RU2018144112A - Гликозилированные слитые белки vwf с улучшенной фармакокинетикой - Google Patents
Гликозилированные слитые белки vwf с улучшенной фармакокинетикой Download PDFInfo
- Publication number
- RU2018144112A RU2018144112A RU2018144112A RU2018144112A RU2018144112A RU 2018144112 A RU2018144112 A RU 2018144112A RU 2018144112 A RU2018144112 A RU 2018144112A RU 2018144112 A RU2018144112 A RU 2018144112A RU 2018144112 A RU2018144112 A RU 2018144112A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- fusion protein
- seq
- paragraphs
- fusion
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/20—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/35—Fusion polypeptide containing a fusion for enhanced stability/folding during expression, e.g. fusions with chaperones or thioredoxin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (39)
1. Слитый белок, содержащий основной белок и один или более пептидов удлинения, где аминокислотная последовательность основного белка идентична или схожа с аминокислотной последовательностью белка млекопитающего или его фрагмента, и указанный пептид удлинения содержит кластер O-гликозилированных аминокислот.
2. Слитый белок по п. 1, где слитый белок имеет повышенное время полужизни по сравнению с основным белком без пептида удлинения.
3. Слитый белок по п. 1 или 2, где аминокислотная последовательность одного или нескольких пептидов удлинения идентична или схожа с неповторяющейся частью аминокислотной последовательности указанного основного белка или фрагмента.
4. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, при условии, что один или более пептидов удлинения не получают из β-субъединицы хорионического гонадотропина (CG-β), в частности, он не является идентичным или схожим с C-концевым пептидом (CTP) CG-β.
5. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где кластеры O-гликозилированных аминокислот пептидов удлинения содержат по меньшей мере два, предпочтительно - по меньшей мере три, более предпочтительно - по меньшей мере четыре O-гликозилированных аминокислоты.
6. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где кластер O-участков гликозилирования содержит по меньшей мере один треонин в качестве O-гликозилированной аминокислоты, предпочтительно, указанные кластеры содержат треонин и серин в качестве O-гликозилированных аминокислот.
7. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где один или более пептидов удлинения содержат по меньшей мере один O-участок гликозилирования на десять аминокислот, предпочтительно - по меньшей мере один O-участок гликозилирования на восемь аминокислот.
8. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где один или более пептидов удлинения имеют длину в диапазоне от 20 до 60 аминокислот, предпочтительно - от 22 до 40 аминокислот, более предпочтительно - от 26 до 36 аминокислот.
9. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где один или более пептидов удлинения имеют идентичность последовательности по меньшей мере 90% по отношению к O-гликозилированному пептиду фактора фон Виллебранда (VWF).
10. Слитый белок по п. 9, где один или более пептидов удлинения имеют идентичность последовательности по меньшей мере 90%, предпочтительно - по меньшей мере 95%, более предпочтительно - по меньшей мере 98%, наиболее предпочтительно - по меньшей мере 100% по отношению к O-гликозилированному пептиду VWF, в частности, SEQ ID NO: 1.
11. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, содержащий по меньшей мере две копии, предпочтительно - по меньшей мере четыре копии пептида удлинения.
12. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где пептид удлинения напрямую или косвенно слит с C-концом основного белка.
13. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где пептид удлинения образует C-конец слитого белка, где C-концевая аминокислота указанного пептида удлинения, необязательно, соединена с аффинной меткой слитого пептида.
14. Слитый белок по любому из пп. 9-13, где основной белок содержит по меньшей мере один кластер O-гликозилированных аминокислот.
15. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где слитый белок содержит домен димеризации, в частности, основной белок содержит домен димеризации.
16. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где белок млекопитающего является белком крови человека, предпочтительно, фактором свертывания или ингибитором протеазы, более предпочтительно, выбран из группы, состоящей из VWF, протромбина, фибриногена, FIII, FV, FVII, FVIII, FIX, FX, FXI, FXII, FXIII, ADAMTS13, антитромбина, альфа-1-антитрипсина, ингибитора C1, антихимотрипсина, PAI-1, PAI-3, 2-макроглобулина, TFPI, кофактора гепарина II, протеина Z, протеина C и протеина S.
17. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где основной белок имеет идентичность последовательности по меньшей мере 90%, предпочтительно - по меньшей мере 95%, более предпочтительно - по меньшей мере 98%, наиболее предпочтительно - 100% по отношению к аминокислотам 764-1268 SEQ ID NO: 2.
18. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где слитый белок содержит по меньшей мере 4, предпочтительно - по меньшей мере 8, более предпочтительно - по меньшей мере 12 дополнительных O-гликанов по сравнению с основным белком.
19. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где аминокислотная последовательность слитого белка имеет идентичность по меньшей мере 90%, предпочтительно - по меньшей мере 95%, более предпочтительно - по меньшей мере 98%, наиболее предпочтительно - 100% по отношению к последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10 или SEQ ID NO: 11.
20. Слитый белок по любому из предшествующих пунктов, где слитый белок получают посредством экспрессии в линии клеток млекопитающего, предпочтительно - линии клеток человека, более предпочтительно - линии клеток почки человека, наиболее предпочтительно - линии эмбриональных клеток почки человек, в частности, линии клеток HEK293, такой как HEK293F.
21. Композиция первого белка и второго белка, где указанный первый белок является слитым белком по любому из пп. 1-20 и способен связываться с указанным вторым белком, и указанный второй белок является терапевтическим белком, содержащим аминокислотную последовательность, идентичную или схожую с аминокислотной последовательностью второго белка млекопитающего или его фрагмента.
22. Композиция по п. 21, где время полужизни второго белка, связанного с первым белком, повышается по сравнению со свободной формой указанного второго белка, предпочтительно, где время полужизни второго белка, связанного с первым белком, повышается по сравнению с указанным вторым белком, связанным с нативным белком млекопитающего, или основным белком без слитого пептида.
23. Композиция по п. 21 или 22, где молярное соотношение первого белка и второго белка находится в диапазоне от 0,1 до 250, предпочтительно - в диапазоне от 0,5 до 50, более предпочтительно - в диапазоне от 1 до 25, наиболее предпочтительно - в диапазоне от 2 до 10.
24. Композиция по любому из пп. 21-23, где аффинность связывания первого белка со вторым белком находится в диапазоне от 0,05 до 3 нМ.
25. Композиция по любому из пп. 21-24, где второй белок млекопитающего является белком крови, более предпочтительно, указанный второй белок млекопитающего является белком плазмы, наиболее предпочтительно, указанный второй белок является фактором свертывания.
26. Композиция по п. 25, где второй белок млекопитающего является белком человека.
27. Композиция по любому из пп. 21-25, где второй белок является белком FVIII, выбранным из полноразмерного FVIII, белка FVIII, в котором, по меньшей мере, часть B-домена отсутствует, и белка FVIII, в котором, по меньшей мере, часть B-домена заменяют пептидом удлинения, где пептид удлинения определяют по любому из пп. 5-10.
28. Композиция по любому из пп. 21-27, где один или более пептидов удлинения находятся в положении в свернутом состоянии первого белка, не мешающем связыванию первого белка со вторым белком.
29. Комплекс первого белка и второго белка, где указанный первый белок является слитым белком по любому из пп. 1-20, и указанный второй белок имеет аминокислотную последовательность, идентичную или схожую с аминокислотной последовательностью второго белка млекопитающего или его фрагмента.
30. Комплекс по п. 29, где первый белок нековалентно связан со вторым белком.
31. Комплекс по п. 29 или 30, содержащий две копии первого и второго белка, где две копии первого белка образуют димер, предпочтительно, нековалентно связанный димер.
32. Комплекс по п. 29, где первый белок ковалентно связан со вторым белком, где линкер выбран из пептидной связи, химического линкера или гликозидной связи.
33. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок по любому из пп. 1-20.
34. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок, имеющий аминокислотную последовательность с идентичностью по меньшей мере 90%, предпочтительно - по меньшей мере 95%, более предпочтительно - по меньшей мере 98%, наиболее предпочтительно - 100% по отношению к последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 14.
35. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 33 или 34, где остов вектора, предпочтительно, выбран из pCDNA3, pCDNA3,1, pCDNA4, pCDNA5, pCDNA6, pCEP4, pCEP-puro, pCET1019, pCMV, pEF1, pEF4, pEF5, pEF6, pExchange, pEXPR, pIRES и pSCAS.
36. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по п. 33 или 34 или вектор по п. 35, где клетка-хозяин, предпочтительно, является клеткой млекопитающего, предпочтительно - клеткой человека, более предпочтительно - клеткой почки человека, наиболее предпочтительно - линией эмбриональных клеток почки человека, в частности, линией клеток HEK293, такой как HEK293F.
37. Применение слитого белка по любому из пп. 1-20 для повышения времени полужизни второго белка, где слитый белок способен связываться с указанным вторым белком.
38. Применение фармацевтической композиции, содержащей слитый белок по любому из пп. 1-20, композиции по любому из пп. 21-28 или комплекса по любому из пп. 29-32 для лечения или профилактики нарушения свертываемости, предпочтительно, выбранного из лечения PUP и лечения ITI и/или родственных нарушений свертываемости.
39. Применение по п. 38, где применение включает внутривенную или невнутривенную инъекцию, предпочтительно, подкожную инъекцию.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP16170690.8 | 2016-05-20 | ||
| EP16170690 | 2016-05-20 | ||
| PCT/EP2017/059976 WO2017198435A1 (en) | 2016-05-20 | 2017-04-26 | Glycosylated vwf fusion proteins with improved pharmacokinetics |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018144112A true RU2018144112A (ru) | 2020-06-22 |
| RU2018144112A3 RU2018144112A3 (ru) | 2021-03-10 |
| RU2782212C2 RU2782212C2 (ru) | 2022-10-24 |
Family
ID=
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vlot et al. | Factor VIII and von Willebrand factor | |
| ES2935489T3 (es) | Composiciones de factor VIII y métodos de preparación y uso de las mismas | |
| CN104984319B (zh) | Tfpi抑制剂和使用方法 | |
| EA201590198A1 (ru) | Комплекс фактора viii с xten и белком фактора фон виллебранда и его применение (варианты) | |
| TR200200766T2 (tr) | Güçlendirilmiş farmakokinetik özelliklere sahip hibrid polipeptidler | |
| CN101124331A (zh) | Fⅷ的位点定向修饰 | |
| TR200100163T2 (tr) | Güçlendirilmiş farmakokinetik özelliklere sahip hibrid polipeptidler | |
| EP3360895B1 (en) | Preparation comprising factor viii and von willebrand factor peptides | |
| JP2010532467A5 (ru) | ||
| NO20043891L (no) | Anti-A-beta-antistoffer og deres anvendelse | |
| JP2015134758A (ja) | Ｔｆｐｉ阻害剤および使用方法 | |
| US12071468B2 (en) | Purification of Factor VIII subspecies | |
| CN102066416A (zh) | 肽、拟肽及其衍生物、它们的生产方法以及它们用于制备治疗和/或预防活性的药物组合物的用途 | |
| RU2018144112A (ru) | Гликозилированные слитые белки vwf с улучшенной фармакокинетикой | |
| Fischer et al. | Biochemical and functional characterization of recombinant von Willebrand factor produced on a large scale | |
| US5998589A (en) | Method of purifying human factor VIII | |
| CN116284224B (zh) | 一种结合Claudin 18.2的环肽及其应用 | |
| WO2000031121A1 (en) | Recombinant factor viii binding peptides | |
| EA200601749A1 (ru) | Коспептин, космедин и варианты их применения | |
| KR20160126075A (ko) | 펩티드 및 사용 방법 | |
| AU2017203999B2 (en) | Tfpi inhibitors and methods of use | |
| US20220118063A1 (en) | Methods and compositions related to improved factor viii long half-life coagulation complexes | |
| Jin Kang et al. | Enhanced immunodetection of cell-free synthesized erythropoietin under denaturing conditions | |
| Polevaya¹ et al. | Fragment of Thrombin in Recognition and |