TW201006824A - Novel compound 395 - Google Patents

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201006824 六、發明說明： 【發明所屬技術領域】 發明領域 本發明係有關於特定雜環化合物、其製法及用於其製 備之中間產物、含其等之藥學組成物、及其等在治療之用途。 L ^tr ]j 發明背景 趨化激素在各種疾病及病症，其包括氣喘及過敏性疾 病，以及自體免疫病變，諸如類風濕性關節炎及動脈粥瘤 硬化’之免疫及炎性反應中扮演重要角色。這些小分泌之 分子為具保留性半胱胺酸模序特徵之8_14kDa蛋白質的生 長總科。目前’該趨化激素總科包含3種具有特有結構模序 之族’亦即C-X-C、C-C及C-X3-C科。C-X-C及C-C科具有序 列相似性且根據插入於半胱胺酸殘基之NH近側對間之單 一胺基酸可彼此區別。根據插入於半胱胺酸殘基之NH近側 對間之三重胺基酸，可區別該C-X3-C科與另兩科。 該等C-X-C趨化激素包括嗜中性白血球之幾種有效力 的化學誘質及活化劑，諸如介百素-8(IL-8)及嗜中性白血球 活化肽2(NAP-2)。 該等C-C趨化激素包括非嗜中性白血球之單核細胞及 淋巴細胞之有效力的化學誘質。實例包括人類單核細胞趨 化性蛋白質 1-3(MCP-1、MCP-2 及 MCP-3)、RANTES (Regulated on Activation, Normal T Expressed and Secreted) ' 嗜伊紅趨化因子(eotaxin)及巨噬細胞炎性蛋白質1 α與1 /3 201006824 (ΜΙΡ-1 α 及ΜΙΡ-lyg)。 該c-Xs-c趨化激素（亦稱為弗電克塔激素(fractalkine) 為中枢神經系統(CNS)以及單核細胞、τ細胞、Νκ細胞及肥 大細胞中之小神經膠質的有效力之化學誘質及活化劑。 研究已證明該等趨化激素之作用係藉G蛋白質偶聯之 受體的亞科而媒介’這些受體被稱為CCRi、CCR2、 CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、 CCR8、CCR9、CCR10及 CCR11(就C-C科而言）；CXCR1、 CXCR2、CXCR3、CXCR4 及 CXCR5(就 C-X-C 科而言）及 CXsCRl(就C-XyC科而言）。這些受體代表用於藥物研發之 良好標靶’因為可調節這些受體之藥劑可用以治療，諸如 上述之病症及疾病。 【明内】 發明概要 在我們的PCT專利申請案WO 2004/011443中，我們揭 示作為趨化激素受體之調節劑的嘧啶基磺醯胺衍生物。 本發明現在提供式（1)化合物及

(1) 其藥學上可接受鹽。參考WO 2004/011443中所揭示之化合 物’並未預先討論此種化合物，其通常有至少兩結構差異。 201006824 此外，我們已發現該式（1)化合物之藥理特性優於此等化合 物。更明確地，該式（1)化合物具有至少一如下文陳述的改 良藥理性質。雖然我們並不希望受限於理論考慮因素，但 是已預期該式1化合物之改良藥理特性在人體内可得到較 長的作用持續期。在本發明之一方面中，該式1化合物之給 藥頻率為每曰一次或兩次。 可藉本項技藝中已熟知之有機化學的標準技術而進行 旋光性形式之合成’例如藉自旋光性起始物質而進行合成 或藉/肖方疋形式之拆分（例如見Enantioselective Synthesis of fully protected anti 3-amino-2-hydroxy butyrates ;

Tetrahedron Asymmetry ; 1995，第 6冊，第 9期，第 2329-2342 頁）。類似地，可使用下文所述的標準實驗室技術以評估上 述活性。 在本發明範圍内，該該瞭解的是該式化合物或其鹽 或溶劑化物可顯示互變異構現象且在本專利說明書範圍内 之化學式圖示可代表僅一種可能的互變異構形式。應該瞭 解的是本發明涵蓋任何互變異構形式及其混合物，且不僅 限於該等化學式圖示範圍内所使用之任一互變異構形式。 本專利說明書範圍内之該等化學式圖示可代表僅一種可能 的互變異構形式且應該瞭解的是本專利說明書涵蓋不僅在 文中已可能以圖解表示之彼等形式的該等化合物之所有可 能互變異構形式。 亦應該瞭解的是該式（1)化合物及其鹽可以以溶劑化以 及非溶劑化形式’例如水合形式存在。應該瞭解的是本發 5 201006824 明涵蓋所有此等溶劑化或水合形式。 本發明係有關於如下文定義之該式（1)化合物，以及其 鹽。用於藥學組成物之鹽可以是藥學上可接受鹽，但是其 它鹽亦可用以製備該式（1)化合物及其等之藥學上可接受 鹽。本發明之藥學上可接受鹽包括其鹼性足以形成此等鹽 之如上文定義之式（1)化合物的驗加成鹽。可使用能得到藥 學上可接受陽離子之無機或有機鹼以形成此等鹽。具有無 機或有機鹼之此等鹽包括，例如鹼金屬鹽，諸如鈉或鉀鹽； 鹼土金屬鹽，諸如鈣或鎂鹽；或有機胺鹽，例如具有三-(2-羥乙基）胺、二乙醇胺或乙醇胺之鹽。 本發明進一步提供用於製備如上文定義之式（1)化合物 的方法，其包括： (a)在合適鹼、催化劑及溶劑存在下以磺醯胺(2c): 〇 〇

V 、m2 (2c) 處理式（2a)化合物

其中PG為保護基或兩各別氫原子，而L為脫離基，諸如齒素。 201006824 且可選擇性於其後以任何順序進行⑴或(ii): i) 移除任何保護基； ii) 形成鹽。 可在合適催化劑存在下並藉熱或微波加熱而進行式 (2a)化合物與磺醯胺(2c)之反應。 合適鹼之實例包括金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，諸如得自 铯、鉀、鋰或鈉之金屬碳酸鹽；或金屬磷酸鹽，諸如得自 鋰、鈉或鉀(例如磷酸鉀(K：3P〇4))之金屬磷酸鹽；或三燒基 胺’諸如三乙胺或Ν，Ν-二-異丙基乙胺。最佳使用碳酸鉋。 合適溶劑包括甲苯；鍵，諸如菌香醚、四氫咬嗔、2_甲其 四氫呋喃、1，4-二哼烷、乙二甲醚及二乙二曱醚；或酯，諸 如乙酸正-丁酯或乙酸異丙酯。最佳使用1，4-二噚烷。可以 於介於10C與120C間之溫度下、最佳於i〇5°C下進行該反 應。在合適配位基’諸如（9,9-二曱基-9H-二笨并旅喃-45_ 二基）雙[二苯基膦](Xantphos)或2-二環己基-膦基_2, _(n，n_ 二甲胺基)聯苯或2-二環己基-膦基·2’，4，，6，·：異丙基」广 聯苯(XPHOS)(各呈0.01-0.5莫耳當量）存在下，合適催化劑 實例包括合適把（0)源，諸如鈀三（二亞苄基丙酮）二紐 (0)(Pd2(dba)3)或四（三苯基膦）鈀(pdfh3)4)(各呈〇 〇丨5莫 耳當量）。該催化劑組合最㈣於1G5t下使用碳酸絶作為 該鹼，在1，4-二噚烷中呈〇·01_〇·5莫耳當量之含有孓二環己 基-膦基_2’’4’，6’-三-異丙醇-U，_聯笨(Xph〇s)之三（二亞节 基丙酮）二鈀(〇)(Pd2(dba)3)。 合適的保護基(PG)包括丙烯酸系及環系化合物。丙稀 201006824 酸系保護基之實例包括苄基、對-硝基苄基或對卜 PG最佳為環系。合適的環系保護基實例包括壤亞^〜基。 亞戊基及縮丙酮化物。最佳使用縮丙酮化物保 環 或； (b)在合適驗及溶劑存在下，以式(2d)胺 h2n

PG

(2d) 其中PG為合適保護基或兩各別氫原子， 處理式（2b)化合物

其中PG2為保§蒦基且L為脫離基，諸如鹵素， 且可選擇性於其後以任何順序進行⑴及/或(ii): i) 移除任何保護基； ii) 形成鹽。 可以在合適鹼、溶劑存在下並藉熱或微波加熱而進行 式(2b)化合物及胺(2d)之反應。 合適鹼實例包括金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，諸如鈉、鉀、 铯；或三烷基胺，諸如三乙胺或N，N-二-異丙基乙胺。最佳 8 201006824 使用碳酸氯鈉。 +合適溶舞 1包括N，N-二甲基酿胺；1-甲基场各·; 甲苯，醚’諸如菌香醚、四氣 二雜、乙二甲峻、一乙2_甲基四氫吱喃、M- 醋’諸如乙酸正-丁醋 或乙酼異丙酯；及烷基腈，諸如乙腈 =:於阶與12旳間之溫度下進行二腈。 可在δ適驗及溶劑存在下，以胺(2d)， ❹ 基或兩各別氫原子，處理式（3)化合物 為保護

其中L為脫離基，諸如商素 來製成式(2a)化合物。 ❿ 合適驗實純括金屬碳酸鹽或碳錢鹽，諸如納、卸、 絶；或三燒基胺’諸如三乙胺或N，N_二異丙基乙胺。最好 使用碳酸氫鈉。 合適溶劑包括Μ二甲基醯胺；Η基財娜鍵， 諸如四氫Μ、2-甲基讀料、Μ•二料、乙二甲鍵、 二乙m諸如乙酸丁醋或乙酸異丙s 諸如乙腈或丁腈。最好使用乙腈。 基月 可以於介於1代與12〇。⑶之溫度下，最好於刪。c下 進行該反應。 9 201006824 式⑽化S物’其中L為脫離基，諸如函素，且pg2為 合適保4基或氫之製法為在合適驗 '溶劑存在下，在或不 在合適催化劑下藉熱或微波加熱而進行式⑶化合物，其中 L為脫離基，諸如南素，與雜胺(2e)之反應， 並可選擇吐於其後以任何順序進行⑴或⑼： i)添加任何保護基團； UM吏式⑽化合物轉化成另一式⑽化合物）， 合適驗實例包括驗金屬氫化物 ，諸如鈉或卸；或金屬 烧氧化物’諸如第三丁氧化鐘、第三-丁氧化鈉或第三-丁 ❹ 氧化鉀；鹼金屬六甲基二矽疊氮化物，諸如六甲基二矽疊 II化鉀、六甲基二發叠氮化納或六甲基二石夕疊氮化卸；或 金屬碳酸鹽’諸如納、卸、絶。合適溶劑包括乙骑、四氫 ' 吱》南、2-甲基四氫吱η南、认二，烧、乙二甲鍵及二乙二甲 謎’可以於介於0。0與1耽間之溫度下進行該反應。在合 適配位基，諸如(9,9-二甲基-9H-二苯并口底喃-4,5-二基)雙[二 苯基膦](乂&1^11〇8)或2-二環己基_膦酸_2’_(]^，义二甲胺基） 聯苯或2_二環己基-膦基_2’，4，，6，-三-異丙基-1，1，-聯苯 (XPHOS)存在下，合適催化劑實例包括合軌⑼源，諸如 四（三苯基鱗）纪（Pd(Ph3)4)或三（二亞苄基丙酮）二鈀 (0)(Pd2(dba)3)。 合適的保護基(PG2)實例包括醚，諸如藉使用[2 (氣甲 氧基）乙基](二甲基)矽烷而烷化之三甲基曱矽烷基醚(SEM) 或藉使用對·甲氧基节基氣而烧化之對·甲氧基节基(pMB)。 可藉在或不在合適溶劑存在下，使齒化劑，諸如磷醯 10 201006824 氟’與式(3)化合物，其中L為經基，進行反應而製成式(3) 化合物，其中L為鹵素。可在N，N-二甲基苯胺存在或不存在 下進行該反應。合適的溶劑包括甲苯、二甲苯、乙腈、四 氫呋喃、2-甲基四氫吱喃、1,4-二噚烷、乙二甲醚及二乙二 曱醚。 可以於介於90°C至150°C間之溫度下進行該反應。 可在合適驗及溶劑存在下，藉使式(4)化合物：

⑷ 其中L為經基， 與1-(漠甲基)-2,3-二氟苯反應而製成式(3)化合物，其中l為 經基。 合適的驗實例包括驗金屬氫氧化物，諸如氫氧化鐘、 氫氧化鈉、氫氧化鉀；或金屬碳酸鹽（或碳酸氫鹽），諸如碳 酸(或碳酸氫)鋰、碳酸(或碳酸氫)鈉、碳酸(或碳酸氫)卸、 碳酸(或碳酸氫)铯；或金屬乙酸鹽，諸如乙酸鋰、乙酸鈉、 乙酸舒或乙酸絶；或金屬烧氧化物，諸如第三_丁氧化鐘、 第三-丁氧化鈉、第三-丁氧化鉀。合適溶劑包括水；NN_ 二曱基醢胺；1-曱基-2-吡咯啶酮；醚，諸如四氫吱嚼、2_ 甲基四氫呋喃、1，4-二噚烷、乙二曱醚及二乙二甲醚；醇， 諸如甲醇、乙醇及第二-丁醇；或乙腈。最好於3〇6〇<^下使 用乙酸納在曱醇及水混合物之溶液。更佳於4〇〇c^使用乙 11 201006824 酸納在乙骑及水混合物中之溶液。 式(4)，其中L為羥基，（2c)及(2d)化合物，其中PG為保 護基’諸如縮丙酮化物或環亞乙基或兩各別氫原子，係使 用文中所述之程序製成、係市售、係在該文獻中廣為人知 或可使用已知技術輕易地製成。

在上述用於製備式（1)化合物或其藥學上可接受鹽、溶 劑化物或活體内可水解酯的各方法變異中，所述最好或合 適材料或反應條件各代表本發明之各別及不同方面。 熟悉本項技藝者可知在本發明之方法中，特定官能 基，諸如在該等起始試劑或中間產物化合物中之羥基或胺 基需要藉保護基而保護。因此，式（1)化合物之製法的一合 適階段可包括一或多保護基之移除。該等官能基之保護作 用及脫除保護作用詳述在以下資料中：‘Protective Groups in Organic Chemistry’，edited by J. W. F. McOmie, Plenum Press (1973)、及‘Protective Groups in Organic Synthesis，，2nd

edition, T. W. Greene & P. G. M. Wuts, Wiley-Interscience (1991)。 合適脫離基實例係提供在標準化學教科書内，諸如由 Oxford University Press (第 3版，2005年）出版之“〇rgan.ic Chemistry’’(by Jonathan Clayden等人）。其包括齒素、甲確 睃根及甲苯磺酸根基團。合適脫離基為i素，諸如氣或溴、 最好為氣。 上述式（1)化合物可轉化成如上述之其藥學上可接受鹽 或溶劑化物。該鹽最好為鹼性加成鹽。 12 201006824 該式⑴化合物具有作為藥m (特別為CXCR2)活性調節劑的活性且可又體 預防性）人類及非人類〜療U療性或 ΓΓ中 此等病症/疾病之實例包括: 其中各病症疾病係獨立或呈其之任何組合被選取。 (1) 呼吸道-阻塞性氣道疾病， 、扃其包括慢性阻塞性肺病

(C0PD);氣喘’諸如支氣管、過敏性、内因性、外因性及 塵埃誘發性氣喘，_為慢性或難治的氣喘(例如遲發型氣 喘及氣道過度反應性）；支氣管炎；急性、過敏性、萎縮性 鼻炎及慢性鼻炎，其包括乾路狀鼻炎、肥厚性鼻炎、化腹 性鼻炎、乾雜鼻炎及藥物性鼻炎；膜性鼻炎，其包括哮 吼性(croupous)、纖維性及假膜性鼻炎與結核性鼻炎；季節 性鼻炎’其包括神經性鼻炎(花粉熱)及血管運動性鼻炎；肉 狀瘤病、農民肺及姻疾病化肺及自發性間質性肺炎； (2) 骨及關節-類風濕性關節炎、骨關節病、血清反應陰 性脊椎關節病（其包括僵直性脊椎炎、牛皮癖性關節炎及雷 透氏症（Reiter’s disease)、貝赛特氏症(Behchet，s disease)、 索格倫氏症候群(Sjogren’s syndrome)及全身性硬化症； (3) 皮膚-牛皮癬、異位性皮膚炎、接觸性皮膚炎及其它 濕疹性皮膚病、皮脂漏皮膚炎、扁平苔癖、天疱瘡、球狀 天疱瘡、大泡性表皮鬆懈、蓴麻疹、血管性水腫、血管炎、 紅斑、皮膚嗜伊紅血球增多、葡萄膜炎、簇圓禿及春季鈐 骐炎； & 蓴 (4)胃腸道-腹疾、直腸炎、嗜伊紅型胃腸炎、著色性 13 201006824 麻療、克隆氏症(Crohn’s disease)、潰瘍性結腸炎、未定型 結腸炎、微細結腸炎、發炎性腸病、大腸激躁症、非炎性 腹瀉、可具有遠離腸之作用的食物關聯性過敏，例如偏頭 痛、鼻炎及濕疹； (5) 中樞及末梢神經系統-神經變性疾病及失智症，例如 阿滋海默氏症(Alzheimer’s disease)、側索硬化性肌萎縮症 及其它運動神經元疾病、克魯滋費德-賈可氏症 (Creutzfeldt-Jacob’s disease)及其它普思蛋白（prion)疾病、 HIV腦病（AIDS痴呆症候群）、亨丁頓氏症（Huntington’s disease)、額顳型失智症、路易氏體失智症（Lewy body dementia)及血管性失智症；多發性神經病，例如格巴二氏 症候群(Guillain-Barrd syndrome)、慢性炎性脫鞘狀多神經 根神經病、多病灶運動神經病變、神經叢失調；CNS髓鞠 脫失，例如多發性硬化、急性散佈性/出血性腦脊髓炎、及 亞急性硬化性全腦炎；神經肌肉病症，例如重肌無力症及 朗伯-伊通症候群(1^11^11;-£&1;〇118711(11>〇11^);脊髓病症，例 如熱帶痙攣性下身輕癱、及僵體症候群（stiff_man syndrome).副癌症候群，例如小腦變性及腦脊趙炎；cNS 損傷；偏頭痛；及中風。 (6) 其它組織及全身性疾病_動脈粥瘤硬化、後天性免疫 缺乏症(AIDS)、紅斑性狼瘡、全身性紅斑、狼瘡、橋本氏 甲狀腺炎(1^8111111〇1〇’8出71'〇1(1出8)、第1型糖尿病、腎病症候 群、嗜伊紅血球增多性筋膜炎、高IgE症候群、痳瘋瘤性痳 瘋、及原發性血小板減少性紫斑症；手術後黏連、及敗血 14 201006824 病0 心臟、肝、肺、骨趙、 ;及慢性移植物對抗 (7)同種異體移植物排斥_例如腎、 皮膚及角膜移植後之急性與慢性排斥 宿主之疾病。 ⑻癌-尤其非小細胞肺癌(Nsclc)、惡性黑色瘤、攝護 腺癌及鱗狀肉瘤、與腫瘤轉移、 非黑色瘤皮膚癌及化學預 防之轉移；

⑼疾病-其中血管生成係與增高的cxcr2趨化激素含 量有關之疾师物NSCLC：，尿雜視網膜病）； (10) 纖維囊泡症； (11) 燒傷及慢性皮膚潰瘍； (12) 生殖疾病-例如排卵、月經及植入、早產、子宮内 膜異位； (13)再灌注性傷害_心臟、腦、末梢肢體及其它器官内 之再灌注性傷害、動脈粥瘤硬化之抑制。 因此，本發明提供適用於治療之如上文定義的式（1)化 合物或其藥學上可接受鹽、溶劑化物或活體内可水解酯。 最好使用本發明該化合物以治療其中該趨化激素受體 屬於CXC趨化激素受體亞科之疾病，該標靶趨化激素受體 更佳為CXCR2受體。 可經本發明該化合物處置之特定病症為癌、其中血管 生成係與升高之CXCR2趨化激素含量有關的疾病、及炎 症，諸如氣喘、過敏性鼻炎、（:OPD、類風濕性關節炎、牛 皮癬、發炎性腸病、骨關節炎或骨質疏鬆症。當獨立或以 15 201006824 任何組合攝取上料病症/賴時，其代表本發明之獨立實 施例。 亦可使用本發明該化合物以處置其中該趨化激素受體 屬於CCR趨化激素^體亞科的疾病，該標祕化激素受體 更佳為CCR2b受體。 在另方面中，本發明提供適於作為藥物之如上 義的式（1)化合物或其藥學上 ^ t 疋 六眾予上了接受鹽、溶劑化物或 可水解酷。 體内 m 今、甘π從伢如上文定義之式（ 物或其藥學上可接*鹽、溶劑化物或活體内可水解 用於β療其中趨化激素受體活性之調節係有利之人類 或病症的藥物之用途。 在—另方面中，本發明提供如上文定義之式（1)化 物或其樂學上可接受鹽、溶劑化物或活體内可水解龜作 用於治療氣喘、騎性鼻炎、癌、COPD、類風驗關節炎 牛皮癖發尺性腸病、骨關節炎或骨質疏鬆症之藥物的用途 。，另方面中，本發明提供如上文定義之式（1)化合j t藥學上可接受鹽或溶劑化物在製備用於治療之藥物1 在又另一方面中’本發明提供如上文定義之式 f /、、上可接受鹽或溶劑化物在製備用於治療其中趨 化激素活14之調節係有利之人類疾病或病症的藥物 在又另一太品士 丄 逮。 万面中，本發明提供如上文定義之式（1 物志豆藥敏， ^^ 〆/上可接受鹽或溶劑化物在製備用於治療氣喘、 16 201006824 過敏性鼻炎、癌、CQPD、類風濕性_炎、牛皮癖、發炎 性腸病、骨_炎或骨質疏鬆症之藥物的用途。 ，，就本專利4明書而言，除非另有特·示，該名詞“治 f亦包括預防”。該等名詞“治療性，，及“治療上，，應該相應 地經解釋。

本發明又進-步提供一種治療其中該趨化激素可結合 至趨化激她別為CXCR2)受體之_化激素媒介的疾病 之方法，其包括對患者投與轉上有效量之如上文定義的 式⑴化合物或其藥學上可接受鹽或溶劑化物。 本發明亦提供一種治療正羅患炎症，特別為氣喘、過 敏性鼻炎、COPD、類風祕關節炎、牛皮癖、發炎性腸病、 骨關節炎或骨質疏鬆症、或妹,€、該疾狀餘的患者之 方法’其包括對該患者投與治療上有效量之如上文定義的 式化合物或其藥學上可接受鹽或溶劑化物。 就上述冶療用途而言，所投與劑量當然可根據所使用 Q物技藥方式、所欲治療法及欲治療之病症而不同。 該式⑴化合物及其藥學上可接受鹽或溶劑化物可立使 用’但是通常可以以其巾式⑴化合物•溶劑化物(活性成 份)係與藥學上可接受佐劑、稀釋劑或制結合之藥學組成 物形式投與。根據投藥方式，以總組成物之重量為基準計， 該藥學組成物較佳包含自〇.〇5至99重量％(%w)、更佳自〇〇5 重量％、又更佳自⑽至7〇重量％且甚至更佳自〇職 5〇重量％活性成份。 本發明亦提供含與藥學上可接受佐劑、豨释劑或載劑 17 201006824 之藥學組成物、,.σ合之如上文定義的式⑴化合物或其藥學上 可接跫鹽或溶劑化物的藥學組成物。 本發月進纟提供一種用於製備本發明藥學組成物之 方法’其包括以藥學上可接受佐劑、稀釋劑或載劑混合如 上文定義之式⑴化合物或其藥學上可接受鹽或溶劑化物。 該等藥學組成物可以呈溶液、懸浮液、七氟烧烴氣溶膠及 乾散劑調配物之形式局雜投與（例如投至肺及/或氣道或 皮膚），或王身性投與，例如藉口服鍵劑、膠囊、糖浆、散 劑或顆粒'或藉非經腸投與溶液或懸浮液、或藉皮下投 參 藥或藉直腸投與或經皮投與塞劑。最好口服本發明該等 化合物。 — #除其作為治療藥物之用途外，該等式⑴化合物及其等 之藥學上可接受鹽或溶劑化物亦可作為用於評估實驗室動 物二諸如描、狗、兔、猴子、大鼠及小鼠體内之趨化激素 調節讀的作用之活體外及活體内試驗系統的研發及標準 化之藥理具以作為研究新治療劑的_部份。 ^本發明進—步係有關於合併療法，其中式⑴化合物或 其藥學上可接文鹽或溶劑化物、或含式⑴化合物之藥學組 成物或調配物係與用於治療氣喘、過敏性鼻炎、癌、COPD、 類^•濕性關知炎、牛皮癬、發炎性腸炎、大腸激躁症、骨 關即炎或骨質疏鬆症中之任一種的治療法及/或藥劑同時 或相繼投與。 、更詳細地，就該等炎症：類風濕性關節炎、牛皮癖、 發炎性腸病、大腸激躁症、C⑽、氣喘及過敏性鼻炎而言， 18 201006824 本發明該等化合物可以與下述藥劑併用：諸如TNF-α抑制 劑，諸如抗-TNF單株抗體（諸如雷米卡德（Remicade)、 CDP-870及D#7)及TNF受體免疫球蛋白分子，諸如依坦赛 特(Etanercept)(Enbrel)、非選擇性COX-1/COX-2抑制劑（諸 如吡羅昔康(piroxicam)、雙氣芬酸(diclofenac))、丙酸(諸如 納普森（naproxen)、氟比洛芬（flubiprofen)、芬諾洛芬 (fenoprofen)、酮洛酚(ketoprofen)及依布洛芬(ibuprofen))、 芬那酸鹽(fenamate)(諸如曱芬那酸(mefeiiamic acid))、,嗓 美辛（indomethacin)、舒林酸(suiindac)、阿帕腙(apazone))、 "比唑酮（諸如苯基丁腙(phenylbutazone))、柳酸鹽（諸如阿斯 匹靈(aspirin))、COX-2抑制劑（諸如米羅昔康(meloxicam)、 塞力可西（celecoxib)、羅飛可西（rofecoxib)、瓦德可西 (valdecoxib)及依托可西（etoricoxib))、低劑量阿美蘇嗓吟 (methotrexate)、雷夫米德（lefunomide);塞里松耐德 (ciclesonide);羥基氣喳、d-青黴胺、金諾芬(auranofin)或非 經腸或口服金。就發炎性腸病及大腸激躁症而言，另外合 適的藥劑包括舒沙拉啡(81^1^&1&211^)及5-八5八8、局部及 全身用類固醇、免疫調節劑及免疫抑制劑、抗生素、益生 菌（probiotic)及抗-整合素。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：白三烯素生物合成抑制劑、5-脂肪氧合酶(5-LO) 抑制劑或5-脂肪氧合酶活化蛋白質（FLAP)拮抗劑，諸如齊 留通（zileuton) ; ABT-761 ;芬留通（fenleuton);替波札林 (tepoxalin);阿波特（Abbott)-79175 ;阿波特-85761 ;N-(5- 19 201006824 取代)-嘍吩-2-烷基磺醯胺；2,6-二-第三-丁基酚腙；甲氧基 四氫°底喃，諸如齊卡(Zeneca)ZD-2138 ;化合物SB-210661 ; 吡啶基-取代之2-氰基萘化合物，諸如L-739,010 ; 2-氰基喳 啉化合物，諸如L-746,530 ;吲哚及喳啉化合物，諸如 MK-591、MK-886、及BAYX1005。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與用於選自 由以下化合物所組成之群組之白三烯素LTB.sub4、 LTC.sub4.、LTD_sub4.、及LTE.sub4的受體括抗劑之組合： 吩嗔畊(phenothiazin)-3-酮，諸如L-651，392 ;甲脒化合物， 諸如CGS-25019c ;苯并哼拉敏(benzoxaiamine)，諸如翁塔 唑拉（ontazolast);苯羧醯亞胺醯胺，諸如BIIl284/260 ;及 化合物’諸如扎非留卡（zafirlukast)、阿佈留卡(ablukast)、 蒙特留卡（montelukast)、普倫留卡（praniukast)、波留卡 (verlukast)(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、依拉留卡 (iralukast)(CGP45715A)、及BAYX7195。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與PDE4抑 制劑，其包括變異體PDE4D之組合。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與抗組織胺 的H.subl受體拮抗劑’諸如西替利π井(cetirizine)、羅拉塔咬 (loratadine)、迪斯羅塔咬（desloratadine)、飛索芬咬 (fexofenadine)、阿司咪唑（astemiz〇le)、阿吉拉斯丁 (azelastine)、及氯芬拉胺（chlorpheniramine)之組合。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與胃保護性 H2受體拮抗劑之組合。 201006824 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：α丨-及απ腎上腺素能受體促效劑血管收縮劑擬交 感神經作用劑’諸如丙基海西尊(propylhexedrine)、苯基腎 上腺素(phenylephrine)、苯基丙醇胺、擬麻黃素、拿法唑啉 (naphazoline)鹽酸鹽、奥昔美唾琳(OXymetazoline)鹽酸鹽、 四氫嗤琳（tetrahydrozoline)鹽酸鹽、賽浴》坐琳 (xylometazoline)鹽酸鹽、及乙基正腎上腺素鹽酸鹽。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合.異丙托漠錢（ipratropium bromide);嘴托漠鍵 (tiotropium bromide);氧托演錢(oxitropium bromide) ; π底侖 西平(pirenzepine);及特能吉品（teienzepine)。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：々r至/3 4_腎上腺能受體促效劑，諸如美他丙腎上 腺素（metaproterenol)、異丙腎上腺素（iSOpr〇terenol)、異丙 去甲腎上腺素(isoprenaline)、沙丁胺醇(albuterol)、沙布塔 莫（salbutamol)、福莫特羅（form〇terol)、沙美特羅 (salmeterol)、特布塔林（terbutaline)、歐西普那林 (orciprenaline)、必妥特羅(bitolterol)曱磺酸酯、及吡布特羅 (pirbuterol);或甲基黃嘌呤素，其包括茶鹼及胺基茶鹼；色 甘酸鈉（80(!丨111110'01110§1又〇316);或毒簟鹼受體(]^1、]^2、及 M3)拮抗劑。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與似騰島素 生長因子第I型（IGF-1)類似物之組合。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下具有 21 201006824 減少的全身性副作用之吸入性腎上腺促糖皮質激素之組 合：諸如潑尼松（prednisone)、氫化潑尼松、氟西耐德 (flunisolide)、安西諾隆(triamcinolone)縮丙酮化物、貝克羅 美松(beclomethasone)二丙酸酯、布地索耐德(budesonide)、 氟替卡橫(fluticasone)丙酸酯、及莫美塔松(mometasone)糠 酸酯。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：基質金屬蛋白酶(MMP)之抑制劑，亦即基質溶素 (stromelysin)、膠原酶、及明膠酶、以及聚蛋白多醣酶 (aggrecanase);尤其膠原酶-l(MMP-l)、膠原酶-2(MMP-8)、 膠原酶-3(MMP-13)、基質溶素-1(ΜΜΡ-3)、基質溶素 -2(MMP-10)、及基質溶素-3(MMP-11)及MMP-12。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下具有 趨化激素受體機能之其它調節劑的組合：諸如CCR1、 CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6 ' CCR7、CCR8、CCR9、CCR10及CCR11(就該C-C科而言）； CXCR1、CXCR3、CXCR4及CXCR5(就該C-X-C科而言）、 及CX3CR1(就該c-x3-c科而言）。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：抗病毒劑，諸如比拉賽特(Viracept)、AZT、艾赛 可威(aciclovir)及方赛可威(famciclovir)、及防腐化合物，諸 如貝能特（Valant) 〇 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：心血管藥劑，諸如鈣通道阻斷劑；降脂劑，諸如 201006824 司他>丁 (statin) ’纖維酸鹽；冷-阻斷劑；ACE抑制劑；血管 緊縮素(Angi〇tensin)-2受體拮抗劑及血小板凝聚抑制劑。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合：CNS藥劑，諸如抗抑制劑（諸如舍曲林(sertraline)、 抗帕金森氏症（Anti-Parkinsonian)藥物（諸如迪普雷尼 (deprenyl)、L-多巴(d〇pa)、雷峻(Requip)、米拉佩(Mirapex)、 MAOB抑制劑’諸如色黑幾（selegine)及拉沙幾啉 (rasagiline)、comP抑制劑，諸如塔斯莫（Tasmar)、A 2抑制 劑、多巴胺再吸收抑制劑、NMDA拮抗劑、菸鹼促效劑、 多巴胺促效劑、及神經元氧化氮合成酶之抑制劑）、及抗阿 滋海默氏症藥物，諸如道佩吉（d〇nepezil)、四氫胺基吖咬 (tacrine)、COX-2抑制劑、丙戊茶驗(pr〇pent〇fylline)或美崔 方納特(metryfonate)。 本發明又進一步係有關於本發明該化合物與以下藥劑 之組合.⑴類騰蛋白梅抑制劑；⑴)血小板活化因子(pAF) 拮抗劑，（in)介百素轉化酶(ICE)抑制劑；（iv)iMPDH抑制 劑；（v)粘連分子抑制劑，其包括VLA_4#抗劑；（vi)組織蛋 白酶(cathepsin); (vii)MAP激酶抑制劑；（viii)葡萄糖_6_磷酸 脫氫酶抑制劑；（ix)激肽_B.subl.-及B.sub2.-受體拮抗劑；（X) 抗痛風劑，例如秋水仙素(colchicine;); (xi)黃嘌呤素氧化酶 抑制劑，例如異嘌呤醇；（xii)尿酸促排劑，例如普羅本西 德（probenecid)、確咐;酮（suifinpyraz〇ne)、及苯并溴酮 (benzbromarone);⑻山生長激素促分泌素；（xiv)轉形生長 因子（TGF石）；（xv)血小板衍生之生長因子（pDGF) ; (χνί) 23 201006824 纖維組織母細胞生長因子，例如驗性纖維組織母細胞生長 因子（bFGF) ; (xvii)粒性細胞巨噬細胞集落刺激因子 (GM-CSF) ; (xviii)辣椒驗（capSaicin)乳劑；（χιχ)選自由 NKP-608C、SB-233412(特内坦（talnetant))、及D-4418所組 成之群組的心動促速素（Tachykinin)NK.subl.及NK.sub3 ; (XX)選自由UT-77及ZD-0892所組成之群組的彈性蛋白酶抑 制劑；（xxi)TNFa轉化晦抑制劑(TACE) ; (xxii)誘發性氧化 氮合成酶抑制劑（iNOS)或（xxiii)在TH2細胞上表現之化學 誘質受體-同源性分子、（CRTH2拮抗劑）。 ® 本發明該化合物亦可併用骨質疏鬆症藥劑，諸如羅拉 西紛（roloxifene)、卓羅西盼（droloxifene)、拉索夫西酴 (lasofoxifene)或福索馬克斯（fosomax)及免疫抑制劑，諸如 FK-506、雷帕黴素(rapamycin)、環孢黴素、咪唑硫嘌呤、 及阿美蘇嗓吟。 本發明該等化合物亦可併用用於治療骨關節炎之現有 治療劑。欲併用之合適藥劑包括標準非類固醇消炎劑（下文 _ 稱為NSAID)，諸如吡羅昔康；雙氣芬酸；丙酸，諸如納普 森、氟比洛芬、芬諾洛芬、酮洛酚及依布洛芬；芬那酸鹽， 諸如甲芬那酸；吲嵘美辛；舒林酸；阿帕腙 ;η比嗤鲷，諸 如笨基丁腙；柳酸鹽，諸如阿斯匹靈；COX-2抑制劑，諸 如塞力可西、瓦德可西、羅飛可西及依托可西；止痛藥及 關節内治療劑，諸如皮質類固醇；透明質酸，諸如海能 (hyalgan)及辛比斯克(synvisc);及Ρ2χ7受體拮抗劑。 本發明該化合物亦可併用用於治療癌症之現有治療 24 201006824 劑。欲併用之合適藥劑包括： ⑴如在醫學腫瘤學中所使用之抗增生/抗腫瘤藥物及其組 合，諸如烧化劑（例如順銘（cis-platin)、卡始（carboplatin)、 環填酿胺、氮芥、美發能（melphalan)、苯丁酸氮芬 (chlorambucil)、白消胺(busulphan)及亞靖脈）；抗代謝產物 (例如抗葉酸劑，諸如It喊咬，例如5-氟尿嘴咬及替加氟 (tegafur)、拉替崔西(raltitrexed)、阿美蘇蝶吟、阿拉伯糖胞 苷（cytosine arabinoside)、經脲、傑西塔賓（gemcitabine)及太 ❹ 平洋紫杉醇(paclitaxel)(Taxol®);抗腫瘤抗生素（例如蔥環 類抗生素(anthracycline)，例如艾黴素(adriamycin)、布里歐 黴素（bleomycin)、小紅每（doxorubicin)、道諾黴素 (daunomycin)、表柔黴素（epirubicin)、泛達黴素 (idarubicin)、絲裂黴素（mitomycin)-C、放射菌素 (dactinomycin)及光神黴素(mithramycin);抗有絲分裂劑（諸 如長春花生物驗vinca alkaloid，例如長春新驗 (vincristine)、長春花驗(vinblastine)、長春地辛（vindesine) ❿ 及溫諾賓（vinorelbine);類毒素(taxoids)，例如紫杉紛(taxol) 及剋癌易（taxotere));及拓樸異構酶抑制劑(例如表鬼臼素素 (epipodophyllotoxin)，例如鬼臼乙叉甙（etoposide)及替尼泊 戒(teniposide)、安沙克靈（amsacrine)、拓樸替肯(topotecan) 及喜樹驗(camptothecin)); (ii)細胞生長抑制劑，諸如抗雌激素藥劑（例如泰莫西芬 (tamoxifen)、托米芬(toremifene)、拉羅西芬(raloxifene)、卓 羅西芬(droloxifene)及碘西芬(iodoxyfene)、雌激素受體下調 25 201006824 劑（例如夫貝斯尊(fulvestrant))、抗雄激素藥劑（例如必卡酿 胺（bicalutamide)、氟他醯胺（flutamide)、尼魯特醢胺 (nilutamide)及氣羥甲烯孕酮(cyproterone)乙酸酯）、LHRH拮 抗劑或LHRH促效劑（例如戈舍瑞林(goserelin)、亮普瑞林 (leuprorelin)及布舍瑞林(buserelin))、黃體脂酮（例如甲地孕 酮（megestrol)乙酸酯）、芳香酶抑制劑（例如阿那斯唑 (anastrozole)、雷托π坐（iej；roz〇ie)、帕拉。坐（voraz〇ie)及依美 斯坦（exemestane))及5 α -還原酶抑制劑，諸如費納德 (finasteride)； ❿ (iii) 可抑制癌細胞侵襲之藥劑（例如金屬蛋白酶抑制劑，例 如馬莉瑪斯特(marimastat);及尿激酶纖維蛋白溶酶活化劑 受體機能之抑制劑）； - (iv) 生長因子機能之抑制劑，例如包括生長因子抗體、生長 因子受體抗體之抑制劑（例如抗_erbb2抗體；曲妥朱單 (trastuzumabHHerceptinTM]、及抗_erbbl 抗體：塞突西單 (cetuximab)[C225])、法泥基(farneSyi)轉移酶抑制劑、酪胺 酸激酶抑制劑及絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑，例如上皮細胞 © 生長因子科之抑制劑（例如EGFR科酪胺酸激酶抑制劑，諸 如M-(3-氣-4-氟笨基)_7_甲氧基_6_(3_嗎琳丙氧基)唆”坐琳_4_ 胺(吉非替尼(gefitinib)，AZD1839)、仏(3_乙炔基笨基)6,7-雙(2-甲氧乙氧基)咬D坐琳_4_胺(俄羅替尼(ed〇Unib，〇si_頂） 及6_丙烯醯胺基-N-(3-氣-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉丙氧其丨嗎啾 销⑴叫《如血小板之咖子科== 例如肝細胞生長因子科之抑制劑； 26 201006824 (V)抗血管生成劑（諸如可抑制血管内皮細胞生長因子之藥 劑，例如抗血管内皮細胞生長因子抗體：具戈西朱單 (bevacizumab)[AvastinTM];國際專利申請案WO 97/22596、 WO 97/30035、WO 97/32856及 WO 98/13354)中所揭示之化 合物）、及可藉其它機制而作用之化合物（例如里諾米德 (linomide)、整合素a v卢3機能之抑制劑、及血管抑制素 (angiostatin); (vi) 血管損壞劑，諸如康布雷司他汀(Combretastatin)A4及國 際專利申請案 WO 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、 WO 01 /92224、W002/04434及 WO 02/08213 中所揭示之化合 物； (vii) 反訊息治療劑，例如針對上述目標之治療物，諸如bis 2503抗-ras反訊息劑； (viii) 基因治療法，其包括取代異常基因，諸如異常p53或異 常BRCA1或BRCA2之方法、GDEPT(基因導向之酶前藥治 藝療)法，諸如使用胞嘧啶去胺酶、胸腺核苷激酶或細菌硝基 還原酶之方法、及增加患者之化學療法或放射療法的耐受 性之方法’諸如多重藥物抗藥性基因治療法；及 ⑽免疫治療法，其包括，例如可增加患者腫瘤細胞之免疫 原性的活體外及活體内方法’諸如經細胞素諸如介面素 2、介百素4或粒性細胞·£私胞集落雜因子轉移感染之 方法、降低T細胞無力之方法、使用經轉移感染之免疫細 胞，諸如經細胞素轉移感染之樹狀細胞的方法、使用經細 胞素轉移感染之腫瘤細胞株的方法、及使用抗個體基因型 27 201006824 抗體之方法。 現在可參考（但不限於）以下具體說明、實例、生物資料 及參考例以進行闡明： 【實施方式】 較佳實施例之詳細說明 具體說明 與任一種下述已知化合物比較，該式（1)化合物具有至 少一改良藥理性質（見表丨及2)。 自得自人類肝細胞及得自主要由於血漿蛋白質結合性 之人類血液結合性程度之按比例的活體外固有清除率（匸^加) 數據預測人類肝代謝組份清除率（見Chein Biol Interact. 2007, 168(1)，2-15)。肝之充份攪拌模式為用於自使用肝細 胞所測定之固有清除率（CLint)預測該肝内之血液清除率的 模式（見Drug Metab Dispos· 2005，33(9)，1304-11)。該模式 通常描述為： A,B,CL^ 0 1000.(B/P).XC ^ 其中A為每克肝之肝細胞百萬份數，b為每公斤體重之肝克 數（這些參數之標準曲線為A=120且B = 22.1)，fuhuman為人 類血漿中之游離態部份，比心為該肝細胞基質内之游離態部 份且B/P為人類血液中之血液對血漿濃度比。 自上述模式可知降低活體外人類肝細胞固有清除率可 降低人類代謝清除率（CL)。降低代謝清除率(CL)可增加挪 28 201006824 除半衰期（v2)，因此可藉考慮以下眾所熟知之方程式瞭解該 藥物之作用期：

Vd X 0.693 t\/2 =-

CL 排除半衰期(ty為達到半血漿濃度所需之時間（在與該 血漿濃度-時間分佈之最大面積有關之階段中）而乂<1為分佈 之體積（見 Clinical Pharmacokinetics, concepts and applications, 3rd edition. 1995. by M Rowland and T. N. Tozer. Publisher Williams and Wilkins 並見 Current Drug Matabolism. 2006, 7(3)，251-64)。 自上文可知較低的清除率（CLint)及(CL)可影響獲得藥 物之治療濃度所需之劑量及給藥頻率。較低的（CL)意指獲 得治療濃度所需之較低藥物劑量。 更詳細地，得自WO 2004/011443之化合物（亦即實例 21、及39-42(見表1))與式（1)化合物（見表2)的比較顯示該式 (1)化合物兼具可作為其肝代謝安定性之評估標準的改良效 力及減少的肝固有清除率(Clint=2.1)。 更明確地，得自WO 2004/011443之實例21(pIC5〇=5.6)(表 1)的肝固有清除率值（Clint=2.3)低於式（1)化合物 (Clint=2.1)。然而，本化合物之效力顯著低於實例39-42化合 物（316-1000倍)及式（1)(398倍）。 得自WO 2004/011443之實例39-42的一些化合物(表1)中 所包含之結構改質體可得到比式⑴化合物(pIC5〇==8.2)還高之 效力（pIC5〇=8.1-8.6)。然而，如藉其肝固有清除率高於得自 WO 2〇〇4/022443之實例21化合物(2.2-7.4倍）及式⑴化合物 29 201006824 (2.4-8.1倍）而證明，實例39-42化合物具低代謝安定性。此外， 該式（1)化合物在人類血漿内具有合適的游離態部份。已預期 人類血漿内之改良性游離態部份可改良人類體内之總全血 效力。 表1 WO 2004/011443中所揭示之化合物的結構及藥理輪廓 實例編號 (結構） 效力配位 體-結合性 分析pIC5〇 人類肝細胞固有 清除率分析CLint (微升/分鐘/106 個細胞） 大鼠口服 生體可用 率 F(%) 溶度S (毫克/毫升） 人類血漿 蛋白質結 合性PPB (游離態％) 21 5.6 2.3 - - - 39 Η人0H 8.4 5.1 44 342 1.0 40 Η人。H 8.6 9 - - <0.2 41 h人。h 8.5 12 - 372 0.6 42 hn^〇H 8.1 17 - - <0.2 201006824 表2 式（1)化合物之結構及藥理輪廓 實例蝙號 (結構） 效力配位 體-結合性 分析pICso 人類肝細胞固有 清除率分析CLinl (微升/分鐘/106 個細胞） 大鼠口服 生體可用 率 F(%) 溶度S (毫克/毫升） 人類血漿 蛋白質結 合性PPB (游離態％) 1 1 〇Ws^F — 8.2 2.1 49 317 1.9

除非另有指定，本發明現在可藉以下非限制性實例而 闌明，其中： (1) 當提出時，核磁共振(NMR)頻譜係在Varian Unity Inova 300或400MHz譜議上測得。〗h NMR數據係以 用於主要診斷質子之6值形式列舉並以相對於作 為内標準物的四甲基矽烷（TMS)之每百萬之份數 (ppm)表示。 (ii)質譜測定（MS)據係在 Finnigan Mat SSQ7000 或 Micromass Platform譜儀上測得。 (i i i)該等實例及方法之標題及副標題化合物係使用得 自 Advanced Chemical Development Inc (Canada)之 IUPACACD命名方案加以命名。 (iv)使用矽石柱進行正向柱式層析法及正相HPLC。使 用具有Waters 600泵控制器、Waters 2487偵檢器及 Gilson FC024 溶離份收集器之 Waters Micromass LCZ、或 Waters Delta Prep 4000 或 Gilson Auto Purification System，利用對稱NovaPak或Ex-Terra 31 201006824 逆向矽石柱進行逆向高壓液相層析(HPLC)純化。 (v) 使用AA-1000偏光計測定旋光度。於20°C溫度及鈉D 線589.3奈米之波長下測定[a]D。 (vi) 使用PANalytical CubiX PRO機器進行第1-6圖中所 示之X射線粉末繞射(XRPD)分析。在該PANalytical CubiX PRO機器上，在每〇.〇2。增量之1〇〇秒曝光 下，在2°至40° 20的掃描範圍内以Θ-20構型收集 該數據。藉於45kV及40mA下操作之銅長細聚焦管 而產生X射線。該銅X射線之波長為1>5418埃（入）。 @ 在於其上放置〜2毫克該化合物之零背景座上收集 該數據。該座係由矽單晶製成，其業經沿著非繞射 . 平面切割，然後以光學上平拋光劑拋光。入射於本 表面上之X射線係藉布拉格(Bragg)消光而使其無 效。所有確定之波峰準確性保持在土〇1 p。 (vii) 使用以下縮寫：

Xphos 2-二環己基-膦基_2’，4，，6,三異丙基u，聯笨 AcOH乙酸 _ CHC13氣仿 DCM 二氯甲烷 DMF N，N-二甲基甲醯胺 DMSO二甲基亞礙

Et20 二乙醚

EtOAc乙酸乙酯

MgS04硫酸鎂 32 201006824 NMP 1-甲基'>比略咬-2-鲷 THF 四氫呋喃 H20 水 NH3 氨 TFA 三氟乙酸

MeOH曱醇

EtOH 乙醇 實例1 N-(2-[(2’3-二氟苄基)硫]_6_{[(1r，2r)_2,3_二羥基d 甲基丙 基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉（azetidine)-1 -磺醯胺

ι)Η(45)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙酮

添加檸檬酸(70克，0.37莫耳)在水(67毫升）中之溶液至 (S)2,2-二甲基_ι，3·二氧伍圜_4_羧酸鉀(j Med. Chem. 1991， 34,⑴’ 392-397)(75克’ 0.41莫耳)在水(89毫升)及乙酸乙酯 (600毫升）中之攪拌溶液内。分離該有機溶液並以乙酸乙酯 (3x300毫升）萃取水性溶液。在MgS〇4上乾燥合併有機萃取 物，過濾，真空濃縮，然後於室溫在高真空下乾燥以得到 清澈油（59克，0.41莫耳）。在攪拌下使游離態酸((4S)-2,2_ 二甲基-1，3-二氧伍圜-4-羧酸）溶解在無水二乙醚(8〇〇毫升） 33 201006824 内並在氮氣氛下冷却至〇°C。一滴滴添加溴化曱基鎮（在二 乙醚中3M, 200毫升，0.60莫耳）。然後添加另一數量之無 水二乙醚(300毫升），繼而添加另一數量之溴化甲基鎂（在二 乙醚中3M，97毫升，0.29莫耳）。以75分鐘完成添加。於〇 °〇下再攪拌該反應混合物，費時3〇分鐘，然後使其溫熱至 室溫並再攪拌18小時。以5分鐘一滴滴添加乙酸乙酯（91毫 升）’於其間使該溫度自21。(：上升至25。(：，並搜拌該混合 物，費時15分鐘。分批將該反應混合物倒入已預先在冰浴 中冷却至5。(：之水性氣化銨（在730毫升中230克）内，於其 間，該溫度上升至l〇°C。分離有機相對以二乙醚(4χ6〇〇毫 升）萃取水性相。在MgSCU上乾燥合併有機餾份並真空濃縮 (浴溫<2〇C)以得到如淺黃色油之產物（27克，46%)。 *H NMR (400 MHz, CDC13): δ 4.41 (t, 1Η)>4.20 (t, 1Η)^4.00 (dd，1Η)、2.26 (s，3Η)、1.49 (s，3Η)、1.40 (s，3Η)。 ii)(lR)-l-[(4R)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍園 _4-基]-N-[(lR)-l_ 苯基乙基]乙胺

在氮氣氛下以2分鐘一滴滴添加（r)_( α )_甲基苄胺 (29.6克’ 31毫升’ 0 24莫耳）至步驟i)之產物（1_[(4幻_2 2_二 甲基-1,3-二氧伍圜_4_基]乙酮)(27丨克，〇 19莫耳)在無水乙 腈（430毫升）中之攪拌溶液内。當以1〇分鐘一滴滴添加乙酸 (14.6克，13.9毫升，0 24莫耳）時，使該反應混合物在水浴 中冷刼，於其間，維持該溫度在20-23T：之間。再攪拌1〇分 34 201006824 鐘後’以1小時分批添加三乙醯氧基硼氫化鈉（99 7克，〇47 莫耳），維持該溫度在24與26。(：之間。於室溫下攪拌所形成 混合物’費時72小時(超過週末時間將該混合物倒入水性 碳酸氫納中並添加固體碳酸氫鈉直到起泡停止(pH 7_8)為 止。分離有機溶液並以二乙醚(2χ5⑻毫升）萃取水性相。以 水性氣化鈉(300毫升）清洗有機萃取物，在MgS〇4上乾燥， 過遽並真空濃縮以留下雙相油（清澈/黃色)(4 3.5克）。添加異 φ 己燒並分離黏性下層。然後真空濃縮該異己烷萃取物以得 到如淺黃色油之粗產物(43克，92%)。 . 分別使用10.3克及33.6克(R)-(a)-甲基苄胺、與9·4克及 30.8克l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜-4基]乙酮再重複上 述反應以分別得到14.7克及43克粗產物。如以下步驟純化 該等合併粗產物（100.7克）： 藉在石夕石上進行層析法(Biotage，EtOAc :異己烧：三 乙胺20 : 80 : 0.5)而分批(每回約22.5克）純化該非對映異構 φ 性產物。將含該所欲產物（上斑點）之合適溶離份合併成兩各 別批(溶離份1 : 32.9克，及溶離份2 : 19.5克)且分別再進行 層析（溶離份分成2批，溶離份分成1批）以得到如淺黃色油之 副標題化合物(39.2克，33%)。 *H NMR (300 MHz, CDC13): δ 7.31 (m, 4Η) ' 7.23 (m, 1H) > 4.01 (m，2H)、3.84 (m，2H)、2.73 (m，1H)、1.43 (s，3H)、1.36 (s，3H)、1.31 (d，3H)、0.95 (d，3H)。 GC MS純度 100% MS: APCI(+ve) 105(基峰)，234 (M-15)，250[M+H]+ 35 201006824 HPLC MS純度97.5%;(無雜質>〇·8%) [〇:]1)+33.17@ 589奈米，〇=8.35毫克/毫升]^011。 對掌性HPLC純度 100% @ 220奈米。（以6.7 : 3·3 : 90，0.1% AcOH在MeOH中之溶液：0.1% TEA在MeOH : MeOH中之 溶液，1毫升/分鐘，20°C以15分鐘溶析Chirobiotic V柱 4.6x100毫米） iii){(lR>-l-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍園-4-基]乙基}胺曱酸 第三-丁酯

在授拌下’於室溫在4大氣壓下氫化步驟⑴該產物 ((1尺)-1-[(4尺)-2,2-二曱基-1，3-二氧伍圜_4-基]_]^-[(11^)_1_苯 - 基乙基]乙胺)(18.9克，76毫莫耳）、二碳酸二-第三_丁醋（16 9 克’76毫莫耳)及碳載20%氫化把(II)在乙醇(27〇毫升）中之混 合物，費時72小時(超過週末時間）。經由Hyfl〇而過濾該反 應混合物且蒸發該溶劑以得到如無色結晶性固體之副標題 化合物（18.7克，100%)。 © 4 miR (400 MHz，CDCl3): δ 4.56 (bs，1H)、4 〇2 (t + ^ 2H)、3.76 (q + bs，2H)、1.44 (S，9H)、(s, 3H)、！ 34 (s， 3H)、1.15 (d，3H)。 ’ GC MS純度 100% MS: APCI(+ve) 57 (基峰)，23〇 (m_15) [a]D+12.49 @ 589奈米’ c=9 6毫克/亳升Μ· iv)(2R，3R)-3-胺基丁-1，2-二醇鹽酸鹽 36 201006824

在攪拌下以4M 11〇在二噚烷(51毫升）中之溶液一滴滴 處理步驟Hi)該產物{(1R)_H(4R)_2,2_二甲基_13二氧伍園 4基]乙基}胺曱酸第二-丁酯)(ι〇克，41毫莫耳)在曱醇(Μ毫升) 中之溶液，費時10分鐘，在水浴下維持溫度在21<)(：至25艺之 間，並於室溫下攪拌該混合物，費時18小時。真空移除溶劑， 使殘留物經甲笨共沸兩次，然後在高真空下乾燥以得到保有少 量殘留溶劑之如黃色黏性樹脂的副標題化合物(73克）。 咕 NMR (300 MHz, DMSO): δ 7.79 (bs，3H)、3.67 (m，1H)、 3.42 (dd，1H)、3·30 (m，2H)、1·1〇 (山 3H)。 v)(2R，3R)-3-({6-氣-2-[(2,3-二氟苄基)硫]嘧啶_4_基}胺基）丁 -1,2-二醇

於回流在攪拌及氮氣氛下加熱步驟iv)該產物 ((2R，3R)-3-胺基丁-1,2-二醇鹽酸鹽）(3.3克（以自NMR分析 測得之75重量％為基準計），2.5克，17毫莫耳）、4,6-二氯 -2-[(2,3-二氟苄基)硫]嘧啶(W0-2004/011443)(5.0克，16毫莫 耳)及碳酸氫鈉(4.4克，53毫莫耳)在乙腈（80毫升）中之混合 物，費時18小時。使該反應混合物冷却至室溫，真空移除 該溶劑並使殘留物分溶在水與乙酸乙酯之間。分離有機相 並經水及鹽液清洗，然後在MgS04上乾燥，過滤並真空濃 37 201006824 縮以得到黃色油（7.5克）。在矽石上藉層析法(Biotage，乙酸 乙酯：異己烧8 : 2)而純化該油以得到如白色發泡體之產物 (5.7克，95%)。 lH NMR (300 MHz, DMS0): δ 7.70 (d, 1Η) ' 7.32 (m, 2H) ' 7.15 (m，1H)、6.32 (s，1H)、4.83 (d，1H)、4.59 (t，1H)、4.37 (q, 2H)、4.21 (bm，1H)、3.52 (m，ih)、3.34 (m，2H)、1.02 (d， 3H)。 HPLC MS 純度 100% MS: APCI(+ve) 376/378 [M+H]+ ® 丫聰-(2-[(2,3-二氟节基)硫]-6-{[(1尺，211)-2,3-二羥基-1-甲基 丙基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉_i_磺醯胺

於105 °C在攪拌及氮氣氛下加熱步驟v)該產物 ((2R，3R)-3-({6-氣-2-[(2,3-二氟节基)硫]嘴啶_4_基}胺基）丁 -1,2-二醇）(5.3克，14毫莫耳）、四氫吖唉小確醯胺 (W0-2004/011443)(2.7克，19毫莫耳）、鈀(π)三（二亞苄基丙 酮）二鈀(0)(0.82克）、XPhos(0.82克）及碳酸铯(6.4克，20毫 莫耳)在無水二噚烷(85毫升）中之混合物，費時9〇分鐘。使 該混合物冷却至室溫，添加乙酸（13毫升）並真空移除該溶 劑。在水與乙酸乙酯之間分溶殘留物，並分離有機餾份， 經水及鹽液清洗，在MgS〇4上乾燥，過濾並真空濃縮以得 到紅色發泡體（10.0克）。藉層析法（Si〇2，EtOAc)而純化該 38 201006824 產物共兩次以得到黃色發泡體’使其懸浮在DCM中，回流 10分鐘，然後在攪拌下使其冷却至室溫，費時一夜。過濾 固體並在真空下乾燥以得到如無色固體之標題化合物，其 被稱為結晶型改質物A。 lH NMR (400 MHz, DMSO): δ 10.49 (s, 1Η) > 7.35 (m, 2H) ' 7.14 (m，1H)、5.99 (s，1H)、4_71 (s，1H)、4.53 (s，1H)、4.39 (q，2H)、4.17 (bs，1H)、3_88 (t，4H)、3.48 (m，1H)、2_12 (m， 2H)、1.04 (d, 3H)、3.33 (m (藉HOD信號而部份遮蔽），2H) HPLC MS純度99.2% ; MS ： APCI(+ve) 476 [M+H]+ 元素分析：實測值：C：，45.32; H，4.86; N，14.79; S，13.47%。 [C18H23N5O4S2F2]之計算值：C，45.46; H，4.87; N，14.73; S， 13.48%。 m.p. 116-116.5°C。

[a]D+28.3 @ 589奈米，c=0.972毫克/毫升MeOH ^ 對掌性HPLC純度98.3% @ 220奈米（於40°C下以90分鐘使 ❿ 用90 : 10，0.1%TFA在異己烷：異丙醇中之溶液（1毫升/分 鐘）溶析。1^以1〇6100柱4.6\250毫米）。於室溫下，藉在水 (150微升）中漿化該材料（10.8毫克）而改良改質物a之結晶 性’費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉XRPD而分 析。改質物A之XRPD圖示於第1圖中。改質物A之部份特性 波峰示於表3内。 39 201006824 表3.改質物A之部份特性波峰 P〇s.[°2Th.l d-間隔[A] 6.7 13.1 8.8 10.0 11.6 7.6 13.5 「6.5 17.5 5.1 改質物B之製法為於室溫下，在環己烷(70微升）中 藉漿化改 質物Α(8·9毫克）’費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉 XRPD而分析。改質物Β之XRPD圖案示於第2圖中。改質物 Β之部份特性波峰示於表4内。亦藉於室溫下在異丙醇内漿 參 化改質物Α並於7〇。(：下在己烷、環己烷、水或甲苯中漿化改 質物A，共費時一週而製成改質物B。 - 表4.改質物B之部份特性波峰 P〇s.[°2Th.] d-間隔[A] 7.1 12.5 11.7 7.6 15.3 5.8 22.1 4.0 改質物C之製法為於室溫下在二噚烷(5〇微升）中漿化改質 物A(9.6毫克），費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉 參 XRPD而分析。該改質物C之XRPD圖案示於第3圖中。改質 物C之部份特性波峰示於表5内。 表5.改質物C之部份特性波峰

Pos.[°2Th.] d-間隔[A] 8.4 10.5 14.7 6.0 15.1 5.9 15.7 5.6 16.8 5.3 改物質D的製法為於室溫下在乙酸乙酯（5〇微升）中漿化改 40 201006824 質物A(9.1毫克），費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉 XRPD而分析。該物質物D之XRPD圖案示於第4圖中。改質 物D之部份特性波峰示於表6内。亦藉於70°C下在乙酸乙酯 中漿化改質物A，費時一週而製成改質物D。 表6.改質物D之部份特性波峰

Pos.[°2Th.] d-間隔[A] 8.0 11.1 9.0 9.9 9.2 9.6 11.9 7.5 13.9 6.4 改質物E之製法為於室溫下在己烷（100微升）中漿化改質物 A(6.8毫克），費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉 XRPD而分析。該改質物E之XRPD示於第5圖内，改質物E 之部份特性波峰示於表7内。 表7.改質物E之部份特性波峰

Pos.[°2Th.] d-間隔[A] 11.2 7.9 12.8 6.9 18.5 4.8 19.8 4.5 改質物F之製法為於室溫下在二乙醚(70微升）中漿化改質物 A(9.1毫克），費時一週。一週後自該漿體離析固體並藉 XRPD而分析。該改質物F之XRPD圖案示於下文第6圖中， 改質物F之部份特性波峰示於表8内。 表8.改質物F之部份特性波峰

Pos.[°2Th.] d-間隔[A] 8.7 10.2 13.0 6.8 13.3 6.7 16.9 5.3 19.9 4.5 41 201006824 實例2 實例1化合物之另一製法 a)(lR)小[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙胺

添加氫氧化鈀(0.05克，20% Pd)至實例1步驟ii)該產物 ((lR)-l-[(4R)-2,2-二曱基-1,3-二氧伍圜-4-基]-N-[(1R)-1-苯 基乙基]乙胺）(2克’ 8.0毫莫耳）在乙醇（3〇毫升）中之溶液内 並於室溫在5巴壓力下，在攪拌下氫化該混合物，費時16小 時。再添加氫化鈀(0.2克)且進一步氫化該混合物，費時72 小時。經由Hyflo而過濾該混合物並真空濃縮以得到如清澈 油之產物(0.79克，67%)。 lH NMR (400 MHz, CDC13): δ 4.00 (t, 1Η) > 3.93 (mq, 1H) ' 3.81 (t，1H)、3.06 (m，1H)、1.43 (s，3H)、1·36 (s，3H)、1.08 (d，3H)。 GC MS純度 100% MS: APCI(+ve) 44 (基波峰)，i45 [m+h]+ b)6-氣-2-[(2,3-二氟苄基）硫]_n_{(ir)_i_[(4r)_2,2-二甲基 -1，3-二氧伍圜-4-基]乙基丨喊咬_4_胺

於回流在氮氣氛下，在攪拌下加熱步驟a)該產物 ((1R)-卜[(4R)-2,2-二甲基-1，3_二氧伍囿 _4_基]乙胺）(〇4〇克，28 201006824 毫莫耳）、4,6-二氣-2-[(2,3-二氟苄基)硫]嘧啶(WO-2004/011443) (0.77克，2·5毫莫耳)及碳酸氫鈉(0.24克，2_8毫莫耳)在乙猜（12 毫升）中之混合物，費時18小時。使該反應混合物冷却至室溫， 真空移除該溶劑並在水與乙酸乙酯之間分溶殘留物。分離有機 相並經水及鹽液清洗，然後在MgS04上乾燥，過濾並真空濃縮 以得到黃色油（1.2克）。在石夕石上藉層析法(Biotage，乙酸乙醋： 異己烷2.5 : 7·5)而純化該油以得到如清澈黏性油之副標題化合 物（1.1 克 ’ 95%)。 !H NMR (300 MHz, CDC13): δ 7.28 (m, 2Η) > 7.02 (m, 2H) > 6.07 (s, 1H)、5.00 (bs，1H)、4.42 (t, 2H)、4.05 (m, 2H)、3.76 (dd，1H)、1.42 (s，3H)、1.33 (s，3H)、1.17 (d，3H)。 HPLC MS純度 100% MS: APCI(+ve) 416/418 [M+H]+ c)N-[2-[(2,3-一敗卞基）硫]-6-({(1R)_l-[(4R)-2,2-二甲基 -1,3-二氧伍圜-4-基]乙基}胺基)嘧啶_4_基]四氫吖唉小確 醯胺

0nX

在攪拌下，於l〇〇°C/300W最高值下在撒油哭咖>

嘧啶-4-胺）(1」克，25毫莫耳）、四氫ργ唉小磺醯胺 (W0-2004/011443)(0.51克，3.8毫莫耳）、鈀⑹三(二亞苄基 43 201006824 丙酮）二鈀(0)(0.15克）、XPh〇s(0.i5克）及碳酸绝（1 2克，2〇 毫莫耳)在無水二哼烷（15毫升）中之混合物，費時12分鐘。 使該混合物冷却至室溫，添加乙酸(2.4毫升）並真空移除該 溶劑。在水與乙酸乙酯之間分溶殘留物並分離有機餾份， 經水及鹽液清洗，在MgS〇4上乾燥’過濾並真空濃縮以得 到紅色樹膠（1.7克）。藉層析法(Si〇2，EtOAc :異己院1 : 1， 然後EtOAc :異己烷4 : 6)而純化該產物以得到如無色發泡 體之產物（1.0克，75%)。 巾 NMR (300 MHz，CDC13): δ 7.22 (m，1H)、7.02 (m，2H)、 5.99 (s，1H)、4.96 (bd，1H)' 4.35 (q, 2H)、4.15 (m, 2H)、3.98 (t, 4H)、3.78 (dd，1H)、2.24 (m，2H)、1.44 (s, 3H)、1.34 (s， 3H)、1.18 (d，3H)。 HPLC MS純度98.0% ; MS: APCI(+ve) 516 [M+H]+ d)N-(2-[(2,3-二氟节基）硫]-6-{[(lR，2R)-2,3-二羥基-1-甲基 丙基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉-i_績醯胺

於60°C下加熱步驟c)該產物（n-[2-[(2,3-二氟苄基） 硫]-6-({(111)-1-[(411)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍園-4-基]乙基} 胺基)痛啶-4-基]四氫吖唉-1-磺醯胺)(〇 87克，1.7毫莫耳)及 對-甲苯磺酸(0·85克，3.4毫莫耳)在甲醇（19.5毫升)及水(5滴) 中之混合物’費時20小時。蒸發該溶劑並在乙酸乙酯中萃 44 201006824 取殘留物，以水清洗該殘留物，在MgS04上乾燥並蒸發以 得到淺黃色發泡體(0.74克）。藉層析法(Si02, EtOAc:異己 烷9 : 1)而純化以得到發泡體’並於40°C下在高真空下乾 燥，費時18小時以得到如無色固體之標題化合物(0.54克， 67%)。 ]H NMR (300 MHz, DMSO): δ 10.49 (s, 1Η) ' 7.35 (m, 2H) ' 7.14 (m, 1H)、5.99 (s，1H)、4.71 (s，1H)、4.53 (s，1H)、4.39 (q，2H)、4.17 (bs，1H)、3.88 (t，4H)、3.48 (m，1H)、2.12 (m， 2H)、1.04 (d，3H)、3.33 (m (藉HOD信號而部份遮蔽)，2H)。 MS: APCI(+ve) 476 [M+H]+ 元素分析：實測值：C，45.15; H，4.79; N，14.50; S，13.36% [C18H23N504S2F2]之計算值：C，45.46; H，4.87; N，14.73; S， 13.48% 實例3 使用圖解1中所述之方法以較大規模重複實例1該化合物之 製法(如下示）

ο6ηθκο4 分子壘J队23 胺 〇15Η23Ν〇2

ASA嘧啶 分手‘1:475·53 氯嘧啶 Ci5H,eCF2N3〇2S 分子量:375.82

45 201006824 1 2 3 4 5 6 ' H20 ' EtOAc ； (ii)MeMgBr ' Et20 ⑵/乂)-1-笨基乙胺、NaBH(CH3C〇f)3、MeCN ^〇c_20 ' 碳載20% Pd(〇H)2、H INg

f 一°亏烷中 4M HCI、MeOH

“ 二氟苄基)硫]嘯啶、NaHC〇3、MeCN 四虱V唉-1-續醯胺、Pd2(dba)3、X-Phos、Cs2C03、1,4-二噚烷 圖解1 步驟1

⑴檸檬酸,H20, EtOAc (ii) MeMgBr, Et20 C6H9KO4 分子量:184.23 酮 C7Ht2〇3 分子量:144.17

添加檸檬酸(848克’ 4.41莫耳)在水(800毫升）中之溶液 至2,2_二曱基-13-二氧伍圜-4-羧酸鉀(J_ Med. Chem. 1991， 34,⑴，392-397)(900克，4.89莫耳)在水（1062毫升)及乙酸

乙酯（7150毫升）中之攪拌溶液内，然後攪拌15分鐘以得到無 色雙相溶液。在添加期間並未發現放熱現象。分離有機相 並在MgSCU上乾燥。以乙酸乙酯（2χ35〇〇毫升）萃取水性層並 在MgS〇4上乾燥有機化合物。合併有機餾份，真空濃縮並 於室溫在高真空下乾燥以得到清澈油（685丨克，4 66莫耳）。 於-30°C下貯存該油，費時2天，藉1HNMR分析而知其對產 物品質無影響。使該油溶解在二乙醚（Uooo毫升）内並在氮 氣氣下冷却至5 C。以90分鐘一滴滴添加溴化甲基鎂（在二 乙_中3.〇河，3500毫升，10.50莫耳）至該反應並維持反應溫 度在0-10°C之間。一旦添加完成時，於10°c下攪拌該混合 物，費時30分鐘，然後在攪拌下溫熱至室溫，費時一夜。 添加乙酸甲酯（75毫升’ 0.94莫耳）至該反應混合物，產生排 氣及微放熱現象。添加該反應混合物至水性氯化銨(在87〇〇 46 201006824 毫升中275G克）並在添加期間維持該溫度在说以下且授 拌H)分鐘。分離有機相並以二乙趟(3χ7ι〇〇毫升）萃取水性 相。在琴〇4上乾燥合併有機萃取物並真空濃縮以得到如 黃色油之酮。

實驗重複數 S.M之數量(克）

mTi；* 藉1H NMR而 1定之純度（％)

步驟2 0

把Η+Η-笨基乙脸 ^

NaBH(CH3C02)3) MeCN _ c7h12〇3 胺 分子量：144.17 C^HaNOz 分子量：249.35

在鼠氣氛下以55分鐘-滴滴添加(r)#)]苯基乙胺 (715克’ 5.90莫耳）至該酮(克，偽莫耳)在乙腈⑴· 毫升)中之攪拌溶液内。在添加期間發現小放熱現象。使該 反應混合物冷却至阶並以45分鐘-滴滴添加乙酸⑽毫 升，6.03莫耳)且_溫度在饥以下以形成自色沈殿物。 再授拌10刀鐘後，以！小時一份一份地添加三乙酿氧爛氮化 鈉(2340克’ U，〇4莫耳)並維持溫度在饥以下且發現排氣 現象。於室溫下搜拌該混合物，f時—夜。然後於氣氣份 在授拌下以9 G分鐘添加該反應混合物至水（丨丨隱毫升）(流 率.5升/分鐘）。該添加會導致溫度降低及排氣。一份一份 地添加碳錢鈉（156()克，18 57莫耳）㈣混合物直到該 47 201006824

溶液達pH 7為止。該添加會導致放熱及排氣。分離有機相 對並以二乙醚(2x10000毫升）萃取水性相。以水性氣化鈉（在 7000毫升中2760克）清洗合併有機萃取物，在MgS〇4上乾 燥，過濾並真空濃縮以得到雙相油（清澈/黃色）。添加庚烷 (2000毫升)並分離黏性下層。然後真空濃縮該庚烷萃取物以 得到如淺黃色油之粗產物(929.3克，76.7%)。分批在矽石上 藉層析法（乙酸乙酯：庚烷：三乙胺2〇 : 80 : 0.5)而純化非 對映異構性產物以得到如黃色油之該產物。再層析具較低 非對映異構性純度之已離析胺以得到第二批產物。 步驟3

β〇〇2〇.碳載20% H2i IMS

Boe胺 C12H23N〇4 分子量:245.32

實驗重複數 酮之數量 (克） 胺之數量 (克） 產率 (%) 藉對掌性LC 而測定之de(%) 1 28.1 17.8 35.7 98.7% 2 900 463.8 37.0 >99% 於室溫在4巴壓力下’在攪拌下氫化該胺(236 1克，〇 95 莫耳）' 一*反酸一-第二-丁醋(208.0克，0.95莫耳)及碳載20% 纪（11)(11.5克）在IMS(3375毫升）中之混合物，費時7天。經 由H yfo 1而過濾該反應混合物並真空濃縮以得到無色結晶 性固體。 48 201006824 實驗重複數 胺之數量 (克） Boc胺之數量 (克） 產率 (%) 藉1H NMR而 測定之純度（％) 1 12.8 11.3 89.4 >95% 2 200.0 192.2 97.3 >95% 3 236.1 227.2 97.5 >95% 步驟4

4Μ HC1在二今烷中之溶液 MeOH Boc胺 c12h23n〇4 分-ΐΐ : 245.32

HCLH2N

OH OH 胺二醇 c4h12cino2 分子ϊ : 141.6 在氮氣氛下一滴滴添加在二噚烷中之4Μ HC1( 1800毫 升，7.22莫耳）至Boc胺（353.5克，1.44莫耳）在曱醇（1800毫 升）中之冷溶液内。在添加期間，借助水浴使該反應溫度之 範圍自14至20°C。然後於室溫下攪拌該混合物，費時18小 時。真空移除該溶劑，使殘留物經甲苯(2x500毫升）共沸兩 次，然後在高真空下乾燥以得到褐色黏性樹膠。 實驗重複數 Boc胺之數量 (克） 胺二醇之數量 (克） 藉1H NMR而 測定之純度（％) 1 11.3 7.1 〜75% 2 50.0 36.8 〜75% 3 353.3 266.4 〜75%

步驟5 hci_h2n

4, 6-二氫-2「（2,3-二氟节基)硫]哺嘴 NaHC03, MeCN 胺二醇 c4h12cino2 -分子:f : 141.6

5H1 eCl F2N3O2S 务子 t : 375.82 49 201006824 於回流在氮氣氛下，在攪拌下加熱該胺二醇(266 4克， 約75重量％，199.8克，1.38莫耳）、4,6-二氯-2[(2,3-二氟苄 基)硫]嘴咬(390.0克，1.27莫耳)及碳酸氫鈉(361〇克，4 3〇 莫耳)在乙腈（6500毫升）中之混合物，費時17小時。於其間， 形成近純白色懸浮液。使該反應混合物冷却至室溫，真空 移除該溶劑並在乙酸乙酯（4〇〇〇毫升）與水(4〇〇〇毫升）之間 分溶殘留物。分離有機層並經水(2〇〇〇毫升)及鹽液(2〇〇〇毫 升）清洗，然後在MgSCU上乾燥，過濾並真空濃縮以得到暗 黃色油。在矽石上藉層析法（乙酸乙酯：庚烷4 :丨）而純化該 油以得到如黃色樹膠之氣嘧啶。 實驗重複數 胺二醇之數量 (克） 氣嘧啶之數量 (克） 產率 (%) 藉1H NMR而 測定之純度 (%) 1 36.8 54.7 74.6 >90% 2 266.4 347.0 66.8 〜90%

四氩吖唉-1-碏醯脸，Pdb(dba) Χ-Phos» CS2CO3,1,4-dioxane 氣嘧啶 C15H16CIF2N3〇2S 分子量：375.82

ASA C18H23F2N5O4S2 分子量：4/5.53

於105°C在氮氣氛下，在攪拌下加熱該氣嘧啶(382.1 克，1.02莫耳）、四氫吖唉_1_續醯胺(200.0克，1.48莫耳）、 二-纪-三（二亞苄基丙酮）(56.1克）、X-Phos(56.5克碳酸铯 (465.0克，1.43莫耳）在1，4-二哼烷(6400毫升）中之混合物， 費時90分鐘。使該反應混合物冷却至室溫並添加乙酸(950 50 201006824 毫升）至該混合物，且攪拌10分鐘。在添加期間發現放熱現 象。真空移除該紅色溶液之溶劑並在乙酸乙酯（3500毫升） 與水(3500毫升）之間分溶殘留物。分離有機相，經水(25〇〇 毫升）及鹽液(2500毫升）清洗，在MgSCU上乾燥並過滤。真 空濃縮所形成紅色溶液以得到紅色發泡體。在;5夕石上藉層 析法（乙酸乙酯：庚烷1 : 1，繼而乙酸乙酯）而純化該產物以 得到黃色發泡體。使該黃色發泡體溶解在二氯甲炫^中，回 流10分鐘以形成淺黃色沈澱物並使其冷却至室溫。過滤該 沈澱物，然後再晶化（乙酸乙酯：庚烷），過濾並於6〇。〇下真 空乾燥以得到如無色固體之ASA嘧啶。於室溫在攪拌下使 該固體進一步懸浮在DCM(2升）内，費時5天。過濾固體並 真空乾燥以得到如無色固體之實例丨標題化合物。 實驗 重複數 氣嘴嘴之 數量（克） ASA咳咬之 數量（實例1) (克） 產率 (%) 藉 LCMS 而2攻定之 純庚(％) 鼻對掌性 而測定 之比（％) 1 20 14.8 58.6 >98% >99% 2 382.1 270.5 56.0 >98% — >99% — 生物學資料 人類肝固有清除率(CLint) 就大部份該等藥物而言，其血漿清除率之—大要素係 藉肝代謝作用而促成。固有清除率(CLint)為化合物進行代謝 之潛力的量度且可以與得自考慮血漿蛋白質結合性及肝血 流之活體内肝清除率有關。因此，CLint可作為一計劃内化 合物之相對代謝安定性之指數並與其它外部探測基質比 較。而且在一研究計劃（其中已知肝代謝清除率為組織）内之 51 201006824 活體外CLint的測定法可以是瞭解活體内該等化合物之不同 藥物動力學性質的有用方法。 試驗說明 以下說明描述自使用不含HSA(人類血清白蛋白）並維 持p Η 7.4之生理條件之懸浮緩衝劑的人類肝細胞培育估計 固有清除率(CLint)的方法。 熟練的科學家為了再製本試驗程序之操作特性，必需 參考在該試驗程序之初正確性檢測及最後確定時所使用之 試劑的特定供應商及目錄號。其並未排除使用具有文件上 已證明類似的規格之合適替代試劑的取代或以下實驗確認 該取代並未顯著影響該分析之操作特性。 肝細胞之製法為使懸浮在不含蛋白質之緩衝劑（見下 文）内並在培養前貯存於冰上之人類肝臟的一部份進行雙 步驟當場膠原梅灌注法。 藉當場膠原酶灌注而離析人類肝細胞之方法 本方法係根據Seglen I. Effect of Ca2+ on enzymatic dispersion of isolated, perfused liver. Exptl. Cell Res., 1972, 74, p450 and preparation of isolated rat liver cells. Methods Cell Biol·, 1976，13, p29)，其 本身係研發自Berry及Friend之一步驟程序（High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells. J. Cell Biol” 1969, 43, p506)。 現在我們揭示不含蛋白質之細胞懸浮液的製法。 化學品及試劑 52 201006824 5%過氧化氫：經Milli-Q水稀釋之60%(w/v)過氧化氩 (Fisher Scientific) ° 肝灌注培養基：藉Gibson Life Technologies而供應隨時 可用之培養基。 肝消化培養基：藉Gibson Life Technologies而供應隨時 可用之培養基。 懸浮培養基：2.34克NaHEPES、2.0克HSA部份V、0.4 克D-果糖、DMEM(1升粉末同等物，Sigma ; w/1克.升1葡 萄糖、w/丙酮酸鈉、w/o NaHC03、w/o酚紅），其等可經 Milli-Q水構成1升，並經1M HC1使pH達7.4(未使用2.0克 HSA部份V以製成不含蛋白質之懸浮液）。 肝細胞離析 將業經消化培養基灌注之肝膠囊切開並溫和地選取細 胞以加入該培養基内。然後使該等細胞通過網目（約250μΜ) 進入含50毫升懸浮培養基之燒杯内》進一步以懸浮緩衝劑 沖洗該燒杯内之網目以得到1〇〇毫升之最終體積，將該懸浮 液分配在兩塑膠50毫升離心管（其已在冰上預冷却）内並於4 C在50xg下離心處理2分鐘。傾析上澄清液且使該等小粒再 懸浮於不含蛋白質之懸浮緩衝劑内以達原有體積。重複離 心步驟且使各小粒再懸浮液於約1〇毫升不含蛋白質之懸浮 緩衝劑内。合併該等懸浮液並使用不含蛋白質之懸浮緩衝 劑以構成50毫升之體積。 肝細胞產率及存活力之估計 以0·2毫升不含蛋白質之懸浮緩衝劑稀釋一整份細胞 53 201006824 懸浮液(0.2毫升）。添加0.2毫升錐藍(trypan blue)溶液(0.4% w/v)至該等經稀釋細胞，繼而溫和地混合。1分鐘後，使用 巴斯德（pasteur)吸管以取出試樣並藉毛細作用而填滿 Improved Neubauer Counting Chamber。然後使用反相顯微 鏡以計算(僅中央方塊部份)細胞數目，其中活細胞可將染劑 排斥在外，而非活細胞係經染色。因此可如下計算該製劑 内之活細胞百分比： 存活細胞計數χ 100 總細胞計數 1 =存活率％

活細胞之濃度計算法如下： 存活細胞毫升-1 =存活細胞計數χ104χ3χ50 兩次進行該計數程序。 使該細胞懸浮液經合適體積之不含蛋白質的懸浮緩衝劑稀 釋以得到所欲濃度之活細胞並在使用前貯存在冰上，費時 至高1小時。 蛋白質之移除 通常在含HSA之懸浮缓衝劑内得到新的人類肝細胞。 下述程序描述該蛋白質之移除法。可使用不含蛋白質之懸 浮缓衝劑以簡單地製成經低溫保存之細胞。 以和僅不含該H S Α之具有蛋白質的懸浮緩衝劑類似的 方法製成不含蛋白質之懸浮缓衝劑。如上述，於5〇xg下再 離心該細胞懸浮液並棄置上澄清液。然後使其經合適體積 之不含蛋白質的懸浮緩衝劑取代。第二次重複本方法以移 除任何殘留蛋白質，確保該等細胞之最終再懸浮液得到兩 54 201006824 倍於所欲培養濃度之濃度。 試驗程序 自在DMSO中〇.lmM之濃儲備溶液⑽v/v最終溶劑濃 度）添加欲培養之該試驗化合物以使合適小玻瓶内之不含 蛋白㈣懸浮緩衝㈣到合軸積⑽毫升）。將濃度為 2XH)6個細胞·毫升(兩倍於該最終培養細胞濃度，藉錐藍 排阻法而得知存活率>85%)之合適體積的細祕5毫升)放 ❹ 人各別小玻瓶内且於抓下在水浴㈣培養這兩個小破 瓶。 5刀鐘預培養後，添加合適體積之該緩衝劑及化合物至 _ 該等細胞以得到副6個細胞.亳升」之最終細胞濃度且進 行該等反應。 於合適時間點（例如5、10、20、30、6〇、90及丨2〇分鐘) 下，自該培養混合物取出5〇微升整份並添加至2體積冰冷却 之/谷劑曱醇以中止反應並使該等肝細胞變性。亦進行其中 φ 不含細胞或化合物之對照培養。一旦該等培養之反應業經 中止，搖動試樣，費時5分鐘，於-2〇°c或更低之溫度下貯 存2小時以促進蛋白質沈澱，然後於3〇〇〇rpm及4艺下離心處 理15分鐘。將上澄清液移至HPLC小玻瓶並藉使用以下方法 之HPLC-MS而進行分析以作為合適起始點：溶劑：a :在 甲醇中0.1%曱酸溶液、及在水中之0.1%曱酸溶液(v/v)柱： Waters Xterra CI8 20x3.9毫米，3.5微米 流率1.5毫升.分鐘-1 梯度：0%，費時0.3分鐘，0%至100% B，費時0.7分鐘，保 55 201006824 持於100% B下，費時0.2分鐘，100%至〇%B，費時0.01分鐘。 資料分析及計算方法 將經培育化合物之所形成波峰面積列入Excel試算表 並製成In[殘留濃度]對時間之曲線圖。然後以類似單區室藥 物動力學模式進行該資料之處理。由於劑量/C〇可得到用於 該培養之體積（以毫升.106個細胞―1表示）之項及排除率常數 k=0.693/t]/2’所以可如以下方程式1所予，導出能表示以t1/2 表示之Clint的方程式： ❹ CL=體積 X 0.693 tl/2 方程式1 然後測定得自該培養之母體化合物之損失的t1/2及 ·

Clint ° 效力（pic50)-配位體結合性分析 藉自經人類重組型CXCR2受體轉移感染之HEK293細 胞膜定量其抑制CXCR2放射性配位體（[1251]介百素-8(IL-8)) ^ ❹ 之特異結合性的能力而活體外測定位於人類CXCR2受體之 拮抗劑的效力。 實驗程序 材料 獲得如下之市售材料： 得自Costar，Corning, Kent, UK之U形底96井平皿及225厘米2 具有可透氣蓋之培養燒瓶(3001)。得自Millipore，Watford, UK之多篩濾板(0.45微米；MAHV N45 50)、真空歧管及泵 56 201006824 (XF54 230 50)，得自 Sigma, Poole, UK之N-[2-羥乙基]哌讲 -N’-[2-乙磺酸](HEPES ; H-3375)、乙二胺四乙酸(EDTA ; E1644)、氣化鎂（M-9272)、明膠(G9382)、二硫蘇糖醇(DTT ; D06052)、氣化鈉（S3160/63)、氫氧化鈉(B6506)、枯草桿菌 素(bacitracin)(B0125)、滅活牛胎兒血清（FCS ; CR0848)及 DMSO Fluka Chemika(41648)。得自 Packard BioScience, 卩3叩13〇111：116，1；1(：之]\4化]'〇86111;-0(6013611)。得自3〇611011荩61 Mannheim, GmbH, Germany之完全蛋白酶抑制劑混合鍵劑 (1836145)。得自 Amersham，Horsham UK之人類重組型 [125I]IL-8 74TBq/毫莫耳、〇.712MBq/毫升(IM249)。所有其 它組織培養試劑係購自Invitrogen，Paisley，Scotland, UK。所 有其它化學試劑為得自 Fisher Scientific，Loughborough，UK 之分析級試劑。 溶液 含HEPES(lOmM)、氣化鉀(2.7mM)、氣化鈉（i37mM)、 ❿ 磷酸氫斜(〇.4mM)、氣化約（1.8mM)、氣化鎂（lmM)、明膠 (0.1%(w/v))及枯草桿菌素（1〇〇微克/毫升）之HEPES緩衝鹽 溶液(pH 7.4)。 含HEPES(lOmM)、氣化卸(2.7mM)、氣化鈉（i37mM)、 磷酸氩鉀(〇.4mM)、葡萄糖(llmM)之HEPES緩衝之泰羅特 氏溶液(Tyrode’s solution)(pH 7.4)。 低滲壓緩衝劑：水：HEPE緩衝之泰羅特氏溶液的3 : 1 混合物。 細胞培養及膜製法 57 201006824 使HEK293細胞經先前已選殖入真核表現載體RcCMV 内之人類CXCR2(EMBLL19593)cDNA轉移感染。自經穩定 性轉移感染之基因黴素(geneticin)抗性菌群產生經選殖的 細胞株。於37°C，5% C02下在恆濕培養器内之含10%(v/v) 牛胎兒血清及麩醯胺（2mM)之DMEM培養基内例行地使細 胞成長至約80%匯合率。於37°C下使用AccutaseTMg燒瓶採 集細胞，費時3至5分鐘並以2xl〇7個細胞/毫升之密度使其再 懸浮於低滲壓緩衝劑内之冰上。於22000rpm下使用polytron 組織均質機進行均質化以在冰上製成膜。藉蔗糖梯度離心 法而純化該膜部份，其中係將均質化細胞層疊至41%(w/v) 蔗糖溶液上’然後於4°C下以140000克力進行離心處理，費 時1小時。於介面處採集該膜部份經HEPES-緩衝之泰羅特 氏溶液稀釋4倍並於4。(：下以100000克力進行離心處理，費 時20分鐘。使該膜小粒以1)<1〇8個細胞當量/毫升再懸浮於 HEPES緩衝之泰羅特氏溶液内且其後於_8〇。〇下以整份貯 存。遵照製造商指示’用於膜製法及貯存之所有緩衝劑係 在ImM DTT及Complete Protease Inhibitor™混合錠劑存在 下製成。 分析程序 在96井平皿内之HEPES緩衝的鹽溶液中進行分析。使 用預先自9·6ηΜ儲備溶液稀釋之具〇.06nM最終濃度的 [I]IL-8。本分析中之最終DMS〇濃度為1%(v/v)。藉在 DMSO中連續稀釋，繼而1〇倍稀釋成HEpES緩衝之鹽溶液 以得到含化合物及10% DMSO之操作溶液而製成試驗化合 58 201006824 物。在該化合物未存在下測定用於[125I]IL_8之總結合性(BO) 的對照物。藉在ΙμΜ最終濃度之(ir)_5-[[(3_氯-2-氟苯基）甲 基]硫]-7-[[2-羥基小曱基乙基]胺基]噻唑并[4,5-d]嘧啶 -2(3H)-酮二水合物鈉鹽的存在下，藉測定[i25i]il-8結合性 而測定用於非特異結合性(NSB)之對照物。將冷凍之膜整份 解凍並稀釋至先前經測定可得到典型上以約lxl〇6個細胞 當量/毫升添加之總放射性標記的約10%結合性之濃度。如 φ 下添加該等分析組份至各井：在含10% DMSO之緩衝劑内 之十分之一體積試驗化合物或對照物、十分之一體積放射 性標記、十分之八體積稀釋膜。將該等平JHL密封並於室溫 . 下培育2小時。培育後，過濾該分析混合物，然後使用微孔 真空歧管以2體積之冷HEPES緩衝之鹽溶液進行清洗。風乾 該過渡平皿’然後各該濾器緩衝壓成聚丙烯試驗管且使用

Cobra II Gamma計數器（Packard BioScience)藉直接 7 計數 而測定放射性’費時每一試樣1分鐘，或者將該總過濾平皿 籲 放入載體平皿内且添加50微升MicroScient-Ο至各井。使用

TopCount儀器（packard BioScience)進行96井平皿閃燥計 數，費時每一試樣井1分鐘。 數據分析 藉減去在各分析平孤中所測定之對照物NSB值的平均 值而計算[125I]IL_8之特異結合性。將數據轉換成濃度反應 曲線圖且以相對於總特異性結合之[125I]IL-8(B〇-NSB)之百 分比表示。該ICm之定義為得到特異性結合之[i25I]IL_8的 50%抑制作用所需之化合物的莫耳濃度將該等π，。值轉換 59 201006824 成用於敘述性統計學之計算（平均值±SEM)之倒數對數 (pic%)。該等pIC5〇值接近結合性親和力（pKj)，因為所使用 [125I]IL-8之濃度(0.06nM)低於IL-8所測定之Kd(平衡解離常 數）(1.2nM)。 已發現該式（1)化合物之pIC50值>8 血漿蛋白質結合性(PPB)之測定 藥物與血漿蛋白質之結合程度為測定其活體内效力及 藥物動力學之重要因素。用於測定血漿蛋白質結合性之程 度的方法包括於37°C下在血漿與緩衝劑間之該化合物的平 衡透析。然後使用具有質譜(MS)偵測作用之高壓液相層析 法(HPLC)測定在血漿與緩衝劑間該化合物之濃度。該透析 方法包括同時使用至高10種化合物之混合物。業經證明當 單獨或以混合物形式使用化合物時，於用於該分析中之濃 度下’結果並沒有顯著差異。 方法 首先藉浸泡在該透析緩衝劑内，費時至少j小時而製成 膜(分子量截45_。錢賴㈣析料人透析細胞内。 製備化合物在二曱基亞礙(DMSO)内之儲備溶液。其及 所有後續液體處理步驟通常係使用Tecan液體處理自動控 制裝置進行。使用含至高5種化合物之混合物。各化人物^ 混合物内之濃度通常為ImM。該等混合物經選擇可I使各 混合物含有在分子量方面全部彼此具有至少5單位差異之 化合物。 冷凍血漿(EDTA抗凝血劑）通常係用於人類血漿結合性實 201006824 驗。在使用前不久’使用1M HC1將該血漿之pH調整至7.4。 然後連同血漿(750微升）添加該等化合物之DMSO儲備 溶液(7.5微升）至透析細胞。就各混合物而言，係兩次進行 該步驟。在血漿溶液中其可得到1% DMSO，其中各化合物 之濃度為10μΜ(若該儲備溶液為標準imM)。然後將該等透 析細胞密封’在Dianorm轉子裝置内牢牢固定並於37°C下使 其平衡18小時，在該等透析細胞經平衡時，可使用dmSO 儲備溶液以產生適用於該等血漿及緩衝劑試樣之最終分析 的最佳化HPLC/MS方法。平衡後，鬆開該等細胞並使用 Tecan液體處理自動控制裝置以自各該透析細胞之血漿及 緩衝劑侧移除整份。然後添加空白血漿至該等緩衝劑試樣 並添加緩衝劑至該等血漿試樣以致使各試樣在6倍稀釋之 血漿的基質内。然後自該等DMSO儲備溶液及空白6倍稀釋 之血漿製備標準物。4種標準物之濃度通常為50nM、 150nM、500nM及 2500nM。 然後使用具有MS偵測作用之HPLC以分析該等試樣及 標準物’其可進行該等化合物之混合物的去捲積。該Hplc 方法包括可直接注射該稀釋血漿之順向沖洗柱轉換技術。 結果之計算 使用可自動計算混合物中之水化合物的校準曲線之 MassLynx軟體，然後進行將該等緩衝劑及血漿試樣之濃度 值的内插法以處理層析圖。就該血漿之稀釋而言，這些濃 度仍需要校正。使用以下方程式自該MassLynx數據計算結 合百分率： 61 201006824 結合％ = 100-100( 1.2X緩衝劑濃度 6x血漿濃度 該分子内之1.2係數說明血漿之該等水性試樣的小稀 釋液。該分母内之6係數用以校正具有緩衝劑之該等血聚試 樣的6倍稀釋液。 自該等濃度數據計算各化合物之游離態％(結合 100-%)，然後記錄。 大鼠體内之生體可用率（F)

本文係描述用以在雄大鼠體内獲得活體内藥物動力學 參數的方法。其適用於任何化合物，但是可根據，諸如溶 度、分析靈敏度、預測清除率及半衰期而修飾，當預設公 式化時’劑量或採樣時間可能不合適。文中所述該方法代 表標準的方法，於其中可進行合法及文件上可證明之修 飾。本方絲可投與單—化合物錢合物(長方形扁盒）。 劑量製法 製備1毫克

之標準劑量溶液。所推薦之劑量女 劑(若該化合物在等渗壓鹽液中並不具充份可溶性）為50 ‘ . 50%無g水。使所f f量之化合物溶解在咖 二=加水。藉將一整份稀釋至5〇微克.毫升乂_ 射濃度準轉轉:鮮物的雙重a ^刀析崎物在_液内之漠度。 62 201006824 藉口灌食法而對不同的3隻動物群組投藥(3毫升.公斤―1)。藉 減重而估計所遞送劑量。 在給藥前，通常使動物絕食，若必要可研究其影響。 試樣收集

自該口服群組採集預給藥試樣。將血液試樣(0.25毫升) 裝入1毫升注射器内，移至EDTA試管内並在試樣收集後不 久藉離心處理(於13000rpm下，費時3分鐘）而製備血漿。 標準程序之採樣時間（分鐘） iv 2 σ月艮 口服前 4 20 8 40 15 60 30 120 ^ ---------------- --------------- 60 180 120 240 180 严[[[[— ---------- 300 240 360 300 ' 試樣分析 藉質譜測定法而定量測定血衆中之該分析物(群)的濃度。 63 201006824 標準物及QCs之製法 製備在曱醇中50微克/毫升之濃度的標準物及品質控 制儲備溶液。«下表藉TECANGENESIS而稀釋 : 物及QC儲備溶液並攙入血漿内： 下 連績稀釋計劃 50微克/毫升儲備溶液 溶液 |儲備溶液之體 I 積 稀釋劑之體積 標準濃度 QC濃度 (毫微克/毫升） | (微升） (微升） (毫微克/毫升） 初儲備溶液之9〇 + -.................. 81〇 .............-................〜 1000 ··----.-， ....................................------—........ Α 之 300 3〇〇 ： ->v>w+w_"w.〜ww..·.------^ 500 一’.…….................-一-.一'.……-.....— 500 B 之 300 300 250 .. ϊ C 之 200 .…-v--------------------------------------------—------------ •+v"™~++++-~™~++~++~™+~~^一吻 300 100 100 D 之 300 --------------------------- 3〇〇 ™.......... ''·'·—·--—— ..•v.v·'..,,...__________________________ 50 ------------------....-------------- E 之 300 3〇〇 - + + ·" + + + ·*· '* ......—— 25 ................... - F 之 200 300 10 —_1~.....“| 10 G 之 3〇〇 ---- ·~~-ν----------- 300 -----------------------------...... 5 """""""—...--------------------------------

藉TECAN而添加10微升各該上述溶液Α_Η(其係藉該 合併標準儲備轉之連續_而製成）、及雌升溶液Β、^ 及G(其係藉該合併QC儲備溶液之連續稀釋而製成)至含％ ，升二白血聚之96井1.2毫升聚丙烯試管内。所製成之該等 5^準曲線及QC試樣的最終濃度麵於上仙。可使用濃縮 或稀釋之初儲備溶液以獲得較高或較低丨農度範圍。 試樣之製法 64 201006824 添加150微升水至各該試樣、標準物及QCs。以下文定 義之順序安排該等試樣： L按照上升濃度之順序的標準物 2·按照上升濃度手動標準之QCs 3. 取自IV投藥之動物的試驗試樣（先後為1M、2M及3M試樣) 4. 按照上升濃度之QCs 5. 取自P〇投藥之動物的試驗試樣(先後為4M、5M及6M試樣） φ 6.按照上升濃度之QCs 7.按照上升濃度之標準物

— 然後覆蓋試樣，藉重複轉化而混合，然後在IEC CENTRA 離心機内以3500rpm進行離心處理，費時20分鐘。分析 (LC/MS)各試樣之整份（120微升）。 質譜測定法 使用具有HP1100 HPLC系統之TSQ700或TSQ或 SSQ7〇0〇質譜儀。所使用來源為APCI或ESI。預測涵蓋在該 Φ 等試驗試樣内所發現之濃度範圍的標準物及品質控制試樣 在該標稱濃度之25%内。 結果 使用WinNonlin及Excel獲得藥物動力學數據分析及製 成表格。使用標準非區室分析以估計表格化之參數。一旦 劑量歸一化時，自該iv及口服AUC之比率（該血漿濃度時間 曲線之積分)計算生體可用率（F)。 溶度(S)之測定 化合物之溶度為影響用於篩選之該化合物溶液之製法 65 201006824 以及影響該化合物之固體劑量在動物及人類研究中之吸收 的重要性質。用於測定該溶度之下文所述的方法包括產生 該化合物之飽和溶液，繼而使用具有UV定量作用及^^3鑑 定作用之HPLC以分析該溶液。 方法 用於測定該溶度之飽和溶液的製法為連同部份該化合 物將約0.3-3.0毫升溶劑放入玻璃螺旋蓋試樣管内。在怪溫 室（20°C)内搖動該等試樣管，費時一夜。搖動後，未溶解之 材料應該存在於該溶液内’且若情況並非如此，添加更多 溶劑並持續搖動。然後將該等試樣移至離心管並使用 Heraeus Biofuge Fresco離心機以l3〇〇〇rpm進行離心處理， 費時約30分鐘，然後移除上澄清液，放入新離心管内並再 以13000rpm離心處理’費時約30分鐘。該未溶解之材料於 離心管之底部形成小粒且移除該小粒上之液體以進行分 析。然後使用具有UV定量作用之HPLC以分析該溶液。若 該化合物之反應很強，則該溶液應該精確地稀釋以致使該 反應位於UV反應之更合適範圍内。亦藉精確地稱出該化合 物試樣之重量並使其溶解在合適體積之可將其完全溶解的 溶劑（典型上為DMSO、乙醇或曱醇）内而製備標準物。然後 藉HPCL/UV而分析本試樣。而且本標準物之反應應該在uv 反應之合適範圍内，或應該製成更合適的濃度且藉 HPLC/UV而分析。 結果 自該等HPLC/UV層析圖内之所觀測波峰面積連同該試 66 201006824 樣之任何稀釋液的校正值及注射體積之差異以計算該溶度 (s)。使用以下方程式： 溶度（毫克/毫升(毫克/毫升)·試樣^主多試稀釋停數.標準注射壟積） 標準波峰面積試樣注射體積 參考實例1

N-(2-[(2,3-二氟苄基)硫]-6-{[(lR,2S)-2,3-二羥基-1-甲基丙 基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉-1-磺醯胺

i)l-[(4R)-2,2-二甲基-l，3-二氧伍園-4-基]乙酮

於-Π5 C在氮氣下以30分鐘一滴滴添加甲基鍾 (18毫升）至（r)_2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜_4-羧酸(+)_甲酯（5 毫升）在無水1 : 1二乙醚/戊烷(160毫升）中之溶液内。進一 步攪拌1小時40分鐘後，以飽和水性氣化銨溶液(8〇毫升）中 止該混合物之反應，然後使其達環境溫度。收集有機層且 進-步以二乙ϋ萃取水性層共兩次。合併該等有機化人 物，在MgS〇4上乾燥並真空蒸發該等溶劑以得到如清激= 之副標題化合物。產率：4.77克。 !H NMR (300 MHz, CDC13)： δ 1.40 (s, 3Η) > l.47(s, 3Η). 2.24(s, 3Η)、3.97(m，1Η)、4.19(m，1Η)、4 41(m，1Η)。

ii)(1R)-1-[(4S)-2,2-二曱基-1，3-二氧伍圜_4 基]_N 笨基甲 乙胺 A 67 201006824

添加苄胺（3毫升）及冰醋酸（16毫升）至步驟⑴該產物 (1 [(4R)_2,2'二甲基-1，3-二氧伍圜-4-基]乙酮)(3.58克）在二 氣’元(40毫升）中之溶液内繼而在冰浴内冷却該混合物。 然後以25分鐘—份-份地添加三乙酿氧基喊化鈉（7.4 克）°接著於環境溫度下擾拌該混合物，費時Η小時。以飽 和碳酸氫鈉溶液中止該混合物，然後經二氣甲烧二氣甲燒 萃取4-人收集該等合併有機化合物，在上乾燥並蒸 魯 發溶劑以留下淺黃色油。藉以自1〇至2〇至3〇至4〇%乙酸^ 酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶析之矽凝膠柱式層析 法而純化以得到如淺黃色油之第一溶析非對映異構物的副 _ 標題化合物：產率3.66克。 4 NMR (300 MHz，CDC13): δ 1.07(d，3H)、1.36(s，3H)、 1.44(s，3H)、2.83(四重峰，1H)、3.77(m，1H)、3.88(, 2H)、 4.02(m，2H)、7.22(m，1H)、7.35(m，4H)。 iii)(lR)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍園-4-基]乙胺 ®

添加本炭載10%紀至步驟(ii)產物（(lR)-l-[(；4S)-2，：2_: 甲基-1,3-二氧伍園-4-基]-N-苯基甲基]乙胺)(3.65克)在乙醇 (50毫升）中之溶液内並於4巴壓力在環境溫度下將該混合物 氫化12小時。過濾該混合物並在真空下蒸發該溶劑以留下 如淺黃色油之副標題化合物。產率：2.5克。 68 201006824 NMR (300 MHz，CDC13): δ 1.07(d，3H)、i.36(s, 3H)、 1.46(s，3H)、3.08(四重峰，1H)、3.82(m，1H)、3.93(m，1H)、 3.99(m, 1H)。 iv)6-氣-2-[(2,3-二氟苄基）硫]-N-{(lR)-l-[(4S)-2,2-二甲基 -1，3-二氧伍圜-4-基]乙基}嘧啶-4-胺

添加4,6-二氣-2-[(2,3-二氟苄基）硫]喊咬 (W0-2004/011443)(1.3克）、碳酸氫鈉(0.39克）至步驟(出)產 物（lR)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙胺)(0.67克) 在乙腈（15毫升）中之溶液内並於回流在氮氣下凝固該混合 物’費時12小時。在乙酸乙酯與水之間分溶該冷却反應混 合物。合併該等有機化合物，在MgS04上乾燥並蒸發溶劑。 藉以自5至20%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶 析之矽凝膠柱式層析法而純化殘留物以得到如清澈油之副 標題化合物。產率：1.25克。 ]H NMR (300 MHz, CDC13)： δ 1.17(d, 3Η) > 1.34(s, 3H) ^ 1.43(s, 3H)、3.77(dd, lH)、4.14(m, 2H)、4.37(m, 2H)、5.02(bs, 1H)、6.06(s，1H)、7.02(m，2H)、7.26(m，1H)。 v)N-[2-[(2,3-二氟苄基)硫]-6-({(lR)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3- 二氧伍圜-4-基]乙基}胺基)嘧啶-4-基]四氫吖唉-l-磺醯胺 69 201006824

V5 於I00°c/300W最大值下在攪拌下，在微波器之開口容 器内加熱步驟（iv)產物（6-氣-2-[(2,3-二說节基） 硫二甲基13-二氧伍圜_4基]乙基} 喷咬·4·胺）)(0.45克）、四氳4唉小^醯胺 (W0-2004/011443)(0.295克）、鈀(H)三（二亞节基丙酮）二鈀 (0)(0.1克）、XPhos(0.052克)及碳酸絶(0.53克)在無水二吟烧 (6毫升）中之混合物，費時15分鐘。使該混合物冷却至室溫， 添加乙酸(2.4毫升）並真空移除溶劑。在水與乙酸乙酯之間 分溶殘留物’並分離有機餾份，經水及鹽液清洗在MgS〇4 上乾燥’過濾並真空濃縮以得到紅色樹膠（丨丨克）。藉以自5 至40%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶析的石夕凝 膠柱式層析法而純化殘留物以得到如淺黃色發泡體之副標 題化合物。產率：0.4克。 !H NMR (300 MHz, DMSO): δ 1.07(d, 3Η) χ i>26(d, 3Η) ' 1.33(s，3Η)、2.14(四重峰，2Η)、3.67(m，1Η)、3 85(t，4Η)、 3.94(m，2H)、4.15(bs，lH)、4.38(m，2H)、5.96(s，iH)、7.14(m, 1H)、7_33(m，1H)、7.38(m, 1H)、7.46(m, 1H)。 vi)N-(2-[(2,3-二氟节基)硫]-6-{[(lR，2S)-2,3-二經基小甲基 丙基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉-1-磺醯胺 70 201006824

於60 °C下加熱步驟（v)產物（(N-[2-[(2,3-二氟苄基） 硫]-6-({(1尺)-1-[(48)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍園-4-基]乙基） 胺基）嘧啶-4-基]四氫吖唉_丨磺醯胺)(〇 38克）及對-甲苯磺 酸(0.093克)在甲苯(5毫升）及水(3滴）中之混合物。費時4小 時。蒸發該溶劑並在乙酸乙酯内萃取殘留物。並經水清洗， 在MgS〇4上乾燥且蒸發以得到淺黃色發泡體(0.29克）。藉使 用二氣甲烷進行濕磨而純化以得到如近純白色固體之標題 化合物。產率：0.23克 4 NMR (300 MHz, DMSO): δ 1.04(d，3H)、2.12(四重峰’ 2H)、3.30(m，2H)、3.47(m，1H)、3.86(m，4H)、4.17(m，1H)、 4.41(m，lH)、4.53(bs，lH)、4.73(bs，lH)、5.98(bs，lH)、7.15(m， 1H)、7.32(m，1H)、7.42(m，1H)、10.50(bs，1H)。 MS: APCI(+ve) 476 [M+H]+ 參考實例2 N-(2-[(2,3-二氟苄基）硫]-6-{[(lS，2R)-2,3-二羥基-1-甲基丙 基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉-1-磺醯胺

i) l-[(4R)-2,2-二曱基-1,3-二氧伍園-4-基]乙酮 71 201006824

於-115 C在氮氣體下以ι〇分鐘一滴滴添加16M甲基鋰 (5.6毫升）至（S)-2,2-二甲基_ι，3-二氧伍園_4-羧酸㈠_甲酯 毫升)在無水1 : 1二乙醚/戊烷(35毫升）中之溶液内。進—步 攪拌80分鐘後，以飽和氣化銨水溶液（15毫升）中止該混合物 之反應，然後使其達環境溫度。收集有機層且進一步以二 乙醚兩次萃取水性層。合併該等有機化合物，在MgS〇4上 乾燥且真空蒸發溶劑以得到如清澈油之副標題化合物。產 率：0.25克。 NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.40 (s，3H)、1.5〇(s，3H)、 2.25(s，3Η)、4.00(dd，1Η)、4.19(t，1Η)、4.42(dd，1Η)。 u)(lS)-l-[(4R)-2,2-二曱基-l，3-二氧伍圜基]_N_苯基曱基] 乙胺

添加苄胺（1.1毫升)及冰醋酸(0.575毫升）至步驟(i)產物 魯 (l-[(4S)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍園-4-基]乙酮)(1.3克)在二氣 乙烷（15毫升）中之溶液内，繼而在冰浴内冷却該混合物。以 25分鐘一份一份地添加三乙醯氧基硼氫化鈉（2.68克）。於環 境溫度下攪拌該混合物，費時14小時。以飽和碳酸氫鈉溶 液中止該混合物之反應，然後經二氣甲烷4次萃取。收集合 併之有機化合物，在MgS04上乾燥並蒸發溶劑留下淺黃色 油。藉以自10至20至30至40%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯 72 201006824 /Mi合物進行溶析的石夕凝膠柱式層析法而純化以得到如清澈 油之該第一溶析非對映異構物：產率：1丨克。 !H NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.08(d, 3Η) > 1.36(s, 3H) ' 1.42(s，3H)、1.47(bs，1H)、2.84(四重峰，1H)、3.77(m，1H)、 3.89(, 2H)、4.03(m，2H)、7.24(m，1H)、7.34(m，4H)。 iii)(lS)-l-[(4R)-2,2-二曱基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙胺

添加木炭載10%鈀（0.18克）至步驟（ii)產物 ((lS)-l-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]-N-苯基甲基) 乙胺）(1.4克）在乙醇（20毫升）中之溶液内並於4巴壓力在環 境溫度下氫化該混合物，費時12小時。過滤該混合物並真 空濃縮溶劑以留下如淺黃色油之副標題化合物。產率： 0.82 克 lH NMR (300 MHz, CDC13)： δ 1.06(d, 3H) ' 1.35(s, 3H) ' 1.44(s, 3H)、3.06(四重峰，1H)，3.82(m, 1H), 3.96(m, 2H)。 iv)6-氯-2-[(2,3-二氟苄基）硫]-N-{(lS)-l-[(4R)-2,2-二曱基 -1,3-二氧伍圜-4-基]乙基}嘧啶-4-胺

添加4,6-二氯-2-[(2,3-二氟苄基）硫]嘧啶 (W0-2004/011443)(1.2克）、碳酸氫鈉(0.38克）至步驟(iii)產 物（lS)-l-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙基）(0.655 73 201006824 克）在乙腈（ίο毫升）内之溶液内並於回流在氮氣下凝固該混 合物，費時12小時。在乙酸乙酯與水之間分溶該冷押反應 混合物。收集有機層並進一步以乙酸乙酯萃取水性層。合 併該等有機化合物’在MgS04上乾燥並蒸發溶劑。藉以自5 至20%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶析的矽凝 膠柱式層析法而純化殘留物以得到如清澈油之副標題化合 物。產率：1.5克。 4 NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.17(d，3H)、1.34(s，3H)、 1.43(s，3H)、3.77(dd，lH)、4.15(m，2H)、4.37(m，2H)、4.98(bs， 1H)、6.06(s, 1H)、7.03(m，2H)、7.26(m，1H)。 v)N-[2-[(2,3-二氟苄基)硫]-6-({(lS)-l-[(4R)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜-4-基]乙基}胺基)嘧啶-4-基]四氫吖唉-1-磺醯胺

於100°C/300W最大值下在微波器之開口容器内，在授 拌下加熱步驟（iv)產物（6-氣-2-[(2,3-二氟苄基） 硫]-N-{(lS)-l-[(4R)-2,2-二曱基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙基} 嘧啶-4-胺）)(0.52克）、四氫吖唉、1-磺酸胺 (W0-2004/011443)(0_34克）、鈀(II)三（二亞苄基丙鲖）二鈀 (0)(0.115克）、XPhos(0.06克)及碳酸鉋(0.612克)在無水二吟 炫*(8毫升）中之混合物，費時20分鐘。使該混合物冷却至室 溫，添加乙酸(2.4毫升）並真空移除該溶劑。在水與乙酸乙 酯之間分溶殘留物，並分離有機餾份，經水與鹽液清洗， 201006824 在MgS〇4上乾燥，過濾並真空濃縮以得到紅色樹膠(2克）。 藉以自5至40%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶 析的石夕凝膠柱式層析法而純化殘留物以得到如乳黃色發泡 體之副標題化合物。產率：0.42克。

NMR (300 MHz, DMSO): δ 1.04(d，3H)、1.26(s, 3H)、 1.33(s, 3H)、2.14(四重峰，2H)、3.65(m，1H)、3.85(t, 4H)、 3.88(m，4H)、3.94(m，2H)、4.38(m，2H)、5.96(s，lH)、7.13(m， 1H)、7.33(m，1H)、7.38(m，1H)、7.46(m，1H)、10.56 (bs， 1H)。 vi)N-(2-[(2,3-二氟节基)硫]-6-{[(lS，2R)-2,3-二羥基小甲基 丙基]胺基} °^咬基）四風ρ丫唉-1 酿胺

於60 °C下加熱步驟（ν)產物（(Ν-[2-[(2,3-二氣节基） 硫]-6-({(lS)-l-[(4R)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜 _4_基]乙基} 胺基）嘧啶-4-基]四氫吖唉-1-磺醯胺）(〇.31克）及對_曱苯續 酸(0.076克)在曱醇(5毫升)及水(3滴）中之混合物，費時45 小時。蒸發該溶劑並在乙酸乙酯内萃取殘留物，使其經水 清洗，在MgSCU上乾燥並蒸發以得到淺黃色發泡體。藉以 二氣甲烷/曱醇混合物（1至2%甲醇）進行溶析之矽凝膠柱式 層析法而純化，繼而經二氣甲烷濕磨以得到如白色固體之 標題化合物。產率：0.185克。 4 NMR (300 MHz，DMSO): δ 1.07(d，3H)、2.13(四重峰， 75 201006824 2H)、3.23(m，2H)、3.46(m，1H)、3.87(t，4H)、4.23(bs，1H)、 4.39(q，lH)、4.50(bs，lH)、4.76(bs, lH)、6.02(bs, lH)、7.15(m， lH)、7.22(bs，lH)、7.33(m，lH)、7.44(t，lH)、l〇.49(bs，1H)。 MS: APCI(+ve) 476 [M+H]+ 參考實例3 N-(2-[(2,3-二氟苄基）硫]-6-{[(lS，2S)-2,3-二羥基_i_ 曱基丙 基]胺基}嘧啶-4-基）四氫吖唉-1-磺醯胺

i)l-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氟伍園-4-基]乙酮

於-115°C在氮氣下以30分鐘一滴滴添加ι·6Μ甲基鐘 (18毫升）至(R)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜-4-鲮基(+)_甲(5 毫升)在無水1 : 1二乙醚/戊烷（160毫升）中之溶液内。進— 步攪拌1小時4〇分鐘後，以飽和氣化銨水溶液(8〇毫升）中止 該混合物之反應並使其㈣境溫度。收集錢層並進一步 以二乙醚兩次萃取水性層。合併鱗有機化合物，在Μ卻4 上乾燥並真空蒸發溶劑以得到如清澄油之副標題化合物。 產率：4.77克。 Ή NMR (300 MHz, CDC13):

2.24(s，3H)、3.97(m，1H)、4.19(m，1H)、4 4i(m，即 ii)⑽-H(4S)-2,2-二曱基-U_二氧伍圜_4基]_n笨基 76 201006824 乙胺

添加苄胺（3毫升）及冰醋酸（1.6毫升）至步驟⑴產物 (1·[(4Κ)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜-4-基]乙酮）(3.58克）在二 氣乙烧(40毫升）中之溶液内，繼而在冰浴内冷却該混合物。 以25分鐘一份一份地添加三乙醯氧硼氩化鈉（7.4克）。然後

於環境溫度下攪拌該混合物，費時14小時。以飽和碳酸氫 納溶液中止該混合物之反應，然後經二氯曱烷4次萃取。收 集該等合併有機化合物，在MgS04上乾燥並蒸發溶劑以留 下淺黃色油。藉以自1〇至20至30至40%乙酸乙酯之異己烷/ 乙酸乙醋混合物進行溶析的矽凝膠柱式層析法而純化以得 到如淺黃色油之第二溶析非對映異構物的副標題化合物： 產率0.74克。 NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.02(d, 3Η) ' 1.36(s, 3H) ' 3.38(s, 3H)、2.80(bs，1H)、2.76(四重峰，2H)、3·68(ιη，2H)、 3.96(m，1H)、7.22(m，1H)、7.35(m，4H)。 m)(lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3_ 二氧伍圜 _4_ 基]乙胺

HzN 〜。X 添加木炭載10%鈀（〇.!克）至步驟（ii)產物 ((lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍圜 _4基]_N_苯基甲基) 乙胺)(〇.73克)在乙醇(2〇毫升）中之溶液内並於4巴壓力在環 境溫度下氫化舰合物，料2小時，過_混合物並真空蒸 77 201006824 發該溶劑以留下如淺黃色油之副標題化合物。產率：043克。 NMR (300 MHz，CDC13): δ 1.00(d，3H)、1.35(s，3H)、 1.43(s，3H)、2.87(四重峰，1H)、3.63(t，1H)、3.78(m, 1H)、 4.03(m, 1H)。 iv)6-氣-2-[(2,3-二氟苄基）硫]-N-{(lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基 -1，3-二氧伍圜-4-基]乙基}嘧啶-4-胺

添加4,6-二氯-2-[(2,3-二氟苄基）硫]嘧啶 (W0-2004/011443)(0.616克）、碳酸氫鈉(0.185克)至步驟(出) 產物（(lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1,3-二氧伍園·4_ 基]乙 胺）(0.32克）在乙腈（8毫升）中之溶液内並於回流在氮氣下凝 固該混合物，費時12小時。在乙酸乙酯與水之間分溶該冷 却反應混合物。收集有機層並進一步以乙酸乙酯萃取水性 層。合併該等有機化合物’在MgS〇4上乾燥並蒸發溶劑， 藉以自5至20%乙酸乙醋之異己烧/乙酸乙g旨混合物進行溶 析的矽凝膠柱式層析法而純化殘留物以得到如清澈油之副 標題化合物。產率：0.58克。 lH NMR (300 MHz, CDC13): δ 1.23(d, 3Η) ^ 1.36(s, 3Η) > 1.44(s, 3Η)、3.58(t, 1Η)、3.98(t，2Η)、4.14(m，1Η)、4.37(s, 2H)、5.07(bs，1H)、6.05(s, 1H)、7.02(m，2H)、7.30(m，1H)。 v)N-[2-[(2,3-二氟苄基)硫卜卜⑴⑸小[(4S)_2 2_二甲基_13 二乳伍圜-4-基]乙基}胺基)嘴咬_4_基]四氫n丫唉_ι_續醯胺 78 201006824

於l〇〇°C/30〇W最大值下在微波器之開口容器内，在授 拌下加熱步驟（iv)產物（6_氣_2_(2,3_二氟节基） 硫)-N-{ (lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜-4-基]乙基 咬-4-胺）)(0.37克）' 四氫吖唉-1·磺醜胺 (W0-2004/011443)(0.24克）、鈀(II)三（二亞 f 基丙 _)二起 (0)(0.082克）、XPh〇s(〇.〇42克）及碳酸鉋(0.435克）在無水二 噚烷(5毫升）中之混合物’費時15分鐘。使該混合物冷却至 室溫，添加乙酸(2.4毫升）並真空移除該溶劑。在水與乙酸 乙酯之間分溶殘留物，且分離有機餾分，經水及鹽液清洗， 在MgSCXt上乾燥，過濾並真空濃縮以到紅色樹膠（^克）。 藉以自10至40%乙酸乙酯之異己烷/乙酸乙酯混合物進行溶 析的矽凝膠柱式層析法而純化殘留物以得到如淺黃色發泡 體的副標題化合物。 產率：0.36克。 NMR (300 MHz，CDC13): δ 1.24(d，3H)、1.36(s，3H)、 1.45(s，3H)、2.26(四重峰，2H)、3.62(t，1H)、3.95(t，in)、 3.99(m，4H)、4.27(m，lH)、4.34(m，2H)、5.06(bs, 1H)、5.92(s 1H)' 7.02(m, 2H)、7.23(m, 1H)、7.38(m，1H)、7·46(ιπ，ih)。 vi)N-(2-[(2,3-二氟节基）硫]-6-{[(18,25)-2,3-二羥基小甲基 丙基]胺基}喷°定-4-基）四氫吖唉-1-績酿胺 79 201006824

於60 °C下加熱步驟⑺((N-(2-[(2,3-二氟 下基） 硫]-6-({(lS)-l-[(4S)-2,2-二甲基-1，3-二氧伍圜、4、基]乙其^ 胺基)嘧啶-4-基]四氫吖唉-1-磺醯胺)(0.346克）及對甲笨# 酸(0.084克)在曱醇(5毫升)及水(2滴）中之混合物，費時3小 時。蒸發該溶劑且在乙酸乙酯中萃取殘留物’使其經水清 洗，在MgS04上乾燥並蒸發以得到淺黃色發泡體。 @ 藉以二氣甲烷/甲醇混合物(2至4%甲醇）進行溶析之石夕 凝膠層析法而純化以得到如白色固體之標題化合物。產 率：0.185克。 ' 4 NMR (300 MHz，CDC13): δ 1.27(d，3H)、2.26(四重蜂， 2H)、3.56(m，2H)、3.71(m，1H)、3.96(m，4H)、4.17(t，4H)、 4.25(m，lH)、4.35(s，2H)、5.14(bd，lH)、6.01(s, lH)、7.06(m， 2H)、7.23(m，1H)。 o MS: APCI(+ve) 476 [M+H]+ — I：圖式簡單說明3 第1-6圖分別為改質物A-F的X射線粉末繞射圖案。 【主要元件符號說明】 (無） 80

Claims (1)

1. 201006824 七、申請專利範圍： 1. 一種式（1)化合物

   或其藥學上可接受鹽。 2. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受鹽， 其可用以治療趨化激素媒介之疾病或病症。 3. 如申請專利範圍第2項之化合物或其藥學上可接受鹽， 其可作為用於治療氣喘、過敏性鼻炎、COPD、發炎性 腸病、骨關節炎、骨質疏鬆症、類風濕性關節炎或牛皮癣。 4. 一種藥學組成物，其包含如申請專利範圍第1項之化合 物或其藥學上可接受鹽、及藥學上可接受稀釋劑或載劑。 5. —種用於製備如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學 上可接受鹽之方法，其包括： (a)在合適鹼、催化劑及溶劑存在下以式(2c)磺醯胺 〇 〇 V 〔Ji〆、m2 (2c) 處理式（2a)化合物 81 201006824

   其中PG為保護基或兩各別氫原子且L為脫離基 且可選擇性於其後以任何順序進行(i)/或(ii): i) 移除任何保護基團； ii) 形成鹽； 或任擇地 (b)在合適鹼、及溶劑存在下，以式(2d)胺

   其中PG為保護基團或兩各別氫原子 處理式(2b)化合物

   (2b) 其中PG2為保護基團而L為脫離基 82 201006824 且可選擇性於其後以任何順序進行⑴及/或(ii): i) 移除任何保護基團； ii) 形成鹽。 6. —種式（la)化合物

   da) 及其藥學上可接受鹽。 7. —種式(2a)化合物，其中L為鹵素

   8. —種式(2e)化合物，其中L為鹵素

   (2e) 83 201006824 9. 一種合併療法，其包括同時或相繼與其它治療法及/或 另一藥學劑一起投與如申請專利範圍第1項之式（1)化合 物或其藥學上可接受鹽、或含式（1)化合物之藥學組成物 或調配物。 10. 如申凊專利範圍第9項之合併療法，其可用於治療氣 喘、過敏性鼻炎、c〇PD '發炎性腸病、大腸激躁症、 骨關節炎、骨質疏鬆症、類風濕性關節炎或牛皮癬。 11. 一種藥學組成物，其包含式（1)化合物或其藥學上可接受 鹽’結合另一藥劑。 12. 如申請專利範圍第11項之藥學組成物，其可用於治療氣 喘、過敏性鼻炎、（:OPD、發炎性腸病、大腸激躁症、 骨關節炎、骨質疏鬆症、類風濕性關節炎或牛皮癖。 如申明專利範圍第11項之藥學組成物，其可用於治療癌症。 14.如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受鹽， 其係呈以下結晶狀形式中之任一種： ⑻如藉文中表3内所示之X射線粉末繞射（XRPD)圖案 來定特徵，被稱為改質物A ; (b) 如藉文中表4内所示之X射線粉末繞射（XRPD)圖案 來定特徵，被稱為改質物B ; (c) 如藉文中表5内所示之X射線粉末繞射（xRPD)圖案 來定特徵’被稱為改質物C ; ⑷如藉文中表6内所示之X射線粉末繞射（xRPD)圖案 來定特徵，被稱為改質物D ; ⑷如藉文中表7内所示之X射線粉末繞射（xrpd)圖案 84 201006824 來定特徵，被稱為改質物E ; (f)如藉文中表8内所示之X射線粉末繞射（XRPD)圖案 來定特徵，被稱為改質物F。

   85