TW200911277A - An agent for preventing or decreasing peripheral neuropathy by an anticancer drug - Google Patents

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200911277 九、發明說明： .[發明所屬之技術領域】 本發明疋關於牛症病毒接種‘炎症組織抽出物的$ 樂用途’具體而§是有關對抗癌劑所引起的末梢神、麵尚^生 病（包括各種病理變化與傷害以及障礙）的預防或減輕叫 係含有牛痘病毒接種炎症組織抽出物作為有效成份.。 [neuropathy依華欣醫學大字典稱為「神經變性病」] 【先前技術】 現今對於癌（惡性腫瘤）的治療上，適宜地個別或併拜 外科手術、放射線照射M匕學療法。丨中M匕學療法所用 的抗癌劑（抗惡性腫瘤劑）本來為具有細胞毒性、細胞傷逢 性者，不只是癌（惡性腫瘤）細胞，也會發生傷害人類: 常細胞的副作用’所以要盡量預防或減輕這種副作用， ，發揮充分的抗癌（抗惡性腫瘤）效果的方 是很重要的。 $ ^樂， — It隨抗癌劑給藥的副仙，可列舉血㈣性病、消 =隻性病、神經變性病等，而最近的傾向，特 著的抗癌效果初大。這可認為是由於發揮 情形為劑的主要副作用，為神經變性病 鄕’、s取i成為治療中心點的多劑併用瘆法的 響，及對於血液轡枓、产^,』夕削併用療去的 :=!其原因。如此，目前伴隨癌的== 難，-旦發生就益有=性病，由於神經細胞的再生[ …有效的對策，呈現重病.症狀，或不可去 320556 5 200911277 的變性病等，因而成為治療上重要的問題。 伴隨抗癌劑給藥而產生的神經變性 系、自律神經季、古她斗么/ 丙除了中榴神經 的痛減耸以 成問題的’是刺痛及如燒烤似 的痛感專疼痛、四肢末端的 冷感刺激的過敏#知覺過敏等知見異ι對於 感_感覺)等感覺異常， 見既運動失调，劝力陰你楚 末梢神經系的神經變性病。該由於抗癌劑給藥引起的末梢神 的徵小管’在細胞分裂時形成紡錘體，或細胞内=官= 酉=及物質輸送等，於細胞正常機能的維持上扮演重要的 f色’而太平洋紫杉醇、多西他賽等的紫杉醇系藥劑，長 春新鹼(VlnCriStine)、長春鹼、長春地辛' (Vmd_e)、長春瑞濱（Vin〇relbine)等長春花生物驗系藥 劑’由作用於微小管為標的而抑制惡性腫瘤細胞的增殖，、 被認為也會傷害正常神經細胞的微小管而引起神經病變。 又，奥沙利鈾、卡麵、順翻、奈達麵等顧製劑因直接傷金 神、_包的結果’被認為會引起二次性的軸索變性病。 但是抗癌劑引起的神經毒性是研究沒有多大進展的領 域’神經變性病的預.防或對症方法尚未確立'因此為了緩 和，痒症狀而使用甲鈷胺（Mec〇balamin)等維他命製劑或 中藥方的牛車腎氣丸等’對於疼痛則用抗營藥（鹽酸阿米替 林（Amitriptyline)，抗癲癇藥（卡馬西平（Carbamazepine))， 抗心律不整藥（鹽酸美西律（Mexiletine))，$腎上腺皮質類 320556 6 200911277 固醇（adren〇corticosteroid)等，但目前尚未確立 法’中止或減量藥劑給藥為阻止神經病變的唯一 防 法（但是，給藥中止後神經變性病有時也會持續或變，持、）方 由於如上的現狀，對於由抗癌劑所引起的神經變性病二^ 臨床現場有急迫需求有效的預防或減輕劑。 丙 有關本發明藥劑的有效成份的牛痘病毒接種炎症組織 抽出物，已揭示有鎮痛作用、鎮靜作用、抗壓力作用、 過敏作用（參料利文獻〗），免疫促進作用、抗癌作用、= 硬化抑制作用（參照專利文獻2)，#於併發性血小板減少性 紫斑病的治療效果（參照專利文獻3)，對帶狀癌渗後神經 痛、腦浮腫、癌呆、脊趙小腦退化症等的治療效果（參^專 =文獻4)，對雷諾症候群、糖尿病性神經變性病、亞魚性 脊髓視神經變性病（SMON(Subacute ^

Myelo-〇ptico-Neuropathy))後遺症等的治療效果（參照專利 文獻5)，激肽原酶（kallikrein)產生抑制作用、末梢循環變 性病改善作用（參照專利文獻6)，骨萎縮改善作用（參照專 利文獻7)，對敗血症及内毒素休克(end〇i〇xin sh〇叫的治 $上有效的一氧化氮產生抑制作用（參照:專利文獻8)，對骨 質疏鬆症的治療效果（參照專利文獻9 )，基於N e f作用抑制 作用及趨化因子（chem〇kine)的愛滋病治療效果（參照專利 文獻1 ο 11 )，對腦梗塞等的虛血性疾患的治療效果（袁日，召 專利文獻12)，對於纖維筋痛症的治療效果（參照專利文獻 13)"’對感染症的治療效果（參照專利文獻14)。 特別是在專利文獻5中，提示本發明藥劑的有效成份 320556 200911277 的牛痘病毒接種炎症組織抽 '流病變而陷入缺血狀嶋織:臟;=在生體局部的金 文獻5所提示的，牛痘 2異吊荨症狀。但是專利 .疼痛、四肢冷感、知覺異常.等的織抽出物對麻瘁、 流變性病引起的缺血狀態的改：：：，是基於對於血 明的對於抗癌劑給藥的副作用2；；^用，與本發 經變性病的預防或減輕作用，是該抽^ .起的末梢神 的發症機制的末梢神經變性病的效果，曰=於完全不同 見。亦即，未知該拉出物對被疋先則無所知的知 ‘神經轴索的微小管的變性病、神經輛索的簡 5、6 頁） 2頁） 4頁） ㈣的直接傷害等而引起的末梢神經變性病的減 效的，尚未有關於這種醫藥用途的發表或報告。工專為有 [專利文獻1]曰本特開昭53_101515號公報 [專利文獻2]曰本特開昭55_87724號公報（第3 [專利文獻3]曰本特開平1-265〇28號公報(第工 [專利文獻4]曰本特開平號公報（第3、< [專利文獻5]曰本特開平2_28119號公報（第3頁） [專利文獻6]日本特開平7_97336號公報（第4頁） [專利文獻7]日本特開平8_291〇77號公報 [專利文獻8]曰本特開平1〇_194978號公報 [專利文獻9]日本特開平^80005號公報（第2、3頁， [專利文獻1〇]曰本特開平u_139977號公報、） [專利文獻11]日本特開2000-336034號公報（第2、 、3頁 320556 200911277 [專利文獻12]日本特開200046942號公報 [專利文獻13]國際公開w〇2〇〇4/〇39383號公報 [專利文獻14]曰本特開2〇〇4_3〇〇146號公報 【發明内容】 [發明要解決的課題] 本發明的目的為提供有效表現為抗癌劑給藥時的副別 用之末梢神經魏病的肋及減輕為且安純高的藥劑。 [解決課題的手段] ” I本發明者等精心研究的結果，發現牛疫財接種炎症 .錢抽出物料抗癌㈣起的末梢神經變性病表現優里的 預防或減輕效果’而完成發明。 [發明的效果] .牛痘病毒難炎症組織抽出物，具有肋或減輕因抗 癌別給藥所引起的末梢神經變性病的優異藥理作用。再 $ 3有該抽出物作為有效成份的本發明藥劑，是副 等問題點少的安全:藥劑，有用性極高。 【實施方式】… 、本發月疋關於含有牛痘接種炎症組織抽出物作為有效 、份之對於抗癌劑所引起的末梢神經變性病的預防或_ ‘本發明中表現末梢神經變性病的抗癌劑，特別地是傷二 = = 起末梢神經變性病的抗癌劑。這-類藥劑可 :好洋㈣、多西他赛等的紫杉醇系藥劑，及長春新 (VmCriStme)、長春花鹼（vinblastine)、長春地辛 (vindesine)、長春瑞濱（vin〇veibine)等長春花生物驗系藥 320556 9 200911277 劑。此外，由神經細胞的傷害而引起轴索變性病，因 起末梢神經變性病的藥劑，可舉奥沙利鈾、卡始、順鉑 奈達麵等㈣劑。這些抗癌劑所引起的末梢神經變性 疼痛、、麻痒、知覺異常'感覺異常、知覺過敏等，因此發 生無法抓取物品、扣金?子，舟^^暗故從 卞步仃障礙等運動失調或深部腱 反射的降低等日常生活上的障礙。本發明藥劑做為預防、 改善對象的抗癌劑所引起的末梢神經變性病，當然包含由 使用單-種類的抗癌劑的單劑療法引起的末梢神經變性 病更包s由於組合作用機制不同的複數藥劑的給藥的多 ，併用療法’以及為了要使作顯制不同的藥劑能發揮最 大的有效性而在藥劑的組合或給藥方法上下卫夫的生化調 即（biochemical m()dulati()n)的療法中所產生的末梢神經變 有關本發明藥劑所用的牛痘病毒接種炎症組織抽t ’其在.牛痘病毒接種的炎症組織所產生的生理活性㈣ :病態組織抽出該物質的方法以及其藥理活性等，已有」 处的種種報告（上列專利文獻1乃至14等）。 液制Γ者1已市售的醫藥品有牛癌接種家兔炎症皮膚抽出 衣d 個製劑係如醫療用醫藥品集（2〇〇7年版，財團 之$日本醫藥情報令心編輯、發行）的2697_期頁所揭示 抽^，為含有由經接種牛痘病毒的家兔的炎症皮膚組織 症、:離的非蛋白性的活性物質的藥劑，認為適應於腰痛 性n 腕症侯群、症候性神經痛、肩關節周ϋ炎、變形 f生關郎炎、皮膚疾患（濕療、皮膚炎、尋麻細起的播疼、 320556 10 200911277 過敏i·生鼻κ、亞急性脊髓視神經病後遺症狀的冷感、異常 知覺、疼痛、帶狀癌療後神經痛等的適用，以皮下、肌肉 庄射、靜脈用的注射劑以及錠劑作為醫療用醫藥品受到製 造認可而上市販售。 用於本么明藥劑的牛痘病毒接種炎症組織抽出物，是 如上述的由牛痙病毒接種炎症組織抽出的非蛋白性的生體 機能調整物質，在前述的醫療藥曰本醫藥品集中也揭示牛 痘病毒接種家兔炎症皮膚組織抽出液製劑，受到醫華力的 製造認可而上市販售而可取得。又，可利用上述的專利文 獻所記载的種種牛疫病毒接種炎症組織抽出物作為本發明 .物質’其製造方法以及較佳的給藥量等也在文獻中有說明。 本發明藥劑所用的牛癌病毒接種炎症組織抽出物，是 將接種牛痘病毒而發瘦的炎症組織破碎，添加抽出溶 肘有效成份溶出而得。 牛痘病毒接種炎症組織抽出物，可以例如 驟 而製造。 「π灾鄉 (a)採取接種牛癌病毒而發殖 簟，吐#办— ^ ^軋孚的皮膚組鐘 碎發瘦組織，添加水、齡水、生理食 油水等抽出溶媒德、两、♦々她 & 1水或酶加脅 上澄I 離，獲得抽出液（據液或 做除蛋.白處 加熱後過濾 (b)調整上述抽出液為酸性pH並加熱 理。繼而將經除蛋白處理的溶液調整為鹼性 或離心分離。 320556 11 200911277 (C)所得濾液或上澄液調整為酸性 碳、高嶺土等吸附劑。 使其吸附於活性 ⑷上述吸附劑添加水等抽出溶媒，調整為驗性阳， :吸附成份溶出而得牛痘病毒接種炎症級織括出物。之 二下蒸發乾固或凌 、、，口乾燥而製成乾固物。 丰=接種牛癌病毒獲得炎症组織的動物，可使用感染 牛痘病毋的種種動物如兔、牛、馬、羊、山 » ^ 丁條、X 鼠、 小私等，λ症組織是以兔的發痘皮膚組織為佳。 採取這些炎症組織而破碎，添加其之〗至5俨量的抽 出溶媒而成為乳化㈣。抽出溶媒可以❹蒸財、生理 食鹽水、弱酸性乃至弱驗性的緩衝料，也加 Γ油等安定化劑，料殺菌、防腐劑，氯化納、氯_ 等鹽類。此時’可藉由;東結融解、超音波、細胞膜 冷”酶或界面活性劑等的處理而破壞細胞組織’使抽出六 易。 所知礼狀抽出液藉由過濾或離心分離等而除去組織片 後，進躲蛋白處理。除蛋白處理操作，可適用慣用的公 知方法實施’如加熱處理，以蛋白質變性劑，例如酸、驗、 尿素、胍（guanidine)、丙酮等有機溶媒等處理，等 殿鹽析等方法。其次，除去不溶物的通常方法，例如使： 濾紙（纖維素、硝化纖維素等）、玻璃過濾器、矽藻土 (ite)賽氏過濾板（seitz filter plate)等過濾、超過漁 (ultrafiltration)、離心分離等除去所析出的不溶性蛋白質。 320556 12 200911277 〃如此所得的含有有效成份的抽心，使㈣ -.虱溴酸等酸調整為酸性，較佳在ρΉ3 5至5 i 、、醆’ .附劑的吸附操作。可使用的吸附劑可舉活性二=對吸 在抽出液中添加吸附劑而攪拌，或抽 、土等， 管柱，可使有效成份吸附於該吸附劑。在彳：充 出液中的情形時.，可以用魏或離心等除力:抽 附有有效成份的吸附劑。. ' 而得吸 要把有效成份由吸附劑溶出（脫離）時，可於 劑添加溶出溶媒，在室溫或適當加熱或攪拌而溶出“吸附 編心等通常的方法除去吸附劑而達成 媒„媒，例如可使用調整為驗性Ριί的水、^冷 乙醇、異丙醇等或它們的適當混合 ' 為ΡΗ^12的水。、田^〜夜’較佳可使用調整 用；^ = H ί的抽出液（溶出液）可以適當地調製成為製劑 /、體或面樂品製劑的較佳形態。例如可以將溶液的 ㈣為中性附近而做為製劑用原體，或藉由濃縮、稀釋而 :為所希望的濃度。還可以加氯化納而調製二 液而广注射用製劑。又可以將這些溶^ 、、:乙固或/東結乾固’調製成為可利用為旋劑等的原料之固 形物形態。 對病患的給藥方法，除經口給藥外，可舉皮下、肌肉 脈内給藥等’給藥量可以視牛痘病毒接種炎症組織 t 2種類而適宜設定。市售製劑認可的給藥量，根據 月'』療用醫藥品集（2697頁），提示做為醫療用醫藥品基 320556 13 200911277 為1日刪，注射劑為1日Wu，但視 疾病的種類、嚴重程度、、忘串 荜期Η笨而丄 人差異、給藥方法、給 =間寺而可以適宜增減⑽：神經托平單位（η_ίΓ〇ρ_ 疼錢值動物降低的慢性受壓動物的 傲 ΙιΓ ^、鼠（SART_StreSSed)，遵照 Randall_Selitt0 變法 =驗’而以鎮痛效㈣叫◦值來定義。聊是Eh。值 ，、，、〇〇mg/kg時顯示神經托平製劑的鎮痛活 img的活性。） 月 以下揭示牛癌病毒接種炎症組織抽出物的製造方法， 出物的新穎的藥理作用，即關於預防或減輕由抗癌 相引起㈣經變性病的藥理試驗結果，但本發明並不受 這些貧施例的記載的任何限制。 [實施例] 夏施例1 在健康成熟的家兔皮膚接種牛疫病毒，剝出發疫的皮 ^將其破碎而㈣水。.繼而將其加壓㈣，所得遽液以 =調整為P Η 5後，在9 〇至i Q G t加熱3 〇分鐘。過滤除 蛋白質後，以氫氧化釣調為p H 9，再於9 〇至]〇 〇加為 处理15分鐘後過濾。濾液以鹽酸調整為約ρΗ4·5，加 的活性碳㈣2小時後’心分.對取得的活性碳加水， 从氫氧化鈉調整為ρΗ 10 ,在6〇。〇攪拌15小時後，離心 分離過濾獲得上清液。所取得的活性碳再加水，以氯氧化 2調為ΡΗ η ’在6(TC授拌1>5小時後，離心分離得上清 液。合併兩次的上清液，以鹽酸中和而得牛痘病毒接種家 320556 14 200911277 兔炎症皮膚抽出物。在以下的藥理試驗中，將其濃度適宜 調整而使用。 實施例2 在健康成熟的家兔皮膚接種牛痘病毒使其感染，以無 菌方式剝出發痘的皮膚，細切後加入酚加甘油水，以均質 機磨碎成乳狀。繼而將其過濾，所得濾液以鹽酸調整為弱 酸性(PH4.5至5.5)後，在1_加熱處理而過濾。濾液以 氫氧化鈉調整為弱鹼性(；pH8.5至1〇〇)，再於1〇(rc加熱處 理後過濾。濾液以鹽酸調整為約ρΗ4·5，添加約15%的活 性妷攪拌1至5小時後過濾。濾取活性碳，加水而以氫氧 化鈉調整為ΡΗ9.4至1〇’攪拌3至5小時後，過濾而將濾 液以鹽酸中和。 實施例3 在健康成熟的家兔皮膚接種牛痘病毒，使其活性化 後，以無菌方式剝出活性化的皮膚，細切而加水，以均質 機磨碎成乳狀。繼而將其加壓過濾，所得據液以鹽酸調整 為ΡΗ5.0後，流通蒸氣下以1〇〇。〇加熱處理。過濾除蛋白 後，以氫氧化鈉調整為ρΗ9.1，再於100t加熱處理後過 濾。濾液以鹽酸調整為ΡΗ4·1，添加活性碳2%攪拌2小時 後過濾。濾液再添加活性碳5.5%，攪拌2小時後過濾。 在最初濾取的活性碳加水，以氫氧化鈉調整為9.9，在 6〇 C攪拌1.5小時後過濾。在最初的活性碳與其次的活性 碳添加水，以氫氧化鈉調為ρΗ1〇 9，在6〇t：攪拌15小時 後過濾。合併濾液而以鹽酸中和後，使用分子量〗⑽的膜 320556 15 200911277 乂電：：法進行脫鹽處理，在減壓下乾固。 種炎::織:::二施例1所得的本發明牛痘病毒接 試驗中，試驗結果的一例。又，在所有藥理 越理· / 〃顯著性的檢定是使帛Tukema贿法。 ^用對於由太平洋紫杉醇所:引起的大鼠末梢神經 免炎=二I:抽出物(實施’"製造的牛痘病毒接種家 癌劑太平洋紫杉醇給藥時所引 引起痛覺的觸覺刺4:=an〇dynia，對於通常不會 低溫刺激的知覺^^\起的激謂的知覺過敏及對於 而對大鼠經口給荜，的:果。：:：明抽出物做為受驗藥 柒進仃下面的實驗（von Frey test及 acetone test) 〇 ^ (1)受驗藥的給藥 、.、，b使用7至8週齡的SD雄性大鼠，構成對照群、太平 洋务杉私給藥群、太平洋紫杉醇及受驗藥給藥群(太平洋紫 杉·醇+受驗藥給藥群)的3群。太平洋紫.杉醇給藥群是每週 2將太平洋紫杉醇經腹腔内給藥（6mg/kg)，連續4週繼 ' 十4 X太平洋紫杉醇+受驗藥給藥群則在每週分3 次’在太平洋紫杉醇給藥前、給藥後1日、給·2日經 口給藥（2GGNU/kg)連續4週，計實施12次。又，對照群則 將太平洋紫杉醇給藥時所用的溶媒（聚氧化伸乙基萬麻 油.乙醇=1 :丨）以同樣的方法給藥。 320556 16 200911277 (2) von Frey 試驗 在金屬網底的籠中放入上述（1)的3群大鼠，馴化1小 日守後，用2、4、6、8、10、15g的von Frey線，對後肢足 底垂直地壓到線會彎曲為止而靜止6秒鐘，左右實施各6 次，測定回避反應次數。又，測定是在給藥開始之〇、2、 4、5、6週後實施。線強度（幻為X，回避次數為y而製成 政布圖，以最小二乘法繪製y=A/(1+(exp(_Bx(x_c)))的

Sigma曲線’算出相當於6次（5〇%)反應的線強度做為％ %反應閾.值’做為受驗藥對觸覺痛的效果。 將上述试驗結果之一例示於第j圖。太平洋紫杉醇給 樂群與對照群相較50%反應閾值顯著地降低。太平洋紫杉 醇併用本發明抽出物的紫杉醇+受驗藥給藥群，則顯示與 對照群相同程度的50%反應閾值，與太平洋紫杉醇給藥群 相較顳著地抑制50%反應閾值的降低。又，在太平洋紫杉 醇+受驗藥給藥群中，在停止受驗藥的給藥後，亦確誌繼 續維持抑制疼痛閾值的降低。由以上的結果，可確認本發 明抽出物對於由太平洋紫杉醇引起的知覺過敏有優異的預 防或改善作用。 (3) 丙酮試驗（acetone test) 有金屬網底的籠内，分別放入上述（1)的3群大鼠，馴 化1小時後，以微喷霧器（MicroSprayer，PENN- aEimmv 公蝴對Μ歷經5秒鐘喷霧__，利用=3 化時的冷卻作用給予冷刺激。從喷霧開始40秒中觀察大鼠 的回避反應，記錄開始反應為止的時間（潛時）。試 320556 17 200911277 右各做3次’算.出平均值。 + 上述試驗結果之一例示於第 激’太平洋紫杉醇群的潛辟顯著地縮； 時。由以上的結果，可確認本發明抽：：：同的程度的潛 醇引起的知覺異常(對冷刺激的過敏)具有優 =，_~中，則沒有看到對:::洋 =料樂的潛時縮短，在太料紫杉醇+受驗藥給= ’對知群與太平+紫杉醇群的潛時為同等的。抗癌巧 病：症狀而言’可舉出對冷感刺激二為 ”特徵，而本试驗（acetone test)是反應此症狀的

本發明抽出物對抗癌劑所引起的知覺 T 善作用的。 制_異_防或改 藥理試驗2 : 在體外（in vitro)試驗系中對於太平洋紫杉醇引起的 經細胞變性的作用 以測試本發明抽出物對於抗癌劑的太平洋紫杉醇處置 而引起的神經細胞變性的藥理作用為目的，使用神經分 化、突起伸展的模型細胞株的大鼠腎上腺鉻親和性細胞二 (PC12，Pheochromocytoma 12)及脊髓背根神經節（d〇rsal root ganglia，DRG)細胞實施下面的實驗。 (1)細胞的培養 PC 12細胞疋以含有5%牛胎兒血清、1 〇%馬血清、1 〇〇 單位盤尼西林-鏈黴素（Gibco BRL公司製；)的rpMi164〇培 320556 18 200911277 養基（MP Biomedicals 公司製），在 37°C、5°/〇C〇2 培養器 中，使用80cm3燒瓶培養。 又，DRG細胞是由雄性Sprague-Dawley系大鼠取出 而做第一代培養後，將L4-5的DRG5節以I型膠原酶 (collagenase type I，船越公司製）及中性蛋白分解酶 (dispase，三光純藥公司製）處理，在24孔盤上播種培養。 培養使用含10%牛胎兒血清，l〇〇unit/ml盤尼希林-鏈黴素 (Gibco BRL 公司製）的 Dulbecco’s modified Eagle’s 培養基 (DMEM 培養基，MP Biochemicals 公司製），在 370C、5%C02 培養器中實施。 (2)藥物處置及神經突起的長度測定 PC12細胞在24孔盤中以10,000細胞/孔的比率播 種，3小時後以弗司可林（forskohlin) 10 /z Μ處置使突起伸 展，24小時後做藥物處置。對DRG細胞則培養1週，確 認細胞的連接及突起的伸展後，進行藥物處置。藥物有只 用太平洋紫杉醇l〇ng/ml的情況及太平洋紫杉醇10ng/ml 再併用各濃度的受驗藥（0.001、0.003、0.01、0.03NU/ml) 的情況，各分別處置。在以藥物處置24及96小時後，各 別換到含有各別預定濃度的藥物及受驗藥的新培養基，168 小時後以台盼藍（trypan blue)染色液染出死細胞，以光學顯 微鏡拍照相片（Χ20Ό，每洞拍3處）。拍照後以解析軟體 Image J測定活細胞的突起的長度。 上述試驗結果的一例示於第3圖及第4圖。PC 12細胞 及DRG細胞之任一者中，神經突起的伸展都會受到太平 19 320556 200911277 洋紫杉醇的阻礙，但由本發明抽出物的併用卢罢 突起伸展阻礙隨著遭度有顯著的抑制。特別=可看到 梢神經變性病的減輕作用，其作用機 伸展阻礙的抑制。 就疋神經突起 璧奥沙利銘對大鼠末梢神經變性病的作用 越的場驗1同樣，測試_劑的奥沙利翻的认 二山出物（實施例1製造的牛癌接種家J 症皮膚抽出物）對由機械性刺激所引起 二 過敏及對低溫刺激的知覺異常的效果。奥沙利 引起末梢神經病變的藥劑，對其病變的預防、改盖 的需求。 口虿強大 (1)受驗藥的給藥 與藥理試驗1同樣，構成對照群、奥沙利氣給、 奥沙利鉑及受驗藥給藥群(奥沙利鉑+受驗藥給藥群;的： 群大鼠。奥沙利鉑（H)0mg凍結乾燥製劑）是溶解於5%葡萄 糖液而使用。奥沙利鉑給藥群是將奥沙利鉑每週連續2 = 做腹腔内給藥（4mg/kg)，繼續4週計實施8次。奥沙利鉑+ 受驗藥給藥群則將受驗藥1週3次在奥沙_給藥開始+ 日、第2日、第3日經口給藥（2〇〇NU/kg)。受驗藥是在^ 沙利鉑給藥前給藥，連續4週實施計；12次。又，對照群是 將奥沙利鉑給藥時的溶媒（5%葡萄糖液）同樣給= (lml/kg)。 (2)vonFrey 試驗 320556 20 200911277 與藥理試驗1(2)同樣，每週由奥沙利鉑給藥開始曰起 第6天實施von Frey測驗，測驗受驗藥對觸覺痛的效果。 上述測驗結杲的一例（第2週）示於第5圖。在上述測 驗的第2週，奥沙利鉑給藥群相比於對照群，50%反應閾 值顯著地降低。與此相對，奥沙利鉑與本發明抽出物併用 給藥的奥沙利鉑+受驗藥給藥群則顯示與對照群同程度的 50%反應閾值（threshold value)，與奥沙利翻群比較為極顯 著地抑制50%反應閾值的降低。由以上結果可確認，本發 明抽出物對於由奥沙利翻引起的知覺過敏有優異的預防或 改善作用。 (3)冷盤試驗（cold plate test) 奥沙利鉑給藥開始日起第5日實施冷盤試驗，測試低 溫刺激下受驗藥對知覺異常的效果。試驗前日對上述（1) 的 3 群大鼠放在冷盤（Hot/Cold plate Cat. No.35100 Ugo Basile Biological Research Aparatus 公司製）上 30 分鐘充分 馴化。試驗當日將大鼠放在設定在4°C的冷盤上，觀察大 鼠的行動150秒鐘，測定到後足教回避行動的時間（潛時）。 在本試驗.中》為排除試驗貫施者的主觀起見5安排使_其無 法辨認大鼠各群所受給藥藥物而實施。試驗實施3次而求 平均，算出平均值士標準偏差。多群間的比較就做單因子變 方分析（one-way ANOVA)後，各群間的比較與其他藥理試 驗同樣，以Tukey-Kramer法做測驗。測驗是使用Stat View (Abacus Concepts，Berkley, CA, USA)，未達 5%(p<0.05)的 危險率認為顯著。 21 320556 200911277 上述試驗結果的一例（第2週）示於第 '驗的第2週，奥沙利鉑給藥群斜a、人i 圖。在上述試 ..著地縮短，但奥沙利鉑 ·：：冷刺激的潛時顯 。.照群略同的程度。由以上的結=潛時到與對 :=:=覺異常(對冷感刺= 變性病的==:=_所_二 理試驗⑼的丙SI 激過敏為特徵，而與增 發明抽出物對抗癌劑所引起的知覺過敏^ 顯示本 善作用。 B的優異的預防或改 —[產業上利用可能性] 藥===;本發心病毒接種炎症 ，對機 及低溫刺激的知覺異常做為末梢神^見過敏 的預防或減輕作用。又，：：：對末梢神經變性病有優異 突起伸展阻礙有關的體外試驗中千誘發的神經 因此’顯示本發明牛痘 ：者、抑制作用。 被使用多年，被#種豕兔炎症皮膚抽出液製劑已 明牛“=;:全性非常高的藥劑。如此，本發 覺異常或疼痛箄的4與'、抽出物對四肢末端的麻痒等的知 、/、、口克過敏等由抗癌劑所5ί起的末梢神經 320556 22 200911277 變性病可做為有致的預防 安全性極高的有用性高的藥物。成手叹有到作用 【圖式簡單說明】 第1圖為以v〇n Frey試驗測試 主 症組織抽出物對太平洋 月牛在病母接種炎 輕作用的結果。觀I樂所引起的知覺過敏的減 第2圖是以丙軻試驗測試本發 織抽出物、，此i Λ不毛月牛痘病毒接種炎症組 出物對太千乎紫杉醇給藥所 用的結果。 見吳〶的減輕作 症电^^使㈣12細胞職本發明牛“毒接種炎 症組織抽出物對太平洋紫杉醇 =種人 的抑制作用的結果。 犬起伸展阻礙 二4圖是使用DRG細胞測試本發明牛痘病毒接 =且織抽出物對太平洋紫杉醇所誘發的神經 礙 的抑制作㈣結果。 甲展阻礙 第5圖是以von Frey試驗测試本發 二出物對奥雜給藥所引起的知覺過= 織抽2圖是以冷盤試驗測試本發明牛疫病毒接種炎症組 2出物對奥沙利翻給藥所引起的知覺過敏的減輕作用的 .【主要元件符號說明】 無 320556 23

Claims (1)

1. 200911277 十、申請專利範圍： 1. 一種末梢神經變性病的預 病由抗癌劑所引起係含有—1劑，該末梢神經變性 物為有效成份者。 病f接種炎症組織抽出 2.如申請專利範圍第〗項 劑，其中，該抗癌劑為微小管抑^性病的預防或減輕 利末梢神經變性病的預防或減輕 …請專⑽⑽）系藥劑。 劑，其中，該紫杉醇系藥劑為太 、方戍減輕 或多西他賽（d。她吟為太切*料—1) 5. 如申請專利範圍第3項的末梢神 劑，其中，該紫杉醇轉料太平洋紫料戈魅 6. :申I:利乾圍第2項的末梢神經變性病的預防或減輕 中，該微小管抑制藥為長春花生物鹼(Vinca .alkaloid)系藥劑。 7. 如申明專利乾圍第j項的末梢神經變性病的預防或減輕 劑，其中，該抗癌劑為鉑製劑。 8. 如申請專利範圍第7項的末梢神經變性病的預防或減輕 劑，其中.，該鉑製劑為奥沙利鉑（〇xaliplatin)、卡鉑 (Carboplatin) ’ 順鉑（Cisplatin)或奈達翻㈣dapiatin)。 9. 如申請專利範圍第7項的末梢神經變性病的預防或減輕 劑，其中，該鉑製劑為奥沙利鉑。 1〇·如申請專㈣圍第1項至第9項中任-項的末梢神經變 320556 24 200911277 性病的預防或減輕劑，其中，該由抗癌劑所 神經變性病為急性或慢性的疼痛、辆、知覺^末梢 覺過敏或感覺異常。 見-爷、知 11 ♦如申請專利蘇 ifi μ 1 tS # γq现固弟1項至第j〇項中任 ^M· /W- 2^JU T?-r--. . 變性病的預防或減輕劑、，：v:::;，梢神經 組織。 孕y 一令，該炎症組織為兔的皮膚 12.如申請專利範圍第1項至 變性病的#卩ϋ # 員中任一項的末梢神經 減輕劑，係為口服劑者。 3.如申㈣專利範圍第！項 變性病的預% @ 項中任一項的末梢神經 戈減麵劑，係為注射劑者。 320556 25