RS58245B1

RS58245B1 - Kombinacija derivata pirolo[2,3-d]pirimidina sa jednim ili više dodatnih sredstava kao inhibitor janus kinaza (jak)

Info

Publication number: RS58245B1
Application number: RS20190097A
Authority: RS
Inventors: Matthew Frank Brown; Ashley Edward Fenwick; Mark Edward Flanagan; Andrea Gonzales; Timothy Allan Johnson; Neelu Kaila; Mark J Mitton-Fry; Joseph Walter Strohbach; Ruth E Tenbrink; John David Trzupek; Rayomand Jal Unwalla; Michael L Vazquez; Mihir D Parikh
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2013-02-22
Filing date: 2014-02-11
Publication date: 2019-03-29
Also published as: US20140243312A1; CY1121468T1; KR20150109434A; US9035074B2; EA201591255A1; LT2958921T; ES2713052T3; MA38347A1; GEP201606600B; TR201902525T4; ME02904B; MX2015010928A; ES2647525T3; MD4735C1; EP2958921A1; CN105008362B; RS56503B1; LT3290421T; ME03301B; EA027879B1

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Predmetni pronalazak daje farmaceutski aktivna jedinjenja i analoge pirolo[2,3-d]pirimidina. Takva jedinjenja su korisna za inhibiciju Janus kinaze (JAK). Ovaj pronalazak takođe je usmeren na kompozicije koje sadrže postupke za pripremu takvih jedinjenja, i postupke za lečenje i prevenciju stanja posredovanih preko JAK.

OSNOVA PRONALASKA

[0002] Protein kinaze su familije enzima koji katalizuju fosforilaciju specifičnih ostataka u proteinima, široko klasifikovane u tirozin i serin/treonin kinaze. Neodgovarajuća aktivnost kinaze, koja je rezultat mutacije, prekomerne ekspresije, ili neodgovarajuće regulacije, disregulacije ili de-regulacije, kao i prekomerne ili premale proizvodnje faktora rasta ili citokina je uključena u mnoge bolesti, uključujući, ali bez ograničenja na kancer, kardiovaskularne bolesti, alergije, astmu i druge respiratorne bolesti, autoimune bolesti, inflamatorne bolesti, bolest kostiju, metaboličke poremećaje i neurološke i neurodegenerativne poremećaje kao što je Alzheimer-ova bolest. Neodgovarajuća aktivnost kinaze pokreće različite biološke ćelijske odgovore koji se odnose na ćelijski rast, ćelijsku diferencijaciju, preživljavanje, apoptozu, mitogenezu, kontrolu ćelijskog ciklusa i ćelijsku pokretljivost uključene u gore navedene i srodne bolesti.

[0003] Na taj način, protein kinaze su se pojavile kao značajna klasa enzima kao ciljna mesta za terapeutsku intervenciju. Naročito, JAK familija ćelijskih protein tirozin kinaza (JAK1, JAK2, JAK3 i Tyk2) ima centralnu ulogu u prenosu signala preko citokina (Kisseleva et al., Gene, 2002, 285, 1; Yamaoka et al. Genome Biology 2004, 5, 253)). Posle vezivanja za svoje receptore, citokini aktiviraju JAK koji zatim fosforiliše citokinski receptor, na taj način stvarajući vezujuća mesta za molekule preko kojih se prenose signali, naime, članove familije prenosnika signala i aktivatora transkripcije (STAT) što konačno dovodi do ekspresije gena. Poznati su brojni citokini koji aktiviraju JAK familiju. Ovi citokini obuhvataju, IFN familiju (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-omega, Limitin, IFN-gama, IL-10, IL-19, IL-20, IL-22), gp130 familiju (IL-6, IL-11, OSM, LIF, CNTF, NNT-1/BSF-3, G-CSF, CT-1, Leptin, IL-12, IL-23), gama C familiju (IL-2, IL-7, TSLP, IL-9, IL-15, IL-21, IL-4, IL-13), IL-3 familiju (IL-3, IL-5, GM-CSF), jednolančanu familiju (EPO, GH, PRL, TPO), receptor tirozin kinaze (EGF, PDGF, CSF-1, HGF), i receptore spojene za G-protein (AT1).

[0004] Ovde ostaje potreba za novim jedinjenjima koja efikasno i selektivno inhibiraju specifične JAK enzime, i JAK1 naročito, naspram JAK2. JAK1 je član Janus familije protein kinaza sastavljene od JAK1, JAK2, JAK3 i TYK2. JAK1 je eksprimiran do različitih nivoa u svim tkivima. Mnogi citokinski receptori prenose signale preko parova JAK kinaza u sledećim kombinacijama: JAK1/JAK2, JAK1/JAK3, JAK1/TYK2, JAK2/TYK2 ili JAK2/JAK2. JAK1 je najšire sparena JAK kinaza u ovom kontekstu i potrebna je za prenos signala preko γ zajedničkih (IL-2Rγ) citokinskih receptora, familije IL-6 receptora, familija receptora tipa I, II i III i familije IL-10 receptora. Studije na životinjama su pokazale da je JAK1 potreban za razvoj, funkciju i homeostazu imunog sistema. Modulacija imune aktivnosti preko inhibicije aktivnosti JAK1 kinaze može da se dokaže kao korisna u lečenju različitih imunih poremećaja (Murray, P.J.J. Immunol., 178, 2623-2629 (2007); Kisseleva, T., et al., Gene, 285, 1-24 (2002); O’Shea, J. J., et al., Cell, 109, (suppl.) S121-S131 (2002)) uz izbegavanje JAK2 zavisnog prenosa signala preko eritropoetina (EPO) i trombopoetina (TPO) (Neubauer H., et al., Cell, 93(3), 397-409 (1998); Parganas E., et al., Cell, 93(3), 385-95 (1998)).

REZIME PRONALASKA

[0005] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje formule I koje ima strukturu:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je vodonik ili C1-C4alkil, pri čemu je navedeni alkil dodatno izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, hidroksi, metoksi, amino, CF3i C3-C6cikloalkila; R<2>i R<3>su svaki nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, C1-C6perfluoroalkil sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6alkoksi sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6perfluoroalkoksi sa linearnim ili granatim lancem, halogen, cijano, hidroksil, amino, karboksi, aminokarbonil, aril, heteroaril, (aril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heteroaril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heterociklik)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heterociklik, (C1-C6alkoksil sa linearnim ili granatim lancem)karbonil, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)amino-karbonilamino, ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aminokarbonil; R<4>je izabran od vodonika, deuterijuma, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6perfluoroalkila sa linearnim ili granatim lancem, arila i alkilarila; X je izabran od –NH—i --CRaRb--, gde (a) Rai Rbsu nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil pravog ili granatog lanca, C3-C6cikloalkil, aril, (aril) C1-C6alkil pravog ili granatog lanca, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, (heteroaril) C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heterociklični) C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili (b) Rai Rbzajedno obrazuju lanac koji sadrži --(CRcRd)j--, gde Rci Rdsu nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, CF3, hidroksil, CONH2, ili SO2CH3; Y je -A-R5, gde A je veza, --(CH2)k—ili --(CD2)k—i R5je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, ili --NRa’Rhb’, ili je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monocikličnia ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koji imaju jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota, i sumpora, naznačeno time da pomenuti alkil, C3-C6cikloalkil, aril, ili monociklična ili biciklična struktura prstena je dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksil, CF3, --ORe, --NReRf, --S(O)pRei C3-C6cikloalkil, naznačeno time da pomenuti alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksil, CONH2, i SO2CH3, gde (a) R i Rb, nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, naznačeno time da pomenuti alkil i cikloalkil može izborno biti supstituisan sa jednim ili više od Rc’, ili (b) Ra’i Rb’zajedno obrazuju lanac koji sadrži --(CRc’,Rd’)j--, gde Rc, i Rd’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2, --ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde Rei Rfsu nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, naznačeno time da pomenuti alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksil, CF3, i CONH2; j je 2, 3, 4 ili 5; k je 1, 2; 3, ili 4; p je 0, 1 ili 2; i, n je 1 ili 2.

[0006] U drugim aspektima, tu su takođe opisani:

farmaceutske kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljivi nosač i jedinjenje formule I; postupci za lečenje stanja ili poremećaja uključujući miozitis, vaskulitis, pemfigus, Crohn-ovu bolest, lupus, nefritis, psorijazu, multiplu sklerozu, veliki depresivni poremećaj, alergiju, astmu, Sjogren-ovu bolest, sindrom suvog oka, odbacivanje transplanta, kancer, inflamatornu bolest creva, septički šok, kardiopulmonalnu disfunkciju, akutnu respiratornu bolest ili kaheksiju primenom na subjekta kod koga postoji potreba za tim terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; postupci za lečenje stanja ili poremećaja uključujući atopijski dermatitis, ekcem, psorijazu, sklerodermu, lupus, pruritus, druga pruritička stanja, alergijske reakcije uključujući alergijski dermatitis kod sisara, alergijske bolesti konja uključujući hipersenzitivnost na ujed, letnji ekcem, slatki svrab kod konja, bolest sličnu astmi kod konja, inflamatornu bolest disajnih puteva, povratnu opstrukciju disajnih puteva, hiper-responsivnost disajnih puteva i hroničnu opstruktivnu bolest pluća primenom na sisara kod koga postoji potreba za tim terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I, ili njegove farmaceutski prtihvatljive soli; i, postupci za pripremu jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Predmetni pronalazak će biti dalje shvaćen iz sledećeg opisa datog samo radi ilustracije. Predmetni pronalazak je usmeren na klasu derivata pirolo[2,3-d]pirimidina. Naročito, predmetni pronalazak je usmeren na jedinjenja pirolo[2,3-d]pirimidina korisna kao inhibitori JAK, i naročito JAK1. Dok predmetni pronalazak nije tako ograničen, razumevanje različitih aspekata pronalaska će biti dobijeno preko sledeće diskusije i primera.

[0007] Termin "alkil", pojedinačno ili u kombinaciji, označava acikličnu, zasićenu ugljovodoničnu grupu formule CnH2n+1koja može biti linearna ili granata. Primeri takvih grupa obuhvataju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, pentil, izo-amil i heksil. Osim ukoliko je drugačije naznačeno, alkil grupa sadrži od 1 do 6 atoma ugljenika. Sadržaj atoma ugljenika alkila i različitih drugih grupa koje sadrže ugljovodonik je naznačen prefiksom koji označava donji i gornji broj atoma ugljenika u grupi, to jest, prefiks Ci-Cjoznačava grupu sa celim brojem "i" do celim brojem "j" atoma ugljenika, uključujući navedene. Na taj način, na primer, C1-C6alkil označava alkil od jedan do šest atoma ugljenika, uključujući navedene brojeve.

[0008] Termin "hidroksi," kao što je ovde korišćen, označava OH radikal. Termin "heterociklik" označava zasićeni ili delimično zasićeni (tj. nearomatičan) heterociklus koji može biti vezan preko atoma azota u prstenu (kada je heterocikilus vezan za atom ugljenika) ili atoma ugljenika u prstenu (u svim slučajevima). Jednako, kada je supstituisan, supstituent može biti lociran na atomu azota u prstenu (ako je supstituent spojen preko atoma ugljenika) ili atomu ugljenika u prstenu (u svim slučajevima). Specifični primeri obuhvataju oksiranil, aziridinil, oksetanil, azetidinil, tetrahidrofuranil, pirolidinil, tetrahidropiranil, piperidinil, 1,4-dioksanil, morfolinil, piperazinil, azepanil, oksepanil, oksazepanil i diazepinil.

[0009] Termin "aril" označava aromatični monociklični ili biciklični ugljovodonik koji može biti vezan preko atoma ugljenika na prstenu. Jednako, kada je supstituisan, supstituent može biti lociran na atomu ugljenika prstena. Specifični primeri obuhvataju fenil, toluil, ksilil, trimetilfenil, i naftil. Primeri aril supstituenata obuhvataju alkil, hidroksil, halo, nitril, alkoksi, trifluorometil, karboksamido, SO2Me, benzil, i supstituisani benzil.

[0010] Termin "heteroaril" označava aromatičan heterociklus koji može biti vezan preko atoma ugljenika u prstenu (u svim slučejvima) ili atoma azota u prstenu sa odgovarajućom valencom (kada je heterociklus vezan za atom ugljenika). Jednako, kada je supstituisan, supstituent može biti lociran na atomu ugljenika u prstenu (u svim slučajevima) ili atom azota u prstenu sa odgovarajućom valencom (ako je supstituent spojen preko atoma ugljenika). Specifični primeri obuhvataju tienil, furanil, pirolil, pirazolil, imidazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil i pirazinil. Termin "cikloalkil" označava monocikličnu, zasićenu ugljovodoničnu grupu formule CnH2n-1. Primeri obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i cikloheptil. Osim ukoliko je drugačije naznačeno, cikloalkil grupa sadrži od 3 do 8 atoma ugljenika.

[0011] Termini "halo" i "halogen" označavaju fluorid (F), hlorid (CI), bromid (Br) ili jodid (I).

[0012] Termin "sisar" označava čoveka, stoku ili prateće životinje.

[0013] Termin "prateća životinja" ili "prateće životinje" označava životinje koje se drže kao kućni ljubimci ili kućne životinje. Primeri pratećih životinja obuhvataju pse, mačke i glodare uključujući hrčke, zamorčiće, gerbile i slično, zečeve, feretke i ptice.

[0014] Termin "stoka" označava životinje gajene ili uzgajane u poljoprivrednom okruženju za pripremu proizvoda kao što su hrana ili vlakna, ili zbog njihovog rada. U nekim primerima izvođenja, stoka je pogodna za hranu sisara, na primer ljudi. Primeri stočnih životinja obuhvataju goveda, koze, konje, svinje, ovce, uključujući jagnjad i zečeve, kao i ptice, kao što su kokoške, patke i ćurke.

[0015] Termin "tretman" ili "lečenje" označava ublažavanje simptoma povezanih sa bolešću, poremećajem ili stanjem, ili zadržavanje daljeg napredovanja ili pogoršavanje tih simptoma. U zavisnosti od bolesti i stanja pacijenta, termin "lečenje" kao što je ovde korišćen može da obuhvata jedan ili više kurativnih, palijativnih i profilaktičkih tretmana. Lečenje može takođe da obuhvata primenu farmaceutske formulacije prema predmetnom pronalasku u kombinaciji sa drugim terapijama.

[0016] Termin "terapeutski efikasan" označava sposobnost sredstva da spreči, ili poboljša težinu poremećaja uz izbegavanje štetnih sporednih efekata tipično povezanih sa alternativnim terapijama. Izraz "terapeutski efikasan" trebalo bi razumeti da je ekvivalentan izrazu "efikasan za lečenje, prevenciju ili poboljšanje", i oba su namenjeni za kvalifikaciju količine svakog sredstva za upotrebu u kombinovanoj terapiji koji će postići cilj poboljšanja težine kancera, kardiovaskularne bolesti ili bola i inflamacije i učestalost incidence u odnosu na lečenje svakim sredstvom pojedinačno, uz izbegavanje štetnih sporednih efekata tipično povezanih sa alternativnim terapijama.

[0017] "Farmaceutski prihvatljiv" označava pogodan za upotrebu kod sisara, pratećih životinja ili stočnih životinja.

[0018] Ako su susptituenti opisani kao "nezavisno izabrani" iz grupe, svaki supstituent je izabran nezavisno od ostalih. Svaki supstituent prema tome može biti identičan ili različit od drugog supstituenta (supstituenata).

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0019] Predmetni pronalazak je povezan sa novim jedinjenjima koja su selektivni modulatori JAK1 u farmaceutski prihvatljivom obliku u kombinaciji korisni za lečenje bolesti i stanja povezanih sa disregulacijom JAK1. Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje farmakološke kompozicije koje sadrže takve modulatore JAK1 i odnosi se na postupke za lečenje i/ili prevenciju takvih bolesti i stanja. Shodno tome, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule I koje ima strukturu:

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde R<1>je vodonik ili C1-C4alkil, pri čemu je navedeni alkil dodatno izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, hidroksi, metoksi, amino, CF3, i C3-C6cikloalkila; R<2>i R<3>su svaki nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, C1-C6perfluoroalkil sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6alkoksi sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6perfluoroalkoksi sa linearnim ili granatim lancem, halogen, cijano, hidroksil, amino, karboksi, aminokarbonil, aril, heteroaril, (aril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heteroaril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heterociklik)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heterociklik, (C1-C6alkoksil sa linearnim ili granatim lancem)karbonil, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)amino-karbonilamino ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aminokarbonil; R<4>je izabran od vodonika, deuterijuma, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, C1-C6perfluoroalkila sa linearnim ili granatim lancem, arila i alkilarila; X je izabran od –NH i --CRaRb--, gde (a) Rai Rbsu nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (aril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, (heteroaril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heterociklik)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili (b) Rai Rbzajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRcRd)j--, gde su R i Rdnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, CF3, hidroksil, CONH2, ili SO2CH3; Y je -A-R<5>, gde A je veza, --(CH2)k—ili --(CD2)k— i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril ili --NRa’Rb’, ili je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --ORe, --NReRf, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila, gde navedeni alkil i cikloalkil može biti izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2i SO2CH3, gde (a) Ra, i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc’, ili (b) Ra’i Rb’zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)j--, gde Rc’i Rd’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2, --ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde su Rei Rfnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; j je 2, 3, 4 ili 5; k je 1, 2; 3 ili 4; p je 0, 1 ili 2; i, n je 1 ili 2. Pronalazak daje jedinjenje formule IA koje ima formulu:

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde Y je -A-R<5>, gde A je veza, --(CH2)k-- ili --(CD2)k– i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril ili --NRa’Rb’, ili je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koji imaju jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --ORe’--NReRf, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2i SO2CH3, gde (a) Ra’i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc’, ili (b) Ra’i Rb’zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)j--, gde Rc’i Rd’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2, --ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde su Rei Rfnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; j je 2, 3, 4 ili 5; k je 1, 2; 3, ili 4; i, p je 0, 1 ili 2; u farmaceutski prihvatljivom obliku u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava koja moduliraju sisarski imuni sistem ili koja su anti-infalamtorna.

[0020] U jednom primeru izvođenja, pronalazak daje kobinaciju sa jedinjenjem formule IA gde A je veza i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil ili aril. U sledećem primeru izvođenja, pronalazak daje jedinjenje formule IA gde A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je C3-C6cikloalkil pri čemu je navedeni C3-C6cikloalkil dodatno izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, i CN gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2, i SO2CH3; gde k je 1, 2 ili 3. U sledećem primeru izvođenja, pronalazak daje jedinjenje formule IA gde A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NRa’Rb’, --ORe, -S(O)pRei C3-C6cikloalkil; gde k je 1, 2 ili 3.

[0021] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje kombinaciju sa jedinjenjem formule IB koje ima formulu:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde (a) Ra’i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc, ili (b) R<a’>i Rb’zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)j--, gde su Rc’i Rd’nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2,-ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde su Rei Rfnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; ili, (c) Ra’i Rb’zajedno formiraju nezasićenu, zasićenu ili delimično zasićenu monocikličnu ili bicikličnu strukturu prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedena monociklična ili biciklična struktura prstena dalje izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NR<a’>Rb<’>, --ORe, --S(O)pRei C3-C6cikloalkil; j je 2, 3, 4 ili 5; i, p je 0, 1 ili 2.

[0022] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje kombinaciju sa jedinjenjem formule IC koje ima formulu:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde (a) Ra’i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc, ili (b) Ra, i Rb, zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)j--, gde Rc’i Rd’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2,-ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde Rei Rfsu nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; ili, (c) Ra’i Rb’zajedno formiraju nezasićenu, zasićenu ili delimično zasićenu monocikličnu ili bicikličnu strukturu prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedena monobiciklična ili biciklična struktura prstena dalje izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NRa’Rb’, --ORe, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila; j je 2, 3, 4 ili 5; i, p je 0, 1 ili 2.

[0023] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje kombinaciju sa jedinjenjem formule ID koje ima formulu:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde

Y je -AR<5>, gde A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, ili nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NRa’Rb’, --ORe, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2i SO2CH3, gde (a) Ra’i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (aril)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, (heteroaril) C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, (heterociklik)C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc’, ili (b) Ra’i Rb’zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)--, gde su Rc’i Rd’nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2, --ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde Rei Rfgde su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; j je 2, 3, 4 ili 5; k je 1, 2 ili 3; i , p je 0, 1 ili 2. U jednom primeru izvođenja, pronalazak daje jedinjenje formule ID gde R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem ili C3-C6cikloalkil.

[0024] Takođe je opisano jedinjenje formule ID gde A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NRa’Rb’, --ORe, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila; gde su Rei Rfnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; k je 1, 2 ili 3; i, p je 0, 1 ili 2. U sledećem primeru izvođenja, pronalazak daje kombinaciju sa jedinjenjem formule I gde R<5>je nezasićena struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan ili dva heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora. U drugim primerima izvođenja, pronalazak daje jedinjenje formule I gde R<5>je furil, tiofuril, pirolil, pirazolil, oksazolil, azetidinil, piperidinil ili tiazolil, izborno supstituisan sa jednim ili dva metila.

[0025] U sledećem primeru izvođenja, pronalazak daje kobinaciju sa jedinjenjem izabranim iz grupe koja se sastoji od:

4-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}piridin-2-sulfonamida;

2,2,2-trifluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-etansulfonamida;

2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamida;

N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}propan-1-sulfonamida;

1-ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metansulfonamida;

N-{cis-3-[(butilsulfonil)metil]cklobutil}-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina;

1-ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-azetidin-3-sulfonamida;

3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-azetidin-1-sulfonamida;

(1R,5S)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamida;

(3R)-3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-pirolidin-1-sulfonamida;

(3S)-3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-pirolidin-1-sulfonamida;

1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metan-sulfonamida;

trans-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}ciklobutansulfonamida;

cis-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}ciklobutan-sulfonamida;

(1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida;

(1R,5R)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida;

3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida;

cis-3-(cijanometil)-3-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida;

trans-3-(cijanometil)-3-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamida;

N-(2-cijanoetil)-N-metil-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}sumpornog diamida;

3-(2-hidroksipropan-2-il)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}benzen-sulfonamida;

N-(ciklopropilmetil)-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}sumpornog diamida;

N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-4-(1H-pirazol-3-il)piperidin-1-sulfonamida;

2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-2,6-dihidropirolo[3,4-c]pirazol-5(4H)-sulfonamida;

2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamida; ili, njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0026] U sledećem primeru izvođenja, pronalazak daje jedinjenje izabrano iz grupe koja se sastoji od:

1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}metansulfonamida;

3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida; i, ili, njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0027] U drugim primerima izvođenja, pronalazak daje kombinaciju sa jedinjenjem izabranim iz grupe koja se sastoji od:

(3R)-3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}pirolidin-1-sulfonamida;

i,

2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-2,6-dihidropirolo[3,4-c]pirazol-5(4H)-sulfonamida; ili, njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0028] Naročito poželjni primeri izvođenja obuhvataju 2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamid, N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamid; N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-oksetan-3-ilmetansulfonamid 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metansulfonamid; 3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamid; trans-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamid; (1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamid i (3S)-1-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]pirolidin-3-karbonitril; ili, njihovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0029] Predmetni pronalazak takođe daje farmaceutsku ili veterinarsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule I, IA, IB, IC ili ID, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0030] Takođe je opisan postupak za lečenje poremećaja ili stanja povezanog sa disregulacijom JAK, i naročito JAK1, kod subjekta, koji sadrži primenu na subjekta terapeutski efikasne količine jedinjenja koje ima formulu I, IA, IB, IC ili ID, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U određenim primerima izvođenja, poremećaj ili stanje lečeni pomoću ovog postupka je izabrano od reumatoidnog artritisa, miozitisa, vaskulitisa, pemfigusa, Crohn-ove bolesti, ulceroznog kolitisa, Alzheimer-ove bolesti, lupusa, nefritisa, psorijaze, atopijskog dermatitisa, autoimunih tiroidnih poremećaja, multiple skleroze, velikog depresivnog poremećaja, alergije, astme, Sjogren-ove bolesti, sindroma suvog oka, odbacivanja transplantiranog organa, kseno-transplantacije, dijabetesa tipa I i komplikacija dijabetesa, kancera, leukemije, T ćelijske akutne limfoblastične leukemije, T ćelijske leukemije kod odraslih aktivirane ćelijama sličnim B ćelijama, difuznog krupnoćelijskog B ćelijskog limfoma, inflamatorne bolesti creva, septičkog šoka, kardiopulmonalne disfunkcije, hroničnog pulmonarnog opstruktivnog poremećaja, akutne respiratorne bolesti i kaheksije koji sadrži korak primene na subjekta efikasne količine kompozicije koja sadrži jedinjenje formule I, IA, IB, IC ili ID. U određenim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina korišćena prema postupku je od 0.01 mg/kg telesne težine/dan do 100 mg/kg telesne težine/dan. U određenim drugim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina korišćena prema postupku je terapeutski efikasna količina od 0.1 mg/kg telesne težine/dan do 10 mg/kg telesne težine/dan. U izvođenju postupka, jedinjenje formule I je poželjno izabrano od N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamida, N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-oksetan-3-ilmetansulfonamida; 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metansulfonamida; 3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamida; trans-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida; (1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabi-ciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida; i, (3S)-1-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]pirolidin-3-karbonitrila;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0031] Takođe je opisan postupak za lečenje ili prevenciju poremećaja ili stanja izabranog od atopijskog dermatitisa, ekcema, skleroderme, pruritusa, drugih pruritičkih stanja, alergijskih reakcija uključujući alergijski dermatitis kod sisara, alergijske bolesti konja uključujući hipersenzitivnost na ujed, letnji ekcem, slatki svrab kod konja, bolest sličnu astmi kod konja, inflamatornu bolest disajnih puteva, povratnu opstrukciju disajnih puteva i hiperresponsivnosti disajnih puteva primenom na sisara kod koga postoji potreba za tim terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0032] U određenim primerima izvođenja gore navedenog opisa, terapeutski efikasna količima korišćena u skladu sa postupkom je od 0.01 mg/kg telesne težine/dan do 100 mg/kg telesne težine/dan. U određenim drugim primerima izvođenja, terapeutski efikasna količina korišćena u skladu sa postupkom je tamo gde je terapeutski efikasna količina od 0.1 mg/kg telesne težine/dan do 10 mg/kg telesne težine/dan. U skladu sa postupkom, sisar tretiran jedinjenjem prema pronalasku je izabran od pratećih životinja, pasa i stoke. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje formule I, IA, IB, IC ili ID, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu biti primenjivani u skladu sa postupkom oralno, parenteralno ili topikalno. U izvođenju postupka, jedinjenje formule I je poželjno izabrano od N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamida; N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-oksetan-3-ilmetansulfonamida; 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metansulfonamida; 3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamida; trans-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida; (1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida; i, (3S)-1-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]pirolidin-3-karbonitrila; ili, njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0033] Jedinjenja koja imaju istu molekulsku formulu, ali se razlikuju po prirodi ili redosledu vezivanja njihovih atoma ili rasporedu njihovih atoma u prostoru su označena terminom "izomeri". Izomeri koji se razlikuju po rasporedu svojih atoma u prostoru su označeni terminom "stereoizomeri". Stručnjacima iz date oblasti tehnike biće jasno jedinjenje formule I, IA, IB, IC ili ID može da postoji kao cis- i trans- ahiralni diastereomeri.

[0034] Unutar obima opisanih jedinjenja su svi izomeri (npr. cis-, trans-, ili diastereomeri) jedinjenja opisanih ovde pojedinačno, kao i bilo koje smeše. Svi ovi oblici, uključujući enantiomere, diastereomere, cis, trans, sin, anti, solvate (uključujući hidrate), tautomere i njihove smeše, su uključeni u opisana jedinjenja. Stereoizomerne smeše, npr. smeše diastereomera, mogu biti pripremljene u njihove odgovarajuće izomere na poznat način pomoću pogodnog postupka razdvajanja. Diastereomerne smeše na primer mogu biti razdvojene u njihove pojedinačne diastereomere pomoću frakcionisane kristalizacije, hromatografije, raspodele rastvarača i sličnih postupaka. Ovo razdvajanje se može izvesti ili na nivou jednog od početnih jedinjenja ili u samom jedinjenju formule I, IA, IB, IC ili ID. Enantiomeri mogu biti razdvojeni preko formiranja diastereomernih soli, na primer formiranjem soli sa enantiomerno-čistom hiralnom kiselinom ili pomoću hromatografije, na primer pomoću HPLC, upotrebom hromatografskih supstrata sa hiralnim ligandima.

[0035] U terapeutskoj upotrebi za lečenje poremećaja kod sisara, jedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegove farmaceutske kompozicije mogu biti primenjeni oralno, parenteralno, topikalno, rektalno, transmukozno, ili intestinalno. Parenteralne primene obuhvataju indirektne injekcije za generisanje sistemskog efekta ili direktne injekcije na pogođenu oblast. Topikalne primene obuhvataju tretman kože ili organa lako dostupne lokalnom primenom, na primer, na oči ili uši. One takođe obuhvataju transdermalnu primenu za generisanje sistemskog efekta. Rektalna primena obuhvata oblik supozitorija. Poželjni putevi primene su oralni i parenteralni.

[0036] Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID obuhvataju njihove kisele adicione i bazne soli. Pogodne kisele adicione soli su formirane od kiselina koje formiraju netoksične soli. Primeri obuhvataju acetat, adipat, aspartat, benzoat, besilat, bikarbonat/karbonat, bisulfat/sulfat, borat, kamsilat, citrat, ciklamat, edisilat, esilat, format, fumarat, gluceptat, glukonat, glukuronat, heksafluorofosfat, hibenzat, hidrohlorid/hlorid, hidrobromid/bromid, hidrojodid/jodid, izetionat, laktat, malat, maleat, malonat, mesilat, metilsulfat, naftilat, 2-napsilat, nikotinat, nitrat, orotat, oksalat, palmitat, pamoat, fosfat/hidrogen fosfat/dihidrogen fosfat, piroglutamat, saharat, stearat, sukcinat, tanat, tartrat, tozilat, trifluoroacetat i ksinofoat soli.

[0037] Pogodne bazne soli su formirane od baza koje formiraju netoksične soli. Primeri obuhvataju soli aluminijuma, arginina, benzatina, kalcijuma, holina, dietilamina, diolamina, glicina, lizina, magnezijuma, meglumina, olamina, kalijuma, natrijuma, trometamina i cinka.

[0038] Hemisoli kiselina i baza takođe mogu biti formirane, na primer, hemisulfatne i hemikalcijum soli. Za prikaz pogodnih soli, videti Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002).

[0039] Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID mogu biti pripremljene, respektivno, pomoću jednog ili više od tri postupka: (i) reakcijom jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID sa željenom kiselinom ili bazom; (ii) uklanjanjem zaštitne grupe osetljive na kiselinu ili bazu iz pogodnog prekursora jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID ili otvaranjem prstena pogodnog cikličnog prekursora, na primer, laktona ili laktama, upotrebom željene kiseline ili baze; ili (iii) prevođenjem jedne soli jedinjenja formule I, IA, IB, IC ili ID u drugu reakcijom sa odgovarajućom kiselinom ili bazom ili pomoću pogodne jonoizmenjivačke kolone. Sve tri reakcije su tipično izvedene u rastvoru. Rezultujuća so može da se istaloži i da se sakupi filtracijom ili može biti dobijena isparavanjem rastvarača. Stepen jonizacije u rezultujućoj soli može da varira od potpuno jonizovanog do skoro nejonizovanog.

[0040] Farmaceutske kompozicije prema predmetnom pronalasku mogu biti proizvedene pomoću postupaka dobro poznatim u stanju tehnike, npr., pomoću konvencionalnog mešanja, rastvaranja, granulacije, pripreme dražeja, pretvaranja u prah, emulgovanja, inkapsulacije, hvatanja, postupaka liofilizacije ili sušenja raspršivanjem.

[0041] Farmaceutske kompozicije za upotrebu u skladu sa predmetnim pronalaskom mogu biti formulisane na konvencionalan način upotrebom jednog ili više farmaceutski prihvatljivih nosača koji sadrže ekscipijense i pomoćna sredstva, koji olakšavaju obradu aktivnog jedinjenja u preparate, koji mogu biti korišćeni farmaceutski. Pogodna formulacija je zavisna od izabranog puta primene. Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi i nosači su generalno poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike i na taj način su uključeni u ovaj pronalazak. Takvi ekscipijensi i nosači su opisani, na primer, u "Remington’s Pharmaceutical Sciences" Mack Pub. Co., New Jersey (1991). Formulacije prema pronalasku mogu biti dizajnirane tako da imaju kratko delovanje, brzo oslobađanje, dugotrajno delovanje i produženo oslobađanje. Na taj način, farmaceutske formulacije takođe mogu biti formulisane za kontrolisano oslobađanje ili za sporo oslobađanje.

[0042] Farmaceutske kompozicije pogodne za upotrebu u predmetnom pronalasku obuhvataju kompozicije u kojima su aktivni sastojci sadržani u količini koja je dovoljna da se postigne nameravana svrha, tj., kontrola ili lečenje poremećaja ili bolesti. Specifičnije, terapeutski efikasna količina označava količinu jedinjenja efikasnu za prevenciju, olakšanje ili poboljšanje simptoma/znakova bolesti ili produženje preživljavanja subjekta koji se leči.

[0043] Količina aktivne komponente, koja je jedinjenje prema ovom pronalasku, u farmaceutskoj kompoziciji i njegovog jediničnog oblika doze, može biti varirana ili podešena široko u zavisnosti od načina primene, potencije određenog jedinjenja i željene koncentrcije. Određivanje terapeutski efikasne količine je unutar sposobnosti stručnjaka iz date oblasti tehnike. Generalno, količina aktivne komponente će biti u opsegu između 0.01% do 99% prema težini kompozicije.

[0044] Generalno, terapeutski efikasna količina doze aktivne komponente biće u opsegu od oko 0.01 do oko 100 mg/kg telesne težine/dan, poželjno oko 0.1 do oko 10 mg/kg telesne težine/dan, poželjnije oko 0.3 do 3 mg/kg telesne težine/dan, čak poželjnije oko 0.3 do 1.5 mg/kg telesne težine/dan. Trebalo bi razumeti da doze mogu da variraju u zavisnosti od potreba svakog subjkekta i težine poremećaja ili bolesti koje se leče.

[0045] Željena doza može povoljno biti predstavljena u jednoj dozi ili kao podeljene doze primenjene u odgovarajućim intervalima, na primer, kao dve, tri, četiri ili više pod-doza na dan. Sama pod-doza može biti dalje podeljena, npr., u određeni broj posebnih primena sa malim razmakom; kao što su višestruke inhalacije iz insuflatora ili primenom većeg broja kapi u oko.

[0046] Takođe, potrebno je razumeti da početna primenjena doza može biti povećana preko gore navedenog gornjeg nivoa u cilju brzog postizanja željene koncentracije u plazmi. Sa druge strane, početna doza može biti manja od optimalne i dnevna doza može biti progresivno povećavana u toku lečenja u zavisnosti od određene situacije. Ako je poželjno, dnevna doza može takođe biti podeljena u višestruke doze za primenu, npr., dva do četiri puta na dan.

[0047] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su usmerena na jedinjenja pirolo[2,3-d]pirimidina korisna kao inhibitori Janus kinaze (JAK-i). Ona su korisna kao terapeutska sredstva zajedno sa lečenjem ili prevencijom poremećaja ili stanja izabranog od reumatoidnog artritisa, miozitisa, vaskulitisa, pemfigusa, Crohn-ove bolesti, ulceroznog kolitisa, Alzheimerove bolesti, lupusa, nefritisa, psorijaze, atopijskog dermatitisa, autoimunih tiroidnih poremećaja, multiple skleroze, velikog depresivnog poremećaja, alergije, astme, Sjogren-ove bolesti, sindroma suvog oka, odbacivanja transplantiranog organa, kseno-transplantacije, dijabetesa tipa I i komplikacija dijabetesa, kancera, leukemije, T ćelijske akutne limfoblastične leukemije, T ćelijske leukemije kod odraslih aktivirane ćelijama sličnim B ćelijama, difuznog krupnoćelijskog B ćelijskog limfoma, inflamatorne bolesti creva, septičkog šoka, kardiopulmonalne disfunkcije, hroničnog pulmonarnog opstruktivnog poremećaja, akutne respiratorne bolesti, kaheksije i drugih indikacija gde bi imunosupresija/imunomodulacija bila poželjna, koji sadrži korak primenu na subjekta efikasne količine jedinjenja prema pronalasku.

[0048] Postoji značajna potreba za bezbednim i efikasnim sredstvima za kontrolu poremećaja povezanih sa JAK, kao što je atopijski dermatitis, kako kod ljudi tako i kod životinja. Tržištem za lečenje atopijskog dermatitisa kod žiotinja trenutno dominiraju kortikosteroidi, koji izazivaju uznemirujuće i nepoželjne sporedne efekte kod životinja, specifično kod pratećih životinja kao što su psi. Antihistamini su takođe korišćeni, ali su slabo efikasni.

Formulacija za pse ciklosporina (ATOPICA™) se trenutno prodaje za atopijski dermatitis, ali je skupa i ima spori početak efikasnosti. Pored toga, postoje problemi GI tolerancije sa ATOPICA™. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su inhibitori JAK sa selektivnom efikasnošću protiv JAK1. Očekuje se da ova jedinjenja obezbeđuju alternativu upotrebi steroida i obezbeđuju reršavanje hroničnog pruritusa i inflamacije koja bi ili postojala kod atopijskog dermatitisa ili bi imala sporu regresiju posle uklanjanja alergena ili uzročnog sredstva, kao što su buve kod dermatitisa sa alergijom na buve.

[0049] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su u farmaceutski prihvatljivom obliku u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava koja moduliraju sisarski imuni sistem ili sa anti-inflamatornim sredstvima. Ova sredstva mogu da obuhvataju, ali bez ograničenja na ciklosporin A (npr., Sandimmune™ ili Neoral™, rapamicin, FK-506 (takrolimus), leflunomid, deoksispergualin, mikofenolat (npr., Cellcept™, azatioprin (npr., Imuran™), daklizumab (npr., Zenapax™), OKT3 (npr., Orthocolone™), AtGam, aspirin, acetaminofen, ibuprofen, naproksen, piroksikam i anti-inflamatorne steroide (npr., prednizolon ili deksametazon). Ova sredstva mogu biti primenjivana kao deo istih ili posebnih oblika doze, preko istih ili različitih puteva primene, i po istim ili različitim režimima primene prema standardnoj farmaceutskoj praksi poznatoj stručnjaku iz date oblasti tehnike.

[0050] Prema tome, opisani su postupci za lečenje ili prevenciju bolesti, stanja ili poremećaja povezanog sa JAK kod subjekta, kao što je čovek ili sisar koji nije čovek, koji sadrže primenu efikasne količine jednog ili više jedinjenja koja su ovde opisana na subjekta. Pogodni subjekti koji mogu biti lečeni obuhvataju domaće ili divlje životinje, prateće žoivotinje, kao što su psi, mačke, konji i slično; stoka uključujući, krave i druge preživare, svinje, živinu, zečeve i slično; primate, na primer majmune, kao što su rezus majmuni i makaki (takođe poznati kao majmuni koji se hrane krabama ili dugorepi) majmuni, marmozeti, tamarini, šimpanze, makaki i slično; i glodare, kao što su pacovi, miševi, gerbili, zamorci i slično. U jednom primeru izvođenja, jedinjenje je primenjeno u farmaceutski prihvatljivom obliku, izborno u farmaceutski prihvatljivom nosaču.

[0051] Stanja kod kojih je razmatrano selektivno ciljno delovanje JAK puta ili modulacija JAK kinaza, naročito JAK1, su razmatrana kao terapeutski efikasna i obuhvataju, artritis, astmu, autoimune bolesti, kancere ili tumore, dijabetes, određene bolesti oka, poremećaje ili stanja, inflamaciju, intestinalne inflamacije, alergije ili stanja, neurodegenerativne bolesti, psorijazu i odbacivanje transplanta. Stanja koja mogu imati korist od selektivne inhibicije JAK1 su razmatrana detaljnije u daljem tekstu.

[0052] Prema tome, jedinjenje formule I, IA, IB, IC ili ID, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i njihove farmaceutski prihvatljive kompozicije mogu biti korišćeni za lečenje različitih stanja ili bolesti kao što su sledeći:

Artritis, uključujući reumatoidni artritis, juvenilni artritis i psorijatički artritis;

Autoimune bolesti ili poremećaji, uključujući one označene kao autoimuni poremećaji tipa jednog organa ili tipa jedne ćelije, na primer Hashimoto-ov tiroiditis, autoimuna hemolitička anemija, autoimuni atrofični gastritis perniciozne anemije, autoimuni encefalomijelitis, autoimuni orhitis, Goodpasture-ova bolest, autoimuna trombocitopenija, simpatička oftalmija, mijastenija gravis, Graves-ova bolest, primarna bilijarna ciroza, hronični agresivni hepatitis, ulcerozni kolitis i membranozna glomerulopatija, one označene kao da uključuju sistemski autoimuni poremećaj, na primer sistemski lupus eritematozis, reumatoidni artritis, Sjogren-ov sindrom, Reiter-ov sindrom, polimiozitis-dermatomiozitis, sistemska skleroza, poliarteritis nodoza, multipla skleroza i bulozni pemfigoid, i dodatne autoimune bolesti, koje mogu biti na bazi O-ćelija (humoralni) ili na bazi T-ćelija, uključujući Cogan-ov sindrom, ankilozni spondilitis, Wegener-ov granulomatozis, autoimuna alopecija, dijabetes tipa I ili juvenilni, ili tiroiditis;

Kanceri ili tumori, uključujući kancer alimentarnog/gastrointestinalnog trakta, kancer debelog creva, kancer jetre, kancer kože uključujući tumor mastocita i karcinom skvamoznih ćelija, kancer dojke i mlečne žlezde, kancer jajnika, kancer prostate, limfom, leukemiju, uključujući akutnu mijelogenu leukemiju i hroničnu mijelogenu leukemiju, kancer bubrega, kancer pluća, kancer mišića, kancer kosti, kancer bešike, kancer mozga, melanom uključujući oralni i metastatski melanom, Kaposi-ev sarkom, mijelomi uključujući multipli mijelom, mijeloproliferativne poremećaje, proliferativnu dijabetičku retinopatiju ili poremećaji povezani sa angiogenezom uključujući solidne tumore;

Dijabetes, uključujući dijabetes tipa I ili komplikacije od dijabetesa;

Bolesti, poremećaji ili stanja oka, uključujući autoimune bolesti oka, keratokonjuktivitis, prolećni konjuktivitis, uveitis uključujući uveitis povezan sa Behcet-ovom bolešću i uveitis indukovan sočivom, keratitis, herpetički keratitis, konusni keratitis, kornealnu epitelijalnu distrofiju, keratoleukom, okularni pemfigus, Mooren-ov ulcer, skleritis, Grave-ovu oftalmopatiju, Vogt-Koyanagi-Harada sindrom, keratokonjuktivitis sika (suvo oko), fliktenul, iridociklitis, sarkoidozu, endokrinu oftalmopatiju, simpatički oftalmus, alergijski konjuktivitis, ili okularnu neovaskularizaciju;

Crevne inflamacije, alergije ili stanja uključujući Crohn-ovu bolest i/ili ulcerozni kolitis, inflamatornu bolest creva, celijačne bolesti, proktitis, eozinofilni gastroenteritis ili mastocitozu;

Neurodegenerativne bolesti uključujući motornu neuronsku bolest, Alzheimer-ou bolest, Parkinson-ovu bolest, amiotrofičnu lateralnu sklerozu, Huntington-ovu bolest, cerebralnu ishemiju ili neurodegenerativnu bolest uzorokovanu traumatskom povredom, udar, neurotoksičnost glutamata ili hipoksiju; ishemičnu/reperfuzionu povredu kod šloga, miokardijalnu ishemiju, ishemiju bubrega, srčane napade, srčanu hipertrofiju, aterosklerozu i arteriosklerozu, hipoksiju organa ili agregaciju trombocita;

Bolesti, stanja ili poremećaji kože uključujući atopijski dermatitis, ekcem, psorijazu, sklerodermu, pruritus ili druga pruritička stanja;

Alergijske reakcije uključujući alergijski dermatitis kod sisara (uključujući alergijske bolesti konja kao što je hiperosteljivost na ujed), letnji ekcem, sladak svrab kod konja, bolest sličnu astmi kod konja, inflamatornu bolest disajnih puteva, rekurentnu opstrukciju disajnih puteva, hiper-responsivnost disajnih puteva ili hroničnu opstruktivnu bolest pluća;

Astma i druge opstruktivne bolesti disajnih puteva, uključujući hroničnu ili inveteratnu astmu, kasnu astmu, bronhitis, bronhijalnu astmu, alergijsku astmu, intrinzičnu astmu, ekstrinzičnu astmu, ili astmu od prašine;

Odbacivanje transplanta, uključujući odbacivanje transplanta ostrvca pankreasa, odbacivanje transplanta koštane srži, bolest grafta protiv domaćina, odbacivanje transplantiranog organa i ćelije kao što je koštana srž, hrskavica, rožnjača, srce, intervertebralni disk, ostrvce, bubreg, ud, jetra, pluća, mišić, mioblast, nerv, pankreas, koža, tanko crevo ili traheja, ili ksenotransplantacija; i

Sledeći primer izvođenja daje postupak selektivne inhibicije JAK1 enzima, koji obuhvata dovođenje u kontakt jAK enzima sa neterapeutskom količinom ili terapeutski efikasnom količinom jednog ili više ovde opisanih jedinjenja. Takvi postupci mogu da se jave in vivo ili in vitro. In vitro kontakt može da obuhvata skrining analizu za određivanje efikasnosti jednog ili više jedinjenja protiv izabranog enzima u različitim količinama ili koncentracijama. In vivo kontakt sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više jedinjenja može da obuhvata lečenje opisane bolesti, poremećaja ili stanja ili profilaksu odbacivanja transplantiranog organa kod životinje kod koje se javlja kontakt. Efekat jednog ili više jedinjenja na jAK enzim i/ili životinju domaćina takođe može biti određen ili izmeren. Postupci za određivanje aktivnosti JAK obuhvataju one opisane u Primerima kao i one opisane u WO99/65908, WO 99/65909, WO01/42246, WO02/00661, WO02/096909, WO2004/046112 i WO2007/012953.

Hemijska sinteza

[0053] Sledeće šeme i pisani opisi daju opšte detalje u vezi sa pripremom jedinjenja prema pronalasku.

SULFONAMIDI

[0054] Jedinjenja formule I, gde p je 2, X je NH, Y je AR<5>, i A je veza, mogu biti pripremljeni prema Šemi 1.

[0055] Stručnjaku iz date oblasti tehnike biće jasno da može biti potrebna zaštita i deprotekcija osetljivih funkcionalnih grupa (PG) u toku sinteze jedinjenja prema pronalasku. Zaštita i deprotekcija mogu se postići pomoću konvencionalnih postupaka, kao što su opisani, na primer, u "Protective Groups in Organic Synthesis" by T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons Inc. (1999), i referencama koje su tu date. Na taj način, u Šemi 1, Korak 1, jedinjenje formule II, gde Q1 je halogen, je tretirano zaštitnim sredstvom da bi se dobilo jedinjenje formule III, gde PG1 je arilsulfonil zaštitna grupa kao što je benzensulfonil, ili poželjno para-toluensulfonil ("tozil"). Zaštitna grupa može biti instalirana reakcijom jedinjenja formule II sa arilsulfonil hloridom, poželjno tozil hloridom, u prisustvu baze kao što je vodeni rastvor natrijum hidroksida i organski rastvarač kao što je aceton. Reakcija se tipično izvodi na 0°C do oko 50°C, poželjno na oko 23°C (sobna temperatura). Alternativno, mogu biti korišćene baze kao što su natrijum hidrid i kalijum terc-butoksid, upotrebom pogodnog rastvarača kao što je N,N-dimetilformamid ili tetrahidrofuran. Nekoliko jedinjenja formule II su poznata u literaturi i pripremljena su pomoću gore navedenih postupaka. Na primer, sinteza jedinjenja formule II, gde Q1 je Cl i R<2>i R<3>su vodonik je prethodno objavljena, na primer u WO 2007012953.

[0056] U Šemi 1, Korak 2, zaštićeno jedinjenje formule III je kombinovano sa 1-2 ekvivalenta amina formule IV u prisustvu 1-3 ekvivalenta baze i protičnim rastvaračem da bi se dobilo jedinjenje formule V. Pogodne baze obuhvataju trietilamin, diizopropiletilamin, i kalijum karbonat, dok pogodni rastvarači obuhvataju metanol, etanol, diizopropil alkohol i vodu ili njihove smeše. Reakcija se tipično izvodi na oko 23°C do oko 150°C, poželjno oko 75°C. Biće naglašeno da amin formule IV sadrži drugu amino grupu koja je zaštićena sa zaštitnom grupom PG2 koja može biti uklonjena pod uslovima koji ne dovode do gubitka PG1. Pogodne zaštitne grupe PG2 obuhvataju t-butoksikarbonil ("Boc") i ("Cbz"), poželjno benziloksikarbonil.

[0057] U Šemi 1, Korak 3, zaštitna grupa PG2 je uklonjena iz jedinjenja formule V pod uslovima koji ne dovode do gubitka PG1 da bi se dobio primarni amin (ili njegova so) formule VI. Kada je PG2 jednak benziloksikarbonil, benziloksikarbonil zaštitna grupa može biti uklonjena hidrogeniolizom gde je jedinjenje formule V izloženo vodoniku ili reagensu za transfer vodonika kao što je cikloheksen u prisustvu katalizatora hidrogenizacije kao što je paladijum hidroksid upotrebom rastvarača kao što je metanol, sirćetna kiselina ili poželjno, etanol. Alternativno, kada je PG2 jednak benziloksikarbobil, benziloksikarbonil zaštitna grupa može biti uklonjena tretmanom jedinjenja formule V sa rastvorom vodonik bromida (oko 6 ekvivalenata) u sirćetnoj kiselini izborno u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je etil acetat na temperaturi od oko minus 20°C do oko 40°C, poželjno manje od 25°C. Ovaj poslednji postupak deprotekcije je poželjan gde n je 1, R<2>, R<3>i R<4>su vodonik, R<1>je metil, PG1 je tozil i PG2 je benziloksikarbonil i daje amin formule VI kao dihidrobromidnu so. Kada je PG2 tbutoksikarbonil, t-butoksikarbonil zaštitna grupa može biti uklonjena tretmanom sa viškom kiseline kao što je hlorovodonična kiselina ili trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču kao što je dihlorometan ili 1,4-dioksan.

[0058] U Šemi 1, Korak 4, primarni amin formule VI (ili njegova so) je preveden u sulfonamid derivat formule VII tretmanom sa aktiviranim derivatom sulfonske kiseline formule VIII, gde Q2 je halogen, O-alkil ili O-aril u prisustvu baze. Najčešće, VIII je sulfonil hlorid derivat u kome Q2 je Cl. Mnogi sulfonil hloridi mogu biti dobijeni iz komercijalnih izovra. Takođe, postoji nekoliko postupaka za pripremu sulfonil hlorida, koji su dobro poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike i opisani su u tekstovima kao što je "Advanced Organic Chemistry" by J. March, John Wiley & Sons (1985). Tipično, amin formule VI je tretiran derivatom sulfonil hlorida formule VIII gde Q2 je Cl u prisustvu najmanje jednog ekvivalenta baze kao što je trietilamin ili diizopropilamin u pogodnom rastvaraču kao što je dihlorometan, tetrahidrofuran ili acetonitril. Kada je korišćen oblik soli amina, dodatni ekvivalent baze je korišćen za svaki ekvivalent kiseline koja formira so. Na primer, upotrebom dihidrobromidne soli, koriste se dva dodatna ekvivalenta baze. Reakcija može biti izvedena od oko minus 20°C do oko 50°C, poželjno počevši reakciju na oko 0°C i zatim omogućavajući da se zagreva do oko 23°C (sobna temperatura).

[0059] Konačno, u Šemi 1, Korak 5, derivat sulfonamida formule VII je deprotektovan da bi se dobilo jedinjenje formule 1, gde p je 2, X je NH, Y je AR<5>i A je veza. Tipično su korišćena dva postupka, čiji izbor je određen preko kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu. Prvi postupak obuhvata izlaganje jedinjenja formule VII višku (oko 4 ekvivalenta) baze kao što je litijum hidroksid ili natrijum hidroksid. Reakcija je izvođenja u smeši rastvarača koja sadrži vodu i alkohol kao što je metanol ili etanol. Ona takođe može biti izvođena u smeši vode i tetrahidrofurana, i, izborno alkohola kao što je metanol ili etanol. Reakcija može biti izvođenja na temperaturi od oko 23°C do oko 100°C, tipično oko 60°C. Drugi postupak, koji je poželjan u slučajevima gde postoji funkcionalna gupa osetljiva na hidroksid kao što je nitril prisutna u molekulu, obuhvata reakciju jedinjenja formule VII sa viškom tetrabutilamonijum fluorida (4-25 ekvivalenata) u rastvaraču kao što je 1,2-dimetoksietan ili, poželjno tetrahidrofuran. Deprotekcija je izvedena na temperaturi od oko 0°C do oko 60°C, poželjno oko 23°C.

[0060] Jedinjenja formule II, u kojima Q1 je halogen, su komercijalno dostupna ili su poznata u hemijskoj literaturi. Na primer, 4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin, gde Q1 je Cl i R<2>i R<3>su oba vodonik, je lako dostupno komercijalno jedinjenje.

[0061] Jedinjenja formule IV su poznata u hemijskoj literaturi ili mogu biti pripremljena pomoću standardnih hemijskih reakcija dobro poznatih stručnjaku iz date oblasti tehnike.

[0062] Alternativni postupak pripreme jedinjenja prema pronalasku gde p je 2, X je NH, Y je AR<5>, A je veza, je prikazan u Šemi 2.

[0063] U Šemi 2, Korak 1, jedinjenje formule IX je kombinovano sa derivatom benziloksikarbamata formule X u prisustvu baze (1-5 ekvivalenata) da bi se dobio derivat benziloksikarbamata formule XI. Reakcija je izvedena u rastvaraču kao što je voda ili alkohol kao što je etanol, izborno uz dodavanje mešljivog ko-rastvarača kao što je tetrahidrifuran. Pogodne baze obuhvataju kalijum karbonat, cezijum karbonat, trietilamin i diizopropiletilamin. Reakcija je izvođena na oko 23°C do oko 100°C. Kada je n jednako 1, R<2>, R<3>i R<4>su vodonik, i R<1>je metil, poželjni uslovi su za izvođenje reakcije u vodi, upotrebom kalijum karbonata (3 ekvivalenta) kao baze, počevši reakciju na oko 23°C i zatim zagrevanjem do oko 95°C.

[0064] U Šemi 2, Korak 2, derivat benziloksikarbamata formule XI je deprotektovan izlaganjem vodoniku ili reagensu za transfer vodonika kao što je cikloheksen u prisustvu hidrogenizacionog katalizatora kao što je paladijum hidroksid. U isto vreme, pod uslovima deprotekcije, atom hlora na 2-položaju prstena 7H-pirolo[2,3-d]pirimidina je zamenjen vodonikom da bi se dobila amin hidrohloridna so formule XII. Reakcija je izvedena u rastvaraču kao što je metanol ili etanol na temperaturi od oko 50°C do oko 80°C. Kada su R<2>, R<3>i R<4>jednaki vodonik, i R<1>je metil, poželjni uslovi su za izvođenje reakcije u etanolu na oko 78°C upotrebom paladijum hidroksida kao katalizatora, i cikloheksena (oko 20 ekvivalenata) kao reagensa za transfer vodonika.

[0065] Konačno, u Šemi 2, Korak 3, amin hidrohlorid formule XII je preveden u sulfonamid formule I, gde p je 2, X je NH, Y je AR<5>, A je vezan pomoću reakcije sa aktiviranim derivatom sulfonske kiseline formule VIII, gde Q2 je halogen, O-alkil ili O-aril u prisustvu najmanje dva ekvivalenta baze. Najčešće, VIII je derivat sulfonil hlorida gde Q2 je Cl. Pogodne baze obuhvataju trietilamin, diizopropiletilamin i kalijum karbonat. Pogodni rastvarači obuhvataju N,N-dimetilformamid, i smešu tetrahidrofurana i vode. Reakcija se može izvoditi na temperaturi od oko minus 20°C do oko 50°C poželjno na oko 23°C. Alternativno, amin hidrohlorid formule XII je prvo tretiran sa oko 2 ekvivalenta trimetilhlorosilana u prisustvu oko 2-3 ekvivalenata baze kao što je litijum bis(dimetilsilil)amid ili natrijum bis(dimetilsilil)amid u pogodnom neprotičnom rastvaraču kao što je tetrahidrofuran. Zatim, posle oko 1 časa, oko 1.2 ekvivalenata sulfonil hlorida formule VIII, Q2 je Cl je dodato da bi se posle obrade dobio sulfonamid formule I, gde p je 2, X je NH, Y je AR<5>, A je veza

Reakcija može biti izvođena na temperaturi od oko minus 20°C do oko 50°C, poželjno na oko 23°C.

[0066] Jedinjenja formule IX, su komercijalno dostupna ili su poznata u hemijskoj literaturi. Na primer, 2,4-dihloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin, gde R<2>i R<3>su oba vodonik, je komercijalno dostupan. Njegova sinteza je opisana u PCT međunarodnoj objavi br. WO2007/012953.

SULFAMIDI

[0067] Jedinjenja formule I, gde p je 2, X je NH, i Y je NRaRb, može biti pripremljeno prema Šemi 3.

[0068] U Šemi 3, Korak 1, amin formule VI (ili njegova so), gde PG1 je arilsulfonil zaštitna grupa kao što je benzensulfonil, ili poželjno tozil, je preveden u derivat oksazolidinona formule XIII. Prvo, rastvor N-hlorosulfonilizocijanata (1 ekvivalent) je sporo dodat u rastvor 2-bromoetanola (1 ekvivalent) na temperaturi od oko -40°C do oko 10°C, poželjno oko 0°C. Zatim, posle 0.5 do 2 časa, lagano je dodat rastvor amina formule VI (1 ekvivalent) i baze kao što je trietilamina ili diizopropiletilamina (oko 3 ekvivalenta, plus jedan ekvivalent za svaki mol kiseline koja formira so) i reakcija je ostavljena da se zagreva do oko 23°C tokom perioda od oko 10 do 24 časova. Pogodni rastvarači za reakciju obuhvataju hloroform ili poželjno dihlorometan.

[0069] U Šemi 3, Korak 2, derivat oksazolidinona formule XIII je reagovao sa 1-3 ekvivalenata amina formule HNRaRb, u prisustvu baze (2-5 ekvivalenata), da bi se dobio derivat sulfamida formule XIV. Pogodne baze obuhvataju trietilamin i diizopropiletilamin. Reakcija je poželjno izvedena zagrevanjem do oko 90°C do oko 150°C u posudi pod pritiskom upotrebom pogodnog rastvarača kao što je N,N-dimetilformamid ili acetonitril.

[0070] U Šemi 3, Korak 3, jedinjenje formule XIV je deprotektovano, uklanjanjem arilsulfonil zaštitne grupe PG1 da bi se dobio derivat sulfamida formule 1, gde p je 2, X je NH, i Y je NRaRb. Reakcija može biti izvedena pomoću jednog od dva opšta postupka opisana za Šemu 1, Korak 5. Ponovo, izbor postupka deprotekcije je određen preko kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu. Alternativno, sulfamidi formule XIV mogu biti dobijeni direktno od amina formule VI (ili njegove soli). Na taj način, u Šemi 3, Korak 4, amin formule VI (ili njegova so) je tretiran sulfamoil hloridom formule Cl-SO2NRaRbi bazom kao što je trietilamin ili diizopropiletilamin kao što je opisano za Šemu 1, Korak 4. Sulfamoil hloridi formule Cl-SO2NRaRbmogu biti pripremljeni, zauzvrat, od amina formule HNRaRbprema postupcima prikazanim od strane W. R. Bowman and R. J. Marmon in "Comprehensive Organic Functional Group Transformations, Volume 2", Pergamon (1995).

[0071] Jedinjenja formule I, gde p je 2, X je NH, i Y je NRaRbmogu takođe biti dobijena direktno od amina formule XII (ili njegove soli). Nataj način, u Šemi 3, Korak 5, amin formule XII (ili njegova so) je tretiran sa sulfamoil hloridom formule Cl-SO2NRaRbi bazom kao što je trietilamin ili diizopropiletilamin kao što je opisano za Šemu 1, Korak 4. Amini formule XII su dobijeni kao što je opisano za Šemu 2. Amini formule XII (ili njihove soli) mogu biti dobijeni uklanjanjem arilsulfonil zaštirne grupe PG1 iz jedinjenja formule VI (u vezi sa Šemom 1). Deprotekcija može biti izvedena pomoću jednog od dva ošta postupka deprotekcije opisana za Šemu 1, Korak 5. Izbor postupka deprotekcije je određen pomoću kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu.

REVERZNI SULFONAMIDI

[0072] Jedinjenja formule I, gde p je 2, X je CH2, i Y je NRaRb, mogu biti pripremljena prema Šemi 4.

[0073] U Šemi 4, Korak 1, jedinjenje formule III (u vezi sa Šemom 1), je kombinovano sa amino alkoholom formule XV u prisustvu baze i polarnog rastvarača da bi se dobilo jedinjenje formule XVI. Pogodne baze obuhvataju trietilamin i diizopropiletilamin dok pogodni rastvarači obuhvataju metanol, diizopropil alkohol i aceton. Reakcija se tipično izvodi na oko 23°C do oko 70°C. Poželjno, u reakciju je dodata katalitička količina (oko 1 mol %) kalijum jodida.

[0074] U Šemi 4, Korak 2, jedinjenje formule XVI je prevedeno u jedinjenje formule XVII, gde LG je odlazeća grupa kao što je bromo, jodo, metansulfonat ili, poželjno, paratoluensulfonat. Postupci za instalaciju takvih odlazećih grupa su dobro poznatih stručnjaku iz date oblasti tehnike i opisani su u tekstovima kao što su "Advanced Organic Chemistry" by J. March, John Wiley & Sons (1985). U slučaju gde LG je para-toluensulfonat, jedinjenje formule XVI je tretirano para-toluensulfonil hloridom u prisustvu baze kao što je trietilamin, diizopropiletilamin ili N,N-dimetilaminopiridin u aprotičnom rastvaraču kao što je dihlorometan ili tetrahidrofuran. Reakcija je izvođenja na temperaturi od oko -10°C do oko 40°C, poželjno počevši na oko 0°C i omogućavajući zagrevanje reakcije do oko 23°C.

[0075] U Šemi 4, Korak 3, jedinjenje formule XVII je kombinovano sa soli tiosirćetne kiseline, poželjno kalijum tioacetatom da bi se proizveo derivat tioestra formule XVIII. Reakcija je izvedena u polarnom rastvaraču kao što je N,N-dimetilformamid ili N-metilpirolidin, na temperaturi od oko 23°C do oko 80°C, poželjno na oko 55°C.

[0076] U Šemi 4, Korak 4, derivat tioestra formule XVIII je preveden u derivat sulfonske kiseline formule XIX reakcijom sa vodenim rastvorom vodonik peroksida, tipično 30% prema težini. Reakcija je izvedena u kiselom rastvaraču kao što je mravlja ili sirćetna kiselina na temperaturi od oko 0°C do oko 40°C, poželjno na oko 23°C.

[0077] U Šemi 4, Korak 5, derivat sulfonske kiseline formule XIX je preveden u derivat sulfonil hlorida formule XX. Iz literature je poznato nekoliko postupaka za izvođenje ove ransformacije funkcionalne grupe. Poželjan postupak je tretman jedinjenja formule XIX sa viškom (3-15 ekvivalenata) tionil hlorida u prisustvu katalitičke količine N,N-dimetilformamida u aprotičnom rastvaraču kao što je dihlorometan ili hloroform. Reakcija može biti izvođena od oko minus 20°C do oko 100°C, poželjno počevši reakciju na oko 0°C, i zatim zagrevanjem do oko 75°C.

[0078] Alternativno, u Šemi 4, Korak 6, derivat tioestra formule XVIII može biti direktno preveden u derivat sulfonil hlorida formule XX tretmanom sa hlorinacionim sredstvom. Iz literature je poznato nekoliko postupaka za izvođenje ove transformacije funkcionalne grupe. Hlorinaciona sredstva obuhvataju gasoviti hlor i N-hlorosukcinimid, i reakcija je uobičajeno izvođena u prisustvu kiseline kao što je hlorovodonična kiselina ili sirćetna kiselina. Mešani vodeni sistemi rastvarača su često korišćeni, kao što su voda i dihlorometan i voda i acetonitril.

[0079] U Šemi 4, Korak 7, derivat sulfonil hlorida formule XX je kombinovan sa 1-3 ekvivalenata amina formule HNRaRbda bi se formirao derivat sulfonamida formule XXI. Reakcija je izvođena u prisustvu najmanje jednog ekvivalenta baze kao što je trietilamin ili diiozopropiletilamin na temperaturi od oko minus 20°C do oko 50°C, poželjno počevši reakciju na oko 0°C i omogućavajući da se reakcija zagreje do oko 23°C. Reakcija je izvođena u aprotonskom rastvaraču kao što je tetrahidrofuran ili dihlorometan.

[0080] Konačno u Šemi 4, Korak 8, arilsulfonil zaštitna grupa PG1 je uklonjena da bi se dobilo jedinjenje formule I, gde p je 2, X je CH2, i Y je NRaRb. Reakcija može biti izvođena pomoću jednog od dva opšta postupka deprotekcije opisana za Šemu 1, Korak 5. Izbor deprotekcije je određen pomoću kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu. Amino alkoholi formule XV su poznati u hemijskoj literaturi ili mogu biti pripremljeni pomoću postupaka dobro poznatih stručnjaku iz date oblasti tehnike.

SULFONI, sulfoksidi i tioetri

[0081] Jedinjenja formule I, gde p je 0, 1 ili 2, X je CH2, Y je AR<5>i A je veza, mogu biti pripremljena prema Šemi 5.

[0082] U Šemi 5, Korak 1, jedinjenje formule XVII (u vezi sa Šemom 4) je tretirano sa 1-2 ekvivalenata tiola formule R<5>SH u prisustvu 1-2 ekvivalenata baze da bi se dobio sulfid formule XXIII. Pogodne baze obuhvataju natrijum hidrid, natrijum bis(trimetilsilil)amid, 1,5-diazabiciklo[4.3.0]non-5-en (DBN) i poželjno, 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (DBU).

Reakcija je izvedena u rastvaraču kao što je N,N-dimetilformamid ili N-metilpirolidinon na temperaturi od oko 0°C do oko 50°C, poželjno na oko 23°C.

[0083] U Šemi 5, Korak 2, jedinjenje formule XXIII je deprotektovano, uklanjanjem arilsulfonil zaštitne grupe PG1 da bi se dobilo jedinjenje formule XXIV. Reakcija može biti izvedena pomoću jednog od dva opšta postupka deprotekcije opisana za Šemu 1, Korak 5.

Izbor postupka deprotekcije je određen pomoću kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu.

[0084] U Šemi 5, Korak 3, sulfid formule XXIV je oksidovan tako da se proizvede sulfon formule I, gde p je 2, X je CH2, Y je AR<5>i A je veza. Nekoliko postupaka su poznati u literaturi i svi obuhvataju upotrebu oksidanta kao što je meta-hloroperbenzoeva kiselina, vodonik peroksid ili kalijum peroksimonosulfat (Oxone®). Poželjan postupak je tretman jedinjenja formule XXIV sa 2 ekvivalenta kalijum peroksimonosulfata (Oxone®) u smeši rastvarača tetrahidrofurana, etanola i vode na temperaturi od oko 23°C. Sulfid formule XXIV takođe može biti oksidovan pod blažim uslovima, na primer upotrebom 1 ekvivalenta metahlorobenzoeve kiseline u rastvaraču kao što je dihlorometan na oko 0°C da bi se proizveo sulfoksid formule I, gde p je 1, X je CH2, Y je AR<5>i A je veza.

[0085] Naglašeno je da redosled Koraka 2 i 3 u Šemi 5, može izborno biti obrnut tako da je korak oksidacije izveden pre koraka deprotekcije.

[0086] Jedinjenja formule I, gde p je 0, X je CH2, Y je AR<5>i A je veza su pripremljena u Šemi 5, Korak 4 uklanjanjem arilsulfonil zaštitne grupe PG1 iz jedinjenja formule XXIII. Reakcija može biti izvedena pomoću jednog od dva opšta postupka deprotekcije opisana za Šemu 1, Korak 5. Ponovo, izbor postupka deprotekcije je određen pomoću kompatibilnosti uslova sa drugim funkcionalnim grupama na molekulu.

[0087] U Šemi 5, Korak 5, jedinjenja formule XXIII su alternativno pripremljena od derivata tioacetata formule XVIII. Prvo, tioacetat formule XVIII je rastvoren u rastvaraču kao što je etanol, metanol ili voda (ili njihova smeša). Pogodna baza kao što je kalijum karbonat ili cezijum karbonat (oko 2 ekvivalenta) je dodata i azot je barbotiran kroz rastvor da bi se uklonio kiseonik. Zatim je dodato alkilujuće sredstvo formule R<5>-LG, gde LG je odlazeća grupa kao što je bromo, jodo, metansulfonat ili para-toluensulfonat. Reakcija je izvedena na temperaturi od oko minus 20°C do oko 30°C. Poželjno, reakcija je započeta na oko 0°C i zatim ostavljena da se zagreva do oko 23°C.

[0088] Mnogi tioli formule R<5>SH i alkilujuća sredstva formule R<5>-LG mogu biti dobijeni iz komercijalnih izvora. Takođe, postoji nekoliko postupaka za pripremu takvih jedinjenja, koji su dobro poznati stručnjaku iz date oblasti tehnike i opisani u tekstovima kao što je "Advanced Organic Chemistry" by J. March, John Wiley & Sons (1985).

[0089] Navodi se da određena jedinjenja prema pronalasku mogu biti dobijena pomoću transformacija funkcionalne grupe na kasnom stadijumu sinteze, na primer, pomoću hemijske modifikacije grupa R<4>ili R<5>posle izvođenja Koraka 4 ili 5 u Šemi 1, Korak 3 u Šemi 2, Koraci 2, 3 ili 4 u Šemi 3, Koraci 7 ili 8 Šemi 4 i Koracima 2, 3, 4 ili 5 u Šemi 5. Takve transformacije funkcionalne grupe mogu da obuhvataju jean korak ili više koraka, na primer, redukciju estra do alkohola, reoksidaciju u aldehid, dodavanje organomagnezijum reagensa tako da se formira sekundarni alkohol, reoksidaciju u keton i, konačno, dodavanje organomagenzijum reagensa da bi se proizveo tercijarni alkohol.

[0090] U izvođenju sinteze jedinjenja prema pronalasku, stručnjak iz date oblasti tehnike će prepoznati potrebu za uzorkovanjem i analiziranjem reakcionih smeša pre obrade u cilju praćenja napredovanja reakcija i odlučivanja o tome da li bi reakciju trebalo nastaviti ili da li je spremna za obradu za dobijanje željenog proizvoda. Uobičajeni postupci za analiziranje reakcionih smeša obuhvataju hromatografiju na tankom sloju (TLC), tečnu hromatografiju/masenu spektroskopiju (LCMS), i nuklearnu magnetnu rezonancu (NMR).

[0091] Stručnjak iz date oblasti tehnike će takođe prepoznati da jedinjenja prema pronalasku mogu biti pripremljena kao smeše diastereomera ili geometrijskih izomera (npr., cis i trans supstitucija na prstenu cikloalkana). Ovi izomeri mogu biti razdvojeni pomoću standardnih hromatografskih tehnika, kao što su hromatografija na normalnim fazama na silika gelu, reverzno-fazna preparativna tečna hromatografija pod visokim pritiskom ili superkritična tečna hromatografija. Stručnjak iz date oblasti tehnike će takođe prepoznati da su izvesna jedinjenja prema pronalasku hiralna i na taj način mogu biti pripremljena kao racemske ili neracemske smeše enantiomera. Nekoliko postupaka je dostupno i dobro poznato stručnjaku iz date oblasti tehnike za razdvajanje enantiomera. Poželjan postupak za rutinsko razdvajanje enantiomera je superkritična tečna hromatografija upotrebom hiralne stacionarne faze.

EKSPERIMENTALNI DEO

[0092] Osim gde je drugačije navedeno, reakcije su izvođene pod atmosferom azota. Hromatografija na silika gelu je izvedena upotrebom silika gela veličine okaca 250-400 upotrebom azota pod pritiskom (~10-15 psi) da bi se rastvarač proveo kroz kolonu ("flash“ hromatografija). Tamo gde je naznačeno, rastvori i reakcione smeše su koncentrovani pomoću rotacionog isparavanja pod vakuumom.

Primer 1: 2,2,2-Trifluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} etansulfonamid

Korak 1: Benzil [cis-3-(metilamino)ciklobutil]karbamat i benzil [trans-3-(metilamino)ciklobutil]karbamat

[0093] 33% rastvor metilamina (1000 mL, 9.13 mol) u apsolutnom etanolu je dodat u smešu benzil (3-oksociklobutil)karbamata (WO2012/75381 A1 i WO2012/09678 A1) (200 g, 0.913 mol) i sirćetne kiseline (88 mL) mešanjem u etanolu (1000 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1.5 časa i zatim mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Litijum borohidrid (41 g, 2.05 mol) je dodavan u porcijama u reakcionu smešu na -70°C. Pošto je dodavanje završeno, reakciona smeša je mešana na -70°C u trajanju od 1 časa i zatim ostavljena da se zagreva do sobne temperature tokom 12 časova. Reakciona smeša je ugašena vodom (400 mL), i koncentrovana pod vakuumom da bi se uklonio etanol. Vodeni sloj je zakišeljen sa koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom do pH 2, ispran etil acetatom (2 x 1000 mL), bazifikovan sa 10 % natrijum hidroksidom do pH 9-10 i zatim ekstrahovan sa dihlorometanom (3 x 1000 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (1000 mL), sušeni preko natrijum sulfata, i kocentrovani da bi se dobio sirovi proizvod kao svetlo braon tečnost. Ovo je rastvoreno u dihlorometanu (400 mL) i hlađeno do 0°C. U dobijeni rastvor dodat je rastvor 4M HCl u dioksanu (300 mL). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 minuta, i zatim na sobnoj temperaturi u trajanju od 12 časova. Reakciona smeša je filtrirana i preostala čvrsta supstanca je rekristalizovana iz smeše metanola i metil terc-butil etra da bi se dobio cis-izomer kao bela čvrsta supstanca (111.09 g, 52%).<1>H NMR: (400 MHz, D2O): δ 7.33-7.38 (m, 5H); 5.02 (s, 2H), 3.83-3.87 (m, 1H), 3.89-3.41 (m, 1H), 2.66-2.70 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.03-2.05 (m, 2H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C13H18N2O2; 234.137, zabeležena (M H<+>); 235.1.

[0094] Trans izomer je izolovan iz matične tečnosti upotrebom superkritične fluidne hromatografije.

Korak 2: Benzil {cis-3-[(2-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)(metil)amino]-ciklobutil}karbamat

[0095] U rastvor kalijum karbonata (20.47 g, 148 mmol) u vodi (180 mL) dodat je benzil [cis-3-(metilamino)ciklobutil]karbamat (13.57 g, 50.2 mmol), a zatim 2,4-dihloro-7H-pirolo(2,3-d)pirimidin (9.0 g, 47.9 mmol) na sobnoj temperaturi. Pošto je dodavanje završeno, reakciona smeša je mešana na 95°C preko noći. Smeša je filtrirana da bi se sakupila čvrsta supstanca. Filter kolač je ispran vodom i sušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16.5 g, 89.7%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.81 (sm 1 H), 7.65 (d, 1 H), 7.38 (m, 5 H), 7.16 (m, 1 H), 6.67 (d, 1 H), 5.02 (s, 2 H), 4.81 (m, 1 H), 3.85 (m, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 2.53 (m, 2 H), 2.25 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H20ClN5O2; 385.131, zabeležena (M H<+>); 386.1.

Korak 3: cis-N-Metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorid [0096] Smeša {cis-3-[(2-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)(metil)-amino]ciklobutil} karbamata (13.0 g, 34.0 mmol), Pd(OH)2(40.3 g, 40.8 mmol) i cikloheksena (72.5 mL, 0.71 mol) u etanolu (300 mL) je mešana na refluksu u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od Celite® i čep je ispran metanolom. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.8 g, 66%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.68 (br, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.67 (br, 2H), 7.17 (d, 1H), 6.65 (d, 1H), 5.08 (m, 1 H), 3.45 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.31 (m, 4H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C11H15N5; 217.133, zabeležena (M H<+>); 218.1.

Korak 4: 2,2,2-Trifluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil} etansulfonamid

[0097] U rastvor cis-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorid (100 mg, 0.39 mmol) u tetrahidrofuranu (0.8 mL) dodat je litijum bis(trimetilsilil)amid (1M rastvor u tetrahidrofuranu) (0.9 mL, 0.9 mmol) i hlorotrimetilsilan (94 mg, 0.88 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana u trajanu od 45 minuta i lagano je dodat 2,2,2-trifluoroetansulfonil hlorid (86 mg, 0.47 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 18 časova i zatim podeljena između dihlorometana i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa dihlorometanom i kombinovani organski slojevi su koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod kao žuto-mrka čvrsta supstanca. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (93:7) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (93 mg, 65%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.61 (br. s., 1 H), 8.20 (d, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 6.60 (d, 1 H), 4.80-4.94 (m, 1 H), 4.34 (q, 2 H), 3.58-3.71 (m, 1H), 3.23 (s, 3 H), 2.55-2.67 (m, 2 H), 2.17-2.30 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C13H16F3N5O2S; 363.098, zabeležena (M H<+>); 363.9.

[0098] Sledeća jedinjenja, Primeri 2-7, su pripremljena od cis-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorida (Primer 1, Korak 3) na sličan način onome koji je opisan u Primeru 1, Korak 4, supstitucijom naznačenog sulfonil hlorida za 2,2,2-trifluoroetansulfonil hlorid.

Primer 2: N-{cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamid

[0099] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 1-propansulfonil hlorida. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (93:7) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto-mrka čvrsta supstanca (78% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.60 (br s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.46 (d, 1 H), 7.12 (d, 1 H), 6.61 (d, 1 H), 4.81-4.94 (m, 1 H), 3.47-3.62 (m, 1 H), 3.23 (s, 3 H), 2.87-2.96 (m, 2 H), 2.52-2.63 (m, 2 H), 2.14-2.27 (m, 2 H) 1.60-1.73 (m, 2 H) 0.96 (t, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C14H21N5O2S; 323.142, zabeležena (M H<+>); 324.1.

Primer 3: 2-Metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}propan-1-sulfonamid

[0100] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 2-metil-1-propansulfonil hlorida. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (93:7) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (52%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.64 (br s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 7.51 (d, 1 H), 7.03-7.26 (m, 1 H), 6.65 (d, 1 H), 4.82-5.02 (m, 1 H), 3.52-3.70 (m, 1 H), 3.26 (s, 3 H), 2.87 (d, 2 H), 2.55-2.67 (m, 2 H), 2.18-2.30 (m, 2 H), 2.11 (dt, 1 H), 1.04 (d, 6 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H23N5O2S; 337.157, zabeležena (M H<+>); 338.0.

Primer 4A i Primer 4B: cis- i trans-3-(Cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamid

[0101] Ova jedinjenja su pripremljena upotrebom smeše (~1:1) cis- i trans-3-(cijanometil)ciklobutansulfonil hlorida. Sirova smeša cis i trans izomera je prečišćena hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 10:1) da bi se dobila smeša (420 mg) jedinjenja iz naslova kao bela čvrsta supstanca (67%). Cis i trans izomeri su razdvojeni pomoću superkritične fluidne hromatografije.

cis-izomer 4A: 160 mg (21%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1H), 7.13-7.12 (d, 1H), 6.69-6.69 (d, 1 H), 4.92-4.89 (m, 1 H), 3.84-3.78 (m, 1 H), 3.76-3.67 (m, 1 H), 3.36 (s, 3 H), 2.79-2.73 (m, 2 H), 2.65-2.64 (m, 3H), 2.58-2.52 (m, 2 H), 2.32-2.19 (m, 4 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N6O2S; 374.152, zabeležena (M H<+>); 375.3.

trans-izomer 4B: 155 mg (20%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1H), 7.13 (d, 1H), 6.70 (d, 1H), 4.94-4.89 (m, 1H), 3.89-3.85 (m, 1H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.85-2.62 (m, 7H), 2.31-2.23 (m, 4H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N6O2S; 374.152, zabeležena (M H<+>); 374.9.

[0102] Smeša cis- i trans-3-(cijanometil)ciklobutansulfonil hlorida je pripremljena na sledeći način:

Korak 1: [3-(Benziloksi)ciklobutiliden]acetonitril

[0103] U hladnu suspenziju natrijum hidrida (125 mg, 3.12 mmol) u tetrahidrofuranu (12 mL) na 0°C dodat je dietil cijanometilfosfonat (1.21 g, 3.40 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa pre dodavanja rastvora 3-(benziloksi)ciklobutanona (500 mg, 2.84 mmol) u tetrahidrofuranu (8 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, i zatim je ugašena vodom. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 25mL) i kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (100:0 do 85:15) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (450 mg, 80%) kao žuto ulje.

Korak 2: [3-(Benziloksi)ciklobutil]acetonitril

[0104] Smeša [3-(benziloksi)ciklobutiliden]acetonitrila (10.2 g, 51 mmol,) i 10% Pd/C (2.0 g) u suvom tetrahidrofuranu je držana pod pritiskom do 50 psi sa vodonikom i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Smeša je zatim filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (100:0 do 80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7 g, 70%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.36-7.28 (m, 5 H), 4.44-4.43 (m, 2 H), 4.30-4.09 (m, 1H), 3.98-3.95 (m, 1 H), 2.64-2.45 (m, 4 H), 1.81-1.759 (m, 2 H).

Korak 3: (3-Hidroksiciklobutil)acetonitril

[0105] U rastvor [3-(benziloksi)ciklobutil]acetonitrila (1 g, 5.00 mmol) u acetonitrilu (15 mL) ukapavanjem je dodat jodotrimetilsilan (1.5 g, 7.50 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je ugašena sa trietilaminom, koncentrovana i zatim prečišćena hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (1:0 do 1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (340 mg, 62%) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.55-4.15 (m, 1H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.25-2.21 (m, 2H), 2.14-2.08 (m, 1H), 1.79-1.72 (m, 2H).

Korak 4: 3-(Cijanometil)ciklobutil-4-metilbenzensulfonat

[0106] U rastvor (3-hidroksiciklobutil)acetonitrila (333 mg, 3.0 mmol) u suvom dihlorometanu (25 mL) dodat je 4-dimetilaminopiridin (732 mg, 6.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta i zatim je dodat p-toluensulfonil hlorid (859 mg, 4.5 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je isprana vodom (2 x 15mL). Organski sloj je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (10:0 do 7:3) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (520 mg, 65% prinos) kao bezbojno ulje. Korak 5: S-[3-(Cijanometil)ciklobutil]etantioat

[0107] Smeša 3-(cijanometil)ciklobutil 4-metilbenzensulfonata (1.5 g, 5.7 mmol) i kalijum tioacetata (1.29 g, 3.00 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) zagrevana je na 80°C preko noći. Smeša je razblažena sa etil acetatom (15 mL), isprana vodom (30 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 30 mL), sušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne hromatografije na tankom sloju eluiranjem sa smešom petrol etra i etil acetata (3:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (750 mg, 78%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.12-3.92 (m, 1 H), 2.86-2.77 (m, 2 H), 2.71-2.47 (m, 2 H), 2.42-2.37 (m, 2 H), 2.30-2.29 (m,3 H), 1.97-1.90 (m, 1 H).

Korak 6: 3-(Cijanometil)ciklobutansulfonil hlorid

[0108] Smeša N-hlorosukcinimida (1.6 g, 12.0 mmol) u koncentrovanoj HCl (3 mL) i acetonitrilu (12 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Dodat je S-[3-(cijanometil)ciklobutil]etantioat (507 mg, 3.0 mmol) u acetonitrilu (3 mL) na 0°C i smeša je mešana 10 minuta. Smeša je razblažena vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL), i ekstrahovana sa metil terc-butil etrom (3 x 50 mL). Kombinovani osušeni organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu eluiranjem sa smešom petrol etra i etil acetata (100:0 do 50:50) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (400 mg, 69%) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.45-4.40 (m, 1H), 3.06-2.71 (m, 3H), 2.61-2.49 (m, 4H).

Referentni primer 5: 1-[3-(Cijanometil)oksetan-3-il]-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metansulfonamid

[0109] Ovo jedinjenje je pripremljeno od [3-(cijanometil)oksetan-3-il]metansulfonil hlorida. Sirovo jedinjenje je prečišćeno upotrebom preparativne hromatografije na tankom sloju eluiranjem sa etil acetatom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (32%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.14-7.13 (m, 1 H), 6.71-6.70 (m, 1 H), 5.06-5.05 (m, 1 H), 4.85-4.81 (m, 2 H), 4.52-4.50 (m, 2 H), 3.77-3.75 (m, 1 H), 3.63 (m, 2 H), 3.39 (s, 3 H), 3.29-3.26 (m, 2 H), 2.85-2.78 (m, 2 H), 2.38-2.30 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N6O3S; 390.147, zabeležena (M H<+>); 391.0.

[3-(Cijanometil)oksetan-3-il]metansulfonil hlorid

Korak 1: [3-(Cijanometil)oksetan-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat

[0110] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem postupka iz Primera 4 Korak 4, supstitucijom [3-(Hidroksimetil)-3-oksetanil]acetonitrila za (3-hidroksiciklobutil)acetonitril. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom petrol etra i etil acetata (1:0 do 1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.82-7.80 (m, 2 H), 7.41-7.39 (m, 2 H), 4.54-4.35 (m, 4 H), 4.31 (s, 2 H), 2.79 (s, 2 H), 2.45 (s, 3H).

Korak 2: [3-(Cijanometil)oksetan-3-il]metil tiocijanat

[0111] Rastvor [3-(cijanometil)oksetan-3-il]metil 4-metilbenzensulfonata (150 mg, 0.53 mmol) i kalijum tiocijanata (104 mg, 1.07 mmol) je mešan u etanolu (10 mL). Reakcija je zagrevana do 85°C i mešana u trajanju od 16 časova. Rastvarač je isparavan da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca.

Korak 3: [3-(Cijanometil)oksetan-3-il]metansulfonil hlorid

[0112] Gasoviti hlor je barbotiran kroz rastvor [3-(cijanometil)oksetan-3-il]metil tiocijanata (0.53 mmol, sirov) u vodi (10 mL) na 0°C u trajanju od 30 minuta. Reakciona smeša je ekstrahovana sa metil terc-butil etrom (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg, 18%). Referentni primer 6: N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-oksetan-3-ilmetansul fonamid

[0113] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom oksetan-3-ilmetansulfonil hlorida. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (85:15) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (23%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (m, 1 H), 7.13 (d, J = 4Hz, 1 H), 6.70-6.69 (m, J = 4Hz, 1 H), 4.93-4.91 (m, 1 H), 4.84-4.83 (m, 2 H), 4.63-4.59 (m, 2 H), 3.74-3.68 (m, 1 H), 3.58-3.56 (m, 1 H), 3.47-3.45 (m, 2 H), 3.37 (s, 3 H), 2.79-2.77 (m, 2 H), 2.32-2.29 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H21N5O3S; 351.136, zabeležena (M H<+>); 352.1.

Oksetan-3-ilmetansul fonil hlorid

Korak 1: Oksetan-3-ilmetil tiocijanat

[0114] Ovo jedinjenje je pripremljeno prema postupku iz Primera 5, Korak 2, supstitucijom oksetan-3-ilmetil 4-metilbenzensulfonata (WO2012/117000A1) za [3-(cijanometil)oksetan-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca. (100%).

Korak 2: Oksetan-3-ilmetansulfonil hlorid

[0115] Ovo jedinjenje je pripremljeno u sirovom obliku (25% prinos) praćenjem postupka iz Primera 5 Korak 3, supstitucijom oksetan-3-ilmetil tiocijanata za [3-(cijanometil)oksetan-3-il]metil tiocijanat.

Primer 7A i 7B: cis- i trans-3-(Cijanometil)-3-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamid

[0116] Ova jedinjenja su pripremljena upotrebom smeše (~1:1) cis- i trans-3-(cijanometil)-3-metilciklobutansulfonil hlorida. Sirova smeša cis- i trans izomera je prečišćena hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra:etil acetata (10:1 do 1:15) da bi se dobila smeša (70 mg) jedinjenja iz naslova kao svetlo braon čvrsta supstanca (28%). Cis i trans iozomeri su zatim razdvojeni pomoću superkritične fluidne hromatografije (SFC). cis-izomer (7A): 26 mg (10%); SFC vreme zadržavanja = 7.11 minuta;<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13-7.13 (d, 1 H), 6.69 (d, 1 H), 4.93-4.86 (m, 1 H), 3.91-3.87 (m, 1 H), 3.71-3.65 (m, 1 H), 3.37-3.33 (m, 3 H), 2.77-2.75 (m, 2 H), 2.68 (s, 2 H), 2.41-2.36 (m, 2 H), 2.26-2.21 (m, 2 H), 1.34 (m, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H24N6O2S; 388.168, zabeležena (M H<+>); 389.1.

trans-izomer (7B) 24 mg (10%); SFC vreme zadržavanja = 11.35 minuta;<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.14 (d, 1 H), 6.69 (d, 1 H), 4.93-4.86 (m, 1 H), 3.96-3.86 (m, 1 H), 3.72-3.65 (m, 1 H), 3.36-3.31 (m, 3 H), 2.77-2.75 (m, 2 H), 2.71 (s, 2 H), 2.34-2.26 (m, 6 H), 1.33 (m, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H24N6O2S; 388.168, zabeleženo (M H<+>); 389.0.

[0117] Smeša cis- i trans-3-(cijanometil)-3-metilciklobutansulfonil hlorida je pripremljena na sledeći način:

Korak 1: 1-Metil-3-metilenciklobutankarbonitril

[0118] U rastvor 3-metilenciklobutankarbonitrila (35.0 g, 373.0 mmol) u tetrahidrofuranu (200 mL) ukapavanjem je dodat litijum bis(trimetilsilil)amid (450 mL, 1M) na -78°C. Rastvor je mešan u trajanju od 1 časa na -78°C i u reakciju je dodat jodometan (30 mL, 448 mmol). Posle 1 časa, smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je ugašena vodenim rastvorom amonijum hlorida (380 mL) i ekstrahovana sa metil terc-butil etrom (3 x 400 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen destilacijom pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 g, 50%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.90-4.89 (m, 2 H), 3.24-3.20 (m, 2 H), 2.67-2.62 (m, 2 H), 1.50 (s, 3H).

Korak 2: 1-Metil-3-metilenciklobutankarboksilna kiselina

[0119] U rastvor 1-metil-3-metilenciklobutankarbonitrila (10.0 g, 93.3 mmol) u vodi (50 mL) i etanola (50 mL) dodat je kalijum hidroksid (25.6 g, 466.6 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa i mešana preko noći. Etanol je uklonjen pod sniženim pritiskom, i rastvor je hlađen do ispod 10°C, zakišeljen sa koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom do pH 1. Vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 g, 77%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 11.90 (s, 1 H), 4.88-4.85 (m, 2 H), 3.23-3.17 (m, 2 H), 2.53-2.41 (m, 2 H), 1.45 (s, 3 H).

Korak 3: Etil 1-metil-3-metilenciklobutankarboksilat

[0120] U rastvor 1-metil-3-metilenciklobutankarboksilne kiseline (6 g, 47.6 mmol) u dihlorometanu (30 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat tionil hlorid (11.0 mL, 143 mmol). Rastvor je mešan na 0°C u trajanju od 1 časa. U rastvor je dodato tri kapi N,N-dimetilformamida. Rastvor je mešan na 0°C u trajanju od 30 minuta. Rastvarač je isparavan i u ostatak su dodati dihlorometan (20 mL) i etanol (125 mL). Dobijeni rastvor je mešan 16 časova na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan i u ostatak je dodata voda (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (4 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (20:1 do 10:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5 g, 68%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.85-4.83 (m, 2 H), 4.17-4.12 (m, 2 H), 3.18-3.12 (m, 2 H), 2.48-2.42 (m, 2H), 1.41 (s, 3 H), 1.27-1.23 (m, 3 H).

Korak 4: (1-Metil-3-metilenciklobutil)metanol

[0121] Smeša etil 1-metil-3-metilenciklobutankarboksilata (4.55 g, 29.5 mmol), litijum aluminijum hidrida (2.8 g, 72 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu dodat je Na2SO4·10H2O (3.7 g, 11.5 mmol) i dobijena smeša je mešana u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su uklonjene filtracijom i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ekstrahovan sa dihlorometanom (3 x 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.6 g, 79%) kao bezbojno ulje.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.79-4.78 (m, 2 H), 3.48 (s, 2 H), 2.53-2.48 (m, 2 H), 2.36-2.27 (m, 2 H), 1.16 (s, 3 H).

Korak 5: (1-Metil-3-metilenciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat

[0122] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem Primera 4, Korak 4, supstitucijom (1-metil-3-metilenciklobutil)metanola za (3-hidroksiciklobutil)acetonitril. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (20:1 do 4:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (70%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.79 (d, 2 H), 7.34 (d, 2 H), 4.79-4.78 (m, 2 H), 3.90 (s, 2 H), 2.51-2.47 (m, 2 H), 2.44 (s, 3 H), 2.35-2.31 (m, 2 H), 1.15 (s, 3 H).

Korak 6: (1-Metil-3-metilenciklobutil)acetonitril

[0123] Smeša (1-metil-3-metilenciklobutil)metil 4-metilbenzensulfonata (2.5 g, 9.4 mmol), kalijum cijanida (1.3 g, 19 mmol) i N,N-dimetilformamida (8mL) je mešana preko noći na 70°C. Voda (10 mL) i metil terc-butil etar (20 mL) su dodati u smešu i organski sloj je odvojen. Vodena faza je ekstrahovana sa metil terc-butil etrom (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodenim zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (15 mL), sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (10:1 to 5:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.1 g, 97%) kao svetlo braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.88-4.87 (m, 2 H), 2.62-2.54 (m, 2 H), 2.50 (s, 2 H), 1.33 (s, 3 H).

Korak 7: (1-Metil-3-oksociklobutil)acetonitril

[0124] Ozon gas je barbotiran kroz rastvor (1-metil-3-metilenciklobutil)acetonitrila (1.08 g, 8.91 mmol) u dihlorometanu (30 mL) -78°C u trajanju od 10 minuta. Posle prečišćavanja rastvora gasovitim azotom, dimetilsulfid (10 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor na -78°C. Rastvor je mešan 30 minuta na -78°C i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (20:1 do 8:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (920 mg, 84%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.11-3.06 (m, 2 H), 2.96-2.91 (m, 2 H), 2.69 (s, 2 H), 1.53 (s, 3 H).

Korak 8: (3-Hidroksi-1-metilciklobutil)acetonitril

[0125] U rastvor (1-metil-3-oksociklobutil)acetonitrila (400 mg, 3.25 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) dodat je natrijum borohidrid (246 mg, 6.5 mmol). Smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Dodat je aceton (2 mL) i zatim je rastvarač isparavan. Voda (10 mL) je dodata u ostatak i vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom (4 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (10:1 do 1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (300 mg, 74%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.38-4.34 (m, 2 H), 2.46-2.27 (m, 4 H), 1.94-1.86 (m, 2 H), 1.33-1.12 (m, 3 H).

Korak 9: 3-(Cijanometil)-3-metilciklobutil 4-metilbenzensulfonat

[0126] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem Primera 7, Korak 5, supstitucijom (3-hidroksi-1-metilciklobutil)acetonitrila za (1-metil-3-metilenciklo-butil)metanol. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (20:1 do 4:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.77 (d, 2 H), 7.35 (d, 2 H), 4.89-4.81 (m, 1 H), 2.45 (s, 3 H), 2.43-2.34 (m, 3 H), 2.26-2.21 (m, 1 H), 2.15-2.11 (m, 2 H), 1.33 (s, 3 H).

Korak 10: S-[3-(Cijanometil)-3-metilciklobutil]etantioat

[0127] Ovo jedinjenje je pripremljeno u 89% prinosu (sirovo) praćenjem postupka iz Primera 4, Korak 5, supstitucijom 3-(cijanometil)-3-metilciklobutil 4-metilbenzensulfonata za 3-(cijanometil)ciklobutil 4-metilbenzen-sulfonat.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.12 (s, 1 H), 2.46-2.30 (m, 4 H), 2.19 (s, 2 H), 1.29 (s, 1 H) 1.26-1.24 (m, 1 H), 1.18-1.14 (m, 1 H), 1.13 (s, 3H).

Korak 11: 3-(Cijanometil)-3-metilciklobutansulfonil hlorid

[0128] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem Primera 4 Korak 6, supstitucijom S-[3-(cijanometil)-3-metilciklobutil]etantioata za S-[3-(cijanometil)-ciklobutil]etantioat. Sirovo jedinjenje je prečišćeno upotrebom hromatografije na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (90:10 do 30:70) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta tečnost (66%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.45-4.38 (m, 1 H), 2.67-2.55 (m, 4 H), 2.46-2.40 (m, 2 H), 1.42-1.40 (m, 3 H).

Primer 8: 4-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}piridin-2-sulfonamid

Korak 1: 2-(Benziltio)izonikotinonitril

[0129] 60% suspenzija natrijum hidrida u mineralnom ulju (8.36 g, 210.0 mmol) je suspendovana u tetrahidrofuran (100 mL). Zatim je ukapavanjem dodavan rastvor benzil merkaptana (21.5 g, 173 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL). Tokom dodavanja formirana je gusta suspenzija. Dodat je 4-cijano-2-hloropiridin (12.5 g, 90.2 mmol) i dobijena smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Posle pažljivog gašenja vodom, smeša je podeljena između vode i dietil etra. Etarski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, sušen preko magnezijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Heptan je dodat u ostatak pri čemu se čvrste supstance brzo formiraju. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, isprane heptanom i sušene da bi se dobilo (33.02 g, 84%) jedinjenja iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.61 (d, 1 H), 7.25-7.46 (m, 6 H), 7.16-7.22 (m, 1 H), 4.47 (s, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C13H10N2S; 226.056, zabeležena (M H<+>); 227.1.

Korak 2: 4-cijanopiridin-2-sulfonil hlorid

[0130] U mehanički mešanu smešu 2-(benziltio)izonikotinonitrila (8.92 g, 39.4 mmol) u dihlorometanu (139 mL) i vodi (31 mL) ukapavanjem je dodat sulfuril hlorid (22.5 mL, 278 mmol), održavajući temperaturu smeše ispod 3°C. Pošto je dodavanje završeno, smeša je mešana 30 minuta sa kontinuiranim hlađenjem u ledenom kupatilu. Dodata je suspenzija vode (50 mL) i leda (20 g). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovani ekstrakti su sušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova.

Korak 3: 4-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}piridin-2-sulfonamid

[0131] Rastvor 4-cijanopiridin-2-sulfonil hlorida (9.7 g, 47.9 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 mL) je dodat u rastvor cis-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorida (8.0 g, 36.8 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (150 mg, 0.03 mmol) u N,N-dimetilformamidu (90 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je diizopropiletilamin (13 mL, 77 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Smeša je razblažena etil acetatom (200 mL) i dodat je vodeni zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dodata je voda da bi se rastvorile istaložene čvrste supstance. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani četiri puta fiziološkim rastvorom, sušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodata 1:1 smeša etil acetata i heksana. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i zatim rastvorene u dihlorometanu i minimalnoj količini metanola. Dobijeni rastvor je propušten kroz čep od silika gela eluiranjem sa 5% rastvorom metanola u dihlorometanu. Rastvarači su isparavani da bi se dobila čvrsta supstanca u koju je dodat rastvor 10% metanola u dihlorometanu. Smeša je kratko mešana i zatim ostavljena da odstoji preko noći. Čvrste supstance su filtrirane, isprane sa dihlorometanom i sušene da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.58 g, 39%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.62 (br. s., 1 H), 9.02 (d, 1 H), 8.52 (d, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.17 (dd, 1 H), 8.07 (s, 1 H), 7.10-7.15 (m, 1 H), 6.59 (dd, 3.41 Hz, 1 H), 4.80-4.91 (m, 1 H), 3.58-3.71 (m, 1 H), 3.19 (s, 3 H), 2.25-2.36 (m, 2 H), 2.10 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H17N7O2S; 383.116, zabeležena (M H<+>); 384.1.

Primer 9: 3-(1-Hidroksi-1-metiletil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}benzensulfonamid

Korak 1: Metil 3-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}amino)-sulfonil]benzoat

[0132] U suspenziju cis-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorida (1.8 g, 8.29 mmol) u N,N-dimetilformamidu (100 mL) u porcijama je dodavan trietilamin (6.7 mL, 49 mmol) na 0°C. Metil 3-(hlorosulfonil)benzoat (2.3 g, 9.9 mmol) je dodat na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom metanola u dihlorometanu (3% do 10%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.6 g, 47%) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak 2: 3-(Hidroksimetil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} benzensulfonamid

[0133] U rastvor metil 3-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} amino)sulfonil]benzoata (800 mg, 1.92 mmol) u tetrahidrofuranu (120 mL) dodat je litijum aluminijum hidrid (0.25 g, 6.7 mmol) na 0°C. Reakcija je zagrevana do 25°C i mešana u trajanju od 3 časa. Reakcija je ugašena vodom (2 mL) i mešana 15 minuta. Reakciona smeša je filtrirana. Filter kolač je mešan u tetrahidrofuranu (50 mL) i ponovo filtriran. Kombinovani filtrat je koncentrovan do sušenja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (430 mg, 58%) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak 3: 3-Formil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil} benzensulfonamid

[0134] U rastvor 3-(hidroksimetil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}benzensulfonamida (400 mg, 1.03 mmol) u hloroformu (50 mL) i metanolu (5 mL) dodat je mangan dioksid (0.89 g, 10.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na 25°C preko noći. Reakciona smeša je filtrirana i filter kolač je ispran hloroformom (3 x 25 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom metanola u dihlorometanu (2% to 8%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (240 mg, 60%) kao ulje.

Korak 4: 3-(1-Hidroksietil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} benzensulfonamid

[0135] U rastvor 3-formil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} benzensulfonamida (260 mg, 0.68 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je metilmagnezijum bromid (1.8 mL, 5.4 mmol) na 0°C pod azotom. Reakcija je mešana na 25°C preko noći i zatim je ugašena vodenim rastvorom amonijum hlorida (10 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x25 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatorafije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 22%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.6 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 8.03 (d, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 7.70 (m, 1 H), 7.55 (m, 2 H), 7.15 (m, 1 H), 6.61 (m, 1 H), 5.44 (m, 1 H), 4.85 (m, 1 H), 3.56 (m, 1 H), 3.18 (s, 3 H), 2.18 (m, 2 H), 2.04 (m, 2 H), 1.32 (d, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H23N5O3S; 401.152, zabeležena (M H<+>); 402.2.

Korak 5: 3-Acetil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil} benzensulfonamid

[0136] U rastvor 3-(1-hidroksietil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}benzensulfonamida (60 mg, 0.15 mmol) u hloroformu (30 mL) i metanolu (5 mL) dodat je mangan dioksid (190 mg, 2.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na 45°C preko noći. Zatim je reakciona smeša filtrirana i filter kolač je ispran hloroformom (3 x 25 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 25%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.58 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 8.21 (m, 2 H), 8.16 (m, 2 H), 7.76 (m, 1 H), 7.09 (d, 1 H), 6.56 (s, 1 H), 4.82 (m, 1 H), 3.54 (m, 1 H), 3.14 (s, 3 H), 2.81 (m, 3 H), 2.26 (m, 2 H), 1.98 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H21N5O3S; 399.136, zabeležena (M H<+>); 400.1.

Korak 6: 3-(1-Hidroksi-1-metiletil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}benzensulfonamid

[0137] U rastvor 3-acetil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} benzensulfonamida (240 mg, 0.58 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je metilmagnezijum bromid (2.4 mL, 7.2 mmol) na 0°C pod azotom. Reakcija je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa i ugašena vodenim rastvorom amonijum hlorida (10 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (101 mg, 42%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.6 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.97 (m, 2 H), 7.67 (m, 2 H), 7.52 (m, 1 H), 7.12 (m, 1 H), 6.57 (m, 1 H), 5.29 (s, 1 H), 4.85 (m, 1 H), 3.53 (m, 1 H), 3.15 (s, 3 H), 2.24 (m, 2 H), 1.98 (m, 2 H), 1.44 (s, 6 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C20H25N5O3S; 415.168, zabeležena (M H<+>); 416.0.

Referentni primer 10: 1-Ciklopropil-N-{trans-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metansulfonamid

[0138] Ovo jedinjenje je sintetisano počevši od benzil [trans-3-(metilamino)-ciklobutil]karbamata (Primer 1, Korak 1), praćenjem postupaka sličnih onima koji su opisani za Primer 1, Koraci 2 i 3 da bi se dobio trans-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorid. U dobijeni hidrohlorid (60 mg, 0.28 mmol) u THF (10 mL) dodat je kalijum karbonat (76 mg, 0.55 mmol), H2O (5 mL) i ciklopropilmetansulfonil hlorid (52 mg, 0.33 mmol). Smeša mešana dva časa je razblažena sa dihlorometanom, isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (7 mg; 8%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.14 (s, 1 H), 7.16 (d, 1 H,), 6.72 (d, 1 H), 5.44-5.40 (m, 1 H), 4.07-4.06 (m, 1 H), 3.41 (s, 3 H), 3.01-2.99 (m, 2 H), 2.81-2.74 (m, 2 H), 2.54-2.49 (m, 2 H), 1.15-1.13 (m, 1 H), 0.720-0.69 (m, 2 H), 0.42-0.41(m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H21N5O2S; 335.142, zabeležena (M H<+>); 336.1.

Referentni primer 11: N-{(1S,3R)-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklopentil}propan-1-sulfonamid

[0139] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem Primera 10 supstitucijom (1S,3R)-N-benzil-N’-metilciklopentan-1,3-diamina za benzil [trans-3-(metilamino)-ciklobutil]karbamat, (1R,3S)-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklopentan-1,3-diamin hidrohlorida za trans-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorid, i propan-1-sulfonil hlorida za ciklopropilmetansulfonil hlorid da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (11%). Sirovo jedinjenje je prečišćeno upotrebom preparativne tečne hromatografije visokog učinka.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.08 (s, 1 H), 7.08 (s, 1 H,), 6.65 (s, 1 H), 5.27-5.23 (m, 1 H), 3.81-3.76 (m, 1 H), 3.31 (s, 3 H), 2.33-2.29 (m, 1 H), 2.13-2.04 (m, 1 H), 1.98-1.92 (m, 2 H), 1.82-1.75 (m, 4 H), 1.06 (t, 3 H), 0.42-0.41(m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H23N5O2S; 337.157, zabeležena (M H<+>); 337.8. (1S,3R)-N-benzil-N’-metilciklopentan-1,3-diamin je pripremljen na sledeći način:

Korak 1: Benzil[(1R,3S)-3-aminociklopentil]karbamat

[0140] Trifluorosirćetna kiselina (15 mL, 190 mmol) je dodata u rastvor benzil terc-butil (1R,3S)-ciklopentan-1,3-diilbiskarbamata (pripremljen kao što je opisano u WO2011/086053A1) (5.02 g, 15.0 mmol) u dihlorometanu (75 mL) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana 2 časa i zatim koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo braon ulje (6.70 g, sirovo)

Korak 2: Benzil [(1R,3S)-3-(benzilamino)ciklopentil]karbamat

[0141] Natrijum triacetoksihidroborat (4.38 g, 20.0 mmol) je dodat u rastvor benzil [(1R,3S)-3-aminociklopentil]karbamata (5.23 g, 15.0 mmol) i benzaldehida (1.7 mL, 16.0 mmol) u dihlorometanu (75 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 21 čas i zatim je dodat vodeni 1 M rastvor natrijum hidroksida (75 mL) da bi rastvor postao bazan. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi materijal je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (100:0 do 88:12) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (3.47 g, 71%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.35-7.31 (m, 5 H), 7.30-7.26 (m, 5 H), 5.07 (s, 2 H), 4.17-4.07 (m, 1 H) 3.76-3.68 (m, 2 H), 3.27-3.20 (m, 1 H), 2.02-1.51 (m, 6 H).

Korak 3: (1S,3R)-N-Benzil-N’-metilciklopentan-1,3-diamin

[0142] Litijum aluminijum hidrid (1.02 g, 26.9 mmol) je dodavan u porcijama u rastvor benzil [(1R,3S)-3-(benzilamino)ciklopentil]karbamata (3.47 g, 10.7 mmol) u tetrahidrofuranu (70 mL) na sobnoj temperaturi. Reakcija je zagrevana do refluksa u trajanju od 3.5 hours. Smeša je zatim hlađena u ledenom kupatilu i redom ugašena vodom (1.0 mL), vodenim 15% rastvorom natrijum hidroksida (1.0 mL) i vodom (3.0 mL). Suspenzija je razblažena sa etil acetatom i filtrirana kroz Celit. Filtrat je koncentrovan i ostatak je apsorbovan u vodeni 0.5 M rastvor hlorovodonične kiseline. Smeša je isprana dietil etrom (2 x 20 mL) i vodeni rastvor je napravljen baznim (pH~11) sa natrijum hidroksidom. Dobijena smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi materijal je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (204 mg, 9%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.33-7.20 (m, 5 H), 3.74 (s, 2 H), 3.19-3.13 (m, 1 H), 3.08-3.02 (m, 1 H) 2.39 (s, 3 H), 2.09-2.03 (m, 1 H),1.87-1.81 (m, 2 H), 1.67-1.54 (m, 2 H), 1.46-1.39 (m, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C13H20N2; 204.163, zabeležena (M H<+>); 205.1.

Primer 12: 1-(3,3-Difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metansulfonamid

Korak 1: Benzil [cis-3-(metil[7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]karbamat

[0143] 4-Hloro-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (15 g, 48.7 mmol) i benzil [cis-3-(metilamino)ciklobutil]karbamat (17.2 g, 63.5 mmol) su mešani sa izopropil alkoholom (180 mL) i diizopropiletilaminom (28 mL, 161 mmol). Dobijena suspenzija je zagrevana na 75°C u trajanju od 6 časova. Reakcija je hlađena do sobne temperature, filtrirana, isprana izopropil alkoholom (150 mL) i sušena u peći na 50°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23.5 g, 95%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSOd6): δ 8.38 (s, 1 H), 8.03 (d, 2 H), 7.45 (d, 1 H), 7.38-7.28 (m, 4 H), 7.26 (s, 1 H), 7.25 (d, 1 H), 6.61 (d, 1 H), 5.08 (s, 2 H), 4.96 (d, 1 H), 4.77 (m, 1 H), 3.88 (m, 1 H), 3.23 (s, 3 H), 2.71 (m, 2 H), 2.36 (s, 3 H), 2.18 (m, 2 H).

Korak 2: cis-N-Metil-N-{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}ciklobutan-1,3-diamin dihidrobromid

[0144] Benzil [cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]karbamat (15.2 g, 30.1 mmol) je suspendovan u etil acetatu (45 mL) i sirćetnoj kiselini (45 mL). U suspenziju je lagano dodavan 4M rastvor HBr u sirćetnoj kiselini (45 mL, 180 mmol), održavajući temperaturu ispod 25°C. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, isprane etil acetatom (450 mL), i sušene na 40°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16 g; 100%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.31 (s, 1 H), 8.20 (s, 2 H), 7.97 (d, 2 H), 7.72 (d, 1 H), 7.44 (d, 2 H), 7.08 (d, 1 H), 4.93 (m, 1 H), 3.54 (m, 1 H), 3.30 (s, 3 H), 2.50 (m, 4 H), 2.35 (s, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H21N5O2S; 371.142, zabeležena (M H<+>); 372.1.

Korak 3: ({[(3,3-Difluorociklobutil)metil]tio}metil)benzen

[0145] Smeša (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonata (videti WO2010/032200A1) (4 g, 14.5 mmol), benzil imidotiokarbamata (3.53g, 17.4 mmol), rastvora natrijum hidroksida (1.45 g, 36.2 mmol, rastvoren u 16 mL vode) i N,N-dimetilformamida (16 mL) je mešana na 60°C u trajanju od 16 časova. Dodati su voda (40 mL) i etil acetat (150 mL). Organski sloj je ispran vodom (40 mL), razdvojen, sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (100:0 do 95:5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (3.2 g, 81%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.34-7.24 (m, 5 H), 5.71 (s, 2 H), 2.71-2.61 (m, 2 H), 2.57-2.55 (m, 2 H), 2.30-2.14 (m, 3 H).

Korak 4: (3,3-Difluorociklobutil)metansulfonil hlorid

[0146] Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem postupka iz Primera 8 Korak 2, supstitucijom S-[3-(cijanometil)-3-metilciklobutil]etantioata za 2-(benziltio)izonikotinonitril da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (93%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.88-3.86 (m, 2 H), 3.03-2.94 (m, 3 H), 2.61-2.49 (m, 2 H).

Korak 5: 1-(3,3-Difluorociklobutil)-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metansulfonamid

[0147] Rastvor (3,3-difluorociklobutil)metansulfonil hlorida (2.5 g, 12.19 mmol) u 10 mL dihlorometana ukapavanjem je dodat u rastvor cis-N-metil-N-{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7Hpirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}ciklobutan-1,3-diamin dihidrobromida (3.25 g, 6.10 mmol) i trietilamina (3.08 g, 30.49 mmol) u dihlorometanu (150 mL) na 0°C tokom 15 minuta. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 časa. Dodata je voda (50 mL) i organski sloj je odvojen. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 150 mL), i kombinovani organski slojevi su razdvojeni sušeni preko natrijum sulfata. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (2.0 g, 61%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C23H27F2N5O4S2; 539.147, zabeležena (M H<+>); 540.1.

Korak 6: 1-(3,3-Difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino] ciklobutil}metansulfonamid

[0148] Rastvor 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)-sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metansulfonamida (2 g, 3.71 mmol) i litijum hidroksid monohidrata (780 mg, 18.6 mmol) u etanolu (40 mL) i vodi (20 mL) je mešan na 60°C u trajanju od 4 časa. Etanol je isparavan i preostali organski sloj je neutralizovan do pH 7 sa hlorovodoničnom kiselinom i zatim ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pomoću preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (800 mg, 56%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanold4): δ 8.15 (s, 1H), 8.13 (s, 1 H), 7.16-7.15 (m, 1 H), 6.73-6.62 (m, 1 H), 4.95-4.88 (m, 1 H), 3.73-3.71 (m, 1 H), 3.38 (s, 3 H), 3.28-3.26 (m, 2 H), 2.87-2.78 (m, 4 H), 2.63-2.61 (m, 1 H), 2.56-2.48 (m, 2 H), 2.35-2.28 (m, 2 H).

LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H21F2N5O2S; 385.138, zabeležena (M H<+>); 386.1.

[0149] Sledeća jedinjenja, Primeri 13-14, su pripremljena od cis-N-metil-N-{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}ciklobutan-1,3-diamin dihidrobromida (Primer 12, Korak 2) na sličan način onome koji je opisan u Primeru 12, Korak 5, supstitucijom naznačenog sulfonil hlorida za (3,3-difluorociklobutil)metansulfonil hlorid i upotrebom postupka deprotekcije ilustrovanog u Primeru 12, Korak 6.

Primer 13: 3,3-Difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} ciklobutansulfonamid

[0150] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 3,3-difluorociklobutansulfonil hlorida upotrebom postupka iz PCT objave br. WO2011/068881. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (80:20 do 10:90) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (22% u 2 koraka).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 6.70 (d, 1 H), 4.86-4.81 (m, 1H), 3.78-3.72 (m, 2 H), 3.35 (s, 3 H), 3.01-2.93 (m, 4 H), 2.78-2.76 (m, 2 H), 2.32-2.25 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H19F2N5O2S; 371.123, zabeležena (M H<+>); 372.1.

Primer 14: 1-Ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} metansulfonamid

[0151] Ovo jedinjenje je pripremljeno kao bela čvrsta supstanca upotrebom ciklopropilmetansulfonil hlorida (73% u 2 koraka).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.64 (br. s., 1 H), 8.11 (s, 1 H), 7.53 (d, 1 H), 7.12-7.19 (m, 1 H), 6.64 (m, 1 H), 4.84-4.97 (m, 1 H), 3.54-3.70 (m, 1 H), 3.26 (s, 3 H), 2.93 (d, 2 H), 2.55-2.66 (m, 2 H), 2.29-2.22 (m, 2 H), 0.96-1.09 (m, 1 H), 0.53-0.64 (m, 2 H), 0.29-0.39 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H19F2N5O2S; 335.142, zabeležena (M H<+>); 336.0.

Referentni primer 15: 1-Ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}azetidin-3-sulfonamid

Korak 1: terc-Butil 3-({[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]amino}sulfonil)azetidin-1-karboksilat

[0152] cis-N-Metil-N-{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}ciklobutan-1,3-diamin dihidrobromid (7.0 g, 18.8 mmol) je pretvoren u slobodnu bazu mešanjem u višku vodenog 1N rastvora natrijum hidroksida u trajanju od 3 minuta i zazim ekstrakcijom u dihlorometan. Organski sloj je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Preostala slobodna baza je apsorbovana u dihlorometanu (200 mL), hlađena do 0°C i tretirana sa i trietilaminom (13 mL, 94 mmol) i terc-butil 3-(hlorosulfonil)azetidin-1-karboksilatom. Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Sirova smeša je isprana vodom i fizilološkim rastvorom, zatim sušena preko natrijum sulfata i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod kao bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je kristalizovana upotrebom smeše dihlorometana i dietil etra da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (9.61 g, 90%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.19 (s, 1 H), 7.92-8.01 (m, 2 H), 7.54 (d, 1 H), 7.35 (d, 2 H), 6.86 (d, 1 H), 4.76-4.65 (m, 1 H), 4.18 (br. s., 2 H), 3.99-4.10 (m, 3 H), 3.66-3.78 (m, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 2.64-2.78 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.10-2.25 (m, 2 H), 1.41 (s, 9 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C26H34N6O6S2, 590.198, zabeležena (M H<+>); 591.45.

Korak 2: N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]azetidin-3-sulfonamid

[0153] Acetil hlorid (0.20 mL, 2.8 mmol) je dodat u rastvor terc-butil 3-({[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]amino}sulfonil)azetidin-1-karboksilata (1.64 g, 2.78 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (18 mL) i metanolu (7 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Beli talog je otfiltriran i apsrobovan u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa dihlorometanom (3 x 20 mL) i kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (810 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C21H26N6O4S2, 490.146, zabeležena (M H<+>); 491.0.

Korak 3: 1-Ciklopropil-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]azetidin-3-sulfonamid

[0154] N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]azetidin-3-sulfonamid (810 mg, 1.65 mmol), metanol (10 mL), molekularne rešetke i [(1-etoksiciklopropil)oksi](trimetil)silan (0.53 mL, 2.64 mmol) su kombinovani u reakcionoj posudi koja se može zatvoriti hermetički. Posuda je prečišćena azotom i dodata je sirćetna kiselina (1.28 mL, 8.26 mmol). Posuda je hermetički zatvorena i zatim zagrevana na 80°C u trajanju od 2 časa. Pošto je smeša ohlađena do sobne temperature, dodat je natrijum cijanoborohidrid (273 mg, 4.13 mmol). Posuda je ponovo hermetički zatvorena i lagano zagrevana do 40°C u trajanju od 1.5 časa. Sirova smeša je filtrirana kroz sloj od Celita, ispiranjem metanolom. Filtrat je koncentrovan i ostatak je apsorbovan u vodeni zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa dihlorometanom (5 x 20 mL), i kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (576 mg, 74%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.23 (s, 1 H), 7.95-8.05 (m, 2 H), 7.58 (d, 1 H), 7.39 (d, 2 H), 6.90 (d, 1 H), 4.69-4.83 (m, 1 H), 3.94-4.09 (m, 1 H), 3.65-3.75 (m, 3 H), 3.54-3.64 (m, 2 H), 3.29 (s, 3 H), 2.67-2.79 (m, 2 H), 2.41 (s, 3 H), 2.15-2.29 (m, 2 H), 2.02-2.15 (m, 1 H), 0.43-0.51 (m, 2 H), 0.29-0.39 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C24H30N6O4S2; 530.177, zabeležena (M H<+>); 531.0.

Korak 4: 1-Ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil} azetidin-3-sulfonamid

[0155] Rastvor cezijum karbonata (976 mg, 3.0 mmol) u vodi (5 mL) dodat je u rastvor 1-ciklopropil-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]azetidin-3-sulfonamida (530 mg, 1.0 mmol) u etanolu (10 mL). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa u trajanju od 16 časova. Pošto je rastvarač uklonjen, preostali materijal je apsorbovan u vodi i ekstrahovan sa smešom dihlorometana i metanola (96:4; 3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirova čvbrsta supstanca je kristalizovana iz metanola da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (225 mg, 59%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanold4): δ 8.10 (s, 1 H), 7.09 (d, 1 H), 6.66 (d, 1 H), 4.88-4.80 (m, 1 H), 4.03-3.96 (m, 1 H), 3.73-3.65 (m, 3 H), 3.61-3.57 (m, 2 H), 3.32 (s, 3 H), 2.77-2.68 (m, 2 H), 2.28-2.19 (m, 2 H), 2.08-2.03 (m, 1 H), 0.46-0.41 (m, 2 H), 0.34-0.31 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H24N6O2S; 376.168, zabeležena (M H<+>); 377.0.

Primer 16: N-(Ciklopropilmetil)-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutilsulfamid

Korak 1: N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-2-okso-1,3-oksazolidin-3-sulfonamid

[0156] U rastvor hlorosulfonil izocijanata (1.76 mL, 20.6 mmol) u dihlorometanu (150 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor 2-bromoetanola (1.43 mL, 20.6 mmol) u dihlorometanu (80 mL) na 0°C. Posle 30 minuta na 0°C, ukapavanjem je dodat rastvor cis-N-metil-N-{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}ciklobutan-1,3-diamin dihidrobromida (11.0 g, 20.6 mmol) i trietilamina (10.42 g, 103.2 mmol) u suvom dihlorometanu (80 mL) i reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature preko noći. Reakcioni rastvor je rastvoren u dihlorometanu (1 L), ispran vodenim 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (2 x 800 mL) i fiziološkim rastvorom (500 mL). Rastvor je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (8.5 g, 79%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.22 (s, 1 H), 8.00 (d, 2 H), 7.58 (d, 1 H), 7.38 (d, 2 H), 6.91 (d, 1 H), 4.88 (m, 1 H), 4.45-4.41 (m, 2 H), 4.06-4.02 (m, 2 H), 3.75 (m, 1 H), 3.29 (s, 3 H), 2.72-2.69 (m, 2 H), 2.40 (s, 3 H); 2.30-3.27 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C21H24N6O6S2; 520.120, zabeležena (M H<+>); 521.4.

Korak 2: N-(Ciklopropilmetil)-N’-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]sulfamid

[0157] Rastvor N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-2-okso-1,3-oksazolidin-3-sulfonamida (150 mg, 0.29 mmol), ciklopropanmetilamina (51 mg, 0.72 mmol) i trietilamina (116 mg, 1.15 mmol) u acetonitrilu (3 mL) je mešan u trajanju od 15 minuta na 100°C upotrebom mikrotalasnog zagrevanja. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova (146 mg, 100% sirovi prinos) kao žuto ulje. LC/MS (tačna masa) izračunata za C22H28N6O4S2; 504.161, zabeležena (M H<+>); 505.2.

Korak 3: N-(Ciklopropilmetil)-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino] ciklobutil}sulfamid

[0158] Rastvor N-(ciklopropilmetil)-N’-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]sulfamida (146 mg, 0.29 mmol), litijum hidroksida (48 mg, 1.15 mmol) u etanolu (5 mL) i vodi (2.5 mL) je mešan na 100°C u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 14%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 6.90 (d, 1 H), 4.90-4.86 (m, 1 H), 3.63-3.59 (m, 1 H), 3.37 (s, 3 H), 2.85-2.83 (m, 2 H), 2.78-2.71 (m, 2 H), 2.33-2.26 (m, 2 H), 1.05-1.03 (m, 1 H), 0.57-0.52 (m, 2 H); 0.30-0.25 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H22N6O2S; 350.152, zabeležena (M H<+>); 351.2.

[0159] Sledeća jedinjenja, Primeri 17-18, su pripremljena od N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-2-okso-1,3-oksazolidin-3-sulfonamida (Primer 16, Korak 1) na sličan način onome opisanom u Primeru 16, Korak 2, supstitucijom naznačenog amina za ciklopropanmetilamin, i upotrebom postupka deprotekcije ilustrovanog u Primeru 16, Korak 3.

Primer 17A i 17B: (R)- i (S)-3-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}pirolidin-1-sulfonamid

[0160] Ova jedinjenja su pripremljena upotrebom racemskog pirolidin-3-karbonitril hidrohlorida. Sirova racemska smeša je prečišćena pomoću tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobila bela čvrsta supstanca (60 mg, 52% u 2 koraka). Enantiomeri su razdvojeni pomoću superkritične fluidne hromatografije.

Enantiomer A (17A): 24 mg (21%):<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13 (d, J = 3.2 Hz, 1 H), 6.69 (d, 1 H, J = 3.6 Hz, 1 H), 4.87-4.84 (m, 1 H), 3.73-3.67 (m, 1 H), 3.65-3.57 (m, 1 H), 3.53-3.50 (m, 2 H), 3.48-3.44 (m, 2 H), 3.405 (s, 3 H), 2.77-2.75 (m, 2 H), 2.42-2.20 (m, 4 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H21N7O2S; 375.148, zabeležena (M H<+>); 376.1. Hiralna HPLC vreme zadržavanja = 5.97 minuta.

Enantiomer B (17B): 25 mg (21%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13 (d, J = 3.2 Hz, 1 H), 6.69 (d, 1 H, J = 3.6 Hz, 1 H), 4.87-4.84 (m, 1 H), 3.73-3.67 (m, 1 H), 3.65-3.57 (m, 1 H), 3.53-3.50 (m, 2 H), 3.48-3.44 (m, 2 H), 3.405 (s, 3 H), 2.77-2.75 (m, 2 H), 2.42-2.20 (m, 4 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H21N7O2S; 375.148, zabeležena (M H<+>); 376.1. Hiralna HPLC vreme zadržavanja = 5.16 minuta.

Primer 18: 2-Metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}2,6-dihidropirolo[3,4-c]pirazol-5(4H)-sulfonamid

[0161] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 2-metil-2,4,5,6-tetrahidropirolo[3,4-c]pirazol hidrohlorida. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (24% u 2 koraka).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.08 (s, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 7.10 (d, 1 H), 6.66 (d, 1 H), 4.87-4.86 (m, 1 H), 4.42-4.41 (m, 4 H), 3.87 (s, 3 H), 3.71-3.67 (m, 1 H), 3.31 (s, 3 H), 2.68-2.61 (m, 2 H), 2.27-2.22 (m, 3H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N8O2S ; 402.159, zabeležena (M H<+>); 403.2 i (M Na); 425.1.

Primer 19: N-{cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamid

Korak 1: N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil}-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamid

[0162] Smeša N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-2-okso-1,3-oksazolidin-3-sulfonamida (208 mg, 0.40 mmol), 6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptana (50 mg, 0.50 mmol), trietilamina (220 mL, 1.58 mmol) u acetonitrilu (15 mL), je zagrevana u 20 mL posudi za mikrotalase u mikrotalasnom reaktoru u trajanju od 1 časa na 120°C. Višak rastvarača je isparavan i dobijeno ulje je apsorbovano u dihlorometanu. Rastvor je ispran vodenim rastvorom amonijum hlorida i fiziološkim rastvorom. Sirovi materijal je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo ulje. Ovo je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom metanola u dihlorometanu (0:100 do 5:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena (82 mg, 30%).

<1>H NMR (CDCl3): δ 8.38 (s, 1 H), 8.04 (d, 2 H), 7.48 (d, 1 H), 7.28 (d, 2 H), 6.63 (d, 1 H), 4.78-4.69 (m, 1 H), 4.62 (d, 1 H), 4.47 (d, 1 H), 3.69-3.61 (m, 1 H), 3.58 (d, 3 H), 3.26-3.17 (m, 1 H), 3.24 (s, 3 H), 2.83-.275 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.18-2.11 (m, 2 H), 2.04 (d, 1 H), 1.18 (t, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C23H28N6O5S2; 532.156, zabeležena (M H<+>); 533.

Korak 2: N-{cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamid

[0163] N-[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamid (229 mg, 0.43 mmol) dodat je u rastvor 1M tetrabutilamonijum fluorida u tetrahidrofuranu (6.5 mL, 6.4 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 časova. Smeša je koncentrovana i preostali materijal je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa smešom metanola u etil acetatu (1:9). Izolovano je žuto ulje koje je triturisano sa smešom etil acetata i heptana da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je podeljena između etil acetata i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca. Ovo je triturisano sa dietil etrom i zatim izopropil alkoholom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (14 mg, 9%).<1>H NMR (CD3OD) δ 8.08 (s, 1 H), 7.09 (d, 1 H), 6.66 (s, 1 H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.62 (d, 2 H), 3.86-8.84 (m , 1 H), 3.66 (t, 1 H), 3.56-3.49 (m, 3 H), 3.33 (s, 3 H), 3.19-3.13 (m, 1 H), 2.75-2.70 (m, 2 H), 2.32-2.24 (m, 2 H), 2.05-2.03 (d, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H22N6O3S, 378.147, zabeležena (M H<+>); 379.5.

[0164] Sledeća jedinjenja, Primeri 20-24, su pripremljena od N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-2-okso-1,3-oksazolidin-3-sulfonamida (Primer 16, Korak 1) na sličan način onom opisanom u Primeru 16, Korak 2, supstitucijom naznačenog amina za ciklopropanmetilamin, i upotrebom postuka deprotekcije ilustrovanog u Primeru 19, Korak 2.

Primer 20: 3-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil} azetidin-1-sulfonamid

[0165] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom azetidin-3-karbonitrila. Sirovo jedinjenje je prečišćeno tečnom hromatografijom viskog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (23% u 2 koraka).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.10 (s, 1 H), 7.11 (d, 1 H), 6.68 (d, 1 H), 4.80 (m, 1 H), 4.02 (m, 2 H), 3.90 (m, 2 H), 3.58 (m, 2 H), 3.32 (s, 3 H), 2.72 (m, 2 H), 2.25 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H19N7O2S; 361.132, zabeležena (M H<+>); 362.1.

Primer 21: N-{cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-4-(1H-pirazol-3-il)piperidin-1-sulfonamid

[0166] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 4-(1H-pirazol-3-il)piperidina. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa smešom dihlorometana i metanola (9:1). Izolovani materijal je triturisan sa dietil etrom i zatim etil acetatom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10% u 2 koraka).<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.09 (s, 1 H), 7.48 (s, 1 H), 7.12-7.05 (m, 1 H), 6.71-6.60 (m, 1 H), 6.22-6.08 (m, 1 H), 4.92-4.73 (m, 1H), 3.80-3.55 (m, 3H), 3.41 (s, 3H), 2.90-2.65 (m, 5 H), 2.38-2.19 (m, 2 H), 2.09-1.90 (m, 2 H) i 1.83-1.65 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H26N8O2S; 430.190, zabeležena (M H<+>); 431.1.

Primer 22: N-(2-Cijanoetil)-N-metil-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}sulfamid

[0167] Ovo jedinjenje je pripremljeno upotrebom 3-metilaminopropionitrila. Sirovo jedinjenje je prečišćeno tečnom hromatografijom visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7% u 2 koraka). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H21N7O2S; 363.148, zabeležena (M H<+>); 364.0.

Primer 23 i 27: (1S,5S)-1-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamid i (1R,5R)-1-Cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamid

[0168] Ova jedinjenja su pripremljena upotrebom racemskog 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karbonitrila. Sirovo racemsko jedinjenje je prečišćeno kao bela čvrsta supstanca (92 mg, 21% u 2 koraka) hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (30:1 do 5:1). Enantiomeri iz naslova su razdvojeni pomoću superkritične fluidne hromatografije.

Enantiomer 23: 41 mg (9%); SFC vreme zadržavanja= 4.28 minuta;<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 6.70 (d, 1 H), 4.61 (s, 1 H), 3.57 - 3.72 (m, 2 H), 3.43 - 3.51 (m, 3 H), 3.36 (s, 3 H), 2.70 - 2.77 (m, 2 H), 2.24 - 2.38 (m, 3 H), 1.41 - 1.48 (m, 1 H), 1.32 (t, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H21N7O2S; 387.148, zabeležena (M H<+>); 388.1. Enantiomer 27: 40 mg (9%); SFC vreme zadržavanja = 4.84 minuta<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 6.70 (d, 1 H), 4.61 (s, 1 H), 3.57 - 3.72 (m, 2 H), 3.43 - 3.51 (m, 3 H), 3.36 (s, 3 H), 2.70 - 2.77 (m, 2 H), 2.24 - 2.38 (m, 3 H), 1.41 - 1.48 (m, 1 H), 1.32 (t, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H21N7O2S; 387.148, zabeležena (M H<+>); 388.1.

Racemski 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karbonitril je pripremljen na sledeći način.

Korak 1: Racemski terc-butil rac-1-formil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat [0169] 1,1,1-Triacetoksi-1,1-dihidro-1,2-benziodoksol-3(1H)-on (6.5 g, 15.2 mmol) dodat je u rastvor racemskog terc-butil-1-(hidroksimetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (Synlett 2009, 921) (2.5 g, 11.7 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (60 mL). Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa dihlorometanom (60 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum sulfita, zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL). Organski sloj je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (1.7 g, 68%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.01 (d, 1 H), 3.83 (d, 1 H), 3.68 (t, 1H), 3.59 (dd, 1 H), 3.50-3.36 (m, 1 H), 2.25-2.09 (m, 1 H), 1.63 (t, 1 H), 1.43 (s, 9 H), 1.19-1.06 (m, 1 H).

Korak 2: Racemski terc-butil-1-[(hidroksiimino)metil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat

[0170] Kalijum karbonat (3.89 g, 28.2 mmol) i hidroksilamin hidrohlorid (671 mg, 9.7 mmol) su dodati u rastvor terc-butil racemskog 1-formil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (1.7 g, 8.05 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (40 mL) na sobnoj temperaturi i zatim mešani 16 časova. Smeša je razblažena etil acetatom (80 mL), i isprana vodom (30 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL). Organski sloj je sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (0:100 do 83:17) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (1.6 g, 88%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.18 (s, 1 H), 3.74-3.55 (m, 3 H), 3.44-3.40 (m, 1 H), 1.74-1.72 (m, 1 H), 1.44 (s, 9 H), 1.10 (t, 1 H), 0.86-0.83 (m, 1 H).

Korak 3: Racemski terc-butil-1-cijano-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat

[0171] U rastvor racemskog terc-butil-1-[(hidroksiimino)metil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (925 mg, 4.09 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (100 mL) dodat je metil N-(trietilamonijum sulfonil)karbamat (2.92 g, 12.3 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa u trajanju od 3 časa. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa smešom petrol etra i etil acetata (5:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (570 mg, 67%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.84 (dd, 1 H), 3.64 (dd, 1 H), 3.50 (d, 1 H), 3.46 (dd, 1 H), 2.21-2.12 (m, 1 H), 1.44 (s, 9 H), 0.96 (t, 1 H). Korak 4: Racemski 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karbonitril

[0172] Rastvor racemskog terc-butil-1-cijano-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata u trifluorosirćetnoj kiselini (1 mL) i dihlorometanu (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Rastvarač je uklonjen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (205 mg, 100%) kao braon ulje.

Referentni primer 24: Racemski 3-cijano-N-{trans-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}pirolidin-1-sulfonamid

[0173] Ovo jedinjenje je sintetisano praćenjem postupka iz Primera 10, supstitucijom 3-cijanopirolidin-1-sulfonil hlorida za ciklopropilmetansulfonil hlorid. Sirovi proizvod je prečišćen upotrebom preparativne tečne hromatografije visokog učinka da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (5%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.13 (s, 1 H), 7.14 (d, 1 H), 6.67 (d, 1 H), 5.45-5.41 (m, 1 H), 4.00-3.64 (m, 1 H), 3.62-3.52 (m, 1 H), 3.51-3.47 (m, 2 H), 3.45-3.39 (m, 2 H), 3.369 (s, 3 H), 2.78-2.70 (m, 2 H), 2.53-2.47 (m, 2 H); 2.39-2.36 (m, 1 H); 2.27-2.24 (m, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H21N7O2S; 375.148, zabeležena (M H<+>); 375.9.

Racemski 3-cijanopirolidin-1-sulfonil hlorid

[0174] Rastvor racemskog pirolidin-3-karbonitrila (53 mg, 0.4 mmol) i trietilamina (101 g, 1 mmol) u suvom dihlorometanu (1.0 mL) ukapavanjem je dodat u mešani rastvor sulfuril hlorida (64.8 mg, 0.48 mmol) u dihlorometanu (3.0 mL) na -78°C. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 30 minuta, i zatim ostavljena da se zagreva do sobne temperature tokom 1 časa. Reakcioni rastvor je ispran vodenim 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (5 mL) i fiziološkim rastvorom (5 mL), sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (68 mg, sirovo).

Referentni primer 25: N-(cis-3-{[(4,4-Difluoropiperidin-1-il)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: cis/trans-Etil 3-[(terc-butoksikarbonil)amino]ciklobutankarboksilat

[0175] U rastvor smeše cis- i trans-etil 3-aminociklobutankarboksilat hidrohlorida (cis/trans = 10:1) (WO2009/60278) (10 g, 55.7 mmol) i trietilamina (19.4 mL, 139.1 mmol) u dihlorometanu (370 mL) na 0°C ukapavanjem je dodat di-terc-butil dikarbonat (15.8 g, 72.3 mmol). Pošto je dodavanje završeno, smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (10:1 do 3:1) da bi se dobila smeša iz naslova kao bela čvrsta supstanca (19 g, 92%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.77 (s, 1 H), 4.13 (q, 3 H), 2.68 - 2.82 (m, 1 H), 2.60 (d, 2 H), 1.99 - 2.17 (m, 2 H), 1.43 (s, 9 H), 1.25 (t, 3 H).

Korak 2: cis/trans-[3-(Metilamino)ciklobutil]metanol

[0176] Litijum aluminijum hidrid (9.14 g, 240.4 mmol) je suspendovan u suvom tetrahidrofuranu (350 mL). Smeša je hlađena do 0°C i ukapavanjem je dodat rastvor cis/trans etil 3-[(terc-butoksikarbonil)amino]ciklobutankarboksilata (cis/trans = 10:1) (11.7 g, 48.1 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (170 mL). Pošto je dodavanje završeno, dobijena smeša je zagrevana do refluksa preko noći. Pošto je ohlađena do sobne temperature, reakcija je razblažena tetrahidrofuranom (1.5 L) i zatim hlađena do 0~5°C. Male porcije Na2SO4.10H2O su dodavane sve dok nije prestalo oslobađanje gasa. Smeša je filtrirana da bi se uklonile čvrste supstance, koje su isprane sa još tetrahidrofurana (500mL). Filtrat je koncentrovan do sušenja čime je dobijena smeša iz naslova (cis/trans = 10:1) kao ulje(10 g, >100%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.58 (d, J = 3.8 Hz, 2 H), 3.06-3.17 (m, 1 H), 2.34-2.43 (m, 3 H), 2.32 (s, 3 H), 1.48-1.57 (m, 2 H).

Korak 3: cis/trans-[3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metanol

[0177] Kalijum jodid (173 mg) i trietilamin (13 mL, 93.8 mmol) u dodati u rastvor cis/trans-[3-(metilamino)ciklobutil]metanola (6.0 g, 52.1 mmol) u acetonu (250 mL). 4-Hloro-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin (14.4 g, 46.9 mmol) je zatim dodat i dobijena smeša je zagrevana do refluksa preko noći. Posle isparavanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je razblažen sa dihlorometanom (500 mL). Rastvor je ispiran redom vodom (300 mL), 2% vodenim rastvorom limunske kiseline (300 mL) i fiziološkim rastvorom (300 mL), i zatim sušen preko natrijum sulfata. Posle filtracije, rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobila smeša iz naslova kao svetla čvrsta supstanca (15.3 g, 85%). Deo (5.0 g) smeše cis/trans-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)-ciklobutil]metanola je odvojen pomoću superkritične fluidne hromatografije upotrebom Chiralpak-AD kolone: cis izomer, 4.6 g:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.20 (s, 1 H), 7.98 (d, 2 H), 7.53 (d, 1 H), 7.34 (d, 2 H), 6.83 (d, 2 H), 4.99-4.95 (m, 1 H), 3.56 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 3.24 (s, 3 H), 2.36 (s, 3 H), 2.34-2.28 (m, 2 H), 2.24-2.19 (m, 1 H), 2.11-2.03 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H22N4O3S: 386.14, zabeležena (M H<+>): 387.3 trans izomer, 0.4 g:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.20 (s, 1H), 7.98 (d, 2 H), 7.55 (d, 1H), 7.35 (d, 2H), 6.84 (d, 2H), 5.26-5.22 (m, 1H), 3.69 (d, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.46-2.41 (m, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.19-2.14 (m, 2H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H22N4O3S: 386.14, zabeležena (M H<+>): 387.3

Korak 4: cis-[3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]metil 4-metilbenzensulfonat

[0178] U rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metanola (20 g, 51.8 mmol) i N,N-dimetilaminopiridina (12.6 g, 103.6 mmol) u dihlorometanu (500 mL) na 0°C dodat je p-toluensulfonil hlorid (14.8 g, 77.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova i zatim isprana vodom (500 mL). Kombinovani vodeni ostaci ispiranja su ekstrahovani sa dihlorometanom (2 x 800 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 95:5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23 g, 82%) kao bela čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C26H28N4O5S2: 540.150, zabeležena (M H<+>): 541.3. Korak 5: S-{[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}etantioat

[0179] U rastvor kalijum tioacetata (678 mg, 5.93 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor [cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil 4-metilbenzensulfonata (2.0 g, 3.70 mmol) u N,N-dimetilformamidu (6 mL) tokom 5 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je zatim zagrevana do na 50-55°C preko noći. Smeša je hlađena do sobne temperature i ugašena sipanjem u vodeni zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (60 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 30 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 30 mL), fiziološkim rastvorom (30 mL). Posle sušenja preko Na2SO4rastvor je koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.2 g, 73%) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.39 (s, 1H), 8.04 (d, 2 H), 7.45 (d, 1 H), 7.27 (d, 2 H), 6.63 (d, 1 H), 4.98-4.88 (m, 1 H) 3.2 (s, 3 H) 3.02-3.00 (m, 2 H) 2.45-2.44 (m, 2 H), 2.47 (m, 3 H) 2.22 (m, 3 H) 2.21-2.24 (m, 1 H) 1.92-1.87 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C2H24N4O3S2: 444.129, zabeležena (M H<+>): 445.1.

Korak 6: [cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]metansulfonska kiselina

[0180] U rastvor S-{[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}etantioata (580 mg, 1.31 mmol), u mravljoj kiselini (10 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 30% vodeni rastvor vodonik peroksida (0.7 mL, 6.92 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je sipana u vodeni 33% rastvor natrijum bisulfata (1.12 mL) i zatim mešana 10 minuta. Zatim je dodat vodeni 33% rastvor natrijum hidroksida (1.8 mL) da bi se podesila pH do 5. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Čvrsta supstanca je sakupljena čvrsta filtracijom, isprana vodom (10 mL) i sušena pod vakuumom na oko 60°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (634 mg, sirovo) kao bela čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H22N4O5S2; 450.103, zabeležena (M H<+>); 451.3.

Korak 7: cis-[3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]metansulfonil hlorid

[0181] Tionil hlorid (0.3 ml, 3.33 mmol) dodavan je ukapavanjem tokom 5 minuta u rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metansulfonske kiseline (150 mg, 0.33 mmol) u dihlorometanu (20 mL) na 0°C. Dve kapi N,N-dimetilformamida su dodate u rastvor, koji je zatim zagrevan na 75°C u trajanju od 2 časa. Smeša je hlađena i rastvarač je isparavan. Ostatak je ispran anhidrovanim dihlorometanom (3 x 10 mL) da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova (170 mg) kao žuta čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H21ClN4O4S2; 468.069, zabeležena (M H<+>); 469.2.

Korak 8: N-(cis-3-{[(4,4-Difluoropiperidin-1-il)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0182] U smešu 4,4-difluoropiperidina (77 mg, 0.64 mmol) i trietilamina (97 mg, 0.96 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0°C ukapavanjem je dodavan rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metansulfonil hlorida (150 mg, 0.320 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL). Smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature preko noći. Rastvarač je isparavan i ostatak je apsorbovan u etil acetatu (80 mL). Rastvor je ispran fiziološkim rastvorom (30 mL), sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova (134 mg) kao bela čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C24H29F2N5O4S2; 553.651, zabeležena (M H<+>); 554.3. Korak 9: N-(cis-3-{[(4,4-difluoropiperidin-1-il)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0183] N-(cis-3-{[(4,4-Difluoropiperidin-1-il)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin (134 mg, 0.24 mmol) i litijum hidroksid monohidrat (51 mg, 1.21 mmol) su spojeni u smeši etanola (14 mL) i vode (7 mL) i zatim zagrevani na 50°C preko noći. Reakcija je koncentrovana pod vakuumom i razblažena sa etil acetatom (100 mL). Dobijeni rastvor je ispran fiziološkim rastvorom (30 mL), sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji upotrebom preparativne hromatografije na tankom sloju eluiranjem sa smešom etil acetata i metanola (20:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (31 mg, 32.3 %) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1H), 7.13 (d, J = 3.6, 1H), 6.70 (d, J = 3.6, 1H), 5.12 (m, 1H), 3.49-3.47 (m, 4H), 3.46 (m, 3H), 3.33 (m, 2H), 2.62-2.54 (m, 3H), 2.25-2.20 (m, 1H), 2.11-2.05 (m, 2H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H23F2N5O2S; 399.154, zabeležena (M H<+>); 400.3.

Referentni primeri 26, 28 i 29.

[0184] Sledeća jedinjenja su pripremljena počevši od cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metansulfonil hlorida (Primer 25, Korak 7), prema postupcima iz Primera 25, Korak 8 (sulfonilacija) i Korak 9 (deprotekcija), supstitucijom odgovarjućeg amina za 4,4-difluoropiperidin u Koraku 8.

Referentni primer 26: 1-[({cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil)-metil)sulfonil]-4-(trifluorometil)piperidin-4-ol

[0185] Jedinjenje iz naslova (31 mg) je pripremljeno upotrebom 4-(trifluorometil)piperidin-4-ola u koraku sulfonilacije i deprotektovano upotrebom postupka iz Primera 25, Korak 9. Jedinjenje je prečišćeno upotrebom preparativne hromatografije na tankom sloju eluiranjem sa smešom etil acetata i metanola (20:1).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1H), 7.13 (d, J = 3.6, 1 H), 6.70 (d, J = 3.6, 1H), 5.10-5.08 (m, 1 H), 3.74-3.71 (m, 2 H), 3.36 (m, 3 H), 3.32-3.27 (m, 2 H), 3.19-3.13 (m, 2 H), 2.62-2.54 (m, 3 H), 2.25-2.21 (m, 2 H), 1.86-1.84 (m, 4 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H24F3N5O3S; 447.155, zabeležena (M H<+>); 448.3.

Referentni primer 28 i 29: (3R) i (3S)-1-[({cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]pirolidin-3-karbonitril

[0186] Jedinjenja iz naslova (330 mg ukupno) su pripremljena upotrebom pirolidin-3-karbonitrila obogaćenog kao 80:20 neracemska smeša enantiomera (3R)-pirolidin-3-karbonitrila i (3S)-pirolidin-3-karbonitrila u koraku sulfonilacije i deprotektovana su upotrebom postupka iz Primera 19, Korak 2. Jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom petrol etra i etil acetata (10:1 do 1:10). LC/MS m/z=375.2 (M+1). Enantiomeri su razdvojeni pomoću preparativne superkritične fluidne hromatografije: 3R-enantiomer (28): 178 mg.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.31 (s, 1H), 7.06 (d, 1 H), 6.58 (d, 1 H), 5.19-5.10 (m, 1 H), 3.77-3.75 (m, 1 H), 3.61-3.54 (m, 3 H), 3.33 (s, 3 H), 3.21-3.19 (m, 3 H), 2.69-2.66 (m, 3 H), 2.36-2.31 (m, 2 H), 2.14-2.11 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N6O2S; 374.15, zabeležena (M H<+>); 375.2. hiralna HPLC vreme zadržavanja = 2.65 minuta 3S-enantiomer(29): 31 mg.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.31 (s, 1H), 7.06 (d, 1 H), 6.58 (d, 1 H), 5.19-5.10 (m, 1 H), 3.77-3.75 (m, 1 H), 3.61-3.54 (m, 3 H), 3.33 (s, 3 H), 3.21-3.19 (m, 3 H), 2.69-2.66 (m, 3 H), 2.36-2.31 (m, 2 H), 2.14-2.11 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22N6O2S; 374.15, zabeležena (M H<+>); 375.2 hiralna HPLC vreme zadržavanja = 2.53 minuta

Referentni primer 30: N-{cis-3-[(Butilsulfonil)metil]ciklobutil}-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: N-{cis-3-[(Butiltio)metil]ciklobutil}-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin [0187] Rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil 4-metilbenzensulfonata iz Primera 25, Korak 4 (23 g, 42.6 mmol) je mešan u N-metilpirolidinu (100 mL). Zatim je u reakcionu smešu dodat 1,8-diazabicikloundec-7-en (12.8 g, 85.2 mmol) i 1-butantiol (7.8 g, 85.2 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Dodati su voda (200 mL) i etil acetat (500 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 500 mL) i kombinovani organski slojevi su sšeni i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.8 g, 91%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H24N4S; 304.172, zabeležena (M H<+>); 305.3.

Korak 2: N-{cis-3-[(Butilsulfonil)metil]ciklobutil}-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin [0188] N-{cis-3-[(Butiltio)metil]ciklobutil}-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin (12 g, 39.5 mmol) je rastvoren u smeši tetrahidrofurana (200 mL), etanola (200 mL) i vode (200 mL). Dodat je kalijum peroksomonosulfat (48.6 g, 79.0 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je zatim filtrirana; čvrste supstance su isprane smešom tetrahidrifurana (40 mL), etanola (40 mL) i vode (20 mL). Filtrat je tretiran vodenim 10% rastvorom natrijum bisulfita (200 mL) i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata dodat je da bi se podesila pH do ~7. Smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 x 800 mL) i kombinovani organski slojevi su sušeni i koncentrovani pod vakuumom. Sirovi ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 to 95:5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.4g, 86%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.13 (s, 1 H), 7.13-7.12 (m, 1 H), 6.70-6.69 (m, 1 H), 5.13-5.10 (m, 1 H), 3.42 (s, 3 H), 3.33 (m, 2 H), 3.11-3.07 (m, 2 H), 2.65-2.63 (m, 3 H), 2.29-2.25 (m, 2 H),1.86-1.78 (m, 2 H), 1.55-1.50 (m, 2 H), 1.03-0.99 (m, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C16H24N4O2S; 336.162, zabeležena (M H<+>); 337.3 Referentni primer 31: N-Metil-N-(trans-3-((propilsulfonil)metil)ciklobutil)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0189] Jedinjenja iz naslova su pripremljena kao smeša cis i trans izomera (50 mg) počevši od cis i trans-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]metil 4-metilbenzen sulfonata (cis/trans = 10:1) (Primer 25, Korak 4), prema postupcima sličnim onima iz Primera 30, Koraci 1 i 2, upotrebom propan-1-tiola umesto butan-1-tiola u Koraku 2. Smeša cis i trans izomera je prečišćena pomoću reverzno-fazne tečne hromatografije visokog učinka eluiranjem sa gradijentom vode i acetonitrila (95:5 do 5:95). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H22N4O2S; 322.15, zabeležena (M H<+>); 323.2

[0190] Cis i trans izomeri su zatim razdvojeni pomoću preparativne superkritične fluidne hromatografije.

trans isomer (31), 12 mg:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1 H), 7.13-7.12 (m, 1 H), 6.69-6.66 (m, 1 H), 5.45-5.41 (m, 1 H), 3.46-3.44 (m, 2 H), 3.36 (s, 3 H), 3.11-3.09 (m, 2 H), 2.88-2.86 (m, 1 H), 2.75-2.67 (m, 2 H), 2.40-2.38 (m, 2 H), 1.91-1.86 (m, 2 H), 1.12-1.10 (m, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H22N4O2S; 322.15, zabeležena (M H<+>); 323.2 cis izomer, 36 mg:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1 H), 7.13-7.12 (m, 1 H), 6.70-6.69 (m, 1 H), 5.10-5.20 (m, 1 H), 3.36 (s, 3 H), 3.33-3.32 (m, 2 H), 3.08-3.04 (m, 2 H), 2.64-2.61 (m, 3 H), 2.24-2.22 (m, 2 H), 1.90-1.84 (m, 2 H), 1.13-1.09 (m, 3 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C15H22N4O2S; 322.15, zabeležena (M H<+>); 323.2 Referentni primer 32: N-(cis-3-{[(2-Ciklopropiletil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: N-(cis-3-{[(2-Ciklopropiletil)sulfanil]metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0191] Azot je barbotiran kroz smešu S-{[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}etantioata Primer 25, Korak 5 (190 mg, 0.43 mmol) i kalijum karbonata (129 mg, 0.94 mmol) u metanolu (10 mL) na 0°C u trajanju od 2 minuta. Zatim je dodat 2-ciklopropiletil 4-metilbenzensulfonat (159 mg, 1.53 mmol) i rastvor je mešan u trajanju od 6 časova na sobnoj temperaturi. Dodati su dihlorometan (30 mL) i voda (20 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne hromatografije na tankom sloju upotrebom etil acetata-petrol etra (1:2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (62 mg, 31%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C24H30N4O2S2; 470.18, zabeležena (M H<+>); 471.1

Korak 2: N-(cis-3-{[(2-Ciklopropiletil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0192] Smeša N-(cis-3-{[(2-ciklopropiletil)sulfanil]-metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)-sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (24 mg, 0.051 mmol) i kalijum peroksomonosulfata (49 mg, 0.079 mmol) u tetrahidrofuranu (1.2 mL), vodi (0.6 mL) i etanolu (1.2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Dodat je vodeni rastvor natrijum bisulfita, a zatim dihlorometan (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 20 mL) i kombinovani organski slojevi su ekstrahovanu fiziološkim rastvorom, sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. LC/MS (tačna masa) izračunata za C24H30N4O4S, 502.17, zabeležena (M H<+>); 503.3

Korak 3: N-(cis-3-{[(2-Ciklopropiletil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0193] Smeša N-(cis-3-{[(2-ciklopropiletil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (49 mg, 0.097 mmol) i litijum hidroksida (30 mg, 1.3 mmol) u vodi (5 mL) i etanolu (10 mL) je mešana na 50°C u trajanju od 2 časa. Zatim, dodat je dihlorometan (20 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom. Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću reverzno-fazne tečne hromatografije viskog učinka upotrebom gradijenta vode i gradijenta acetonitrila (95:5 do 5:95) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 40%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1 H), 7.13 (d, 2 H), 6.70 (d, 2 H), 5.12-5.09 (m, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 3.34-3.33 (m, 2 H), 3.20-3.17 (m, 2 H), 2.64-2.61 (m, 3 H), 2.26-2.22 (m, 2 H), 1.75-1.69 (m, 2 H), 0.89-0.86 (m, 2 H), 0.56-0.52 (m, 2 H), 0.18-0.17 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H24N4O2S; 348.16, zabeležena (M H<+>); 349.1

Referentni primer 33: N-[cis-3-({[(3,3-Difluorociklobutil)metil]sulfonil}-metil)ciklobutil]-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: N-[cis-3-({[(3,3-Difluorociklobutil)metil]sulfanil}metil)ciklobutil]-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0194] Azot je barbotiran kroz smešu S-{[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)-sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}etantioata, Primer 25, Korak 5 (250 mg, 0.56 mmol) i kalijum karbonata (194 mg, 1.41 mmol) u metanolu (100 mL) u trajanju od dva minuta na 0°C, a zatim je dodat (3,3-difluorociklobutil)metil 4-metilbenzensulfonat (pripremljen kao što je opisao u WO2004/032834) (310 mg, 1.12 mmol). Smeša je mešana 6 časova na sobnoj temperaturi, filtrirana i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (270 mg, sirovo) kao bela čvrsta supstanca. LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22F2N4S; 352.15, zabeležena (M H<+>); 353.2

Korak 2: N-[cis-3-({[(3,3-Difluorociklobutil)metil]sulfonil}metil)ciklobutil]-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0195] Smeša N-[cis-3-({[(3,3-difluorociklobutil)metil]sulfanil}-metil)ciklobutil]-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (45 mg, 0.13 mmol) i kalijum peroksomonosulfata (157 mg, 0.26 mmol) u smeši tetrahidrofurana (20 mL), vode (10 mL) i etanola (20 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Zatim je dodat vodeni rastvor natrijum bisulfita, a zatim dihlorometan (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 20 mL) i kombinovani organski slojevi su ekstrahovani fiziološkim rastvorom, sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću reverzno-fazne tečne hromatografije visokog učinka upotrebom gradijenta vode:acetonitrila (95:5 do 5:95) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (34 mg, 39%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.29 (s, 1 H), 7.42 (d, 1 H), 7.03 (d, 1 H), 4.86 (m, 1 H), 3.51 (s, 3 H), 3.393.33 (m, 4 H), 2.84 (m, 1 H), 2.76-2.71 (m, 4 H), 2.53 (m, 2 H), 2.37-2.34 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22F2N4O2S; 384.14, zabeležena (M H<+>); 385.1.

Referentni primer 34A i 34B: (1R, 3R) i (1S, 3S)-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]ciklopentankarbonitril

[0196] Smeša jedinjenja iz naslova (1R, 3R) i (1S, 3S)-3-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metil)sulfonil]ciklopentan-karbonitrila je pripremljena od S-{[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}etantioata Primer 25, Korak 5, prema postupku iz Primera 30, koraci 1 i 2.

[0197] Jedinjenje iz naslova (180 mg) je odvojeno pomoću preparativne superkritične fluidne hromatografije upotrebom Chiralpak AS kolone:

(1R, 3R) enantiomer 34A: 60 mg,<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.12 (s, 1 H), 7.13-7.12 (d, 1 H), 6.70-6.69 (d, 1 H), 5.17-5.11 (m, 1H), 3.86-3.78 (m, 1H), 3.41-3.36 (m, 5 H), 3.15-3.11 (m, 1 H), 2.63-2.53 (m, 4 H), 2.37-2.13 (m, 6 H), 2.03-1.91 (m, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22F2N4O2S; 373.16, zabeležena (M H<+>); 374.1

(1S, 3S) enantiomer 34B: 27 mg, LC/MS (tačna masa) izračunata za C17H22F2N4O2S; 373.16, zabeležena (M H<+>); 374.1

[0198] Intermedijer 3-cijanociklopentil 4-metilbenzensulfonata korišćen u koraku-1 je prikazan kao što je dato u daljem tekstu:

3-Cijanociklopentil 4-metilbenzensulfonat

[0199] 4-Metilbenzen-1-sulfonil hlorid (6.9 g, 36 mmol) i N,N-dimetilpiridin-4-amin (100 mg) su dodati u rastvor jedinjenja 3-hidroksiciklopentan-karbonitrila (J. Org. Chem. 2007, 72, 7423) (2 g, 18 mmol) i trietilamina (5.5 g, 54 mmol) u dihlorometanu (100 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 časova i zatim ugašena smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (20 mL). Smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (4 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa smešom petrol etra i etil acetata (1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (0.5 g, 11% prinos). LC/MS (tačna masa) izračunata za C13H15NO3S; 265.08, zabeležena (M 23); 287.9.

Referentni primer 35: Racemski N-metil-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfonil}metil)ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: terc-Butil 3-({[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}sulfanil)pirolidin-1-karboksilat

[0200] Rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil 4-metilbenzensulfonata iz Primera 25, Korak 4 (2 g, 3.7 mmol) je mešan u N-metilpirolidinu (40 mL). U reakcionu smešu su zatim dodati 1,8-diazabicikloundec-7-en (1.13 g, 7.4 mmol) i terc-butil estar 3-merkapto-pirolidin-1-karboksilne kiseline (1.13 g, 5.6 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Dodati su voda (200 mL) i etil acetat (500 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 500 mL) i kombinovani organski slojevi su sušeni i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (2.6 g, 118%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C28H37N5O4S2; 571.23, zabeležena (M H<+>): 572.1.

Korak 2: N-Metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-{cis-3-[(pirolidin-3-ilsulfanil)metil]ciklobutil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0201] U rastvor terc-butil 3-({[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}sulfanil)pirolidin-1-karboksilata (2.6 g, 4.5 mmol) u metanolu (15 mL) dodat je 3M rastvor hlorovodonične kiseline u metanolu (40 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Rastvor je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i metanola (100:0 do 85:15) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (1.7 g, 52%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.21 (s, 1 H), 7.99 (d, 2 H), 7.56 (d, 1 H), 7.37 (d, 2 H), 6.88 (d, 1 H), 4.95-4.87 (m, 1H), 3.29 (s, 1 H), 3.27 (s, 3 H), 3.21-3.17 (m, 1 H), 3.04-3.96 (m, 1 H), 2.92-29 (m, 1 H), 2.72-2.01 (m, 3 H), 2.50-2.43 (m, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 2.29-2.15 (m, 2 H), 2.03-2.01 (m, 2 H), 1.98-1.65 (m, 1 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C23H29N5O2S2; 471.18, zabeležena (M 23): 494.

Korak 3: N-Metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfanil}metil)ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0202] U rastvor N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-{cis-3-[(pirolidin-3-ilsulfanil)metil]ciklobutil}-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (472 mg, 1 mmol) u dihlorometanu (50 mL) dodat je aceton (174 mg, 3 mmol), 4Å molekularne rešetke (40 mg) i natrijum cijanoborohidrid (189 mg, 3 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim je razblažen dihlorometanom (70 mL) i vodom (70 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 50 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (100 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (500 mg, 97% prinos) kao bezbojno ulje. LC/MS (tačna masa) izračunata za C26H35N5O2S2; 513.22, zabeležena (M H<+>); 514.1.

Korak 4: N-Metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfonil}metil)ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0203] Smeša N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfanil}metil)ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (500 mg, 1.0 mmol) i kalijum peroksomonosulfata (1.23 g, 2.0 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL), vodi (10 mL) i etanolu (20 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Reakcioni rastvor je razblažen etil acetatom (100 mL) i vodom (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (100 mL), sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (420 mg, 90%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C26H35N5O4S2; 545.21, zabeležena (M H<+>): 546.3.

Korak 5: N-Metil-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfonil}metil)-ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0204] Smeša N-metil-7-[(4-metilfenil)sulfonil]-N-[cis-3-({[1-(propan-2-il)pirolidin-3-il]sulfonil}metil)ciklobutil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (330 mg, 0.6 mmol) i litijum hidroksida (126 mg, 3 mmol) u smeši vode (5 mL) i etanola (10 mL) je mešana na 50°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana i ostatak je apsorbovan u etil acetatu. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću reverzno-fazne tečne hromatografije visokog učinka upotrebom gradijenta vode i acetonitrila (95:5 do 5:95) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (89 mg, 38%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.32 (s, 1 H), 7.07 (d, 1 H), 6.57 (d, 1 H), 5.13 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 3.33 (s, 3 H) 3.05-3.22 (m, 3H), 2.92 (m, 1H), 2.78 - 2.87 (m, 1H), 2.58-2.77 (m, 4H), 2.50 (m, 1H), 2.19-2.34 (m, 2H), 2.06-2.19 (m, 2H), 1.12 (d, 6H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C19H29N5O2S; 391.20, zabeležena (M H<+>); 392.3

Referentni primer 36: N-(cis-3-{[(3-Hloro-4-fluorofenil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

Korak 1: N-(cis-3-{[(3-Hloro-4-fluorofenil)sulfanil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0205] U rastvor 3-hloro-4-fluorotiofenola (93 mg, 0.55 mmol) u tetrahidrofuranu (1.5 mL) dodat je 50% vodeni rastvor natrijum hidroksida (44 mg, 0.55 mmol) i etanol (1.5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. U reakcionu smešu je dodat rastvor cis-[3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino) ciklobutil]metil 4-metilbenzensulfonata iz Primera 25, Korak 4 (200 mg, 0.37 mmol) u tetrahidrofuranu (1.5 mL). Kombinovana smeša je zagrevana na 40°C preko noći. Reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću silika gela eluiranjem sa gradijentom heptana i etil acetata (90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (69 mg, 49.6%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.18 (s, 1 H), 7.39 (dd, 1 H), 7.28 (s, 1 H), 7.03-7.08 (m, 1 H), 7.00 (d, 1 H), 6.52 (d, 1 H), 4.97-5.07 (m, 1 H), 3.35 (m, 2 H), 3.23 (s, 3 H), 2.89 (s, 1 H), 2.43-2.52 (m, 2 H), 2.19-2.30 (m, 2 H).

Korak 2: N-(cis-3-{[(3-Hloro-4-fluorofenil)sulfonil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin

[0206] U rastvor N-(cis-3-{[(3-hloro-4-fluorofenil)sulfanil]metil}ciklobutil)-N-metil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (75 mg, 0.2 mmol) u dihlorometanu (10 mL) dodata je 3-hlorobenzoperoksi kiselina (107 mg). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim koncentrovana. Sirovi ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa gradijentom dihlorometana i 2M amonijaka u metanolu (80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (48 mg, 59.2%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 8.31 (s, 1H), 8.02 (m, 1H), 7.81-7.83 (m, 1H) 7.37-7.27 (m, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.18-5.10 (m, 1 H), 4.15-4.09 (m, 1 H), 3.32 (m, 5 H), 2.59-2.54 (m, 2 H), 2.44-2.42 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H18ClFN4O2S; 408.08, zabeležena (M H<+>); 409

Referentni primer 37: 2-[({cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]piridin-4-karbonitril

Korak 1: 2-({[cis-3-(Metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}sulfanil)piridin-4-karbonitril

[0207] 1,8-Diazabicikloundec-7-en (24.6 g, 161 mmol) i 2-merkapto-izonicktinonitril (16.1 g, 118 mmol) su dodati u rastvor [cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-metil metansulfonata (50 g, 110 mmol) u N-metilpirolidinu (250 mL). Reakcija je zagrevana na 50°C preko noći. Dodata je nova količina 2-merkaptoizonikotinonitrila (8.1 g, 59 mmol) da bi se reakcija završila. Smeša je hlađena do oko 0°C i zatim je reakcija ugašena ukapavanjem vode. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, isprane vodom, i sušene pod vakuumom na 50°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (45.8 g, 82.8%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C25H24N6O2S2; 504.14, zabeležena (M H<+>); 505.1

Korak 2: 2-[({cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfanil] piridin-4-karbonitril

[0208] U rastvor 2-({[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]metil}sulfanil)piridin-4-karbonitrila (45.3 g, 89.8 mmol) u tetrahidrofuranu (180 mL) dodat je rastvor 1M tetrabutilamonijum fluorida u tetrahidrofuranu (269 mL). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa u trajanju od 6 časova i zatim hlađena do sobne temperature. Ukapavanjem je dodavana voda tokom 45 minuta. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i isprane smešom 20% tetrahidrofurana (33 mL) i vode (97 mL). Vlažni kolač je sušen pod vakuumom na 50°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto-mrka čvrsta supstanca (25 g, 79%). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H18N6S2; 350.13, zabeležena (M H<+>); 351.1

Korak 3: 2-[({cis-3-[Metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil] piridin-4-karbonitril

[0209] Kalijum peroksomonosulfat (236.8 g, 385.2 mmol) je lagano dodavan u smešu 2-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metil)sulfanil]piridin-4-karbonitrila (22.5 g, 64.2 mmol) u metanolu (337 mL) i vodi (56 mL) na 0°C. Reakcija je mešana na 3°C u trajanju od 20 časova. Reakcija je ugašena upotrebom 10% vodenog rastvora natrijum bisulfata (40 mL) i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Vodeni 10% rastvor kalijum karbonata je dodavan dok pH nije bila 4 do 5. Materijal je filtriran i ispiran vodom. Vlažni filter kolač je sušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca. Ovaj materijal je apsorbovan u u tetrahidrofuranu (50 mL) i zagrevan do refluksa u trajanju od 3 časa. Smeša je hlađena do sobne temperature i filtrirana da bi se sakupila čvrsta supstanca, koja je sušena pod vakuumom na 40°C u jedinjenje iz naslova kao svetlo žuto-mrki prah (17.3 g, 70.46%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 11.97 (s, 1 H), 8.95 (d, 1 H), 8.33-8.28 (m, 2 H), 7.81 (d, 1 H) 7.1 (d, 1 H), 6.54 (d, 1 H), 5.13-5.08 (m, 1 H), 3.63 (m, 2 H), 3.30 (s, 3 H), 2.54-2.48 (m, 3 H), 2.09-2.07 (m, 2 H). LC/MS (tačna masa) izračunata za C18H18N6O2S2; 382.12, zabeležena (M H<+>); 383.1.

Primer 38. 2-Metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamid

Korak 1: 2-Metil-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-1,3-tiazol-5-sulfonamid

[0210] Trietilamin (62.0 g, 0.613 mol) je dodat u rastvor cis-N-metil-N-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ilciklobutan-1,3-diamin hidrohlorida (22.2.g, 0.102 mol) u dihlorometanu (250 mL). 2-Metiltiazol-5-sulfonil hlorid (28.0 g, 0.142 mol) u dihlorometanu (250 mL) je dodavan tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi u reakcionu smešu. Posle 1.5 časa rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u 4:1 etilacetatu:dihlorometanu (400 mL). Rastvor je filtriran kroz 40g silika čep, ispiranjem sa etilacetatom (800 mL) i dihlorometanom (100 mL). Rastvarač iz filtrata je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobila čvrsta supstanca (59 g). Čvrsta supstanca je prečišćena upotrebom hromatografije na koloni silika gela eluiranjem sa od 1:1 dihlorometana:etilacetata do čistog etilacetata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (44.4g, 81%); m/z (CI) 533 [M+H]<+>. Korak 2: 2-Metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamid

[0211] Litijum hidroksid (12.1g, 0.505 mol) u vodi (290 mL) je dodat u 2-metil-N-[cis-3-(metil{7-[(4-metilfenil)sulfonil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il}amino)ciklobutil]-1,3-tiazol-5-sulfonamid (43.8g, 82.2 mmol) u izopropil alkoholu (435 mL) i smeša je zagrevana do 60°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature reakciona smeša je filtrirana ispiranjem vodom (145 mL). Podešena je pH filtrata do 6-7 upotrebom 6M vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Reakciona suspenzija je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dodata je voda (370 mL) i smeša je hlađena do 0°C. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana hladnom vodom (150 ml), zatim sušena pod vakuumom na 60°C preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25.0 g, 80%);<1>H NMR (DMSO-d6): δ 11.66-11.71 (1 H), 8.44-8.47 (1 H), 8.11-8.08 (2 H), 7.16-7.17 (1 H),6.63-6.65 (1 H), 4.86-4.94 (1 H), 3.58-3.68 (1 H), 3.22 (3 H), 2.74 (3 H), 2.40-2.46 (2 H), 2.10-2.18 (2H). m/z (CI) 379 [M+H]<+>.

Biološka procena

Enzimska analiza JAK Caliper u 1mM ATP

[0212] Test aritkl je solubilizovan u dimetil sulfoksidu (DMSO) do stok koncentracije od 30 mM. Serija od 11-tačaka polu-log razblaženja je stvorena u DMSO sa maksimalnom koncentracijom od 600 µM. Ploča test jedinjenja je takođe sadržala pozitivne kontrolne komorice koje sadrže poznati inhibitor da bi se definisala 100% inhibicija i negativne kontrolne komorice koje sadrže DMSO da bi se definisalo stanje bez inhibicije. Ploče sa jedinjenjem su razblažene 1 do 60 rezultujući u maksimalnoj krajnjoj koncentraciji jedinjenja u analizi od 10 µM i 2% DMSO koncentracija.

[0213] Test artikl i kontrole analize su dodate u 384-komornu ploču. Reakcione smeše su sadržale 20 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM magnezijum hlorid, 0.01% goveđi serum albumin (BSA), 0.0005% Tween 20, 1 mM ATP i 1 µM peptidni supstrat. JAK1 i TYK2 analize su sadržale 1 µM IRStid peptida (5FAM-KKSRGDYMTMQID) i JAK2 i JAK3 analize su sadržale 1 µM JAKtid peptida (FITC-KGGEEEEYFELVKK). Analize su započete dodavanjem 20 nM JAK1, 1 nM JAK2, 1 nM JAK3 ili 1 nM TYK2 enzima i inkubirane su na sobnoj temperaturi tri časa za JAK1, 60 minuta za JAK2, 75 minuta za JAK3 ili 135 minuta za TYK2. Koncentracije jedinjenja i vremena inkubacije su optimizovane za svaki novi preparat enzima i neznatno su modifikovane tokom vremena da bi se osigurala 20%-30% fosforilacija. Analize su zaustavljene sa krajnjom koncentracijom od 10 mM EDTA, 0.1% reagensom za oblaganje i 100 mM HEPES, pH=7.4. Ploče za analizu su postavljene na Caliper Life Science Lab Chip 3000 (LC3000) instrument, i svaka komorica je uzorkovana upotrebom odgovarajućih uslova razdvajanja za merenje nefosforilisanog i fosforilisanog peptida.

Tabela 1. Podaci za enzimsku analizu JAK Caliper™ u 1 mM ATP.

Analiza HWB INF alfa indukovane STAT3 fosforilacije

[0214] Test artikli su pripremljeni kao 30 mM stokovi u 100% DMSO, i zatim razblaženi do 5 mM. Serija od 10-tačaka 2.5 razblaženja je stvorena u DMSO sa maksimalnom koncentracijom od 5 mM. Dodatno razblaženje je izvedeno dodavanjem 4 µL rastvora gore navedenog test artikla u 96 µL PBS sa maksimalnom koncentracijom od 200 µM.

[0215] U 96-komornu polipropilensku ploču (VWR 82007-292) dodato je 90 µl HWB po komorici, a zatim je dodato 5 µl rastvora test artikla pripremljenog u prethodnom tekstu da bi se dobila maksimalna koncentracija od 10 µM. Ploča je mešana i inkubirana u trajanju od 45 minuta na 37°C. U svaku komoricu dodato je 5 µl humanog IFN alfa (Universal Type I IFN, R&D Systems #11200-2; krajnja koncentracija od 5000U/ml) ili D-PBS (nestimulisana kontrola), mešano i inkubirano 15 minuta na 37°C. Reakcija je ugašena dodavanjem pufera za liziranje/fiksiranje [BD Phosflow 5x pufer za liziranje/fiksiranje (BD #558049)] u sve komorice u 1000 µl/komorici i inkubirana u trajanju od 20 minuta na 37°C; posle ispiranja sa FACS puferom [D-PBS (Invitrogen cat# 14190) koji sadrži 0.1 % BSA i 0.1% natrijum azid], 400 µl ledeno hladnog 90% metanola/vode dodato je u svaku komoricu i inkubirano na ledu u trajanju od 30 minuta. Još jedno ispiranje je izvedeno sa hladnim FACS puferom i svi uzorci su konačno resuspendovani u 250 µl/komorici željenog Alexa Fluor 647 konjugovanog mantifosfo-STAT3 (pY705) antitela (BD #557815) u 1:125 razblaženju u FACS puferu. Posle prekonoćne inkubacije na 4 stepena svi uzorci su prebačeni u 96-komornu polipropilensku ploču sa U-dnom (Falcon #353077) i proveravani pomoću mašine za protočnu citometriju. Vrednosti IC50dobijene za primere 1 do 9, 11-23, 25-38 su bile u opsegu od 22 do 2610 nM.

In vitro analiza T-ćelijske proliferacije kod pasa

[0216] T-ćelijska aktivacija ima ključnu ulogu u različitim inflamatornim i autoimunim poremećajima kao i u astmi, alergijama i pruritusu. S obzirom na to da T-ćelijska aktivacija može, delimično, da se pokrene citokinima koji prenose signale preko JAKSTAT puta, inhibitor JAK bi mogao da bude efikasan protiv takvih bolesti koje uključuju aberantnu T-ćelijsku aktivaciju.

[0217] Postupci: Cela krv pasa je sakupljena u epruvetama sa natrijum heparinom od 29 pasa rase zečar i 23 psa mešane rase. Cela krv (20 µL) je zasejana u 96-komorne ploče (Costar 3598) sa 180 µL medijuma (RPMI 1640, Gibco #21870-076, sa 1% toplotom inaktiviranog fetusnog telećeg seruma, Gibco #10082-39, 292 µg/ml L-glutamina, Gibco #250030-081, 100 u/ml penicilina i 100 µg streptomicina po ml, Gibco #15140-122) koji sadrži kontrolu u vidu nosača ili test jedinjenje (0.001 do 10 µM), konkanavalin A (ConA; 1 µg/ml, Sigma C5275), i interleukin-2 pasa (IL-2; 50 ng/ml, R&D Systems 1815-CL/CF). Komorice koje sadrže celu krv, medijum sa kontrolom u vidu nosača i ne sadrže ConA ili IL-2 su korišćene kao kontrole pozadine. Ploče su inkubirane na 37°C u trajanju od 48 časova. Tricijumski timidin, 0.4 µCi/komorici (Perkin Elmer, Net027A-005MC), dodavan je tokom 20 dodatnih časova. Ploče su zamrznute i zatim odmrznute, isprane i filtrirane upotrebom Brandel MLR-96 uređaja za sakupljanje ćelija i prethodno ovlaženih filter uložaka (Wallac 1205-401, Perkin Elmer). Filteri su sušeni na 60°C jedan čas (Precision 16EG konvekcijska peć) i postavljeni u kese za uzorkovanje filtera (Wallac 1205-411, Perkin Elmer) sa 10 mL scintilatora (Wallac 1205-440, Perkin Elmer). Hermetički zatvoreni filteri su brojani na LKB Wallac 1205 Betaplate tečnom scintilacionom brojaču. Podaci su sakupljeni preko Gterm Betaplate programa v1.1 i transformisani u procenat inhibicije, izračunat upotrebom sledeće formule:

[0218] Podaci su grafički prikazani kao procenat inhibicije upotrebom GraphPad Prism 4.0, i krive IC50su aproksimirane upotrebom analize kalibracije po tačkama.

[0219] Primer 38 je imao IC50od 48.5 nM u ovoj analizi. Ovi podaci sugerišu da su jedinjenja prema predmetnom pronalasku efikasna u inhibiciji T-ćelijske proliferacije, ključne karakteristike kod bolesti koje su rezultat disregulacije JAK.

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule IA koje ima strukturu:

ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, u kojoj Y je -A-R<5>, gde A je veza, --(CH2)k-- ili --(CD2)k— i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, ili --NRa’Rb’, ili je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril, ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3,-ORe, --NReRf, --S(O)pRei C3-C6cikloalkila, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2, i SO2CH3, gde (a) Ra’i Rb’su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril ili (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, pri čemu navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više Rc’, ili (b) Ra’i Rb’zajedno formiraju lanac koji sadrži --(CRc’Rd’)j--, gde Rc’ i Rd’ su nezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, aril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)aril, heteroaril, (C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem)heteroaril, halo, CN, hidroksil, CF3, CONH2, --ORe, --NReRf, ili --S(O)pRe; gde su Rei Rfnezavisno vodonik, deuterijum, C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, ili C3-C6cikloalkil, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CF3i CONH2; j je 2, 3, 4 ili 5; k je 1, 2; 3 ili 4; i, p je 0, 1 ili 2. u farmaceutski prihvatljivom obliku u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava koja moduliraju imuni sistem sisara ili koja su anti-inflamatorna.
2. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time da jedinjenje formule IA ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je jedinjenje naznačeno time da A je veza i R<5>je C1-C6alkil sa linearnim ili granatim lancem, C3-C6cikloalkil ili aril.
3. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time da jedinjenje formule IA ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je jedinjenje naznačeno time da A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je C3-C6cikloalkil, pri čemu je navedeni C3-C6cikloalkil dodatno izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, i CN, gde navedeni alkil i cikloalkil mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, CN, hidroksila, CONH2i SO2CH3; gde k je 1, 2 ili 3.
4. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time da jedinjenje formule IA ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je jedinjenje naznačeno time da A je veza ili --(CH2)k--, i R<5>je nezasićena, zasićena ili delimično zasićena monociklična ili biciklična struktura prstena koja sadrži ukupno pet do jedanaest atoma koja ima jedan do tri heteroatoma nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni alkil, C3-C6cikloalkil, aril ili monociklična ili biciklična struktura prstena dodatno izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od deuterijuma, halo, C1-C6alkila sa linearnim ili granatim lancem, CN, hidroksila, CF3, --NRa’Rb’, --ORe, --S(O)pRei C3-C6cikloalkil; gde k je 1, 2 ili 3.
5. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time da je jedinjenje formule IA izabrano iz grupe koja se sastoji od: 4-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}piridin-2-sulfonamida; 2,2,2-trifluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-etansulfonamida; 2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamida; N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}propan-1-sulfonamida; 1-ciklopropil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-metansulfonamida; 1-ciklopropil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-azetidin-3-sulfonamid; 3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-azetidin-1-sulfonamida; (1R,5S)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-6-oksa-3-azabiciklo[3.1.1]heptan-3-sulfonamida; (3R)-3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-pirolidin-1-sulfonamida; (3S)-3-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-pirolidin-1-sulfonamida; N-{cis-3-[methil(7H-pyrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-(oksetan-3-il)metansulfonamid; 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metan-sulfonamida; cis-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-ciklobutil}ciklobutan-sulfonamida; (1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida; (1R,5R)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamida; 3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamida; 1-[3-(cijanometil)oksetan-3-il]-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutyl}-metansulfonamida; cis-3-(cijanometil)-3-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-ciklobutansulfonamida; trans-3-(cijanometil)-3-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamida; N-(2-cijanoetil)-N-metil-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}sumpornog diamida; 3-(2-hidroksipropan-2-il)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}benzen-sulfonamida; N-(ciklopropilmetil)-N’-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}sumpornog diamida; N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-4-(1H-pirazol-3-il)piperidin-1-sulfonamida; 2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-2,6-dihidropirolo[3,4-c]pirazol-5(4H)-sulfonamida; i, 2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamida; ili, njegove farmaceutski prihvatljive soli.
6. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je 2-metil-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1,3-tiazol-5-sulfonamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
7. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-propan-1-sulfonamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
8. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je trans-3-(cijanometil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutan-sulfonamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je 1-(3,3-difluorociklobutil)-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metan-sulfonamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
10. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-1-(oksetan-3-il)metansulfonamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
11. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je (3R)-1-[({cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}metil)sulfonil]pirolidin-3-karbonitril ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je 3,3-difluoro-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}ciklobutansulfonamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
13. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time što jedinjenje formule IA je (1S,5S)-1-cijano-N-{cis-3-[metil(7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]ciklobutil}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-sulfonamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so
14. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 naznačeno time da je jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava izabrano od ciklosporin A, rapamicin, takrolimus, leflunomid, dezoksispergualin, mikofenolat, azatioprin, daklizumab, OKT3, AtGam, aspirin, acetaminofen, ibuprofen, naproksen, piroksikam, i anti-inflamatorni steroidi.
15. Kombinacija prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 14 naznačeno time da je jedinjenje formule IA ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i jedan ili više dodatnih sredstava primenjeno kao deo istog ili zasebnih doznih oblika, preko istog ili različitih puteva primene, i u istom ili različitim rasporedima primene. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5