[go: up one dir, main page]

RS61746B1 - C-3 i c-17 modifikovani triterpenoidi kao hiv-1 inhibitori - Google Patents

C-3 i c-17 modifikovani triterpenoidi kao hiv-1 inhibitori

Info

Publication number
RS61746B1
RS61746B1 RS20210450A RSP20210450A RS61746B1 RS 61746 B1 RS61746 B1 RS 61746B1 RS 20210450 A RS20210450 A RS 20210450A RS P20210450 A RSP20210450 A RS P20210450A RS 61746 B1 RS61746 B1 RS 61746B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
group
ethyl
methyl
phase
6alkyl
Prior art date
Application number
RS20210450A
Other languages
English (en)
Inventor
Jie Chen
Yan Chen
Ira B Dicker
Richard A Hartz
Nicholas A Meanwell
Alicia Regueiro-Ren
Sing-Yuen Sit
Ny Sin
Jacob Swidorski
Brian Lee Venables
Original Assignee
Viiv Healthcare Uk No 5 Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Viiv Healthcare Uk No 5 Ltd filed Critical Viiv Healthcare Uk No 5 Ltd
Publication of RS61746B1 publication Critical patent/RS61746B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J53/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class
    • C07J53/002—Carbocyclic rings fused
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/503—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from viruses
    • C12N9/506—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from viruses derived from RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/02—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems
    • C07C2603/52—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems containing five condensed rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
    • C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
POLJE PRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja korisna protiv HIV i, još preciznije, na jedinjenja dobijena od betulinske kiseline i druga jedinjenja koja su korisna kao inhibitori sazrevanja HIV i na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže, kao i na postupke za njihovu izradu.
POREKLO PRONALASKA
[0002] HIV-1 (humani imuni deficijentni virus-1) infekcija ostaje glavni medicinski problem, uz procenu da je do kraja 2010. godine širom sveta inficirano 45-50 miliona ljudi. Broj slučajeva HIV i AIDS (stečeni imunodeficijentni sindrom) rapidno raste. U 2005. zabeleženo je približno 5.0 miliona novih infekcija a 3.1 milion ljudi je umrlo od AIDS-a. Trenutno raspoloživi lekovi za tretman HIV uključuju inhibitore nukleozid reverzne transkriptaze (RT) ili kombinacije odobrenih pojedinačnih lekova: zidovudin (ili AZT ili RETROVIR®), didanozin (ili VIDEX®), starvudin (ili ZERIT®), lamivudin (ili 3TC ili EPIVIR®), zalcitabin (ili DDC ili HIVID®), abakavir sukcinat (ili ZIAGEN®), tenofovir diizoproksil fumaratna so (ili VIREAD®), emtricitabin (ili FTC-EMTRIVA®), COMBIVIR® (sadrži -3TC plus AZT), TRIZIVIR® (sadrži abakavir, lamivudin i zidovudin), EPZICOM® (sadrži abakavir i lamivudin), TRUVADA® (sadrži VIREAD® i EMTRIVA®); inhibitore ne-nukleozid reverzne transkriptaze: nevirapin (ili VIRAMUNE®), delavirdin (ili RESCRIPTOR®) i efavirenz (ili SUSTIVA®), ATRIPLA® (TRUVADA® SUSTIVA®) i etravirin i inhibitore peptidomimetičke proteaze ili odobrene formulacije: sakvinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir, amprenavir, lopinavir, KALETRA® (lopinavir i Ritonavir), darunavir, atazanavir (REYATAZ®) i tipranavir (APTIVUS®) i kobicistat i inhibitore integraze kao što je raltegravir (ISENTRESS®) i inhibitore ulaza kao što su enfuvirtid (T-20) (FUZEON®) i maravirok (SELZENTRY®).
[0003] Svaki od ovih lekova može samo prolazno da zaustavi replikaciju virusa ukoliko se koristi sam. Međutim, kada se koriste u kombinaciji, ovi lekovi imaju dubinski efekat na viremiju i progresiju bolesti. Zapravo, nedavno je dokumentovano da je značajno smanjenje stope smrtnosti među AIDS pacijentima posledica široke primene kombinovane terapije. Međutim, uprkos ovim impresivnim rezultatima, kod 30 do 50% pacijenata ovakva terapija kombinovanim lekovima može da ne uspe. Nedovoljna potencija leka, nepridržavanje, ograničena penetracija u tkivo i ograničenja određenog leka unutar nekih tipova ćelija (na primer, najveći broj nukleozid analoga ne može da bude fosforilisano u ćelijama koje se ne dele) može da bude razlog za nepotpunu supresiju osetljivosti virusa. Pored toga, velika brzina replikacije i brze promene HIV-1 u kombinaciji sa čestom inkorporacijom mutacija dovodi do pojave varijanti rezistentnih na lekove i neuspeha lečenja kada se primenjuju suboptimalne koncentracije leka. Prema tome, nova anti-HIV sredstva koja ispoljavaju profile prepoznatljivih oblika rezistencije i povoljnu farmakokinetiku kao i bezbednost su potrebni za obezbeđivanje više opcija tretmana. Unapređeni inhibitori HIV fuzije i antagonisti koreceptora HIV ulaza su dva primera nove grupe anti-HIV sredstava koji su predmet ispitivanja brojnih istraživača.
[0004] Inhibitori HIV vezivanja su naredna podgrupa antivirusnih jedinjenja koja se vezuju za glukoprotein gp120 na površini HIV i ometaju interakciju između proteina gp120 površine i ćelijskog receptora CD4 domaćina. Prema tome, oni sprečavaju vezivanja HIV za humanu CD4 T-ćeliju i blokiraju HIV replikaciju u prvoj fazi životnog ciklusa HIV. Osobine inhibitora HIV vezivanja su poboljšane u pokušaju da se dobiju jedinjenja koja su maksimalno korisna i efikasna kao antivirusna sredstva. Preciznije, U.S. Patent brojevi 7,354,924 i U.S.7,745,625 su ilustrativni za inhibitore vezivanja HIV.
[0005] Naredna potencijalna grupa jedinjenja za tretman HIV je označena kao inhibotiri sazrevanja HIV. Sazrevanje je poslednja od više od 10 ili više faza u HIV replikaciji ili životnom ciklusu HIV u kome HIV postaje infektivan kao posledica nekoliko slučajeva cepanja posredstvom HIV proteaze u gag proteinu što na kraju dovodi do oslobađanja kapsid (CA) proteina. Inhibitori sazrevanja sprečavaju HIV kapsid da se na odgovarajući način spoji i sazri, da se formira zaštitni spoljašnji omotač, ili da nastane iz humanih ćelija. Umesto toga, produkuju se anti-infektivni virusi, koji sprečavaju naredne cikluse HIV infekcija.
[0006] Pokazano je da neki derivati betulinske kiseline ispoljavaju potentnu anti-HIV aktivnost kao inhibitori HIV sazrevanja. Na primer, US 7,365,221 otkriva derivate monoacilovani betulin i dihidrobetulin i njihovu upotrebu kao anti-HIV sredstava. Kako je objašnjeno u ’221 referenci, esterifikacijom betulinske kiseline (1) sa nekim supstituisanim acil grupama, kao što su 3’,3’-dimetilglutaril i 3’,3’-dimetilsukcinil grupe, dobijaju se derivati koji imaju pojačanu aktivnost (Kashiwada, Y., i saradnici, J. Med. Chem.39:1016-1017 (1996)). Acilovana betulinska kiselina i derivati dihidrobetulinske kiseline koji su potentna anti-HIV sredstva su takođe opisani u U.S. Pat. No.5,679,828. Esterifikacijom hidroksilne grupe na 3 ugljeniku betulina sa sukcinatnom kiselinom se takođe dobija jedinjenje sposobno da inhibira HIV-1 aktivnost (Pokrovskii, A. G., i saradnici, "Synthesis of derivati of plant triterpens i study of their antiviral i immunostimulating activity," Khimiya y Interesakh Ustoichivogo Razvitiya, Vol.9, No.3, pp.485-491 (2001) (abstrakt na engleskom)).
[0007] Druge reference za upotrebu u lečenju HIV infekcije sa jedinjenjima dobijenim iz betulinske kiseline uključuju US 2005/0239748 i US 2008/0207573, kao i WO2006/053255, WO2009/100532 WO2011/007230, WO2014/123889 i WO2015/157483 koje je u razvoju je označeno kao Bevirimat ili PA-457, sa hemijskom formulom C36H56O6i IUPAC nazivom 3β-(3-karboksi-3-metil-butanoiloksi) lup-20(29)-en-28-oik kiselina.
[0008] Jedno jedinjenje za HIV sazrevanje koje je bilo u razvoju je označeno kao HIV maturation compound that has been in development has been identified Bevirimat ili PA-457, sa hemijskom formulom C36H56O6i IUPAC nazivom 3β-(3-karboksi-3-metil-butanoiloksi) lup-20(29)-en-28-oik kiselina.
[0009] Ovde su kao referenca takođe navedene aplikacije Bristol-Myers Squibb pod nazivom "MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS" USSN 13/151,706 podneta 2. Juna 2011. (SADA U.S.8,754,068) i "C-28 AMIDS OF MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS" USSN 13/151,722, podneta 2. Juna 2011. (SADA U.S.8,802,661). Kao referenca je takođe navedena aplikacija pod nazivom "C-28 AMINS OF C-3 MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS" USSN 13/359,680, podneta January 27, 2012 (sada U.S.8,748,415). Pored toga, kao referenca je navedena aplikacija pod nazivom "C-17 i C-3 MODIFIED TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY" USSN 13/359,727 podneta January 27, 2012 (sada U.S.8,846,647). Kao naredna referenca je takođe navedena aplikacija "C-3 CYCLOALKENYL TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY" USSN 13/760,726 podneta 6. februara, 2013., (sada U.S.8,906,889), kao i aplikacija pod nazivom "TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY" USSN 14/682,179 podneta 9. aprila 2015.
[0010] Ono što je sada potrebno u tehnici su nova jedinjenja koja su korisna kao inhibitori HIV sazrevanja, kao i nove farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja. Posebno, potrebna su nova jedinjenja koja će da budu efikasna protiv nastajanja genotipnih HIV mutanta.
KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA
[0011] Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja niže date Formule I, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli, njihove farmaceutske formulacije i njihovu upotrebu na pacijentima koji boluju od ili su osetljivi na virus kao što je HIV. Jedinjenja Formule I su efikasna antivirusna sredstva, posebno kao inhibitori HIV. Korisna su za tretman HIV i AIDS.
[0012] Jedno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na jedinjenje Formule I, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli:
gde je R1izopropenil ili izopropil;
A je -C1-6alkil-OR0;
gde je R0heteroaril-Q0grupa;
Q0je izabran iz grupe -H, -CN, -C1-6alkil, -COOH, -Ph, -OC1-6alkil, -halo, -CF3grupe, Y je izabran iz grupe -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazola i -CONHOH;
R2je -H, -C1-6alkil, -alkilsupstituisana C1-6alkil ili -arilsupstituisana C1-6alkil grupa;
W nema, ili je -CH2- ili -CO- grupa;
R3je -H, -C1-6alkil ili -alkilsupstituisana C1-6alkil grupa;
R4je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisane -C1-6alkil, -C1-6alkil-Q1, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q1, aril, heteroaril, supstituisane heteroaril, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, i
gde je G izabran iz grupe -O-, -SO2- i -NR12-;
gde je Q1izabran iz grupe -C1-6alkil, -C1-6fluoroalkil, heteroaril, supstituisane heteroaril, halogena, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9i -SO2R7;
R5je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6alkilsupstituisane alkil, -C1-6alkil-NR8R9, -COR3, -SO2R7i -SO2NR2R2;
us uslov da R4ili R5nije -COR6kada je W -CO- grupa;
uz naredni uslov da je samo jedan od R4ili R5izabran iz grupe -COR6, -COCOR6, -SO2R7i -SO2NR2R2;
R6je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-supstituisane alkil, -C3-6cikloalkil, -C3-6supstituisane cikloalkil-Q2, -C1-6alkil-Q2, -C1-6alkil-supstituisane alkil-Q2, -C3-6cikloalkil-Q2, aril-Q2, -NR13R14i -OR15;
gde je Q2izabran iz grupe aril, heteroaril, supstituisane heteroaril, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3i -CONHSO2NR2R2;
R7izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil, -C3-6cikloalkil, -CF3, aril i heteroaril;
R8i R9su nezavisno izabrani iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil, aril, heteroaril, supstituisane aril, supstituisane heteroaril, -C1-6alkil-Q2i -COOR3, ili su R8i R9uzeti zajedno sa susednim N da formiraju ciklus izabran iz grupe:
M je izabran iz grupe -R15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH i -NR2R12;
V je izabran iz grupe -CR10R11-, -SO2-, -O- i -NR12-;
us uslov da samo jedan od R8ili R9može da bude -COOR3grupa;
R10i R11su nezavisno izabrani iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil i -C3-6cikloalkil;
R12izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -alkil supstituisane C1-6alkil, -CONR2R2, -SO2R3i -SO2NR2R2;
R13i R14su nezavisno izabrani iz grupe -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil,-C1-6supstituisane alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i C1-6supstituisane alkil-Q3;
Q3je izabran iz grupe heteroaril, supstituisane heteroaril, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2i -SO2R3;
R15je izabran iz grupe -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisane alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i -C1-6supstituisane alkil-Q3;
R16je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -NR2R2i -COOR2;
us uslov da kada je V -NR12-, R16nije -NR2R2; i
R17je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -COOR3i aril.
[0013] U narednom ostvarenju, dat je postupak za lečenje sisara inficiranih virusom posebno kada je taj virus HIV, uključujući primenu na tom sisaru antivirusno efektivne količine jedinjenja koje je izabrano iz grupe jedinjenja Formule I i jednog ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, podloga ili razblaživača. Opciono, jedinjenje Formule I može da se primeni u kombinaciji sa antivirusno efektivnom količinom drugog sredstva za tretman AIDS-a izabranog iz grupe koja se sastoji od: (a) AIDS antivirusnog sredstva; (b) anti-infektivnog sredstva; (c) imunomodulatora; i (d) drugog inhibitora ulaska HIV.
[0014] Naredno ostvarenje ovog pronalaska je farmaceutska kompozicija koja uključuje jedno ili više jedinjenja Formule I i jedan ili više farmaceutski prihvatljiv nosač, podlogu i/ili razblaživač; i opciono u kombinaciji sa drugim sredstvom za tretman AIDS-a izabranog iz grupe koja se sastoji od: ((a) AIDS antivirusnog sredstva; (b) anti-infektivnog sredstva; (c) imunomodulatora; i (d) drugog inhibitora ulaska HIV.
[0015] U još jednom ostvarenju pronalaska, obezbeđen je jedan ili više postupaka za izradu ovde datih jedinjenja Formule I.
[0016] Ovde su takođe opisana jedinjenja koja su međuproizvodi korisni u izradi ovde datih jedinjenja Formule I.
[0017] Ovaj pronalazak se odnosi na ove, kao i na druge važne proizvode koji su ovde opisani.
DETALJAN OPIS OSTVARENJA
[0018] Kako se ovde koristi, neodređeni članovi jednine odnose se i na množinu ukoliko kontekst jasno ne ukazuje drugačije
[0019] Kako jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da poseduju asimetrične centre i stoga se javljaju kao smeše diastereomera, ovo otkriće pored njihovih smeša uključuje pojedinačne diastereoizomerne oblike jedinjenja Formule I.
Definicije
[0020] Ukoliko nije drugačije posebno navedeno u prijavi, ovde može da se koristi jedan ili više od narednih naziva i treba da imaju sledeća značenja:
"H" se odnosi na vodonik, uključujući njegove izotope, kao što je deuterijum.
[0021] Naziv "C1-6alkil", kako se ovde koristi i u patentnim zahtevima (ukoliko nije drugačije naznačeno) označava alkil grupe ravnog ili račvastog lanca kao što su metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, t-butil, amil, heksil i slično.
[0022] " C1-C4fluoroalkil" se odnosi na F-supstituisanu C1-C4alkil grupu gde je najmanje jedan H atom supstituisan sa F atomom a svaki H atom može nezavisno da bude supstituisan sa F atomom;
[0023] "Halogen" ili "halo" se odnosi na hlor, brom, jod ili fluor.
[0024] "aril" ili "Ar" grupa se odnosi na sve ugljenik monociklične ili policiklične grupe sa kondenzovanim prstenom (to jest, prsteni koji dele susedni par atoma ugljenika) koji imaju potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Primeri aril grupa, bez ograničenja, su fenil, naftalenil i antracenil. Aril grupa može da bude supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstituisana, jedna ili više supstituent grupa je izabrana od alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, heteroaliciklične, hidroksi, alkoksi, ariloksi, heteroariloksi, heteroalicikloksi, tiohidroksi, tioariloksi, tioheteroariloksi, tioheteroalicikloksi, cijano, halogena, nitro, karbonil, O-karbamil, N-karbamil, C-amido, N-amido, C-karboksi, O-karboksi, sulfinil, sulfonil, sulfonamido, trihalometil, ureido, amino i -NR<x>R<y>, pri čemu su R<x>i R<y>nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkil, cikloalkil, aril, karbonil, C-karboksi, sulfonil, trihalometil i, kombinovano, pet- ili šest-članog heteroalicikličnog prstena.
[0025] "heteroaril" grupa se odnosi na monociklični ili kondenzovani prsten (to jest, prstenove koji dele susedni par atoma) koji u prstenu(ovima) ima jedan ili više atoma izabanih iz grupe koja se sastoji od azota, kiseonika i sumpora i koji, pored toga, ima potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Ukoliko nije drugačije naznačeno, heteroaril grupa može da bude vezana ili za atom ugljenika ili atom azota u okviru heteroaril grupe. Treba da se napomene da naziv heteroaril treba da obuhvati N-oksid osnovne heteroaril grupe ukoliko je N-oksid hemijski ostvarljiv kako je poznato u tehnici. Primeri, bez ograničenja, heteroaril grupa su furil, tienil, benzotienil, tiazolil, imidazolil, oksazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, benzotiazolil, triazolil, tetrazolil, izoksazolil, izotiazolil, pirolil, piranil, tetrahidropiranil, pirazolil, piridil, pirimidinil, hinolinil, izohinolinil, purinil, karbazolil, benzoksazolil, benzimidazolil, indolil, izoindolil, pirazinil, diazinil, pirazin, triazinil, tetrazinil i tetrazolil. Kada je supstituisana, supstituisana grupa(e) je preferirano jedna ili više grupa izabranih od alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, heteroaliciklični, hidroksi, alkoksi, ariloksi, heteroariloksi, heteroalicikloksi, tioalkoksi, tiohidroksi, tioariloksi, tioheteroariloksi, tioheteroalicikloksi, cijano, halogen, nitro, karbonil, O-karbamil, N-karbamil, C-amido, N-amido, C-karboksi, O-karboksi, sulfinil, sulfonil, sulfonamido, trihalometil, ureido, amino i -NR<x>R<y>, gde su R<x>i R<y>kako je prethodno definisano.
[0026] "Heteroaliciklična" grupa se odnosi na monocikličnu ili kondenzovanu grupu prstenva koji u prstenu(ovima) imaju jedan ili više atoma izabrana iz grupe koja se sastoji od azota, kiseonika i sumpora. Prstenovi su izabrani od onih koji obezbeđuju stabilan raspored veza a ne treba da obuhvate sisteme koji ne mogu da egzistiraju. Prstenovi mogu takođe da imaju jednu ili više dvostrukih veza. Međutim, prstenovi nemaju potpuno konjugovani sistem pielektrona. Primeri, bez ograničenja, heteroalicikličnih grupa su azetidinil, piperidil, piperazinil, imidazolinil, tiazolidinil, 3-pirolidin-1-il, morfolinil, tiomorfolinil i njegovi S oksidi i tetrahidropiranil. Kada je supstituisana, supstituisana grupa(e) je preferirano jedna ili više izabrana od alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, heteroaliciklični, hidroksi, alkoksi, ariloksi, heteroariloksi, heteroalicikloksi, tiohidroksi, tioalkoksi, tioariloksi, tioheteroariloksi, tioheteroalicikloksi, cijano, halogen, nitro, karbonil, tiokarbonil, O-karbamil, N-karbamil, O-tiokarbamil, N-tiokarbamil, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-karboksi, O-karboksi, sulfinil, sulfonil, sulfonamido, trihalometansulfonamido, trihalometansulfonil, silil, gvanil, gvanidino, ureido, fosfonil, amino i -NR<x>R<y>, pri čemu su R<x>i R<y>kako je prethodno definisano.
[0027] "Alkil" grupa se odnosi na zasićeni alifatični ugljovodonik uključujući grupe ravnog lanca i račvastog lanca. Preferirano, alkil grupa ima 1 do 20 atoma ugljenika (kad god je naveden numerički opseg, na primer "1-20", to znači da grupa, u ovom slučaju alkil grupa, može da sadrži 1 atom ugljenika, 2 atoma ugljenika, 3 atoma ugljenika, itd., do uključujući 20 atoma ugljenika). Još poželjnije, to je alkil grupa srednje veličine koja ima 1 do 10 atoma ugljenika. Najpoželjnije, to je niža alkil grupa koja ima 1 do 4 atoma ugljenika. Alkil grupa može da bude supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstituisana, grupa(e) supstituent je preferirano jedna ili više pojedinačno izabrana od trihaloalkil, cikloalkil, aril, heteroaril, heteroaliciklični, hidroksi, alkoksi, ariloksi, heteroariloksi, heteroalicikloksi, tiohidroksi, tioalkoksi, tioariloksi, tioheteroariloksi, tioheteroalicikloksi, cijano, halo, nitro, karbonil, tiokarbonil, O-karbamil, N-karbamil, O-tiokarbamil, N-tiokarbamil, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-karboksi, O-karboksi, sulfinil, sulfonil, sulfonamido, trihalometansulfonamido,
1
trihalometansulfonil i kombinovano, pet- ili šest-članog heteroalicikličnog prstena.
[0028] "Cikloalkil" grupa se odnosi na sve ugljenik monociklične ili grupe kondenzovanog prstena (to jest prstenovi koji dele susedni par atoma ugljenika) pri čemu jedan ili više prstenova nema potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Primeri, bez ograničenja, cikloalkil grupa su ciklopropan, ciklobutan, ciklopentan, ciklopenten, cikloheksan, cikloheksen, cikloheptan, ciklohepten i adamantan. Cikloalkil grupa može da bude supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstitusiana, supstituent grupa(e) je preferirano jedna ili više pojedinačno izabranih od alkil, aril, heteroaril, heteroaliciklična, hidroksi, alkoksi, ariloksi, heteroariloksi, heteroalicikloksi, tiohidroksi, tioalkoksi, tioariloksi, tioheteroariloksi, tioheteroalicikloksi, cijano, halo, nitro, karbonil, tiokarbonil, O-karbamil, N-karbamil, O-tiokarbamil, N-tiokarbamil, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-karboksi, O-karboksi, sulfinil, sulfonil, sulfonamido, trihalometansulfonamido, trihalometansulfonil, silil, amidino, gvanidino, ureido, fosfonil, amino i -NR<x>R<y>gde su R<x>i R<y>kako je prethodno definisano.
[0029] "alkenil" grupa se odnosi na alkil grupu, kako je ovde definisano, koja ima najmanje dva atoma ugljenika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu.
[0030] "Alkinil" grupa se odnosi na alkil grupu, kako je ovde definisano, koja ima najmanje dva atoma ugljenika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu.
[0031] "Hidroksi" grupa se odnosi na -OH grupu.
[0032] "Alkoksi" grupa se odnosi i na -O-alkil i na -O-cikloalkil grupu kako je ovde definisano.
[0033] "Ariloksi" grupa se odnosi i na -O-aril i na -O-heteroaril grupu, kako je ovde definisano.
[0034] "Heteroariloksi" grupa se odnosi na heteroaril-O- grupu sa heteroaril grupom kako je ovde definisano.
[0035] "Heteroalicikloksi" grupa se odnosi na heteroalicikličnu-O- grupu sa heteroalicikličnom grupom kako je ovde definisano.
[0036] "Tiohidroksi" grupa se odnosi na -SH grupu.
[0037] "Toalkoksi" grupa se odnosi i na S-alkil i na -S-cikloalkil grupu, kako je ovde definisano.
[0038] "Tioariloksi" grupa se odnosi i na -S-aril i na -S-heteroaril grupu, kako je ovde definisano.
[0039] "Tioheteroariloksi" grupa se odnosi na heteroaril-S- grupu sa heteroaril grupom kako je ovde definisano.
[0040] "Tioheteroalicikloksi" grupa se odnosi na heteroalicikličnu-S- grupu sa heteroalicikličnom grupom kako je ovde definisano.
[0041] "Karbonil" grupa se odnosi na -C(=O)-R" grupu, gde je R" izabran iz grupe koja sadrži vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, aril, heteroaril (vezan preko ugljenika prstena) i heteroalicikličnu (vezan preko ugljenika prstena), kako je svaka ovde definisana.
[0042] "Aldehid" grupa se odnosi na karbonil grupu gde je R" vodonik.
[0043] "Tiokarbonil" grupa se odnosi na -C(=S)-R" grupu, gde je R" kako je ovde definisano.
[0044] "Keto" grupa se odnosi na -CC(=O)C- grupu pri čemu ugljenik na jednoj ili obe strane C=O može da bude alkil, cikloalkil, aril ili ugljenik heteroaril ili heteroaliciklične grupe.
[0045] "Trihalometankarbonil" grupa se odnosi na Z3CC(=O)- grupu gde je navedeni Z halogen.
[0046] "C-karboksi" grupa se odnosi na -C(=O)O-R" groupe, gde je R" kako je ovde definisano.
[0047] "O-karboksi" grupa se odnosi na R"C(-O)O-grupu, gde je R" kako je ovde definisano.
[0048] "Karboksilna kisela" grupa se odnosi na C-karboksi grupu u kojoj je R" vodonik.
[0049] "Trihalometil" grupa se odnosi na -CZ3grupu gde je Z halogen kako je ovde definisano.
[0050] "Trihalometansulfonil" grupa se odnosi na Z3CS(=O)2- groupe gde je Z kako je prethodno definisano.
[0051] "Trihalometansulfonamido" grupa se odnosi na Z3CS(=O)2NR<x>- grupu gde je Z kako je prethodno definisano a R<x>je H ili (C1-6)alkil grupa.
[0052] "Sulfinil" grupa se odnosi na -S(=O)-R" grupu, gde je R" (C1-6)alkil grupa.
[0053] "Sulfonil" grupa se odnosi na -S(=O)2R" grupu gde je R" (C1-6)alkil grupa.
[0054] "S-sulfonamido" grupa se odnosi na -S(=O)2NR<X>R<Y>, gde su R<X>i R<Y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0055] "N-sulfonamido" grupa se odnosi na R"S(=O)2NRX- grupu, gde je RxH ili (C1-6)alkil grupa.
[0056] "O-karbamil" grupa se odnosi na -OC(=O)NR<x>R<y>grupu, gde su R<X>i R<Y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0057] "N-karbamil" grupa se odnosi na R<x>OC(=O)NR<y>grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0058] "O-tiokarbamil" grupa se odnosi na -OC(=S) NR<x>R<y>grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0059] "N-tiokarbamil" grupa se odnosi na R<x>OC(=S)NR<y>- grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0060] "Amino" grupa se odnosi na -NH2grupu.
[0061] "C-amido" grupa se odnosi na -C(=O)NR<x>R<y>grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-
6)alkil grupa.
[0062] "C-tioamido" grupa se odnosi na -C(=S)NR<x>R<y>grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0063] "N-amido" grupa se odnosi na R<x>C(=O)NR<y>- grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0064] "Ureido" grupa se odnosi na -NR<x>C(=O)NR<y>R<y2>grupu, gde su R<x>, R<y>i R<y2>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0065] "Gvanidino" grupa se odnosi na -R<x>NC(=N)NR<y>R<y2>grupu, gde su R<x>, R<y>i R<y2>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0066] "Amidino" grupa se odnosi na R<x>R<y>NC(=N)- grupu, gde su R<x>i R<y>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0067] "Cijano" grupa se odnosi na -CN grupu.
[0068] "Silil" grupa se odnosi na -Si(R")3, gde su R" (C1-6)alkil ili fenil grupa.
[0069] "Fosfonil" grupa se odnosi na P(=O)(OR<x>)2gde je R<x>(C1-6)alkil grupa.
[0070] "Hidrazino" grupa se odnosi na -NR<x>NR<y>R<y2>grupu, gde su R<x>, R<y>i R<y2>nezavisno H ili (C1-6)alkil grupa.
[0071] "4, 5, ili 6 člani ciklični N-laktam prsten" grupa se odnosi na
[0072] "Spiro" grupa je biciklična organska grupa sa prstenovima vezanim preko samo jednog atoma. Prstenovi mogu da budu u osnovi različiti ili identični. Atom za vezivanje se takođe naziva spiroatom, najčešće kvaternanrni ugljenik ("spiro ugljenik").
[0073] "Oksospiro" ili "oksaspiro" grupa je spiro grupa koja ima kiseonik koji se nalazi unutar strukture bicikličnog prstena. "Dioksospiro" ili "dioksaspiro" grupa ima dva kiseonika u okviru strukture bicikličnog prstena.
[0074] Bilo koje dve susedne R grupe mogu da se kombinuju da formiraju dodatni aril, cikloalkil, heteroaril ili heterociklični prsten kondenzovan sa prstenom koji inicijalno sadrži ove R grupe.
1
[0075] U tehnici je poznato da atomi azota u heteroaril sistemima mogu da "učestvuju u dvostrukoj vezi heteroaril prstena" a ovo znači da formiraju dvostruke veze u dve tautomerne strukture koje uključuju peto-člani prsten heteroaril grupa. Ovo ukazuje da azoti mogu da budu supstituisani kako je poznato u hemijskoj tehnici. Otkrića i patentni zahtevi ovog pronalaska su zasnovani na poznatim opštim principima hemijskog vezivanja. Razumljivo je da patentni zahtevi ne obuhvataju strukture za koje se u literaturi zna da su nestabilne i da ne mogu da egzistiraju.
[0076] Farmaceutski prihvatljive soli ovde otkrivenih jedinjenja su obuhvaćene okvirom pronalaska. Naziv "farmaceutski prihvatljiva so" kako se koristi ovde i u patentnim zahtevima treba da uključi netoksične soli nastale dodatkom baze. Odgovarajuće soli uključuju one dobijene od organskih i neorganskih kiselina kao što su, bez ograničenja, hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina, metan sulfonska kiselina, sirćetna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, sulfinska kiselina, limunska kiselina, maleinska kiselina, fumarna kiselina, sorbinska kiseina, akonitinska kiselina, salicilna kiselina, ftalna kiselina i slično. Naziv " farmaceutski prihvatljiva so " kako se ovde koristi treba takođe da uključi soli kiselih grupa, kao što je karboksilatna, sa takvim kaunterjonima kao što je amonijum, soli alkalnih metala, posebno natrijuma ili kalijuma, soli zemno alkalnih metala, posebno kalcijuma ili magnezijuma i soli sa pogodnim organskim bazama kao što su niži alkilamini (metilamin, etilamin, cikloheksilamin i slično) ili sa supstituisanim nižim aminima (na primer hidroksil-supstituisanim alkilaminima kao što su dietanolamin, trietanolamin ili tris(hidroksimetil)-aminometan), ili sa bazama kao što su piperidin ili morfolin.
[0077] Kako je prethodno izloženo, pronalazak se odnosi na jedinjenje, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli, koje je izabrano od jedinjenja Formule I:
gde je R1izopropenil ili izopropil;
A je -C1-6alkil-OR0;
gde je R0je heteroaril-Q0;
Q0je izabran iz grupe od -H, -CN, -C1-6alkil, -COOH, -Ph, -OC1-6alkil, -halo, -CF3,
Y je izabran iz grupe od -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazol i -CONHOH;
R2je -H, -C1-6alkil, -alkil supstituisani C1-6alkil ili -arilsupstituisani C1-6alkil;
W nema, ili je -CH2- ili -CO-;
R3je -H, -C1-6alkil ili -alkil supstituisani C1-6alkil;
R4je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisane -C1-6alkil, -C1-6alkil-Q1, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q1, aril, heteroaril, supstituisane heteroaril, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, i
gde je G izabran iz grupe od -O-, -SO2- i -NR12-;
gde je Q1izabran iz grupe od -C1-6alkil, -C1-6fluoroalkil, heteroaril, supstituisane heteroaril, halogena, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9i -SO2R7;
R5je izabran iz grupe -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6alkil supstituisane alkil, -C1-6alkil-NR8R9, -COR3, -SO2R7i -SO2NR2R2;
us uslov da R4ili R5nije -COR6kada je W -CO-;
uz dalji uslov da je samo jedan od R4ili R5izabran iz grupe od -COR6, -COCOR6, -SO2R7i -SO2NR2R2;
R6je izabran iz grupe od -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-supstituisane alkil, -C3-6cikloalkil, -C3-6supstituisanacikloalkil-Q2, -C1-6alkil-Q2, -C1-6alkil-supstituisane alkil-Q2, -C3-6cikloalkil-Q2, aril-Q2, -NR13R14i -OR15;
1
gde je Q2izabran iz grupe od aril, heteroaril, supstituisane heteroaril, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3i -CONHSO2NR2R2;
R7je izabran iz grupe od -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil, -C3-6cikloalkil, -CF3, aril i heteroaril;
R8i R9su nezavisno izabrani iz grupe od -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil, aril, heteroaril, supstituisane aril, supstituisane heteroaril, -C1-6alkil-Q2i -COOR3, ili su R8i R9uzeti zajedno sa susednim N da formiraju ciklus izabran iz grupe:
1
M je izabran iz grupe od -R15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH i -NR2R12;
V je izabran iz grupe od -CR10R10-, -SO2-, -O- i -NR12-;
us uslov da samo jedan od R8ili R9može da bude -COOR3;
R10i R11su nezavisno izabrani iz grupe od -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisane alkil i -C3-6cikloalkil;
R12je izabran iz grupe od -H, -C1-6alkil, -alkil supstituisane C1-6alkil, -CONR2R2, -SO2R3i -SO2NR2R2;
R13i R14su nezavisno izabrani iz grupe od -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisane alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i C1-6supstituisane alkil-Q3;
Q3je izabran iz grupe od heteroaril, supstituisane heteroaril, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2i -SO2R3;
R15je izabran iz grupe od -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisane alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i -C1-6supstituisane alkil-Q3;
R16je izabran iz grupe od -H, -C1-6alkil, -NR2R2i -COOR2;
us uslov da kada je V -NR12-; R16nije -NR2R2; i
R17je izabran iz grupe od -H, -C1-6alkil, -COOR3i aril grupe.
[0078] U preferiranom ostvarenju pronalaska, R1je izopropenil.
[0079] Takođe je preferirano da je Y -COOR2. Još poželjnije, u ovom ostvarenju R2je -H.
[0080] U narednom preferiranom ostvarenju pronalaska, u R0grupi "heteroaril" radikal je preferirano izabran iz grupe:
1
[0081] Takođe je preferirano da nema ubačene alkil grupe ili drugog supstituenta između -O radikala i R0grupe u supstituentu A.
[0082] Dalje je preferirano da je R4-C1-6alkil-Q1.
[0083] Takođe je preferirano ostvarenje u kome je Q1-NR8R9.
[0084] Pored toga, kada su R8i R9uzeti zajedno sa susednim -N da formiraju ciklus, preferirani ciklus će da bude izabran iz grupe:
[0085] U nekim ostvarenjima je takođe preferirano da je Q0-CN grupa.
[0086] U narednom preferiranom ostvarenju, R1je izopropenil, a u R0grupi "heteroaril" radikal je izabran iz grupe:
Y je -COOH, R4je -C1-6alkil-Q1, Q1je -NR8R9a R8i R9su uzeti zajedno sa susednim -N da formiraju ciklus koji je izabran iz grupe:
1
[0087] U ovom ostvarenju, takođe je preferirano da su R7i R16svaki -H ili -C1-6alkil.
[0088] Preferirana jedinjenja, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli, kao deo pronalaska, uključuju sledeća:
1
�
�
�
�
�
[0089] U narednom ostvarenju, preferirana jedinjenja, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli, su sledeća:
2
[0090] Prethodna jedinjenja predstavljaju smešu diastereoizomera i dva pojedinačna stereomera. U nekim ostvarenjima, jedan od specifičnih diastereomera može da ima posebnu prednost.
[0091] Jedinjenja iz ovog pronalaska, u skladu sa svim prethodno opisanim različitim ostvarenjima, mogu da se primene oralno, parenteralno (uključujući subkutane injekcije, intravenske, intramuskularne, intrasternalne injekcije ili infuzione tehnike), inhalacijom sprejom ili rektalno, ili drugim načinima u doznim jedinicama formulacija koje sadrže netoksične farmaceutski prihvatljive nosače, podloge i razblaživače raspoložive stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Takođe može da bude uključeno jedno ili više pomoćnih sredstava.
[0092] Prema tome, u skladu sa ovim pronalaskom, dalje je obezbeđen postupak za tretman i farmaceutska komopozicija, za lečenje virusnih infekcija kao što su HIV infekcija i AIDS. Tretman obuhvata primenu farmaceutske kompozicije koja sadrži antivirusnu efektivnu količinu jednog ili više jedinjenja Formule I zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, podloga ili razblaživača na pacijentu kome je potreban ovakav tretman. Kako se ovde koristi, naziv "antivirusna efektivna količina" označava ukupnu količinu svake aktivne komponente kompozicije i postupka koja je dovoljna da pokaže značajnu korist za pacijenta, to jest, inhibiciju, poboljšanje ili isceljenje akutnih stanja koje karakteriše inhibicija HIV infekcija. Kada se primeni na pojedinačni aktivni sastojak, primenjen samostalo, naziv se odnosi samo na taj jedan sastojak. Kada se primeni na kombinaciju, naziv se donosi na
2
kombinovane količine aktivnih sastojaka koje dovode do terapeutskog efekta, kada se primene u kombinaciji, po redu ili istovremeno. Nazivi "lečenje, tretiranje, tretman" kako se koristi ovde i u patentnim zahtevima, označavaju prevenciju, inhibiciju, poboljšanje i/ili zarastanje bolesti i/ili isceljenje bolesti i stanja povezanih sa HIV infekcijom.
[0093] Farmaceutske kompozicije pronalaska mogu da budu u obliku suspenzija ili tableta za oralnu primenu; kao i u obliku nazalnih sprejova, sterilnih injektabilnih preparata, na primer kao sterilne injektabilne vodene ili uljane suspenzije ili u obliku supozitorija. Farmaceutski prihvatljivi nosači, podloge ili razblaživači mogu da se koriste u farmaceutskim kompozicijama i predstavljaju one koji se koriste u tehnici izrade farmaceutskih preparata.
[0094] Kada se primenjuju oralno kao suspenzije, ove kompozicije se izrađuju u skladu sa tehnikama koje se uobičajeno primenjuju u tehnici farmaceutskih formulacija i mogu da sadrže mikrokristalnu celulozu za povećanje mase, alginatnu kiselinu ili natrijum alginat kao sredstvo za suspendovanje, metilcelulozu za povećanje viskoznosti i sredstva za zaslađivanje/korekciju ukusa poznatih u tehnici. Kao tablete sa tretnutnim oslobađanjem, ove kompozicije mogu da sadrže mikrokristalu celulozu, dikalcijum fosfat, skrob, magnezijum stearat i laktozu i/ili druge podloge, vezivna sredstva, pojačivače, dezintegratore, razblaživače i lubrikanse poznate u tehnici.
[0095] Injektabilni rastvori ili suspenzije mogu da se formulišu u skladu sa poznatom tehnikom, upotrebom pogodnih ne-toksičnih parenteralno prihvatljivih razblaživača ili rastvarača, kao što su manitol, 3-butandiol, voda, Ringerov rastvor ili izotonični rastvor natrijum hlorida ili pogodnih sredstava za dispergovanje, vlaženje i suspendovanje, kao što su sterilna, neutralna, fiksna ulja, uključujući sintetičke mono- ili digliceride i masne kiseline, uključujući oleinsku kiselinu.
[0096] Ovde navedena jedinjenja mogu da se primene oralno na ljudima u dozi u opsegu od približno 1 do 100 mg/kg telesne težine u podeljenim dozama, obično u dužem periodu, kao što su dani, nedelje, meseci ili čak godine. Jedan od preferiranih opsega doze je približno 1 do 10 mg/kg telesne težine oralno u podeljenim dozama. Naredni preferirani opseg doza je približno 1 do 20 mg/kg telesne težine u podeljenim dozama. Međutim, razumljivo je da posebna vrednost doze i učestalost doziranja za svakog pojedinačnog pacijenta može da varira i zavisiće od različitih faktora, uključujući aktivnost specifičnog jedinjenja koje je primenjeno, metaboličku stabilnost i dužinu delovanja jedinjenja, starost, telesnu težinu, opšte zdravstveno stanje, pol, ishranu, način i vreme primene, brzinu izlučivanja, kombinacije lekova i težine određenog stanja i domaćina terapije koja se primenjuje.
[0097] Ovde su razmatrane kombinacije jedinjenja Formula 1 koja su ovde navedena, zajedno sa jednim ili više drugih sredstava korisnih u tretmanu AIDS. Na primer, jedinjenja iz ovog otkrića mogu efikasno da se primene, ili u periodu pre izlaganja i/ili nakon izlaganja, u kombinaciji sa efektivnim količinama AIDS antivirusa, imunomodulatora, antiinfektivnih sredstava ili vakcina, kao što je navedeno u niže datoj, ne-ograničavajućoj tabeli:
ANTIVIRUSI
[0098]
Naziv leka Proizvođač Indikacija
097 Hoechst/Bayer HIV infekcija,
AIDS, ARC (inhibitor nonnukleozid reverzne transkriptaze (RT))
Amprenavir 141 W94 GW 14 Glaxo Wellcome HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze)
Abakavir (1592U89) GW 1592 Glaxo Wellcome HIV infekcija, AIDS, ARC (RT inhibitor)
Acemannan Carrington Labs ARC
(Irving, TX)
Aciklovir Burroughs Wellcome HIV infekcija, AIDS, ARC
AD-439 Tanox Biosystems HIV infekcija, AIDS, ARC
AD-519 Tanox Biosystems HIV infekcija, AIDS, ARC
Adefovir dipivoxil AL-721 Gilead Sciences HIV infekcija ARC, PGL Ethigen
(Los Angeles, CA) HIV pozitivni, AIDS
1
Alpha Interferon Glaxo Wellcome Kapošijev sarkom, HIV u kombinaciji sa/Retrovir
Ansamycin LM 427 Adria Laboratories ARC
(Dublin, OH) Erbamont
(Stamford, CT)
Antitelo koje neutrališe pH Advanced Biotherapy AIDS, ARC
labilnog alfa nenormalnog Concepts (Rockville,
Interferona MD)
AR177 Aronex Pharm HIV infekcija, AIDS, ARC Beta-fluoro-ddA Nat’l Cancer Institute AIDS-povezane bolesti BMS-234475 (CGP-61755) Bristol-Myers Squibb/ HIV infekcija, AIDS, ARC Novartis (inhibitor proteaze)
CI-1012 Warner-Lambert HIV-1 infekcija
Cidofovir Gilead Science CMV retinitis, herpes,
papilomavirus
Curdlan sulfat AJI Pharma USA HIV infekcija Cytomegalovirus MedImmune CMV retinitis
Immune globin
Cytovene Syntex Ugrožen vid
Ganciclovir CMV periferni CMV retinitis
Darunavir Tibotec- J & J HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze)
Delaviridine Pharmacia-Upjohn HIV infekcija, AIDS, ARC (RT inhibitor)
2
Dextran Sulfat Ueno Fine Chem. Ind. AIDS, ARC, HIV pozitivni Ltd. (Osaka, Japan) asimptomatski
ddC Dideoksicytidine Hoffman-La Roche HIV infekcija, AIDS, ARC
ddI Dideoksiinosine Bristol-Myers Squibb HIV infekcija, AIDS, ARC;
kombinacija sa AZT/d4T
DMP-450 AVID (Camden, NJ) HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze) Efavirenz (DMP 266, SUSTIVA®) Bristol Myers Squibb HIV infekcija, AIDS, ARC (non-(-)6-Hlor-4-(S)-ciklopropiletinil- nukleozid RT inhibitor) 4(S)-trifluorometil-1,4-dihidro-2H-3,1-benzoksazin-2-on,
STOCRINE
EL10 Elan Corp, PLC HIV infekcija
(Gainesville, GA)
Etravirin Tibotec/ J & J HIV infekcija, AIDS, ARC (nonnukleozid inhibitor reverzne transkriptaze)
Famciclovir Smith Kline herpes zoster, herpes simplex
GS 840 Gilead HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor reverzne transkriptaze)
HBY097 Hoechst Marion HIV infekcija, AIDS, ARC Roussel (inhibitor non- nukleozid reverzne transkriptaze)
Hypericin VIMRx Pharm. HIV infekcija, AIDS, ARC Rekombinantni humani Interferon Triton Biosciences AIDS, Kapošijev sarkom, ARC Beta (Almeda, CA)
Interferon alfa-n3 Interferon Sciences ARC, AIDS
Indinavir Merck HIV infekcija, AIDS, ARC, asimptomatski HIV pozitivni, takođe u kombinacija sa AZT/ddI/ddC
ISIS 2922 ISIS Pharmaceuticals CMV retinitis
KNI-272 Nat’l Cancer Institute HIV-povezane bolesti
Lamivudin, 3TC Glaxo Wellcome HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor reverzne transkriptaze); takođe sa AZT
Lobucavir Bristol-Myers Squibb CMV infekcija
Nelfinavir Agouron HIV infekcija, AIDS, ARC Pharmaceuticals (inhibitor proteaze)
Nevirapin Boeheringer HIV infekcija, AIDS, ARC (RT Ingleheim inhibitor)
Novapren Novaferon Labs, Inc. HIV inhibitor
(Akron, OH)
Peptide T Oktapeptide Sequence Peninsula Labs AIDS
(Belmont, CA)
Trinatrijum fosfofonoformat Astra Pharm. CMV retinitis, HIV infekcija, Products, Inc. other CMV infekcije
4
PNU-140690 Pharmacia Upjohn HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze)
Probucol Vyrex HIV infekcija, AIDS
RBC-CD4 Sheffield Med. Tech HIV infekcija, AIDS, ARC (Houston, TX)
Ritonavir Abbott HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze)
Sakvinavir Hoffmann-LaRoche HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze)
Starvudin; d4T Didehidrodeoksi- Bristol-Myers Squibb HIV infekcija, AIDS, ARC Thymidine
Tipranavir Boehringer Ingelheim HIV infekcija, AIDS, ARC (inhibitor proteaze) Valaciclovir Glaxo Wellcome Genital HSV & CMV infekcije
Virazole Ribavirin Viratek/ICN asimptomatski HIV pozitivni, LAS,
(Costa Mesa, CA) ARC
VX-478 Vertex HIV infekcija, AIDS, ARC
Zalcitabin Hoffmann-LaRoche HIV infekcija, AIDS, ARC, sa AZT
Zidovudin; AZT Glaxo Wellcome HIV infekcija, AIDS, ARC, Kapošijev sarkom, u kombinaciji sa drugim terapijama Tenofovir diizoproksil, fumarat so Gilead HIV infekcija, AIDS, (inhibitor (VIREAD®) reverzne transkriptaze)
EMTRIVA® (Emtricitabin) (FTC) Gilead HIV infekcija, AIDS, (inhibitor reverzne transkriptaze)
COMBIVIR® GSK HIV infekcija, AIDS, (inhibitor reverzne transkriptaze)
Abakavir sukcinat (ili ZIAGEN®) GSK HIV infekcija, AIDS, (inhibitor reverzne transkriptaze)
REYATAZ® (ili atazanavir) Bristol-Myers Squibb HIV infekcija AIDs, inhibitor proteaze
FUZEON® (Enfuvirtid ili T-20) Roche / Trimeris HIV infekcija AIDs, inhibitor virusne fuzije
LEXIVA® (ili GSK/Vertex HIV infekcija AIDs, virusna (ili Fosamprenavir kalcijum) inhibitor proteaze
Selzentry Maravirok; (UK 427857) Pfizer HIV infekcija AIDs, (CCR5
antagonist, u razvoju)
Trizivir® GSK HIV infekcija AIDs, (kombinacija tri leka)
Sch-417690 (vicriviroc) Schering-Plough HIV infekcija AIDs, (CCR5
antagonist, u razvoju)
TAK-652 Takeda HIV infekcija AIDs, (CCR5
antagonist, u razvoju)
GSK 873140 (ONO-4128) GSK/ONO HIV infekcija AIDs, (CCR5antagonist, u razvoju)
Integrase Inhibitor MK-0518 Merck HIV infekcija AIDs Raltegravir
TRUVADA® Gilead Kombinacija Tenofovir diizoproksil fumaratne soli (VIREAD®) i EMTRIVA® (Emtricitabin)
Integrase Inhibitor GS917/JTK-303 Gilead/Japan Tobacco HIV Infekcija AIDs u Elvitegravir razvoju
Trostruka kombinacija leka Gilead/Bristol-Myers Kombinacija Tenofovir ATRIPLA® Squibb diizoproksil fumaratne soli (VIREAD®), EMTRIVA® (Emtricitabin) i SUSTAVA® (Efavirenz)
FESTINAVIR® 4’-etinil-d4T Oncolys BioPharma HIV infekcija AIDs u razvoju
CMX-157 Chimerix HIV infekcija
Lipidni konjugat tenofovir nukleotida AIDs
GSK1349572 Inhibitor integraze GSK HIV infekcija AIDs dolutegravir
S/GSK1265744 Inhibitor integraze GSK HIV infekcija AIDs
IMUNOMODULATORI
Naziv leka Proizvođač Indikacija
AS-101 Wyeth-Ayerst AIDS
Bropirimine Pharmacia Upjohn Uznapredovani AIDS
Acemannan Carrington Labs, Inc. AIDS, ARC
(Irving, TX)
CL246,738 Wyeth Lederle Labs AIDS, Kapošijev sarkom
FP-21399 Fuki ImmunoPharm Blocks HIV fuzija sa CD4+ ćelijama
Gamma Interferon Genentech ARC, u kombinaciji sa/TNF (faktor nekroze tumora)
Granulocyte Genetics Institute AIDS
Macrophage Colony Sandoz
faktor stimulacije
Granulocyte Macrophage Hoechst-Roussel Immunex AIDS
Colony faktor stimulacije
Granulocyte Macrophage Schering-Plough AIDS, kombinacija sa/AZT Colony faktor stimulacije
HIV Core Particle Rorer Seropozitivni HIV Immunostimulant
IL-2 Interleukin-2 IL-2 Cetus Hoffman-LaRoche AIDS, u kombinaciji sa/AZT Interleukin-2 Immunex AIDS, ARC, HIV, u kombinaciji sa/AZT
IL-2 Interleukin-2 (aldeslukin) Chiron AIDS, povećanje u broju CD4 ćelija
Intravenozni imuni globulin Cutter Biological Pedijatrijski AIDS, u kombinaciji (human) (Berkeley, CA) sa/AZT
IMREG-1 Imreg (New Orleans, AIDS, Kapošijev sarkom, ARC,
LA) PGL
IMREG-2 Imreg (New Orleans, AIDS, Kapošijev sarkom, ARC, Imutiol Dietil LA) Merieux Institute PGL AIDS, ARC
Ditio Carbamate Alpha-2 Interferon Schering Plough Kapošijev sarkom sa/AZT, AIDS
Metionine-Enkephalin TNI Pharmaceutical AIDS, ARC
(Chicago, IL)
MTP-PE Muramyl-Tripeptide Ciba-Geigy Corp. Kapošijev sarkom
Granulocyte Colony Amgen AIDS, u kombinaciji sa/AZT faktor stimulacije
Remune Immune Response Imunoterapeutici
Corp.
rCD4 rekombinantni rastvorljivi Genentech AIDS, ARC
humani CD4
rCD4-IgG hibridi AIDS, ARC
rekombinantnog rastvorljivog
humanog CD4 Biogen AIDS, ARC
Interferon Alfa 2a Hoffman-La Roche Kapošijev sarkom AIDS, ARC, u kombinaciji sa/AZT
SK&F106528 Soluble T4 Smith Kline HIV infekcija
Thymopentin Immunobiology HIV infekcija
Research Institute
(Annandale, NJ)
Tumor Necrosis Factor; TNF Genentech ARC, u kombinaciji sa/gama Interferon
ANTI-INFEKTIVNA SREDSTVA
[0100]
Clindamycin sa Primaquine Pharmacia Upjohn PCP
Fluconazole Pfizer Kriptokokalni meningitis, kandidiaze
Pastille Nystatin Pastille Squibb Corp. Prevencija oralnih kandidiaza
Ornidyl Eflornithine Merrell Dow PCP
Pentamidine Isetionate (IM & IV) LyphoMed PCP tretman (Rosemont, IL)
Trimethoprim Antibakterijski
Trimethoprim/sulfa Antibakterijski Piritrexim Burroughs Wellcome PCP tretman
Pentamidine Isetionate za inhalaciju Fizons Corporation PCP profilaksa
4
Spiramycin Rhone- Poulenc Kriptosporidijalna diareja Intraconazole-R51211 Janssen-Pharm. Histoplazmoze; kriptokokalni meningitis
Trimetrexate Warner-Lambert PCP
Daunorubicin NeXstar, Sequus Kapošijev sarkom
Recombinant Human Erythropoietin Ortho Pharm. Corp. Teška anemija povezana sa AZT terapijom
Recombinant Human Growth Serono AIDS-povezano gladovanje, Hormone kaheksija
Megestrol Acetat Bristol-Myers Squibb Tretman anoreksije povezane sa AIDS
Testosterone Alza, Smith Kline AIDS- povezano gladovanje
Total Enteral Nutrition Norwich Eaton Diareja i malapsorpcija Pharmaceuticals povezana sa AIDS
[0101] Pored toga, jedinjenja iz ovde datog otkrića mogu da se koriste u kombinaciji sa inhibitorima HIV ulaza. Primeri ovakvih inhibitora HIV ulaza su objašnjeni u DRUGS OF FUTURE 1999, 24(12), pp.1355-1362; CELL, Vol.9, pp.243-246, Oct. 29, 1999; i DRUG DISCOVERY TODAY, Vol.5, No.5, May 2000, pp.183-194 i u Inhibitors of entry of HIV into host cells. Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F., Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461. Preciznije jedinjenja mogu da se koriste u kombnaciji sa inhibitorima vezivanja, inhibitorima kondenzovanja i antagonistima hemokin receptora usmerenim ili na CCR5ili CXCR4koreceptor. Inhibitori HIV vezivanja su takođe navedeni u US 7,354,924 i US 7,745,625.
[0102] Razumljivo je da okvir kombinacija jedinjenja iz ove prijave sa AIDS antivirusima, imunomodulatorima, antiinfektivnim sredstvima, inhibitorima HIV ulaza ili vakcinama nije ograničen na spisak u prethodno datoj Tabeli već, u principu, uključuje bilo koju kombinaciju sa bilo kojom farmaceutskom kompozicijom korisnom za tretman AIDS-a.
[0103] Preferirane kombinacije su istovremeni ili alternativni tretmani sa jedinjenjem iz ovog otkrića i inhibitorom HIV proteaze i/ili non-nukleozid inhibitorom HIV reverzne transkriptaze. Opciono, navedena komponenta u kombinaciji je nukleozid inhibitor HIV reverzne transkriptaze, kao što su AZT, 3TC, ddC ili ddI. Preferirani inhibitor HIV proteaze je REYATAZ® (aktivni sastojak Atazanavir). Uobičajena doza od 300 do 600 mg se primenjuje jedanput dnevno. Može da se primeni zajedno sa manjom dozom Ritonavir (50 do 500mg). Naredni preferirani inhibitor HIV proteaze je KALETRA®. Naredni korisni inhibitor HIV proteaze je indinavir, koji je sulfatna so N-(2(R)-hidroksi-1-(S)-indanil)-2(R)-fenilmetil-4-(S)-hidroksi-5-(1-(4-(3-piridil-metil)-2(S)-N’-(t-butilkarboksamido)-piperazinil))-pentanamid etanolata i sintetizovan je u skladu sa U.S. 5,413,999. Indinavir se generalno primenjuje u dozi od 800 mg tri puta dnevno. Drugi preferirani inhibitori proteaze su nelfinavir i ritonavir. Naredni preferirani inhibitor HIV proteaze je sakvinavir koji se primenjuje u dozi od 600 ili 1200 mg tid. U preferirane non-nukleozid inhibitore HIV reverzne transkriptaze spada efavirenz. Ove kombinacije mogu da imaju neočekivane efekte na ograničenje širenja i stepen infekcije HIV-om. Preferirane kombinacije uključuju sledeće (1) indinavir sa efavirenzom, i opciono, AZT i/ili 3TC i/ili ddI i/ili ddC; (2) indinavir i bilo koji od AZT i/ili ddI i/ili ddC i/ili 3TC, posebno, indinavir i AZT i 3TC; (3) starvudin i 3TC i/ili zidovudin; (4) tenofovir diizoproksil fumaratna so i emtricitabin.
[0104] U ovakvim kombinacijama jedinjenje(a) iz ovog pronalaska i druga aktivna sredstva mogu da se primenjuju odvojeno ili u konjukciji. Pored toga, primena jednog elementa može da bude pre nego, zajedno sa ili nakon primene drugog sredstva(ava).
OPŠTA HEMIJA (POSTUPCI SINTEZA)
[0105] Ovaj pronalazak uključuje jedinjenja Formule I, njihove farmaceutske formulacije i njihovu upotrebu na pacijentima koji boluju ili su podložni HIV infekciji. Jedinjenja Formule I takođe uključuju njihove farmaceutski prihvatljive soli. Procedure za izradu jedinjenja Formule I i međuproizvoda korisnih za njihovu sintezu su opisani nakon odeljka skraćenica. Skraćenice
[0106] Jedna ili više od niže datih skraćenica, od kojih su najveći broj uobičajene skraćenice dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici, mogu da se koriste u toku opisa otkrića i primera:
RT = sobna temperatura
BHT = 2,6-di-terc-butil-4-hidroksitoluen
CSA = kamforsulfonska kiselina
LDA = litijum diizopropilamid
KHMDS = kalijum bis(trimetilsilil)amid
SFC = superkritična tečna hromatografija
Quant = kvantitativno
TBDMS = terc-butildimetilsilan
PTFE = politetrafluoroetilen
NMO = 4-metilmorfolin-N-oksid
THF = tetrahidrofuran
TLC = hromatografija na tankom sloju
DCM = dihlormetan
DCE = dihloretan
TFA = trifluorosirćetna kiselina
LCMS = tečna hromatografija masena spektrometrija
Prep = preparativna
HPLC = visoko efikasna tečna hromatografija
DAST = (dietilamino)sumpor trifluorid
TEA = trietilamin
DIPEA = N,N-diizopropiletilamin
HATU = [O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat]
DCC = N,N’-dicikloheksilkarbodiimid
DMAP = dimetilaminopiridin
TMS = trimetilsilil
NMR = nuklearna magnetna rezonanca
DPPA = difenil fosforil azid
AIBN = azobisizobutironitril
TBAF = tetrabutilamonijum fluorid
DMF = dimetilformamid
4
TBTU = O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’;N’-tetrametiluronijum tetrafluoroborat Min(s) = minut(i)
h = sat(i)
sat. = zasićeni
TEA = trietilamin
EtOAc = etil acetat
TFA = trifluorosirćetna kiselina
PCC = piridinijum hlorhromat
TLC = hromatografija na tankom sloju
Tf2NPh = (trifluorometilsulfonil)metansulfonamid
dioksan = 1,4-dioksan
PG = zaštitna grupa
atm = atmosfera(e)
mol = mol(i)
mmol= milimol(i)
mg = miligram(i)
µg = mikrogram(i)
µl = mikrolitar(i)
µm= mikrometar(i)
mm= milimetar(i)
Rpm = obrtaja po minutu
SM = početni materijal
TLC = hromatografija na tankom sloju
AP = procenat oblasti
Equiv. = ekvivalent(i)
DMP = Dess-Martin perjodinan
TMSCl = trimetilsilil hlorid
TBSCl = terc-butildimetilsilil hlorid
TBSOTf = trimetilsilil trifluorometansulfonat
PhMe = toluen
PhNTf2= N-Fenil-bis(trifluorometansulfonimid)
S-Phos = 2-Dicikloheksilfosfino-2’,6’-dimetoksibifenil
TFDO = metil(trifluorometil)dioksiran
TEMPO = 2,2,6,6-tetrametilpiperidiniloksi
DI = dejonizovana voda
[0107] Nazivi "C-3" i "C-28" se odnose na određene položaje triterpen jezgra označene u skladu sa IUPAC pravilom (položaji niže označeni u odnosu na dati triterpen: betulin):
[0108] Isto označavanje se zadržava kada se odnosi na serije jedinjenja u šemama i opštim opisima postupaka.
<C-17 uree>C-17 amidiC-17 amini
4
PRIMERI
[0109] Naredni primeri su ilustracija uobičajenih sinteza jedinjenja Formule I kako je prethodno generalno objašnjeno. Ovi primeri su samo kao ilustracija i ne treba da ograniče otkriće na bilo koji način. Reagensi i početni materijali su lako raspoloživi stručnjaku sa iskustvom u tehnici.
Hemija
Uobičajene procedure i karakterizacija izabranih Primera:
[0110] Ukoliko nije drugačije navedeno, rastvarači i reagensi se koriste direktno kako su dobijeni od komercijalnih dobavljača a reakcije se izvode u atmosferi azota. Flash hromatografija se izvodi na silika gelu 60 (0.040-0.063 veličina čestica; EM Science dobavljač).<1>H NMR spektar se beleži na Bruker DRX-500f pri 500 MHz (ili Bruker AV 400 MHz, Bruker DPX-300B, ili Varian Gemini 300 pri 300 MHz kako je navedeno). Hemijske promene se beleže u ppm na δ skali u odnosu na δTMS = 0. Koriste se sledeće interne reference za rezidualne protone u sledećim rastvaračima: CDCl3(δH7.26), CD3OD (δH3.30), sirćetni-d4 (Sirćetna kiselina d4) (δH11.6, 2.07), DMSO mix ili DMSO-D6-CDCl3(δH2.50 i 8.25) (odnos 75%:25%) i DMSO-d6(δH2.50). Standardni akronimi su korišćeni za opis obrazaca višestrukosti: s (singlet), br. s (široki singlet), d (dablet), t (triplet), q (kvartet), m (multiplet), b (široko), app (očigledno). Konstanta udvajanja (J) je u hercima. Svi rezultati tečnih hromatografija (LC) su beleženi na Shimadzu LC-10AS tečnom hromatografu koristeći SPD-10AV UV-Vis detektor sa rezultatima masene spektrometrije (MS) dobijenih korišćenjem Micromass platforme za LC u elektrosprej modu.
LCMS postupci
[0111]
LCMS Postupak 1:
Na početku % B = 0
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
4
Brzina protoka = 1 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Phenomenex C182.0 x 30mm 3µm
LCMS Postupak 2:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 3 min
Brzina protoka = 0.6 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 3:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
Brzina protoka = 0.6 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 4:
Na početku % B = 0
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 4 min
4 Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Phenomenex C182.0 x 50mm 3 µm
LCMS Postupak 5:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 3 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1%
TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Phenomenex C182.0 x 50mm 3 µm
LCMS Postupak 6:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Phenomenex C182.0 X 50 mm 3 µm
LCMS Postupak 7:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
4 Brzina protoka = 0.5 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA
Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA
Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 8:
Na početku % B = 20
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA
Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA
Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 9:
Na početku % B = 0
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 2 min
Brzina protoka = 1.0 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 5% MeCN - 95% H2O - 10 mM Amonijum Acetat Rastvarač B = 95% MeCN - 5% H2O - 10 mM Amonijum Acetat Kolona = PHENOMENEX-LUNA C182.0 X 30mm 3 µm
LCMS Postupak 10:
Na početku % B = 0
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 4 min
4
Brzina protoka = 0.6 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 11:
Na početku % B = 0
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 4 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Phenomenex C182.0 X 50 mm 3 µm
LCMS Postupak 12:
Na početku % B = 40
Na kraju % B = 60
Vreme gradijenta = 4 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 254 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA Kolona = Xbridge Fenil 2.1 X 50 mm 2.5 µm
LCMS Postupak 13:
Na početku % B = 35
Na kraju % B = 100
Vreme gradijenta = 4 min
Brzina protoka = 0.8 mL/min
Talasna dužina = 220 nm
Rastvarač A = 10% MeOH - 90% H2O - 0.1% TFA
Rastvarač B = 90% MeOH - 10% H2O - 0.1% TFA
Kolona = Phenomenex C182.0 X 50 mm 3 µm
LCMS Postupak 14
Uslovi: gradijent 0% B → 100% B u toku 4 min; zadržavanje za 100% B u toku 1 min Rastvarač A: 90% voda, 10% metanol, 0.1% TFA
Rastvarač B: 10% voda, 90% metanol, 0.1% TFA
Kolona: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2.0 x 50 mm
Brzina protoka: 1 mL / min
Detektor talasne dužine: 220 nm
LCMS Postupak 15
Uslovi: gradijent 0% B → 100% B u toku 2 min; zadržavanje za 100% B u toku 1 min Rastvarač A: 90% voda, 10% metanol, 0.1% TFA
Rastvarač B: 10% voda, 90% metanol, 0.1% TFA
Kolona: Phenomenex Luna C18, 2.0 x 50 mm, 3 µm
Brzina protoka: 1 mL / min
Detektor talasne dužine: 220 nm
LCMS Postupak 16
Na početku gradijent %B = 2,
Na kraju %B = 98 u toku 1.5 min; zadržavanje za 98%B u toku 0.5 min
Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 100% voda, 0.05% TFA
Rastvarač B = 100% acetonitril, 0.05% TFA
Kolona = Waters Aquity UPLC BEH C182.1 X 50 mm 1.7 um
1
Temperatura peći = 40 °C
LCMS Postupak 17
Na početku gradijent %B = 2,
Na kraju %B = 98 u toku 3 min; zadržavanje za 98%B u toku 1 min Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 100% voda, 0.05% TFA
Rastvarač B = 100% acetonitril, 0.05% TFA
Kolona = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm Temperatura peći = 40 °C
LCMS Postupak 18
Na početku gradijent %B = 0,
Na kraju %B = 100 u toku 4 min; zadržavanje za 100%B u toku 1 min Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 95% voda, 5% acetonitril, 10 mM amonijum acetat Rastvarač B = 5% voda, 95% acetonitril, 10 mM amonijum acetat Kolona = Phenomenex Luna C18, 50 x 2 mm, 3 µm Temperatura peći = 40 °C
LCMS Postupak 19
Na početku gradijent %B = 2,
Na kraju %B = 98 u toku 4 min; zadržavanje za 98%B u toku 1 min Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 100% voda, 0.05% TFA
Rastvarač B = 100% acetonitril, 0.05% TFA
Kolona = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm
2
Temperatura peći = 40 °C
LCMS Postupak 20
Na početku gradijent %B = 2,
Na kraju %B = 98 u toku 2 min; zadržavanje za 98%B u toku 1 min
Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 100% voda, 0.05% TFA
Rastvarač B = 100% acetonitril, 0.05% TFA
Kolona = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm
Temperatura peći = 40 °C
LCMS Postupak 21
Na početku gradijent %B = 0,
Na kraju %B = 100 u toku 2 min; zadržavanje za 100%B u toku 3 min
Brzina protoka = 0.8 mL / min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Rastvarač A = 95% voda, 5% acetonitril, 10 mM amonijum acetat
Rastvarač B = 5% voda, 95% acetonitril, 10 mM amonijum acetat
Kolona = Phenomenex Luna C18, 50 x 2 mm, 3 µm
Temperatura peći = 40 °C
Preparativni HPLC postupci
[0112]
Preparativni HPLC Postupak 1
Uslovi: gradijent 30% B → 100% B u toku 20 min; zadržavanje za 100% B u toku 4 min Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Xbridge 30 x 100 mm, 5 µm
Brzina protoka: 40 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 2
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 25 minuta
Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Brzina protoka: 40 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 3
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 20 min; zadržavanje za 100% B u toku 5 min Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Brzina protoka: 40 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 4
Uslovi: gradijent 30% B → 100% B u toku 20 min; zadržavanje za 100% B u toku 5 min Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Brzina protoka: 40 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 5:
4
Na početku gradijent % B = 20,
Na kraju % B = 100 u toku 10 min, zadržavanje za 100% B u toku 4 min Brzina protoka = 50 ml/min
Talasna dužina = 220
Rastvarač Pair = Voda - acetonitril- TFA
Rastvarač A = 90% Voda -10% acetonitril-0.1% TFA
Rastvarač B = 10% Voda -90% acetonitril-0.1% TFA
Kolona = Waters Sunfire C18, 5 µm, 30 x 150 mm
Preparativni HPLC Postupak 6
Uslovi: gradijent 0% B → 100% B u toku 20 minuta
Rastvarač A: 10% acetonitril, 90% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 90% acetonitril, 10% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 µm
Brzina protoka: 50 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 7
Uslovi: gradijent 30% B → 100% B u toku 20 minuta
Rastvarač A: 10% acetonitril, 90% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 90% acetonitril, 10% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 µm
Brzina protoka: 50 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni HPLC Postupak 8
Uslovi: gradijent 20% B → 100% B u toku 15 minuta
Rastvarač A: 10% acetonitril, 90% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 90% acetonitril, 10% voda 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 µm
Brzina protoka: 50 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Preparativni MPLC Postupci
Preparativni MPLC Postupak 1
Uslovi: gradijent 30% B za 1 zapreminu kolone, 30%B do 80%B za 7 zapremina kolone, gradijent 80%B do 100%B za 0.5 zapremina kolone, 100%B za 2 zapremine kolone Rastvarač A = 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B = 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona = Redi Sep Gold (150 g)
Brzina protoka = 60 mL/min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Preparativni MPLC Postupak 2
Uslovi: gradijent 30% B za 1 zapreminu kolone, 30%B do 80%B za 10 zapremina kolone, 100%B za 2 zapremine kolone
Rastvarač A = 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B = 95% acetonitril, 5% voda 0.1% TFA
Kolona = Redi Sep Gold (150 g)
Brzina protoka = 60 mL/min
Detektor talasne dužine = 220 nm
Analitički HPLC Postupci
[0113]
Analitički HPLC Postupak 1
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 15 min; zadržavanje za 100% B u toku 10 min Rastvarač A: 10% metanol, 90% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 90% metanol, 10% voda, 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire C18, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
Brzina protoka: 1 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Analitički HPLC Postupak 2
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 15 min; zadržavanje za 100% B u toku 10 min Rastvarač A: 10% metanol, 90% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 90% metanol, 10% voda, 0.1% TFA
Kolona: Waters Xbridge fenil, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
Brzina protoka: 1 mL/min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Analitički HPLC Postupak 3
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 15 min; zadržavanje za 100% B u toku 10 min Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda, 0.1% TFA
Kolona: Waters Sunfire C18, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
Brzina protoka: 0.5 mL / min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Analitički HPLC Postupak 4
Uslovi: gradijent 10% B → 100% B u toku 15 min; zadržavanje za 100% B u toku 10 min Rastvarač A: 5% acetonitril, 95% voda, 0.1% TFA
Rastvarač B: 95% acetonitril, 5% voda, 0.1% TFA
Kolona: Waters Xbridge fenil, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
Brzina protoka: 0.5 mL / min
Detektor talasne dužine: 220 nm
Izrada međuproizvoda
Međuproizvod 1. Izrada etil 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0115]
[0116] Smeša etil 4-oksocikloheksankarboksilata (12.7 g, 75 mmol), etilen glikola (21 ml, 373 mmol), (1S)-(+)-10-kamforsulfonske kiseline (0.175 g, 0.75 mmol) i anhidrovanog toluena (300 mL) se refluksuje sa Dean-Stark kondenzatorom u toku 8 sati. Smeša se neutrališe sa 100 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i energično meša. Izdvojena organska faza se ispere sa vodom (100 mL), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-15 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt kao ulje (15.9 g, 99 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM- d) δ 4.13 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.95 (s, 4H), 2.34 (tt, J=10.4, 4.0 Hz, 1H), 1.98 - 1.90 (m, 2H), 1.87 -1.75 (m, 4H), 1.61 - 1.51 (m, 2H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Međuproizvod 2. Izrada etil 8-formil-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0117]
[0118] U rastvor etil 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (21 g, 98 mmol) u THF (150 mL) se u kapima na -78 °C doda 2M rastvor LDA (64 mL, 127 mmol). Dobijeni rastvor se meša 1 h na -78 °C, nakon toga 1.5 h u ledenom kupatilu. Reaktivna smeša se ponovo ohladi na -78 °C i doda se molekularno sito. U kapima se polako u toku 1 h dodaje suvi etil format (12 mL, 147 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 h na -78 °C. Hladno kupatilo se ukloni i reakcija se u kapima neutrališe sa zasićenim rastvorom NH4Cl u 0.5 N HCl (250 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 200 mL). Kombinovani organski sloj se ispere sa zasićenim rastvorom NH4Cl u 0.5 N HCl (200 mL), slanim rastvorom (200 mL), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-20 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt kao ulje (9.3 g, 39 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 9.54 (s, 1H), 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.98 - 3.90 (m, 4H), 2.25 - 2.16 (m, 2H), 2.10 - 2.01 (m, 2H), 1.74 - 1.60 (m, 4H), 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Međuproizvod 3. Izrada etil 8-(hidroksimetil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0119]
[0120] U rastvor etil 8-formil-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1.0 g, 4.13 mmol) u EtOH (10 mL) se na 0 °C doda NaBH4(0.187 g, 4.95 mmol). Smeša se meša 1 h na 0 °C. Reakcija se neutrališe sa zasićenim NH4Cl (10 mL) a nakon toga se razblaži sa H2O dok se ne rastvori. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 50 mL), ispere sa slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-25 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt kao ulje (0.86 g, 85 %).
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.99 - 3.91 (m, 4H), 3.65 (d, J=6.5 Hz, 2H), 2.19 - 2.11 (m, 2H), 1.68 (dd, J=6.8, 5.5 Hz, 4H), 1.63 - 1.57 (m, 2H), 1.29 (t, J=7.0 Hz, 3H).
Međuproizvod 4. Izrada etil 8-((benzoiloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0121]
[0122] U rastvor etil 8-(hidroksimetil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (3.0 g, 12.3 mmol) u piridinu (60 mL) se doda DMAP (0.3 g, 2.5 mmol). Smeša se zagreje na 50 °C i doda se benzojev anhidrid (3.1 g, 13.5 mmol). Reaktivna smeša se meša 3 h na 50 °C.
Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom. Ostatak se rastvori u EtOAc (50 mL), ispere sa slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-20 % heksan/EtOAc da se dobije traženi produkt kao ulje (4.3 g, 100 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.01 (dd, J=8.4, 1.4 Hz, 2H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 4.20 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 4H), 2.36 - 2.23 (m, 2H), 1.76 - 1.63 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Međuproizvod 5. Izrada (1-(etoksikarbonil)-4-oksocikloheksil)metil benzoata.
[0123]
[0124] Rastvor etil 8-((benzoiloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (4.3 g, 12.4 mmol) u acetonu (120 mL) i 0.5N HCl (24.8 mL, 12.4 mmol) se meša na 50 °C u toku noći. Reaktivna smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3i delimično koncentruje pod vakuumom da se ukloni aceton. Ostatak se razblaži sa H2O (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-30 % heksan/EtOAc da se dobije traženi produkt kao ulje (3.8 g, 100 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.01 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 2H), 4.45 (s, 2H), 4.28 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.61 - 2.48 (m, 4H), 2.47 - 2.37 (m, 2H), 1.91 - 1.79 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Međuproizvod 6. Izrada (1-(etoksikarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0125]
[0126] Rastvor (1-(etoksikarbonil)-4-oksocikloheksil)metil benzoata (3.8 g, 12.4 mmol) i 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)metansulfonamida (4.95 g, 13.8 mmol) u THF (120 mL) se ohladi na -78 °C. U ovaj rastvor se doda KHMDS (1 M rastvor u THF)
1
(16.4 mL, 16.4 mmol). Dobijeni rastvor se meša 2h na -78 °C. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 100 mL).
Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-20 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (3.8 g, 69 %) kao ulje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.00 (dd, J=8.4, 1.1 Hz, 2H), 7.62 - 7.56 (m, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 5.80 (td, J=3.2, 1.6 Hz, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 2H), 4.21 (qd, J=7.1, 2.1 Hz, 2H), 2.93 -2.83 (m, 1H), 2.59 - 2.27 (m, 4H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Međuproizvod 7. (1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat.
[0127]
[0128] Smeša (1-(etoksikarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (3.8 g, 8.7 mmol), bis(pinakolato)dibora (2.4 g, 9.5 mmol), kalijum acetata (2.6 g, 26.0 mmol) i PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (0.2 g, 0.260 mmol) u 1,4-dioksanu (80 mL) se ohladi na -78 °C. Izvrše se tri ciklusa pražnjenja boce iprečišćavanja sa azotom. Smeša se meša 3 h na 70 °C. Smeša se razblaži sa vodom (50 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-20 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (5.8 g, 67 %) kao ulje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.00 (dd, J=8.4, 1.4 Hz, 2H), 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 2H), 6.54 (dt, J=3.6, 1.9 Hz, 1H), 4.44 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.39 (d, J=10.8 Hz, 2H), 4.17 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.77 - 2.68 (m, 1H), 2.29 - 2.20 (m, 3H), 2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 1.27 (s, 12H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Međuproizvodi 8 i 9. Asimetrično razdvajanje (S)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-
2
1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata i (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0129]
[0130] Racematna smeša se izdvoji superkritičnom tečnom hromatografijom (SFC) da se dobiju (S)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metilbenzoat i (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat.
SFC eksperimentalni detalji:
[0131]
Kolona: ChiralCel OJ-H, 30 x 250mm, 5µm Mobilna faza: 5% MeOH /95% CO2
Pritisak: 100 bara
Temperatura: 40°C
Brzina protoka: 70 mL/min
UV: 225 nm
Injekcija: 0.50 mL (~100 mg/mL u IPA:ACN:MeOH,
2:2:1)
Sakupljene frakcije: Nagib & Vrednost (w/ 6 mL/min MeOH podešavanje):
Pik 1 sagledavanje: 3.00’ - 4.50’
Pik 2 sagledavanje: 3.80’ - 7.00’ Međuproizvod 10. Izrada etil 8-(((metilsulfonil)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0132]
[0133] U vakuumom osušeni etil 8-(hidroksimetil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (280 mg, 1.146 mmol) u DCM (2 mL) se doda u atmosferi azota N,N-diizopropiletilamin (0.299 mL, 1.719 mmol). Bistar rastvor se hladi u ledenom kupatilu dok se ne ohladi. U ovo se u kapima doda čist metansulfonil hlorid (0.106 mL, 1.375 mmol) i dobijeni rastvor se meša u ledenom kupatilu i ostavi u toku noći da dostigne RT. Sirova reaktivna smeša se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 50% etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (304 mg, 82 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.26 - 4.17 (m, 4H), 3.97 - 3.93 (m, 4H), 3.00 (s, 3H), 2.24 - 2.15 (m, 2H), 1.73 - 1.61 (m, 6H), 1.29 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Opšti postupak A: Izrada C-3 α-supstituisanah derivata cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0134]
4
Faza 1: Izrada etra.
[0135]
Faza 1-A: U rastvor etil 8-(hidroksimetil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (međuproizvod 3) (1 eq), reaktanta Ar-OH (1 eq) i trifenilfosfina (1.2 eq) u THF se u kapima u atmosferi azota doda diizopropil diazen-1,2-dikarboksilat (1.2 eq). Dobijeni rastvor se meša 1 h na RT, nakon toga 3 dana na 50 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa zasićenim NH4Cl, ekstrahuje sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi produkt.
Faza 1-B: Smeša etil 8-(((metilsulfonil)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1 eq), cezijum karbonata (2.15 eq) i Ar-OH (3.5 eq) u acetonuitrilu se meša 48 sati na 85 °C. Neorganske soli se uklone filtriranjem i filtrat se ispere sa vodom i ekstrahuje sa etil acetatom. Kombinovana organska faza se koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi produkt.
Faza 2: Izrada ketona.
[0136]
[0137] Rastvor produkta iz faze 1 (1 eq) i 0.5 N HCl (1 eq) u acetonu se meša 1-2 dana na 50 °C. Reaktivna smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3i delimično koncentruje pod vakuumom da se ukloni aceton. Ostatak se razblaži sa H2O, ekstrahuje sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženiketon.
Faza 3: Izrada triflata.
[0138]
[0139] U rastvor ketona iz faze 2 (1 eq) i 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)-metansulfonamida (1.1 eq) u THF se na -78 °C doda KHMDS (1 M rastvor u THF) (1.3 eq). Dobijeni žuti do narandžasti rastvor se meša 2 h na -78 °C. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi triflat.
Faza 4: Izrada boronata.
[0140]
[0141] U posudi pod pritiskom, smeša triflata iz faze 3 (1 eq), bis(pinakolato)dibora (1.1 eq), KOAc (2.5 eq) i PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (0.03 eq) u 1,4-dioksanu se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C. Smeša se razblaži sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc.
Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi boronat.
Faza 5: Izrada C-3 α-supstituisanog cikloheksenkarboksilnog estra.
[0143] Smeša C3-triflata (1 eq), boronata iz faze 4 (1eq), Na2CO3H2O (3 eq) i Pd(Ph3P)4(0.06 eq) u dioksanu i H2O (4:1) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C.
Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom i ostatak se podeli između EtOAc i H2O. Izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi C-3 αsupstituisani cikloheksenkarboksilni estar.
Faza 6: Izrada karboksilne kiseline.
[0144]
[0145] Rastvor estra iz faze 5 u 1,4-dioksanu, MeOH i 1N rastvor NaOH (2:1 : 1) se mešaju 1-2 h na 60 -70 °C. Reaktivna smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobije finalni produkt.
Primer 1
[0146] Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
Faza 1. Izrada etil 8-((piridin-2-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0147]
[0148] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 83 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći piridin-2-ol kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.14 (ddd, J=5.0, 2.0, 0.8 Hz, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 1H), 6.87 (ddd, J=7.1, 5.1, 0.9 Hz, 1H), 6.73 (dt, J=8.4, 0.8 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H), 4.17 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.01 - 3.93 (m, 4H), 2.35 - 2.24 (m, 2H), 1.79 - 1.67 (m, 6H), 1.23 (t, J=7.1 Hz, 3H). LC/MS m/z 322.10 (M+H)<+>, 1.93 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilata.
[0149]
[0150] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 99 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-((piridin-2-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.14 (ddd, J=5.1, 1.9, 0.8 Hz, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 6.90 (ddd, J=7.1, 5.1, 0.9 Hz, 1H), 6.74 (dt, J=8.3, 0.8 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.24 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.59 - 2.48 (m, 4H), 2.46 -2.37 (m, 2H), 1.94 - 1.83 (m, 2H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 278.05 (M+H)<+>, 1.74 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-((piridin-2-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0151]
[0152] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 110 % prinosa (sadrži PhNHTf) kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 4-okso-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.14 (ddd, J=5.0, 2.0, 0.8 Hz, 1H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 6.90 (ddd, J=7.1, 5.1, 0.9 Hz, 1H), 6.73 (dt, J=8.3, 0.8 Hz, 1H), 5.80 - 5.76 (m 1H), 4.45 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.39 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.18 (qd, J=7.1, 1.3 Hz, 2H), 2.88 -2.80 (m, 1H), 2.56 - 2.25 (m, 4H), 2.02 - 1.93 (m, 1H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -73.87 (s, 3F). /LC/MS m/z 410.00 (M+H)<+>, 2.24 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-((piridin-2-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0153]
[0154] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 75 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-((piridin-2-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.13 (ddd, J=5.0, 2.0, 0.8 Hz, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 1H), 6.86 (ddd, J=7.0, 5.1, 0.9 Hz, 1H), 6.71 (dt, J=8.4, 0.8 Hz, 1H), 6.57-6.53 (m, 1H), 4.42 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.33 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.14 (qd, J=6.7, 1.4 Hz, 2H), 2.73 (dq, J=18.8, 2.8 Hz, 1H), 2.31 -2.18 (m, 3H), 2.03 - 1.95 (m, 1H), 1.91 - 1.83 (m, 1H), 1.27 (s, 6H), 1.26 (s, 6H), 1.19 (t, J=7.0 Hz, 3H). LC/MS m/z 388.20 (M+H)<+>, 2.22 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0155]
1
[0156] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 71 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-((piridin-2-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.13 (dd, J=5.1, 1.4 Hz, 1H), 7.55 (ddd, J=8.6, 7.0, 2.0 Hz, 1H), 6.85 (ddd, J=7.0, 5.3, 0.8 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.35 (br. s, 1H), 5.18 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.47 - 4.37 (m, 2H), 4.14 ((qd, J=6.7, 1.4 Hz, 2H), 3.12 - 2.99 (m, 8H), 2.73 - 2.39 (m, 6H), 2.23 - 0.84 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 -0.90 (m, 9H), 0.89 (s, 3H). LC/MS m/z 830.00 (M+H)<+>, 3.74 min (LCMS Postupak 2).
[0157] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 32 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.14 (d, J=3.8 Hz, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 1H), 6.89 - 6.84 (m, 1H), 6.73 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.35 (br. s, 1H), 5.21 - 5.16 (m, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 2H), 3.14 - 2.99 (m, 8H), 2.86 - 2.57 (m, 6H), 2.29 - 0.89 (m, 27H), 1.68 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.97 - 0.91 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 802.50 (M+H)<+>, 3.56 min (LCMS Postupak 2).
2
Primer 2
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0158]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0159]
[0160] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 99 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-ol kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 7.78 - 7.70 (m, 2H), 7.39 (t, J=7.6 Hz, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.01 - 3.94 (m, 4H), 3.67 (s, 3H), 2.37 - 2.26 (m, 2H), 1.80 - 1.65 (m, 6H), 1.31 - 1.26 (m, 3H). LC/MS m/z 401.10 (M+H)<+>, 2.17 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0161]
[0162] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 81 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.75 - 7.71 (m, 2H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.32 - 7.27 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 4.28 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 2.63 - 2.51 (m, 4H), 2.48 - 2.39 (m, 2H), 1.92 - 1.81 (m, 2H), 1.30 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 357.15 (M+H)<+>, 1.99 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0163]
4
[0164] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 68 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.75 -7.71 (m, 2H), 7.41 - 7.35 (m, 2H), 7.32 - 7.29 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.83 - 5.79 (m, 1H), 4.25 - 4.10 (m, 4H), 3.67 (s, 3H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.59 - 2.25 (m, 4H), 2.00 (ddd, J=13.7, 7.8, 6.4 Hz, 1H), 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -73.83 (s, 3F). LC/MS m/z 489.20 (M+H)<+>, 2.30 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0165]
[0166] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 68 % prinosa kao vosak, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.75 - 7.71 (m, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.31 - 7.28 (m, J=7.5 Hz, 1H), 6.57 - 6.53 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.23 - 4.11 (m, 4H), 3.65 (s, 3H), 2.76 - 2.67 (m, 1H), 2.32 -2.12 (m, 3H), 2.03 - 1.86 (m, 2H), 1.27 (s, 12H), 1.23 (t, J=7.0 Hz 3H). LC/MS m/z 467.30 (M+H)<+>, 3.58 min (LCMS Postupak 2).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0167]
[0168] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 59 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.74 - 7.70 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.24-4.15 (m, 4H), 3.65 (s, 3H), 3.10 - 2.98 (m, 8H), 2.74 - 2.43 (m, 6H), 2.32 - 1.02 (m, 27H), 1.68 (s, 3H), 1.26 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.97 - 0.91 (m, 9H), 0.86 (s, 3H). LC/MS m/z 909.60 (M+H)<+>, 3.89 min (LCMS Postupak 2).
[0169] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 81 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.
<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.31 - 4.23 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.20 - 3.04 (m, 8H), 2.92 - 2.61 (m, 6H), 2.24 - 1.10 (m, 27H), 1.73 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H). LC/MS m/z 881.55 (M+H)<+>, 3.77 min (LCMS Postupak 2).
Primer 3
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0170]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0171]
[0172] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 86 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-ol kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 5.99 (s, 1H), 4.20 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.96 (t, J=3.0 Hz, 4H), 3.82 (s, 3H), 2.31 - 2.19 (m, 2H), 1.78 - 1.64 (m, 6H), 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H). LC/MS m/z 393.05 (M+H)<+>, 2.18 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0173]
[0174] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 98 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.99 (s, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.82 (d, J=0.8 Hz, 3H), 2.59 - 2.34 (m, 6H), 1.92 - 1.79 (m, 2H), 1.28 (t, J=6.8 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -60.88 (s, 3F). LC/MS m/z 349.15 (M+H)<+>, 2.08 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0175]
[0176] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 70 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.99 (s, 1H), 5.79 - 5.76 (m, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 4H), 3.81 (d, J=0.8 Hz, 3H), 2.85 - 2.75 (m, 1H), 2.55 - 2.19 (m, 4H), 2.02 - 1.93 (m, 1H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H).
<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -60.89 (s, 3F), -73.88 (s, 3F). LC/MS m/z 481.10 (M+H)<+>, 2.32 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0177]
[0178] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 79 % prinosa kao vosak, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.55 - 6.51 (m, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.25 (d, J=9.3 Hz 1H), 4.19-4.13 (m, 3H), 3.81 (d, J=0.8 Hz, 3H), 2.69 (dq, J=19.1, 2.8 Hz, 1H), 2.27 - 2.16 (m, 3H), 2.00 - 1.81 (m, 2H), 1.26 (s, 12H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H).
<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -60.84 (s, 3F). LC/MS m/z 481.13 (M+Na)<+>, 2.41min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0180] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 88 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.98 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.29 - 4.09 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.12 - 3.00 (m, 8H), 2.79 - 2.46 (m, 6H), 2.24 - 0.88 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.22 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.96 - 0.89 (m, 6H), 0.85 (s, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -60.83 (s, 3F). LC/MS m/z 901.50 (M+H)<+>, 3.89 min (LCMS Postupak 2).
[0181] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 56 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.00 (s, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.34 - 4.21 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.14 - 2.99 (m, 8H), 2.76 - 2.54 (m, 6H), 2.23 - 1.04 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.97 -0.92 (m, 6H), 0.86 (s, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -60.81 (s, 3F). LC/MS m/z 873.45 (M+H)<+>, 3.73 min (LCMS Postupak 2).
Primer 4
Izrada 2-((1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11aS,11bR, 13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilne kiseline.
[0182]
Faza 1. Izrada etil 2-((8-(etoksikarbonil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)metoksi)tiazol-4-karboksilata.
[0183]
[0184] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao ulje bez daljeg prečišćavanja, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći etil 2-hidroksitiazol-4-karboksilat kao reaktant. LC/MS m/z 400.30 (M+H)<+>, 2.18 min (LCMS Postupak 1).
1
Faza 2. Izrada etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-oksocikloheksil)metoksi)tiazol-4-karboksilata.
[0185]
[0186] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 26 % prinosa (prinos izračunat nakon 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći sirovi etil 2-((8-(etoksikarbonil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)metoksi)tiazol-4-karboksilat kao reaktant.
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.61 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.38 (q, J=7.3 Hz, 2H), 4.26 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.58 - 2.48 (m, 4H), 2.45 - 2.36 (m, 2H), 1.92 - 1.81 (m, 2H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Faza 3. Izrada etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilata.
[0187]
[0188] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 40 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-oksocikloheksil)metoksi)tiazol-4-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.60 (s, 1H), 5.80 - 5.76 (m, 1H), 4.66 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.60 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.19 (qd, J=7.1, 0.8 Hz, 2H), 2.87 -2.79 (m, 1H), 2.56 - 2.23 (m, 4H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H).<19>F
2
NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -73.84 (s, 3F). LC/MS m/z 488.15 (M+H)<+>, 2.41 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilata.
[0189]
[0190] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 57 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilat kao reaktant.
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.58 (s, 1H), 6.54 - 6.49 (m, 1H), 4.64 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.56 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.37 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.16 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.68 (dq, J=19.1, 3.0 Hz, 1H), 2.27 - 2.16 (m, 3H), 2.00 - 1.81 (m, 2H), 1.38 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.26 (s, 12H), 1.21 (t, J=7.0 Hz, 3H). LC/MS m/z 466.30 (M+H)<+>, 2.42 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 2-((4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilata.
[0191]
[0192] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 79 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 2-((1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.58 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.67 - 4.60 (m, 2H), 4.59 (s, 1H), 4.37 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.20 - 4.09 (m, 2H), 3.12 - 2.96 (m, 8H), 2.74 - 2.41 (m, 6H), 2.21 - 0.86 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.96 - 0.90 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 908.60 (M+H)<+>, 3.05 min (LCMS Postupak 3).
[0193] Faza 6.2-((1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilna kiselina se izrađuje u 85 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 2-((4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)tiazol-4-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, METANOL-d4) δ 7.49 (s, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.61 - 4.53 (m, 2H), 3.27 - 3.06 (m, 11H), 2.99 - 2.96 (m, 1H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.67 - 2.58 (m, 1H), 2.35 - 1.04 (m, 27H), 1.73 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 - 0.96 (m, 6H), 0.92 (s, 3H). LC/MS m/z 852.50 (M+H)<+>, 2.86 min (LCMS Postupak 3).
Primer 5
4
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0194]
Faza 1. Izrada etil 8-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0195]
[0196] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 64 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.43 (s, 2H), 4.18 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 2.31 - 2.24 (m, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H).
LC/MS m/z 343.20 (M+H)<+>, 2.17 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1karboksilata.
[0197]
[0198] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 81 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.51 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.61 - 2.38 (m, 6H), 2.37 (s, 3H), 1.91 - 1.82 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 299.20 (M+H)<+>, 1.94 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0199]
[0200] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 60 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.82 -5.78 (m, 1H), 4.52 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.47 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.26 - 4.12 (m, 2H), 2.90 -2.82 (m, 1H), 2.59 - 2.27 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 2.00 - 1.93 (m, 1H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H).
<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -73.83 (s, 3F). LC/MS m/z 431.15 (M+H)<+>, 2.41 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0201]
[0202] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 74 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.56 - 6.52 (m, 1H), 4.51 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.44 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.16 (qd, J=7.1, 1.1 Hz, 2H), 2.71 (dq, J=19.1, 3.3 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.31 -2.17 (m, 3H), 2.04 - 1.85 (m, 2H), 1.26 (s 12H), 1.21 (t, J=7.0 Hz, 3H). LC/MS m/z 409.25 (M+H)<+>, 2.45 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0203]
[0204] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 73 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.56 - 4.44 (m, 2H), 4.21 - 4.09 (m, 2H), 3.17 - 3.00 (m, 8H), 2.98 -2.59 (m, 6H), 2.23 - 0.82 (m, 27H), 2.35 (s, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.97 - 0.91 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 851.55 (M+H)<+>, 3.07 min (LCMS Postupak 3).
[0205] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 53 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.18 (br. s., 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.65 (br. s., 1H), 4.59 - 4.45 (m, 2H), 3.24 - 2.98 (m, 9H), 2.89 - 2.51 (m, 5H), 2.34 (s, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.22 - 0.97 (m, 27H), 1.15 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 - 0.89 (m, 6H), 0.86 (s, 3H). LC/MS m/z 823.55 (M+H)<+>, 2.85 min (LCMS Postupak 3).
Primer 6
Izrada 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0206]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0207]
[0208] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 92 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 1,2,5-tiadiazol-3-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.97 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.18 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.00 - 3.92 (m, 4H), 2.32 - 2.21 (m, 2H), 1.76 - 1.66 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 329.20 (M+H)<+>, 2.07 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0210] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 80 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.99 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 4H), 2.47 - 2.38 (m, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.0 Hz, 3H). LC/MS m/z 285.15 (M+H)<+>, 1.85 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0211]
[0212] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 34 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.99 (s, 1H), 5.81 - 5.78 (m, 1H), 4.55 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.50 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.20 (qd, J=7.1, 0.8 Hz, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.57 - 2.25 (m, 4H), 2.04 - 1.95 (m, 1H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ - 73.83 (s, 3F). LC/MS m/z 417.10 (M+H)<+>, 2.37 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0213]
[0214] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 69 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.96 (s, 1H), 6.56 - 6.52 (m, 1H), 4.54 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.45 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.16 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.71 (dq, J=18.9, 3.4 Hz, 1H), 2.30-2.17 (m, 3H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 1.26 (s, 12H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 395.30 (M+H)<+>, 2.40 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0215]
1
[0216] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 76 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.97 (s, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 2H), 4.16(q, J=7.5 Hz, 2H), 3.13 - 2.98 (m, 8H), 2.76 - 2.43 (m, 6H), 2.22 - 0.82 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.22 (t, J=7.2 Hz 3H), 1.06 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 - 0.91 (m, 6H), 0.85 (s, 3H).
LC/MS m/z 837.55 (M+H)<+>, 3.08 min (LCMS Postupak 3).
[0217] Faza 6.1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1- karboksilna kiselina se izrađuje u 56 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.98 (s, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.19 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.62 - 4.49 (m, 2H), 3.23 -3.00 (m, 8H), 2.90 - 2.53 (m, 6H), 2.28 - 0.89 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.97 - 0.91 (m, 6H), 0.86 (s, 3H). LC/MS m/z 809.50 (M+H)<+>, 2.90 min (LCMS Postupak 3).
Primer 7
2
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0218]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0219]
[0220] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 56 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-B, koristeći 1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-ol kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 7.07 (s, 1H), 4.19 (q, J=7.1 Hz, 3H), 4.17 (q, J=7.3 Hz, 2H), 4.10 (s, 2H), 4.01 - 3.92 (m, 4H), 2.33 - 2.24 (m, 2H), 1.76 - 1.61 (m, 6H), 1.44 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 340.25 (M+Na)<+>, 1.91 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0221]
[0222] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 86 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.09 (s, 1H), 4.26 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.18 (q, J=7.5 Hz, 2H), 4.17 (s, 2H), 2.61 - 2.50 (m, 4H), 2.47 - 2.38 (m, 2H), 1.89 - 1.78 (m, 2H), 1.45 (t, J=7.4 Hz, 3H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H).
LC/MS m/z 296.25 (M+H)<+>, 1.62 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0223]
[0224] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 35 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.09 (s, 1H), 5.82 - 5.78 (m, 1H), 4.24 - 4.13 (m, 6H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.60 - 2.24 (m, 4H), 2.00 -1.92 (m, 1H), 1.44 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz,
4
HLOROFORM-d) δ -73.82 (s, 3F). LC/MS m/z 428.20 (M+H)<+>, 2.15 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0225]
[0226] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 57 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.07 (s, 1H), 6.55 - 6.50 (m, 1H), 4.21 - 4.11 (m, 6H), 2.69 (dq, J=19.0, 2.9 Hz, 1H), 2.31 - 2.09 (m, 3H), 2.02 - 1.85 (m, 2H), 1.43 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.27 (s, 12H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 406.20 (M+H)<+>, 2.22 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0227]
[0228] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 90 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.07 (s, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.23 - 4.11 (m, 6H), 3.11 - 2.97 (m, 8H), 2.71 - 2.42 (m, 6H), 2.24 - 0.86 (m, 27H), 1.68 (s, 3H), 1.42 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 - 0.90 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 848.60 (M+H)<+>, 2.74 min (LCMS Postupak 3).
[0229] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 61 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.10 (s, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.18 (br. s., 1H), 4.69 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.28 - 4.20 (m, 2H), 4.16 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.13 - 2.99 (m, 8H), 2.82 -2.55 (m, 6H), 2.24 - 1.00 (m, 27H), 1.68 (s, 3H), 1.43 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 - 0.91 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 820.55 (M+H)<+>, 2.86 min (LCMS Postupak 3).
Primer 8
Izrada 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0230]
Faza 1. Izrada etil 8-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0231]
[0232] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 26 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-B, koristeći benzo[d]izotiazol-3(2H)-on kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 7.88 (dd, J=8.1, 0.9 Hz, 1H), 7.78 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.53 (ddd, J=8.2, 7.1, 1.1 Hz, 1H), 7.39 (td, J=7.5, 0.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.59 (m, 2H), 4.20 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.97 (t, J=2.6 Hz, 4H), 2.41 - 2.31 (m, 2H), 1.82 - 1.73 (m, 6H), 1.23 (t, J=7.1 Hz, 3H). LC/MS m/z 378.25 (M+H)<+>, 4.17 min (LCMS Postupak 4).
Faza 2. Izrada etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0233]
[0234] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 88 % prinosa kao vosak, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.87 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.79 (dt, J=8.2, 0.8 Hz, 1H), 7.54 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 7.40 (ddd, J=8.0, 7.0, 1.0 Hz, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.3 Hz, 2H), 2.66 - 2.51 (m, 4H), 2.49 - 2.40 (m, 2H), 1.99 - 1.88 (m, 2H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 334.20 (M+H)<+>, 2.31 min (LCMS Postupak 1).
Faza 3. Izrada etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0235]
[0236] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 64 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4oksocikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.86 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.79 (dt, J=8.1, 0.8 Hz, 1H), 7.54 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 7.43 -7.39 (m, 1H), 5.83 - 5.79 (m, 1H), 4.68 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.63 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.20 (qd, J=7.2, 2.1 Hz, 2H), 2.97 - 2.88 (m, 1H), 2.59 - 2.32 (m, 4H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) δ -73.83 (s, 3F). LC/MS m/z 466.15 (M+H)<+>, 2.51 min (LCMS Postupak 1).
Faza 4. Izrada etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0237]
[0238] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 61 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.85 (dt, J=7.9, 0.9 Hz, 1H), 7.76 (dt, J=8.2, 0.8 Hz, 1H), 7.52 (ddd, J=8.2, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 6.58 - 6.54 (m.1H), 4.66 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.16 (qd, J=7.1, 1.0 Hz, 2H), 2.76 (dq, J=18.9, 2.7 Hz, 1H), 2.37 -2.28 (m, 1H), 2.27 - 2.20 (m, 2H), 2.07 - 1.89 (m, 2H), 1.28 - 1.25 (m, 12H), 1.19 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 444.25 (M+H)<+>, 2.58 min (LCMS Postupak 1).
Faza 5. Izrada etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0239]
[0240] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 47 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.87 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.52 (td, J=7.6, 1.1 Hz, 1H), 7.37 (td, J=7.5, 1.0 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.19 - 4.16 (m, 2H), 4.13 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.17 - 3.03 (m, 8H), 2.79 - 2.36 (m, 6H), 2.28 - 0.83 (27H), 1.70 (s, 3H), 1.27 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.99 - 0.95 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 886.55 (M+H)<+>, 3.07 min (LCMS Postupak 3).
[0241] Faza 6.1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 21 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 1-((benzo[d]izotiazol-3-iloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.88 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.40 - 7.33 (m, 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.20 (br. s., 1H), 4.78 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.74 - 4.64 (m, 2H), 3.34 - 2.52 (m, 14H), 2.33 - 1.00 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.98 - 0.91 (m, 6H), 0.87 (s,
1
3H). LC/MS m/z 858.50 (M+H)<+>, 2.88 min (LCMS Postupak 3).
Primer 9
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0242]
Faza 1. Izrada etil 8-((piridin-4-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0243]
[0244] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 77 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 4-hidroksipiridin kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.46 - 8.41 (m, 2H), 6.81 - 6.77 (m, 2H), 4.20 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.04 (s, 2H), 4.01 - 3.93 (m, 4H), 2.37 - 2.25 (m, 2H), 1.80 - 1.66 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.1 Hz, 3H). LC/MS: m/e 322.05 (M+H)<+>, 2.26 min (LCMS Postupak 11).
1 1
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilata.
[0245]
[0246] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 64 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-((piridin-4-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.27 - 8.23 (m, 2H), 6.67 -6.62 (m, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.92 (q, J=7.3 Hz, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 4H), 2.27 - 2.17 (m, 2H), 1.77 - 1.66 (m, 2H), 1.07 (t, J=7.3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 278.05 (M+H)<+>, 0.81 min (LCMS Postupak 8).
Faza 3. Izrada etil 1-((piridin-4-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0247]
[0248] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 66 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 4-okso-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM- d) δ 8.47 - 8.44 (m, 2H), 6.83 - 6.79 (m, 2H), 5.82 (t, J=4.1 Hz, 1H), 4.21 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.17 - 4.07 (m, 2H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.59 -2.47 (m, 1H), 2.45 - 2.25 (m, 4H), 2.09 - 2.00 (m, 2H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e
1 2
410.00 (M+H)<+>, 1.92 min (LCMS Postupak 8).
Faza 4. Izrada etil 1-((piridin-4-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0249]
[0250] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 59 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-((piridin-4-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.33 - 8.30 (m, 2H), 6.73 - 6.69 (m, 2H), 6.46 (br. s., 1H), 4.10 - 4.04 (m, 2H), 4.02 - 3.95 (m, 2H), 2.63 (dd, J=19.2, 2.9 Hz, 1H), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 2.01 (m, 1H), 1.94 - 1.77 (m, 2H), 1.17 (s, 12H), 1.11 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 388.10 (M+H)<+>, 1.90 min (LCMS Postupak 8).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0251]
1
[0252] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 34 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-((piridin-4-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 831.45 (M+H)<+>, 2.54 min (LCMS Postupak 3).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.42 (d, J=6.0 Hz, 2H), 6.80 (d, J=6.3 Hz, 2H), 5.36 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.20 - 4.06 (m, 4H), 3.12 - 2.97 (m, 8H), 2.74 - 2.51 (m, 4H), 2.51 - 2.40 (m, 1H), 2.31 - 2.12 (m, 4H), 2.11 - 1.98 (m, 3H), 1.98 - 1.80 (m, 5H), 1.80 - 1.62 (m, 2H), 1.69 (s, 3H), 1.62 - 1.37 (m, 10H), 1.37 - 1.17 (m, 4H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.16 - 0.99 (m, 3H), 0.99 - 0.93 (m, 6H), 0.93 - 0.87 (m, 3H), 0.87 - 0.81 (m, 3H).
[0253] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 47 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.33 (d, J=6.3 Hz, 2H), 6.98 (d, J=5.5 Hz, 2H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.80 - 4.71 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.28 - 4.12 (m, 2H), 3.24 - 3.00 (m, 8H), 2.94 - 2.72 (m, 5H), 2.66 (d, J=18.1 Hz, 1H), 2.37 - 1.97 (m, 8H), 1.97 - 1.78 (m, 1H), 1.72 (s, 3H), 1.78 - 1.69 (m, 3H), 1.66 - 1.21 (m, 14H), 1.16 (s, 3H), 1.20 - 1.08 (m, 2H), 1.05 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H). LC/MS: m/e 802.45 (M+H)<+>, 2.50 min (LCMS Postupak 3).
1 4
Primer 10
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0254]
Faza 1. Izrada etil 8-((piridin-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0255]
[0256] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 84 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 3-hidroksipiridin kao reaktant<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.30 (d, J=2.7 Hz, 1H), 8.24 (dd, J=4.4, 1.4 Hz, 1H), 7.25 - 7.15 (m, 2H), 4.21 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 4.00 - 3.93 (m, 4H), 2.38 - 2.25 (m, 2H), 1.83 - 1.66 (m, 6H), 1.32 - 1.22 (m, 3H). LC/MS: m/e 322.10 (M+H)<+>, 2.534 min (LCMS Postupak 11).
1
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilata.
[0257]
[0258] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 47.8 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-((piridin-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant. LCMS: m/e 279.00 (M+H)<+>, 2.079 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.22 (dd, J=2.6, 0.9 Hz, 1H), 8.16 (dd, J=4.3, 1.8 Hz, 1H), 7.19 - 7.09 (m, 2H), 4.18 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.07 - 4.04 (m, 2H), 2.55 - 2.41 (m, 4H), 2.38 - 2.28 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 1.19 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Faza 3. Izrada etil 1-((piridin-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0259]
[0260] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 51.9 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 4-okso-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheksankarboksilat kao reaktant. LCMS: m/e 410.00 (M+H)<+>, 1.983 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.26 - 8.21 (m, 1H), 8.19 - 8.13 (m, 1H), 7.20 - 7.09 (m, 2H), 5.78 - 5.70
1
(m, 1H), 4.16 - 4.10 (m, 2H), 4.09 - 4.02 (m, 2H), 2.84 - 2.74 (m, 1H), 2.52 - 2.40 (m, 1H), 2.38 - 2.26 (m, 2H), 2.26 - 2.17 (m, 1H), 2.01 - 1.92 (m, 1H), 1.21 - 1.15 (m, 3H).
Faza 4. Izrada etil 1-((piridin-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0261]
[0262] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 88 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-((piridin-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. LC-MS: m/e 388.10 (M+H)<+>, 1.986 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.20 (dd, J=2.4, 0.9 Hz, 1H), 8.13 (dd, J=4.0, 2.0 Hz, 1H), 7.18 - 7.10 (m, 2H), 6.52 - 6.45 (m, 1H), 4.16 - 3.95 (m, 4H), 2.71 - 2.60 (m, 1H), 2.26 - 2.03 (m, 3H), 1.96 - 1.79 (m, 2H), 1.20 - 1.18 (m, 12H), 1.14 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata i etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-)-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3- iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0263]
1
[0264] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 26.4 % i 28.4 % prinosa, tim redom, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-((piridin-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.
Za etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat: LCMS: m/e 830.50 (M+H)<+>, 2.363 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.28 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.21 (dd, J=4.0, 2.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.16 (m, 2H), 5.35 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.15 - 4.09 (m, 4H), 3.14 - 2.96 (m, 8H), 2.91 - 2.48 (m, 6H), 1.68 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 2.29 - 1.00 (m, 30H), 0.97 - 0.89 (m, 9H), 0.86 - 0.81 (m, 3H). Za etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat: LCMS: m/e 858.55 (M+H)<+>, 2.454 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.28 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.21 (dd, J=4.0, 1.8 Hz, 1H), 7.20 - 7.16 (m, 2H), 5.35 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.20 - 4.05 (m, 4H), 3.11 (t, J=8.5 Hz, 2H), 2.83 (s, 3H), 2.88-2.76 (m, 1H), 2.2.74 - 2.38 (m, 7H), 1.68 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 2.27 - 0.78 (m, 47H).
[0265] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina se izrađuje u 68.1 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-
1
5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.32 (s, 1H), 8.21 (br. s., 1H), 7.23 (br. s., 2H), 5.37 (br. s., 1H), 5.18 (br. s., 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.23 - 4.08 (m, 2H), 3.16 - 2.99 (m, 8H), 2.89 - 2.57 (m, 6H), 2.33 - 1.79 (m, 9H), 1.68 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93-0.92 (m, 3H), 0.86 (s, 3H), 1.75 - 0.81 (m, 18H). LC/MS: m/e 802.45 (M+H)<+>, 2.346 min (LCMS Postupak 8).
Primer 11
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0266]
[0267] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 4.02 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(propl-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. LCMS: m/e 830.50 (M+H)<+>, 2.367 min (LCMS Postupak 8).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.31 (s, 1H), 8.20 (t, J=2.9 Hz, 1H), 7.22 (d, J=2.3 Hz, 2H), 5.37 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.5 Hz, 1H),
1
4.76 - 4.67 (m, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.16 (br. s., 2H), 3.13 (t, J=10.2 Hz, 2H), 2.92 - 2.59 (m, 9H), 2.48 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.31 - 1.78 (m, 15H), 1.68 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93-0.92 (m, 3H), 0.85 (s, 3H), 1.71 - 0.77 (m, 18H).
Primer 12
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0268]
Faza 1. Izrada etil 8-((izotiazol-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0269]
[0270] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 69 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 5-metilizotiazol-3-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz,
11
HLOROFORM-d) δ 6.32 (d, J=1.0 Hz, 1H), 4.37 (br. s, 2H), 4.17 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.95 (s, 4H), 2.47 (d, J=1.0 Hz, 3H), 2.28 - 2.21 (m, 2H), 1.76 - 1.63 (m, 6H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 342.10 (M+H)<+>, 3.67 min (LCMS Postupak 11).
Faza 2. Izrada etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0271]
[0272] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 87 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.34 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.59 - 2.45 (m, 4H), 2.45 - 2.36 (m, 2H), 1.94 - 1.82 (m, 2H), 1.29 (t, J=7.1 Hz, 3H). LC/MS: m/e 298.05 (M+H)<+>, 2.20 min (LCMS Postupak 8).
Faza 3. Izrada etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0273]
[0274] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 87 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4oksocikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.31 (s, 1H), 5.74 (br. s., 1H), 4.43 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.37 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.17 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.79 (dd, J=17.8, 2.8 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.43 - 2.17 (m, 4H), 1.97 - 1.86 (m, 1H), 1.22 (t, J=7.3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 430.2 (M+H)<+>, 2.20 min.
Faza 4. Izrada etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0275]
[0276] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 32 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.51 - 6.45 (m, 1H), 6.26 (d, J=1.0 Hz, 1H), 4.42 - 4.37 (m, 1H), 4.33 -4.26 (m, 1H), 4.11 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.69 - 2.58 (m, 1H), 2.42 (d, J=1.0 Hz, 3H), 2.22 - 2.12 (m, 3H), 2.02 (s, 1H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.82 - 1.74 (m, 1H), 1.22 (d, J=2.0 Hz, 12H), 1.16 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0277]
[0278] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 43 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.30 (d, J=1.0 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.58 (d, J=1.5 Hz, 2H), 4.49 - 4.43 (m, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 1H), 4.17 - 4.12 (m, 2H), 3.13 - 2.96 (m, 8H), 2.73 - 2.62 (m, 2H), 2.62 - 2.52 (m, 2H), 2.50 - 2.41 (m, 1H), 2.46 (d, J=1.0 Hz, 3H), 2.22 - 2.10 (m, 8H), 2.10 - 1.97 (m, 3H), 1.96 - 1.65 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.64 - 1.37 (m, 7H), 1.37 - 1.23 (m, 6H), 1.20 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.16 - 0.98 (m, 5H), 0.98 -0.81 (m, 9H). LC/MS: m/e 850.55 (M+H)<+>, 2.99 min (LCMS Postupak 3).
[0279] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 36 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-metilizotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.36 (d, J=0.8 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.30 - 5.10 (m, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.51 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.45 (dd, J=10.0, 3.5 Hz, 1H), 3.39 (d, J=12.3 Hz, 1H), 3.28 - 2.87 (m, 11H), 2.86 - 2.57 (m, 2H), 2.49 (d, J=0.8 Hz, 3H), 2.31 - 1.83 (m, 12H), 1.83 - 1.67 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.67 - 1.23 (m, 13H), 1.16 (s, 3H), 1.13 - 1.02 (m, 2H), 1.06 (s, 3H), 0.97 (m, 3H), 0.93 (m, 3H), 0.88 (s, 3H). LC/MS: m/e 822.60 (M+H)<+>, 2.83 min (LCMS Postupak 3).
11
Primer 13
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0280]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0281]
[0282] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 82 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 1-metil-1H-tetrazol-5-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.57 (s, 2H), 4.18 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.97 - 3.92 (m, 4H), 3.77 (s, 3H), 2.29 - 2.21 (m, 1H), 2.18 - 2.10 (m, 1H), 1.76 - 1.63 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 327.20 (M+H)<+>, 2.15 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0283]
[0284] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 91 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.67 (s, 2H), 4.27 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.61 - 2.36 (m, 6H), 1.92 - 1.75 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 283.15 (M+H)<+>, 3.01 min (LCMS Postupak 10).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0285]
[0286] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 29 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.80 - 5.72 (m, 1H), 4.70 - 4.57 (m, 2H), 4.22 - 4.15 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.50 - 2.23 (m, 4H), 1.97 - 1.88 (m, 1H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 415.25 (M+H)<+>, 2.51 min (LCMS Postupak 3).
11
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0287]
[0288] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 90 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.54 - 6.40 (m, 1H), 4.64 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.56 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.72 - 2.63 (m, 1H), 2.34 - 2.11 (m, 3H), 2.00 - 1.92 (m, 1H), 1.88 - 1.80 (m, 1H), 1.23 (s, 12H), 1.21 (t, J=7.2 Hz 3H). LC/MS: m/e 393.35 (M+H)<+>, 4.06 min (LCMS Postupak 10).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-1H- tetrazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0289]
[0290] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 56 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem
11
postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.20 - 4.10 (m, 4H), 3.75(s, 3H), 3.12 - 2.97 (m, 8H), 2.76 - 2.40 (m, 6H), 2.26 - 0.87 (m, 27H), 1.68 (s, 3H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.94 - 0.87 (m, 6H), 0.84 (s, 3H). LC/MS: m/e 835.60 (M+H)<+>, 2.82 min (LCMS Postupak 3).
[0291] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 74 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.37 (br. s., 1H), 5.20 (t, J=6.4 Hz, 1H), 4.79 - 4.61 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 3.26 - 2.98 (m, 10H), 2.82 (d, J=9.3 Hz, 4H), 2.76 - 2.55 (m, 1H), 2.33 - 2.11 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.11 - 1.82 (m, 8H), 1.70 (s, 3H), 1.65 - 1.37 (m, 10H), 1.36 - 1.22 (m, 4H), 1.16 (s, 3H), 1.11 - 1.01 (m, 2H), 1.03 (s, 3H), 0.98 (s, 1.5H), 0.97 (s, 1.5H), 0.94 (s, 1.5H), 0.93 (s, 1.5H), 0.87 (s, 3H). LC/MS: m/e 807.60 (M+H)<+>, 2.90 min (LCMS Postupak 3).
Primer 14
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-okso-4,5-dihidro-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0292]
11
Faza 1. Izrada etil 8-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0293]
[0294] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 90 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.45 (s, 2H), 4.17 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.98 - 3.91 (m, 4H), 2.68 (s, 3H), 2.31 - 2.21 (m, 2H), 1.77 - 1.66 (m, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 375.10 (M+H)<+>, 2.50 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2. Izrada etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilata.
[0295]
11
[0296] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 100 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.53 (s, 2H), 4.25 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.58 - 2.48 (m, 4H), 2.44 - 2.35 (m, 2H), 1.96 - 1.86 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 331.05 (M+H)<+>, 2.32 min (LCMS Postupak 3).
Faza 3. Izrada etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0297]
[0298] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 55 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.74 (td, J=3.1, 1.8 Hz, 1H), 4.50 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.45 (d, J=10.3 Hz, 1H),4.15 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.84 - 2.75 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.51 - 2.19 (m, 4H), 2.02 - 1.94 (m, 1H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Faza 4. Izrada etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
11
[0300] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 39 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4 za 7 h, koristeći etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.50 (dt, J=3.5, 1.8 Hz, 1H), 4.49 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.40 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.11 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.28 - 2.16 (m, 3H), 1.98 -1.81 (m, 2H), 1.23 (s, 12H), 1.17 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 441.25 (M+H)<+>, 2.92 min (LCMS Postupak 3).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0301]
[0302] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5 na 90 °C u toku 4 h, koristeći etil 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-
12
tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 883.55 (M+H)<+>, 3.11 min (LCMS Postupak 3).
[0303] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-okso-4,5-dihidro-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 10 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.80 (s, 1H), 4.76 - 4.69 (m, 1H), 4.60 -4.50 (m, 2H), 3.35 - 3.01 (m, 10H), 3.01 - 2.78 (m, 4H), 2.67 - 2.51 (m, 4H), 2.51 - 2.36 (m, 5H), 2.36 -2.14 (m, 2H), 1.81 - 1.75 (m, 2H), 1.72 (s, 3H), 1.75 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.34 (m, 11H), 1.27 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 4H), 0.94 (s, 3H).
LC/MS: m/e 825.50 (M+H)<+>, 2.78 min (LCMS Postupak 3).
Primer 15
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0304]
Faza 1: Izrada etil 8-((tiazol-2-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0305]
[0306] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 35 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći tiazol-2-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.39 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.03 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.09 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.86 (s, 4H), 3.76 (s, 2H), 2.11 - 2.03 (m, 2H), 1.68 - 1.46 (m, 6H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS m/z 328.10 (M+H)<+>, 2.09 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilata.
[0307]
[0308] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 80 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-((tiazol-2-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.47 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.13 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.28 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.97 (s, 2H), 2.55 - 2.35 (m, 6H), 1.89 - 1.77 (m, 2H), 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS m/z 284.20 (M+H)<+>, 1.72 min (LCMS Postupak 3).
Faza 3. Izrada etil 1-((tiazol-2-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0310] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 22 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 4-okso-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheksan-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.43 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J=5.3 Hz, 1H), 5.73 (td, J=3.4, 1.5 Hz, 1H), 4.16 (qd, J=7.2, 2.6 Hz, 2H), 3.90 (s, 2H), 2.74 - 2.64 (m, 1H), 2.45 - 2.39 (m, 2H), 2.33 - 2.20 (m, 2H), 1.85 - 1.76 (m, 1H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS m/z 416.20 (M+H)<+>, 2.75 min (LCMS Postupak 3).
Faza 4. Izrada etil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0311]
[0312] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 71 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-((tiazol-2-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.49 - 6.46 (m, 1H), 6.45 (d, J=5.3 Hz, 1H), 6.06 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.12 (qd, J=7.2, 2.6 Hz, 2H), 3.86 (s, 2H), 2.63 - 2.54 (m, 1H), 2.31 - 1.99 (m, 4H), 1.60 (ddd, J=13.0, 9.0, 5.6 Hz, 1H), 1.23 (s, 12H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS m/z 394.30 (M+H)<+>, 2.65 min (LCMS Postupak 3).
12
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0313]
[0314] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 30 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći 1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonat i etil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktante.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.46 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.06 (d, J=5.3 Hz, 1H), 5.30 (br. s., 1H), 5.18 - 5.13 (m, 1H), 4.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.11 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.96 - 3.84 (m, 2H), 3.11 - 2.97 (m, 8H), 2.74 - 2.42 (m, 6H), 2.22 - 0.85 (m, 27H), 1.67 (s, 3H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.93 - 0.86 (m, 6H), 0.83 (s, 3H). MS m/z 836.65 (M+H)<+>, 2.98 min (LCMS Postupak 3).
[0315] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 68 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((tiazol-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.70 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.08 (d, J=5.5 Hz, 1H), 5.42 - 5.28 (m, 1H), 5.20 (dd, J=16.2, 4.9 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.19 - 4.01 (m, 1H), 4.02 - 3.85 (m, 1H), 3.29 (d, J=15.8 Hz, 1H), 3.24 - 2.95 (m, 7H), 2.85 (d, J=10.8 Hz, 2H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.43 (d, J=15.1 Hz, 1H), 2.31 - 2.12 (m, 8H), 2.12 - 1.85 (m, 6H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.75 - 1.60 (m, 2H), 1.59 - 1.21 (m, 12H), 1.17 (s, 3H), 1.13 - 1.01 (m, 2H), 1.04 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). LC/MS: m/e 808.55 (M+H)<+>, 1.832 min (LCMS Postupak 3).
Primer 16
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0316]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8 -karboksilata.
[0317]
12
[0318] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći 1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-ol kao reaktant. Ovaj materijal se prenosi u sledeću fazu bez prečišćavanja. LC/MS: m/e 388.20 (M+H)<+>, 2.32 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheksankarboksilata.
[0319]
[0320] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 9 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 4.22 (s,
2H), 4.15 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.53 - 2.42 (m, 4H), 2.40 - 2.30 (m, 2H), 1.83 - 1.71 (m, 2H), 1.15 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 388.20 (M+H)<+>, 2.32 min (LCMS Postupak 3).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0321]
12
[0322] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 144 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 4-okso-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.54 - 7.48 (m, 2H), 7.46 -7.40 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.80 - 5.75 (m, 1H), 4.29 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.22 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.17 - 4.11 (m, 2H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.56 - 2.44 (m, 1H), 2.42 - 2.22 (m, 3H), 1.97 - 1.89 (m, 1H), 1.17 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 476.25 (M+H)<+>, 2.65 min (LCMS Postupak 3).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0323]
[0324] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 91 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.68 - 7.63 (m, 2H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.49 (dt, J=3.5, 1.8 Hz, 1H), 4.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.19 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.08 (qd, J=7.1, 1.0 Hz, 2H), 2.69 - 2.60 (m, 1H), 2.28 - 2.05 (m, 3H), 1.98 - 1.90 (m, 1H), 1.88 - 1.81 (m, 1H), 1.23 (s, 12H), 1.12 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 454.35 (M+H)<+>, 2.63 min (LCMS Postupak 3).
12
Faza 4. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0325]
[0326] 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 58 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.71 - 7.65 (m, 2H), 7.51 - 7.44 (m, 2H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.32 (br. s., 1H), 5.15 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.68 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 2H), 4.09 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.09 - 2.96 (m, 8H), 2.71 - 2.38 (m, 6H), 2.25 - 0.86 (m, 27H), 1.66 (s, 3H), 1.14 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.93 - 0.87 (m, 6H), 0.83 (s, 3H).
[0327] Faza 6. Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 20% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
12
il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.79 - 7.70 (m, 2H), 7.53 - 7.46 (m, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.18 (t, J=5.5 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.38 - 4.23 (m, 2H), 3.09 - 2.92 (m, 8H), 2.90 - 2.80 (m, 2H), 2.78 - 2.54 (m, 4H), 2.31 - 2.10 (m, 4H), 2.04 - 1.80 (m, 6H), 1.73 (d, J=11.3 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.54 (d, J=17.8 Hz, 3H), 1.49 - 1.35 (m, 6H), 1.35 - 1.15 (m, 5H), 1.11 (s, 3H), 1.14 - 1.02 (m, 2H), 1.00 (s, 3H), 0.97 -0.94 (m, 1H), 0.96 (s, 3H), 0.93 - 0.92 (m, 3H), 0.85 (s, 3H). LC/MS: m/e 868.65 (M+H)<+>, 2.83 min (LCMS Postupak 3).
Primer 17
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0328]
Faza 1. Izrada etil 8-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro [4.5] dekan-8-karboksilata.
[0329]
12
[0330] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 43 % prinosa kao polu-čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-B na 105 °C, koristeći 1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-ol kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.06 (s, 1H), 4.59 (spt, J=6.8 Hz, 1H), 4.18 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.00 - 3.91 (m, 4H), 2.33 - 2.24 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 6H), 1.51 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 354.30 (M+H)<+>, 3.33 min (LCMS Postupak 11).
Faza 2. Izrada etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksan-1-karboksilata.
[0331]
[0332] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 91 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2, koristeći etil 8-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.02 (s, 1H), 4.50 (spt, J=6.8 Hz, 1H), 4.17 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 2.52 - 2.40 (m, 4H), 2.38 - 2.28 (m, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 2H), 1.43 (d, J=7.0 Hz, 6H), 1.19 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 354.30 (M+H)<+>, 1.96 min (LCMS Postupak 3).
Faza 3. Izrada etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilata.
1
[0334] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 97 % prinosa kao ulje, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3, koristeći etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.04 (s, 1H), 5.79 - 5.73 (m, 1H), 4.53 (spt, J=6.8 Hz, 1H), 4.19 - 4.04 (m, 4H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.55 - 2.21 (m, 4H), 1.92 (ddd, J=13.7, 7.9, 6.3 Hz, 1H), 1.47 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (376MHz, HLOROFORM-d) h -73.94 (s, 3F). LC/MS: m/e 442.20 (M+H)<+>, 2.64 min (LCMS Postupak 3).
Faza 4. Izrada etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan- 2-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0335]
[0336] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 100 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4, koristeći etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.02 (s, 1H), 6.48 (dt, J=3.3, 1.7 Hz, 1H), 4.53 (spt, J=6.8 Hz, 1H), 4.16 - 4.06 (m, 4H), 2.69 - 2.60 (m, 1H), 2.28 - 2.05 (m, 3H), 1.98 - 1.81 (m, 2H), 1.46 (dd, J=6.8, 2.3 Hz, 6H), 1.22 (s, 12H), 1.17 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 420.30 (M+H)<+>, 2.65 min (LCMS Postupak 3).
1 1
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0337]
[0338] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 100 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5, koristeći etil 1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.05 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.56 (spt, J=6.7 Hz, 1H), 4.20 - 4.09 (m, 4H), 3.11 - 2.93 (m, 8H), 2.71 -2.36 (m, 6H), 2.30 - 0.86 (m, 27H), 1.66 (s, 3H), 1.49 (d, J=6.3 Hz, 6H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.93 - 0.87 (m, 6H), 0.83 (s, 3H). LC/MS: m/e 862.73 (M+H)<+>, 2.35 min (LCMS Postupak 1).
[0339] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 45 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((1-izopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.
1 2
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.12 (d, J=2.3 Hz, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.3 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.67 - 4.52 (h, J=6.8 Hz, 1H), 4.32 - 4.10 (m, 2H), 3.20 - 2.89 (m, 8H), 2.87 - 2.68 (m, 3H), 2.68 - 2.53 (m, 1H), 2.34 - 2.21 (m, 1H), 2.21 - 1.85 (m, 11H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.65 (m. 1H), 1.68 (s, 3H), 1.51 (d, J=65 Hz, 6H), 1.64 -1.36 (m, 9H), 1.36 - 1.19 (m, 4H), 1.14 (s, 3H), 1.07 (br. s., 2H), 1.01 (s, 3H), 0.97 - 0.96 (m, 4H), 0.94 - 0.89 (m, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS: m/e 834.69 (M+H)<+>, 2.32 min (LCMS Postupak 1).
Primer 18
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0340]
Faza 1. Izrada etil 8-((izotiazol-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0341]
1
[0342] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 36 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 1-A, koristeći izotiazol-3(2H)-on kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.42 (d, J=4.8 Hz, 1H), 6.57 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.17 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.99 - 3.93 (m, 4H), 2.31 - 2.20 (m, 2H), 1.75 - 1.65 (m, 6H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 328.20 (M+H)<+>, 3.59 min (LCMS Postupak 12).
Faza 2. Izrada etil 8-(((5-(2-hidroksipropan-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0343]
[0344] U rastvor etil 8-((izotiazol-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (100 mg, 0305 mmol) u THF (2 mL) se u atmosferi azota na -78 °C doda 2M rastvor LDA (0.305 mL, 0.611 mmol). Rastvor se meša 20 minuta na -78 °C a zatim se doda čist propan-2-on (0.045 mL, 0.611 mmol). Mešanje se nastavi narednih 30 minuta na -78 °C. Reakcija se neutrališe sa polu-zasićenim amonijum hloridom u 0.5M HCl, ekstrahuje sa etil acetatom i koncentruje pod vakuumom. Sirova smeša se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-45 % EtOAc / heksani da se dobije traženi produkt kao ulje (83 mg, 70 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.35 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.13 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.91 (s, 4H), 2.84 (s, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.58 (s, 6H), 1.19 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 386.20 (M+H)<+>, 2.75 min (LCMS Postupak 13).
1 4
Faza 3. Izrada etil 1-(((5-(2-hidroksipropan-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilata.
[0345]
[0346] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 100 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2 koristeći etil 8-(((5-(2-hidroksipropan-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.36 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.20 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.52 - 2.41 (m, 4H), 2.39 -2.29 (m, 2H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 1.59 (s, 6H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 3H). LC/MS: m/e 342.15 (M+H)<+>, 2.03 min (LCMS Postupak 3).
Faza 4. Izrada etil 1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0347]
[0348] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 22 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3 koristeći etil 1-(((5-(2-hidroksipropan-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-oksocikloheksankarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.50 (s, 1H), 5.76 (td, J=3.3, 1.8 Hz, 1H), 5.45 (s, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.47 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.41 (d,
1
J=10.0 Hz, 1H), 4.19 (qd, J=7.1, 0.8 Hz, 2H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.53 - 2.22 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 1.98 - 1.90 (m, 1H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 456.10 (M+H)<+>, 2.76 min (LCMS Postupak 3).
Faza 5. Izrada etil 1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0349]
[0350] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 78 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4 koristeći etil 1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.55 - 6.50 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.46 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.37 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.15 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.74 - 2.64 (m, 1H), 2.28 -2.16 (m, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.01 - 1.80 (m, 2H), 1.26 (s, 12H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 434.20 (M+H)<+>, 2.79 min (LCMS Postupak 3).
Faza 6. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0351]
1
[0352] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 42 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5 koristeći etil 1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.51 (s, 1H), 5.44 (s, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (br. s., 1H), 5.17 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.51 - 4.38 (m, 2H), 4.21 - 4.12 (m, 2H), 3.41 - 2.92 (m, 11H), 2.78 - 2.54 (m, 3H), 2.22 - 0.89 (m, 27H), 2.09 (s, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.96 - 0.91 (m, 6H), 0.87 (s, 3H). LC/MS: m/e 876.60 (M+H)<+>, 3.01 min (LCMS Postupak 3).
[0353] Faza 7.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 56 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6 koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,1la-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)izotiazol-3-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.55 (s, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=5.3 Hz, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.56 - 4.50 (m, 1H), 4.50 - 4.43 (m, 1H), 3.40 (d, J=11.8 Hz, 1H), 3.29 - 2.91 (m, 10H), 2.80 - 2.72 (m, 1H), 2.72 - 2.62 (m, 1H), 2.34 - 2.09 (m, 6H), 2.11 (s, 3H), 2.09 - 1.97 (m, 4H), 1.97 - 1.83 (m, 2H), 1.83 - 1.68 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.67 - 1.37 (m, 12H), 1.37 - 1.23 (m, 1H), 1.15 (s, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 3H), 0.98 - 0.97 (m, 3H), 0.95 - 0.93 (m, 3H), 0.89 (s, 3H). LC/MS: m/e 848.50
1
(M+H)<+>, 3.05 min (LCMS Postupak 3).
Primer 19
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0354]
Faza 1. Izrada etil 8-((piridazin-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata.
[0355]
[0356] U rastvor etil 8-(hidroksimetil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (300 mg, 1.23 mmol) u DMF (6 mL) se na 0 °C doda kalijum terc-butoksid (1.84 mL, 1.84 mmol), nakon toga se doda 3-hlorpiridazin (211 mg, 1.84 mmol). Dobijena suspenzija se meša na 0
1
°C, nakon toga zagreje na RT u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa etil acetatom (10 mL), ispere sa vodom, suši preko natrijum sulfata i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt. LC/MS: m/e 323.20 (M+H)<+>, 2.09 min (LCMS Postupak 7).
Faza 2. Izrada etil 4-okso-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheksankarboksilata.
[0357]
[0358] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 70 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 2 koristeći etil 8-((piridazin-3-iloksi)metil)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.82 (dd, J=4.5, 1.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J=9.0, 4.5 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=8.9, 1.4 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.57 - 2.28 (m, 6H), 1.92 - 1.82 (m, 2H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 279.15 (M+H)<+>, 1.71 min (LCMS Postupak 7).
Faza 3. Izrada etil 1-((piridazin-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0359]
[0360] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 39 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 3 koristeći etil 4-okso-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheksankarboksilat
1
kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.82 (dd, J=4.5, 1.3 Hz, 1H), 7.36 (dd, J=9.0, 4.5 Hz, 1H), 6.94 (dd, J=9.0, 1.3 Hz, 1H), 5.75 (td, J=3.1, 1.8 Hz, 1H), 4.62 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.18 - 4.11 (m, 2H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.53 - 2.23 (m, 4H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 411.15 (M+H)<+>, 2.66 min (LCMS Postupak 7).
Faza 4. Izrada etil 1-((piridazin-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0361]
[0362] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 43 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 4 koristeći etil 1-((piridazin-3-iloksi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.78 (dd, J=4.5, 1.3 Hz, 1H), 7.32 (dd, J=8.9, 4.4 Hz, 1H), 6.91 (dd, J=8.9, 1.4 Hz, 1H), 6.49 (dt, J=3.7, 1.8 Hz, 1H), 4.62 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.27 - 2.08 (m, 3H), 1.98 - 1.80 (m, 2H), 1.21 (s, 12H), 1.21 (t, J=7.3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 389.25 (M+H)<+>, 2.74 min (LCMS Postupak 7).
Faza 5. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0363]
14
[0364] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 5 koristeći etil 1-((piridazin-3-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. Sirovi materijal se direktno prenese u sledeću fazu bez prečišćavanja.
[0365] Faza 6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 22 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku A faza 6 koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridazin-3-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 9.09 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.74 (dd, J=9.0, 4.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (t, J=5.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.76 - 4.64 (m, 2H), 3.39 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.25 - 3.02 (m, 9H), 3.02 - 2.86 (m, 2H), 2.86 - 2.62 (m, 2H), 2.32 -2.06 (m, 5H), 2.06 - 1.84 (m, 6H), 1.82 - 1.67 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.66 - 1.35 (m, 10H), 1.35 - 1.20 (m, 4H), 1.17 (s, 3H), 1.14 - 1.04 (m, 2H), 1.05 (s, 3H), 0.97 - 0.95 (m, 3H), 0.92 -0.91 (m, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS: m/e 803.48 (M+H)<+>, 2.27 min (LCMS Postupak 1).
Opšti postupak B: Izrada (R) derivata α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0366]
Faza 1. Izrada ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0367]
[0368] Smeša (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-iltrifluorometansulfonata (1 eq), (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metilbenzoata (1.2 eq), Na2CO3(3 eq) i Pd(Ph3P)4(0.06 eq) u 1,4-dioksanu i H2O (4 : 1) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-35 % Etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (68 % prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.01 (dd, J=8.4, 1.4 Hz, 2H), 7.60 - 7.53 (m, 1H), 7.47 -7.40 (m, 2H), 5.36 (br. s., 1H), 5.20 (dd, J=6.0, 1.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 2H), 4.18 (qd, J=7.2, 1.4 Hz, 2H), 3.13 - 2.98 (m, 8H), 2.73 - 2.43 (m, 6H), 2.27 - 0.89 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.25 - 1.20 (m, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (br. s., 3H), 0.96 (br. s., 3H), 0.94 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS m/z 857.65 (M+H)<+>, 2.43 min (LCMS Postupak 1).
Faza 2. Izrada etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0369]
[0370] Suspenzija ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1 eq) i 1N NaOH (1 eq) u MeOH i THF se meša 2 dana na RT. Smeša se neutrališe sa 1N HCl i rastvarač se ukloni pod
14
vakuumom. Ostatak se prenese u CH2Cl2, ispere sa H2O, nakon toga sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na silika gelu uz eluiranje sa etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (85 % prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.32 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.19 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.69 (br. s., 2H), 3.12 - 2.98 (m, 8H), 2.72 - 2.43 (m, 6H), 2.28 - 0.89 (m, 27H), 1.70 (s, 3H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). LC/MS m/z 753.65 (M+H)<+>, 3.79 min (LCMS Postupak 2).
Faza 3. Izrada (R) α-metil etra.
[0371]
[0372] U rastvor etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (1 eq) i Ar-X (2 eq) u DMF se na 0 °C doda KOtBu (2 eq). Dobijena smeša se zagreje na RT i meša u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa EtAOc, ispere sa vodom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4: Izrada (R) α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0373]
[0374] Rastvor (R) α-metil etra iz Faze 3 u 1,4-dioksanu, MeOH i 1N NaOH (2: 1 : 1) se meša na 50 °C. Reaktivna smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobije finalni produkt.
Primer 20
Izrada (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0375]
Faza 1 - 2: Opšti postupak B.
Faza 3. Izrada etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS, 1bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
14
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0376]
[0377] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 3, koristeći 2-hlorpiridin kao reaktant. LC/MS m/z 830.55 (M+H)<+>, 3.56 min (LCMS Postupak 5).
[0378] Faza 4. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 41 % prinosa (2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 4 u toku 6 h, koristeći etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.
<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.21 (dd, J=5.3, 1.4 Hz, 1H), 7.70 (ddd, J=8.6, 7.0, 2.0 Hz, 1H), 6.98 (ddd, J=1.1, 5.3, 0.8 Hz, 1H), 6.84 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.20 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.49 (d, J=9.9 Hz, 1H), 4.45 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.38 - 3.31 (m, 1H), 3.25 - 3.00 (m, 9H), 2.98 - 2.85 (m, 2H), 2.79 (dt, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.70 - 2.62 (m, 1H), 2.28 - 1.86 (m, 11H), 1.76 - 1.07 (m, 16H), 1.70 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS m/z 802.45 (M+H)<+>, 3.34
14
min (LCMS Postupak 5).
Primer 21
Izrada (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0379]
Faza 1 - 2: Opšti postupak B.
Faza 3. Izrada etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0380]
14
[0381] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 3, koristeći 4-hlorpirimidin kao reaktant. LC/MS m/z 831.55 (M+H)<+>, 3.45 min (LCMS Postupak 5).
[0382] Faza 4. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 31 % prinosa (2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 4 za 4 h, koristeći etil (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.95 (s, 1H), 8.57 (d, J=6.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=6.3, 0.9 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.37 - 3.31 (m, 1H), 3.23 - 3.01 (m, 9H), 2.97 - 2.86 (m, 2H), 2.80 (dt, J=10.6, 5.6 Hz, 1H), 2.69 - 2.62 (m, 1H), 2.30 - 1.87 (m, 11H), 1.76 - 1.01 (m, 16H), 1.70 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS m/z 725.50 (M+H)<+>, 3.23 min (LCMS Postupak 5).
Primer 22
Izrada (R)-1-(((3-hlorpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
14
il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0383]
Faza 1 - 2: Opšti postupak B.
Faza 3. Izrada etil (R)-1-(((3-hlorpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0384]
[0385] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 3, koristeći 2,3-dihlorpiridin kao reaktant. LC/MS m/z 864.45
14
(M+H)<+>, 3.83 min (LCMS Postupak 5).
[0386] Faza 4. (R)-1-(((3-hlorpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 69 % prinosa (2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 4 za 6 h, koristeći etil (R)-1-(((3-hlorpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.04 (dd, J=4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.64 (dd, J=7.6, 1.5 Hz, 1H), 6.87 (dd, J=7.6, 5.0 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.54 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J=10.2 Hz, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 3.25 - 3.01 (m, 9H), 2.99 - 2.87 (m, 2H), 2.75 (td, J=10.9, 5.7 Hz, 1H), 2.69 - 2.62 (m, 1H), 2.30 - 1.85 (m, 11H), 1.76 - 1.07 (m, 16H), 1.69 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). LC/MS m/z 836.45 (M+H)<+>, 3.48 min (LCMS Postupak 5).
Primer 23
Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0387]
1
Faza 1 - 2: Opšti postupak B.
Faza 3. Izrada etil (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0388]
[0389] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 97 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 3, koristeći 2-fluoronikotinonitril kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.33 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J=7.4, 1.9 Hz, 1H), 7.00 - 6.95 (m, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.57 - 4.53 (m, 2H), 4.18 (qd, J=7.2, 2.6 Hz, 2H), 3.12 - 2.99 (m, 8H), 2.76 - 2.41 (m,
1 1
6H), 2.28 - 0.90 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
LC/MS m/z 855.60 (M+H)<+>, 4.03 min (LCMS Postupak 2).
[0390] Faza 4. (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 67 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 3 na RT u toku 2 dana, koristeći etil (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.37 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.10 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.0, 1.5 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.76 (t, J=1.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 3.27 - 3.07 (m, 11 H), 2.91 (ddd, J=14.4, 10.0, 4.6 Hz, 1H), 2.79 - 2.61 (m, 2H), 2.32 - 1.09 (m, 27H), 1.77 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). LC/MS m/z 827.60 (M+H)<+>, 3.70 min (LCMS Postupak 2).
Primer 24
Izrada (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0391]
1 2
[0392] Naslovljeno jedinjenje je sporedni produkt formiran u toku Faze 4 za izradu etil (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata. Materijal se izdvoji u 14 % prinosa kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.40 (dd, J=7.8, 2.0 Hz, 1H), 8.29 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.13 (dd, J=7.7, 4.9 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.64 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.03 (m, 11H), 3.01 - 2.90 (m, 1H), 2.84 - 2.68 (m, 2H), 2.37 - 1.06 (m, 27H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H). LC/MS m/z 845.60 (M+H)<+>, 3.66 min (LCMS Postupak 2).
Opšti postupak C: Izrada (S) derivata α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0393]
1
Faza 1. Izrada ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0394]
[0395] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 86% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku
1 4
opisanom u Opštem postupku B faza 1, koristeći kao reaktant (S)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat umesto (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata. LC/MS m/z 857.50 (M+H)<+>, 3.055 min (LCMS Postupak 3).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.07 - 7.90 (m, 2H), 7.64 - 7.52 (m, 1H), 7.49 - 7.37 (m, 2H), 5.37 (br. s., 1H), 5.21 (dd, J=6.0, 1.8 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.61 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.52 - 4.37 (m, 2H), 4.25 - 4.16 (m, 2H), 3.15 - 3.00 (m, 8H), 2.78 - 2.53 (m, 5H), 2.51 - 2.42 (m, 1H), 2.34-2.23 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 2.22 - 0.80 (m, 29H).
Faza 2. Izrada etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0396]
[0397] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 94% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 2, koristeći kao reaktant ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat umesto ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
1
il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata. LC/MS m/z 753.55 (M+H)<+>, 2.754 min (LCMS Postupak 3).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.30 (s, 1H), 5.16 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.23 - 4.12 (m, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.28 - 2.65 (m, 13H), 2.54 (d, J=16.1 Hz, 1H), 1.68 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.85 (s, 3H), 2.23 - 0.78 (m, 30H).
Faza 3. Izrada etil (S)-1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0398]
[0399] U rastvor etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (1 eq) u DMF se na -78 °C doda KOtBu (2 eq). Dobijena smeša se meša 20 minuta nakon čega se doda Ar-X (2 eq). Nakon toga se reakcija zagreje na RT i meša u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa EtAOc, ispere sa vodom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se ili koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja ili prečisti hromatografijom na silika gelu koristeći etil acetat/heksani kao eluente.
Faza 4. Izrada (S)-1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-
1
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0400]
[0401] Rastvor etil (S)-1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata iz Faze 3 u 1,4-dioksanu, MeOH i 1N NaOH (2 : 1 : 1) se meša 2-18 sati na 50 °C. Reaktivna smeša se nakon toga prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobije finalni produkt.
Primer 25
Izrada (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0402]
1
Faza 1 - 2: Opšti postupak C faza 1-2.
Faza 3. Izrada etil (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0403]
[0404] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 3, koristeći 2-hlornikotinonitril kao reaktant. LC/MS m/z 855.50 (M+H)<+>, 3.004 min (LCMS Postupak 3).
[0405] Faza 4. (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-
1
5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a, 11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 29 % prinosa (nakon 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 7 h, koristeći etil (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 827.50 (M+H)<+>, 3.393 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.40 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.25 - 5.21 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.62 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.58 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.31 - 3.18 (m, 8H), 3.16 - 3.12 (m, 2H), 3.12 - 3.07 (m, 1H), 3.02 - 2.87 (m, 1H), 2.80 (td, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 2.73 - 2.63 (m, 2H), 2.37 - 2.27 (m, 1H), 2.26 - 2.01 (m, 8H), 1.97 - 1.91 (m, 1H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 1.78 (s, 3H), 1.72 - 1.44 (m, 10H), 1.42 - 1.31 (m, 1H), 1.20 (s, 3H), 1.27 - 1.09 (m, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
Alternativno, Primer 28 može da se izradi koristeći naredne postupke:
Faza 1: Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
1
il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, HCl. U bocu koja sadrži suspenziju (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(fluorometil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline (4.08 g, 5.61 mmol) izrađenu kako je opisano u WO 2015157483 u 1,4-dioksanu (50.0 mL) se doda tetrabutilamonijum hidroksid (55% u vodi) (26.5 g, 56.1 mmol). Boca se priključi na refluksni kondenzator i zagreva u uljanom kupatilu na 100 °C. Nakon 8.5 dana zagrevanja, LC/MS pokazuje da je reakcija završena. Smeša se ohladi na rt i prenese u graduirani levak za dodavanje. Nakon stajanja u levku za dodavanje, formiraju se dva odvojena sloja. Donji sloj koji sadrži produkt se podeli na pola prema oznakama na levku. Polovina materijala postaje kisela dodavanjem 1N rastvora HCl. Formirane čvrste susptance se sakupe filtriranjem i isperu sa vodom. Čvrste supstance se nakon toga trituriraju sa etrom i sakupe filtriranjem. Čvrste supstance se isperu sa etrom, nakon toga ostave da se osuše na filter papiru. Naslovljeni produkt se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (1.95g, 2.56 mmol, 45.6% prinosa, 91% izračunato prema polovini smeše). LCMS: m/e 725.4 (M+H)<+>, 1.15 min (postupak 16).
Faza 2. U suspenziju (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, HCl (1.95 g, 2.56 mmol) u THF (30 mL) se doda KHMDS (0.91M rastvor u THF) (9.0 mL, 8.19 mmol). Smeša se meša 5 minuta, nakon toga se doda 2-fluoronikotinonitril (1.0 g, 8.19 mmol). Nakon 2.5h, alikvot se ukloni. LC/MS pokazuje da je reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa 1N rastvorom HCl (30 mL) a zatim se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 75 mL). Organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl i suše preko magnezijum sulfata. Sredstvo za sušenje se ukloni filtriranjem. Sredstvo za sušenje nije dobro uklonjeno filtriranjem, pa će verovatno čvrsta supstanca precipitirati stajanjem na rt, pa se čvrsta filter pogača meša sa etil acetatom, nakon toga sa dihlormetanom, a zatim ponovo filtrira. Kombinovani filtrati se koncentruju pod sniženim pritiskom. Ostatak se triturira sa etrom i formirane čvrste supstance sakupe filtriranjem i isperu sa etrom. Ostatak se rastvori u metanolu i prečisti reverzno faznom hromatografijom koristeći 275g Isco Redisep gold C18 kolonu i gradijent 20%B-80%A do 100%B gde je A 90% voda, 10% acetonitril sa 0.1% TFA puferom i B je 10% voda, 90%
1
acetonitril sa 0.1% TFA puferom. Frakcije koje sadrže produkt se kombinuju i koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a- pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (1.50g, 1.59 mmol, 62%) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: m/e 827.4 (M+H)<+>, 1.32 min (postupak 16).
Primer 26
Izrada (S)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0406]
[0407] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao sporedni produkt u 7 % prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C Faza 4 za 7 h, koristeći etil (S)-1-3-canopiridin-2-il)oksi)metil-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 845.55
1 1
(M+H-H2O)<+>, 3.349 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.42 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 8.31 (dd, J=4.8, 2.0 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.40 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.66 - 4.62 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.57 - 4.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.30 - 3.17 (m, 7H), 3.12 (d, J=17.3 Hz, 3H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.81 - 2.71 (m, 2H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.25 - 2.12 (m, 5H), 2.12 - 2.00 (m, 3H), 1.92 - 1.67 (m, 6H), 1.78 (s, 3H), 1.67 - 1.41 (m, 10H), 1.26 - 1.06 (m, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
Primer 27
Izrada (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-(metoksikarbonil)piridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0408]
[0409] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao sporedni produkt u 0.6 % prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku B faza 4 za 15 h, koristeći etil (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR, 3bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 860.65 (M+H)<+>, 2.93 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.30 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 8.17 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 7.06 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.39 (br. s.,
1 2
1H), 5.25 - 5.21 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.57 - 4.47 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.30 -3.17 (m, 8H), 3.16 - 3.07 (m, 3H), 3.02 - 2.90 (m, 1H), 2.81 (td, J=11.0, 5.4 Hz, 1H), 2.73 -2.63 (m, 1H), 2.36 - 2.00 (m, 9H), 2.00 - 1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.75 (m, 3H), 1.77 (s, 3H), 1.75 - 1.34 (m, 12H), 1.26 - 1.09 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
Primer 28
Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((6-metoksipiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0410]
Faza 1 - 2: Opšti postupak C faza 1-2.
Faza 3. Izrada etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0411]
1
[0412] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 3, koristeći 2,6-difluoropiridin kao reaktant. LC/MS m/z 848.50 (M+H)<+>, 3.031 min (LCMS Postupak 3).
[0413] Faza 4. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((6-metoksipiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 3.7 % prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 15 h, koristeći etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 832.50 (M+H)<+>, 3.267 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (500MHz, METANOL-d4) δ 7.54 (t, J=7.9 Hz, 1H), 6.32 (d, J=2.9 Hz, 1H), 6.30 (d, J=2.9 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.29 - 5.15 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.485 - 4.345 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.30 - 3.17 (m, 8H), 3.17 - 3.07 (m, 3H), 2.94 (ddd, J=14.5, 10.2, 4.7 Hz, 1H), 2.78 (td, J=11.0, 5.4 Hz, 1H), 2.67 -2.60 (m, 1H), 2.30 (d, J=18.2 Hz, 1H), 2.22 - 2.09 (m, 3H), 2.09 - 2.00 (m, 2H), 1.96 - 1.66 (m, 8H), 1.78 (s, 3H), 1.66 - 1.43 (m, 10H), 1.43 - 1.29 (m, 2H), 1.29 - 1.09 (m, 1H), 1.19 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
Primer 29
Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
1 4
il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0414]
[0415] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 69.8 % prinosa (2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 7 h, koristeći etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 820.45 (M+H)<+>, 3.136 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (500MHz, ACETON-d6) δ 7.85 (q, J=8.1 Hz, 1H), 6.71 (dd, J=8.0, 1.3 Hz, 1H), 6.61 (dd, J=7.8, 2.3 Hz, 1H), 5.42 - 5.35 (m, 1H), 5.23 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.79 (d, J=1.2 Hz, 1H), 4.68 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.41 (d, J=10.2 Hz, 1H), 3.43 - 3.24 (m, 8H), 3.23 - 3.12 (m, 5H), 3.12 - 3.05 (m, 3H), 3.02 (td, J=10.8, 5.7 Hz, 1H), 2.70 - 2.61 (m, 1H), 2.38 - 2.16 (m, 4H), 2.17 - 2.01 (m, 3H), 1.95 - 1.84 (m, 2H), 1.84 - 1.68 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.64 (d, J=16.8 Hz, 1H), 1.61 - 1.42 (m, 8H), 1.40 - 1.22 (m, 1H), 1.26 (s, 3H), 1.23 - 1.11 (m, 2H), 1.13 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H).
Primer 30
Izrada (S)-1-(((4-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-
1
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0416]
Faza 1 - 2: Opšti postupak C faza 1-2.
Faza 3. Izrada etil (S)-1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0417]
1
[0418] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 3, koristeći 2-fluoroizonikotinonitril kao reaktant. LC/MS m/z 855.50 (M+H)<+>, 3.048 min (LCMS Postupak 3).
[0419] Faza 4. (S)-1-(((4-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 30.5 % prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 7 h, koristeći etil (S)-1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 845.55 (M+H)<+>, 3.048 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.02 (d, J=5.3 Hz, 1H), 7.12 (d, J=5.3 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.16 (br. s., 1H), 5.00 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.58 (br. s., 1H), 4.48 (br. s., 1H), 4.35 - 4.18 (m, 2H), 3.25 - 2.65 (m, 18H), 2.47 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.14 - 1.64 (m, 10H), 1.52 - 1.48 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.45 - 1.03 (m, 10H), 0.98 (s, 3H), 0.88 - 0.84 (m, 2H), 0.86 (s, 3H), 0.78 (s, 3H), 0.73 (s, 3H), 0.68 (s, 3H).
Primer 31
Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0420]
1
Faza 1 - 2: Opšti postupak C faza 1-2.
Faza 3. Izrada etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0421]
[0422] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 3, koristeći 2-bromopiridin kao reaktant. LC/MS m/z M+1=830.55.
2.822 min (LCMS Postupak 3).
[0423] Faza 4. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 22.9 %
1
prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 7 h, koristeći etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 802.45 (M+H)<+>, 2.824 min (LCMS Postupak 3).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.21 (dd, J=5.1, 1.4 Hz, 1H), 7.69 (ddd, J=8.6, 7.0, 1.8 Hz, 1H), 6.97 (td, J=6.2, 0.9 Hz, 1H), 6.83 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.51 (d, J=10.0 Hz 1H), 4.46 (d, J=10.0 Hz 1H), 3.37 - 3.34 (m, 1H), 3.25 - 3.10 (m, 7H), 3.10 - 3.01 (m, 2H), 3.00 - 2.87 (m, 2H), 2.82 (dt, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.73 (d, J=15.3 Hz, 1H), 2.35 -2.13 (m, 4H), 2.13 - 1.88 (m, 7H), 1.81 - 1.67 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.66 - 1.26 (m, 13H), 1.18 (s, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 1H), 1.06 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
Primer 32
Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirazin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0424]
Faza 1 - 2: Opšti postupak C faza 1-2.
Faza 3. Izrada etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirazin-2- iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0425]
[0426] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 3, koristeći 2-fluoropirazin kao reaktant. LC/MS m/z M+1=831.55.
2.922 min (LCMS Postupak 3).
[0427] Faza 4. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirazin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 77.0 % prinosa (preko 2 faze) kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku C faza 4 za 9 h, koristeći etil (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirazin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 803.42 (M+H)<+>, 2.38 min (LCMS Postupak 1).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.27 (br. s., 2H), 8.17 (br. s., 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.62 - 4.48 (dd, J=10.5, 17.3 Hz, 2H), 3.44 - 3.32 (m, 1H), 3.30 - 2.89 (m, 11H), 2.84 - 2.64 (m, 2H), 2.38 - 1.83 (m, 11H), 1.83 - 1.67 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.68 - 1.37 (m, 10H), 1.38 - 1.22 (m, 2H), 1.16 (s, 3H), 1.13 - 1.03 (m, 2H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
1
Opšti postupak D: Izrada derivata α-piridin-2-iloksi cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0428]
Faza 1. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13aR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0429]
[0430] Smeša (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-
1 1
pentametil-1-(prop-1- en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonata (1 eq), etil 1-((piridin-2-iloksi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-ene-1-karboksilata (1eq), Na2CO3(3 eq) i Pd(Ph3P)4(0.06 eq) u 1,4-dioksanu i H2O (4 : 1) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-55 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt (57 % prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.13 (dd, J=5.0, 1.5 Hz, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 6.86 (ddd, J=7.2, 5.1, 0.8 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=58 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.3 Hz, 1H), 4.60 (dd, J=2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 2H), 4.18 - 4.11 (m, 2H), 2.70 - 2.62 (m, 1H), 2.54 (td, J=10.9, 5.3 Hz, 1H), 2.29 - 0.84 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.97 - 0.91 (m, 6H), 0.86 (s, 3H). LC/MS m/z 669.60 (M+H)<+>, 2.82 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2: Izrada derivata C-17 amina.
[0431]
[0432] U rastvor etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (1 eq) i aldehida (2 eq) u DCE se doda titanijum (IV) izopropoksid (2 eq). Smeša se meša 1 h na RT. Doda se natrijum triacetoksiborhidrid (2 eq) i smeša se meša na RT u toku noći. Reakcija se neutrališe sa
1 2
zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3. Dobijena žitka supstanca se ekstrahuje sa dihlormetanom, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom / heksani da se dobije traženi produkt.
Faza 3: Izrada karboksilne kiseline.
[0433]
[0434] Rastvor estra iz faze 2 u 1,4-dioksanu, MeOH i 1N rastvor NaOH (2 : 1 : 1) se meša na 60 -70 °C. Reaktivna smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobije finalni produkt.
Primer 33
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroksi-1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0435]
1
Faza 1: Opšti postupak D faza 1.
Faza 2. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroksi-1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0436]
[0437] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 78 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku D faza 2, koristeći 2-(4-hidroksi-1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)acetaldehid kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.12 (dd, J=5.0, 1.5 Hz, 1H), 7.57 - 7.52 (m, 1H), 6.85 (ddd, J=7.0, 5.1, 0.9 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.48 -4.36 (m, 2H), 4.18 - 4.08 (m, 4H), 3.57 - 3.43 (m, 2H), 2.91 - 2.61 (m, 5H), 2.50 (td, J=10.7,
1 4
5.5 Hz, 1H), 2.24 - 0.88 (31H), 1.68 (s, 3H), 1.19 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 - 0.90 (m, 6H), 0.85 (s, 3H). LC/MS m/z 845.60 (M+H)<+>, 3.59 min (LCMS Postupak 4).
[0438] Faza 3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroksi-1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 76 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku D faza 3 za 12 h na 60° C, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4- hidroksi-1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.29 (br. s., 1H), 7.96 (t, J=7.0 Hz, 1H), 7.17 (br. s., 1H), 7.04 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=53 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.53 - 4.39 (m, 2H), 3.58 - 3.35 (m, 2H), 3.21 (br. s., 2H), 2.97 - 2.84 (m, 2H), 2.76 - 2.62 (m, 2H), 2.58 -2.44 (m, 1H), 2.34 - 1.04 (m, 32H), 1.68 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.95 - 0.91 (m, 6H), 0.87 (s, 3H). LC/MS m/z 817.55 (M+H)<+>, 5.51 min (LCMS Postupak 4).
Opšti postupak E. Izrada derivata α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline alkilacijom α-metil alkohola.
[0439]
1
Faza 1. Izrada (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,12b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0440]
[0441] Smeša (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-
1
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonata (1 eq), (1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1.05 eq), Na2CO3H2O (3 eq) i Pd(Ph3P)4(0.06 eq) u 1,4-dioksanu i H2O (4 : 1) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom a ostatak se podeli između EtOAc i H2O. Izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0 - 60 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt kao čvrsta supstanca (67 % prinos).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.01 (dd, J=8.2, 1.1 Hz, 2H), 7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 2H), 5.36 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.21 - 4.14 (m, 2H), 3.12 - 2.98 (m, 8H), 2.73 - 2.53 (m, 5H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 2.31 - 0.81 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.22 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.98 - 0.92 (m, 6H), 0.86 (s, 3H).
LC/MS: m/e 857.50 (M+H)<+>, 2.91 min (LCMS Postupak 3).
Faza 2:. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0442]
[0443] Suspenzija 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1 eq) i 1N rastvora NaOH (1 eq) u
1
MeOH i THF se meša 1 dan na RT. Smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom limunske kiseline i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Ostatak se prenese u EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se bez daljeg prečišćavanja dobije traženi produkt (99% prinos) kao čvrsta supstanca. LC/MS m/z 753.70 (M+H)<+>, 2.85 min (LCMS Postupak 3).
Faza 3. Izrada α-supstituisanog cikloheksenkarboksilnog estra.
[0444]
[0445] U rastvor etil-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (1 eq) i Ar-X (2 eq) u DMF se doda KOtBu (2 eq). Dobijena smeša se zagreje na RT i meša u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa EtAOc, ispere sa vodom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
Faza 4. Izrada α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline.
[0446]
1
[0447] Rastvor α-metil etra iz faze 4 u 1,4-dioksanu, MeOH i 1N NaOH (2: 1 : 1) se meša na 50 °C. Reaktivna smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobije finalni produkt.
Primer 34
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0448]
Faza 1-2: Opšti postupak E.
Faza 3. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0449]
[0450] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao sirovi produkt, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 3, koristeći 2-bromopirimidin kao reaktant. LC/MS m/z 831.60 (M+H)<+>, 2.76 min (LCMS Postupak 3).
[0451] Faza 4.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 11 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 4, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.62 (d, J=4.8 Hz, 2H), 7.10 (t, J=4.9 Hz, 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.64 - 4.54 (m, 2H), 3.39 (br. d, J=13.1 Hz, 1H), 3.27 - 3.03 (m, 9H), 3.03 - 2.89 (m, 2H), 2.80 - 2.70 (m, 1H), 2.33 - 2.06 (m, 4H), 2.06 - 2.02 (m, 6H), 2.02 - 1.85 (m, 4H), 1.81 - 1.67 (m, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.67 - 1.37 (m, 10H), 1.37 -1.25 (m, 2H), 1.16 (s, 3H), 1.12 - 1.03 (m, 1H), 1.06 (s, 3H), 0.98 - 0.97 (m, 3H), 0.95 - 0.94 (m, 3H), 0.89 (s, 3H). LC/MS: m/e 803.50 (M+H)<+>, 2.80 min (LCMS Postupak 3).
1
Primer 35
Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((7-metoksiizohinolin-1-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0452]
Faza 3. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((7-metoksiizohinolin-1-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0453]
1 1
[0454] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao sirovi produkt, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 3, koristeći 1-hlor-7-metoksiizohinolin kao reaktant. LC/MS: m/e 910.65 (M+H)<+>, 2.98 min (LCMS Postupak 3).
[0455] Faza 4: 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((7-metoksiizohinolin-1-il)oksi)metil)cikloheks-3-en-1-karobksilna kiselina se izrađuje u 39 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 4, koristeći etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((7-metoksiizohinolin-1-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 882.60 (M+H)<+>, 2.83 min (LCMS Postupak 3).
Primer 36
Izrada 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0456]
Faza 3. Izrada etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-
1 2
((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilata.
[0457]
[0458] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 41 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 3, koristeći 2-hlornikotinonitril kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.31 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.86 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 6.97 (dd, J=7.4, 5.1 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.69 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.57 (br. s., 1H), 4.53 (s, 2H), 4.21 - 4.12 (m, 2H), 3.10 - 2.97 (m, 8H), 2.74 - 2.40 (m, 6H), 2.28 - 0.82 (m, 27H), 1.67 (s, 3H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.93 - 0.88 (m, 6H), 0.84 (s, 3H). LC/MS: m/e 855.60 (M+H)<+>, 3.08 min (LCMS Postupak 7).
[0459] Faza 4.1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 33 % prinosa, po postupku opisanom u Opštem postupku E faza 3 na RT, koristeći etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilat kao reaktant.<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.41 - 8.38 (m, 1H), 8.08 (dd, J=7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.12 (dd, J=7.7, 5.1 Hz, 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.23 (d,
1
J=4.8 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.63 (dd, J=3.8, 10.5 Hz, 1H), 4.58 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.30 - 3.17 (m, 8H), 3.17 - 3.07 (m, 3H), 2.99 - 2.89 (m, 1H), 2.80 (td, J=11.0, 5.4 Hz, 1H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 2H), 2.15 - 2.01 (m, 7H), 1.99 -1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.76 (m, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.76 - 1.64 (m, 2H), 1.63 - 1.41 (m, 9H), 1.41 - 1.29 (m, 1H), 1.24 - 1.18 (m, 1H), 1.20 (s, 3H), 1.18 - 1.10 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 1.025 -1.015 (m, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). LC/MS: m/e 827.65 (M+H)<+>, 3.12 min (LCMS Postupak 7).
Opšti postupak F. Izrada derivata α-supstituisane cikloheksenkarboksilne kiseline preko silil karboksilata.
[0460]
1 4
Faza 1. Izrada (1-((benziloksi)karbonil)-4-oksocikloheksil)metil benzoata.
[0461]
[0462] U rastvor benzil 1-(hidroksimetil)-4-oksocikloheksankarboksilata (4.3 g, 16.4 mmol) u
1
piridinu (20 mL) se doda benzojev anhidrid (4.45 g, 19.7 mmol) a nakon toga DMAP (2.00 g, 16.4 mmol). Dobijeni rastvor se meša 2 sata na 55 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa 50 mL etil acetata i ispere sa 0.5 N HCl do pH = 4. Organski sloj se suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-50 % etil acetat / heksani da se dobije traženi produkt kao ulje (3.3 g, 49 %).
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.92 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.65 - 7.54 (m, 1H), 7.44 -7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.27 (m, 5H), 5.25 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 2.63 - 2.35 (m, 6H), 1.86 (td, J=12.4, 5.0 Hz, 2H).
Faza 2. Izrada (1-((benziloksi)karbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0463]
[0464] U rastvor (1-((benziloksi)karbonil)-4-oksocikloheksil)metil benzoata (4.2 g, 11.5 mmol) i 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)-metansulfonamida (4.5 g, 12.6 mmol) u THF (50 mL) se na -78 °C doda KHMDS (1 M rastvor u THF) (14.9 mL, 14.9 mmol). Dobijeni žuti rastvor se meša 2 h na -78 °C. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-15 % etil acetat / heksani da se dobije traženi triflat kao ulje (3.6 g, 63 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.92 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 7.42 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.35 - 7.27 (m, 5H), 5.80 (br. s., 1H), 5.26 - 5.14 (m, 2H), 4.50 - 4.41 (m, 2H), 2.90 (dd, J=17.9, 2.4 Hz, 1H), 2.57 - 2.28 (m, 4H), 2.02 - 1.91 (m, 1H).
Faza 3. Izrada (1-((benziloksi)karbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
1
[0466] Smeša (1-((benziloksi)karbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (3.32 g, 6.66 mmol), bis(pinakolato)dibora (1.71 g, 6.73 mmol), KOAc (1.64 g, 16.7 mmol)) i PdCh(dppf)-CH2Cl2adukta (0.16 g, 0.2mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 20 h na 70 °C. Smeša se razblaži sa vodom (150 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 125 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-20 % etil acetat / heksani da se dobije traženi borat kao ulje (2.2 g, 69 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.90 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.58 -7.51 (m, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.32 - 7.22 (m, 5H), 6.54 (br. s., 1H), 5.16 (s, 2H), 4.48 -4.36 (m, 2H), 2.75 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.32 - 2.19 (m, 3H), 2.07 - 2.00 (m, 1H), 1.92 - 1.86 (m, 1H), 1.27 (s, 12H). LC/MS: m/e 499.20 (M+Na)<+>, 3.10 min (LCMS Postupak 7).
Faza 4. Izrada (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-1-(buta-2,3-dien-2-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((benziloksi)karbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0467]
1
[0468] Smeša (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonata (2.4 g, 4.3 mmol), (1-((benziloksi)karbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (2.05 g, 4.3 mmol), Na2CO3H2O (1.60 g, 12.9 mmol) i Pd(Ph3P)4(0.3 g, 0.26 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) i H2O (25 mL) se ispere sa azotom, zatvori i zagreva 2 h na 70 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 0-55 % etil acetat / heksani da se dobije traženi C-3 α-supstituisani cikloheksenkarboksilni estar (1.8 g, 55 %).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.91 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.58 - 7.51 (m, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 2H), 7.26 - 7.22 (m, 3H), 5.34 (br. s., 1H), 5.21 - 5.11 (m, 3H), 4.73 (s, 1H), 4.60 (br. s., 1H), 4.51 - 4.39 (m, 2H), 2.71 (d, J=17.3 Hz, 1H), 2.54 (td, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 2.25 - 0.92 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.13 - 0.85 (m, 15H). LC/MS: m/e 758.70 (M+H)<+>, 3.24 min (LCMS Postupak 7).
Faza 5. Izrada (1-((benziloksi)karbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0469]
1
[0470] Suspenzija (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((benziloksi)karbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1.6 g, 2.11 mmol), 4-(2-hloretil)tiomorfolin 1,1-dioksid hidrohlorida (1.5 g, 6.33 mmol), natrijum jodida (0.35 g, 2.32 mmol) i K3PO4(2.24 g, 10.55 mmol) u acetonuitril (20 mL) se ispere sa N2, zatvori i zagreva 15 h na 100 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (100 mL), ispere sa vodom (100 mL), suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa 25-60% EtOAc/heksan da se dobije traženi produkt (1.3 g, 67 % prinos).
<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 7.92 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.58 - 7.51 (m, 1H), 7.43 -7.36 (m, 2H), 7.31 (d, J=4.6 Hz, 2H), 7.25 (d, J=4.4 Hz, 3H), 5.35 (br. s., 1H), 5.22 - 5.12 (m, 3H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (br. s., 1H), 4.45 (q, J=10.7 Hz, 2H), 3.15 - 2.99 (m, 8H), 2.78 - 2.42 (m, 6H), 2.23 - 0.81 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.07 - 0.79 (m, 15H). LC/MS: m/e 919.60 (M+H)<+>, 3.27 min (LCMS Postupak 7).
Faza 6. Izrada benzil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0471]
1
[0472] U rastvor (1-((benziloksi)karbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1.0 g, 1.09 mmol) u MeOH (15 mL) se doda 1N NaOH (1.09 mL, 1.09 mmol). Smeša se meša 12 h na RT, neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom limunske kiseline i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Ostatak se rastvori u EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije traženi produkt (56% prinosa metil estar produkta u tragovima) bez daljeg prečišćavanja. LC/MS: m/e 815 (M+H)<+>, 4.803 min (LCMS Postupak 7). Za metil estar: LC/MS: m/e 739.55 (M+H)<+>, 4.615 min (LCMS Postupak 7).
Faza 7. Izrada benzil 1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0473]
1
[0474] U rastvor benzil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (1 eq) u DMF se na -78 °C doda KOtBu (2 eq). Dobijena smeša se meša 20 minuta nakon čega se doda Ar-X (2 eq). Nakon toga se reakcija zagreje na RT i meša u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, suši preko Na2SO4i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se ili koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja ili prečisti hromatografijom na silika gelu sa smešometil acetat/heksani kao eluentima.
Faza 8. Izrada terc-butildimetilsilil 1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0475]
[0476] U rastvor sirovog produkta (1 eq) iz Opšteg postupka F, faza 7 u DCE (3 mL) se dodaju TEA (1.6 eq), t-butildimetilsilan (2.0 eq) i paladijum acetat (0.25 eq). Smeša se ispere sa N2u toku 5 minuta i nakon toga zagreva 2-6 sati na 60 °C. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira kroz celite i silika gel ploču, ispere sa 50 % EtOAc u heksanu, a zatim sa dihlormetanom. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a dobijeni sirovi produkt se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.
1 1
Faza 9. Izrada 1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotio-morfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-l-karboksilne kiseline.
[0477]
[0478] U rastvor sirovog produkta (1 eq) iz Opšteg postupka F, faza 8 u THF (3 mL) se doda rastvor TBAF (1.6 eq) u THF. Dobijena smeša se meša 2 sata. Rastvor se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC. Frakcije koje sadrže traženi produkt se sakupe i suše da se dobije tražena 1-((ariloksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina.
Primer 37
Izrada 1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1lbR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0479]
1 2
Faza 1-6: Opšti postupak F faze 1-6
Faza 7. Izrada benzil 1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0480]
[0481] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 22% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 7, koristeći 2-fluoroizonikotinonitril kao reaktant. LC/MS m/z M+1=917.65, 4.765 min (LCMS Postupak 7).
Faza 8. Izrada terc-butildimetilsilil 1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0482]
[0483] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 8, koristeći benzil 1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS m/z M+1=941.75, 3.467 min (LCMS Postupak 7).
[0484] Faza 9.1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino) etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 10.7% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 9, koristeći terc-butildimetilsilil 1-(((4-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1lbR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 827.60 (M+H)<+>, 3.00 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.31 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.21 (dd, J=5.1, 1.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.75 (s, 1H),
1 4
4.52 (dd, J=4.3, 10.3 Hz, 1H), 4.45 (dd, J=1.8, 10.3 Hz, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 8H),3.14 - 3.06 (m, 4H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.76 (td, J=11.1, 5.4 Hz, 1H), 2.45 - 2.58 (m, 1H), 2.35 - 2.21 (d, J=8.5 Hz, 1H), 2.21 - 1.98 (m, 8H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.73 - 1.41 (m, 11H), 1.40 - 1.28 (m, 2H), 1.27 - 1.08 (m, 2H), 1.18 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.00 - 0.99 (m, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H).
Primer 38
Izrada 1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0485]
Faza 1-6: Opšti postupak F faze 1-6
Faza 7. Izrada benzil 1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0486]
1
[0487] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 35.5% prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 7, koristeći 6-fluoronikotinonitril kao reaktant. LC/MS m/z M+1=917.65, 3.136 min (LCMS Postupak 7).
Faza 8: Izrada terc-butildimetilsilil 1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0488]
[0489] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 8, koristeći benzil 1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS m/z M+1=941.70, 3.311 min (LCMS Postupak 7).
[0490] Faza 9.1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-l-karboksilna kiselina se izrađuje u 10.5 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 9, koristeći terc-butildimetilsilil 1-(((5-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 827.55 (M+H)<+>, 3.049 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 8.52 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.96 (dd, J=8.8, 2.3 Hz, 1H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.56 (dd, J= 2.8, 10.5 Hz, 1H), 4.49 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 8H), 3.14 - 3.06 (m, 3H), 2.93 (dt, J=14.2, 5.2 Hz, 1H), 2.81 - 2.71 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.35 - 2.21 (m, 1H), 2.21 - 1.97 (m, 10H), 1.92 - 1.72 (m, 5H), 1.77 (s, 3H), 1.72 - 1.39 (m, 11H), 1.39 - 1.20 (m, 1H), 1.20 - 1.07 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.02 - 0.98 (m, 1H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H).
Primer 39
Izrada 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1lbR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0491]
1
Faza 1-6: Opšti postupak F faze 1-6
Faza 7. Izrada benzil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0492]
[0493] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 7, koristeći 6-hlorpikolinonitril kao reaktant. LC/MS m/z M+1=917.65, 3.083 min (LCMS Postupak 7).
Faza 8. Izrada terc-butildimetilsilil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
1
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0494]
[0495] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 8, koristeći benzil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS m/z M+1=941.70, 3.516 min (LCMS Postupak 7).
[0496] Faza 9.1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u 17.6 % prinosa kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 9, koristeći terc-butildimetilsilil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 827.55 (M+H)<+>, 3.003 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 7.84 (dd, J=8.5, 7.3 Hz, 1H), 7.47 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.09 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H),
1
4.76 (s, 1H), 4.59 - 4.53 (m, 1H), 4.48 - 4.43 (m, 1H), 3.30 - 3.17 (m, 8H), 3.09 - 3.17 (m, 3H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.78 (td, J=10.9, 5.5 Hz, 1H), 2.65 (br. d, J=15.8 Hz, 1H), 2.37 -2.00 (m, 9H), 1.94 - 1.74 (m, 5H), 1.79 (s, 3H), 1.74 - 1.44 (m, 11H), 1.44 - 1.29 (m, 2H), 1.26 - 1.10 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.03 - 1.02 (m, 3H), 1.00 - 0.99 (m, 3H), 0.95 (s, 3H).
Primer 40
Izrada 1-(((6-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0497]
Faza 1. Izrada metil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0498]
2
[0499] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku F, faza 7, koristeći 6-hlorpikolinonitril i metil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilat umesto benzil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-en-1-karboksilata reaktanta. LC/MS m/z M+1=841.60, 3.164 min (LCMS Postupak 7).
[0500] Faza 2.1-(((6-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina se izrađuje u prinosu od 19.9% kao čvrsta supstanca, po postupku opisanom u Opštem postupku E, faza 4, koristeći metil 1-(((6-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilat kao reaktant. LC/MS: m/e 845.60 (M+H)<+>, 2.931 min (LCMS Postupak 7).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ 7.84 (dd, J=8.3, 7.3 Hz, 1H), 7.72 (dd, J=7.3, 0.8 Hz, 1H), 6.99 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.39 (br. s., 1H), 5.23 (d, J=4.3 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.50 (m, 1H), 3.25 (d, J=8.8 Hz, 5H), 3.20 (br. s., 2H), 3.17 - 3.09 (m, 3H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.77 (d, J=5.3 Hz, 1H), 2.68 (d, J=13.6 Hz,
2 1
1H), 2.41 - 1.99 (m, 9H), 1.94 - 1.68 (m, 6H), 1.79 (s, 3H), 1.68 - 1.44 (m, 9H), 1.43 - 1.30 (m, 3H), 1.29 - 1.11 (m, 2H), 1.19 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
Izrada 4-(metilsulfonil)cikloheksanona.
[0501]
[0502] U rastvor (metilsulfonil)etena (10.0 g, 94 mmol) u benzenu (50 mL) se dodaju (buta-1,3-dien-2-iloksi)trimetilsilan (14.07 g, 99 mmol) i hidrohinon (20 mg, 0.182 mmol). Smeša se degasira nekoliko puta na -78 °C pre zagrevanja. Sadržaji se zatvore i zagrevaju 48 sati na 105 °C. Reakcija se analizira pomoću NMR u CDCl3koji pokazuje da ima približno 10% vinil sulfon ostatka. Doda se nova količina (buta-1,3-dien-2-iloksi)trimetilsilana (4 mL) i zagrevanje nastavi narednih 48 sati. Ponovna analiza NMR nakon 72 h pokazuje dalje smanjenje količine vinil sulfona (~3%). Uzorak iz NMR kivete se kombinuje sa reaktivnom smešom i upari do konzistencije čvrste gume pod vakuumom na sobnoj temperaturi (~19 °C). Smeša se razblaži sa acetonom (250 mL) što za rezultat ima formiranje bistrog rastvora. Smeša se potpuno ohladi u ledenom kupatilu. Doda se 4 mL 0.25 N HCl (prethodno ohlađenog u istom ledenom kupatilu) što dovodi do formiranja mutne smeše, koja postaje bistra nakon 15 minuta mešanja na 0 °C, a nakon 10 minuta ponovo postaje mutna i ostaje zamućena sve dok se meša. 50 µL alikvota se ukloni, brzo se osuši do filma i analizira pomoću NMR u CDCl3. NMR pokazuje ~7% vinil sulfona u odnosu na traženi produkt. Rastvor acetona se filtrira kroz kratku ploču silika gela tip-H nakon ukupnog vremena reakcije od približno jedan sat i nakon toga se ispere sa još acetona. Filtrat se koncentruje na rotouparivaču na temperaturi kupatila od 19 °C. Sirovi produkt se podeli u dva dela, 7.75 g svaki, zbog prečišćavanja. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat → 100% etil acetat u heksanima; dve 330 g kolone) da se dobije 4-(metilsulfonil)cikloheksanon (16.7 g, 100% prinos) kao bela čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 3.29 (tt, J=11.0, 3.9 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.73 - 2.62 (m,
2 2
2H), 2.58 - 2.37 (m, 4H), 2.15 (qd, J=11.9, 4.5 Hz, 2H).
Izrada 2-(cis-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid i 2-(trans-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid.
[0503]
Faza 1
(pik 1) (pik 2)
(29% prinos) (43% prinos)
Faza 1. Izrada (cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanola i (trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanola.
[0504]
[0505] U rastvor 4-(metilsulfonil)cikloheksanona (1.03 g, 5.84 mmol) u THF (40 mL) se pomoću kanile na 0 °C doda alilmagnezijum bromid (7.60 mL, 7.60 mmol). Reaktivna smeša se meša 30 min na 0 °C. Reakcija se neutrališe dodavanjem zasićenog rastvora NaHCl (25 mL). Smeša se prenese u levak za razdvajanje i vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela
2
(70% etil acetat sa 1% metanol/30% heksani → 100% etil acetat sa 1% metanola; 40 g kolona) da se dobije (cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol (374 mg, 1.713 mmol, 29% prinos) kao bela čvrsta supstanca i (trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol (551 mg, 2.52 mmol, 43% prinos) kao bezbojno ulje.
(cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol:
[0506]<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.96 - 5.79 (m, 1H), 5.26 - 5.21 (m, 1H), 5.18 (ddt, J=17.1, 2.1, 1.2 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.80 (tt, J=12.5, 3.6 Hz, 1H), 2.25 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.15 - 2.07 (m, 2H), 1.97 (qd, J=13.0, 3.8 Hz, 2H), 1.88 - 1.81 (m, 2H), 1.52 - 1.42 (m, 2H);<13>C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.50, 120.02, 69.06, 62.26, 47.86, 36.85, 35.67, 21.13. struktura (cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanola se potvrdi pomoću kristalografije X-zraka.
(trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol:
[0507]<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.88 (ddt, J=17.2, 10.1, 7.4 Hz, 1H), 5.28 - 5.16 (m, 2H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.35 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.23 - 2.14 (m, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.57 - 1.46 (m, 2H);<13>C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.62, 120.19, 69.20, 62.41, 48.00, 36.98, 35.83, 21.29.
Faza 2a. Izrada 2-((cis)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehida.
[0508]
[0509] (trans)-1-Alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol (3.4 g, 15.57 mmol) se rastvori u CH2Cl2(160 mL) i MeOH (32.0 mL) u boci okruglog dna zapremine 500 mL. Doda se N-metilmorfolin-N-oksid (NMO) (2.189 g, 18.69 mmol) i smeša se ohladi na -78 °C [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org. Lett.2006, 8, 3199 - 3201]. Kroz reaktivnu smešu se u mehurićima propušta ozon sve dok je rastvor zasićen sa ozonom (prelazi u plavu boju) i nekoliko minuta nakon toga (ukupno vreme 25 min). Nakon toga se u mehurićima
2 4
kroz reaktivnu smešu propušta azot sve dok ne nestane plava boja. Nakon toga se doda dimetil sulfid (11.52 mL, 156 mmol) i reaktivna smeša se meša 16 h na 0 °C. Smeša se koncentruje pod vakuumom. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% etil acetat sa 1% metanol/50% heksani → 95% etil acetat sa 1% metanol/5% heksani; 330 g kolona) da se dobije 2-((1s,4s)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (3.31 g, 15.03 mmol, 96% prinos) kao bela čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 9.87 (t, J=1.1 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.67 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.13 - 1.98 (m, 6H), 1.50 - 1.38 (m, 2H);<13>C NMR (101MHz, HLOROFORM-d) δ 202.5, 68.9, 61.9, 54.9, 36.8, 35.9, 20.8.
Faza 2b. Izrada 2-((trans)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehida.
[0510]
[0511] (1r,4r)-1-Alil-4-(metilsulfonil)cikloheksanol (2 g, 9.16 mmol) se rastvori u CH2Cl2(80 mL) i MeOH (16.00 mL) u boci okruglog dna zapremine 500 mL. Doda se N-metilmorfolin-N-oksid (NMO) (1.288 g, 10.99 mmol) i smeša se ohladi na -78 °C [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org. Lett.2006, 8, 3199 - 3201]. Kroz reaktivnu smešu se u mehurićima propušta ozon sve dok je rastvor zasićen sa ozonom (prelazi u plavu boju) i nekoliko minuta nakon toga (ukupno vreme 25 min). Nakon toga se u mehurićima kroz reaktivnu smešu propušta azot sve dok ne nestane plava boja. Nakon toga se doda dimetil sulfid (6.78 mL, 92 mmol) i reaktivna smeša se meša 16 h na 0 °C. Smeša se koncentruje pod vakuumom. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (70% etil acetat sa 5% metanola/30% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 220 g kolona) da se dobije 2-((1r,4r)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (1.58 g, 7.17 mmol, 78% prinos) kao bela čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 9.82 (t, J=1.8 Hz, 1H), 2.99 - 2.88 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.67 (d, J=1.8 Hz, 2H), 2.20 - 2.10 (m, 2H), 2.06 - 1.98 (m, 2H), 1.74 (dtd, J=14.0, 10.6, 3.5 Hz, 2H), 1.61 - 1.50 (m, 2H);<13>C NMR (101MHz, HLOROFORM-d) δ 202.4, 70.0, 59.3, 50.3, 38.2, 34.9, 21.1.
2
Primer A1. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0512]
Faza 1. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0513]
2
[0514] Smeša etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata (65 mg, 0.097 mmol), 2-((1s,4s)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehida (47.1 mg, 0.214 mmol) i bor-2-pikolin kompleksa (22.86 mg, 0.214 mmol) u MeOH (1 mL) i sirćetnoj kiselini (0.2 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (10 mL) i zasićeni vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (4 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (10% 9:1 aceton:metanol/90% heksani → 65% 9:1 aceton:metanol/35% heksani; 24 g kolona, λ = 220 nm) da se dobije etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi- 4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (69 mg, 81% prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.15 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (ddd, J=8.5, 6.9, 2.0 Hz, 1H), 6.87 (td, J=6.1, 0.7 Hz, 1H), 6.73 (d, J=8.4 Hz, 1H),
5.37 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=6.1 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.50 - 4.44 (m, 1H), 4.43 - 4.37 (m, 1H), 4.21 - 4.10 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.84 - 2.67 (m, 4H), 2.55 (td, J=10.8, 5.5 Hz, 1H), 2.22 - 0.88 (m, 43H), 1.70 (s, 3H), 1.21 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS m/e 873.7 [(M+H)<+>, izračunato za C53H81N2O6S 873.6], tR= 4.67 min (LCMS Postupak 14).
[0515] Faza 2. Rastvor etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-
2
1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata (65 mg, 0.074 mmol) u dioksanu (1 mL) i MeOH (0.5 mL) se tretira sa natrijum hidroksidom (0.372 mL, 0.744 mmol, 2M aq). Reaktivna smeša se zagreva 3 h na 50 °C i nakon toga 6 h na 60 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 2 N rastvora HCl (200 uL). Smeša se filtrira kroz špric filter i prečisti reverzno faznom HPLC (Preparativni HPLC Postupak 1). Produkt (61.7 mg) sadrži nečistoće (ca.6%). Produkt se ponovo prečisti reverzno faznom HPLC (Preparativni HPLC Postupak 2). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču i vodena smeša se liofilizira da se dobije 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (48.4 mg, 67% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.29 (dd, J=5.3, 1.7 Hz, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.13 - 7.08 (m, 1H), 6.99 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.41 (br. s., 1H), 5.26 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.56 - 4.50 (m, 1H), 4.49 - 4.44 (m, 1H), 3.48 - 3.34 (m, 2H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.89 -2.79 (m, 1H), 2.72 (d, J=16.0 Hz, 1H), 2.32 - 1.32 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.13 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (d, J=3.7 Hz, 3H), 0.99 (d, J=3.7 Hz, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 845.6 [(M+H)<+>, izračunato za C51H77N2O6S 845.6], tR= 4.36 min (LCMS Postupak 14); HPLC (Analitički HPLC Postupak 1): tR= 18.86 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 2): tR= 20.24 min.
Primer A2. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0516]
2
Faza 1. Izrada etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0517]
[0518] Smeša etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-
2
oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata (65 mg, 0.097 mmol), 2-((1r,4r)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehida (47.1 mg, 0.214 mmol) i bor-2-pikolin kompleksa (22.86 mg, 0.214 mmol) u MeOH (1 mL) i sirćetnoj kiselini (0.2 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reakcija nije završena. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda još 2-((1r,4r)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehida (21 mg, 0.097 mmol, 1 eq) a 1 h kasnije još bor-2-pikolin kompleksa (10 mg, 0.097 mmol, 1 eq) i smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (10 mL) i zasićeni vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (4 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (10% 9:1 aceton:metanol/90% heksani → 65% 9:1 aceton:metanol/35% heksani; 24 g kolona, λ = 220 nm) da se dobije etil
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (42.4 mg, 50% prinos) kao bezbojna pena:<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.14 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.61 - 7.54 (m, 1H), 6.87 (ddd, J=7.0, 5.1, 0.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.36 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 4.43 - 4.36 (m, 1H), 4.21 - 4.10 (m, 2H), 2.99 - 2.91 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.83 - 2.76 (m, J=12.1 Hz, 1H), 2.72 -2.62 (m, 2H), 2.59 - 2.51 (m, 1H), 2.21 - 0.88 (m, 43H), 1.69 (s, 3H), 1.21 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS m/e 873.7 [(M+H)<+>, izračunato za C53H81N2O6S 873.6], tR= 4.62 min (LCMS Postupak 14).
[0519] Faza 2. Rastvor etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2-iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata (42 mg, 0.048 mmol) u dioksanu (1 mL) i MeOH (0.5 mL) se tretira sa natrijum hidroksidom (0.361 mL, 0.721 mmol, 2 M aq). Reaktivna smeša se zagreva 24 h na 60 °C. Doda se još natrijum hidroksida (0.120 mL, 0.240 mmol, 5 eq, 2 M aq) i reaktivna smeša se zagreva 8 h na 70 °C. Reakcija je završena. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 2 N HCl (400 uL). Smeša se filtrira kroz špric filter i prečisti reverzno faznom
21
HPLC (Preparativni HPLC Postupak 3). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču i vodena smeša se liofilizira da se dobije 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-((piridin-2- iloksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (31.3 mg, 67% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca.<1>H NMR (500MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.30 - 8.25 (m, 1H), 7.85 - 7.78 (m, 1H), 7.10 - 7.04 (m, 1H), 6.95 (dd, J=8.5, 0.6 Hz, 1H), 5.41 (br. s., 1H), 5.26 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.48 - 4.43 (m, 1H), 3.46 - 3.37 (m, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 3.18 - 3.10 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.71 (d, J=16.3 Hz, 1H), 2.32 - 1.32 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.16 - 1.12 (m, 2H), 1.14 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (d, J=3.7 Hz, 3H), 0.99 (d, J=3.2 Hz, 3H), 0.94 (s, 3H); LC/MS m/e 845.6 [(M+H)<+>, izračunato za C51H77N2O6S 845.6], tR= 4.33 min (LCMS Postupak 14); HPLC (Analitički HPLC Postupak 1): tR= 18.86 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 2): tR= 20.48 min.
Primer A3. Izrada (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0520]
Faza 1. Izrada ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9- il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0521]
[0522] U bocu koja sadrži (1R,3aS,5aR,5bR,7aR1aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonat (1.00 g, 1.79 mmol) se dodaju (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (1.337 g, 3.23 mmol), tribazni kalijum fosfat (1.52 g, 7.17 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-dimetoksibifenil (S-Phos) (0.055 g, 0.134 mmol) i paladijum(II) acetat (0.020 g, 0.090 mmol). Smeša se razblaži sa 1,4-dioksanom (25 mL) i vodom (6.25 mL), nakon toga se ispere sa N2i zagreva 16 h na 75 °C. Smeša se ohladi na rt. Smeša se razblaži sa vodom (100 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 75 mL). Organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (150 mL), suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% etil acetat sa 4% MeOH i 0.8% amonijum hidroksid/50% heksani → 70% etil acetat sa 4% MeOH i 0.8% amonijum hidroksid/30% heksani, 120 g kolona) da se dobije ((S)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (1.15 g, 92% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.06 - 8.00 (m, 2H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 7.49 - 7.41 (m, 2H), 5.38 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.3, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 (dd, J= 2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.52 - 4.40 (m, 2H), 4.20 (qd, J=7.2, 2.1 Hz, 2H), 2.70 (d, J=18.3 Hz, 1H), 2.56 (td, J=10.9, 5.3 Hz, 1H), 2.35 - 1.95 (m, 6H), 1.91 - 1.81 (m, 1H), 1.78 - 1.13 (m, 20H), 1.71 (s, 3H), 1.24 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); LC/MS m/e 696.7 [(M+H)<+>, izračunato za C46H65NO4696.5], tR= 2.60 min (LCMS Postupak 15).
21
Faza 2. Izrada (S)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0523]
[0524] U rastvor ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1.07 g, 1.537 mmol) u THF (10 mL) i MeOH (1 mL) se doda natrijum hidroksid (1.691 mL, 1.691 mmol). Reaktivna smeša se meša 14 h na r.t. Čvrsta supstanca se ukloni filtriranjem. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićen vodeni rastvor NaHCO3(10 mL)/voda (10 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa 5% metanola u etil acetatu (5 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL). Isprani slani rastvor se ponovo ekstrahuje sa 5% metanola u etil acetatu. Kombinovani organski slojevi se suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju da se dobije (S)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bF,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilat (0.535 g, 59% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Sirovi produkt se direktno koristi u sledećoj fazi.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.34 (t, J=3.8 Hz, 1H), 5.20 (dd, J=6.1, 1.9 Hz, 1H), 4.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.21 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.70 (s, 2H), 2.62 - 2.51 (m, 2H), 2.23 - 2.15 (m, 2H), 2.09 - 1.92 (m, 4H), 1.83 - 1.12 (m, 21H), 1.72 (s, 3H), 1.30 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 614.6 [(M+H)<+>, izračunato za C39H6NO3Na 614.5], tR= 4.28 min (LCMS Postupak 14).
Faza 3. Izrada (S)-etil 4-((1R,3aS,5aR5bR7aR11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0525]
[0526] U rastvor (S)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopentata[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilata (495 mg, 0.836 mmol) i 2-fluoronikotinonitrila (204 mg, 1.673 mmol) u THF (7 mL) i DMF (1 mL) se na 0 °C doda kalijum terc-butoksid (1.004 mL, 1.004 mmol). Kupatilo za hlađenje se ukloni i reaktivna smeša se meša 1.5 h na 20 °C. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićen vodeni rastvor NaHCO3(15 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (4 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (15 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju.
[0527] Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% rastvora 5% metanola u etil acetatu/50% heksani → 100% rastvora 5% metanola u etil acetatu; 40 g kolona) da se dobije (S)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b, 8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
21
il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (344 mg, 59% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.34 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.21 (dd, J=6.1, 1.6 Hz, 1H), 4.75 (d, J=2.3 Hz, 1H), 4.62 (dd, J=2.1, 1.4 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.25 -4.15 (m, 2H), 2.78 - 2.68 (m, 1H), 2.56 (td, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 2.35 - 1.89 (m, 6H), 1.79 -1.11 (m, 21H), 1.71 (s, 3H), 1.27 (t, J=6.8 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 694.7 [(M+H)<+>, izračunato za C45H64N3O3694.5], tR= 4.52 min (LCMS Postupak 14).
Faza 4. Izrada (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4 ((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilata.
[0528]
[0529] (S)-Etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1- en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (150 mg, 0.216 mmol) i 2-((1s,4s)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (76 mg, 0.346 mmol) se rastvore u MeOH (1.6 mL) i sirćetnoj kiselini (0.32 mL). Doda se bor-2-pikolin kompleks (37.0 mg, 0.346 mmol) i smeša se meša 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (3 mL) i rastvor natrijum karbonata (2 mL).
21
Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat sa 5% metanola/70% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 24 g kolona, 25 min gradijent) da se dobije (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilat (134.6 mg, 69% prinos) kao bela pena:<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.34 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=7.6, 1.9 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.20 (dd, J=6.2, 1.6 Hz, 1H), 4.74 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.24 - 4.15 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.83 - 2.67 (m, 4H), 2.55 (td, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.31 - 0.88 (m, 37H), 1.70 (s, 3H), 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 898.7 [(M+H)<+>, izračunato za C54H80N3O6S 898.6], tR= 4.44 min (LCMS Postupak 14).
[0530] Faza 5. U rastvor (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata (123 mg, 0.137 mmol) u dioksanu (4 mL) i MeOH (2 mL) se doda litijum hidroksid (2 mL, 2.00 mmol, 1 M aq). Smeša se zagreva 12.5 h na 60 °C.
Pomoću LC/MS se detektuje samo mala količina početnog materijala (LCMS Postupak 16). Reakcija se zaustavi u ovoj tački zbog moguće hidrolize nitrilne grupa u odgovarajući amid. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 6 N rastvora HCl (250 mL). Smeša se nakon toga filtrira kroz špric sa filterom i prečisti reverzno faznom HPLC (5 injektovanja) (Preparativni HPLC Postupak 4). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču i vodena smeša se liofilizira da se dobije (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (51.6 mg, 38% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.42 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=7.6, 1.9 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=7.6, 5.1 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.27 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.68 - 4.61 (m, 2H), 3.47 - 3.33 (m, 2H), 3.08 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H),
21
2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.74 (d, J=15.6 Hz, 1H), 2.38 - 1.13 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870.6 [(M+H)<+>, izračunato za C52H76N3O6S 870.5], tR= 1.31 min (LCMS Postupak 16); HPLC (Analitički HPLC Postupak 3): tR= 12.19 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 4): tR
= 11.64 min.
Alternativni postupak za izradu Primera A3
Izrada (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilne kiseline.
[0531]
Faza 1. Izrada ((S)-1-(etoksikarbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,lla-pentametil-1-
21
(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0532]
[0533] ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (7.63 g, 10.96 mmol) i 2-((1s,4s)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (3.86 g, 17.54 mmol) se rastvore u MeOH (30 mL) i sirćetnoj kiselini (6 mL). Doda se bor-2-pikolin kompleks (1.876 g, 17.54 mmol) i smeša se meša 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (50 mL) i rastvor natrijum karbonata (50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (7 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (25 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat sa 5% metanola/70% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 330 g kolona, 30 min gradijent) da se dobije ((S)-1-(etoksikarbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS, 11bR, 13aR, 13bR)- 3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (8.81 g, 89% prinos) kao bela čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.06 - 8.00 (m, 2H), 7.61 - 7.54 (m, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 5.37 (br. s., 1H), 5.21 (dd, J=6.2, 1.6 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.47 -4.41 (m, 2H), 4.24 - 4.16 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.83 - 2.65 (m, 4H), 2.55 (td, J=10.9, 5.6 Hz,
21
1H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 2.20 - 1.03 (m, 36H), 1.70 (s, 3H), 1.24 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.99 - 0.87 (m, 12H); LC/MS (ESI) m/e 900.4 [(M+H)<+>, izračunato za C55H82NO7S 900.6], tR= 4.55 min (LCMS Postupak 14).
Faza 2. Izrada (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0534]
[0535] U rastvor ((S)-1-(etoksikarbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (8.00 g, 8.89 mmol) u 1,4-dioksanu (160 mL) i metanolu (80 mL) se u posudi pod pritiskom doda litijum hidroksid (89 mL, 89 mmol). Posuda se zatvori i smeša se zagreva 16 h na 65 °C (unutrašnja temperatura). Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 4 N rastvora HCl (15.5 mL, 7 eq). Smeša se nakon toga koncentruje. Sirovi produkt se prenese u dioksan (40 mL)/metanol (20 mL)/voda (5 mL) i zakiseli dodavanjem TFA (u kapima dok ne postane kiseo). Suspenzija postaje rastvor. Rastvor sadrži neke suspendovane čvrste materije. Propusti se kroz tanku ploču peska a nakon toga filtrira kroz špric sa filterom. Produkt se nakon toga prečisti reverzno faznom MPLC preko C18 Redi Sep Gold kolone (150 g) na Biotage (Preparativni MPLC Postupak 1, 6 injektovanja). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču i vodena smeša se liofilizira da se dobije (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-
22
(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (6.57 g, 84% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca. Produkt se nakon toga dalje suši pod vakuumom u vakuum desikatoru.<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.54 (br. s., 1H), 8.02 (br. s., 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.22 (d, J=3.1 Hz, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 2.59 (d, J=15.3 Hz, 1H), 2.47 - 2.34 (m, 1H), 2.26 -1.06 (m, 36H), 1.71 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 768.4 [(M+H)<+>, izračunato za C46H74NO6S 768.5], tR= 3.85 min. (LCMS Postupak 14).
[0536] Faza 3. U rastvor (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enekarboksilne kiseline, TFA (5.92 g, 6.71 mmol) u THF (80 mL) se na 0 °C doda natrijum hidrid (2.147 g, 53.7 mmol). Kupatilo za hlađenje se ukloni i reaktivna smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi. Smeša se ohladi na 0 °C i pomoću kanile se doda 2-fluoronikotinonitril (3.28 g, 26.8 mmol) u THF (10 mL). Reaktivna smeša se meša 1.5 h na 0 °C. Reakcija se neutrališe dodavanjem sirćetne kiseline (3.84 mL, 67.1 mmol, 10 eq). Rastvor se direktno injektuje na kolonu i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (5% metanola u CH2Cl2da eluira visoko Rf materijal a nakona toga 12% metanola u CH2Cl2da produkt eluira. Dobija se 6.70 g produkta. Produkt se nakon toga dalje prečisti reverzno faznom MPLC preko C18 Redi Sep Gold kolone (150 g) na Biotage (Preparativni MPLC Postupak 2, 5 injektovanja). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču a vodena smeša se liofilizira da se dobije (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (5.06 g, 5.14 mmol) kao bela amorfna čvrsta supstanca. Produkt (TFA so) se nakon toga rastvori u smeši MeCN/H2O (60/40) i polako propušta kroz AG 1-x2 smolu jonskih izmenjivača oblika hlorida (Bio-Rad 100-200 eša cat # 140-1241, prethodno ispranu sa 90% acetonitril/10% voda). Koristi se 140 grama smole. Frakcije koje sadrže produkt se kombinuju i organski rastvarač se ukloni na rotacionom isparivaču a voda se zamrzne i prenese u liofilizator da se dobije (S)-1-(((3-cijanopiridin-2il)oksi)metil)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, HCl (4.26 g, 66% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.42 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=7.6, 1.9 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=7.6, 5.1 Hz, 1H), 5.43 (br. s., 1H), 5.27 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 2H), 3.45 - 3.33 (m, 2H), 3.13 (td, J=10.8, 5.1 Hz, 1H), 3.08 - 3.00 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 2.74 (d, J=15.1 Hz, 1H), 2.61 - 2.53 (m, 1H), 2.38 -1.13 (m, 36H), 1.76 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870.3 [(M+H)<+>, izračunato za C52H76N3O6S 870.5], tR= 4.56 min (LCMS Postupak 14); HPLC (HPLC Postupak 3): tR= 13.13 min; HPLC (HPLC Postupak 4): tR= 12.46 min.
Primer A4. Izrada (S)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0537]
Faza 1. Izrada (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0538]
[0539] (S)-Etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1- en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (150 mg, 0.216 mmol) i 2-((1r,4r)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (76 mg, 0.346 mmol) se rastvore u MeOH (1.6 mL) i sirćetnoj kiselini (0.32 mL). Doda se bor-2-pikolin kompleks (37.0 mg, 0.346 mmol) i smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat sa 5% metanola/70% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 24 g kolona) da se dobije (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilat (131 mg, 68% prinos) kao bela pena:<1>H NMR (400MHz,
22
HLOROFORM-d) δ 8.33 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 6.98 (dd, J=7.4, 5.1 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.24 - 4.15 (m, 2H), 2.99 - 2.89 (m, 1H), 2.88 (s, 3H), 2.83 - 2.61 (m, 3H), 2.55 (td, J=10.8, 5.5 Hz, 1H), 2.31 - 1.02 (m, 37H), 1.69 (s, 3H), 1.27 (q, J=7.2 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 6H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS m/e 898.7 [(M+H)<+>, izračunato za C54H79N3O6S 898.6], tR= 4.44 min (LCMS Postupak 14).
[0540] Faza 2. U rastvor (S)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata (131 mg, 0.146 mmol) u dioksanu (4 mL) i MeOH (2 mL) se doda litijum hidroksid (2 mL, 2.00 mmol, 1 M aq). Smeša se zagreva 10.5 h na 60 °C.
Pomoću LC/MS se detektuje samo mala količina početnog materijala (LCMS Postupak 16). Reakcija se zaustavi u ovoj tački. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 6 N rastvora HCl (250 mL). Smeša se nakon toga filtriraju kroz špric sa filterom i prečisti reverzno faznom HPLC (5 injektovanja) (Preparativni HPLC Postupak 4). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču a vodena smeša se liofilizira da se dobije (S)- 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilna kiselina, TFA (69 mg, 48% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.43 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (dd, J=7.5, 5.3 Hz, 1H), 5.44 (br. s., 1H), 5.27 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.69 - 4.61 (m, 2H), 3.43 - 3.29 (m, 2H), 3.20 - 3.10 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.91 - 2.81 (m, J=9.0 Hz, 1H), 2.74 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.40 - 1.33 (m, 37H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870.7 [(M+H)<+>, izračunato za C52H75N3O6S 870.5], tR= 2.37 min (LCMS Postupak 15); HPLC (Analitički HPLC Postupak 3): tR= 16.00 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 4): tR= 13.90 min.
Primer A5. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0541]
r mer
Faza 1. Izrada ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
22
[0543] U bocu koja sadrži (1R,3aS,5aR,5bR,7aR11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonat (2.2 g, 3.94 mmol) se dodaju (S)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (2.94 g, 7.10 mmol), tribazni kalijum fosfat (3.35 g, 15.78 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-dimetoksibifenil (S-Phos) (0.121 g, 0.296 mmol) i paladijum(II) acetat (0.044 g,
0.197 mmol). Smeša se razblaži sa 1,4-dioksanom (60 mL) i vodom (15 mL), ispere sa N2i zagreva 16 h na 75 °C. Smeša se ohladi na rt. Smeša se razblaži sa vodom (150 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 100 mL). Organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% etil acetat sa 4% MeOH i 0.8% amonijum hidroksid/50% heksani → 70% etil acetat sa 4% MeOH i 0.8% amonijum hidroksid/30% heksani, 220 g kolona) da se dobije ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2- il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (2.47 g, 90% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM- d) δ 8.05 - 8.00 (m, 2H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.45 (t, J=7.7 Hz, 2H), 5.38 (br. s., 1H), 5.25 - 5.19 (m, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.46 (q, J=10.8 Hz, 2H), 4.19 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.74 - 2.66 (m, 1H), 2.56 (td, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 2.29 - 1.96 (m, 6H), 1.87 (dt, J=12.9, 6.2 Hz, 1H), 1.78 - 1.11 (m, 20H), 1.71 (s, 3H), 1.24 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.98 (br. s., 3H), 0.97 (br. s., 3H), 0.95 (s, 3H), 0.89 (s, 3H); LC/MS m/e 696.7 [(M+H)<+>,
22
izračunato za C46H65NO4696.5], tR= 2.55 min (LCMS Postupak 15).
Faza 2. Izrada (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8.11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13, 13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0544]
[0545] U rastvor ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (1.20 g, 1.724 mmol u THF (10 mL) i MeOH (1 mL) se doda natrijum hidroksid (1.897 mL, 1.897 mmol). Reaktivna smeša se meša 14 h na r.t. Čvrsta supstanca se ukloni filtriranjem. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićen vodeni rastvor NaHCO3(10 mL)/voda (10 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa 5% metanola u etil acetatu (5 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL). Isprani slani rastvor se ponovo ekstrahuje sa 5% metanola u etil acetatu. Kombinovani organski slojevi se suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju da se dobije (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilat (450 mg, 44% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Sirovi produkt se direktno koristi u sledećoj fazi.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.20 (dd, J=6.0, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.20 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.70 (s, 2H), 2.62 - 2.51 (m, 2H), 2.21 - 2.14 (m, 2H), 2.10 - 1.94 (m, 4H), 1.82 - 1.12 (m, 21H), 1.71 (s, 3H), 1.29 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.09
22
(s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.89 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 614.6 [(M+H)<+>, izračunato za C39H61NO3Na 614.5], tR= 4.27 min (LCMS Postupak 14).
Faza 3. Izrada (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0546]
[0547] U rastvor (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-arnino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopentata[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilata (412 mg, 0.696 mmol) i 2-fluoronikotinonitrila (170 mg, 1.392 mmol) u THF (7 mL) i DMF (1 mL) se na 0 °C doda kalijum terc-butoksid (0.835 mL, 0.835 mmol). Kupatilo za hlađenje se ukloni i reaktivna smeša se meša 1.5 h na 20 °C. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićen vodeni rastvor NaHCO3(15 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (4 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (15 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% rastvora 5% metanola u etil acetatu/50% heksani → 100% rastvora 5% metanola u etil acetatu; 40 g kolona) da se dobije (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (365 mg, 0.526 mmol, 76% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.34 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=7.4, 1.9 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.38 (br. s.,
22
1H), 5.21 (dd, J=6.3, 1.8 Hz, 1H), 4.74 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 (dd, J=2.1, 1.4 Hz, 1H), 4.60 -4.52 (m, 2H), 4.19 (qd, J=7.1, 2.5 Hz, 2H), 2.73 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.56 (td, J=10.9, 5.4 Hz, 1H), 1.78 - 1.13 (m, 21H), 2.27 - 1.87 (m, 6H), 1.71 (s, 3H), 1.26 (t, J=6.8 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 694.7 [(M+H)<+>, izračunato za C45H64N3O3694.5], tR= 4.51 min (LCMS Postupak 14).
Faza 4. Izrada (R)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0548]
[0549] (R)-Etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1- en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (150 mg, 0.216 mmol) i 2-((1s,4s)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (76 mg, 0.346 mmol) se rastvore u MeOH (1.4 mL) i sirćetnoj kiselini (0.28 mL). Doda se bor-2-pikolin kompleks (37.0 mg, 0.346 mmol) i smeša se meša 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (3 mL) i rastvor natrijum karbonata (2 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat sa 5% metanola/70% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 24 g kolona, 25 min gradijent) da se dobije (R)-etil 1-
22
(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilat (130 mg, 67% prinos) kao bela pena:<1>H NMR (500MHz, HLOROFORM-d) δ 8.34 (dd, J=5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=7.5, 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.38 (br. s., 1H), 5.23 - 5.19 (m, 1H), 4.75 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.59 - 4.52 (m, 2H), 4.19 (dtt, J=10.8, 7.2, 3.8 Hz, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.83 -2.70 (m, 4H), 2.55 (td, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.28 - 0.89 (m, 37H), 1.70 (s, 3H), 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 898.7 [(M+H)<+>, izračunato za C54H80N3O6S 898.6], tR= 4.43 min (LCMS Postupak 14).
[0550] Faza 5. U rastvor (R)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)- 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata (124 mg, 0.138 mmol) u dioksanu (4 mL) i MeOH (2 mL) se doda litijum hidroksid (2 mL, 2.00 mmol, 1 M aq). Smeša se zagreva 10 h na 60 °C. Pomoću LC/MS se detektuje pojavljivanje malo početnog materijala (LCMS Postupak 16) zajedno sa formiranjem sporednog produkta amida zbog hidrolize nitrila. Reakcija se zaustavi u ovoj tački. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 6 N rastvora HCl (250 mL). Smeša se nakon toga filtriraju kroz špric sa filterom i prečisti reverzno faznom HPLC (5 injektovanja) (Preparativni HPLC Postupak 4). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču a vodena smeša se liofilizira da se dobije (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (48.1 mg, 34% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (500MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.42 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=7.6, 1.9 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=7.5, 5.2 Hz, 1H), 5.43 (br. s., 1H), 5.27 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.68 - 4.59 (m, 2H), 3.46 - 3.33 (m, 2H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.74 (d, J=16.5 Hz, 1H), 2.34 - 1.13 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870.7 [(M+H)<+>, izračunato za C52H76N3O6S 870.5], tR= 1.24 min (LCMS Postupak 16); HPLC (Analitički HPLC Postupak 3): tR= 12.24 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 4): tR=
2
11.77 min.
Primer A6. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0551]
Primer A6
Faza 1. Izrada (R)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0552]
2 1
[0553] (R)-Etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (150 mg, 0.216 mmol) i 2-((1r,4r)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)acetaldehid (76 mg, 0.346 mmol) se rastvore u MeOH (1.6 mL) i sirćetnoj kiselini (0.32 mL). Doda se bor-2-pikolin kompleks (37.0 mg, 0.346 mmol) i smeša se meša 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša se prenese u levak za razdvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju. Produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (30% etil acetat sa 5% metanola/70% heksani → 100% etil acetat sa 5% metanola; 24 g kolona) da se dobije (R)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilat (131 mg, 68% prinos) kao bela pena:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.33 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 7.87 (dd, J=7.4, 1.9 Hz, 1H), 6.98 (dd, J=7.4, 5.1 Hz, 1H), 5.37 (br. s., 1H), 5.22 - 5.17 (m, 1H), 4.71 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 3H), 4.23 - 4.14 (m, 2H), 2.99 - 2.90 (m, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.82 - 2.61 (m, 3H), 2.54 (td, J=10.8, 5.5 Hz, 1H), 2.23 - 1.02 (m, 37H), 1.68 (s, 3H), 1.26 (q, J=7.3 Hz, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 898.7 [(M+H)<+>, izračunato za C54H79N3O6S 898.6], tR= 4.43 min (LCMS Postupak 14).
[0554] Faza 2. U rastvor (R)-etil 1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-
2 2
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilata (107 mg, 0.119 mmol) u dioksanu (4 mL) i MeOH (2 mL) se doda litijum hidroksid (2 mL, 2.00 mmol, 1 M aq). Smeša se zagreva 10.5 h na 60 °C.
Pomoću LC/MS se detektuje samo mala količina početnog materijala (LCMS Postupak 16). Reakcija se zaustavi u ovoj tački. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i delimično neutrališe dodavanjem 6 N rastvora HCl (250 µL). Smeša se nakon toga filtriraju kroz špric sa filterom i prečisti reverzno faznom HPLC (5 injektovanja) (Preparativni HPLC Postupak 4). Organski rastvarač se upari na rotacionom isparivaču a vodena smeša se liofilizira da se dobije (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroksi-4-(metilsulfonil)cikloheksil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-karboksilna kiselina, TFA (58 mg, 49% prinos) kao bela amorfna čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, Sirćetna kiselina-d4) δ 8.43 (dd, J=5.1, 1.9 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.12 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.44 (br. s., 1H), 5.27 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 2H), 3.43 - 3.29 (m, 2H), 3.20 - 3.09 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.75 (d, J=15.3 Hz, 1H), 2.32 - 1.33 (m, 37H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870.6 [(M+H)<+>, izračunato za C52H75N3O6S 870.5], tR= 2.30 min (LCMS Postupak 15); HPLC (Analitički HPLC Postupak 3): tR= 14.96 min; HPLC (Analitički HPLC Postupak 4): tR= 14.64 min.
Primer A7 i Primer A8. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A7) i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline (Primer A8).
[0555]
2
Faza 1. Izrada ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata.
[0556]
2 4
[0557] U bocu pod osrednjim pritiskom zapremine 150 mL se kombinuju (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonat (1.5 g, 2.69 mmol), (R)-(1-(etoksikarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (1.259 g, 3.04 mmol) i Buchwald-ov pre-katalizator (0.127 g, 0.161 mmol) u THF (25 mL). U reaktivnu smešu se doda vodeni rastvor 0.5 M K3PO4(13.45 mL, 6.72 mmol). Dobijeni braon rastvor se isprska sa N2(g) i meša na 72 °C u toku noći. Nakon 16h, reakcija se ostavi da se ohladi na rt, razblaži sa EtOAc (50 mL) i ispere sa 1.5M K3PO4(50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa 2 x 50 mL EtOAc. Kombinovani organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje do sive pene. Sirovi materijal se rastvori u DCM i nanese na kolonu silika gela (SiO2, 80g Isco kartridž, uz eluiranje sa 0%B do 50%B preko 4 zapremina kolone i zadržava na 50%B dok ne eluira sav produkt, rastvarač A= DCM, rastvarač B = 90:10 DCM:MeOH) i suši pod vakuumom da se dobije ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a- amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoat (1.8 g, 2.59 mmol, 96 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z 696.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.589 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.06 -7.96 (m, 2H), 7.63 - 7.53 (m, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 5.36 (br. s., 1H), 5.20 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.44 (q, J=10.8 Hz, 2H), 4.18 (qd, J=7.1, 1.0 Hz, 2H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.55 (td, J=10.9, 5.3 Hz, 1H), 2.26 - 2.13 (m, 3H), 2.08 (td, J=12.7, 5.7 Hz, 2H), 2.00 (dd, J=17.0, 6.5 Hz, 1H), 1.85 (dt, J=13.1, 6.4 Hz, 1H), 1.78 - 1.71 (m, 2H), 1.70 (s, 3H), 1.67 - 1.56 (m, 6H), 1.55 - 1.49 (m, 4H), 1.48 - 1.38 (m, 6H), 1.37 -1.26 (m, 3H), 1.24 - 1.19 (m, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (br. s., 3H), 0.94 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
2
Faza 2. Izrada (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0558]
[0559] U rastvor ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(etoksikarbonil)cikloheks-3-en-1-il)metil benzoata (0.692 g, 0.994 mmol) u THF (10 mL) i MeOH (1 mL) se doda natrijum hidroksid (0.994 mL, 0.994 mmol) i dobijena smeša se meša na rt. Nakon 3h, reakcija se koncentruje do sušenja a materijal se rastvori u smeši DCM:MeOH i prečisti flash hromatografijom na koloni (SiO2, 40g Isco kartridž, uz eluiranje sa 95:5 DCM:MeOH) i suši pod vakuumom da se dobije (R)-etil 4-((1R3aS,5aR5bR,7aR11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilat (427 mg, 0.721 mmol, 72.6 % prinos) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LCMS: m/z 592.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.705 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3.-METANOL-d4) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.14 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.72 (br. s., 1H), 4.60 (br. s., 1H), 4.22 - 4.00 (m, 2H), 3.74 - 3.53 (m, 2H), 2.60 - 2.42 (m, 2H), 2.13 (br. s., 2H), 2.06 - 1.87 (m, 4H), 1.78 -1.70 (m, 1H), 1.67 (br. s., 5H), 1.63 - 1.51 (m, 6H), 1.43 (br. s., 7H), 1.32 (br. s., 1H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 4H), 1.06 (br. s., 4H), 0.97 (br. s., 3H), 0.92 (br. s., 3H), 0.90 (br. s., 3H), 0.85 (br. s., 3H).
2
Faza 3. Izrada (R)-etil4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata.
[0560]
[0561] (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1- en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(hidroksimetil)cikloheks-3-enkarboksilat (420 mg, 0.710 mmol) i 3-cijano-2-fluoropiridin (130 mg, 1.064 mmol) se kombinuju u DMF (3 mL) i THF (3 mL) ohlađenom na 0°C. Žuta žitka smesa se tretira sa rastvorom kalijum tercbutoksida (0.781 mL, 0.781 mmol) u THF. Reakcija postaje skoro potpuno homogena; kupatilo za hlađenje se ukloni i reakcija se meša na rt. Nakon 3.5h, tu se još uvek nalazi mala količina početnog materijala; zato se u reakciju doda još 3-cijano-2-fluoropiridina (43.3 mg, 0.355 mmol) i kalijum terc-butoksida (0.142 mL, 0.142 mmol) i meša na RT još 1h. Reakcija se razblaži sa EtOAc i ispere sa 0.5N rastvora HCl (25 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa 2 x 50 mL EtOAc. Kombinovani organski sloj se ispere sa zasićenim rastvorom NaHCO3, slanim rastvorom, suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje do braon paste. Sirovi materijal se prečisti flash hromatografijom na koloni (SiO2, 40 g Isco kartridž, uz eluiranje sa smešom 95:5 DCM:MeOH) i suši pod vakuumom da se dobije (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat (426
2
mg, 0.614 mmol, 87 % prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z 694.9 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.517 min (LCMS Postupak 16).
Faza 4. Izrada (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((tercbutildimetilsilil)oksi)-2-hidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata, TFA.
[0562]
[0563] U rastvor (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata (48.5 mg, 0.070 mmol) u acetonuitrilu (0.5 mL) i 1,4-dioksanu (0.5 mL) se doda terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etar (0.094 mL, 0.489 mmol) i smeša se meša na 100 °C u toku noći. Nakon 19h, reakcija se ostavi da se ohladi na RT i prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC koristeći preparativni HPLC postupak 8 i suši pod vakuumom da se dobije (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-hidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilat, TFA (22.8 mg, 0.023 mmol, 32.7 % prinosa, 53.5% prinosa na bazi povraćenog početnog materijala) i povraćeni početni materijal (21.9 mg), oba kao prozirno čvrsto staklo. LCMS: m/z 882.4 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.849 min (LCMS Postupak 16).
2
[0564] Faza 5. U rastvor (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-hidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata, TFA (22.8 mg, 0.023 mmol) u 2-Me-THF (1 mL) i H2O (0.3 mL) se doda rastvor tetrabutilamonijum hidroksida (0.105 mL, 0.160 mmol) i smeša se meša 4h na RT ali LC/MS pokazuje da nema reakcije. Reakcija se nakon toga meša na 50 °C. Nakon 14 h, LC/MS pokazuje da je preostalo približno 60% početnog materijala; zatim se smeša meša na 50°C drugu noć. Nakon 40 h, reaktivna smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC koristeći preparativni HPLC postupak 8 a frakcije produkta se suše pod vakuumom da se dobiju dva produkta, oba kao čvrsto staklo.
Primer A8 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-Sa,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (4.0 mg, 4.36 µmol, 19.04 % prinos). LCMS: m/z 758.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.219 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.47 - 8.36 (m, 1H), 8.25 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (br. s., 1H), 4.06 - 3.90 (m, 1H), 3.66 (d, J=4.2 Hz, 2H), 3.23 - 3.11 (m, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.80 - 2.61 (m, 2H), 2.48 - 1.90 (m, 10H), 1.84 (d, J=6.6 Hz, 1H), 1.71 (s, 4H), 1.69 - 1.21 (m, 15H), 1.15 (d, J=12.7 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
Primer A7 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-cyan- opiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (6.5 mg, 7.46 µmol, 32.6 % prinos). LCMS: m/z 740.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.289 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.6, 1.7 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.6, 5.1 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 3.99 (dd, J=8.6, 3.9 Hz, 1H), 3.66 (d, J=4.2 Hz, 2H), 3.18 (dd, J=12.1, 3.5 Hz, 1H), 2.98 (dd, J=11.9, 8.9 Hz, 1H), 2.78 - 2.56 (m, 2H), 2.35 - 2.08 (m, 4H), 2.08 - 1.87 (m, 6H), 1.75 (br. s., 1H), 1.72 (s, 3H), 1.70 - 1.53 (m, 6H), 1.51 - 1.22 (m, 8H), 1.21 - 1.12 (m, 1H), 1.08 (s, 3H),
2
1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
Primer A9 i Primer A10. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline (Primer A9) i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline (Primer A10).
[0565]
[0566] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 7.1% i 16.1% prinosa, tim redom, od (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
24
il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, osim što se (R)-(-)-metil glicidil etar koristi umesto terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4. Primer A10 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina (5.6 mg, 7.25 µmol, 16.13 % prinos). LCMS: m/e 772.6 (M+H<+>), 1.284 min (LCMS Postupak 16).
Primer A9 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (2.9 mg, 3.17 µmol, 7.06 % prinos). LCMS: m/z754.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.345 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.07 (dd, J=9.9, 4.0 Hz, 1H), 3.54 - 3.44 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.15 (dd, J=11.9, 3.3 Hz, 1H), 2.93 (t, J=11.1 Hz, 1H), 2.75 - 2.59 (m, 2H), 2.31 - 2.08 (m, 4H), 2.07 - 1.89 (m, 6H), 1.79 -1.73 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.67 (br. s., 1H), 1.65 - 1.57 (m, 3H), 1.56 - 1.39 (m, 6H), 1.37 -1.22 (m, 4H), 1.21 - 1.13 (m, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
Primer A11 i Primer A12. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A11) i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A12).
[0567]
[0568] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 26.9% i 6.1% prinosa, tim redom, od (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2- il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a- pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, osim što se (S)-(+)-metil glicidil etar koristi umesto terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4. Primer A12 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (2.2 mg, 2.359 µmol, 6.11 % prinos). LCMS: m/z 772.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.279 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.41 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J=4.8, 2.1 Hz, 1H), 7.08 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.11 (t, J=4.0 Hz, 1H), 3.69 - 3.63 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.27 - 3.20 (m, 1H), 3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.72 (d, J=15.9 Hz, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.26 (br. s., 1H), 2.22 - 2.08 (m, 4H), 2.07 - 1.95 (m, 4H), 1.88 - 1.74 (m, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.62 1.41 (m, 8H), 1.41 - 1.22 (m, 4H), 1.16 (br. s., 1H), 1.09 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
Primer A11 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroksi-3-metoksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (9.5 mg, 10.40 µmol, 26.9 % prinos). LCMS: m/z 754.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.347 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.1, 2.0 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.11 (t, J=4.0 Hz, 1H), 3.70 - 3.54 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.27 - 3.20 (m, 1H), 3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.64 (d, J=15.9 Hz, 1H), 2.60 - 2.51 (m, 1H), 2.20 (d, J=16.6 Hz, 3H), 2.11 - 1.89 (m, 7H), 1.82 - 1.74 (m, 2H), 1.72 (s, 3H), 1.70 - 1.63 (m, 2H), 1.63 - 1.22 (m, 12H), 1.20 - 1.11 (m, 1H), 1.09 (s, 3H), 1.05 (s, 2H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).<13>C NMR (101MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 178.3, 164.5, 152.27 - 152.01, 148.9, 147.7, 144.1, 139.7, 122.7, 121.9, 117.7, 112.5, 97.5, 78.5, 76.6, 72.6, 71.5, 65.1, 60.2, 53.8, 50.0, 46.8, 46.6, 45.3, 42.8, 41.4, 38.6, 38.3, 36.9, 34.2, 32.6, 31.1, 30.2, 30.1, 28.1, 27.4, 26.8, 25.9, 22.0, 21.7, 20.3, 19.2, 17.0, 16.0, 15.0.
Primer A13 i Primer A14. Izrada (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksi-2-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A13) i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksi-2-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A14).
[0569]
24
[0570] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 26.0% i 13.6% prinosa, tim redom, od (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2- il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a- pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, osim što se (2R)-(-)-2-metilglicidil 4-notrobenzoat koristi umesto terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4.
Primer A14 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksi-2-metil-propil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (4.8 mg, 5.91 µmol, 13.57 % prinos). LCMS: m/z 772.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.242 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.41 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J=4.9, 2.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 3.69 (s, 2H), 2.97 (d, J=12.2 Hz, 1H), 2.79 - 2.68 (m, 1H), 2.68 - 2.59 (m, 1H), 2.34 - 2.23 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 3H), 2.08 - 1.95 (m, 4H), 1.90 - 1.80 (m, 1H), 1.79 - 1.74 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.71 - 1.66 (m, 1H), 1.66 - 1.53 (m, 4H), 1.52 - 1.33 (m, 6H), 1.30 (br. s., 2H), 1.23 (s, 3H), 1.20 - 1.09 (m, 2H), 1.06 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). Primer A13 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksi-2-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (8.7 mg, 0.011 mmol, 26.0 % prinos). LC-MS: m/z 754.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.309 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.6, 5.1 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 3.69 (s, 2H), 2.97 (d, J=12.0 Hz, 1H), 2.72 - 2.59 (m, 2H), 2.30 - 2.15 (m, 3H), 2.12 - 1.99 (m, 5H), 1.98 - 1.88 (m, 2H), 1.81 - 1.74 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.71 - 1.66 (m, 1H), 1.66 - 1.53 (m, 5H), 1.52 - 1.33 (m, 7H), 1.31 - 1.25 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.19 - 1.09 (m, 2H), 1.06 (s, 3H), 1.04 (s, 2H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).<13>C NMR (101MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 178.3, 164.5, 152.2, 148.9, 147.8, 144.1, 139.7, 122.7, 121.9, 117.7, 112.4, 97.5, 78.6, 72.2, 71.6, 71.5, 69.6, 53.8, 50.0, 46.3, 45.3, 42.9, 42.6, 41.4, 38.6, 38.3, 36.9, 34.2, 32.1, 31.1, 30.2, 30.08 - 30.04, 28.5, 28.1, 27.7, 26.9, 26.0, 23.5, 22.0, 21.7, 20.3, 19.4, 17.0, 16.0, 15.0.
Primer A15 i Primer A16. Izrada (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A15) i 2-(((R)-1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)nikotinske kiseline, TFA (Primer A16).
[0571]
24
[0572] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 19.5% i 17.9% prinosa, tim redom, od (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2- il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a- pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, osim što se (R)-metilglicidat koristi umesto tercbutildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4.
Primer A16 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: 2-(((R)-1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)cikloheks-3-en-1-il)metoksi)nikotinska kiselina (6.0 mg, 7.37 µmol, 17.94 % prinos).
LCMS: m/z 773.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.224 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.41 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J=4.9, 2.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.44 (dd, J=10.0, 4.2 Hz, 1H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 3.06 (t, J=11.0 Hz, 1H), 2.77 -2.62 (m, 2H), 2.26 (br. s., 1H), 2.22 - 2.05 (m, 5H), 2.04 - 1.94 (m, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.69 - 1.57 (m, 4H), 1.57 - 1.40 (m, 5H), 1.39 - 1.22 (m, 4H), 1.22 - 1.12 (m,
24
1H), 1.10 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
Primer A15 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen- 9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina (6.3 mg, 8.02 µmol, 19.52 % prinos). LCMS: m/z 754.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.289 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 (d, J=5.4 Hz, 1H), 3.06 (t, J=10.8 Hz, 1H), 2.65 (d, J=19.1 Hz, 2H), 2.20 (d, J=15.9 Hz, 3H), 2.14 - 2.05 (m, 2H), 2.05 - 1.87 (m, 5H), 1.82 - 1.69 (m, 5H), 1.68 - 1.57 (m, 4H), 1.56 - 1.41 (m, 5H), 1.39 - 1.22 (m, 4H), 1.21 - 1.12 (m, 1H), 1.10 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
Primer A17 i Primer A18. Izrada (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA (Primer A17) i (R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-(etoksikarbonil)cikloheks-1-en-1-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-3a-il)amino)-2-hidroksipropanoatne kiseline, TFA (Primer A18).
[0573]
[0574] Naslovljena jedinjenja se izrađuju u 19.5% i 16.0% prinosa, tim redom, od (R)-etil 4-
24
((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2- il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, osim što se (S)-metilglicidat koristi umesto tercbutildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4.
Primer A18 je prvi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-(((3-karbamoilpiridin-2-il)oksi)metil)-4-(etoksikarbonil)cikloheks-1-en-1-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-3a-il)amino)-2-hidroksipropanoatna kiselina, TFA (5.7 mg, 6.11 µmol, 15.98 % prinos). LCMS: m/z 772.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.222 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.41 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J=4.9, 2.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.20 (d, J=6.4 Hz, 2H), 2.71 (d, J=13.4 Hz, 2H), 2.36 - 2.23 (m, 1H), 2.16 (d, J=14.9 Hz, 2H), 2.13 - 2.06 (m, 2H), 2.05 - 1.95 (m, 4H), 1.89 - 1.80 (m, 1H), 1.79 - 1.74 (m, 1H), 1.72 (s, 3H), 1.68 (br. s., 2H), 1.65 -1.57 (m, 2H), 1.57 - 1.50 (m, 2H), 1.49 - 1.39 (m, 4H), 1.39 - 1.22 (m, 4H), 1.12 (s, 3H), 1.08 (d, J=9.5 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
Primer A17 je drugi od dva izdvojena produkta koji eluira iz preparativne HPLC kolone: (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-karboksi-2-hidroksietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilna kiselina, TFA (6.8 mg, 7.44 µmol, 19.46 % prinos). LCMS: m/z 754.6(M+H<+>), vreme zadržavanja 1.284 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H),
24
7.94 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.6, 5.1 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (br. s., 1H), 4.71 (br. s., 1H), 4.41 (br. s., 1H), 3.20 (d, J=5.1 Hz, 2H), 2.70 (br. s., 1H), 2.64 (d, J=18.8 Hz, 1H), 2.20 (d, J=16.1 Hz, 3H), 2.12 - 1.89 (m, 7H), 1.75 (br. s., 2H), 1.72 (s, 3H), 1.70 - 1.51 (m, 6H), 1.51 - 1.39 (m, 4H), 1.38 - 1.22 (m, 4H), 1.12 (s, 3H), 1.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
Primer A19
Izrada (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-karboksi-2-hidroksipropil)amino)- 5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro- 1H-ciklopenta[a]chiysen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline.
[0575]
[0576] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje u 19.4% prinosa od (R)-etil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)- 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)cikloheks-3-enkarboksilata po istom postupku kako je opisano za izradu (R)-1-(((3-cijanopiridin-2-il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-okta-dekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline, TFA i (R)-1-(((3-karbamoilpiridin-2- il)oksi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroksipropil)amino)-
24
5a,5b,8,8,11a- pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-enkarboksilne kiseline; osim što se metil 2-metilglicidat koristi umesto tercbutildimetilsilil (R)-(-)-glicidil etra u Fazi 4. LCMS: m/z 768.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.295 min (LCMS Postupak 16).<1>H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:METANOL-d4) δ 8.33 (dd, J=5.0, 1.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.5, 5.0 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (br. s., 1H), 4.71 (br. s., 1H), 3.08 - 2.89 (m, 1H), 2.80 -2.57 (m, 2H), 2.33 - 2.09 (m, 4H), 2.08 - 1.87 (m, 6H), 1.82 - 1.74 (m, 1H), 1.72 (s, 3H), 1.70 - 1.57 (m, 4H), 1.56 - 1.41 (m, 8H), 1.40 - 1.22 (m, 4H), 1.12 (s, 1H), 1.09 (br. s., 1.5H), 1.07 (br. s., 1.5H), 1.05 (s, 3H), 1.01 (s, 1H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (br. s., 3H).
Izrada 8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-ona.
[0577]
Faza 2
KHMDS
THF, -7 dioksan, KOAc, 70 °C
faza 3 faza 3
Faza 1: Izrada 8-((trimetilsilil)oksi)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-ona.
[0578]
[0579] U Chemglass posudu pod pritiskom sa navojnim zatvaračem zapremine 350 mL se
2
dodaju 3-metilendihidrofuran-2(3H)-on (4.31 g, 43.9 mmol), (buta-1,3-dien-2-iloksi)trimetilsilan (7.50 g, 52.7 mmol) i benzen (100 mL). Doda se hidrohinon (0.726 g, 6.59 mmol), a nakon toga se rastvor ispere sa azotom, posuda zatvori i zagreva 20 h na 123 °C. U posudu se nakon toga doda još 2.4 ekvivalenta (buta-1,3-dien-2-iloksi)trimetilsilana (15.0 g, 105.4 mmol) i smeša se zagreva još 60 h na 123 °C. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije približno 19 g žutog ulja. Sirova smeša se sa minimumom DCM i heksanima prenese na heksanima prethodno uravnoteženi Isco kartridž sa 330 g silika gela. Gradijent eluacije je 100% heksani do 11:1 heksani:EtOAc preko 2 zapremina kolone, zatim zadržavanje na 11:1 heks:EtOAc 3 zapremina kolone, nakon toga gradijent od 5:1 heks:EtOAc preko 2 zapremine kolone, zatim zadržavanje na 5:1 heks:EtOAc za 6 zapremina kolone. Koncentracijom kombinovanih frakcija koje sadrže traženi materijal se dobija produkt kao bela čvrsta supstanca: 7.50 g (71.0 % prinos).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.85 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.40 - 4.23 (m, 2H), 2.47 (dd, J=16.6, 2.2 Hz, 1H), 2.19 - 2.10 (m, 4H), 2.06 (d, J=3.4 Hz, 1H), 2.04 - 1.99 (m, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 1H), 0.22 (s, 9H).
Faza 2. Izrada 2-oksaspiro[4.5]dekan-1,8-diona.
[0580]
[0581] 8-((trimetilsilil)oksi)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-on (7.50 g, 31.2 mmol) se kombinuje sa THF (100 mL) i hlorovodoničnom kiselinom, 0.05M vodenim rastvorom (3.12 mL, 0.156 mmol). Smeša se meša 18 h na RT. Reaktivna smeša se nakon toga koncentruje pod vakuumom do ostatka. Ostatak se prenese u EtOAc (200 mL) i ispere sa zasićenim NaHCO3(50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organska faza se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Sirova smeša se u minimumu DCM prenese na heksanima prethodno uravnoteženi Isco kartridž sa 330 g silika gela. Gradijent eluacije 100% heksani do 1:1 heksani:EtOAc preko 10 zapremina kolone, zadržavanje 1:1 heksani:EtOAc za 6 zapremina kolone. Postiže se delimično razdvajanje dva materijala. Slične frakcije se kobinuju i stave sa strane a izmešane frakcije se ponovo prečiste hromatografijom na sličan način. Traženi materijal se glavni produkt reakcije i predstavlja drugi od dva materijala koji
2 1
eluiraju iz kolone silika gela. Traženi materijal se dobija kao bela čvrsta supstanca: 4.14 g (79.0 % prinos).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.40 (t, J=7.1 Hz, 2H), 2.87 - 2.70 (m, 2H), 2.44 - 2.29 (m, 4H), 2.24 (ddd, J=13.6, 8.3, 5.5 Hz, 2H), 1.96 (dt, J=13.6, 6.5 Hz, 2H).
Faza 3. Izrada 1-okso-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-8-il trifluorometansulfonata.
[0582]
[0583] U boci okruglog dna zapremine 250 mL opremljenoj sa magnetnom mešalicom i gumenom pregradom se kombinuju 2-oksaspiro[4.5]dekan-1,8-dion (4.13 g, 24.6 mmol) i N,N-bis(trifluorometilsulfonil)anilin (10.1 g, 28.2 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (100 mL). Rastvor se ohladi na -78 °C u kupatilu sa smešom suvi led/aceton. U ohlađeni rastvor se u kapima u toku 15 min dodaje kalijum heksametildisilazid, 0.5M u toluenu (56.5 mL, 28.2 mmol). Smeša se meša ukupno 4 h na -78 °C kada se polako tretira sa 100 mL zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida. Smeša se meša 15 min na RT i koncentruje pod vakuumom da se ukloni najveći deo THF, a zatim se u ostatak doda etil acetat (300 mL). Dobijena smeša se mućka i faze se razdvoje. Organska faza se ispere sa vodom (2 x 100 mL) i sa slanim rastvorom (50mL). Organski deo se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovo žuto ulje. Sirovi ostatak se prenese kao ulje na heksanima prethodno uravnoteženi Isco kartridž sa 220 g silika gela, boca se ispere sa minimumom DCM i ispirak se isto tako doda u kolonu. Gradijent eluacije 100% heksani do 3:1 heksani:EtOAc preko 3 zapremine kolone, nakon toga zadržavanje 3:1 heks:EtOAc za 3 zapremine kolone, zatim 2:1 heks:EtOAc za 3 zapremine kolone. Slične frakcije produkta se kombinuju i koncentruju pod vakuumom da se dobije traženi materijal kao bledo žuto ulje: 6.44 g (87.0 % prinos).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.86 -5.76 (m, 1H), 4.44 - 4.29 (m, 2H), 2.63 (dd, J=17.7, 2.8 Hz, 1H), 2.59 - 2.38 (m, 2H), 2.30 -2.16 (m, 3H), 2.16 - 2.04 (m, 1H), 1.86 (dt, J=13.7, 2.9 Hz, 1H).
[0584] Faza 4. U boci okruglog dna zapremine 250 mL opremljenoj sa refluksnim
2 2
kondenzatorom se kombinuju 1-okso-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-8-il trifluorometansulfonat (6.43 g, 21.4 mmol), kalijum acetat (5.25 g, 53.5 mmol), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-oktametil-2,2’-bi(1,3,2-dioksaborolan) (5.71 g, 22.5 mmol) i PdCh(dppf).CH2Cl2(0.529 g, 0.642 mmol) u bezvodnom 1,4-dioksanu (100 mL). Smeša se ispere sa azotom i 5 h zagreva na 70 °C.
Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom do približno 25 mL ukupne zapremine i razblaži sa etil acetatom (300 mL) i vodom (150 mL). Smeša se mućka i faze se razdvoje. Organska supstanca se ponovo ispere sa vodom (100 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (100 mL). Organska faza se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom do tamno crvenog ostatka. Sirova smeša se rastvori u minimumu DCM i prenese na heksanima prethodno uravnoteženi Isco kartridž sa 220 g silika gela. Gradijent eluacije 100% heksani do 20% etil acetat u heksanima preko 10 zapremina kolone, nakon toga zadržavanje 20% etil acetat u heksanima za 6 zapremina kolone, nakon toga gradijent do 15% etil acetat u heksanima za 2 zapremina kolone, nakon toga zadržavanje sa 25% etil acetata u heksanima za 6 zapremina kolone. Frakcije produkta se kombinuju i koncentruju pod vakuumom da se dobije traženi materijal kao čvrsta bela pena = 4.94 g (83.0% prinos).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.60 - 6.49 (m, 1H), 4.39 - 4.22 (m, 2H), 2.50 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.40 (dd, J=18.1, 3.9 Hz, 1H), 2.21 - 2.01 (m, 4H), 1.85 (td, J=12.3, 5.5 Hz, 1H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.29 (s, 12H).
Primer A20. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0585]
2
Faza 1. Izrada 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-ona.
[0586]
2 4
[0587] U Chemglass boci pod pritiskom zapremine 150 mL sa magnetnom mešalicom se kombinuje (1R,3aS,5aR5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il trifluorometansulfonat (2.00 g, 2.78 mmol) sa 8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-onom (0.851 g, 3.06 mmol) i Buchwald prekatalizatorom 13 (0.131 g, 0.167 mmol). Posuda se zatvori sa gumenom pregradom. U pregradu se ubaci igla i posuda se iterativno isprazni a nakon toga četiri puta prečisti sa azotom u vakuumskoj pećnici na RT u toku 15 min. U azotom prečišćenu reaktivnu bocu se doda anhidrovani THF (40 mL) i sveže izrađeni, azotom poprskan vodeni 0.5 M rastvor K3PO4(13.9 mL, 6.95 mmol). Posuda se zatvori i dobijeni žuti rastvor se meša 20.5 h na 80 °C. Nakon 30 min zagrevanja smeša tamni do veoma tamne zelene boje a nakon 20.5 h zagrevanja postaje skoro bezbojna dvofazna smeša. Smeša se razblaži sa EtOAc (150 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL x 2) a nakon toga sa slanim rastvorom (50 mL). Kombinovani vodeni sloj se ekstrahuje sa 2 x 100 mL hlorforma a organske faze se kombinuju, suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju do bledo žute čvrste pene. Sirovi žuti materijal se u minimumu DCM prenese na heksanima prethodno uravnoteženi Isco kartridž sa 80 g silika gela. Gradijent eluacije 100% heksani do 1:1 heksani:EtOAc preko 2 zapremine kolone, zadržavanje 1:1 heksani:EtOAc za 3 zapremine kolone, nakon toga gradijent 1:1 heksani:EtOAc do 1:4 heks:EtOAc preko 8 zapremina kolone, nakon toga zadržavanje 1:4 heksani:EtOAc za 10 zapremina kolone. Frakcije produkta se kombinuju i koncentruju pod vakuumom da se dobije belčasta staklasta čvrsta supstanca: 1.63 g (81.0% prinos). LCMS m/z = 721.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 2.404 min (LCMS Postupak 17).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 5.41 - 5.30 (m, 1H), 5.22 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.70 (br. s., 1H), 4.42 - 4.27 (m, 2H), 3.19 - 2.97 (m, 8H), 2.78 - 2.53 (m, 4H), 2.52 - 2.32 (m, 2H), 2.29 - 2.10 (m, 4H), 2.04 - 1.75 (m, 6H),
2
1.69 (s, 4H), 1.66 - 1.54 (m, 4H), 1.53 (br. s., 1H), 1.45 (br. s., 4H), 1.40 - 1.32 (m, 2H), 1.32 - 1.13 (m, 5H), 1.10 (s, 6H), 1.04 (br. s., 1H), 0.99 (br. s., 5H), 0.95 (d, J=7.3 Hz, 3H), 0.88 (s, 3H).
Faza 2. Izrada kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0588]
[0589] U boci okruglog dna zapremine 250 mL opremljenu sa refluksnim kondenzatorom se u smeši MeOH (20 mL) i THF (20 mL) kombinuje 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-on (1.61 g, 2.23 mmol) sa kalijum karbonatom (1.54 g, 11.2 mmol). Dobijena smeša se zagreje na 70°C u uljanom kupatilu u toku 2.5 h. Rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobije čvrsti braon ostatak koji se prenese u sledeću fazu bez dalje manipulacije. LCMS m/z = 739.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.852 min (LCMS Postupak 18).
Faza 3. Izrada izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-
2
il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0590]
[0591] U boci okruglog dna zapremine 250 mL opremljenoj sa refluksnim kondenzatorom se u smeši acetonitrila (20 mL) i DMF (20 mL) kombinuje sirova reaktivna smeša iz Faze 2 koja sadrži kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-enkarboksilat (1.73 g, 2.23 mmol) sa kalijum karbonatom (1.543 g, 11.17 mmol). U smešu se doda 2-jodopropan (4.46 mL, 44.7 mmol). Dobijena suspenzija se meša 2.5 h na 80 °C. Smeša se koncentruje pod vakuumom do ostatka. Dodaju se etil acetat (120 mL) i voda (100 mL) i smeša se mućka a faze se razdvoje. Organska faza se ispere još dva puta sa vodom (2 x 50 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (20 mL). Svetlo žuta organska supstanca se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom do ostatka. Materijal sa DCM se prenese na Isco kartridž sa 120 g silika gela koji je prethodno uravnotežen sa DCM. Gradijent eluacije 100% DCM do 19:1 DCM:MeOH preko 6 zapremina kolone, zadržavanje 19:1 DCM:MeOH za 8 zapremina kolone.
Kombinovane frakcije produkta se koncentruju pod vakuumom da se dobije bež pena: 1.55 g (89% prinosa preko 2 faze). LCMS m/z = 781.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 2.873 min (LCMS Postupak 19).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.6 Hz, 1H), 5.04 (dt, J=12.4, 6.1 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.73 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.16 - 2.97 (m, 7H), 2.75 - 2.54 (m, 4H), 2.54 - 2.42 (m, 1H), 2.28 - 2.16 (m, 1H), 2.13 (dd, J=12.1, 6.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.91 (m, 4H), 1.89 - 1.75 (m, 4H), 1.71 (s, 3H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.62 - 1.49 (m, 5H), 1.49 - 1.39 (m, 4H), 1.39 - 1.29 (m, 3H), 1.29 - 1.22 (m, 7H), 1.22 - 1.11 (m, 2H), 1.08 (s, 6H), 1.01 - 0.95 (m, 6H), 0.94 - 0.90 (m, 3H), 0.88 (s, 3H).
2
Faza 4. Izrada izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((metilsulfonil)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0592]
[0593] Izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-enkarboksilat (0.800 g, 1.02 mmol) se rastvori u smeši trietilamina (5 mL) i DCM (5 mL). Bistra smeša se ohladi u ledenom kupatilu i u nju se polako dodaje rastvor metansulfonskog anhidrida (0.446 g, 2.56 mmol) u DCM (3 mL). Bezbojni rastvor dobija svetlo žutu boja koja prelazi u tamno narandžastu i konačno u braon u toku reakcije. Braon smeša se meša 4 h na 0 °C a nakon toga se bez zagrevanja koncentruje pod vakuumom do ostatka. Sirovi ostatak se razblaži sa EtOAc (100 mL) i ispere sa 5% vodenim rastvorom NaHCO3(2 x 20 mL), vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska supstanca se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije crvenkasto/braon pena. Sirovi materijal se prenese u minimumu DCM na Isco kartridž sa 80 g silika gela koji je prethodno uravnotežen sa heksanima. Gradijent eluacije 100% heksani do 3:2 heksani:aceton preko 3 zapremine kolone, zadržavanje 3:2 heksani:aceton za 10 zapremina kolone. Frakcije traženog produkta se kombinuju i koncentruju pod vakuumom da se dobije žuta pena: 667 mg (76.0% prinos). LCMS m/z = 859.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 3.160 min (LCMS Postupak 19).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.4 Hz, 1H), 5.04 (dt, J=12.2, 6.3 Hz, 1H),
2
4.75 (br. s., 1H), 4.63 (br. s., 1H), 4.29 (t, J=7.0 Hz, 1H), 3.72 (t, J=6.5 Hz, 1H), 3.25 (s, 1H), 3.16 (s, 1H), 3.08 (br. s., 6H), 3.01 (s, 2H), 2.83 (s, 1H), 2.77 - 2.54 (m, 4H), 2.49 (br. s., 1H), 2.30 - 2.09 (m, 3H), 2.09 - 1.95 (m, 4H), 1.95 - 1.76 (m, 4H), 1.72 (br. s., 3H), 1.66 (dd, J=14.3, 7.2 Hz, 3H), 1.61 - 1.50 (m, 5H), 1.50 - 1.38 (m, 5H), 1.33 (t, J=13.1 Hz, 3H), 1.29 -1.21 (m, 7H), 1.18 - 1.03 (m, 6H), 1.00 (br. s., 3H), 0.97 (d, J=7.3 Hz, 3H), 0.93 (d, J=5.4 Hz, 3H), 0.88 (s, 3H).
Faza 5. Izrada izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0594]
[0595] U boci od 1 drama sa PTFE zavrtnjem se u anhidrovanom DMF (0.5 mL) kombinuju piridin-2-ol (0.0190 g, 0.204 mmol) i izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((metilsulfonil)oksi)etil)cikloheks-3-enkarboksilat (0.0250 g, 0.0290 mmol). U smešu se uz mešanje doda NaHMDS, 1.0M u THF (0.175 mL, 0.175 mmol). Dobijena svetlo žuta smeša se zagreje na 50 °C i meša 3 dana. Sirova smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC (Preparativni HPLC Postupak 6). Na ovaj način se izdvoji željeni materijal (0.00940 g, 29.7 % prinos) kao bela čvrsta TFA so. LCMS m/z = 858.6 (M+H<+>),
2
vreme zadržavanja 1.627 min (LCMS Postupak 16).
[0596] Faza 6. U boci od 1 drama sa PTFE zavrtnjem se kombinuje izopropil 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-enkarboksilat, TFA so (0.00940 g, 8.65 µmol) sa litijum hidroksidom, 1.0M voden rastvor (0.087 mL, 0.087 mmol) i smešom THF (0.3 mL) i MeOH (0.3 mL). Dobijena smeša se meša 48 h na 75 °C. Sirova smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC (preparativna HPLC Postupak 6). Frakcije koje sadrže željeni materijal se koncentruju pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela staklasta čvrsta supstanca (0.0035 g 33% prinos). LCMS m/z = 816.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 2.182 min (LCMS Postupak 17).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.07 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 6.90 (t, J=6.1 Hz, 1H), 6.74 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.34 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.24 (br. s., 3H), 3.21 - 3.13 (m, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 4H), 2.84 - 2.72 (m, 1H), 2.60 (d, J=15.4 Hz, 1H), 2.26 - 1.96 (m, 10H), 1.87 - 1.70 (m, 6H), 1.69 -1.59 (m, 3H), 1.57 (br. s., 2H), 1.53 - 1.43 (m, 5H), 1.40 (br. s., 1H), 1.39 - 1.22 (m, 2H), 1.15 (s, 3H), 1.11 (br. s., 1H), 1.08 (s, 3H), 1.04 - 0.99 (m, 1H), 0.97 (br. s., 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
Primer A21. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((5-metilizotiazol-3-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0597]
2
[0598] Naslovljeno jedinjenje se dobija po istim postupcima koji se koriste za izradu 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline, osim što se 5-metilizotiazol-3-ol (0.023 g, 0.204 mmol) koristi umesto piridin-2-ola u Fazi 5. Na ovaj način se dobija naslovljeno jedinjenje kao bela staklasta čvrsta supstanca (0.0027 g, 8.3 % kombinovani prinos za Faze 5 i 6). LCMS m/z = 836.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 2.394 min (LCMS Postupak 17).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 5.32 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.36 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.75 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.27 - 3.12 (m, 8H), 3.12 - 2.94 (m, 5H), 2.78 (td, J=10.8, 4.4 Hz, 1H), 2.58 (d, J=16.1 Hz, 1H), 2.25 - 1.95 (m, 11H), 1.92 - 1.70 (m, 8H), 1.70 - 1.59 (m, 3H), 1.59 - 1.39 (m, 9H), 1.39 - 1.24 (m, 3H), 1.22 (s, 1H), 1.18 - 1.04 (m, 7H), 0.97 (d, J=2.7 Hz, 3H), 0.92 (br. s., 3H), 0.90 (s, 3H).
Primer A22. Izrada 1-(2-((3-cijanopiridin-2-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0599]
2 1
Faza 1. Izrada kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0600]
[0601] U boci okruglog dna zapremine 50 mL opremljenoj sa refluksnim kondenzatorom se u smeši MeOH (10 mL) i THF (15 mL) kombinuje 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-on (0.700 g, 0.971 mmol) sa kalijum
2 2
karbonatom (1.34 g, 9.71 mmol). Dobijena smeša se zagreje do refluksa u uljanom kupatilu na 85 °C u toku 24 h. Smeša se ostavi da se ohladi na RT, nakon toga se doda DCM i dobijena smeša se filtrira da se uklone bele čvrste supstance. Rastvarač se ukloni pod vakuumom a ostatak se suši u vakuumskoj pećnici na 50 °C u toku noći da se dobije traženi materijal kao beli prašak (0.940 g, 125% prinos). Povraćena masa ukazuje da je materijal približno 80% čist sa ostatkom u obliku viška kaliijumovih soli. Ovaj materijal se direktno koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. LCMS m/z = 739.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.852 min (LCMS Postupak 17).
[0602] Faza 2. U sirovi praškasti produkt iz Faze 1 koji sadrži približno 80% težinski kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-enkarboksilat (0.025 g, 0.026 mmol) se dodaju 2-fluoronikotinonitril (0.016 g, 0.129 mmol), anhidrovani DMF (0.4 mL) i anhidrovani THF (0.3 mL) da se dobije blago zamućena žuta smeša. U smešu se doda kalijum terc-butoksid, 1.0M rastvor u THF (0.103 mL, 0.103 mmol). Smeša se meša 2 h na RT i nakon toga se dodaju nove količine 6-fluoropikolinonitrila (0.032 g, 0.258 mmol) i kalijum terc-butoksida, 1.0M rastvor u THF (0.206 mL, 0.206 mmol) i još DMF (0.2 mL) i smeša se meša još 1 h. Sirova smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC (Preparativni HPLC Postupak 7). Ovako dobijeno naslovljeno jedinjenje je u obliku bledo žutog praška (0.0086 g, 25% prinos) kao TFA so. LCMS m/z = 841.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 2.289 min (LCMS Postupak 17).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.34 (dd, J=4.2, 1.0 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=8.1, 1.7 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=7.1, 5.1 Hz, 1H), 5.40 - 5.28 (m, 1H), 5.17 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (br. s., 1H), 4.71 (br. s., 1H), 4.39 -4.31 (m, 1H), 3.28 - 3.12 (m, 7H), 3.09 (br. s., 2H), 3.01 (br. s., 2H), 2.82 (br. s., 1H), 2.61 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.25 - 1.96 (m, 10H), 1.86 (d, J=10.5 Hz, 1H), 1.78 - 1.68 (m, 5H), 1.67 -1.53 (m, 5H), 1.53 - 1.38 (m, 6H), 1.38 - 1.24 (m, 3H), 1.19 - 1.03 (m, 8H), 1.03 - 0.82 (m, 9H).
Primer A23. Izrada 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline.
2
Faza 1. Izrada kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-en-1-karboksilata.
[0604]
[0605] U boci okruglog dna zapremine 50mL opremljenoj sa refluksnim kondenzatorom se u smeši MeOH (10 mL) i THF (15 mL) kombinuje
2 4
8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-2-oksaspiro[4.5]dec-7-en-1-on (0.700 g, 0.971 mmol) sa kalijum karbonatom (1.34 g, 9.71 mmol). Dobijena smeša se zagreje do refluksa na 85 °C u uljanom kupatilu u toku 24 h.
Smeša se ostavi da se ohladi na RT, nakon toga se doda DCM i dobijeni ostatak filtrira da se uklone bele čvrste supstance. Rastvarač se ukloni pod vakuumom a ostatak se suši u vakuumskoj pećnici na 50 °C u toku noći da se dobije traženi materijal kao beli prašak (0.940 g, 125% prinos).0.9155 g ovog materijala se rastvori uz mešanje u 10 mL smeše 9: 1 DCM:MeOH i ova suspenzija (soli se nisu rastvorile) se prenese na kratku ploču silika gela zapremine 40 mL u levku za sukciju staklenim fritom zapremine 60 mL. Materijal se eluira sa 400 mL smeše 9: 1 DCM:MeOH. Veći deo oranž boje povezane sa nečistim produktom se zaustavi na silika gelu. Koncentrisanjem pod vakuumom se dobija ružičasto/bela čvrsta supstanca koja se ostavi nekoliko sati u vakuumskoj pećnici na 45 °C. Tako se dobija željeni materijal kao beli prašak (0.5082 g, 69.4% prinos). LCMS m/z = 739.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.978 min (LCMS Postupak 21).
[0606] Faza 2. U prečišćeni prdukt Faze 1 kalijum 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-hidroksietil)cikloheks-3-enkarboksilat (0.025 g, 0.032 mmol) se doda 2-hlorizonikotinska kiselina (0.025 g, 0.161 mmol) a nakon toga anhidrovani DMF (0.35 mL). U smešu se doda kalijum terc-butoksid, 1.0M rastvor u THF (0.322 mL, 0.322 mmol). Smeša postaje svetlo žuta i zamućena zbog suspendovanja čvrste supstance nakon dodavanja baze. Smeša se meša 70 h na RT. Reaktivna smeša se neutrališe dodavanjem 3 kapi sirćetne kiseline. Nakon toga se doda 0.5 mL MeOH i smeša se filtrira. Sirova smeša se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC jednim injektovanjem (Preparativni HPLC Postupak 8). Na ovaj način se dobija naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (0.0069 g, 18% prinos) TFA so. LCMS m/z = 860.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.559 min (LCMS Postupak 20).
Primer A24. Izrada 1-(2-((4-cijanopiridin-2-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-
2
5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0607]
[0608] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-fluoroizonikotinonitril (0.020 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao svetelo žuta čvrsta supstanca (0.0133 g, 36.0 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 841.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.689 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.28 (d, J=5.4 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=5.1, 1.2 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 2H), 3.28 - 3.04 (m, 9H), 3.04 - 2.96 (m, 2H), 2.86 -2.74 (m, 1H), 2.59 (d, J=16.4 Hz, 1H), 2.24 - 1.95 (m, 11H), 1.89 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.68 - 1.42 (m, 10H), 1.42 - 1.29 (m, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.11 (br. s., 2H), 1.08 (s, 4H), 0.96 (d, J=2.4 Hz, 3H), 0.92 (d, J=2.9 Hz, 3H), 0.90 (s, 3H).
Primer A25. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-
2
dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(pirimidin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0609]
[0610] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-bromopirimidin (0.026 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0056 g, 14.2 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 817.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.547 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.50 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.02 (t, J=4.8 Hz, 1H), 5.35 (dd, J=14.7, 2.9 Hz, 1H), 5.25 - 5.14 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.50 - 4.44 (m, 1H), 4.38 - 4.31 (m, 1H), 3.27 - 2.98 (m, 10H), 2.84 - 2.75 (m, 1H), 2.64 - 2.58 (m, 1H), 2.25 - 1.96 (m, 10H), 1.89 - 1.75 (m, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.69 - 1.53 (m, 5H), 1.53 - 1.25 (m, 8H), 1.15 (d, J=2.9 Hz, 3H), 1.11 (br. s., 2H), 1.08 (s, 3H), 1.03 - 0.84 (m, 9H).
Primer A26. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-
2
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((4-metilpirimidin-2-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0611]
[0612] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-hlor-4-metilpirimidin (0.021 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0056 g, 14.2 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 831.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.550 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.21 (d, J=6.1 Hz, 1H), 6.52 (d, J=5.9 Hz, 1H), 5.40 - 5.34 (m, 1H), 5.23 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 -4.27 (m, 2H), 3.30 - 3.05 (m, 10H), 3.01 (d, J=3.4 Hz, 2H), 2.81 (td, J=11.2, 4.9 Hz, 1H), 2.49 - 2.33 (m, 2H), 2.27 - 1.98 (m, 10H), 1.93 - 1.81 (m, 2H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.72 (s, 4H), 1.69 - 1.40 (m, 12H), 1.38 - 1.34 (m, 1H), 1.21 - 1.03 (m, 9H), 1.02 - 0.86 (m, 8H).
Primer A27. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((4-metoksipirimidin-2-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2
[0614] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-hlor-4-metoksipirimidin (0.023 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0116 g, 28.8 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 847.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.525 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 7.28 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.62 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.40 - 5.33 (m, 1H), 5.23 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 -4.29 (m, 2H), 3.27 - 2.97 (m, 12H), 2.81 (td, J=11.2, 4.9 Hz, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 1H), 2.28 -1.98 (m, 10H), 1.92 - 1.81 (m, 2H), 1.80 - 1.73 (m, 2H), 1.73 (s, 3H), 1.70 - 1.40 (m, 12H), 1.38 - 1.34 (m, 1H), 1.16 (s, 3H), 1.15 - 1.09 (m, 2H), 1.08 (s, 3H), 1.00 (d, J=3.2 Hz, 3H), 0.96 (d, J=7.6 Hz, 3H), 0.91 (s, 3H).
Primer A28. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((3-metilpiridin-2-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2
[0616] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-fluoro-3-metilpiridin (0.018 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0262 g, 74.7 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 830.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.707 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 7.89 (dd, J=5.1, 1.2 Hz, 0.35H), 7.44 (dd, J=7.1, 1.0 Hz, 0.35H), 7.42 - 7.37 (m, 0.65H), 7.22 (dd, J=6.5, 1.3 Hz, 0.65H), 6.81 (dd, J=7.0, 5.3 Hz, 0.35H), 6.29 (t, J=6.7 Hz, 0.65H), 5.39 - 5.30 (m, 1H), 5.23 (d, J=4.9 Hz, 0.65H), 5.18 (d, J=4.6 Hz, 0.35H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 - 4.29 (m, 2H), 3.27 - 2.98 (m, 12H), 2.81 (td, J=11.1, 4.6 Hz, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 1H), 2.30 - 2.07 (m, 10H), 2.07 - 1.94 (m, 4H), 1.92 - 1.73 (m, 4H), 1.72 (s, 3H), 1.69 - 1.40 (m, 12H), 1.38 - 1.34 (m, 1H), 1.20 - 1.05 (m, 9H), 1.02 - 0.86 (m, 9H).
Primer A29. Izrada 1-(2-((3-hlorpiridin-2-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2
[0618] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 3-hlor-2-fluoropiridin (0.021 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0156 g, 42.7 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 850.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.770 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 7.99 (dd, J=4.9, 1.7 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=7.7, 1.6 Hz, 1H), 6.86 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.45 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.27 - 2.98 (m, 12H), 2.80 (td, J=11.1, 4.8 Hz, 1H), 2.60 (d, J=15.7 Hz, 1H), 2.25 - 1.95 (m, 10H), 1.90 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.68 - 1.42 (m, 10H), 1.40 (br. s., 1H), 1.38 - 1.29 (m, 2H), 1.29 - 1.23 (m, 1H), 1.15 (s, 3H), 1.12 (d, J=5.4 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 0.99 - 0.84 (m, 9H).
Primer A30. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((3-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2 1
[0620] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-hlor-3-(trifluorometil)piridin (0.029 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0020 g, 4.9 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 884.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.810 min (LCMS Postupak 20).
Primer A31. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-(pirazin-2-iloksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0621]
2 2
[0622] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-hlorpirazin (0.018 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje se izdvoji kao bela čvrsta supstanca (0.0102 g, 28.2 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 817.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.592 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.16 - 8.08 (m, 2H), 8.05 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (br. s., 1H), 4.44 (t, J=6.2 Hz, 2H), 3.27 - 3.13 (m, 7H), 3.13 - 3.05 (m, 3H), 3.05 - 2.95 (m, 2H), 2.86 -2.74 (m, 1H), 2.60 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.25 - 1.96 (m, 10H), 1.89 - 1.81 (m, 1H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.73 (s, 4H), 1.65 - 1.42 (m, 10H), 1.40 (br. s., 1H), 1.38 - 1.24 (m, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.11 (br. s., 2H), 1.08 (s, 3H), 1.01 - 0.86 (m, 9H).
Primer A32. Izrada 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)-1-(2-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)etil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
[0623]
2
[0624] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-bromo-4-metoksipiridin (0.030 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje je jedno od dva jedinjenja izdvojena iz ove reakcije. Materijal se dobija kao bela čvrsta supstanca (0.0068 g, 18.3 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 846.7 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.335 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 7.97 (d, J=6.6 Hz, 1H), 6.76 (dd, J=6.6, 2.2 Hz, 1H), 6.59 (d, J=2.0 Hz, 1H), 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.42 (t, J=6.7 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.27 - 3.04 (m, 10H), 3.01 (d, J=3.4 Hz, 2H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 3H), 2.15 - 1.96 (m, 8H), 1.85 (td, J=12.2, 3.3 Hz, 1H), 1.81 - 1.73 (m, 2H), 1.72 (s, 4H), 1.66 - 1.38 (m, 10H), 1.38 - 1.28 (m, 2H), 1.15 (s, 3H), 1.12 (br. s., 2H), 1.07 (s, 3H), 1.01 - 0.85 (m, 9H).
Primer A33. Izrada 1-(2-((4-bromopiridin-2-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2 4
[0626] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta ta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2-bromo-4-metoksipiridin (0.030 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje je jedno od dva jedinjenja izdvojena iz ove reakcije. Materijal se dobija kao bela čvrsta supstanca (0.0045 g, 12.2 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 894.5 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.672 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.09 (d, J=5.9 Hz, 1H), 7.06 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.86 (dd, J=5.9, 2.2 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.21 - 5.15 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.16 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.27 - 2.98 (m, 12H), 2.84 - 2.74 (m, 1H), 2.60 (dd, J=18.7, 2.8 Hz, 1H), 2.24 - 1.96 (m, 11H), 1.87 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.68 - 1.55 (m, 4H), 1.55 -1.38 (m, 7H), 1.38 - 1.25 (m, 2H), 1.15 (s, 3H), 1.14 - 1.10 (m, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.01 - 0.96 (m, 3H), 0.96 - 0.91 (m, 3H), 0.90 (s, 3H).
Primer A34. Izrada 1-(2-((4-hlorpiridin-2-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)- 3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2
[0628] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiseline, osim što se u ovom slučaju koristi 2,4-dihlorpiridin (0.024 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje je jedno od dva jedinjenja izdvojena iz ove reakcije. Materijal se dobija kao svetlo žuta čvrsta supstanca (0.0143 g, 38.7 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 850.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.637 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.11 (d, J=5.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.83 (dd, J=5.9, 2.2 Hz, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.17 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.27 - 2.98 (m, 12H), 2.80 (td, J=11.2, 4.8 Hz, 1H), 2.60 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.26 - 1.97 (m, 11H), 1.89 - 1.74 (m, 3H), 1.72 (s, 4H), 1.67 - 1.38 (m, 11H), 1.38 -1.27 (m, 2H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.99 - 0.86 (m, 9H).
Primer A35. Izrada 1-(2-((2-hlorpiridin-4-il)oksi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline.
2
[0630] Naslovljeno jedinjenje se izrađuje po opisanom postupku za izradu 2-(2-(1-karboksi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioksidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-oktadekahidro-1H-ciklopenta[a]hrizen-9-il)cikloheks-3-en-1-il)etoksi)izonikotinske kiselina, osim što se u ovom slučaju koristi 2,4-dihlorpiridin (0.024 g, 0.161 mmol) umesto 2-hlorizonikotinske kiseline i što se takođe u ovom slučaju koristi manje kalijum terc-butoksida, 1.0M u THF (0.129 mL, 0.129 mmol). Naslovljeno jedinjenje je jedno od dva jedinjenja izdvojena iz ove reakcije. Materijal se dobija kao svetlo žuta čvrsta supstanca (0.0168 g, 41.2 % prinos) TFA so. LCMS m/z = 850.6 (M+H<+>), vreme zadržavanja 1.809 min (LCMS Postupak 20).<1>H NMR (400MHz, 1:1 Smeša CDCl3i CD3OD, CD3OD zaključano) δ 8.00 (d, J=5.6 Hz, 1H), 6.90 (dd, J=5.6, 1.7 Hz, 1H), 6.76 (d, J=1.7 Hz, 1H), 5.32 (br. s., 1H), 5.17 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.41 - 4.33 (m, 2H), 3.28 - 2.98 (m, 12H), 2.80 (td, J=11.0, 4.6 Hz, 1H), 2.58 (d, J=15.4 Hz, 1H), 2.26 - 1.96 (m, 11H), 1.89 - 1.73 (m, 2H), 1.72 (s, 4H), 1.67 - 1.38 (m, 11H), 1.38 - 1.26 (m, 2H), 1.18 - 1.04 (m, 8H), 1.01 - 0.86 (m, 9H).
ISPITIVANJE KULTURE HIV ĆELIJA
[0631] Ćelije. MT-2 ćelije i 293T ćelije su dobijene od NIH AIDS Research and Reference Reagent Program. Ćelijske linije su sub-uzgajane dva puta nedeljno ili u RPMI 1640 (MT-2)
2
ili DMEM (293T, HeLa) medijumu obogaćenom sa 10% seruma fetusa govečeta inaktiviranog toplotom (FBS), 100 jedinica/mL penicilina G i 100 mg/mL streptomicina. DMEM medijum je dodatno obogaćen sa 10 mM HEPES puferom, pH 7.55, 2 mM L-glutamina i 0.25 µg/mL amfotericina B.
[0632] Virusi. NLRepRluc virus sadrži marker Renilla luciferaze umesto virusnog nef gena. Provirusni plazmid pNLRepRluc je konstruisan u Bristol-Myers Squibb, počevši od klona provirusa NL4-3 (B subtip) koji je odbijen od NIH AIDS Research and Reference Reagent Programa. Matični rekombinantni izvorni tip (WT) virusa (NLRepRlucP373S) je dobijen od NLRepRluc i sadrži dodatnu supstituciju P373 za serin u Gag (u okviru SP1 razdvajača), najčešća 373 varijacija u subtipu B. Drugi rekombinantni virusi (A364V, V370A/ΔT371 i "T332S trostruke" (T332S/V362I HIV-1 proteaza R41G)) su generisani ciljanim mutagenezama plazmida pNLRepRlucP373S da bi se uvele ove supstitucije amino kiseline u Gag i proteazi. DNK rekombinantnog virusa se nakon toga koristi za generisanje zaliha virusa transfekcijom 293T ćelija (Lipofectamin PLUS kit, Invitrogen). Titri zaliha virusa se određuju analizom rezultata luciferaze (Dual-Luciferase® Reporter Assay System, Promega, Milwaukee, WI, USA).
[0633] Višestruki ciklus analize osetljivosti leka. Pelete MT-2 ćelija se inficiraju sa NLRepRlucP373S Gag ciljanim virusima, gde je inicijalna inocula reporter sojeva normalizovana koristeći ekvivalent rezultata signala aktivnosti luciferaze. Ove smeše ćelijavirus se resuspenduju u medijumu, inkubiraju 1-sat na 37°C/CO2i dodaju u ploče sa 96 udubljenja koje sadrže jedinjenje u finalnoj gustini ćelija od 10,000 ćelija po udubljenju. Test jedinjenja se 3 puta serijski razblaže u 100% DMSO i ispituju pri konačnoj koncentraciji DMSO od 1%. Nakon 4 – 5 dana inkubacije na 37°C/CO2, količine virusa se određuju preko aktivnosti Renilla luciferaze (Dual-Luciferase® Reporter Assay System, Promega). Rezultat luminescencije se detektuje na Wallac Trilux (PerkinElmer).
[0634] Koncentracije 50% inhibitornosti (EC50e) se izračunavaju pomoću eksponencijalnog oblika jednačine srednjeg efekta gde je procenat inhibicije = 1/[1+ (EC50/koncentracija leka)<m>], gde je m parametar koji odražava pad krive koncentracija-odgovor. Osnova se uzima kao rezidualni signal uočen nakon inhibicije pri najvećoj koncentraciji kontrolnog inhibitora proteaze, NFV (3 µM).
[0635] Koncentracije 90% inhibitornosti (EC90e) se izračunavaju pomoću eksponencijalnog oblika jednačine srednjeg efekta gde je ECF = [(F/(100-F)]<1/H>·EC50, gde je H parametar koji odražava pad krive koncentracija-odgovor. Osnova se uzima kao rezidualni signal uočen
2
nakon inhibicije pri najvećoj koncentraciji kontrolnog inhibitora proteaze, NFV (3 µM). Ispitivanje HIV ćelijske kulture
[0636] HIV-1 NL4-3koji ekspresuje gen Renilla luciferaze se konvertuje u gag V370A/ΔT371 virus ciljanom mutagenezom. A364V je ciljani mutant.
[0637] T332s/V362I/Pr R41G (N14.3, B Clade) virus je dobijen na sledeći način: Selekcija za rezistenciju HIV-1 soja NL4-4 virusa sa jedinjenjem inhibitorom HIV sazrevanja (MI)
se započinje za EC50za ovaj virus (2 nM), uz dvostruko povećanje u koncentracije jedinjenja inhibitora sazrevanja nanetog u svakoj pasaži. U pasaži 8, virus se sakupi i sekvencira. Izdvoji se populacija virusa koja sadrži T332S i V362I supstitucije Gag amino kiseline i R41G supstituciju u proteazi. Ove supstitucije se po redu uvode u NLRepRlucP373, derivat HIV-1 klona NL4-3 modifikovanog da sadrži P373S, najčešću polimorfnu supstituciju u subtipu B na položaju 373 i Renilla luciferaza gen ubačen u nef locus. Nastajanje izabranih supstitucija u wt genotipnoj osnovi je ovde diskutovano:
počevši od wt virusa, R41G supstitucija HIV proteaze se detektuje u jednoj od tri in vitro selekcije za rezistenciju na prethodno navedeno MI jedinjenje zajedno sa Gag V362I i Gag T332S. R41G nije primarna PI rezistentna supstitucija<i>i nije prisutna u LANL bazi podataka (2010). Postoji jedan izveštaj o R41G posvezan sa in vitro selekcijom za rezistenciju na ispitivani PI<ii>. Međutim, u tom slučaju, R41G sam ne učestvuje u PI rezistenciji. Povezana promena, R41K, je običan polimorf subtipa B (27% LANL bazi podataka) i R41K može da bude uključen u nastajanje rezistencije proteaze na inhibitor proteaze koji se ispituje.<iii>R41 je lociran u petlji proksimalno od mesta vezivanja supstrata HIV-1 proteaze i ova promena može da deluje alosterično da omogući zatvaranje aktivnog mesta delovanja proteaze u odnosu na supstrat, čime omogućava katalizu. Moguće je da R41G menja dinamiku kretanja petlje i finalno pozicioniranje petlje, što može da dovede da aktivno mesto bolje prepoznaje osnovne izabrane promene MI jedinjenja (kao gore)(V362I/T332S). Ispitivanje V362I/T332S/Pr R41G
2
supstitucija i njihovih efekata na osetljivost MI jedinjenja i rast virusa su opisani u niže datoj Tabeli 1:
[0638] Virusi su konstruisani tako da sadrže kombinacije T332S i R41G HIV proteaze, sa i bez V362I.). Virusi sa samo jednom promenom su samo ~2-puta manje osetljivi na MI jedinjenje, dok su dvostruke kombinacije ove 3 supstitucije 5.7- do 9.3-puta manje osetljive. Neočekivano je nađeno da je virus sa trostrukom promenom mnogo manje osetljiv na MI jedinjenje, što ukazuje da R41G promena u proteazi može zajedno sa Gag promenama dalje da smanji osetljivost na MI jedinjenje. Prema tome, T332S/V362I ciljani mutant (SDM) virusa ispoljava samo 5.7 puta manju promenu, ali dodavanjem promena na R41G proteazi značajno povećava FC do 217.
i Johnson VA, Brun-Vezinet F, Clotet B, Gunthard HF, Kuritzkes DR, Pillay D, Schapiro JM,Richman DD. Update of drug resistance mutations in HIV-1: December 2009. Top HIVMed. 2009 Dec; 17(5):138-45.
ii Dierynck, I, Van Markck, H, Van Ginderen, M, Jonckers, TH, Nalam, MN, Schiffer, CA,Raoof, A, Kraus, G, Picchio, G. TMC310911, novel human immunodeficiency virus type 1 inhibitor proteaze, shows in vitro improved resistance profile i higher genetic barrier toresistance compared
iii Stray KM, Callebaut C, Glass B, Tsai L, Xu L, Müller B, Kräusslich HG, Cihlar T.
Mutations in multiple domains of Gag drive emergence of in vitro resistance to the
2
phosphonate-containing HIV-1 protease inhibitor GS-8374. J Virol.2013 87:454-63
[0639] Sva tri rekombinantna virusa su korišćena kako je prethodno opisano u ispitivanju kulture HIV ćelija za NL4-3 virus. EC50WT, EC50V370A/ΔT371, EC50A364V i EC50T332s/V362I/Pr R41G rezultat za jedinjenja je pokazan u Tabeli 2.
Ključni biološki rezultat za EC50e
2 1
Tabela 2.
22 n l
2 (nastavlja se)
24 (nastavlja se)
2 (nastavlja se)
2 (nastavlja se)
2 (nastavlja se)
2 (nastavlja se)
2
(nastavlja se)
2
n l
21 (nastavlja se)
22 n l
2 n l
24 n l
2 n l
2 n l
2 n l
[0640] U niže datoj Tabeli 3, dva jedinjenja koja su u skladu sa dva ostvarenja iz pronalaska (Primeri 25 i A3) su testirana i upoređena sa dva druga (komparativna) jedinjenja izvan njihovog okvira. Svako jedinjenje je ispitivano na EC50(WT) ili EC90 vrednosti (videti niže date identifikovane sojeve, uključujući T332S/V362I/pr R41G trostruki mutant):
Tabela 3
2
[0641] Kao što može da se zaključi iz Tabele 3, dva navedena jedinjenja u skladu sa pronalaskom imaju bolje EC90vrednosti u odnosu na komparativna jedinjenja, kada su testirana na prethodno identifikovane navedene sojeve mutanta.
[0642] Prethodno dat opis je samo ilustrativan i ne treba shvatiti da na bilo koji način ograničava okvir ili određuje principe pronalaska. Naravno, različite modifikacije pronalaska, pored ovih koje su ovde pokazane i opisane, su jasne stručnjaku sa iskustvom u tehnici iz narednih primera i oprethodnog opisa.
2

Claims (17)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule I, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli:
    naznačeno time što: R1je izopropenil ili izopropil; A je -C1-6alkil-OR0; gde je R0heteroaril-Q0grupa; Q0je izabran iz grupe koju čine -H, -CN, -C1-6alkil, -COOH, -Ph, -OC1-6alkil, -halo, -CF3; Y je izabran iz grupe koju čine -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazola i -CONHOH; gde je n = 1-6 R2je -H, -C1-6alkil, -alkilsupstituisana C1-6alkil ili -arilsupstituisana C1-6alkil grupa; W nema, ili je -CH2- ili -CO- grupa; R3je -H, -C1-6alkil ili -alkilsupstituisana C1-6alkil grupa; R4je izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisana -C1-6alkil, -C1-6alkil-Q1, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q1, aril, heteroaril, supstituisani heteroaril, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, i
    gde je G izabran iz grupe koju čine -O-, -SO2- i -NR12-; gde je Q1izabran iz grupe koju čine -C1-6alkil, -C1-6fluoroalkil, heteroaril, supstituisani heteroaril, halogena, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9i -SO2R7; R5je izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6alkilsupstituisana alkil, -C1-6alkil-NR8R9, -COR3, -SO2R7i -SO2NR2R2; us uslov da R4ili R5nije -COR6kada je W -CO- grupa; uz naredni uslov da je samo jedan od R4ili R5izabran iz grupe koju čine -COR6, -COCOR6, -SO2R7i -SO2NR2R2; R6je izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C1-6alkil-supstituisana alkil, -C3-6cikloalkil, -C3-6supstituisana cikloalkil-Q2, -C1-6alkil-Q2, -C1-6alkil-supstituisana alkil-Q2, -C3-6cikloalkil-Q2, aril-Q2, -NR13R14i -OR15; gde je Q2izabran iz grupe koju čine aril, heteroaril, supstituisani heteroaril, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3i -CONHSO2NR2R2; R7izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisana alkil, -C3-6cikloalkil, -CF3, aril i heteroaril; R8i R9su nezavisno izabrani iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisana alkil, aril, heteroaril, supstituisana aril, supstituisani heteroaril, -C1-6alkil-Q2i -COOR3, ili su R8i R9uzeti zajedno sa susednim N da formiraju ciklus izabran iz grupe:
    1
    M je izabran iz grupe koju čine -R15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH i -NR2R12; V je izabran iz grupe koju čine -CR10R11-, -SO2-, -O- i -NR12-; us uslov da samo jedan od R8ili R9može da bude -COOR3grupa; R10i R11su nezavisno izabrani iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C1-6supstituisana alkil i -C3-6cikloalkil; R12izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -alkil supstituisana C1-6alkil, -CONR2R2, -SO2R3i -SO2NR2R2; R13i R14su nezavisno izabrani iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisana alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i C1-6supstituisana alkil-Q3; Q3je izabran iz grupe koju čine heteroaril, supstituisani heteroaril, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2i -SO2R3; R15je izabran iz grupe koju čine -C1-6alkil, -C3-6cikloalkil, -C1-6supstituisana alkil, -C1-6alkil-Q3, -C1-6alkil-C3-6cikloalkil-Q3i -C1-6supstituisana alkil-Q3; R16je izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -NR2R2i -COOR2; us uslov da kada je V -NR12-, R16nije -NR2R2; i R17je izabran iz grupe koju čine -H, -C1-6alkil, -COOR3i aril.
  2. 2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je u R0grupi heteroaril radikal izabran iz grupe koju čine 2
  3. 3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 2, naznačeno time što je R1izopropenil grupa.
  4. 4. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 3, naznačeno time što je Y = -COOR2grupa.
  5. 5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, naznačeno time što je R2= -H.
  6. 6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je R4= -C1-6alkil-Q1grupa.
  7. 7. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačeno time što je Q1= -NR8R9grupa.
  8. 8. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 7, naznačeno time što kada su R8i R9uzeti zajedno sa susednim -N da formiraju ciklus, ciklus je izabran iz grupe koju čine:
  9. 9. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 8, naznačeno time što je svaki R7i R16izabran iz grupe koju čine -H i -C1-6alkil grupa.
  10. 10. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je Q0= -CN grupa.
  11. 11. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je R1izopropenil grupa, u R0grupi "heteroaril" radikal je izabran iz grupe koju čine:
    Y je -COOH, R4je -C1-6alkil-Q1, Q1je -NR8R9i R8i R9su uzeti zajedno sa susednim -N da formiraju ciklus koji je izabran iz grupe koju čine:
  12. 12. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli, naznačeno time što je izabrano iz grupe koju čine:
    4
    �
    11
    ��
    1
  13. 13. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli, naznačeno time što je izabrano iz grupe koju čine:
    14
  14. 14. Jedinjenje, uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli u skladu sa patentnim zahtevom 13, naznačeno time što je to:
  15. 15. Kompozicija, naznačena time što uključuje količinu jednog ili više jedinjenja u skladu sa patentnim zahtevom 1-14 za poboljšanje HIV, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, podloga i/ili razblaživača. 1
  16. 16. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa patentnim zahtevima 1-14, naznačeno time što je za upotrebu u terapiji.
  17. 17. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u skladu sa patentnim zahtevima 1-14, naznačeno time što je za upotrebu u lečenju sisara inficiranih sa HIV virusom. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1
RS20210450A 2016-02-04 2017-02-02 C-3 i c-17 modifikovani triterpenoidi kao hiv-1 inhibitori RS61746B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662291298P 2016-02-04 2016-02-04
EP17704093.8A EP3411381B1 (en) 2016-02-04 2017-02-02 C-3 and c-17 modified triterpenoids as hiv-1 inhibitors
PCT/IB2017/050568 WO2017134596A1 (en) 2016-02-04 2017-02-02 C-3 and c-17 modified triterpenoids as hiv-1 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61746B1 true RS61746B1 (sr) 2021-05-31

Family

ID=57995251

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210450A RS61746B1 (sr) 2016-02-04 2017-02-02 C-3 i c-17 modifikovani triterpenoidi kao hiv-1 inhibitori

Country Status (39)

Country Link
US (4) US10421774B2 (sr)
EP (2) EP3831839B1 (sr)
JP (1) JP6735837B2 (sr)
KR (1) KR102795662B1 (sr)
CN (1) CN109153700B (sr)
AR (1) AR107512A1 (sr)
AU (1) AU2017215529B2 (sr)
BR (1) BR112018015629B1 (sr)
CA (1) CA3013417C (sr)
CL (1) CL2018002084A1 (sr)
CO (1) CO2018008157A2 (sr)
CR (1) CR20180387A (sr)
CY (1) CY1124353T1 (sr)
DK (1) DK3411381T3 (sr)
DO (1) DOP2018000174A (sr)
EA (1) EA036211B1 (sr)
ES (2) ES2862325T3 (sr)
HR (1) HRP20210502T1 (sr)
HU (1) HUE054337T2 (sr)
IL (1) IL260741B (sr)
JO (1) JOP20170029B1 (sr)
LT (1) LT3411381T (sr)
MA (2) MA53358A (sr)
MD (1) MD3411381T2 (sr)
MX (1) MX375118B (sr)
MY (1) MY199668A (sr)
PE (1) PE20181355A1 (sr)
PL (1) PL3411381T3 (sr)
PT (1) PT3411381T (sr)
RS (1) RS61746B1 (sr)
RU (1) RU2716502C2 (sr)
SG (1) SG11201806388XA (sr)
SI (1) SI3411381T1 (sr)
SM (1) SMT202100210T1 (sr)
TW (1) TWI719126B (sr)
UA (1) UA123867C2 (sr)
UY (1) UY37109A (sr)
WO (1) WO2017134596A1 (sr)
ZA (1) ZA201805044B (sr)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR107512A1 (es) * 2016-02-04 2018-05-09 VIIV HEALTHCARE UK Nº 5 LTD Triterpenoides modificados en c-3 y c-17 como inhibidores del vih-1
PT3784349T (pt) 2018-04-24 2024-01-22 Viiv Healthcare Uk No 5 Ltd Compostos com atividade inibidora de maturação do hiv
JP7703538B2 (ja) 2019-12-09 2025-07-07 ヴィーブ、ヘルスケア、カンパニー カボテグラビルを含んでなる医薬組成物
WO2025068743A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 ViiV Healthcare UK (No.3) Limited Pharmaceutical composition of cabotegravir
WO2024089216A1 (en) 2022-10-27 2024-05-02 Syngenta Crop Protection Ag Novel sulfur-containing heteroaryl carboxamide compounds
WO2025037232A1 (en) 2023-08-11 2025-02-20 ViiV Healthcare UK (No.4) Limited Tosylate salt form of a maturation inhibitor for treatment of hiv
US20250099464A1 (en) 2023-09-27 2025-03-27 ViiV Healthcare UK (No.3) Limited Pharmaceutical compositions

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
US5679828A (en) 1995-06-05 1997-10-21 Biotech Research Labs, Inc. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefor
US20040110785A1 (en) 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US7365221B2 (en) 2002-09-26 2008-04-29 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof
GB0301227D0 (en) 2003-01-20 2003-02-19 Keen Group Ltd Seating apparatus
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
WO2005090380A1 (en) 2004-03-17 2005-09-29 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceuticals salts of 3-o-(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid
TW200628161A (en) 2004-11-12 2006-08-16 Panacos Pharmaceuticals Inc Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof
US20090105203A1 (en) 2006-10-16 2009-04-23 Myriad Genetics, Incorporated Compounds for treating viral infections
WO2009100532A1 (en) 2008-02-14 2009-08-20 Virochem Pharma Inc. NOVEL 17ß LUPANE DERIVATIVES
US9067966B2 (en) 2009-07-14 2015-06-30 Hetero Research Foundation, Hetero Drugs Ltd. Lupeol-type triterpene derivatives as antivirals
FR2956034B1 (fr) 2010-02-09 2012-02-10 Thales Sa Dispositif d'entrainement pour des joueurs de rugby
US8802661B2 (en) 2010-06-04 2014-08-12 Bristol-Myers Squibb Company C-28 amides of modified C-3 betulinic acid derivatives as HIV maturation inhibitors
JP5752789B2 (ja) 2010-06-04 2015-07-22 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｈｉｖ成熟阻害剤としての修飾ｃ−３ベツリン酸誘導体
DE102010017786A1 (de) 2010-07-07 2012-01-12 Continental Reifen Deutschland Gmbh Elastomerprodukt, enthaltend ein linienförmiges, textiles Gebilde zur Verstärkung
CN103339141B (zh) 2011-01-31 2016-08-24 百时美施贵宝公司 作为hiv成熟抑制剂的c-3修饰的桦木酸衍生物的c-28胺
PT2670765T (pt) * 2011-01-31 2018-01-08 Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd Triterpenoides modificados em c-17 e c-3 com atividade inibidora da maturação do vih
US9340513B2 (en) * 2011-12-14 2016-05-17 Glaxosmithkline Llc Propenoate derivatives of betulin
US8906889B2 (en) * 2012-02-15 2014-12-09 Bristol-Myers Squibb Company C-3 cycloalkenyl triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
US8889854B2 (en) * 2012-05-07 2014-11-18 Bristol-Myers Squibb Company C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
CA2894126A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Epizyme, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
US9378035B2 (en) 2012-12-28 2016-06-28 Commvault Systems, Inc. Systems and methods for repurposing virtual machines
US20140221361A1 (en) * 2013-02-06 2014-08-07 Bristol-Myers Squibb Company C-19 modified triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity
WO2014130810A1 (en) 2013-02-25 2014-08-28 Bristol-Myers Squibb Company C-3 alkyl and alkenyl modified betulinic acid derivatives useful in the treatment of hiv
CN104877015B (zh) * 2014-02-28 2019-02-01 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 一种三萜-多肽缀合物、其药物组合物及用途
AU2015243500B2 (en) * 2014-04-11 2017-03-30 ViiV Healthcare UK (No.4) Limited Triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity, substituted in position 3 by a non-aromatic ring carrying a haloalkyl substituent
MA40886B1 (fr) 2015-02-09 2020-03-31 Hetero Research Foundation Nouveau triterpénone en c-3 avec des dérivés d'amide inverse en c-28 en tant qu'inhibiteurs du vih
AR107512A1 (es) * 2016-02-04 2018-05-09 VIIV HEALTHCARE UK Nº 5 LTD Triterpenoides modificados en c-3 y c-17 como inhibidores del vih-1
PL3984994T3 (pl) 2016-02-04 2024-11-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Podstawiony związek piperydyny jako agonista oreksyny typu 2 do leczenia narkolepsji

Also Published As

Publication number Publication date
LT3411381T (lt) 2021-04-26
MY199668A (en) 2023-11-15
EP3411381B1 (en) 2021-01-20
MA53358A (fr) 2021-07-21
WO2017134596A1 (en) 2017-08-10
SI3411381T1 (sl) 2021-04-30
CN109153700A (zh) 2019-01-04
CA3013417A1 (en) 2017-08-10
RU2716502C2 (ru) 2020-03-12
US20190031709A1 (en) 2019-01-31
EP3831839B1 (en) 2023-07-26
CR20180387A (es) 2018-09-20
AR107512A1 (es) 2018-05-09
JP6735837B2 (ja) 2020-08-05
BR112018015629A2 (pt) 2018-12-26
DK3411381T3 (da) 2021-04-06
KR102795662B1 (ko) 2025-04-14
JP2019504104A (ja) 2019-02-14
MA43960A (fr) 2018-12-12
US20210323997A1 (en) 2021-10-21
US20190359647A1 (en) 2019-11-28
RU2018130181A (ru) 2020-03-05
DOP2018000174A (es) 2018-10-31
UA123867C2 (uk) 2021-06-16
CL2018002084A1 (es) 2018-09-21
CA3013417C (en) 2024-01-02
EA201891649A1 (ru) 2019-02-28
MA43960B1 (fr) 2021-02-26
TW201739757A (zh) 2017-11-16
UY37109A (es) 2017-09-29
MX2018009514A (es) 2018-09-05
ES2957767T3 (es) 2024-01-25
PE20181355A1 (es) 2018-08-22
MD3411381T2 (ro) 2021-07-31
TWI719126B (zh) 2021-02-21
US10421774B2 (en) 2019-09-24
CN109153700B (zh) 2021-03-09
IL260741B (en) 2020-04-30
EP3831839A2 (en) 2021-06-09
RU2018130181A3 (sr) 2020-03-05
AU2017215529A8 (en) 2018-08-30
US11084845B2 (en) 2021-08-10
US20230295220A1 (en) 2023-09-21
HRP20210502T1 (hr) 2021-05-14
HUE054337T2 (hu) 2021-08-30
EP3831839A3 (en) 2021-07-21
ES2862325T3 (es) 2021-10-07
EP3411381A1 (en) 2018-12-12
AU2017215529A1 (en) 2018-08-23
SMT202100210T1 (it) 2021-05-07
ZA201805044B (en) 2020-08-26
BR112018015629B1 (pt) 2023-10-24
EA036211B1 (ru) 2020-10-14
MX375118B (es) 2025-03-06
AU2017215529B2 (en) 2019-01-31
CY1124353T1 (el) 2022-07-22
JOP20170029B1 (ar) 2021-08-17
PL3411381T3 (pl) 2021-09-13
CO2018008157A2 (es) 2018-08-21
SG11201806388XA (en) 2018-08-30
PT3411381T (pt) 2021-03-18
KR20180105229A (ko) 2018-09-27
HK1256866A1 (en) 2019-10-04
NZ744545A (en) 2025-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2847208B1 (en) C-17 bicyclic amines of triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity
US11084845B2 (en) C-3 and C-17 modified triterpenoids as HIV-1 inhibitors
US10780102B2 (en) Triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
AU2015346303B2 (en) Oxolupene derivatives
HK40053429A (en) C-3 and c-17 modified triterpenoids as hiv-1 inhibitors
HK1256866B (en) C-3 and c-17 modified triterpenoids as hiv-1 inhibitors
HK40041853A (en) Triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity