RS56404B1

RS56404B1 - Slojeviti zaptivači i separatori plazme za epruvete za sakupljanje krvi

Info

Publication number: RS56404B1
Application number: RS20170987A
Authority: RS
Inventors: Jane F Emerson
Original assignee: Univ California
Priority date: 2014-10-28
Filing date: 2014-10-28
Publication date: 2018-01-31
Also published as: BR112017009063A2; EP3015168B1; HUE036632T2; JP2018502610A; LT3015168T; ES2643758T3; HRP20171596T1; CY1119363T1; DK3015168T3; WO2016069468A1; AU2015339569B2; EP3015168A1; CA2966331C; US20170326544A1; PL3015168T3; JP6706256B2; AU2015339569A1; PT3015168T; HK1221933A1; US11318460B2

Description

Opis

Oblast pronalaska

[0001] Oblast pronalaska je tehnologija odvajanja uzoraka.

Stanje tehnike

[0002] Analize uzorka krvi često zahtevaju odvajanje kompletne krvi u frakciju seruma i frakciju koja sadrži delije. Dobro je poznato u stanju tehnike da odvajanje kompletne krvi može biti izvedeno pomodu centrifugiranja, stavljanja komplente krvi u epruvete za sakupljanje krvi, smeštanjem epruveta u centrifugu i centrifugiranjem krvi.

[0003 ] Nažalost, jednom kada se krv odvoji, frakcije kompletne krvi se mogu pomešati što može izazvati kontaminaciju frakcija difuzijom, mudkanjem, ekstrakcijom uzorka, ili drugim neželjenim interakcijama. Idealno, dve frakcije treba da ostanu izolovane da bi se osiguralo da se ne javlja kontaminacija kada se pristupa željenoj frakciji.

[0004 ] U pokušaju da se prevaziđu gore diskutovani problemi, učinjeni su napori da se obezbede gelovi separatori naneti na donji deo epruvete. Ovi gelovi separatori imaju nameru da pomogu održavanje stabilnosti analita, smanje manualni rad (pipetiranjem u sekundarne eprivete) i da se omogudi odložena obrada koja može biti posledica potrebe za transportovanjem uzoraka sa lokacije uzimanja u objekte gde se izvodi testiranje. Neke funkcionlne osobine i osobine pri upotrebi gelova tipično uključuju sledede: (1) osobine gela sprečavaju isticanje pre upotrebe da bi se eliminisao potencijalni refluks u toku vađenja krvi; (2) gel ima vrednost gustine između delija i seruma/plazme (oko 1,04 specifične težine); (3) gel je tiksotopni (postaje ređi pri centrifugiranju pod uobičajenim laboratorijskim protokolima); (4) gel postaje tečniji i prolazi kroz krvne delije i proteine u toku centrifugiranja; i (5) tečni gel ponovo gelira u sloj između delija i seruma posle centrifugiranja i prijanja na zidove epruvete. Pored toga, komponente gela generalno ne treba da utiču na komponente krvi ili korišdene testove u kliničkim laboratorijama.

[0005 ] Nažalost, poznati gelovi separatori imaju jedan ili više direktnih i indirektnih nedostataka, uključujudi na primer: ometanje (izvesnih testova koji su poznati kao problematični); plutanje analita usled permeabilnosti, zarobljavanje delija u ili na površini gela; fizička kontaminaciju sondi analizatora ili gelova elektroforeze; netačnost izazvanu ponovnim centrifugiranjem; potrebu za alikvotovanjem (sa pratedim manualnim troškovima i potencijalnim greškama pri ponovnom obeležavanju); nekompletna aspiracija koja negativno utiče na standardizaciju i rezultate rasipanja; pitanja pomeranja pri skladištenju/transportu, pitanja zamrzavanja-otapanja i nesposobnosti da se ponovo meša uzorak sa barijerom od mekanog gela.

[0006 ] U pokušaju da se prevaziđu neki od problema u vezi sa gelovima separatorima, učinjeni su napori da se obezbede kompozicije i postupci za odvajanje kompletne krvi koji omogudavaju da odvojene frakcije kompetne krvi budu efikasno zaštidene naspram kontaminacije usled neželjenih interakcija uzoraka. Na primer, prijavilac je dobio nekoliko patenata za prethodne napore koji se odnose na fotopolimerne separatore seruma i postupke (npr. U.S. patent br. 7,674,388, 7,673,758, 7,775,962, 7,971,730, 7,780,861, 8,206,638, 8,282,540). Fotopolimerni separatori seruma mogu biti prednost u obezbeđivanju čvrste granične površine (kada se fotopolimerni gel polimerizuje) između delija i seruma ili plazme, što omogudava kompletnu aspiraciju uzorka. Dodatno, epruveta koja sadrži neke fotopolimerne gelove kao separatore (pre polimerizacije do čvrstog oblika) može biti transportovana, čuvana u frižideru ili zamrzavana sa ponavljajudim ciklusima mržnjenje-otapanje. Dalje, epruveta može biti mešana bez da se poremeti barijera da bi se osiguralo jednoobrazno uzorkovanje testirane frakcije (npr. krv nije ponovo pomešana kada se epruvete mešaju), epruveta je bez mekanog gelastog materijala (posle polimerizacije) koji može da zapuši sonde analizatora ili vrhove pipeta, ili da dođe u kontakt sa testiranim frakcijama da ometa osetljive laboratorijske postupke za testiranje (npr. elektroforezu i sl.).

[0007 ] Nažalost, neki od poznatih kompozicija separatora i postupaka su bili problematični iz različitih razloga, uključujudi visoke cene kompozicija koje očvršdavaju pomodu svetlosti, potrebu da se formuliše tiksotropna kompozicija, toplote proizvedene pri egzotermnim polimerizacionim reakcijama koje mogu uticati na analite, nemogudnost da se steriliše zračenjem i da se zadrži tečljivost kompozicije separatora za naknadno UV očvršdavanje (npr. posle transprota sterilizovanih kompozicija u epruvetama za sakupljanje uzorka) i zahteve za izlaganje UV svetlu zavisne od zapremine.

[0008 ] Prema tome, još uvek postoji potreba za poboljšanim tehnologijama odvajanja.

Suština pronalaska

[0009 ] Prikazani pronalazak obezbeđuje epruvete za sakupljanje krvi i postupak za dobijanje epruvete za sakupljanje krvi koji su definisani u priloženim zahtevima. Generalno ovde su opisani uređaji, kompozicije, sistemi i postupci koji pokušavaju da reše gore iznete probleme obezbeđivanjem epruvete za sakupljanje uzorka prema pronalaksu. U nekim aspektima, svaki od slojevitog materijala sa gel komponentom i slojevitog materijala sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti može da sadrži odvojene slojeve (npr. pre sterilizacije zračenjem, pre centrifugiranja, pre očvršdavanja, posle sterilizacije zračenjem, posle centrifugiranja, posle očvršdavanja, pre i posle sterilizacije zračenjem, pre i posle centrifugiranja, pre i posle očvršdavanja). Dodatno ili alternativno, slojeviti materijal sa gel komponentom i slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti mogu da obrazuju smešu.

[0010 ] U nekim aspektima, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti može opciono biti anti-tiksotropna. Dodatno ili alterntivno, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti može biti formulisana da polimerizuje u toku deset minuta do čvrstode od bar 1 na Shore 00 skali tvrdode kada je inicirana pogodnim izvorom energije (npr. UV svetlom itd.) Viđeno iz druge perspektive, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti može da sadrži promoter koji dozvoljava polimerizaciju u toku deset minuta do bar 1 na Shore 00 skali tvrdode kada je izazvana pogodnim izvorom energije. Dodatno ili alternativno, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti može biti formulisana da polimerizuje u toku 10 minuta do bar 10 na bar jednoj od Shore A skali tvrdode i Shore D skali tvrdode kada je inicirana pogodnim izvorom energije. Viđeno iz još jedne perspektive, smatra se da zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti, posle polimerizacione inicijacije sa pogodnim izvorom enerije, može biti čvrsta u odnosu na probu.

[0011 ] Dalje ovde su opisani uređaju, sistemi i postupci u kojima epruveta za sakupljanje uzorka sadrži supstancu kao separator koja može da održi nivoe analita (npr., nivoe kalijuma i glukoze, itd.) u okviru prihvatljivog praga u produženom vremenskom periodu. U jednom aspektu, nivoi kalijuma su stabilni u okviru 10% početnog nivoa pre centrifugiranja i novi glukoze su stabilni u okviru 5%. Viđeno iz druge perspektive, jedna ili obe, gel komponenta i zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti (npr., celokupna supstanca separator), mogu biti formulisane da održe nivo kalijuma uzorka koji se nalazi u epruveti u okviru 25%, u okviru 15%, u okviru 10%, ili čak u okviru 5% početnog nivoa kalijuma u toku bar četiri dana. Takođe je razmatrano da jedna ili obe gel komponenta i zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti može biti formulisana da održi nivo glukoze uzorka koji se nalazi u epruveti u okviru 25%, u okvir 15%, u okviru 10%, ili čak u okviru 5% početnog nivoa kalijuma u toku bar četri dana, poželjnije bar pet dana.

[0012] Dodatno ili alternativno, supstanca separator poželjno može biti biokompatibilna sa komletnom krvi, i formulisana da ima gustinu između prosečne gustine frakcije seruma / plazme kompletne krvi i frakcije koja sadrži delije kompletne krvi (npr., oko 1,04 g/cm<3>). Zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti tipično ima gustinu koja je neznatno niža od komponente gela, tako da, posle očvršdavanja, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti je iznad komponente gela i obezbeđuje jasnu barijeru. Dodatno ili alternativno, supstanca separator može da bude tečna u kompletnoj krvi pre očvršdavanja, a imobilizovana posle očvršdavanja obrazovanjem čvrstog slojevitog zaptivača.

[0013] Gledano iz druge perspektive, inventivni predmet pronalaska obuhvata postupke koji su definisani priloženim patentnim zahtevima. Razmatrani korak ovde opisanih postupaka može obuhvatati postavljanje slojevitog materijala sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti u šupljinu epruvete. Dalji korak, može da obuhvata postavljanje slojevitog materijala sa gel komponentom separatora u šupljinu epruvete. Gore pomenuti koraci mogu biti izvršeni bilo kojim pogodnim redom tako da gel komponente mogu biti postavljene iznad ili ispod zaptivajude komponente koja očvršdava pomodu svetlosti. U nekim postupcima, slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti je postavljen ispred/iza slojevitog materijala sa gel komponentom i konfigurisan je da obrazuje čvrsti zaptivni sloj iznad slojevitog materijala sa gel komponentom posle očvršdavanja. U nekim razmatranim postupcima, gel komponenta se prvo smesti u epruvetu, a zatim zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti. Posle centrifugiranja, zaptivajuda komponenta može se didi iznad gel komponente i obrazovati zaptivajudi sloj koji deluje kao barijera između gel komponente i frakcije plazme, seruma ili drugog uzorka. Pretpostavlja se da gel komponenta i zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti sadrži slojevitu supstancu kao separator kao što je gore opisano.

[0014] Neki razmatrani postupci mogu dodatno sadržati postavljanje uzorka (npr., krv, itd.) u šupljinu epruvete, i centrifugiranje epruvete za sakupljanje uzorka sa slojevitom supstancom kao separatorom i u njemu postavljenim uzorkom. Dodatno ili alternativno, epruvete za sakupljanje uzorka mogu biti izložene UV svetlu (npr., u toku ili posle centrifugiranja) da bi se očvrsnula zaptivajuda komponenta koja očvršdava pod dejstvom svetlosti. Dodatno ili alternativno, kada je komplenta krv smeštena u epruvetu, postupak prema inventivnom pronalasku može da obuhvata odvajanje frakcije koja sadrži delije kompletne krvi od frakcije seruma (npr., fizičkim uklanjanjem frakcije pomodu pipete, itd.) posle izlaganja epruvete UV svetlu ili drugom izvoru energije da bi se inicirala polimerizacija zaptivajude komponente koja očvršdava pomodu svetlosti.

[0015] Drugi opcioni koraci nekih razmatranih postupaka obuhvataju, između ostalih stvari, sterilizaciju epruvete za sakupljanje pre ili posle unošenja u nju slojevite supstance kao separatora i unošenje vakuma u šupljinu epruvete. Korak sterilizacije može biti izveden na bilo koji pogodni način, uključujudi na primer, gama zračenje ili sterilizaciju komponenti izlaganjem toploti (npr., bar 250 stepeni Celzijusa, itd.). Korak uvođenja vakuma može biti izveden na bilo koji pogodan način, uključujudi na primer, dekomresiju zapremine šupljine pomodu pogodne pumpe. Izraz "vakum" koji je ovde korišden označava parcijalni vakum koji ima pritisak koji je niži od pritiska van epruvete.

[0016] Podrazumeva se da epruvete za sakupljanje uzoraka predmetnog pronalaska mogu biti korišdene za frakcionisanje bilo kog pogodnog uzorka, uključujudi na primer, kompletnu krv. Pogodne supstance separatori su formulisane da imaju pogodnu gustinu koja je intermedijarna između frakcija tečnosti koje se odvajaju. Kada je tečnost koja se odvaja kompletna krv, na primer, supstanca separator može biti formulisana da ima gustinu između srednje gustune frakcije seruma kompletne krvi i frakcije koja sadrži delije kompletne krvi, i da je tečna u kompletnoj krvi. Jednom kada supstanca separator odvoji frakcije tečnosti koje se odvajaju, zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti /sloj može očvrsnuti pomodu polimerizacije.

[0017] Druge komponente pogodno mogu biti uključene u epruvetu prema inventivnom pronalasku, uključujudi na primer, antikoagulant (npr., gde uzorak sadrži plazmu) ili aktivator zgrušvanja (npr., gde uzorak sadrži serum).

[0018] Dalje ovde su opisani uređaji, kompozicije, sistemi i postupci za dobijanje kompozicija koje polimerizuju koji se sterilišu pomodu zračenja ili primenom toplote, dok je zadržana prethodno određena efikasna tečljivost da bi se dozvolilo taloženje kompozicije pod uticajem centrifugalne sile do položaja između faze bez delija kompletne krvi i faze obogadene delijama kompletne krvi. U nekim aspektima, kompozicija koja polimerizuje sadrži oligomer, fotoinicijator, stabilizator i antioksidant, i može biti postavljena u šupljinu epruvete za sakupljanje uzorka. Kada epruveta i kompozicija koja polimerizuje su sterilizovane pomodu zračenja ili toplote, prethodno određena tečljivost kompozicije je poželjno zadržana na način da omogudava naknadnu polimerizaciju kompozicije pomodu UV-očvršdavanja. Različiti ciljevi, karakteristike, aspekti i prednosti inventivnog pronalaska de biti očigledni iz slededih detaljnih izvođenja, zajedno sa priloženim nacrtima na kojima su brojevima prikazane odgovarajude komponente.

Kratak opis slika nacrta

[0019]

Slika 1 prikazuje komercijalno dostupnu epruvetu za odvajanje plazme (BD vakumski kontejner) kao kontrolu i sa fotopolimernim zaptivačem.

Slika 2 je poprečni presek epruvete za odvajanje koja sadrži fotopolimerni separator prema inventivnom pronalasku.

Detaljni opis

[0020] Sledede diskusije obezbeđuju mnogo primera prema inventivnom pronalasku.

[0021] Supstance separatori prema inventivnom pronalasku su u prednost u odnosu na postojede supstance separatore bar iz slededih razloga:

• Sposobnost za odvajanje bilo kako zarobljenih delija koje se mogu javiti u okviru gela iz testirane frakcije.

• Redukovanje intenziteta UV svetla i vremena izlaganja potrebnog za kompletno očvršdavanje barijere, bar zato što je smanjena zapremina zaptivajude komponente koja očvršdava pomodu svetlosti. Ovo smanjenje ima dodatne prednosti smanjenja efekta UV na pigmente osetljive na svetlo, poboljšavajudi radni tok smanjivanjem vremena obrade i smanjivanjem proizvodnje egzotermne toplote u toku očvršdavanja, što može uticati na neke komponente krvi kao što su enzimi.

• Dozvoljavanje potpune aspiracije uzorka bez suštinske, ukoliko je upošte ima, kontaminacije iz gel komponente, bar zbog toga što očvrsnuta zaptivajuda komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti deluje kao barijera od gel komponente.

• Omogudava mešanje frakcije bez delija kompletne krvi da bi se omogudilo jednoobrazno uzorkovanje.

• Sprečava ponovno mešanje krvi koje može da se javi kada su separatori od mekanog gela fizički poremedeni mešanjem, na primer, u toku prevoženja ili mešanja.

• Smanjenje ometanja iz gel komponente ili delijske frakcije kompletne krvi.

• Omogudava ponovljene cikluse smrzavanja/odmrzavanja epruveta. Zamrzavanje seruma ili plazme je uobičajena praksa, na primer, za budude testiranje ili za usaglašenost sa izvesnim regulatornim zahtevima. Kada je gel separator korišden za odvajanje frakcija uzorka, frakcija ispod separatora de tipično biti smrznuta pre gela, čime se proširuje i krivi oblik barijere gel separatora. S obzirom da supstanca separator prema inventivnom pronalasku obuhvata zaptivajudu komponentu koja očvršdava pomodu svetlosti koja je formulisana da očvršdava posle izlaganja pogodnom izvoru energije, neki ili svi problemi koji su tipično u vezi sa smrzavanjem i otapanjem epruveta sa separatorom su zanačajno smanjeni ili čak eliminisani.

• Može biti smanejna zapremina sloja koji očvršdava izlaganjem svetlosti pa na taj način se može smanjiti cena.

• Sloj koji očvršdava pomodu svetlosti ne mora da bude tiksotropan, jer tiksotropni mekani gel je nanet u epruvetu iznad sloja koji očvršdava pomodu svetlosti i ne dolazi do isticanja pre upotrebe. Ovo dozvoljava jednostavnije kompozicije sa manjim zarobljavanjem delija i eliminiše potrebu za aditivima koji mogu doprineti degradiranju krvnih delija ili ometanju laboratorijskih testova.

• Smanjeni troškovi rada u vezi sa uklanjanjem seruma ili plazme u sekundarne epruvete.

• Smanjenje potencijala za greškama ponovnog obeležavanja u vezi sa uklanjanjem seruma ili plazme u sekundarne epruvete.

[0022] Izvodljivost je pokazana pomodu zaptivača koji očvršdava pomodu svetlosti koji sadrži: (1) bar jedan monomer, i oligomer (npr., njihovu kombinaciju (npr., Ebecryl, Cytec)), sa (2) fotoinicijatorom (npr., Additol® BDK, Additol® TPO) i (3) stabilizatorom (fenotiazin). Treba znati da može biti korišdena bilo koja komercijalno pogodna zaptivajuda komponenta. Pogodne zaptivajude komponente koje očvršdavaju pomodu svetlosti su tipično bar jedna gel (npr., kada je dodato gelirajude sredstvo (npr., DBS ili silicijumdioksid, itd.)) i tečna (sa kompletnom krvi) pre polimerizacije, i može očvrsnuti kada se izlaže pogodnom izvoru energije (npr., UV svetlo, itd.). Primeri pogodnih zaptivača koji očvršdavaju pomodu svetlosti mogu uključiti, umesto ostalih, MLA (npr., M1L1A1), MLAI (npr., M1L1A1 i fenotiazin), MAI (npr., M1A1 i fenotiazin), LAI (npr., L1A1 i fenotiazin), i LMA (npr., L1M1A1). Kako je ovde korišdeno, M = monomer (npr., M1, koji je monomer trimetilolpropan propoksilat triakrilat iz Sigma-Aldrich Cat. No. 407577, itd.); L = oligomer (npr., L1 = Ebecryl 230 iz Allnex, ranije iz Cytec Industries, Inc., itd.); A = fotoinicijator (npr., A1 = Additol BDK); I = stabilizator (npr., fenotiazin, itd.). Viditi ispod Tabelu 1. LAI (npr., L1, A1 i fenotiazin) može biti uključen u neke posebno poželjne zaptivajude komponente koje očvršdavaju pomodu svetlosti, dok mogu da imaju željeni opseg gustine 1,00-1,09 g/cm<3>.

[0023] Drugi primeri pogodnih zaptivača koji očvršdavaju pomodu svetlosti obuhvataju LAIR, LAIE (npr., L1, A1, fenotiazin i tokoferol), i LAIER, gde R = sredstvo za geliranje (npr., DBS, silicijum dioksid, itd.), i E = bar jedan antioksidant i sredstvo za sakupljanje radikala (npr., vitamin E, butilovani hidroksitoluen (BHT), butilatovani hidroksianizol (BHA), karoten, bilirubin, askorbinska kiselina, itd.). Dok R i E generalno nisu neophodni, svaki može da obezbedi pogodne osobine zaptivaču koji očvršdava pomodu svetlosti. Određenije, sredstvo za geliranje generalno nije neophodno komponenta za zaptivač koji očvršdava pomodu svetlosti jer tiksotorpni mekani gel može biti nanet u epruvetu iznad sloja koji očvršdava pomodu svetlosti tako da nede dodi do isticanja pre upotrebe. Bez obzira na to, može biti poželjno da postoji tiksotropni zaptivač, na primer, kada je poželjno da postoji zaptivač nanet u epruvetu preko komponente mekanog gela. Dodatno, sredstvo za sakupljanje radikala kao što su jedinjenja koja imaju aktivnosti vitamina E (npr., tokoferol), iako nisu neophodna, mogu dozvoliti da zaptivač koji očvršdava pomodu svetla bude sterilizovan zračenjem bez očvršdavanja (npr., menjanjem osobina grustine), umesto potrebe sterilizacije toplotom da se bi se održala efikasna tečljivost da se omogudi sedimentacija između dve frakcije uzorka.

Tabela 1

[0024] Smatra se da slojeviti separatori prema inventivnom pronalasku, u jednoj ili obe komponente koja očvršdava pomodu svetlosti i gel komponente, mogu da obuhvataju polimer kao što je silikonsko ulje, poliamidi, olefinski polimeri, poliakrilati, poliesteri i njihovi kopolimeri, polisilani i poliizopreni. Dodatno ili alternativno, slojeviti separatori mogu da sadrže punilac (npr., silicijum dioksid, lateks ili druge inertne materijale) da bi se prilagodila gustina separatora ili njegove komponente. Dodatno ili alternativno, slojeviti separatori mogu obuhvatati dodatne materijale ili reagense da bi se postigla željena svrha (npr., EDTA (sredstvo za helatiranje), ili heparin, citrat, dekstroza (antikoagulanti)).

[0025] Slično, treba smatrati da bilo koja pogodna gel komponenta može biti naneta u epruvetu prema inventivnom pronalasku. Pogodne gel komponente obuhvataju one koje postaju tečne u toku centrifugiranja i ponovo posle geliraju, i mogu uključivati, na primer, uobičajene gotove gelove (npr., BD Vacutainer® SST™, BD Vacutainer® PST™, Vacuette® epruvete za sakupljanje krvi sa gel separatorima, PPMA gel epruvete za odvajanje seruma, polipropilen gel epruvete za odvajenje seruma, itd.), ili bilo koji drugi komercijalno pogodan gel koji je formulisan da, posle centrifugiranja, bude smešten između dve frakcije uzorka (npr., između seruma i zgrušane krvi, itd.).

[0026] Slika 1 pokazuje komercijalno dostupne epruvete za odvajanje plazme (BD vakumski kontejner) kao kontrola 110A i sa fotopolimernim zaptivačem 110B. Foto-zaptivač 120 bez sredstva za geliranje ili sastojaka za tiskotropnu modifikaciju je bistar i bez zarobljenih delija i posle centrifugiranja i UV očvršdavanja. Zarobljavanje delija je nepoželjno jer analit curi u frakciju za testiranje. Delije često prionu za gornji sloj mekanog gela 110 kako je prikazano na slici 1. Međutim, one mogu biti odvojene iz plazme sa foto-zaptivačem 120.

[0027] Slededi podaci pokazuju poboljšanu stabilnost analita sa slojevitim separatorom prema inventivnom pronalasku (epruveta fotogelom za odvajanje plazme sa) kada se poredi sa upotrebom samo mekanog gela.

[0028] Epruvete za sakupljanje uzorka prema inventivnom pronalasku generalno obuhvata epruvetu, čep i supstancu separator koja ima gel komponentu / sloj i zaptivajudu komponentu koja očvršdava pomodu svetlosti / sloj koja je naneta u šupljinu epruvete. Epruveta za sakupljanje može poželjno biti proizvedena od odgovarajudeg čvrstog materijal da bi se izdržao vakum u šupljini. Primeri materijala koji obuhvataju tvrdu plastiku, staklo ili druge slične materijale. Šupljina je poželjno dovoljne zapremine da drži željeni uzorak kompletne krvi ili druge tečnosti. Tipično zapremine su u opsegu od nekoliko ml do 10ml ili vede. Čep treba da se uklapa dovoljno tesno da bi se održao vakum u šupljini. Primer prihvatljive epruvete koja može biti korišdena za proizvodnju epruvete za sakupljanje prema inventivnom pronalasku obuhvata proizvode kolekcije za uzorke iz Vacutainer® razvijene u Becton, Dickenson and Company (Franklin Lakes, NJ USA 07417).

[0029] Izraz "epruveta" se koristi eufemistički da se odnosi na sudove koji imaju šupljinu. Mada poželjna izvođenja obuhvataju epruvetu, zna se da i drugi sudovi koji imaju šupljinu mogu takođe biti korišdeni dokle god spadaju u okviru obima inventivnog pronalaska. Na primer, smatra se da epruvete za sakupljanje mogu biti zamenjene sa drugim sudovima koji mogu sadržati tečnost ili opciono podneti vakum. Alternativno primeri sada uključuju balone, tegle, čaše, flaše, kese za sakupljanje krvi, ili fiole. Sudovi pored čvrstih cevi takođe kada se inventivni pronalazak primeni imaju primenu na alternativne oblasti pored sakupljanja krvi.

[0030] U poželjnom izvođenju, epruveta za sakupljanje je proizvedena nanošenjem slojevitog separatora u šupljinu epruvete i postiže se vakuum u šupljini u pripremi za prodaju. Generalno je poželjno da nije više od oko 1ml, ili oko 1 gram, supstance separatora naneto u šupljinu u tipičnu epruvetu za sakupljanje od 10ml. Dodatno ili alternativno, generalno je poželjno da ne više od 50%, poželjnije ne više od 25%, i čak poželjnije ne više od 10% supstance separatora sadrži zaptivajudi sloj koji očvršdava pomodu svetlosti. Smatra se da druge količine supstance separatora (ili njegovog sloja) mogu biti korišdene u nekim izvođenjima da se uklapaju za upotrebu u specifični slučaj. Na primer, manja verzija epruvete treba da zahteva manje supstance separatora, dok veda verzija može zahtevati više da bi se napravila adekvatna zaptivajuda barijera.

[0031] U nekim izvođenjima, epruvete za sakupljanje su sterilizovane pre prodaje. Na primer, epruvete mogu biti sterilizovane (poželjno bez polimerizacije supstance separatora ili njenog dela) pomodu gama zračenja ili toplote između 100 do 250 stepeni Celzijusovih ili čak i više. Opcioni vakum može biti unet jednostavnom dekompresijom zapremine šupljine epruvete korišdenjem pogodne pumpe.

[0032] Takođe se smatra da korisnik treba da doda jednu ili više supstanci separatora u epruvetu za sakupljanje posle nabavljanja, suprotno onome da je je supstanca separar prethodno naneta unutar epruvete.

[0033] Kada je uzorak (npr., kompletna krv) dodat u epruvetu za sakupljanje prema inventivnom pronalasku, centrifugiranjem se može odvojiti kompletna krv u frakciju seruma i frakciju koja sadrži delije. Kada svaki sloj (gel / zaptivač koji očvršdava pomodu svetlosti) supstance separatora ima gustinu koja je intermedijarna frakciji seruma i frakciji koja sadrži delije, migrira između dve frakcije u toku centrifugiranja, na taj način izolujudi frakcije jednu od druge. Supstanca separator može zatim biti brzo očvrsnuta kroz polimerizaciju kada je inicirana pogodnim energetskim izvorom da bi se obezbedila čvrsta barijera između dve frakcije.

[0034] U nekim aspektima inventivnog pronalaska, epruveta za odvajanje može biti snabdevena sa (1) oboje, kompozicijom koja polimerizuje i tiksotropnim gelom, kao što je prikazano na slici 1, ili (2) samo kompozicijom koja polimerizuje, kako je prikazano na Slici 2. Kako je prikazano, epruveta 200 za sakupljanje uzoraka sadrži kompoziciju 210 koja polimerizuje prema inventivnom pronalasku (npr., LAIE) na nju nanetu i očvrsnutu posle centrifugiranja u položaju između faze 220 osiromašene delijama i faze 230 obogadene delijama kompletne krvi.

[0035] Kompozicija koja polimerizuje poželjno obuhvata bar tri od slededih komponenti: oligomer (L) (npr., akrilat koji sadrži oligomer i metakrilat koji sadrži oligomer, itd.), fotoinicijator (A), stabilizator (I) i bar jedno od sredstava za hvatanje radikala i antioksidant (E).

[0036] Kompozicija koja polimerizuje može poželjno imati sastav koji je efikasan da omogudi sterilizaciju zračenjem bez gubitka prehodno određene tečljivosti (npr. efikasane da omogudi taloženje kompozicije pod dejstvom centrifugalne sile u položaj između dve faze uzorka (npr., faza osiromašena delijama i faza obogadena delija kompletne krvi, itd.)). Gledajudi iz druge perspektive, kompozicija može biti efikasna da omogudi sterilizaciju zračenjem ili toplotom bez očvršdavanja kompozicije više od 40%, poželjnije bez očvršdavanja kompozicije više od 30%, i da se dozvoli naknadna polimerizacija sa UV ili drugačije očvršdavanje. Naknadna polimerizacija pomodu UV očvršdavanja može da se javi u minutima npr., više od 30 minuta), satima (npr., više od 1 sata, više od 2 sata, više od 5 sati, više od 10 sati), danima (više od 1 dan, više od 5 dana, više od 10 dana, više od 15 dana, više od 20 dana, više od 25 dana), mesecima (više od 1 mesec, više od 2 meseca, više od 6 meseci, više od 9 meseci) ili čak godinama (više od 1 godine, više od 2 godine, više od 3 godine, više od 5 godina ili čak duže) posle zračenja radi sterilizacije. U nekim izvođenjima, kompozicija koja polimerizuje može biti podvrgnuta dozi zračenja između 5 i 35 kGy, zaključno, poželjnije dozi zračenja između 10 i 30 kGy, zaključno, i čak poželjnije dozi zračenja između 10 i 20 kGy, zaključno, bez gubitka prethodno određene tečljivosti. Gledano iz drugačije perspektive, kompozicija koja polimerizuje može biti podvrgnuta dozi zračenja manjoj od 30 kGy, poželjnije manjoj od 20 kGy, i čak poželjnije manjoj od 17 kGy obema (1) dozvoljavajudi sterilizaciju zračenjem bez gubitka prethodno određene tečljivosti, i (2) dozvoljavajudi naknadnu polimerizaciju pomodu UV očvršdavanja.

[0037] Smatra se da fotoinicijator (npr., azobisizobutironitril, benzoil peroksid, kamforhinon, fosfin oksid fotoinicijator, fotoinicijator na bazi ketona, benzoin etar fotoinicijator, itd.) može biti prisutan u kompoziciju za polimerizovanje u bilo kojoj pogodnoj koncentraciji. U nekim poželjnim izvođenjima, fotoinicijator je prisutan u kompoziciji u konncetraciji manjoj od 5 mas%, poželjnije u koncentraciji manjoj od 2 mas%, i čak poželjnije u koncentraciji manjoj od 1,5 mas.%. Dodatno ili alternativno, kompozicija koja polimerizuje prema inventivnom pronalasku može sadržati fotoinhibitor.

[0038] Treba primetiti da sredstvo za sakupljanje radikala ili antioksidant nije neophodan u svim razmatranim kompozicijama koje polimerizuju. Međutim, kada je uključen (npr., da olakša održavanje tečljivosti u toku sterilizacije zračenjem pomodu gama snopa ili snopa elektrona), i smatra se da bar jedno sredstvo za sakupljanje radikala i antioksidant (npr., tokoferol, itd.) može biti prisutno u kompoziciji koja polimerizuje u bilo kojoj pogodnoj molarnoj koncentraciji. Prijavilac je iznenađujude ustanovio da kada je uključeno sredstvo za sakupljanje radikala kao što je tokoferol, neke kompozicije prema inventivnom pronalasku (npr., LAIE) de zadržati tečljivost u toku sterilizacije zračenjem pri dozi zračenja vedoj od 3kG, dok neke druge kompozicije (npr., LAI) nede zadržati tečljivost pod istom dozom zračenja. Gledano iz druge perspektive, nađeno je da LAI samo održava tečljivost u toku sterilizacije zračenjem do doze zračenja od približno 3kG. U nekim poželjnim izvođenjima bar jedno sredstvo za sakupljanje radikala i antioksidant obuhvataju tokoferol koji je prisutan u molarnoj koncentraciji od bar 75mM, poželjnije bar 100mM, i čak poželjnije bar 135mM.

[0039] Dodatno ili alternativno, kompozicija koja polimerizuje može da polimerizuje UV očvršdavanjem (npr., posle sterilizacije zračenjem (gama, esnop, itd.)) do bilokog pogodnog polimera, uključujudi na primer, akrilatni polimer, metakrilatni polimer, epoksi polimer, poliuretan, ili tiolenski polimer.

[0040] Gledano iz različite perspektive, kompozicija koja polimerizuje prema inventivnom pronalasku može da sadrži jedan ili više polimera koji sadrže terminalnu eposki grupu, polimer koji sadrži bočnu epoksi grupu, epoksisiloksansku smolu, epoksi-poliuretan, epoksi-poliestar, epihlorohidrin, polihidroksilni diol, polihidroksilni poliol, polimer koji sadrži terminalnu ili bočnu izocijanatnu grupu, polimer koji sarži bar dve hidroksilne grupe, polihidroksilni diol, polihidroksilni poliol, alifatični monomerni politiol, alifatični ditiol, aromatični ditiol, polimerini politiol, akrilat, metakrilat, alkenil, i cikloalkenil. Kada se kompozicija koja polimerizuje prema inventivnom pronalasku podvrge pogodnom energetskom izvoru (npr., UV izvor energije, itd.), smatra se da kompozicija može biti očvrsnuta do tvrdode od bar 1 (npr., tvrdode od bar 10, itd.) na Shore A skali tvrdode u toku perioda od manje od deset minuta, poželjnije perioda manje od 5 minuta, poželjnije perioda manjeg od 60 sekundi, i čak poželjnije, perioda manjeg od 20 sekundi. Gledano iz druge perspektive, smatra se da kompozicija može biti očvrsnuta do tvrdode od bar 1 (npr., tvrdode od bar 10, itd.) na Shore 00 skali tvrdode u okviru bar 10 minuta, poželjnije perioda manjeg od 5 minuta, poželjnije perioda manjeg od 60 sekundi, i čak poželjnijem perioda manjeg od 20 sekundi. Gledano iz druge perspektive, smatra se da kompozicija može biti očvrsnuta do tvrdode od bar 1 (npr., tvrdode od bar 10, itd.) na Shore D skali tvrdode u toku perioda od manje od deset minuta, poželjnije manje od 5 minuta, poželjnije perioda manjeg od 60 sekundi, i čak poželjnije, perioda manje od 20 sekundi.

Eksperimenti

[0041] Različite kompozicije kandidati koje varjabilno sadrže oligomer ili monomer (ili oba), fotoinicijator, stabilizator, antioksidant, sredstvo za podešavanje gustine ili sredstvo za geliranje (ili oba) su testirane da se odredi, između ostalih stvari, da li prethodno određena tečljivost može biti održana u toku sterilizacije zračenjem (e-snop ili gama) pri različitim dozama zračenja i različitim vremenskim periodima. Određenije, kompozicije su testirane u odnosu na sledede:

a. Krajnja gustina – testirana piknometron i izvedena u kompletnoj krvi u toku centrifugiranja. b. Ometanje laboratorijskih testova – testirano upoređivanjem rezultata sa onima dobijenim u BD epruvetama za sakupljanje krvi. Nije bilo primedenih smetnji kada su sredstva za merenje bila u okviru CVs testova. Upoređivanja laboratorijskih testova su obuhvatala ceo postupak korišdenja separatora u centrifugi i pri očvršdavanju sa UV. Monomeri i oligomeri su takođe bili testirani u odnosu na ostajanje krvi u kontaktu sa fotopolimerom koji očvršdava do 8 dana tražedi odložene nedostatke.

i. Potpuni metabolički panel (natrijum, kalijum, hlorid, CO2, kreatinin, bilirubin, ukupni protein, AST, ALT, alkalna fosfataza, glukoze, azot uree, albumin) ii. Imuno testovi (PSA, testosteron, estradiol, TSH, slobodni T4, feritin, iii. Elektroforeza (elektroforeza proteina seruma, lipidni paneli elektroforeze) iv. Lipidi (ukupni holesterol, LDL-c, HDL-c, VLDL-c, Lp(a), trigliceridi)

v. Molekularni testovi (DNK, egzozomna RNK)

c. Hemoliza – merena indeksom na automatizovanom analizatoru, vizuelna procena i povedani nivoi kalijuma.

d. Vreme očvršdavanja sa UV lampama (’arc’ lampe, mikrotalasne sijalice, LEDs)

i. Povedavanje koncentracije antioksidansa izvan (na primer preko 500mM tokoferola) neželjenih efekata na vremena očvršdavanja (produžavanja). Povedavanje koncentracije fotoinicijatora izvan približno 3% da nadoknadi negativan efekat koji utiče na funkcionisanje antioksidanta u održavanju jedinjenja u toku sterilizacije zračenjem.

e. Proizvodnja toplote pri očvršdavanju.

f. Skupljanje pri očvršdavanju.

g. Sposobnost da se steriliše toplotom ili zračenjem (e-snop i gama pri različitim dozama i šemama davanja doza).

i. Sterilizacija toplotom, nije bio potreban antioksidans i nekoliko kombinacija L1 i M1 zadovoljava druge zahteve izvođenja.

ii. Za sterilizaciju zračenjem, data kompozicija ima vede izglede da odgovara ukoliko se doza da brzo (na primer e-snop pre nego gama).

1. LAI može biti sterilisan do 3 kGy bez antioksidansa.

[0042] Testirani monomeri (neki u kombinaciji za podešavanjem gustine) obuhvataju M1, 1,6 heksandiol etoksilat diakrital, poli(etilen glikol) metil etar metakrilat, poli(etilen glikol) diakrilat (kat. br. 437441), poli(etilen glikol) diakrilat (kat. br.475629), trimetilolpropan propoksilat triakrilat, i 1,6-heksandiol etoksilat diakrilat (kat. br. 497134). Od testiranih monomera, M1 je najbolji. Nažalost, kompozicije uključujudi M1 dovode do sakupljanja posle očvršdavanja i prema tome se smatraju optimalnim za upotrebu u zaptivajudim kompozicijama.

[0043] Testirani oligomeri su svi iz serije Ebecryl, i obuhvataju L1-L10 (različiti oligomeri dobijeni iz Cytec). Od testiranih oligomera, L1, L2, L6, L8, L9 i L10 su pogodniji za održavanje tečljivosti u poređenju sa L3-L5 i L7. L1 se pokazao najbolje u odnosu na, na primer, stvaranje manje toplote u toku očvršdavanja, manje sakupljanja (ukoliko ga ima), gustine, viskoznosti, manje zarobljenih balona vazduha i manje pokazanog nepoželjnog uticaja na standardne testove za serum, i ostali ologomeri su brzo odbačeni jer ne ispunjavaju kriterijume. L8 i L9 imaju vedi nepoželjan uticaj na enzime od L1, dok L10 dovodi do vidljive interakcije sa očvrsnutim materijalima. Plazma je vidljivo podeljena u gornji sloj barijere.

[0044] Testirani fotoinicijatori u 1mas.% koncentracije u M1, obuhvataju (azobisizobutilonitril): 254 nm; benzofenon: 254 nm; 4-(dimetilamino)benzofenon: 356 nm; 4,4’-bis(dimetilamino)benzofenon: 370 nm; 4,4’-bis(dietilamino) benzofenon: 379 nm; i A1: 365nm. Talasna dužina fotoinicijatora je izabrana prenošenjem kroz PET epruvete koje de se koristiti. Nađeno je A1 da ima superiorne osobine, pomodu kriterijuma koji uključuje, kompatibilnost sa krvlju, vremena očvršdavanja, stvaranja toplote i mešljivost sa oligomerima i monomerima. A1 je nađeno da ima najbolje osobine za ovu primenu.

[0045] A1 je testiran u različitim koncentracijama u L1 (između 1-8 mas%, uključujude). 1% ±,5% je nađeno da je optimalno kada je(su) prisutan(i) antioksidans(i). Additiol TPO, sa apsorpcijom što dužih talasnih dužina koja se poklapa izabranim UV izvorima, je takođe testiran u različitim koncentracijama u L1. Kada je testiran Additol TPO u 1% koncentraciji sa L1, I1 i vitaminom E u 200-300mM koncentraciji, vreme očvršdavanja je bilo nešto bolje nego kad je testiran u 1% koncentraciji sa L1, I1 i vitaminom E u koncentraciji od 200-300mM. Dalje, nisu primedeni neželjeni uticaji pomodu potpunog metaboličkog panela.

[0046] Testirani stabilizator je fenotiazin u 0,1 mas% koncentraciji. Ovaj stabilizator je prisutan u svim uzorcima. Međutim, smatra se da bilo koji pogodan stabilizator može biti korišden, uključujudi na primer, pogodne stabilizatore koji bi radili u atmosferi bez vazduha (nizak O2).

[0047] Testirani antioksidanti uključuju alfa-tokoferol - 2mM-500mM, karoten, bilirubin, BHT, BHA, tempo, i 4-OH-tempo. Dok tokoferol, tempo i 4-OH-tempo svaki zadržava tečljivost u toku zračenja u dozama iznad 15 kGy (karoten, bilirubin, BHT i BHA nisu uspeli), tempo i 4-OH-tempo su izazvali hemolizu i ometali labaratorijske testove. Tokoferol je nađeno da ima najbolje osobine pri toj primeni.

[0048] Testirani podešivači gustine uključuju Ebecryl 113 iz CYTEC. Testirana je formulacija fizičkog gela obeleženog LARID (D= Ebecryl 113 iz Cytec) i pokazala da ima dobra vremena očvršdavanja i malo ili uopšte nema uticaj na vedinu laboratorijskih testova. LARID sadrži:

a. 30% L= EBECRYL 230 i 70% D

b. gde:

i.1% (L+D) A1 (Additol BDK);

ii.8,19% (L+D) R, pirogeni silicijum dioksid R1 (AEROSIL R805 iz Degussa); i iii.0,1% (L+D) I (fenotiazin iz Sigma).

[0049] Nađeno je da LARID formulacija nije podložana sterilizaciji zračenjem (dok je zadržala tečljivost) jer nije bio prisutan antioksidans.

[0050] Testirana sredstva za geliranje obuhvataju pirogeni silicijum dioksid i DBS (1,3:2,4-dibenziliden sorbitol) i korastvarač NMP (N-metilpirolidon). DBS ima lošije osobine u odnosu na silicijum dioksid u smislu sterilizacije zračenjem dok se zadržava tečljivost. Sa 0,6% DBS i 1,8% NMP, L1A1I1 sistemi gelova. Kada se vrti proređuje se i ima gustinu nižu od BD gela. Vreme UV očvršdavanja je bilo gotovo isto kao L1A1I1R1 i gel koji je očvrsnuo je bio u stanju da preživi jedan krug sa testom tečnog azota sa vrelom vodom, što znači da očvrsli gel treba da preživi mnogi krugova ciklusa smrzavanja otapanja.

Primeri

[0051] Slededi eksperimentalni podaci su obezbeđeni da ilustruju kao primer različite aspekte ovde prikazanog inventivnog pronalaska. Određenije, podaci prikazuju iznenađujudi efekat tokoferola i Additol BDK pri specifičnim koncentracijama u održavanju tečljivosti kompozicije (da bi se omogudila sedimentacija između dve faze kompletne krvi posle centrifugiranja) posle sterilizacije zračenjem pri specifičnim dozama zračenja. Kao što je prikazano, kompozicije sadrže oligomer (EBECRYL 230), fotoinicijatorr, Additol BDK, u koncentraciji manjoj od 2 mas%, i sredstvo za sakupljanje radikala, tokoferol, u koncentraciji od bar 100 mM iznenađujude zadržane tečljivosti posle sterilizacije zračenjem (gama ili e-snop) pri dozi manjoj od 20 kGy. Nasuprot tome, kompozicije kojima fale sredstva za havatanje radikala i kompozicije koje imaju koncentraciju fotoinicijatora vedu od 5 mas.% nisu bile u stanju da zadrže tečljivost posle sterilizacije zračenjem.

[0052] Kao što je ovde prikazano, tehniči efekat nekih aspekta pronalaska je da tokoferol uključen u kompoziciju za zaptivanje u pogodnom koncentracionom opsegu (npr., između 100 - 200 mM) može oboje (1) zarobiti ili ometati radikale dobijene u toku sterilizacije zračenjem (npr., e-snop ili gama), i (2) ne sakuplja ili ometa radikale dobijene u toku polimerizacije izazvane UV zračenjem. Gledano iz različitih perspektiva, tokoferol može biti prisutan u količini koja je efikasna da spreči nekontrolisanu polimerizaciju kada su radikali dobijeni u toku sterilizacije e-snopom ili gama, ali nije efikasan da spreči polimerizaciju u prisustvu UV ili drugih pogodnih izvora energije.

[0053] U nekim izvođenjima inventivnog pronalaska, dva tipa sakupljača radikala su uključena u kompoziciju separatora. Prvi sakupljač radikala (npr., E) može biti osetljiv na radikale koji izazivaju polimerizaciju koji su dobijeni e-zračenjem ili gama zračenjem. Drugi sakupljač radikala (npr., I) može biti osetljiv na radikale koji izazivaju polimerizaciju koji su dobijeni fotoinicijatorom. Prema tome, bez želje za ograničavanjem bilo kojom teorijom ili ograničavanjem obima inventivnog pronalaska, tehnički efekat nekih aspekata inventivnog pronalaska je da E (npr., tokoferol) može biti korišden da održi pogodnu ravnotežu između A (fotoinicijatora) i I (stabilizatora) potrebnog za očvršdavanje L (oligomera) u prisutvu zračenja izazvanog obrazovanjem radikala. Drugim rečima, ukoliko postoji porast I u odgovarajudoj količini da skupi radikale u toku sterilizacije zračenjem (iznad 3kG), I u kompoziciji de nadvaldati A, i kompozicija nede očvrsnusti posle izlaganja UV izvoru energije. Kompozicije prema inventivnom pronalasku mogu da sadrže I u nižim količinama da omogude očvršdavanje / otvrdnajvanje kompozicije posle izlaganja UV energetskom izvoru zbog prisutva E. Gledano iz druge perspektive, E se može smatrati sredstvom za sakupljanje koje je antioksidant koji se žrtvuje i koji se može potroštiti i koji ne utiče na polimerizacionu reakciju izazvanu sa A.

[0054] Dok su gornji podaci zasnovani na L koji je L1, treba znati da drugi oligomeri (npr., akrilat koji sadrži oligomer i metakrilat koji sadrži oligomer) se očekuje da radi umesto L1 zbog njihovih sličnih hemijskih osobina i upotrebe u slobodnoradikalskim polimerizacijama. Slično, dok su gornju podaci zasnovani na A koje je A1 (Additol BDK), drugi fotoinicijatori se očekuje da rade umesto A1 (npr., fosfin oksidni fotoinicijator, fotoinicijator na bazi ketona, benzoin etarski fotoinicijator) zbog njihove sposobnosti da izazovu polimerizacione reakcije.

[0055] Dodatno ili alternativno, drugi stabilizatori mogu biti korišdeni umesto fenotiazina (npr., hidrohinona) jer de se očekivati da se slično produži skladištenje i rok trajanja kompozicije. Drugi sakupljači radikala se takođe očekuje da rade umesto tokoferola, međutim, drugi testirani sakupljači radikala (npr., BHA, BHT, karoten, askorbinska kiselina, bilirubin, galna kiselina, i tempo nitroksid) je dokazano da ometaju neke laboratorijske testove. Bez obzira na to, ovi sakupljači mogu biti korišdeni ukoliko su tipovi korišdenih tesotva ograničeni na specifične kliničke laboratorijske testove. Na primer, nađeno je da izvesni antioksidasi ometaju merenja nekih imunotestova, ali ne molekularne testove.

[0056] Svi ovde opisani postupci mogu biti izvedeni na bilo kojim pogodnim redom ukoliko nije drugačije pokazano ili na drugi način jasno navedeno suprotno. Upotreba bilo kog i svih primera, ili termina korišdenih u primerima (npr. "kao što je") dati su u vezi sa ovim posebnim izvođenjima i svrha je da bolje objasne pronalazak.

Claims

PATENTNI ZAHTEVI

1. Epruveta za sakupljanje uzorka, koja obuhvata

epruvetu koji ima šupljinu; i

supstancu separatora nanetu unutar šupljine koja ima:

slojeviti materijal sa gel komponentom, gde gel komponenta sadrži tiksotropni gel; i dodatni slojeviti materijal sa zaptivajudim slojem koji očvršdava pod dejstvom svetlosti i sadrži (1) oligomer sa (2) fotoinicijator i (3) stabilizator.

2. Epruveta prema zahtevu 1, gde svaki slojeviti materijal sa gel komponentom i slojeviti materijal sa zaptivajudim slojem koji očvršdava pomodu svetlosti ima gustinu između 1,00 i 1,09 g/cm<3>, uključujudi granične vrednosti.

3. Epruveta prema zahtevu 1 ili 2, gde supstanca separator ima gustinu između prosečne gustine kompletne krvi osiromašene delijama i faze kompletne krvi obogadene delijama i tečna je u kompletnoj krvi.

4. Epruveta prema zahtevu 3, gde slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetla sadrži antioksidant i steriliše se zračenjem bez gubitka tečljivosti pri sedimentaciji supstance separatora pod uticajem centrifugalne sile do položaja između faze osiromašene delijama kompletne krvi i faze obogadene delijama kompletne krvi i naknadno polimerizuje pomodu UV očvršdavanja.

5. Epruveta prema bilo kom od zahteva 1 do 4, gde slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti zadržava bar jedan od nivoa kalijuma u uzorku u okviru 10% od početnog nivoa kalijuma i nivoa glukoze u uzorku u okviru 5% početnog nivoa glukoze u tokubar četiri dana.

6. Epruveta prema zahtevu 1, gde slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti je anti-tiksotropni.

7. Postupak proizvodnje epruvete za sakupljanje krvi, koji obuhvata:

nanošenje slojevitog materijla sa gel komponentom separatora, gde gel komponenta sadrži tiksotropni gel u šupljini epruvete; i

nanošenje slojevitog materijala sa zaptivajudom komponentom koja sadrži (1) oligomer, sa (2) fotoinicijatorom i (3) stabilizatorom u šupljini epruvete; i izlaganje komponente koja očvršdava pomodu svetlosti, tako da komponenta koja očvršdava pomodu svetlosti polimerizuje u toku 10 minuta do bar 1 na Shore 00 skali tvrdode.

8. Postupak prema zahtevu 7, dalje obuhvata nanošenje uzorka u šupljinu epruvete i centrifugiranje epruvete za sakupljanje uzorka sa uzorkom, slojevitim materijalom sa gel komponentom separatora i slojevitim materijalom sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti.

9. Postupak prema bilo kom zahtevu 7 ili 8, koji dalje obuhvata sterilizaciju epruvete za sakupljanje uzorka sa slojevitim materijalom sa gel komponentom separatora i slojevitim materijalom sa zaptivajudom komponentom koja očvršdava pomodu svetlosti koje su na nju nanete, pomodu zračenja.

10. Postupak prema bilo kom od zahteva 7 do 9, gde slojeviti materijal sa zaptivajudom gel komponentom sadrži promoter.

11. Postupak prema bilo kom od zahteva 7 do 10, gde svaki slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koji očvršdava pomodu svetlosti i slojeviti materijal sa gel komponentom separatora ima gustinu koja je između srednje gustine frakcije seruma kompletne krivi i frakcije koja sadrži delije kompletne krvi i još je tečna u kompletnoj krvi.

12. Postupak prema bilo kom od zahtev 7 do 11, koji dalje obuhvata grejanje epruvete za sakupljanje uzorka na bar 250 stepeni Celzijusa da bi se sterilizovala epruveta za sakupljanje uzorka.

13. Postupak prema zahtevu 7, gde je slojeviti materijal sa zaptivajudom komponentom koji očvršdava pomodu svetlosti anti-tiksotropan.