RS58184B1 - Derivati piridin-2(1h)-on hinolinona kao inhibitori mutirane izocitrat dehidrogenaze - Google Patents

Description

Opis

Upućivanje na srodne prijave

[0001] Ova prijava zahteva pravo prioriteta US privremene prijave broj 62/053,006, podnete 19. septembra 2014. godine i US privremene prijave broj 62/128,089, podnete 4. marta 2015, i US privremene prijave broj 62/150,812, podnete 21. aprila 2015.

Oblast tehnike

[0002] Predmetni pronalazak se odnosi na inhibitore proteina mutirane izocitrat dehidrogenaze (mt-IDH) sa neomorfnom aktivnošću korisne u lečenju bolesti ili poremećaja povezanih sa takvim mutiranim IDH proteinima uključujući poremećaje ćelijske proliferacije i kancere. Posebno, pronalazak se bavi jedinjenjima i kompozicijama koje inhibiraju mt-IDH, navedenim jedinjenjima i kompozicijama za upotrebu u postupcima lečenja bolesti ili poremećaja povezanih sa mt-IDH, i postupcima sinteze ovih jedinjenja.

Stanje tehnike

[0003] Izocitrat dehidrogenaze (IDHs) su enzimi koji učestvuju u ciklusu limunske kiseline (ćelijski metabolizam). Oni katalizuju oksidativnu dekarboksilaciju izocitrata do 2-oksoglutarata (t.j., αketoglutarata, α-KG). U IDH familiji postoje tri izo oblika. IDH-1, eksprimovan u citoplazmi i peroksizomu, IDH-2, lokalizovan u mitohondriji, oba koriste NADP+ kao kofaktor i postoje kao homodimeri. IDH-3 je lokalizovan u mitohondrijskom matriksu i koristi NAD+ kao kofaktor i postoji kao tetramer. Mutacije u IDH-1 (citosolne) i IDH-2 (mitohondrijske) su identifikovane u različitim bolestima ili poremećajima uključujući gliom, glioblastom multiforme, paragangliom, supratentorjalni primordijalni neuroektodermalni tumori, akutna mijeloidna leukemija (AML), kancer prostate, karcinom štitaste žlezde, karcinom debelog creva, hondrosarkom, holangiokarcinom, periferni T-ćelijski limfom, i melanom (L. Deng et al., Trends Mol. Med., 2010, 16, 387; T. Shibata et al., Am. J. Pathol., 2011 , 178(3), 1395; Gaal et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 2010; Hayden et al., Cell Cycle, 2009; Balss et al., Acta Neuropathol., 2008). Mutacije su pronađene na ili u blizini ključnih ostataka na aktivnoj strani: G97D, R100, R132, H133Q, i A134D za IDH1,i R140 i R172 za IDH2. (Videti L. Deng et al., Nature, 2009, 462, 739; L. Sellner et al., Eur. J. Haematol., 2011, 85, 457).

[0004] Mutantni oblici IDH-1 i IDH-2 pokazali su da gube aktivnost divljeg tipa, i umesto toga pokazuju neomorfnu aktivnost (takođe poznatu kao dobitak funkcionalne aktivnosti), redukcije alfaketoglutarata do 2-hidroksiglutarata (2-HG). (Videti P.S. Ward et al., Cancer Cell, 2010, 17, 225; Zhao et. al., Science 324, 261(2009); Dang et.al Nature 462, 739 (2009)). Uopšteno, proizvodnja 2-HG je enantio specifična, što dovodi do stvaranja D-enantiomera (takođe poznat kao R enantiomer ili R-2HG). Normalne ćelije imaju niske bazalne nivoe 2-HG, dok ćelije koje sadrže mutacije u IDH1 ili IDH2 pokazaju značajno podignute nivoe2-HG. Visoki nivoi 2-HG su takođe otkriveni u tumorima koji sadrže mutacije. Na primer, visoki nivoi 2-HG su otkriveni u plazmi pacijenata sa mutiranim IDH koji sadrže AML. (Videti S. Gross et al., J. Exp. Med., 2010, 207(2), 339). Pokazalo se da visoki nivoi 2-HG blokiraju α-KG zavisnu DNA i histonske demetilaze, i na kraju dovode do nepravilne dediferencijacije hematopoetskih progenitorskih ćelija kod AML pacijenata (Wang et. al., Science 340, 622 (2013); Losman et al., Science 339, 1621 (2013)).

[0005] Dalje, kod pacijenata sa Olijerovom bolešću i Mafucci sindromom (dva retka poremećaja koji dovode do tumora hrskavice) se pokazalo da su somatski mozaici za IDH1 i 2 mutacije i pokazuju visoke nivoe D-2-HG. (Videti Amary et al., Nature Genetics, 2011 and Pansuriya et al., Nature Genetics, 2011).

[0006] Inhibicija mt-IDHs i njihove neomorfne aktivnosti sa inhibitorima malih molekula stoga ima potencijal da bude lečenje karcinoma i drugih poremećaja proliferacije ćelija.

Suština pronalaska

[0007] Prvi aspekt pronalaska odnosi se na jedinjenja formule I:

i njihove farmaceutske soli, enantiomere, hidrate, solvate i tautomere,

gde :

svaki W1i W2je nezavisno CH, CF ili N;

W3je nezavisno CR2ili N;

U je N ili CR6;

A je odabran iz grupe koja se sastoji od H, D, halogena, CN, -CHO, -COOH, -COOR, -CONH2, -CONHR, R’S(O)2-, -O(CH2)nC(O)R’, R’SO-, heteroarila, -SOMe, -SO2Me,

gde su X i Y nezavisno u svakom slučaju C , N, NR’, S, i O, pod uslovom da prsten koji sadrži X i Y ne može imati više od 4 N ili NH atoma ili više od jednog S ili O atoma, i gde S i O nisu susedni;

R i R’ u svakom slučaju se nezavisno biraju iz grupe koju čine H, OH, CN, -CH2CN, halogen, -NR7R8, CHCF2, CF3, C1-C6alkil, R7S(O)2-, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, C3-C8cikloalkilalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, i heteroaril, gde je svaki R opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja sadrži OH, halogen, C1-C6alkoksi, NH2, R7S(O)2-, CN, C3-C8cikloalkil , 3 do 8-člani heterociklil, aril, heteroaril, i R7S(O)-; R1je nezavisno OH, CN, halogen, CHCF2, CF3, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkenil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril, gde je svaki C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril opciono supstituisan jedan ili više puta sa supstituentima odabranim iz grupe koju čine halogen, OH, NH2, CN, C1-C6alkil, i C1-C6alkoksi;

svaki R2je nezavisno H, OH, CN, halogen, CF3, CHF2, benzil, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, NH2, -O(CH2)nR’, -O(CH2)nC(O)NHR’, -O(CH2)nC(O)R’, NHR7, -N(R7)(R8), NHC(O)R7, NHS(O)R7, NHS(O)2R7, NHC(O)OR7, NHC(O)NHR7,, -S(O)2NHR7, NHC(O)N(R8)R7, OCH2R7, CHRR’ ili OCHR’R7, gde je C1-C6alkil, C1-C6alkoksi opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja sadrži C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, C3-C8cikloalkil supstituisan sa jednim ili više halogena, 3 do 8-člani heterociklil, aril, -heteroaril-C(O)NH2, i heteroaril;

ili R1i R2mogu se kombinovati da obrazuju C4-C6cikloalkil ili 3 do 8-člani heterociklil koji sadrži najmanje jedan atom izabran iz grupe koja se sastoji od N, O, i S;

R3je H, D, C1-C6alkil, ili; -OH;

R4i R5su nezavisno H, D, halogen, CH2OH, C1-C3alkil, ili C1-C3alkil supstituisan sa halogenom, ili R4i R5kada se kombinuju mogu obrazovati C3-C6cikloalkil ili C3-C6heterociklil;

svaki R6je H, halogen, C1-C6alkil, C1-C6alkil supstituisan sa halogenom, C1-C6alkoksi, C1-C6alkoksi supstituisan sa jednim ili više halogena, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril;

R7i R8su nezavisno H, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3-do 8-člani heterociklil, aril, i heteroaril; ili kada se kombinuju R7i R8mogu da obrazuju 3 do 8-člani heterociklil ili heteroaril prsten;

R9je nezavisno H, D, CD3, CF3, C1-C6alkil, C2-6alkenil, C3-6alkinil, C3-C8cikloalkil, kada je alkil, alkenil, alkinil, i cikloalkil opciono supstituisan sa amino, OH, halo, ili alkoksi;

n je 0, 1, ili 2; i

r je 0, 1, ili 2;

pod uslovom da kada je A H, onda R1nije C1-C6alkil ili C1-C6alkoksi i R1i R2ne mogu da se kombinuju da se dobije 3 do 8-člani heterociklil.

[0008] Još jedan aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule I za upotrebu u postupku lečenja bolesti ili poremećaja povezanih sa mutiranom izocitrat dehidrogenazom. Postupak uključuje davanje efikasne količine jedinjenja formule I pacijentu koji ima potrebu za lečenjem bolesti ili poremećaja povezanih sa mutiranom izocitrat dehidrogenazom.

[0009] Još jedan aspekt pronalaska je usmeren na jedinjenje formule I za upotrebu u postupku inhibicije mutirane izocitrat dehidrogenaze. Postupak uključuje davanje efikasne količine jedinjenja formule I pacijentu ukoliko je to potrebno.

[0010] Još jedan aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule I za upotrebu u postupku redukcije 2hidroksiglutarata. Postupak obuhvata davanje efikasne količine jedinjenja formule I pacijentu ukoliko je to potrebno.

[0011] Još jedan aspekt pronalaska je usmeren na farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje formule I i farmaceutski prihvatljiv nosač. Farmaceutski prihvatljiv nosač može dalje da sadrži ekscipijens, razblaživač, ili surfaktant.

[0012] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje jedinjenje formule I za upotrebu u postupcima lečenja ćelijskih proliferativnih bolesti i kancera uključujući, bez ograničenja, gliom, glioblastom multiforme, paragangliom, supratentorijalne primordijalne neuroektodermalne tumore, akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), kancer prostate, karcinom štitaste žlezde, karcinom debelog creva, hondrosarkom, holangiokarcinom, periferni T-ćelijski limfom, melanom, intrahepatični holangiokarcinom (IHCC), mijelodisplazni sindrom (MDS), mijeloproliferativnu bolest (MPD), i druge čvrste tumore.

[0013] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje moćne mt-IDH inhibitore sa odličnim osobinama kao lek prema kancerima i drugim poremećajima proliferacije ćelija. Inhibitori predmetnog pronalaska mogu da ciljaju mutirane IDH1 ili IDH2.

[0014] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje razvoj moćnih, oralno aktivnih, i selektivnih IDH inhibitora kao terapeutskih sredstava za različite bolesti ili poremećaje uključujući kancere. Pronalazak takođe obezbeđuje navedene agense za upotrebu u lečenju čvrstih i hematoloških kancera za koje ne postoje trenutno ciljane terapije za pacijente koji pate od ovih stanja ili poremećaja.

Kratak opis slika nacrta

[0015] Slika 1 ilustruje grafikon koji pokazuje jačinu IDH1 inhibitora u IDH1-R132H enzimskom testu upotrebom jedinjenja 1-1, 1-5, i 1-20.

Detaljan opis pronalaska

[0016] IDH1 ili IDH2 mutacije su genetski potvrđena meta kod mnogih čvrstih i hematoloških kancera, ali trenutno ne postoje ciljane terapije za pacijente kojima je potrebno lečenje za ova specifična stanja povezana sa mt-IDH aktivnošću. Nemutiran IDH (npr., divlji-tip) katalizuje oksidativnu dekarboksilaciju izocitrata do α-ketoglutarata čime se redukuje NAD<+>(NADP<+>) do NADH (NADPH) (WO 2013/102431 to Cianchetta et al.). Mutacije IDH, prisutne u određenim ćelijama karcinoma rezultuju novom sposobnošću enzima da katalizuju NADPH-zavisnu redukciju α-ketoglutarata R(-)-2-hidroksiglutarata (2HG).2HG nije formiran divljim-tipom IDH. Proizvodnja 2HG doprinosi formiranju i progresiji karcinoma (Dang, L et al., Nature, 2009, 462:739-44, ovde je pripojen u celini kao referenca). Predmetni pronalazak obezbeđuje mt-IDH inhibitore, i profilaktičke mere za smanjenje nastajanja i progresije 2HG u ćelijama.

[0017] U prvom aspektu pronalaska, opisana su jedinjenja formule I:

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomeri, hidrati, solvati i tautomeri, gde su A, U, W1, W2, W3, R1-R6, i R9kao što je iznad opisano.

[0018] Detalji pronalaska su navedeni u pratećem opisu ispod. Iako metode i materijali slični ili ekvivalentni onima opisanim ovde mogu da se koriste u praksi ili testiranju predmetnog pronalaska, sada su opisane ilustrativne metode i materijali. Ostale karakteristike, predmeti, i prednosti pronalaska biće očigledni iz opisa i iz patentnih zahteva. U opisu i priloženim patentnim zahtevima, oblici u jednini takođe uključuju i množinu osim ako kontekst jasno ne zahteva drugačije. Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni pojmovi koji se ovde koriste imaju isto značenje kao što je obično poznato jednom prosečnom stručnjaku iz oblasti tehnike kojoj pripada ovaj pronalazak.

Definicije

[0019] Jednina se u ovom opisu koriste da uputi na jedan ili više od jednog (t.j., na najmanje jedan) gramatički predmet u tekstu. Kao primer, "element" označava jedan element ili više od jednog elementa.

[0020] Izraz "i/ili" se koristi u ovom opisu da znači ili "i"ili "ili" osim ako nije drugačije naznačeno.

[0021] Pod izrazom "opciono supstituisan" se podrazumeva da dati hemijski deo (npr. alkil grupa) može (ali nije obavezno) da bude vezan drugim supstituentima (npr. heteroatomima). Na primer, alkil grupa koja je opciono supstituisana može da bude potpuno zasićen alkilni lanac (npr. čist ugljovodonik). Alternativno, ista opciono supstituisana alkil grupa može da ima supstituente različite od vodonika. Na primer, na bilo kom mestu duž lanca može biti vezan atom halogena, hidroksilna grupa, ili bilo koji drugi supstituent koji je ovde opisan. Tako izraz "opciono supstituisan" znači da dati hemijski deo ima sposobnost da sadrži druge funkcionalne grupe, ali ne mora nužno da ima bilo koje dalje funkcionalne grupe. Pogodni supstituenti koji se koriste u opcionoj supstituciji opisanih grupa uključuju, bez ograničenja, halogen, okso, CN, -COOH, -CH2CN, -O-C1-C6alkil, C1-C6alkil, -OC1-C6alkenil, -OC1-C6alkinil, -C1-C6alkenil, -C1-C6alkinil, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -OC(O)OC1-C6alkil, NH2, NH(C1-C6alkil), N(C1-C6alkil)2, -NHC(O)C1-C6alkil, -C(O)NHC1-C6alkil, -S(O)2-C1-C6alkil, -S(O)NHC1-C6alkil, i S(O)N(C1-C6alkil)2

[0022] Osim ako nije drugačije definisano, izraz "aril" odnosi se na ciklične, aromatične grupe ugljovodonika koji imaju 1 do 2 aromatična prstena, uključujući monociklične ili biciklične grupe kao što je fenil, bifenil ili naftil. Tamo gde se nalaze dva aromatična prstena (biciklični, itd.), aromatični prstenovi aril grupa mogu da budu spojeni na jednom mestu (npr., bifenil), ili kondenzovani (npr., naftil). Aril grupa može da bude opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata, npr., 1 do 5 supstituenata, na bilo kom mestu spajanja. Primerni supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na, -H, -halogen, -O-C1-C6alkil, C1-C6alkil, -OC1-C6alkenil, -OC1-C6alkinil, -C1-C6alkenil, -C1-C6alkinil, -OH, -OP(O)(OH)2, -OC(O)C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -OC(O)OC1-C6alkil, NH2, NH(C1-C6alkil), N(C1-C6alkil)2, -S(O)2-C1-C6alkil, -S(O)NHC1-C6alkil, i S(O)N(C1-C6alkil)2. Supstituenti mogu da budu sami opciono supstituisani. Dalje, kada sadrže dva spojena prstena, aril grupe ovde definisane mogu da imaju nezasićen ili delimično zasićen prsten kondenzovan sa potpuno zasićenim prstenom. Primeri sistema sa prstenovima ovih aril grupa uključuju indanil, indenil, tetrahidronaftalenil, i tetrahidrobenzoanilenil.

[0023] Osim ako nije drugačije definisano, "heteroaril" znači monovalentni monociklični aromatični radikal od 5 do 10 atoma u prstenu ili policikličnog aromatičnog radikala, koji sadrži jedan ili više heteroatoma u prstenu izabranih od N, O, ili S, preostali atomi u prstenu su C. Heteroaril kao što je ovde definisan, takođe označava bicikličnu heteroaromatičnu grupu u kojoj je heteroatom izavran od N, O, ili S. Aromatični radikal je opciono supstituisan nezavisno sa jednim ili više ovde opisanih supstituenata. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, furil, tienil, pirolil, piridil, pirazolil, pirimidinil, imidazolil, pirazinil, indolil, tiofen-2-il, hinolil, benzopiranil, tiazolil, i njihove derivate. Osim toga, kada sadrže dva kondenzovana prstena ovde definisane aril grupe mogu da imaju nezasićen ili delimično zasićen prsten kondenzovan sa potpuno zasićenim prstenom. Primeri sistema prstenova ovih heteroaril grupa uključuju indolinil, indolinonil, dihidrobenzotiofenil, dihidrobenzofuran, hromanil, tiohromanil, tetrahidrohinolinil, dihidrobenzotiazin, i dihidrobenzoksanil.

[0024] Halogen ili "halo" odnosi se na fluor, hlor, brom i jod.

[0025] Alkil se odnosi na ravan ili razgranat lanac zasićenih ugljovodonika koji sadrži 1-12 atoma ugljenika. Primeri C1-C6alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, propil, butil, pentil, heksil, izopropil, izobutil, sec-butil, terc-butil, izopentil, neopentil, i izoheksil.

[0026] "Alkoksi" se odnosi na ravan ili razgranat lanac zasićenih ugljovodonika koji sadrži 1-12 atoma ugljenika koji sadrži terminalni "O" u lancu. Primeri alkoksi grupa uključuju bez ograničenja, metoksi, etoksi, propoksi, butoksi, t-butoksi, ili pentoksi grupe.

[0027] "Alkenil" se odnosi na ravan ili razgranat lanac nezasićenih ugljovodonika koji sadrži 2-12 atoma ugljenika. "Alkenil" grupa sadrži najmanje jednu dvostruku vezu u lancu. Primeri alkenil grupa uključuju etenil, propenil, n-butenil, izo-butenil, pentenil, ili heksenil.

[0028] "Alkinil" se odnosi na ravan ili razgranat lanac nezasićenih ugljovodonika koji sadrži 2-12 atoma ugljenika. "Alkinil" grupa sadrži najmanje jednu trostruku vezu u lancu. Primeri alkenil grupa obuhvataju etinil, propargil, n-butinil, izo-butinil, pentinil, ili heksinil.

[0029] "Cikloalkil" podrazumeva monociklične zasićene ugljenične prstenove koji sadrže 3-18 atoma ugljenika. Primeri cikloalkil grupa uključuju, bez ograničenja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptanil, ciklooktanil, norboranil, norborenil, biciklo[2.2.2]oktanil, ili biciklo[2.2.2]oktenil.

[0030] "Cikloalkilalkil" podrazumeva monociklične zasićene ugljenične prstenove koji sadrže 3-18 atoma ugljenika dalje supstituisane sa C1-C6alkil grupama. Uopšteno, ovde opisane cikloalkilalkil grupe su prikazane sledećom formulom

gde je m ceo broj od 1 do 6 i n je ceo broj od 1 do 16.

[0031] "Heterociklil" ili "heterocikloalkil" monociklični prstenovi sadrže ugljenik i hetero atome izabrane od kiseonika, azota, ili sumpora i gde nema delokalizovanih π elektrona (aromatičnost) deljenih između ugljenika ili heteroatoma u prstenu; heterociklil prstenovi uključuju, ali nisu ograničeni na, oksetanil, azetadinil, tetrahidrofuranil, pirolidinil, oksazolinil, oksazolidinil, tiazolinil, tiazolidinil, piranil, tiopiranil, tetrahidropiranil, dioksalinil, piperidinil, morfolinil, tiomorfolinil, tiomorfolinil S-oksid, tiomorfolinil S-dioksid, piperazinil, azepinil, oksepinil, diazepinil, tropanil, i homotropanil. U saglasnosti sa predmetnim pronalaskom, 3 do 8-člani heterociklil odnosi se na zasićene ili delimično zasićene ne aromatične prstenaste strukture koje sadrže između 3 i 8 atoma u kojima je najmanje jedan od heteroatoma odabran iz grupe od N, O, ili S.

[0032] Izraz "solvat" odnosi se na kompleks promenljive stehiometrije nastao od supstance koja se rastvara i rastvarača. Takvi rastvarači u svrhu pronalaska ne smeju da ometaju biološku aktivnost rastvorene supstance. Primeri pogodnih rastvarača uključuju, ali nisu ograničeni na, vodu, MeOH, EtOH, i AcOH. Solvati u kojima je voda molekul rastvarača, obično se nazivaju hidrati. Hidrati uključuju kompozicije koje sadrže stehiometrijske količine vode, kao i kompozicije koje sadrže promenljive količine vode.

[0033] Izraz "izomer" se odnosi na jedinjenja koja imaju istu kompoziciju i molekulsku masu ali se razlikuju u fizičkim i/ili hemiskim osobinama. Strukturna razlika može da bude u strukturi (geometrijski izomeri) ili u sposobnosti da rotiraju ravan polarizovane svetlosti (stereoizomeri). Što se tiče stereoizomera, jedinjenja formule (I) mogu da imaju jedan ili više asimetričnih ugljewnikovih atom i mogu da se pojave kao racemati, racemske smešes i kao pojedinačni enantiomeri ili diastereomeri.

[0034] Opis takođe uključuje farmaceutske kompozicije koje sadrže efikasnu količinu otkrivenog jedinjenja i farmaceutski prihvatljiv nosač. Predstavnik "farmaceutski prihvatljivih soli" uključuje, npr., rastvorljive u vodi i soli rastvorljive u vodi, kao što je acetat, amsonat (4,4-diaminostilben-2,2-disulfonat), benzensulfonat, benzonat, bikarbonat, bisulfat, bitartrat, borat, bromid, butirat, calcijum, calcijum edetat, kamsilat, karbonat, hlorid, citrat, klavulariat, dihidrohlorid, edetat, edizilat, estolat, ezilat, fiunarat, gluceptat, glukonat, glutamat, glikolilarsanilat, heksafluorofosfat, heksilrezorcinat, hidrabamin, hidrobromid, hidrohlorid, hidroksinaftoat, jodid, izotionat, laktat, laktobionat, laurat, magnezijum, malat, maleat, mandelat, mezilat, metilbromid, metilnitrat, metilsulfat, mukat, napsilat, nitrat, N-metilglukamin amonijum so, 3-hidroksi-2-naftoat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat (1,1-meten-bis-2-hidroksi-3-naftoat, einbonat), pantotenat, fosfat/difosfat, pikrat, poligalakturonat, propionat, p-toluensulfonat, salicilat, stearat, subacetat, sukcinat, sulfat, sulfosalicilat, suramat, tanat, tartrat, teoklat, tozilat, trietjodid, i valerat soli.

[0035] "Pacijent" ili "subjekt" je sisar, npr., čovek, miš, pacov, zamorac, pas, mačka, konj, krava, svinja, ili nehumani primati, kao što je majmun, šimpanza, babun ili rezus.

[0036] "Efikasna količina" kada se koristi u vezi sa jedinjenjem je količina efikasna za lečenje ili prevenciju bolesti kod subjekta kao što je ovde opisano.

[0037] Izraz "nosač", kako se koristi u ovom opisu, obuhvata nosače, ekscipijense, i razblaživače i podrazumeva materijal, kompoziciju ili nosač, kao što je tečni ili čvrsti punilac, razblaživač, ekscipiens, rastvarač ili materijal za kapsuliranje, koji su uključeni u nošenje ili transportovanje farmaceutskog sredstva iz jednog organa, ili dela tela, do drugog organa, ili dela tele kod subjekta.

[0038] Izraz "lečenje" u odnosu na subjekta, odnosi se na poboljšanje najmanje jednog simptoma poremećaja kod subjekta. Lečenje uključuje izlečenje, poboljšanje, ili barem delimično ublažavanje poremećaja.

[0039] Izraz "poremećaj" se koristi u ovom opisu da bi označio,i da se koristi naizmenično sa, izrazima bolest, stanje, ili oboljenje, ukoliko nije drugačije naznačeno.

[0040] Izraz "davati" ili "davanje" kako se koristi u ovom opisu odnosi se na ili direktno davanje otkrivenog jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivu so otkrivenog jedinjenja ili kompozicije subjektu, ili davanje derivata proleka ili analoga jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja ili kompozicije subjektu, koji može da obrazuje ekvivalentnu količinu aktivnog jedinjenja u telu subjekta.

[0041] Izraz "prolek" kako se koristi u ovom opisu, podrazumeva jedinjenje koje se konvertuje in vivo pomoću metaboličkih sredstava (npr., hidrolizom) u otkriveno jedinjenje.

[0042] U jednom izvođenju pronalaska, A je CN. U ovom izvođenju, R9može dalje da bude H, C1-C6alkil ili C3-C6cikloalkil. U drugom izvođenju, R9može takođe da bude metil ili etil.

[0043] U drugom izvođenju jedinjenja formule I, U je N. U ovom izvođenju, A može dalje da bude CN.

[0044] U drugim izvođenjima pronalaska, su opisana jedinjenja formule I gde je A H ili F.

[0045] U drugim izvođenjima pronalaska, su opisana jedinjenja formule I gde je A

[0046] Drugo izvođenje pronalaska odnosi se na jedinjenja formule I gde su R4i R5H.

[0047] U drugom izvođenju pronalaska, R3je H, metil ili etil.

[0048] U drugom izvođenju jedinjenja formule I, R4je H i R5je metil.

[0049] U još jednom izvođenju pronalaska, R4je H i R5je (S)-metil.

[0050] U drugom izvođenju, R4i R5su halogen.

[0051] U drugom izvođenju jedinjenja formule I, R4je F i R5je metil.

[0052] U drugom izvođenju, R4i R5mogu se kombinovati da se obrazuje C3-C6cikloalkil.

[0053] U jednom izvođenju jedinjenja formule I, W1, W2, i W3su svi CH.

[0054] U jednom izvođenju jedinjenja formule I, W1, W2, ili W3su CF.

[0055] U jednom izvođenju, W1ili W3je CH ili N.

[0056] U jednom izvođenju, W3je CR2.

[0057] U drugom izvođenju pronalaska, R1can be halogen. U drugom izvođenju, R1is hloro.

[0058] U jednom izvođenju pronalaska R2can be H, halogen, or C1-C6alkoksi. U drugom izvođenju, R2can also be C1-C6alkoksi supstituisan with heteroaril or 3 do 8-člani heterociklil.

[0059] U drugom izvođenju, ilustrativna jedinjenja formule I su:

5-{[(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

6-hloro-3-{[(1-etil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on;

6-hloro-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 5-{[(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil]amino}-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

6-hloro-3-{[(1-ciklopropil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-{[(1,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 3-{[(6-bromo-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-6-hloro-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-({[2-okso-6-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}metil)-1,2-dihidrohinolin-2-on;

6-hloro-3-({[1-metil-2-okso-6-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}metil)-1,2-dihidrohinolin-2-on;

metil 5-{[(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil]amino}-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -karboksilat;

6-hloro-7-metoksi-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on;

6-hloro-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-2on;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1R)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropirazine-2-karbonitril;

5-{[(1R)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[(1R)-1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1R)-1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-({1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil}amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-{6-hloro-2-okso-7-[(1R)-1-(piridin-2-il)etoksi]-1,2-dihidrohinolin-3-il}etil]amino}-1-metil-6-okso1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-[(1-{6-hloro-7-[(3,3-difluorociklobutil)metoksi]-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il}etil)amino]-1-metil-6-okso1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[6-hloro-2-okso-7-(propan-2-iloksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-8-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

1

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[(1R)-1-(7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; i

5-{[(1S)-1-(7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril.

[0060] U drugom izvođenju, ilustrativna jedinjenja formule I uključuju:

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-6-okso-1-(trifluorometil)-1,6-dihidropiridin-2karbonitril;

5-{[(1S)-1-[6-hloro-7-(2-hidroksipropan-2-il)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil] amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-ciklopropil-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil]amino 1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-{6-hloro-7-[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il}etil]amino}-1-metil-6okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[7-(azetidin-1-il)-6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[7-(azetidin-1-il)-6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril;

5-{[(1S)-1-[6-hloro-7-(3,3-difluoroazetidin-1-il)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril;

6-hloro-3-[(1S)-1-{[1-metil-2-okso-6-(1H-1,2,3,4-tetrazol-1-il)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}etil]-1,2-dihidrohinolin-2-on; i

5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamid.

[0061] U jednom izvođenju, jedinjenja pronalaska imaju formulu Ia:

[0062] U drugom izvođenju, jedinjenja pronalaska imaju formulu Ia-1:

[0063] U drugom izvođenju, jedinjenja pronalaska imaju formulu Ia-2:

[0064] U drugom izvođenju, jedinjenja pronalaska imaju formulu Ib:

[0065] U drugom izvođenju, jedinjenja pronalaska imaju formulu Ib-1:

[0066] U drugom izvođenju pronalaska, jedinjenja formule I su enantiomeri. U nekim izvođenjima jedinjenja su (S)-enantiomer. U drugim izvođenjima jedinjenja mogu takođe da budu (R)-enantiomer. U još nekim izvođenjima, jedinjenja formule I mogu da budu (+) ili (-) enantiomeri.

[0067] U drugom izvođenju pronalaska, jedinjenja formule I sadrže izotope atoma koji obrazuju strukturu formule I. Izotopi ovde označavaju, svaki od dva ili više oblika istog elementa (npr., H i D;<12>C i<13>C) koji sadrže jednake brojeve protona ali različite brojeve neutrona u njihovim jezgrima, i zato se razlikuju u relativnoj atomskoj masi.

[0068] Ako jedinjenje sadrži dvostruku vezu, supstituent može da bude u E ili Z konfiguraciji. Ako jedinjenje sadrži disupstituisan cikloalkil, cikloalkil supstituent može da ima cis ili trans konfiguraciju. Svi tautomerni oblici takođe treba da budu uključeni.

Postupci za upotrebu otkrivenih jedinjenja

[0069] Otkriven je postupak lečenja bolesti ili poremećaja povezanog sa mutiranom izocitrat dehidrogenazom. Postupak uključuje davanje efikasne količine kompozicija ili jedinjenja formule I pacijentu koji ima potrebu za lečenjem bolesti ili poremećaja povezanog sa mutiranom izocitrat dehidrogenazom.

[0070] Još jedan aspekt pronalaska je usmeren na jedinjenje formule I za upotrebu u postupku inhibiranja mutirane izocitrat dehidrogenaze. Postupak uključuje davanje pacijentu, ukoliko je to potrebno, efikasne količine kompozicija ili jedinjenja formule I.

[0071] Primeri mutiranih IDH proteina koji imaju neomorfnu aktivnost su mutirani IDH1 i mutirani IDH2. Neomorfna aktivnost u vezi sa mutiranim IDH1 i mutiranim IDH2 je sposobnost da se proizvede 2-hidroksiglutarat (2-HG neomorfna aktivnost), posebno R-2-HG (R-2-HG neomorfna aktivnost). Mutacije na IDH 1 u vezi sa 2-HG neomorfnom aktivnošću, posebno R-2-HG neomorfnom aktivnošću, uključuju mutacije na ostatke 97, 100, i 132, npr. G97D, R100Q, R132H, R132C, R132S, R132G, R132L, i R132V. Mutacije na IDH2 u vezi sa 2-HG neoaktivnošću, posebno R-2-HG neomorfnom aktivnošću, uključuju mutacije na ostatke 140 i 172, npr. R140Q, R140G, R172K, R172M, R172S, R172G, i R172W.

[0072] Još jedan aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule I za upotrebu u postupku redukcije 2hidroksiglutarata. Postupak obuhvata davanje efikasne količine kompozicija ili jedinjenja formule I pacijentu ukoliko je to potrebno.

[0073] Jedna terapeutska upotreba jedinjenja ili kompozicija prikazanog pronalaska koja inhibiraju mt-IDH je da obezbede lečenje pacijentima ili subjektima koji pate od bolesti proliferacije ćelija i kancera uključujući, bez ograničenja, gliom, glioblastom multiforme, paragangliom, supratentorijalne primordijalne neuroektodermalne tumore, akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), kancer prostate, karcinom štitaste žlezde, karcinom debelog creva, hondrosarkom, holangiokarcinom, periferni T-ćelijski limfom, melanom, intrahepatični holangiokarcinom (IHCC), mijelodisplazni sindrom (MDS), mijeloproliferativnu bolest (MPD), i druge čvrste tumore. Ciljana lečenja ovih kancera i bolesti proliferacije ćelija trenutno nisu dostupna pacijentima koji pate od ovih stanja. Zbog toga, postoji potreba za novim terapeutskim sredstvima koji su selektivni za ova stanja.

[0074] Otkrivena jedinjenja pronalaska mogu da se daju u efikasnim količinama za lečenje ili prevenciju poremećaja i/ili sprečavanje njihovog razvoja kod subjekata.

[0075] Davanje opisanih jedinjenja može da se postigne putem bilo kog načina davanja terapeutskih sredstava. Ovi načini uključuju sistemsko ili lokalno davanje kao što je oralno, nazalno, parenteralno, transdermalno, subkutano, vaginalno, bukalno, rektalno ili topikalni načini davanja.

[0076] U zavisnosti od planiranog načina primene, otkrivene kompozicije mogu da budu u čvrstom, polu čvrstom ili tečnom doznom obliku, kao što su, na primer, injekcije, tablete, supozitorije, pilule, kapsule sa vremenskim otpuštanjem, eliksiri, tinkture, emulzije, sirupi, praškovi, tečnosti, suspenzije, ili slično, ponekad u jediničnim dozama i u skladu sa uobičajenim farmaceutskim praksama. Isto tako se mogu davati i intravenski (i bolus i infuzija), intraperitonealni, subkutani ili intramuskularni oblici, i svi koriste oblike koji su dobro poznati stručnjacima iz farmaceutske oblasti.

[0077] Illustrativne farmaceutske kompozicije su tabelate i želatinske kapsule koje sadrže jedinjenje pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač, kao što je a) a razblaživač, npr., prečišćena voda, trigliceridna ulja, kao što je hidrogenizovano ili delimično hidrogenizovano biljno ulje, ili njihove smeše, kukuruzno ulje, maslinovo ulje, suncokretovo ulje, ulje šafranike, riblja ulja, kao što je EPA ili DHA, ili njihovi estri ili trigliceridi ili njihove smeše, omega-3 masnih kiselina ili njihovih derivata,

1

laktoza, dekstroza, sukroza, manitol, sorbitol, celuloza, natrijum, saharin, glukoza i/ili glicin; b) lubrikant, npr., silicijum, talk, stearinska kiselina, njena magnezijumova ili kalcijumova so, natrijum oleat, natrijum stearat, magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid i/ili polietilene glikol; za tablete takođe; c) vezivno sredstvo, npr., magnezijum aluminijum silikat, skrobni lepak, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, magnezijum karbonat, prirodni šećeri kao što je glukoza ili beta laktoza, kukuruzni zaslađivači, prirodne i sintetičke gume kao što je akacija, tragakant ili natrijum alginat, voskovi i/ili polivinilpirolidon, ako je poželjno; d) dezintegrant, npr., skrobovi, agar, metil celuloza, bentonit, ksantan guma, algininska kiselina ili njena natrijumova so, ili efervescentne smeše; e) absorbent, boja, sredstvo za ukus i zaslađivač; f) sredstvo za emulgovanje ili dispergovanje, kao što je Tween 80, Labrasol, HPMC, DOSS, caproil 909, labrafac, labrafil, peceol, transcutol, capmul MCM, capmul PG-12, captex 355, gelucire, vitamin E TGPS ili drugi prihvatljivi emulgatori; i/ili g) sredstvo koje poboljšava apsorpciju jedinjenje kao što je ciklodekstrin, hidroksipropil-ciklodekstrin, PEG400, PEG200.

[0078] Tečne kompozicije, naročito injektabilne, mogu na primer, da se pripreme rastvaranjem, disperzijom, itd. Na primer, otkriveno jedinjenje je rastvoreno ili mešano sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračem kao što je, na primer, voda, fiziološki rastvor, vodena dekstroza, glicerol, etanol, i slično, čime se stvara injektabilan izotoničan rastvor ili suspenzija. Proteini kao što je albumin, hilomikron čestice, ili serumski proteini mogu da se koriste za rastvorljivost otkrivenih jedinjenja.

[0079] Otkrivena jedinjenja takođe mogu da se formulišu kao supozitorije koje mogu da se pripremaju iz masnih emulzija ili suspenzija; kao nosač se korisite polialkilen glikoli kao što je propilen glikol.

[0080] Otkrivena jedinjenja takođe mogu da se primenjuju u obliku lipozomskih sistema za isporuku, kao što su male unilamelarne vezikule, velike unilamelarne vezikule i multilamelarne vezikule. Lipozomi mogu da se obrazuju od različitih fosfolipida, koji sadrže holesterol, stearilamin ili fosfatidilholine. U nekim izvođenjima, film od lipidnih komponenti je hidriran sa vodenim rastvorom leka u oblik lipidnog sloja koji inkapsulira lek, kao što je opisano u US patentu broj 5,262,564.

[0081] Otkrivena jedinjenja takođe mogu da se isporuče upotrebom monoklonalnih antitela kao pojedinačnih nosača za koja su spojena otkrivena jedinjenja. Otkrivena jedinjenja se takođe mogu spojiti sa rastvorljivim polimerima kao nosačima ciljanog leka. Takvi polimeri mogu da uključe polivinilpirolidon, piran kopolimer, polihidroksipropilmetakrilamidfenol, polihidroksietilaspanamidfenol, ili polietilenoksidpolilizin supstituisan sa palmitoilnim ostacima. Dalje, otkrivena jedinjenja mogu da budu spojena sa klasom biorazgradivih polimera orisnih za postizanje kontrolisanog oslobađanja leka, na primer, polilaktonska kiselina, poliepsilon caprolacton, polihidroksi butirna kiselina, poliortoestri, poliacetali, polidihidropirani, policijanoakrilati i ukršteni ili amfipatični blok kopolimeri hidrogela. U jednom izvođenju, otkrivena jedinjenja nisu kovalentno vezana za polimer, npr., polimer polikarboksilne kiseline, ili poliakrilat.

[0082] Davanje roditeljske injekcije se uopšteno koristi za subkutane, intramuskularne ili intravenske injekcije i infuzije. Injektiranje može da se pripremi u uobičajenim oblicima, bilo koji tečni rastvori ili suspenzije ili čvrsti oblici pogodni za rastvaranje u tečnosti pre injektiranja.

[0083] Još jedan aspekt pronalaska je usmeren na farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje formule I i farmaceutski prihvatljiv nosač. Farmaceutski prihvatljiv nosač može dalje da sadrži ekscipijens, razblaživač, ili surfaktant.

[0084] Kompozicije mogu da se pripreme prema uobičajenim postupcima mešanja, granulacije ili oblaganja, respektivno, i predmetne farmaceutske kompozicije mogu da sadrže od oko 0,1% do oko 99%, od oko 5% do oko 90%, ili od oko 1% do oko 20% otkrivenog jedinjenje po masi ili zapremini.

[0085] Dozni režim korišćenjem otkrivenog jedinjenja je odabran u skladu sa različitim faktorima uključujući tip, vrste, starosno doba, masu, pol i zdravstveno stanje pacijenta; ozbiljnost stanja koje treba lečiti; način davanja; funkciju bubrega ili jetre pacijenta; i posebno otkriveno jedinjenje koje se koristi. Lekar ili veterinar kao stručnjak iz ove oblasti može lako da odredi i prepiše efikasnu količinu leka neophodnog za sprečavanje, suprotstavljanje ili zaustavljanje napretka stanja.

[0086] Efikasne dozne količine otkrivenih jedinjenja, kada se koriste za naznačene efekte, kreću se od oko 0,5 mg do oko 5000 mg otkrivenog jedinjenje, koliko je potrebno za tretiranje stanja. Kompozicije za in vivo ili in vitro upotrebu mogu da sadrže oko 0,5, 5, 20, 50, 75, 100, 150, 250, 500, 750, 1000, 1250, 2500, 3500, ili 5000 mg otkrivenog jedinjenja, ili, u opsegu od jedne do druge količine u listi doza. U jednom izvođenju, kompozicije su u obliku tableta koje mogu da se postignu.

Postupak sinteze jedinjenja

[0087] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu da se naprave pomoću različitih postupaka, uključujući standardnu hemiju. Pogodni sintetički putevi su prikazani u dole datim šemama.

[0088] Jedinjenja formule (I) mogu da se pripreme po postupcima poznatim iz oblasti organske sinteze kao što je navedeno delom u sledećim šemama sinteza. U šemama opisanim u daljem tekstu, dobro je razumeti da su zaštitne grupe za osetljive ili reaktivne grupe tamo gde je neophodno u skladu sa opštim principima hemije. Zaštitne grupe se koriste u skladu sa standardnim postupcima organske sinteze (T. W. Greene i P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", treće izdanje, Wiley, New York 1999). Ove grupe se uklanjaju u pogodnoj fazi sinteze jedinjenje upotrebom postupaka koji su očigledni stručnjacima iz ove oblasti. Selekcioni procesi, kao i reakcioni uslovi i redosled njihovog izvršenja, moraju biti u skladu sa dobijanjem jedinjenja formule (I).

[0089] Stručnjaci iz ove oblasti će prepoznati ako postoji stereocentar u jedinjenjima formule (I). Shodno tome, predmetni pronalazak uključuje i moguće stereoizomere (osim ukoliko nije naglašeno u sintezi) i uključuje ne samo racemska jedinjenja već i pojedinačne enantiomere i/ili dijastereomere. Kada je jedinjenje poželjno kao pojedinačni enantiomer ili diastereomer, on može da se dobije stereospecifičnom sintezom ili razlaganjem finalnog proizvoda ili bilo kog pogodnog intermedijera. Razlaganje finalnog proizvoda, intermedijera, ili početnog materijala može da bude pod uticajem bilo kog pogodnog postupka poznatog u stanju tehnike. Videti, na primer, "Stereochemistry of Organic Compounds" od E. L. Eliel, S. H. Wilen, i L. N. Mander (Wiley-lnterscience, 1994).

[0090] Jedinjenja koja su ovde opisana mogu da se naprave od komercijalno dostupnih početnih materijala ili da se sintetizuju upotrebom poznatih organskih, neorganskih, i/ili enzimskih procesa.

1

Priprema jedinjenja

[0091] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu da se pripreme na brojne načine dobro poznate stručnjacima iz oblasti organskih sinteza. Kao primer, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu da se sintetišu pomoću dole navedenih postupaka, zajedno sa postupcima sinteze koji su poznati u stanju tehnike sinteza u organskoj hemiji, ili varijacija na njima kao što cene stručnjaci iz ove oblasti. Poželjni postupci uključuju ali nisu ograničeni na one postupke opisane u nastavku. Jedinjenja predmetnog pronalaska formule (I) mogu da se sintetišu praćenjem koraka opisanih u šemama 1-2, koje sadrže različite sekvence sastavljanja intermedijera II, III, IV, i V. Početni materijali su ili komercijalno dostupni ili napravljeni po poznatim procedurama u prijavljenoj literaturi ili kao što je ilustrovano.

Šema 1

Šema 2

Gde su A, U, W1, W2, W3, R1-R9definisani u formuli (I).

[0092] Opšti načini pripremanja ciljanih molekula formule I upotrebom intermedijera II, III, IV, i V su prikazani u šemama 1 i 2. Zamena aril halogenida (III) sa intermedijernim aminom (II) pod standardnim nukleofilnim supstitucionim uslovima upotrebom baze kao što je N,N-diizopropiletilamin, i /ili kalijum karbonat, cezijum karbonat u rastvaraču DMSO ili DMF daje jedinjenja formule I. Redukciona aminacija aldehida (IV) sa aminom (V ) je izvedena pod standardnom procedurom (AcOH i NaBH(OAc)3) da se dobije jedinjenje formule I (gde je R4=R5=H). Smeša enantiomera, dijastereomera, cis/trans izomera nastala u procesu, može da se odvoji u njihove pojedinačne komponente pomoću tehnike hiralnih soli, hromatografijom koristeći normalnu fazu, reverznu fazu ili hiralnu kolonu, zavisno od prirode razdvajanja.

[0093] Treba shvatiti da su u opisu i formulama koje su prikazane iznad, razne grupe A, U, W1, W2, W3, R1-R6, i R9i druge promenljive veličine kako su definisane iznad, osim ako nije drugačije naznačeno. Dalje, u sintetičke svrhe, jedinjenja iz šema 1 i 2 su čisto reprezentativna sa izabranim radikalima da ilustruju opštu sintetičku metodologiju jedinjenja formule I kao što je ovde definisano.

1

Primeri

[0094] Opis je dalje ilustrovan pomoću sledećih primera i šema sinteza, koje ne mogu da se protumače kao ograničavanje ovog opisa u obimu i duhu prema specifičnim procedurama koje su ovde opisane. Treba shvatiti da su primeri ovde obezbeđeni da ilustruju određena izvođenja i da nema nikakvog ograničavanja u obimu opisa.

[0095] Tabela 6 obezbeđuje aktivnost ilustrativnih jedinjenja formule I u IDH1-R132H, IDH1-R132C, IDH1-MSHTC116-R132H, i IDH1-MS-HTC116-R132C testovima.

Analitičke metode, materijali, i instrumentacija

[0096] Ukoliko nije drugačije naznačeno, korišćeni su reagensi i rastvarači kako su dobijeni od komercijalnih dobavljača. Spektri nuklearne magnetne rezonance (NMR) su dobijeni ili na Bruker ili na Varian spektrometrima na 300 MHz. Spektri su dati u ppm (δ) i konstante kuplovanja, J, su zabeležene u hercima. Kao interni standard je korišćen tetrametilsilan (TMS). Maseni spektri su sakupljeni pomoću Vodas ZQ Single Quad masenog spektrometra (jonska zamka elektrosprej jonizacija (ESI)). Analize visoko efikasnom tečnom hromatografijom (HPLC) su dobijene korišćenjem XBridge Phenyl ili C18 kolonom (5 µm, 50x4,6 mm, 150x4,6 mm ili 250x4.6 mm) sa UV detekcijom (Waters 996 PDA) na 254 nm ili 223 nm koristeći standardni program rastvarača u gradientu (Metod 1-4).

LCMS metod 1 (ESI, 4 min metod):

[0097]

Instrumenti:

HPLC: Waters HT2790 Alliance MS: Waters ZQ Single Quad Mass Spectrometer UV: Waters 996 PDA 95% voda/5% metanol sa 0.1% mravlje kiseline

Uslovi:

Mobilna faza A

Mobilna faza B (B) 95% metanol/5% voda sa 0,1% mravlje kiseline

Kolona XBridge Fenil ili C18, 5 µm 4,6 x 50 mm

Temperatura kolona temperatura okoline

LC gradijent Linearno5-95% B u 2,5 min, zadržavanje 95% B do 3,5 min LC brzina protoka 3 mL/min

UV talasna dužina 220 nm i 254 nm

Režim jonizacije Elektrosprej jonizacija; pozitivno/negativno

LCMS metod 2 (ESI, 10 min metod):

[0098]

Instrumenti:

HPLC: Waters HT2790 Alliance MS: Waters ZQ Single Quad maseni spektrometar UV: Waters 996 PDA

1

Uslovi:

Mobilna faza A (A) 95% voda/5% metanol sa 0,1% mravlje kiseline Mobilna faza B (B) 95% metanol/5% voda sa 0,1% mravlje kiseline Kolona XBridge C18, 5 µm 4,6 x 150 mm

Temperatura kolona temperatura okoline

LC gradijent Linearni 5-95% B u 5,5 min, zadržavanje 95% B do 7,5 min LC brzina protoka 1,2h mL/min

UV talasna dužina 220 nm i 254 nm

Režim jonizacije Elektrosprej jonizacija; pozitivno/negativno

LCMS metod 3: (APCI, 20 min)

Instrumenti i uslovi:

[0099] HPLC-Agilent 1100 serija.

Kolona: Agela Technologies Durashell C18, 3 µm, 4., x 50 mm,).

Mobilna faza A: ACN 0,1 % TFA.

Mobilna faza B: Voda 0,1 % TFA.

Gradijent:

Vreme (min) %B

00 95

15 05

18 05

20 95

Brzina protoka: 1 mL/min.

Temperatura kolone: okolna.

Detektor: 254 nm.

LCMS Metod 4 (ESI, 2.5 min metod):

Instrumenti i uslovi:

[0100]

HPLC: Waters Acquity Binary Solvent

Manager MS: Waters ZQ Mass Detector

UV: Vodas Acquity PDA

Mobilna faza A (A) 95% voda/5% acetonitril sa 0,1% mravlje kiseline u 10 mM amonijum formijatu

Mobilna faza B (B) 95% acetonitril/5% voda sa 0,09% mravlje kiseline

Kolona Waters Acquity UPLC BEH C18, 1,7 µm, 2,1 x 50mm Temperatura kolone 35 °C

LC gradijent 5-100% B u 2,0 min, zadržavanje 100% B do 2,2 min

LC brzina protoka 0,6 mL/min

UV talasna dužina 220 nm i 254 nm

1

Režim jonizacije Elektrosprej jonizacija; pozitivno/negativno Skraćenice koje se koriste u sledećim primerima i na drugim mestima ovde su:

[0101]

AC2O anhidrid sirćetne kiseline

ACN Acetonitril

BOP amonijum 4-(3-(piridin-3-ilmetil)ureido)benzenesulfinat CDCl3deuterizovani hloroform

Cs2CO3cezijum karbonat

CuSO4bakar sulfat

δ hemijski pomak

DCM dihlorometan ili metilen hlorid

DCE 1,2-dihloroetan

DEAD dietil azodikarboksilat

DIAD diizopropil azodikarboksilat

DIEA N,N-diizopropiletilamin

DMA N,N-dimetilacetamid

DME dimetoksietan

DMF N,N-dimetilformamid

DMP Des-Martinov perjodinan

DMSO dimetilsulfoksid

DMSO-d6deuterizovani dimetilsulfoksid

dppf 1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen

EDCI N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid hidrohlorid EDTA etilendiamintetrasirćetna kiselina

ee enantiomerni višak

EtOAc etil acetat

EtOH etanol

<1>H NMR protonska nuklearna magnetna rezonanca

HOAc sirćetna kiselina

HATU 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametiluronium heksafluorofosfat

HCl hlorovodonična kiselina

HOBT 1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ol hidrat

HPLC visoko efikasna tečna hromatografija

Hz herc

IPA izopropil alkohol

KOAc kalijum acetat

K2CO3kalijum karbonat

LAH litijum aluminijum hidrid

LCMS tečna hromatografija/masena spektrometrija

(M+1) masa 1

m-CPBA m-hloroperbenzojeva kiselina

MeOH metanol

MeMgBr metil magnezijum bromid

MS masena spektrometrija

NaBH4natrijum borohidrid

Na2SO4natrijum sulfat

Pd(dppf)Cl2[1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) Palladium tetrakis Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)

1

Rt vreme zadržavanja

TBDMS-Cl Terc-butil dimetilsilil hlorid

TEA trietilamin

THF tetrahidrofuran

TLC tankoslojna hromatografija

Xantphos 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten

Primer 1 -Intermedijer II-1:(S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid [0102]

,

Refluks preko noći

Korak-1: (R,E)-N-((2,6-dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfonamid.

[0103]

[0104] U smešu 2,6-dihlorohinolin-3-karbaldehida (15,0 g, 66,37 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (8,85 g, 73,14 mmol) u 1,2-dihloroetanu (150 mL) je dodat CuSO4(16,0 g, 100,25 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 55 °C i mešana na 55 °C preko noći. Nakon što su TLC i MS pokazali potpun nestanak početnih materijala, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i ceđena kroz sloj Celite®. Sloj celita je zatim ispran sa CH2Cl2. Filtrat je uparen do suva in vacuo i prečišćen pomoću hromatografije na koloni sa SiO2(0 do 25% heksani/EtOAc) da se dobije naslovno jedinjenje, (R,E)-N-((2,6-dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan2-sulfinamid, kao žuta čvrsta supstanca (17,7 g, 81% prinos).

Korak-2: (R)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0105]

[0106] U rastvor (R,E)-N-((2,6-dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamida (8,85 g, 26,88 mmol) u anhidrovanom CH2Cl2(200 mL) na -60 °C dodat je u kapima MeMgBr (3M rastvor u dietil

2

etru, 13,5 mL, 40,54 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana na oko -60 do -50 °C tokom 3 sata i zatim mešana na -20 °C preko noći u atmosferi N2. Nakon što su TLC i MS pokazali potpun nestanak početnih materijala, dodat je zasićen NH4Cl (163 mL) na -20 °C i dobijena smeša je mešana tokom 10 minuta. Vodena faza je ekstrahovana sa CH2Cl2(100 mL x 3), osušena preko anhidrovanog Na2SO4, proceđena, i uparena. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2: Zlatna kolona; gradijent; heksani do 100% EtOAc) da se obezbedi naslovno jedinjenje, (R)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid, kao žuta čvrsta supstanca (5.8 g, 63% prinos).

Korak-3: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-1).

[0107]

[0108] Smeša (R)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (6,6 g, 19,13 mmol) u 1,4-dioksanu (41 mL) i IN HCl (41 mL) je zagrevana na refluksu preko noći. Rastvarači su ispareni in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u toploj vodi i liofiliziran. Sirov proizvod je triturisan sa dietil etrom da se dobije naslovno jedinjenje II-1 kao žuta čvrsta supstanca (9,0 g, ee: 98.4%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.4 (br s, 1 H), 8.32 (br s, 2 H), 8.07 (s, 1 H), 7.85 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.63 (dd, J1= 8.8 Hz, J2= 2.5 Hz, 1 H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.40-4.45 (m, 1 H), 1.53(d, J = 8.5 Hz, 3 H). LCMS (Metod 3): Rt 3,42 min, m/z 223.1 [M+H]<+>.

Primer 2--Intermedijer II-2: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid.

[0109]

DCE, preko noći Dijastereomerni izomeri

izdvojeni na normalnoj fazi hromatografije na koloni

1N HCL, dioksan,

Korak-1: (R)-N-((2,6-dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0110] U smešu 2,6-dihlorohinolin-3-karbaldehida (500 mg, 2,21 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (295 g, 2,43 mmol) u 1,2-dihloroetanu (15 mL) je dodat CuSO4(530 mg, 3,31 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 55 °C i mešana na 55 °C tokom 18 sati. Kada su TLC i MS pokazali potpun nestanak početnih materijala, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ceđena kroz sloj Celite® Sloj celita je zatim ispran sa CH2Cl2. Filtrat je uparen do suva in vacuo i prečišćen pomoću hromatografije na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2; heksani do 60% EtOAc/heksani) da se dobije naslovno jedinjenje, (R)-N-((2,6dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid, kao žuta čvrsta supstanca (510 mg, 70% prinos).

Korak-2: (R)-N-((R)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0111] U rastvor (R)-N-((2,6-dihlorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamida (505 mg, 1,534 mmol) u anhidrovanom THF-u (8 mL) na 0 °C dodat je u kapima MeMgBr (3M rastvor u dietil etru, 0,56 mL, 1,687 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 3 sata u atmosferi N2. Nakon što su TLC i MS pokazali potpun nestanak početnih materijala, zasićen NH4Cl (5mL) je dodat na 0 °C i dobijena smeša je mešana tokom 10 minuta. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (10 mL x 3), osušena preko anhidrovanog Na2SO4, proceđena, i uparena. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2; heksani do 80% EtOAc/heksani) da se dobije naslovno jedinjenje kao R,R izomer kao bledo žuta čvrsta supstanca (200 mg, 38%) i R,S izomer kao bledo žuta čvrsta supstanca (93 mg, 18% prinos).

Korak-3: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-2).

[0112]

[0113] Smeša (R)-N-((R)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (190 mg, 0,55 mmol) u 1,4-dioksan (2 mL) i IN HCl (1,1 mL, 1,1 mmol) je zagrevana na 150 °C tokom 30 minuta u mikrotalasnom reaktoru. Rastvarači su ispareni i ostatak je rastvoren u toploj vodi i liofiliziran da se dobije naslovno jedinjenje II-2 kao žuta čvrsta supstanca (148 mg, kvantitativan prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.35 (br s, 1 H), 8.28 (br s, 2 H), 8.05 (s, 1 H), 7.86 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.63 (dd, J1= 8.8 Hz, J2= 2.5 Hz, 1 H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.40-4.45 (m, 1 H), 1.53 (d, J = 8.5 Hz, 3 H). LCMS (Metod 3): Rt 3,40 min, m/z 223.1 [M+H]<+>.

Primer 3 --An alternative approach to Intermedijer II-1

[0114]

Korak-1: 3-acetil-6-hlorohinolin-2(1H)-on.

[0116] Smeša 2-amino-5-hlorobenzaldehida (0,5 g, 3,21 mmol) i 2,2,6-trimetil-4H-1,3-dioksin-4-ona (0,594 g, 4,18 mmol) u ksilenu (10 mL) u atmosferi azota je zagrevana na refluksu tokom 3 sata i zatim ohlađena do sobne temperature. Reakciona smeša je ceđena i oprana dva puta sa ksilenom da se dobije naslovno jedinjenje, 3acetil-6-hlorohinolin-2(1H)-on (330 mg, 46,3 %).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.22 (br, 1 H), 8.41 (s, 2 H), 8.00 (s, 1 H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.32 (dd, J1= 8.8 Hz, J2= 2.5 Hz, 1 H), 2.58 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 222.94 [M+H]<+>.

Korak-2: ((S)-N-((S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid.

[0117]

[0118] Smeša tetraetoksititanijuma (144 mg, 0,632 mmol), (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (38,3 mg, 0,316 mmol), i 3-acetil-6-hlorohinolin-2(1H)-ona (70 mg, 0,316 mmol) u THF-u (20 mL) je zagrevana na 80 °C preko noći i zatim ohlađena do sobne temperature. U ovu smešu je dodat NaBH4(59,7 mg, 1,579 mmol) na -50 °C. Smeša je tada polako zagrevana do sobne temperature preko noći. MeOH (2 mL) je dodat da neutrališe višak NaBH4a zatim je sledilo dodavanje vode. Dobijena smeša je ceđena da se uklone čvrste supstance i vodena faza je dva puta ekstrahovana sa EtOAc, osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen na Biotage® hromatografskom sistemu upotrebom 25 g SiO2kolona sa eluiranjem u gradijentu (20% do 100% EtOAc/Heksani, zatim 0-5% MeOH/DCM) da se dobije (S)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (39 mg, 38% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.05 (br, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 7.38(d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.76 (d, J = 8.06 Hz, 1 H), 5.37 (m, 1 H), 4.55(m, 1 H), 1.44 (d, J = 6.82 Hz, 3 H), 1.18 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): Rt 2,22 min; m/z 327.96 [M+H]<+>.

Korak-3: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-1).

[0119]

[0120] U rastvor ((S)-N-((S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamida (150 mg, 0,459 mmol) u MeOH (5 mL) je dodat HCl (2 mL, 8,0 mmol, 4M u 1,4-dioksanu). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. U ovu smešu je dodato 6 mL etil etra i dobijeni

2

talog je sakupljen ceđenjem, opran sa etil etrom (2 x), i onda osušen da se dobije (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (50 mg, 42% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.4 (br s, 1 H), 8.32 (br s, 2 H), 8.07 (s, 1 H), 7.85 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.63 (dd, J1= 8.8 Hz, J2= 2.5 Hz, 1 H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.40-4.45 (m, 1 H), 1.53 (d, J = 8.5 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 1,22 min, m/z 223.1 [M+H]<+>. Čistoća enantiomera (ee %) II-1 (>98%) je određena pomoću hiralne HPLC analize.

Primer 4 –Alternativni pristup (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-2).

[0121]

Korak-1: ((R)-N-((R)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid

[0122]

[0123] Smeša tetraetoksititanijum (412 mg, 1,805 mmol) (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (131 mg, 1,083 mmol) i 3-acetil-6-hlorohinolin-2(1H)-ona (160 mg, 0,722 mmol) u THF-u (20 mL) je zagrevana na 80 °C preko noći, zatim ohlađena do sobne temperature. U ovu smešu je dodat NaBH4(137 mg, 3,61 mmol) -50 °C. Smeša je tada polako zagrevana do sobne temperature preko noći. MeOH (2 mL) je dodat da neutrališe višak NaBH4a zatim je sledilo dodavanje vode. Dobijena smeša je ceđena da se uklone čvrste supstance i vodena faza je dva puta ekstrahovana sa EtOAc, osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen na Biotage® hromatografskom sistemu upotrebom 25 g SiO2kolona sa eluiranjem u gradijentu (20 do 100% EtOAc/Heksani, onda 0-5% MeOH/DCM) da se dobije ((R)-N-((R)1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid (157 mg, 66% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ ppm 11.31 (br, 1 H), 7.35 (s, 1 H), 7.07-7.22 (m, 2 H), 5.86 (d, J = 9.3Hz, 1 H), 5.37 (m, 1 H), 4.55 (m, 1 H), 1.56 (d, J = 6.94 Hz, 3 H), 1.32 (s, 9H). LCMS (Metod 1): Rt 2,20 min, m/z 327.96 [M+H]<+>.

Korak-2: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-2).

[0124]

[0125] U rastvor (R)-N-((R)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (150 mg, 0,459 mmol) u MeOH (5 mL) je dodat HCl (2 mL, 8,00 mmol, 4M u 1,4-dioksanu). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. U ovu smešu je dodato 6 mL etil etra i dobijeni talog je sakupljen ceđenjem, opran sa etil etrom (2 x), i onda osušen da se dobije (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (80 mg, 67% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.32 (br s, 1 H), 8.34 (br, 2 H), 8.06 (s, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 7.58 (d, J = 8.82 Hz, 1 H), 7.31 (d, J = 8.83 Hz, 1 H), 4.40-4.45 (m, 1 H), 1.53 (d, J = 6.81 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 1,20 min, m/z 223.1 [M+H]<+>. Čistoća enantiomera (ee %) II-2 (>98%) je određena pomoću hiralne HPLC analize.

Primer 5 --Intermedijer II-3: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on.

[0126]

Korak-1: N-(4-hloro-3-fluorofenil)acetamid.

[0127]

[0128] U rastvor 4-hloro-3-fluoroanilina (10,00 g, 68,7 mmol) i DIEA (13,2 mL, 76 mmol) u EtOAc (200 mL) je dodat Ac2O (7,1 mL, 75 mmol) kap po kap. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, rastvor je opran sa vodom (2 x 100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), osušen (Na2SO4), proceđen, i uparen pod sniženim pritiskom da obezbedi proizvod kao belu čvrstu supstancu LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(4-hloro-3-fluorofenil)acetamidom (12,39 g, 66,0 mmol, 96 % prinos)<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.26 (s, 1 H), 7.77 (dd, J = 12.17, 2.20 Hz, 1 H), 7.49 (dd, J = 8.60, 8.60 Hz, 1 H), 7.30 (dd, J = 8.79, 2.35 Hz, 1 H), 2.06 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 188 [M+H]<+>.

Korak-2: 2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-karbaldehid.

2

[0130] Epruveta je zatvorena sa pregradom i stavljena u atmosferu azota. DMF (9,5 mL, 123 mmol) je dodat špricem i zatim ohlađena na ledenom kupatilu. POCl3(37 mL, 397 mmol) je dodat u kapima špricem (preko 25 minuta). Crveni rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature (preko 20 minuta), tada je pregrada uklonjena i smeša je tretirana sa N-(4-hloro-3-fluorofenil)acetamidom (7,00 g, 37,3 mmol). Zatim je epruveta zapečaćena i rastvor je mešan na 80 °C preko noći. Rastvor je pipetiran u led, što dovodi do nastajanja žutog taloga. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku i opran sa vodom (500 mL), tokom čega je većina taloga rastvorena. Filter kolač je osušen da obezbedi 427,6 mg naslovnog jedinjenja kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa nečistim 2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-karbaldehidom (427,6 mg, 1,752 mmol, 4,70% prinos). Materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.36 (s, 1 H), 8.99 (s, 1 H), 8.67 (d, J = 8.21 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 10.26 Hz, 1 H), 5.76 (s, 1 H). LCMS (Metod 1): m/z 244 [M+H]<+>.

Korak-3: N-((2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0131]

[0132] Smeša 2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-karbaldehida (424,4 mg, 1,739 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamida (253,8 mg, 2,094 mmol) je stavljena u atmosferu azota. Onda su špricom dodati THF (4 mL) i titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (1,00 mL, 3,41 mmol) i nastala suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. LCMS je pokazao da je reakcija potpuno gotova. Reakcija je zaustavljena dodavanjem kap po kap vodenog zasićenog NH4Cl (2 mL). Smeša je triturisana sa EtOAc (100 mL), i čvrsta supstanca je sakupljena na Bihnerovom levku, i oprana sa EtOAc (50 mL). Filtrat je opran sa koncentrovanim rastvorom soli (50 mL), osušen (Na2SO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 574,3 mg naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa (E)-N-((2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (574,3 mg, 1,654 mmol, 95% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.13 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 8.67 (d, J = 8.21 Hz, 1 H), 8.11 (d, J = 10.26 Hz, 1 H), 1.25 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 347 [M+H]<+>.

Korak-4: N-(1-(2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0133]

2

[0134] N-((2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (573,6 mg, 1,652 mmol) je stavljen u balon sa okruglim dnom od 100 mL u atmosferi azota. Dodat je DCM (14 mL) i nastala suspenzija je ohlađena u kupatilu suvi led/hloroform (na približno. -60 °C). Zatim je dodat kap po kap metil magnezijum bromid (MeMgBr) (3M u etil etru, 0,83 mL, 2,490 mmol). Reakcija je mešana na -60 °C tokom nekoliko sati, a zatim na -20 °C preko noći. Smeša je stavljena u ledeno kupatilo i dodavana je voda kap po kap (7 mL). Smeša je razblažena vodom (150 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Dodat je silikagel u kombinovane ekstrakte i uzorak je uparen pod smanjenim pritiskom. Uzorak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (eluiran sa 0 do 100% EtOAc u heksanu i sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana) da obezbedi 226,3 mg naslovnog jedinjenja kao žućkastu čvrstu supstancu. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(1-(2,6dihloro-7-fluorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (226,3 mg, 0,623 mmol, 25,02% prinos).<1>H NMR označava jedan dijastereomer.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.52 (s, 1 H), 8.47 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 8.01 (d, J = 10.26 Hz, 1 H), 5.66 (d, J = 6.16 Hz, 1 H), 4.83 (q, J = 6.60 Hz, 1 H), 1.60 (d, J = 6.74 Hz, 3 H), 1.13 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 363 [M+H]<+>.

Korak-5: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-3).

[0135]

[0136] Uzorak N-(1-(2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (226,3 mg, 0,623 mmol) je pomešan sa 1,4-dioksanom (3,5 mL) i 3,6% HCl (vodeni, 3,5 mL) i mešan na 95 °C preko noći; materijal je brzo prešao u rastvor pri zagrevanju. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, rastvor je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u MeOH (∼10 mL), tretiran sa heptan (∼15 mL), i ponovo uparen pod smanjenim pritiskom. Nastali ostatak je tada triturisan sa Et2O, sakupljen na Hiršovom levku, i opran sa Et2O (20 mL) da obezbedi 179,8 mg naslovnog jedinjenja kao žute čvrste supstance. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohloridom (179,8 mg, 0,649 mmol, 104% prinos).<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 8.02 (s, 1 H), 7.92 (d, J = 7.62 Hz, 1 H), 7.23 (d, J = 9.97 Hz, 1 H), 4.53 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 1.68 (d, J = 6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 241 [M+H]<+>.

Primer 6 --Intermedijer II-4: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on (II-4)

[0137]

2

Korak 1 Korak 2

Korak 5

Korak-1: 2-Amino-5-hloro-4-fluorobenzojeva kiselina

[0138]

[0139] 2-Amino-4-fluorobenzojeva kiselina (50 g, 322,6 mmol) je rastvorena u 700 mL DMF i N-hlorosukcinamid (41 g, 305,5 mmol) je dodat u porcijama. Reakciona smeša se zagrevala na 50 °C tokom 5 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana na ledeno hladnu vodu da se dobije čvrsta supstanca. Čvrsta supstancaje ceđena i rastvorena u EtOAc, zatim je dodat zasićen NaCl (300 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 200 mL). Kombinovana organska faza je osušena (Na2SO4) i uparena do braon čvrste supstance (42 g, 69%) kao željenog proizvoda 2-amino-5-hloro-4-fluorobenzojeve kiseline.

Korak-2: (2-Amino-5-hloro-4-fluorofenil)metanol

[0140]

[0141] 2-Amino-5-hloro-4-fluorobenzojeva kiselina (42 g, 221 mmol) je rastvorena u 100 mL THF-a i BH3.THF (712 mL 1 M rastvor u THF, 712 mmol) je dodat u kapima tokom perioda od 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se zagrevala na 50 °C preko noći (18 h). Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana na ledeno hladnu vodu, i dodat je zasićen rastvor NaCl. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 200 mL). Kombinovana organska faza je osušena (Na2SO4), uparena i prečišćena koncentrovani upotrebom 0-100% heksani /etil acetat kao eluentom da se dobije željeni proizvod kao čvrsta braon supstanca (17 g, 45%).

2

Korak-3: 2-Amino-5-hloro-4-fluorobenzaldehid

[0142]

[0143] U rastvor (2-amino-5-hloro-4-fluorofenil)metanola (22 g, 125,7 mmol) u 1000 mL hloroforma je dodat MnO2(109 g, 1250 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na temperaturi okoline. Reakciona smeša je ceđena, oprana sa EtOAc i uparena. Nastali sirovi proizvod je propušten kroz sloj silikagela eluiranjem sa 0 do 20% heksani/EtOAc da se dobije čist proizvod kao braon čvrsta supstanca (19 g, 87%).

Korak-4: 3-acetil-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on

[0144]

[0145] Smeša 2-Amino-5-hloro-4-fluorobenzaldehida (14 g, 173,6 mmol) i 2,2,6-trimetil-4H-1,3-dioksin-4-ona (16 mL, 121 mmol) u m-ksilenu (500 mL) je refluktovana tokom 1,5 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ceđena. Sakupljena čvrsta supstanca je oprana sa m-ksilenom i osušena da bi se dobio željeni proizvod (9,6 g, 50%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Korak-5: (S)-N-((S)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid.

[0146]

[0147] U smešu 3-acetil-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-ona (6,4 g, 26,7 mmol) i (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4,85 g, 40,06 mmol) u THF-u (450 mL) je dodat Ti(OEt)4(14 mL, 66,7 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80 °C preko noći. Po završetku reakcije, reakciona smeša je ohlađena na -60 °C i u porcijama je dodat NaBH4(5,1 g, 134 mmol) a zatim je puštena da se zagreje do sobne temperature preko noći. Višak NaBH4je neutralisan sa MeOH (20 mL), zatim sa vodom (20 mL) i EtOAc (300 mL). Rastvor je ceđen kroz sloj celita. Filtrat je prenet u levak za razdvajanje i organski sloj je odvojen, osušen (Na2SO4), koncentrovan i prečišćen koncentrovani (SiO2: heksani/<i>PrOH 0 do 20%) da se dobije naslovno jedinjenje (4,5 g, 49%) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak-6: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on. HCl, (II-4)

2

[0149] U smešu (S)-N-((S)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamida (3,5 g, 10,1 mmol) u MeOH (80 mL) je dodat 3N HCl u metanolu (80 mL, 121 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. U ovu smešu je dodat dietil etar (60 mL) i nastala čvrsta supstanca je ceđena i osušena da se dobije željeni proizvod II-4 (2,1 g, 75%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (br s, 1H), 8.24 (br s, 2H), 8.07-8.05(m, 2H), 7.32 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.5-4.15 (m, 1H), 1.53 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): Rt 3,47 min, m/z 241.1 [M+H]<+>.

Primer 7 --Intermedijer II-5: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on

[0150] Korak-1: 6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid

[0151] 2,6-dihloro-7-fluorohinolin-3-karbaldehid (2,56 g, 10,49 mmol) je zagrevan na refluksu u koncentrovanoj HCl (12M, 100 mL) preko noći, za koje vreme se činilo da materijal nije prešao u rastvor. Smeša je ostavljena da se ohladi, zatim sipana u vodu (750 mL). Suspenzija je ceđena na Bihnerovom levku, oprana vodom (750 mL), i osušena da obezbedi nečist 6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid (2,1991 g, 9,75 mmol, 93 % prinos) kao crvenkasto braon čvrstu supstancu. Materijal je bio pogodan za upotrebu kao takav.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.41 (s, 1 H), 10.20 (s, 1 H), 8.49 (s, 1 H), 8.28 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 7.25 (d, J=10.26 Hz, 1 H). LCMS: m/z 226 [M+H]<+>.

Korak-2: (R,E)-N-((6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0152]

[0153] Smeša 6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehida (2,20 g, 9,75 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1,42 g, 11,72 mmol) je stavljena u balon sa okruglim dnom od 50 mL u atmosferi azota. THF (20 mL) i titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (5,8 mL, 19,79 mmol) su dodati pomoću šprica i nastala suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog dana, i za to vreme je smeša potamnela. Reakciona smeša je zaustavljena dodavanjem kap po kap zasićenog vodenog rastvora NH4Cl, obrazujući talog. Smeša je triturisana sa EtOAc (400 mL) i ceđena na Bihnerovom levku. Filter kolač je zatim tretiran ultra zvukom u 300 mL EtOAc tokom 15 minuta. Smeša je ceđena na Bihnerovom levku, a filtrati od dva ceđenja su spojeni. Spojeni ceđeni rastvor je opran sa koncentrovanim rastvorom soli (200 mL), osušen (Na2SO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi (R,E)-N-((6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metil propan-2-sulfinamid (3,22 g, 9,79 mmol, 100% prinos) kao narandžasto čvrsto jedinjenje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.40 (br s, 1 H), 8.75 (br s, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.27 (d, J = 8.21 Hz, 1 H), 7.25 (d, J = 10.26 Hz, 1 H), 1.20 (s, 9 H). LCMS: m/z 329 [M+H]<+>.

Korak-3: (R)-N-((R)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0154]

[0155] (R,E)-N-((6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (3,22 g, 9,79 mmol) je stavljen u balon sa okruglim dnom od 500 mL, u atmosferi azota. Dodat je DCM (100 mL) i nastala suspenzija je ohlađena na kupatilu suvi led/hloroform (na približno -60 °C). U kapima je dodat metil magnezijum bromid (MeMgBr) (3M u etru, 10 mL, 30.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na -60 °C tokom nekoliko sati, a zatim puštena da se zagreje do sobne temperature preko noći, pri čemu je nastao crveni rastvor. Rastvor je zatim ohlađen na ledenom kupatilu, tretiran kap po kap vodom (40 mL) i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Nastala suspenzija je razblažena vodom (300 mL) i oprana sa EtOAc. Nastala emulzija je ostavljena da se razdvoji preko noći. Slojevi su razdvojeni, i silikagel je dodat u organski sloj. Većina rastvarača je uparena pod smanjenim pritiskom. Dodati su MeOH i heptan i smeša je uparena pod smanjenim pritiskom do suva. Materijal je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (upotrebom 50 g silikagel kolona; eluiran sa 0 do 50% EtOAc u heksanu, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana) da obezbedi (R)-N-((R)-1-(6hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (774,3 mg, 2,245 mmol, 23% prinos) kao zelenkastu čvrstu supstancu.<1>H NMR pokazuje jedan dijastereomer.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.03 (s, 1 H), 7.98 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.22 (d, J = 10.26 Hz, 1 H), 5.67 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 4.41 -4.55 (m, 1 H), 1.37 (d, J = 6.74 Hz, 3 H), 1.12 (s, 9 H). LCMS: m/z 345 [M+H]<+>.

1

Korak 4: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-5).

[0156]

[0157] Rastvor (R)-N-((R)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (773 mg, 2,242 mmol) u MeOH (20 mL) je ohlađen na ledenom kupatilu i tretiran kap po kap sa 4M HCl u dioksanu (12 mL), tokom čega je materijal prešao u rastvor. Reakcija je mešana 25 minuta, i za to vreme je obrazovan talog. Rastvarači su ispareni pod smanjenim pritiskom na sobnoj temperaturi. Ostatak je triturisan sa etil etrom (50 mL), onda je sakupljena čvrsta supstanca na Hiršovom levku i oprana sa još etil etra (50 mL) da obezbedi (R)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (613,5 mg, 2,214 mmol, 99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 7.99 (s, 1 H), 7.90 (d, J = 7.62 Hz, 1 H), 7.22 (d, J = 9.67 Hz, 1 H), 4.51 (q, J = 6.64 Hz, 1 H), 1.66 (d, J = 7.04 Hz, 3 H). LCMS: m/z 241 [M+H]<+>.

Primer 8 --Intermedijer II-6: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on.

[0158]

Korak 1: 2,6-dihloro-7-metoksihinolin-3-karbaldehid.

[0159]

[0160] Epruveta je zatvorena sa pregradom i stavljena u atmosferu azota. DMF (6,4 mL, 83 mmol) je špricom dodat i zatim ohlađena na ledenom kupatilu. POCl3(25 mL, 268 mmol) je dodat u kapima pomoću šprica (preko 20 minuta). Crveni rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature (preko 20 minuta), zatim je pregrada uklonjena, i smeša je tretirana sa N-(4-hloro-3-metoksifenil)acetamidom (5 g, 25,05 mmol). Epruveta je zapečaćena i rastvor je mešan na 80 °C preko noći. Rastvor je zatim pipetiran u led, pri čemu je došlo do stvaranja žutog taloga. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku, opran sa vodom (1200 mL), i osušen da obezbedi 5,06 g naslovnog jedinjenja kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 2,6-dihloro-7-

2

metoksihinolin-3-karbaldehidom (5,06 g, 19,76 mmol, 79% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.33 (s, 1 H), 8.87 (s, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 4.08 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 256 [M+H]<+>.

Korak-2: 6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid.

[0161]

[0162] 2,6-Dihloro-7-metoksihinolin-3-karbaldehid (5,06 g, 19,76 mmol) je zagrevan na refluksu u koncentrovanoj HCl (12M, 185 mL) preko noći. Materijal je prešao u rastvor rastvor tokom zagrevanja a onda u čvrst talog tokom trajanja reakcije. Smeša je ostavljena da se ohladi a onda je sipana u vodu (1500 mL) dovodeći do daljeg taloženja. Suspenzija je ceđena na Bihnerovom levku, oprana sa vodom (1500 mL), i osušena da obezbedi 4,04 g naslovnog jedinjenja kao žućkasto braon čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2dihidrohinolin-3-karbaldehidom (4,04 g, 17,00 mmol, 86% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.22 (s, 1 H), 10.16 -10.18 (m, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 3.94 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 238 [M+H]<+>.

Korak-3: N-((6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0163]

[0164] Smeša 6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehida (2,00 g, 8,42 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamida (1,22 g, 10,07 mmol) je stavljena u atmosferu azota. Pomoću šprica su dodati THF (20 mL) i titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (5,0 mL, 17,06 mmol) i nastala suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, reakcija je zaustavljena dodavanjem kap po kap zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (10 mL). Smeša je triturisana sa EtOAc (450 mL), zatim filtrirana kroz Celite® 545, i Celite® dalje je isprana sa EtOAc (200 mL). Filter kolač je zatim tretiran ultra zvukom u EtOAc (450 mL) tokom 15 minuta, zatim proceđen na Bihnerovom levku. Dva filtrata su spojena, oprana sa koncentrovanim rastvorom soli (200 mL), osušena (Na2SO4), proceđena, i uparena pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 1,01 g naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa (E)-N-((6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (1,01 g, 2,96 mmol, 35,2% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.21 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 6.97 (s, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 1.19 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 341 [M+H]<+>.

Korak-4: N-(1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0165]

[0166] N-((6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (265 mg, 0,778 mmol) je stavljen u balon sa okruglim dnom od 50 mL u atmosferi azota. DCM (7 mL) je dodat, i suspenzija je ohlađena na suvi led/hloroform kupatilu (na približno. -60 °C). Metilmagnezijum bromid (MeMgBr) (3M u etru, 0,80 mL, 2,40 mmol) je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana na -60 °C tokom nekoliko sati, zatim puštena da se zagreje do sobne temperature preko noći, pri čemu je nastao narandžasti rastvor. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, suspenzija je ohlađena na ledenom kupatilu i tretirana kap po kap sa vodom (3 mL). Dobijena smeša je razblažena sa vodom (75 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (75mL 20 mL). Dodat je silikagel i EtOAc je uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi vlažna globularna masa. Dodati su heptan i MeOH i smeša je uparena pod smanjenim pritiskom da obezbedi prah Materijal je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (eluirana sa 0 to 4,2% MeOH u DCM, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana). Frakcije proizvoda su obezbedile 152,7 mg naslovnog jedinjenja kao plavo zelenu krtu penu. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (152,7 mg, 0,428 mmol, 55% prinos). LCMS (Metod 1): m/z 357 [M+H]<+>.

Korak-5: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-6).

[0167]

[0168] Rastvor N-(1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamida (149,6 mg, 0,419 mmol) u MeOH (3.8 mL) je ohlađen na ledenom kupatilu i tretiran kap po kap sa 4M HCl u 1,4-dioksanu (2,2 mL). Reakcija je mešana 25 minuta, i za to vreme je obrazovana mala količina taloga. Rastvarači su ispareni pod smanjenim pritiskom na sobnoj temperaturi. Ostatak je triturisan sa 10 mL etil etra, zatim sakupljen na Hiršovom levku, i opran sa još etil etra da obezbedi 115,6 mg naslovnog jedinjenja kao bledo zelena čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on hidrohloridom (115,6 mg, 0,400 mmol, 95% prinos).<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 7.95 (s, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 6.97 (s, 1 H), 4.51 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 3.98 (s, 3 H), 1.68 (d, J = 7.04 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 253 [M+H]<+>.

Primer 9 --Intermedijer II-7: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on.

[0169]

4

Korak-1: N-(4-hloro-3-metoksifenil)acetamid

[0170]

[0171] U rastvor 4-hloro-3-metoksianilina (50 g, 317 mmol) i DIPEA (110 mL, 635 mmol) u CH2Cl2(700 mL) je dodat anhidrid sirćetne kiseline (36 mL, 381 mmol) kap po kap na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je onda zaustavljena vodom (250 mL) i organski sloj je odvojen. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(100 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni koncentrovani sa CH2Cl2/MeOH da daju N-(4-hloro-3-metoksi fenil)acetamid (71 g, kvantitativan prinos) kao belu čvrstu supstancu.

Korak-2: 2,6-Dihloro-7-metoksihinolin-3-karbaldehid

[0172]

[0173] U POCl3(450 g, 274 mL, 2,95 mol) u balonu od 2 L je dodat anhidrovani DMF (83,5 g, 89 mL, 14 mol) kap po kap. Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 20 min. Nakon toga je u porcijama dodat N-(4-hloro-3-metoksifenil)acetamid (65 g, 327 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je zagrevana na 90 °C preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i pažljivo zaustavljena u vodenom rastvoru NaHCO3. Dobijeni talog je proceđen, opran sa vodom (100 mL x 3) i onda osušen u vakuumskoj sušnici da se dobije 60 g naslovnog jedinjenja (73%).

Korak-3: 6-Hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-karbaldehid

[0174]

[0175] U 2,6-dihloro-7-metoksihinolin-3-karbaldehida (40 g, 157 mmol) u MeOH (1 L) i THF (200 mL) dodat je NaOMe (16,9 g, 314 mmol) u porcijama na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je refluktovana 3 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je zaustavljena dodavanjem vodenog rastvora NH4Cl (200 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (200 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni koncentrovani sa heksani/ EtOAc (3:1) da se dobije željeni proizvod (37,89 g, 96%) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak-4: 1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etanol

[0176]

[0177] U rastvor 6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-karbaldehida (36,74 g, 151 mmol) u THF-u (1 L) na -78 °C u kapima je dodat rastvor MeMgCl u THF-u (3 M, 75.5 mL, 226 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i onda zaustavljena sa vodenim rastvorom NH4Cl (250 mL). Organski sloj je odvojen a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (100 mL X 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksani/ EtOAc (3:1) da se dobije naslovno jedinjenje (38,06 g, 91%).

Korak-5: 1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etanon

[0178]

[0179] U 1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etanola (36,74 g, 137,6 mmol) u CH2Cl2(1 L) na 0 °C u porcijama je dodat DMP (70,0 g, 165,1 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, i onda je zaustavljena sa vodenim rastvorom NaHCO3i Na2S2O3. Posle mešanja od 15 min, oba sloja su postala bistra. Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(100 mL X 2). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksani/ EtOAc (4:1) da se dobije naslovno jedinjenje (30,02 g, 80%) kao bela čvrsta supstanca.

Korak-6: (R,E)-N-(1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0180]

[0181] U 1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etanon (30,07 g, 113,5 mmol) u THF/toluen (100 mL/1 L) na sobnoj temperaturi je dodat (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (27,5 g, 227 mmol,) i Ti(OiPr)4(97 mL, 340,5 mmol,). Reakcija je refluktovana sa Dean-Stark aparaturom. Nakon što je reakcija refluktovana 4 h i 300 mL rastvarača je uklonjeno, reakcija je ohlađena do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i u ostatak je dodato 200 mL EtOAc, a zatim i 100 mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Posle mešanja od 10 min, reakciona smeša je prošla kroz sloj celita. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (200 mL x 2), osušen (Na2SO4), koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silikagelu sa heksani/ EtOAc (1:1) da se dobije naslovno jedinjenje (34,28 g, 82%).

Korak-7: (R)-N-((S)-1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0182]

[0183] U (R,E)-N-(1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (34,28 g, 93,15 mmol) u THF-u (600 mL) na -78 C, je dodat 1 M L-selektrid (121 mL, 121 mmol) u THF-u kap po kap. Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 3 h. Reakcija je zaustavljena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (300 mL) i onda ekstrahovana sa EtOAc (200 mL X 2). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksani/ EtOAc (1:1) da se dobije naslovno jedinjenje (29,27 g, 85%).

Korak-8: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on hidrohlorid so (II-7).

[0184]

[0185] U (R)-N-((S)-1-(6-hloro-2,7-dimetoksihinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (30,35 g, 82 mmol) u dioksanu (250 mL) je dodat 2 N HCl (250 mL) na rt. Reakciona smeša je refluktovana 3 h, ohlađena do sobne temperature a rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijen sirov ostatak je osušen pod vakuumom da se dobije sirov proizvod, koji je dalje prečišćen triturisanjem (CH2Cl2/MeOH/heksan) da se dobije čisto naslovno jedinjenje II-7 (17,65 g, 75%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.18 (s, 1H), 8.24 (br, s, 3H), 7.99 (s, 1H), 7.86 (s, 1 H), 7.02 (s, 1H), 4.41 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 1.52 (d, J = 6.87 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): Rt 3,48 min, m/z 253.1 [M+H]<+>.

Primer 10 --Intermedijer II-8: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on

[0186]

[0187] Naslovno jedinjenje II-8 je pripremljeno u istoj proceduri opisanoj za II-7, izuzev korišćenja (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida u Koraku-6 (šema-3).<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 7.92 (s, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 4.48 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 3.96 (s, 3 H), 1.65 (d, J = 6.74 Hz, 3 H). LCMS: m/z 253 [M+H]<+>.

Primer 11 --Intermedijer II-9: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(piridin-2-ilmetoksi) hinolin-2(1H)-on.

[0188]

Racemska smeša

Korak-1: 4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)anilin.

[0189]

[0190] Rastvor 5-amino-2-hlorofenola (2,00 g, 13,93 mmol) piridin-2-ilmetanola (1,4 mL, 14,51 mmol), i trifenilfosfina (4.30 g, 16.39 mmol) u THF-u (250 mL) je stavljen u atmosferu azota i tretiran sa DEAD (2,6 mL, 16,42 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, rastvor je tretiran sa silikagelom i uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (korišćenjem kolone od 340 g silikagela, eluiran sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, zatim 2,3% MeOH u EtOAc) da obezbedi naslovno jedinjenje kao svetlo braon čvrstu supstancu. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)anilinom (2,29 g, 9,76 mmol, 70,0% prinos) sa ostatkom trifenilfosfin oksida. U sledećem koraku je korišćen sirov, bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.55 -8.62 (m, 1 H), 7.86 (ddd, J = 7.77, 7.77, 1.76 Hz, 1 H), 7.52 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J = 6.89, 5.42 Hz, 1 H), 7.02 (d, J= 8.50 Hz, 1 H), 6.37 (d, J = 2.35 Hz, 1 H), 6.15 (dd, J = 8.50, 2.35 Hz, 1 H), 5.28 (s, 2 H), 5.14 (s, 2 H). LCMS (Metod 1,): m/z 235 [M+H]<+>.

Korak-2: N-(4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)fenil)acetamid.

[0191]

[0192] Rastvor 4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)anilina (5,22 g, 22,24 mmol) i DIEA (4,30 mL, 24,62 mmol) u EtOAc (125 mL) je tretiran sa Ac2O (2,30 mL, 24,38 mmol) Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći, nakon čega je obrazovan debeo beli talog. Dodat je EtOAc (300 mL) i smeša je mućkana dok se većina taloga nije rastvorila. Organski sloj je zatim opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli (125 mL svaki),osušen (Na2SO4) i proceđen. Dodat je silikagel, i smeša je uparena pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (korišćenjem kolone sa 100 g silikagela, eluiran sa 0 do 5% MeOH u DCM) da se obezbedi 3,23 g naslovnog jedinjenja kao bela čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)fenil)acetamidom (3,23 g, 11,67 mmol, 52,5% prinos)<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.06 (s, 1 H), 8.56 -8.62 (m, 1 H), 7.87 (ddd, J = 7.80, 7.80, 1.80 Hz, 1 H), 7.53 (d, J = 7.62 Hz, 1 H), 7.49 (d, J = 2.05 Hz, 1 H), 7.33 -7.40 (m, 2 H), 7.22 (dd, J = 8.65, 2.20 Hz, 1 H), 5.21 (s, 2 H), 2.02 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 277 [M+H]<+>.

Korak-3: 2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-karbaldehid.

[0193]

[0194] Epruveta je zatvorena sa pregradom i stavljena pod atmosferu azota. Pomoću šprica je dodat DMF (2,9 mL, 37,5 mmol) i zatim ohlađena na ledenom kupatilu. POCl3(11,4 mL, 122 mmol) je dodat u kapima pomoću šprica (preko 20 minuta). Rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature (preko 15 minuta) i pregrada je uklonjena. Smeša je tretirana sa N-(4-hloro-3-(piridin-2-ilmetoksi)fenil)acetamidom (3,16 g, 11,42 mmol). Epruveta je ponovo zapečaćena i rastvor je mešan na 80 °C preko noći. Rastvor je onda pipetiran u led, pri čemu je došlo do nastajanja žutog taloga. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku, opran sa vodom (500 mL), i osušen da se obezbedi 2,88 g naslovnog jedinjenja kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-karbaldehidom (2,88 g, 8,64 mmol, 76% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.34 (s, 1 H), 8.89 (s, 1 H), 8.66 (br d, J = 4.10 Hz, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 7.92 -8.01 (m, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.69 (br d, J = 7.62 Hz, 1 H), 7.41 -7.50 (m, 1 H), 5.55 (s, 2 H). LCMS (Metod 1): m/z 333 [M+H]<+>.

Korak-4: 6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid IV-3

[0195]

[0196] Rastvor 2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-karbaldehida (2,88 g, 8,64 mmol) u koncentrovanoj HCl (81 mL) je mešan na refluksu (c 100 °C) tokom jednog dana, i za to vreme rastvor je postao narandžast. Rastvor je razblažen sa vodom (900 mL), što je dovelo do stvaranja žutog taloga. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku, opran sa vodom (750 mL), i osušen pod vakuumom na 60 °C da se obezbedi 2,27 g naslovnog jedinjenja kao čvrsta žuta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2dihidrohinolin-3-karbaldehidom IV-3 (2,27 g, 7,21 mmol, 83% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.20 (s, 1 H), 10.16 -10.19 (m, 1 H), 8.60 -8.64 (m, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.90 (ddd, J = 7.60, 7.60, 1.80 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 7.62 Hz, 1 H), 7.36-7.43 (m, 1 H), 7.05 (s, 1 H), 5.37 (s, 2 H). LCMS (Metod 1): m/z 315 [M+H]<+>.

Korak-5: (E)-N-((6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0197]

[0198] Smeša 6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehida (2,27 g, 7,21 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamida (1,05 g, 8,66 mmol) je stavljena u balon sa okruglim dnom od 25 mL, pod atmosferom azota. Pomoću šprica su dodati THF (9 mL) i titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (4,3 mL, 14,68 mmol) i suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog dana. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, material je triturisan sa EtOAc (400 mL), zatim filtriran kroz Celite® 545, i filter kolač je opran sa EtOAc (100 mL). Filter kolač je tretiran ultra zvukom u EtOAc (400 mL) tokom petnaest minuta i onda proceđen na Bihnerovom levku. Dva filtrata su spojena i

4

oprana sa koncentrovanim rastvorom soli (250 mL). Vodeni sloj je vraćen na ekstrahovanje sa EtOAc (200 mL 100 mL). Tri spojena organska sloja su osušena (Na2SO4), proceđena, i uparena pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 1,44 g naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa (E)-N-((6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (1,44 g, 3,45 mmol, 47,8% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.20 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.62 (d, J = 4.10 Hz, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 7.90 (ddd, J = 7.80, 7.80, 1.80 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 7.40 (dd, J = 7.18, 4.54 Hz, 1 H), 7.06 (s, 1 H), 5.36 (s, 2 H), 1.19 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 418 [M+H]<+>.

Korak-6: N-(1-(6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0199]

[0200] (E)-N-((6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2-metil propan-2-sulfinamid (1,44 g, 3,45 mmol) je stavljen u 250 mL balon sa okruglim dnom u atmosferi azota. Dodat je DCM (27 mL) i suspenzija je ohlađena na suvi led/hloroform kupatilu (na približno. -60 °C). U kapima je dodat metilmagnezijum bromid (MeMgBr) (3M u etru, 3,50 mL, 10,50 mmol). Hladno kupatilo je ostavljeno da se zagreje do sobne temperature preko noći pri čemu je nastala narandžasta suspenzija. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, suspenzija je ohlađena na ledenom kupatilu i tretirana u kapima sa vodom (10 mL) resulting in emulsification. Emulzija je razblažena sa EtOAc (400 mL) i oprana sa vodom (400 mL). U organski sloj je dodat silikagel i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (eluiran sa 0 do 6% MeOH u DCM sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana) da obezbedi 1,17 g naslovnog jedinjenja kao žuta krta pena. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(1-(6-hloro2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (1,17 g, 2,70 mmol, 78% prinos). NMR je pokazao smešu diastereomera. LCMS (Metod 1): m/z 434 [M+H]<+>.

Korak-7: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-9).

[0201]

[0202] Rastvor N-(1-(6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (167,3 mg, 0,386 mmol) u MeOH (3,5 mL) je ohlađen na ledenom kupatilu i tretiran u kapima sa 4M HCl u 1,4-dioksanu (2 mL). Reakcija je mešana 20 minuta i u pet minuta je počeo da se stvara talog. Rastvarači su ispareni pod smanjenim pritiskom na sobnoj temperaturi. Ostatak je triturisan sa 10 mL etil etra, sakupljen na Hiršovom levku i opran sa još etil etra da obezbedi 145,8 mg naslovnog jedinjenja kao bledo žute čvrste supstance. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohloridom (145,8 mg, 0,398 mmol, 103% prinos).<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 8.91-8.95 (m, 1 H), 8.68 (ddd, J = 7.90, 7.90, 1.50 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 7.62 Hz, 1 H), 8.04-8.11 (m, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.17 (s, 1 H), 5.66 (s, 2 H), 4.53 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 1.69 (d, J = 6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 352 [M+Na]<+>.

Primer 12 --Intermedijer 11-10: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-2(1H)-on.

[0203]

ii) Des Martinov

perjodinat Toluen, THF CH2CH2

Korak-1: 1-(2,6-Dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etanon.

[0204]

[0205] U rastvor 2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-karbaldehida (1,0 g, 3,0 mmol) (pripremljen u istoj proceduri opisanoj za korak-1-3 prikazanoj u šemi-4) u CH2Cl2(40 mL) dodat je u kapima metil magnezijum bromid (MeMgBr) (3 M rastvor u dietil etru, 1,5 mL, 4,50 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša je zatim mešana na temperaturi okoline tokom 1,5 sati. Po završetku reakcije, smeša je polako razblažena sa vodom (3 mL) i ekstrahovana sa CH2Cl2(50 mL). Organski sloj je odvojen i osušen preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvarači su ispareni do suva. Nastali talog je rastvoren u CH2Cl2(25 mL) i tretiran sa Des-Martinovim perjodinatom (2,54 g, 6,00 mmol). Smeša je mešana na temperaturi okoline preko noći. Smeša je zatim razblažena sa vodenim korastvorom 20% NaHCO3i 20% Na2S2O3(10 mL) i mešana tokom 5 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvor je ekstrahovan sa CH2Cl2(40 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Nastali talog je prečišćen hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2kolona: eluirano sa CH2Cl2/MeOH 0 do 10%) da se dobije naslovno jedinjenje (800 mg, 79%).

Korak-2: (R,E)-N-(1-(2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etilidene)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0206]

[0207] U smešu 1-(2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etanona (2,18 g, 6,56 mmol) i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1,19 g, 9,84 mmol) u THF:Toluen (40 mL:180 mL), je dodat titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (3,96 mL, 13,30 mmol). Dobijena smeša je refluktovana sa Dean-Stark aparaturom tokom 7 časova. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, zaustavljena sa vodom, i razblažena sa EtOAc (300 mL). Organski sloj je opran sa vodom (100 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen do suva. Nastali talog je prečišćen hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2kolona: eluirano sa Heks/EtOAc 0 do 100%) da se dobije naslovno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (1,4 g, 50% prinos). Početni materijal keton je takođe oporavljen (250 mg, 11% prinos).

Korak-3: (R)-N-((S)-1-(2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid.

[0208]

[0209] U rastvor (R,E)-N-(1-(2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etiliden)-2-metil propan-2-sulfinamida (900 mg, 1,99 mmol) u THF-u (25 mL) na -40 do -50 °C je dodat L-selektrid (1M u THF, 1,98 mL, 2,59 mmol) kap po kap. Dobijena smeša je mešana na -40 do -50 °C tokom 2 sata. Na završetku reakcije, smeša je ohlađena sa ledom na -50 °C, ekstrahovana sa EtOAc (100 mL), osušena, i uparena. Nastali talog je prečišćen hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu (SiO2kolona: Heks/EtOAc 0 do 100%) praćen triturisanjem sa heksani-metilen hlorid da se dobije naslovno jedinjenje (266 mg, 30% prinos).

Korak-4: (S)-3-(1-Aminoetil)-6-hloro-7-(piridin-2-ilmetoksi) hinolin-2(1H)-on TFA so (II-10).

[0210]

4

[0211] U smešu (R)-N-((S)-1-(2,6-dihloro-7-(piridin-2-ilmetoksi)hinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1,1 g, 2,43 mmol) u 1,4-dioksanu (6,6 mL), je dodat vodeni IN HCl (6,6 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana na 120 °C preko noći. Nakon što su TLC i MS pokazali završetak reakcije, rastvarači su uklonjeni na rotacionom uparivaču i liofilizirani da se obezbedi žuta čvrsta supstanca. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom sa reverznom fazom na ISCO® hromatografskom sistemu (C18 kolona: eluirano sa H2O/MeCN/(0,1% CF3CO2H 0 do 100%) i frakcije su praćene pomoću LCMS. Čiste frakcije su spojene i liofilizirane da se dobije naslovno jedinjenje II-10 (920 mg, 86% prinos) kao TFA so.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.17 (br s, 1 H), 8.62 (d, J = 4.95 Hz, 1 H), 8.09 (br s, 2 H), 7.96-7.85 (m, 3 H), 7.59 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.42-7.37 (m, 1 H), 7.08 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 5.33 (s, 2 H), 4.39-4.38 (m, 1 H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3 H). LCMS (metod 3): Rt 3,3 min, m/z 329.1 [M+H]<+>.

Primer 13 --Intermedijer 11-11: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-on.

[0212]

Korak-1: 3-acetil-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-on.

[0213]

[0214] Smeša 2-amino-5-hloronikotinaldehida (1 g, 6,39 mmol) i 2,2,6-trimetil-4H-1,3-dioksin-4-ona (1,362 g, 9,58 mmol) u ksilenima (10 mL) je zagrevana na refluksu tokom 3 sata, zatim ohlađena do sobne temperature, proceđena, i oprana dva puta sa ksilenima da se dobije 914 mg 3-acetil-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-ona (64,3% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.68 (br, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 8.49 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 2.48 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 1,60 min, m/z 223.03[M+H]<+>.

Korak-2: (S)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0215]

[0216] Smeša tetraetoksititanijuma (512 mg, 2.25 mmol), (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (163 mg, 1,35 mmol) i 3-acetil-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-ona (200 mg, 0,898 mmol) u THF-u (15 mL) je zagrevana na 80 °C preko noći, zatim ohlađena do sobne temperature. U ovu smešu je dodat NaBH4(170 mg, 4.49 mmol) i smeša je polako zagrevana do sobne temperature preko noći. Zatim je dodat MeOH da neutrališe svaki višak NaBH4, praćen dodavanjem vode. Smeša je ceđena da se ukloni čvrsta supstanca, zatim dva puta ekstrahovana sa EtOAc, osušena preko Na2SO4, i koncentrovana. Talog je prečišćen na Biotage® hromatografskom sistemu upotrebom kolone sa 25 g SiO2eluiran na gradijentu (prvo 20% do 100% EtOAc /Heksani, zatim 0-5% MeOH/DCM) da se dobije (S)-N-((S)-1-(2,6-dihlorohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (123 mg, 42% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.40 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.24 (s, 1 H), 5.24(d, J = 9.45 Hz, 1 H), 4.42 (m, 3 H), 1.54 (d, J = 6.93Hz, 3 H), 1.20 (s, 9H). LCMS (Metod 1): Rt 2,07 min, m/z 328.98 [M+H]<+>.

Korak-3: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-on (II-11).

[0217]

[0218] U rastvor ((S)-N-((S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (123 mg, 0,375 mmol) u MeOH (5 mL) je dodat HCl (2 mL, 8,00 mmol, 4M u 1,4-dioksanu). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. U ovu smešu je dodato 6 mL etil etra i nastali talog je proceđen, opran sa etil etrom (2 x), osušen i koncentrovan da se dobije (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-on, HCl (96 mg, 98% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.75 (br s, 1 H), 8.60-8.35 (s, 1 H), 8.26 (br, 1 H) 8.07 (s, 1 H), 4.40-4.50 (m, 1 H), 1.51 (d, J= 6.78 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,87 min, m/z 224.99 [M+H]<+>.

Primer 14 --Intermedijer II-12: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinoksalin-2(1H)-on

[0219]

4

Korak-1: Etil 3-((4-hloro-2-nitrofenil)amino)-3-oksopropanoat.

[0220]

[0221] U rastvor 4-hloro-2-nitroanilina (42,3 g, 245 mmol) u CH2Cl2(1 L) dodat je u kapima etil 3-hloro-3-oksopropanoat (48 g, 319 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dobijeni ostatak je rastvoren u minimalnoj količini MTBE (200 mL) i heksana (800 mL) koji je polako dodat. Svaki proizvod koji je istaložen iz rastvora je proceđen i filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni ISCO® hromatografskog sistema sa heksani/etil acetat gradijentom eluiranja da se dobije dodatno željeni proizvod. Naslovno jedinjenje je dobijeno sa 98% prinosa (69,85 g).

Korak-2: 7-Hloro-2-(etoksikarbonil)-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin 1-oksid (A) i 7-hloro-2-(metoksikarbonil)-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin 1-oksid (B).

[0222]

4

[0223] U rastvor etil 3-((4-hloro-2-nitrofenil)amino)-3-oksopropanoata (68 g, 238 mmol) i metil benzoata (150 mL) u anhidrovanom DMF-u (500 mL) na 0 °C dodat je u kapima KO<t>Bu (1M rastvor u THF, 500 mL, 500 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 4 sata i zatim neutralisana sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(300 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni SiO2fleš hromatografijom i eluirani sa CH2Cl2/MeOH da se dobije smeša A/B (42,54 g, 67% prinos, A/B odnos 1:2) kao čvrsta supstanca. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Etil 7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-karboksilat (D) i metil 7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-karboksilat (C).

[0224]

[0225] U smešu jedinjenja A i B (42,54 g, 159 mmol) u DMF-u (200 mL) dodat je kap po kap PBr3(85,9 g, 318 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata i onda je ohlađena sa ledenom vodom i ekstrahovana sa CH2Cl2(200 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni fleš hromatografijom upotrebom CH2Cl2/MeOH (9:1) kao eluenta da se dobije C/D (36,6 g, 91% prinos) kao čvrsta supstanca. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak-4: Etil 3,7-dihlorohinoksalin-2-karboksilat (E) i metil 3,7-dihloro hinoksalin-2-karboksilat (F).

[0226]

[0227] U smešu jedinjenja C/D (36,6 g, 145 mmol) u balon od 1 L je dodat POCl3(150 mL) u jednoj porciji i dobijena smeša je refluktovana 3 sata. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i pažljivo zaustavljena sa vodenim rastvorom NaHCO3. Smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(200 mL x 3). Spojeni organski sloj je osušen (Na2SO4), koncentrovan, i prečišćen SiO2fleš hromatografijom upotrebom heksan/etil acetat (9:1) kao eluenta da se dobije E/F (23,7 g, 61% prinos) kao čvrsta supstanca. Ova smeša je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

4

Korak-5: Metil 7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-karboksilat.

[0228]

[0229] U smešu jedinjenja E/F (22,11 g, 81,9 mmol) u THF/MeOH (9:1, 300 mL) dodat je kap po kap NaOMe (0.5 M, 360 mL) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata i neutralisana sa čvrstim NH4Cl (20 g). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i dodata je voda (200 mL). Smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(150 mL x 3) i spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni SiO2fleš hromatografijom upotrebom heksani/etil acetata (9:1) kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (19,1 g, 88 % prinos) kao čvrsta supstanca.

Korak-6: 7-Hloro-3-metoksihinoksalin-2-karbaldehid (G) i oksibis((7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)metanol) (H).

[0230]

[0231] U metil 7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-karboksilat (5,3 g, 20 mmol) u CH2Cl2(250 mL) dodat je kap po kap diizobutilaluminijum hidrid (1 M, 30 mL) na -78 °C. Dobijena smeša je mešana na -78 °C tokom 3 sata i onda je neutralisana sa MeOH (na -78 °C, 20 mL). Nakon mešanja od 0,5 sati, smeša je zagrejana do sobne temperature i dodat je vodeni rastvor kalijum natrijum L-tartrata (100 mL). Organski sloj je zatim odvojen, a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(50 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni SiO2fleš hromatografijom upotrebom heksani/etil acetat (1:1) kao eluenta da se dobije G (1,02 g, 23 % prinos) i H (2,24 g, 50% prinos). Struktura od H je određena na osnovu MS i<1>H NMR.

Korak-7: (R,E)-N-((7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0232]

[0233] U jedinjenje H (2,24 g, 5,1 mmol) u DCE (300 mL) na sobnoj temperaturi je dodat (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,44 g, 20,1 mmol) i CuSO4(4,85 g, 30,3 mmol). Reakcija je zagrevana na 60 °C i mešana tokom 4 sata. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i zaustavljena sa 50 mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Nakon mešanja od 10 minuta, reakciona smeša je ceđena kroz sloj Celite®. Filtrat je ekstrahovan sa CH2Cl2(50 mL x 3), osušen (Na2SO4),

4

koncentrovan, i prečišćen hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom heksani/etil acetat kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (2,21 g, 67% prinos).

Korak-8: (R)-N-((R)-1-(7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0234]

[0235] U (R,E)-N-((7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,21 g, 6,8 mmol) u CH2Cl2(150 mL) dodat je kap po kap metil magnezijum hlorid (MeMgCl) (3M u THF, 3,4 mL) na -78 °C. Dobijena smeša je mešana na -78 °C tokom 2 sata i onda je zaustavljena sa vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL). Nakon mešanja od 10 minuta, organski sloj je odvojen, a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(25 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom heksani/etil acetat kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (1,18 g, 51% prinos).

Korak-9: (R)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinoksalin-2(1H)-on (II-12).

[0236]

[0237] U jedinjenje (R)-N-((R)-1-(7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1,29 g, 3,46 mmol) u CH3CN (100 mL) dodat je kap po kap jodotrimetilsilan (3,46 g, 17,3 mmol) na 0 °C. Smeša je zatim refluktovana tokom 2 sata, ohlađena do sobne temperature, i zaustavljena sa MeOH (10 mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je prečišćen hromatografijom na C-18 reverznoj fazi na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom vode (0,1% TFA)/CH3CN (0,1% TFA) kao eluenta da se dobije jedinjenje II-12 (1,22 g, 95% prinos) kao TFA so.

Primer 15 --Intermedijer 11-13: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinoksalin-2(1H)-on

4

Korak-1: (S,E)-N-((7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0239]

[0240] U jedinjenje H (2,31 g, 5,2 mmol) u DCE (300 mL) na sobnoj temperaturi je dodat (S)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,52 g, 20,8 mmol) i CuSO4(5,0 g, 31,2 mmol). Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 60 °C i mešana tokom 4 sata. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i zaustavljena sa 50 mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Nakon mešanja od 10 minuta, smeša je ceđena kroz sloj Celite®. Filtrat je ekstrahovan sa CH2Cl2(50 mL X 3), osušen (Na2SO4), koncentrovan, i prečišćen hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom heksani/etil acetat kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (2,62 g, 78% prinos).

Korak-2: (S)-N-((S)-1-(7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0241]

[0242] U jedinjenje (S,E)-N-((7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,62 g, 8,0 mmol) u CH2Cl2(150 mL) dodat je kap po kap metil magnezijum hlorid (MeMgCl) (3M u THF-u, 4,0 mL) na -78 °C. Dobijena smeša je mešana na -78 °C tokom 2 sata a zatim je zaustavljena sa vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL). Nakon mešanja od 10 minuta, organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(25 mL x 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni hromatografijom na koloni na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom heksani/etil acetat kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (1,69 g, 62%).

Korak-14: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinoksalin-2(1H)-on (II-13).

[0244] U jedinjenje (S)-N-((S)-1-(7-hloro-3-metoksihinoksalin-2-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid (350 mg, 1,03 mmol) u CH3CN (40 mL) dodat je kap po kap jodotrimetilsilan (1,03 g, 5,15 mmol) na 0 °C . Smeša je zatim refluktovana tokom 2 sata. Nakon što je ohlađena do sobne temperature, reakcija je zaustavljena sa MeOH (2 mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na reverznoj C-18 na ISCO® hromatografskom sistemu upotrebom vode (0,1% TFA)/CH3CN (0,1% TFA) kao eluenta da se dobije naslovno jedinjenje (267 mg, 79% prinos) kao TFA so.

Primer 16 --Intermedijer II-14: (3-((S)-1-aminoetil)-6-hloro-7-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)hinolin-2(1H)-on

[0245]

Korak-1: terc-butil (3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-4-hlorofenil)karbamat.

[0246]

1

[0247] Rastvor 5-amino-2-hlorofenola (10,00 g, 69,7 mmol) u THF-u (350 mL) je tretiran sa di-tercbutil dikarbonatom (20 mL, 86 mmol) i mešan na refluksu preko noći. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom da se obezbedi braon ulje. Ulje je zatim rastvoreno u EtOAc (300 mL), oprano sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, i koncentrovanim rastvorom soli (300 mL svaki), osušeno (Na2SO4), proceđeno, i upareno pod smanjenim pritiskom da obezbedi 21,01 g nečistog tercbutil (4-hloro-3-hidroksifenil)karbamata kao braon ulja (LCMS: m/z 244 [M+H]<+>). Ovaj materijal je rastvoren u DMF (130 mL) i ohlađen na ledenom kupatilu. Zatim je polako dodat imidazol (11,74 g, 172 mmol) (preko ∼10 minuta). Dodat je rastvor TBDMS-Cl (14,98 g, 99 mmol) u DMF (45 mL) (preko ∼2 minuta). Ledeno kupatilo je uklonjeno i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, rastvor je razblažen sa EtOAc (1L) i opran sa vodom (2 x 600 mL), polu zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(600 mL), polu zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (600 mL), zasićenim NaHCO3(600 mL), i koncentrovanim rastvorom soli (600 mL). Organski sloj je osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 28,00 g braon čvrste supstance. Uzorak je rastvoren u EtOAc, dodat je silikagel (33 g), i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je podeljen u dve gomile, svaka je prečišćena hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu upotrebom 330 g silikagel kolona, eluirana sa 0 do 5% EtOAc u heksanima i sa izokratskim eluiranjem na 4.5% ili 5% EtOAc kada je proizvod eluiran. Frakcije proizvoda su sakupljene i obrzbeđeno je 21,76 g terc-butil (3-((tercbutildimetil-silil)oksi)-4-hlorofenil)karbamata (21,76 g, 60,8 mmol, 88% prinos) kao čvrsta supstanca boje breskve.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.43 (s, 1 H), 7.23-7.28 (m, 1 H), 7.22 (d, J= 2.35 Hz, 1 H), 7.09-7.16 (m, 1 H), 1.46 (s, 9 H), 0.99 (s, 9 H), 0.21 (s, 6 H). LCMS (Metod 1): m/z 358 [M+H]<+>.

Korak-2: terc-butil (4-hloro-2-formil-5-hidroksifenil)karbamat (J).

[0248]

[0249] U sušnici osušen 3-grli balon sa okruglim dnom od 500 mL je napunjen sa terc-butil (3-((tercbutildimetilsilil)oksi)-4-hlorofenil)karbamatom (10 g, 27,9 mmol). U sušnici osušen dodatni levak je pričvršćen, i sistem je ispran sa azotom. Etil etar (113 mL) je dodat pomoću šprica. Nastali žuti rastvor je ohlađen na acetonitril/suvi led kupatilu (na približno -40 °C). Zatim je dodat t-BuLi (1,7 M u pentanu, 40 mL, 68,0 mmol) u dodatni levak pomoću kanile. Rastvor t-BuLi je dodat u kapima u rastvor etra (preko ∼10 minuta), za koje vreme je rastvor etra postepeno postao zamućen sa talogom. Smeša je mešana na oko -40 °C tokom 2,5 sata, zatim je DMF (11 mL) dodat u kapima pomoću šprica (preko ∼10 minuta), i za to vreme je čvrsta supstanca ponovo prešla u rastvor. Acetonitril / suvi led kupatilo je zamenjeno sa ledenim kupatilom, i žuti rastvor je mešan na 0 °C tokom 1,75 sati. Reakcija je onda zaustavljena dodavanjem kap po kap vode (25 mL), dovodeći do obrazovanja narandžastog taloga. Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je razblažen sa vodom (125 mL), što dovodi do rastvaranja taloga. Smeša je mućkana, i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je zakišeljen na pH ∼4-5 sa AcOH. Nastali talog je ekstrahovan sa EtOAc (200 mL), opran sa vodom (2 x

2

100 mL), osušen (Na2SO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi terc-butil (4-hloro-2-formil-5-hidroksifenil)karbamat kao žutu čvrstu supstancu (4,79 g, 17,63 mmol, 63% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.72 (s, 1 H), 10.50 (s, 1 H), 9.68 (br s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 7.88 -7.91 (m, 1 H), 1.48 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 216 (M-56, gubitak t-Bu).

Korak-3: (R)-terc-butil (4-hloro-2-formil-5-(1-(piridin-2-il)etoksi)fenil)karbamat.

[0250]

[0251] Smeša (S)-1-(piridin-2-il)etanola (454,3 mg, 3,69 mmol), terc-butil (4-hloro-2-formil-5-hidroksifenil)karbamata (1 g, 3,68 mmol) i trifenilfosfina (1,158 g, 4,42 mmol) je stavljena u balon sa okruglim dnom od 100 mL u atmosferi azota. THF (40 mL) je dodat pomoću šprica. Nastal žuti rastvor je ohlađen na ledenom kupatilu a zatim DIAD (0,86 mL, 4,42 mmol) dodat u kapima. Ledeno kupatilo je uklonjeno i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, silikagel je dodat i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Uzorak je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (upotrebom kolone sa 50 g silikagela, eluiran sa 0 do 13% EtOAc u heksanima) da obezbedi 473,7 mg belog čvrstog jedinjenja. LCMS i NMR su u saglasnosti sa (R)-terc-butil (4-hloro-2-formil-5-(1-(piridin-2-il)etoksi)fenil)karbamatom kontaminiranim sa početnim fenolnim materijalom (∼5:1 proizvod prema početnom materijalu prema NMR). Materijal je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.42 (s, 1 H), 9.73 (s, 1 H), 8.54-8.60 (m, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 7.82 (ddd, J = 7.80, 7.80, 1.80 Hz, 1 H), 7.44 (br d, J = 7.90 Hz, 1 H), 7.30-7.36 (m, 1 H), 5.64 (q, J = 6.35 Hz, 1 H), 1.67 (d, J = 6.45 Hz, 3 H), 1.46 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 377 [M+H]<+>.

Korak-4: (S)-etil 3-((terc-butoksikarbonil)amino)butanoat (K).

[0252]

[0253] Suspenzija (S)-3-aminobutanove kiseline (6,25 g, 60,6 mmol) u EtOH (27,5 mL) je ohlađena na ledenom kupatilu. Tionil hlorid (7,5 mL, 103 mmol) je zatim dodat u kapima preko 40 minuta, tokom kojeg vremena je amino kiselina prešla u rastvor. Ledeno kupatilo je pušteno da se otopi, a rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je uparena pod smanjenim pritiskom, i ostatak jr mršan sa još EtOH (60 mL) i ponovo uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi ulje. Ulje je rastvoreno u DCM (55 mL) i ohlađeno na ledenom kupatilu. TEA (25 mL, 179 mmol) je dodata u kapima preko 15 minuta sa mešanjem, što dovodi do nastanka mlečne smeše. Zatim je dodat di-tercbutil dikarbonat (17 mL, 73,2 mmol). Ledeno kupatilo je pušteno da se otopi, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom pet dana. Dobijena smeša je ceđena kroz Celite® 545 na Bihnerovom levku, i filter kolač je opran sa DCM (50 mL). Filtrat je opran sa zasićenim vodenim rastvorom limunske kiseline (20 mL) i vode (2 x 100 mL), osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi naslovno jedinjenje kao bistro ulje.<1>H NMR je u saglasnosti sa (S)-etil 3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoatom (13,47 g, 58,2 mmol, 96% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ ppm 4.95 (br s, 1 H), 4.15 (q, J = 7.13, 2 H), 3.98-4.10 (m, 1 H), 2.40-2.57 (m, 2 H), 1.44 (s, 9 H), 1.27 (t, J = 7.18, 3 H), 1.22 (d, J = 6.74, Hz, 3 H).

Korak-5 & 6: 3-((S)-1-aminoetil)-6-hloro-7-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (11-14).

[0254]

[0255] U sušnici-osušen balon sa okruglim dnom od 25 mL i mešalica su stavljeni u atmosferu azota. Zatim su pomoću šprica dodati THF (2,25 mL) i diizopropilamin (0,27 mL, 1,894 mmol). Rastvor je ohlađen upotrebom suvi led/aceton kupke (-78 °C) i n-BuLi (1,6 M u heksanu, 1,15 mL, 1,84 mmol) dodat u kapima preko 5 minuta. Nakon mešanja od 10 minuta, rastvor (S)-etil 3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoata K (115,3 mg, 0,499 mmol) u THF-u (0.5 mL) dodat je u kapima (preko 5 minuta). Rastvor je mešan tokom 75 minuta na -78 °C i onda je dodat rastvor (R)-terc-butil (4-hloro-2-formil-5-(1-(piridin-2-il)etoksi)fenil)karbamata (188,7 mg, 0,501 mmol) u THF-u (1,0 mL) u kapima pomoću šprica. Reakcioni rastvor postao je žut kada je dodat aldehid. Reakcija je mešana na -78 °C tokom 13 minuta i onda zaustavljena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (2,5 mL). Smeša je podeljena između EtOAc i vode (10 mL svaki). Organski sloj je osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi nečistu smešu izomera(3S)-etil 3-((tercbutoksikarbonil)amino)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-5-hloro-4-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)fenil) (hidroksi)metil) butanoata kao žuto ulje (344,8 mg; LCMS: m/z 608 [M+H]<+>). Sirov materijal (334 mg) je rastvoren u 1,4-dioksanu (5 mL), tretiran sa 12M vodenog rastvora HCl (0,125 mL), i mešan na 110 °C 90 minuta, tokom kojeg vremena je istaložen crveni materijal. Smeša je ostavljena da se ohladi i supernatant je dekantovan i odbačen. Heptan (∼4 mL) je dodat u crveni talog koji je ostao u okruglom dnu i onda uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 161,8 mg crvene čvrste supstance. Materijal je triturisan sa<i>PrOH (5 mL) i nastali talog je sakupljen na Hiršovom levku i opran sa<i>PrOH (1 mL) i etil etrom (∼20 mL) da obezbedi 3-((S)-1-aminoetil)-6-hloro-7-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (104,2 mg, 0.,274 mmol, 55% prinos) kao crvena čvrsta supstanca, nečista ali pogodna za korišćenje kao takva.<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 8.81-8.87 (m, 1 H), 8.55-8.64 (m, 1 H), 8.18 (d, J = 7.92 Hz, 1 H), 7.96-8.04 (m, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 6.99 (s, 1 H), 5.98 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 4.48 (q, J = 6.84 Hz, 1 H), 1.86 (d, J = 6.45 Hz, 3 H), 1.64 (d, J = 6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 344 [M+H]<+>.

Primer 17 --Intermedijer 11-15: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)hinolin-2(1H)on

[0256]

4

Korak-1: terc-butil (4-hloro-5-(ciklopropilmetoksi)-2-formilfenil)karbamat.

[0257]

[0258] Smeša ciklopropilmetanola (0,145 mL, 1,838 mmol), terc-butil (4-hloro-2-formil-5-hidroksifenil)karbamata J (499,4 mg, 1,838 mmol) i trifenilfosfina (579,4 mg, 2,209 mmol) je stavljena u balon sa okruglim dnom od 100 mL u atmosferi azota a onda je dodat THF (20 mL) pomoću šprica. Nastali narandžasti rastvor je ohlađen na ledenom kupatilu i dodat je DIAD (0,43 mL, 2,184 mmol) u kapima. Ledeno kupatilo je uklonjeno i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Kada je LCMS pokazao da je reakcija završena, silikagel je dodat i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Uzorak je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu upotrebom 25 g silikagel kolone eluiran sa 0 do 3% EtOAc u heksanima da obezbedi terc-butil (4-hloro-5-(ciklopropilmetoksi)-2-formilfenil)karbamat (410,6 mg, 1,260 mmol, 68,6% prinos) kao žućkasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.57 (s, 1 H), 9.75 (s, 1 H), 7.95-8.00 (m, 2 H), 4.02 (d, J = 7.04 Hz, 2 H), 1.49 (s, 9 H), 1.23-1.31 (m, 1 H), 0.57-0.66 (m, 2 H), 0.38-0.46 (m, 2 H). LCMS (Metod 1): m/z 270 (gubitak t-Bu).

Korak-2 & 3: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (11-15).

[0259]

[0260] U sušnici osušen balon sa okruglim dnom od 25 mL i mešalica su stavljeni u atmosferu azota i THF (5,6 mL) i diizopropilamin (0,53 mL, 3,72 mmol) su dodati špricem. Rastvor je ohlađen na suvi led/aceton kupatilu (na -78 °C) i dodat je u kapima n-BuLi (1,6 M u heksanu, 2,35 mL, 3,76 mmol) dodata u kapima u periodu od minuta. Nakon mešanja od 15 minuta, rastvor (S)-etil 3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoata K (286 mg, 1,238 mmol) u THF-u (1,25 mL) je dodat u kapima (preko 5 minuta). Rastvor je mešan 80 minuta na -78 °C i rastvor terc-butil (4-hloro-5-(ciklopropilmetoksi)-2-formilfenil)karbamata (403,2 mg, 1,238 mmol) u THF-u (2,5 mL) je dodat u kapima pomoću šprica. Reakcioni rastvor postao je žut kada je dodat aldehid. Reakcija je mešana na -78 °C tokom 12 minuta a onda zaustavljena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (6 mL). Smeša je podeljena između EtOAc i vode (25 mL svaka) i organski sloj je osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 724,5 g žućkastog ulja. Materijal je rastvoren u 1,4-dioksanu (12,5 mL), tretiran sa 12M HCl (vodeni; 0,32 mL), i mešan na 110 °C 70 minuta tokom kojeg vremena je rastvor postao gust sa ružičastim talogom. Uzorak je ostavljen da se ohladi a rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 1,13 g vlaknaste crvene čvrste supstance. Materijal je triturisan sa i-PrOH (15 mL) i nastali talog je sakupljen na Bihnerovom levku i oprana sa i-PrOH (20 mL) i etil etrom (∼60 mL) da obezbedi (S)-3-(1-aminoetil)6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (146,1 mg, 0,444 mmol, 36 % prinos) kao papirasta bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.13 (br s, 1 H), 8.21 (br s, 3 H), 7.98 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 6.98 (s, 1 H), 4.32-4.46 (m, 1 H), 3.96 (d, J = 6.40 Hz, 2 H), 1.51 (d, J = 6.70 Hz, 3 H), 1.21-1.35 (m, 1 H), 0.55-0.68 (m, 2 H), 0.35-0.46 (m, 2 H). LCMS (Metod 1): m/z 293 [M+H]<+>.

Primer 18 --Intermedijer 11-16: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil) metoksi)hinolin-2(1H)-on

[0261]

Korak-1: N-(4-hloro-3-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)fenil)acetamid.

[0262]

[0263] Rastvor 5-amino-2-hlorofenola (3 g, 20,90 mmol) (3,3-difluorociklobutil)metanola (2.66 g, 21,78 mmol) u THF-u (375 mL) je stavljen u atmosferu azota i tretiran sa DEAD (3,90 mL, 24,63 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Kada je LCMS naznačio adekvatnu progresiju reakcije, u rastvor je dodat silikagel i uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (upotrebo 340 g silikagel kolone eluiran sa 0 do 100% EtOAc u heksanima sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana) da se obezbedi 3,89 g naslovno jedinjenje kao braon tečnost. LCMS je u saglasnosti sa nečistim 4-hloro-3-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)anilinom (m/z 248 [M+H]<+>). Uzorak je rastvoren u EtOAc (80 mL) i tretiran sa DIEA (3,00 mL, 17,18 mmol) i Ac2O (1,60 mL, 16,96 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je zatim opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli (50 mL svaki), osušen (Na2SO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (upotrebom 50 g silikagel kolone, eluiran sa 0 do 50% EtOAc u heksanima sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina eluirana) da obezbedi 3,16 g naslovno jedinjenje kao svetlo braon ulje, koje stajanjem polako kristališe. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(4-hloro-3-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)fenil)acetamidom (3,16 g, 10,91 mmol, 52% prinos) U NMR-u jedan proton je prekriven signalom rastvarača.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.91 (s, 1 H), 8.54-8.67 (m, 1 H), 7.80-7.95 (m, 2 H), 7.68 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 7.30 Hz, 1 H), 7.34-7.44 (m, 1 H), 7.29 (d, J = 9.10 Hz, 1 H), 7.13-7.22 (m, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 6.31 (br s, 1 H), 6.22 (d, J = 7.90 Hz, 1 H), 5.30 (s, 2 H), 4.10-4.26 (m, 2 H), 3.78 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 290 [M+H]<+>.

Korak-2: 2,6-dihloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-3-karbaldehid.

[0264]

[0265] Epruveta je zatvorena sa pregradom i stavljena u atmosferu azota. DMF (2,15 mL, 27,8 mmol) je zatim dodat pomoću šprica i dobijena reakciona smeša je ohlađena na ledenom kupatilu. POCl3(8,40 mL, 90 mmol) je dodat u kapima pomoću šprica (10 minuta) tokom kojeg vremena je istaložen beli materijal. Rastvor je zatim pušten da se zagreje do sobne temperature preko 10 minuta i smeša je tretirana sa N-(4-hloro-3-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)fenil)acetamidom (2,44 g, 8,42 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom dva dana. Dobijeni gusti crveni rastvor je pipetiran na led što je dovelo da nastanka žutog taloga. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku, opran sa vodom (∼500 mL), i osušen da se obezbedi 2,38 g naslovno jedinjenje kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 2,6-dihloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-3-karbaldehidom (2,38 g, 6,88 mmol, 82% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.31-10.36 (m, 1 H), 8.88 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 4.37 (d, J = 4.69 Hz, 2 H), 2.53-2.84 (m, 5 H). LCMS (Metod 1): m/z 346 [M+H]<+>.

Korak-3: 6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid.

[0266]

[0267] Rastvor 2,6-dihloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-3-karbaldehida (2,66 g, 7,68 mmol) u koncentrovanoj HCl (75 mL) je mešan na 100 °C tokom jednog dana za koje vreme je na površini balona formirana crvena kora. Smeša je razblažena sa vodom (800 mL), dovodeći do stvaranja crvenog taloga. Smeša je ostavljena da stoji na sobnoj temperaturi tokom 4 dana. Talog je sakupljen na Bihnerovom levku, opran sa vodom (1 L), i osušen pod vakuumom na 50 °C da obezbedi 2,16 g naslovnog jedinjenja kao crvena čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehidom (2,16 g, 6,59 mmol, 86% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.21 (s, 1 H), 10.16-10.18 (m, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 6.94 (s, 1 H), 4.20 (d, J = 4.10 Hz, 2 H), 2.54-2.80 (m, 5 H). LCMS (Metod 1): m/z 328 [M+H]<+>.

Korak-4: (E)-N-((6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metilen)-2metilpropan-2-sulfinamid.

[0268]

[0269] Smeša 6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehida (499,6 mg, 1,525 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamida (222,1 mg, 1,832 mmol) je stavljena u balon sa okruglim dnom od 25 mL u atmosferi azota. THF (3,0 mL) i titanijum (IV) izopropoksid (Ti(O<i>Pr)4) (0,90 mL, 3,07 mmol) su dodati pomoću šprica, i suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je LCMS naznačio da se bliži završetak reakcije, reakcija je zaustavljena dodavanjem u kapima zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (2 mL). Materijal je zatim triturisan sa EtOAc (100 mL) i nastali talog je ceđen kroz Celite®. Filter kolač je opran sa EtOAc (50 mL), tretiran ultra zvukom u EtOAc tokom 15 minuta i ceđen upotrebom Bihnerovog levka. Filtrati su spojeni i oprani sa koncentrovanim rastvorom soli (100 mL), osušeni (Na2SO4), proceđeni, i upareni pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 413 mg naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa (E)-N-((6-hloro-7-((3,3-difluor-ociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin -3-il)metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (413 mg, 0,958 mmol, 62,9% prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.21 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 4.19 (d, J = 4.40 Hz, 2 H), 2.55-2.79 (m, 5 H), 1.19 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 431 [M+H]<+>.

Korak-5: N-(1-(6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.

[0270]

[0271] (E)-N-((6-Hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il) metilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid (411,3 mg, 0,955 mmol) je stavljen u balon sa okruglim dnom od 100 mL u atmosferi azota. DCM (7,6 mL) je dodat, i suspenzija je ohlađena na suvi led/hloroform kupatilu (na približno. -60 °C). Metilmagnezijum bromid (MeMgBr, 3M u etru) (0,95 mL, 2,85 mmol) je dodat u kapima. Hladno kupatilo je zatim ostavljeno da se zagreje do sobne temperature preko noći, pri čemu je nastao narandžasti rastvor. Kada je LCMS pokazao završetak reakcije, rastvor je ohlađen na ledenom kupatilu i tretiran u kapima sa vodom (5 mL), dovodeće do taloženja. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL) i oprana sa vodom (100 mL). Silikagel je dodat u organski sloj i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom na koloni na Biotage® MPLC hromatografskom sistemu (eluiran sa 0 do 5% MeOH u DCM sa izokratskim eluiranjem pri 3,2% MeOH) da obezbedi 345,5 mg naslovnog jedinjenja kao braon krta pena. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa N-(1-(6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamidom (345,5 mg, 0,773 mmol, 81% prinos). NMR pokazuje ∼1:1 smešu dijastereomera. LCMS (Metod 1): m/z 447 [M+H]<+>.

Korak-6: 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-16).

[0272]

[0273] Rastvor N-(1-(6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (342,7 mg, 0,767 mmol) u MeOH (7,0 mL) je ohlađen na ledenom kupatilu i tretiran u kapima sa 4M HCl u 1,4-dioksanu (4 mL). Rastvor je zatim mešan tokom 25 minuta. Rastvarači su upareni pod smanjenim pritiskom na sobnoj temperaturi. Ostatak je triturisan sa 20 mL etil etra i nastali talog je sakupljen na Hiršovom levku i opran sa još etil etra da obezbedi 271,4 mg ružičaste čvrste supstance. LCMS i<1>H NMR su u saglasnosti sa 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohloridom (271,4 mg, 0,716 mmol, 93% prinos).<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4): δ ppm 7.95 (s, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 6.96 (s, 1 H), 4.48-4.55 (m, 1 H), 4.20 (d, J = 4.10 Hz, 2 H), 2.56 -2.79 (m, 5 H), 1.68 (d, J = 7.04 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 343 [M+H]<+>.

Primer 19 --Intermedijer 11-17: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-8-fluorohinolin-2(1H)-on

[0274]

100°C

Korak-1: terc-butil (4-hloro-2-fluorofenil)karbamat.

[0275]

[0276] Rastvor 4-hloro-2-fluoroanilina (2 g, 13,74 mmol) i di-terc-butil dikarbonata (6,4 mL, 27,6 mmol) u 1,4-dioksanu (50 mL) je mešan na refluksu tokom 2 dana. Rastvarač je zatim uparen. Nastalo ulje je razblaženo sa MeOH, vodom, i vodenim rastvorom amonijum hidroksida (10 mL svaki) i snažno mešano tokom 45 minuta. Niži organski sloj je odvojen. Organski materijal je razblažen sa EtOAc (50 mL), i opran sa vodom (50 mL), 3,6% vodenim rastvorom HCl (2 x 50 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), i onda ponovo sa vodom (2 x 50 mL). Organski sloj je osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi terc-butil (4-hloro-2-fluorofenil)karbamat (3,0011 g, 12,22 mmol, 89% prinos) kao crvenkasta tečnost koja očvršćava stajanjem.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.12 (s, 1 H), 7.63 (t, J = 8.65 Hz, 1 H), 7.42 (dd, J = 10.85, 2.35 Hz, 1 H), 7.18-7.24 (m, 1 H), 1.45 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 246 [M+H]<+>.

Korak-2: terc-butil (4-hloro-2-fluoro-6-formilfenil)karbamat.

[0277]

[0278] u sušnici osušen 3-grli balon sa okruglim dnom od 500 mL je spojen sa u sušnici-osušenim levkom i stavljen u atmosferi azota. Pomoću šprica su dodati terc-butil (4-hloro-2-fluorofenil) karbamat (5,44 g, 22,14 mmol) i etil etar (91 mL). Bistar rastvor je ohlađen na acetonitrile/suvi led kupatilo (na približno -40 °C). Dodat je terc-butillitijum (1,7M u pentanu, 33 mL, 22,14 mmol) u dodati levak pomoću kanile. Rastvor t-BuLi je dodat u kapima u rastvor etra (preko ∼10 minuta), za koje vreme je rastvor etra počeo da postaje narandžast. Rastvor je mešan na oko -40 °C tokom 2 sata, za koje vreme je postepeno postao narandžastiji. DMF (8,7 mL, 112 mmol) je dodat u kapima (preko ∼10 minuta), što je dovelo do taloženja žute čvrste supstance. MeCN/suvi led kupatilo je zamenjeno sa ledenim kupatilom i smeša je mešana tokom dodatnih 2 sata. Reakcija je zatim zaustavljena dodavanjem vode u kapima (20 mL), nastala je braon smeša i ledeno kupatilo je uklonjeno. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL), oprana sa vodom (2 x 100 mL), osušena (Na2SO4), proceđena, i uparena pod smanjenim pritiskom da obezbedi 5,45 g uljaste crne čvrste supstance. Materijal je triturisan sa heksanima (50 mL), sakupljen na Bihnerovom levku i opran sa još heksana da obezbedi 2,73 g terc-butil (4-hloro-2-fluoro-6-formilfenil)karbamata kao žutog praha. Filtrat je uparen pod smanjenim pritiskom, ostatak je triturisan u heksanima (∼15 mL), i nastala žuta čvrsta supstanca je sakupljena na Hiršovom levku da obezbedi drugi prinos naslovnog jedinjenja (0,66 g). Ukupno 3,39 g (12,4 mmol, 56% prinos) terc-butil (4-hloro-2-fluoro-6-formilfenil)karbamata je oporavljeno.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.93 (d, J = 0.88 Hz, 1 H), 9.47 (s, 1 H), 7.81-7.90 (m, 1 H), 7.55-7.61 (m, 1 H), 1.44 (s, 9 H). LCMS (Metod 1): m/z 296 [M+Na].

Koraks-3 & 4: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-8-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (II-17).

[0279]

[0280] U sušnici osušen balon sa okruglim dnom od 200 mL i mešalica su stavljeni u atmosferu azota. THF (17 mL) i diizopropilamin (1,59 mL, 11,16 mmol) su dodati špricem. Nastali rastvor je ohlađen na kupatilu suvi led/aceton (na približno -78 °C) a onda je n-butillitijum (1,6M u heksanu, 7,1 mL, 11,36 mmol) dodat u kapima u periodu od 5 minuta. Nakon mešanja od 15 minuta, rastvor (S)-etil 3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoata K (860,7 mg, 3,72 mmol) u THF-u (3,75 mL) je dodat u kapima tokom 5 minuta. Rastvor je mešan 80 minuta na -78 °C, i zatim je dodat u kapima pomoću šprica rastvor terc-butil (4-hloro-2-fluoro-6-formilfenil)karbamata (1016,4 mg, 3,71 mmol) u THF-u (7,5 mL). Reakcija je mešana na -78 °C tokom narednih 22 minuta i onda zaustavljena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (17 mL). Smeša je podeljena između EtOAc i vode (100 mL svaki). Organski sloj je osušen (MgSO4), proceđen, i uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 1,88 g naslovnog jedinjenja kao narandžastu gumu. Materijal je rastvoren u 1,4-dioksanu (38 mL), tretiran sa 12M vodenog rastvora HCl (0,96 mL), i mešan na 110 °C 50 minuta. Uzorak je zatim ostavljen da se ohladi. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom da obezbedi 1,24 g crvene čvrste supstance. Materijal je triturisan u IPA (25 mL), sakupljen na Hiršovom levku i opran redom sa IPA (5 mL) i etil etrom (∼20 mL) da obezbedi (S)-3-(1-aminoetil)6-hloro-8-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorid (370,4 mg, 1,337 mmol, 36% prinos) kao crvenu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.41 (s, 1 H), 8.33 (br s, 3 H), 8.10 (s, 1 H), 7.67-7.76 (m, 2 H), 4.38-4.53 (m, 1 H), 1.52 (d, J = 7.04 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): m/z 241 [M+H]<+>.

Primer 20 --Intermedijer 11-18: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-izopropoksi hinolin-2(1H)-on

[0281]

1

Toluen, THF

Korak-1: 4-hloro-3-izopropoksianilin

[0282]

[0283] Smeša 5-amino-2-hlorofenola (20 g, 139 mmol) i 2-bromopropana (26 mL, 278 mmol) i K2CO3(38,4 g, 278 mmol) u CH3CN (300 mL) je refluktovana 24 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i i čvrsta supstanca je oprana sa etil acetatom (150 mL). Filtrat je koncentrovan a talog je prečišćen na ISCO (SiO2: Heks/EtOAc 0 do 40%) da se dobije naslovno jedinjenje, 4-Hloro-3-izopropoksianilin (22,6 g, 87%).

Korak 2: N-(4-hloro-3-izopropoksifenil)acetamid

[0284]

[0285] U smešu 4-hloro-3-izopropoksianilina (22,5 g, 121 mmol) u CH2Cl2(200 mL) je dodat DIPEA (42 mL, 242 mmol) nakon čega sledi anhidrid sirćetne kiseline (17 mL, 181 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Po završetku reakcije, dodata je voda (100 mL) i mešano je tokom 10 minuta. Organski sloj je odvojen, opran sa IN HCl (aq, 200 mL), koncentrovanim rastvorom soli (150 mL) i osušen preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je ceđen i koncentrovan. Sirov talog je prekristalizovan iz CH2Cl2/heksani da se dobije željeno jedinjenje N-(4Hloro-3-izopropoksifenil) acetamid (19,6 g, 71%).

2

Korak-3: 2,6-dihloro-7-izopropoksihinolin-3-karbaldehid

[0286]

[0287] DMF (15 mL, 193,6 mmol) je dodat u zatopljenu epruvetu od 350 mL i ohlađen na 0 °C. U ovaj rastvor je dodat fosfor oksihlorid (60,1 mL, 645,6 mmol) u kapima za vreme 40-50 min. Dobijena smeša je dovedena do sobne temperature nakon čega sledi dodatak N-(4-hloro-3-izopropoksifenil)acetamida (14,7 g, 64,5 mmol) u porcijama i zagrevanje na 80 °C preko noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i pažljivo sipana na zdrobljeni led. Žuti talog je proceđen, opran sa vodom i osušen preko P2O5preko noći da se dobije 2,6-dihloro-7-izopropoksihinolin-3-karbaldehid kao žuta čvrsta supstanca (17,5 g, 95%).

Korak-4: 6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-karbaldehid

[0288]

[0289] U 2,6-dihloro-7-izopropoksihinolin-3-karbaldehid (5,8 g, 20,4 mmol) u ko-rastvaraču MeOH:THF (1:1, 100 mL) dodat je NaOMe (2,2 g, 40,8 mmol) u porcijama na rt. Reakciona smeša je refluktovana 3 h. Nakon hlađenja do rt, reakcija je zaustavljena sa vodenim rastvorom NH4’Cl (20 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (25 mL x 3). Spojen organski sloj je osušen (Na2SO4), koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom sa Heksan/EA (3:1) da se dobije 6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-karbaldehid (5,07 g, 89%) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak-5: 1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etanol

[0290]

[0291] U 6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-karbaldehid (5,07 g, 18,17 mmol) u THF-u (100 mL) na -78 °C dodat je rastvor MeMgCl u THF-u (3 M, 9,1 mL, 27,2 mmol) u kapima. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi (rt) tokom 3 h i onda zaustavljena sa vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL). Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (25 mL X 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani, i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksan/EA (3:1) da se dobije jedinjenje 1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etanol (4,06 g, 76%).

Korak-6: 1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etanon

[0292]

[0293] U 1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etanol (4,06 g, 13,8 mmol) u CH2Cl2(50 mL) na rt je u porcijama dodat DMP (7,0 g, 16,5 mmol). Reakcija je mešana na rt tokom 2 h, a onda je zaustavljena sa vodenim rastvorom NaHCO3i Na2S2O3. Nakon mešanja od 15 min, oba sloja su postala bistra. Organski sloj je odvojen a vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2(30 mL X 2). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksan/EA (4:1) da se dobije 1-(6-hloro-7-izopropoksi2-metoksihinolin-3-il)etanon (3,67 g, 72%) kao bela čvrsta supstanca.

Korak-7: (R,E)-N-(1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etilidene)-2-metil propan-2-sulfinamid

[0294]

[0295] U 1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etanon (3,67 g, 12,5 mmol) u THF/toluen (20 mL : 400 mL) na rt je dodat (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (3,03 g, 25 mmol,) i Ti(O<i>Pr)4(11 mL, 37,5 mmol,). Reakcija je refluktovana sa Dean-Stark aparaturom. Nakon što je reakcija refluktovana 4 h a 150 mL rastvarača je uklonjeno, reakcija je ohlađena do rt. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i 50 mL EtOAc je dodato u ostatak, nakon čega sledi dodatak 20 mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Nakon mešanja od 10 min, čvrsto jedinjenje je uklonjeno kroz sloj celita. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (200 mL X 2), osušen (Na2SO4), koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silikagelu sa heksan/EA (1:1) da se dobije naslovno jedinjenje (4,32 g, 87%).

Korak-8: (R)-N-((S)-1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid

[0296]

[0297] U (R,E)-N-(1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etiliden)-2-metil propan-2-sulfinamid (4,32 g, 10,9 mmol) u THF-u (100 mL) na -78 °C, dodat je 1 M L-selektrida (14,2 mL, 14,2 mmol) u THF-u u kapima. Reakciona smeša je zagrejana do rt i mešana tokom 3 h. Reakcija je zaustavljena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (30 mL) i onda ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silikagelu sa heksan/EA (1:1) da se dobije željeno jedinjenje (3,58 g, 82%).

Korak-9: (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-izopropoksihinolin-2(1H)-one hidrohlorid so (II-18).

4

[0299] U (R)-N-((S)-1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-metoksihinolin-3-il)etil)-2-metil propan-2-sulfinamid (3,58 g, 8,99 mmol) u dioksanu (50 mL) dodat je 2 N HCl (50 mL) na rt. Reakcija je refluktovana 3 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je osušen pod vakuumom da se dobije sirov II-18, koji je dalje prečišćen triturisanjem (CH2Cl2/MeOH/heksan) da se dobije čisto jedinjenje II-18 (2,44 g, 86%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.10 (s, 1H), 8.29 (br, s, 3H), 7.98 (s, 1H), 7.83 (s, 1 H), 7.08 (s, 1H), 4.66 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 1.52 (d, J = 6.87 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 6.03 Hz, 6H). LCMS (Metod 3, APCI): RT = 8,06 min, m/z = 281.1 [M+H]<+>.

Primer 21 --Intermedijer III-1: 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril

[0300]

Korak-1: 2-cijano-5-fluoropiridin 1-oksid.

[0301]

[0302] Rastvor 5-fluoropikolinonitril (7,27 g, 59,5 mmol) u CHCl3(60 mL) dodat je u kapima pomoću dodatnog levka u rastvor m-CPBA (<77%, 22,00 g, 98 mmol) u CHCl3160 mL). Rastvor je mešan na refluksu 4 dana, za koje je vreme LCMS pokazao ∼85% konverzije. Uzorak je ostavljen da se ohladi, a zatum je natrijum sulfit (12,4 g, 98 mmol) dodat i uzorak je mešan na sobnoj temperaturi tri sata, tokom kojeg je vremena rastvor postao gust sa belim talogom. Uzorak je razblažen sa DCM (300 mL) i ceđen na Bihnerovom levku, a filter kolač je opran sa DCM (∼400 mL). Beli materijal je prenet u filtrat. Filtratna smeša je oprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(400 mL), za koje je vreme talog prešao u rastvor. Organski sloj je opran sa vodom (300 mL), zatim osušen (MgSO4) i ceđen. Dodat je silikagel i smeša je uparena pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (340 g silikagel kolona) sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina spirana da obezbedi 2-cijano-5-fluoropiridin 1oksid (4,28 g, 31,0 mmol, 52 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.85 -8.93 (m, 1 H), 8.23 (dd, J=9.09, 6.74 Hz, 1 H), 7.53 -7.64 (m, 1 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,57 min., m/z 138.9 [M+H]<+>.

Korak 2: 6-cijano-3-fluoropiridin-2-il acetat

[0303]

[0304] Rastvor 2-cijano-5-fluoropiridin 1-oksida (4,28 g, 31,0 mmol) u anhidrid sirćetne kiseline (40 ml, 424 mmol) je zagrevan na refluksu (150 °C kupatilu) tri dana, za koje vreme je bistar rastvor postao taman. Uzorak je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u MeOH (30 mL) i mešan 1 sat. Silikagel je dodat irastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (100 g silikagel kolona) sa 0 do 23% EtOAc u heksanima da obezbedi 6-cijano-3-fluoropiridin-2-il acetat (3,32 g, 18,43 mmol, 60 % prinos) kao bistra tečnost koja hlađenjem očvršćava.<1>H NMR (300 MHz, HLOROFORM-d): δ ppm 7.65 -7.75 (m, 2 H), 2.42 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 1,54 min., m/z 138.8 (gubitak acetata) .

Korak 3: 5-fluoro-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril.

[0305]

[0306] Rastvor 6-cijano-3-fluoropiridin-2-il acetata (3,32 g, 18,43 mmol) u MeOH (40 ml) je tretiran sa kalijum karbonatom (5,10 g, 36,9 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi četiri sata. LCMS je za 2 sata pokazao da je reakcija završena. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u vodi (100 mL) i zakišeljen do pH ≤1 sa 1M HCl. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3x100 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni, i upareni pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 5-fluoro-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril (2,34 g, 16,94 mmol, 92 % prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.92 (br s, 1 H), 7.73 (br s, 1 H), 7.43 (br s, 1 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,70 min., m/z 138.9 [M+H]<+>.

Korak 4: 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (III-1)

[0307]

[0308] Smeša 5-fluoro-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila (2,31 g, 16,73 mmol) i kalijum karbonata (4,86 g, 35,2 mmol) u balon sa okruglim dnom od 200 mL je tretirana sa DMF (46 ml) i mešana 15 minuta. MeI (1,2 ml, 19,19 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 45 minuta. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pomešan sa vodom (150 mL) i ekstrahovan sa DCM (2x150 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (MgSO4), proceđeni, tretirani sa silikagelom, i upareni pod smanjenim pritiskom, zatim dalje upareni na 60 °C pod visokim vakuumom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC sa 0 do 35% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem na 16% EtOAc i 35% EtOAc dok je maksimalna količina spirana. Maksimalna količina koja je spirana sa 16% EtOAc bio je O-metilovani materijal i on je odbačen. Maksimalna količina koja je spirana sa 35% EtOAc dala je naslovno jedinjenje III-1 (1,70 g, 11,17 mmol, 67 % prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.53 (dd, J=9.38, 7.62 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=7.77, 4.84 Hz, 1 H), 3.60 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,94 min., m/z 152.9 [M+H]<+>.

Primer 22 --Intermedijer V-2: 5-amino-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril

[0309]

Korak-1: N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamid.

[0310] Rastvor 5-aminopikolinonitril (5,50 g, 46 mmol, 1 eq.) u 300 mL DCM je ohlađen na 0°C, i zatim tretiran sa TEA (20 mL, 144 mmol, 3,1 eq.) zatim dodavanjem u kapima anhidrida trifluorosirćetne kiseline (20 mL, 144 mmol, 3,1 eq.). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je sipana na led, i ekstrahovana sa DCM. Prečišćavanjem prolaskom kroz zapušač od silikagela (heksan/EtOAc, 75/25) obezbeđuje se N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamid (7,24 g, 73%) kao bela čvrsta supstanca. TLC: Heksan/EtOAc, 8/2.

Korak-2: N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamid-N-oksid.

[0311] Rastvor N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamida (7,24 g, 33,7 mmol, 1 eq.) u 270 mL CHCl3je ohlađen u ledenom kupatilu, zatim tretiran u kapima sa rastvorom mCPBA (7,68 g, 39 mmol, 1,15 eq.) u 65 mL CHCl3. Reakciona smeša je refluktovana 24 sata i onda sipana u H2O. Nakon mešanja sa 10% vodenog rastvora NaHSO3i NaHCO3, čvrsto jedinjenje je sakupljeno i isprano sa H2O, zatim CHCl3. Ovo obezbeđuje 1,86 g (24%) naslovnog jedinjenja kao bele čvrste supstance. Neizreagovan N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamid (4,70 g, 65%) je oporavljen ekstrakcijom filtrata, i prečišćavanjem hromatografijom na silikagelu (heksan/EtOAc, 75/25).

Korak-3: 5-amino-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril.

[0312] Suspenzija N-(6-cijanopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamid-N-oksida (0,81 g, 3,5 mmol, 1 eq.) u 10,5 mL THF-u je tretirana sa TEA (0,75 mL, 5,3 mmol, 1,5 eq.) zatim je dodavan u kapima anhidrid trifluorosirćetne kiseline (1,74 mL, 12,5 mmol, 3,5 eq.). Nakon mešanja preko noći na sobnoj temperaturi,dodati su u smrvljeni led i 12 mL 10% NaOH. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, reakciona smeša je zakišeljena na pH ∼ 4 sa HOAc i čvrsti talog je sakupljen, obezbeđujući 0,31 g 5-amino-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila (64%) kao bež čvrste supstance. TLC: DCM/Me-OH, 97/3.

Korak-4: 5-amino-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (V-2).

[0313] Rastvor 5-amino-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila (500mg, 3,7 mmol, 1 eq.) u 18 mL DMF je tretiran sa anhidrovanim K2CO3(1,0 g, 7,26 mmol, 2 eq.) i CH3I (0,175 mL, 4,0 mmol, 1,1 eq) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. U reakcionu smešu je dodata voda zatim je sledila ekstrakcija sa EtOAc (2x), ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i upareni da se obezbedi žuto braon čvrsta supstanca. Analiza sirovog proizvoda pomoću NMR pokazuje ∼ 8/2 odnos željenog proizvoda vs O-metilovanog izomera. Triturisanje čvrstog jedinjenja sa Et2O obezbeđuje 160 mg željenog proizvoda (29%). Prečišćavanjem od Et2O pranja C18 ISCO preparativnom hromatografijom obezbeđuje se dodatno 82 mg naslovnog jedinjenja V-1 kao TFA so (15%). TLC: Heksan/EtOAc, 1/1.<1>H-NMR (300 MHz, d6DMSO) δ: 6.94 (d, J = 7.68), 6.42 (širina s, 2H), 6.33 (d, J = 7.68), 3.55 (s, 3H). LC/MS (Metode 3): Rt 3,0 min., m/z 150 [M+H]<+>.

Tabela 1: Intermedijeri navedeni u Tabeli 1 ili su pripremljeni korišćenjem gore opisanih metoda ili su dobijeni iz komercijalnih izvora.

Primer 23 -5-(((6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (I-1)

[0314]

1

[0315] U balon sa okruglim dnom od 100 mL je dodat 6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehid IV-1 (69,6 mg, 0,335 mmol), 5-amino-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril V-2 (50 mg, 0,335 mmol) i sirćetna kiselina (0,096 ml, 1,676 mmol) u DCM (10 ml). Na kraju je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (107 mg, 0,503 mmol) i snažno mešan na sobnoj temperaturi pod protokom N2preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (60 mL), zatim oprana sa zasićenim NaHCO3, vodom (x2) i koncentrovanim rastvorom soli. Organski ekstrakt je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan do sirovog prinosa, koji je prečišćen preparativnom HPLC sa reverznom fazom na Gilson-u do prinosa smeše proizvoda i nepoznatog nus proizvoda(∼32 mg, 28% prinos, 81% HPLC čistoća). Smeša je podvrgnuta drugom HPLC prečišćavanju da se dobije čist željeni proizvod (4 mg, 3,5% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 7.97 (s, 1 H), 7.56 (br s, 1 H), 7.45 (br d, J=11.43 Hz, 2 H), 7.36 (br d, J=8.79 Hz, 1 H), 7.12 -7.20 (m, 1 H), 6.66 -6.78 (m, 1 H), 6.00 (br d, J=7.92 Hz, 1 H), 3.68 (s, 2 H), 3.31 (br s, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 2,37 min, m/z 340.97 [M+H]<+>.

Primer 24 -6-hloro-3-((1-etil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-ilamino)metil)hinolin-2(1H)-on (1-2)

[0316]

Korak 1: 1-etil-3-nitropiridin-2(1H)-on.

[0317]

[0318] Smeša 3-nitropiridin-2(1H)-ona (1,00 g, 7,14 mmol) i K2CO3(3,00 g, 21,71 mmol) u DMF (30 ml) je tretiran sa etil jodidom (0,60 ml, 7,42 mmol) i mešana na 50 °C preko noći. LCMS je pokazao smešu proizvoda i početnog materijala 4:1. Dodato je još etil jodida (0,25 mL) i reakcija je mešana na 60 °C pet sati. Žuta smešae je razblažena sa vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x100 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (MgSO4), proceđeni, i upareni pod smanjenim pritiskom da se obezbedi 1,08 g žute čvrste supstance. Materijal je rastvoren unekoliko mL DCM i prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (25 g silikagel kolona, 0 do 10% MeOH u DCM, sa izokratskim eluiranjem na 3% MeOH) da obezbedi 1-etil-3-nitropiridin-2(1H)-on (898,9 mg, 5,35 mmol, 74,9 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.38 (dd, J=7.92, 2.05 Hz, 1

2

H), 8.24 (dd, J=6.60, 2.20 Hz, 1 H), 6.44 (dd, J=7.62, 6.45 Hz, 1 H), 4.05 (q, J=7.04 Hz, 2 H), 1.26 (t, J=7.18 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,96 min., m/z 169.0 [M+H]<+>.

Korak 2: 3-amino-1-etilpiridin-2(1H)-on

[0319]

[0320] Rastvor 1-etil-3-nitropiridin-2(1H)-ona (891,2 mg, 5,30 mmol) i kalaj (II) hlorid dihidrat (5,03 g, 22,29 mmol) u EtOAc (30 ml) u balon sa okruglim dnom od 200 mL je mešan na 80 °C dva sata; LCMS je na 1,5 sati pokazao da je reakcija očigledno završena. Rastvor je ostavljen da se ohladi i razblažen je sa EtOAc (50 mL), zatim je NaHCO3 (8 g) dodat u malim porcijama i smeša je mešana 20 minuta, za to vreme se pojavila mala efervescencija i smeša je bila još jako kisela (pH ∼1). Voda (50 mL) je dodata u porcijama sa temeljnim mešanjem, prvo magnetnim a zatim ručno kako bi nastali talog doveo do nastajanja tamno plasve smeše na pH ∼8. Smeša je proceđena na Bihnerovom levku i filter kolač je opran sa nekoliko porcija EtOAc (∼100 mL ukupno). Slojevi filtrata su razdvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x50 mL), a sve organske su spojene i osušene (Na2SO4), proceđene, i uparene pod smanjenim pritiskom. Nastala plavičasta čvrsta supstanca (0,64 g) je rastvorena u nekoliko mL DCM i prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (25 g silikagel snap kolona, 0 do 9% MeOH u DCM, sa izokratskim eluiranjem na 3,8% MeOH).Tako dobijena plava čvrsta supstanca je rastvorena u DCM, tretirana sa silikagelom, i uparena pod smanjenim pritiskom. Materijal je preprečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (25 g silikagel kolona, 0 do 100% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem na 67% EtOAc) da obezbedi 3-amino-1-etilpiridin-2(1H)-on (517,7 mg, 3,75 mmol, 70,7 % prinos) kao neznatno plava čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 6.88 (dd, J=6.89, 1.91 Hz, 1 H), 6.41 (dd, J=7.04, 1.76 Hz, 1 H), 6.03 (dd, J=6.90, 6.90 Hz, 1 H), 5.06 (s, 2 H), 3.89 (q, J=7.13 Hz, 2 H), 1.19 (t, J=7.18 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 0,76 min., m/z 139.0 [M+H]<+>.

Korak 3: 6-hloro-3-((1-etil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-ilamino)metil)hinolin-2(1H)-on (1-2).

[0321]

[0322] Suspenzija 6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-karbaldehida (100,1 mg, 0,482 mmol) i 3-amino-1etilpiridin-2(1H)-ona (67,1 mg, 0,486 mmol) u MeOH (1,5 mL) i toluenu (1,5 mL) je tretirana sa AcOH (27,6 mL) i mućkana na 50 °C tokom 5,5 sati, za koje vreme je plava boja početnog materijala piridinona otpuštena. Rastvarači su upareni pod smanjenim pritiskom. Crveni talog je tretiran sukcesivno sa dva alikvota toluena (3 mL svaki) i uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je suspendovan u DCM (3 mL) i tretiran sa AcOH (135.4 mL) i natrijum triacetoksiborohidridom (164,3 mg, 0,775 mmol), zatim postavljen ispod azota i mešan na sobnoj temperaturi preko noći; u roku od nekoliko minuta materijal je prešao u rastvor, i u roku od jednog sata material je istaložen. Uzorak je razblažen sa DCM/MeOH/EtOAc, tretiran sa silikagelom, i uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (0 do 100% EtOAc u heksanima) da obezbedi naslovno jedinjenje (I-2) (25,7 mg, 0,078 mmol, 16,16 % prinos, HPLC čistoća 100% na 220 nm) kao zelenkasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.02 (s, 1 H), 7.79 (d, J=2.05 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.49 (dd, J=8.65, 2.20 Hz, 1 H), 7.30 (d, J=8.79 Hz, 1 H), 6.90 (dd, J=4.30, 4.30 Hz, 1 H), 5.95 -6.11 (m, 3 H), 4.16 (d, J=5.90 Hz, 2 H), 3.93 (q, J=6.84 Hz, 2 H), 1.22 (t, J=7.04 Hz, 3 H). LCMS (Metod 4): Rt 1,15 min., m/z 330.0 [M+H]<+>.

Tabela : Navedena jedinjenja u tabeli su pripremljena upotrebom metoda koje su slične onima opisanim za dobijanje I-1 & I-2

4

Tabela 3. LCMS signal i NMR hemijski pomak svakog jedinjenja navedenog u tabeli 2.

Primer 25 --(S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (I-13)

[0323]

[0324] Smeša 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (1,23 g, 8,09 mmol), (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-1 (1,91 g, 7,37 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (3,8 mL, 21,8 mmol) u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (57 mL) ispod N2je zagrevana na 110 °C i mešana tokom 6 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je podeljena između EtOAc/H2O (750 mL/750 mL). Organski sloj je odvojen, osušen (Na2SO4) i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na ISCO dva puta (40 g silikagel kolona, EtOAc/heksani 0∼100%; 80 g silikagel kolona, MeOH/dihlorometan 0∼5%). Bezbojne frakcije su spojene i dihlorometan je uklonjen pod smanjenim pritiskom na rotacionom uparivaču sve dok se mnogo bela čvrsta supstanca nije istaložila. Bela čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem i oprana sa hladnom MeOH. Zatim je pomešana sa MeCN/H2O (10 mL/25 mL) i liofilizirana da se dobije naslovno jedinjenje 1-13 kao bela čvrsta supstanca (790 mg). m.p. 262-264 °C.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 12.07 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.73 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.68 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 1.50 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): 100% čista @ 254 nm, Rt 10,78 min, m/z 355, 357 [M+H]+. Filtrat i obojene frakcije (TLC čist) iz drugog ISCO su spojeni i tretirani sa aktivnim ugljem i ceđeni (dok se filtrat nije obezbojio). Filtrat je zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom na rotacionom uparivaču da se ukloni dihlorometan sve dok se ne istalože puno bele čvrste supstance. Bela čvrsta supstanca je sakupljena ceđenjem i oprana sa hladnim MeOH. Zatim je pomešana sa MeCN/H2O (10 mL/25 mL) i liofilizirana da se dobije naslovno jedinjenje 1-13 kao bela čvrsta supstanca (970 mg). m.p.262-264 °C.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 12.06 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.73 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.68 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 1.50 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): 100% čista @ 254 nm, m/z 355, 357 [M+H]+. Ukupan prinos za spojene dve gomile je 67%.

Primer 26 --(S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (I-14)

[0325]

[0326] Smeša DIEA (0,165 ml, 0,943 mmol), (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on II-1 (70 mg, 0,314 mmol), i 5-fluoro-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila (52,1 mg, 0,377 mmol) u DMSO (1 ml) je zagrevana na 110 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, onda je tretirana sa EtOAc, oprana sa vodom dva puta, osušena i koncentrovana. Biotage prečišćavanje sa 0 do 10 % MeOH/DCM na koloni od 10 g dalo je (S)-5-((1-(6hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-6-okso-1,6-dihidro piridin-2-karbonitrila (12,1 mg, 11,3%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.03 (s, 1 H), 7.72 (s, 2 H), 7.47 (m, 1 H), 7.28(m, 1H), 6.84 (m, 1 H), 6.68(m, 1H), 5.93(m, 1H), 4.66(m, 1H), 1.45(d, J=6.74Hz, 3H). LCMS (Metod 3): Rt 2,35 min, m/z 361.05 [M+Na]<+>.

Primer 27 --(S)-5-((1-(6-Hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (I-16)

[0327]

[0328] Smeša (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-4 (1,00 g, 3,61 mmol), 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (604 mg, 3,97 mmol), N,N-diizopropiletilamina (1,9 mL, 10,8 mmol) u DMSO (15 mL) je zagrevana na 110 °C u zatopljenoj epruveti tokom 16 h. MS i TLC pokazali su čistu konverziju. Reakciona smeša je sipana u vodu (300 mL) uz snažno mešanje. Čvrsta supstanca je ceđena i oprana vodom, a onda rastvorena u EtOAc i osušena preko natrijum sulfata. Nakon ceđenja, rastvor je koncentrovan sa silikagelom i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: dihlorometan/EtOAc 0 do 50%) da se dobije ciljano jedinjenje 1-16 kao bledo žuta čvrsta supstanca (1,20 g, 89%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.12 (s, 1H), 7.95 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.21 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.94 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.69-4.62 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.6 Hz, 3H); LCMS (Metod 3): Rt 5,00 min, m/z 373.1, 375.1 [M H]<+>.

Primer 28 --(S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropirazin-2-karbonitril (1-17)

Korak 1: 6-bromo-3-hloro-1-metilpirazin-2(1H)-on.

[0330]

[0331] Smeša 6-bromo-3-hloropirazin-2(1H)-ona (2 g, 9,55 mmol) i kalijum karbonata (2,77 g, 20,04 mmol) u balonu sa okruglim dnom od 200 mL je tretirana sa DMF (25 ml) i mešana 15 minuta. Dodat je MeI (0,69 ml, 11,04 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 minuta. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pomešan sa vodom (75 mL) i ekstrahovan sa DCM (2x75 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (MgSO4), proceđeni, tretirani sa silikagelom, i upareni pod smanjenim pritiskom, zatim dalje upareni na 60 °C pod visokim vakuumom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (silikagel, 0 do 35% EtOAc u heksanima), sa izokratskim eluiranjem na 16% EtOAc i 30% EtOAc dok je maksimalna količina željene supstance spirana. Maksimalna količina je spirana sa 30% EtOAc obezbeđujući 6-bromo-3-hloro-1-metilpirazin-2(1H)-on (1,30 g, 5,82 mmol, 61 % prinos) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.50 (s, 1 H), 3.63 (s, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 1,44 min., m/z 222.9,

224.9 [M+H]<+>.

Korak 2: (S)-3-(1-((5-bromo-4-metil-3-okso-3,4-dihidropirazin-2-il)amino)etil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on

[0332]

[0333] Smeša (S)-3-(1-aminoetil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-1 (200 mg, 0,772 mmol) i 6-bromo-3-hloro-1-metilpirazin-2(1H)-ona (189,2 mg, 0,847 mmol) u DMSO (5 ml) je tretirana sa DIEA (400 mL, 2,290 mmol) i mešana na 110 °C pet sati. Uzorak je pomešan sa vodom (75 mL) i ekstrahovan sa DCM (2x50 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i ceđeni, dodat je silikagel, i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Uzorak je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (25 g silikagel kolona, 0 do 100% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina spirana) da se obezbedi (S)-3-(1-((5-bromo-4-metil-3-okso-3,4-dihidropirazin-2-il)amino)etil)-6-hloro hinolin-2(1H)-on (32,9 mg, 0,080 mmol, 10 % prinos) kao narandžasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.99 (s, 1 H), 7.70 -7.75 (m, 2 H), 7.56 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 7.46 -7.52 (m, 1 H), 7.30 (d, J=8.79 Hz, 1 H), 6.88 -6.96 (m, 1 H), 5.02 -5.17 (m, 1 H), 3.50 -3.60 (m, 3 H), 1.44 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 2,55 min., m/z 410.8 [M+H]<+>.

Korak 3: (S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropirazin-2-karbonitril (1-17).

[0334]

[0335] Smeša (S)-3-(1-((5-bromo-4-metil-3-okso-3,4-dihidropirazin-2-il)amino)etil)-6-hlorohinolin-2(1H)-on (31,0 mg, 0,076 mmol), Pd2(dba)3(7,4 mg, 8,08 mmol), 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocena (8,7 mg, 0,016 mmol), i dicijanocinka (18,1 mg, ,154 mmol) je stavljena ispod azota u malu bočicu. DMF (1,4 ml) je dodat pomoću šprica. Atmosfera je ispražnjena i zamenjena azotom tri puta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. LCMS je pokazao da je reakcija bila potpuno gotova. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je podeljen između vode (15 mL) i DCM (2x15 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i proceđeni, silikagel je dodat, i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (0 do 65% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina spirana) da obezbedi naslovno jedinjenje 1-17 (20,1 mg, 0,055 mmol, 72,0 % prinos, HPLC čistoća 96,5% na 220 nm) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.03 (s, 1 H), 8.59 (d, J=8.50 Hz, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.72 (d, J=2.35 Hz, 1 H), 7.47 -7.55 (m, 2 H), 7.31 (d, J=8.79 Hz, 1 H), 5.18 -5.31 (m, 1 H), 3.48 (s, 3 H), 1.48 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 4): Rt 1,25 min., m/z 356.1 [M+H]<+>.

Primer 29 --(S)-5-((1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-20)

[0336]

[0337] Smeša 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (58 mg, 0,38 mmol), (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-metoksihinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-7 (100 mg, 0,35 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (180 mL, 1,04 mmol) u n-BuOH (3 mL) je zagrevana na 110°C u zatopljenoj epruveti ispod N2i mešana preko noći. Smeša je zatim koncentrovana pod smanjenim pritiskom i ostatak je prečišćen na ISCO (20 g silikagel kolona, EtOAc/heksani 0∼100%). Dobijena prljavo-bela čvrsta supstanca je triturisana sa EtOAc/heksani, proceđena, rastvorena u vrućoj MeCN/H2O (10 mL/10 mL) i zatim liofilizirana da se dobije naslovno jedinjenje 1-20 kao bela čvrsta supstanca (78 mg, 58%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 11.90 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.98 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.90 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.65 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): Rt 4,98 min, m/z 385 [M+H]<+>.

Primer 30 --5-(((S)-1-(6-hloro-2-okso-7-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)-1,2-dihidrohinolin -3-il)etil)amino)-1metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-26)

[0338]

[0339] Smeša 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (35,2 mg, 0,231 mmol) i 3-((S)1-aminoetil)-6-hloro-7-((R)-1-(piridin-2-il)etoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorida 11-14 (80 mg, 0,210 mmol) II-8 je tretirana sa DMSO (1,5 ml) i DIEA (111 mL, 0,636 mmol). Rastvor je mešan na 110 °C tokom pet sati. Uzorak je pomešan sa vodom (20 mL) i ekstrahovan sa DCM (2x15 mL). Ekstrakti su oprani sa vodom (2x20 mL), osušeni (Na2SO4) i proceđeni, silikagel je dodat, i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (10 g silikagel kolona) sa 0 do 3,4% MeOH u heksanima. Tako dobijen materijal je rastvoren u MeCN (2 mL), tretiran sa vodom (1 mL), zamrznut na suvi led/aceton kupatilu, i liofiliziran da obezbedi naslovno jedinjenje (I-26) (32,7 mg, 0,069 mmol, 33% prinos, HPLC čistoća 100% na 220 nm) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.75 (s, 1 H), 8.55 -8.62 (m, 1 H), 7.80 (dd, J=7.50, 7.50 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.39 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 7.32 (dd, J=7.48, 4.84 Hz, 1 H), 6.96 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 6.82 -6.89 (m, 2 H), 5.93 (d, J=7.92 Hz, 1H), 5.50 (q, J=6.16 Hz, 1 H), 4.61 (s, 1 H), 3.57 (s, 3 H), 1.66 (d, J=6.16 Hz, 3 H), 1.44 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 2,61 min., m/z 475.9 [M+H]<+>.

Primer 31 --(S)-5-((1-(6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-27)

[0340]

[0341] Rastvor 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (18,3 mg, 0,120 mmol) i (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-15(35 mg, 0,106 mmol) je tretiran sa DMSO (0,8 ml) i DIEA (57 mL, 0,326 mmol). Rastvor je mešan na 110 °C 3,5 sata. Uzorak je pomešan sa vodom (20 mL) i ekstrahovan sa DCM (2x10 mL). Spojeni ekstrakti su oprani sa vodom (2x20 mL), osušeni (Na2SO4) i proceđeni, silikagel je dodat, i rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (10 g silikagel kolona) sa 0 do 70% EtOAc u heksanima. Tako dobijen materijal je rastvoren u MeCN (0,8 mL), tretiran sa vodom (0,4 mL), zamrznut na suvi led/aceton kupatilu, i liofiliziran da obezbedi naslovno jedinjenje (I-27) (23,9 mg, 0,056 mmol, 52,9 % prinos, HPLC čistoća > 99% na 220 nm) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.83 (s, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 6.97 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 6.92 (s, 1 H), 6.89 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 5.95 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 4.61 -4.70 (m, 1 H), 3.92 (d, J=6.74 Hz, 2 H), 3.58 (s, 3 H), 1.48 (d, J=6.74 Hz, 3 H), 1.21 -1.33 (m, 1 H), 0.56 -0.65 (m, 2 H), 0.34 -0.44 (m, 2 H). LCMS (Metod 1): Rt 2.,61 min., m/z 424.9 [M+H]<+>.

Primer 32 --5-((1-(6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)-2-okso-1,2-dihidro hinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-28)

[0342]

[0343] Smeša 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (26,7 mg, 0,176 mmol) i 3-(1-aminoetil)-6-hloro-7-((3,3-difluorociklobutil)metoksi)hinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-16 (59,7 mg, 0,157 mmol) je tretirana sa DMSO (1 ml) i DIEA (84 mL, 0,481 mmol). Rastvor je mešan na 110 °C osam sati. LCMS je pokazao da je reakcija završena. Uzorak je pomešan sa vodom (15 mL) i ekstrahovan sa DCM (3x10 mL). Ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni, tretirani sa silikagelom, i upareni pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (10 g silikagel kolona, 0 do 75% u EtOAc u heksanima) da obezbedi naslovno jedinjenje 1-28 (40,5 mg, 0,085 mmol, 54,2 % prinos, HPLC čistoća 100% na 220 nm) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.90 (s, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 6.97 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 6.94 (s, 1 H), 6.91 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 5.95 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 4.65 (hin, J=6.82 Hz, 1 H), 4.12 (d, J=4.10 Hz, 2 H), 3.58 (s, 3 H), 2.522.80 (m, 5 H), 1.48 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 4): Rt 1,51 min., m/z 475.1 [M+H]<+>.

1

Primer 33 -(S)-5-((1-(6-hloro-7-izopropoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil) amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-29)

[0344]

[0345] Smeša (S)-3-(1-ammoetil)-6-hloro-7-izopropoksihinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-18 (128 mg, 0,4 mmol, 1 eq.), 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila (67 mg, 0,44 mmol, 1,1 eq.) i DIPEA (148 mg, 1,2 mmol, 3 eq.) u 4 mL DMSO je zagrevana na 130-135 °C tokom 80 minuta. Reakciona smeša je zatim spana u vodu i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena i isprana sa vodom. Hromatografija na 3,5 g silikagela upotrebom gradijenta DCM do DCM/EtOH (98/2) praćena je triturisanjem sa H2O/MeOH da bi se dobilo I-29 (93 mg, 56%) kao prljavo-bela čvrsta supstanca.<1>H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ: 11.80 (širina s, 0.7H), 7.72 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.89 (d, J = 7.41, 1H), 5.93 (d, J = 7.68, 1H), 4.62 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.41, 3H), 1.33 (d, J = 6.03, 6H). LC/MS (Metod 3), Rt 5,5 min, m/z 413 [M+H]<+>.

Primer 34 --(S)-5-((1-(6-hloro-8-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-30)

[0346]

[0347] Rastvor (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-8-fluorohinolin-2(1H)-on hidrohlorida II-17 (91,7 mg, 0,331 mmol) i 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril III-1 (56,8 mg, 0,373 mmol) u DMSO (2,0 ml) je tretiran sa DIEA (172 µl, 0,985 mmol) i mešan na 110 °C tokom četiri sata. Uzorak je dodat u vodu (30 mL), i nastali talog je ekstrahovan sa DCM (2x20 mL) i EtOAc (10 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni, tretirani sa silikagelom, i uparen pod smanjenim pritiskom. Materijal je prečišćen hromatografijom sa Biotage MPLC (10 g silikagel kolona) sa 0 do 45% EtOAc u heksanima, sa izokratskim eluiranjem kada je maksimalna količina spirana. Frakcije proizvoda su spojene, oprane sa vodom (2x30 mL), i uparene pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u MeCN (4 mL) i vodi (2 mL), zamrznut (suvi led & aceton kupatilo), i liofiliziran da obezbedi naslovno jedinjenje I-30 (62,0 mg, 0,166 mmol, 50,3 % prinos, HPLC čistoća 100% na 220 nm) kao sivkasto žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.15 (s, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.56 -7.65 (m, 2 H), 6.97 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 6.93 (d, J=7.62 Hz, 1 H), 5.94 (d, J=7.92 Hz, 1 H), 4.61 -4.75 (m, 1 H), 3.58 (s, 3 H), 1.50 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 2.39 min., m/z 373.0 [M+H]<+>.

2

Primer 35 --(S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (I-31)

[0348]

[0349] Smeša (S)-3-(1-aminoetil)-6-hloro-1,8-naftiridin-2(1H)-ona II-11 (100 mg, 0,447 mmol), 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitrila III-1 (82 mg, 0,537 mmol) i DIEA (0,234 ml, 1,341 mmol) u DMSO (1 ml) je zagrevana na 110°C tokom dva sata. LC-MS je pokazao nastajanje proizvoda. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, sledilo je dodavanje vode i ceđenje. Biotage prečišćavanje sirovog proizvoda sa 0-10% MeOH/DCM na 25g kolona obezbedilo je (S)-5-((1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril I-31 (53,8mg, 33,8%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.52 (s, 1 H), 8.49 (d, J=2.64 Hz, 1 H), 8.24 (d, J=2.64 Hz, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 6.71 -7.07 (m, 2 H), 5.91 (d, J=8.21 Hz, 1 H), 4.524.85 (m, 1 H), 3.46 -3.74 (s, 3 H), 1.48 (d, J=6.74 Hz, 3 H). LCMS (Metod 1): Rt 2,22 min, m/z 356.01 [M+H]<+>.

Primer 36 --(S)-5-((1-(7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-il)etil)amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril (1-33)

[0350]

[0351] U jedinjenje II-13 (59 mg, 0.175 mmol) u DMSO (5 mL) u zapečaćenoj epruveti je dodat 5-fluoro-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril III-1 (35 mg, 0,23 mmol) i DIEA (0,5 mL). Reakciona smeša je zagrevana do 110 °C i mešana tokom 3 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena do rt, razblažena sa vodom (30 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (50 mL X 4). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4), koncentrovani i prečišćen reverznom C-18 ISCO sa vodom (0,1% TFA) do CH3CN (0,1% TFA) da daju naslovno jedinjenje (I-33) (22 mg, 34%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.71 (s, 1H), 7.82 (d, J = 6.57 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.81 (s, 1 H), 7.59 (d, J = 2.19 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 9.06 Hz, 2.19 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.79 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.71 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.98 Hz, 1H), 6.31 (d, J = 7.98 Hz, 1H), 5.00 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.60 Hz, 3H). LCMS (Metod 3): Rt 5,30 min, m/z 357.1 [M+H]<+>.

3.

I-3 do 13I-jeanrem ip prza mani

opis a

onim e i<č>n slsu ekojaam odet m nalj<e>mre

prip sui4 bel tau vaedenavja nje din

4:Je aelTab

Tabela 5. LCMS signal i NMR hemijski pomaci za svako jedinjenje navedeno u tabeli 4.

Primer 37 --IDH1-R132H i IDH1-R132C enzimski test

[0352] Testovi su izvođeni na crnoj ploči sa 384-bunarčića. Alikvot od 250 nL jedinjenja je inkubiran sa 10 µL 30 nM IDH1-R132H ili 10 nM IDH1-R132C recombinantnog proteina u puferu za test (50 mM Tris pH = 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 0,1% (mas./v) goveđi serum albumin, i 0,01% Triton X-100) u svaki bunarčić na 25 °C tokom 15 minuta. Nakon što je ploča kratko centrifugirana, alikvot od 10 µL 2 mM ketoglutarata i 20 mM rastvora NADPH pripremljenog u puferu za test, je zatim dodat u svaki bunarčić i reakcijaje održavana na 25 °C tokom 45 minuta. Alikvot od 10 µL rastvora dijaforaze (0,15U/mL dijaforaze i 30 µM resazurina u puferu za test) je dodat u svaki bunarčić. Ploča je održavana na 25 °C tokom 15 minuta a zatim očitana na čitaču za ploču sa eksitacionim i emisionim talasnim dužinama na 535 nm i 590 nm, respektivno. IC50datog jedinjenja je izračunata uklapanjem krive doznog odgovora inhibicije NADPH potrošnje u datoj koncentraciji sa logističkom jednačinom sa četiri parametra.

Primer 38 --Ćelijski 2-HG test korišćenjem HCT116 mutiranih IDH1 ćelija

[0353] HCT116 izogene IDH1-R132H i IDH1-R132C mutirane ćelije su kultivisane u medijumu za rast (McCoy’s 5A, 10% fetalni goveđi serum, 1X antibiotički-antimikotički rastvor i 0,3 mg/mL G418) u 5% CO2u inkubatoru na 37 °C. Za pripremanje testa, ćelije su podvrgnute disocijaciji pomoću tripsina i resuspendovane u medijumu za test (McCoy’s 5A bez L-glutamina, 10% fetalni goveđi serum, 1X antibiotički-antimikotički rastvor i 0,3 mg/mL G418). Alikvot od 10,000 ćelija/100 µL je prebačen u svaki bunarčić čiste ploče sa 96-bunarčića za kulturu tkiva. Ćelije su inkubirane u 5% CO2na 37 °C u inkubatoru preko noći da bi se omogućilo ispravno povezivanje ćelija. Alikvot od 50 µL jedinjenja koje sadrži medijum za test je zatim dodat u svaki bunarčić i ploča za test je držana u 5% CO2na 37 °C u inkubatoru tokom 24 sata. Zatim je uklonjen medijum iz svakog bunarčića i dodato je 150 µL smeše metanol/voda (80/20 v/v) u svaki bunarčić. Ploča je čuvana na -80 °C u zamrzivaču preko noći da bi se omogućilo potpuno liziranje ćelija Alikvot od 125 µL od ekstrahovanog supernatanta je analiziran pomoću RapidFire visoko-protočnog-masenog spektrometra (Agilent) da se odredi ćelijski 2-HG nivo. IC50datog jedinjenja je izračunat uklapanjem krive doznog odgovora ćelijske 2-HG inhibicije pri datoj koncentraciji sa logističkom jednačinom sa četiri parametra

[0354] Tabela 6 dole prikazuje aktivnost svakog jedinjenja prema legendi tako da "++++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji < 0,01 µM; "+++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji između 0,01 µM i 0,1 µM otkrivenog jedinjenja; "++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji od 0,1 µM do1 µM otkrivenog jedinjenja; i "+" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji > 1 µM za enzim IDH1 R132H, HCT116 IDH1 R132H, i HCT116 IDH1 R132C.

[0355] Za enzim IDH1 R132C, "++++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji< 0,1 µM; "+++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji između 0,1 µM i 1 µM otkrivenog jedinjenja; "++" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji od 1 µM do 10 µM otkrivenog jedinjenja; i "+" ukazuje na inhibiciju pri koncentraciji > 10 mM.

Tabela 6 Rezultati ilustrativnih jedinjenja formule I u IDH1-R132H, IDH1-R132C, IDH1-MS-HTC116-R132H, u IDH1-MS-HTC116-R132C testovima.

Claims (18)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I:

   ili njegova farmaceutska so, enantiomer, hidrat, solvat, ili tautomer, gde: svaki W1i W2je nezavisno CH, CF ili N; W3je nezavisno, CR2ili N; U je N ili CR6; A je odabran iz grupe koja se sastoji od H, D, halogena, CN, -CHO, -COOH, -COOR, -C(O)NH2, -C(O)NHR, R’S(O)2-, -O(CH2)nC(O)R’, R’S(O)-, heteroaril, -SOMe, -SO2Me,

   gde su X i Y nezavisno u svakom slučaju C, N, NR’, S, i O, pod uslovom da prsten koji sadrži X i Y ne može imati više od 4 N ili NH atoma ili više od jednog S ili O atoma, i gde S i O nisu susedni; R i R’ u svakom slučaju se nezavisno biraju iz grupe koju čine H, OH, CN, -CH2CN, halogen, -NR7R8, CHCF2, CF3, C1-C6alkil, R7S(O)2-, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, C3-C8cikloalkilalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, i heteroaril, gde je svaki R opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine OH, halogen, C1-C6alkoksi, NH2, R7S(O)2-, CN, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, heteroaril, i R7S(O)-; R1je nezavisno OH, CN, halogen, CHCF2, CF3, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkenil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril, gde je svaki C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril opciono supstituisan jedan ili više puta sa supstituentima odabranim iz grupe koju čine halogen, OH, NH2, CN, C1-C6alkil, i C1-C6alkoksi; svako R2je nezavisno H, OH, CN, halogen, CF3, CHF2, benzil, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, NH2, -O(CH2)nR’, -O(CH2)C(O)NHR’, -O(CH2)C(O)R’, NHR7, -N(R7)(R8), NHC(O)R7, NHS(O)R7, NHS(O)2R7, NHC(O)OR7NHC(O)NHR7, -S(O)2NHR7, NHC(O)N(R8)R7, OCH2R7, CHRR’ ili OCHR’R7, gde je C1-C6alkil, C1-C6alkoksi opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, C3-C8cikloalkil supstituisan sa jednim ili više halogena, 3 do 8-člani heterociklil, aril, -heteroaril-C(O)NH2, i heteroaril; ili R1i R2se mogu kombinovati da obrazuju C4-C6cikloalkil ili 3 do 8-člani heterociklil koji sadrži najmanje jedan atom izabran iz grupe koja se sastoji od N, O, i S; R3je H, C1-C6alkil, ili -OH; R4i R5su nezavisno H, halogen, CH2OH, C1-C3alkil, ili C1-C3alkil supstituisan sa halogenom, ili R4i R5kada se kombinuju mogu obrazovati C3-C6cikloalkil ili C3-C6heterociklil; svaki R6je H, halogen, C1-C6alkil, C1-C6alkil supstituisan sa halogenom, C1-C6alkoksi, C1-C6alkoksi supstituisan sa jednim ili više halogena, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, ili heteroaril; R7i R8su nezavisno H, C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C8cikloalkil, 3 do 8-člani heterociklil, aril, i heteroaril; ili kada se kombinuju R7i R8mogu da obrazuju 3 do 8-člani heterociklil ili heteroarilni prsten; R9je nezavisno H, D, CD3, CF3, C1-C6alkil, C2-6alkenil, C3-6alkinil, C3-C8cikloalkil, kada je alkil, alkenil, alkinil, i cikloalkil opciono supstituisan sa amino, OH, halo, ili alkoksi; n je 0, 1, ili 2; i r je 0, 1,ili 2; pod uslovom da kada je A H, onda R1nije C1-C6alkil ili C1-C6alkoksi i R1i R2ne mogu da se kombinuju da se dobije 3 do 8-člani heterociklil.
2. 2. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je A CN, H ili F.
3. 3. Jedinjenje iz patentnog zahteva 2, gde je A CN i U je N.
4. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je A CN i R9je H, C1-C6alkil ili C3-C6cikloalkil.
5. 5. Jedinjenje iz patentnog zahteva 4, gde je R9metil.
6. 6. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je R3H, metil ili etil.
7. 7. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde: a)R4i R5su H; ili b) R4je H i R5je metil; ili c) R4i R5su halogen; ili d) R4je F i R5je metil; ili e) R4i R5se mogu kombinovati da obrazuju C3-C5cikloalkil.
8. 8. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je R4H i R5je (S)-metil.
9. 9. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde su W1, W2, i W3CH, ili CF.
10. 10. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je W1ili W3N.
11. 11. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je R1halogen.
12. 12. Jedinjenje iz patentnog zahteva 11, gde je R1hlor.
13. 13. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde: a) R2je H, halogen, ili C1-C6alkoksi; ili b) R2je C1-C6alkoksi supstituisan sa heteroarilom ili 3 do 8-člani heterociklilom.
14. 14. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 odabrano iz grupe koja sadrži: 5-{[(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 6-hloro-3-{[(1-etil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 5-{[(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)metil]amino}-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 6-hloro-3-{[(1-ciklopropil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-{[(1,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 3-{[(6-bromo-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-6-hloro-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-({[2-okso-6-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}metil)-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-({[1-metil-2-okso-6-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}metil)-1,2-dihidrohinolin-2on; 6-hloro-7-metoksi-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-1,2-dihidrohinolin-2-on; 6-hloro-3-{[(1-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)amino]metil}-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-2-on; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1R)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropirazine-2-karbonitril; 5-{[(1R)-1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin2-karbonitril; 5-{[1-(6-hloro-7-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1R)-1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[1-(6-hloro-7-metoksi-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2karbonitril; 5-{[(1S)-1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1R)-1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-({1-[6-hloro-2-okso-7-(piridin-2-ilmetoksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil}amino)-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-{6-hloro-2-okso-7-[(1R)-1-(piridin-2-il)etoksi]-1,2-dihidroqunolin-3-il}etil]amino}-1-metil-6okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-[(1S)-1-[6-hloro-7-(ciklopropilmetoksi)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-[6-hloro-2-okso-7-(propan-2-iloksi)-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-8-fluoro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin2-karbonitril; 5-{[(1R)-1-(7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(7-hloro-3-okso-3,4-dihidrohinoksalin-2-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-6-okso-1-(trifluorometil)-1,6-dihidropiridin2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-[6-hloro-7-(2-hidroksipropan-2-il)-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-(6-hloro-7-ciklopropil-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-{6-hloro-7-[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il}etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-[7-(azetidin-1-il)-6-hloro-2-okso-1,2-dihidro-1,8-naftiridin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6dihidropiridin-2-karbonitril; 5-{[(1S)-1-[7-(azetidin-1-il)-6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il]etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril; 6-hloro-3-[(1S)-1-{[1-metil-2-okso-6-(1H-1,2,3,4-tetrazol-1-il)-1,2-dihidropiridin-3-il]amino}etil]-1,2-dihidrohinolin-2-on; i 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidroqunolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamid.
15. 15. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, gde je jedinjenje 5-{[(1S)-1-(6-hloro-2-okso-1,2-dihidrohinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karbonitril.
16. 16. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 koje ima: a) formulu Ia:

    ili b) formulu Ia-2:

    ili c) formulu Ib:
17. 17. Jedinjenje iz patentnog zahteva 16 koje ima: a) formulu Ia-1:

    ili b) formulu Ib-1
18. 18. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom patentnom zahtevu 1-17 i farmaceutski prihvatljiv nosač.