TW200817403A - Cyclopropyl fused indolobenzazepine HCV NS5B inhibitors - Google Patents

Description

200817403 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明涵蓋式I化合物以及使用該等化合物之組合物及 方法。該等化合物具有抗C型肝炎病毒（HCV)之活性並可 用於治療彼等經HCV感染的患者。 【先前技術】 C型肝炎病毒（HCV)係一種主要的人類病原體，據估計 世界上有1億7千萬人感染了乙肝病毒-幾乎是受第1型人類 免疫缺陷病毒（HCV)感染之人數的五倍。相當大部分的該 專經HCV感染之個體發展成嚴重惡化的肝臟疾病，包括肝 硬化及肝細胞癌（Lauer，G· M·; Walker，B. D. N. .g/· J. H 2001，345, 41-52)。 HCV係一種正鏈rNA病毒。基於對推斷的胺基酸序列及 5’-未翻譯區域中廣泛的相似性進行比較，hcv已被分類為 黃病毒科中的一個單獨的種。黃病毒科之所有成員皆具有 包膜之病毒粒子，該等包膜病毒粒子包含一經由轉譯一單 獨且連續的開放閱讀框（〇RF)以編碼所有已知之病毒特異 性蛋白的正鍵RN A基因組。 在整個HCV基因組之核苷酸及經編碼之胺基酸序列中發 現了相當大的異源性。人們已對至少六種主要的基因型進 行特彳政分析’並對超過5〇種亞型進行闡述。Hcv之主要基 因型有不同之全球分佈，儘管人們關於基因型對發病機理 及療法的可能影響進行了很多研究，但HCV之遺傳異源性 的臨床重要性仍然不為人們所瞭解。 120736.doc 200817403 單鏈HCV RNA基因組為約9500個核苷酸長，並具有一 編碼約3000個胺基酸之單一大聚蛋白的單一開放閱讀框 (ORF)。在經感染細胞中，此聚蛋白藉助細胞蛋白酶及病 毒蛋白酶在多個位點分開以產生結構蛋白及非結構（NS)蛋 白。當為HCV時，成熟的非結構蛋白（NS2、NS3、NS4A、 NS4B、NS5A及NS5B)受兩種病毒蛋白酶的影響。第一種 ' 據認為係金屬蛋白酶，其可使NS2-NS3接點處分開；第二 種係一絲胺酸蛋白酶，其包含於NS3之N末端區域内（亦稱 為NS3蛋白酶）並可介導NS3下游之所有隨後分裂，既包括 順式的（在NS3-NS4A分裂位點）又包括反式的（對於其餘 NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位點）。NS4A蛋白 似乎可提供多種功能，擔當NS3蛋白酶之辅因子並可能有 助於NS3及其他病毒複製酶組份之膜定位。NS3蛋白與 NS4A之複合物形成似乎對於該加工事件係必要的，可在 所有位點增強蛋白水解的效率。NS3蛋白亦展示核苷三磷 酸酶及RNA解旋酶之活性。NS5B(亦稱為HCV聚合酶）係一

U 依賴於RNA (RNA-dependent)的RNA聚合酶，其與HCV之 複製有關。HCV NS5B蛋白闡述於下面文獻中·· "Structural • Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in

Complex with Ribonucleotides” Bressanelli; S.等人， Jowrna/ 〇/ 2002，3482-3492 ;及 Defrancesco 及

Rice，CV/mcs 2003，7，211-242。 當前，最有效的HCV療法採用一 α-干擾素及利巴韋林 (ribavirin)之組合，可在40%的患者中達成持久的效力 120736.doc 200817403 (Poynard，丁·等人， Lancet 1998，352，1426-1432)。最近臨

343，1666-1672)。然而， 即使對於涉及聚乙二醇化α_干擾 素與利巴韋林之組合的實驗性治療方案，一相當大部分之 …者並不具有持久的病毒載量減小。因此，當前明顯且非 常需要開發可有效治療Hcv感染的治療劑。 【發明内容】 一本發明態樣係一種下式j化合物：

其中： 1) R1 係 co2r5或 conr6r7 ; R2係六氫吡啶基或哌嗪基，且經選自由烷基、鹵代烧基、 烷氧基烷基、（苯基）烷基、烷基co、i代烷基co、烷氧 基co、（胺基）co、（烷胺基）co及（二烷胺基）co組成之群 的3個取代基取代； R3係氫、鹵素、炫基、浠基、經基、苄氧基、或烧氧基； R4係環烷基； R5係氫或烷基； R6係氫、烧基、烧基s〇2、環烧基s〇2、鹵代燒基s〇2、 120736.doc 200817403 (r7)(r8)nso2、或（r9)so2 ; R7係氫或烷基； R8係氫或烷基； R9係氮雜環丁基、吡咯啶基、六氫吡啶基、N-(R1G)哌嗪 基、嗎淋基、硫嗎琳基、高六氫σ比咬基、或高嗎琳基； R1G為氫或烷基；且 該帶有星號之碳具有（R)構型或（S)構型； 或其醫藥上可接受之鹽。

(i 本發明另一態樣係一其中R1為CONHR6且R6係烷基 so2、環烷基 so2、鹵代烷基 so2、（r7)(r8)nso2、或 (R9)S02之式I化合物。 本發明另一態樣係其中R2係下列之式I化合物： 烷基 烷基、烷基CO、ii代烷基CO、或苄基 烧基 烧基 烷基、烷基CO、s代烷基CO、或苄基

烷基、烷基CO、鹵代烷基CO、或苄基 及

烷基 烷基、烷基CO、鹵代烷基CO、或苄基 本發明另一態樣係其中R3為氫之式I化合物。 本發明另一態樣係其中R3為甲氧基之式I化合物。 120736.doc -10- 200817403 本發明另一態樣係其中R4為環己基之式I化合物。 本發明另一態樣係其中R6為烷基S02、（r7)(r8)nso2、 或（R9)S〇2之式I化合物。 本發明另一態樣係其中R6為（二甲胺基）S02之式I化合 物0 本發明另一態樣係其中R6係烷基S02之式I化合物。 本發明另一態樣係其中R6係異丙基S02之式I化合物。

本發明另一態樣係其中該帶有星號之碳具有（R)構型之 式I化合物。 本發明另一態樣係一其中該帶有星號之碳具有構型 之式I化合物。 任一變量（包括 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、 R9、R1G及該星號）之任何範圍皆可獨立地隨任一其他變量 之範圍使用。 除非另外指明，該等術語具有以下含義。”烷基”指由1 至6個碳原子組成的直鏈或具支鏈的烷基。”烯基”指由2至 6個奴原子組成並具有至少一個雙鍵之直鏈的或具支鏈的 烷基。裱烷基”指由3至7個碳原子組成的單環系統。，，羥 烷基烷氧基”及其他具有經取代烷基部分之術語包括 名烷基α卩刀係由丨至6個碳原子組成之直鏈的及具支鏈的同 分異構體 鹵代烷基”及”鹵代烷氧基”包括所有自單鹵素 之所有經_化的同分異構體 芳香族取代基。括號内的及 内熟練的技術人員明示鍵結 多 關 取代烷基至全齒素取代烷基 "芳基”包括碳環的及雜環的 重括號内的術語欲向彼等業 120736.doc 200817403 係。舉例而言，一諸如（(R)烷基）之術語指—進—步經該取 代基R取代的烷基取代基。 本發明包括該等化合物之所有醫藥上可接受之越形式。 醫藥上可接受之鹽係彼等其中抗衡離子不顯著景^料化 纟物之生理活性或毒性且因此可起到藥理學等效物作用之 鹽。該等鹽可依照有機技術利用可蹲得試劑製得。一些陰 .離子鹽形式包括：乙酸鹽、醋硬脂酸鹽、苯石黃酸鹽、㈣ ('冑、鹽酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、萄糖駿酸鹽、氫漠酸 冑、氫氯酸鹽、氫碘酸鹽'碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、 甲續酸根、石肖酸鹽、雙經萘酸鹽、鱗酸鹽、號王白酸鹽、硫 酸鹽、酒石酸鹽、甲苯績酸鹽及經萘甲酸鹽。一些陽離子 鹽形式包括：銨鹽、銘鹽、苯乍生（benzathine)、祕鹽、辦 鹽膽驗、一乙胺鹽、二乙醇胺鹽、鍾鹽、鎮鹽、葡甲胺 鹽、4-苯基環己胺鹽、派嗪鹽、鉀鹽、納鹽、胺基丁三醇 鹽及鋅鹽。 U 二本卷月化a物具有不對稱碳原子（例如下面結構）。 本考又月涵瓜所有立體異構形式，包括旋光對映體及非對映 體，以及立體異構體（例如消旋體）之混合4勿。一些立體異 • ㈣可使用業内已知方法製得。該等化合物及相關中間體 • 《立體異構的混合物可根據業内已知方法分離成單獨的同 分異構體。 120736.doc 200817403

該等化合物可藉由包括下文所闡述之 制彡e 矛《"菜内已知方 製付。-些試劑及中間體係業内已知者

間體可藉由業内已知方法利 ：π, * 用於描述化合物合成之變_如°該等 艾里I例如編旒的” R”取代基欲 明如何製備而不應與中請專利範圍中或該說明書其他部分 中所用變量混淆。反應圖中所用縮寫通常依照業内習用含 義0 2-演代_3_環己基_1H令朵冬甲酸甲醋可水解成2_漠代· 3-環己基-1H-« -6-曱酸（參見反應圖υ。於無水thf中利 用（例如）ι，ι，-羰基二咪唑聯合丨，8-二氮雜二環[5.4.〇]十一 _ 7-烯，可使此化合物與多種磺醯脲縮合。利用（例 如）Suzuki偶合反應條件，可使所得醯基磺醯胺與不同的2_ 甲醯基硼酸或酯發生反應，以提供所繪示類型的環狀半縮 酸胺中間體。遠專化合物可藉由在DMF中在碳酸铯之影燮 下用2-( 一甲氧基磷醯基）丙稀酸甲酯處理經由連續的 Michael及Horner Emmons反應轉化成吲哚并苯并氮呼衍生 物。 相關稠合的環丙基酯衍生物可藉由業内已知方法（包括 於DMSO中在強驗性條件下用三甲基峨化亞石風處理該等。引 120736.doc • 13 - 200817403 哚并苯并氮呼酿）而生成。於DMS〇中利用（例如）〇_(m_苯 并三嗤+基）_n，n，n’，n，_四甲基腺四氣爛酸§旨及二異丙基 乙胺，所得稠合環丙烷中剩餘脂肪族酯部分可發生水解， 且產物酸可與多種三取代哌嗪縮合。 反應圖1.

CHO HOOC、

f、 O XX>~Br uoh MeOHrrHF/H20 o"s:o 一N-R R.

1. EtOH 回流至〇°C 2. THF 2 N HCI rt

Pd(PPh3)4 (3 mol%) LiCI Na2C03 EtOH/甲苯/H20 70 °C

120736.doc -14· 200817403 一可用於合成某些本發明化合物之中間體涉及反應圖2 中所示第三丁基酯吲哚并苯并氮呼的製備。 反應圖2.

此操作法包括所示吲哚曱酯之經鹼催化的水解作用，隨 後其與亞硫醯二氯及第三丁醇鉀反應，或與碳酸銀及第三 丁基溴進行烷基化反應。利用類似於前文所略述之化學方 法，可對所得化合物實施轉化，以提供上文所示混合的酯 吲哚并苯并氮呼。 一些實例係呈立體異構混合物形式存在。本發明涵蓋該 等化合物之所有立體異構體。對立體異構混合物實施分級 120736.doc -15- 200817403 的方法為業内人士所熟知，並包括（但不限於）：製備型手 性超臨界溫度液層析法（SFC)及手性高效液相層析法 (HPLC)。一利用此途徑之實例示於反應圖3中。 反應圖3.

藉助手性SFC 特定對映異構 體之分離

TFA ^

實現该等分離之另一方法包括製備可利用多種業内已知 方法加以分離之非對映體混合物。下面（反應圖4)顯示此方 法之一實例。 120736.doc • 16- 200817403 反應圖4.

藉由反相HPLC分離的非對映體 一些非對映醯胺類可利用反相高壓液相層析法進行分 離。經水解作用後，所得具旋光活性之酸可與經三取代哌 秦衍生物偶聯（反應圖5)。舉例而言，存於〇1^8〇中之二異 =基乙胺及〇-(1H_苯并三唑·丨-基）_n，n，n，，n,_四甲基脲四 氟硼駄酯可用於提供經三取代的哌嗪甲醯胺。其他標準的 酸胺偶聯方法亦可用於提供具旋光活性的曱醯胺。 反應圖5.

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N-經保護的哌嗪亦可偶聯至該等中間體吲哚并苯并氮呼 酸，且所得哌嗪曱醯胺可利用業内已知方法進行去保護， 並利用多種合成方案實施衍生，其某些說明性實例示於下 方（反應圖6)。 反應圖6.

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另外，經三取代哌嗪胺可在偶聯至該等吲哚并苯并氮呼 核之别利用業内已知操作法製得，其某些實例於反應圖7 中提供。

反應圖7.

多聚甲醛

Na(CN)BH3 ZnCI2, MeOH

_TFA__ CH2CI2

Ο 某些經雙取代哌嗪可直接偶聯至與環丙基稠合的吲哚并 苯并氮㈣上，且隨後可利用多種方法對其實施衍生以提 供另外實例，其一實例示於反應圖8中。

反應圖8.

120736.doc -19 - 200817403

(HCHO)n

NaBH3(CN)

ZnCI2

MeOH 可用於製備用於合成另外實例之中間體的替代操作法示 於反應圖9中。經雙取代芳基硼酸可藉由業内已知方法製 備，其一實例係對一適宜芳基前體實施直接鋰化，並用硼 酸三異丙酯對中間體有機鋰實施驟冷。經水解後，利用 (例如）Suzuki偶合反應條件，所得棚酸可與經適宜衍生的 2-溴代吲哚偶聯。利用與先前於反應圖1中所示相關的操 作法，可對產物吲哚進一步實施轉化，以提供另外其他實 例。 反應圖9. CH0

OCH3 ^nh^hn EtOH

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可用於合成另外實例的之其他中間體示於反應圖1 〇中。 垓第二丁基酯2-溴代吲哚可在§ϋζιιΗ條件下偶聯成（4•苄氧 基-2-甲醯基）苯基硼酸，以提供所示芳基化的吲哚衍生 (I 物。藉由在DMF中於碳酸铯的之影響下用2-(二甲氧基磷 酿基）丙稀酸甲酯處理經岳連續的Michael及H〇rner Emmons反應，可將其轉化成相關的吲哚并苯并氮呼衍生 物。隨後可利用業内已知條件對所得產物實施環丙烷化， 包括於DMSΟ中在強鹼性條件下用三甲基碘化亞颯對吲哚 并苯并氮呼酯實施處理。然後使用（例如）利用存於丨，2_二 氯乙烷中之三氟乙酸之處理可達成該第三丁基酯部分之繼 後選擇性斷開’且在無水中利用（例如儿匕幾基二味 〇 坐、、° 口丨，8·一氮雜二環[5·4·0]十一 _7_烯可使該產物酸與 N’N 一甲基磺醯胺進行縮合。隨後，在一甲醇及丁册之混 合物中利用(例如)第三丁基氫氧化胺，可使剩餘醋官能基 斷開、，以提供所示十朵并苯并氮呼酸。隨後，利用業内已 ，方去可使此中間體偶聯至多種經三取代哌嗪，以提供另 120736.doc -21 - 200817403 反應圖1 0. B(〇H),

u/ 另外實例可藉由反應圖11中所示類型的啊并苯并氮, 甲醯胺中間體之環丙烷化而製得。所示類型之吲哚 =酿基伽胺酸可利用業内已知方法進行偶聯以得到相 以提供另外實例。¥ 了對…間體實施環丙烧化 120736.doc -22- 200817403 反應圖11.

.生物學方法 該等化合物展示了抗HCV NS5B活性，如在以下HCV RdRp分析中所測定。 HCV NS5B RdRp選殖、表現及純化。將編碼Hcv之 NS5B蛋白的cDNA(基因型lb)選殖至pET21a表現載體中。 表現該蛋白質，並將18個胺基酸之c_末端截除以增強溶解 性。用大腸桿菌感受態細胞系BL21(DE3)來表現表現該蛋 白質。使培養物在37°C下生長約4小時，直至培養物之光 密度在600奈米處達2·〇。將培養物冷卻至2〇°c，並用1 mM IPTG貝施誘導。添加新鮮的胺苄青黴素（ampiciiHn)至微 克/毫升之最終濃度，並在2〇。(：下對該等細胞實施培養過 夜。 將細胞小丸（3升）溶解並實施純化，產生ι5-24毫克純化 的 NS5B。溶胞緩衝液由 2〇 Tris-HCl (pH值為 7.4)、500 120736.doc -23· 200817403 mM NaC卜 〇·5% triton X-100、1 mM DTT、1 mM EDTA、 20%甘油、〇·5宅克/毫升溶菌酶、i〇 mM MgCl2、15微克/ 毫升脫氧核糖核酸酶I及Complete™蛋白酶抑制劑旋劑 (Roche)構成。添加溶胞緩衝液後，利用組織勻漿器對冰 束細胞小丸實施再懸浮。為減小該試樣之黏度，在冰上利 用一連接至一 Branson超聲波儀的微探頭對該溶解物之分 液實施超音波處理。在4°C下以1005000xg對經超音波處理 的溶解物實施1小時離心，並穿過一 〇·2微米之過濾單元 (Corning)對其實施過濾。 利用三個依序層析步驟對該蛋白質實施純化：肝素瓊脂 糖凝膠CL-6B、多聚尿苷酸瓊脂糖凝膠4B及Hitrap SP竣脂 糖凝膠（Pharmacia)。層析緩衝劑與溶胞緩衝液相同但不包 含溶菌酶、脫氧核糖核酸酶I、MgCh或蛋白酶抑制劑，並 依照將蛋白質裝填至管柱上之需要對該緩衝劑之NaCl濃度 進行調節。對各管柱實施NaCl梯度洗脫，該梯度洗脫沿長 度方向的變化端視管柱類型可達5-50管柱體積。經最終層 析步驟後，所得該酵素純度基於SDS-PAGE分析>90%。對 5亥酵素實施分樣，並在-80 °C下進行儲存。 襟準好CT 及他户擘#分典。HCV RdRp基因型lb分 析係在96孔板（Costar 3912)中以60微升之最終體積實施。 分析緩衝液由 20 mM Hepes (pH值為 7.5)、2.5 mM KCn、 2.5 mM MgCl2、1 mM DTT、1·6 U RNA酶抑制劑（Promega N2515)、0.1 毫克 /毫升 BSA (Promega R3961)及 2¾甘油構 成。在DMSO中對所有化合物實施連續稀釋（3倍），並在水 120736.d〇i -24- 200817403 中進一步實施稀釋，以便在該分析中DMSO之最終濃度為 2%。HCV RdRp基因型lb酵素以一 28 nM之最終濃度使 用。一聚腺苷酸模板以6 nM使用，及一生物素化的寡-dT12引物以180 nM最終濃度使用。模板係市購模板 (Amersham 27-4110)。生物素化的引物係藉由Sigma Genosys 製得。3H-UTP 係以 0.6微居裏（0.29 μΜ 總 UTP)使 用。藉由添加酵素起始反應，在30°C下實施60分鐘培養， 並藉由添加包含SPA珠（4微克/微升，Amersham RPNQ 0007)之25微升50 mM EDTA使反應停止。在室溫下經超過 1小時之培養後，在一Packard Top Count NXT上對板實施 讀數。 改良的HCV NS5B RdRp酵素分析。基冬如錡贄標隼酵，： 分析所闡述實施一改良的酵素分析，僅以下不同：藉由在 分析緩衝液中混合引物及珠子並在室溫下實施1小時培養 將生物素化的募dT 12引物預捕獲至經抗生蛋白鏈菌素塗覆 的SPA珠上子。經離心後將未結合的引物去除。將經引物 結合的珠子再懸浮於20 mM Hepes緩衝劑（pH值為7.5)中， 並以20 nM引物及0.67微克/微升珠子之最終濃度用於該分 析中。分析中之添加次序：向稀釋的化合物中添加酵素 (14 nM)，隨後添加一模板（0.2 nM)、3H-UTP (0.6 微居 裏，0.29 μΜ)及經引物結合之珠子的混合物以起始反應； 所給定濃度係最終濃度。使反應在30 °C下發生4小時反 應。 IC5 0值係使用七個不同的[I]進行測定。IC50值係利用公 120736.doc -25- 200817403 式y=A+((B-A)/(l+((C/x)AD)))自抑制情況計算得到。 分务举/着。為實施HCV FRET篩選分析，利用96-孔細胞培養板。該FRET肽（Anaspec公司）（Taliani等人， Anal. Biochem. 1996，240，60-67)包含一螢光供體 EDANS(接近於該肽之一端）及一受體DABCYL(接近於另一 端）。該肽之螢光被供體與受體間之分子間共振能轉移 ’ （RET)淬滅，但由於NS3蛋白酶可解離該肽，因此該等產 物自RET淬滅中釋放出來，並且該供體之螢光變得明顯。 分析試劑係按下述製備：用dH20將得自Promega之5 X細胞 螢光素酶細胞培養溶解試劑（#E153A)稀釋至1 X，添加 NaCl至150 mM之最終濃度，將FRET肽自2 mM原液稀釋至 20 μΜ之最終濃度。 為準備板，對HCV複製子細胞（包括/不包括Renilla螢光 素酶報告基因）實施胰蛋白酶化並置於一在第3行至第12行 中添加有經滴定法量測之化合物的96孔板的各孔中；第1 行及第2行包含一對照化合物（HCV蛋白酶抑制劑），底列包 V/ 含細胞而無化合物。然後在37°C下將該等板置於C02培養 箱中。 分#。繼添加上文所述測試化合物後（FRET分析準備）， c 在不同的時間移出該板，並每孔添加Alamar藍溶液（Trek

Diagnostics，#00-100)作為細胞毒性之量度。在一 Cytoflour 4000儀器（PE Biosystems)中讀數後，用 PBS沖洗 該板，並隨後藉由添加每孔30微升上文（FRET分析準備）所 述FRET肽分析試劑用於FRET分析。隨後將該板置於 120736.doc -26- 200817403

Cytoflour 4000儀器（已經設置為340激發波長/490發射波 長）中，以自動模式運行20個循環，以動態模式對該板進 行讀數。通常，讀數後利用一終點分析法得到的信噪比係 至少三倍。或者，經Alamar藍讀數後，用PBS對板實施沖 洗，添加50微升不含酚紅的DMEM(高葡萄糖），並隨後利 用Promega Dual-Glo螢光素酶分析系統對板實施螢光素酶 分析。 、 藉由對相關複製子抑制及相關細胞毒性值進行量化來確 定化合物分析值。為計算細胞毒性值，將取自對照孔之平 均Alamar藍螢光信號設定為100%無毒。然後，將各化合 物測試孔中之單獨信號除以平均對照信號並乘以1〇〇%以 確定百分比細胞毒性。為計算HCV複製子抑制值，在該分 析時段結束時自包含最高數量之HCV蛋白酶抑制劑之兩孔 獲取一平均本底值。該等數量與自純真Huh_7細胞獲取之 彼等相似。 U 然後自由對照孔獲取之平均信號減去該等本底數量並將 此數里用作100%活性。然後，扣除本底後，將各化合物 、】忒孔中之單獨信號除以平均對照值，並乘以1 〇〇。/。以確 • 定百分比活性。以引起FRET或螢光素酶活性減小5〇%之濃 • 度的形式來計算蛋白酶抑制劑滴定之ec5〇值。用針對該化 口物板生成的兩個數量（百分比毒性及百分比活性）來確定 用於進一步分析的目標化合物。 下表1中報告了代表性化合物數據。 120736.doc -27- 200817403 表1 結構 IC5〇 (uM) EC5〇 (uM) 〇^ic Β Β 〇γ& Β Β 。在 ΊκΛ〇；^^λ Β Β rV °γΝχ^>ν Β Β 。為 ^^ντΟ=ν 1 Η Β Β 120736.doc -28 200817403

結構 IC5〇 (uM) EC5〇 (uM) B B B B 〇ν& 、々Λα B B Λ又 B B ο^Χ B B 120736.doc 29- 200817403

結構 IC5〇 (uM) EC5〇 (uM) B B 。。：^° E D V> B B B B Α>0·5 μΜ ; B 0.001 μΜ-0·5 μΜ ; C <0·02 μΜ，但未測 得一精確值；D >0.5 μΜ至 1 μΜ ; Ε >1 μΜ至 10 μΜ IC50 值係利用預培養方案測定。EC50係利用FRET分析法測 定。 醫藥組合物及治療方法 該等化合物顯示抗HCV NS5B活性且可用於治療HCV及 HCV感染。因此，本發明另一態樣係一包含化合物或其醫 藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的組合物。 120736.doc -30- 200817403 本發明另一態樣係進一步包含具有抗HCV活性之化合物 的組合物。 本發明另一態樣係其中該具有抗HCV活性之化合物為干 擾素之組合物。本發明另一態樣係其中該干擾素選自干样 素α 2B、聚乙二醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素以 及淋巴細胞樣干擾素τ之組合物。 本發明另一態樣係其中該具有抗HCV活性之化合物為_ 環孢細素之組合物。本發明另一態樣係其中該環孢菌素為 環孢黴素Α之組合物。 ' 本發明另一態樣係一種組合物，其中該具有抗HCV活性 之化合物選自由介白素2、介白素6、介白素12、（一可增 強1型輔助T細胞應答之發生的化合物）、干擾RN A、反義 RNA、味喹莫特（Imiqim〇d)、利巴韋林（一肌苷5，_一磷酸脫 氫酶抑制劑）、金剛烷胺及金剛乙胺組成之群。 本發明另一態樣係一種組合物，其中該具有抗HCV活性 之化合物可有效抑制一選自HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸 蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白質、 HCV侵入、Hcv組裝、HCV釋出、HCV NS5A蛋白、 IMPDH及一用於治療hCV感染的核苷類似物之目標的功 能。 , 本發明另一態樣係一包含一化合物或其醫藥上可接受之 鹽、w藥上可接受之載劑、干擾素及利巴韋林之組合物。 本發明另一態樣係一抑制HCV複製子功能的方法，該方 法包括使該HCV複製子與一化合物或其醫藥上可接受之鹽 120736.doc -31 - 200817403 接觸。 本發明另一態樣係一抑制HCV NS5B蛋白功能的方法， 該方法包括使該HCV NS5B蛋白與一化合物或其醫藥上可 接受之鹽接觸。 本發明另一態樣係一治療患者HCV感染的方法，該方法 包括對該患者投與治療有效量之一化合物或其醫藥上可接 又之鹽。在另一實施例中，該化合物可有效抑制該HCV複 f、 製子之功能。在另一實施例中，該化合物可有效抑制該 HCV NS5B蛋白之功能。 本發明另一態樣係一治療患者HCV感染的方法，該方法 包括對該患者投與治療有效量的一化合物或其醫藥上可接 文之鹽，並且在該投與之前、該投與之後或與該投與同時 聯合投與另一具有抗HCV活性的化合物。 本發明另一態樣係其中該具有抗HCV活性之另一化合物 為干擾素之方法。 U 本發明另一態樣係其中該干擾素選自干擾素α 2B、聚 乙一醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素α 2Α及淋巴細 胞樣干擾素r之方法。 本毛月另一態樣係其中該具有抗HCV活性之另一化合物 ' 為環孢菌素之方法。 本t明另一態樣係其中該環孢菌素為環孢黴素A之方 本=明另一態樣係其中該具有抗hcv活性之另一化合物 ^自’1白素2、介白素6、介白素12(一可增強丨型辅助τ細 120736.doc -32- 200817403 胞應答之發生的化合物）、干擾RNA、反義RNA、咪喹莫 特、利巴韋林（一肌苷5’- 一磷酸脫氫酶抑制劑）、金剛烷胺 及金剛乙胺之方法。 本發明另一態樣係其中該具有抗HCV活性之另一化合物 可有效抑制一選自由HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸蛋白 酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV侵 入、HCV組裝、HCV釋出、HCV NS5A蛋白、IMPDH及一 用於治療HCV感染之核苷類似物組成之群之目標的功能的 方法。 本發明另一態樣係其中該具有抗HCV活性之另一化合物 可有效抑制除NS5B蛋白外在HCV生命週期中的目標之功 能的方法。 ’’治療有效的’’指如肝炎及HCV感染領域中之從業者所理 解提供一有意義之患者益處所需藥劑之數量。 π患者’’指如肝炎及HCV感染領域中之從業者所理解感染 有HCV病毒並適於療法之人。 ’’治療療法π、’’方案n、’’HCV感染’’及相關術語按照 肝炎及HCV感染領域中之從業者所理解之含義使用。 本發明化合物一般呈由治療有效量之化合物或其醫藥上 可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組合物形式提供 且可包含慣用賦形劑。治療有效量係提供一有意義之患者 益處所需的數量。醫藥上可接受之載劑係彼等具有可接受 之安全特徵的習知載劑。組合物涵蓋所有通常固體及液體 形式，包括膠囊、錠劑、糖錠及粉劑，以及液體懸浮液、 120736.doc -33- 200817403 糖漿劑、醜劑及溶液。組合物係利用普通調配技術製得， 且組合物通常使用慣用賦形劑（例如結合及濕潤劑）及媒劑 (例如水及醇類）。 固體組合物通常以劑量單位形式調配，且每劑提供自約 • ^至咖毫^該活性成分之組合物較佳。-些劑量實例^ 笔克、10毫克、1〇〇毫克、25〇毫克、5〇〇毫克及1〇〇〇毫 克。-般而言，其他藥劑應以一與臨床所用種類之藥劑相 ρ ^之單位範圍存在。通常’此係0.25-1 〇〇〇毫克/單位。 ’ 液體組合物通常處於劑量單位範圍内。一般而言，該液 =組合物應處於1-100毫克/毫升之單位劑量範圍。一些劑 量實例為1毫克/毫升' 10毫克/毫升、25毫克/毫升、5〇毫 克/毫升及100毫克/毫彳。一般而t，其他藥劑應以一與臨 床所用種類之藥劑相似之單位範圍存在。通常，此係L 100毫克/毫升。 土 t月涵蓋所有慣用投藥方式；經口及非經腸方法較 〇 =。一般而言，給藥方案應與臨床所用其他藥劑相似。通 吊’日劑量應係1_100毫克/公斤體重每日。一般而言，經 口投樂需較多化合物，而非經腸投藥需較少化合物。然 而具體給藥方案應由醫師利用可靠的醫學判斷加以確 . 定。 胃本I明亦涵蓋其中該化合物係以組合療法提供之方法。 P °亥化合物可與可用於治療肝炎及HCV感染之其他藥劑 組合地（但與之分開地）使用。在該等組合方法中，該化合 物通常以一 毫克/公斤體重每日之日劑量與其他藥劑 120736.doc -34- 200817403 聯合地提供。其他藥劑通常應以治療所用量提供。然而， 具體給藥方案應由醫師利用可靠的醫學判斷加以確定。 一些適合於組合物及方法之化合物實例列示於表2中。 表2

商品名 抑制劑或 靶標之類型 來源公司 Omega IFN IFN-ω BioMedicines公司，Emeryville， CA BILN-2061 絲胺酸蛋白 酶抑制劑 Boehringer Ingelheim Pharma KG, Ingelheim，Germany Summetrel 权》病毒'的 Endo Pharmaceuticals Holdings 公 司，Chadds Ford，PA Roferon A IFN-a2a F. Hoffmann-La Roche LTD， Basel, Switzerland Pegasys 聚乙二ί芋化 IFN-a2a F. Hoffmann-La Roche LTD，Base， Switzerland Pegasys及利巴韋林 聚乙二醇化 IFN-oc2a/利 巴韋林 F_ Hoffmann-La Roche LTD, Base， Switzerland 驍悉（CellCept) HCV IgG 免疫抑制劑 F· Hoffmann-La Roche LTD，Base， Switzerland 惠福仁(Wellferon) 類淋巴母細 胞 IFN-anl GlaxoSmithKline plc，Uxbridge， UK Albuferon- a 白蛋白IFN-a2b Human Genome Sciences公司， Rockville，MD 利巴早林 利巴韋林 ICN Pharmaceutical，Costa Mesa， CA IDN-6556 卡斯蛋白酶 抑制劑 Idun Pharmaceuticals公司，San Diego, CA IP-501 阬纖維變性的 Indevus Pharmaceuticals 公司， Lexington, MA Actimmune INF-γ InterMune公司，Brisbane，CA 120736.doc -35- 200817403

商品名 抑制劑或 靶標之類型 來源公司 幹複津(Infergen) A IFN干擾素 α_1 InterMune Pharmaceuticals 公司’ Brisbane，CA ISIS 14803 反義的 ISIS Pharmaceuticals公司， Carlsbad, CA/Elan Phamaceuticals 公司，New York，NY JTK-003 RdRp抑制齊J Japan Tobacco公司，Tokyo， Japan Pegasys 及 Ceplene 聚乙二醇化 IFN-a2a/免 疫調節劑 Maxim Pharmaceuticals公司， San Diego, CA Ceplene 免疫調節劑 Maxim Pharmaceuticals 公司， San Diego, CA Civacir HCVIgG 免 疫抑制劑 Nabi Biopharmaceuticals公司， Boca Raton, FL 甘樂能(Intron A)及 曰達仙（Zadaxin) IFN-a2b/al- 胸腺素 RegeneRx Biopharmiceuticals公 司，Bethesda，MD/ SciClone Pharmaceuticals公司，San Mateo, CA Levovirin IMPDH抑制 劑 Ribapharm公司，Costa Mesa，CA Viramidine IMPDH抑制劑 Ribapharm公司，Costa Mesa，CA Heptazyme 核酶 Ribozyme Pharmaceuticals公司， Boulder，CO 甘樂能 IFN-a2b Schering-Plough公司， Kenilworth，NJ PEG-内含子 聚乙二醇化 IFN-a2b Schering-Plough公司， Kenilworth, NJ Rebetron IFN-a2b/利 0 韋林 Schering-Plough公司， Kenilworth，NJ 利巴韋林 利巴韋林 Schering-Plough公司， Kenilworth，NJ PEG-内含子/利巴 韋林 聚乙二醇化 IFN-oi2b/利巴 韋林 Schering-Plough公司， Kenilworth，NJ 120736.doc -36- 200817403 商品名 抑制劑或 靶標之類型 來源公司 Zadazim 免疫調節劑 SciClone Pharmaceuticals公司， San Mateo, CA 利比(Rebif) IFN-pia Serono, Geneva, Switzerland IFN-万及EMZ701 IFN-β 及 EMZ701 ------ Transition Therapeutics公司， Ontario, Canada T67 β-微管素抑 制劑 Tularik公司，South San Francisco, CA VX-497 IMPDH抑制劑 Vertex Pharmaceuticals公司， Cambridge，MA VX-950/LY-570310 絲胺酸蛋白 酶抑制劑 Vertex Pharmaceuticals公司， Cambridge，MA/禮來大藥廠， Indianapolis，IN Omniferon 天然IFN-a Viragen公司，Plantation，FL XTL-002 單株抗體 XTL Biopharmaceuticals有限公 司，Rehovot，Isreal 【實施方式】 除非另外指明，在以下中間體及實例上之分析的LCMS 數據係利用以下管柱及條件獲得。停止時間：梯度時間+1 分鐘；起始濃度：0% B，除非另有說明；洗脫液A : 5% CH3CN/95% H20，含有 10 mM NH4OAc(對於柱 A、D 及 E) ; 10% MeOH/90% H20，含 0.1% TFA(對於柱 B 及 C);洗 脫液 B : 95% CH3CN/5% H20，含 10 mM NH4OAc(對於柱 A、D及 E) ; 90% MeOH/10% H20，含 0.1% TFA(對於柱 B 及 C);管柱 A : Phenomenex 10 μ 4.6x50 毫米 C18;管柱B: Phenomenex C18 10 μ 3.〇x50毫米；管柱C ·· Phenomenex 4.6x50 毫米 C18 10 μ;管柱D: Phenomenex Lina C18 5 μ 3.0x50 毫米；管柱E: Phenomenex 5 μ 4.6x50 毫米 C18 〇 120736.doc -37- 200817403 中間體1 Ο

1Η-吲哚-6-曱酸、2-溴代_3-環己基-、甲酯。表TQy觀 1 〇分鐘以數份將新鮮重結晶的三溴吡啶（自熱Ac〇h (5毫升 每1克）重結晶，用冷的AcOH沖洗並於高度真空中經KOH 乾燥）添加至一經攪拌的3-環己基-1H-吲哚-6-曱酯（60克， 233毫莫耳）（利用WO 2004/065367中所闡述製程製得）存於 CHCh/THF (1:1 ’ 1.25升）中之混合物中。在〇_5 °C下對反 應溶液貫施2.5小時擾拌，並用飽和NaHS03水溶液（1升）、 1 N HC1.(1升）及鹽水（1升）實施洗滌。對有機層實施乾燥 (MgS〇4)並濃縮之。所得紅色油狀物用Et2〇加以稀釋並實 施濃縮。將所得粉紅色固體溶解至Et20 (200毫升）中，用 己烧（3 0 0宅升）實施處理’並實施不完全濃縮。藉由過濾、收 集固體，並用己烷實施沖洗。將母液濃縮至乾燥，並重複 該操作。將固體合併，以得到1 Η- α引u朵-6-甲酸，2-溴代-3 -環己基-，曱酯（64克，190毫莫耳，82%)，呈一絨毛狀的 粉紅色固體’其無需進一步純化即可使用。NMR (300 MHz，CDC13) δ 8.47 (br s，1Η)，8·03 (d，J=1.4 Hz, 1Η)， 7·74 (dd，J-1.4，8·8 Hz，1H)，7.69 (d，J = 8.8 Hz，1H)，3.92 (s，3H)，2.82 (tt，J=3.7，11.7 Hz，1H)，1.98-1.72 (m,7H)， 1.50-1.27 (m，3H)。13CNMR (75 MHz，CDC13) δ 168.2 120736.doc -38- 200817403 ，30.2, 123.1，120.8, 120.3, ΐι8·7, 112 8, 11〇 7, 52 l ，2·2(2)，27.G(2)，26.1。LCMS·· m/e 334 (M-H)·，保留 時間3.34分鐘，管柱A，4分鐘梯度。 中間體2 〇

1Η·吲>-6-曱酸，2-溴代-3-環己基-。緣一 u臭氏_2>是己 基-1Η_吲哚-6_甲酸甲酯（2〇克，6〇毫莫耳）&u〇H(3.8*， 160¾ 莫耳）溶於 Me0H/THF/H20 (1:1:1，300 毫升）之溶液 在90 C下加熱2小時。在冰/H2〇浴中對反應混合物實施冷 卻’用1 M HC1(約160毫升）進行中和，並用h20 (250毫升） 進行稀釋，並在室溫下實施1小時攪拌。藉由過濾收集沉 澱物，用H2〇實施沖洗，並實施乾燥，得到定量產率的 ΙΗ-叫丨σ朵-6-甲酸，2-溴代-3-環己基·，無需進一步純化即可 使用。 下面闡述一可用於提供1Η-吲哚-6-甲酸，2-溴代-3-環己 基-之替代製程： 將一 2_溴代-3-環己基·1Η-吲哚-6-甲酸甲酯（117克，349 毫莫耳）及LiOH.HiO (26.4克，629毫莫耳）溶於 Me0H/THF/H20 (1:1:1，1·8升）之溶液在回流溫度下加熱3 小時。在冰/Η20浴中將反應混合物冷卻至约2°C，隨後用1 M HC1 (約650毫升）進行中和，該鹽酸之添加速率應使溫 120736.doc -39· 200817403 度不超過5。(：。添加後，用H2〇 (1升）對該混合物實施稀 釋’並且邊實施攪拌邊使其升溫至環境溫度。藉由過濾收 集所得沉澱物，用HW實施沖洗，並實施乾燥，得到呈黃 色固體狀1 Η-σ弓卜朵_6-甲酸，2-溴代_3 -環己基-之單thf溶劑 合物（135.5克，345毫莫耳，99%)，其無需進一步純化即 可使用。1H NMR (300 MHz，CDC13) δ 11.01 (bl· s，1Η)， 8·77 (s，1Η)，8·07 (d，J=1.5 Ηζ，1Η)，7.82 (dd，卜1·5, 8·8 Ηζ，1Η)，7·72 (d，J = 8.8 Ηζ，1Η)，3·84_3·74 (m，4Η)，2.89 (m，1Η)，1.98-1.72 (m，11Η)，1.50-1.24 (m，3Η)。13CNMR (75 MHz，CDC13) δ 172.7，135.5，130.7，122.3，120.9(2)， 118.8，113.3，111.1，67.9(2)，37.0, 32.2(2)，27.0(2)，26.1， 25.5(2)。LCMS: m/e 320 (M-H)-，保留時間 2·21 分鐘，管 柱A ’ 4分鐘梯度。 中間體3

1H-吲哚-6-甲醯胺，2-溴代-3-環己基[(二甲胺基）石黃酿 差在22°C下將1，1’_羰基二咪唑（1.17克，7.2毫莫耳）添 加至一經攪拌的2-溴代-3-環己基-1H-吲哚-6-甲酸（2.03 克，6.3毫莫耳）溶於thf (6毫升）之溶液中。C〇2之放出係 同時發生的，並且當其變慢時，將該溶液在5 0 °C下加熱工 小時，並隨後冷卻至22°C。添加N,N-二曱基磺醯胺（0.94 120736.doc -40- 200817403 克’ 7.56毫莫耳），再逐滴禾 ’ 4、加一 DBU (1.34 克，8·8 毫莫 耳）溶於THF (4毫升）之溶液。繼綠由 ‘績實施24小時攪拌。使該 混合物在乙酸乙酯與稀HC1< η、仓>、 ^ 〈間進仃分配。先用水再用鹽 水對乙酸乙酯層實施洗務，# 具 卞並經NajO4乾燥。將萃取物濃 縮至乾燥，留下g迷音多！ 下呈色易碎泡沫狀之標題產物（2.0克， 74% ’ >90% 純度，自 NMR /士上丄、1 估叶）。NMR (300 MHz， DMSO-D6) 5 ppm 1 28-1 4〇 / PP 1,49 (叫 3H) 1.59-2.04 (m，7H)

2.74-2.82 (m，1H) 2·88 (s5 6H、7 山 t。^ ’ 、，〇Η) 7·57 (dd，J=8.42，1.46 Hz， 1H) 7_74 (d5 J=8.78 Hz，1H、7qi , in) /.91 (S? 1H) 11.71 (Sj 1H) 12.08 (s，1 H)。 下面閣述一製備m-。弓卜朵·6_甲酿胺，2-演代_3_環己基_n_ [(二甲胺基）磺醯基]-之替代方法。 將己基-出“弓卜朵冬甲酸（1〇2〇克，莫 耳）及乾知THF (300宅升）添加至一裝備有一機械搜拌器、 酿度凋即态、一 n2入口及一冷凝器之i升四頸圓底燒瓶 中，亚將該混合物置於％下。搜拌1〇分鐘後，逐份添加 CDI (50·3克’ 〇·31莫耳然後將反應混合物加熱至5〇。〇 保持2 ]、纣冷卻至30 C後，一次添加N，N-二甲胺基磺醯 胺（41.7克’〇.336莫耳），隨後經1小時之時段逐滴添加 4、，（54]ι升〇·362莫耳）。然後將反應混合物在室溫下 攪拌20小時。在真空中去除溶劑，並使殘餘物在Et〇Ae與1 N HC1 (1·1 ’ 2升）之間進行分配。分離出有機層，並用 EtOAc (500 ¾升）對水層實施萃取。合併的有機層用鹽水 (1.5升）洗滌並經MgS〇4乾燥。對溶液實施過濾，並隨後在 120736.doc -41 - 200817403

真空中實施濃縮’得到粗產物（111.〇克）。在6(rc下將粗產 物懸汁於EtOAc (400毫升）中，隨後缓慢添加庚烷（2升）。 對所得混合物實施攪拌，並冷卻至〇£5(：。隨後對其實施過 濾。用少1庚烷對濾餅實施沖洗，並實施真空室空氣乾燥 2天。收集產物’為一白色固體（92 〇克，83〇/())。iH NMR (MeOD，300 MHz) δ 7.89 (s，H)，7.77 (d，J=8.4 Hz，1H)， 7.55 (dd，J = 8.4及 1·8 Hz，1H)，3.01 (s，6H)，2.73-2.95 (m， 1H)，1.81-2.05 (m，8H)，1·39-1·50 (m，2H); m/z 429 (M+H)+ 〇 中間體4

1H-吲哚-6-甲醯胺，3-環己基-N-[(二甲胺基）磺醯基]-2-〈2- f潑差-心f輿茗差>。將一 2-溴代-3-環己基-N-[(二甲 胺基）磺醯基]-1H-吲哚-6-甲醯胺（4.28克，0.01莫耳）、4-甲 氧基-2-甲醯基苯基硼酸（2_7克，0.015莫耳）、2-二環己基 膦基-2f，6’·二甲氧基·聯苯基（41毫克，0.0001莫耳）、乙酸 鈀（11.2毫克）及精細研磨的碳酸鉀（4.24克，0·02莫耳）存於 甲苯（30毫升）中之混合物在氮氣氛中於回流條件下實施3〇 分鐘授拌，在此期間LC/MS分析顯示反應結束。隨後用乙 酸乙酯及水稀釋反應混合物，並隨後用過量稀HC1對其實 施酸化。然後，收集乙酸乙S旨層，並用稀HC1、水及鹽水 120736.doc -42- 200817403 洗滌之。然後對有機溶液實施乾燥（硫酸鎂）、過濾及濃 縮，得到一樹膠狀物。用己烷（250毫升）及乙酸乙酯（25毫 升）對該樹膠狀物實施稀釋，並在22°C下對該混合物實施 2 0小時擾拌’在此期間，產物轉化成一嫩黃色顆粒狀固體 (4 · 8克），其無需進一步純化即可直接使用。 下面闡述一製備1H-吲哚-6-甲醯胺，3-環己基-N-[(二甲 胺基）磺醯基]-2-(2-甲醯基_4_甲氧苯基）-之替代方法： 向一經攪拌的2-溴代-3-環己基[(二甲胺基）磺醯基]_ 吲哚-6-甲醯胺（54.0克，126毫莫耳）、4-甲氧基-2-甲醯基 苯基硼酸（29·5克，164毫莫耳）及LiCl(13.3克，315毫莫耳） 溶於EtOH/甲苯（1:1，1升）之溶液中添加一 Na2C03 (40.1 克，379毫莫耳）溶於水（380毫升）之溶液。將反應混合物 攪拌10分鐘，並隨後添加Pd(PPh3)4 (11.3克，10·0毫莫 耳）。用氮氣對反應溶液實施沖洗，並在70°C (内部監測）下 實施加熱過夜，並隨後冷卻至室溫。用EtOAc (1升）及 EtOH (100毫升）對反應物實施稀釋，用i n HC1水溶液（1 升）及鹽水（500毫升）小心地實施洗滌，實施乾燥（MgS04)、 過濾及濃縮。用Et20 (600毫升）對殘餘固體實施1小時攪拌 並藉由過濾進行收集，得到1H-吲哚-6-曱醯胺，3-環己基· N-[(二甲胺基）石黃醯基]-2_(2-曱醯基-4-曱氧苯基）-(52.8克， 109毫莫耳，87%)，呈黃色粉末狀，其無需進一步純化即 可使用。1H NMR (300 MHz，d6-DMS0) δ 11.66 (s，1H)， 8.17 (s5 1Η)，7.75 (d，J=8.4 Ηζ，1Η)，7·74 (d，J=8.4 Ηζ， 1Η)，7·59 (dd，J=1.4，8.4 Ηζ，1Η)，7·23-7·16 (m，2Η)，7.08 120736.doc -43 - 200817403 (dd，J-2.6，8.4 Hz，1H)，6.54 (d，J=8.8 Hz，1H)，3 86 Γ V s ； 3H)，3.22-3.08 (m，1H)，2.91 (s，6H)，2.00-1.74 (m，7H) 1·60·1·38 (m，3H)。13CNMR (75 MHz，CDC13) δ 1657 158.8，147.2，139.1，134.3，132.0，123·4，122.0，1192 118·2, 114.8，112.3, 110.4, 109.8, 79.6, 45.9, 37.2(2)，34 7 32.0(2)，25.9(2)，24.9。LCMS: m/e 482 (M-H)_，保留時間 2·56分鐘，管柱A，4分鐘梯度。 中間體5

6H-異吲哚并[2，l-a]吲哚-3-甲醯胺，11-環己基二甲 胺基）石頁醯基]-6-乙氧基-8-罗氧基-。句一襄儀有一溫^产_ 制器、一冷凝器、一 N2入口及機械攪拌器之5升四頸圓底 U 燒瓶中充入甲苯（900毫升）、EtOH (900毫升）、2_漠代_3_環 己基-N-(N，N-二甲基胺磺醯基）-1沁吲哚_6_甲醯胺（9〇克， 0.21莫耳）、2 -甲醯基-4 -甲氧基苯基蝴酸（4 9.2克，〇 273莫 耳）及LiCl (22.1克，0.525莫耳）。用乂對所得溶液實施15 分鐘鼓泡。添加一 Na2C03 (66.8克，0.63莫耳）溶於ho (675毫升）之溶液，並用A對反應混合物實施再1〇分鐘鼓 泡。添加Pd(PPh3)4 (7.0克，6.3毫莫耳），並將反應混合物 加熱至70°C ’保持20小時。冷卻至35。(：後，緩慢添加一 j 120736.doc -44- 200817403 ΝΗα溶液（1.5升）。將所得混合物轉移至—6升分液漏斗中 並用EtOAe (2x1.5升）貝施萃取。合併的有機萃取物用鹽水 (2升）洗滌，經MgS〇4乾燥、過渡並在真空中實施濃縮，得 到一頁色固體，用20% EtOAc存於己烷（45〇毫升，5(rc至〇 °c )中之混合物實施研磨，得到呈黃色固體狀3_環己基·Ν_ (Ν，Ν-一甲基胺磺醯基）-2-(2-甲醯基-4·甲氧苯基）-iH j引哚一 6-甲醯胺（65·9克）。HPLC純度，98%。

在真空中對取自研磨製品之母液實施濃縮。殘餘物用 EtOH (50宅升）實施3小時回流。然後將溶液冷卻至〇它。 對沉澱物實施過濾並用冷的TBME (5°C )(20毫升）實施洗 滌。對濾餅實施真空室空氣乾燥，以得到更多量白色固體 狀標題化合物（16.0克）。HPLC純度，99%。4 NMR (CDC13，300 ΜΗζ) δ 8.75 (s，1H)，7.96(s，1H)，7·73 (d， J = 8.4 Ηζ，1Η)，7·67 (d，J=8.4 Ηζ，1Η)，7.45 (dd，J=8.4及 1.4 Hz，1H)，7.09 (d，J=2.2 Hz，1H)，6·98 (dd，J=8.4及 2.2 Hz， 1H)，6.50 (s，1H)，3.86 (s，3H)，3.05 (s，6H)，2.92-3.13 (m， 3H)，1.85-1.93 (m，7 H)，1.40-1.42 (m，3H)，1.05 (d，J=7.1

Hz，3H)。m/z 512 (M+H)+ 0 中間體4

1H-吲哚-6-甲醯胺，3-環己基-N-[(二甲胺基）磺醯基] 120736.doc -45- 200817403 (严严萬衷基」將11-環己基-N-(N，N-二甲基胺 磺醯基）_卜乙氧基氧基-6H-異吲哚并[2，！^]吲哚-3-甲 酉血胺/合解於THF (75毫升）中。向該溶液中添加一2 N HC1 溶液（300毫升）。在室溫下於n2氣氛中對該混合物實施16 小打劇烈攪拌。對所得懸浮液實施過濾並用冷的tbME (2x30宅升）對其實施洗滌。對濾餅實施真空空氣乾燥過 仪’得到黃色固體狀標題化合物。HPLC純度，99%。β NMR (DMSO-d6，300 MHz) δ 11.65 (s，1H)，8.16 (s，1H)， 7.76 (d，J=5.9 Ηζ，1Η)，7·73 (d，J=5.9 Ηζ，1Η)，7·58 (dd， J=8.5及 1·5 Hz，1H)，7.17-7.20 (m，2H)，7·08 (dd，J=8.5及 1·4 Hz，1H)，6.55 (d，J=8.6 Hz，1H)，3·86 (s，3H)，3.14-3.18 (m，1H)，2·91 (s，6H)，1.75-1.99 (m，7H)，1.48-1.60 〇, 3H) ; m/z 484 (M+H)+ 〇 中間體6

7H-。弓卜朵并[2，1-α][2]苯并氮呼_6-甲酸，i3_環己基-10-[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基]_3_甲氧基_，甲酯。在一 55 C之油浴溫度下對一 3 -環己基-n_(N，N-二甲基胺石黃醢 基）-2-(2-甲醯基-4-甲氧苯基）4^吲哚-6-甲醯胺（4.8克， 120736.doc -46- 200817403 0·01莫耳）、2_(二甲氧基磷醯基）丙烯酸甲酯（9.7克，〇·〇2莫 耳）及碳酸铯（7.1克，〇·〇2莫耳）存於DMF (28毫升）中之混 合物實施20小時攪拌。將該混合物倒至冰_水中，並用稀 HC1實施酸化，以使粗產物沉澱。收集固體，實施乾燥並 於Si〇2 (110克）上用一包含2%乙酸之乙酸乙酯與二氯甲烧 (1:10)之溶液實施急驟層析。將同質部分合併，並實施蒸 發，以獲得呈淡黃色固體狀標題化合物（3 ·9克，71%產 率）。MS: 552 (Μ=Η+) 〇 下面闡述一製備7Η·吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼_6_甲酸， 13-環己基_1〇-[[[(二甲胺基）石黃醯基]胺基]幾基]_3—甲氧基·， 甲酯之替代製程。 在60°C下對一 11-環己基[(二甲胺基）磺醯基]_6_羥基_ 8-甲氧基-6H-異吲哚并甲醯胺（環狀的半縮醛 胺）(63.0克，130¾莫耳）、2-(二甲氧基麟醢基）丙稀酸甲酯 (60克，261¾莫耳）、碳酸铯（ι〇6克，326毫莫耳）溶於DMF (400耄升）之浴液實施4·5小時加熱。額外添加2_(二甲氧基 磷醯基）丙烯酸甲酯（15克，65毫莫耳）及碳酸铯（21.2克， 65毫莫耳）’並隨後在6〇 t下對反應物實施加熱過夜，並 冷卻至室溫。用HW (1升）對活躍的反應混合物實施稀釋， 用1 N的HC1水溶液（800毫升）實施緩慢中和，攪拌3小時， 並隨後藉由過濾進行收集沉澱物。用玢2〇 (8〇〇毫升）將固 體研成粉末，並實施乾燥，得到呈黃色固體狀7H_吲哚并 [2，14][2]苯并氮呼-6_甲酸甲酯，13-環己基_1〇_[[[(二甲胺 基）石頁醯基]胺基]羰基]_3_甲氧基_，曱酯（7〇·2克，127毫莫 120736.doc -47- 200817403 耳，98°/〇) ’其無需進一步純化即可使用。iH nmR (300 MHz，CDC13) δ 8.67 (s，1H)，8.09 (s，1H)，7.86 (d，J=8.4 Hz，1H)，7.80 (s，1H)，7.50 (d，J=8.4 Hz，1H)，7.42 (d， J=8.8 Hz，1H)，7.08 (dd，J=2.6，8·8 Hz，1H)，6.98 (d，J=2.6 Hz, 1H), 5.75-5.51 (m，1H)，4.29-4.01 (m，1H)，3.89 (s， 3H)，3_82(s，3H)，3.05(s，6H)，2.87-2.73 (m，lH)，2.11-1·12 (m, 10H)。LCMS: m/e 5 50 (M-H)·，保留時間 3.21 分 鐘，管柱A，4分鐘梯度。 中間體7 O^OMe

壞丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼_la(2H)-甲酸，8_環己 1/ 基_5·[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基μ1ιη_二氫_u-甲氧 差、f藉，向一圓底燒瓶中之三曱基碘化亞颯（199 耄克，0.906毫莫耳）及NaH (38毫克存於6〇%油分散液中， 0.953 ¾莫耳）之混合物中添加dMS〇 (5毫升）。在室溫下對 ’ 反應混合物實施〇·5小時攪拌。然後添加7H-吲哚并[2,1 - a][2]苯并氮呼_6_甲酸，13_環己基_1〇_[[[(二甲胺基）磺醯 基]胺基]幾基]-3-(曱氧基）_，甲酯（125毫克，0.227毫莫 耳）’並在室溫下對反應混合物實施3小時攪拌，隨後在50 °C實施再3小時攪拌。然後用水對反應物實施驟冷，並用1 120736.doc -48- 200817403 N HC1溶液實施酸化。然後粗產物發生沉澱，呈-淡黃色 固體狀，藉由過濾收集之，並在空氣中實施乾燥，（⑽毫 克，83%產率）。隨後藉由製備型^^乙〇對6毫克該物質實施 、、'屯化獲得呈乂汽色固體狀標題化合物（i. 8毫克）。⑽_ 566 (MH )，保留時間：3.850 分鐘。咕 NMR (500 MHz， MeOD) δ ppm 0.28 (m5 0.36H) 1.19-2.20 (m5 11.64H) 2.70-3.02 (m? 2H) 3.03 (Sj 2.16H) 3.05 (s5 3.84H) 3.49 (d? J 15·26 HZ，〇·64Η) 3·54 (s，1.92H) 3.83 (s，1.08H) 3.91 (s， 3H) 4.08 (d5 J=15.26 Hz5 0.36H) 5.29 (d, J=15.26 Hz? 0.36H) 5.50 (d? J=14.95 Hz, 0.64H) 6.98-7.06 (m5 1H) 7.16 (d, J 2.44 Hz5 0.36H) 7.23 (d5 1=2.44 Hz5 0.64H) 7.30 (d5 J-8·55 Hz，0.64H) 7.34 (d，J=8.55 Hz，0.36H) 7·56 (dd， J-8.55，1.53 Hz，0.64H) 7.63 (dd，J=8.55，1.53 Hz，0.36H) 7·88 (d，J=8.55 Hz，0.64H) 7·91 (d，J=8.55 Hz，0.36H) 8.12 (s，0.36H) 8.33 (d，J=l_53 Hz，0.64 H)。 Q 下面提供一製備標題化合物之替代製程。 在A中向一裝備有一機械攪拌器、a入口及一溫度計之 經火焰滅菌的1升四頸圓底燒瓶中充入氫化鈉（95%)(3.09 • 克’ 129·2毫莫耳）及乾燥DMF (200毫升）。伴隨劇烈攪拌， . 逐份添加三甲基碘化亞颯（32.5克，147.3毫莫耳），在此期 間’溫度升高至30°C。經30分鐘攪拌後，快速添加一 7H-叫卜朵并[2，1^][2]苯并氮呼-6-甲酸，；13_環己基-10-[[[(二曱 胺基）石黃醯基]胺基]羰基]_3_(甲氧基）_，甲酯（33.8克，613 毫莫耳）溶於乾燥DMF (70毫升）之溶液。在低於30。(：下對 120736.doc -49- 200817403 應此&物實知3 〇分鐘攪拌，並隨後逐份傾倒至一冰冷的 1 N HC1 (130毫升）溶於η2〇 (2升）之溶液中。將所得懸浮液 钱械攪拌1小時後，對沉澱物實施過濾，並用Η2〇 (1〇〇毫 升）對濾、餅實施洗滌。使該濾餅在Et〇Ac及〇.5 ν HC1 ，4升）之間進行分配。分離出有機相，用ιι20 (1升）及 鹽水（1升）實施洗滌，經MgS〇4乾燥，實施過濾並在真空中 /辰縮之。將殘餘物溶解於Et〇Ac (15〇毫升）中，穿過矽膠 塾（300克於己燒中）對溶液實施過濾，並用5〇%存於己烷中 之EtOAc (5升）進行沖洗。在真空中對濾液實施濃縮，得 到一淺黃色固體，自50。(：至〇。〇在10%存於TBME (220毫 升）中之EtOAc對該淺黃色固體實施研磨，得到呈白色固體 狀環丙[d]吲哚[2，l-a][2]苯并氮呼-la(2H)-曱酸，8-環己基-5_[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基;二氫-11-甲氧基_， 甲酯，（+/-)，（26.1 克，75%產率）。HPLC純度，1〇〇%。4 NMR (DMS0-d6, 300 ΜΗζ) δ 11.61 (s，1Η)，8.47 (s，0·5Η)， 8.25(s，0.5H)，7.81-7.88(m，lH)，7.57-7.63 (m，lH)，7.23-7.29 (m，2Η)，7.01-7.07 (m，1Η)，5.43 (d，J=15.〇 Ηζ，0.5Η)， 5.22 (d，J-15 Hz，0.5H)，4.04 (dd，J=15.4及 ό·6 Hz，0·5Η)， 3·83 (s，3H)，3.75 (s，1H)，3.08-3.47 (m，〇·5Η)，3.29 (s， 3H)，2.73-2.92 (m，8H)，1·1ΐ-ΐ·99 (m，；ι〇·5Η)，0.20 (m， 0.5H); m/z 566 (M+H)+。 -50- 120736.doc 200817403 中間體8

環丙[d]。引口朵并[2，l-a][2]苯并氮呼-：[a(2H)-甲酸，8-環己 基=%[[[(二曱胺基）磺醯基]胺基]羰基]q，12b_二氫曱氧 基、产藉。以5〇毫克/毫升之濃度將一（+/-)環丙[d]吲 哚并[2，l-a][2]苯并氮呼-la(2H)-甲酸，8-環己基_5-[[[(二曱 fe:基）石頁醯基]胺基]魏基]-1，12b -二氫-11-甲氧基-甲g旨試樣 溶解於EtOH/CH3CN 1/1+0.5% DEA中。[添加DEA可確保 化合物在注射期間保持呈溶液狀態]。然後，在下示條件 下將此溶液注射至一 Thar SFC-350製備型SFC上。

Thar SFC-350 Ji ^ ^ ^ Ί'ά ： Chiralcel OJ-H 5x25^ 米；流動相：25% MeOH/CH3CN (1/1)於C02中；壓強 (巴）：1 00 ;流率（毫升/分鐘）：240 ;溶液濃度（毫克/毫 升）·· 50 ;注射數量（毫升）：4.5-5 ;循環時間（分鐘/注 射）：6·5-7 ;溫度（。〇 ·· 45 ;處理量（克/小時）：約2 ;檢測 波長（運行）·· 254。 自371 ·4克外消旋的起始物，獲得合計177.3克期望的第 二流出的（-)同分異構體，包含約1 Meq二乙胺。用以下操 作對此物質實施純化。依序用〇·5 N HC1 (lx4〇〇毫升， 1x240毫升）、Ηβ (2x240毫升）及鹽水（2x240毫升）對溶解 120736.doc -51- 200817403 於二氯甲烷(800毫升)中之混合物(24 7克)實施洗務。然後 用無水Na2S04對有機層實施乾燥，並實施過&m 到22.33克（環丙[d]。弓卜朵并[2山a][2]苯并氮呼士(叫甲酸于 8_環己基-5-[[[( 一曱胺基）磺醯基]胺基]羰基]_i，ub -气 1卜甲氧基-，甲酯，㈠-為一黃色固體（92%回收率 HPLC >99%(保留時間 2.38 分鐘）；LC/MS (Bs+) 566 5 1 C30H35N3O6S.0.33H2〇之分析計算值：c，63 〇4; Ή 6 ^ n 7.35; S，5·61; H2〇，1·〇4。觀測值：c，63 〇7· 5 〇·υι; n. 7.24; S，5.58; H2〇，1·〇3。NMR 顯示 Et2NH 缺乏。利用以 分析性HPLC操作測得此物質之ee>99%。 (M+H? 100)； [a]D25C.194.64° (c 1.03, Me〇H)

。分析 :100 ：15% ;保留 在Thar分析性SFC上進行ee測定之分析性條件 柱：Chiralcel OJ (.46x25釐米，1〇微升；BPR壓強 巴；溫度：35 °C ;流率：3.0毫升/分鐘；流動相 MeOH/CH3CN (1/1)於C02中；檢測波長·· 254奈米 時間（分鐘）·· 4, 6.5。 中間體9

OMe 環丙[d]吲u朵并[2，l-a][2]苯并氮呼-la(2H)-甲酸 〇 ^ 一3畏已 120736.doc -52- 200817403 基-5-[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基μ1ιη_二氫_u-甲氧 羞㈠-。經20分鐘緩慢地向一㈠環丙[d]吲哚并[2，l_a][2] 苯并氮呼_la(2H)_曱酸，8-環己基_5-[[[(二甲胺基）磺醯基] 胺基]羰基]-l，l2b-二氫-11-甲氧基-，曱酯（22.33克，39.5毫 莫耳）溶解1^011(30〇毫升）之溶液中添加1^价011(120毫 升），同時保持反應溫度<30°C。在室溫下於N2中對混合物 • 實施1 8小時攪拌。HPLC指示反應結束。向反應溶液中添 加1 N HC1 (130毫升）。完成添加後，反應混合物之pH值為 % J 約2°將反應混合物中之曱醇蒸發掉。向該混合物中添加 水（3 00毫升），隨後用CH2C12 (1 x600毫升，1x200毫升）對 其實施萃取。合併的萃取物用H20 (2x300毫升）、鹽水 (2x300毫升）洗滌，並實施乾燥（Na2S〇4)及蒸發，得到 20.82克（96%產率）黃色固體狀標題化合物。HPLC條件管 柱· Phenomenoex Synergi Polar-RP 4 um 4·6><50 毫米； UV : 220奈米；梯度時間：4分鐘；流率·· 4毫升/分鐘， 75-100% B ;溶劑 a ; 10% MeOH/90% H20，含 〇 2% kJ · H3P〇4，溶劑 B : 90% MeOH/10% H20，含 0.2% H3P〇4。 HPLC>99%(保留時間 180分鐘）LC/MS (ES+) 552.25 (M+H， 100); [a]D25c-i66.99。（c 1·00，MeOH)。GC分析：CH2C12 • 4·94% ; C29H33N3〇6S.0.16 Η2Ο·0·35 CH2C12 之分析計算 值：c，60.37; H，5·87; N，7·20; S，5.49; H20, 0.49; CH2C12, 5.02。觀測值：c，59.95; H，5.89; N，7.03; S，5.38; h，〇 0.47; CH2CI2，4.94。 120736.doc -53- 200817403 中間體1 ο

環丙[d]吲哚并[2，1-α][2]苯并氮呼_la(2H)_甲酸，8_環己 基_%[[[(二曱胺基）磺醯基]胺基]羰基]_l jn_二氫_u-甲氧 差、Γ+/+。向一（+/-)環丙[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮呼_ la(2H)-甲酸，8-環己基_5_[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基卜 l，12b-二氫-11-甲氧基_，甲酯（1〇〇毫克，〇177毫莫耳）溶於 THF/甲醇混合物（2·〇毫升/2.0毫升）之溶液中添加2 N Na〇H 溶液（1.0毫升）。在90°C下於微波條件下對反應混合物實施 5分鐘加熱。隨後對其實施濃縮，用} n HC1溶液實施酸 化’並用乙酸乙酯（2x20毫升）實施萃取。將有機層合併， 實施乾燥（MgSOO、過濾及濃縮。藉由製備型Hplc對殘餘 物實施純化，獲得呈淡黃色固體狀期望產物（59毫克，60% 產率）。乂8 111/2 5 52 (^411+)，保留時間：3.850 分鐘。111 NMR (3〇〇 MHz? MeOD) δ ppm 0.25 (m, 0.38H) 1.14-2.22 (m，11.62H) 2.69-2.98 (m，2H) 3.02 (s，2.28H) 3.02 (s， 3.72H) 3.41 (d，J=15.00 Hz, 0.62H) 3.88 (s，3H) 4.01 (d， J=15.〇〇 Hz? 0.38H) 5.26 (d5 J=15.00 Hz, 0.38H) 5.45 (d? J=14.64 Hz，0.62H) 6.94-7.02 (m，1H) 7.13 (d，J=2.56 Hz， 120736.doc -54- 200817403 0.38H) 7.21 (d? J=2.20 Hz? 0.62H) 7.26 (d? J=8.42 Hz 0.62H) 7.30 (d? J=8.78 Hz5 0.3 8H) 7.53 (dd? J=8.42? 1.46

Hz，0.62H) 7.61 (dd，J = 8.60，1.65 Hz，0.38H) 7.85 (d J = 8.42 Hz，0.62H) 7.89 (d，J=8.42 Hz，0.38H) 8.10 (s， 0.38H) 8.28 (d，J=1.46 Hz，0.62 H)。 中間體11

環丙[d]吲哚并[2，1-α][2]苯并氮呼-la5(2H)_二甲醯胺， 8-環己基-N5-[(二甲胺基）磺醯基]-m二氫—Nla_[(2R 3s)_ 3-羥基-4,7,7-三甲基二環[221]庚_2_基]_u-甲氧基·， 幻-厂部分的夂。向一（+Λ)環丙[d]。引哚并[2，l-a][2]苯并氮 呼-la(2H)_曱酸，8-環己基_5_[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰 基]_1，121)-二氫-11-曱氧基-(50〇毫克，（)9〇6毫莫耳）溶於 DMSO (20.0毫升）之溶液中添加TBTU (437毫克，ι·36毫莫 耳）及DIPE A (0.95¾升’ 5.436毫莫耳）。在室溫下對反應 混合物實施1 5分鐘攪:拌。然後添加（2S，3R)-3 -胺基-1 7,7_ 三甲基二環[2.2.1]庚-2-醇（2 80毫克，1.36毫莫耳），並在室 溫下對反應混合物實施攪拌過夜。用水對反應混合物實施 120736.doc •55- 200817403 驟1並用1 N HC1溶液對其實施酸化。一棕色固體分離 出來並藉由過濾採集之。然後在以下條件下藉由製備型 HPLC對此材料實施分級。管柱：伽⑽―如19毫米 χ100宅米；溶劑 A : 10% Ch3CN_9〇% h2〇_01% TFA ;溶 劑B . 90% CH3CN-l〇% h2〇_〇 1% TFA ;過程：以 65%溶劑 B開始，起始保持時間為5分鐘，然後在3〇分鐘内逐漸增加 至_溶劑B，流率25毫升/分鐘。載率：5〇_6〇毫克/運 行0

在上文所述HPLC條件下，環丙[d]吲哚并苯并 氮呼-la，5(2H)-二甲醯胺，8_環己基[(二甲胺基）石黃酿 基]-l，12b-二氫-Nla-[(2R，3S)-3-羥基-4,7,7-三曱基二環 [2.2.1]庚-2_基]_11-甲氧基_，（1叫[部分的]_在環丙问吲哚 并[2，l-a][2]苯并氮呼_ia，5(2H)-二甲醯胺，8-環己基_N5 [(二甲胺基）磺醯基]-l，12b-二氫 _ΝιΜ(2Κ，38)_3_ 羥基 _4,7,7· 三甲基二環基]甲氧基_，（laSM部分的’]_之 前流出。所獲得產物為淡黃色固體，23〇毫克，36°/0產 率。]^!11/ 703 (]^11+)，保留時間：3.936分鐘。111!^1^汉 (500 MHz5 MeOD) δ ppm 0.14-0.24 (m? 2.64H) 0.51 (s 2.46H) 0.72-2.21 (m，20.9H) 2.49 (m，0.18H) 2.62 (m 0.82H) 2.85 (m，0.18H) 2.96 (m，〇·82Η) 3·03 (s，6H) 3 39 (m，0.82H) 3.49-3.58 (m，1.64H) 3.71-3.80 (m，〇·36Η) 3 9〇 (s，3H) 4.17 (d，J=14.65 Hz，0.18H) 5.06 (d5 J44.65 Hz 0.18H) 5.37 (d，J=14.95 Hz，〇·82Η) 6.73 (d，j=5.49 出 0.82H) 6.98-7.05 (m，1H) 7.08 (d，J=4.58 Hz，〇·ΐ8Η) 7 1〇 120736.doc -56- 200817403 (d，J=2.44 Hz，0.18H) 7.21 (d，J=2.44 Hz，0.82H) 7·31 (d， J=8.55 Hz5 0.82H) 7.34 (d, J=8.55 Hz, 0.18H) 7.59-7.64 (m, 1H) 7.87-7.93 (m，1H) 7.99 (s，0.18H) 8.09 (d，J=l.22 Hz， 0.82 H)。 中間體12

〆、μ /❿田又,u。一棕色固 然後在以下條件下藉由 體分離出來，並藉由過濾收集之。 環丙[d]吲哚并[2,1-a][2]苯并氮呼-la，5(2H)-二甲醯胺， 8-環己基-N5-[(二甲胺基）磺醯基卜二氫_Nia_以2R，3Sy 3-羥基-4,7,7-三甲基二環[2 2 η庚_2_基]_u_甲氧基_， 部分的7-。向一（+/_)環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮 呼-la(2H)-甲酸，8-環己基_5-[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰 基]-l，12b·二氫-11-甲氧基_(5〇〇毫克，〇·9〇6毫莫耳）溶於 DMSO (20.0毫升）之溶液中添加TBTU (437毫克，136毫莫 耳）及DIPEA (0.95毫升，5.436毫莫耳）。在室溫下對反應 混合物實施15分鐘攪拌。隨後添加（2S，3R)_3_胺基]，7,7_ 三甲基二環[2.2.1]庚-2-醇（280毫克，1.36毫莫耳），並在室 溫下對該反應混合物實施攪拌過夜。用水對反應混合物實 施驟冷，並隨後用1 N HC1溶液對其實施酸化。一棕色固 120736.doc -57- 200817403

製備型HPLC對此材料實施 宅米x 100毫米；溶劑A 分級。管柱：Waters SimHre 19 :!〇% CH3CN-90°/〇 H2〇.〇.1% TFA ;溶劑 B : 90% CH3CN_1〇% H2〇_〇 tfa ;過程：以 65%的溶劑B開始，初始保持時間為5分鐘，然後在％分鐘 内逐漸增大至90%溶劑b ’流率25毫升/分鐘。載率：5"〇 毫克=行。在上文所述HPLC條件τ，環丙⑷㈣并㈤-a][2]苯并氮呼-la，5(叫二曱醯胺，8_環己基_N5_[(二甲胺 基）續醯基]-l，12b-二氫-NiM(2R，3S)_3_ 經基 _4,7,7_三甲基 二環[2.2.1]庚-2-基H1-甲氧基·，（USH部分的]_在環丙⑷ t朵并苯并氮呼七，5(叫二甲酿胺，8_環己基_ NM(二甲胺基）磺醯基H,12b_二氫-NlM(2R，3s)_3_羥基· Ο u 4,7,7-三甲基二環[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基_，（1叫[部分 的l·之前流出。所獲得產物為淡黃色固體，215毫克，34% 產率。MS m/ 703 (MH+)，保留時間：4·〇38分鐘。lH nmr (500 MHz，MeOD) δ ppm 0.20 (m，0.38H) 〇·75 (s，1.86H) 0.76 (s? 1.86H) 0.84 (s5 1.86H) 0.85 (s? I.14H) 0.89-2.18 (m，18.9H) 2:52 (m，0.38H) 2.70 (m，〇 62H) 2 85 (m， 0.38H) 2.97 (m，0.62H) 3.03 (s，2.28H) 3·〇4 (s，3 72H) 3.33-3.39 (m, 0.62H) 3.43-3.51 (m5 1.24H) 3.73-3 77 (m 0.38H) 3.78-3.84 (m, 0.38H) 3.90 (s5 1.86H) 3.90 (s5 1.14H) 4.14 (d? J=14.65 Hz? 0.38H) 5.11 (d5 J=l4.65 Hz? 0.38H) 5.44 (d，J=15.26 Hz，0.62H) 6.68 (d，J=4 88 jjz，〇 62H) 6.96-7.03 (m，1H) 7.07 (d，J=5.19 Hz，〇·38Η) 7 12 (d J=2.44 Hz, 0.38H) 7.23 (d5 J=2.14 Hz, 0.62H) 7 27 (d 120736.doc -58- 200817403 J=8.54 Hz，0.62H) 7.33 (d，J=8.54 Hz，0.38H) 7.55 (dd， J=8.39? 1.68 Hz? 0.62H) 7.62 (dd5 J-8.55, 1.53 Hz? 0.38H) 7.87 (d，J=8.54 Hz，0.62H) 7.91 (d，J=8.55 Hz，0.38H) 8·08 (d，J=1.22 Hz，0.38H) 8.10 (d，J=1.22 Hz，0.62 H)。 中間體9

環丙[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮呼-la(2H)-甲酸，8-環己 基-5-[[[(二甲胺基）磺醯基]胺基]羰基]_112b-二氫甲氧 差〜向一環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼-la，5(2H)· 二甲胺基，8-環己基-N5-[(二甲胺基）磺醯基piub-二氫· Nla-[(2R，3S)-3-羥基 _4,7,7-三甲基二環[m]庚基卜 u-甲氧基-，（laR)-[部分的]-(160毫克，〇·228毫莫耳）溶於 THF/MeOH (7毫升/7毫升）之溶液中添加1〇 n Na0H (2.0毫 升，20毫莫耳）溶液及4毫升水。在120°C下於微波條件下 對反應混合物實施1小時加熱。然後，對其實施濃縮，用 深濃HC1 >谷液實施酸化，並用乙酸乙酯（2 x 3 〇毫升）實施兩 次萃取。將有機層合併，對其實施乾燥（MgS〇4)、過濾並 在真空中濃縮成一燈色油狀物。然後，藉由製備型HpLC 120736.doc • 59- 200817403 管柱對粗產物實施純化，獲得呈淡黃色固體狀產物（80毫 克，64%產率）。平均比旋光度-130.85 ° ;溶劑MeOH ;波 長589奈米；50毫米室。MS m/ 552 (MH+)，保留時間： 3.760分鐘。NMR (500 MHz，MeOD) δ ppm 0.27 (m? 0.38H) 1.14-2.22 (m3 11.62H) 2.76 (m3 0.38H) 2.80-2.92 (m，1H) 2.92-3.09 (m，6.62H) 3.45 (d，卜 14.95 Hz，0.62H) * 3.90 (s5 1.86H) 3.91 (s5 1.14H) 4.04 (d? J=15.26 Hz, 0.38H) 5.28 (d5 J-15.26 Hz? 0.38H) 5.47 (d? J=15.26 Hz3 0.62H) ' 6.95-7.05 (m? 1H) 7.15 (d5 J=2.75 Hz? 0.38H) 7.23 (d5 J=1.83 Hz5 0.62H) 7.28 (d? J=8.55 Hz? 0.62H) 7.33 (d5 J = 8.54 Hz5 0.3 8H) 7.54 (dd, J=8.395 1.68 Hz, 0.62H) 7.63 (dd，J=8.55，1.53 Hz，0.38H) 7.86 (d，J=8.55 Hz，0.62H) 7.91 (d5 J=8.55 Hz5 0.38H) 8.11 (d? J=1.22 Hz, 0.62H) 8.29 (d，J=1.22 Hz，0.38 H)。 中間體13

OMe 環丙[d]吲哚并[2，1-αΠ2]苯并氮呼-ia(2H)-甲酸，8-環己 基-5-[[[(二曱胺基）磺醯基]胺基]羰基]_1)12b•二氫_u-曱氧 120736.doc -60- 200817403 羞-，⑴·。向一環丙[d]吲哚并[2，ΐ4][2]苯并氮呼一 U，5(2H)_二甲胺基，8_環己基·Ν5_[(二甲胺基）磺醯基]· l’12b-_ 氫-Ν -[(2R，3S)-3·經基 _4,7,7-三甲基二環[2·2·1] 庚-2-基]-11-曱氧基·，（laS)_[部分的]_(ΐ3〇毫克，〇 ΐ85毫莫 耳）>谷於bTHF/MeOH (7毫升/7毫升）之溶液中添加1〇 N NaOH (1.8毫升，18毫莫耳）溶液及4毫升水。在12〇。〇下於 微波條件下對反應混合物實施丨小時加熱。用濃HC1溶液對 其實施濃縮，並用乙酸乙酯（2x30毫升）實施兩次萃取。將 有機層合併’實施乾燥（MgS〇4)、過濾並在真空中實施濃 縮’得到一橙色油狀物。然後，藉由製備型HPLC管柱對 粗產物實施純化，獲得呈淡黃色固體狀產物（68毫克，67% 產率）。平均比旋光度+174.73。；溶劑MeOH ;波長589奈 米；50毫米室。MS m/ 552 (MH+)，保留時間：3.773分 名里。4 NMR (500 MHz，MeOD) δ ppm 0.27 (m. 0.38H) 1.14-2.22 (m3 11.62H) 2.76 (m? 0.38H) 2.80-2.92 (m5 1H) 2.92-3.09 (m，6.62H) 3.45 (d，J=14.95 Hz，0.62H) 3.90 (s， 1.86H) 3.91 (s，1.14H) 4.04 (d，J=15.26 Hz，0.38H) 5.28 (d， J=15.26 Hz，0.38H) 5·47 (d，J=15.26 Hz，0.62H) 6.95-7.05 (m，1H) 7.15 (d5 J=2_75 Hz，0.38H) 7.23 (d，J=1.83 Hz， 〇·62Η) 7.28 (d，J=8.55 Hz，0.62H) 7.33 (d，J=8.54 Hz, 0.38H) 7.54 (dd，J = 8.39, 1.68 Hz，0.62H) 7_63 (dd，J = 8.55, 1.53 Hz，0.38H) 7·86 (d5 J二8·55 Hz，0.62H) 7.91 (d，J = 8.55 Hz，0.38H) 8.11 (d，J=1.22 Hz，0.62H) 8.29 (d，J=1.22 Hz， 0.38H)。 120736.doc -61 - 200817403 中間體14 A |ic〇Me ϋ II OMe 2 -丙烯酸，2-( 一甲氧基氧膦基）-，甲酯。免一 i兔有一 機械攪拌器、一冷凝器、一溫度控制器及一入口之5升 四頸圓底燒瓶中充入低聚曱醛（40.5克，1·35莫耳）、Me〇H (2升）及六氫吼啶（2毫升）。在&下將反應混合物加熱至回 流保持3小時。冷卻至50°C後，一次添加2-(二甲氧基碟酿 基）乙酸酯（150克，0.824莫耳）。繼續將反應混合物加熱至 回流保持1 8小時。冷卻至室溫後，在真空中對反應溶液實 施濃縮’得到澄清的無色油狀物。於一裝備有一溫度調節 器、一N2入口、一磁力攪拌器及一Dean_Stark裝置之3升四 頸燒中將上述油狀物溶解於乾燥甲苯（1升）中。向該溶液中 添加TsOH_H2〇 (5.2克）。然後對反應混合物實施is小時共 沸回流以去除曱醇。冷卻至室溫後，在真空中對該溶液實 施濃縮，得到一黃色油狀物，在1 50-155°C/0.2毫米汞柱下 對該黃色油狀物實施真空蒸餾，獲得呈無色油狀產物 (135.0克）。純度為 90%，基於1H NMR。4 NMR (CDC13, 300 ΜΗζ) δ 7.0 (dd，J=42.4及 1.5 Ηζ，1Η)，6.73 (dd，J=20.5 及 1.8 Hz, 1H)，3.80 (s，6H)，3.76 (s5 3H)。 120736.doc -62- 200817403 中間體15

1H-吲嗓_6•甲酸，2_滇代_3_環己基、u 向-經機械授拌的2,代_3_環己基.十朵_"酸(8〇 克，0·24 m)溶於乾燥-备w

U 你一乳甲烷（1.2升）及THF (1〇〇毫升）之 溶液中添加活化的分子篩（4A，8〇克）及碳酸銀（275克， 〇·99 m)。將反應混合物冷卻至『c並逐滴添加第三丁基漠 二42克1.04 m)。在室溫下對該混合物實施攪拌過夜，並 藉由TLC(己烧-乙酸乙_ 8〇:2〇，心（產物）=〇·7)進行監測。 若剩餘-些未轉化的演酸，則再添加⑽的碳酸銀，並繼 貝攪拌再2·4小時。完成後，穿過—薄的碎藻土底層對反 應混合物實施過濾、。用二氯甲則谓毫升）對濾液實施洗 I。在真空中對合併的濾、液實施濃縮，如此獲得之粗產物 藉由石夕膠層析法_·_網目1乙酸乙S旨於石油鱗（〇_ 2%^中之梯度溶液洗脫）純化。將同質部分合併，並在減壓 下實。施蒸發，得到80克（85%)標題化合物。hplc: / 1/〇(保邊時間=6·56分鐘），管柱：C18 bds，⑼毫 米），流動相：〇.1%溶於水之TFA : ACN之梯度 (3〇—1〇0〜3〇)，流率0·8毫升/分鐘。LCMS: 99·8%(保留時 1 〇4、^4刀鐘），管柱：―仏，C18 5〇Χ4·6毫米流動相： 〇·1%/合於水之甲酸：ACN之梯度（70 —95 —70)，流率：〇 8 120736.doc •63· 200817403 毫升 /分鐘；Μ-1 = 376·5 ; 4 NMR CDC13)(400 MHz) δ 1.37-1.40 (m，3H，環己基），1·62 (s，9H，t-Bu)，1.80-1.94 (兩組m，分別為3H & 4H，環己基部分），2.81 (m，1H，環 己基-苄基的 CH)，7.70-7.75 (m，2H，吲哚-H4&5)，8.04 (s， 1H，吲哚-H7)，8.52 (s，1H，吲哚-NH)。 中間體16

1H-吲哚-6-甲酸，3-環己基-2-(2-曱醯基_4_甲氧基苯基卜， 人厂二严基乙羞潑。將2-溴代-3-環己基_ΐΗ-吲味-6-甲酸第 三丁基酯（72克，0.19 m)溶解於一甲苯與乙醇之ι:1混合物 (720毫升）中並實施脫氣。然後加入LiCi (23·9克，〇·5工 m) ’隨加入碳酸納（720毫升，1·〇 M溶液，分別經脫氣處 理）及 Pd-tetrakis (13.1 克，0.011 m)。攪拌 〇25 小時後，添 加2_甲醯基-4-甲氧基苯基硼酸（41·1克，〇·22 m)，並將反 應混合物加熱至85 c保持4小時。然後藉由TLc對反應進 行監測（己烷-乙酸乙酯80:20，Rf (產物）=〇55)。結束後， 將反應混合物冷卻至室溫’並先添加水（丨〇升）再添加乙酸 乙酯（1.0升）。有機層用鹽水洗滌，並實施乾燥及真空濃 縮，獲得呈黃色固體狀標題化合物。產率75克（74%)。 册1^:99.7%(保留時間=6.3〇分鐘），管柱：（：186別 (4.6x50毫米），SC-307，流動相：〇1% 溶於水 iTFA : 120736.doc -64- 200817403

ACN之梯度（30—1〇〇 —3〇)，流率〇·8毫升/分鐘。lcms: 98·0/〇(保留時間=5·28分鐘），管杈：C18 (5〇><4.6毫 米），流動相：0.1%溶於水之甲酸：ACN之梯度 (7〇 —95 —70)，流率·· 0·8 毫升 / 分鐘；M-l=432.2 ; 4 NMR (DMS〇_d6)(4〇〇 MHz) 1·4(Μ·48 (m，3H，環己基），1·57 (s’ 9Η，t-Bu)，1.84-1.90 (m，7Η，環己基部分），3.09 (m， 1H ’ ％ 己基-节基的 CH)，3.84 (s，3H，OCH3)，6.55 (d，J=4 Hz，1H，芳基h2·)，7·06 (d，1H，芳基h3 )，7 〇8 (s，m，芳 基1"16·)，7.23 (d，1H，吲哚·Η5)，7.53 (d，J=8 Hz，1H，吲哚- H4)，7.70-7.75 (m，2H，NH+吲哚-h7), 8.06 (s，1H，CHO)。 120736.doc 中間體17

7 H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮呼二甲酸，13-環巳基-， 7〇吖7,厂二四差乙羞严鎊。將3_環己基_2_(2_甲醯基_4_曱 氧苯基）-1Η-。弓丨鳴-6-曱酸第三丁基酯（62·5克，〇144 m)溶 解於乾燥DMF (1.2升）中並實施機械攪拌。然後添加碳酸 铯（84克，0.17 m)及2-(二甲氧基磷醯基）丙烯酸甲酯（65_ 70% GC純度，56.2克，〇_18 m)，並將反應混合物加熱至 65°C保持4小時’並藉由Tlc(己烷-乙酸乙酯80:20，Rf (產 物）==0.7)對反應實施監測。結束後，將反應物冷卻至室 -65- 200817403 流，热後用水（1.0升）貫施驟冷。—龙A m ha 汽已口體沉殿出來， 由過濾收集之並在空氣中實施乾燥。夸 精 木卩思後在曱醇中對此材 料實施製漿，實施過濾，並在真空中實 T X她乾燥，得到呈 色粉末狀產物（70克，90%) 〇 HPLC : 99 1〇"仅如士 、 /。（保留時間45 分鐘），管柱：C18 BDS (4.6x50毫米），产翻知· λ · 不J机動相：0.1%溶於 水之TFA: ACN之梯度（30—100 — 3〇)，流率·· 〇·8毫升/分 鐘。LCMS : 100%(保留時間=7·00分鐘），管柱： C18 (50x4.6毫米），流動相：0.1%溶於水之甲酸：acn之 梯度（70 — 95 — 70)，流率：〇·8毫升/分鐘；M+14 02.2 ,·咕 NMR (CDC13)(400 MHz) δ 1·1〇-1·30 (m，3H，環己基），丄 64 (s，9H，t-Bu)，1·77-2·07 (m，7H，環己基部分），28〇 (m，

1H，環己基-节基的 CH)，3.84 (s，3H，〇CH3)，3·93 (s，3H， COOCH3)，4·15 & 5.65 (兩寬峰，皆為 ih，稀丙位 ch2)， 6·95 (s，1H ’ 芳基H6，），7.01 (d，1H，芳基Η2·)5 7.53 (d，J=8

Hz，1H，芳基H3.)，7.70 (d，J=4 Hz，1H，吲哚-H5)，7·84 (s + d，2H，稀 Η+ϋ弓卜朵 _H4)，8.24 (s，1H，叫卜朵 _H7); 13C NMR (CDC13)(100.0 MHz) δ 166.92, 165.71, 158.96, 142.28, 136.47，13.50，134.61，132.43，132.01，129,73，124.78, 124.68，120.33，119.39，119.04，115.62，115.05，111.27, 8 0 · 2 7，5 5.4 9，5 2 · 5 G，3 9 · G 9，3 6 · 8 1，3 3 · 4 Q，2 8 · 3 8，2 7 · 1 5， 26.28。 120736.doc -66- °V°\200817403 中間體1 8

環丙⑷吲哚并[2J_a][2]苯并氮呼·W㈣_二曱酸 環己基-l，12b-二氫甲氧基、5_(1，卜二甲基乙基甲 I「+/十於氮氣中向一經攪拌的三甲基氣化亞颯（567毫 克，4.4毫莫耳）存於無水DMS〇 (1〇毫升）中之懸浮液中添 加氫化納（96毫克’ 4毫莫耳）。在室溫下對所得混合物實施 30-45分鐘攪拌，並隨後以小部分形式添加淨7h、|哚并 [2，l-a][2]苯并氮呼_6，1〇-二甲酸，13_環己基_3_甲氧基_，1〇_ (ι，ι-二甲基乙基）6·甲酉旨（1.〇, 2毫莫耳）。用dms〇(5毫升） 對懸浮液實施稀釋，並在5(rc下實施Η小時加熱。使反 應此口物冷卻至室溫並添加水。分離出一固體，藉由過濾 收集之’用水實施洗〉條，隨後在空氣中實施乾燥過夜，獲 得丨.15克粗產物。藉由急驟管柱層析法（砍膠，3% MeOH 於DCM中）對此材料實施純化，提供純標題化合物（〇 96 克）[(^/1^8.保留時間3.816分鐘；11^516(]\/111+)。111 NMR (400 MHz，CDC13):經觀察發現此產物以呈相互轉化 的旋轉異構體形式存在，此可由化合物的NMR波譜證 實。 以下操作為一影響外消旋的環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯 120736.doc -67- 200817403 并氛呼-la，5(2H)-二曱酸，8_環己基·U2b_二氫-u_甲氧基_， 5-(1，1-二甲基乙基如甲酉旨，（+/_)溶解之方法的實例。將— 環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]笨并氮呼_la,5(2 (+/-)-溶解於一異丙醇與乙腈（8:2)之混合物中，得到—2〇 毫克/毫升之最終濃度。利用以下條件將此混合物注射至 一製備型手性SFC層析系統上：Chirakel 〇J_H管柱， 4.6x250毫米，5微米；流動相：8% Μ_於c〇2中；溫 度：35°C ;流率：2毫升/分鐘，保持16分鐘；在260奈米 下由UV監測；注射量：5微升，約2〇 〇毫克/毫升於 IPA:ACN (8:2)中。 中間體19

衰丙[d]弓丨。木并[2，ι_α][2]笨并氮,_la，5(2H)_二甲酸 環抑己基-l，12b-二氫七_f氧基_，la_f0，（仏)_。&一{+/餐 環己基-i，ia，2，m-四氫_n.甲氧基-la•(甲氧幾基）_環丙⑷ °引°朵并[2，1-a][2]苯并氮°平-5-甲酸，帛三丁基醋（515毫克， 1毫莫耳）溶於無水DCM (1〇毫升）之溶液中添加TFA (5毫 升）。在室溫下對所得溶液實施約8至12小時攪拌❶然後將 反應物療發至乾燥，獲得標題化合物（〇 47克，。 120736.doc -68- 200817403 LC/MS :保留時間 2.245 分鐘；m/e mo (MH+)。A NMR (400 MHz，CDC13):自化合物NMR波譜觀察到該產物呈一 相互轉化的旋轉異構體之混合物形式存在。 中間體20

環丙[d]吲哚并DJ-a] [2]苯并氮呼-la(2H)-甲酸，8-環己 基-5-[[(環丙磺醯基）胺基]羰基]_η2})_二氳_u_甲氧基_， 。在 50°C 下對一（+/-)8-環己基-l，la，2，12b-四氫-11-曱 氧基- la-(甲氧羰基）_環丙[d]吲哚并苯并氮呼 甲酸（1當量）及羰基二咪唑（1 ·5當量）存於無水thf中之混合 物實施30分鐘加熱，並使其冷卻至室溫。然後，連續添加 1當量環丙環醯胺基及1，8-二氮雜二環[5·4·〇]十一 ·7-烯（2當 量）。在至溫下對所得混合物實施擾拌過夜。經酸水溶液 整理後，藉由HPLC對分離出的粗產物實施純化。隨後用 存於THF-MeOH中之1 N NaOH對中間體酯實施水解，獲得 標題化合物。LC/MS :保留時間：2.030分鐘；m/e 549 (MH+)。巾NMR (400 MHz，CDC13):據觀察該產物呈相互 轉化的旋轉異構體形式存在，此係由化合物之nmr波譜證 實0 120736.doc -69- 200817403 中間體21

足β 乂〜^-人2, 三严基娘嗓。向一順式-3,5-二甲 基哌嗪-1-甲酸第三丁基酯（2.0克，9.22毫莫耳）溶於Me〇H (25毫升）之溶液中添加低聚甲醛（〇·84克，28毫莫耳）及氯 化鋅（3 · 8 3克’ 28耄莫耳）。然後以多份形式添加氰基氫

I " 化鈉（1.76克，28毫莫耳）。在室溫下對反應混合物實施4小 時攪拌。然後將不可溶固體濾出，並對濾液實施濃縮。使 殘餘物在飽和NaHCCh溶液及CH/h (2x50毫升）之間進行 分配。將有機層合併，實施乾燥（MgS〇4)及濃縮，得到無 色油狀物。然後將其溶解於CHAh (10毫升）中，並添加 TFA (2 · 5毫升）。在室溫下對反應混合物實施攪拌過夜。蒸 發掉TFA及溶劑，得到一白色固體，為呈TFA鹽形式之最 U 終產物。（2·6克，86%產率）；MS m/ 129 (MH+)。1H NMR (500 MHz，氯仿-D) δ ppm L4l (d，J=6.41 Hz，6H) 2.87 (s 3H) 3.38-3.56 (m，4 H) 3.71-3.90 (m，2H)。 中間體22 • vCH3

H (2S，6R)及⑽州小㈠卜二甲基哌嗓小幻乙烷酮。^ 120736.doc ·70· 200817403 順式-3,5_二甲基哌嗪-i -甲酸第三丁基酯〇 ,〇克，4.666毫 莫耳）溶於CH2C12 (10毫升）之溶液中添加TEA (〇.7 15毫升， 5.133毫莫耳）及乙醯氯（〇.364毫升，5133毫莫耳）。在室溫 下對反應混合物實施2小時攪拌。然後用水對其實施驟 冷’並用1 N HC1溶液對其實施酸化。用ch2C12 (2x50毫 升）貫施萃取，並將有機層合併，實施乾燥（MgS〇4)及濃 縮，得到一淡黃色固體。然後將其溶解於CH2Cl2(10毫升） 中，並添加TFA (2毫升）。在室溫下對反應混合物實施3小 時攪拌。蒸發掉TFA及溶劑，得到微黃色稠油狀物，為呈 TFA鹽形式之最終產物。（11克，93%產率）。MS m/z 157 (ΜΗ )，保留時間：〇·2〇8分鐘。4 NMR (500 MHz，氣仿_ 〇) δ ppm 1.38 (d, J = 7.02 Hz, 6H) 2.09 (s5 3H) 3.06 (dd5 J-12.97, 5.04 Hz, 2H) 3.25 (d? J=13.43 Hz, 2H) 4.27-4.73 (m，2H)。 中間體23 ΓΛ

(J 2-「2-产真哀基」-厂3-二严差_嗞1#。在室溫下對一鄰曱 氧基苯甲醛（9.0克，66毫莫耳）及N，N，·二甲基乙二胺（79毫 :’ 73毫莫耳)溶於乙醇(180毫升)中之溶液實施攪拌過 仪。添加MgS〇4 (30克）並對混合物實施2〇分鐘攪拌。對反 應混合物實施過濾並用乙醚實施洗滌。在真空中去除溶 劑，獲得2-(2-甲氧苯基Η，3·:ψ基。米。坐琳。:一淡二= 120736.doc •71- 200817403 固體，12克，產率 88%。4 NMR (500 MHz，氯仿-D) 5 ppm 2·21 (s，6H) 2.57-2.72 (m，2H) 3.34 (d，J=2.75 Hz，2H) 3.82 (s，3H) 4·13 (s，ih) 6.88 (d，J=8.24 Hz，1H) 7.00 (t， J一7.48 Hz, 1H) 7.25-7.30 (m，1H) 7.67 (d，J=7.63 Hz, 1H) 〇 中間體24

CHO

夂f真差-2- f瘸基茗差娜鑀。在4 及乂中向向一經 攪拌的2-(2-曱氧苯基）_l53_二甲基咪唑啉（2 〇克，9·8毫莫 耳）溶於THF (5毫升）之溶液中添加一第三丁基鋰（9〇毫 升，1.7 Μ溶於戊烷中）溶液，並在〇_5t下實施2小時攪 拌。將反應混合物冷卻至_5〇〇c，並添加硼酸三異丙基酯 (3 ·5笔升，1 5笔莫耳）。在3小時内使溶液緩慢升溫至。 在〇°C下添加HC1 (120毫升，2 Ν)，並對其實施3〇分鐘攪 拌。使混合物升溫至室溫，並用乙酸乙酯加以稀釋。對有 j層實施洗滌（2xHC1 (1 Ν)，鹽水）、實施乾燥（硫酸鈉）及 濃縮，獲得黃色粗產物，藉由反相HPLC層析法對其實施 藉由去除溶劑，3_甲氧基_2_甲醯基苯基硼酸結晶為 一淡黃色固體，1.3克（產率75%)。ESI_MS m/e 177 (MH+) 〇 120736.doc -72- 200817403 中間體25

. 11-環己基-6-羥基-7-甲氧基-6H-異吲哚并[2，l，-a]吲哚-3- f鑀f潑。一經攪拌的2-溴代-3-環己基-1H-吲哚-6-甲酸甲 〇 酯（1.27克，7.0毫莫耳）、3-曱氧基-2-甲醯基苯基硼酸（2.37 克，7.0 毫莫耳）、LiCl(1.18 克，28 毫莫耳）及 Pd(PPh3)4 (200 毫克，〇·17毫莫耳）溶於1 M Na2C03(25毫升，25毫莫耳）及 1:1之乙醇-甲苯（1〇〇毫升）之經攪拌混合物。在8(rc及氮氣 中對反應混合物實施加熱過夜。然後用乙酸乙酯及水稀釋 該反應混合物，並隨後用過量稀HC1 (1 N)對其實施酸化。 然後收集該乙酸乙酯層，並用水及鹽水實施洗滌，並隨後 、 對其實施乾燥（NaSOd。蒸發掉溶劑，提供粗產物，用 U DCM及己院對其實施研磨，獲得呈白色固體狀標題化合物 (克 68/〇產率）。LC-MS: m/e 390 (M-H)-; 374 (M-H)+。 . 中間體26

120736.doc 73- 200817403 13-環己基-4_甲氧基-71{-吲哚并[2，1，-61][2]苯并氮呼_ 6 70-二f鑀二严鎊。在65°C下對一經攪拌的1!_環己基冬 羥基-7·曱氧基-6H·異吲哚并[2，l，-a]吲哚-3·甲酸甲酉旨（1.9 克，4.9毫莫耳）、碳酸鉋（2.4克，7.3毫莫耳）及2-磷乙酸三 甲酉旨（1.4克’ 7.3毫莫耳）存於無水DMF (10毫升）中之懸浮 液實施20小時加熱。將混合物倒至冰水中並用稀鹽酸實施 酸化以沉澱該粗產物。收集該固體，實施乾燥，並藉由 Biotage層析系統用乙酸乙酯及己烷（1:6)實施洗脫對其實施 純化。將同質部分合併，提供呈淡黃色固體狀指定化合物 (2.0 克，89% 產率）。MS m/z 460 (MH+)，b NMR (500 MHz，氯仿-D) δ ppm 1.12-2.21 (m，10H) 2.85-2.94 (m， 1H) 3.82 (s，3H) 3.92-3.99 (m，6H) 4.20 (d，J=14.65 Hz， 1H) 5.70 (d，J=l4.65 Hz，1H) 6.97-7.05 (m，1H) 7.19 (d， J-7.63 Hz，1H) 7.49 (t，J=7.93 Hz，1H) 7·72_7·79 (m，1H) 7·84_7·91 (m，1H) 8.12 (s，1H) 8.31 (s，ih)。 中間體27

8_環己基-12-甲氧基-1>12b_:氫環丙⑷吲哚并[21_ 〇][2一]苯并氮呼_1£1，5(211)_二甲酸二甲酯。甸一嵐氐氚氚今 之二曱基碘化亞颯（660毫克，3·〇毫莫耳）及NaH(120毫克存 120736.doc -74- 200817403 於60%油分散液中，3.0毫莫耳）之、、曰人4 夭吁）之此合物中添加DMSO (5 宅升）。在室溫下對反應混合物眚 σ物貫施〇·5小時攪拌。然後添 加13-環己基-4-曱氧基-7札吲啐# 、，， w木开L2，l，-a][2]苯并氮呼_ 6，1〇-二甲酸二甲酉旨（46〇毫克，1〇毫莫耳），並在室溫下對 反應混合物實施3小時攪拌。然後用水對反應物實施驟 冷，並用1 N HC1溶液實施酸化。然後粗產物發生沉澱， 呈一淺汽色固體狀，藉由過濾收集之，並在空氣中實施乾 燥’（470¾克’ 99°/。產率）。隨後藉由製備型hplc對10毫 克該物質實施純化，獲得呈淺黃色固體狀標題化合物（7毫 克）。MS m/z 474 (MH+)，NMR (500 MHz，氣仿-D) δ ppm 0.26-0.33 (m5 0.25H) 1.00-1.07 (m, 0.75H) 1.12-2.62 (m，12H) 2.76-2.86 (m，0.25H) 2.87-2.97 (m，0.75H) 3.44、 3.57 (m? 3H) 3.92-3.99 (m5 6H) 4.01-4.16 (m? 1H) 5.14-5.23 (m? 0.25H) 5.39-5.48 (m5 0.75H) 6.91-7.02 (m5 2H) 7.27* 7.40 (m，1H) 7·67-7·73 (m，〇·75Η) 7.73-7.79 (m，0.25H) 7.80-7.88 (m，1H) 8.12-8.16 (m，0.25H) 8.34-8.39 (m， 0.75H) 〇 中間體28

120736.doc 200817403 衣己基12- f氧基·5_( $氧羰基）]，12b_二氣環丙⑷巧 。木并[2，l-a][2]苯并氮呼七(2H)_甲酸。n環己良喜 甲氧基-1，12b_二氫環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼一 ，（2H) 一甲酉夂一甲酯（47〇毫克，i ·〇毫莫耳）溶於甲 • 知此合物（10耄升710毫升）之溶液中添加1 N NaOH溶液（5.0 宅升），並在室溫下對其實施1〇小時搖動。用丨N HC1溶液 將pH值調節至4-5。然後用乙酸乙酯對所得混合物實施萃 取’並對有機層實施乾燥（NaSCU)，過濾並在真空中濃縮 i 之。然後藉由製備型反向HPLC對粗產物實施純化，提供

呈土頁色固體狀純標題化合物（230毫克，50%產率）。MS m/z 460 (MH+)，4 NMR (500 MHz，氯仿-〇)3卩？111〇.25-0.41 (m，0.35H) 1.02-1.14 (m，0.63H) 1.14-2.72 (m，12H) 2.75-2.88 (m? 0.35H) 2.86-2.99 (m5 0.65H) 3.89-3.99 (m? 6H) 4·00-4·16 (m，1H) 5.10-5.22 (m, 0.35H) 5.35-5.48 (m， 〇·65Η) 6.88-7.04 (m，2H) 7.27-7.41 (m，1H) 7.66-7.90 (m， y 2H) 8·〇8-8·16 (m，0.35H) 8.30-8.39 (m，0.65H)。 中間體29

120736.doc -76- 200817403 Ο 8-環己基-1(1[[[31(，58]-3,5-二甲基-1-哌嗪基]羰基]-12_甲 氧基-1，1(2,2，121^四氫環丙[(^]吲哚并[2，1，_(：1][2]苯并氮呼、 5-严鑀f鎊。於一裝備有一具線紋之特氟隆螺旋帽的3打 蘭小瓶中向8-環己基-12-甲氧基_5_(甲氧羰基）_i，i2b_二氫 環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼-ia(2H)-甲酸（70毫克， 0.15毫莫耳）存於1·〇毫升無水DMF中之混合物中添加 DIPEA (0.1毫升，0.57毫莫耳）、2-(1Η-苯并三唑小基> 1，1，3,3，-四甲基脲四氟硼酸酯（TBTU，67毫克，0.21毫莫 耳）’再添加2,6-二甲基α底嗓（21毫克，018毫莫耳）。在室 溫下於一Innova 2000定執振盪器上以24〇 rpm對反應物實 施振盪過夜。過濾反應溶液並藉由製備型HPLC(乙腈/水， 含TFA缓衝劑）實施純化，產生呈黃色固體狀標題化合物 (70毫克，85。/。產率）。MS m/e 556 (MH+)。 中間體30

8-環己基-la[[[3R，5S]-3,5-二甲基-1-哌嗪基]羰基]-12-甲 氧基-1，1(1，2，12}^四氫環丙[幻吲哚并[2，1，-(1][2]苯并氮呼-5-严鑀。向一 8-環己基-1&[[[311，58]-3,5-二甲基-1-哌嗪基] 羰基]-12-甲氧基_l，la，2，12b-四氫環丙[d]吲哚并[2，l，-a][2] u 120736.doc -77- 200817403 苯并氮呼-5-甲酸甲醋（70毫克，〇13毫莫耳）溶於ΤΗρ/甲醇 混合物（1¾升/1毫升）之溶液中添加丨N Na〇H溶液（2 〇毫 升），並在室溫下對其實施3小時振盪。利用i N HC1溶液 將pH值調節為4-5。然後用乙酸乙酯對所得混合物實施萃 取’並對有機層實施乾燥（NaSCU)，過濾並在真空中濃縮 之。然後藉由製備型反向HPLC對粗產物實施純化，提供 呈淡黃色固體狀純標題化合物（68毫克，1〇〇%產率）。£81-

MS m/e 542 (MH+)，巾 NMR (500 MHz，CD3OD) δ ppm 1H 1.06- 2.41 (m，20Η) 2.97-3.09 (m，1Η) 3.21-3.79 (m，6Η) 3.94-4.02 (m，3H) 4.91-4.99 (m，0.2H) 5.07-5.16 (m，〇·8Η) 7.01-7.08 (m，1H) 7.12-7.18 (m，〇·8Η) 7.20-7.26 (m，0.2H) 7.38-7.52 (m, 1H) 7.71-7.81 (m, 1H) 7.88-7.96 (m 1H) 8.06- 8.10 (m，0.8H) 8.19-8.24 (m，0.2H)。

(七/-)8-環己基-la[[[3R，5S]-3,5 -二甲基-i-u辰嗪基]幾基]_ ”-(二甲基胺石黃醯基）-12-甲氧基-1，1€1，2，121>-四氫環丙[(^]17弓1 ϋ朵并[2，l，-a][2]苯并氮呼-5-甲醢胺。飞繁_落-環己 基-1&[[[311，58]-3,5_二甲基-1-紙嗪基]魏基]_12_曱氧基- 120736.doc -78- 200817403 1，1&，2，1213-四氫環丙[(1]吲哚并[2，1，4][2]苯并氮呼-5-甲酸 (54毫克’ 〇·1毫莫耳）及羰基二咪唑（49毫克，〇·3毫莫耳）存 於無水THF中之混合物實施1小時加熱，並使其冷卻至室 溫。然後連續加入N，N-二曱基磺醯胺（37毫克，〇·3毫莫耳） 及丨，8_ 一氮雜二環[5.4.0]十一 _7_烯（46毫克，0.3毫莫耳）。 在6 0 C下對所得混合物實施2小時加熱。經酸水溶液整理 後，藉由製備型HPLC對分離出的粗產物實施純化，獲得 f、' 呈&只色固體狀標題化合物（39毫克，60%)。MS m/z 648 \ ^ (MH )? !H NMR (500 MHz5 CD3OD) δ ppm 1.05-1.59 (m? 12H) 1.69-1.88 (m? 3H) 1.91-2.17 (m, 4.2H) 2.27-2.35 (m5 〇·8Η) 2.51-2.64 (m，1H) 3.01-3.07 (m，6H) 3.10-3.63 (m， 4*2H) 3.71.3.78 (m5 0.8H) 3.94-3.98 (m5 2.4H) 3.98-4.02 (m5 0.6H) 4.13-4.19 (m, 0.2H) 4.25-4.37 (m? 0.8H) 4.90- 4.97 (m5 0.2H) 5.08-5.15 (m5 0.8H) 7.01-7.09 (m5 1H) 7.12- 7.18 (m5 〇.8H) 7.22-7.27 (m5 0.2H) 7.41-7.51 (m5 1H) 7.56- U 7·62 (m5 0.8H) 7.63-7.67 (m? 0.2H) 7.89-7.98 (m? 1H) 7.99- 8.03 (m，〇.8H) 8 〇7_8 13 (m，〇 2H)。 中間體32

120736.doc -79 200817403 1Η节氧基）-8-環己基-1，12b-二氫環丙[d]吲哚并[21_ a][2]苯并氮坪-la，5(2H)-二甲酸5•第三丁基酯u_甲基酿 將三甲基碘化亞颯（8.51克，38.7毫莫耳）懸浮於1〇〇毫升無 水DMSO中並置於氮氣層氣氛下。向反應物中添加氫化 鈉，95% (937毫克，37」毫莫耳）。在氮氣氛下對反應物實 施約30分鐘攪拌，直至反應混合物變得清澈及同質。向該 反應物中添加3-(苄氧基）-13-環己基_7H_吲哚并dq P 苯并氮呼_6，10-二甲酸10-第三丁基酯6-甲基酯（ι〇·63克， ' 1 8 ’ 4毫莫耳），並在6 5 C及氣氣氣下對反應物實施1 8小時加 熱。 對反應物實施冷卻，並使其在二氯甲烷及丨1^鹽酸水溶 液之間進行分配。水相用二氣甲烷實施萃取，將有機相合 併，用1 N鹽酸水溶液實施洗滌，並經硫酸鈉實施乾燥。 獲得呈棕色泡沫狀粗產物（11. i 7克），藉由矽膠層析法用二 氯甲烷洗脫對其實施純化，產生9·3克呈淺橙色泡沫狀標 Q 題化合物。4 Ν· (500 MHz，氯仿 _D) δ ppm 〇.40 (t， J=6.1〇 Hz5 0.5H) 1.09-1.31 (m5 2.1H) 1.32-1.48 (m5 2.8H) 1·格 1.61 (m，2.1H) 1.61-1.66 (m，9.〇H) 1.66-1.85 (m， ' 3-5H) 1.86-2.18 (m? 4.3H) 2.63 (t? J=8.39 Hz? 0.5H) 2.78 ， (s5 〇.5H) 2.84-2.97 (m5 1.1H) 3.42 (d5 1=14.95 Hz? 0.5H) 3.49-3.63 (m，1.5H) 3.73-3.86 (m，1.4H) 4.06 (d，J=15.26

Hz5 0.5H) 5.06-5.24 (m5 2.6H) 5.42 (d5 1=14.95 Hz, 0.5H) 6.93-7.04 (m? 1.0H) 7.10 (s5 0.5H) 7.22 (Sj 〇.6H) 7.26-7.31 (m，0.9H) 7.31-7.39 (m，1.1H) 7.39-7.53 (m，4.2H) 7.68 120736.doc -80 - 200817403 (dd，J=20.29，8.39 Hz，1.1H) 7.80 (d，J=8.39 Ηζ，1·〇η) 8.02-8.13 (m, 0.5H) 8.18-8.32 (m，〇·5Η)。HPLC分析：利 用 Discovery VP軟體之 Shimadzu分析型 HPLC : 〇/〇 A=l〇〇/0 甲 醇，90%水，〇·1%三氟乙酸；％ b = 90%甲醇，10%水， 0.1%三氟乙酸；初始％ B = 50 ;終末。/。b = i〇〇 ;梯度μ分 鐘，運行時間=7分鐘；流率=5毫升/分鐘；波長=220奈 米；管柱=Phenomenex Luna 3.0毫米χ5〇毫米S10 ;保留時 間=5.17分鐘，純度99% ;流動注射質譜測定：MS m/z 592 (MH+)。 中間體33

11-(苄氧基）-8-環己基-la-(甲氧羰基）_lla，2，12b_四氫環 丙[d] , 口朵并[2，l-a][2]苯并氮呼-5-甲酸。絡t基 環己基-l，12b-二氫環丙[d]吲哚并[2，i_a][2]苯并氮呼_ la，5(2H)-二甲酸5-第三丁基酯ia-甲基酯（3〇克，51毫莫 耳）溶解於1，2-二氯乙烷（5〇毫升）中，並利用一加料漏斗經 5分鐘向反應物中添加二氟乙酸（5〇毫升）。在室溫下對反應 物實施1.25小時攪拌。在真空中去除反應揮發物，重複添 120736.doc • 81 - 200817403

加苯并隨後在真空中去除之，以協助去除痕量三氟乙酸。 分離出呈無定型米色固體狀標題化合物（2 82克）。NMR (500 MHz，氯仿_〇)5口口111〇.43(1：，1：==6 26 只2，〇.411)1.〇6-1·16 (m，0.3H) 1.18-1.33 (m，2.4H) 1.33-1.50 (m，2·7Η) 1.58 (d，J=13.12 Hz，0·5Η) 1.65-1.72 (m，〇·7Η) 1.71-1.85 (m? 2.7H) 1.93 (d? J=7.63 Hz5 1.3H) 1.96-2.18 (m5 2.9H) 2.61-2.70 (m，0·4Η) 2.80 (d，J=12.21 Hz，0.5H) 2.86-2.99 (m5 1.2H) 3.45 (d, J=15.26 Hz, 0.6H) 3.53-3.64 (m5 1.8H) 3.76-3.86 (m? 1.1H) 4.10 (d? J=15.26 Hz, 0.4H) 5.09-5.19 (m5 2.OH) 5.22 (d5 J=15.26 Hz, 0.4H) 5.38-5.51 (m3 0.6H) 6.95-7.05 (m，1.0H) 7.11 (d，J=2.14 Hz，0.4H) 7.22-7.26 (m， 0.7H) 7.26-7.31 (m，1.1H) 7.33-7.40 (m，L2H) 7.43 (m， 2.1H) 7.44-7.50 (m，2.1H) 7.72-7.93 (m，2.0H) 8.21 (s， 0.4H) 8.37-8.50 (m，0.6H)。HPLC分析：利用 Disc〇very vp 軟體之Shimadzu分析型HPLC : % A=10〇/〇甲醇，9〇%水， 0.1%三氟乙酸；。/〇 B = 90%甲醇，i〇〇/o水，〇1%三氣乙酸； 起始％ B = 50 ;終末。/〇 B=1 〇〇 ;梯度=5分鐘；運行時間· 6 分鐘；流率=5毫升/分鐘；波長=22〇奈米；管柱 =Phenomenex Luna 3.0毫米 x50毫米 S10 ;保留時間响 ， 純度97%，流動注射質譜：MS m/z 536 (MH+、 )，m/z 534 (MH+)。 120736.doc -82- 200817403 中間體34

11-(苄氧基）-8-環己基_5_((二甲基胺磺醯基）胺甲醯基）一 ι，ιη-二氫環丙[d]吲哚并[214][2]苯并氮呼-ία(2Η)_甲酸 f藉。將11·(节氧基）_8-環己基_la_(甲氧羰基 四氮壞丙[(1]叫卜朵并[2，11][2]苯并氮呼_5_甲酸（2.79克， 5.21宅莫耳）懸浮於7〇毫升無水THF中並向反應物中添加羰 基二味唾（1·1〇克’ 6·79毫莫耳）。在室溫及氮氣氛下對反 應物實施1小時攪拌，產生一透明同質的黃色溶液。在氮 氣氛下將反應物加熱至回流溫度保持1小時，然後使之冷 部。向反應物中添加二曱基磺醯胺（3·3〇克，26·6毫莫 耳），隨後添加DBU (856微升，5.73毫莫耳）。在氮氣氛下 將反應物加熱至60-65。(：保持20小時。使反應物在i Ν鹽酸 水溶液與二氯甲烷之間進行分配。用二氯甲烷對水相實施 萃取。將有機相合併，並用丨Ν鹽酸水溶液實施洗滌 X)，經硫酸鈉乾燥，並在真空中去除揮發物，得到3 85克 頁色無定形泡沫狀物。氘氣仿中之質子NMR揭示約〇.8莫 耳田畺之一甲基磧醯胺（δ ppm=2.8)反應產物。將該產物溶 解於約200毫升二氯甲烷中，並用1 N鹽酸水溶液實施洗滌 120736.doc •83- 200817403 (1 x)再用0·1 N鹽酸水溶液實施洗滌（3 x)。此操作之水性 洗液總體積為約1〇00毫升。有機相經硫酸鈉乾燥，並在真 空中去除溶劑，得到3·21克黃色無定形固體。NMR (500 MHz，氯仿-D) δ ppm 0.33-0.41 (m，0·3Η) 1.08 (m， 0.2H) 1.18-1.33 (m，2.6H) 1·33_1·47 (m，3·3Η) 1.57 (d， J=12.21 Hz，0.8H) 1.65-1.83 (m，4.4H) 1.89-2.12 (m，4·8Η) 2.64 (dd? J=10.223 6.87 Hz? 0.5H) 2.74-2.83 (m5 0.6H) 2.84- 2.97 (m，1.4H) 3.08 (s，6.0H) 3.43 (d，J=14.95 Hz，0.7H) 3.53-3.56 (m，1.6H) 3.81 (s，1.3H) 4.09 (d，J=15.26 Hz， 0.5H) 5.08-5.21 (m? 2.7H) 5.40 (d5 J=14.65 Hz, 0.6H) 6.94- 7.04 (m，1.2H) 7.11 (d，J=2.44 Hz，0.5H) 7.20-7.25 (m， 0.8H) 7.26-7.29 (m，0.9H) 7.32-7.52 (m，6.9H) 7.80-7.90 (m，1.1H) 7.97 (s，0·5Η) 8.20 (s，0.6H) 8.51 (d，J=22.58 Hz， 1.OH)。HPLC分析：利用 Discovery VP軟體的 Shimadzu分 析型HPLC : % A= 10%甲醇，90%水，0.1%三氟乙酸；％ B = 90%甲醇，10%水，〇·1%三氟乙酸；起始0/〇 b==5();終末 % B = 100 ;梯度=5分鐘；運行時間=6分鐘；流率毫升/分 鐘’波長-220奈米；管柱=phenonienexLuna3.0毫米χ$〇毫 米S10，保留時間=4.06，純度97% ;流動注射質谱：MS m/z 642 (MH+)，m/z 64〇 (ΜΗ·)。 120736.doc -84- 200817403 中間體35

11-(节氧基）-8-環己基-5-((二甲基胺磺醯基）胺甲醯基）_ f、 l，12b-二氫環丙[d]，v朵并[2，：[-a][2]苯并氮呼-la(2H)-曱 礙。將11-(苄氧基）_8_環己基_5-((二甲基胺磺醯基）胺曱醯 基）-1，12b_二氫環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼- la(2H)-甲酸甲S旨（3.02克，4.70毫莫耳）溶解於24毫升THF中，並向 反應物中添加一 1 Μ四丁基氫氧化銨（24毫升，24毫莫耳） 溶於曱醇之溶液。在氮氣氛下對反應物實施封端，並在室 溫下貫施1 8 · 5小時攪拌。使反應物在1 ν鹽酸水溶液與二 氯甲烧之間進行分配。用二氣甲烷對水相實施萃取。將有 li 機洗液合併，並用1 N鹽酸水溶液實施洗滌（2 X)，經硫酸 鈉乾燥並在真空中去除溶劑，得到3· 17克黃色無定形泡沫 狀物。该材料無需進一步純化即可使用。HPLc分析：利 用 Discovery VP軟體之 Shimadzii分析型 HPLC : % A=10% 乙 • 腈，9〇%水，TFA ; % B = 90% 乙腈，10% 水，〇」〇/〇 TFA ,起始/。b = 50 ;終末％ B = l〇〇 ;梯度=6分鐘；運行時 間=6分鐘；流率=4毫升/分鐘；波長=22〇奈米；管柱 ^Waters Sunfire 4.6 毫米 χ50 毫米 S5 ;保留時間=3.29 分 鐘，純度89% 〇 120736.doc •85- 200817403 中間體36

rel-6-(((2R，6S)-4-苄基-2,6-二甲基-1-哌嗪基）羰基）·13_ 環 〇 己基((二甲胺基）磺醯基μ3_甲氧基_7Η•吲u朵并[2 ^ 苯#羞甲-7 0- f艏蜃。向一經攪拌的π·環己基q 〇_ (((一甲基胺基）石黃驢基）胺甲酿基）-3-甲氧基-7H-叫| π朵并 [2，l-a][2]苯并氮呼-6-甲酸（2〇〇毫克，〇·37毫莫耳）、 (3R，5S)-1-苄基-3,5-二甲基哌嗪（115毫克，〇·56毫莫耳）及 二異丙基乙胺（0.26毫升）溶於DMF (4毫升）之溶液中添加 HATU (212毫克，0.56毫莫耳）。在室溫下對反應混合物實 施2小時攪拌，用另外的（3R，5S)-1-苄基-3,5-二甲基派嗓 G (100毫克，〇·49毫莫耳）實施處理，並在100°C下實施3小時 攪拌。將反應物冷卻至室溫，用Ηβ (30毫升）及1 Μ HC1(水溶液）（1.5毫升）加以稀釋，並用EtOAc (20毫升）實施 萃取。分離出有機層，用鹽水（1 〇毫升）實施洗務，經 (MgS〇4)乾餘’實施過慮及濃縮。殘餘物用Me〇H (5毫升） 實施稀釋，並藉由製備型HPLC (H2〇/CH3CN，含1〇 mM NH4〇Ac緩衝劑）進行純化，得到呈燈色固體狀代卜6-(((2尺，68)_4-节基-2,6-二甲基-1-旅嗪基）幾基）_13-環己基- 120736.doc -86- 200817403

N-((二甲胺基）磺醯基）_3_甲氧基_7H_吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮坪_1(K甲醯胺（38毫克，0.052毫莫耳，14%)。4 NMR (300 MHz，CD3〇D) δ 1.02-2.22 (m，20H)，2.58-3.03 (m， 3H)，3.05(s，6H)，3.27-3.40 (m，2H)，3.92(s，3H)，4.34-4.56 (m，1H)，4.99-5.19 (m，1H)，6.89 (s，1H) 7.08 (d，J=2.6

Hz，1H)，7.14 (dd，J=8.8, 2·6 Hz，1H)，7.19-7.33 (m，5H)， 7.55 (d，J=8.4 Hz，1H)，7.65 (d，J=8.4 Hz，1H)，7.90 (d， J-8.4 Hz，1H)，8.17 (s，1H)。LCMS: m/e 724 (M+H)+，保 留時間3.3 7分鐘，管柱B，4分鐘梯度。 中間體37

1H-吲哚-6-甲酸，3-環己基-2-[2-曱醯基-4-(苯基曱氧基) 笨基基]-，1，1-二甲基乙酯，2-溴代-3-環己基-1H-吲哚-6-甲 鑀茗三差鎊（55克，0.145 m)溶解於甲苯與乙醇之1:1混 合物（5 50毫升）中並實施脫氣。添加LiCi (18·3克，〇·43 m) ’隨後添加碳酸鈉（550毫升，1·〇 μ溶液，分別經氣處 理）及 Pd-tetrakis (7.7 克 ’ 0.008 m)。經〇·25 小時授拌後， 添加4-(卞氧基）-2-甲酿基苯基棚酸（44.6克，0.17 m)，並將 反應混合物加熱至85 C保持4小時並藉由TLC實施監測（己 烧-乙酸乙Ϊ旨80:20，Rf (產物）=0.45)。完成後，將反應混 合物冷卻至室溫，並添加水（1·0升），隨後添加乙酸乙酉旨 120736.doc • 87 - 200817403 (1 · 〇升）。然後’將该混合物擾拌一較短時段，之後將各居 为離。收集有機層，用鹽水洗務，並隨後經硫酸鈉實施乾 燥。然後，對混合物實施過濾，並在真空下對該濾液實施 浪縮，獲付60克呈頁色固體狀標題化合物（8〇%)。1h nmr (DMSO-d6)(400 MHz) δ 1.40-1.42 (m，3H，環己基），丄 53 (s, 9H, t-Bu), 1.76-1.82 (m，7H，環己基部分），3 15 (m 1H，環己基-苄型的 CH)，5.15 (s，2H，〇cH2Ph)，6·49 (/ 1H ’芳基H2，），7·10_7·71 (多重峰組，lm，芳基+,,朵部分 +NH)，8·01 (s，1H，CHO)。 中間體38

71{-17引。朵并[2，1-(2][2]苯并氮啤-6，1〇-二甲酸，13_環己基_ 3-(苯基甲氧基）·，10-(1，1-二甲基乙基）6-甲酯。緣嘴-6-甲酸，3_環己基-2-[2-曱醯基-4-(苯基甲氧基）苯基]丨，^ 二甲基乙酯（3 2.5克，〇·〇6 m)溶解於乾燥DMF (0·7升）中並 實施機械擾掉。添加碳酸絶（24.8克，〇·〇7 m)及2-丙烯酸， 2-(二甲氧基氧膦基）-，甲酯（65-70% GC純度，37.2克， 〇·19 m)，並將反應混合物加熱至65°C保持4小時，並藉由 tic對反應進行監測（己烷-乙酸乙酯80:2〇，Rf (產物）=〇6)。 完成後’將混合物冷卻至室溫並用水（1 · 〇升）實施驟冷。藉 120736.doc -88- 200817403 隨後實施乾燥。藉由在甲 ，隨後實施空氣乾燥，得 。HPLC ·· 99·7〇/ο (Max 由過遽採集分離出的黃色固體， 醇中製裝及過濾、進一步去除溶劑 到35克標題化合物（95%)

Chr_t〇gram Of (l9(M〇〇奈米）(保留時間=717分鐘），管 柱：C18腦（4.6X50毫米），流動相：〇 1%溶於溶液之 TFA ·· ACN之梯度（30 — 1〇〇—3〇)，流率〇8毫升/分鐘。 LCMS : 99.8%(保留時間=6.9〇分鐘），管柱：G· ci8

(50x4.6毫米），流動相：溶於水之甲酸：之梯度 (90 —95 —90)，流率：1.0 毫升 / 分鐘；M+l = 578.2。咕 NMR (CDC13)(400 ΜΗζ) δ 1.26-1.40 (m，6H，環己基），1.66 (s，9H，t-Bu)，1.78-2.06 (m，5H，環己基部分），2.80 (m， 1H ’ 環己基-节基的 CH)，3 87 (s，3H，c〇〇CH3)，4·30 & 5·40 (兩寬峰，皆為1H，烯丙型CH2)，5.18 (s，2H， 〇CH2Ph)，7.09 (s，1H，芳基h6，)，7.17-7.86 (多組多重峰， 10H，芳基+吲哚部分）8.24 (s，1H，吲哚 iH7)。13C NMR (CDC13)(100.0 MHz) δ 166.91，165.69，158.20，142.26, 136.44，136.40135.5 5，134.64，132.49，132.04，129.74, 128.76，128.29，127.56，125.05，124.73，120.38，119.43, 119.11，116.42, 115.96, 111.31，80.27, 70.30, 60.41，52.52, 39.11, 36.82，33.42，32.98，28.40，27.17, 26.31，21.07, 14.23。 120736.doc -89- 200817403 實例1

(+/-)環丙[d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺，la-[[(315幻-4-乙醯基-3,5-二曱基-1-哌嗪基]羰基]-8-環己基-1[(二甲胺基）磺醯基]-1，161，2，12})-四氫-11-甲氧基-，（161汉， 7。MS m/z 690 (MH+)，保留時間·· 3.661 分鐘。 1H NMR (500 MHz5 MeOD) δ ppm 0.22 (m5 0.32H) 1.10-2.19 (m5 20.68H) 2.58 (m? 0.32H) 2.68 (m? 0.68H) 2.79-3.40 (m，11H) 3·64 (d，J=15.26 Hz，0.68H) 3.91 (s，2.04H) 3.93 (s3 0.96H) 4.02-4.24 (m5 2.32H) 4.81-4.85 (m5 0.32H) 5.05 (d，J=15.26 Hz，0.68H) 7.01-7.06 (m，1H) 7.19 (d，J=2.44 Hz，0.32H) 7.22 (d，J = 2.75 Hz，0.68H) 7.33 (d，1 = 8.54 Hz， 0.68H) 7.35 (d，J=8.55 Hz，0.32H) 7.56 (d，J=8.55 Hz， 0.68H) 7.64 (d，J=8.55 Hz，0.32H) 7.85-7.96 (m，1.68H) 8.15 (s，0.32H)。 120736.doc -90- 200817403 實例2

(+/-)環丙[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮呼-5-曱醯胺，8-環 己基[(二甲胺基）磺醯基]-l，la，2，12b-四氫-11-甲氧基-1€1-[[(361，561)-3,4,5-三甲基-1-哌嗪基]羰基]-。1^^瓜11661 (MH+)，保留時間：3.396 分鐘。1H NMR (500 MHz， MeOD) δ ppm 0.24 (m5 0.28H) 1.13 (m3 0.28H) 1.20-1.64 (m，10.44H) 1.68-2.18 (m, 7H) 2.57 (m5 0.28H) 2.62 (m5 0.72H) 2.74-3.27 (m5 14H) 3.69 (d? J=15.56 Hz? 0.72H) 3.91 (s，2.16H) 3.93 (s，0.84H) 4.06-4.23 (m，1.28H) 4.38-4.52 (m? 1H) 4.88-4.92 (m? 0.28H) 5.12 (d5 J=15.56 Hz, 0.72H) 7.01-7.08 (m，1H) 7·19 (d，J=2.44 Hz，0·28Η) 7·20 (d， J = 2.44 Hz，0.72H) 7.36 (d5 J=8.55 Hz，0.72H) 7.37 (d， J=8.54 Hz，0.28H) 7.58 (d，J=8.55 Hz，0.72H) 7.64 (d, J = 8.55 Hz，0.28H) 7.90 (d，J = 8.54 Hz，0.72H) 7.94 (d， J=8.55 Hz，0.28H) 8.03 (s，0.72H) 8.11 (s，0.28H) ° 120736.doc -91- 200817403 實例3

(+/-)環丙[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮呼-5-曱醯胺，8-環 己基-N-[(二甲胺基）磺醯基]-la-[[(3^5(1)-3^-二曱基-4-(1-甲基乙基）-1-哌嗪基]羰基]-1，1(1，2，121^四氫-11-甲氧基-。 MS m/z 690 (MH+)，保留時間：2.493 分鐘。4 NMR (300 MHz, MeOD) δ ppm 0.25 (m? 0.29H) 1.06-2.22 (m5 23.7 1H) 2.60 (m? 0.29H) 2.68 (m5 0.71H) 2.77-4.49 (m5 17H) 4.92-4.98 (m，1.29H) 5.12 (d，J=15.37 Hz，0.71H) 6.96-7.11 (m， 1H) 7.20 (d? J=2.56 Hz5 1H) 7.35 (d, J = 8.42 Hz? 1H) 7.57 (dd，J=8.42，1.46 Hz，0.71H) 7.62 (dd，J=8.42，1.10 Hz， 0.29H) 7.85-7.96 (m，1H) 7.99 (s，0.71H) 8.12 (s，0.29H)。 實例4

120736.doc -92- 200817403 (+/-)8-環己基-N-(環丙磺醯基）-ΐ，ια，2，12b-四氫-11-甲氧 基-1〇1-[(38,511)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-羰基]_環丙[(^吲哚并 哀#農甲-5-严廢嚴。LC/MS :保留時間：1 ·712 分鐘；m/e 659 (ΜΗ+)。咕 NMR (400 MHz，CDC13):化合 物據觀察呈相互轉化的旋轉異構體形式存在，如自化合物 之NMR波譜所證實。 實例5

(+/-)8-環己基-N-(二甲基胺磺醯基）_12_甲氧基-1〇[[[311，58]-3,4,5-三甲基-1_哌嗪基]羰基]_1，161，2，12^四氨 環丙[d]吲哚并[2，l，-a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺。句一&丨^^ 環己基-la[[[3R，5S]-3,5-二曱基-1-哌嗪基]羰基]_N-(二甲基 胺磺醯基）·12-甲氧基-i，ia，2，i2b-四氫環丙[d]吲哚并[2，1，· a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺（28毫克，0.043毫莫耳）、多聚甲 醛（4.0毫克，0·13毫莫耳）及氯化鋅（18毫克，〇13毫莫耳） 之MeOH溶液（2毫升）中添加氰基硼氫化鈉（8·2毫克，〇.13 笔莫耳）。在60 C下對反應混合物實施〇·5小時加熱。經酸 水溶液整理後，藉由製備型HPLC對分離出來的粗產物實 施純化，獲得呈白色固體狀標題化合物（22毫克，77%)。 120736.doc -93- 200817403 MS m/z 662 (MH+)，4 NMR (500 MHz，CD3OD) δ ppm 1.02-1.62 (m，12H) 1.68-1.88 (m，3H) 1·90·2.17 (m，4·2Η) 2.22-2.34 (m，0·8Η) 2.73-3.61 (m，8H) 3.03 (s，6H) 3.73 (d， J=15.26 Hz，1H) 3.96 (s，2.4H) 4_00 (s，0·6Η) 4.07-4.20 Ο, 0.2H) 4.37-4.47 (m，0.8H) 4.90-4.97 (m，0.2H) 5.11 (d， J=15.26 Hz，0·8Η) 6.99-7.09 (m，1H) 7.15 (d，J=8.55 Hz， 0.8H) 7.24 (d，J=8.55 Hz，0.2H) 7.39-7.49 (m，1H) 7.58 (d，

J = 8.24 Hz, 0.8H) 7.64 (d, J = 8.55 Hz, 0.2H) 7.89-7.98 (m, 1H) 8.05 (s，0.8H) 8.10 (s5 0.2H)。

實例6

Rac_U_(苄氧基）-8-環己基-N-((二甲胺基）磺醯基）-1心 (((3R，5S)-3,4,5-三甲基-1-哌嗪基）羰基）_：[，iai2，12b-四氫環 丙[dp引蜂并[2，l-a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺。% 基）-8-環己基-5-((二曱基胺磺醯基）胺甲醯基）-1，12b-二氫 環丙[d]吲哚并苯并氮呼4 a(2H)_甲酸（1.89克， 3.01毫莫耳）溶解於3〇毫升dmF中，並添加TBTU(1.28克， 3 ·98毫莫耳）。於室溫及氮氣氛下對反應物實施30分鐘攪 120736.doc -94- 200817403 拌，然後溶解DMAP(1.83克，14.98毫莫耳），隨後溶解 (2R’6S) 1，2,6-二甲基旅嗓雙（二氟乙酸）鹽（149克，418毫 莫耳）在至及氮氣氣下對反應物實施16小時授拌。將 反應物倒至300毫升水中，並用二氯曱烷實施萃取，並經 . 硫酸鈉實施乾燥。在真空中去除溶劑，得到i.79克黃色固 體。自含4毫升水及丨毫升曱醇之約2〇毫升乙腈中對粗產物 實施重結晶。濾出一無色沉澱物，並用小體積20。/。（v/v)溶 p 於乙腈中之水沖洗之。在室溫下於真空中經五氧化二磷對 產物實施乾燥，得到L35克（61%)標題化合物。lH nmr (500 MHz，氯仿-D) δ ppm 0.34 (t，J=5 〇4 Hz，〇 5h) 〇 % 1.32 (m，8·5Η) 1.32-1.48 (m，3·1Η) 1.57 (d，J=13.43 Hz， 1.1H) 1.76 (d? J=l〇.〇7 Hz? 3.8H) 1.85-2.08 (m5 6.7H) 2.24-2.44 (m? 3.3H) 2.63 (d5 J=5.80 Hz5 0.9H) 2.73-2.86 (m5 0.9H) 2.89-3.00 (ni5 i.〇H) 3.05 (d5 1=4.58 Hz5 6.OH) 3.63 (d? J=14.95 Hz5 0.6H) 4.13 (d, J=13.73 Hz5 0.7H) 4.68 (d? U J=14.65 Hz5 0.5H) 5.09-5.19 (m, 2.OH) 6.94-7.05 (m? 1.2H) 7.12 (s，0·6Η) 7.20 (t，J=3.20 Hz，0.6H) 7.26-7.39 (m，2.4H) 7.39-7.44 (m，2.4H) 7.44-7.50 (m，2.4H) 7.83-7.90 (m， • L〇H) 7·95 (br.s，UH)。HPLC分析：利用 Disc〇very 則欠’ • 體之 Shimadzu 分析型 HPLC : 〇/〇 A=10〇/o 甲醇，9〇% 水， 0.1%三氟乙酸；％ B = 90%甲醇，1〇%水，〇1%三氟乙酸； 起始％B = 50;終末％B = 100;梯度=5分分鐘；運行時間^分 鐘；流率=5毫升/分鐘；波長=22〇奈米；管柱外

Luna 3.0毫米X50毫米S10 ;保留時間=2·7〇分鐘，純度 120736.doc -95- 200817403 99% ;流動注射質譜：MS m/z 738 (mh+)，m/z 736 (ΜΙΓ)。 實例7

Rac-8-環己基((二甲胺基）磺醯基H1-羥基」α· (((3R，5S)-3,4,5-三甲基哌嗪基）羰基）四氫環 丙[d]。引口朵并[2，l-a][2]苯并氮呼_5_甲醯胺。絡从 氧基）-8-環己基((二甲胺基）磺醯基）-la-(((3R，5S)-3,4,5-三甲基-l-π辰嗪基）羰基>1，la，2，12b_四氫環丙⑷吲哚并 [2，l-a][2]苯并氮呼_5-甲醯胺（1·35克，L87毫莫耳）溶解於 75毫升甲醇中，並添加35毫升thf。將反應物置於氮氣氛 下’添加10%的碳載鈀（2〇8毫克）。將反應物置於氫氣氛（1 atm ’氣室）下，並在室溫下對反應物實施17小時攪拌。穿 過一石夕澡土塞對反應物實施過濾，並用甲醇沖洗矽藻土。 在真空中自濾液去除揮發物，得到1.177克（97%)淡黃淺綠 色固體。質子NMR&HPLC顯示皆顯示標題化合物展示旋 轉異構體類物質特性。1H NMR (500 MHz，氣仿-D) δ ppm 0·35 (br.s，〇·9Η) 0.92-1.45 (m，11.6H) 1·55 (d5 J=11.6〇 Hz， 120736.doc -96- 200817403

U 0.9H) 1.74 (d5 J=8.55 Hz? 3.OH) 1.83-2.08 (m? 4.9H) 2.10-2.48 (br. m，5.1H) 2.50-2.62 (m，0.9H) 2.77 (t，J=12.05 Hz， 1.2H) 2.84-2.99 (m? 1.3H) 3.03 (d? J=3.66 Hz? 6.OH) 3.57 (d，J=15.26 Hz，0.4H) 4.10 (d，J=9.46 Hz，0.9H) 4.35 (s， 0.5H) 4.65 (d5 J=14.34 Hz, 0.6H) 4.98 (s5 0.3H) 6.82 (dd5 J=8.24，1.83 Hz，0.7H) 6.87 (dd，J=8.24，2.14 Hz，0.4H) 6.93-7.08 (m? 1.1H) 7.13 (d5 J=8.24 Hz, 0.8H) 7.21 (d5 J=8.24 Hz? 0.6H) 7.45 (d5 J = 8.24 Hz, l.OH) 7.83 (t? J=8.55 Hz，1.1H) 7.87-8.08 (br.s，1.OH)。LC-MS 分析：利用 Discovery VP軟體之 Shimadzu分析型 HPLC : % A=10°/〇 甲 醇，90%水，0.1%三氟乙酸；％ B = 90%曱醇，10%水， 0.1%三氟乙酸；起始％ B = 0 ;終末％ B = 100 ;梯度=2分 鐘；運行時間=3分鐘；流率=4毫升/分鐘；波長=220奈 米；管柱=Phenomenex Luna 3.0毫米x50毫米S10;保留時 間=1.67分鐘及1_74分鐘（旋轉異構體）MS m/z=648 (M+H)+。 實例8

N-(胺磺醯基）-la-(rel-6-(((2R，6S)-4-苄基-2,6-二甲基-1- 120736.doc -97- 200817403 辰禾基）爹厌基））-8 -壤己基-11-甲氧基-1，1(2,2，121^_四氫環丙 [d]’嗓并[2，i_a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺。甸I也靶、6{)%& 礦物油中之分散液，1〇毫克，〇·25毫莫耳）存於DMSCK0.2 毫升）中（在Ν2中進行攪拌）之漿液中添加三甲基碘化亞硬 (50毫克，0.23毫莫耳）。在室溫下對反應混合物實施3〇分 • 鐘攪拌，並隨後添加rel-6-(((2R，6S)_4_节基-2,6-二甲基」· 旅嗓基）羰基）-13-環己基-Ν-((二甲胺基）磺醯基）_3_甲氧基_ p 7H“引σ朵并[2^4^2]苯并氮呼-10-甲醯胺（33毫克，〇·〇46毫 莫耳）存於DMSO (0_5毫升）中之混合物（經〇·3毫升DMSO沖 洗的燒瓶）。在室溫下對反應混合物實施1小時攪拌，在 100 C下實施2小時加熱，並隨後用1 ν HC1實施中和。用 MeOH (0.5毫升）對反應混合物實施稀釋，並藉由製備型 HPLC (H20/CH3CN，含 1〇 mM NH4OAc緩衝劑）純化之，得 到一不可分離的期望產物與起始物之混合物。對混合物再 次施加上述反應條件，並在l〇(rc下實施3小時加熱，然後 {J 貫施冷卻。將反應物濃縮至約1/2體積，用MeOH (1毫升） 實施稀釋’用HC1 (3滴）加以中和，並藉由製備型HPLC (H^/CHsCN，含1〇 mM NH4〇Ac緩衝劑）純化之，得到呈 黃色固體狀1^-(胺磺醯基）_1&_(1^1_6-(((211，68)-4_苄基_2,6_ ， 二曱基哌嗪基）羰基））-8-環己基-11-甲氧基 四氫環丙⑷吲哚并[2，l_a][2]苯并氮呼-5-甲醯胺（9毫克， 0.01，25%)。LCMS: m/e 738 (M+H)+，保留時間 3.27 分 鐘，管柱B，4分鐘梯度。 120736.doc -98- 200817403 實例9

玉衣丙[d]。引祿并[2]苯并氮呼_5_甲醯胺，N_(1_氮雜 化丁基石買酿胺）-8_環己基·四氫_u_甲氧基_ la[[(3R’5S) 3,4,5 -二曱基•旅嗓基]幾基]_。向一環丙 吲％并[2，l_a][2]苯并氮呼_la(2H)_甲酸，5_[[(卜氮雜環丁 基績酿胺）胺基]羰基]_8•環己基―丨，1213_二氫_u -甲氧基_ (0.055毫莫耳’ 1當量）溶於無水dmf之溶液中加入HATU (0.083毫莫耳，1.5當量）及〇1?£八（0.083，1.5當量）。在室 溫下對混合物實施2分鐘攪拌，隨後添加三甲基哌嗪 (0.083毫莫耳，1.5當量）。對所得溶液實施14小時攪拌， 並直接注射至一反相製備型HPLC上實施分級。儀器：

MassLynx 4.0 SP4 LC-MS軟體；CTC_Leap HTS-PAL 自動 取樣器；Agilent 1100二元幫浦；Agilent 11〇〇光敏二極管 陣列：Polymer Lab 2100 ELS檢測器（Evap· Temp.=45°C， Neb. Temp.=3 5°C );帶有 ESCi 質譜儀之 Waters ZQ ;管柱： Waters x-Bidge C18 150x4.6毫米 5微米；洗脫液·· a=水， 1 0 mM NH4OAc，B-ACN，流率=1 毫升 / 分鐘；梯度·· τ^ο 分鐘，90% A: 10% B ; T=ll 分鐘，5% a·· 95% B ; τ=13 分 -99- 120736.doc 200817403 鐘，5% A: 195% B ; Τ=13·5分鐘，90% A: 10% B。將同質 部合併並實施蒸發，得到標題化合物。m/e 674.24 (M+H)+，保留時間=8.4分鐘，92%純度。 實例10

環丙[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮呼-5-曱醯胺，8-環己基-l，la，2，12b-四氫-11-甲氧基(甲基磺醯基）-la-[[(3R，5S)-3乂5-三f差-厂哝#差7鮝差7-。向一環丙[幻叫1哚并[2，1-a][2]苯并氮呼-la(2H)-曱酸，8-環己基-l，12b-二氫-11-甲氧 基-5-[[(甲基磺醯基）胺基]羰基;K〇.055毫莫耳，1當量）溶 於無水DMF之溶液中添加HATU (0.083毫莫耳，1.5當量）及 DIPEA (0.083，1_5當量）。在室溫下對混合物實施2分鐘攪 拌，隨後添加1，2,6-三甲基哌嗪（0.083毫莫耳，1.5當量）。 對所得溶液實施14小時攪拌，並直接注射至一反相製備型 HPLC上實施分級。儀器·· Masslynx 4.0 SP4 ;帶有 Harney 4-孔注射模組之CTC-Leap HTS-PAL自動取樣器；Waters 1525 二元幫浦；Waters 2488 UV檢測器；Polymer Lab 1000 ELS檢測器（Evap. Temp. = 90°C，Neb. Temp. = 80〇C ); 120736.doc 100· 200817403 咿有4路MUX源之Waters LCT質譜儀。管柱：Waters Xbridge 2·1χ50 毫米 5 微米 C18 ;洗脫液：A=5:95 ACN : 水 ’ B = 95:5 ACN :水；調節劑=1〇 NH4OAc ;流率=1 笔升/分鐘；梯度：τ=0分鐘，1〇〇% A: 0% B ; Τ=0·1分 鐘 ’ 100% A: 0% Β ; Τ=2·〇分鐘，〇% a: 1〇〇% β ; τ=3·0分 鐘，〇% A: 100% Β ; Τ=3·〇5 分鐘，1〇0% a: 0% Β ; Τ=3·5 分鐘，100% A: 0% Β。將同質部分合併並實施蒸發，得到 標題化合物，m/e 62〇·15 (Μ+Η广，保留時間=8·4分鐘， 9 6 %純度。 實例11

壞丙[d]吲哚[2，1-α][2]苯并氮呼-5_曱醯胺，8_環己基_ 1>，2，12^四氫_11_甲氧基1(2_丙基磺醯基）=_ [[(3汉，58)-3’4,5-三甲基-1-娘嗅基]幾基]_。利甩认飞_敗裝 序製備作為庫成員。將酸（0·055毫莫耳，i當量）溶解於= 燥的DMF中，並隨後添加HATU (〇 〇83毫莫耳，！ $告旦、L 〇腿(_，1>5當量）。在室溫下對溶液實施ς里鐘= 拌’並加入預稱重的胺(0.083毫莫耳，15當量)。對混合 120736.doc -101 - 200817403 物Λ施14小時攪拌’ 用下述方法藉由製備型HpLc對其 實施純化。 標題化合物 將同質部分合併並實施蒸發，得到2〇 47毫克 ’《1/6 661’24(]^+11)+，保留時間=6.32分鐘， 96.7%純度。LCMS方法··起始％ Β· 〇，終末％ & 1〇〇 ;梯 度時間：2分鐘；停止時間：4分鐘；流率：丄毫升/分鐘； 波長.220奈米，>谷劑A : 5%乙猜/95%水；溶劑b : 乙

腈/W水m mM乙酸銨；管柱：咖咖Η·毫米5微米 C18〇 1H NMR(^ ^)(6〇〇 ΜΗζ> CDCl3-DMSO-d6) δ 8.36 bs, 8.28 s, 8.16 s, 8.00 s, 7.85 (dd, J=^6 Hz), 7.69 (dd, J=

Hz), 7.31 (d, J=^6 Hz), 5.06 (bd, J=12 Hz), 4.87 (bd, J=^12 Hz), 4.11 (bd, J=^6 Hz), 3.95 (m), 3.92 (s), 3.54 2.56 (s)，2·31 (bs)， Hz)，1.54 (bd，J=18 (d，J=18 Hz)，2_96 (s) 2.80 (s)，2.60 (s)， 2.2-1.9 (m)，1.78 (bs)，1·65 (bd，；=約5 Hz)，1.39 (d，J=24 Hz)，1.3-0.90 (m)。 實例12

u 產物之TFA鹽（0.0323克， HBTU及三乙胺自酸製得。 末％ B ·· 100 ;梯度時間： LCMS方法：起始％ 終 3分鐘；停止時間：4分鐘；流 120736.doc •102- 200817403

率：4毫升/分鐘；波長：220 ;溶劑A : 10% MeOH/90% Η2Ο/0·1%三氟乙酸；溶劑B : 10% H2O/90% MeOH/O.l%三 氟乙酸；管柱：XBridge 4.6x50毫米S5。LC-MS保留時 間：3.023 ; MS m/z (M+H) 704。 120736.doc 103 -

Claims (1)

1. 200817403 十、申請專利範圍： 1· 一種式I化合物

   其中： 〇 Rl係 C02R5或 c〇NR6R7 ; R係六氫°比咬基或旅嗓基，且經3個選自由烧基、鹵代 烷基、烷氧基烷基、（苯基）烷基、烷基CO、i代烷基 CO、烷氧基CO、（胺基）CO、（烷胺基）CO及（二烷胺 基）CO所組成之群的取代基取代； R3為氫、鹵素、烷基、烯基、羥基、苄氧基、或烷氧 基； R4係環烷基； b R5係氫或烷基； R6係氫、烷基、烷基S02、環烷基S02、鹵代烷基S02、 (r7)(r8)nso2、或（r9)so2 ; R7係氫或烷基； - R8係氫或烷基； R9係氮雜環丁基、吡咯啶基、六氫吡啶基、N-(R1G)哌嗓 基、嗎琳基、硫嗎琳基、高六氫σ比唆基、或高嗎琳基； R1G為氫或烷基；且 120736.doc 200817403 該帶有星號之碳具有（R)構型或（S)構型； 或其醫藥上可接受之鹽。 2.如請求項1之化合物，其中R1係CONHR1，且R1係烷基 so2、環烷基 so2、鹵代烷基 so2、（r2)(r3)nso2、或 (r4)so2。 3 ·如請求項1之化合物，其中R2係

   J完基、烷基co、i代烷基co、或苄基

   烷基、烷基co、鹵代烷基co、或苄基

   120736.doc 1 如請求項1之化合物，其中R5 6係環己基。 2 如請求項1之化合物，其中R1係烷基S02、 ^ (r2)(r3)nso2、或（R4)S02。 3 如請求項1之化合物，其中該帶有星號之碳係具有（R)構 型。 4 如請求項1之化合物，其中該帶有星號之碳係具有（S)構 5 如請求項1之化合物，其中R3為氫。 6 如請求項1之化合物，其中R3係甲氧基。 200817403 型。 10.如請求項1之化合物，其係選自由下列組成之群：

   120736.doc 200817403

   或其醫藥上可接受之鹽。

   種、、且5物’其包含請求項1 合物 為 峭之化口物或其醫藥上可接 又之氣及醫藥上可接受之載劑。 ::^11之組合物，其進-步包含至少-針對HCV具 化、垃處之額外化合物，其中該化合物選自由干择 素、環孢菌去丄 囷京、白介素、HCV金屬蛋白酶抑制劑、Hcv 絲胺酸蛋&4 ^姆抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、HCV解旋酶 120736.doc 200817403 抑制劑、HCV NS4B蛋白抑制劑、HCV侵入抑制劑、 HCV組裝抑制劑、HCV釋出抑制劑、HCV NS5A蛋白抑 制劑、HCV NS5B蛋白抑制劑及HCV複製子抑制劑組成 之群。 13. —種請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽之用途， 其係用於製備供治療C型肝炎感染之藥劑。 14 ·如請求項13之用途，其中該藥劑進一步包括至少一針對 HCV具有治療益處的額外化合物，其中該化合物係選自 由干擾素、環孢菌素、白介素、HCV金屬蛋白酶抑制 劑、HCV絲胺酸蛋白酶抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、 HCV解旋酶抑制劑、HCV NS4B蛋白抑制劑、HCV侵入 抑制劑、HCV組裝抑制劑、HCV釋出抑制劑、HCV NS5A蛋白抑制劑、HCV NS5B蛋白抑制劑及HCV複製子 抑制劑組成之群。 120736.doc 200817403 七、指定代表圖·· (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   120736.doc -6-