[go: up one dir, main page]

SK287075B6 - Inhibítory bunkovej adhézie a farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú - Google Patents

Inhibítory bunkovej adhézie a farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú Download PDF

Info

Publication number
SK287075B6
SK287075B6 SK215-2002A SK2152002A SK287075B6 SK 287075 B6 SK287075 B6 SK 287075B6 SK 2152002 A SK2152002 A SK 2152002A SK 287075 B6 SK287075 B6 SK 287075B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
amino
methyl
phenyl
carbonyl
acetyl
Prior art date
Application number
SK215-2002A
Other languages
English (en)
Other versions
SK2152002A3 (en
Inventor
Wen-Cherng Lee
Daniel Scott
Mark Cornebise
Russell Petter
Original Assignee
Biogen Idec Ma Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biogen Idec Ma Inc. filed Critical Biogen Idec Ma Inc.
Publication of SK2152002A3 publication Critical patent/SK2152002A3/sk
Publication of SK287075B6 publication Critical patent/SK287075B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/48—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/30—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by doubly bound oxygen or sulfur atoms or by two oxygen or sulfur atoms singly bound to the same carbon atom
    • C07D211/32—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by doubly bound oxygen or sulfur atoms or by two oxygen or sulfur atoms singly bound to the same carbon atom by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06165—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)

Abstract

Opísané sú inhibítory bunkovej adhézie všeobecného vzorca R3-L-L'-R1, v ktorom R1 je prípadne substituovaný pyrolidinyl- SO2-fenyl, L' je mostíková skupina všeobecného vzorca (iv), L je mostíková skupina všeobecného vzorca (v) a R3 je skupina so všeobecným vzorcom R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-, kde R6 je postranný reťazec leucínu alebo izoleucínu. Tieto zlúčeniny interagujú s molekulami VLA-4 a inhibujú tak bunkovú adhéziu závislú od VLA-4. Preto sú vhodné na prevenciu a potlačenie VLA-4 sprostredkovanej bunkovej adhézie a s ňou spojených patologických stavov, ako sú zápaly a imunitné rekcie. Tiež sú opísané farmaceutické kompozície obsahujúce tieto zlúčeniny.

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka inhibítorov bunkovej adhézie, spôsobu ich prípravy a ich použitia vo farmaceutických prostriedkoch, ktoré ich obsahujú.
Doterajší stav techniky
Bunková adhézia je proces, pri ktorom bunky navzájom asociujú, migrujú k špecifickému cieľu alebo sa lokalizujú v extracelulámej matrici. Samotná bunková adhézia je jedným zo základných mechanizmov mnohých biologických fenoménov. Tak napríklad, bunková adhézia hrá dôležitú úlohu pri adhézii hematopoetických buniek k endoteliálnym bunkám a pri následnej migrácii týchto hematopoetických buniek z ciev na miesto poškodenia. Bunková adhézia samotná hrá svoju úlohu v patologických stavoch, ako sú zápaly a imunitné reakcie u cicavcov.
Výskumy bunkovej adhézie na molekulárnej úrovni ukázali, že rôzne makromolekuly na povrchu buniek, známe spolu ako molekuly alebo receptory bunkovej adhézie, sprostredkujú interakcie bunka-bunka a bunkamatrica. Tak napríklad, proteíny superrodiny nazývanej „integríny“ sú kľúčovými mediátormi v adhezívnych interakciách medzi hematopoetickými bunkami a ich mikrookolím (M.E. Hemler, „VLA Proteins in the Integrin Family: Structures, Functions, and Their Role on Leukocytes“, Ann. Rev. Immunol., 8, str. 365 (1990)). Integríny sú nekovalentné heterodiméme komplexy, pozostávajúce z dvoch podjednotiek, nazývaných a a β. Existuje prinajmenšom 12 rôznych podjednotiek a (al - a6, a - L, a - M, a - X, a -IIB, a - V a a - E) a prinajmenšom 9 rôznych podjednotiek β (βΐ - β9). Každá molekula integrínu je potom kategorizovaná do podrodín na základe typu podjednotiek a a β, z ktorých je zložená.
Integrín α4β1, ktorý je tiež známy ako veľmi neskorý antigén-4 („VLA-4“), CD49d/CD29, je receptor na povrchu leukocytov, zúčastňujúci sa najrôznejších adhezívnych interakcií bunka-bunka aj bunka-matrica (M.E. Hemler, Ann. Rev. Immunol. 8, str. 365 (1990)). Slúži ako receptor cytokínom indukovateľného proteínu na povrchu endoteliálnych buniek, „vascular celí adhesion“ molekuly-1 („VCAM-1“), práve tak, ako extracelulámeho matricového proteínu fibronektínu („FN“) (Ruegg akol., J. Celí. Biol., 177, str. 179 (1991); Wayner a kol., J. Celí. Biol., 105, str. 1873 (1987); Kramer a kol., J. Biol. Chem., 264, str. 4684 (1989); Gehlsen a kol., Science 24, str. 1228 (1988)). Zistilo sa, že monoklonálne protilátky anti-VLA-4 („mAb“) inhibujú VLA-4-dependentné adhezívne interakcie tak in vitro, ako in vivo (Ferguson a kol., Proc. Natl. Acad. Sci., 88, str. 8072 (1991); Ferguson a kol., J. Immunol., 150, str. 1172 (1993)). Výsledky pokusov in vivo nasvedčujú tomu, že táto inhibícia VLA-4-dependentnej bunkovej adhézie môže zabraňovať alebo inhibovať niektoré zápalové a autoimunitné patologické stavy (R.L. Lobb a kol., „The Pathophysiologic Role of a4 Integrins/n Vivo“, J. Clin. Invest., 94, str. 1722-1728 (1994)).
Napriek týmto pokrokom stále trvá potreba malých špecifických inhibítorov VLA-4-dependentnej bunkovej adhézie. V ideálnom prípade by bolo možné podávať také inhibitory perorálne. Také zlúčeniny by poskytli užitočné účinné látky na terapiu, prevenciu alebo potlačenie rôznych patologických stavov, sprostredkovaných bunkovou adhéziou a väzbou na VLA-4.
Podstata vynálezu
Predložený vynález sa týka nových nepeptidických zlúčenín, špecificky inhibujúcich väzbu ligandov k VLA-4. Tieto zlúčeniny sú užitočné na inhibíciu, prevenciu a potlačenie VLA-4 sprostredkovanej bunkovej adhézie a s ňou spojených patologických stavov, ako sú zápaly a imunitné reakcie. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť samotné alebo v kombinácii s inými terapeutickými alebo profylaktickými činidlami, aby sa inhibovala, predošlá alebo potlačila bunková adhézia. Predložený vynález sa týka tiež farmaceutických kompozícií, ktoré obsahujú zlúčeniny podľa predloženého vynálezu. Zlúčeniny a kompozície podľa vynálezu sa môžu použiť na inhibíciu bunkovej adhézie.
Nové zlúčeniny a podľa vynálezu sa výhodne použijú na liečbu zápalových a imunitných ochorení. Opis tiež poskytuje metódy prípravy zlúčenín podľa vynálezu a ich medziproduktov.
Predložený vynález sa týka inhibítorov bunkovej adhézie vzorca:
R3-L-Ľ-R'
R1 je prípadne substituovaný pyrolidinyl-SO2-fenyl, kde prípadným substituentom je alkylová skupina alebo halogén
Ľ má všeobecný vzorec (iv)
x (iv) kde Y1 je -NH-CO-, R2 je H, Y2 je väzba a X je COOH;
L má všeobecný vzorec (v)
kde Y3 je -(CH2)o.5-, Y4 je -CO-NH-; a
R3 má nasledujúci všeobecný vzorec -R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-, kde R6je postranný reťazec leucínu alebo izoleucínu; R5 je atóm vodíka alebo metylová skupina, Y5 je C(=O)- a R4 je o-metylfenyl-ureido-fenyl-CH2; alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
V jednom z aspektov zlúčeniny podľa vynálezu majú hodnotu IC5o 5 nM alebo nižšiu, 2 nM alebo nižšiu, 1 nM alebo nižšiu, alebo 0,5 nM alebo nižšiu. Hodnoty IC50 je možné stanoviť väzbovými testami, ako je opísané ďalej, alebo inými známymi konvenčnými metódami. V jednom z aspektov zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú percentuálnu hodnotu väzby k Mn-aktivovanej forme molekúl VLA-4 50 % alebo vyššiu, 75 % alebo vyššiu, 90 % alebo vyššiu, alebo 95 % alebo vyššiu. V jednom z aspektov zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú percentuálnu hodnotu väzby k Ca/Mg-aktivovanej forme molekúl VLA-4 50 % alebo vyššiu, 75 % alebo vyššiu, 90 % alebo vyššiu, alebo 95 % alebo vyššiu. Percentuálny podiel väzby k molekulám VLA-4 je možné stanoviť biologickými testami, opísanými ďalej.
Nasledujú niektoré príklady zlúčenín podľa predloženého vynálezu. Atóm dusíka a atóm uhlíka v stĺpci ,,N(R5)-CH(R6)“ sú α-dusíkový atóm a α-uhlíkový atóm uvedenej aminokyseliny. Napríklad označenie „Leu“ znamená, že R5 je atóm vodíka a R6 je izobutylová skupina.
JL
CPD# R3/R4 Y5 N(R5)CHR6 Y4 Y3 Y2 Yl R2 R1 X konfíg·
5192 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H A A CO2H S
5283 oMePUPCH2 JW Leu _C(O)NH. _CH2. _NHC(O)- H Λ Ά CO2H S
6714 oMePUPCffl _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _CH2- _NHC(O)- H A A CO2H s
CPD# R3/R4 Y5 N(R5)CHR6 Y4 Y3 Y2 Yl R2 R1 X kon- fíg-
7234 oMePUPCH2 _C(O)- Leu _NH- _(CH2)4- _NHC(O)- H Ó. í».·-'Cl Ί CO2H s
7662 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H -ti CO2H s
7796 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)CH- (CH2)2- NHC(O)- H ,6. CH2OH s
8221 oMePUPCffl _C(O)- N.Me.Leu C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H Λ Cl 1 CO2H s
i 8341 oMePĽPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H ,Ό 'Ó CO2H s
8342 oMePUPCffi _C(O)- N-Me-Leu í _C(O)NH. _(CH2)2- _NHC(O)- H Ô CO2H A
8343 oMePUPCffi _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H -ô CO2H R
8348 oMePUPCH2 _C(O)- D-H-Me-Leu _C(O)NH (CH2)2- NHC(O) H ,JO CO2H R
CPD# R3/R4 Y5 N(R5)CHR6 Y4 Y3 Y2 Yl R2 R1 x konfíg-
8367 oMePUPCffi _C(O)- D-N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- NHC(O) H X X CO2H s
8368 oMePUPCH2 _C(O)- D-N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- NHC(O) H X 'Ô CO2H s
8469 0MePUPCH2 _C(O)- Leu _C(O)NH- _(CH2)2- NHC(O) H A x CO2H s
8491 oMePUPCH2 _C(O> Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H .,0 x/ CO2H s
8494 oMePUPCH2 _C(O> D-N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H X 'ô CO2H R
8555 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H C» A y; CO2H S
8558 oMePUP(CH2)2 _C(O)- Leu C(O)NH- _(CH2)2- NHC(O) H x CO2H s
8559 oMePUP(CH2)3 C(O) Leu C(O)NH _(CH2)2 NNC(O) H x CO2H s
CPD# R3/R4 Y5 N(R5)CHR6 Y4 Y3 Y2 Yl R2 Rl x konfig-
8685 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H VP C02H s
8689 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H ,,jo X NR, C02H s
8690 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH _(CH2)2- _NHC(O) H .jO CO2H s
8723 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H X) ..jO C02H s
8746 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H ,,JO x CO2H s
8749 oMePUPCH2 JXO)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H x CO2H s
8758 oMePUPCH2 _O(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)2. _NHC(O)- H í° B »»K ' CO2H s
8796 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu | _C(O)NH- _(CH2)2- - _NHC(O)- H O C02H s
8797 oMePUPCN2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH _(CH2)2- _NHC(O)- H ..o Oi C02H s
8809 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O) H C02H s
CPD# R3/R4 Y5 N(R5)CHR6 Y4 Y3 Y2 Yl R2 R1 x koníig-
9120 oMePUPCffi _C(O)- N-Me-Leu C(O)NH- _(CH2)2- _NHC(O)- H /A CO2H s
9169 oMePUPCffi _C(O)- N-Mc-Leu _C(O)NH- _(CH2)2- _NIIC(O)- H Y C02H s
9171 oMePUPCffi _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH, _(CH2)2- NIIC(O)- H Y Y CO2H s
9182 oMcPUPCH2 C(O). N-Me-Leu _C(O)NH. _(CH2)2- _NHC(O)- H Y CO2H s
9227 oMePUPCH2 C(O) N-Me-Leu C(O)jNH JCH2)2- _NHC(O)- H Y CO2H s
9264 oMePUPCH2 _C(O) N-Me-Leu C(O)NH (CH2J2 NHC(O) H Ä CO2H s
9315 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu _C(O)NH- _(CH2)r _NHC(D)- H 9 CO2H s
9418 oMePUPCH2 _C(O)- N-Me-Leu C(O)NH- _(CH2)ľ _NHC(O) H CO2H s
Jeden alebo viacero skôr opísaných inhibítorov alebo ich solí sa môže použiť pri príprave liečebného prostriedku na liečbu skôr uvedených porúch.
Ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka kompozície, obsahujúcej farmaceutický nosič a účinné množ5 stvo zlúčeniny všeobecného vzorca (I), uvedeného skôr.
Zlúčenina všeobecného vzorca (I), uvedeného skôr, sa môže použiť v spôsobe inhibície VLA-4-dependentnej bunkovej adhézie, čo spočíva v tom, že sa pacientovi, ktorý to potrebuje podá účinné množstvo.
Pretože zlúčeniny podľa vynálezu antagonizujú pôsobenie VLA-4, sú užitočné na prevenciu, liečbu alebo likvidáciu symptómov, porúch alebo ochorení, spôsobených väzbou VLA-4 k jeho ligandom. Tieto antago10 nisty teda budú inhibovať procesy bunkovej adhézie vrátane aktivácie buniek, ich migrácie, proliferácie a diferenciácie. Preto sa môžu použiť v spôsobe liečby, prevencie, zmiernenie alebo potlačenie ochorení alebo porúch, sprostredkovaných pôsobením VLA-4. Také ochorenia a poruchy zahŕňajú napríklad astmu, roztrúsenú sklerózu, alergickú nádchu, alergickú konjunktivitídu, zápalové ochorenia pľúc, reumatoidnú artritídu, septickú artritídu, diabetes typu I, odmietnutie transplantovaných orgánov, črevné zápaly a podobne.
Zlúčeniny podľa vynálezu obsahujú jedno alebo viacero asymetrických centier a môžu teda existovať ako racemáty alebo racemické zmesi, ako čisté enantioméry, ako diastereoizoméme zmesi, aj ako individuálne diastereoizoméry. Predložený vynález sa týka všetkých takých izomémych foriem zlúčenín podľa vynálezu.
Predložený vynález tiež zahŕňa farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca (I). Výraz „farmaceutický prijateľné soli“ znamená soli, pripravené z farmaceutický prijateľných netoxických zásad alebo kyselín, zahŕňajúcich anorganické alebo organické zásady a anorganické alebo organické kyseliny. Soli, odvodené od anorganických zásad, zahŕňajú hlinité soli, amónne soli, vápenaté soli, soli medi, železité soli, železnaté soli, lítne soli, horečnaté soli, manganičité soli, manganité soli, manganaté soli, draselné soli, sodné soli, zinočnaté soli a podobne. Zvlášť preferované sú amónne soli, vápenaté soli, horečnaté soli, draselné soli a sodné soli.
Soli, odvodené od farmaceutický prijateľných organických netoxických zásad, zahŕňajú soli s primárnymi, sekundárnymi a terciámymi amínmi, so substituovanými amínmi vrátane prirodzene sa vyskytujúcich substituovaných amínov, s cyklickými amínmi a so zásaditými iónomeničmi, ako sú arginin, betain, kofeín, cholín, Ν,Ν'-dibenzyletyléndiamín, dietylamín, 2-dietylaminoetanol, 2-dimetylaminoetanol, etanolamín, etyléndiamin, N-etylmorfolín, N-etylpiperidín, glukamín, glukozamín, histidín, hydrabamín, izopropylamín, lyzín, metylglukamín, morfolin, piperazín, piperidín, polyamínové živice, prokaín, puríny, teobromín, trietylamín, trimetylamín, tripropylamín, trometamín a pod.
Ak zlúčenina podľa predloženého vynálezu je zásaditá, môžu sa pripraviť jej soli s farmaceutický prijateľnými netoxickými anorganickými aj organickými kyselinami. Medzi také kyseliny patrí kyselina octová, kyselina benzénsulfónová, kyselina benzoová, kyselina gáforsulfónová, kyselina citrónová, kyselina etánsulfónová, kyselina fumarová, kyselina glukónová, kyselina glutámová, kyselina bromovodíková, kyselina chlorovodíková, kyselina izetiónová, kyselina mliečna, kyselina maleínová, kyselina jablčná, kyselina mandľová, kyselina metánsulfónová, kyselina slížová, kyselina dusičná, kyselina pamoová, kyselina pantoténová, kyselina fosforečná, kyselina jantárová, kyselina sírová, kyselina vínna, kyselina p-toluénsulfónová a podobne. Zvlášť preferované sú kyselina citrónová, kyselina bromovodíková, kyselina chlorovodíková, kyselina maleínová, kyselina fosforečná, kyselina sírová a kyselina vínna.
V tomto texte použitý výraz „alkyl“, samotný alebo v kombinácii, znamená alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorá obsahuje 1 až 10 atómov uhlíka, výhodne 1 až 6 atómov uhlíka, a ešte výhodnejšie 1 až 4 atómy uhlíka. Príklady takých skupín (bez toho, aby boli obmedzené len na uvedené skupiny) sú metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, izobutylová skupina, íei-butylová skupina, terc-butylová skupina, pentylová skupina, izoamylová skupina, hexylová skupina, decylová skupina a podobne.
Výraz „halogén“ znamená fluór, chlór, bróm a jód.
V celom texte tejto prihlášky výraz „pacient“ sa vzťahuje na cicavce vrátane človeka, a výraz „bunka“ sa vzťahuje na cicavčie bunky vrátane buniek ľudských.
Vo svetle skôr uvedených definícií môže odborník v odbore ľahko porozumieť ostatným chemickým termínom, uvedeným v tejto prihláške. Tieto termíny je možné použiť samotné alebo v akýchkoľvek kombináciách. Preferované a zvlášť preferované dĺžky reťazcov v skupinách sa týkajú všetkých takých kombinácií. Ďalšie rysy alebo výhody predloženého vynálezu sú zrejmé z detailného opisu niekoľkých uskutočnení, a tiež z uvedených nárokov.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu je možné syntetizovať s použitím obvyklých techník, z ktorých niektoré sú tu opísané ako príklady. Tieto zlúčeniny sú výhodne syntetizované z ľahko dostupných východiskových látok, ako sú α-aminokyseliny a ich funkčné ekvivalenty. Taktiež sú preferované moduláme a konvergentné metódy prípravy týchto zlúčenín. Napríklad, pri konvergentnom prístupe sú veľké časti výsledného produktu spojené v posledných stupňoch syntézy, a syntéza teda neprebieha postupným pridávaním malých častí k rastúcemu reťazcu molekuly.
Podľa jedného z aspektov, zlúčeniny podľa vynálezu, R3-L-Ľ- -R1, môžu byť znázornené ako R3-Y4-Y3-CHĺXj-Y’-R1. Taká zlúčenina môže byť považovaná za derivát dipeptidu, keď R1 je zvyšok aminokyseliny alebo jeho derivát; Y1 je amidová spojka medzi dvoma zvyškami, alebo jej derivát; X je karboxylová skupina alebo jej derivát; C je α-uhlíkový atóm druhého zvyšku; a R3-Y4-Y3- je postranný reťazec druhého zvyšku.
Vo všeobecnej metóde, uvedenej ďalej, zlúčenina R3-Y4-Y3- -CH(X)-Y1-RI sa pripraví tak, že sa najskôr kondenzuje vhodne chránená zlúčenina Y4'-Y3-CH(X)-Y' s vhodne chráneným R3. Y3 a X sú definované skôr. Y4, Y1 a R3 sú prekurzory Y4, Y1 a R3.
Zlúčeniny všeobecného vzorca Y4 -Y3-CH(X)-Yľ sú komerčne dostupné, alebo sa môžu pripraviť metódami, ktoré sú odborníkovi v odbore známe. Napríklad, ak Y1 je amínová skupina; X je karboxylová skupina; a Y4-Y3-je skupina NH2-(CH2)3-, zlúčenina Y4-Y3-CH(X)-Y' je omitín. V inom príklade, keď Y* je amínová skupina; X je karboxylová skupina; a Y4'-Y3- je skupina 4-NH2-fenyl-CH2-, zlúčenina Y4 -Y5-CH(X)-Y' je 4-aminofenylalanín, ktorý je možné získať redukciou komerčne dostupného 4-nitrofenylalanínu. Ďalšou redukciou fenylového zvyšku sa získa zlúčenina, v ktorej Y1 je amínová skupina; X je karboxylová skupina; a Y4'-Y3- je skupina 4-NH2-cyklohexyl-CH2-; teda 4-aminocyklohexylalanín, ktorý je komerčne dostupný ako zmes cis- a (ra«.s-izomérov. Ako už bolo povedané skôr, je potrebné použiť vhodné ochranné skupiny, aby sa zabránilo nežiaducim reakciám určitých funkčných skupín. Napríklad pri použití omitinu sú Y1 a X funkčné skupiny, ktoré sa nezúčastňujú prvej kondenzačnej reakcie a ktoré by mali byť chránené bežnými skupinami, chrániacimi amínmi, ako sú karbamáty (napríklad íerc-butylkarbamát (Boe) a benzylkarbamát (Cbz), a bežnými skupinami, chrániacimi karboxyl, ako sú substituované estery (napríklad etylester alebo metoxymetylester). Ďalšie vhodné ochranné skupiny je možné nájsť v publikácii T.W. Greene, Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1981 a v tam uvedených odkazoch.
Zlúčenina R3' môže byť znázornená všeobecným vzorcom Z3-Lb-Z4-T alebo R4-YS-N(R5)-CH(R6)-T'. Každá zo skupín T a T' je funkčná skupina, ktorá sa spája s Y4 a vzniká Y4. Napríklad, keď žiadané Y4 je amidové zoskupenie, môže byť utvorené reakciou amínovej skupiny (Y4) s karboxylovou skupinou (T alebo T') v prítomnosti bežného kondenzačného činidla, ako je benzotriazol-l-yloxytris-dimetylamino)fosfóniumhexafluorofosfát (BOP) alebo 0-benzotriazol-l-yl-N,N,N',N'-tetrametyluróniumhexaíluorofosfát (HBTU). V inom príklade, keď žiadané Y4 je aryléter, môže sa pripraviť reakciou fenolu s alkoholom za prítomnosti dietylazodikarboxylátu (DEAD) a trifenylfosfínu.
Keď R3 má všeobecný vzorec Z3-Lb-Z4-T, zlúčenina je komerčne dostupná, alebo sa môže pripraviť metódami, ktoré sú odborníkovi známe. Napríklad, keď Z3 je 2-metylfenylová skupina, Z4 je fenylmetylová skupina, Lb je skupina -NH-CO-NH- a T je skupina -COOH, R3’ je kyselina o-metylfenyl-ureido-fenyloctová, a môže sa pripraviť reakciou kyseliny 4-aminofenyloctovej s 2-metylfenylizokyanátom. V inom príklade, keď Z3 je 3-indolylová skupina, Z4 je fenylmetylová skupina, Lb je skupina -CO-NH- a T je skupina -COOH, R3 je kyselina 3-indolkarboxamidofenyloctová, ktorú je možné pripraviť reakciou kyseliny 4-aminofenyloctovej s indol-3-karbonylchloridom.
Keď R3 má všeobecný vzorec R4-Y5-N(R5)-CH(RS)-T', môže sa Y4-Y3-CH(X)-Y' kondenzovať s NH(R5)-CH(R6)-T' za tvorby medziproduktu NH(R5)-CH(R6)-Y4-Y3-CH(X)-Yľ, ktorý sa ďalej kondenzuje s r4-Y5', £ím vznikne R4-Y5-N(R3)-CH(R6)-Y4-Y3-CH(X)-Y’. Y5 je funkčná skupina, ktorá po ďalších kondenzačných reakciách poskytne funkčnú skupinu Y5. Všimnime si, že zlúčenina NH(R5)-CH(R6)-T' môže byť derivát aminokyseliny, ktorý je komerčne dostupný a ktorý sa môže pripraviť obvyklými, odborníkovi známymi metódami. Napríklad, keď T' je karboxylová skupina, R6 je izobutylová skupina, a R5 je metylová skupina, zlúčenina NH(R5)-CH(R6)-T' je N-metylleucín. R4-Y5 sa môže kondenzovať s NH(R5)-CH(R6)-Y4-Y’-CHÍXj-Y1 s použitím obvyklých syntetických metód. Napríklad, keď Y5 je karboxylová skupina, výsledné Y5 je amidová spojka a môže sa pripraviť s použitím bežných činidiel na syntézu peptidov, ako je uvedené skôr. V inok príklade, ak Y5 je halogenid alebo sulfonát, výsledné Y5 je sekundárny alebo terciámy amín, ktorý vznikne alkyláciou východiskového amínu. Alternatívne, pri príprave zlúčeniny R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-Y4-Y3-CH(X)-Y1 je možné vopred kondenzovať zlúčeninu NH(R5)-CH(R6)-T' s R4-Y5 za tvorby medziproduktu R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-T, ktorý sa potom kondenzuje so zlúčeninou Y4-Y3-CH(X)-Y’. Príklad 1, uvedený ďalej, opisuje detailne postup pre prípad, keď R3 má všeobecný vzorec R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-.
Alternatívne, keď R3 má všeobecný vzorec Z3-Lb-Z4-T, môže reagovať so zlúčeninou Y4-Y3-CH(X)-Y’ za tvorby zlúčeniny Z3-Lb-Z4- -Y4-Y3-CH(X)-Y'; pozri príklad 2.
Výsledný produkt R3-Y4-Y3-CH(X)-Y1 sa potom môže získať buď reakciou zlúčeniny R4-Y5-N(R5)-CH(R6)-Y4-Y3-CH(X)-Y1 alebo zlúčeniny Z3-Lb-Z4-Y4-Y3-CH(X)-Y‘ s R1' (prekurzorom R1). Zvyšok Y1 sa môže utvoriť podobným spôsobom ako Y4.
a) Y4 «·<Χ>·ΝΗ· kjY4-·©· //N' r‘ *
R4—Y5,
a) Y4'--NH2;T«-COOH; (HATU, iPr2NEt. DMF)
b) Y'a-nOHiT'-'OH; (DEAD.PhjP)
R1’
R1· benzyl íerc-butoxykarbonylová skupina benzyloxykarbonylová skupina
1- (4,4-dimetyl-2,6-dioxocyklohexylidén)etyl dietylazodikarboxylát diizopropyletylamín dimetylformamid „electrospray“ hmotnostné spektrum íluorénmetyloxykarboxyskupina glycín
O-(7-azabenzotriazol-1 -yl)-1,1,3,3 -tetrametylurónium-hexafluorofosfát
2- ( lH-benzotriazol-1 -yl)-1,1,3,3-tetrametyluróniumhexafluorofosfát vysokoúčinná kvapalinová chromatografia kvapalinová chromatografia leucín lyzín metyl kyselina 4-(2-metylfenylaminokarbonylamino)fenyloctová hmotnostné spektrum fenyl prolín kyselina trifluóroctová
Inhibítor bunkovej adhézie podľa vynálezu sa môže čistiť obvyklými metódami, ako je chromatografia alebo kryštalizácia.
Ďalej je opísaných päť všeobecných metód prípravy zlúčenín podľa predloženého vynálezu.
Zoznam skratiek, použitých vo vzorcoch a texte:
Bn
Boe
CBz
Dde
DEAD
DIEA
DMF
ESMS
Fmoc
Gly
HATU
HBTU
HPLC
LC
Leu
Lyz
Me oMePUPA
MS
Ph
Pro
TFA
Všeobecná metóda A - Príprava diaminopropionátových derivátov na pevnej fáze
SK 287075 Β6
Ortogonálne Fmoc/Dde chránená Wangova živica (Π)
Kyselina (5)-N-a-Fmoc-N-P-Dde-diaminopropiónová (I) (4,95 g; 10,1 mmol) sa naviaže na Wangovu živicu (7,88 g; 0,64mmoVg; 100-200 mesh) reakciou s 2,6-dichlórbenzoylchloridom (1,45 ml; 10,1 mmol) a suchým pyridínom (1,35 ml) v 40 ml suchého dimetylformamidu. Zmes sa trepe 16 hodín za laboratórnej 5 teploty. Živica sa izoluje filtráciou a premyje sa trikrát dimetylformamidom a trikrát dichlórmetánom. Potom sa nezreagované miesta na živici zaslepia reakciou s dichlórbenzoylchloridom (2 ml) a pyridínom (2 ml) počas 2 hodín, potom sa živica znova premyje, ako je opísané skôr. Výsledná živica obsahuje 0,64 mmol/g Fmoc, ako sa zistilo reakciou s piperidínom a meraním A290·
Deblokácia a N-α acylácia
Diaminopropionátová živica II sa podrobí pôsobeniu 20 % piperidínu v dimetylformamide počas 15 minút, potom sa sfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Deblokovaná živica sa ihneď acyluje reakciou s R'CO2H (2 ekvivalenty), HATU (2 ekvivalenty) a diizopropyletylamínom (4 ekvivalenty). Reakčná zmes sa trepe 2 hodiny, sfiltruje sa a acylácia sa opakuje. Úplnosť acylácie sa zistí negatívnym Kai15 serovým testom. Živica sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Ak R'CO2H je aminokyselina, chránená skupinou Fmoc, deblokácia a acylácia sa opakujú skôr opísaným spôsobom.
Deblokácia a Ν-β acylácia
Acylovaná diaminopropionátová živica III sa podrobí reakcii s 2 % hydrazínom v dimetylformamide po20 čas 1 hodiny, potom sa sfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Deblokovaná živica sa ihneď acyluje reakciou s R3CO2H (2 ekvivalenty), HATU (2 ekvivalenty) a diizopropyletylamínom (4 ekvivalenty). Reakčná zmes sa trepe 2 hodiny, sfiltruje sa a acylácia sa opakuje. Živica sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom.
Uvoľnenie výsledného produktu zo živice
Diacyldiaminopropionátová živica IV sa podrobí reakcii so zmesou 95 % kyseliny trifluóroctovej a 5 % vody počas 1 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstráni filtráciou a živica sa premyje dvakrát malým množstvom kyseliny trifluóroctovej. Spojené trifluóroctové roztoky sa zahustia vo vákuu a získaný odparok sa prečistí HPLC na reverznej fáze, čím sa získa čistý diacyldiaminopropionátový derivát.
Všeobecná metóda B - príprava derivátov β-lyzínu
Metylester (L>-N-Cbz-P-N-Boc-3-homolyzínu (II) co-N-Cbz-P-N-Boc-p-Homolyzín (I) sa rozpustí v Ν,Ν-dimetylformamide. K tomuto roztoku sa pridá za miešania hydrogenuhličitan sodný (10 ekvivalentov) a potom metyljodid (6 ekvivalentov). Zmes sa mieša cez noc za laboratórnej teploty a potom sa roztrepe medzi vodu a etylacetát. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom sodným. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla sa zvySK 287075 B6 šok chromatografuje na silikagéli v zmesi hexán-etylacetát, čím sa získa ester II.
Metylester p-N-Boc-P-homolyzínu III
N-Cbz-karbamát II sa rozpustí v metanole a k roztoku sa pridá 10 % paládium na uhlí. Zmes sa prepláchne dusíkom a potom sa napustí vodík pod tlakom 50 psi. Zmes sa mieša cez noc, katalyzátor sa odfiltruje cez PTFE filter Whatman a roztok sa zahustí, čím sa získa surový amín III.
Ν-ω-Acylácia
Amín III (111 mg), 2-(l//-benzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetrametyluróniumhexafluorofosfát (HBTU; 1,1 ekvivalentu) a RlCO2H (1,1 ekvivalentu) sa rozpustí v Ν,Ν-dimetylformamide. K tomuto roztoku sa pridá N,N-diizopropyletylamín (2,5 ekvivalentu). Zmes sa mieša cez noc, a potom sa reakcia ukonči prídavkom 5 % vodného roztoku kyseliny citrónovej. Zmes sa extrahuje etylacetátom, organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom sodným. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla na rotačnej odparke sa získa surový amid IV, ktorý sa bez čistenia použije v ďalšom kroku.
Ν-β-Deblokácia a acylácia
Surový N-Boc-karbamát IV sa zmieša s nasýteným roztokom chlorovodíka v etylacetáte, pripraveným uvádzaním plynného chlorovodíka do studeného (0 °C) etylacetátu počas 30 minút. Reakčná zmes sa mieša jednu hodinu a potom sa odparí do sucha, čím sa získa surový amín V, ktorý sa bez čistenia použije v ďalšom kroku. Surový amín V sa rozpustí v Ν,Ν-dimetylformamide spolu s R3CO2H (1 ekvivalent) a HBTU (1,1 ekvivalentu). Pridá sa za miešania N,N-diizopropyletylamín (7,5 ekvivalentu) a zmes sa mieša cez noc. Potom sa reakčná zmes roztrepe medzi 5 % vodný roztok kyseliny citrónovej a etylacetát. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom sodným. Filtrácia a odparenie rozpúšťadla poskytne surový amid VI, ktorý sa bez čistenia použije v ďalšom kroku.
Výsledná deblokácia
Metylester VI sa rozpustí v zmesi tetrahydrofurán-metanol (1 : 1) a pridá sa za miešania 2 N hydroxid lítny. Zmes sa mieša jednu hodinu a potom sa zahustí do sucha. Odparok sa roztrepe medzi 1 N vodnú kyselinu chlorovodíkovú a etylacetát a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného. Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa surový produkt prečistí HPLC na reverznej fáze, čím sa získa čistá kyselina.
Fmoc/Dde-Lyzín-Wangova živica (II)
N-a-Fmoc-N-P-Dde-lyzín I (5,0 g; 9,39 mmol) sa naviaže na Wangovu živicu (7,34 g; 0,64 mmoľg; 100-200 mesh) reakciou s 2,6-dichlórbenzoylchloridom (1,33 ml; 10,1 mmol) a suchým pyridínom (1,27 ml) v 50 ml suchého dimetylformamidu. Zmes sa trepe 16 hodín pri laboratórnej teplote. Živica sa izoluje filtráciou a premyje sa trikrát dimetylformamidom a trikrát dichlórmetánom. Potom sa nezreagované miesta na živici zaslepia reakciou s dichlórbenzoylchloridom (2 ml) a pyridínom (2 ml) počas 2 hodín a živica sa premyje skôr uvedeným spôsobom. Získaná živica obsahuje 0,56 mmol/g Fmoc, ako sa zistilo reakciou s piperidínom a meraním Α29ο·
Deblokácia a N-α acylácia
Diaminopropionátová živica II sa zmieša s 20 % roztokom piperidínu v dimetylformamide. Po 15 minútach sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Deblokovaná živica sa ihneď acyluje reakciou s R‘CO2H (2 ekvivalenty), HATU (2 ekvivalenty) a diizopropyletylamínom (4 ekvivalenty). Zmes sa trepe 2 hodiny, sfiltruje sa a acylácia sa opakuje. Úplnosť acylácie sa potvrdí negatívnym Kaiserovým testom. Živica sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Ak R'CO2H je Fmoc-chránená aminokyselina, deblokácia a acylácia sa opakujú skôr opísaným spôsobom.
Deblokácia a N-ε acylácia
Acylovaná lyzínová živica III sa podrobí reakcii s 2 % hydrazínom v dimetylformamide. Po jednej hodine sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom. Deblokovaná živica sa ihneď acyluje reakciou s R3CO2H (2 ekvivalenty), HATU (2 ekvivalenty) a diizopropyletylamínom (4 ekvivalenty). Zmes sa trepe 2 hodiny, odfiltruje sa a acylácia sa opakuje. Živica sa odfiltruje a premyje dimetylformamidom a dichlórmetánom.
Odštiepenie výsledného produktu zo živice
Diacylovaná lyzínová živica IV sa nechá 1 hodinu reagovať so zmesou 95 % kyseliny trifluóroctovej a 5 % vody. Rozpúšťadlo sa odstráni filtráciou a živica sa premyje dvoma malými porciami kyseliny trifluóroctovej. Spojené trifluóroctové filtráty sa zahustia vo vákuu a zvyšok sa prečistí HPLC na reverznej fáze, čím sa získajú čisté diacyllyzínové deriváty.
Všeobecná metóda D - príprava derivátov kyseliny oMePUPA-N- -MeLeu-aj-diaminomaslovej h|HCBz yHCBz
o
O
I O NHCBz
blHCBz .OH
rv
Hydrochlorid metylesteru kyseliny N-a-Cbz-L-2,4-diaminomaslovej (I)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania suspenduje 8,4 g (33,3 mmol) kyseliny N-a-Cbz-L-2,4-diaminomaslovej v 200 ml metanolu. Suspenzia sa ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ) a potom sa v priebehu 15 minút prikvapká 14,6 ml (200 mmol) tionylchloridu. Vzniknutý bezfarebný roztok sa nechá zohriať na laboratórnu teplotu a mieša sa cez noc. Potom sa zahustí, odparok sa znova rozpustí v metanole a odparovanie s metanolom sa ešte raz opakuje. Odparok sa potom rozpustí v dichlórmetáne, zahustí sa a suší sa 16 hodín vo vysokom vákuu. Získa sa tak 10,33 g (34,2 mmol); 103 %) slabožltej peny.
M/z = 267,1 (M+H)+.
Boc-N-Metyl-leucinyl-(N-a-Cbz)-GABA-metylester (II)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa rozpustí za miešania 10,33 g (33,3 mmol) zlúčeniny I (mol. hmotnosť 302) v 100 ml dimetylformamidu. K vzniknutému bezfarebnému roztoku sa pridá 17,4 ml (100 mmol) diizopropyletylamínu (DIEA), potom 7,96 g (32,5 mmol) Boc-N-Me-leucínu, a nakoniec 14,83 g (39,0 mmol) 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetrametyluróniumhexafluorofosfátu (HATU), čím vznikne žltý roztok, ktorý sa mieša cez noc. Po tomto čase už HPLC neukazuje žiadnu východiskovú látku. Roztok sa zriedi etylacetátom (500 ml) a premyje sa dvakrát 1 N HC1, dvakrát 1 N NaOH a raz solankou. Organická fáza sa vysuší nad bezvodým síranom horečnatým, sfiltruje sa a zahustí. Zvyšný červený olej sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave hexán-etylacetát (2 : 1), čím sa získa 12,56 g (25,5 mmol; 78 %) produktu II (Rf = 0,46, hexán-etylacetát 1:1, silikagél) vo forme žltého sirupu (čistota >99 % podľa HPLC).
M/z = 494,3 (M+H)+.
Trifluóracetát H-N-metyl-leucmyl-(N-a-Cbz)-GABA-metylesteru (III)
V 50 ml banke s okrúhlym dnom sa rozpustí za miešania 0,50 g (1,01 mmol) zlúčeniny II (mol. hmotnosť 493) v 10 ml dichlórmetánu. K vzniknutému bezfarebnému roztoku sa pridajú 2 ml (26 mmol; veľký prebytok) kyseliny trifluóroctovej a vzniknutý roztok sa mieša 4 hodiny, a po tomto čase nie je podľa HPLC v zmesi prítomná žiadna východisková látka. Roztok sa zahustí, znova sa rozpustí v dichlórmetáne a zahustí sa, a tento postup sa opakuje ešte raz. Potom sa odparok suší vo vysokom vákuu cez noc, čím sa získa 0,52 g (~ kvantitatívny výťažok) produktu III vo forme veľmi slabožltého oleja, ktorý sa použije ďalej.
M/z = 394,4 (M+H)+.
oMePUPA-N-metyl-leucinyl-(N-a-Cbz)-GABA-metylester (IV)
V 10 ml liekovke sa rozpustí za miešania 0,52 g (1,01 mmol) zlúčeniny III (mol. hmotnosť 507) v 5 ml dimetylformamidu. K vzniknutému slabožltému roztoku sa pridá 525 μΐ (3,0 mmol) diizopropyletylamínu, potom 284 mg (1,0 mmol) voľnej kyseliny oMePUPA (Ricerca; mol. hmotnosť 284) a nakoniec 0,42 g (1,1 mmol) HATU. Vzniknutý žltý roztok sa mieša cez noc. Po tomto čase už HPLC neukazuje žiadnu východiskovú látku. Roztok sa zriedi etylacetátom (75 ml) a premyje sa trikrát 1 N HC1, trikrát 1 N NaOH, a raz solankou. Organická fáza sa vysuší nad síranom horečnatým, sfiltruje sa a filtrát sa zahustí. Polotuhý žltý zvyšok sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave acetonitril-dichlórmetán (1 : 2), čím sa získa 0,49 g (0,74 mmol; 74 %) produktu IV (Rf = 0,56, acetonitril-dichlórmetán 1:1, silikagél) vo forme jasne bielej tuhej peny (čistota >99 % podľa HPLC).
M/z = 660,1 (M+H)+.
Hydrochlorid oMePUPA-N-metyl-leucinyl-(N-a-H)-GABA-metylesteru (V)
V 85 ml autokláve sa za miešania rozpustí 400 mg (0,61 mmol) zlúčeniny IV (mol. hmotnosť 659) v 10 ml metanolu, čím vznikne bezfarebný roztok. Autokláv sa prepláchne dusíkom a pridá sa asi 50 mg (katalytické množstvo) 10 % paládia na uhlí. Steny autoklávu sa opláchnu ďalším metanolom a nasadí sa hydrogenačná hlava. Potom sa autokláv natlakuje vodíkom na tlak 60 psi a zmes sa mieša cez noc. Potom sa vodík vypustí a zmes sa filtruje cez celit 545, filtračný koláč sa premyje metanolom (10 ml) a filtrát sa zahustí. Zvyšok sa rozpustí v minimálnom množstve (2 ml) metanolu a prikvapká sa do ľadového 1,0 M roztoku HC1 v éteri. Biela zrazenina sa roztiera 20 minút v éterickom roztoku chlorovodíka, potom sa sfiltruje, premyje sa éterom a jednu hodinu sa suší na vzduchu. Biela tuhá látka sa rozotrie špachtlou na prášok, premyje sa éterom a vysuší sa cez noc na vzduchu. Získa sa 336 mg (0,60 mmol; 98 %) produktu V vo forme bieleho prášku s čistotou vyššou ako 99 % (HPLC).
ESMS m/z = 526,6 (M+H)+.
Acylácia a výsledná hydrolýza
Surový hydrochlorid V sa rozpustí v Ν,Ν-dimetylformamide spolu s R3CO2H (1 ekvivalent) a HBTU (1,1 ekvivalentu). Pridá sa za miešania N,N-diizopropyletylamín (4 ekvivalenty) a zmes sa mieša cez noc. Potom sa reakčná zmes roztrepe medzi 5 % vodný roztok kyseliny citrónovej a etylacetát. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom sodným. Filtrácia a odparenie rozpúš ťadla poskytne surový amid, ktorý sa dá čistiť pomocou HPLC na reverznej fáze. Metylester sa rozpustí v zmesi tetrahydrofúrán-metanol (1:1) a k roztoku sa pridá za miešania vodný roztok hydroxidu lítneho (2 N). Zmes sa mieša jednu hodinu a potom sa zahustí do sucha. Odparok sa roztrepe medzi 1 N vodnú kyselinu chlorovodíkovú a etylacetát, a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného. Po vysušení nad síranom sodným, filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa surová kyselina. Prečistením pomocou HPLC na reverznej fáze sa získa čistý produkt.
Všeobecná metóda E - syntéza z diaminokyselín v kvapalnej fáze:
CBz^lAy°H —► i 0 n °
HCI
III 0
H I
IV 0
VI
VII
Ortogonálne Ν-α-Boc/Cbz-chránený diamín I sa prevedie na metylester II reakciou s metyljodidom (5 ekvivalentov) a uhličitanom draselným (5 ekvivalentov) v acetóne pri laboratórnej teplote počas 16 hodín. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa nad síranom sodným a sfiltruje sa. Produkt sa eluuje na silikagéli etylacetátom a hexánom.
Ν-α-Deblokácia a acylácia
Úplne chránený diamín II sa rozpustí v 3 N roztoku HCI v etylacetáte, roztok sa mieša 1 hodinu pri laboratórnej teplote a potom sa zahustí za zníženého tlaku. Tuhý odparok sa suspenduje v dietyléteri, izoluje sa filtráciou, premyje sa éterom a vysuší sa vo vákuu. K takto izolovanému hydrochloridu III sa pridá HATU (1,25 ekvivalentu), diizopropyletylamín (4 ekvivalenty) a kyselina R'CO2H (1,25 ekvivalentu) v suchom dimetylformamide a zmes sa mieša 16 hodín pod dusíkom. Reakčná zmes sa zriedi 5 % roztokom kyseliny citrónovej a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa nad síranom sodným a sfiltruje sa. Filtrát sa zahustí za zníženého tlaku a odparok sa prečistí elúciou cez silikagél v zmesi etylacetát-hexán, čím sa získa čistý produkt IV.
Distálna deblokácia dusíka a acylácia
Cbz-chránený medziprodukt IV sa rozpustí v metanole a odplyní sa. Pridá sa 10 % paládium na aktívnom uhlí a zmes sa mieša počas 3 až 16 hodín pri tlaku vodíka 60 psi. Reakčná zmes sa sfiltruje a zahustí. Získaný voľný amín sa ihneď acyluje reakciou s HATU (1,25 ekvivalentu), diizopropyletylamínom (4 ekvivalenty) a kyselinou R3CO2H (1,25 ekvivalentu) v suchom dimetylformamide za miešania počas 16 hodín pod dusíkom. Reakčná zmes sa zriedi 5 % roztokom kyseliny citrónovej a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa nad síranom sodným a sfiltruje sa. Produkt VI sa prečistí elúciou cez silikagél v zmesi etylacetát-hexán.
Hydrolýza na výsledný produkt
Metylester VI sa rozpustí v zmesi tetrahydrofuránu a metanolu (1 : 1). Potom sa za miešania pridá vodný roztok hydroxidu lítneho (2 N). Zmes sa mieša jednu hodinu a potom sa odparí do sucha. Odparok sa roztrepe medzi 1 N vodný roztok chlorovodíka a etylacetát, a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného. Vysušenie nad síranom sodným, filtrácia a odparenie rozpúšťadla poskytne surový produkt, ktorý prečistením preparatívnou HPLC na reverznej fáze poskytne čistú kyselinu VII.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu tiež modifikovať pripojením vhodných funkčných skupín, aby sa zvýšili selektívne biologické vlastnosti. Také modifikácie sú v odbore známe a zahŕňajú také modifikácie, ktoré zvyšujú biologický prestup do daného biologického systému (napríklad do krvi, lymfatického systému alebo centrálnej nervovej sústavy), zvyšujú orálnu dostupnosť, zvyšujú rozpustnosť, aby ich bolo možné podať formou injekcie, menia metabolizmus, alebo menia rýchlosť vylučovania.
Príklady týchto modifikácií sú esterifikácie polyetylénglykolmi.
Aktivity a špecifické vzťahy k VLA-4 zlúčenín podľa vynálezu sa môžu stanoviť s použitím in vitro aj in vivo testov.
Napríklad, inhibícia bunkovej adhézie pri týchto zlúčeninách sa môže stanoviť určením koncentrácie inhibítora, potrebnej na blokovanie väzby buniek, exprimujúcich VLA-4, k doskám, pokrytým fibronektínom alebo CS-1. V tomto teste sú mikrotitračné jamky potiahnuté buď fibronektínom (obsahujúcim sekvenciu CS-1) alebo CS-1. Ak sa použije CS-1, musí byť konjugovaný s nosným proteínom, ako je hovädzí sérumalbumin, aby sa zaistila väzba v jamkách. Akonáhle sú jamky potiahnuté, nanesie sa v rôznych koncentráciách testovaná zlúčenina spolu s patrične označenými bunkami, exprimujúcimi VLA-4. V alternatívnom usporiadaní sa môže testovaná zlúčenina naniesť ako prvá a inkubovať sa v potiahnutých jamkách pred pridaním buniek. Bunky sa inkubujú v jamkách aspoň 30 minút. Po inkubácii sa jamky vyprázdnia a premyjú. Inhibícia väzby sa pre každú z koncentrácií meranej zlúčeniny určuje podľa fluorescencie alebo rádioaktivity jamky, v porovnaní s kontrolami, ktoré neobsahujú žiadnu testovanú zlúčeninu.
Ako bunky, exprimujúce VLA-4, sa môžu v tomto teste použiť bunky Ramos, bunky Jurkat, bunky A375 melanómu, aj periferálne lymfocyty ľudskej krvi (PBL). Bunky v tomto teste môžu byť fluorescenčné alebo rádioaktívne označené.
Na určenie inhibičnej aktivity zlúčenín podľa vynálezu je tiež možné použiť test priamej väzby. V tomto teste sa VCAM-IgG fúzovaný proteín, majúci prvé dve imunoglobulínové domény VCAM (D1D2) pripojené nad pantovou oblasťou molekuly IgGl („VCAM 2D- -IgG“), konjuguje k markerovému enzýmu, ako je alkalická fosfatáza („AP“). Syntéza tohto VCAM-IgG-fuzovaného proteínu je opísaná v spise WO 90/13300, na ktorý sa tu odvolávame. Jeho konjugácia s markerovým enzýmom sa dosiahne pomocou dobre známych metód („cross-linking“). Konjugát VCAM-IgG s enzýmom sa potom prenesie do jamiek viacjamkovej filtračnej doštičky, aká je napríklad súčasťou systému „Millipore Multiscreen Assay Systém“ (Millipore Corp., Bedford, MA). Do jamiek sa potom vnesie testovaná inhibujúca zlúčenina v rôznych koncentráciách, potom sa pridajú bunky exprimujúce VLA-4. Bunky, zlúčenina a konjugát VCAM-IgG s enzýmom sa spolu zmiešajú a inkubujú sa pri laboratórnej teplote.
Po inkubácii sa jamky prepláchnu, čím v nich zostanú bunky a viazaný VCAM. VCAM sa stanoví kvantitatívne pridaním vhodného kolorimetrického substrátu pre enzým, konjugovaný s VCAM-IgG, a stanovením množstva reakčného produktu. Znížené množstvo reakčného produktu indikuje zvýšenú inhibíciu adhézie.
Na vyhodnotenie inhibičnej špecifity zlúčenín podľa vynálezu proti VLA-4 sa uskutočňujú aj testy pre iné veľké skupiny integrínov, t. j. β2 a β3, aj iné βΐ integríny, ako sú VLA-5, VLA-6 a α4β7. Tieto testy môžu byť podobné skôr uvedeným testom inhibície adhézie a testom priamej väzby, a použijú sa v nich príslušné bunky exprimujúce integrín, a zodpovedajúce ligandy. Napríklad polymorfonukleáme bunky (PMN) exprimujú na svojom povrchu β2 integríny a viažu sa na ICAM. Integríny β3 sa zúčastňujú agregácie krvných doštičiek a na stanovenie inhibície sa môže použiť štandardný test na agregáciu doštičiek. VLA-5 sa špecificky viaže na sekvenciu Arg-Gly-Asp, zatiaľ čo VLA-6 sa viaže na laminín. Integrín α4β7 je nedávno objavený homológ VLA-4, ktorý tiež viaže fibronektín a VCAM. Špecifita proti α4β7 sa stanoví vo väzbovom teste, používajúcom skôr opísaný konjugát VCAM-IgG s markerovým enzýmom a bunkovú líniu, exprimujúciu α4β7, ale nie VLA-4, napríklad bunky RPMI-8866.
Nájdené špecifické inhibítory VLA-4 sa môžu ďalej charakterizovať pomocou in vivo testov. Jeden z takých testov sa týka inhibície kontaktnej hypersenzitivity u zvierat a je opísaný v publikáciách: P.L. Chisholm a kol.: „Monoclonal Antibodies to the Integrín a-4 Subunit Inhibit the Murine Contact Hypersenzitivity Response“, Eur. J. Immunol., 23, str. 682-688 (1993); a „Current Protocols in Immunology“ (J. E. Coligan a kol., Eds., John Wiley & Sons, New York, 1 str. 4.2.1-4.2.5 (1991)), na ktoré tu odkazujeme. V tomto teste sa koža zvieraťa senzibilizuje dráždiacou látkou, ako je dinitrofluórbenzén, a následným ľahkým fyzickým podráždením, ako je ľahké poškrabanie kože ostrým hrotom. Po perióde zotavenia sa zvieratá znova senzibilizujú takým istým postupom. Niekoľko dní po senzibilizácii sa jedno ucho zvieraťa vystaví chemickému dráždidlu, zatiaľ čo na druhé ucho sa nanesie nedráždivý kontrolný roztok. Skoro po tejto aplikácii sa zvieratám podajú rôzne dávky inhibítora VLA-4 vo forme subkutánnej injekcie. In vivo ihibícia zápalu, spojeného s bunkovou adhéziou, sa vyhodnotí porovnaním opuchu na ošetrenom uchu a na uchu s kontrolou. Opuch sa meria s použitím posuvného meradla alebo iného vhodného nástroja na meranie hrúbky ucha. Týmto spôsobom je možné identifikovať také inhibítory podľa vynálezu, ktoré sú najvhodnejšie na inhibíciu zápalov.
Iný in vivo test, ktorý je možné použiť na testovanie inhibítorov podľa predloženého vynálezu, je test na astmatických ovciach. Tento test sa uskutočňuje v podstate tak, ako ho opísal W.M. Abraham a kol., v publikácii: „α-Integrins Mediate Antigen-induced Late Bronchial Responses and Prolonged Airway Hyperresponsiveness in Sheep“, J. Clin. Invest., 93, str. 776-787 (1994), na ktorú tu odkazujeme. Tento test meria inhibíciu neskorej fázy odpovede dýchacích ciest, spôsobenej antigénom Ascaris, u astmatických oviec.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť vo forme farmaceutický prijateľných solí, odvodených od anorganických alebo organických kyselín a zásad. Také soli s kyselinami zahŕňajú nasledujúce: acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzénsulfonát, bisulfát, butyrát, citrát, gáforát, gáforsulfonát, cyklopentánpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, etánsulfonát, fúmarát, glukoheptanoát, glycerofosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyetánsulfonát, laktát, maleát, metánsulfonát, 2-naftalénsulfonát, nikotinát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartrát, tiokyanát, tosylát a undekanoát. Soli so zásadami zahŕňajú amónne soli, soli alkalických kovov, ako sú sodné a draselné soli, soli kovov alkalických zemín, ako sú vápenaté a horečnaté soli, soli s organickými zásadami, ako sú soli s dicyklohexylamínom, N-metyl-D-glukamínom, a soli s aminokyselinami, ako je arginín, lyzín atď. Zásadité skupiny, obsahujúce dusík, môžu byť tiež kvartemizované činidlami, ako sú nižšie alkylhalogenídy ako metyl-, etyl-, propyl- a butylchloridy, -bromidy alebo -jodidy; dialkylsulfáty, ako sú dimetylsulfát, dietylsulfát, dibutylsulfát a diamylsulfát; halogenidy s dlhým reťazcom, ako sú decyl-, lauryl-, myristyl- a stearyl-chloridy, -bromidy a -jodidy; aralkylhalogenidy, ako sú benzylbromid a fenetylbromid, a podobne. Získajú sa tak produkty, rozpustné alebo dispergovateľné vo vode alebo v oleji.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť formulované do farmaceutických kompozícií, ktoré sa môžu podávať orálne, parenterálne, inhalačné v spreji, topicky, rektálne, nazálne, bukálne, vaginálne alebo pomocou implantovaného rezervoára. Výraz „parenterálne“ v tomto texte zahŕňa subkutánne, intravenózne, intramuskuláme, intraartikulárne, intrasynoviálne, intrastemálne, intratekálne, intrahepatické, intralézne a intrakraniálne injekčné alebo infúzne techniky.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu zahŕňajú akúkoľvek zo zlúčenín podľa tohto vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľné deriváty, spolu s akýmkoľvek farmaceutický prijateľným nosičom. Výraz „nosič“ v tomto texte zahŕňa prijateľné adjuvans a vehikuly. Farmaceutický prijateľné nosiče, ktoré sa môžu použiť vo farmaceutických kompozíciách podľa tohto vynálezu, zahŕňajú (bez toho, aby boli obmedzené len na uvedené nosiče) iónomeniče, alumínu, stearát hlinitý, lecitín, sérumproteíny, ako je ľudský sérumalbumín, pufry, ako sú fosfáty, glycín, kyselinu sorbovú, sorbát draselný, zmesi parciálnych glyceridov nasýtených rastlinných mastných kyselín, vodu, soli alebo elektrolyty ako protamínsulfát, hydrogenfosfát disodný, hydrogenfosfát draselný, chlorid sodný, zinočnaté soli, koloidnú siliku, magnéziumtrisilikát, polyvinylpyrolidón, látky na báze celulózy, polyetylénglykol, sodnú soľ karboxymetylcelulózy, polyakryláty, vosky, blokové polyméry na báze polyetylén-polyoxypropylénu, polyetylénglykol a tuk z ovčej vlny.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu môžu byť vo forme sterilných injektabilných prípravkov, ako je napríklad sterilná injektabilná vodná alebo olejová suspenzia. Táto suspenzia môže byť formulovaná v odbore známymi technikami, s použitím vhodných disperzných, zmáčacích alebo suspenzných činidiel. Sterilný injektabilný prípravok môže byť tiež sterilný injektabilný roztok alebo suspenzia v netoxickom parenterálne prijateľnom riedidle alebo rozpúšťadle, napríklad roztok v 1,3-butándiole. Medzi prijateľné vehikulá a rozpúšťadlá, ktoré sa môžu použiť, patrí voda, Ringerov roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Taktiež sterilné netuhnúce oleje sa bežne používajú ako rozpúšťadlá alebo suspenzné prostredie. Na tento cieľ je možné použiť akýkoľvek nedráždivý netuhnúci olej vrátane syntetických monoglyceridov a diglyceridov. Na prípravu injektabilných kompozícií sú výhodné mastné kyseliny, ako je kyselina olejová a jej glyceridové deriváty práve tak, ako prírodné farmaceutický prijateľné oleje, ako je olivový olej alebo ricínový olej, zvlášť v ich polyoxyetylovaných verziách. Tieto olejové roztoky alebo suspenzie môžu tiež obsahovať riedidlo alebo disperzant na báze alkoholu s dlhým reťazcom, ako je Ph.Helv alebo podobný alkohol.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu sa môžu orálne podávať v akejkoľvek orálne prijateľnej dávkovej forme vrátane toboliek, tabliet, vodných suspenzií alebo roztokov bez toho, aby sa tým výpočet obmedzoval len na uvedené formy.
V prípade tabliet na orálne podanie, obvykle používané nosiče zahŕňajú laktózu a kukuričný škrob. Lubrikanty, ako je stearát horečnatý, sú tiež typické prísady. Užitočné riedidlá na orálne podanie vo forme toboliek zahŕňajú laktózu a sušený kukuričný škrob. Ak sú na orálne podanie žiaduce vodné suspenzie, zmieša sa aktívna zložka s emulgátormi a dispergentmi. Podľa potreby sa môžu tiež pridať určité sladidlá, chuťové prísady alebo farbivá.
Alternatívne, farmaceutické kompozície podľa tohto vynálezu sa môžu podávať vo forme čapíkov na rektálnu aplikáciu. Tieto čapíky sa môžu pripraviť zmiešaním účinnej látky s vhodným nedráždivým excipien tom, ktorý je pri izbovej teplote tuhý, ale pri teplote konečníka je kvapalný, takže v konečníku sa roztápa a uvoľní účinnú látku. Také materiály zahŕňajú kakaové maslo, včelí vosk a polyetylénglykoly.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu sa môžu aplikovať tiež topicky, zvlášť keď cieľ liečby zahŕňa oblasti alebo orgány, ľahko prístupné topickej aplikácii vrátane očných ochorení, kožných ochorení alebo ochorení dolného črevného traktu. Pre každú z týchto oblastí alebo orgánov sa ľahko dajú pripraviť vhodné topické formulácie.
Topická aplikácia pre dolný črevný trakt sa môže tiež uskutočňovať rektálnou čapíkovou formuláciou (pozri skôr opísané) alebo vhodnou formuláciou pre klystýr. Topicky sa môžu tiež použiť transdermálne náplaste.
Pri topických aplikáciách môžu byť farmaceutické kompozície formulované tiež ako vhodné masti, obsahujúce aktívnu zložku suspendovanú alebo rozpustenú v jednom alebo viacerých nosičoch. Nosiče na topickú aplikáciu zlúčenín podľa vynálezu zahŕňajú nasledujúce látky bez toho, aby však boli obmedzené len na ne: minerálny olej, tekutú vazelínu, bielu vazelínu, propylénglykol, polyoxyetylén, polyoxypropylén, emulzný vosk a vodu. Alternatívne sa farmaceutické kompozície môžu formulovať ako vhodné lotion alebo krém, obsahujúce aktívne zložky suspendované alebo rozpustené v jednom alebo viacerých farmaceutický prijateľných nosičoch, λ/hodné nosiče zahŕňajú nasledujúce látky bez toho, aby však boli obmedzené len na ne: minerálny olej, sorbitan-monostearát, polysorbát 60, cetylesterový vosk, stearylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a vodu.
Na oftalmologické použitie môžu byť farmaceutické kompozície formulované ako mikronizované suspenzie v izotonickom soľnom roztoku s nastaveným pH, alebo výhodne ako roztoky v izotonickom soľnom roztoku s nastaveným pH, a to buď s konzervačným činidlom, ako je napríklad benzylalkóniumchlorid, alebo bez neho. Alternatívne sa na oftalmologické použitie môžu farmaceutické kompozície formulovať v masti, ako je vazelínová masť.
Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu sa môžu tiež aplikovať ako nasálny aerosól alebo inhalačný prostriedok s použitím nebulizéra, práškového inhalátora alebo dávkovacieho inhalátora. Také kompozície sa pripravia v odbore dobre známymi technikami a môžu sa pripraviť vo forme roztokov v soľnom roztoku s použitím benzylalkoholu alebo iného vhodného konzervačného činidla, promótorov absorpcie na zvýšenie biologickej dostupnosti, fluorouhľovodíkov a/alebo obvyklých solubilizátorov alebo dispergátorov.
Množstvo účinnej zložky, ktorá sa môže kombinovať s nosičmi, aby sa získala jednotlivá dávková forma, bude rôzne a bude závisieť od pacienta a od daného spôsobu podania. Je potrebné si však uvedomiť, že dávky a režim podania pre daného pacienta budú závisieť od mnohých faktorov vrátane aktivity použitej zlúčeniny, veku pacienta, jeho telesnej hmotnosti, celkového zdravotného stavu, pohlavia, od jeho diéty, od času podania, od rýchlosti exkrécie, od kombinácie liečiv, aj od úvahy ošetrujúceho lekára a od závažnosti liečeného ochorenia. Množstvo aktívnej zložky bude tiež závisieť od terapeutického alebo profylaktického činidla, s ktorým je účinná zlúčeniná podávaná, ak nejaké je.
Ako je uvedené skôr, predložený vynález sa týka tiež účinného množstva farmaceutickej kompozície, obsahujúcej účinné množstvo zlúčeniny podľa vynálezu. Účinné množstvo je definované ako množstvo, ktoré je potrebné, aby vyvolalo u liečeného pacienta terapeutický efekt. Toto množstvo bude závisieť od mnohých rôznych faktorov, ako je charakter inhibítora, hmotnosť pacienta, cieľ liečby, charakter liečeného patologického stavu, použitá farmaceutická kompozícia, aj úvaha ošetrujúceho lekára. Viac je uvedené v literatúre (Freirich a kol., Cancer Chemother. Rep. 1966, 50, 219; Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardley, New York, 1970, 537). Vhodné dávky aktívnej zložky sú asi 0,001 až 100 mg/kg telesnej hmotnosti za deň, výhodne asi 0,1 až 10 mg/kg telesnej hmotnosti za deň.
Kompozície, obsahujúce zlúčeninu podľa predloženého vynálezu, môžu tiež obsahovať ďalšiu účinnú látku, zvolenú zo skupiny kortíkosteroidy, bronchodilatanty, antiastmatiká (stabilizátory žírnych buniek), protizápalové látky, antireumatiká, imunosupresory, antimetabolity, imunomodulátory, antipsoriatiká a antidiabetiká. Konkrétne látky, patriace k týmto skupinám, je možné vybrať z látok, uvedených pod príslušným heslom v publikácii „Comprehensive Medicinal Chemistry“, Pergamon Press, Oxford, England, str. 970-986 (1990), na ktorú týmto odkazujeme. Do tejto skupiny patria tiež zlúčeniny, ako je teofilín, sulfasalazín a aminosalicyláty (protizápalové látky); cyklosporín, FK-506 a rapamycín (imunosupresory); cyklofosfamid a metotrexát (antimetabolity); a interferóny (imunomodulátory).
Kompozícia podľa vynálezu sa môže použiť v spôsobe prevencie, inhibície alebo potlačenia zápalov, spojených s bunkovou adhéziou, a imunitných alebo auto imunitných odpovedí spojených s bunkovou adhéziou. Bunková adhézia, spojená s VLA-4, hrá kľúčovú úlohu pri mnohých rôznych zápalových, imunitných a autoimunitných ochoreniach. Inhibícia bunkovej adhézie zlúčeninami podľa vynálezu môže sa tak využiť pri metódach liečby alebo prevencie zápalových, imunitných a auto imunitných ochorení. Výhodne sú ochorenia, ktoré sa majú liečiť vybrané z astmy, artritídy, psoriázy, odmietania transplantátov, roztrúsenej sklerózy, diabetu a zápalového ochorenia čriev.
Tieto metódy môžu používať zlúčeniny podľa vynálezu pri monoterapii alebo v kombinácii s protizápa lovým alebo imunosupresívnym činidlom. Také kombinačné terapie zahŕňajú podávanie účinných látok vo forme jednotlivých dávok alebo vo forme viac dávok, podávaných súčasne alebo v rôznom čase.
Pre lepšie porozumenie sú v ďalšom uvedené príklady uskutočnenia vynálezu. Tieto príklady sú uvedené len na ilustráciu a v žiadnom smere rozsah vynálezu nijako neobmedzujú.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Medziprodukt 1
Kyselina 4-(2-metylfenylaminokarbonylamino)fenyloctová (oMePUPA-OH)
K suspenzii kyseliny p-aminofenyloctovej (56,8 g; 376 mmol) v DMS (150 ml) sa po kvapkách pridá o-tolylizokyanát (50 g; 376 mmol). Reakčná zmes sa mieša jednu hodinu a potom sa naleje za miešania do 1,75 litra etylacetátu. Zrazenina sa odsaje a premyje sa 400 ml etylacetátu a 400 ml acetonitrilu, čím sa získa oMePUPA-OH (80 g; 75 %).
ESMS: m/z (M+H)+ 285,1.
Medziprodukt 2 oMePUPA-Leu-OH oMePUPA-OH (0,78 g) sa zmieša s hydrochloridom leucínmetylesteru (0,50 g; 1,0 ekvivalent), HATU (1,10 g; 1,05 ekvivalent) a diizopropyletylamínom (1,9 ml; 4 ekvivalenty) v 10 ml suchého dimetylformamidu. Reakčná zmes sa mieša 16 hodín pri laboratórnej teplote, potom sa zriedi 50 ml etylacetátu, premyje sa 5 % roztokom kyseliny citrónovej, vodou, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáza sa vysuší nad síranom sodným, sfiltruje sa a zahustí. Získaná biela tuhá látka (1,13 g) sa rozpustí v 10 ml tetrahydrofúránu, k roztoku sa pridá 5 ml 2 N LiOH a reakčná zmes sa mieša 16 hodín. Tetrahydrofurán sa odparí za zníženého tlaku a roztok sa zriedi 40 ml vody a premyje sa etylacetátom. Vodná vrstva sa okysli 1 N HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organické extrakty sa premyjú zriedenou kyselinou soľnou a solankou, vysušia sa nad síranom sodným a po filtrácii sa zahustia za zníženého tlaku, čím sa získa 0,77 g bielej tuhej látky.
ESMS: m/z (M+H)+398,5.
Medziprodukt 3
Metylester N-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)prolínu
K roztoku 24,8 g (0,15 mol) hydrochloridu L-prolínmetylesteru v 500 ml dichlórmetánu sa pridá za miešania 70 ml (0,5 mol) trietylaminu, čím vznikne objemná biela zrazenina. Zmes sa sfiltruje a filtrát sa za miešania ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ). K ochladenej zmesi sa rýchlo v priebehu 5 minút prikvapká roztok 36,8 g (0,15 mol) 3,5-dichlórbenzénsulfonylchloridu v 70 ml dichlórmetánu. Kvapkacia nálievka sa prepláchne ďalšími 30 ml dichlórmetánu a zakalená žltá zmes sa nechá za miešania zohriať cez noc na laboratórnu teplotu. Zmes sa premyje dvakrát po 400 ml 1 N HC1, dvakrát po 400 ml 1 N NaOH a potom solankou, vysuší sa nad síranom horečnatým, sfiltruje sa a zahustí. Získaný žltý olej státím skryštalizuje. Tento materiál sa trikrát rekryštalizuje zo zmesi etylacetát-hexány, čím sa získa 39,3 g (0,116 mol; 77 %) metylesteru N-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)prolínu (mol. hmotnosť 338) vo forme bielych ihlíc (TLC na silikagéli v sústave hexány-etylacetát (2 : 1): Rf 0,51.
M/z = 339,3 (M+H)+.
N-(3,5-Dichlórbenzénsulfonyl)prolín
K roztoku 39,3 g (0,116 mol) metylesteru z predošlej preparácie v 250 ml metanolu sa pridá za miešania 115 ml (0,23 mol) čerstvo pripraveného 2 M vodného roztoku LiOH. Vzniknutý bezfarebný roztok sa mieša tri hodiny, po tomto čase HPLC neukazuje už žiadnu východiskovú látku. Roztok sa zahustí vo vákuu na polovicu a roztrepe sa medzi 1 N HC1 (asi 200 ml) a dichlórmetán (asi 200 ml). Fázy sa oddelia a vodná fáza sa znova premyje dichlórmetánom. Organické fázy sa spoja, vysušia sa nad síranom horečnatým a zahustia. Získaná biela tuhá pena sa dvakrát rekryštalizuje zo zmesi etylacetát-hexány, čím sa získa 33,8 g (0,104 mol; 90 %) výslednej zlúčeniny vo forme bezfarebných, širokých a plochých ihlíc.
M/z = 325,2 (M+H)+.
Medziprodukt 4 Metylester N-(benzénsulfonyl)prolínu
K roztoku 25 g (0,15 mol) hydrochloridu L-prolínmetylesteru v 500 ml dichlórmetánu sa pridá za miešania 70 ml (0,5 mol) trietylaminu, čím sa vylúči objemná biela zrazenina. Zmes sa sfiltruje a filtrát sa za miešania ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ). K ochladenému roztoku sa po kvapkách v priebehu 15 minút pridá roztok 20 ml (0,15 mol) benzénsulfonylchloridu v 50 ml dichlórmetánu. Kvapkacia nálievka sa prepláchne ďal
SK 287075 Β6 šími 25 ml dichlórmetánu a zakalená bezfarená zmes sa nechá za miešania zohriať cez noc na laboratórnu teplotu. Zmes sa premyje dvakrát 400 ml 1 N HCI, dvakrát 400 ml 1 N NaOH, jedenkrát solankou, vysuší sa nad síranom horečnatým, sfiltruje sa a zahustí. Získaná slabožltá tuhá látka sa trikrát rekryštalizuje zo zmesi etylacetát-hexány, čím sa získa 38,2 g (0,142 mol; 95 %) metylesteru N-(benzénsulfonyl)prolínu (mol. hmotnosť = 269) vo forme širokých bielych ihlíc (TLC v sústave hexány-etylacetát (2 : 1): Rf = 0,35).
M/z = 270,2 (M+H)+.
N-(Benzénsulfonyl)prolín
K roztoku 38,2 g (0,142 mol) metylesteru z predošlej preparácie v 500 ml metanolu sa za miešania pridá 140 ml (0,28 mol) čerstvo pripraveného 2 M vodného roztoku LiOH. Vzniknutý bezfarebný roztok sa mieša cez noc, po tomto čase HPLC neukazuje už žiadnu východiskovú látku. Roztok sa zahustí vo vákuu na polovicu a roztrepe sa medzi 1 N HCI (asi 200 ml) a dichlórmetán (asi 200 ml). Fázy sa oddelia a vodná fáza sa znova premyje dichlórmetánom. Organické fázy sa spoja, vysušia sa nad síranom horečnatým a zahustia. Získaná biela tuhá látka sa dvakrát rekryštalizuje zo zmesi etylacetát-hexány, čím sa získa 34,7 g (0,136 mol; 96 %) výslednej zlúčeniny vo forme jemných bielych ihlíc.
M/z = 256,2 (M+H)+.
Príklad 1
Syntéza zlúčeniny IX
yHCBZ ^OH W Y SOC1, MeOH ----->= 0°- RT NHCBZ «Αγ0''
0 HCI· j °
TFA
CHA
---►
Medziprodukt I
DIEA ý DMF
Metylester-hydrochlorid (I)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania suspenduje 8,4 g (33,3 mmol) kyseliny 2-NCBz-L-2,4-diaminomaslovej v 200 ml metanolu. Suspenzia sa ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ) a potom sa v priebehu 15 minút prikvapká 14,6 ml (200 ml) tionylchloridu. Vzniknutý bezfarebný roztok sa nechá zohriať na laboratórnu teplotu a mieša sa cez noc. Po tomto čase NMR spektrum vzorky ukazuje, že všetko zreagovalo. Roztok sa zahustí, znova sa rozpustí v metanole a zahustí sa. Procedúra sa ešte raz opakuje. Potom sa odparok rozpustí v dichlórmetáne, roztok sa zahustí a suší sa 16 hodín vo vysokom vákuu. Získa sa 10,33 g (34,2 mmol; 103 %) zlúčeniny I vo forme nažltlej peny.
MS: m/z 267 (M+H)+.
7erc-butoxykarbonylmetylester (II)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania rozpustí 10,33 g (33,3 mmol) zlúčeniny I z predošlej preparácie v suchom dimetylformamide, čím vznikne bezfarebný roztok. K tomuto roztoku sa pridá 17,4 ml (100 mmol) diizopropyletylamínu, potom 7,96 g (32,5 mmol) Boc-N-metyl-leucínu a nakoniec 14,83 g (39,0 mmol) 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetrametyluróniumhexafluorofosfátu (HATU). Vzniknutý žltý roztok sa mieša cez noc. Po tomto čase HPLC neukazuje žiadnu východiskovú látku. Roztok sa zriedi etylacetátom (500 ml) a premyje sa 1 N HC1 (2x), 1 N NaOH (2x) a solankou (lx). Organická fáza sa vysuší nad bezvodým síranom horečnatým, sfiltruje sa a zahustí. Získaný červený olejovitý zvyšok sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave hexány-etylacetát (2 : 1), čím sa získa 12,56 g (25,5 mmol; 78 %) zlúčeniny II vo forme žltého sirupu (čistota podľa HPLC >99 %).
MS: m/z 393 (M-Boc)+, 494 (M+H)+.
Aminoester (III)
V 280 ml autokláve sa za miešania rozpustí 11,38 g (23,08 mmol) zlúčeniny II z predošlej preparácie v 75 ml metanolu, čím vznikne oranžový roztok. Autokláv sa prepláchne dusíkom a pridá sa asi 200 mg (katalytické množstvo) 10 % paládia na uhlí. Steny autoklávu sa opláchnu ďalším metanolom a na autokláv sa nasadí hydrogenačná hlava. Zmes sa natlakuje vodíkom na tlak 60 psi a mieša sa cez noc. Po tomto čase hydrogenačná zmes podľa HPLC už neobsahuje žiadny východiskový materiál. Zmes sa potom sfiltruje cez celit 545, filtračný koláč sa premyje metanolom a filtrát sa zahustí, čím sa získa 8,29 g (~ kvantitatívny výťažok) produktu III vo forme bezfarebného oleja, ktorý sa použije v ďalšej preparácii.
MS: m/z 360 (M+H)+.
Benzylkarbamát-metylester (IV)
V 500 ml banke s okrýhlym dnom sa za miešania rozpustí 8,29 g (23,08 mmol) zlúčeniny III v 100 ml dichlórmetánu, čím vznikne bezfarebný roztok. K nemu sa pridá 7,0 ml (50 mmol) trietylamínu a potom 7,96 g (23,0 mmol) hydroxysukcínimidového esteru CBz-prolínu (CBz-Pro-Osu). Vzniknutý bezfarebný roztok sa mieša cez noc. Po tomto čase zmes podľa HPLC už neobsahuje žiadny východiskový materiál. Roztok sa zriedi ďalším dichlórmetánom, premyje sa 1 N HC1 (2x), 1 N NaOH (2x), organická fáza sa vysuší nad síranom horečnatým, sfiltruje a zahustí sa. Zvyšný bezfarebný olej sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave etylacetát-hexány (3 : 1). Získa sa tak 12,22 g (20,7 mmol; 90 %) produktu ľV vo forme bezfarebnej sklovitej peny (čistota podľa HPLC >99 %).
MS: m/z 490 (M-Boc)+, 591 (M+H)+.
Amín-trifluóracetát (V)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania rozpustí 11,80 g (20,0 mmol) zlúčeniny IV v 120 ml dichlórmetánu, čím vznikne bezfarebný roztok. K tomuto roztoku sa pridá 20 ml (260 mmol; veľký prebytok) kyseliny trifluóroctovej a vzniknutý roztok sa mieša štyri hodiny. Po tomto čase roztok podľa HPLC neobsahuje žiadny východiskový materiál. Roztok sa zahustí, znova sa rozpustí v dichlórmetáne a zahustí sa. Tento postup sa opakuje dvakrát. Nakoniec sa odparok vysuší vo vysokom vákuu. Získa sa 12,1 g (~ kvantitatívny výťažok) produktu V vo forme slabožltého oleja, ktorý sa priamo použije v ďalšom syntetickom stupni.
MS: m/z 491 (M+H)+.
Diarylureido-metylester (VI)
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania rozpustí 12,1 g (20 mmol) zlúčeniny V v 100 ml dimetylformamidu, čím vznikne nažltlý roztok. K tomuto roztoku sa pridá 17,4 ml (100 mmol) dietylaminu, potom 5,68 g (20,0 mmol) medziproduktu 1 (oMePUPA-OH) a nakoniec 9,12 g (24 mmol) HATU, čím vznikne žltý roztok, ktorý sa mieša cez noc. Po tomto čase roztok podľa HPLC neobsahuje žiadny východiskový materiál. Roztok sa zriedi etylacetátom (500 ml) a premyje sa 1 N HC1 (2x), 1 N NaOH (2x) a solankou (lx). Organická fáza sa vysuší nad bezvodým síranom horečnatým, sfiltruje sa a zahustí. Získaný žltý polotuhý zvyšok sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave acetonitril-dichlórmetán (2 : 1), čím sa získa 11,35 g (15,0 mmol; 75 %) zlúčeniny VI vo forme nažltlej tuhej peny (čistota podľa HPLC >99 %).
MS: m/z 757 (M+H)+, 779 (M+Na)+.
Amino-metylester VII
V 280 ml autokláve sa za miešania rozpustí 8,0 g (10,6 mmol) zlúčeniny VI v 50 ml metanolu, čím vznikne nažltlý roztok. Autokláv sa prepláchne dusíkom a pridá sa ~250 mg (katalytické množstvo) 10 % paládia na uhlí. Steny autoklávu sa opláchnu ďalším metanolom a na autokláv sa nasadí hydrogenačná hlava. Zmes sa natlakuje vodíkom na tlak 60 psi a mieša sa cez noc. Po tomto čase hydrogenančná zmes podľa HPLC už neobsahuje žiadny východiskový materiál. Zmes sa potom sfiltruje cez celit 545, filtračný koláč sa premyje metanolom a filtrát sa zahustí, čím sa získa 6,6 g (~ kvantitatívny výťažok) produktu VII vo forme bielej tuhej látky, ktorá sa použije v ďalšej preparácii.
MS: m/z 623 (M+H)+.
SK 287075 Β6
Sulfónamid-metylester VIII
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania rozpustí 6,6 g (10,6 mmol) zlúčeniny VII v 100 ml suchého dichlórmetánu, čím vznikne bezfarebný roztok. Tento roztok sa ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ), pridá sa 4,2 ml (30 mmol) trietylamínu a potom sa v priebehu 10 minút prikvapká roztok 3,68 g (15 mmol) 3,5-dichlórbenzénsulfonylchloridu v 25 ml suchého dichlórmetánu. Vzniknutý roztok sa nechá zohriať na laboratórnu teplotu a mieša sa dve hodiny. Po tomto čase neobsahuje reakčný roztok podľa HPLC žiadny východiskový materiál. Roztok sa zriedi dichlórmetánom, premyje sa 1 N HCI (2x), 1 N NaOH (2x), vysuší sa nad síranom horečnatým, sfiltruje sa a filtTát sa zahustí. Získaný žltý tuhý zvyšok sa podrobí chromatografii na silikagéli v sústave dichlórmetán-acetonitril (2 : 1), čím sa získa 6,68 g (8,0 mmol; 75 %) zlúčeniny VIII vo forme bielej tuhej látky (čistota podľa HPLC >99 %).
MS: m/z 832/833 (M+H)+.
Karboxylová kyselina IX
V 500 ml banke s okrúhlym dnom sa za miešania rozpustí 6,26 g (7,53 mmol) zlúčeniny VIII v 150 ml metanolu, čím vznikne bezfarebný roztok. Tento roztok sa ochladí na 0 °C (ľadový kúpeľ) a prebubláva sa cez neho za miešania dusík počas 30 minút. Potom sa v priebehu 10 minút prikvapká 19 ml (38 mmol) čerstvo pripraveného 2 M roztoku LiOH a roztok sa potom mieša pri 0 °C pod dusíkom. Priebeh reakcie sa starostlivo sleduje pomocou HPLC. Po troch hodinách zmes podľa HPLC neobsahuje už žiadny východiskový materiál. Roztok sa zahustí asi na polovicu pri minimálnom zahriatí, a potom sa pomaly po častiach naleje do ľadovej 1 N HCI, pričom sa vylúči objemná čisto biela zrazenina, ktorá sa odfiltruje, premyje studenou destilovanou vodou a vysuší sa na vzduchu cez noc. Získaná jemná biela tuhá látka sa prenesie do sklenenej nádoby a suší sa 72 hodín vo vysokom vákuu. Získa sa 6,02 g (7,36 mmol; 98 %) produktu IX vo forme bieleho prášku (čistota je podľa HPLC >98 %).
MS: m/z 818/819 (M+H)+, 841 (M+Na)+.
Príklad 2
Syntéza zlúčeniny XVI
Benzylester homoserín-4-nitrofenyléteru
K roztoku 1,2 g (3,89 mmol) benzylesteru N-Boc-homoserínu I, 485 mg (4,08 mmol) 4-nitrofenolu a 1,2 g (4,66 mmol) trifenylfosfínu v 10 ml tetrahydrofuránu sa prikvapká 0,74 ml (4,66 mmol) dietylazodikar boxylátu (DEAD) a reakčná zmes sa mieša za laboratórnej teploty 12 až 24 hodín. Keď zmes úplne zreagovala (LC), rozpúšťadlo sa odparí a k viskóznemu sirupovitému zvyšku sa rýchlo pridá 10 ml 4 N roztoku HC1 v dioxáne. Roztok sa potom mieša pri laboratórnej teplote 3 až 6 hodín, alebo až je podľa LC reakcia úplná. Roztok sa zahustí na štvrtinu pôvodného objemu a produkt sa zrazí prídavkom etylacetátu. Získa sa 867 mg (2,36 mmol; 61 %) hydrochloridu II (čistota podľa LC je 96 %) vo forme bielej tuhej látky.
ESMS: (M-Cl) 331.
K roztoku 117 mg (0,46 mmol) medziproduktu IV v 3 ml dimetylformamidu sa pridá 0,27 ml (1,84 mmol) DIPEA, potom sa po sebe pridá 160 mg (0,48 mmol) hydrochloridu II a 239 mg (0,63 mmol) HATU. Roztok sa mieša 2 až 4 hodiny pri laboratórnej teplote, až je reakcia úplná (LC). Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (30 ml) a premyje sa 5 % roztokom bikarbonátu (10 ml), vodou (10 ml), roztokom kyseliny citrónovej (10 ml) a solankou (2x10 ml) a vysuší sa nad síranom sodným, čím sa získa 213 mg (0,37 mmol; 82 %) surového produktu III vo forme béžovej peny, ktorá sa použije ďalej.
ESMS: (M+H) 568.
Získaný materiál sa rozpustí v 15 ml etylacetátu, pridá sa 200 mg 10 % paládia na uhlí, a zmes sa hydrogenuje 4 až 6 hodín pri tlaku 50 psi, pokiaľ LC nepreukáže úplnú hydrogenáciu. Hydrogenačná zmes sa potom sfiltruje cez celit a filtrát sa zahustí. Získa sa 144 mg (0,32 mmol; 87 %) surového anilínu IV vo forme béžovej peny, ktorá sa ihneď ďalej spracuje.
ESMS: 448 (M+H).
Anilín (74 mg; 0,17 mmol), získaný v predchádzajúcom experimente, sa rozpustí v 3 ml dimetylformamidu, k roztoku sa pridá oMePUPA (52 mg; 0,18 mmol) a potom DIPEA (0,08 ml; 0,43 mmol) a HATU (69 mg; 0,18 mmol) a reakčná zmes sa mieša 3 až 4 hodiny pri laboratórnej teplote, pokiaľ všetko nezreaguje (LC). Prečistenie pomocou HPLC poskytne 39 mg (0,054 mmol; 30 %) produktu Bio-8355 vo forme bielej tuhej látky.
ESMS: 714 (M+H), 712 (M-H).
Opísaným spôsobom sa pripravili zlúčeniny podľa vynálezu, uvedené v nasledujúcich tabuľkách.
Zlúčeniny pripravené podľa všeobecnej metódy A, zahŕňajú:
Zlúčenina č. R3 R1 ESMS m/z
6714 oMePUP A-N-MeLeu Cl 804.4 (M+H+)
Zlúčeniny pripravené podľa všeobecnej metódy C, zahŕňajú:
Zlúčenina č. R3 R1 ESMS m/z
7234 oMePUPA-Leu Cl -o 831.1 (M+H+)
Zlúčeniny pripravené podľa všeobecnej metódy D, zahŕňajú:
1------------------------------------------------------------------------------ ------------------- Zlúčenina č. R1 ESMS m/z
7092 ...X A 875.8 (M+H+)
7181 Ä X 833.1 (M+H+)
7398 Cl X 832.1 (M+H+)
7662 ΓΊ 1 A 750.1 (M+H+)
8221 Cl X 832.9 (M+H+)
Zlúčenina č. R1 ESMS m/z
8341 o2s^^ >·<·'...... 750.0 (M+H+)
9120 852.2 (M+H+)
9169 rO 881.4 (M+H+)
9171 CHj XA A 791.3 (M+H+)
9182 „xr X 775.5 (M+H+)
Zlúčenina č. R1 ESMS m/z
9264 a 764.2 (M+H+)

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčenina všeobecného vzorca
    R3-L-ľ-R‘ kde
    R1 je prípadne substituovaný pyrolidinyl-SO2-fenyl, kde prípadným substituentom je alkylová skupina obsahujúca 1 až 10 atómov uhlíka alebo halogén
    Ľ má všeobecný vzorec (iv) kde Y1 je -NH-CO-, R2 je H, Y2 je väzba a X je COOH; L má všeobecný vzorec (v) (v), kde Y3 je -(CH2)o_5-, Y4 je -CO-NH-; a
    R3 má nasledujúci všeobecný vzorec -R4-Y’-N(R5)-CH(R6)-, kde R6 je postranný reťazec leucínu alebo izoleucínu; R5 je atóm vodíka alebo metylová skupina, Y5 je C(=O)- a R4 je o-metylfenyl-ureido-fenyl-CH2; alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
  2. 2. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej R5 je H.
  3. 3. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej R5 je metylová skupina.
  4. 4. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej fenyl je substituovaný.
  5. 5. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej fenyl je nesubstituovaný.
  6. 6. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5, kde uvedená zlúčenina je
    5192, kyselina 2S-{[l-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-í>-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    5283, kyselina 2S-{[l-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}-3-(4-metyl-2S-{2-[4-(3-t>-tolylureido)fenyl]acetylamino)pentanoylamino)propánová,
    6714, kyselina 2S-{[l-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)pyrolidm-2S-karbonyl]amino}-3-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]propánová,
    7234, kyselina 2S-{[l-(3,5-dichlór-benzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}-6-(4-metyl-2S-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetylamino}pentanoylamino)hexánová,
    7662, kyselina 2S-[(l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]--4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8221, kyselina 2S-{[l-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)-2-metylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyI]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová
    8341, kyselina 2S-[( 1 -benzénsulfonylpyrolidín-2R-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8342, kyselina 2R-[(l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}-amino)pentanoylamino]butánová,
    8343, kyselina 2R-[(l-benzénsulfonylpyrolidín-2R-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(nietyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8367, kyselina 2S-[(l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2R-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8368, kyselina 2S-[(l-benzénsulfonylpyrolidín-2R-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2R-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8469, kyselina 2S- {[ 1 -(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)-pyrolidín-2S-karbonyl] amino} -4-(4-metyl-2S- {2- [4-(3 -o-tolylureidojfenyl] acetylamino} pentanoylamino)butánová,
    8491, kyselina 2S-[(l-benzénsulfonyl-2-metylpyrolidm-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl} amino)pentanoylamino]butánová, alebo
    9264, kyselina 2S-[2-(l-benzénsulfonylpyrolidin-2S-yl)acetylamino]-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová.
  7. 7. Zlúčenina podľa nároku 6, kde uvedená zlúčenina je zlúčenina č. 5192, kyselina 2S-{[I-(3,5-dichlórbenzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová.
  8. 8. Zlúčenina, ktorou je
    8685, kyselina 2S-[(l-benzénsulfonyl-4R-benzyloxykarbonylaminopyrolidm-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová
    8689, kyselina 2S-[(4R-amino-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8690, kyselina 2S-{[4R-(6-amino-hexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl {2- [4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl} amino)pentanoylamino]butánová,
    8749, konjugát 20K PEG-SPA a kyseliny 2S-{[4S-(6-amino-hexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánovej,
    8758 konjugát 20K PEG-SPA a kyseliny 2S-[(4S-amino-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánovej,
    8796, kyselina 2S-({l-benzénsulfonyl-4R-[2-(4-hydroxyfenyl)acetylamino]pyrolidín-2S-karbonyl}amino)-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8797, kyselina 2S-({l-benzénsulfonyl-4R-[3-(4-hydroxyfenyl)propionylamino]pyrolidín-2S-karbonyl}amino)-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    8809, konjugát 20K PEG-SPA a kyseliny 2S-[(4R-amino-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4- [4-metyl-2S-(metyl- {2-[4-(3 -o-tolylureido)fenyl] acetyl} amino)pentanoylamino]butánovej,
    9120, kyselina 4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]-2S-{[l-(4-(E)styrylbenzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}butánová,
    9169, kyselina 4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]-2S-({l-[4-(l-oxo-l,3-dihydroizoindol-2-yl)benzénsulfonyl]pyrolidín-2S-karbonyl}amino)butánová,
    9171, kyselina 2S-{[l-(4-acetylbenzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová,
    9182, kyselina 4-[4-metyl-2S-(metyl- {2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl} amino)pentanoylamino]-2S- {[ 1 -(4-vinyl-benzénsulfonyl)pyrolidín-2S-karbonyl]amino}butánová,
    9227, konjugát 30K PEG-SPA a kyseliny 2S-{[(4R-(6-amino)hexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl-{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylaniino]butánovej,
    9315, konjugát 50K PEG-SPA a kyseliny 2S-{[(4R-(6-amino)hexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánovej,
    9418, konjugát 20K PEG-SPA a kyseliny 2S-{[(4R-(6-amino)hexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánovej,
    8723, kyselina 2S-{[4S-(6-aminohexanoylamino)-l-benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl]amino}-4-[4-metyl-2S-(metyl{2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]-acetyl}amino)pentanoylamino]butánová, alebo
    8746, kyselina 2S-[(4S-amino-1 -benzénsulfonylpyrolidín-2S-karbonyl)amino]-4-[4-metyl-2S-(metyl- {2-[4-(3-o-tolylureido)fenyl]acetyl}amino)pentanoylamino]butánová.
  9. 9. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, kde zlúčenina je modifikovaná polyetylénglykolom.
  10. 10. Kompozícia obsahujúca farmaceutický nosič a zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9.
SK215-2002A 1999-08-13 2000-08-14 Inhibítory bunkovej adhézie a farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú SK287075B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14884599P 1999-08-13 1999-08-13
PCT/US2000/022285 WO2001012186A1 (en) 1999-08-13 2000-08-14 Cell adhesion inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK2152002A3 SK2152002A3 (en) 2002-07-02
SK287075B6 true SK287075B6 (sk) 2009-11-05

Family

ID=22527673

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK215-2002A SK287075B6 (sk) 1999-08-13 2000-08-14 Inhibítory bunkovej adhézie a farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú

Country Status (31)

Country Link
US (3) US6630503B1 (sk)
EP (2) EP1265606B9 (sk)
JP (1) JP2003506491A (sk)
KR (1) KR100720907B1 (sk)
CN (1) CN1377268A (sk)
AT (1) ATE343383T1 (sk)
AU (1) AU780610B2 (sk)
BG (1) BG65755B1 (sk)
BR (1) BR0013248A (sk)
CA (1) CA2380817A1 (sk)
CY (1) CY1105912T1 (sk)
CZ (1) CZ2002518A3 (sk)
DE (1) DE60031577T2 (sk)
DK (1) DK1265606T3 (sk)
EA (1) EA005578B1 (sk)
EE (1) EE200200070A (sk)
ES (1) ES2270868T3 (sk)
GE (2) GEP20053477B (sk)
HU (1) HUP0202469A3 (sk)
IL (2) IL148014A0 (sk)
IS (1) IS6257A (sk)
MX (1) MXPA02001449A (sk)
NO (1) NO324044B1 (sk)
NZ (1) NZ517011A (sk)
PL (1) PL354063A1 (sk)
PT (1) PT1265606E (sk)
RS (1) RS50470B (sk)
SK (1) SK287075B6 (sk)
UA (1) UA75581C2 (sk)
WO (1) WO2001012186A1 (sk)
ZA (1) ZA200201158B (sk)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7618630B2 (en) 1998-09-14 2009-11-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of treating multiple myeloma and myeloma-induced bone resorption using integrin antagonists
WO2001012186A1 (en) * 1999-08-13 2001-02-22 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
DE10006453A1 (de) * 2000-02-14 2001-08-16 Bayer Ag Piperidylcarbonsäuren als Integrinantagonisten
RU2290403C2 (ru) 2000-12-28 2006-12-27 Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. Ингибиторы vla-4
JP2002201168A (ja) * 2000-12-28 2002-07-16 Kaken Pharmaceut Co Ltd シクロヘキサン誘導体
JP2004526733A (ja) * 2001-03-20 2004-09-02 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 強力な細胞接着阻害剤としての置換ｎ−アリールスルホニル−プロリン誘導体
US6663489B2 (en) 2001-08-24 2003-12-16 Igt Gaming device having an award distributor and an award accumulator bonus game
ES2197003B1 (es) * 2002-04-08 2005-03-16 J. URIACH &amp; CIA S.A. Nuevos compuestos antagonistas de integrinas alfa.
US7691894B2 (en) 2003-07-24 2010-04-06 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Cyclohexanecarboxylic acid compound
WO2005070921A1 (en) * 2004-01-23 2005-08-04 Elan Pharmaceuticals, Inc. Polyethylene glycol conjugates of heterocycloalkyl carboxamido propanoic acids
EA012433B1 (ru) * 2004-07-08 2009-10-30 Элан Фармасьютикалз, Инк. Многовалентные vla-4 антагонисты, содержащие полимерные фрагменты
US7196112B2 (en) * 2004-07-16 2007-03-27 Biogen Idec Ma Inc. Cell adhesion inhibitors
US7915316B2 (en) * 2005-08-22 2011-03-29 Allergan, Inc Sulfonamides
JP5114202B2 (ja) 2005-09-27 2013-01-09 塩野義製薬株式会社 Ｐｇｄ２受容体アンタゴニスト活性を有するスルホンアミド誘導体
PL1948678T3 (pl) * 2005-11-09 2013-09-30 Onyx Therapeutics Inc Związki do hamowania enzymów
CA2659463A1 (en) * 2006-08-02 2008-02-07 Genzyme Corporation Combination therapy
TW200817319A (en) 2006-08-10 2008-04-16 Astellas Pharma Inc Sulfonamide compound or salt thereof
WO2008103378A2 (en) 2007-02-20 2008-08-28 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating multiple sclerosis by administration of alpha-fetoprotein in combination with an integrin antagonist
NZ589086A (en) 2008-04-11 2012-09-28 Merrimack Pharmaceuticals Inc Human serum albumin (HSA) linkers and conjugates thereof
US8927694B2 (en) 2008-11-18 2015-01-06 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Human serum albumin linkers and conjugates thereof
WO2014036520A1 (en) 2012-08-30 2014-03-06 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies comprising anti-erbb3 agents
WO2015171558A2 (en) 2014-05-05 2015-11-12 Lycera Corporation BENZENESULFONAMIDO AND RELATED COMPOUNDS FOR USE AS AGONISTS OF RORγ AND THE TREATEMENT OF DISEASE
AU2015256190B2 (en) 2014-05-05 2019-08-15 Lycera Corporation Tetrahydroquinoline sulfonamide and related compounds for use as agonists of rory and the treatment of disease
JP2018515491A (ja) 2015-05-05 2018-06-14 リセラ・コーポレイションＬｙｃｅｒａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ＲＯＲγの作動薬及び疾患の療法として使用するジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジンスルホンアミド及び関連化合物
EP3307738B1 (en) 2015-06-11 2022-04-20 The Regents of the University of Michigan Aryl dihydro-2h-benzo[b][1,4]oxazine sulfonamide and related compounds for use as agonists of rory and the treatment of disease
EP3436046A4 (en) * 2016-04-01 2020-03-11 The Regents of The University of California INTEGRIN ALPHA 5 BETA 1 INHIBITORS AND METHOD FOR USE THEREOF
CN109721605B (zh) * 2017-10-31 2022-03-11 维眸生物科技（上海）有限公司 一种免疫细胞迁徙抑制剂
US11760701B2 (en) 2018-02-27 2023-09-19 The Research Foundation For The State University Of New Yrok Difluoromethoxylation and trifluoromethoxylation compositions and methods for synthesizing same
EP3873897B1 (en) 2018-10-30 2024-08-14 Gilead Sciences, Inc. N-benzoyl-phenylalanine derivatives as alpha4beta7 integrin inhibitors for treating inflammatory diseases
PL3873900T3 (pl) 2018-10-30 2025-06-02 Gilead Sciences, Inc. Imidazo[1,2-a]pirydynowe pochodne jako inhibitory integryny alpha4beta7 do leczenia chorób zapalnych
LT3873884T (lt) 2018-10-30 2025-03-10 Gilead Sciences, Inc. 3-(chinolin-8-il)-1,4-dihidropirido[3,4-d]pirimidin-2,4-diono dariniai kaip alfa4beta7 integrino inhibitoriai, skirti uždegiminių ligų gydymui
KR102659859B1 (ko) 2018-10-30 2024-04-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 알파4β7 인테그린의 억제를 위한 화합물
EP4013499A1 (en) 2019-08-14 2022-06-22 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of alpha 4 beta 7 integrin
CA3224494A1 (en) 2021-07-09 2023-01-12 Koen Vandyck Anti-viral compounds
US12065428B2 (en) 2021-09-17 2024-08-20 Aligos Therapeutics, Inc. Anti-viral compounds

Family Cites Families (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1149971B (it) 1979-06-11 1986-12-10 Syntex Inc Derivati nonapeptide e decapeptide dell'ormone che rilascia l'ormone luteinizzante
US4725583A (en) 1985-01-23 1988-02-16 Abbott Laboratories Functionalized peptidylaminoalcohols
US4826815A (en) 1985-05-17 1989-05-02 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
GB2218102B (en) 1988-04-08 1992-09-16 Sandoz Ltd Calcitonin peptide derivatives
ES2030974T3 (es) 1988-07-21 1992-11-16 Pfizer Inc. Proceso de preparado de sustitutos de guaniltioureas.
US4908360A (en) 1988-11-14 1990-03-13 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. 1-aminoalkyl-3-oxysubstituted-4-aryl-1,3,4,5-tetrahydro-2H-1,3-benzodiazepine-2-ones
US5272263A (en) 1989-04-28 1993-12-21 Biogen, Inc. DNA sequences encoding vascular cell adhesion molecules (VCAMS)
US5196404B1 (en) 1989-08-18 1996-09-10 Biogen Inc Inhibitors of thrombin
EP0506748B1 (en) 1989-12-22 1995-12-13 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Amino acids, peptides or derivatives thereof coupled to fats
CA2043741C (en) 1990-06-07 2003-04-01 Kiyofumi Ishikawa Endothelin antagonistic peptide derivatives
US5192746A (en) 1990-07-09 1993-03-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Cyclic cell adhesion modulation compounds
US5260277A (en) 1990-09-10 1993-11-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
WO1992008464A1 (en) 1990-11-15 1992-05-29 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. Substituted urea and related cell adhesion modulation compounds
BR9206142A (pt) 1991-06-11 1994-12-27 Blood Res Center Molécula de adesão intercelular-3 e seus ligantes de aglutinação
CA2071674C (en) 1991-06-21 2003-08-19 Kevin T. Chapman Peptidyl derivatives as inhibitors of interleukin-1.beta. converting enzyme
US5250679A (en) 1991-10-18 1993-10-05 Genentech, Inc. Nonpeptidyl platelet aggregation inhibitors having specificity for the GPIIb III.sub. receptor
WO1993008823A1 (en) 1991-11-06 1993-05-13 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
AU3141693A (en) 1991-11-22 1993-06-15 Friedman, Mark M. Non-peptidic surrogates of the arg-gly-asp sequence and pharmaceutical compositions comprising them
AU3420693A (en) 1991-12-24 1993-07-28 Fred Hutchinson Cancer Research Center Competitive inhibition of high-avidity alpha4-beta1 receptor using tripeptide ldv
DE4212304A1 (de) 1992-04-13 1993-10-14 Cassella Ag Asparaginsäurederivate, ihre Herstellung und Verwendung
IL102646A (en) 1992-07-26 1996-05-14 Yeda Res & Dev Non-peptidic surrogates of the ldv sequence and pharmaceutical compositions comprising them
CA2153228A1 (en) 1993-01-08 1994-07-21 Shiu-Lan Ng Chiang Peptide inhibitors of cell adhesion
US5314902A (en) 1993-01-27 1994-05-24 Monsanto Company Urea derivatives useful as platelet aggregation inhibitors
DE4309867A1 (de) 1993-03-26 1994-09-29 Cassella Ag Neue Harnstoffderivate, ihre Herstellung und Verwendung
WO1994023714A1 (fr) 1993-04-09 1994-10-27 Toyama Chemical Co., Ltd. Immunomodulateur, inhibiteur de l'adherence cellulaire, et agent permettant de traiter et de prevenir des maladies auto-immunes
AU693143B2 (en) 1993-12-06 1998-06-25 Cytel Corporation CS-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US5770573A (en) 1993-12-06 1998-06-23 Cytel Corporation CS-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US5434188A (en) 1994-03-07 1995-07-18 Warner-Lambert Company 1-ether and 1-thioether-naphthalene-2-carboxamides as inhibitors of cell adhesion and as inhibitors of the activation of HIV
US6306840B1 (en) * 1995-01-23 2001-10-23 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US6248713B1 (en) * 1995-07-11 2001-06-19 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
US5760028A (en) * 1995-12-22 1998-06-02 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Integrin receptor antagonists
AU1345697A (en) * 1995-12-22 1997-07-17 Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The Novel integrin receptor antagonists
US6185453B1 (en) * 1996-06-19 2001-02-06 Dupont Pharmaceuticals Company Iontophoretic delivery of integrin inhibitors
ES2271971T3 (es) 1996-07-25 2007-04-16 Biogen Idec Ma Inc. Inhibidores de la adhesion celular.
DE19647380A1 (de) 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag 5-Ring-Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19647381A1 (de) 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
AU6780398A (en) * 1997-03-28 1998-10-22 Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The Heterocyclic integrin inhibitor prodrugs
AU728435B2 (en) 1997-05-29 2001-01-11 Merck & Co., Inc. Sulfonamides as cell adhesion inhibitors
EP1001764A4 (en) 1997-05-29 2005-08-24 Merck & Co Inc HETEROCYCLIC AMIDE COMPOUNDS AS INHIBITORS OF CELL ADHESION
DE69833654T2 (de) 1997-05-29 2006-12-14 Merck & Co., Inc. (A New Jersey Corp.) Biarylalkansäuren in der verwendung als zelladhäsionsinhibitoren
ATE249421T1 (de) * 1997-06-23 2003-09-15 Tanabe Seiyaku Co Inhibitoren der alpha4-beta1 vermittelten zelladhäsion
CA2290747A1 (en) * 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
CN1265670A (zh) * 1997-07-31 2000-09-06 伊兰药品公司 抑制vla－4介导的白细胞粘附的二肽和相关的化合物
JP2001512139A (ja) * 1997-07-31 2001-08-21 エラン・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド Ｖｌａ−４が介在する白血球接着を阻害するスルホニル化ジペプチド化合物
CA2291475A1 (en) * 1997-07-31 1999-02-11 Elan Pharmaceuticals, Inc. Dipeptide compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4
HUP0004531A3 (en) * 1997-07-31 2001-12-28 American Home Prod 4-amino-phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by vla-4, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
CN1265669A (zh) 1997-07-31 2000-09-06 伊兰药品公司 抑制由vla－4介导的白细胞粘着的化合物
BR9811730B1 (pt) 1997-08-22 2014-04-08 Hoffmann La Roche Derivados de n-aroilfenilalanina, uso dos mesmos, medicamentos contendo os mesmos.
CN1276785A (zh) * 1997-08-22 2000-12-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 N－烷酰基苯丙氨酸衍生物
DE19741235A1 (de) * 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
AR013693A1 (es) * 1997-10-23 2001-01-10 Uriach & Cia Sa J Nuevas piperidinas y piperazinas como inhibidores de la agregacion plaquetaria
CN1327443A (zh) * 1997-10-31 2001-12-19 艾文蒂斯药品有限公司 取代的酰苯胺化合物
WO1999026923A1 (en) 1997-11-20 1999-06-03 Merck & Co., Inc. Para-aminomethylaryl carboxamide derivatives
AU1463499A (en) 1997-11-21 1999-06-15 Merck & Co., Inc. Substituted pyrrole derivatives as cell adhesion inhibitors
US6645939B1 (en) * 1997-11-24 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Substituted β-alanine derivatives as cell adhesion inhibitors
JP2001524465A (ja) * 1997-11-24 2001-12-04 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド 細胞接着阻害剤としての置換β−アラニン誘導体
EP1049693A1 (en) * 1997-11-26 2000-11-08 Du Pont Pharmaceuticals Company 1,3,4-THIADIAZOLES AND 1,3,4-OXADIAZOLES AS $g(a) v?$g(b) 3? ANTAGONISTS
US6197794B1 (en) * 1998-01-08 2001-03-06 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
US6329372B1 (en) * 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
JP2002504534A (ja) * 1998-02-26 2002-02-12 セルテック・セラピューティクス・リミテッド α４インテグリンの阻害剤としてのフェニルアラニン誘導体
ATE353640T1 (de) * 1998-03-27 2007-03-15 Genentech Inc Antagoniste zur behandlung von cd11/cd18 adhäsionsrezeptor-vermittelten krankheiten
PL198189B1 (pl) 1998-05-28 2008-06-30 Biogen Idec Ma (R)-N-{[4-{[(2-metylofenyloamino)-karbonylo]amino}fenylo]acetylo}-L-prolilo-3-metylo]-ß-alanina, jej zastosowanie i kompozycja farmaceutyczna ją zawierająca
TW591026B (en) * 1998-06-23 2004-06-11 Upjohn Co Inhibitors of alpha4beta1 mediated cell adhesion
US6303625B1 (en) * 1998-07-27 2001-10-16 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Triazolopyridines for the treatment of thrombosis disorders
US6331640B1 (en) * 1998-10-13 2001-12-18 Hoffmann-La Roche Inc. Diaminopropionic acid derivatives
ATE261932T1 (de) * 1998-12-22 2004-04-15 Tanabe Seiyaku Co Inhibitoren der alpha-4 beta-1 vermittelten zelladhäsion
EP1028114A1 (en) 1999-02-13 2000-08-16 Aventis Pharma Deutschland GmbH Novel guanidine derivatives as inhibitors of cell adhesion
DK1154987T3 (da) * 1999-02-18 2004-08-09 Hoffmann La Roche Phenylalaninolderivater
WO2001012186A1 (en) * 1999-08-13 2001-02-22 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
JP2001089448A (ja) * 1999-09-24 2001-04-03 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd アミド誘導体
US7196112B2 (en) * 2004-07-16 2007-03-27 Biogen Idec Ma Inc. Cell adhesion inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
YU9802A (sh) 2004-11-25
EP1265606A1 (en) 2002-12-18
RS50470B (sr) 2010-03-02
NO20020725D0 (no) 2002-02-13
NZ517011A (en) 2004-02-27
GEP20053477B (en) 2005-03-25
ATE343383T1 (de) 2006-11-15
DE60031577D1 (de) 2006-12-07
HK1051500A1 (en) 2003-08-08
WO2001012186A1 (en) 2001-02-22
HUP0202469A3 (en) 2004-06-28
IL148014A0 (en) 2002-09-12
CN1377268A (zh) 2002-10-30
AU780610B2 (en) 2005-04-07
BG65755B1 (bg) 2009-10-30
US20040132809A1 (en) 2004-07-08
EP1265606B9 (en) 2007-02-28
SK2152002A3 (en) 2002-07-02
CZ2002518A3 (cs) 2002-05-15
ZA200201158B (en) 2003-07-30
DE60031577T2 (de) 2007-08-23
EE200200070A (et) 2003-04-15
AU7058600A (en) 2001-03-13
DK1265606T3 (da) 2007-02-12
EP1741428A2 (en) 2007-01-10
BR0013248A (pt) 2002-07-23
GEP20063956B (en) 2006-11-10
JP2003506491A (ja) 2003-02-18
IL148014A (en) 2008-12-29
EA005578B1 (ru) 2005-04-28
KR20020019973A (ko) 2002-03-13
EP1741428A3 (en) 2007-05-09
NO324044B1 (no) 2007-07-30
CY1105912T1 (el) 2011-04-06
EA200200253A1 (ru) 2002-08-29
IS6257A (is) 2002-01-31
UA75581C2 (en) 2006-05-15
US7034043B2 (en) 2006-04-25
US6630503B1 (en) 2003-10-07
MXPA02001449A (es) 2002-07-02
CA2380817A1 (en) 2001-02-22
BG106510A (bg) 2002-10-31
US20060166961A1 (en) 2006-07-27
PT1265606E (pt) 2007-01-31
PL354063A1 (en) 2003-12-15
EP1265606A4 (en) 2002-12-18
KR100720907B1 (ko) 2007-05-25
ES2270868T3 (es) 2007-04-16
NO20020725L (no) 2002-04-08
EP1265606B1 (en) 2006-10-25
HUP0202469A2 (hu) 2002-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK287075B6 (sk) Inhibítory bunkovej adhézie a farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú
CZ23299A3 (cs) Inhibitory adheze buněk a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
US6495525B1 (en) VLA-4 inhibitor: oMePUPA-V
US7196112B2 (en) Cell adhesion inhibitors
US6686350B1 (en) Cell adhesion inhibitors
HK1051500B (en) Cell adhesion inhibitors
HK1099708A (en) Cell adhesion inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20100814