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PT2271650E - Compostos de quinuclidina como ligandos de recetor de acetilcolina alfa-7-nicotínica - Google Patents

Compostos de quinuclidina como ligandos de recetor de acetilcolina alfa-7-nicotínica Download PDF

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Publication number
PT2271650E
PT2271650E PT97339493T PT09733949T PT2271650E PT 2271650 E PT2271650 E PT 2271650E PT 97339493 T PT97339493 T PT 97339493T PT 09733949 T PT09733949 T PT 09733949T PT 2271650 E PT2271650 E PT 2271650E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
mmol
amine
pyrimidinyl
methyl
octan
Prior art date
Application number
PT97339493T
Other languages
English (en)
Inventor
Richard E Olson
John E Macor
James H Ii Cook
Ivar M Mcdonald
Dalton King
Nenghui Wang
Christiana I Iwuagwu
F Christopher Zusi
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of PT2271650E publication Critical patent/PT2271650E/pt

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/20—Spiro-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
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Description

DESCRIÇÃO
COMPOSTOS DE QUINUCLIDINA COMO LIGANDOS DE RECEPTOR DE ACETILCOLINA ALFA-7-NICOTINICA
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se de um modo geral a compostos de Fórmula I, incluindo sais dos mesmos, bem como composições e métodos de uso dos compostos. Os compostos são ligandos para o recetor al nicotinico e podem ser úteis para o tratamento de vários distúrbios do sistema nervoso central, especialmente distúrbios afetivos e neurodegenerativos. A esquizofrenia é um distúrbio mental sério, que afeta aproximadamente 1% da população. 0 seu curso progressivo resulta em maior dano do funcionamento mental e social e frequentemente induz ao desenvolvimento de outras patologias. A suscetibilidade é frequentemente típica em famílias, tanto com fatores genéticos como ambientais sendo considerados importantes. Os custos diretos e indiretos da doença são estimados nas dezenas de bilhões de dólares anualmente nos Estados Unidos apenas.
Os pacientes com esquizofrenia tém um risco elevado de suicídio (aproximadamente um risco de 10% ao longo da vida) . Tém um aumento de 2,5 vezes em todas as causas de mortalidade, resultando numa esperança de vida reduzida em 20%. O início da doença pode resultar numa cascata de fatores de estilo de vida não saudáveis e comportamentos que elevam o risco de várias condições e consequentemente o risco de morte. O início da esquizofrenia é mais frequente na adolescência tardia ou idade adulta precoce, e os episódios são recorrentes durante toda a vida. A doença é caracterizada pela expressão de trés domínios de sintoma distintos: positivo, negativo e cognitivo. Sintomas psicóticos ou positivos incluem delírios, alucinações, distúrbios do pensamento e paranoia. Sintomas negativos incluem emoções negativas, abstinência social, e anedonia. A disfunção cognitiva inclui défices de atenção, memória de trabalho e função executiva. A patofisiologia de esquizofrenia não é bem entendida, no entanto, a maioria dos especialistas acreditam que é um distúrbio mult if atorial em que os fatores biológicos, genéticos e ambientais desempenham um papel. A maioria das terapias atuais visam o sistema dopaminérgico e resultaram na sugestão de que um excesso de neurotransmissão dopaminérgica acompanha pelo menos alguns aspetos da esquizofrenia. Esta teoria recebeu suporte adicional de descobertas de que fármacos que aumentam os níveis de dopamina causam psicoses semelhantes aos sintomas positivos da doença. Além disso, análises pós-morte de cérebros de pacientes esquizofrénicos indicam números aumentados dos recetores de dopamina D2. Embora tenham sido introduzidos agentes antipsicóticos mais recentes, conhecidos como antipsicóticos atípicos, que são ativos em diversos recetores de neurotransmissores adicionais, na década anterior, estes agentes ainda partilham eficácia contra o recetor de dopamina D2 . Todos os agentes atualmente utilizados também tém grandes limitações. Embora os sintomas positivos sejam geralmente reduzidos na maioria dos pacientes, estes fármacos contribuem pouco para o alívio dos efeitos negativos e défices cognitivos que são comuns e frequentemente mais debilitantes. Além disso, os agentes antipsicóticos tém diversos efeitos secundários indesejados e limitantes. A nicotina está entre os novos agentes que tém um efeito positivo sobre a função cognitiva. Muitos esquizofrénicos fumam; a taxa em pacientes é 2 a 4 vezes a da população geral, e até 90% dos esquizofrénicos que foram institucionalizados fumam. Este hábito de fumar foi caracterizado como uma forma de automedicação. A doença de Alzheimer é um distúrbio neurodegenerativo progressivo, resultando na perda geral de funções cognitivas. A incidência aumenta com a idade, até ao ponto em que 25 a 50% de todos os indivíduos acima de 85 são estimados como sofrendo de algum grau de demência. Um diagnóstico de Alzheimer implica que a esperança de vida restante é reduzida pela metade, em comparação com adultos normais.
Os sinais clínicos da doença de Alzheimer são deterioração cognitiva progressiva, capacidade diminuída de realizar as atividades da vida diária e sintomas neuropsiquiátricos ou alterações comportamentais. Nos estádios avançados da doença, a deterioração de musculatura e da mobilidade podem levar à incapacidade de alimentar-se, e eventualmente tornar o paciente acamado. A linguagem torna-se gravemente desorganizada, e posteriormente é perdida totalmente. Os pacientes não são capazes de realizar inclusive tarefas simples independentemente e requerem constante supervisão. 0 custo de cuidados institucionais supõe quase 70% do custo da doença. Consequentemente, terapias que aumentam a função cognitiva e atrasam a institucionalização são enormemente necessárias.
Os recetores de acetilcolina nicotinica (nAChR's) são canais iónicos fechados por ligando pentamérico que são amplamente expressos através do sistema nervoso central e periférico. Estes canais são canais de cálcio de rápida dessensibilização que, quando abertos, aumentam a concentração intracelular do ião de Ca++. Embora existam 12 recetores individuais, os recetores nicotínicos mais abundantes no cérebro são α4β2 e a7. O complexo α4β2 foi identificado como o sítio de nicotina de "alta afinidade". O recetor a.1 homo-pentamérico seletivamente liga o produto natural, a α-bungarotoxina, o que permitiu a localização e medição relativamente fácil. O recetor a7 é primariamente expresso no córtex, hipocampo e regiões límbicas subcorticais e comumente ocorre pré-sinapt icamente. A localização de nAChRs de a.1 em áreas envolvidas n aprendizagem e memória tem levado a estudos utilizando tanto ratinhos knockout como manipulação farmacológica. Está envolvido em fechamento sensorial, memória, e plasticidade neuronal. Os compostos que se ligam seletivamente ao recetor a.1 foram mostrados como melhorando funções de aprendizagem e memória em animais normais e idosos, défices de memória reversos induzidos por escopolamina, défices de fechamento reverso induzidos farmacologicamente, e como tendo algumas propriedades ansioliticas. 0 recetor al foi também mostrado como estando envolvido na redução da inflamação por meio do nervo vago. A doença de Alzheimer foi mostrada em diversos estudos como sendo acompanhada por uma redução dos recetores nicotinicos no córtex e hipocampo. Injeções de nicotina ou emplastros de pele de nicotina foram reportadas como melhorando significativamente a atenção, memória e aprendizagem em pacientes de doença de Alzheimer. Enquanto existe uma perda progressiva de recetores nicotinicos durante o curso da doença de Alzheimer, os neurónios al são relativamente poupados, em comparação com os recetores a4 mais abundantes. Recentemente, a administração de agonistas al nicotinicos seletivos foi mostrada como aumentando o funcionamento cognitivo em pacientes de Alzheimer quando doseados durante tanto como 8 semanas.
As seguintes referências proporcionam revisões gerais do sistema de recetor nicotinico e ligandos e recetores al: Picciotto e Zoli, J. Neurobio. (2002) 53:641-655; Brening, et al., Ann. Reports in Med. Chem. (2005) 40:3-16; Dani and Bertrand, Ann. Rev. Pharm. Tox. (2007) 47:699-729; Olincy and Stevens, Biochem. Pharmacol. (2007) 74:11192-1201; Braad, et al., Drugs Future (2007) 32 (2) :161-70; de Jonge and Ulloa, Brit. J. Pharmacol. (2007) 151:915-929; Romanelli, et al., ChemMedChem (2007) 2(6):746767.
Foram descritos ligandos para o recetor al nicotinico Veja-se os documentos EP 452.101, EP 337.547, WO 2003/092580, WO 2004/000,469, publicação de pedido de patente U.S. 2007004715, e C.J. Swain, et al., J. Med. Chem., (1992) 35 :1019-1031. A invenção proporciona vantagens técnicas, por exemplo, os compostos são novos e são eficazes contra a hepatite C.
Adicionalmente, os compostos proporcionam vantagens para usos farmacêuticos, por exemplo, com respeito a um ou mais dos seus mecanismos de ação, ligação, eficácia de inibição, seletividade do alvo, solubilidade, perfis de segurança, ou biodisponibilidade.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO A invenção abrange compostos de Fórmula I, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, e composições dos mesmos. São também divulgados métodos de tratamento utilizando estes compostos. Os compostos podem ser úteis para o tratamento de vários distúrbios do sistema nervoso central:
Um aspeto da invenção é um composto de Fórmula I, ou um estereoisómero do mesmo, em que:
R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em isoxazolilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, piridinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo, triazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, naftiridinilo, indazolilo, indolilo, 2-indolonilo, benzisoxazolilo, benzoisotiazolilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzimidazolilo, furopiridinilo, tienopiridinilo, tienopirimidinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, tiazolopiridinonilo, tiazolopirazinilo, tiazolopirimidinilo, triazolopiridinilo, triazolopiraz inilo, pirrolotriazinilo, 5.6- diidrobenzo[h]quinazolinilo, 5H-cromeno[4,3-d]pirimidinilo, 6.7- diidro-5H-ciclopenta[d]pirimidinilo, 5.6.7.8- tetrahidroquinazolinilo, 7.8- diidroquinazolin-5(6H)-onilo, e tetraidrobenzotiazolilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcoxi, C3-7 cicloalcoxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulf onilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilamida, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde o piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalquilo, Ci-4haloalcoxi, e NR2R3; R2 é hidrogénio, C1-4 alquilo, C1-4 hidroxialquilo, ou C1-4 aminoalquilo; R3 é hidrogénio, C1-4 alquilo, C1-4 hidroxialquilo, ou C1-4 aminoalquilo; ou R2 e R3 empregues juntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados são axetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, N- (C4 —4 alquil)piperazinilo, morfolinilo, ou homopiperidinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é o estereoisómero de Fórmula I, de acordo com a Fórmula Ia.
Outro aspeto da invenção é um composto de Fórmula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilisoxazolilo, (metil)(fenil)isoxazolilo, metilpirazolilo, dimetilpirazolilo, tienilpirazolilo, metoxifenilpirazolilo, tiazolilo, bromotiazolilo, cianotiazolilo, metiltiazolilo, dimetiltiazolilo, (metil)(fenil)tiazolilo, isopropiltiazolilo, butiltiazolilo, benziltiazolilo, metoxifenilmetiltiazolilo, feniltiazolilo, clorofeniltiazolilo, metoxifeniltiazolilo, (metoxifenil)(metil)tiazolilo, piridiniltiazolilo, (fenil)(metil)imidazolilo, metiloxadiazolilo, etiloxadiazolilo, metiltiadiazolilo, fluorofeniltiadiazolilo, furiitiadiazolilo, (dimetilcarboxamido)(metil)tiazolilo, (pirrolidinilo)tiazolilo, feniltriazolilo, piridinilo, bromopiridinilo, cloropiridinilo, (cloro) (fluoro)piridinilo, (cloro)(metil)piridinilo, dicloropiridinilo, fluoropiridinilo, cianopiridinilo, (ciano) (metil)piridinilo, (ciano)(dimetil)piridinilo, metoxipiridinilo, (metilpirrolidinil)piridinilo, fenilpiridinilo, metoxipiridinilpiridinilo, piridazinilo, bromopiridazinilo, cloropiridazinilo, metilpiridazinilo, metoxipiridazinilo, metiltiopiridazinilo, pirrolidinilpiridazinilo, pirrolidinonilpiridazinilo, fenilpiridazinilo, piridinilpiridaz inilo, metoxipiridinilpiridaz inilo, pirimidinilo, (bromo) (isopropil)pirimidinilo, (bromo)(dimetil)pirimidinilo, (bromo)(ciclopropil)pirimidinilo, (bromo) (metoxi)pirimidinilo, (bromo) (fenil)pirimidinilo, (bromo)(piridinil)pirimidinilo, cloropirimidinilo, (cloro)(dimetil)pirimidinilo, (metil)(metoxi)pirimidinilo, metilpirimidinilo, etilpirimidinilo, (metil) (fenil)pirimidinilo, dimetilpirimidinilo, butilpirimidinilo, isopropilpirimidinilo, ciclopropilpirimidinilo, metoxipirimidinilo, dimetoxipirimidinilo, isopropoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, trifluoroetoxipirimidinilo, fenoxipirimidinilo, metiltiopirimidinilo, fenilpirimidinilo, clorofenilpirimidinilo, metilfenilpirimidinilo, metoxifenilpirimidinilo, (fenil)(triazolil)pirimidinilo, piridinilpirimidinilo, metoxipiridinilpirimidinilo, metoxipirimidinilpirimidinilo, naftilpirimidinilo, pirazinilo, bromopirazinilo, (bromo)(metoxi)pirazinilo, cloropirazinilo, metilpirazinilo, dimetilpirazinilo, butilpirazinilo, cianopirazinilo, metoxipirazinilo, isopropoxipirazinilo, trifluorometilpirazinilo, e fenilpirazinilo, e dimetiltriazinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto de Fórmula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilpiridinoisoxazolilo, benzoxazolilo, clorobenzoxazolilo, fluorofenilbenzoxazolilo, etilfenilbenzoxazolilo, dimetilaminofenilbenzoxazolilo, piridinilbenzoxazolilo, benzotiazolilo, acetamidobenzotiazolilo, bromobenzotiazolilo, clorobenzotiazolilo, (cloro)(metil)benzotiazolilo, (cloro)(metoxi)benzotiazolilo, fluorobenzotiazolilo, difluorobenzotiazolilo, cianobenzotiazolilo, metilbenzotiazolilo, dimetilbenzotiazolilo, (metil)(metoxi)benzotiazolilo, etilbenzotiazolilo, trifluorometilbenzotiazolilo, hidroxibenzotiazolilo, metoxibenzotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, isopropoxibenzotiazolilo, trifluorometoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, dimetoxibenzotiazolilo, morfolinilbenzotiazolilo, (pirrolidinilCO)benzotiazolilo, metilsulfonilbenzotiazolilo, clorotiazolopiridinilo, dimetiltiazolopiridinilo, benziloxitiazolopiridinilo, difluorometoxitiazolopiridinilo, benzotriazolilo, indolonilo, indazolilo, bromoindazolilo, cloroindazolilo, fluoroindazolilo, (metil)(metoxi)indazolilo, metoxiindazolilo, trifluorometilindazolilo, trifluorometoxiindazolilo, difluorometoxiindazolilo, benzimidazolilo, fluorobenzimidazolilo, metilbenzimidazolilo, (metil)(metoxi)benzimidazolilo, metoxibenzimidazolilo, tetraidrobenzotiazolilo, furopiridinilo, dimetilfuropirimidinilo, tienopirimidinilo, isopropiltienopirimidinilo, dimetiltienopirimidinilo, clorotriazolopiridinilo, metiltriazolopiridinilo, trifluorometiltriazolopiridinilo, metoxitriazolopiridinilo, triazolopiraz inilo, bromopirrolotriaz inilo, dimetilaminotiazolopirimidinilo, tiazolopiazinilo, bromotiazolopiazinilo, metoxitiazolopiazinilo, metiltiotiazolopiazinilo, metoxitiazolopirimidinilo, (metil)(metoxi)tiazolopirimidinilo, quinolinilo, bromoquinolinilo, fluoroquinolinilo, metilquinolinilo, (metil)(metoxi)quinolinilo, isoquinolinilo, bromoisoquinolinilo, dicloroisoquinolinilo, metilisoquinolinilo, dimetilisoquinolinilo, quinoxalinilo, cloroquinoxalinilo, metilquinoxalinilo, metoxiquinoxalinilo, quinazolinilo, bromoquinazolinilo, naftiridinilo, 5.6- diidrobenzo[h]quinazolinilo, 5H-cromeno[4,3-d]pirimidinilo, 6.7- diidro-5H-ciclopenta[d]pirimidinilo, 5.6.7.8- tetraidroquinazolinilo, e 7.8- diidroquinazolin-5(6H)-onilo; ou urn sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto de Fórmula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em feniltiazolilo, (cloro)(metil)piridinilo, (bromo) (fenil)pirimidinilo, metoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, difluoroetoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, (metilfenil)pirimidinilo, (metoxifenil)pirimidinilo, bromopirazinilo, cloropirazinilo, metiltiopirazinilo, metoxibenzotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, tiazolopiridinonilo, trifluorometilindazolilo, benzimidazolilo, isoquinoinilo, e quinazolinilo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto ou formula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, benzotiazolilo, tiazolopiridinilo, indazolilo, benzimidazolilo, isoquinoinilo, e quinazolinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em Ci.4 alquilo, C3. 7cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, Ci-4haloalcoxi, C3. vcicloalcoxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilomido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde o piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcoxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto ou Fórmula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, tiazolopiridinilo, e isoquinoinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcoxi, C3-7 cicloalcoxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilomido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde o piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, Ci_4 alcoxi, Ci_4 haloalquilo, Ci_4 haloalcoxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto ou Fórmula I ou Ia onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em piridinilo e isoquinoinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcoxi, C3-7 cicloalcoxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, Ci-4alquilomido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde 0 piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcoxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto selecionado a partir do grupo consistindo em
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspeto da invenção é um composto de Fórmula I onde Ri é selecionado a partir do grupo consistindo em tiazol, tiadiazol, isoxazol, oxazol, pirazol, imidazol, piridina, pirazina, piridazina, pirimidina, quinolina, isoquinolina, quinoxalina, indazol, indol, 2-indolona, benzotiazol, benzimidazol, benzoxazol, benzo(d)isotiazol, benzisoxazol, isotiazolo-[5,4-b]piridina, (1,2,4)triazolo[1,5-a]piridina, tiazolo[5,4-b]piridina e tetraidrobenzotiazol em que cada grupo é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, halogénio, hidroxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, trifluorometoxi, difluorometoxi, C1-4 alquilsulfonilo, furilo, morfolino, metilenodioxi, piridilo, C1-4 alquilfenilo, halofenilo, dimetilaminofenilo, C1-4 alquilamido, -CONR2R3 em que R2 e R3 cada é independentemente hidrogénio, C1-4 alquilo, hidroxi C1-4 alquilo, amino C1-4 alquilo ou R2 e R3 empregues juntos com o átomo ao qual se encontram ligados são C3-6cicloalquilo; fenilo, fenilo substituído, fenilmetilo, fenilmetilo substituído no qual os ditos fenilo substituído e fenilmetilo substituído são substituídos com substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halogénio, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, trifluorometilo e trifluorometoxi; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
Para um composto de Fórmula I ou Ia, o âmbito de qualquer caso de um substituinte variável, incluindo R1, R2, e R3, pode ser utilizado independentemente com o âmbito de qualquer outro caso de um substituinte variável. Como tal, a invenção inclui combinações dos diferentes aspetos. A menos que de outro modo especificado, estes termos tém os seguintes significados. "Alquilo" significa um grupo alquilo linear ou ramificado composto por 1 a 4 carbonos. "Alquenilo" significa um grupo alquilo linear ou ramificado composto por 2 a 4 carbonos com pelo menos uma ligação dupla. "Alquinilo" significa um grupo alquilo linear ou ramificado composto por 2 a 4 carbonos com pelo menos uma ligação tripla. "Cicloalquilo" significa um sistema de anel monocíclico composto de 3 a 7 carbonos. "Haloalquilo" e "haloalcoxi" incluem todos os isómeros halogenados de monohalo a perhalo. Termos com uma porção de hidrocarboneto (por exemplo alcoxi) incluem isómeros lineares e ramificados para a porção de hidrocarboneto. Os termos em parêntesis e multiparêntesis pretendem clarificar relações de ligação para os peritos na especialidade. Por exemplo, um termo tal como ( (R)alquilo) significa um substituinte alquilo substituído adicionalmente com o substituinte R. A invenção inclui todas as formas de sal farmaceuticamente aceitável dos compostos. Sais farmaceuticamente aceitáveis são aqueles em que os contra-iões não contribuem significativamente para a atividade fisiológica ou toxicidade dos compostos e como tal funcionam como equivalentes farmacológicos. Estes sais podem ser fabricados de acordo com técnicas orgânicas comuns empregando reagentes comercialmente disponíveis. Algumas formas de sal aniónicas incluem acetato, acistrato, besilato, brometo, cloreto, citrato, fumarato, glucouronato, bromidrato, cloridrato, iodidrato, iodeto, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato, e xinofoato. Algumas formas de sal catiónicas incluem amónio, alumínio, benzatina, bismuto, cálcio, colina, dietilamina, dietanolamina, lítio, magnésio, meglumina, 4-fenilcicloexilamina, piperazina, potássio, sódio, trometamina, e zinco.
Alguns dos compostos da invenção existem em formas estereoisoméricas. A invenção inclui todas as formas estereoisoméricas dos compostos incluindo enantiómeros e diastereómeros. Métodos de preparar e separar estereoisómeros são conhecidos na técnica. A invenção inclui todas as formas tautoméricas do composto. Um exemplo de um par tautomérico é mostrado abaixo.
Métodos sintéticos
Os compostos podem ser feitos através de métodos conhecidos na técnica incluindo aqueles descritos abaixo e incluindo variações dentro da experiência da técnica. Alguns reagentes e intermediários são conhecidos na técnica. Outros reagentes e intermediários podem ser preparados através de métodos conhecidos na técnica utilizando materiais prontamente disponíveis. A variável (por exemplo substituintes "R" numerados) utilizada para descrever a síntese dos compostos pretende somente ilustrar como preparar os compostos e não deve ser confundida com variáveis utilizadas nas reivindicações ou noutras seções da especificação. Os seguintes métodos são para propósitos ilustrativos.
Alguns dos compostos podem ser preparados utilizando as reações e técnicas descritas nesta seção. As reações são realizadas em solventes adequados para os reagentes e materiais empregues e são adequadas para as transformações sendo realizadas. É entendido por um perito na especialidade de sínteses orgânicas que a funcionalidade presente em várias porções da molécula deve ser compatível com os reagentes e reações propostos. Tais restrições aos substituintes que são compatíveis com as condições de reação serão facilmente evidentes para um perito na especialidade e devem então ser utilizados métodos alternativos.
As abreviações utilizadas nos esquemas geralmente seguem convenções utilizadas na técnica. As abreviações químicas utilizadas na especificação e exemplos são definidas como segue: "NaHMDS" para bis (trimetilsilil)amida de sódio; "DMF" para N,N-dimetilformamida; "MeOH" para metanol; "NBS" para N-bromossuccinimida; "Ar" para arilo; "TFA" para ácido trifluoroacético; "LAH" para hidreto de alumínio e lítio; "BOC", "DMSO" para dimetilsulfóxido; "h" para horas; "rt" até à temperatura ambiente ou tempo de retenção (o contexto ditará); "min" para minutos; "EtOAc" para acetato de etilo; " THF" para tetraidrofurano; "EDTA" para ácido etilenodiaminatetra-acético; "Et20" para éter dietílico; "DMAP" para 4-dimetilaminopiridina; "DCE" para 1.2- dicloroetano; "ACN" para acetonitrilo; "DME" para 1.2- dimetoxietano; "HOBt" para hidrato de lidroxibenzotriazol; "DIEA" para diisopropiletilamina, "Nf" para CF3(CF2) 3SO2-; e "TMOF" para trimetilortoformiato.
Abreviações conforme utilizado no presente documento, são definidas como segue: "1 x" para uma vez, "2 x" para duas vezes, "3 x" para trés vezes, "°C" para graus Celsius, "eq" para equivalente ou equivalentes, "g" para grama ou gramas, "mg" para miligrama ou miligramas, "1" para litro ou litros, "ml" para mililitro ou mililitros, "μΐ" para microlitro ou microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol" para milimol ou milimoles, "min" para minuto ou minutos, "h" para hora ou horas, "ta" até à temperatura ambiente, "TR" para tempo de retenção, "atm" para atmosfera, "psi" para libras por polegada ao quadrado, "conc." para concentrado, "sat" ou "sat'd " para saturado, "MM" para massa molecular, "pf" para ponto de fusão, "ee" para excesso enantiomérico, "MS" ou "Mass Spec" para espetrometria de massa, "ESI" para espectroscopia de massa por ionização de eletrovaporização, "HR" para alta resolução, "HRMS" para espectrometria de massa de alta resolução, "LCMS" para espectrometria de massa de cromatografia liquida, "HPLC" para cromatograf ia liquida de alta pressão, "RP HPLC" para HPLC de fase reversa, "TLC" ou "tlc" para cromatografia de camada fina, "RMN" para espectroscopia de ressonância magnética nuclear, nlH" para protão, "δ" para delta, "s" para singleto, "d" para dupleto, "t" para tripleto, "q" para quarteto, "m" para multipleto, "1" para longo, "Hz" para hertz, e "a", "P", "R", "S", "E", e "Z" são designações estereoquímicas familiares para um perito na especialidade.
Esquema 1
Os compostos de Fórmula I são preparados como ilustrado no Esquema de Reação 1. A cetona de Fórmula III (3-quinuclidona) é conhecida, encontra-se comercialmente disponível, ou pode ser preparada através de métodos conhecidos por parte dos peritos na especialidade. A cetona pode ser convertida na correspondente cianoidrina de Fórmula IV através reação com cianeto de sódio ou potássio mais um ácido. 0 composto de Fórmula IV pode ser reduzido ao correspondente composto de amino-metilo (complexo de borano) de Fórmula V por reação com complexo de borano/tetraidrofurano. 0 composto de Fórmula V pode ser feito reagir com isotiocianatos de heteroarilo diretamente num solvente inerte para proporcionar as tioureias de Fórmula VI. Alternativamente, a heteroarilamina pode ser feita reagir com tiocarbonil-diimidazol para proporcionar uma espécie ativada que pode ser utilizada sem isolação para converter o composto de Fórmula V no composto de Fórmula VI. A heteroarilamina pode ser preparada por métodos conhecidos por parte dos peritos na especialidade. A tioureia de Fórmula VI pode ser ciclizada utilizando, por exemplo, carbodiimida de diisopropilo para proporcionar a oxazolina de Fórmula VII que pode ser desprotegida por meio de tratamento com ácido para proporcionar o produto final racémico do composto de Fórmula I. 0 composto de Fórmula I pode ser redissolvido em compostos de enantiómero puro de Fórmula Ia e Fórmula Ib através de métodos conhecidos na técnica, por exemplo, através de cromatografia quiral.
Alternativamente, o grupo amino livre da quinuclidina de Fórmula V pode ser bloqueado com, por exemplo, carbobenziloxi-cloreto ("CBZ-C1") para proporcionar o composto de Fórmula VIII, conforme ilustrado no Esquema de Reação 2 . 0 composto racémico de Fórmula VIII pode ser redissolvido nos seus enantiómeros, Fórmula IX e Fórmula X, por exemplo, através de cromatografia quiral. 0 composto de Fórmula IX ou de Fórmula X, e preferivelmente o composto de Fórmula X, pode então ser levado conforme mostrado no esquema de reação 2. 0 grupo borano no composto de Fórmula X pode ser removido, por exemplo, através de tratamento com ácido clorídrico diluído, e o grupo carbobenziloxi pode ser removido, por exemplo, através hidrogenação catalítica para proporcionar a amina de quinuclidina quiral de Fórmula XI. De forma semelhante ao Esquema de Reação 1, o sal de amina de Fórmula XI pode ser feito reagir com isotiocianatos para proporcionar a tioureia de Fórmula Via, que pode então ser feita reagir com dialquil carbodiimidas ou tioureias mistas (conforme a partir da reação com tiocarbonil diimidazol) para proporcionar os compostos de quinuclidina de oxazolina quiral de Fórmula Ia, e o seu tautómero, Fórmula lia.
Alternativamente, o grupo de borano de V pode ser removido com ácido clorídrico para proporcionar o sal de dicloridrato XII, que pode ser feito reagir na presença de base com um isotiocianato para proporcionar o intermediário tioureia XIII, que pode então ser ciclizado conforme os Esquemas de Reação 1-2 para proporcionar I. XII pode também ser preparado através de outros métodos, conforme referenciado no documento de Patente U.S. N° 5.137.895 (11/8/1992).
Adicionalmente, as aminas (hetero)aromáticas podem ser feitas reagir com dissulfureto de carbono, hidróxido de sódio, e iodeto de metilo para proporcionar os carbonimidoditioatos de dimetilo intermédios XIV. Estes são feitos reagir com diidrocloreto XI na presença de base para eliminar duas moles de metanotiol e gerar os produtos desejados Ia diretamente. Métodos biológicos I) Ligação de Acetilcolina Nicotinica al. Foram preparadas membranas para ligação utilizando células HEK293 estavelmente expressando o recetor de acetilcolina nicotinico a7 de rato (nAChR a7 de rato) . As células foram homogeneizadas a 4°C em tampão de lise hipotónico consistindo em Tris a 10 mM (pH 7,4), EDTA a 5 mM e inibidores de protease e centrifugadas a 32000 xg durante 20 minutos. O sedimento foi lavado uma vez em tampão de lavagem de membrana consistindo em Tris a 50 mM (pH 7,4), EDTA a 1 mM e inibidores de protease e centrifugado a 32000 xg durante 20 minutos. Este sedimento foi posteriormente ressuspenso em tampão de ensaio consistindo em KH2P04 a 50 mM (pH 7,4 a 25°C), EDTA a 1 mM, 0,005% TritonX 100 e 0,1% (v/v) Sigma Protease Inhibitor Cocktail. As aliquotas foram posteriormente congeladas em gelo seco/etanol e mantidas a-80°C até ao dia do ensaio. II) Um Ensaio com base em Fluorescência, Sensível a Ca2+ para Função de Canal de Recetor de Acetilcolina Nicotinico a-7 em Células de Mamíferos ("FLIPR"). Sumário: Compostos de chumbo são avaliados enquanto à atividade de agonista nos subtipos a-7, a3pp4, a4ap2, e αΐβίδΐε de canais iónicos de recetor Ach nicotinico expressos em células HEK 293 mamíferas. A potência de agonista e valores de eficácia são determinados a partir de medições de influxo de Ca2+ de fluorescência cinética feitas utilizando um FLIPR de 384 poços (Leitora de Placa de Imagem de Fluorescência). A utilidade de indicadores fluorescentes para medir alterações em concentrações de catião divalente intracelular, particularmente Ca2+, para esforços de descoberta de fármaco é bem-documentada (Rudiger, R., et al., Nature Reviews, 2003, 4:579-586; Gonzalez J.E., et al., Receptors and Channels, 2002, 8:283-295) . Neste ensaio, linhagens de células HEK expressando canais semeadas em placas de ensaio de 384 poços são carregadas com um corante indicador de Ca2+ fluorescente de permeação de membrana, cujo sinal de emissão verde de 510 nm aumenta em resposta à elevação de concentração de Ca2+ intracelular. A fluorescência basal das células é monitorada em tempo real, seguida pela adição aguda de compostos teste. Se o composto é um agonista em qualquer dos canais de catiões não seletivos, estes últimos abrem e permitem o movimento de iões de Ca2+ extracelulares dentro do citoplasma celular, onde se ligam ao corante indicador de Ca2+, e produzem um aumento no sinal de produção de fluorescência, que é detetado através de uma câmara de imagem CCD arrefecida.
Materiaise Métodos: Reagentes: O éster de acetometoxi (AM) do corante Fluo-4 indicador de Ca2+ foi obtido a partir de InVitrogen, (Carlsbad, CA) . Acetilcolina e todos os constituintes de tampões foram adquiridos a partir de Sigma Chemical Company, St. Louis, MO. G418 e o Meio Essencial Mínimo foi adquirido a partir de InVitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA. O soro bovino fetal foi adquirido a partir de (InVitrogen, Carlsbad, CA). Cultura celular: Células HEK-293 foram cultivadas em Meio Essencial Mínimo contendo soro bovino fetal a 10% (v/v) a 37°C numa incubadora de C02 a 5%. Células HEK-293 expressando estavelmente os canais iónicos foram cultivadas no mesmo meio com a adição de G418 a 500 pg/ml. Ensaios de fluxo de Ca2+ de canais de Ca2+ expressos em células HEK-293: Células HEK-293 expressando os canais iónicos de interesse foram semeadas em placas revestidas com poli-D-lisina, de base transparente, de parede preta, 384 poços a uma densidade de -20,000 células/poço em Meio Essencial Mínimo a 20μ1 contendo de soro bovino fetal a 10% (v/v) e incubadas durante 2 dias a 29°C numa incubadora de C02 a 5%. Antes do ensaio, as células foram carregadas com o éster de Fluo-4 AM. 0 carregamento celular foi realizado removendo o meio de cultura e substituindo-o com do éster de AM do corante (5 μΜ) a 30pl/poço misturado com Hanks Balanced Salt Solution (n.° 14175-095) contendo HEPES a 20mM, probenecid a 2,5 mM, CaCl2 a 0,5 mM, MgCl2 a 1 mM e atropina a 10 μΜ. O carregamento de corante foi deixado prosseguir durante 90 minutos à temperatura ambiente, em cujo tempo a solução de carregamento de corante foi removida e substituída com tampão de Hanks a 40 μΐ/poço. As células carregadas com corante foram carregadas sobre um FLIPR384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) . O corante Fluo-4 foi excitado utilizando a linha de 488 nm de um laser de árgon. A emissão foi filtrada utilizando um filtro de passagem de intervalo de 540 ± 30 nm. Para avaliação dos efeitos de compostos teste utilizando o ensaio de fluxo de Ca2+, os compostos a serem testados foram proporcionados em placas prontas de ensaio. Para células expressando canais iónicos de recetor nicotínico, o ensaio foi iniciado através da adição de tampão Hanks a 20 μΐ/poço contendo compostos testes. Para todos os ensaios, os dados foram recolhidos a 1 Hz durante 10 segundos (referência), em cujo tempo o composto contendo tampões de estímulo é adicionado, e outras medições são recolhidas a 0,33Hz durante 3 min. Análise de Dados: A robusteza estatística dos ensaios de fluxo de Ca2+ de recetor nicotínico é determinada a partir de poços vazios e totais. Os poços totais definem a ativação de canal máxima para cada placa teste de composto (dose de eficácia máxima de acetilcolina), e os poços vazios que contém apenas DMSO igualado, definem a ativação de canal zero. Os arquivos de dados de unidades de fluorescência em bruto gerados no leitor de placa FLIPR são automaticamente exportados e processados por ferramentas de análise de dados internos. Os dados de ativação de percentagem reduzida para cada concentração de composto teste são ajustados utilizando o mecanismo de ajuste MathlQ (ID Business Solutions Limited, Surrey, UK). Os dados foram analisados através de ajuste de amplitudes máximas de alteração em fluorescência, para fluxo de Ca2+ para uma determinada condição de composto teste. As potências (valores CE50) de compostos são calculadas a partir da média de trés poços de ensaio a partir de um CRC de vinte pontos. Os valores de eficácia de composto teste (valores Ymax) são expressos com relação à resposta máxima à acetilcolina nos poços totais. III) Ensaio de quantificação Fos: Ratos Wistar machos são tratados com fármaco (1 a 10 mg/kg) ou veiculo (2 ml/kg, sc) . Duas horas após os tratamentos, os ratos são rapidamente decapitados e são isoladas regiões cerebrais discretas de interesse sobre gelo e pesadas e congeladas instantaneamente com azoto liquido e armazenadas a-80°C. Processamento adicional do tecido cerebral para extratos nucleares, bem como para a quantificação de Fos estão de acordo com o protocolo prescrito por um kit de deteção de quimioluminiscéncia comercialmente disponível (catálogo n.° 89.860, EZ-detect c-Fos Trans kit, Pierce
Biotechnology Inc., Rockford, IL). IV) Ensaio MK-801 Disrupted Set-Shift em ratos: Este ensaio utiliza uma modificação do protocolo descrito por Stefani et ai. (Behavioral Neuroscience, 2003, 117: 728-737). Os compostos teste são avaliados enquanto à sua capacidade de reverter um défice de desempenho induzido por MK-801 (0, 03 mg/kg, i.p., dose única) neste ensaio. A atividade de compostos específicos descritos aqui e testados no ensaio acima (II) é proporcionada no Quadro 1.
Quadro 1
Composições Farmacêuticas e Métodos de Tratamento
Compostos de Fórmula I ligam a alfa 7 e podem ser úteis no tratamento de distúrbios afetivos e distúrbios neurodegenerativos. Consequentemente, outro aspeto da invenção é uma composição compreendendo um composto de Fórmula I,ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
Outro aspeto da invenção é a utilização de um composto de Fórmula I no fabrico de um medicamento para o tratamento de distúrbios afetivos ou distúrbios neurodegenerativos.
Outro aspeto da invenção é a utilização de um composto de Fórmula I no fabrico de um medicamento para o tratamento de esquizofrenia ou doença de Alzheimer.
Outro aspeto da divulgação é um método de tratar distúrbios afetivos ou distúrbios neurodegenerativos compreendendo administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I.
Outro aspeto da divulgação é um método de tratar esquizofrenia ou doença de Alzheimer compreendendo administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I.
Outro aspeto da divulgação é um método de tratar a esquizofrenia compreendendo administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I.
Outro aspeto da divulgação é um método de tratar a doença de Alzheimer compreendendo administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I. "Paciente" significa uma pessoa adequada para terapia como entendido pelos práticos no campo de distúrbios afetivos e distúrbios neurodegenerativos. "Tratamento" "terapia," e termos relacionados são utilizados conforme entendido por parte dos profissionais no campo de distúrbios afetivos e distúrbios neurodegenerativos.
Os compostos desta invenção são geralmente administrados como composições farmacêuticas compreendidas de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou do seu sal farmaceuticamente aceitável e um veículo farmaceuticamente aceitável e podem conter excipientes convencionais. Os veículos farmaceuticamente aceitáveis são aqueles veículos convencionalmente conhecidos tendo perfis de segurança aceitáveis. Composições abrangem todas as formas sólidas e líquidas comuns incluindo, por exemplo, cápsulas, comprimidos, losangos, e pós, bem como suspensões líquidas, xaropes, elixires, e soluções. As composições são preparadas utilizando técnicas de formulação comuns, e excipientes convencionais (tais como agentes de ligação e humedecimento) e veículos (tais como água e álcoois) são geralmente utilizados para composições. Veja-se, por exemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17a edição, 1985 .
As composições sólidas são normalmente formuladas em unidades de dosagem e são preferidas composições proporcionando de cerca de 1 a 1000 mg do ingrediente ativo por dose. Alguns exemplos de dosagens são de 1 mg, 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg, e 1000 mg. Geralmente, outros agentes estarão presentes num intervalo de unidade semelhante aos agentes do tipo utilizado clinicamente. Tipicamente, este é de 0,25 a 1000 mg/unidade.
As composições líquidas encontram-se habitualmente em intervalos de unidade de dosagem. Geralmente, a composição líquida estará num intervalo de dosagem unitária de 1-100 mg/ml. Alguns exemplos de dosagens são de 1 mg/ml, 10 mg/ml, 25 mg/ml, 50 mg/ml, e 100 mg/ml. Geralmente, outros agentes estarão presentes num intervalo de unidade semelhante aos agentes do tipo utilizado clinicamente. Tipicamente, este é de 1-100 mg/ml. A divulgação abrange todos os modos de administração convencionais; são preferidos os métodos oral e parentérico Geralmente, o regime de dosagem será semelhante a outros agentes utilizados clinicamente. Tipicamente, a dosagem diária será de 1-100 mg/kg de massa corporal diariamente. Geralmente, é requerido mais composto por via oral e menos por via parentérica. O regime de dosagem especifico, no entanto, será determinado por parte de um médico utilizando juízo médico seguro.
DESCRIÇÃO DE FORMAS DE REALIZAÇÃO ESPECÍFICAS
Os espectros de 1H-RMN foram feitos correr num instrumento Bruker de 500, 400, ou 300 MHz e os deslocamentos químicos foram relatados em ppm (5) com referência atetrametilsilano (8 = 0,0). Todas as evaporações foram realizadas sob pressão reduzida. A menos que de outro modo estabelecido, foram realizadas análises de LC/MS num instrumento Shimadzu utilizando uma coluna de fase reversa Phenomenex-Luna 4,6x50mm S 10 empregando uma taxa de fluxo de 4 ml/min utilizando um gradiente de TFA a 0,1% em metanol/água [0-100% em 3 min, com 4 min de tempo de realização] e um detetor de UV estabelecido a 220 nm ou coluna de fase reversa Gemini C18 4,6x50 mm 5u empregando uma taxa de fluxo de 5 ml/min utilizando um gradiente de acetato de amónio a 10 mM acetonitrilo/água [5-95% em 3 minutos, com 4 minutos de tempo de realização] e um detetor de UV estabelecido a 220 nm (espectrometria de massa iónica negativa) . A menos que de outro modo estabelecido, a purificação pode ser realizada através de coluna C-18 preparativa empregando gradientes de metanol-água contendo ácido trifluoroacético (TFA) a 0,1%, e utilizando um Sistema Cromatográfico Preparativo Liquido de Alto Desempenho Shimadzu empregando uma coluna XTERRA 30x100 mm S5 a 40 ml/min de taxa de fluxo com um gradiente de 12 minutos. EXEMPLO 1 N-(benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1 '-azaspiro[oxazol-5f3' -biciclo[ 2r2,2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(Benzo[d]tiazol-2-il)-IH-imidazol-l-carbotioamida
À benzo[d]tiazol-2-amina (20 g, 133 mmol) em acetonitrilo (300 ml) foi adicionado 1,1'tiocarbonildiimidazol (30,8 g, 173 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 24 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 2 horas. O produto, N-(benzo [d]tiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida (28,9 g, 111 mmol), foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer purificação adicional.
Etapa B: (3- ( (3-Benzo[d]tiazol-2-iltioureido)metil)-3-hidroxi-l-amon iobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
À N-(benzo[d]tiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida (9,2 g, 35 mmol) em N, N-dimetilformamida (100 ml) foi adicionado (3-(aminometil)-3hidroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)t riidroborato (6,0 g, 35 mmol) que foi sintetizado de acordo com Swain C.J., et ai., J. Med. Chem., 35:10191031 (1992) . A reação foi agitada a 65°C durante 15 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir o produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo/hexanos a 50-100%) produzindo as primeiras manchas/frações detetadas através de TLC como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (3((3-benzo[d]tiazol-2-iltioureido)metil)-3idroxi-l-amoniob iciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (10,6 g, 29,1 mmol, rendimento 83%) como um pó esbranquiçado. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,88 (s, 1 H) , 10,30 (s, 1 H) , 7,94 (d, J= 7,63
Hz, 1 H) , 7,55 7, 74 (m, 1 H) , 7,37 7,53 (m, J = 7,32, 7,32 Hz, 1H), 7,16 7,37 (m, J = 7, 63, 7,63 Hz, 1H), 5,39 (s, 1H), 3,85 (d, 2 H) , 2, 65 3, 08 (m, 6 H) , 1, 99 2,22 (m, 1 H) , 1,79 1, 97 (m, 2 H), 1,66 1,79 (m, 1 H), 1,08 1,63 (m, 4 H). MS (LC/MS) T.R. = 3,40; [M+H]+ = 363, 1 .
Etapa C: (2-(Benzo[d]tiazo 1-2-ilamino)-4H-1 '-amonioespiro[oxazol-5, 3 ' biciclo[2 f2, 2 ] octano]-1'-il) triidroborato
Ao
(3- ( (3-benzo[d]tiazol-2-iltioureido)metil)-3idroxi-l-amonio biciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (10, 6 g, 29,1 mmol) em N,N-dimetilformamida (100 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (11,4 ml, 72,8 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada para produzir um resíduo em bruto. Uma pequena quantidade de acetato de etilo (20 ml) foi adicionada e a suspensão foi sonicada. Os sólidos foram filtrados e lavados com pequenas porções de acetato de etilo (2 x 10 ml) . Os sólidos foram secos num forno a vácuo (80°C) para produzir (2-(benzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (6,83 g, 20,8 mmol, rendimento 72%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,09 (s. 1., 1H) 7,81 (d, J =7, 63 Hz, 1H) 7,63 (d, J - 7,93 Hz, 1H) 7,30 7,40 (m, 1H) 7,15 7,24 (m, 1H) 3,88 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,77 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,25 3,37 (m, 1H) 3,17 (dd, J = 14,95, 1,83 Hz, 1H) 2,993,10 (m, 1H) 2,79 2,98 (m, 3 H) 2,27 (s. 1., 1 H) 1,98 2,11 (m, 1 H) 1,71 1,88 (m, 3 H) 1,45 (s. 1., 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 2,44; [M+H-BH3]+ = 315, 1 .
Etapa D: N-(Benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo [2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(benzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3 'biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (6,6 g, 20,1 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3M (50,3 ml, 151 mmol) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi concluída através de TLC (mancha inferior). Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 150 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir um pó branco. Uma pequena quantidade de acetato de etilo (20 ml) foi adicionada ao pó. Os sólidos foram sonicados e filtrados para produzir N-(benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'biciclo[ 2,2,2]octan]-2-amina racémico (5,13 g, 16,3 mmol, rendimento 81%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,02 (s. 1., 1 Η) 7,79 (d, J = 7,02 Hz, 1 H) 7,62 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,29-7,38 (m, 1 H) 7,15-7,22 (m, 1 H) 3,90 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,98-3,10 (m, 2 H) 2,73- 2,88 (m, 2 H) 2,67 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) 2,07 (s. 1., 1H) 1,93 (s. 1., 1 H) 1,42-1, 67 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,15; [M+H] + = 315,3.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (3x25 cm, 5 uM) com uma fase móvel consistindo em C02/ (metanol/ACN/DEA = 70/30/0,1 (v/v/v)) = 77/23. O comprimento de onda foi estabelecido em 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-N-(benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina (1,45 g, 4,61 mmol, rendimento 29,4%) . (la; isómero S) : ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,03 (s. 1., 1 H) 7,78 (d, J = 7,05 Hz, 1 H) 7,61 (d, J = 7,55 Hz, 1 H) 7,27-7,37 (m, 1 H) 7,11-7,23 (m, 1 H) 3,89 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,64 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2, 96-3, 09 (m, 2 H) 2,71-2,88 (m, 2 H) 2,66 (t, J = 7,81 Hz, 2 H) 2,02-2,11 (m, 1 H) 1,85-1,97 (m, 1 H) 1,41-1,65 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,15; [M+H]+ = 315,3. Rotação ótica (1,23 mg/ml, DMSO) = +5,20. O segundo pico foi (R)-N-(benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina (1,21 g, 3,85 mmol, 24,5%) . (lb; isómero R) : ΤΗ RMN (50 0 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,02 (s. 1., 1 H) 7,79 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) 7,62 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,33 (t, J = 7,63 Hz, 1H) 7,18 (t, J = 7,48 Hz, 1H) 3,90 (d, J = 10, 0 7 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,98-3,10 (m, 2 H) 2,73-2,87 (m, 2 H) 2,67 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) 2,08 (s. 1., 1H) 1,93 (s. 1., 1 H) 1,42 1,67 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,15; [M+H]+ = 315,3; Rotação ótica (3,9 mg/ml, DMSO) =-3,92. EXEMPLO 2 N-(5-Metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il) -4H-1'-azaespiro[oxaz ο 1-5, 3'biciclo [2,2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-Metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-amina
Num balão de 3 gargalos de 500 ml equipado com um agitador mecânico, funil de gotejamento e termómetro, ácido acético (100 ml) foi adicionado e arrefecido num banho de gelo. Tiocianato de potássio (40 g, 412 mmol) e 6-metoxipiridin-3-amina (6,2 g, 49,9 mmol) foram adicionados à mistura de reação. A reação foi arrefecida num banho de gelo-sal até a temperatura de reação atingir <0°C. Uma solução de bromo (8 ml, 156 mmol) em ácido acético (30,0 ml) foi adicionada gota a gota durante 2 horas numa taxa que manteve a temperatura de reação <0°C. Foi requerida agitação mecânica. Após a adição ser concluída, a mistura foi deixada agitar e deixada lentamente aquecer até à temperatura ambiente durante a noite. Água (30 ml) foi posteriormente adicionada e a mistura foi aquecida até 85°C num banho de óleo. Esta mistura foi posteriormente filtrada enquanto ainda quente. A massa filtrada laranja foi devolvida ao balão de reação, e mais 50 ml de ácido acético foram adicionados. A mistura foi aquecida novamente até 85°C, e posteriormente filtrada enquanto ainda quente mais uma vez. Os filtrados combinados foram arrefecidos num banho de gelo e neutralizados a pH 8 com hidróxido de amónio concentrado. Foi formado um precipitado roxo formado que foi posteriormente recolhido através de filtração para produzir 5 g de material em bruto. Este material em bruto foi recristalizado a partir de metanol (40 ml) para produzir 5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (3 g, 16,55 mmol, rendimento 33,1%) como cristais roxos. ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO-de) δ ppm 7,60 (1 H, d, J = 8,42 Hz), 7,41 (2 H, s), 6,67 (1 H, d, J = 8,78 Hz), 3,81 (3 H, s) .
Etapa B: (3idroxi-3- ((3- (5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)tioureid o) metil)-lamoniobiciclo[2.2, 2 1 octan-l-il)triidroborato
5-Metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (2,4g, 13,24 mmol) foi dividida entre 5 x 20 ml de frascos com tampa de rosea. A cada frasco foram adicionados acetonitrilo (10 ml) e diimidazol de tiocarbonilo (600 mg). Todos os frascos foram aquecidos a 60°C durante a noite. Os frascos de reação foram combinados e concentrados para produzir produto N-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-lH-imidazol-1-carbot ioamida em bruto.
Este produto em bruto foi suspenso em N,N-dimetilformamida (50ml) e (3-(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (2,7g, 15,88 mmol) foi posteriormente adicionado. A reação foi aquecida a 70°C durante 4 horas. LC/MS mostrou conversão essencialmente completa. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e posteriormente vertida em água. O produto foi extraído primeiro com tolueno, e posteriormente com clorofórmio. Os orgânicos foram combinados, lavados com água e salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir material em bruto. Este material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 20-100%) . As frações de produto foram recolhidas e concentradas in vacuo para produzir (3idroxi-3- ( (3-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)tioureid o)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,36 g, 3,46 mmol, rendimento 26,1%) . 1HNMR mostrou uma relação molar de 1: 0,55 de (3idroxi-3-((3-(5-metoxitiazolo[5,4b]piridin-2-il)tioureido )metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,36 g, 3,46 mmol, rendimento 26,1%) para 5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (,34 g, 1,876 mmol, rendimento 14,17%) . A mistura foi levada diretamente para a etapa seguinte sem qualquer purificação adicional. MS (LC/MS) T.R. = 3,23; [M+H]+ = 392,1.
Etapa C: (2-(5-Metoxi-3a, 7a-diidrotiazolo[5,4-b]piridin-2-ilamino)-4 H-l 'amonioespiro [oxazol-5f 3 ' -biciclo [2r2, 2] octano] -1' -il) tr iidroborato
Ao
(3idroxi-3-((3-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)tioureid o)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,7 g, 3,46 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (10 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (1,89 ml, 12,10 mmol) . A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A mistura foi arrefecida e posteriormente vertida em água. O produto foi extraído com tolueno e clorofórmio. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas in vacuo para produzir material em bruto. Este material sólido foi triturado com éter. Os sólidos foram posteriormente filtrados e secos para produzir (2-(5-metoxi-3a,7a-dihidrotiazolo[5,4-b]piridin-2-ilamino)-4H-l'-amonioespiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)t riidroborato (700 mg, 1, 94 mmol, rendimento 56, 0%) . RMN (300 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,98 (1 H, s), 7,86 (1 H, d, J = 8,78 Hz), 6,81 (1 H, d, J= 8,42 Hz), 3,87 (3H, s), 3,83 (1H, s), 3,68-3,78 (1 H, m) , 3,31 (1 H, s) , 3,15-3,29 (1 H, m) , 2,78-3,14 (4 H, m) , 2,26 (1 H, s. 1.), 2,04 (1 H, s. 1.), 1, 63 1, 89 (3 H, m) . Etapa D: N- (5-Metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1’-azaespiro[oxaz ol-5, 3 ’biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-ilamino)-4H-1'-amonioes piro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (780 mg, 2,17 mmol) em acetona (10 ml) foi adicionado HC1 a 3M (10 ml, 329 mmol) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Clorofórmio e água foram adicionados e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com bicarbonato de sódio. O produto foi extraído com clorofórmio (2x). Os orgânicos foram combinados, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina racémica (588 mg, 1,70 mmol, rendimento 78%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,90 (1 H, s. 1.), 7,82 7, 86 (1 H, m) , 6,80 (1 H, d, J = 8,85 Hz) , 3,84 3,89 (4 H, m), 3,61 (1Η, d, J = 10, 0 7
Hz), 3,03 (2 H, d, J = 5,19 Hz), 2,73 2,86 (2 H, m), 2,66 (2 H, t, J = 7,78 Hz) , 2,07 (1H, s. 1.), 1,92 (1H, s. 1.), 1,45 I, 65 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,29; [M+H]+ = 346,1.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em 35% de metanol (DEA a 0,1%) em CO2. O comprimento de onda foi estabelecido a 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-N-(5-metoxitiazolo[5,4-b]piridin-2il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (212 mg, 0,61 mmol, rendimento 36,1%) . (2a; isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,89 (1 H, s. 1.), 7,84 (1 H, d, J = 8,85 Hz), 6,77-6,82 (1H, m), 3,84-3,89 (4 H, m), 3,61 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,03 (2 H, d, J = 5,19 Hz), 2,74-2,86 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J = 7,63 Hz), 2,06 (1 H, s. 1.), 1,92 (1 H, s. 1.), 1,44-1,65 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,47; [M+H]+ = 346,2. Rotação ótica (3,57 mg/ml, DMSO) =-2,58. O segundo pico foi (R)-N-(5-metoxitiazolo[5,4b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (242 mg, 0,70 mmol, rendimento 41,2%). (2b; isómero R) : RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,89 (1 H, s. 1.), 7,84 (1 H, d, J = 8,85 Hz), 6,79 (1 H, d, J = 8,55 Hz) , 3,82-3,90 (4 H, m), 3,61 (1H, d, J = 10, 0 7 Hz), 3,03 (2 H, d, J = 5,49 Hz), 2,74-2,86 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J" = 7,7 8 Hz) , 2,06 (1H, s. 1.), 1,92 (1H, s. 1.), 1,42-1,67 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,30; [M+H]+ = 346,2. Rotação ótica (3,29 mg/ml, DMSO) = +2,43. EXEMPLO 3 (2- (5H-1'-Azaespiro[oxazol-4, 3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilo mina)benzo[d]tiazol-6-il)pirrolidin-1-il)metanona
Etapa A: 6- (pirrolidina-1-carbonil) benzo[d]tiazol-2-ilcarbamato de terc-butilo
Num balão de 250 ml foram adicionados ácido
2-(terc-butoxicarbonil-amino)benzo[d]tiazol-6-carboxílico (1,0 g, 3,4 mmol) e pirrolidina (0,559 ml, 6,8 mmol) em tetraidrofurano (50 ml) . A esta solução foram adicionados EDC (1,3 g, 6,8 mmol), lidroxibenzotriaxol (1,041 g, 6,8 mmol) e base de Hunig (2,37 ml, 13,59 mmol) . A reação foi agitada a 25°C durante 1 hora. A reação foi posteriormente vertida em água e diclorometano. A água foi extraída 3 vezes com diclorometano e as camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O resíduo foi tomado numa pequena quantidade de diclorometano e precipitado com éter dietílico/hexanos. 0 balão foi colocado no congelador durante 1 hora e filtrado. 0 precipitado branco foi recolhido para produzir 6-(pirrolidina-l-carbonil)benzo[d]tiazol-2ilcarbamato de terc-butilo (1,09 g, 3,14 mmol, rendimento 92%). RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 11,95 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,61 7,77 (m, J = 8,39, 1, 98 Hz, 1 H) , 7,46-7, 63 (m, 1 H) , 3, 39-3, 63 (m, 4 H), 1,74-2,00 (m, 4 H), 1,45-1,62 (m, 9 H). MS (LC/MS) T.R. = 3,40; [M+H]+ = 363, 1 .
Etapa B: (2-Aminobenzoílotiazol-6-il) (pirrolidin-l-il)metona
6-(Pirrolidina-l-carbonil)benzo[d]tiazol-2-ilcarbamato de terc-butilo (1,09 g, 3,14 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 ml) e TFA (3 ml, 38,9 mmol) e a reação foi agitada a 25°C durante a noite. A reação foi vertida num funil separatório e cuidadosamente neutralizada com bicarbonato de sódio. O liquido foi extraído 3 vezes com clorofórmio/metanol (4:1) . As camadas orgânicas foram concentradas num resíduo branco e trituradas em éter dietílico. O precipitado foi recolhido para produzir (2-aminobenzo[d]tiazol-6-il)(pirrolidin-l-il)metona (0,497 g, 2,0 mmol, 64%) . RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 7,86 (d, J = 1,51 Hz, 1 H) , 7,65 (s, 2 H) , 7,35-7,46 (m, 1 H) , 7,26-7,35 (m, 1 H), 3,41-3,57 (m, 4 H), 1,64-1,97 (m, 4 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,39; [M+H]+ = 248,1.
Etapa C: (2- (5H-1'-Azaespiro[oxazol-4, 3'-biciclo[2, 2, 2]octano]-2-ila mina)benzo[d]tiazol-6-il)pirrolidin-1-il)metanona
(2-(5H-1'-Azaespiro[oxazol-4,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2ilamina)benzo-[d]tiazol-6-il)pirrolidin-l-il)metanona foi preparado seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 1, Etapas A-D e utilizando (2-aminobenzo[d]tiazol-6-il)(pirrolidin-l-il)metona (Exemplo 3, Etapa B) como o material de partida. RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9,05 (s. 1., 1 H) 7,99 (d, J = 1,7 6 Hz, 1 H) 7,60 (d, J = 8,31 Hz, 1 H) 7,48 (dd, J = 8,31, 1,76 Hz, 1 H) 3,90 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,42-3,52 (m, 4 H) 3,04 (s, 2 H) 2,75-2,87 (m, 2 H) 2,67 (t, J = 7,81 Hz, 2 H) 2,08 (s. 1., 1 H) 1,76-1, 98 (m, 5 H) 1,41-1,65 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,33; [M+H]+ = 412,2. EXEMPLO 4 N- (5-Feniltiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[ 2,2,2]octan]-2-amina
Etapa
A: (3idroxi-3-((3-(5-feniltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-amoni obiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A 5-feniltiazol-2-amina (0,52 g, 2,9 mmol) em acetonitrilo (6 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (0,68 g, 3,8 mmol). A mistura de reação foi agitada a 65°C durante 2 horas. O precipitado foi filtrado e lavado com
acetonitrilo (2 x 20 ml) para produzir o intermediário N-(5-feniltiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida. O intermediário foi tomado em N,Ndimetilformamida (30 ml) e tratado com (3-(aminometil)-3-idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)t riidroborato (0,5 g, 2,9 mmol) . A mistura de reação foi agitada durante 5 horas a 65°C. A reação foi concentrada in vacuo e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 30-100%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (3idroxi-3-((3-(5-feniltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-amoni obiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,85 g, 2,19 mmol, rendimento 74,4%) como um pó branco. LC/MS confirmou produto com perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 3,26 (M+1-BH3= 375,33).
Etapa B: (2-(5-Feniltiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro-[oxazol-5,3 '-biciclo[2, 2, 2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao
(3idroxi-3-((3-(5-feniltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-amoni obiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,8 g, 2,1 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (1,12 ml, 7,2 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada in vacuo e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 40-100%). As frações de produto combinadas foram concentradas in vacuo para produzir (2 - (5-feniltiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,51g, 1,44 mmol, rendimento 70%) como um pó branco. A massa de LCMS corresponde à perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 2,46 (M+1-BH3 = 341,36).
Etapa C: N-(5-Feniltiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[ 2 f2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(5-feniltiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3' biciclo [2,2,2 ] octano]-1'-il) triidroborato (0,56 g, l,58mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (3, 95 ml, 11, 86 mmol) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas e posteriormente neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 20 ml) , seguido por clorofórmio (2 x 20 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir um pó branco. O produto em bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 30 X lOOmm; 220 comprimento de onda; tempo de gradiente 10 min; taxa de fluxo 40 ml/min; solvente A; metanol a 10%-água a 90%-TFA a 0,1%, solvente B; metanol a 90%-água a 10% TFA a 0, 1%) . As frações foram combinadas, neutralizadas com hidróxido de sódio a 1 N e extraídas com acetato de etilo (2 x 30 ml) e clorofórmio (2 x 30 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(5-feniltiazol-2-il)-4H-l,azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2 ,2,2]octan]-2-amina (0,4 g, 1,175 mmol, rendimento 74,3%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,63 (1 H, s. 1.), 7,71 (1 H, s), 7,52 (2 H, d, J = 7,32 Hz), 7,37 (2 H, t, J = 7.78 Hz), 7,25 (1 H, t, J = 7,32 Hz), 3,82 (1 H, d, J = 10,07
Hz), 3,57 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,02 (2 H, d, J = 4,27 Hz), 2.79 (2 H, t, J = 7,63 Hz), 2,66 (2 H, t, J = 7,63 Hz), 2,04 (1H, s. 1.), 1, 92-1, 97 (1H, m), 1,44-1,65 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,52; [M+H]+ = 341,3.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AS-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em C02 e monitorizada através de UV a 300 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 0,4 g, 1,15 mmol, 32,7% (4a, isómero S) : RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,69 (s, 1H), 7,69-7,87 (m, 1H), 7,52-7,66 (m, J" = 10, 9 9 Hz, 2 H) , 7,37-7,51 (m, 2 H) , 7,21-7,38 (m, 2 H) , 3,52-4, 00 (m, 2 H) , 2, 98-3,23 (m, 2 H) , 2,78- 2, 94 (m, 2 H) , 2, 64-2,78 (m, 2 H) , 1,88-2,19 (m, J = 60,43 Hz, 2 H) , 1,40-1,77 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,77; [M+H]+ = 341,1. O segundo pico produziu
0,4 g, 1,15 mmol, 32,7%. (4b, isómero R) :L P.F. 187-9°C. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,64 (s, 1 H) , 7, 62-7, 84 (m, 1 H) , 7,44-7,61 (m, 2 H), 7,33-7,46 (m, 2 H), 7,18-7,31 (m, 1 H), 3, 50-3, 99 (m, 2 H) , 2,94-3,14 (m, 2 H) , 2,74-2,91 (m, 2 H) , 2,61-2,72 (m, 2 H) , 2,05 (s, 1H), 1,82-2,00 (m, 1H), 1,34 1,72 (m, 3 H). MS(LC/MS) T.R. = 1,78; [M+H]+ = 341,1. EXEMPLO 5 N- (6-Metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(6-Metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida
A 6-metoxibenzo[d]tiazol-2-amina (0,53 g, 2,94 mmol) em acetonitrilo (20 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (0,681 g, 3, 82 mmol) . A mistura de reação foi agitada a 65°C durante 24 horas. O precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 20 ml) para produzir o produto. O produto foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional. Etapa B: (3idroxi-3- ((3-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-tioureido)meti 1)-1 amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato À
N-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida (,82 g, 2,82 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,48 g, 2, 82 mmol) . A mistura de reação foi agitada a 65°C durante 6 horas. A reação foi concentrada in vacuo e posteriormente purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 30%-100%). As frações puras foram combinadas e concentradas para produzir (3-idroxi-3-((3-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)meti 1)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,7 g, 1,78 mmol, rendimento 63,2%) como um pó branco. LC/MS confirmou produto como perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 3,11 (M+1-BH3 = 379,4).
Etapa C: (2-(6-Metoxibenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[ox azo!5, 3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao
(3-idroxi-3-((3-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)meti 1)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,68 g, 1,73 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,95 ml, 6,1 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 40-100%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (2-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[ox azol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)trihidroborato (0,35 g, 0,98 mmol, rendimento 56,4%) como um pó branco. LC/MS MH+ BH3 = 345,2.
Etapa D: N-(6-Metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[ox azol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,33 g, 0,921 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (2,30 ml, 6,91 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas e posteriormente neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 20 ml) , seguido por clorofórmio (2 x 20 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir um pó branco. O produto em bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 30 X 100mm; 220 comprimento de onda; tempo de gradiente 10 min; taxa de fluxo 40 ml/min; solvente A; metanol a 10%-água a 90%-TFA a 0,1%, solvente B; metanol a 90% -água a 10%-TFA a 0,1%) . As frações foram combinadas, neutralizadas com hidróxido de sódio a 1 N e extraídas com acetato de etilo (2 x 30 ml). Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,25 g, 0,73 mmol, rendimento 79%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,88 (1 H, d, J = 1,22 Hz), 7,48-7,52 (1 H, m), 7,40 (1 H, d, J = 2,75 Hz), 6,92 (1 H, dd, J = 8,70, 2,59 Hz), 3,87 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,77 (3 H, s), 3,61 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,03 (2 H, s) , 2,75-2,86 (2 H, m) , 2,67 (2 H, t, J = 7,78 Hz), 2,06 (1 H, s. 1.), 1,91 (1 H, s. 1.), 1,41 1,65 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. =1,44; [M+H]+ = 345,3.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 23% (DEA a 0,1%) em CO2 e monitorizada através de UV a 220 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 205,5 mg, 0,60 mmol, 34,1%. (5a, isómero S) : :Η RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,88 (1 H, s. 1.), 7,50 (1 H, d, J = 8,81 Hz), 7,40 (1 H, d, J = 2,52 Hz), 6,92 (1 H, dd, J = 8,81,2,77 Hz) , 3,8 7 (1 H, d, J — 9,82 Hz), 3,77 (3 H, s) , 3,58 3, 65 (1 H, m) , 3,02 (2 H, s), 2,74 2,86 (2 H, m), 2,66 (2 H, t, J = 7,68 Hz), 2,03 2,08 (1 H, m) , 1,91 (1H, s. 1.), 1,391,65 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,40; [M+H]+ = 345,2. O segundo pico produziu 206,9 mg, 0,6 mmol, 34%. (5b, isómero R) : ΤΗ RMN (400 MHz, DMSOd6) δ ppm 8,88 (1H, s. 1.), 7,50 (1H, d, J = 8,5 6 Hz) , 7,40 (1H, d, J = 2,52 Hz), 6,93 (1H, dd, J = 8,81, 2,52 Hz), 3,87 (1H, d, J = 10, 0 7 Hz), 3,77 (3 H, s), 3,62 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,02 (2 H, s), 2,75-2,86 (2 H, m) , 2,67 (2 H, t, J = 7,68 Hz), 2,04-2,09 (1 H, m), 1,92 (1 H, s. 1.), 1,42-1,66 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,70; [M+H]+ = 345, 1 . EXEMPLO 6 N-(4-Metilbenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespim[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]2-amina
Etapa
A: N-(4-Metilbenzo[d]tiazol-2-il)H-imidazol-1-carbotioamida
A 4-metilbenzo[d]tiazol-2-amina (1,1 g, 6,7 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado I, 1'-tiocarbonildiimidazol (1,552 g, 8,71 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (50°C) durante 1 hora para produzir N-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida (900 mg, 3,28 mmol, rendimento 49%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa B: (3idroxi-3- ( (3- (4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil) -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
À N-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (0,71 g, 2,59 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,44 g, 2,59 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatograf ia de gel de silica (acetato de etilo/hexanos a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3idroxi-3-((3-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil) -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,65 g, 1,73 mmol, rendimento 66,7%) como um pó branco. JH RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,93 (1 H, s) , 7,74 (1 H, d, J = 7,63 Hz), 7,22-7,26 (1 H, m) , 7,19 (1 Η, t, J = 7,63 Hz), 3,75-3, 93 (2 Η, m), 2,72-2,95 (6 Η, m), 2,56 (3 Η, s), 2,03-2,14 (1 Η, m), 1,95 (1 Η, s. 1.), 1,78-1,87 (1 Η, m) , 1,73 (1 Η, ddd, J = 13,81, 9,23, 5,04 Hz), 1,56 (1Η, td, J = 9, 99, 7,78 Hz), 1,38 (2 H, s. 1.). (LC/MS) T.R. = 3,70; [M+H]+ = 375,2.
Etapa C: (2-(4-Metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1 '-amonio-espiro[ox azo 1-5, 3 ' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-11)trlldroborato Ao
(3idroxi-3- ( (3-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil) -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,62 g, 1,65 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,33 ml, 2,14 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (2-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[oxaz ol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,4 g, 1.17 mmol, rendimento 70, 9%) como um pó branco . 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,90 (s, 1H), 7,61 (d, J = 7, 63 Hz, 1H), 7,13 7.17 (m, 1H), 7,09 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) , 3,90 (d, J = 10,38
Hz, 1 H) , 3,77 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) , 3,32 (s, 3 H) , 3,30 (d, J = 1,53 Hz, 1 H), 3,13-3,20 (m, 2 H), 3,00-3,09 (m, 1 H), 2, 85-2, 94 (m, 4 H) , 2,57 (s, 4 H) , 2,28 (s, 1 H) , 2,06 (s, 1 H), 1,75-1,83 (m, 4 H), 1,45 (s, 1 H). (LC/MS) T.R. = 2,73; [M+H]+ = 343,2.
Etapa D: N- (4-Metilbenzo[d]tiazol-2-il) -4H-1 ’-azaespiro[oxazol-5, 3’-biciclo[2r2, 2]octan]-2-amina
Ao
(2-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,38 g, 1,11 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (2,78 ml, 8,33 mmol) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N . 0 produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(4-metilbenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro [oxazol-5,3 ' -b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,195 g, 0,594 mmol, rendimento 53,5%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,84 (s, 1 H) , 7,60 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) , 7,13-7,17 (m, 1 H) , 7,08 (t, J = 7,63 Hz, 1 H) , 3,92 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,66 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3,04 (s, 2 H) , 2,76-2,85 (m, 2 H) , 2,68 (t, J = 7,48 Hz, 2 H) , 2,56 (s, 3 H) , 2,09 (s, 1H), 1,93 (s, 1H), 1.61 (d, J= 3,05 Hz, 1 H) , 1,60 (s, 1 H) , 1,50 (dd, J=7,17, 2,59 Hz, 1 H). (LC/MS) T.R. = 1,76; [M+H]+ = 329,2.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (30 x 250mm, 5 | im) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em CO2 e monitorizada através de UVa 300 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 0,07 g, 0,21 mmol, 38,9%. (6a, isómero S) : 2Η RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,83 (s. 1., 1 H) 7,59 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,11-7,18 (m, 1 H) 7,08 (t, J = 7,63 Hz, 1 H) 3,92 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,66 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,04 (s, 2 H) 2,73-2,89 (m, 2 H) 2.61 2,72 (m, 2 H) 2,56 (s, 3 H) 2,09 (s. 1., 1 H) 1,93 (s. 1., 1 H) 1,43 1,71 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,75; [M+H]+ = 329, 1. O segundo pico produziu 0,07 g, 0,21 mmol, 38,1%. (6b, isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,84 (s. 1., 1H) 7,59 (d, J =7, 63 Hz, 1H) 7,15 (d, J = 7,20 Hz, 1 H) 7,08 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) 3,92 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,66 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3, 00-3, 09 (m, 2 H) 2,73-2,87 (m, 2 H) 2,62-2,72 (m, 2 H) 2,56 (s, 3 H) 2,05-2,12 (m, 1 H) 1,93 (s. 1., 1 H) 1,56-1,67 (m, 2 H) 1,45-1,55 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,75; [M+H]+ = 329,1. EXEMPLO 7 N-(4-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2, 2, 2]octan]2-amina
Etapa A: N-(4-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-1-carbotioamida
À 4-clorobenzo[d]tiazol-2-amina (1,12 g, 6,07 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (1,405 g, 7,89 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 1 hora para produzir N-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida (0,33 g, 1,12 mmol, rendimento 18,5%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa B: (3-( (3-(4-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi-l amoniobiciclo[2,2,21octan-l-il)triidroborato À
N-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida (0,3 g, 1,018 mmol) em N, N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,173 g, 1,018 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 60-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3-((3-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,25 g, 0, 63 mmol, rendimento 61, 9%) como um pó branco. JH RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 12,19 (s, 1 H) 9,72 (s. 1., 1 H) 7,93 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,51 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,26-7,32 (m, 1 H) 5,32 (s, 1 H) 3,88 (dd, J= 13,73, 4, 88 Hz, 1 H) 3,75 (dd, J= 13,73, 4,88 Hz, 1 H) 2,73-2,95 (m, 6 H) 2,08 (s. 1., 1 H) 1,96 (s. 1., 1 H) 1,79-1, 89 (m, 1 H) 1, 68-1,78 (m, 1 H) 1,52-1,61 (m, 1 H) 1,39 (s. 1. , 3 H) .
Etapa C: (2-(4-Clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol53'-binirJof2,2,2lontano]-1'-il)triidroborato
Ao (3-((3-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi -lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,23 g, 0,58 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N, N'-diisopropilcarbodiimida (0,117 ml, 0,75 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (2-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro [oxaz ol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,1 g, O, 27 mmol, rendimento 47, 6%) como um pó branco. JH RMN (500 MHz, DMSO-d6) δδ ppm 8,95 (s, 1 H) 7,79 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,42 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,18 (t, J = 7,93 Hz, 1 H) 3,92 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,77 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,26-3,38 (m, 1 H) 3,19 (dd, J= 15,26, 1,53 Hz, 1 H) 3,01-3,11 (m, 1 H) 2,81-3,00 (m, 3 H) 2,31 (s. 1., 1 H) 2,03-2,15 (m, 1 H) 1,70-1,89 (m, 3 H) 1,45 (s. 1., 3 H) .
Etapa D: N-(4-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2loctanl-2-amina
Ao
(2 - (4-clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,08 g, 0,221 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (0,551 ml, 1,654 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aguosa foi recolhida e neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,05 g, 0,14 mmol, rendimento 65,0%) como um pó branco. 2Η RMN(50 0 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,9 0 (s. 1., 1 H) 7,77 (dd, J = 7,78, 1,07 Hz, 1 H) 7,41 (dd, J = 7,78, 1, 07 Hz, 1 H) 7,17 (t, J = 7,78 Hz, 1 H) 3,94 (d, J=10,07 Hz, 1 H) 3,67 (d, J=10,07Hz, 1 H) 3,00-3,11 (m, 2 H) 2,76-2,88 (m, 2 H) 2,68 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) 2,11 (s. 1., 1H) 1,91-2,00 (m, 1 H) 1,47 1,67 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,11; [M+H]+ = 349, 1.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em CO2. O comprimento de onda foi estabelecido a 220 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. 0 primeiro pico da coluna foi (S)-N- (4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H1'-azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,11 g, 0,30 mmol, rendimento 34,8%) . (7a, isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8.90 (s. 1., 1H) 7,77 (d, J = 7,32 Hz, 1H) 7,41 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,17 (t, J = 7,93 Hz, 1 H) 3,94 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,67 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,00-3,11 (m, 2 H) 2,76 2,90 (m, 2 H) 2,68 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) 2,11 (s. 1., 1H) 1.91 2,01 (m, 1 H) 1,47 1, 68 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 2,06; [M+H] + = 349,1. O segundo pico foi (R)-N-(4-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,11 g, 0,30 mmol, rendimento 35,2%) . (7b, isómero R) : 2Η RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,89 (s. 1., 1 H) 7,77 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,40 (d, J = 7,93 Hz, 1 H) 7,16 (t, J = 7,93 Hz, 1 H) 3,94 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,67 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,99-3,11 (m, 2 H) 2,74-2,88 (m, 2 H) 2,68 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) 2,11 (s. 1., 1H) 1,90-2,01 (m, 1 H) 1,44-1,68 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,07; [M+H]+ = 349, 1. EXEMPLO 8 N- (1 Η-Benzo [d] imidazol-2-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3 ’ -bi del o[2,2,2]octan]2-amina
Etapa
A: N- (1 Η-Benzo [d] imidazol-2-il)1 H-imidazol-1 -carbotioamida
À 1H-benzo[d]imidazol-2-amina (1,28 g, 9,61 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (2,227 g, 12,5 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 1 hora para produzir N- (1H-benzo[d]imidazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida (1,8 g, 7,4 mmol, rendimento 77%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa B: (3- ((3-1H-Benzo[d]imidazol-2-iltioureido)metil)-3idroxi-l~a moniobiciclo[2,2,21octan-1-il)
triidroborato À N— (1H-benzo[d]imidazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (1,07 g, 4,4 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,748 g, 4,4 mmol) . A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatograf ia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 60-100%). As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3- ( (3-1H-benzo[d]imidazol-2-iltioureido)metil)-3hidroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,28 g, 3,71 mmol, rendimento 84%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,41 (s, 1 H) , 11,16 (s, 1 H) , 7,43 (d, J=3,05 Hz, 3 H), 7,13 (ddd, J = 9,46, 3,81, 3,51 Hz, 3 H), 5,36 (s, 1H), 4,01-4,07 (m, 3 H), 3,79 (dd, J = 13,28, 4,12 Hz, 1H), 2, 83-2, 92 (m, 6 H) , 2,71 (d, J = 14,04 Hz, 2 H) , 2,04-2,13 (m, 2 H) , 1, 89-1, 94 (m, 3 H) , 1,74 (td, J = 9, 46, 5,49 Hz, 2 H) , 1,51-1,59 (m, 2 H) , 1,38 (s, 2 H) , 1,31 (s, 1 H) . LC/MS confirmou produto como perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 2,75 (M+1-BH3 = 332,2).
Etapa C: (2- (1H-Benzo [d] imidazol-2-ilamino) -4H-1 ' -amonioespiro - [oxaz ο 1-5, 3'hiciclo [2r2, 2]octano]-1'-11)triidroborato
Ao
(3-((3-1 H-benzo[d]imidazol-2-iltioureido)metil)-3idroxi-l-amoniobic iclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,0 g, 2,9 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,587ml, 3,77 mmol). A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (2 - (1H-benzo[d]imidazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,81 g, 2,6 mmol, rendimento 90%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 7,29 (s, 1 H) , 6, 99-7,05 (m, 2 H) , 3,90 (t, J =9,77 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 10,38 Hz, 1 H), 3,26-3,35 (m, 1 H), 3,13 (dd, J = 14, 95, 1,53 Hz, 1H), 2,98 3,06 (m, 1H), 2,84 2,92 (m, 3 H) , 2,22 (s, 1 H) , 1, 98 2,05 (m, 1 H) , 1,72 1, 82 (m, 3 H) , 1,45 (s, 1 H) . LC/MS confirmou produto como perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 2,29 (M+1-BH3 = 298,2) .
Etapa D: N- (1 Η-Benzo [d] imidazol-2-il) -4H-1 ’ -azaespiro- [oxazol-5, 3 ’ -b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(1 H-benzo[d]imidazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,77 g, 2,5 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (6,2 ml, 18,6 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. 0 produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N- (1H-benzo[d]imidazol-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bi ciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,5 g, 1,68 mmol, rendimento 68%) como um pó branco. ΤΗ RMN (50 0 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,45 (s, 1 H) , 9,20 (s, 1 H) , 7,32 (s, 1 H) , 7,00 (dd, J = 5,65, 2,90 Hz, 4 H), 3,91 (d, J = 10,07 Hz, 2 H), 3,64 (d, J = 10,07 Hz, 2 H) , 2,98-3,05 (m, 4H), 2,73-2,82 (m, 4H), 2,67 (t, J = 1,63 Hz, 4 H) , 2,03 (d, J = 2,75 Hz, 2 H) , 1, 85-1, 92 (m, 2 H) , 1.54- 1, 63 (m, 4 H) , 1,44-1,51 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,30; [M+H]+ = 298,2.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AS-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em C02 e monitorizada através de UV a 330 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 0,11 g, 0,36 mmol, 33,0%. (8a; isómero R): P.F. 255°C (dec). ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,43 (s. 1., 1 H) 9,16 (s. 1., 1 H) 7,14-7,53 (m, 2 H) 6,82-7,09 (m, 2 H) 3,91 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,64 (d, J= 10,07 Hz, 1 H) 2,96-3,09 (m, 2 H) 2,71-2,87 (m, 2 H) 2,62-2,73 (m, 2 H) 2,01-2,08 (m, 1 H) 1,81-1,97 (m, 1 H) 1.54- 1, 66 (m, 2 H) 1,40-1,53 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,26; [M+H]+ = 298,2. O segundo pico produziu 0,11 g, 0,36 mmol, 33,0%. (8b; isómero S) : TH RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,43 (s. 1., 1 H) 9,20 (s. 1., 1 H) 7, 10 7, 60 (m, 2 H) 6,83-7,11 (m, 2 H) 3,91 (d, J" = 9, 7 7 Hz, 1 H) 3,64 (d, J=9,77 Hz, 1 H) 2,94-3,16 (m, 2 H) 2,71-2,86 (m, 2 H) 2,59-,72 (m, 2 H) 1,97-2,09 (m, 1 H) 1,81 1,95 (m, 1 H) 1,53 1,71 (m, 2 H) 1,41-1,53 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,28; [M+H]+ = 298,2. EXEMPLO 9 N-(6-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’- biciclo[2,2, 2]octan 12-amina
Etapa
A: N-(6-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-1-carbotioamida
À 6-clorobenzo[d]tiazol-2-amina (1,14 g, 6,17 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (1,43 g, 8 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 1 hora para produzir N-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (1,16 g, 3,9 mmol, rendimento 64%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional
Etapa B: (3-((3-(6-Clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi -1 -amoniobicicloí 2,2,21octan-l-il)triidroborato
N-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida (0,86 g, 2,9 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,5 g, 2,9 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 60-100%). As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3-((3-( 6-clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido) metil) -3idroxi 1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,4 g, 1,01 mmol, rendimento 34,6%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 11,92 (s. 1., 1 Η) 9,89 (s. 1., 1 Η) 8,08 (s. 1., 1 Η) 7,62 (s. 1., 1 Η) 7,40-7,50 (m, 1 Η) 5,40 (s. 1., 1 Η) 3,88 (d, J = 10,20 Hz, 1 H) 3,76 (d, J = 10,20 Hz, 1 H) 2,67-3,02 (m, 6 H) 2,08 (s. 1., 1 H) 1,80-1,95 (m, 2 H) 1,73 (s. 1., 1 H) 1,01-1,63 (m, 4 H) . MS (LC/MS) T.R. = 3,87; [M+H] + = 395,1.
Etapa C: (2-(6-Clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol5,3 ' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao (3-((3-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi -lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,37 g, 0,93 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N, N'-diisopropilcarbodiimida (0,19 ml, 1,2 mmol) . A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica ( acetato de etilo/hexano a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (2-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,12 g, O, 33 mmol, rendimento 35,5%) como um pó branco. JH RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9, 10 (s. 1., 1 H) 7, 95 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7, 60 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J = 8,55, 2,14 Hz, 1 H) 3,88 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,76 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) 3,26-3,37 (m, 1 H) 3,17 (dd, J = 14,95, 1,83 Hz, 1 H) 3,00-3,11 (m, 1 H) 2, 80-2, 97 (m, 3 H) 2,28 (s. 1., 1 H) 2,00-2,11 (m, 1 H) 1,69-1,88 (m, 3 H) 1,46 (s. 1., 3 H). LC/MS : tempo de retenção 2,94 (M+1-BH3 = 349, 1).
Etapa D: N- (6-Clorobenzo[d]tiazol-2-il) -4H-1 '-azaespiro[oxazol-5, 3'b iciclo [2r2, 2]octanl-2-amina
Ao
(2-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,1 g, 0,28 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (0,69 ml, 2,07 mmol) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N . O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(6-clorobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,06 g, 0,17 mmol, rendimento 62,4%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9,03 (s. 1., 1 H) 7,93 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7,58 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J = 8,55, 2,14 Hz, 1 H) 3,90 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,99-3,11 (m, 2 H) 2,73-2,89 (m, 2 H) 2,67 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) 2,08 (s. 1., 1H) 1,82-1,99 (m, 1 H) 1,43 1,67 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,07; [M+H]+ = 349, 1 .
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AS-H (30 x 250mm, 5 ym) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em CO2 e monitorizada através de UV a 220 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 0,034 g, 0,10 mmol, 36,2%. (9a; isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9,02 (s. 1., 1 H) 7,93 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 7,58 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J = 8,55, 2,14 Hz, 1 H) 3,90 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,97-3,11 (m, 2 Η) 2,73 2,89 (m, 2 Η) 2,67 (t, J = 7,48 Hz, 2 H) 2,08 (s. 1., 1 H) 1,93 (s. 1., 1 H) 1,43-1,69 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,05; [M+H]+ = 349,1. Rotação ótica =+4,00. O segundo pico produziu 0,037 g, 0,10 mmol, 3 9,4%. (9b; isómero R) : ΤΗ RMN(500 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,02 (s. 1., 1H) 7,93 (d, J= 2,14 Hz, 1 H) 7,58 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J = 8,55, 2,44 Hz, 1 H) 3,90 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 3,65 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) 2,93-3,13 (m, 2 H) 2,72-2,91 (m, 2 H) 2,62-2,73 (m, 2 H) 2,08 (s. 1., 1H) 1,93 (d, J= 1,22 Hz, 1H) 1,44-1,68 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,04; [M+H]+ = 349,1. Rotação ótica =-3,74. EXEMPLO 10 N-( 1 -Metil^H-benzo [d] imidazol-2-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3 ’bicido[2,2, 2]octan]-2-amina
Etapa
A: N- (1 -Metil^H-benzo [d] imidazol-2-il) -1H-imidazol-l -carbotio amida
À 1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (1,28 g, 8,7 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (2,015 g, 11,31 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 1 hora para produzir N- (1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-1H-imidazol-lcarbotioa mida (1,6 g, 6,22 mmol, rendimento 71,5%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa B: (3idroxi-3- ((3-(1 -meti 1-1 H-benzo [d] imidazol-2-il) tioureido) metil)-lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
À N-il-metil-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (1,04 g, 4,04 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,687 g, 4,04 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 60-100%). As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3-idroxi-3-((3-(1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)tioureido )metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,28 g, 3,56 mmol, rendimento 88%) como um pó branco. LC/MS confirmou produto como perda de BH3 nas condições de LC/MS: tempo de retenção 3,01 (M+1-BH3 : 346,2) .
Etapa C: (2 - (1 -Metil-1 H-benzo [d] imidazol-2-ilamino) -4H-1' -amonioespi ro [oxazol-5, 3 ’ -biciclo3' -biciclo [2,2,2] octano]-1'-il)triidroborato
Ao (3idroxi-3-((3-(1-metil-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)tioureido)metil)-1-amoniobiciclo[2, 2,2]octan-l-il)triidroborato (1,19 g, 3,31 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (1,55 ml, 9,9 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e purificada por meio de cromatograf ia de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (2-(1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespir o[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-l'-il)triidroborato (0,94 g, 2,9 mmol, rendimento 87%) como um pó branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,36 (s. 1., 1 Η) 7,34 7,44 (m, 1 Η) 7,26-7,34 (m, 1 Η) 7,00-7,12 (m, 2 Η) 3,90 (d, J = 10,32 Hz, 1 H) 3,77 (d, J = 10,32 Hz, 1 H) 3,57 (s, 3 H) 3,28 (dd, J = 14, 86, 2,27 Hz, 1 H) 3,13 (dd, J=14,86, 1,51 Hz, 1 H) 2,95-3,08 (m, 1 H) 2,75-2,95 (m, 3 H) 2,22 (s. 1., 1 H) 1,96-2,11 (m, 1 H) 1,67-1,89 (m, 3 H) 1,43 (s. 1., 3 H) . LC/MS : tempo de retenção 2,37 (M+l BH3 = 312,2).
Etapa D: N- ( 1 -Metil^H-benzo [d] imidazol-2-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3'bicido[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(1-metil-1 H-benzo[d]imidazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,92 g, 2,8 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (7,1 ml, 21,2 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidroxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,84 g, 2,7 mmol, rendimento 95%) como um pó branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,24 9,39 (m, 1 H) 7,33 7,42 (m, 1 H) 7,25 7,33 (m, 1 H) 6,99-7,10 (m, 2 H) 3,92 (d, J=10,07Hz, 1 H) 3,66 (d, J=10,07 Hz, 1H) 3,57 (s, 3 H) 2,97 3,08 (m, 2 H) 2,78 (t, J = 7,81 Hz, 2 H) 2,67 (t, J = 7,81 Hz, 2 H) 2,01-2,09 (m, 1 H) 1,80-1,96 (m, 1 H) 1,40-,66 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,49; [M+H]+ = 312,2.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (30 x 250mm, 5 pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 22% (DEA a 0, 1%) em CO2 e monitorizada através de UV a 300 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 0,065 g, 0,205 mmol, 39,8%. (10a, isómero R) : ΤΗ RMN(50 0 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,31 (s. 1., 1 H) 7,35-7,45 (m, 1 H) 7,26-7,34 (m, 1 H) 7,00-7,15 (m, 2 H) 3,93 (d, J = 10,10 Hz, 1 H) 3,67 (d, J = 10,10 Hz, 1 H) 3,59 (s, 3 H) 2,93-3,13 (m,
2 H) 2,74-2,89 (m, 2 H) 2,61-2,74 (m, 2 H) 2,05 (s. 1., 1 H) 1,91 (s. 1., 1 H) 1,38-1, 68 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,37; [M+H]+ = 312,2. Rotação ótica = 16,02°. O segundo pico produziu 0, 06 g, 0,19 mmol, 36,8%. (10b; isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,31 (s. 1., 1 H) 7,33 7,43 (m, 1 H) 7,25-7,33 (m, 1 H) 6,93-7,11 (m, 2 H) 3,93 (dd, J = 9, 92, 3,20 Hz, 1 H) 3,67 (dd, J = 9, 92, 3,20 Hz, 1 H) 3,58 (s, 3 H) 2,94-3,13 (m, 2 H) 2,74- 2,85 (m, 2 H) 2,59 2,72 (m, 2 H) 2.04 (s. 1., 1H) 1,90 (s. 1., 1H) 1,37-1,70 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,37; [M+H]+ = 312,2. Rotação ótica = + 35,99. EXEMPLO 11 N- (6-Etoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2, 2, 2]octan]2-amina
Etapa A: N-(6-Etoxibenzo[d]tiazol-2-il)IH-imidazol-l-carbotioamida
Num frasco foram colocados 6-etoxibenzo[d]tiazol-2amina (1,5 g, 7,72 mmol) e di (1H-imidazol-l-il) metanotiona (1,789 g, 10.04 mmol) em acetonitrilo (15 ml) . A reação foi aquecida até 80°C durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e ο precipitado foi recolhido para produzir 2,4 gramas (7,88 mmol, 102%) de sólidos de cor ferrugem.
Etapa B: (3- ( (3- (6-Etoxibenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil)-3idroxi -1-amoniobicidor2.2.21octan-l-iljtriidroborato
Num frasco foram colocados N-(6-etoxibenzo[d]tiazol-2-il)1H-imidazol-l-carbotioamida (2,4 g, 7,88 mmol) e (3-(aminometil)-3-idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)t riidroborato (1,341 g, 7,88 mmol) em N,N-dimetilformamida (8 ml) . A reação foi aquecida até 80°C. Após 2 horas a reação foi vertida em água e clorofórmio e o orgânico foi extraído e concentrado até dar um óleo vermelho. Este material foi utilizado na reação seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa C:
(2 - (6-Etoxibenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro-[ox azo 1-5, 3 ' -bid nln í ?. ? . ? 7 nnt^rnl -1 ' -i 7 ) 1" Ή i Hroborat O
Num balão foram colocados (3-((3-(6-etoxibenzo[d]tiazol-2il)tioureido)-metil)-3idroxi -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (3,2 g, 7,9 mmol) e N,N'-diisopropilcarbodiimida (4,3 ml, 27,6 mmol) em N, N-dimetilformamida (10 ml) . A reação foi aquecida até 70°C durante 2 horas e posteriormente vertida em água e clorofórmio. O orgânico foi recolhido e concentrado para um resíduo. O resíduo foi triturado em éter e o precipitado foi recolhido por meio de filtração a vácuo para produzir 1,11 grama (2,98 mmol, 37,8%) de pó cinzento.
Etapa D: N-(6-Etoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2r2, 2]octan1-2-ami na
Num frasco foram colocados (2-(6-etoxibenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (500 mg, 1,34 mmol) e HC1 (8,06 ml, 24,17 mmol) em acetona (10 ml) . A reação foi monitorizada através de HPLC. Após 2 horas, a reação foi concluída através de LC/MS. A reação foi vertida em água e clorofórmio, e a camada orgânica foi colocada à parte. A camada aquosa foi neutralizada e extraída com clorofórmio (2x) . A segunda fração de clorofórmio foi concentrada para dar um resíduo branco. O sólido foi triturado em éter e o precipitado recolhido para produzir 314,4 mg (0,877 mmol, 65,3%) do material desejado. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,89 (1 Η, s. 1.), 7,50 (1H, d, J = 8,81 Hz), 7,38 (1H, d, J = 2,52 Hz), 6,91 (1H, dd, J = 8,81, 2,52 Hz), 4,03 (2 H, q, J = 7,05 Hz), 3,87 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,62 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,02 (2 H, s), 2,78 (2 H, t, J = 7,81 Hz), 2,66 (2 H, t, J = 7,68 Hz), 2,05 (1 H, s. 1.), 1,91 (1 H, s. 1.), 1,42 1, 67 (3 H, m) , 1,33 (3 H, t, J = 7,05 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 1,60; [M+H]+ = 359, 0 .
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AS-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em C02 e monitorizada através de UV a 300 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna produziu 62,4 mg, 0, 17 mmol, 31,2%. (11a; isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,87 (1 H, s. 1.), 7,49 (1 H, d, J = 8,55 Hz), 7,38 (1 H, d, J= 2,44 Hz), 6,91 (1H, dd, J = 8,85, 2,44 Hz), 4,03 (2 H, q, J = 7,02 Hz), 3,87 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,61 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,02 (2 H, s) , 2,72 2,85 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J = 7,63 Hz) , 2,05 (1H, s. 1.), 1,91 (1H, s. 1.), 1,43 1, 64 (3 H, m), 1,33 (3 H, t, J = 7,02 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 1,81; [M+H]+ = 359,1. O segundo pico produziu 58,9 mg, 0,164 mmol, 29,5%. (lib; isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,86 (1H, s. 1.), 7,48 (1H, d, J = 8,85 Hz) , 7,37 (1H, d, J = 2,4 4 Hz), 6,91 (1 H, d, J = 2,75 Hz), 4,02 (2 H, q, J = 7,02 Hz), 3,86 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,61 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,01 (2 H, s), 2,72-2,85 (2 H, m) , 2, 62-2, 69 (2 H, m) , 2,04 (1 H, d, J = 2,44 Hz), 1,90 (1 H, d, J = 4,27 Hz), 1,42 1,63 (3 H, m) , 1,29-1,35 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,52; [M+H] + = 359, 1 . EXEMPLO 12 N-(6-Metilbenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespim[oxazol-5,3'-b iciclo[2, 2, 2]octanl2-amina
Etapa A: N-(6-Metilbenzo[d]tiazol-2-il)H-imidazol-1-carbotioamida
A 6-metilbenzo[d]tiazol-2-amina (1 g, 6,2 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (1,44 g, 8,1 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml). O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 1 hora para produzir N-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-il)-1H-imidazol-l-carbotioamida (1,06 g, 3,86 mmol, rendimento 62%) e posteriormente utilizado na etapa seguinte sem qualquer purificação ou caracterização adicional.
Etapa B: (3idroxi-3-((3-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil) -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A N-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (0,96 g, 3,5 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,595 g, 3,5 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 40-100%) . As frações de produto foram concentradas in vacuo para produzir (3idroxi-3-((3-(6-metilbenzo[d]tiazol-2il)tioureido) metil) -1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-1-il)triidroborato (0,88 g, 2,338 mmol, rendimento 66, 8%) como um pó branco. MS (LC/MS) T.R. = 3,71; [M+H]+ = 375,2.
Etapa C: (2-(6-Metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5, 3 'bicicloí2.2.21octanol-1'-il)triidroborato
Ao
(3idroxi-3- ( (3-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-il)tioureido)metil) -lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,86 g, 2,285 mmol) em N,Ndimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N1-diisopropilcarbodiimida (0,288 g, 2,285 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada e acetato de etilo foi adicionado. O precipitado foi filtrado e lavado com acetato de etilo adicional. O pó foi seco num forno a vácuo (70°C) para produzir (2-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,65 g, 1, 899 mmol, rendimento 83%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,03 (1 H, s. 1.), 7,59 (1 H, s), 7,51 (1 H, d, J = 8,24 Hz), 7,15 (1H, d, J = 8,24 Hz), 3,86 (1H, d, J = 10,38 Hz), 3,74 (1H, d, J" = 10,38 Hz), 3,29 (1H, dd, J = 15,2 6, 1,83 Hz), 3,14 (1H, d, J" = 15,26 Hz), 2,9 9-3, 09 (1 H, m), 2,80-2,95 (3 H, m), 2,36 (3 H, s), 2,25 (1 H, s. 1.), 2,03 (1 H, t, J= 10,22 Hz), 1,70-1,85 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 2,78; [M+H]+ = 343,2.
Etapa D: N-(6-Metilbenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'b iciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
Ao
(2-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,24 g, 0,70 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3 M (1,753 ml, 5,26 mmol) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N . O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml). Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N-(6-metilbenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,19 g, 0,58 mmol, rendimento 83%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,96 (1H, s. 1.), 7,57 (1H, s), 7,49 (1H, d, J = 8,24 Hz), 7,13 (1H, d, J = 8,24 Hz), 3,88 (1H, d, J = 10,07 Hz) , 3,63 (1H, d, J = 9,77 Hz), 2, 98-3, 04 (2 H, m) , 2,72-2,85 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J = 7,63 Hz), 2,36 (3 H, s), 2,05 (1 H, d, J = 2,14 Hz), 1,91 (1H, s. 1.), 1,53-1,64 (2 H, m), 1,42 1,53 (1 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,79; [M+H]+ = 329,2.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (4,6x25 cm, 5pm) com metanol a 30% (DEA a 0, 1%) em C02 e monitorizada através de UV a 300 nm. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. 0 primeiro pico da coluna produziu 0,11 g, 0,34 mmol, 55%. (12a; isómero R) : RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,95 (s, 1 H) , 7,57 (s, 2 H), 7,48 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 7,13 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 3,89 (d, J = 10,38 Hz, 2 H) , 3,63 (d, J = 10,38 Hz, 2 H) , 2, 99-3, 06 (m, 4 H) , 2,75-2,84 (m, 4 H) , 2,67 (t, J = 7,63 Hz, 4 H) , 2,37 (s, 7 H) , 2,06 (s, 2 H) , 1,92 (s, 2 H) , 1,55-1,64 (m, 4 H), 1,49 (dd, J = 9,77, 2,44 Hz, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,80; [M+H]+ = 329,2. Rotação ótica =-4,52. O segundo pico produziu 0,11 g, 0,34 mmol, 55%. (12b; isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,96 (s, 1 H) , 7,58 (s, 1 H) , 7,49 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) , 7,14 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) , 3,89 (d, J= 10,07 Hz, 1 H), 3,63 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 3,03 (d, J = 2,44 Hz, 2 H) , 2,75-2,84 (m, 2 H) , 2,67 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) , 2,37 (s, 3 H) , 2,06 (s, 1 H) , 1,92 (s, 1 H) , 1,55-1, 64 (m, 2 H) , 1,49 (dd, J = 9,77, 2,75 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,80; [M+H]+ = 329,2. Rotação ótica= + 10,08. EXEMPLO 13 2-(4H-1'-Azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2, 2, 2]octano]-2-ilam ino)benzo[d]tiazolfi-ol
Etapa
A: N- (6- (terc-Butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-lH-imi dazo 1-1-carbotioamida
À 6-(terc-hutildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-amina (preparada conforme descrito no documento WO 2007/086800 p,102) (3,1 g, 11,05 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado diimidazol de tiocarbonilo (2,56 g, 14,37 mmol) . A reação foi aquecida até 70°C durante a noite. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo para produzir um sólido amarelo. 0 produto, N-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-lH-imi dazol-l-carbotioamida (3,85g, 9,86mmol, rendimento 89%), foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer purificação adicional. MS (LC/MS) T.R. = 2,56; [M+H]+ = 388,9. Etapa B:
(3-((3-(6-(terc-Butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)ti oureido)metil)3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)trii droborato À N-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (3,85 g, 9,86 mmol) em N,N-dimetilformamida (40 ml) foi adicionado(3-(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]oct an-l-il)trihidroborato (1,68 g, 9,86 mmol). A reação foi aquecida a 80°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida e posteriormente vertida numa mistura de clorofórmio e água. A camada orgânica foi recolhida e concentrada in vacuo para produzir (3-((3-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)ti oureido)metil)-3hidroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (6,2 g) como um óleo amarelo.
Etapa C: (2- (6- (terc-Butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1 ' -amonioespiro [oxazol-5, 3 ' -biciclo [2r2, 2] octano] -1' -il) triidroborato
Ao (3-((3-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-il)ti oureido)metil)-3-idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (4,9 g, 9,9 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (10 ml) foi adicionada 1,3-diisopropilcarbodiimida (5,4 ml, 34,5 mmol). A reação foi aquecida até 80°C e monitorizada através de LC/MS. A reação foi arrefecida e posteriormente vertida numa mistura de clorofórmio e água. A camada orgânica foi recolhida e concentrada in vacuo. O resíduo restante foi triturado em éter. O precipitado foi recolhido para produzir (2-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-l'-il)t riidroborato (3,28 g, 7,15 mmol, rendimento 72,6%) . MS (LC/MS) T.R. = 3,60; [M+H-BH3]+ = 445,2.
Etapa D: 2- (4H-1'-Azaespiro[oxazol-5,3’-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilam ino)bemzo[d]tiazol-6-ol
Ao
(2-(6-(terc-butildimetilsililoxi)benzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-l'-il)t riidroborato (3,2 g, 6,98 mmol) em acetona (10 ml) foi adicionado HC1 (8,14 ml, 24,43 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi vertida em água e neutralizada com bicarbonato de sódio saturado. A camada aquosa foi posteriormente extraída com clorofórmio. A camada orgânica foi recolhida e concentrada in vacuo. O resíduo restante foi triturado em éter para produzir 2- (4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-iIam ino)benzo[d]tiazol-6-ol racémico (958 mg, 2,90 mmol, rendimento 41,5%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,36 (1 H, s. 1.), 8,85 (1 H, s. 1.), 7,41 (1 H, d, J = 8,85 Hz), 7,12 (1H, d, J = 2,44 Hz), 6,78 (1H, dd, J = 8,85, 2,44 Hz), 3,86 (1H, d, J = 10,07 Hz) , 3,61 (1H, d, J = 10,07 Hz), 2, 96 3, 06 (2 H, m) , 2,71 2,85 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J =7,78 Hz), 2,04 (1H, s. 1.), 1,90 (1H, s. 1.), 1,43-1,64 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,03; [M+H]+ = 331,29.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em C02. O comprimento de onda foi estabelecido a 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-2-(4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octano]—2 — i lamino)benzo[d]tiazol-6-ol (395,2 mg, 1,19 mmol, rendimento 41,4%) . (13a, isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,36 (1 H, s. 1.), 8,84 (1 H, s. 1.), 7,41 (1 H, d, J = 8,55 Hz), 7,12 (1H, d, J = 2,44 Hz), 6,78 (1H, dd, J = 8,55, 2,44 Hz), 3,86 (1 H, d, J = 9,77 Hz) , 3,61 (1H, d, J=10,07Hz), 2,96-3,05 (2 H, m) , 2,72-2, 84 (2 H, m), 2,65 (2 H, t, J = 7,63 Hz), 2,04 (1 H, s. 1.), 1,90 (1 H, s. 1.), 1,52-1, 64 (2 H, m) , 1,43-1,52 (1 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,30; [M+H]+ = 331,4. O segundo pico foi (R)-2-(4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilamino)benzo[d]tiazol-6-ol (375 mg, 1,14 mmol, rendimento 39,3%) . (13b, isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 7,40 (1 H, d, J = 8,55 Hz), 7,11 (1 H, d, J = 2,44 Hz), 6,77 (1 H, dd, J = 8,55, 2,44 Hz), 3,86 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,60 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,01 (2 H, s), 2,73-2,84 (2 H, m) , 2,65 (2 H, t, J = 7,78 Hz), 2,04 (1 H, s. 1.), 1,90 (1 H, s. 1.), I, 54-1, 62 (2 H, m) , 1,4 3-1,52 (1 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,43; [M+H]+ = 331,4. EXEMPLO 14 N-(4,5, 6, 7-Tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespirofox azol-5, 3’biciclo[2r2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(4, 5, 6, 7Tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida
A 4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-amina (0,5 g, 3,24 mmol) em acetonitrilo (20 ml) foi adicionada di(lH-imidazol-l-il)metanotiona (0,58 g, 3,24 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 50-100%) para produzir N- (4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il) -1 H-imidazol-l-carbotioamida (0,60 g, 2,27 mmol, rendimento 70,0%) como um pó branco.
Etapa B: (3idroxi-3- ((3-(4,5,6, 7-tetraidrobenzo [d] tiazol-2-il) ti oure ido)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A N-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (0,54 g, 2 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3-(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (0,35 g, 2 mmol) . A reação foi agitada a 50°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 50-100%) produzindo as primeiras manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (3idroxi-3- ( (3- (4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)tioure ido)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,51 g, 1,3 9 mmol, rendimento 68,2%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,46 (s, 1 H) , 5,26 (s, 1 H) , 3,89 (dd, J = 13,58, 5,34 Hz, 1 H), 3,68 (dd, J = 13,73, 4,88 Hz, 1 H) , 2,55-2, 94 (m, 8 H) , 2,06 (dd, J = 9,31,3,20 Hz, 1 H) , 1,66-1,90 (m, 6 H), 1,21-1,59 (m, 4 H); [M+H]+ = 365,1. Etapa C:
(2- (4, 5, 6, 7-Tetraidrobenzo [d] tiazol-2-ilamino) -4H-1 ' -amonio espiro [ oxazol-5r 3 ' -biciclo [2 r2 f 2] octano] -1' -il) triidroborat o
Ao (3-idroxi-3-((3-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)tiour eido)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,5 g, 1,37 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (20 ml) foi adicionada N,N-diisopropilcarbodiimida (0,74 ml, 4,78 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 4 horas. A reação foi concentrada para produzir um resíduo em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (50-100% de acetato de etilo-hexanos) produzindo as segundas manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (2-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonio espiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,38 g, 1,14 mmol, rendimento 84%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,26-8, 86 (m, 1 H) , 3,78 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 3,66 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3, 19 3,30 (m, J = 14,95, 2,14 Hz, 1 H) , 2,96-3,12 (m, 2 H) , 2,78-2, 94 (m, 3 H) , 2,54-2,65 (m, 4 Η), 2,19 (s, 1 Η), 2,00 (s, 1 Η), 1, 66-1,85 (m, 7 Η), 1,43 (m, 3 Η). MS (LC/MS) T.R. = 2,50; [M+H—ΒΗΛ = 319,1.
Etapa D: N- (4,5,6, 7-Tetraidrobenzo [d] tiazol-2-il) -4H-1 ' -azaespiro [ox azol5,3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao (2-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonio espiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-l'-il)triidroborat o (0,36 g, 1,08 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3M (0,36 ml, 1,08 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi concluída através de TLC ( mancha inferior). Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[ox azol-5,3 '-biciclo [2,2,2 ] octan]-2-amina racémica (0,28 g, 0,84 mmol, rendimento 78%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,30-8,75 (s. 1., 1 H) , 3,79 (d, J = 9,44 Hz , 1H), 3,55 (d, J = 9,76 Hz , 1H), 2,90-3,03 (m, 2 H) , 2,54-2,84 (m, 8 H) , 2,00 (s, 1H), 1,81-1,93 (m, 1H), 1,75 (d, J = 2,4 4 Hz, 4 H), 1,36-1,67 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,39; [M+H]+ = 319,1.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (30 x 250mm, 5 pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 23% (DEA a 0,1%) em CO2. O comprimento de onda foi estabelecido a 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-N-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespir o[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,1 g, 0,29 mmol, rendimento 36,8%) . (14a, isómero S) : 1H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,29-8, 89 (s. 1., 1 H) , 3,80 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 3,54 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 2, 94-3, 04 (m, 2 H) , 2,55-2,85 (m, 8 H) , 2,00 (s, 1 H) , 1,85-1, 94 (m, 1 H) , 1,70 1,81 (m, J = 2,43 Hz , 4 H), 1,39-1,65 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,54; [M+H]+ = 319,1. O segundo pico foi (R)-N-(4,5,6,7-tetraidrobenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespir o[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,11 g, 0,30 mmol, rendimento 38,2%) . (14b, isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,24-8, 96 (s. 1., 1 H) , 3,79 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 3,52 (d, J = 9,76 Hz, 1 H) , 2, 95-3, 08 (m, 2 H) , 2,55-2,80 (m, 8 H) , 2,00 (s, 1 H) , 1,85-1, 90 (m, 1 H) , 1,70-1,79 (m, J = 2,42 Hz , 4 H), 1,39-1,63 (m, 3 H); [M+H]+ = 319,1. EXEMPLO 15 N- (4-Isopropiltiazol-2-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3 ' -bid do [2, 2, 2] octan] -2-amina
Etapa A: N- (4-Isopropiltiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida
A 4-isopropiltiazol-2-amina (1,04 g, 7,31 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi adicionado 1,1-tiocarbonildiimidazol (1,7 g, 9,5 mmol) . A reação foi agitada a 50 °C durante 18 horas . A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo (2 x 50 ml) . O pó amarelo foi seco num forno a vácuo (40°C) durante 2 horas. O produto, N- (4-isopropiltiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbotioamida (1,02 g, 4,04 mmol, rendimento 55,3%), foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer purificação adicional. Etapa B: (3idroxi-3-((3- (4-isopropiltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-a moniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A
N- (4-isopropiltiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbotioamida (0,57 g, 2.26 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,38 g, 2.26 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 24 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 50-100%) para produzir (3idroxi-3-((3-(4-isopropiltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-a moniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,56 g, 1,58 mmol, rendimento 70,0%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,62 (s, 1 H) , 6,70 (s, 1 H) , 5,31 (s, 1 H) , 3,58-3,96 (m, 2 H), 2,63-3,11 (m, 7 H), 2,00-2,22 (m, 1 H), 1, 65-1, 97 (m, 3 H) , 1, 16-1, 61 (m, 10 H) . MS (LC/MS) T.R. =3,43; [M+H]+ = 353,2.
Etapa C: (2-(5-1sopropiltiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3 ' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao
(3idroxi-3-((3-(5-isopropiltiazol-2-il)tioureido)metil)-1-a moniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,54 g, 1,52 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,Ν'-diisopropilcarbodiimida (0,83 ml, 5,33 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 24 horas. A reação foi concentrada para produzir um resíduo em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexanos a 50-100%) produzindo as segundas manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (2 - (5-isopropiltiazol-2ilamino)-4H-11-amonioespiro[oxazol-5 ,31-biciclo[2,2,2]octano]-11-il)triidroborato (0,39 g, 1,22 mmol, rendimento 80%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 6,55 (s, 1 H) , 3,75 (m, 2 H) , 3,20-3,31 (m, 1 H) , 2,96-3,15 (m, 2 H) , 2,77-2, 97 (m, 4 H) , 2,22 (s, 1 H) , 2,01 (s, 1 H) , 1, 68-1, 90 (m, 3 H) , 1,43 (s, 3 H) , 1,21 (d, J = 7,02 Hz, 6 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,36; [M+H-BH3]+ = 307,2.
Etapa D: N- (4-Isopropiltiazol-2-il) -4H-1 ' -azaespiro [oxazol-5, 3 ' -bid cio[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(4-isopropilt iazol-2-ilami.no)-4H-1'-amonioespiro[oxazol5 ,31-biciclo[2,2,2]octano]-11-il)triidroborato (0,42 g, 1,31 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3M (0,44 ml, 1,31 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi concluída por TLC (mancha inferior) . Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(4-isopropiltiazol-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bici cio [2,2,2]octan]-2-amina racémico (0,34 g, 1,05 mmol, rendimento 80%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,20-8,91 (m, 1H), 6,52 (s, 1H), 3,83 (d, J = 9,4 6 Hz, 1 H) , 3,57 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 2,99 (s, 2 H) , 2,58-2, 92 (m, 5 H) , 2,02 (s, 1 H) , 1,82-1, 96 (m, 1 H) , 1,38-1, 66 (m, 3 H) , 1,20 (d, J = 7,02 Hz, 6 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,27; [M+H]+ = 307,1 .
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (30 x 250mm, 5Am) com uma fase móvel consistindo em metanol a 23% (DEA a 0,1%) em C02. O comprimento de onda foi estabelecido a 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S) -N- (4-isopropiltiazol-2-il) -4H-l'azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,01 g, 0,03 mmol, rendimento 2,95%) . (15a, isómero S) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8.35- 8, 95 (m, 1 H) , 6,52 (s, 1 H) , 3,82 (d, J= 9,41 Hz, 1 H) , 3.57 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 2,99 (s, 2 H) , 2, 60-2,88 (m, 5 H) , 2.02 (s, 2 H) , 1,82-1, 96 (m, 1 H) , 1.38-1,65 (m, 3 H) , 1,20 (d,
J = 6,71 Hz, 6 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,38; [M+H]+ = 307,1. O segundo pico foi (R)-N-(4-isopropiltiazol-2-il)-4H-l'azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,02 g, 0,05 mmol, rendimento 4,83%) . (15b, isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8.35- 8,91 (m, 1H), 6, 52 (s, 1H), 3,82 (d, J = 9,44 Hz , 1 H) , 3.57 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 2,99 (s, 2 H) , 2, 60-2, 90 (m, 5 H) , 2.02 (s, 2 H) , 1,82-1, 96 (m, 1 H) , 1.38-1,62 (m, 3 H) , 1,20 (d, J = 6,78 Hz, 6 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,49; [M+H]+ = 307,3. EXEMPLO 16 N-(Tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’-biciclo[2,2,21o ctan 1-2-amina
Etapa A: N-(Tiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbotioamida
A tiazol-2-amina (2,12 g, 21,17 mmol) em acetonitrilo (30 ml) e tetraidrofurano (5 ml) foi adicionada di(lH-imidazol-l-il)metanotiona (4,90 g, 27,5 mmol). A reação foi agitada a 60°C durante 5 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado e lavado com acetonitrilo frio (2 x 15 ml) para produzir um pó castanho-alaranjado. O produto, N— (tiazol —2 —il)-lH-imidazol-l-carbotioamida (3,70 g, 17,60 mmol, rendimento 83%), foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer outra caracterização.
Etapa B: (3idroxi-3- ( (3-tiazol-2-iltioureido)metil)-1-amoniobiciclo[ 2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A N—(tiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbotioamida (1,7 g, 8 mmol) em N,N-dimetilformamida (30 ml) foi adicionado (3-(aminometil)-3idroxi-lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (1,37 g, 8 mmol) . A reação foi agitada a 50°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (50-100% de acetato de etilo-hexano) produzindo as primeiras manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (3idroxi-3-((3-tiazol-2-iltioureido)metil)-lamoniobiciclo[2 ,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,5 g, 4,80 mmol, rendimento 59,8%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 11,64 (s, 1H), 7,42 (d, J = 3,36 Hz, 1 H), 7,14 (m, 1H), 5,32 (s, 1 H), 3,78 (dd, 2 H), 2,59-3,02 (m, 6 H), 1,99-2,18 (m, 1 H),
1.7 9-1, 92 (m, 2 H) , 1, 64-1, 8 0 (m, 1 H) , 1,19-1,65 (m, 4 H) . MS (LC/MS) T.R. = 2,73; [M+H]+ = 311,1.
Etapa C: (2-(Tiazol-2-ilamino)-4H-1 ' -amonioespiro[oxazol-5,3'-bicicl o[2, 2, 2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao
(3idroxi-3-((3-tiazol-2-iltioureido)metil)-1-amoniobiciclo [ 2,2,2]octan-l-il)triidroborato (1,2 g, 3,84 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (2,09 ml, 13,45 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 24 horas. A reação foi concentrada para produzir um resíduo em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 50-100%) produzindo as primeiras manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas para produzir (2-(tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3'-bicicl o[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,84 g, 3,02 mmol, rendimento 79%) como um pó branco. 2Η RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,37-9,14 (m, 1 H) , 7,32 (d, J = 3,66 Hz, 1 H) , 7,04 (d, J = 3,66 Hz, 2 H) , 3,79 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,67 (d, J = 10.07 Hz, 1 H) , 3,20-3, 29 (m, J=14,95, 2,14Hz, 1 H) , 2,97-3,15 (m, 2 H), 2,78-2,94 (m, 3 H), 2,22 (s, 1 H), 1,95-2,08 (m, 1 H) , 1, 66-1,85 (m, 3 H) , 1,43 (s, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,57; [M+H-BH3]+ = 265,1.
Etapa D: N-(Tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2, 2, 2]o ctan]-2amina
Ao (2-(tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[oxazol-5,3'-bicicl o[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,57 g, 2,05 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3M (0,68 ml, 2,05 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi concluída por TLC ( mancha inferior). Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]oc tan]-2-amina racémica (0,4 g, l,44mmol, rendimento 70,2%) como um pó branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,64 (s, 1 H) , 7,24 (d, J = 3,74 Hz, 2 H) , 7,01 (d, J = 3,75 Hz, 2 H) , 3,78 (d, J = 9,80 Hz, 2 H) , 3,53 (d, J = 9,80 Hz, 2 H) , 2,97-3,05 (m, 4 H) , 2,7 4-2, 86 (m, 4H), 2,65 (t, J = 7,84 Hz, 4 H) , 2,01 (s, 2 H) , 1,88 (s, 2 H) , 1,53-1, 64 (m, 4 H) , 1,45-1,56 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,28; [M+H]+ = 265,1.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralcel OJ-H (30 x 250mm, 5pm) com uma fase móvel consistindo em de metanol a 23% (DEA a 0,1%) em C02. O comprimento de onda foi estabelecido a 300 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-N- (tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2 ,2]octan]-2-amina (0,12 g, 0,43 mmol, rendimento 18,80%). (16a, isómero S) : ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,64 (s, 1 H), 7,26 (d, J = 3,75 Hz, 2 H) , 7,00 (d, J = 3,77 Hz, 2 H) , 3,78 (d, J = 9,81 Hz, 2 H) , 3,54 (d, J = 9,82 Hz, 2 H) , 2,95-3,10 (m, 4 H) , 2,7 5-2, 82 (m, 4H), 2,65 (t, J = 7,80 Hz, 4 H) , 2,01
(s, 2 H) , 1,88 (s, 2 H) , 1,53-1, 60 (m, 4 H) , 1,42-1,51 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,32; [M+H] + = 265, 1. O segundo pico foi (R)-N-(tiazol-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2 ,2]octan]-2amina (0,15 g, 0,52 mmol, rendimento 22,96%). (16b, isómero R) : ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,64 (s, 1 H) , 7,25 (d, J = 3,74 Hz, 2 H), 7,00 (d, J = 3,76 Hz, 2 H) , 3,78 (d, J = 9,80 Hz, 2 H) , 3,53 (d, J = 9,80 Hz, 2 H) , 2, 95-3, 08 (m, 4 H) , 2,75-2,84 (m, 4 H) , 2,65 (t, J = 7,80 Hz, 4 H) , 2,01 (s, 2 H) , 1,88 (s, 2 H) , 1,54-1, 62 (m, 4 H) , 1,43-1,53 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,28; [M+H]+ = 265,3.
Exemplo 17 N-(4-(4-Metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[ox az o1-5,3’biciclo [2 f2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(4-(4-Metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida
À 4-(4-metoxifenil)-5-metiltiazol-2-amina (0,98 g, 4,45 mmol) em acetonitrilo (25 ml) foi adicionada di(lH-imidazol-l-il)metanotiona (1,03 g, 5,78 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado. O pó foi lavado com acetonitrilo (2 x 10 ml) e seco para produzir N-(4-(4-metoxifenil)-5metiltiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbo tioamida racémica (1,28 g, 3,87 mmol, rendimento 87%) como um pó amarelo. O produto foi levado diretamente para a seguinte etapa.
Etapa B: (2- (4- (4-Metoxifenil)-5-metiltiazol-2-ilamino)-4H-1 ' -amonio espiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1 ' -il)triidroborat o
À N-(4-(4-metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il) -1 H-imidazol-1-carboxamida (0,44 g, 1,39 mmol) em N,N-dimetilformamida (25 ml) foi adicionado (3-(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (0,24 g, 1,39 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. N, N'-Diisopropilcarbodiimida (0,65 ml, 4,16 mmol) foi adicionada e a reação aquecida até 75°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir o produto em bruto. O material em bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 60-100%) para produzir (2(4-(4-metoxifenil)-5-metiltiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioe spiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,41 g, 1,029 mmol, rendimento 74,2%) como um pó amarelo. RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 7,59 (d, J = 7,63 Hz, 2 H) , 6,98 (d, J = 8,55 Hz, 2 H) , 3,80 (s, 4H), 3,67 (s, 1H), 3,24 3,31 (m, 1 H) , 3,13 (s, 1 H) , 3,03 (s, 1 H) , 2,83-2, 92 (m, 3 H) , 2,39 (s, 3 H) , 2,23 (s, 1 H) , 2,07 (s, 1 H) , 1,73-1,82 (m, 2 H) , 1,44 (s, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,88; [M+H]+ = 399,34.
Etapa C: N- (4 - (4-Metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il)-4H-1 '-azaespiro[ox az o 1-5, 3'biciclo [2 f2, 2]octan]-2-amina
Ao
(3idroxi-3-((3-(4-(4-metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il)tioure ido)metil)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,08 g, 0,19 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 2 M (0,09 ml, 0,19 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A reação foi concluída por TLC (mancha inferior) . Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi recolhida e neutralizada com hidroxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(4-(4-metoxifenil)-5-metiltiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[ox azol-5,3 '-biciclo [2,2,2 ] octan]-2-amina racémica (0,05g, 0,12 mmol, rendimento 66,8%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 7,58 (d, J = 8,24 Hz, 2 H) , 6,98 (d, J = 8,55
Hz, 2 H) , 3,83 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) , 3,80 (s, 3 H) , 3,56 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 3,00 (s, 2 H) , 2,74-2,83 (m, 2 H) , 2,66 (t, J = 7,63 Hz, 2 H), 2,38 (s, 3 H), 2,03 (s, 1H), 1,91 (s, 1H), 1,54 1, 62 (m, 2 H) , 1,48 (d, J = 7,02 Hz, 1 H) . MS (LC/MS) T .R. = 2,04; [M+H]+ = 385,28. EXEMPLO 18 (E) -N- (1' -Azaespiro [oxazolidina-5, 3 ’ -biciclo [2,2,2] odano] -2 -ilideno) piridin-3amina
Etapa
A: (3idroxi-3- ( (3-piridin-3-iltioureido)metil)-1-amoniobiciclo [2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A uma suspensão em agitação de (3-(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr iidroborato (247 mg, 1,45 mmol) em tetrahidrofurano (3 ml) foi adicionada uma solução de 3-isotiocianatopiridina (298 mg, 2,19 mmol) em tetraidrofurano (1,5 ml) e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi evaporada in vacuo e o resíduo (sólido ceroso branco) purificado por meio de cromatografia de coluna (metanol/acetato de etilo a 3%) para produzir (3hidroxi-3-((3-piridin-3-iltioureido)metil)-1-amoniobicicl 0 [2,2,2]octan-l-il)trihidroborato (294, 6 mg, 0,96 mmol, rendimento 66,2%) como uma espuma branca. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,56-8,70 (m, 1 H) , 8,24-8,36 (m, 1 H) , 8,08-8,16 (m, 1 H) , 7,32-7,48 (m, 1 H) , 4,02-4,18 (m, 1 H) , 3, 67-3,77 (m, 1 H) , 3,53-3, 62 (m, 1 H) , 2,88-3,11 (m, 3 H) , 2,70-2,88 (m, 1 H) , 2,15-2,29 (m, 1 H) , 1,92-2,12 (m, 2 H) , 1,73-1, 89 (m, 1 H) , 1,54-1, 6 9 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,00; [MH+-BH3 ] = 2 93, 10. Etapa B: (E) - (2 - (Pirídin-3-ilimino) -1 ' -amonioespim [oxazolidina-5, 3 ' - bide lo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato
A uma solução de (3idroxi-3-((3-piridin-3-iltioureido)metil)-1-amoniobiciclo [ 2,2,2]octan-l-il)triidroborato (294, 6 mg, 0,96 mmol) em N,N-dimetilformamida (5 ml) foi adicionada uma solução de N,N'-metanodiilidenodipropan-2-amina (121 mg, 0,96 mmol) em N,N-dimetilformamida (1 ml) e a mistura de reação foi deixada descansar à temperatura ambiente durante 7 dias. 133 mg adicionais de N,N'-metanodiilidenodipropan2-amina em 0,5 ml de N,N-dimetilformamida foram adicionados e a reação foi deixada continuar durante 7 dias adicionais. A reação foi purificada por meio de cromatografia de coluna (metanol/acetato de etilo a 5-10%) para produzir (E)-(2-(piridin-3-ilimino)-1'-amonioespiro[oxazolidina-5,3' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (134,3 mg, 0,49 mmol, rendimento 51,3%) . RMN (500 MHz, MeOD) δ ppm 8,34-8, 60 (m, 1 H) , 8,16 (d, J = 4,27 Hz, 1 H) , 7,59-7, 96 (m, 1 H) , 7,35 (dd, J = 8,24, 4,88 Hz, 1H), 3,89 (s. 1., 1H), 3,65 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 3,16-3,23 (m, 1 H), 3,04-3,16 (m, 1 H), 2,85-3,04 (m, 2 H) , 2,23 (s. 1., 1 H) , 1,74-1, 97 (m, 4 H) , 1,36-1,70 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,65; [M+H—ΒΗΛ = 259,21.
Etapa C: (E)-N-( 1'-Azaespiro[oxazolidina-5,3’-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilide no)piridin-3-amina
A uma suspensão de (E)-(2-(piridin-3-ilimino)-1'-amonioespiro[oxazolidina-5,3' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (127 mg, 0,47 mmol) em acetona (5 ml) foi adicionado ácido clorídrico a 3 M (2 ml, 6,00 mmol) e a mistura foi deixada descansar à temperaturaambiente durante 2 horas. Esta foi posteriormente adicionada a um funil separatório contendo água e clorofórmio. As camadas foram separadas, posteriormente a camada aquosa foi tornada básica com solução de carbonato de sódio e a mistura foi novamente extraída com clorofórmio. Finalmente, a fase aquosa foi lavada com acetato de etilo. Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hidróxido de amónio a 1% / metanol a 9% / diclorometano a 90%) para produzir (E)-N-(1'-azaespiro[oxazolidina-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilideno)piridin-3-amina racémica (19 mg, 0,074 mmol,rendimento 15,8%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,39 (s. 1., 1 H) , 8,14 (d, J - 4,77 Hz, 1 H) , 7,72 (s. 1., 1H), 7,34 (dd, J = 8,24, 4,88 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 9,77 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) , 3,14-3,27 (m, 1 H), 3,00-3,13 (m, 1 H), 2,70 3,00 (m, 4 H), 1,97-2,22 (m, 2 H) , 1,54-1, 84 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,26; [M+H]+ = 259, 16. EXEMPLO 19 N- (Piridin-2-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3 ’ -biciclo [2,2,2] octan]-2-amina
Etapa A: 2-Bromo-6-isotiocianatopiridina
Uma mistura de 6-bromopiridin-2-amina (253 mg, 1,46 mmol), clorofórmio (2 ml) , bicarbonato de sódio (850 mg, 10,12 mmol) e água (3 ml) foi agrupada, e a esta foi adicionada uma solução de tiofosgénio (190 mg, 1,65 mmol) em clorofórmio (1 ml) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi transferida para um funil separatório e dividida entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e o solvente evaporado para proporcionar um sólido amarelo. O sólido foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 5%) para produzir 2-bromo-6-isotiocianatopiridina (281 mg, 1,31 mmol, rendimento 89%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 7,50 -1,62 (m, 1 Η), 7,34-7,43 (m, 1 Η), 6,91 -7,11 (m, 1 Η). MS (LC/MS) T.R. = 1,92; [M+H]+ = 216,86.
Etapa B: N- (6-Bromopiridin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazoI-5,3'-blciclo [2,2,2]octan]-2-amine
A uma solução de 2-bromo-6-isotiocianatopiridina (281 mg, 1,31 mmol) em N, N-dimetilformamida (8 ml) e base de Hunig (0,6 ml, 3,44 mmol) foi adicionado dicloridrato de (+/-) 3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (300 mg, 1,31 mmol) e a mistura resultante foi aquecida até 75°C durante 2,5 horas. MS (LC/MS) T.R. = 1,04; [M+H]+ = 373,01. A esta mistura de reação foi adicionada diisopropil-carbodiimida (523 mg, 4,14 mmol) e o aquecimento a 75°C foi continuado durante 2,25 horas. A mistura foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente durante o fim de semana. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. Ο material foi purificado através de cromatografia de coluna e posteriormente HPLC preparativa para produzir N-(6-bromopiridin-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[ 2,2,2]octan]-2-amina (291,5 mg, 0,86 mmol, rendimento 66,2 %) como um sólido amarelo (contendo impurezas de 2-amino-6-bromopiridina) . MS (LC/MS) T.R. = 0,65; [M+H]+ = 337,0.
Etapa C: N- (Piridin-2-il) -4H-1 ' -azaespiro [oxazol-5, 3 ' -biciclo [2,2,2] octan]-2-amina
N-(6-bromopiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bi ciclo[2,2,2]octan]-2-amina (291 mg, 0,86 mmol) em metanol (20 ml) foi hidrogenada sobre paládio a 10% sobre carbono (23 mg) no aparelho Parr durante 2 horas. O catalisador foi removido através de filtração e o filtrado concentrado in vacuo. Ο resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (hidróxido de amónio a 0,7% / metanol a 6,3% / clorofórmio a 93%) para proporcionar N-(piridin-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2] octan]-2-amina racémica (41,3 mg, 0,16 mmol, rendimento 18,65). ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD) δ ppm 8,13-8,33 (m, 1 H) , 7,57-7,72 (m, 1 H) , 6, 83-7, 04 (m, 2 H) , 3,97 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,66 (d, J" = 10,07 Hz, 1 H) , 3,18-3,27 (m, 1 H) , 3,03-3,14 (m, 1 H) , 2,94 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 2,70-2, 90 (m, 2 H) , 2,06-2,24 (m, 2 H) , 1,57-1, 87 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T .R. = 1,76; [M+H]+ = 259,25. EXEMPLO 20 N-(4-(4-Metoxifenil)tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa
A: N- (5- (4-Metoxifenil)tiazol-2-il)-IH-imidazol-l-carbotioamid a
A 5-(4-metoxifenil)tiazol-2-amina (1,07 g, 5,19 mmol) em aceto5 nitrilo (30 ml) e tetraidrofurano (5 ml) foi adicionada di (lH-imidazol-lil)metanotiona (1,20 g, 6,74 mmol) . A reação foi agitada a 60°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado. 0 pó foi lavado com acetonitrilo frio (2 x 15 ml) e seco para produzir N-(5-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)-lH-imidazol-l-carbotioamid a (0,59 g, 10 1,86 mmol, rendimento 35,9%) como um pó castanho-alaranjado. O produto foi levado diretamente para a etapa seguinte sem qualquer outra caracterização.
Etapa B: (3idroxi-3- ( (3- (4 - (4-metoxifenil)tiazol-2-il)tioureido)meti 1)-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato
A N-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (0,57 g, 1,82 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado (3(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tri idroborato (0,31 g, 1,82 mmol). A reação foi agitada a 60°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida e concentrada para produzir produto em bruto. O material em bruto foi purifica do por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexano a 60-100%) produzindo as primeiras manchas/frações (TLC) como o produto. As frações foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (3idroxi-3-((3(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)tioureido)metil )-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)trihidroborato (0,6 g, 1,43 mmol, rendimento 79%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,74 (s, 1 H) , 7,91 (d, J = 8,55 Hz, 2 H) , 7,43 (s, 1H), 6,97 (d, J = 8,85 Hz, 2 H), 5,50 (s, 1H), 3,62-3,98 (m, 5 H) , 2,70-3,10 (m, 6 H) , 2,13 (s, 1 H) , 1,94 (s, 1 H) , 1,66-1,91 (m, 2 H) , 1,11-1, 62 (m, 4 H) . MS (LC/MS) T.R. = 3,54; [M+H]+ = 417,1.
Etapa C: (2-(4-(4-Metoxifenil)tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[o xazol5,3 ' -biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato
Ao
(3idroxi-3- ( (3-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)tioureido)meti 1)-lamoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidroborato (0,59 g, 1,41 mmol) em N,Ndimetilformamida (20 ml) foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,66 ml, 4,23 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 24 horas. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de cromatografia flash (acetato de etilo-hexanos a 50-100%), recolhendo o primeiro componente como o produto, para produzir (2-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-ilamino)-4H-1'amonioespiro[ox azol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,45 g, 1,17 mmol, rendimento 83%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8, 65 (s, 1 H) , 7,89 (d, J = 7,32 Hz, 2 H) , 7,15 7,43 (m, 1 H) , 6,95 (d, J = 8,85 Hz, 2 H) , 3, 64 3, 93 (m, 5 H) , 3,23-3,31 (m, J= 1,53 Hz, 1 H) , 3,09-3,21 (m, 1 H) , 2,99-3,09 (m, 1 H) , 2,79-2, 97 (m, 3 H) , 2,25 (s, 1 H) , 1,96-2,16 (m, 1 H), 1,68-1,91 (m, 3 H) , 1,45 (s, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 2,80; [M+H-BH3]+ = 371,1.
Etapa D: N-(4-(4-Metoxifenil)tiazol-2-il)-4H-1’-azaespiro[oxazol-5,3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao
(2-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-ilamino)-4H-1'-amonioespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-1'-il)triidroborato (0,41 g, 1,07 mmol) em acetona (9 ml) foi adicionado HC1 a 3M (0,36 ml, 1,07 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi concluída através de TLC (mancha inferior). Acetato de etilo foi adicionado e a camada aquosa foi posteriormente separada. A camada aquosa foi neutralizada com hidróxido de sódio a 1 N. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 40 ml) . Os orgânicos foram combinados, secos com sulfato de magnésio, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir N-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)-4H-1'azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina racémica (0,3 g, 0,77 mmol, rendimento 72,1%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,56 (s, 1 H) , 7,77-8, 00 (m, J = 8,55 Hz, 2 H) , 7,27 (s, 1 H) , 6, 80-7, 08 (m, 2 H), 3,87 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3,79 (s, 3 H) , 3,61 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3,02 (s, 3 H) , 2, 60-2, 92 (m, 4 H) , 2,06 (s, 2 H) , 1,82-2,00 (m, 1 H) , 1,39-1,70 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,95; [M+H]+ = 371,2.
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak AD-H (30 x 250mm, 5 pm) com uma fase móvel consistindo em metanol a 30% (DEA a 0,1%) em CO2. O comprimento de onda foi estabelecido a 220 nM. Os picos separados foram concentrados in vacuo para produzir pós brancos. O primeiro pico da coluna foi (S)-N-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,035 g, 0,09 mmol, rendimento 22,87%) . ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,56 (1 Η, s. 1.), 7,86 (2 H, d, J = 8,55 Hz), 7,25 (1 H, s), 6, 93 6, 96 (2 H, m) , 3,86 (1 H, d, J = 9,77 Hz), 3,78 (3 H, s) , 3,60 -(1 H, d, J = 9,4 6 Hz) , 3,01 (2 H, s), 2,72-2,8 4 (2 H, m), 2,62-2,71 (2 H, m) , 2,05 (1 H, s. 1.), 1,91 (1 H, s. 1.), 1,55-1, 64 (2 H, m), 1,44-1,52 (1 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 2,03; [M+H]+ = 371,3. O segundo pico foi (R)-N-(4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol 5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,055 g, 0,15 mmol, rendimento 35,9%) . (21b, isómero R) : ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,58 (1 Η, s. 1.), 7,87 (2 Η, d, J = 8,55 Hz), 7,26 (1 H, s) , 6, 92-6, 97 (2 Η, m) , 3,86 (1 Η, d, J = 9,77 Hz), 3,78 (3 Η, s) , 3,60 (1 Η, d, J = 9,77 Hz), 3,01 (2 Η, s), 2,73-2,85 (2 Η, m) , 2,63-2,71 (2 Η, m) , 2,05 (1 Η, s. 1.), 1,91 (1 Η, s. 1.), I, 54-1, 64 (2 Η, m) , 1,43-1,53 (1 Η, m) . MS (LC/MS) T.R. = 2,03; [M+H]+ = 371,3 . EXEMPLO 21 (R)-N-(2-(4H-1' -Azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo [2,2,2]odano]-2ilamino)benzo[d/tiazol-6-il)acetamida
Etapa A: (3-( (Benz iloxicarboni lamino)metil)-3idroxi-l-amoniobi ciclo[2,2, 2]octan-l-il)triidroborato
Ao
(3-(aminometil)-3idroxi-1-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)tr ihidroborato (10 g, 47,0 mmol) em diclorometano (150 ml) foram adicionados carbonato de sódio (200 ml, 200 mmol) e cloroformiato de benzilo (9,5 ml, 66,5 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 40 minutos. Diclorometano e água foram adicionados e a camada aquosa foi posteriormente separada e extraída novamente com diclorometano (2x) . As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (acetato de etilo-hexanos a 12-100%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas para produzir (3- ( (benziloxicarbonilamino)metil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[ 2,2,2]octan-1-il)triidroborato racémico (3 g, 9,86 mmol, rendimento 20, 96%) como um óleo claro. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,30-7,43 (5 Η, m), 5,27 (1Η, s . 1.), 5,12 (2 H, s), 3,36 (2 H, d, J = 6,04 Hz), 2,76-3,21 (6 H, m), 2,21 (1 H, s. 1.), 1,97 (1 H, s. 1.), 1,71-1,86 (2 H, m) .
Os enantiómeros foram separados utilizando uma coluna Chiralpak OJ-H (5 x 25) com uma fase móvel consistindo em acetonitrilo/metanol a 20% (1:1) em C02. O comprimento de onda foi estabelecido a 210 nM. O primeiro pico da coluna foi (R) -(3-(aminometil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-i 1)triidroborato (37,67 g, 123 mmol) como um óleo incolor. Rotação ótica: +28,2, c=2,9 em clorofórmio. O segundo pico da coluna foi (S) - (3- ( (benziloxicarbonilamino)metil)-3idroxi-l-amoniobici cio [2,2,2]octan-1-il)triidroborato (46, 82 g, 153 mmol) como um óleo âmbar-claro. Rotação ótica:-27,4, c=2,5 em clorofórmio. Etapa B: (S)-3- (Aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1
Uma solução de (S)-(3-((benziloxicarbonilamino)meti lmetil)-3idroxi-l-amoniobiciclo[2,2,2]octan-l-il)triidrobor ato (20,5 g, 67 mmol) em acetona (120 ml) foi arrefecida num banho de gelo. HC1 aquoso a 3 M (120 ml, 360 mmol) foi adicionado durante 2 minutos. Borbulhamento vigoroso foi observado. Após 10 minutos, o banho gelado foi removido e a mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. Após 20 minutos, esta foi diluída com metanol (800 ml) e enxaguada com azoto. Paládio sobre carbono (2 g, 1,88 mmol) foi adicionado e a reação foi enxaguada com azoto e ajustada com balão de hidrogénio. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Esta foi posteriormente enxaguada com azoto e filtrada através de um blocode celite utilizando metanol. O solvente foi evaporado para produzir um sólido amarelo em bruto. Os sólidos foram dissolvidos em água (25 ml) , posteriormente etanol (400 ml) foi adicionado. Cristais brancos foram formados imediatamente. Estes foram recolhidos por filtração e lavados com etanol, seguidos por éter. Um sólido cristalino branco foi obtido, (S)3-(aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1 (10,7 g, 46,7 mmol, rendimento 69,3%) . ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,93 (1 H, s. 1.), 8,24 (3 H, s. 1.), 6,02 (1 H, s), 3,26 (1 H, d, J = 13,43 Hz) , 2,99-3,22 (5 H, m), 2,10-2,19 (2 H, m), 1,81-1,90 (1 H, m), 1,72-1,81 (1 H, m), 1,60-1,72 (1 H, m) . Rotação ótica: [a]20D =-50,9 (c=6,4, água).
Etapa C: N- (2 - ( IH-Imidazol-l-carbotioamido)benzo[d]tiazol-6-il)acetamida
À N-(2-aminobenzo[d]tiazol-6-il)acetamida (4 g, 19,3 mmol) em acetonitrilo (100 ml) foi adicionada di(lH-imidazol-l-il)metanotiona (3,44 g, 19,30 mmol) . A reação foi deixada agitar a 80°C durante a noite. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado. O produto, N-(2-(lH-imidazol-1-carbotioamido)benzo[d]tiazol-6-il)aceta mida (3,6 g, 11,34 mmol, rendimento 58,8 %) , foi levado diretamente para a etapa seguinte sem gualguer purificação adicional.
Etapa D: (R) -N- (2- (4H-1 ' -Azaespiro [oxazol-5, 3 ' -biciclo [2,2,2] octano] -2-ilamino)benzoíd 1tiazol-6-il)acetamida
A
N- (2 - (1 H-imidazol-1-carbotioamido)benzo[d]tiazol-6-il)acetamida (300 mg, 0,95 mmol) em N, N-dimetilformamida (10 ml) foram adicionados (S)-3-(aminometil)guinuclidin-3-ol, 2 HC1 (238 mg, 1 mmol) e trietilamina (0,39 ml, 2,84 mmol) . A reação foi aguecida até 80°C durante 3 horas. N, N '-disopropilcarbodiimida (0,59 ml, 3,78 mmol) foi posteriormente adicionada à mistura de reação. A mistura foi aquecida a 80°C durante 2 horas adicionais. A reação foi arrefecida, posteriormente clorofórmio e água foram adicionados à mistura. A camada orgânica foi concentrada in vacuo para produzir produto em bruto. 0 material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash ([10% de hidroxido de amónio/metanol-clorofórmio a 2-20%). As frações de produto foram posteriormente trituradas com éter para produzir (R)-N-(2-(4H-l'azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilamino)benzo[d]tiazol-6il)acetamida (144,5 mg, 0,39 mmol, rendimento 41,2%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9,98 (1 H, s), 8,93 (1 H, s. 1.), 8,12 (1 H, d, J = 1,83 Hz), 7,52 (1 H, d, J = 8,42 Hz), 7,38 (1 H, dd, J = 8,60, 2,01 Hz), 3,88 (1H, d, J = 9,88 Hz), 3, 62 (1H, d, J = 9,88 Hz), 3,02 (2 H, s), 2,74-2,85 (2 H, m) , 2,66 (2 H, t, J = 7,68 Hz), 2,05 (4 H, s), 1,91 (1 H, s. 1.), 1,41-1,64 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,55; [M+H]+ = 372,2. EXEMPLO 22 (R)-N- (6- (Difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il) -4H-1'-azaespi ro[oxazol-5,3 ’biciclo[2,2,21octanl-2-amina
Etapa A: 6-(Difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-amina
A 4-(difluorometoxi)anilina (9,55 g, 60 mmol) em ácido acético (90 ml) foi adicionado tiocianato de potássio (KSCN) (12,41 ml, 240 mmol). A mistura foi agitada durante 20 minutos (KSCN dissolvido na solução). A esta mistura, bromo (3,08 ml, 60,0 mmol) em ácido acético (40 ml) foi adicionado gota a gota durante 20 minutos. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Esta foi vertida numa mistura de 800 ml de água gelada e 200 ml de hidróxido de amónio saturado. O produto foi extraído com acetato de etilo (5x) . Os orgânicos foram combinados, lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir 6-(difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-amina (12,6 g, 52,4 mmol, rendimento 87%) como um sólido amarelo.
Etapa B: N- (6- (Difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il) -1 H-imidazol-1 -carb^i~ i ή a
A 6-(difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-amina (0,5 g, 2,3 mmol) em acetonitrilo (15 ml) foi adicionado 1,1'-tiocarbonildiimidazol (0,49 g, 2,8 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante a noite. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado foi filtrado para produzir N-(6(difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (500 mg, 1,53 mmol, rendimento 66,3%) como um sólido amarelo.
Etapa C: (R) -N-(6-(Difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1 '-azaespi ro[oxazol5,3'-biciclof 2,2,21octanl-2-amina
A uma solução de N-(6-(difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-lH-imidazol-l-car botioamida (285 mg, 0,87 mmol) em N,N-dimetilformamida (5 ml) foram adicionados (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1 (200 mg, 0, 87 mmol) e trietilamina (0,4 ml, 2,87 mmol) . A reação foi aquecida até 70°C durante 2 horas. N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,4 ml, 2,57 mmol) foi posteriormente adicionada à mistura de reação. A mistura foi aquecida a 70°C durante 3 horas adicionais. Esta foi arrefecida e posteriormente vertida em tolueno/hidróxido de sódio a 0,3 Μ. O produto foi extraído com tolueno (4x) e clorofórmio (3x) . Os orgânicos foram combinados, lavados com água (3x), secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir produto em bruto. 0 material em bruto foi purificado por meio de cromatografia flash ([hidróxido de amónio/metanol a 10%]-clorofórmio a 2-20%) para produzir (R)-N-(6-(difluorometoxi)benzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespi ro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (186,2mg, 0,49 mmol, rendimento 55,5%) como um pó branco. P.F. 223-5°C. ΤΗ RMN (50 0 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,99 (1H, s. 1.), 7,69 (1H, d, J = 2,75 Hz), 7,61 (1 H, d, J - 8,55 Hz), 7,02 7,34 (2 H, m) , 3,89 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,64 (1H, d, J = 9,77 Hz), 3,03 (2 H, d, J = 2,44 Hz), 2,73-2,86 (2 H, m) , 2, 62-2,70 (2 H, m) , 2,07 (1 H, s. 1.), 1,92 (1 H, s. 1.), 1,54-1, 65 (2 H, m) , 1,44-1,53 (1 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,43; [M+H]+ = 381,1. EXEMPLO 23 (R)-N- (6-Metoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 ’ -biciclo[2, 2, 2]octan]2-amina
Etapa A: 4-Isotiocianato-6-metoxipirimidina
A uma solução laranja brilhante de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2-(1H)ona (1,86 g, 7,99 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente foi adicionada 6-metoxipirimidin-4-amina (1 g, 8 mmol) . A solução laranja foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. LC/MS mostrou o produto desejado como um dos principais picos. A solução laranja intenso foi concentrada e o resíduo restante foi filtrado. O filtrado foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo/hexanos a 10-50%) para produzir 4-isotiocianato-6-metoxipirimidina (0,72 g, 4,3 mmol, rendimento 54%) como um óleo amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,49 (1 H, d, J = 5,79 Hz), 6,95 (1 H, d, J = 5, 7 9 Hz) , 3, 92 (3 H, s) . MS (LC/MS) T.R. = 3,15; [M+H] + = 16 8,1. Etapa B: (R)-N- (6-Metoxipirimidin-4-il) -4H-1 '-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (da Etapa B do Exemplo 21) (0,34 g, 1,49 mmol) em N, N-dimetilformamida (15 ml) foram adicionados CS2CO3 (1,22 g, 3,74 mmol) e 4-isotiocianato-6-metoxipirimidina (0,25 g, 1,5 mmol). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν' —diisopropilcarbodiimida (0,7 ml, 4,5 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [metanol : hidroxido de amónio 9 :1]/clorofórmio a 5-15%) para produzir (R)-N-(6-metoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,21 g, 0,72 mmol, rendimento 48,2%) como um sólido branco. P.F. 186-8 °C. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,40 (1 H, s) , 6,17 (1 H, s. 1.), 3, 92-4,04 (1 Η, m) , 3,89 (3 Η, s) , 3,68 (1 Η, d, J = 10,32 Hz), 3,12-3,23 (1 Η, m) , 2,98-3,12 (1 Η, m) , 2, 67-2,97 (4 Η, m) , 2,11 (2 Η, s. 1.), 1,48-1,82 (3 Η, m) . MS (LC/MS) T.R. = 0,82; [M+H] + = 290,3. EXEMPLO 24 (R) -N- (6-Metoxi- [ 1,2,4] triazolo [ 1,5-a]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: Tioureia de etoxicarbonilo de 5-metoxipiridin-2-amina
À 5-metoxipiridin-2-amina (5g, 40 mmol) em dioxano (40 ml) foi adicionado isotiocianato de etoxicarbonilo (5,23 ml, 44,3 mmol) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada in vacuo para produzir tioureia de etoxicarbonilo de 5- metoxipiridin-2-amina (10,28 g, 40,3mmol, rendimento 100%) . ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO~d6) δ ppm 12,03 (1 H, s. 1.), 11,37 (1 H, s. 1.), 8,53 (1H, s. 1.), 8,11 (1H, d, J = 2,93 Hz) , 7,50 (1H, dd, J = 8,97, 3,11 Hz), 4,22 (2 H, q, J = 7,07 Hz), 3,84 (3 H, s), 1,26 (3 H, t, J = 7,14 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 2,40; [M+H]+ = 256,1.
Etapa B: 6-Metoxi-[ 1.2. 4 1 triazolo [ 1,5-a]piridin-2-amina
À tioureia de etoxicarbonilo de 5-metoxipiridin-2-amina (10,21 g, 40 mmol) em etanol (57 ml) e metanol (57 ml) foram adicionados cloridrato de hidroxilamina (14 g, 200 mmol) e base de Hunig (21 ml, 120 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, e posteriormente aquecida a 60°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida até à à temperatura ambiente e filtrada para remover sólidos. Esta foi concentrada in vacuo e posteriormente suspensa em clorofórmio. Os sólidos foram filtrados para produzir 6- metoxi-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-amina (6,05 g, 33,2 mmol, rendimento 83%) . ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,30 (1 H, d, J = 1,83 Hz), 7,24-7,32 (1 H, m), 7,16-7,23 (1 1 H, m), 3,82 (2 H, s. 1.), 3,78 (3 H, s) . MS (LC/MS) T.R. = 0,53; [M+H] + = 165,2. Dois gramas de 6-metoxi-[l,2,4]triazolo[l,5-a]piridin-2-amina foram purificados por meio de cromatografia flash ( [hidróxido de amónio/metanol a 10 %]/clorofórmio a 2-20%) para produzir 6-metoxi-[1,2,4]triazolo[1,5a]piridin-2-amina (1,35 g, 8,22 mmol, rendimento 67,5%) . RMN (300 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,29 (1 H, d, J = 2,20 Hz), 7,24-7,30 (1 H, m), 7,15-7,22 (1 H, m), 5,79 (2 H, s) , 3,78 (3 H, s) .
Etapa C: 2-1sotiocianato-6-metoxi-[1,2r 4]triazolo[ 1, 5-a]piridina
A 6-metoxi-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-amina (0,3 g, 1,8 mmol) em diclorometano (15 ml) foi adicionada l,l'-tiocarbonildi-2(lH)-piridona (0,51 g, 2,2 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, concentrada in vacuo e purificada por meio de cromatograf ia flash produzindo 2-isotiocianato-6-metoxi-[l,2,4]triazolo[l,5-a]piridina (166 mg, 0,8 mmol, rendimento 44%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (30 0 MHz, CDC13) δ ppm 8,03 (1H, d, J = 2,20 Hz), 7,54 (1 H, d, J = 9,8 8 Hz) , 7,34 (1H, dd, J = 9,51,2,56 Hz), 3,88 (3 H, s) .
Etapa D: (R)-N-(6-Metoxi-[1,2, 4]triazolo[
I, 5-a]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’ -biciclo[2,2 ,2]octan]-2-amina
A 2-isotiocianato-6-metoxi-[l,2,4]triazolo[l,5-a]piridina (160 mg, 0,78 mmol) em N, N-dimetilformamida (5 ml) foram adicionados (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1 (178 mg, 0,78 mmol) e trietilamina (0,32 ml, 2,33 mmol). A reação foi agitada a 70°C durante 1 hora. N, N'-Diisopropilcarbodiimida (0,36 ml, 2,33 mmol) foi posteriormente adicionada à mistura de reação. A mistura foi aquecida a 70°C durante 4 horas, posteriormente arrefecida e vertida em bicarbonato de sódio aquoso/clorofórmio. 0 produto foi extraído (3x) com clorofórmio. Os orgânicos combinados foram lavados com água (3x), secos sobre sulfato de sódio, filtrados, e concentrados in vacuo, posteriormente purificados por meio de cromatografia flash ([hidróxido de amónio:metanol a 10%]/clorofórmio a 2-20%) para produzir (R)-N-(6-metoxi[l,2,4]triazolo[l,5-a]piridin-2-il)-4H-l'-az aespiro-[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (114,5 mg, 0,33 mmol, rendimento 42%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,51 (1H, s. 1.), 8,08 (1H, d, J = 2,44 Hz), 7,35 (1H, d, J = 9,77 Hz), 7,18 (1H, dd, J = 9,4 6, 2,44 Hz), 3,92 (1 H, d, J = 8,85 Hz), 3,84 (3 H, s), 3,58 (1 H, d, J = 8,85 Hz), 3,36-3,41 (1 H, m), 2,72-3,05 (4 H, m), 2,18-2,26 (1 H, m, J = 13,26, 9, 98, 3, 66, 3,49, 3,49 Hz), 2,13 (1 H, s. 1.), 1,79 (1 H, s. 1.), 1,67-1,76 (1 H, m, J = 13,96, 9,84, 4,27, 4,27 Hz), 1,45 1,63 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,86; [M+H]+ = 329,2. EXEMPLO 25 (R) -N-(5-(Trifluorometil)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5, 3 'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-(Trifluorometil)pirazin-2-amina
1J h2n n A um banho de solução arrefecida com gelo de 5,6-diaminopirimidin-4-ol (18 g, 143 mmol) em hidroxido de sódio a 3 M (180 ml, 540 mmol), foi adicionada 3,3-dibromo-l,1,1-trifluoropropan-2-ona (25,2 g, 93 mmol). A reação foi agitada durante 3 dias à temperatura ambiente. Os sólidos foram filtrados, dissolvidos em 60% de ácido sulfúrico (140 ml), e agitados a 135°C durante 8 horas. A reação foi arrefecida, vertida sobre gelo e deixada assentar durante 16 horas. A solução foi neutralizada para pH 8 com hidróxido de amónio concentrado e extraída com acetato de etilo (5 X 100 ml) , seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo sólido foi recristalizado de benzeno/hexano para produzir 5-(trifluorometil)pirazin-2-amina (2,28 g, 14 mmol, rendimento 15%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,32 (1 H, s), 7,99 (1H, d, J = 1,26 Hz), 5,02 (2 H, s. 1.). MS (LC/MS) T.R. = 1,56; [M+H]+ = 164,03.
Etapa B: (R)-N-(5-(Trifluorometil)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz o 1-5, 3'biciclo [2r2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-(trifluorometil)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro [oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada seguindo os procedimentos gerais 5 do Exemplo 23, Etapas A-B e utilizando 5- (trifluorometil)pirazin-2-amina (da Etapa A acima) como o material de partida. ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,08 (1 H, s. 1.), 8,35 (1 H, s), 8,32 (1 H, s), 3,95 (1 H, d, J = 9,57 Hz), 3,61 (1H, d, J = 9,57 Hz), 3,30 (1H, dd, J = 14, 86, 1,76 Hz), 2, 65 2, 99 (5 H, m) , 2,05 2,16 (2 H, m) ,
I, 64 1,74 (1 H, m) , 1,42 1,57 (2 H, m) . MS 10 (LC/MS) T.R. = 1,06; [M+H]+ = 328,30. EXEMPLO 26 (R)-N-(6-Fluoro-l H-indazol-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]oc tan]-2-amina
Etapa A: 6-Fluoro-l H-indazol-3-amina
A 2,4-difluorobenzonitrilo (1,21 g, 8,70 mmol) foi adicionado monoidrato de hidrazina (8,46 ml, 174 mmol). A mistura foi aquecida ao refluxo durante 5 horas e posteriormente vertida em gelo. A solução foi extraída com acetato de etilo, seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 6-fluoro-lH-indazol-3-amina (0,5 g, 3,3 mmol, rendimento 38%) como pó amarelo-claro. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,42 (s, 1H), 7,70 (dd, J" = 8,55, 5,49 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 10,07, 1,83 Hz, 1 H), 6,72-6,79 (m, 1 H), 5,40 (s, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,61; [M+H]+ = 152,11.
Etapa B: 6-Fluoro-3-isotiocianato-lH-indazol
À 6-fluoro-l H-indazol-3-amina (0,32 g, 2,1 mmol) em diclorometano (15 ml) foi adicionada 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,53 g, 2,30 mmol). A reação foi agitada a 50°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 25%) para produzir 6-fluoro-3isotiocianato-lH-indazol (0,30 g, 1,53 mmol, rendimento 73,0%) como um pó amarelo-claro. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 13,39 (s, 1 H), 7,78 (dd, J = 8,85, 4, 88 Hz, 1 H) , 7,41 (dd, J = 9,31, 1,68 Hz, 1 H) , 7,14 (td, J=9,16, 1,83 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 3,69; [M+H]+ = 194,07.
Etapa C: (R)-N-(6-Fluoro-lH-indazol-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5.3 'bicicloi2.2 .21octanl-2-amina
Ao 6-fluoro-3-isotiocianato-lH-indazol (0,20 g, 1,04 mmol) em DMF (15 ml) foram adicionados trietilamina (0,43 ml, 3,11 mmol) e dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,26 g, 1,14 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e tratada com N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,48 ml, 3,11 mmol). A reação foi posteriormente aquecida até 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (clorofórmio a 85%, metanol a 14%, hidróxido de amónio a 1%) para produzir (R)-N-(6-fluorol H-indazol-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]o ctan]-2-amina (0,22 g, 0,66 mmol, rendimento 64%) como um pó branco. RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 12,16 (s, 1 H) , 8,00 (s, 1 H) , 7,59-7, 67 (m, 1 H) , 7,09 (dd, J = 9,77, 2,14 Hz, 1 H) , 6,81-6,88 (m, 1 H) , 3,81 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) , 3,56 (d, J = 8,85 Hz, 1H), 3,00 (s, 2 H), 2,78 (s, 2 H), 2,67 (t, J = 7,32 Hz, 2 H) , 2,01 (d, J = 2,44 Hz, 1 H) , 1,92 (s, 1H), 1,59 (d, J = 5,80 Hz, 2 H), 1,46 (s, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,44; [M+H]+ = 316,16. EXEMPLO 27 (R)-N-(Furo[3, 2~c]piridin-4-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5, 3’ -bicicio[2,2,2]octan]2-amina
Etapa A: Furo[3,2-c]piridin-4-amina
A 4-clorofuro[3,2-c]piridina (1 g, 6,5 mmol) em tolueno sob azoto foram adicionados BINAP racémico (0,243 g, 0,4 mmol) , Pd2 (dba)3 (0,12 g, 0,13 mmol) e terc-butoxido de sódio (0,88 g, 9,1 mmol) . Benzofenonaimina (1,3 ml, 7,81 mmol) foi adicionada e a mistura foi aquecida até 80°C durante 3 horas e arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com éter, filtrada através de Celite, e lavada com éter. O filtrado foi concentrado e o resíduo laranja intenso foi tomado em metanol (90 ml) e tratado com hidroxilamina (1,2 ml, 19,5 mmol). A mistura foi agitada à temperaturaambiente durante 18 horas e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 95-100%) para produzir furo[3,2-c]piridin-4-amina (776 mg, 5,79 mmol, rendimento 89%) como um sólido laranja intenso. MS (LC/MS) T.R. = 0,51; [M+H]+ = 135,02.
Etapa B: (R)-N-(Furo[3, 2-c]piridin-4-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazoi-5,3' -bicicio[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(Furo[3,2-c]piridin-4-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol -5,3'-bicicio[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada seguindo os procedimentos gerais de Exemplo 23, Etapas A-B utilizando furo[3,2-c]piridin-4-amina (Etapa A acima) 5 como o material de partida. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,08 (1 H, d, J = 5,79 Hz), 7,69 (1 H, d, J = 2,01 Hz), 6,99-7,13 (2 H, m) , 4,00 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,69 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,19-3,26 (1 H, m), 3,05-3,13 (1H, m), 2,93 (2 H, t, J = 7,43 Hz) , 2,73-2,87 (2 H, m) , 2,08-2,24 (2 H, m) , 1,52-1,82 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 0,68; [M+H]+ = 299,19. EXEMPLO 28 (R)-N-(5-Fenilpiridin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-Fenilpiridin-3-amina
Uma mistura de 5-bromopiridin-3-amina (248 mg, 1,43 mmol), Pd(PPh3)4 (50,4 mg, 0,04 mmol), tolueno (3 ml), carbonato de sódio (2 M, 3 ml, 6 mmol), e ácido fenilborónico (195 mg, 1,60 mmol) dissolvida em etanol (3 ml) foi aquecida durante 4 horas num banho de óleo a 90 °C e deixada arrefecer até à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi transferida para um funil separatório e dividida entre acetato de etilo e água. A fase aquosa foi lavada novamente com acetato de etilo, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 80%) para produzir 5-fenilpiridin-3-amina (31,9 mg, 0,19 mmol, rendimento 13%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,17-8,42 (m, 1 H) , 8,02-8,20 (m, 1 H) , 7,32-7, 62 (m, 4 H) , 7,2 5 (s, 1 H) , 7, 06-7,20 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,91; [M+H]+ = 171,09.
Etapa B: (R)-N- (5-Fenilpiridin-3-il) -4H-1 '-azaespiro[oxazol-5, 3'-bic iclo [2r2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-Fenilpiridin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-bicilO clo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B utilizando 5-fenilpiridin-3-amina (da Etapa A acima) como o material de partida. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD-db δ ppm 8,40 (s. 1., 2 H), 7,66 (d, J = 7,32 Hz, 2 H) , 7,46-7,56 (m, 3 H) , 7,43 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) , 3,79-4,02 (m, 1 H) , 3,51 -3,68 (m, 1 H) , 3,22 (d, J = 14,95 Hz, 1 H) , 15 3, 02-3, 15 (m, 1 H) , 2,72-2, 99 (m, 3 H) , 2,14 (s. 1., 2 H) , 1,76 (dd, J=9,31,4,12 Hz, 3 H) , 1,12-1,35 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,90; [M+H]+ = 335,17. EXEMPLO 29 (R)-N- (2-Fenilpiridin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3’-bic iclo[2,2,2]octan]-220 amina
(R)-N-(2-Fenilpiridin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 2-bromopiridin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 28, Etapas A-B. ΤΗ RMN (50 0 MHz, 2 5 MeOD) δ ppm 8,3 8 (d, J = 5,49 Hz, 1 H) , 7,88 (d, J = 7,93 Hz, 2 H) , 7,71-7,84 (m, 1 H) , 7,48 (d, J=7,63Hz, 3 H) , 7, 19 7,36 (m, 1 H) , 3,94-4,09 (m, 1 H) , 3,61-3,79 (m, 1 H) , 3,17-3,27 (m, 1 H) , 3,00-3,14 (m, 1 H) , 2,74-3, 00 (m, 4 H) , 2,05-2,23 (m, 2 H) , 1,55 -1, 86 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,86; [M+H]+ = 335,23. EXEMPLO 30 (R)-N- (6-Fenilpiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 31 -bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Fenilpiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-biciclo [2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-bromopiridin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 28, Etapas A-B. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD-db δ ppm 7,91 (d, J = 7,63 Hz, 2 H) , 7,71 (t, J = 7,78 Hz, 1 H) , 7,32-7,55 (m, 5 H), 4,04 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,72 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3,23 (d, J = 1,22 Hz, 1 H) , 3,12 (s, 1 H) , 2,95 (s, 2 H) , 2,84 (s, 2 H) , 2,16 (s. 1., 2 H) , 1,58 1,85 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,75; [M+H]+ = 335,23. EXEMPLO 31 (R)-N-(6-(Difluorometoxi)-1-metil-lH-indazol-3-il)-4H-1 ' -az aespiro[oxazol5, 3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 6- (Difluorometoxi)-l-metil-lH-indazol-3-amina
À 4-(difluorometoxi)-2-fluorobenzonitrilo (1 g, 5,3 mmol) foi adicionada metilidrazina (4,92 g, 107 mmol). A mistura foi aquecida até 50°C durante 5 horas e posteriormente arrefecida até à temperatura ambiente. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 40-100%) para produzir 6-(difluorometoxi)-1-metil-lH-indazol-3-amina (0,5 g, 2,35 mmol, rendimento 44%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,70 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) , 7,14 (s, 1 H) , 6,73 (d, J = 8,55 Hz, 1H), 5,49 (s, 1H), 3,70 (s, 3 H).
Etapa B: (R)-N-(6-(Difluorometoxi)-l-metil-lH-indazol-3-il)-4H-1'-az aespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(difluorometoxi)-1-metil-l H-indazol-3-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]o ctan]-2-amina foi preparada seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B utilizando 6-(difluorometoxi)-lmetil-lH-indazol-3-amina (Etapa A) como o material de partida. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSOd-d6) δ ppm 7,64 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 5,19 Hz, 1 H) , 6,83 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H) , 3,88 (s, 3 H) , 3, 77-3, 84 (m, 1 H) , 3,51-3,64 (m, 1H), 3,00 (s, 2 H) , 2,72-2,84 (m, 2 H) , 2,67 (t, J = 7,4 8 Hz, 2 H) , 2,02 (s. 1., 1 H) , 1,85 1, 98 (m, 1 H) , 1,59 (d, J = 5,80 Hz, 2 H) , 1,36-1,53 (m, 1H), 1,09 (d, J = 6,41 Hz, 1H). MS (LC/MS) T.R. = 1,04; [M+H]+ = 378,19. EXEMPLO 32 (R) -N- (5- (Difluorometoxi) tiazolo [ 5, 4-b ] piridin-2-il) -4H-1' -azaespiro[oxazol-5,3’biciclo[2,2,21octan1-2-amina
Etapa A: 2- (Difluorometoxi)-5-nitropiridina
À 2idroxi-5-nitropiridina (7 g, 50 mmol) em acetonitrilo (500 ml) foram adicionados sulfato de sódio (1,5 g, 10,6 mmol), e ácido 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acético (6,2 ml, 60 mmol) e a reação foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 16 horas. A reação foi extinta com bicarbonato de sódio aquoso saturado e a acetonitrilo foi removida in vacuo. Ο componente aquoso restante foi extraído com acetato de etilo, lavado com salmoura, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado in vacuo. O sólido oleoso marrom pálido foi triturado com éter/hexanos, filtrado e o filtrado concentrado para produzir 2-(difluorometoxi)-5-nitropiridina (4,7 g, 24,7 mmol, rendimento 49%) como um óleo amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,14 (d, J = 2,76 Hz, 1 H) , 8,68 (dd, J" = 9, 03, 2,76 Hz, 1 H) , 7,98 (s, 0,5 H) , 7,62 (s, 0,5 H) , 7,34 (d, J = 9, 03 Hz, 1 H) .
Etapa B: 6-(Difluorometoxi)piridin-3-amina
À 2-(difluorometoxi)-5-nitropiridina (4,7 g, 24,7 mmol) em metanol desgaseifiçado (100 ml) foram adicionados paládio a 10% sobre carbono (500 mg, 0,47 mmol) e a reação foi hidrogenada à pressão atmosférica durante 1 hora. A esta foi adicionado ácido acético (2,83 ml, 49,4 mmol) e a reação foi filtrada através de Celite e concentrada in vacuo para produzir 6-(difluorometoxi)piridin-3-amina (6,33 g, 25,9 mmol, rendimento 105%) como um líquido verde azeitona. 2Η RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 7,60 (d, J = 2,76 Hz, 1 H) , 7,37 (s, 0,5 H) , 7,15 (dd, J = 8, 66, 2,89 Hz, 1 H) , 7,00 (s, 0,5 H) , 6,71 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) .
Etapa C: 5-(Difluorometoxi)tiazolo [ 5.4-b] piridin-2-amina
Ao ácido acético (10 ml) arrefecido num banho de gelo foram adicionados tiocianato de potássio (3,18 g, 32,8 mmol) e 6-(difluorometoxi)piridin-3-amina (1 g, 4,1 mmol). A reação foi arrefecida num banho de gelo-sal até à temperatura de reação atingir <0 °C. Uma solução de bromo (0,65 ml, 12,7 mmol) em ácido acético (3 ml) foi adicionada gota a gota durante 2 horas numa taxa que manteve à temperaturaa temperatura de reação <0°C. Isto proporcionou uma mistura muita espessa. Após a adição ser concluída, a mistura foi deixada agitar e deixada lentamente aquecer até à temperatura ambiente durante a noite. Após agitar durante a noite, água (5 ml) foi adicionada e a mistura foi aquecida até 85°C num banho de óleo. Esta mistura foi posteriormente filtrada e ainda quente. A massa filtrante amarela foi devolvida ao balão de reação, e 5 ml de ácido acético adicionais foram adicionados. A mistura foi aquecida novamente até 85°C, e posteriormente filtrada ainda quente. Os filtrados combinados foram arrefecidos num banho de gelo e neutralizados a pH 8 com hidróxido de amónio concentrado. Um precipitado amarelo formado foi posteriormente recolhido através de filtração. Este material em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 12-100%) para produzir 5-(difluorometoxi)tiazolo[5,4b]piridin-2-amina (321 mg, 1,48 mmol, rendimento 36,1%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 7,64-7,81 (m, 2 H) , 6,92 (d, J = 8,53 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,66; [M+H]+ = 218,10. Etapa D: N- (5- (Difluorometoxi)tiazolo[5, 4-b]piridin-2-il)-IH-imidazo 1-1-carbotioamida
5-(Difluorometoxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (310 mg, 1,43 mmol) e di (lH-imidazol-l-il) metanotiona (311 mg, 1,75 mmol) foram dissolvidas em acetonitrilo (5 ml) e aquecidas até 70°C num frasco selado durante 10 horas. O frasco foi posteriormente armazenado no congelador durante 16 horas. Os sólidos foram recolhidos através de filtração e lavados com acetonitrilo para produzir N-(5-(difluorometoxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-il) -1
Himidazol-l-carbotioamida (296 mg, 0,72 mmol, rendimento 51%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,77 (d, J = 4,77 Hz, 1 H) , 8,06 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,54 (s, 1 H) , 6, 94 7,13 (m, 1 H) .
Etapa E: (R) -N- (5- (Difluorometoxi) tiazolo [5, 4-b]piridin-2-il) -4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
A N-(5-(difluorometoxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-1 H-imidazol-1-carbotioamida (296 mg, 0,72 mmol) em N,N-dimetilformamida (4 ml) num frasco selado foram adicionados (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1 (175 mg, 0,76 mmol) e trietilamina (0,3 ml, 2,2 mmol) e a mistura foi aquecida até 70°C durante a noite. A isto foi adicionada N, N '-diisopropilcarbodiimida (350 pi, 2,25 mmol) e a reação foi aquecida até 70°C durante 6 horas. Esta foi arrefecida até à temperatura ambiente e vertida em água/clorofórmio, extraída com clorofórmio adicional e concentrada in vacuo. O resíduo foi posteriormente tomado em tolueno e lavado com água para remover a N,N-dimetilformamida residual. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna ((hidroxido de amónio/metanol a 10%)/clorofórmio a 2%-20%) para produzir (R)-N-(5(difluorometoxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-a zaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (104 mg, O, 27 mmol, rendimento 37%) como um sólido de cor creme pálido. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 7,99 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) , 7,68 (s, 1 H), 7,03 (d, J = 8,53 Hz, 1 H) , 3,87 (d, J = 10,04 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 10,04 Hz, 1 H), 3,03 (d, J = 5,02 Hz, 2 H), 2,80 (d, J = 9,03 Hz, 2 H) , 2,65 (t, J = 7,65 Hz, 2 H) , 2,08 (s. 1., 1H), 1,83 1,99 (m, 1H), 1,43 1,68 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,73; [M+H]+ = 382,20. EXEMPLO 33 (R)-N- (6-Isopropoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5, 3 ' -biciclo f 2 2 2 1 or.t an 1 -2-ami na
(R)-N-(6-Isopropoxibenzo[d]tiazol-2-il)-4H-1'-azaespir o [oxazol5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 4-isopropoxianilina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 32, Etapas C-E. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSOd) δ ppm 7,4 9 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) , 7,38 (d, J = 2,51 Hz, 1 H) , 6,90 (dd, J = 8,78, 2,51 Hz, 1H), 4,50 4,68 (m, 1H), 3,87 (d, J = 10, 04 Hz, 1 H), 3,62 (d, J = 9,79 Hz, 1 H), 2,79 (d, J = 9,03 Hz, 2 H), 2,66 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) , 2,06 (s. 1., 1H), 1,85-1,96 (m, 1 H) , 1,42-1, 67 (m, 3 H) , 1,17-1,34 (m, 6 H) , 0,96-1,19 (m, 2 H) . EXEMPLO 34 (R)-N-(5-(Pirrolidin-1-il)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5,3 ' -hlciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5- (Pirrolidin-l-il)pirazin-2-amina
Uma mistura de 5-bromopirazin-2-amina (1,2 g, 6,9 mmol) e pirrolidina (4 ml, 48 mmol) foi tratada por micro-ondas a 180° C, 200 W durante 2 horas. A reação foi diluída em 125 ml de acetato de etilo e extraída com água (3 x 50 ml) e salmoura (50 ml). Ela foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (cloreto de metanol/metileno a 0 a 3%) para produzir 5-(pirrolidinl-il)pirazin-2-amina (495 mg, 3 mmol, rendimento 43,7%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,52 (1 H, d, J = 1,51 Hz), 7,36 (1 H, d, J = 1,76 Hz), 5,21 (2 Η, s) , 3,24-3,29 (4 H, m) , 1,90 (4 H, ddd, J = 6,48, 3, 53, 3,34 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 0,52; [M+H]+ = 165,29.
Etapa B: (R)-N- (5- (Pirrolidin-1-il)pirazin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxa zol-5, 3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-(Pirrolidin-l-il)pirazin-2-il)-4H-11-azaespir o [oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 5-(pirrolidin-l-il)pirazin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B . ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,51 (1 H, s. 1.), 8,02 (1 H, s), 7,44 (1 H, d, J = 0,92 Hz) , 3,84 (1H, d, J = 9, 16 Hz) , 3,51 (1H, d, J = 8,8 5 Hz), 3,39-3,45 (4 H, m), 3,31 (1 H, dd, J = 14,80, 1,07 Hz), 2, 69-3, 04 (5 H, m) , 2,15-2,25 (1 H, m) , 2,09 (1 H, s. 1.), 1, 98-2,02 (4 H + HOD, m) , 1, 64-1,74 (1 H, m) , 1,42-1,61 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,76; [M+H]+ = 329,40. EXEMPLO 35 (R) -1- (5- (4H-1' -Azaespim [oxazol-5, 3 ' -biciclo [ 2,2,2]octano]-2-ilamino)pirazin2-il)pirrolidin-2-ona
Etapa A: 1- (5-Aminopirazin-2-il)pirrolidin-2-ona
Uma mistura de 5-bromopirazin-2-amina (5 g, 29 mmol), pirrolidin-2-ona (11 ml, 144 mmol), iodeto de cobre (I) (1,1 g, 5,75 mmol), carbonato de potássio (7,94 g, 57,5 mmol), e (1R,2R)-ciclohexano-1,2-diamina (1,38 ml, 11,49 mmol) foi refluxada sob azoto em dioxano (100 ml) durante 18 horas. Após resfriamento, 200 ml de acetato de etilo e 20 ml de metanol foram adicionados à reação. Isto foi filtrado através de Celite, concentrado, e absorvido em sulfato de sódio por purificação por cromatografia de coluna (cloreto de metanol/metileno a 0- 5%). O produto purificado foi recristalizado de éter/acetato de etilo para produzir 1- (5-aminopirazin-2-il)pirrolidin-2-ona (1,57 g, 8,81 mmol, rendimento 30,7%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,7 4 (1 H, d, J = 1,51 Hz), 7,69 (1 H, d, J = 1,51 Hz), 6,20 (2 H, s), 3,84 (2 H, t, J" = 7, 0 5 Hz) , 2,49 (2 H, t, J = 7,93 Hz), 2,04 (2 H, dq, J = 7,68, 7,51 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 0,48; [M+H]+ = 179,27.
Etapa B: (R) -1- (5- (4H-1 ' -Azaespiro [oxazol-5, 3 ' -biciclo [2,2,2] odano] - 2- ilamino)pirazin-2-il)pirrolidin-2-ona
(R)-1-(5-(4H-1'-Azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]oc tano]-2-ilamino)pirazin-2-il)pirrolidin-2-ona foi preparada a partir de 1-(5-Aminopirazin-2-il)pirrolidin-2-ona seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B. ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,20 (1H, d, J = 1,22 Hz) , 8,91 (1H, s. 1.), 8,13 (1 H, s), 4,02 (2 H, t, J = 7,02 Hz), 3,92 (1 H, d, J = 9,46 Hz), 3,58 (1H, d, J = 9,16 Hz), 3,33 (1H, dd, J = 14,95, 1,53 Hz), 2,71-3,01 (5 H, m) , 2,63 (2 H, t, J = 8,09 Hz), 2,08-2,23 (4 H, m), 1,66-1,76 (1 H, m), 1,42-1,61 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,67; [M+H]+ = 343,30. EXEMPLO 36 (R)-N-(5-(Piridin-3-il)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3 ’biciclo[2.2.2loctanl-2-amina
Etapa A: 5- (Plridin-3-il)OÍrazin-2-amina
Ácido piridin-3-ilborónico (307 mg, 2,50 mmol), 5-bromopirazin2-amina (391 mg, 2,25 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)-paládio (11) (88 mg, 0,13 mmol) foram adicionados ao dioxano desgaseifiçado (12 ml) e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Posteriormente carbonato de sódio (795 mg, 7.50 mmol) e água desgaseifiçada (8 ml) foram adicionados e a reação foi aquecida num frasco de reação fechado a 100°C durante 8 horas. A reação foi deixada descansar à temperatura ambiente durante um fim de semana. Esta foi diluída em acetato de etilo (100 ml) e extraída com salmoura (3 x 25 ml). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas in vacuo. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (metanol/acetato de etilo a 0 a 5%) para produzir 5-(piridin-3-il)pirazin-2-amina (235 mg, 1,37 mmol,rendimento 54,6%). ΤΗ RMN (400 MHz, Acetona) δ ppm 9,13 (1H, d, J = 1,51 Hz), 8,54 (1H, d, J = 1,26 Hz), 8.50 (1 H, dd, J = 4,78, 1,51 Hz), 8,22-8,28 (1 H, m), 8,07 (1 H, d, J = 1,26 Hz) , 7,39 (1H, ddd, J" = 7, 87, 4,72, 0,76 Hz), 6,05 (2 H, s. 1.). MS (LC/MS) T.R. = 0,58; [M+H]+ = 173,20.
Etapa B: (R)-N- (5- (Piridin-3-ii)pirazin-2-ii)-4H-1 '-azaespiro[oxazoi -5,3'-biciclo [2r2, 2]octan]-2-amina
(R) -N-(5-(Piridin-3-il)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 5-(piridin-3-il)pirazin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,12 (1H, dd, J = 2,27, 0,76 Hz), 9,08 (1H, s. 1.), 8,59 (1 H, dd, J = 4,78, 1,76 Hz), 8,55 (1H, d, J = 1,51 Hz), 8,45 (1 H, d, J= 1,26 Hz), 8,25 (1H, dt, J = 7,99, 1,92 Hz), 7,38 (1 H, ddd, J = 8,06, 4,78, 0,76 Hz), 3,97 (1 H, d, J = 9,57 Hz), 3,63 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,36 (1 H, dd, J = 14,86, 1,76 Hz), 2, 69-3, 06 (5 H, m) , 2,14-2,24 (1 H, m) , 2,12 (1 H, s. 1.), I, 66-1,77 (1 H, m, J = 13, 94, 9, 66, 4,31,4,31 Hz), 1,44-1,62 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,65; [M+H]+ = 337,30. EXEMPLO 37 (R)-N- (5-(6-Metoxipiridin-3~ii)pirazin-2-iI)-4H-1'-azaespir o[oxazoi-5,3 'biciclo[2,2,21octan]-2-amina
(R)-N-(5-(6-Metoxipiridin-3-il)pirazin-2-il) -4H-1'-aza espiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 5-bromopirazin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 36, Etapas A-B . ΤΗ RMN (400 MHz, CDCls) δ ppm 9,04 (1H, s. 1.), 8,66 (1H, d, 7 = 2,01 Hz), 8,46 (1 H, d, J = 1,51 Hz), 8,41 (1 H, d, J = 1,01 Hz), 8,15 (1 H, dd, J = 8,81, 2,52 Hz), 6,82 (1H, d, J = 8,31 Hz), 3,97 (3 H, s), 3, 95 (1H, d, J = 9,57 Hz) , 3,61 (1H, d, J = 9,32 Hz), 3,35 (1 H, dd, J = 14,86, 1,51 Hz), 2, 68-3, 07 (5 H, m) , 2,14-2,24 (1H, m, J = 13,27, 9,93, 3,53, 3,38, 3,38 Hz), 2,11 (1H, s. 1.), 1,67 1,77 (1 H, m), 1,45 1,61 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,81; [M+H]+ = 367,40. EXEMPLO 38 (R)-N-(6-Metoxiquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 ’ biciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 7-Metoxiquinoxalin-2(1H)-ona e 6-metoxiquinoxalin-2(1H)-ona
Uma solução a 50% de 2-oxoacetato de etilo (18,47 ml, 93 mmol) em tolueno foi adicionada a uma solução de 4-metoxibenzeno-l,2diamina (10,73 g, 78 mmol) em etanol (100 ml) à temperatura ambiente e a reação foi refluxada durante 2 horas. A reação foi concentrada in vacuo e cristalizada de etanol para produzir uma mistura de 6- metoxiquinoxalin2(1H)-ona e 7-metoxiquinoxalin-2(1H)-ona (5,73 g, 32,50 mmol,rendimento 42%). MS (LC/MS) T.R. = 0,68; [M+H]+ = 177,10.
Etapa B: 2-Cloro-6-metoxiquinoxalina
Uma mistura de 6-metoxiquinoxalin-2(1H)-ona e 7- metoxiquinoxalin-2(1H)-ona (5,67 g, 32,20 mmol) foi submetida a refluxo em oxicloreto de fósforo (120 ml) durante 1 hora. A reação foi concentrada e extinta através de adição de gelo, posteriormente basificada com carbonato de sódio, e extraída com acetato de etilo (3 x 200 ml) . As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas in vacuo. O produto em bruto foi absorvido em sulfato de sódio e purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 0 a 5%) para produzir 2-cloro-6-metoxiquinoxalina (2,21 g, 11,36 mmol, rendimento 35%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,69 (s, 1 H) , 7,88 (d, J = 9,32 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 9,32, 2,77 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 2,77 Hz, 1 H) , 3,95 (s, 3 H) .
Etapa C: N- (2,4-Dimetoxibenzil)-6-metoxiquinoxalin-2-amina
2-Cloro-6-metoxiquinoxalina (0,93 g, 4,77 mmol) e (2,4-dimetoxifenil)metanamina (2,2 ml, 14,64 mmol) foram tratadas por micro-ondas em dimetilsulfoxido (5 ml) durante 30 minutos a 150°C. A reação foi diluída em acetato de etilo (250 ml) e extraída com salmoura (3 x 100 ml). O produto em bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 20 a 80%) para produzir N—(2,4-dimetoxibenzi1)-6-metoxiquinoxalin-2-amina (1,46 g, rendimento 87%). RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,13 (1 H, s) , 7,59-7, 63 (1 H, m) , 7,30 (1 Η, d, J = 8,31 Hz), 7,21-7,24 (2 H, m), 6,47 (1H, d, J = 2,27 Hz), 6,42 (1H, dd, J = 8,31, 2,27 Hz), 5,10 (1 H, t, J - 5,92 Hz), 4,61 (2 H, d, J - 5,79 Hz), 3,88 (3 H, s), 3,84 (3 H, s), 3,78 (3 H, s). MS (LC/MS) T.R. = 1,95; [M+H]+ = 326,23.
Etapa D: 6-Metoxiquinoxalin-2-amina
N-(2,4-Dimetoxibenzil)-6-metoxiquinoxalin-2-amina (2,8 g, 8,61 mmol) foi agitada em TFA (10 ml, 130 mmol) e diclorometano (10 ml) à temperatura ambiente durante 30 minutos. Os solventes foram removidos in vacuo.
Hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado (200 ml) foi adicionado ao resíduo vermelho, que posteriormente precipitou um sólido amarelo. A mistura foi extraída extensivamente com diclorometano. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada in vacuo para produzir 6-metoxiquinoxalin-2-amina (1,50 g, 8,56 mmol, rendimento 99%). 2Η RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,27 (1 H, s) , 7,54-7,58 (1H, m), 7,25-7,29 (2 H, m), 4,71 (2 H, s. 1.), 3,90 (3 H, s). MS (LC/MS) T.R. = 0,86; [M+H]+ = 176,23.
Etapa E: (R)-N-(6-Metoxiquinoxalin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5,3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Metoxiquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-metoxiquinoxalin-2-amina seguindo os procedimentos gerais de Exemplo 23, Etapas A-B. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,61 (1 H, s. 1.), 8,57 (1 H, s), 7,62 (1H, d, J=9,06Hz), 7,23-7,32 (2 H, m) , 4,01 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,90 (3 H, s), 3,66 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,37 (1H, dd, J=14,86, 1,51 Hz), 2,68-3,08 (5 H, m) , 2,15-2,25 (1 H, m) , 2,10-2,14 (1 H, m) , 1, 67-1,77 (1 H, m), 1,42 1,63 (2 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,81; [M+H]+ = 340,30 . EXEMPLO 39 (R)-N- (5- (Difluorometoxi)pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespiro[ox az o1-5, 3'-biciclo [2r2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 2-Cloro-5- (Difluorometoxi)pirimidina
2-Cloropirimidin-5-ol (1 g, 7,66 mmol) e 2-cloro-2,2-difluoroacetato de sódio (3,50 g, 22,98 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) e água (0,2 ml) foram aguecidos para 90°C durante 24 horas e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 5-30%) para produzir 2-cloro-5-(difluorometoxi)pirimidina (549 mg, 3,04 mmol, rendimento 39,7%) como um óleo amarelo pálido. MS (LC/MS) T.R. = 1,32; [M+H]+ = 181,14 .
Etapa B: (R)-N- (5- (Difluorometoxi)pirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[ox az o1-5,3 ' biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-(Difluorometoxi)pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespi ro[oxazol5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 2-cloro-5-(difluorometoxi)pirimidina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B . ΤΗ RMN (400 MHz, MeO-d4) δ ppm 8,46 (2 H, s) , 6,85 (1 H, t) , 4,02 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,73 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,28 (1H, d, J = 1, 01 Hz), 3,16 (1 H, d) , 2,81-3,05 (4 H, m) , 2,08-2,25 (2 H, m) , 1,46-1,89 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,53; [M+H]+ = 326,30. EXEMPLO 4 0 (R) -N-(4, 5-Dimetilpirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5, 3 'biciclo [2r2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 4, 5-Dimetilpirimidin-2-amina
Uma solução de 4-cloro-5,6-dimetilpirimidin-2-amina (0,35 g, 2,22 mmol) em amoníaco a 2 M em metanol (100 ml) foi enxaguada com azoto e paládio sobre carbono (0, 035 g, 0,33 mmol) foi adicionado, enxaguado com azoto e a reação foi hidrogenada a 1 atm, temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura de reação foi enxaguada com azoto e filtrada através de celite e o bloco de Celite lavado com metanol. O filtrado foi evaporado até à secura in vacuo para produzir 4,5-dimetilpirimidin-2-amina (0,35 g, 2,56 mmol, rendimento 90%) que foi utilizada sem purificação adicional. 2Η RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 7,89 (1 H, s), 6,19 (2 H, s) , 2,18 (3 Η, s), 1,99 (3 Η, s). MS (LC/MS) T.R. = 0,56; [M+H]+ = 124,20.
Etapa B: (R)-N- (4,5-Dimetilpirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5, 3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(4,5-Dimetilpirimidin-2-N)-4H-1'-azaespiro[oxazo 1-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 4,5-dimetilpirimidin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B. RMN (400 MHz, MeOD-dg) δ ppm 8,22 (1H, s), 4,01 (1H, d, J = 10,07 Hz) , 3,73 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,40 (1 H, d) , 3,25 (1 H, d) , 2,91-3,12 (4 H, m) , 2,41 (3 H, s), 2,0 9-2,2 8 (5 H, m), 1, 62-1, 97 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 0,47; [M+H]+ = 288,31 . EXEMPLO 41 (R)-N-(6-Fenilpirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 ’ -b iciclo[2, 2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-Fenilpirimidin-4-amina
Uma mistura de 6-cloropirimidin-4-amina (0,32 g, 2,5 mmol), ácido fenilborónico (0,38 g, 3,13 mmol), carbonato de sódio aquoso saturado (0,80 g, 7,50 mmol) e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (11) (0,035 g, 0,05 mmol) foi suspensa numa mistura de dimetoxietano (15 ml)/etanol (2 ml)/água (2ml) . A mistura foi aquecida no micro-ondas a 125°C durante 20 minutos posteriormente concentrada in vacuo. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 10-60%) para produzir 6-fenilpirimidin-4-amina (167 mg, 0,98 mmol, rendimento 39%) como um sólido esbranquiçado. MS (LC/MS) T.R. = 0,99; [M+H]+ = 172,23.
Etapa B: (R)-N-(6-Fenilpirimidin-4-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Fenilpmmidin-4-N)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-fenilpirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 9,54 (1H, d, J = 1,01 Hz), 8,75-8,86 (2 H, m), 8,18-8,28 (3 H, m), 8,00 (1H, s. 1.), 4,70 (1H, d, J = 10,32 Hz), 4,43 (1H, d, J = 10,58 Hz) , 3,72-3,88 (2 H, m) , 3,41-3, 63 (4 H, m) , 2,63-2,87 (2 H, m) , 2,18-2,48 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,36; [M+H] + = 336,24. EXEMPLO 42 (R)-N-(6-(4-Metoxifenil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5, 3’biciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(4-Metoxifenil)pirimidin-4-N)-4H-1'-azaespiro [oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-cloropirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 41, Etapas A-B. ΧΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,72 (1 H, d, J = 1,26 Hz), 7, 90-8, 00 (2 H, m) , 7,16 (1 Η, s. 1.), 6,96 7,05 (2 H, m), 4,04 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,84 (3 H, s), 3,73 (1H, d, J = 10,07 Hz) , 3,22 (1H, d), 3,09 (1 H, d) , 2,73-2, 98 (4 H, m) , 2,02-2,21 (2 H, m) , 1,51-1,85 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,44; [M+H]+ = 366,28. EXEMPLO 43 (R)-N- (6- (6-Metoxipiridin-3-il)pirimidin-4-il)-4H-1 ' -azaesp iro[oxazol-5,3'biciclo[2, 2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(6-Metoxipiridin-3-N)pirimidin-4-N)-4H-l'-aza espiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-cloropirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 41, Etapas A-B. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,79 (2 H, dd, J = 19,01, 1,89 Hz), 8,27 (1 H, dd, J = 8,56, 2,52 Hz), 7,18 (1 H, s. 1.), 6,89 (1 H, d, J = 8,81 Hz), 4,05 (1H, d, J = 10,32 Hz) , 3,96 (3 H, s), 3,74 (1 H, d, J = 10,32 Hz), 3,23 (1 H, d), 3,10 (1 H, d), 2,73-2,99 (4 H, m) , 2,02-2,21 (2 H, m) , 1,53-1, 84 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,34; [M+H]+ = 367,25. EXEMPLO 44 (R)-N-(6-(Naftalen-2-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5,3'biciclo[2,2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(Naftalen-2-il)pirimidin-4-N)-4H-1'-azaespiro [oxazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-cloropirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 41, Etapas A-B. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,83 (1 H, s) , 8,56 (1 H, s), 7,83 8,13 (4 Η, m) , 7,49-7,58 (2 Η, m), 7,37 (1Η, s. 1.), 4,06 (1H, d, J = 10,32 Hz) , 3,76 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,23 (1H, s), 3,12 (1H, d), 2,7 5-3, 0 0 (4 H, m) , 2,02-2,24 (2 H, m) , 1,56-1, 84 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,93; [M+H]+ = 386,31.
Os compostos no Quadro 2 foram sintetizados de acordo com o método do Exemplo 1 utilizando o isotiocianato ou amina comercialmente disponível adequado. Intermediários contendo amida foram obtidos através dos procedimentos descritos no Exemplo 3.
Quadro 2
Os compostos no Quadro 3 foram sintetizados de acordo com o método do Exemplo 21, etapas C-D utilizando o isotiocianato apropriado ou amina e (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol, 2 HC1.
EXEMPLO 218 (R)-N- (6- (metoximetil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazo 1-5,3 ’ -biciclo[2,2,2loctanl-2-amina
Etapa A: 6- (Metoximetil)pirimidin-4-ol
A uma solução de 4-metóxi-3-oxobutanoato de metilo (3,54 mL, 26,5 mmol) em metanol (30 ml) foram adicionados acetato de formamidina (3,07 g, 29,2 mmol) e metóxido de sódio (13 mL, 58,4 mmol). A mistura foi posteriormente aquecida até o refluxo durante 18 horas e arrefecida até à temperatura ambiente, posteriormente concentrada. 0 resíduo foi tomado em água e o pH ajustado a 7 com HC1 a IN. A mistura aquosa foi extraída com clo-rofórmio. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para produzir 6-(metoximetil)pirimidin-4-ol (1,38 g, 9,85 mmol, rendimento 37,1%). MS (LC/MS) T.R. = 0,19; [M+H]+ = 141,20. Etapa B: 4-Cloro~6-(metoximetil)pirimidina
6-(Metoximetil)pirimidin-4-ol (1,38 g, 9,85 mmol) foi tomado em diclorometano (14 ml) e oxicloreto de fósforo (9 mL, 97 mmol) foi adicionado àà temperatura ambiente. A mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas e concentrada. O resíduo foi tomado em água gelada e o pH foi ajustado para 7 com hidróxido de sódio a 1 N . A mistura foi extraída com clorofórmio e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (-de acetato de etilo/clorofórmio a 5-10%) para produzir 4-cloro-6-(metoxi-metil)pirimidina (1,2 g, 7,57 mmol, rendimento 77%) como um óleo amarelo pálido, que se solidificou em repouso. 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,88 (1 H, d, J = 1,01 Hz), 7,52 (1 H, d, J = 1,01 Hz), 4,53 (2 H, s), 3,50 (3 H, s). MS (LC/MS) T.R. = 0,98; [M+H]+ = 159,10. Etapa C: 6-(Metoximetil)pirimidin-4-amina
Uma mistura de 4-cloro-6-(metoximetil)pirimidina (1,2 g, 7,57 mmol) e hidróxido de amónio (20 ml) foi aquecida num tubo selado durante 3 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi triturado com éter para produzir 6-(metoximetil)pirimidin-4-amina (0,50 g, 3,59 mmol, rendimento 48%) como um sólido amarelo pálido. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,47 (1 H, s), 6,55 (1 H, s), 5,12 (2 H, s. 1.), 4,38 (2 H, s), 3,45 (3 H, s). MS (LC/MS) T.R. = 0. 42; [M+H]+ = 140,20.
Etapa D: 4-Isotiocianato-6- (metoximetil)pirimidina
A uma solução laranja brilhante de 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,84 g, 3,59 mmol) em diclorometanoà temperatura ambiente foi adicionada 6-(metoximetil)pirimidin-4-amina (0,5 g, 3,59 mmol). A solução laranja foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A solução foi purificada através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 0 a 40%) para produzir 4-isotiocianato-6-(metoximetil)pirimidina (0,32 g, 1,77 mmol, rendimento 49%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,91 (1H, d, J = 1,26 Hz), 7,19 (1H, d, J = 1,01 Hz), 4,52 (2 H, s), 3,49 (3 H, s). MS (LC/MS) T.R. = 1,39; [M+H]+ = 182,10 .
Etapa E: (R)-N-(6-(Metoximetil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazo 1-5,3'-biciclo [ 2 f2, 2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,39 g, 1,71 mmol) em dimetilformamida foram adicionados carbonato de césio (1,39 g, 4,28 mmol) e 4-isotiocianato-6-(metoximetil)pirimidina (0,31 g, 1,71 mmol) . A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 15 minutos. A uma mistura reacional foi adicionada N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,80 mL, 5,13 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite posteriormente concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (meta-nol/hidróxido de amónio em acetato de etilo 9:1a 5-25%) para produzir (R)-N-(6-(meto-ximetil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,18 g, 0,58 mmol, rendimento 34%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,65 (1 H, d, J = 1,01 Hz), 6,92 (1 H, s. 1.), 4,40 (3 H, s), 4,03 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,72 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,44 (2 H, s), 3,18-3,26 (1 H, m) , 3,06-3,13 (1 H, m), 2,69-2,96 (4 H, m), 1,94-2,19 (2 H, m), 1,45-1,86 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,76; [M+H]+ = 304,30. EXEMPLO 219 (R)-N-(5-(Ciclopentilóxi)pirimidin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[ox az o 1-5, 3 '-biciclo[2,2,2]octan]
-2-amina
Etapa A: 2-Cloro-5- (ciclopentiloxi)pirimidina
Uma mistura de 2-cloropirimidin-5-ol (1 g, 7,66 mmol), cloroci-clopentano (2,39 mL, 22,98 mmol) e carbonato de potássio (3,18 g, 22,98 mmol) em N,N-dimetilformamida foi aquecida a 65°C durante 16 horas àà temperatura ambiente. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 0 a 25%) para produzir 2-cloro-5-(ciclopentiloxi)pirimidina (831 mg, 4,18 mmol, rendimento 54, 6%) como um sólido branco . MS (LC/MS) T.R.=2,32; [M+H]+ = 199,23.
Etapa B: 5- (Ciclopentiloxi)pirimidin-2-amina
5-(Ciclopentiloxi)pirimidin-2-amina foi preparada a partir de 2-cloro-5-(ciclopentiloxi)pirimidina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 218, Etapa C. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSOd) δ ppm 7,99 (2 H, s), 6,18 (2 H, s) 4,54-4,75 (1 H, m) , 1,30-1,91 (8 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,47; [M+H]+ = 180,24.
Etapa C: (R) -N-(5-(Ciclopentiloxi)pirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[ox azol-5, 3'-biciclof 2 2, 21octanl-2-amina
(R)-N-(5-(Ciclopentiloxi)pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespi ro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 5-(ciclopentiloxi)pirimidin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B . ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,24 (2 H, s) , 4,76-4, 86 (1 H, m) , 3,98 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,69 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,33 (1H, d), 3,20 (1 H, d) 2,77-3, 08 (4 H, m) , 2,04-2,26 (2 H, m) , 1,49-2,03 (11 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,56; [M+H]+ = 344,32.
Os compostos no Quadro 5 foram sintetizados de acordo com o método do Exemplo 218 usando os cloretos comercialmente disponíveis apropriados como no Exemplo 218, Etapa C.
EXEMPLO 228 (R)-N-(6-(2,2,2-Trifluoroetoxi)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaesp iro[oxazol-5,3'-biciclo[2:2, 2
] octan]-2-amina
Etapa A: 4-Cloro~6-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidina
Uma soluçãode2,2,2-trifluoroetanol (2,61g, 26,10 mmol) em tetraidrofurano (12 ml) foi adicionada em gotas a uma suspensão de hidre-to de sódio (1,31 g, 32,60 mmol) em tetraidrofurano (48 ml) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 30 minutos e uma solução de 4,6-diclo-ropirimidina (3, 6 g, 24,16 mmol) em tetraidrofurano (12 ml) foi adicionada a 0°C. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas e vertida em cloreto de amónio aguoso saturado e extraída com acetato de etilo. O extrato de acetato de etilo foi lavado com água, seco sobre sulfato de magnésio e concentrado in vacuo. O resíduo laranja foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 10 a 40%) para produzir 4-cloro-6-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidina (2,0 g, 2,41 mmol, rendimento 38,9%) como um óleo amarelo pálido. MS (LC/MS) T.R. = 2,78; [M+H]+ = 213,12.
Etapa B: 6- (2r2, 2-Trifluoroetoxi)pirimidin-4-amina
6-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-amina foi preparada a partir de 4-cloro-6-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidina seguindo o procedimento geral do Exemplo 218, Etapa C. MS (LC/MS) T.R. = 1,16; [M+H]+ = 194,07.
Etapa C: (R)-N- (6-(2,2,2-Trifluoroetoxi)pirimidin-4-il)-4H-1 '-azaesp iro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(2,2,2-trifluoroetóxi)pirimidin-4-il)-4H-1'-a zaespiro[oxa-zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6- (2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B . ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,30 (1 H, s. 1.), 8,39 (1 H, s) , 6,38 (1 H, s. 1.), 4,59-4,84 (2 H, m) , 3,94 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,59 (1 H, d, J = 9,57 Hz), 3,33 (1H, d, J = 16,62 Hz) , 2,61-3,01 (5 H, m), 1,97-2,25 (2 H, m), 1,37-1,81 (3 H, m). MS (LC/MS) T .R. = 1,42; [M+H]+ = 358,33. EXEMPLO 229 (R)-N- (5-Bromo-4-isopropilpirimidin-2-il)-4H-1'-azaespiro[0 xazol-5,3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 4-Isopropilpirimidin-2-amina
4-Isopropilpirimidin-2-amina foi preparada a partir de 2-cloro-4-isopropil-pirimidina seguindo o procedimento geral para Exemplo 218, Etapa C. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,10 (1 H, d, J = 5,04 Hz), 6,45 (3 H, d, J = 5,04 Hz), 2,59-2,80 (1H, m), 1,15 (6 H, d, J = 7,05 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 0,76; [M+H]+ = 138,12 .
Etapa B: 5-Bromo-4-isopropilpirimidin-2-amina N-Bromossuccinimida (0,5 g, 2,8 mmol) foi adicionada auma solução de 4-isopropilpirimidin-2-amina (0,39 g, 2,81 mmol) em clorofórmio. A solução amarela resultante foi agitada àà temperatura ambiente durante 1 hora e concentrada in vacuo. Ο resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna ( metanol : hidróxido de amónio em clorofórmio 9:1a 3-10%) para produzir 5-bromo-4-isopropilpirimidin-2-amina (0,69 g, 3,18 mmol, 113%) como um sólido amarelo pálido. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,21 (1 H, s) , 6,75 (2 H, s) , 3,10-3,23 (1 Η, m), 1,14 (6 Η, d, J = 6,80 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 2,58; [M]+ = 216,09.
Etapa C: (R)-N- (5-Bromo-4-isopropilpirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[o xazol-5, 3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-Bromo-4-isopropilpirimidin-2-il)-4H-1'-azaesp iro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 5-bromo-4-isopropilpirimi-din-2-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B . ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,49 (1H, s), 4,02 (1H, d, J = 10,07 Hz), 3,72 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,34-3,44 (1 H, m), 3,23 (1 H, s), 3,06-3,15 (1 H, m) , 2,95 (2 H, t, J = 7,55 Hz), 2,75-2,89 (2 H, m) , 2,00-2,21 (2 H, m) , 1,52-1,83 (3 H, m) , 1,24 (6 H, d, J = 6,80 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 1,84; [M+H]+ = 382,24. EXEMPLO 230 (R)-N- (5-Bromo~4- (piridin-3-il)pirimidin-2-il)-4H-1'-azaesp iro[oxazol-5,3’-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(5-Bromo-4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)-4H-1'-a zaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 4-(piridin-3-il)pirimidin-2-amina seguindo os procedimentos gerais do xemplo 229, Etapas B-C. RMN (400 MHz, MeOD~d4) δ ppm 8,92 (1 H, d, J = 1,51 Hz), 8,73 (1H, s), 8,64 (1H, dd, J = 4,91, 1,64 Hz), 8,23 (1H, dt, J = 8, 06, 1, 89 Hz), 7,56 (1 H, dd, J = 7,93, 4,91 Hz), 4,00 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,69 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,22 (1 H, d) , 3,07 (1 H, d) , 2, 60-2, 99 (4 H, m) , 2,00-2,21 (2 H, m) , I, 50-1,83 (3 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 0,76; [M+H]+ = 416,30. EXEMPLO 231 (R) -N-(6-(Ciclopentilóxi)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[ox azol-5, 3 ’ -biciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 4-Cloro-6-(ciclopentiloxi)pirimidina
Uma solução de ciclopentanol (2,25 g, 26,1 mmol) em tetraidrofurano (12 ml) foi adicionada gota a gota a uma suspensão de hidreto de sódio (1,31 g, 32,6 mmol) em tetraidrofurano (48 ml) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 30 minutos e uma solução de 4,6-dicloropirimidina (3,6 g, 24,16 mmol) em tetraidrofurano (12 ml) foi adicionada a 0°C. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas e vertida em cloreto de amónio aquoso saturado e extraída com acetato de etilo-. As camadas orgânicas foram lavadas com água, secas sobre sulfato de magnésio e concentradas in vacuo. 0 resíduo laranja foi purificado através de cromatografia de coluna (acetato de etilo/hexanos a 10 a 40%) . para produzir 4-cloro-6- (ciclopentiloxi) pirimidina como um óleo amarelo pálido . Este material foi usado diretamente para a reação seguinte.
Etapa B: 6- (Ciclopentiloxi)pirimidin-4-amina
6-(Cidopentilóxi)pirimidin-4-amina foi preparada a partir de 4-cloro-6-(ciclopentiloxi)pirimidina seguindo o procedimento geral do Exemplo 218, Etapa C. MS (LC/MS) T.R. = 1,64; [M+H]+ = 180,22.
Etapa C: (R)-N- (6- (Ciclopentiloxi)pirimidin-4-il)-4H-1 '-azaespiro[ox azo1-5,3'-biciclo [2,2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(ciclopentiloxi)pirimidin-4-N)-4H-11-azaespir o[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 6-(ciclopentiloxi)pirimidin-4-amina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 23, Etapas A-B. RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,37 (1 H, s) , 6,16 (1 H, s. 1.), 5,27 (1 Η, s. 1.), 3,98 (1Η, d, J = 10,32 Hz), 3,67 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,15-3,24 (1 H, m) , 3,02-3,12 (1 H, m) , 2,71-2,97 (4 H, m) , 2,01-2,14 (2 H, m), 1,87-2,00 (3 H, m), 1,49-1,84 (8 H, m). MS (LC/MS) T.R. = 1,96; [M+H]+ = 344,34. EXEMPLO 232 (R)-N- (6-Isopropoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina.
(R)-N-(6-Isopropoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 4,6-dicloropirimidina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 231, Etapas A-C. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,37 (1 H, s), 6,13 (1 H, s. 1.), 5, 09-5,30 (1 H, m) , 3,98 (1 H, d, J = 10,32 Hz), 3,67 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,13-3,24 (1H, m), 3,01-3,09 (1 H, m) , 2, 68-2, 98 (4 H, m) , 1,98-2,17 (2 H, m) , 1,49-1,83 (3 H, m) 1,30 (6 H, d, J = 6,04 Hz). MS (LC/MS) T.R. = 1,36; [M+H]+ = 318,24. EXEMPLO 233 (R)-N- (6- (2,2-Difiuoroetóxi)pirimidin-4-ii)-4H-1'-azaespiro [oxazoi-5,3’-biciclo [2 r2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-(2,2-Difluoroetóxi)pirimidin-4-il)-4H-1'-azae spiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada a partir de 4,6-dicloropirimidina seguindo os procedimentos gerais do Exemplo 231, Etapas A-C. P.F. 83-8 °C. RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,42 (1 H, s), 5, 93-6,37 (2 H, m) , 4,52 (2 H, td, J = 13, 98, 3,78 Hz), 3,99 (1H, d, J = 10,32 Hz) , 3,68 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,19 (1H, d), 3,07 (1H, d), 2,67-2,97 (4 H, m) , 1,99-2,19 (2 H, m) , 1,51-1,82 (3 H, m) . MS (LC/MS) T.R. = 0,99; [M+H]+ = 340,26. EXEMPLO 234 (R)-N-(Piridin-2-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5,3’-bicicio[2, 2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(Piridin-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bicic lo[2,2,2]oc-tan]-2-amina foi preparada a partir de (R)-N-(6-bromopiridin-2-il)-4H-1'-azaespi-ro[oxazol-5,3'-bi ciclo[2,2,2]octan]-2-amina (do Exemplo 155) de acordo com o procedimento geral de Exemplo 19, Etapa C. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,26 (d, J = 4, 88 Hz, 1 H) , 7,58-7,74 (m, 1H), 6,85-7,02 (m, 2 H) , 4,00 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,70 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,26-3,35 (m, 1 H) , 3,14-3,21 (m, 1 H) , 3,02 (d, J = 8,2 4 Hz, 2 H) , 2,84-2, 97 (m, 2 H) , 2,11-2,25 (m, 2 H) , 1.58- 1,92 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,30; [M+H]+ = 259,16. EXEMPLO 235 (R)-N-(Piridin-4-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5,3’-bicicio[2, 2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(Piridin-4-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bicic lo[2,2,2]oc-tan]-2-amina foi preparada a partir de (R)-N-(2-bromopiridin-4-il)-4H-1'-azaespi-ro[oxazol-5,3'-bi ciclo[2,2,2]octan]-2-amina (do Exemplo 154) de acordo com o procedimento do Exemplo 19, Etapa C. 2Η RMN (500 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,31 (d, J = 6,41 Hz, 2 H), 7,39 (d, J = 3,97 Hz, 2 H), 4,01 (d, J = 12,21 Hz, 1 H) , 3,70 (d, J = 11,90 Hz, 1 H) , 3,37 (s, 1H), 3,29 (s, 1H), 3,18 (d, J = 1,83 Hz, 1H), 3,15 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) , 2,86-3,09 (m, 3 H) , 2,02-2,20 (m 1 H) , 1.59- 1,88 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,22; [M+H]+ = 259,16. EXEMPLO 236 (R) -N- (5- (Benzilóxi) tiazolo [5, 4-b]piridin-2-il) -4H-1' -azaes piro[oxazol-5,3’-bicicio[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5- (Benziloxi)tiazolo[
5,4-b]piridin-2-amina
Tiocianato de potássio (12,42 g, 128 mmol) foi suspenso em ácido acético (45,0 mL) e arrefecido até 0°C. 6-(Benzilóxi)piridin-3-amina (3,2 g, 15,98 mmol) , preparada de acordo com o documento W02006/044707 foi adicionada. Bromo (2,55 mL, 49,5 mmol) em ácido acético (15 mL) foi adicionado gota a gota durante 30 minutos durante cujo tempo a mistura de reação se tornou muito espessa. Esta foi deixada aquecer até à temperatura ambiente lentamente e agitada durante a noite. Água (20 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi aquecida até 90°C e filtrada quente. O filtrado foi protegido e a massa filtrante devolvida ao frasco de reação, ao qual foram adicionados 40 ml adicionais de HOAc. A mistura foi novamente aquecida até 90°C e filtrada quente. Os filtrados combinados foram arrefecidos sobre banho de gelo e NH4OH foi adicionado gota a gota até pH >8. Foi formado um precipitado amarelo, o qual foi recolhido através de filtração. Os sólidos foram secos in vacuo durante 1 hora para fornecer 5-(benziloxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (1,95 g, 7,58 mmol, rendimento 47,4%), que foi usada sem purificação adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,70 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) 7,48 (d, J" = 7,2 8 Hz, 2 H) 7,39 (t, J=7,28Hz, 2 H) 7,30-7,36 (m, 1 H) 6,78 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) 5,39 (s, 2 H) 5,14 (s. 1., 2 H) .
Etapa B: 5-(Benzilóxi)tiazolo [5f4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo.
A uma suspensão de 5- (benziloxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (800 mg, 3,11 mmol) em DMF (3,1 mL) foi adicionado hidróxido de sódio a 20,0M (0,3 mL, 6,22 mmol). A mistura foi deixada agitar 10 min àà temperatura ambiente, em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (0,47 mL, 7,77 mmol) e a mistura foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 20,0M (0,3 mL, 6,22 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometa-no (0,47 mL, 7,46 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 1 hora, em cujo tempo foi vertida em água e extraída com EtOAc (3x) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura em bruto foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (EtOAc/CHCl3 a 2-20%) para proporcionar 5- (benziloxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (1,02 g, rendimento 91%) como um sólido cristalino amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,02 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) 7,51 (d, J = 7,28 Hz, 2 H) 7,38-7,45 (m, 2 H) 7,32-7,38 (m, 1 H) 6,89 (d, J = 8,53 Hz, 1 H) 5,46 (s, 2 H) 2,65 (s, 6 H) .
Etapa C: (R)-N- (5- (benziloxi)tiazolo[5, 4-b]piridin-2-il)-4H-1 '-azaes piro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 5- (benziloxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo (500 mg, 1,38 mmol), dicloridrato de (S)-3-(amino-metil)quinuclidin-3-ol (317 mg, 1,38 mmol) e carbonato de césio (1, 0 g, 3,07 mmol) em DMF (7 mL) foi aquecida até 100°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida até àaté à temperatura ambiente, vertida em água e extraida com clorofórmio (4x). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura foi purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [metanol: hidróxido de amónio 9:1]-clorofórmio a 2 a 20%) para produzir (R)-N-(5-(benzilo-xi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azae spiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (3 9 0mg, rendimento 67%) . 1H RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,18 (s. 1., 1 H) 7,76 (d, J = 8,85 Hz, 1 H) 7,50 (d, J = 7,32 Hz, 2 H) 7,41 (t, J = 7,32 Hz, 2 H) 7,32-7,37 (m, 1 H) 5,42 (s, 2 H) 4,02 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) 3,68 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) 3,37-3,44 (m, 1 H) 2,75-3, 06 (m, 5 H) 2,13-2,25 (m, 2 H) 1,73-1,82 (m, 1 H) 1,49-1,70 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,69; [M+H]+ = 421,98. EXEMPLO 237 (R) -2- (4H-1' -azaespirof oxazol-5, 3' -biciclo [2 r2,2]octano]-2-ilamino)tiazolo[5,4-b]piridin-5(4H)-ona
(R)-N-(5-(benziloxi)tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1' -azaespi-ro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (390 mg, 0,925 mmol) foi dissolvida em TFA e deixada reagir durante 4 horas àà temperatura ambiente, em cujo tempo LCMS e TLC mostraram o material de partida como sendo principalmente seguro. O TFA foi removido in vácuo e a mistura em bruto foi purificada através de H-PLC preparativa. As frações de produto combinadas foram concentrados in vacuo e trituradas com éter para produzir (R)-2-(4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilamino)tiazolo[5,4-b]piridin-5(4H)-ona, TFA (164 mg, 0,368 mmol, rendimento 39,8%) . P.F. 245 (dec) . 1H RMN (400 MHz, DM-SO-d6) δ ppm 9,99 (s. 1., 1 H) 9,05 (s. 1., 1 H) 7,81 (d, J = 8,53 Hz, 1H) 6,65 (d, J = 8,78 Hz, 1H) 3,96 (d, J = 10,29 Hz, 1 H) 3,82 (d, J = 10,54 Hz, 1 H) 3, 63-3,78 (m, 2 H) 3,36-3,47 (m, 1 H) 3,16-3,34 (m, 3 H) 2,43 (s. 1., 1 H) 2,16 (s. 1., 1 H) 1,76-2,07 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,50; [M+H]+ = 332,15. EXEMPLO 238 (R)-N-(6-(3-Metoxifenil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespirofoxa zol-5, 3’-biciclo [2.2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-(3-Metoxifenil)pirimidin-4-amina
Uma mistura de 6-cloropirimidin-4-amina (0,324 g, 2,5 mmol), ácido 3-metoxifenilborónico (0,475 g, 3, 13 mmol), Na2C03 (0,795 g, 7,50 mmol) e cloreto de bis(trifenilfosfina) (II) (0,035 g, 0,050 mmol) foi suspensa em DME/EtOH/água (15:2:3 mL), aquecida no sintetizador de micro-ondas a 125°C durante 20 minutos e concentrada. O resíduo foi purificado através de croma-tografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 10-60%) para produzir 6-(3-metoxifenil)pirimidin-4-amina (0,35 g, 1,74 mmol, rendimento 70%) como um sólido esbranquiçado. LCMS T.R. = 1,28; [M+H]+ = 201,98.
Etapa B: 4-Isotiocianato-6-(3-metoxifenil)pirimidina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0, 970 g 4, 17 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente foi adicionada 6-(3-metoxifenil)pirimidin-4-amina (0,7 g, 3,48 mmol) . A reação foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A LC/MS mostrou o pico do produto desejado como um pico maior. A solução laranja intenso foi concentrada e o resíduo restante foi filtrado. O filtrado foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0 a 10%) para produzir 4-isotiocia-nato-6-(3-metoxifenil)pirimidina (0,39 g, 4,31 mmol, rendimento 46%) como um óleo amarelo. LCMS T.R. = 2,91; [M+H]+ = 244,03.
Etapa C: R) -N-(6-(3-Metoxifenil)pirimidin-4-il)-4H-1 '-azaespiro[oxaz ol-5, 3'-biciclo [2.2, 21octanl-2-amina.
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,363 g, 1,583 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados Cs2C03 (1,289 g, 3,96 mmol) e 4-isotiocianato-6-(3-metoxifenil)pirimidina. A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-di-isopropilcarbodiimida (0,740 mL, 4,75 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi mantida em agitação àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica (metanol: hidróxido de amónio 9:1 -acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-(6-metoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,294 g, 0,788 mmol, rendimento 50%) como um sólido amarelo pálido. P.F. 80-5°C. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,77 (1 H, s), 7,47-7,58 (2 H, m), 7,39 (1 Η, t), 7,20 (1 H, s. 1.), 7,04 (1 Η, dd), 4,05 (1 Η, d), 3,85 (3 Η, s) , 3,74 (1 Η, d), 3,23 (1 Η, d), 3,10 (1 Η, d), 2,71-3,00 (4 Η, m) , 2,03-2,22 (2 Η, m) , 1,53-1,85 (3 Η, m) . MS (LC/MS) T.R. = 1,58; [M+H]+ = 366,15. EXEMPLO 239 (R)-N-(Isoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’-bicicl o[2, 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 3-Isotiocianatoisoquinolina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,805 g, 3,47 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente foi adicionada iso-quinolin-3-amina (0,5 g, 3,47 mmol). A reação foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. LC/MS mostrou o pico do produto desejado como o maior pico. A solução laranja intenso foi concentrada e filtrada. O filtrado purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0 a 40%) para produzir 4-isotiocianato-6-(3-metoxifenil)pirimidina (0,55 g, 2,96 mmol, rendimento 8 5%) um sólido branco. LCMS T.R. = 2,47; [M+H] + = 187,23.
Etapa B: (R)-N- (Isoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bicicl o[2, 2, 2]oc-tan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,2 g, 0,873 mmol) em N, N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados Cs2C03 (0,711 g, 2,182 mmol) e 3-isotiocianatoisoquinolina (0,163g, 0, 873 mmol) . A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-Di-isopropilcarbodiimida (0,408 mL, 2,62 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [metanol : hidróxido de amónio 9:1]-acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-(isoquinolin-3-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bicicl o[2,2,2]octan]-2-amina (0,16 g, 0,508 mmol, rendimento 58%) como um sólido esbranquiçado. P.F. 196-200°C. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,00 (1 H, s) , 7,92 (1 H, d), 7,71 (1 Η, d), 7,59 (1 Η t) , 7,20-7,45 (2 Η, m), 3,96 (1Η, d), 3,65 (1H, d), 3,22 (1 H, d), 3,08 (1 H, d), 2, 66-3, 00 (4 H, m) , 2,05-2,23 (2 H, m), 1,50-1,86 (3 H, m). T.R. = 1,37; [M+H]+ = 309,31. EXEMPLO 240 (R)-N-(6-Fenoxipirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5r 3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-Fenoxipirimidin-4-amina
6-Cloropirimidin-4-amina (3,00 g, 23,14 mmol) foi adicionada a uma solução de sódio (0,197 g, 8,57 mmol) em fenol (11,29 g, 120 mmol) a 55°C. A mistura foi aquecida a 140°C durante 2 horas, posteriormente mantida à temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura de reação foi vertida em NaOH aquoso a 32% sobre água gelada mantendo a temperatura da mistura abaixo de 20°C. A mistura foi extraída com clorofórmio e o extrato orgânico seco sobre cloreto de cálcio e concentrado. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (2-20% de acetato de etilo em hexanos) para produzir 6-fenoxipirimidin-4-amina (0,6 g, 3,21 mmol, rendimento 75%) como um sólido branco. LCMS T.R. = 1,37; [M+H]+ = 197,95.
Etapa B: 4-Isotiocianato-6-fenoxipirimidina
Uma mistura de 6-fenoxipirimidin-4-amina (0,288 g, 1,538 mmol) e 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,357 g, 1,538 mmol) em DCM foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura laranja pálido foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 5-35%) para produzir 4-isotiocianato-6-fenoxipirimidina (0,55 g, 2,96 mmol, rendimento 85%) como óleo amarelo. LCMS T.R. = 2,78; [M+H]+ = 229,94.
Etapa C: (R)-N-(6-Fenoxipirimidin-4-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3 ' -bici-clo[2, 2, 2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,170 g 0,742 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados Cs2C03 (0,604 g, 1,854 mmol) e 4-isotiocianato-6-fenoxipirimidina (0,17 g, 0,742 mmol). A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν' —diisopropilcarbodiimida (0,347 mL, 2,225 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi mantida em agitação àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-(6-fenoxipirimidin-4-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina (0,21 g, 0,72 mmol, rendimento 48,2%) como um sólido amarelo pálido. ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD) δ ppm 8,43 (1 H, s), 7,47 (2 H, t), 7,30 (1 H, t), 7,16 (2 Η, d), 6,21 (1 H, s. 1.), 4,03 (1 H, d), 3,72 (1 H, d), 3,22 (1 H, d), 3,11 (1 H, d), 2,73-2, 99 (4 H, m) , 2,00-2,18 (2 H, m) , I, 54-1,88 (3 Η, m). LCMS T.R. = 1,46; [M+H]+ = 352,19. EXEMPLO 241 (R)-N-(7-metoxiquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5f3’ -biciclo[2,2,2]oc-tan]-2-amina
Etapa A: N-(2,4-Dimetoxibenzil)-7-metoxiquinoxalin-2-amina
2-Cloro-7-metoxiquinoxalina (0,51 g, 2,62 mmol), preparada de acordo com J. Chem. Soc. Perk Trans. 1, 2001, 978-984, e (2,4-dimetoxi-fenil)metanamina (1,181 mL, 7,86 mmol) foram tratadas por micro-ondas em DMSO (2,5 mL) durante 30 minutos a 150°C. Isto foi diluído em 150 mL de EtOAc e extraído trés vezes com 100 mL de salmoura. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia flash num cartucho de 90 g de gel de silicacom de EtOAc a 20 a 80% em hexano, 50 min, a 40 mL/min para produzir N—(2,4-dimetoxibenz i1)-7-metoxiquinoxalin-2-amina (795 mg, 2,443 mmol, rendimento 93%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,00 (1 H, s), 7,70 (1 H, d, J = 8,81 Hz), 7,29 (1H, d, J = 8,31 Hz), 7,05 (1H, d, J = 2,7 7
Hz) , 6,97 (1H, dd, J = 9, 06, 2,77 Hz), 6,47 (1H, d, J = 2,27 Hz), 6,43 (1H, dd, J = 8,18, 2,39 Hz), 5,22 (1H, t, J = 5,29 Hz), 4,63 (2 H, d, J = 5,54 Hz), 3,91 (3 H, s), 3,83 (3 H, s), 3,78 (3 H, s) LCMS: RT = 1,91 min, MH+ = 326, 15.
Etapa B: 2, 2, 2-trifluoroacetato de7-Metoxiquinoxalin-2-amina
N-(2,4-Dimetoxibenzil)-7-metoxiquinoxalin-2-amina (0,79 g, 2,428 mmol) foi agitada em TFA (10 mL, 130 mmol) /CH2CI2 (10 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos. Os solventes foram removidos no evaporador rotatório. NaHC03 saturado aguoso (200 mL) foi adicionado ao resíduo vermelho, gue precipitou um sólido amarelo. A mistura foi extraída extensivamente com DCM. A camada orgânica foi concentrada e seca sob vácuo para produzir 2,2,2-trifluoroacetato de 7-metoxiquinoxalin-2-amina (0,70 g, 2,4 mmol, rendimento 99%) . 1H RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,10 (1H, s), 7,63 (1H, d J = 9,07 Hz), 6,95 (1 H, dd, J = 9, 06, 2,77 Hz), 6,89 (1 H, d, J = 2,77 Hz) 6,85 (2 H, s. 1.), 3,84 (3 H, s) LCMS: RT = 1,04 min, MH+ = 176,14.
Etapa C: 2-Isotiocianato-7-metoxiquinoxalina
Uma mistura de 2,2,2-trifluoroacetato de 7-metoxiquinoxalin-2-amina (578 mg, 2 mmol), trietilamina (335 gL, 2,400 mmol), e 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (557 mg, 2,400 mmol) foi agitada em 5 mL DCM durante 24 horas. A reação foi diretamente eluída num cartucho de gel de sílicade 120 g com de EtOAc a 0 a 25% em hexano, 25 min, a 35 mL/min para produzir 2-isotiocianato-7-metoxiquinoxalina (84 mg, 0,387 mmol, rendimento 19%). LCMS: RT = 2,49 min, MH+ = 218,06.
Etapa D: (R)-N-(7-Metoxiquinoxaiin-2-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5,3' -bici-clo[2f2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(7-Metoxiquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do Exemplo 23, Etapa B. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 120 g com [9:1 Me0H/NH40H] 1 a 4% em CHC13, 50 minutos, produziu 24 mg (rendimento 17%) . 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,73 (1H, s. 1.), 8,45 (1H, s), 7,80 (1H, d, J = 9,0 7 Hz) , 7,12 (1H, dd, J = 9, 0 6, 2,77 Hz), 7,03 (1 H, d, J = 2,52 Hz), 4,02 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,90 (3 H, s), 3,67 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,36 (1 H, dd, J = 14,86, 1,51 Hz), 2, 69-3, 06 (5 H, m) , 2,10-2,26 (2 H, m) , 1, 66-1, 80 (1 H, m), 1,43-1,63 (2 H, m) LCMS: RT = 0,835 min, MH-= 338,2, MH+ = 340,1. EXEMPLO 242 (R)-N- (6-Metiiquinoxaiin-2-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5, 3’-bicicio[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: N- (2,4-Dimetoxibenzii)-6-metiiquinoxaiin-2-amina
2-Cloro-6-metilquinoxalina (0,51 g, 2,86 mmol), preparada de acordo com J. Chem. Soc. 1948,1310-1313, e (2,4-dimetoxifenil)metanamina (1,29 mL, 8,57 mmol) foram tratadas por micro-ondas em DMSO (2,5 mL) durante 30 minutos a 150°C. Isto foi diluído em 150 mL de EtOAc e extraído trés vezes com 100 mL de salmoura. O produto em bruto foi purificado através de cro-matografia flash num cartucho de 90 g de gel de silicacom de EtOAc 20 a 60% em hexano, 50 minutos, a 40 mL/min para produzir N—(2,4-dimetoxibenzi1)-6-metilquinoxalin-2-amina (848 mg, 2,74 mmol, rendimento 96%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,12 (1 H, s), 7,60 (1 H, s) 7,59 (1H, d, J = 5,79 Hz), 7,38 (1H, dd, J = 8,56, 1,76 Hz), 7,30 (1 H, d, J = 8,31 Hz), 6,46 (1 H, d, J — 2,27 Hz), 6,42 (1 H, dd, J = 8,18, 2,39 Hz), 5,20 (1H, t, J = 5,41 Hz), 4,62 (2 H, d, J = 5,54 Hz), 3,83 (3 H, s), 3,77 (3 H, s), 2,46 (3 H, s) LCMS: RT = 1,93 min, MH+ = 310,20.
Etapa B: 2, 2, 2-trifluoroacetato de 6-Metilquinoxalin-2-amina
N-(2,4-Dimetoxibenzil)-6-metilquinoxalin-2-amina (0,84 g, 2,72 mmol) foi agitada em TFA (10 mL, 130 mmol)/CH2Cl2 (10 mL) à temperatura ambiente durante 30 minutos. Os solventes foram removidos no evapo-rador giratório. Na2C03 aquoso saturado (200 mL) foi adicionado ao resíduo vermelho, que posteriormente precipitou um sólido castanho. A mistura foi extraída extensivamente com DCM. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, concentrada, e seca sob vácuo para produzir 2,2,2-trifluoroace-tato de 6-metilquinoxalin-2-amina (640 mg, 2,343 mmol, rendimento 86%) . 1H RMN (400 MHz, DMSO~de) δ ppm 8,24 (1 H, s), 7,55 (1 H, s) 7,34-7,45 (2 H, m) , 6,82 (2 H, s), 2,41 (3 Η, s) LCMS: RT = 1,07 min, MH+ = 160,12.
Etapa C: 2-Isotiocianato-6-metilquinoxalina
Uma mistura de 2,2,2-trifluoroacetato de 6-metilquinoxalin-2-amina (546 mg, 2 mmol), trietilamina (243 mg, 2,400 mmol), e 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (557 mg, 2,40 mmol) foi agitada em 5 mL de DCM durante 4 horas. A reação foi diretamente eluída num cartucho de gel de sílicade 120 g com de EtOAc a 0 a 25% em hexano, 25 minutos, a 35 mL/min para produzir 2-isotiocianato-6-metilquinoxalina (153 mg, 0. 760 mmol, rendimento 38%). LCMS: RT = 2,59 min, MH+ = 202,04
Etapa D: (R)-N-(6-Metilquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bici-clo[2, 2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Metilquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do Exemplo 23, Etapa B. Cromatografia flash num cartucho de gel de sílica de 120 g com [Me0H/NH40H 9:1] a 1 a 4% em CHC13, 50 minutos, produziu 46 mg (rendimento 19%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,75 (1H, s. 1.), 8,57 (1H, s), 7,71 (1H, s), 7,60 (1H, d, J = 8,56 Hz), 7,42 (1H, dd, J = 8,44, 1,89 Hz), 4,01 (1H, d, J = 9,57 Hz), 3,68 (1H, d, J = 9,32 Hz), 3,38 (1H, dd, J = 14,86, 1,01 Hz), 2,73-3,08 (5 H, m) , 2,50 (3 H, s) , 2,16-2,26 (1 H, m) , 2,14 (1 H, s. 1.), 1, 67-1,79 (1 H, m) , 1,45-1,65 (2 H, m) . LCMS: RT = 0,838 min, MH-= 322,2, MH+ = 324,2. EXEMPLO 243 (R)-N- (7-Metilquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3’-biciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina.
Etapa A: N-(2, 4-Dimetoxibenzil)-7-metilquinoxalin-2-amina
2-Cloro-7-metilquinoxalina (0,51 g, 2,86 mmol), preparada de acordo com J. Chem. Soc. 1948 1310-1313, e (2,4-dimetoxifenil)metanamina (1,29 mL, 8,57 mmol) foram preparadas por micro-ondas em DMSO (2,5 mL) durante 30 minutos al50°C. Esta foi diluída em 150 mL de EtOAc e extraída trés vezes com 100 mL de salmoura. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 90 g com EtOAc a 20 a 80% em hexano, 50 minutos, a 40 mL/min para produzir N—(2,4-dime-toxibenzi1)-7-metilquinoxalin-2-amina (860 mg, 2,78 mmol, rendimento 97%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,08 (1 H, s), 7,70 (1 H, d, J = 8,31 Hz), 7,49 (1H, s), 7,30 (1H, d, J = 8,06 Hz), 7,17 (1 H, dd, J = 8,31, 2,01 Hz), 6,47 (1H, d, J = 2,52 Hz), 6,42 (1 H, dd, J = 8,31,2,52 Hz) , 5,23 (1H, t, J = 5,16 Hz), 4,63 (2 H, d, J = 5,79 Hz), 3,83 (3 H, s), 3,78 (3 H, s), 2,48 (3 H, s) . LCMS: RT = 1,93 min, MH+ = 310,20.
Etapa B: 2, 2, 2-trifluoroacetato de 7-Metilquinoxalin-2-amina
N-(2,4-Dimetoxibenzil)-7-metilquinoxalin-2-amina (0,85 g, 2,75 mmol) foi agitada em TFA (10 mL, 130 mmol)/CH2C12 (10 mL) àà temperatura ambiente durante 30 minutos. Os solventes foram removidos no eva-porador rotatório. NaHC03 aquoso saturado (200 mL) foi adicionado ao resíduo vermelho, que posteriormente precipitou um sólido rosa. A mistura foi extraída extensivamente com DCM. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, concentrada, e seca sob vácuo para produzir 2,2,2-trifluoroacetato de 7-metilquinoxalin-2-amina (640 mg, 2,34 mmol, rendimento 85%). 1H RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,2 0 (1 H, s), 7,64 (1 H, d, J = 8,31 Hz) , 7,28 (1H, s), 7,15 (1H, dd, J = 8,31, 1,76 Hz), 6,89 (2 H, s) , 2,42 (3 H, s) . LCMS: RT = 1,07 min, MH+ = 160,12.
Etapa C: 2-Isotior.i anato-fi-mRti 7 ση i noxal ina
Uma mistura de 2,2,2-trifluoroacetato de 7-metilquinoxalin-2-amina (546 mg, 2 mmol) 78263-058-01, trietilamina (243 mg, 2,40 mmol), e 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (557 mg, 2,40 mmol) foi agitada em 5 mL de DCM durante 2 horas. A reação foi diretamente eluida num cartucho de gel de silicade 120 g com de EtOAc a 0 a 25% em hexano, 25 minutos, a 35 mL/min para produzir 2-isotiocianato-7-metilquinoxalina (185 mg, 0,919 mmol, rendimento 46%). LCMS: RT = 2,58 min, MH+ = 202,04
Etapa D: (R)-N-(7-Metilquinoxalin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5,3 ' -bici-clo[2, 2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(7-Metilquinoxalin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do Exemplo 23, etapa B. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 120 g com 1 a 3% [ 9 :1 de Me0H/NH40H] em CHC13, 50 minutos, produziu 22 mg (rendimento 7%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,80 (1H, s. 1.), 8,53 (1H, s), 7,81 (1H, d, J = 8,31 Hz), 7,50 (1H, s), 7,31 (1H, dd, J = 8,56, 1,76 Hz), 4,01 (1 H, d, J = 9,57 Hz), 3,66 (1 H, d, J = 9, 32 Hz), 3,36 (1H, d, J = 14,86 Hz), 2,70-3,04 (5 H, m), 2,50 (3 H, s), 2,15-2,24 (1 H, m) , 2,13 (1 H, s. 1.), 1, 66-1,79 (1 H, m), 1,44-1,63 (2 H, m) LCMS: RT = 8,67 min, MH-= 322,6, MH+ = 324,1. EXEMPLO 244 (R)-N- (6- (Piridin-3-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespirofoxaz ol-5, 3'-biciclo[2r2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-(Piridin-3-il)pirimidin-4-amina
Uma mistura de 6-cloropirimidin-4-amina (0,324 g, 2,5 mmol) ácido piridin-3-ilborónico (0,384 g, 3,13 mmol), Na2CC>3 (0,795 g, 7,50 mmol) e cloreto de bis (trifenilfosfina)paládio (11) (0,035 g, 0,050 mmol) foi suspensa numa mistura de DME/EtOH/água. A mistura foi aquecida no sintetizador de micro-ondas a 125°C durante 20 minutos e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo em hexanos a 10-60%, posteriormente metanol: hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 5 a 25%) para produzir 6- (piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,17 g, 0, 987 mmol, rendimento 40%) como um sólido esbranquiçado. LCMS T.R. = 0,31; [M+H]+ = 173,11.
Etapa B: 4-Isotiocianato-6-(piridin-3-il)pirimidina
A uma solução de 1,11-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,682 g 2,94 mmol) em diclorometano/N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente foi adicionada
6-(piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,337 g, 1,957 mmol). A mistura foi aquecida a 60°C durante 18 horas. LC/MS mostrou o pico do produto desejado como o maior pico. A mistura laranja intenso foi purificada Através de cromatografia de gel de sílica ( acetato de etilo-hexanos a 1-40%) para produzir 4-isotiocianato-6-metoxipirimidina (0,12 g, 0,56 mmol, rendimento 28,6%) como um sólido laranja.
Etapa C: (R) -N- (6- (Piridin-3-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5, 3’-bici-clo[2.2.2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,13 g 0,560 mmol) em N, N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados Cs2C03 (0,46 g, 1,4 mmol) e 4-isotiocianato-6-(piridin-3-il)pirimidina (0,12 g, 0,56 mmol) . A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-Diisopropilcarbodiimida (0,26 mL, 1,7 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio 9 :1 ]-acetato de etilo a 0-10%) para produzir (S) -N-(5-cloropirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,182 g, 0,613 mmol, rendimento 35%) como um sólido esbranquiçado. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,13-9,21 (1 H, m) , 8,82 (1 H, d), 8,63 (1 Η, dd) , 8,44 (1 Η, dt), 7,56 (1 Η, dd) , 7,31 (1 Η, s) , 4,06 (1 Η, d), 3,76 (1 Η, d), 3,20-3,28 (1 Η, m) , 3,08-3,16 (1 Η, m) , 2,72-3,01 (4 Η, m) , 2, 00-2,24 (2 Η, m) , 1,52-1,83 (3 Η, m) . LCMS T.R. = 0,72; [Μ+Η] + = 337,2. EXEMPLO 245 (R)-Ν-(2’-Metóxi-4,5’-bipirimidin-6-il)-4H-V-azaespiro[oxaz ol-5,3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 2 ' -Metóxi-4,5 ' -bÍOÍrimidin-6-amina
6-Cloropirimidin-4-amina (0,35 g, 2,70 mmol), ácido 2-metoxi-pirimidin-5-ilborónico (0,520 g, 3,38 mmol), Na2CC>3 (0,859 g, 8,11 mmol) e cloreto de bis (trifenilfosfina)paládio (11) (0, 038 g, 0,054 mmol) foram suspensos numa mistura de DME/EtOH/ água. (15:2:3 mL). A mistura foi aquecida no sintetizador de micro-ondas a 125°C durante 20 minutos e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica ( de metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 0-5%) para produzir 6-(piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,28 g, 1,378 mmol, rendimento 51%) como um sólido esbranquiçado. LCMS T.R. = 0,53; [M+H]+ = 204,11.
Etapa B: 6-Isotiocianato-2 ' -metOxi-4, 5 ' -bipirimidina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,832 g, 3,58 mmol) em diclorometano/N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente foi adicionada 2'-metoxi-4,5'-bipirimidin-6-amina (0,56 g, 2,76 mmol). A mistura laranja foi aquecida a 60°C durante 18 horas. O LC/MS mostrou o pico do produto desejado como o maior pico. A mistura laranja carregada foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0 a 40%) para produzir 4-isotiocianato-6-metoxipirimidina (0,1 g, 0,408 mmol, rendimento 15%) como um sólido laranja. LCMS T.R.=2,29; [M+H] + = 246,03.
Etapa C: (R)-N-(2'-Metóxi-4,5'-bipirimidin-6-ii)-4H-1'-azaespiro[oxa zoi-5, 3'-biciclo[2 r2,2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,093 g, 0,41 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados Cs2C03 (0,33 g, 1 mmol) e 6-isotiocianato-2'-metóxi-4,5'-bipirimidina (0,1 g, 0,41 5 mmol) . A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-Diisopropilcarbodiimida (0,19 mL, 1,2 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio9:l]-acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-10 (21-metóxi-4,51-bipirimidin-6-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 31-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina(0,072 g, 0,188 mmol, rendimento 46%) como um sólido esbranquiçado. RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,19 (2 H, s) , 8,80 (1 H, d), 7,24 (1 Η, s. 1.), 4, 00-4, 09 (4 Η, m) , 3,76 (1 Η, d), 3,23 (1 Η, s), 3,08-3,15 (1 Η, m) , 2,72-3, 04 (4 Η, m) , 1, 97-2,22 (2 Η, m) , 1,38-1,85 15 (3 Η, m). T.R. = 1,22; [Μ+Η]+ = 368,22. EXEMPLO 246 (R)-Ν- (6- (Piridin-4-il)pirimidin-4-il)-4Η-1'-azaespiro[oxaz oi-5,3'-biciclo [2'2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 6- (Piridin-4-il)pirimidin-4-amina
6-Cloropirimidin-4-amina (0,324 g, 2,5 mmol), ácido piridin-4-ilborónico (0,384 g, 3,13 mmol), Na2C03 (0,795 g, 7,50mmol) e cloreto de bis (trifenilfosfina)paládio (11) (0,035 g, 0,050 mmol) foram suspensos numa mistura de DME/EtOH/água(15:2:3 mL) . A mistura foi aquecida no sintetiza-dor de micro-ondas a 125°C durante 20 minutos e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio9 :1 ] -acetato de etilo 5-25%) para produzir 6-(piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,15 g, 0,871 mmol, rendimento 35%) como um sólido esbranquiçado. LCMS T.R. = 0,30; [M+H]+ = 173,11.
Etapa B: 4-Isotiocianato-6-(piridin-4-il)pirimidina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,601 g, 2,59 mmol) em diclorometano/N,N-dimetilformamida àà temperatura ambiente foi adicionada 6-(piridin-4-il)pirimidin-4-amina (0,297 g, 1,725 mmol). A mistura laranja foi aquecida a 60°C durante 18 horas. LC/MS mostrou o pico do produto desejado como o maior pico. A mistura laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica ( acetato de etilo-hexanos a 0-40%) para produzir 4-isotiocianato-6-(piridin-4-il)pirimidina (0,055 g, 0,257 mmol, rendimento 15%) como um sólido laranja. LCMS T.R. = 1,46; [M+H]+ = 215,09.
Etapa C: (R)-N- (6- (Piridin-4-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz o 1-5,3 '-bici-cloí2.2.2loctanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,059 g, 0,257 mmol) em N,N-dimetilformamida (15 mL) foram adicionados Cs2C03 (0,209 g, 0,642 mmol) e 4-isotiocianato-6-(piridin-4-il)pirimidina (0,055 g, 0,257 mmol) . A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-diisopropilcarbodiimida (0,12 mL, 0,77 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi continuada agitar à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [metanol : hidróxido de amónio9:1]-acetato de etilo a 0-10%) para produzir (R)-N-(6-(piridin-4-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5,3'-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina (0,014 g, 0,04 mmol, rendimento 16%) como uma película amarela. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,85 (1 H, d), 8,67 (2 H, dd), 8,04 (2 H, dd), 7,34 (1 H, s. 1.), 4,06 (1 H, d), 3,76 (1 H, d), 3,23 (1 H, d), 3,10 (1 H, d), 2,70-2, 99 (4 H, m) , 2,01-2,22 (2 H, m) , 1,53-1, 86 (3 Η, m). LCMS T.R. = 0,42; [M+H]+ = 337,14. EXEMPLO 247 (R)-6- (4H-1'-Azaespim[oxazol-5,3’-biciclo[2, 2, 2]octano]-2-i lamino)-2-metilnicotinonitrilo
Etapa A: 6-Isotiocianato-2-metilnicotinonitrilo
À 6-amino-2-metilnicotinonitrilo (0,41 g, 3,08 mmol) em dicloro-metano (20 mL) foi adicionada 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,75 g, 3,23 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 6-isotiocianato-2-metilnicotinonitrilo (0,52 g, 2,97 mmol, rendimento 96%) . 1H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,36 (d, J = 8,24 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 2,65 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,09; [M+H]+ = 176,0.
Etapa B: (R)-6-(4H-1 ' -Azaespiro[oxazol-5,3'-hidelo[2,2,2]octano]-2-1 lamino)-2-metilnicotinonitrilo
À 6-isotiocianato-2-metilnicotinonitrilo (0,25 g, 1,43 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados trietilamina (0,5 mL, 3,666 mmol) e dicloridrato de 3-(aminometil)guinuclidin-3-ol (0,33 g, 1,46 mmol) àà temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatograf ia (Biotage: CHCI3 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) . 0 produto foi posteriormente tratado com N, N-dimetilformamida (20 mL) e N, N'-diisopropilcarbodiimida (0,67 mL, 4,28 mmol) . A reação foi aquecida até 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo para produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) para produzir (R)-6-(4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilamino)-2-metilnicotinonitrilo (0,09 g, 0,3 mmol, rendimento 21%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 9,11 (s, 1H), 7,87 (d, J = 7,93 Hz, 2 H) , 6,69 (s, 1H), 3,89 (d, J = 10,38 Hz, 2 H) , 3,63 (d, J = 10,38 Hz, 3 H) , 3,00 (s, 5H), 2,72-2,80 (m, 4 H) , 2, 64-2, 69 (m, 5 H) , 2,60 (s, 7 H) , 2,00 (d, J = 2,14 Hz, 3 H), 1,91 (s, 1H), 1,87 (s, 2 H), 1,58 (s, 5 H), 1,42-1,50 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,48; [M+H]+ = 298,13. EXEMPLO 248 (R)-6-(4H-1'-Azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2, 2, 2]octano]-2-ilamino)-2,4-dimetilnicotinonitrilo
Etapa A: 6-Isotiocianato-2r4-dimetilnicotinonitrilo
À 6-amino-2,4-dimetilnicotinonitrilo (0,14 g, 0,95 mmol) em diclo-rometano (20 mL) foi adicionada 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,23 g, 0,1 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Bio-tage: de acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 6-isotiocianato-2,4-dimetilnicotinonitrilo (0,15 g, 0,79 mmol, rendimento 83%) . 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,37 (s, 1 H), 2,63 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,40; [M+H]+ = 190.
Etapa B: (R) -6- (4H-1 ' -Azaespiro [oxazol-5,3' -biciclo [2, 2, 2] octano] -2-ilamino)-2,4-dimetilnicotinonitrilo
A 6-isotiocianato-2,4-dimetilnicotinonitrilo (0,09 g, 0,48 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados trietilamina (0,17 mL, 1,19 mmol) e dicloridrato de 3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,11 g, 0,49 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) . O produto foi posteriormente tratado com N, N-dimetil-formamida (20 mL) e N, N'-diisopropilcarbodiimida (0,22 mL, 1,43 mmol) . A reação foi aquecida até 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo para produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, de NH4OH a 1%) para produzir (R)-6-(4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octano]-2-ilamino)-2,4-dimetilnicotinonitrilo (0,10 g, 0,32 mmol, rendimento a 66%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,08 (s, 1 H) , 6,60 (s, 1 H) , 3,88 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) , 3,61 (d, J = 10,38 Hz, 1 H) , 2,98 (s, 2 H) , 2,70-2,79 (m, 2 H) , 2, 63-2, 69 (m, 2 H) , 2,55-2, 60 (m, 4 H) , 2,31-2,39 (m, 4 H) , 1,99 (s, 1 H) , 1,89 (s, 1 H) , 1,54-1, 62 (m, 2 H) , 1,41-1,49 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,78; [M+H]+ = 312,1. EXEMPLO 249 (R)-N-(6-Fenilpiridazin-3~il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3’-b iciclo[2, 2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 3-Isotiocianato-6-fenilpiridazina
3-Isotiocianato-6-fenilpiridazina foi sintetizada através do método do Exemplo 23, etapa B. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 120 g com de EtOAc a 0 a 25% em hexano, 25 minutos, a 35 mL/minutos produziu 420 mg (rendimento 49%). LCMS: RT = 2,17 min, MH+ = 214,06.
Etapa B: (R)-N- (6-Fenilpiridazin-3-il)-4H-1’-azaespiro[oxazol-5, 3’-b ici-clo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Fenilpiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada atavés do método do Exemplo 23, etapa B. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 160 g com [9:1 de MeOH/NH4OH] a 14% em CHC13, 50 minutos, a 40 mL/minutos produziu 67 mg de (R)-N-(6-fenilpiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-b ici-cio[2,2,2]octan]-2-amina (rendimento 17%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,61 (1 H, s. 1.), 7, 95-7, 99 (2 H, m), 7,74 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 7,39-7,52 (3 H, m), 7,22 (1 Η, d parcial), 3,97 (1 Η, d, J = 9,32 Hz), 3,64 (1 H, d, J = 9,32 Hz), 3,37 (1H, dd, J = 14,73, 1,38 Hz), 2,69-3,06 (5H, m) , 2,16-2,26 (1 H, m) , 2,14 (1 H, s. 1.), 1, 66-1,79 (1 H, m) , 1,45-1, 60 (2 H, m) 1Η RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 7,87-8,02 (3 H, m), 7,44-7,55 (3 H, m) , 7,13-7,29 (1 H, m) , 4,05 (1 H, d, J = 9,82 Hz), 3,74 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,17 (2 H, dd, J = 49,35, 14, 60 Hz), 2,73-3, 04 (4 H, m) , 2,16 (2 H, s. 1.), 1,55-1,85 (3 H, m) LCMS: RT = 0,82 min, MH-= 334,2, MH+ = 336,2. EXEMPLO 250 (R)-N- (5- (Metiltio)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 ' -biciclo[2,2,2]crtan 7-P-amina
Etapa A: 5-(Metiltio)pirazin-2-amina
A uma solução de 5-bromopirazin-2-amina (2 g, 11,49 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tiometóxido de sódio (1,611 g, 22, 99 mmol) . A mistura foi agitada e aquecida a 100°C sob azoto durante 18 horas e concentrada. O resíduo foi tratado com água e a mistura foi extraída com diclorometano. Os orgânicos combinados foram secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 0-10%) para produzir 6-(piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,15 g, 0,871 mmol, rendimento 35%) como um sólido amarelo. LCMS T.R. = 0,91; [M+H] + = 141,89.
Etapa B: 2-Isotiocianato-5-(metiltio)pirazina
A uma solução de 1,11-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (1, 069 g 4,60 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente foi adicionada 5-(metiltio)pirazin-2-amina (0,50 g, 3,54 mmol). A reação foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. 0 LC/MS mostrou o pico do produto desejado como o maior pico. A mistura laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0 a 40%) para produzir 2-isotiocianato-5-(metiltio)pirazina (0,545 g, 0,257 mmol, rendimento 84%) como um sólido laranja. LCMS T.R. = 2,65; [M+H]+ = 184,02.
Etapa C: (R)-N- (5- (Metiltio)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 '-biciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,375 g, 1,637 mmol) em N,N-dimetilformamida (15 mL) foram adicionados Cs2C03 (1,333 g, 4,09 mmol) e 2-isotiocianato-5-(metiltio)pirazina (0,3 g, 1,637 mmol). A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-diisopropilcarbodiimida (0,765 mL, 4, 9mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi mantida em agitação àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de sílica-gel (metanol : hidróxido de amónio9:1-acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-(5-(metiltio)pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,014 g, 0,04 mmol, rendimento 16%) como um sólido amarelo. P.F. 155-60°C. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,13 (1 H, d), 8,06 (1 H, s), 3,96 (1 Η, d), 3,66 (1 H, d), 3,20 (1 H, d), 3,08 (1 H, d), 2,87-2, 96 (2 H, m) , 2,72-2,82 (2 H, m) , 2,52 (3 Η, s), 2,00-2,19 (2 Η, m) , I, 51-1,81 (3 Η, m). LCMS T.R. = 1,01; [Μ+Η]+ = 306,12. EXEMPLO 251 (R) -N- (5, 6-Dicloropiridin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: N- (5,6-Dicloropiridin-2-il)pivalamida
A uma solução de N-(6-cloropiridin-2-il)pivalamida, sintetizada como conforme no J. Org. Chem 2005, 70, 1771, (1, 02 g, 4,80 mmol) em clorofórmio (25 mL) foi adicionada l-cloropirrolidina-2,5-diona (0,62 g, 4,67 mmol) e a mistura foi submetida a refluxo num banho de óleo durante 3 horas. Esta foi deixada arrefecer até à até à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi evaporada in vacuo e novamente em DMF (15 mL) . 480 mg de 1-cloropirrolidina-2,5-diona adicionais foram adicionados e a solução resultante foi aquecida durante a noite num banho de óleo a 95-100°C, posteriormente arrefecida novamente até àaté à temperatura ambiente. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre água e acetato de etilo. A fase aquosa foi lavada adicionalmente duas vezes com acetato de etilo e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, e evaporadas in vacuo. TLC (acetato de etilo/hexano a 10%) mostrou uma mancha forte a Rf 0,6 com manchas inferiores a Rf 0,4 e 0,2. O material foi submetido a Biotage em de acetato de etilo/hexano a 5-10%, recolhendo a fração de Rf 0,6 para proporcionar 790 mg (66%) de sólido branco, N-(5,6-dicloropiridin-2-il)pivalamida. 1H RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,17 (s, 1 H) , 7,96 (s, 1 H) , 7,72 (s, 1 H) , 1,31 (s, 10 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,85; [M+H]+ = 248,8.
Etapa B: 5,6-Dicloropiridin-2-amina
Uma mistura de N-(5,6-dicloropiridin-2-il)pivalamida (790 mg, 3,20 mmol), ácido clorídrico, 37% (1,25 mL), água (1,25 mL), e EtOH (3 mL) foi aguecida durante 4 horas num banho de óleo a 85-90°C. LCMS mos-trou conversão guase completa no produto. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e a mistura de reação foi evaporada para um pegueno volume, posteriormente transferida para um funil separatório onde foi dividida entre carbonato de sódio aguoso e acetato de etilo. As camadas foram separadas, a fase aguosa foi lavada novamente com acetato de etilo, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSCh, filtradas, e evaporadas para proporcionar um sólido branco. O material foi submetido a uma coluna Biotage em de acetato de etilo/hexano a 20%, recolhendo o principal componente.
5,6-Dicloropiridin-2-amina (0,49 g, 2,98 mmol, 93%) foi obtida como um sólido branco. 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 7,44 (d, J = 8,55 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) , 4,58 (s, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,28; [M+H]+ = 164,8.
Etapa C: 5r 6-Dicloro-2-isotiocianatopiridina
A 5, 6-dicloropiridin-2-amina (0,47 g, 2,88 mmol) em diclorome-tano (25 mL) foi adicionada 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,68 g, 2,94 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas, posteriormente arrefecida até à temperatura ambiente. O material bruto foi purificado através de cromatografia a 25-100% (Biotage: acetato de etilo/hexano) 2,3-dicloro-6-isotiocianatopiridina (0,48 g, 2,34 mmol, rendimento 81%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,26 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) , 7,47 (d, J = 8,24 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,83; [M+H]+ = 204,8.
Etapa D: (R)-N- (5, 6-Dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -bici-clo[2,2,2]octanl-2-amina
À 2,3-dicloro-6-isotiocianatopiridina (0,47 g, 2,29 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados trietilamina (0,8 mL, 5,7 mmol) e dicloridrato de 3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,54 g, 2,34 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas, arrefecida até à até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: de CHCI3 a 85%, de MeOH a 14%, de NH4OH a 1%) . O produto foi posteriormente tratado com N,N-dimetilformamida (20 mL) e N,N'-diisopropilcarbodiimida (1,07 mL, 6,88 mmol) . A reação foi aquecida até70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O produto em bruto foi purificado através de cromatograf ia (Biotage: de CHC13 a 85%, de MeOH a 14%, de NH4OH a 1%) para produzir (R)-N-(5,6-dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,36 g, 1,08 mmol, rendimento 47%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,31 (d, J = 1,22 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 3,85 (d, J = 10,07 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,38 Hz, 2 H) , 2,98 (s, 3 H) , 2, 69-2,78 (m, 3 H) , 2,65 (t, J = 7,78 Hz, 3 H) , 2,00 (s, 2 H) , 1,86 (s, 2 H) , 1,58 (dd, J = 7,48, 2, 90 Hz, 2 H) , 1,56 (s, 1 H) , 1,41-1,49 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,81; [M+H] + = 327,1. EXEMPLO 252 (R)-N-(4, 5-Dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 4,5-Dicloro-2-isotiocianatopiridina
À 4,5-dicloropiridin-2-amina (0,25 g, 1,53 mmol) em diclorometano (25 mL) foi adicionada 1,1 '-tiocarbonildipiridin-2(1H) -ona (0,36 g, 1,56 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas, posteriormente arrefecida até à temperatura ambiente. O material em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 4,5-dicloro-2-isotiocianatopiridina (0,26 g, 1,27 mmol, rendimento 83%) como um pó amarelo. O produto foi levado diretamente para a etapa seguinte.
Etapa B: (R) -N-(4, 5-Úicioropiridin-2-ii)-4H-1 '-azaespiro[oxazoi-5,3' -biciclo[2f2, 2]octan]-2-amina
À 4,5-dicloro-2-isotiocianatopiridina (0,25 g, 1,22 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados trietilamina (0,43 mL, 3,05 mmol) e dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,29 g, 1,24 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHCI3 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) . 0 produto foi posteriormente tratado com N,N-dimetilformamida (20 mL) e N,N' diisopropilcarbodiimida (0,57 mL, 3,66 mmol). A reação foi aquecida atéaté 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada para produzir o produto bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: CHCI3 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) para produzir (R)-N-(4,5-dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,09 g, 0,27 mmol, rendimento 22%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, ()MSO-()6) δ ppm 8,81 (s, 1 H) , 8,32 (d, J = 6,10 Hz, 1 H) , 7,03 (s, 1 H) , 3,83 (d, J = 9,46 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 2,98 (s, 2 H) , 2,71-2,79 (m, 2 H) , 2,65 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) , 1,99 (s, 1H), 1,8 6 (s, 1 H) , 1,53-1,61 (m, 2 H) , 1,41-1,49 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,78; [M+H]+ = 327,0. EXEMPLO 253 (R)-N-(5-Cioro-4-metiipiridin-2-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi-5,3 ’ -bicicio[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-Cloro-2-isotiocianato-4-metilpiridina
À 5-cloro-4-metilpiridin-2-amina (0,41 g, 2,88 mmol) em diclorometano (25 mL) foi adicionada 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,70 g, 3,0 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura em bruto foi purificada através de cromato-grafia (Biotage: acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 5-cloro-2-isotiocianato-4-metilpiridina (0,45 g, 2,44 mmol, rendimento 85%). 1H 10 RMN (500 ΜΗ) δ ppm 8,45 (s, 1 H) , 7,47 (s, 1 H), 2,37 (s, 3 H). LC/MS RT=2,79; [M+H]+ = 184,9.
Etapa B: (R) -N-(5-Cloro-4-metilpiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’ -biciclo[2,2,21octanl-2-amina
À 5-cloro-2-isotiocianato-4-metilpiridina (0,37 g, 2,0 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados trietilamina (0,7 mL, 5,0 mmol) e dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (da etapa B do Exemplo 17) (0,47 g, 2,0 mmol) àà temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à até à temperatura ambi-20 ente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHCI3 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) . O produto foi posteriormente tratado com N,N-dimetilformamida (20 mL) e N,N'-diisopropil-carbodiimida (0,94 mL, 6,0 mmol). A reação foi aquecida até 70 °C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada pa-ra produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatograf ia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH4OH a 1%) para produzir (R)-N-(5-cloro-4-metilpiridin-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,19 g, 0,61 mmol, rendimento 30,3%) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) b ppm 8,79 (s, 1 H) , 8,08-8,15 (m, 2 H) , 6,78 (s, 1 H) , 3,82 (d, J = 8,55 Hz, 2 H) , 3,55 (d, J = 10,38 Hz, 2 H) , 2,93-3,02 (m, 5 H) , 2,71-2,80 (m, 5 H) , 2,66 (t, J = 7,63 Hz, 4 H) , 2,23-2,29 (m, 7 Η), 1, 94-2,02 (m, 2 Η), 1,92 (s, 1 Η), 1,86 (s, 2 Η) , 1,53-1, 62 (m, 5 Η) , 1,41-1,49 (m, J= 12,55, 9, 88, 7,02, 2,29 Hz, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,72; [M+H]+ = 307,1. EXEMPLO 254 (R)-N-(6-Cloropiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3'-b iciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 3-Cloro-6-isotiocianatopiridazina
3-Cloro-6-isotiocianatopiridazina foi sintetizada através do método do Exemplo 218, etapa D. Cromatografia flash num cartucho de sílica-gel de 120 g com de EtOAc em hexano a 0 a 25%, 25 min, a 35 ml/min produziu 213 mg (rendimento 31%) . LCMS: RT = 1,25 min, MH+ = 172,00.
Etapa B: (R)-N-(6-Cloropiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-b ici-clo[2, 2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-CIoropiridazin-3-iI)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada pelo método do exemplo 218, etapa E. Cromatografia flash num cartucho de gel de sílicade 160 g com [MeOH/NH4OH 9:1] a 1-3% em CHCI3, 50 min, a 40 ml/min produziu 29 mg (rendimento 8%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,27 (1H, s. 1.), 7,28 (1H, d, J = 9,07 Hz) , 7,10 (1H, d, J = 9,07 Hz), 3,95 (1H, d, J = 9,57 Hz), 3,62 (1H, d, J = 9,57 Hz), 3,34 (1H, dd, J = 14, 98, 1,64 Hz), 2, 67-3, 04 (5 H, m) , 2,14-2,21 (1 H, m) , 2,12 (1 H, s. 1.), 1, 65-1,79 (1 H, m) , 1,45-1,61 (2 Η, m) . LCMS: RT = 0,62 min, ΜΗ-= 292,1, MH+ = 294,1. EXEMPLO 255 (R)-N- (6-Bromopiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-b iciclo[2,2,2]odan]-2-amina
Etapa A: 3-Bromo~6-isotiodanatopiridazina
3-Bromo-6-isotiocianatopiridazina foi sintetizada pelo método do exemplo 218, etapa D. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 120 g com de EtOAc em hexano 0 a 25%, 25 min, a 35 ml/min produziu 364 mg (rendimento 42%). LCMS: RT = 1,34 min, MH+ = 215,92.
Etapa B: (R)-N-(6-Bromopiridazin-3-ii)-4H-1 ' -azaespiro[oxazoi-5,3'-b ici-clo[2,2,2]odan1-2-amina
(R)-N-(6-Bromopiridazin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do Exemplo 218, etapa E. Cromatografia flash num cartucho de gel de silicade 160 g com [Me0H/NH40H 9:1] a 1-3% em CHCI3, 50 min, a 40 ml/min produziu 211 mg (rendimento 37%) . 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,23 (1 H, s. 1.), 7,37 (1 H, d, J = 9,07 Hz) , 6,97 (1H, d, J = 9,07 Hz), 3, 92 (1H, d, J = 9,57
Hz), 3,59 (1H, d, J = 9,82 Hz), 3,29 (1H, dd, J = 14,98, 1,64 Hz), 2,63-2, 99 (5 H, m) , 2,04-2,19 (2 H, m) , 1,59-1,74 (1 H, m) , 1,39-1,58 (2 H, m) LCMS: RT= 0,64 min., MH-336,1, MH+ 338,0. EXEMPLO 256 (R)-N- (6- (4-Clorofenil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5, 3 '-bici-clo[2,2, 2loctanl-2-amina
Etapa A: 6- (Piridin-4-il)pirimidin-4-amina
Uma mistura de 6-cloropirimidin-4-amina (0,324 g, 2,5 mmol), ácido 4-clorofenilborónico (0,489 g, 3, 13 mmol), Na2CC>3 (0,795 g, 7,50 mmol) e cloreto de bis (trifenilfosfina)paládio (11) (0,035 g, 0,050 mmol) foi suspensa numa mistura de DME/EtOH/água (15:2:3 ml) . A mistura foi aquecida no sintetizador de micro-ondas a 125°C durante 20 min e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 2-15%) para produzir:6-(piridin-3-il)pirimidin-4-amina (0,3 g, 0,871 mmol, rendimento 5 8,4%) como um sólido esbranquiçado . LCMST.R. = 1,42; [M+2H]+ = 207,91.
Etapa B: 4- (4-Clorofenil)-6-isotiocianatopirimidina
A uma solução laranja brilhante de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona(0,666 g, 2,87 mmol) diclorometano/ N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente foi adicionada 6-(4-clorofenil)pirimidin-4-amina (0,59 g, 2,87 mmol). A mistura laranja foi aquecida a 60°C durante 18 horas. O LC/MS mostrou o pico do produto desejado como um maior pico. A mistura laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos 0 a 40%) para produzir 4-(4-clorofenil)-6-isotiocianatopirimidina (0,322 g, 1,300 mmol, rendimento 45%) como um sólido laranja. LCMS T.R. = 2,82; [M]+ = 248,03.
Etapa C: (R)-N-(6-(4-Clorofenil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz o1-5,3'-bicicloÍ2 2, 21octanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,298 g 1.300 mmol) em N,N-dimetilformamida (15 ml) foram adicionados Cs2C03 (1,059 g, 3,25 mmol) e 4-(4-clorofenil)-6-isotiocianatopirimidina (0,322 g 1.300 mmol) . A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-Diisopropilcarbodiimida (0, 608 ml, 3, 90 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( de metanol: hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo 5-25%) para produzir (R)-N-(6-(piridin-4-il)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,104 g, 0,276 mmol, rendimento 21%) como um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,54 (1 H, s. 1.), 8,83 (1 H, d), 7,89-8,04 (2 H, m), 7,41-7,54 (2 H, m) , 7,33 (1 Η, s. 1.), 4,02 (1 Η d), 3,71 (1 Η, d), 3,42 (1 Η, d), 2,73-3,15 (5 Η, m) , 2,10-2,31 (2 Η, m) , 1,46-1,89 (3 Η, m). LCMS T.R. = 1,92; [Μ]+ = 370,35. EXEMPLO 257 (R)-Ν- (6- (3-Clorofenil)pirimidin-4-il)-4Η-1'-azaespiro[oxaz ol-5, 3’-biciclo [2'2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-(3-Clorofenil)pirimidin-4-amina
Uma mistura de 6-cloropirimidin-4-amina (0,324 g, 2,5 mmol) ácido 3-clorofenilborónico (0,489 g, 3,13 mmol), Na2C03 (0,795 g, 7,50 mmol) e cloreto de bis (trifenilfosfina)paládio (11) (0,035 g, 0,050 mmol) foi suspensa numa mistura de DME/EtOH/água(15 : 2 : 3 ml) . A mistura foi aquecida no sintetizador de micro-ondas a 125°C durante 20 min e concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo em hexanos a 30-70%) para produzir: 6-(3-clorofenil)pirimidin-4-amina (0,47g, 2,286 mmol, rendimento 91%) como um sólido amarelo. LCMS T.R. = 1,45; [M+2HJ+ = 208,05.
Etapa B: 4-(3-Clorofenil)-6-isotiocianatopirimidina
A uma solução laranja vivo de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona(0,486 g, 2,091 mmol) em diclorometano/ N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente foi adicionada 6-(3-clorofenil)pirimidin-4-amina (0,43 g, 2,091 mmol) . A mistura laranja foi aquecida a 60°C durante 18 horas. LC/MS mostrou o pico do produto desejado como um maior pico. A mistura laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0 a 40%) para produzir 4-(3-clorofenil)-6-isotiocianatopirimi-dina (0,12 g, 0,484 mmol, rendimento 23%) como um sólido laranja. LCMS T.R. = 2,15; [M]+ = 248,31.
Etapa C: (R) -N-(6-(3-Clorofenil)pirimidin-4-il)-4H-1 '-azaespiro[oxaz ol-5, 3'-biciclo [2,2, 2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,111 g 0,484 mmol) em N,N-dimetilformamida (15 ml) foram adicionados Cs2C03 (0,395 g, 1,211 mmol) e 4-(3-clorofenil)-6-isotiocianatopirimidina (0,12 g, 0,484 mmol) . A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-diisopropilcarbodiimida (0,226 ml, 1,453 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi mantida em agitação àà temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica (, metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 5-25%, posteriormente, 2-10%) para produzir (R)-N-(6-(3-clorofenil)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxaz ol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,086 g, 0,221 mmol, rendimento 46%) como um sólido amarelo. RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,82 (1 H, d), 8,05 (1 Η, d), 7,93 (1 Η, ddd) , 7,43-7,52 (2 Η, m) , 7,35 (1 Η, s. 1.), 4,13 (1 Η, d), 3,93 (1 Η, d), 3,63-3,81 (2 Η, m) , 3,42-3,53 (1 Η, m) , 3,30-3,40 (3 Η, m) , 2,46 (1 Η, d), 2,26-2,40 (1 Η, m) , 1,88-2,16 (3 Η, m) . LCMS T.R. = 1,90; [Μ]+ = 370,28. EXEMPLO 258 (R)-Ν-(5-Metil-l,3, 4-oxadiazol-2-il)-4Η-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-metil-l, 3, 4-oxadiazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de 5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-amina (1,92g, 20 mmol) em DMF (10ml) foram adicionados NaOH (20M, 2ml), CS2 (3ml), NaOH (20M, 2ml) e iodometano (3ml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 1 hora e vertida em 20 ml de água. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água, e seco para obter o produto desejado, 5-metil-l,3,4-oxadiazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo como um sólido branco (l,45g, 35,7%) . ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 2,63 (s, 6H) , 2,50 (s, 3H) . LCMS T.R. 1,66 min; [M+H] = 203,91.
Etapa B: (R)-N-(5-Metil-l, 3, 4-oxadiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo [2r2, 2]octan]-2-amina
Uma mistura de 5-metil-1,3,4-oxadiazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (260 mg, 1,28 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (200 mg, 1,28 mmol) e carbonato de césio (876 mg, 2,69 mmol) em DMF (5ml) foi agitada durante a noite àà temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de silicaBiotage (acetato de etilo a 100%, posteriormente metanol: hidróxido de amónio 9:1—clorofórmio a 10-35%) para obter o produto desejado,
(R)-N-(5-metil-1,3,4-oxadiazol-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (192mg, 54,1%). ΤΗ RMN (50 0 MHz, MeOD) δ ppm 4,05 (d, 1H), 3,74 (d, 1H), 3,25 (d, 1H), 3,15 (d, 1H) , 2,94 (m, 2H) , 2,85 (m, 2H) , 2,43 (s, 3H) , 2,19(m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,6-1,8 (m, 3H). MS (LCMS) [M+H] =264,05. T . R. 0,16 min. EXEMPLO 259 (R)-N-(3-Metil-1,2, 4-tiadiazol-5-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-hlciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 3-metil-1 r2r 4-tiadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de 3-metil-l, 2, 4-tiadiazol-5-amina (2,3g, 20 mmol) em DMF (10ml) foram adicionados NaOH (20M, 2ml), CS2 (3ml), NaOH (20M, 2ml) e iodometano (3ml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 1 hora e vertida em 20 ml de água. O sólido precipitado foi filtrado e lavado com água, e seco para obter 3-metil-l,2,4-tiadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo impura , um sólido amarelo ( 2,3 g, 52,5%) . ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 2,67 (s) , 2,62 (s) . MS [M+H] = 219,85.
Etapa B: (R) -N-(3-Meti 1-1,2, 4-tiadiazol-5-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-bici-clo[2,2,21octanl-2-amina
Uma mistura de 3-metil-l,2,4-tiadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (281 mg, 1,28 mmol), dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (200 mg, 1,28 mmol) e carbonato de césio (876 mg, 2, 69 mmol) em DMF (5 ml) foi agitada durante a noite àà temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de silicaBiotage (acetato de etilo a 100%, posteriormente metanol : hidróxido de amónio9:1-clorofórmio a 10-35%) para obter o produto desejado, (R)-N-(3-metil-l,2,4-tiadiazol-5-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol -5,3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (147,8 mg, 40,5%) . ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD) δ ppm 4, 01-3, 99 (d, 1H) , 3,72-3,70 (d, 1H) , 3,27 (d, 1H) , 3,16 (d, 1H) , 3,01-2,9 (m, 2H) , 2,86-2,83 (m, 2H) , 2,43 (s 3H) , 2,21-2,0 (m, 2H) , l,81-l,75(m, 1H) , 1,75-1,70 (m, 2H) . MS (LCMS) [M+H] = 279,99; T.R. = 0,2 min. EXEMPLO 260 (R)-N- (3-Metii-l,2,4-oxadiazoi-5-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi -5,3'-biciclo [2 r2,21octanl-2-amina
Etapa A: 3-metil-l,2, 4-oxadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de 3-metil-l,2,4-oxadiazol-5-amina (490 mg, 4,94 mmol) em DMF (5ml) foram adicionados NaOH (20M, 0,5ml), CS2 (lml), NaOH (20M, 0,5ml) e iodometano (lml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura tornou-se muito espessa, e 20 ml de água foram adicionados. O sólido foi filtrado, lavado com água, e seco para obter 3-metil-l,2,4-oxadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo impura, um sólido amarelo ( 770 mg, 77%). MS (LCMS) [M+H] = 203,91; T.R. = 1,84 min. O produto foi usado diretamente na etapa seguinte.
Etapa B: (R) -N-(3-Meti 1-1,2, 4-oxadiazol-5-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo [2 f2, 2]octanl-2-amina
Uma mistura de 3-metil-l,2,4-oxadiazol-5-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (280 mg, 1,37 mmol), dicloridrato de (S) -3-(aminometil)qui-nuclidin-3-ol (215 mg, 1,37 mmol) e carbonato de césio (942 mg, 2,89 mmol) em DMF (5ml) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de sílica Biotage (100% de acetato de etilo, posteriormente 10-35% de 9:1 de metanol : hidróxido de amónio-clorofórmio) para obter o produto desejado, (R)-N-(3-meti1-1,2,4-oxadiazol-5-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (198 mg, 51,9%). ΤΗ RMN (50 0 MHz, MeOD) δ ppm 4,1-4,0 (d, 1H) , 3,8-3,7 (d, 1H) , 3,4-3,2 (d, 1H) , 3,2-3,1 (d, 1H) , 3,0-2,9 (m, 2H) , 2,9-2,8 (m, 2H) , 2,27 (s, 3H) , 2,2 (m, 1H) , 2,2-2,0 (m, 1H) , 1,9-1,6 (m, 3H) . MS (LCMS) [M+H] = 264,05; T.R. = 0,26 min. EXEMPLO 2 61 (R)-N-(6-(Metiltio)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 6-cloropirimidin-4-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de 6-cloropirimidin-4-amina (1,295 g, 10 mmol) em N,N-dimetilformamida (12 ml) foram adicionados gota a gota NaOH (1 ml, 2 0,00 mmol, 20 M), CS2 (1,5 ml, 24,88 mmol) , NaOH (1 ml, 20,00 mmol, 20 M) e iodometano (1,5 ml, 23, 99 mmol) em intervalos de 15 minutos. A agitação foi continuada durante 1,5 h e a mistura foi vertida em água. O sólido laranja foi separado, lavado com água, seco e recristalizado a partir de metanol para produzir
6-cloropirimidin-4-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (0,966 g, 4,13 mmol, rendimento 41,3%) como um sólido amarelo. LCMS T.R. = 2,39; [M+H]+ = 234,08.
Etapa B: (R) -N-(6-(Metiltio)pirimidin-4-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5 ,3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,9 g, 3,93 mmol) em N, N-dimetilformamida (20 ml) foram adicionados Cs2C03 (2,69 g, 8,25 mmol) e 6-cloropirimidin-4-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (0,964 g, 4,12 mmol). A suspensão foi agitada àà temperatura ambiente durante 18 horas, posteriormente aquecida a 100°C durante 3 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:l-acetato de etilo a 5-15%) para produzir (R)-N-(6-(metiltio)pirimidin-4-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,21 g, 0,72 mmol, rendimento 48,2%) como um sólido amarelo pálido. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,43 (1 H, s. 1.), 8,55 (1 H, d), 6,78 (1 Η, s. 1.), 3,98 (1 H, d), 3,64 (1 H, d), 3,37 (1 H, dd) , 2,72-3,06 (5 H, m) , 2,51 (3 Η, s), 2,08-2,24 (2 Η, m) , 1,69-1,81 (1 Η, m) , 1,41-1,64 (2 Η, m) . LCMS T.R. = 0,93; [Μ+Η]+ = 306,29. EXEMPLO 262 (R) -Ν- ([ 1,2,4]Triazol[4, 3-a]piridin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2 r2,2]octan]-2-amina
Etapa A: Di (IH-imidazol-l-il)metanimina
A uma solução de lH-imidazol (42g, 617mmol) em diclorome-tano (1L) foi adicionado brometo de cianogénio (22,5, 212 mmol) e a mistura foi aquecida até ao refluxo durante 30 minutos, deixada arrefecer até à temperatura ambiente e o sólido branco foi filtrado. O filtrado foi concentrado a 100 ml e armazenado no refrigerador durante 3 dias. O sólido precipitado foi filtrado para obter 8 g de di (lH-imidazol-l-il)metanimina (49,6mmol, 8%). RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,09 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,13 (s, 1H). Etapa B: [1, 2, 4]Triazolo [4r3-a] piridin-3-amina
A uma solução de 2-idrazinilpiridina (5,2g, 47, 6 mmol) em THF (70ml) foi adicionada di(lH-imidazol-l-il)metanimina (7,8g, 48,4mmol). A mistura foi aquecida até ao refluxo durante a noite. A mistura em bruto foi evaporada e purificada numa coluna de gel de silicaBiotage (, cloreto de metanol-metileno a 0-25%) recolhendo a mancha de cor roxa, [1, 2,
4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (4,7g, 35mmol, 73,5%). ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,05-8,0 (m, 1H) , 7,44-7, 40 (m, 1H) , 7,08-7,0 (m, 1H) , 6,74-6,70 (m, 1H) , 6,35 (s, 2H) . MS (LCMS) [M+H] = 134,98; T.R. = 0,1 min.
Etapa C: [1, 2, 4] triazol[4, 3-a]piridin-3-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de [1, 2, 4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (300 mg, 2,24mmol) em DMF (5ml) foram adicionados NaOH (20M, 0,25ml), CS2 (0,5ml), NaOH (20M, 0,25ml) e iodometano (0,5ml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada àà temperatura ambiente durante 1 hora e 10 ml de água foram adicionados à mistura de reação. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água (100ml) , e seco para obter 230 mg de [1, 2, 4]triazol [4,3-a]piridin-3-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (0,96mmol, 43,1%), um sólido branco. JH RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,17 (d, 1H) , 7,7 (d, 1H) , 7,24-7,22 (t, 1H) , 6, 84-6, 80 (t, 1H) , 2,71-2,68 (d, 6H) . MS (LCMS) [M+H] = 238, 94; T.R. = 1,26 min.
Etapa D: (R)-N-([ 1,2,4]Triazol[4,3-a]piridin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2,2,21octanl-2-amina
Uma mistura de [1, 2, 4]triazol[4,3-a]piridin-3-ilcarbonimidotioato de dimetilo (120 mg, 0,50 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (120 mg, 0,76 mmol) e carbonato de césio (492 mg, 1,5 mmol) em DMF (5ml) foi aquecida a 70°C durante 6 horas. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de sílica Biotage ( acetato de etilo a 100%, posteriormente metanol : hidróxido de amónio9:l -clorofórmio a 10-35%) para obter o produto desejado, (R)-N-([l,2,4]triazol[4,3-a]piridin-3-il)-4H-l'-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (97,2 mg, 61,5%). ΤΗ RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 8,2-8,1 (d, 1H) , 7,6-7,5 (d, 1H) , 7,2-7,1 (t, 1H) , 6,7-6,6 (t, 1H) , 4,1-4,0 (d, 1H) , 3,7-3,6 (d, 1H) , 3,5-3,4 (m, 1H) , 3,1-2,7 (m, 5H) , 2,4-2,2 (m, 2H) , 1,8-1,7 (m, 1H), 1,7-1,5 (m, 2H) . MS (LCMS) [M+H] = 299,3; T.R. = 1,22 min . EXEMPLO 263 (R)-N- (6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5, 3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A:
6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma suspensão de 6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-amina (700 mg, 3,03 mmol) em DMF (3 ml) foram adicionados 16,0 M de hidróxido de sódio (400 | j L, 6,40 mmol). A mistura foi deixada agitar 10 minutos àà temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (450 ml, 7,57 mmol) e a mistura castanho avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de 16,0 M de hidróxido de sódio (400 jL, 6,40 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (450 jL, 7,27 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 5 minutos, em cujo tempo um precipitado amarelo volumoso formou-se. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir 6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-ilcarbonimidoditioato de
dimetilo (680 mg, rendimento 67%) como um sólido amarelo de suficiente pureza para uso sem purificação adicional. RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,63 (s, 1 H) 2,68 (s, 6 H) .
Etapa B: (R)-N- (6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (300 mg, 0,895 mmol), dicloridrato de (S)-3-(amino-metil)quinuclidin-3-ol (210 mg, 0,895 mmol) e carbonato de césio (600 mg, 1,79 mmol) em acetonitrilo (25 ml) foi aquecida num banho de óleo a 100°C durante 2 horas num frasco aberto, com borbulhamento de azoto através da solução o tempo inteiro para ajudar na remoção de metanotiol. Após 2 horas, TLC mostrou a reação como estando completa, deste modo a mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com água e concentrada in vacuo. A mistura foi extraída com clorofórmio (4x) . Os orgânicos combinados foram lavadoss com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados, concentrados in vacuo, e o resíduo em bruto foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (metanol: hidróxido de amónio 9:1-clorofórmio a 2-40%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N-(6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaespi-ro[ oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (200 mg, rendimento 57%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,39 (s. 1., 1 H) 8,48 (s, 1 H) 4,05 (d, J = 9,79 Hz, 1 H) 3,72 (d, J = 9,79 Hz, 1 H) 3,42 (dd, J = 15, 0 6, 1,76 Hz, 1H) 2,73-3,08 (m, 5H) 2,10-2,22 (m, 2 H) 1,73-1, 84 (m, J= 14, 09, 9, 94, 4, 17, 4, 17 Hz, 1H) 1,52-1,65 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,29; [M+H]+ = 394,99. EXEMPLO 264 (R)-N- (6- (metiltio)tiazolo[5, 4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaesp irofoxazol-5,3 ’ -biciclo [2 r2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 6-bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo da Etapa A do Exemplo 263 (100 mg, 0,298 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (68 mg, 0,2 98 mmol) e carbonato de césio (100 mg, 0,6 0 mmol) em DMF (1,5 ml) foi colocada num frasco de 1,77.10~3 Kg (1 dracma) e aquecida num banho de óleo a 100°C durante 1 hora, em cujo tempo tiometóxido de sódio (100 mg, 1,43 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida durante a noite. A mistura foi arrefecida até àtemperatura ambiente e vertida em água (20 ml) e os sólidos resultantes foram recolhidos através de filtração e posteriormente purificados por cromatografia de gel de sílica (metanol: hidróxido de amónio 9:1 -clorofórmio a 2-40%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N- (6- (metiltio)tiazolo[5,4-b]pirazin-2-il) -4H-1' -azaes-piro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (52 mg, rendimento 46%) . 3Η RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 9,39 (s. 1., 1 H) 8,31 (s, 1 H) 4,03 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,70 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,41 (dd, J= 14, 95, 1,83 Hz, 1H) 2,73-3,10 (m, 5 H) 2,63 (s, 3 H) 2,10-2,25 (m, 2 H) 1,47-1, 86 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,04; [M+H]+ = 363,04. EXEMPLO 265 (R)-N-(5-Metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespir o[oxazol-5,3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-Metoxit iazolo [5,4-d] pirimidin-2-amina
5-Clorotiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (250 mg, 0, 966 mmol) foi suspensa em MeOH (10 ml) e de solução de metóxido de sódio em metanol a 25% (peso/peso) foi adicionada (10 ml, 46,3 mmol) . A solução resultante foi submetida a refluxo durante a noite, arrefecida até à até à temperatura ambiente, vertida num volume igual de água e extraída com clorofórmio (4x) . Uma quantidade significante de composto estava ainda presente na fase aquosa, desse modo este foi concentrado para o resíduo, e posteriormente dissolvido numa pequena quantidade de HC1 a IN (não suficiente para tornar a solução resultante ácida) e extraído novamente com EtOAc (5x) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. 5-Metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina (144 mg, 0,790 mmol, rendimento 82%) foi deste modo obtido como um sólido branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,43 (s, 1 H) 7,81 (s, 2 H) 3,90 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,73; [M+H]+ = 183,03.
Etapa B: 5-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma suspensão de 5-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina (911 mg, 5,00 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 20,0M (500 μΐ, 10,00 mmol). A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (750 μΐ, 12,50 mmol) e a mistura marrom avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos . Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 20,0M (500 μΐ, 10,00 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (750 μΐ, 12,00mmol) foi adicio-nado gota a gota. A mistura foi agitada durante 5 minutos, em cujo tempo se formou um precipitado amarelo volumoso. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir um sólido amarelo que foi também purificado através de cromatografia de gel de silica (EtOAc/CHCl3 a 2-20%) para proporcionar 5-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditioato de dime-tilo (380 mg, rendimento 27%). ΤΗ RMN (400 MHz, CDCfe) δ ppm 8,90 (s, 1 H) 4,09 (s, 3 H) 2,66 (s, 6 H) .
Etapa C: (R) -N-(5-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ii)-4H-1 ' -azaespir o[oxazoi-5,3'-bicicio[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 5-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo (100 mg, 0,349 mmol), dicloridrato de (S) -3-(amino-metil)quinuclidin-3-ol (80mg, 0,349 mmol) e carbonato de césio (228mg, 0,698 mmol) em DMF (1,7 ml) foi aquecida atél00°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir (R)-N-(5-metoxi-tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespi ro [oxazol-5,3'-bicicio[2,2,2]octan]-2-amina (78 mg, rendimento 64%) . ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,12 (s. 1., 1 H) 8,63 (s, 1 H) 3,95-4,18 (m, 4 H) 3,71 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) 3,41 (d, J = 15,26 Hz, 1 H) 2,74-3,10 (m, 5 H) 2,11-2,27 (m, 2 H) 1,71-1,86 (m, 1 H) 1,50-1,70 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 1, 66; [M+H]+ = 347,0 . EXEMPLO 266 (R)-N-(5-Etil-l,3,4-oxadiazoi-2-ii)-4H-1'-azaespiro[oxazoi- 5,3'-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-etil-l, 3, 4-oxadiazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de 5-etil-l, 3, 4-oxadiazol-2-amina (2,26g, 20 mmol) em DMF (10ml) fooram adicionados NaOH (20M, 2ml), CS2 (3ml), NaOH (20M, 2ml) e iodometano (3ml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas e vertida em 30 ml de água. O sólido amarelo precipitado foi filtrado, lavado com água, e seco para obter o produto desejado, 5-etil-l,3,4-oxadiazol-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo, um sólido branco (2,6 g, 59,8%) . ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 2,86-2,83 (g, 2H), 2,63 (s, 6H), 1,3901,35 (t, 3H). MS (LCMS) [M+H] = 217,95; T.R. = 1,93 min.
Etapa B: (R)-N- (5-Etil-l,3,4-oxadiazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 5-etil-l,3,4-oxadiazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (327 mg, 1,5 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (235 mg, 1,5 mmol) e carbonato de césio (1000 mg, 3,16 mmol) em DMF (10ml) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de silicaBiotage (acetato de etilo a 100%, posteriormente metanol: hidróxido de amónio 9:1—clorofórmio a 10-35%) para obter o produto desejado, (R) -N-(5-etil-l, 3,4-oxadiazol-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (290mg, 66%). ΤΗ RMN (500 MHz, MeOD) δ ppm 4,05 (d, 1H), 3,74 (d, 1H), 3,3-3,2 (d, 1H), 3,2-3,1 (d, 1H) , 3,0-2,9 (m, 2H) , 2,9-2,8 (m, 5H) , 2,2 (s, 1H) , 2,15-2,0 (m, 1H) , 1,9-1,6 (m, 3H) , 1,4-1,3 (t, 3H) . (m, 2H) . MS (LCMS) [M+H] = 278,09; T.R. = 0,48 min. EXEMPLO 267 (R) -N- (3, 5-Dicloropiridin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3' -biciclo [2,2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: 3, 5-Dicloro-2-isotiocianatopiridina
A 3,5-dicloropiridin-2-amina (0,36 g, 2,209 mmol) em diclorome-tano (25 ml) foi adicionada 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,523 g, 2,253 mmol). A reação foi agitada a 40°C durante 3 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biota-ge: de acetato de etilo/hexano a 25-100%) para produzir 3,5-dicloro-2-isotiocianatopiridina (0,4 g, 1,951 mmol, rendimento 88%) . ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,50 (t, J = 2,59 Hz, 1H), 8,45 (t, J = 2,59 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,07; [M+H]+ = 204,8 .
Etapa B: (R) -N- (3,5-Dicloropiridin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5,3' -bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina
A 3,5-dicloro-2-isotiocianatopiridina (0,11 g, 0,55 mmol) em N, N-dimetilformamida (10 ml) foram adicionados Et3N (0,17 ml, 1,21 mmol) e dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,13 g, 0,56 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida para temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%) . O produto foi posteriormente tratado com N,N-dimetilformamida (10 ml) e N, N'-diisopropilcarbodiimida (0,26 ml, 1,65 mmol). A reação foi aquecida até70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo para produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatograf ia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%) para produzir (R)-N-(3, 5-dicloropiridin-2-iI)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-bicicIo[ 2,2,2]octan]-2-amina (0,08 g, 0,24 mmol, rendimento 44%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,91 (s, 1 H) , 8,11-8,17 (m, 1 H) , 7,97 (d, J = 2,44 Hz, 1 H) , 3,84 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 3,59 (d, J = 9,11 Hz, 1 H) , 2, 95-3, 04 (m, 2 H) , 2,72-2,81 (m, 2 H) , 2,66 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 2,01 (s, 1H), 1,8 9 (s, 1 H) , 1,54-1,62 (m, 2 H) , 1,42-1,50 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,78; [M+]+ = 326, 1 . EXEMPLO 268 (R)-N-(5-domtiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxa zol-5, 3 ' biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa
A: 5-clorotiazolo[5, 4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma suspensão de 5-clorotiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (930 mg, 5,00 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 20,0M (500 μΐ, 10, 00 mmol) . A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (750 μΐ, 12,50 mmol) e a mistura foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 20,0M (500 μΐ, 10,0 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (750 μΐ, 12,00 mmol) foi adicionado gota a gota. Uma exoterma foi observada durante esta adição. A mistura foi agitada durante 15 minutos, em cujo tempo se formou um precipitado volumoso. A mistura foi vertida em água e os sólidos foramrecolhidos através de filtração. A maior parte dos sólidos recolhidos foi amarelo pálido e cristalino. Alguns pedaços pequenos de um sólido laranja gomoso ligeiramente mais escuro estavam também presentes, e estes foram manualmente removidos e descartados. O restante foi o composto do titulo, 5-clorotiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (l,00g, rendimento 69%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,04 (d, J = 8,53 Hz, 1H) 7,38 (d, J = 8,53 Hz, 1H) 2,66 (s, 6 H) .
Etapa B: (R)-N- (5-clorotiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1 '-azaespiro[o xazol-5,3 ' biciclo[2,2, 2]octan]-2-amina
Uma mistura de 5-clorotiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (100 mg, 0,35 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminome-til)quinuclidin-3-ol (79mg, 0,35mmol) e carbonato de césio (225mg, 0,69 mmol) em DMF (1,7 ml) foi aquecida até 100°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida para temperatura ambiente, vertida em água e os sólidos recolhidos por filtração. Os sólidos brutos foram purificados por cromato-grafia de sílica-sgel (2-40% de 9:1 de metanol : hidróxido de amónio-clorofórmio) para produzir (R)-N-(5-clorotiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5,3'biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (62 mg, rendimento 51%). ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,13 (s. 1., 1 H) 7,93 (d, J = 8,53 Hz, 1 H) 7,45 (d, J = 8,28 Hz, 1 H) 3,92 (d, J = 10,29 Hz, 1 H) 3,67 (d, J = 10,29 Hz, 1 H) 3,00-3,14 (m, 2 H) 2,77-2, 93 (m, 2 H) 2,69 (t, J = 7,65 Hz, 2 H) 2,12 (s. 1., 1 H) 1,95 (s. 1., 1 H) 1,43-1,72 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,10; [M+H]+ = 350,10. EXEMPLO 269 (R) -N5, N5-dimetH-*- (4H-1 ’ -azaespiro [oxazol-5; 3 ’ -biciclo [2,2 ;2]octano]-2-il)tiazolo[5,4-d]pirimidina-2, 5-diamina
Etapa A: 5-clorotiazolo [5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo
Isotiocianato de etoxicarbonilo (4,32 ml, 36,6mmol) e 2,4-dicloro-pirimidin-5-ilamina (3,00 g, 18,29 mmol) foram misturadas puras e sonicadas durante 5 minutos para ajudar dissolver. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos, em cujo tempo a mistura inteira solidificou-se. Metanol (100 ml) foi adicionado e a mistura foi submetida a refluxo durante 30 minutos, arrefecida até à temperatura ambiente e os sólidos foram recolhidos por filtração para produzir 5-clorotiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcar-bamato de etilo (3, 8g, rendimento 80%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 12,64 (s, 1 H) 9,05 (s, 1 H) 4,31 (q, J = 7,19 Hz, 2 H) 1,32 (t, J = 7,15 Hz, 3 H) .
Etapa B: 5- (dime ti lamino)tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo
5-clorotiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (300 mg, 1,16 mmol) foi suspenso numa solução de dimetilamina a 2,0 M em metanol (5,0 ml, 10,00 mmol) num vaso de pressão, que foi selado e aquecido durante a noite num banho de óleo a 75°C. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, o solvente foi evaporado e o resíduo foi dividido entre bicarbonato aquoso e clorofórmio e extraído 3 vezes. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir 5-(dimetilamino)tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (236 mg, rendimento 99%) . 2Η RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,97 (s, 1 H) 8,67 (s, 1 H) 4,26 (q, J = 7,03 Hz, 2 H) 3,17 (s, 6 H) 1,16-1,40 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,88; [M+H]+ = 2 68,09. Etapa C: N5, N5-dimetiltiazolo[5,4-d]pirimidina-2,5-diamina de etilo
5-(Dimetilamino)tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (236 mg, 0,88 mmol) foi suspenso numa solução de metóxido de sódio a 25% (peso/peso) em metanol (5 ml, 23, 0 mmol) e a mistura foi aquecida até ao refluxo durante a noite. A mistura de reação foi evaporada até a secura e o resíduo foi dividido entre água e clorofórmio e extraído 3 vezes. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir N5, N5-dime-tiltiazolo[5,4-d]pirimidina-2,5-diamina de etilo (170 mg, rendimento 99%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,27 (s, 1 H) 7,44 (s, 2 H) 3,10 (s, 6 H) .
Etapa D: 5-(dimetilamino)tiazolo [5f4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditi oato de dimetilo
A uma suspensão de N5, N5-dimetiltiazolo[5,4-d]pirimidina-2,5-diamina de etilo (160 mg, 0,819 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 20,0 M (100 μΐ, 2,00 mmol) . A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (120 μΐ, 2 mmol) e a mistura castanho avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 20,0 M (100 μΐ, 2,0 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (120 μΐ, 1,9 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 5 minutos, em cujo tempo se formou um precipitado amarelo volumoso. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir 5-(dimetilamino)tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditi oato de dimetilo (194 mg, rendimento 79%). 2H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,75 (s, 1 H) 3,26 (s, 6 H) 2,64 (s, 6 H) .
Etapa E: (R) -N5, N5-dimetil-N2- (4H-1 ' -azaespiro [oxazol-5, 3 ' -biciclo [2, 2, 2 ] octano ] -2-~· 1 ' +- => ^ r q λ-w 7 m1 mi ai 5-diamina
Uma mistura de 5-(dimetilamino)tiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbo-nimidodit ioato de dimetilo (90 mg, 0,301 mmol), dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (83mg, 0,361 mmol) e carbonato de césio (196 mg, 0,60 mmol) em DMF (1,0 ml) foi aquecida atél00°C durante 1,5 horas. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água e extraída com clorofórmio (4x). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados , concentrados in vacuo , e o resíduo bruto foi purificado através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:1-clorofórmio a 2-40%) para produzir (R) -N5, N5-dimetil-N2- (4H-1 '-azaespiro [oxazol-5,3 '-biciclo [2, 2,2]octano]-2-il)tiazo-lo[5,4-d]pirimidina-2,5-diamina (81 mg, rendimento 71%) como um sólido castanho. 2H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,07 (s. 1., 1 H) 8,50 (s, 1 H) 4,01 (d, J = 9,54
Hz, 1 H) 3,67 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,39 (dd, J = 14,93, 1,63
Hz, 1 H) 3,23 (s, 6 H) 2,71-3,10 (m, 5 H) 2,10-2,24 (m, 2 H) 1, 68-1, 84 (m, 1 H) 1,46-1, 68 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,87; [M+H]+ = 360,23. EXEMPLO 270 (R)-N-([ 1,2,4]Triazol[ 1,5-a ] pirazin-2-il) -4H-1' -azaespiro [ oxazol-5, 3'-blciclo/"2,2 ,2]octan]-2-amina
Etapa A: [1, 2, 4] Triazolo[1,
5-a]pirazin-2-amina A uma solução de pirazin-2-amina (25 g, 260 mmol) em dioxa-no (300 ml) à temperatura ambiente foi adicionado etoxicarbonil-isotiocianato (37, 9g, 289 mmol) lentamente. A mistura foi agitada durante 18 horas e o solvente foi evaporado sob vácuo. O sólido residual foi dissolvido numa mistura de metanol (150 ml) e etanol (150 ml) . A esta solução foram adicionados TEA (109 ml, 780 mmol) e cloridrato de hidroxilamina (72,5g, 1040 mmol) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas e foi aquecida até o refluxo durante 4 horas. A mistura em bruto foi arrefecida até à temperatura ambiente e o solvente foi evaporado. O sólido residual foi purificado através de cromatografia de coluna (metanol/CH2CÍ2 a 0-20%) para obter um sólido branco (60g) . O sólido foi colocado em EtOAc e água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc duas vezes. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de sódio para obter [1, 2, 4 ] triazolo[1,5-a]pirazin-2-amina como um sólido branco (12g, 88mmol, 33%) . MS (LCMS) [M+H] = 135, 96; T.R. = 0,21 min. Etapa B: [1, 2, 4]triazol [ 1,5-a]pirazin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução de [1,2, 4]triazolo[1,5-a]pirazin-2-amina (676 mg, 5 mmol) em DMF (10 ml) foram adicionados NaOH (20 M, 0,5 ml), CS2 (1 ml), NaOH (20 M, 0,5 ml) e iodometano (1 ml) lentamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e 10 ml de água foram adicionados à mistura de reação, que se tornou turva. A mistura foi extraída com EtOAc (lOOml x 3) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas, e evaporadas. O resíduo foi purificado numa coluna de gel de sílica Biotage (acetato de etilo-hexano a 10-30%) para obter [1, 2, 4]triazol[1,5-a]pirazin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo como um sólido amarelo (720mg, 3mmol-60%). ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,2 (2, 1H) , 8,5 (d, 1H) , 8,2 (d, 1H) , 2,67 (s, 6H) . MS (LCMS) [M+H] = 2 3 9, 92. [M+Na] = 261, 89; T.R. =1,55 min. Etapa C: (R)-N-([ 1,2, 4]Triazol[ 1.5- a]pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2 ,2]octan]-2-amina
Uma mistura de [1, 2, 4]triazol[1,5-a]pirazin-2-ilcarbonimidodi-tioato de dimetilo (120 mg, 0,50 mmol), dicloridrato de (S)-3-(amino-metil)quinuclidin-3-ol (120 mg, 0,76 mmol) e carbonato de césio (492 mg, 1,5 mmol) em DMF (5 ml) foi aquecida a 70°C durante 6 horas. A mistura foi concentrada e purificada numa coluna de gel de sílica Biotage (acetato de etilo a 100%, posteriormente metanol : hidróxido de amónio 9:1-clorofórmio a 10-35%) para obter o produto desejado, (R)-N-([l,2,4]triazol[l,5-a]pirazin-2-il)-4H-l'-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (85mg, 26,7%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (50 0 MHz, MeOD) δ ppm 9,0 (m, 1H), 8,718,70 (m, 1H) , 8,15-8,10 (m, 1H) , 4,15-4,0 (d, 1H) , 3,85-3,8 (d, 1H) , 3.6- 3,5 (d, 1H) , 3,4-3,3 (d, 1H) , 3,3-3,0 (m, 4H) , 2,4-2,2 (m, 2H) , 2,0-1, 8 (m, 3H) . MS (LCMS) [M+H] = 300,06; T.R. = 0,2 min. EXEMPLO 2 71 (R)-N-(Tiazolo[5, 4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3 '-biciclo[2,2,2]oc-tan]-2-amina
Etapa A: Tiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma suspensão de tiazolo[5,4-b]piridin-2-amina (30 0 mg, 1,98 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 20,0M (200 μΐ, 4,0 mmol) . A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (300 μΐ, 4, 96 mmol) e a mistura castanho avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 20,0M (200 μΐ, 4,0 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (300 μΐ, 4,76 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 5 minutos, em cujo tempo um precipitado amarelo volumoso formou-se. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir tiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (190 mg, rendimento 38%) como um sólido amarelo de suficiente pureza para utilização sem purificação adicional. ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 8,47 (d, J = 4,58 Hz, 1 H) 8,11 (dd, J = 8,24, 1,53 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J = 8,24, 4, 88 Hz 1 H) 2,66 (s, 6 H) . Etapa B: (R)-N- (Tiazolo[5,4-b]piridin-2-il) -4H-1 '-azaespiro[oxazol-5 , 3'-bici-clo[2,2, 2] octan]-2-amina
Uma mistura de tiazolo[5,4-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (90 mg, 0,35 mmol), dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (97mg, 0,42 mmol) e carbonato de césio (230 mg, 0,71 mmol) em DMF (1 ml) foi aquecida atél00°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água e extraída com clorofórmio (4x). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:1—clorofórmio a 2-40%) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N-(tiazolo[5,4-b]piridin-2-il)-4H-1'-azaespi-ro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (84mg, rendimento 76%). ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,30 (s. 1., 1H) 8,37 (dd, J = 4,77, 1,51 Hz, 1 H) 7,82 (dd, J = 8,03, 1,51 Hz, 1 H) 7,28 (dd, J = 8, 03, 4,77 Hz, 1 H) 4,05 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,70 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,42 (dd, J = 15, 06, 1,76 Hz, 1 H) 2,75-3, 07 (m, 5 H) 2,14-2,26 (m, 2 H) 1,71-1,84 (m, J = 13, 99, 9,79, 4,17, 4, 17 Hz, 1 H) 1,48-1,68 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,64; [M+H]+ =316,15. EXEMPLO 2 72 (R)-N-(Tiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaespirofoxazol-5 ,3’-biciclo [2,2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Bromotiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaesp iro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (44 mg, 0,111 mmol) foi suspensa em Me-OH (50 ml) e HC1 a 3N foi adicionado até que todos os sólidos se dissolveram-(~10ml). O balão de reação foi enxaguado com azoto e posteriormente de paládio a 10% sobre carbono (35 mg) foram adicionados, e o balão foi equipado com um balão de hidrogénio. A mistura foi deixada reagir durante a noite, em cujo tempo TLC mostrou o consumo do material de partida. O balão foi enxaguado com azoto, filtrado através de Celite e lavado com metanol. Os filtrados combinados foram concentrados a -90% para remover a maior parte do metanol, e a solução foi tornada básica através da adição de um solução de bicarbonato de sódio saturada. A fase aquosa básica foi extraída com clorofórmio (4x). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura foi purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio 9:1]-clorofórmio a 2-40%). As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N-(tiazolo[5,4-b]pirazin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (24 mg, 0,075 mmol, rendimento 67,5%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,50 (s. 1., 1H) 8,41 (d, J = 2,76 Hz, 1H) 8,27 (d, J = 2,76 Hz, 1H) 4,06 (d, J = 9,79 Hz, 1 H) 3,72 (d, J = 9,79 Hz, 1 H) 3,43 (dd, J = 15, 06, 1,76 Hz, 1 H) 2,74-3, 09 (m, 5 H) 2,12-2,25 (m, 2 H) 1,71-1,86 (m, 1 H) 1,49-1, 67 (m, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,75; [M+H]+ = 317,13. EXEMPLO 273 (R)-N-(7-Metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5, 3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa
A: 7-cloro-5-metiltiazolo [5f4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo
A uma mistura de 4,6-dicloro-2-metilpirimidin-5-amina (1 g, 5, 62 mmol) e carbonisotiocianatidato de O-etiloilo (0,66 ml, 5,62 mmol) foi adicionado tolueno (2 ml) para humedecer os sólidos completamente. A mistura foi colocada em banho de óleo a 100°C durante 1,5 horas, em cujo tempo, a mistura foi utilizada para proporcionar uma massa sólida. Os sólidos foram arrefecidos até à temperatura ambiente e triturados com éter, posteriormente os sólidos resultantes foram recolhidos por filtração para proporcionar 7-cloro-5-metiltia-zolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (1,08 g, 3,96 mmol, rendimento 70,5%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,70 (s. 1., 1 H) 4,30 (q, J = 7,19 Hz, 2 H) 2,69 (s, 3 H) 1,30 (t, J = 7,15 Hz, 3 H) .
Etapa B: 7-Metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina
7-cloro-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbamato de etilo (300 mg, 1,100 mmol) foi suspenso numa solução a 25% peso/peso de metóxi-do de sódio em metanol (5 ml, 23,14 mmol) e a mistura foi submetida a refluxo durante a noite. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com água e extraída com clorofórmio (4x) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo para produzir 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina (12 Omg, 0,612 mmol, rendimento 55,6%) . ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,71 (s, 2 H) 3,98 (s, 3 H) 2,52 (s, 3 H) .
Etapa C: 7-metóxi-5-metiltiazo lo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditi oato de dimetilo
A uma suspensão de 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina (100 mg, 0,51 mmol) em DMF (0,5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 16,0M (75 μΐ, 1,2 mmol). A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (80 μΐ, 1,27 mmol) e a mistura castanho avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 16, 0M (75 μΐ, 1,2 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (80 μΐ, 1,29 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 5 minutos, em cujo tempo se formou um precipitado amarelo volumoso. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir um sólido amarelo brutou que foi também purificado através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-clorofórmio a 2-20%). As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimi-dodit ioato de dimetilo (90 mg, rendimento 59%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, CDCls) δ ppm 4,17 (s, 3 H) 2,71 (s, 3 H) 2,64 (s, 6 H) .
Etapa D: (R)-N- (7-Metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1 '-azaespi-m[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbo-nimidodit ioato de dimetilo (56 mg, 0,19 mmol), dicloridrato de (S)-3-(ami-nometil)quinuclidin-3-ol (51mg, 0,22 mmol) e carbonato de césio (175 mg, 0,54 mmol) em DMF (0,5 ml) foi aquecida atél00°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água e extraída com clorofórmio (4x) . Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (2-40% [9:1 de metanol : hidróxido de amónioj-clorofórmio) . As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N-(7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]oc-tan]-2-amina (34 mg, rendimento 50%) . ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,10 (s. 1., 1 H) 4,14 (s, 3 H) 4,03 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,68 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,39 (dd, J = 14, 93, 1, 63 Hz, 1H) 2,74-3, 07 (m, 5H) 2,68 (s, 3 H) 2,04-2,28 (m, 2 H) 1,70-1, 86 (m, 1 H) 1,44-1,67 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,10; [M+H]+ = 361,32. EXEMPLO 274 (R)-N- (7-Metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespir o[oxazol-5, 3 ' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa
A: 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditi oato de dimetilo
A uma suspensão de 7-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-amina (300 mg, 1,67 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio a 16, 0M (210 μΐ, 3,4 mmol). A mistura foi deixada agitar 10 minutos à temperatura ambiente em cujo tempo dissulfeto de carbono foi adicionado (250 μΐ, 4, 15 mmol) e a mistura castanho avermelhada resultante foi agitada durante 10 minutos. Uma porção adicional de hidróxido de sódio a 16, 0M (210 μΐ, 3,4 mmol) foi adicionada e a mistura foi novamente agitada durante 10 minutos. Finalmente, iodometano (250 μΐ, 4,00 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada durante 10 minutos, em cujo tempo um precipitado amarelo volumoso formou-se. A mistura foi vertida em água e os sólidos foram recolhidos através de filtração para produzir 7-metóxi-5-metiltiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimidoditi oato de dimetilo (324 mg, rendimento 69%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,60 (s, 1 H) 4,20 (s, 3 H) 2,65 (s, 6 H) .
Etapa B: (R) -N- (7-Metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1 ' -azaespir o[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Uma mistura de 7-metoxitiazolo[5,4-d]pirimidin-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo (150 mg, 0,52 mmol) , dicloridrato de (S) -3-(amino-metil)quinuclidin-3-ol (132mg, 0,58 mmol) e carbonato de césio (427 mg, 1,31 mmol) em DMF (3ml) foi aquecida até 100°C durante 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água e extraída com clorofórmio (4x). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados in vacuo. A mistura foi purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio 9:1]-clorofórmio a 2-40%). As frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir (R)-N-(7-metoxitia-zolo[5,4-d]pirimidin-2-il)-4H-1'-azaespi ro [oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (95 mg, rendimento 51%). RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,12 (s. 1., 1 H) 8,52 (s, 1 H) 4,16 (s, 3 H) 4,05 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,70 (d, J = 9,54 Hz, 1 H) 3,40 (dd, J= 14, 93, 1, 88 Hz, 1 H) 2,70-3,07 (m, 5 H) 2,08-2,27 (m, 2 H) 1, 68-1,85 (m, 1 H) 1,48-1, 66 (m, 2 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,90; [M+H]+ = 347,34. EXEMPLO 275 (R)-2-(4H-1'-Azaespiro[oxazol-5r3’ -biciclo[2, 2, 2]octan]-2-i lamino)tiazol-5-carbonitrilo
(R)-2-(4H-1'-Azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan ]-2-ilamino)tiazol-5-carbonitrilo foi sintetizada através do método do Exemplo 274, partindo de 2-amino-5-cianotiazol. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,05 (s, 1 5 H) , 8,13 (s, 1 H) , 3,86 (d, J = 10,38 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 10,38 Hz, 1H), 3,01 -3,10 (m, 2 H) , 2,83 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 2,62-2,71 (m, 2 H) , 2,0 9 (s, 1 H) , 1, 90-1, 97 (m, 2 H) , 1,54-1, 62 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,52; [M+H]+ = 290,0. EXEMPLO 276 10 (R)-N-(7-Bromopirrolo[ 1,2-f] [1,2, 4] triazin-4-il) -4H-1' -azaespiro [oxazol-5, 3 ’ -bid cio [2r2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(7-bromopirrolo[1,2-f][l,2,4]triazin-4-il)-4H-1' -azaespi-ro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do E-xemplo 274 partindo de 7-bromopirrolo[1,2 — f] [1,2,4]triazin-4-amina. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,13 (1 H, s) , 7,04 (1 H, d, J = 4,53 Hz), 6,77 (1 H, d, J = 4,53 Hz), 4,09 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,79 (1H, d, J = 10,58 Hz), 3,24 (1 H, d) , 3,12 (1 H, d) , 2,70-3, 00 (4 H, m) , 2,06-2,25 (2 H, m) , 1,52-1, 86 (3 H, m) MS (LC/MS) T.R. = I, 62; [M+H]+ = 377,2. EXEMPLO 277 (R)-N-(1, 6-Naftiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo [2, 2, 2 ] oct a nl -?-a™-i n a
(R)-N-(1,6-Naftiridin-2-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3 '-bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do Exemplo 274 partindo de 1,6-naftiridin-2-amina. ΤΗ RMN (4 00 MHz, MeOD) δ ppm 8,99 (1H, s), 8,48 (1H, d, J = 6, 04 Hz), 8,20 (1 H, d, J = 8,56 Hz), 7,77 (1 H, d, J = 6,04 5 Hz), 7,12 (1H, d, J = 8,81 Hz), 4,12 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,82 (1H, d, J = 10,32 Hz), 3,36 (1H, d), 3,21 (1H, d), 2,79-3,09 (4 H, m), 2,08-2,30 (2 H, m), 1,56-1,95 (3 H, m). (LC/MS) T.R. = 0,38; [M+H]+ = 310,3. EXEMPLO 278 (R)-N- (Quinazolin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’-biciclo [2, 2, 2]octan]-2-10 amina
(R)-N-(Quinazolin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bi ci-clo[2,2,2]octan]-2-amina foi sintetizada através do método do exemplo 274 partindo de 2-aminoquinazolina. ΤΗ RMN (400 MHz,
MeOD) δ ppm 9,2 7 (1 H, s) , 15 7,72-7,99 (3 H, m), 7,47 (1 Η, dd, J = 7,55, 3,78 Hz), 4,07 (1 H, d, J = 10,07 Hz), 3,76 (1 H, d, J" = 10,07 Hz), 3,26 (1H, s. 1.), 3,13 (1H, d) , 2,70-3,03 (4 H, m), 2,17 (2 H, s. 1.), 1,50-1,88 (3 H, m). (LC/MS) T.R. = 1,11; [M+H]+ = 310,3. EXEMPLO 279 20 (R)-N-(6,8-Diclomisoquinolin-3-il)-4H-V~azaespim[oxazol-5,3 ' -bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(2,4-Diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida
(2,4-Diclorofenil)metanamina (2 g, 11,4 mmol) foi adicionada a uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (2,04 g, 12, 6 mmol) em metanol (10 ml) . A mistura foi aquecida a 70°C durante 1 hora. A mistura foi purificada através de cromatografia (Biotage: de acetato de etilo a 100%). As frações desejadas foram concentradas para produzir N-(2,4-diclorobenzil)-2,2-dieto-xiacetimidamida (2,8 g, 9,2 mmol, rendimento 72,7%) como um óleo viscoso incolor. TH RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 7,27-7,70 (m, 3 H) , 4,77 (s, 1 H) , 4,14-4,35 (m, 2 H) , 3,45-3, 68 (m, 4 H) , 1, 09-1,29 (m, 6 H) . LC/MS RT=2,03; [M+H]+ = 304,9.
Etapa B: 6,8-Dicloroisoquinolin-3-amina
Ao ácido sulfúrico (4 ml, 75 mmol) foi adicionada N—(2,4-diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida (2 g, 6,6 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi aquecida até 40°C durante 18 horas. TLC e LC/MS indicaram a presença de produto. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e extinta com NaOH aquoso (~15 M) até a mistura de reação ser ~pH 7. O produto bruto foi extraído com acetato de etilo(2 x 50 ml) e os orgânicos foram secos com MgS04, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir o produto. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Bio-tage: de acetato de et/ hexanos a 10-80%) para produzir 5, 7-dicloroiso-quinolin-l-amina (0,32 g, 1,50 mmol, rendimento 22,9%) como um pó amarelo escuro. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,99 (s, 1 H) , 7, 64-7,73 (m, 1 H) , 7,30 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,43 (s, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,40; [M+H]+ = 213,1 .
Etapa C: 6, 8-Dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina
À 6,8-dicloroisoquinolin-3-amina (0,27 g, 1,28 mmol) em diclo-rometano (20 ml) foi adicionada 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,30 g, 1,29 mmol) e a mistura de reação foi agitada a 40°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e cromatografada (Biotage: de acetato de etilo /hexanos a 100%) para produzir 6,8-dicloro-3-isotiociana-toisoquinolina (0,2 g, 0,78 mmol, rendimento 61,9%) como um pó. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,42 (s, 1 H) , 8,16 (d, J = 1,83 Hz, 1 H) , 8,02 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) , 7,92 (s, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 3, 63; [M+H] + = 2 55, 0. Etapa D: (R)-N-(6.8-Dicloroisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5.3' -bici-clo[2.2.21octanl-2-amina
A 6, 8-dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina (0,17 g, 0,67 mmol) em DMF (10 ml) foram adicionados carbonato de césio (0,543 g, 1,67 mmol) e dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,15 g, 0,67 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O produto foi tratado com N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,31 ml, 2,0 mmol). A reação foi aquecida até 90°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada para produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, dMeOH a 14% , NH40H a 1%) . O produto foi tomado numa pequena quantidade de acetato de etilo, que resultou na formação de um precipitado. Este foi filtrado, lavado com uma pequena quantidade de acetato de etilo, e seco num forno a vácuo para produzir (R)-N-(6,8-dicloroisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,094 g, 0,24 mmol, rendimento 36,6%) como um pó branco. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,23 (s, 1 H) , 8,71-8,83 (m, 1 H) , 7, 90-8, 00 (m, 1 H) , 7,57-7, 67 (m, 1 H) , 7,13-7,24 (m, 1 H) , 3,79-3, 90 (m, 1 H) , 3, 53-3, 64 (m, 1 H) , 2, 93-3, 04 (m, 2 H) , 2,72-2,82 (m, 2 H) ,
2,61-2,70 (m, 2 H) , 1,99 (s, 1 H) , 1,90 (s, 1 H) , 1,59 (d, J = 4,78 Hz, 2 H) , 1,40-1,50 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,68; 5 [M+H]+ = 377, 1 . EXEMPLO 280
(R)-N-(6, 7-Didomisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespimfoxazol-5,3 '-biciclo [2'2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: N- (3,4-Diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida
(3,4-Diclorofenil)metanamina (2 g, 11,4 mmol) foi adicionada a uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (2,0 4 g, 12,6 mmol) em 15 metanol (10 ml) . A mistura foi aquecida a 70°C durante 1 hora. A mistura foi purificada através de cromatografia (Biotage: acetato de etilo a 100%) . As frações desejadas foram concentradas para produzir N-(3,4-diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida (2,8 g, 9,2 mmol, rendimento 72,7%) como um óleo viscoso incolor. ΤΗ RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 7,45 (m, 1 H) , 7,40 (m, 1 20 H) , 7,19 (dd, J = 8, 09, 1, 98 Hz, 1 H) , 4,94 (s, 1 H) , 4,43 (s, 2 H) , 3, 47-3,77 (m, 4 H) , 1,41-1,79 (m, 6 H) . LC/MS RT=2,15; [M+H] + = 305, 1.
Etapa B: 6,7-Dicloroisoquinolin-3-amina e 5, 6-dicloroisoquinolin-3~amina
Ao ácido sulfúrico (4 ml, 75 mmol) foi adicionada N—(3,4-diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida (2 g, 6,6 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi aquecida até 40°C durante 49 horas. TLC e LC/MS indicam a presença de produto. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e extinta com NaOH aquoso (~15 M) até a mistura de reação ser ~pH 7. O produto em bruto foi extraído com acetato de etilo (2 x 50 ml) e os orgânicos foram secos com MgS04, filtrados, e concentrados in vacuo para produzir o produto. O produto bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: acetato de etilo para [de acetato de etilo/MeOH a 90/10%] a 100%) para produzir aproximadamente uma mistura de 1:1 de regioisómeros 6,7-dicloroiso-quinolin-l-amina e 5.6- dicloroisoquinolin-3-amina (1,2 g, 5,64 mmol, rendimento 86,0%) como um pó amarelo escuro. Os regioisómeros foram levados sem separação. ΤΗ RMN : ΤΗ RMN (50 0 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,90 (s, 1 H) , 8,83 (s, 1 H) , 8,12 (s, 1 H) , 7,89 (s, 1 H) , 7,84 (d, J = 8,54 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,58 (s, 1H), 6,48 (s, 2 H) , 6,25 (s, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,59; [M+H]+ = 213,0 .
Etapa C: 6, 7-Dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina e 5, 6-dicloro-3-isotiociana-toisoquinolina
A 6,7-dicloroisoquinolin-3-amina e 5.6- dicloroisoquinolin-3-amina (0,410 g, 1,924 mmol) em diclorometano (20 ml) fo adicionada 1, 1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,469 g, 2,021 mmol) e a mistura de reação foi agitada a 40°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e cromatografada (Biotage: de acetato de etilo/hexanos a 10-100%) para produzir os regioisómeros separados, 6.7- dicloro-3-isotiocianatoiso-quinolina (0,2 g, 0,784 mmol, rendimento 40,7%) e 5,6-dicloro-3-isotiocia-natoisoquinolina (0,23 g, 0,902 mmol, rendimento 46,8%) como sólidos amarelos. 5,6-dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina: ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,10 (s, 1 H) , 7,87 (d, J = 8,85 Hz, 1 H) , 7,82 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 3,63; [M+H]+ = 255,0. 6,7-dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina: ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,04 (s, 1 H) , 8,11 (s, 1 H) , 7,94 (s, 1H), 7,37 (s, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 3,42; [M+H] + = 2 55, 0. Etapa C: (R) -N-(6, 7-Dicloroisoquinolin-3~il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3'-bici-clo [2 f2, 2]octan]-2-amina
À 6, 7-dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina (0,13g, 0,510 mmol) em DMF (10 ml) foram adicionados carbonato de césio (0,42 g, 1,27 mmol) e dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,118 g, 0,515 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%) . 0 produto foi posteriormente tratado com DMF (10 ml) e N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,238 ml, 1,529 mmol). A reação foi aquecida até 90°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada para produzir o produto bruto, que foi purificado através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%)) para produzir (R)-N-(6,7-dicloroisoquinolin-3-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,12 g, 0,312 mmol, rendimento 61,2%). ΤΗ RMN (50 0 MHz, CDC13) δ ppm 9,0 3 (s, 1 H) , 8,87 (s, 1 H) , 7,96 (s, 1 H) , 7,83 (s, 1 H) , 7,24 (s, 1 H) , 3, 88-4, 06 (m, 1 H) , 3, 60-3,74 (m, 1 H) , 3,42 (d, J = 14,65 Hz, 1 H) , 2,82-3,15 (m, 5 H) , 2,23-2,34 (m, 1 H) , 2,18 (s, 1 H) , 1,72-1, 87 (m, 1 Η) , 1,48-1,70 (m, 2 Η) . MS (LC/MS) T.R. = 1, 63; [M+H]+ = 377,1. EXEMPLO 281 (R) -N-(5, 6-Dicloroisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 'biciclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
A 5,6-dicloro-3-isotiocianatoisoquinolina (0,11 g, 0,431 mmol) em DMF (10 ml) foram adicionados carbonato de césio (0,351 g, 1,078 mmol) e dicloridrato de (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,100 g, 0,435 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%)) . O produto foi posteriormente tratado com DMF (10 ml) e N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,202 ml, 1,293 mmol). A reação foi aquecida até 90°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada para produzir o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado através de cromatograf ia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%)) para produzir (R)-N-(5,6-dicloroisoquinolin-3-il)-4H-l'-azaespiro[oxazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,084 g, 0,218 mmol, rendimento 50,6%) como um pó amarelo. ΤΗ RMN (500 MHz, CDC13) δ ppm 9,09 (s, 1 H) , 8,93 (s, 1 H) , 7, 63-7,82 (m, 2 H) , 7,40 (d, J = 8,55 Hz, 1H), 3,99 (d, J = 9,16 Hz, 1 H) , 3,78 (d, J = 8,85 Hz, 1H), 3,51 (d, J = 14,65 Hz, 1H), 3,30 (d, J = 14, 65 Hz, 1 H) , 2, 90-3,23 (m, 4 H) , 2,33-2,48 (m, 1 H) , 2,29 (s, 1 H), 1,83-1,94 (m, 1H), 1, 62-1,83 (m, J = 42,12 Hz, 2 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,57; [M+H]+ = 377,1. EXEMPLO 282 (R)-N-(3, 4-Dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(3,4-Dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada através do método de Exemplo 267, partindo de 2-amino-3,4-dicloropiridina. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,10 (s, 1 H) , 8,08 (d, J = 5,49 Hz, 1 H) , 7,13 (d, J = 5,49
Hz, 1 H), 3,86 (d, J = 9,11 Hz, 1 H), 3,60 (d, J = 9,77 Hz, 1 H) , 2, 96-3, 05 (m, 2 H) , 2,77 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 2,66 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) , 1, 97-2,05 (m, 1 H) , 1, 86-1, 94 (m, 5 1 H) , 1.54- 1, 63 (m, 2 H) , 1,43-1,51 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,78; [M+H]+ = 327,0. EXEMPLO 283 (R) -N-(3-Cloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 ’ -bic iclo[2, 2, 2]octan]-2-amina
(R)-N-(3-Cloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada através do método do Exemplo 261, partindo de 2-amino-3-cloropiridina. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 9,06 (s, 1 H) , 8,14-8,19 (m, 1 H) , 7,74-7,79 (m, J = 7,78, 1,83, 1,83, 1, 68 Hz, 1 H) , 6,86-6,91 (m, 1 H) , 3,81-3,89 (m, 1 H) , 3,55-3, 63 (m, 1 H) , 2, 96-3, 04 (m, 2 H) , 2,78 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 2,67 (t, J = 7,63 Hz, 2 H) , 1, 96-2,02 (m, 1 H) , 1, 86-1, 92 (m, J = 5, 65, 3,20 Hz, 1 H) , 1.54- 1, 63 (m, J = 6, 87, 3, 66, 3,51 Hz, 2 H) , 1,42-1,49 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,26; [M+H]+ = 293,0. EXEMPLO 284 (R)-N-(5-Cloro-3-fluoropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3' -bici-clo[2,2,27 octanl-2-amina
(R)-N-(5-Cloro-3-fluoropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[o xazol-5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada através do método do Exemplo 267, partindo de 2-amino-3-fluoro-5-cloropiridina. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,81 (s, 1 H) , 8,05 (s, 1 H) , 7,79 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 3,83 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 3,58 (d, J = 9,46 Hz, 1 H) , 2,99 (s, 2 H) , 2,71-2,80 (m, 2 H) , 2,61-2,70 (m, 2 H) , 2,00 (s, 1 H) , 1,83-1, 92 (m, 1 H) , 1,53-1, 62 (m, 2 H) , 1,41-1,50 (m, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,52; [M+]+ = 311,0. EXEMPLO 285 (R)-N-(6-Cloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3’-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(6-Cloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-bici-cio[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada através do método do Exemplo 267, partindo de 2-amino-6-cloropiridina. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO~d6) δ ppm 8,33-8,42 (m, 1 H) , 7, 60-7, 68 (m, 1 H) , 6,94 (d, J= 7,02 Hz, 1 H) , 6,72-6,81 (m, 1 H) , 3,86 (d, J= 9,46 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,07 Hz, 1 H), 2,97 (s, 2 H), 2, 69-2,78 (m, 2 H) , 2, 63-2, 68 (m, J = 7, 63, 7,63 Hz, 2 H) , 1, 95-2,03 (m, 1 H) , 1,83-1, 92 (m, 1 H) , 1,53-1, 62 (m, 2 H) , 1,41-1,49 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,43; [M+H]+ = 293,0. EXEMPLO 286 (R)-N-(4, 6-Dicloropiridin-2-il)-4H-1’-azaespiro[oxazol-5,3’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
(R)-N-(4,6-Dicloropiridin-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol -5,3'-bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina foi preparada através do método do exemplo 267, partindo de 2-amino-4, 6-dicloropiridina. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,43 (s, 1 H) , 7,13 (s, 1 H) , 6,84 (s, 1 H) , 3,86 (d, J=9,77 Hz, 1 H) , 3,59 (d, J = 10,07 Hz, 1 H) , 2,98 (s, 2 H) , 2,58-2,86 (m, 4 H) , 1,94-2,13 (m, 1 H) , 1,78-1, 95 (m, 1 H) , 1,36-1, 65 (m, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 0,87; [M+H]+ = 327,0. EXEMPLO 287 (R)-N- (2-Metóxi-3-4'-bipiridin-2 ’-il)-4H-1'-azaespiro[oxazo 1- 5, 3’-biciclo [2r 2, 2]octan]-2-amina
Etapa A: N-(2, 4-Diclorobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida
A 4-bromopiridin-2-amina (0,5 g, 2,8 mmol), ácido 2- metoxipiridin-3-ilborónico (0,52 g, 3,4 mmol) em DMF (25 ml) foi adicionado carbonato de sódio a IN (10 ml, 2,3 mmol), seguido por complexo de dicloro-metano de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio(II)dicloreto (0,21 g, 0,26 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 3 horas a 85°C e posteriormente arrefecida até à temperatura ambiente. O produto foi extraído com acetato de etilo (2 x 50 ml), seco com MgS04, filtrado, e concentrado in vacuo. O produto em bruto foi purificado através de cromatografia (Biotage: de acetato de etilo-acetato de etilo/metanol a 100 a 90/10%) para produzir 2-metoxi-3,4'-bipiridin-2'-amina (0,53 g, 2,63 mmol, rendimento 93%) como um pó castanho. O produto foi levado diretamente para a seguinte etapa.
Etapa B: 2 '-Isotiocianato-2-metóxi-3,4'-bipiridina
À2-metóxi-3,4'-bipiridin-2'-amina (0,53 g, 2, 63 mmol) em diclo-rometano (20 ml) foi adicionada 1,1 '-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,62 g, 2,7 mmol) e a mistura de reação foi agitada a 40°C durante 4 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e cromatografada (Biotage: de acetato de etilo/hexanos a 100%) para produzir 2'-isotiocianato-2-metóxi-3,4'-bipiridina (0,46 g, 1,9 mmol, rendimento 71,8%) . ΤΗ RMN (500 MHz DMSO-dg) δ ppm 8,67 (d, J =2,44 Hz, 1H), 8,26 (dd, J = 4,88, 1,53 Hz, 1H), 8,15 (dd, J = 8,24, 2,44 Hz, 1 H) , 7,89 (dd, J = 1,32, 1,53 Hz, 1 H) , 7,48 (d, J = 8,24 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 1,32, 4,88 Hz, 1H), 3,91 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,87; [M+H]+ = 244,9.
Etapa D: (R)-N- (2-Metóxi-3-4'-bipiridin-2'-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazo 1-5, 3'-bici-clo[2,2, 2]octan]-2-amina
A 2'-isotiocianato-2-metóxi-3,4'-bipiridina (0,09 g, 0,37 mmol) em DMF (20 ml) foram adicionados Et3N (0, 11 ml, 0, 81 mmol) e dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,09g, 0,37 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 70°C durante 2 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. A ureia em bruto foi purificada através de cromatografia (Biotage: CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%) para produzir a ureia intermediária em bruto. 0 produto foi posteriormente tratado com DMF (20 ml) e N,N'-diisopropilcarbodiimida (0,17 ml, 1,1 mmol). A reação foi aquecida até 90°C durante 18 horas. A reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado através de cromatografia (CHC13 a 85%, MeOH a 14%, NH40H a 1%)) e o produto contendo frações foi combinado. LC/MS e 1HNMR indicaram que algumas impurezas podem estar presentes . O produto impuro foi submetido a HPLC de fase reversa para produzir (R)-N-(2-metoxi-3,4'-bipiridin-2'-il)-4H-1'-azaespiro[oxazo 1- 5,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,02 g, 0,05 mmol, rendimento 14,05%) como um pó branco. ΤΗ RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,07 (s, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,17 (dd, J = 4,73, 1,68 Hz, 1 H) , 7,79 (d, J = 7,32 Hz, 2 H) , 7,10 (dd, J = 1,32, 4,88 Hz, 1 H) , 6,79-6, 92 (m, 1 H) , 3,76-3, 97 (m, 4 H) , 3,51-3,66 (m, 1 H) , 2, 92-3, 09 (m, 2 H) , 2,59-2,82 (m, 4 H) , 1,85-2,03 (m, 2 H), 1,53-1,71 (m, 2 H), 1,35-1,49 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,05; [M+H]+ = 366, 1 . EXEMPLO 288 (R)-N-(Benzo[d]oxazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: Benzo[d]oxazol-2-amina
Um balão de base redonda seco num forno foi carregado com di(lH-imidazol-l-il)metanimina (500 mg, 3,10 mmol), 2- aminofenol (188 mg, 1,724 mmol) e THF anidro (20ml) à temperatura ambiente. A suspensão resultante foi submetida a refluxo sob N2 durante 2 horas para proporcionar base de conversão completa em LC/MS. 0 solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado num Biotage Flash Collector, eluindo com EtOAc/Hexano a 30-80% (1200ml) para produzir o produto esperado, benzo[d]oxazol-2-amina (200 mg, 1,5 mmol, rendimento 87%) , como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 6,20 (s. 1., 2 H) 7,02-7,11 (m, 1 H) 7,17-7,22 (m, 1 H) 7,29 (d, J = 7,53 Hz, 1 H) 7,36 (d, J = 7,03 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,05; [M+H]+ = 134,96.
Etapa B: Benzo[d]oxazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução incolor de benzo[d]oxazol-2-amina (200 mg, 1,491 mmol) em DMF (10ml) foi adicionado hidróxido de sódio (20N, 149 μΐ, 2,98 mmol), para proporcionar uma suspensão verde. A mistura foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente. Dissulfeto de carbono (225 μΐ, 3,73 mmol) foi adicionado para proporcionar uma solução castanho-escura. A reação foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente, seguida pela adição de hidróxido de sódio (20N, 149 μΐ, 2,98 mmol) e agitada durante 10 minutos adicionais. Iodometano (224 μΐ, 3,58 mmol) foi posteriormente adicionado gota a gota. Um sólido verde precipitou-se após 12 minutos. A reação foi agitada durante 2 horas adicionais. O sólido foi recolhido através de filtração, lavado com DMF (2xlml), H20 (2xlml), seco sob vácuo interno durante 30 minutos e também seco num forno in vacuo durante a noite para produzir o produto esperado, benzo[d]oxazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (258,5mg, 1,085 mmol, rendimento 72,7%), como um sólido branco. ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) 5ppm2,70 (s, 6 H) 7,24-7,34 (m, 2 H) 7,45-7,50 (m, 1 H) 7,66-7,74 (m, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,76, [M+H]+ = 238,96.
Etapa C: (R)-N-(Benzo[d]oxazol-2-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5,3 ' -bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina
Um frasco de 10 ml foi carregado com (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ob2 sal de HC1 (69,5 mg, 0,361 mmol) , DMF (2ml), DIEA (0,063 ml, 0,361 mmol) e CS2CO3 (235 mg, 0,722 mmol) à temperatura ambiente, seguido por benzo[d]oxazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (86mg, 0,361 mmol). A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. LC/MS posteriormente indicou consumo de material de partida. A mistura foi diluída com MeOH e purificada por HPLC preparativa para produzir o produto esperado, (R)-N-(benzo[d]oxazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3'-bic iclo[2,2,2]octan]-2-amina (101,5 mg, 0,323 mmol, rendimento 90%), como uma goma castanha. RMN (400 MHz, Acetona-de) δ ppm 2,07-2,14 (m, 2 H) 2,20 (ddd, J = 8,78, 5,27, 3,26 Hz, 2 H) 2,33-2,45 (m, 1H) 2,62 (d, J = 2,26 Hz, 1H) 3,34-3, 47 (m, 3 H) 3,48-3,58 (m, 1 H) 3,75-3, 88 (m, 2 H) 4,15 (d, J = 10,54 Hz, 1 H) 4,32 (d, J = 10,54 Hz, 1 H) 7,13-7,26 (m, 2 H) 7,41 (td, J = 3,70, 1, 63 Hz, 1 H) 9,24 (br, s, 1H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,792, [M+H]+ = 299,17. EXEMPLO 289 (R)-N-(5-Clorobenzo[d]oxazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 , 3 ’ -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: 5-clorobenzo[d]oxazol-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo
A uma solução castanha de 5-clorobenzo[d]oxazol-2-amina (700mg, 4,15 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (20N, 415 μΐ, 8,30 mmol) para proporcionar uma suspensão cinzenta. A mistura foi agitada durante 15 minutos à temperaturaambiente. Dissulfeto de carbono (626 μΐ, 10,38 mmol) foi adicionado à temperatura ambiente para proporcionar uma solução castanha. A mistura foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente, posteriormente hidróxido de sódio (20N, 208 μΐ, 4,16mmol) foi adicionado. Após 10 min, iodometano (623 μΐ, 9,97 mmol) foi adicionado gota a gota. Um sólido cinzento surgiu da solução. A reação foi também agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. O sólido foi recolhido através de filtração, lavado com DMF/H20 (50:50, 2x2ml), seco sob vácuo interno durante 30 minutos e mais seco num forno a 65°C sob vácuo durante 1 1/2 horas para produzir o produto esperado, 5-clorobenzo[d]oxazol-2-ilcarbonimido-ditioato de dimetilo (780mg, 2,86 mmol, rendimento 68,9%), como um sólido esbranquiçado que estava suficientemente puro para ser utilizado na etapa seguinte. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 2,69 (s, 6 H) 7,37 (dd, J = 8,53, 2,26 Hz, 1 H) 7,66 (d, J = 9,03 Hz, 1 H) 7,75 (d, J = 1,76 Hz, 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 1,44; [M+H]+ = 272,9.
Etapa B: (R) -N-(5-Clorobenzo[d]oxazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3 ' -biciclo[2,2, 2loctanl-2-amina
Um frasco de 10 ml foi carregado com (S) -3-(amino-metil)quinuclidin-3-ob2 sal de HC1 (106 mg, 0,550 mmol), DMF (2ml), DIEA (0,096 ml, 0,550 mmol), e CS2CO3(358 mg, 1,100 mmol) à temperatura ambiente, seguido por 5-clorobenzo[d]oxazol-2-ilcarbonimidoditioato de di-metilo (150mg, 0,550 mmol). A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. LC/MS posteriormente indicou consumo de material de partida. A mistura de reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa para produzir o produto esperado, (R)-N-(5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5 ,3'-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (106,5 mg, 0,3 mmol, rendimento 53,0%), como um sólido branco. RMN (400 MHz,
Acetona-dg) δ ppm 2, 08-2,30 (m, 3 Η) 2,35-2,48 (m, 1 Η) 2, 60-2,73 (m, 1 Η) 3,48 (qd, J = 7,53, 7,28 Hz, 3 H) 3,54-3,68 (m, 1 H) 3,79-4, 00 (m, 2 H) 4,18 (d, J = 10,54 Hz, 1 H) 4,35 (d, J = 10,54 Hz, 1 H) 7,19 (dd, J= 8,53, 2,01 Hz, 1 H) 7,30-7,47 (m, 2 H) 9,10 (s. 1., 1 H). MS(LC/MS) T.R. = 1,56; [M+H]+ = 333,13. EXEMPLO 290 (R)-N-(Oxazoio[4,5-b]piridin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazoi-5 ,3 'blciclo[2,2,2]octan]-2-amina
Etapa A: Oxazoio[4,5-b]piridin-2-amina
Um balão de base redonda seco num forno foi carregado com di(lH-imidazol-l-il)metanimina (500 mg, 3,10 mmol), 2-aminopiridin-3-ol (171 mg, 1,551 mmol) e THF anidro (20ml) à temperatura ambiente. A suspensão resultante foi submetida a refluxo sob N2 durante 1 hora. LC/MS indicou completo consumo de material de partida. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. MS(LC/MS) T.R. = 0,235; [M+H]+ = 136,09.
Etapa B: Oxazoio[4,5-b]piridin-2-iicarbonimidoditioato de dimetilo
A oxazoio[4,5-b]piridin-2-amina em bruto (811 mg, 6 mmol) da etapa A, em DMF (12ml), foi adicionado NaOH (20 N, 600 μΐ, 12,00 mmol) para proporcionar uma solução castanha que foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente. Dissulfeto de carbono (904 μΐ, 15,00 mmol) foi em seguida adicionado para proporcionar uma solução laranja. A mistura foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente, posteriormente NaOH (20 N, 600 μΐ, 12,00 mmol) foi adicionado e a agitação continuada durante 10 minutos para proporcionar um sólido vermelho escuro. Iodometano (900 μΐ, 14,40 mmol) foi adicionado gota a gota, resultando num sólido amarelo precipitando-se após 1 hora para proporcionar -80% de conversão. A mistura foi diluída com MeOH e purificada por meio de HPLC preparativa para produzir o produto esperado, oxazolo[4,5-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (35 mg, 0,146 mmol, rendimento 2,4%), como um sólido branco. '"H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 2,71 (s, 6 H) 7,22 (dd, J = 8,03, 5,02 Hz, 1 H) 7,72 (dd, J = 8,03, 1,25 Hz, 1 H) 8,49 (dd, J = 5,02, 1,51 Hz, 1 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,358; [M+H] = 240,04.
Etapa C: (R) -N-(Oxazolo[4,5-b]piridin-2-il)-4H-1 ' -azaespiro[oxazol-5 ,3 ' -bici-clo[2,2,2]octan]-2-amina
Um frasco de 10 ml foi carregado com (S) -3-(aminometil)quinuclidin-3-ob2 sal de HC1 (8,53 mg, 0,044 mmol), DMF (2 ml), DIEA (7,74 μΐ, 0,04 mmol) e Cs2C03(28, 9 mg, 0,089 mmol) à temperatura ambiente, seguido por oxazolo[4,5-b]piridin-2-ilcarbonimidoditioato de dimetilo (10,6 mg, 0,044 mmol). A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. LC/MS indicou completo consumo de material de partida. A mistura de reação foi diluída com MeOH e purificada por meio de HPLC preparativa para produzir o produto esperado, (R)-N-(oxazolo [4, 5 — ^ >] piridin-2-il)-4H-1'-azaespiro [oxazol-5, 3'-biciclo [2,2,2] octan]-2-amina (13 mg, 0,038 mmol, rendimento 86%), como um sólido branco. ΤΗ RMN (400 MHz, Acetona-d6) δ ppm 1,54-1, 60 (m, 1 Η) 1,71-1,77 (m, 2 Η) 2,16-2,24 (m, 1 Η) 2,77-2,82 (m, 2 Η) 2,89 (t, <7 = 7,91 Hz, 4 Η) 3,13-3,25 (m, 2 Η) 3,90 (d, J = 10,29 Hz, 1 Η) 4,22 (d, J = 10,29 Hz, 1 Η) 7,13 (dd, J = 8,03, 5,02 Hz, 1 H) 7,70 (dd, J = 7,91, 1,13 Hz, 1H) 8,27 (dd, J=5,14, 1,13 Hz, 1 H) 9,11 (s. 1., 1 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,443; [M+H] + = 300,16. EXEMPLO 291 (2R)-N-(6,8-Dimetil-3-isoquinolinil)-4 H-espiro[4-azabidclo[2,2,2]octano-2, 5'-[ 1,3]oxazol]-2'-amina
Etapa A: 6-Metilisoquinolin-3-amina
A uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (1,1 g, 6,82 mmol) em metanol (8 ml) foi adicionada p-tolilmetanamina (0,788 g, 6,50 mmol) gota a gota à temperatura ambiente. O balão de reação foi então colocado num banho de óleo pré-aquecido e agitado a 70°C durante 16 horas, posteriormente removido e deixado arrefecer. Os voláteis foram removidos sob pressão reduzida e o material em bruto foi adicionado gota a gota ao ácido sulfúrico (5 ml) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 72 horas, posteriormente o balão foi colocado num banho de água gelada, diluído com água (50 ml), e lentamente neutralizado para pH = 10 com hidróxido de sódio (10 N) . Quando a mistura de reação se tornou básica, formou-se um precipitado castanho. Este precipitado foi filtrado, lavado com água, e seco para produzir 6-metilisoquinolin-3-amina (0,65g, 63%), como um pó cinzento. ΤΗ RMN (400 MHz, DMSO-dg) b ppm 8,73 (s, 1 H) , 7,69 (d, J = 8,28 Hz, 1 H),7,29 (s, 1 H) , 7,00 (d, J = 8,28 Hz, 1H), 5,81 (s, 1H), 2,40 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,37; [M+H]+ = 159,10.
Etapa B: 3-Isotiocianato-6-metilisoquinolina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (220mg, 0,948 mmol) em diclorometano (10 ml) à temperatura ambiente foi adicionada 6-metilisoquinolin-3-amina (125 mg, 0,790 mmol) . A mistura de reação foi colocada num banho de óleo pré-aquecido e agitada a 40°C durante 18 h, posteriormente removida do banho de óleo e arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e o material bruto foi purificado por croma-tografia de gel de sílica (acetato de etilo em hexanos a 5-30%) para produzir 3-isotiocianato-6-metilisoquinolina (75 mg, 0,375 mmol, rendimento 47,4%), como um sólido esbranquiçado, ΤΗ RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9,03 (s, 1 H) , 7,88 (d, J = 8,24 Hz, 1 H) , 7,56 (s, 1 H), 7,46 (dd, J = 8,24, 1,53 Hz, 1 H) , 7,39 (s, 1 H) 2,57 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 1,92; [M+H]+ = 201,13.
Etapa C: (R)-N-(6-Metilisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -biciclo[2,2,21octanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (65,8 mg, 0,285 mmol) em N, N-dimetilformamida (6 ml) foram adicionadas trietilamina (0,090 ml, 0,63 mmol) e
3-isotiocianato-6-metilisoquinolina (57 mg, 0,285 mmol). A suspensão foi colocada num banho de óleo preaquecido e agitada a 70°C durante 2 horas e 30 minutos. N,Ν'-diisopropilcarbodiimida (0,177 ml, 1,14 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada a 85°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada e purificada por cromato-grafia de gel de sílica (metanol : hidróxido de amónio 9:1] em clorofórmio a 0 a 40%) seguida por purificação através de HPLC preparatória de fase reversa (TFA a 0 a 40%-metanol-água) . A solução de produto foi filtrada através de cartucho UCT Clean-up CHQAX15M25 com MeOH (3xl0ml) e concentrada para produzir o produto esperado, (S)-1-((3idroxiquinuclidin-3-il)metil)-3-(6-metilisoquinoli n-3-il) tioureia, como uma goma castanha. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,11 (s, 1H), 8,02 (d, J = 8,53 Hz, 1 H) , 7,80 (s, 1H), 7,74 (s, 1 H), 7,47 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 4,47 (d, J = 10,54 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 10,54 Hz, 1 H), 4,10 (d, J = 14,81 Hz, 1 H) , 3,92 (d, J = 14,81 Hz, 1 H) , 3,53-3,71 (m, 2 H) , 3,27-3,51 (m, 3 H) , 2,84 (br.s, 1 H) , 2,55 (s, 3H) , 2,48 (m, 1 H) , ) 2,10-2,30 (m, 3H). MS (LC/MS) T.R. = 1,24; [M+H]+ = 323,2. EXEMPLO 292 (R)-N- (6-Bromoisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3' -biciclo [2'2, 21 octanl -2-amina
Etapa A: N-(4-Bromobenzil)-2,
2-dietoxiacetimidamida NH
Cloridrato de (4-bromofenil)metanamina (2,359 g, 10,39 mmol) e metóxido de sódio (2,376 ml, 10,39 mmol) foram adicionados a uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (3,35 g, 20,78 mmol) em metanol (10 ml). A mistura turva foi aquecida a 70°C durante 1,5 horas e a mistura amarela resultante foi concentrada. O resíduo foi purificado através de gel de sílicacom de acetato de etilo a 100% para proporcionar um óleo viscoso amarelo (2,04 g, 62%) . 2Η RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,47 (2 H, d, J = 8,56 Hz), 7,23 (2 H, d, J = 8,06 Hz), 6,76 (1 H, s. 1.), 5,31 (1 Η, s. 1.), 4,94 (1 Η, s. 1.), 4,45 (2 Η, s. 1.), 3,47-3,77 (4 Η, m), 1,26 (6 Η, t, J = 7, 0 5 Hz) . LCMS :T.R. = 2,12; [M+2]+ = 317,2.
Etapa B: 6-BromoisoquinoIin-3-amina
N—(4-bromobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida (1,53 g, 4,85 mmol) em ácido sulfúrico (4 ml, 95-98%) foi aquecida a 40 °C durante 14 horas. A mistura foi neutralizada com NaOH a 1 M para pH 7 e a suspensão resultante foi filtrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílicacom de acetato de etiloem hexanos a 55%. As frações desejadas foram concentradas para proporcionar um sólido amarelo acastanhado (0,434 g, 40%). LCMS:T.R. = 1,62; [M+2]+ = 225,1.
Etapa C: 6-Bromo-3-isotiocianatoisoquinolina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (0,251 g, 1,080 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente foi adicionada 6-bromoisoquinolin-3-amina (0,241 g, 1,080 mmol) . A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. LC/MS indicou formação do produto desejado. A solução laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0-10%) para produzir: 6-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,1 g, 0,377 mmol, rendimento 35%) como um óleo amarelo. T.R. = 2,54; [M+H]+ = 267,04.
Etapa D: (R)-N- (6-bromoisoquinolin-3-il) -4H-1 '-azaespiro[oxazol-5, 3' -bici-clo[2,2, 2loctanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,086 g, 0,377 mmol) em N,N-dimetilformamida (15 ml) foram adicionados Cs2C03 (0,307 g, 0,943 mmol) e 6-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,1 g, 0,377 mmol). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν' —Diisopropilcarbodiimida (0,176 ml, 1,132 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada durante 18 horas adicionais. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio 9,5:0,5]-acetato de etilo a 5-25%) para produzir (R)-N-(6-bromoisoquinolin-3-il)-4H-11-azaespiro[oxazol-5,31 -biciclo[2,2,2]octan]-2-ami-na (0,054 g, 0,135 mmol, rendimento 36%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,04 (1H, s), 7,80-8,05 (2 H, m), 7,55 (1H, dd, J = 8, 81, 1,76 Hz), 7,37 (1H, s. 1.), 4,10 (1H, d, J = 10,58 Hz), 3,87 (1H, d, J = 10,83 Hz), 3,68-3,77 (1 H, m), 3,56-3,67 (1 H, m), 3, 29-3,49 (4 H, m) , 2,45 (1 H, s. 1.), 2,28-2,41 (1 H, m) , 1,86-2,15 (3 H, m). LCMS:T.R. = 1,76; [M+]+ = 387,21. EXEMPLO 293 (R)-N-(7-Bromoisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3’ bideio[2,2, 2loctanl-2-amina
Etapa A: N-(3-Bromobenzii)-2,2-dietoxiacetimidamida
Cloridrato de (3-Bromofenil)metanamina (3,62 g, 15,64 mmol) e metóxido de sódio (3,58 ml, 15,64 mmol) foram adicionados a uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (5,042 g, 31,3 mmol) em metanol (15 ml). A mistura turva foi aquecida a 70°C durante 1,5 hora e a mistura amarela resultante foi concentrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílicacom 100% de acetato de etilo. As frações desejadas foram concentradas para proporcionar um óleo viscoso amarelo (2,5 g, 51%) . LCMS :T.R. =2,11; [M+2]+ = 317,06. Etapa B: 7-Bromoisoquinoiin-3-amina e 5-bromoisoquinoiin-3-amina
N—(3-Bromobenzil)-2,2-dietoxiacetimidamida (2,5 g, 7,93 mmol) em ácido sulfúrico (5 ml, 95-98%) foi aquecida a 40°C durante 54 horas. A mistura foi neutralizada com NaOH aquoso a 10 M para pH 7 e a suspensão resultante foi filtrada. O resíduo foi purificado através de cromatografia de gel de sílicacom de acetato de etiloem hexanos a 20-55%, posteriormente de acetato de etilo a 100%. As frações foram concentradas para proporcionar um sólido castanho contendo uma mistura de produtos. (1,0 g, 57%). LCMS:T.R. = 1,56; [M+2]+ = 225,1.
Etapa C: 7-Bromo-3-isotiocianatoisoquinoiina e 5-bromo-3-Isotiocianatoiso-auinoiina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona 1, 145 g 4, 93 mmol) em diclorometano à temperaturaà temperaturaà temperatura ambiente foi adicionada uma mistura de 7-bromoisoquinolin-3-amina e 5-bromoisoquinolin-3-amina da etapa B (1,0 g, 4,5 mmol). A solução laranja foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. LCMS indicou a formação de produto. A solução laranja intenso foi purificada através de cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo-hexanos a 0-5%) . As primeiras frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir 7-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,27 g, 0,377 mmol, rendimento 22%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, Acetona) δ ppm 9,19 (1 H, s) , 8,41 (1 H, s) , 7, 86-8, 02 (2 Η, m), 7,76 (1 Η, s). T.R. = 4,28; [Μ+Η]+ = 267,04. As segundas frações de produto foram combinadas e concentradas in vacuo para produzir 5-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,25 g, 0,377 mmol, rendimento 21%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, Acetona) δ ppm 9,24 (1 H, s), 8,23 (1 H, d), 8,15 (1 Η, d), 7,81 (1 Η, s), 7,64 (1 Η, t). LCMS:T.R. = 4,61; [M+H]+ = 267,04 .
Etapa D: (R)-N-(7-Bromoisoquinolin-3-il)-4H-1 '-azaespiro[oxazol-5,3 ' -bici-clo[2,2, 2loctanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,207 g 0,905 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foram adicionados Cs2C03 (0,737 g, 2,263 mmol) e 7-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,24 g, 0,905 mmol). A suspensão foi agitada à ambiente durante 30 minutos. N,Ν'-Diisopropilcarbodiimida (0,423 ml, 2,72 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatograf ia de gel de sílica utilizando [de metanol : hidróxido de amónio 9:1] em acetato de etilo a 5-15%. As frações desejadas foram concentradas e também purificadas usando [metanol : hidróxido de amónio 9,5:0,5] em acetato de etilo a 5-15% para produzir ((R) -N-(7-bromoisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5,3 '-biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,061 g, 0,156 mmol, rendimento 17%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,96 (1H, s), 8,12 (1H, s), 7,66 (2 H, s), 7,32 (1H, s), 4,01 (1 H, d), 3,73 (1 H, d), 3,35-3,42 (1 H, m) , 3,22-3,29 (1 H, m) , 2,84-3,17 (4 H, m) , 2,13-2,35 (2 H, m) , 1, 62-1, 96 (3 H, m). LCMS:T.R. = 1,76; [M+]+ = 387,21. EXEMPLO 294 ((R)-N- (5-Bromoisoquinolin-3-il)-4H-1'-azaespiro[oxazol-5, 3 '-bicicloí2.2.2loctanl-2-amina
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (0,207 g, 0,905 mmol) em N,N-dimetilformamida (20 ml) foram adicionados Cs2C03 (0,737 g, 2,263 mmol) e 5-bromo-3-isotiocianatoisoquinolina (0,24 g, 0,905 mmol). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. N,Ν' —Diisopropilcarbodiimida (0,423 ml, 2,72 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromatografia de gel de sílica ( [de metanol : hidróxido de amónio 9,5 : 0,5]-acetato de etilo a 5-15%). As frações desejadas foram concentradas e também purificadas usando [de metanol : hidróxido de amónio 9,5:0,5] em acetato de etilo a 5-15% para produzir (R)-N-(5-bromoisoquinolin-3-il)-4H-11-azaespiro[oxazol-5,31 -biciclo[2,2,2]octan]-2-amina (0,248 g, 0,634 mmol, rendimento 70%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,99 (1H, s), 7,91 (2 H, dd) , 7,55 (1 H, s. 1.), 7,28 (1 H, t), 3,96 (1 H, d), 3,65 (1 H, d), 3,17-3,26 (1 H, m) , 3,03-3,13 (1 H, m) , 2,70-2, 99 (4 H, m) , 2,03-2,30 (2 H, m) , 1,47-1,87 (3 H, m) . LCMS:T.R. = 1,69; [M+2] + = 389,21. EXEMPLO 295 (2R)-N-(6,8-Dimetil-3-isoquinolinil)-4 H-espiro[4-azabiciclo[2,2,2]octano-2, 5 '-[ 1,3]oxazol]-2'-amina
Etapa A: 6,8-Dimetilisoquinolin-3-amina
A uma solução de 2,2-dietoxiacetimidato de metilo (1,5 g, 9,3 mmol) em metanol (4,9 ml) foi adicionada (2,4-dimetilfenil)metanamina (1,2 g, 8,9 mmola) gota a gota à temperatura ambiente. 0 balão de reação foi então colocado num banho de óleo pré-aaquecido e agitado a 70°C durante 16 horas, posteriormente arrefecido e os voláteis removidos sob pressão reduzida. 0 material em bruto foi adicionado gota a gota ao ácido sulfúrico (19,7 ml) à temperatura ambiente e agitado durante 72 horas. 0 balão foi então colocado num banho de água gelada, diluído com água (50 ml) , e lentamente neutralizado até pH = 10 com hidróxido de sódio (10 N) . Quando a mistura de reação tornou-se básica, um precipitado laranja formou-se. Este precipitado foi filtrado, lavado com água, e seco para produzir 6, 8-dimetiliso-quinolin-3-amina (1,37 g, 7,95 mmos, 90%) . ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 8,82 (s, 1 H) , 7,17 (s, 1 H) , 6,90 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 2,61 (s, 3 H) , 2,37 (s, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,77; [M+H]+ = 173,15.
Etapa B: 3-Isotiocianato-6,8-dimetilisoquinolina
A uma solução de 1,1'-tiocarbonildipiridin-2(1H)-ona (1,35 g, 5,8 mmol) em diclorometano (19 ml) à temperatura ambiente foi adicionada 6, 8-dimetilisoquinolin-3-amina (1 g, 5,8 mmol). A mistura de reação foi colocada num banho de óleo preaquecido e agitada a 40°C durante 18 horas posteriormente arrefecida, concentrada, e o material em bruto foi purificado por cromatografia de gel de sílica (acetato de etilo em hexanos a 10 a 35%) para produzir 3-isotiocianato-6, 8-dimetilisoquinolina (93,7 mg, 0,437 mmol, 8%) como um sólido amarelo. ΤΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,20 (s, 1 H) , 7,36-7,44 (m, 2 H) , 7,23 (s, 1 H) , 2,75 (s, 3 H) , 2,51 (s, 3 H). MS (LC/MS) T.R. = 2,03; [M+H]+ = 215,1.
Etapa C: (2R)-N-(6,8-Dimetil-3-isoquinolinil)-4H-espiro[4-azabiciclo [2,2,2]oc-tano-2, 5 '-[ 1,3 loxazoll-2'-amina.
Ao dicloridrato de (S)-3-(aminometil)quinuclidin-3-ol (99 mg, 0,43 mmol) em N, N-dimet ilf ormamida (1,4 ml) foram adicionadas trietilamina (0,18 ml, 1,3 mmol) e 3-isotiocianato-6,8-dimetilisoquinolina (93 mg, 0,43 mmol). A suspensão foi colocada num banho de óleo preaquecido e agitada a 70 °C durante 2 horas e 30 minutos.
N, Ν'-Diisopropilcarbodiimida (0,27 ml, 1,7 mmol) foi posteriormente adicionada e a mistura foi agitada a 85°C durante 16 horas. A mistura foi concentrada e purificada através de cromato-grafia de gel de sílica ([metanol : hidróxido de amónio 9:1] em clorofórmio a 0 a 40%) seguido por purificação por HPLC preparativa de fase reversa ( [TFA O, 1%]-metanol-água a 0 a 40%) para produzir (2R)-N-(6,8-dimeti1-3-isoquinolinil)-4'H-espiro[4-azabicicl o[2,2,2]octano-2,5'-[1,3]oxazol]-2'-amina como o sal de ácido trifluoroacético (24 mg, 0,053 mmol, rendimento 12%) como um sólido branco. ΤΗ RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,29 (s, 1H), 7,54 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 4,38 (d, J = 11,04 Hz, 1 H) , 4,17 (d, J = 11,04 Hz, 1 H) , 3,94-4,10 (m, 1 H) , 3,86 (dd, J = 15, 0 6, 2,26 Hz, 1H), 3,51-3,67 (m, 1H), 3,37-3,51 (m, 3 H), 2,77 (s, 3 H), 2,73 (d, J = 3,51 Hz, 1 H), 2,48-2,57 (m, 3 H) , 2,30-2,46 (m, 1 H) , 1, 94-2,28 (m, 3 H) . MS (LC/MS) T.R. = 0,90; [M+H]+ = 337,38. É desejável que os exemplos sejam considerados em todos os aspetos como ilustrativos.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição • EP 452101 A [0011] • EP 337547 A [0011] • WO 2003092580 A [0011] • US 2007004715 A [0011] • US 5137895 A [0038] • WO 2007086800 A [0173] • WO 2006044707 A [0421]
Documentos de não patente citados na descrição • PICCIOTTO ; ZOLI. J. Neurobio., 2002, vol. 53, 641-655 [0010] • BRENING et al. Ann. Report s in Med. Chem., 2005, vol. 40, 3-16 [0010] • DANI ; BERTRAND. Ann. Rev. Pharm. Tox., 2007, vol. 47, 699-729 [0010] • OLINCY ; STEVENS. Biochem. Pharmacol., 2007, vol. 74, 11192-1201 [0010] • BRAAD et al. Drugs Future, 2007, vol. 32 (2), 161-70 [0010] • DE JONGE AND ULLOA. Brit. J. Pharmacol. , 2007, vol. 151, 915-929 [0010] • ROMANELLI et al. ChemMedChem, 2007, vol. 2 (6), 746-767 [0010] • C.J. SWAIN et al. J. Med. Chem., 1992, vol. 35, 1019-1031 [0011] • RUDIGER, R. et al. Nature Reviews, 2003, vol. 4, 579-586 [0040] • GONZALEZ J.E. et al. Receptors and Channels, 2002, vol. 8, 283-295 [0040] • STEFANI et al. Behavioral Neuroscience, 2003, vol. 117, 728-737 [0040] • Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Company, 1985 [0051] • SWAIN C.J. J. Med. Chem., 1992, vol. 35, 1019-1031 [0060] • J. Chem. Soc. Perk Trans. 1, 2001, vol. 978-984 [0450] • J. Org. Chem, 2005, vol. 70, 1771 [0520]
Lisboa, 19 de Novembro de 2015

Claims (14)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de fórmula l,ou um estereoisómero do mesmo
    em que R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em isoxazolilo, pirazoli-la, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, piridinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo, triazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, naftiridinilo, indazolilo, indolilo, 2-indolonilo, benzisoxazolilo, benzoisotiazolilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzimidazolilo, furopiridinilo, tienopiridinilo, tienopirimidinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, tiazolopiridinonilo, tiazolopirazinilo, tiazolopirimidinilo, triazolopiridinilo, triazo-lopirazinilo, pirrolotriazinilo, 5.6- dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5H-cromeno[ 4,3-d]pirimidinilo, 6.7- diidro-5H-ciclopenta[d]pirimidinilo, 5.6.7.8- tetraidroquinazolinilo, 7.8- dihidroquinazolin-5(6H)-onilo, e tetraidrobenzotiazolilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalcóxi, C3-7 cicloalcóxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, Ci_4alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilamido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, Ci-4 haloalquilo, C1-4 haloalcoxi, e NR2R3; R2 é hidrogénio, C1-4 alquilo, C1-4 hidroxialquilo, ou C1-4 aminoalquilo; R3 é hidrogénio, C1-4 alquilo, C1-4 hidroxialquilo, ou C1-4 aminoalquilo; ou R2 e R3 empregues juntamente com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados são azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, N-(C1-4 alquil)piperazinilo, morfolinilo, ou homopiperidinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  2. 2. Um composto da reivindicação 1 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilisoxazolilo, (metil) (fenil)isoxazolilo, metilpirazolilo, dimetilpirazolilo, tienilpirazolilo, metoxifenilpirazolilo, tiazolilo, bromotiazolilo, cianotiazolilo, metiltiazolilo, dimetiltiazolilo, (metil)(fenil)tiazolilo, isopropiltiazolilo, butiltiazolilo, benziltiazolilo, metoxifenilmetiltia-zolilo, feniltiazolilo, clorofeniltiazolilo, metoxifeniltiazolilo, (metoxifenil)(metil)tiazolilo, piridiniltiazolilo, (fenil)(metil)imidazolilo, metiloxadiazolilo, etiloxa-diazolilo, metiltiadiazolilo, fluorofeniltiadiazolilo, furiltiadiazolilo, (dimetilcarboamido)(metil)tiazolilo, (pirrolidinilCO)tiazolilo, feniltriazolilo, piridinilo, bromopiridinilo, cloropiridinilo, (cloro)(fluoro)piridinilo, (cloro)(metil)piridinilo, dicloropiridinilo, fluoropiridinilo, cianopiridinilo, (ciano)(metil)piridinilo, (ciano)(dimetil)piridinilo, metoxipiridinilo, (metilpirrolidinil)piridinilo, fenilpiridinilo, metoxipiridinilpiridinilo, piridazinilo, bromopiridazinilo, cloropiridazinilo, metilpiridazinilo, metoxipiridazinilo, metiltiopiridazinilo, pirrolidinilpiridazinilo, pirrolidinonilpiridazinilo, fenilpiridazinilo, piridinilpiridazinilo, metoxipiridinilpiridazinilo, pirimidinilo, (bromo) (isopropil)pirimidinilo, (bromo)(dimetil)pirimidinilo, (bromo) (ciclopropil)pirimidinilo, (bromo)(metoxi)pirimidinilo, (bromo)(fenil)pirimidinilo, (bromo)(piridinil)pirimidinilo, cloropirimidinilo, (cloro) (dimetil)pirimidinilo, (metil) (metoxi)pirimidinilo, metilpirimidinilo, etilpirimidinilo, (metil) (fenil)pirimidinilo, dimetilpirimidinilo, butilpirimidinilo, isopropilpirimidinilo, ciclopropilpirimidinilo, metoxipirimidinilo, dimetoxipirimidinilo, isopropoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, trifluoroetoxipirimidinilo, fenoxipirimidinilo, metiltiopirimidinilo, fenilpirimidinilo, clorofenilpirimidinilo, metilfenilpirimidinilo, metoxifenilpirimidinilo, (fenil) (triazolil)pirimidinilo, piridinilpirimidinilo, metoxipiridinilpirimidinilo, metoxipirimidinilpirimidinilo, naftilpirimidinilo, pirazinilo, bromopirazinilo, (bromo)(metoxi)pirazinilo, cloropirazinilo, metilpirazinilo, dimetilpirazinilo, butilpirazinilo, cianopi-razinilo, metoxipirazinilo, isopropoxipirazinilo, trifluorometilpirazinilo, e fenilpirazinilo, e dimetiltriazinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  3. 3. Um composto da reivindicação 1 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilpiridinoisoxazolilo, benzoxazolilo, clorobenzoxazolilo, fluorofenilbenzoxazolilo, etilfenilbenzoxazolilo, dimetilaminofenilbenzoxazolilo, piridinilbenzoxazolilo, benzotiazolilo, acetamidoben-zotiazolilo, bromobenzotiazolilo, clorobenzotiazolilo, (cloro)(metil)bem-zotiazolilo, (cloro)(metoxi)benzotiazolilo, fluorobenzotiazolilo, difluorobenzoti-azolilo, cianobenzotiazolilo, metilbenzotiazolilo, dimetilbenzotiazolilo, (metil)(metoxi)benzotiazolilo, etilbenzotiazolilo, trifluorometilbenzotiazolilo, hidroxibenzotiazolilo, metoxibenzotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, isopropoxibenzoti-azolilo, trifluorometoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, dimetoxibenzotiazolilo, morfolinilbenzotiazolilo, (pirrolidinilCO)benzotiazolilo, metilsulfonilbenzotiazolilo, clorotiazolopiridinilo, dimetiltiazolopiridinilo, benziloxitiazolopiridinilo, difluorometoxitiazolopiridinilo, benzotriazolilo, indolonilo, indazoli-la, bromoindazolilo, cloroindazolilo, fluoroindazolilo, (metil)(metoxi)indazolilo, metoxiindazolilo, trifluorometilindazolilo, trifluorometoxiindazolilo, difluorometoxiindazolilo, benzimidazolilo, fluorobenzimidazolilo, metilbenzimidazolilo, (metil)(metoxi)benzimidazolilo, metoxibenzimidazolilo, tetraidrobenzotiazolilo, furopiridinilo, dimetilfuropirimidinilo, tienopirimidinilo, isopropiltienopirimidinilo, dimetiltienopirimidinilo, clorotriazolopiridinilo, metiltriazolopiridinilo, trifluorometiltriazolopiridinilo, metoxitriazolopiridinilo, triazolopiraz inilo, bromopirrolotriaz inilo, dimetilaminotiazolopirimidinilo, tiazolopiazinilo, bromotiazolopiazinilo, metoxitiazolopiazinilo, metiltiotiazolopiazinilo, metoxitiazolopirimidinilo, (metil)(metoxi)tiazolopirimidinilo, quinolinilo, bromoquinolinilo, fluoroquinolinilo, metilquinolinilo, (metil)(metoxi)quinolinilo, isoquinolinilo, bromoisoquinolinilo, dicloroisoquinolinilo, metilisoquinolinilo, dimetilisoquinolinilo, quinoxalinilo, cloroquinoxalinilo, metilquinoxalinilo, metoxiquinoxalinilo, quinazolinilo, bromoquinazolinilo, naftiridinilo, 5.6- dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5H-cromeno[4,3-d]pirimidinilo, 6.7- diidro-5H-ciclopenta[d]pirimidinilo, 5.6.7.8- tetraidroquinazolinilo, e 7.8- dihidroquinazolin-5(6H)-onilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  4. 4. Um composto da reivindicação 1, onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em feniltiazolilo, (cloro) (metil)piridinilo, (bromo) (fenil)pirimidinilo, metoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, difluoroetoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, (metilfenil)pirimidinilo, (metoxifenil)pirimidinilo, bromopirazinilo, cloropirazinilo, metiltiopirazinilo, metoxiben-zotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, tiazolopiridinoni-la, trifluorometilindazolilo, benzimidazolilo, isoquinoinilo, e quinazolinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  5. 5. 0 estereoisómero da reivindicação 1, de acordo com a fórmula Ia;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  6. 6. Um composto da reivindicação 5 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilisoxazolilo, (metil) (fenil)isoxazolilo, metilpirazolilo, dimetilpirazolilo, tienilpirazolilo, metoxifenilpirazolilo, tiazolilo, bromotiazolilo, cianotiazolilo, metiltiazolilo, dimetiltiazolilo, (metil) (fenil)tiazolilo, isopropiltiazolilo, butiltiazolilo, benziltiazolilo, metoxifenilmetiltiazolilo, feniltiazolilo, clorofeniltiazolilo, metoxifeniltiazolilo, (metoxifenil)(metil)tiazolilo, piridiniltiazolilo, (fenil)(metil)imidazolilo, metiloxadiazolilo, etiloxadiazolilo, me-tiltiadiazolilo, fluorofeniltiadiazolilo, furiItiadiazolilo, (dimetilcarboxamido)(metil)tiazolilo, (pirrolidinilCO)tiazolilo, feniltriazolilo, piridinilo, bromopiridinilo, cloropiridinilo, (cloro) (fluoro)piridinilo, (cloro)(metil)piridinilo, dicloropiridi-nilo, fluoropiridinilo, cianopiridinilo, (ciano)(metil)piridinilo, (ciano)(dimetil)piridinilo, metoxipiridinilo, (metilpirrolidinil)piridinilo, fenilpiridinilo, metoxipiridinilpiridinilo, piridazinilo, bromopiridazinilo, cloropiridazinilo, metilpiridazini-la, metoxipiridazinilo, metiltiopiridazinilo, pirrolidinilpiridazinilo, pirrolidinonilpiridazinilo, fenilpiridazinilo, piridinilpiridazinilo, metoxipiridinilpiridazinilo, pirimidinilo, (bromo) (isopropil)pirimidinilo, (bromo)(dimetil)pirimidinilo, (bromo) (ciclopropil)pirimidinilo, (bromo) (metoxi)pirimidinilo, (bromo) (fenil)pirimidinilo, (bromo)(piridinil)pirimidinilo, cloropirimidinilo, (cloro)(dimetil)piri-midinilo, (metil)(metoxi)pirimidinilo, metilpirimidinilo, etilpirimidinilo, (metil)(fenil)pirimidinilo, dimetilpirimidinilo, butilpirimidinilo, isopropilpirimidinilo, ciclopropilpirimidinilo, metoxipirimidinilo, dimetoxipirimidinilo, isopropoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, trifluoroetoxipirimidinilo, fenoxipirimidinilo, metiltiopirimidinilo, fenilpirimidinilo, clorofenilpirimidinilo, metilfenilpirimidinilo, metoxifenilpirimidinilo, (fenil)(triazolil)pirimidinilo, piridinilpirimidinilo, metoxipiridinilpirimidinilo, metoxipirimidinilpirimidinilo, naftilpirimidinilo, pirazinilo, bromopirazinilo, (bromo)(metoxi)pirazinilo, cloropirazinilo, metilpirazinilo, dimetilpirazinilo, butilpirazinilo, cianopirazinilo, metoxipirazinilo, isopropoxipirazinilo, trifluorometilpirazinilo, e fenilpirazinilo, e dimetiltriazinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  7. 7. Um composto da reivindicação 5 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em dimetilpiridinoisoxazolilo, benzoxazolilo, clorobenzoxazolilo, fluorofenilbenzoxazolilo, etilfenilbenzoxazolilo, dimetilaminofenilbenzoxazolilo, piridinilbenzoxazolilo, benzotiazolilo, acetamidobenzotiazolilo, bromobenzotiazolilo, clorobenzotiazolilo, (cloro)(metil)benzotiazolilo, (cloro) (metóxi)benzotiazolilo, fluorobenzotiazolilo, difluorobenzotiazolilo, cianobenzotiazolilo, metilbenzotiazolilo, dimetilbenzotiazolilo, (metil)(metoxi)benzotiazolilo, etilbenzotiazolilo, trifluorometilbenzotiazolilo, hidroxibenzotiazolilo, metoxibenzotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, isopropoxibenzotiazolilo, trifluorometoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, dimetoxibenzotiazolilo, morfolinilbenzotiazolilo, (pirrolidinilCO)benzotiazolilo, metilsulfonilbenzotiazolilo, clorotiazolopiridinilo, dimetiltiazolopiridinilo, benziloxitiazo-lopiridinilo, difluorometoxitiazolopiridinilo, benzotriazolilo, indolonilo, indazolilo, bromoindazolilo, cloroindazolilo, fluoroindazolilo, (metil)(metoxi)indazolilo, metoxiindazolilo, trifluorometilindazolilo, trifluorometoxiindazolilo, difluorometoxiindazolilo, benzimidazolilo, fluorobenzimidazolilo, metilbenzimidazolilo, (metil)(metoxi)benzimidazolilo, metoxibenzimidazolilo, tetraidrobenzotiazolilo, furopiridinilo, dimetilfuropirimidinilo, tienopirimidinilo, isopropiltienopirimidinilo, dimetiltienopirimidinilo, clorotriazolopiridinilo, metiltriazolopiridinilo, trifluorometiltriazolopiridinilo, metoxitriazolopiridinilo, triazolopiraz inilo, bromopirrolotriaz inilo, dimetilaminotiazolopirimidinilo, tiazolopiazinilo, bromotiazolopiazinilo, metoxitiazolopiazinilo, metiItiotiazolopiyazinilo, metoxitiazolopirimidinilo, (metil)(metoxi)tiazolopirimidinilo, quinolinilo, bromoquinolinilo, fluo-roquinolinilo, metilquinolinilo, (metil)(metoxi)quinolinilo, isoquinolinilo, bromoisoquinolinilo, dicloroisoquinolinilo, metilisoquinolinilo, dimetilisoquinolinilo, quinoxalinilo, cloroquinoxalinilo, metilquinoxalinilo, metoxiquinoxalinilo, quinazolinilo, bromoquinazolinilo, naftiridinilo, 5.6- diidrobenzo[h]quinazolinilo, 5H-cromeno[4,3-d]pirimidinilo, 6.7- dihidro-5H-ciclopenta[d]pirimidinilo, 5.6.7.8- tetraidroquinazolinilo, e 7.8- dihidroquinazolin-5(6H)-onilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  8. 8. Um composto da reivindicação 5, onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em feniltiazolilo, (cloro)(metil)piridinilo, (bromo)(fenil)pirimidinilo, metoxipirimidinilo, difluorometoxipirimidinilo, difluoroetoxipirimidinilo, ciclopentoxipirimidinilo, (metilfenil)pirimidinilo, (metoxifenil)pirimidinilo, bromopirazinilo, cloropirazinilo, metiltiopirazinilo, metoxibenzotiazolilo, etoxibenzotiazolilo, difluorometoxibenzotiazolilo, tiazolopiridinonilo, trifluorometilindazolilo, benzimidazolilo, isoquinoinilo, e quinazolinilo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  9. 9. um composto da reivindicação 5 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, benzotiazolilo, tiazolopiridinilo, indazolilo, benzimidazolilo, isoquinoinilo, e quinazolinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcóxi, C3-7 cicloalcóxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilamido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde o piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes, independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcóxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  10. 10. Um composto da reivindicação 9 onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, tiazolopiridinilo, e isoquinoinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em C1-4 alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcóxi, C3-7 cicloalcoxi, C1-4 alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulf onilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilamido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde o piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halo, Ci_4 alquilo, Ci_4 alcoxi, Ci_4 haloalquilo, C1-4 halo-alcóxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  11. 11. Um composto da reivindicação 10, onde R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em piridinilo e isoquinoinilo, e é substituído com 0 a 3 substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em Ci-4alquilo, C3-7 cicloalquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, C1-4 haloalcoxi, C3-7cicloalcoxi, Ci-4alquiltio, fenoxi, benziloxi, halo, hidroxi, ciano, C1-4 alquilsulfonilo, NR2R3, pirrolidinonilo, metilenodioxi, furilo, tienilo, triazolilo, pirimidinilo, naftilo, C1-4 alquilamido, CONR2R3, piridilo, fenilo, e benzilo, e onde 0 piridilo, fenilo e benzilo são substituídos com 0 a 2 substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em halo, C1-4 alquilo, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalquilo, C1-4 haloalcóxi, e NR2R3; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  12. 12. Composto selecionado a partir do grupo consistindo em e
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  13. 13. Uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 12, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um portador farmaceuticamente aceitável.
  14. 14. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 12 para utilização no tratamento de esquizofrenia ou doença de Alzheimer . Lisboa, 19 de Novembro de 2015
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