RU2000800C1 - Способ получени экстракта корн солодки голой - Google Patents

Abstract

Использозэмие: п медицине, з именно о г.имико-фармгцевтнческой промышпгнности дл  получени  экстракта корн  сшюдш Судност.: эигу- шенное wp j i измельчают и го«огеиизио1/ют г течение ЯП - 30 мин прм 2000 об/мин гомогонаг экстрагируют физрзпмром Р нгмф&льной среде сначйлл при комнатной температуре, лечм прк пературп 4 - 8°С в течение 18 - 0 ч, да/iee тракт выдерживают Р течеиче 1,0 - 1,5 ч при 37 - J8°C и цс ечой продукт отдептт и мпл-фугир - ванирм не менее 0 мин npi 8000 оГ /мин. табп

Description

Изобретение относитс  к медицине, фармакологии и иммунологии и может быть использовано дл  приготовлени  препаратов , примен емых в качестве иммуностимул торов при ослабленном иммунитете.

Известен р д способов проведени  экстрагировани  фармакологически активных веществ дл  приготовлени  лекарственных препаратов. Сущность их заключаетс  в вы делейиюг шшаризиновой кислоты путем осажЈ|Р1МГе% шеральными кислотами на вод riMi ир i и водно-ацетоновых вы- т же ко Ли солодки, ,с последующей очисткой путем кристаллизации из уксусной кислоты и спирта,

Дл  приготовлени  препаратов на основе глицирретиновой кислоты полученную указанным способом глицирризиновую кислоты подвергают кислотному гидролизу. Фармакологическа  активность препаратов из глицирретиноврй и глицирризиновой кислоты, полученных указанным способом, существенно отличаетс  от нативных экстрактов корн  солодки. В фармакопии приводитс  р д способов приготовлени  ле- карственных препаратов из корн  солодки (сложный порошок солодкового корн , солодковый корень, сироп солодковОго корн , экстракт солодкового корн  сухой, экстракт солодкового корн  густой), однако все они предполагают использование достаточно жестких условий выделени  экстрагируемых соединений, направленных прежде всего на повышение выхода глицирризиновой кислоты, и не обеспечивают сохранени  нативных свойств остальных биологически активных веществ, вход щих в состав экстракта .

Целью изобретени   вл етс  разработка метода приготовлени  экстракта солодки, об- ладающего выраженными иммуностимулирующими свойствами.

Указанна  цель достигаетс  тем, что дл  получени  экстрактов солодки используютс  услови , позвол ющие сохранить натив- ные свойства биологически активных соединений, способствующие активации факторов неспецифического иммунитета.

Сущность изобретени  заключаетс  в расширении спектра применени  лекарст- венных растений дл  профилактики и лечени .

Приготовление водного экстракта корн  солодки производилось следующим образом . Высушенный до посто нной массы корень, неочищенный от наружного коркового сло , измельчалс  сначала на мелкой металлической терке, а затем гомогенезиро- валс  в течение 20 мин при 2000 об./мин. Полученна  навеска гомогената из расчета

10% сухой массы переносилась в физиологический раствор (рН 7,0), экстрагирующа  взвесь перемешивалась 30 мин при комнатной температуре на магнитной мешалке, а затем помещалась на 18 ч в рефрижератор (+4°С). На следующий день, по истечении 24 ч с начала экстрагировани , раствор термо- статировали при 37°С 1 ч., после чего взвесь центрифугировали 20 мин при 8000 об./мин. Осадок отбрасывалс , а надоса- дочна  жидкость использовалась в биологических экспериментах.

Анализ содержани  экстративных веществ , глицирризиновой кислоты и сопутствующих им других биологически активных соединений, выполненный согласно требовани м государственной фармакопеи и техническим услови м по производству глицирризиновой кислоты (ГОСТ 22840-77), показал, что в экстракт за пл емого способа приготовлени  переходит 70-80% содержащихс  в корне солодки биологически активных веществ (см. табл. 1).

Дл  оценки вли ни  экстрактов корн  солодки на клеточный игуморальный иммунитет крысам со средней массой тела 240 г препарат-вводилсл внутрижелудочно 4 раза из расчета 2 мл/кг при каждом введении. Схема введени  следующа . Перва  два - ежедневно, по одному введению в день, затем двухдневный интервал между последующими двум  ежедневными введени ми.

Контрольным животным вводилс  физиологический раствор. В каждой группе было по 12 животных. Через сутки после четвертого введени  все крысы одновременно подвергались тестированию по следующим показател м:

фагоцитарна  активность нейтрофилов, определ ема  по проценту фагоцитирующих клеток, тест-микробом служили E.coll;

активность комплемента сыворотки крови по 50% гемолизу;

функциональна  активность Т- и В-лим- фоцитов, определ ема  по проценту роает- кообразующих клеток;

уровень естественных антител к сальмонеллезному антигену реакций пассивной гемагглютинации, использу  дл  этих целей стандартный диагностикум МНИИ эпидемиологии и микробиологии им. Т.Н.Габричевского.

Результаты исследований подвергались статической обработке методом критери  Фишера-Стьюдента. Изменени  показателей считали достоверным при Р 0,05. Полученные данные представлены в табл. 2.

Анализ представленных в табл. 2 результатов показывает, что введение животным экстрактов корн  солодки оказывает

положительное вли ние на большинство из используемых иммунологических тестов, причем занимающих наиболее важное место среди показателей неспецифической ре- зистентности организма.

Пример1.1кг высушенного до посто нной массы корень, неочищенный от наружного коркового сло , измельчают сначала на мелкой терке, а затем гомогене зируют в течение 20 мин при 2000 об./мин, Далее полученный гомогенат экстрагируют в физиологическом растворе при рН 7,0 в течение 30 мин при комнатной температуре при посто нном перемешивании на магнитной мешалке, затем при температуре +4°С на 18 ч помещают в рефрижератор. Полученный раствор помещают в термостат при температуре 37°С в течение 1 ч, после чего взвесь центрифугируют не менее 20 мин при 8000 об/мин.

П р и м е р 2. 1 кг высушенного корн  измельчают, как в примере 1, гомогенизируют в течение 30 мин при 2000 об./мин, Пол0

5

0

ученный гомогенат экстрагируют физраствором при рН 7,0 в течение 40 мин при комнатной температуре при посто нном помешивании на магнитной мешалке, далее при температуре +8°С в течение 20 ч. Раствор помещают в термостат .:пи температуре 38°С в течение 1,5 ч, после чего взвесь центрифугируют не менее 20 мин при 8000 об./мин.

Таким образом на основании полученных результатов следует, что введение за вл емого водного экстракта корн  солодки оказывает стимулирующее вли ние на факторы неспецифического иммунитета, что может быть использовано при неблагопри тной эпидемиологической обстановке дл  профилактики бактериальных и вирусных инфекций .

(56) Экстракт солодкового корн .Технические услови  приготовлени , ГОСТ 22840- 77.

Таблица 1

i

Количественное содержание экстрактивных веществ и биологически активных соединений в корне солодки и в экстрактах за вленного способа приготовлени 

Вещества

Экстрактивные

Глицирризинова  кислота

Флавоноиды

Сахароза Аскорбинова  кислота

Содержание экстрактивных веществ и биологически активных веществ в корне солодки привод тс  по данным И А.Муравьева и Соколова B.C.

Таблица 2

Воздействие водного экстракта корн  солодки на иммунную систему при четырехкратном внутрижелудочном введении в дозе 1 мл/кг (анализ через сутки после четвертого введени )

Содержание в за вленном экстракте, от содер- жани г в корне олодки

33 15 3.5 10 мг %

80%

24

70 %

90%

33 мг %

Наличие статистически достоверного различи  между контролем и опытом.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА КОРНЯ СОЛОДКИ ГОЛОЙ путем обработки измельченного сырь  экстрагентом с последующим отделением целевого продукте, отличающийс  тем, что. с целью сохранени  нативных свойств биологически активных соединений , способствующих активации факторов Неспецифичёского иммунитета, измельченПродолжение табл. 2

   0

   ное сырье гомогенизируют в течение 20 - 30 мин при 2000 и гомогенат экстрагируют физраствором в нейтральной среде сначала при комнатной температурь в течение 30 - 40 мин, затем при 4 - 8 С в течение 18 - 20 ч, далее экстракт выдерживают в течение 1 - 1,5 ч при 37 - 38 С и целевой продукт отдел ют центрифугированием не менее 20 мин при 8000 .