SA08290625B1 - مركبات حلقية غير متجانسة جديدة لتثبيط إنزيم كيناز البروتيني b - Google Patents

Abstract

B Novel Heterocyclic Compounds for the Inhibition of Protein Kinase B الملخـــص يتعلق الاختراع بمجموعة جديدة من المركبات ذات الصيغة (I) أو أملاح منها: (I) حيث Y، Z1، Z2، R1، R4، R5 وn هي كما تم وصفها في الوصف الكامل، حيث يمكن أن تكون مفيدة في علاج أو منع مرض أو حالة طبية يسببها انزيم protein kinase B (PKB) مثل السرطان. كما يتعلق الاختراع بتركيبات صيدلانية تشتمل على المركبات المذكورة، وطرق لعلاج الأمراض التي يسببها PKB باستخدام المركبات المذكورة، وطرق لتحضير المركبات ذات الصيغة (I). شكل ( 1 ) .

Description

YY -

B ‏مركبات حلقية غير متجانسة جديدة لتثبيط إنزيم كيناز البروتيني‎

Novel Heterocyclic Compounds for the Inhibition of Protein Kinase B ‏الوصف الكامل‎ خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بمجموعة جديدة من المركبات الحلقية غير المتجانسة ثنائية الحلقات التي يمكن أن تكون مفيدة في علاج أو منع مرض أو ‎alla‏ طبية يساهم فيها إنزيم 3 ‎protein kinase‏ ‎PKB‏ ؛ يعرف أيضاً باسم 167م. ولهذا فإن المركبات يمكن أن تفيد في علاج أو منع عدد من ‏© السرطانات المختلفة. كما يتعلق الاختراع بتركيبات صيدلانية تشتمل على المركبات المذكورة؛ ‏وبعمليات لتصنيع المركبات المذكورة؛ وبطرق لمعالجة الأمراض التي يساهم فيها ‎PKB‏ باستخدام ‏المركبات المذكورة. ‏يُعد ‎PKB‏ أحد مكونات مسار إصدار الإشارات لانزيم ‎phosphatidyl 3-kinase (PI3K)‏ الذي ‏يلعب دوراً هاماً في تكاثر الخلايا وقدرتها على الحياة؛ بما في ذلك الاستجابات الخلوية لمعاملات ‎Ve‏ النمو. وعند ربط معامل نمو؛ على سبيل ‎JU‏ معامل النمو للبشرة (2061)؛ بإنزيم ‎tyrosine‏ ‎kinase‏ لمستقبل سطح الخلية الخاص به؛ على سبيل المثال المستقبل 2017 ‎«(EGFR)‏ فإن ‏المستقبل يتحول إلى ‎dimerises‏ ويخضع للفسفرة الذاتية ‎autophosphorylation‏ . وتسمح هذه ‏الفسفرة الذاتية للوحدة الفرعية المنظمة ل ‎(P85) P13K‏ التي تعادل ‎Ao‏ كيلو دالتون بالتفاعل مع ‏المستقبل إما مباشرة أو عبر بروتين مهايئ؛ على سبيل المثال البروتين ¥ المرتبط بمستقبل معامل ‎٠‏ النمو ‎((GRB2)‏ وبالتالي يتم تنشيط الوحدة الفرعية الحفزية ل 01316 (0110) التي تعادل ‎٠١١‏ ‏كيلو دالتون. وبعد التنتشيطء تعمل 0110 على تحفيز فسفرة ‎catalyses phosphorylation‏ ‏(10ط) ‎phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate‏ لإنتاج : ‏دي

‎YY -‏ ا

‏روظاط) ‎phosphatidylinositol-3,4,5-triphosphate‏ ؛٠‏ وجزيء رسول ثانٍ يمد كل من اتزيم

‎phosphatidylinositol-dependent kinase 1 (PDK) and PKB‏ إلى غشاء البلازما حيث يقوم

‎.PKB phosphorylates and activates ‏بفسفرة وتنشيط‎ phosphatidylinositol

‏وتوجد ثلاث صور متماثلة معروفة ل ‎AKT2/PKBB <AKT1/PKBo) PKB‏ ى ‎«(AKT3/PKBy‏

‏© مشتقة من ثلاث جينات متميّزة. ويكون تنتشيط 171080 مصحيباً بأحداث إصدار الإشارات من ‎LAA)‏ التي تساهم في تكاثر الخلايا وبقائها على قيد الحياة؛ في حين يكون تنشيط م0108 مصحوباً بالغزو والتحرك والعمليات الأيضية التي يساهم ‎insulin le‏ . ويعمل ‎PKB‏ المنشط على

‏حماية الخلايا من التلاشي عن طريق تثبيط تنشيط عوامل تلاشي الخلية الطليعية» مثل عوامل الاستنساخ ‎«BAD‏ إنزيم ‎cprocaspase-9 and forkhead (FKHR)‏ وتنشيط عوامل الاستنساخ التي

‎٠‏ تعمل على الزيادة المتحكم ‎Led‏ في الجينات المضادة لتلاشي الخلية؛ مثل بروتين ربط عنصر الاستجابة ‎AMP‏ الحلقي ‎(CREB)‏ ويمكن أيضاً أن يساهم ‎PKB‏ في بقاء الخلية على قيد الحياة

‏عن طريق تثبيط تنشيط 3 عبر فسفرة ‎.MDM2 phosphorylation‏ وبالمتل؛ يقوم ‎PKB‏ المنشط

‏بحث تكاثر الخلايا عن طريق تنشيط البروتينات المساهمة في نمو وأيض الخلية؛ على سبيل المثال

‏عن طريق مسار يؤدي إلى تنشيط الهدف الثديي ‎je grapamycin (mTOR)‏ انزيم ‎glycogen‏

‎. synthase kinase-3 (GSK3) ٠

‏ولهذا فإن حث تكاثر الخلايا الذي يساهم فيه ‎PKB‏ وحمايتها من التلاشي يصب في مصلحة تكون الأورام والاضطرابات الجينية للمكونات داخل المسار 01316 التي تتواجد عادة في السرطان. على

‏سبيل المثال؛ تم العثور على حدوث تطفير أو تعديل للجينات التي تشفر الصور المتماثلة 7110 ل ‎P13K‏ في سرطانات الثدي ‎breast cancers‏ ؛ سرطان الأمعاء ‎bowel cancer‏ ؛ سرطان المبيض

‎head and neck and ‏سرطانات الرأس والرقبة والسرطانات الحرشفية العنقية‎ » ovarian cancer ٠

‏اما

_ ot

‎cervical squamous cancers‏ ؛ وسرطانات المعدة والرئة ‎gastric and lung cancers‏ ؛ وأورام الخلايا الدبقية العصبية قليلة الزوائد الناتجة عن ترقيع الأوعية ‎angioplastic oligodendrogliomas‏ » الأورام النجمية الناتجة عن تقويم انتفاخ القناة النصف دائرية في الأذن الداخلية ‎amaplastic‏ ‎astrocytomas‏ ¢ الورم ‎١‏ لأرومي الدبقي متعدد الأشكال. وا لأورام الأورمية الدبقية النخاعية

‎glioblastoma multiforme and medulloblastomas ©‏ وبالمثل؛ تم العثور على تطفير ؛ تكاثر؛ و/ أو فرط التعبير عن الجينات التي تشفر الصور المتماتلة ‎PKB‏ في الأورام التي تصيب البنكرياس ‎pancreatic‏ ¢ الثدي ‎cbreast‏ والمبيض ‎tumours‏ 190:ة017. ولهذاء يتم تنشيط نشاط الجين الذي يشفر ‎PTEN‏ (فوسفات يعلب دوراً معاكساً ‎«P13K J‏ ويحفز تحويل ‎PIP2‏ إلى ‎(PIP3‏ في الكثير من أنواع | لأورام ‎٠‏ وتشمل أورام المبيض ‎ovarian‏ ؛ القولون والمستقيم ‎colorectal‏ ؛ الثدي ‎breast‏ ؛

‎Ve‏ الورم الدبقي ‎glioma glioma‏ ¢ الورم الميلانيني الأسود ‎«melanoma melanoma‏ ورم الرئة

‎AKT/PKB ‏؛ سرطانات الدم» الأورام الليمفاوية؛ وهذا يؤدي إلى تنشبط‎ lung

‏وعلى ضوء أهمية مسار إصدار الإشارات 01316 في تكاثر الخلية الورمية وبقائها على قيد الحياة؛

‏فإن أي مركب يعوق هذا المسار ويعطله؛ ‎Ley‏ في ذلك مثبطات ‎PKB‏ يمكن أن يفيد في علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ . ولقد تم تقديم معلومات مفصلة عن مسار إصدار الإشارات

‎: ‏ومساهمته في توليد الأرقام بواسطة‎ 0136 VO

‎Hennessy et al., Nature Reviews / Drug Discovery (December 2005) Vol. 4, 988-1004.

‎and Cully et al, Nature reviews / Cancer (March 2006) Vol. 6, 184-192

‏ويعتقد أن قناة البوتاسيوم المعتمدة على الجهد والمشفرة بواسطة الجين البشري المتعلق ب ‎ether-a-‏ ‎(hERG) go-go-‏ تلعب دوراً رئيسياً في إعادة استقطاب جهد التأثير القلبي البطيني. ويمكن أن

‏عم

تؤدي التأثيرات التي تحدث في نشاطها إما بواسطة الطفرات الموروثة لمتوالية الجين أو التعديلات الدوائية إلى إطالة فترة استمرار جهد التأثير. وهذا يمكن أن يؤدي إلى إطالة فترة ال 07 المسجلة في إنسان على جهاز لرسم مخطط كهرباء ‎tall‏ والى حدوث اضطراب ممت محتمل في إيقا & ضربات القلب يعرف باسم : ‎(Vandenberg et al. (2001). Trends Pharmacol.

Sci. 22, 240-246) Torsades de Pointes ©‏ . وتنصح القواعد المنظمة الحالية ‎(CPMP/ICH/539/00)‏ بأن أية تجربة تتم في المختبر للتحري عن تأثيرات مركبات الاختبار على القناة ‎hERG‏ يمكن أن تمثتل أحد عناصر استراتيجية ما قبل العلاج الاكلينيكي التي تهدف إلى ‎all‏ باحتمالية إمكان قيام كيانات كيميائية جديدة بإطالة الفترة ‎QT‏ ‎٠‏ وفي هذه الحالة؛ يظل التخلص من النشاط الحاجب ل ‎hERG‏ أمراً مهماً في تطوير واستحداث أي عقار جديد. ولقد سبق وصف عدد من المركبات التي تستهدف المسار 01316. على سبيل المثال يصف كل من الطلب الدولي رقم ‎١١‏ . / »؟ والطلب الدولي ‎Astex Therapeutics ) Youll / EYE‏ ‎(Limited‏ مركبات ‎purinone «purine‏ « وعصممس(ةته»0 تشبط أو تعدّل من نشاط انزيم ‎protein kinase B (PKB) Vo‏ وانزيم ‎(PKA) A‏ ومع ذلك؛ تظل هناك حاجة لعوامل محسنة أخرى ذات فعالية فائقة ضد ‎PKB‏ و/ أو ذات خواص فيزيائية مفيدة ‎(Jia)‏ قابلية ذوبان أعلى في الماء؛ نفاذية ‎eet‏ و/ أو ارتباط أقل ببروتين البلازما) و أو صور سمية مفضلة ‎Jia)‏ ‘ احتمال حدوث أقل لحجب ‎(hERG‏ و أو صور أيضية مفضلة مقارنة بمثبطات ‎PKB‏ المعروفة الأخرى. عدي

01 =

ولقد اكتشف مقدمو الطلب بشكل مثير للاهتمام أن بعض المشتقات الحلقية غير المتجانسة ثنائية

الحلقات تكون فعالة بشكل خاص عند تثبيط نشاط ‎PKB‏ ولهذا يمكن أن تكون مفيدة في علاج

الحالات المرضية التي يساهم فيها نشاط ‎Jie (PKB‏ السرطان.

الوصف العام للا ختراع

وفقاً لسمة أولى لا ‎JA‏ | & ¢ ثم تقديم مركب لها 1 لصبغة 0 3 أو ملح مقبول صيد لانياً منه : يتن لج ‎N (CH),‏ ‎H‏ 1 ‎R‏ ‎R’ N‏ ‎yA NA‏ ‎Jy‏ ‎NTH‏ ‏@

حيث :

¢N ‏أو‎ CH ‏تمثل‎ 7

‎Ji 21-2‏ مجموعة يتم اختيارها من ‎CH = N «CH = (R6)C‏ و ‎¢N = (R6)C‏ حيث ‎R6‏ تمتل ‎trifluoromethyl » ethyl » methyl » cyano « bromo « chloro ¢ fluoro ¢ hydrogen Ye‏ أو

‎¢ cyclopropyl

‎an‏ صفر؛ ١أو‏ ؟؛

‏1 تمثل :

‎YAo)

‎Vv .‏ -— ‎Caalkyl, Cijalkoxy, methoxy( Salkyl fuoroCyalkyl. aminoCysalkyl. hvdroxyC.‏ ‎cyano, cyanoC Lsatkyl, Cy geyeloalkyl. -(CHy)NHCOCH;. -‏ .اتلد ‎(CH)NHSO,C Hz.

ACH), NHCONH,, (CH), NHCON RR, (CH), NR'R,‏ ‎(CH2)pSONHs, ~(CH2),CONHy. © Hy), CONR’R” or -(CH)),-R:‏ ‎dus ©‏ ‎AD‏ صفرء؛ ‎FY)‏ ‏2 تمثل ‎alkyl C1-3 Jui R3 ¢ 2-3 alkyl sl hydrogen‏ ¢ و ‎R7‏ تمثل ‎phenyl‏ ¢ 7 تمثل حلقة أريل غير متجانس أحادية ‎Le monocyclic heteroaryl ring‏ © أو 1 ذرات تشتمل على ‎HY)‏ ؟ ذرة غير متجانسة يتم اختيارها من ‎SS INO‏ ‎٠‏ 87 تمثل حلقة أحادية غير متجانسة_ بها ؛ أو © أو 6 ذرات تشتمل على ‎١‏ 7 أو ؟ ذرة غير متجانسة يتم اختيارها من 0؛ 11 أو5 ؛ حيث 87 يحدث بها استبدال اختياري بواسطة ‎١‏ أو ¥ مجموعات استبدال يتم اختيارها من 1-4 ‎bromo « chloro ¢ fluoro ¢ alkoxy 01-4 « trifluoromethyl « alkyl‏ « و ‎cyano‏ ¢ 4 تمثل ‎cyano ¢« bromo « chloro « fluoro ¢ hydrogen‏ أو ‎trifluoromethyl‏ ¢ و 5ع تمثل ‎chloro ¢ fluoro « hydrogen‏ أو ‎bromo‏ . في أحد نماذج الاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة (1)؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه: عي

الى متلا 0 ‎R'‏ ‎Ory (CH),‏ ‎H‏ ‏0 ‎N‏ ‏1 ‏ب 77 لي ‎nt N‏ )0 حيث : 7 تمثل ‎«NICH‏ ‏1- 72 تمثل مجموعة يتم اختيارها من ‎N= CH 5 CH = N «CH = CH‏ © «هي صفرء ١أو‏ ؟؛و 1 تمثل : ‎or Cj ¢cycloalkyl‏ الطلق 0 مصتحطة ‎Calkyl,‏ ؛ ‎dua‏ ‏2 تمثل ‎hydrogen‏ أو ‎alkyl‏ 01-3 ؛ 3 تمثل 01-3 ‎alkyl‏ ؛ و ‎٠‏ «و و على حدة تمثل ‎XY‏ ‏وفي نموذج ‎AT‏ للاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة )1( ¢ أو ملح مقبول صيدلانياً منه: ‎YAO)‏

R' 0 nH,

N (CH,), 8 0

N

1 7 2 2 ‏تمل‎ ‏تت“‎ N 0 ‏حيث:‎ ‎«Nl CH ‏تمثل‎ 7 ¢N=CH ‏أ - 01 ر‎ «CH = CH ‏تمثل مجموعة يتم اختيارها من‎ 72 -1 ‏؛ و‎ Cy4alkyl, aminoCi4alkyl or Ciecycloalkyl ‏تمثل‎ R1 ©

YY ‏هي صفرء‎ « ‏إلى 4 ذرة كربون بطول‎ ١ ‏يقصد به الاشارة إلى سلسلة كربون مشبعة بها‎ " 01-4 alkyl’ ‏تعبير‎ ‎" propyl’ Jie ‏المستقلة‎ alkyl ‏سلسلة مستقيمة أو متفرعة. ومع ذلك فإن الاشارة إلى مجموعات‎ t= Jie ‏متفرعة السلسلة‎ alkyl ‏تكون محددة للصورة المستقيمة للسلسلة فقط والاشارة إلى مجموعات‎ ‏تشمل‎ " 01-4 alkyl’ ‏تكون محددة محددة للصورة المتفرعة للسلسلة فقط. على سبيل المثال؛‎ butyl ٠ . t-butyl ‏و‎ isopropyl¢ propyl « ethyl صصعاطجلا‎ ‏إلى ؛ ذرة كربون بطول‎ ١ ‏يقصد به الاشارة إلى سلسلة كربون مشبعة بها‎ " alkoxy 01-4" ‏تعبير‎ ‏تشمل؛ على‎ ' alkoxy C1-6 "JE ‏على سبيل‎ . oxygen ‏سلسلة مستقيمة أو متفرعة؛ مرتبطة ب‎ .methoxy, ethoxy, propoxy and butoxy ‏سبيل المثال ¥ الحصرنء‎ ‏امي‎

‎٠ —_—‏ \ ب تعبير ‎fluoro Cl-4 alkyl’‏ " يقصد به الاشارة إلى سلسلة كربون مشبعة بها ‎١‏ إلى 4 ذرة كربون بطول سلسلة مستقيمة أو متفرعة؛ حيث تكون واحدة على الأقل من ذرات . ‎hydrogen‏ قد تم استبدالها بواسطة ‎fluoro‏ . على سبيل المثال» ‎fluoro 01-4 alkyl’‏ " تشمل؛ على سبيل المثال لا الحصر : ‎fluoromethyl, fluoroethyl, fluoropropyl, fluoroisopropyl, fluorobutyl, fluoroisobutyl, °‏ ‎fluoro-tert-butyl, trifluoromethyl, pentafluoroethyl, heptafluoropropyl and‏ ‎nonafluorobutyl.‏ ‏تعبير ‎alkyl s amine’‏ 01-4 " يقصد به الاشارة إلى سلسلة كربون مشبعة بها ‎١‏ إلى ؛ ذرة كربون بطول سلسلة مستقيمة أو متفرعة؛ تشتمل على مجموعة ‎amine‏ و أولية واحدة. على سبيل المثال " ‎amine | ٠‏ وأوللة 01-4 " تشمل : ‎“aminoC alkyl” includes aminomethyl, aminoethyl, 2-aminopropyl , 3-aminopropyl, 1-‏ ‎aminoisopropyl and 4-aminobutyl.‏ تعبير " هيدروكسي ‎alkyl‏ 014 " يقصد به الاشارة إلى سلسلة كربون مشبعة بها ‎١‏ إلى ¢ ذرة كربون بطول سلسلة مستقيمة أو متفرعة؛ تشتمل على مجموعة ‎hydroxyl‏ . على سبيل المثال: ‎“hydroxyC.salkyl” includes hydroxymethyl, hydroxyethyl, 2-hydroxypropyl , 3- \o‏ ‎hydroxypropyl, 1-hydroxyisopropyl and 4-hydroxybutyl.‏ تعبير " 63-6 ‎cycloalkyl‏ " يقصد به الاشارة إلى حلقة كربون أحادية مشبعة بها ؟ إلى 6 ذرات. على سبيل المثال : عدي

‎١١ -‏ ‎.cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl Jedd" cycloalkyl C3-6 ١‏ تعبير " حلقة ‎Jol‏ غير متجانس " يقصد به الاشارة إلى حلقة أحادية عطرية غير مشبعة تماماً بها 2 إلى 1 ذرات تشتمل على ‎١‏ أو ‎V‏ 30 غير متجانسة تختار كل منها على حدة من ‎nitrogen‏ ¢ ‎oxygen‏ أو الكبريت ‎sulphur sulfur‏ ¢ مرتبطة عبر ذرة كربون الحلقة أو ذرة ‎asl nitrogen‏ © عندما يكون الارتباط من ‎ies nitrogen‏ على سبيل المثال؛ لا يكون الارتباط من ‎nitrogen‏ ‎Lites‏ في حلقة ‎pyridine‏ ¢ ولكن يكون الارتباط ممكناً من ‎nitrogen‏ عند الموضع ‎١‏ لحلقة بيرازول. وتشتمل أمثلة حلقات الأريل غير متجانس التي بها © إلى 16 ذرات؛ على سبيل المثال لا الحصرء على : ‎pyrrole. furan, imidazole. triazole. tetrazole. pyrazine. pyrimidine, pyridazine. pyridine,‏ ‎pyrazole. isoxazole. oxazole. 1.2.4 oxadiazole. isothiazole. thiazole. 1.2. 4-triazole and ٠٠١‏ ‎thiophene.‏ ‏تعبير " حلقة غير متجانسة " يقصد به الاشارة إلى ‎dala‏ أحادية مشبعة كلياً أو جزئياً بها ‎of‏ أو 1 ذرات وتشتمل على ‎١‏ ؟ أو ؟ ذرة غير متجانسة يتم اختيارها من ‎oxygen » nitrogen‏ أو الكبريت ‎sulfur‏ مرتبطة عبر ذرة كربون الحلقة أو ذرة ‎nitrogen‏ الحلقة. أمثلة الحلقات غير المتجانسة التي ‎Ye‏ بها ‎of‏ © أو 1 ذرات تشمل : ‎azetidine. tetrahvdrofuran. tetrahydropyran, pyrroline, pyrrolidine, thiazolidine,‏ ‎morpholine. piperidine. piperazine. dihydropyridine. dihydropyrimidine and azepane.‏ وفى نماذج أخرى للاختراع؛ ‎JS‏ من التعريفات الآتية ل ‎Y‏ ¢ 21- 272 اقل فال كال ‎p sn «R6‏ في الفقرات ‎)١(‏ إلى ‎(Ye)‏ قد يتم استخدامها من الآن فصاعداً بمفردها أوفي توليفة مع أحد دما

١٠١ - ‏حسب‎ (IB) ‏و/أو‎ (1A) ‏التعريفات الأخرى الآتية للحد من المجال الواسع لتعريف الصيغ )1( و/أو‎ ‏الحاجة.‎ ‎IN ‏تمتل‎ Y «CH = CH Jw 71-2 ¢«CH = (Br)C ‏تمثل‎ 21-22 © ¢ C.4alkyl ‏تمثل‎ R1 ¢ aminoC.4alkyl ‏تمثل‎ 1 ¢ hydroxyCj.salkyl ‏تمثل‎ R1 ¢ cycloalkyl C3-6 ‏1ج تمثل‎ : ‏تمثل‎ 8100 ٠ methoxvC 1-dalkyl. fluoroC1-4alkyvl. _aminoCl-4alkyl. ‏حيط‎ -dalkyl. cyanoCl- alkyl. C3-6eveloalkyl, «(CH2)pNHCOCH3 {(CH2)pNHSO2CH3, - (CH2)pNHCONH?2, -(CH2)pNHCONRZ2R3. CH2)pNR2R3. -(CH2)pSO2NH2,

R7 ‏حيث‎ (R7-(CH2)p — Jaa <(CH2 )pCONH2. -) CH2)pCONR2R3 or -(Cl [2)p-R7:R1 : ‏يتم اختيارها من‎ yo phenvl. piperidinyl, piperazinyl. pyrrolidinyl. morpholinyl, imidazolyl, isoxazolyl, pyrazolyl and thiazolvl . ‏مما‎

‎١١‏ هه و ‎RT‏ يحدث بها استبدال اختياري بواسطة مجموعة ‎methyl‏ واحدة؛ 1 تمثل ‎hydroxyethyl‏ ؛ ‎AN‏ صفر؛ ‎n‏ هي ١؛‏ ‎an ©‏ ١أو‏ ؟؛ 3 هي صفر أو 1 0 هي ١ء‏ أو ؟؛ 4 تمثل ‎bromo « chloro‏ أو ‎cyano‏ ؛ ‎R4‏ تمثل ‎bromo « chloro‏ ؛ ‎٠‏ 4ق تمثل ‎chloro‏ ¢ ‎R4‏ تمثل ‎bromo‏ ¢ ‎RS‏ تمثل ‎hydrogen‏ ¢ ‎RS‏ تمثل ‎chloro‏ ¢ ‎R6‏ تمثل ‎hydrogen‏ ¢ ‎٠‏ | 86 تمثل ‎bromo‏ ¢ دم

Ng . methyl ‏تمثل‎ R6 ‏حيث‎ Ada wy ‏أو ملح مقبول صيد‎ ‘ (I) ‏للاختراع ¢ ثم تقديم مركب له الصيغة‎ al z ‏ووفقاً لنموذ‎ ‏هو:‎ ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxamide; © (S)-4-amino-N-(1 -(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine- 4-carboxamide; 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4-yl)piperidine- 4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-((4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methyl)-1 -(7TH-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; ٠١ 4-amino-N-(2-amino-1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; ‏دما‎

— Yo (S)-4-(aminomethyl)-N-(1 -(4-chlorophenyl)ethy!)-1-(7H-pyrrolo[2.3 -dlpyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4 -hydroxybutyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1 -(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- © yl)piperidine-4-carboxamide; (R)-4-amino-N-(1 -(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1 -(7H-pyrrolo[2.3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; ٠٠١ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide;

N-(3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propyl)-4-amino-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-(1-(4-chloropheny!)-3-(dimethylamino)propyl)-1 -(TH-pyrrolo[2,3- Vo d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethyl amino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide;

YAN

At - (R)-4-amino-N-(1 -(4-chlorophenyl)-3 -(dimethylamino)propyl)-1 -(7TH-pyrrolo{2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxamide; 4-(aminomethyl)-N-(1-(4 -chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H -pyrrolof2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-c arboxamide; 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo{2,3 -d]pyrimidin-4- © yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-(3-amino-1 -(4-chlorophenyl)propyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (R)-4-amino-N-(1-(4- chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrro l0[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; ٠١ (R)-4-amino-N-(1 -(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (R)-4-(aminomethyl)-N-(1 -(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-cyanophenyl)-3 -hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- ١ yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-1-(5-bromo-7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-y1)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3- hydroxypropy!)piperidine-4 carboxamide;

YA©o)

١١ - (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropyl)-1-(1H-pyrazolo[3,4-d|pyrimidin- 4-yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(3-hydroxy-1 -phenylpropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropy!)-1-(9H-purin-6-yl)piperidine-4- © carboxamide; (S)-4-(aminomethy!)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-bromophenyl)-3 -hydroxypropy!)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide; Yo 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-(dimethylamino)butyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(diethylamino)propyl)-1 -(7H-pyrrolof2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(5-c yclopropyl-7H-pyrrolo[2,3- Yo d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide;-o¢ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; ‏امي‎

— YA — 4-amino-1-(3-bromo-1H-pyrazolo]3.4-d] pyrimidin-4-y1)-N-{(15)-1-(4- chlorophenvhethyl Ipiperidine-4-carboxami de: 4-amino-N-[ 1-(4-chlorophenyl)-2-(11 1-pyrazol-1-yhethyl]-1-(7H -pyrrolof2.3- d|pyrimidin-4-vl )piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(18)-1-(4-chlorophenyDethyl]-1 -(3-chloro-7H-pyrrolo[2.3-d]pyrimid in-4- © yv])piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-{(1S)-1-(4-¢ hlorophenvl)-3 -(4-methylpiperazin-1-ylpropvl]-1 -(7H- pyrrolo[2.3-dlpyrim idin-4-vl)piperidine-4-carboxam ide: 4-amino-N-|1-(4-chlorophenyl)-4-pyrrolidin-1 -vibutyl]-1-{ 7H-pyrrolo[2.3-d|pyrimidin- 4-v] )piperidine-4-carboxamide: ٠١ 4-amino-N-[(1S)-1-(4-chlorophenyl)-3 -hvdroxy-3-methylbutyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3- d]pyrimidin-4-vl )piperidi ne-4-carboxamide: 4-amino-1-(3-bromo-1H-pyrazolo[3.4-d [pyvrimidin-4-y1}-N-[ (15)-1-( 4-chlorophenyl)-3- hydroxypropyilp iperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(1S)-1-(4-chlorophenyl )-3-hydroxypropyl]-1-(5-chloro-7H- vrrolo{2.3- Vo d]pyrimidin-4-yl )piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(1S)-1-(4-¢ yanophenyhethyl]-1-(711 -pyrrolo[2.3-d]pyrimidin-4- yl )piperidine-4-carboxamide: ‏عم‎

١١ - 4-amino-N-[(18)-1-(3-chlorophenyl)-3-hvd roxypropyl|-1-(7H-pyrrolo[2.3-d pyrimidin- 4-yD)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[1-(4-chlorophenvi)-2-(11 J-imidazol-2-vhethyi]-1-(71-pyrrolo|2.3- d]pyrimidin-4-vl)piperidi ne-4-carboxamide: 4-amino-1-(3-bromo-7H-pyrrolo|2.3-d Jpyrimidin-4-v1)-N-[(1 S)-1-(4- ° chlorophenyl)ethylipiperi dine-4-carboxamide: 4-amino-N-[1-(4-chlorophenvl)-2-(3 -methvlisoxazol-5-vDethyl]-1-(7H-pyrrolof2.3- dpyrimidin-4-vDpiperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(1R)-1-(4-bromophenvlethyl|-1-(7 H-pyrrolo[2.3-d]pyrimidin-4- vl)piperidine-4-carboxamide; ٠١ 4-amino-N-[ 1-(4-chlorophenyl)-2-(1.3-thiazol-2-ylethyl|-1-(7 H-pyrrolo[2.3- d]pyrimidin-4-yl )piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(1S)-1-(4-chlorophenyl)-3 -morpholin-4-ylpropyl]-1-(7H-pyrrolo}2.3- d]pyrimidin-4-yDpiperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(18)-1-(4-chlorophenvl)-3-piperidin-1-vip ropyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3- \o dlpyrimidin-4-vl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(18)-1-(4-chlorophenyl)-3-piperazin-1-ylpropy H-1-(7H-pyrrolo]2.3- d]pyrimidin-4-yl)piperidi ne-4-carboxamide: ‏عدي‎

_ Y ٠ — 4-amino-N-[(1S)-1-(4-chloropheny])-3-(1 I1-imidazol-1-vl)propvl]-1-(7H-pyrrolo]2.3- dlpvrimidin-4-yDpiperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-[{18)-1-(4-chlorophenyl)-3-pyvrrolidin-1-vIpropyl}-1-(7H-pyrrolo] 2.3- d]pyrimidin-4-vl)piperidine-4-carboxam ide: 4-amino-N-[1-(4-chlorophenyl)-4-piperidin- 1 -ylbutyl]-1-(7H-pyrro lo[2.3-d]pyrimidin-4- © yl)piperidine-4-carboxamide: (S)-4-amino-N-[ 1-(4-chloropheny-4-piperidin- 1 -ylbutyl}-1-(7H-pyrrolo} 2.3- d]pvrimidin-4-vl )piperidine-4-carboxamide:; (R)-4-amino-N-[ 1 -(4-chlorophenyl)-4-piperidin-1-ylbutvl]-1-(71i-pyrrolof2.3- dlpvrimidin-4-vl)piperidine-4-carboxamide: ٠١ 4-amino-N-[1-(4-chlorophenyl)-4-morpholin-4-ylbutyl]-1-(7H-pyrrolo 2.3-d]pyrimidin- 4-yl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[1-(d-chlorophenyl)-2-phenylethyl]-1-(7H-pyrrolo| 2.3-d |pyrimidin-4- yhpiperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[1-(4-chlorophenyl)-3-methoxypropyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3-d]pyrimidin-4- ١ vhpiperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-| 1-(4-chlorophenyi)-3-sulfamoylpropyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3-d [pyrimidin-4- vhpiperidine-4-carboxamide: ‏دي‎ ov —

4-amino-N-|3-amino- 1 -(4-chlorophenyl)-3-oxopropyl]-1-(7H-pvrrolo|2.3-d |pyrimidin- 4-vl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[3-(carbamoylamino)-1-(4-chlorophenyl)propyl]-1-(7Hi-pyrrolo]2.3- d]pvrimidin-4-vD)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-| 1-(4-chlorophenvh)-2-cvanoethyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3-d |pyrimidin-4- © yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-[ 1-(4-tluorophenybethyl]-1-(7H-pyrrolo|2.3-d|pyrimidin-4-vl)piperidine-4- carboxamide: 4-amino-N-[(4-chlorophenyl)(cyano)methyl]-1-(7H-pyrrolo[2.3-d [pyrimidin-4- vpiperidine-4-carboxamide; AE 4-amino-N-[ 1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)-3-oxopropyt]-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-{ 1 -(4-chlorophenvl)-3-[{methvlsulfonyl)amino|propyl } -1-(7H-pyrrolo[2.3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-[(1S)-1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropvl]-1-(5-methyl-7H-pyrrolo[2.3- Vo d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[(4-chloropheny)(phenyl)methyl]-1-(7H-pvrrolo[2.3-d]pyrimidin-4- vDpiperidine-4-carboxamide:

عدي

0 77 _— 4-amino-N-[(18)-1-(4-chlorophenylethyl]-1-(5-methyl-7H-pyrrolof2.3 -d]pyvrimidin-4- vl)piperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-[ 1 -(4-chlorophenyl)-2-[(methvlsulfonylamino ethyl} -1-(7H-pyrrolo[2.3- d]pvrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide; 4-amino-N-{ 1-(4-chlorophenyl)-2-sulfamoylethyl]-1-(7H-pyrrolo| 2.3-d [pyrimidin-4- 5 ‏بع تسم 4-0810 191017( ألا‎ 4-amino-N-|2-amino- 1 -(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl|-1-(7H-pyrrolo[2.3-d|pyrimidin-4- vhpiperidine-4-carboxamide: 4-amino-N-(1-phenvlethyl)-1-(7H-pyrrolo[2.3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxamide: ٠١

N-[2-(acetylamino)-1-(4-chlorophenylethyl]-4-amino-1-(7H-pyrrolo| 23-0 |pyrimidin-4- vhpiperidine-4-carboxamide: or 4-amino-1-(7H-pyrrolo[2.3-d|pyrimidin-4-v1)-N-{(1S)-1-|4- (trifluoromethyl)phenyl]ethyl} piperidine-4-carboxamide.- ‏يجب أن يفهم أنه؛ حيث أن المركبات ذات الصيغة )1( التي تم تعريفها أعلاه تتواجد في صور‎ ٠ ‏بفضل ذرةٍ الكربون غير المتماثلة؛ فإن الاختراع‎ racemic forms ‏نشطة ضوئياً أو صور راسيمية‎ ‏يشتمل في تعريفه على أية صورة نشطة ضوئياً أو صورة راسيمية كهذه تتمتع بخاصية تثبيط نشاط‎ ‏بالأساليب القياسية للكيمياء‎ optically active ‏ويمكن القيام بتخليق الصور النشطة ضوئياً‎ .PKB عي

‎YY -‏ - العضوية ‎organic chemistry‏ المعروفة جيداً في المجال؛ على سبيل المثال عن طريق التخليق ‎synthesis‏ من مواد البدء النشطة ضوئياً ‎optically active starting materials‏ أو تحليل صورة راسيمية ‎of a racemic form‏ «68010000:. ولقد تم رسم المركبات الراسيمية والمركبات الراسيمية الوسيطة لإنتاجها في هذا الطلب في صورة بنيات مسطحة في حين ثم رسم المركبات النوعية © الفراغية ‎stereospecific compounds‏ والمركبات النوعية الفراغية الوسيطة | ‎stereospecific‏ ‎intermediates‏ لإنتاجها باستخدام الكيمياء الفراغية الملاثمة المشار إليها. كما يتعلق الاختراع أيضاً بجميع الصور الصنوية للمركبات ذات الصيغة )1( وأي منها التي تعتبر مثبطات لنشاط ‎PKB‏ . في أحد نماذج الاختراع؛ يكون للمركب ذي الصيعة )1( الشكل المبين في الصيغة ‎H(A)‏ ‎o NH‏ ىج ‎Fes”‏ ‎H‏ 1 ‎R‏ ‎R’ N‏ 1 2 2 ا حال ‎N H 0‏ ‎(IA)‏ ‎Yun :‏ 18167267216 1046 » 185 و ‎an‏ كما تم تعريفها من قبل. وفي نموذج ‎Al‏ للاختراع؛ يكون للمركب ذي الصيعة ‎(I)‏ الشكل المبين في الصيغة ‎(IB)‏ : دما

‎Y¢ -‏ -— ‎R' 0 NH,‏ ‎N (CH,),‏ ‎H‏ 1 ‎R‏ ‎R’ N‏ 1 ‎Cr‏ ‏/ با ‎NT N‏ ‎(IB)‏ ‏حيث ‎¢Z1 ¢Y‏ 22؛ ‎RS (R4 RI‏ و « هي كما تم تعريفها من قبل. الاشارة في هذا الطلب إلى مركب له الصيغة )1( يجب أن تفهم على أنها إشارة إلى مركب له الصيغة (1) ‎(IA)‏ أو ‎(IB)‏ ‏© في أحد نماذج الاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة (ه1)؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه: اه 8 ‎(CH),‏ ا ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏1 ‎Vd | “a‏ ‎Ay‏ ‎NH‏ ‎(IA)‏ ‏حيث : 7 تمثل ‎Nl CH‏ ؛ 1- 22 تمثل مجموعة يتم اختيارها من ‎CH = N «CH = CH‏ و ‎N= CH‏ ‎YAO)‏

‎١# _‏ ‎n‏ هي صفر ‎١‏ أو ‎Y‏ ؛و 1 تمثل : ‎or Cs.‏ عالت )- ‎hydroxyC.salkyl, -(CHz),NHCOCHS3,‏ ,انوللقير مصتطة للقي ‎scycloalkyl;‏ ‏© حيث ‎R2‏ تمثل ‎hydrogen‏ أو ‎alkyl‏ 01-3 ¢ 3 تمثل 01-3 ‎alkyl‏ ¢ و ‎qsp‏ على حدة تمثل أو ‎Y‏ ‏في نموذج ثان للاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة ‎(TA)‏ أو ملح مقبول صيدلانياً منه: ‎Roo i‏ ‎or N (CH,),‏ ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏1 ‏2 7 8 ‎I‏ ‎NTH‏ ‎(1A)‏ ‎RS‏ ‎Y‏ تمثل ‎«Nol CH‏ 1- 22 تمثل مجموعة يتم اختيارها من ‎CH = N «CH = CH‏ و ‎N= CH‏ 1 تمثل ‎amine © alkyl C1-4‏ و ‎alkyl C1-4‏ أو ‎cycloalkyl‏ 03-6 ؛و د78

‎١ —-‏ -— © هي صفر؛ ١أو‏ 7. أي ملح مقبول صيد ‎Ly‏ من مركب له الصيغة 0 عبارة عن؛ على سبيل المثالء ملح إضافة حمض لمركب خاص بالاختراع يكون قاعدياً بدرجة ‎AS‏ على سبيل المثال؛ ملح إضافة حمض باستخدام؛ على سبيل المثال؛ حمض غير عضوي أو عضوي ‎inorganic or organic acid‏ ¢ مثل: ‎hydrochloric, hydrobromic, sulphuric, phosphoric, trifluoroacetic, citric or maleic acid. ©‏ ويجب أن يفهم أن بعض مركبات الاختراع الحالي يمكن أن تتواجد في صور مذابة؛ ‎Jie‏ هيدرات؛ وكذلك في صور غير مذابة. ويجب أن يفهم أن الاختراع الحالي يتضمن جميع مثل هذه المذابة التي تعتبر مثبطات لنشاط ‎PKB‏ ‏ويمكن إعطا عِ المركبات ذات الصيغة 0 في صورة عقار أولي يتحلل في جسم ‎J‏ لإنسان أو الحيوان ‎Ye‏ ليعطي مركب له الصيغة ‎(I)‏ . وتشتمل أمثلة العقاقير الأولية على ‎esters‏ التي يمكن أن تتحلل بالماء في الجسم الحي من مركب له الصيغة )1( ومختلف صور العقاقير الأولية معروقة في المجال. وكأمثلة لمشتقات العقاقير الأولية هذه؛ أنظر: ‎Design of Prodrugs, edited by 11. Bundgaard, (Elsevier, 1985) and Methods in 0‏ ‎¢Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K.

Widder, et al. (Academic Press, 1985)‏ ‎٠‏ (ب) ‎A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard- Larsen and‏ ‎H.

Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs", by H.Bundgaard p.‏ )1991( ¢113-191 ‎ H.

Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992) (z)‏ )¢ ‎YAO)‏

- لا؟ -

‎tH.

Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988) (2)‏ و

‎.N.

Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984)

‏ووفقاً لسمة أخرى للاختراع تم تقديم تركيبة صيدلانية؛ تشتمل على مركب له الصيغة (1)؛ أو ملح

‏مقبول صيدلانياً مته؛ كما تم تعريفه في هذا الطلب من قبل بالاشتراك مع مادة مخففة أو مادة

‏© حاملة ‎carrier‏ مقبولة صيدلانياً.

‏ويمكن أن تكون التركيبات الخاصة بالاختراع في صورة مناسبة للاستخدام عن طريق الفم ‎oral‏

‎hard or soft capsules ‏كبسولات صلبة أو رخوة‎ « lozenges ‏أقراص محلاأة‎ » tablets ‏أقراص‎ Jia)

‏؛ معلقات مائية أو زيتية ‎aqueous or oily suspensions‏ « مستحلبات ‎emulsions‏ « مساحيق

‏حبيبات ‎ALE‏ للتشتت ‎dispersible powders‏ ¢ أشربة ‎syrups‏ أو أكسيرات ‎(elixirs‏ أو للاستخدام ‎٠‏ الموضعي (مثل كريمات ‎creams‏ » مراهم ‎ointments‏ » أنوا ع ‎gels‏ ؛ محاليل أو معلقات مائية أو

‏زيتية ‎«(aqueous or oily solutions or suspensions‏ أو للإعطاء عن طريق الاستنشاق (مثل

‎(liquid aerosol Jitu ‏أو أيروسول‎ finely divided powder 488) ‏مسحوق مطحون إلى حبيبات‎

‏أو للإعطاء عن طريق النفخ ‎Jie)‏ مسحوق مطحون إلى حبيبات رقيقة) أو للإعطاء عن طريق

‏الحقن (مثل محلول مائي أو زيني معقم للحقن في الوريد ‎intravenous‏ ؛ تحت الجلد ‎subcutaneous ©‏ ؛ في العضل ‎«intramuscular‏ أو إعطاء جرعات في العضل أو في صورة

‏تحميلية لإعطاء جرعات عن طريق المستقيم).

‏ويمكن الحصول على التركيبات الخاصة بالاختراع بإتباع الإجراءات التقليدية باستخدام السواغات

‏الصيذلانية التقليدية؛ المعروفة جيداً في المجال. ولهذاء فإن التركيبات المعدة للإعطاء عن طريق

‏الفم يمكن أن تحتوي؛ على سبيل المثال؛ على واحد أو أكثر من العوامل المكسبة للون ‎colouring‏

‏عم

‎YA —‏ — ¢ عوامل التحلية ‎sweetening‏ ¢ العوامل المكسبة ‎flavouring A¢Sill‏ و/ أو عوامل الحفظ ‎.preservative‏ ‏وسوف يتم في الغالب إعطاء المركب ذي الصيغة ‎(I)‏ لكائن من ذوات الدم الحار في صورة ‎Bang‏ ‏جرعة في المدى من 5- ‎Ose‏ مجم/ 2 من مساحة جسم الكائن الحي؛ أي ‎Yeo =e‏ مجم/ © كجم تقريباً؛ وهذا عادة ما يوفر جرعة فعالة علاجياً. وغالباً سوف تحتوي صورة وحدة جرعة ‎Jie‏ ‏قرص أو كبسولة؛ على سبيل ‎(JU)‏ على ‎You -١‏ مجم من المكون الفعال. ويفضل استخدام جرعة يومية في المدى من ‎٠ -١‏ 5 مجم/كجم؛ على سبيل المثال جرعة تتراوح من 4 - ‎١‏ مجم/ كجم مرين يومياً. ومع ذلك من الجرعة اليومية سوف تتغير بالضرورة اعتماداً على العائل الذي يتم ‎(dade‏ المسار المخصص للإعطا 33 وخطورة المرض الذي يجرى ‎4a le‏ . ووفقاً لهذا يمكن أن ‎٠‏ يكون المختص الذي يعالج أي مريض محدد بتحديد الجرعات المثالية. على سبيل المثال؛ يمكن أن تحتوي تركيبة صيدلانية خاصة بالاختراع الحالي مناسبة للإعطاء عن طريق الفم على ‎١٠١ -١‏ مجم/ مل من مركب له الصيغة ‎(I)‏ ¢ ملح مقبول صيد لانيا منهء ‎Jie‏ : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d ]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide)‏ ‎٠١‏ في 20.8 من ‎hydroxypropylmethyleellulose (HPMC)‏ . وفي سياق الوصف ‎Jal‏ « يشتمل تعبير "علاج ‎therapy‏ " أيضاً على "الوقاية ‎prophylaxis‏ " إل إذا كانت هناك إشارات محددة تدل على )ل < . ويجب ‎A - \ oe‏ يِ " ع“ = 1 و " > يا ‎laa‏ لهذا : ‎YAo)‏

‎Y8 -‏ - ‎LS‏ هو مستخدم في هذا الطلب؛ يقصد بتعبير "معالجة ‎treatment‏ ” أن يحمل معناه المتداول يومياً للتعامل مع مرض من أجل تخفيف ‎canal‏ أو بعض؛ أو كل أعراضه كلياً أو جزئياً؛ أو لتصحيح أو تعويض الأعراض المرضية المرتبطة به. وكما هو مستخدم في هذا الطلب؛ يقصد بتعبير "وقاية ‎prophylaxis‏ ” أن يحمل معناه المتداول © يومياً ويشتمل على الوقائية الأولية لمنع تطور المرض والوقاية الثانوية حيث يكون المرض قد تطور بالفعل وتجب حماية المريض مؤقتاً أو بصفة دائمة ضد تفاقم أو تدهور المرض أو ظهور أعراض جديدة مرتبطة بالمرض. ونتيجة لنشاطها المشبط ل ‎PKB‏ يتوقع أن تكون المركبات ذات الصيغة )1( الخاصة بالاختراع الحالي مفيدة في علاج الأمراض أو الحالات الطبية التي تظهر من تلقاء نفسها أو يساهم ‎Led‏ ‎٠‏ نشاط ‎Jie Le PKB‏ السرطان. وتشتمل أنواع السرطانات التي يمكن علاجها باستخدام المركبات ذات الصيغة )1( الخاصة بالاختراع الحالي؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ على سرطان المبيض ‎ovarian cancer‏ ؛ سرطان العنق ‎cervical cancer‏ ؛ سرطان القولون والمستقيم ‎colorectal cancer‏ ‎٠‏ سرطان الثدي ‎breast cancer‏ « سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ » الورم الدبقي ‎glioma‏ ؛ الورم الأورمي الدبقي ‎glioblastoma‏ ¢ الورم الميلانيني الأسود ‎melanoma‏ « سرطان البروستاتا ‎prostate cancer ©‏ ¢ سرطان الدم ‎leukaemia‏ » الورم الليمفي ‎lymphoma‏ ؛ الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ » سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ¢ سرطان الرثة ‎lung‏ ‎cancer‏ » سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ؛ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ؛ الورم ‎(gall‏ المعدي المعوي ‎gastrointestinal stromal tumour‏ (6151) الورم الدبقي ‎glioma‏ « سرطان الغدة الدرقية ‎thyroid cancer‏ ¢ سرطان القناة المرارية ‎bile duct cancer‏ ¢ السرطان ‎Ye‏ البطاني الرحمي ‎endometrial cancer‏ ؛ سرطان الكلى ‎renal cancer‏ ¢ الورم الليمفي الذي يصيب دا

.© - الخلايا ‎iS)‏ الكبيرة ‎anaplastic large cell lymphoma‏ ؛ سرطان الدم النخاعي الحاد ‎acute‏ ‎¢(AML) myeloid leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple‏ ‎myeloma‏ وورم المتوّسّطة ‎melanoma‏ . ويمكن أن يكون سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ؛ وبشكل أكثر تحديداً سرطان الثدي ‎luminal breast cancer al‏ هو السرطان الذي يمكن تحديداً علاجه © باستخدام المركبات الخاصة بالاختراع الحالي. ويمكن تصور أنه بالنسبة لطرق علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ المذكورة في هذا الطلب؛ أنه يمكن إعطاء المركب ذي الصيغة ‎(I)‏ إلى كائن ثديي؛ وبشكل أكثر تحديداً لإنسان. وبالمثل؛ بالنسبة لاستخدامات مركب له الصيغة )1( لعلاج السرطان المذكور في هذا الطلب؛ يمكن تصور أنه يمكن إعطاء المركب ذي الصيغة )1( لكائن ثديي؛ وبشكل أكثر تحديداً لإنسان. ‎٠‏ ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة (1) كما تم تعريفه من قبل في هذا الطلب؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ للاستخدام كدواء. ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم مركب له الصيغة (1) كما تم تعريفه من قبل في هذا الطلب؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ للاستخدام في علاج مرض يسببه ‎PKB‏ وفي أحد نماذج الاختراع؛ يكون المرض المذكور الذي يسببه ‎PKB‏ هو السرطان. وفي نموذج آخر للاختراع؛ يتم اختيار ‎٠‏ السرطان المذكور من سرطان المبيض ‎ovarian cancer‏ ؛ سرطان العنق ‎cervical cancer‏ ؛ سرطان القولون والمستقيم ‎colorectal cancer‏ ؛ سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ » الورم الدبقي ‎glioma‏ » الورم ‎١‏ لأورمي الدبقي ‎glioblastoma‏ » الورم الميلانيني الأسود ‎melanoma‏ ؛ سرطان ‎prostate cancer Glug‏ ؛ سرطان الدم ‎leukaemia‏ « الورم الليمفي ‎lymphoma‏ » الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ « سرطان ‎٠٠‏ المعدة ‎gastric cancer‏ » سرطان الرئة ‎lung cancer‏ » سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ دما

‎١١ -‏ ¢ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ؛ الورم السَّذَوي المعدي المعوي ‎gastrointestinal stromal‏ ‎tumour‏ (6151) الورم الدبقي ‎glioma‏ ¢ سرطان الغدة الدرقية ‎«thyroid cancer‏ سرطان القناة المرارية ‎bile duct cancer‏ ؛ السرطان البطاني الرحمي ‎endometrial cancer‏ ¢ سرطان الكلى ‎renal cancer‏ » الورم الليمفي الذي يصيب الخلايا ‎Lill‏ الكبيرة للك ‎anaplastic large‏ ‎lymphoma ©‏ ¢ سرطان الدم النخاعي الحاد ‎(AML) acute myeloid leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple myeloma‏ وورم المتوّسّطة ‎melanoma‏ . وفي أحد َ نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ؛ الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ ء سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ¢ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ؛ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer ٠‏ ¢ وسرطان الرئة ‎lung cancer‏ - وفي أحد النماذج الخاصة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ؛ ويشكل أكثر تحديداً سرطان الثتدي ‎luminal na‏ ‎.breast cancer‏ ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم استخدام مركب له الصيغة )1( كما تم تعريفه من قبل؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ في تحضير دواء لعلاج مرض يسببه ‎PKB‏ وفي أحد نماذج الاختراع» يكون ‎٠‏ المرض المذكور الذي يسببه ‎PKB‏ هو السرطان. ‎(Ag‏ نموذج آخر للاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان المبيض ‎ovarian cancer‏ ؛ سرطان العنق ‎cervical cancer‏ ؛ سرطان القولون والمستقيم ‎colorectal cancer‏ ؛ سرطان ‎breast cancer ill‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic‏ ‎cancer‏ » الورم الدبقي ‎glioma‏ » الورم ‎١‏ لأورمي الدبقي ‎glioblastoma‏ ¢ الورم الميلانيني الأسود ‎melanoma‏ ¢ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ ¢ سرطان الدم ‎leukaemia‏ ؛ الورم الليمفي ‎lymphoma | ٠‏ » الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ ؛ سرطان المعدة ‎gastric‏ ‎cancer‏ » سرطان الرئة ‎lung cancer‏ ¢ سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ؛ سرطان ‎YAo)‏ vy المعدة ‎gastric cancer‏ ¢ الورم السّذوي المعدي المعوي ‎gastrointestinal stromal tumour‏ ‎«(GIST)‏ الورم الدبقي ‎glioma‏ ¢ سرطان الغدة الدرقية ‎thyroid cancer‏ ¢ سرطان القناة المرارية ‎bile duct cancer‏ » السرطان البطاني الرحمي ‎endometrial cancer‏ « سرطان الكلى ‎renal cancer‏ » الورم الليمفي الذي يصيب الخلايا 20050 الكبيرة ‎٠ anaplastic large cell lymphoma‏ سرطان © الدم ‎elas‏ الحاد ‎((AML) acute myeloid leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple myeloma‏ وورم المتوّسّطة ‎melanoma‏ . وفي أحد نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ؛ الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins‏ ‎lymphoma‏ ¢ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ » سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular‏ ‎cancer‏ + سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ؛ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ ؛ وسرطان الرثة ‎lung cancer ٠‏ . وفي أحد النماذج الخاصة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان الثدي ‎breast‏ .luminal breast cancer ‏وبشكل أكثر تحديداً سرطان الثدي اللُنْعي‎ «cancer ‏ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم استخدام مركب له الصيغة (1) كما تم تعريفه من قبل؛ أو ملح‎ ‏وفي أحد نماذج‎ . treatment of cancer ‏في تحضير دواء لعلاج السرطان‎ cada ‏مقبول صيدلانياً‎ ‏؛ سرطان العنق‎ ovarian cancer ‏الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان المبيض‎ ‏؛‎ breast cancer ‏؛ سرطان الثدي‎ colorectal cancer ‏؛ سرطان القولون والمستقيم‎ cervical cancer ٠ ‏لأورمي الدبقي‎ ١ ‏الورم‎ ¢ glioma ‏الورم الدبقي‎ » pancreatic cancer ‏سرطان البنكرياس‎ « prostate cancer ‏؛ سرطان البروستاتا‎ melanoma ‏الورم الميلانيني الأسود‎ » glioblastoma

Non- ‏الورم الليمفي غير هودجكن‎ » lymphoma ‏الورم الليمفي‎ ¢ leukaemia ‏سرطان الدم‎ ‏؛ سرطان‎ lung cancer ‏سرطان الرئة‎ » gastric cancer ‏سرطان المعدة‎ « Hodgkins lymphoma ‏الورم السّذّوي المعدي‎ gastric cancer ‏؛ سرطان المعدة‎ hepatocellular cancer ‏خلايا الكبد‎ ٠٠١ ‏؛ سرطان الغدة الدرقية‎ glioma ‏(6151)؛ الورم الدبقي‎ gastrointestinal stromal tumour ‏المعوي‎

YAO)

‎+٠“ -‏ - ‎thyroid cancer‏ ؛ سرطان القناة المرارية ‎bile duct cancer‏ السرطان البطاني الرحمي ‎endometrial cancer‏ ؛ سرطان الكلى ‎renal cancer‏ ؛ الورم الليمفي الذي يصيب الخلايا ‎a‏ ‏الكبيرة ‎anaplastic large cell lymphoma‏ ؛ سرطان الدم التخاعي الحاد ‎acute myeloid‏ ‎«(AML) leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple myeloma‏ وورم © المتوسّطة ‎ds. melanoma‏ أحد نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ¢ الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ « سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ؛ سرطان المعدة ‎gastric‏ ‎cancer‏ ¢ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ » وسرطان الرئة ‎lung cancer‏ . وفي أحد النماذج الخاصة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ¢ وبشكل أكثر تحديداً سرطان ‎Ve‏ الثدي ‎.luminal breast cancer gal‏ ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم طريقة لاستخدام مركب له الصيغة )1( كما تم تعريفه من قبل؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ لعلاج السرطان ‎treatment of cancer‏ . وفي أحد نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان المبيض ‎ovarian cancer‏ ؛ سرطان العنق ‎cervical‏ ‎cancer‏ ¢ سرطان القولون والمستقيم ‎colorectal cancer‏ ¢ سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ¢ سرطان ‎٠‏ البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ ¢ الورم الدبقي ‎glioma‏ ¢ الورم ‎١‏ لأورمي الديقي ‎glioblastoma‏ « الورم الميلانيني الأسود ‎melanoma‏ ؛ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ ؛ سرطان الدم ‎leukaemia‏ ¢ الورم الليمفي ‎lymphoma‏ ؛ الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins‏ ‎lymphoma‏ ¢ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ » سرطان الرئة ‎Tung cancer‏ ؛ سرطان ‎WA‏ الكبد ‎٠‏ ‎hepatocellular cancer‏ ¢ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ¢ الورم السَّذوي المعجدي المعوي ‎gastrointestinal stromal tumour | ٠‏ (6151) الورم الدبقي ‎glioma‏ ؛ سرطان الغدة الدرقية ‎thyroid cancer‏ ؛ سرطان القناة المرارية ‎bile duct cancer‏ ؛ السرطان البطاني الرحمي دما

‎endometrial cancer‏ ¢ سرطان الكلى ‎renal cancer‏ ؛ الورم الليمفي الذي يصيب ‎LAY‏ الكشميَّة الكبيرة ‎anaplastic large cell lymphoma‏ ¢ سرطان الدم التخاعي الحاد ‎acute myeloid‏ ‎(AML) leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple myeloma‏ وورم المتوسّطة ‎melanoma‏ . وفي أحد نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان الثدي ‎breast cancer ©‏ » الورم الليمفي غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ ¢ سرطان ‎UMA‏ الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ¢ سرطان المعدة ‎gastric‏ ‎cancer‏ ¢ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ » وسرطان الرئة ‎lung cancer‏ - وفي أحد النماذج الخاصة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان الثدي ‎breast cancer‏ « وبشكل أكثر تحديداً سرطان

‎.luminal breast cancer, gall (sll ‏مفيداً‎ PKB ‏ووفقاً لسمة أخرى للاختراع؛ تم تقديم طريقة لعلاج إنسان يعاني من مرض يكون تثبيط‎ ٠ ‏في علاجه؛ حيث تتضمن خطوات إعطاء شخص في حاجة لهذا العلاج كمية فعالة علاجياً من‎ ‏مركب له الصيغة (!) كما تم تعريفه من قبل؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منه. وفي أحد النماذج يكون‎ ‏مفيداً في علاجه هو السرطان. وفي نموذج آخر للاختراع؛ يتم‎ PKB ‏المرض الذي يكون تثبيط‎ ‏؛‎ cervical cancer ‏سرطان العنق‎ ¢ ovarian cancer ‏اختيار السرطان المذكور من سرطان المبيض‎ ‏؛ سرطان البنكرياس‎ breast cancer ‏سرطان الثدي‎ ¢ colorectal cancer ‏سرطان القولون والمستقيم‎ VO ‏؛ الورم‎ glioblastoma ‏الورم أ لأورمي الدبقي‎ » glioma ‏الورم الدبقي‎ ¢ pancreatic cancer ¢ leukaemia ‏سرطان الدم‎ ¢ prostate cancer ‏سرطان البروستاتا‎ « melanoma ‏الميلاتيني الأسود‎ ‏؛ سرطان‎ Non-Hodgkins lymphoma ‏؛ الورم الليمفي غير هودجكن‎ lymphoma ‏الورم الليمفي‎ hepatocellular cancer ‏سرطان خلايا الكيد‎ ¢ lung cancer ‏سرطان الرئة‎ ¢ gastric cancer ‏المعدة‎ ‎gastrointestinal stromal ‏الورم السّذوي المعدي المعوي‎ ¢ gastric cancer ‏ء سرطان المعدة‎ Yo ‏سرطان القناة‎ «thyroid cancer ‏؛ سرطان الغدة الدرقية‎ glioma ‏الورم الدبقي‎ ¢(GIST) tumour

‏دي

‎Yo _—‏ — المرارية ‎bile duct cancer‏ ؛ السرطان البطاني الرحمي ‎endometrial cancer‏ ¢ سرطان الكلى ‎renal cancer‏ ¢ الورم الليمفي الذي يصيب الخلايا الكُثْميّة الكبيرة ‎anaplastic large cell‏ ‎lymphoma‏ ¢ سرطان الدم النخاعي الحاد ‎((AML) acute myeloid leukaemia‏ الورم النخاعي المتعدد؛ الورم الميلانيني الأسود ‎multiple myeloma‏ وورم المتوّسّطة ‎melanoma‏ . وفي أحد © نماذج الاختراع؛ يتم اختيار السرطان المذكور من سرطان الثدي ‎breast cancer‏ ¢ الورم الليمفي

‏غير هودجكن ‎Non-Hodgkins lymphoma‏ ؛ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ ¢ سرطان خلايا الكبد ‎hepatocellular cancer‏ ؛ سرطان المعدة ‎gastric cancer‏ ¢ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ ¢ وسرطان الرئة ‎lung cancer‏ . وفي أحد النماذج الخاصة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان الثدي ‎cancer‏ 516581 وبشكل أكثر تحديداً سرطان الثدي ‎luminal Al‏

‎.breast cancer 0٠ ‏الذي يتم تعريفه في هذا الطلب من قبل‎ treatment of cancer ‏ويمكن استخدام علاج السرطان‎ ‏الجراحة التقليدية أو‎ cp AY ‏كعلاج وحيد أو يمكن أن يتضمن؛ بالإضافة إلى المركب الخاص‎ ‏العلاج الإشعاعي؛ أو العلاج الكيماوي. ويمكن أن يشتمل هذا العلاج الكيماوي على نوع واحد أو‎ ‏أكثر من العوامل المضادة للأورام الآتية:‎

‎VO‏ عقار مضاد لتكاثر الخلايا / مضاد للأورام الحديثة أو توليفة منه؛ كما يستخدم في العلاج الطبي للأورام مثل عوامل ألكلة ‎Jie‏ : ‎cis-platin, oxaliplatin, carboplatin, cyclophosphamide, nitrogen mustard, melphalan,‏ ‎¢(chlorambucil, busulphan, temozolamide and nitrosoureas‏ أو مضاد لناتج الأيض ‎Jie)‏ ‎gemcitabine‏ و ‎Jia antifolates‏ مركبات ‎Ji fluoropyrimidines‏ :

‎YA)

_ Y 2 —_ 5-fluorouracil and tegafur, raltitrexed, methotrexate, cytosine arabinoside, and anthracyclines like adriamycin, ‏أو مضاد حيوي مضاد للأورام (مثل‎ ‘ (hydroxyurea bleomycin, doxorubicin, daunomycin, epirubicin, idarubicin, mitomycin-C, ‏شبيه‎ Jie) antimitotic ‏؛ أو عامل مضاد للإنقسام الفتيلي‎ ) dactinomycin and mithramycin vincristine, vinblastine, vindesine and vinorelbine and ‏مثل‎ vinca alkaloids ‏أقلاء فنيكا‎ © topoisomerase ‏؛ أو مثبط لإنزيم‎ (polokinase ‏ومثبطات إنزيم‎ taxol and taxotere ‏مثل‎ 5 epipodophyllotoxins like etoposide and teniposide, amsacrine, topotecan and Ji) ¢(camptothecin

Jie) antioestrogens ‏مضاد لهرمون الإستروجين‎ Jie cytostatic agents ‏عوامل الركود الخلوي‎ ‏أو (مثل‎ «(tamoxifen, fulvestrant, toremifene, raloxifene, droloxifene and iodoxyfene Vo ‏أو مساعد‎ «LHRH ‏أو مضاد‎ ‘ (bicalutamide, flutamide, nilutamide and cyproterone acetate ‏(مثل‎ progestogens ‏أو هرمون‎ «(goserelin, leuprorelin and buserelin J“) LHRH anastrozole, letrozole, vorazole and Jia) aromatase ‏مثبط إنزيم‎ 0 1 megestrol acetate ¢ finasteride Jie 50 -reductase ‏أو مثبط إنزيم‎ «(exemestane : Jie c-Sre ‏مثبطات عائلة إنزيم‎ Jie) ‏عامل يثبط تفشي خلايا السرطان‎ ٠ 4-(6-chloro-2,3-methylenedioxyanilino)-7-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]-5- tetrahydropyran-4-yloxyquinazoline ‏و‎ (WO 01/9434] ‏طلب البراءة الدولي‎ ¢AZD0530) ‏دم‎

—- YY -

N-(2-chloro-6-methylphenyl)-2- {6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2- methylpyrimidin-4-ylamino}thiazole-5-carboxamide ‏لخدت لاف 11-1784 17)؛ ومثبطات‎ «. Chem. Med. J 16 87 9- BMS «dasatinib) plasminogen ‏أو مثبطات وظيفة المستقبل المنشط‎ « marimastat ‏مثل‎ metalloproteinase ‏إنزيم‎ © إنزيم ‎urokinase‏ أو | لأجسام المضادة لإنزيم ‎{(Heparanase‏ ‏مثبطات وظيفة عامل النمو؛ ومثل هذه المثبطات تشمل الأجسام المضادة لعامل النمو والأجسام المضادة لمستقبل عامل النمو (مثل جسم ‎alias‏ ل 2باطت ‎[Herceptin™ ]trastuzumab‏ جسم ‎alae‏ ل ‎panitumumab EGFR‏ » أو جسم مضاد ل ‎[Erbitux, C225]cetuximab cerbbl‏ أو أي من الأجسام المضادة لعامل النمو والأجسام المضادة لمستقبل عامل النمو التي تم الكشف عنها ‎٠‏ بواسطة ‎ppll- «Vol. 54 2005 «Stern et al. Critical reviews in oncology/haematology‏ 29(¢ وهذه المثبطات تشمل أيضاً مثبطات إنزيم ‎tyrosine kinase‏ ؛ مثل متبط لعائلة عامل نمو البشرة (مثل مثبط إنزيم ‎tyrosine kinase‏ لعائلة ‎Jie EGFR‏ : ‎N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-7-methoxy-6-(3-morpholinopropoxy)quinazolin-4-amine‏ ‎(gefitinib, ZD1839), N-(3-ethynylphenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)quinazolin-4-amine‏ ‎(erlotinib, OSI-774) and 6-acrylamido-N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-7-(3- Vo‏ ‎morpholinopropoxy)-quinazolin-4-amine (CI 1033),‏ أو مثبطات إنزيم ‎lapatinib Jie tyrosine kinase erbb2‏ ¢ أو مثبطات عائلة عامل نمو الخلية الكبدية؛ أو مثبطات عائلة عامل النمو المشتق من الصفائح ‎imatinib Jie‏ ؛ أو مثبطات إنزيمات ‎serine/threonine kinases‏ (مثل مثبطات إصدار الاشارة ‎Ras/Raf‏ مثل مثبطات إنزيم ‎farnesyl‏ ‎transferase Ye‏ » على سبيل المثال ‎«(BAY 43-9006) sorafenib‏ أو مثبطات إصدار إشارات

YAS)

— م الخلية خلال إنزيمات ‎MEK‏ و/أو ‎AKT‏ ؛ أو متثبطات عائلة عامل نمو الخلية الكبدية؛ أو مثبطات المجموعة - » ؛ أو مثبطات إنزيم ‎abl kinase‏ « أو مثبطات إنزيم ‎kinase‏ مستقبل ‎IGF‏ (عامل ‎sail‏ الشبيه ب ‎insulin‏ )؛ أو مثبطات إنزيم ‎aurora kinase‏ (مثل 2701152 ‎(PH739358‏ ‎VX-528 «MP529 010235 «R763 «MLN8054 2714-0‏ و ‎«(AX39459)‏ أو متبطات © إنزيم ‎JUS‏ المعتمد على ‎fie cyclin‏ مثبطات ‎CDK2‏ و/أرو ‎¢«CDK4‏ ‏العوامل المضاد لتكون الأوعية ‎Jie‏ تلك التي تثبط تأثيرات عامل نمو البطانة الوعائية (مثل الجسم المضاد لعامل نمو ‎LAAN‏ البطانية الوعائية (التصتبوجم) ‎cbevacizumab‏ ومثبطات إنزيم ‎tyrosine kinase‏ المستقبل ‎Jie VEGF‏ : ‎4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-methoxy-7-(1-methylpiperidin-4-ylmethoxy)quinazoline‏ ‎ZD6474) ٠‏ ؛ مثال رقم ‎Y‏ في الطلب الدولي رقم 787581 )و ‎4-(4-fluoro-2-methylindol-5-yloxy)-6-methoxy-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinazoline‏ ‎AZD217)‏ ؛ مثال رقم ‎YE.‏ في الطلب الدولي رقم ‎PTK787) vatalanib ) ٠/4771‏ ¢ الطلب الدولي رقم مفكح مارم 4)» 5011248 ‎sunitinib)‏ ؛ الطلب الدولي رقم 6 ‎VTA‏ ¢ والمركبات التي تم الكشف عنها في طلبات البراءات الدولية 497/77/81 و ‎57/7٠78‏ و ‎٠‏ 6414 لاخ روئ ٠ر1‏ ) أو مركبات تعمل بآلية أخرى (مثل ‎linomide‏ ¢ أو متبط لوظيفة ‎integrin 3‏ و ‎(angiostatin‏ ¢ عامل متلف للأوعية ‎cCombretastatin Ad Jie‏ أو المركبات التي تم الكشف ‎Lie‏ في طلبات البراءات الدولية 14/671757 و 059795/ 5و 51375/ط و 1/1777 :و 7/4و ‎١‏ ل م

٠395 -

عامل يستخدم في العلاج المضاد لاتجاه النسخ؛ مثل تلك الموجهة للأهداف المذكورة من قبل مثل

‎<ISIS 2503‏ أو مضاد اتجاه النسخ المضاد ل ‎tras‏

‏عامل يستخدم في طريقة للعلاج بالجينات مثل طريق استبدال جينات شاذة مثل الجين ‎ALAN‏

‎aberrant‏ 53م أو الجينات الشاذة ‎(BRCAI‏ أو ‎(BRCA2‏ أو ‎GDEPT‏ (علاج بعقار إنزيمي أولي © موجه للجين ‎«(gene-directed enzyme pro-drug therapy‏ أو طرق مثل تلك التي تستخدم إنزيم

‏سيتوسين دي ‎amine‏ از أو إنزيم ‎thymidine kinase‏ ¢ أو إنزيم ‎«bacterial nitroreductase‏

‏وطرق لزيادة تحمل المريض للعلاج الكيميائي أو العلاج بالإشعاع ‎Jie‏ العلاج بالجينات المقاوم

‏لعقاقير متعددة؛ و

‏عامل يستخدم في طريقة للعلاج ‎Jie oo lial‏ طرق تستخدم خارج الجسم الحي وداخله لزيادة تولد

‎interleukin 2, Jie cytokines ‏المناعة لخلايا أورام المريض؛ مثل نقل العدوى إلى الخلايا بواسطة‎ ٠ ‏ملتهمة كبيرة لخلايا حبيبية؛ وطرق لتقليل طاقة‎ WIA ‏أو عامل منشط لمستعمرة‎ » interleukin 4 ‏أو‎ ¢ cytokines ‏خلايا شجرية تم نقل العدوى إليها‎ Jie ‏وطرق تستخدم خلايا مناعة‎ oT - ‏الخلايا‎ ‏؛ وطرق تستخدم أجسام‎ cytokines ‏بواسطة‎ Led) ‏العدوى‎ Jas ‏طرق تستخدم سلالات خلايا ورم ثم‎ ‏مضادة لتماتل العوامل الوراثية؛‎

‎٠5‏ يمكن تحضير مركب خاص بالاختراع؛ أو ملح منه؛ باستخدام أية عملية معروفة يمكن استخدامها لتحضير هذه المركبات أو مركبات ذات صلة من حيث الصيغة البنائية. ويمكن حماية المجموعات الوظيفية ونزع الحماية عنها باستخدام الطرق التقليدية. وبالنسبة لأمثلة مجموعات الحماية ‎Jie‏ ‏مجموعات حماية ‎amino and carboxylic acid‏ (وكذلك طرق التكوين ونزع الحماية بعد ذلك)؛ أنظر ‎.W.

Greene and P.G.M.

Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Second‏

‎.Edition, John Wiley & Sons, New York, 1991 0 ٠

‏دم

د41 ا ولقد تم تقديم بعض العمليات لتخليق المركبات ذات الصيغة ‎(I)‏ كجانب ‎HAT‏ للاختراع. ولهذاء وفقاً لسمة أخرى لاختراع تم تقديم عملية لتحضير مركب له الصيغة (1)؛ حيث تتضمن العملية (أ)؛ (ب)؛ (ج) أو (د) (حيث تكون المتغيرات كما تم تعريفها من قبل في هذا الطلب بالنسبة للمركبات ذات الصيغة )1( إلا إذا ذكر ما يخالف ذلك بشكل محدد): ‎o‏ 00( تفاعل حمض له الصيغة ‎(IT)‏ مع ‎amine‏ له الصيغة (11): ‎p'‏ ‎Nn‏ 0 ‎N NH,‏ ‎z 5 8 ٍ‏ 7 ع 2 | با ‎N‏ ‏8< ‎(In (IID)‏ حيث 01 تمثل مجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال ‎tert-butoxycarbonyl‏ ¢ (ب) ‎carboxamide Jeli‏ له الصيغة ‎(Iv)‏ مع حلقة ثنائية غير متجانسة لها الصيغة ‎(V)‏ : ‎NH‏ ا ‎R 0 | 2 L‏ ‎(CH,), !‏ ‎N 1‏ ‎es‏ ‎R 2‏ : / > ‎R’ N NTN‏ ‎(Ivy 010‏ ‎Vo‏ حيث 11 تمثتل مجموعة تاركة مناسبة ؛ على سبيل المثال ‎chlorine‏ ¢ (ج) عندما تكون ©« هي ‎١١‏ هدرجة مركب له الصيغة (171): أو دم

‎4١ -‏ - م ‎R'‏ ‎oN‏ . ‎N‏ ‎H‏ 1 ‎R‏ ‎R’ N‏ صصص حال كلا ‎(VD)‏ ‏(د) ‎Laie‏ 11 تمثل ‎amine‏ و ‎methyl‏ ¢ هدرجة مركب له الصيغة ‎(VI)‏ ‎N Pp‏ ‎NH‏ 0 ‎N (CH),‏ ‎H ¢‏ ‎Re‏ ‎R’ 1‏ 1 ‎Cr‏ ‏/ > ‎N‏ ‎NH‏ ‎(VII)‏ ‏حيث 01 تمثل مجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال ‎tert-butoxycarbonyl‏ ¢ وبعد ذلك؛ عند الضرورة: ‎(i)‏ تحويل مركب له الصيغة 0 إلي مركب آخر له الصيغة ‎(I)‏ ¢ ‎(id)‏ إزالة أية مجموعات حماية؛ و/أو ‎(ii)‏ تكوين ملح منه. عم

أمثلة عمليات تحويل مركب له الصيغة ‎(I)‏ إلي مركب آخر له الصيغة (1)؛ معروفة جيداً لأولئك المتمرسين في المجال ‘ وتشمل التحولات الداخلية لمجموعة وظيفية ‎Jia‏ التحليل الماني ‘ الهدرجة ¢ التحليل بال ‎hydrogen‏ ؛ الأكسدة أو الاختزال» و/أو عمليات أخرى للتحكم في الوظائف عن طريق التفاعلات القياسية مثل الاقتران © المحفز بأميد أو بمعدن» أوتفاعلات الازاحة الآلفة للنواة. ظروف التفاعل المحددة للعمليات 0 ؛ (ب) « (ج) و (د) السابقة هي كالتالي: العملية 0( - أحماض لها الصيغة ‎(I)‏ و ‎Led amines‏ الصيغة ‎(II)‏ يمكن أن تتفاعل ‎Up‏ في وجود عامل إقتران مناسب»؛ على سبيل المثال : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-y])-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ‎(HATU), Ye‏ وقاعدة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎NN'-diisopropylethylamine (DIPEA)‏ « في مذيب ‎lie‏ ‏على سبيل المتال ‎dimethylacetamide (DMA)‏ ¢ وعند درجة حرارة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎ov‏ ‏إلى ‎٠‏ لاقم و لأنسب حوالي ‎٠‏ م العملية (ب) - مركبات ‎carboxamide‏ لها الصيغة ‎(IV)‏ وحلقات غير متجانسة لها الصيغة ‎(V)‏ ‎٠‏ يمكن أن تتفاعل سوياً في وجود قاعدة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎N,N'-diisopropylethylamine‏ ‎(DIPEA)‏ « في مذيب مناسب على سبيل المثال ‎butan-1-ol‏ ؛ وعند درجة حرارة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎٠‏ © إلى ‎oY ٠‏ والأنسب حوالي ‎fT‏ ‏دي

‎YY —‏ هه ْ العمليتان ‎(z)‏ و )3( - يمكن هدرجة مركبات لها الصيغة ‎(V1)‏ أو ‎(VII)‏ مذابة في ‎Cuda‏ مناسب»ء على سبيل المثال ‎ethanol‏ ؛ في جو من ‎hydrogen‏ في وجود محفز مناسب؛ على سبيل المثال نيكل ‎Raney™‏ ؛ وقاعدة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎ammonium hydroxide‏ . المركبات التي لها الصيغة ‎(I)‏ يمكن تحضيرها وفقاً لمخطط التفاعل رقم ‎:١‏ ‏© مخطط ‎١‏ ‎p!‏ ‎p' |‏ ‎Q NH‏ ‎NH‏ 0 ‎HO (CHL),‏ رآ ) ‎(CH‏ ‎HO 2/n‏ 27 ‎NaHCO, \ 00‏ ا ع + ‎N > /‏ ‎Reflux T‏ ‎H N N eflux Temp or‏ ‎z‏ ‎N‏ بجا 0710 ‎(VID‏ ‎Ng‏ ‏حيث 1 ‎AP‏ مجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال ‎L1 ١ tert-butoxycarbonyl‏ هي مجموعة تاركة مناسبة؛ على سبيل المثال ‎chlorine‏ ¢ وجميع المتغيرات الأخرى هي كما تم تعريفها من قبل. ‎٠‏ المركبات التي لها الصيغة ‎(IV)‏ يمكن تحضيرها وفقاً لمخطط التفاعل رقم ؟: ديا

؟‎ _ ‏مخطط ؟‎

P ! 1

P

© ‏م ؤ‎ (CH), R R 0 ١

HO (CH,),

NH, ‏يبب‎ N + DIPEA R’

N rR DMA ; p? RS 20°C R N p? (Vllla) (mn (va)

HCl

Dioxane 20°C ‏لد 0 اج‎

N (CH,), \ H

R rR’ N

H av) ‏وجميع‎ ¢ tert-butoxycarbonyl ‏و 02 هما مجموعات حماية مناسبة؛ على سبيل المثال‎ P1 ‏حيث‎ ‏يمكن تحضيرها وفقاً لمخطط التفاعل رقم ؟:‎ (VI) ‏المركبات التي لها الصيغة‎ © 7 | ] ٠ 0 N R'

ZZ wos R' © UN

NH, 2 + _— N

N RY DIPEA 8 or H 2 ١ DMA

P ‏دن‎ 60°C rR’ N (IX) (un X) bi

DCM

TFA rR! 0 2 4 DIPEA 1 0

R ‏و‎ DMA T . ‏ال‎ ‎8 1 1 Je Cr 4 H 2 + R . ‏خخ‎ BT ‏جا‎ ‏.ع‎ i 1

Nj Vv) (Xa)

YAS)

_ 0# حيث 01 هي مجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال ‎tert-butoxycarbonyl‏ ؛ وجميع المتغيرات الأخرى هي كما تم تعريفها من قبل. المركبات التي لها الصيغة ‎(VII)‏ يمكن تحضيرها وفقاً لمخطط التفاعل رقم ؛: ‎NH‏ 0 ‎N (CH),‏ : ‎((CH,),Si),NLi 7 0‏ ‎NYT N, lo an‏ أ + .©" ‎Lo re i,‏ ‎acetone 1 1‏ 4 ‎25°C R' Cr‏ و 8 / با 5 ‎R‏ ‎R N N‏ ‎HATU‏ ‎DIPEA‏ ‎DMA‏ ‎50°C‏ ‎N p'‏ ‎US‏ ‏ ‎H‏ ‎R* N‏ ا ‎R‏ ‎(VID) 2 7‏ © مخطط ¢§ حيث ‎PT‏ تمثل مجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال ‎ ¢ tert-butoxycarbonyl‏ جميع المتغيرات الأخرى هي كما تم تعريفها من قبل. المركبات ذات الصيغة ‎(VID) »)17( (I)‏ و ‎(IX)‏ متوفرة تجارياً؛ أو معروفة في المراجع. أو يمكن تحضيرها بالعمليات القياسية المعروفة في المجال؛ أو يمكن تحضيرها وفقاً للعمليات التي تم ‎٠‏ وصفها في هذا الطلب. عدي

— $ > __

والأمثلة الآتية هي لأغراض التوضيح ولا يقصد بها الحد من مجال هذا الطلب. وكل مركب تم تقديمه في ‎J‏ لأمثلة يعبر عن سمة محددة ومستقلة للاخترا ¢ . وجميع مواد البد ع ‎Bye‏ عن مركبات متوفرة تجارياً؛ أو هي معروفة في المراجع. أو يمكن تحضيرها بالعمليات القياسية المعروفة في المجال.

© وبصفة ‎dale‏ فيما يتعلق بالأمثلة الآتية: تم إعطاء درجات الحرارة بالدرجات المئوية (*م )؛ وتم تتفيذ العمليات عند درجة حرارة الغرفة أو درجة حرارة الجو؛ أي؛ عند درجة حرارة في ‎sad)‏ من ‎OVO = VA‏ تم تجفيف المحاليل العضوية فوق ‎magnesium sulfate‏ أو صوديوم لاأمائية ‎anhydrous sodium‏ ؛ وتم تبخير المذيب باستخدام مبخر دوار تحت ضغط منخفض ‎Te)‏ = 506060 باسكال؛ 4.5 -

‎0٠‏ ٠؟‏ ملي متر زثبق) في وجود حمام حراري درجة حرارته 9760 م؛ تشير التنقية بواسطة كروماتوجراف بصفة عامة إلى عمود كروماتوجراف وميضي على جل ‎silica‏ ‏¢ وتم إجراء كروماتوجراف الطبقة الرقيقة ‎(TLC)‏ باستخدام أطباق جل ‎silica‏ ؛ بصفة ‎dale‏ تلي التفاعل بعد انتهائه إجراء تحليلات ‎LC-MS‏ و/ أو ‎TLC‏ وتم إعطاء أزمنة التفاعل للتوضيح فقط؛

‎٠‏ وكان للمنتجات النهائية أطياف رنين نووي مغناطيسي للبروتون ‎(NMR)‏ مقبولة و/ أو بيانات طيف ‎(MS) ALS‏ مقبولة؛ تم إعطاء الكميات المتحصل عليها للتوضيح فقط وليست هي بالضرورة التي يمكن الحصول عليها عند استحداث عملية متقنة؛ وتم تكرار عمليات التحضير عند الحاجة لمزيد من المادة المطلوبة؛

‏عم

عند إعطائها؛ تكون بيانات ‎NMR‏ في صورة قيم بيانات البروتونات التشخيصية الرئيسية؛ معطاة في صورة أجزاء في المليون ‎(ppm)‏ بالنسبة ل ‎tetramethylsilane (TMS)‏ كمعيار داخلي؛ ويتم تحديدها عند 550 ميجا هرتز باستخدام ‎perdeuterio dimethyl sulfoxide (DMSO-dg)‏ كمذيب إلا إذا تمت الإشارة إلى خلاف ذلك؛ وتم استخدام الاختصارات الآثية: ‎cs‏ أحادية؛ 4؛ ثنائية؛ )؛ © ثلاثية؛ ‎(q‏ رباعية؛ ‎am‏ متعددة؛ ‎(bs‏ أحادية متسعة؛ الرموز الكيميائية تحمل نفس معانيها المعتادة؛ وتم استخدام وحدات ورموز ‎(ST‏ ‏تم توليد بيانات طيف اكيلة ‎(MS)‏ وبيانات ‎MS-LC‏ باستخدام نظام 1.0148 حيث يشتمل المكون ‎HPLC‏ بصفة عامة إما على معدة 1100 ‎Agilent‏ دأو ‎Waters s Alliance HT‏ )2795& 2790( وتم تشغيلها على عمود أبعاده ‎x ٠‏ ؟ مم من نوع ‎a Phemonenex Gemini 018 5 um‏ (أو أي ‎٠‏ عمود مشابه) . تتم فيه التصفية التتابعية باستخدام مادة تصفية تتابعية حمضية (على سبيل المثال؛ باستخدام تدرج بين صفر - 7955 ماء ‎acetonitrile‏ مع 58 من ‎formic acid‏ تركيزه ‎/١‏ في خليط بنسبة ‎٠‏ *: ‎٠‏ ماء : ‎acetonitrile‏ (حجم/حجم) ؛ أو باستخدام نظام مذيب مكافىء مع ‎Yau methanol‏ من ‎acetonitrile‏ (« أو مادة تصفية تتابعية قاعدية ( على سبيل المثال؛ باستخدام تدرج بين صفر - ‎Jqo0 Veo‏ ماء ‎acetonitrile‏ مع 70 من خليط ‎AA ammonia‏ بتركيز 7001 في ‎¢(acetonitrile‏ ‏ويشتمل المكون ‎MS‏ عموماً على مقياس طيفي من نوع ‎Waters ZQ‏ وتم توليد الكروماتجرافات المستخدمة للرش الالكتروني ‎(ESI)‏ بشدة كثافة للقمم السالبة والموجبة؛ وكروماتوجراف الامتصاص الكلي للأشعة ‎UV‏ بطول موجي يتراوح من ‎Toe = 73١‏ نانو ‎sie‏ وتم إعطاء قيم ‎42m‏ وعموماً؛ تم فقط تسجيل الأيونات التي تشير إلى الكتلة الأصلية وإذا لم يذكر خلاف ذلك فإن القيمة ‎Ye‏ المستشهد بها هي ‎M)‏ + 11)+؛ عدم

4/8 = إذا لم ينص على خلاف ذلك؛ فإن المركبات التي تحتوي على ذرة كربون و/ أو كبريت ‎sulfur‏ تم استبدالها بشكل غير متماتل لم يتم فصلها؛ تم إجراء أية تفاعلات ميكروويف إما في ‎«Biotage Optimizer EXP‏ أو ميكروويف استكشافي في ‎‘CEM‏ © ثم إجراء كروماتوجراف السائل ‎Je‏ الأدا ء ‎(HPLC)‏ على جهاز ‎Gilson‏ باستخدام الظروف الآتية: العمود : 018 من 511168 ذي ‎Se sda‏ على سبيل المثال؛ ‎«Waters 'Xbridge'‏ © ميكرومتر ‎٠٠١» ١٠ ¢ silica‏ مم؛ أو ‎Yoo ٠‏ مم؛ باستخدام خلائط مذيب قطبي بكميات متدرجة تناقصياً كمادة تصفية تتابعية نسبة متناقصة من المذيب أ إلى المذيب ب) المذيب أ : ماء مع 7 ‎ammonium hydroxide‏

Acetonitrile ‏المذيب ب:‎ ٠

Addy ‏مل/‎ ١١ ‏دقيقة أو‎ [da YA ‏معدل التدفق:‎ ٠١ -١7 ‏التدرج: تم التحكم فيه ليتناسب مع كل مركب - ويستغرق عموما فترة زمنية تتراوح من‎ ‏دقائق.‎ ‏نانومتر.‎ YO ‏الطول الموجي:‎

Vo ‏الاختصارات‎ عدي

Chemical Abstracts Service dichloromethane

N.N'-diisopropylethylamine | DIPEA dimethylamine diethylamine dimethylacetamide

O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N' ,N'-tetramethyluronium

HATU hexafluorophosphate ‏طيف الكتلة بواسطة كروماتوجراف سائل‎ uld | LEMS lithium diisopropylamide ‏كروماتوجراف سائل متوسط الضغط‎ ٠ MPLC

N-methylpyrrolidinone a ne wi polytetrafluoroethylene PTFE strong cation exchange ‏تبادل كاتيوني قري‎ supercritical flow chromatography ‏كروماتوجراف 33( فوق حرج‎ t-butyl methyl ether | TBME triethylamine trifluoroacetic acid tetrahydrofuran ‏شرح مختصر للرسومات‎ ‏في العينات المأخوذة من‎ PRAS40 5 GSK3P phosphorylation ‏مستويات فسفرة‎ :١ ‏الشكل‎ ‎Yeo ‏أو‎ Yo. ‏ء جرعة صغيرة تبلغ‎ Llc) ‏المزروعة في فئران عارية بعد‎ U87-MG ‏ا لأورام‎ : ‏مجم/كجم من‎ 2 (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide (E9), ‏لكل نقطة زمنية.‎ 0 - « Cua ‏ميا‎

لذ © اا

الشكل ؟: نتائج دراسة حول ‎MCF-7‏ المضاد للأورام في فئران ‎SCID‏ باستخدام جرعة تعطى مرة

واحدة في اليوم تبلغ ‎7٠١‏ مجم/كجم من : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1 -(7TH-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yhpiperidine-4-carboxamide (E9).‏

© الوصف التفصيلي مثال رقم ‎A‏ ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxamide‏ ‏0 ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏م0 ‎٠‏ لتم تقليب : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ (المركب الوسيط رقم ‎VY) 1-(4-chlorophenyl)ethanamine ane YAY) )١‏ مجم) ‎N-(3-‏ ‎YY) dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide‏ مجم) 5 ‎1-hydroxybenzotriazole‏ ‎NIT) ٠‏ مجم) سوياً في ‎(de ¥) DMF‏ في جو من ‎nitrogen‏ لمدة ‎١7‏ ساعة. تم تقسيم خليط ميا

١ ‏تم تجميع الطبقات العضوية؛‎ ٠ ‏مل)‎ Yox ¢ ) ‏مل) و محلول ملحي‎ Ye. ) EtOAc ‏التفاعل بين‎ ‏تجفيفها فوق 4 وتبخيرها في وسط مفرغ . تمت إذابة المادة الصلبة البيضاء الناتجة في-1,4‎ ‏مل). تم‎ ©) 1,4-dioxane ‏في‎ HCL ‏مل) وتمت إضافة محلول تركيزه ؛ مولار من‎ ©) dioxane ‏مل). تم عزل‎ ٠ ) diethyl ether ‏ساعة؛ ثم تم تخفيفه باستخدام‎ ١ ‏تقليب الخليط الناتج لمدة‎ ‏حيث تمت تنقيته التنقية بواسطة كروماتوجراف تبادل‎ HCL ‏المنتج الخام بالترشيح في صورة ملح‎ © ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته‎ SCX ‏باستخدام عمود‎ ¢ jon exchange chromatography ‏أيوني‎ ‎|ّ ‏وتم تبخير الأجزاء النقية حتى‎ MeOH/ ammonia ‏مولار‎ ١ ‏تتابعياً من العمود باستخدام‎ ‏تحضيري باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة‎ LCMS ‏الجفاف. تمت تنقية هذه المادة بواسطة‎ ‏كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي‎ MeCN ‏و‎ (NH3 7) ‏من ماء (يحتوي على‎ : ‏المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي‎ ٠ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxamide . (% ¢y cas ١ A) ‏في صورة مادة صلبة بيضا ع‎ 1H NMR (d6-dmso, 400MHz) 1.33-1.49 (m, 5H), 1.84-2.04 (m, 2H), 2.12-2.22 (brs, 2H), 3.54 (t, 2H), 4.39 (t, 2H), 4.81-4.92 (m, 1H), 6.55-6.59 (m, 1H), 7.13-7.18 (m, 1H), ١ 7.31-7.39 (m, 4H), 8.12 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 11.62 (s, 1H).

MS m/e MH+ 399.

ARPS ‏مثال‎ ‏دما‎

- ١ه‏ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo{2,3 -d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏0 - ‎H‏ ‎Ci‏ ‎N‏ ‎on‏ ‎NS‏ ‎NTH‏ ‏تمت إضافة : ‎0-(7-Azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate 2‏ ‎EVA)‏ 0 جم) دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ (المركب الوسيط رقم ‎٠.711( )١‏ جم) ‎S)-1-(4-chlorophenyl)ethanamine)‏ (46..مل)و ‎٠‏ 0 لمتط1ط ‎(Je +.0Y¢)‏ في اط ‎٠١(‏ مل) عند 5 7”م في جو من ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند ‎p21‏ لمدة 8 ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion‏ ‎exchange chromatography‏ ¢ باستخدام عمود 50(6. المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎V‏ مولار ‎MeOH/ NH3‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. هذه المادة الخام تمت معالجتها بعد ذلك باستخدام محلول تركيزه ‎77١8‏ من ‎٠١( DCM STFA‏ مل) و تم تقليبها ‎٠‏ عند درجة حرارة الغرفة. تمت تتقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion exchange‏ ‎chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود عي

“هم _ باستخدام ‎١‏ مولار ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف . تمت تنقية هذه المادة بواسطة ‎LCMS‏ تحضيري باستخدام ‎Lda‏ قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎(NH3/)‏ و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d] pyrimidin-4-) ©‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏في صورة ‎sale‏ صلبة بيضاء ‎YAY)‏ جم 7004 7). ‎1H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6) § 1.37 (3H, d), 1.42 - 1.45 (2H, m), 1.88 - 2.01 (2H.‏ ‎m), 2.27 (2H, s), 3.49 - 3.59 (2H, m), 4.34 - 4.44 (2H, m), 4.83 - 4.90 (1H, m), 6.57 -‏ ‎(1H, m), 7.14 - 7.16 (1H, m), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.30 (1H, d), 11.62 ٠١‏ 6.58 ‎(1H, s).‏ ‎MS m/e MH" 399‏ مثال رقم ؟: ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d|pyrimidin-4-yl)piperidine-‏ ‎4-catBoxamide‏ ‏0 ‎N‏ 0 8 ال تمت إضافة : ال

— 4ه ‎O-(7-Azabenzotriazol-1 -y1)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ) 4 ؛ جم) ‎dada‏ واحدة إلى : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ © (المركب الوسيط رقم ‎vorA0) 1 _(4-chlorophenyl)propan-1-amine «(aa +. YAY) )١‏ جم)و ‎(Je +.Y1Y) DIPEA‏ في ‎٠١( DMA‏ مل) عند 75م في جو من ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند 0٠م‏ لمدة £ ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎on‏ ‎«exchange chromatography‏ باستخدام عمود ‎SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ل ع ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. هذه المادة ‎٠‏ الخام تمت معالجتها بعد ذلك باستخدام محلول تركيزه ‎27١‏ من ‎TFA‏ في ‎٠١( DOM‏ مل) واتم تقليبها عند درجة حرارةٍ الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ؛ باستخدام عمود ‎(SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎١‏ ع ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. تمت ‎Aan‏ هذه المادة بواسطة تحضيري باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎ammonia)‏ ( ‎Vo‏ و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2.3 -d]pyrimidin-4-yl)piperidine-‏ ‎4-carboxamide‏ ‏في صورة مادة صلبة بيضاء ‎CATA)‏ جم؛ ‎(ETT‏ ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d¢) 6 0.87 3H, 1), 1.42 - 1.55 (2H, m), 1.72 - 1.79 (2H, Ye‏ ‎m), 1.91 - 2.05 (2H, m), 2.21 (2H, 5), 3.54 — 3.62 (2H, m), 4.38 — 4.45 (2H, m), 4.65 -‏ دما

5ه ‎(1H, m), 6.61 (1H, dd), 7.18 (1H, dd), 7.32 - 7.37 (4H, m), 8.31 (1H, d), 8.12 (1H,‏ 4.70 ‎S).‏ ‎MS m/e MH" 413.‏ المثالان ‎av 39 Jv‏ ‎(S)-8-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide and (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏0 5 ‎NH, NH,‏ ‎ove oes‏ ص ‎C0 oD‏ ‎SN N‏ 7< تمت تنقية : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine- Ye‏ ‎4-carboxamide‏ ‏راسيمي (مثال ‎(Vad)‏ بواسطة ‎HPLC‏ كيرالي تحضيري. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي الأيزومر١‏ (ناتج التصفية التتابعية الأول» ١؛‏ مجم) في صورة مادة صلبة ‎94s Lay‏ } لأيزومر ‎١‏ (ناتج التصفية التتابعية الثاني؛ ‎١‏ مجم) في صورة مادة ‎V0‏ صلبة بيضاء. كانت البيانات التحليلية مطابقة ‎dll‏ الأصلية. أظهرت التحليلات بواسطة ‎HPLC‏ ‏كيرالي تحليلي(باستخدام عمود ١٠ميكرومتر ‎(pet 1 x axYo:) Chiralpak AS‏ 6 مع علا

‎7١ —‏ — 1 باستخدام خليط تصفية تتابعية من ‎TEA [(°+/ ©+MeOH [EtOH)/ iso-hexane‏ ‎Yoel) / Ye /4 ٠‏ مل/دقيقة عند ‎Yo‏ م ؛ مع حقن ‎Yo‏ ميكرولتر من محلول ‎١‏ مجم/ ‎Je‏ في ‎EtOH‏ ( أن كل متشاكل كان متميزاً عن الآخر ونقي تشاكلياً (زيادة تشاكلية = ‎(Ye‏ ‏مثال رقم 4 : ‎4-arfino-N-((4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏0 ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏صن ‏تمت إضافة : ‎O-(7-Azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ‎٠١‏ (77. جم) إلى : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ (المركب الوسيط رقم ‎VAY) )١‏ + جم)؛ ‎(4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanamine‏ (المركب ميا

١7 ‏عند © تم . تم تقليب‎ (Je ©) DMA ‏مل) في‎ +. YT) DIPEA ‏الوسيط رقم ؟) (41 0.0 جم) و‎ ‏م لمدة ساعة. تمت تتقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني‎ "٠ ‏المحلول الناتج عند‎ ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً‎ SCX ‏؛ باستخدام عمود‎ 100 exchange chromatography ‏وتم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف . هذه‎ MeOH/ ammonia ‏من العمود باستخدام ل ع‎ ‏مل). تم تقليب‎ 0) TFA ‏وتمت إضافة‎ «(d= Yo) dichloromethane ‏المادة الخام تم تعليقها في‎ © ‏خليط التفاعل لمدة ساعة؛ ثم تمت تتقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ؛‎ ammonia ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ل ع‎ SCX ‏باستخدام عمود‎ ‏في صورة مادة صلبة‎ lal ‏حتى الجفاف لتعطي المادة‎ AE ‏تم تبخير الأجزاء‎ 5 MeOH/ : ‏بارد لتعطي المنتج النقي‎ methanol ‏بيضاء. هذه المادة ثم سحقها في وجود‎ 4-amino-N-((4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- Ye yl)piperidine-4-carboxamide .)7 174 ca NV 1Y) ‏في صورة مادة صلبة بيضاء‎ 'H NMR (400.13 MHz, DMS0-d6) 6 0.27 - 0.37 (2H, m), 0.48 - 0.52 (2H, m), 1.18 - 1.24 (1H, m), 1.40 - 1.48 (2H, m), 1.88 - 2.02 (2H, m), 2.20 (2H, 3 .50 - 3.59 (2H, m), 4.15 (1H, 1), 4.36 - 4.42 (2H, m), 6.57 - 6.58 (1H, m), 7.14 - 7.16 (1H, m), 7.35 - 7.40 Vo (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.47 (1H, d), 11.62 (1H, s). ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(2-amino- 1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide ‏عدي‎

‎oA —‏ - ‎NH,‏ ‏0 ‎NH,‏ ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎N‏ 1 بجا إضافة ‎trifluoroacetic acid‏ (؟ ‎(Ja‏ تمت إلى : ‎tert-butyl 4-(2-amino-1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏© (المركب الوسيط رقم 1) ( 84. .؛ جم) في ‎٠ ( DCM‏ مل) عند 75م . تم تقليب المحلول الناتج عند ©" م لمدة ؟ ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion‏ ‎exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎١‏ مولار ‎MeOH/ NH3‏ تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف . المنتج الخام تمت تنقيته بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎«Waters XBridge Prep C18 OBD‏ © ميكرو ‎٠‏ وعثااه ؛ قطر ‎١4‏ مم؛ طول ‎٠٠١‏ مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎141137١‏ ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف. هذه المادة تمت تتقيتها مرة أخرى بعد ذلك باستخدام كروماتوجراف وميضي على 111:8 ؛ تدرج التصفية التتابعهية من صفر إلى ‎ammonia/ ٠١‏ ‎methanol‏ 4 ( ع ) في ‎DCM‏ . تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(2-amino-1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- ‘oe‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏مي

. (% YY. 6+ ‏جم‎ 4 ¢ v) ‏في صورة مادة صمغية عديمة اللون‎ 1H NMR (400.13 MHz, DMSO-d¢) 6 1.41 - 1.51 (2H, m), 1.86 - 1 94 2H, m), 1.97 - 2.05 (2H, m), 2.77 - 2.86 (2H, m), 3.18 (2H, s), 3.51 - 3.59 (2H, m), 4.35 - 4.44 (2H, m), 4.70 (1H, 1), 6.58 (1H, d), 7.15 (1H, d), 7.30 - 7.32 (2H, m), 7.35 - 7.37 (2H, m), 8.12 (1H, s), 8.41 (1H, 5), 11.62 (1H, 5). °

MS m/e MH" 414. :1 ‏مثال رقم‎ (S)-4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1 -(7TH-pyrrolo|2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide 0 2 0

N

00

NS

NR v. : ‏ملي مول) إلى‎ 19.57 «Ja Y) trifluoroacetic acid ‏تمت إضافة‎ (S)-tert-butyl (4-(1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidin-4-yl)methylcarbamate ‏مل) عند #70 . تم تقليب‎ ٠١( DEM ‏جم؛ 22+ ملي مول) في‎ TOY) (17 ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏المحلول الناتج عند © "م لمدة ساعة.‎ ٠ ‏دي‎

« ion exchange chromatography ‏تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني‎ 11113 ‏مولار‎ ١ ‏باستخدام عمود 5076. المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام‎ ‏تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف‎ 5 MeOH/ ‏في‎ 1 | ammonia ‏ع‎ ١ 7٠١ ‏تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى‎ «silica ‏وميضي على‎ : ‏تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي‎ .0010 © (S)-4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide ce ‏في صورة مادة صلبة بيضا‎ (% Ee + ‏جم‎ 8 5 ) 1H NMR (400.13 MHz, DMSO0-d6) 6 1.39 (3H, d), 1.43 - 1.50 (4H, m), 2.05 - 2.14 (2H, m), 2.69 (2H, 5), 3.37 - 3.47 (2H, m), 4.20 - 4.25 (211, m), 4.96 - 5.04 (1H, 10. 6.55 (1H, Ye d), 7.15 (1H, d), 7.37 (4H, 5), 8.11 (1H, 5), 8.49 (1H, d), 11.61 (1H, s).

Vv ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yhpiperidine-4-carboxamide 0

TN a— N NH,

N

BE

SZ

N

N H \o ‏عي‎

‎1١ -‏ - تمت إضافة ‎«Ja Y) trifluoroacetic acid‏ 179.57 ملي مول) إلى : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamoyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏(المركب الوسيط رقم لا ( ) ‎١٠٠8‏ مجم ‎LY‏ ملي مول عند ‎°Y 6٠‏ م و المحلول الناتج ثم تقليبه © المدة ساعة. ثم تم تخفيف المحلول باستخدام ‎methanol‏ « وتم وضعه على عمود ‎٠١ SCX‏ جم وتصفيته تتابعياً باستخدام ‎methanol‏ تلاه "ع ‎NH3‏ /146011. تم تجميع الأجزاء التي تحتوي علي المنتج؛ تركيزها بالتبخير و تنقيتها بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎Waters XBridge Prep C18‏ ‎<OBD‏ © ميكرومتر 51168 ؛ قطر ‎cae ١5‏ طول ‎٠‏ مم) ؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء ‎(gia)‏ على ‎111137١‏ ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي ‎sind‏ ‎٠١‏ علي المركب المطلوب تم ‎pan‏ حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎OA. )‏ مجم؛ ‎A‏ .+0 7( في صورة مادة صلبة عديمة اللون . ‎1H NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.28 - 1.51 (4H, m), 1.69 - 1.80 (2H, m), 1.90 - 2.03‏ ‎(2H, m), 3.37 - 3.41 (2H, m), 3.50 - 3.58 (2H, m), 4.37 - 4.43 (3H, m), 4.71 - 4.76 (1H, Yo‏ ‎m), 6.59 (1H, m), 7.16 (1H, m), 7.36 (4H, m), 8.13 (1H, 5), 8.33 (1H, d), 11.64 (1H, 3).‏ ‎MS m/e MH" 443.‏ ‎YAO)‏

المثالان ‎iv‏ و لاب: ‎(S)-4-amino-N-(1~(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide and (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-‏ ‎1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎HO HO‏ بل ذا ‎N N‏ ‎fon‏ ‎Cl Cl‏ ‎N N‏ ‎N= NZ‏ ‎N H N H 2‏ تمت إضافة ‎٠٠١ «Je 7.85( DIPEA‏ ملي مول) إلى : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)piperidine-4-carboxamide‏ (المركسب الوسيط رقم ‎٠٠ ( (VY‏ جم؛ ‎VV‏ ملي مول) و ‎4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ )+ 44 .» جم 1.9 ملي مول) في ‎ethanol‏ )10.41 ‎(Ja Ye‏ عند © تم . تم تقليب المحلول الناتج عند 2210 طوال الليل . المنتج الخام تم تحليله بواسطة 5م و تبخيره حتى الجفاف . المادة الصلبة الخام تمت تنقيتها بعد ذلك بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion exchange chromatography‏ ¢ باستخدام ؟ عمود ‎SCX‏ . المنتج تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎Y 77١8‏ ع ‎ammonia‏ في ‎DCM/ methanol‏ . الخليط الخام أعيدت تنقيته بعد ذلك باستخدام كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ (مادة التصفية التتابعية صفر - ‎ye ٠‏ لا ع ‎MeOH [ammonia‏ في ‎(DCM‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎YA)‏ yl)piperidine-4-carboxamide ‏الراسيمات تم تحليلها كيرالياً بواسطة‎ (racemate) ‏في صورة مادة صلبة دقيقة‎ (1 7.9) 0 ‏لتعطي المتشاكلات النقية بنواتج تبلغ 77١7مجم( 4م‎ (SFC) ‏كروماتوجراف تدفق فوق حرج‎ ٠ ‏مجم(717) على الترتيب. أطياف 11841 لكل من المتشاكلين كانت متطابقة.‎ £0 'H NMR (400.13 MHz, DMSO) 6 1.38-1.42 (2H, m), 1.46-1.49 (2H, d), 1.74 (2H, s), 2 1.92-2.03 (2H, m), 2.19 (2H, s), 3.55-3.58 (2H, d), 4.38 (1H, 5), 4.41 (2H, 5), 4.75-4.76 (1H, d), 6.59 (1H, s), 7.17 (1H, 5), 7.36 (4H, 5), 8.15 (1H, 5), 8.32-8.34 (1H, d), 11.65 (1H, s, exchange);

MS m/e MH" 443; HPLC tg = 1.66 min. tA ‏مثال رقم‎ ٠ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide 0 ‏حرج‎ N 5 2 ! | H ‏ر حكن‎ 1 17 <>

NR

: ‏تمت معالجة‎ tert-Butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Vo d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏مل).‎ Y) trifluoroacetic acid ‏ملي مول) باستخدام‎ + TV cane VYV) (VA ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏ملا‎

تم تقليب المحلول لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. تم تركيز الخليط تحت ضغط منخفض. تمت 485 المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎exchange chromatography‏ دمن باستخدام عمود ‎.SCX‏ تم تحميل الباقي على العمود في ‎methanol‏ وغسله باستخدام ‎methanol‏ . المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ؟ مولار ‎ammonia‏ في ‎methanol‏ و © تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎١١١(‏ مجم؛ ناتج كمي) في صورة ‎sale‏ صلبة متبلرة عديمة اللون. ‎NMR (399.9 MHz, DMSO-dg) 6 1.40 - 1.49 (2H, m), 1.85 - 2.09 (2H, m), 3.48 - 3.69‏ زا ‎(4H, m), 4.35 - 4.48 (2H, m), 4.72 - 4.81 (1H, m), 4.90 - 4.96 (1H, m), 6.58 (1H, br, s), ٠١‏ ‎(1H, m), 7.30 - 7.40 (4H, m), 8.13 (1H, s), 8.45 - 8.53 (1H, m), 11.64 (1H, 5)‏ 7.18 - 7.12 ‎m/z (ESI+) (M+H)+ = 415:4+7; HPLC tg = 1.57 min.‏ 14 ‏مثال رقم‎ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piRridine-4-carboxamide (E9)

OH

\

F000 alls]

N

{0

NY

YAO)

— Re : ‏ملي مول) إلى‎ ٠١٠٠١ «Ja ٠.٠٠١( ) Dioxane ‏تمت إضافة 1101( مولار في‎ (S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo{2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏تم‎ (Je Y+) dichloromethane ‏في‎ (Use ‏ملي‎ 7.40 can 1. YY) (YY ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏و‎ PTFE filtercup ‏ساعة. تم ترشيح خليط التفاعل خلال‎ VT ‏م لمدة‎ *٠١ ‏تقليب المعلق الناتج عند‎ © © «Waters XTerra C18 ‏تحضيري ( عمود‎ HPLC ‏المادة الصلبة الخام تمت تنقيتها بواسطة‎ ‏باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من‎ (pe ٠٠١ ‏طول‎ cae ١19 had ‏ميكرومتر 511168 ؛‎ ‏كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب‎ MeCN ‏ماء (يحتوي على 17871 ) و‎ ‏دمن‎ exchange chromatography ‏تمت تنقيتها بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني‎ بولطملا‎ 11113 ‏مولار‎ V ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام‎ .SCX ‏باستخدام عمود‎ ٠ : ‏تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي‎ 5g MeOH/ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide . ‏في صورة مادة صلبة بيضا‎ “0 ٠6 + ‏.أ جم‎ ) 1H NMR (399.9 MHz, 101150-026( 6 1.45 (2H, d), 1.86 (1H, d), 1.90 - 1.93 (1H, m), Vo 2.19 (2H, s), 3.38 (2H, q), 3.51 - 3.58 (2H, m), 4.35 - 4.38 (2H, m), 4.53 (1H, t), 4.88 (1H, d), 6.58 (1H, t), 7.16 (1H, t), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.12 (1H, 5), 8.43 (1H, d), 11.63 (1H, s), m/z (ESI+) (M+H)+ = 429; HPLC tR = 1.46 min.

YA)

مثال رقم 9 مسار بديل رقم ‎:١‏ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]|pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏

OH

‏ل‎ ‏م‎ ‎N ‎or ‎> ‏ا‎ ‎i : ‏ملي مول) إلى‎ 1.77 «Je ٠. 176( N-Ethyldiisopropylamine : ‏تمت إضافة‎ © ‏(المركب‎ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide +.£4Y) 4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine ‏ملي مول) و‎ 7.7١ ءمج١(‎ (£9 ‏الوسيط رقم‎

VA ‏مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ١٠*م لمدة‎ V0) butan-1-0l ‏جم؛ ١7.؟ ملي مول) في‎ slo ‏و غسله على التتابع باستخدام‎ (Jeo) EtOAc ‏ساعة. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام‎ ‏مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 1/8504 ؛ ترشيحها‎ YO) ‏(©*؟ مل) و محلول ملحي مشبع‎ ٠ silica ‏و تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على‎ ‏تم تبخير الأجزاء‎ . DCM 4 ammonia ‏مع‎ MeOH 7 ١ ‏؛ تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى‎ : ‏النقية حتى الجفاف لتعطي‎ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide Vo : ‏مجم) _ في صورة مادة رغوية بيضاء. تم تقليب‎ ALY)

YAo)

(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1 -(7TH-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide

في ‎ethyl acetate‏ (7 مل) لمدة ‎VA‏ ساعة. تم تجميع المادة الصلبة بالترشيح؛ غسلها باستخدام كمية صغيرة من ‎ethyl acetate‏ و تجفيفها في فرن مفرغغ عند ©" م لمدة ‎VA‏ ساعة لتعطي : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4- ©‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎+.0A0)‏ جم ‎£Y.0‏ 7( في صورة مادة صلبة ‎¢¢Y8 = + (H+ M) (+ ES)z / melian‏ ‎٠.٠١ = HPLC R‏ دقيقة . ‎1H NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 8 1.39 - 1.47 (2H, m), 1.80 - 2.02 (4H, m), 2.17 (2H,‏ ‎s), 3.35 - 3.40 (2H, m), 3.50 - 3.59 (2H, m), 4.34 - 4.41 (2H, m), 4.53 (1H, 1), 4.88 (1H, ٠‏ ‎d), 6.57 (1H, m), 7.14 - 7.16 (1H, m), 7.31 - 7.37 (4H, m), 8.12 (1H, 5), 8.42 (1H, d),‏ ‎(1H, s)‏ 11.62 مثال رقم 4 مسار بديل رقم ؟: ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piRridine-4-carboxamide‏ ‎HO‏ ‏م ‎NH,‏ وت ‎H‏ ‎N‏ ‎Cl 2.‏ ‎NN‏ ‎NTH‏ ‎YAY :‏

= 18 تمت إضافة ‎(S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط رقم ‎٠.0695( (£V‏ جم ‎YY. ov‏ ملي مول) دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ © (المركب الوسيط رقم ‎١‏ ( ) ¢ جم؛ ‎YY. ov‏ ملي مول) و ‎“٠٠ ) DIPEA‏ ملء ‎7.١‏ ملي مول) في ‎DMA‏ )£4 مل). تمت إضافة ‎VT VA can £17) HATU‏ ملي مول) وتم تقليب المحلول الناتج عند ١٠م‏ لمدة ‎VE‏ ساعة. تم تبخير خليط التفاعل حتى الجفاف ثم تم تخفيفه باستخدام ‎Ve +) EtOAc‏ مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ‎ele‏ )© مل) و محلول ملحي مشبع ‎٠ ١(‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎٠١‏ 4 ترشيحها و تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على 51168 ؛ تدرج التصفية التتابعية من ‎١‏ إلى 71 717 مع ‎ammonia‏ في 41. تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف وسحقها باستخدام ‎(Jo +) Dioxane‏ لتعطي : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎Yo‏ (المركب الوسيط رقم ‎AY Coax ¢ LAY ) (Y Y‏ %( في صورة مادة صلبة بيضاء . ‎S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏(المركب الوسيط رقم ‎£LAY) (YY‏ جمء ‎AY‏ 7( تم تعليقه في ‎(Je £0. +) Dioxane‏ وتمت إضافة ميا

¢ مولار ‎hydrogen chloride‏ في ‎«Je V.14) Dioxane‏ 771.77 ملي مول). تم تقليب الخليط عند درجة حرارة ‎gall‏ لمدة ساعتين. تمت تتقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيونى ‎jon exchange chromatography‏ ¢ باستخدام عمود 506. المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام 0.¥ مولار 10113 /148011 و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. المنتج © الخام تمت تنقيته بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎(Waters XBridge Prep C18 OBD‏ © ميكرومتر ‎silica‏ ¢ قطر 4 ‎cae‏ طول ‎٠٠١‏ مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على 71 11113 ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide Ve‏ ‎٠٠ )‏ جم "7" %( في صورة مادة صلبة بيضاء . ‎m/z (ES+) (M+H)+ = 429; HPLC tR= 1.67 min.‏ ‎'H NMR matches previous.‏ مثال رقم ‎:٠‏ ‎N-(3-4cetamido-1-(4-chlorophenyl)propyl)-4-amino-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎YAO)‏

ذه — ‎nd‏ ‏0 ‏0 ‎NH‏ ‏ض ب ا ‎N‏ ‏.6 1 ‎N‏ ب تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ )¢ مولار) ‎V.VY «Je +. 470( 1 ,4-dioxane‏ ملي مول) إلى : ‎tert-butyl 4-(3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate °‏ (المركب الوسيط رقم ‎AA) (YA‏ مجم؛ ‎١0٠١7‏ ملي مول) في ‎DOM‏ )8 مل) عند 22% تم تقليب المعلق الناتج عند ‎Yo‏ © م لمدة ٠لااساعة.‏ تم تبخير خليط التفاعل حتى الجفاف. المنتج الخام تمت تنقيته بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎«Waters XTerra C18‏ © ميكرو ‎hi ¢ silica‏ ‎cae 4‏ طول ‎٠٠١‏ مم) ؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎7١‏ ‎٠‏ 20113) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎N-(3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propyl)-4-amino-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎١٠١ )‏ مجم مضا 0 في صورة غشاء أبيض ‎ala‏ . ‎YAR)‏

١٠ — 111 NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) 6 1.42 -1.47 (2H, m), 1.79 (3H, s), 1.85 (1H, t), 1.89 - 1.93 (1H, m), 2.10 (2H, s), 3.00 (2H, t), 3.55 (2H, d), 4.36 - 4.40 (2H, m), 4.80 (1H, d), 6.58 - 6.60 (1H, m), 7.16 (1H, t), 7.34 - 7.39 (4H, m), 7.80 (1H, 0. 8.13 (1H, s), 8.39 (1H, s), 11.64 (1H, s) No visible NH2. m/z (ESI+) (M+H)+=470; HPLC tR = 1.56 min. 0 :١١ ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide

Cl \

N

/ 0 os

N

Cry

H

‏ملي مول) إلى:‎ 5.60 «Ja ٠٠١١٠ ١ ‏مولار في عصة*1,4-010‎ £) hydrogen chloride ‏تمت إضافة‎ Ve tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate (Je ©) DCM ‏ملي مول) في خليط من‎ rat A ‏جم‎ vaio) ‏(المركب الوسيط رقم ؛)‎ ‏ساعة. تم تبخير‎ ١١ ‏عند 77" م . تم تقليب المحلول الناتج عند 97م لمدة‎ (Je Y ) methanol ‏و‎ ‏ميم‎

— YY —- ion exchange chromatography ‏الخليط و تمت تتقية الباقي بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني‎

NH3 ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ؟ مولار‎ (SCX ‏باستخدام عمود‎ : ‏تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي‎ 5 MeOH/ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide ° ‏)في صورة مادة صمغية عديمة اللون.‎ ARR ‏جم‎ ٠.07 4( 1H NMR (399.902 MHz, 00013( 6 1.57 (2H, m), 1.66 (2H, br.s), 1.81 (1H, m), 2.02 (1H, m), 2.18 (6H, s), 2.18 - 2.36 (4H, m), 3.67 (3H, m), 4.50 (2H, m), 5.00 (1H, dt), 6.52 (1H, d), 7.05 (1H, d), 7.18 (2H, d), 7.29 (2H, d), 8.33 (1H, s), 9.07 (1H, d), 9.61 (1H, s). ٠٠١

MS m/e MH" 456.458 :با١ ‏المثالان ١١أ و‎ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide and (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3- (dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide

Cl cl ‏ب تل‎ / fF / ‏ا‎ oo ْ ‏ب‎ ّ -

N N

NT

C0 C0

Ng NN

YA)

- ل ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo{2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏

Chiralpak AD-H ‏ملي مول) تم فصله كيرالياً على عمود‎ ١.5١ aaa YT) ( )١١ ‏رقم‎ JG) ‏مم باستخدام كروماتوجراف مائع فوق حرج؛ مذيب التصفية التتابعية اا‎ ٠١ «+ PON Oo. )SFC ‏تم‎ NA ‏لأجزاء المناسبة للأيزومر الذي تمت تصفيته تتابعياً‎ ٠.١) DEA/ +. + EtOH)/CO2 © : ‏ليعطي‎ diethyl ether ‏تبخيرها و الباقي تم سحقه باستخدام‎ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide . ‏في صورة مادة صلبة بيضاء‎ (% Yo ‏مجم؛‎ oq ) 1H NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.43 (2H, ddd), 1.83 (2H, dt), 1.86 - 2.01 (2H, m), Ye 2.11 (6H, s), 2.14 (2H, 1), 3.56 (2H, ddd), 4.39 (2H, ddd), 4.83 (1H, dt), 6.58 (1H, dd), 7.16 (1H, dd), 7.33 (2H, d), 7.37 (2H, d), 8.13 (1H, s), 8.61 (1H, d), 11.63 (1H, s). ‏الأجزاء المناسبة للأيزومرالثاني الذي تمت تصفيته تتابعياً تم تبخيرها و الباقي تم سحقه باستخدام‎ : sh diethyl ether 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Vo d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide ‏مجم 799) في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ £7)

YA2)

— Vi — 1H NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.43 (2H, ddd), 1.83 (2H, dt), 1.86 - 2.01 (2H, m), 2.11 (6H, s), 2.14 (2H, 1), 3.56 (2H, ddd), 4.39 (2H, ddd), 4.83 (1H, ‏,زو‎ 6.58 (1H, dd), 7.16 (1H, dd), 7.33 (2H, d), 7.37 (2H, d), 8.13 (1H, 5), 8.61 (1H, d), 11.63 (1H, 5).

MS m/e MH" 456.4, 458.4

NY ‏مثال رقم‎ © 4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide

Cl

HO

0

N

H NH,

N

Co

Pa

NN

‏تمت إضافة:‎ 0-(7-Azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate Ve : ‏ملي مول) إلى‎ «.YA (ada ٠١ ) 4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid

YA)

‎Yo -— |‏ — (المركب الوسيط رقم ‎YY cana Ver) (OY‏ .+ ملي مول) و ‎N,N-diisopropylethylamine‏ ‎cov. r00)‏ 0.77 ملي مول) في ‎(Je ©) NMP‏ عند ‎°YY‏ 4 . تم تقليب المحلول الناتج عند .0 *م لمدة ‎٠١‏ دقائق ثم تم تبريده إلى درجة حرارة الجو. تمت إضافة : ‎3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-o‏ (المركب الوسيط رقم 79) )£9.0 مجم؛ ‎YY‏ ملي © مول) في صورة محلول في ‎(Je Y) NMP‏ وتم تقليب الخليط عند ‎OY‏ م لمدة ‎١76‏ ساعة. تمت إضافة ؛ مولار ‎HCl‏ في ‎(Jw V) Dioxane‏ تم تقليب الخليط عند ‎°YY‏ م لمدة ‎YE‏ ساعة إضافية. تم تركيز الخليط وتمت تنقية الباقي بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion exchange‏ ‎chromatography‏ ¢ باستخدام عمود ‎SCX‏ ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎Y) 77٠0‏ مولار ‎NH3‏ في ‎MeOH‏ ( ‎DOME ٠‏ وتم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي المنتج الخام. المنتج الخام تمت تنقيته بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎«Waters XBridge Prep 018 OBD‏ © ميكرو ‎«silica‏ قطر 4 مم؛ طول ‎٠٠١‏ مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ‎ele‏ (يحتوي على ‎7١‏ ‏3 ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- \o‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎AY cpa v.40)‏ 7) في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎1H NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.47 (2H, m), 1.80 - 1.96 (2H, m), 2.09 (2H, m),‏ ‎(1H, s), 3.27 - 3.45 (4H, m), 4.26 (2H, ddd), 5.02 (1H, dd), 6.56 (1H, d), 7.15 (1H,‏ 2.69 ‎d), 7.33 - 7.39 (4H, m), 8.12 (1H, 5), 8.44 (1H, d), 11.63 (1H, 5). Ye‏ ‎MS m/e MH" 6‏ مي

— Yi =

VY ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide

OH

0 od

N

‏من‎ ‎= ‎NTR ‎: : ‏معلق عبارة عن‎ (Jer V) TFA ‏تمت إضافة‎ 5 tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏في جو‎ (de) dichloromethane ‏ملي مول) في‎ ٠١77 ‏مجم؛‎ ١75( (V1 ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏ساعة. تمت إزالة المذيبات في وسط‎ ١١ ‏م لمدة‎ Yo ‏ثم تقليب المحلول الناتج عند‎ . argon ‏من‎ ‎Waters X-Bridge ‏تحضيري باستخدام عمود‎ HPLC ‏مفرغ وتمت تنقية خليط التفاعل بواسطة‎ ٠ ‏مم مع خلائط قطبية‎ ٠٠١ ‏قطر ل مم » طول‎ ¢ silica ‏ميكرون‎ © «18 -C) ‏ذي طور عكسي‎ ‏كمادة‎ acetonitrile ‏و‎ (ammonium carbonate 70.7 ‏(يحتوي على‎ ele ‏بكميات متناقصة من‎ التصفية التتابعية. تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide Yo‏

YAO)

- لال ) 5 مجم 71 في صورة مسحوق أبيض . 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 6 1.38 -1.46 (2H, m), 1.81 - 1.91 (4H, m), 2.25 (ZH, br 5), 3.48 (2H, m), 3.35 - 3.54 (2H, m), 4.35 - 4.41 (2H, m), 4.57 (1H, v), 4.87 (1H, m), 6.58 (1H, d), 7.16 (1H, d), 7.31 - 7.37 (4H, m), 8.11 (1H, 5), 8.45 (1H, d), 11.65 (1H, s). m/z (ESI+) (M+H)+ = 429; HPLC tR = 1.58 min. 2

VE ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(3-amino-1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo(2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide

NH, 0 >

N

H

Cl

N

0 x ‏ا‎ ‎: ‏مل) إلى معلق سبق تقليبه عبارة عن‎ +. ©) trifluoroacetic acid ‏تمت إضافة‎ Ye tert-butyl 4-(3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏تم. تم‎ YO ‏عند‎ argon ‏مل) في جو من‎ ١( DCM ‏مجم) في‎ ٠ ) (YA ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏ثم لمدة يومين . تم تبخير خليط التفاعل حتى الجفاف ليعطي ملح‎ YO ‏تقليب المعلق الناتج عند‎ ‏عا‎

— م8 ‎TFA‏ الثنائي من : 4-amino-N-(3-amino-1-(4-chlorophenyl)propyl)-1-(7H-pyrrolo| 2,3 -d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide as a partially solid oil . ‏مجم)‎ ٠١ NY. ) ‏في صورة زيت صلب جزئياً‎ 'H NMR (500 MHz, DMSO-d) 6 1.86 (1H, d), 2.01 (2H, m), 2.08 (1H, m) 2.41 (2H, 2 m), 2.69 (2H, m), 2.85 (1H, m), 3.61 (2H, 1), 4.63 (2H, 1), 5.02 (1H, q), 6.82 (1H, s), 7.36 (1H, 1), 7.41 (2H, d), 7.49 (2H, d), 7.93 (3H, 5 br), 8.32 (1H, 5), 8.59 (3H, s br), 8.96 (1H, d).

MS m/e MH" 42841426.

Vo ‏مثال رقم‎ > ٠ (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide

OH

0

NH i 4 ;

N

‏م‎ ‎N ‎<8 ‎YAo)

: ‏ملي مول) إلى‎ ١٠.٠١ ‏“فك مل‎ A) ( Dioxane ‏مولار في‎ ) HCI ‏تمت إضافة‎ (R)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3 -hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- dJpyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏ثم تقليب المعلق‎ . (Ja 9 DCM ‏ملي مول) في‎ Ve ‏جمء‎ Ye ) ( 1 ‏(المركب الوسيط رقم‎ ‏م لمدة ؟ ساعات. تم تبخير خليط التفاعل. المنتج الخام تمت تنقيته بواسطة‎ Ye ‏الناتج عند‎ © ‏مم؛ طول‎ ١19 dad ‏ميكرومتر 511168 ؛‎ © «Waters XTerra 018 ‏تحضيري (عمود‎ HPLC ‏)و‎ ammonia 7١ ‏مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على‎ ٠ ‏كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف‎ MeCN : ‏ي‎ Lal (R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1 -(7TH-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- | ٠ yl)piperidine-4-carboxamide ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ (% 98.7 tan 8 ١ ) 'H NMR (399.9 MHz, DMSO0-d6) 6 1.46 (2H, d), 1.86 (1H, d), 1.90 - 1.93 (1H, m), 2.10 (2H, m), 3.37 (1H, t), 3.55 (2H, d), 4.40 (2H, d), 4.53 (2H, m), 4.88 (1H, d), 6.58 (1H, 1), 7.16 (1H, 1), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.14 (1H, ‏,له‎ 8.43 (1H, d), 11.63 (1H, s) no visible Vo

NH2.

MS m/e MH" 429; HPLC tR = 1.46 min.

YAS)

دعقم مثال رقم ‎١‏ : ‎(R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏0 ‎N‏ ‎H‏ ‎cl‏ ‎N‏ ‏حت ‏ل ‏ا ‏© تمت إضافة :

O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate : . ‏ملي مول) دفعة واحدة إلى‎ ٠.٠ ‏جم‎ EVA) 4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid ‎٠٠‏ (المركب الوسيط رقم ‎«YT ( )١‏ جم؛ ‎١‏ ملي مول)؛ ‎«Ja 07 4( DIPEA ‏ملي مول)و‎ ٠.٠١ ‏جم؛‎ 1 ) (R)-1-(4-chlorophenyl)ethanamine ‏6 ملي مول) في 0118 ‎٠١(‏ مل) عند ”م في جو من ©01008©0. تم تقليب المحلول الناتج ‏عند ‎PT‏ لمدة ؛ ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني 100 ‎exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎.SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من ‎٠‏ العمود باستخدام /اع ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. تمت معالجة ‏المادة الخام باستخدام ‎7٠١‏ محلول من ‎TFA‏ في ‎(Je ©) DCM‏ وتم تقليبها عند درجة حرارة ‏دي

‎AY —‏ — الغرفة ‎٠‏ مت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion exchange‏ ‎chromatography‏ ¢ باستخدام عمود 50. المنتج المطلوب ‏ تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام اع ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة 1.0145 تحضيري باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎ammoniaZ) ©‏ ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم ‏تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ‎(R)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)ethy!)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- ‎vD)piperidine-4-carboxamide ‎. ‏جمء 7.4 0 في صورة مادة صلبة بيضاء‎ Yi) ) 'H NMR (400 11112, DMSO) 6 1.37 (3H, d), 1.39 - 1.48 (2H, m), 1.86 — 2.02 (2H, m), ٠١ 2.19 (2H, 5), 3.49 - 3.58 (2H, m), 4.34 — 4.43 (2H, m), 4.83 — 4.91 (1H, m), 6.56 — 6.59 (1H, m), 7.14 - 7.16 (1H, m), 7.32 — 7.38 (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.30 (1H, d), 11.62 (1H, 59)

MS m/e MH" 399. ‎WWE) ‏مثال‎ Ye (R)-4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]}pyrimidin-4- yDpiperidine-4-carboxamide ‎YAO)

- آم 0 ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎SA‏ تمت إضافة ‎YAY) Raney® nickel‏ مجم؛ ‎٠١١١‏ ملي مول) إلى محلول من : ‎(R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyano-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏2 (المركب الوسيط رقم ‎to‏ ( ) 1 مجم ‎١.٠6‏ ملي مول) 6 في ‎Ye. ) ethanol‏ مل) ‎٠‏ تمت إضافة ‎٠١( ammonium hydroxide‏ مل). تم تطهير هذا الخليط أولاً باستخدام ‎nitrogen‏ ؛ ثم تم وضعه تحت بالون من ‎hydrogen‏ وتم تقليبه لمدة ‎YT‏ ساعة. تم ترشيح خليط التفاعل خلال سيليت وتم تبخير المذيب حتى الجفاف. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ؛ تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى ‎7٠١‏ من ‎MeOH / ammonia gV‏ في 10014. تم تبخير : ‏الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي‎ ٠ (R)-4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide . ‏في صورة مادة صلبة بيضاء‎ (% oA. ‏مجم‎ 1777 ) 'H NMR (400 MHz, DMSO) ‏ة‎ 1.38 (3H, d), 1.41 - 1.51 (2H, m), 1.61 (2H, s), 2.09 (2H, d), 2.68 (2H, 5), 3.37 - 3.50 (2H, m), 4.18 - 4.28 (2H, m), 4.95 - 5.04 (1H, m), 6.56 (1H, ٠ d), 7.15 (1H, d), 7.26 — 7.50 (4H, m), 8.11 (1H, s), 8.52 (1H, d), 11.66 (1H, s).

MS m/e MH" 413. ‏ديا‎

م مثال رقم ‎A‏ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-cyanophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d|pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎HO‏ ‏م ‎ol‏ / ‎—N‏ ‎H‏ ‏: 0 با ‎N‏ ‎NTR‏ ‏© تمت إضافة ‎(S)-4-(1-amino-3-hydroxypropyl)benzonitrile‏ (المركب الوسيط رقم £1( ‎Yao)‏ ‏مجم ‎٠.١‏ ملي مول) دفعة واحدة إلى : . ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ (المركب الوسيط رقم ‎٠١١١ cama £00) )١‏ ملي مول) و ‎V-¥Y cde + 0A) DIPEA‏ ملي ‎٠‏ . مول) في ‎ud (Je) DMA‏ إضافة : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N’,N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ 9 1 ‎٠١١" cane‏ ملي مول) و تم تقليب المحلول الناتج عند ‎oF.‏ م ‎YE sad‏ ساعة. تم تبخير خليط التفاعل حتى الجفاف ثم تم تخفيفه باستخدام 20/56 ‎Vv)‏ مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ) ‎Ou‏ مل) و محلول ملحي مشبع ) 54 مل) . ثم تجفيف المادة العضوية ‎MgSO4 (sé‏ ؛ ترشيحها و تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎«silica‏ تدرج التصفية التتابعية من ؟ إلى ‎7١‏ 1 مع ‎ammonia‏ في ‎DCM‏ . تم تبخير ‎YAo)‏

I

: ‏الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي‎ (S)-tert-butyl 4-(1-(4-cyanophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate : ‏ثم تعليق‎ oe ‏مجم 6+ 1.6 7 ( في صورة مادة صلبة بيضا‎ yy ) (S)-tert-butyl 4-(1-(4-cyanophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolof2,3- © d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate hydrogen ‏و تمت إضافة ؛ مولا‎ (Je ©.+ +) Dioxane ‏في‎ (Use ‏مجم؛ )0.+ ملي‎ TV) ‏ملي مول) . تم تقليب الخليط عند درجة حرارة‎ YY. VE ‏مل‎ .4 Dioxane ‏في‎ chloride ion exchange ‏الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني‎ ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود‎ SCX ‏باستخدام عمود‎ « chromatography ٠١ ‏و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. ثم تمت تنقية‎ MeOH/ ammonia g¥.0 ‏باستخدام‎ ‏؛‎ silica ‏ميكرو‎ © «Waters XBridge Prep 018 OBD ‏تحضيري ( عمود‎ HPLC ‏المنتج بواسطة‎ ‏مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على‎ ٠٠١ ‏قطر مم؛ طول‎ 7١ ‏كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم‎ MeCN ‏و‎ ( ammonia/. : ‏تبخيرها حتى الجفاف لتعطي‎ ٠ (S)-4-amino-N-(1-(4-cyanophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d}pyrimidin-4- yDpiperidine-4-carboxamide . ‏في صورة مادة صلبة بيضاء‎ ( / ١٠.2٠ + ‏مولا مجم‎ ) ‏مضا‎

— Ao _— . 'H NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 6 1.36 - 1.47 (2H, m), 1.80 - 2.01 (4H, m), 2.17 (2H, s), 3.39 (2H, q), 3.52 - 3.59 (2H, m), 4.34 - 4.40 (2H, m), 4.58 (1H, t), 4.94 (1H, 5), 6.57 (1H, d), 7.15 (1H, d), 7.50 (2H, d), 7.76 - 7.79 (2H, d), 8.12 (1H, 5), 8.52 (1H, s), 11.61 (1H, s).

MS m/e MH" 420. 8 : ‏مثال رقم‎ (S)-4-amino-1-(5-bromo-7H-pyrrolo|2,3-d]pyrimidin-4-yl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3- hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide

Pa م ‎NH,‏ ‎N Br‏ ‎ard‏ ‎Sy N‏ ‎Ve‏ تمت إضافة ‎TV 4) DIPEA‏ + ملء ‎TAC‏ ملي مول) إلى : ‎(8)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide‏ (المركب ‏الوسيط رقم 4 ( ) ‎foe‏ مجم؛ ‎٠‏ ملي مول) و عصننستدوم[5-070110-4-0100-711-0171010]2,3-0 (المركب الوسيط رقم +0( (7948 مجم؛ ‎٠١8‏ ملي مول) في ‎١( butan-1-0]‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند 0١٠1م ‎١8 sad‏ ساعة. ‎٠‏ خليط التفاعل تم تخفيفه باستخدام ‎EtOAc‏ )04 مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ‎Yo)‏ ‏دي

- ١م‏ مل) و محلول ملحي مشبع ‎YO)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎MgSO4‏ ؛ ترشيحها و تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ‏تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى 775 ‎MeOH‏ .مع ‎ammonia‏ .في ‎DCM‏ . ثم تمت تنقية المنتج بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري (عمود ‎«Waters XBridge Prep C18 OBD‏ © ميكرو ‎silica‏ « © قطر ‎١9‏ ممء؛ طول ‎(pe ٠٠١‏ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎ammoniall)‏ ) و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف و سحقها باستخدام ‎diethyl ether‏ لتعطي : (S)-4-amino-1-(5-bromo-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3- hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide oe Lay ‏في صورة مادة صلبة‎ (% ١٠١ ‏م ولا مجم‎ ) Ye '"H NMR (400.13 MHz, DMSO-d¢) 6 1.41 - 1.50 (2H, m), 1.81 - 1.92 (2H, m), 2.04 - 2.20 (4H, m), 3.37 - 3.44 (4H, m), 3.91 (2H, t), 4.54 (1H, t), 4.90 (1H, m), 7.33 - 7.38 (4H, m), 7.50 (1H, s), 8.25 (1H, 5), 8.47 (1H, d), 12.18 (1H, s).

MS m/e MH" 510.

Ya ‏مثال رقم‎ Yo (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin- 4-yl)piperidine-4-carboxamide

YAO)

— AV —

OH

‏ا‎ ‎: ‏)ل‎ + 3

N or

XN N

تمت إضافة ‎DIPEA‏ (4195.» مل؛ ‎7.4١‏ ملي مول) إلى : ‎GS yall) (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide‏ الوسيط رقم £9( ‎YOu)‏ مجمء ‎Av‏ .+ ملي مول) و ‎4-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine‏ ‎YE) ©‏ مجم؛ ‎Ar‏ + ملي مول) في ‎butan-l-ol‏ )© مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎“٠١‏ م لمدة 1 ساعة. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ )+0 مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ‎(Je YO)‏ و محلول ملحي مشبع ‎YO)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 118804 ؛ ترشيحها وتبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ؛ تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى 776 ‎MeOH‏ مع ‎DCM 4 ammonia‏ . تم : ‏لتعطي‎ diethyl ether ‏تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف وسحقها باستخدام‎ ٠ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin- 4-yl)piperidine-4-carboxamide ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ )7 77.5 (aaa 11 Y) ‏عي‎ :

مم ‎1H NMR (399.9 MHz, DMSO-d¢) 6 1.49 (2H, 0.1.79 - 2.01 (4H, m), 3.39 (2H, m), 3.62‏ ‎(2H, 5), 4.40 (2H, 5), 4.57 (1H, 1), 4.88 (1H, m), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.22 (1H, d), 8.29‏ ‎(1H, s), 8.45 (1H, d), 13.52 (1H, s).‏ ‎MS m/e MH" 430.‏ © مثال رقم ‎YY‏ ’ ‎(S)-4-amino-N-(3-hydroxy-1-phenylpropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎HO‏ ‏م ) ‎H‏ ‏015 ‏م0 ‎NS‏ ‎NTR‏ ‏تمت إضافة ‎٠١١ cana YT4) (S)-3-Amino-3-phenylpropan-1-ol hydrochloride‏ ملي ‎٠‏ مول) دفعة واحدة إلى : 4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid ‏مل؛ 0.0% ملي‎ «.3TV) DIPEA ‏ملي مول) و‎ ٠.78 ‏مجم؛‎ 000) )7١ ‏(المركب الوسيط رقم‎ : ‏مل). تمت إضافة‎ °) DMA ‏في‎ (Use

YAO)

4م ‎ova ) O-(7-azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N’,N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ مجم؛ ‎٠.57‏ ملي مول) وتم تقليب المحلول الناتج عند ١٠م‏ لمدة ‎YE‏ ساعة. تم تبخير خليط التفاعل حتى الجفاف ثم تم تخفيفه باستخدام ‎Yor) EtOAc‏ مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء )01 مل) و محلول ملحي مشبع )04 ‎(Ju‏ تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎MgSO4‏ ؛ © ترشيحها وتبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎«silica‏ تدرج التصفية التتابعية من ؟ إلى 776 ‎ammonia ae MeOH‏ في104 . الأجزاء تم تبخيرها لتعطي : ‎(S)-tert-butyl 4-(3-hydroxy-1-phenylpropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-‏ ‎4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎EAA (aaa TYE) ٠‏ 1( في صورة مادة صلبة بيضاء. تم تعليق المنتج ‎YT E)‏ مجم؛ ‎TY‏ ملي ‎(Use‏ فيع110*80 )© ‎(Je‏ وتمت إضافة 4 مولار ‎hydrogen chloride‏ في ‎+.97Y) Dioxane‏ مل ‎١7.59‏ ملي مول) . ثم تقليب الخليط عند درجة حرارة الجو لمدة سا عثين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎ion exchange chromatography‏ ¢ باستخدام عمود ‎SCX‏ ‏. المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام 7.6 ع ‎MeOH/ NH3‏ و تم تبخير ‎Ve‏ الأجزاء النقية حتى الجفاف. تم سحق المادة الصمغية الناتجة باستخدام ‎EtOAc‏ لتعطي ‎sale‏ ‏صلبة تم تجميعها بالترشيح وتجفيفها في وسط مفرغ لتعطي : ‎(S)-4-amino-N-(3-hydroxy-1-phenylpropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎VY (ada 9 9‏ %( في صورة مادة صلبة بيضاء . د

.8# ا ‎(2H, 0. 1.82 - 2.03 (4H, m), 3.37 (2H, t), 3.50‏ 1.44 ة ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d)‏ ‎(2H, m), 4.40 (2H, 1), 4.49 (1H, 1), 4.90 (1H, d), 6.58 (1H, 5), 7.15 (1H, 1), 7.21 -‏ 3.58 - ‎(1H, m), 7.30 - 7.31 (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.41 (1H, d), 11.62 (1H, s).‏ 7.23 ‎MS m/e MH" 395.‏ © مثال رقم ‎(YY‏ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(9H-purin-6-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxamide‏ ‎Pa‏ ‏م لمح“ ‎Ay NH,‏ ِ ‎N‏ ‎NZ SN‏ ‎I‏ ‎N‏ ‏3< ‏تمت إضافة ‎+.¥Y0) DIPEA‏ مل؛ ‎٠.57‏ ملي مول) إلى : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(9H-purin-6-yl)piperidine-4- ٠١‏ ‎carboxamide‏ ‏(المركب الوسيط رقم £9( ‎TE cana You)‏ .+ ملي مول) وى ‎6-chloro-9H-purine‏ )44 مجم؛ 4 ملي مول) في 5180-1-01 )£ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند 221 ‎١8 ad‏ ساعة. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎١( EtOAc‏ 5 مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ‎Yo)‏ ‏10 مل) و محلول ملحي مشبع ‎YO)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎MgSO4‏ ؛ ترشيحها و مي

— ١ - ¢ silica ‏تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على‎ ‏في0014 . تم تبخير الأجزاء‎ ammonia ‏مع‎ MeOH 77 ‏تدرج التصفية التتابعية من صفر إلى‎ : ‏النقية حتى الجفاف لتعطي‎ (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(9H-purin-6-yl)piperidine-4- carboxamide o ‏في صورةٍ مادة صلبة بيضاء.‎ )7 ©٠١١٠ aan) €)) ‏يرا‎ NMR (400.13 MHz, DMSO-d¢) 6 1.42 (2H, t), 1.78 - 2.00 (4H, m), 3.34 - 3.41 (2H, m), 3.61 (2H, s), 4.53 (1H, t), 4.88 (1H, d), 5.02 (2H, s), 7.30 - 7.39 (4H, m), 8.08 (1H, 5), 8.17 - 8.22 (1H, s), 8.42 (1H, d), 13.02 (1H, s).

MS m/e MH" 430. ٠١ ‏مثال رقم ؟7:‎ (S)-4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d}pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide

OH

0

Cl

N

‏حت‎ ‎x ‎N ‎Nom ‏ديا‎

‎ay -‏ - تمت إضافة ‎(S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط رقم ‎YEV) (£V‏ ‎VEY cans‏ ملي مول) دفعة واحدة إلى : ‎4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ 2 (المركب الوسيط رقم ‎(aa 05 ) ( ١١‏ 97 ملي مول) و ‎ov (dw . .4 A)DIPEA‏ ملي مول) في ‎DMA‏ )1 مل). تمت إضافة : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N’,N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ) لاذه مجم ‎Y.EV‏ ملي مول) وثم تقليب المحلول الناتج عند ‎Ye‏ م لمدة سا ‎Ce‏ ثم عند ‎٠٠‏ 2° لمدة ‎YA‏ ‏ساعة. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ )© مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ‎٠‏ (١٠مل)‏ و محلول ملحي مشبع ‎Yr)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 118504 ؛ ترشيحها و تبخيرها لتعطي المنتج الخام . تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ‎٠‏ تدرج التصفية التتابعية من ؟ إلى 771 1 مع ‎ammonia‏ في ‎DCM‏ . تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎(S)-tert-butyl (4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-yl)methylcarbamate Yo‏ ‎A)‏ إل ‎Cada‏ 8.7 %( في صورة مادة صمغية عديمة اللون ‎Caddo‏ إذابة المنتج ‎¢Y A)‏ مجم) في ‎(Ja 1. +) Dioxane‏ وتمت إضافة ¢ مولار ‎hydrogen chloride‏ في ‎+.9Y0) Dioxane‏ مل؛ 7.4 ملي مول) ‎٠‏ تم تقليب الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎jon exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ ‏| ملا

‎ar _‏ — المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام 6. ع ‎MeOH/ ammonia‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف. المنتج الخام تمت تنقيته بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ( عمود ‎«Waters XBridge Prep 018 08‏ © ميكرومتر 11168 ؛ قطر 14 مم؛ طول ‎(pe ٠‏ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على ‎MeCN ) ammonia 7١‏ © كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي ‎4-(aminomethyl)-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏

‎١97(‏ مجمء 7.5 1( في صورة غشاء أبيض جاف. ‎(2H, m), 1.79 - 1.84 (1H, m), 1.89 - Ye‏ 1.47 - 1.45 ة ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6)‏ ‎(1H, m), 2.09 (2H, s), 2.67 (2H, 5), 3.36 - 3.42 (4H, m), 4.25 (2H, d), 4.57 (1H, s),‏ 1.99 ‎(1H, d), 6.55 (1H, s), 7.14 (1H, s), 7.33 - 7.36 (4H, m), 8.11 (1H, s), 8.44 (1H, d),‏ 5.01 ‎(1H, s).‏ 11.61 ‎MS m/e MH" 443.‏

‎YE ‏مثال رقم‎ . ٠ (S)-4-amino-N-(1-(4-bromophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d ]pyrimidin-4- ybpiperidine-4-carboxamide ‏ميا‎

‎HO‏ ‏م ) ‎fo)‏ 2 2 م ‎H‏ ‏06 ‎des‏ ‎XN‏ ‏تمت إضافة ‎(S)-3-Amino-3-(4-bromophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط رقم )0( ‎YAY)‏ ‏مجم؛ ال ملي مول) دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid °‏ (المركب الوسيط رقم ‎AT cana Yoo) )١‏ + ملي مول) و ‎«Jo +. 270) DIPEA‏ 7.41 ملي ‎(Use‏ في ‎DMA‏ )° مل). تمت إضافة : ‎Yi V) O-(7-azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N’N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ مجم )4 ملى مول و ثم تقليب المحلول الناتج عند ‎٠١‏ م لمدة ؛ ؟ ساعة. ثم تبخير خليط ‎٠‏ التفاعل حتى الجفاف ثم تم تخفيفه باستخدام 210/6 )+ ‎Ve‏ مل)؛ وغسله على التتابع باستخدام ‎ele‏ ‎*٠١(‏ مل) و محلول ملحي مشبع ‎١(‏ 5 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 148804 « ترشيحها و تبخيرها لتعطي المنتج الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ‏» تدرج التصفية التتابعية من ؟ إلى 756 ‎MeOH‏ مع ‎ammonia‏ في ‎DCM‏ . تم تبخير الأجزاء لتعطي : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-bromophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1 -(7H-pyrrolo[2,3- Yo‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏ديا

— 0{ — ‎١٠١ )‏ مجم + 20 %( في صورة مادة صلبة بيضاء. ثم تعليق المنتج ) ‎YYY‏ مجم ‎LY‏ ملى مول) في ‎(Jo ٠٠ ( Dioxane‏ وتمت إضافة § مولار ‎hydrogen chloride‏ في ‎Dioxane‏ ‎٠».‏ مل ‎VT‏ ملي مول) . تم تقليب الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎jon exchange chromatography‏ ؛ باستخدام © عمود ‎SCX‏ المنتج المطلوب ‏ تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام .ع ‎ammonia‏ ‎MeOH/‏ وثم تبخير ‎١‏ لأجزاء النقية حتى الجفاف. ثم تمت تنقية المنتج بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ) عمود ‎o «Waters XBridge Prep C18 OBD‏ ميكرومتر ‎silica‏ ¢ قطر 4 ‎cae‏ طول ‎٠٠١‏ مم)؛ باستخدام خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على 71 ‎ammonia‏ ( و ‎MeCN‏ كمواد تصفية تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي ‎Ye‏ المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي : ّ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-bromophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎٠١. (ane 5. )‏ %( في صورة مادة صلبة ‎ve Lay‏ ‎NMR (400.13 MHz, DMSO-d) 8 1.38 - 1.46 (2H, m), 1.79 - 2.01 (4H, m), 2.15 (2H,‏ {1' ‎s), 3.37 (2H, q), 3.51 - 3.58 (2H, m), 4.37 (2H, 1), 4.52 (1H, t), 4.86 (1H, d), 6.57 (1H, Yo‏ ‎d), 7.15 (1H, d), 7.27 (2H, d), 7.48 - 7.51 (2H, m), 8.12 (1H, 5), 8.42 (1H, d), 11.62 (1H,‏ ‎s).‏ ‎MS m/e MH" 473.‏ عدم

= 4741 — مثال رقم ‎Yo‏ ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-(dimethylamino)butyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏ ‎NG‏ ‏0 ‎H‏ ‎cl‏ ‎N‏ ‏حت ‎NS‏ ‏ا ‏© تمت إضافة : ‎1-(4-Chlorophenyl)-N4,N4-dimethylbutane-1,4-diamine‏ (المركب الوسيط رقم ‎YY) (oF‏ ‎(axa‏ 1.1 ملي مول) دفعة ‎asl,‏ إلى : ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ ‎Ve‏ (المركب الوسيط رقم ‎)١‏ )07 مجم؛ ‎٠.47‏ ملي مول)و ‎5.7١7 cde + VIY) DIPEA‏ ملي ‎(Use‏ في ‎(Je ©) DMA‏ تمت إضافة : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N’ N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ) 1.9 مجم؛ ‎٠.6٠١‏ ملي مول) وتم تقليب المحلول الناتج عند ‎١‏ © م لمدة ساعتين. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎(Ja Yo ) EtOAc‏ ‘ وغسله على التتابع باستخدام ماء ) ‎٠‏ مل) ومحلول ملحي ‎٠١‏ مشبع ‎V+)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 1/8504 ؛ ترشيحها وتبخيرها لتعطي المنتج

‎av —‏ _ الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على ‎silica‏ ¢ تدرج التصفية التتابعية من © إلى ‎7٠١‏ 1 مع ‎ammonia‏ في ‎.isohexane‏ تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف ‎Lal‏ يا : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-4-(dimethylamino)butylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate 2‏ 9 لل مجم + ‎٠.‏ %( في صورة مادة صمغية عديمة اللون ‎Cu ٠.‏ إذابة : ‎tert-Butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-4-(dimethylamino)butylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎١94 cana EY 9)‏ ملي مول) في ‎٠ ) DCM‏ مل) وتمت إضافة ‎(Je ١( TFA‏ تم تقليب ‎٠‏ الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎jon exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎(SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎MeOH/ ammonia g¥.0‏ و تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي المنتج الخام الذي تم سحقه باستخدام ‎diethyl ether‏ ليعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-(dimethylamino)butyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide Vo‏ ‎(A(X 75.8 cana YEO)‏ صورة مادة صلبة بيضاء. ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO0-d6) 6 1.26 - 1.33 (2H, m), 1.38 - 1.47 (2H, m), 1.65 -‏ ‎(2H, m), 1.87 - 2.01 (2H, m), 2.08 (6H, s), 2.18 (2H, t), 3.50 - 3.58 (2H, m), 4.35 -‏ 1.75 ديا

4.41 (2H, m), 4.73 (1H, m), 6.57 (1H, d), 7.14 - 7.16 (1H, m), 7.32 - 7.37 (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.31 (1H, d), 11.62 (1H, s).

MS m/e MH" 470. : :77 ‏مثال رقم‎ (5)-8-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(diethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide [J

H

Cl

N

‏م0‎ ‏ا‎ ‏ل«‎ ‏(المركب الوسيط‎ (S)-1-(4-Chlorophenyl)-N3,N3-diethylpropane-1,3-diamine: ‏تمت إضافة‎ : ‏ملي مول) دفعة واحدة إلى‎ ١.49 ‏مجمء‎ VA) (0 ‏رقم‎ ‎4-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d}pyrimidin-4-yl)piperidine-4- Ye carboxylic acid ‏ملي‎ YEA ‏مل‎ 04 ) DIPEA ‏ملي مول) و‎ EA ‏(المركب الوسيط رقم \ ( ) 78 مجم؛‎ : ‏مل). تمت إضافة‎ °) DMA ‏مول) في‎ ‏دي‎

‎O-(7-azabenzotriazol-1-y1)-N,N,N’ ,N’-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ (لا ‎Ye.‏ ‏مجم؛ ‎١.04‏ ملي مول) وتم تقليب المحلول الناتج عند 220 لمدة ساعتين. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ ) ©؟ مل)؛ و غسله على التتابع باستخدام ماء ) ‎(Je Yo‏ ومحلول ملحي مشبع ‎Yr)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 118504 ؛ ترشيحها وتبخيرها لتعطي المنتج © الخام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على 511:08 ؛ تدرج التصفية التتابعية من © إلى ‎MeOH 72٠‏ مع ‎DCM 4 ammonia‏ . تم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(diethylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎٠١‏ فم مجم؛ 10.0 %( في صورة مادة صمغية عديمة اللون ‎aad,‏ إذابة: (S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(diethylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏مل). تم تقليب‎ ١( TFA Ala) ‏مل) و تمت‎ 0.0 +) DCM ‏ملي مول) في‎ ١77 cane YAS) ‏الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبادل‎ ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته‎ SCX ‏؛ باستخدام عمود‎ jon exchange chromatography ‏أيوني‎ Yo ‏وتم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف‎ MeOH/ ammonia ‏تتابعياً من العمود باستخدام لاع‎ لتعطي المنتج الخام الذي تم سحقه باستخدام ‎diethyl ether‏ ليعطي : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(diethylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏

YAo)

سد هي —

) م ولا مجم « 1.7 7 ( في صورة مادة رغوية ‎Lay‏ ء. ‎(6H, d), 1.42 - 1.49 (2H, m), 1.86 - 2.01 (4H,‏ 0.94 ة ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6)‏ ‎m), 2.43 (2H, m), 3.51 - 3.59 (2H, m), 4.37 - 4.43 (2H, m), 4.84 (1H, 1), 6.58 (1H, d),‏ ‎(1H, d), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.12 (1H, s), 8.59 (1H, s), 11.63 (1H, 5).‏ 7.16 - 7.15 ‎MS m/e MH" 484, °‏

مثال رقم ‎(YY‏ ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(5-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎OH‏ ‎So‏ ‎N NH,‏ » ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎ors‏ ‏> ‏8 “ ‎٠‏ تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ 4 مولار في ‎AYY) Dioxane‏ .+ مل؛ 7.74 ملي مول) إلى: ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(5-cyclopropyl-7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏(المركب الوسيط رقم 10( )0 ‎+-VE cane £Y‏ ملي مول) في ‎(Je 0) Dioxane‏ تم تقليب المحلول الناتج عند درجة حرارة ‎gall‏ لمدة ساعتين. تمت إذابة خليط التفاعل في ‎methanol‏ و ‎Vo‏ تنقيته بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎jon exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ ‏عي

— ١١١ ‏ا‎ ‏وتم تبخير‎ MeOH/ ammonia ‏المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام .ع‎ . ‏مم)؛ باستخدام‎ ٠٠١ ‏مم؛ طول‎ ١1 ‏ميكرو 11168 ؛ قطر‎ © «Waters XBridge Prep C18 OBD ‏كمواد تصفية‎ MeCN ‏و‎ ( ammonia/. ١ ‏خلائط قطبية بكميات متناقصة من ماء (يحتوي على‎ : ‏تتابعية. الأجزاء التي تحتوي علي المركب المطلوب تم تبخيرها حتى الجفاف لتعطي‎ © (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(5-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide sc Lay Alia ‏مجم « آلا %( في صورة مادة‎ 7.6 ) 'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d) ‏ة‎ 0.66 - 0.70 (2H, m), 0.86 - 0.91 (2H, m), 1.41 - 1.50 (2H, m), 1.81 - 2.13 (5H, m), 3.35 - 3.43 (4H, m), 3.99 - 4.07 (2H, m), 4.54 (1H, 1), Ye 4.90 (1H, d), 6.90 (1H, s), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.18 (1H, s), 8.47 (1H, d), 11.46 (1H, s).

MS m/e MH" 470. (YA ‏مثال رقم‎ 4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propy!)-1-(7H-pyrrolo[2,3- dJpy¥fnidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide

YA)

‎١١١7 -‏ — 0 \ ‎N‏ ‏لم ‎N‏ ‎L~ N‏ تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ )£ مولار في ‎٠.84 (Jae £1) ¢ dioxane‏ ملي مول) إلى: ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏© (المركب الوسيط رقم ‎cana ٠١( (TA‏ 07 ملي مول) في خليط من ‎methanol 5 (Je ¥) DCM‏ ‎١(‏ مل) عند 77م . تم تقليب المحلول الناتج عند ١7م‏ لمدة ساعتين. تم تبخير الخليط و تمت تنقية الباقي بواسطة كروماتوجراف تبادل أيوني ‎jon exchange chromatography‏ باستخدام عمود ‎.SCX‏ المنتج المطلوب تمت تصفيته تتابعياً من العمود باستخدام ‎77٠‏ )¥ مولار ‎NH3‏ في ‎(MeOH‏ في ‎DCM‏ ‎٠‏ وتم تبخير الأجزاء النقية حتى الجفاف لتعطي : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏(لا مجم ‎AT‏ 0 في صورة مادة صمغية عديمة اللون . ‎YAO)‏

— ١١١7 = 'H NMR (399.902 MHz, DMSO) ‏ة‎ 1.44 (2H, m), 1.83 (2H, dt), 1.87 - 2.01 (2H, m), 2.15 (2H, m), 2.25 (2H, br.s), 2.42 (2H, m), 3.56 (2H, m), 4.38 (2H, m), 4.84 (1H, br.s), 6.58 (1H, d), 7.16 (1H, d), 7.32 - 7.38 (4H, m), 8.13 (1H, s), 8.57 (1H, s), 11.63 (1H, s).

MS m/e MH" 442. 4-44-44, ‏بالإضافة إلى المركبات التي تم تقديمها في الأمثلة السابقة؛ تم استخدام الاجراءات التي تم وصفها‎ © ‏في هذا الطلب أو إجراءات مناظرة لها لتحضير المركبات المدرجة في الجدول أ أدناه.‎ ‏جدول أ‎ oy es on 4-amino-1-(3- iQ 4-amino-1-(3- Yq bromo-1H- cl — HL NH, bromo-1H- pyrazolo[3,4- N pyrazolo[3,4- d]pyrimidin-4-yl)- d]pyrimidin-4-yl)-

N-[(18)-1-(4- NT ge | N-[(1S)-1-(4- chlorophenyl)ethyl] NZ { | chlorophenyl)ethyl] piperidine-4- ‏با‎ IN | piperidine-4- carboxamide NN ١ carboxamide 4-amino-N-[1-(4- CO 4-amino-N-[1-(4- v. chlorophenyl)-2- NN o chlorophenyl)-2- (1H-pyrazol-1- NH (1H-pyrazol-1- yDethyl]-1-(7H- N ’ yl)ethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- al pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- N d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- NTN yDpiperidine-4- carboxamide I pa carboxamide <8“ 4-amino-N-[(1S)-1- HI 4-amino-N-[(1S)-1- ‏م‎ ‏م‎ a ( ‏م سل‎ chlorophenyl)ethyl] H chlorophenyl)ethyl]- -1-(5-chloro-7H- N 1-(5-chloro-7H- pyrrolo[2,3- ©! pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- TC ٠ > | dlpyrimidin-4- yD)piperidine-4- ‏يت‎ N yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide

YAO)

١٠١6 0- 4-amino-N-[(1S)-1- / 4-amino-N-[(15)-1- vy (4-chlorophenyl)-3- NS (4-chlorophenyl)-3- (4-methylpiperazin- ( J (4-methylpiperazin- 1-yl)propyl]-1-(7H- J 1-yl)propyl]-1-(7H- pyrrolo|2,3- 70 pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- : x NH, d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- Cry yDpiperidine-4- : cl : carboxamide N carboxamide 00 4-amino-N-| 1-)4- ‏"ع‎ 4-amino-N-[1-(4- vy chlorophenyl)-4- N chlorophenyl)-4- pyrrolidin-1- pyrrolidin-1- ylbutyl]-1-(7H- 0 ylbutyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- N NH, | pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- al i d]pyrimidin-4- yD)piperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide “I carboxamide 8 | N\ ‏ل جا‎ 4-amino-N-[(1S)-1- SL 4-amino-N-[(1S)-1- ve (4-chlorophenyl)-3- : 0 (4-chlorophenyl)-3- hydroxy-3- : N NH, hydroxy-3- methylbutyl]-1- ‏زر‎ ١ methylbutyl]-1-(7H- (7H-pyrrolo[2,3- 0 N pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- J d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4- 1 ١ | yDpiperidine-4- carboxamide SN N | carboxamide 4-amino-1-(3- OH 4-amino-1-(3- v bromo-1H- ‏ب‎ 0 bromo-1H- ° pyrazolo[3,4- Ly NH, pyrazolo|3.,4- d]pyrimidin-4-yl)- 0 H d]Jpyrimidin-4-yl)-

N-[(1S)-1-(4- N-[(1S)-1-(4- chlorophenyl)-3- N sr | chlorophenyl)-3- hydroxypropyl] pipe NF \ | hydroxypropyl]piper ridine-4- ‏با‎ | 7 idine-4-carboxamide carboxamide <0 ‏ميا‎

—_ Vio 4-amino-N-[(1S)-1- Pa 4-amino-N-[(1S)-1- v1 (4-chlorophenyl)-3- ‏مص‎ (4-chlorophenyl)-3- hydroxypropyl}-1- ‏ب 7ل‎ NH, hydroxypropyl]-1- (5-chloro-7H- 0 H (5-chloro-7H- pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- N cr | d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- NZ \ yD)piperidine-4- carboxamide ls | | carboxamide 8 4-amino-N-[(1S)-1- ] 0 4-amino-N-[(1S)-1- oy (4- ‏بت‎ NH, (4- cyanophenyl)ethyl] H cyanophenyl)ethyl]- 0 ‏دي ا . -2,3[ مد‎ [2,3- pyrimidin-4- ]pyrimidin-4- yhpiperidine-4- 0 NF yl)piperidine-4- : 7 5 : carboxamide N | carboxamide

Ny N 4-amino-N-[(1S)-1- HO 4-amino-N-[(1S)-1- YA (3-chlorophenyl)-3- ) 0 (3-chlorophenyl)-3- hydroxypropyl]-1- =, NH, hydroxypropyl]-1- ‏سيا‎ 3 - N (TH-pymolo [2,3- pyrimidin-4- Jpyrimidin-4- yD)piperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide

Cl NT N\ ‏ا‎ 4-amino-N-[1-(4- ‏دصح‎ 4-amino-N-[1-(4- vq chlorophenyl)-2- N= chlorophenyl)-2- (1H-imidazol-2- 0 (1H-imidazol-2- yhethyl]-1-(7H- “ N Nil, yDethyl]-1-(7H- oon . H pyrrolo[2,3- pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- N yDpiperidine-4- carboxamide N ny carboxamide 4-amino-1-(5- 0 4-amino-1-(5- 2 bromo-7H- a= HY NH, 7H. ii ‏اه‎ ‎ab: N d]pyrimidin-4-yl)- - -1-(4- Br | N-[(1S)-1-(4- chlorophenyl)ethyl] I chlorophenyl)ethyl] piperidine-4- N + | piperidine-4- carboxamide H | carboxamide

YAS)

١٠١1 4-amino-N-[1-(4- 4-amino-N-[1-(4- ١ chlorophenyl)-2-(3- I chlorophenyl)-2-(3- methylisoxazol-5- ‘0 0 methylisoxazol-5- yDethyl]-1-(7H- 1 yDethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- N ’ pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- al d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- N yD)piperidine-4- carboxamide N OR carboxamide

LA

H

4-amino-N-[(1R)-1- 0 4-amino-N-[(1R)-1- > )4- N NH, (4- bromophenyl)ethyl] OES bromophenyl)ethyl]- -1-(7H-pyrrolo[2,3- | © N 1-(7TH-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- yD)piperidine-4- 01 |] | yl)piperidine-4- carboxamide SN N | carboxamide 4-amino-N-[1-(4- IY 4-amino-N-[1-(4- ¢y chlorophenyl)-2- 5 o chlorophenyl)-2- (1,3-thiazol-2- pe o> (1,3-thiazol-2- yDethyl]-1-(7H- N ’ yDethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- al pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- N d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- ‏دخ‎ yl)piperidine-4- carboxamide ‏ا‎ carboxamide

NTH

4-amino-N-[(1S)-1- 0 4-amino-N-[(1S)-1- ‘ ¢ (4-chlorophenyl)-3- C J (4-chlorophenyl)-3- morpholin-4- J morpholin-4- ylpropyl]-1-(7H- 70 ylpropyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- 1 NH, pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- ‏له‎ ١ d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide ‏م‎ \ 0".

NR

4-amino-N-[(1S)-1- 0 4-amino-N-[(1S)-1- ‘io (4-chlorophenyl)-3- N (4-chlorophenyl)-3- piperidin-1- ‏ل‎ piperidin-1- ylpropyl]-1-(7H- HE ylpropyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- IR NH; ١ pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- a 8 d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide I carboxamide ‏ني‎ ‏ا‎ ‏د‎

ZY - 4-amino-N-[(1S)-1- i 4-amino-N-[(1S)-1- 2 (4-chlorophenyl)-3- C ] (4-chlorophenyl)-3- piperazin-1- N piperazin-1- ylpropyl}-1-(7H- ‏ل‎ ylpropyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- Pon pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- 0 d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- al yD)piperidine-4- carboxamide N carboxamide ‏جا‎ ‎4-amino-N-[(1S)-1- IY 4-amino-N-[(1S)-1- 7 (4-chlorophenyl)-3- N (4-chlorophenyl)-3- (1H-imidazol-1- J (1H-imidazol-1- yDpropyl}-1-(7H- cof yl)propyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- In NH, | pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- 0 1 d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- N yD)piperidine-4- carboxamide 2 carboxamide

Jey

Nh 4-amino-N-[(1S)-1- (7) 4-amino-N-[(1S)-1- 2 (4-chlorophenyl)-3- N (4-chlorophenyl)-3- pyrrolidin-1- ‏ل‎ pyrrolidin-1- ylpropyl]-1-(7H- 1. |vlpropyl}-1-(7H- pyrrolo[2,3- ps * | pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- Cl d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4- N yD)piperidine-4- carboxamide NF carboxamide ‏صب‎ ‎4-amino-N-[1-(4- 0 4-amino-N-[1-(4- ¢q chlorophenyl)-4- N chlorophenyl)-4- piperidin-1- piperidin-1-ylbutyl]- ylbutyl]-1-(7H- 0 1-(7H-pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3- N NH, d]pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- a 1 yl)piperidine-4- yl)piperidine-4- N carboxamide carboxamide ‏حت‎ ‏ني‎ ‎NR ‎YAS)

١٠١م‎ 4-amino-N-[(15)-1- 4-amino-N-[(18)-1- | ‏ذم وه‎ (4-chlorophenyl)-4- ‏ل‎ (4-chlorophenyl)-4- piperidinl- J plpaidin-1-ylbuyll- ylbutyl]-1-(7H- 0 1-(7H-pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3- “Ny NH, d]pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- 23 H yDpiperidine-4-

YDpiperidine-4, N carboxamide carboxamide

C0 4-amino-N-[(1R)-1- 4-amino-N-[(1R)-1- 0 (4-chlorophenyl)-4- (4-chlorophenyl)-4- N piperidin-1-ylbutyl]- piperidin-1- 5 1-(7H-pyrrolo[2,3- lbutyl]-1-(7H- imidin-4- i” 1 | 2 \ NH, din 4 pyrrolo| - - N y piper ine- - d|pyrimidin-4- al carboxamide yl)piperidine-4- N carboxamide 2 ‏بلا‎ ‎NY ‎NTR ‎4-amino-N-[1-(4- No | 4-amino-N-[1-(4- oY chloropheny)-4- NJ chlorophenyl)-4- morpholin-4- morpholin-4- ylbutyl]-1-(7H- 0 ylbutyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- N NH, pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- 0 8 d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- N yl)piperidine-4- : carboxamide ‏حة‎ carboxamide 4-amino-N-[1-(4- 4-amino-N-{1-(4- oy chlorophenyl)-2- ‏لح‎ chlorophenyl)-2- phenylethyi} . 0 « phenylethyl]- 1-(7H- -pyrrolo[2,5- N 2 pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- a 2 8 d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- N yDpiperidine-4- : carboxamide ‏حة‎ carboxamide

Jey <9 ‏يا‎ ‎YAo)

١٠١8 4-amino-N-[1-(4- % 4-amino-N-[1-(4- of chlorophenyl)-3- chlorophenyl)-3- methoxypropyl]-1- methoxypropyl]-1- (7H-pyrrolo[2,3- cl 0 (7TH-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- N NH, d] pyrimidin-4- yl)piperidine-4- yDpiperidine-4- carboxamide . carboxamide

Cr

NTH

4-amino-N-[1-(4- Cl 4-amino-N-[1-(4- chlorophenyl)-3- o chlorophenyl)-3- sulfamoylpropyl]- u ‏لب‎ sulfamoylpropyl]-1- potas | MINT ‏مووي‎ ‎pyrimidin-4- N pyrimidin-4- yl)piperidine-4- H NH, yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide

N

CD

‏ض‎ NH 4-amino-N-[3- NH, 4-amino-N-[3- on amino-1-(4- 0 amino-1-(4- chlorophenyl)-3- 2 chlorophenyl)-3- po 1-(7H- a os oxopropyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- 1 d}pyrimidin-4- yl)piperidine-4- “ yDpiperidine-4- carboxamide 1 “> | carboxamide

NTN

H

4-amino-N-[3 - Lo 4-amino-N-[3 - ov (carbamoylamino)- FM % (carbamoylamino)- 1-(4- 1-(4- chlorophenyl)propy 0 chlorophenyl)propyl 1]-1-(7H- a N\A | ]-1-(7TH-pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3 - d]pyrimidin-4- a pyrimidin-4. N Ypiperidine-4- yD)piperi ine-4- ‏جل‎ carboxamide carboxamide I 8

NT TN

H

YA2)

١١٠١ 4-amino-N-[1-(4- AN 4-amino-N-[1-(4- oA chlorophenyl)-2- o chlorophenyl)-2- an -1-(7H- . « NH, cyanoethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- H pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- 0 yD)piperidine-4- carboxamide 1 ‏ا اخ‎ carboxamide

N N

4-amino-N-[1-(4- F 4-amino-N-[1-(4- oq fluorophenyl)ethyl] fluorophenyl)ethyl]- 0 ‏م1 00د‎ [2,3- L(t pyrolo [2,3- pyrimidin-4- Jpyrimidin-4- yD)piperidine-4- 0 yl)piperidine-4- carboxamide NH carboxamide

N 2

H

N

7 ‏حت‎ ‎N ‎<2 ‎4-amino-N-[(4- 1 4-amino-N-[(4- “1. chlorophenyl)(cyan 0 ‏م‎ chlorophenyl)(cyano oles -(7H- ‏ص‎ 2 Jmethyl]-1-(7H- rrolo[2,3- 3- pyrimidine. cl N iin. yDpiperidine-4- 2 yD)piperidine-4- i carboxamide ‏جا‎ | | carboxamide

SN N

H

4-amino-N-[1-(4- Sy 4-amino-N-[1-(4- 1) chlorophenyl)-3 - chlorophenyl)-3- (dimethylamino)-3- 0 0 (dimethylamino)-3- ra. 1-(7H- os oxopropyll- 1-(7H- pyrrolo[2,3- pyrrolo[2,3- d] pyrimidin-4- 0 N d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- yDpiperidine-4- carboxamide 07 SN | carboxamide

LA

H

‏ما‎

— ١١٠١ - 4-amino-N-{1-(4- a 4-amino-N-{1-(4- 15 chlorophenyl)-3- NTO chlorophenyl)-3- [(methylsulfonyl)a © [(methylsulfonyl)am mino]propyl}-1- 0 ino]propyl}-1-(7H-

Honey [2,3- al N NH, pyrrolo[2,3- d}pyrimidin-4- d}pyrimidin-4- yD)piperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide 7 1 ‏بار‎ ‏ا‎ ‎4-amino-N-[(1S)-1- Pa 4-amino-N-[(1S)-1- 1 (4-chlorophenyl)-3- ‏مص‎ (4-chlorophenyl)-3- hydroxypropyl}-1- Ly NH, hydroxypropyl]-1- (5-methyl-7H- a H (5-methyl-7H- pyrrolo[2,3- pyrrolof2,3- d]}pyrimidin-4- N d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- NF yDpiperidine-4- carboxamide ‏يجا‎ [> | carboxamide ‏ا‎ ‎4-amino-N-[(4- 4-amino-N-[(4- 1¢ chlorophenyl)(phen O chlorophenyl)(pheny yDmethyl]-1-(7H- 0 Dmethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- N 2 pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- “ 1 d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- N yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide

To

NTN

4-amino-N-[(1S)-1- 0 4-amino-N-[(1S)-1- le 4 ‏مس 4ه‎ NH, (4-

N chlorophenyl)ethyl] H chlorophenyl)ethyl]- -1-(5-methyl-7H- N 1-(5-methyl-7H- ‏ا ا ا‎ pyrimidin-4- SN . Jpyrimi in-4- yl)piperidine-4- H yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide ‏دم‎

- ١١٠١ - 4-amino-N-{1-(4- Cl 4-amino-N-{1-(4- “1 chiorophenyl)-2- chlorophenyl)-2- [(methylsulfonyl}amino] [(methylsulfonyl)a ‏مي‎ ethyl ‏ل‎ ‎: 9 yi}-1(7TH minoJethyl}-1-(7H- AS SN 0 pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- pyrrolo[2,3- H 4-yl)piperidine-4- d]pyrimidin-4- H NH, carboxamide yD)piperidine-4- carboxamide N

C0 ~

N

<2 4-amino-N-[1-(4- Cl 4-amino-N-[1-(4- Tv chlorophenyl)-2- chlorophenyl)-2- sulfamoylethyl]-1- sulfamoylethyl]-1- (7H-pyrrolo[2,3- ‏مالملا‎ 0 (7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- Jo XN d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4- H NH, yDpiperidine-4- carboxamide carboxamide

N

LD

4-amino-N-[2- NO 6 4-amino-N-[2- TA amino-1-(4- NH, amino-1-(4- chlorophenyl)-2- N chlorophenyl)-2- oxoethyl]-1-(7H- cl oxoethyl]-1-(7H- pyrrolo[2,3- N pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- Na d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- ‏!ا‎ | YDpiperidine-4- carboxamide N° § | carboxamide 4-amino-N-(1- 0 4-amino-N-(1- “14 phenylethyl)-1- N NH, phenylethyl)-1-(7H- (7H-pyrrolo[2,3- H pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4- d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4- 1 yD)piperidine-4- carboxamide = carboxamide oo

NY

NOR

‏ما‎

١١١“ -

N-[2- Cl N-[2-(acetylamino)- Vv. (acetylamino)-1-(4- 1-(4- chlorophenyl)ethyl] 0 chlorophenyl)ethyl]- -4-amino-1-(7H- JM 4-amino-1-(7H- pyrrolo[2,3- N 0 pyrrolo[2,3- d)pyrimidin-4- N NH, | dlpyrimidin-4- yl)piperidine-4- yl)piperidine-4- carboxamide carboxamide

N

Cr ~

N

N H

4-amino-1-(7H- . 0 4-amino-1-(7H- 71 pyrrolo[2,3- ‏وبا‎ NH, pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)- H d]pyrimidin-4-yl)-

N-{(1S)-1-[4- N N-{(1S)-1-[4- (trifluoromethyl)ph F (trifluoromethyl)phe enyl]ethyl}piperidi | F ‏حة‎ nyl]ethyl} piperidine ne-4-carboxamide F 5 ‏ا‎ -4-carboxamide

H

: ١ ‏المركب الوسيط‎ 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid 0

No ‏من‎ YY 0

N

C0

NY

<2 5 4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]piperidine-4-carboxylic acid : ‏إلى خليط من‎ 4- ‏جم)؛ متبوعاً ب‎ YAY) 1011003 ‏لتر) تمت إضافة‎ ١( 01130120 ‏جم) في‎ 110.9) ‏جم). تم تسخين الخليط إلى الارتجاع طوال الليل‎ YY.V) chloro 7H-pyrrole[2,3-d]pyrimidine ‏ديا‎

‎١٠ —‏ - تحت ‎nitrogen‏ لمدة ؛ 7 ساعة ثم تم استخلاصه باستخدام ‎١( EtOAc‏ لتر ‎(EX‏ تم تركيز الطبقة المائية واضافة ‎٠.5( MeOH‏ لتر). تم هز الخليط لمدة ‎Ve‏ دقيقة عند £0 م وترشيحه. تم تركيز ناتج الترشيح مرة أخرى وإذابته في 1120 ‎Tov)‏ مل). تمت إضافة ‎HCL‏ بتركيز +7 عياري إلى أن يصل الرقم الهيدروجيني ‎pH‏ إلى 4.5 ‎Ar)‏ مل محسوبة). تم ترشيح الخليط وتجفيف © العجينة تحت ضغط منخفض لإعطاء المنتج الخام؛ الذي تمت تنقيته مرة أخرى بواسطة كروماتوجراف جل ‎silica‏ ( تصفية تتابعية باستخدام ‎١ = MeOH : DCM‏ : ) لإعطاء : ‎4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-1-(3,5,7-triazabicyclo[4.3.0]nona-2,4,8,10-‏ ‎tetraen-2-yl)piperidine-4-carboxylic acid‏ في صورة ‎sale‏ صلبة ذات لون رمادي باهت )° ‎can Ye‏ 4 %( . ‎(9H, s), 1.88 - 1.95 (2H, m), 2.02 - 2.06 (2H, Ye‏ 1.40 6 و101150-0 ‎1H NMR (400.13 MHz,‏ ‎m), 3.44 - 3.51 (2H, m), 4.30 (2H, d), 6.60 - 6.61 (1H, m), 7.16 - 7.18 (1H, m), 7.29 (1H,‏ ‎s), 8.14 (1H, 5s), 11.68 (1H, s).‏ ‎MS m/e MH" 362.‏ المركب الوسيط ؟ : ‎(4-chRrophenyl)(cyclopropyl)methanone O-methyl oxime‏ ف ‎NT‏ ‎ov‏ ‎Cl‏ ‎YA)‏

- ١١٠5 : ‏إلى‎ (p> ٠٠٠١٠١ §) Methoxylamine hydrochloride ‏تمت إضافة‎ ‏م.‎ Yo ‏مل) عند‎ ٠١( pyridine ‏جم) في‎ 7.9/١ ) (4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanone ‏في وسط مفرغ؛‎ pyridine ‏ساعة. تمت إزالة‎ YE ‏ثم تقليب المحلول الناتج عند 75 م لمدة‎ : ‏واستخلاص المادة الصلبة المتبقية باستخدام إيثر. الترشيح والتبخير للمذيب أعطى‎ (LAY an X .Yo) ‏خام‎ (4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanone O-methyl oxime © ‏صورة زيت أصفر. تم استخدام تلك المادة مباشرةً في الخطوة التالية بدون تنقية إضافية.‎

MS m/e MH" 210. : ‏المركب الوسيط ؟‎ (4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanamine

NH,

Cl ‏ض‎ Ye. : ‏إلى‎ (Je 159.76 THF ‏عياري في‎ ١( Borane tetrahydrofuran ‏تمت إضافة معقد‎

V.vo) )١ ‏(المركب الوسيط‎ (4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanone O-methyl oxime ‏تم تقليب المحلول الناتج عند الارتجاع‎ . nitrogen ‏تحت‎ a Yo ‏عند‎ (Js ٠٠١( THF ‏جم) في‎ (Ste NaOH ‏متبوعة بواسطة‎ cela ‏بحرصض إضافة‎ Saal . a ‏لمدة ؟ ساعات»ء ثم تبريده إلى صفز‎ ‏مل). تم تقليب الخليط الناتج عند الارتجاع طوال الليل؛ ثم السماح له ليبرد إلى‎ ٠٠١ 2 70( Ne ‏درجة حرارة الغرفة.‎

YAe)

— ٠١ ‏؛ وترشيحه وتبخيره لإعطاء‎ sodium sulfate ‏؛ ثم تجفيفه فوق‎ hexane Jah ‏تم استخلاص المنتج‎ . (% AV ‏جم؛‎ YY 0) ‏في صورة زيت رائق‎ (4-chlorophenyl)(cyclopropyl)methanamine "HNMR (400.13 MHz, CDCI3) 8 0.24 - 0.29 (1H, m), 0.30 - 0.13 (1H, m), 0.45 - 0.50 (1H, m), 0.58 - 0.64 (1H, m), 1.01 - 1.09 (1H, m), 1.77 (2H, 5), 3.20 (1H, d), 7.28 - 7.32 (2H, m), 7.33 - 7.36 (2H, m). ° : ‏المركب الوسيط ؛‎ 2-amino-2-(4-chlorophenyl)acetonitrile

N il

NH, 0 ‏جم)‎ ©) 4-chlorobenzaldehyde ‏مل)‎ £Y.Y) Lithium bis(trimethylsilyl)amide ‏تمت إضافة‎ ‏تمت تدفئة المحلول الناتج إلى درجة حرارة‎ nitrogen ‏عند - 6 مم تحت‎ (Je ٠٠١( THF ‏في‎ ٠ : ‏الغرفة وتقليبه لمدة ؛ ساعات. ثم تمت إضافة‎ ‏مل)؛ وتقليب خليط التفاعل عند‎ 1.00٠ ¢ acetone cyanohydrin) a-Hydroxyisobutyronitrile ‏مشبعة )© مل)؛ والاستخلاص‎ NaHCO3 ‏ساعة إضافية؛ ثم إخماده باستخدام‎ VY ‏م لمدة‎ Yo ‏وترشيحها وتبخيرها.‎ (MgS04 ‏مل) ¢ وتجفيف المادة العضوية فوق‎ Yeu x 9 EtOAc ‏باستخدام‎ ‎« flash silica chromatography ‏ثم تم إخماد المادة الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ ٠ ‏ثم تبخير الجزيئات النقية إلى‎ . isohexane ‏في‎ EtOAc 7 ٠٠١ ‏إلى‎ ٠ ‏من‎ Zo ‏وتصفيته تتابعياً‎ : ‏درجة الجفاف لإعطاء‎ ‏عم‎

١١١ - ‏في صورة زيت عديم اللون؛ الذي تم تركه ليتصلب‎ 2-amino-2-(4-chlorophenyl)acetonitrile 0 ov.¢ ‏جم؛‎ 7٠8 ) ‏لإعطاء مادة صلبة بيضاء‎ 111 NMR (400.13 MHz, CDCl3) ‏ة‎ 1.85 (2H, s), 4.82 (1H, (, 7.30 - 7.34 (2H, m), 7.39 - 7.43 (2H, m). : © ‏المركب الوسيط‎ © tert-butyl 4-((4-chlorophenyl)(cyano)methylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- 4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

N

I

‏م‎ ‎ie TY 0 0

N

00

Ny N ‏تمت إضافة ك‎ «HATU) O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n’,n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate Yo : ‏ال 0 جم) إلى‎ 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid ‏(المركب‎ 2-amino-2-(4-chlorophenyl)acetonitrile (am YY) )١ ‏(المركب الوسيط‎ ‏ملي مول ) في‎ Yor Ju voy ¥) N-cthyldiisopropylamine 4 ‏جم)‎ VW) )4 ‏الوسيط‎ Vo

YAS)

‎١١ =‏ - ‎DMA‏ )© مل) عند ‎Yo‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند ‎5٠‏ .م لمدة ساعة واحدة. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل أ لأيوني ‎jon exchange chromatography‏ ؛ باستخدام عمود +<50. تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎١‏ مولار من ‎MeOH/NH3‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎tert-butyl 4-((4-chlorophenyl)(cyano)methylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- 2‏ ‎4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏في صورةٍ مادة صلبة بيضاء ‎VEY)‏ .+ جي 11.7 7). .510 ‎MS m/e MH"‏ المركب الوسيط 6 : ‎tert-butyl 4-(2-amino-1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎NH,‏ ‏0 ‎H‏ ‎N 0‏ ‎N hl‏ ‎H‏ ‏0 ‏0 ‎N‏ ‏< ‏لا ‏تمت ‎(a> +.YOV) Raney™ nickel ddl)‏ إلى : ‎tert-butyl 4-((4-chlorophenyl)(cyano)methylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-‏ ‎4-yhpiperidin-4-ylcarbamate‏ ‎YA)‏

١١٠ ammonium hydroxide ‏مل). تمت إضافة‎ ¥'+) ethanol ‏جم) في‎ .20٠0( (© ‏(المركب الوسيط‎ ‏ساعات. تم ترشيح خليط‎ £A ‏وتفليبه لمدة‎ hydrogen ‏مل). تم وضع الخليط تحت فقاعة‎ ve TS ) ‏التفاعل خلال سيليت وتبخير المذيب إلى درجة الجفاف. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف‎ ‏مل). تم تجفيف المادة العضوية‎ ١7©( ‏مل)؛ وغسله باستخدام ماء‎ ٠٠١( 1014 ‏واعادة إذابته في‎ : ‏ع منتج خام‎ Uae ‏وترشيحها وتبخيرها‎ «MgSO4 ‏فوق‎ © tert-butyl 4-(2-amino-1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏تم استخدام تلك المادة وهي خام في‎ ٠ 0 ٠٠١ ‏جم؛‎ no) ‏في صورة مادة صمغية عديمة اللون‎ ‏الخطوة التالية بدون تنقية إضافية.‎

MS m/e MH" 514. Ve 1-tert-butyl 4-ethyl 4-cyanopiperidine-1,4-dicarboxylate : V ‏المركب الوسيط‎ 0 N 7 2 ‏م‎ ‎N ‎: ‏من‎ cilia ‏مل؛ 71.01 ملي مول ) إلى محلول‎ VY) LDA ‏تمت إضافة محلول من‎ (Je You) THF ‏ملي مول ) في‎ ٠7 ‏جم؛‎ ٠١( tert-butyl 4-cyanopiperidine-1-carboxylate ‏دقيقة. تمت‎ Te ‏م لمدة‎ VA = ‏تم تقليب المحلول الناتج عند‎ . nitrogen ‏م» تحت‎ VA - ‏عند‎ Ve ‏ملي مول ). تم تقليب المحلول الناتج‎ ١7.١7 (Je ٠٠ ¥V) ethyl chloroformate ‏إضافة‎ ‏ما‎

‎ZY. =‏ والسماح بتدفئته إلى درجة حرارة الغرفة. تم إخماد خليط التفاعل باستخدام ‎NaHCO3‏ مشبعة ‎V0)‏ ‎(Ja‏ ‘ و لاستخلاص باستخدام ‎«DCM‏ وغسل المادة العضوية باستخدام محلول ملحي مشبع ) ‎٠‏ ‎(Je‏ ثم تجفيفه فوق ‎(MgSO‏ وترشيحه وتبخيره لإعطاء المادة الخام في صورة زيت برتقالي. تمت تنقية تلك المادة بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎«flash silica chromatography‏ وتصفيته © تتابعياً بتدرج من ‎EtOAc 7 ٠١‏ في ‎isohexane‏ . تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎can Yo A) I-tert-butyl 4-ethyl 4-cyanopiperidine-1,4-dicarboxylate‏ 501.03 7) في صورة زيت أصفر. ‎NMR (400.13 MHz, CDCls) 6 1.33 (3H, t), 1.46 (9H, 5), 1.96 - 2.00 (2H, m), 2.04 -‏ 111 ‎(2H, m), 3.12 (2H, 5), 4.09 - 4.14 (2H, m), 4.29 (2H, q). ٠١‏ 2.08 المركب الوسيط 6 : ‎1-tert-butyl 4-ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-1,4-dicarboxylate‏ © ‎LS “NH,‏ 0 ب 0 ب ©‘ ص7 ‎XK‏ ‏تم تقليب ‎١.27 4( Platinum(IV) oxide‏ جم؛ 7.19 ملي مول ) و ‎1-tert-butyl 4-ethyl 4-cyanopiperidine-1,4-dicarboxylate ٠‏ (المركب الوسيط 7) )4 جم؛ 4 ملي مول ) في ‎(Ja ٠٠١( acetic acid‏ تحت جو من ‎hydrogen‏ عند © بار و ‎Yo‏ م لمدة ‎YAS)‏

-١"١٠- ‏يوم واحد. تم ترشيح المنتج الخام خلال سيليت وتنقية ناتج الترشيح بواسطة كروماتوجراف تبديل‎ ‏مولار من‎ ١ ‏تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام‎ SCX ‏أيوني؛ باستخدام عمود‎ : ‏وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ MeOH/NH3 ‏في‎ 0 AY ‏جم‎ V.04) I-tert-butyl 4-ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-1 ,/4-dicarboxylate ‏صورة زيت عديم اللون.‎ ©

IH NMR (400.13 MHz, CDCI3) § 1.27 - 1.28 (3H, m), 1.30 - 1.37 (211, m), 1.41 (2H, s), 1.45 (9H, 5), 2.10 (2H, d), 2.78 (2H, 5), 2.91 - 2.97 (2H, m), 3.89 (2H, 5), 4.21 (2H, q). : 9 ‏المركب الوسيط‎ ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-4-carboxylate 0 ‏هخم‎ 0 > NH,

N

H \ ‏ملي مول ) إلى‎ ١١7١١ (Ja TY.Y) dioxane ‏في‎ hydrogen chloride ‏تمت إضافة 4 مولار من‎ (A ‏(المركب الوسيط‎ 1-tert-butyl 4-ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-1,4-dicarboxylate ‏م لمدة‎ 7١ ‏مل). تم تقليب المحلول الناتج عند‎ Yo) dioxane ‏ملي مول ) في‎ 7.5 can .7( ion exchange ‏ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل الأيوني‎ 7 ١ ‏تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام‎ SCX ‏؛ باستخدام عمود‎ chromatography ٠ : ‏وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ MeOH/NH3 ‏مولار من‎ ‏في صورة مادة‎ (% 197.76 aa ‏؛؟‎ ) ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-4-carboxylate ‏دم‎

‎١١١7 -‏ — سائلة صفراء. و( ‎NMR (400.13 MHz, 013013( 6 1.23 - 1.30 (3H, m), 1.26 - 1.37 (2H, m), 2.12 (2H,‏ 111 ‎(2H, m), 2.77 (2H, 5), 2.94 - 2.99 (2H, m), 4.21 (2H, q).‏ 2.65-2.72 المركب الوسيط ‎٠١‏ : ‎ethy? 4-(aminomethyl)-1-(7H-pyrrolof2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate‏ 0 ‎—N\‏ ‎NH,‏ 0 ‎N‏ ‏حت ‏تمت إضافة ‎Neethyldiisopropylamine‏ (١٠.؟‏ مل ١١٠؟‏ ملي مول ) إلى : ‎ethyl 4-(aminomethyl)piperidine-4-carboxylate‏ (المركب الوسيط 4) ‎YL)‏ جم؛ ‎١7.١7‏ ملي مول ) و ‎Y.VY) 4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ جم ‎١7.77‏ ملي مول ) في ‎DMA‏ ‎Ye) ٠‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Te‏ لمدة ‎VA‏ ساعة. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف تبديل أيوني؛ باستخدام عمود ‎(SCX‏ تمت ‎A)‏ المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎V‏ مولار من ‎MeOH/NH3‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎ethyl 4-(aminomethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate‏ ‎q0 (ax 0.» A)‏ %( في صورة مادة صلبة ذات لون بيج. ‎YAo)‏

١١٠ -

IH NMR (400.13 MHz, DMSO-d¢) 6 1.22 (3H, t), 1.44 - 1.51 (2H, m), 2.04 - 2.07 (2H, m), 2.67 (2H, d), 3.23 - 3.30 (2H, m), 4.15 (2H, q), 4.39 - 4.44 (2H, m), 6.59 (1H, 1), 7.16 -7.17 (1H, m), 8.12 (1H, s), 11.67 (1H, s)

MS m/e MH" 304. : ١١ ‏المركب الوسيط‎ © cthyl 4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxylate

IL

IN oo 0 ‏جل"‎ ‎N ‎I ‎x ‎N ‎NH ‎: ‏ملي مول ) إلى‎ 7.٠٠ ‏مجم؛‎ ٠ ( di-tert-butyl dicarbonate ‏تمت إضافة‎ ethyl 4-(aminomethyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3 -d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate Ye ‏ملي‎ ٠.٠٠ ‏مل؛‎ +e +) triethylamine 5 ( ‏ملي مول‎ 7.٠٠ ‏مجم؛‎ TOF) )٠١ ‏(المركب الوسيط‎ ‏تم تقليب المعلق الناتج عند درجة الحرارة المحيطة لمدة ساعتين. تم‎ . (Ja V+) DCM ‏مول ) في‎ 04) ‏وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء‎ ٠ (Je 2+) DCM ‏تخفيف خليط التفاعل باستخدام‎ ‏تم تجفيف المادة العضوية فوق 148504 وترشيحها‎ . (Jw 50( ‏مل) ومحلول ملحي مشبع‎ flash silica ‏كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ dda uly ‏وتيخيرها. تمت تنقية المنتج الخام‎ ٠ ‏عضا‎

- ١75 - ‏تم‎ . isohexane ‏في‎ EtOAc ٠٠ ‏إلى‎ ٠١٠ ‏وتصفيته تتابعياً بتدرح من‎ «chromatography ‏في صورة زيت عديم‎ )7 OFLA (ame £TA) ‏تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ ‏اللون الذي تم تركه ليتصلب.‎ 111 NMR (400.13 MHz, DMSO-d6) 6 1.22 (3H, t), 1.36 - 1.38 (9H, m), 1.42 - 1.49 (2H, m), 2.05 (2H, d), 3.13 (2H, d), 3.20 (2H, t), 4.09 - 4.14 (2H, m), 4.45 (2H, d), 6.58 (1H, © d), 6.94 (1H, 1), 7.16 (1H, d). 8.13 (1H, d), 11.65 (1H, ٠

MS m/e MH" 404.

NY ‏المركب الوسيط‎ 4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)- 1-(7H-pyrrolo[2,3-d]}pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carbbxylic acid

LL oS) 0 "

N

‏مت‎ ‎Xe ‎NTH ‎: ‏ملي مول ) إلى‎ ١.776 cpa +001) Lithium hydroxide monohydrate ‏تمت إضافة‎ ethyl 4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxylate ‏مل)‎ YO) THF (dw 1.Y0) ‏جم؛ 7.15 ملي مول ) في ماء‎ Vee V) )١١ ‏(المركب الوسيط‎ ٠

YAS)

‎١# -‏ - ‎Yo. +) ethanol‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎٠١‏ م لمدة يوم واحد. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎(Je Yo) EtOAc‏ وغسله باستخدام ماء ‎(de Yo)‏ تم تعديل المواد المائية إلى رقم هيدروجيني © باستخدام ‎١‏ مولار من محلول ‎citric acid‏ ثم استخلاصه باستخدام ‎EtOAc‏ )¥ ‎x‏ 00 مل). تم غسل نواتج الاستخلاص العضوية باستخدام محلول ملحي مشبع ‎(Je YO)‏ ثم © تجفيفه فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحه وتبخيره لإعطاء منتج مطلوب من : ‎4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ ‎A)‏ أ“ ‎٠‏ جم .أ 0 في صورة ‎bel)‏ بيضاء . ‎NMR (400.13 MHz, DMSO-d6) 6 1.36 (9H, s), 1.44 - 1.51 (2H, m), 1.99 - 2.04 (2H,‏ 111 ‎m), 3.14 (2H, d), 3.25 (2H, 5), 4.43 - 4.46 (2H, m), 6.64 (1H, s), 6.84 (1H, t), 7.21 (1H, Ye‏ ‎s), 8.16 (1H, s), 11.82 (1H, s)‏ ‎MS m/e MH" 376.‏ المركب الوسيط ‎DY‏ ‎(S)- tert-butyl (4-(1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yD)piRridin-4-yl)methylcarbamate‏ ‎YAO)‏

‎١77١ -‏ ‎AA‏ ‎rege‏ ‎H H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏0 ‎Sa N‏ تمت إضافة ‎HATU‏ (101. جم؛ ‎١.717‏ ملي مول ) على دفعة واحدة إلى : ‎4-((tert-butoxycarbonylamino)methyl)-1-(7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ © (المركب الوسيط ‎can +. YY 5( (VY‏ 7 .+ ملي مول (« ‎8)-1-(4-chlorophenyl)ethanamine)‏ ‎can +2041)‏ 0-70 ملي مول ) 5 ‎٠.80 «ds ١.7٠( DIPEA‏ ملي مول ) في ‎٠١( DMA‏ ‎(Ja‏ عند ‎a Yo‏ تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند ‎١‏ م لمدة ؛ ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل ‎١‏ لأيوني ‎«ion exchange chromatography‏ باستخدام عمود ‎SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎methanol‏ - ‎٠‏ تمت إزالة ‎HATU‏ المتبقي عن طريق إمرار محلول ‎methanol‏ خلال عمود كربونات مدعم ‎silica‏ . ثم تبخير المنتج الخام الذي تم الحصول عليه إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎(S)-tert-butyl (4-(1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-1 -(7TH-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yDpiperidin-4-yl)methylcarbamate‏ ‎can .7017(‏ 47 7) في صورة مادة صمغية عديمة اللون. تم استخدام تلك المادة مباشرةً في ‎Vo‏ الخطوة التالية بدون تنقية إضافية. ديا

- ١١ال-‎ 1H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6) ‏ة‎ 1.37 (9H, s), 1.38 (3H, d), 1.48 - 1.55 (2H, m), 2.17 (2H, d), 3.12 - 3.36 (4H, m), 4.28 - 4.34 (2H, m), 4.95 - 5.03 (1H, m), 6.65 (2H. s), 7.23 - 7.24 (1H, m), 7.35 (4H, 5), 8.10 (1H, d), 8.18 (1H, s), 11.94 (1H, 5).

MS m/e MH" 513. : ١4 ‏المركب الوسيط‎ © ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate

NO ry 0. : 0 0 ‏ملي مول )؛‎ 5.4١ can ٠٠١( 4-(4-Chlorophenyl)-4-oxobutanoic acid ‏ثم تقليب‎ sodium carbonate y ) ‏ملي مول‎ ١.6 can «.AAY) methoxylamine hydrochloride ‏والتسخين عند 0 م لمدة ؛ ساعات.‎ (Je Yo) ethanol ‏ملي مول ) في‎ ١١١74 ‏(477.؛ مل؛‎ ٠ ‏تم السماح للخليط الناتج ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة وترشيحه. تم تركيز ناتج الترشيح عن طريق‎ ‏تصفية‎ flash silica chromatography ‏التبخير ثم التنقية بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف‎ . isohexane ‏في‎ TBME 7 Ve ‏تتابعية باستخدام‎ (Vel am V.VaL ) ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate ‏لإعطاء‎ ‎NO‏ في صورة زيت عديم اللون. ‎IH NMR (399.902 MHz, CDCI3) 1.23 (3H, 1), 2.53 (2H, 1), 3.01 (2H, 1, 3.98 (3H. 91‏ ‎(2H, q), 7.33 (2H, d), 7.58 (2H, d).‏ 4.11 ‎MS m/e MH" 270.‏ مي

١١/8 : ١5 ‏المركب الوسيط‎ 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid

N A

0

Cl 7١ ‏ملي مول ) على دفعة واحدة عند‎ 71.40 can ».177( Lithium hydroxide ‏تمت إضافة‎ ‏(المركب الوسيط‎ ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate ‏م إلى محلول من‎ © ‏مل). تم تقليب المحلول الناتج‎ ٠١( ‏وماء‎ (Ja Yo) THF ‏جم 1.30 ملي مول ) في‎ V.VA) )٠4 ‏مخفف واستخلاصه باستخدام‎ HCL ‏عند درجة حرارة الغرفة لمدة 7 ساعات ثم تحميضه باستخدام‎ ‏تم غسل نواتج الاستخلاص المجمعة باستخدام محلول ملحي وتجفيفها فوق‎ (XY ) TBME : ‏وتبخيرها لإعطاء‎ 04 ‏في صورة مادة‎ )7 90 can 1.0Y +) 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid ٠ ‏صلبة عديمة اللون.‎ 111 1111 (399.902 MHz, CDCI3) § 2.61 (2H, 1), 3.01 (2H, 1), 3.99 (3H, 5), 7.34 (2H, d), 7.58 (2H, d). 4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-0l : ١١6 ‏المركب الوسيط‎

NH, ‏مجر‎ ‎Cl \ ‏م‎ ‏ما‎

‎vq -‏ — تم تبريد ‎4-(4-Chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid‏ (المركب الوسيط ‎YA) (Vo‏ ‎71.٠٠١ can‏ ملي مول ) في ‎A) tetrahydrofuran‏ مل) ‎٠‏ تحت جو من ‎(N2‏ في ‎ethanol ales‏ تلجي ثم المعالجة بالتنقيط باستخدام معقد ‎١ ( borane-tetrahydrofuran‏ مولار في ‎Y1) ( THF‏ ‎٠.٠٠ de‏ ملي مول خلال مدة ‎Ye‏ دقيقة. ‎٠‏ تم السماح للمحلول الناتج ليدفاً إلى درجة حرارة الغرفة؛ والتقليب لمدة ساعة واحدة ثم التسخين عند الارتجاع ‎sad‏ 7 ساعات إضافية. بعد التبريد في ثلج - ‎elo‏ تمت معالجة الخليط باستخدام ‎ele‏ )1 ‎(Je‏ بالتنقيط مع التقليب خلال ‎Ye‏ دقائق . تم السماح للخليط مرة أخرى ليدفاً إلى درجة حرارة الغرفة وتقليبه ‎sad‏ ساعتين قبل تبخير معظم المذيب. تم تبخير البقية في تلج - ماء و50 7 ‎NaOH‏ (مائي) (7 مل) مضاف بالتنقيط مع ‎٠‏ التقليب. تم تقليب الخليط الناتج والتسخين عند 50 م لمدة ؛ ساعات ثم تبريده إلى درجة حرارة الغرفة واستخلاصه باستخدام ‎(XT) E20‏ تم غسل نواتج الاستخلاص المجمعة باستخدام ماء متبوعاً بمحلول ملحي؛ وتجفيفها فوق 18504 وتبخيرها لإعطاء : ‎٠ ( 4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-ol‏ جمء؛ ‎7٠١‏ 7) في صورة زيت عديم اللون» ‎٠‏ لزج الذي تم استخدامه بدون تتقية إضافية. ‎NMR (399.902 MHz, CDCI3) § 1.58 - 1.84 (4H, m), 2.39 (3H, br. 5), 3.57 -7‏ 111 ‎(2H, m), 3.88 - 3.91 (1H, m), 7.23 (2H, d), 7.30 (2H, d).‏ ‎MS m/e MH" 200.‏ عي

١١ : ١7 ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo [2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

HO

0

N 1 0 ‏م كر 0 اه‎ 0

N

‏م0‎ ‎= ‎NOH ‎: ‏تمت إضافة‎ ©

O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate . ‏مجم؛ 88 ملي مول ( على دفعات إلى‎ yi ) 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl )piperidine-4- carboxylic acid : ( ‏ملي مول‎ EA ‏مجم؛‎ Vou) (0 ‏(المركب الوسيط‎ Ye. ‏ملي مول)‎ ».47 cana AY) )١١ ‏(المركب الوسيط‎ 4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-ol ‏مل) عند‎ ٠.١( DMF ‏ملي مول ) في‎ v.00 (Ja .٠ AY) N-ethyldiisopropylamine s ‏مل) لإعطاء‎ ٠١( ‏م لمدة ؟ ساعات ثم اخماده في ماء‎ 7١ ‏م. تم تقليب المحلول الناتج عند‎ ٠ ‏أصفر باهت. تم تجميع الراسب بالترشيح + وغسله باستخدام ماء وتجفيفه تحت ضغط منخفض‎ ppt ‏ع‎

١١٠ - : ‏لإعطاء‎ ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏مجم 17.46 %( في صورة مادة صلبة كريمية؛ التي تم استخدامها بدون تنقية إضافية.‎ YOY ) 111 NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.40 (11H, 5), 1.69 - 1.74 (2H, m), 1.93 - 2.09 (4H, m), 3.38 - 3.43 (2H, m), 3.51 - 3.61 (2H, m), 4.19 - 4.27 (2H, m), 4.38 (1H, br 5), 4.76 (1H, q), 6.65 (1H, m), 6.95 (1H, s), 7.20 (1H, m), 7.33 (4H, s), 7.89 (1H, d), 11.78 (1H, s).

MS m/e MH" 543. ° : : ١8 ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

HO

~ ©

A nd

TS oS { ! H 0 oF q J

N

Yr

SF

N

N H

: ‏تمت إضافة‎ Ve ‏الله‎

‎١١7 -‏ ‎A) O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ¢\ مجم؛ ‎١79‏ ملي مول ) على دفعة واحدة إلى محلول ‎cilia‏ من : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ © (لمركب الوسيط ‎TV cana ١4( )١‏ .+ ملي مول ( 5 ‎VV) N-ethyldiisopropylamine‏ +.+ مل ؛ ملي مول ) في ‎NMP‏ )¥ مل). تمت معالجة الخليط باستخدام : ‎V+) 2-amino-2-(4-chlorophenyl)ethanol‏ مجم؛ ).+ ملي مول ) ‎CAS™)‏ رقم -179811 64-4« للتحضير ‎«lai‏ البراءة الامريكية رقم ‎.)٠٠١ ٠٠0046485‏ تم تقليب المحلول الداكن لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. ‎٠‏ تم تقسيم الخليط بين ‎ethyl acetate‏ ومحلول ‎sodium bicarbonate‏ مشبع. تم غسل المادة العضوية مرتين باستخدام ما & ثم محلول ملحي . تم تجفيف المحلول العضوي فوق ‎magnesium sulfate‏ ؛ وترشيحها وتبخيرها. تمت تنقية البقية بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ على ‎silica‏ باستخدام تصفية تتابعية تدريجية ‎DCM / methanol 7 ١(‏ إلى ‎methanol 7 Yo‏ / 1(014).تم تجميع ‎Ve‏ الجزيئات المحتويى على المنتج لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎Av came YOY)‏ 1( في صورة مادة صلبة عديمة اللون. دي

١١١ - 'H NMR (399.9 MHz, DMSO-d¢) 6 1.42 (9H, 5), 1.93 - 2.12 (4H, m), 3.45 - 3.63 (4H, m), 4.22 - 4.33 (2H, m), 4.75 - 4.88 (2H, m), 6.59 - 6.61 (1H, m), 7.14 - 7.24 (2H, m), 7.33 (4H, s), 7.76 (1H, d), 8.14 (1H, s), 11.65 (1H, br, s) m/z (ESI+) M+H)+ = 515:517;

HPLC tg = 1.99 min. : ١9 ‏المركب الوسيط‎ © (S)-methyl 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate 0 ‏ا‎ 0 ‏طحم‎ ‏ض‎ Cl : ‏ملي مول ) على دفعة واحدة إلى‎ ١1.18 ‏مل؛‎ V+ TA) Todomethane ‏تمت إضافة‎ ‏ملي‎ VTE ‏جم‎ ١ (S)-3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoic acid ‏مل). تم تقليب‎ V0) DMF ‏ملي مول ) في‎ TV can ‏(577.؛‎ potassium carbonates ( ‏مول‎ ٠ 0+) EtOAc ‏ساعة. تم تركيز خليط التفاعل وتخفيفه باستخدام‎ YE ‏م لمدة‎ Av ‏المعلق الناتج عند‎ ‏باستخدام ماء )00 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 08504 وترشيحها وتبخيرها‎ (Jw (S)-methyl ~~ 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate : ‏لإعطاء‎ ‏صلبة برتقالية.‎ sale ‏في صورة‎ (4 ١78 can VTE) 1H NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) 6 1.36 (9H, s), 2.71 - 2.74 (1H, m), 2.74 - 2.80 (1H, Yo m), 3.57 (3H, 5), 4.91 (1H, d), 7.33 (2H, d), 7.39 (2H, d), 7.49 (1H, d). m/z (ESI-) (M-

H)-=312; HPLC tR = 2.57 min.

YAO)

١١ — : 30 ‏المركب الوسيط‎

NH, 0 ‏محم‎ , cl ‏ملي مول‎ ١1.77 «da £.YA) ( dioxane 4 ١ ‏مولار في‎ 4 ) hydrochloric acid ‏تمت إضافة‎ ‏على دفعة واحدة إلى:‎ ) ‏(المركب الوسيط‎ (S)-methyl 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate 8 ‏م. تم تقليب المحلول الناتج‎ ٠١ ‏مل) عند‎ Yo) DOM ‏ملي مول ) في‎ 2.78 can ٠١84 : ‏ساعات. تم تبخير خليط التفاعل لإعطاء‎ 0 sad a Yo ‏عند‎ ‏جم؛‎ 06 ) (S)-methyl 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ (% ٠١ 111 NMR (399.9 MHz, DMSO0-d6) 6 2.98 - 3.04 (1H, m), 3.16 - 3.21 (1H, m), 3.58 (3H, Ve 5), 4.62 - 4.66 (1H, m), 7.50 - 7.52 (2H, m), 7.57 - 7.59 (2H, m), 8.66 (3H, s). m/z (ESI+) (M+H)+ = 214; HPLC tR = 1.71 min. : 9١ ‏المركب الوسيط‎ (S)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- yDpiperidine-4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate Ye

YA)

‎١١75© —‏ ٍ 0 ‎A‏ \ 0 ‎S00‏ ‏بده 1 0 ‎N‏ ‏مه ‎N‏ ' تمت إضافة : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluoro-phosphate‏ ‎VV OV)‏ جم؛ 7.04 ملي مول ) على دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- ©‏ ‎carboxylic acid‏ (المركب الوسيط ‎Y.VV can 1) )١‏ ملي مول ) ‎٠٠٠١ ١( NN-diisopropylethylamine s‏ مل؛ 4 ملي مول ) في ‎٠١( NMP‏ مل) عند ‎٠١‏ -م. تم تقليب المحلول الناتج عند ‎٠١‏ م لمدة 0 دقائق. ثم تمت إضافة : ‎(S)-methyl 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoate (hydrochloride) Yo‏ (المركب الوسيط ‎)٠١‏ ‎can ».197(‏ 7لا ملي مول ) المحلول وتقليبه عند درجة حرارة الغرفة لمدة ؟ ساعات. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎٠٠١( EtOAc‏ مل)؛ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء ‎XY)‏ ‎٠‏ مل) ومحلول ملحي ‎١(‏ © مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحها وتبخيرها لإعطا عِ منتج خام ‎dl,‏ تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica‏ ‎chromatography | ٠5‏ ؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى م 1 في ‎.DCM‏ تم تبخير ديا

‎١776 -‏ ل

‏الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎(S)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yDpiperidine-4-carboxamido)-3-(4-chloropheny!)propanoate‏

‎١ YY)‏ جم؛ ‎AY‏ %( في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) 6 1.40 (9H, 5), 1.99 (2H, s), 2.04 - 2.07 (2H, m), 2.79 |‏ 111 ‎(2H, m), 3.56 (3H, s), 3.60 - 3.66 (1H, m), 3.67 - 3.70 (1H, m), 4.20 (2H, t), 5.20 -‏ 2.84 - ‎(1H, d), 8.21‏ 8.14 ,رو ‎(1H, m), 6.73 (1H, d), 7.13 (1H, s), 7.27 (1H, t), 7.35 (4H,‏ 5.26 ‎(1H, s), 11.98 (1H, s). m/z (ESI+) M+H)+ = 557; HPLC tR = 2.12min.‏ المركب الوسيط ‎7١‏ : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Ve‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‏0 ‏هذه ‎a‏ ‎N‏ ‏0 ‎N‏ ‏حا ‏ِِ ‎N‏ ‎Np‏ ‏تمت إضافة ‎LiAIH4‏ ) “.1 مل ‎Y.YA‏ ملي مول ( بالتنقيط إلى :

‎١7 - :‏ ‎(S)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yD)piperidine-4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate‏ ‏(المركب الوسيط ‎can 1.YV) (YY‏ 7.748 ملي مول ) في ‎(Je Vo) THE‏ مبرّد إلى صفز م تحت 008 . تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Yeo‏ م لمدة ساعة واحدة. تم إخماد خليط ‎Jeli)‏ ‏© باستخدام ‎Y) sodium hydroxide‏ مولار) ‎Y)‏ مل) وماء ‎١(‏ مل). تم ترشيح المحلول وتخفيفه باستخدام ‎(Jw ٠٠١( EtOAc‏ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء ‎٠٠١(‏ مل)؛ ماء ‎٠٠١(‏ ‏مل)؛ ومحلول ملحي مشبع ‎٠٠١(‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 248504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ٠١‏ ‎Yoo 8 )‏ جم تم 0 في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎M/z (ESI+) (M+H)+ = 529; HPLC (R = 2.00 min.‏ المركب الوسيط ؟؟ : ‎2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-(4-chlorophenyl)ethyl methanesulfonate‏ ‎x‏ ‏ب ‎HN‏ ‏0 ‏2 ‏0 0 ‎١‏ 0 تمت إضافة ‎(Ja ٠١401( methanesulfonyl chloride‏ 18074 ملي مول ) إلى : 1د

م١‏ ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamate‏ (17.؛ ‎١١7.١ 6 can‏ ملي مول ( ‎YO.VA (Je 1:77( N,N-diisopropylethylamine‏ ملي مول ) في ‎DCM‏ )£4 مل) مبرّد إلى صفزام خلال مدة 0 دقائق تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Yo‏ م لمدة ساعتين. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎(Jo ٠٠١( DCM‏ وغسله على نحو متعاقب باستخدام © ماء ‎٠٠١(‏ مل).

تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ ؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى ‎EtOAc 7 ٠١‏ في ‎DCM‏ تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف ‎٠‏ لإعطاء ‎¥.)Y) 2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-(4-chlorophenyl)ethyl methanesulfonate‏

‎aa‏ 507.7 7) في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎(9H, s), 3.17 (3H, s), 4.22 - 4.28 (2H, m), 4.90‏ 1.39 ة ‎1H NMR (399.9 MHz, DMSO-d6)‏ ‎(1H, d), 7.40 - 7.46 (4H, m), 7.68 (1H, d). m/z (ESI+) (M-H)- = 348; HPLC tR = 2.32‏ ‎min.‏ ‎٠‏ تم تحضير ال ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamate‏ المستخدم في التفاعل السابق كما يلي. تم تقليب ‎VY) 2-Amino-2-(4-chlorophenyl)acetic acid‏ جم 14.26 ملي مول ) في ‎(Ja ٠٠١( THF‏ وإضافة ‎0.AY) sodium borohydride‏ جم ‎٠57.897‏ ملي مول ) على دفعات إلى الخليط المقلب تحت ‎nitrogen‏ . تمت إضافة محلول من ‎jodine‏ (16.41 جم؛ 59 ملي مول ) في ‎THF‏ (70 مل) بالتتقيط مع الحفاظ على درجة الحرارة ‎Jil‏ من ‎p10‏ ‎٠٠‏ باستخدام حمام ثلج. تمت تدفئة الخليط الناتج إلى درجة حرارة الغرفة وتقليبه عند الارتجاع ‎dish‏

‎١95 —‏ - الليل. تم إخماد التفاعل عن طريق إضافة ‎methanol‏ )+ مل). تمت إزالة دفعة ذلك المحلول ‎O04)‏ مل) وتقسيمها بين ‎ethyl acetate‏ وماء. تم تركيز المادة العضوية تحت ضغط منخفض. تمت تنقية البقية بواسطة ‎MPLC‏ على ‎silica‏ باستخدام تصفية تتابعية تدريجية ‎١(‏ إلى ‎٠١‏ 7 ‎methanol‏ / 0014). ثم تم عزل المنتج المطلوب : ‎٠١ A) 2-amino-2-(4-chlorophenyl)ethanol | ©‏ جم ‎١٠.848‏ 7) في صورة مادة صلبة عديمة اللون. ‎1H NMR (399.9 MHz, CDCI3) 6 2.00 (3H, br, s), 3.48 - 3.58 (1H, m), 3.68 - 3.76 (1H,‏ ‎m), 4.02 - 4.08 (1H, m), 7.23 - 7.39 (4H, m). m/z (ESI-) (M-H)- = 284,286 ; HPLC tR =‏ ‎min.‏ 2.20 ‎٠‏ تمت معالجة 48 المحلول باستخدام ‎YA. +) triethylamine‏ مل» ‎١9.71‏ ملي مول ) ‎di-5‏ ‎can VEY Y) tert-butyl dicarbonate‏ 14.715 ملي مول ). تم تقليب الخليط لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة قبل تقسيمها بين ‎ethyl acetate‏ وماء. تم تجفيف الطبقة العضوية باستخدام ‎magnesium sulfate‏ « وترشيحها؛ وتركيزها ‎aad‏ ضغط منخفض. تمت تنقية البقية بواسطة ‎MPLC‏ على ‎silica‏ باستخدام تصفية تتابعية تدريجية ‎ZY)‏ ‎DCM / ethyl acetate ٠‏ إلى +© 7 ‎(DCM / ethyl acetate‏ المنتج المطلوب : ‎cam 1/.51( tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-hydroxyethylcarbamate‏ 40.6 7)؛ ثم تم عزل في صورة مادة صلبة عديمة اللون. تمت ‎sale)‏ تنقية الجزيئات غير النقية بواسطة ‎MPLC‏ لإعطاء قطفة ‎٠4 can 7.41( Al‏ 7). فيا

“Vt. = 111 NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) § 1.37 (9H, s), 3.41 - 3.52 (2H, m), 4.42 - 4.58 (1H, m), 4.79 (1H, t), 7.23 (1H, d), 7.31 (2H, d), 7.37 (2H, d). tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-cyanoethylcarbamate : Y¢ ‏المركب الوسيط‎

J

HN oA cl oN

N

: ‏ملي مول ( إلى‎ 7.١4 ‏مجم‎ ٠ sodium cyanide ‏تمت إضافة‎ © ‏(المركب الوسيط‎ 2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-(4-chlorophenyl)ethyl methanesulfonate ‏م. تم تقليب المعلق الناتج عند‎ 7١ ‏عند‎ (Je ©) DMF ‏ملي مول ) في‎ + AT cama Yoo) (YY ‏مل)؛‎ Vv) ‏إذابته في ماء‎ solely ‏م لمدة ؟ ساعات. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف‎ ٠ ‏مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق‎ ٠١( XY DOM ‏وغسله على نحو متعاقب باستخدام‎ ‏وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف‎ (MgSO4 ٠ 1 Yo ‏إلى‎ ٠ ‏وتصفيته تتابعياً بتدرح من‎ « flash silica chromatography ‏سيليكا ومضي‎ : ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ . isohexane ‏في‎ EtOAc ‏في صورة مادة‎ (7 AY ‏مجم‎ Y+ 9) tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-cyanoethylcarbamate ec ‏صلبة بيضا‎ 111 NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) 61.38 - 1.42 (9H, s), 2.82 - 2.89 (2H, m), 4.89 (1H, Vo d), 7.38 - 7.45 (4H, m), 7.76 (1H, d). m/z (ESI+) (M-H)- = 279; HPLC tR = 2.42 min. tert-butyl 3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamate : Yo ‏المركب الوسيط‎ ‏مما‎

١5١ 0

HN Ae As ym : ‏ملي مول ) بالتنقيط إلى‎ 0 VY ‏مل؛‎ ٠ . ال١‎ 7( lithium aluminium hydride ‏تمت إضافة‎ cane Yoo) (VE ‏(المركب الوسيط‎ tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-2-cyanoethylcarbamate ‏تم تقليب المحلول الناتج عند‎ . nitrogen ‏عند ١٠م تحت‎ (de £) THF ‏ملي مول ) في‎ 7١ ‏مل) وترشيح‎ ١( ‏مولار)‎ ١( NaOH ‏خليط التفاعل باستخدام‎ sled) ‏م لمدة ساعتين. تم‎ 70 © ‏مل). تم‎ ٠١( « ‏مل)؛ وغسله باستخدام ماء ؟‎ Yo) EtOAc ‏المحلول. تم تخفيف المحلول باستخدام‎ : ‏وترشيحها وتبخيرها لإعطاء‎ (MgSO4 ‏تجفيف المادة العضوية فوق‎ ‏في صورة‎ 0 ٠٠١ ‏مجم‎ ٠ 9 tert-butyl 3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamate m/z (ESI+) (M+H)+ = 285; HPLC tR = 2.33 min. ‏مادة صمغية.‎ tert-butyl 3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamate :¥71 ‏المركب الوسيط‎ ٠ 0

A

HN 0 or

Cl oo ‏ملي مول ) بالتنقيط إلى‎ + AS ce +. AE) Acetic anhydride ‏تمت إضافة أسيتيك غير مائي‎ cane YoY) (YO ‏(المركب الوسيط‎ tert-butyl 3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamate

DCM ‏ملي مول ( في‎ ٠١47 ‏ملء‎ +. Y £A) N,N-diisopropylethylamine 5 ( ‏ملي مول‎ 7١ ‏ساعات. تم إخماد خليط‎ ١7 ‏تقليب المحلول الناتج عند ١7م لمدة‎ a3. Yo ‏عند‎ (Jeo) ٠5 ‏للحي‎

‎VEY -‏ — التفاعل باستخدام ‎Y) NaHCO3‏ مولار) ‎(de ٠١(‏ وماء ‎٠١(‏ مل) واستخلاصه باستخدام ‎DCM‏ ‎٠١(‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ ؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من + إلى ‎MeOH 7 Y.0‏ في ‎DCM‏ ‏5 تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء ‎١47(‏ مجم؛ 1100 7) في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎1H NMR (399.9 MHz, DMSO-d6) 51.36 (9H, 5), 1.67- 1.82 (2H, m), 1.79 (3H, s),‏ . ‎(2H, q), 4.50 (1H, d), 7.32 (2H, d), 7.38 (2H, d), 7.43 - 7.45 (1H, m), 7.79 (1H, 5).‏ 2.97 ‎m/z (ESI+) (M+H)+ = 327; HPLC (R = 2.03 min.‏ ‎٠‏ المركب الوسيط ‎N-(3-amino-3-(4-chlorophenyl)propyl)acetamide : YV‏ ‎NH,‏ ‎ry‏ ‎Cl oA‏ تمت إضافة ‎tert-Butyl 3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamate‏ (المركب الوسيط 7؟) ‎cama VEY)‏ £7 ++ ملي مول ) إلى ‎Y) TFA‏ مل) عند ‎Yo‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند ١7م‏ لمدة ‎5٠0‏ دقيقة. تم تبخير خليط التفاعل وتنقيته باستخدام كروماتوجراف التبديل الأيوني ‎ion‏ ‎exchange chromatography ٠‏ باستخدام عمود 506. تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎١‏ مولار من ‎MeOH/NH3‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء ‎N-(3-amino-3-(4-chlorophenyl)propyl)acetamide‏ (١٠؟‏ مجم ¥4.7 0 في صورة مادة صمغية عديمة اللون. ‎m/z (ESI+) (M+H)+ = 227: HPLC 18 = 1.32 min.‏ ‎YAO)‏

— ١47 - : 78 ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate سين 0 بده ‎nu‏ ? ‎N‏ ‎ci NC‏ 0 ‎N‏ ‎CT‏ ‎N‏ ‎NH‏ ‏© تمت إضافة :

A) O-(7-azabenzotriazol-1-yl)- N,N,N'N'-tetramethyluronium hexafluoro-phosphate : ‏ملي مول ) على دفعة واحدة إلى‎ ١77 cans 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid

N,N-diisopropylethylamine ‏ملي مول ) و‎ +. VY ‏مجم‎ 1Y.Y) )١ ‏(المركسب الوسيط‎ Vo ‏تم تقليب‎ . nitrogen ‏تحت‎ a ٠١ ‏مل) عند‎ Y) NMP ‏ملي مول ) في‎ ١.07 oda .٠ Ao) المحلول الناتج عند ١7م‏ لمدة 0 دقائق. ثم تمت إضافة : ‎N-(3-amino-3-(4-chlorophenyl)propyl)acetamide‏ (المركب الوسيط ‎(YY‏ )4 مجم ‎٠.١١‏ ‏دم

‎١44 —‏ ملي مول ) في ‎(Je 7( NMP‏ إلى التفاعل وتقليبه لمدة ساعة واحدة. تم تركيز خليط التفاعل وتخفيفه باستخدام 210/6 ‎(Je Yo)‏ وغسله باستخدام ماء ‎Vo)‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحها وتبخيرها لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(3-acetamido-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ©‏ ‎AT aa Vor 8)‏ 4( في صورة ‎sale‏ صلبة بيضاء. ‎m/z (ESI+) (M+H)+ = 570; HPLC tR = 1.95 min.‏ المركب الوسيط ‎3-amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol : Y4‏ 0 ‎OH‏ ناآ ‎NH,‏ ‎٠‏ تمت إضافة معقد ‎A£. +) borane-tetrahydrofuran‏ ملء 97.97 ملي مول ) بالتنقيط إلى معلق ‎lie‏ من ‎3-amino-3-(4-chlorophenyl)propionic acid‏ ) 86 جم ‎١.57‏ ملي مول في ‎(Ja Vo) THF‏ عند صفرً م خلال مدة ‎٠١‏ دقائق تحت 0100860 . تم تقليب المعلق الناتج عند صفر م ‎Ye sad‏ دقيقة ثم عند ‎YY‏ م لمدة © ساعات. تمت إضافة خليط التفاعل على دفعات إلى ‎methanol‏ )+ + © مل). تم تركيز الخليط» وإذابته مره أخرى في ‎(Je YO +) methanol‏ وتركيزه مرة ‎٠‏ أخرى (تم إعادة تلك العملية ثلاث مرات ). تمت إذابة البقية في ‎Tov) DOM‏ مل) وغسلها . باستخدام ‎NaOH‏ بتركيز ‎Vou) (he ١‏ مل). تم استخلاص الطبقة الماثية باستخدام ‎DCM‏ )0 ‎٠ x‏ مل) وتجميع نواتج الاستخلاص مع المادة العضوية. تم غسل المواد العضوية المجمعة باستخدام محلول ملحي مشبع ‎Vo xY)‏ مل)؛ وتجفيفها فوق 145504 وتركيزها لإعطاء مادة شبه 01م

‎١+8 —‏ هه صلبة بيضا ‎Lg‏ تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضصي ‎flash silica‏ ‎١ chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من # إلى ‎[MeOH ١ : ٠١ 7 ١‏ 3 مركز (مائي)) في ‎DCM‏ تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎V.YY +) 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ جم ‎A‏ .01 %( في صورة مادة صلبة © بيضاء. ‎NMR (399.902 MHz, 010013( 6 1.87 (2H, m), 2.34 (2H, br.s), 3.79 (2H, m), 4.13‏ 111 ‎(1H, 1), 7.24 (2H, d), 7.32 (2H, d).‏ ‎MS m/e MH" 169‏ المركب الوسيط ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate : ٠١‏ ‎Cl‏ ‏01 نآ ‎NH‏ ح< 0 كك ‎Va‏ 0 تمت إضافة ‎Di-tert-butyl dicarbonate‏ (0700 جم؛ 7.7 ملي مول ) إلى : ‎3-amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط ‎can ١.295 0( (V4‏ 7.11 ملي مول ) في ‎Vo) DOM‏ مل) عند ‎YY‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند 77 م لمدة ساعتين. تم تركيز الخليط وتنقيته بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ « ‎٠‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى ؛ 7 ‎NH3 [MeOH ١ : ٠١(‏ مركّز (مائي)) في ‎DCM‏ تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎YAO)‏

- ١57 — ‏جم 14 %( في صورة‎ +.V04) tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate ee Liaw alia ‏مادة‎ ‎1H NMR (399.902 MHz, CDCI3) 6 1.43 (9H, s), 1.81 (1H, m), 2.04 (1H, m), 2.74 (1H, br.s), 3.69 (2H, m), 4.88 (1H, br.s), 5.04 (1H, d), 7.23 (2H. d). 7.32 (2H, d).

MS m/e MH" 284, 286 © :3١ ‏المركب الوسيط‎ 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl methanesulfonate

Cl

OL 2

PN

AG ‏اب‎ 0 0 : ‏ملي مول ) بالتنقيط إلى‎ ٠١# ‏مل؛‎ +. + 4Y) methanesulfonyl chloride ‏تمت إضافة‎ .771( )٠١ ‏(المركب الوسيط‎ tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate Ve (Je \o ) DCM ‏ملي مول ( في‎ Y.YY ‏مل ي‎ +340) ) triethylamine ( ‏ملي مول‎ ١6 ca ‏م لمدة ساعتين. تم تركيز الخليط وتنقيته بواسطة‎ YY ‏م. تم تقليب المحلول الناتج عند‎ YY ‏عند‎ ‎Yo ‏وتصفيته تتابعياً بتدرج من‎ «flash silica chromatography ‏كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ : ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ . isohexane ‏في‎ EtOAc Lee ‏إلى‎ ‏جم‎ 1 1( 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl methanesulfonate Vo ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ (% AA

YAO)

١697 1H NMR (399.902 MHz, CDCI3) 6 1.42 (9H, s), 2.19 (2H, m), 3.01 (3H, s), 4.24 (2H, m), 4.82 (2H, m), 7.22 (2H, d), 7.33 (2H, d).

MS m/e MH- 362, 364 tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propylcarbamate : VY ‏المركب الوسيط‎

Cl ‏دا لآ‎ . 0 NH 0 8 3-(tert-Butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl ~~ methanesulfonate ‏تمت إذابة‎ tetrabutylammonium iodide 5 ) ‏ملي مول‎ 2.7١ ‏جم؛‎ 0.0 VO) (VY ‏(المركب الوسيط‎ 5.1597 ¢ Nga Y) THF ‏في‎ dimethylamine ‏ملي مول ) في محلول من‎ ١04 can vue) °) ‏م‎ 19١8 ‏ملي مول ) وإدخاله داخل أنبوب ميكروويف ثم غلقه. تم تسخين التفاعل إلى‎ ٠٠١١٠ a ‏دقيقة في مفاعل الميكروويف والتبريد إلى درجة الحرارة المحيطة. تم تركيز خليط التفاعل؛‎ To ‏لمدة‎ ٠ ‏مل). تم ترشيح المادة العضوية‎ YO) ‏وغسله باستخدام ماء‎ (Je YO) DCM ‏وتخفيفه باستخدام‎ ‏خلال ورقة مرشح فصل أطوار وتبخيرها. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا‎

Ye) LA ‏؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ؛ إلى‎ flash silica chromatography ‏ومضي‎ ‎DCM ‏مركّز (مائي)) في‎ NH3 /MeOH tert-butyl ~~ 1-(4-chlorophenyl)-3- ‏تم تبخير الجزيثات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ 0 Ye ‏في صورة زيت عديم اللون.‎ (4 AE ‏مجم؛‎ ٠.٠٠ 4( (dimethylamino)propylcarbamate ‏دي‎

— YEA — 1H NMR (399.902 MHz, CDCI3) 6 1.40 (9H, s), 1.80 (1H, br.s), 1.94 (1H, m), 2.23 (6H, 5), 2.26 (2H, m), 4.71 (1H, br.s), 6.16 (1H, br.s), 7.21 (2H, d), 7.29 (2H, d).

MS m/e MH" 3 1-(4-chlorophenyl)-N3,N3-dimethylpropane-1,3-diamine : YY ‏المركب الوسيط‎

Cl ‏نآ‎ N ~

NH, o تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ )£ مولار في ‎YY «Je ٠.177 «dioxane‏ ملي مول ) إلى ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propylcarbamate‏ (المركب الوسيط ‎(VY‏ ‎v0)‏ جمء 0.136 ملي مول ) في خليط من ‎DCM‏ )© مل) 5 ‎(Je Y) methanol‏ عند ‎YY‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند ‎YY‏ م لمدة ؛ ساعات. تم تركيز الخليط وتتقيته بواسطة كروماتوجراف ‎Ye‏ التبديل ‎١‏ لأيوني ‎jon exchange chromatography‏ » باستخدام عمود ‎LSCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام مولار من ‎MeOH/NH3‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎YY) 1-(4-chlorophenyl)-N3,N3-dimethylpropane-1,3-diamine‏ .+ جم ‎AY‏ ( في صورة زيت عديم اللون. ١ 111 NMR (399.902 MHz, 010013( 6 1.72 - 1.85 (2H, m), 2.19 - 2.32 (2H, m), 2.21 (6H, s), 3.99 (1H, t), 7.25 - 7.31 (4H, m).

YAO)

‎١589 -‏ — ‎m/e MH+ 213‏ 115 المركب الوسيط ؛؟ : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎Cl‏ ‏\ ‎N‏ ‏0 / امي 2 0 ‎N‏ ‎Co‏ ‏= ‎٠“ 5‏ تمت إضافة ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n"-tetramethyluronium‏ ‎١٠١ aa 0.٠ 44( hexafluorophosphate‏ ملي مول ) إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo{2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ ‎Ye‏ (المركب الوسيط ‎cov fe) )١‏ جم؛ ).+ ملي مول ) 5 ‎N,N-diisopropylethylamine‏ ‏5 "...ملء ‎CY‏ ملي مول ( في ‎NMP‏ (5 مل) عند ‎YY‏ م. تم تقليب المعلق الناتج عند ‎٠‏ م لمدة ‎٠١‏ دفائق. تم تبريد الخليط إلى درجة الحرارة المحيطة واضافة : ‎1-(4-chlorophenyl)-N3,N3-dimethylpropane-1,3-diamine‏ (المركب الوسيط ‎YY) (YY‏ © جم؛ ‎١01١‏ ملي مول ) كمحلول في ‎Y) NMP‏ مل). تم تقليب الخليط عند ‎YY‏ م لمدة ؟ أيام. تم مدلا

— Yo. ‏وتنقيته بواسطة كروماتوجراف تبديل أيوني باستخدام عمود‎ methanol ‏تخفيف الخليط باستخدام‎ (MeOH ‏مولار من 11113 في‎ Y) 7 Fo ‏*©؟؛ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام‎ ‏في 17014 وتبخير الجزيئات المحتوية على المنتج إلى درجة الجفاف. تمت تنقية المنتج الخام‎ ‏وتصفيته تتابعياً بتدرج‎ «flash silica chromatography ‏بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى‎ DCM ‏(مائي)) في‎ $e NH3 MeOH Y : ٠١ 7 + ‏.من ؟ إلى‎ © : ‏درجة الجفاف لإعطاء‎ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(dimethylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ (% v1 (o> veg V) 1H NMR (399.902 MHz, DMSO) 6 1.43 (9H, s), 1.82 (2H, m), 1.90 - 2.04 (5H, m), 2.14 0 ٠ (6H, s), 2.16 (2H, m), 3.54 (2H, m), 4.25 (2H, m), 4.86 (1H, dt), 6.61 (1H, dd), 7.09 (1H, br.s), 7.17 (1H, dd), 7.33 (4H, s (roof effect)), 8.14 (1H, s), 8.45 (1H, d), 11.65 (1H, s).

MS m/e MH" 556-558 : : Vo ‏المركب الوسيط‎ methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine- Vo 4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate ‏عي‎

— ١5١ - 0 >» 0 0 a 0 ‏اس‎ ‎0 ‎N ‎1 ©. ‏حي‎ N : ‏تمت إضافة‎

O-(7-azabenzotriazol-1-yl1)-N,N,N' N'-tetramethyluronium hexafluoro-phosphate ‎At )‏ مجم ‎YY‏ ملي مول ( على دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- 5‏ ‎carboxylic acid‏ ‏(المركب الوسيط ‎YY .¥) ( ١‏ مجم؛ ‎AR‏ ملي مول 1 ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ ‎٠‏ )0 مجم؛ ‎١٠١‏ ملي مول ) 5 ‎eda vi) od ) N.N-diisopropylethylamine‏ 210 ملي مول ) في ‎٠١*( N-methyl-2-pyrrolidinone‏ مل) عند ‎٠١‏ .م تحت ‎argon‏ . تم تقليب المحلول الناتج لمدة © ساعات. تمت تنقية خليط التفاعل بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري باستخدام عمود ‎Waters sh‏ ‎X-Bridge‏ عكسي )8 1-لء 5 ميكرون ‎silica‏ 4 قطر اداه مم طول ‎Yeo‏ مم معدل تدفق ‎$a‏ مل / دقيقة ) باستخدام خلائط قطبية بشكل متناقص من ماء ( تحتوي على 0.7 7 كربونات أمونيوم ) ديا

— YoY - ‏تصفية تتابعية. تم تبخير الجزيئات المحتوية على المركب المطلوب إلى‎ JelxS acetonitrile : ‏درجة الجفاف لإعطاء‎ methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine- 4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate . ‏مالا مجم يل كاي %( في صورة مادة صلبة بلورية بيضاء‎ ) 2 111 NMR (500 MHz, DMSO-d6) 6 1.36 (9H, s), 1.94 - 2.00 (4H, m), 2.79 - 2.86 (2H, dq), 3.54 (3H, s), 3.52 - 3.61 (2H, m), 4.19 (2H, 1), 5.22 (1H, ‏,لو‎ 6.56 (1H, d), 6.9 (1H br s), 7.13 (1H, d), 7.33 (4H, ‏,لو‎ 7.98 (1H, d), 8.12 (1H, s), 11.53 (1H, s). m/z (ESI+) (M+H)+ = 557; HPLC tR = 3.18 min.

TU ‏المركب الوسيط‎ ٠ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

OH

0 0

N

من ‎N‏ 7 تمت إضافة ‎can 1.019) sodium borohydride‏ 71.97 ملي مول ) على دفعة واحدة إلى ‎VO‏ معلق ‎lie‏ من : دي

— ١8١ methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine- 4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate . argon ‏تحت‎ (Jw £ ++) EtOH ‏ملي مول ) مذاب في‎ ٠.80 ‏جم؛‎ ٠٠١( (YO ‏(المركب الوسيط‎ ‏ساعات. تمت إضافة قطرات قليلة من الماء لإخماد‎ Ve ‏تم تقليب المعلق الناتج عند ١7م لمدة‎ ‏وتقليب الخليط لمدة ساعة واحدة. تم تبخير الخليط إلى درجة الجفاف‎ hydride ‏الكمية الزائدة من‎ © ‏تم تجفيف الطور العضوي وتركيزه لإعطاء منتج‎ NaCl ‏وتقسيم البقية بين 0112012 وماء مشبع ب‎ ‏ثمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف وميضي على جل‎ Le ‏خام في صورة بلورات بيضا‎ ‏تم تبخير‎ . dichloromethane ‏في‎ methanol Lye ‏إلى‎ ٠ ‏وتصفية تتابعية باستخدام‎ silica الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطا : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Vo‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ . ‏في صورةً مادة صلبة بيضاء‎ (% ٠١٠. ‏مجم؛‎ 7 ) 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 1.41 (9H, s), 1.79 - 1.99 (6H, m), 3.31 - 3.37 (2H, m), 3.51 (2H, m), 4.21 - 4.28 (2H, m), 4.55 (1H, s), 4.90 (1H, q), 6.59 (1H, d), 7.06 (1H, s), 7.16 (1H, d), 7.31 (4H, s), 8.01 (1H, d), 8.12 (1H, s), 11.67 (1H, s). m/z (ESI+) (M- Yo

H)- = 529; HPLC (R = 2.93 min.

TY ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(1,3-dioxoisoindolin-2-yl)propylcarbamoyl)-1-(7H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

YAO)

‎١ —‏ 1 ص 0 ‎No‏ ‏0 ‎cl‏ ‎N‏ ‎BR‏ ‎L~ N‏ تمت إضافة ‎١ A) triphenylphosphine‏ مجم) ‎YY.V)) phthalimide s‏ مجم) على دفعة واحدة إلى محلول مقلب من : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate 8‏ (المركب الوسيط 37) (7* مجم) مذاب في ‎٠١( THF‏ مل) ومبرد إلى ٠م‏ تحت «ميته . تم تقليب الخليط المحلول الناتج عند + م لمدة ‎٠0‏ ؟ دقيقة. تمت إضافة ‎Diethyl azodicarboxylate‏ (97... مل) على قطرات عند ‎٠‏ .م تحت ‎argon‏ . تم تقليب المعلق الناتج عند ‎٠‏ .م لمدة ‎Te‏ ‏دقيقة وطوال الليل عند درجة حرارة الغرفة. تم إخماد المعلق باستخدام ماء. تمت ‎adh)‏ ال ‎THF‏ في ‎٠‏ وسط مفرغ واستخلاص ‎shall‏ المائي باستخدام ‎DCM‏ تم تجفيف الطور العضوي وتركيزه لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف ومضي على جل ‎silica‏ بتدرج من ‎٠‏ ‏إلى ‎methanol ٠‏ في ‎-DCM‏ تم تبخير المذيب إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(1,3-dioxoisoindolin-2-yl)propylcarbamoyl)-1-(7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎VO‏ في صورة مادة صلبة بيضاء ‎7٠١١ aaa VE)‏ 7). دي

— Yoo — 'H NMR (500 MHz, DMSO-d) 8 1.37 (9H, 5), 2.01 (4H, m), 2.09 (2H, m), 3.58 (4H, m), 4.23 (2H, m), 4.84 (1H, ‏,لو‎ 6.60 (1H, d), 7.00 (1H, m), 7.16 (1H, t), 7.27 (2H, d), 7.33 (2H, d), 7.82 (4H, m), 8.12 (1H, d), 8.13 (1H, s), 11.67 (1H, s).

MS m/e MH" 658. : 38 ‏المركب الوسيط‎ © tert-butyl 4-(3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

NH, . 0 ‏مل‎ ٍ 0 0

N

0

Ny N : ‏من‎ lie ‏ميكرولتر) إلى معلق‎ ٠٠١”7( hydrazine monohydrate ‏تمت إضافة‎ : tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(1,3-dioxoisoindolin-2-yl)propylcarbamoyl)-1-(7H- Ve pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏تم تقليب المعلق الناتج‎ . argon ‏تحت‎ (Je ٠0٠١( ethanol ‏مجم) في‎ VE) (VV ‏(المركب الوسيط‎ ‏تحضيري باستخدام‎ HPLC ‏عند درجة حرارة الغرفة لمدة © أيام. تم ترشيح الخليط وتنقيته بواسطة‎ ( ‏مم‎ ٠ ‏طول‎ cae V4 ‏قطر‎ ¢ silica ‏ميكرون‎ © «C-1 8) ‏عكسي‎ Waters X-Bridge ‏عمود طور‎ acetonitrile ( ‏وخلائط قطبية بشكل متناقص من ماء ) تحتوي على ا كربونات أمونيوم‎ Vo ‏دي‎

— Yo — كعامل تصفية تتابعية. تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(3-amino-1-(4-chlorophenyl)propylcarbamoy!)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ . ( 7 20 + ‏مجم‎ SI ) ‏في صورة مسحوق أبيض‎ 'H NMR (500 MHz, CDCl; + CD;0D) 6 1.43 (9H, s), 1.93 (2H, 9, 2.19 (4H, m), 2.74 © (2H, 5) 3.57 (4H, m), 4.39 (2H, 0. 5.01 (1H, t), 6.53 (1H, d), 7.07 (1H, d), 7.28 (4H, q), 8.19 (1H, s).

MS m/e MH" 528-and-336.

PVA ‏المركب الوسيط‎ (R)-methy! 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate Ve x mo NH ‏م‎ ‎0 ‎ ‎Cl ‎: ‏ملي مول ) على دفعة واحدة إلى‎ ١9.88 (Ja +. 9AY) Todomethane ‏تمت إضافة‎ ) ‏ملي مول‎ VY ‏مجم؛‎ don ) boc-(R)-3-amino-3-(4-chloro-phenyl)-propionic acid ‏مل). تم تقليب المعلق‎ V0) DMF ‏ملي مول ( في‎ 1.7 4 cane AV) potassium carbonate 4 ‏مل)‎ YO) EtOAc ‏ساعة. تم تركيز خليط التفاعل وتخفيفه باستخدام‎ YE ‏م لمدة‎ Av ‏الناتج عند‎ ٠ ‏مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 28504؛ وترشيحها وتبخيرها لإعطاء:‎ YO) ‏باستخدام ماء‎ ‏عي‎

- ١١ — ‏مجم‎ ٠ ) (R)-methyl 3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propanoate ‏في صورة مادة صلبة برتقالية.‎ (% ١ 'H NMR (399.9 MHz, 01150-06( ‏ة‎ 1.36 (9H, s), 2.67 - 2.70 (1H, m), 2.71 - 2.80 (1H, m), 3.57 (3H, s), 4.91 (1H, d), 7.32 - 7.34 (2H, m), 7.38 - 7.40 (2H, m), 7.49 (1H, d).

MS m/e MH" 312; HPLC tR = 2.57 min. ° : 40 ‏المركب الوسيط‎ (R)-methyl 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoate (hydrochloride)

MH, Q 0

Cl ) ‏ملي مول‎ YV.00 ‏مل؛‎ V.AQ) ( dioxane ‏مولار في‎ 4 ) hydrochloric acid ‏تمت إضافة‎ ‏(المركب الوسيط‎ (R)-methyl 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoate : ‏على دفعة واحدة إلى‎ ٠ ‏.م. تم تقليب المحلول الناتج‎ Yo ‏عند‎ (Ja ٠١( DOM ‏ملي مول ) في‎ To) cane 494) (78 : ‏عند ١7م لمدة ؟ ساعات. تم تبخير خليط التفاعل لإعطاء‎ ( 7 AA ‏مجم‎ YVV ) (R)-methyl 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoate (hydrochloride) ‏كمادة صلبة صفراء.‎ 'H NMR (399.9 MHz, DMSO0-d6) 6 2.99 - 3.05 (1H, m), 3.18 - 3.23 (1H, m), 3.58 (3H, Vo d), 4.62 - 4.65 (1H, m), 7.49 - 7.53 (2H, m), 7.57 - 7.61 (2H, m), 8.72 (3H, (٠

MS m/e MH" 214; HPLC tR = 1.71 min.

YAo)

‎١87 —‏ المركب الوسيط ‎4١‏ : ‎(R)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yDpiperidine-4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate‏ ‏0 ‏“> ‏0 ‏ذه نم 7 ‎die)‏ ‏0 ‎N‏ ‏حم ‏= ‎NTH‏ ‏© تمت إضافة : ‎O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluoro-phosphate‏ ‎٠7 can ٠ 574 )‏ ملي مول ( على دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-‏ ‎carboxylic acid‏ ‎Vo‏ (المركب الوسيط ‎٠١78 can +20) )١‏ ملي مول ) 5 ‎DIPEA‏ (507.» ملء؛ 4 ‎Vor‏ ملي مول ) فى ‎NMP‏ )° مل) عند ‎7١‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند ‎7١‏ مم لمدة © دقائق. ثم تمت إضافة محلول ‎(R)-methyl 3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoate (hydrochloride)‏ (المركب الوسيط 460) (41 ‎٠.78 aa ٠.‏ ملي مول ) وتقليبه عند درجة حرارة الغرفة ‎Vso‏ ساعات. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎٠٠١( EtOAc‏ مل)؛ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء )+0 ‎50١( elude VO‏ مل) وماء )00 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎MgSO4‏ وترشيحها ديا

وها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف ‎Solow‏ ومضي ‎flash‏ ‎«silica chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى ‎Lo‏ 1 في ‎.DCM‏ تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطا : ‎(R)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate 5‏ ‎Ave )‏ + جم ‎١٠‏ %( في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎'H NMR (399.9 MHz, DMSO0-d6) 6 1.40 (9H, 5), 1.94 - 1.98 (2H, m), 2.00 - 2.01 (2H,‏ ‎m), 2.83 (1H, d), 2.85 - 2.87 (2H, m), 3.55 (3H, 5), 3.60 (2H, s), 4.21 (2H, s), 5.23 (1H,‏ ‎d), 6.60 - 6.61 (1H, m), 7.16 - 7.18 (1H, m), 7.35 (4H, q), 8.09 - 8.14 (2H, m), 11.65‏ ‎(1H, s). Vo‏ ‎MS m/e MH" 557; HPLC tR = 2.29min.‏ المركب الوسيط 47 : ‎(R)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎OH :‏ ‎uo‏ ? ‎al rd +‏ 0 ‎N‏ ‎C0‏ ‏~ ‎NTN vo‏ ‎YAS)‏

— Yi. = تمت إضافة ‎V.Y4A) LiAIH4‏ مل ‎١06‏ ملي مول ) بالتنقيط إلى : ‎(R)-methyl 3-(4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamido)-3-(4-chlorophenyl)propanoate‏ ‏(المركب الوسيط ‎YVR) )4١‏ مجم؛ ‎٠.450‏ ملي مول ) في ‎THF‏ )£0 مل) مبزّد إإلى صفز م © تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Yo‏ م لمدة ؟ ساعات. تم إخماد خليط التفاعل باستخدام ماء ‎(Jo ١(‏ ومعادلته باستخدام ؟ مولار 1101. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف ‎sale‏ إذابته في ‎٠٠١( DCM‏ مل) وغسله باستخدام ‎٠٠١( ele‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 048504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎«flash silica chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى : ‏تم تجميع الجزيئات النقية وتبخيرها لإعطاء‎ .DCM ‏في‎ 1460117 ٠ ٠ (R)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate ‏صلبة.‎ sale ‏مجمء 71.17 4( في صورة‎ VY) 'H NMR (399.9 MHz, DMS0-d6) 6 1.37 - 1.41 (9H, 5), 1.86 - 1.92 (2H, m), 1.94 (2H, d), 2.00 (2H, d), 3.38 (2H, s), 3.53 - 3.55 (2H, m), 4.25 (2H, 1), 4.52 (1H, 5), 4.91 (1H, Yo d), 6.60 - 6.62 (111, m), 7.01 (1H, s), 7.16 - 7.18 (1H, m), 7.33 (4H, m), 7.98 - 8.00 (1H, m), 8.14 (1H, s), 11.67 (1H, s).

MS m/e MH" 529; HPLC tR = 2.01 min. ‏مما‎

‎١١١ -‏ المركب الوسيط 47 : ‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxylic acid‏ 0 ‎HO‏ ‎N‏ ‏تمت إضافة محلول مائي من هيدروكسيد ليثيوم ) ‎Y‏ مولار + ‎1.١‏ مل + ‎YV.4Y‏ ملي مول إلى محلول ‎lie‏ من ‎1-tert-butyl 4-ethyl 4-cyanopiperidine-1,4-dicarboxylate‏ (المركب الوسيط ‎(V 8‏ )0.0 جم؛ ‎٠١5.48‏ ملي مول )؛ في ‎(Je VA) THF‏ عند ‎Yo‏ م. تم تقليب الخليط الناتج عند ‎Yo‏ م لمدة ؟ ساعات ومراقبته بواسطة 11,0. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎diethyl ether‏ ‎١ On )‏ مل) ¢ وغسله باستخدام ماء ) ‎(J ١ ٠.‏ . ثم تجميع الطبقات المائية الطبقات المائية ثم تحميضها باستخدام ‎٠٠١ (LV) citric acid‏ مل). تم استخلاص المنتج داخل ‎DCM‏ تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎magnesium sulfate‏ « وترشيحها وتبخيرها لإعطاء : ‎)1-(tert-butoxycarbonyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxylic acid Ve‏ 00.£ جم ‎٠ (% 1١‏ ثم استخدام تلك المادة في الخطوات التالية بدون تنقية إضافية. ‎'H NMR (400 MHz, CDCI3) 6 1.40 (9H, 9٠, 1.87 — 1.97 (2H, m), 2.04 (2H, d), 3.08 (2H,‏ ‎t), 4.05 (2H, s), 8.23 (1H, s).‏ المركب الوسيط 44 : ‎(R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxamide‏ ‏0 ‎N‏ ‎H‏ ‎a .‏ ‎H \o‏ دي

‎١١17 -‏ — تمت إضافة : ‎٠ °) O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ‎7.٠١ aa‏ ملي مول ) على دفعة واحدة إلى : ‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxylic acid‏ (المركب الوسيط 47) ‎vay) ©‏ جم؛ ؟ ملي مول ) : ‎(R)-1-(4-chlorophenyl)ethanamine‏ (417.؛ ‎Toro cd‏ ملي مول ) 5 ‎V.oVY) DIPEA‏ ملء ‎dre‏ ملي مول ) في ‎٠١( DMA‏ مل) عند ‎Yo‏ م تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند 10م لمدة ؛ ساعات. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف وإعادة إذابته في ‎٠5١( DCM‏ مل)؛ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ‎١‏ مولار من حمض سيتريك مائي ‎(Je © +) aqueous citric acid 0٠‏ ماء )© ‎«(Je‏ ومشبعة ‎٠٠١( sodium hydrogen carbonate‏ مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق ‎magnesium sulfate‏ « وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تم تركيز ذلك المنتج الخام؛ ثم تنقيته بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica‏ ‎«chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى ‎EtOAc #2 ٠٠١‏ في ‎isohexane‏ . تم تبخير الجزيئات النقية لإعطاء : ‎(R)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)ethylcarbamoyl)-4-cyanopiperidine-1-carboxylate Vo‏ ‎V0)‏ جم؛ 44 1( في صورة مادة صمغية عديمة اللون التي تم تصليدها تحت تجفيف عالي التفريغ. ثم تمت ‎sale]‏ إذابة تلك المادة في ‎5٠٠٠١( DCM‏ مل)؛ واضافة ‎trifluoroacetic acid‏ ‎(Ja YY)‏ 0.00 ملي مول ). تم تقليب المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة ؟ ساعات؛ بعد ذلك تمت ‎Ais‏ المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل ‎١‏ لأيوني ‎ion exchange‏ ‎chromatography | ٠‏ ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎١7‏ ‏عياري من ‎MeOH/ ammonia‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء :

‎Vy -‏ — ‎+.YY +) (R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxamide‏ جي ‎(Z AY‏ في صورة مادة صمغية عديمة اللون. تم استخدام تلك المادة ‎5yalie‏ في الخطوة التالية بدون تنقية إضافية. .292 ‎MS m/e MH"‏ المركب الوسيط © : ‎(R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyano-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- 2‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎N‏ 1 ‎N‏ ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‏م ‎NS‏ ‎NT‏ ‏تمت إضافة ‎«Ja V2) +1) DIPEA‏ 1.17 ملي مول ) : ‎(R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyanopiperidine-4-carboxamide‏ (المركب الوسيط 44) ‎0٠‏ (70ل ‎cana‏ 7.497 ملي مول ) 5 ‎Y.£Y cana YV4) 6-chloro-7-deazapurine‏ ملي مول ) في ‎DMA‏ ) 05 مل) عند ‎YO‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند 90 ‎a‏ لمدة ؟ ساعات. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل ا لأيوني ‎jon exchange chromatography‏ ¢ باستخدام عمود ‎SCX‏ ‏تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎١‏ عياري من ‎MeOH/ ammonia‏ وتبخير ‎١‏ الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ميا

— Vie — (R)-N-(1-(4-chlorophenyl)ethyl)-4-cyano-1-(7H-pyrrolo{2,3-d]pyrimidin-4- yl)piperidine-4-carboxamide

‎£7.Y)‏ 7( في صورة مادة صلبة برتقالية.تم استخدامها في الخطوة التالية بدون تنقية إضافية. ‎'"H NMR (400 MHz, DMSO) 6 1.38 (3H, d), 1.94 -9 (3H, m), 2.19 (3H, 1), 4.72 (2H,‏ ‎d), 4.92 (1H, dd), 6.61 — 6.72 (1H, m), 7.23 (1H, dd), 7.30 — 7.41 (4H, m), 8.18 (1H, 5), ©‏ ‎(1H, d), 11.77 (1H, s).‏ 8.77 ‎MS m/e MH" 409.‏ المركب الوسيط £7 : ‎(S)-4-(1-amino-3-hydroxypropyl)benzonitrile‏ ‏و ‎Ne |‏ ‎٠‏ ثمت إضافة ‎(Ja). Y9) sodium borohydride‏ 19.44 ملي مول ) على دفعات إلى : ‎Y.YY) (S)-methyl 3-amino-3-(4-cyanophenyl)propanoate‏ جم؛ ‎٠ ٠٠7‏ ملي مول ) في ‎(Js Y +) methanol‏ عند صفزام خلال مدة © دقائق. تم تقليب المحلول الناتج عند ١7م‏ لمدة ‎YE‏ ساعة. تم إخماد خليط التف المادة العضوية باستخدام ‎Jel‏ باستخدام ‎NaHCO3‏ مشبعة )+0 ‎(J‏ « والاستخلاص باستخدام ‎٠ xY) EtOAc‏ مل) ‎٠‏ وغسل محلول ملحي مشبع ) ‎(Je Vo‏ ‎٠‏ وتجفيفها فوق ‎(MgSO4‏ وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف ‎Salus‏ ومضي ‎«flash silica chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠‏ إلى عدي

‎١٠10 —‏ - ‎ammonia ae MeOH YARN‏ 4 10014. تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء ‎YA) (8)-4-(1-amino-3-hydroxypropyl)benzonitrile‏ .+ جم» 19.17 4( في صورة زيت عديم اللون ‎٠‏ ‎'H NMR (400.13 MHz, CDCl;) 6 1.84 - 1.93 (2H, m), 3.77 - 3.80 (2H, m), 4.22 - 4.25 (1H, m), 7.43 (2H, m), 7.63 - 7.66 (2H, m). 2

MS m/e MH" 177. ‏المركب الوسيط 497 : ‎(S)-3-amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ ‏ل ‏زم ‏0 ‏تمت إضافة معقد ‎(Je YY) borane-tetrahydrofuran‏ 759.64" ملي مول ) بالتنقيط إلى معلق ‎cilia ٠‏ من ‎can ٠١( (S)-3-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoic acid‏ 50.094 ملي مول ) في ‎(Ja ©+ +) THF‏ عند ‎"ia‏ م خلال مدة £0 دقيقة تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المعلّق الناتج عند صفر م لمدة 0 دقيقة ثم عند ‎YY‏ لمدة © ساعات. تمت إضافة خليط التفاعل على دفعات إلى ‎methanol‏ )+ + © مل). تم تقليب المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة ثلاثة أيام. تم تركيز الخليط واذابته مره أخرى في ‎(Jo 1*5 ١( methanol‏ وتركيزه مرة أخرى (تم إعادة تلك العملية ثلاث مرات ‎٠‏ ( تمت إذابة البقية في ‎VO) DCM‏ مل) وغسلها باستخدام ‎NaOH‏ بتركيز ‎١‏ عياري ‎or)‏ مل). تم استخلاص الطبقة المائية باستخدام ‎٠٠١ XT) DCM‏ مل) وتجميع نواتج الاستخلاص مع المادة العضوية. تم غسل المواد العضوية المجمعة باستخدام محلول ملحي مشبع ‎١(‏ 5 مل)؛ وتجفيفها دي

‎١17 -‏ - فوق 1/8504 وتركيزها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومبضي ‎flash silica chromatography‏ ¢ وتصفيته تتابعياً ‎ZA‏ من ؟ إلى / ‎ammonia/MeOH‏ في ‎.DCM‏ ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء ‎(S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-‏ ‎(px 2. ) 1-01 2‏ اساي 0 في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎'"H NMR (400.13 MHz, CDCI3) 5 1.84 - 1.93 (2H, m), 3.76 - 3.81 (2H, m), 4.13 (1H, 1),‏ ‎(2H, m), 7.30 - 7.34 (2H, m).‏ 7.25 - 7.23 ‎MS m/e MH" 186.‏ المركب الوسيط 48 : ‎(S)-tert-butyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-3- Ye‏ ‎hydroxypropylcarbamoyl)piperidine-1-carboxylate‏ ‎OH‏ ‏0 ‏م : ‎N‏ ‎ey‏ ‏0 ‏0 ‎N‏ ‏تمت إضافة ‎(S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط 497) ‎V0)‏ جم؛ 0.7 ملي مول ) على دفعة واحدة إلى : ادا

‎١١9 -‏ ‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylic acid‏ (المركب الوسيط ‎can Y, 0 YY) (Vo‏ 5,897 ملي مول ( 5 ‎«Ja ¥, A) DIPEA‏ 17,11 ملي مول ( في ‎٠١( DMA‏ مل). تمت إضافة : ‎o-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ‎can Y, 800) ©‏ 1,67 ملي مول ) وتقليب المحلول الناتج عند ١7م‏ لمدة ‎YE‏ ساعة. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف ثم تخفيفه باستخدام ‎Yoo) EtOAc‏ مل)؛ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء )04 مل) ومحلول ملحي مشبع )00 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 4ه وترشيحها وتبخيرها ثم سحنها باستخدام ‎diethyl ether‏ لإعطاء : ‎(S)-tert-butyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-3-‏ ‎hydroxypropylcarbamoyl)piperidine-1-carboxylate ٠١‏ خام )17,£ ‎(aa‏ 100 #) في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎1H NMR (400.13 MHz, DMSO-d) 6 1.39 (18H, s), 1.71 - 1.92 (6H, m), 3.06 (2H, s),‏ ‎(2H, 0, 3.54 - 3.65 (2H, m), 4.52 (1H, t), 4.89 (1H, q), 6.89 (1H, s), 7.29 - 7.34 (4H,‏ 3.36 ‎m).‏ ‎MS m/e M+Na" 534. Vo‏ المركب الوسيط 55 : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏عا

‎VIA -‏ — ‎J‏ ‎z 0‏ ‎NH,‏ : ‎N‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎H‏ ‏تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ 4 مولار من في ‎«Ja VV,VY) dioxane‏ 51,897 ملي مول ) إلى : ‎(S)-tert-butyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropy-‏ ‎lcarbamoyl) piperidine-1-carboxylate ©‏ (المركب الوسيط £4( )¥ ‎can‏ 5,87 ملي مول ) في ‎Vo) dioxane‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Yo‏ .م لمدة ساعتين. تمت إذابة خليط التفاعل في ‎methanol‏ وتنقيته بواسطة كروماتوجراف تبديل أيوني ؛ باستخدام عمود ‎SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام 0,¥ عياري من ‎MeOH/ ammonia‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide ٠١‏ ‎1٠ )‏ جم؛ ‎٠‏ %( في صورة مادة صمغية عديمة اللون . ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 6 1.20 - 1.28 (2H, m), 1.75 - 1.91 (4H, m), 2.67 -‏ ‎(2H, m), 3.30 (2H, m), 4.87 (1H, s), 7.30 - 7.37 (4H, m).‏ 2.83 ‎MS m/e MH" 312.‏ ‎Yo‏ ‏المركب الوسيط + © : ‎5-bromo-4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ ‏مضا

‎١١9 -‏ — ‎Br‏ 0 .© ‎N‏ ‏2< ‏تمت إضافة ‎N-Bromosuccinimide‏ (4 ,ا ‎YA EY can‏ ملي مول ) على دفعات إلى : ‎Y'Y,07 can 8) 4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ ملي مول ) في ‎DCM‏ جاف ‎1Y0)‏ ‎(de‏ عند ١7م‏ تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المعلق الناتج عند ١7م‏ لمدة ساعة واحدة. تم تبخير © خليط التفاعل وسحن المادة الصلبة البنية الناتجة باستخدام ماء لإعطاء مادة صلبة أرجوانية التي تم تجميعها بالترشيح. تم سحن المادة الصلبة الخام باستخدام ‎MeOH‏ ساخن لإعطاء مادة صلبة تم تجميعها بالترشيح. ثم إعادة السحن على الساخن لإعطاء : ‎0,YY) 5-bromo-4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ جي ),19 0 في صورة مادة صلبة كريمية. ‎(1H, 5) ٠١‏ 12.95 ,له ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6) 7.94 (1H, 5), 8.63 (1H,‏ ‎MS m/e MH" 234.‏ المركب الوسيط )© : ‎(S)-3-amino-3-(4-bromophenyl)propan-1-ol‏ ‏رز ‎o™‏ ‎Br‏ ‏تمت إضافة معقد ‎VY, VY) borane-tetrahydrofuran‏ مل؛ ‎717١‏ ملي مول ) بالتنقيط إلى معلق ‎«lie ٠‏ من ‎١٠,7 4 can ¥,0) (S)-3-amino-3-(4-bromophenyl)propanoic acid‏ ملي مول ) في ديا

١١٠١ ‏دقيقة تحت 0100860 . تم تقليب المعلق الناتج عند‎ Ve ‏عند صفز م خلال مدة‎ (Je A+) THF ‏دقيقة ثم عند 77م لمدة © ساعات. تمت إضافة خليط التفاعل على دفعات إلى‎ "٠ ‏صفزام لمدة‎ ‏ساعة. تم تركيز‎ YE ‏مل). تم تقليب المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة‎ YO +) methanol ‏مل) وتركيزه مرة أخرى (تم إعادة تلك العملية ثلاث‎ YO ١( methanol ‏الخليط» واذابته مره أخرى في‎ 0+) whe ١ ‏بتركيز‎ NaOH ‏وغسله باستخدام‎ (Jw Yo) DCM ‏مرات ). تمت إذابة البقية في‎ © ‏وتجميع نواتج الاستخلاص مع‎ (de ٠٠١ xT) DCM ‏مل). تم استخلاص الطبقة المائية باستخدام‎ ‏المادة العضوية.‎ 18504 ‏مل)؛ وتجفيفها فوق‎ 5 ١( ‏تم غسل المواد العضوية المجمعة باستخدام محلول ملحي مشبع‎ flash ‏ومضي‎ Salis ‏وتركيزها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف‎ ‏في‎ ammonia/MeOH 7 +١ ‏وتصفيته تتابعياً بتدرج من ؟ إلى‎ ¢ silica chromatography ٠ (S)-3-Amino-3-(4- ‏تم تبخير الجزيثات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ .DCM ‏جم 10,0 %( في صورة مادة صمغية عديمة اللون.‎ ¥,)1 +) bromophenyl)propan-1-ol '"H NMR (400.13 MHz, CDCl;) § 1.82 - 1.90 (2H, m), 3.76 - 3.82 (2H, m), 4.12 (1H, 1), 7.17 -7.20 (2H, m), 7.45 - 7.49 (2H, m).

MS m/e MH" 230. Ve ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate : 07 ‏المركب الوسيط‎ ‏دي‎

‎١9١ -‏ } ‎nN”‏ ‎o__‏ ‏0 ‎cl‏ ‏تم تقليب ‎can ٠١( 4-(4-Chlorophenyl)-4-oxobutanoic ~~ acid‏ 7,07 ملي مول )؛ ‎methoxylamine hydrochloride‏ (4,11 جي ‎AVY‏ ملي مول ) 5 ‎©,4A) sodium carbonate‏ ‎(an‏ 571,44 ملي مول ( في ‎You ) ethanol‏ مل) لمدة ؛ ساعات عند ‎Ae‏ م. تم تبريد الخليط © إلى درجة حرارة الغرفة قبل ترشيحه. تم تركيز ناتج الترشيح عن طريق التبخير وتنقيته ‎daly‏ ‏كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ (تصفية تتابعية ‎56-7١‏ / ‎EtOAc‏ / عصه«»ه؟ ). تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎VY,YY) ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate‏ جم ‎AY‏ %( في صورة مادة سائلة برتقالية شفافه. ‎(1H, qu), ٠‏ 2.50-2.52 ,لا ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO) 1.13-1.17 (3H, 1), 2.26-2.50 (2H,‏ ‎(2H, 1), 3.94 (3H, 5), 4.00-4.05 (2H, q), 7.47-7.49 (2H, d), 7.66-7.69 (2H, d).‏ 2.94-2.98 المركب الوسيط #07 : ‎4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid‏ 80" 9 مص جر 0 0 تمت إضافة ‎can 4,04) Lithium hydroxide monohydrate‏ 777,57 ملي مول ) إلى : 01د

‎١7 -‏ ‎ethyl 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoate‏ (المركب الوسيط ‎١,7( (oF‏ جم؛ ‎£0,V)‏ ملي مول ) في ماء )¥0,8 ‎٠١١( THF «(Jw‏ مل) ‎٠١١( ethanol y‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎Yo‏ م لمدة يوم واحد. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎(Jo ٠٠١( EtOAc‏ وغسله باستخدام ماء ) ‎Yoo‏ مل). ثم تعديل المواد المائية إلى رقم هيدروجيني ‎pH‏ © باستخدام ‎١‏ ‏© مولار من محلول ‎citric acid‏ ثم تم استخلاصه باستخدام ‎٠9١ x T) EtOAc‏ مل). تم غسل نواتج الاستخلاص العضوية باستخدام محلول ملحي مشبع ‎YO)‏ مل) ثم تجفيفه فوق 08504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج مطلوب من : ‎aa 1 9 4-(4-chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid‏ )14 %( في صورة مادة صلبة ذات لون أصفر فاتح. ‎2H, ٠‏ 747-749 ,ز: ‎'H NMR (400.13 MHz) 2.39-2.43 (2H, t), 2.91-2.95 (2H, 0, 3.94 (3H,‏ ‎d), 7.67-7.69 (2H, d), 12.21 (1H, broad).‏ ‎MS m/e MH" 242.‏ المركب الوسيط #4 : ‎4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-0l‏ ‎NH,‏ ‏جر ‏0 ‎٠‏ ...تم ‎4-(4-Chlorophenyl)-4-(methoxyimino)butanoic acid adi‏ (المركب الوسيط ‎(oF‏ (1,47 ‎77,1١ aa‏ ملي مول ) في ‎V+) tetrahydrofuran‏ مل)؛ تحت جو من ‎nitrogen‏ ؛ في ‎plea‏ ‏تلج - ‎methanol‏ . تمت إضافة معقد ‎١ ( borane-tetrahydrofuran‏ مولار في ‎AY) ) THF‏ مل؛ 7 ملي مول ) بالتنقيط خلال مدة ‎٠١‏ دقيقة. تم السماح للمحلول الناتج ‎lad‏ إلى درجة حرارة دا

‎١7 -‏ الغرفة؛ والتقليب لمدة ساعة واحدة ثم التسخين عند الارتجاع لمدة 7 ساعات إضافية. بعد التبريد في ثلج - ماء تمت معالجة الخليط باستخدام ماء ‎(de Ve)‏ بالتنقيط مع التقليب خلال ‎٠١‏ دقائق. تم السماح للخليط مرة أخرى ‎Bad‏ إلى درجة حرارة الغرفة وتقليبه لمدة ساعتين قبل تبخير معظم المذيب. ثم تم تبريد البقية في ثلج - ماء وإضافة ‎NaOH 7 5+٠‏ (مائي) ‎(do ٠١(‏ بالتنقيط مع © التقليب. تم تقليب الخليط الناتج والتسخين عند 910 م لمدة ؛ ساعات ثم تبريده إلى درجة حرارة الغرفة واستخلاصه ثلاث مرات باستخدام ‎E20‏ تم ‎Jus‏ نواتج الاستخلاص المجمعة باستخدام ماء متبوعاً بمحلول ‎gale‏ وتجفيفها فوق 148504 وتبخيرها إلى درجة الجفاف. ثم تم إخماد المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ (تصفية ‎dali‏ - ‎٠‏ 7 لا عياري من ‎ammonia‏ في ‎(DCM / MeOH‏ وتبخير الجزيئات النقية لإعطاء : -4 ‎AA) amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-ol ٠‏ ا جم 77,0 7) في صورة مادة صمغية شفافة عديمة اللون. ‎"H NMR (400.13 MHz) 1.25-1.47 (2H, dm), 1.51-1.61 (2H, m), 3.34-3.38 (2H, 1), 3.76-‏ ‎(1H, t), 7.33-7.38 (4H, m).‏ 3.79 المركب الوسيط ©© : ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamate‏ ‎OH‏ ‎os‏ ‏مخض 0 ‎AK Vo‏ تمت إضافة ‎«Ja V,0AA) Ditert-butyl dicarbonate‏ 1,51 ملي مول ) على دفعة واحدة إلى ‎aS3all) 4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-ol‏ الوسيط 06( (1,74 ‎1,5١ can‏ ملي مول) د76

‎١56 —‏ في ‎(Ja ٠١( DCM‏ عند 75م تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند درجة حرارة الغرفة لمدة ‎YE‏ ساعة. تم تبخير الخليط الناتج إلى درجة الجفاف وسحن الزيت الخام باستخدام ‎isohexane‏ لإعطاء مادة صلبة التي تم تجميعها بالترشيح وتجفيفها تحت ضغط منخفض لإعطاء ‎V, Av} tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamate‏ جم ‎AY‏ %( في صورة مادة صلبة بيضا ‎x‏ ‎(9H, 5), 1.48 - 1.66 (2H, m), 1.78 - 1.83 (2H, m),‏ 1.40 ة ‎'"H NMR (400.13 MHz, CDCI3)‏ ‎(2H, m), 4.61 (1H, s), 4.84 (1H, 5), 7.21 (2H, m), 7.29 - 7.31 (2H, m).‏ 3.68 - 3.63 المركب الوسيط 0%{ ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(4-chlorophenyl)butyl methanesulfonate‏ مله 1 0 م مخض 0 0 2 تمت إضافة ‎»,0١١( methanesulfonyl chloride‏ مل؛ 1,0 ملي مول ) بالتنقيط إلى : ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylcarbamate‏ (المركب الوسيط 00( ‎VA)‏ جم؛ ‎٠‏ ملي مول ( ‎Vy ot) triethylamine s‏ مل؛ ‎٠٠١‏ ملي مول ) في ‎(da Vey 0) DCM‏ عند ‎Yo‏ م خلال مدة 10 دقائق تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند درجة حرارة الغرفة ‎VO‏ لمدة ‎Fy‏ دقيقة. تم تبخير الخليط الناتج إلى درجة الجفاف وتعليق البقية في ‎DCM‏ وترشيحها ادي

‎\Yo -‏ ~— وتنقية ناتج الترشيح بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ ¢ وتصفيته تتابعياً ‎ZA‏ من ‎٠١‏ إلى ‎EtOAc Z ٠٠‏ في ‎isohexane‏ . تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎1١٠١ 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(4-chlorophenyl)butyl methanesulfonate‏ جم ‎١٠ ©‏ %( في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎'H NMR (400.13 MHz, CDCI3) 6 1.41 (9H, s), 1.67 - 1.87 (4H, m), 2.99 (3H, s), 4.23‏ ‎(2H, 1), 4.62 (1H, s), 4.75 (1H, s), 7.20 (2H, d), 7.30 - 7.33 (2H, d).‏ ‎MS m/e M+Na" 400.‏ المركب الوسيط ‎1-(4-chlorophenyl)-N4,N4-dimethylbutane-1,4-diamine : ©V‏ ‎NG‏ ‏م ‎Ya‏ 0 تمت إذابة ‎٠,85 cana At) dimethylamine‏ ملي مول ) ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(4-chlorophenyl)butyl methanesulfonate 4‏ (المركسب الوسيط 1 °( ) ‎Yeo‏ مجم + دارا ملي مول ( في ‎٠ ) THF‏ مل) وادخاله داخل أنبوب ميكروويف ثم غلقه. تم تسخين التفاعل إلى ‎٠7١‏ م لمدة ‎5٠‏ دقيقة في مفاعل الميكروويف وتبريده إلى درجة ‎VO‏ حرارة الغرفة. تم تركيز خليط التفاعل ثم إذابته في ‎Y) TFA (Ja Vv, +) DCM‏ مل). تم تقليب الخليط عند ‎7٠١‏ م لمدة ساعتين. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل الأيوني عا

‎١76 -‏ ‎ion exchange chromatography‏ « باستخدام عمود ‎SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام 0,¥ عياري من ‎MeOH/ ammonia‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎AY (ana ١ ) 1-(4-chlorophenyl)-N4,N4-dimethylbutane-1,4-diamine‏ %( في صورة مادة صمغية صفراء . ‎'H NMR (400.13 MHz, CDCI3) 6 0.70 - 0.79 (1H, m), 0.82 - 0.91 (1H, m), 0.93 1.09 °‏ ‎(2H, m), 1.21 (6H, 5), 1.64 (2H, 1), 3.23 (1H, 1), 6.58 - 6.66 (4H, m).‏ ‎MS m/e MH" 227.‏ المركب الوسيط ‎(S)-tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate : ©A‏ ‎J‏ ‎rr‏ ‏ره ‎cl‏ ‎V+‏ تمت إضافة ‎75,0٠ «Jw 0,0 4( Di-tert-butyl dicarbonate‏ ملي مول ) إضافة على دفعة واحدة إلى ‎(S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ (المركب الوسيط 47) )1,0 جم؛ ‎5,0١‏ ملي مول ) في ‎Yo) DCM‏ مل) عند 75م تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند درجة حرارة الغرفة لمدة ‎YE‏ ساعة. تم تبخير الخليط الناتج إلى درجة الجفاف وسحن الزيت الخام باستخدام ‎ isohexane‏ لإعطاء ‎sale‏ صلبة التي تم تجميعها بالترشيح وتجفيفها تحت ضغط ‎Yo‏ منخفض لإعطاء : ‎1,٠١( (S)-tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate‏ جيم ‎AY‏ 0 في صورة دما

‎AVY —‏ — مادة صلبة بيضا ‎os‏ ‎(9H, 5), 1.78 - 1.84 (1H, m), 2.05 (1H, d), 2.74‏ 1.43 ة ‎'H NMR (399.9 MHz, CDCI3)‏ ‎(1H, s), 3.67 - 3.71 (2H, m), 4.88 (1H, s), 5.04 (1H, d), 7.21 - 7.24 (2H, m), 7.30 - 7.33‏ ‎(2H, m).‏ ‎MS m/e M+Na" 308. 8‏ المركب الوسيط 04 : ‎(S)-3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl methanesulfonate‏ 0 ‎Il‏ ‎JN‏ ‎i‏ ‎Oro‏ ‏رك ‎cl‏ ‏تمت إضافة ‎methanesulfonyl chloride‏ (4 ,7 ملء؛ ١5,4؟‏ ملي مول ) بالتنقيط إلى : ‎(S)-tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamate ٠١‏ المركب الوسيط ‎(oA‏ (7, ‎(an‏ 77,19 ملي مول ) 5 ‎0,YA) triethylamine‏ ملء ‎YAY‏ ملي مول ) في ‎YI) DCM‏ مل) عند ‎Yo‏ م خلال مدة ‎١١‏ دقائق تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند درجة حرارة الغرفة لمدة ‎Ve‏ دقيقة. تم تبخير الخليط الناتج إلى درجة الجفاف وتنقيته بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ ؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ٠؟‏ إلى ‎٠٠١‏ 7 ‎EtOAc ٠‏ في ‎isohexane‏ . تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎(S)-3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl ~~ methanesulfonate‏ )¥ + ,+ } دما

‎١/8 -‏ ‎(Z A ‘ax‏ في صورة مادة صلبة بيضاء. ‎'"H NMR (399.9 MHz, CDCI3) 8 1.36 - 1.48 (9H, m), 2.20 (2H, s), 3.01 (3H, 5), 4.19 -‏ ‎(2H, m), 4.81 (2H, 5), 7.21 - 7.23 (2H, d), 7.32 - 7.35 (2H, d).‏ 4.29 ‎MS m/e M+Na" 386.‏ © المركب الوسيط ‎(S)-1-(4-chlorophenyl)-N3,N3-diethylpropane-1,3-diamine : T+‏ ‎y‏ ‎Qe‏ ‎Cl‏ ‏تمت إذابة ‎4.١7 «Ja +,£Y1) diethylamine‏ ملي مول ) و ‎(S)-3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl methanesulfonate‏ (المركحب الوسيط 8 °( ) ا مجم لحرا ملي مول ( في ‎Ye ) THF‏ مل) وادخاله داخل أنبوب ميكروويف ‎٠‏ ثم غلقه. تم تسخين التفاعل إلى ‎٠‏ م لمدة ‎٠٠‏ دقائق في مفاعل الميكروويف وتبريده إلى درجة حرارة الغرفة. تم تركيز خليط التفاعل وتخفيفه باستخدام ‎DCM‏ )© مل). تمت إضافة ‎١( TFA‏ مل) وتقليب الخليط عند ‎Ye‏ م لمدة ساعة واحدة. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف التبديل ‎١‏ لأيوني ‎jon exchange chromatography‏ » باستخدام عمود ‎SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام 5,؟ عياري من ‎MeOH/ ammonia‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى ‎١‏ درجة الجفاف لإعطاء . ‎٠٠١ aaa ١١1 (S)-1-(4-chlorophenyl)-N3,N3-diethylpropane-1,3-diamine‏ %( في دا

‎١79 -‏ — صورة ‎Cu)‏ أصفر . ‎'H NMR (400.13 MHz, CDCI3) § 1.00 (6H, t), 1.75 - 1.82 (2H, m), 2.40 - 2.54 (6H, m),‏ ‎(1H, t), 7.27 - 7.31 (4H, m).‏ 3.97 ‎MS m/e MH" 241.‏ © المركب الوسيط )1 : ‎5-bromo-4-chloro-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ ‎Cl Br‏ ‎rd‏ ‎J‏ ‏مر ‎“٠‏ ‎_S‏ ‏ ‏تم سحب ‎5-Bromo-4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ (المركب الوسيط +0( )¥ جم؛ ‎٠‏ ملي مول ) 5 ‎can 1,140( p-toluenesulfonyl chloride‏ 8,10 ملي مول ) في ‎acetone‏ ‎(Je VY)‏ وتقليبه تحت ‎nitrogen‏ والتبريد إلى بين 0 م و#م. إلى ذلك المحلول تمت إضافة ‎Ve‏ محلول ؟ مولار من ‎(Je 0,00) NaOH‏ 14,99 ملي مول ) أثناء الحفاظ على درجة الحرارة الداخلية أقل من 0 تم السماح للتفاعل ليدفاً إلى درجة حرارة الغرفة وتقليبه لمدة ساعة واحدة. تم فصل المادة الصلبة البيضاء بالترشيح وغسلها جيداً باستخدام ‎acetone‏ لإعطاء : ‎¥,YA) S-bromo-4-chloro-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidine‏ جمء 99 4( في صورة مادة ‎Vo‏ صلبة ذات لون كريمي باهت. عدي

‎YA. —‏ — ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 6 2.38 (3H, s), 7.48 - 7.50 (2H, m), 8.06 - 8.08 (2H,‏ ‎m), 8.41 (1H, s), 8.84 (1H, s).‏ ‎MS m/e MH" 387.‏ المركب الوسيط 7 : ‎methyl 1-(5-bromo-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-4-(tert- 8‏ ‎butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylate‏ ‏0 ‎H 0‏ ‎N‏ ‏0 ‎N Br‏ ‎rd‏ ‎N_o‏ 5 26 تمت إضافة ‎«Ja ¥,00) triethylamine‏ 175,45 ملي مول) إلى : ‎5-bromo-4-chloro-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine‏ (المركب الوسيط ‎)1١‏ (748, جم؛ ‎A, £A 0٠‏ ملي مول) ى ‎lla ( methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylate‏ دولي رقم ‎TeV) ) ٠٠١809785154‏ جم؛ ‎١١,88‏ ملي مول) في ‎(Je) DMA‏ عند ‎٠١‏ م. تم تقليب المعلق الناتج عند ‎Ve‏ م لمدة ساعتين. تم تركيز خليط التفاعل وتخفيفه باستخدام 240/6 ‎(Je ٠٠١(‏ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء ) ‎(Jw Vo‏ ومحلول ملحيء مشبع ‎VO‏ مل). تم تجفيف الطبقة العضوية فوق 8504 د

— YAY - ‏وترشيحها وتبخيرها لتعطي منتج خام.‎ « flash silica chromatography ‏تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي‎ . isohexane ‏في‎ EtOAc ‏من‎ 7 ١7٠١ ‏إلى‎ ٠١٠ ‏وتصفيته تتابعياً بتدرج من‎ : ‏تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء‎ methyl 1-(5-bromo-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-4-(tert-butoxycarbon- 8 ylamino) piperidine-4-carboxylate ‏في صورة مادة صلبة بيضاء.‎ (4 79,7 aa ,10( 'H NMR (400.13 MHz, DMSO-d) 5 1.38 (9H, 5), 2.03 (2H, 5), 2.38 (3H, 5), 3.33 - 3.37 (2H, m), 3.59 (3H, s), 3.84 (2H, d), 7.41 (1H, s), 7.46 (2H, d), 8.00 (1H, s), 8.03 (2H, d), 8.40 (1H, s). Vo

MS m/e MH" 610. : 1١ ‏المركب الوسيط‎ methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate ‏عم‎

‎YAY -‏ — و م " "م 0 ‎N‏ ‎ig‏ ‎NY‏ ‎NTN Jo‏ 26 ‎Gud‏ سحب : ‎Methyl 1-(5-bromo-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-4-(tert-‏ ‎butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylate‏ ‏5 (المركب الوسيط ‎١١ ) (1 Y‏ جم؛ اا ملي مول ل بوتاسيوم فوسفات ‎(oh‏ القاعدة ‎potassium‏ ‎can ٠,١ 7( phosphate tribasic‏ 1,77 ملي مول ) ‎0٠١١٠( tricyclohexyl phosphine‏ جم 1 ملي مول ) و ‎cyclopropylboronic acid‏ (47» جم 4 4,7 ملي مول ) في ‎toluene‏ ‎vv) slag (Je ٠١(‏ مل). تم تطهير الخليط باستخدام ‎nitrogen‏ لمدة ‎Ye‏ دقيقة ثم ‎Alia)‏ ‎١,18 can ١.0 41( palladium(Tl) acetate‏ ملي مول ). تم تسخين الخليط إلى ‎Vo‏ م ‎Tad‏ ‎٠‏ ساعات ثم السماح له ليبرد ويُقلب عند درجة حرارة الغرفة طوال الليل. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎VO) EtOAc‏ مل)؛ وغسله على نحو متعاقب باستخدام ماء )04 مل) ومحلول ملحي مشبع )04 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 08504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ « وتصفيته تتابعياً بتدرج من ‎٠١‏ إلى ‎EtOAc 7 7١0‏ في ‎isohexane‏ . تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎YAO‏

— VAY - methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate ‏صلبة كريمية.‎ sale ‏في صورة‎ (4 EF, € ‏جم؛‎ +, E2Y) 'H NMR (400.13 MHz, CDCl3) 6 0.72 - 0.76 (2H, m), 0.99 - 1.04 (2H, ‏,لت‎ 1.43 (9H, s), 1.90 - 1.94 (1H, m), 2.04 - 2.10 (2H, m), 2.17 - 2.25 (2H, m), 2.38 (3H, 5), 3.34 - 3.41 ° (2H, m), 3.74 (3H, s), 3.98 - 4.03 (2H, m), 4.76 (1H, s), 7.12 (1H, 5s), 7.28 (2H, m), 8.03 - 8.05 (2H, m), 8.46 (1H, s).

MS m/e MH" 570. : 14 ‏المركب الوسيط‎ 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4- Ve yl)piperidine-4-carboxylic acid 0

H ‏ذه‎ ‎N ‎oS = 0

N ge

NS

N

NH

: ‏محلول )0,00 مل) إلى‎ sodium hydroxide ‏تمت إضافة ؟ مولار من‎ methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7-tosyl-7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxylate Vo ‏ديا‎

‎١4 —‏ (المركب الوسيط ‎YAS) (TF‏ مجم؛ ‎٠,7١7‏ ملي مول ) في ‎(Je ٠١( THF‏ عند ‎٠١‏ -م. تم تقليب المحلول الناتج عند 50 م لمدة 4 7 ساعة. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ )+0 مل) وتجميع الطبقة المائية وتحميضها إلى رقم هيدروجيني ‎pH‏ ؛ باستخدام ‎١‏ مولار ‎HCL‏ محلول. تم استخلاص الطبقة المائية باستخدام ‎5٠0 x ¥) DCM‏ مل) وتجميع الطبقات العضوية وغسلها © باستخدام محلول ملحي مشبع )04 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 28504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yD)piperidine-4-carboxylic acid‏ ‎YVO)‏ مجم؛ ‎TAY‏ 4( في صورة مادة صلبة كريمية. ‎NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 5 0.66 - 0.73 (2H, m), 0.88 - 1.00 (2H, m), 1.40 (9H, Ye‏ يرا ‎s), 1.94 - 2.09 (5H, m), 3.41 - 3.53 (2H, m), 3.92 - 4.01 (2H, m), 6.92 (1H, d), 7.18 -‏ ‎(1H, m), 8.21 (1H, s), 11.51 (1H, s), 12.29 (1H, 5). MS m/e MH" 402.‏ 7.22 المركب الوسيط 15 : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(5-cyclopropyl-7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate Vo‏ ‎OH‏ ‎A‏ ‎Ho‏ ‎N‏ ‎TY‏ ‏0 ‏0 ‎N‏ ‎ors‏ ‎NY‏ ‎NTH‏ ‏دي

— ف ‎١‏ - تمت إضافة ‎١ YY) (S)-3-Amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-0l‏ مجم؛ 7 ملى مول ( على دفعة واحدة إلى : ‎4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(5-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxylic acid‏ © (المركب الوسيط 64) ‎AF cane YVO)‏ ,+ ملي مول ) 5 ‎§A) DIPEA‏ ,+ مل 7,80 ملي مول) في ‎dma‏ )° مل). تمت إضافة : ‎0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate‏ ) 7951 ‎٠,١7 cana‏ ملي مول ) وتقليب المحلول الناتج عند ‎a Ye‏ لمدة 74 ساعة. تم تبخير خليط التفاعل إلى درجة الجفاف ثم تخفيفه باستخدام ‎EtOAc‏ )° لا مل) » وغسله على نحو متعاقب ‎٠‏ باستخدام ماء )00 ‎(da‏ ومحلول ملحي مشبع )+0 مل). تم تجفيف المادة العضوية فوق 148504 وترشيحها وتبخيرها لإعطاء منتج خام. تمت تنقية المنتج الخام بواسطة كروماتوجراف سيليكا ا ‎flash silica chromatography‏ ؛ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ؟ إلى + 7 ‎MeOH‏ مع ‎ammonia‏ في 4. تم تبخير الجزيئات لإعطاء : ‎(S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(5-cyclopropyl-7H-‏ ‎pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate Yo‏ ‎AR )‏ مجم « ‎Ya‏ 0 في صورة مادة صمغية صفراء. ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO-dg) 6 0.66 - 0.70 (2H, m), 0.86 - 0.91 (2H, m), 1.40 (9H,‏ ‎s), 1.81 - 2.06 (7H, m), 3.33 - 3.40 (4H, m), 3.90 - 3.94 (2H, m), 4.53 (1H, t), 4.91 - 4.93‏ ‎(1H, m), 6.92 (1H, s), 7.30 - 7.38 (4H, m), 7.96 (1H, d), 8.20 (1H, 5), 11.49 (1H, s).‏ مما

‎VAT —‏ — المركب الوسيط 16 : ‎tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamate‏ ‎Cl‏ ‎H‏ ‎NG‏ ‏لبد بك 0 تم إمرار فقاعة من غاز ‎Jah amine methyl‏ محلول من : ‎3-(tert-butoxycarbonylamino)-3-(4-chlorophenyl)propyl methanesulfonate ©‏ (المركب الوسيط ‎١19 coma Vo) (FY‏ ملي مول ) في ‎THF‏ )© مل) عند 77م خلال مدة © دقائق. تم إدخال الخليط داخل أنبوب ميكروويف ثم إغلاقه. تم تسخين التفاعل إلى ‎sada Yo‏ 70 دقيقة في مفاعل الميكروويف والتبريد إلى درجة الحرارة المحيطة. تم تبخير الخليط وتنقيته بواسطة كروماتوجراف ‎Sha‏ ومضي ‎«flash silica chromatography‏ وتصفيته تتابعياً بتدرج من ؛ إلى ‎NH3 MeOH ١: Yo) 7 8 ٠‏ مركز (مائي)) في 0014. تم تبخير الجزيئات النقية إإلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎OV) tert-butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamate‏ مجم ‎١‏ 0“ في صورة زيت عديم اللون. ‎'"H NMR (399.902 MHz, CDCI3) 6 1.41 (9H, s), 1.80 (1H, br.m), 1.93 (1H, br.m), 2.40‏ ‎(3H, 5), 2.59 (2H, m), 4.73 (1H, br.s), 5.94 (1H, br.s), 7.21 (2H, d), 7.29 (2H, d). Vo‏ ‎MS m/e MH" 299.5-364-3.‏ دا

‎AY -‏ — المركب الوسيط ‎methyl =VN—( phenyl chloro - 4(-١ : TV‏ بروبان ‎«Y=‏ ؟- داي ‎amine‏ ‎Cl‏ ‎H‏ ‎NL‏ ‎NH,‏ ‏تمت إضافة ‎hydrogen chloride‏ )£ مولار في ‎٠,٠٠ cw 9٠ » 1,4-dioxane‏ ملي مول ) إلى : ‎butyl 1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamate °‏ (المركب الوسيط 16) )+0 مجم؛ ‎١,١١7‏ ملي مول ) في خليط من ‎Y) methanol 5 (Je ©) DCM‏ مل) عند ‎YY‏ م. تم تقليب المحلول الناتج عند ‎a YY‏ لمدة ؛ ساعات. تم تركيز الخليط وتنقية البقية بواسطة كروماتوجراف التبديل ‎١‏ لأيوني ‎«ion exchange chromatography‏ باستخدام عمود ‎.SCX‏ تمت إزالة المنتج المطلوب من العمود باستخدام ‎١‏ مولار من ‎MeOH/NH3‏ وتبخير الجزيئات النقية إلى درجة ‎Yo‏ الجفاف لإعطاء : ‎٠ ١( 1-(4-chlorophenyl)-N3-methylpropane-1,3-diamine‏ مجم ‎(٠‏ في صورة زيت عديم اللون. ‎'"H NMR (399.902 MHz, CDCI3) 8 1.81 (2H, df), 2.40 (3H, 5), 2.58 (2H, m), 4.01 (1H,‏ ‎t), 7.25 - 7.31 (4H, m).‏ ‎MS m/e MH" 199.3-204-3. Vo‏ دي

— ١8 - : 148 ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate

Cl

N

H 0 1 ‏م‎ Vv 0

N

C0

L~ ‏ل‎ ‎: ‏تمت إضافة‎ © ‏؛) مجم؛‎ ) 0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n"-tetramethyluronium hexafluorophosphate : ‏ملي مول ( إلى‎ ٠,١ Y 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- carboxylic acid +,+Y¥) N,N-diisopropylethylamine 5 ( ‏ملي مول‎ ١ ‏مجم؛‎ £0) )١ ‏(المركب الوسيط‎ ٠ ‏لمدة‎ a ٠ ٠ ‏-م. تم تقليب المعلق الناتج عند‎ YY ‏عند‎ (Je ©) NMP ‏ملي مول ) في‎ VY eda : ‏دقاثئق. تم تبريد الخليط إلى درجة الحرارة المحيطة واضافة‎ ٠ ‏مجم؛‎ YY) (TV ‏(المركب الوسيط‎ 1-(4-chlorophenyl)-N3-methylpropane-1,3-diamine ‏لمدة ؟ أيام. تم تخفيف‎ a YY ‏وتقليب الخليط عند‎ (Je 7( NMP ‏كمحلول في‎ (se ‏ملي‎ 0١ ‏دي‎

‎YAS -‏ — خليط التفاعل باستخدام ‎(Je 5 0( EtOAc‏ وغسله باستخدام ماء ( ‎٠‏ مل). تم إمرار الطبقة المائية خلال عمود ‎SCX‏ تمت تصفية العمود تتابعياً باستخدام ماء 5 ‎methanol‏ لإزالة الشوائب متبوعاً ب ‎Y) JAR‏ مولار من 11113 في ‎methanol‏ ) في ‎DCM‏ لتصفية المنتج تتابعياً. تم تبخير الجزيئات المناسبة إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-(methylamino)propylcarbamoyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- 8‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate‏ ‎Vi, 0 0)‏ مجمء ‎١١7‏ 4( في صورة ‎sala‏ صلبة بيضاء. ‎MS m/e MH" 542.5:-544-4.‏ ذ المركب الوسيط 19 : ‎1-tert-butyl 4-methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-1,4-dicarboxylate‏ ‎Ye.‏ ‏0 ‏مب ‏ا ‎Sor‏ ‏0 ‎N‏ ‎A‏ مخض تم إذابة : ‎Methyl ~~ 4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylate‏ ( طلب دولي رقم ‎YAYY aa ٠ ) (Y evAdVoy i‏ ملي مول ( في ‎V4¢) DCM‏ مل). 01د

- ١9١ —

إليه تمت إضافة : ‎<a ٠١ 17( Di-tert-butyl dicarbonate‏ 5,476 ملي مول ) على دفعات. بعد تلك الإضافة تم تقليب الخليط عند ‎YO‏ م لمدة ساعة واحدة. تم غسل المنتج الخام باستخدام ‎sodium bicarbonate‏ مشبعة )¥ ‎+x‏ © مل) وتجفيف المواد العضوية فوق 1/8504 قبل تبخيرها إلى درجة الجفاف لإعطاء :

1-tert-butyl 4-methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-1,4-dicarboxylate 8

‎(aa 1,7(‏ 98 7) في صورة مادة صلبة بيضاء.

‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO) & 1.39 (9H, s), 1.40 (9H, 5), 1.70-1.77 (2H, td), 1.88- 1.92 (2H, d), 3.05 (2H, broad), 3.61 (3H, s), 3.62-3.65 (2H, m), 7.33 (broad, exchange). : ٠١ ‏المركب الوسيط‎

‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylic acid Vo

‎Q H

‎N 0 ‏ا‎ ‎0 ‎N

‎A A

‎: ) ‏ملي مول‎ ١97,17 ‏جم‎ AVY) Lithium hydroxide monohydrate ‏تمت إضافة‎

‎1-tert-butyl 4-methyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-1,4-dicarboxylate

‎(Je AT) THF «(Jw 75١ ) ‏ملي مول ) في ماء‎ YAYY ax YVAN) )19 ‏(المركب الوسيط‎

‎A) methanol; ٠‏ مل). تم تقليب المحلول الناتج عند ‎7١‏ م لمدة يوم واحد. تم تخفيف خليط التفاعل باستخدام ‎١ ©) EtOAc‏ مل) وغسله باستخدام ماء ‎YO)‏ مل). تم تعديل المواد المائية إلى عي

— Vay - ‏ثم تم‎ « citric acid solution ‏مولار من حمض سيتريك محلول‎ ١ ‏باستخدام‎ © pH ‏رقم هيدروجيني‎ ‏استخلاص باستخدام 21086 (؟*#١٠٠ مل). تم غسل نواتج الاستخلاص العضوية باستخدام‎ ‏وترشيحه وتبخيره لإعطا ع المنتج‎ (MgSO4 ‏مل ( ‘ ثم تجفيفه فوق‎ ٠ ) ‏محلول ملحي مشبع‎ : ‏المطلوب‎ ‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylic acid © ‏في صورة مادة صلبة رقيقة بيضاء.‎ “0 YA (ax ٠١ ,١( '"H NMR (400.13 MHz, DMSO) 5 1.39 (9H, s), 1.40 (9H, 5), 1.68-1.76 (2H, td), 1.89- 1.92 (2H, d), 3.03 (2H, broad), 3.62-3.65 (2H, d), 7.16 (exchange), 12.36 (exchange). : ١ ‏المركب الوسيط‎ tert-butyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylc- Ve arbamoyl)piperidine-1-carboxylate

HO > ‏م‎ & © YT .

N

H

0

N

0 A 0 : ‏تمت إضافة‎ o0-(7-azabenzotriazol-1-yl)-n,n,n',n'-tetramethyluronium hexafluorophosphate ‏دي‎

‎١97 -‏ — ‎‘ax 2, )‏ ألا ‎١٠١‏ ملي مول ( على دفعة واحدة إلى : ‎1-(tert-butoxycarbonyl)-4-(tert-butoxycarbonylamino)piperidine-4-carboxylic acid‏ (المركب الوسيط ‎£,7Y) (Ve‏ جم؛ ‎YY,0‏ ملي مول )؛ : ‎4-amino-4-(4-chlorophenyl)butan-1-ol‏ (المركب الوسيط ‎VY,0 cpa Y,0) (VT‏ ملي مول ) © و8م0105 )1,07 ‎«Jw‏ 7,6 ملي مول ) في ‎(Jw 1Y,7) DMA‏ تحت ‎nitrogen‏ . تم تقليب المحلول الناتج عند 60 م لمدة ؟ ساعات وتبخيرها إلى درجة الجفاف. تمت إذابة خليط التفاعل الخام في ‎٠‏ مل ‎tOAC‏ ثم تحميضه باستخدام ‎NaHCO3‏ مشبعة ) ‎(Jw ٠‏ وتجفيف الجزيئ العضوي فوق 28504 وترشيحه وتبخيره إلى درجة الجفاف. تمت تنقية الجزيء العضوي بواسطة كروماتوجراف سيايكا ومضي ‎flash silica chromatography‏ (تصفية تتابعية ‎٠١-٠‏ )ر لا ‎٠‏ عياري من ‎ammonia‏ في ‎MeOH‏ / 0014). ثم تبخير الجزيئات النقية لإعطاء : ‎tert-butyl 4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutylc-‏ ‎arbamoyl) piperidine-1-carboxylate‏ ) 8,7 جم؛ لال %( في صورة مادة صلبة ذات لون أبيض ‎Jil‏ للصفرة. ‎'H NMR (400.13 MHz, DMSO) & 1.39 (18H, s), 1.42-1.50 (2H, sex), 1.67-1.73 (2H, q),‏ ‎(2H, m), 1.87 (2H, broad), 3.07 (2H, broad), 3.34-3.41 (2H, m), 3.53-3.61 Yo‏ 1.74-1.82 ‎(2H, 1), 4.71-4.76 (1H, q), 6.79 (3xchange, broad), 7.29-7.34 (4H, m), 7.80-7.82‏ ‎(exchange, d).‏ ‎MS m/e MH" = 527; HPLC tg = 2.48 min.‏ دي

‎١97 -‏ - المركب الوسيط ‎VY‏ ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎HO‏ ‏0 ‎NH,‏ ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎H‏ ‏ثم تقليب : ‎Tert-butyl4-(tert-butoxycarbonylamino)-4-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybuty- 8‏ ‎carbamoyl) piperidine-1-carboxylate‏ (المركب الوسيط ‎(px ١ ,4 A) (v ١‏ 1,77 ملي مول) في ‎١ A, AY) THF‏ مل) واضافة ¢ مولار من ‎١4,1١( hydrogen chloride‏ مل؛ 51,47 ملي مول) في 110*806 مع التقليب. تم تقليب المحلول الناتج عند درجة الحرارة المحيطة طوال الليل. تمت تنقية الخليط الخام بواسطة ‎٠‏ كروماتوجراف ‎SCX‏ (تصفية تتابعية ‎٠١‏ 7 من ‎١‏ عياري من ‎MeOH / ammonia‏ في ‎«(DCM‏ تم تبخير الجزيئات النقية إلى درجة الجفاف لإعطاء : ‎4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-4-hydroxybutyl)piperidine-4-carboxamide‏ ‎٠,0 4(‏ جم؛ ‎AC‏ 1( في صورة مادة صمغية شفافة عديمة اللون. ‎'H NMR (400.13 MHz) § 1.16-1.27 (2H, dd), 1.29-1.51 (2H, sepd), 1.70-1.76 (2H, q),‏ ‎(2H, m), 2.65-2.72 (2H, m), 2.74-2.83 (2H, dq), 3.37-3.39 (2H, m), 4.39 Vo‏ 1.75-1.89 0د

‎١945 -‏ - ‎(exchange, broad) 4.70-4.76 (1H, q), 7.32-7.35 (2H, d), 7.36-7.39 (2H, d), 8.25-8.27‏ ‎(exchange, d)‏ يمكن اختبار التأثيرات البيولوجية للمركبات التي لها الصيغة )1( كما هو مبين فيما يلي. اختبار فسفرة ‎SK-3 phosphorylation‏ 6 للورم الغدي لسرطان الثدي ‎breast cancer‏ في البشر ‎MDA-MB-468 ©‏ معملياً : يحدد هذا الاختبار قدرة مركبات الاختبار على تثبيط فسفرة ‎phosphorylation‏ الوحدة البنائية ‎Serine-9‏ في ‎Glycogen Synthase Kinase-3beta (GSK-3B)‏ كعلامة مظهرة بديلة لنشاط ‎PKB (Akt)‏ الخلوي؛ حسبما يتم تقييمه باستخدام تقنية : ‎Acumen Explorer Fluorescent Plate-Reader‏ سلالة الخلية للورم الغدي لسرطان الثدي ‎breast cancer ٠‏ في البشر ‎AMDA-MB-468‏ من : ‎(LGC Promochem, Teddington, Middlesex, UK, Catalogue No.

HTB-132)‏ ثم الحفاظ عليها - كما هو متبع - في وسط نمو ‎Dulbecco's modified Eagle's‏ (أي ‎DMEM‏ من ‎Invitrogen Limited, Paisley, UK Catalogue No. 11966-025)‏ يحتوي على ‎٠١‏ 7 مصل جنين العجل المخمد بالحرارة (أي ‎FCS‏ من : ‎Sigma, Poole, Dorset, UK, Catalogue No.

F0392) ٠‏ و 7 ‎L-glutamine (Gibco, Catalogue‏ )25030-024 .1106 عند اعم مع © 0027 حتى نسبة توافق 7+6- 70 لاختبار الفسفرة ‎phosphorylation‏ « تم فصل الخلايا من قارورة المزرعة باستخدام ‎Trypsin-EDTA‏ من ‎(Invitrogen Limited, Catalogue No. 25300-062)‏ وتم إحكام الإغلاق عليها في عيون طبق أسود ذي ؛ قا 2 شفاف به 7 عينا من نوع : ‎Corning‏ ‏دما

- © — ‎Costar Polystyrene‏ من : ‎(Fisher Scientific UK, Loughborough, Leicestershire, UK; Catalogue No. 3904 and‏ ‎DPS-130-020K)‏ ‏عند كثافة 55.65 خلية في كل عين في وسط ‎Yeo‏ ميكرولتر من وسط نمو كامل . ثم تحضين هذه © الخلايا طول الليل عند ١م‏ مع 0 7 002 للسماح لها بالالتصاق. في اليوم ‎o SUI‏ تمت معالجة الخلايا بمركبات اختبار وتحضينها لمدة ساعتين عند ‎١‏ ”م باستخدام © 1 002. تم تحضير مركبات الاختبار في صورة محاليل تخزين ‎٠١‏ ملي مولار في ‎DMSO‏ ‏وإعطاؤها مباشرةٍ بالتركيز المطلوب في أعين اختبار باستخدام تقنية ‎ECHO‏ مع عدم التلامس (توزيع صوتي لقطرات مقدرة ‎Y,0‏ نانولتر مباشرةٍ في أعين الاختبار) : ‎Inc.

Sunnyvale, California, USA) Ve‏ عار5م.1). كل طبق كان يحتوي على أعين لمقارنة بدون مركب الاختبار. تمت عندئذ إضافة ‎٠١‏ ميكرولتر من محلول التنظيم المثبت (محلول ملحي منظم بالفوسفات ‎(PBS)‏ يحتوي على ‎٠١‏ 7 فورمالدهيد؛ من شركة سيجماء رقم الكتالوج 1635 ‎(F‏ إلى كل عين حتى الوصول إلى تركيزها في كل عين 7271,7. تم عندئذ تحضين الأطباق لمدة ‎Te‏ دقيقة عند درجة ‎VO‏ حرارة الفرق قبل إزالة المادة المثبتة. تم غسل كل عين ‎se‏ واحدة باستخدام ‎YOu‏ ميكرولتر من 735 ثم ‎5٠‏ ميكرولتر من ‎PBS‏ إلى كل عين. عندئذ تم شطف ‎PBS‏ وانفاذ الخلايا ومنها بتحضين كل خلية بواسطة ‎٠‏ 5 ميكرولتر من المحلول المنظم للنفاذ/ الحجز ‎PBS)‏ يحتوي على 0,58 7# توين ‎Yo‏ (من شركة سيجماء رقم الكتالوج ‎(P 5927‏ © 7 مسحوق لبن ‎Marvel‏ من ‎(Andrews Pharmacy Ltd, Macclesfield, Cheshire,‏ ‎YAO)‏

— Vat -

‎UK; Catalogue No.

APC100199))‏ لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة قبل تبقيعها.

‏بعد إزالة المحلول المنظم للنفاذ/ الاحتجازء تمت إضافة ‎٠‏ 5 ميكرولتر من الجسم المضاد الأولى

‏المضاد للفسفرة ‎phosphorylation‏ بواسطة 38- 6516 (تقنية إشارات الخلية ‎Signalling‏

‎Technology (New England Biolabs (Uk) Ltd.), Hitchin, Hertfordshire, UK; Catalogue +,+0 3 Marvel / © ‏يحتوي على‎ PBS) wile ‏في محلول منظم‎ 4060 : ١ ‏مخففة بنسبة‎ N0.9336 ©

‎Polysorbate 20 / Tween 7‏ ) إلى كل عين وتحضينها طول الليل عند 4" م.

‏تم غسل كل عين ثلاث مرات في ‎Yoo‏ ميكرولتر من المحلول المنظم المستخدم في الغسيل ‎PBS)‏

‏يحتوي على ‎Lovo‏ بولي سوربات ‎)٠١‏ وتم تحضين الخلايا لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة

‏باستخدام ‎٠٠‏ ميكرولتر من جسم مضاد 488 ‎Alexa Fluor‏ مضاد للأرتب معلم فلوريا (من

‎(Molecular Probes, Invitrogen Limited, Catalogue No.

Al 1008 ٠‏ مخفف بنسبة ‎١‏ :29600 في محلول منظم للإيقاف. تم غسل الأطباق ثلاث مرات في ‎75٠‏ ميكرولتر من المحلول المنظم المستخدم للغسيل وتخزينها وهي محتوي على ‎٠ ٠‏ ميكرولتر من ‎PBS‏ عند ؛*م لحين الحاجة إليها. ثم تحليل الأطباق باستخدام قارئ أطباق ‎Acumen Explorer‏ لتقييم مستوى إشارةٍ الفلورسنت التي تمثل كمية 3512-38 المفسفر.

‎١‏ المركبات النشطة تسببت في حدوث نقص في فسفرة ‎phosphorylation‏ 0516-38 مم محم بالنسبلة لأقصى تحكم (غير محدد الجرعة) لكل ‎lal‏ وقد تم قياس ذلك بعدد الوحدات التي تمت فسفرتها في كل عين؛ وزادت من إمكانية تحديد مثبطات ‎PKB (Att)‏ حسابات 1050 : 1050 هو تركيز المركب المطلوب للحصول على تأثير ‎5٠‏ عبر مدى النشاط المتأثر بالمركب؛ بين نهاية عظمى (تعني عدم وجود مركب) ونهاية صغرى (مستوى زائد من

‏دي

‎١99 -‏ - المركب) لبيانات التحكم في الاستجابة. تم تحدثد قيم 1050 بمواءمة بيانات اختبار الاستجابة للجرعة بعد تصحيحها وفقاً للخلفية مع نموذج معادلة مواءمة لمنحنى لوجستي ذي ؛ متغيرات مؤثرة مع ضبط أدنى استجابة لتكون صفر. ثم عمل ذلك باستخدام خوارزم داخلي خطور داخل حزمة برمجيات الرسم ‎Origin‏ (من ‎.(OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA‏ تم اختبار أمثلة الاختراع في الاختبار السابق وتم وضع هذه القيم في الجدول ب.

‏تجربة ‎AKT] kinase‏ في المختبر تكشف تلك التجربة عن مثبطات نشاط ‎kinase‏ (ه0180) ‎AKT1‏ باستخدام ‎Caliper LabChip‏ 0.. تستخدم تجربة إزاحة حركة تحضين خارج شريحة المعايرة شريحةً مائعة دقيقة لقياس تحول ببتيد مرقم فلورياً ‎fluorescent labelled peptide‏ إلى منتج مفسفر ‎phosphorylated‏

‎٠‏ باستخدام ‎kinase‏ مناظر. يتم تنفيذ تفاعل الإنزيم كاملاً في أطباق ذات مقياس صغير ثم إخماده. تم سحب المحاليل الناتجة تتابعياً خلال أنبوبة شعرية داخل الشريحة؛ حيث يتم فصل ركيزة الببتيد والمنتج المفسفر عن طريق الرحلان الكهربائي. ثم تم اكتشافها بإشعاع ليزر مستحث. تم فصل الركيزة والمنتج داخل قمتين بتسليط مجال كهربائي عال واكتشافه مباشرةً بشعاع ضوئي. يظهر توقيع الإشارة الضوئية مدى التفاعل.

‎2 ‏ثم تحضير الطبق الرئيسي باستخدام‎ .1150 7 ٠٠١ solvent ‏بلغ معدل تكرار جرعة المذيب‎ Yo ‏بها طبق خلايا‎ ١ ‏في ربع دائرة‎ Primary Liquid Store ‏ملي مولار من‎ ٠١ ‏ميكرو لتر من خام‎ ‏داخل ربع الدائرة‎ ١ ‏مرة من ربع الدائرة‎ ٠٠١ ‏في خليط مخفف‎ ١ ‏عيناً. تم عمل‎ TAS ‏معملية ذي‎ ‏تالي‎ ١ ‏ميكرو لتر واضافتها إلى 9,7" ميكرو لتر من 01450. تم عمل‎ ١,4 ‏عن طريق إزالة‎ ¥ .7 ‏مرةٍ داخل ربع الدائرة ؟ من ربع الدائرة ؟ وربع الدائرة ؛ من ربع الدائرة‎ ٠٠١ ‏فى خليط مخفف‎

‎YAO)

- ١8 تم توزيع قطرات متعددة 7,5 نانو لتر من صدى كل ربع دائرة للطبق الرئيسي باستخدام تقنية جرعة ‎(Labeyte Inc. Sunnyvale, California, USA) ECHP‏ لتوليد مدى الجرعة الذي تطلّب في الاختبار. تم استخدام مدى جرعة أكبر عموماً كما يلي: ‎٠٠١‏ ميكرو لترء ‎3٠0‏ ميكرو لتر ‎٠١‏ ‏ميكرو لترء ؟ ميكرو لترء ‎١‏ ميكرو لتر؛ ‎١,3‏ ميكرو ‎١1 Of‏ ميكرو لترء ‎١.07‏ ميكرو لتر؛ ‎ye) ©‏ ميكرو لترء 0.007 ميكرو لترء ‎00٠‏ ميكرو لترء ‎١.000٠‏ ميكرو لتر. تمت تعبئة كل عين 466 باستخدام ‎(DMSO)‏ ليبلغ الحجم الإجمالي ‎١8١‏ نانو لترء مثل ذلك عندما يتم إضافة خليط الإنزيم والركيزة إلى تركيز ‎DMSO‏ الذي كان ‎١‏ #. تمت إضافة ‎DMSO‏ لزيادة عيون المقارنة بأقصى درجة عند ‎١7١‏ نانو لتر ومعالجتها بأقل درجة باستخدام ‎١7١‏ نانو لتر من ‏امركب بتركيز يثبط نشاط الإنزيم ‎٠٠١‏ 7. ‎٠‏ - بعد إضافة المركّب أو عينة المقارنة إلى طبق التجربة؛ أضيف خليط من 6 ميكرو لتر ببتيد يحتوي على ركيزة ؟ ميكرو مولار ‎(-FAM-GRPRTSSFAEG-CONH2; CRB)‏ و٠5‏ ميكرو مولار من ‎٠9 ‏فا‎ pH ‏رقم هيدروجيني‎ (Hepes ‏ملي مولار‎ ٠٠١( Kinase ‏في قاعدة منظمة من‎ ATP ‎(Brij-35 7‏ و1 ميكرو لتر من خليط إنزيم يحتوي على ‎A‏ نانو مولار من إنزيم ‎AKTI/PKBa‏ ‏نشط (14-276 ‎Ay «(Upstate Biotechnology, Cat No.‏ ملي مولار من ‎DTT‏ و١٠‏ ملي مولار ‎VO‏ من 148012 في قاعدة منظمة من ‎kinase‏ تم تصنيع كل المحاليل المنظمة باستخدام ‎ele‏ 18149 تم غلق الأطباق وتحضينها عند درجة حرارة الغرفة لمدة ‎٠‏ دقيقة. تم إيقاف التفاعل عن طريق إضافة ‎٠١‏ ميكرو لتر من محلول إيقاف منظم ‎٠٠١(‏ ملي مولار ‎Hepes‏ رقم هيدروجيني ‎PH‏ ‎(DMSO 7 © (EDTA ‏كاشف غطاء 7# 46 ملي مولار‎ ٠١.١ (Brij-35 ‏محلول‎ 7 ١.١5 V,0 ‏لكل عين (يمكن تجميد أطباق 11-3 بعد الإيقاف ثم استكمالها فيما بعد). ثم تم تحليل الأطباق‎ ‎Caliper LabChip LC3000 Drug re System (Caliper Life Sciences, 1 ‏باستخدام‎ Ye.

PSI V,A— ‏باستذ لم ظروف الفصل التالية؛‎ Wellfield, Preston Brook, Runcorn, WA7 3A7) ‏عي‎

‎١995 -‏ - - .9.7 فولتية بعدية؛ - ‎١700‏ فولتية نهائية؛ زمن سحب عينة 7,. ثانية؛ زمن إرسال العينة المسحوبة ‎7٠‏ ثانية والتأخير النهائية ‎١8١‏ ثانية. تم تنفيذ تكامل قمم المنتج والركيزة باستخدام برنامج ‎Caliper LabChip‏ ومنحنيات 1050 التي تم احتسابها باستخدام برنامج ‎Origin™‏ ‎٠ (OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA)‏ تم اختبار أمثلة ‎١‏ لاختراع في المعمل © بتجربة إنزيم 1671 وتم عرض القيم الأساسية ل 1050 التي تم الحصول عليها في الجدول ب. الجدول ب . » 0 (ميكرو مولار) 0 (ميكرو مولار) من ل ‎I‏ ‏اها اج ل ‎I‏ ‏ض دي

ض — ‎١١‏ ب عدي

— ١١ - ‏دما‎

— YY - lL ‏اماد‎ |e ‏دي‎

- ١١ - ‏سس‎ ‎eT

دا

7.60 * - تم اختبارها ‎ye‏ واحدة فقط تحليل ‎Herg‏ ‏مزرعة ‎Cell culture WA‏ © ثم زرع ‎WDA‏ تعبير ‎hERG‏ لمبيض ‎Ohi‏ من نوع هميستر الصينية ‎Chinese hamster ovary K1‏ ‎(CHO)‏ الموصوفة بواسطة (2005 ‎(Persson, Carlsson, Duker, & Jacobson,‏ بنصف تدفق عند ب م في بيئة مشابهة للإنسان )0 / 02) في وسط بشري ‎(gina F-12‏ على ‎L-glutamine‏ ¢ ‎٠‏ / مصل ‎Jae‏ جيني ‎(FCS)‏ 1+ مجم / مل هيجروميسين ‎Sigma-Aldrich)‏ لله). قبل الاستخدام؛ تم غسل الطبقة الأحادية باستخدام باستخدام قسامة سابقة التدفئة ‎TV)‏ م) "مل ‎٠‏ من ‎(Invitrogen) © + ++ : ١ Versene‏ بعد خروج ذلك المحلول تم تحضين الدورق عند ‎a TV‏ في حضانة بها ¥ مل من ‎٠٠0٠0 : ١ Versene‏ لمدة ‎١‏ دقائق. ثم تم فصل الخلايا من قاع الدورق بواسطة النقر البسيط و١٠‏ مل من ‎Dulbecco's‏ به ملح فوسفاتي منظم يحتوي على ‎calcium‏ )4,+ ملي مولار) و ‎magnesium‏ )0,+ ملي مولار) ثم إضافة ‎(PBS; Invitrogen)‏ إلى الدورق وإخراجه ١د‏

‎Yio —‏ — داخل ‎Vo‏ مل أنبوب فصل مركزي قبل الفصل المركزي )04 مجم لمدة © دقائق). تم عزل المادة الطافية الناتجة وإعادة تعليق القطعة في ؟ مل من ‎PBS‏ تمت إزالة 8,6 مل من قاطع الخلية المعلقة وتحديد عدد الخلايا المتاحة ‎lo)‏ أساس استثناء تريبان الأزرق) في قارئ تلقائي ) ‎Cedex;‏ ‎(Innovatis‏ وبالتالي يمكن تعديل حجم ‎sale)‏ تعليق الخلية باستخدام ‎PBS‏ لإعطاء تركيز الخلية النهائي المطلوب. يكون ذلك تركيز الخلية عند تلك النقطة في التجربة المقتبس عند الإشارة إلى ذلك المعامل. تم إبقاء ‎LDA‏ 0110-601.5؛ التي تم استخدامها لتعديل فولتية التحويل في ‎ddonWorks™ HT‏ وتجهيزها للاستخدام بنفس الطريقة. الفيزيولوجيا الكهربية ‎Electrophysiology‏ ‏تم وصف مبادئ وعملية ذلك الجهاز بواسطة )2003 ‎-(Schroeder, Neagle, Trezise, & Worley,‏ ‎٠‏ باختصار؛ تعتمد التقنية على طبقة ذي ‎YAS‏ عين ‎(PatchPlate™)‏ يتم فيه تسجيل كل عين عن طريق استخدام امتصاص للمكان ومسك الخلية في فتحة صغيرة وفصلها لقسمين لعزل الغرف السائلة. بمجرد أن يتم التغطية؛ يتم تغيير المحلول في الجانب السفلي من ‎PatchPlate™‏ إلى أخر يحتوي على أمفوتيرسين ب. ذلك يجعل أطراف قطعة الخلية تنفذ لتغطية الفتحة في كل عين وء إن كان مؤثراًء يسمح بتسجيل تثقيب؛ تشبيك كل قطعة الخلايا. ‎Ve‏ تتم استخدام ‎B-test lonWorks™ HT‏ من ‎Essen Instrument‏ لا يوجد قدرة لتدفئة المحاليل في تلك الأجهزة وبالتالي يتم التعامل عند درجة حرارة الغرفة (حوالي ‎7١‏ م)؛ كما يلي. تم تحميل مستودع في موضع "محلول تنظيم' مع ؛ مل من ‎PBS‏ وفي موضع الخلايا مع معلق خلية ‎CHO-‏ ‏0 الموصوف أعلاه. يحتوي طبق ذو 97 عين ‎(V-bottom, Greiner Bio-one)‏ على المركبات التي يتم اختبارها (اختبار التركيز النهائي عند ال * مزارع السابقة ) موضوع في موضع ‎Yo‏ "طبق ‎"١‏ وتثبيت ‎PatchPlate™‏ داخل محطة 0810:0181677. تم عرض كل طبق مركب في ‎VY‏ ‏دي

‎١٠١1 -‏ ل

‏عمود لتمكين عشرة؛ إنشاء منحنيات 8- نقاط تركيز مؤثرة؛ تم سحب العمودين المتبقيين على الطبق بناقلة (تركيز نهائي ‎(DMSO 7 ٠,77‏ لإثبات أساسيات التجربة؛ وتمنع الطبقة الأعلى تركيز ‎cisapride‏ (تركيز نهائي ‎٠١‏ ميكرو مولار) لإثبات مستوى تثبيط ‎٠٠١‏ 7. ثم تمت ‎Ala)‏ ‏السوائل الرئيسية ‎(F-Head)‏ من ‎JTonWorks™ HT‏ 0,¥ ميكرو لتر من 035 لكل عين من

‎PatchPlate™ ©‏ وتغطية جانبه السفلي بمحلول "داخلي" الذي كان عنده التركيب التالي (في ملي مؤلار (: ‎KCl) ++ K-Gluconate‏ +¢¢ 2ع آرت ‎all) © HEPES; ١ EGTA‏

‎Sigma-Aldrich‏ رقم هيدروجيني ‎V,Y0 pH‏ - 7,70 باستخدام ‎٠١‏ مولار من ‎(KOH‏ بعد الطلاء الأولي ونزع الفقاعات؛ تم تحريك الرأس الإلكتروني (الرأس ‎(E‏ حول ‎PatchPlate™‏ لتكوين

‏كامل الاختبار (بمعنى ‎Gabi AT‏ نبضات فولتية لتحديد ما إذا كانت فتحة كل عين مفتوحة). تم

‎٠‏ فصل 7-680 0,¥ ميكرو لتر من معلق الخلية الموصوف أعلاه داخل كل عين من ‎PatchPlate™‏ واعطا ¢ ‎٠٠١‏ ثانية للخلايا لتصل وتستقر في فتحة كل عين. بعد ‎cell)‏ تحركت ‎E-‏

‎head‏ حول ال ‎PatchPlate™‏ لتحديد مقاومة الغطاء التي يتم الحصول عليها في كل فتحة؛ بعد

‏ذلك؛ تم تغيير المحلول في الطبقة السفلى من ‎PatchPlate™‏ إلى محلول ‎"aly‏ الذي يكون له التركيب التالي ‎Lally)‏ مولار): ‎HEPES 5 ١ 148012 ١ EGTA 0٠48 KCl‏ (رقم هيدروجيني

‎Vo‏ 1زم 15,لا - ‎VF‏ باستخدام ‎٠١‏ مولار من ‎(KOH‏ بالإضافة إلى ‎٠٠١‏ نانو جم / مل من أمفوتيرسين ب ‎.(Sigma-Aldrich)‏ بعد السماح ب 9 دقائق لكل ثقب في القطعة ليظهر؛ تحركت ال

‏الرأس ‎BE‏ حول ‎PatchPlate™‏ ذي ‎$A‏ عين أثناء الحصول على مركب ‎hERG‏ سبق قياسه بقياسات

‏التيار تلك. ثم تمت إضافة 1-6680 3,5 ميكرو لتر من محلول من كل عين من طبق المركب إلى

‏؛ عيون على ‎PatchPlate™‏ (كان تركيز ‎DMSO‏ النهائي ‎XY‏ في كل عين). تم الوصول إلى

‎Ys‏ ذلك عن طريق التحرك من العين الأكثر تخفيفاً إلى الأكثر تركيزاً من طبق المركب لتقليل تأثير أي مركب منتقل. بعد حوالي 7,0 دقيقة من التحضين؛ تم تحريك الرأس 8 حول كل ال ‎YAEL‏ عين ل ديا

‎١ —‏ 7 للحصول على قياسات تيار ‎hERG‏ ما بعد تناول المركب. في تلك الطريقة؛ يمكن إنتاج أقواس تأثير تركيز غير متراكمة حيث؛ يتم تقديم معايير قبول تم الوصول إليها في نسب مثوية مرضية من العيون (أنظر فيما يلي)؛ يكون تأثير كل تركيز لمركب الاختراع على أساس التسجيل فيما بين ‎١‏ و4 ‎AOA‏ © تمت استثارة المركب السابق والتالي من تيار ‎hERG‏ عن طريق ‎Aan‏ فولتية واحدة تشتمل على مدة ‎٠١‏ ثانية من الاحتفاظ عند - ‎Ve‏ ميكرو فولت؛ خطوة ‎١٠١‏ ثانية إلى - ‎Te‏ ميكرو فولت (للحصول على توقع التسريب)؛ خطوة ‎٠٠١‏ ثانية للخلف إلى - ‎Vr‏ ميكرو فولت؛ خطوة ‎١‏ ثانية إلى + £0 ميكرو فولت؛ خطوة ‎١‏ ثانية إلى - ‎Ve‏ ميكرو فولت وأخيراً خطوة ‎٠٠١٠‏ ثائية إلى ‎Veo‏ ‏ميكرو فولت. فيما بين النبضات الفولتية للمركب السابق والتالي لا يوجد تشابك بين الأطراف ‎٠‏ المتاحة. تم استخلاص التيارات بالارتشاح ‎oly‏ على توقع استثارة التيار أثناء ‎٠١+‏ خطوة ميكرو فولت في بداية نظام نبض الفولتية. تم تعديل إزاحات أيّ فولتية في برنامج ‎TonWorks™ HT‏ في إحدى الطريقين. عند تقرير فعالية المركب ؛ يتم تسليط منحدر فولطية مزيلة للاستقطاب على خلايا ‎CHO Kv 5‏ وملاحظة الفولتية فيما إذا كان هناك نقطة تصريف في الأثر الحالي (وبمعنى آخر: النقطة التي عندها ‎Jang)‏ تحول التنشيط مع بروتوكول الانحدار). تم مسبقاً تحديد الفولتبة التي ‎Ne‏ حدثت لاستخدامها بنفس تأثير الفولطية في الفزيوكهربائية التقليدية وثبت ‎Lal‏ تبلغ ‎Vom‏ ميكرو فولت (لم يتم عرض البيانات)؛ هكذا يمكن أن تدخل إمكانية التعديل ضمن برنامج ‎TonWorks™‏ ‎HT‏ باستخدام هذه القيمة كنقطة مرجعية. عند تحديد الخاصية الأساسية للفيزيوكهربائية من ‎hERG‏ ‏يتم إجراء أي تعديل بتحديد تيار ‎hERG‏ في برنامج ‎JonWorks™ HT‏ ومقارنته بذلك الموجود في الفيزيوكهربائية التقليدية (-7/ ميكروفولت) وبعد ذلك يتم إجراء التعديل الضروري في برنامج ‎٠‏ | 100170071117. تم اختبار إشارة التيار في 7,59 كيلو هرتز. ‎YAO)‏

‎A —‏ أ _ ثم قياس مقدار تيار ‎hERG‏ قبل وبعد إجراء الفحص آليا من آثار ‎J‏ لارتشاح المتتبعة بواسطة برنامج ‎TonWorks™ HT‏ بأخذ متوسط ‎5٠‏ ملي ثانية من التيار أثناء ‎ay‏ الاحتجاز الأولية في ‎Vim‏ ‏ميكرو فولت (تيار القيمة الأساسية) ويطرح ذلك من قمّة نهاية التيار. فيما يلي معايير قبول التيارات في كل عين: مقاومة إحكام ما قبل الفحص> ‎Lage ٠١‏ أوم؛ سعة تيار ‎hERG‏ الطرفي ما © قبل الفحص > ‎lage ١٠٠١‏ أوم؛ مقاومة إحكام ما بعد الفحص> ‎٠١‏ ميجا أوم. تم تقييم درجة تثبيط تيار ‎hERG‏ بتقسيم التيار ‎hERG‏ ما بعد الفحص على تيار 1286 الخاص قبل فحص كل عين. المراجع ‎Persson, F., Carlsson, L., Duker, G., & Jacobson, I. (2005)‏ منع خصائص 115126 ‎hKVLQT1/hminK +5‏ بعد إعطاء مركب جديد ‎alias‏ الاضطراب ‎AZD7009. J‏ ‎.Cardiovasc Electrophysiol. 16, 329-341 ٠‏ ‎:Schroeder, K., Neagle, B., Trezise, D.

J., & Worley, J. (2003). Tonworks HT‏ خطة جديدة لمقياس الفسيولوجيا الكهربائية عالية الإنتاج. 50-64 ,8 ‎-JBiomol Screen.,‏ نتائج تحليل ‎hERG‏ ‏تم اختبار متال رقم : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Vo‏ ,9 ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide‏ ‏طبقاً للإجراءات الموصوفة أعلاه ووجد أن قيمة 1050 ‎hERG‏ تساوي 776,8 ميكرو مولار. التجارب داخل الجسم عي

‎٠١! _‏ - تحليل الديناميكا الدوائية لركيزة ‎PKB‏ بروتينات 06817238 5 ‎RAS40‏ ‏تم حقن ‎(ATCC number HTB-14T) US7-MG LDA ٠١١ X Y,0‏ + +0 1 متريجيل ‎sc.‏ ‏(تحت الجلد) في جانب فئران عارية. عندما تصل الأورام إلى حجم حوالي 0,+ سم؟ يتم إعطاء جرعة حادة من ‎Yo‏ أو ‎Yeo‏ مجم / كجم من المركب 0 ‎E9‏ (إعطا ءِِ فمي) . ثم تحسين الحيوانات © عند نقطةزمنية محددة وترشيح الأورام خارجاً وتجميدها في النتروجين السائل

‏تم تحضير ورم نتائج التحلل خارج الجسم في ‎٠١‏ 7 تريتون ‎X‏ - 100 محلول ‎Lysis Tris‏ منظم يحتوي على إنزيم بروتيني واستخدام مثبطات فوسفاتية بطرق "24 ‎MP Biomedicals ( "FastPrep‏ ‎(matrix #6910-500‏ .5 توقع تجمعات البروتين ضد استخدام منحنى ‎BSA‏ القياسي باستخدام أداة تثقيب ‎BCA‏ (177705#). تم قياس ‎pGSK3B‏ ببقعة ‎Western‏ و40 ‎pPRAS‏ بتطبيق المرحلة

‎-(Biosource KHO0421) ELISA4lall ٠ : ‏تم حل كميات مكافئة من البروتين بواسطة ¢ -717 تدرج‎ «Western ‏بالنسبة لبقعة‎ ‏حوّل إلى‎ «(Invitrogen NP 0323) ‏سابق التجميع‎ Bis-Tris polyacrylamide pre-cast gels ‏وفقست بمضاد‎ (Invitrogen LC 2001) ‏إضافي‎ © Extra nitrocellulose membranes ‏أغشية‎ ‎: ‏المصل الأساسي‎

‎ser9, Cell Signaling Technology #9336; total GSK3P, BD Transduction Labs ) Yo‏ ]0513م 2+ وبعد ذلك مع ‎Wl‏ هورسيراديش بيروكسيدات تم تصريفها مع مضاد ‎IgG‏ الأرنب ‎Cell)‏ ‎(Signaling Technology #7074‏ أو مضاد ‎IgG‏ الفأر ) #7076 ‎(Cell Signalling Technology‏ . تم اكتشاف بروتين متفاعل ‎Lelie‏ بواسطة اللمعان الكيميائي المحسّن ‎Pierce V&+V1#)‏ ‎(Supersignal Dura‏ والفروع حدّدت مع ‎.(ChemiGenius IT (Syngene‏ تم عرض القييم المخططة

‏دما

‎7٠١ -‏ للنسبة المئوية للمنع 00516308 المقارنة مع نواقل التحكم؛ باتباع تطبيع ل ]05123«(كلي. بالنسبة ل ‎ELISA‏ (تجربة ربط إنزيم ممتز مناعياً)؛ تمت إضافة كميات مكافئة من البروتين إلى طبق ذي 47 عين تم تغطيته مسبقاً مع ‎"BUEN‏ جسم مضاد 40 ‎PPRAS‏ معيّن أحادي السلالة. تمت إضافة جسم مضاد معين ‎(Thr 246) Jai‏ يليه تعبير جسم مضاد 118 ل ‎IgG‏ الأرنب. © ثم تحديد التجربة باستخدام مثبت ‎(TMB (tetramethylbenzidine‏ عند ‎49٠‏ نانو متر من طبق القراءة. تكون كثافة اللون نسبة إلى تركيز ‎pPPRASA0‏ لب )246 ع:ا1). تم عرض النتائج في شكل رقم ‎.١‏ ‏دراسة حول ‎MCF-7‏ المضاد للأورام باستخدام (5)-4 - ‎phenyl chloro —¢)=Y)=N— amine‏ ) -7- هيدروكسي ‎-١- (propyl‏ (117- بيرولو [7؛ 1-7] بيريميدين -؛ - يل) ببريدين-؛ - ‎(AE) carboxamide ٠‏ تم الحصول على فئران ناقصة المناعة بصورة حادة ومشتركة ‎(SCID)‏ من ‎Charles River‏ ‎Laboratories‏ تم تسكين الفثران والإبقاء على شروط خالية من السبب المرضي المعيّنة. للزرع داخل الجسم؛ تم حصد الخلايا من قارورة 1225 زرع نسيج ب ؟ - 0 دقائق مع ؟ ‎X‏ تريبسين ‎(Invitrogen)‏ في محلول ‎EDTA‏ يليها التعليق في الوسط القاعدي وثلاثة محاليل غسيل في ملح ‎٠‏ فوسفاتي منظم ‎(Invitrogen)‏ استخدمت معلقات أحادية الخلايا تبلغ نسبة إعاشتها أكبر من ‎٠‏ أ كما هي محدّدة مسبقاً واستبعاد تريبان الأزرق؛ المستخدم للحقن. تم حقن خلايا أورام الثدي ‎MCF-7‏ (عدد 106 ‎ATCC 1113-22 ™) (5 x‏ خلية + ‎Matrigel 75 ٠‏ ™( تحت الجلد في الجناح اليسار للحيوان بحجم ‎١,١‏ مليلتر. قبل زرع خلايا ‎MCF-7‏ تم تخدير ‎SCID oh‏ وزرعت مع ‎١,5‏ مجم ‎YY‏ كرية إستروجين لفترة نهارية. عندما يصل متوسط ‎ana‏ الورم إلى حوالي ‎SF‏ ‎٠١‏ ستتيمتر ‎F‏ يتم تقسيم الفئران عشوائياً إلى مجموعات مقارنة ومجموعات معالجة. استلمت مجموعة ‎YAO)‏

‎71١١ -‏ - المعالجة ‎7٠١‏ مجم / كجم من 29 مذوّب في ناقل يشمل ‎٠١‏ 7 (حجم / حجم) ‎(DMSO‏ 25 / (وزن / حجم ) ‎Kleptose‏ ™ في الماء؛ بالتزقيم عبر الفم. استلمت مجموعة المقارنة العربة بمفردهاء بالتزقيم عبر الفم ‎Ba‏ يومياً. تم تسجيل أحجام الأورام (مقاسة بالفرجار) على فترات زمنية طوال مدة الدراسة. تم ذبح الفئران باستخدام ثاني أكسيد الكربون. تم حساب حجم الورم بحيث يكون © الطول هو أكبر قطر في الورم ويكون العرض هو القطر المتعامد المناظر باستخدام الصيغة: (الطول * العرض) ‎Vx‏ (الطول ‎X‏ العرض) ‎(VF) X‏ تم تقييم تثبيط النمو منذ بداية المعالجة بمقارنة الاختلافات في حجم الورم بين مجموعات المقارنة والمعالجة. نظراً لأن التباين في بيانات متوسط حجم الورم يؤدي إلى زيادة متناسبة مع الحجم (وبالتالي غير متكافئة أيضاً بين المجموعات)؛ وتم تحويل البيانات لوغارتمياً لإلغاء أي اعتماد على الحجم قبل التقييم الإحصائي. ‎٠‏ .تتم تقييم الدلالة الإحصائية باستخدام اختبار العينتين ' الذي يحتوي على ذيل واحد. تم عرض النتائج في الشكل 7. توقع الجرعة البشرية اقتضى توقع الجرعة البشرية المستخدمة للدراسات الإكلينيكية تقدير متغيرات الحركيات الدوائية لدى الإنسان ‎(PK)‏ والتي تعتبر ‎Ala‏ في تحديد إلغاء 11/2 وسمات شكل وحجم التركيز في البلازما ‎٠5‏ على مدار الوقت بجرعة معينة. تتضمن هذه المتغيرات المقدرة التخلص»؛ وحجم توزيع الحالة الثابتة ‎«(Vss)‏ وثابت معدل الامتصاص ‎(Ka)‏ والإتاحة البيولوجية ‎(F)‏ وتكرار تناول الجرعات. كما اقتضى توقع الجرعات البشرية توافر دليل فارماكولوجي لمدى ارتباط التعرض بالفاعلية ‎-(McGinnity, Collington, Austin & Riley, Current Drug Metabolism 2007 8 463479)‏ ‎Lad‏ يتعلق ب 89 تم تقدير التخلص البشري من بيانات التخلص الداخلية ‎(Clint)‏ في الخلايا ‎7٠‏ الكبدية البشرية المصححة في التخلص داخل الجسم الحي بدمج النموذج المقلب جيداً : ‎YAO)‏

‎١7١١ -‏ - ‎-(Riley, McGinnity & Austin, Drug Metabolism & Disposition 2005 33(9) 1304-1311)‏ لوحظت اختلافات طفيفة في ارتباط بروتين البلازما للمركب بانلسبة للجرذان؛ والكلاب والإنسان؛ ‎lll‏ تم تصحيح قيم ‎Vss‏ في الجرذان والإنسان عن طريق العامل ‎Fu‏ الإنسان/ن1 (الجرذان/الكلاب) (حيث ‎Fu‏ = جزء غير مرتبط في البلازما). بلغ 755 البشري 7,7 لتر/كجم © باستخدام هذا المتحى. تم أخذ الجزء الممتص ‎(Fabs)‏ في الإنسان باعتباره المتوسط بالنسبة للجرذان والإنسان. تم بعد ذلك ضبط متغير ‎Fabs‏ هذا على الإتاحة البيولوجية ‎(F)‏ بتصحيحه للاستخلاص الكبدي. تم ضبط معدل الامتصاص ‎(Ka)‏ لضمان أن ‎Tmax‏ قد بلغ ‎dela‏ واحدة بالنسبة ل ‎<E9‏ وهي قيمة محافظة نسبياً تبين أن القيمة الملاحظة قبل الإجراء داخل المعمل يجب أن تؤدي على نحو متساو إلى قيمة ‎Cmax‏ محافظة لاستخدامها في حساب الهوامش الخاصة ‎٠‏ بالدراسات حول الأمان. يفترض أن الجرعات الإكلينيكية يتم تكرارها مرتين يومياً ‎(BID)‏ ‏بعد تحديد شكل وحجم تركيز البلازما البشري مقابل المنحنى الزمني؛ تتمثل الخطوة الأخيرة في ضبط الجرعة للحصول على تركيزات البلازما التي يحتمل أن تحقق الفاعلية المطلوبة. في دراسات ‎PD‏ التي أجريت على الفئران؛ لوحظ تثبيط ‎pGSK‏ (نقطة نهائية بديلة للنشاط المضاد للأورام) عندما تجاوزت تركيزات البلازما الحرة ضعف 1050 لكل مركب وفقاً لقياس تجربة الخلايا لتثبيط ‎Vo‏ نشاط ‎AKT‏ المصحح للارتباط نظراً للمصل البقري الجنيني الموجود في التجربة. بالتالي؛ مفترض نموذج ‎PK‏ البشري أن من الضروري أن يتجاوز التعريض الحر ل 1050 7103 ‎BO‏ لضمان الفاعلية الإكلينيكية. بعد وضع كافة هذه البيانات ‎clas‏ يتوقع أن : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-‏ ‎yl)piperidine-4-carboxamide (E9), Y.‏ ‎YAO)‏

‎7١٠١ -‏ يتطلب ‎deja‏ بشرية تبلغ حوالي ‎١‏ مجم/كجم ‎BID‏ لتحقيق الفاعلية ‎Cua‏ بلغ عمر النصف حوالي 1 ساعات. دي

Claims (1)

1. ‎١١ -‏ - عناصر الحماية ‎-١ ١‏ المركب : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)-1-(7H-pyrrolo[2,3- Y‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide v‏ 1 ‎S00‏ ‎NH‏ ‏¢ ‎N‏ ‏حت ‏= ‎N‏ ‎Non‏ ‏0 أو ملح مقبول صيدلانياً منه. ‎—Y ١‏ تركيبة صيدلانية تشتمل على مركب وفقاً لعاصر الحماية ١؛‏ أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(Ala ¥‏ سوياً مع مادة مخففة ‎diluent‏ أو مادة حاملة ‎carrier‏ مقبولة صيد لانياً . ‎١‏ *- مركب وفقاً لعنصر الحماية ٠؛‏ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ للاستخدام كدواء. ‎١‏ ؛- مركب وفقاً لعنصر الحماية ١؛‏ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ من أجل الاستخدام في ‎Y‏ علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ ‎١‏ 0— مركب وفقاً لعنصر الحماية ‎٠١‏ أو ملح مقبول صيدلانياً ‎cia‏ من أجل الاستخدام في ‎Y‏ علاج سرطان الثدي ‎treatment of breast cancer‏ دي

   — م \ ‎Y‏ — ‎١‏ 1— مركب وفقاً لما هو مذكور في عنصر الحماية ‎١‏ أو ملح منه مقبول صيدلانياً ‎Y‏ للإستخدام في تحضير دواء لعلاج السرطان ‎treatment of cancer‏ ‎١‏ "- مركب وفقاً لما هو مذكور في عنصر الحماية ‎١‏ أو ملح منه مقبول صيدلانياً ‎Y‏ للإستخدام في تحضير دواء لعلاج سرطان الثدي ‎treatment of breast cancer‏ ‎—A \‏ المركب: ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropy!)-1-(7H-pyrrolo-[2,3- Y‏ ‎d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4-carboxamide ¥‏ 1 وفقاً لعنصر الحماية ‎.١‏ ‎١‏ 4- عملية لتحضير مركب وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎٠‏ أو ملح مقبول صيد لانياً منه؛ ‎vo‏ تشتمل على ‎Jeli (00 7‏ حمض له الصيغة ‎(II)‏ مع ‎(S)-3-amino-3-(4-chlorophenyl)propan-1-ol‏ ‏ا م0 ‎NH‏ ‎HO ‘‏ ‎N (1‏ ‎Cr‏ ‏7 ‎N‏ ‏م 8“ ‎Jia p! Cus‏ مجموعة حماية مناسبة؛ وبعد ‎«lla‏ )13 لزم ‎J‏ لأمر : 0 ‎(i) <‏ إزالة مجموعات الحماية ‎¢protecting groups‏ و/أو ‎(i) y‏ تكوين ملح مقبول صيدلانياً منه. ‎YAo)‏ tert- ‏العملية وفقاً لعنصر الحماية 9؛ حيث !2 تمثل مجموعة حماية‎ -٠ ١ -butoxycarbonyl Y ‏المركب:‎ -١١ ١ (S)-tert-butyl 4-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropylcarbamoyl)-1-(7H- y pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidin-4-ylcarbamate: v 8 IP ‏هذه م‎ ¢ ‏أله‎ Pa ~ 0

   N

   ‏.ا‎ ‎= ‎NOR ‏المركب:‎ YY ١ 4-(tert-butoxycarbonylamino)-1-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)piperidine-4- y carboxylic acid: v 0 ¢ N 00 > NTR (dia Ly ‏عملية لتحضير مركب وفقاً لعنصر الحماية 3 أو ملح مقبول صيد‎ -\Y ١ : ‏تشتمل العملية على‎ Y (S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide v ‏دما‎

   ‎7١٠ -‏ - ‎L, .‏ ‎N™ -‏ ‎NW)‏ ص2 ‎N‏ ‎H‏ “ © مع حلقة غير متجانسة ثنائية الحلقة ‎bicyclic heterocycle‏ لها الصيغة ‎:(V)‏ ‎L; Cua 1‏ تمثل مجموعة تاركة ‎leaving group‏ مناسبة؛ وبعد ذلك؛ عند الضرورة؛ تكوين ل ملح مقبول صيدلانياً منه. ‎—V € ١‏ عملية وفقاً لعنصر الحماية ‎»١‏ أو حيث ‎Ly‏ عبارة عن ‎.chlorine‏ ‎-١ ١‏ المركب : ‎(S)-4-amino-N-(1-(4-chlorophenyl)-3-hydroxypropyl)piperidine-4-carboxamide: v‏ ‎OH‏ ‎N NH,‏ ; ‎H‏ ‎Cl‏ ‎N‏ ‎H‏ ‎YAO)‏