[go: up one dir, main page]

SA03240005B1 - مركبات ثلاثي ببتيد مثبط لالتهاب الكبد c - Google Patents

مركبات ثلاثي ببتيد مثبط لالتهاب الكبد c Download PDF

Info

Publication number
SA03240005B1
SA03240005B1 SA3240005A SA03240005A SA03240005B1 SA 03240005 B1 SA03240005 B1 SA 03240005B1 SA 3240005 A SA3240005 A SA 3240005A SA 03240005 A SA03240005 A SA 03240005A SA 03240005 B1 SA03240005 B1 SA 03240005B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
compound
formula
butyl
cyclopentyl
hcv
Prior art date
Application number
SA3240005A
Other languages
English (en)
Inventor
فيدا جيه. جوريس
مونتس ليناس - برونت
Original Assignee
بوهرنجر انجلهايم انترناشونال جي ام بي اتش
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by بوهرنجر انجلهايم انترناشونال جي ام بي اتش filed Critical بوهرنجر انجلهايم انترناشونال جي ام بي اتش
Publication of SA03240005B1 publication Critical patent/SA03240005B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

الملخص: يتعلق الاختراع الراهن بمركبات بالصيغة (١): (١)حيث R1 يمثل هيدروكسي hydroxy أو NHSO2r1a حيث r1A يمثل ألكيل (8-Cl- (C1) alkyl(8، ألكيل حلقي (7-(C3- (C3 cycloaikyl(7 أو {ألكيل (C1-6)-ألكيلحلقي (7-{(C1-6)alkyl-(C3- {(C3{7)cycloalky، يحمل كل منها بشكل اختياري بديلا واحدا إلى ثلاثة بدائل من هالو halo، سيانو cyano، نترو nitro، ألكيل (C1- O-(C1-6)-O 6)alkyl، أميدو amido، أمينو amino أو فنيل phenyl، أو r1A يمثل أريل C6 aryl C6 أو أريلC10 aryl C10 يحمل بشكل اختياري بديلا واحدا إلى ثلاثة بدائل من هالو halo، سيانو cyano، نترو nitro، ألكيل (6-Cl- (Cl) 6)alkyl،O- ألكيل ((C1-6)alkyl O-(C1-6 أميدو amido، أمينو amino أو فنيل phenyl، R2 يمثل ألكيل - (6-C4- (C4) 6)cycloalkyl، R3 يمثل ثث-بيوتيل t-butyl أو ألكيل حلقي (6-C5-6) cycloalkyl (C5) و R4 يمثل ألكيل حلقي (6-C4-6) cycloalkyl (C4)، أو ملح مقبول صيدليا pharmaceutically acceptable salt منها. وتعتبر المركبات مفيدة كمثبطات inhibitors لبروتياز NS3 NS3 protease لفيروس التهاب الكبد HCV) C).

Description

Y
C ‏مركبات ثلاثي بيبتيد مشبطة لالتهاب الكبد‎
HEPATITIS C INHIBITOR TRI-PEPTIDES ‏الوصف الكامل‎ ‏طلبات ذات صلة‎ ‏يعد هذا الطلب استمراراً جزئياً لطلب براءة الاختراع الأمريكية بالرقم المتسلسل‎ ‏كانون الأول, 7١٠٠م؛ ويدمج في هذا البيان بكامل محتواه‎ ١١7 ‏المودع في‎ ٠١/7171 ‏للإحالة إليه كمرجع.‎ ‏مجال الاختراع‎ > ‏يتعلق الاختراع الراهن بمركبات؛ عمليات لتخليقهاء تراكيب وطرق لمعالجة العدوى‎ ‏وبصفة خاصة؛ يزود الاختراع الراهن‎ (HCV) hepatitis C virus C ‏بفيروس التهاب الكبد‎ ‏تحتوي على‎ pharmaceutical compositions ‏جديدة؛ تراكيب صيدلية‎ peptide analogs ‏نظائر ببتيد‎
HCV ‏نظائر من هذا القبيل وطرق لاستخدام هذه النظائر في معالجة الإصابة ب‎ ‏خلفية الاختراع‎ ‏المسبب‎ etiological agent ‏العامل الرئيسي‎ (HCV) © ‏يعتبر فيروس التهاب الكبد‎ ‏والمكتسب‎ post-transfusion ‏و 8 الذي يحدث بعد نقل الدم‎ A ‏لالتهاب الكبد من نوع غير نوع‎ ‏مليون نسمة في‎ Yoo ‏من المجتمع في جميع أنحاء العالم. وقد قدر أنه يصاب ما يزيد عن‎ ‏جميع أنحاء العالم بعدوى الفيروس. وتشصاب نسبة كبيرة من الأشخاص الحاملين للمرض‎ ‏يطلق‎ cronic liver disease ‏بالعدوى بشكل مزمن وتتعرض لتطورات عديدة لمرض كبد مزمن‎ vo ‏عليه التهاب الكبد © المزمن. وتتعرض هذه المجموعة بدورها لخطر الإصابة الكبير بمرض‎ hepatocellular carcinoma ‏الكيد‎ UMA ‏وسرطان‎ liver cirrhosis ‏خطير مثل تشمع الكبد‎ as ‏ويؤدي إلى الموت.‎ terminal liver ‏ومرض الكبد الذي يحدث في نهاية العمر‎ ‏البقاء الفهيروسي‎ HOV ‏بها‎ doa ‏ولم توضح بشكل دقيق الآلية التي‎ v ‏مزمن. ومن غير المعروف كيف‎ AS ‏ويتسبب بمعدل مرتفع لمرض‎ viral persistence ‏وكيف يتفاداه. غير أنه‎ host immune system ‏مع جهاز المناعة للعائل‎ HCV ‏يتفاعل‎ ‏بالإضافة إلى ذلك؛ ينبغي إثبات أدوار الاستجابات المناعية الخلوية والخلطية‎ ‏والمرض بهذا الفيروس.‎ HOV ‏في الوقاية من عدوى‎ cellular and humoral immune responses ‏للوقاية من التهاب الكبد الفيروسي المقترن‎ Immunoglobulins ‏وقد ذكرت الغلوبيولينات المناعية‎ © ‏غير أن مركز التحكم بالمرض‎ «transfusion-associated viral hepatitis ‏بنقل الدم‎ ‏لم يوص في الوقت الحاضر بالمعالجة بالغلوبيلينات المناعية‎ Center for Disease Control ‏لهذا الغعرض. ويعيق الافتقار إلى استجابة مناعية واقية‎ Immunoglobulins ‏أو إجراءات وقائية ملائمة بعد‎ vaccine ‏فعّالة تطوير لقاح‎ protective immune response
Gl gill ‏على التدخلات المضادة‎ ash ‏التعرض بحيث بعبارة قريبة؛ تعلق الآمال بشكل‎ ٠ .antiviral interventions ‏وقد أجريت دراسات سريرية مختلفة بهدف تمييز عوامل صيدلية‎ ‏في مرضى مصابين بالتهاب الكبد‎ HCV ‏قادرة على معالجة عدوى‎ pharmaceutical agents ‏المزمن © بشكل فعال. وقد اشتملت هذه الدراسات على استخدام ألفا-إنترفيرون‎ ‏مضادة أخرى للفيروسات‎ Jal se ‏في صورة مفردة وفي توليفة مع‎ interferon-alpha Vo ‏وقد بينت هذه الدراسات أن عددآً كبيراً من المشاركين لا يستجيب لهذه‎ anti-viral agents ‏العلاجات؛ ووجد أن نسبة كبيرة من العدد الذي يستجيب بشكلٍ مرض تنتكس بعد انتهاء‎ ‏المعالجة.‎ ‏العلاج المتوفر الوحيد الذي له‎ (IFN) interferon ‏قريب؛ اعتبر الإنترفيرون‎ jee ‏وحتى‎ ‏فائدة مثبتة موافق عليها في العلاج السريري لمرضى مصابين بالتهاب الكبد المزمن ©. غير‎ | © ‏تأثيرات‎ interferon ‏أن معدل الاستجابة المعززة منخفض كما تسبب المعالجة بالإنترفيرون‎ «thyroiditis ‏التهاب الغدة الدرقية‎ retinopathy ‏الشبكية‎ Jie ‏(أي‎ side effects ‏جانبية خطيرة‎ ‏تؤثر على طبيعة حياة‎ (depression ‏والإكتئاب‎ acute pancreatitis ‏التهاب البنكرياس الحاد‎ ‏المرضى المعالجين. ولقد استحسن؛ مؤخرا؛ استخدام الإنترفيرون 1000500 في توليفة مع‎ ‏وحده. غير أن التأثيرات‎ interferon ‏لمرضى لا يستجيبون للإنترفيرون‎ ribavirin ‏ريبافيرين‎ Yo ‏باستخدام توليفة العلاج هذه. ويمكن‎ JL 5 VY interferon ‏الجانبية التي يسببها الإنترفيرون‎
$ لأشكال الإنترفيرونات ‎interferons‏ المضاف إليها غليكول متعدد إثينين ‎polyethylene glycol‏ ‎(Pegylated)‏ مثل إنترون-بي ئي جي (علامة تجارية مسجلة) ‎PEG-Intron®‏ وبيجاسيس (علامة تجارية مسجلة) ‎Pegasys®‏ أن ‎Hs‏ هذه التأثيرات الجانبية الضارة ‎Wa‏ بشكل واضح إلا أن العقاقير المضادة للفيروسات ‎antiviral drugs‏ مازالت هي السبيل إلى اختيار ° المعالجة عن طريق الفم ‎HCV — oral treatment‏ حتى الآن. وبناءًٌ على ذلك؛ ثمة حاجة لتطوير عوامل مضادة للفيروسات فعالة لمعالجة العدوى ب ‎HOV‏ تتغلب على قيود العلاجات الصيدلية الموجودة. ويعتبر ‎HCV‏ فيروس من جديلة ‎RNA‏ (حمض ريبي نووي) موجبة مغلفة ‎enveloped positive strand RNA virus‏ في عائلة فلافيفيريدا ‎Flaviviridae‏ ويبلغ طول مجين ‎RNA genome ٠١‏ ل ‎HCV‏ أحادي الجديلة + + 40 نيوكليوتيداً ‎nucleotides‏ تقريباً ولها إطار قراءة مفتوح ‎open reading frame (ORF)‏ مفرد يحمل شيفرة متعدد بروتين ‎polyprotein‏ ضخم واحد يتكون من حوالي ‎Laan 6٠‏ أمينياً ‎amino acids‏ وفي الخلايا المصابة بالعدوى؛ يُشق متعدد البروتين ‎polyprotein‏ هذا عند مواقع متعددة باستخدام أنزيمات بروتياز خلوية وفيروسية ‎cellular and viral proteases‏ لإنتاج بروتينات ‎(NS)‏ بنيوية وغير بنيوية ‎structural and non-structural (NS) proteins Vo‏ وفي ‎(HCV Ala‏ يجرى إنتاج بروتينسات غير بنيوية ناضجة ‎NS5A «(NS4B ¢<NS4A ¢NS3 «NS2) mature nonstructural proteins‏ و ‎(NSsB‏ ‏باستخدام أنزيمي بروتياز فيروسيين ‎.viral proteases‏ فالأنزيم الأول؛ كما ميز بشكل غير جيد حتى الآن؛ ينشق عند نقطة الاتصال بين ‎NS2‏ و ‎SLE) NS3‏ إليه فيما بعد ب 'بروتياز 13( 3 والأنزيم الثاني هو عبارة عن بروتياز يحتوي على سيرين ‎serine protease‏ موجود ‎vo‏ ضمن المنطقة الطرفية النتروجينية ‎N-terminal region‏ ل ‎NS3‏ ("بروتياز ‎('NS3‏ ويسبب جميع الانشقاقات اللاحقة بعد ‎(NS3‏ بشكل متجاور عند موقع الشق 1153-1548 وبشكل متقابل لمواقع ‎NSAB-NSSA <NS4A-NS4B‏ و ‎NSSA-NSSB‏ المتبقية. ويبدو أن بروتين 14848 يؤدي عدة وظائف فقد يعمل كعامل إسهامي ‎cofactor‏ لبروتياز ‎NS3‏ ومن الممكن أن يساعد في تعيين موضع الغشاء ل ‎NS3‏ ومكونات تضاعف فيروسية ‎viral replicase‏ أخرى. ويبدو أن ‎vo‏ تشكّل المتراكب ‎complex‏ من بروتياز ‎NS3‏ وبروتياز 11548 ضروري لحالات المعالجة بحيث يعزز الفعالية الوقائية عند جميع المواقع. كما يظهر البروتين ‎NS3‏ فعاليات 0
فسفاتاز نكليوزيدي ‎nucleoside triphosphatase‏ وهليكاز ‎.RNA helicase RNA‏ ويعتبر 11553 بوليمراز ‎RNA polymerase RNA‏ يعتمد على ‎RNA-dependent RNA polymerase RNA‏ ويشترك في تضاعف ‎HCV‏ ‏وتتمثل طريقة عامة لتطوير العوامل المضادة للفيروسات في تثبيط فعالية أنزيمات ‎c‏ تحمل شفرتها فيروسات ‎virally encoded enzymes‏ ضرورية لتضاعف الفيروس. ويبين فيما يلي قائمة بطلبات براءات الاختراع المنشورة في السنوات القليلة الماضية التي تصف ببتيد مثشبط ‎inhibitor peptide‏ لبروتياز 1453 ل ‎HCV‏ تختلف بنيوياً عن المركبات ‎Ga‏ للاختراع الراهن: براءة الاختراع البريطانية رقم 77777؟؛ براءات الاختراع اليابانية أرقام ‎١‏ 76151 ٠؛‏ 78601 111؛ 79746 11؛ 497 7١-1١0٠؟؛ ‎Sel 5a‏ الاختراع الأمريكيتين رقم ‎١1999748‏ ورقم 65 11897؛ طلبات براءات الاختراع الدولية أرقام ‎¢49/YAAAA 16/117 ¢AA/ET04Y ¢AA/YY £41 ¢AA/) viva 197/4771 ٠‏ ‎4/٠‏ 447 ا/رففك لصا انف ‎(Aq VVYE‏ صمف .تبت مممك ل ‎٠ ١8‏ حخاححمل ‎TARVER £2 ETRY AR RA LED‏ كاربت تحار ‎gs 1/7151 Vo‏ ل .« الس ‎٠8‏ اللاخط حي ب لمكا اا( د كار دمر اضرب ‎SOY[PAYOR ca Y[LAYOY eu Y[CAYEE ca Y[LAVAA‏ اس د ‎٠‏ كحت روتكارت وتتمثل إحدى ميزات الاختراع الراهن في أنه يزود مركبات ثلاثية الببتيد ‎tripeptide‏ ‏مثبطة لبروتياز 8053 أنزيم أساسي لتضاعف فيروس التهاب الكبد ©. وعلاوة على ذلك؛ © | تكون المركبات قادرة على تثبيط تضاعف ‎RNA‏ ل ‎HCV‏ في نموذج الخلية التكررية ‎.replicon cell model‏ وتكمن ميزة أخرى لأحد أوجه الاختراع الراهن في الحقيقة ‎8A Bad‏ أن هذه المركبات تثبط بصفة خاصة بروتياز ‎NS3‏ ولا تظهر فعالية مثبطة كبيرة ضد أنزيمات بروتياز تحتوي على سيرين ‎serine proteases‏ أخرى مثل إلستاز كريات بيضاء ‎Yo‏ بشرية ‎«(HLE) human leukocyte elastase‏ إلستاز بنكرياسي خنزيري ‎porcine pancreatic‏ ‎«(PPE) elastase‏ أو كيموتربسين بنكرياسي بقري ‎bovine pancreatic chymotrypsin‏ أو
أنزيمات بروتياز من سيستثئين ‎Jie cysteine proteases‏ كاثبسين كبد بشري ‎human liver‏ ‎(Cat B) B cathepsin‏ الوصف العام للاختراع يتضمن نطاق الاختراع مركباً بالصيغة ‎:)١(‏ ‏نيع ‏= ‏حت دا ‎MeO,‏ ‏حر ‏9 ‎R? &‏ 0 ‎eA y Ne N‏ ‎NR‏ 0 ‎H‏ ‏° ’ ال حيث ‎R!‏ يمثل هيدروكسي ‎hydroxy‏ أو ‎NHSO,R™‏ حيث ‎R™‏ يمثل أكيل ‎(Crs)‏ ‎JH (Crpalkyl‏ حلقي ‎(Crreycloalkyl (Cs)‏ أو (ألكيل (..6)- ألكيل حلقي (ى)) (وللدماه»(:0)-1ا0,.(0))؛ يحمل كل منها بشكل اختياري ‎Taal 5 Sa‏ إلى ثلاثة بدائل من هالو ‎chalo‏ سيانو ‎cyano‏ نترو ‎nitro‏ ألكيل ‎«O-(Cyg)alkyl 0—(Ci.6)‏ أميدو ‎camido‏ أمينو ‎amino ٠١‏ أو فيل ‎phenyl‏ أو ‎Jia RM‏ أريل من ‎Cs aryl‏ أو اريل ‎aryl Cp‏ ,© يحمل بشكل اختياري ‎Taal Shy‏ إلى ثلاثة بدائل من هالو ‎halo‏ سيانو ‎ccyano‏ نترو ‎¢nitro‏ ألكيل ‎(Cis)‏ الولاد.)» ألكيل (6)-0 انوالد0.©)-0» أميدو ‎amido‏ أمينو ‎amino‏ أو فنتيل ‎R? ¢phenyl‏ يمثل ‎Jf‏ حلقي ‎J Say RP ¢(Cyg)eycloalkyl (Cas)‏ ث-بيوتيل ‎t-butyl‏ أو ألكيل حلقي ‎(Cs) cycloalkyl (Css)‏ و ‎RY‏ يمثل ‎JSF‏ حلقي ‎(Cag) cycloalkyl (Cog)‏ أو ملح ‎١‏ مقبول صيدلياً ‎pharmaceutically acceptable salt‏ منها. ويشمل نطاق هذا ‎١‏ لاخترا 2 تركيباً صيدلياً يشتمل على مقدار فعال مضاد لفيروس التهاب الكبد © من مركب بالصيغة ‎oI‏ أو ملح مقبول ‎therapeutically acceptable salt Ladle‏ منه في مزيج ‎admixture‏ مع وسط حامل ‎carrier medium‏ أو عامل مساعد ‎auxiliary agent‏ مقبول صيدلياً . ‎144Y‏
‎Gay,‏ لأحد التجسيدات؛ يشمل التركيب الصيدلي ‎Gay‏ لهذا الاختراع أيضاً إنترفيرون ‎interferon‏ (مضاف إليه غليكول متعدد إثيلين ‎(Pegylated) polyethylene glycol‏ أو غير مضاف إليه)؛ أو ريبافيرين ‎ribavirin‏ أو عامل واحد أو أكثر آخر مضاد ل ‎(HOV‏ أو أي توليفة مما ذكر أعلاه. : ويشمل وجه آخر هام للاختراع طريقة لمعالجة الإصابة بفيروس التهاب الكبد © في ثديي بإعطاء الثديي مقدار فال مضاد لفيروس التهاب الكبد © من مركب بالصيغة ‎of‏ ملح مقبول ‎Ladle‏ منه؛ أو تركيب كما وصف أعلاه؛ بصورة مفردة أو في توليفة مع واحد أو أكثر من: إنترفيرون ‎interferon‏ إمضاف إليه غليكول متعدد إثيلين ‎(Pegylated) polyethylene glycol‏ أو غير مضاف إليه)؛ أو ربيافيرين ‎eribavirin‏ أو عامل ‎aly‏ ‏7 أو أكثر ‎AT‏ مضاد ل ‎(HOV‏ تشعطى معاآ أو بشكل منفصل؛ مثلاً ‎oJ‏ في نفس وقت أو بعد إعطاء المركب بالصيغة ! أو ملح مقبول ‎Wana‏ منها. ويشمل وجه آخر هام للاختراع طريقة للوقاية من الإصابة بفيروس التهاب الكبد © في ثديي بإعطاء الثديي مقدار فال مضاد لفيروس التهاب الكبد © من مركب بالصيغة ([)؛ ملح مقبول صيدلياً منه؛ أو تركيب كما وصف أعلاه؛ بصورة مفردة أو في توليفة مع واحد أو ‎Vo‏ أكثر من: إنترفيرون ‎interferon‏ (مضاف إليه غليكول متعدد إثيلين ‎polyethylene glycol‏ ‎(Pegylated)‏ أو غير مضلف إليه)؛ أو ربيافيرين ‎cribavirin‏ أو عامل واحد أو أكثر آخر مضاد ل ‎(HCV‏ تشعطى جميعها ‎Tae‏ أو بشكل منفصل؛ ‎Nie‏ قبل في نفس وقت أو بعد إعطاء المركب بالصيغة ! أو ملح مقبول صيدليا منها. كما يتضمن نطاق هذا الاختراع استخدام مركب بالصيغة ‎of‏ كما وصف في هذا © البيان؛ لصنع دواء ‎medicament‏ لمعالجة أو الوقاية من الإصابة بفيروس التهاب ‎(CSD‏ ‏يشير الوصف الراهن إلى عدد من الوثائق؛ أدمجت في هذا البيان بكامل محتواها للإحالة إليها كمرجع. الوصف التفصيلي للتجسيدات المفضلة تعريفات ‎Yo‏ تطبق التعريفات التالية كما استخدمت في هذا البيان ما لم يذكر غير ذلك: ‎ya4y‏
A
‏أو )5( للإشارة إلى الشكل المطلق‎ (R) ‏بالرجوع إلى الحالات حيث يستخدم‎ ‏لمركب‎ asymmetric centre ‏أو مركز لا تماثلي‎ substituent ‏لبديل‎ absolute configuration ‏تجرى الإشارة في سياق كل المركب وليس في سياق البديل أو المركز اللاتماثلي‎ ١١ ‏بالصيغة‎ ‏وحده.‎ ‏و 3 كما استخدم في هذا البيان إلى موقع ركازات الأحماض‎ P2 PI” ‏ويشير الرمز‎ > peptide ‏لنظائر الببتيد‎ C-terminus ‏من الطرف الكربوني‎ Teds amino acid residues ‏الأمينية‎ ‏من الطرف‎ ١ ‏يشير إلى الموضع‎ PL ‏(أي‎ Neterminus ‏وامتداداً نحو الطرف النتروجيني‎
Berger A. ‏يشير إلى الموضع الثاني من الطرف الكربوني؛ إلخ) (انظر المرجع‎ P2 ‏الكربوني؛‎ ‎. (& Schechter I., Transactions of the Royal Society London series B257, 249—264 (1970) ‏كما استخدم في هذا البيان إلى مركب‎ 'vinyl-ACCA ‏ويشير المصطلح "م060م-فينيل‎ Ve ‏بالصيغة:‎ ‎5 ‎pe ‎0 ‏بروبيل حلقي كربوكسيليك‎ لينيثإ-7-ونيمأ-٠-)57‎ RY) ‏حمض‎ ol (Cis) ‏ويقصد بالمصطلح "ألكيل‎ .(1R,2S)1-amino-2-ethenylcyclopropylcarboxylic ‏هنع‎ ‏إما لوحده أو في توليفة مع بديل آخرء بدائل ألكيل‎ (lal ‏الواله(ى©) كما استخدم في هذا‎ ٠ ‏إلى‎ ١ ‏بها من‎ branched ‏أو متفرعة‎ straight ‏ذات سلسلة مستقيمة‎ acyclic ‏لا حلقية‎ alkyl ‏"7-مثيل هكسيل‎ cethyl ‏إثيل‎ emethyl ‏وتشمل؛ على سبيل المثال؛ مثيل‎ carbon ‏ذرات كربون‎ A ‏وأكتيل‎ (t-butyl ‏(أو ثث- بيوتيل‎ 1,1-dimethylhexyl ‏مثيل هكسيل‎ يئانث-٠١١‎ «2-methylhexyl octyl ‏كما استخدم في هذا البيان؛ إما‎ (Cyp)eycloalkyl (Csr) ‏أ ويقصد بالمصطلح "ألكيل حلقي‎ ‏به من ؟ إلى 7 ذرات‎ cycloalkyl ‏بديل من ألكيل حلقي‎ AT ‏لوحده أو في توليفة مع بديل‎ ‏بنتيل حلقي‎ ccyclobutyl ‏بيوتيل حلقي‎ cyclopropyl ‏ويشمل بروبيل حلقي‎ carbon ‏كربون‎ ‎.cycloheptyl ‏وهبتيل حلقي‎ cyclohexyl ‏هكسيل حلقي‎ «cyclopentyl q "{(Crealkyl-(Cs.o)cycloalkyl} ‏(ى©)- ألكيل حلقي (مت))‎ JI} ‏ويقصد بالمصطلح‎ ‏ذرات كربون‎ ١ ‏به من ؟ إلى‎ cycloalkyl radical ‏كما استخدم في هذا البيان شق ألكيل حلقي‎ ‏ذرات كربون «08:00؛ على سبيل‎ "١ ‏إلى‎ ١ ‏به من‎ alkylene ‏ترتبط مباشرة بشق ألكيلين‎ carbon ‏هكسيل‎ ccyclopentylethyl ‏بنتيل حلقي إثيل‎ ccyclopropylmethyl ‏بروبيل حلقي مثيل‎ (JU
R™ ‏وفي الحالة عندما‎ -cyclohexylethyl ‏إثيل‎ Als ‏وهكسيل‎ ccyclohexylmethyl ‏حلقي مثيل‎ ° ‏ترتبط هذه المجموعة‎ ({(Cre)alkyl{(Csg)eycloalkyl} ‏يمثل (ألكيل (..,6)-ألكيل حلقي (مت))‎ (alkylene ‏(أي جزء الألكيلين‎ (Croalkyl (Cre) ‏عن طريق ألكيل‎ SO, ‏بالمجموعة‎ ‏كما استخدم في هذا‎ "0, aryl Cio ‏ويتقصد بالمصطلح "أريل ,© ابه ,© أوأريل‎ ‏لوحده أو في توليفة مع شق آخرء مجموعة عطرية أحادية الحلقة‎ Ld cgi ‏أو مجموعة عطرية ثنائية الحلقة‎ carbon ‏بها 1 ذرات كربون‎ aromatic monocyclic ٠١ ‏على‎ aryl ‏المثال؛ يشتمل الأريل‎ Ju ‏ذرات كربون 8:000. فعلى‎ ٠١ ‏بها‎ aromatic bicyclic .2-naphthyl ‏أو 7" -تفثيل‎ 1-naphthyl ليثفت-١‎ «phenyl Jui ‏كما استخدم في هذا البيان؛ إما‎ '0-)6,.( alkyl 0 (Cr) ‏ويقصد بالمصطلح "ألكيل‎ ‏حيث يحتوي الألكيل‎ 0-©,.0( alkyl ‏لوحده أو في توليفة مع شق آخرء الشق ألكيل (.ى©)-0-‎ ‏اتأالة كما عرف أعلاه على ما لا يزيد عن > ذرات كربون 08:000» ويشمل مثوكسي‎ ve ¢I-methylethoxy ‏إثوكسي‎ ليثم-١‎ ¢propoxy ‏بروبوكسي‎ cethoxy ‏إثوكسي‎ cmethoxy ‏ويعرف الشق الأخير‎ . 1,1-dimethylethoxy ‏مثيل إثوكسي‎ AE) ١٠ butoxy ‏بيوتوكسي‎ ‎.16)-01010<(( ‏ثث-بيوتوكسي‎ sale ‏بالمصطلح "هالو ملم" كما استخدم في هذا البيان بديل من هالوجين‎ sai 7 iodo ‏أو يودو‎ fluoro ‏فلورو‎ «chloro ‏كلورو‎ <bromo ‏من برومو‎ JUBA" 5 halogen Y. ‏ويقصد بالمصطلح "ملح مقبول صيدليا" ملح لمركب بالصيغة )1( الذي يكون؛ ضمن‎ ‏نطاق الحكم الطبي الصائبء ملائما للاستخدام بالتلامس مع أنسجة البشر والحيوانات الدنيا‎ ‏غير‎ allergic ‏تهيجية 1181100 تحساسية‎ ctoxicity ‏دون إحداث استجابة سمية‎ lower animals ‏للذوبان‎ SUL ‏مناسبة؛ وما شابه ذلك؛ يتناسب مع نسبة معقولة من الفائدة إلى الخطورة؛‎ ‏الماء أو الزيت بوجه عام؛ وفقالا في الاستخدام‎ dispersible ‏أو التشتت‎ soluble Yo ‏مقبولة‎ acid addition salts ‏المقصود منه. ويشمل المصطلح أملاحاً بالإضافة إلى حمض‎
٠١
صيدلياً وأملاحاً بالإضافة إلى قاعدة ‎base addition salts‏ مقبولة صيدلياً. وتوجد قوائم بالأملاح الملائمة في؛ على سبيل المثال؛ ما جاء في المرجع ‎J.‏ .لد ا ‎Birge‏ .5.14 ‎Pharm Sci, 1977, 66, pp. 1-19‏ المذكورة في هذا البيان بكامل محتواها للإحالة إليها
كمرجع. ‎asi ٍ:‏ بالمصطلح "ملح بالإضافة إلى حمض مقبول صيدليا" تلك الأملاح التي تحتفظ بالفعالية الحيوية ‎biological effectiveness‏ وخواص القواعد الطلقة ‎free bases‏ وتكون مرغوبة حيوياً أو بطريقة ‎cs Al‏ وتتشكّل باستخدام أحماض غير عضوية ‎inorganic acids‏ مثل حمض الهيدروكلوريك ‎hydrochloric acid‏ حمض الهيدروبروميك ‎¢hydrobromic acid‏ حمض الهيدرويوديك ‎chydroiodic acid‏ حمض الكبريتيك ‎sulfuric acid‏ حمض الكبريتاميك ‎aes ¢sulfamic acid Ve‏ النتريك ‎nitric acid‏ حمض الفسفوريك ‎acid‏ 010900016 وما شابه ذلكء والأحماض العضوية ‎(Jie organic acids‏ حمض أستيك ‎cacetic acid‏ حمض ثلاثي كلوروأستيك ‎«trichloroacetic acid‏ حمض ثلاثي فلوروأستيك ‎trifluoroacetic acid‏ حمض أديبيك ‎cadipic acid‏ حمض ألجينيك ‎calginic acid‏ حمض أسكوربيك ‎ascorbic acid‏ حمض أسبارتيك ‎saspartic acid‏ حمض بنزين كبريتونيك ‎cbenzenesulfonic acid‏ حمض بنزويك ‎acid Vo‏ 5602016 حمض ‎Y‏ -أستوكسي بنزويك ‎2-acetoxybenzoic acid‏ حمض بيوتيريك ‎butyric acid‏ حمصض كافوريك ‎ccamphoric acid‏ حمض كافور كبريتونيك ‎ccamphorsulfonic acid‏ حمض سيناميك ‎ccinnamic acid‏ حمض سيتريك ‎ceitric acid‏ حمض ثنائي غلوكونيك ‎digluconic acid‏ حمض إيثان كبريتونيك ‎cethanesulfonic acid‏ حمض غلوتاميك ‎glutamic acid‏ حمض غليكوليك ‎cglycolic acid‏ حمض غليسيرو فسفوريك ‎aes glycerophosphoric acid Ye‏ نصف كبريتيك ‎chemisulfic acid‏ حمض هبتانويك ‎<heptanoic acid‏ حمض هكسانويك ‎chexanoic acid‏ حمض فورميك ‎formic acid‏ حمض فوماريك ‎fumaric acid‏ حمض 7١7-هيدروكسي‏ إيثان كبريتونيك ‎2-hydroxyethanesulfonic‏ ‎acid‏ (حمض إيزثيونيك ‎«(isethionic acid‏ حمض لاكتيك ‎lactic acid‏ حمض مالئيك ‎maleic acid‏ حمض هيدروكسي مالئيك ‎chydroxymaleic acid‏ حمض ‎dle‏ ‎¢malic acid Yo‏ حمض مالونيك ‎¢malonic acid‏ حمض مندليك ‎¢mandelic acid‏ حمض مزيتيلين كبريتونيك ‎cmesitylenesulfonic acid‏ حمض ميثان كبريتونيك ‎smethanesulfonic acid‏ حمض yaa
ا
—Y ‏حمض‎ «nicotinic acid ‏حمض نيكوتينيك‎ cnaphthalenesulfonic acid ‏نفثالين كبريتونيك‎ ‏حمض بامويك‎ coxalic acid ‏حمض أكساليك‎ 2-naphthalenesulfonic acid ‏تفثالين كبريتونيك‎ ‏حمض‎ ¢phenylacetic acid ela uf ‏حمض فنيل‎ pectinic acid ‏حمض بكتينيك‎ ¢pamoic acid ‏حمض بيفاليك‎ cpicric acid ‏حمض بيكريك‎ 3-phenylpropionic acid ‏بروبيونيك‎ Jus Y ‏حمض‎ ¢pyruvic acid ‏حمض بيروفيك‎ propionic acid ‏حمض بروبيونيك‎ epivalic acid ° ssuccinic acid ‏حمض سكسينيك‎ stearic acid ‏حمض ستياريك‎ salicylic acid ‏ساليسليك‎ ‏حمض بارا-تولوين‎ tartaric acid ‏حمض طرطريك‎ csulfanilic acid ‏حمض كبريتانيليك‎
كبريتونيك ‎acid‏ 0016؟0-010608501» حمض أنديكانويك ‎cundecanoic acid‏ وما شابه ذلك. ويقصد بالمصطلح "ملح بالإضافة إلى قاعدة مقبول صيدليا" تلك الأملاح التي تحتفظ ‎٠‏ بالفعالية الحيوية وخواص الأحماض الطلقة والتي تكون مرغوبة ‎Gm‏ أو بطريقة أخرى؛ ‎JT Cl‏ باستخدام قواعد غير عضوية مثل الأمونيا ‎ammonia‏ أو الهيدروكسيد ‎chydroxide‏ ‏الكربونات ‎carbonate‏ أو بيكربونات الأمونيوم ‎ammonium bicarbonate‏ أو بيكربونات كاتيون فلزي ‎metal cation bicarbonate‏ مثل الصوديوم ‎¢sodium‏ البوتاسيوم 6055000 الليثيوم ‎clithium‏ الكالسيوم صتاءلة»ه؛ المغنيسيوم ‎«magnesium‏ الحديد ‎iron‏ الخارصين ‎zine‏ النحاس ‎«copper Vo‏ المنغنيز ‎«manganese‏ الألومنيوم ‎caluminum‏ وما شابه ذلك. وتفضل بصفة ‎ald‏ ‏أملاح الأمونيوم ‎cammonia‏ البوتاسيوم ‎potassium‏ الصوديوم ‎(sodium‏ الكالسيوم ‎«calcium‏ ‏والمغنيسيوم ‎magnesium‏ وتشمل الأملاح المشتقة من قواعد غير سامة عضوية ‎organic nontoxic bases‏ مقبولة صيدلياً أملاحاً لأمينات ‎amines‏ أولية ‎cprimary‏ ثانوية ‎secondary‏ وثالثية ‎«tertiary‏ مركبات أمين رباعية ‎quaternary amine‏ أمينات ‎amines‏ تحمل ‎Ye‏ بدائل بما في ذلك الأمينات ‎amines‏ الطبيعية التي تحمل بدائل» الأمينات الحلقية ‎cyclic amines‏ وراتنجات التبادل الأيوني القاعدية ‎(Jia ¢basic ion-exchange resins‏ مثيل أمين ‎«methylamine‏ ‏ثنائي مثيل أمين ‎«dimethylamine‏ ثلاثي مثيل أمين ‎trimethylamine‏ إثيل أمين ‎cethylamine‏ ‏ثنائي إثيل أمين ‎diethylamine‏ ثلاثي إثيل أمين ‎triethylamine‏ أيزوبروبيل أمين ‎¢isopropylamine‏ ثلاثي بروبيل أمين ‎ctripropylamine‏ ثلاني بيوتيل أمين ‎tributylamine‏ ‎Yo‏ إيثانول أمين ‎<ethanolamine‏ ثنائي إيثانول أمين ‎«diethanolamine‏ 7'-ثنائي مثيل أمينو إيثانول ‎WY «2-dimethylaminoethanol‏ إثيل أمينو إيثانول ‎¢2-diethylaminoethanol‏ ثنائي هكسيل
١
حلقي أمين ‎«dicyclohexylamine‏ ليزين عصتدراء أرجينين عمتصنوعه» هستيدين ‎chistidine‏ كافئين ‎«caffeine‏ هيدر ابامين ‎¢hydrabamine‏ كولين ‎«choline‏ بتائين ‎cbetaine‏ إثيلين ‎i‏ أمين ‎ethylenediamine‏ غلوكوزامين 106«ة8مم:1ع» مثيل غلوكامين ‎¢methylglucamine‏ ثيوبرومين ‎«theobromine‏ بورينات ‎cpurines‏ بيبرازين ‎piperazine‏ بيبريدين 010610106 1+7-إثيل بيبريدين
‎N-ethylpiperidine °‏ مركبات رباعي مثيل أمونيوم ‎ctetramethylammonium‏ مركبات رباعي إثيل أمونيوم ‎stetraethyl ammonium‏ بيريدين ‎SEN «N «pyridine‏ مثيل أنيلين ‎«N,N-dimethylaniline‏ 71-مثيل بيبريدين ‎«N-methylpiperidine‏ ل7-مثيل مورفوليمن عصناهطم:21-061:100؛ ثنائي هكسيل حلقي أمين ‎«dicyclohexylamine‏ ثنائي بنزيل أمين ‎«N «dibenzylamine‏ 1-ثنائي بنزيل فنيثيل أمين ‎«N,N-dibenzylphenethylamine‏ ١-إفينامين‏
‎«N,N"-dibenzylethylenediamine ‏بنزيل إثيلين ثنائي أمين‎ SWNT ON «d-ephenamine ٠١ ‏وما شابه ذلك. وتتمثل قواعد غير سامة عضوية مفضلة‎ polyamine ‏راتنجات متعدد أمين‎ ‏إيثانول‎ cdiethylamine ‏بصفة خاصة في أيزوبروبيل أمين عصتنسوا م5000 ثنائي إثيل أمين‎ ‏حلقي أمين‎ Jw Sa SUS 106171776 ‏أمين‎ Jia sb ethanolamine ‏أمين‎ ‎«caffeine ‏كولين عصنامدء» وكافئين‎ «dicyclohexylamine
‎Lal yy Vo‏ بالمصطلح "عامل مضاد للفيروسات ‎"antiviral agent‏ كما استخدم في هذا البيان عامل (مركب أو عامل حيوي) فعّال في تثبيط تشك_ّل و/أو تضاعف ‎replication‏ ‏فيروس في ثديي. ويشمل هذا المصطلح ‎Jal go‏ تتداخل مع آليات عائلة أو فيروسية ‎host or viral mechanisms‏ ضرورية ‎J Sl‏ و/أو تضاعف فيروس في ثديي. وتشمل العوامل المضادة للفيروسات»؛ على سبيل المثال؛ ريبافيرين ‎cribavirin‏ أمانتادين ‎camantadine‏
‏© 9 في إكس-5997 ‎VX-497‏ (ميريميبوديب ‎emerimepodib‏ من شركة فيرتكس فارماسيوتيكالز ‎Pharmaceuticals‏ حا 17) في إكس-49/8 ‎VX-498‏ (من شركة فيرتكس فارماسيوتيكالز ‎Vertx‏ ‎«(Pharmaceuticals‏ ليفوفيرين 1.»0«1©10؛ فيراميدين ‎«Viramidine‏ سيبلين ‎Ceplene‏ (ماكسامين ‎¢(maxamine‏ إكس تي ‎XTL-001 + + Y=‏ و إكس تي ‎XTL-002 + + Y=)‏ (من شركة إكس تي إل بيوفا رماسيو 5< ‎.(XTL Biopharmaceuticals‏
‎Yo‏ ويتلقصد بالمصطلح "عامل آخر مضاد ل 1167 كما استخدم في هذا البيان تلك العوامل ‎All‏ تقليل أو منع تقدم الأعراض ‎symptoms‏ المرتبطة بمرض التهاب الكبد
©. ويمكن اختيار عوامل من هذا القبيل من: عوامل مضادة ‎(lug pill‏ عوامل ‎A aa‏ للمناعة ‎«immunomodulatory agents‏ مثبطات لبروتياز 3 ل 107 مثبطات بوليمراز ل 1107 أو مثبطات لمواد مستهدفة أخرى في دورة حياة ‎HCV life cycle HCV‏ ويقصد بالمصطلح "عامل معدل للمناعة' كما استخدم في هذا البيان تلك العوامل (المركبات أو العوامل الحيوية) الفعّالة في تعزيز أو تقوية استجابة جهاز المناعة ‎immune system response‏ في تدبي. وتشمل العوامل المعدلة ‎cde lial‏ على سبيل المثال؛ إنترفيرونات ‎interferons‏ من الفثة 1 (مثل إنترفيرونات من نوع ألفا- ‎cor‏ بيتا- ‎B-‏ ‏وأوميغا- ‎comega‏ تاو- ‎ctau-‏ إنترفيرونات توافقية ‎consensus interferons‏ وإنترفيرونات تفتقر إلى مجموعة حمض السياليك 51:0107:0::005)؛ إنترفيرونات الفئفة من ‎I‏ ‎Jia) Ve‏ غاما-إنترفيرونات ‎(v-interferons‏ وإنترفيرونات مضاف إليها غليكول متعدد ‎Old‏ ‎-pegylated interferons‏ ‎sai 2‏ بالمصطلح "مثبط بروتياز ‎"HCV —INS3‏ كما استخدم في هذا البيان عامل (مركب أو عامل حيوي) ‎Jd‏ في تثبيط وظيفة بروتياز 1053 ل 1107 في ثديي. وتشمل مثبطات بروتياز 1053 ل ‎(HCV‏ على سبيل المثال؛ تلك المركبات الموصوفة في م طلبات براءات الاختراع الدولية أرقام لاا /حكى 4 الالال /ركق مممك الى فيان 4474 أو 7/0977 والمواد المرشّحة المطؤرة ‎Ga‏ من شركة فيرتكس/إيلي ليلي ‎Vertex/Eli Lilly‏ المعروفة بالإسم التجاري في إكس 5*0 ‎VX-950‏ ‏أو إل واي-١٠707© ‎JLY-570310‏ وبصفة خاصة؛ يمكن استخدام المركبات بالأرقام ‎FY‏ ‎YY Yh Ao‏ مك كك كت نك لكت كك كك ‎(FV‏ لمك مف كف نا نك ‎٠١‏ يمت يك صك ‎NYY‏ “حك قحك مجك ‎IY ad‏ كك أ ‎AYO AYE‏ 1 و ‎١77‏ التي تم الكشف عنها في الجدول في الصفحات 777-774 في طلب براءة الاختراع الدولية رقم 07-0850477 في توليفة مع مركبات الاختراع الراهن. ويقصد بالمصطلح "مثبط بوليمراز ل ‎"HEV‏ كما استخدم في هذا البيان عامل (مركب أو عامل حيوي) فغّال في تثبيط وظيفة بوليمراز من ‎HCV‏ في ثدي. وهذا يتضمنء ‎Yo‏ على سبيل المثال مثبطات 11858 ل ‎polymerase HCV‏ 11558 11017. وتتضمن مثبطات
V¢ ‏على سبيل المثال تلك‎ cnon-nucleosides ‏مثبطات غير نكليوزيدية‎ HCV ‏بوليمراز ل‎ ‏المركبات الموصوفه:‎ ‏في طلب براءة الاختراع الأمريكية بالرقم المتسلسل 19874850/١٠٠؛ الذي أدمج في هذا البيان‎ ‏بكامل محتواه للإحالة إليه كمرجع؛ المناظر لبراءة الاختراع الكندية وفقا لمعاهدة‎ ‏يوليو؛‎ ١8 ‏التعاون في مجال براءات الاختراع رقم 07/011717؛ المودعين في‎ °
07٠٠م‏ (بورنجر إنجلهايم ‎«(Boehringer Ingelheim‏ في طلب براءة الاختراع الأمريكية بالرقم المتسلسل ‎٠١/١98784‏ الذي أدمج في هذا البيان بكامل محتواه للإحالة ‎ad)‏ كمرجع؛ المناظر لبراءة الاختراع الكندية ‎Gay‏ لمعاهدة التعاون في مجال براءات الاختراع رقم 7/0011748؛ المودعين في ‎YA‏ يوليو؛
«(Boehringer Ingelheim ‏(بورنجر انجلهايم‎ م٠٠"‎ ١ ‏الذي أدمج في هذا البيان‎ ٠١/١98709 ‏في طلب براءة الاختراع الأمريكية بالرقم المتسلسل‎ ‏لمعاهدة‎ Gy ‏بكامل محتواه للإحالة إليه كمرجع؛ المناظر لبراءة الاختراع الكندية‎ ‏يوليو؛‎ YA ‏التعاون في مجال براءات الاختراع رقم 07/001174 المودعين في‎
07م (بورنجر إنجلهايم ‎«(Boehringer Ingelheim‏ طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎١7/٠00١8456 AL‏ و طلب براءة الاختراع الدولي رقم
2م ‎١7/٠٠١88١‏ (كلاهما باسم شير ‎«(Shire‏ ‏طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎١7/851977 AL‏ و طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎١7/09/8474 Al‏ ( كلاهما باسم جي أس كيه ‎(GSK‏ ‏طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎٠0/068679‏ و طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎٠ Y/ IY ET AL Y.‏ (كلاهما باسم ميرك ‎«(Merck‏ ‏طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎١1/474887‏ و طلب براءة الاختراع الدولي رقم 0/4 (كلاهما باسم شركة توباكو اليابانية ‎Tobacco‏ 20م1) و براءة الاختراع الأوروبية رقم ‎١ YOU 748 AD‏ (باسم أغورون 4800:00). وعلاوة على ذلك تتضمن ‎Lal‏ مثبطات أخرى بوليمراز ل ‎HCV‏ مثبطات ‎ve‏ ككليوزيدية مناظرة؛ على سبيل المثال؛ تلك المركبات الموصوفة في: طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎١٠/9 0171 A2‏ (باسم إدنيكس ‎((Idenix‏
\o ‏(باسم بيوكريست فارماسيوتيكلز إنك.‎ ٠ ‏طلب براءة الاختراع الدولي رقم 2م 144567 ل‎ ‏6و‎ (Biocryst Pharmaceuticals Inc. ‏و طلب براءة الاختراع الدولي رقم‎ Y[0OVYAY AD ‏طلب براءة الاختراع الدولي رقم‎ ‏(كلاهما باسم ميرك/ أيسز وزقالاء:146).‎ ١7/١ 5097475 A2
JTK-002 ٠٠7-هيك ‏جيه تي‎ HCV ‏وتشتمل أمثلة محددة على مثبطات بوليمراز ل‎ ° ‏و جيه تي كيه-4١٠ 176-109 (باسم شركة توباكو اليابانية‎ JTK-003 ‏جيه تي كيه-7©‎ . (Vapan Tobacco ‏كما استخدم‎ "HCV ‏بالمصطلح 'مثبط لمادة مستهدفة أخرى في دورة حياة‎ sai “yg ‏تضاعف‎ off yg ‏في تثبيط تشكل‎ JU 3d ‏في هذا البيان عامل (مركب أو عامل حيوي)‎
HCV ‏أو بوليمراز ل‎ HOV ‏في ثديي بطريقة غير تثبيط وظيفة بروتياز 1153 ل‎ 1107# - ٠ ‏ضرورية‎ HOV ‏ويشمل هذا المصطلح عوامل تتداخل مع آليات عائلة أو فيروسية ل‎ ‏في ثديي. وتشمل مثبطات لمادة مستهدفة أخرى في دورة حياة‎ HOV ‏لتشكّل و/أو تضاعف‎ 1152/3 ‏من هليكازء بروتياز‎ Ua 73 ‏مستهدفة‎ sale ‏على سبيل المثال؛ عوامل تثشبط‎ HCV ‏وتشمل‎ ٠ (IRES) internal ribosomal entry site ‏ل 1107 ومثبط لموقع دخول ريبوسوم داخلي‎ ١7/٠0 ‏جيه تي كيه-7‎ HOV lia ‏أمثلة خاصة لمثبطات مادة مستهدفة أخرى في دورة‎ ١ ١80 ‏وآي إس أي إس-7‎ (Japan Tobacco ‏(من شركة توباكو اليابانية‎ 1114-2 (ISIS Pharmaceuticals ‏(من شركة أي إس أي إس فارماسيوتيكالز‎ 1515-3 ‏(فيروس نقص المناعة البشرية‎ HIV ‏ويتقصد بالمصطلح "مشبط‎ ‏كما استخدم في هذا البيان عوامل (مركبات أو عوامل‎ "(human immunodeficiency virus ‏في ثديي. ويشمل هذا المصطلح‎ HIV ‏فعّالة في تثبيط تشكسّل و/أو تتضاعف‎ (gn. ‏عوامل تتداخل مع آليات عائلة أو فيروسية ضرورية لتشكّل و/أو تضاعف 1117 في تديي.‎ ‏متبطات غير‎ cnucleosidic ‏مثبطات نكليوزيدية‎ (JE ‏على سبيل‎ HIV ‏وتشمل مثبطات‎ ‏ومثبطات‎ fusion ‏مثبطات بروتياز 00686 مثبطات اندماجية‎ cnon-nucleosidic ‏نكليوزيدية‎ ‎.integrase ‏إنتجراز‎ ‏كما استخدم في هذا‎ (A ‏(فيروس التهاب الكبد‎ HAV ‏بالمصطلح 'مثبط‎ sal * Yo ‏تتضاعف 118417 في‎ ff 3 ‏البيان عامل (مركب أو عامل حيوي) فعّال في تثبيط تشكّل‎
ثديي . ويشمل هذا المصطلح عوامل تتداخل مع آليات عائلة أو فيروسية ضرورية ‎JCal‏ ‏و/أو تضاعف 11817 في تديي. وتشمل مثبطات ‎HAV‏ لقاحات ‎vaccines‏ التهاب الكبد ‎A‏ على سبيل المثال؛ هافريكس (علامة تجارية مسجلة) 11»»»8 (من شركة جلاكسو سميث كلين ‎(GlaxoSmithKline‏ فاكتا (علامة تجارية مسجلة) ‎VAQTA®‏ (إمن شركة ميرك ‎(Merck‏
° وأفاكسيم (علامة تجارية مسجلة) ‎Avaxim®‏ (من شركة أفينتيس باستور ‎(Aventis Pasteur‏ . ويقصد بالمصطلح "'مثبط ‎HBV‏ (فيروس التهاب الكبد 8)' كما استخدم في هذا البيان عامل (مركب أو عامل حيوي) فعال في تثبيط تشكل و/أو تضاعف 1197 في ثديي. ويشمل هذا المصطلح عوامل تتداخل مع آليات ‎Alle‏ أو فيروسية ضرورية لتشكتّل و/أو تضاعف ‎HBV‏ في ثديي. وتشمل مثبطات ‎HBV‏ على سبيل ‎(JB‏ عوامل تشبط بوليمراز ‎DNA ٠‏ (الحمض الريبي النووي منقوص الأكسجين ‎(deoxyribonucleic acid‏ الفيروسي ل ‎HBV‏ ‏أو لقاحات ‎(HBV‏ وتشمل أمثلة خاصة لمثبطات ‎HBV‏ لاميفودين ‎Lamivudine‏ (إبيفير-اتسش بي في (علامة تجارية مسجلة) ‎(Epivir-HBV®‏ أديفوفير ديبيفوكسيل ‎«Adefovir Dipivoxil‏ إنتكافير ‎¢Entecavir‏ إف تي سي ‎FTC‏ (كوفيراسيل ‎dade)‏ تجارية مسجلة) ©611ه::00)؛ دي إيه بيه دي (دي إكس جي) ‎<DAPD (DXG)‏ إل-إف إم إيه يو ‎LFMAU‏ (كليفودين (علامة ‎Vo‏ تجارية مسجلة) ‎¢(Clevudine®‏ إيه إم ‎AM365 Yo‏ (أمراد ‎¢«(Amrad‏ إل دي تي ‎Ldt‏ ‏(تلبيفودين ‎«(Telbivudine‏ موتوفال-إل دي سي ‎monoval-LdC‏ (فالتورسيتابين ‎«(Valtorcitabine‏ ‏إيه سي اتش-76,447١‏ (إل-إف دي ؛ سي) (أشيليون) ‎ACH-126,443 (L-FA4C)‏ («دنللنطءه)؛ إم سي سي ‎VA‏ 1400478 (من شركة ايلي ليلي ‎«(Eli Lilly‏ راسيفير ‎Racivir‏ ‏(أر سي في ‎((RCV‏ مركبات فلورو-1 ‎Fluoro-L‏ و 7-نكليوزيد ‎«D nucleosides‏ ‎ Y.‏ روبستافلافون ‎«Robustaflavone‏ أي سي إن ‎(ICN) ICN 2001-3 7-7٠١١‏ بام ‎٠١١‏ ‎Bam 5‏ (نوفيلوس ‎¢(Novelos‏ إكس تي إل-٠0٠٠ ‎¢(XTL) XTL-001‏ إيمينو-شوجارز ‎Imino-Sugars‏ (نونيل-دي إن جيه ‎(Nonyl-DNJ‏ (سنيرجي ‎«(Synergy‏ هب بزيم ‎¢HepBzyme‏ ‏ومنتجات ‎AD aa‏ للمناعة مثل: إنترفيرون من نوع ألفا "ب ‎«interferon alpha 2b‏ إتش ني ‎Jal sa) HE2000 ٠٠‏ -إيدن ‎«(Hollis-Eden‏ ثيراديجم ‎Theradigm‏ (إبيميون ‎«(Epimmune‏ تي ‎ve‏ إتش تي ‎EHT899 A44‏ (من شركة إنزوبيوكيم ‎«(Enzo Biochem‏ ثيموسين أألفا- ‎١‏ ‎Thymosin alpha-1‏ (زاداكسين (علامة تجارية مسجلة) ‎«(Zadaxin®‏ لقاح ‎DNA‏ ل ‎HBV‏ (من
لاا شركة باودر جيكت ‎DNA cu ‘ (PowderJect‏ ل ‎HBV‏ (من شركة جفرون ستر ‎«(Jefferon Center‏ مولد مضاد ‎antigen‏ ل ‎HBV‏ (من شركة أوراجين ‎((OraGen‏ باي هب بي (علامة تجارية مسجلة) ‎BayHep B®‏ (من شركة باير ‎(Bayer‏ نابي-إتش بي (علامة تجارية مسجلة) ‎Nabi-HB®‏ (من شركة نابي ‎(Nabi‏ ومضاد لالتهاب الكبد ‎Anti-hepatitis 18 B‏ (إمن شركة كانجين ‎¢(Cangene‏ ومنتجات لقاح ‎HBV‏ مثل ما يلي: إنجيريكس بي ‎«Engerix B‏ ريكومبيفاكس إتش بي ‎«Recombivax HB‏ جن هيفاك بي ‎«GenHevac B‏ هيباكير ‎«Hepacare‏ ‎«Bio-Hep B RTs‏ توين ركس ‎«TwinRix‏ كومفاكس ‎«Comvax‏ هكسافاك ‎-Hexavac‏ ‏ويقصد بالمصطلح "إنترفيرون ‎interferon‏ )34 1" كما استخدم في هذا البيان إنترفيرون ‎interferon‏ يتُختار من فئة إنترفيرونات ‎interferons‏ ترتبط جميعها بمستقبل ‎receptor‏ من ‎٠١‏ النوع 1. ويشمل هذا المصطلح كل من إنترفيرونات ‎interferons‏ الفئة 1 المنتجة طبيعياً ‎naturally‏ واصطناعياً ‎.synthetically‏ وتشمل أمثلة إنترفيرونات ‎interferons‏ الفئة 1 من النوع ألفا-- -»؛ بيتا- -8» أوميجا ‎comega‏ تاو ‎ctau-‏ إنترفيرونات توافقية ‎«consensus interferons‏ وإنترفيرونات تفتقر إلى مجموعة حمض السياليك ‎.asialo-interferons‏ ‎sat Zo‏ بالمصطلح "إنترفيرون ‎IT Ad) interferon‏ كما استخدم في هذا البيان ‎Vo‏ إنترفيرون ‎interferon‏ يتُختار من 4% إنترفيرونات ‎interferons‏ ترتبط جميعها بمستقبل من النوع 1. وتشمل أمثلة إنترفيرونات ‎interferons‏ الفئة 11 غاما-إنترفيرونات ‎-y-interferons‏ ‏ويمكن أن تحتوي التراكيب الصيدلية وفقاً للاختراع على عامل فعّال ‎active agent‏ إضافي واحد أو ‎Af‏ يُختارء؛ على سبيل المثال؛ من عوامل مضادة ‎clu pill‏ عوامل معدلة للمناعة؛ مثبطات أخرى لبروتياز 1153 ل ‎(HCV‏ مثبطات لمادة مستهدفة أخرى في © > دورة حياة ‎¢HCV‏ مثبطات ‎(HIV‏ مثبطات ‎HAV‏ ومثبطات ‎HBV‏ وتزود أمثلة ‎Jal gad‏ من هذا القبيل في قسم التعريفات أعلاه. وتذكر أدناه أمثلة خاصة مفضلة لبعض هذه العوامل: عوامل مضادة للفيروسات: ريبافيرين ‎ribavirin‏ وأمانتادين ‎tamantadine‏ ‏كه عوامل معدلة للمناعة: إنترفيرونات ‎interferons‏ الفثة ‎«I‏ إنترفيرونات ‎interferons‏ الفئة ‎Yo‏ 11 وإنترفيرونات مضاف إليها غليكول متعدد إثيلين ‎tpegylated interferons‏ +
ا ‎٠‏ مثبط لمادة مستهدفة أخرى في دورة حياة ‎HOV‏ يثبط مادة مستهدفة تُؤشختار من: هليكاز ‎«NS3‏ بروتياز 1452/3 ل ‎HOV‏ أو موقع دخول ريبوسوم داخلي ‎¢(IRES)‏ ‏= مثبطات 1117: مثبطات نكليوزيدية :0061:0511 مثبطات غير ‎Ayal‏ ‎cnon-nucleosidic‏ مثبطات بروتياز ‎protease‏ مثبطات اندماجية ومثبطات انتجراز ‎¢integrase °‏ أو ‎٠‏ مثبطات ‎tHBV‏ عوامل تثبط بوليمراز ‎DNA‏ الفيروسي ل ‎HBV‏ أو لقاح ‎HBV‏ ‏وكما ذكر أعلاه؛ يتضمن الاختراع علاج مؤتلف حيث يُبعطى مركب بالصيغة ‎١‏ 1 أو ملح مقبول صيدليا منه؛ إسهامياً ‎co-administered‏ مع عامل إضافي واحد على الأقل ‎Jaa”‏ من: عامل مضاد للفيروسات؛ عامل معدل للمناعة؛ مثبط ‎Jal‏ لبروتياز 1153 ‎٠‏ ال ‎(HCV‏ مثبط لمادة مستهدفة أخرى في دورة حياة ‎(HCV‏ مثبط ‎(HIV‏ مثبط ‎HAV‏ ومثبط ‎(HBV‏ وتزود أمثلة لعوامل من هذا القبيل في قسم التعريفات أعلاه. ويمكن أن تخلط هذه العوامل الإضافية مع المركبات وفقآً لهذا الاختراع لتكوين شكل ‎do ja‏ صيدلية مفردة ‎pharmaceutical dosage‏ 16ع5108. وبشكلٍ بديل» يمكن إعطاء هذه العوامل الإضافية ‎(JCS‏ منفصل إلى المريض كجزء من شكل ‎de ja‏ متعددة ‎multiple dosage form‏ على سبيل ‎(Jal‏ ‎ve‏ باستخدام طقم ‎kit‏ ويمكن إعطاء عوامل إضافية من هذا القبيل إلى المريض قبل؛ في نفس وقت أو بعد إعطاء المركب بالصيغة ‎)١(‏ أو ملحه المقبول صيدلياً. وكما استخدم في هذا البيان» يقصد بالمصطلح 'معالجة" إعطاء مركب أو تركيب ‎lay‏ ‏للاختراع الراهن لتخفيف أو التخلص من أعراض مرض التهاب الكبد © و/أو تقليل الحمل الفيروسي ‎viral load‏ في مريض. ‎Ye‏ وكما استخدم في هذا ‎(all‏ يقصد بالمصطلح 'وقاية ‎"prevention‏ إعطاء مركب أو تركيب وفقآ للاختراع الراهن بعد تعرض الشخص للفيروس لكن قبل ظهور أعراض المرض؛ و/أو قبل الكشف عن الفيروس في الدم. التجسيدات المفضلة تفضل؛ مركبات بالصيغة ‎)١(‏ كما عرفت أعلاه ‎Cua‏ ل8 يمثل هيدروكسي ‎hydroxy‏ ‎<(NHSOMe vo‏ بروبيل حلقي-,11150 الإم0:م0ا©111180,»2 أو 107150,01. ومن الأفضل؛ أن يمثل
Ya ‏وبشكلٍ بديل؛ يكون من الأكثر تفضيلاآً أن يمثتل‎ NHSOPh ‏بروبيل حلقي-:101150 أو‎ R ‘hydroxy ‏ل هيدروكسي‎ ‏يمثل بنتيل حلقي‎ R? ‏كما عرفت أعلاه حيث‎ )١( ‏وتفضل؛ مركبات بالصيغة‎ ‏بنتيل حلقي‎ R? ‏أن يمثل‎ Apa ‏والأكثر‎ cyclohexyl ‏أو هكسيل حلقي‎ cyclopentyl .cyclopentyl ° ‏والأكثر‎ cyclohexyl ‏أو هكسيل حلقي‎ t-butyl ‏ويفضل؛ أن يمثل 83 ثث-بيوتيل‎ t-butyl ‏ث-بيوتيل‎ RP ‏تفضيلا أن يمفل‎ ‏بيوتيل حلقي‎ RY ‏كما عرفت أعلاه حيث يمثل‎ )١( ‏وتفضل؛ مركبات بالصيغة‎ ‏بنتيل حلقي‎ RY ‏والأكثر تفضيلاء أن يمثل‎ cyclopentyl ‏أو بنتيل حلقي‎ cyclobutyl .cyclopentyl Ve ‏هيدروكسي‎ RY ‏أعلاه حيث يمثل‎ Ge ‏كما‎ )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ t-buty ‏ثث-بيوتيل‎ RP ‏ويمثل‎ cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ RY ‏و‎ R? ‏ويمثل كل من‎ hydroxy ‏يمثل بيوتيل‎ 82 chydroxy ‏هيدروكسي‎ Jia R' Cus )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ .cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ Jia RY ‏و‎ t-butyl ‏ثث-بيوتيل‎ Jia R? «cyclobutyl ‏حلقي‎ ‏يمتل هكسيل‎ R? chydroxy ‏هيدروكسي‎ Jia ‏ل8‎ Cua )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ .cyclopentyl ‏يمثل بنتيل حلقي‎ R* ‏و‎ t-butyl ‏يمثل ثث-بيوتيل‎ 183 «cyclohexyl ls ‏كل من 82 و 8 بنتيل حلقي‎ ia ‏وأن‎ (NHSOPh ‏والأفضل؛ أن يكون ل8 عبارة عن‎ t-butyl ‏وأن يمثل 83 ثث-بيوتيل‎ cyclopentyl ‏يمثل‎ RP chydroxy ‏والأفضلء؛ مركب بالصيغة )1( حيث 8 يمثل هيدروكسي‎ .cyclobutyl la ‏و 57 يمثل بيوتيل‎ t-butyl ‏يمتل ثث -بيوتيل‎ 83 ccyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ >. © ‏يمثل بنتيل‎ R? chydroxy ‏يمثل هيدروكسي‎ R ‏حيث‎ )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ .cyclohexyl ‏يمثل هكسيل حلقي‎ R* ‏و‎ t-butyl ‏ل يمثل ثث-بيوتيل‎ ccyclopentyl ‏حلقي‎ ‎R? ‏يمثل كل من‎ chydroxy ‏حيث يمثل 18 هيدروكسي‎ )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ .cyclohexyl ‏ويمثل 8 هكسيل حلقي‎ cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ RY ‏و‎ ‏ويمثل كل من‎ chydroxy ‏هيدروكسي‎ RY ‏حيث يمثل‎ )١( ‏والأفضل؛ مركب بالصيغة‎ Yo .cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ R* ‏تج و‎ «R?
Y.
‎Gy‏ لتجسيد ‎cin‏ يمكن أن يشتمل التركيب الصيدلي ‎Gay‏ لهذا الاختراع ‎Lad‏ على عامل آخر مضاد ل 1107. وتشمل أمثلة العوامل المضادة ل ‎HCV‏ إنترفيرون ‎interferon‏ ‏من نوع »-(ألفا ‎«(alpha‏ م-(بيتا ‎«(beta‏ ة5-(دلتا ‎(delta‏ ,-(غاما ‎«(gamma‏ ©-(أوميغا ‎«(omega‏ ريبافيرين مصنسودان وأمانتادين ‎.amantadine‏
‏:ٍ ووفقا لتجسيد بديل آخرء يمكن أن يشتمل التركيب الصيدلي وفقا لهذا الاختراع أيضا
‏على مثبط آخر لبروتياز 1153 ل ‎HCV‏
‎Gay‏ لتجسيد بديل آخر ‎clad‏ يمكن أن يشتمل التركيب الصيدلي ‎Gay‏ لهذا الاختراع ‎La‏ على مثبط لمواد مستهدفة أخرى في دورة حياة ‎HOV‏ بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر هليكاز» بروتياز 1152/3 أو موقع دخول ريبوسوم داخلي ‎(IRES)‏
‏0 ويمكن أن يُعطى التركيب الصيدلي ‎iy‏ لهذا الاختراع عن طريق القم والة:ه أو عن طريق غير معوي ‎parenterally‏ أو بواسطة خزان مغروز ‎reservoir‏ 10(0120160. ويفضل الإعطاء عن طريق الفم أو بالحقن ‎injection‏ ويمكن أن يحتوي التركيب الصيدلي وفقآً لهذا الاختراع على أية مواد حاملة ‎carriers‏ مواد مساعدة ‎adjuvants‏ أو سواغات ‎vehicles‏ مقبولة صيدليا غير سامة تقليدية. وفي بعض الحالات؛ يمكن ضبط درجة الحموضة ‎pH‏ للتركيبة
‎١‏ - باستخدام أحماض؛ قواعد أو عوامل منظمة لدرجة الحموضة ‎buffers‏ مقبولة صيدلياً لتعزيز ثبات ‎stability‏ المركب المشكّل أو صورة إعطائه. ويشمل المصطلح إعطاء عن طريق غير معوي كما استخدم في هذا البيان تقنيات حقن أو تسريب ‎infusion‏ تحت الجلد ‎«subcutaneous‏ ‏داخل الجلد ‎cintracutaneous‏ في الوريد ‎cintravenous‏ في العضل ‎cintramuscular‏ في المفصل ‎intra-articular‏ في التجويف الزلالي ‎cintrasynovial‏ في القص ‎cintrasternal‏ داخل الغمد
‎.intralesional ‏وفي الأنسجة‎ intrathecal ٠
‏ويمكن أن يكون التركيب الصيدلي في صورة مستحضر قابل للحقن معقم ‎«sterile injectable preparation‏ على سبيل المثال في صورة معلق مائي ‎aqueous‏ أو زيتي ‎oleaginous‏ قابل للحقن معقم. ويمكن أن يشكل هذا المعلق ‎Why‏ لتقنيات معروفة في التقنية باستخدام عوامل تشتيت ‎dispersing‏ أو ترطيب ‎wetting‏ ملائمة (مثل؛ على سبيل المثال؛ ‎Yo‏ توين ‎(Tween 80 Av‏ وعوامل تعليق ‎.suspending agents‏
نص ويمكن أن ييُعطى التركيب الصيدلي ‎Gay‏ لهذا الاختراع عن طريق الفم بأية صورة للجرعة مقبولة للإعطاء عن طريق الفم وتشمل على سبيل المثال لا الحصر كبسولات ‎capsules‏ أقراص ‎tablets‏ ومعلقات ومحاليل مائية. وفي حالة الأقراص للاستخدام عن طريق ‎cal‏ تشمل المواد الحاملة التي تستخدم عادة لاكتوز ‎lactose‏ ونشا الذرة ‎.corn starch‏ كما ° تضاف عادة عوامل تزليق ‎Jie lubricating agents‏ ستيارات المغنيسيوم ‎.magnesium stearate‏ وللإعطاء عن طريق الفم في صورة كبسولة؛ تشمل المواد المخففة ‎diluents‏ المفيدة اللاكتوز ‎lactose‏ ونشا الذرة المجفف. وعندما تعطى معلقات مائية عن طريق الفم؛ يخلط المقوم الفعال ‎active ingredient‏ مع عوامل استحلاب ‎emulsifying‏ وعوامل تعليق ‎suspending‏ ويمكن إضافة ‎Jal so‏ تحلية ‎sweetening‏ و/أو إضفاء نكهة ‎flavoring‏ و/أو تلوين ‎coloring‏ معينة ‎٠‏ حسب الرغبة. ويمكن إيجاد سواغات أو مواد حاملة ملائمة أخرى للتركيبات والتراكيب المذكورة أعلاه في كتب صيدلية قياسية ‎Mia‏ في كتاب ‎Remington's Pharmaceutical Sciences’‏ "¢ في مقالة بعنوان ‎The Science and Practice of Pharmacy, Ed.
Mack Publishing Company, Easton,‏ ‎Pa., (1995)‏ وتعتبر مستويات الجرعة التي تكون بين حوالي ‎00٠‏ وحوالي ‎٠٠١‏ ملغم/كغم ‎mg/kg‏ ‏من وزن الجسم لكل يوم؛ ويفضل بين حوالي ‎١١‏ وحوالي ‎٠٠‏ ملغم/كغم من وزن الجسم لكل يوم من المركب المثبط للبروتياز ‎protease‏ الموصوف في هذا البيان مفيدة في علاج أحادي ‎monotherapy‏ للوقاية من ومعالجة المرض الذي يسببه 1107. وعادة ما يعطى التركيب الصيدلي ‎Ey‏ لهذا الاختراع بمقدار يتراوح من حوالي ‎١‏ إلى حوالي © أضعاف لكل يوم؛ أو © يعطى بدلا من ذلك كتسريب متواصل. ويمكن استخدام إعطاء من هذا القبيل كعلاج للحالات المزمنة أو الحادة. ويختلف مقدار المقوم الفعال الذي يمكن أن يخلط مع المواد الحاملة لإنتاج شكل جرعة مفردة اعتماداً على العائل المعالج والأسلوب المحدد للإعطاء. ويحتوي مستحضر نموذجي على مقدار يتراوح من حوالي ‎Te‏ إلى حوالي 745 (وزن/وزن) من المركب الفعّال. ويفضل أن تحتوي مستحضرات من هذا القبيل على مقدار يتراوح من حوالي ‎77١‏ إلى حوالي ‎ve‏ 780 من المركب الفعال.
YY
‏ويدرك المتمرس بالتقنية فيما إذا كان هنالك حاجة لجرعات أقل أو أعلى من الجرعات‎ ‏المذكورة أعلاه. وتعتمد الجرعة وطرق المعالجة الخاصة لأي مريض معين على عدة‎ ‏الحالة‎ body weight ‏وزن الجسم‎ cage ‏فعالية المركب الخاص المستخدم؛ العمر‎ Joli ‏عوامل‎ ‏زمن الإعطاء‎ diet ‏النظام الغذامي‎ sex ‏الجنس‎ cgeneral health status ‏الصحية العامة‎ «drug combination ‏توليفة العقار‎ crate of excretion ‏معدل الإخراج‎ ctime of administration ° ‏وحكم الطبيب‎ patient's disposition ‏وتقدم العدوى؛ استعداد المريض للعدوى‎ severity ‏شدة‎ ‏المعالج. وعادة ما تبدأ المعالجة بجرعات صغيرة أقل بصفة جوهرية من الجرعة المثلى للببتيد‎ ‏تزداد الجرعة بمقادير تزايدية صغيرة حتى الوصول إلى التأثير الأمثل‎ cell ‏وبعد‎ peptide ‏في هذه الظروف. وعموماء من المرغوب بدرجة كبيرة إعطاء المركب بمستوى تركيز يكفل‎ ‏تأثيرات جانبية مؤذية أو ضارة.‎ A Gas) ‏ضد الفيروسات بدون‎ Aled ‏عادةً نتائج‎ ‏وعامل‎ )١( ‏وعندما يشتمل تركيب هذا الاختراع على توليفة من مركب بالصيغة‎ ‏علاجي أو وقائي إضافي واحد أو أكثر؛ ينبغي أن يوجد كل من المركب والعامل الإضافي‎ ‏والأفضل مستويات جرعة بين حوالي‎ 7٠00 ‏إلى‎ ٠١ ‏بمستويات جرعة تتراوح من حوالي‎ ‏و 780 من الجرعة التي تعطى عادة في طريقة المعالجة الأحادية.‎ ٠ ‏وعندما تشكّل هذه المركبات أو أملاحها المقبولة صيدلياً مع مادة حاملة مقبولة‎ Vo 1153 ‏صيدلياً» يمكن أن يعطى التركيب الناتج داخل جسم ثديي؛ مثل البشرء لتثبيط بروتياز‎ ‏تحقيق معالجة من هذا‎ (Say ‏أو لمعالجة أو الوقاية من الإصابة ببفيروس 1107. كما‎ HOV ‏ل‎ ‏القبيل باستخدام مركب وفقاً لهذا الاختراع في توليفة مع عوامل تشمل على سبيل المثال لا‎ ‏ريبافيرين‎ o- We ‏بيتا- -8؛ دلتا- -5؛ أوميغا- -» أو‎ ca ‏الحصر: إترفيرون من النوع ألفا-‎ ‏مثبطات أخرى لبروتياز 1453 ل 1107؛مثبطات بوليمراز‎ amantadine ‏أمانتادين‎ eribavirin ~~ v. ‏تشمل على سبيل المثال لا‎ HOV ‏ل 1107 مثبطات لمواد مستهدفة أخرى في دورة حياة‎ ‏الحصر هليكاز؛ بروتياز 1152/3 أو موقع دخول ريبوسوم داخلي (18255) أو توليفة منها.‎ ‏ويمكن خلط العوامل الإضافية مع مركبات هذا الاختراع لإنتاج شكل جرعة مفردة. ويمكن‎ ‏بدلا من ذلك إعطاء هذه العوامل الإضافية بشكل منفصل إلى ثديي كجزء من شكل جرعة‎ ‏متعددة.‎ Yo yy
NS3 ‏لهذا الاختراع طريقة لتثبيط فعالية بروتياز‎ lady AT ‏ووفقآً لذلك» يزود تجسيد‎ .١ ‏ل 1107 في ثديي بإعطاء مركب بالصيغة‎ 1153 ‏وفي تجسيد مفضل؛ تعتبر هذه الطريقة مفيدة في تقليل فعالية بروتياز‎ rd ‏لفيروس التهاب الكبد © الذي يصيب‎ ‏وإذا اشتمل التركيب الصيدلي على مركب هذا الاختراع فقط بصفته المكون الفعال؛‎ ‏خطوة إعطاء الثديي المذكور عامل يختار من‎ Caf ‏يمكن أن تتضمن طريقة من هذا القبيل‎ ‏عامل معدل للمناعة؛ عامل مضاد للفيروسات»؛ مثبط لبروتياز 1153 ل 1107, مثبط بوليمراز‎ .18255 ‏بروتياز 1153/2 أو‎ «Sila Jia HOV ‏ل 1107 أو مثبط لمواد مستهدفة في دورة حياة‎ ‏ويمكن أن يعطى عامل إضافي من هذا القبيل إلى الثديي قبل أو في نفس وقت؛ أو بعد إعطاء‎ ‏لهذا الاختراع.‎ Gay ‏التركيب‎ ٠ ‏موصوف في هذا البيان أدناه كمادة مفاعلة‎ ١ ‏كما يمكن أن يستخدم مركب بالصيغة‎ ‏ويمكن أن يستخدم مركب هذا الاختراع أيضاً لمعالجة أو الوقاية‎ laboratory reagent ‏مخبرية‎ ‏للمواد ومن ثم يقلل من خطر الإصابة بالعدوى‎ viral contamination ‏من التلوث الفيروسي‎ ‏لموظفي أو مرضى المختبرات أو المعالجة الطبية الذين على اتصال‎ viral infection ‏الفيروسية‎ ‏أدوات وأثواب الجراحة‎ tissue ‏الأنسجة‎ cblood ‏الدم‎ Jie) of gall ‏مباشر مع مثل هذه‎ 00 ‏أدوات وأثواب المختبرات وأجهزة ومواد جمع الدم‎ csurgical instruments and garments . (blood collection ‏موصوف في هذا البيان أدناه كمادة مفاعلة‎ ١ ‏كما يمكن أن يستخدم مركب بالصيغة‎ positive control ‏كضابط إيجابي‎ Lind ١ ‏للبحث العلمي. ويمكن أن يستخدم مركب بالصيغة‎ ‏أو معايرات تضاعف فيروسية‎ surrogate cell-based assays Aba ‏لإثبات معايرات أساسها خلايا‎ Y. ‏الجسم الحي.‎ Jala ‏في أنبوب الاختبار أو‎ viral replication assays ‏بأنها غير‎ ag 75 ‏للاختراع في الأمثلة التالية التي‎ Gy ‏وتبين تفاصيل أخرى‎ ‏محددة لعناصر الحماية الملحقة.‎ ‏المنهجية‎ ‎cintermediates ‏عام؛ تحضّر المركبات بالصيغة ١؛ ومركباتها الوسيطة‎ dag Yo reactants ‏بطرق معروفة باستخدام ظروف تفاعل تعرف بكونها ملائمة للمواد المتفاعلة‎
Ye 046547 ‏وتوصف طرق متعددة من هذا القبيل في طلبي براءتي الاختراع الدوليتين رقم‎ ‏وبراءة الاختراع الأمريكية رقم 177717856 المدمجة في هذا البيان للإحالة‎ ٠١/١95858 ‏و‎ ‏إليها كمرجع.‎ ‏كما عرف في هذا البيان‎ NHSOR™ ‏وتحضس_ّر مركبات بالصيغة 1 حيث 8 يمثل‎ ‏مع‎ (hydroxy ‏(أي ل يمثل هيدروكسي‎ I ‏بالصيغة‎ correspondindg acid ‏بقرن الحمض المقابل‎ © coupling agent (UE ‏في وجود عامل‎ RSONH, ‏مناسب بالصيغة‎ sulfonamide ‏كبريتوناميد‎ ‏في ظروف قياسية. وبالرغم من إمكانية استخدام عوامل تقارن عديدة مستخدمة عادة؛ وجد أن‎ ‏تجارياً أو يمكن‎ sulfonamides ‏عمليان. وتتوفر مركبات الكبريتوناميد‎ HATU ‏و‎ 0 ‏تحضيرها بطرق معروفة.‎ ‏ويوضح المخططان التاليان عمليتين مناسبتين باستخدام طرق معروفة لتحضير‎ Ve
OH ‏يمثل‎ R! ‏حيث‎ ١ ‏المركبات بالصيغة‎ yaar
Yo :١ ‏المخطط‎ ‎Q ‏3ج‎ ‎RY Je OH + ~ x 0 ‏ار‎ ‎H 06
NH O=X od 0 ‏()م.‎ ‎oO ‎em ‎HCI N
OMe
N
4 H 0 0 0 .) ‏مل(‎ ‎0 ‎0 R? ‏جب‎ ‎RY PY N ~
X N Ar OMe
I N
H 0 & H 0 iv
OH
0 R?
R? PY N: + ~ x Ar OMe
H 0 J N 0 fv 0
MeO. N. =x OMe
FF ee
OH
9
A!
MeO
N 0
A
0 Si OMe 0 ‏3ج‎ — ‏اه‎ ‎1 J N ~
X N Ar OMe
N
H 0 4 H 0 iv.
MeO
Oye 9 Br + 0 ‏3ج‎ ‎RY J N >
X N Ae OMe
N
H 6 4 H 0 ‏أ‎ ‏ل‎ 12 = ‏يت‎ ‎NH. ‎MeO ‎N N R—re pas
J ‏بت‎ 5 0 RY ‏جع‎ JY N ‏و‎ ‎x Ay Ca
N
H 06 4 H 6
OH ‏يمثل‎ R' ‏مركبات بالصيغة | حيث‎
)
Yv ‏المخطط ؟:‎ 0
MeO. N x OMe
LF
O _
BocN
SC
0 N
H
0
Ve 0
MeO N, Br ‏جح‎ ‏ا‎ ‎° +
BocN. 0 N
H
0
YA
H— R? ‏هيب ا‎ 112
A
H
N—R?
N 2 0 R3
Vico. N= RY, ML Nr oH = 0 = H 6 8 NH:O =X
O © ‏؛ أو‎ - : ‏ل‎ ٍ OMe 0 N
H
0 7 ‏ل‎
YA
Hr:
N ~
MeO NN — = 9 ‏الو‎ ‎0 Rr} 2 : rw AN ‏رطس‎ 88 ٍْ 0 OMe °° 8 0 ‏ا‎ ‎«= ‎5 ‎MeO N > > ‏ص‎ ‎0 ‏3ج‎ ّ «A AN N 0
OH ‏يمثل‎ R' ‏مركبات بالصيغة | حيث‎ ‏الأمثفلة‎ ‏تسشقاس درجات الحرارة بالدرجات المئوية. وتعبر النسب المئوية للمحاليل عن‎ ‏علاقة وزن إلى حجم » وتعبر نسب المحاليل عن علاقة حجم إلى حجم » ما لم يذكر غير ذلك.‎ ‏على‎ Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectra ‏وسجلت أطياف الرنين النووي المغنطيسي‎ ° ‏وسجلت‎ «Bruker 400 MHz spectrometer ‏ميغاهرتز‎ 40١0 ‏تردده‎ Sg ‏مطياف من نوع‎ -parts per million ‏بوحدة جزء في المليون‎ chemical shifts (5) ‏الإزاحات الكيميائية (دلتا)‎ a, (si0y) silica gel ‏على هلام السليكا‎ flash chromatography ‏وأجري الاستشراب الخاطف‎
W. C. Still et al., J. Org. Chem., ‏للاستشراب الخاطف (انظر المرجع‎ Still's ‏لتقنية ستيل‎ (1978), 43,2923 ٠ ‏وتدل المختصرات المستخدمة في الأمثلة على المعاني المذكورة بجوارها:‎
Ya ‏شائفي حلقسي‎ )١( ‏4-ديازا ]0 4؛. صفر] انديسين‎ ١ :DBU ‏أزو‎ :DIAD dichloromethane ‏ثنائي كلوروميثان‎ :DCM «¢1,8-diazabicyclo[5.4.0Jundec-7-ene
ثنائي كربوكسيلات ثنائي أيزوبروبيل ‎tdiisopropylazodicarboxylate‏ 0188 : ثنائي أيزوبروبيل
إثهل أمين ‎:DIPEA tdiisopropylethylamine‏ ثتنائي أيزوبروبيل إقيل أمين ‎EN «N :DMF tdiisopropylethyl amine °‏ مثيل فورماميد ‎«N,N-dimethylformamide‏
‎:DMAP‏ ¢ -) ثنائي مثيل أمينو) بيريدين ‎(EtOAc ¢4-(dimethylamino) pyridine‏ أسيتات إثيل
‎YF A —(( ١ ) ‏نتتمة: [(إسداسي فلوروفسفات 7-0-أزابنزوتريازوليل‎ tethyl acetate
‏رباعي مثيسل يورونثنيوم] ‎[O-7-azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium‏
‎high performance liquid ‏استشراب بسائل عالي الأداء‎ HPLC ¢hexafluorophosphate] ‏تأين‎ MALDI-TOF) mass spectrometry ‏مطيف الكتلة‎ :MS ¢chromatography ve
‏بالامتصاص الثنائي لأشعة الليزر بمساعدة مصفوفة-زمن الطيران ‎Matrix Assisted Laser‏
‎Fast Atom ‏القذف الذري السريع‎ :FAB ¢Disorption Ionization-Time Of Flight
‎(Bombardment‏ ؛ ‎Me‏ مثيل ‎:MeOH ¢methyl‏ ميثانول ‎R.T ‘phenyl Jud Ph ¢methanol‏ درجة
‏حرارة الغرفة هي درجة الحرارة التي تتراوح من ‎١8‏ إلى 77م ثث-بيوتيل ‎tbutyl‏ أو ‎Vo‏ ثلاثي-بيوتيل ‎tert-butyl‏ ١٠١٠-ثنائي‏ مثيل إثيل ‎Thy ¢1,1-dimethylethyl‏ ثث-بيوتيل
‎—Y ‏رباعي فلوروبورات‎ :1311[ ‘tert-leucine ‏ثث-لوسين‎ TL Stert-butyl glycine ‏غليسين‎
‎2-(1H-benzotriazole-1-yl)- ‏؟ء ١-رباعي مثيل يورونيوم‎ ٠٠ -)) ١ ) ليلوزايرتوزنب-11١‎ )
‎trifluoroacetic ‏حمض ثلاثي فلوروأستيك‎ (TFA ¢1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate
‏10 ؛ ‎THF‏ رباعي هيدروفوران ‎tetrahydrofuran‏ 806: ثث-بيوتيلوكسي كربونيل ‎.stert-butyloxycarbonyl Y.‏
‏وفي أطياف الرنين النووي المغناطيسي تستعمل الرموز الآتية:
‎'H Nuclear Magnetic Resonance ‏:الرنين النووي المغناطيسي البروتوني‎ 1178
‏5: طيف مفرد 1 ‎m‏ طيف متعدد ‎multiplet‏ ل طيف مزدوج ‎br «douplet‏ طيف عريض
‎molecular weight ‏الصيغة الجزيئية‎ M ‏الكتلة/شحنة الأيون»‎ m/z ‏معامل الاقتران؛‎ J cbroad ‏تُستخدم الرموز التالية:‎ (MS) ‏وفي مقياس طيف الكتلة‎ Yo
‎=est‏ رش بالإلكترونات (تأين موجب)
‎yaa v. ‏رش بالإلكترونات (تأين سالب)‎ =es- :)1( ‏تخليق مركبات بالصيغة‎ ‏و؟-‎ ( Y ‏(المخطط‎ ( Vo ) ‏الوسيط‎ dipeptide ‏ثم تخليق مركب ثنائي الببتيد‎ 2-carbomethoxy-4-hydroxy-7- ‏كربومثشوكسي -؛ -هيدروكسي-7 -مثوكسي كينولين‎ ‏وفقاً للطرق الموصوفة في طلب براءة الاختراع الدولية‎ )١ ‏(المخطط‎ (4) methoxyquinoline °
Lee / ٠ 9 ‏رقم 7 عت‎ )١( dipeptide ‏تخليق ثنائي الببتيد‎
OH
Se + 0 0
P2 7 > —_— ‏تحاط‎ ‎0 ‎P1 ‎OH ‎0 N > hd x) OMe 0 oO N 1 0
P2-P1
Clg ‏ملي مول) من 00-هيدروكسي‎ 7١ ) ‏غم‎ 5٠,٠ ‏مزيج من‎ 18 ‏مكافئ) من إستر مثيل فينيل-‎ ٠,١ ‏ملي مول»‎ YYA) ‏غم‎ €Y,Y0 (Boc-hydroxyproline Ve
TBTU ‏مكافئ) من‎ ١,١ ‏ملي مول؛‎ Y¥A) ‏مهارد 7,75 غم‎ methyl ester ACCA ‏عند درجة‎ DMF ‏مل (149 ملي مول؛ * مكافئ) من 01:58 في 80860 مل من‎ ١١“ ‏و‎ ‏وبعد * ساعات ونصف»؛ تم تبخير المذيب‎ nitrogen ‏حرارة الغرفة في جو من النتروجين‎ ‏وغسلت الخلاصة باستخدام حمض هيدروكلوريك‎ EtOAc ‏باستخدام‎ residue ‏واستخلص الركاز‎ saturated sodium bicarbonate ‏بيكربونات صوديوم مشبع‎ 7٠ ‏تركيزه‎ hydrochloric acid \o ‏فوق كبريتقات المغنيسيوم‎ organic phase ‏ثم جفف الطور العحضوي‎ .brine ‏وماء أجاج‎
‎«magnesium sulfate‏ رشح وبخشر فنتج زيت. وبعد التجفيف طوال الليل في خواء ‎vacuum‏ ‏شديد؛ تم الحصول على 77.0 غم من ثنائي ببتيد ‎)١( dipeptide‏ في صورة رغوة لونها أصفر (معدل الإنتاج-< 744 ونقّي المنتج بواسطة ‎HPLC‏ بنسبة تزيد عن 790( تحضير ثنائي ببتيد ‎dipeptide‏ (*) ‎OH‏ ‎N —_—‏ 0 ‎hd oo OMe‏ 2 ‎N‏ 0 0 0 ‎١ o‏ 0 ‎N‏ 0 ‎hd oN OMe‏ 1 ‎N‏ 0 0 0 7 0 10117 ‎ww OMe‏ ‎o i‏ 0 ‎v‏ ‏أذيب ‎٠‏ غم ‎YT)‏ ملي مول) من ثنائي الببتيد ‎«(V) dipeptide‏ 54 غم ‎VEY, A)‏ ملي مول؛ ‎٠,١‏ مكافئ) من ثلاثي فنيل فسفين ‎striphenylphosphine‏ و ‎0A‏ ,£1 غم ‎A)‏ ,8 ملي مول؛ ‎٠,١‏ مكافئ) من حمض ؛ -نتروبنزويك ‎4-nitrobenzoic acid‏ ‎Ve‏ في 4 لتر من ‎THF‏ جاف. وبرد المحلول المقلتب إلى درجة الصفر المثوي في جو من النتروجين ‎nitrogen‏ ثم أضيف 8 ‎YA‏ مل ‎YEE)‏ ملي مول؛ ‎٠١١7‏ مكافئ) من أزو ثنائي كربوكسيلات ثنائي إثيل ‎diethyl azodicarboxylate‏ نقطة نقطة خلال £0 دقيقة وثرك مزيج التفاعل ‎lad‏ إلى درجة حرارة الغرفة. وبعد ؛ ساعات؛ بخّر المذيب. ‎at dy‏ الركاز
إلى أربعة أجزاء. ‎Bi‏ كل جزء من هذه الأجزاء باستشراب على هلام ‎silica Solu‏ دقيق (تراوح حجم مسامه من ‎٠١‏ إلى 6 ميكرومترء قطر العمود ‎١١‏ سم؛ طول العمود سم باستخدام مزيج متدرج التركيز من هكسان ‎EtOAc/hexane‏ تدرجت نسبته من ‎٠:١‏ ‏إلى ‎١:١‏ إلى 20/6 نقي. وبهذه الكيفية؛ تم الحصول على ‎٠١8,١‏ غم من إستر ©130-ثنائي ° الببتيد ‎Boc-dipeptide ester‏ )¥( في صورة مادة صلبة لابلورية ‎amorphous‏ بيضاء اللون بعد تبخير المذيبات وتجفيف الركازات في خواء شديد عند ٠م‏ لمدة ساعة واحدة (معدل الإنتاج ‎.)7٠5 = oS)‏ وأضيف محلول من كلوريد هيدروجين ‎hydrogen chloride‏ تركيزه ؛ عياري في ديوكسان ‎dioxane‏ إلى ‎٠١8‏ غم (147 ملي مول) من إستر »80-ثنائي الببتيد ‎(Y) Boc-dipeptide ester‏ فنتج محلول عديم اللون. وقلتّب المحلول عند درجة حرارة ‎٠١‏ الغرفة لمدة ساعة واحدة. ‎Sg‏ = المذيب ووضع الركاز في خواء شديد لمدة ¥ ساعات فنتج ملح هيدروكلوريد ‎hydrochloride salt‏ للمركب (9) في صورة مادة صلبة لابلورية. واستخدمت المادة الصلبة كما هي. تخليق مركبات كربامات ‎Carbamates‏ ) ¢ تحضير كربامات ‎Carbamates‏ ( م ): 0 ‎x Sow AJ. —‏ ‎wT a‏ 0 © ‎AIX.‏ ل 1 ‎ove TT !‏ ,~~ ‎BO it ve‏ أضيف عند درجة الصفر المئوي؛ 00,+ مل ‎1,EY)‏ ملي مول) من كلوروفورمات فينيل ‎vinylchloroformate‏ و ‎٠١٠9‏ مل ‎AYO)‏ ملي مول) من ثلاني ‎Cal J‏ ‎triethylamine‏ إلى محلول من ‎٠0‏ ملغم ‎¥,Y0)‏ ملي مول) من إستر مثيل ثث-بيوتيل غلبسين ‎tert-butyl glycine methyl ester‏ في ‎A‏ مل من ‎THF‏ وتشركت درجة الحرارة ترتفع إلى ‎Aa.‏ حرارة الغرفة. وقلتب المحلول لمدة ‎١١‏ ساعة. وركّز المحلول وأذيب الركاز في ‎.EtOAc‏ وغسل محلول ‎EtOAc‏ مرتين باستخدام محلول مائي من حمض سيتريك
YY
‏في كل مرة‎ NaHCO; ‏مرة؛ مرتين بمحلول مائي مشبع من‎ JS ‏في‎ ٠١ ‏تركيزه‎ citric acid ‏المقابل في‎ vinyl carbamate ‏من كربامات الفينيل‎ pile Te A ‏وماء أجاج؛ جفف وركّز فنتج‎ ‏برد عند درجة الصفر‎ DOM ‏صورة زيت عديم اللون. وأذيب الزيت في ؛ مل من‎ diiodomethane ‏ملي مول) من ثنائي يودوميثان‎ VAT) ‏مل‎ ١.159 ‏وأضيف‎ og gil
Gogh ‏وفي البداية‎ diethylzine ‏و 4# ميكرولتر )4+ ملي مول) من ثنائي إثيل خارصين‎ ly ‏مادة صلبة بيضاء اللون لكن ذابت في غضون ساعة واحدة تقريباً.‎ ‏المعلتق/المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة © ساعات. وأضيف محلول مشبع من‎ ‏في كل‎ EtOAc ‏واستخلص المحلول مرتين باستخدام‎ ammonium chloride ‏كلوريد الأمونيوم‎ ‏الركاز باستشراب‎ By ‏مرة. وجففت الخلاصة العضوية فوق ,14850 وركّتزت.‎ ‏بنسبة‎ EtOAc/hexane ‏عمودي خاطف. ونتج عن التصويل باستخدام مزيج من هكسان‎ ٠ ‏المقابل في صورة زيت عديم اللون (معدل‎ methyl ester ‏ملغم من إستر المثيل‎ 41 (0:40 (14 ‏الإنتاج<‎ ‏في‎ methyl ester ‏من إستر المثيل‎ (Use ‏ملغم (41© ملي‎ AF ‏وقلتب محلول من‎ ‏ملي مول) من محلول مائي من‎ VAY) ‏©؛ ملغم‎ MeOH ‏مل من‎ ١ ‏و‎ «THF ‏مل من‎ © ‏مل من الماء لمدة ؛ ساعات. وخفّف المحلول بالماء واستخلص مرتين‎ Y ‏في‎ 11017 1 ‏عياري؛‎ ١ ‏في كل مرة. وحمّض المحلول المائي بإضافة 1101 تركيزه‎ EtOAc ‏باستخدام‎ ‏في كل مرة. وجففت‎ EtOAc ‏مرتين باستخدام‎ acidic solution ‏واستخلص المحلول الحمضي‎ ‏ملغم من‎ OF ‏رششّحت وبخّخرت فنتج‎ (MgSO, ‏الخلاصات العضوية بعد مزجها فوق‎ oa of ‏المرغوب في صورة مادة صلبة لونها‎ (i £) carbamate ‏الكربامات‎ ‎(7 ‏(معدل الإنتاج-‎ | ٠ (ft) carbamate ‏تحضير كربامات‎ ‏ب"‎ ‏بل‎ ‎0 ‏لل ملي‎ y
Hoo ‏كب‎
Ye ‏إلى قارورة تحتوي على 9,060 غم )2,71 ملي مول) من‎ THF ‏مل من‎ Yoo ‏أضيف‎ ‏إستر 7+ ©-ديوكسو-‎ ccarbonicacid cyclopentyl ester ‏إستر بنتيل حلقي لحمض الكربونيك‎ ‏ملي مول) من ثث-‎ £V,0) ‏غم‎ ١7 4 52 5-dioxo-pyrrolidin-l-yl ester )١( ‏بيروليدينيل‎ ‎ital) ‏مل من الماء‎ ٠٠١ ‏فنتج معلسسق. وأضيف‎ tert-butyl glycine ‏بيوتيل غليسين‎ ‏مع التقليب الشديد. وبقي مقدار صغير من المادة الصلبة غير ذائب. ثم أضيف 17,6 مل‎ oo ‏عند‎ vo TB ‏فنتج محلول متجانس‎ triethylamine ‏ملي مول) من ثلاثي إثيل أمين‎ 4 ) ‏وخفشف الركاز المائي‎ THF ‏درجة حرارة الغرفة. وبعد ساعتين ونصف؛ بخحّر‎
NaOH ‏مل من‎ Yo ‏مل من الماء. وجُعل مزيج التفاعل قاعدياً بإضافة‎ ٠٠١ ‏باستخدام‎ ‏وغسل المحلول مرتيسن‎ .)٠١ ‏عياري (درجة الحموضة النهائية زادت عن‎ ١ ‏تركيزه‎ ‏في كل مرة وحمّض الطور المائي باستخدام حوالي‎ EtOAc ‏مل من‎ Yoo ‏باستخدام‎ ٠ ‏عياري (درجة الحموضة النهائية قلت عن ؟). واستخلص‎ ١ ‏مل من 1101 تركيزه‎ Ve ‏وجففت‎ .EtOAC ‏مل من‎ ١١٠ ‏مل ثم‎ ٠ ‏باستخدام‎ turbid solution ‏المحلول العكر‎ ‏في صورة‎ (tf) carbamate ‏غم من كربامات‎ ATA ‏وبخّرت فنتج‎ MgSO, ‏الخلاصة فوق‎ ‏مادة صلبة لونها أبيض.‎ ‏أ خرى‎ carbamate ‏بامات‎ S GUS jo ‏تحضير‎ Vo ‏باستخدام الإجراء الموصوف أعلاه وباستخدام توليفات مناسبة من ثث-بيوتيل غليسين‎ ‏أو هكسيل حلقي غليسين‎ «cyclopentyl glycine (ple ‏بنتيل حلقي‎ ctert-butyl glycine cyclopentyl ester ‏إستر بنتيل حلقي‎ ccyclobutyl ester ‏وإستر بيوتيل حلقي‎ cyclohexyl glycine —0 ١ ‏إستر‎ «carbonic acid ‏لحمض كربونيك‎ cyclohexyl ester ‏أو إستر هكسيل حلقي‎ ‏تم تحضير مركبات الكربامات‎ »2,5-0100-07170110 10-171 ester )١( ‏ديوكسو -بيروليدينيل‎ © ‏بالصيغ التالية:‎ 85
Yo 0 0
R A N OH R AA, OH
I
R= R=
R A N OH
(©) ureas ‏تحضير مركبات اليوريا‎ xX. ‏الست‎ ‎HN ‎CiH o
QW
A, OBn ‏يب‎ ‎0 ‎0 ‎AMT — § 2 0
AM a ‏ل‎ 8 0 yaar
صن
برد محلول من 00,¥ غم )1,48 ملي مول) من ملح هيدروكلوريد إستر بنزيل ثث-بيوتيل غليسين ‎tert-butyl glycine benzyl ester hydrochloride salt‏ في ‎٠٠‏ مل من ‎THF‏ ‏و ‎7,٠‏ مل ‎YEVY)‏ ملي مول) من البيريدين ‎pyridine‏ إلى درجة الصفر المئوي. وأضيف ‎٠‏ مل ‎٠١19(‏ ملي مول) من كلوروفورمات الفنيل ‎phenyl chloroformate‏ نقطة نقطة إلى المحلول المبررد. وقلتّب ‎Bled)‏ الناتج لمدة 0 دقائق عند درجة الصفر ‎og gall‏ ثم عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة ونصف. وخفف مزيج التفاعل باستخدام ‎(EtOAc‏ غسل مرتين باستخدام كل من حمض سيتريك ‎7٠١ 0 3S Jicitric acid‏ ماءء ‎NaHCO;‏ مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جفف فوق ‎MgSO,‏ رشح وبر فنتج "ا,؟ غم (فرضاً 9,84 ملي مول) من المركب الخام في صورة زيت عديم اللون تقريباًء - بمعدل إنتاج > ‎72٠٠‏ وأذيب ‎٠.0٠‏ غم (7,97 ملي ‎(Use‏ من المنتج الخام في 1,0 مل من ‎DMSO‏ وأضيف بنتيل حلقي أمين ‎cyclopentylamine‏ نقطة نقطة. وقلتب مزيج التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة £0 دقيقة. وخفف مزيج التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ وغسل الطور العضوي مرتين باستخدام كل من حمض سيتريك ‎٠ 03S jicitric acid‏ ماء؛ ‎NaHCO;‏ ‏مشبع؛ ماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ ‎iin‏ فوق ‎MgSO,‏ رشح ‎vo‏ وبخسّر فحصل على منتج ‎Jib‏ حلقي يرريا7-ع080716 ‎cyclopentyl urea-Tbg-OBn‏ الخام في صورة زيت عديم اللون تقريباً. ونقّيت المادة الخام بالاستشراب العمودي الخاطف على هلام السليكا ‎silica‏ باستخدام مزيج من هكسان ‎EtOAc thexane‏ بنسبة ‎٠:4‏ لإزالة الشوائب الأقل قطبية ‎polar impurities‏ وبنسبة 3:7 لتصويل 9776 ملغم من المنتج المنقى في صورة زيت عديم اللون غليظ القوام بمعدل إنتاج بلغ 745. وأزيلت المجموعة الواقية ‎Ye‏ 0 عن 977 ملغم ‎Y,AY)‏ ملي ‎(Use‏ من منتج إستر البنزيل ‎benzyl ester‏ باستخدام بالون مملوء بهيدروجين ‎hydrogen‏ عند درجة حرارة الغرفة في ‎VO‏ مل من إيشانول صرف ‎absolute ethanol‏ عن طريق تقليب المحلول مع 47,6 ملغم من ‎Pd‏ محمول على كربون ‎PAC‏ بنسبة ‎/٠١‏ لمدة © ساعات ونصف. ورشِّح مزيج التفاعل من خلال مرشح حجم مسامه 160+ ميكرون وبر ‎in‏ الجفاف فنتج ‎TIAA‏ ملغم من اليوريا ‎urea‏ )2(
.)754 =z WY) ‏في صورة مادة صلبة بيضاء اللون (معدل‎ vo
Yv ‏لح كملا‎ «d) ‏كم‎ (1H ¢s) ٠,1 ‏دلتا‎ (DMSO-ds ‏ميغامن‎ € ++) "TH NMR <m) Y,VY=Y,AY «(1H ‏هز؛ء‎ 5,2 =] «d) ٠ «(1H ‏هزء؛‎ 6 =] «d) 8,7 «(1H A ‏(ى‎ +, AQ «(2H <m) ‏ارا‎ 1-٠ «(4H <m) ‏ارا‎ - «(2H «m) ‏“حا ارا‎ «(1H
JH + M) YEY,. «(H - M) Yey, : (electrospray ‏(برش الإلكترونات‎ M.S (9H ‏تركيزه‎ TFA ‏بالتصويل باستخدام‎ Reverse Phase ‏معكوس الطور‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقاً ل‎ 0 119 11:0:013:07 ‏في مزيج من‎ 7 (1) tripeptide ‏الببتيد‎ , AS ‏تخليق‎ ‎0 ‎CJ Loa. 0 N + ‏كب‎ ‎0 ‎0 ‎0 0 ‏م‎ OMe ‏مت‎ ‎0 ‎v ‎0 ‎0 ‎0 ‎CL A N Ca 0 N ow OMe
H 0 0 N 0 1 ‏غم‎ V,¥Y ‏كب و‎ ) carbamate ‏ملي مول) من الكربامات‎ YY, °) ‏أ غم‎ (Fic ‏مل‎ TY ‏المعلسّّق بسرعة. وأضيف‎ (TB 0014 ‏في‎ TBTU ‏ملي مول) من‎ YE,V) ٠ ‏دقائق؛ كان مزيج التفاعل‎ ٠١ ‏عند درجة حرارة الغرفة وبعد‎ DIPEA ‏ملي مول) من‎ 77,©( ‏محلول من أ غم ) اضرف ملي مول) من ثتائي الببتيد‎ aa ‏ثم‎ . Ly ‏متجانساً‎ ‏يحتوي على ١١,؛ مل‎ anhydrous ‏لامائي‎ DCM ‏مل من‎ ٠ ‏في‎ (*) dipeptide ‏في مزيج التفاعل. وسمح بتقليب المحلول أصفر اللون الناتج‎ DIPEA ‏من‎ (Use ‏ملي‎ YY,1Y)
YA
لمدة ‎V‏ ساعة. ثم بخّر المذيب فنتج شراب أصفر اللون استخلص باستخدام ‎٠٠١‏ مل ‎EtOAc‏ ثم باستخدام ‎١5١0‏ مل منه وغسل مرتين باستخدام ‎٠٠١‏ مل من ‎HCl‏ تركيزه ‏00+ عياري في كل مرة؛ وغسل مرة واحدة باستخدام كل من ‎٠0‏ مل من ‎NCO;‏ مشبع ‏و ‎١5١‏ مل من ماء أجاج. وجففت الخلاصات بعد مزجها فوق ‎MgSO;‏ وبرت فئنتج م 15,18 غم ‎(aS)‏ من ثلاثي الببتيد ‎tripeptide‏ )1( في صورة رغوة لونها أصفر باهت. ‏تخليق ثلاثي الببتيد ‎tripeptide‏ (): ‎o ‎o —_ 0 axa re CUTS on
Ho of ON H oo do 8 o 5 \ v ١ ‏وأضيف‎ THF ‏مل من‎ ٠ ‏في‎ (1) tripeptide ‏غم من ثلاثي الببتيد‎ ١5,148 ‏أذيب‎ ‏مل من الماء. وبرّد المحلول الناتج إلى درجة الصفر المئوي وأضيف محلول من 1,18 غم ‎YAY ) ٠١‏ ملي مول) من أحادي هيدرات هيدر وكسيد الليثيوم ‎lithium hydroxide mono-hydrate‏ ‏خلال ؟ دقائق مع تقليب شديد. وبعد ¥ ساعات وعند درجة الصفر ‎og stall‏ تم معادلة ‏0 المقدار الزائد من القاعدة ‎base‏ باستخدام ‎HCI‏ تركيزه ‎١‏ عياري (حيث بلغت درجة ‏الحموضة النهائية حوالي ‎(THF "dg )7١‏ فنتج معلق مائي في صورة صمغ أصفر اللون. ‏واستخلص المزيج مرتين باستخدام ‎٠٠١‏ مل من ©5040 في كل مرة وغسل مرتين باستخدام ‎Vo‏ مل من ‎NaHCO;‏ مشبع في كل مرة. وجففت الخلاصات بعد مزجها فوق ,14850 ‎oy Ky‏ فنتجت رغوة لونها أصفر باهت. ونتج عن الاستشراب الخاطف للرغوة على ‏هلام السليكا ‎silica‏ باستخدام 2060 كمادة التصويل 4,797 غم من المركب (7) في صورة ّ ‏مادة صلبة لابلورية بيضاء اللون (معدل الإنتاج- )79(
Ya (A) thioureas ‏تحضير مركبات ثيويوريا‎ :(IA) thioureas Uys off ‏تخليوّ‎ ‏مر‎ a
HN —
SO JO iA ‏تلاه‎ cyclopentylamine ‏ملي مول) من بنتيل حلقي أمين‎ § V,¥) ‏مل‎ €,1V ‏أضيف‎ ‎٠‏ 0158 إلى محلول من ‎5,٠‏ مل (5,4” ملي مول) من أيزوثيوسيانات ثث-بيوتيل ‎tert-butyl isothiocyanate‏ في ‎٠٠١‏ مل من ‎DCM‏ وقلتب مزيج التفاعل عند درجة حرارة ‏الغرفة لمدة ساعتين. وخفف المزيج باستخدام ‎BIOAC‏ وغسل مرتين باستخدام كل من محلول ‏مائي من حمض سيتريك ‎citric acid‏ تركيزه ‎NaHCO; ٠١‏ مشبع؛ 5 ‎H,0‏ في كل مرة وغسل ‏مرة واحدة باستخدام ماء أجاج. وجففت الطبقة العضوية فوق ,14850 ‎Gal do SLY‏ 0 وبرت فنتج ‎Ve‏ غم من ‎Jot N= fir SN‏ حلقي ثيويوريا ‎N-tert-butyl-N'-cyclopentyl thiourea‏ في صورة مادة صلبة بيضاء اللون بمعدل إنتاج بلغ ‎ey‏ وأذيب ‎VV‏ غم من «-ثث-بيوتيل-17-بنتيل حلقي تيويوريا ‎N-tert-butyl-N'-cyclopentyl thiourea‏ في 57 مل من ‎2g. 378 50 HCI‏ = المحلول ‏الذي لونه أصفر غامق مع الترجيع بشكل معتدل. وبعد 560 دقيقة؛. تثشرك مزيج التفاعل ‎ve‏ ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة ومن ثم برد في الثلج وجعل قاعدياً إلى درجة حموضة بلغت ‏4,0 باستخدام مادة صلبة من ‎NaHCO;‏ ومحلول مائي مشبع منه. واستخلص المنتج " مرات ‏باستخدام ‎EtOAc‏ في كل مرة. وغسلت الخلاصات من ‎EtOAc‏ بعد مزجها مرتين باستخدام ‏0 في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج. وجففت الطبقة العضوية فوق ‎(MgSO,‏ رشحت وركّزت فنتج ‎VET‏ غم من مادة صلبة خام بيجية اللون. ونتج عن © سحن ‎Trituration‏ المادة الخام في مزيج من هكسان ‎EtOAc/hexane‏ بنسبة 0/90« بعد ‏الترشيح؛ ,1 غم من «-بنتيل حلقي ثيويوريا ‎(IA) N-cyclopentythioure‏ في صورة مادة ‏صلبة بيضاء اللون (معدل الإنتاج- 0 14).
0 )111 ¢bs) ٠/١4 ‏تتل)‎ cbs) V,0A ‏ميغامن ,ه-01450): دلتا‎ £ ++) 'H NMR =1,00 (2H «m) ٠ ‏تتراحة‎ (2H ‏لس‎ V,Y4-),4Y (1H ¢bs) ‏ا‎ «(1H cbs) 1,V1 . (4H <m) ٠ . )11 - 14( VEYA tes S(H + M) ١٠ ‏حر‎ tes 5 ‏(أب):‎ thiourea ‏تخليق ثيويوريا‎ ٠ ‏نتج عن استخدام الإجراء الموصوف أعلاه واستخدام بيوتيل حلقي أمين‎ ‏المركب‎ cyclopentylamine Opal ‏متوفر تجارياً بدلا من بنتيل حلقي‎ cyclobutylamine (A) thiourea ‏ثبويوريا‎ ‎~ , Ne—==———) wT —_— i 5
SAMO - AO
H H H
WA
(=A) thiourea ‏تحضير تبويوريا‎ ١ ‏نتج عن استخدام الإجراء الموصوف أعلاه واستخدام هكسيل حلقي أمين‎ ‏المركب‎ cyclopentylamine ‏من بنتيل حلقي أمين‎ Yu ‏متوفر تجارياً‎ cyclohexylamine :(—>A) thiourea ‏ثيويوريا‎ ‎J > N——=—===0
HN —_— ٠ ‏ل‎ J
SLA A
‏“جب‎
‏بن م‎ 9° ok [A
EN
أضيف ‎٠‏ ,© مل (7١,7؛‏ ملي مول) من كلوريد البنزويل 56020710010806 نقطة نقطة إلى محلول من 4,680 غم ‎V,¥Y)‏ ؛ ملي مول) من ‎KSCN‏ في ‎YO‏ مل من الأستون ‎cacetone‏ م عند درجة الصفر المئوي. وقلتب المحلول حليبي اللون في حمّام ثلجي لمدة ساعة ونصف» ثم أضيف ‎VY‏ مل ) 816 ملي مول) من بروبيل حلقي ‎cyclopropylamine (yal‏ نقطة نقطة. وقلتب مزيج التفاعل ‎sad‏ ساعة ونصف عند درجة الصفر المئوي؛ ثم أضيف مقدار إضافي من بروبيل حلقي الأمين ‎cyclopropylamine‏ بلغ 50 مل ‎V,YY)‏ ملي مول) وقلتب مزيج التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة إضافية بلغت ‎Ye‏ دقيقة. ‎Cay‏ ‎٠‏ > مزيج التفاعل في ‎٠80‏ مل من ‎HO‏ مبرد بالثلج؛ وقلتب لمدة © دقائق ورتشحت المادة الصلبة التي لونها أصفر فاتح؛ غسلت عدة مرات باستخدام ‎HO‏ وجففت فنتج 71,17 غم من ١-بنزيلوكسي-‏ 17-بروبيل حلقي تيويوريا ‎.N-benzyloxy-N'-cyclopropyl thiourea‏ وعلشسشق مركب الثيويوريا ‎thiourea‏ هذا في 560 مل من محلول من ‎NaOH‏ تركيزه ‎١‏ عياري ‎GT ag‏ عند درجة حرارة الترجيع لمدة ‎١١‏ دقيقة. وبرد المحلول إلى درجة حرارة الغرفة؛ ‎vo‏ أشبع باستخدام ‎NaCl‏ صلب واستخلص 7 مرات باستخدام ‎EtOAc‏ في كل مرة. وغسلت الخلاصات من ‎EtOAc‏ بعد مزجها مرتين باستخدام ‎HO‏ في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جففت فوق ,10850 رشّّحت وبخّخرت فحصل على المنتج الخام ‏في صورة مادة صلبة لونها أبيض ضارب إلى الصفرة. وسحنت المادة الصلبة في مزيج ‏من هكسان ‎EtOAc/hexane‏ بنسبة 0/0 فنتج 0,¥ غم من ‎dmg rN‏ حلقي ثيويوريا
¢Y ‏بيضاء اللون‎ crystalline solid ‏في صورة مادة صلبة بلورية‎ (2A) N-cyclopropyl thiourea (7.0 ٠ =z wy! ‏(معدل‎ ‎«(1H bs) ‏يلا‎ «(1H bs) ‏لا‎ ١ ‏ميغامزء ب-0150): دلتا‎ ٠٠ ) 'H NMR .(2H «m) ,86—,0) «(2H <m) ‏وي تا‎ «(1H bs) Y , V4 «(1H <bs) Vv, Y
CH-M)OVEA tes S(H + M) ١١1ر4‎ tes” ‏قث‎ 0 (1) ‏المثال‎ ‎( ٠١ ) ‏كب‎ wll ‏تحضير‎ ‎:)٠١( tripeptide ‏تخليق ثلاني الببتيد‎ :)١( ‏الخطرة‎ ‎OH ‎0 ‎CL A N + 0 N
H
0 N
H
7 0 0 ~° "SS OMe
FF mein
OH
1 0
MeO N, = OMe oo
O o &
CL J N
0 0 a OMe “Ny ١ © (9) hydroxyquinoline ‏ملي مول) من هيدروكسي كينولين‎ ١ ¥) ‏أضيف 7795 ملغم‎ ٠١ ٠,١ ( ‏غم‎ ٠0١ ‏إلى‎ triphenylphosphine ‏من ثلاثي فنيل فوسفين‎ (Use ‏غم (7.؛ ملي‎ ٠,١ ‏و‎ ‏وبرد المعلق‎ THF ‏مل من‎ YO ‏المذاب في‎ )١( tripeptide ‏ملي مول) من الببتيد الثلاثي‎ ‏نقطة‎ DIAD ‏ميكرولتر (7,؛ ملي مول) من‎ AY) ‏أصفر اللون في حمّام ثلجي وأضيف‎ ‏دقيقة وعند درجة‎ Ye ‏نقطة. ولب المحلول عند درجة حرارة الحمتام الثتلجي لمدة‎ ev ‏وغسل‎ EtOAc ‏ساعة. وبخّر المحلول حتى الجفاف وأذيب الركاز في‎ ١١ ‏حرارة الغرفة لمدة‎ ‏مشبع وماء في كل‎ sodium bicarbonate ‏مرتين باستخدام كل من محلول بيكربونات صوديوم‎ ‏رشح وبخّر فنتج زيت‎ (MgSO, ‏مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جفف فوق‎ ‏ورشّحت المادة‎ DCM ‏الصلبة الخام في‎ sala cd "ley ‏أصفر اللون ترسب عند تركه.‎ ‏عديمة الذوبان. وركز المحلول ونقّي الركاز بالاستشراب الخاطف بالتصويل باستخدام‎ ° ‏بنسبة 0:0 لإزالة جميع الشوائب الأقل قطبية ومزيج من‎ EtOAc:Hexane ‏مزيج من هكسان‎ ‏غم من المركب‎ ٠.١ ‏وصوؤل‎ .PhiP=0 ‏إلى أن صول كل‎ ١:86 ‏بنسبة‎ 2204:0110 ‏بنسبة 8:65 في صورة مادة صلبة بيضاء‎ EtOACICHCL ‏المرغوب باستخدام مزيج من‎ (LY ٠ ‏اللون (معدل الإنتاج-‎ + M) VIVE (H+ ‏لمح مر‎ C(H- M) 47 ‏(برش الإلكتررونت):‎ 148 ٠ . "(Na ‏تركيزه 70,007 في‎ TRA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقآً ل‎ 43 H,O:CH;CN ‏مزيج من‎ :)٠١( ester ‏للإستر‎ selective monohydrolysis ‏حلمأة أحادية انتقائية‎ :)١( ‏الخطوة‎ ‎0 ‎MeO Na oH
A
0
CA xX : 0 = OMe oR 0 vs.
MeO. N, N > ‏صن‎ ‎oo ‎0 ‏م‎ ‎AI ‎0 oo OMe " ‏م‎ ‎0 ‎ف١‎ \o te
THF ‏مل من‎ ٠١ ‏في‎ (+) tripeptide ‏ملي مول) من ثلاثي الببتيد‎ V, £8) ‏غم‎ ١ ‏أذيب‎ ‎١ ‏تركيزه‎ NaOH ‏مل من الماء و 1,0 مل من محلول مائي من‎ © (MeOH ‏وأضيف © مل من‎ ‏المزيج حتى‎ Aa ‏المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين.‎ “la, ‏عياري‎ ‎toluene ‏تولوين‎ MeOH ‏الجفاف ومن ثم بخّر بشكل إسهامي ؛ مرات باستخدام مزيج من‎ ‏ثنائي إثيل أثير‎ toluene ‏في كل مرة؛ مرتين باستخدام كل من تولوين‎ 1:١ ‏م بنسبة‎ ‏غم من المنتج (الخالي من الماء) في صورة مادة‎ ٠,٠ 4 ‏في كل مرة فحصل على‎ diethyl ether (7 os ‏بيضاء اللون (معدل الإنتاج-‎ flaky 485 ‏صلبة‎ ‎TM) VTE ‏جعت‎ M) TAY (HSM) IVY ‏(برش الإلكترونات):‎ 5 +4 . (Na ‏تركيزه تح في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقاً ل‎ ٠١ 7 ‏ا‎ H,0:CH;CN ‏مزيج من‎ () Y) Diazoketone ‏الخطوة (): تخليق ديازوكيتون‎ . 0 0 “oO Na M or ‏ونح‎ ‏حر‎ ‎o ‎L 0 $
QA So AA ‏ب‎ ‎N 0 N 0 N 8
H 0 ‏لي‎ OMe ‏و‎ SC 6 ‏سك‎ ‎0 9 "7
THF ‏مل من‎ ١١ ‏ملي مول) في‎ ٠,44 ‏(فرضاً‎ )١١( sodium salt ‏أذيب ملح صوديوم‎ ‏وبرّد المحلول‎ triethylamine ‏ملي مول) من ثلاثي إثيل أمين‎ Y, 1 ) ‏ميكرولتر‎ 0١٠ ‏وأضيف‎ Vo ‏إلى درجة الصفر المئوي. وأضيف 780 ميكرولتر (7,16 ملي مول) من كلوروفورمات‎ ‏المعلق أبيض اللون عند درجة الصفر‎ oT Bg ‏نقطة نقطة‎ isobutylchloroformate ‏أيزو بيوتيل‎ ‏ملي مول) من ديازوميثان‎ ANE) ‏مل‎ ١١ ‏دقيقة؛ تلاه إضافة محلول من‎ VO ‏لمدة‎ $s sll ‏وقلتتب مزيج التفاعل‎ diethyl ether ‏جزيئي في ثنائي إثيل أثير‎ TY ‏تركيزه‎ diazomethane ‏لمدة ساعة واحدة عند درجة الصفر المثوي؛ ولمدة اد دقيقة عند درجة حرارة الغرفة‎ 79.
$0 وبخّر فنتج معلق غليظ القوام. وأذيب هذا المعلّق في ‎EtOAc‏ وماء. وغسل المحلول العضوي مرتين باستخدام كل من ‎NaHCO;‏ مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ ‎hia‏ فوق ‎«MgSO,‏ رشح وبحر فحصل على منتج ديازوكيتون ‎١ , 4 La 9) diazoketone‏ ملي مول) في صورة مادة صلبة عاجية اللون (عبارة عن مادة ف خام استخدمت في الخطوة التالية). ‎MS‏ (برش الإلكترونات): ‎M) ١‏ = ع)ت ‎JH+M) ٠١,٠‏ نسبة التجانس ‎Gy‏ ل ‎HPLC‏ معكوس الطور بالتصويل باستخدام ‎TFA‏ تركيزه 70,001 في مزيج من 11,0:01:077 ‎71١‏ ‏الخطوة (4): تخليق البروموكيتون ‎:)١( bromoketone‏ 0 0 ‎MeO Ns MN eo “ 5‏ = ‎A‏ ‎Oo‏ ‎L .‏ يهب م 0 ] ( ‎CL 0 ٍ‏ ِ 2 ‎N‏ ‎tl SC © A Sa‏ ‎N 0 n OMe‏ 0 ‎N‏ 0 0 ‎"١ 0‏ ‎١‏ 7 أضيف ‎٠١‏ مل من محلول ‎HBr‏ نقطة نقطة إلى محلول من ‎١.44‏ ملي مول من ديازوكيتون ‎(VY) diazoketone‏ في ‎YE‏ مل من ‎THF‏ عند درجة الصفر المئوي ‎"ly‏ ‏المزيج لمدة ساعة واحدة. وخفف المحلول باستخدام ‎Jue EtOAc‏ مرتين باستخدام كل من محلول ‎NaHCO;‏ مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ‎ele‏ أجاج؛ ‎Cain‏ فوق ‎«MgSO, Vo‏ رشح وبخر فنتج ‎١‏ غم (فرضاً م ملي مول) من البروموكيتون ‎bromoketone‏ المرغوب في صورة مادة صلبة لونها بيج مائل إلى اللون العاجي. ‎MS‏ (برش الإلكترونات): ‎.)١ + M) ٠4,7 (M) Vov,¥‏ ا
ا الخطوة (5): تخليق تبازوليل ثلانى ببتيد ‎:)١٠( thiazolyl tripeptide‏ 0 ‎AN SN Br‏ 0 رول 5 ‎NF‏ ‏اسيم مر 0 ‎A os‏ لل ‎H‏ ‏1خ حر : ‎H‏ ‎VY 0‏
الور ‎MeO.
N.‏ ‎N‏ > ‎TD‏ ‎Oo‏ ‏\ [ 1 ‎N‏ 0 ‎H‏ ‏ب 2 0 ل 0 ‎H‏ ‏0 ‎VE‏ ‏أذيب 6 ملي مول من ألفا-بروموكيتون ‎(VY) a-Bromoketone‏ و 0 ‎TA,‏ ملغم ‎EA)‏ ملي مول) من ‎JN‏ حلقي ثيويوريا ‎N-cyclopentylthiourea‏ في ‎Yo‏ مل من ‎٠‏ أيزوبروبائول ‎isopropanol‏ وسخّن المحلول أصفر اللون عند درجة حرارة بلغت ‎١‏ 7م لمدة ‎Vo‏ دقيقة. وتشرك المحلول ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة وبر حتى الجفاف. وأذيب الركاز في ‎(EtOAc‏ وغسل المحلول مرتين باستخدام كل من ‎NaHCO;‏ مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ ‎«aia‏ فوق ‎«MgSO;‏ رتسْسح وركز فحصل على المنتج في صورة رغوة لونها أسمر مائل إلى البرتقالي. وأزال الاستشراب العمودي الخاطف ‎٠‏ بالتصويل باستخدام مزيج من هكسان ع<«ه«22040:06 بنسبة 7:© الشوائب الأقل قطبية بينما ty ‏بنسبة 4:7 714 ملغم من المركب‎ EtOAc hexane ‏استعاد باستخدام مزيج من هكسان‎ (7198 ‏المرغوب في صورة رغوة لونها أصفر فاتح (معدل الإنتاج-‎ ‏نسبة‎ . + M) AYo 1 tM) ‏لك‎ T(H = M) AYE ‏(برش الإلكترونات):‎ MS ‏تركيزه 750.001 في مزيج‎ TFA ‏بالتصويل باستخدام‎ shall ‏معكوس‎ HPLC ‏ل‎ Gig ‏التجانس‎ ‎A 9 10:02:01 ‏من‎ °e :)١6( ester ‏الخطوة )1(: حلمأة الإستر‎
McC Na ‏ار‎ ‎FO ‎© _
AJ
AX
0 ‏بت‎ OMe 0 N
H
0
VE
5
MeO. Nx 2-01 ‏ل‎ ‎Oo ‎! xX ' 4 >
CL J N
© ‏]م‎ ‎0 © OH 0 N
H
0 ٠٠١ ‏المركب‎ ‎methyl ester ‏ملي مول) من إستر المثيل‎ ١,181( ‏ملغم‎ ١45 ‏قلتب محلول من‎ ‏ملي‎ VAY) ‏ومحلول مائي من 5,8 ملغم‎ MeOH ‏مل من‎ 1,0 (THF ‏في ¥ مل من‎ (1 £) ‏ساعة. وركّز المحلول العضوي فنتج‎ ١8 ‏مول) من 10011 في 1,0 مل من الماء لمدة‎ 0 . ‏وماء أجاج فنتج محلول كلي‎ EtOAc ‏معلق لونه أبيض ضارب إلى الصفرة خفف باستخدام‎ ‏عياري‎ ١ ‏تركيزه‎ HCL ‏وضبطت درجة الحموضة إلى قيمة بلغت 7 عن طريق إضافة‎ ‏في كل مرة. وغسلت‎ EtOAc ‏واستخلصت الطبقة العضوية بشكل إضافي مرتين باستخدام‎ ‏الخلاصات العضوية بعد مزجها مرتين باستخدام الماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام‎
$A ‏ملغم من المركب‎ VAY ‏رشّحت وبخّرت فنتج‎ (MgSO, ‏ماء أجاج؛ جففت فوق‎
JAY ‏المرغوب في صورة مادة صلبة صفراء اللون بمعدل إنتاج بلغ‎
Na ‏التحويل إلى ملح‎
MeOH ‏مل من‎ Yo ‏في‎ )٠٠١( ‏ملي مول) من المركب‎ +,1V0) ‏ملغم‎ ١8:7 ‏أذيب‎ ‎٠‏ وأضيف ‎١,5‏ مل ‎١(‏ مكافئ) من ‎NaOH‏ تركيزه ‎١0٠‏ عياري. وركّز المحلول أصفر ‏اللون الرائق لإزالة ‎MeOH‏ وخفف باستخدام ‎celal‏ جمد ‎Iyophililzed aria yg‏ فصل ‏على ‎١9‏ ملغم (مقدار الإنتاج النظري- ‎(pide VEY‏ من المنتج (ملح ‎(Na‏ وزنه الجزيئي: ‎)٠٠59‏ في صورة مادة صلبة لابلورية صفراء اللون. ‎+ M) ‏“للم‎ (H+ M) ‏ارتخل‎ C(H ‏مح‎ VAY,Y ‏(برش الإلكترونت):‎ MS (Na Ve ‏نسبة التجانس ‎Gy‏ ل ‎HPLC‏ معكوس الطور بالتصويل باستخدام ‎TFA‏ تركيزه 70,00 في ‏مزيج من 11:0:011:071 914/. ‎'THNMR‏ (400 ميغاهزء؛ ,01450-4): خليط من زمراء ‏دورانية ‎rotamers‏ بنسبة بلغت حوالي 1:0 دلتا ‎«d) 07 (1H cbs) ANE‏ ل- 9,7 هزء ‎(1H‏ كخرا ‎-١ «d)‏ اا فزن تنا حلاحت اا ‎em)‏ تل2) ا ‎(1H ¢bs)‏ تم لاحتثرة مد الس ‎«(1H em) ةءكنصحترا١ (2H‏ ار (ى ‎«(1H‏ ب لك ‎VLA =J‏ هنل ‎(TH‏ كار ‎-[ «d) ٠١ «(1H em) ‏اتح‎ (IH em) ‏الامتحفت‎ (1H ‏هنل‎ ٠١1 ‏ل-‎ «d) ‎«(3H ‏(ى‎ ١ «(2H em) ‏.محقم‎ (1H ‏هن‎ AA =J od) ‏ذا‎ (IH ‏هل‎ ١ ‎SAT 5 AT (18H em) ‏انخراح تا‎ (2H em) ‏فمابتحلة,ا‎ (1H em) 7-77 ‎(HY ss) (Y) ‏المثال‎ Ye ‏تحضير المركب ‎(V+)‏ ‏نتج عن استخدام نفس الإجراء الموصوف في المثال ‎)١(‏ واستخدام 7١-بيوتيل‏ حلقي ثيويوريا ‎Yau (@A) Necyclobuty! thiourea‏ من استخدام 11-بنتيل ‎Als‏ ثيويوريا ‎(A) N-cyclopentyl thiourea‏ في الخطوة )0( المركب ‎)٠١١(‏ في صورة ملح ‎‘TFA‏
]
MeO Na 7 8 ore o
AG
0 3 OH
Ny ٠١١ ‏المركب‎ © 0:98 ‏خليط من زمراء دورانية بنسبة بلغت حوالي‎ ((DMSO-dg ‏ميغاهز؛‎ £44) "HNMR bs) A Yo «(1H <m) AY 4—A, to «(1H s) A,04 Lal ‏الرئيسية:‎ isomer el ya ‏وصف الز‎ ‏لحا ابلا ب‎ ١ «(1H ¢s) V,Y¢ «(1H bs) V,A¢ «(1H ‏همزء‎ 1,Y -[ «d) AY «(1H ‏ماف را‎ =] «dd) 8,٠١ «(2H <m) 0,11-0,YA «(1H Jd AY =] «d) Vv, «(1H 0 ‏احا‎ «(2H ¢m) ‏حا‎ 6 «0 «(4H <m) ¢ , Y1-¢,0¥ «(1H <m) 0,v¢—0,:9 «(1H ‏هز؛‎ ‎«(HY ¢m) \ ,40-Y, oY «(HY <m) ‏باح ارا‎ $ «(1H <m) 1, ‏-ف‎ 17 (HY ¢s) (oH ¢s) ٠ +7 «(12H «m) ١ ,١١-١ 173
CHF 14( ‏حتت لاا‎ M) 7.4 ‏(برش الإلكترونات):‎ MS ‏تركيزه 70.07 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏ل‎ Gig ‏نسبة التجانس‎ oy. 7148 HO:CH;CN ‏مزيج من‎ (¥) ‏المثال‎ ‎(VoV) ‏كب‎ all ‏تحضير‎ ‏واستخدام 17-هكسيل حلقي‎ )١( ‏نتج عن استخدام نفس الإجراء الموصوف في المثال‎ ‏بدلا من استخدام 7<-بنتيل حلقي تيويوريا‎ (=A) N-cyclohexyl thiourea ‏ثيويوريا‎ Vo
TFA ‏في صورة ملح‎ (V+ ¥) ‏في الخطوة )0( المركب‎ (in) N-cyclopentyl thiourea
MeO 8 ‏الور‎ ‎> N
TO
SL
AL
0 o oH ‏لخ‎ 0 ٠١7 ‏المركب‎
‎NMR‏ 11 )£44 ميغاهزء ,01450-4): خليط من زمراء دورانية بنسبة بلغت حوالي 06 وصف الزمراء الرئيسية: ‎¢s) AN aly‏ 11 جارخ ‎«(2H <m)‏ - ‎bs) Y,A\ «(1H <m) Avg‏ 1 للا ‎١ «(1H bs)‏ لا ‎«d) VY, VY «(1H ¢m)‏ ]= ‎AY‏ ههزء ‎«(1H <m) 0, ¥~0,.4 «(1H «m) o,Yo—0o,VY «(2H «m) o,l0—-0,YA «(1H‏ هه ‎«(3H «m) 2 7-0١‏ 0« ب -لالار ا ‎«(3H <m)‏ احا ‎«(1H «m) Y,00—-Y,1 3 «(3H s)‏ ‎«(2H <m) ١ AA -1 , va «(3H <m) ١ ,19-( «0 «(1H <m) Y,YV-Y,YA‏ يل 4-9 , ‎<m) ١‏ ‎(HIT‏ حك (ى ‎(9H‏ ‎MS‏ (برش الإلكترونات): ‎JH FM) AYE (HM) AYE‏ نسبة التجانس ‎Wd y‏ ل ‎HPLC‏ معكوس الطور بالتصويل باستخدام ‎TFA‏ تركيزه 750,07 في ‎٠‏ مزيج من 0:01:07 715 المثال (4) تحط ‎pas)‏ المر كب ) ‎Va.‏ { ‎H‏ 5 لور | .ا ~ ‎MeO.‏ ‎NF‏ 9 ‎QL » wo LO)‏ ‎NY a)‏ ‎١ Co‏ ‎N°‏ ?0 0 المركب ‎٠٠١‏ ‏5 ‏لم ~" ‎MeO‏ ‏حر ‎o‏ ‎CAAT‏ ‏ل ‎ry x‏ ‎ie,‏ الح 3 ‎IN‏ 6 المركب ‎٠١#‏
‏ملغم )£0 0.0 ملي‎ ١7 ‏مع‎ )٠٠١( ‏ملي مول) من المركب‎ +e TA) ‏خلط © ملغم‎
مول) من ‎HATU‏ وأذيب في ؛ مل من ‎DMF‏ لامائي. وقلتب المحلول عند درجة حرارة
الغرفة قبل إضافة 7736 ميكرولتر )50+ ملي مول) من ‎DIPEA‏ نقطة نقطة خلال دقيقة واحدة
تقريباً. وقلتب المزيج لمدة ‎٠١‏ دقيقة عند درجة حرارة الغرفة وحلّل بواسطة ‎HPLC‏ ‎oe‏ تحليلي ‎analytical HPLC‏ لتشكيل الإستر المنشط ‎activated ester‏ وبعد ذلك أضيف محلول
من 77 ملغم )510+ ملي ‎(Use‏ من بنزين كبريتوناميد ‎١١ cbenzenesulfonamide‏ ملغم
‎١٠(‏ ملي مول) من ‎DMAP‏ و ‎YY‏ ميكرولتر )10+ ملي مول) من ‎DBU‏ في ‎١‏ مل من
‎A" na ‏ساعة عند درجة حرارة الغرفة قبل‎ YE ‏وقلتب مزيج التفاعل لمدة‎ DMF
‎٠‏ مل من ‎EtOAc‏ وغسل باستخدام محلول ‎NaHCO;‏ مشبع ومحلول ملحي مشبع. وجفف الطور العضوي فوق ,008580 رشح وركّز. وأعيد تشكيل الركاز في ‎DMSO‏
‎Sig‏ بواسطة ‎HPLC‏ تحضيري ‎preparative HPLC‏ ونتج عن التجفيد ‎١١7‏ ملغم من المنتج
‏النهائي في صورة مادة صلبة لابلورية لونها أصفر باهت بمعدل إنتاج بلغ ‎JEN‏
‎«d) AY (1H ¢s) AA (1H es) V+,A% ‏دلتا‎ ((DMSO-d6 « alas 00( 'H NMR
‎=J «dd) ٠٠١ (2H ‏هن‎ Y, ح١ ‏لك‎ V,A% (2H cm) A, AANA (HY ‏هل‎ AA =) -[ «d) ١١ (1H bs) V,YA (2H «3a V,V ‏لأرلا‎ =J ‏لفك‎ V,0A (2H «3a ٠,3 ‏كرا‎ ae
‎«(IH ‏هن‎ ١١7 =J «d) 17 «(1H ‏لس‎ 0,Y0=0,¥V (1H ¢bs) ©,Y0 (1H « ‏هن‎ 3
‎V,A =J «d) ‏قب‎ (1H ¢bs) ‏أ‎ (3H em) ‏لمحت‎ (1H ‏من‎ VY =J ‏لك‎ £,4Y
‎—Y,¥0 (1H em) Y,"V=Y,4 (1H ‏هل‎ V,A ‏زح‎ «d) ¥,4Y «(3H ‏(ى‎ ¥,3Y (1H «Ja
‎«(8H ‏ةلاحل (س‎ «(4H ‏لس‎ V,TA=V,VA «(3H em) V,3A=Y, NY (1H ¢m) 7١ «(9H ¢s) 14 «(1H em) ٠" ٠74 «(4H em) ٠1-8 Ye
‎S(H-M) 171,85 ‏حتت و‎ M) AYA0 ‏(برش الإلكترونات):‎ MS
‏نسبة التجانس بواسطة ‎HPLC‏ معكوس ‎shall‏ = 799 زمن البقاء- 7,7 دقيقة.
‏حضّرث المركبات التالية باستخدام التسلسل التخليقي المبين في المخطط ‎)١(‏ ‏كما يلي:
ey (°) ‏المثال‎ ‎(V1) dipeptide ‏تخليق ثنائي الببتيد‎ :)١( ‏الخطوة‎ 0 0
MeO Na oe MeO. "~ oo Na
A ZF
9 ‏ب‎ ‎ry ‏حي‎ YY SC 0 a OMe 0 ‏لي‎ OMe 0 ‏ل‎ 0 N 0 0
Ye 27 ‏مل من‎ Yo ‏في‎ (V0) dipeptide ‏غم (07, ملي مول) من ثنائي الببتيد‎ ٠ ‏أذيب‎ ‏مل من الماء و 7,4 مل )1,00 مكافئ) من محلول‎ ٠١ MeOH ‏مل من‎ ٠١ ‏وأضيف‎ 111 © ‏عياري. ,18“ 0 المحلول عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين‎ ١ ‏تركيزه‎ NaOH ‏ماني من‎
A aa eld ‏المزيج حتى الجفاف. وخفف الركاز باستخدام‎ — Ag ‏دقيقة.‎ Vo ‏و‎ ‏في صورة مادة صلبة لابلورية‎ ( ١ sodium salt ‏غم من ملح الصوديوم‎ ¢ , YA ‏وجفّد فنتج‎ ‏بيضاء اللون.‎ + M) oVAY 8 + M) ‏ارخف‎ (H-M) ‏(برش الإلكترونات): تك‎ MS Ve . "(Na ‏تركيزه 750,006 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقاً ل‎ 116 HO:CH;CN ‏مزيج من‎ :(VV) dipeptide diazoketone ‏الخطوة (7): تخليق ثنائي ببتيد ديازوكيتون‎ ‏ال‎ oy 0
MeO, ‏ص ب‎ Na ‏ا‎ ‎9 ‏حا‎ N,
YY SC
0 ‏لل‎ ‎H ‎0 ‎5 ‎0 ‎MeO " 2 Nz
SO
~ Rd N 0 a OMe ” H 0 7 ‏مل من‎ VA ‏(فرضاً 7,07 ملي مول) في‎ (V1) Sodium salt ‏أذيب ملح الصوديوم‎ ‏وبرد المحلول‎ triethylamine ‏ملي مول) من ثلاثي إثيل أمين‎ 4, AY) ‏مل‎ ٠,7١7 ‏وأضيف‎ ¢THF ‏ملي مول) من كلوروفورمات‎ BAY) ‏إلى درجة الصفر المئوي. وأضيف 1,78 مل‎ ‏نقطة نقطة وقلتب المعلسّق أبيض اللون عند درجة‎ isobutylchloroformate ‏أيزوبيوتيل‎ 0 ‏ملي مول) من‎ EY) ‏الصفر المثوي لمدة ساعتين؛ تلاه إضافة محلول من 7+ مل‎ ‏وقلتب‎ diethylether ‏جزيئي في ثنائي إثيل أثير‎ ١,711 ‏تركيزه‎ diazomethane ‏ديازوميثان‎ ‏ولمدة ساعة وخمس وعشرين دقيقة‎ (gall ‏مزيج التفاعل لمدة ساعة واحدة عند درجة الصفر‎ ‏عند درجة حرارة الغرفة وبخثر فنتج معلّق غليظ القوام. وأذيب هذا المعلشق في‎ ‏مشبع وماء في كل‎ NaHCO; ‏وماء . وغسل المحلول العضوي مرتين باستخدام كل من‎ EtOAc Vo ‏رشح وبخر فنتج‎ «MgSO, ‏مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جفف فوق‎ ‏(فرضاً لا ملي مول) في صورة مادة صلبة بيجية اللون‎ ( VV ) diazoketone ‏ديازوكيتون‎ ‏(عبارة عن مادة خام استخدمت في الخطوة التالية).‎ (HFM) ‏اربخ‎ T(H = M) OVAY ‏(برش الإلكترونات):‎ MS v44y of ‏تركيزه 70,006 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقآً ل‎ 140 11:0:01:07 ‏مزيج من‎ :)١8( dipeptide bromoketone ‏الخطوة )9( : تخليق ثنائي ببتيد بروموكيتون‎ 0
MeO NS PA]
FF
L
~N N 0 =n OMe pi SC 0 7 0
MeO. "~ Br
JF
9 > ~N N 0 SC 0 N’
H
0
YA
‏نقطة نقطة إلى محلول من‎ 7 6A ‏مائي تركيزه‎ HBr ‏أضيف ),© مل من محلول‎ 0 ‏عند درجة الصفر‎ THF ‏مل من‎ ١١١ ‏ملي مول) في‎ ٠,44 ‏(فرضاً‎ diazoketone ‏ديازوكيتون‎ ‎Od ya Ju tg EtOAc ‏المزيج لمدة ساعتين . وخفف المحلول باستخدام‎ «la, ‏المثوي‎ ‎sla ‏مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام‎ NaHCO; ‏باستخدام كل من محلول‎ ‏رشسح وبِحُْر فنتج ا غم ) نف ملي مول) من‎ MgSO, ‏أجاج؛ جفف فوق‎ ‏بيجية اللون.‎ Ada ‏المرغوب في صورة مادة‎ bromoketone ‏البروموكيتون‎ - ٠ .)١ FM) IVEY (M) 137 ‏(برش الإلكترونات):‎ MS
الخطوة (4) : تخليق ثنائي الببتيد ‎dipeptide‏ )14(: 0 ‎“ory LAD‏ ‎ZZ HN N‏ ‎Ba‏ ‏بك £ ‎Y OH‏ طح ~ ‎on‏ 0 ‎N‏ 0 ‎H‏ ‏0 ‎A‏ ‏5 ‎MeO Na I‏ ‎JD‏ ‏9 ‎nd N‏ ~ ‎oN OMe‏ 0 ‎N‏ 0 0 14 ‎a‏ 17 ملغم ) الف ملي مول) من ألفا-بروموكيتون ‎a-bromoketone‏ ) ا ( و ‎١7/84‏ ملغم (85,» ملي مول) من ‎JAN‏ حلقي ثيويوريا ‎N-cyclopentylthiourea‏ في ‎Ja ١ °‏ من أيزوبروبانول ‎isopropanol‏ . وسخكن المحلول أصفر اللون الناتج عند درجة حرارة بلغت ٠م‏ لمدة ساعة ونصف. وثرك المحلول ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة وبخشر حتى الجفاف . وخفف الركاز باستخدام ‎EtOAc‏ وغسل محلول ‎EtOAc‏ مرتين باستخدام كل من ‎NaHCO;‏ مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء ‎lal‏ ‏جفف فوق ‎«MgSO,‏ رششسْح 3 ‎3—=S‏ فحصل على المنتج في صورة رغوة لونها أسمر ‎Jey.‏ إلى البرتقالي. وأزال الاستشراب العمودي الخاطف بالتصويل باستخدام مزيج من هكسان ‎EtOAc:hexane‏ بنسبة 7:7 الشوائب الأقل قطبية بينما استعاد باستخدام مزيج من هكسان ‎EtOActhexane‏ بنسبة 4:7 511,8 ملغم من المركب المرغوب في صورة مادة صلبة لونها أصفر فاتح (معدل الإنتاج- 75/).
‎MS‏ (برش الإلكترونات): 3ر175 ‎(HM)‏ رخالا ‎JH + M)‏ نسبة التجانس ‎Gi‏ ل ‎HPLC‏ معكوس الطور بالتصويل باستخدام ‎TFA‏ بنسبة 70,056 في مزيج من ‎VAR! H,O:CH;CN‏ الخطوة )©( : تخليق ثلاثي الببتيد ‎:)٠١( tripeptide‏
‎poond 8‏ 0 ‎ax.‏ ا ل نب ‎F - ___° |‏ ‎N.‏ مح ~ ‎XY ~‏ 0 ‎N‏ 0 ‎H‏ ‏0 ‏9 ‏5 ‎MeO.
N.
I~ H‏ ‎N‏ > ‎JD‏ ‏م ‏2 0 ‎CML‏ ‎HB‏ ‎we OMe‏ ص 0 0 ‎Xe °‏ أذيب 1 ‎TY,‏ غم )£4 0+ ملي ‎(Use‏ من ‎EBoe‏ ببتيد ‎Boc-dipeptide‏ في 7 ‎Ja‏ من ‎HCI‏ تركيزه ء عياري في ديوكسان ‎dioxane‏ وقلتب عند درجة حرارة الغرفة. وبعد ساعتين» عولج مزيج التفاعل عن طريق تبخيره حتى الجفاف. وحصل على ملح ‎HCI‏ بهذه الكيفية في صورة مادة صلبة لونها أبيض ضارب إلى الصفرة. وعرض ملح ‎HCl‏ لخواء ‎٠‏ > شديد لمدة ‎9٠0‏ دقيقة. وأضيف ‎١,96‏ ملغم ‎0A)‏ 0+ ملي ‎(Use‏ من اليوريا ‎oD ¢(0) urea‏ ‎0٠‏ ملغم ‎0A)‏ ,+ ملي مول) من عامل تقارن ‎HATU‏ إلى محلول من ملح 1101 في ؟ مل من ‎YY DCM‏ ميكرولتر ‎١197(‏ ملي مول) من ‎DIEA‏ وقلتب مزيج التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة ‏ ساعات. وخفف مزيج التفاعل باستخدام ‎EtOAc‏ غسل مرتين باستخدام ov ‏مشبع وماء في كل مرة وغسل مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جفف فوق‎ NaHCO; ‏كل من‎ ‏فحصل على المنتج الخام (فرضاً م ملي مول) في صورة‎ JA ‏رششسح‎ «MgSO, ‏زيت أصفر اللون غليظ القوام.‎
JHA M) AYE ‏(برش الإلكترونات): ىرت (لت)ت‎ MS ‏في‎ fo, ‏بنسبة‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخد ام‎ HPLC ‏ل‎ (as ‏نسبة التجانس‎ ° 7.40 HO:CH;CN ‏مزيج من‎ : ( ‏ص‎ ) tripeptide methyl ester ‏الخطوة ) 7( : حلمأة إستر مثيل ثلاثي الببتيد‎ 5
MeO Na NH MeO. Na I~ i
JD JD
2 0 ‏لل‎ x LL ‏ا‎ ‎- ‏وخ كا ا‎ N 0 “١ OMe H H oy a 0 °° ‏يخ‎ ‎Xs 0 methyl ester ‏قاب محلول من 797,860 ملغم (لا ملي مول) من إستر المثيل‎ ‏ومحلول مائي من 40,7 ملغم (لا 4 ملي‎ MeOH ‏مل من‎ ١ ‏و‎ THF ‏في ¥ مل من‎ ( Y. ) ٠١ ‏ساعة. وركسّز المحلول العضوي فنتج‎ ١ ‏مل من الماء لمدة‎ ١ ‏في‎ LIOH ‏مول) من‎ ‏تحضيري‎ HPLC ‏لونه أبيض ضارب إلى الصفرة. ونقيت المادة الخام بواسطة‎ 3" laa ‏(باستخدام عمود من نوع واي م سسي كومبيسكرين أوه دي إس-إيه كيو‎ ‏من‎ balay ‏محشو‎ pla Yo ‏ملم وقطره الداخلي‎ ٠٠ ‏طوله‎ (YMC Combiscreen ODS-AQ) ‏نانومتر)‎ 77٠١ ‏عند طول موجي بلغ‎ A ‏أنغستروم‎ ١٠١ ‏انوع 5 حجم جسيماتها © ميكرون؛‎ Ne ‏فيه‎ TFA ‏بلغ تركيز‎ Cua ‏بالتصويل باستخدام مزيج من 011:0177: 11.0 تدرج تركيزه خطياً؛‎ .sodium salt ‏وحولت إلى ملح الصوديوم‎ Gy TS ‏ومزرجث الأجزاء النقية؛‎ oa, ‏لم‎ ‎Na ‏التحويل إل ملح‎ l= ‏من ماء‎ ills ‏ومليلترات‎ EtOAc ‏باستخدام‎ 3 3S yall ‏خففت الأجزاء‎ Y. «gle © » 31S $i NaOH ‏باستخدام‎ \'Y ‏قاعدية إلى درجة حموضة بلغت حوالي‎ Gls” a) 144Y oA ‏عياري).‎ ١ ‏باستخدام 1101 تركيزه‎ 6.٠ ‏ثم عودلت إلى درجة حموضة تراوحت ما بين 9,8 و‎ ‏غسل مرتين باستخدام الماء في كل مرة وغسل‎ (EtOAc ‏واستخلص المنتج ؟ مرات باستخدام‎ ‏رشح وبر حتى الجفاف‎ MgSO, ‏مرة واحدة باستخدام ماء أجاج؛ جفف فوق‎ ‏من المنتج المتعادل في صورة مادة صلبة صفراء اللون بمعدل‎ pale 07,7 ‏فحصل على‎ ‏مل من‎ ٠١ ‏ملي مول) من المنتج المتعادل في‎ +0 TTY) ‏وأذيب 54 ملغم‎ Ve ‏م إنتاج بلغ‎ ‏عياري.‎ ١.0٠ ‏تركيزه‎ NaOH ‏مكافئ) من‎ ١( ‏مل‎ 7١ ‏وأضيف‎ MeOH ‏جتّد‎ celal ‏وخفف باستخدام‎ MeOH ‏وركّز المحلول أصفر اللون الرائق لإزالة‎ (Na ‏ملغم (مقدار الإنتاج النظري- 0,8 © ملغم) من المنتج (ملح‎ ٠0.8 ‏وجفد فحصل على‎ ‏في صورة مادة صلبة لابلورية صفراء اللون.‎ (AYO ‏وزنه الجزيئي-‎
A ‏خليط من زمراء دورانية بنسبة بلغت حوالي‎ ((DMSO-dg ‏ميغاهز؛‎ £4+) 'THNMR 0 ٠ (1H ‏من‎ 0,Y ح١‎ «d) VAT (1H ‏هل‎ AA ‏لح‎ od) V,8T (1H bs) AY ‏دلتا‎ ‎am) ‏لاتحت‎ (1H a A =T ed) LAY (1H ‏(ى‎ V, YT (2H am) V,EV=V,00 (1H ‏هل‎ ٠٠١ =T ed) YY (IH ‏هن‎ VLA =) od) £,29 (1H bs) )8 ¢s) ‏كذ‎ (2H am) ¥,40-¢, 0 € (TH ‏مل‎ ٠١ ح١‎ od) 7 (2H im) 41-7 =Y,60 (HY «water peak ‏(تحت ذروة الماء‎ ¥,Y0=¥,TA (1H am) ‏لخت‎ (3H ‏مد‎ ‎cm) ٠ر١1‎ 7-6 «(16H «m) ‏لبح ارا‎ «(2H «m) y,4Y-Y,.0 «(1H <m) 171 (HS ss) ‏تن )54,4 كذ‎ م٠١‎ S(H + M) YAAY C(H - M) YATE ‏(برث الإلكترونات):‎ 5 (Na +M) ‏في‎ 7007 03S 178 ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏ل‎ Gi ‏التجانس‎ dps vo 159 HO :CH;CN ‏مزيج من‎ (1) ‏المثال‎ ‎)٠١؛( ‏المركب‎ ‏نتج عن استخدام نفس الإجراء كما وصف في المثال )1( واستخدام كربامات بيوتيل‎ ‏في الخطوة 0 بدلا‎ tert-butyl glycine ‏ل ثث-بيوتيل غليسين‎ cyclobutyl carbamate ‏حلقي‎ Yo
Y44y oq (0 ) ‏الخام بعد الخطوة‎ carboxylic acid ‏وتنقية الحمض الكربو كسيلي‎ (°) urea ‏من اليوريا‎ ‘TFA ‏تحضيري المركب المسميى في العنوان في صورة ملح‎ HPLC ‏بواسطة‎ ‎5 ‎McO "so 2 oO ° 5
DLS
CTA
0 = OH 0 N 0
Vet ‏المركب‎ ‏ميغاهز؛ ,01450-4): خليط من زمراء دورانية بنسبة بلغت حوالي‎ ؛00١(‎ 'H NMR (1H ‏هن‎ 1,0 =J «d) V,AA (1H ‏هنل‎ 5. =J «d) ‏تت) تب‎ cbs) ‏كحك‎ Wa ‏لان‎ ٠ «(H) «m) Y,«A=Y, ١ «(1H ‏مز‎ ار١‎ -[ «d) Y,YA «(1H s) ‏مع إلا‎ «(1H ¢s) v,¢0 ءزه١‎ ال١‎ -[ «d) 0,6 «(1H <bs) 8,١ «(1H <m) 0,40", «(1H «m) ‏لاح يملا‎ oY «(1H «m) ‏محل‎ «(1H «m) 01-64 1 ‏را مزء‎ =] «d) ‏زم‎ «(1H «(2H ¢m) ‏همزء 11 قاعملا‎ A=) «d) 7 «(1H ‏همزء‎ 1,7 =] «d) £,Y4 «(6H «m) YANN, Y «(2H «m) ٠,١ ‏امتح‎ «(1H <m) Y,Yv-y,v1 «(3H s) Ya) ١ .(9H ¢ss) Ao و٠‎ , 41 «(1H <m) ‏الس د‎ «(9H «m) Y,EY-), VY (H+ M) ‏فلالا‎ (HM) ‏(برش الإلكترونات): 73ل‎ MS ‏تركيزه 70.07 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقآً ل‎ 11 HyO:CHiCN ‏مزيج من‎ (V) ‏المثال‎ Ve (Yeo) ‏المركب‎ ‏نتج عن استخدام نفس الإجراء كما وصف في المثال )1( واستخدام كربامات هكسيل‎ ‏في الخطوة 0 بدلا‎ tert-butyl glycine ‏ل نث-بيوتيل غليسين‎ cyclohexyl carbamate ‏حلقي‎ ‎:sodium salt ‏المركب المسمى في العنوان في صورة ملح الصوديوم‎ (©) urea ‏من اليوريا‎
NH
MeO. Na 7 0
OO
2 5 ‏م‎ ‎0 or oH ‏م‎ ‎6 ‎Veo ‏المركب‎ ‏من زمراء دورانية بنسبة بلغت حوالي‎ Ls :(DMSO-ds ‏ميغاهز؛‎ €++) 'THNMR «(1H ‏هزء‎ 1,0 =] «d) Y,A4 «(1H ‏هنء‎ 9,6 =) «d) AY «(1H <bs) AYA ‏دلتا‎ 5 a A=) «d) ‏م .إلا‎ «(1H ‏هنء‎ YoY =) «d) ‏فلالا‎ «(1H ¢s) ‏إلا‎ «(1H 0 ‏مل‎ ‎=] «d) 0,vA «(1H s) o,v¢ «(1H bs) 0,4 «(1H ‏نح جا ,4 هزء‎ «dd) ‏م إلا‎ «(1H 0 «(1H ‏ربخا هزء؛‎ AE =) «dd) £,¢Y «(1H ‏هرء؛‎ 5,26 =J «d) £,4) «(1H ‏هزء‎ ٠ s) 4 «(3H «m) YAT=€, 0 «(1H ‏هز؛‎ A=) «d) £,\¢ «(1H «m) 1-١ - 4 «(10H «m) ‏احالكرا‎ , va «(SH <m) Y,4)-V,. ¢ «(1H «m) ١ ١ ١ © «(3H .(oH ¢ss) ٠ ‏و تم‎ ٠ ‏مف‎ «(7H <m) ١ , «A
SHAM) AYE T(H-M) AE ‏(برش الإلكترونات):‎ 165 ٠ ‏تركيزه 76,07 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏نسبة التجانس وفقاً ل‎
A! A H,0 :CH;CN ‏مزيج من‎ (A) ‏المثال‎ ‎:) ٠١١ ‏كب‎ yall
H
MeO. a 2 0 0 2
AL 0
TL
0 0 OH 0 N 6 ٠١١ ‏المركب‎ ‘o
TY
‏نتج عن استخدام نفس الإجراء كما وصف في المثال )1( واستخدام كربامات بنتيل‎ ‏في الخطوة )0( بدلا‎ cyclohexyl glycine ‏لهكسيل حلقي غليسين‎ cyclopentyl carbamate ‏حلقي‎ ‎sodium salt ‏في العنوان في صورة ملح الصوديوم‎ andl ‏المركب‎ (0) urea ‏من اليوريا‎ ‏ميغاهزء ,01450-4): خليط من زمراء دورائنية بنسبة بلغت حوالي‎ £4 +) 'THNMR ‏,ا ل( [ح فر من‎ (1H ‏مل‎ 4,Y -[ «d) Ave ‏للل)‎ ess) ‏دلتا رخو 6ك‎ 4:1 °
At ‏زح‎ od) VY (TH ‏لفك - 6 مل‎ V,YY (1H ‏(ى‎ ١ (1H es) ‏ا‎ (1H (1H «s) ‏لا‎ (1H em) 14-4 (1H ‏كرا 4,0 هزء‎ =] edd) ١٠ (1H ‏هزء‎ ‎am) ‏لابطلا‎ (TH ‏فل‎ ١١,1 -( wd) ‏ان‎ (IH ‏آرت ااا همل‎ =] wd) 514 ( 8٠ «(1H ¢m) ‏محم‎ «(2H ‏بس‎ ¥.40—¢,.0 «(2H cm) 1-7 (1H =, YY (24H ‏(س‎ V,YV=V,AY (2H em) V,4Y=Y, 0 (1H ‏ارا 7 لس‎ «(3H (SH «m) +,AY (HAM) ‏عله‎ T(H = M) MY, E (ls SY) Gi) MS ‏تركيزه 70,00 في‎ TFA ‏معكوس الطور بالتصويل باستخدام‎ HPLC ‏ل‎ Gay ‏نسبة التجانس‎ 1595 HO:CH;CN ‏مزيج من‎ )9( ‏المثال‎ Vo (VV) ‏المركب‎ ‏نتج عن استخدام نفس الإجراء كما وصف في المثال )1( واستخدام كربامات بنتيل‎ urea ‏بدلا من اليوريا‎ cyclopentyl glycine ‏لبنتيل حلقي غليسين‎ cyclopentyl carbamate ‏حلقي‎ ‎(VF) ‏المقابل له (رقم المركب‎ Na ‏(©)؛ المركب المسمى في العنوان الذي حول إلى ملح‎ ‏فيما يلي).‎ )١( ‏.في الجدول‎ © )٠١( ‏المثال‎ ‎1153-1154 ‏معايرة بروتياز‎ ‏للاختراع‎ Gag ‏المستخدمة لتقييم المركب‎ enzymatic assay ‏توصف المعايرة الانزيمية‎ . 0 /84474 ‏ورقم‎ ٠/0986 ‏الراهن في نشرتي براءتي الاختراع الدوليتين رقم‎ (VY) ‏المثال‎ Yo ‏بناءً على الخلية‎ HCV ‏مأخوذ من‎ RNA ‏إجراء معايرة لتضاعف‎
> استنبات الخلايا حُددت خلايا من نوع ‎Huh?‏ تحافظ بشكل ثابت على وحدة تكررّية ل ‎HOV‏ مجيني فرعي ‎subgenomic HCV replicon‏ كما وصف مسبقاً (انظر ما جاء في المرجع ‎Lohman etal,‏ ‎Science 285: 110—113‏ .1999( وسميت بخط الخلايا ‎cell-line‏ 822.3. وحوفظ على الخلايا © 5822.3 في وسط إيرل مُعدل لدلبيكو ‎(DMEM) Dulbecco's Modified Earle Medium‏ مزود مصل بقري جنيني ‎Fetal Bovine Serum (FBS)‏ تركيزه ‎٠١‏ ونيومايسين ‎neomycin‏ تركيزه ‎١‏ ‏ملغم /مل (وسط قياسي)؛ وأثناء إجراء المعايرة؛ استخدم وسط ‎DMEM‏ مزوّد ب ‎FBS‏ تركيزه ‎٠‏ ويحتوي على ‎DMSO‏ بنسبة 70,0 ويخلو من نيومايسين ‎neomycin‏ (إوسط معايرة). وقبل ‎٠١‏ ساعة من إضافة ‎(CoS pall‏ أضيف أنزيم التربسين ‎trypsinized‏ إلى الخلايا 522.3 ‎٠‏ وخففت إلى أن أصبح تركيزها ‎50٠0٠0٠0‏ خلية/مل في الوسط القياسي. ووزع ‎٠7٠00‏ ميكرولتر (يحتوي على ‎٠٠٠٠١‏ خلية) في كل عين في صفيحة تحتوي على 46 ‎plate Lue‏ 11©»-96. ثم حضنت الصفيحة عند درجة حرارة بلغت 7م باستخدام ‎CO,‏ بنسبة 70 حتى اليوم التالي. المواد المفاعلة والمواد: ‎em (|‏ | الشركة | رقم الكتالوج | درجة حرارة التخزين_ ‎Wisent Inc‏ لدلبيكو ‎Gibco-BRL Dulbecco's PBS‏ ‎Whittaker‏ ‎Gibco-BRL Neomycin (G418)‏ ‎Gibco-BRL‏ ‏حجم مسامها ‎١77‏ ميكرومتر من نوع ‎PVDF‏ ‎yaa‏
عميقة مصنوعة من متعدد البروبيلين ‎Polypropylene Deep-‏ ‎Well Titer Plate‏ تحضير مركب الاختبار أضيف ‎٠١‏ ميكرولتر من مركب الاختبار (في ‎DMSO‏ تركيزه +0 )1( إلى ‎١‏ مل من وسط المعايرة بحيث بلغ التركيز النهائي ل ‎DMSO‏ 70.5 وغُرّض المحلول لأمواج فوق صوتية ‎sonicated‏ لمدة ‎V0‏ دقيقة ورشح من خلال وحدة ترشيح من شركة ميليبور ‎Millipore Filter Unit °‏ حجم مسامها ‎YY‏ ,+ ميكرومتر. ونقل 00 ميكرولتر من المادة الراشحة إلى الصف | لصفيحة معايرة تحتوي على عيون عميقة مصنوعة من متعدد البروبيلين ‎Cua Polypropylene Deep-Well Titer Plate‏ تحتوي الصفوف من ب إلى ح؛ على أجزاء مقدارها 40860 ميكرولتر من وسط المعايرة (الذي يحتوي على ‎DMSO‏ بنسبة 10+( وتستخدم لتحضير سلسلة من محاليل مخففة بمقدار النصف عن طريق نقل ال ‎fre‏ ‎٠‏ - ميكرولتر من صف إلى صف (لم يوجد أي مركب في الصف ح). وضع مركب الاختبار علي الخلايا سُفط وسط استنبات الخلايا من الصفيحة التي بها 97 ‎ly Tue‏ تحتوي على الخلايا 5223. وثقل 75 ميكرولتر من وسط المعايرة مع المحلول المخفف المناسب لمركب الاختبار من كل عين في صفيحة المركب إلى العين المقابلة في صفيحة استنبات الخلايا ‎Vo‏ (استخدم الصف ح بصفته الصف الذي "لا يحتوي على ضابط ‎("inhibition control Jari‏ وحضنت صفيحة استنبات الخلايا عند درجة حرارة بلغت 77م باستخدام غاز ‎CO,‏ نسبته 5/ لمدة ‎VY‏ ساعة. استخلاص ال يلل الخلوي الكل بعد فترة الحضن البالغة ‎VY‏ ساعة؛ استخلص ‎RNA‏ الخلوي الكلي من الخلايا 5223 ‎Y.‏ الموجودة في الصفيحة التي تحتوي على 46 عيناً باستخدام ‎alla‏ رنيزي 47 ‎RNeasy 96 kit‏ (بالعلامة التجارية المسجلة كياجين ‎«Qiagen®‏ كتيب رنيزي 1160050016 ‎(RNeasy‏ 449 ١م).‏ وباختصار؛ أزيل وسط المعايرة كلياً من الخلايا وأضيف ‎٠٠١‏ ميكرولتر من محلول منظم 7 (بالعلامة التجارية المسجلة كياجين ‎(Qiagen®‏ يحتوي على بيتا-مركبتو إيثانول ‎B-‏
1¢ ‎mercaptoethanol‏ تركيزه ‎VEY‏ ملي جزيئي إلى كل عين في صفيحة استنبات الخلايا التي تحتوي على 976 ‎lie‏ ورُجت الصفيحة الدقيقة بلطف لمدة ‎٠١‏ ثانية. ثم أضيف ‎٠٠١‏ ‏ميكرولتر من إيثانول ‎ethanol‏ تركيزه ‎77٠8‏ إلى كل عين في الصفيحة الدقيقة؛ ومزج باستخدام ‏ماصة مخبرية ‎pipetting‏ وأزيلت الحلالة ‎lysate‏ ووضعت على عيون صفيحة رنيزي 6 ‎Square-Well ‏الموضوعة أعلى قالب مربع العيون‎ (Qiagen® ‏(كياجين (علامة تجارية مسجلة)‎ oo ‏بالعلامة التجارية المسجلة كياجين ©0:08©0. وأحكم سد الصفيحة رنيزي 96 باستخدام‎ 6 ‏شريط وحمل القالب مربع العيون مع الصفيحة رنيزي 96 في الحامل ووضع في قادوس دوّار ‎rotor bucket‏ في جهاز فصل بالطرد المركزي ‎centrifuge‏ من نوع ‎4KISC‏ وفصلت العينة بالطرد المركزي بسرعة بلغت ‎٠0080‏ دورة في الدقيقة (حوالي ‎870٠0‏ تسارع الجاذبية ‏- الأرضية) ‎add‏ ؛ دقائق عند درجة حرارة الغرفة. وأزيل الشريط عن الصفيحة وأضيف 4 مل من محلول منظم ‎RWI‏ (من طقم رنيزي 46 بالعلامة التجارية المسجلة كياجين ‎(Qiageng®‏ إلى كل عين في الصفيحة رئنيزي 476. وأحكم ‎Tu‏ الصفيحة رنيزي 46 باستخدام ‏قطعة جديدة من الشريط وفصلت بالطرد المركزي بسرعة بلغت ‎٠٠٠١‏ دورة في الدقيقة لمدة ‏؛ دقائق عند درجة حرارة الغرفة. ووضعت الصفيحة رنيزي 96 أعلى قالب مربع العيون ‎6 ‏(من طقم رنيزي‎ RPE ‏مل من محلول منظم‎ ١,8 ‏وأزيل الشريط وأضيف‎ coal ‏نظيف‎ vs
AT ‏إلى كل عين في الصفيحة رنيزي‎ (Qiageng® ‏بالعلامة التجارية المسجلة كياجين‎ ‏وأحكم منَدّ الصفيحة رنيزي 96 باستخدام قطعة جديدة من الشريط وفصلت بالطرد المرككزي‎ ‏دورة في الدقيقة لمدة ؛ دقائق عند درجة حرارة الغرفة. وأزيل الشريط‎ 00٠0 ‏بسرعة بلغت‎ ‏(من طقم رنيزي 6 بالعلامة‎ RPE ‏مل من المحلول المنظم‎ ١,8 ‏وأضيف مقدار آخر بلغ‎ ‏© التجارية المسجلة كياجين ‎(Qiageng®‏ إلى كل عين في الصفيحة رنيزي 270 وأحكم ‎Su‏ ‏الصفيحة رنيزي ‎AT‏ باستخدام قطعة جديدة من الشريط وفصلت بالطرد المركزي بسرعة ‏بلغت ‎00١0‏ دورة في الدقيقة لمدة ‎٠١‏ دقائق عند درجة حرارة الغرفة. وأزيل ‎day pi‏ ووضعت الصفيحة رنيزي 976 أعلى حامل يحتوي على أنابيب تجميع دقبقة ‎collection microtubes‏ سعتها ‎١,١‏ مل. وصول الغا عن طريق إضافة ‎5٠‏ ميكرولتر من ‎JW cla vo‏ من رناز ‎RNase-free water‏ إلى كل عين؛ وإحكام سد الصفيحة باستخدام قطعة جديدة من الشريط وحضن لمدة دقيقة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. ثم فصلت الصفيحة بالطرد
+
المركزي بسرعة بلغت ‎٠٠0٠١‏ دورة في الدقيقة لمدة ؛ دقائق عند درجة حرارة الغرفة. وكرّرت خطوة التصويل باستخدام حجم ثان من الماء الخالي من رناز ‎RNase‏ مقداره ‎٠‏ ميكرولتر. وتم تخزين الأنابيب الدقيقة التي تحتوي على ال ‎RNA‏ الخلوي الكلي عند
درجة حرارة بلغت ‎Va‏
° تحديد كمية ال ‎RNA‏ الخلوي الكل حددت كمية ال ‎RNA‏ باستخدام نظام ستورم ‎Ade)‏ تجارية مسجلة) ‎STORM®‏ ‏(موليكيولار دينامكس (علامة تجارية مسجلة) ‎(Molecular Dynamics®‏ باستخدام طقم تحديد كمية ‎RNA‏ بالعلامة التجارية المسجلة ريبوجرين ‎RiboGreen®‏ (موليكيولار بروبس (علامة تجارية مسجلة) ‎(Molecular Probes®‏ وباختصارء؛ خففت مادة ريبوجرين المفاعلة ‎٠٠١ RiboGreen reagent ٠‏ مرة في ‎TE‏ (مكون من ‎Tris-HCI‏ تركيزه ‎٠١‏ ملي جزيئي ودرجة حموضته ©,/اء 5 ‎EDTA‏ تركيزه ‎١‏ ملي جزيئي). وبشكل عام؛ خفف ‎٠٠‏ ميكرولتر من المادة المفاعلة في ‎٠١‏ مل من ‎a” 833 TE‏ منحنى ‎ld‏ ل ‎RNA‏ ريبوسومي ‎ribosomal RNA‏ في ‎TE‏ إلى أن بلغ تركيزه ¥ ميكروغرام/مل ومن ثم نقلت مقادير محددة مسبقا (بلغت ‎٠١ 7١ cfr con 0٠٠١‏ ©؛ ¥ وصفر ميكرولتر) من محلول ال ‎RNA‏ ‎vo‏ الريبوسومي في صفيحة جديدة تحتوي على 976 عيناً (من شركة كوستار ‎COSTAR‏ رقم الكتالوج ‎(FAY‏ وأكمل الحجم إلى ‎٠٠١‏ ميكرولتر باستخدام ‎TE‏ وبشكل عام؛ استخدم العمود ‎)١(‏ في الصفيحة التي تحتوي على 96 ‎lie‏ لرسم المنحنى القياسي واستخدمت العيون الأخرى لعينات ال ‎RNA‏ المراد تحديد كميتها. ونقل ‎٠١‏ ميكرولتر من كل ‎die‏ 8778 يراد تحديد كميتها؛ إلى العين ‎ALE‏ في الصفيحة التي تحتوي على 176 ‎glue‏ وأضيف ‎٠ ©‏ ميكرولتر من ‎TE‏ وأضيف ‎aaa‏ مقداره ‎٠٠١‏ ميكرولتر من مادة ريبوجرين المفاعلة المُغففة إلى كل عين في الصفيحة التي تحتوي على 16 ‎Te‏ وحضنت لفترة زمنية تراوحت من دقيقتين إلى © دقائق عند درجة حرارة الغرفة؛ وحفظت ‎Tum‏ عن الضوء ‎Cua)‏ ‏يزود ‎٠١‏ ميكرولتر من عينة ‎RNA‏ في حجم نهائي مقداره ‎٠٠١0‏ ميكرولتر محلولاً ‎lida‏ ‎٠‏ مرة) ‎٠‏ وقيست شدة القلورة ‎fluorescent intensity‏ لكل عين باستخدام نظام بالعلامة التجارية ‎ vo‏ المسجلة ستورم ‎STORM®‏ (موليكيولار ديناميكس (علامة تجارية مسجلة) ‎(Molecular Dynamics®‏ .وشكل منحنى قياسي ‎ply‏ على الكميات المعروفة لل ‎RNA‏
الريبوسومي وقيم شدة الفلورة الناتجة. وحدد تركيز ال ‎RNA‏ في العينات التجريبية من المنحنى القياسي وعدل بالنسبة للمحلول المخفف ‎٠١‏ مرة. المواد المفاعلة والمواد ‎Tube Strips‏ ‎Molecular Probe Ribogreen RNA‏ كياجين ‎Qiagen‏ 19573 درجة حرارة الغرفة ‎Blocks‏ ‏تفاعل بلمرة أنزيمية متسلسل بالنسخ العكسي ‎(RT-PCR)‏ في الوقت الفعلي ‎Real-Time RT-‏ ‎PCR °‏ أجري ‎RT-PCR‏ في الوقت الفعلي باستخدام نظام كشف سياق من نوع إيه بي آي بريزم + + ‎ABI Prism 7700 Sequence Detection System VV‏ باستخدام طقم ‎RT-PCR‏ ‏من نوع تاكمان 5( زد ‎(TaqMan EZ)‏ (من شركة بيركن-إلمر أبلايد بيوسيستمز (علامة تجارية مسجلة) ‎(Perkin-Elmer Applied Biosystems®‏ واستمتل ‎RT-PCR‏ لتحديد كمية ‎٠١‏ 5 عند الموقع ‎٠‏ لل ‎RNA‏ المأخوذ من ‎HCV‏ باستخدام تقنية ‎Taqman technology (LSU‏ (روتش موليكيولار دياجنوستيكس سيستمز ‎(Roche Molecular Diagnostics Systems‏ مشابهة للتقنية الموصوفة مسبقاً في المرجبع 327—332 :37 ‎J.
Clin.
Microbiol.‏ .1999 ملة ‎-(Martell et‏ ويستغل النظام الفعالية الحالة النووية ‎7-٠ nucleolytic activity‏ لبوليمراز ‎DNA‏ ‏أمبلي تاك و1118مم. وباختصار؛ تستخدم الطريقة مسبار تهجين فلوري ثنائي الوسم
Tv
‎dual-labeled fluorogenic hybridization probe‏ (مسبار ‎(PUTR‏ يطوع بصفة خاصة المرصاف ‎template‏ الموجود بين بوادىء تفاعل البلمرة الأنزيمية المتستسل ‎PCR primers‏ (البادئين ‎(V2 YA AVY‏ ويحتوي الطرف ©" للمسبار على مركب ‎le‏ فلوري ‎fluorescent reporter‏ ( ١-كربوكسي‏ فلوريسين ‎([FAM] 6-carboxyfluorescein‏ ويحتوي الطرف م“ على مركب كابت تفسفر فلوري ‎fluorescent quencher‏ ( ١-كربوكسي‏ رباعي مثيل رودامين ‎[TAMRA] 6-carboxytetramethylrhodamine‏ ). وكبت طيف ابتعاث ‎emission spectrum‏ المركب المبلّغ ‎FAM‏ بفعل المركب كابت التفسفر الموجود على مسبار التهجين السليم ‎intact hybridization probe‏ ويُطلق انحلال ‎Nuclease degradation JL sill‏
‏في مسبار التهجين ‎hybridization probe‏ المركب المبلغ؛ مما يؤدي إلى حدوث زيادة في ابتعاث
‎٠١‏ الفلثورة ‎fluorescence emission‏ ويقيس كاشف السياق 7700 ‎ABI Prism‏ الزيادة في ابتعاث الفلورة بشكل مستمر أثناء التضخيم ب ‎PCR amplification PCR‏ بحيث يتناسب المنتج المضخم ‎Gli‏ طردياً مع الإشارة ‎Jag signal‏ رسم التضخيم في وقت مبكر من التفاعل عند
‏نقطة تمثل الطور اللوغاريتمي ‎logarithmic phase‏ لتجمع المنتج. وعرفت نقطة تمثل عتبة كشضف ل65001: ‎detection‏ محدّدة للزيادة في إشارة الفلورة ‎fluorescent signal‏ المرافقة للزيادة
‏الأسية ‎exponential growth‏ لمنتج ‎PCR‏ بالنسبة لكاشف السياق ‎ili sequence detector‏ عتبة الدورات ‎(Cy) cycle threshold‏ وتتناسب قيم ‎Cp‏ تناسباً عكسياً مع كمية ‎RNA‏ المأخوذ من
‎HCV‏ الداخل؛ بحيث أنه في ظروف ‎PCR‏ مماثلة؛ كلما زاد التركيز الابتدائي ل ‎RNA‏ المأخوذ
‏ْ من ‎(HCV‏ قلت قيمة ‎.Cr‏ وتشثكل منحى قياسي أوتوماتياً باستخدام نظام الكشف ‎ABI Prism 7700‏ من خلال رسم ‎Cr‏ مقابل كل تخفيف قياسي لتركيز معروف ل ‎RNA‏ 107.
‏9 وتضاف ‎Clie‏ مرجعية للمنحنى ‎ull‏ على كل صفيحة ل ‎RT-PCR‏ وتم تخليق ‎RNA‏ لوحدة تكررية ‎HCV‏ (عن طريق انتساخ 17 ‎transcription‏ 17)؛ خارج الجسم
‏الحي؛ تنقيته وتحديد كميته بواسطة الكثافة البصرية عند طول موجي يبلغ ‎7٠١‏ نانومتر (:ط0) ‎density‏ لدهامه. وباعتبار أن ‎١‏ ميكروغرام من هذا ال ‎"٠١7*7١٠ RNA‏ نسخة
‎aed ‏عثت‎ A ‏للحصول على عغثت نت نك‎ Asda ‏حضرت محاليل‎ (RNA
‎Yo‏ نسخة ‎Of Jina RNA‏ ميكرولتر. كما أنه دمج ‎Huh-7 RNA‏ خلوي ‎SIS‏ مع كل محلول مخفف )00 ‎Of) je sil‏ ميكرولتر). ومزج © ميكرولتر من كل وسط قياسي مرجعي
TA
‏ميكرولتر من مزيج المواد المفاعلة‎ to ‏مع‎ (Huh-7 RNA + HCV ‏(وحدة تكررية ل‎ ‏في الوقت الفعلي.‎ RT-PCR ‏واستخدم في تفاعل‎ ‏على صفائح‎ cull ‏في الوقت الفعلي للعينات التجريبية التي‎ RT-PCR ‏تفاعل‎ xy ‏خلوي كلي‎ RNA ‏رنيزي تحتوي على 16 عيناً عن طريق مزج 0 ميكرولتر من كل عينة من‎ ‏ميكرولتر من مزيج المواد المفاعلة.‎ fo ‏مع‎ 0 ‏المواد المفاعلة والمواد‎ ‏المنتج الشركة رقم الكتالوج درجة حرارة التخزين‎
RARE N808-0236 | ‏بيه ي أبلايد بيوسيستمز‎ TaqMan EZ RT-PCR ‏طقم‎ ‎PE Applied Biosystems ‏حرارة الغرفة‎ da, N801-0935 |. ‏من .بيه ئي أبلايد بيوسيستمز‎ Optical Caps ‏قلنسوات بصرية‎
PE Applied Biosystems MicroAmp ‏نوع‎ ‏درجة حرارة الغرفة‎ NBOI0S60 abwpusy ‏بيه ئي أبلايد‎ Lie 976 ‏صفيحة تفاعل تحتوي على‎
PE Applied Biosystems MicroAmp ‏بصرية من نوع‎ ‏تحضير مزيج المواد المفاعلة‎ ‏الحجم لصفيحة‎ .
Not ay . ‏لعينة واحدة‎ saad) ‏واحدة (ميكرولتر) التركيز النهائي‎ 7 PRN ‏المكون‎ ‏ل (ميكرولتر) )41 عينة+ حجم ميت)‎ ‏م ا‎ Rnase ‏من رناز‎ JA cla
Lo TaqMan EZ ‏محلول منظم من‎ ‏ضعف واحد‎ AA ١ ‏تركيزه 5 أضماف‎ ‏ملي جزيئي‎ Oo AA 1 ‏ملي جزيئي‎ Yo ‏تركيزه‎ Mn(OAc), ‏ميكروجزيئي‎ ٠ VEY \,0 ‏ملي جزيثي)‎ ٠١( dATP ‏ميكروجزيئي‎ ٠ ٠١ \,0 ‏ملي جزيئي)‎ ١ ) dCTP ‏ميكروجزيئي‎ ٠5 Vey ‏ملي جزيئي) م‎ V+) dGTP ‏ميكروجزيئي‎ ٠ ‏ملي جزيئي) م ا‎ ٠ ) dUTP
Forward Primer ‏بادئ تقد‎ ‏نانوجزيئي‎ ٠٠ aA ١ THE ‏ميكروجزيئي)‎ ٠١(
Reverse Primer ‏بادئ عكسي‎ ‏نانوجزيني‎ Yeo A ١ ‏ميكروجزيئي)‎ ٠١( ‏نانوجزيئي‎ ٠ 14% Y ‏ميكروجزيئي)‎ ©( PUTR ‏مسبار‎
‎Amp ye ny‏ م" £4 61 وحدة/ميكرولتر الحجم الكل ‎to‏ £41 سياق بادئ تقدمي (سياق تمييز رقم ‎:))١(‏ ‎5'-ACG CAG AAA GCG TCT AGC CAT GGC GTT 401-3'‏ سياق بادئ عكسي (سياق تمييز رقم ‎:))١(‏ ‎5'-TCC 00 GGC ACT CGC AAG CAC CCT ATC AGG-3'‏ ‎o‏ ملاحظة: تضخم تلك البادئات منطقة تحتوي على ‎YOU‏ نوويد موجودة ضمن منطقة 0" غير المترجمة ل ‎HCV‏ ‏سياق مسبار ‎PUTR‏ (سياق تمييز رقم (9)): ‎6FAM-‏ ‎TGG TCT GCG GAA CCG GTG AGT ACA CC-‏ ‎TAMRA ١‏ ضوابط لا تحتوي على مرصاف ‎Template Control (NTC)‏ 110: على كل صفيحة؛ تستخدم ؛ عيون بصفتها ‎NTC‏ وبالنسبة لهذه الضوابط؛ فإنه يضاف © ميكرولتر إلى العين بدلا من ‎.RNA‏ ‏ظروف ‎gall‏ 3 الحرارية ‎thermal cycling‏ ‎Oo.‏ ; دقيقتان ‎٠‏ م ‎٠‏ دقيقة .9 م © دقائق ‎Vo‏ ‏مم ‎Yo‏ ثائية ‎١‏ ‏لمدة دورتين ‎ale‏ دقيقة واحدة ‎٠‏ م ‎٠‏ ثانية 1 لمدة 56 دورة كم دقيقة واحدة
وبعد انتهاء ‎(RT-PCR Jeli‏ يتطلب تحليل البيانات تحديد إشارة فلورة عتبية ‎threshold fluorescence signal‏ لصفيحة ‎PCR‏ وشكئسل منحنى قياسي عن طريق رسم ‎Ct dad‏ مقابل عدد نسخ ال ‎RNA‏ المستخدم في كل تفاعل مرجعي. وتستخدم قيم ‎Ct‏ التي حصل ‎lle‏ ‏لعينات المعايرة لاستكمال ‎interpolate‏ عدد نسخ ‎Bly RNA‏ على المنحنى القياسي.
° وفي النهاية؛ تم معايرة عدد نسخ ال ‎RNA‏ (بناءً على تحديد كمية ‎RNA‏ ريبوجرين ‎RiboGreen‏ لل ‎RNA‏ الكلي المستخلص من عين استنبات الخلايا) وبر عنه بوحدة مكافئات مجينية/ميكرو غم من ‎RNA‏ الكلي [عر/»ع].
وكان عدد نسخ ال ‎[ge/pg] RNA‏ لكل عين في صفيحة استنبات الخلايا عبارة عن مقياس ‎aS‏ تضاعف ‎RNA‏ مأخوذ من ‎HOV‏ في وجود تراكيز مختلفة للمثبط. وحسبت النسبة ‎٠‏ - المئوية للتثبيط ‎(inh)‏ باستخدام المعادلة التالية: ‎inh)/(g.e./pg cthX 100‏ عنر/.».ع)]-100 وطبق توفيق منحنى غير خطي ‎non-linear curve fit‏ مع نموذج هيل ‎Hill model‏ على بيانات تراكيز التثبيط ‎cinhibition-concentration data‏ وحسب التركيز الفغّال بنسبة 756 ‎(ECs)‏ باستخدام برامجيات ‎SAS‏ (نظام برامجي إحصائي ‎Statistical Software System‏ شركة إس 4 إس إنستيتيوت؛ إنك. ‎«SAS Institute, Inc.‏ مدينة كاري؛ نورث كارولينا). وعندما قيمت المركبات وفقاً لهذا الاختراع في المعايرات الأنزيمية والمعايرات المعتمدة على الخلايا السابقة؛ وجد أن المركبات فعَّالة بدرجة عالية. وبشكل أكثر تحديدآ؛ كان للمركبات ‎IC — ad‏ تقل عن ‎١١‏ ميكروجزيئي في معايرة بروتياز م1153-1154 وقيم ل ,20 تقل عن 0,0 ميكروجزيئي في معايرة تضاعف ‎RNA‏ مأخوذ من ‎HCV‏ المعتمدة على ‎Y.‏ الخلايا. المثال ‎(YY)‏ ‏معايرات_النو عية ‎Specificity Assay‏ توصف معايرات النوعية المستخدمة لتقييم انتقائية هذا المركب في نشرة براءة الاختراع الدولية رقم مر
إلا وعندما © ‎Cae‏ المركبات في معايرات النوعية؛ وجد أن المركبات بالصيغة ‎١‏ ‏انتقائية في أنها لا تُُظهر تثبيطا كبيرا في عمليات معايرة إلستاز كريات بيضاء بشرية ‎Human Leukocyte Elastase‏ وكاثبسين ‎.Cathepsin 8 (B)‏ المثال ‎(VY)‏ ‏° الخواص الحركية ‎Pharmacokinetic Properties 428 gall‏ تتُظهر المركبات ‎Gay‏ للاختراع الراهن أيضاً خواصاً حركية دوائية جيدة مثلاً وجودها بمستويات عالية في البلازما ‎plasma‏ في الجرذ بعد ساعة واحدة وساعتين من إعطائه جرعة منها عن طريق الفم مقدارها © ملغم /كغم. وبشكل أكثر وضوحا استخدمت المعايرة التالية؛ تقصي الامتصاص الفموي ‎oral absorption screen Ve‏ في الجسم الحي؛ لتحديد مستويات مركبات الاختبار في البلازما بعد إعطائها عن طريق الفم في جرة: المواد والطرق ‎.١‏ الطريقة المستخدمة لتجميع المركبات ("انتقاء العليبات ‎:("Cassette Selection‏ اعتمد انتقاء المركبات المراد تجميعها في "عليبة ‎"cassette‏ على تماثلها البنيوي ‎structural similarity Vo‏ وخواصها الكيميائية الفيزيائية ‎physicochemical‏ وحذدّت طريقة استخلاص في طور صلب ‎solid phase‏ قابلة للتطبيق على جميع المركبات المنتقاة. وبناءً على الاختبار الابتدائي حيث أضيف كل مركب إلى بلازما الجرذ وفحص بواسطة ‎HPLC‏ أو الاستشراب بسائل عالي الأداء/المطيافية الكتلية ‎(MS/HPLC)‏ عند تركيز بلغ 8 ميكروجزيئي» استخدم زمن البقاء ‎(retention time‏ الكتلة الأيونية ‎jonic mass‏ وعملية © الفصل الممكنة بين المركبات بواسطة ‎HPLC‏ و/أو ‎MS/HPLC‏ كأساس لتجميع © إلى ؛ مركبات في "عليبة" واحدة. ". تحضير السواغات والمركبات الفموية تحتوي كل "عليبة" من ؟ إلى ؛ مركبات بمقدار ‎aly‏ © أو ؛ ملغم /كغم لكل مركب. وحضّّرت العليبات في صورة معلّق فموي في مثيل سليلوز ‎methylcellulose‏ مائي ‎vo‏ تركيزه 0,5 وأحادي أوليات متعدد أكسي إثيلين سوربيتان ‎)٠١(‏
ل ‎polyoxyethylene (20) sorbiton monooleate‏ (بالعلامة التجارية توين- ‎(Tween-80 78 ٠‏ تركيزه ‎٠"‏ /. وبلغ حجم الجرعة ‎٠١‏ مل/كغم عن طريق التغذية الأنبوبية الفموية ‎coral gavage‏ ‎LY‏ تقدير الجرعات وأخذ العينات من البلازما: صؤمت ذكور جرذان من نوع سبراجي داولي ‎Sprague Dawley‏ طوال الليل في © أقفاص منفردة مع إمكانية حصولها على دكستروز ‎dextrose‏ مائي تركيزه ‎./٠١‏ وأعططي جرذان جرعة من كل "عليبة". وأخذت عينات من البلازما بلغ مقدارها حوالي ‎١‏ مل بعد إعطاء جرعات للجرذين بساعة واحدة وساعتين وجمعت لاستخلاصها وتحليلها. ؛. استخلاص وتحليل المركبات: من كل عليبة؛ استخلصت عينات البلازما المأخوذة بعد ساعة واحدة ‎(oie lug‏ ‎Ve‏ البلازما الغفل ‎plasma‏ !18؛ والبلازما الغفل المضاف إليها جميع المركبات بتركيز بلغ 8 ميكروجزيئي لكل ‎dele‏ باستخدام طريقة الاستخلاص في طور صلب. وحللت العينات بواسطة 1101.0 و ‎MS/HPLC‏ لغرض المقارنة. وقدرت التراكيز في البلازما بناءً على التركيز المفرد الذي بلغ 0+ ميكروجزيئي كمعيار. ‎ic‏ معايرتها في عملية التقصي السابقة؛ تبين أن المركبات في الأمثلة من ‎)١(‏ إلى ‎١‏ | (4) لهذا الاختراع موجودة بمستويات ‎Alle‏ في البلازما بعد إعطائها عن طريق الفم بفترة بلغت ساعة واحدة وساعتين؛ حيث بلغ متوسط مستواها في بلازما الدم 1,77 ميكروجزيئي و 71 ميكروجزيئي على الترتيب. ولم يكن الامتصاص الفموي ‎oral absorption‏ الكبير لمركبات هذا الاختراع في الجسم الحي الذي ظهر في هذه التجربة ‎clad gia‏ نظر للامتصاص الفموي المنخفض عمومآ الذي يتميز به هذا النوع من الببتيدات ‎peptides‏ ويجعل الامتصاص ‎٠‏ الفموي السريع هذه المركبات مفيدة لمعالجة الإصابة ب 1167. ويبين الجدول التالي المركبات النموذجية وفقآ للاختراع. وبالاتفاق مع الوصف الراهن ‎Lia‏ كان لجميع المركبات قيم ل ‎ICH‏ تقل عن ‎١.1‏ ميكروجزيئي في معايرة بروتياز 0153-54 وقيم ل ‎ECs‏ تقل عن ‎١#‏ ميكروجزيثي في المعايرة المعتمدة على الخلايا لتقتضاعف ال ‎RNA‏ المأخوذ من ‎HCV‏
Mee mn AL ‏2ج‎
MeQ. ‏د‎ Twa, ‏حر‎ ‏بل ملي‎ ’ © 0 2 _ ‏عله م‎ RR RR SAE a. == ‏و‎ ‏7ص‎ OH ٠ tert-butyl ‏ةلالا‎ CL ‏ثث-بيوتيل‎ ‎OH ١٠١١ tert-butyl
QL ses
Ae ١ , ¢ OH ١ ٠ tert-butyl ‏لل ثث-بيوتيل‎ 4YA,0 CL > Vey tert-butyl J
LL ‏ثث-بيوتيل‎ ‎YVo,¢ OH ٠ tert-butyl! ‏ثث-بيوتيل‎ ‎AY , $ OH ٠. tert-butyl wes CL
OH ٠١ ‏.ل“ 4م‎
OH ٠١١ ‏ا‎
ل قائمة السياقات ‎>١٠ ١<‏ سياق التمييز رقم: ؟ م <١٠؟>‏ سياق تميز رقم ‎١‏ ‎<YYY>‏ الطول: ‎٠١‏ ‏<١؟>‏ النوع: ‎DNA‏ ‏<١؟>‏ الكائن الحي: سياق اصطناعي ‎<YY >‏ الميزة: ‎<YYY>‏ معلومات أخرى: بادئ تقدمي <. . > سياق ‎١‏ ‎acgcagaaag cgtctagcca tggcgttagt‏ ‎Vo‏ ‎<YY >‏ سياق تمييز رقم ‎١‏ ‎١١<‏ ؟> الطول: ‎٠١‏ ‎<Y\Y>‏ النوع: ‎DNA‏ ‏<١؟>‏ الكائن الحي: سياق اصطناعي ‎<YY> 0‏ الميزة: <777>معلومات أخرى: بادئ عكسي ‎“el‏ ¢ < سياق: ‎Y‏ ‎tccecggggca ctcgcaagca ccctatcagg Ye‏ ‎<YY >‏ سياق تتميز رقم “* ‎>7١١<‏ الطول: ‎١‏ ‎١<‏ ؟> النوع: ‎DNA‏ ‎>7١9< ©‏ الكائن الحي: سياق اصطناعي ‎٠١<‏ ؟>الميزة: ‎<YYY>‏ معلومات أخرى: مسبار ‎PUTR‏ ‎ve‏ ¢ < سياق: ‎Ay‏ ‎Yo‏ ‎tggtctgcgg aaccggtgag tacacc‏

Claims (1)

  1. ولا عناصر الحماية ‎١‏ = مركب بالصيغة )1( : نمؤا ب
    اح ‎MeO ANG‏ حر ‎Y‏ & ّّ 3ج 0 ‎Cr‏ ’ 5 رس الى 8 نج 0 0 اج 0 ‎H‏ ‏° )0 1 حيث ‎RY‏ يمثل هيدروكسي ‎hydroxy‏ أو ‎NHSOR'™‏ حيث ‎hey R'‏ ألكيل ‎(Crs)‏ ‏¢ الوللدزيى0)؛ ألكيل حلقي ‎(Cs)‏ الولتقماهلرهربين) أو (ألكيمل (..6)- ألكيل 0 حلقي (مبت)) ‎¢{(Croalkyl-(Css)eycloalky}‏ يحمل كل منها بشكل اختياري بديلاً 1 واحداً إلى ثلاثة بدائل من هالى ‎chalo‏ سيانو ‎ccyano‏ نترو دنه ألكيسل ‎0—(Ci.)‏ ‏ل ‎<O-(Cpg)alkyl‏ أميدو ‎amido‏ أمينو ‎amino‏ أو ‎R™ phenyl Ji‏ يسثل أريل ‎A‏ © اناه © أو أريل ‎aryl Cio‏ .© يحمل بشكل اختياري بديلاً واحدآً إلى ثلاثة بدائل ‎q‏ من هالو ‎chalo‏ سيانو ‎«cyano‏ نترو دنه ألكيل ‎«(Cgalkyl (Cus)‏ ألكيل ‎٠‏ (ى©)-ه ‎<O-(Cio)alkyl‏ أميدى ‎camido‏ أمينو ‎amino‏ أو فنيل ‎¢phenyl‏ 82 يمثل ألكيل ‎"١‏ حلقي ‎¢(Ca)eycloalkyl (Cos)‏ ث1 يمثل ثث-بيوتيل ‎t-butyl‏ أو ألكيل حلقي ‎(Cs)‏ ‎(Cs) cycloalkyl VY‏ و ‎RY‏ يمثل ألكيل حلقي (مت) ‎(Cus) cycloalkyl‏ أو ملح مقبول صيدلياً ‎pharmaceutically acceptable salt 7‏ منها. ‎١‏ “- المركب بالصيغة 1 وفقآً ‎pa ial‏ الحماية ١ء‏ حيث ‎RN‏ يمثفل هيدروكسي ‎<hydroxy‏ ‎Y‏ 11506 بروبيل حلقي-:211150 ‎.NHSO,Ph sl NHSO,cyclopropyl‏
    ‎١‏ *- المركب بالصيغة 1 وفقاً لعنصر الحماية ‎oF‏ حيث لي بروبيل حلقي- :11150 ‎NHSO,cyclopropyl Y‏ أو 00 \ ¢- المركب بالصيغة 1 وفقاً لعنصر الحماية ‎R? Cua XY‏ يمثل هيدروكسي ‎hydroxy‏ ‎١‏ 0— المركب بالصيغة ‎Gy T‏ لعنصر الحماية )0 حيث “© ‎Jie‏ بنتيل حلقي ‎cyclopentyl‏ أو ‎Y‏ هكسيل حلقي ‎.cyclohexyl‏ ‎١ ١‏ المركب بالصيغة ! وفقا لعنصر الحماية ©؛ حيث ©8 يمثل بنتيل حلقي ‎cyclopentyl‏ ‎١‏ 7- المركب بالصيغة ‎T‏ وفقاً لعنصر الحماية ١؛‏ حيث 8 يمثل ثث-بيوتيل ‎t-butyl‏ أو همكسيل ‎١‏ حلقي ‎.cyclohexyl‏ ‎—A ١‏ المركب بالصيغة ‎Gig I‏ لعنصر الحماية ‎Gua oF‏ 83 يمثل ثث-بيوتيل ‎t-butyl‏ ‎0١‏ +- المركب بالصيغة 1 ‎Gig‏ لعنصر الحماية ٠؛‏ حيث “© ‎Jia‏ بيوتيل حلقي ‎cyclobutyl‏ أو ‎Y‏ بنتيل حلقي ‎.cyclopentyl‏ ‎-٠٠ ١‏ المركب بالصيغة ] وفقاً لعنصر الحماية 9؛ حيث ‎R*‏ يمثل بنتيل حلقي ‎.cyclopentyl‏ ‎-١ ١‏ المركب بالصيغة 1 ‎Gag‏ لعنصر الحماية )¢ حيث ‎R'‏ يمثل هيدروكسي ‎chydroxy‏ يمثل ‎Y‏ كل من ‎R?‏ و “18 بنتيل حلقي ‎cyclopentyl‏ و 183 يمثل ثث-بيوتيل ‎t-butyl‏ ‎-١ ١‏ المركب بالصيغة ‎T‏ وفقاً لعنصر الحماية ‎١١‏ حيث ‎Jia R'‏ هيدروكسي ‎Jia R? chydroxy‏ ‎Y‏ بيوتيل حلقي ‎Jia 17 ccyclobutyl‏ ثث-بيوتيل ‎RY t-butyl‏ بنتيل حلقي ‎.cyclopentyl‏
    144y vv ‏يمثل‎ R? <hydroxy ‏يمثل هيدروكسي‎ R! dus 3 ‏لعنصر الحماية‎ (ad, 1 ‏المركب بالصيغة‎ -١١ ١ .cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ R* ‏و‎ t-butyl ‏ثث-بيوتيل‎ Sia R? ‏هكسيل حلقي ال«عاماهن»‎ Y R? ‏ويمثل كل من‎ «NHSO,Ph Sia R! Cua ‏لعنصر الحماية ل‎ (ad, I ‏المركب بالصيغة‎ —-\¢ \ t-butyl ‏يمثل ثث-بيوتيل‎ R? ‏و‎ cyclopentyl ‏حلقي‎ Jan RY ‏و‎ ¥ ‏يمثل‎ R? chydroxy ‏يمثل هيدروكسي‎ RY ‏حيث‎ ١١ ‏المركب بالصيغة 1 وفقآً لعنصر الحماية‎ -١# ٠١ ‏يمثل بيوتيل حلقي‎ RY ‏و‎ t-butyl ‏ثث-بيوتيل‎ Jia 187 ‏و‎ «cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ Y .cyclobutyl 7 ‏يمثل‎ R? chydroxy ‏هيدروكسي‎ Jia R' ‏حيث‎ oY ‏المركب بالصيغة 1 وفقآً لعنصر الحماية‎ - ١ .cyclohexyl ‏هكسيل حلقي‎ RY t-butyl ‏يمثل ثث-بيوتيل‎ R® «cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ 7 ‏ويمثل‎ chydroxy ‏هيدروكسي‎ Jia 1! ‏حيث‎ ١١ ‏المركب بالصيغة 1 وفقاً لعنصر الحماية‎ -١١ ١ .cyclohexyl ila ‏و 15 هكسيل‎ cyclopentyl ‏بنتيل حلقي‎ RY ‏كل من 2 و‎ Y ‏ويمثل‎ chydroxy ‏يمثل هيدروكسي‎ RY ‏حيث‎ ١ ‏لعنصر الحماية‎ Gg 1 ‏المركب بالصيغة‎ —1A ١ «cyclopentyl Als ‏بنتيل‎ R* ‏كل من ث و تج و‎ Y ‏مضاد لفيروس‎ JL" ad aie ‏يشتمل على‎ pharmaceutical composition ‏تركيب صيدلي‎ —14 \ ‏لعنصر الحماية ١؛ أو ملح‎ Gag] ‏من مركب بالصيغة‎ anti-hepatitis © C ‏التهاب الكبد‎ ‏مادة حاملة‎ ae admixture ‏منه؛ في خليط‎ pharmaceutically acceptable salt ‏و مقبول صيدلياً‎ ‏مقبول‎ vehicles ‏مقبولة صيدلياً واحدة أو أكثر أو سواغ‎ adjuvants ‏65م مادة مساعدة‎ ‏صيدلياً واحد أو أكثر.‎ 8 ‏وفقاً لعنصر الحماية 9٠؛ يشتمل أيضاً‎ pharmaceutical composition ‏التركيب الصيدلي‎ -٠ ١
    VA ‏واحد أو أكثر.‎ anti-HCV agents HCV ‏على عامل آخر مضاد ل‎ Y ‏حيث‎ Ve ‏لعنصر الحماية‎ L884 pharmaceutical composition ‏التركيب الصيدلي‎ -7١ ١ ‏آخر واحد على الأقل من: ألفا-‎ anti-HCV agent HCV ‏عامل مضاد ل‎ jas * Y ‏أو ألفا-إنترفيرون مضاف إليه غليكول متعدد إثيلين‎ acinterferon ‏إنترفيرون‎ r .pegylated a-interferon ¢ ‏وفقاً لعنصر الحماية ١؛ حيث يتمثل‎ pharmaceutical composition ‏التركيب الصيدلي‎ — YY ١ ribavirin ‏واحد على الأقل في ريبافيرين‎ AT anti-HCV agent HCV ‏ل‎ alias ‏عامل‎ Y ‏حيث يتمثل‎ Yr ‏لعنصر الحماية‎ Gd 5 pharmaceutical composition ‏التركيب الصيدلي‎ —YY \ HCV ‏آخر واحد على الأقل في مثبط بوليمراز ل‎ anti-HCV agent HCV ‏عامل مضاد ل‎ Y -HCV polymerase inhibitor 7 ‏حيث‎ «Yo ‏وفقاً لعنصر الحماية‎ pharmaceutical composition ‏؛؟*- التركيب الصيدلي‎ ١ ‏الآخر الواحد على الأقل من‎ anti-HCV agents HCV ‏العامل المضاد ل‎ jaa * 4 ‏وموقع دخول‎ 1152/3 protease NS2/3 ‏بروتياز‎ helicase ‏ل: هليكاز‎ inhibitors ‏1و مثبطات‎ .(IRES) internal ribosome entry site ‏ريبوسوم داخلي‎ ¢
SA3240005A 2002-02-01 2003-03-05 مركبات ثلاثي ببتيد مثبط لالتهاب الكبد c SA03240005B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA002370396A CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2002-02-01 Hepatitis c inhibitor tri-peptides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA03240005B1 true SA03240005B1 (ar) 2008-04-15

Family

ID=27626587

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA3240005A SA03240005B1 (ar) 2002-02-01 2003-03-05 مركبات ثلاثي ببتيد مثبط لالتهاب الكبد c

Country Status (30)

Country Link
EP (1) EP1474441B1 (ar)
JP (1) JP4060801B2 (ar)
KR (1) KR20040097990A (ar)
CN (1) CN100430414C (ar)
AR (1) AR038383A1 (ar)
AT (1) ATE358137T1 (ar)
AU (1) AU2003202347B2 (ar)
BR (1) BR0307408A (ar)
CA (1) CA2370396A1 (ar)
CO (1) CO5611113A2 (ar)
DE (1) DE60312824T2 (ar)
DK (1) DK1474441T3 (ar)
EA (1) EA007742B1 (ar)
EC (1) ECSP045226A (ar)
ES (1) ES2285085T3 (ar)
HR (1) HRP20040697A2 (ar)
IL (1) IL163130A (ar)
MX (1) MXPA04007515A (ar)
MY (1) MY127791A (ar)
NO (1) NO20043643L (ar)
NZ (1) NZ534689A (ar)
PE (1) PE20031012A1 (ar)
PL (1) PL371324A1 (ar)
RS (1) RS67204A (ar)
SA (1) SA03240005B1 (ar)
TW (1) TW200400199A (ar)
UA (1) UA77758C2 (ar)
UY (1) UY27636A1 (ar)
WO (1) WO2003064456A1 (ar)
ZA (1) ZA200405933B (ar)

Families Citing this family (136)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PE20020707A1 (es) 2000-11-20 2002-08-11 Bristol Myers Squibb Co Compuestos tripeptidicos como inhibidores de la proteasa ns3 del virus de hepatitis c
US6867185B2 (en) 2001-12-20 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
DE60334205D1 (en) 2002-05-20 2010-10-28 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische sulfonamid-hepatitis-c-virus-hemmer
DE60324552D1 (en) 2002-05-20 2008-12-18 Bristol Myers Squibb Co Substituierte cycloalkyl p1' hepatitis c virus inhibitoren
PL215228B1 (pl) 2002-05-20 2013-11-29 Bristol Myers Squibb Co Zwiazki tripeptydowe, ich zastosowanie i kompozycja farmaceutyczna je zawierajaca oraz jej zastosowanie
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
EP1599496B1 (en) * 2003-03-05 2010-11-03 Boehringer Ingelheim International GmbH Hepatitis c inhibitor peptide analogs
WO2004101605A1 (en) * 2003-03-05 2004-11-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibiting compounds
US7176208B2 (en) 2003-04-18 2007-02-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors
EA009295B1 (ru) 2003-05-21 2007-12-28 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Соединения в качестве ингибиторов вируса гепатита с
RS20060197A (sr) 2003-09-22 2008-09-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh., Makrociklični peptidi koji su aktivni protiv hepatitisa c virusa
WO2005030774A1 (en) * 2003-09-26 2005-04-07 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Hcv inhibitors and methods of using them
RS20110578A3 (en) * 2003-10-14 2016-02-29 F. Hoffmann-La Roche Ltd MACROCYCLIC CARBOXYLIC ACIDS AND ACYLSULPHONAMIDES AS HCV REPLICATION INHIBITORS
EP1944042A1 (en) 2003-10-27 2008-07-16 Vertex Pharmceuticals Incorporated Combinations for HCV treatment
WO2005043118A2 (en) 2003-10-27 2005-05-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Drug discovery method
US7132504B2 (en) 2003-11-12 2006-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7309708B2 (en) * 2003-11-20 2007-12-18 Birstol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP4682155B2 (ja) 2004-01-21 2011-05-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎ウイルスに対して活性な大環状ペプチド
DE602005017582D1 (en) 2004-01-30 2009-12-24 Medivir Ab Hcv ns-3 serine protease inhibitoren
CN103319464A (zh) 2004-02-20 2013-09-25 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 病毒聚合酶抑制剂
JP4874227B2 (ja) * 2004-02-27 2012-02-15 シェーリング コーポレイション Ｃ型肝炎ウイルスのｎｓ３セリンプロテアーゼインヒビターとしての環状ｐ４’ｓを有する新規ケトアミド
BRPI0509467A (pt) * 2004-03-30 2007-09-11 Intermune Inc compostos macrocìclicos como inibidores de replicação viral
US7569580B2 (en) 2004-06-03 2009-08-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Heterotricyclic compounds for use as HCV inhibitors
EP1763531A4 (en) * 2004-06-28 2009-07-01 Boehringer Ingelheim Int ANALOGUE OF HEPATITIS-C INHIBITING PEPTIDES
EP1778702B1 (en) 2004-07-16 2011-07-13 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
UY29016A1 (es) * 2004-07-20 2006-02-24 Boehringer Ingelheim Int Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c
ATE512971T1 (de) * 2004-07-20 2011-07-15 Boehringer Ingelheim Int Peptidanaloga als hepatitis c-hemmer
US7323447B2 (en) 2005-02-08 2008-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7776847B2 (en) 2005-02-25 2010-08-17 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Benzisothiazoles useful for treating or preventing HCV infection
US7592336B2 (en) 2005-05-10 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7601686B2 (en) 2005-07-11 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI389908B (zh) * 2005-07-14 2013-03-21 Gilead Sciences Inc 抗病毒化合物類
KR101294467B1 (ko) 2005-07-25 2013-09-09 인터뮨, 인크. Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 거대고리형 억제제
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
EP1915378A4 (en) 2005-08-12 2009-07-22 Boehringer Ingelheim Int VIRUS POLYMERASE INHIBITORS
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
US7964624B1 (en) 2005-08-26 2011-06-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases
DE602006019323D1 (de) 2005-10-11 2011-02-10 Intermune Inc Verbindungen und verfahren zur inhibierung der replikation des hepatitis-c-virus
US7772183B2 (en) 2005-10-12 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7741281B2 (en) 2005-11-03 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
CN101421292A (zh) * 2006-04-11 2009-04-29 诺瓦提斯公司 Hcv抑制剂
US7935670B2 (en) 2006-07-11 2011-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
KR20090042973A (ko) 2006-08-17 2009-05-04 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 바이러스 폴리머라제 억제제
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US7772180B2 (en) 2006-11-09 2010-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8003604B2 (en) 2006-11-16 2011-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7763584B2 (en) 2006-11-16 2010-07-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7888464B2 (en) 2006-11-16 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US7932277B2 (en) * 2007-05-10 2011-04-26 Intermune, Inc. Peptide inhibitors of hepatitis C virus replication
TW200918524A (en) * 2007-06-29 2009-05-01 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
JP5465666B2 (ja) 2007-06-29 2014-04-09 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗ウイルス化合物
KR20100038417A (ko) 2007-06-29 2010-04-14 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 화합물
JP2010535156A (ja) 2007-08-03 2010-11-18 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼ阻害剤
US8940688B2 (en) 2007-12-05 2015-01-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Fluorinated tripeptide HCV serine protease inhibitors
US8476257B2 (en) 2007-12-19 2013-07-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
US8202996B2 (en) 2007-12-21 2012-06-19 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide
WO2009099596A2 (en) 2008-02-04 2009-08-13 Idenix Pharamaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors
US8163921B2 (en) 2008-04-16 2012-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2300491B1 (en) 2008-05-29 2016-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
ES2458358T3 (es) 2008-07-02 2014-05-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compuestos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de infecciones víricas
US8207341B2 (en) 2008-09-04 2012-06-26 Bristol-Myers Squibb Company Process or synthesizing substituted isoquinolines
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
CA2737958A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
US8044087B2 (en) 2008-09-29 2011-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8563505B2 (en) 2008-09-29 2013-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8283310B2 (en) 2008-12-15 2012-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8716262B2 (en) 2008-12-23 2014-05-06 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
EP2376514A2 (en) 2008-12-23 2011-10-19 Pharmasset, Inc. Nucleoside analogs
WO2010075554A1 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Pharmasset, Inc. Synthesis of purine nucleosides
CN102271699A (zh) 2009-01-07 2011-12-07 西尼克斯公司 用于治疗hcv和hiv感染的环孢菌素衍生物
EP2403860B1 (en) 2009-03-04 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Phosphothiophene and phosphothiazole as hcv polymerase inhibitors
TW201040181A (en) 2009-04-08 2010-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Macrocyclic serine protease inhibitors
CA2761650C (en) 2009-05-13 2015-05-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
CA2769652A1 (en) 2009-08-05 2011-02-10 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic serine protease inhibitors useful against viral infections, particularly hcv
US20110117055A1 (en) 2009-11-19 2011-05-19 Macdonald James E Methods of Treating Hepatitis C Virus with Oxoacetamide Compounds
US8362068B2 (en) 2009-12-18 2013-01-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis C virus inhibitors
RS54368B1 (sr) 2010-03-31 2016-04-28 Gilead Pharmasset Llc Kristalni (s)-izopropil 2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-diokso-3,4-dihidropirimidin-1-(2h)-il)-4-fluoro-3-hidroksi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi)(fenoksi)fosforil)amino)propanoat
WO2011123672A1 (en) 2010-03-31 2011-10-06 Pharmasset, Inc. Purine nucleoside phosphoramidate
MX2012011222A (es) 2010-04-01 2013-01-18 Centre Nat Rech Scient Compuestos y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de infecciones virales.
NZ608720A (en) 2010-09-21 2015-03-27 Enanta Pharm Inc Macrocyclic proline derived hcv serine protease inhibitors
CA2818853A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Gilead Pharmasset Llc 2'-spirocyclo-nucleosides for use in therapy of hcv or dengue virus
CN103380132B (zh) 2010-12-30 2016-08-31 益安药业 菲啶大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
TW201309690A (zh) 2011-02-10 2013-03-01 Idenix Pharmaceuticals Inc 巨環絲胺酸蛋白酶抑制劑，其醫藥組合物及其於治療ｈｃｖ感染之用途
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
US20120252721A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating drug-resistant hepatitis c virus infection with a 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitor
EP2691409B1 (en) 2011-03-31 2018-02-21 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8957203B2 (en) 2011-05-05 2015-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
US8691757B2 (en) 2011-06-15 2014-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2847892A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
AR088441A1 (es) 2011-09-12 2014-06-11 Idenix Pharmaceuticals Inc Compuestos de carboniloximetilfosforamidato sustituido y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de infecciones virales
AR089650A1 (es) 2011-10-14 2014-09-10 Idenix Pharmaceuticals Inc Fosfatos 3,5-ciclicos sustituidos de compuestos de nucleotido de purina y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de infecciones virales
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
ES3018133T3 (en) 2011-11-30 2025-05-14 Univ Emory Jak inhibitors for use in the prevention or treatment of a viral disease caused by a coronaviridae
WO2013133927A1 (en) 2012-02-13 2013-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions of 2'-c-methyl-guanosine, 5'-[2-[(3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)thio]ethyl n-(phenylmethyl)phosphoramidate]
US9109001B2 (en) 2012-05-22 2015-08-18 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection
US9296778B2 (en) 2012-05-22 2016-03-29 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′,5′-cyclic phosphate prodrugs for HCV infection
CA2873315A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharamaceuticals, Inc. D-amino acid compounds for liver disease
MX353422B (es) 2012-10-08 2018-01-12 Idenix Pharmaceuticals Llc Análogos de 2'-cloronucleósido para infección por vhc.
SI2909205T1 (sl) 2012-10-19 2017-02-28 Bristol-Myers Squibb Company 9-metil substituiran heksadekahidrociklopropa(e)pirolo(1,2-A)(1,4)diazaciklopentadecinil karbamat derivati kot nestrukturalni 3 (NS3) proteazni inhibitorji za zdravljenje hepatitis C virusnih infekcij
WO2014063019A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotide compounds for hcv infection
WO2014066239A1 (en) 2012-10-22 2014-05-01 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection
EP2914598B1 (en) 2012-11-02 2017-10-18 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014070964A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US9643999B2 (en) 2012-11-02 2017-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9409943B2 (en) 2012-11-05 2016-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2920195A1 (en) 2012-11-14 2015-09-23 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of rp-nucleoside analog
EP2938624A1 (en) 2012-11-14 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
WO2014099941A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
WO2014137926A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
JP6342922B2 (ja) 2013-03-07 2018-06-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
EP2981542B1 (en) 2013-04-01 2021-09-15 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
EP3004130B1 (en) 2013-06-05 2019-08-07 Idenix Pharmaceuticals LLC. 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv
EP3027636B1 (en) 2013-08-01 2022-01-05 Idenix Pharmaceuticals LLC D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
SG11201600919UA (en) 2013-08-27 2016-03-30 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
WO2015042375A1 (en) 2013-09-20 2015-03-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
US20160271162A1 (en) 2013-11-01 2016-09-22 Idenix Pharmacueticals, Llc D-alanine phosphoramide pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
WO2015081297A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2'-dichloro and 2'-fluoro-2'-chloro nucleoside analogues for hcv infection
WO2015095419A1 (en) 2013-12-18 2015-06-25 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-or nucleosides for the treatment of hcv
EP3089757A1 (en) 2014-01-03 2016-11-09 AbbVie Inc. Solid antiviral dosage forms
EP3114122A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid forms of a flaviviridae virus inhibitor compound and salts thereof
EP3113763A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Solid prodrug forms of 2'-chloro-2'-methyl uridine for hcv
US20170135990A1 (en) 2014-03-05 2017-05-18 Idenix Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising a 5,5-fused heteroarylene flaviviridae inhibitor and their use for treating or preventing flaviviridae infection
WO2015161137A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
US12083099B2 (en) 2020-10-28 2024-09-10 Accencio LLC Methods of treating symptoms of coronavirus infection with viral protease inhibitors

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides

Also Published As

Publication number Publication date
EA007742B1 (ru) 2006-12-29
RS67204A (sr) 2006-12-15
BR0307408A (pt) 2004-12-28
UA77758C2 (en) 2007-01-15
ECSP045226A (es) 2004-09-28
DK1474441T3 (da) 2007-07-30
DE60312824T2 (de) 2008-03-06
HRP20040697A2 (en) 2005-06-30
EA200400987A1 (ru) 2005-02-24
ZA200405933B (en) 2005-09-05
CA2370396A1 (en) 2003-08-01
EP1474441B1 (en) 2007-03-28
IL163130A (en) 2010-06-30
WO2003064456A1 (en) 2003-08-07
MXPA04007515A (es) 2005-07-13
ATE358137T1 (de) 2007-04-15
TW200400199A (en) 2004-01-01
JP2005530688A (ja) 2005-10-13
JP4060801B2 (ja) 2008-03-12
ES2285085T3 (es) 2007-11-16
NO20043643L (no) 2004-08-31
EP1474441A1 (en) 2004-11-10
KR20040097990A (ko) 2004-11-18
NZ534689A (en) 2007-05-31
AU2003202347B2 (en) 2008-10-30
DE60312824D1 (de) 2007-05-10
MY127791A (en) 2006-12-29
CN1642974A (zh) 2005-07-20
AR038383A1 (es) 2005-01-12
CN100430414C (zh) 2008-11-05
UY27636A1 (es) 2003-09-30
PE20031012A1 (es) 2004-01-26
PL371324A1 (en) 2005-06-13
CO5611113A2 (es) 2006-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA03240005B1 (ar) مركبات ثلاثي ببتيد مثبط لالتهاب الكبد c
SA03240006B1 (ar) مركب مثبط لالتهاب الكبد c
EP1105422B1 (en) Hepatitis c inhibitor peptides
US7091184B2 (en) Hepatitis C inhibitor tri-peptides
EP1654261B1 (en) Hepatitis c inhibitor compounds
EP1472278B1 (en) Macrocyclic peptides active against the hepatitis c virus
US6642204B2 (en) Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US7119072B2 (en) Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
EP1012180B1 (en) Hepatitis c inhibitor peptide analogues
AU2003202347A1 (en) Tripeptides having a hydroxyproline ether of a substituted quinoline for the inhibition of NS3 (Hepatitis C)
AU2003202348A1 (en) Heterocyclic tripeptides as hepatitis c inhibitors
EP1601685A1 (en) Hepatitis c inhibiting compounds
SA99200617B1 (ar) مركبات ثلاثية الببتيد tri-peptides مثبطةinhibitor لالتهاب الكبد c
MX2014015846A (es) Inhibidores de virus de hepatitis c.
CA2474031C (en) Heterocyclic tripeptides as hepatitis c inhibitors