱峰。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為在固態C¹³核磁光譜(NMR)中在161.5、133.6、105.8、44.4、31.1及22.1處出現波峰。
如請求項16之多晶形式，其中多晶形式P之特徵為具有實質上與圖8中所示相同的固態C¹³ NMR光譜。
如請求項1之多晶形式，其中該多晶形式為化合物1之多晶形式X。
如請求項23之多晶形式，其中多晶形式X之特徵為具有在以2θ±0.2表示之7.5及12.1處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項23之多晶形式，其中多晶形式X之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5、12.1、13.0、13.8、16.2及19.7，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項23之多晶形式，其中多晶形式X之特徵為具有實質上與圖9中所示相同的X射線粉末繞射圖。
如請求項1之多晶形式，其中該多晶形式為化合物1之多晶形式ZA。
如請求項27之多晶形式，其中多晶形式ZA之特徵為具有在以2θ±0.2表示之5.2及10.2處出現特徵峰的X射線粉末繞射圖，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項27之多晶形式，其中多晶形式ZA之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：5.2、10.2、16.5、18.6、19.8及20.3，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
如請求項27之多晶形式，其中多晶形式ZA之特徵為具有實質上與圖10中所示相同的X射線粉末繞射圖。
一種化合物1之非晶形式，其係由以下結構式表示：
一種醫藥組合物，其包含化合物1之形式M、形式H、形式P、形式X及形式ZA或化合物1之非晶形式，及至少一種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑，其中化合物1係由以下結構式表示：
一種醫藥組合物，其包含如請求項2至8中任一項之化合物1之形式M。
一種醫藥組合物，其包含如請求項9至15中任一項之化合物1之形式H。
一種醫藥組合物，其包含如請求項16至22中任一項之化合物1之形式P。
一種醫藥組合物，其包含如請求項23至26中任一項之化合物1之形式X。
一種醫藥組合物，其包含如請求項27至30中任一項之化合物1之形式ZA。
一種醫藥組合物，其包含如請求項31之化合物1之非晶形式。
一種抑制或降低生物活體外樣本中HCV聚合酶之活性之方法，其包括向該樣本投與有效量之如請求項1至30中任一項之化合物1之多晶形式。
如請求項39之方法，其中該HCV為基因型1。
如請求項39之方法，其中該HCV為基因型1a或基因型1b。
一種如請求項1至30中任一項之化合物1之多晶形式之用途，其係用於製備治療個體中之HCV感染之藥物。
一種如請求項1至30中任一項之化合物1之多晶形式之用途，其係用於製備抑制或降低個體中HCV聚合酶之活性之藥物。
如請求項42或43之用途，其中該藥物係與一或多種其他治療劑併用。
如請求項44之用途，其中該等其他治療劑包括抗HCV藥物。
如請求項45之用途，其中該抗HCV藥物為HCV蛋白酶抑制劑。
如請求項46之用途，其中該HCV蛋白酶抑制劑為HCV NS3抑制劑。
如請求項47之用途，其中該HCV蛋白酶抑制劑為VX-950。
如請求項45之用途，其中該抗HCV藥物為HCV NS5A抑制劑。
如請求項45之用途，其中該藥物係與干擾素及/或病毒唑(ribavirin)併用。
如請求項50之用途，其中該干擾素為聚乙二醇化干擾素。
如請求項51之用途，其中該聚乙二醇化干擾素為聚乙二醇化干擾素α。
如請求項52之用途，其中該聚乙二醇化干擾素為聚乙二醇化干擾素α 2a或聚乙二醇化干擾素α 2b。
如請求項42或43之用途，其中該HCV為基因型1。
如請求項42或43之用途，其中該HCV為基因型1a或基因型1b。
一種製備由以下結構式表示之化合物(1)之形式M之方法，其包括在10℃至47℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式M，該溶劑系統包括異丙醇、乙酸乙酯、乙酸正丁酯、乙酸甲酯、丙酮、2-丁酮或庚烷或其組合。
如請求項56之方法，其中該溶劑系統包括：異丙醇；乙酸乙酯；乙酸正丁酯；乙酸正丁酯與丙酮之混合物；乙酸正丁酯與乙酸甲酯之混合物；丙酮；2-丁酮；乙酸正丁酯與庚烷之混合物；丙酮與庚烷之混合物；或乙酸乙酯與庚烷之混合物。
如請求項57之方法，其中化合物(1)： i)於異丙醇中，在10℃至47℃範圍內之溫度下攪拌；ii)於乙酸乙酯中，在45℃至47℃範圍內之溫度下攪拌；iii)於乙酸正丁酯中，在35℃至47℃範圍內之溫度下；iv)於乙酸正丁酯與丙酮之混合物中，在30℃至47℃範圍內之溫度下；v)於乙酸正丁酯與乙酸甲酯之混合物中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；vi)於丙酮中，在20℃至47℃範圍內之溫度下；vii)於2-丁酮中，在30℃至47℃範圍內之溫度下；viii)於乙酸正丁酯與庚烷之混合物中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；ix)於丙酮與庚烷之混合物中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；或x)於乙酸乙酯與庚烷之混合物中，在25℃至47℃範圍內之溫度下；以形成化合物(1)之形式M。
一種製備由以下結構式表示之化合物(1)之形式H之方法：其包括在48℃至70℃範圍內之溫度下攪拌化合物(1)之溶液以形成化合物(1)之形式H。
如請求項59之方法，其中該化合物(1)之溶液係在50℃至70℃範圍內之溫度下攪拌以形成化合物(1)之形式H。
如請求項59或60之方法，其中該化合物(1)之溶液包括化合物(1)及乙酸乙酯。
一種製備由以下結構式表示之化合物(1)之形式P之方法，其包括：在室溫下攪拌化合物(1)與溶劑系統之混合物以形成化合物(1)之形式P，該溶劑系統包括選自由二氯甲烷、四氫呋喃(THF)及其混合物組成之群的溶劑。
一種製備由以下結構式表示之化合物(1)之形式X之方法，其包括自化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G中移除乙酸乙酯，其中化合物(1)之乙酸乙酯溶劑合物G之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：7.5及12.1，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。
一種製備由以下結構式表示之化合物(1)之形式ZA之方法，其包括自化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A中移除乙酸正丁酯，其中化合物(1)之乙酸正丁酯溶劑合物A之特徵為具有在以2θ±0.2表示之以下位置出現特徵峰的X射線粉末繞射圖：9.7及16.5，其中該X射線粉末繞射圖係在室溫下使用Cu K α輻射而獲得。