TW201119672A

TW201119672A - Targeted immunoconjugates

Info

Publication number: TW201119672A
Application number: TW099127335A
Authority: TW
Inventors: Ralf Hosse; Ekkehard Moessner; Michela Silacci-Melkko; Pablo Umana
Original assignee: Roche Glycart Ag
Priority date: 2009-08-17
Filing date: 2010-08-16
Publication date: 2011-06-16
Also published as: KR20150088328A; MA33717B1; AR077879A1; EP2467165A2; MX2012002014A; WO2011020783A2; SG178443A1; WO2011020783A3; JP5764127B2; JP2013502209A; US8945571B2; ZA201200767B; AU2010285071A1; PE20120630A1; RU2583876C2; RU2012110127A; CR20120042A; KR20120053042A; EP2467165B1; ES2534085T3

Description

201119672 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明大致關於用於選擇H楂、路步伽，“ 心伟注傳遞影響細胞活性之效應部分的抗原特異性免疫結合物。χ^ α ^ θ " 另外，本發明係關於編碼該等免疫結合物之核酸分子、及包含該等核酸分子之載體及宿主細胞。本發明進一步係關於製備本發明免疫結合物的方法及使用該等免疫結合物治療疾病之方法。【先前技術】籲纟各種臨床環境中常常需要選擇性破壞個體細胞或特定細胞類型。舉例而言，癌症療法之主要目的在於特定地破壞腫瘤細胞，同時使健康細胞及組織保持完整且未受損傷。細胞中之多種信號轉導路徑與細胞之存活及/或死亡有關。因此，細胞存活或死亡所涉及之路徑因子的直接傳遞可用於促進細胞之維持或破壞。細胞因子係參與免疫系統調節之細胞信號傳導分子。者 Φ 用於癌症療法中時’細胞因子可充當具有抗腫瘤作用且可增加一些類型腫瘤之免疫原性的免疫調節劑。然而，快速血液清除率及缺乏腫瘤特異性需要全身投與高劑量之細胞因子以使腫瘤部位之細胞因子濃度足以活化免疫反應或具有抗腫瘤作用。此等高含量之全身細胞因子可導致嚴重毒性及藥物不良反應。一種將信號轉導路徑因子（諸如細胞因子）傳遞至活體内特定位點（例如腫瘤或腫瘤微環境）之方法在於使該因子結合於對於該位點具有特異性之免疫球蛋白。早期策略係針 149654.doc 201119672 對將信號轉導路徑因子（諸如細胞因子）傳遞至活體内特定位點’包括結合於多種細胞因子之免疫球蛋白重鏈，該等因子包括淋巴毒素、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、介白素-2(IL-2)及粒細胞巨噬細胞-群落刺激因子（Gm-CSF)。該等免疫球蛋白重鏈以化學方式結合於細胞因子或免疫球蛋白-細胞因子結合物表現為融合蛋白。參見Nakamura κ及 Kubo, A. Cancer Supplement 80:2650-2655 (1997) ； Jun L 等人，C/n«· U. 乂 "3:151-153 (2000);及 Becker j.C·等人，Proc. Λ^ί/· dcd. 93:7826 7831 (1996)。研究者觀察到，其不僅能夠使細胞因子靶向活體内特定位點，而且能夠利用單株抗體之血清半衰期比大多數其他蛋白質之血清半衰期長的事實。由於全身毒性與高劑量之某些未結合細胞因子(亦即IL·2)相關’因此降低劑量之免疫球蛋白-細胞因子融合蛋白可使腫瘤位點的免疫刺激活性最大同時保持全身副作用最小使得研究者咸信免疫球蛋白-細胞因子免疫結合物為最佳治療劑。然而，免疫球蛋白作為傳遞藥劑之臨床效用的主要限制之-為其在腫瘤内攝取不足及稀/刀佈’此部分歸因於免疫球蛋白分子之大尺寸。參見 Xiang，J·等人，細卿/· CW/ 細/. 72:275-285 )另卜已表明免疫球蛋白'細胞因子免疫結合物可活化補體且與Fc受體知$从m 恭…… 斤觀測到的此固有免疫球 *不寿，因為治療性免疫結合物之細胞而非帶有較佳抗原之細胞。又體一種克服此等問題方法為使用經工程改造之免疫球蛋 149654.doc 201119672 白片段。大量研究已詳述了免疫球蛋白片段-細胞因子免疫結合物之特徵。參見Savage, P.等人，β r - J ^ Lancer 67:304-310 (1993) ; Harvill，Ε·Τ.及 M〇rris〇n SL，

Immunotechnol. 7:95-105 (1995)；及 Yancr τ 楚. J.寻人，Mo/. /mm㈣〇/. 32:873-881 (1995)。一般而言，存在兩種常見免疫球蛋白片段-細胞因子融合蛋白構築體，即表現於哺乳動物細胞中之F(ab，）2-細胞因子及表現於大腸捍菌中之

scFv-細胞因子。參見Xiang，J_ //㈣.山·以 p:23_36 (1999)。大多數此等類型之免疫結合物中維持免疫球蛋白母分子之腫瘤結合反應性與細胞因子之功能活性。最新臨床前研究已顯示，此等融合蛋白能夠使細胞因子無向活體内表現腫瘤相關抗原之腫瘤，且抑制免疫勝任動物 (immune competent animal)模型中之原發性與轉移性腫瘤0 免疫球蛋白片段-細胞因子免疫結合物之實例包括如PCT 公開案WO 2001/062298 A2中所述之scFv-IL-2免疫結合物；如美國專利第5，650,1 50號中所述之免疫球蛋白重鏈片段-GM-CSF免疫結合物；如PCT公開案WO 2006/119897 A2中所述之免疫結合物，其中ScFv-IL-12第一次單元與 IL-12第二次單元-scFv僅共用二硫鍵；及如PCT公開案WO 99/29732 A2中所述之免疫結合物，其中ig重鏈片段_化_ 12 第一次單元與Ig重鏈片段-IL-12第二次單元僅共用二硫鍵。雖然此等第二代免疫結合物與第一代免疫球蛋白-細胞因子結合物相比已具有一些改良之性質，但仍需要開發 149654.doc 201119672 更夕且甚至更女全的特定治療劑以更有效地抵抗腫瘤細胞且減少此等產物之副作用（例如毒性、對非腫瘤細胞的破壞等）的數目及降低其嚴重程度。另外，需要鑑別進一步穩定免疫結合物、同時維持可接受之治療活性程度的方式。本發明提供相對於已知免疫結合物展現改良之功效、高作用特異性、減少之毒性及改良之血液内穩定性的免疫結合物。【發明内容】 · 本發明之一態樣係針對與已知免疫結合物相比展現改良之功效、高作用特異性、減少之毒性及改良之穩定性的免疫&物。本發明免疫結合物可用於將效應部分選擇性傳遞至活體内標革巴位點。在另一實施例中，免疫結合物將細胞因子傳遞至標靶位點，其中該細胞因子可發揮局部生物作用，諸如局部發炎性反應、刺激τ細胞生長及活化、及/ 或活化B及/或NK細胞。本發明之一態樣係關於一種包含至少一個第一效應部分籲及至少一個獨立地選自由卜及Fab組成之群的第一及第二抗原結合部分之免疫結合物，其中第一效應部分與第一抗原結合部分共用胺基或羧基末端肽鍵且第二抗原結合部分與丨）該第一效應部分或者ii)該第一抗原結合部分共用胺基或羧基末端肽鍵。本發明之另一悲樣為一種免疫結合物，其包含至少一個第一單鏈效應部分在其胺基末端胺基酸處連接於一或多個 I49654.doc 201119672 scFv分子且其中該第一單鏈效應部分在其叛基末端胺基酸處連接於一或多個scFv分子。本發明之另一態樣為一種免疫結合物，其包含至少一個第一單鏈效應部分以及第一及第二抗原結合部分，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分各包含scF v分子在其羧基末端胺基酸處連接於恆定區，該恆定區包含獨立地選自由IgG CHI、IgG Ck及IgE CH4組成之群的免疫球蛋白恆定域，且其中該第一抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。本發明之另一態樣為一種免疫結合物，其包含至少一個第一單鏈效應部分以及第一及第二抗原結合部分，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分各包含scFv分子在其叛基末端胺基酸處連接於IgGl CH3域，且其中該第一 iu原結合部分在其缓基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。本發明之另一態樣係針對一種免疫結合物，其包含第一及第一單鏈效應部分以及第一及第二抗原結合部分其中 3亥專抗原結合部分各包含F ab分子在其重鍵或輕鏈缓基末端胺基酸處連接於IgGl CH3域，且其中該等IgG1 CH3域各在其羧基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二 149654.doc 201119672 硫鍵共價連接。在一實施例中，免疫結合物包含SEQ ID NO: 95之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含SEq ID NO: 1 04 之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含SEq ID NO: 1 05之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含 SEQ ID NO: 1 06之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含SEQ ID NO: 107之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含SEQ ID NO: 96之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含SEQ ID NO: 96之多肽序列及選自由 SEQ ID NO: 95及104-107組成之群的多肽序列。在另一實施例中’免疫結合物包含具有與選自由SEQ ID NO: 95、 96及104-107組成之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%或99%—致之序列的多肽。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 108至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 1 08之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 117 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99°/。一致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 11 7之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 11 8至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一 149654.doc 201119672 實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 11 8之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與8丑(^10 1^0:119至少約 800/。、85%、90%、95%、960/〇、 97%、98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 119之聚核苦酸序列編碼的多狀序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 120至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 120 之聚核皆酸序列編碼的多狀序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 109至少約80%、85%、90%、 95%、96°/。、97°/。、98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 109之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 13或 SEQ ID NO: 15 之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的重鏈可變區。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 9或SEQ ID NO: 11 之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致的輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 15 之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100% —致的重鏈可變區序列，及與 SEQ ID NO: 9或 SEQ ID NOM1之序列至少約 80%、85%、 149654.doc 201119672 90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致的輕鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 14或 SEQ ID NO: 16 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 16之聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 10 或 SEQ ID NO: 12至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 12之聚核苷酸序列編碼的輕鏈可變區序列。

在一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 99之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96% ' 97%、98%、99% 或100%—致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 100或SEQ ID NO: 215之序列至少約 80%、85% > 90% ' 95% ' 96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 101 或 SEQ ID NO: 235 之序列至少約80%、 85%、90% ' 95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 100之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致的多肽序列，及與SEQ ID 149654.doc -10- 201119672 NO: 101 之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100% —致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與S E Q ID N 0: 21 5之序列至少約 80% ' 85%、90%、95%、96% ' 97%、98% ' 99% 或 100% 一致的多肽序列，及與SEQ ID NO: 235之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的多肽序列。 $ 在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 112至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 112之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 113 或 SEQ ID NO: 216 至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 113 φ 或SEQ ID NO: 216之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 114或SEQ ID NO: 236至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或99% —致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 114或SEQ ID NO: 236之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 7、 SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 187、 SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO:195、SEQ ID NO: 199、 149654.doc -11 - 201119672 SEQ ID NO: 203及SEQ ID NO: 207之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之重鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自 SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO: 185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201及SEQ ID NO: 205之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 7 ' SEQ ID NO: 179 ' SEQ ID NO: 183 ' SEQ ID NO: 187、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO:195、SEQ ID NO: 199、 SEQ ID NO: 203及 SEQ ID NO: 207之群的序列至少約 80%、85% ' 90% ' 95%、96%、97% > 98%、99% 或 100% —致之重鏈可變區序列，及與選自SEQ ID NO: 3、 SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201及 SEQ ID NO: 205之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之輕鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 180、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 200、 SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群的序列至少約 80%、85%、90°/。、95%、96%、97%、98%或 99%—致之 149654.doc -12- 201119672

聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 180、 SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、 SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群的聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 182、 SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 194、 SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的序列至少約 80%、85。/。、90%、95%、96%、97%、98% 或99% —致之聚核苷酸序列編碼的輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結舍物包含由選自SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6 > SEQ ID NO: 178 ' SEQ ID NO: 182 ' SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的聚核普酸序列編碼的輕鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 239、SEQ ID NO: 241 及 SEQ ID NO: 243 之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% > 99% 或 100% —致之多肽序列。在另一實施例中，結合物包含與選自 SEQ ID NO·· 245、SEQ ID NO: 247及 SEQ ID NO:249 之群的序列至少約80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100%—致之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 239、SEQ ID NO: 241及 149654.doc 13 201119672 SEQ ID NO: 243之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或 100%— 致之多肽序列，及與選自 SEQ ID NO: 245、SEQ ID NO: 247 及 SEQ ID NO:249之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 240、SEQ ID NO: 242及 SEQ ID NO: 244之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 240、SEQ ID NO: 242 及 SEQ ID NO: 244之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248及SEQ ID NO: 250之群的序列至少約80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99%—致之聚核發酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248及 SEQ ID NO: 25 0之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含與選自由以下組成之群的序列至少約 80%、85°/。、90%、95%、96%、97%、 98%、99°/。或100°/。一致之重鏈可變區序列：SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO: 31、 SEQ ID NO: 35、SEQ ID NO: 39、SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO: 73、SEQ ID NO: 77、SEQ ID NO: 81、SEQ ID NO: 149654.doc •14- 201119672

85、SEQ ID NO: 89、SEQ ID NO: 93、SEQ ID NO: 123、 SEQ ID NO: 127、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 135、 SEQ ID NO: 139、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 147、 SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 159、 SEQ ID NO: 163、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 171 及 SEQ ID NO: 175。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自由以下組成之群的序列至少約80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之輕鏈可變區序列： SEQ ID NO: 17 ' SEQ ID NO: 19 > SEQ ID NO: 23 ' SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41 ' SEQ ID NO: 45 ' SEQ ID NO: 49 ' SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、 SEQ ID NO: 83、SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO·· 125、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 133 ' SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 145 > SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 169及SEQ ID NO: 173。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自由以下組成之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96°/。、97%、98%、99% 或 100%—致之重鏈可變區序列：SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 35、SEQ ID NO: 39、 SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO: 73、SEQ ID NO: 77、SEQ ID 149654.doc •15· 201119672 NO: 81、SEQ ID NO: 85、SEQ ID NO: 89、SEQ ID NO: 93、SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 127、SEQ ID NO: 131 ' SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 139、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 147、SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 163 > SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 171 及 SEQ ID NO: 175，及與選自由以下組成之群的序列至少約80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之輕鏈可變區序歹|J : SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41、 SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、SEQ ID NO: 83、SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 129 ' SEQ ID NO: 133、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 145、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 169及 SEQ ID NO: 173。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自由以下組成之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列： SEQ ID NO: 22 ' SEQ ID NO: 26 ' SEQ ID NO: 28 ' SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、SEQ ID NO: 149654.doc -16· 201119672

70、SEQ ID NO: 74、SEQ ID NO: 78、SEQ ID NO: 82、 SEQ ID NO: 86、SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 144、SEQ ID

NO: 148、SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID

NO: 160、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO·· 172及SEQ ID NO: 176。在另一實施例中，免疫結合

物包含由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼之重鏈可變區序列：SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 28、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、 SEQ ID NO: 70、SEQ ID NO: 74、SEQ ID NO: 78、SEQ ID NO: 82、SEQ ID NO: 86、SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 144、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO: 172 及 SEQ ID NO: 176。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自由以下組成之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之聚核苷酸序列編碼的輕鏈可變區序列：SEQ ID NO: 1 8、 SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、SEQ ID NO: 149654.doc 17 201119672

72、SEQ ID NO: 76、SEQ ID NO: 80、SEQ ID NO: 84、 SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134、SEQ ID NO: 138、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 146、SEQ ID

NO: 150、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 158、SEQ ID

NO: 162、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 170及 SEQ ID

SEQ ID SEQ ID SEQ ID SEQ ID NO: 1 74。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼之輕鏈可變區序列：SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、 SEQ ID NO: 72、SEQ ID NO: 76、SEQ ID NO: 80、SEQ ID NO: 84、SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130 SEQ ID NO: 142 SEQ ID NO: 154 SEQ ID NO: 166 NO: 134、SEQ ID NO: 138 NO: 146、SEQ ID NO: 150 NO: 158、SEQ ID NO: 162 NO: 170及 SEQ ID NO: 174。在一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 211、SEQ ID NO: 213、SEQ ID NO: 217、SEQ ID NO: 219、SEQ ID NO: 221、SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 227之群的序列至少約 80%、85% ' 90% ' 95%、96%、97% ' 98% ' 99% 或 1 00% —致之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包 149654.doc -18· 201119672

含與選自 SEQ ID NO: 229、SEQ ID NO: 231、SEQ ID NO: 233及SEQ ID NO: 237之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 211、SEQ ID NO: 219及 SEQ ID NO: 221之群的序列至少約 80%、85%、90% ' 95% ' 96%、97%、98%、99% 或 100°/。一致之多肽序列，及與SEQ ID NO: 231之序列至少約 8 0% ' 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與選自 SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 227之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或 100%— 致之多肽序列，及與 SEQ ID NO: 229之序列至少約 80%、85%、90% ' 95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 213之序列至少約 80%、85% ' 90%、95% ' 96%、97% > 98% ' 99% 或 100%—致的多肽序列，及與SEQ ID NO: 233之序列至少約 80% ' 85% ' 90% ' 95% > 96% > 97% > 98%、99% 或 100% 一致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 217之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的多肽序列，及與SEQ ID NO: 237之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 149654.doc -19- 201119672 210、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214、SEQ ID NO: 218、SEQ ID NO: 220、SEQ ID NO: 222、SEQ ID NO: 224、SEQ ID NO: 226及 SEQ ID NO: 228之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214、SEQ ID NO: 218、SEQ ID NO: 220、SEQ ID NO: 222、SEQ ID NO: 224、SEQ ID NO: 226及 SEQ ID NO: 228之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 23 0、SEQ ID NO: 232、SEQ ID NO: 234及 SEQ ID NO: 238之群的序列至少約 80%、85%、90%、95% ' 96% ' 97% ' 98% 或 99% — 致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由選自SEQ ID NO: 230、SEQ ID NO: 232、 SEQ ID NO: 234及SEQ ID NO: 23 8之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 257或 SEQ ID NO: 261之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的重鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 259或 SEQ ID NO: 271之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99°/。或100%—致的輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 257或 SEQ ID NO: 261之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 149654.doc ·20· 201119672 96%、97%、98%、99°/。或100%—致的重鏈可變區序列，及與SEQ ID NO: 259或SEQ ID NO: 271之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的輕鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO·. 258或 SEQ ID NO: 262之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97°/❶、98%或99%—致的聚核苷酸序列編碼之重鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 258或SEQ ID NO: 262之聚核苷酸序列編碼的重鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 260 或 SEQ ID NO·· 272 之序列至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%或99%—致的聚核苷酸序列編碼之輕鏈可變區序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO·· 260或SEQ ID NO·· 272之聚核苷酸序列編碼的輕鏈可變區序列。在一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 25 1或 SEQ ID NO·· 255之序列至少約 80%、85%、90%、95。/〇、 96°/〇、97%、98%、99%或100%—致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 253或SEQ ID NO: 265 之序列至少約 80%、85。/。、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 251或SEQ ID NO: 25 5 之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100%—致的多肽序列，及與SEQ ID NO: 253 149654.doc -21 - 201119672 或 SEQ ID NO: 265之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 252或 SEQ ID NO: 256之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%或99%—致的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 252 或SEQ ID NO: 256之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 254或SEQ ID NO: 266至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或99%—致之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 254或SEQ ID NO: 266之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含至少一個效應部分，其中該效應部分為細胞因子。在一特定實施例中，效應部分為選自由以下組成之群的細胞因子：介白素-2(IL-2)、粒細胞巨噬細胞-群落刺激因子（GM-CSF)、干擾素-a(INF-a)、介白素-12(IL-12)、介白素-8(IL-8)、巨噬細胞發炎性蛋白-la(MIP-la)、巨噬細胞發炎性蛋白-Ιβ(ΜΙΡ-Ιβ)及轉化生長因子-p(TGF-p) »在另一實施例中，至少一個抗原結合部分對於以下抗原決定子之一具有特異性：纖維結合蛋白之外域B(EDB)、肌腱蛋白之A1域（TNC-A1)、肌腱蛋白之A2域（TNC-A2)、纖維母細胞活化蛋白（FAP);及黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白聚糖（MCSP)。在另一實施例中，本發明免疫結合物以如下解離常數 149654.doc •22· 201119672 (kd)結合於效應部分受體：對照效應部分之至少約工、 ' 2 > 2.5 > 3 ^ 3.5 ^ 4 ^ 4.5 > 5 ^ 5.5 ^ 6 ^ 6.5 ^ 7 ^ 7.5 ^ 8 8·5、9、9.5或1〇倍。在另一實施例中，在投藥期結束時免疫結合物使活體内腫瘤體積之增加抑制至少約丨〇〇/〇、 2〇%、30%、40%、50¼、60%、70%、80%、90。/。、100% 或更多。在另一實施例中，當投與有需要之哺乳動物時，相對於對照效應部分或「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少約10%、2〇%、3〇%、4〇%、5〇%、6〇%、 70%、80%、90〇/〇。本發明之另一態樣係針對編碼本發明免疫結合物或其片奴的分離聚核苷酸。本發明之另一態樣係針對一種包含表現卡S之表現載體，該表現卡匣包含本發明之聚核苷酸序列0 本發明之另一態樣係針對表現本發明免疫結合物或其片段的宿主細胞。本發明之另一態樣係針對製造本發明免疫結合物或其片段的方法’其中該方法包含在適於表現本發明免疫結合物或其片段的條件下培養經編碼本發明免疫結合物或其片段的表現載體轉型之宿主細胞。本發明之另一態樣係針對促進活化T淋巴細胞之增生及分化的方法’其包含使活化T淋巴細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對促進活化B淋巴細胞之增生及 149654.doc -23- 201119672 分化的方法’其包含使活化B淋巴細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸》本發明之另一態樣係針對促進自然殺手（ΝΚ)細胞之增生及分化的方法，其包含使ΝΚ細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對促進粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞之增生及分化的方法，其包含使粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對促進細胞毒性Τ淋巴細胞（CTL)籲分化之方法，其包含使τ淋巴細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對抑制病毒複製之方法，其包含使受病毒感染之細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對上調主要組織相容性複合體 I(MHC I)之表現的方法，其包含使標靶細胞與有效量之本發明免疫結合物接觸。本發明之另一態樣係針對誘導細胞死亡之方法，其包含鲁向標乾細胞投與有效量之本發明免疫結合物。本發明之另一態樣係針對誘導標靶細胞之趨化性的方法，其包含向標靶細胞投與有效量之本發明免疫結合物。本發明之另-態樣係針對一種治療個體疾病之方法，其包含向個體投與治療有效量之包含本發明免疫結合物及醫藥載劑的組合物之步驟。【實施方式】 149654.doc •24- 201119672 定義除非另有定義’否則本文中所使用之所有技術及科學術 5吾通常均具有與一般技術者通常所瞭解相同之含義。通常，本文中所使用之命名法及下文所述之細胞培養、分子遺傳學'核酸化學及雜交中的實驗程序為此項技術中熟知且通常所用之彼等者。標準技術及程序通常根據此項技術及夕種般參考文獻（通常參見Sambrook等人Molecular 鲁 C1〇ning: A Laboratory Manual，第 2版（1989) Cold Spring

Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harb〇r, Ν.Υ·，其以引用的方式併入本文中）中之習知方法來進行，該等習知方法係在本文獻中提供。如本文中所使用，術語「免疫結合物」係指包括至少一個效應部分及至少一個抗原結合部分之多肽分子。在一實施例中’該免疫結合物包含至少一個單鏈效應部分及至少兩個抗原結合部分。該抗原結合分子可如本文所述藉由各 φ 種相互作用及以各種構型連接於該效應部分。如本文中所使用，術語「效應部分」係指影響細胞活性 (例如經由信號轉導或其他細胞路徑）之多肽，例如蛋白質或醣蛋白。因此’本發明之效應部分可與受體介導之信號傳導相關，該信號傳導傳輸來自細胞膜外部之信號以調節帶有效應部分之一或多個受體之細胞的反應。在一實施例中，效應部分可引發帶有效應部分之一或多個受體之細胞的細胞毒性反應。在另一實施例中，效應部分可引發帶有效應部分之一或多個受體之細胞的增生反應。在另一實施 149654.doc •25- 201119672 例中，效應部分可引發帶有效應部分之受體之細胞的分化。在另一實施例中，效應部分可改變帶有效應部分之受體之細胞内的内源性細胞蛋白質之表現（亦即上調或下調）。效應部分之非限制性實例包括細胞因子、生長因子、激素、酶、受質及輔因子。效應部分可以各種構型與抗原結合部分締合以形成免疫結合物。如本文_所使用，術語「細胞因子」係指介導及/或調節生物或細胞功能或過程（例如免疫性、發炎及血細胞生成）之分子。如本文中所使用，術語「細胞因子」包括「淋巴因子」、「趨化因子」、「單核細胞因子（m〇n〇kine)」及「介白素」。適用細胞因子之實例包括（但不限於）GM-CSF、IL-la、IL_ip、IL_2、比_3、il_4、比_5、

IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、TT p TCXT iL·12、IFN-a、IFN-β、测-γ、MIP_la、MIIMp、TGF p、TNF ^TNF_p。如本文中所使用，術語「罝輔 ..,t ^ ^ 旱鍵」係私所包含的胺基酸單體由肽鍵線性連接的分子。在— 任貫鈀例中，效應部分為單鏈效應部分。單鏈效應部分非限制性貫例包括細胞因子、生長因子、激素、酿、AjW· 又質及輔因子。當效應部分為細胞因子且所關注之細胞因通*在自然界中以多聚體形式發現時，多聚細胞因子之 _ A 合-人單兀*依序由效應部分之單鏈編碼。因此，適用單鍵政應部分之非限制性實例包括 GM-CSF、IL-la、iL-ΐβ、ϊτ TT iL·2 、 IL-3 、 IL-4 、 IL-5 、 IL-6 、 IL-7 、 IL-8 、 IL-1

Tr IL]2、IFN-a、IFN-β、 IFN-γ、MIP-la、ΜΙΡ-1β、ΤΓΐΓ。、TNF-a及 TNF-β。 149654.doc -26 - 201119672 如本文中所使用，術語「對照效應部分」係指未結合之效應部分。舉例而言’當比較本發明之IL-2免疫結合物與對照效應部分時，對照效應部分為游離且未結合之IL_2。同樣’例如當比較本發明之IL-12免疫結合物與對照效應部分時，對照效應部分為游離且未結合之IL_丨2(例如，以雜二聚蛋白質形式存在，其中p4〇及p35次單元僅共用二硫鍵）。 φ 如本文中所使用，術語「效應部分受體」係指能夠特異性結合於效應部分之多肽分子。舉例而言，當IL_2為效應部分時，結合於IL-2(例如包含IL_2之免疫結合物）之效應部分受體為IL-2受體。類似地，例如當IL_12為免疫結合物之效應部分時，效應部分受體為IL_12受體。當效應部分特異性結合於一個以上受體時，特異性結合於效應部分之所有受體均為該效應部分之「效應部分受體」。如本文中所使用，術語「抗原結合部分」係指特異性結 # 合於抗原決定子之多肽分子。在一實施例中，抗原結合部分能夠將其所連接之實體（例如效應部分或第二抗原結合部分）引導至標靶位點，例如帶有抗原決定子之特定類型的腫瘤細胞或腫瘤基質。如本文進一步所定義，抗原結合部分包括抗體及其片段。「特異性結合」意謂對於抗原之結^具有選擇性且可有別於不當或非特異性相互作用。在貝施例中&本文進—步所定義及此項技術中所知，免疫結合物包含至少-個、通常兩個或兩個以上具有怪定區之抗原結合部分。適用重鏈恒定區包括五種同型中之任一 I49654.doc •27· 201119672 者：α、δ、ε、γ或μ。適用輕鏈恆定區包括兩種同型中之任一者：κ及λ。如本文中所使用，術語「抗原決定子」與「抗原」及「抗原決定基」同義，且係指多肽大分子上結合於抗原結合部分而形成抗原結合部分-抗原複合物之位點（例如，胺基酸之連續延伸段或由不同非連續胺基酸區域構成之構形構型）。如本文中所使用，術語「對照抗原結合部分」係指不存在其他抗原結合部分及效應部分之抗原結合部分。舉例而言，當比較本發明之Fab-IL2-Fab免疫結合物與對照抗原結合部分時，對照抗原結合部分為游離Fat)，其中Fab_IL2_Fab 免疫結合物及游離Fab分子皆可特異性結合於相同抗原決定子。如本文中所使用，關於抗原結合部分、效應部分等之術 00 第一」及「第·一」係當存在一個以上各類型之部分時為了方便區別而使用。使用此等術語不欲使免疫結合物具有特定順序或位向，除非明確地如此規定。在此項技術中所使用及/或所接受之術語存在兩種或兩種以上定義的情況下’除非明確相反地說明，否則如本文中所使用之術s吾的定義意欲包括所有該等含義。特定實例為使用術s吾「互補決定區j (「CDR」）來描述重鏈與輕鏈多肽之可變區中所見的非鄰接抗原組合位點。此特定區域已由 Kabat專人 ’ U.S_ Dept, of Health and Human Services, 「Sequences of Proteins of Immunological Interest」 149654.doc -28- 201119672 (1983)及 Chothia等人，乂 Μο/_ 5/〇/. 卜 917 (1987)描述，該等文獻以引用的方式併入本文中，其中該等定義包括相互比較時胺基酸殘基之重疊或子集。然而，應用任一定義提及抗體或其變異體之CDR意欲處於如本文中所定義及所使用之術語的範B壽内。包涵如上文所引述之各參考文獻所定義之CDR的適當胺基酸殘基在以下表I中闡述作為比較。包涵特定CDR之精確殘基數目將視cdr之序列及大

小而變化。熟習此項技術者通常可判定，在假定抗體之可變區胺基酸序列的情況下，何等殘基包含特定Cdr。表1. CDR定義1 CDR Kabat Chothia AbM2 VH CDR1 31-35 26-32 26-35 VH CDR2 50-65 52-58 50-58 VH CDR3 95-102 95-102 95-102 _ VL CDR1 24-34 26-32 24-34 VL CDR2 50-56 50-52 50-56 VL CDR3 89-97 91-96 89-97 二一，，，丨夂我又綱鈮均根據Kabat等人（來見下文）所述之編號規定。表1中所用之具有小寫字母「b」的「AbM」係

Molecular之「AbM」抗體模型化軟體所疋義的CDR。 / Kabat等人亦定義適用於任何抗體之可變域序列的編號系統。一般技術者可在不依靠除序列本身外之任何實驗資料㈣况下對任何可變域序列明確指定此「Kabat編號」系、先如本文中所使用，「Kabat編號」係指由Kabat等 S，Dept, of Health and Human Services，「Sequence 149654.doc -29- 201119672 of Proteins of Immunological Interest」（1983)所闡述之編號系統。除非另有規定’否則對本發明之抗原結合部分中的特定胺基酸殘基位置之編號的提及係根據Kabat編號系統。序列表之多肽序列（亦即，SEQ ID NO: 3、5、7、9、 11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、 35、37、39、41、43、45、47、49、51、67、69、71、 73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、 96、97等）並不根據Kabat編號系統進行編號。然而，將序列表之序列編號轉換成Kabat編號完全在一般技術者之技能範圍内。免疫結合物免疫結合物為包含至少一個效應部分及至少一個抗原結合部分之多肽分子。在一實施例中，該效應部分為單鏈效應部分。在一實施例中’免疫結合物包含至少兩個抗原結合部分。免疫結合物之抗原結合部分及效應部分包括上文及下文以及附圖中所詳述之彼等者。免疫結合物之抗原結合部分可直接針對各種標靶分子（例如表現於腫瘤細胞或腫瘤基質上之蛋白質分子上的抗原決定子）。本文描述抗原結合部分之非限制性實例。在一實施例中，至少一個抗原結合部分係針對下文表5中所呈現之一或多種多肽的抗原決定子。本發明免疫結合物通常展現一或多種以下性吳·同作用特異性、減少之毒性及/或改良之穩定性，尤其與標靶相同抗原決定子且帶有相同效應部分之具有不同構型的已知免疫結合物相比。 149654.doc 201119672 在一實施例中，免疫結合物包含至少一個第一效應部分以及至少一個第一及第二抗原結合部分，在一較佳實施例中’該第一效應部分為單鏈效應部分。在一較佳實施例中’該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分係獨立地選自由Fv及Fab組成之群。在一特定實施例中，第一效應为與第一抗原結合部分共用胺基或竣基末端肽鍵且第二抗原結合部分與丨）第一效應部分或Η)第一抗原結合部分共用胺基或羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物基本上由第一單鏈效應部分以及第一及第二抗原結合部分組成。在一實施例中’第一效應部分與第一抗原結合部分共用叛基末端肽鍵且進一步與第二抗原結合部分共用胺基末端肽鍵。在另一實施例中，第一抗原結合部分與第一效應部为（較佳單鍵效應部分）共用叛基末端狀鍵，且進一步與第一抗原結合部分共用胺基末端狀鍵。在另一實施例中，第一抗原結合部分與第一效應部分（較佳單鏈效應部分）共用胺基末端肽鍵，且進一步與第二抗原結合部分共用羧基末端肽。在一實施例中，效應部分（較佳單鏈效應部分）與第一重鏈可變區共用緩基末端肽鍵且進一步與第二重鏈可變區共用胺基末端肽鍵。在另一實施例中，效應部分（較佳單鏈效應部分）與第一輕鏈可變區共用羧基末端肽鍵且進一步與第二輕鏈可變區共用胺基末端肽。在另一實施例中，第一重鏈或輕鏈可變區由羧基末端肽鍵連接於第一效應部分 149654.doc •31 - 201119672 (較佳單鍵效應部分），且進一步由胺基末端肽鍵連接於第二重鏈或輕鏈可變區。在另一實施例中，第一重鏈或輕鏈可變區由胺基末端肽鍵連接於第一效應部分（較佳單鏈效應部分）’且進一步由羧基末端肽鍵連接於第二重鏈或輕鏈可變區。在一實施例中’效應部分（較佳單鏈效應部分）與第一

Fab重鏈或輕鏈共用羧基末端肽鍵，且進一步與第二Fab重鏈或輕鏈共用胺基末端肽鍵。在另一實施例中，第一 Fab 重鏈或輕鏈與第一單鏈效應部分共用羧基末端肽鍵，且進一步與第二Fab重鏈或輕鏈共用胺基末端肽鍵。在其他實施例中，第一 Fab重鏈或輕鏈與第一單鏈效應部分共用胺基末端肽鍵，且進一步與第二Fab重鏈或輕鏈共用羧基末端肽鍵。在實施例中’免疫結合物包含至少一個與一或多個 scFv分子共用胺基末端肽鍵之第一效應部分，且其中該第一效應部分進一步與一或多個scFv分子共用羧基末端肽鍵。在一較佳實施例中，效應部分為單鏈效應部分。在另實施例中，免疫結合物包含至少一個第一效應部分（較佳單鏈效應部分），以及第一及第二抗原結合部分，其中各抗原結合部分包括seFv分子在其緩基末端胺基酸處連接包括免疫球蛋白恆定域之恆定區，且其中該第一抗原結合部分在其值定區缓基末端胺基酸處連接第—效應部分之胺基末端胺基西楚，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個：硫鍵共價連接。在-較佳實施财，該恒定區 I49654.doc -32· 201119672 係獨立地選自由 IgG CHI、IgG CH2、IgG CH3、IgG Ck、 IgG (：λ及IgE CH4域組成之群。在一實施例中，第一抗原結合部分之免疫球蛋白域經由二硫鍵共價連接第二抗原結合部分之免疫球蛋白域。在一實施例中，至少一個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之免疫球蛋白域的羧基末端。在另一實施例中，至少一個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之免疫球蛋白域的胺基末端。在另一實施例中，至少兩個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之免疫球蛋白域的胺基末端。在一特定實施例中，免疫結合物包含第一及第二抗原結合部分’各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接包含 IgG CH1域之恆定區’其中該第一抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接第一效應部分（較佳單鏈效應部分）之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。免疫結合物之第二抗原結 φ 合部分可進一步在其羧基末端胺基酸處連接第二效應部分之胺基末端胺基酸。在一實施例中，該第二效應部分為單鏈效應部分。在一特定實施例中，免疫結合物包含第一及第二抗原結合部分’各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於包含IgG Ck域之恆定區，.其中該第一抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接於第一效應部分（較佳單鏈效應部分）之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部为經由至少一個二硫鍵共價連接。免疫結合物之第二抗原 149654.doc •33- 201119672 結合部分可進一步在其羧基末端胺基酸處連接於第二效應部分之胺基末端胺基酸。在一實施例中，該第二效應部分為單鏈效應部分。在另一特定實施例中’免疫結合物包含第一及第二抗原結合部分’各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於包含IgE CH4域之恆定區’其中該第一抗原結合部分在其恒·定區緩基末端胺基酸處連接於第一效應部分（較佳單鏈效應部分）之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。免疫結合物之第二抗原結合部分可進一步在其羧基末端胺基酸處連接於第二效應部^7之胺基末端胺基酸。在一實施例中，該第二效鹿部分為單鏈效應部分。在另一特定實施例中，免疫結合物包含第一及第二抗原結合部分，各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於 IgE CH3域，其中該第一抗原結合部分在其羧基末端胺基酸處連接於第一效應部分（較佳單鏈效應部分）之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。免疫結合物之第二抗原結合部分可進一步在其竣基末端胺基酸處連接於第二效應部分之胺基末端胺基酸。在一實施例中，該第二效應部分為單鏈效應部分。在另一實施例中’免疫結合物包含第一及第二效應部分，以及第一及第二抗原結合部分，其中各抗原結合部分包含Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端胺基酸處連接於 IgGl CH3域，且其中各IgGl CH3域在其各別羧基末端胺 149654.doc -34- 201119672 基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。在一較佳實施例中，第一及/或第二效應部分為單鏈效應部分。在另一實施例中，抗原結合部分之IgGi CH3域可由二硫鍵連接。在另一實施例中，至少一個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之IgGl CH?域的羧基末端。在另—實施例中，至少一個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之 IgGl CH3域的胺基末端。在另一實施例中，至少兩個二硫鍵位於第一及第二抗原結合部分之IgG1 CH3域的胺基末端。在另一實施例中，免疫結合物包含一或多個位於效應部分與抗原結合部分之間的蛋白水解裂解位點。免疫結合物之組分（例如抗原結合部分及/或效應部分）可直接連接或經由本文所述或此項技術所知之多種連接子 (例如包含一或多個胺基酸、通常約2_ 1 〇個胺基酸之肽連接子）連接。在一特定實施例中，免疫結合物具有改良之溶液狀態下的穩定性’尤其與已知免疫結合物製劑相比。在一實施例中，免疫結合物以如下解離常數（KD)結合於抗原決定子：對照抗原結合部分之至少約1 / 2、1 / 3、1 / 4、1 / 5、1 / 6、 1/7、1/8、1/9、1/1〇、1/11、1/12、1/13、1/14、1/15、 1/16、1/17、1/18、1/19、1/20 ' 1/21、1/22、1/23、1/24 或1/25倍。在一更特定實施例中，免疫結合物以對照抗原結合部分約1/10倍之KD結合於抗原決定子。在一實施例 149654.doc -35- 201119672 中，免疫結合物以低於約10 nM、低於約丨nM或低於約〇」 nM之Κ〇結合於抗原決定子。在另一實施例中，免疫結合物具有與已知免疫結合物製劑相比優良的安全概況。免疫結合物較佳引發極少及極小嚴重副作用，諸如毒性、對非腫瘤細胞的破壞等。副作用之減少可歸因於本發明免疫結合物對效應部分受體之結合親和性降低。在一實施例中，免疫結合物以如下Kd結合於效應部分受體：對照效應部分之至少約2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24或25倍。在一更特定實施例中，免疫結合物以對照效應部分約2倍之KD結合於效應部分受體。在另一貫施例中’免疫結合物以對照效應部分約丨〇倍之Kd 結合於效應部分受體。在另一實施例中，免疫結合物以如下KD結合於效應部分受體：「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之相應效應部分的至少2、3、4、5、6、7、8、9 或1 0倍。在另一實施例中，免疫結合物以「微型雙功能抗體」免疫結合物中之相應效應部分約1 〇倍的解離常數結合於效應部分受體。在另一實施例中，免疫結合物具有優良功效，尤其與已知免疫結合物製劑相比。在一實施例中，免疫結合物較好地能夠抑制活體内腫瘤體積之增加及/或較好地能夠延長具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活。在一實施例中，到約至少 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、 15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 149654.doc •36· 201119672 27、28、29或30天之投藥期結束時，免疫結合物使活體内腫瘤體積之增加抑制至少約1〇%、15%、2〇%、25%、 30%、35%、4G%、45%、5G%、55%、6G%、65%、70%、 75%、80%、85〇/〇、90%、95%或 1〇〇%。在一實施例中到 13天投藥期結束時，免疫結合物使活體内腫瘤體積之增加抑制至少 50%、55%、60%、65% ' 70% 或 75。/〇。在另一實施例中，當投與有需要之哺乳動物時，相對於對照效應部 φ 分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少 5%、10%、15%、2〇%、25%、3〇%、35%、、 45%、50%、55%、60%、65%、70%、75。/。、80。/。、85%、 90%或95%。在另一實施例中，當投與有需要之哺乳動物時，相對於對照效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少30%、32%或35%。在另一實施例中，當投與有需要之哺乳動物時，相對於對照效應部分’免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長約 φ 30%。在另一實施例中，當投與有需要之哺乳動物時，相對於「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少 10%、15%、20%、25%、30%、35%、4〇%、45%、5〇%、 55%、60%、65%、70%、75%、80〇/〇、85%、90%或 95〇/〇。在另一實施例中’當投與有需要之哺乳動物時，相對於「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少3 、 320/〇或35%。在另一實施例中’當投與有需要之哺乳動物 149654.doc -37· 201119672 時，相對於「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長約30%。在另一實施例中，相對於對照效應部分或「微型雙功能抗體」免疫結合物分子中之效應部分，免疫結合物使具有惡性腫瘤之哺乳動物的存活延長至少5%、1 〇%或 15%。抗原結合部分本發明免疫結合物的抗原結合部分通常為多肽分子’其結合於特異性抗原決定子且能夠將其所連接之實體（例如效應部分或第二抗原結合部分）引導至標靶位點，例如帶有該抗原決定子之特定類型的腫瘤細胞或腫瘤基質。免疫結合物可結合於例如可見於腫瘤細胞表面上、受病毒感染細胞表面上、其他患病細胞表面上、游離於血清中及/或細胞外基質（ECM)中之抗原決定子。腫瘤抗原之非限制性實例包括MAGE，MART-1 /Melan-A， gplOO，二肽基肽酶IV(DPPIV)，腺苷脫胺酶結合蛋·白 (ADAbp)，親環素b(cyclophilin b)，結腸直腸相關抗原 (CRC)-C017-1A/GA733，癌胚抗原（CEA)及其免疫原性抗原決定基CAP-1及CAP-2，etv6，ami 1，前列腺特異抗原 (PSA)及其其免疫原性抗原決定基PSA-1、PSA-2及PSA-3，前列腺特異性膜抗原（PSMA)，T細胞受體/CD3-《鏈，腫瘤抗原之 MAGE 家族（例如 MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE-A3、 MAGE-A4、MAGE-A5、MAGE-A6、MAGE-A7、MAGE-A8、 MAGE-A9 、 MAGE-A10 、 MAGE-A11 、 MAGE-A12 、 149654.doc •38· 201119672

MAGE-Xp2(MAGE-B2)、MAGE-Xp3(MAGE-B3)、MAGE-Xp4 (MAGE-B4)、MAGE-C1、MAGE-C2、MAGE-C3、MAGE-C4、 MAGE-C5)，腫瘤抗原之 GAGE 家族（例如 GAGE-1、GAGE-2、 GAGE-3、GAGE-4、GAGE-5、GAGE-6、GAGE-7、 GAGE-8、GAGE-9)，BAGE，RAGE，LAGE-1，NAG， GnT-V，MUM-1，CDK4，酪胺酸酶，p53，MUC家族， HER2/neu，p21ras，RCAS1，α-胎蛋白（fetoprotein)，E-l弓黏素（cadherin)，a-索烴素（catenin)、β-索烴素及γ-索烴素，pl20ctn，gplOO Pmelll7，PRAME，NY-ESO-1， cdc27，腺瘤性結腸息肉病蛋白（APC)，胞襯蛋白，連接蛋白37，個體遺傳型Ig，pl5，gp75，GM2及GD2神經節苷脂，諸如人類乳頭狀瘤病毒蛋白之病毒產物，腫瘤抗原之 Smad家族，lmp-1，P1A，EBV編碼之細胞核抗原（EBNA)-l，腦糖原磷酸化酶，SSX-1，SSX-2(HOM-MEL-40)，SSX-1， SSX-4，SSX-5，SCP-1 及 CT-7，及 c-erbB-2。病毒抗原之非限制性實例包括流感病毒血細胞凝集素、埃-巴二氏病毒（Epstein-Barr virus)LMP-l、C型肝炎病毒 E2醣蛋白、HIV gpl60 及 HIV gpl20。 ECM抗原之非限制性實例包括多配體蛋白聚糖 (syndecan)、肝素酶、整合素、骨橋蛋白、連接蛋白 (link)、鈣黏素、層黏連蛋白、層黏連蛋白型EGF、凝集素、纖維結合蛋白、洛奇蛋白（notch)、肌腱蛋白及基質金屬蛋白酶（matrixin)。本發明免疫結合物可結合於以下細胞表面抗原之特定非 149654.doc •39- 201119672 限制性實例：FAP、Her2、EGFR、CD2(T細胞表面抗原）、CD3(與TCR相關之雜多聚體）、CD22(B細胞受體）、 CD23(低親和性IgE受體）、CD25(IL-2受體α鏈）、CD30(細胞因子受體）、CD33(骨髓細胞表面抗原）、CD40(腫瘤壞死因子受體）、IL-6R(IL6 受體）、CD20、MCSP 及 PDGF0R(p 血小板源性生長因子受體）。在一實施例中，本發明免疫結合物包含兩個或兩個以上抗原結合部分，其中此等抗原結合部分各特異性結合於相同抗原決定子。在另一實施例中，本發明免疫結合物包含兩個或兩個以上抗原結合部分，其中此等抗原結合部分各特異性結合於不同抗原決定子。抗原結合部分可為保持特異性結合於抗原決定子之任何類型的抗體或其片段。抗體片段包括（但不限於）VH片段、 VL片段、Fab片段、F(aiy)2片段、scFv片段、Fv片段、微型抗體、雙功能抗體、三功能抗體及四功能抗體（參見例如 Hudson及 Souriau, iVaiwre Med. 9: 129-134 (2003))。在一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於纖維結合蛋白之外域B(EDB)具有特異性的抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上可與單株抗體L19競爭結合於 EDB之抗原決定基的抗原結合部分。參見例如PCT公開案 WO 2007/128563 A1(其以全文引用的方式併入本文中）。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中源自L19單株抗體之第一 Fab重鏈與IL-2分子共用羧基末端肽 149654.doc •40- 201119672 鍵，而該IL-2分子又與源自L19單株抗體之第二Fab重鏈共用叛基末端狀鍵。在另一實施例中’免疫結合物包含一個多肽序列，其中源自L19單株抗體之第一 Fab重鏈與IL-12 分子共用缓基末端肽鍵，而該IL-12分子又與源自L19單株抗體之第二F ab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中’免疫結合物包含一個多肽序列，其中源自L19單株抗體之第一Fab重鏈與IFN α分子共用羧基末端肽鍵，而該 IFN α分子又與源自L19單株抗體之第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中’免疫結合物包含一個多狀序列，其中源自L19單株抗體之第一 Fab重鏈與GM-CSF分子共用羧基末端肽鍵’而該GM-CSF分子又與源自L19單株抗體之第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中源自L19單株抗體之第一 scFv與IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該IL_2分子又與源自L19單株抗體之第：scFv共用羧基末端肽鍵。在一更特定實施例中’免疫結合物包含SEQ ID NO: 95之多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含源自L19單株抗體之Fab輕鏈。在一更特定實施例中’免疫結合物包含與SEQ ID NO: 96至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98。/〇、99。/。或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 95及SEQ ID NO: 96至少約 80%、85。/〇、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特 I49654.doc •41 - 201119672 定實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 1 04至少約 80%、85%、90%、950/。、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 104及SEQ ID NO: 96至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或100% —致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 105 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98°/。、99%或 100% —致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 105及SEQ ID NO: 96至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100°/。一致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 106 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含與SEQ ID NO: 106 及 SEQ ID NO: 96 至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 107至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一實施例中，免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 107及 SEQ ID NO: 96至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之一個多 I49654.doc -42· 201119672 肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，該等多肽例如由二硫鍵共價連接。在一實施例中，本發明免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於肌腱蛋白之A丨域（TNC-A1)具有特異性的抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上可與單株抗體F16競爭結合於TNC-A1之抗原決定基的抗原結合部分。參見例如pCT公 φ 開案W〇 2007/128563 A1(其以全文引用的方式併入本文中）。在一實施例中’免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於肌腱蛋白之幻及/或或 TNC-A4或TNC-A1/A4)具有特異性的抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於肌腱蛋白之A1域具有特異性的第一 Fab重鏈與江_2分子、 IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子共用羧基末端肽鍵，而s玄IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子 φ 又與對於肌腱蛋白之Α1域具有特異性的第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於肌腱蛋白之八丨域具有特異性的第一重鏈與IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該比_2分子又與對於肌腱蛋白之A1域具有特異性的第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於肌腱蛋白之八丨域具有特異性的第一sch與 IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該IL_2分子又與對於肌腱蛋白之A1域具有特異性的第二scFy共用羧基末端肽鍵。在 149654.doc -43· 201119672 一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 13 或 SEQ ID NO: 15 至少約 80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或100%—致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 9或SEQ ID NO: 11至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或100% —致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與 SEQ ID NO: 13 或 SEQ ID NO: 15 至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 9或 SEQ ID NO: 11至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由與SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 16至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%或99% —致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 16之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由與SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 12至少約80%、 85%、90%、95%、96°/。、97%、98% 或 99%—致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 149654.doc -44- 201119672 12之聚核苷酸序列編碼。在一特定實施例中，免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 99 至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 100或SEQ ID NO: 215至少約 80% ' 85% > 90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 101或 SEQ ID NO: 235至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，本發明免疫結合物包含與 SEQ ID NO·· 100及 SEQ ID NO: 101至少約 80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 215及SEQ ID NO: 235 至少約 80%、85%、900/〇、95%、96%、97%、 98%、99%或100% —致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一特定實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 112至少約 80〇/〇、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或99% —致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 112之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 113或SEQ ID NO: 216至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之 I49654.doc -45· 201119672 聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 113或SEQ ID NO: 216 之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 114或SEQ ID NO: 236 至少約 80%、85% ' 90% > 95%、96%、97%、98% 或 99% —致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO: 114或SEQ ID NO: 23 6之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於肌腱蛋白之A2域（TNC-A2)具有特異性的抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於肌腱蛋白之A2域具有特異性的第一 Fab重鏈與IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或 GM-CSF分子又與對於肌腱蛋白之Α2域具有特異性的第二 Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於肌腱蛋白之A2域具有特異性的第一Fab重鏈與IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2 分子又與對於肌腱蛋白之A2域具有特異性的第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 179、 SEQ ID NO: 183、SEQ ID NO: 187、SEQ ID NO: 191、 SEQ ID NO:195、SEQ ID NO: 199、SEQ ID NO: 203 及 SEQ ID NO: 207之群的序列至少約 80%、85°/。、90%、 149654.doc -46- 201119672

95%、96%、97%、98%、99°/。或100%—致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201及 SEQ ID NO: 205之群的序列至少約 80% ' 85%、90% ' 95% ' 96%、97%、98% ' 99% 或 100%—致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自 SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 179、SEQ ID NO: 183、 SEQ ID NO: 187、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO: 195、 SEQ ID NO: 199、SEQ ID NO: 203及 SEQ ID NO: 207之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99°/。或100% —致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體，及與選自SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201及SEQ ID NO: 205之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由與選自 SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 180、SEQ ID NO: 184、 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 196、 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群 149654.doc •47· 201119672 的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或99%—致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由選自SEQ ID NO: 8 ' SEQ ID NO: 180 ' SEQ ID NO: 184 ' SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群的聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由與選自SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96% ' 97% ' 98%或 99% — 致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由選自SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 178、SEQ ID NO: 182、 SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、SEQ ID NO: 194、 SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的聚核苷酸序列編碼。在一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自 SEQ ID NO: 239、SEQ ID NO: 241 及 SEQ ID NO: 243之群的序列至少約80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 245、SEQ ID NO: 247及 SEQ ID NO:249之群的序列至少約80%、85%、90%、 -48- 149654.doc 201119672

95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 239、SEQ ID NO: 241 及SEQ ID NO: 243之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體，及與選自SEQ ID NO: 245、 SEQ ID NO: 247及SEQ ID NO:249之群的序列至少約 80% ' 85%、90% ' 95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID ΝΟ·_ 239及 SEQ ID NO: 247 或 SEQ ID NO: 249 至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 241及SEQ ID NO: 245 或 SEQ ID NO: 247 至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 243及SEQ ID NO: 245至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% ' 99% 或 100% 一致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一特定實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 240、 SEQ ID NO: 242及SEQ ID NO: 244之群的序列至少約 80%、85°/。、90%、95%、96%、97%、98%或99%— 致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中， •49· 149654.doc 201119672 免疫結合物包含由選自SEQ ID NO: 240、SEQ ID NO: 242 及SEQ ID NO: 244之群的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與選自SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248 及 SEQ ID NO: 250 之群的序歹|J 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99% 一致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由選自SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248及SEQ ID NO: 250之群的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於纖維母細胞活化蛋白（FAP)具有特異性之抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於FAP具有特異性之第一 Fab重鏈與IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子又與對於FAP具有特異性之第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於FAP具有特異性之第一 Fab重鏈與IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2分子又與對於FAP具有特異性之第二 Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於FAP具有特異性之第一 Fab 重鏈與IL-12分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-12分子又與對於FAP具有特異性之第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自 149654.doc •50· 201119672

由以下組成之群的序列至少約80%、85%、90%、95%、 96°/。、97%、98%、99%或100%—致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體：SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 35、 SEQ ID NO: 39、SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO: 73、SEQ ID NO: 77、SEQ ID NO: 81、SEQ ID NO: 85、SEQ ID NO: 89、SEQ ID NO: 93、SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 127 ' SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 139 ' SEQ ID NO: 143 ' SEQ ID NO: 147 > SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 163 ' SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 171 及 SEQ ID NO: 1 75。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自由以下組成之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、9 8%、99% 或 100%—致之輕鏈可

變區序列或其保留功能性之變異體：SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41、SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、 SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、SEQ ID NO: 83、SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91、SEQ ID NO: 121、SEQ ID

NO: 125、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 133、SEQ ID

NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 145、SEQ ID

NO: 149 > SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 157、SEQ ID 149654.doc -51 - 201119672 NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 169及 SEQ ID NO: 1 73。在一更特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與選自由以下組成之群的序列至少約80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98% ' 99%或 100%—致之重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體：SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO: 31、 SEQ ID NO: 35、SEQ ID NO: 39、SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO: 73、SEQ ID NO: 77、SEQ ID NO: 81、SEQ ID NO: 85、SEQ ID NO: 89、SEQ ID NO: 93、SEQ ID NO: 123、 SEQ ID NO: 127、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 135、 SEQ ID NO: 139、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 147、 SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 159、 SEQ ID NO: 163、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 171 及 SEQ ID NO: 175 ;及與選自由以下組成之群的序列至少約 80%、85% ' 90% ' 95% > 96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體：SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41、 SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、SEQ ID NO: 83、SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 133、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 149654.doc -52- 201119672

145、SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 169及SEQ ID NO: 173。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由與選自由以下組成之群的序列至少約 80°/。、85%、90%、95%、96%、97°/〇、 98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 22、 SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 28、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、SEQ ID NO: 70、SEQ ID NO: 74、SEQ ID NO: 78、SEQ ID NO: 82、SEQ ID NO: 86、 SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 144、SEQ ID NO: 148、SEQ ID

NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID NO: 160、SEQ ID

NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO: 172及 SEQ ID NO: 1 76。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 28、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、 SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、SEQ ID NO: 70、SEQ ID NO: 74、SEQ ID NO: 78、SEQ ID NO: 82、SEQ ID NO: 86、SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128 ' SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 149654.doc -53- 201119672

144、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO·· 172及 SEQ ID NO: 176。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由與選自由以下組成之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼： SEQ ID NO: 18 > SEQ ID NO: 20 ' SEQ ID NO: 24 ' SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、SEQ ID NO: 72、SEQ ID NO: 76、SEQ ID NO: 80、 SEQ ID NO: 84、SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134、SEQ ID NO: 138、SEQ ID NO: 142、SEQ ID

NO: 146、SEQ ID NO: 150、SEQ ID NO: 154、SEQ ID

NO: 158、SEQ ID NO: 162、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 170及SEQ ID NO: 174。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、 SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、SEQ ID NO: 72、SEQ ID NO: 76、SEQ ID NO: 80、SEQ ID NO: 84、SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 > SEQ ID NO: 149654.doc -54· 201119672 138、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 150、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 162、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 170及 SEQ ID NO:

174。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自 SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 211、SEQ ID NO: 213、 SEQ ID NO: 217、SEQ ID NO: 219、SEQ ID NO: 221 ' SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 227之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100% —致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自 SEQ ID NO: 229、SEQ ID NO: 231、SEQ ID NO: 233 及SEQ ID NO: 237之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 211、SEQ ID NO: 219 及SEQ ID NO: 221之群的序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、9 8%、99%或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 23 1至少約 80% ' 85% ' 90%、95% ' 96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與選自SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 227 之群的序列至少約 80%、85%、90°/。、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之多肽序列或其保留功能性 149654.doc -55- 201119672 之變異體’及與SEQ ID NO: 229至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或 100%— 致的一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 213及SEQ ID NO: 233至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% —致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 217 及 SEQ ID NO: 237 至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 221及SEQ ID NO: 231至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 223及 SEQ ID NO: 229至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99%或100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 229至少約 80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 227及SEQ ID NO: 229 至少約 80%、85%、90% ' 95% > 96%、97%、 98°/。、99%或100%—致之兩個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與選自 149654.doc -56· 201119672 SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214、 SEQ ID NO: 218、SEQ ID NO: 220、SEQ ID NO: 222、 SEQ ID NO: 224、SEQ ID NO: 226及 SEQ ID NO: 228之群的序列至少約 80%、85%、90%、95%、96% ' 97%、98% 或99% —致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由選自SEQ ID NO: 210、 SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214、SEQ ID NO: 218、

SEQ ID NO: 220、SEQ ID NO: 222、SEQ ID NO: 224、 SEQ ID NO: 226及SEQ ID NO: 228之群的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與選自 SEQ ID NO: 230、SEQ ID NO: 232、SEQ ID NO: 234及SEQ ID NO: 238之群的序列至少約80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 230、SEQ ID NO: 232、SEQ ID NO: 234及SEQ ID NO: 238之群的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在一實施例中，免疫結合物包含至少一個、通常兩個或兩個以上對於黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白聚糖（MCSP)具有特異性之抗原結合部分。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於MCSP具有特異性之第一 Fab重鏈與IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或GM-CSF分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2分子、IL-12分子、IFN α分子或 GM-CSF分子又與對於MCSP具有特異性之第二Fab重鏈共 149654.doc -57- 201119672 用羧基末端肽鍵。在另一實施例中，免疫結合物包含一個多肽序列，其中對於MCSP具有特異性之第一 Fab重鏈與 IL-2分子共用羧基末端肽鍵，而該IL-2分子又與對於MCSP 具有特異性之第二Fab重鏈共用羧基末端肽鍵。在一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 257 或 SEQ ID NO: 261 之序列至少約 80%、85%、90%、 95%、96°/。、97°/。、98%、99% 或 100%—致的重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 259或SEQ ID NO: 271 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99°/。或100% —致之輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 25 7或SEQ ID NO: 261之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 1 00% —致的重鏈可變區序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 259或SEQ ID NO: 271之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的輕鏈可變區序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與SEQ ID NO: 257之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99°/。或100% —致的重鏈可變區序列，及與 SEQ ID NO: 259之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99°/。或100%—致的輕鏈可變區序列。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分包含與 149654.doc -58- 201119672

SEQ ID NO: 261之序列至少約 80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%—致的重鏈可變區序列，及與SEQ ID NO: 259之序列至少約80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或100%—致的輕鏈可變區序列。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由與SEQ ID NO·· 258或SEQ ID NO: 262至少約 80% ' 85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的重鏈可變區序列由SEQ ID NO: 258或 SEQ ID NO: 262之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由與 SEQ ID NO: 260 或 SEQ ID NO: 272 至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97°/。、98%或99%—致之聚核苷酸序列編碼。在另一特定實施例中，免疫結合物之抗原結合部分的輕鏈可變區序列由SEQ ID NO: 260或SEQ ID NO: 272之聚核苷酸序列編碼。在一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 251 或 SEQ ID NO: 255至少約 80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 25 3或SEQ ID NO: 265 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或1 00% —致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在一更特定實施例中，本發明免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 251 或 SEQ ID NO: 255 至少約 80%、85%、 149654.doc •59- 201119672 90〇/〇、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%— 致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 25 3或 SEQ ID NO: 265 至少約 80%、85%、90%、95%、96%、 97%、98%、99°/。或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與 SEQ ID NO: 251 至少約 80%、85%、90%、95%、 96°/〇、97%、98%、99%或100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 253至少約80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100%—致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，本發明免疫結合物包含與SEQ ID NO: 255至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體，及與SEQ ID NO: 253至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或100% —致之一個多肽序列或其保留功能性之變異體。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 252 或 SEQ ID NO: 256之序列至少約 80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%或99%—致的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由SEQ ID NO·· 252或SEQ ID NO: 256之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在另一特定實施例中，免疫結合物包含由與SEQ ID NO: 254或SEQ ID NO: 266之序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%— 致的聚核苷酸序列編碼之一個多肽序列。在另一特定實施例中， 149654.doc -60· 201119672 免疫結合物包含由SEQ ID NO: 2 54或SEQ ID NO: 266之聚核苷酸序列編碼的一個多肽序列。在一實施例中，抗原結合部分包含至少一個能夠結合抗原決定子之可變區。適用於本發明中之非限制性可變區可為鼠類、靈長類或人類來源。人類可變區可源自由雜交瘤方法製造之人類單株抗體。用於產生人類單株抗體之人類骨髓瘤及小鼠-人類雜骨髓瘤細胞株已例如由Kozbor等人，J 厂 733:3001-3005 (1984)及 Brodeur 等人，

Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications ' 第 51-63 頁（Marcel Dekker，Inc.，New York, 1987)描述。人類可變區亦可由能夠在免疫後在不產生内源性免疫球蛋白之情況下產生人類抗體譜系的轉殖基因動物（例如小鼠）產生。舉例而言，已描述嵌合及生殖系突變小鼠之抗體重鏈連接區（JH)基因的同種接合子型缺失導致完全抑制内源性抗體產生。將人類生殖系免疫球蛋白基因陣列轉移至該等生殖系突變小鼠中將會在抗原激發後引起人類抗體之產生。參見例如 Jakobovits等人，362:255-258 (1993)。或者，可使用噬菌體呈現，由免疫球蛋白可變（V)域基因譜系（例如來自未經免疫之供體）活體外製造人類抗體及人類可變區。（McCafferty等人，3料:552-554 (1990))。在此技術之一實例中，將抗體V域基因同框選殖至絲狀噬菌體之主要或次要鞘蛋白基因（諸如Ml 3或fd)中，且以功能性抗體片段形式呈現於噬菌體粒子之表面上。由於絲狀粒子含有噬菌體基因組之單股DNA複本，因此 149654.doc 61 201119672 基於抗體/抗體片段之功能性質的選擇亦使得選擇編碼屐 '^菌體模擬B細現彼等性質抗體/抗體片段之基因。因此，胞之一些性質。噬菌體呈現可以各種形式進行。對於噬菌體呈現形式之評述，參見Ho〇genb〇〇m等人， 79:4133-4137 (1991)。對於噬菌體呈現，可使用乂基因區段之若干來源。Clacks〇n等人自源自經免疫小鼠之脾的V基因之小型隨機組合文庫分離出抗噁唑酮抗體之不同陣列。參見 Clackson 等人，TVaiwre 352:624-628 (1991)。可構築來自未經免疫之人類供體的v基因譜系且可基本上按照Marks等人，乂施/出〇⑵:58^597 (⑼丨）所述之技術分離不同陣列之抗原（包括自抗原）的抗體。在天然免疫反應中，抗體基因高速積累突變（體細胞超突變）。所引入之一些變化將會賦予較高親和性，且呈現高親和性表面免疫球蛋白之Β細胞在隨後抗原攻毒期間優先複製及分化。此天然過程可藉由使用稱作「鏈改組（chain shuffling)」之技術來仿效。參見Marks等人，細⑽办.切:779_783 (1992)。在此方法中，藉由噬菌體呈現所獲得之「初級」人類抗體的親和性可藉由用自未經免疫之供體所獲得之¥域基因的天’、、；存在；異體（5普糸）的譜糸依序置換重鏈及輕鏈V區基因來改良。此技術可產生親和性在nM範圍内的抗體及可變區。製造極大噬菌體抗體譜系之策略已由等人於#wC/· 及以27.2265 2266 (1993)中描述，且直接由》亥大4菌體文庫分離高親和性人類抗體係由比等人，乂〇//·扔0· ;20:885_896 (1993)報導。亦可使用基因 149654.doc -62· 201119672 改組，自齧齒動物抗體得到人類抗體及可變區，盆中人類抗體或可變區具有與起始齧齒動物抗體或可變區類似的親和性及特異性。根據亦㈣「抗原決定基印記（eph〇pe 卿rmtmg)」之此方法，用人類乂域基因譜系置換藉由嗤菌體呈現技術所獲得之養齒動物抗體的重鍵或輕鍵v域基因’從而形成齧齒動物-人類嵌合體。利用抗原進行選擇使得能夠恢復功能性抗原結合位點之人類可變區得以分 • 離’亦#抗原決定基控制（印記）搭配物之選擇。當重複該過程以置換殘餘的齧齒動物v域時，獲得人類抗體（朱見 PCT公開案WO 9鳩213)。不同於f #動物抗體之傳統人類化，抗原決定基印記技術提供完整人類抗體或可變區，其無齧齒動物來源之構架或CDR殘基。可使用之可變區亦包括已經$長類化或人類化的鼠類可變區序列或已經人類化之靈長類可變區序列。如本文中所使用，術語「人類化」係指源自非人類抗體（例如鼠類抗鲁It)之抗原結合部分可變區序列’其保留或實質上保留母分子之抗原結合性質，但在人類中之免疫原性較低。此可藉由多種方法達成，包括：⑷在保留或不保留關鍵構架殘基（例如對於保留良好抗原結合親和性或抗體功能具有重要性之彼等殘基）之情況下僅將非人類cdr移植於人類構架區上；及（b)藉由置換表面殘基而用類似人類之區段「遮掩（cloaking)」非人類可變區。該等方法由以下文獻揭示..ί繼s專 K，Morris〇n^ & , pr〇c 制舣政 ^， 57:6851-6855 (1984) ； Morrison ^ 〇i? Adv^ Immun〇l 149654.doc -63- 201119672 44:65-92 (1988) ； Verhoeyen# A > Science, 239:1534-1536 (1988) ； Padlan, Molec. Immun,, 25:489-498 (1991)；

Padlan, Μσ/ec. 3/(3):169-217 (1994)，其全部均以全文引用的方式併入本文中。在抗體之各重鏈及輕鏈可變區中通常存在3個互補決定區或CDR(CDR1 ' CDR2及 CDR3)，其在抗體之各重鍵及輕鏈可變域中由四個構架亞區（亦即 FR1、FR2、FR3 及 FR4)側接：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。具有人類化可變區之抗體的討論可尤其見於美國專利第6,632,927號及已公開之美國申請案第2003/0175269號中，該兩者皆以全文引用的方式併入本文中。類似地，如本文中所使用，術語「靈長類化」用於指源自非靈長類抗體（例如鼠類抗體）之抗原結合部分可變區，其保留或實質上保留母分子之抗原結合性質，但在靈長類中之免疫原性更低。在製造人類化抗原結合部分時人類可變域（重鏈與輕鏈）之選擇對於降低抗原性極其重要。根據所謂「最佳擬合」法，針對已知人類可變區序列之整個文庫篩選齧齒動物抗原結合部分之可變區序列。接著接受最接近齧齒動物序列之人類序列作為人類化抗原結合部分之人類構架區 (FR)(Sims等人，J. i_5i:2296 (1993) ; Chothia等人，/· Mo/·价〇/·，/9(5:901 (1987))。另一選擇人類構架序列之方法為將完整齧齒動物構架之各個別亞區（亦即FR1、 FR2、FR3及FR4)或個別亞區之一些組合（例如FR1與FR2) 149654.doc •64- 201119672 與對應於該構架亞區（例如如由Kabat編號所確定）之已知人類可變區序列文庫進行比較’且選擇對於各亞區或組合而 §最接近齧齒動物之序列的人類序列（美國專利申請公開案第2003/0040606A1號）。另一方法使用源自特定亞群輕鏈或重鏈之所有人類抗體的共同序列之特定構架區。對於若干不同人類化抗原結合部分可使用相同構架（Carter等人，尸roc.勤".J59:4285 (1992) ; presta等人，J. /5/:2623 (1993))。通常’本發明免疫結合物的抗原結合部分保留對於特異性抗原決定子之高親和性及其他有利生物性質。因此，人類化可變區係藉由使用親本及人類化序列之三維模型分析親本序列及多種概念人類化產物來製備。三維免疫球蛋白模型普遍可得且為熟習此項技術者熟悉。可獲得說明及呈現所選之候選免疫球蛋白可變區序列之可能三維構形結構的電腦程式。檢查此等呈現物可分析殘基在候選免疫球蛋白可變區序列之機能中的可能作用，亦即分析影響候選可變區序列結合其抗原之能力的殘基。以此方式，fr殘基可自接受者及引人序列選擇及組合以便獲得所需抗原結合部分特徵’諸如對標靶抗原之親和性增加。一般而言，高變區殘基直接且最實質上涉及到影響抗原結合。在另一實施例中，根據例如美國專利申請公開案第 2004/0132066號（該案之全部内容以引用的方式併入本文中）中所揭示之方法，對本發明之抗原結合分子進行工程改造以具有增強之結合親和性。本發明免疫結合物結合二 149654.doc -65- 201119672 效應部分受體或特異性抗原決定子之能力可經由酶聯免疫吸附分析（ELISA)或熟習此項技術者所熟悉之其他技術來量測’例如表面電漿共振技術（在BIACORE T100系統上進行分析）（Liljeblad等人，/7:323-329 (2000))及傳統結合分析（Heeley，R· ρ·, 及以2S:217_229 (2002)) 〇效應部分用於本發明中之效應部分通常為影響細胞活性（例如經由信號轉導路徑）之多肽。因此’本發明免疫結合物的效應部分可與受體介導之信號傳導相關，該信號傳導傳輸來自細胞膜外部之信號以調節細胞之反應。舉例而言，免疫結合物之效應部分可為細胞因子。在一特定實施例中，效應部分為如本文所定義之單鏈效應部分。在一實施例中，本發明免疫結合物的一或多個效應部分、通常單鏈效應部分為選自由以下組成之群的細胞因子：IL-2、GM-CSF、 IFN-α及IL-12。在另一實施例中，免疫結合物之一或多個單鏈效應部分為選自由以下組成之群的細胞因子：IL_8、 ΜΙΡ-1α、MIP-Ιβ及 TGF-β。在一實施例中，免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為IL-2。在一特定實施例中’ IL-2效應部分可引發一或多種選自由以下組成之群的細胞反應：活化Τ淋巴細胞之增生、活化Τ淋巴細胞之分化、細胞毒性τ細胞（CTL)活性、活化Β細胞之增生、活化Β細胞之分化、自然殺手 (ΝΚ)細胞之增生、ΝΚ細胞之分化及ΝΚ/淋巴細胞活化殺手 149654.doc -66 - 201119672 免疫結合物之效在一特定實施例 (LAK)抗腫瘤細胞毒性。在一實施例中，免應部分（較佳單鏈效應部分）為GM-CSF。在中，GM-CSF效應部分可引發粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞之增生及/或分化。在一實施例中，免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為IFN-α。在一特定實施例中 IFN-a效應部分可引發一或多種選自由以下組成之群的細胞反應：抑制受病毒感染之細胞中的病毒複製及上調主要鲁組織相容性複合體I(MHC I)之表現。在另一特定實施例中，IFN a效應部分可抑制腫瘤細胞之增生。在— ^ 貫苑例中’免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為12。在一特定實施例中，IL-12效應部分可引發一或多種選自由以下組成之群的細胞反應：NK細胞之增生、Νκ細胞之分化、T細胞之增生及T細胞之分化。在一實施例中，免产結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為IL_8。在—特定實施例中’ IL-8效應部分可引發嗜中性白血球之趨化性。 φ 在一實施例中，免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為MIP-la。在一特定實施例中，ΜΙΡ-ΐα效應部分可引發單核細胞及T淋巴細胞之趨化性。在一實施例中，免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為MIp_丨β。在一特定貫施例中，ΜΙΡ-1 β效應部分可引發單核細胞及τ淋巴細胞之趨化性。在一實施例中，免疫結合物之效應部分（較佳單鏈效應部分）為TGF-β。在一特定實施例中，TGF_p效應部分可引發一或多種選自由以下組成之群的細胞反應：單核細胞之趨化性、巨噬細胞之趨化性、上調活性巨嗤細 149654.doc •67· 201119672 胞中IL-1之表現及上調活化b細胞中IgA之表現。免疫結合物多肽及聚核苷酸本發明免疫結合物包含多肽及其片段。如本文中所使用，術語「多肽」意欲涵蓋單數「多肽」以及複數「多肽」且係指由單體（胺基酸）經醯胺鍵（亦稱為肽鍵）線性連接構成的分子。術語「多肽」係指兩個或兩個以上胺基酸之任何鏈，且並不指特定長度之產物。因此，用於指兩個或兩個以上胺基酸之鏈的肽、二肽、三肽、寡肽'「蛋白質」、「胺基酸鏈」或任何其他術語包括在「多肽」之定義中，且術語「多肽」可替代任何此等術語使用或可與任何此等術語互換使用。術語r多肽」亦欲指多肽之表現後修飾的產物，包括（但不限於）糖基化、乙醯化、磷酸化、醯胺化、藉由已知保護/封端基團衍生、蛋白水解裂解或藉由非天然存在之胺基酸修飾。多肽可源自天然生物來源或藉由重組技術製造，但不一定由指定核酸序列轉譯。其可以任何方式產生’包括藉由化學合成。本發明之多肽的大小可為約3個或更多、5個或更多、個或更多、2G個或更多、25個或更多、5〇個或更多、75個或更多、100個或更多、2〇〇個或更多、5〇〇個或更多、 1，000個或更多、或2，GGG個或更多胺基酸。多肽可具有所定義之三維結構，儘管其未必具有該結構。具有所定義之三維結構的多狀稱為經摺#，而$具有所定義之三維結構的多肽可採用許多不同構形，且稱為未摺疊。「分離j之多肽或其變異體或衍生物意欲為其天然環境 149654.doc •68- 201119672 二肽。無需特定程度之純化。舉例而言，分離，、自然或天然環境中移出。出於本發明之目八離於宿主細胞f之重組產生的多肽及蛋白質被視為 :a及蛋自f，如Μ藉由任何適合之技術分離、分離或部分或實質上純化之天然或重組多肽。作為本發明之多R，亦包括上述多肽之衍生物、類似物或：異體及其任何組合。當提及本發明之多肽時，術語「變異體」、「衍生物」及「類似物」包括保留相應天然多肽之至少一些生物性質、抗原性質或免疫原性質的任何多肽。本發明之多肽的變異體包括由於胺基酸取代、缺失戈插入而改變胺基酸序列之多肽。變異體可天然存在或非天然存在。非天然存在之變異體可使用此項技術已知之突變誘發技術來製造。變異體多肽可包含保守性或非保守性胺基酸取代、缺失或添加。本發明多肽的衍生物為已經改變以便展現未見於天然多肽之其他特徵的多肽。實例包括融合蛋白。變異多肽亦可在本文中稱為「多肽類似物」。如本文中所使用，多肽之「衍生物」係指具有一或多個藉由官能性側基之反應而以化學方式衍生之殘基的受檢多肽。作為「衍生物」，亦包括含有二十種標準胺基酸之一或多個天然存在之胺基酸衍生物的彼等肽。舉例而言，4_經基脯胺酸可取代脯胺酸；5-羥基離胺酸可取代離胺酸；3-甲基組胺酸可取代組胺酸；高絲胺酸可取代絲胺酸；且鳥胺酸可取代離胺酸。或者’編碼此等相同·或相似多肽之重組變異體可藉由利 149654.doc •69· 201119672 用遺傳密碼中之「冗餘」來合成或選擇。可引入多種密碼子取代（諸如產生多種限制性位點之靜止變化）以優化選殖至質體或病毒載體中或表現於特定原核或真核系統中。聚核苷酸序列中之突變可反映於多肽或添加至多肽中以改良多肽任何部分性質的其他肽之域中，以便改變諸如配位體結合親和性、鏈間親和性或降解/轉換率之特徵。較佳地’胺基酸「取代」係用一個具有類似結構及/或化學性質之胺基酸置換另一個胺基酸之結果，亦即保守性胺基酸置換。「保守性」胺基酸取代可基於所涉及殘基之極性、電荷、溶解性、疏水性、親水性及/或兩性性質的相似性來進行。舉例而言，非極性（疏水性）胺基酸包括丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、纈胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及曱硫胺酸；極性中性胺基酸包括甘胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、半胱胺酸、酪胺酸、天冬醯胺及麩醯胺酸；帶正電荷（鹼性）胺基酸包括精胺酸、離胺酸及組胺酸；且帶負電荷（酸性）胺基酸包括天冬胺酸及麩胺酸。「插入」或「缺失j較佳在約1個至約20個胺基酸、更佳1個至1 〇個胺基酸之範圍内。所允許之變化可以實驗方式藉由使用重組 DNA技術系統地進行胺基酸在多肽分子中之插入、缺失或取代且分析所得重組變異體之活性來確定。多肽胺基酸序列與本發明之查詢胺基酸序列至少例如 95%「一致」，意謂除受檢多肽序列可包括每100個查詢胺基酸序列之胺基酸至多5個胺基酸改變外，受檢多肽之胺基酸序列與查詢序列一致。換言之，為獲得胺基酸序列與 149654.doc •70· 201119672 查詢胺基酸序列至少9 5 % —致之多肽’受檢序列中至多5 〇/0 之胺基酸殘基可插入、缺失或經另一個胺基酸取代。參考序列之此等改變可發生在參考胺基酸序列之胺基或羧基末端位置或彼等末端位置之間的任何地方，個別穿插於參考序列之殘基當中或參考序列内之一或多個鄰接基團中。實際上，慣常宜使用已知電腦程式確定任何特定多肽是否與參考多肽至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、 98%或99%—致。可使用基於BruUag等人，c㈣户却〆扪6:237-245 (1990)之演算法的FASTDB電腦程式來確定用於確定查詢序列（本發明之序列）與受檢序列之間的最佳總匹配之較佳方法，亦稱為全局序列比對。在序列比對中查。旬序列及文檢序列皆為核芽酸序列或皆為胺基酸序列°亥王局序列比對之結果以一致性百分數計。FASTDB 胺基酸比對中所使用之較佳參數為：矩陣=pAM q、k_元組 =2、錯配罰分=1、連接罰分=2〇、隨機化組長度=〇、截斷计分=1、窗口大小=序列長度、空隙罰分=5、空隙大小罰分=0.05、窗口大小=5〇〇或受檢胺基酸序列長度(任一較短者）0 若受檢序列由於N端或c端缺失（非内部缺失）而比查詢序列短，則必須對結果進行手動校正。此係因為“ST卿 t在計鼻全局—致性百分數時未考慮受檢序列之N端及C 多而截短。對於相對於查詢序列在N端及c端截短之受檢序二藉由計算為受檢序列之N端及c端且不與相應受檢殘土 - &對的查詢序列殘基數目以查詢序列總驗基計之 149654.doc 201119672 百分數來校正一致性百分數。由FASTDB序列比對之結果來確定殘基是否匹配/比對。接著自使用指定參數由上述 FASTDB程式所計算出之一致性百分數減去此百分數，得出最終一致性百分數計分。此最終一致性百分數計分係用於本發明之目的。出於手動調整一致性百分數計分之目

的’僅考慮不與查詢序列匹配/比對之受檢序列之N端及C 端殘基。其僅為受檢序列之最遠N端及C端殘基外的查詢殘基位置。

舉例而言，將90個胺基酸殘基之受檢序列與1〇〇個殘基之查詢序列進行比對以確定一致性百分數。缺失發生在受檢序列之N端，因此FASTDB比對未顯示N端頭1〇個殘基的匹配/比對。10個未配對殘基表示之序列（N端及C端處不匹配之殘基數目/查詢序列之殘基總數），因此自 FASTDB程式所計算出之—致性百分數計分中減去跳。若其餘90個殘基完全匹配，則最終一致性百分數將 9〇%。在另-實例中，將90個殘基之受檢序列與100個:

基之查詢序列相比較。這次’缺失為内部缺失，因此在, 檢序列之N端或C端處不存在不與查詢序列匹配/比對之j 基。在此情況下，不對由FASTDB所計算之一致性百分; 進行手動校正。再-次，僅對如fastdb比對中所呈心觉檢序列之N端及C端外且不與查詢序列匹配/比對之^ 位置進行手動校正。出於本發明之目的，目的，不精其他手ί 本發明之多肽包括與以下表3及4中所示之序列至少約 149654.doc -72· 201119672 80/〇、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或 100% 一致的彼等多肽，包括功能性片段或其變異體。本發明亦涵蓋包含表3或4中具有保守性胺基酸取代之序列的多肽。本發明之多肽可由單個聚核苷酸編碼。或者，可由多個 (例如兩個或兩個以上）聚核苷酸編碼，以使得多肽共表現。由多個聚核苷酸共表現之多肽可經由例如二硫鍵或其他方式缔合以形成功能性免疫結合物。舉例而言，抗原結合部分之重鏈部分可由與免疫結合物中包含抗原結合部分之輕鏈部分及效應部分的部分分開之聚核苷酸編碼。當共表現時’重鏈多肽將與輕鏈多肽締合形成抗原結合部分。或者’在另一實例中，抗原結合部分之輕鏈部分可由與免疫結合物中包含抗原結合部分之重鏈部分及效應部分的部分分開之聚核苷酸編碼。本發明免疫結合物及其片段通常由聚核苷酸編碼。術語「聚核苷酸」意欲涵蓋單數核酸以及複數核酸，且係指分離之核酸分子或構築體，例如信使RNA(mRNA) '病毒源性RNA或質體DNA(pDNA)。聚核普酸可包含習知碟酸二酉曰鍵或非習知鍵（例如醒胺鍵’諸如見於肽核酸（PNa) 中）。術^吾「核酸」係指聚核苦酸中存在之任一個或多個核酸區段，例如DNA或RNA片段。「分離」之核酸或聚核苦酸意謂自其自然環境移出之核酸分子' DNA或RNA。舉例而言’出於本發明之目的’載體中所含之編碼治療性多肽的重組聚核苷酸被視為分離之聚核苷酸^分離之聚核苦酸的其他實例包括保持在異源性宿主細胞中之重組聚核普 149654.doc • 73- 201119672 酸或溶液狀態下之經绌仆、、，屯化（邛刀或實質上）之聚核苷酸。分離之RN A分子包括本發明之活f由斗、，义/舌體内或活體外RNA轉錄物，本文所揭不之疲病毒載體的正股與負股形式及雙股形式。、本發明之分離之聚核㈣或核酸另包括合成產生之該等分子。另外，聚核芽酸或核酸可為或可包括調節元件，諸如啟動子、核Μ體結合位點或轉錄終止子。

如本文中所使用’ r編碼區」為核酸中由轉譯為胺基酸之密碼子組成的—部分。儘管「終止密碼子」（TAG、TGA 或TAA)並不轉譯為胺基酸，但若存在，則其仍可視為編碼區之-部分，而例如啟動子、核糖體結合位點、轉錄終止子内含子、5,及3.非轉譯區及其類似部分之任何側接序列並非編碼區之-部分。本發明之兩個或兩個以上編碼區可存在於單個聚核普酸構築體中，例如單個載體上，或各別聚㈣酸構築體中’例如各別(不同)載體上。此外，任何載體可含有單個編碼區，或可包含兩個或兩個以上編碼區’例如本發明之載體可編碼一或多種聚合蛋白質，其丄由蛋白水解裂解在轉譯後或共轉譯地分離為最終蛋白質_。另外’本發明之載體、聚核苦酸或核酸可編碼融合或未融合於編碼本發明免疫結合物或其變異體或衍生物的第一或第二核酸之異源性編碼區。異源性編碼區包括（但不限於）特殊化元件或基元，諸如分泌性信號肽或異源性功能域。在某些實施例中，聚核苷酸或核酸為DNA。在Dna之情 149654.doc -74- 201119672 況下’包含編碼多肽之核酸的聚核苷酸通常可包括啟動子及/或與一或多個編碼區可操作地締合之其他轉錄或轉譯控制元件。可操作締合為基因產物（例如多肽）之編碼區與一或多個調節序列缔合，以此方式使得基因產—物之表現受調節序列影響或控制。若誘導啟動子功能可導致編碼所需基因產物之mRNA的轉錄且若兩個DNA片段之間鍵聯之性質並不干擾表現調節序列引導基因產物表現之能力或干擾 φ DNA模板被轉錄之能力，則兩個DNA片段（諸如多肽編碼區及與其締合之啟動子）「可操作地締合」。因此，若啟動子旎夠實現編碼多肽之核酸的轉錄，則啟動子區將與該核酸可操作地締合。啟動子可為僅引導預定細胞内之DNA實質轉錄之細胞特異性啟動子。除啟動子外，其他轉錄控制疋件（例如増強子、操縱子、抑制因子及轉錄終止信號）可與聚核普酸可操作地締合以引導細胞特異性轉錄。本文揭不適合之啟動子及其他轉錄控制區。 • 各種轉錄控制區為熟習此項技術者所知。此等區域包括 (但不限於）在脊椎動物細胞内起作用之轉錄控制區，諸如 (仁不限於）來自細胞巨大病毒之啟動子及增強子區段（例如 17刻早期啟動子結合内含子-Α)、猿猴病毒40(例如早期啟動子）及反轉錄病毒（例如勞斯肉瘤病毒（Rous sarcoma virus))其他轉錄控制區包括源自脊椎動物基因之彼等者諸如机動蛋白、熱休克蛋白、牛生& & m pn x及I夠控制真核細胞内之基因表現的其他序列。其 I °轉錄控制區包括組織特異性啟動子及增強子以及 149654.doc -75· 201119672 淋巴因子誘導性啟動子（例如可由干擾素或介白素誘導之啟動子）。類似地，各種轉譯控制元件為一般技術者所知。此等元件包括（但不限於）核糖體結合位點、轉譯起始及終止密碼子、及源自病毒系統之元件（尤其為内部核糖體進入位點或IRES，亦稱為CITE序列）。在其他實施例中’本發明之聚核苷酸為rNA，例如呈信使RNA(mRNA)形式。本發明之rna可為單股或雙股。本發明之聚核苷酸及核酸編碼區可與編碼分泌性或信號肽之其他編碼區締合，該等肽引導由本發明之聚核苷酸編碼的多肽之分泌。根據信號假說，哺乳動物細胞分泌之蛋白質具有信號肽或分泌性前導序列，在引發生長蛋白質鏈穿過粗糙内質網排出後’該信號肽或分泌性前導序列自成熟蛋白質裂解。一般技術者意識到，脊椎動物細胞分泌之多肽通常具有融合於多肽N端之信號肽，其自完整或「全長」多肽裂解以產生分泌或「成熟」形式之多肽。在某些實施例中，使用天然信號肽（例如免疫球蛋白重鏈或輕鏈信號肽）’或該序列之保留引導與其可操作地締合之多肽分泌之能力的功能衍生物。或者，可使用異源性哺乳動物信號肽或其功能衍生物。舉例而言，野生型前導序列可由人類組織纖維蛋白溶酶原活化因子（TPA)或小鼠β-葡萄糖醛酸酶之前導序列取代。術語「表現卡匣」係指重組或合成產生之聚核苷酸，其具有一系列允許特定核酸在標把細胞内轉錄的指定核酸元 149654.doc •76- 201119672 件。重組表現卡匣可併入質體、染色體、線粒體DN A、質體DNA、病毒或核酸片段中。通常’表現載體之重組表現卡匣部分包括待轉錄之核酸序列及啟動子。在一實施例中’本發明之表現卡匣包含編碼本發明免疫結合物或其片段的聚核苷酸序列。術語「表現載體」與「表現構築體」同義且係指用於將與其可操作地締合之特定基因引入至標耙細胞内及引導特疋基因表現的DNA分子。本發明之表現載體包含表現卡 ! 表現載體允命轉錄大置穩定mRN A。一旦表現載體在標靶細胞内，基因編碼之核糖核酸分子或蛋白質係藉由細胞轉錄及/或轉譯機構產生。在一實施例中，本發明之表現載體包含含有編碼本發明免疫結合物或其片段的聚核苷酸序列之表現卡匣。何6吾人造」係#合成組合物或非宿主細胞源性組合物，例如以化學方式合成之寡核苷酸。

至少例如95%「一致術語「人造

定核酸分 149654.doc 意謂除聚核苷酸序列可包括每1 〇〇苷酸至多5個點突變外，聚核苷酸列一致。換言之，為獲得核苷酸序少95% —致的聚核苷酸，參考序列 4失或經另一核苷酸取代，或參考 5%數目之核苷酸可插入參考序列 •77· 201119672 子或多肽是否與本發明之核苷酸序列或多肽序列至少 80%、85°/。、90%、95%、96%、97%、98%或 99%—致。可使用基於 Brutlag 等人 ’ Comp. Appl. Biosci. 6:237-245 (1990)之演算法的FASTdb電腦程式來確定用於確定查詢序列（本發明之序列）與受檢序列之間的最佳總匹配的較佳方法’亦稱為全局序列比對。在序列比對中，查詢序列與丈檢序列皆為DNA序列。RNA序列可藉由將u轉化為τ來進行比較。該全局序列比對之結果以一致性百分數計。 DNA序列之FASTDB比對中用於計算一致性百分數之較佳參數為：矩陣=單位、k-元組=4、錯配罰分=1、連接罰分 =30、隨機組長度=〇、截斷計分=1、空隙罰分=5、空隙大小罰分=0.05、窗口大小=5〇〇或受檢核苷酸序列長度（任— 較短者）。若受檢序列由於5,或3,缺失（不是因為内部缺失）而比查詢序列短，則必須對該等結果進行手動校正。此係因為 FASTDB程式在計算__致性百分數時未考慮受檢序列之5, 及3’截短。對於相對於查詢序列在5，或3，端截短之受檢序列，藉由計算為受檢序列之5，及3,且並不匹配/比對的查詢序列之驗基數目相對於查詢序列總驗基的百分數來校正一致性百分數。由FASTDB序列比對之結果來確定核普酸是否匹配/比對°接著自使用指定參數由上述FASTDB程式所計算出之—致性百分數中減去此百分數，#出最終-致性百分數計分。此經校正之計分係用於本發明之目的。出於手動調整一致性百分數計公夕s &

刀数卞刀之目的，僅計算如由FASTDB 149654.doc •78· 201119672 比對所呈現在受檢序列之5,及3'鹼基外且不與查詢序列匹配/比對之鹼基。舉例而言，將90個鹼基之受檢序列與100個鹼基之查詢序列進行比對以確定一致性百分數。缺失發生在受檢序列之5’端，因此FASTDB比對未顯示5'端頭10個鹼基的匹配/ 比對。10個未配對鹼基表示10。/。之序列（5,端及3'端處不匹配之鹼基數目/查詢序列之鹼基總數），因此自FASTDB程式所計算出之一致性百分數計分中減去1〇〇/。。若其餘90個鹼基完全匹配，則最終一致性百分數將為90%。在另一實例中’將90個鹼基之受檢序列與100個鹼基之查詢序列相比較。這次，缺失為内部缺失，因此在受檢序列之5，或3 · 處不存在不與查詢序列匹配/比對之驗基。在該情況下，不對由FASTDB所計算出之一致性百分數進行手動校正。再一次，僅對不與查詢序列匹配/比對之受檢序列的鹼基5, 及3'手動校正。出於本發明之目的’不進行其他手動校正。本發明之聚核苷酸包括與以下表6及8中所示之序列至少約 80%、85% ' 90%、95%、96% ' 97%、98% ' 99% ^ 100% —致的彼等聚核苷酸，包括功能性片段或其變異體。聚核苷酸可表現為編碼整個免疫結合物之單個聚核# 酸或共表現之多個（例如兩個或兩個以上）聚核苦酸。由共表現之聚核苷酸編碼的多肽可經由例如二硫鍵或其他方締合以形成功能性免疫結合物。舉例而言，抗原結合部八之重鏈部分可由與免疫結合物中包含抗原結合部分_ 149654.doc •79- 201119672 部分及效應部分的部分分開之聚核^編碼_ 時，重鏈多肽將與輕鏈多肽締合形成抗原結合，者，在另一實例中，抗原結合部分之輕鍵部分可°由刀與免1 結合物中包含抗原結合部分之重鏈部分及效應部分的部分分開之聚核苷酸編碼。在-較實施例中，本發明之分離之聚核㈣編碼包含至少-個效應部分（較佳單鏈效應部分）及至少_個較佳兩個或兩個以上抗原結合部分之免疫結合物的片段其中第-效應部分與第-抗原結合部分共用胺基讀基末端狀鍵且第二抗原結合部分與該第—效應部分或該第—抗原結合部分共用胺基錢基末端肽鍵。在-較佳實施例中，抗原結合部分係獨立地選自由卜及以^^組成之群。在另一特定實施例中，聚核苷酸編碼兩個抗原結合部分之重鏈及一個效應部力。在另—特定實施例中，聚核苷酸編碼兩個抗原結合部分之輕鏈及一個效應部分。在另一特定實施例中，聚核苷酸編碼來自一個抗原結合部分之一個輕鏈、來自第二抗原結合部分之一個重鏈及一個效應部分。在另一特定實施例中，本發明之分離之聚核苷酸编碼免疫、结合物之片段’其中聚核苷酸編碼兩個Fab分子之重鏈及效應部分（較佳單鏈效應部分）。在另一特定實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼免疫結合物之片段，其中聚核苦酸編碼兩個pab分子之輕鏈及效應部分（較佳單鏈效應部分）°在另一特定實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼免疫結合物之片段，其中聚核苷酸編碼一個Fab分子 149654.doc 201119672 之重鏈、第二Fab分子之輕鏈及效應部分（較佳單鏈效應部分）。在一實施例中’本發明之分離之聚核苷酸編碼包含至少一個效應部分（較佳單鏈效應部分）在胺基及羧基末端胺基酸處連接於一或多個scFv分子的免疫結合物。在一實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼包含至少一個效應部分（較佳單鏈效應部分）及至少第一及第二抗原結合部分之免疫結合物片段，其中各抗原結合部分包含 scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於恆定區，該恆定區包含獨立地選自由IgGl CHI、IgG Ck及IgE CH4威成之群的免疫球蛋白恆定域，且其中一個抗原結合部分在其恆定區叛基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部分經由二硫鍵共價連接。在另一實施例中’本發明之聚核苷酸編碼一個抗原結合部分及效應部分（較佳單鏈效應部分）。在一實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼包含第一及第二效應部分及兩個抗原結合部分之免疫結合物片段，其中各抗原結合部分包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於包含免疫球蛋白恆定域之恆定區，且其中一個抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸’且其中第二抗原結合部分在其恆定區叛基末端胺基酸處連接於第二效應部分之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部分經由二硫鍵共價連接。在一較佳實施例中’第一及/或第二效應部分為單鏈 149654.doc -81 - 201119672 效應部分。在一較佳實施例中，恆定域係獨立地選自由 IgGl CHI、IgG Ck及IgE CH4組成之群。在另一實施例中’本發明之聚核苷酸編碼一個抗原結合部分及一個效應部分。在一實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼包含至少一個效應部分（較佳單鍵效應部分）及至少第一及第二抗原結合部分之免疫結合物片段’其中各抗原結合部分包含 scFv分子在其叛基末端胺基酸處連接於igG CH3域，且其中一個抗原結合部分在其羧基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸’且其中第一及第二抗原結合部分經由一硫鍵共價連接。在另一實施例中，本發明之聚核苷酸編碼一個抗原結合部分及效應部分（較佳單鏈效應部分）。在一實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼包含兩個效應部分及兩個抗原結合部分之免疫結合物片段，其中各抗原結合部分包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接於 IgG CH3域，且其中-個抗原結合部分在其缓基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第二抗原結合部分在其羧基末端胺基酸處連接於第二效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第一及第二抗原結合部分經由二硫鍵共價連接。在一較佳實施例中，第一及/或第二效應部分為單鏈效應部分。在另一實施例中，本發明之聚核苷酸編碼一個抗原結合部分及一個效應部分（較佳單鏈效應部分）。 149654.doc -82- 201119672 在一實施例中，本發明之分離之聚核苷酸編碼包含兩個效應部分及兩個抗原結合部分之免疫結合物片段，其中各抗原結合部分包含Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端胺基酸處連接於IgGl CH3域，且其中各IgG1 CH3域在其羧基末端胺基酸處連接於一個效應部分之胺基末端胺基酸，且其中第一及弟一抗原結合部分經由二硫鍵共價連接。在一較佳實施例中，第一及/或第二效應部分為單鏈效應部分。在另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼一個抗原結合部分之重鍵可變區及該等效應部分（較佳單鏈部分）中之一者的序列。在另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼一個抗原結合部分之輕鏈可變區及一個效應部分 (較佳單鏈效應部分）的序列。在另一實施例中，本發明係針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之聚核苷酸’其中該聚核苷酸包含編碼如以下表3中所示之可變區序列的序列。在另一實施例中，本發明係針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之聚核苷酉文其中6亥t核音酸包含編碼如表4中所示之多狀序列的序列。在另一實施例中’本發明進一步針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之核酸，其中該核酸包含與以下表 6及8中所示之核苷酸序列至少約80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%或99%—致的序列《在另一實施例中，本發明係針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之核酸，其中§玄核酸包含表6及8中所示之核酸序列。在另一實施例中’本發明係針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之 149654.doc -83- 201119672 核酸，其中該核酸包含編碼與表3中之胺基酸序列至少約 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99%— 致之可變區序列的序列。在另一實施例中，本發明係針對一種編碼免疫結合物或其片段的分離之核酸，其中該核酸包含編碼與表4中之胺基酸序列至少約80%、85%、90%、95%、 96°/。、97%、98%或99%—致之多肽序列的序列。本發明涵蓋一種編瑪免疫結合物或其片段的分離之核酸，其中該核酸包含編碼表3中具有保守性胺基酸取代之可變區序列的序列。本發明亦涵蓋一種編碼本發明免疫結合物或其片段的分離之核酸，其中該核酸包含編碼表4中具有保守性胺基酸取代之多肽序列的序列。表2

構築體 _ 核苷酸序列 SEQIDNO DP47-3文庫之文庫模板；包含輕鏈之PelB前導序列 + Vk3_20 κ V -域+ CL恨定域及重鏈之PelB + VH3 23 V-域+ CHUi定域的完整Fab編碼區； pMS25〇pt ATGAAATACCTATTGCCTACGGCAGCCGCTGGAirGTTAT TACTCGCGGCCCAGCCGGCCATGGCCGAAATCGTGTTAAC GCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTITGTCTCCAGGGGAAAGA GCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCA GCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCC CAGGCTCCTCATCTATGGAGCATCCAGCAGGGCCACTGGC ATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCCGGGACAGAC TTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGAmTG CAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCGCTGAC GTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGAAATCAAACGTACGGT GGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAG CAGTrGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGA ATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGG TGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTG TCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCA GCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAAC ACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGA GCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTG GAGCCGCAGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGA ATGGAGCCGCAGACTACAAGGACGACGACGACAAGGGTG CCGCATAATAAGGCGCGCCAATTCTATITCAAGGAGACA GTCATATGAAATACCTGCTGCCGACCGCTGCTGCTGGTCT GCTGCTCCTCGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCGAGGTGCA ATTGCTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGG GTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGATTCACCTTT 1 149654.doc -84- 201119672

構築體核苷酸序列 SE〇 ID NO AGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAGTGGT GGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTC ACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGC AGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATT ACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATTTTGACTACTGGGGCCA AGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCACCAAAGG CCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACC TCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGAC TACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCG CCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACA GTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTG CCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACG TGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAAGTGGACAAGAAAG TTGAGCCCAAATCTTGTGACGCGGCCGCAAGCACTAGTGC CCATCACCATCACCATCACGCCGCGGCATAG DP88-3文庫之文庫模板；包含輕鏈之PelB前導序列+Vkl_17KV -域+cui定域及重鏈之PelB + VH1—69 V-域+ CHl'li定域的完整Fab編碼區； pRJH32 ATGAAATACCTATTGCCTACGGCAGCCGCTGGATTGTTAT TACTCGCGGCCCAGCCGGCCATGGCCGATATCCAGATGA CCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTCGGAGACCG GGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAA TGATTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCCAGGGAAAGCCCC TAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAGAGTGGC GTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCCGGGACAGAG TTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAGCCTGAAGATTTTG CCACCTATTACTGCTTGCAGCATAATAGTTACCCCACGTT TGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGATCAAGCGTACGGTGGC TGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAG TTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATA ACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGG ATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCA CAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCA GCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACA AAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTC GCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTGGAGC CGCAGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGAATGG AGCCGCAGACTACAAGGACGACGACGACAAGGGTGCCGC ATAATAAGGCGCGCCAATTCTATTTCAAGGAGACAGTCAT ATGAAATACCTGCTGCCGACCGCTGCTGCTGGTCTGCTGC TCCTCGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCCAGGTGCAATTGGT GCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGT GAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAGGCACATTCAGCAG CTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGG GCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACA GCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCACCATT ACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTG AGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTATTACTGTG CGAGACTATCCCCAGGCGGTTACTATGTTATGGATGCCTG GGGCCAAGGGACCACCGTGACCGTCTCCTCAGCTAGCAC CAAAGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAG AGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTC AAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAAC TCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTG TCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGT GACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATC TGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAAGTGGAC AAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACGCGGCCGCAAGC 1 ACTAGTGCCCATCACCATCACCATCACGCCGCGGCATAG 2 149654.doc •85- 201119672 表3 構築體多肽序列 SEQroNO 2B10;Vl DKPTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFA TYYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 3 2B10(GS); VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVT1TCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLT1SSLQPEDFAT YYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 5 2B10;Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGWSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYME LSSLRSEDTAmCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 7 2FU;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWQQKPG QAPRLLIYGASSRATGVPDRFSGSGSGTDFT^SRLEPEDFA VYYCQQGQYTPPWGQGTKVEIK 9 2FU(VI);Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCQQGOYTPPTFGQGTKVEIK 11 2F11;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDMAVYYCAKWRWMMFDYWGOGTLVTVSS 13 2F11(MT);Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKWRWMMFDYWGOGTLVTVSS 15 3F2;Vl EIVLTQSPGTLSLYPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFT^SRLEPEDFA VYYCQOGIMLPPTFGOGTKVEIK 17 3F2(YS);Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLnSRLEPEDFA VYYC00G1MLPPTFG0GTKVEIK 19 3F2;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 21 3D9，Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCQOGOLIPPTFGOGTKVEIK 23 3D9,Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQTP GKGLEWVSAIGVSTGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGOGTLVTVSS 25 2D9(TA);Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIGVSTGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGOGTLVTVSS 27 4G8;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSRSYLAWYQQKPG QAPRLLIIGASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGOVIPPTFGQGTKVEIK 29 4G8;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ 31

149654.doc •86- 201119672

構築體多肽序列 SEQ ID NO MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVTVSS 4B3;Vl ErVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKPG QAPRLLIYGAYIRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGOVIPPTFGOGTKVEIK 33 4B3;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRfTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGOGTLVTVSS 35 4D6;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKPG QAPRLLIQGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGOVIPPTFGOGTKVEIK 37 4D6;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGOGTLVTVSS 39 2C6;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLUYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGOODPPTFGOGTKVEIK 41 2C6; VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSAGYTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGNFDYWGOGTLVTVSS 43 5H5;Vl EIYLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFAV YYCOOGNOIPPTFGOGTKVEIK 45 5H5;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYTMSWVRRSP GKGLEWVSAISGGGRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFTPFDYWGOGTLVTVSS 47 2C4; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASIRATGIPDRFSGSGSGTOFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGNOIPPTFGOGTKVEIK 49 2C4:Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFITSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFTPFDYWGOGTLVTVSS 51 2D9;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLT1SRLEPEDFAV YYCOOGNOIPPTFGOGTKVEIK 67 2D9;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFTPFDYWGOGTLVTVSS 69 4B8; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFAV YYCOOGOVIPPTFGOGTKVEIK 71 4B8;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGOGTLVTVSS 73 7A1;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFimSRLEPEDFAV YYCOOGOOIPPTFGOGTKVEIK 75 7A1;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGNFDYWGQGTLVTVSS 77 13C2;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFimSRLEPEDFAV YYC〇〇G〇LIPPTFG〇GTKVEIK 79 13C2;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP 81 149654.doc -87- 201119672 構築體多肽序列 SE〇 ID NO GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGOGTLVTVSS 13E8;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGLNIPSTFGOGTKVEIK 83 13E8;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGOGTLVTVSS 85 14C10; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLT1SRLEPEDFAV YYCOOGfflIPPTFGOGTKVEIK 87 14C1〇;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKAWMGPFDYWGOGTLVTVSS 89 17A11;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTUTISRLEPEDFAV YYCOOGLNIPSTFGOGTKVEIK 91 17A11;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGOGTLVTVSS 93 19G1;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 121 19G1;V„ EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIISSGGLTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 123 20G8; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFILTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 125 20G8; VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIIGSGSRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 127 4B9; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 129 4B9;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIIGSGASTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSS 131 5B8;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRPSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 133 5B8;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIWGGGRSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 135 5F1;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 137 5F1;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIISSGASTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 139 14B3;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 141

149654.doc -88 - 201119672

構築體多肽序列 SEQ ED NO 14B3;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAILASGAnYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 143 16F1;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFA VYYCQOGIMLPPTFGOGTKVEIK 145 16F1;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTTSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSGnGSGGITYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 147 16F8;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 149 16F8; VH EYQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWYSAILGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 151 03C9; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 153 03C9; VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFAMSWVRQSP GKGLEWVSAnGSGSNTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 155 02D7;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGTPDRFSGSGSGTDFILT1SRLEPEDFA VYYCOQAIMLPPTFGOGTKVEIK 157 02D7; VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRITISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSS 159 28H1;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSRSYLAWYQQKPG QAPRLLIIGASTRATGIPDRFSGSGSGTOFTLTISRLEPEDFAV YYCOOGOVIPPTFGOGTKVEIK 161 28H1;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSHAMSWVRQAP GKGLEWVSAIWASGEQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGOGTLVTVSS 163 22A3;Vl EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCOOGIMLPPTFGOGTKVEIK 165 22A3;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIIGSGSnYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSS 167 29B11;Vl EIVLTQSPGILSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCQQGIMLPPTFGOGTKVEIK 169 29B11;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSADGSGGlTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGOGTLVTVSS 171 23C10; VL EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSRSYLAWYQQKPG QAPRLLIIGASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFAV YYCQQGQVIPPTFGOGTKVEIK 173 23C10;Vh EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSSAMSWVRQAP GKGLEWVSAISTNGNYTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGOGTLVTVSS 175 2B10_C3B6;Vl DIQMTQSPSSLSASVGDRVmCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYAASSLOSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLOPEDFAT 177 149654.doc • 89 - 201119672 構築體多肽序列 SE〇 ID NO YYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 2B10_C3B6;Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTTSSYA1SWVRQAP GQGLEWMGAIIPILGIANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMEL SSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 179 2B10_6A12;Vl DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYAASSLQSGVPSRfSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFAT YYCLQNGLOPATFGQGTKVEIK 181 2B10_6A12:Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGVIlPILGTANYAQKFQGRVmADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 183 2B10_C3A6;Vl DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNVLGWYQQKPG KAPKRLIYDSSSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFAT YYCLQNGLOPATFGQGTKVEIK 185 2B10_C3A6;Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 187 2B10 D1A2 wt; VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNVLGWYQQKPG KAPKRLIYDAYSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFA TyYCL〇NGL〇PATFGQGTKVEIK 189 2B10 D1A2 wt; VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 191 2B10 D1A2 VD; VL ' DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGAVYQQKPG KAPKRLIYDAYSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTUTISSLQPEDFA 1YYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 193 2B10 D1A2 VD: VH — QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVmADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 195 2B10_〇7D8;Vl DIQMTQSPSSLSASVGDRVT1TCRASQSIRNVLGWYQQKPGK APKRLIYDVSSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFAT YYCLQNGL〇PATFG〇GTKVEIK 197 2B10_O7D8;Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGOGTTVTVSS 199 2B10_O1F7;Vl DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNVLGWYQQKPG KAPKRLIYDASSLQSGVPSRFSGGGSGTEFT^SSLQPEDFA TYYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 201 2B10_O1F7;Vh QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTTSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVmADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGQGTTVTVSS 203 2B10_6H10; VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVUTCRASQGIRNVLGWYQQKPG KAPKRL1QAATSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFA TYYCL〇NGL〇PATFG〇GTKVEIK 205 2B10_6H10; VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVmADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGQGTTVTVSS 207 MHLG1;Vh EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQA PGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYYAASVKGRFnSRDDSKNTL YLQMNSLKTEDTAVYYCnYGNYVGHYFDHWGQGTTVTV SS 257 KV9;Vl DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQNVDTNVAWYQQKPG QAPRPLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFAT YYCOOYNSYPLTFGGGTKVEIKRT 259 149654.doc • 90- 201119672 構築體多肽序列 SEQ ID NO MHLG;Vh EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQA PGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYYAASVKGRFTISRDDSKNTL YLQMNSLKTEDTAVYYCTTYGNYVGmTDHWGQGTTVTV ss 261 KV1;VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVnTCRASQNVDTNLAWYQQKPGKA PKLLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFILTISSLQPEDFATYYC OQYNSYPOTGGGTXVEIKRT 269 KV7;Vl DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQNVDINVAWYQQKPGKA PKPLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFimSSLQPEDFATYYC OOYNSYPOTGGGTXVEIKRT 271 表4

構築體多肽序列 SE〇 ID NO 源自L19單株抗體之Fab重鏈-源自 L19單株抗體之 IL2-Fab重鍵的 C125A變異體 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSISGSSGTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ SLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPS NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKTQ LQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATE LKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNPHLRPRDLISNINVIVLE LKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG(} SGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSF SMSWVRQAPGKGLEWVSSISGSSGTTYYADSVKGRFTISRD NSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVT VSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTV SWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTY ICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 95 源自L19單株抗體之Fab輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYYASSRATGIPDRFSGSGSGTDFILnSRLEPEDFAV YYCQQTGRIPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDS KDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 96 源自L19單株抗體之scFv-8個胺基酸連接子-IL2之 CI25A變異體 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSISGSSGTIYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSSGGSGG ASEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQK PGQAPRLLIYYASSRATGIPDRFSGSGSGTOFTUnSRLEPEDF AVYYCQQTGRIPPTFGQGTKVEISVLSSSSGSSSSGSSSSGAP TSSSTKKTQLQLEHLLLDLQM1LNGINNYKNPKLTRMLTFKF YMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLI SNINVIVLELKGSETrFMCEYADETAHVEFLNRWITFAQSIIS TLT 97 F16-微型雙功能抗體-IL2蛋白質 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKAHNAFDYWGQGTLVTVSSASGGSS ELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAP VLVIYGKNNRPSGIPDRFSGSSSGNTASLmGAQAEDEADY YCNSSVYTMPPWFGGGTKLTVLGSSSSGSSSSGSSSSGAPTS SSTKKTOLQLEHLLLDLOMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFY 98 149654.doc •91- 201119672 構築體多肽序列 SE〇 ID NO MPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLIS NINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIIST LT scFv-EL2-scFv (F16,蛋白質） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAP GKGLEWVSAlSGSGGSTYYADSVKGIUniSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKAHNAFDYWGQGTLVTVSRGGGGS GGGGSGGGGSSELTQDPAVSVALGQTVR1TCQGDSLRSYYA SWYQQKPGQAPVLVIYGKl^NRPSGIPDRFSGSSSGNTASLTI TGAQAEDEADYYCNSSVYTMPPWFGGGTKLTVLGSSSSGS SSSGSSSSGAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNP KLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQS KNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETrFMCEYADETATIVEFL NRWITFAQSIISTLTSGGGGSGGGGSGGGGSSELTQDPAVSV ALGQTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNN RPSGIPDRFSGSSSGNTASLmGAQAEDEADYYCNSSVYTM PPWFGGGTKLTVLGSGGGSGGGSGGGSGSEVQLLESGGGL VQPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAPGKGLEWVSAIS GSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAV YYCAKAHNAFDYWGOGTLVTVS 99 Fab-BL2-Fab (F16，重鏈細胞因子融合構築體，蛋白質） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYGMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKAHNAFDYWGQGTLVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKP SNTKVDKKVEPKSCDSSSSGSSSSGSSSSGAPTSSSTKKTQLQ LEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELK HLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELK GSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGGGSG GGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYG MSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDN SKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKAHNAFDYWGQGTLVT VSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTV SWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTY ICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 100 F16 ’較鍵，蛋白質 SSELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQ APVLVIYGKNNRPSGIPDRFSGSSSGNTASLmGAQAEDEAD YYCNSSVYTMPPWFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEE LQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPS KQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTV APTECS 101 JL2R-3-Fc (¾) 融合蛋白，蛋白質 MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARCAVNGTSQFTCFYNSRANIS CVWSQDGALQDTSCQYHAWPDRRRWNQTCELLPVSQASW ACNLILGAPDSQKLTTVDIVTLRVLCREGVRWRVMAIQDFK PFENLRLMAPISLQWHVETHRCNISWEISQASHYFERHLEFE ARTLSPGHTWEEAPLLTLKQKQEWICLETLTPDTQYEFQVR VKPLQGEFTTWSPWSQPLAFRTKPAALGKDTGAQDKTHTCP PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHE DPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSIYRWSVLTVL HQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCT LPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY KTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEAL HNHYTQKSLSLSPGK 102 MLKPSLPFTSLLFLOLPLLGVGLNTnLTPNGNEDTTADFFLT 103 149654.doc -92- 201119672

多肽序列 SEQ ID NO 1L2R-y-Fc (結）’蛋白質 TMPTDSLSVSTLPLPEVQCFVFNVEYMNCTWNSSSEPQPTNL TLHYWYKNSDNDKVQKCSHYLFSEEITSGCQLQKKEIHLYQ TFVVQLQDPREPRRQATQMLKLQNLVIPWAPENLTLHKLSE SQLELNWNNRFLNHCLEHLVQYRTDWDHSWTEQSVDYRH KFSLPSVDGQKRYTFRVRSRFNPLCGSAQHWSEWSHPIHWG SNTSKENPFLFALEAGAQDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPP KPKDTLMSRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGICEYKCKVSN KALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELIXNQVSLWC LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSK LTVDKSRWOOGNVFSCSVMHEALHNHYTOKSLSLSPGK Fab-IL12-Fab L19抗體，鼠類 scIL12，蛋白質 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSISGSSGTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ Μ^ίΚΑΕσΤΑνΥΥεΑΚΡΡΡΥΡΟΥλνΟΟΟπΛαΛ^ΒΑ^ΤΚσΡ SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPS NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAMWELEKDVY VVEVDWTPDAPGETVNLTCDTPEEDDITWTSDQRHGVIGSG ΚΤυΠΤΥΚΕΡ1^Α〇ρΥΤ(：ΗΚ(Κ}ΕΤΙ^Η8ΗίΙΧΗΚΚΕΝΟΙ\νΈ TEILKNFKNKTFLKCEAPNYSGRFTCSWLVQRNMDLKFNIK SSSSPPDSRAVTCGMASLSAEKVTLDQRDYEKYSVSCQEDV TCPTAEETLPIELALEARQQNKYENYSTSFFIRDIIKPDPPKNL QMKPLKNSQVEVSWEYPDSWSTPRSYFSLKFFVRIQRKKEK MKETEEGCNQKGAFFVEKTSTEVQCKGGNVCVQAQDRYY NSSCSKWACVPCRVRSGGDGSGGGGSGGGGSRVIPVSGPAR CLSQSRNLLKTTDDMVKTAREKLKHYSCTAEDIDHEDITRD QTSTLKTCLPLELHKNESCLATRETSSTTRGSCLPPQKTSLM MTLCLGSIYEDLKMYQTEFQAINAALQNHNHQQIILDKGML VAIDELMQSLNHNGETLRQKPPVGEADPYRVKMKLCILLHA FSTRWTINRVMGYLSSAGGCjGSGGGGSGGCXjEVQLLESGG GLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAPGKGLEWVSS Κσ53ΰΤΙΥΥΑϋ5νΚΧϊΚΕΓΚΚΟΝ8ΚΝΤΧΥΙ^ΜΝ8Ι^ΚΑ£ϋΤΑ VYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQS SGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPK SCD 104 Fab-IL12-Fab L19抗體，人類 scIL12，蛋白質 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSIRGSSGTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS 6νΗΤΡΡΑνί(^50ΙΛ^Ι^8νντνΡ5551ΧΪΤ〇ΤΥΚΝνΝΗΚΡ$ NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGIWELKKDVYV VELDWYPDAPGEMYVLTCDTPEEDGITW1LDQSSEVLGSGK ΤυΠ()νΚΕΡΟϋΑσρΥΤ(：ΗΚΟΟΕνΐ^Η51Χ1ΧΗΚΚΕϋΟΙ\ν5Τ DILKDQKEPKNKTFLRCEAKNYSGRFTCWWLTnSTDLTFSV KSSRGSSDPQGVTCGAATLSAERVRGDNKEYEYSVECQEDS ACPAAEESLPIEVMVDAVHKLKYENYTSSFFIRDIIKPDPPKN LQLKPLKNSRQVEVSWEYPDTWSTPHSYFSLTFCYQVQGKS KREKKDRVFTDKTSATVICRKNASISVRAQDRYYSSSWSEW ASVPCSGGGGSGGGGSGGGGSRNLPVATPDPGMFPCLHHSQ NLLRAVSNMLQKARQTLEFYPCTSEEIDHEDITKDKTSTVEA CLPLELTKNESCLNSRETSF1TNGSCLASRKTSFMMALCLSSI YEDLKMYOVEFKTMNAKLLMDPKRQIFLDONMLAVIDELM 105 149654.doc -93- 201119672 構築體多肽序列 SEQIDNO QALNFNSETVPQKSSLEEPDFYKTKIKLCILLHAFRIRAVTID RVMSYLNASGGGGSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGS LRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAPOKGLEWVSSIRGSSGTTY YADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKPF PYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALG CLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSV VTVPSSSLGTOTYICNYNHKPSNTKVDKKVEPKSCD F ab -GMC SF -F ab L19抗體，人類 GM-CSF，蛋白質 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSIRGSSGTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPS NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPARSPSPSTQP WEHVNAIQEARRLLNLSRDTAAEMNETVEVISEMFDLQEPT CLQTRLELYKQGLRGSLTKLKGPLTMMASHYKQHCPPTPET SCATQIITFESFKENLKDFLLVIPFDCWEPVQESGGGGSGGGG SGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSW VRQAPGKGLEWVSSIRGSSGTTYYADSVKGRFTISRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSA STKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV NHKPSNTKVDKKVEPKSCD 106 Fab-IFNa2-Fab > L19抗體，蛋白質 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVRQAP GKGLEWVSSIRGSSGTTYYADSVKGIOTISRDNSKNILYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS 〇νΗΤΡΡΑνΐ^550ΙΛ^1^5νντνΡ$85ΙΧ}Τ(3ΤΥΚ：ΝνΝΗΚΡ5 NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGCDLPQTHSLGN RRALILLAQMRRISPFSCLKDRHDFGFPQEEFDGNQFQKAQA ISVLHEMIQQTFNLFSTKDSSAAWDESLLEKFYTELYQQLND LEACVIQEVGVEETPLMNVDSILAVKKYFqRITLYLTEKKYS PCAWEVVRAEIMRSFSLSTNLQERLRRKESGGGGSGGGGSG GGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSFSMSWVR QAPGKGLEWVSSIRGSSGTTYYADSVKGRFnSRDNSKNILY LQMNSLRAEDTAVYYCAKPFPYFDYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCD 107 3F2 Fab-IL2.Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAlSGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL Τ5〇νΗΤΡΡΑνί(^50ΙΛ^Ι^νντνΡ558ΙΛΤ(5ΤΥ1€ΝνΝΗΚ PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL ELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITTAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTTS SYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTIS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 209

149654.doc -94- 201119672

構築ft 4G8 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體）多肽序列 SE〇 ID NO EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL ELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFITS SYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTIS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 211 3D9 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQTP GKGLEWVSAIGVSTGSTYYADSVKGRITISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALC5CLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL· ELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS SYAMSWVRQTPGKGLEWVSAIGVSTGSTYYADSVKGRFTIS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWLGPFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 213 2F11 Fab-H2-Fab (重鍵細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKWRWMMFDYWGQGTLVTVSSAST KGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTK KTQLQLEHLLLDLQM1LNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKK ATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVI VLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSnSTLTSG GGGSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFT FSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRF TISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKWRWMMFDYW GQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDY FPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS SLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 215 4B3 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLOCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL 217 149654.doc -95- 201119672 構築體多肽序列 SEOID NO ELKGSETTFMCEYADETATTVEFLNRWnTFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS SYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTIS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNYNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 4G8 Fab-IL12-Fab (鼠類IL-12 ; 重鍵細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVTVSSASTK 0Ρ5νΡΡίΑΡ55Κ8Τ500ΤΑΑΙ^ανΚ0ΥΡΡΕΡντν5ΨΝ$0ΑΙ TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAMWELEKD VYVVEVDWTPDAPGETVNLTCDTPEEDDITWTSDQRHGVIG SGKTLTITVKEFLDAGQYTCHKGGETLSHSHLLLHKKENGI WSTEILKNFKNKTFLKCEAPNYSGRFTCSWLVQRNMDLKFN DCSSSSPPDSRAVTCGMASLSAEKVTLDQRDYEKYSVSCQED VTCPTAEETLPIELALEARQQNKYENYSTSFFIRDIIKPDPPKN LQMKPLKNSQVEVSWEYPDSWSTPRSYFSLKFFVRIQRKKE KMKETEEGCNQKGAFFVEKTSTEVQCKGGNVCVQAQDRY YNSSCSKWACVPCRVRSGGDGSGGGGSGGGGSRVffVSGPA RCLSQSRNLLKTTDDMVKTAREKLKHYSCTAEDIDHEDITR DQTSTLKTCLPLELHKNESCLATRETSSTTRGSCLPPQKTSL MMTLCLGSIYEDLKMYQTEFQAINAALQNHNHQQIILDKGM LVAIDELMQSLNHNGETLRQKPPVGEADPYRVKMKLCILLH AFSTRVVTINRVMGYLSSAGGGGSGGGGSGGGGEVQLLESG GGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWV SAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAED TAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAP SSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP Ανί(^50Ύ51^5νντνΡ5881ΧίΤ(3ΤΥΚΝνΝΗΚΡ5ΝΤΚλωΚ KVEPKSCD 219 28H1 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSHAMSWVRQAP GKGLEWVSAIWASGEQYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQGTLVIYSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISN1NVIVL ELKGSETTFMCEYADETATTVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS SHAMSWVRQAPGKGLEWVSAIWASGEQYYADSVKGRFnS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWLGNFDYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 221 29B11 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIIGSGGITYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPS NTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKTO 223

149654.doc •96- 201119672

構築體多肽序列 SE〇 ID NO LQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATE LKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLE LKGSETTFMCEYADETATTVEFLNRWITFAQSnSTLTSGGGG SGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSS YAMSWVRQAPGKGLEWVSAnGSGGITYYADSVKGRFnSR DNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGT LVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEP VTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGT OTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 19G1 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIISSGGLTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL· TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL ELKGSETTFMCEYADETAmEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS SYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIISSGGLTYYADSVKGRFTIS RDNSKNTLYLQ_SLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLG TOTYICNYNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 225 20ϋ8 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAP GKGLEWVSAIIGSGSRTYYADSVKGRFnSRDNSKNTLYLQ MNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTKKT QLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKAT ELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVL ELKGSETTFMCEYADETATTVEFLNRWITFAQSIISTLTSGGG GSGGGGSGGGGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS SYAMSWVRQAPGKGLEWVSAIIGSGSRTYYADSVKGRFnS RDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKGWFGGFNYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLG TQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 227 3F2輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVTSSYLAWYQQKPG QAPRLLINVGSRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFA VYYCQQGIMLPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 229 4G8輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSRSYLAWYQQKPG QAPRLLIIGASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV YYCQQGQVIPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDS KDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 231 3D9輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAV 233 149654.doc -97- 201119672 構築體多肽序列 SEOIDNO YYCQQGQLIPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDS KDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 2F11輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPG QAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLnSRLEPEDFAV YYCQQGQYTPPTFGQGIKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 235 4B3輕鏈 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKPG QAPRLLIYGAYlRATGIPDRFSGSGSGTDFTUnSRLEPEDFAV YYCQQGQVIPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDS KDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 237 2B10 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTTSSYAISWVRQAP GQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYME LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGQGTTVTVSSA STKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSMLGTQTYICNV NHKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSST KKTQLQLEHLLLDLQM1LNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPK KATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNIN VIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIISTLTS GGGGSGGGGSGGGGQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG GTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGR VmADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAF DYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSW TVPSSSLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 239 C3B6 Fab-IL2-Fab (重键細胞因子融合構築體） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP GQGLEWMGAIIPILGIANYAQKFQGRVmADKSTSTAYMEL SSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGQGTTVTVSSAS TKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSSTK KTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKK ATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVI VLELKGSETTFMCEYADETAnVEFLNRWITFAQSIISTLTSG GGGSGGGGSGGGGQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGG TFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGAIIPILG1ANYAQKFQGRVT ITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDY WGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK DYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVP SSSLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 241 6A12 Fab-IL2-Fab (重键細胞因子融合構築體） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAP gqglewmgviipilgtanyaqkfqgrvutadkststayme LSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAFDYWGQGTTVTVSSA STKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNS GALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNV NHKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPTSSST KKT〇L〇LEHLLLDL〇MILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPK 243 149654.doc -98- 201119672

構築體多肽序列 SEQ ID NO KATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNIN VIVLELKGSETrFMCEYADETATrVEFLNRWnTAQSIISTLTS GGGGSGGGGSGGGGQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG GTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGVIIPILGTANYAQKFQGR VmADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARLYGYAYYGAF DYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVV TVPSSSLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 2B10輕鏈 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFAT YYCLQNGLQPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 245 D1A2輕鏈 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPG KAPKRLIYDAYSLQSGVPSRFSGGGSGTEFTLTISSLQPEDFA TYYCLQNGLQPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLK SGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQ DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTK SFNRGEC 247 07D8輕鏈 DIQMTQSPSSLSASVGDRVmCRASQSIRNVLGWYQQKPGK ΑΡΚΚυΥΌν55ί(^0νΡ5ΚΡ800050ΤΈΡΤυΠ551^ΡΕΒΡΑΤ YYCLQNGLQPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 249 MHLGl Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLVESCX5GLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQA PGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYYAASVKGRFTISRDDSKNTL YLQMNSLKTEDTAVYYCTTYGNYYGHYFDHWGQGTTVTV SSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYI CNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPT SSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFY MPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLIS NINVIVLELKGSETrFMCEYADETAHVEFLNRWITFAQSIIST LTSGGGGSGGGGSGGGGEVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCA ASGFTFSNYWMNWVRQAPGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYY AASVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTYGN YVGHYFDHWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGT AALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLY SLSSVVTVPSSSLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD 251 KV9輕鏈 DIQLTQSPSFLSASVGDRVmCKASQNVDTOVAWYQQKPG QAPRPLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFT^SSLQPEDFAT YYCQQYNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQD SKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF NRGEC 253 MHLGFab-IL2 -Fab (重鏈細胞因子融合構築體） EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQA PGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYYAASVKGRFTISRDDSKNTL YLQMNSLKTEDTAVYYCTTYGNYVGHYFDHWGQGTTVTV SSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVS λνΝ80ΑΙΤ5〇νΗΤΡΡΑνΐ^(^50ΙΛ^Ι^5ννΤνΡ555Ι^Τ()ΤΥΙ CNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDSGGGGSGGGGSGGGGAPT 255 I49654.doc -99- 201119672 構築體多肽序列 SE〇 ID NO SSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFY MPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLIS NINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFAQSIIST LTSGGGGSGGGGSGGGGEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCA ASGFTTSNYWMNWVRQAPGKGLEWVAEIRLKSNNFGRYY aasvkgrfusrddskntlylqmnslktedtavyycttygn YVGHYFDHWGQG1TVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGT AALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLY SLSSVVTVPSSSLGTOTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD KV1輕鏈 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTTTCRASQNVDTNLAWYQQKPGKA PKLUYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFTUnSSLQPEDFATYYC QQYNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVnFPPSDEQLKSGTASV VCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYS LSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHOGLSSPVTKSFNRGEC 263 KV7輕鏈 DIQLTQSPSFLSASVGDRVnTCKASQNVDTNVAWYQQKPGKA PKPUYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTEFIITISSLQPEDFATYYC QQYNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASV VCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYS LSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 265

表5 構謓體多肽序列 SE〇 ID NO 人類FAP胞外域+ 聚離胺酸（poly-lys)標記+his6 標記 RPSRVHNSEENTMRALTLKDILNGTFSYKTFFPNW1SGQEYL HQSADNNIVLYNIETGQSYTILSNRTMKSVNASNYGLSPDRQ FVYLESDYSKLWRYSYTATYYIYDLSNGEFVRGNELPRPIQY LCWSPVGSKLAYVYQNNIYLKQRPGDPPFQITFNGRENKIFN GIPDWVYEEEMLATKYALWWSPNGKFLAYAEFNDTDIPVIA YSYYGDEQYPRTINIPYPKAGAKNPWRIFIIDTTYPAYYGPQ EVPVPAMIASSDYYFSWLTWVTDERVCLQWLKRVQNYSVL SICDFREDWQTWDCPKTQEHIEESRTGWAGGFFVSTPVFSY DAISYYKIFSDKDGYKHIHYIKDTVENAIQITSGKWEAINIFR VTQDSLFYSSNEFEEYPGRRNIYRISIGSYPPSKKCVTCHLRK ERCQYYTASFSDYAKYYALVCYGPGIPISTLHDGRTDQEIKI LEENKELENALKNIQLPKEEIKKLEVDEITLWYKMILPPQFD RSKKYPLLIQVYGGPCSQSVRSVFAVNWISYLASKEGMVIAL VDGRGTAFQGDKLLYAVYRKLGVYEVEDQ1TAVRKFIEMG FIDEKRIAIWGWSYGGYVSSLALASGTGLFKCGIAVAPVSSW EYYASVYTERFMGLPTXDDNLEHYKNSTVMARAEYFRNVD YLL1HGTADDNVHFQNSAQIAKALVNAQVDFQAMWYSDQ NHGLSGLSTNHLYTHMTHFLKQCFSLSDGKKKKKKGHHHH HH 53 鼠類FAP胞外域+ 聚離胺酸標記+ his6標記 RPSRVYKPEGNTKRALTLKDILNGTFSYKTYFPNWISEQEYL HQSEDDNIVFYN1ETRESYIILSNSTMKSVNATDYGLSPDRQF VYLESDYSKLWRYSYTATYYIYDLQNGEFVRGYELPRPIQY LCWSPVGSKLAYVYQNNIYLKQRPGDPPFQITYTGRENRIFN GIPDWVYEEEMLATKYALWWSPDGKFLAYVEFNDSDIPIIA YSYYGDGQYPRTINIPYPKAGAKNPWRVFIVDTrYPHHVG PMEVPVPEMIASSDYYFSWLTWVSSERVCLQWLKRVQNVS VLSICDFREDWHAWECPKNQEHVEESRTGWAGGFFVSTPAF SQDATSYYKIFSDKDGYKH1HYIKDTVENAIQITSGKWEAIYI FRVTQDSLFYSSNEFEGYPGRRNIYRISIGNSPPSKKCVTCHL RKERCOYYTASFSYKAKYYALVCYGPGLPISTLHDGRTDQE 55

149654.doc •100· 201119672

構築體多肽序列 SE〇 ID NO IQVLEENKELENSLRNIQLPKVEIKKLKDGGLTFWYKMILPP QFDRSKKYPLLIQVYGGPCSQSVKSVFAVNWITYLASKEGIV IALVDGRGTAFQGDKFLHAVYRKLGVYEVEDQLTAVRKFIE MGFIDEERIAIWGWSYGGYVSSLALASGTGLFKCGIAVAPVS SWEYYASIYSERFMGLPTKDDNLEHYKNSTVMARAEYFRN VDYLLfflGTADDNVHFQNSAQIAKALVNAQVDFQAMWYS DQNHGILSGRSQNHLYTFIMTHFLKQCFSLSDGKKKKKKGH HHHHH 人類·INC-A2 + avi 標記+ his6標記 ASTGETPNLGEVVVAEVGWDALKLNWTAPEGAYEYPFIQV QEADTVEAAQNLTVPGGLRSTDLPGLKAATHYTITIRGVTQ DFSTTPLSVEVLTASGLNDIFEAQKIEWHEGTHHHHHH 57 人類 TNC-A1 + avi 標記+ his6標記 EQAPELENLTVTEVGWDGLRLNWTAADQAYEHFIIQVQEA NKVEAARNLTVPGSLRAVDIPGLKAATPYTVSIYGVIQGYRT PVLSAEASTASGLNDIFEAOKIEWHEGTHHHHHH 59 鼠類 TNC-A1 + avi 標記+ his6標記 ISEFGSSTEEVPSLENLTVTEAGWDGLRLNWTADDLAYEYF VIQVQEANNVETAHNFTVPGNLRAADIPGLKVATSYRVSIY GVARGYRTPVLSAETSTASGLNDIFEAQKIEWHEGTHHHHH H 61 人類 TNC-A4 + avi 標記+his6標記 EDLPQLGDLAVSEVGWDGLRLNWTAADNAYEHFVIQVQEV NKVEAAQNLILPGSLRAVDIPGLEAATPYRVSIYGVIRGYRT PVLSAEASTASGLNDIFEAOKIEWHEGTHHHHHH 63 鼠類 TNC-A4 + avi 標記+ his6標記 ISEFGSLTEDLPQLGGLSVTEVSWDGLTLNWTTDDLAYKHF VVQVQEANNVEAAQNLTVPGSLRAVDIPGLKADTPYRVSIY GV1QGYRTPMLSTDVSTASGLND1FEAQKIEWHEGTHHHHH H 65 表6 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO 2B10;Vl GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCA GTTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGAmTGCCACCTAITACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 4 2B10(GS);Vl GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTAGAAATGAITTAGGCTCjGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCA GTTTGCAGAGTCMjCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCrTGCA GCCTGAAGAmTGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 6 2B10;Vh CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG 8 149654.doc -101 - 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 2F1];Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGTATACTCCCCCCACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 10 2F11(VI);Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGCiGTC AGTATACTCCCCCCACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 12 2F11;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTITAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACATGGCC GTATATTACTGTGCGAAATGGAGATGGATGATGITTGACT ACTCKjGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 14 2F11(MT);Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCC GTATATTACTGTGCGAAATGGAGATGGATGATGTITGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 16 3F2;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTrGT ATCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACACSGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTAITACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 18 3F2(YS); VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA 20

149654.doc •102· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇ID NO AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 3F2;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 22 3D9,Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGCTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 24 3D9: VH GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTrATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGAC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGGTGTT AGTACTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGTTGGCTGGGTCCTTTTGACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 26 2D9(TA);Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTrATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGGTGTT AGTACTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGTrGGCTGGGTCCTTTTGACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 28 4G8;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGmGCCGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCATTGGGGCCTC CACCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACGGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 30 4G8;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT 32 149654.doc -103- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQID NO TCACCTTrAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 4B3: VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAATTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGCGCCTA CATCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 34 4B3;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 36 4D6;Vl GAAATCGTGTrAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCCAGGGCGCCTC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATmGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 38 4D6; VH GAGGTGCAATTGTrGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATTTTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 40 2C6; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCACfGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGGCTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTAnACTGTCAGCAGGGTC AGCAGATTCCCCCTACGTrCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 42 2C6;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG 44 149654.doc -104- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEOID NO CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT CCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG GAGTGCTGGTTATACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGTTGGTTTGGGAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 5H5;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA ATCAGATTCCCCCTACGTTCGGTCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 46 5H5;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATACCATGAGCTGGGTCCGCCGGTC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGrG TGGTGGTAGGACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCG GTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT CTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTA TATTACTGTGCGAAAGGTTGGTnTACGCCmTGACTACT GGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 48 2C4;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCnTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGTAACTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCCTC CATTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTAGTGTCAGCAGGGTA ATCAGATTCCCCCTACGTTCGGTCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 50 2C4;Vh GAGGTGCAA1TGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTrAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTAmGCGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGTTGGTTTACGCCTnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 52 2D9;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTrGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA ATCAGATTCCCCCTACGTTCGGTCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 68 149654.doc -105- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 Π) NO 2D9;V„ GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGCGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGTTGGTTTACGCCTnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 70 4B8; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGmGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 72 4B8;Vh GAGGTGCAATTGITGGAGTCTCXjGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 74 7A1;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGCAGATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 76 7A1;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTAITAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAAGGTTGGTrTGGGAAmTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 78 13C2;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGAmTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGCTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA 80 149654.doc -106· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO AATCAAA 13C2;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAAGGTTGGCTGGGTCCTnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 82 13E8;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGArmGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC TGAATATrCCCTCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 84 13E8;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGITGGTrGGGTCCGTITGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 86 14C10;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCmGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGITAGCAGCAGCTACTrAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC ATATTATrCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 88 14C10;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTITAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAAGCTTGGATGGGGCCmTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 90 17A11;Vl GAAATCGTGTrAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGITCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTAITACTGTCAGCAGGGTC 92 149654.doc •107· 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQ Π) NO TGAATATTCCCTCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 17A11;Vh GAGGTGCAATrGTrGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGITATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTAITAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGTrGGTTGGGTCCGTnGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 94 19G1;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 122 19G1; VH GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCGATTATTAG TAGTGGTGGTCTCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAA1TCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGinTGGTGGTTTTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 124 20G8; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTG1TACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGG1TCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTrCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 126 20G8; VH GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGmTGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTGG GAGTGGTAGTCGTACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 128 4B9; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCnTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTrAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACITCACTCTCACCATCAGCAGACTG 130

149654.doc -108· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO GAGCCTGAAGAmTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGCjGGACCAAAGTGGA AATCAAA 4B9;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTGGT AGTGGTGCTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTrGGTGGTTTTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 132 5B8;Vl GAAATCGTGTrAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATrACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 134 5B8:Vh GAGGTGCAATTGTrGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCriTAGCAGTrATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTTGGGG TGGTGGTCGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACT ACTGCXjGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 136 5F1；Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 138 5F1；Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTAGT AGTGGGGCTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTrCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTITGGTGGTnTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 140 14B3;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTnTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACmGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG 142 149654.doc •109- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTAITACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 14B3; VH GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTITGGCT AGTGGTGCGATCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 144 16F1;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCriTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACITCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 146 16F1;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTATTGG TAGTGGTGGTATCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCrCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 148 16F8; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACITCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATriTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTrCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 150 16F8; VH GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCITGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTCTTGGT AGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGriTGGTGGmTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 152 03C9;Vl GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGCXjCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC 154 149654.doc •110· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 〇3C9;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTTTGCCATGAGCTGGGTCCGTCAGTC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTGGT AGTGGTAGTAACACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CC3GTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTITGGTGGTTTTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 156 02D7; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTrGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCACCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGCTA TTATGCTTCCTCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 158 02D7; VH GAGGTGCAArTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAAITCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATAITACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACT ACTGOGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGTCC 160 28H1;Vl GAAATCGTGITAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTrTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCCGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCATTGGGGCCTC CACCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 162 28H1;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCITTAGCAGTCATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTTGGGC TAGTGGGGAGCAATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCG GTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT CTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAC5GACACGGCCGTA TATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACTACT GGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 164 22A3; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA 166 149654.doc -Ill - 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQIDNO AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGAmTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTTCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 22A3;Vh GAGGTGCAATrGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAG1TATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTGGT AGTGGTAGTATCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTrCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGmTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 168 29B11; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTrACCAGTAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCAATGTGGGCTC CCGTAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTrCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTA TTATGCTrCCCCCGACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAA 170 29B11;Vh GAGGTGCAATrGTrGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTATTGGT AGTGGTGGTATCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTTTGGTGGTTTTAACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGT 172 23C10; VL GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCnTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCCGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCATTGGGGCCTC CACCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGGTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAA 174 23C10;Vh GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTCTGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTAC TAATGGTAATTATACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATTTTGACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTCXjTCACCGTCTCGAGT 176 2B10_C3B6;Vl GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC 178

149654.doc • 112· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO AGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCA GriTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGATTTTGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 2B10_C3B6;Vh CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGCTATCATCC CGATCCTTGGTATCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGG GCAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAG CCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCG CCGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTA CGGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 180 2B10_6A12;Vl GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTAGAAATGATITAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCA GTTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTrCAGCGGCAGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGATTTTGCCACCTArrACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 182 2B10_6A12; VH CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTATGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGTGATCATCC CTATCCTTGGTACCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATrACTGTGCGAGACTGTACGGTrACGCITACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 184 2B10_C3A6;Vl GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTCGTAATGTrTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATTCGTCCAGT TTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTGGA TCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAGC CTGAAGATTTrGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGTCT GCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGAT CAAG 186 2B10_C3A6; VH CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAACXjCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTCXKjTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTrCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC 188 149654.doc -113 - 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 2B10 D1A2 wt; ~vL GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGGATTCGTAATGmTAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGCmCA GCTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCITGCA GCCTGAAGATnTGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 190 2B10 D1A2 wt; VH CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTITGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 192 2B10 D1A2 VD; vL GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGGATTCGTAATGATITAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGCITACA GCTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGATnTGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTITGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAG 194 2B10 D1A2 VD; VH ~ CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTrCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTmGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 196 2B10_O7D8;Vl GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGAGCATTCGTAATGTTTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGTGTCCAGT TTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTGGA TCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAGC CTGAAGATnTGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGTCT GCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGAT CAAG 198 2B10_O7D8;Vh CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC 200

149654.doc •114· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO CTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCmTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 2B10_01F7; VL GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTCGTAATGTTTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGCGTCCAG TnTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTGG ATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAG CCTGAAGATnTGCCACCTATTACTGCCTGCAGAATGGTC TGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGA TCAAG 202 2B10_01F7; VH CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCmGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 204 2B10_6H10;Vl GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTCGTAATGTnTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCCAGGCTGCTACCAG TTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTrCAGCGGCGGTGG ATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAG CCTGAAGATmGCCACCTATTACTGCTTGCAGAATGGTC TGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGA TCAAG 206 2B10_6H10;Vh CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCmTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCA 208 MHLG1;Vh GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTCAAG CCTGGCGGGTCCCTGCGGCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACATTTAGCAACTATTGGATGAACTGGGTGCGGCAGGC TCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGGTGGCCGAGATCAGATT GAAATCCAATAACTTCGGAAGATATTACGCTGCAAGCGT GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCAGAGATGATTCCAAGAA CACGCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAAGACCGAGGA TACGGCCGTGTATTACTGTACCACATACGGCAACTACGTT GGGCACTACTTCGACCACTGGGGCCAAGGGACCACCGTC 258 149654.doc -115- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO ACCGTCTCCAGT KV9;Vl GATATCCAGTrGACCCAGTCTCCATCCITCCTGTCTGCATC TGTGGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAAGGCCAGTCA GAATGTGGATACTAACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGCAGGCACCTAGGCCTCTGATCTATTCGGCATCCTAC CGGTACACTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA TCCGGGACAGAGTTCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAAC CTGAAGATTTCGCAACTTACTACTGTCAACAGTACAATAG TTACCCTCTGACGTTCGGCGGAGGTACCAAGGTGGAGATC AAGCGTACG 260 MHLG;Vh GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTCCAG CCTGGCGGGTCCCTGCGGCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACATTTAGCAACTATTGGATGAACTGGGTGCGGCAGGC TCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGGTGGCCGAGATCAGATT GAAATCCAATAACTTCGGAAGATATTACGCTGCAAGCGT GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCAGAGATGATTCCAAGAA CACGCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAAGACCGAGGA TACGGCCGTGTATTACTGTACCACATACGGCAACTACGTT GGGCACTACTTCGACCACTGGGGCCAAGGGACCACCGTC ACCGTCTCCAGT 262 KV1;VL GATATCCAGTTGACCCAGTCrCCATCCTTCCTGTCTGCATCr GTXjGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAGGGCCAGTCAGAA TGTGGATACTAACTTAGCITGGTACCAGCAGAAGCCAGGGA AAGCACCTAAGCTCCTGATCTATrCGGCATCCTACCGTTACA CTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCCGGGACA GAGTrCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAACCTGAAGATTTC GCAACrrACTACTGTCAACAGTACAATAGTTACCCTCTGACG TTCGGCGGAGGTACCAAGGTGGAGATCAAGCGTACGGTG 270 KV7; VL GATATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTTCCTGTCTGCATC TGTGGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAAGGCCAGTCA GAATGTGGATACTAACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCACCTAAGCCTCTGATCTATTCGGCATCCTAC CGGTACACTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA TCCGGGACAGAG1TCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAAC CTGAAGATTTCGCAACTTACTACTGTCAACAGTACAATAG TTACCCTCTGACGTTCGGCGGAGGTACCAAGGTGGAGATC AAGCGTACGGTG 272

表7 構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO 人類FAP胞外域+ 聚離胺酸標記+ his6標記 CGCCCnCAAGAGTTCATAACTCTGAAGAAAATACAATG AGAGCACTCACACTGAAGGATATTTTAAATGGAACATnT CmTMMCATTTTTTCCAAACTGGATTTCAGGACAAGA ATATCTTCATCAATCTGCAGATAACAATATAGTACTTTAT AATATTGAAACAGGACAATCATATACCAmTGAGTAATA GAACCATGAAAAGTGTGAATGCTTCAAATrACGGCTTATC ACCTGATCGGCAATTTGTATATCTAGAAAGTGAnATOA AAGCTrTGGAGATACTCITACACAGCAACATAmCATCT ATGACCTTAGCAATGGAGAATTTGTAAGAGGAAATGAGC TTCCTCGTCCAAnCAGTATTTATGCTGGTCGCCTGTTGGG AGTAAAnAGCATATGTCTATCAAAACAATATCTATITGA 54 I49654.doc -116- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO AACAAAGACCAGGAGATCCACCTnTCAAATAACATTTA ATGGAAGAGAAAATAAAATATTTAATGGAATCCCAGACT GGGTTTATGAAGAGGAAATGCTTGCTACAAAATATGCTCT CTGGTGGTCTCCTAATGGAAAATmTGGCATATGCGGAA TTrAATGATACGGATATACCAGTTATTGCCTATTCCTATTA TGGCGATGAACAATATCCTAGAACAATAAATATTCCATAC CCAAAGGCTGGAGCTAAGAATCCCGTTGTrCGGATATTTA TTATCGATACCACTTACCCTGCGTATGTAGGTCCCCAGGA AGTGCCTGTTCCAGCAATGATAGCCTCAAGTGATTATTAT TTCAGTTGGCTCACGTGGGTTACTGATGAACGAGTATXnT TGCAGTGGCTAAAAAGAGTCCAGAATGTTTCGGTCCTGTC TATATGTGACTrCAGGGAAGACTGGCAGACATGGGATTG TCCAAAGACCCAGGAGCATATAGAAGAAAGCAGAACTGG ATGGGCTGGTGGATrCTTTGTITCAACACCAGmTCAGC TATGATGCCATTTCGTACTACAAAATATrTAGTGACAAGG ATGGCTACAAACATATTCACTATATCAAAGACACTGTGGA AAATGCTATTCAAATTACAAGTGOCAAGTGGGAGGCCAT AAATATATTCAGAGTAACACAGGATTCACTGTnTATTCT AGCAATGAATITGAAGAATACCCTGGAAGAAGAAACATC TACAGAATTAGCATTGGAAGCTATCCTCCAAGCAAGAAG TGTGTTACTrGCCATCTAAGGAAAGAAAGGTGCCAATATT ACACAGCAAGTTTCAGCGACTACGCCAAGTACTATGCACT TGTCTGCTACGGCCCAGGCATCCCCATTTCCACCCTTCAT GATGGACGCACTGATCAAGAAATTAAAATCCTGGAAGAA AACAAGGAATTCKjAAAATGCnTGAAAAATATCCAGCTG CCTAAAGAGGAAATTAAGAAACTTGAAGTAGATGAAATT ACTTTATGGTACAAGATGATTCTTCCTCCTCAATTTGACA GATCAAAGAAGTATCCCTTGCTAATTCAAGTGTATGGTGG TCCCTGCAGTCAGAGTGTAAGGTCTGTATTTGCTGTTAAT TGGATATCTTATCTTGCAAGTAAGGAAGGGATGGTCATTG CCTTGGTGGATGGTCGAGGAACAGCTTTCCAAGGTGACA AACTCCTCTATGCAGTGTATCGAAAGCTGGGTGTTrATGA AGTTGAAGACCAGATTACAGCTGTCAGAAAATTCATAGA AATGGGTTTCATTGATGAAAAAAGAATAGCCATATGGGG CTGGTCCTATGGAGGATACGTTrCATCACTGGCCCTrGCA TCTGGAACTGGTCTTTTCAAATGTGGTATAGCAGTGGCTC CAGTCTCCAGCTGGGAATATTACGCGTCTGTCTACACAGA GAGATTCATGGGTCTCCCAACAAAGGATGATAATCTTGA GCACTATAAGAATTCAACTGTGATGGCAAGAGCAGAATA TITCAGAAATGTAGACTATCTTCTCATCCACGGAACAGCA GATGATAATGTGCACTITCAAAACTCAGCACAGAITGCTA AAGCTCTGGTTAATGCACAAGTGGATTTCCAGGCAATGTG GTACTCTGACCAGAACCACGGCTTATCCGGCCTGTCCACG AACCACTTATACACCCACATGACCCACTTCCTAAAGCAGT GTTTCTCTITGTCAGACGGCAAAAAGAAAAAGAAAAAGG GCCACCACCATCACCATCAC 鼠類FAP胞外域+ 聚離胺酸標記+ his6標記 CGTCCCTCAAGAGTrTACAAACCTGAAGGAAACACAAAG AGAGCTCTTACCTTGAAGGATAmTAAATGGAACAITCT CATATAAAACATATTTTCCCAACTGGAT1TCAGAACAAGA ATATCTTCATCAATCTGAGGATGATAACATAGTAmTAT AATATTGAAACAAGAGAATCATATATCATnTGAGTAATA GCACCATGAAAAGTGTGAATGCTACAGATrATGGTITGTC ACCTGATCGGCAAmGTGTATCTAGAAAGTGATTATrCA 56 149654.doc -117- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQIDNO AAGCTCIGGCGATATTCATACACAGCGACATACTACATCT ACGACCTTCAGAATGGGGAATTTGTAAGAGGATACGAGC TCCCTCGTCCAATTCAGTATCTATGCTGGTCGCCTGTTGG GAGTAAATTAGCATATGTATATCAAAACAATATTTATITG aaacaaagaccaggagatccaccttttcaaataac™t ACTGGAAGAGAAAATAGAATATTTAATGGAATACCAGAC TGGGTTrATGAAGAGGAAATGCTTGCCACAAAATATGCTC TTTGGTGGTCTCCAGATCGAAMTTTTTGGCATATGTAGA ATTTAATGATrCAGATATACCAATTATTGCCTAITCTTATT ATGGTGATGGACAGTATCCTAGAACTATAAATATTCCATA TCCAAAGGCTGGGGCTAAGAATCCGGTTGTTCGTGTmT ATTGTTGACACCACCTACCCTCACCACGTGGGCCCAATGG AAGTGCCAGTTCCAGAAATGATAGCCTCAAGTGACTATTA TTTCAGCTGGCTCACATGGGTGTCCAGTGAACGAGTATGC TTGCAGTGGCTAAAAAGAGTGCAGAATGTCTCAGTCCTGT CTATATGTGATrTCAGGGAAGACTGGCATGCATGGGAAT GTCCAAAGAACCAGGAGCATGTAGAAGAAAGCAGAACA GGATGGGCTGGTGGATrcnTGTTTCGACACCAGCTnTA GCCAGGATGCCACTTCTrACTACAAAATATITAGCGACAA GGATGGTTACAAACATATTCACTACATCAAAGACACTGTG GAAAATGCTATTCAAATTACAAGTGGCAAGTGGGAGGCC ATATATATATrCCGCGTAACACAGGATTCACTGTnTATT CTAGCAATGAATTTGAAGGTTACCCTGGAAGAAGAAACA TCTACAGAATTAGCATTGGAAACTCTCCTCCGAGCAAGAA GTGTGTTACTTGCCATCTAAGGAAAGAAAGGTGCCAATAT TACACAGCAAGTnCAGCTACAAAGCCAAGTACTATGCA CTCGTCTGCTATGGCCCTGGCCTCCCCATITCCACCCTCCA TGATGGCCGCACAGACCAAGAAATACAAGTATTAGAAGA AAACAAAGAACTCXiAAAATTCTCTGAGAAATATCCAGCT GCCTAAAGTGGAGATTAAGAAGCTCAAAGACGGGGGACT GACmCTGGTACAAGATGATTCTGCCTCCTCAGTTTGAC AGATCAAAGAAGTACCCTTTGCTAATTCAAGTGTATGGTG GTCCTTGTAGCCAGAGTGTTAAGTCTGTGTTrGCTGTTAA TTGGATAACTTATCTCGCAAGTAAGGAGGGGATAGTCATT GCCCTGGTAGATGGTCGGGGCACTGCTTTCCAAGGTGACA AATTCCTGCATGCCGTGTATCGAAAACTGGGTGTATATGA AGTTGAGGACCAGCTCACAGCTGTCAGAAAATTCATAGA AATGGGTTTCATTGATGAAGAAAGAATAGCCATATGGGG CTGGTCCTACGGAGGTTATGTTTCATCCCTGGCCCTTGCA TCTGGAACTGGTCTTTTCAAATGTGGCATAGCAGTGGCTC CAGTCTCCAGCTGGGAATATTACGCATCTATCTACTCAGA GAGATTCATGGGCCTCCCAACAAAGGACGACAATCTCGA ACACTATAAAAATTCAACTGTGATGGCAAGAGCAGAATA TTTCAGAAATGTAGACTATCITCTCATCCACGGAACAGCA GATGATAATGTGCACTTTCAGAACTCAGCACAGATrGCTA AAGCTITGGTTAATGCACAAGTGGATrTCCAGGCGATGTG GTACTCTGACCAGAACCATGGTATATTATCTGGGCGCTCC CAGAATCATTTATATACCCACATGACGCACTTCCTCAAGC AATGCmTCnTATCAGACGGCAAAAAGAAAAAGAAAA AGGGCCACCACCATCACCATCAC 人類 TNC-A2+avi 標記+his6標記 GCGTCCACCGGGGAAACCCCGAACCTGGGCGAAGTGGTG GTGGCGGAAGTGGGTTGGGATGCGCTGAAACTGAACTGG ACCGCGCCGGAAGGCGCGTATGAATATmTTCATCCAGG 58

149654.doc -118· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO TGCAGGAAGCGGATACCGHGAAGCGGCGCAGAACCIGA CCGTTCCGGGCGGTCTGCGTAGCACCGATCTGCCGGGCCT GAAAGCGGCGACCCAHATACCAnACCATCCGTGGGGT GACCCAGGAmTAGCACCACCCCGCTGTCTGTGGAAGTG CTGACCGCTAGCGGCCTGAACGACATCTTCGAGGCTCAG AAAATCGAATGGCACGAAGGTACCCATCACCATCACCAC CAC 人類 TNC-A1 + avi 標記+ his6標記 GAACAAGCCCCTGAGCTGGAAAACCTCACCGTGACTGAG GTTCKjCTGGGATGGCCTCAGACTCAACTGGACCGCGGCT GACCAGGCCTATGAGCACnTATCAnCAGGTGCAGGAG GCCAACAAGGTGGAGGCAGCTCGGAACCTCACCGTGCCT GGCAGCCnCGGGCTGTGGACATACCGGGCCTCAAGGCT GCTACGCCnATACAGTCTCCATaATGGGGTGATCCAGG GCTATAGAACACCAGTGCTCTCTGCTGAGGCCTCCACAGC TAGCGGCCTGAACGACATCnCGAGGCTCAGAAAATCGA ATGGCACGAAGGTACCCATCACCATCACCACCAC 60 鼠類 TNC-Al+avi 標記+his6標記 AnTCAGAAnCGGATCCAGCACCGAAGAAGTGCCGAGC CTGGAAAACCTGACCGTGACCGAAGCGGGCTGGGATGGC CTGCGTCTGAACTGGACCGCGGATGATCTGGCCTATGAAT AmTGTGATCCAGGTGCAGGAAGCGAACAACGnGAAA CCGCGCATAACTTTACCGTGCCGGGCAATCTGCGTGCGGC GGATAnCCGGGCCTGAAAGTGGCGACCAGCTATCGTGT GAGCATTTATGGCGTGGCGCGTGGCTATCGTACCCCGGn CTGAGCGCGGAAACCAGCACCGCTAGCGGCCTGAACGAC ATCnCGAGGCTCAGAAAATCGAATGGCACGAAGGTACC CATCACCATCACCACCAC 62 \ 人類 TNC-A4 + avi 標記+ his6標記 GAAGATCTGCCGCAGCTGGGCGATCTGGCCGTGAGCGAA GTGGGCTGGGATGGCCTGCGTaGAACTGGACCGCGGCG GATAACGCGTATGAACATTTTGTGAnCAGGTGCAGGAA GTGAACAAAGTTGAAGCGGCGCAGAACCTGACCCTGCCG GGCAGCCTGCGTGCGGTGGATAnCCGGGCCTGGAAGCG GCGACCCCGTATCGTGTGAGCATCTATGGCGTGATTCGTG GCTATCGTACCCCGGTTCTGAGCGCGGAAGCGAGCACCG CTAGCGGCCTGAACGACATCTTCGAGGCTCAGAAAATCG AATGGCACGAAGGTACCCATCACCATCACCACCAC 64 鼠類 TNC-A4 + avi 標記+ his6標έ己 AmCAGAATTCGGATCCCTGACCGAAGATCTGCCGCAGC TGGGCGGTCTGAGCGTGACCGAAGTGAGCTGGGATGGCC TGACCCTGAACTGGACCACCGATGATCTGGCCTATAAACA mTGTGGTGCAGGTGCAGGAAGCGAACAACGnGAAGC GGCGCAGAACCTGACCGnCCGGGTAGCCTGCGTGCGGT GGATATTCCGGGCCTGAAAGCGGATACCCCGTATCGTGTG AGCATTTATGGCGTGATTCAGGGCTATCGTACCCCGATGC TGTCTACCGATGTGAGCACCGCTAGCGGCCTGAACGACAT CnCGAGGCTCAGAAAATCGAATGGCACGAAGGTACCCA TCACCATCACCACCAC 66 149654.doc -119- 201119672 表8 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO 源自L19單株抗體之Fab重鏈·源自 L19單株抗體之 IL2-Fab重鍵的 C125A變異體 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTrAGCAGTTTTTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTCCGGT AGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATnTGACTACTG GGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCAC CAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAG AGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTC AAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAAC TCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTG TCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGT GACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATC TGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGAT AAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCGGAGGA CK3GAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGAGCACCT ACTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAACTGGAG CATTTACTGCTGGATTrACAGATGArnTGAATGGAATTA ATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGCTCACATT TAAGTTTTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACTGAAACA TCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCTGGAGGA AGTGCTAAATTTAGCTCAAAGCAAAAACTTTCACTTAAGA CCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAATAGTTCTGG AACTAAAGGGATCTGAAACAACATTCATGTGTGAATATG CTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATTrCTGAACAGAT GGATTACCTITGCCCAAAGCATCATCTCAACACTGACTrC CGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGG CGGAGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGT ACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCT GGATTCACCTTTAGCAGTmTCGATGAGCTGGGTCCGCC AGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTC CGGTAGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAA GGGCCGGTrCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACAC GCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACAC GGCCGTATATTACTGTGCGAAACCGTTTCCGTAmTGAC TACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCITGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCITGTGACTGA 108 源自L19單株抗體之Fab輕鏈 GAAATrGTGTrGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATTATGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGACGG GTCGTATTCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGG AAATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTT CCCGCCATCTGATGAGCAG1TGAAATCTGGAACTGCCTCT 109

149654.doc -120- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO GTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCA AAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTA ACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACA GCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAG CAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCA CCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCA ACAGGGGAGAGTGTTAG 源自L19單株抗體之scFv-8個胺基酸連接子_BL2之 C125A變異體 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCAGTTnTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTAinTCCGGT AGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATnTGACTACTG GGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTAGCGGCGG GAGCGGCGGGGCTAGCGAAATTGTGTTGACGCAGTCTCC AGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTC TCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAG CCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CATCTATTATGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGAC AGGITCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCA CCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGAmTGCAGTGTATTA CTGTCAGCAGACGGGTCGTATTCCTCCGACGTTCGGCCAA GGGACCAAGGTGGAAATCTCCGTGCTGTCTTCCTCATCGG GTAGTAGCTCTTCCGGCTCATCGTCCTCCGGAGCACCTAC TTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAACTGGAGCA TTTACTGCTGGATnTACAGATGATnTGAATGGAATTAAT AATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGCTCACATITA AGTTTTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACTGAAACATC TTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCTGGAGGAAG TGCTAAATTTAGCTCAAAGCAAAAACTTTCACTrAAGACC CAGGGACTrAATCAGCAATATCAACGTAATAGTTCTGGA ACTAAAGGGATCTGAAACAACATrCATGTGTGAATATGCT GATGAGACAGCAACCATTGTAGAATTTCTGAACAGATGG ATTACCnTGCCCAAAGCATCATCTCAACACTGACTTGA no Π6-微型雙功能抗體-IL2 DNA GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCCGGTATGGTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTAnAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGCGCATAATGCTnTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTGTCGAGTGCTAGCG GCGGATCGTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGT GGCCTTGGGACAGACAGTCAGGATCACATGCCAAGGAGA CAGCCTCAGAAGCTATTATGCAAGCTGGTACCAGCAGAA GCCAGGACACjGCCCCTGTACTTGTCATCTATGGTAAAAAC AACCGGCCCTCAGGGATCCCAGACCGATTCTCTGGCTCCA GCTCAGGAAACACAGCTTCCTTGACCATCACTGGGGCTCA GGCGGAAGATGAGGCTGACTATTACTGTAACTCCTCTGTr TATACTATGCCGCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAG 111 149654.doc -121 - 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO CTGACCGTCCTAGGCTCTTCCTCATCGGGTAGTAGCTCTr CCGGCTCATCGTCCTCCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTAC AAAGAAAACACAGCTACAACTGGAGCATITACTGCTGGA nTACAGATGATnTGAATGGAATTAATAAmCAAGAAT CCCAAACTCACCAGGATGCTCACATlTAAGTnTACATGC CCAAGAAGGCCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAG AAGAAGAACTCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATITAG CTCAAAGCAAAAACTTTCACTTAAGACCCAGGGACTTAAT CAGCAATATCAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATC TGAAACAACATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGC AACCATTGTAGAATTTCTGAACAGATGGATTACCnTGCC CAAAGCATCATCTCAACACTGACTTGA scFv-IL2-scFv (F16, DNA) GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGC1TGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCCGGTATGGTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATrCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGCGCATAATGCmTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTGTCGAGAGGTGGAG GCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGT CTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGTGGCCTTGGG ACAGACAGTCAGGATCACATGCCAAGGAGACAGCCTCAG AAGCTATTATGCAAGCTGGTACCAGCAGAAGCCAGGACA GGCCCCTGTACTTGTCATCTATGGTAAAAACAACCGGCCC TCAGGGATCCCAGACCGATTCTCTGGCTCCAGCTCAGGAA ACACAGCTTCCTTGACCATCACTGGGGCTCAGGCGGAAG ATGAGGCTGACTATTACTGTAACTCCTCTGTTTATACTAT GCCGCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGT CCTAGGCTCTTCCTCATCGGGTAGTAGCTCTTCCGGCTCA TCGTCCTCCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAA CACAGCTACAACTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAGAT GATnTGAATGGAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTC ACCAGGATGCTCACATTTAAGTnTACATGCCCAAGAAGG CCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAAC TCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATTTAGCTCAAAGCA AAAACnTCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATAT CAACGTAATAGTTCITGGAACTAAAGGGATCTGAAACAAC ATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCA1TGTA GAATTTCTGAACAGATGGATTACCTTTGCCCAAAGCATCA TCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAG GTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGTCTGAGCTCACTCAGGA CCCTGCTGTGTCTGTGGCCTTGGGACAGACAGTCAGGATC ACATGCCAAGGAGACAGCCTCAGAAGCTATTATGCAAGC TGGTACCAGCAGAAGCCAGGACAGGCCCCTGTACTTGTC ATCTATGGTAAAAACAACCGGCCCTCAGGGATCCCAGAC CGATrCTCTGGCTCCAGCTCAGGAAACACAGCTTCCTTGA CCATCACTGGGGCTCAGGCGGAAGATGAGGCTGACTAn ACTGTAACTCCTCTGTTTATACTATGCCGCCCGTGGTATTC GGCGGAGGGACCAAGCTTACCGTACTAGGCTCAGGAGGC GGTTCAGGCGGAGGTTCTGGCGGCGGTAGCGGATCGGAG GTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCT 112

149654.doc -122· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO GGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCA CCTTTAGCCGGTATGGTATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCC AGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAG TGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCG GTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTAT CTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTA TATTACTGTGCGAAAGCGCATAATGCmTGACTACTGGG GCCAGGGAACCCTGGTCACCGTGTCGTGA Fab-IL2-Fab (F16，重鍵細胞因子融合構築體， DNA) GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTCiGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCCGGTATGGTATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGCGCATAATGCTTTTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTGTCGAGTGCTAGCA CCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAA GAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAA CTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGG TGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACAT CTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGA TAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCTTCCTCATCG GGTAGTAGCTCTTCCGGCTCATCGTCCTCCGGAGCACCTA CTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAACTGGAGC ATTTACTGCTGGATTrACAGATGAmTGAATGGAATTAA TAATrACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGCTCACATIT AAGTnTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACTGAAACAT CTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCTGGAGGAA GTGCTAAATTTAGCTCAAAGCAAAAACTTTCACTTAAGAC CCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAATAGTTCTGGA ACTAAAGGGATCTGAAACAACATTCATGTGTGAATATGCT GATGAGACAGCAACCATrGTAGAATTTCTGAACAGATGG ATTACCmGCCCAAAGCATCATCTCAACACTGACTTCCG GCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCG GAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGG ATrCACCTTTAGCCGGTATGGTATGAGCTGGGTCCGCCAG GCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGT GGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAG GGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACG CTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACG GCCGTATATTACTGTGCGAAAGCGCATAATGCTnTGACT ACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTGTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG 113 149654.doc -123 - 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO TGGACAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA F16，輕鏈，DNA TCTTCTGAGCTGACTCAGGACCCTGCTGTGTCTGTGGCCT TGGGACAGACAGTCAGGATCACATGCCAAGGAGACAGCC TCAGAAGCTATTATGCAAGCTGGTACCAGCAGAAGCCAG GACAGGCCCCTGTACTTGTCATCTATGGTAAAAACAACCG GCCCTCAGGGATCCCAGACCGATTCTCTGGCTCCAGCTCA GGAAACACAGCTTCCTTGACCATCACTGGGGCTCAGGCG GAAGATGAGGCTGACTATrACTGTAACTCCTCTGTTTATA CTATGCCGCCCGTGGTATTCCKjCGGAGGGACCAAGCTGA CCGTCCTAGGTCAACCCAAGGCTGCCCCCAGCGTGACCCT GTTCCCCCCCAGCAGCGAGGAACTGCAGGCCAACAAGGC CACCCTGGTCTGCCTGATCAGCGACTTCTACCCAGGCGCC GTGACCGTGGCCTGGAAGGCCGACAGCAGCCCCGTGAAG GCCGGCGTGGAGACCACCACCCCCAGCAAGCAGAGCAAC AACAAGTACGCCGCCAGCAGCTACCTGAGCCTGACCCCC GAGCAGTGGAAGAGCCACAGGTCCTACAGCTGCCAGGTG ACCCACGAGGGCAGCACCGTGGAGAAAACCGTGGCCCCC ACCGAGTGCAGCTGA 114 IL2R-p-Fc (孔）融合蛋白， DNA ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGCCTCCTGC TGCTCTGGTTCCCAGGTGCCAGGTGTGCGGTGAATGGCAC TTCCCAGTTCACATGCTTCTACAACTCGAGAGCCAACATC TCCTGTGTCTGGAGCCAAGATGGGGCTCTGCAGGACACTT CCTGCCAAGTCCATGCCTGGCCGGACAGACGGCGGTGGA ACCAAACCTGTGAGCTGCTCCCCGTGAGTCAAGCATCCTG GGCCTGCAACCTGATCCTCGGAGCCCCAGATTCTCAGAAA CTGACCACAGTTGACATCGTCACCCTGAGGGTGCTGTGCC GTGAGGGGGTGCGATGGAGGGTGATGGCCATCCAGGACT TCAAGCCCTTTGAGAACCTTCGCCTGATGGCCCCCATCTC CCTCCAAGTTGTCCACGTGGAGACCCACAGATGCAACAT AAGCTGGGAAATCTCCCAAGCCTCCCACTACTnTGAAAGA CACCTGGAGTTCGAGGCCCGGACGCTGTCCCCAGGCCAC ACCTGGGAGGAGGCCCCCCTGCTGACTCTCAAGCAGAAG CAGGAATGGATCTGCCTGGAGACGCTCACCCCAGACACC CAGTATGAGTTTCAGGTGCGGGTCAAGCCTCTGCAAGGC GAGTTCACGACCTGGAGCCCCTGGAGCCAGCCCCTGGCCT TCAGAACAAAGCCTGCAGCCCTTGGGAAGGACACCGGAG CTCAGGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCAC CTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCC AAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGA GGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCC TGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGT GCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAA CAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCAC CAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTC TCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCT CCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTGCA CCCTGCCCCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAACCAGG TCAGCCTCTCGTGCGCAGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGA CATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAA CAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGG CTCCTTCTTCCTCGTGAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGC AGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGC ATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCT 115 149654.doc -124- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO CCCTGTCTCCGGGTAAATGA IL2R-y-Fc (结），DNA ATGTrGAAGCCATCATTACCATTCACATCCCTCTTAITCCT GCAGCTGCCCCTGCTGGGAGTGGGGCTGAACACGACAAT TCTGACGCCCAATGGGAATGAAGACACCACAGCTGATTT CTTCCTGACCACTATGCCCACTGACTCCCTCAGTGTn'CCA CTCTGCCCCTCCCAGAGGTrCAGTGTTTTGTGTTCAATGTC GAGTACATGAATTGCACTTGGAACAGCAGCTCTGAGCCC CAGCCTACCAACCTCACTCTGCATTATTGGTACAAGAACT CGGATAATGATAAAGTCCAGAAGTGCAGCCACTATCTATT CTCTGAAGAAATCACTTCTGGCTGTCAGTTGCAAAAAAAG GAGATCCACCTCTACCAAACATTTGTTGTTCAGCTCCAGG ACCCACGGGAACCCAGGAGACAGGCCACACAGATGCTAA AACTGCAGAATCTGGTGATCCCCTGGGCTCCAGAGAACCT AACACTTCACAAACTGAGTGAATCCCAGCTAGAACTGAA CTGGAACAACAGATrCTTGAACCACTGriTGGAGCACTTG GTGCAGTACCGGACTGACTGGGACCACAGCTGGACTGAA CAATCAGTGGATrATAGACATAAGTTCTCCTTGCCTAGTG TGGATGGGCAGAAACGCTACACGTTTCGTGTrCGGAGCC GCTTTAACCCACTCTGTGGAAGTGCTCAGCATTGGAGTGA ATGGAGCCACCCAATCCACTGGGGGAGCAATACTTCAAA AGAGAATCCTTTCCTGTTTGCATTGGAAGCCGGAGCTCAG GACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAA CTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAAC CCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCAC ATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGT CAAGTTCAACTGGTACGIXiGACGGCGTGGAGGTGCATAA TGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCAC GTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGAC TGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAAC AAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAA GCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTG CCCCCATGCCGGGATGAGCTGACCAAGAACCAGGTCAGC CTGTGGTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCG CCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACT ACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTT CTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTG GCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAG GCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGT CTCCGGGTAAATGA 116 Fab-IL12-Fab L19抗體，鼠類 scIL12 > DNA GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCAGTTTTrCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTCCGGT AGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATrACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATTTrGACTACTG GGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCAC CAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAG AGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTC AAGGACTACITCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAAC TCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTG TCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGT Π7 149654.doc -125- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO GACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATC TGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGAT AAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCGGAGGA GGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGGGGCGGAGCCAT GTGGGAGCTGGAAAAGGACGTGTACGTGGTGGAGGTGGA CTGGACCCCCGACGCCCCTGGCGAGACAGTGAACCTGAC CTGCGACACCCCCGAAGAGGACGACATCACCTGGACCAG CGACCAGCGGCACGGCGTGATCGGCAGCGGCAAGACCCT GACCATCACCGTGAAAGAGTITCTGGACGCCGGCCAGTA CACCTGCCACAAGGGCGGCGAGACACTGAGCCACAGCCA CCTGCTGCTGCACAAGAAAGAGAACGGCATCTGGTCCAC CGAGATCCTGAAGAACTTCAAGAACAAGACCITCCTGAA GTGCGAGGCCCCCAACTACAGCGGCCGGTTCACCTGCAG CTGGCTGGTGCAGCGGAACATGGACCTGAAGTTCAACAT CAAGAGCAGCAGCAGCCCCCCTGACAGCAGGGCCGTGAC CTGCGGCATGGCCAGCCTGAGCGCCGAGAAGGTGACCCT GGACCAGAGGGACTACGAGAAGTACAGCGTGAGCTGCCA GGAAGATGTCACCTGCCCCACCGCCGAGGAAACCCTGCC CATCGAGCTGGCCCTGGAAGCCCGGCAGCAGAACAAGTA CGAGAACTACTCTACCAGCTTCTTCATCCGGGACATCATC AAGCCCGACCCCCCCAAGAACCTGCAGATGAAGCCCCTG AAGAACAGCCAGGTGGAGGTGTCCTGGGAGTACCCTGAC AGCTGGTCCACCCCCAGAAGCTACTTCAGCCTGAAG1TCT TCGTGAGAATCCAGCGGAAGAAAGAAAAGATGAAAGAG ACAGAGGAAGGCTGCAACCAGAAGGGCGCCTTCTTCGTC GAGAAAACCAGCACCGAGGTGCAGTGCAAGGGCGGCAA CGTGTGCGTGCAGGCCCAGGACCGGTACTACAACAGCAG CTGCAGCAAGTGGGCCTGCGTGCCCTGCAGAGTGCGGTCT GGCGGCGACGGCTCTGGCGGCGGAGGAAGCGGCGGAGG GGGCAGCAGAGTGATCCCCGTGAGCGGCCCTGCCCGGTG CCTGAGCCAGAGCCGGAACCTGCTGAAAACCACCGACGA CATGGTGAAAACCGCCAGAGAGAAGCTGAAGCACTACAG CTGCACAGCCGAGGACATCGACCACGAGGACATCACCCG GGACCAGACCAGCACCCTGAAAACCTGCCTGCCCCTGGA ACTGCACAAAAACGAGAGCTGCCTGGCCACCCGGGAGAC AAGCAGCACCACCCGGGGCAGCTGCCTGCCTCCCCAGAA AACCTCCCTGATGATGACCCTGTGCCTGGGCAGCATCTAC GAGGACCTGAAGATGTACCAGACCGAGTTCCAGGCCATC AACGCCGCCCTGCAGAACCACAATCACCAGCAGATCATC CTGGACAAGGGCATGCTGGTCGCCATCGACGAGCTGATG CAGAGCCTGAACCACAACGGCGAAACCCTGCGGCAGAAA CCCCCCGTGGGCGAGGCCGACCCCTACCGGGTGAAGATG AAGCTGTGCATCCTGCTGCACGCCTTCAGCACCCGGGTGG TGACCATCAACCGGGTGATGGGCTACCTGTCCTCTGCCGG GGGAGGGGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGG AGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACA GCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGA TrCACCTTTAGCAGTmTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGG CTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTTCCGG TAGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATTTTGACTACT -126- 149654.doc 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCA CCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAA GAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAA CTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGG TGACCGTGCCCTCCAGCAGCITGGGCACCCAGACCTACAT CTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGA TAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA Fab-IL12-FabL19 抗體，人類 scIL12 > DNA GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCAGTTnTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGAGG TAGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAACCGTITCCGTAmTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCA CCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAA GAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAA CTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGG TGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACAT CTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGA TAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCGGAGG AGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGGGGCGGAATCTG GGAGCTGAAGAAAGACGTGTACGTGGTGGAGCTGGACTG GTATCCCGACGCCCCTGGCGAGATGGTGGTGCTGACCTGC GACACCCCCGAAGAGGACGGCATCACCTGGACCCTGGAC CAGAGCAGCGAGGTGCTGGGCAGCGGCAAGACCCTGACC ATCCAGGTGAAAGAGTTCGGCGACGCCGGCCAGTACACC TGCCACAAGGGCGGCGAAGTGCTGTCCCACAGCCTGCTG CTGCTGCACAAGAAAGAGGATGGCATCTGGTCCACCGAC ATCCTGAAGGACCAGAAAGAGCCCAAGAACAAGACCTTC CTGCGGTGCGAGGCCAAGAACTACAGCGGCCGGTTCACC TGTTGGTGGCTGACCACCATCAGCACCGACCTGACCTTCA GCGTGAAGAGCAGCCGGGGCAGCAGCGACCCTCAGGGCG IXjACCTGCGGAGCCGCCACCCTGAGCGCCGAGAGAGTGC GGGGCGACAACAAAGAGTACGAGTACAGCGTCGAGTGCC AGGAAGATAGCGCCTGCCCTGCCGCCGAGGAAAGCCTGC CCATCGAGGTGATGGTGGACGCCGTGCACAAGCTGAAGT ACGAGAACTACACCAGCAGCTmTCATCCGGGACATCAT CAAGCCCGACCCCCCCAAGAACCTGCAGCTGAAGCCCCT GAAGAACAGCCGGCAGGTGGAGGTGTCCTGGGAGTACCC TGACACCTGGTCCACCCCCCACAGCTACTTCAGCCTGACA TTCTGTGTGCAGGTGCAGGGCAAGAGCAAGCGGGAGAAG AAAGACCGGGTGTTCACCGACAAGACCAGCGCCACCGTG ATCTGCCGGAAGAACGCCAGCATCAGCGTGCGGGCCCAG GACCGGTACTACAGCAGCTCCTGGTCCGAGTGGGCCAGC GTGCCTTGCAGCGGCGGAGGGGGCTCTGGCC5GCGGAGGA TCTGGGGGAGGGGGCAGCCGGAACCTGCCCGTGGCCACC CCCGACCCCGGCATGTTCCCCTGCCTGCACCACAGCCAGA 118 149654.doc •127- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO ACCTGCTGCGGGCCGTGAGCAACATGCTGCAGAAGGCCC GGCAGACCCTGGAATTCTACCCCTGCACCAGCGAGGAAA TCGACCACGAGGACATCACCAAGGATAAGACCAGCACCG TGGAGGCCTGCCTGCCCCTGGAACTGACCAAGAACGAGA GCTGCCTGAACAGCCGGGAGACAAGCTTCATCACCAACG GCAGCTGCCTGGCCAGCAGAAAGACCAGCTTCATGATGG CCCTGTGCCTGAGCAGCATCTACGAGGACCTGAAGATGT ACCAGGTGGAGTTCAAGACCATGAACGCCAAGCTGCTGA TGGACCCCAAGCGGCAGATCTTCCTGGATCAGAACATGCT GGCCGTGATCGACGAGCTGATGCAGGCCCTGAACTTCAA CAGCGAGACAGTGCCCCAGAAGTCCAGCCTGGAAGAGCC CGACTTCTACAAGACCAAGATCAAGCTGTGCATCCTGCTG CACGCCTTCAGAATCCGGGCCGTGACCATCGACCGGGTG ATGAGCTACCTGAACGCCAGCGGAGGGGGGGGATCCGGC GGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAGAGGTGCAGCTGTTG GAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTG AGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCnTAGCAGTr TITCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGC TGGAGTGGGTCTCATCTATTAGAGGTAGTrCGGGTACCAC ATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCC AGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAAC AGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCG AAACCGTTrCCGTATnTGACTACTGGGGCCAGGGAACCC TGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGT CTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGC ACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCG AACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCA GCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGG ACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGC AGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCAC AAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCC AAATCTTGTGACTGA Fab-GMCSF-Fab LI9抗體，人類 GM-CSF，DNA GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCnTAGCAGTmTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGAGG TAGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAACCGTITCCGTATnTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCA CCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAA GAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAA CTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGG TGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGCKjCACCCAGACCTACAT CTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGA TAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCGGAGG AGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGAGCACC CGCCCGCTCGCCCAGCCCCAGCACGCAGCCCTGGGAGCA TGTGAATGCCATCCAGGAGGCCCGGCGTCTCCTGAACCTG AGTAGAGACACTGCTGCTGAGATGAATGAAACAGTAGAA 119

149654.doc -128- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO GTCATCTCAGAAATGTTTGACCTCCAGGAGCCGACCTGCC TACAGACCCGCCTGGAGCTGTACAAGCAGGGCCTGCGGG GCAGCCTCACCAAGCTCAAGGGCCCCTTGACCATGATGG CCAGCCACTACAAGCAGCACTGCCCTCCAACCCCGGAAA ΟΤΤΟΟΤΟΤΟΟΑΑΟΟΟΑΟΑΤΤΑΤΟΑΟαΤΓΟΑΑΑΟΤΓΤΟΑΑ AGAGAACCTGAAGGACTTTCTGCTTGTCATCCCCTITGAC TGCTGGGAGCCAGTCCAGGAGTCCGGCGGAGGAGGATCC GGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAGAGGTGCAGCTG TTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCC CTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCA GTmTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGG GGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGAGGTAGTTCGGGTAC CACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATC TCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATG AACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGT GCGAAACCGTTTCCGTAmTGACTACTGGGGCCAGGGAA CCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATC GGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGG GGCACAGCCKjCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCC CCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGA CCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTC AGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCC AGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAAT CACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAG CCCAAATCTTGTGACTGA Fab-IFNa2-Fab» L19抗體，DNA GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAT TCACCTTTAGCAGTmTCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTAITAGAGG TAGTTCGGGTACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAACCGTTTCCGTATnTGACTACT GGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCA CCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAA GAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAA CTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCT GTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGG TGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACAT CTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGA TAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCGGAGG AGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGGGGCGGATGCG ACCTGCCCCAGACCCACAGCCTGGGCAACAGACGGGCCC TGATCCTGCTGGCCCAGATGCGGCGGATCAGCCCCTTCAG CTGCCTGAAGGACCGGCACGACTTCGGCTTCCCCCAGGA AGAGTTCGACGGCAACCAGTTCCAGAAGGCCCAGGCCAT CAGCGTGCTGCACGAGATGATCCAGCAGACCTTCAACCT GTTCAGCACCAAGGACAGCAGCGCCGCCTGGGACGAGAG CCTGCTGGAAAAGTTCTACACCGAGCTGTACCAGCAGCTG AACGACCTGGAAGCCTGCGTGATCCAGGAAGTGGGCGTC GAGGAAACCCCCCTGATGAACGTGGACAGCATCCTGGCC GTGAAGAAGTACTTCCAGCGGATCACCCTGTACCTGACCG 120 149654.doc -129- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQIDNO AGAAGAAGTATAGCCCCTGCGCCTGGGAGGTGGTGCGGG CCGAGATCATGCGGAGCTTCAGCCTGAGCACCAACCTGC AGGAACGGCTGCGGCGGAAAGAGAGCGGCGGAGGGGGA TCCGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAGAGGTGCAG CTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGG TCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTITA GCAGTTmCGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAA GGGGCTGGAGTGGGTCTCATCTATTAGAGGTAGTTCGGGT ACCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAA ATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTAC TGTGCGAAACCGTTTCCGTATnTGACTACTGGGGCCAGG GAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAGCACCAAGGGCC CATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTC TGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTA CTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCC CTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGT CCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCC CTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTG AATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTT GAGCCCAAATCTTGTGACTGA 3F2 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAAITGTrGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATAITACTGTGCGAAAGGGTGGTrrGGTGGTnTAACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCG GAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGA GCACCTACTTCAAG1TCTACAAAGAAAACACAGCTACAA CTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAGATGATnTGAATG GAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGC TCACATTTAAGTITTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACT GAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCT GGAGGAAGTGCTAAATITAGCTCAAAGCAAAAACTTTCA CTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAAT AGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAACATrCATGTGT GAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATTTCTGA ACAGATGGATTACCTTTGCCCAAAGCATCATCTCAACACT GACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGG CGGTGGCGGAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGG CTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA GCCTCCGGATTCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGG 210 149654.doc -130- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ1D NO TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAG CTATrAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTC CGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAA GAACACGCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGTITGGT CjGTnTAACTACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCT CGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGC ACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCT C5GGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCA CACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCC CTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA CCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCA ACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTG ACTGA 4G8 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTrGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGITGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCG GAGGAGGGAGCGGCCKjAGGTGGCTGCCKjAGGTGGCGGA GCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAA CTGGAGCATITACTGCTGGAmACAGATGATnTGAATG GAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGC TCACATTrAAGTTTTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACT GAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCT GGAGGAAGTGCTAAATrTAGCTCAAAGCAAAAACinTCA CTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAAT AGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAACATTCATGTGT GAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATITCTGA ACAGATGGATTACCTTrGCCCAAAGCATCATCTCAACACT GACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGG CGGTGGCGGAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGO CTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA GCCTCCGGATTCACCTTTAGCAGmTGCCATGAGCTGGG TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAG CTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTC CGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAA GAACACGCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGG TAAmTGACTACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTC 212 149654.doc -131 · i： 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO TCGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGG CACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCT GGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCA CACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCC CTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA CCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCA ACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTG ACTGA 3D9 Fab-IL2.Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTCCGCCAGAC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTGGTGTr AGTACTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGC CGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGT ATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCG TATATTACTGTGCGAAAGGTrGGCTGGGTCCTnTGACTA CTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTAG CACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCC AAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGG AACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCG GCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCG TGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTA CATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGT GGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTrGTGACTCCGGCGG AGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGAG CACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAACT GGAGCATTTACTGCTGGATTTACAGATGATTTTGAATGGA ATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGCTCA CATTTAAGTnTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACTGA AACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCTGG AGGAAGTGCTAAATTTAGCTCAAAGCAAAAACTTTCACTT AAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAATAGT TCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAACATTCATGTGTGA ATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATITCTGAAC AGATGGATTACCTTTGCCCAAAGCATCATCTCAACACTGA CTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGOAGGTGGCTCTGGCG GTGGCGGAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCT TGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGC CTCCGGATTCACCnTAGCAGTTATGCTATGAGCTGGGTC CGCCAGACTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCT ATTGGTGTTAGTACTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCG TGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAAITCCAAGA ACACGCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGG ACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGGTTGGCTGGGTCC mTGACTACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCG AGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCAC CCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGG GCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGT GTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACAC CTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACC 214 149654.doc 132· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO CAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAAC ACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGAC TGA 2F11 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCC GTATATTACTGTGCGAAATGGAGATGGATGATGTTTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCG GAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGA GCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAA CTGGAGCATrTACTGCTGGATTTACAGATGAmTGAATG GAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGC TCACATTTAAGTTTTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACT GAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCT GGAGGAAGTGCTAAATITAGCTCAAAGCAAAAACnTCA CTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAAT AGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAACATrCATGTGT GAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATITCTGA ACAGATGGATTACCnTGCCCAAAGCATCATCTCAACACT GACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGG CGGTGGCGGAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGG CTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA GCCTCCGGATTCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGG TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAG CTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTC CGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAA GAACACGCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACCGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGAGATGGAT GATGTTTGACTACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTC TCGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGG CACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCT GGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCA CACCTrCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCC CTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA CCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCA ACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTG ACTGA 216 GAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAG CCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACCnTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC 218 149654.doc •133· 201119672 聚核苷酸序列 SEQ ID NO 4B3 Fab-EL2-Fab (重鍵細胞因子融合構築體） TCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATOGTGG TAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTG TATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCC GTATATrACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGGTAATnTGACT ACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCG GAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGTGGCGGA GCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAA CTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAGATGATnTGAATG GAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGC TCACATTTAAGmTACATGCCCAAGAAGGCCACAGAACT GAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAACTCAAACCTCT GGAGGAAGTGCTAAAinTAGCTCAAAGCAAAAACTITCA CTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATATCAACGTAAT AGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAACATTCATGTGT GAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATnCTGA ACAGATGGATTACCnTGCCCAAAGCATCATCTCAACACT GACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGG CGGTGGCGGAGAGGTGCAATTGTTGGAGTCTGGGGGAGG CTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCA GCCTCCGGATTCACCTTTAGCAGTTATGCCATGAGCTGGG TCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAG CTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTC CGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAA GAACACGCTGTATCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGA GGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGGGTGGCTGGG TAATmGACTACTGGGGCCAAGGAACCCTGGTCACCGTC TCGAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGG CACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCT GGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGAC GGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCA CACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCC CTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA CCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCA ACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTG ACTGA 4G8Fab-IL]2-Fab (鼠類IL-12 ;重鍵細胞因子融合構築體） GAGGTGCAATTGCTGGAAAGCGGCGGAGGACTGGTGCAG CCTGGCGGCAGCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGCGGC TTCACCTTCAGCAGCTACGCCATGTCTTGGGTCCGCCAGG CCCCTGGAAAGGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCAGCG GCAGCGGCGGCAGCACCTACTACGCCGACAGCGTGAAGG GCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACAGCAAGAACACCC TGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACCG CCGTGTACTACTGCGCCAAGGGCTGGCTGGGCAAC1TCGA CTACTGGGGCCAGGGCACTCTGGTCACAGTGTCTAGCGCT 220

149654.doc -134- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQIDNO AGCACCAAGGGCCCATCGGTCTrCCCCCTGGCACCCTCCT CCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCC TGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTCCGGCG GAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCGGAGGGGGCGGA GCCATGTGGGAGCTGGAAAAGGACGTGTACGTGGTGGAG GTGGACTGGACCCCCGACGCCCCTGGCGAGACAGTGAAC CTGACCTGCGACACCCCCGAAGAGGACGACATCACCTGG ACCAGCGACCAGCGGCACGGCGTGATCGGCAGCGGCAAG ACCCTGACCATCACCGTGAAAGAGTTTCTGGACGCCGGCC AGTACACCTGCCACAAGGGCGGCGAGACACTGAGCCACA GCCACCTGCTGCTGCACAAGAAAGAGAACGGCATCTGGT CCACCGAGATCCTGAAGAACTTCAAGAACAAGACCTrCC TGAAGTGCGAGGCCCCCAACTACAGCGGCCGGTTCACCT GCAGCTGGCTGGTGCAGCGGAACATGGACCTGAAG1TCA ACATCAAGAGCAGCAGCAGCCCCCCTGACAGCAGGGCCG TGACCTGCGGCATGGCCAGCCTGAGCGCCGAGAAGGTGA CCCTGGACCAGAGGGACTACGAGAAGTACAGCGTGAGCT GCCAGGAAGATGTCACCTGCCCCACCGCCGAGGAAACCC TGCCCATCGAGCTGGCCCTGGAAGCCCGGCAGCAGAACA AGTACGAGAACTACTCTACCAGCTTCTTCATCCGGGACAT CATCAAGCCCGACCCCCCCAAGAACCTGCAGATGAAGCC CCTGAAGAACAGCCAGGTGGAGGTGTCCTGGGAGTACCC TGACAGCTGGTCCACCCCCAGAAGCTACTTCAGCCTGAAG TTCTTCGTGAGAATCCAGCGGAAGAAAGAAAAGATGAAA GAGACAGAGGAAGGCTGCAACCAGAAGGGCGCCTTCTTC GTCGAGAAAACCAGCACCGAGGTGCAGTGCAAGGGCGGC AACGTGTGCGTGCAGGCCCAGGACCGGTACTACAACAGC AGCTGCAGCAAGTGGGCCTGCGTGCCCTGCAGAGTGCGG TCTGGCGGCGACGGCTCTGGCGGCGGAGGAAGCGGCGGA GGGGGCAGCAGAGTGATCCCCGTGAGCGGCCCTGCCCGG TGCCTGAGCCAGAGCCGGAACCTGCTGAAAACCACCGAC GACATGGTGAAAACCGCCAGAGAGAAGCTGAAGCACTAC AGCTGCACAGCCGAGGACATCGACCACGAGGACATCACC CGGGACCAGACCAGCACCCTGAAAACCTGCCTGCCCCTG GAACTGCACAAAAACGAGAGCTGCCTGGCCACCCGGGAG ACAAGCAGCACCACCCGGGGCAGCTGCCTGCCTCCCCAG AAAACCTCCCTGATGATGACCCTGTGCCTGGGCAGCATCT ACGAGGACCTGAAGATGTACCAGACCGAGTTCCAGGCCA TCAACGCCGCCCTGCAGAACCACAATCACCAGCAGATCA TCCTGGACAAGGGCATGCTGGTCGCCATCGACGAGCTGA TGCAGAGCCTGAACCACAACGGCGAAACCCTGCGGCAGA AACCCCCCGTGGGCGAGGCCGACCCCTACCGGGTGAAGA TGAAGCTGTGCATCCTGCTGCACGCCTTCAGCACCCGGGT GGTGACCATCAACCGGGTGATGGGCTACCTGTCCTCTGCC GGGGGAGGGGGATCCGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGC GGAGAGGTGCAATTGCTGGAAAGCGGCGGAGGACTGGTG CAGCCTGGCGGCAGCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGC GGCTTCACCTrCAGCAGCTACGCCATGTCTTGGGTCCGCC 149654.doc -135· 201119672

搆築體聚核苷酸序列 SE〇ID NO AGGCCCCTGGAAAGGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCA GCGGCAGCGGCGGCAGCACCTACTACGCCGACAGCGTGA AGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACAGCAAGAACA CCCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACA CCGCCGTGTACTACTGCGCCAAGGGCTGGCTGGGCAACTT CGACTACTGGGGCCAGGGCACTCTGGTCACAGTGTCTAGC GCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCT CCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCT GCCTGGTCAAGGACTACTTCCGCGAACCGGTGACGGTGTC GTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGC AGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAG ACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACC AAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA 28H1 Fab-IL2-Fab (重键細胞因子融合構築體） GAAGTGCAGCTGCTGGAATCCGGCGGAGGCCTGGTGCAG CCTGGCGGATCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGCCTCCGGCT TCACCTTCTCCTCCCACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGC TCCTGGCAAAGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCTGGGCC TCCGGCGAGCAGTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCCGG TTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACC TGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGT ACTACTGTGCCAAGGGCTGGCTGGGCAACTTCGACTACTG GGGACAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCAGCGCTAGCAC CAAGGGACCCTCCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTCCAGCAAG TCTACCTCTGGCGGCACCGCCGCTCTGGGCTGCCTGGTCA AGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTC TGGCGCCCTGACCAGCGGCGTCCACACCTTTCCAGCCGTG CTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCTCCGTCGTGA CCGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTG CAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAA GAAGGTGGAACCCAAGTCCTGCGACAGTGGTGGGGGAGG ATCTGGTGGCGGAGGTTCTGGCGGAGGTGGCGCTCCTAC ATCCTCCAGCACCAAGAAAACCCAGCTCCAGCTGGAACA TCTCCTGCTGGATCTGCAGATGATCCTGAACGGCATCAAC AACTACAAGAACCCCAAGCTGACCCGGATGCTGACCTTC AAGTTCTACATGCCCAAGAAGGCCACCGAGCTGAAACAT CTGCAGTGCCTGGAAGAGGAACTGAAGCCTCTGGAAGAG GTGCTGAACCTGGCCCAGTCCAAGAACTTCCACCTGAGGC CTCGGGACCTGATCTCCAACATCAACGTGATCGTGCTGGA ACTGAAGGGCTCCGAGACAACCTTCATGTGCGAGTACGC CGACGAGACAGCTACCATCGTGGAATITCTGAACCGGTG GATCACCTTCGCCCAGTCCATCATCTCCACCCTGACCTCC GGTGGTGGCGGATCCGGGGGAGGGGGTTCTGGCGGAGGC GGAGAAGTGCAGCTGCTGGAATCCGGCGGAGGCCTGGTG CAGCCTGGCGGATCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGCCTCCG GCTTCACCTTCTCCTCCCACGCCATGTCCTGGGTCCGACA GGCTCCAGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCTG GGCCTCCGGCGAGCAGTACTACGCCGACTCTGTGAAGGG CCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTG TACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCC GTGTACTACTGTGCCAAGGGCTGGCTGGGCAACTTCGACT ACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCCGCCTC TACCAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCCTCCAGC 222 149654.doc -136- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO AAGTCTACCTCTGGCGGCACCGCCGCTCTGGGCTGCCTGG TCAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAA CTCTGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTTCCAGCC GTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCTCCGTCGT GACCGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATC TGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGAC AAGAAGGTGGAACCCAAGTCCTGCGACTGA 29B11 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAAGTGCAGCTGCTGGAATCCGGCGGAGGCCTGGTGCAG CCTGGCGGATCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGCCTCCGGCT TCACCTTCTCCTCCTACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGC TCCTGGCAAAGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCATCGGC TCCGGCGGCATCACCTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCC GGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTA CCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGT GTACTACTGTGCCAAGGGCTGGTTCGGAGGCTTCAACTAC TGGGGACAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCAGCGCTAGC ACCAAGGGACCCTCCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTCCAGCA AGTCTACCTCTGGCGGCACCGCCGCTCTGGGCTGCCTGGT CAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAAC TCTGGCGCCCTGACCAGCGGCGTCCACACCTTrCCAGCCG TGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCTCCGTCGTG ACCGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCT GCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACA AGAAGGTGGAAGCCAAGTCCTGCGACAGTGGTGGGGGAG GATCTGGTGGCGGAGGTTCTGGCGGAGGTGGCGCTCCTA CATCCTCCAGCACCAAGAAAACCCAGCTCCAGCTGGAAC ATCTCCTGCTGGATCTGCAGATGATCCTGAACGGCATCAA CAACTACAAGAACCCCAAGCTGACCCGGATGCTGACCTT CAAGTTCTACATGCCCAAGAAGGCCACCGAGCTGAAACA TCTGCAGTGCCTGGAAGAGGAACTGAAGCCTCTGGAAGA GGTGCTGAACCTGGCCCAGTCCAAGAACTTCCACCTGAG GCCTCGGGACCTGATCTCCAACATCAACGTGATCGTGCTG GAACTGAAGGGCTCCGAGACAACCTTCATGTGCGAGTAC GCCGACGAGACAGCTACCATCGTGGAATTTCTGAACCGG TGGATCACCTTCGCCCAGTCCATCATCTCCACCCTGACCT CCGGTGGTGGCGGATCCGGGGGAGGGGGTTCTGGCGGAG GCGGAGAAGTGCAGCTGCTGGAATCCGGCGGAGGCCTGG TGCAGCCTGGCGGATCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGCCTC CGGCTTCACCTTCTCCTCCTATGCCATGTCCTGGGTCCGAC AGGCTCCAGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGTCCGCCATCA TCGGCTCCGGCGGCATCACCTACTACGCCGACTCTGTGAA GGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACAC CCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACAC CGCCGTGTACTACTGTGCCAAGGGCTGGTTCGGAGGCTrC AACTACTGGC5GCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCCG CCTCTACCAAGCjGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCCTC CAGCAAGTCTACCTCTGGCGGCACCGCCGCTCTGGGCTGC CTGGTCAAGCjACTACITCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACTCTGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTTCC AGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCTCC GTCGTGACCGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGG TGGACAAGAAGGTCXjAACCCAAGTCCTGCGACTGA 224 149654.doc •137· 201119672

搆築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO 19G1 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAGCTGCTCGAAAGCGGCGGAGGACTGGTGCAG CCTGGCGGCAGCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCAGCGGCT TCACCTTCAGCAGCTACGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC CCCTGGCAAGCXjACTGGAATGGGTGTCCGCCATCATCAG CTCTGGCGGCCTGACCTACTACGCCGACAGCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACAGCAAGAACACCCT GTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGGACACCGC CGTGTACTACTGCGCCAAGGGATGGTTCGGCGGCTTCAAC TACTGGGGACAGGGCACCCTGGTCACAGTGTCCAGCGCT AGCACCAAGGGACCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCAGC AGCAAGAGCACATCTGGCGGAACAGCCGCCCTGGGCTGC CTGGTCAAAGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTTC CAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCA GCGTGGTCACCGTGCCTAGCTCTAGCCTGGGCACCCAGAC CTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACACCAA GGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGAGCTGCGACTCCGG CGGAGGCGGATCTGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGCGGAGG CGCTCCTACTAGCAGCTCCACCAAGAAAACCCAGCTCCA GCTGGAACATCTGCTGCTGGATCTGCAGATGATCCTGAAC GGCATCAACAACTACAAGAACCCCAAGCTGACCCGGATG CTGACCTTCAAGTTCTACATGCCCAAGAAGGCCACCGAAC TGAAACATCTGCAGTGCCTGGAAGAGGAACTGAAGCCTC TGGAAGAGGTGCTGAACCTGGCCCAGAGCAAGAACTTCC ACCTGAGGCCCAGGGACCTGATCAGCAACATCAACGTGA TCGTGCTGGAACTGAAGGGCAGCGAGACAACCTTCATGT GCGAGTACGCCGACGAGACAGCCACCATCGTGGAATITC TGAACCGGTGGATCACCTTCGCCCAGAGCATCATCAGCAC CCTGACAAGCGGAGGCGGCGGATCCGGCGGAGGCGGATC TGGCGGAGGAGGCGAGGTCCAGCTGCTCGAAAGCGGCGG AGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCAGCCTGAGACTGTCTTG CGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCAGCAGCTACGCCATGAGC TGGGTCCGCCAGGCCCCTGGCAAGGGACTGGAATGGGTG TCCGCCATCATCAGCTCTGGCGGCCTGACCTACTACGCCG ACAGCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACA GCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGG CCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAAGGGATGGT TCGGCGGCTTCAACTACTGGGGACAGGGCACCCTGGTCA CAGTGTCCAGCGCCAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCC CCCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGGAACAG CCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAAGACTACTTCCCCGAGCC CGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGG CGTGCACACCITTCCAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTG TACAGCCTGAGCAGCGTGGTCACCGTGCCTAGCTCTAGCC TGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGC CCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAG AGCTGCGACTGA 226 20G8 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAGGTGCAGCTGCTCGAAAGCGGCGGAGGACTGGTGCAG CCTGGCGGCAGCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCAGCGGCT TCACCTTCAGCAGCTACGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGC CCCTGGCAAGGGACTGGAATGGGTGTCCGCCATCATCGG CTCTGGCAGCCGGACCTACTACGCCGACAGCGTGAAGGG CCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACAGCAAGAACACCCT 228 149654.doc •138· 201119672

搆築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO GTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGGACACCGC CGTGTACTACTGCGCCAAGGGATGGTTCGGCGGCTTCAAC TACTGGGGACAGGGCACCCTGGTCACAGTGTCCAGCGCT AGCACCAAGGGACCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCAGC AGCAAGAGCACATCTGOCGGAACAGCCGCCCTGGGCTGC CTGGTCAAAGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTTC CAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCA GCGTGGTCACCGTGCCTAGCTCTAGCCTGGGCACCCAGAC CTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACACCAA GGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGAGCTGCGACTCCGG CGGAGGCGGATCTGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGCGGAGG CGCTCCTACTAGCAGCTCCACCAAGAAAACCCAGCTCCA GCTGGAACATCTGCTGCTGGATCTGCAGATGATCCTGAAC GGCATCAACAACTACAAGAACCCCAAGCTGACCCGGATG CTGACCTTCAAGTrCTACATGCCCAAGAAGGCCACCGAAC TGAAACATCTGCAGTGCCTGGAAGAGGAACTGAAGCCTC TGGAAGAGGTGCTGAACCTGGCCCAGAGCAAGAACTTCC ACCTGAGGCCCAGGGACCTGATCAGCAACATCAACGTGA TCGTGCTGGAACTGAAGGGCAGCGAGACAACCTTCATGT GCGAGTACGCCGACGAGACAGCCACCATCGTGGAATITC TGAACCGGTGGATCACCTTCGCCCAGAGCATCATCAGCAC CCTGACAAGCGGAGGCGGCGGATCCGGCGGAGGCGGATC TGGCGGAGGAGGCGAGGTCCAGCTGCTCGAAAGCGGCGG AGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCAGCCTGAGACTGTCTTG CGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCAGCAGCTACGCCATGAGC TGGGTCCGCCAGGCCCCTGGCAAGGGACTGGAATGGGTG TCCGCCATCATCGGCTCTGGCAGCCGGACCTACTACGCCG ACAGCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACA GCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGG CCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAAGGGATGGT TCGGCGGCTTCAACTACTGGGGACAGGGCACCCTGGTCA CAGTGTCCAGCGCCAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCC CCCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGGAACAG CCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAAGACTACTTCCCCGAGCC CGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGG CGTGCACACCTTTCCAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTG TACAGCCTGAGCAGCGTGGTCACCGTGCCTAGCTCTAGCC TGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGC CCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAG AGCTGCGACTGA 3F2輕鏈 GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGGCACCCTGTCTCTGA GCCCTGGCGAGAGAGCCACCCTGTCCTGCAGAGCCTCCC AGTCCGTGACCTCCTCCTACCTCGCCTGGTATCAGCAGAA GCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCAACGTGGGCAG TCGGAGAGCCACCGGCATCCCTGACCGGTTCTCCGGCTCT GGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGG AACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGGGCA TCATGCTGCCCCCCACCTITGGCCAGGGCACCAAGGTGGA AATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTC CCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCC GTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCA AGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCA 230 149654.doc •139· 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO ACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACA GCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGC CGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGAC CCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAAC CGGGGCGAGTGCTGATGA 4G8輕鏈 GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGGCACCCTGTCTCTGA GCCCTGGCGAGAGAGCCACCCTGTCCTGCAGAGCCTCCC AGTCCGTGTCCCGGTCCTACCTCGCCTGGTATCAGCAGAA GCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCATCGGCGCCTCT ACCAGAGCCACCGGCATCCCTGACCGGTTCTCCGGCTCTG GCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGA ACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGGGCCA GGTCATCCCTCCCACCTTTGGCCAGGGCACCAAGGTGGAA ATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCC CACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGT CGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAG GTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAAC TCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGC ACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCG ACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCC ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCG GGGCGAGTGCTGATGA 232 3D9輕鏈 GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCnTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTG1TAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGGGTC AGCTTATTCCCCCTACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGGA AATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTC CCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTG TTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAA AGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAA CTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAG CACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGC AGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCAC CCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA CAGGGGAGAGTGTTAG 234 2F11輕鏈 GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCITGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGAGCATC CAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATrACTGTCAGCAGGGTC AGTATACTCCCCCCACGTTCGGCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTT CCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCT GTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCA AAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTA ACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACA GCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAG 236

149654.doc •140- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO CAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCA CCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCA ACAGGGGAGAGTGTTAG 4B3輕鏈 GAAATCGTGTTAACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGT CTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCTTGCAGGGCCAGTC AGAGTGTTAGCAGCAATTACTTAGCCTGGTACCAGCAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGCGCCTA CATCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAG TGGATCCGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG GAGCCTGAAGATnTGCAGTGTATrACTGTCAGCAGGGTC AGGTTAITCCCCCTACGTTCCKjCCAGGGGACCAAAGTGG AAATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTT CCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCT GTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCA AAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTA ACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACA GCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAG CAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCA CCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCA ACAGGGGAGAGTGTTAG 238 2B10Fab-IL2-Fab (重鏈細胞1因子融合構築體） CAGGTGCAAITGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGGGATCATCC CTATCTTrGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCAGCTAGCACCAAGC3GCCCATCGGTCTTCCCCC TGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGG CCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGT GACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGT GCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTAC TCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGG GCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCA GCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTT GTGACTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCG GAGGTGGCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAA CACAGCTACAACTGGAGCATTrACTGCTGGATTTACAGAT GATnTGAATGGAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTC ACCAGGATGCTCACAITTAAGinTTACATGCCCAAGAAGG CCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAAC TCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATTTAGCTCAAAGCA AAAACTTTCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATAT CAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAAC ATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTA GAAnTCTGAACAGATGGATTACCnTGCCCAAAGCATCA TCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAG GTGGCTCTGGCGGTGGCGGACAGGTGCAATTGGTGCAGT CTCXiGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGG TCTCCTGCAAGGCCTCCGGAGGCACATTCAGCAGCTACGC TATAAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTCGA 240 149654.doc -141 - 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEOIDNO GTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAAC TACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCACCATTACTGCA GACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGC CTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTATTACTGTGCGAGAC TGTACGGmCGCmCTACGGTGCTnTGACTACTGGGG CCAAGGGACCACCGTGACCGTCTCCTCAGCTAGCACCAA GGGCCCATCGGTCITCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGC ACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG GACTACITCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAG GCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCT ACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACC GTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCA ACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGA AAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA C3B6 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） CAGGTGCAATrGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTACGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGCTATCATCC CGATCCTTGGTATCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGG GCAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAG CCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCG CCGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTA CGGTGCmTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCAGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCC TGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGG CCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGT GACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGT GCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTAC TCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGG GCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCA GCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTT GTGACTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCG GAGGTGGCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAA CACAGCTACAACTGGAGCATTTACTGCTGGATTrACAGAT GATTTTGAATGGAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTC ACCAGGATGCTCACATITAAGTnTACATGCCCAAGAAGG CCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAAC TCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATnTAGCTCAAAGCA AAAACnTCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATAT CAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAAC ATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTA GAATTTCTGAACAGATGGATTACCTTTGCCCAAAGCATCA TCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAG GTGGCTCTGGCGGTGGCGGACAGGTGCAATTGGTGCAGT CTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGG TCTCCTGCAAGGCCTCCGGAGGCACATTCAGCAGCTACGC TATAAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTCGA GTGGATGGGAGCTATCATCCCGATCCTTGGTATCGCAAAC TACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCACCATTACTGCA GACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGC CTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTATTACTGTGCGAGAC TGTACGGmCGCTTACTACGGTGCTnTGACTACTGGGG CCAAGGGACCACCGTGACCGTCTCCTCAGCTAGCACCAA 242 149654.doc •142· 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO GGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGC ACCTCTGGGGGCACAGCCXjCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG GACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAG GCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCT ACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACC GTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCA ACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGA AAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA 6A12 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） CAGGTGCAATTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCCTCCGGAG GCACATTCAGCAGCTATGCTATAAGCTGGGTGCGACAGG CCCCTGGACAAGGGCTCGAGTGGATGGGAGTGATCATCC CTATCCTTGGTACCGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGG CAGGGTCACCATTACTGCAGACAAATCCACGAGCACAGC CTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACCGC CGTGTATTACTGTGCGAGACTGTACGGTTACGCTTACTAC GGTGCTTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACC GTCTCCTCAGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCC TGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGG CCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGT GACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGT GCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTAC TCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGG GCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCA GCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTT GTGACTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTCCG GAGGTGGCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAAAA CACAGCTACAACTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAGAT GATnTGAATGGAATTAATAATTACAAGAATCCCAAACTC ACCAGGATGCTCACATITAAGmTACATGCCCAAGAAGG CCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGAAC TCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATrTAGCTCAAAGCA AAAACTTrCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAATAT CAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACAAC ATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTA GAATTTCTGAACAGATGGATrACCTTKjCCCAAAGCATCA TCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGGAG GTGGCTCTGGCGGTGGCGGACAGGTGCAATTGGTGCAGT CTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGG TCTCCTGCAAGGCCTCCGGAGGCACATTCAGCAGCTATGC TATAAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTCGA GTGGATGGGAGTGATCATCCCTATCCTTGGTACCGCAAAC TACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCACCATTACTGCA GACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGC CTGAGATCTGAGGACACCGCCGTGTATTACTGTGCGAGAC TGTACGGTTACGCTTACTACGGTGCmTGACTACTGGGG CCAAGGGACCACCGTGACCGTCTCCTCAGCTAGCACCAA GGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGC ACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG GACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAG GCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCT ACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACC GTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCA 244 149654.doc •143· 201119672 構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO ACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGATAAGA AAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACTGA 2B10輕鏈 GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCA GTTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGATnTGCCACCTATrACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAGCGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTrCATCTTCC CGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGT TGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAA GTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAAC TCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGC ACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCA GACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACC CATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAAC AGGGGAGAGTG1TAG 246 D1A2輕鏈 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGGGGATTCGTAATGATTTAGGCTGGTACCAGCAGAAGC CAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGCTTACA GCTTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTG GATCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCA GCCTGAAGATTTTGCCACCTAITACTGCTTGCAGAATGGT CTGCAGCCCGCGACGTITGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG ATCAAGCGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCC CGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGT TGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAA GTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAAC TCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGC ACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCA GACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACC CATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAAC AGGGGAGAGTGTTAG 248 07D8輕鏈 GATATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCAT CTGTCGGAGACCGGGTCACCATCACCTGCCGGGCAAGTC AGAGCATTCGTAATGTnTAGGCTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGATGTGTCCAGT TTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCGGTGGA TCCGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCTTGCAGC CTGAAGATnTGCCACCTATTACTGCTrGCAGAATGGTCT GCAGCCCGCGACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAGAT CAAGCGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTrCCCG CCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTG TGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGT ACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTC CCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCA CCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAG ACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCC ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACA GGGGAGAGTGTTAG 250

149654.doc -144- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SEQ ID NO MHLG1 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTCAAG CCTGGCGGGTCCCTGCGGCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACATTTAGCAACTAITGGATGAACTGGGTGCGGCAGGC TCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGGTGGCCGAGATCAGATT GAAATCCAATAACTrCGGAAGATATTACGCTGCAAGCGT GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCAGAGATGATTCCAAGAA CACGCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAAGACCGAGGA TACGGCCGTGTATTACTGTACCACATACGGCAACTACGTT GGGCACTACTTCGACCACTGGGGCCAAGGGACCACCGTC ACCGTCTCCAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCC CCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGC GGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCG GTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGC GTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCT ACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTT GGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCC CAGCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATC TTGTGACTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTC CGGAGGTGGCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAA AACACAGCTACAACTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAG ATGAmTGAATGGAATrAATAATTACAAGAATCCCAAAC TCACCAGGATGCTCACATITAAGTnTACATGCCCAAGAA GGCCACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGAAGA ACTCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAAITTAGCTCAAAG CAAAAACTTTCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAAT ATCAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACA ACATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTG TAGAATITCTGAACAGATGGATTACCnTGCCCAAAGCAT CATCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGACXjATCCGGCGG AGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAGAAGTGCAGCTGGTGGA GTCTGGAGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGCGGGTCCCTGCG GCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGATTCACATITAGCAACTAT TGGATGAACTGGGTGCCKxCAGGCTCCTGGAAAGGGCCTC GAGTGGGTGGCCGAGATCAGATTGAAATCCAATAACTTC GGAAGATATTACGCTGCAAGCGTGAAGGGCCGGTTCACC ATCAGCAGAGATGATTCCAAGAACACGCTGTACCTGCAG ATGAACAGCCTGAAGACCGAGGATACGGCCGTGTATTAC TGTACCACATACGGCAACTACGTrGGGCACTACTTCGACC ACTGGGGCCAAGGGACCACCGTCACCGTCTCCAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAGITGAGCCCAAATCTTGTGACTGA 252 KV9輕鏈 GATATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTTCCTGTCTGCATC TGTGGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAAGGCCAGTCA GAATGTGGATACTAACGTGGCTTGGTACCAGCAGAAGCC AGGGCAGGCACCTAGGCCTCTGATCTATTCGGCATCCTAC CGGTACACTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA TCCGGGACAGAGTTCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAAC 254 I49654.doc -145- 201119672 構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO CTGAAGATTTCGCAACTTACTACTGTCAACAGTACAATAG TTACCCTCTGACGTTCGGCGGAGGTACCAAGGTGGAGATC AAGCGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGC CATCTGATGAGCAGTrGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGT GTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTA CAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCC CAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCAC CTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGA CTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCA TCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAG GGGAGAGTGTTAG MHLGFab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTCCAG CCTGGCGGGTCCCTGCGGCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGAT TCACATTTAGCAACTATTGGATGAACTGGGTGCGGCAGGC TCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGCXjTGGCCGAGATCAGATT GAAATCCAATAACTTCGGAAGATATOCGCTGCAAGCGT GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCAGAGATGATTCCAAGAA CACGCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGAAGACCGAGGA TACGGCCGTGTATTACTGTACCACATACGGCAACTACGTT GGGCACTACTTCGACCACTGGGGCCAAGGGACCACCGTC ACCGTCTCCAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCC CCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGC GGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCG GTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGC GTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCT ACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTT GGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCC CAGCAACACCAAGGTGGATAAGAAAGTTGAGCCCAAATC TTGTGACTCCGGCGGAGGAGGGAGCGGCGGAGGTGGCTC CGGAGGTGGCGGAGCACCTACTTCAAGTTCTACAAAGAA AACACAGCTACAACTGGAGCATTTACTGCTGGATTTACAG ATGAmTGAATGGAATTAATAATTACAAGAATCCCAAAC TCACCAGGATGCTCACATTTAAGmTACATGCCCAAGAA GGCCACAGAACTGAAACATCTrCAGTGTCTAGAAGAAGA ACTCAAACCTCTGGAGGAAGTGCTAAATITAGCTCAAAG CAAAAACTTTCACTTAAGACCCAGGGACTTAATCAGCAAT ATCAACGTAATAGTTCTGGAACTAAAGGGATCTGAAACA ACATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTG TAGAATTTCTGAACAGATGGATTACCmGCCCAAAGCAT CATCTCAACACTGACTTCCGGCGGAGGAGGATCCGGCGG AGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGAGAAGTGCAGCTGGTGGA GTCTGGAGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGCGGGTCCCTGCG GCTCTCCTGTGCAGCCTCCGGATTCACATITAGCAACTAT TGGATGAACTGGGTGCGGCAGGCTCCTGGAAAGGGCCTC GAGTGGGTGGCCGAGATCAGATTGAAATCCAATAACITC GGAAGATATTACGCTGCAAGCGTGAAGGGCCGG1TCACC ATCAGCAGAGATGATTCCAAGAACACGCTGTACCTGCAG ATGAACAGCCTGAAGACCGAGGATACGGCCGTGTATTAC TGTACCACATACGGCAACTACGTTGGGCACTACTTCGACC ACTGGGGCCAAGGGACCACCGTCACCGTCTCCAGTGCTA GCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTC CAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCT GGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTG 256

149654.doc •146- 201119672

構築體聚核苷酸序列 SE〇 ID NO GAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCC GGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGC GTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCT ACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGG TGGATAAGAAAG1TGAGCCCAAATCTTGTGACTGA KV1輕鏈 GATATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTrCCTGTCTGCATCT GTGGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAGGGCCAGTCAGAA TGTGGATACTAACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAGCCAGGGA AAGCACCTAAGCTCCTGATCTATTCGGCATCCTACCGTTACA CTGGCGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCCGGGACA GAGTTCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAACCTGAAGATTTC GCAACTrACTACTGTCAACAGTACAATAGTTACCCTCTGACG TTCGGCC3GAGGTACCAAGGTGGAGATCAAGCGTACGGTGGC TGCACCATCTGTCTrCATCTrCCCGCCATCTGATCAGCAGTT GAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAAdT CTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACG CCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAG GACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGAC GCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCT GCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAG AGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG 264 KV7輕鏈 GATATCCAGTrGACCCAGTCTCCATCCTTCCTGTCTGCATCT GTGGGCGACCGGGTCACCATCACCTGCAAGGCCAGTCAGAA TGTGGATACTAACGTGOCTTGGTACCAGCAGAAGCCAGGGA AAGCACCTAAGCCTCTGATCTATTCGGCATCCTACCGGTACA CTGGCGTCCCATCAAGGTrCAGCGGCAGTGGATCCGGGACA GAGTTCACTCTCACAATCTCAAGCCTGCAACCTGAAGATTTC GCAACTTACTACTGTCAACAGTACAATAGTrACCCTCTGACG TTCCXjCGGAGGTACCAAGGTGGAGATCAAGCGTACGGTGGC TGCACCATCTGTCTTCATCITCCCGCCATCTGATGAGCAGTr GAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACIT CTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACG CCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAG GACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGAC GCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCT GCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAG AGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG 266 宿主細胞如本文中所使用，術語「宿主細胞」係指可工程改造產生本發明免疫結合物或其片段的各種細胞系統。在一實施例中，宿主細胞經工程改造成允許產生免疫結合物片段。宿主細胞包括培養細胞，例如哺乳動物培養細胞，諸如 CHO細胞、HEK、BHK細胞、NS0細胞、Sp2/0細胞、YO 骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6 149654.doc -147- 201119672 細胞或融合瘤細胞、酵母細胞'昆蟲細胞、細菌細胞及植物細胞（僅舉幾個例子），以及轉殖基因動物、轉殖基因植物或培養植物或動物組織内所包含之細胞。在一實施例中，本發明之宿主細胞包含含有編碼本發明免疫結合物或其片段的聚核苷酸序列之表現載體。本發明之宿主細胞可為真核或原核細胞。免疫結合物多肽及其片段之純化本發明免疫結合物或其片段可藉由此項技術已知之技術來純化，諸如高效液相層析、離子交換層析、凝膠電泳、親和層析、尺寸排阻層析及其類似技術。用於純化特定蛋白質之實際條件將部分視諸如淨電荷、疏水性、親水性等之因素而定’且對於熟習此項技術者將顯而易知。對於親和層析純化，可使用具有蛋白質八或蛋白質g之基質。或者，對於'親和層析純化，可使用特異性結合免疫結合物之單鏈效應部分的任何抗體。對於抗體之產生，包括（但不限於）兔、小鼠、大鼠等之多種宿主動物可藉由注射本發明免疫結合物或其片段而免疫。免疫結合物可藉助於側鏈官能基或連接於側鏈官能基之連接子而連接於適合之載劑，諸如牛血清白蛋白（BSA)。多種佐劑可用於增加免疫反應，此視宿主物種而定，該等佐劑包括（但不限於）弗氏佐劑（Freund，s)(完全及不完全）、礦物凝膠（諸如氫氧化鋁）、表面活性物質（諸如溶血卵磷脂）、氧化異丙稀多元醇類（pluronic polyol)、聚陰離子、肽、油乳液、匙孔螺血氰蛋白、二硝基酚、及潛在有用之人類佐劑，諸如 149654.doc -148- 201119672 BCG(卡介苗（bacilli Calmette-Guerin))及短棒狀桿菌 parvwm)。因此，一實施例包括一種製造本發明免疫結合物的方法，該方法係在適於表現本發明免疫結合物或其片段的條件下培養包含含有編碼本發明免疫結合物或其片段之聚核苷酸序列的表現載體之宿主細胞。使用免疫結合物之方法本發明免疫結合物適用於靶向特異性抗原決定子及引發 φ 標靶及募集細胞之多種細胞反應。本發明免疫結合物亦適用作診斷試劑。免疫結合物與抗原決定子之結合可容易藉由使用對於效應部分具有特異性之二次抗體來偵測。在一實施例中，二次抗體及免疫結合物有助於偵測免疫結合物與位於細胞或組織表面上之抗原決定子的結合。在一些實施例中，向細胞投與有效量之本發明免疫結合物。在其他實施例中，向個體投與治療有效量之本發明免疫結合物以治療疾病。如本文中所使用，術語「有效量」 • 係定義為本發明免疫結合物引起投與該免疫結合物之細胞或組織的生理變化所需之量。如本文中所使用，術語「治療有效量」係定義為本發明免疫結合物消除、減少、延遲疾病之不良作用、使该等不良作用減至最少或預防該等不良作用的量。本發明免疫結合物可自身或以醫藥組合物之形式投與個體。在-實施例中，該疾病為增生性病症，諸如癌症。諸如癌症之增生性病症的非限制性實例包括膀耽癌、腦癌、頭頸部癌、騰臟癌、肺癌、乳癌、印巢癌、子宮癌、子宮 149654.doc -149· 201119672 頸癌、子宮内膜癌、食道癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、胃癌、前列腺癌、血癌、皮膚癌、鱗狀細胞癌、骨癌及腎癌。其他可使用本發明免疫結合物治療之細胞增生病症的實例包括（但不限於）位於以下部位之贅瘤：腹部、骨、乳房、消化系統、肝、胰腺、腹膜、内分泌腺（腎上腺、副曱狀腺、垂體、睾丸、卵巢、胸腺、曱狀腺）、眼、頭頸部、神經系統（中樞與周邊）、淋巴系統、骨盆、皮膚、軟組織'脾、胸部及泌尿生殖系統。亦包括癌前病狀或病變及癌轉移。類似地’亦可由本發明免疫結合物治療其他細胞增生病症。該等細胞增生病症之實例包括（但不限於）：高γ球蛋白血症（hypergammaglobulinemia)、淋巴增生病症、副蛋白血症、紫癜、類肉瘤病、赛謝症候群 (Sezary Syndrome)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症 (Waldenstron’s MacroglobulinemU)、高歇氏病（Gaucher，s Disease)、組織細胞增多病及任何其他位於以上所列出之器官系統中的除腫瘤形成之外的細胞增生疾病。在另—實施例中’疾病與自體免疫、移植排斥、創傷後免疫反應及傳染性疾病（例如HIV)有關。更特定言之，免疫結合物可用於消除免疫細胞介導之病症中所涉及的細胞，包括淋巴瘤、自體免疫、移植排斥、移植物抗宿主疾病、局部缺血及中風。熟習此項技術者容易認識到，在許多情況下，免疫結合物可能不會治癒，而是僅提供局部益處。在—此實施例中’具有一些益處之生理變化亦視為具有治療性益處。因此，在一些實施例中，提供生理變化之免疫結合物 149654.doc -150- 201119672 的量被視為「有效量」或「治療有效量」。需要治療之個體或患者通常為哺乳動物，更特定為人類。組合物、調配物、劑量及投藥途徑本發明之醫藥組合物包含有效量之一或多種免疫結合物溶解或分散於醫藥學上可接受之載劑中。短語「醫藥學咬藥理學上可接受的」係指分子實體及組合物在投與動物 (適當時，例如人類）時不會產生不良、過敏或其他不當反應。含有至少一種免疫結合物及視情況選用之其他活性成份的醫藥組合物之製備將為熟習此項技術者根據本發明所知，如以引用的方式併入本文中之Remingtonis

Pharmaceutical Sciences，第 18 版 Mack Printing Company, 1990所例示。此外，對於動物（例如人類）投藥，應瞭解，製劑應符合如FDA生物學標準管理局（FDA Office 〇f Biological Standards)或其他國家之對應機關所要求之無菌、熱原性、一般安全性及純度標準。如本文中所使用，術語「醫藥學上可接受之載劑」包括如一般技術者所知之任何及所有溶劑、缓衝液、分散介質、包衣、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑（例如抗細菌劑、抗真菌劑）、等張劑、吸收延遲劑、鹽、防腐劑、藥物、藥物穩定劑、凝膠、黏合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染料、諸如此類之物質及其組合 (參見例如 Remington’s Pharmaceutical Sciences，第 18版， Mack Printing Company, 1990，第 1289-1329頁，其以引用 -151 - 149654.doc 201119672 的方式併入本文中）。除非有任何習知載劑與活性成份不相谷’否則均涵蓋其在治療或醫藥組合物中之用途。免疫結合物可包含不同類塑之載劑，依其是否呈固體' 液體抑或軋溶膠形式投與及該投藥途徑（諸如注射）是否需要滅菌而定。本發明可經以下途徑投藥：靜脈内、皮内、動脈内、腹膜内、病灶内、顱内、關節内、前列腺内、脾内、腎内、胸膜内、氣管内、鼻内、玻螭體内、陰道内、直腸内、表面、瘤内、肌肉内、腹膜内、皮下、結膜下、囊泡内、經黏膜、心包内、臍帶内、眼内、經口、表面、局部、吸Μ例如氣溶膠吸入）、注射、輸注、連續輸注、直接浸洗標$細胞之局部灌注、經由導管、經由灌洗、以礼膏形式、以脂質組合物（例如脂質體）形式、或藉由其他

〜很汉叹週用於個別個體之劑量。

殊裢合物的多肽分子。

H9654.doc 例如至少約0.1 %之免疫結合物可佔單 •152· 201119672 位重量之約2%至約75%，或例如約25%至約6〇% ,及其中可引出之任何範圍。在其他非限制性實例中，劑量亦可包含每次投藥每公斤體重約1微克、每公斤體重約5微克、每公斤體重約10微克、每公斤體重約50微克、每公斤體重約 100微克、每公斤體重約200微克、每公斤體重約35〇微克、每公斤體重約500微克、每公斤體重約1毫克、每公斤體重約5毫克、每公斤體重約10毫克、每公斤體重約％毫

克、每公斤體重約100毫克、每公斤體重約2〇〇毫克、每公斤體重約350毫克、每公斤體重約500毫克至每公斤體重約 1000毫克、或每公斤體重約1〇〇〇毫克以上、及其中可引出之任何範圍。在可自本文中所列數目引出之範圍的非限制性實例中，S於上述數目，可投與每公斤體重約5叫至每公斤體重約100 mg、每公斤體重約5微克至每公斤體重約 500毫克等之範圍。在任何情況下，組合物均可包含多種抗氧化劑以延遲一或多種組分之氧化。另外，可藉由諸如多種抗細菌劑及抗真菌劑之防腐劑預防微生物作用，該等防腐劑包括（但不限於）對經基苯旨（例如對歸苯甲酸甲醋、對經基苯甲酸丙酉旨）、氯丁醇、苯齡、山梨酸、硫柳汞或其組合。免疫結合物可調配為呈游離驗、中性或鹽形式之組合 2。醫藥學上可接受之鹽包括酸加成鹽，例如與蛋白質組 2之游離胺基形成的鹽，或與例如鹽酸或魏之無機酸趟兮乙—馱、酒石酸或杏仁酸之有機酸形成的现。與游離'縣形成之鹽亦可源自例如氫氧化納、氯氧化 149654.doc •153· 201119672 钟、氫氧化敍、氫氧化㉟或氫氧化鐵之無機驗及諸如異丙胺、三甲胺、組胺酸或普魯卡因(pr〇caine)之有機鹼。在組合物呈液體形式之實施例中，載劑可為溶劑或分散介質，其包含（但不限於）水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇、液態聚乙二醇等）、脂質(例如，甘油三醋、植物油、脂質體)及其組合。例如藉由使用包衣，諸如卵磷脂；藉由分散於例如液態多元醇或脂質之載劑中來維持所需粒度；#由使用例如經丙基纖維素之界面活性劑；或該等方法之組合，從而可維持適當流動性。在許多情況下，較佳將包括等張劑（例如糖、氣化鈉或其组合）及/或緩衝劑以維持生理學上可接受之pH值。在其他貫施例中’在本發明中’吾人可使用滴眼劑、鼻用冷液或喷霧、氣溶膠或吸人劑。該等組合物通常設計成 =標紙組織類型相容。在—非限制性實例中，鼻用溶液通吊為。又汁成以滴劑或喷霧形式投與鼻腔之水溶液。製備鼻用岭液以使仔其在許多方面類似於鼻液⑻， '使得、准持正常纖毛作用。因此，在—些實施例中，水性鼻用洛液通吊為等張的或略微經緩衝以維持約$ $至約6 $ 之阳值。另外，需要時，類似於眼用製劑、藥物或適當藥物穩疋劑中所用的抗微生物防腐劑可包括在調配物中。舉 [J而》彳種市售鼻用冑劑為已知的且包括諸如抗生素或抗組織胺之藥物。在某二貫施例中，製備藉由諸如經口攝取之途徑來投與的免疫、&物。在此等實施例中，固體組合物可包含例如 149654.doc 201119672 溶液、懸浮液、乳液、錠劑、丸劑'膠囊（例如硬殼或軟殼明膠膠囊）、持續釋放調配物、頰用組合物、糖衣錠、酏劑、懸浮液、糖漿、粉片或其組合。口服組合物可直接與膳食食品合併。用於經口投藥之較佳載劑包含惰性稀釋劑、可同化可食用載劑或其組合。在本發明之其他態樣中，口服組合物可製成糖漿或酏劑形式。糖漿或酏劑可包

含例如至少一種活性劑、甜味劑、防腐劑、調味劑、染料、防腐劑或其組合。在某些實施例中，口服組合物可包含—或多種黏合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、調味劑及其組合。在某些實施例中，組合物可包含以下一或多I:黏合劑，例如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米澱粉、明膠或其組合；賦形劑，例如填酸二約、甘露糖醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精納、纖維素、碳酸鎮或其組合；崩解劑，例如玉米殿粉、馬鈴兽殿粉、海藻酸或其組合；潤滑劑，例如硬脂酸鎂；甜味 ::广如蔗糖、乳糖、糖精或其組合；調味劑，例如胡椒 /何、冬青油、櫻桃調味劑、橙子調味劑f ;或上述之植合。當單位劑型為膠囊時，除以上類型之物質以外，盆亦可含有液態載劑。多種其他物f可以包衣形式存在或^直他方式改變劑量單位之物理形式。舉例而言，錠劑、丸劑或膠囊可用蟲膠、糖或兩者包覆膜衣。二於其他投藥模式之其他調配物包括栓劑力重：及形狀之插入直腸、陰道或尿道中之固體劑型二樂物。插入後’栓劑軟化、炫化或溶解於腔流體中。 149654.doc -155 - 201119672 般而。，對於栓劑而言，傳統載劑可包括例如聚伸烧基二醇、三酸甘油酯或其組合。在某些實施例中，栓劑可由含有例如約0.5%至約10%且較佳約1%至約2%之範圍㈣活性成份之混合物形成。滅菌可注射溶液係如下製備：將所需量之本發明的免疫結合物視需要與以上所列舉之多種其他成份一起併入適當溶劑中，繼而過濾滅菌。一般藉由將多種經滅菌之活性成份併入含有基本分散介質及/或其他成份之滅菌媒劑中來製備分散液。在用於製備滅菌可注射溶液、懸浮液或乳液之滅菌粉末的情況下，較佳製備方法為真空乾燥或冷凍乾燥技術，其由預先過濾滅菌之液體介質產生活性成份加任何其他所需成份之粉末。必要時，液體介質應適當地經緩衝，首先使液體稀釋劑等張然後隨足夠食鹽水或葡萄糖注射。亦涵蓋用於直接注射之高度濃縮組合物的製備，其中預想使用DMSO作為溶劑以產生極快滲透，從而將高濃度之活性劑傳遞至小區域。組合物在製造及儲存條件下必須穩定，且經防腐處理以免觉諸如細菌及真菌之微生物的污染作用。應瞭解，應使内毒素污染最低程度地保持達安全水準，例如小於0.5 ng/mg蛋白質。在特定實施例中’可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中使用延遲吸收之藥劑（例如單硬脂酸鋁、明膠或其組合）來達成。包含本發明免疫結合物的醫藥組合物可藉助於習知混 149654.doc •156- 201119672 合、溶解、粒化、製備糖衣藥丸、水磨、乳化、囊封'覆 f或来乾過程來製造。醫藥組合物可以習知方式使用一或夕種生理子上可接叉之載劑、稀釋劑、賦形劑或助劑調配，=等載劑、稀釋劑、賦形劑或助劑有助於將蛋白質加工成醫藥學上可使用之製劑。適當調配物視所選投與途徑而定》對於表面投藥，本發明免疫結合物可調配成如此項技術 • 中熟知之溶液、凝膠、軟膏、乳膏、懸浮液等形式。全身調配物包括設計成藉由注射（例如皮下、靜脈内、肌肉内u或腹膜内注射）投與之彼等調配物，以及設冲成經皮、經黏膜、吸入、經口或經肺投與之彼等調配物。對於注射，本發明免疫結合物可在水溶液中，較佳在生理學上相容之緩衝液（諸如漢克氏液（Hanks, s〇lution)、林格氏液（Ringer’s s〇luti〇n)或生理食鹽水緩衝液）中調配。溶 # 液可含有諸如懸浮劑、穩定劑及/或分散劑之調配劑。或者，免疫結合物可呈在使用之前用適合之媒劑（例如滅菌無熱原質之水）復原的粉末形式。對於經黏膜投藥，在調配物中使用適於待滲透之障壁的渗透劑。該等滲透劑通常為此項技術所知。對於經口投藥，免疫結合物可容易藉由將免疫結合物與此項技術中熟知之醫藥學上可接受之載劑組合來調配。該等載劑使本發明免疫結合物能夠調配成錠劑、丸劑、糖衣藥丸、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、懸浮液及其類似 H9654.doc -157- 201119672 待治療之患者經口攝取。對於σ服固體調配物 1 1囊及㈣），適合之賦形劑包括填充劑，諸例如礼糖、庶糖、甘露糖醇及山梨糖醇；纖維素製 1王米瓜畚、小麥搬粉、米澱粉、馬鈴薯激粉、明蓍膠、甲基纖維素、經丙基甲基纖維素、叛甲基纖 $素#Ϊ及/或聚乙稀対㈣（PVP);成粒劑；及結合劑。必要時’可添加崩解劑，諸如交聯聚乙稀対。定酮、複脂或海藻酸或其鹽（諸如海藻酸鈉）。必要時’固體劑型可使用標準技術包覆糖衣或包覆腸衣。對於口服液體製劑（例如懸浮液、酏劑及溶液），適合之載劑賦形劑或稀釋劑包括水 '二醇、油、醇等。另外，可添加調味劑、防腐劑、著色劑及其類似物。對於、屋頰技藥，免疫結合物可採用以習知方式調配之鍵劑、口含劑等形式。對於藉由吸入投藥，根據本發明使用之免疫結合物宜藉由使用適合之推進劑（例如二氣二氟曱烷、三氣氟甲烷、一氣四氣乙燒、二氧化碳或其他合適之氣體）以來自加壓包裝或噴霧器之氣溶膠喷霧形式來傳遞。在加壓氣溶膠之情況下’劑量單位可藉由提供閥門以傳遞計量量來確定。用於吸入器或吹入器中之凝膠的膠囊及濾筒可調配成含有免疫結合物與諸如乳糖或澱粉之適合粉末基質的粉末混合物。免疫結合物亦可調配於諸如例如含有習知栓劑基質（諸 149654.doc -158· 201119672 如可可月曰或其他甘油醋）的栓劑或保留灌腸劑之直腸或陰道組合物中。除先前所述之調配物外，免疫結合物亦可調配成儲槽式製劑。§亥等長效調酉己物可藉由植入（例士口皮下或肌肉内）或藉由肌肉内注射來投與。因此，舉例而言，免疫結合物可與適合之聚合或疏水性物質（例如呈可接受油中之乳液形式）或離子乂換樹脂一起調配，或調配為微溶衍生物，例 ^ 如微溶鹽。或者，可使用其他藥物傳遞系統。脂質體及乳液為可用於傳遞本發明免疫結合物的傳遞媒劑之熟知實例。亦可使用某些有機溶劑（諸如二曱亞砜），儘管通常以較大毒性為代價。另外，免疫結合物可使用諸如含有治療劑之固體聚合物的半透性基質之持續釋放系統來傳遞◊熟習此項技術者已確定且熟知各種持續釋放物質。持續釋放膠囊可視其化學性質而釋放免疫結合物歷時數週至超過1〇〇天。視免 Φ 疫結合物之化學性質及生物穩定性而定，可使用使免疫結合物穩定之其他策略。因為本發明免疫結合物可含有帶電側鏈或末端，所以其可以游離酸或驗形式或以醫藥學上可接受之鹽形式包括在任何上述調配物中。醫藥學上可接受之鹽為實質上保留游離鹼之生物活性且藉由與無機酸反應來製備之彼等鹽。醫藥鹽傾向於比相應游離鹼形式更易溶於水性及其他質子性溶劑中。本發明免疫結合物通常將以有效達成所欲目的之量來使 149654.doc -159- 201119672 用。對於用於治療或預防疾病病狀，本發明免疫結合物或其醫藥組合物係以治療有效量投與或施用。治療有效量為有效改善或預防症狀、或延長待治療患者之存活的量。治療有效量之確定完全在熟習此項技術者之能力範圍内，尤其根據本文所提供之詳細揭示内容。對於全身投藥’治療有效劑量可最初由活體外分析來估 a十。舉例而言’劑量可在動物模型十調配以達成循環濃度範圍，包括如在細胞培養物中所測定之IC5〇。該資訊可用於更精確地測定適用於人類之劑量。初始劑量亦可使用此項技術中熟知之技術由活體内資料 (例如動物模型）估計。一般技術者可容易基於動物資料優化對人類之投藥。劑量及時間間隔可個別地調整為提供足以維持治療效果之免疫結合物的血漿含量。藉由注射投與之常用患者劑量在每天約0.1 mg/kg至50 mg/kg、通常每天約〇 5瓜以“至工 mg/kg之範圍内。治療有效血清含量可藉由每天投與多次劑量來達成。在局部投藥或選擇性吸收之情況下，免疫結合物之有效局部濃度可能與血漿濃度無關。熟習此項技術者將能夠在無需過度實驗之情況下優化治療有效局部劑量。免疫結合物之投藥量當然將視所治療之個體、個體之體重、病痛之嚴重程度、投藥方式及處方醫師之判斷而定。當症狀可侧時或甚至當症狀不可偵測時，1間歇地重複療法。療法可單獨提供或與其他藥物組合提供。在自體 149654.doc -160- 201119672 免疫病症之情況下’可與本發明免疫結合物組合使用的藥物包括（但不限於）類固醇及非類固醇消炎劑。毒性治療有效劑量之本文所述之免疫結合物通常將提供治療性益處而不會引起實質毒性。免疫結合物之毒性可藉由標準藥物程序在細胞培養物或實驗動物中測定，例如藉由測定LDSQ(致50%群體死亡之劑量）或LDig()(致1〇〇%群體死亡 Φ 之劑量）。毒性作用與治療作用之間的劑量比率為治療指數。在一實施例中，免疫結合物展現高治療指數。自此等細胞培養物分析及動物研究獲得之資料可用於調配例如對用於人類無毒之劑量範圍。本文所述之免疫結合物的劑量較佳處於包括毒性極小或無毒性之有效劑量的循環濃度範圍内。劑量可視所用劑型及所用投藥途徑而在此範圍内變化。精確調配、投藥途徑及劑量可由個別醫師鑒於患者之病況而進行選擇。（參見例如Fingl等人，1975，The Φ Pharmacologlcal Basis of Therapeutics，第 1 章，第 i 頁）（以全文引用的方式併入本文中）。其他藥劑及治療預期其他藥劑可與本發明組合使用以改善治療之治療性功效。此等其他藥劑包括免疫調節劑、影響細胞表面受體及間，接合之上調的藥劑、細胞生長抑制劑及分化劑、細胞黏著抑制劑或增加過度增生細胞對細胞洞亡誘導劑之敏感性的藥劑。免疫調節劑包括腫瘤壞死因子；干擾素a、P 及γ; IL-2及其他細胞因子；F42K&其他細胞因子類似 149654.doc • 161 - 201119672 物；或狐卜聰小膽心⑽則及其他趨化因子。進一步預期、細胞表面受體或其配位體（諸如Fas/Fas配位體、聰或DR5/TRAIL)之上調將藉由對過度增生細胞具有自分泌或旁分泌作用而增強本發明之細胞〉周 I-, 玄包 | 月 ti 。藉由增加間隙接合之數目而增加細胞間信號傳導將增加對相鄰過度增生細胞群體之抗過度增生作用。在其他^ 施例中’細胞生長抑制劑或分化劑可與本發明組合使用以改善治療之抗過度增生功效。預期細胞黏著抑制劑改善本發明之功效。細胞黏著抑制劑之實例為局部黏著斑激酶 (FAK)抑制劑及洛伐他汀（L〇vastatin)。進一步預期增加過度增生細胞對細胞祠亡之敏感性的其他藥劑（諸如抗體 C225)可與本發明組合使用以改善治療功效。激素療法亦可與本發明結合使用或與先前所述之任何其他癌症療法組合使用。激素之使用m;台㈣些癌症 (諸如礼癌、前列腺癌、卵巢癌或子宮頸癌）以降低某些激素（諸如睾固酮或雌激素）之含量或阻斷其作用。此治療常承與至少一種其他癌症療法組合使用以作為治療選擇或降低轉移風險。本發明免疫結合物亦可與化學療法、放射療法或其他免疫療法結合投與。用於該組合療法之抗癌劑可例如選自以下之群.微管破裂劑（例如長春花生物驗（vinca alkaloid)，諸如長春鹼（vinblastine)或長春新鹼（vincristine);紫杉烷 (taxane)，諸如多西他賓（d〇cetaxel)或太平洋紫杉醇 (paclitaxel)，埃坡黴素（ep〇thii〇ne)，諸如伊沙匹隆 149654.doc -162. 201119672

(ixabepilone))、抗代謝物（例如抗葉酸鹽，諸如曱胺喋呤 (methotrexate)或胺基蝶呤（aminopterin);抗嗓吟劑，諸如氟達拉濱（fludarabine)、6-巯基嘌呤或6-硫鳥嘌呤；抗嘧啶劑，諸如5 -氟尿α密α定、卡培他濱（capecitabine)或吉西他濱 (gemcitabine);羥脲）、拓撲異構酶抑制劑（例如喜樹鹼 (camptothecin)、伊立替康（irinotecan)、拓朴替康 (topotecan)或諸如依託泊苷（et0p0Side)之鬼臼毒素 (podophyllotoxin)) 、 DNA嵌入劑（例如阿黴素 (doxorubicin)、道諾黴素（daunorubicin)、放線菌素 (actinomycin)、博來黴素（bleomycin))、烷基化劑（例如環磷酸胺（cyclophosphamide)、苯丁酸氮芥（chlorambucil)、諸如卡莫司汀（carmustine)或尼莫司汀（nimustine)之亞硝脲、鏈佐星（streptozocin)、白消安（busulfan)、順鉑 (cisplatin)、奥賽力始（oxaliplatin)、三伸乙基三聚氰胺、氮烯。坐胺（dacarbazine))、激素療法（例如糠皮質激素、諸如他莫昔芬（tamoxifene)之芳香酶抑制劑、諸如氟他胺 (flutamide)之抗雄激素、諸如免丙立德（ieUpr〇iide)之促性腺激素釋放激素（GnRH)類似物）、抗生素、激酶抑制劑（例如埃羅替尼（erlotinib)、吉非替尼（gefitinib)、伊馬替尼 (imatinib))、受體拮抗劑（例如標靶已知促進癌發生及腫瘤生長之細胞表面受體的抗體）、酶抑制劑（例如週期素依賴性激酶（CDK)抑制劑）、胺基酸消耗酶（例如天冬醯胺酶卜甲醯四氫葉酸（leucovorin)、類視色素、腫瘤細胞凋亡活化劑及抗血管生成劑。 149654.doc -163- 201119672 實例 Ά 1 W抗體介導之細胞因子傳遞最先由Harvin Ε τ及 Morrison S.L. Immunotech. /^).95 10Wlo 嚐躺曰— "々·95-1〇5 (1995)進行時，構肖於腫瘤抗縣向之兩個抗原結合部分及用於誘巴細胞活化之兩個細胞因子部分似分子融合於挪 =各重鏈C端）。細胞因子對其受體之親和性通常較高

有兩個細胞因子i开夕a1i A 早兀之刀子由於親和力(或多價)作用而可對細胞因子受體具有甚至更高的親和性。因此，該分子可谷易活化血流中之淋巴細胞，甚至在乾向腫瘤之前。此作用對於患者將為不需要的。相比之下，僅帶有一個細胞因 :部分及兩個或兩個以上標靶域之免疫結合物分子活化循環中之淋巴細胞的可能性較小且可將整個免疫結合物分子引導至腫瘤’由此淋巴細胞活化可以較低速度進行。因此，使用介白素-2(IL-2)作為模型細胞因子來構築圖1及2 如中所示之分子。如圖式中所指示，所有產生之分子對於腫瘤抗原均為二價的，且對於江_2細胞因子均為二價或單镉的。例如使用L19抗體，比較兩種不同免疫結合物形式對於抗原之親和性。作為參考，將此抗體選殖至人類IgQ1 形式、微型雙功能抗體形式（圖1A)及Fab_IL2_Fab融合物 (圖1B)中。在微型雙功能抗體形式中測試一種變數以使得 vH與vL之間的連接肽之長度為8或12個胺基酸。將經純化之抗原，即纖維結合蛋白之外域B(EDB)固定於biac〇re 晶片上且使用抗體融合構築體作為親和性測定之可溶性分 149654.doc -164· 201119672 析物。圖8至11展示此實驗之結果。IgG被視為二價結合事件之理想情況。此處’觀察到2 6 0 p Μ之親和性常數。 Fab-IL2-Fab融合構築體產生31〇 ΡΜ之親和性，其基本上與IgG相同。微型雙功能抗體之兩種變異體（圖⑺及丨丨中所示）分別測得親和性為270 ΡΜ及360 ρΜ。因此，所有此等構築體均具有類似的對於抗原之親和性。對於抗原及江_2 受體之親和性係使用基於F 1 6抗體序列之類似構築體來解 • 決（Brack, S.S.等人，Cawc. /2(7(^):3200-3208 (2006))。圖12展示當TNC-A1域固定於BIACORE晶片上時 F16 IgG及其相應單價Fab片段之BIACORE感應圖。在此等特定實驗條件下’ IgG分子顯示2.6 nM之親和性常數，且 Fab分子顯示50 nM之親和性常數。此處，歸因於二價之親和性的增加為20倍。微型雙功能抗體、

scFV-IL2-SCFv免疫結合物分別顯示5 nM、4.8 nM及12 nM 的對於抗原之親和性。因此，所有此等構築體對於抗原所 • 具有之親和性相較於Fab片段之單價特性，其更為接近地類似於IgG分子之二價特徵。當著眠於對於IL-2受體之親和性時，差異更顯著。為了研究IL-2受體結合親和性，產生允許表現雜二聚IL_2受體之工具；IL-2受體之β鏈融合於經工程改造以使用「結至孔中（knobs-into-holes)」技術（Merchant，ΑΜ 等人，扪Μ:677-681 (1998))雜二聚化（Fc(結”之以分子。接著IL-2受體之γ鏈融合於FC(孔）變異體，其與Fc(結）雜二聚化。接著使用此雜二聚Fc-融合蛋白作為分析IL 2/IL_2 149654.doc •165- 201119672 受體相互作用之受質。圖13展示作為分析物之市fiL2(普留淨）及經固^之IL_2受體的BIACC)RE感應圖。測得之約 0.5 nM的親和性與先前公佈之值一致。多種構築體對於 IL-2受體之親和性總結於圖17中。所觀察到之重要結果為對於細胞因子為二價之微型雙功能抗體（F16 &叫與僅帶有-個IL-2部分之Fab_IL2_Fab分子之間的差p微型雙功能抗體之IL-2受體結合親和性（〇 8 nM)類似於未結合之 IL-2(普留淨）之親和性（0.5 nM) M盡管微型雙功能抗體為二價的而IL-2為單價的。與微型雙功能抗體相比，Fab_iL2_Fab 融合物之IL-2受體結合親和性幾乎降低1〇倍，其反映在如圖19中所示誘導NK92細胞增生之能力降低。實例2 一般Fab文庫之構築基於人類生殖系基因，使用以下¥域配對來構築呈Fab形式之一般抗體文庫：用於DP47_3文庫之vk3—2〇 κ輕鏈及 VH3一23重鏈及用於DP88_3文庫之vu_17 κ輕鏈及vm—69 重鍵。參見表2。使兩個文庫在輕鏈（L3)之cdR3及重鏈 (H3)之CDR3中隨機化且藉由經重疊延伸（s〇E)pCR拼接，由每個文庫3個片段組裝。片段丨包含抗體基因之5，端，包括隨機化L3，片段2為跨越L3至H3之中心‘(·互定片段，而片段3包含隨機化H3及抗體基因之3·部分。使用以下引子組合產生DP47-3文庫之文庫片段：片段1 (LMB3-LibLlb_new)、片段2(MS63-MS64)、片段3(Lib2H-fdseqlong) »參見表9。使用以下引子組合產生DP88-3文庫 149654.doc •166· 201119672 之文庫片段：片段1(LMB3-RJH_LIB3)、片段2(RJH31-RJH32)及片段3(LIB88_2-fdseqlong)。參見表 10。表9

用於DP47-3文庫之引子 LMB3 CAGGAAACAGCTATGACCATGATTAC LibLlb_neAv CACTTTGGTCCCCTGGCCGAACGTMNNGGGMNN3V1NNMMACCCTGCTGAC AGTAATACACTGC MS63 TTTCGCACAGTAATATACGGCCGTGTCC MS64 1 ACGITCGGCCAGGGGACCAAAGTGG Lib2H GGCCGTATATTACTGTGCGAAANNKNNKNNKNNKNNKTTTGACTACTGGGG CCAAGGAAC fdseqlong GACGTTAGTAAATGAAmTCTGTATGAGG 表10

用於DP88-3文庫之引子 LMB3 CAGGAAACAGCTATGACCATGATTAC RJH_LIB3 GACTTTGGTGCCCTGGCCAAACGT MNN GGG MNN MNN ACC MNN CTGCAAGCAGTAATAGGTGGCAAAATC RJH31 ACGTTTGGCCAGGGCACCAAAGTCGAG RJH32 TCTCGCACAGTAATACACGGCGGTGTCC LIB88_2 GGACACCGCCGTGTATTACTGTGCGAGA -[(33% GAC Asp; 26% GGT Gly; 10% GAA Glu; 9% CGT Arg; 7% Lys; 6% GTT Val; 5% TCT Ser; 4% CTG Leu) 1 - (23% GGT Gly; 17% TAC Tyr; 16% TCT Ser; 11% GCT Ala; 9% CGT Arg; 7% AAC Asn; 6% ACT TTir; 6% GTT Val; 5% CCG Pro)8]-TnGACTACTGGGGCCAAGGGACCACCGTGACCGTCTCC fdseqlong GACGnAGTAAATGAATmCTGTATGAGG 用於產生文庫片段之PCR方案包括：在94t：下5分鐘之

初始變性；在94°C下1分鐘、在58°C下1分鐘及在72°C下1 分鐘之25個循環；及在72°C下10分鐘之末端伸長。對於組裝PCR，使用等莫耳比率之3個片段作為模板。組裝PCR方案包括：在94°C下3分鐘之初始變性；及在94°C下30秒、在58°C下1分鐘及在72°C下2分鐘之5個循環。在此階段，添加與片段1-3外序列互補之引子且再進行20個循環，隨後在72°C下末端伸長10分鐘。 149654.doc -167- 201119672 組裝足夠量之全長隨機化F ab構築體後，除經類似處理之接受體噬菌粒載體外’對於DP47-3文庫用iVcoI/iVoil及對於DP88-3文庫用iVcoI/錄el消化Fab構築體。對於DP47-3文庫，將22.8 pg Fab文庫與16.2 噬菌粒載體接合。對於 DP88-3文庫’將30.6 pg Fab文庫與30.6 pg噬菌粒載體接合。使用經純化之接合，分別對於DP47-3文庫進行68次轉型及對於DP88-3文庫進行64次轉型，獲得對於DP47-3為 4.2x 101。及對於DP88-3為3.3 X 1 〇9之最終文庫大小。回收呈現Fab文庫之噬菌粒粒子且藉由pEG/NaCl純化反應來純化以供選擇使用。實例3 抗TNC A2純系2B10之選擇針對大腸桿菌表現之次選殖至avi標記及6xhis標記之5, 端的人類TNC-A2進行選擇。參見表5中之SEQ ID NO: 57。在表現後對抗原進行活體内生物素標記。根據以下方案’在溶液狀態下進行選擇：（i)在1 m 1之總體積中，使文庫DP88-3之約1012個噬菌粒粒子及10〇 nM生物素標記人類丁>1〇八2結合0.5小時；（丨丨）藉由添加5.4><107個塗有抗生蛋白鏈菌素之磁性珠粒捕捉生物素標記人類TNC-A2及所連接之噬菌體歷時10分鐘；（iii)使用5xl ml PBS/Tween20及5x1 ml PBS洗滌珠粒；（iv)藉由添加1 mL 100 mM TEA(三乙胺）溶離嗤菌體粒子歷時10分鐘且藉由添加5〇〇 pL 1 Μ 1^/11(：1(?117.4)進行中和；及（幻使對數期大腸桿菌1^1細 149654.doc •168· 201119672 胞再次感染，用輔助噬菌體VCSM13感染且隨後對噬菌粒粒子進行PEG/NaCl沈澱以供後續選擇輪次使用。經3輪，使用1〇〇 nM之恆定抗原濃度進行選擇。在第2輪中，在中性鏈親和素培養板而非抗生蛋白鏈菌素珠粒上捕捉抗原：噬菌體複合物。藉由如下將1〇〇 y 1〇〇 nM生物素標記人類TNC-A2塗佈於中性鏈親和素培養板之各孔中之 ELISA鑑別特異性結合物。添加含有Fab之細菌上清液且藉由使用抗Flag/HRp二次抗體，經由Flag標記偵測結合Fab。鑑別出後，在〇 5公升培養體積中用細菌表現純系2B 10，親和純化且進一步藉由 SPR分析，使用BIACORE T100進行表徵β參見表^SEQ ID NO: 3及 7。實例4 抗TNC A1/A4純系2F11之選擇針對大腸桿菌表現之次選殖至avi標記及6xhis標記之5, • 端的人類TNC A1進行選擇。參見表5之沾^ m no: 59。在表現後對抗原進行活體内生物素標記。根據以下方案，在溶液狀態下進行選擇：（i)在1 m丨之總體積中，使文庫 DP47-3之約1012個噬菌粒粒子及1〇〇 nM生物素標記人類 TNC-A1結合〇·5小時；（ii)藉由添加5 4χ1〇7個塗有抗生蛋白鏈菌素之磁性珠粒捕捉生物素標記人類TNC-A1及所連接之噬菌體歷時10分鐘；（iii)使用5x1 mL PBS/Tween20及 5x1 ml PBS洗蘇珠粒；（iv)藉由添加1抓1〇〇 mM TEA(三乙胺）溶離嗤菌體粒子歷時1〇分鐘且藉由添加5〇〇 1 μ 149654.doc •169· 201119672

Tris/HCl(pH7.4)進行中和；及（v)使對數期大腸桿菌TGl細胞再次感染，用輔助噬菌體VCSM13感染且隨後對噬菌粒粒子進行PEG/NaCl沈澱以供後續選擇輪次使用。經3輪，使用100 nM之恆定抗原濃度進行選擇。在第2輪中’在中性鏈親和素培養板而非抗生蛋白鏈菌素珠粒上捕捉抗原：噬菌體複合物。所有結合反應均補充有1 〇〇 nM包含羧基末端avi標記及 6xhis標記之非生物素標記人類IgG CH3恆定域以便競爭得到識別抗原標記的非所需純系。在第一篩選步驟中，藉由如下將10〇 μ1 1〇〇 nM生物素標 έ己人類TNC-ΑΓ塗佈於各中性鏈親和素培養板中之elis a鑑別特異性結合物。添加含有Fab之細菌上清液且藉由使用抗Flag/HRP二次抗體，經由Fiag標記偵測特異性結合於人類 TNC-A1 之 Fab。在第二篩選步驟中，亦使用鼠類TNC-A1、人類tNC A4 及mu TNC A4作為抗原重複上述ELISA以便測定交叉反應性。所有抗原均在其C端包含相同avi標記及6吨18標記且經活體内生物素標記。參見表5iSEQ ID NO: 5〇及61。一旦鑑別出，在0.5公升培養體積中用細菌表現純系 2F11，親和純化且進一步藉由spR分析，使用biac〇re T100進行表徵。參見表3之SEQ ID N〇: 9及13。實例5 抗FAP純系之選擇（初級選擇）針對選殖至聚離胺酸及6xhis標記上游之人類或鼠類纖 I49654.doc -170- 201119672 維母細胞活化蛋白（FAP)之胞外域進行選擇。參見表5之 SEQ ID NO: 53及55。在選擇之前，將抗原以1〇 pg/mw 5 Pg/ml之濃度塗佈於免疫試管中，此視選擇輪次而定。根據以下方案進行選擇：⑴使文庫DP47_3之約1〇ι2個噬菌粒粒子與經固定之人類或鼠類Fap結合2小時；（π)使用5χ5 mL PBS/Tween2〇及5x5 ml PBS洗滌免疫試管；（m)藉由添加1 mL 100 mM TEA(三乙胺）溶離噬菌體粒子歷時10分鐘且藉由添加500 pL 1 M Tris/HCl(pH 7.4)進行中和；及（W) 使對數期大腸桿菌TG1細胞再次感染，用輔助噬菌體 VCSM13感染且隨後對噬菌粒粒子進行PEG/NaCl沈澱以供後續選擇輪次使用。經3或4輪’使用遞減抗原濃度之人類FAp且在一些情況下在最後一輪選擇中使用5 pg/ml之鼠類FAp來進行選擇。以5倍於者景之信號定義特異性結合物且藉由ELISA鑑別。用10 pg/ml人類或鼠類FAp塗mNUNC maxis〇rp培養板，隨後添加含有Fab之細菌上清液並藉由使用抗 Flag/HRP二次抗體，經由Fiag標記偵測特異性結合。在96孔形式中，以J mL培養物，用細菌表現陽性純系且使上清液經受使用BIAC〇RE Tl〇〇之動力學筛選實驗。實例6 抗FAP親和性成熟文庫之構築之抗體構築三個親和性基於自初級抗FAP選擇預先選出成熟文庫。更確切而言’其係基於⑴抗人類FAp純系2D9 149654.doc 201119672 (文庫 a.m.FAP2D9)(參見表 3 之 SEQ ID NO: 67 及 69)、（ii)抗鼠類FAP純系4B8(文庫a_m.FAP4B8)(參見表3之SEQ ID NO: 71 及 73)及（iii)交叉反應性純系 7A1、13B2、13C2、13E8、 14C10 及 17A11(文庫 a.m.FAPpool)(參見表 3 之 SEQ ID NO: 75及77，對應於7A1之可變區序列；表3之SEQ ID NO: 79 及81，對應於13C2之可變區序列；SEQ ID NO: 83及85，對應於13E8之可變區序列；SEQ ID NO: 87及89，對應於 14C10之可變區序列；及SEQ ID NO: 91及93，對應於 17A11之可變區序列）。此等文庫各由兩個子文庫組成，即分別在輕鍵之Cdr 1 及CDR2中隨機化之子文庫（L1/L2)或在重鏈之CDR1及 CDR2中隨機化之子文庫（H1/H2)。在轉型後彙集此等子文庫。此等子文庫各藉由隨後四個步驟之擴增及組裝來構 /r/e 桌0 對於L1 /L2文庫，擴增及組裝方案包括：⑴擴增片段丄 (LMB3-DPK22一CDRl_rand_ba_opt)及片段 2(DPK22 CDR1 fo-DPK^—Ck—AzWI一ba) ; (ii)使用外部引子 LMB3 及 DPK^—CkjhWIjDa組裝片段1及2以形成用於片段3之模板；（iii)擴增片段 3(lmb3_DPK22—CDR2一rand一ba)及片段 4(DPK22_CDR2_f〇-DPK22_Ck 如WI—ba);及（iv)最後使用與以上相同之外部引子組裝片段3及4。引子序列參見表 11 » 149654.doc -172- 201119672 表11 用於抗FAP, 鼠和性成熟之L1/L2親和性成熟文庫的引子 LMB3 CACXjAAACAGCTATGACCATGATTAC DPK22_CDRl_rand_ba_opt CAGGTITCTGCTGGTACCAGGCTAAGTAGCTGCTGCTAACA CTCTGACTGGCCCTGCAAG DPK22 CDR1 fo HAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTG DPK22 Ck Bsm ba GGTGCAGCCACCGTACGTTTGAmCC DPK22_CDR2_rand_ba CTGTCTGGGATGCCAGTGGCCCTGCTGGAGGCGCCATAGAT GAGGAGCCTGGGAGCCTG DPK22 CDR2 fo AGGGCCACTGGCATCCCAGACAG 粗體：60%原始鹼基及40%隨機化為Μ 下劃線：60%原始鹼基及40%隨機化為Ν 對於Η1/Η2文庫，擴增及組裝方案包括：（i)擴增片段1 (RJH53-DP47—CDRl rand ba—opt)及片段 2(DP47_CDR1一 fo-MS52) ; (ii)使用外部引子RJH53及MS52組裝片段1及2 以形成用於片段3之模板；（iii)擴增片段3(RJH53-DP47_CDR2_rand_ba)及片段 4(DP47_CDR2_fo-MS52);及 (iv)最後使用與以上相同之外部引子組裝片段3及4。引子序列參見表12。表12

用於抗FAPI 性成熟之H1/H2親和性成熟文庫的引子 RJH53 CATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCAC DP47_CDRl_rand_ba_opt GAGCCT(XK：(KjACCCAGCTCATGGCATAACTGCTAAAGGTG AATCCGGAGGC DP47 CDR1 fo ATGAGCTGCXiTCCGCCAGGCTC MS52 GAAGACCGATGGGCCTTTGGTGCTAG DP47_CDR2_rand_ba CCnCACGGAGTCTGCGTAGTATGTGCTACCACCACTACCA CTAATAGCTGAGACCCACTCCAGCCCCTTCCC DP47 CDR2 fo ACATACTACGCAGACTCCGTGAAGG 粗體：60%原始鹼基及40%隨機化為Μ 下劃線：60%原始鹼基及40%隨機化為Ν 149654.doc -173· 201119672 分別基於純系2D9、4B8或純系7A1、13B2、13C2、 13E8、14C10及17A11之等莫耳混合物的質體製備，除經類似處理之接受體載體外，分別對於a.m.FAP2D9及 a_m.FAP4B8 之 L1/L2 子文庫用 iVcoI/B以.WI 、對於 a.m.FAP2D9及 a.m.FAP4B8 之 H1/H2 子文庫用及 A^/zel、以及對於a.m.FAPpool之L1/L2文庫用TVcoI/eamHI、及對於 a.m.FAPpool之H1/H2文庫用抑EIAPWI消化最後組裝產物。對於各別文庫接合以下量之經消化的隨機化（部分）V 域及經消化的接受體載體（gg V域載體）：a.m.FAP2D9 L1/L2 子文庫（5.7/21.5)、a.m.FAP2D9 H1/H2 子文庫 (4.1/15.5) ' a.m.FAP4B8 L1/L2 子文庫（6.5/24.5)、 а. m.FAP4B8 H1/H2子文庫（5.7/21.5)、a.m.FAPpool L1/L2 子文庫（4.4/20)、a.m.FAPpool H1/H2子文庫（3.4/15.5)。彙集L1/L2及H1/H2子文庫之經純化的接合且對於3個親和性成熟文庫各進行60次轉型，獲得對於a.m.FAP2D9為 б. 2xl09、對於 a.m.FAP4B8 為 9·9χ109 及對於 a.m.FAPpool 為 2.2xl09之最終文庫大小。回收呈現此等Fab文庫之噬菌粒粒子且藉由PEG/NaCl純化反應來純化以供二次選擇使用。實例7 親和性成熟之抗FAP純系的選擇針對選殖至聚離胺酸及6xhis標記之5’端的人類或鼠類纖維母細胞活化蛋白（FAP)之胞外域進行選擇。參見表5之 SEQ ID NO: 53及55。在選擇之前，將抗原以10 pg/mL、5 149654.doc -174- 201119672 pg/mL或0.2 pg/mL之濃度塗佈於免疫試管中，此視文庫及選擇輪次而定。根據以下方案進行選擇：（i)使文庫 a.m.FAP2D9、a.m.FAP4B8 或 a.m.FAPpool 之約 1012 個嗤菌粒粒子與經固定之人類或鼠類FAP結合2小時；（ii)使用 10-20x5 mL PBS/Tween20及 10-20x5 mL PBS(視文庫及選擇輪次而定）洗蘇免疫試管；（iii)藉由添加1 mL 100 mM TEA(三乙胺）溶離噬菌體粒子歷時1 〇分鐘且藉由添加5〇〇 41^114 1'1^/11(：1(?^17.4)進行中和；及(^)使對數期大腸桿菌TG1細胞再次感染，用輔助噬菌體VCSM13感染且隨後對噬菌粒粒子進行PEG/NaCl沈澱以供後續選擇輪次使用。經2輪進行選擇且對於3個文庫各自個別地調整條件。詳言之’選擇參數為：a.m.FAP2D9(第1輪總共5 pg/mL人類 FAP及20次洗滌，第2輪總共1 pg/mL人類FAP及30次洗滌）、a.m.FAP4B8(第1輪總共1 pg/mL鼠類FAP及30次洗滌，第2輪總共0.2 pg/mL人類FAP及40次洗滌）及 a.m.FAPpool(第1輪總共5 pg/mL人類FAP及30次洗滌，第2 輪總共5 pg/mL鼠類FAP及30次洗滌）。以5倍於背景之信號定義特異性結合物且藉由ELISA鑑別。用1 pg/mL或0.2 pg/mL人類或鼠類FAP塗佈NUNC maxisorp培養板，隨後添加含有Fab之細菌上清液並藉由使用抗Flag/HRP二次抗體，經由Flag標記偵測特異性結合Fab。在96孔形式中’以1 mi培養物，用細菌表現ELISA陽性純系且使上清液經受使用BIACORE T100之動力學篩選實驗0 149654.doc -175- 201119672 實例8 不同形式之標靶性IL-2的功效研究使用對腫瘤基質具有特異性之兩種不同介白素免疫結合物分子形式進行功效實驗。將趵畸胎上皮癌經皮下注入 129SvEv小鼠體内，且使用測徑規量測腫瘤尺寸。在兩種不同濃度下比較「微型雙功能抗體」_IL_2分子與Fab-介白素-2-Fab(Fab-IL2-Fab)免疫結合物，其中該等濃度反映免疫結合物分子之類似數目。結果展示於圖3中。FabiL2_Fab 免疫結合物顯示明顯腫瘤生長抑制且在兩種不同濃度下優於微型雙功能抗體形式並優於對照組。亦檢查經對腫瘤基質具有特異性之兩種不同介白素_ 2免疫結合物分子形式處理的小鼠之存活。將人類胃腫瘤細胞株LS174T經脾内注入SCID灰棕色小鼠體内。在兩種不同濃度下比較「微型雙功能抗體」-IL_2分子與Fab-lL-2-Fab 免疫，纟σ &物’其中。亥荨濃度反映免疫結合物分子之類似數目。結果展示於圖4中。與微型雙功能抗體形式及對照組相比’ Fab-IL-2-Fab形式存活％較高。實例9 重組DNA技術使用標準方法操作DNA，如Sambrook，J.等人， Molecular cloning: A laboratory manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，New York，1989 中所述。根據製造商之說明書使用分子生物學試劑》關於人類免疫球蛋白輕鏈及重鏈之核苷酸序列的一般資 149654.doc -176· 201119672 訊在 Kabat, E.A_等人，（1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第 5版，NIH Publication No 91-3242給出。 DNA測序藉由雙股測序來測定DNA序列。基因合成藉由 Geneart AG(Regensburg，Germany)，由合成寡核苦酸及自動基因合成之PCR產物製備所需基因區段。將由單個限制性核酸内切酶裂解位點側接之基因區段選殖至 pGA18(ampR)質體中。純化經轉型細菌的質體DNA且藉由 UV光譜法測定濃度。藉由DNA測序來確認次選殖基因片段之DNA序列。基因區段經設計具有適合之限制性位點以允許次選殖至各別表現載體中。所有構築體均設計具有編碼目的為使蛋白質在真核細胞中分泌之前導肽的5'端DNA 序列。表13及14分別給出例示性前導肽及編碼其之聚核苷酸序列。表13 用於分泌之前導序列：多酞序列。多肽序列 SEQ ID NO MDWTWRILFLVAAATGAHS 273 MDMRVPAQLLGLLLLWFPGARC 276 MGWSCIILFLVATATGVHS 278 149654.doc -177- 201119672 表14 用於分泌之前導序列：聚核苷酸序列。聚核苷酸序列 SEQIDNO ATGGACTGGACCTGGAGAATCCTCrrCTTGGTGGCAGCAGCC ACAGGAGCCCACTCC 274 ATGGACTGGACCTGGAGGATCCTCTTCTTGGTGGCAGCAGCC ACAGGAGCCCACTCC 275 ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGCCTCCTGCTGC TCTGGTTCCCAGGTGCCAGGTGT 277 ATGGGATGGAGCTGTATCATCCTCTTCTTGGTAGCAACAGCTA CCGGTGTGCATTCC 279 ATGGGCTGGTCCTGCATCATCCTGTTTCTGGTGGCTACCGCCA CTGGAGTGCATTCC 280 ATGGGCTGGTCCTGCATCATCCTGTITCTGGTCGCCACAGCCA CCGGCGTGCACTCT 281 免疫結合物之製備在MPSV啟動子的控制下在合成polyA位點之上游將所得 DNA序列次選殖至哺乳動物表現載體中（一者用於輕鏈且另一者用於重鏈/融合蛋白），各載體帶有EBV OriP序列。以下實例中所用之免疫結合物係藉由使用磷酸鈣轉染，用哺乳動物表現載體共轉染指數生長之HEK293-EBNA細胞來製造。或者，藉由聚伸乙基亞胺（PEI)，用表現載體轉染生長於懸浮液中之HEK293細胞，或使用經穩定轉染之 CHO細胞池。雖然基於3F2及4G8且靶向FAP之Fab-IL2-Fab 構築體可藉由使用蛋白質A基質之親和層析來純化，但基於2B10且靶向TNC A2之Fab-IL2-Fab構築體必須藉由蛋白質G基質親和層析來純化。簡言之，藉由一個親和步驟（蛋白質G)，隨後尺寸排阻層析（Superdex 200，GE Healthcare)，自上清液純化把向 149654.doc -178- 201119672 TNC A2 之 2B10 Fab-IL2-Fab。以 20 mM 填酸納、20 mM 擦檬酸鈉（pH 7.5)平衡蛋白質G管柱，裝載上清液，且用20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉（pH 7.5)洗滌該管柱。用8.8 mM曱酸（pH 3)溶離Fab-IL2-Fab。彙集溶離份且藉由尺寸排阻層析，用如下最終調配緩衝液來高度純化：25 mM磷酸鉀、125 mM氯化鈉、100 mM甘胺酸（pH 6.7)。圖50展示來自純化及分析學之例示性結果。

靶向FAP之 3F2 Fab-IL2-Fab 或 4G8 Fab-IL2-Fab係藉由由一個親和步驟（蛋白質A)、隨後尺寸排阻層析（Superdex 200，GE Healthcare)構成之類似方法純化。以20 mM填酸鈉、20 mM檸檬酸鈉（pH 7.5)平衡蛋白質A管柱，裝載上清液，且用20 mM石粦酸納、20 mM擰檬酸納、500 mM氣化鈉 (pH 7.5)洗滌該管柱，隨後用13.3 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉、500 mM氣化鈉（pH 5.45)洗滌。視情況用10 mM MES、50 mM氣化鈉（pH 5)進行第三次洗滌。用20 mM檸檬酸鈉、100 mM氣化鈉、100 mM甘胺酸（pH 3)溶離 Fab-IL2-Fab。彙集經溶離之溶離份且藉由尺寸排阻層析，用如下最終調配緩衝液來高度純化：25 mM磷酸鉀、125 mM氯化納、100 mM甘胺酸（pH 6.7)。實例1 0 其他抗FAP親和性成熟文庫之構築（基於純系3F2、 3D9、4G8、4B3及 2C6) 基於自抗FAP抗體之第一親和性成熟期預先選出之交叉反應性抗體（亦即純系3F2、3D9、4G8、4B3及2C6)構築另 149654.doc -179- 201119672 外四個親和性成熟文庫（參見表3之SEQ ID NO: 17及21，對應於3F2之可變區序歹4 ;表3之SEQ ID NO: 23及25，對應於3D9之可變區序列；表3之SEQ ID NO: 33及35，對應於4B3之可變區序列；表3之SEQ ID NO: 41及43，對應於 2C6之可變區序列）。更確切而言，四個文庫係基於1)抗 FAP純系3F2、4G8及4B3(在可變重鏈之CDR 1及2中隨機化之VH文庫，亦即H1/H2文庫）、2)抗FAP純系3D9及2C6(在可變輕鏈之CDR 1及2中隨機化之VL文庫，亦即L1/L2文庫）、3)抗FAP純系3F2(在輕鏈CDR3中軟隨機化之L3文庫，亦即L3文庫）及4)抗FAP純系3F2(在重鏈CDR3中軟隨機化之H3文庫，亦即H3文庫）。分別對於L1/L2及H1/H2文庫，以如抗FAP抗體之第一親和性成熟期所概述完全相同之方式構築頭兩個文庫。相比之下，對於基於純系3F2之 L3及H3親和性成熟文庫，使用兩個新引子在親本純系之 L3(AM_3F2_DPK22_L3_ba : CACTTTGGTCCCCTGGCCGAACGT CGGGGGAAGCA TAATACCCTGCTGACAGTAATACACTGC，其中加下劃線之鹼基為60%既定鹼基且40%混合物N(四種核苷酸A、C ' G、及T之混合物）)及H3(AM_3F2_DP47_H3_fo : GGCCGTATATTACTGTGCG AjA GGG TGG ΤΤΓ GGT GGT ITT 4AC TACTGGGGCCAAGGAAC，其中加下劃線之鹼基為60%既定鹼基且40%混合物N，斜體鹼基為60%既定鹼基及40%G，以及加下劃線之斜體鹼基為60%既定鹼基及 40%混合物K(兩種核苷酸G與T之混合物））中引入軟隨機化。文庫大小如下：H1/H2文庫（1.13xl01G)、L1/L2文庫 149654.doc -180- 201119672 (5.6xl09)、L3 文庫（2·3χ101())及 H3 文庫（2.64X1010)。實例11 親和性成熟之抗FAP純系的選擇針對選殖至6χ離胺酸及6xhis標記之上游的人類及鼠類纖維母細胞活化蛋白（FAP)之胞外域進行選擇（參見表5之 SEQ ID NO: 53及55)。在選擇之前，將抗原以1 μ§/η^、 0.2 pg/ml或0.02 pg/ml之濃度塗佈於免疫試管中，此視文庫及選擇輪次而定。如對於抗FAP抗體之第一親和性成熟期所述，進行選擇及墓於ELISA之篩選。使用ProteOn XPR36生物感測器（Biorad)進行二次篩選，且藉由在同一儀器上分析親和純化之Fab製劑來測定動力學速率常數及親和性。鑑別出以下親和性成熟之純系：19G1(參見表3之 SEQ IDNO: 121 及 123)、20G8(參見表 3之 SEQ ID NO: 125 及 127)、4B9(參見表 3 之 SEQ ID NO: 129及 131)、5B8(參見表 3之 SEQ ID ΝΟ:·133及 135)、5F1(參見表 3 之 SEQ ID NO: 137及 139)、14B3(參見表 3 之 SEQ ID NO: 141 及 143)、 16F1(參見表 3 之 SEQ ID NO: 145 及 147)、16F8(參見表 3 之 SEQ ID NO: 149及 151)、〇3C9(參見表 3之 SEQ ID NO: 153 及 155)、22A3(參見表 3 之 SEQ ID NO: 165 及 167)及 29B11(參見表3之SEQ ID NO: 169及171)(所有此等純系均選自H1/H2文庫且源自親本純系3F2)、02D7(參見表3之 SEQ ID NO: 157及159)(選自L3文庫，基於親本純系3F2)、及28H1(參見表3之SEQ ID NO: 161及163)及23C10(參見表 3之SEQ ID NO: 173及175)(此兩個純系選自H1/H2文庫且 149654.doc -181 - 201119672 源自親本純系4G8)。圖21-25展示所選針對FAP之親和性成熟Fab的表面電漿子共振感應圖且表15給出各別親和性。所選Fab跨越在pM 至nM範圍内之高親和性範圍且對於人類（hu)及鼠類 (mu)FAP以及獼猴（cyno)FAP具有交叉反應性，如對於所選純系所測定。使親和性成熟之抗FAP Fab轉化為Fab-IL2-Fab形式。由於不結合於表現於HEK293或CHO細胞上之作為FAP之接近同源物的DPPIV而顯示結合特異性。表15 呈Fab片段（單價結合）形式之親和性成熟之抗FAP抗體的動力學平衡常數（KD)之總結。抗體對於hu FAP之對於mu FAP之對於cyno FAP之親和性(KD)[pM】親和性(KD)[pM] 親和性(KD)[pM] 19G1 76 2600 n.d. 20G8 69 2800 n.d. 4B9 157 3300 n.d. 5B8 690 3200 n.d. 5F1 243 4100 n.d. 14B3 377 3800 n.d. 16F1 193 3400 n.d. 16F8 301 3800 n.d. 03C9 160 3700 n.d. 02D7 619 8300 n.d. 28H1 200 9 3600 22A3 34 655 522 29B11 35 436 23 23C10 1600 125 990 149654.doc -182· 201119672 實例12 抗TNC A2親和性成熟文庫之構築（基於純系2B10) 基於自初級TNC A2選擇預先選出之抗體構築親和性成熟文庫。更確切而言，其係基於親本純系2B 1 0且由兩個子文庫組成：1)在輕鏈之CDR1及CDR2中隨機化之VL子文庫 (L1/L2);及2)在重鏈之CDR1及CDR2中隨機化之VH子文庫 (H1/H2)。在轉型後彙集此等子文庫。此等子文庫各藉由隨後四個步驟之擴增及組裝來構築。對於L1/L2文庫：1) 擴增片段 l(LMB3-AM_VklA30_Ll_ba)及片段 2(RJH50 (VklA30_Ll/L2_fo)-RJH51(VklA30_BsiWI一ba))、2)使用外部引子LMB3及RJH5 1(VklA3 0_BsiWI_ba)組裝片段l及2 以形成模板、3)擴增片段3(LMB3-AM_VklA30_L2_ba)及片段 4(RJH52(VklA30_L2/L3)-RJH51(VklA30_BsiWI_ba))、及4)最後使用與以上相同之外部引子組裝片段3及4。對於 H1/H2 文庫：1)擴增片段 l(RJH53-AM_DP88_Hl_ba_opt)及片段 2(RJH54(DP88_Hl/H2_fo)-MS52)、2)使用外部引子 RJH53及MS52組裝片段1及2以形成模板、3)擴增片段3 (RJH53-AM_DP88_H2_ba)及片段4(RJH55(DP88_H2H3一f〇)-MS52)、及4)最後使用與以上相同之外部引子組裝片段3及4。對於 VL子文庫用iVcoIASWWI及對於VH子文庫用MwM及消化最後組裝產物且選殖至經類似消化之接受體載體中。文庫大小產生1.16xl01G個獨立純系。 149654.doc -183- 201119672 表16

用於抗TNC A2結合物2B10之L1/L2親和性成熟文庫的引子 LMB3 CAGGAAACAGCTATGACCATGATTAC AM_VldA30_Ll_ba CCTGGCTTCTGCTGGTACCAGCCTAAATCATTACGAAT GCCCTGACTTGCCCGGCAGGTGATG ~ 一 RJH50(VklA30 L1/L2 fo) GCTGGTACCAGCAGAAGCCAGGGAAAG RJH51(VklA30 BsiWI ba) GGTGCAGCCACCGTACGCTTGATCTC AM_VklA30_L2_ba CTTGATGGGACGCCACTCTGCAAACTGGACGCAGCAT AGATCAGGCGCTTAGGGGCTTTCC — RJH52(VklA30 L2/L3) TTGCAGAGTGGCGTCCCATCAAGGTTC

下劃線：60%原始鹼基及40%隨機化為V

粗體：60%原始鹼基及40%隨機化為N 表17

用於抗TNC A2結合物2B10之H1/H2親和性成熟文庫的引子 RJH53 CATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCAC AM_DP88_Hl_ba_opt GTCCAGGGGCCTGTCGCACCCAGCTTATAGCGTAGCT GCTGAATGTGCCTCCGGAGGCCTTG RJH54(DP88 H1/H2 fo) ATAAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGAC MS52 GAAGACCGATGGGCCTTTGGTGCTAG AM_DP88_H2_ba GACCCTGCCCTGGAACTTCTGTGCGTAGTTTGCGGTAC CAAAGATAGGGATGATCCCTCCCATCCACTCGAGCCC ttgtccag" RJH55 (DP88 H2H3 fo) TACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCAC

下劃線：60%原始鹼基及40%隨機化為V 粗體：60°/。原始鹼基及40%隨機化為N 實例13 親和性成熟之抗TNC A2純系的選擇針對大腸桿菌表現之選殖至avi標記及6><his標記上游的人類TNC A2進行選擇（參見表5之SEQ ID NO: 57)。在表現後對抗原進行活體内生物素標記。如對於使用範圍為1〇〇 nM至2 nM之遞減濃度之人類TNC A2的初級TNC A2選擇所述，在溶液狀態下進行選擇。藉由ELISA鑑別出親和性成 149654.doc -184- 201119672 熟之純系後，使用Prote〇n XPR36生物感測器（Bi〇rad)進行一-人筛選且藉由在同一儀器上分析親和純化之Fab製劑來測定動力學速率常數及親和性。鑑別出以下親和性成熟之純系：2Bl〇—01F7(參見表 3 之 SEQ id NO: 201 及 203)、 2B10_6H10(參見表 3 之 SEQ ID NO: 205 及 207)、2B10_C3A6 (參見表 3之 SEQ ID NO: 185及 187)、2Bl〇_DlA2(表見表3

之 SEQ ID NO: 189 及 191)及 2B10_O7D8(參見表 3之§叫 ID NO: 197及199)(所有此等純系均源自VL子文庫）、以及 2B10_C3B6(參見表 3 之 SEQ ID NO: ι77 及 179)及 2B10_6A12(參見表3之SEQ ID NO: 181及183)(此兩個純系產生V32D Kabat進行源自VH子文庫）。此外’對於純系2B10—D1A2，突變體（參見表3之SEQ ID NO: 193及195)(根據編號）。所選Fab跨越在ρϊ 圖26展示所選針對TNC A2之親和共振感應圖且表18給出各別親和性圍内之高親和性範圍。表18 呈Fab片段（單價結合）形式之親和性成熟之抗^ a $ 的動力學平衡常數（KD)之總結。隨 IM 〇A 抗體對於huTNCA2之、親和性(ΚηΜρΜ1 2B10—C3B6 191 2B10 6A12 290 〜 2B10_C3A6 497 〜 2B10 07D8 147 〜 2B10—O1F7 56 ~ 2B10—6H10 810 〜 -----—. 149654.doc -185- 201119672 實例14 基於2B10、3F2及4G8之Fab-IL2-Fab構築體的純化開發用於基於2B10、3F2及4G8之Fab-IL2-Fab構築體的另一種純化方法（除實例9中所述之方法外）。雖然基於3F2 及4G8之Fab-IL2-Fab構築體可藉由使用蛋白質A基質（例如 MabSelect Sure)之親和層析來純化，但基於2B10之Fab-IL2-Fab構築體必須藉由蛋白質G基質親和層析來純化。純化程序係基於以下四個步驟： 1. 使用MabSelect Sure或蛋白質G之親和層析 2. 適用於反轉錄病毒滅活之低pH值

3 .陰離子交換層析-CaptoQ層析，移除DNA 4.陽離子交換層析-SP Sepharose FF層析，移除聚集體對於小規模地移除聚集體，可替代地使用Superdex 200 管柱（GE Healthcare)尺寸排阻層析。

隨後對基於3F2之Fab-IL2-Fab給出純化程序之一實例。在第一步驟中，將來自含經PEI短暫轉染之HEK293細胞的 Freestyle培養基（Invitrogen)之上清液調整至pH 7且施加於 MabSelect 蛋白質 A 管柱（GE Healthcare)上，用 100 mM NaP04、250 mM NaCl(pH 7)洗滌並用 8.8 mM 曱酸納（pH 3) 溶離。以洗滌緩衝液交換所選溶離份且施加於CaptoQ管柱 (GE Healthcare)上，用 10 mM NaP04、40 mM NaCl(pH 6.5)洗滌且用2 M NaCl溶離。將流過物調整至pH 5且施加於 SP Sepharose FF 管柱（GE Healthcare)上，用 25 mM 乙酸鈉、25 mM NaCl(pH 5)洗滌且用25 mM乙酸鈉、300 mM 149654.doc •186· 201119672

NaCl(pH 5)溶離。將溶離份交換至最終調配緩衝液中。圖 27展示純化程序之概述。經純化之基於3F2的Fab-IL2-Fab在純化後為純的（圖28A) 且不含有聚集體（圖28B)。將所述純化程序應用於基於4G8 之Fab-IL2-Fab。基於4G8之Fab-IL2-Fab的表現類似於基於 3F2之Fab-IL2-Fab。經純化之物質在純化後為純的且不含有聚集體（圖28，C-D)。

對以2B10(TNC A2結合物）作為Fab片段之Fab-IL2-Fab形式進行純化。在第一步驟中，將來自含經PEI短暫轉染之 HEK293細胞的Freestyle培養基（Invitrogen)之上清液調整至pH 7且施加於蛋白質G管柱（GE Healthcare)上，用100 mM NaP〇4、250 mM NaCl(pH 7)洗務，且用 8.8 mM 曱酸鈉 (pH 3)溶離。將所選溶離份交換於洗滌緩衝液中且施加於 CaptoQ 管柱（GE Healthcare)上，用 10 mM NaP〇4、40 mM NaCl(pH 6.5)洗滌且用2 M NaCl溶離。將流過物調整至pH 5且施加於 SP Sepharose FF 管柱（GE Healthcare)上，用 25 mM乙酸納、25 mM NaCl(pH 5)洗滌且用25 mM乙酸鈉、 300 mM NaCl(pH 5)溶離。將溶離份交換至最终調配緩衝液中。圖29展示在三個純化步驟之每一者後（A)藉由SDS-PAGE(NuPAGE Novex Bis-Tris Mini Gel, Invitrogen > MOPS電泳緩衝液，還原及非還原）對產物之分析表徵及 (B)對產物之分析性尺寸排阻層析的結果。在最終產物中偵測到2.3%聚集體。 149654.doc -187- 201119672 實例15 穩定性測試1 對以纖維結合蛋白胞外域-B結合物L19作為Fab片段之 Fab-IL2_Fab^騎敎性職。料敎性測試，藉由在PH 3下進行溶離步驟的蛋白質A親和層析，隨後進行所述之perdex 200 g柱（GE Healthcare)尺寸排阻層析來純化Fab-IL2-Fab構築體。測試三種不同緩衝液且鑑別出2〇 mM組胺酸HC1、140 mM NaCl(pH 6.0)為適合之緩衝液。

後，將 L19 Fab-IL2-Fab於 20 mM 組胺酸 HC1、140 mM

NaCl(pH 6.0)中調配為6.3 mg/ml之濃度且在室溫及4〇c下儲存4週。圖30展示例示性穩定性數據：每週藉由uv光譜法分析探針之濃度（圖30A)(離心使潛在沈澱物質粒化後）及藉由Superdex 200管柱分析性尺寸排阻層析分析探針之聚集體含量（圖30B)。結果顯示當在4。(：或室溫下儲存構築體 28天時以及在6 mg/ml濃度下之凍/融循環後，未出現聚集及降解。此等數據顯示Fab-IL2-Fab形式高度穩定且表現類似於IgG抗體。實例16 藉由表面電衆共振（Biacore)得到之把向FAP之Fab-IL2- F a b結合親和性藉由表面電漿共振測定三種靶向FAP之Fab-IL2-Fab構築體’即 3F2 Fab-IL2-Fab、4G8 Fab-IL2-Fab及 3D9 Fab-IL2-

Fab之結合親和性。為了測定FAP結合，藉由經固定之抗His抗體（Penta His, I49654.doc -188- 201119672

Qiagen #34660)捕捉FAP且使用構築體作為分析物。分析溫度為25°C且將Fab-IL2-Fab構築體以1:5自1〇 nM稀釋至 3.2 pM。應用以下量測參數：締合時間1 80秒，解離9〇〇秒，流速90 μΐ/m in。用1 0 mM甘胺酸（pH 2)使晶片再生歷時60秒。用1:1模型擬合曲線，得到KD值（局部Rmax， RI=0)。為測定對於IL-2受體（IL-2R)鏈之親和性，將IL-2R之β及 γ鏈（b/g ;結至孔中構築體）或α鏈（a)固定於晶片上且使用 Fab-IL2-Fab構築體作為分析物。分析溫度為25°C。將 Fab-IL2-Fab 構築體 3F2 及 3D9 以 1:2 自 25 nM 稀釋至 0.78 nM 且應用以下量測參數：締合時間100秒，解離180秒，流速 90 μΐ/min。用 10 mM甘胺酸（pH 1.5)再生 20秒。將 Fab-IL2-卩31)構築體408自10〇111^稀釋至3.125 111^且應用以下量測參數：締合時間180秒，解離180秒，流速40 μΐ/min。用3 Μ MgCl2再生30秒。表 19 給出 3F2 Fab-IL2-Fab、4G8 Fab_IL2-Fab 及 3D9 Fab-IL2-Fab免疫結合物之結合親和性的總結。親和性之皮莫耳值達到Biacore之彳貞測極限。圖31-34展示各別Biacore 感應圖及親和性。 149654.doc -189- 201119672 表19 如藉由表面電漿共振所測定的靶向FAP之Fab-1L2-Fab構築體對於來自不同物種之FAP及IL-2受體的動力學平衡常數 (KD)之總結

構築體人類FAP 鼠類FAP 獼猴FAP 對於IL_2 受體(b/g) 之親和性經固定之受體對於IL_2 受體(a) 之親和性經固定之受體 Fab，IL2-Fab 3F2 親和力： 25 pM 親和力· 49 pM 親和力： 24 pM 2.7 ηΜ hu IL-2R bg ND Fab-IL2-Fab 4G8 親和力： 83 pM 親和力： 2.3 pM 親和力： 74 pM 3.8 ηΜ hu IL-2R bg 45.6 ηΜ mu IL-2R bg 4.5 ηΜ hu IL-2R a 29 ηΜ mu IL-2R a Fab-IL2-Fab 3D9 親和力： 96 pM 親和力： 63 pM 親和力： 105 pM 2.7 nM huIL-2Rbg ND 實例17 藉由表面電漿共振（Biacore)得到之靶向TNC A2之Fab-IL2-Fab結合親和性為了測定TNC A2結合，將生物素標記抗原（TNC fn5-Al-A2-A3域，融合在一起，表現於大腸桿菌中。雖然fn5及 A3域始終為人類來源，但A1及A2域為人類、鼠類或獼猴）固定於抗生蛋白鏈菌素晶片上且使用免疫結合物構築體作為分析物。分析溫度為25°C。將Fab-IL2-Fab以1··2自25 nM 稀釋至0.3 9 ηΜ且應用以下量測參數：締合時間180秒，解離1 80秒，流速50 μΐ/min。用10 mM甘胺酸（pH 1.5)再生60 秒。用1:1模型擬合曲線以得到KD值。作為陰性對照組， 149654.doc .190- 201119672 施用於HEK細胞中所產生之TNC域1至8(TNC 1-8 HEK)。為測定對於IL-2受體（IL-2R)P及γ鏈（b/g ;結至孔中構築體）之親和性，將IL-2R構築體固定於晶片上且使用 Fab-IL2-Fab免疫結合物作為分析物。分析溫度為25°C。將 Fab-IL2-Fab以1:2自25 nM稀釋至0.7 8 nM且應用以下量測參數：締合時間100秒，解離180秒，流速90 μΐ/min。用10 mM甘胺酸（pH 1.5)再生20秒。將Fab-IL2-Fab構築體自100 ^ nM稀釋至3.125 nM且應用以下量測參數··締合時間1 80 秒，解離1 80秒，流速40 μΐ/min。用3 M MgCh再生30秒。表20給出對於2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物之結合親和性的總結，圖35展示各別Biacore感應圖及親和性。表20 如藉由表面電漿共振所測定的靶向TNC A2之Fab-IL2-Fab 構築體對於來自不同物種之TNC A2及IL-2受體-β/y的動力學平衡常數（KD)之總結

構築體人類TNC 鼠類TNC 獼猴 TNC 對於hu IL-2 受體(β/γ)之親和性經固定之受體 Fab-IL2-Fab 2B10 免疫大腸桿菌抗原 TNC 1-8 HEK (陰性對照組）親和力· 0.12 nM 未結合親和力· 0.77 nM 親和力： 0.12 nM 2.7 nM 實例1 8 使用標靶性IL-2 Fab-IL2-Fab免疫結合物之生物活性分析 I49654.doc -191 - 201119672 在若干細胞分析中研究與IL-2(普留淨）相比，標靶性 IL-2 Fab-IL2-Fab免疫結合物之生物活性。 NK92細胞增生之誘導研究與IL-2(普留淨）及識別纖維結合蛋白-EDB之IL-2 L19微型雙功能抗體相比，識別TNC A2(2B10)或FAP(3F2 及4G8)之標靶性IL-2 Fab-IL2-Fab分子誘導NK92細胞增生之潛力。在4°C下將2 pg/ml人類肌腱蛋白、FAP或纖維結合蛋白塗佈於96孔平底ELISA培養板中隔夜。阻斷培養板後，將 Fab-IL2-Fab構築體或微型雙功能抗體滴定至培養板中且在室溫（RT)下培育90分鐘以進行結合。充分洗滌以移除未結合之構築體後，添加IL-2饑餓NK92細胞（每孔10000個細胞）。作為陽性對照組，將溶液狀態下之普曾淨添加至一些孔中。在37°C含濕氣培育箱（含有5% C02)中培育細胞2 天，隨後溶解細胞以藉由ATP量測法、使用CellTiter Glo 套組（Promega)測定增生。圖36中之結果顯示所有Fab-IL2-Fab構築體均能夠活化 NK92細胞上IL-2R信號傳導並刺激其增生。由於對於信號傳導所需之IL-2R β/γ雜二聚體的結合親和性降低，誘導細胞生長之效能與IL-2(普留淨）相比降低約1 0倍或更多。然而，較高劑量下之總體功效保持且與IL-2(普留淨）相當。 STAT5磷酸化之誘導在另一實驗中，吾等測試在與溶液狀態下之識別不同效應細胞群體上之FAP(基於4G8)的IL-2 Fab-IL2-Fab分子一 149654.doc -192- 201119672 起培育後對由IL-2介導之IL-2R信號傳導所致的STAT5磷酸化之誘導，該等效應細胞群體包括A)CD56+NK細胞、 B)CD4+CD25XD127 +輔助 T細胞、C)CD3+、CD8+細胞毒性 T細胞及D)來自人類PBMC之CD4+CD25+FOXP3 +調節T細胞 (Tregs)。用不同濃度之普留淨或Fab-IL2-Fab處理自健康供體之血液分離的PBMC歷時20分鐘，隨後固定/滲透該等PBMC且根據供應商之說明書用抗磷酸化STAT5抗體（Becton Dickinson)染色。對鱗酸化STAT5以及FOXP3進行細胞内染色後，對表面標記（CD3、CD4、CD8、CD56及CD127) 進行染色以藉由流動式細胞測量術（FACS Canto II)測定不同亞群。圖37中之結果證實圖36之發現且展示4G8 Fab-IL2_Fab構築體能夠活化多種IL-2R陽性效應細胞上之IL-2R信號傳導且誘導IL-2R下游信號傳導及STAT5磷酸化。由於對於信號 ^ 傳導所需之IL-2R β/γ雜二聚體的結合親和性降低，誘導 STAT5磷酸化之效能與IL-2(普留淨）相比降低約10倍或更多。然而，較高劑量下之總體功效保持且與IL-2(普留淨）相當。溶液狀態下及固定後之IFN-γ釋放及增生誘導在另一實驗中，吾等旨在模擬標靶性IL-2免疫結合物結合及固定於腫瘤細胞或腫瘤基質上並可活化效應細胞之腫瘤中所發生的情形。為了如此進行，吾等使用NK92細胞進行IFN-γ釋放分析以及使用溶液狀態下之免疫結合物進 149654.doc •193· 201119672 行增生分析，或吾等用TNC或FAP抗原塗佈微量滴定板以使得標靶性IL-2免疫結合物在結合於TNC或FAP後進行固定。在4°C下將2 pg/ml人類肌腱蛋白或FAP塗佈於96孔平底 ELIS A培養板中隔夜。阻斷培養板後，將Fab-IL2-Fab構築體滴定至培養板中且在室溫下培育90分鐘以進行結合。充分洗滌以移除未結合之構築體後，添加IL-2饑餓NK92細胞 (每孔1 0000個細胞）。作為陽性對照組，將溶液狀態之普留淨添加至一些孔中*為了測定增生，在37°C含濕氣培育箱 (含有5% C02)中培育細胞2天，隨後溶解細胞以藉由ATP量測法、使用CellTiter Glo套組（Promega)測定增生。使用 Becton Dickinson之人類IFN-γ ELISA套組，在細胞上清液中與Fab-IL-2-Fab —起培育24小時後，以各別方法量測 IFN-γ之釋放。結果證實所有靶向FAP、TNC A1或TNC A2之Fab-IL2-Fab構築體均能夠活化NK92細胞上之IL-2R信號傳導且當以溶液狀態存在時誘導細胞增生（圖38A)以及IFN-γ分泌（圖 38C)。由於對於信號傳導所需之IL-2R β/γ雜二聚體的結合親和性降低，誘導IFN-γ釋放之效能與IL-2(普留淨）相比降低約10倍或更多。然而，較高劑量下之總體功效保持且與 IL-2(普留淨）相當。若用FAP或TNC塗佈微量滴定板且將構築體固定於培養板上，則所有靶向FAP、TNC A1或TNC A2之Fab-IL2-Fab構築體均仍能活化NK92細胞上之IL-2R信號傳導且誘導細胞生長（圖38B)及IFN-γ釋放（圖38Π)。與溶 149654.doc •194· 201119672 液狀態下進行之分析相比，未經塗佈之IL-2(普留淨）與經固定之Fab-IL2-Fab構築體之間的功效差異具有較高數量級，然而’較高劑量下之總體功效保持且與IL-2(普留淨）相當。此等數據有力地支持產生如下標乾性免疫結合物之概念：具有低全身暴露’但累積於該等免疫結合物介導其功能之疾病部位。在以下實例中，吾等研究在異種移植模型中此等活體外性質是否轉化成優良活體内功效。實例19 在人類腫瘤細胞株之異種移植中針對FAP及TNC A2之標靶性Fab-IL2-Fab免疫結合物的活體内功效在若干異種移植模型中測試針對FAP及TNC A2之標靶性 Fab-IL2-Fab免疫結合物的抗腫瘤功效。 LS174T異種移植模型在經脾内注入SCID小鼠體内之人類結腸直腸ls 174T細胞株中測5式粗向TNC A2之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物。 LS174T細胞（人類結腸癌細胞）最初自ECACC(歐洲細胞保藏中心）獲得且在擴增後寄存於GlyCart内部細胞庫中。將 LS174T 培養於含有 10% FCS(pAA Laborat〇ries， Austria)、1% Glutamax 及 1% MEM非必需胺基酸（Sigma)之 MEM伊格爾氏培養基（Eagle's medium)中。在37°C、水飽和氛圍、5% C〇2下培養細胞。使用活體外第15代進行脾内注射，存活力為92.8。/。。在經麻醉之SCID/灰棕色小鼠之左 149654.doc •195· 201119672 腹部切出小切口。將50微升（含3xl〇6個LS174T細胞之 AimV培養基）細胞懸浮液經由腹壁注射正好置於脾包膜下。使用夾具閉合皮膚創口。根據所承諾之準則（GV_S〇las; Felasa; TierschG)，將在實驗開始時為8_9週齡之雌性SCID小鼠（購自Tac〇nics， Denmark)維持於12小時光照/12小時黑暗之每曰循環的無特定病原體之條件下。實驗研究方案經地方政府審查且批准（P 2008016)。動物到達後，將其維持一週以習慣新環境並進行觀察。定期進行連續健康監測。在研究第〇天’給小鼠經脾内注射3xl〇6個ls174T細胞，隨機化並稱重^腫瘤細胞注射後一週，給小鼠靜脈内注射乾向 TNC A2 之 2B10 Fab-IL2-Fab(Fab-IL2-Fab-SH2B10)、乾向纖維結合蛋白·ΕΓ)Β之Li 9 IL-2-微型雙功能抗體或普留淨，每週兩次，歷時三週。給所有小鼠靜脈内注射2〇〇 μ1適當溶液。給媒劑組之小鼠注射PBS且給處理組注構築體、微型雙功能抗體或普留淨。為獲得每2〇〇 μι適當量之免疫結合物，必要時用PBS稀釋儲備溶液。圖39展示與靶向纖維結合蛋白_edb之裸il-2(普留淨）及 IL-2微型雙功能抗體分子相比，靶向tnc A2之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物介導增強中值存活率方面之優良功效0 149654.doc •196- 201119672 表21 化合物劑量調配緩衝液濃度 (mg/mL) L19IL-2微型雙功能抗體 12 pg 20 mM檸檬酸鈉、 190 mM蔗糖、 20 mM精胺酸， pH 6.5 2.00 (=儲備溶液）普留淨(IL-2) 4 Kg 甘露糖醇月桂基硫酸鈉磷酸鈉 1.0 (=儲備溶液） huTNC A2 2B10(G65S) Fab-IL2-Fab= SH2B10 16 pg 25 mM鱗酸奸、 125mMNaCl、 100 mM甘胺酸， pH 6.7 1.86 (=儲備溶液） --—. ACHN異種移植模型在經腎内注入SCID小鼠體内之人類腎細胞株ACHN中测試靶向FAP之3F2或4G8 Fab-IL2-Fab免疫結合物。 ACHN細胞（人類腎腺癌細胞）最初自ATCC(美國菌種保藏中心（American Type Culture Collection))獲得且在擴增後寄存於Glycart内部細胞庫中。將ACHN培養於含有1 〇〇/() FCS之DMEM中。在37°C、水飽和氛圍、5% C02下培養細胞。使用活體外第9代進行腎内注射，存活力為97.7%。在經麻醉之SCID小鼠之右腹側及腹膜壁處切出小切口 cm)。將50 μΐ(含ΙχΙΟ6個ACHN細胞之AimV培養基）細胞懸浮液在囊下2 mm處注入腎中。使用夹具閉合皮膚創口及腹膜壁。根據所承諾之準則（GV-Solas; Felasa; TierschG)，將在 149654.doc -197- 201119672 實驗開始時為8-9週齡之雌性SCID小鼠（購自Charles River，

Sulzfeld，Germany)維持於12小時光照/12小時黑暗之每曰循環的無特定病原體條件下。實驗研究方案經地方政府審查且批准（P 2008016)。動物到達後，將其維持一週以習慣新環境並進行觀察。定期進行連續健康監測。在研究第0天，給小鼠經腎内注射！ x丨〇6個ACHN細胞，隨機化並稱重^腫瘤細胞注射後一週，給小鼠靜脈内注射普留淨、L19 IL-2微型雙功能抗體或乾向fap之4G8或3F2 Fab-IL2-Fab免疫結合物，每週兩次，歷時三週。給所有小鼠靜脈内注射200 μΐ適當溶液。給媒劑組之小鼠注射PBS且給處理組注射普留淨、l 19 IL-2微型雙功能抗體或乾向FAP之4G8或3F2 Fab-IL2-Fab免疫結合物。為獲付每200 μΐ適當量之免疫結合物，必要時用pbs稀釋儲備溶液。圖40展示與乾向纖維結合蛋白_ΕΕ)Β之裸il_2(普留淨）及 IL-2微型雙功此抗體分子相比，把向fap之3F2及4G8 Fab-IL2-Fab免疫結合物介導增強中值存活率方面之優良功效。相較於基於3F2之Fab-IL2-Fab ’對於鼠類FAP具有較尚親和性的基於4G8之Fab-IL2-Fab介導優良功效。 149654.doc -198- 201119672 表22 化合物劑量調配缓衝液 (mg/mL) L19 IL-2微塑雙功能抗體 12 pg 20 mM檸檬酸鈉、 190 mM蔗糖、 20 mM精胺酸， pH 6.5 2.0〇^~~ 儲備溶液）普留淨 (IL2) 甘露糖醇月桂基硫酸納磷酸鈉 To^ (=儲備溶液） FAP 3F2 Fab-IL2-Fab= FAP3F2 16 pg 25 mM填酸鉀、 125mMNaCl ' 100 mM甘胺酸， pH 6.7 2.46~~ (=儲備溶液） FAP4G8 Fab-IL2-Fab= FAP4G8 16 pg 25 mM構酸卸、 125mMNaCl、 100 mM甘胺酸， pH 6.7 11.8 (=儲備溶液） A549異種移植模型在經靜脈内注入SCID-人類FcyRIII轉殖基因小鼠體内之人類NSCLC細胞株A549中測試靶向TNC A2之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物。 A549非小細胞肺癌細胞最初自ATCC(CCL-18 5)獲得且在擴增後寄存於Glycart内部細胞庫中。通常在37°C、水飽和氛圍、5% C02下將腫瘤細胞株培養於含有10% FCS(Gibco) 之DMEM中。使用第2代進行移植，存活力為98%。將含每隻動物2xl06個細胞之200 μΐ Aim V細胞培養基（Gibco)經靜脈内注入尾靜脈中。根據所承諸之準則（GV-Solas; Felasa; TierschG)’將在 149654.doc 201119672 實驗開始時為8-9週齡之雌性SCID-FcyRIII小鼠（GLYCART-RCC)(在RCC，Switzerland育種）維持於12小時光照/12小時黑暗之每曰循環的無特定病原體條件下。實驗研究方案經地方政府審查且批准（P 2008016)。動物到達後，將其維持一週以習慣新環境並進行觀察。定期進行連續健康監測。在研究第0天，給小鼠靜脈内注射5xl06個A549細胞，隨機化並稱重。腫瘤細胞注射一週後，給小鼠靜脈内注射 2B10 Fab-IL2-Fab或L19 IL-2微型雙功能抗體，每週兩次，歷時三週。給所有小鼠靜脈内注射200 μΐ適當溶液。給媒劑組之小鼠注射PBS且給處理組注射2Β10 Fab-IL2-Fab構築體或L19 IL-2微型雙功能抗體。為獲得每200 μΐ適當量之免疫結合物，必要時用PBS稀釋儲備溶液。圖41展示與靶向纖維結合蛋白-EDB之IL-2微型雙功能抗體分子相比，靶向TNC Α2之2Β10 Fab-IL2-Fab免疫結合物介導增強中值存活率方面之優良功效。表23 化合物劑量調配緩衝液濃度 (mg/mL) L19 IL-2微型雙功能抗體 12 gg 20 mM檸檬酸鈉、 190 mM蔗糖、 20 mM精胺酸， pH 6.5 2.00 (=儲備溶液） huTNCA2 2B10(G65S) Fab-IL2-Fab= 2B10 16 pg 25 mM填酸卸、 125 mMNaCl' 100 mM甘胺酸， pH 6.7 1.86 (=儲備溶液） 149654.doc -200- 201119672 實例20 標靶性GM-CSF Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物之純化自經短暫轉染之HEK 293 EBNA細胞的上清液初始純化以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab片段之 Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物。簡言之，藉由蛋白質A，隨後尺寸排阻層析來純化Fab-GM-CSF-Fab。以20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉（pH 7.5)平衡蛋白質A管柱。裝載上清液且首先用20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉（pH 7·5)、隨後用20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉、100 mM氣化鈉（ΡΗ 7.5)洗滌該管柱。用20 mM檸檬酸鈉、100 mM氯化鈉、 100 mM甘胺酸（pH 3)溶離標靶性GM-CSF且隨後中和。對於調配，施用以下緩衝液：25 mM磷酸鉀、125 mM氯化鈉、100 mM甘胺酸（pH 6.7)。圖42展示純化之溶離概況及藉由SDS-PAGE(NuPAGE Novex Bis-Tris Mini Gel，Invitrogen，MOPS 電泳緩衝液，還原及非還原）分析表徵產物之結果。產量為4.8 mg/L。實例21 使用標靶性GM-CSF Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物之生物活性分析隨後在GM-CSF依賴性增生分析中分析經純化之以 L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab的Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物。簡言之，在以每孔10000個細胞饑餓隔夜後，將GM-CSF依賴性生長之TF-1細胞接種於96孔平 149654.doc -201 - 201119672 底培養板中。在溶液狀態下將人類重組GM-CSF(Miltenyi #130-093-862)或Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物滴定於細胞上。增生2天後，在37°C含有5% C02之含濕氣培育箱中，溶解細胞且用Promega之CellTiter Glo分析量測ATP含量。將未經GM-CSF處理之細胞設定為0%生長以便進行計算。圖43中之結果顯示Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物誘導強 TF-1細胞增生。實例22 標靶性IL-12 Fab-IL12-Fab免疫結合物之純化自經短暫轉染之HEK 293 EBNA細胞的上清液初始純化以4G8(FAP結合物）作為Fab片段之Fab-IL12-Fab免疫結合物。簡言之，藉由蛋白質A，隨後尺寸排阻層析來純化 Fab-IL12-Fab。以 20 mM 磷酸鈉、20 mM 檸檬酸鈉（pH 7.5) 平衡蛋白質A管柱。裝載上清液且用20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸納、500 mM氣化納（pH 7,5)洗務該管柱。用13.3 mM填酸鈉、20 mM檸檬酸鈉、500 mM氣化鈉（pH 5.45)進行第二次洗條。用10 mM MES、50 mM氣化納（pH 5)第三次洗滌後，用20 mM檸檬酸鈉.、100 mM氣化鈉、100 mM 甘胺酸（pH 3)溶離標靶性IL-12且隨後中和。對於調配，施用以下緩衝液：25 mM峨酸釺、125 mM氣化鈉、100 mM 甘胺酸（pH 6.7)。圖44展示純化之溶離概況及藉由SDS-PAGE(NuPAGE Novex Bis-Tris Mini Gel，Invitrogen，MOPS 電泳緩衝液，還原及非還原）分析表徵產物之結果。產量為43 mg/L。 149654.doc -202^ 201119672 實例23 使用標靶性IL-12 Fab-IL12-Fab免疫結合物之生物活性分析隨後分析經純化之以4G8(FAP結合物）作為Fab的 Fab-IL12-Fab免疫結合物之IL-12誘導之IFN-γ釋放，使用自健康供體之新鮮人類血液中分離的PBMC比較IL-12及經純化之4G8 Fab-IL12-Fab免疫結合物之作用。簡言之，自健康供體之新鮮人類血液中分離PBMC且接種於96孔U型底培養板（每孔1.5 xlO5個細胞）之AIM V培養基中。將怪定濃度之10 ng/ml hu IL-2(Peprotech)添加至所有孔中。用培養基稀釋Fab-IL12-Fab構築體且滴定於 PBMC上。約20小時後收集上清液以使用Becton Dickinson 之 hu IFN-γ ELISA套組II(#550612)測定IFN-γ濃度。圖45中之結果顯示A)所選量之單獨人類（hu)IL-2以及單獨IL-12無法誘導人類PBMC大量釋放IFN-γ，然而兩種細胞因子之組合使得PBMC大量釋放IFN-γ。B)Fab-IL-12-Fab 構築體在10 ng/ml人類IL-2存在下以濃度依賴性方式誘導人類PBMC釋放IFN-γ。實例24 標靶性IFN-α Fab-IFNa2-Fab免疫結合物之純化自經短暫轉染之HEK 293 EBNA細胞的上清液初始純化以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab片段之 Fab-IFNa2-Fab免疫結合物。簡言之，藉由蛋白質A，隨後尺寸排阻層析來純化Fab-IFNa2-Fab。以20 mM構酸鈉、20 149654.doc -203 - 201119672 mM檸檬酸鈉（ΡΗ 7·5)平衡蛋白質A管柱。裝載上清液且首先用20 mM磷酸鈉、20 mM擰檬酸鈉（pH 7.5)、隨後用20 mM磷酸鈉、20 mM檸檬酸鈉、100 mM氣化鈉（pH 7.5)洗滌該管柱。用20 mM檸檬酸納、100 mM氣化鈉、100 mM甘胺酸（pH 3)溶離Fab-IFNa2-Fab且隨後中和。對於調配，施用以下緩衝液：25 mM罐酸If、125 mM氯化鈉、100 mM 甘胺酸（pH 6.7)。圖46展示純化之溶離概況及藉由SDS-PAGE(NuPAGE Novex Bis-Tris Mini Gel，Invitrogen，MOPS 電泳緩衝液，還原及非還原）分析表徵產物之結果。產量為8.4 mg/L。實例25 使用IFN_aFab-IFNa2-Fab免疫結合物之生物活性分析隨後分析經純化之以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab的Fab-IFNa2-Fab免疫結合物之IFN-α誘導之對 Jurkat T細胞及A549腫瘤細胞的增生抑制，比較IFN-a(羅飛龍 A(Roferon A)，Roche)及經純化之 L19 Fab-IFNa2-Fab 免疫結合物的作用。簡言之，將對於IFN-α誘導之增生抑制敏感之A549及Jurkat T細胞以每孔5000個細胞（A549)或每孔10000個細胞（Jurkat)接種於96孔平底培養板中。用適當細胞培養基稀釋羅飛龍A(Roche)或Fab-IFNa2-Fab，在溶液狀態下滴定於細胞上。增生兩天後，在37°C含有5% C02之含濕氣培育箱中，溶解細胞且用Promega之CellTiter Glo分析量測ATP含量。將未經IFN-α處理之細胞設定為〇°/〇生長以便進行計算。 149654.doc •204· 201119672 圖47中之結果顯示Fab-IFNa2-Fab構築體以類似於IFN-α (羅飛龍A)之濃度依賴性方式抑制A)Jurkat T細胞及B)A549 細胞之增生。實例26 靶向MCSP之Fab-IL2-Fab免疫結合物的製備如WO 2006/100582(參見其中之特定實例1，其全部内容以引用的方式併入本文中）中所述產生人類化抗MCSP ▲ MHLG抗體，且轉化為Fab-IL2-Fab形式（參見SEQ ID NO: 255 、 256 、 261 、 262) ° 如下產生人類化抗MCSP MHLG1抗體：將抗MCSP抗體 225.28之鼠類胺基酸序歹U輕鏈及重鏈，參見下文）與人類生殖系抗體V基因之集合比對，且根據序列一致性及同源性進行分選。 225.28輕鏈；〇61^&111<:登錄號€八八65007(3£(^1〇 267):

DIELTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVDTNVAWYQQKPGQSPEPLLFSASYRYTGVP

DRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPLTFGGGTKLEIK • 225.28重鏈；無基因庫登錄號可用（SEQ ID 268):

QWLQQSGGGLVQPGGSMKLSCVVSGFTFSNY\VMNWVRQSPEKGLEWIAEIRLKS]S1NF

GRYYAESVKGRFnSRDDSKSSAYLQMINLRAEDTGIYYCTSYGNYVGHYFDHWGQGT

TVTVSS 基於高總體同源性選擇潛在接受體序列，且接受體序列中早已存在恰當典型殘基。選擇人類生殖系序列IGHV3-15 (IMGT登錄號X92216)作為重鏈之接受體且選擇序列 IGKV1-9(IMGT登錄號Z00013)用於輕鏈。人類化構築體由 M-KV1(參見 SEQ ID NO: 263、264、269、270)、7(SEQ ID NO: 265、266、271、272)及 9(SEQ ID NO: 253、254、 149654.doc •205 · 201119672 259、260)表示輕鏈，及由 MHLG1 (參見 SEQ ID NO: 251、 252、257、258)表示重鏈。彼等經設計之抗體序列的基因藉由習知PCR技術產生且融合於人類IgGl及κ恆定域以構築表現質體。抗體以IgG或Fab-IL2-Fab融合蛋白形式表現於哺乳動物細胞培養系統（如HEK或CHO)中，且經由蛋白質A及尺寸排阻層析純化。比較輕鏈變異體M-KV1與M-KV7之結合資料揭露Kabat位置46之脯胺酸殘基為功能性結合於抗原所必需的。採用兩種不同方法來確保此胺基酸之存在：A)將所謂反突變引入IGKV1-9之人類構架中。及B)為避免反突變之存在，整個構架2區（Kabat位置35至49)由具有 GenBank登錄號AAA17574之人類抗體的相應區替換。此抗體在位置46處天然具有脯胺酸殘基。靶向MCSP之MHLG KV9 Fab-IL2-Fab藉由由一個親和步驟（蛋白質A)、隨後尺寸排阻層析（Superdex 200，GE Healthcare)構成之上述方法（實例9)來純化。以20 mM稱酸鈉、20 mM檸檬酸鈉（pH 7.5)平衡蛋白質A管柱，裝載上清液，且用20 mM填酸納、20 mm檸檬酸鈉、500 mM氣化鈉 (pH 7.5)洗滌該管柱，隨後用13.3 mM磷酸鈉、20 mm檸檬酸納、500 mM氣化納（pH 5.45)洗滌。視情況包括使用1 0 mM MES、50 mM氯化鈉（pH 5)進行第三次洗滌。用20 mM 檸檬酸鈉、100 mM氣化鈉、100 mM甘胺酸（pH 3)溶離 Fab-IL2-Fab。彙集溶離份且藉由尺寸排阻層析，用如下最終調配緩衝液來高度純化：25 mM磷酸鉀、125 mM氯化 149654.doc •206· 201119672 納、100 mM甘胺酸（pH 6·7)。圖48展示（Α)純化之溶離概況及（Β)藉由SDS-PAGE (NuPAGE Novex Bis-Tris Mini Ge卜 Invitrogen，MOPS 電泳緩衝液，還原及非還原）分析表徵靶向MCSP之MHLG Fab-IL2-Fab的結果。產量為 30 mg/L。實例27 使用靶向MCSP之Fab-IL2-Fab免疫結合物的生物活性

分析隨後分析經純化之以MHLG KV9(MCSP結合物）作為Fab 的Fab-IL2-Fab免疫結合物之IL-2誘導之IFN-γ釋放，比較經純化之 4G8 Fab-IL2-Fab(FAP 結合物）與 MHLG Fab-IL2-Fab對NK92細胞之作用。將IL-2饑餓NK92細胞接種於96孔U型底培養板（每孔105 個細胞）之NK培養基（MEMa+10% FCS+10%馬血清+0.1 mM 2-毓基乙醇+0.2 mM肌醇+0.02 mM葉酸）中。用培養基稀釋靶向MCSP且基於MHLG之Fab-IL-2-Fab免疫結合物且滴定於NK92細胞上，以直接與靶向FAP且基於4G8之Fab-IL2-Fab免疫結合物比較。約22小時後收集上清液以使用 Becton Dickinson之人類 IFN-γ ELISA套組 11(#550612)測定 IFN-γ濃度。圖49中之結果顯示靶向MCSP或FAP之兩種Fab-IL2-Fab 免疫結合物以濃度依賴性方式誘導NK92細胞中類似的 IFN-γ分泌，不會隨所用之標靶抗體變化。應瞭解，實施方式部分而非發明内容及摘.要部分意欲用 149654.doc •207· 201119672 於解釋中π專利範圍。發明内容及摘要部分可闡述如發明人所/函蓋之本發明的—或多個而非所有例示性實施例，因此《日月内合及摘要部分不m壬何方式限制本發明及附隨申請專利範圍》上文已藉助於說明指定功能及其關係之實施的功能性構建兔來描述本發明。為便於描述，本文任意界定此等功能性構建塊之邊界。只要適當執行指^功能及其關係，即可界定替代邊界》特定實施例之以上描述將因此充分地揭露本發明之一般性質.在不脫離本發明之一般概念的情況下，其他人可藉由應用熟習此項技術者之知識針對多種應用而容易地修改及/或改變忒等特定貫施例，而無需過度實驗。因此，該等改變及修改意欲基於本文所呈現之教示及指導而在所揭示實施例之等效物的含義及範圍内。應瞭解，本文之措辭或術語係出於描述而非限制之目的，使得本說明書之術語或措辭待由熟習此項技術者按照該等教示及指導進行解釋。本發明之廣度及範疇不應受任一上述例示性實施例限制，而應僅根據以下申請專利範圍及其等效物進行界定。【圖式簡單說明】圖1。示意性概述多種免疫結合物融合形式。圖1中之所有構築體均包含兩個抗體SCFV片段（在抗原結合部分中）及一或兩個連接於抗原結合部分之細胞因子分子（作為效應 4刀）。圖A至£展示抗原結合部分及效應部分之不同連接 149654.doc -208- 201119672 性及化學計量。圖A)描繪「微型雙功能抗體」_il_2融合物彳政型雙功能抗體」由兩個相同多肽鏈非共價組震。圖B展示包含Fab分子的重鏈在羧基末端融合於細胞因子，而該細胞因子又在其羧基末端融合於第二Fab重鏈。輕鏈與重鏈Fab-細胞因子-重鏈Fab多肽共表現以形成免疫結合物。或者’兩個輕鏈可融合於細胞因子，且該等重鏈共表現。在圖C中’兩個Fab重鏈直接彼此融合。細胞因子與第 φ 二抗原結合部分重鏈共用胺基末端肽鍵。圖B及C之兩種分子形式可改變以使得Fab鏈經scFv片段置換，如圖〇及E 中。圖2。示意性概述包含兩個抗原結合部分部分及至少一個或多個效應部分之其他免疫結合物。圖A展示Fab分子經由其羧基末端融合於IgG CH3域。為了達成共價抗原結合部分均二聚化，可在IgG CH3域之羧基末端引入人造二硫鍵（圖A右側之免疫結合物）。圖a中所示之igG 1 CH3域可經 φ CH4域取代。圖A中之Fab部分經圖B中之scFv片段置換。對於圖C之免疫結合物’天然IgG鉸鍵在C端融合於 Fab分子。因為鉸鏈之羧基末端區域可對在[端融合於Ig(} 鉸鏈區之怪定域的組裝施加一些幾何約束，所以可在鉸鏈之羧基末端區域與IgG CH3域之胺基末端之間引入人造連接子。如圖D中所示’亦可在scpv片段與免疫球蛋白恆定域之間引入鉸鏈區。在圖A至D中，IgGl CH3或IgE CH4域用於使構築體均二聚化。圖E描繪經由CH1/CK雜二聚化相互作用違成二聚化之免疫結合物。圖D之免疫結合物可每 149654.doc -209- 201119672 個免疫結合物具有一或兩個細胞因子。圖3呈現對於腫瘤基質具有特異性之兩種不同介白素_2 免疫結合物分子形式的功效實驗結果。將F9畸胎上皮癌經皮下注入129SvEv小鼠體内’且使用測徑規量測腫瘤尺寸。在兩種不同濃度下比較「微型雙功能抗體」_IL_2分子與Fab-介白素-2-Fab(Fab-IL2-Fab)免疫結合物，其中該等濃度反映免疫結合物分子之類似數目。在圖3中，Fab IL2 Fab免疫結合物標為「Fab-L19」，未結合之介白素_2對照組標為「未結合之rIL-2」，「微型雙功能抗體_IL_2」分子標為「微型雙功能抗體」。使用針對纖維結合蛋白之外域 B(EDB)的L19抗體產生微型雙功能抗體與Fab_L19免疫結合物中之抗原結合部分。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量（以pg計）。圖4呈現對於腫瘤基質具有特異性之兩種不同介白素免疫結合物分子形式的存活實驗結果。將人類胃腫瘤細胞株LS174T經脾内注入SCID灰棕色小鼠體内。在圖4中， Fab-IL2-Fab免疫結合物標為「Fab_L19」，未結合之介白素-2對照組標為「未結合之rIL_2」’「微型雙功能抗體」-IL-2分子標為「微型雙功能抗體」。使用抗Ε〇Β抗體 L19產生微型雙功能抗體與Fab_L19免疫結合物中之抗原結合部分。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量 (以gg計）’且反映免疫結合物分子之相同數目。圖5展不在ΙΟΟχ及4〇〇x放大倍數下人類子宮組織之免疫組織化學影像。由實例3中所述之方法產生的2B1〇可變區 149654.doc •210- 201119672 結合於人類肌腱蛋白之A2域（TNC-A2)。Fab片段中之2B10 可變區融合於FLAG片段（SHD2B10-FLAG)。準備健康及癌性人類子宮組織樣品用於免疫組織化學染色。隨後，將該等樣品與SHD2B10-FLAG Fab片段一起培育。接著洗滌樣品且與對於FLAG抗原決定基具有特異性之螢光抗體一起培育。與健康組織樣品相比5癌性組織樣品展現較南 TNC-A2表現量。圖6展示以免疫螢光表面積％表示之TNC-A2在多種人類組織樣品中的表現量。將來自健康個體及癌症患者之多種人類組織樣品與如圖5中所述之SHD2B10-FLAG Fab片段一起培育圖7展示以免疫螢光表面積％表示之纖維母細胞活化蛋白（FAP)在多種人類組織樣品中的表現量。將來自健康個體及癌症患者之多種人類組織樣品與針對FAP之市售抗體 (Abeam) —起培育。圖上各條柱之頂部部分表示FAP之腫瘤表現，而圖上各條柱之底部部分表示正常FAP表現。圖8呈現的BIACORE數據展示已知IgG抗體L19對於EDB 之親和性。圖9呈現的BIACORE數據展示對於EDB具有特異性之 Fab-IL-2-Fab免疫結合物的親和性。免疫結合物中之Fab片段源自L19抗體。圖10呈現的BIACORE數據展示對於EDB具有特異性之「微型雙功能抗體」-IL2融合蛋白的親和性。微型雙功能抗體scFv片段源自L19抗體。「微型雙功能抗體」-IL2融合 149654.doc -211 - 201119672 蛋白包括位於scFv片段與IL-2分子之間的8個胺基酸連接子。圖11呈現的BIACORE數據展示對於EDB具有特異性之「微型雙功能抗體」-IL2融合蛋白的親和性。微型雙功能抗體scFv片段源自L19抗體。「微型雙功能抗體」-IL2融合蛋白包括位於scFv片段與IL-2分子之間的12個胺基酸連接子。圖12呈現的BIACORE數據展示已知IgG抗體F16對於經固定之肌腱蛋白之域Al(TNC-Al)的親和性。圖12呈現的 BIACORE數據亦展示F10抗體之Fab片段對於TNC-A1之親和性。圖中指示對於F16 IgG及Fab分子所計算之解離常數 (KD)。圖13呈現的BIACORE數據展示IL-2對於經固定之IL-2受體的親和性。IL-2R之β及γ鏈係藉由將各別鏈融合於人類 IgG 1之Fc部分的「結至孔中」變異體來雜二聚化，如 Merchant, A.M.等人，5/oiec/z. ^7(5:677-681 (1998)中所述。圖中指示由BIACORE數據計算得到之KD值。圖14呈現的BIACORE數據展示「微型雙功能抗體」-IL-2 融合蛋白對於TNC-A1及IL-2受體之親和性。微型雙功能抗體中之scFv分子源自F16抗體。圖中指示由BIACORE數據計算得到之KD值。

圖1 5呈現的BIACORE數據展示Fab-IL-2-Fab免疫結合物對於TNC-A1及IL-2受體之親和性。免疫結合物中之Fab分子源自F16抗體。圖中指示由BIACORE數據計算得到之KD 149654.doc 212· 201119672 值。圖16呈現的BIACORE數據展示scFv-IL-2-scFv免疫結合物對於TNC-A1及IL-2受體之親和性。免疫結合物中之scFv 分子源自F16抗體。圖中指示由BIAc〇RE數據計算得到之值。圖17為由圖12-16中所呈現之BIac〇RE研究獲得之KD值的總結表。圖18呈現比較靶向纖維結合蛋白之EDB域的「微型雙功能抗體」-IL-2分子與靶向肌腱蛋白（^之A2域的Fab_介白素_

2-Fab免疫結合物（標為「Fab-SH2B10」，分別包含SEQ ID NO: 3及7之重鏈及輕鏈可變區）之功效實驗結果。在圖18 中’未結合之介白素-2對照組標為「未結合之rIL_2」，「微型雙功能抗體」-IL-2分子標為「l 19微型雙功能抗體」。使用抗EDB抗體L19產生微型雙功能抗體免疫結合物中之抗原結合部分。將畸胎上皮癌細胞株F 9經皮下注入12 9品系之免疫活性小鼠體内。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量（以pg計）。第6天開始治療且直至實驗第丄j 天為止總共注射5次。圖19展不與未結合之人類IL-2相比’藉由抗FAp或抗肌腱蛋白C之Fab-IL2-Fab免疫結合物（使用3F2、3D9、 4B3(抗FAP)、2F11及2B10構築體（抗肌腱蛋白〇之％及％序列產生）誘導NK-92細胞之增生。培育兩天後，使用^ CellTiter Glo系統量測細胞增生。圖20呈現測定與未結合之細胞因子或在各別分子中含有 149654.doc -213· 201119672 IL-12之p35及p40域的免疫結合物相比，多種含有介白素-12之免疫結合物對IFN-γ產生之誘導的ELISA分析結果。圖A展示塗有纖維結合蛋白之培養板上的結果。圖B 展示溶液狀態下之結果。圖21展示親和性成熟之抗FAP Fab片段的基於表面電漿共振（SPR)之動力學分析。呈現結合於人類（hu)FAP(A)及鼠類（mu)FAP(B)之純系 19G1，結合於 hu FAP(C)、mu FAP(D)之純系20G8及結合於hu FAP(E)及mu FAP(F)之純系 4B9的經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合 1:1相互作用模型。圖22展示親和性成熟之抗FAP Fab片段的基於SPR之動力學分析。呈現結合於hu FAP(A)及mu FAP(B)之純系5B8，結合於hu FAP(C)、mu FAP(D)之純系5F1及結合於hu FAP(E)及mu FAP(F)之純系14B3的經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖23展示親和性成熟之抗FAP Fab片段的基於SPR之動力學分析。呈現結合於hu FAP(A)及mu FAP(B)之純系16F1，結合於hu FAP(C)、mu FAP(D)之純系16F8及結合於hu FAP(E)及mu FAP(F)之純系03C9的經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖24展示親和性成熟之抗FAP Fab片段的基於SPR之動力學分析。呈現結合於hu FAP(A)及mu FAP(B)之純系 02D7，結合於hu FAP(C)、mu FAP(D)、cyno FAP(E)之純系28H1及結合於hu FAP(F)、mu FAP(G)及獼猴 149654.doc -214- 201119672 (cyno)FAP(H)之純系22A3的經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖25展示親和性成熟之抗FAP Fab片段的基於SPR之動力學分析。呈現結合於hu FAP(A)、mu FAP(B)、cyno FAP(C)之純系 29B11及結合於hu FAP(D)、mu FAP(E)及 cyno FAP(F)之純系23C1 0的經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖26展示結合於人類（hu)TNC A2之親和性成熟之抗TNC A2 Fab片段的基於SPR之動力學分析。呈現純系 2B10—C3B6(A)、純系 2B10_6A12(B)、純系 2B10_C3A6(C)、純系 2B10_O7D8(D)、純系 2B10_01F7(E)及純系 2B10_6H10(F) 之經處理之動力學數據組。平滑線表示數據整體擬合1:1 相互作用模型。圖27給出對於純化基於3F2之Fab-IL2-Fab所進行之三個純化步驟的概述。圖28展示基於3F2之Fab-IL2-Fab的純化結果（A及B)及基於4G8之Fab-IL2-Fab的純化結果（C及D)。（A、C)關於純化程序期間之溶離份及最終產物的4-12% Bis-Tris及3-8% Tris乙酸鹽SDS-PAGE。（B、D)施用三個純化步驟後的分析性尺寸排阻層析。圖29展示2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物之純化結果。（A) 關於純化程序期間之溶離份及最終產物的4-12% Bis-Tris SDS-PAGE。B)施用三個純化步驟後的分析性尺寸排阻層析。 149654.doc •215· 201119672 圖3 0展示基於抗纖維結合蛋白EDB L19之Fab-IL2-Fab的穩定性評估。將L19 Fab-IL2-Fab於20 mM組胺酸HC1、140 mM NaCl(pH 6.0)中調配為6.3 mg/ml之濃度且在室溫及4°C 下儲存4週。每週藉由UV光譜法（離心使潛在沈澱物質粒化後）分析樣品之（A)濃度且藉由分析性尺寸排阻層析分析樣品之（B)聚集體含量。圖31展示針對人類、鼠類及獼猴（cyno)FAP及人類IL-2受體-P/Y(IL2R bg)之靶向FAP之3F2 Fab-IL2-Fab免疫結合物的基於SPR之動力學分析，如藉由表面電漿共振所測定。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖32展示針對人類、鼠類及獼猴（cyno)FAP之靶向FAP之 4G8 Fab-IL2-Fab免疫結合物的基於SPR之動力學分析，如藉由表面電漿共振所測定。平滑線表示數據整體擬合1:1 相互作用模型。圖33展示針對人類及鼠類IL-2受體β/γ及α鏈之靶向FAP 之4G8 Fab-IL2-Fab構築體的基於SPR之動力學分析，如藉由表面電漿共振所測定。平滑線表示數據整體擬合雙態反應模型。圖34展示針對人類、鼠類及獼猴（cyno)FAP及人類IL-2受體_0/丫（11^211 bg)之靶向FAP 之 3D9 Fab-IL2-Fab構築體的基於SPR之動力學分析，如藉由表面電漿共振所測定。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖35展示針對人類、鼠類及獼猴（cyno)嵌合TNC A2融合蛋白及人類IL-2受體-p/y(IL2R bg)之靶向TNC A2之2B10 149654.doc -216- 201119672

Fab-IL2-Fab構築體的基於SPR之動力學分析，如藉由表面電漿共振所測定。平滑線表示數據整體擬合1:1相互作用模型。圖36說明與IL-2(普留淨（Proleukin))及識別纖維結合蛋白-EDB之L19微型雙功能抗體相比，識別TNC A2(2B10)或 FAP(3F2及4G8)之標靶性IL-2 Fab-IL2-Fab免疫結合物在誘導NK92細胞增生方面的功效。因為微型雙功能抗體具有兩個IL-2效應部分，而Fab-IL2-Fab構築體僅含有一個IL-2 效應部分，所以針對IL-2分子之數目校正X軸。培育兩天後，使用CellTiterGlo系統量測細胞增生。圖3 7展示在與溶液狀態下之識別不同效應細胞群體上之 FAP的靶向FAP且基於4G8之IL-2 Fab-IL2-Fab免疫結合物一起培育後由IL-2介導之IL-2受體信號傳導所致的STAT5 磷酸化之誘導，該等效應細胞群體包括（A)CD56+NK細胞，（B)CD4 + CD25XD127+輔助 T細胞，（C)CD3+、CD8+細胞毒性T細胞及（D)來自人類PBMC之CD4+CD25+FOXP3 +調節T細胞（Tregs)。圖38八至3 80說明與11^-2相比，識別丁>^八1(2?11)、丁>^ A2(2B10)或 FAP(3F2、4B3 及 3D9)之標靶性 IL-2 Fab-IL2-Fab免疫結合物在誘導IFN-γ釋放及NK92細胞增生方面的功效，其中免疫結合物以溶液狀態存在或經由塗佈於微量滴定板上之FAP或TNC A2固定。圖3 9呈現對於腫瘤基質具有特異性之兩種不同IL-2免疫結合物分子形式的存活實驗結果。將人類結腸腫瘤細胞株 149654.doc •217- 201119672 LS174T經脾内注入SCID小鼠體内。靶向TNC A2之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物標為「SH2B10」，未結合之IL-2對照組標為「普留淨」，靶向纖維結合蛋白EDB之微型雙功能抗體-IL-2分子標為「微型雙功能抗體」。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量（以pg計），且反映免疫結合物分子之相同數目β 圖40呈現對於腫瘤基質具有特異性之兩種不同IL-2免疫結合物分子形式的存活實驗結果。將人類腎細胞株ACHN 經腎内注入SCID小鼠體内。靶向FAP之3F2或4G8 Fab-IL2-Fab免疫結合物標為「FAP-3F2」及「FAP-4G8」，未結合之IL-2對照組標為「普留淨」，靶向纖維結合蛋白EDB之微型雙功能抗體-IL-2分子標為「微型雙功能抗體」。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量（以Kg計），且反映免疫結合物分子之相同數目。圖41呈現對於腫瘤基質具有特異性之兩種不同IL-2免疫結合物分子形式的存活實驗結果。將人類NSCLC細胞株 A549經靜脈内注入SCID小鼠體内。靶向TNC A2之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物標為「2B10」，靶向纖維結合蛋白 EDB之微型雙功能抗體-IL-2分子標為「微型雙功能抗體」。在圖例中指示每隻小鼠所注射之免疫結合物的量（以 pg計），且反映免疫結合物分子之相同數目。圖42呈現（A)以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為 Fab之Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物之純化程序的概述，及 (B)經純化之Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物的SDS-PAGE(還 149654.doc -218· 201119672 原、非還原）。圖43呈現GM-CSF依賴性增生分析之結果，該分析比較 GM-CSF及經純化之以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab的Fab-GM-CSF-Fab免疫結合物對TF-1細胞之作用0 圖44呈現（A)以4G8(FAP結合物）作為Fab之Fab-IL12-Fab 免疫結合物之純化程序的概述，及（B)經純化之Fab-IL12-Fab免疫結合物的SDS-PAGE(還原、非還原）。圖45A及45B呈現測試IL-12誘導之IFN-γ釋放之分析結果，該分析使用自健康供體之新鮮人類血液分離出的 PBMC比較IL-12及經純化之以4G8(FAP結合物）作為Fab的 Fab-IL12-Fab免疫結合物之作用。圖46呈現（A)以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為 Fab之Fab-IFNa2-Fab免疫結合物之純化程序的概述，及（B) 經純化之Fab-IFNa2-Fab免疫結合物的SDS-PAGE(還原、非還原）。圖47呈現測試IFN-α誘導之對（A) Jurkat T細胞及（B) A549腫瘤細胞的增生抑制之分析結果，該分析比較IFN-a (羅飛龍A，Roche)及經純化之以L19(纖維結合蛋白胞外域-B結合物）作為Fab的Fab-IFNa2-Fab免疫結合物之作用。圖48展示（A)靶向MCSP且基於MHLG之Fab-IL2-Fab之純化的溶離概況及（B)

Tris Mini Gel，Invitrogen，MOPS 電泳缓衝液，還原及非還原）分析表徵同一 Fab-IL2-Fab之結果。 149654.doc -219- 201119672 圖49呈現測試IL-2誘導之IFN-γ釋放之分析結果，該分析使用IL-2饑餓NK92細胞比較經純化之以4G8(FAP結合物）作為Fab的Fab-IL12-Fab免疫結合物及經純化之以 MHLG KV9(MCSP 結合物）作為 Fab 的 Fab-IL12-Fab 免疫結合物之作用。圖50呈現（A)以2B10(TNC A2結合物）作為Fab之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物之純化程序的概述，及（B)經純化之2B10 Fab-IL2-Fab免疫結合物的SDS-PAGE(還原、非還原）。 149654.doc -220-

201119672 序列表 <110> 瑞士商羅齊克雷雅公司 <120> 標靶性免疫結合物 <130> 26306 <140> 099127335 <141> 2010-08-16 <150> 61/234,584; 10162410.4 <151> 2009-08-17; 2010-05-10 <160> 281 <170> Patentln version 3.5 <210> 1 <211> 1611 <212> DNA <213> 人造序列 <220〉 <223〉DP47-3文庫之文庫模板 <400> 1 atgaaatacc tattgcctac ggcagccgct ggattgttat tactcgcggc ccagccggcc atggccgaaa tcgtgttaac gcagtctcca ggcaccctgt ctttgtctcc aggggaaaga gccaccctct cttgcagggc cagtcagagt gttagcagca gctacttagc ctggtaccag cagaaacctg gccaggctcc caggctcctc atctatggag catccagcag ggccactggc atcccagaca ggttcagtgg cagtggatcc gggacagact tcactctcac catcagcaga ctggagcctg aagattttgc agtgtattac tgtcagcagt atggtagctc accgctgacg ttcggccagg ggaccaaagt ggaaatcaaa cgtacggtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg tggagccgca gaacaaaaac tcatctcaga agaggatctg aatggagccg cagactacaa ggacgacgac gacaagggtg ccgcataata aggcgcgcca attctatttc aaggagacag tcatatgaaa tacctgctgc cgaccgctgc tgctggtctg ctgctcctcg ctgcccagcc ggcgatggcc gaggtgcaat tgctggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 149654-序列表.doc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 201119672 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 1140 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt 1200 ccgtattttg actactgggg ccaaggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaaa 1260 ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 1320 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 1380 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 1440 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 1500 gtgaatcaca agcccagcaa caccaaagtg gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 1560 gcggccgcaa gcactagtgc ccatcaccat caccatcacg ccgcggcata g 1611 <210> 2 <211> 16X7 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> DP88-3文庫之文庫模板 <400> 2 atgaaatacc tattgcctac ggcagccgct ggattgttat tactcgcggc ccagccggcc 60 atggccgata tccagatgac ccagtctcca tcctccctgt ctgcatctgt cggagaccgg 120 gtcaccatca cctgccgggc aagtcagggc attagaaatg atttaggctg gtaccagcag 180 aagccaggga aagcccctaa gcgcctgatc tatgctgcat ccagtttgca gagtggcgtc 240 ccatcaaggt tcagcggcag tggatccggg acagagttca ctctcaccat cagcagcttg 300 cagcctgaag attttgccac ctattactgc ttgcagcata atagttaccc cacgtttggc 360 cagggcacca aagtcgagat caagcgtacg gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 420 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 480 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 540 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 600 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 660 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgtggagc cgcagaacaa 720 aaactcatct cagaagagga tctgaatgga gccgcagact acaaggacga cgacgacaag 780 ggtgccgcat aataaggcgc gccaattcta tttcaaggag acagtcatat gaaatacctg 840 ctgccgaccg ctgctgctgg tctgctgctc ctcgctgccc agccggcgat ggcccaggtg 900 caattggtgc agtctggggc tgaggtgaag aagcctgggt cctcggtgaa ggtctcctgc 960 aaggcctccg gaggcacatt cagcagctac gctataagct gggtgcgaca ggcccctgga 1020 caagggctcg agtggatggg agggatcatc cctatctttg gtacagcaaa ctacgcacag 1080

149654-序列表.doc 1140 201119672 aagttccagg gcagggtcac cattactgca gacaaatcca cgagcacagc ctacatggag ctgagcagcc tgagatctga ggacaccgcc gtgtattact gtgcgagact atccccaggc ggttactatg ttatggatgc ctggggccaa gggaccaccg tgaccgtctc ctcagctagc accaaaggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaagtggaca agaaagttga gcccaaatct tgtgacgcgg ccgcaagcac tagtgcccat caccatcacc atcacgccgc ggcatag <210> 3

1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1617 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10; VL <400> 3

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 4 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 149654-序列表.doc 201119672 <220>

<223> 2B10; VL <400> 4 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 5 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列 <220> ^

<223> 2B10(GS); VL <400> 5

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105

<210> 6 <211> 321 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223〉 2B10(GS) ; VL -4-

149654-序列表.doc 201119672 <400> 6 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 7 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10; VH <400> 7

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 8 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10; VH 149654·序列表.doc 201119672 <400> 8 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 9 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列

<220>

<223> 2F11; VL <400> 9

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Tyr Thr Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210〉 10 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11; VL 149654-序列表,doc 201119672 <400> 10 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcgtccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagt atactccccc cacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210〉 11 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11(VI); VL <400> 11

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Tyr Thr Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 12 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11(VI) ; VL <400> 12 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 149654-序列表.doc 201119672 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagt atactccccc cacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 13 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11; VH <400> 13

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Trp Arg Trp Met Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 14 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11; VH <400> 14 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 149654-序列表.doc 120 201119672 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac atggccgtat attactgtgc gaaatggaga tggatgatgt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t <210〉 15 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11(MT); VH <400> 15

180 240 300 351

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Trp Arg Trp Met Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 16 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2F11 (MT) ; VH <400> 16 149654-序列表.doc 201119672 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac accgccgtat attactgtgc gaaatggaga 300 tggatgatgt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 17 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 3F2; VL <400> 17

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Tyr Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 18 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 3F2; VL <400> 18 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt atccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 •10· 149654·序列表.doc 180[9672 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaa 240 300 324 <210> 19 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 3F2(YS); VL <400> 19

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro .Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 20 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 3F2(YS); VL <400> 20 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 60 120 149654-序列表.doc -11 - 180 201119672 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaa <210> 21 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 3F2; VH <400> 21

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala 工le Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 22 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 3F2; VH <400> 22 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac •12· 149654·序列表.doc 201119672 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 23 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 3D9, VL <400> 23

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Leu lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 24 <211> 324 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> 3D9, VL <400> 24 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 13- 149654·序列表.doc 201119672 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagc ttattccccc tacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaa <210> 25 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 3D9, VH <400> 25

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Gly Val Ser Thr Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 26 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 3D9, VH <400> 26 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcta tgagctgggt ccgccagact ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attggtgtta gtactggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat • 14· 149654-序列表.doc 201119672 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg ctgggtcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t <210> 27 <211〉 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2D9(TA); VH <400> 27

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Gly Val Ser Thr Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 28 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2D9 (TA) ； VH <400〉 28 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcta tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attggtgtta gtactggtag cacatactac 15- 149654-序列表.doc 201119672 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 ctgggtcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 29 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4G8; VL <400> 29

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Arg Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie lie Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 30 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 4G8; VL <400> 30 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc cgcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcatt ggggcctcca ccagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggacg gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 -16·

149654·序列表.doc 201119672 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 31 <211> 117 <212> PRT <213〉人造序列 <220> <223> 4G8; VH <400> 31 Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val· 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 32 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 4G8; VH <400> 32 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 60 120 180 149654·序列表.doc •17- 240 201119672 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 33 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B3; VL <400> 33

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Tyr lie Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 34 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 4B3; VL <400> 34 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcaattact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggcgcctaca tcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 -18-

149654·序列表.doc 201119672 <210> 35 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B3; VH <400> 35

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 36 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 4B3; VH <400> 36 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg -19- 149654-序列表.doc 201119672 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 37 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4D6; VL <400> 37

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Gin Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 38 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 4D6; VL <400> 38 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcaactact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatccag ggcgcctcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 -20·

149654·序列表.doc 201119672 <210> 39 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4D6; VH <400> 39

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Lau Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 40 <211> 351 <212> DMA <213> 人造序列 <220>

<223> 4D6; VH <400> 40 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 •21 - 149654·序列表.doc 201119672 <210> 41 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2C6； VL <400> 41

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45

lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Gin lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 42 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2C6; VL <400> 42 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag caggctggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagc agattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 43 <211> 117 22-

149654·序列表.doc 201119672 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2C6; VH <400> 43

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Ala Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 44 <211> 351 <212> DMA <213> 人造序列 <220>

<223> 2C6; VH <400> 44 60 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatc cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggga gtgctggtta tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 tttgggaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 45 23· 149654·序列表.doc 201119672 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 5H5; VL <400> 45

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Asn Gin lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 46 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 5H5； VL <400> 46 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtaatc agattccccc tacgttcggt 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 47 <211> 116 <212> PRT <213> 人造序列 24·

149654-序列表.doc 201119672 <220>

<223> 5H5; VH <400> 47

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Thr Met Ser Trp Val Arg Arg Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Lys Gly Trp Phe Thr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser 115 <210> 48 <211> 348 <212> DNA <213> 人造序列

<223> 5H5; VH <400> 48 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatacca tgagctgggt ccgccggtct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggtg gtggtaggac atactacgca 180 gactccgtga agggccggtt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 240 cagatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtatatt actgtgcgaa aggttggttt 300 acgccttttg actactgggg ccaaggaacc ctggtcaccg tctcgagt 348

<210> 49 <211> 108 <212> PRT 25- 149654-序列表.doc 201119672 <213> 人造序列 <220>

<223> 2C4; VL <400> 49

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser lie Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Asn Gin lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 50 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2C4; VL <400> 50 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agtaactact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcctcca ttagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtaatc agattccccc tacgttcggt 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 51 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220> 26· 149654·序列表.doc 201119672 <223> 2C4; VH <400> 51 Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Thr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 52 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220〉 <223> 2C4; VH <400> 52 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagcggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 tttacgcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 53 <211> 748 <212> PRT <213> 人造序列 149654-序列表.doc 27- 201119672 <220> <223> 人類FAP胞外域+聚離胺酸標記+ Ws6標記 <400> 53 .

Arg Pro Ser Arg Val His Asn Ser Glu Glu Asn Thr Met Arg Ala Leu 15 10 15

Thr Leu Lys Asp lie Leu Asn Gly Thr Phe Ser Tyr Lys Thr Phe Phe 20 25 30

Pro Asn Trp lie Ser Gly Gin Glu Tyr Leu His Gin Ser Ala Asp Asn 35 40 45

Asn lie Val Leu Tyr Asn lie Glu Thr Gly Gin Ser Tyr Thr lie Leu 50 55 60

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Pro Asp Arg Gin Phe Val Tyr Leu Glu Ser Asp Tyr Ser Lys Leu Trp 85 90 95

Arg Tyr Ser Tyr Thr Ala Thr Tyr Tyr lie Tyr Asp Leu Ser Asn Gly 100 105 110

Glu Phe Val Arg Gly Asn Glu Leu Pro Arg Pro lie Gin Tyr Leu Cys 115 120 125

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Ala Tyr Ser Tyr Tyr Gly Asp Glu Gin Tyr Pro Arg Thr lie Asn lie 210 215 220

Pro Tyr Pro Lys Ala Gly Ala Lys Asn Pro Val Val Arg lie Phe lie 225 230 235 240 • 28 - 149654-序列表.doc 201119672

He Asp Thr Thr Tyr Pro Ala Tyr Val Gly Pro Gin Glu Val Pro Val 245 250 255

Pro Ala Met lie Ala Ser Ser Asp Tyr Tyr Phe Ser Trp Leu Thr Trp 260 265 270

Val Thr Asp Glu Arg Val Cys Leu Gin Trp Leu Lys Arg Val Gin Asn 275 280 285

Val Ser Val Leu Ser lie Cys Asp Phe Arg Glu Asp Trp Gin Thr Trp 290 295 300

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Ala Gly Gly Phe Phe Val Ser Thr Pro Val Phe Ser Tyr Asp Ala lie 325 330 335

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Tyr lie Lys Asp Thr Val Glu Asn Ala lie Gin lie Thr Ser Gly Lys 355 360 365

Trp Glu Ala lie Asn lie Phe Arg Val Thr Gin Asp Ser Leu Phe Tyr 370 375 380

Ser Ser Asn Glu Phe Glu Glu Tyr Pro Gly Arg Arg Asn lie Tyr Arg 385 390 395 400 lie Ser lie Gly Ser Tyr Pro Pro Ser Lys Lys Cys Val Thr Cys His 405 410 415

Leu Arg Lys Glu Arg Cys Gin Tyr Tyr Thr Ala Ser Phe Ser Asp Tyr 420 425 430

Ala Lys Tyr Tyr Ala Leu Val Cys Tyr Gly Pro Gly lie Pro lie Ser 435 440 445

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Asn Lys Glu Leu Glu Asn Ala Leu Lys Asn lie Gin Leu Pro Lys Glu 465 470 475 480

Glu lie Lys Lys Leu Glu Val Asp Glu lie Thr Leu Trp Tyr Lys Met 29- 149654·序列表.doc 201119672 485 490 495 lie Leu Pro Pro Gin Phe Asp Arg Ser Lys Lys Tyr Pro Leu Leu lie 500 505 510

Gin Val Tyr Gly Gly Pro Cys Ser Gin Ser Val Arg Ser Val Phe Ala 515 520 525

Val Asn Trp lie Ser Tyr Leu Ala Ser Lys Glu Gly Met Val lie Ala 530 535 540

Leu Val Asp Gly Arg Gly Thr Ala Phe Gin Gly Asp Lys Leu Leu Tyr 545 550 555 560

Ala Val Tyr Arg Lys Leu Gly Val Tyr Glu Val Glu Asp Gin lie Thr 565 570 575

Ala Val Arg Lys Phe lie Glu Met Gly Phe lie Asp Glu Lys Arg lie 580 585 590

Ala lie Trp Gly Trp Ser Tyr Gly Gly Tyr Val Ser Ser Leu Ala Leu 595 600 605

Ala Ser Gly Thr Gly Leu Phe Lys Cys Gly lie Ala Val Ala Pro Val 610 615 620

Ser Ser Trp Glu Tyr Tyr Ala Ser Val Tyr Thr Glu Arg Phe Met Gly 625 630 635 640

Leu Pro Thr Lys Asp Asp Asn Leu Glu His Tyr Lys Asn Ser Thr Val 645 650 655

Met Ala Arg Ala Glu Tyr Phe Arg Asn Val Asp Tyr Leu Leu lie His 660 665 670

Gly Thr Ala Asp Asp Asn Val His Phe Gin Asn Ser Ala Gin lie Ala 675 680 685

Lys Ala Leu Val Asn Ala Gin Val Asp Phe Gin Ala Met Trp Tyr Ser 690 695 700

Asp Gin Asn His Gly Leu Ser Gly Leu Ser Thr Asn His Leu Tyr Thr 705 710 715 720

His Met Thr His Phe Leu Lys Gin Cys Phe Ser Leu Ser Asp Gly Lys 725 730 735 30-

149654·序列表.doc

201119672

Lys Lys Lys Lys Lys Gly His His His His His His 740 745 <210> 54 <211> 2244 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 人類FAP胞外域+聚離胺酸標記+ his6標記 <400> 54 cgcccttcaa gagttcataa ctctgaagaa aatacaatga gagcactcac actgaaggat attttaaatg gaacattttc ttataaaaca ttttttccaa actggatttc aggacaagaa tatcttcatc aatctgcaga taacaatata gtactttata atattgaaac aggacaatca tataccattt tgagtaatag aaccatgaaa agtgtgaatg cttcaaatta cggcttatca cctgatcggc aatttgtata tctagaaagt gattattcaa agctttggag atactcttac acagcaacat attacatcta tgaccttagc aatggagaat ttgtaagagg aaatgagctt cctcgtccaa ttcagtattt atgctggtcg cctgttggga gtaaattagc atatgtctat caaaacaata tctatttgaa acaaagacca ggagatccac cttttcaaat aacatttaat ggaagagaaa ataaaatatt taatggaatc ccagactggg tttatgaaga ggaaatgctt gctacaaaat atgctctctg gtggtctcct aatggaaaat ttttggcata tgcggaattt aatgatacgg atataccagt tattgcctat tcctattatg gcgatgaaca atatcctaga acaataaata ttccataccc aaaggctgga gctaagaatc ccgttgttcg gatatttatt atcgatacca cttaccctgc gtatgtaggt ccccaggaag tgcctgttcc agcaatgata gcctcaagtg attattattt cagttggctc acgtgggtta ctgatgaacg agtatgtttg cagtggctaa aaagagtcca gaatgtttcg gtcctgtcta tatgtgactt cagggaagac tggcagacat gggattgtcc aaagacccag gagcatatag aagaaagcag aactggatgg gctggtggat tctttgtttc aacaccagtt ttcagctatg atgccatttc gtactacaaa atatttagtg acaaggatgg ctacaaacat attcactata tcaaagacac tgtggaaaat gctattcaaa ttacaagtgg caagtgggag gccataaata tattcagagt aacacaggat tcactgtttt attctagcaa tgaatttgaa gaataccctg gaagaagaaa catctacaga attagcattg gaagctatcc tccaagcaag aagtgtgtta cttgccatct aaggaaagaa aggtgccaat attacacagc aagtttcagc gactacgcca agtactatgc acttgtctgc tacggcccag gcatccccat ttccaccctt catgatggac gcactgatca agaaattaaa atcctggaag aaaacaagga attggaaaat gctttgaaaa atatccagct gcctaaagag gaaattaaga aacttgaagt agatgaaatt actttatggt acaagatgat tcttcctcct 149654-序列表.doc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 •31 · 1500 201119672 caatttgaca gatcaaagaa gtatcccttg ctaattcaag tgtatggtgg tccctgcagt 1560 cagagtgtaa ggtctgtatt tgctgttaat tggatatctt atcttgcaag taaggaaggg 1620 atggtcattg ccttggtgga tggtcgagga acagctttcc aaggtgacaa actcctctat 1680 gcagtgtatc gaaagctggg tgtttatgaa gttgaagacc agattacagc tgtcagaaaa 1740 ttcatagaaa tgggtttcat tgatgaaaaa agaatagcca tatggggctg gtcctatgga 1800 ggatacgttt catcactggc ccttgcatct ggaactggtc ttttcaaatg tggtatagca I860 gtggctccag tctccagctg ggaatattac gcgtctgtct acacagagag attcatgggt 1920 ctcccaacaa aggatgataa tcttgagcac tataagaatt caactgtgat ggcaagagca 1980 gaatatttca gaaatgtaga ctatcttctc atccacggaa cagcagatga taatgtgcac 2040 tttcaaaact cagcacagat tgctaaagct ctggttaatg cacaagtgga tttccaggca 2100 atgtggtact ctgaccagaa ccacggctta tccggcctgt ccacgaacca cttatacacc 2160 cacatgaccc acttcctaaa gcagtgtttc tctttgtcag acggcaaaaa gaaaaagaaa 2220 aagggccacc accatcacca tcac 2244 <210> 55 <211> 749 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類FAP胞外域+聚離胺酸標記+ his6標記 <400> 55

Arg Pro Ser Arg Val Tyr Lys Pro Glu Gly Asn Thr Lys Arg Ala Leu 1 5 10 15

Thr Leu Lys Asp lie Leu Asn Gly Thr Phe Ser Tyr Lys Thr Tyr Phe 20 25 30

Pro Asn Trp lie Ser Glu Gin Glu Tyr Leu His Gin Ser Glu Asp Asp 35 40 45

Asn lie Val Phe Tyr Asn lie Glu Thr Arg Glu Ser Tyr lie lie Leu 50 55 60

Ser Asn Ser Thr Met Lys Ser Val Asn Ala Thr Asp Tyr Gly Leu Ser 65 70 75 80

Pro Asp Arg Gin Phe Val Tyr Leu Glu Ser Asp Tyr Ser Lys Leu Trp 85 90 95

Arg Tyr Ser Tyr Thr Ala Thr Tyr Tyr lie Tyr Asp Leu Gin Asn Gly 100 105 110 •32- 149654-序列表.doc 201119672

Glu Phe Val Arg Gly Tyr Glu Leu Pro Arg Pro He Gin Tyr Leu Cys 115 120 125

Trp Ser Pro Val Gly Ser Lys Leu Ala Tyr Val Tyr Gin Asn Asn He 130 135 140

Tyr Leu Lys Gin Arg Pro Gly Asp Pro Pro Phe Gin lie Thr Tyr Thr 145 150 155 160

Gly Arg Glu Asn Arg He Phe Asn Gly lie Pro Asp Trp Val Tyr Glu 165 170 175

Glu Glu Met Leu Ala Thr Lys Tyr Ala Leu Trp Trp Ser Pro Asp Gly 180 185 190

Lys Phe Leu Ala Tyr Val Glu Phe Asn Asp Ser Asp lie Pro lie lie 195 200 205

Ala Tyr Ser Tyr Tyr Gly Asp Gly Gin Tyr Pro Arg Thr He Asn lie 210 215 220

Pro Tyr Pro Lys Ala Gly Ala Lys Asn Pro Val Val Arg Val Phe lie 225 230 235 240

Val Asp Thr Thr Tyr Pro His His Val Gly Pro Met Glu Val Pro Val 245 250 255

Pro Glu Met He Ala Ser Ser Asp Tyr Tyr Phe Ser Trp Leu Thr Trp 260 265 270

Val Ser Ser Glu Arg Val Cys Leu Gin Trp Leu Lys Arg Val Gin Asn 275 280 285

Val Ser Val Leu Ser lie Cys Asp Phe Arg Glu Asp Trp His Ala Trp 290 295 300

Glu Cys Pro Lys Asn Gin Glu His Val Glu Glu Ser Arg Thr Gly Trp 305 310 315 320

Ala Gly Gly Phe Phe Val Ser Thr Pro Ala Phe Ser Gin Asp Ala Thr 325 330 335

Ser Tyr Tyr Lys lie Phe Ser Asp Lys Asp Gly Tyr Lys His lie His 340 345 350

Tyr lie Lys Asp Thr Val Glu Asn Ala lie Gin lie Thr Ser Gly Lys 33- U9654·序列表.doc 201119672 355 360 365

Trp Glu Ala He Tyr lie Phe Arg Val Thr Gin Asp Ser Leu Phe Tyr 370 375 380

Ser Ser Asn Glu Phe Glu Gly Tyr Pro Gly Arg Arg Asn lie Tyr Arg 385 390 395 400 lie Ser lie Gly Asn Ser Pro Pro Ser Lys Lys Cys Val Thr Cys His 405 410 415

Leu Arg Lys Glu Arg Cys Gin Tyr Tyr Thr Ala Ser Phe Ser Tyr Lys 420 425 430

Ala Lys Tyr Tyr Ala Leu Val Cys Tyr Gly Pro Gly Leu Pro lie Ser 435 440 445

Thr Leu His Asp Gly Arg Thr Asp Gin Glu lie Gin Val Leu Glu Glu 450 455 460

Asn Lys Glu Leu Glu Asn Ser Leu Arg Asn lie Gin Leu Pro Lys Val 465 470 475 480

Glu lie Lys Lys Leu Lys Asp Gly Gly Leu Thr Phe Trp Tyr Lys Met 485 490 495 lie Leu Pro Pro Gin Phe Asp Arg Ser Lys Lys Tyr Pro Leu Leu He 500 505 510

Gin Val Tyr Gly Gly Pro Cys Ser Gin Ser Val Lys Ser Val Phe Ala 515 520 525

Val Asn Trp lie Thr Tyr Leu Ala Ser Lys Glu Gly lie Val lie Ala 530 535 540

Leu Val Asp Gly Arg Gly Thr Ala Phe Gin Gly Asp Lys Phe Leu His 545 550 555 560

Ala Val Tyr Arg Lys Leu Gly Val Tyr Glu Val Glu Asp Gin Leu Thr 565 570 575

Ala Val Arg Lys Phe lie Glu Met Gly Phe He Asp Glu Glu Arg He 580 585 590

Ala lie Trp Gly Trp Ser Tyr Gly Gly Tyr Val Ser Ser Leu Ala Leu 595 600 605 •34

149654-序列表.doc 201119672

Ala Ser Gly Thr Gly Leu Phe Lys Cys Gly lie Ala Val Ala Pro Val 610 615 620

Ser Ser Trp Glu Tyr Tyr Ala Ser lie Tyr Ser Glu Arg Phe Met Gly 625 630 635 640

Leu Pro Thr Lys Asp Asp Asn Leu Glu His Tyr Lys Asn Ser Thr Val 645 650 655

Met Ala Arg Ala G'lu Tyr Phe Arg Asn Val Asp Tyr Leu Leu lie His 660 665 670

Gly Thr Ala Asp Asp Asn Val His Phe Gin Asn Ser Ala Gin lie Ala 675 680 685

Lys Ala Leu Val Asn Ala Gin Val Asp Phe Gin Ala Met Trp Tyr Ser 690 695 700

Asp Gin Asn His Gly lie Leu Ser Gly Arg Ser Gin Asn His Leu Tyr 705 710 715 720

Thr His Met Thr His Phe Leu Lys Gin Cys Phe Ser Leu Ser Asp Gly 725 730 735

Lys Lys Lys Lys Lys Lys Gly His His His His His His 740 745 <210> 56 <211> 2247 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類FAP胞外域+聚離胺酸標記+ his6標記 <400> 56 60 120 180 240 300 360 420 480 540 cgtccctcaa gagtttacaa acctgaagga aacacaaaga gagctcttac cttgaaggat attttaaatg gaacattctc atataaaaca tattttccca actggatttc agaacaagaa tatcttcatc aatctgagga tgataacata gtattttata atattgaaac aagagaatca tatatcattt tgagtaatag caccatgaaa agtgtgaatg ctacagatta tggtttgtca cctgatcggc aatttgtgta tctagaaagt gattattcaa agctctggcg atattcatac acagcgacat actacatcta cgaccttcag aatggggaat ttgtaagagg atacgagctc cctcgtccaa ttcagtatct atgctggtcg cctgttggga gtaaattagc atatgtatat caaaacaata tttatttgaa acaaagacca ggagatccac cttttcaaat aacttatact ggaagagaaa atagaatatt taatggaata ccagactggg tttatgaaga ggaaatgctt -35- 149654-序列表.doc 、:3 201119672 gccacaaaat atgctctttg gtggtctcca gatggaaaat ttttggcata tgtagaattt 600 aatgattcag atataccaat tattgcctat tcttattatg gtgatggaca gtatcctaga 660 actataaata ttccatatcc aaaggctggg gctaagaatc cggttgttcg tgtttttatt 720 gttgacacca cctaccctca ccacgtgggc ccaatggaag tgccagttcc agaaatgata 780 gcctcaagtg actattattt cagctggctc acatgggtgt ccagtgaacg agtatgcttg 840 cagtggctaa aaagagtgca gaatgtctca gtcctgtcta tatgtgattt cagggaagac 900 tggcatgcat gggaatgtcc aaagaaccag gagcatgtag aagaaagcag aacaggatgg 960 gctggtggat tctttgtttc gacaccagct tttagccagg atgccacttc ttactacaaa 1020 atatttagcg acaaggatgg ttacaaacat attcactaca tcaaagacac tgtggaaaat 1080 gctattcaaa ttacaagtgg caagtgggag gccatatata tattccgcgt aacacaggat 1140 tcactgtttt attctagcaa tgaatttgaa ggttaccctg gaagaagaaa catctacaga 1200 attagcattg gaaactctcc tccgagcaag aagtgtgtta cttgccatct aaggaaagaa 1260 aggtgccaat attacacagc aagtttcagc tacaaagcca agtactatgc actcgtctgc 1320 tatggccctg gcctccccat ttccaccctc catgatggcc gcacagacca agaaatacaa 1380 gtattagaag aaaacaaaga actggaaaat tctctgagaa atatccagct gcctaaagtg 1440 gagattaaga agctcaaaga cgggggactg actttctggt acaagatgat tctgcctcct 1500 cagtttgaca gatcaaagaa gtaccctttg ctaattcaag tgtatggtgg tccttgtagc 1560 cagagtgtta agtctgtgtt tgctgttaat tggataactt atctcgcaag taaggagggg 1620 atagtcattg ccctggtaga tggtcggggc actgctttcc aaggtgacaa attcctgcat 1680 gccgtgtatc gaaaactggg tgtatatgaa gttgaggacc agctcacagc tgtcagaaaa 1740 ttcatagaaa tgggtttcat tgatgaagaa agaatagcca tatggggctg gtcctacgga 1800 ggttatgttt catccctggc ccttgcatct ggaactggtc ttttcaaatg tggcatagca I860 gtggctccag tctccagctg ggaatattac gcatctatct actcagagag attcatgggc 1920 ctcccaacaa aggacgacaa tctcgaacac tataaaaatt caactgtgat ggcaagagca 1980 gaatatttca gaaatgtaga ctatcttctc atccacggaa cagcagatga taatgtgcac 2040 tttcagaact cagcacagat tgctaaagct ttggttaatg cacaagtgga tttccaggcg 2100 atgtggtact ctgaccagaa ccatggtata ttatctgggc gctcccagaa tcatttatat 2160 acccacatga cgcacttcct caagcaatgc ttttctttat cagacggcaa aaagaaaaag 2220 aaaaagggcc accaccatca ccatcac 2247 <210> 57 <211> 119 <212> PRT <213> 人造序列 -36- 149654-序列表.doc 201119672 <220> <223> 人類 TNC-A2 + avi 標記 + his6 標記 <400> 57

Ala Ser Thr Gly Glu Thr Pro Asn Leu Gly Glu Val Val Val Ala Glu 15 10 15

Val Gly Trp Asp Ala Leu Lys Leu Asn Trp Thr Ala Pro Glu Gly Ala 20 25 30

Tyr Glu Tyr Phe Phe lie Gin Val Gin Glu Ala Asp Thr Val Glu Ala 35 40 45

Ala Gin Asn Leu Thr Val Pro Gly Gly Leu Arg Ser Thr Asp Leu Pro 50 55 60

Gly Leu Lys Ala Ala Thr His Tyr Thr lie Thr 工le Arg Gly Val Thr 65 70 75 80

Gin Asp Phe Ser Thr Thr Pro Leu Ser Val Glu Val Leu Thr Ala Ser 85 90 95

Gly Leu Asn Asp lie Phe Glu Ala Gin Lys lie Glu Trp His Glu Gly 100 105 110

Thr His His His His His His 115 <210> 58 <211> 357 <212> DNA <213> 人造序列 <223> 人類 TNC-A2 + avi標記 + his6標記 <400> 58 gcgtccaccg gggaaacccc gaacctgggc gaagtggtgg tggcggaagt gggttgggat 60 gcgctgaaac tgaactggac cgcgccggaa ggcgcgtatg aatatttttt catccaggtg 120 caggaagcgg ataccgttga agcggcgcag aacctgaccg ttccgggcgg tctgcgtagc 180 accgatctgc cgggcctgaa agcggcgacc cattatacca ttaccatccg tggggtgacc 240 caggatttta gcaccacccc gctgtctgtg gaagtgctga ccgctagcgg cctgaacgac 300 atcttcgagg ctcagaaaat cgaatggcac gaaggtaccc atcaccatca ccaccac 357

<210> 59 <211〉 116 <212> PRT 37- U9654-序列表.doc 201119672 <213> 人造序列 <220> <223> 人類TNC-Al + avi標記+ his6標記 <400> 59

Glu Gin Ala Pro Glu Leu Glu Asn Leu Thr Val Thr Glu Val Gly Trp 15 10 15

Asp Gly Leu Arg Leu Asn Trp Thr Ala Ala Asp Gin Ala Tyr Glu His 20 25 30

Phe lie He Gin Val Gin Glu Ala Asn Lys Val Glu Ala Ala Arg Asn 35 40 45

Leu Thr Val Pro Gly Ser Leu Arg Ala Val Asp lie Pro Gly Leu Lys 50 55 60

Ala Ala Thr Pro Tyr Thr Val Ser lie Tyr Gly Val lie Gin Gly Tyr 65 70 75 80

Arg Thr Pro Val Leu Ser Ala Glu Ala Ser Thr Ala Ser Gly Leu Asn 85 90 95

Asp lie Phe Glu Ala Gin Lys lie Glu Trp His Glu Gly Thr His His 100 105 110

His His His His 115 <210> 60 <211> 348 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉人類 TNC-A1 + avi 標記 + Ms6 標記 <400> 60 gaacaagccc ctgagctgga aaacctcacc gtgactgagg ttggctggga tggcctcaga 60 ctcaactgga ccgcggctga ccaggcctat gagcacttta tcattcaggt gcaggaggcc 120 aacaaggtgg aggcagctcg gaacctcacc gtgcctggca gccttcgggc tgtggacata 180 ccgggcctca aggctgctac gccttataca gtctccatct atggggtgat ccagggctat 240 agaacaccag tgctctctgc tgaggcctcc acagctagcg gcctgaacga catcttcgag 300 gctcagaaaa tcgaatggca cgaaggtacc catcaccatc accaccac 348 <210> 61 <211> 124 38-

149654-序列表.doc 201119672 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類TNOAl + avi標記+ his6標記 <400> 61 lie Ser Glu Phe Gly Ser Ser Thr Glu Glu Val Pro Ser Leu Glu Asn 1 5 10 15

Leu Thr Val Thr Glu Ala Gly Trp Asp Gly Leu Arg Leu Asn Trp Thr 20 25 30

Ala Asp Asp Leu Ala Tyr Glu Tyr Phe Val lie Gin Val Gin Glu Ala 35 40 45

Asn Asn Val Glu Thr Ala His Asn Phe Thr Val Pro Gly Asn Leu Arg 50 55 60

Ala Ala Asp lie Pro Gly Leu Lys Val Ala Thr Ser Tyr Arg Val Ser 65 70 75 80 lie Tyr Gly Val Ala Arg Gly Tyr Arg Thr Pro Val Leu Ser Ala Glu 85 90 95

Thr Ser Thr Ala Ser Gly Leu Asn Asp lie Phe Glu Ala Gin Lys lie 100 105 110

Glu Trp His Glu Gly Thr His His His His His His 115 120 <210> 62 <211> 372 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類TNC-A1 + avi標記+ his6標記 <400> 62 atttcagaat tcggatccag caccgaagaa gtgccgagcc tggaaaacct gaccgtgacc 60 gaagcgggct gggatggcct gcgtctgaac tggaccgcgg atgatctggc ctatgaatat 120 tttgtgatcc aggtgcagga agcgaacaac gttgaaaccg cgcataactt taccgtgccg 180 ggcaatctgc gtgcggcgga tattccgggc ctgaaagtgg cgaccagcta tcgtgtgagc 240 atttatggcg tggcgcgtgg ctatcgtacc ccggttctga gcgcggaaac cagcaccgct 300 agcggcctga acgacatctt cgaggctcag aaaatcgaat ggcacgaagg tacccatcac 360 catcaccacc ac 372 39- 149654-序列表.doc 201119672 <210> 63 <211> 116 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類 TNC-A4 + avi 標記 + his6 標記 <400> 63

Glu Asp Leu Pro Gin Leu Gly Asp Leu Ala Val Ser Glu Val Gly Trp 15 10 15

Asp Gly Leu Arg Leu Asn Trp Thr Ala Ala Asp Asn Ala Tyr Glu His 20 25 30

Phe Val He Gin Val Gin Glu Val Asn Lys Val Glu Ala Ala Gin Asn 35 40 45

Leu Thr Leu Pro Gly Ser Leu Arg Ala Val Asp lie Pro Gly Leu Glu 50 55 60

Ala Ala Thr Pro Tyr Arg Val Ser lie Tyr Gly Val lie Arg Gly Tyr 65 70 75 80

Arg Thr Pro Val Leu Ser Ala Glu Ala Ser Thr Ala Ser Gly Leu Asn 85 90 95

Asp lie Phe Glu Ala Gin Lys lie Glu Trp His Glu Gly Thr His His 100 105 110

His His His His 115 <210> 64 <211> 348 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類 TNC-A4 + avi 標記+his6 標記 <400 64 gaagatctgc cgcagctggg cgatctggcc gtgagcgaag tgggctggga tggcctgcgt 60 ctgaactgga ccgcggcgga taacgcgtat gaacattttg tgattcaggt gcaggaagtg 120 aacaaagttg aagcggcgca gaacctgacc ctgccgggca gcctgcgtgc ggtggatatt 180 ccgggcctgg aagcggcgac cccgtatcgt gtgagcatct atggcgtgat tcgtggctat 240 cgtaccccgg ttctgagcgc ggaagcgagc accgctagcg gcctgaacga catcttcgag 300 gctcagaaaa tcgaatggca cgaaggtacc catcaccatc accaccac 348 -40- 149654·序列表.doc 201119672 <210> 65 <211> 124 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類TNC-A4 + avi標記+ his6標記 <400> 65 lie Ser Glu Phe Gly Ser Leu Thr Glu Asp Leu Pro Gin Leu Gly Gly 1 5 10 15

Leu Ser Val Thr Glu Val Ser Trp Asp Gly Leu Thr Leu Asn Trp Thr 20 , 25 30

Thr Asp Asp Leu Ala Tyr Lys His Phe Val Val Gin Val Gin Glu Ala 35 40 45

Asn Asn Val Glu Ala Ala Gin Asn Leu Thr Val Pro Gly Ser Leu Arg 50 55 60

Ala Val Asp lie Pro Gly Leu Lys Ala Asp Thr Pro Tyr Arg Val Ser 65 70 75 80 lie Tyr Gly Val lie Gin Gly Tyr Arg Thr Pro Met Leu Ser Thr Asp 85 90 95

Val Ser Thr Ala Ser Gly Leu Asn Asp lie Phe Glu Ala Gin Lys ILe 100 105 110

Glu Trp His Glu Gly Thr His His His His His His 115 120 <210> 66 <211> 372 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 鼠類 TNC-A4 η 卜avi標記+ his6標記 <400> 66 atttcagaat tcggatccct gaccgaagat ctgccgcagc tgggcggtct gagcgtgacc 60 gaagtgagct gggatggcct gaccctgaac tggaccaccg atgatctggc ctataaacat 120 tttgtggtgc aggtgcagga agcgaacaac gttgaagcgg cgcagaacct gaccgttccg 180 ggtagcctgc gtgcggtgga tattccgggc ctgaaagcgg ataccccgta tcgtgtgagc 240 atttatggcg tgattcaggg ctatcgtacc ccgatgctgt ctaccgatgt gagcaccgct 3〇〇 -41- 149654-序列表.doc 201119672 agcggcctga acgacatctt cgaggctcag aaaatcgaat ggcacgaagg tacccatcac 360 catcaccacc ac 372 <210> 67 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 2D9; VL <400> 67

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 ΊΟ Ί5 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Asn Gin lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 68 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2D9; VL <400> 68 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtaatc agattccccc tacgttcggt 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 •42-

149654·序列表.doc 201119672 <210> 69 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2D9; VH <400> 69

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Thr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 70 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2D9; VH <400> 70 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagcggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg -43 - 149654-序列表.doc 351

201119672 tttacgcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t <210> 71 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B8; VL <400> 71

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 72 <211> 324 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> 4B8; VL <400> Ί2 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 149654·序列表.doc 44· 201119672 <210〉 73 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B8; VH <400> 73

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<211> 351 <212> DMA <213> 人造序列 <220>

<223> 4B8; VH <400> 74 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 •45· 149654·序列表.doc 201119672 <210> 75 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 7A1； VL <400> 75

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly I 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Gin lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 76 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 7A1； VL <400> 76 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagc agattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 77 <211> 117 46- 149654·序列表.doc 201119672 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 7A1; VH <400> 77

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 78 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 7A1; VH <400> 78 60 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 tttgggaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 79 47- 149654-序列表.doc 201119672 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 13C2; VL <400> 79

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly He Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Leu lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 80 <211> 324 <212> DMA <213> 人造序列 <220>

<223> 13C2; VL <400> 80 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagc ttattccccc tacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaa <210> 81 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 48- 60 120 180 240 300 149654-序列表.doc 324 201119672 <220>

<223> 13C2; VH <400> 81

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 82 <211> 351 <212> DMA <213〉人造序列

<223> 13C2; VH <400> 82 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 ctgggtcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351

<210> 83 <211> 108 <212> PRT 49- 149654-序列表.doc 201119672 <213> 人造序列 <220>

<223> 13E8; VL <400> 83

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45

lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Leu Asn lie Pro 85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 84 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 13E8; VL <400> 84

gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtctga atattccctc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 85 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220> 149654-序列表.doc 50· 201119672

<223> 13E8; VH <400> 85

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 86 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 13E8; VH <400> 86 60 120 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 ttgggtccgt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 87 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 -51 · 149654-序列表.doc 201119672 <220>

<223> 14C10; VL <400> 87

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly His lie lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 88 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 14C10; VL <400> 88 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcata ttattccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324

<210> 89 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 14C10; VH 52·. 149654·序列表.doc 201119672 <400> 89

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Ala Trp Met Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 90 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 14C10; VH

gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagcttgg 300 atggggcctt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351

<210> 91 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 17A11; VL -53- 149654-序列表.doc 3 201119672 <400> 91

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Leu Asn lie Pro 85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 92 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 17A11; VL <400> 92 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtctga atattccctc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 93 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 17A11; VH <400> 93 54- 149654·序列表.doc 201119672

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 94 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 17A11; VH <400> 94 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaggttgg 300 ttgggtccgt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 95 <211> 603 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 源自L19單株抗體之Fab重鏈-源自L19單株抗體之IL2-Fab重鏈的C125A變異體 55- 149654-序列表.doc 201119672 <400> 95

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140

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Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 165 170 175

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Thr Ser Ser 225 230 235 240 56-

149654-序列表.doc 201119672

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Pro Leu Glu Glu Val 300

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lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 325 330 335

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Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ser 405 410 415

Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 420 425 430

Ser lie Ser Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 435 440 445

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 450 455 460

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 465 470 475 480

Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 485 490 495 149654-序列表.doc 57· 201119672

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Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 515 520 525

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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

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149654-序列表.doc 201119672

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Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser 115 · 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140

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Ser Ser lie Ser Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

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Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lie Tyr Tyr Ala 165 170 175

Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 180 185 190

Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe 195 200 205

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Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Ser Val Leu Ser Ser Ser Ser Gly Ser 225 230 235 240

Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr 245 250 255

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Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser 325 330 335 60-

149654-序列表.doc 201119672

Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe 340 345 350

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蛋白質 <400> 98

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Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

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Ala Lys Ala His Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

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Gin Ala Pro Val Leu Val lie Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly 165 170 175 lie Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu 180 185 190

Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn 195 200 205

Ser Ser Val Tyr Thr Met Pro Pro Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys 210 215 220

Leu Thr Val Leu Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser 225 230 235 240

Ser Ser Ser Gly Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu 245 250 255

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Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe 275 280 285

Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu 290 295 300

Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys 305 310 315 320

Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie 325 330 335

Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala 340 345 350

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149654-序列表.doc 201119672 <220> <223> scFv-IL2-scFv (F16,蛋白質） <400> 99

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Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

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Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Ala His Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125

Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu 130 135 140

Gly Gin Thr Val Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr 145 150 155 160

Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val 165 170 175 lie Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 180 185 190

Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin 195 200 205

Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Ser Val Tyr Thr Met 210 215 220

Pro Pro Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser 225 230 235 240 63- 149654-序列表.doc 201119672

Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ala Pro 245 250 255

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Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala 290 295 300

Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu 305 310 315 320

Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro 325 330 335

Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly 340 345 350

Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr lie 355 360 365

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Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu 405 410 415

Gly Gin Thr Val Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr 420 425 430

Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val 435 440 445 lie Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 450 455 460

Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin 465 470 475 480

Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Ser Val Tyr Thr Met 64-

149654·序列表.doc 201119672 485 490 495

Pro Pro Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser 500 505 510

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Ser Glu Val 515 520 525

Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu 530 535 540

Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Gly Met 545 550 555 560

Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala 565 570 575 lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 580 585 590

Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin 595 600' 605

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys 610 615 620

Ala His Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 625 630 635 640

Ser

<210> 100 <211> 603 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> Fab-IL2-Fab (F16，重鏈細胞因子融合構築體，蛋白質） <400> 100

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 l〇 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arq Tvr 2〇 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 4 0 45 -65- 149654-序列表.doc 201119672

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Ala His Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190

Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Ser Ser Ser 210 215 220

Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ala Pro Thr Ser Ser 225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu 245 250 255

Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr 260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu 275 280 285

Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val 66·

149654-序列表.doc 201119672 290 295 300

Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu 305 310 315 320 lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr 325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr lie Val Glu Phe 340 345 350

Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie lie Ser Thr Leu Thr 355 360 365

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu 370 375 380

Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser 385 390 395 400

Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Gly 405 410 415

Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 420 425 430

Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 435 440 445

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 450 455 460

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 465 470 475 480

Lys Ala His Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 485 490 495

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 500 505 510

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 515 520 525

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 530 535 540 -67- 149654·序列表.doc 201119672

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly 545 550 555 560

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 565 570 575

Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 580 585 590

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 595 600 <210> 101 <211> 214 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> F16，輕鏈，蛋白質 <400> 101

Ser Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin 15 10 15

Thr Val Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala 20 25 30

Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lie Tyr 35 40 45

Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu 65 70 75 80

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Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gin Pro Lys 100 105 110

Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gin 115 120 125

Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu lie Ser Asp Phe Tyr Pro Gly 130 135 140

Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly • 68 ·

149654·序列表.doc 201119672 145 150 155 160

Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gin Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala 165 170 175

Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gin Trp Lys Ser His Arg Ser 18〇 185 190

Tyr Ser Cys Gin Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val 195 200 205

Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210

<210> 102 <211> 466 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> IL2R-p-Fc (孔）融合蛋白，蛋白質 <400> 102

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15

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Val Asp lie Val Thr Leu Arg Val Leu Cys Arg Glu Gly Val Arg Trp 100 105 no

Arg Val Met Ala He Gin Asp Phe Lys Pro Phe Glu Asn Leu Arg Leu 115 120 125

Met Ala Pro He Ser Leu Gin Val Val His Val Glu Thr His Arg Cys 130 135 140 69- 149654-序列表.doc 201119672

Asn lie Ser Trp Glu lie Ser Gin Ala Ser His Tyr Phe Glu Arg His 145 150 155 160

Leu Glu Phe Glu Ala Arg Thr Leu Ser Pro Gly His Thr Trp Glu Glu 165 170 175

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Leu Gin Gly Glu Phe Thr Thr Trp Ser Pro Trp Ser Gin Pro Leu Ala 210 215 220

Phe Arg Thr Lys Pro Ala Ala Leu Gly Lys Asp Thr Gly Ala Gin Asp 225 230 235 240

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 245 250 255

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Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu 340 345 350

Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Cys 355 360 365

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu 370 375 380

Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp •70·

149654-序列表.doc 201119672 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gin 405 Pro Glu Asn Asn Tyr 410 Lys Thr Thr Pro Pro 415 Val

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430

Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460

Gly Lys

<210> 103 <211> 492 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> EL2R-y-Fc (結），蛋白質 <400> 103

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Asp Lys Val Gin Lys Cys Ser His Tyr Leu Phe Ser Glu Glu lie Thr 100 105 110

Ser Gly Cys Gin Leu Gin Lys Lys Glu lie His Leu Tyr Gin Thr Phe 115 120 125 -71 - 149654·序列表.doc 201119672

Val Val Gin Leu Gin Asp Pro Arg Glu Pro Arg Arg Gin Ala Thr Gin 130 135 140

Met Leu Lys Leu Gin Asn Leu Val lie Pro Trp Ala Pro Glu Asn Leu 145 150 155 160

Thr Leu His Lys Leu Ser Glu Ser Gin Leu Glu Leu Asn Trp Asn Asn 165 170 175

Arg Phe Leu Asn His Cys Leu Glu His Leu Val Gin Tyr Arg Thr Asp 180 185 190

Trp Asp His Ser Trp Thr Glu Gin Ser Val Asp Tyr Arg His Lys Phe 195 200 205

Ser Leu Pro Ser Val Asp Gly Gin Lys Arg Tyr Thr Phe Arg Val Arg 210 215 220

Ser Arg Phe Asn Pro Leu Cys Gly Ser Ala Gin His Trp Ser Glu Trp 225 230 235 240

Ser His Pro lie His Trp Gly Ser Asn Thr Ser Lys Glu Asn Pro Phe 245 250 255

Leu Phe Ala Leu Glu Ala Gly Ala Gin Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 260 265 270

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 275 280 285

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 290 295 300

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 305 310 315 320

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 325 330 335

Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 340 345 350

Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 355 360 365

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala •72·

149654-序列表-doc 201119672 370 375 380

Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg 385 390 395 400

Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly 405 410 415

Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro 420 425 430

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 435 440 445

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin 450 455 460

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 465 470 475 480

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Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 73- 149654-序列表.doc 201119672

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Met Trp Glu Leu 225 230 235 240

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Lys Thr Phe Leu Lys Cys Glu Ala Pro Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr •74·

149654·序列表.doc 201119672 340 345 350

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Ser Ser Ser Ser Pro Pro Asp Ser Arg Ala Val Thr Cys Gly Met Ala 370 375 380

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Ser Leu Lys Phe Phe Val Arg lie Gin Arg Lys Lys Glu Lys Met Lys 485 490 495

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Gly Gly Gly Ser Arg Val lie Pro Val Ser Gly Pro Ala Arg Cys Leu 565 570 575

Ser Gin Ser Arg Asn Leu Leu Lys Thr Thr Asp Asp Met Val Lys Thr 580 585 590 •75· 149654·序列表.doc 201119672

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Ser Ser Phe Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 805 810 815

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149654-序列表.doc 201119672

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Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 885 890 895

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Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Arg Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 •77· 149654-序列表.doc 201119672

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125

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Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190

Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Gly Gly Gly 210 215 220

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly lie Trp Glu Leu Lys 225 230 235 240

Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Leu Asp Trp Tyr Pro Asp Ala Pro Gly 245 250 255

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Lys Gly Gly Glu Val Leu Ser His Ser Leu Leu Leu Leu His Lys Lys 305 310 315 320 78·

149654·序列表.doc 201119672

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Lys Asn Lys Thr Phe Leu Arg Cys Glu Ala Lys Asn Tyr Ser Gly Arg 340 345 350

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Ala Ala Thr Leu Ser Ala Glu Arg Val Arg Gly Asp Asn Lys Glu Tyr 385 390 395 400

Glu Tyr Ser Val Glu Cys Gin Glu Asp Ser Ala Cys Pro Ala Ala Glu 405 410 415

Glu Ser Leu Pro lie Glu Val Met Val Asp Ala Val His Lys Leu Lys 420 425 430

Tyr Glu Asn Tyr Thr Ser Ser Phe Phe lie Arg Asp lie lie Lys Pro 435 440 445

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Tyr Phe Ser Leu Thr Phe Cys Val Gin Val Gin Gly Lys Ser Lys Arg 485 490 495

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Asn Leu Leu Arg Ala Val Ser Asn Met Leu Gin Lys Ala Arg Gin Thr 580 585 590

Leu Glu Phe Tyr Pro Cys Thr Ser Glu Glu lie Asp His Glu Asp lie 595 600 605

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Thr Lys Asn Glu Ser Cys Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe lie Thr 625 630 635 640

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Lys Thr Met Asn Ala Lys Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gin lie Phe 675 680 685

Leu Asp Gin Asn Met Leu Ala Val lie Asp Glu Leu Met Gin Ala Leu 690 695 700

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Asp Phe Tyr Lys Thr Lys lie Lys Leu Cys lie Leu Leu His Ala Phe 725 730 735

Arg lie Arg Ala Val Thr lie Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala 740 745 750

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu 755 760 765

Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser 770 775 780

Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ser 785 790 795 800

Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 805 810 815

Ser lie Arg Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys -80-

149654·序列表.doc 201119672 820 825 830

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 835 840 845

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 850 855 860

Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 865 870 875 880

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 885 890 895

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 900 905 910

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 915 920 925

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly 930 935 940

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 945 950 955 960

Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 965 970 975

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 980 985

<210> 106 <211> 597 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> Fab-GMCSF-Fab，L19 抗體 * 人類 GM-CSF，蛋白質 <400> 106

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 -81 - 149654·序列表.doc 201119672

Ser Ser lie Arg Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 . 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190

Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Gly Gly Gly 210 215 220

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Ala Arg Ser 225 230 235 240

Pro Ser Pro Ser Thr Gin Pro Trp Glu His Val Asn Ala lie Gin Glu 245 250 255

Ala Arg Arg Leu Leu Asn Leu Ser Arg Asp Thr Ala Ala Glu Met Asn 260 265 270

Glu Thr Val Glu Val lie Ser Glu Met Phe Asp Leu Gin Glu Pro Thr 275 280 285

Cys Leu Gin Thr Arg Leu Glu Leu Tyr Lys Gin Gly Leu Arg Gly Ser -82-

149654-序列表.doc 201119672 290 295 300

Leu Thr Lys Leu Lys Gly Pro Leu Thr Met Met Ala Ser His Tyr Lys 305 310 315 320

Gin His Cys Pro Pro Thr Pro Glu Thr Ser Cys Ala Thr Gin lie lie 325 330 335

Thr Phe Glu Ser Phe Lys Glu Asn Leu Lys Asp Phe Leu Leu Val lie 340 345 350

Pro Phe Asp Cys Trp Glu Pro Val Gin Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser 355 360 365

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser 370 375 380

Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 385 390 395 400

Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Sar Met Ser Trp Val Arg Gin 405 410 415 ..

Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ser lie Arg Gly Ser Ser 420 425 430

Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser 435 440 445

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg 450 455 460

Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe 465 470 475 480

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 485 490 495

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 500 505 510

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 515 520 525

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 530 535 540 -83- 149654-序列表.doc 201119672

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 545 550 555 560

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 565 570 575

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Pro Lys Ser Cys Asp 595 <210> 107 <211> 636 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> Fab-IFNa2-Fab，L19抗體，蛋白質 <400> 107

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Arg GXy Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 84-

149654·序列表.doc 201119672 145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190

Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Gly Gly Gly 210 215 220

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Cys Asp Leu Pro Gin 225 230 235 240

Thr His Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu lie Leu Leu Ala Gin Met 245 250 255

Arg Arg lie Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 260 265 270

Phe Pro Gin Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gin Phe Gin Lys Ala Gin Ala 275 280 285 lie Ser Val Leu His Glu Met lie Gin Gin Thr Phe Asn Leu Phe Ser 290 295 300

Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Ser Leu Leu Glu Lys Phe 305 310 315 320

Tyr Thr Glu Leu Tyr Gin Gin Leu Asn Asp Leu Glu Ala Cys Val lie 325 330 335

Gin Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met Asn Val Asp Ser lie 340 345 350

Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Gin Arg lie Thr Leu Tyr Leu Thr Glu 355 360 365

Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg Ala Glu lie Met 370 375 380

Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gin Glu Arg Leu Arg Arg Lys 385 390 395 400 85 149654-序列表.doc 201119672

Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 405 410 415 Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 420 425 430 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 435 440 445 Ser Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 450 455 460 Ser Ser lie Arg Gly Ser Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 465 470 475 480 Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 485 490 495 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 500 505 510 Ala Lys Pro Phe Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 515 520 525 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala .530 535 540 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 545 550 555 560 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 565 570 575 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser 580 585 590 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 595 600 605 Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 610 615 620 Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 625 630 635 <210> 108 <211> 1812 <212> DMA

149654·序列表.doc 86- 201119672 <213> 人造序列 <220> <223> 源自L19單株抗體之Fab重鏈源自L19單株抗體之IL2-Fab重鏈的C125A變異體

<400> 108 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct atttccggta gttcgggtac cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt 300 ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag 360 ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 420 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 480 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 540 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 600 gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 660 tccggcggag gagggagcgg cggaggtggc tccggaggtg gcggagcacc tacttcaagt 720 tctacaaaga aaacacagct acaactggag catttactgc tggatttaca gatgattttg 780 aatggaatta ataattacaa gaatcccaaa ctcaccagga tgctcacatt taagttttac 840 atgcccaaga aggccacaga actgaaacat cttcagtgtc tagaagaaga actcaaacct 900 ctggaggaag tgctaaattt agctcaaagc aaaaactttc acttaagacc cagggactta 960 atcagcaata tcaacgtaat agttctggaa ctaaagggat ctgaaacaac attcatgtgt 1020 gaatatgctg atgagacagc aaccattgta gaatttctga acagatggat tacctttgcc 1080 caaagcatca tctcaacact gacttccggc ggaggaggat ccggcggagg tggctctggc 1140 ggtggcggag aggtgcagct gttggagtct gggggaggct tggtacagcc tggggggtcc 1200 ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc acctttagca gtttttcgat gagctgggtc 1260 cgccaggctc cagggaaggg gctggagtgg gtctcatcta tttccggtag ttcgggtacc 1320 acatactacg cagactccgt gaagggccgg ttcaccatct ccagagacaa ttccaagaac 1380 acgctgtatc tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggccgtata ttactgtgcg 1440 aaaccgtttc cgtattttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcgagtgct 1500 agcaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc 1560 acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 1620 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 1680 •87· 149654·序列表.doc 201119672 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac ccagacctac 1740 atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac accaaggtgg ataagaaagt tgagcccaaa 1800 tcttgtgact ga 1812 <210> 109 <211> 648 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 源自L19單株抗雄之Fab輕鏈 <400> 109 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat tatgcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagacgggtc gtattcctcc gacgttcggc 300 caagggacca aggtggaaat caaacgtacg gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 110 <211> 1149 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 源自L19單株抗體之scFv-8個胺基酸連接子-IL2之C125A變異趙 <400> 110 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct atttccggta gttcgggtac cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt 300 ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtag cggcgggagc 360 ggcggggcta gcgaaattgt gttgacgcag tctccaggca ccctgtcttt gtctccaggg 420 •88- 149654·序列表.doc 201119672

gaaagagcca ccctctcctg cagggccagt cagagtgtta gcagcagcta cttagcctgg 480 taccagcaga aacctggcca ggctcccagg ctcctcatct attatgcatc cagcagggcc 540 actggcatcc cagacaggtt cagtggcagt gggtctggga cagacttcac tctcaccatc 600 agcagactgg agcctgaaga ttttgcagtg tattactgtc agcagacggg tcgtattcct 660 ccgacgttcg gccaagggac caaggtggaa atctccgtgc tgtcttcctc atcgggtagt 720 agctcttccg gctcatcgtc ctccggagca cctacttcaa gttctacaaa gaaaacacag 780 ctacaactgg agcatttact gctggattta cagatgattt tgaatggaat taataattac 840 aagaatccca aactcaccag gatgctcaca tttaagtttt acatgcccaa gaaggccaca 900 gaactgaaac atcttcagtg tctagaagaa gaactcaaac ctctggagga agtgctaaat 960 ttagctcaaa gcaaaaactt tcacttaaga cccagggact taatcagcaa tatcaacgta 1020 atagttctgg aactaaaggg atctgaaaca acattcatgt gtgaatatgc tgatgagaca 1080 gcaaccattg tagaatttct gaacagatgg attacctttg cccaaagcat catctcaaca 1140 ctgacttga 1149 <210> 111 <211> 1134 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉F16-微型雙功能抗體-IL2 <400> 111 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc cggtatggta tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagcgcat 300 aatgcttttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcgagtgc tagcggcgga 360 tcgtctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc 420 acatgccaag gagacagcct cagaagctat tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga 480 caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga 540 ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa 600 gatgaggctg actattactg taactcctct gtttatacta tgccgcccgt ggtattcggc 660 ggagggacca agctgaccgt cctaggctct tcctcatcgg gtagtagctc ttccggctca 720 tcgtcctccg gagcacctac ttcaagttct acaaagaaaa cacagctaca actggagcat 780 -89- 149654·序列表.doc 201119672 ttactgctgg atttacagat gattttgaat ggaattaata attacaagaa tcccaaactc 840 accaggatgc tcacatttaa gttttacatg cccaagaagg ccacagaact gaaacatctt 900 cagtgtctag aagaagaact caaacctctg gaggaagtgc taaatttagc tcaaagcaaa 960 aactttcact taagacccag ggacttaatc agcaatatca acgtaatagt tctggaacta 1020 aagggatctg aaacaacatt catgtgtgaa tatgctgatg agacagcaac cattgtagaa 1080 tttctgaaca gatggattac ctttgcccaa agcatcatct caacactgac ttga 1134 <210> 112 <211> 1926 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> scFv-IL2-scFv (F16, DNA) <400> 112 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc cggtatggta tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagcgcat 300 aatgcttttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcgagagg tggaggcggt 360 tcaggcggag gtggctctgg cggtggcgga tcgtctgagc tgactcagga ccctgctgtg 420 tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc acatgccaag gagacagcct cagaagctat 480 tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa 540 aacaaccggc cctcagggat cccagaccga ttctctggct ccagctcagg aaacacagct 600 tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa gatgaggctg actattactg taactcctct 660 gtttatacta tgccgcccgt ggtattcggc ggagggacca agctgaccgt cctaggctct 720 tcctcatcgg gtagtagctc ttccggctca tcgtcctccg gagcacctac ttcaagttct 780 acaaagaaaa cacagctaca actggagcat ttactgctgg atttacagat gattttgaat 840 ggaattaata attacaagaa tcccaaactc accaggatgc tcacatttaa gttttacatg 900 cccaagaagg ccacagaact gaaacatctt cagtgtctag aagaagaact caaacctctg 960 gaggaagtgc taaatttagc tcaaagcaaa aactttcact taagacccag ggacttaatc 1020 agcaatatca acgtaatagt tctggaacta aagggatctg aaacaacatt catgtgtgaa 1080 tatgctgatg agacagcaac cattgtagaa tttctgaaca gatggattac ctttgcccaa 1140 agcatcatct caacactgac ttccggcgga ggagggagcg gcggaggtgg ctctggcggt 1200 ggcggatcgt ctgagctcac tcaggaccct gctgtgtctg tggccttggg acagacagtc 1260 -90· 149654-序列表.doc 201119672 aggatcacat gccaaggaga cagcctcaga agctattatg caagctggta ccagcagaag 1320 ccaggacagg cccctgtact tgtcatctat ggtaaaaaca accggccctc agggatccca 1380 gaccgattct ctggctccag ctcaggaaac acagcttcct tgaccatcac tggggctcag 1440 gcggaagatg aggctgacta ttactgtaac tcctctgttt atactatgcc gcccgtggta 1500 ttcggcggag ggaccaagct taccgtacta ggctcaggag gcggttcagg cggaggttct 1560 ggcggcggta gcggatcgga ggtgcagctg ttggagtctg ggggaggctt ggtacagcct 1620 ggggggtccc tgagactctc ctgtgcagcc tctggattca cctttagccg gtatggtatg 1680 agctgggtcc gccaggctcc agggaagggg ctggagtggg tctcagctat tagtggtagt 1740 ggtggtagca catactacgc agactccgtg aagggccggt tcaccatctc cagagacaat 1800 tccaagaaca cgctgtatct gcaaatgaac agcctgagag ccgaggacac ggccgtatat 1860 tactgtgcga aagcgcataa tgcttttgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtg 1920 tcgtga 1926

<210> 113 <211> 1812 <212〉 DNA <213> 人造序列 <220> <223〉Fab-IL2-Fab (F16，重鏈細胞因子融合構築體，DNA) <400> 113 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc cggtatggta tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagcgcat 300 aatgcttttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcgagtgc tagcaccaag 360 ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 420 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 480 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 540 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 600 gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 660 tcttcctcat cgggtagtag ctcttccggc tcatcgtcct ccggagcacc tacttcaagt 720 tctacaaaga aaacacagct acaactggag catttactgc tggatttaca gatgattttg 780 aatggaatta ataattacaa gaatcccaaa ctcaccagga tgctcacatt taagttttac 840 •91 · 149654·序列表.doc 201119672 atgcccaaga ctggaggaag atcagcaata gaatatgctg caaagcatca ggtggcggag ctgagactct cgccaggctc acatactacg acgctgtatc aaagcgcata agcaccaagg acagcggccc aactcaggcg ctctactccc atctgcaacg tcttqtqact aggccacaga tgctaaattt tcaacgtaat atgagacagc tctcaacact aggtgcaatt cctgtgcagc cagggaaggg cagactccgt tgcaaatgaa atgcttttga gcccatcggt tgggctgcct ccctgaccag tcagcagcgt tgaatcacaa ga actgaaacat agctcaaagc agttctggaa aaccattgta gacttccggc gttggagtct ctctggattc gctggagtgg gaagggccgg cagcctgaga ctactggggc cttccccctg ggtcaaggac cggcgtgcac ggtgaccgtg gcccagcaac cttcagtgtc aaaaactttc ctaaagggat gaatttctga ggaggaggga gggggaggct acctttagcc gtctcagcta ttcaccatct gccgaggaca cagggaaccc gcaccctcct tacttccccg accttcccgg ccctccagca accaaggtgg tagaagaaga acttaagacc ctgaaacaac acagatggat gcggcggagg tggtacagcc ggtatggtat ttagtggtag ccagagacaa cggccgtata tggtcaccgt ccaagagcac aaccggtgac ctgtcctaca gcttgggcac acaagaaagt actcaaacct cagggactta attcatgtgt tacctttgcc tggctctggc tggggggtcc gagctgggtc tggtggtagc ttccaagaac ttactgtgcg gtcgagtgct ctctgggggc ggtgtcgtgg gtcctcagga ccagacctac tgagcccaaa 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1812

<210> 114 <211> 645 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> F16,輕鏈，DNA <400〉 114 tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc acatgccaag gagacagcct cagaagctat tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa gatgaggctg actattactg taactcctct gtttatacta tgccgcccgt ggtattcggc ggagggacca agctgaccgt cctaggtcaa cccaaggctg cccccagcgt gaccctgttc ccccccagca gcgaggaact gcaggccaac aaggccaccc tggtctgcct gatcagcgac ttctacccag gcgccgtgac cgtggcctgg aaggccgaca gcagccccgt gaaggccggc gtggagacca ccacccccag caagcagagc aacaacaagt acgccgccag cagctacctg agcctgaccc ccgagcagtg gaagagccac aggtcctaca gctgccaggt gacccacgag 149654-序列表.doc •92· 60 120 180 240 300 360 420 480 540

600 201119672 ggcagcaccg tggagaaaac cgtggccccc accgagtgca gctga <210> 115 <211> 1401 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> IL2R-p_Fc (孔）融合蛋白，DNA <400> 115 atggacatga gggtccccgc tcagctcctg ggcctcctgc tgctctggtt cccaggtgcc aggtgtgcgg tgaatggcac ttcccagttc acatgcttct acaactcgag agccaacatc tcctgtgtct ggagccaaga tggggctctg caggacactt cctgccaagt ccatgcctgg ccggacagac ggcggtggaa ccaaacctgt gagctgctcc ccgtgagtca agcatcctgg gcctgcaacc tgatcctcgg agccccagat tctcagaaac tgaccacagt tgacatcgtc accctgaggg tgctgtgccg tgagggggtg cgatggaggg tgatggccat ccaggacttc aagccctttg agaaccttcg cctgatggcc cccatctccc tccaagttgt ccacgtggag acccacagat gcaacataag ctgggaaatc tcccaagcct cccactactt tgaaagacac ctggagttcg aggcccggac gctgtcccca ggccacacct gggaggaggc ccccctgctg actctcaagc agaagcagga atggatctgc ctggagacgc tcaccccaga cacccagtat gagtttcagg tgcgggtcaa gcctctgcaa ggcgagttca cgacctggag cccctggagc cagcccctgg ccttcagaac aaagcctgca gcccttggga aggacaccgg agctcaggac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtgcaccctg cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tctcgtgcgc agtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctcgtgag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaatg a <210> 116 149654-序列表.doc 645

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 •93· 1401 201119672 <211> 1479 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉IL2R卞Fc (結），DNA <400> 116 atgttgaagc catcattacc attcacatcc ctcttattcc tgcagctgcc cctgctggga 60 gtggggctga acacgacaat tctgacgccc aatgggaatg aagacaccac agctgatttc 120 ttcctgacca ctatgcccac tgactccctc agtgtttcca ctctgcccct cccagaggtt 180 cagtgttttg tgttcaatgt cgagtacatg aattgcactt ggaacagcag ctctgagccc 240 cagcctacca acctcactct gcattattgg tacaagaact cggataatga taaagtccag 300 aagtgcagcc actatctatt ctctgaagaa atcacttctg gctgtcagtt gcaaaaaaag 360 gagatccacc tctaccaaac atttgttgtt cagctccagg acccacggga acccaggaga 420 caggccacac agatgctaaa actgcagaat ctggtgatcc cctgggctcc agagaaccta 480 acacttcaca aactgagtga atcccagcta gaactgaact ggaacaacag attcttgaac 540 cactgtttgg agcacttggt gcagtaccgg actgactggg accacagctg gactgaacaa 600 tcagtggatt atagacataa gttctccttg cctagtgtgg atgggcagaa acgctacacg 660 tttcgtgttc ggagccgctt taacccactc tgtggaagtg ctcagcattg gagtgaatgg 720 agccacccaa tccactgggg gagcaatact tcaaaagaga atcctttcct gtttgcattg 780 gaagccggag ctcaggacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 840 gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 900 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 960 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 1020 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 1080 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 1140 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatgccgg 1200 gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg tggtgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 1260 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 1320 cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 1380 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 1440 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 1479 <210> 117 <211> 2976 <212> DNA <213> 人造序列 • 94- 149654-序列表,doc 60 60

201119672 <220>

<223> Fab-IL12-Fab，L19 抗體，鼠類 scIL12，DNA <400> 117 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct atttccggta gttcgggtac cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac tccggcggag gagggagcgg cggaggtggc tccggagggg gcggagccat gtgggagctg gaaaaggacg tgtacgtggt ggaggtggac tggacccccg acgcccctgg cgagacagtg aacctgacct gcgacacccc cgaagaggac gacatcacct ggaccagcga ccagcggcac ggcgtgatcg gcagcggcaa gaccctgacc atcaccgtga aagagtttct ggacgccggc cagtacacct gccacaaggg cggcgagaca ctgagccaca gccacctgct gctgcacaag aaagagaacg gcatctggtc caccgagatc ctgaagaact tcaagaacaa gaccttcctg aagtgcgagg cccccaacta cagcggccgg ttcacctgca gctggctggt gcagcggaac atggacctga agttcaacat caagagcagc agcagccccc ctgacagcag ggccgtgacc tgcggcatgg ccagcctgag cgccgagaag gtgaccctgg accagaggga ctacgagaag tacagcgtga gctgccagga agatgtcacc tgccccaccg ccgaggaaac cctgcccatc gagctggccc tggaagcccg gcagcagaac aagtacgaga actactctac cagcttcttc atccgggaca tcatcaagcc cgaccccccc aagaacctgc agatgaagcc cctgaagaac agccaggtgg aggtgtcctg ggagtaccct gacagctggt ccacccccag aagctacttc agcctgaagt tcttcgtgag aatccagcgg aagaaagaaa agatgaaaga gacagaggaa ggctgcaacc agaagggcgc cttcttcgtc gagaaaacca gcaccgaggt gcagtgcaag ggcggcaacg tgtgcgtgca ggcccaggac cggtactaca acagcagctg cagcaagtgg gcctgcgtgc cctgcagagt gcggtctggc ggcgacggct ctggcggcgg aggaagcggc ggagggggca gcagagtgat ccccgtgagc ggccctgccc ggtgcctgag ccagagccgg 149654·序列表.doc -95- 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 201119672 aacctgctga aaaccaccga cgacatggtg aaaaccgcca gagagaagct gaagcactac 1800 agctgcacag ccgaggacat cgaccacgag gacatcaccc gggaccagac cagcaccctg 1860 aaaacctgcc tgcccctgga actgcacaaa aacgagagct gcctggccac ccgggagaca 1920 agcagcacca cccggggcag ctgcctgcct ccccagaaaa cctccctgat gatgaccctg 1980 tgcctgggca gcatctacga ggacctgaag atgtaccaga ccgagttcca ggccatcaac 2040 gccgccctgc agaaccacaa tcaccagcag atcatcctgg acaagggcat gctggtcgcc 2100 atcgacgagc tgatgcagag cctgaaccac aacggcgaaa ccctgcggca gaaacccccc 2160 gtgggcgagg ccgaccccta ccgggtgaag atgaagctgt gcatcctgct gcacgccttc 2220 agcacccggg tggtgaccat caaccgggtg atgggctacc tgtcctctgc cgggggaggg 2280 ggatccggcg gaggtggctc tggcggtggc ggagaggtgc agctgttgga gtctggggga 2340 ggcttggtac agcctggggg gtccctgaga ctctcctgtg cagcctctgg attcaccttt 2400 agcagttttt cgatgagctg ggtccgccag gctccaggga aggggctgga gtgggtctca 2460 tctatttccg gtagttcggg taccacatac tacgcagact ccgtgaaggg ccggttcacc 2520 atctccagag acaattccaa gaacacgctg tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag 2580 gacacggccg tatattactg tgcgaaaccg tttccgtatt ttgactactg gggccaggga 2640 accctggtca ccgtctcgag tgctagcacc aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc 2700 tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc 2760 cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc 2820 ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc 2880 agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag 2940 gtggataaga aagttgagcc caaatcttgt gactga 2976 <210> 118 <211> 2964 <212> DMA <213> 人造序列 <220>

<223> Fab-IL12-Fab，L19抗體，人類 scIL12，DNA <400> 118 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct attagaggta gttcgggtac cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt 300 ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag 360 -96· 149654-序列表.doc 420 420

201119672 ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac tccggcggag gagggagcgg cggaggtggc tccggagggg gcggaatctg ggagctgaag aaagacgtgt acgtggtgga gctggactgg tatcccgacg cccctggcga gatggtggtg ctgacctgcg acacccccga agaggacggc atcacctgga ccctggacca gagcagcgag gtgctgggca gcggcaagac cctgaccatc caggtgaaag agttcggcga cgccggccag tacacctgcc acaagggcgg cgaagtgctg tcccacagcc tgctgctgct gcacaagaaa gaggatggca tctggtccac cgacatcctg aaggaccaga aagagcccaa gaacaagacc ttcctgcggt gcgaggccaa gaactacagc ggccggttca cctgttggtg gctgaccacc atcagcaccg acctgacctt cagcgtgaag agcagccggg gcagcagcga ccctcagggc gtgacctgcg gagccgccac cctgagcgcc gagagagtgc ggggcgacaa caaagagtac gagtacagcg tcgagtgcca ggaagatagc gcctgccctg ccgccgagga aagcctgccc atcgaggtga tggtggacgc cgtgcacaag ctgaagtacg agaactacac cagcagcttt ttcatccggg acatcatcaa gcccgacccc cccaagaacc tgcagctgaa gcccctgaag aacagccggc aggtggaggt gtcctgggag taccctgaca cctggtccac cccccacagc tacttcagcc tgacattctg tgtgcaggtg cagggcaaga gcaagcggga gaagaaagac cgggtgttca ccgacaagac cagcgccacc gtgatctgcc ggaagaacgc cagcatcagc gtgcgggccc aggaccggta ctacagcagc tcctggtccg agtgggccag cgtgccttgc agcggcggag ggggctctgg cggcggagga tctgggggag ggggcagccg gaacctgccc gtggccaccc ccgaccccgg catgttcccc tgcctgcacc acagccagaa cctgctgcgg gccgtgagca acatgctgca gaaggcccgg cagaccctgg aattctaccc ctgcaccagc gaggaaatcg accacgagga catcaccaag gataagacca gcaccgtgga ggcctgcctg cccctggaac tgaccaagaa cgagagctgc ctgaacagcc gggagacaag cttcatcacc aacggcagct gcctggccag cagaaagacc agcttcatga tggccctgtg cctgagcagc atctacgagg acctgaagat gtaccaggtg gagttcaaga ccatgaacgc caagctgctg atggacccca agcggcagat cttcctggat cagaacatgc tggccgtgat cgacgagctg atgcaggccc tgaacttcaa cagcgagaca gtgccccaga agtccagcct ggaagagccc gacttctaca agaccaagat caagctgtgc atcctgctgc acgccttcag aatccgggcc 149654·序列表.doc -97· 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 201119672 gtgaccatcg accgggtgat gagctacctg aacgccagcg gagggggggg atccggcgga 2280 ggtggctctg gcggtggcgg agaggtgcag ctgttggagt ctgggggagg cttggtacag 2340 cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca gcctctggat tcacctttag cagtttttcg 2400 atgagctggg tccgccaggc tccagggaag gggctggagt gggtctcatc tattagaggt 2460 agttcgggta ccacatacta cgcagactcc gtgaagggcc ggttcaccat ctccagagac 2520 aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggccgta 2580 tattactgtg cgaaaccgtt tccgtatttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 2640 gtctcgagtg ctagcaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc 2700 acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 2760 acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 2820 cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 2880 acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac aagcccagca acaccaaggt ggataagaaa 2940 gttgagccca aatcttgtga ctga 2964 <210> 119 <211> 1794 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> Fab_GMCSF-Fab，L19 抗體，人類 GM-CSF，DNA <400〉 119 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct attagaggta gttcgggtac cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt 300 ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag 360 ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 420 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 480 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 540 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 600 gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 660 tccggcggag gagggagcgg cggaggtggc tccggaggtg gcggagcacc cgcccgctcg 720 cccagcccca gcacgcagcc ctgggagcat gtgaatgcca tccaggaggc ccggcgtctc 780 ctgaacctga gtagagacac tgctgctgag atgaatgaaa cagtagaagt catctcagaa 840 • 98· 149654-序列表.doc 900 900

201119672 atgtttgacc tccaggagcc gacctgccta cagacccgcc tggagctgta caagcagggc ctgcggggca gcctcaccaa gctcaagggc cccttgacca tgatggccag ccactacaag cagcactgcc ctccaacccc ggaaacttcc tgtgcaaccc agattatcac ctttgaaagt ttcaaagaga acctgaagga ctttctgctt gtcatcccct ttgactgctg ggagccagtc caggagtccg gcggaggagg atccggcgga ggtggctctg gcggtggcgg agaggtgcag ctgttggagt ctgggggagg cttggtacag cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca gcctctggat tcacctttag cagtttttcg atgagctggg tccgccaggc tccagggaag gggctggagt gggtctcatc tattagaggt agttcgggta ccacatacta cgcagactcc gtgaagggcc ggttcaccat ctccagagac aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggccgta tattactgtg cgaaaccgtt tccgtatttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc gtctcgagtg ctagcaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac aagcccagca acaccaaggt ggataagaaa gttgagccca aatcttgtga ctga <210> 120 <211> 1911 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223〉Fab-IFNa2-Fab，L19抗體，DNA <400> 120 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agtttttcga tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatct attagaggta gttcgggtac cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccgttt ccgtattttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 149654·序列表.doc -99- 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1794 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 201119672 gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gataagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 660 tccggcggag gagggagcgg cggaggtggc tccggagggg gcggatgcga cctgccccag 720 acccacagcc tgggcaacag acgggccctg atcctgctgg cccagatgcg gcggatcagc 780 cccttcagct gcctgaagga ccggcacgac ttcggcttcc cccaggaaga gttcgacggc 840 aaccagttcc agaaggccca ggccatcagc gtgctgcacg agatgatcca gcagaccttc 900 aacctgttca gcaccaagga cagcagcgcc gcctgggacg agagcctgct ggaaaagttc 960 tacaccgagc tgtaccagca gctgaacgac ctggaagcct gcgtgatcca ggaagtgggc 1020 gtcgaggaaa cccccctgat gaacgtggac agcatcctgg ccgtgaagaa gtacttccag 1080 cggatcaccc tgtacctgac cgagaagaag tatagcccct gcgcctggga ggtggtgcgg 1140 gccgagatca tgcggagctt cagcctgagc accaacctgc aggaacggct gcggcggaaa 1200 gagagcggcg gagggggatc cggcggaggt ggctctggcg gtggcggaga ggtgcagctg 1260 ttggagtctg ggggaggctt ggtacagcct ggggggtccc tgagactctc ctgtgcagcc 1320 tctggattca cctttagcag tttttcgatg agctgggtcc gccaggctcc agggaagggg 1380 ctggagtggg tctcatctat tagaggtagt tcgggtacca catactacgc agactccgtg 1440 aagggccggt tcaccatctc cagagacaat tccaagaaca cgctgtatct gcaaatgaac 1500 agcctgagag ccgaggacac ggccgtatat tactgtgcga aaccgtttcc gtattttgac 1560 tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc tcgagtgcta gcaccaaggg cccatcggtc 1620 ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 1680 gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 1740 ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 1800 gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 1860 cccagcaaca ccaaggtgga taagaaagtt gagcccaaat cttgtgactg a 1911 0 12 3 1 1 1 1 2 2 2 2 V < V < 121 108

PRT 人造序列 <220> <223> 19G1; VL <400> 121 Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30 •100· 149654·序列表.doc 201119672

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 122 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 19G1; VL <400> 122 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324

<210> 123 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 19G1; VH <400> 123

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 -101- 149654-序列表,doc 201119672

Ser Ala lie lie Ser Ser Gly Gly Leu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 124 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 19G1; VH <400〉 124

gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcga tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagcg attattagta gtggtggtct cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgtc c 351

<210> 125 * <211> 108 <212> -PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 20G8; VL <400> 125

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 •102- 149654-序列表.doc 201119672 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 126 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列

<223> 20G8; VL <400> 126 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 127 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 20G8; VH <400> 127

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala He He Gly Ser Gly Ser Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val -103 - 149654·序列表.doc 201119672 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 128 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 20G8; VH <400> 128 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcaa tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attattggga gtggtagtcg tacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgtc c <210> 129 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B9; VL <400> 129

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 149654-序列表.doc •104- 60 120 180 240 300 351

201119672 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 130 <211〉 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 4B9; VL <400> 130

gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 131 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 4B9; VH <400> 131

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie lie Gly Ser Gly Ala Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 -105- 149654-序列表.doc 201119672

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 132 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 4B9; VH <400> 132 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcta tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attattggta gtggtgctag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgtc c <210> 133 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

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Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 149654-序列表.doc -106· 60 120 180 240 300 351

201119672

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105

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Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Trp Gly Gly Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 149654-序列表.doc 107- 201119672 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 136 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly 工le Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 • 108 - 149654·序列表.doc 201119672

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 138 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 5FI; VL <400> 138

gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 139 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

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Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala He lie Ser Ser Gly Ala Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 -109· 149654-序列表.doc 201119672

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 . 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 140 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 .110-

149654·序列表.doc 201119672

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 142 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 14B3; VL <400> 142 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324

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<223> 14B3; VH <400> 143

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Leu Ala Ser Gly Ala lie Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 111 - 149654-序列表.doc 201119672 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 144 <211〉 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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<223> 16F1; VL <400> 145

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 112 149654·序列表.doc 201119672

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 146 <211〉 324 <212〉 DNA <213> 人造序列 <220> <223> 16F1; VL <400> 146 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324

<210> 147 <211〉 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 16F1; VH <400> 147

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie lie Gly Ser Gly Gly lie Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 113· 149654-序列表.doc 201119672

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 148 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 16F1; VH <400> 148 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcta tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attattggta gtggtggtat cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgtc c <210> 149 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 16F8; VL <400> 149

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95 114· 60 120 180 240 300 351 149654·序列表.doc 201119672

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<223> 16F8; VH <400> 151

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Leu Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 115- 149654·序列表.doc 201119672 100 105 no

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 152 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45

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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly He Met Leu Pro 85 90 95 116- 149654·序列表.doc 201119672

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 154 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 155 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie He Gly Ser Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 HO •117 149654-序列表,doc 201119672

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Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg Ala Thr Gly Thr Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

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<223> 02D7; VH <400> 159

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser •119· 149654-序列表.doc 115 201119672 <210> 160 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 02D7; VH <400> 160 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgtc c 351

0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < < 161 108

PRT 人造序列 <220>

<223> 28H1; VL <400> 161

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Arg Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 •120· 149654-序列表.doc 201119672 <210> 162 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 28H1; VL <400> 162 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc cgcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcatt ggggcctcca ccagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324

<210> 163 <211> 116 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 28H1; VH <400> 163

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser His 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Trp Ala Ser Gly Glu Gin Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser 115 -121 - 149654-序列表.doc 201119672 <210> 164 <211> 348 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 28H1; VH <400> 164 gaggtgcaat tgttggagtc tggggg tcctgtgcag cctccggatt cacctt ccagggaagg ggctggagtg ggtctc gactccgtga agggccggtt caccat cagatgaaca gcctgagagc cgagga ggtaattttg actactgggg ccaagg aggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tagc agtcatgcta tgagctgggt ccgccaggct 120 agct atttgggcta gtggggagca atactacgca 180 ctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 240 cacg gccgtatatt actgtgcgaa agggtggctg 300 aacc ctggtcaccg tctcgagt 348 0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < < 165 108 PRT 人造序列 <220> <223> <400> Glu I 1 22A3; VL 165 e Val Leu Thr Gin Ser 5

Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20

Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin 35

Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 40 45 lie Asn Val Gly Ser Arg Arg 50 55

Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 65 70

Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr 85

Tyr Cys Gin Gin Gly lie Met Leu Pro 90 95

Lys Val Glu lie Lys 105

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr 100 <210> 166 <211> 324 -122- 149654-序列表.doc 201119672 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

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<210> 167 <211> 117 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 22A3; VH <400> 167

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie lie Gly Ser Gly Ser lie Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 168 -123· 149654-序列表.doc 201119672 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 22A3; VH <400> 168 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attattggta gtggtagtat cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 169 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 29B11; VL <400> 169

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Thr Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys GJLn Gin Gly lie Met Leu Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 170 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 149654-序列表.doc -124- 201119672 <220>

<223> 29B11; VL <400> 170 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttacc agtagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcaat gtgggctccc gtagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtatta tgcttccccc gacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 171 <211> 117

<212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 29B11; VH <400> 171

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie lie Gly Ser Gly Gly lie Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 172 <211> 351

<212> DNA •125· 149654-序列表.doc 201119672 <213> 人造序列 <220>

<223> 29B11; VH <400> 172 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcta tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attattggta gtggtggtat cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 tttggtggtt ttaactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 173 <211> 108 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 23C10; VL <400> 173

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Arg Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45

lie lie Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 174 <211> 324 <212> DNA <213> 人造序列 <220> 149654-序列表.doc -126- 201119672

<223> 23C10; VL <400> 174 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc cgcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcatt ggggcctcca ccagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc 300 caggggacca aagtggaaat caaa 324 <210> 175 <211> 117 <212> PRT <213〉人造序列

<220>

<223> 23C10; VH <400> 175

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Ser 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Thr Asn Gly Asn Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 176 <211> 351 <212> DNA <213> 人造序列 -127· 149654-序列表.doc 201119672 <220>

<223> 23C10; VH <400> 176 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttctgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtacta atggtaatta tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg 300 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag t 351 <210> 177 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10_C3B6; VL <400> 177

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 178 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 C3B6； VL 128-

149654-序列表.doc 201119672 <400〉 178 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 179 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10一C3B6; VH <400> 179

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Ala lie lie Pro lie Leu Gly lie Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 180 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 C3B6; VH 129· 149654-序列表.doe 201119672 <400> 180 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggagct atcatcccga tccttggtat cgcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 181 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10_6A12; VL <400> 181

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105

<210> 182 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 6A12; VL 130· 149654-序列表.doc 201119672 <400> 182 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 183 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10_6A12; VH <400> 183

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala He Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Val lie lie Pro lie Leu Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Axg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 184 <211〉 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 6A12; VH 131 - 149654·序列表.doc 201119672 <400> 184 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctatgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggagtg atcatcccta tccttggtac cgcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210〉 185 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列

<223> 2B10一C3A6; VL <400> 185

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ser Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 186 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 C3A6; VL -132·

149654·序列表.doc 201119672 <400> 186 gacatccaga tgacccagtc tccttcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat tcgtccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210〉 187 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10_C3A6; VH <400> 187

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 188 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 C3A6; VH -133- 149654-序列表.doc 201119672 <400> 188 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 189 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列

<223> 2B10-D1A2一wt; VL <400> 189

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ala Tyr Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu He Lys 100 105

<210> 190 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 D1A2 wt; VL 134·

149654-序列表.doc 201119672 <400> 190 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca ggggattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat gcttacagct tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 191 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220〉

<223> 2B10_DlA2_wt; VH <400> 191

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr 工le Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 192 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 D1A2 wt; VH 135- 149654-序列表.doc 201119672 <400> 192 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 193 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列

<223> 2B10__D1A2_VD; VL <400> 193

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ala Tyr Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105

<210> 194 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 D1A2 VD; VL •136·

149654-序列表.doc 201119672 <400> 194 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca ggggattcgt aatgatttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat gcttacagct tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 195 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10一D1A2_VD; VH <400> 195

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 GXy Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 196 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 D1A2 VD; VH -137- 149654-序列表.doc 201119672 <400> 196 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 197 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列

<223> 2B10—07D8; VL <400> 197

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Ser lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Val Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu 工le Lys 100 105 <210> 198 <211> 321 <212> DNA <213〉人造序列 <220>

<223> 2B10 07D8; VL -138-

149654-序列表.doc 201119672 <400> 198 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gagcattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat gtgtccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 199 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10一07D8; VH <400> 199

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 200 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 07D8; VH •139· 149654-序列表.doc 201119672 <400> 200 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 0 12 3 1 X 1 1 2 2 2 2 < < < < 201 107

PRT 人造序列 <220>

<223> 2B10一01F7; VL <400> 201

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105

<210> 202 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 01F7; VL -140· 149654·序列表.doc 201119672 <400> 202 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat gcgtccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcctgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 203 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10_01F7; VH <400> 203

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg GJLn Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 204 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 01F7; VH -141 - 149654-序列表.doc 201119672 <400> 204 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 205 <211> 107 <212> PRT <213> 人造序列

<223> 2B10一6H10; VL <400> 205

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Gin Ala Ala Thr Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210〉 206 <211> 321 <212> DNA <213> 人造序列 <220〉

<223> 2B10_6H10; VL -142-

149654-序列表.doc 201119672 <400> 206 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc 60 atcacctgcc gggcaagtca gggcattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatccaggct gctaccagtt tgcagagtgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct 240 gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag 300 ggcaccaaag tcgagatcaa g 321 <210> 207 <211> 121 <212> PRT <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10—6H10; VH <400> 207

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 208 <211> 363 <212> DNA <213> 人造序列 <220>

<223> 2B10 6H10; VH -143- 149654-序列表.doc 201119672 <400> 208 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tea 363 <210> 209 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <223> 3F2Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 209

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 • 144·

149654·序列表.doc 201119672

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser'Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Gly Gly 210 215 220

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Thr Ser 225 230 235 240

Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His Leu Leu Leu Asp 245 250 255

Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu 260 265 270

Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu 275 280 285

Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu 290 295 300

Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp 305 310 315 320

Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr He Val Glu 340 345 350

Phe Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie lie Ser Thr Leu 355 360 365

Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 370 375 380

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 385 390 395 400 145- 149654-序列表.doc 201119672

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 405 410 415

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu .Trp Val 420 425 430

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 435 440 445

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 450 455 460

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 465 470 415 480

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 485 490 495

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 500 505 510

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 515 520 525

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 530 535 540

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 545 550 555 560

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 565 570 575

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 595 600 605 <210> 210 <211〉 1818 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 3F2Fab-lL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 210 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 146-

H9654·序列表.doc 201119672

tcctgtgcag ccagggaagg gcagactccg ctgcagatga tttggtggtt aagggcccat gccctgggct ggcgccctga tccctcagca aacgtgaatc gactccggcg agttctacaa ttgaatggaa tacatgccca cctctggagg ttaatcagca tgtgaatatg gcccaaagca ggcggtggcg tccctgagac gtccgccagg agcacatact aacacgctgt gcgaaagggt agtgctagca gggggcacag tcgtggaact tcaggactct acctacatct cccaaatctt cctccggatt ggctggagtg tgaagggccg acagcctgag ttaactactg cggtcttccc gcctggtcaa ccagcggcgt gcgtggtgac acaagcccag gaggagggag agaaaacaca ttaataatta agaaggccac aagtgctaaa atatcaacgt ctgatgagac tcatctcaac gagaggtgca tctcctgtgc ctccagggaa acgcagactc atctgcagat ggtttggtgg ccaagggccc cggccctggg caggcgccct actccctcag gcaacgtgaa gtgactga cacctttagc ggtctcagct gttcaccatc agccgaggac gggccaagga cctggcaccc ggactacttc gcacaccttc cgtgccctcc caacaccaag cggcggaggt gctacaactg caagaatccc agaactgaaa tttagctcaa aatagttctg agcaaccatt actgacttcc attgttggag agcctccgga ggggctggag cgtgaagggc gaacagcctg ttttaactac atcggtcttc ctgcctggtc gaccagcggc cagcgtggtg tcacaagccc agttatgcca attagtggta tccagagaca acggccgtat accctggtca tcctccaaga cccgaaccgg ccggctgtcc agcagcttgg gtggataaga ggctccggag gagcatttac aaactcacca catcttcagt agcaaaaact gaactaaagg gtagaatttc ggcggaggag tctgggggag ttcaccttta tgggtctcag cggttcacca agagccgagg tggggccaag cccctggcac aaggactact gtgcacacct accgtgccct agcaacacca tgagctgggt gtggtggtag attccaagaa attactgtgc ccgtctcgag gcacctctgg tgacggtgtc tacagtcctc gcacccagac aagttgagcc gtggcggagc tgctggattt ggatgctcac gtctagaaga ttcacttaag gatctgaaac tgaacagatg gatccggcgg gcttggtaca gcagttatgc ctattagtgg tctccagaga acacggccgt gaaccctggt cctcctccaa tccccgaacc tcccggctgt ccagcagctt aggtggataa ccgccaggct cacatactac cacgctgtat gaaagggtgg tgctagcacc gggcacagcg gtggaactca aggactctac ctacatctgc caaatcttgt acctacttca acagatgatt atttaagttt agaactcaaa acccagggac aacattcatg gattaccttt aggtggctct gcctgggggg catgagctgg tagtggtggt caattccaag atattactgt caccgtctcg gagcacctct ggtgacggtg cctacagtcc gggcacccag gaaagttgag 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1818 <210> 211 149654·序列表.doc -147- 201119672 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 4G8Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築逋） <400> 211

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Ser Gly Gly 210 215 220 -148-

149654-序列表.doc 201119672

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Thr Ser 225 230 235 240

Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His Leu Leu Leu Asp 245 250 255

Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu 260 265 270

Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu 275 280 285

Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu 290 295 300

Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp 305 310 315 320

Leu lie Ser Asn 工le Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr lie Val Glu 340 345 350

Phe Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie lie Ser Thr Leu 355 360 365

Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 370 375 380

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 385 390 395 400

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 405 410 415

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 420 425 430

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 435 440 445

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 450 455 460

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 149- 149654-序列表.doc 201119672 465 470 475 480

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 485 490 495

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 500 505 510

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 515 520 525

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 530 535 540

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 545 550 555 560

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 565 570 575

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 595 600 605 <210> 212 <211> 1818 . <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> 4G8Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 212 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcagatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagggtgg ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag tgctagcacc aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 149654-序列表.doc -150- 60 120 180 240 300 360 420 480 540

600 660 660

201119672 aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggataaga aagttgagcc caaatcttgt gactccggcg gaggagggag cggcggaggt ggctccggag gtggcggagc acctacttca agttctacaa agaaaacaca gctacaactg gagcatttac tgctggattt acagatgatt ttgaatggaa ttaataatta caagaatccc aaactcacca ggatgctcac atttaagttt tacatgccca agaaggccac agaactgaaa catcttcagt gtctagaaga agaactcaaa cctctggagg aagtgctaaa tttagctcaa agcaaaaact ttcacttaag acccagggac ttaatcagca atatcaacgt aatagttctg gaactaaagg gatctgaaac aacattcatg tgtgaatatg ctgatgagac agcaaccatt gtagaatttc tgaacagatg gattaccttt gcccaaagca tcatctcaac actgacttcc ggcggaggag gatccggcgg aggtggctct ggcggtggcg gagaggtgca attgttggag tctgggggag gcttggtaca gcctgggggg tccctgagac tctcctgtgc agcctccgga ttcaccttta gcagttatgc catgagctgg gtccgccagg ctccagggaa ggggctggag tgggtctcag ctattagtgg tagtggtggt agcacatact acgcagactc cgtgaagggc cggttcacca tctccagaga caattccaag aacacgctgt atctgcagat gaacagcctg agagccgagg acacggccgt atattactgt gcgaaagggt ggctgggtaa ttttgactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcg agtgctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag cccaaatctt gtgactga <210> 213 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 3D9Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 213 Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

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Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

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Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr TVla Ala Leu Gly Cys 130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

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149654-序列表.doc 201119672

Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu 290 295 300

Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp 305 310 315 320

Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 405 410 415

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Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 515 520 525

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 530 535 540 -153- 149654-序列表.doc 201119672

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Ser Ser Val Val Thr Val 570

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1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1818 ggcggtggcg gagaggtgca attgttggag tctgggggag gcttggtaca gcctgggggg tccctgagac tctcctgtgc agcctccgga ttcaccttta gcagttatgc tatgagctgg gtccgccaga ctccagggaa ggggctggag tgggtctcag ctattggtgt tagtactggt agcacatact acgcagactc cgtgaagggc cggttcacca tctccagaga caattccaag aacacgctgt atctgcagat gaacagcctg agagccgagg acacggccgt atattactgt gcgaaaggtt ggctgggtcc ttttgactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcg agtgctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag cccaaatctt gtgactga <210> 215 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 2F11 Fab-IL2_Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 215

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

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Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Trp Arg Trp Met Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110 -155- 149654·序列表.doc 201119672

Val Thr Val 115

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Gly Ala Leu

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Ser Gly Leu

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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Thr Ser 230 235 240

Ser Ser Thr

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Val Leu Asn 305

Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp 310 315 320

Leu lie Ser

Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

Thr Thr Phe

Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr lie Val Glu 340 345 350

Phe Leu Asn 355

Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie lie Ser Thr Leu 360 365 149654·序列表.doc •156 201119672

Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 370 375 380

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 385 390 395 400

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 405 410 415

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Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 435 440 445

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 450 455 460

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 465 470 475 480

Ala Lys Trp Arg Trp Met Met Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 485 490 495

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 500 505 510

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 515 520 525

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 530 535 540

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser 545 550 555 560

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 565 570 575

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 595 600 605 <210〉 216 -157- 149654·序列表.doc 201119672 <211> 1818 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2F11 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 216 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacctttagc agttatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaggac accgccgtat attactgtgc gaaatggaga 300 tggatgatgt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag tgctagcacc 360 aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480 ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggataaga aagttgagcc caaatcttgt 660 gactccggcg gaggagggag cggcggaggt ggctccggag gtggcggagc acctacttca 720 agttctacaa agaaaacaca gctacaactg gagcatttac tgctggattt acagatgatt 780 ttgaatggaa ttaataatta caagaatccc aaactcacca ggatgctcac atttaagttt 840 tacatgccca agaaggccac agaactgaaa catcttcagt gtctagaaga agaactcaaa 900 cctctggagg aagtgctaaa tttagctcaa agcaaaaact ttcacttaag acccagggac 960 ttaatcagca atatcaacgt aatagttctg gaactaaagg gatctgaaac aacattcatg 1020 tgtgaatatg ctgatgagac agcaaccatt gtagaatttc tgaacagatg gattaccttt 1080 gcccaaagca tcatctcaac actgacttcc ggcggaggag gatccggcgg aggtggctct 1140 ggcggtggcg gagaggtgca attgttggag tctgggggag gcttggtaca gcctgggggg 1200 tccctgagac tctcctgtgc agcctccgga ttcaccttta gcagttatgc catgagctgg 1260 gtccgccagg ctccagggaa ggggctggag tgggtctcag ctattagtgg tagtggtggt 1320 agcacatact acgcagactc cgtgaagggc cggttcacca tctccagaga caattccaag 1380 aacacgctgt atctgcagat gaacagcctg agagccgagg acaccgccgt atattactgt 1440 gcgaaatgga gatggatgat gtttgactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcg 1500 agtgctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 1560 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 1620 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 1680

•158· 149654-序列表.doc 201119672 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 1740 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag 1800 cccaaatctt gtgactga 1818 <210> 217 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 4B3Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 217

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

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Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

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Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser • 159- 149654-序列表.d〇c 201119672 180 185 190

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Pro Thr Ser 225 230 235 240

Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His Leu Leu Leu Asp 245 250 255

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Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu 290 295 300

Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp 305 310 315 320

Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr lie Val Glu 340 345 350

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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 405 410 415

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Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 595 600 605 <210> 218 <211> 1818 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉4B3Fab-IL2_Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 218 gaggtgcaat tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag ccagggaagg gcagactccg ctgcagatga cctccggatt ggctggagtg tgaagggccg acagcctgag cacctttagc ggtctcagct gttcaccatc agccgaggac agttatgcca attagtggta tccagagaca acggccgtat tgagctgggt gtggtggtag attccaagaa attactgtgc ccgccaggct cacatactac cacgctgtat gaaagggtgg 60 120 180 240 300 -161 - 149654-序列表.doc 201119672 ctgggtaatt ttgactactg gggccaagga accctggtca ccgtctcgag tgctagcacc 360 aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480 ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggataaga aagttgagcc caaatcttgt 660 gactccggcg gaggagggag cggcggaggt ggctccggag gtggcggagc acctacttca 720 agttctacaa agaaaacaca gctacaactg gagcatttac tgctggattt acagatgatt 780 ttgaatggaa ttaataatta caagaatccc aaactcacca ggatgctcac atttaagttt 840 tacatgccca agaaggccac agaactgaaa catcttcagt gtctagaaga agaactcaaa 900 cctctggagg aagtgctaaa tttagctcaa agcaaaaact ttcacttaag acccagggac 960 ttaatcagca atatcaacgt aatagttctg gaactaaagg gatctgaaac aacattcatg 1020 tgtgaatatg ctgatgagac agcaaccatt gtagaatttc tgaacagatg gattaccttt 1080 gcccaaagca tcatctcaac actgacttcc ggcggaggag gatccggcgg aggtggctct 1140 ggcggtggcg gagaggtgca attgttggag tctgggggag gcttggtaca gcctgggggg 1200 tccctgagac tctcctgtgc agcctccgga ttcaccttta gcagttatgc catgagctgg 1260 gtccgccagg ctccagggaa ggggctggag tgggtctcag ctattagtgg tagtggtggt 1320 agcacatact acgcagactc cgtgaagggc cggttcacca tctccagaga caattccaag 1380 aacacgctgt atctgcagat gaacagcctg agagccgagg acacggccgt atattactgt 1440 gcgaaagggt ggctgggtaa ttttgactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcg 1500 agtgctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 1560 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 1620 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 1680 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 1740 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag 1800 cccaaatctt gtgactga 1818 <210> 219 <211> 993 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 4G8Fab-IL12-Fab (鼠類IL-12 ;重鏈細胞因子融合構築體） <400> 219 •162· 149654-序列表.doc 201119672

Glu Val Gin Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg, Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Gly Trp Leu Gly Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 HO

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Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Met Trp Glu 225 230 235 240

Leu Glu Lys Asp Val Tyr Val Val Glu Val Asp Trp Thr Pro Asp Ala 245 250 255 -163- 149654·序列表.doc 201119672

Pro Gly Glu Thr Val Asn Leu Thr Cys Asp Thr Pro Glu Glu Asp Asp 260 265 270 lie Thr Trp Thr Ser Asp Gin Arg His Gly Val lie Gly Ser Gly Lys 275 280 285

Thr Leu Thr lie Thr Val Lys Glu Phe Leu Asp Ala Gly Gin Tyr Thr 290 295 300

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Lys Lys Glu Asn Gly lie Trp Ser Thr Glu lie Leu Lys Asn Phe Lys 325 330 335

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Phe Ser Leu Lys Phe Phe Val Arg lie Gin Arg Lys Lys Glu Lys Met 485 490 495

Lys Glu Thr Glu Glu Gly Cys Asn Gin Lys Gly Ala Phe Phe Val Glu •164·

149654-序列表.doc 201119672 500 505 510

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Leu Ser Gin Ser Arg Asn Leu Leu Lys Thr Thr Asp Asp Met Val Lys 580 585 590

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Asp 149654·序列表.doc •166· 201119672 <210> 220 <211> 2982 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉4G8Fab-IL12-Fab (鼠類EL-12 ;重鏈細胞因子融合構築體）

<400> 220 gaggtgcaat agctgcgccg cctggaaagg gccgacagcg ctgcagatga ctgggcaact aagggcccat gccctgggct ggcgccctga tccctcagca aacgtgaatc gactccggcg ctggaaaagg gtgaacctga cacggcgtga ggccagtaca aagaaagaga ctgaagtgcg aacatggacc acctgcggca aagtacagcg atcgagctgg ttcatccggg aacagccagg ttcagcctga gaaggctgca tgctggaaag ccagcggctt gcctggaatg tgaagggccg acagcctgag tcgactactg cggtcttccc gcctggtcaa ccagcggcgt gcgtggtgac acaagcccag gaggagggag acgtgtacgt cctgcgacac tcggcagcgg cctgccacaa acggcatctg aggcccccaa tgaagttcaa tggccagcct tgagctgcca ccctggaagc acatcatcaa tggaggtgtc agttcttcgt accagaaggg cggcggagga caccttcagc ggtgtccgcc gttcaccatc agccgaggac gggccagggc cctggcaccc ggactacttc gcacaccttc cgtgccctcc caacaccaag cggcggaggt ggtggaggtg ccccgaagag caagaccctg gggcggcgag gtccaccgag ctacagcggc catcaagagc gagcgccgag ggaagatgtc ccggcagcag gcccgacccc ctgggagtac gagaatccag cgccttcttc ctggtgcagc agctacgcca atcagcggca agccgggaca accgccgtgt actctggtca tcctccaaga cccgaaccgg ccggctgtcc agcagcttgg gtggataaga ggctccggag gactggaccc gacgacatca accatcaccg acactgagcc atcctgaaga cggttcacct agcagcagcc aaggtgaccc acctgcccca aacaagtacg cccaagaacc cctgacagct cggaagaaag gtcgagaaaa ctggcggcag tgtcttgggt gcggcggcag acagcaagaa actactgcgc cagtgtctag gcacctctgg tgacggtgtc tacagtcctc gcacccagac aagttgagcc ggggcggagc ccgacgcccc cctggaccag tgaaagagtt acagccacct acttcaagaa gcagctggct cccctgacag tggaccagag ccgccgagga agaactactc tgcagatgaa ggtccacccc aaaagatgaa ccagcaccga cctgagactg ccgccaggcc cacctactac caccctgtac caagggctgg cgctagcacc gggcacagcg gtggaactca aggactctac ctacatctgc caaatcttgt catgtgggag tggcgagaca cgaccagcgg tctggacgcc gctgctgcac caagaccttc ggtgcagcgg cagggccgtg ggactacgag aaccctgccc taccagcttc gcccctgaag cagaagctac agagacagag ggtgcagtgc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 .167- 149654-序列表.doc 201119672 aagggcggca acgtgtgcgt gcaggcccag gaccggtact acaacagcag ctgcagcaag 1620 tgggcctgcg tgccctgcag agtgcggtct ggcggcgacg gctctggcgg cggaggaagc 1680 ggcggagggg gcagcagagt gatccccgtg agcggccctg cccggtgcct gagccagagc 1740 cggaacctgc tgaaaaccac cgacgacatg gtgaaaaccg ccagagagaa gctgaagcac 1800 tacagctgca cagccgagga catcgaccac gaggacatca cccgggacca gaccagcacc I860 ctgaaaacct gcctgcccct ggaactgcac aaaaacgaga gctgcctggc cacccgggag 1920 acaagcagca ccacccgggg cagctgcctg cctccccaga aaacctccct gatgatgacc 1980 ctgtgcctgg gcagcatcta cgaggacctg aagatgtacc agaccgagtt ccaggccatc 2040 aacgccgccc tgcagaacca caatcaccag cagatcatcc tggacaaggg catgctggtc 2100 gccatcgacg agctgatgca gagcctgaac cacaacggcg aaaccctgcg gcagaaaccc 2160 cccgtgggcg aggccgaccc ctaccgggtg aagatgaagc tgtgcatcct gctgcacgcc 2220 ttcagcaccc gggtggtgac catcaaccgg gtgatgggct acctgtcctc tgccggggga 2280 gggggatccg gcggaggtgg ctctggcggt ggcggagagg tgcaattgct ggaaagcggc 2340 ggaggactgg tgcagcctgg cggcagcctg agactgagct gcgccgccag cggcttcacc 2400 ttcagcagct acgccatgtc ttgggtccgc caggcccctg gaaagggcct ggaatgggtg 2460 tccgccatca gcggcagcgg cggcagcacc tactacgccg acagcgtgaa gggccggttc 2520 accatcagcc gggacaacag caagaacacc ctgtacctgc agatgaacag cctgagagcc 2580 gaggacaccg ccgtgtacta ctgcgccaag ggctggctgg gcaacttcga ctactggggc 2640 cagggcactc tggtcacagt gtctagcgct agcaccaagg gcccatcggt cttccccctg 2700 gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac 2760 tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac 2820 accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg 2880 ccctccagca gcttgggcac ccagacctac atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac 2940 accaaggtgg ataagaaagt tgagcccaaa tcttgtgact ga 2982

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149654-序列表.doc 201119672

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Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His Leu Leu Leu Asp 245 250 255

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Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu 325 330 335

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Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 565 570 575

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590 • 174

149654-序列表.doc 201119672

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<400> 224 gaagtgcagc tgctggaatc cggcggaggc ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60 tcctgcgccg cctccggctt caccttctcc tcctacgcca tgtcctgggt ccgacaggct 120 cctggcaaag gcctggaatg ggtgtccgcc atcatcggct ccggcggcat cacctactac 180 gccgactctg tgaagggccg gttcaccatc tcccgggaca actccaagaa caccctgtac 240 ctgcagatga actccctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgtgc caagggctgg 300 ttcggaggct tcaactactg gggacagggc accctggtca ccgtgtccag cgctagcacc 360 aagggaccct ccgtgttccc cctggccccc tccagcaagt ctacctctgg cggcaccgcc 420 gctctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgagcccg tgaccgtgtc ctggaactct 480 ggcgccctga ccagcggcgt ccacaccttt ccagccgtgc tgcagtcctc cggcctgtac 540 tccctgtcct ccgtcgtgac cgtgccctcc agctctctgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaacc acaagccctc caacaccaag gtggacaaga aggtggaacc caagtcctgc 660 gacagtggtg ggggaggatc tggtggcgga ggttctggcg gaggtggcgc tcctacatcc 720 tccagcacca agaaaaccca gctccagctg gaacatctcc tgctggatct gcagatgatc 780 ctgaacggca tcaacaacta caagaacccc aagctgaccc ggatgctgac cttcaagttc 840 tacatgccca agaaggccac cgagctgaaa catctgcagt gcctggaaga ggaactgaag 900 cctctggaag aggtgctgaa cctggcccag tccaagaact tccacctgag gcctcgggac 960 ctgatctcca acatcaacgt gatcgtgctg gaactgaagg gctccgagac aaccttcatg 1020 tgcgagtacg ccgacgagac agctaccatc gtggaatttc tgaaccggtg gatcaccttc 1080 gcccagtcca tcatctccac cctgacctcc ggtggtggcg gatccggggg agggggttct 1140 ggcggaggcg gagaagtgca gctgctggaa tccggcggag gcctggtgca gcctggcgga 1200 tctctgagac tgtcctgcgc cgcctccggc ttcaccttct cctcctatgc catgtcctgg 1260 gtccgacagg ctccaggcaa gggcctggaa tgggtgtccg ccatcatcgg ctccggcggc 1320 atcacctact acgccgactc tgtgaagggc cggttcacca tctcccggga caactccaag 1380 aacaccctgt acctgcagat gaactccctg cgggccgagg acaccgccgt gtactactgt 1440 gccaagggct ggttcggagg cttcaactac tggggccagg gcaccctggt caccgtgtcc 1500 -175- 149654·序列表 _doc 201119672 tccgcctcta ccaagggccc ctccgtgttc cctctggccc cctccagcaa gtctacctct ggcggcaccg ccgctctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg tcctggaact ctggcgccct gaccagcggc gtgcacacct ttccagccgt gctgcagtcc tccggcctgt actccctgtc ctccgtcgtg accgtgccct ccagctctct gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc tccaacacca aggtggacaa gaaggtggaa cccaagtcct gcgactga <210〉 225 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 19GlFab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 225

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201119672

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Ser Ala lie lie Ser Ser Gly Gly Leu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 435 440 445

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Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 590

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201119672 gccgacagcg tgaagggccg gttcaccatc agccgggaca acagcaagaa caccctgtac ctgcagatga acagcctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcgc caagggatgg ttcggcggct tcaactactg gggacagggc accctggtca cagtgtccag cgctagcacc aagggaccca gcgtgttccc cctggccccc agcagcaaga gcacatctgg cggaacagcc gccctgggct gcctggtcaa agactacttc cccgagcccg tgaccgtgtc ctggaacagc ggagccctga ccagcggcgt gcacaccttt ccagccgtgc tgcagagcag cggcctgtac agcctgagca gcgtggtcac cgtgcctagc tctagcctgg gcacccagac ctacatctgc aacgtgaacc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aggtggaacc caagagctgc gactccggcg gaggcggatc tggcggtgga ggctccggag gcggaggcgc tcctactagc agctccacca agaaaaccca gctccagctg gaacatctgc tgctggatct gcagatgatc ctgaacggca tcaacaacta caagaacccc aagctgaccc ggatgctgac cttcaagttc tacatgccca agaaggccac cgaactgaaa catctgcagt gcctggaaga ggaactgaag cctctggaag aggtgctgaa cctggcccag agcaagaact tccacctgag gcccagggac ctgatcagca acatcaacgt gatcgtgctg gaactgaagg gcagcgagac aaccttcatg tgcgagtacg ccgacgagac agccaccatc gtggaatttc tgaaccggtg gatcaccttc gcccagagca tcatcagcac cctgacaagc ggaggcggcg gatccggcgg aggcggatct ggcggaggag gcgaggtcca gctgctcgaa agcggcggag gactggtgca gcctggcggc agcctgagac tgtcttgcgc cgccagcggc ttcaccttca gcagctacgc catgagctgg gtccgccagg cccctggcaa gggactggaa tgggtgtccg ccatcatcag ctctggcggc ctgacctact acgccgacag cgtgaagggc cggttcacca tcagccggga caacagcaag aacaccctgt acctgcagat gaacagcctg cgggccgagg acaccgccgt gtactactgc gccaagggat ggttcggcgg cttcaactac tggggacagg gcaccctggt cacagtgtcc agcgccagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcacatct ggcggaacag ccgccctggg ctgcctggtc aaagactact tccccgagcc cgtgaccgtg tcctggaaca gcggagccct gaccagcggc gtgcacacct ttccagccgt gctgcagagc agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtc accgtgccta gctctagcct gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa gaaggtggaa cccaagagct gcgactga <210> 227 <211> 605 <212> PRT <213> 人造序列 U9654-序列表.doc 179- 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1818 201119672 <220> <223> 20G8 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築逋） <400> 227

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Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

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149654·序列表.doc 201119672

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Ser Ala lie lie Gly Ser Gly Ser Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 435 440 445

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Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 465 470 475 480

Ala Lys Gly Trp Phe Gly Gly Phe Asn Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu -181 - 149654-序列表.doc 201119672 485 490 495

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 500 505 510

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 515 520 525

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 530 535 540

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Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 565 570 575

Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 580 585 * 590

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Ser

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Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 -186- 149654·序列表.doc 201119672

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Leu lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser 115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140

Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160

Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205

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Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Tyr Thr Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser 115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 -188 - 149654-序列表.doc 201119672

Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160

Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215

<210> 236 <211> 648 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2F11 輕鏈 <400> 236 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 648 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggagcatcca gcagggccac tggcatccca gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagt atactccccc cacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaacgtacg gtggctgcac catctgtctt catcttcccg ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag <210> 237 <211> 215 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 4B3輕鏈 <400> 237 -189- 149654-序列表.doc 201119672

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Gly Gin Val lie Pro 85 90 95

Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu He Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser 115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140

Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160

Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 238 <211> 648 <212> DNA <213> 人造序列 <220> • 190·

149654-序列表.doc 60 201119672 <223〉 4B3 輕鏈 <400> 238

120 180 240 300 360 420 480 540 600 648 gaaatcgtgt taacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc ctctcttgca gggccagtca gagtgttagc agcaattact tagcctggta ccagcagaaa cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggcgcctaca tcagggccac tggcatccca gacaggttca gtggcagtgg atccgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagggtcagg ttattccccc tacgttcggc caggggacca aagtggaaat caaacgtacg gtggctgcac catctgtctt catcttcccg ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag <210> 239 <211> 613 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 2B10Fab-lL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 239

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 .191 - 149654·序列表.doc 201119672

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175

Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His 195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220

Asp Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 225 230 235 240

Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His 245 250 255

Leu Leu Leu Asp Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys 260 265 270

Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 275 280 285

Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 290 295 300

Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu 305 310 315 320

Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu 325 330 335

Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 340 345 350

Thr lie Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie 355 360 365 •192- 149654-序列表.doc 201119672

He Ser Thr Leu Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 370 375 380

Gly Gly Gly Gly Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys 385 390 395 400

Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr 405 410 415

Phe Ser Ser Tyr Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly 420 425 430

Leu Glu Trp Met Gly Gly lie lie Pro lie Phe Gly Thr Ala Asn Tyr 435 440 445

Ala Gin Lys Phe Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr 450 455 460

Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala 465 470 475 480

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe 485 490 495

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 500 505 510

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 515 520 525

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 530 535 540

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Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 580 585 590

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Pro Lys Ser Cys Asp -193 149654-序列表.doc 201119672 610 <210> 240 <211> 1842 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 2B10Fab-lL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 240 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tcagctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag 660 cccaaatctt gtgactccgg cggaggaggg agcggcggag gtggctccgg aggtggcgga 720 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggagcattt actgctggat 780 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 840 acatttaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 900 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 960 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 1020 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 1080 tggattacct ttgcccaaag catcatctca acactgactt ccggcggagg aggatccggc 1140 ggaggtggct ctggcggtgg cggacaggtg caattggtgc agtctggggc tgaggtgaag 1200 aagcctgggt cctcggtgaa ggtctcctgc aaggcctccg gaggcacatt cagcagctac 1260 gctataagct gggtgcgaca ggcccctgga caagggctcg agtggatggg agggatcatc 1320 cctatctttg gtacagcaaa ctacgcacag aagttccagg gcagggtcac cattactgca 1380 gacaaatcca cgagcacagc ctacatggag ctgagcagcc tgagatctga ggacaccgcc 1440 gtgtattact gtgcgagact gtacggttac gcttactacg gtgcttttga ctactggggc 1500 caagggacca ccgtgaccgt ctcctcagct agcaccaagg gcccatcggt cttccccctg 1560 •194- 149654-序列表.doc 201119672 gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac 1620 tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac 1680 accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg 1740 ccctccagca gcttgggcac ccagacctac atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac 1800 accaaggtgg ataagaaagt tgagcccaaa tcttgtgact ga 1842 <210> 241 <211> 613 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223〉C3B6Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 241

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Ala lie lie Pro lie Leu Gly lie Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala -195- 149654-序列表.doc 201119672 165 170 175

Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His 195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220

Asp Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 225 230 235 240

Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His 245 250 255

Leu Leu Leu Asp Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys 260 265 270

Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 275 280 285

Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 290 295 300

Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu 305 310 315 320

Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu 325 330 335

Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 340 345 350

Thr lie Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser lie 355 360 365 lie Ser Thr Leu Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 370 375 380

Gly Gly Gly Gly Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys 385 390 395 400

Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr 405 410 415 196-

149654·序列表.doc 201119672

Phe Ser Ser Tyr Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly 420 425 430

Leu Glu Trp Met Gly Ala lie lie Pro lie Leu Gly lie Ala Asn Tyr 435 440 445

Ala Gin Lys Phe Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr 450 455 460

Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala 465 470 475 480

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe 485 490 495

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 500 505 510

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 515 520 525

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 530 535 540

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 545 550 555 560

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 565 570 575

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 580 585 590

Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 595 600 605

Pro Lys Ser Cys Asp 610 <210> 242 <211> 1842 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> C3B6Fab-IL2-Frf)(重鏈細胞因子融合構築體） <400> 242 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 197- 149654-序列表.doc 60 201119672 tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctacgcta taagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggagct atcatcccga tccttggtat cgcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac 300 ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc 360 tcagctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag 660 cccaaatctt gtgactccgg cggaggaggg agcggcggag gtggctccgg aggtggc的a 720 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggagcattt actgctggat 780 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 840 acatttaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 900 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 960 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 1020 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 1080 tggattacct ttgcccaaag catcatctca acactgactt ccggcggagg aggatccggc 1140 ggaggtggct ctggcggtgg cggacaggtg caattggtgc agtctggggc tgaggtgaag 1200 aagcctgggt cctcggtgaa ggtctcctgc aaggcctccg gaggcacatt cagcagctac 1260 gctataagct gggtgcgaca ggcccctgga caagggctcg agtggatggg agctatcatc 1320 ccgatccttg gtatcgcaaa ctacgcacag aagttccagg gcagggtcac cattactgca 1380 gacaaatcca cgagcacagc ctacatggag ctgagcagcc tgagatctga ggacaccgcc 1440 gtgtattact gtgcgagact gtacggttac gcttactacg gtgcttttga ctactggggc 1500 caagggacca ccgtgaccgt ctcctcagct agcaccaagg gcccatcggt cttccccctg 1560 gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac 1620 tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac 1680 accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg 1740 ccctccagca gcttgggcac ccagacctac atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac 1800 accaaggtgg ataagaaagt tgagcccaaa tcttgtgact ga 1842 <210> 243 <211> 613 -198- 149654·序列表.doc 201119672 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 6A12 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 243

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 l〇 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala He Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Val lie lie Pro lie Leu Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110

Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys*Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175

Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His 195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 -199- 149654·序列表.doc 201119672

Asp Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 225 230 235 240

Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu His 245 250 255

Leu Leu Leu Asp Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr Lys 260 265 270

Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys 275 280 285

Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys 290 295 300

Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His Leu 305 310 315 320

Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu Leu 325 330 335

Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala 340 345 350

Gly Gly Gly Gly Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys 385 390 395 400

Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr 405 410 415

Phe Ser Ser Tyr Ala lie Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly 420 425 430

Leu Glu Trp Met Gly Val lie lie Pro lie Leu Gly Thr Ala Asn Tyr 435 440 445

Ala Gin Lys Phe Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Ala Asp Lys Ser Thr 450 455 460

Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala 465 470 475 480 •200-

149654-序列表.doc 201119672

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Tyr Gly Tyr Ala Tyr Tyr Gly Ala Phe 485 490 495

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 500 505 510

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 515 520 525

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 530 535 540

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 545 550 555 560

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 565 570 575

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 580 585 590

Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 595 600 605

Pro Lys Ser Cys Asp 610 <210> 244 <211> 1842 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223〉6A12Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 244 60 120 180 240 300 360 420 caggtgcaat tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc tcctgcaagg cctccggagg cacattcagc agctatgcta taagctgggt gcgacaggcc cctggacaag ggctcgagtg gatgggagtg atcatcccta tccttggtac cgcaaactac gcacagaagt tccagggcag ggtcaccatt actgcagaca aatccacgag cacagcctac atggagctga gcagcctgag atctgaggac accgccgtgt attactgtgc gagactgtac ggttacgctt actacggtgc ttttgactac tggggccaag ggaccaccgt gaccgtctcc tcagctagca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 201 - 149654-序列表.doc 480 201119672 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag 660 cccaaatctt gtgactccgg cggaggaggg agcggcggag gtggctccgg aggtggcgga 720 gcacctactt caagttctac aaagaaaaca cagctacaac tggagcattt actgctggat 780 ttacagatga ttttgaatgg aattaataat tacaagaatc ccaaactcac caggatgctc 840 acatttaagt tttacatgcc caagaaggcc acagaactga aacatcttca gtgtctagaa 900 gaagaactca aacctctgga ggaagtgcta aatttagctc aaagcaaaaa ctttcactta 960 agacccaggg acttaatcag caatatcaac gtaatagttc tggaactaaa gggatctgaa 1020 acaacattca tgtgtgaata tgctgatgag acagcaacca ttgtagaatt tctgaacaga 1080 tggattacct ttgcccaaag catcatctca acactgactt ccggcggagg aggatccggc 1140 ggaggtggct ctggcggtgg cggacaggtg caattggtgc agtctggggc tgaggtgaag 1200 aagcctgggt cctcggtgaa ggtctcctgc aaggcctccg gaggcacatt cagcagctat 1260 gctataagct gggtgcgaca ggcccctgga caagggctcg agtggatggg agtgatcatc 1320 cctatccttg gtaccgcaaa ctacgcacag aagttccagg gcagggtcac cattactgca 1380 gacaaatcca cgagcacagc ctacatggag ctgagcagcc tgagatctga ggacaccgcc 1440 gtgtattact gtgcgagact gtacggttac gcttactacg gtgcttttga ctactggggc 1500 caagggacca ccgtgaccgt ctcctcagct agcaccaagg gcccatcggt cttccccctg 1560 gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac 1620 tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac 1680 accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg 1740 ccctccagca gcttgggcac ccagacctac atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac 1800 accaaggtgg ataagaaagt tgagcccaaa tcttgtgact ga 1842 <210> 245 <211> 214 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 2B10 輕鏈 <400> 245

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp • 202- 149654·序列表.doc 201119672

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

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Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ala Tyr Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 • 204- 149654·序列表.doc 201119672

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

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S 201119672

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Ser lie Arg Asn Val 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Val Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gin Asn Gly Leu Gin Pro Ala 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu 工le Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

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120 180 240 300 360 420 480 540 600 645 gatatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga ccgggtcacc atcacctgcc gggcaagtca gagcattcgt aatgttttag gctggtacca gcagaagcca gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgat gtgtccagtt tgcagagtgg cgtcccatca aggttcagcg gcggtggatc cgggacagag ttcactctca ccatcagcag cttgcagcct gaagattttg ccacctatta ctgcttgcag aatggtctgc agcccgcgac gtttggccag ggcaccaaag tcgagatcaa gcgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag <210> 251 <211> 615 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> MHLG1 Fab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 251

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

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Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly Arg Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80

Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95

Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His Tyr Phe Asp His Trp 100 105 110 •207· 149654-序列表.doc 201119672

Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175

Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn 195 200 205

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Gly Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu 245 250 255

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Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro 275 280 285

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Leu Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu 325 330 335

Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr 340 345 350

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149654-序列表.doc 201119672 lie lie Ser Thr Leu Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 370 375 380

Ser Gly Gly Gly Gly Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu 385 390 395 400

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Gly Leu Glu Trp Val Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly 435 440 445

Arg Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp 450 455 460

Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu 465 470 475 480

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His 485 490 495

Tyr Phe Asp His Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala 500 505 510

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser 515 520 525

Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 530 535 540

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 545 550 555 560

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 565 570 575

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr 580 585 590 lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys 595 600 605

Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp -209 149654·序列表.doc 201119672 610 615 <210〉 252 <211> 1848 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> MHLGlFab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 252 gaagtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttggtcaagc ctggcgggtc cctgcggctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacatttagc aactattgga tgaactgggt gcggcaggct 120 cctggaaagg gcctcgagtg ggtggccgag atcagattga aatccaataa cttcggaaga 180 tattacgctg caagcgtgaa gggccggttc accatcagca gagatgattc caagaacacg 240 ctgtacctgc agatgaacag cctgaagacc gaggatacgg ccgtgtatta ctgtaccaca 300 tacggcaact acgttgggca ctacttcgac cactggggcc aagggaccac cgtcaccgtc 360 tccagtgcta gcaccaaggg' cccatcggtc ttccccctgg caccctcctc caagagcacc 420 tctgggggca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc 600 cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga taagaaagtt 660 gagcccaaat cttgtgactc cggcggagga gggagcggcg gaggtggctc cggaggtggc 720 ggagcaccta cttcaagttc tacaaagaaa acacagctac aactggagca tttactgctg 780 gatttacaga tgattttgaa tggaattaat aattacaaga atcccaaact caccaggatg 840 ctcacattta agttttacat gcccaagaag gccacagaac tgaaacatct tcagtgtcta 900 gaagaagaac tcaaacctct ggaggaagtg ctaaatttag ctcaaagcaa aaactttcac 960 ttaagaccca gggacttaat cagcaatatc aacgtaatag ttctggaact aaagggatct 1020 gaaacaacat tcatgtgtga atatgctgat gagacagcaa ccattgtaga atttctgaac 1080 agatggatta cctttgccca aagcatcatc tcaacactga cttccggcgg aggaggatcc 1140 ggcggaggtg gctctggcgg tggcggagaa gtgcagctgg tggagtctgg aggaggcttg 1200 gtcaagcctg gcgggtccct gcggctctcc tgtgcagcct ccggattcac atttagcaac 1260 tattggatga actgggtgcg gcaggctcct ggaaagggcc tcgagtgggt ggccgagatc 1320 agattgaaat ccaataactt cggaagatat tacgctgcaa gcgtgaaggg ccggttcacc 1380 atcagcagag atgattccaa gaacacgctg tacctgcaga tgaacagcct gaagaccgag 1440 gatacggccg tgtattactg taccacatac ggcaactacg ttgggcacta cttcgaccac 1500 tggggccaag ggaccaccgt caccgtctcc agtgctagca ccaagggccc atcggtcttc 1560 •210· 149654-序列表 _doc 201119672 cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggataa gaaagttgag cccaaatctt gtgactga <210> 253 <211> 214 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> KV9 輕鏈 <400> 253

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Lys Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Pro Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 211 · 1620 1680 1740 1800 1848 149654-序列表.doc 201119672 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 254 <211> 645 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> KV9 輕鏈 <400> 254 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc 60 atcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaacgtgg cttggtacca gcagaagcca 120 gggcaggcac ctaggcctct gatctattcg gcatcctacc ggtacactgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct 240 gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 255 <211> 615 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> MHLGFab_IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 255

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 -212· 149654-序列表-doc 201119672

Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly Arg Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80

Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95

Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His Tyr Phe Asp His Trp 100 105 110

Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175

Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn 195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220

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Gly Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gin Leu Gin Leu Glu 245 250 255

His Leu Leu Leu Asp Leu Gin Met lie Leu Asn Gly lie Asn Asn Tyr 260 265 270

Lys Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro -213· 149654·序列表.doc 201119672 275 280 285

Lys Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gin Cys Leu Glu Glu Glu Leu 290 295 300

Lys Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gin Ser Lys Asn Phe His 305 310 315 320

Leu Arg Pro Arg Asp Leu lie Ser Asn lie Asn Val lie Val Leu Glu 325 330 335

Leu Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr 340 345 350

Ala Thr lie Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp lie Thr Phe Ala Gin Ser 355 360 365 lie lie Ser Thr Leu Thr Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 370 375 380

Ser Gly Gly Gly Gly Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu 385 390 395 400

Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe 405 410 415

Thr Phe Ser Asn Tyr Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys 420 425 430

Gly Leu Glu Trp Val Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly 435 440 445

Arg Tyr Tyr Ala Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp 450 455 460

Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu 465 470 475 480

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His 485 490 495

Tyr Phe Asp His Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala 500 505 510

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser 515 520 525 •214

149654·序列表.doc 201119672

Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 530 535 540

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 545 550 555 560

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 565 570 575

Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 610 615 <210> 256 <211> 1848 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> MHLGFab-IL2-Fab (重鏈細胞因子融合構築體） <400> 256 gaagtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttggtccagc ctggcgggtc cctgcggctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacatttagc aactattgga tgaactgggt gcggcaggct 120 cctggaaagg gcctcgagtg ggtggccgag atcagattga aatccaataa cttcggaaga 180 tattacgctg caagcgtgaa gggccggttc accatcagca gagatgattc caagaacacg 240 ctgtacctgc agatgaacag cctgaagacc gaggatacgg ccgtgtatta ctgtaccaca 300 tacggcaact acgttgggca ctacttcgac cactggggcc aagggaccac cgtcaccgtc 360 tccagtgcta gcaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg caccctcctc caagagcacc 420 tctgggggca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc 600 cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga taagaaagtt 660 gagcccaaat cttgtgactc cggcggagga gggagcggcg gaggtggctc cggaggtggc 720 ggagcaccta cttcaagttc tacaaagaaa acacagctac aactggagca tttactgctg 780 gatttacaga tgattttgaa tggaattaat aattacaaga atcccaaact caccaggatg 840 ctcacattta agttttacat gcccaagaag gccacagaac tgaaacatct tcagtgtcta 900 -215- 149654-序列表.doc 201119672 gaagaagaac ttaagaccca gaaacaacat agatggatta ggcggaggtg gtccagcctg tattggatga agattgaaat atcagcagag gatacggccg tggggccaag cccctggcac aaggactact gtgcacacct accgtgccct agcaacacca tcaaacctct gggacttaat tcatgtgtga cctttgccca gctctggcgg gcgggtccct actgggtgcg ccaataactt atgattccaa tgtattactg ggaccaccgt cctcctccaa tccccgaacc tcccggctgt ccagcagctt aggtggataa ggaggaagtg cagcaatatc atatgctgat aagcatcatc tggcggagaa gcggctctcc gcaggctcct cggaagatat gaacacgctg taccacatac caccgtctcc gagcacctct ggtgacggtg cctacagtcc gggcacccag gaaagttgag ctaaatttag aacgtaatag gagacagcaa tcaacactga gtgcagctgg tgtgcagcct ggaaagggcc tacgctgcaa tacctgcaga ggcaactacg agtgctagca gggggcacag tcgtggaact tcaggactct acctacatct cccaaatctt ctcaaagcaa ttctggaact ccattgtaga cttccggcgg tggagtctgg ccggattcac tcgagtgggt gcgtgaaggg tgaacagcct ttgggcacta ccaagggccc cggccctggg caggcgccct actccctcag gcaacgtgaa gtgactga aaactttcac aaagggatct atttctgaac aggaggatcc aggaggcttg atttagcaac ggccgagatc ccggttcacc gaagaccgag cttcgaccac atcggtcttc ctgcctggtc gaccagcggc cagcgtggtg tcacaagccc 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1848 <210> 257 <211> 122 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> MHLG1; VH <400> 257

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg 35

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45

Ala Glu lie Arg Leu Lys 50

Ser Asn Asn Phe Gly Arg Tyr Tyr Ala Ala 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 149654-序列表.doc • 216- 201119672

Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95

Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His Tyr Phe Asp His Trp 100 105 HO

Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 258 <211> 366 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> MHLG1; VH <400> 258

gaagtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttggtcaagc ctggcgggtc cctgcggctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacatttagc aactattgga tgaactgggt gcggcaggct 120 cctggaaagg gcctcgagtg ggtggccgag atcagattga aatccaataa cttcggaaga 180 tattacgctg caagcgtgaa gggccggttc accatcagca gagatgattc caagaacacg 240 ctgtacctgc agatgaacag cctgaagacc gaggatacgg ccgtgtatta ctgtaccaca 300 tacggcaact acgttgggca ctacttcgac cactggggcc aagggaccac cgtcaccgtc 360 tccagt 366 <210> 259 <211> 109 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> MHLG KV9; VL <400> 259

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Lys Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Pro Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro •217· 149654-序列表.doc 201119672 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr 100 105 <210> 260 <211> 327 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> MHLG KV9; VL <400> 260 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc 60 atcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaacgtgg cttggtacca gcagaagcca 120 gggcaggcac ctaggcctct gatctattcg gcatcctacc ggtacactgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct 240 gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacg 327 <210> 261 <211> 122 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> MHLG; VH <400> 261

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly Arg Tyr Tyr Ala Ala 50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 218- 149654-序列表.doc 201119672

Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95

Tyr Cys Thr Thr Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His Tyr Phe Asp His Trp 100 105 110

Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 262 <211> 366 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> MHLG; VH <400> 262

gaagtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttggtccagc ctggcgggtc cctgcggctc 60 tcctgtgcag cctccggatt cacatttagc aactattgga tgaactgggt gcggcaggct 120 cctggaaagg gcctcgagtg ggtggccgag atcagattga aatccaataa cttcggaaga 180 tattacgctg caagcgtgaa gggccggttc accatcagca gagatgattc caagaacacg 240 ctgtacctgc agatgaacag cctgaagacc gaggatacgg ccgtgtatta ctgtaccaca 300 tacggcaact acgttgggca ctacttcgac cactggggcc aagggaccac cgtcaccgtc 360 tccagt 366 <210> 263 <211> 214 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> KV1 輕鏈 <400> 263

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr 工le Thr Cys Arg Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro • 219- 149654-序列表 doc 201119672 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu TVla 130 135 140

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 264 <211> 645 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> KV1 輕鏈 <400> 264 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc atcacctgca gggccagtca gaatgtggat actaacttag cttggtacca gcagaagcca gggaaagcac ctaagctcct gatctattcg gcatcctacc gttacactgg cgtcccatca aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag -220- 149654-序列表.doc 201119672 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 265 <211> 214 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> KV7 輕键 <400> 265

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Lys Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 221 · 149654-序列表.doc 201119672 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 266 <211> 645 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> KV7 輕鏈 <400> 266 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc atcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaacgtgg cttggtacca gcagaagcca gggaaagcac ctaagcctct gatctattcg gcatcctacc ggtacactgg cgtcccatca aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggqgagagt gttag <210〉 <211〉 <212> <213> <400> 267

Asp lie Glu Leu Thr Gin Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Glu Pro Leu Leu 35 40 45

Phe Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 149654-序列表.doc -222-

120 180 240 300 360 420 480 540 600 645

a 7 7lT家 6 OR、 2 1 p J

201119672 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 工le Ser Asn Val Gin Ser 65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 100 105 <210> 268 <211> 122 <212> PRT <213> 小家鼠

<400> 268

Gin Val Lys Leu Gin Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gin Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Ala Glu lie Arg Leu Lys Ser Asn Asn Phe Gly Arg Tyr Tyr Ala Glu 50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser 65 70 75 80

Ala Tyr Leu Gin Met lie Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly lie Tyr 85 90 95

Tyr Cys Thr Ser Tyr Gly Asn Tyr Val Gly His Tyr Phe Asp His Trp 100 105 110

Gly Gin Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 269 <211> 109 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> KV1; VL <400> 269 223- 149654-序列表.doc 201119672

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr 100 105 <210> 270 <211> 327 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> KV1; VL <400> 270 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc 60 atcacctgca gggccagtca gaatgtggat actaacttag cttggtacca gcagaagcca 120 gggaaagcac ctaagctcct gatctattcg gcatcctacc gttacactgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct 240 gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacg 327 <210> 271 <211> 109 <212> PRT <213〉人造序列 <220> <223> KV7; VL <400> 271

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 224- 149654-序列表.doc 201119672

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Lys Ala Ser Gin Asn Val Asp Thr Asn 20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu lie 35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg Thr 100 105 <210> 272 <211> 327 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> KV7; VL <400> 272 gatatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtgggcga ccgggtcacc 60 atcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaacgtgg cttggtacca gcagaagcca 120 gggaaagcac ctaagcctct gatctattcg gcatcctacc ggtacactgg cgtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc cgggacagag ttcactctca caatctcaag cctgcaacct 240 gaagatttcg caacttacta ctgtcaacag tacaatagtt accctctgac gttcggcgga 300 ggtaccaagg tggagatcaa gcgtacg 327 <210> 273. <211> 19 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 273

Met Asp Trp Thr Trp Arg lie Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 15 10 15

Ala His Ser -225, 149654·序列表.doc 201119672 <210> 274 <211> 57 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 274 atggactgga cctggagaat cctcttcttg gtggcagcag ccacaggagc ccactcc <210> 275 <211> 57 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 275 atggactgga cctggaggat cctcttcttg gtggcagcag ccacaggagc ccactcc <210> 276 <211> 22 <212> PRT <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 276

Met Asp Met Arg Val 1 5

Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 10 15

Phe Pro Gly Ala Arg Cys 20 <210> 277 <211> 66 <212> DMA <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 277 atggacatga gggtccccgc tcagctcctg ggcctcctgc tgctctggtt cccaggtgcc aggtgt <210> 278 <211〉 19 <212> PRT <213> 人造序列 226- 149654-序列表.doc 201119672 <220> <223> 前導序列 <400> 278

Met Gly Trp Ser Cys lie lie Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 15 10 15

Val His Ser <210> 279 <211> 57 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 279

atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctaccggtgt gcattcc 57 <210> 280 <211> 57 <212> DNA <213> •人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 280 atgggctggt cctgcatcat cctgtttctg gtggctaccg ccactggagt gcattcc 57 <210> 281 <211> 57 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> 前導序列 <400> 281 atgggctggt cctgcatcat cctgtttctg gtcgccacag ccaccggcgt gcactct 57 227- 149654·序列表.doc

Claims

201119672 七、申請專利範圍： 1 · 種免疫結合物，其包含： (a) 至少一個第一單鏈效應部分；及 (b) 第—及第二抗原結合部分，其獨立地選自由〜及 Fab組成之群，其中該第一效應部分與該第一抗原結合部分共用胺基或缓基末端肽鍵；且其中該第二抗原結合部分與i)該第一效應部分或ii)該第一抗原結合部分共用胺基或羧基末端肽鍵。 2·如請求項1之免疫結合物，其中該免疫結合物基本上由利用一或多個連接子序列連接之第一效應部分以及第一及第一抗原結合部分組成。 3.如請求項丨或2之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分各為Fab分子。 4·如請求項3之免疫結合物，其中該第一Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端胺基酸處連接該第二Fab分子之重鏈或輕鏈的胺基末端胺基酸。 5. 如請求項4之免疫結合物，其中該第二Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端胺基酸處連接該效應部分之胺基末端胺基酸。 6. 如請求項4之免疫結合物，其中該效應部分在其羧基末端胺基酸處連接該第一 Fab分子之該胺基末端胺基酸。 7. 如請求項3之免疫結合物，其中該第一 Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端連接該效應部分之該胺基末端胺基酸。 149654.doc 201119672 8. 如請求項7之免疫結合物，其中該效應部分在其羧基末端胺基酸處連接該第二Fab分子之該重鏈或輕鏈的該末端胺基酸。 9. 一種免疫結合物，其包含第一單鏈效應部分在其胺基末端胺基酸處連接一或多個scFv分子；及其中該第一單鏈效應部分在其羧基末端胺基酸處連接一或多個scFv分子。 I 〇 · —種免疫結合物’其包含： a) 至少一個第一單鏈效應部分；及 b) 第一及第二抗原結合部分，其中該等抗原結合部分各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接恆定區，該怪定區包含獨立地選自由以下組成之群的免疫球蛋白恆定域：IgG CHI、IgG Ck 及 IgE CH4 ; 其中該第一抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接該第一效應部分之胺基末端胺基酸；且其中該第一抗原結合部分及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。 II _如請求項10之免疫結合物，其中該等抗原結合部分各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接包含4〇 CH1域之恆定區。 1 2.如§青求項1 〇之免疫結合物’其中該等抗原結合部分各包含scFv分子在其緩基末端胺基酸處連接包含匕£ CH4域之怪定區。 13.如請求項10之免疫結合物，其中該等抗原結合部分各包 149654.doc 201119672 含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接包含IgG <jK域之恆定區。 14.如請求項1〇之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接包含4〇 (:出域之恆定區，且其中該第二抗原結合部分包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接包含IgG Ck域之恆定區。 1 5 —種免疫結合物，其包含： φ a)至少一個第一單鏈效應部分；及 b)第一及第二抗原結合部分，其中該等抗原結合部分各包含scFv分子在其羧基末端胺基酸處連接IgG CH3 域；其中該第一抗原結合部分在其羧基末端胺基酸處連接該第一效應部分之胺基末端胺基酸；且其中該第一抗原結合部分及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。 • 16.如請求項10至15中任一項之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分之該恆定區經由至少一個二硫鍵共價連接該第二抗原結合部分之該恆定區》 17.如請求項16之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分之免疫球蛋白域經由二硫鍵共價連接該第二抗原結合部分之免疫球蛋白域。 18 ·如請求項16之免疫結合物，其中至少一個二硫鍵位於該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之該等免疫球蛋白域的羧基末端。 149654.doc 201119672 19 _如請求項16之免疫結合物，其中至少一個二硫鍵位於該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之該等免疫球蛋白域的胺基末端。 2 0 ·如請求項19之免疫結合物，其中至少兩個二硫鍵位於該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之該等免疫球蛋白域的胺基末端。 2 1.如請求項1 〇之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含第二效應部分且其中該第二抗原結合部分在其恆定區羧基末端胺基酸處連接該第二效應部分之胺基末端胺基酸。 22. —種免疫結合物，其包含： a) 第一及第二單鏈效應部分；及 b) 第一及第二抗原結合部分，其中該等抗原結合部分各包含Fab分子在其重鏈或輕鏈羧基末端胺基酸處連接 IgGl CH3域；其中該等IgGl CH3域各在其羧基末端胺基酸處連接該等效應部分中之一者的胺基末端胺基酸；且其中該第一抗原結合部分及第二抗原結合部分經由至少一個二硫鍵共價連接。 23. 如請求項22之免疫結合物，其中該等IgGl CH3域由單個二硫鍵連接。 24. 如請求項22或23之免疫結合物，其中至少一個二硫鍵位於該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之該等 IgGl CH3域的羧基末端。 149654.doc 201119672 25. 26. 27.

28. 29. • 30. 31. 32. 如請求項22或23之免疫結合物’其中至少一個二硫鍵位於δ亥第一抗原結合部分及S玄第二抗原結合部分之該等 IgGl CH3域的胺基末端。如請求項25之免疫結合物’其中至少兩個二硫鍵位於該第一抗原結合部分及s亥第 >一抗原結合部分之該等I g g 1 CH3域的胺基末端。如請求項1、2、9至15及21至23中任一項之免疫結合物，其中蛋白水解裂解位點位於該等抗原結合部分與該等效應部分之間。如請求項丨、2、9至15及21至23中任一項之免疫結合物，其中该第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之可變區針對相同抗原具有特異性。如請求項1、2 9至15及21至23中任一項之免疫結合物，其中該第-抗原結合部分及該第二抗原結合部分之可變區針對不同抗原具有特異性。其中5玄第一抗原結合部分及纖維結合蛋白之外域B(EDB)具 ’其中該第一抗原結合部分或纖維結合蛋白之外域B(EDB)具如請求項2 8之免疫結合物 δ玄第一抗原結合部分針對有特異性。如請求項29之免疫結合物 «亥第一抗原結合部分針對有特異性。如印求項30之免疫結合物一，、中5玄一或兩個針對ED] 有特異性之抗原結合部八^ 刀單株抗體L19競牟έ士/ 之抗原決定基。平、，’° c 149654.doc 201119672 33. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 95之多肽序列。 34. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 108具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 3 5.如請求項34之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 108之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 36.如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 104之多肽序列。 3 7.如請求項3 0之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 117具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 3 8.如請求項37之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 117之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 39. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 105之多肽序列。 40. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 118具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 41. 如請求項40之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 11 8之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 42. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 106之多肽序列。 43. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 149654.doc 201119672 SEQ ID NO: 119具有至少80°/。一致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 44. 如請求項43之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 119之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 45. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEq ID NO: 107之多肽序列。 46. 如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 φ SEQ ID NO: 120具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 47_如請求項46之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 120之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 48.如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 96之多肽序列。 49·如請求項30之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 109具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編 ^ 碼的多肽序列。 50. 如請求項49之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 109之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 51. 如請求項33、36、39、42及45中任一項之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含SEQ ID NO: 96之多肽序列。 52. 如請求項28之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分針對肌腱蛋白之A1域（TNC-A1)具有特異性。 149654.doc 201119672 53. 如請求項29之免疫結合物’其中該第一抗原結合部分或該第二抗原結合部分針對肌腱蛋白之A丨域（T N c _ A丨）具有特異性。 54. 如請求項52之免疫結合物，其中該一或兩個針對TNC_ A1具有特異性之抗原結合部分與單株抗體F16競爭結合於TNC-A1之抗原決定基。 55. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEq ID NO: 99之多肽序列。 56. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 112具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 5 7.如請求項5 6之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 112之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 5 8.如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEq ID NO: 100之多肽序列。 59. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 113具有至少80%—致性之聚核苷酸編碼的多肽序列。 60. 如請求項59之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 11 3之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 61. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 101之多肽序列。 62_如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 114具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編 149654.doc 201119672 碼的多肽序列。 63.如請求項62之免疫結合物1中該免疫結合物包含由 SEQ ID紙114之聚核：g:酸序列編碼的多肽序列。 64·如請求項58之免疫結合物’其中該免疫結合物進—步包含SEQ ID NO: 101之多肽序列。 65.如請求項52之免疫結合物’其中該免疫結合物包含seq ID NO: 215之多肽序列。 φ 66.如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 216具有至少80%—致性之聚核苷酸蝙碼的多肽序列。 67.如請求項66之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 216之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 6 8 ·如請求項5 2之免疫結合物’其中該免疫結合物包含$ E q ID NO: 235之多肽序列。 6 9 _如凊求項5 2之免疫結合物’其中該免疫結合物包含由與 _ SEQ ID NO: 236具有至少80°/。一致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 70.如請求項69之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 23 6之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 71 _如請求項65之免疫結合物’其中該免疫結合物進一步包含SEQ ID NO: 235之多肽序列。 72. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 15之重鏈可變區序列。 73. 如請求項52之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ 149654.doc 201119672 ID NO: 9或SEQ ID NO: 11之輕鏈可變區序列。 74.如請求項72之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含SEQ ID NO: 9或SEQ ID NO: 11之輕鏈可變區序列。 7 5.如請求項72之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由與 SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 16具有至少80% —致性之聚核苷酸序列編碼。 76. 如請求項75之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由 SEQ ID NO: 14或SEQ ID NO: 16之聚核苷酸序列編碼。 77. 如請求項73之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由與 SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 12具有至少80% —致性之聚核苷酸序列編碼。 78. 如請求項77之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由 SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 12之聚核苷酸序列編碼。 79. 如請求項28之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分針對肌腱蛋白之A2域（TNC-A2)具有特異性。 80. 如請求項29之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分或該第二抗原結合部分針對肌腱蛋白之A2域（TNC-A2)具有特異性。 8 1.如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 7 ' SEQ ID NO: 179 ' SEQ ID NO: 183 > SEQ ID NO: 187、SEQ ID NO: 191、SEQ ID NO:195、 SEQ ID NO: 199、SEQ ID NO: 203及 SEQ ID NO: 207之群的重鏈可變區序列。 149654.doc -10- 201119672 82. 如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 3 ' SEQ ID NO: 5; SEQ ID NO: 177 ' SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201 及 SEQ IDNO: 205之群的輕鍵可變區序列。 83. 如請求項81之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含選自 SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 181、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO: 189、SEQ ID NO: 193、SEQ ID NO: 197、SEQ ID NO: 201、SEQ ID NO: 205之群的輕鏈可變區序列。 84. 如請求項8 1之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由與選自 SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 180、SEQ ID NO: 184、SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 196、SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群的序列具有至少80% —致性之聚核苷酸序列編碼。 85. 如請求項84之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由選自 SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 180、SEQ ID NO: 184、 SEQ ID NO: 188、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 196、 SEQ ID NO: 200、SEQ ID NO: 204及 SEQ ID NO: 208之群的聚核苷酸序列編碼。 8 6.如請求項8 2之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由與選自 SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 178、 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、 149654.doc -11 - 201119672 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的序列具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼。 87.如請求項86之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由選自 SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 178、 SEQ ID NO: 182、SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 190、 SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO: 198、SEQ ID NO: 202及 SEQ ID NO: 206之群的聚核苷酸序列編碼。 8 8.如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 239、SEQ ID NO: 241 及 SEQ ID NO: 243之群的多肽序列。 89. 如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與選自 SEQ ID NO: 240、SEQ ID NO: 242及 SEQ ID NO: 244之群的序列具有至少80%—致性之聚核苷酸編碼的多肽序列。 90. 如請求項89之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 240、SEQ ID NO: 242及 SEQ ID NO: 244 之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。 9 1.如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 245、SEQ ID NO: 247及 SEQ ID NO:249之群的多肽序列β 92.如請求項79之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與選自 SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248及 SEQ ID NO: 250之群的序列具有至少80°/。一致性之聚核苷酸序列編碼 149654.doc -12- 201119672 的多肽序列。 93. 如請求項92之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 246、SEQ ID NO: 248及 SEQ ID NO: 250 之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。 94. 如請求項88之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含選自 SEQ ID NO: 245、SEQ ID NO: 247 及 SEQ ID NO:249之群的多肽序列。

95. 如請求項28之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分針對纖維母細胞活化蛋白（FAP)具有特異性。 96. 如請求項29之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分或該第二抗原結合部分針對纖維母細胞活化蛋白（FAP)具有特異性。 97. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自由以下組成之群的重鏈可變區序列：SEQ ID NO: 21、 SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO: 27、SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 35、SEQ ID NO: 39、SEQ ID NO: 43、SEQ ID NO: 47、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 69、SEQ ID NO: 73、SEQ ID NO: 77、SEQ ID NO: 81、SEQ ID NO: 85、 SEQ ID NO: 89、SEQ ID NO: 93、SEQ ID NO: 123、 SEQ ID NO: 127、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 135、 SEQ ID NO: 139、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO: 147、 SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 159、 SEQ ID NO: 163、SEQ ID NO: 167、SEQ ID NO: 171 及 149654.doc -13- 201119672 SEQ ID NO: 175。 98. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自由以下組成之群的輕鏈可變區序列：SEQ ID NO: 17、 SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 29、SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41、SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、SEQ ID NO: 83、 SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91、SEQ ID NO: 121、 SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 133、 SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 145、 SEQ ID NO: 149、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 157、 SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 169及 SEQ ID NO: 173。 99. 如請求項97之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含選自由以下組成之群的輕鍵可變區序列：SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 29、 SEQ ID NO: 33、SEQ ID NO: 37、SEQ ID NO: 41、SEQ ID NO: 45、SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 67、SEQ ID NO: 71、SEQ ID NO: 75、SEQ ID NO: 79、SEQ ID NO: 83 ' SEQ ID NO: 87、SEQ ID NO: 91 ' SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 125、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 133、SEQ ID NO: 137、SEQ ID NO: 141、SEQ ID NO: 145 ' SEQ ID NO: 149 ' SEQ ID NO: 153 ' SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO: 165、SEQ ID NO: 149654.doc •14· 201119672 169及 SEQ ID NO: 173。 100. 如請求項97之免疫結合物，其中該重.鏈可變區序列由與

選自由以下組成之群的序列具有至少80% —致性之聚核苷酸序列編碼·· SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 28、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、SEQ ID NO: 70、SEQ ID NO: 74、SEQ ID NO: 78、 SEQ ID NO: 82、SEQ ID NO: 86、SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 144、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO: 172及 SEQ ID NO: 176。 101. 如請求項1 00之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 26、SEQ ID NO: 28、SEQ ID NO: 32、 SEQ ID NO: 36、SEQ ID NO: 40、SEQ ID NO: 44、SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO: 52、SEQ ID NO: 70、SEQ ID NO: 74 ' SEQ ID NO: 78 > SEQ ID NO: 82 ' SEQ ID NO: 86、SEQ ID NO: 90、SEQ ID NO: 94、SEQ ID NO: 124、SEQ ID NO: 128、SEQ ID NO: 132、SEQ ID NO: 136、SEQ ID NO: 140、SEQ ID NO: 144、SEQ ID NO: 148、SEQ ID NO: 152、SEQ ID NO: 156、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO: 149654.doc 15 201119672 172及 SEQ ID NO: 176。 102.如請求項98之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由與選自由以下組成之群的序列具有至少80% —致性之聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 30、SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、SEQ ID NO: 72、SEQ ID NO: 76、 SEQ ID NO: 80、SEQ ID NO: 84、SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134、SEQ ID NO: 138、SEQ ID NO·· 142、SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 150、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 162、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 170及 SEQ ID NO: 174。 103·如請求項1 02之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由選自由以下組成之群的聚核苷酸序列編碼：SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 30、 SEQ ID NO: 34、SEQ ID NO: 38、SEQ ID NO: 42、SEQ ID NO: 46、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 68、SEQ ID NO: 72、SEQ ID NO: 76、SEQ ID NO: 80、SEQ ID NO: 84、SEQ ID NO: 88、SEQ ID NO: 92、SEQ ID NO: 122、SEQ ID NO: 126、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134、SEQ ID NO: 138、SEQ ID NO: 142、SEQ ID NO: 146、SEQ ID NO: 150、SEQ ID NO: 154、SEQ ID NO: 158 ' SEQ ID NO: 162 ' SEQ ID NO: 166 ' SEQ ID NO: 149654.doc -16- 201119672 170及 SEQ ID NO: 174。 104. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 209 ' SEQ ID NO: 211 ' SEQ ID NO: 213 ' SEQ ID NO: 217、SEQ ID NO: 219、SEQ ID NO: 221、 SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO: 227之群的多肽序列。 105. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與選自 SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214 ' SEQ ID NO: 218 ' SEQ ID NO: 220 ' SEQ ID NO: 222、SEQ ID NO: 224、SEQ ID NO: 226及 SEQ ID NO: 228之群的序列具有至少80%—致性之聚核苷酸編碼的多肽序列。 . 106. 如請求項105之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 210、SEQ ID NO: 212、SEQ ID NO: 214、SEQ ID NO: 218、SEQ ID NO: 220、SEQ ID NO: 222、SEQ ID NO: 224、SEQ ID NO: 226及 SEQ ID NO: 228之群的聚核苷酸序列編碼之多肽序列。 107. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 229、SEQ ID NO: 231、SEQ ID NO: 233及 SEQ ID NO: 237之群的多肽序列。 108. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與選自 SEQ ID NO: 230、SEQ ID NO: 232、SEQ ID NO: 234及SEQ ID NO: 23 8之群的序列具有至少80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 149654.doc 201119672 109. 如請求項108之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由選自 SEQ ID NO: 230、SEQ ID NO: 232、SEQ ID NO: 234及SEQ ID NO: 238之群的聚核苷酸序歹丨J編碼之多肽序列。 110. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 211、SEQ ID NO: 219及 SEQ ID NO:221 之群的多肽序列、及SEQ ID NO: 231之多肽序列。 111. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含選自 SEQ ID NO: 209、SEQ ID NO: 223、SEQ ID NO: 225及 SEQ ID NO:227之群的多肽序歹4、及SEQ ID NO: 229之多肽序列。 112. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 213之多肽序列及SEQ ID NO: 233之多肽序列。 113. 如請求項95之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 2 17之多肽序列及SEQ ID NO: 237之多肽序列。 114. 如請求項28之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分針對黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白聚糖 (MCSP)具有特異性。 115. 如請求項29之免疫結合物，其中該第一抗原結合部分或該第二抗原結合部分針對黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白聚糖 (MCSP)具有特異性。 116. 如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO: 25 7或SEQ ID NO: 261之重鏈可變區序歹ij。 117. 如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ 149654.doc -18· 201119672 ID NO: 25 9或SEQ ID NO: 271之輕鍵可變區序列。 118.如請求項116之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含SEQ ID NO: 259或SEQ Π) NO: 271之輕鏈可變區序列。 119•如請求項116之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由與SEQ ID NO: 25 8或SEQ ID NO: 262之序列具有至少 8 0 % —致性的聚核普酸序列編碼。 φ 120.如請求項119之免疫結合物，其中該重鏈可變區序列由 SEQ ID NO: 258或SEQ ID NO: 262之聚核苷酸序列編碼。 121.如請求項117之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由與SEQ ID NO: 260或SEQ ID NO: 272之序列具有至少 80%—致性的聚核苷酸序列編碼。 122如請求項121之免疫結合物，其中該輕鏈可變區序列由 SEQ ID NO: 260或SEQ ID NO: 272之聚核苷酸序列編 • 碼。 123•如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含 ID NO: 251 或 SEQ ID NO: 255之多肽序列。 124·如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 252或 SEQ ID NO: 256具有至少 8〇。/。_5欠性之聚核苷酸編碼的多肽序列。 125.如請求項124之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 252或SEQ ID NO: 256之聚核苷酸序列編喝的多肽序列。 • 19- 149654.doc 201119672 126. 如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含SEQ ID NO:253 或 SEQ ID NO: 265之多肽序列。 127. 如請求項114之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由與 SEQ ID NO: 254或 SEQ ID NO: 266具有至少 80%—致性之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 128. 如請求項1 27之免疫結合物，其中該免疫結合物包含由 SEQ ID NO: 254或SEQ ID NO: 266之聚核苷酸序列編碼的多肽序列。 129. 如請求項123之免疫結合物，其中該免疫結合物進一步包含SEQ ID NO:253或SEQ ID NO: 265之多肽序列。 130·如請求項1、2、9至15及21至23中任一項之免疫結合物’其中該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之可變區針對癌細胞或受病毒感染之細胞的細胞表面抗原或表現於腫瘤中之ECM分子具有特異性。 131. 如請求項130之免疫結合物，其中該細胞表面抗原為腫瘤相關抗原或病毒抗原。 132. 如請求項1、2及9至15中任一項之免疫結合物，其中該免疫結合物僅具有一個效應部分；且其中該效應部分為細胞因子。 133. 如請求項132之免疫結合物，其令該細胞因子係選自由以下組成之群：介白素_2(IL_2)、粒細胞巨噬細胞_群落刺激因子（GM-CSF)、干擾素_a(INF_a)及介白素·12(1匕 12)。 B4.如請求項133之免疫結合物，其中該細胞因子為几_2。 149654.doc •20· 201119672 135. 如請求項1 3 3之免疫結合物’其中該細胞因子為IL-12。 136. 如請求項1 3 2之免疫結合物，其中該細胞因子引發帶有該細胞因子之受體的細胞之細胞毒性反應。 137. 如請求項13 2之免疫結合物，其中該細胞因子引發帶有該細胞因子之受體的細胞之增生反應。 138. 如請求項1、1〇至15及21至23中任一項之免疫結合物，其中該免疫結合物具有兩個效應部分；且其中該等效應部分為細胞因子。 139. 如凊求項1 3 8之免疫結合物，其中該等細胞因子各獨立地選自由以下組成之群：IL_2、GM-CSF、INF-α及IL- 12 ° 140. 如明求項1 3 9之免疫結合物，其中該等細胞因子皆為IL_ 1。 141•如”月求項139之免疫結合物，其中該等細胞因子皆為IL_ 12 °

142. 如叫求項i 3 8之免疫結合物，其中該等細胞因子引發帶有該等細胞因子之受體的細胞之細胞毒性反應。 143. 如明求項丨3 8之免疫結合物，其中該等細胞因子引發帶有。亥等細胞因子之党體的細胞之增生反應。、9至15及21至23中任一項之免疫結合 ’/、中該免疫結合物與效應部分受體結合之解離常數 (Kd)為對照效應部分之至少2倍。 145·如請求項1、2、9至物，其中在投藥期結 15及21至23中任一項之免疫結束時，該免疫結合物於活體内對合腫 149654.doc 201119672 瘤體積增加程度至少抑制3〇%。 H6_—種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項之免疫結合物的片段’其中該聚核苦酸編碼該第一抗原結合部分及該第二抗原結合部分之重鏈以及該第一效應部分。 —種分離之聚核苷酸，其編碼如請求物的片段，其中該聚核《編碼該第—二：:二該第二抗原結合部分之輕鏈以及該第一效應部分。 1你_ 一種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項丨或2之免疫結合物的片段，其中該聚核苦酸編碼一個來自該第一抗原結合部分之輕鏈、一個來自該第二抗原結合部分之重鏈及該第一效應部分。 149·一種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項3至8中任一項之免疫、、〜合物的片&，其中該聚核苷酸編碼該第一分子與該第二Fab分子兩者之重鏈及該效應部分。 150_種刀離之聚核苷酸，其編碼如請求項3至§中任一項之免疫結合物的片段，其中該聚核苷酸編碼該第一 Fab分子與該第二Fab分子兩者之輕鏈及該效應部分。 151_—種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項3至8中任一項之免疫結合物的片段，其中該聚核苷酸編碼一個來自該第 — Fab分子之輕鏈、一個來自該第二Fab分子之重鏈及該效應部分。 152. —種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項9之免疫結合物。 153. 種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項1 〇至2〇中任一項 149654.doc -22· 201119672 之免疫結合物的片段，其中兮& 甲違免疫結合物僅具有一個效應部分；且其中該聚核苷酴娘, 甘κ編碼該等抗原結合部分中之一者及該效應部分。 154· —種分離之聚核苷酸，复龟民 /、‘碼如請求項10至2 1中任一項之免疫結合物的片段，其中兮&#人t β + 八甲忒免疫結合物具有兩個效應部分；且其中該聚核苷酸編碼該等抗原結合部分中之一者及該等效應部分中之一者。

155. —種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項22至％中任一項之免疫結合物的片段，其中該聚核苷酸包含編碼該第一抗原結合部分之重鏈可變區及該第一效應部分的序列。 156. —種分離之聚核苷酸，其編碼如請求項^至託中任一項之免疫結合物的片段，其中該聚核苷酸包含編碼該第一柷原結合部分之輕鏈可變區及該第一效應部分的序列。 157·—種表現卡匣，其包含如請求項146至156中任一項之聚核苦酸序列。 158. —種表現載體，其包含如請求項ι57之表現卡匣。 159. —種宿主細胞，其包含如請求項1 5 8之表現載體。 160. 如請求項159之宿主細胞，其進一步定義為原核宿主細胞0 161·如a求項1 59之宿主細胞，其進一步定義為真核宿主細胞0 162·種製造如請求項1至145中任一項之免疫結合物的方法’其中該方法包括在適於表現該免疫結合物之條件下培養如請求項1 59至1 61中任一項之宿主細胞。 149654.doc •23· 201119672 163. —種如請求項1至145中任一項之免疫結合物的用途，其用於製造供促進活化T淋巴細胞之增生及分化的藥劑。 164. 如請求項1 63之用途，其中該免疫結合物誘導細胞毒性T 細胞（CTL)活性。 165. —種如請求項1至134、136至140或142至145中任一項之免疫結合物的用途’其用於製造供促進活化B淋巴細胞之增生及分化的藥劑。 166. —種如請求項1至145中任一項之免疫結合物的用途，其用於製造供促進自然殺手（NK)細胞之増生及分化的藥劑。 167. 如請求項166之用途，其中該免疫結合物誘導nk/淋巴細胞活化殺手（LAK)抗腫瘤細胞毒性。 168. 如請求項163至167中任一項之用途，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為IL-2。 169. —種如請求項！至133、137至139或143至145中任一項之免疫結合物的用途’其用於製造供促進粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞之增生及分化的藥劑。 170. 如請求項169之用途，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為GM-CSF。 171. —種如請求項i至145中任一項之免疫結合物的用途，其用於製造供促進T淋巴細胞分化之藥劑。 172·如晴求項163、166或171中任一項之用途，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為IL-12。 173. 一種如請求項1至133、138、139、144或145中任一項之 149654.doc -24- 201119672 免疫結合物的用途，其用於製造供抑制病毒複製之藥劑。、 174.-種如請求項1至133、m、139、144或145中任—項之免疫結合物的用途，其用於製造供上調主要組織相容性複合體I(MHC I)之表現的藥劑。 Μ如請求項173或174中任—項之用途，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為IFN-α。陽一種如請求項u132、136、138、142、⑷或⑷中任一項之免疫結合物的用途，其用於製造供誘導細胞死亡之藥劑。 177.如請求項176之用途，其中該免疫結合物針對具有特異性。 ^ 士吻求項1 76之用途，其中該免疫結合物針對tnc_a 1具有特異性。 ' 如叫求項176之用途，其中該免疫結合物針對TNC-A2具有特異性。如°月求項176之用途，其中該免疫結合物針對MCSP具有特異性。 1 8 1 ·如"f 眚炎 τ5 1 貝176之用途，其中該免疫結合物之效應部分係選自由以下組成之群：IL_2、腫瘤壞死因子_a(TNF_a)及腫瘤壞死因子_β(ΤΝρ_β)。 182·如清求項1 8 1之用途，其中該效應部分為IL-2。種如s月求項1至132、138、144或145中任一項之免疫 &物的用途’其用於製造供誘導標乾細胞之趨化性的 149654.doc •25- 201119672 藥劑。 184. 如請求項1 83之用途’其中該免疫結合物之效應部分係選自由以下組成之群：介白素-8(IL-8)、巨噬細胞發炎性蛋白- Ια(ΜΙΡ-Ια)、巨噬細胞發炎性蛋白_ΐβ(Μΐρ_ΐβ)及轉化生長因子-P(TGF-p)。 185. 如請求項 163 至 167、169 至 171、173、174 及 176 至 184 中任一項之用途，其中該細胞為活體内細胞。 186. —種包含如請求項1至145中任—項之免疫結合物之組合物的用途’其用於製造供治療個體疾病之藥劑。 187. 如請求項186之用途’其中該疾病為癌症。 188·如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物針對edb 具有特異性。 189. 如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物針對丁^^^ A1具有特異性。 190. 如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物針對tnc_ A2具有特異性。 191·如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物針對FAp 具有特異性。 192. 如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物針對 MCSP具有特異性。 193. 如請求項186或187之用途，其中該免疫結合物包含江· 2。 3 194. 如請求項186或187之用途，其中該組合物係經以下途徑投與：靜脈内.、皮内、動脈内、腹膜内、病灶内、顱 149654.doc • 26 · 201119672 内、則列腺内、脾内、腎内、胸膜内、氣管内、鼻内、玻璃體内、陰道内、直腸内、表面、瘤内、肌肉内、腹膜内、皮下、結膜下、囊泡内、經黏膜、心包内 '臍帶内、眼内、經口、表面、局部、藉由吸入、藉由注射、藉由輸注、藉由連續輸注、藉由直接浸洗標靶細胞之局部灌注、經由導管、經由灌洗、以乳膏形式或以脂質組合物形式。 • 195. 一種組合物，其包含如請求項1至145中任一項之免疫結合物及醫藥載劑。 196. 如請求項i、2、9至15及21至23中任一項之免疫結合物或如睛求項1 95之組合物，其用於製造供治療有需要患者之疾病的藥劑。 197. 如請求項196之免疫結合物，其中該疾病為癌症。 198·如請求項！、2、9至15及21至23中任一項之免疫結合物’其用於治療有需要患者的疾病。 • 1".如請求項198之免疫結合物，其中該疾病為癌症。 200. —種促進活化T淋巴細胞之增生及分化的活體外方法’ 其包括使活化T淋巴細胞與有效量之如請求項1至145中任一項之免疫結合物接觸。 201. 如請求項200之方法，其中該免疫結合物誘導細胞毒性τ 細胞（CTL)活性。 202. —種促進活化B淋巴細胞之增生及分化的活體外方法，其包括使活化B淋巴細胞與有效量之如請求項丨至134、 136至140或142至145中任一項之免疫結合物接觸。 149654.doc -27- 201119672 203• —種促進自然殺手（NK)細胞之增生及分化的活體外方法’其包括使ΝΚ細胞與有效量之如請求項1至145中任一項之免疫結合物接觸。 204. 如請求項203之方法’其中該免疫結合物誘導νκ/淋巴細胞活化殺手（LAK)抗腫瘤細胞毒性。 205. 如請求項200至204中任一項之方法，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為IL-2。 206. —種促進粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞之增生及分化的活體外方法’其包括使粒細胞、單核細胞或樹突狀細胞與有效量之如請求項1至133、137至139或143至145十任一項之免疫結合物接觸。 207. 如睛求項206之方法，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為GM-CSF。 208. —種促進Τ淋巴細胞分化之活體外方法，其包括使τ淋巴細胞與有效量之如請求項1至丨45中任一項之免疫結合物接觸。 209•如請求項200、203或2〇8中任—項之方法，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為比_12。 21〇_—種抑制病毒複製之活體外方法，其包括使受病毒感染之細胞與有效量之如請求項1至133、138、139、144或 145中任一項之免疫結合物接觸。 211· —種上調主要組織相容性複合體u之表現的活體外方法，其包括使細胞與有效量之如請求項丨至133、 138、139、144或145中任-項之免疫結合物接觸。 149654.doc •28. 201119672 212. 如請求項2 1 〇或2 11中任一項之方法，其中該免疫結合物之至少一個效應部分為IFN-α。 213. —種誘導細胞死亡之活體外方法，其包括向細胞投與有效量之如請求項1至132、136、138、142、144或145中任一項之免疫結合物。 214·如請求項2 1 3之方法，其中該免疫結合物針對edb具有特異性。 215. 如請求項21 3之方法’其中該免疫結合物針對tnC-A1具有特異性。 216. 如凊求項21 3之方法，其中該免疫結合物針對TNC A2具有特異性。 217. 如凊求項21 3之方法，其中該免疫結合物針對MCSp具有特異性。 218. 如請求項213之方法，其中該免疫結合物之效應部分係選自由以下組成之群：IL_2、腫瘤壞死因子_a(TNF_a)及腫瘤壞死因子-β(ΤΝΡ-β)。 219. 如請求項21 8之方法，其中該效應部分為IL_2。 220. —種誘導標靶細胞之趨化性的活體外方法，其包括向標靶細胞投與有效量之如請求項1至132、138、144或145 中任一項之免疫結合物。 221. 如請求項220之方法，其中該免疫結合物之效應部分係選自由以下組成之群：介白素_8(IL_8)、巨嗟細胞發炎性蛋白la(MIP-la)、巨噬細胞發炎性蛋白及轉化生長因子_P(TGF-p)。 149654.doc •29·