TR201815338T4 - Gıp-glp-1 dual agonist bileşikleri ve yöntemler. - Google Patents

Abstract

Bu buluş, yabani tip GIP ile karşılaştırıldığında bir veya daha fazla sübstitüsyon içeren ve örneğin in vitro etkinlik eseylerinde değerlendirildiği gibi değişmiş, tercihen yükselmiş bir GLP-1 aktivitesi özelliğine sahip olabilen trunkat GIP analoglarıyla ilgilidir. Bu buluş, GIP-GLP-1 dual agonist bileşikleri ve ilişkili yöntemler sunar.

Description

Tarifname ve isteinler boyunca dogal amino asitler için geleneksel tek harfli ve üç harfli kodlarin yani sira, sarkosin (Sar), norlösin (Nle), (1- aminoizobütirik asit (Aib) ve ß-(l-naftil)-alanin (l Nal) gibi baska 0t- amino asitler için genel kabul görmüs üç harfli kodlar da kullanilir. Bu bulusa konu olan peptidlerde amino asit artiklarinin hepsi tercihen L- konfigürasyonuna sahiptir. Bununla birlikte, D-konfigürasyonlu amino asitler de mevcut olabilir.

Burada açiklanan sekanslar arasinda, sekansin amino terminusunda (N-terminusu) bir "Hy-" moiyetesi bulunan sekaiislar ve sekansin karboksi terminusunda (C-terminusu) bir "-OH" moiyetesi ya da bir "- NH2" moiyetesi bulunan sekanslar vardir. Bu gibi durumlarda ve aksi belirtilmedikçe, soz konusu sekansin N-terininusunda bir "Hy-" moiyetesi, bir hidrojen atomuna [örnegin, formüller I I(a), I(b), II, ll(a) ya da ll(b)”de Rl = Hy; N-terminusunda bir serbest primer ya da sekonder amino grubunun varligina tekabül eder] isaret ederken, sekansin C-terminusunda bir "-OH" ya da bir "-NHZ" moiyetesi, sirasiyla bir hidroksi grubuna [örnegin, formüller I I(a), I(b), II, II(a) ya da Il(b)”de R2 : OH; C-terminusunda bir karboksi (COOH) grubunun varligina tekabül eder] ya da bir amino grubuna [örnegin, formüller I I(a), I(b), II, ll(a) ya da Il(b)”de R2 = NH2; C-terininusunda bir ainido (CONH2) grubunun varligina tekabül eder] isaret eder. Bu bulusa konu olan her bir sekansta, bir C-terminal "-OH" moiyetesi, bir C-terininal "-NHZ" moiyetesini ikame edebilir ve tam tersi de mümkündür.

Bu dokümanda kullanildigi anlamiyla "konservatif sübstitüsyon", nativ insan GIP peptid sekansinin belirli bir pozisyonuna ait bir amino asit artiginin, asagidaki tabloda gösterildigi gibi, ayni gruba (I, II, III, anlamina gelir.

Asagidaki semada, amino asitlerin koiiservatif sübstitüsyonlari, fizikokimyasal özelliklerine göre gruplandirilir. l: nötr ya da hidrofobik, II: asidik, III: bazik, IV: polar, V: aromatik.

Bu dokümanda kullanildigi anlamiyla bir "konservatif olmayan" sübstitüsyon, nativ insan GIP sekansina ait bir amino asit artiginin baska herhangi bir sübstitüsyonu, örnegin bir non-protein amino asitle (Sar, Nle, Aib, lNal) sübstiti'isyonu ya da ayni gruba ait olmayan bir ainino asitle sübstifusyonu anlamina gelir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus konusu peptid konjugati, asagida atif yapilan spesifik sekanslarin biri veya daha fazlasina kiyasla en fazla 34, 33, sahip olan fonksiyonel fragmanlari ya da onlarin varyantlarini içerebilir.

Bu bulusa konu olan tercih edilen bilesikler, özellikle diyabet ve obezite gibi metabolik hastaliklarin tedavisinde en az bir GIP ve bir GLP-l biyolojik aktivitesine sahiptir. Bu, örnegin, bir test hayvani bir GIP analoguyla tedavi edildikten ya da ona maruz birakildiktan sonra, kans glukozu seviyesinin ya da baska bir biyolojik aktivitenin tayin edildigi örneklerde tarif edildigi gibi, in vivo eseylerde degerlendirilebilir. Özellikle, bu bulusa konu olan bilesikler, bir diyabetik denege uygulandiginda glisemik kontrolü gelistirebilir. ek olarak ya da alternatif olarak, bunlar, asiri kilolu ya da obez bir denege uygulandigiklarinda vücut agirligini da azaltabilmektedirler. Her durumda, etki, kiyaslanabilir ve denk deneklere denk bir dozlama rejimine göre verildiginde, (kütle itibariyle ya da inolar oran olarak) esdeger miktarda yabani tip insan GIP ya da GLP-lsyle edile edilen etkiye kiyasla daha üstün olabilir.

In-vitro eseylerde aktivite, bilesiklerin aktivitesiiiin bir ölçütü olarak da kullanilabilir. Normalde, bilesikler hem GLP-l hem de GIP reseptörlerinde aktiviteye sahiptirler. EC50 degerleri, belirli bir reseptörde agonist potaiisiiiin bir sayisal ölçütü olarak kullanilabilir.

Bir EC50 degeri, belirli bir eseyde o bilesigin maksimum aktivitesinin yarisina ulasmak için gereken bir bilesik konsantrasyonu ölçütüdür.

Sonuçta, `Örnegin, belirli bir eseyde nativ glukagonun EC50 [GLP-lR] degerinden daha düsük EC50[GLP-1R] degerine sahip bir bilesigin glukagona kiyasla GLP-lR°de daha yüksek potansa sahip oldugu düsünülebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, EC50 GLP-l-R ve/veya EC50 GlP-R, örnegin Ornek 2”de tarif edilen esey kullanilarak degerlendirildiginde, 1,0 nMinin altinda, 0,9 nM°nin altinda, 0,8 nM'nin altinda, 0,006 nM'nin altinda ya da 0,005 nM'nin altindadir.

Belirli bir eseyde, bir bilesigin EC50 degeri, insan GIPisinin ECso degerine göre degerlendirilebilir. Sonuçta, insan GIP reseptör'ûnde test bilesiginin EC50 degerinin yabani tip insan GIP°sinin az, l”den az, 0,1,den az, 0,05”ten az ya da 0,01”den az olabilir. GLP-l reseptöri'inde test bilesiginin EC50 degerinin yabani tip insan GIP'sinin EC50 degerine orani (EC50[test bilesigi] / EC50[GIP]) 10'dan az, 5 ,ten bilesigi ve insan GIP'si için iki reseptörde EC50 degerlerinin oraninin karsilastirilmasi da istenebilir. Tercihen, test bilesigi, ayni eseylerde GIP için esdeger orandan daha büyük bir EC50[GIP] / EC50[GLP-l] oranina sahiptir.

Bu bulusa konu olan GIP analogu, nativ GIP°ye kiyasla ve yukarida tarif edildigi gibi bir veya daha fazla amino asit sübstitüsyonu, delesyonu, inversiyonu ya da eklemesi içerir. Bu tanimlama, ayni zamanda, esanlamli terimler GIP mimetikleri ve/Veya GIP-GLPl agonistlerini de kapsar. Ek olarak, bu bulusa konu olan analog, amino asit yan gruplari, (it-karbon atomlari, terminal amino grubu ya da terminal karboksilik asit grubunun biri ya da daha fazlasinin kimyasal modifikasyonunu içerebilir. Bir kimyasal modifikasyon, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, kimyasal moiyetelerin eklenmesini, yeiii baglarin olusturulmasini ve kimyasal inoiyelerin çikartilmasini kapsar.

Amino asit yan gruplarinda modifikasyonlar arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, lizin s-amino gruplarinin açilasyonu, arginin, histidin veya lizinin N-alkilasyonu, glutamik ya da aspartik karboksilik asit gruplarinin alkilasyonu ve glutamin veya asparaginin deamidasyonunu kapsar. Terminal amino modifikasyonlari arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, des-amino, N-daha düsük alkil, N- di-daha düsük alkil ve N-açil modifikasyonlari vardir. Terminal karboksi grubunun inodifikasyonlari arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, amid, daha düsük alkil ainid, dialkil amid ve daha düsük alkil ester modifikasyonlari vardir. Tercihen bu bulusta kullanilan daha düsük alkil, Ci-C4 alkildir. Ek olarak, bir veya daha fazla yan grup ya da terminal grup, sektörde olagan bilgi ve beceri sahibi peptid kimyagerlerinin bildikleri koruyucu gruplar tarafindaii korunabilir. Bir amino asidin a-karbonu mono- ya da di-metillenmis olabilir.

Bu bulusa konu. olan `Örnek GIP analogu bilesikleri asagida tarif edilmektedir; burada, atif yapilan bilesikler, R1 ve R2 için tarif edildigi gibi N-terminus ve C-terminusunda modifiye edilebilir ve farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu, solvati ya da türevini Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKKAAKEFVNWLLAQK SEKANS KOD NO.: 3 Y-AIb-EGTFTSDYSI-Aib- LDKKAQRAFVEWLLAQGPSSGAPPPS SEKANS KOD NO.: 4 Y-Aib-EGTFTSDYSIALDKIAQRAFVNWLVA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 5 AORAFVEWLLAQGPSSGAPPPS Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKIAAKEFVNWLLAQK SEKANS KOD NO.: 6 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 7 YAEGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 8 YGEGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 9 Y-Aib-EGTFSSDYSlYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 10 Y-Aib-EGTFTSDLSlYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 11 Y-Aib-EGTFTSDSSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 12 Y-Aib-EGTFTSDYLIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 13 Y-Aib-EGTFTSDYSIALDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 14 Y-Aib-EGTFTSDYSIYSDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 15 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 16 Y-Aib-EGTFTSDYSIALEKKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 17 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 18 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAQRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 19 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAKRAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 20 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQKEFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 21 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVKWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 22 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWL VA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 23 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLSA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 24 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLKA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 25 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLL-Aib-K SEKANS KOD NO.: 26 îâjb-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-AIb-KYG-1Nal- SEKANS KOD NO.: 27 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLAYG-lNal-LDF SEKANS KOD NO.: 28 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAEKAFVNWLLA-Aib-K SEKANS KOD NO.: 29 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-A'ib- SEK ANS KOD NO.: 30 Y-Aib-EGTFTSDYSiYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib- SEK ANS KOD NO.: 31 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAAKEFVNWLLAQK SEKANS KOD NO.: 32 Y-AIb-EGTFI'SDYSIYLDK-KIII:54-kar1501gsj-nentadekanoil- SEKANS KOD NO.: 35 izoGlul--AQRAFVNWLLA-AIb-K Y-Aib-EGTFTSDýSI-AIb-LDK-KifHeksadekanpi1-izoGlu)- SEKANS KOD NO.: 36 AQRAFVEWLLAQGPSSGAPPPS Y~AIb-EGTFTSDYSIYLDK-K(Heksadekai1piI-igoGjm- SEKANS KOD NO.: 37 Y-AIb-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekanpil-izoülm- SEKANS KOD NO.: 38 AAKEFIEWLESA Y~Aib-EGIFTSDYSIYLDK-K(HeksadekangiI-izoGlin- . SEKANS KOD NO.: 39 AQRAFVNWLLA-Aib-KPSSGAPPPS Y-Aib-EGTFTSDYSlALDK-KcHeksadekanoiLimaiin- SEKANS KOD NO.: 40 AQRAFVNWLVAiAIbKPSSGAPPPS Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAKDFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 41 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAHDFVEWLLSA Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQKEFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 42 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAAKDFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 43 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLESKAAHDFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 44 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAAHDFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 45 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAAKEFVEWLLSA SEKANS KOD NO.: 46 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEWLLRA SEKANS KOD NO.: 47 Y-Aib-EGTFTSDYSKYLDs-Kmeksadekanpn_imam_ SEKANS KOD NO.: 48 AAHDFVEWLLSA Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEK-KcHeksadekanoi'Limaim- SEKANS KOD NO.: 49 AAKEFVEWLLSA AAHDFVEWLLRA Y'AIb'EGTFTSDYSIYLDE'K(Heksadekan0iI-izoGlm- SEKANS KOD NO_: 51 AAKDFVEWLESA Y-AIb-EGTFTSDYSKYLDE-K(HeksadekanpiI-izoGJuN- SEKANS KOD NO.: 52 AAKDFIEWLESA Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekanpil-izoGlu)- SEKANS KOD NO.: 53 AAKDFIEWLESA Y-AIb-EGTFTSDYSKYLDS-K(Heksadekanpil-izoGJuî- SEKANS KOD NO.: 54 AAH DFVEWLLRA Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K{Heksadekanpil-i'znGlm- SEKANS KOD NO.: 55 AAKDFVEWLLSA Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDS-K(Heksadekanoi1-imGhÜ- SEKANS KOD NO.: 56 AAHDFVEWLLSAGPSSGAPPPS Y-Alb-EGTFTSDYSIYLEK-K-(Heksadekanoil-izoGluî- SEKANS KOD NO.: 57 AAKEFVEWLLSAGPSSGAPPPS Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEWLLSAGPSSGAPPPS SEKANS KOD NO.: 58 Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K'(HeksadekanpiI-imGlm- SEKANS KOD NO.: 69 AAHDFVEWLLSA Bu bulus baglaminda kullanilan bir bilesikte amino asit yan zincirlerinin biri veya daha fazlasi, bir lipofilik sübstitüent Zhe konjuge edilebilir. Herhangi bir teoriye bagli kalmak istemeinekle birlikte, lipofilik sübstitüentin kan dolasiininda albümini bagladigi ve böylece, bulusun baglaminda kullanilan bilesikleri, bilesiklerin yari ömrünü arttirabilen enzimatik degradasyondan koruduklari düsünülmektedir. Lipofilik sübstitüent, örnegin GIP reseptörü ve/veya GLP-l reseptörüyle ilgili olarak bilesigin potansini da module edebilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, yalnizca bir amino asit yari zinciri, bir lipofilik sübstit'uente konjuge edilir. Bu bulusun baska yapilarinda, iki ainino asit yan zincirinin her biri bir lipofilik sübstitüente konjuge edilir. Bulusun yine baska yapilarinda, üç ya da hatta daha fazla amino asit yan zincirinin her biri bir lipofilik sübstit'ûente kon juge edilir. Bir bilesik iki ya da daha fazla lipofilik sübstit'uent içerdiginde, bunlar ayni ya da farkli olabilir.

Lipofilik sübstitüent Zl, amino asit yan zincirinde bir atoma kovaleiit baglanabilir ya da alternatif olarak, bir veya daha fazla aralayici 22 yoluyla amino asit yan zincirine konjuge edilebilir. moiyetenin baska birine kovalent baglanmasini ve bu moiyeteler arasindaki yapisal iliskiyi tanimlamak için kullanilir. Belirli bir sentez yöntemine isaret etmek için kullanilmamalidir. Aralayici 22 mevcut oldugunda, bilesik ile lipofilik moiyete arasinda bir aralik saglainak için kullanilir.

Lipofilik sübstitüent, bir ester, bir sülfonil ester, bir tiyoester, bir amid ya da bir sülfonamid araciligiyla aralayiciya ya da ainino asit yan zincirine eklenebilir. Bu dogrultuda, lipofilik sübstit'uentin tercihen ester, sülfoiiil ester, tiyoester, amid ya da sülfonamidin bir parçasini olusturan bir açil grubunu, bir sülfonil grubunu, bir N atomuiiu, bir 0 atomuiiu ya da bir S atomunu kapsadigi anlasilacaktir. Tercihen, lipofilik sübstitüentte bulunan bir acil grubu, ainino asit yan zinciri ya da aralayiciyla bir ainid ya da esterin bir parçasini olusturur.

Lipofilik sübstit'ûent, 10 ilâ 24 karbon (C) atomu, örnegin 10 ilâ 22 C atomu, 'Örnegin 10 ilâ 20 C atomu içeren bir hidrokarbon ziiiciriiii kapsayabilir. Tercihen, en az 11 C atoinuna ve terciheii 18 C atomuna ya da daha azina sahiptir. Örnegin, hidrokarbon zinciri, 12, 13, 14, 15, 16, 17 ya da 18 karbon atoinu içerebilir, Hidrokarbon zinciri, lineer ya da dallanmis olabilir ve doymus ya da doymamis olabilir. Ek olarak, sentez esnasinda koruiiabilecegi gibi, koruninayabilecek de olan karboksilik asit gibi, lipofilik zincirin ucunda bir fonksiyonel grubu da kapsayabilir. Yukarida sunulan açiklama temelinde, hidrokarbon zincirinin tercihen amiiio asit yan zincirine ya da aralayiciya baglanmanin bir kismiiii olusturan bir moiyeteyle, örnegin bir açil grubu, bir sülfonil grubu, bir N atomu, bir 0 atoiiiu ya da bir 8 atomuyla sübstitüe edildigi anlasilacaktir.

En çok tercihen, hidrokarbon ziiiciri, açille sübstitüe edilir ve bu dogrultuda, hidrokarbon zinciri, bir alkaiioil grubunun bir parçasi, heptadekanoil, oktadekanoil ya da eikosanoil grubunun bir parçasi olabilir. Bir fonksiyonalize hidrokarbon zincirine 'Örnek olarak 15- karboksi-pentadekanoil gösterilebilir.

Yukarida bahsi geçtigi gibi, lipofilik sübstitüent 21, bir veya daha fazla aralayici Z2 yoluyla amino asit yan zincirine konjuge edilebilir.

Aralayici mevcut oldugunda, lipofilik sübstiti'iente ve amino asit yan zincirine eklenir. Aralayici, birbirinden bagimsiz olarak bir ester, bir sülfonil ester, bir tiyoester, bir amid ya da bir sülfonamid yoluyla lipofilik sübstitüente ve amino asit yan zincirine eklenebilir. Bu dogrultuda, birbirinden bagimsiz olarak açil, sülfonil, bir N atomu, bir 0 atomu ya da bir 8 atomu arasindan seçilen iki moiyeteyi kapsayabilir. Aralayici, bir lineer Cl-lO hidrokarbon zinciri ya da daha çok tercihen bir lineer C 1-5 hidrokarbon zicirinden olusabilir. Ek olarak, aralayici, C1-6 alkil, C1-6 alkil amin, C1-6 alkil hidroksi ve C 1-6 alkil karboksi arasindan seçilen bir veya daha fazla sübstiti'ientle sübstit'üe edilebilir.

Aralayici, örnegin dogada mevcut olan ya da dogal olmayan herhangi bir amino asidin bir artigi olabilir. Örnegin, aralayici, bir Gly, Pro, Ala, Val, Leu, lle, Met, Cys, Phe, Tyr, Trp, His, Lys, Arg, Gln, Asn, (i-Glu, y-Glu, s-Lys, Asp, Ser, Thr, Gaba, Aib, ß-Ala (yani, 3- aminopropanoil), 4-aminobütanoil, 5-aminopentanoil, 6- aminoheksanoil, 7-aminoheptanoil, 8-aminooktanoil, 9- aminononanoil, lO-aminodekanoil ya da 8-amino-3,6-dioksaoktanoil artigi olabilir. Bu bulusun belirli yapilarinda, aralayici, bir Glu, y-Glu, s-Lys, ß-Ala (yani, 3-aminopropanoil), 4-aminobütanoil, 8- aminooktanoil ya da 8-airiino-3,6-dioksaoktanoi1 artigidir. Bu baglamda, y-Glu ve izoGlu birbirlerinin yerine ve dönüsümlü olarak kullanilir. Lipofilik sübstitüentin konjuge edildigi amino asit yan zinciri, örnegin Glu, Lys, Ser, Cys, Dbu, Dpr ya da Orn artiginin bir yan zinciridir. Örnegin, bir Lys, Glu ya da Cys artiginin yan zinciri de olabilir. Iki veya daha fazla yan zincir bir lipofilik sübstitüent tasidiginda, bunlar birbirlerinden bagimsiz olarak bu artiklar arasindan seçilebilirler. Sonuçta, amino asit yan zinciri, aralayici ya da lipofilik sübstit'üentle bir ester, bir sülfonil ester, bir tiyoester, bir amid ya da bir sülfonarnid olusturmak için bir karboksi, hidroksil, tiol, ainid ya da amin grubunu kapsar.

Bir lipofilik moiyete Z1 ve aralayici Z2 içeren bir lipofilik sübstitüentin bir örnegi asagidaki formülde gösterilmektedir: Burada, bir Lys artiginin yan zinciri, bir amid bagi araciligiyla bir y- Glu aralayicisina (22) kovalent baglanir. Bir heksadekanoil grubu (21, R=CH3), bir amid bagi araciligiyla y-Glu aralayicisina kovalent baglanir. Bir Lys artigina konjuge edilen lipofilik moiyete ve aralayicinin bu kombinasyonu, örnegin spesifik bilesiklerin formüllerinde gösterildiginde, kisaca K(Heksadekanoi1-y-G1u) olarak anilabilir. y-Glu, ayni zamanda, izoGlu olarak da anilabilir ve heksadekanoil grubu bir palmitoil grubu olarak da anilabilir. Sonuçta, (Heksadekanoil-y-Glu) notasyonun (izoGlu(Palm)) ya da (izoG1u(Pa1mitoil)) notasyonlarina esdeger oldugu açikça anlasilacaktir. Bulusun farkli yapilarinda, 15-karboksi-pentadekanoil grubu (ZZ, R=COOH), bir amid bagi araciligiyla y-Glu aralayicisina kovalant baglanir. Bir Lys artigina konjuge edilen lipofilik moiyetenin COOH gibi bir fonksiyonel grupla ve bir aralayiciyla kombinasyonu, K( 1 5-karboksi-pentadekanoil-y-Glu) ya da K( 1 5-karb0ksi- pentadekanoil- izoGlu) olarak anilabilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, bu bulusa konu olan bir GIP analogu, veya daha fazlasina bir lipofilik sübstit'ûentle kon juge edilir.

Sektörde bilgi ve beceri sahibi bir kisi, bu bulus baglaininda kullanilan bilesikleri hazirlamak için uygun teknikleri bilecektir. Uygun kimyasal tekniklerin örnekleri için, bakiniz: 'Örnegin, WO98/08871, 6126-32) ve Knudsen et al. .

Non-proteinoienik amino asit Bir GIP analogu bilesiginin ainino asitlerinin biri veya daha fazlasi, bir non-proteinojenik (dogada mevcut olmayan) amino asit olabilir.

Non-proteinojenik amino asitler, örnegin, alanin, arginin, aspartat, asparagin, sistein, glutamat, glutamin, glisin, histidin, izolösin, lösin, lizin, metionin, fenilalanin, prolin, serin, treonin, triptofan, tirozin ve valin gibi protein sentezinde kullanilan 20 "standart" amino asidin kapsamadigi amino asitleri kapsayabilir. Non-proteinojenik amino asitlerin örnekleri arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, para amino benzoik asit (PABA), 2-amin0 benzoik asit, antranilik asit, p- hidroksibenzoik asit (PHBA), 3-ami110 benzoik asit, 4-amin0metil benzoik asit, 4-amin0 salisilik asit (PAS), 4-amin0 sikloheksanoik asit klorobenzoik asit, 6-aminonik0tinik asit, meti1-6-amin0nik0tinat, 4- amino metil salisilat, 2-amino tiazol-4-asetik asit, 2-amin0-4-(2- aminofenil)-4-0ksobutan0ik asit (L-kinurenin), O-metil serin, asetilamino alanin, ß-alanin, ß-(asetilamin0)alanin, ß-aminoalanin, ß- kloroalanin, siti'ullin, homositrullin, hidroksiprolin, homoarginin, homoserin, homotirozin, homoprolin, ornitin, 4-amino-feni1alanin, sarkosin, bifenilalanin, homofenilalanin, 4-nitr0-fenilalanin, 4-f10r0- fenilalanin, 2,3,4,5,6-pentafloro-fenilalanin, norlösin, sikloheksilalanin, N-metil-alanin, N-metil-glisin, N-metil-glutarnik asit, tert-butilglisin, (x-aminobütirik asit, oc-aminoizobütirik asit (AIB), 2-aminoizobütirik asit, 2-aininoindan-Z-karboksilik asit, selenometionin, lantionin, dehidroalanin, y-aminobütirik asit, naftilalanin, aminoheksanoik asit, fenilglisin, pipekolik asit, 2,3- diaminoproprionik asit, tetrahidroizokinolin-3-karboksilik asit, taurin, tert-lösin, tert-bütilalanin, sikloheksilglisin, dietilglisin ve dipropilglisin vardir.

C-terminal amidasvon Bir GIP analogunun majör biyolojik açidan aktif fragmani, C- terminalde bit serbest karboksilik asitle bir 42-amino asitli peptid olarak üretilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus baglaminda kullanilan bir bilesik, dogada mevcut GIP”nin bir trunkat ya da tam boy analogunuda içerebilir ve ek olarak, bir C-terminal modifikasyon, Klinik fayda Bu bulus baglaminda kullanilan GIP analogu bilesikleri, obezite, diabetes mellitus (diyabet), obezite-iliskili bozuklar ve diyabet-iliskili bozukluklar da dahil metabolik hastaliklar için ilgi çekici bir tedavi seçenegi sunabilir. Diyabet, insülin salgisi, insülin etkinligi ya da her ikisinde kusurlardan kaynaklanan hipergliseiniyle karakterize edilen bir metabolik hastaliklar grubunu kapsar. Diyabet, patojenik özellikler temelinde tip 1 diyabet, tip 2 diyabet ve gestasyonel diyabet olarak siniflandirilir. Tip 1 diyabet, tüm diyabet vakalarinin %5 - %10”unu olusturur ve insülin salgilayan pankreas ß-hücrelerinin oto-immün yikimindan kaynaklanir. Diyabetin akut belirtileri arasinda, asiri idrar üretiini, bundan kaynaklanan kompansatuar susuzluk ve artan sivi alimi, bulanik görme, açiklanamayan kilo kaybi, letarji ve enerji nietabolizmasinda degisiklikler vardir. Bununla birlikte, tip 2 diyabette semptomlar çogunlukla siddetli degildir ya da bulunmayabilir. Diyabette kronik hiperglisemi, çesitli organlarin, uzun süreli hasari, fonksiyon bozuklugu ve islev görmemesiyle iliskilendirilir.

Tip 2 diyabet, diyabet vakalarinin %90 - %95'ini olusturur ve metabolik bozukluklarin bir kompleks setinin bir sonucudur. Bununla birlikte, semptomlar çogunlukla siddetli degildir ya da bulunmayabilir. Tip 2 diyabet, plazma glukoz seviyelerini diyagnostik esiklerin altinda tutmak için endojen insülin üretiminin yetersiz hale gelmesine neden olur.

Gestasyonel diyabet, hamilelik esnasinda tanimlanan glukoz intoleransi derecesine atif yapmaktadir.

Pre-diyabet, bozulmus açlik glukozu ve bozulmus glukoz toleransini kapsar ve kan glikoz seviyeleri yükseldiginde, fakat yine de diyabetin klinik tanisi için belirlenen seviyelerin altinda oldugunda meydana gelen durumlari ifade eder.

Tip 2 diyabet ve pre-diyabeti olan hastalarin büyük bir kismi, abdominal obezite (abdoininal internal organlar etrafinda asiri yag dokusu), aterojenik dislipidemi (arter duvarlarinda plak birikimini tesvik eden yüksek trigliseridler, düsük HDL kolesterolü ve/veya yüksek LDL kolesterolü de dahil kanda yag bozukluklari), yükselmis kans basinci (hipertansiyon) bir protroinbotik durum (örnegin, kanda yüksek fibrinojen ya da plazminoken aktivatör inhibitörü-l) ve/veya bir proinflammatuar durum da (örnegin, kanda yükselmis C-reaktif protein) dahil ilave metabolik risk faktörlerinin yüksek prevalansindan dolayi artan morbidite ve mortalite riski altindadir.

Bunlarin aksine, obezite, pre-diyabet, tip 2 diyabet ve yani sira, örnegin belirli kanser türleri, obstrüktif uyku apnesi ve safrakesesi hastaliginin gelisme riskini artirir. Dislipidemi, yüksek kardiyovasküler hastalik riskiyle iliskilendirilir. Yüksek Yogunluklu Lipoprotein (HDL) klinik açidan önemlidir, çünkü plazma HDL konsantrasyonlari ile aterosklerotik hastalik riski arasinda ters bir korelasyon vardir. Aterosklerotik plaklarda depolanan kolesterolün çogunlugu LDL'den kaynaklanir ve dolayisiyla, Düsük Yogunluklu Lipoproteinlerin (LDL) yükselinis konsantrasyonu, aterosklerozla yakindan iliskilidir. HDL/LDL orani, özellikle ateroskleroz ve koroner ateroskleroz için bir klinik risk göstergesidir.

Bu bulus baglaminda kullanilan bilesikler, GIP-GLPI dual agonistleri olarak islev görürler. Dual agonist, GIP”nin örnegin yag metabolizmasi ve kilo kaybi ve kan glukozu üzerindeki etkisini, GLP- 1”i11 örnegin kan glukoz seviyeleri ve gida aliini üzerindeki etkisiyle kombine edebilir. Bu nedenle, asiri adipoz dokunun ortadan kaldirilmasini hizlandinna, sürdürülebilir kilo kaybini indükleme ve glisemik kontrolü gelistirme islevleri görebilirler. Dual GIP-GLPl agonistleri, ayni zamanda, yüksek kolesterol, ömegin yüksek LDL- kolesterol gibi kardiyovasküler risk faktörlerini düsürme islevi de görebilir.

Sonuçta, bu bulusa konu olan GlP-GLP] dual agonist bilesikleri, kilo alimini önleinek, kilo kaybini tesvik etmek, asiri Vücut agirligini düsürmek ya da morbid obezite de dahil obeziteyi (örnegin, istah, beslenme, gida alimi, kalori alimi ve/veya enerji tüketimi ve lipoliz kontrolü yoluyla) ve yani sira, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin obeziteye bagli inflamasyon, obeziteye bagli safrakesesi hastaligi ve obezite indüklü uyku apnesi de dahil olinak üzere iliskili hastaliklari ve saglik durumlarini tedavi etmek için farmasötik ajanlar olarak kullanilabilirler. Bu bulus baglaminda kullanilan GIP-GLPl dual agonist bilesikleri, insülin direnci, glukoz intoleransi, pre-diyabet, artan açlik glukozu, tip 2 diyabet, hipertansiyon, dislipidemi (ya da bu metabolik risk faktörlerinin bir kombinasyonu), ateroskleroz, arterioskleroz, koroner kalp hastaligi, periferal arter hastaligi ve strok tedavisi için de kullanilabilir. Bunlarin hepsi obeziteyle iliskilendirilebilen hastaliklardir. Bununla birlikte, bu bulus baglaminda kullanilan bilesiklerin bu hastaliklar üzerindeki etkilerine, bir bütün olarak ya da kisinen Vücut agirligi üzerindeki bir etki aracilik edebilir ya da bu etkiler, bundan bagimsiz olabilir. Bu bulus baglaminda kullanilan GIP-GLPl dual agonist bilesikleri, ayrica, mide ve/veya bagirsakle ilgili bir bozuklugun tedavisi için de kullanilabilir.

GIP-GLPl dual agonist bilesikleri ve onlarin farmasötik bilesiinleri ayrica metabolik hastaliklar, diyabet ya da diyabetle iliskili bozukluklar, mide ve/veya bagirsakla iliskili bozukluk ve/veya obezite ya da obeziteyle iliskili bozukluklar da dahil olmak üzere burada tarif edilen hastaliklarin, bozukluklarin ya da durumlarin herhangi birinin tedavisi ve/veya önlenmesi için de kullanilabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, GIP-GLPl dual agonist bilesikleri, metabolik hastaliklar, diyabet ya da diyabetle iliskili bozukluklar ve/veya obezite ya da obeziteyle iliskili bozukluklar da dahil olmak 'uzere burada tarif edilen hastaliklarin, bozukluklarin ya da durumlarin herhangi birinin tedavisi ve/veya önlenmesi için bir ilaç hazirlama prosesinde de kullanilabilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, diyabetle iliskili bozukluk, insülin direnci, glukoz intoleransi, artan açlik glukozu, pre-diyabet, tip 1 diyabet, tip 2 diyabet, gestasyonel diyabet, hipertansiyon, dislipidemi ya da buiilarin bir koinbinasyonu arasindan seçilir. Bu bulusun belirli yapilarinda, diyabetle iliskili bozukluk, ateroskleroz, arterioskleroz, koroner kalp hastaligi, periferal arter hastaligi ve strok arasindan seçilir ya da aterojenik dislipidemi, kan yag bozukluklari, yüksek kan basinci, hipertansiyon, protrombotik durum ve proinflamatuar durum ya da bunlarin bir koinbinasyonu arasindan seçilen bir durumla iliskilendirilir. Bu bulusun belirli yapilarinda, kan yagi bozuklugu, yüksek trigliseridler, düsük HDL kolesterol, yüksek LDL kolesterol, arter duvarlarinda plak birikimi ya da bunlariii bir kombinasyonu arasindan seçilir. Bu bulusun belirli yapilarinda, protrombotik durum, kanda yüksek fibrinojen seviyeleri ve kanda yüksek plazminojen aktivatör inhibitörü-l seviyeleri arasindan seçilir. Bu bulusun belirli yapilarinda, proinflamatuar durum, kanda yükselmis C-reaktif protein seviyesidir. Bu bulusun belirli yapilarinda, obeziteyle iliskili bozukluk, obeziteyle baglantili inflamasyon, obeziteyle baglantili safrakesesi hastaligi ve obeziteyle indüklenen uyku apnesi arasiiidan seçilir.

Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus ayrica bulus konusu bir GIP analogu, bulus konusu bir nükleik asit molekülü, bulus konusu bir ekspresyon vektörü ya da bulus koiiusu bir konakçi hücrenin her birini, istege bagli olarak farmas'otik açidan kabul edilebilir bir tasiyiciyla kombinasyon halinde içeren bir terapötik kit saglar. Bazi yapilarinda, bu bulus, bir denege GIP analogu uygulamak için bulus konusu bir GIP analogu, bulus konusu bir nükleik asit molekülü, bulus konusu bir ekspresyon vektörü ya da bulus konusu bir konakçi hücre içeren bir cihaz sunar.

Farmasötik bilesimler Bu bulusa konu olan GlP-GLPl dual agonist bilesikleri ya da onlarin tuzlari veya solvatlari, farinasötik açidan kabul edilebilir bir tasiyici içinde, tipik olarak bulusun baglaminda kullanilan bir bilesigin ya da onun bir tuzunun veya solvatinin terapötik açidan etkin ve etkili bir miktarini içeren, saklanmak ya da uygulanmak üzere hazirlanmis farmasötik bilesimler olarak formüle edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, farinasötik bilesim, enjeksiyonla veya infüzyonla uygulama için uygun olan ya da GIP-GLPl dual agonist bilesiginin yavas salimini saglayacak sekilde formüle edilen bir sivi olarak forinüle edilir.

Bu bulusa konu olan bir bilesigin terapötik açidan etkin ve etkili miktari, örnegin uygulama yoluna, tedavi edilen memelinin türüne ve dikkate alinan spesifik memelinin fiziksel özelliklerine bagli olacaktir.

Bu faktörler ve bu miktarin belirlenmesiyle iliskileri, medikal sektöründe bilgi ve beceri sahibi doktorlar tarafindan iyi bilinmektedir. Bu miktar ve uygulama yöntemi, optimum etkinlik elde edecek sekilde uyarlanabilir ve medikal sektöründe uzman kisilerce iyi bilinen agirlik, diyet, eszamanli ilaç ve baska faktörler gibi faktörlere bagli olabilir. Insan kullanimi için en uygun dozaj boyutlari ve dozlaina rejimi, bu bulusla elde edilen sonuçlarla yöiilendirilebilir ve uygun sekilde tasarlanmis klinik deneylerde dogrulanabilir.

Etkin ve etkili bir dozaj ve tedavi protokolü, laboratuvar hayvanlarinda düsük bir dozla baslanarak ve daha sonra, etkilerin izlenmesi sirasinda dozaj arttirilarak ve ayni zamanda, dozaj rejimi sistematik olarak degistirilerek geleneksel yollarla belirlenebilir. Bir klinisyen belirli bir denek için bir optimum dozaji belirlerken sayisiz faktörü dikkate alinabilir. Dikkate alinacak bu faktörleri, sektörde bilgi ve beceri sahibi kisiler bilirler. "Farmasötik açidan kabul edilebilir tasiyici" terimi, standart farmasötik tasiyicilarin herhangi birisini kapsar. Terap'otik kullaniin için farinasötik açidan kabul edilebilir tasiyicilar, farmasötik sektöründe iyi bilinmekte ve örnegin Gennaro edit. 1985)” dokümaninda açiklanmaktadir. Örnegin, hafif asidik ya da fizyolojik pH seviyesinde steril salin ve fosfat-tamponlu salin kullanilabilir. Uygun pH tamponlama ajanlari, örnegin fosfat, sitrat, asetat, laktat, maleat, tris/hidroksimetil)aminometan (TRIS), N- Tris(hidroksimetil)metil-3-aminopropansülfonik asit (TAPS), amonyum bikarbonat, dietanolamin, histidin - bu bulusun belirli yapilarinda tersih edilen bir tampondur -, arginin, lizin ya da asetat ya da bunlarin karisimlari olabilir. Terim, ek olarak, insanlar da dahil hayvanlarda kullanmak için ABD Farinakopesinde listelenen ajanlari da kapsar. atif yapmaktadir. Tuzlar arasinda farinasötik açidan kabul edilebilir tuzlar, örnegin asit ilaveli tuzlar ve bazik tuzlar vardir. Asit ilaveli tuzlara örnek olarak hidroklorür tuzlari, sitrat tuzlari ve asetat tuzlari gösterilebilir. Bazik tuzlara örnek olarak katyonun sodyum ve potasyum gibi alkali metaller, kalsiyum gibi alkalin toprak metaller ve amonyum iyonlari +N(R3)3(R4) 7 burada, R3 ve R4 simgeleri birbirlerinden bagimsiz olarak istege göre sübstitüe edilen C].6-alkil, istege göre sübstit'üe edilen C2_6-alkenil, istege göre sübstiti'ie edilen ari] ya da istege göre sübstitüe edilen heteroaril temsil eder - arasindan seçildigi tuzlar gösterilebilir. Farmasötik açidan kabul edilebilir tuzlarin baska 'Örnekleri “"Remington's Pharmaoeutical Sciences" ,17th edition. Ed. Alfonso R. Gennaro (Ed), Mark Publishing Coinpany, Easton, PA, U.S.A., 1985” referansindan ve bunun daha güncel baskilarinda ve “Encyclopaedia of Pharinaceutical Technology” kitabinda açiklaninaktadir. uygulanan bir yaklasimdir. Bu bulusun amaçlari dogrultusunda, faydali ya da istenen klinik sonuçlar arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, tespit edilebilir düzeyde olsun ya da olmasin, semptomlarin hafiflemesi, hastaligin yayiliminin azalmasi, stabil (yani kötülesmeyen) hastalik durumu, hastalik progresyonunun gecikmesi ya da yavaslainasi, hastalik durumunun iyilesmesi ya da palyasyonu ve (kismen ya da tamamen) remisyon vardir. "Tedavi", tedavi verilmeyen durumda beklenen sürviye kiyasla sürvinin uzatilmasi anlamina da gelebilir. "Tedavi", bir bozuklugun sebep oldugu patolojinin gelismesini `Önlemek ya da eger zaten meydana gelmisse degistirmek amaciyla yürütülen bir müdahaledir. Bu tanima bagli olarak, "tedavi" terimi, bu bulusun belirli yapilarinda, hem terap'otik tedaviye hem de profilaktik veya önleyici önlemlere atif yapar.

Dolayisiyla, tedavi ihtiyaci olanlar arasinda, hem bozuklugun zaten var oldugu kisiler hem de bozuklugun 'Önlenmesi gereken kisiler bulunur. Tedavi, tedavinin uygulanmadigi durumla kiyaslandiginda patolojide ya da semptomlarda (örnegin kilo alimi, hiperglisemi) bir artisi inhibe etme ya da azaltma anlamina gelir ve ilgili durumun tamamen ortadan kaldirilmasi anlamina gelmesi sart degildir.

Bu bulusa konu olan farmasötik bilesimler, birim dozaj formunda olabilir. Bu formda, bilesim, uygun miktarlarda etkin bilesen içeren birim dozlara bölüni'ir. Birim dozaj formu, bir ainbalajli preparat olabilir; bu paket, örnegin paketli tabletler, kapsüller ve flakonlar veya ampuller içinde bulunan tozlar gibi ayrik miktarlarda preparat içerir.

Ayrica, birim dozaj formunun bir kapsül, sase ya da tabletin kendisi olabilecegi gibi, paketlenmis formda bulunan bu preparatlarin herhangi birisinden uygun sayida da içerebilir. Tek doz enjekte edilebilir formda, örnegin bir enjeksiyon kalemi formunda sunulabilir.

Bilesimler, uygun herhangi bir uygulama yolu ve sekli için formüle edilebilir. Farmasötik açidan kabul edilebilir tasiyicilar ya da seyrelticiler, oral, rektal, nazal ya da parenteral (subkutan, intramî'iski'iler, intravenöz, intradermal ve transdermal dahil) uygulama için uygun formülasyonlarda kullanilanlari kapsar. Formülasyonlar, birim dozaj formunda uygun sekilde sunulabilir ve eczacilik sektöründe iyi bilinen yöntemlerin herhangi birisiyle hazirlanabilir.

Subkutan ya da transdermal uygulama sekilleri, burada açiklanan bilesiklerin bazilari için özellikle uygun olabilir.

Kombinasvon tedavisi Bu bulusun belirli yapilarinda, bulus baglaminda kullanilan bir GlP- GLP-l dual agonist bilesigi, diyabet, obezite, dislipidemi ya da hipertansiyonun tedavisi için en az bir baska a janla bir kombinasyon tedavisinin bir parçasi olarak uygulanabilir.

Bu gibi durumlarda, en az iki etkin madde birlikte ya da ayri ayri ve ayni farmasötik formülasyonun bir parçasi olarak ya da ayri formülasyonlar olarak da verilebilir. Sonuçta, bu bulus baglaminda kullanilan GIP-GLP-l dual agonist bilesigi (ya da onun tuzu ya da solvati), sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, metformin, bir sülfonilüre, bir glinid, bir DPP-IV inhibitörü, bir glitazon ya da insülin de dahil bir antidiyabetik ajanlar kombinasyon halinde kullanilabilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, bilesik ya da onun tuzu veya solvati, yeterli ve uygun glisemik kontrolü saglamak için insülin, DPP-IV inhibitörü, sülfonilüre ya da metforminle, özellikle de sülfonilüre ya da metforminle koinbinasyon halinde kullanilir. Bu bulusun belirli tercih edilen yapilarinda, bilesik ya da onun tuzu veya solvati, yeterli ve uygun glisemik kontrolü saglamak için insülinle ya da bir insülin analoguyla kombinasyon halinde kullanilir. Insülin analoglarina 'Örnek olarak, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, Lantus®, NovoRapid®, Humalog®, NovoMiX®, Actraphane HM®, Levemir® ve Apidra® gösterilebilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, GIP-GLP-l dual agonist bilesigi ya da onun tuzu veya solvati, ek olarak, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin bir glukagon-benzeri peptid reseptörü l agonisti, peptid YY ya da onun analogu, kannabinoid reseptörü 1 antagonisti, lipaz inhibitörü, melanokortin reseptörü 4 agonisti ya da melanin konsantre edici hormon reseptörü l antagonisti de dahil bir veya daha fazla anti- obezite a janiyla kombinasyon halinde kullanilabilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, GIP-GLP-l dual agonist bilesigi ya da onun tuzu veya solvati, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin bir anjiyotensiii-dönüstürücü enzim inhibitörü, anjiyotensin II reseptör blokeri, diüretikler, beta-bloker ya da kalsiyum kanal blokeri de dahil bir anti-hipertansiyon a janiyla kombinasyon halinde kullanilabilir.

Bu bulusun belirli yapilarinda, GlP-GLP-l dual agonist bilesigi ya da oiiun tuzu, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin bir statiii, bir fibrat, bir niasin ve/Veya bir kolesterol absorpsiyon inhibitörü de dahil bir anti- dislipideini ajaniyla kombinasyon halinde kullanilabilir.

Nükleik asitler.. vektörler ve konakçi hücreler Bazi yapilarinda, bu bulus, bulus konusu bir GIP analogunu kodlayan bir nükleik asit sekansi içeren bir nükleik asilt molekülü sunar. Bazi yapilarinda, bu bulus, bulus konusu bir GIP analogunu kodlayan bir nükleik asit sekansini, ekspreyonunu yönlendirmek amaciyla kontrol sekanslariyla koinbinasyon halinde içeren bir ekspresyon vektörü sunar. Bazi yapilarinda, bu bulus, böyle bir ekspresyon vektörüyle transforme edilinis bir konakçi hücre sunar. Bazi yapilarinda, bu bulus, bulus konusu bir GIP analogunu üretme ainacina yönelik olan ve yukarida açiklanan konakçi hücrelerin GIP analogu eksprese etmek için uygun kosullar altinda kültürleninesi ve bu yolla üretilen GIP analogunun saflastirilmasi basamaklarindan olusan bir yöntem sunar.

Bazi yapilarinda, bu bulus, tedavide kullanmak üzere yukarida tarif edildigi gibi olan bir nükleik asit molekülü, bir ekspresyon vektörü ya da bir konakçi hücre sunar. Bazi yapilarinda, bu bulus, bir metabolik bozuklugun tedavisi ve/veya önlenmesi için bir ilaç hazirlaina prosesinde yukarida tarif edildigi gibi olan bir nükleik asit molekülünün, bir ekspresyon vektörünün ya da bir konakçi hücrenin kullanilmasini sunar. Bir nükleik asidin normalde yalnizca polipeptid sekansinin tamami dogada mevcut (proteinojenik) 20 amino asitten olustugunda, bulus konusu bir polipeptidi kodlayabilecegi anlasilacaktir. Bununla birlikte, bu bulusa konu olan bilesigin bir fragmanini ya da prekürsörünü kodlayan nükleik asitler de kullanilabilir.

Bu bulusa konu olan peptid bilesikleri, standart peptid sentez yöntemleriyle, rekoinbinan ekspresyon sistemleri kullanilarak ya da uygun baska herhangi bir yöntemle üretilebilir. Sonuçta, bilesikler, örnegin asagida açiklananlari kapsayan yöntemler de dahil birçok yolla sentezlenebilir: (a) peptid bilesiginin standart kati-faz ya da sivi-faz metodolojisiyle, kademeli olarak ya da fragman düzenegi yoluyla sentezleninesi ve nihai peptid bilesigi ürününün izole edilmesi ve saflastirilmasi; (b) bir konakçi hücrede peptid bilesigini ya da onun bir fragmanini veya prekürsörünü kodlayan bir nükleik asit yapisi eksprese edilmesi Ve ekspresyon ürününün konakçi hücre kültüründen geri kazanilmasi (0) peptid bilesigini ya da onun bir fragmanini veya prekürsörünü kodlayan bir nükleik asit yapisinin hücresiz olarak in-Vitro ortamde ekspresyonunun gerçeklestirilmesi ve ekspresyon ürününün geri kazanilmasi; ya da (a), (b) veya (o) yöntemlerinin herhangi birisinin koinbinasyonuyla sentezlenebilir ve böylece, peptid bilesiginin fragmanlari elde edilir ve daha sonra, fragmanlar birlestirilerek (örnegin, ligate edilerek) peptid bilesigi elde edilir ve peptid bilesigi geri kazanilir.

Sentez yöntemi, bir prekürsör peptidde bir veya daha fazla amino asit yan zinciri kimyasal olarak modifiye edilerek bu bulusa konu olan bir bilesigin elde edilmesi basamagini kapsayabilir. Bu modifikasyon, örnegin, bir dogada mevcut olinayan amino asidi zincire sokabilir, bir veya daha fazla amino asidi dogada mevcut olinayan amino asitlere dönüstürebilir, örnegin bir Glu ile bir Lys artigi arasinda bir laktam halkasi olusturarak iki amino asit yan zinciri arasina bir intramoleküler köprü sokabilir ya da bir lizin artigiiia bir lipofilik sübstitüent sokabilir.

Bu bulusa konu olan peptid bilesiklerinin kati faz ya da sivi faz peptid sentezi vasitasiyla sentezlenmesi tercih edilebilir. Bu baglamda, WC 98/ 1 l 125 numarali dokümana ya da digerlerinin yani sira, “Fields, G.B. et al., "Principles and Practice of Solid-Phase Peptide Synthesis", in: Synthetic Peptides, Gregory A. Grant (ed), Oxford University Press (2nd edition, 2002)” referansina ve bu referansta verilen sentez örneklerine bakilabilir.

Bu dogrultuda, bu bulus açiklamasi, ayrica, yukarida atif yapilan yöntemlere göre bu bulusa konu olan bir polipeptidi üretme yöntemleri, bu bulusa konu olan bir polipeptidin veya onun bir prekürsörünün bir kismini ya da tamamini kodlayan bir nükleik asit molekülü, bu bulusa konu olan en az bir nükleik asidi içeren bir vektör, bir konakçi hücreye sokuldugunda bu bulusa konu olan bir polipeptidi üretebilen bulus konusu en az bir iiükleik asidi içeren ekspresyon vektörleri ve bu bulusa konu olan bir nükleik asit molekülü, vektör ya da ekspresyon vektörûnü içeren bir konakçi hücre de sunar. Örnekler Aasgidaki örnekler, bu bulusun belirli yapilarini göstermektedir.

Bununla birlikte, bu örneklerin ne bu bulusun kosullari ve kapsami bakimindan tamainen açiklayici olmalarinin hedeflendigi ne de öyle olduklarinin kastedildigi anlasilmalidir. Ornekler, ayrintili olarak açiklandiklari durumlar hariciiide, teknikte uzman kisilerce iyi bilinen ve rutin olan standart teknikler kullanilarak gerçeklestirilmistir.

Asagidaki örnekler yalnizca açiklama amaçli sunulmustur ve bu bulusun kapsamini sinirlayacak sekilde yorumlanmamalidir.

Bu bulusta, sinyalleme selektivitesi gösteren GIP-GLPl dual agonist bilesikleri ve bu bilesikleri tarama yöntemleri açiklanmaktadir.

Sinyalleme selektivitesi, örnegin tercihli yolak aktivasyonu ya da tercihli yolak inhibisyonu ya da her ikisi olabilir. GIP-GLPl dual agonist bilesikleri, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin obezite, morbid obezite, obeziteyle baglantili inflamasyon, obeziteyle baglantili safrakesesi hastaligi, obeziteyle indüklenen uyku apnesi, metabolik sendrom, pre-diyabet, insülin direnci, glukoz intoleransi, tip 2 diyabet, tip 1 diyabet, hipertansiyon, aterojenik dislipidemi, ateroskleroz, arterioskleroz, koroner kalp hastaligi, periferal arter hastaligi ve strok ya da mikrovasküler hastalik da dahil asiri Vücut agirliginin sebep oldugu ya da onunla karakterize edilen hastaliklar ya da durumlarin tedavisi ve/Veya önlenmesinde kullanisli ve faydali olabilir.

Bulusun bazi yapilari örnekleme yoluyla tarif edilmis olsa da, bulusun istemlerin kapsamini asmadan, teknikte uzman kisilerce bilinen kapsam dahiline giren çok sayida esdeger ya da alternatif çözümlerin kullanilmasiyla ve birçok farkli modifikasyon, varyasyon ve adaptasyonun yapilmasiyla uygulamaya geçirilebilecegi açiktir.

Bu bulusta kullanilaii yöntemler, aksi açikça belirtilmedikçe, asagida tarif edildigi gibidirler.

Açillenmis GIP analoglarinin genel sentezi Standart Fmoc kimyasi kullanilarak bir CEM Liberty Peptid Sentezleyicide kati faz peptid sentezi gerçeklestirildi. TentaGel S Ram reçinesi (1 g; içinde sisirildi ve DCM ve NMP kullanilarak tüp ile reaksiyon küveti arasinda transfer edildi.

Kuplajlama NMP/DMF/DCM (1:1:1 ; 0,2 M; 5 ml) içinde bir Fmoc-amino asit, HATU/DMF ya da COMU/DMF (0,5 M; 2 ml) ve DlPEA/NMP (2,0 M; 1 ml) ile birlikte bir CEM Discover mikrodalga 'ünitesinde reçineye ilave edildi. Bir yandan karisimda nitrojen kabarciklandirilarak, kuplajlaina karisimi 5 dakika süreyle 75°C sicakliga kadar isitildi. Daha sonra, reçine, NMP”yle (4 X 10 ml) yikandi.

Koruma gruplarini uzaklastirma Piperidin/DMF (%20, 10 ml), ilk koruma grubunu uzaklastirma basamagi için reçineye ilave edildi ve karisim, mikrodalgalarla (30 saniye; 40°C) isitildi. Reaksiyon küveti bosaltildi ve piperidin/NMP7nin ikinci kismi (%20; 10 ml) ilave edildi ve yeniden isitildi (75°C; 3 dakika). Daha sonra, reçine, DMF”yle (6 x 10 m1) yikandi.

Yan zincir açilasyonu Fmoc-Lys(iVDde_)-OH ya da alternatif olarak, bir ortogonal yan zincir koruma grubuna sahip baska bir amino asit, açilasyon pozisyonuna sokuldu. Peptid omurgasinin N-terminali, daha sonra, BOCZO kullanilarak ya da alternatif olarak, son kuplajlama isleminde bir Boc- koruinali ainino asit kullanilarak Boc-korumasi yapildi. Peptid reçineye hâlâ bagli vaziyetteyken, ortogonal yan zincir koruma grubu, 2 X 15 dakika süreyle NMP içinde taze hazirlanmis hidrazin hidrat (%2 - %4) kullanilarak selektif klevajlandi. Korunmayan lizin yan zinciri ilk 'once Fmoc-Glu-OtBu ya da baska bir aralayici ainino asitle kuplajlandi; piperidinle koruma gruplari uzaklastirildi ve yukarida tarif edildigi gibi peptid kuplajlama metodolojisi kullamlarak bir lipofilik moiyeteyle açilleiidi. Alternatif olarak, açilasyon moiyetesi, gamma-Glu)-OH olarak sokuldu; burada, gamm-Glu, yan zincir yoluyla Glutamik asit kuplajlamasidir. Kullanilan kisaltmalar asagida açiklandigi gibidir: COMU: 1-[(1-(siyano-2-etoksi-2-oksoeti1idenaminooksi)- dimetilamino-inorfolinometilen)]metanaminyum heksaflorofosfat iVDde: l-(4,4-dimetil-2,6-dioksosikloheksiliden)3-metil-bütil Dde: l-(4,4-dimetil-2,6-dioksosikloheksiliden)-etil DCM: diklorometan DMF: N,N-dimetilf0rmamid DIPEA: diizopropiletilamin EtOH: etanol EtZO: dietil eter HATU: N-[(dimetilamin0)- 1 H- 1 ,2,3-triazol[4,5-b]piridin-l -ilmetilen]- N-metilinetanaminyum heksaflorofosfat N-oksit MeCN: asetonitril NMP: N-metilpirrolidon TFA: trifloroasetik asit TIS: triizopropilsilan Klevaj Reçine, EtOH (3 X 10 ml) ve EtZO (3 X 10 ml) ile yikandi ve oda sicakliginda (r.t.) sabit agirliga kadar kurutuldu. Ham peptid, TFA/TIS/su (95/2,5/2,5; 40 ml, 2 saat; r.t.) ile islem yoluyla reçineden klevajlandi. TFA,nin çogu, indirgenmis basinç altinda çikartildi ve ham peptid çökeltildi ve dietileterle üç defa yikandi ve oda sicakliginda sabit agirliga kadar kurutuldu.

Ham peptidin HPLC yöntemiyle saflastmlmasi Ham peptid, bir tampon A (%0,l TFA, aköz) ve tampon B (%0,l TFA, %90 MeCN, ak'oz) gradiyentiyle, bir C-18 kolon (5 cm; 10 pm) ve bir fraksiyon toplayiciyla donatilmis ve 35 ml/dakika hizda çalistirilan bir PerSeptive Biosystems VlSlON Çalisma Istasyonu kullanilarak preparatif ters faz HPLC yöntemiyle %90°dan daha yüksek orana kadar saflastirildi. Fraksiyonlar, analitik HPLC ve MS yöntemiyle analiz edildi ve iliskili fraksiyonlar havuzlandi ve liyofilize edildi. Nihai ürün, HPLC ve MS yöntemiyle karakterize Sentezlenen bilesikler Tablo 1 ve Tablo 2°de gösterilmektedir.

Bilesik No. Sekans 1 Hy-Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKKAAKEFVNWLLAQK-NHZ 2 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSI-Aib- LDKKAQ RAFVEWLLAQGPSSGAPPPS'NHz 3 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIALDKIAQRAFVNWLVA-Aib-K-NH2 4 Hy-Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKIAAKEFVNWLLAQK-NH2 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ Bilesik No. Sekans 6 pGlu-YAEGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH2 7 Hy-YGEGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ 8 Hy-Y-Aib-EGTFS SDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH2 9 Hy-Y-Aib-EGTFTSDLS IYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ Hy-Y-Aib-EGTFTSDSSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ l 1 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYLIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ 12 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlALDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ 13 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYSDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHz 14 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH; Hy-Y-Aib-EGTFTS DY SIALEKKAQRAFV NW LLA-Aib-K-N H; 16 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH2 Bilesik No.

Sekans Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH2 18 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAKRAFVNWLLA-Aib-K-NH2 19 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQKEFVNWLLA-Aib-K-NHZ Hy-Y-Aib-EGTFTS DY SIY LDKKAQ RAFV KW LLA-Aib-K-N HZ 21 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlYLDKKAQRAFVNWLVA-Aib-K-NH2 22 Hy-Y-Aib-EGTFTS DYSIY LDKKAQRAFVN W LSA-Aib-K-N Hz 23 Hy-Y-AIb-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLKA-Aib-K-NHz 24 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLL-Aib-K-NHZ 2 5 Hy-Y-AIb-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-KYG- 1NaI-LDF-NH2 26 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLAYGv1 Nal- 27 Hy-Y-Aib-EGTFTS DYSIY LDKKAEKAFVN W LLA-Aib-K-N HZ 28 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aîb- GPSSGAPPPS~NH2 29 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib- GPSSGAPPS-NH2 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIY LEKKAAKEFVN W LLAQK-N Hz 3 1 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDK-K( l 5-karboksi-pentadekaiioi]- 32 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSI-AIb-LDK-Ki(heksadekan0il-izoGlu- AQRAFVEWLLAQG PSSGAPPPS-NHQ 33 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDK-K((heksadekanoil-izoGlu- AQRAFVEW LLAQGPSSGAPPPS-NHZ 34 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(heksadekanoil-izoGlu- AAKEFlEWLESA-NHQ 3 5 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDK-K((heksadekanoil-izoGlu- 36 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlALDK-K((heksadekan0il-izoGlu- 37 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAKDFVEWLLSA-NH2 3 8 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAHDFVEWLLSA-NH2 39 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQKEFVEWLLSA-NH2 40 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAAKDFVEWLLSA-NHZ 4] Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLESKAAHDFVEWLLSA-NHZ 42 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAAHDFVEWLLSA-NH2 43 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAAKEFVEWLLSA-NH2 44 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEWLLRA-NHZ Bilesik No. Sekans 45 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYS KYLDS-Ki(heksadekaiioil-izoGlu- AAHDFVEWLLSA-NH; 46 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEK-K<(heksadekanoil-izoGlu- AAKEFVEW LLSA-NHZ 47 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDS-K(heksadekanoil-izoGlu- AAHDFVEWLLRA-NHg 48 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlYLDE-K((heksadekanoil-izoGlu- AAKDFVEWLESA-NHg 49 Hy-Y-Aib-EGTFTS DYSKYLDE-KKheksadekanoil-izoGlu- AAKDFIEWLESA-NH2 50 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K((heksadekanoil-izoGlu- AAKDFIEWLESA-NHg 51 Hy-Y-AIb-EGTFTSDYS KYLDS-K' ”^“^j“^^"“^"! 59°" "e AAHDFVEWLLRA-NH2 (heksadekanoi l-izoGlu- 52 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(heksadekan0il-izoGlu- AAKDFVEWLLSA-NHZ 53 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYS|YLDS-K<(heksadekanoil-izoGlu- AAHDFVEWLLSAGPSSGAPPPS-NHQ 54 Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEK-K-(heksadekanoi'l-izoGlu- AAKEFVEWLLSAGPSSGAPPPS-NH2 5 Hy-Y-Aib- EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEW LLSAGPSSGAPPPS-NHz 56 Y-Aib-EGTFTSDYSlYLDE-K((heksadekan0Il-izoGlu- AAHDFVEWLLSA Bilesik no. 367nin sentezi Standart Fmoc kimyasi kullanilarak bir CEM Liberty Peptid Sentezleyicide kati faz peptid sentezi gerçeklestirildi. TentaGel S Ram reçinesi ( içinde sisirildi ve DCM ve DMF kullanilarak tüp ile reaksiyon küveti arasinda transfer edildi.

Kuplajlama DMF/DCM (2:l ; 0,2 M; 5 ml) içinde bir Fmoc-amino asit, COMU/DMF ( ile birlikte bir CEM Discover mikrodalga ünitesinde reçineye ilave edildi.

Bir yandan karisimda nitrojen kabarciklandirilarak, kuplajlaina karisimi 5 dakika süreyle 75°C sicakliga kadar isitildi. Daha sonra, reçine, DMF°yle (4 x 10 ml) yikandi. C-terminalden sayildiginda 29 ve 30 numarali amino asit numarasi için Fmoc-Tyr(OtBu)-Ser(Psi Me,Me)-OH psödoprolin kullanildi. Fmoc-Lys(heksadekanoil- gamma-Glu)-OH (2:l ; 0,2 M; 5 ml), standart Fmoc kuplajlama kimyasi kullanilarak 'Önceden hazirlanmis bir yapitasi olarak sokuldu.

Ilk 9 amino asit ve amino asit numarasi 24 (C-terminalden sayildigiiida) çift kuplajdir, yani yapitasi, koruma gruplari uzaklastirilmadan önce iki defa kuplajlanmistir.

Koruma gruplarini uzaklastirma Piperidin/DMF (%20; 10 ml), ilk koruma grubunu uzaklastirma basamagi için reçineye ilave edildi ve karisim, mikrodalgalarla (30 saniye; 40°C) isitildi. Reaksiyon küveti bosaltildi ve piperidin/DMF”nin ikinci kismi (%20; 10 ml) ilave edildi ve yeniden isitildi (75°C; 3 dakika). Daha sonra, reçine, DMF°yle (6 X 10 ml) yikandi.

Reçine, EtOH (3 x 10 ml) ve EtZO (3 X 10 ml) ile yikandi ve oda sicakliginda (r.t.) sabit agirliga kadar kurutuldu. Ham peptid, TFA/TIS/HZO (95/2,5/2,5; 60 ml, 2 saat; r.t.) ile islem yoluyla reçineden klevajlandi. TFA”nin çogu, indirgenmis basinç altinda çikartildi ve ham peptid çökeltildi ve dietileterle üç defa yikandi ve oda sicakliginda sabit agirliga kadar kurutuldu.

Ham peptidin HPLC yöntemiyle sallastmlmasi Ham peptid, ilk önce, bir tampon A (% ve tampon B (%O,l TFA, %90 MeCN, aköz) gradiyentiyle, bir Gemini NX 5 n C-18 110A, 10x250 mm kolon ve bir fraksiyon t0playiciyla donatilinis ve ml/dakika hizda çalistirilan bir PerSeptive Biosystems VISION Çalisma Istasyonu kullanilarak preparatif ters faz HPLC yöntemiyle yöntemiyle analiz edildi ve iliskili fraksiyonlar havuzlandi ve liyofilize edildi. Urün (138 mg) analiz edildi ve HPLC ve MS yöntemiyle karakterize edildigi gibi, %96 saflik elde edildi.

Insan GIP reseptörü (GIP R) ve GLP-l reseptörü (GLP-l R) aktivite eseyi Bu bulusa konu olan peptid konjugatlarinin in vitro etkileri, Perkin- Eliner firmasindan temin edilen AlphaSceen® CAMP kiti talimatlara göre kullanilarak, bu bulusta ana hatlariyla anlatildigi gibi, ilgili reseptörün GIP, GLPl ya da buiilariii analoglari tarafindan stimülasyonunun ardindan CAMP indüksiyonunun ölçülmesi suretiyle degerlendirildi. Kisaca açiklamak gerekirse, insan GIP R ya da GLP-l R”si eksprese eden HEK293 hücreleri (insan GIP R ya da GLP-1”i için cDNA'mn transfeksiyonu ve stabil klonlarin seçilmesi yoluyla olusturulan stabil hücre hatlari), %0,01 poli-L-lizinle kaplanmis 96- kuyucuklu mikrotitre plakalarina 30.000 hücre/kuyucuk yogunlukla ekildi ve 200 ul büyüme vasati (DMEM, %10 FCS, Penisilin ( içinde kültürde 1 gün süreyle çogaltildi. Analiz gününde, büyüme vasat] çikartildi ve hücreler, 150 ml Tyrode tamponuyla (Tyrode Tuzlari (9,6 g/l), 10 mM HEPES, pH 7,4) bir defa yikandi. Daha sonra, hücreler, artan konsantrasyonlarda kontrol ve test bilesikleri içeren 100 ml Esey tamponu (Tyrode Tamponu içinde % içinde 37°C sicaklikta 15 dakika süreyle inkübe edildi. Esey tamponu çikartildi ve hücreler, beher kuyucukta 80 ul Liziz tamponu (%0,1 W/V BSA, 5 inM HEPES, %0,3 h/h Tween-20) içinde lize edildi. Her bir kuyucuktan 10 u] lize edilmis hücreler, bir 384-kuyucuk1u plakaya aktarildi ve 15 u] boncuk karisimiyla (Esey Tamponu içinde 1 Birim/ 15 ul anti-CAMP Akseptör Boncuklar, 1 Birim/ 15 ul Donör Boncuklar ve 1 Birim/ 15 u] Biyotinlenmis CAMP) karistirildi.

Plakalar karistirildi ve oda sicakliginda bir saat süreyle karanlikta inkübe edildi ve daha sonra, bir EnvisionTM plaka okuyucu (Perkin- Elmer) kullanilarak `Ölçüm yapildi. Elde edilen sonuçlar Tablo 3°te özetlenmektedir.

Tablo 3: Kontrol peptidlerine kiyasla GIP-R ve GLPl-R°de bilesiklerin EC50 ortalama degerleri.

Bilesik No. GlP R (nM birimiyle ECso) GLPl R (nM birimiyle EC50) Eksendin-4 0,0043 Bilesik No. GIP R (nM birimiyle ECso) GLPI R (nM birimiyle ECso) 3 0,015 0,022 4 0,022 * 2,6 0,03 1 0,023 6 0,27 0,97 7 0,2 1 0,024 8 0, 10 0,029 9 0,09 1 0,01 4 11 0,76 0,47 13 0,1 4 0,032 1 8 0,36 0,01 5 23 0,42 0,01 2 0, 12 0,041 26 0,80 0,3 9 27 0,30 0,074 Bilesik No. GlP R (nM birimiyle ECso) GLPI R (nM birimiyle ECso) 45 0,32 0,11 47 0,096 0,14 51 0,24 0,11 52 0,087 0,18 56 0,14 0,13 * Degerde, ilave tayinlerden dolayi, 61/642.439 numarali ABD Patent Basvurusundakine kiyasla hafif ayarlamalar yapilmistir. Degerlerin hepsi, çoklu tayiiilere dayanmaktadir.

Farelerde Bilesik 32 ve Bilesik 33'îin f armakokinetik 'Özellikleri Yöntem C57BL/6J farelerine, test edilecek her bir peptidin 200 nmol/kg vücut agirligi tekli subkutan dozu verildi. Sublingual kanama yoluyla bir zaman noktasinda, iki fareden numuneler, her bir bilesik için 16 nuinune alindi. Servikal dislokasyon yoluyla kan Örnekleri alindiktan hemen sonra farelere ötenazi uygulandi. Plazma numuneleri, kati faz ekstraksiyonundan (SPE) sonra sivi kromatografisi kütle spektrometrisiyle (LC-MS/MS) analiz edildi. Farmakokinetik analizler, non-kompartmental yaklasim kullanilarak gerçeklestirildi (bakiniz Tablo 4).

Tablo 4. 200 nmol/kg Vücut agirligi dozun subkutan uygulamasindan sonra farelerde terminal eliminasyon yari ömrü (saat).

Bilesik Ty, (saat) 32 3,4 33 3,7 Farelerde IPGTT (Intraperitoneal Glukoz Toleransi Testi).

Erkek C57BL/6J farelerin (Charles River, Almanya), normal beslenme düzeni (Altromin 1324, Brogaarden A/S, Gentofte, Danimarka) sürdürüldü ve bu hayvanlara, pH ~ 3,6 seviyesine kadar sitrik asit ilave edilmis eV kalitesinde su verildi. Hayvanlar, isik, sicaklik ve nem kontrollü bir odaya (12:12 saat aydinlik-karanlik saat süreyle aç birakildilar. Intraperitoneal glukoz enjeksiyonundan (t = 0 dakika; 2 g/kg; 5 ml/kg) önce peptidler ve vehikül subkutan yoldan uygulandi. Kan glukozu ölçümleri için t = 0 (glukoz noktalarinda kuyruk veninden kan örnegi alindi. Sonuçlar Sekil 1”de gösterilmektedir.

Diyet ind'ûkl'û obez C57BL/6J farelerde GlP-GLP-l reseptör'û dual etkili agonistinin vücut agirligi, v'i'icut bilesimi.. gida alimi, kan glukozu, plazma ins'ûlini, kolesterol ve trigliseridler Yaklasik 6 ay süreyle yüksek yagli diyetle (yagdan %60 toplam enerji, D12492, Research Diet Inc.) beslenen erkek C57BL/6.l fareler (Jackson Labs, ABD firmasindan alindi) kullanildi. Fareler tek tek barindirildi ve 12: 12 saat aydinlik-karanlik döngüsünde (isiklar 05.00- 1700 saatleri arasinda açik) tutuldu. Farelerin hepsi, elleçleme ve enjeksiyon kosullarina alismalari için bir hafta süreyle mock-tedaviye (günde bir defa subkutan vehikül enjeksiyonu) tâbi tutuldu. Daha sonra, fareler, vücut yag kütlesi (manyetik rezonans teknigiyle ölçülür) ve vücut agirligina göre bes gruba (n = 10) ayrildi. Ardindan, hayvanlar, günde iki defa vehikül (5 ml/kg) (grup 1: 50 mM fosfat tamponu, pH ya da test maddesi (grup 3, 2*5 nmol/kg; grup 4, 2*25 nniol/kg ya da grup 5, 2*100 nmol/kg) subkutan enjeksiyonuyla toplam 21 gün süreyle tedavi edildi. Günlük enjeksiyonlar, sabah ( 800-900) ve ögleden sonra (saat 1500-1600 ) verildi. Çalisma boyunca vücut agirligi, gida aliini ve su aliini günlük olarak tayin edildi. Tedavinin 8. gününde, 2*'100 nmol/kg test maddesi dozu, belirgin kilo kaybi nedeniyle ikiye bölündü. Bu doz (2*50 nmol/kg), geriye kalan tedavi periyodu boyunca kullanildi. 13. günde, hayvanlar 4 saat süreyle aç birakildi ve kan glukozu ve plazma insülini ölçümleri için kan örnekleri alindi. Hayvanlara, kan 'Örnegi alimindan `Önce sabahleyin doz uygulanmadi. 19. günde, bir MR tarayici kullanilarak vücut bilesimi ölçüldü. 21. günde, kan glukozu, plazma insülini, plazma kolesterolü ve plazma trigliseridleri ölçümü için kan `Örnegi alindi.

Hayvanlara, kan örnegi alimindan 2 saat önce vehikül, liraglutid ya da test maddesi enjekte edildi. Nihai kan örnegi alimindan sonra, farelere ötenazi uygulandi.

Graph Pad Prism versiyon 5 kullanilarak istatistiksel analizler yapildi.

Olçülen parametreler, tek yönlü ya da iki yönlü ANOVA'lar ve bunu takiben, Tukey'in çoklu karsilastirma testleri ya da Bonferroni post testleri kullanilarak karsilastirildi. Iki bagimsiz grubu karsilastirmak için Student iki kuyruklu, eslestirilmemis t-testi kullanildi. Farklarin p < 0,05 seviyesinde istatistiksel açidan anlamli ve önemli oldugu TARIFNAME IÇERISINDE ATIF YAPILAN REFERANSLAR Basvuru sahibi tarafindan atif yapilan referanslara iliskin bu liste, yalnizca okuyucunun yardimi içindir ve Avrupa Patent Belgesinin bir kismini olusturmaz. Her ne kadar referanslarin derlenmesine büyük önem verilmis olsa da, hatalar veya eksiklikler engellenememektedir ve EPO bu baglamda hiçbir sorumluluk kabul etmemektedir.

Tarifname içerisinde atifta bulunulan patent dökümanlari:

Claims (19)

ISTEMLER

1. Genel Formül 1' ile temsil edilen bir GIP analogu: ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGlu”dur; X2 simgesi Ala, Aib ya da Gly”dir; X3 simgesi Glu ya da Asp”dir; X7 simgesi Thr, Ser ya da Ile°dir; X9 simgesi Asp ya da Glu”dur; XlO simgesi Tyr, Leu ya da Serldir; X1 1 simgesi Ser ya da Leusdur; Xl3 simgesi Ala, Tyr ya da Aib'dir; Xl4 simgesi Met, Leu ya da Ser”dir; Xl 5 simgesi Asp ya da Glu”dur; X16 simgesi Lys, Gly, Ser ya da Glu°dur; Xl9 simgesi Gin, Ala, Glu ya da Lys°dir; X20 simgesi Gin, Lys, Arg ya da His”dir; X2l simgesi Asp, Ala ya da Glu”dur; X23 simgesi Val, 116 ya da Leuldur; X24 simgesi Asn, Glu, Arg ya da Lys°dir; X27 simgesi Leu, Val, Ile, Lys, Glu ya da Ser°dir; X28 simgesi Ala, Ser, Arg ya da Aib”dir; X29 simgesi Gin, Aib, Lys, Gly ya da Ala”dir; X30 simgesi Lys, Gly, Pr0”dur ya da yoktur; X31 simgesi Gly, Pro, Ser, Glu°dur ya da yoktur; X32 simgesi Lys, Ser”dir ya da yoktur; X33 simgesi Lys, Ser, Glu°dur ya da yoktur; X34 simgesi Asn, Gly, Ala, Lys”dir ya da yoktur; X35 simgesi Asp, Ala, Pro, Glu°dur ya da yoktur; X36 simgesi Trp, Pro, Lys”dir ya da yoktur; X37 simgesi Lys, Pro, Glu'dur ya da yoktur; X38 simgesi His, Pro, Ser, Lys°dir ya da yoktur; X39 simgesi Asn, Ser”dir ya da yoktur; X40 simgesi Ile°dir ya da yoktur; X4l simgesi Thr°dir ya da yoktur; X42 simgesi Gln,dir ya da yoktur ve ve burada, atif yapilan analog, GlP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

2. Istem lse uygun GIP analogu olup, burada GIP analogu genel Formül I(b)' ile temsil edilir: XZß-ßî-mm-Xllû-XM-XQ- R ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; RI simgesi Hy-, Ac ya da pGlu”dur; X2 simgesi Ala, Aib ya da Gly”dir; X3 simgesi Glu ya da Asp”dir; X7 simgesi Thr ya da Ser°dir; X9 simgesi Asp ya da GluSdur; X1 1 simgesi Ser ya da Leu”dur; X13 simgesi Ala, Tyr ya da Aib°dir; X16 simgesi Lys, Ser ya da Glu°dur; Xl9 simgesi Gin, Ala, Glu ya da Lys'dir; X20 simgesi Gin, Lys, Arg ya da His”dir; X21 simgesi Asp, Ala ya da G1u°dur; X23 simgesi Val, Ile ya da Leu”dur; X24 simgesi Asn, Glu, Arg ya da Lys'dir; X27 simgesi Leu, Glu, Val ya da l]e”dir; X28 simgesi Ala, Ser, Arg ya da Aib”dir; X29 simgesi Gin, Gly, Aib ya da A1a”d1r; X30 simgesi Lys, Gly, Pro'dur ya da yoktur; X31 simgesi Gly, Pro, Ser, Glu°dur ya da yoktur; X32 simgesi Lys, Ser'dir ya da yoktur; X33 simgesi Lys, Ser, Glu”dur ya da yoktur; X34 simgesi Asn, Gly, Ala, Lys”dir ya da yoktur; X35 simgesi Asp, Ala, Pro, G1u°dur ya da yoktur; X36 simgesi Trp, Pro, Lys,dir ya da yoktur; X37 simgesi Lys, Pro, Glu°dur ya da yoktur; X38 simgesi His, Pro, Ser, Lys”dir ya da yoktur; X39 simgesi Asn, Ser”dir ya da yoktur; X40 simgesi Ile”dir ya da yoktur; X41 simgesi Thr”dir ya da yoktur; X42 simgesi Gln”dir ya da yoktur ve Ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

3. Genel Formül 11' ile temsil edilen bir GIP analogu: (SEKANS KOD NO.: 64) ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGlu”dur; X2 simgesi Aib ya da Gly°dir; X7 simgesi Thr, Ile ya da Ser°dir; X1 l simgesi Ser ya da Leu”dur; Xl3 simgesi Ala, Tyr ya da Aib°dir; X16 simgesi Ser, Glu ya da Lys”dir; X1 9 simgesi Gln ya da Ala”d1r; X2O simgesi Lys, His ya da Arg°dir; X2l simgesi Ala, Asp ya da Glu°dur; X24 simgesi Asn, Lys ya da Glu°dur; X27 simgesi Leu, Glu, Val ya da Ilesdir; X28 simgesi Aib, Ala, Ser ya da Arg”dir; X29 simgesi Gin, Aib, Ala, Gly ya da Lys°dir; X30 simgesi Lys, Gly,dir ya da yoktur; Yl simgesi Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser, Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Pro- Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser”dir ya da yoktur ve ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

4. Istem 3”e uygun GIP analogu ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu ya da solvati olup, burada GIP analogu genel Formül II(a)' ile temsil edilir: (SEKANS KOD NO.: 65) R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGluSdur; X2 simgesi Aib ya da Glysdir; X7 simgesi Thr, Ile ya da Ser°dir; X1 l simgesi Ser ya da Leu,dur; Xl3 simgesi Ala, Tyr ya da Aib7dir; X16 simgesi Ser, Glu ya da Lys”dir; Xl9 simgesi Gin, Lys, Ala ya da Glu”dur; X20 simgesi Lys, His ya da Argsdir; X21 simgesi Ala, Asp ya da Glusdur; X24 simgesi Asn, Lys ya da Glu”dur; X27 simgesi Leu, Glu, Val ya da lle'dir; X28 simgesi Aib, Ala, Ser ya da Arg”dir; X29 simgesi Gin, Aib, Ala ya da Gly'dir; X30 simgesi Lys, Gly”dir ya da yoktur; Yl simgesi Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser, Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Pro- Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser”dir ya da yoktur Ve R2 simgesi -Nl-lz ya da -OH°dir; ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

5. Istem 4°e uygun GIP analogu olup, burada GIP analogu genel Formül II(b)' ile temsil edilir: R'- Tyr- Aib-Giu-Gty-Thr-Phe-XlSerAsp-Tyr-Set-Ie-X13-Leu-X15-X16-Lys-Ala- (SEKANS KOD NO.: 66) ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGlu3dur; X7 simgesi Thr ya da Ser”dir; X13 simgesi Ala, Tyr ya da Aib°dirg X16 simgesi Lys, Glu ya da Ser”dir; X20 simgesi Lys, His ya da Arg°dir; X21 simgesi Ala, Asp ya da Glu7dur; X27 simgesi Leu, Glu ya da Val”dir; X30 simgesi Lys, Gly”dir ya da yoktur; Yl simgesi Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser, Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Pro- Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser”dir ya da yoktur ve ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

6. Istem 47e uygun GIP analogu olup, burada GIP analogu genel Formül ll(c) ile temsil edilir: R'- Tyr- Aib-GkkGîy-Thr-Phe-XI'SeraAsp-Tyr-Set-Ia-X13-Leu-X15-X16-Lys-Na- (SEKANS KOD NO.: 67) ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGlu3dur; X7 simgesi Thr ya da Ser”dir; X13 simgesi Ala, Aib ya da Tyr”dir; X16 simgesi Glu, Lys ya da Ser”dir; X20 simgesi Lys, His ya da Arg°dir; X21 simgesi Ala, Asp ya da Glu7dur; X27 simgesi Leu, Glu ya da Val”dir; X30 simgesi Lys, Gly”dir ya da yoktur; Yl simgesi Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser, Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Pro- Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser”dir ya da yoktur ve ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

7. Istem 57e uygun GIP analogu olup, burada GIP analogu genel Formül ll(d) ile temsil edilir: R'- Tyr- Aib-GuGty-Thr-Phe-Ü-Ser-Asp-Tyr-Set-Ie-X13-Leu-X15-X16-Lys-Ala- GIn-X20-AJa-Phe-VaI-Gw-Trp-Leu-X2 T-Ala-Gln-Xao-W-R* (Il(d )) (SEKANS KOD NO.: 68) ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati; R1 simgesi Hy-, Ac ya da pGlu3dur; X7 simgesi Thr ya da Ser”dir; X13 simgesi Ala, Aib ya da Tyr”dir; X16 simgesi Glu, Lys ya da Ser”dir; X20 simgesi Lys, His ya da Arg°dir; X27 simgesi Leu, Glu ya da Val”dir; X30 simgesi Lys, Gly”dir ya da yoktur; Yl siingesi Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser, Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser, Pro- Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser”dir ya da yoktur ve R2 simgesi -Nl-Iz ya da -OH°dir; ve burada, atif yapilan analog, GIP ve GLP-l reseptörlerinde agonist aktivitesine sahiptir.

8. Istem l ilâ istem 7°nin herhangi birisine uygun bir GIP analogu ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, burada amino asit sekansi Xl -X29 asagida açiklananlara sahiptir: (i) Y-Aib-EGTFTSDYSlYLDKKAQRAFVEWLLAQ (SEKANS KOD NO.: 70) sekansindan en fazla 6 amino asit farka; (ii) Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAAKEFVEWLLSA (SEKANS KOD NO.: 71) sekansindan en fazla 6 amino asit farka ya da (iii) Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAAKEFIEWLESA (SEKANS KOD NO.: 72) sekansindan en fazla 5 amino asit farka.

9. Istem 1 ilâ istem 7”nin herhangi birisine uygun bir GIP analogu ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, burada X24 simgesi Glu'dur ve/Veya X2] simgesi Ala°d1r.

10. Istem l ilâ istem 9°un herhangi birisine uygun bir GlP analogu ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, (i) X7 simgesi Thr°dir ve X14 simgesi Leu°dur; (ii) X7 simgesi Thr'dir, X14 simgesi Leu°dur ve X18 simgesi Ala”d1r; (iii) X2 simgesi Aibfdir, X7 simgesi Thr”dir ve X14 simgesi Leu”dur; (iv) X2 simgesi Aibsdir, X7 simgesi Thr'dir, X14 simgesi Leu”dur ve Xl3 ve/Veya X29 simgesi Aibsdir; (v) X2 simgesi Aib°dir, X7 simgesi Thr°dir, X14 simgesi Leu”dur ve X24 simgesi Glu°dur; (vi) X2 simgesi Aib'dir, X7 simgesi Thr”dir, X14 simgesi Leu”dur, X24 simgesi Glu9dur ve X29 simgesi Gln'dir; (vii) X2 simgesi Aib,dir, X7 simgesi Thr°dir, X14 simgesi Leu”dur, X21 simgesi Ala”dir, X24 simgesi Glu”dur ve X29 simgesi Gln°dir; (viii) X2 simgesi Aib°dir, X7 simgesi Thr”dir, X14 simgesi Leu°dur, X24 simgesi Glu'dur, X27 simgesi Leu”dur ve X28 simgesi Ser”dir; (ix) X2 simgesi Aib°dir, X7 simgesi Thr'dir, X14 simgesi Leu”dur, X24 simgesi Glu°dur, X27 simgesi Gluadur ve X28 simgesi Ser”dir ya (X) X2 simgesi Aib'dir, X7 simgesi Thridir, X14 simgesi Leu”dur, X2O simgesi His”dir, X24 simgesi Glu'dur, X27 simgesi Leu”dur ve X28 simgesi Ser”dir.

11. Önceki istemlerden herhangi birisine uygun olan ve 15, 16, 17, konjuge edilmis bir lipofilik sübstitüent bulunan bir GIP analogu.

12. Onceki istemlerden herhangi birisine uygun olan ve asagida listelenen bir GIP analogu: Hy-Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKKAAKEFVNWLLAQK-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSl-Aib- LDKKAQRAFVEWLLAQGPSSGAPPPS-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIALDKIAQRAFVNWLVA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFISDYSIYLEKIAAKEFVNWLLAQK-NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ, pGlu-YAEGTFTSDYSlYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-YGEGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFSSDYSlYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDLSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDSSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYLIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIALDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYSDKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHg; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIALEKKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHz; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYSIYLDSKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHz; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAQRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAKRAFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQKEFVNWLLA-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVKWLLA-Aib-K-NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLVA-Aib-K-NHz; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLSA-Aib-K-NHz; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLKA-Aib-K-NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLL-Aib-K-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYS IY LDKKAQRAFVNWLLA-Aib-KYG- 1 NaI-LDF-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYSIYLDKKAQRAFVNWLLAYG- l NaI-LDF- Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAEKAFVNWLLA-Aib-K-NHz; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib- GPSSGAPPPS-NHZ ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAQRAFVNWLLA-Aib- GPSSGAPPS-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSlYLEKKAAKEFVNWLLAQK-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDK-K(1 5 -karboksi-pentadekanoil- Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSI-Aib-LDK-K(Heksadekanoil-izoGlu)- AQRAFVEWLLAQGPS SGAPPPS -NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDK-K(heksadekan0i1-izoGlu)- AQRAFVEWLLAQGPS SGAPPPS -NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(heksadekanoil-izoGlu)- AAKEF IEWLESA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYS IY LDK-K(heksadekanoi1-izoG1u)- AQ RA FVNWLLA-Aib-KPSSGA PPPS-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIALDK-K(heksadekan0il-iZOGlu)- AQRAFVNWLVA-Aib-KPS SGAPPPS-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAKDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLE-KKAAHDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEKKAQKEFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDEKAAKDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLESKAAHDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDKKAAHDFVEWLLSA-NH2; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYS lYLEKKAAKEFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEWLLRA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYS KYLDS-K( Heksadekanoil-izoGlu)- AAHDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEK-K(Heksadekan0il-izoGlu)- AAKEFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDS-K(Heksadekanoil-izoGlu)- AAHDFVEWLLRA-NHg; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekan0il-iz0G1u)- AAKDFVEWLESA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSKYLDE-K(Heksadekan0il-izoGlu)- AAKDFI EWLESA-NHZ; Hy-Y-AIb-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekan0il-izoGlu)- AAKDFIEWLESA-NHg; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSKYLDS-K(Heksadekanoi1-izoG1u)- AAHDFVEWLLRA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekanoi1-izoGlu)- AAKDFVEWLLSA-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTS DYS IY LDS-K(Hek sadekanoil-izoGlu)- AAI-IDFVEWLLSAGPSSGAPPPS-NHZ; Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLEK-K-(Heksadekanoil-izoGlu)- AAKEFVEWLLSAGPSSGAPPPS-NH2 ve Hy-Y-Aib- EGTFTSDYSIYLDSKAAHDFVEWLLSAGPSSGAPPPS-NHZ ya da Hy-Y-Aib-EGTFTSDYSIYLDE-K(Heksadekanoil-izoGlu)- AAHDFVEWLLSA-NHZ ya da onun farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzu veya solvati.

13. Bir terapötik yöntemde kullanmak için önceki istemlerden herhangi birisine uygun olan bir GIP analogu ya da farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati.

14. Bir tasiyiciyla karisim halinde istem 1 ilâ istem 12°nin herhangi birisine uygun bir GIP analogu ya da farinasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvatini içeren bir farmasötik bilesim olup, örnegin burada, tuz, farmasötik açidan kabul edilebilir bir asit ilaveli

15. Istem l4”e uygun farmasötik bilesim olup, enjeksiyonla ya da infûzyonla uygulamak için uygun bir sivi formunda formüle edilir ya da bahsi geçen GIP analogu ya da farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu ve solvatinin yavas salimini saglayacak sekilde formüle edilir.

16. Bir mide ve/Veya bagirsakla iliskili bozuklugun ya da bir metabolik hastalik veya bozuklugun tedavisine yönelik bir yöntemde kullanmak için istem l ilâ istem 123nin herhangi birisine uygun bir GlP aiialogu ya da farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati.

17. Istem lösya göre kullanma amacina yönelik bir GIP analogu ya da farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, burada metabolik hastalik ya da bozukluk, diyabet, bir diyabet-iliskili bozukluk, obezite ya da bir obezite-iliskili bozukluktur.

18. Istem l7sye göre kullanmak için uygun bir GIP analogu ya da farmasötik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, burada (i) diyabetle iliskili bozukluk; insülin direnci, glukoz intoleransi, artan açlik glukozu, pre-diyabet, tip 1 diyabet, tip 2 diyabet, gestasyonel diyabet, hipertansiyon, dislipidemi ya da buiilariii bir kombinasyonudur, (ii) diyabetle iliskili bozukluk; ateroskleroz, arterioskleroz, koroner kalp hastaligi, periferal arter hastaligi ve stroktur ya da aterojenik dislipidemi, kan yag bozukluklari, yüksek kan basinci, hipertansiyon, protrombotik durum ve proinflamatuar durum ya da bunlarin bir kombinasyonuyla iliskilendirilir ya da (iii) obeziteyle iliskili bozukluk; obeziteyle baglantili inflamasyon, obeziteyle baglantili safrakesesi hastaligi ve obeziteyle indüklenen uyku apnesi arasindan seçilir.

19. Istein l8”e göre kullanmak için uygun bir GIP analogu ya da farmas'otik açidan kabul edilebilir tuzu veya solvati olup, burada (i) kan yag bozuklugu; yüksek trigliseridler, düsük HDL kolesterol, yüksek LDL kolesterol, arter duvarlarinda plak birikimi ya da bunlarin bir kombinasyonu arasindan seçilir; (ii) protrombotik durum; kanda yüksek fibrinojen seviyeleri ve kanda yüksek plazminojen aktivatör inhibitörü-l seviyeleri arasindan seçilir (iii) proinflamatuar durum, kanda yükselmis C-reaktif protein seviyesidir.