PT1680425E

PT1680425E - 6 - [fenil (substituído)] triazolopirimidinas como agentes contra o cancro.

Info

Publication number: PT1680425E
Application number: PT04788820T
Authority: PT
Inventors: Semiramis Ayral-Kaloustian; Nan Zhang; Hiep Thai Nguyen; Yanzhong Wu; Wei Tong
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2003-09-24
Filing date: 2004-09-17
Publication date: 2007-02-28
Also published as: RU2006107579A; CN1867569A; ECSP066458A; US7507739B2; CO5690598A2; PA8613301A1; PE20050433A1; GT200400190A; CY1106392T1; TW200512211A; DE602004004295T8; NO20061318L; KR20060098368A; MXPA06003206A; SI1680425T1; CR8288A; ZA200602387B; DE602004004295T2; US20050090508A1; AU2004276240A1

Description

ΡΕ1680425 1

DESCRIÇÃO

"6-[FENIL(SUBSTITUÍDO)]TRIAZOLOPIRIMIDINAS COMO AGENTES CONTRA O CANCRO"

CAMPO DA INVENÇÃO A invenção presente diz respeito a determinados compostos de 6-[fenil(substituído)]-triazolopirimidina ou a seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, e a composições contendo os compostos referidos ou aos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, em que os compostos referidos sejam agentes contra o cancro úteis para o tratamento de cancro em mamíferos, para o tratamento ou a prevenção de tumores cancerosos que expressem resistência a muitos fármacos (MDR) ou que sejam resistentes por causa de MDR, à utilização para a preparação de um medicamento para se tratar ou de inibir o crescimento de células tumorais cancerosas e doenças associadas num mamífero que dele necessite, pela promoção de uma polimerização nos microtúbulos, e à utilização para a preparação de um medicamento para se tratarem ou para inibir o crescimento de tumores cancerosos num mamífero, com resistência inerente ou adquirida aos agentes quimioterapêuticos utilizados em tratamentos por quimioterapia, e em especial a agentes anti mitóticos, pela administração de uma quantidade eficaz de um composto da invenção e de seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. 2 ΡΕ1680425

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A maior parte dos citostáticos que se utilizam hoje em dia, ou inibem a formação dos precursores iniciais para a síntese do ADN, ou bloqueiam as ADN polimerases, ou interferem com a função de matriz do ADN, porque o ADN foi o alvo principal para se desenvolverem os fármacos terapêuticos da quimioterapia. Infelizmente, a inibição da formação de precursores essenciais para a biossíntese do ADN ou o bloqueio da ADN polimerase, ou uma interferência com a função matricial do ADN, também afectam os tecidos normais.

Os fármacos anti microtúbulos são uma das categorias principais de agentes contra o cancro (Rowinsky, E. K. , e Tolcher, A. W. Ant imicrotubule agents. em: V. T. Devita, Jr. , S. Hellman, e S. A. Rosenberg (eds.), Câncer Principies and Practice, 6a Ed., págs. 431-452, Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins, 2001). Eles funcionam pela interferência com a função dos microtúbulos celulares, em especial com a roca mitótica. 0 impedimento da função normal da roca leva à morte apoptótica da célula.

Hoje em dia existem três classes principais de agentes farmacológicos anti microtúbulos conhecidos, cada um deles tem uma região de ligação bem identificada na β-tubulina e efeitos específicos sobre a função dos microtúbulos. Estas classes são: 1) agentes com um local de 3 ΡΕ1680425 taxano que promovem a formação de microtúbulos e que estabilizam os microtúbulos; 2) agentes com um local peptí-dico vinca que desestabilizam os microtúbulos e amiúde induzem a formação de polímeros ou agregados anormais, com elevadas concentrações; e 3) agentes com um local de colchicina que também desestabilizam os microtúbulos e em geral não induzem outros polímeros (Hamel, E. Antimitotic natural products and their interactions with tubulin. Med. Res. Rev., 16: 207-231,1996). A maior parte dos ligandos para todas estas três classes de locais são produtos naturais ou derivados semi-sintéticos de produtos naturais. O paclitaxel e o seu derivado semi-sintético docetaxel (Taxotere®) interferem com a formação dos microtúbulos e estabilizam os microtúbulos. O Paclitaxel (Taxol®) , é um diterpeno isolado da casca de um teixo do Oeste (do Pacífico, nos EUA), Taxus brevifolia, e é representativo de uma nova classe de agentes terapêuticos tendo um anel de taxano. Descobriu-se adicionalmente noutros membros da família dos Taxacae, incluindo o teixo do Canadá (Taxus canadensis) que se encontra na Gaspésia, no Leste do Canada e no Taxus baccata que se encontra na Europa e cujas agulhas contêm paclitaxel e análogos deste composto, e que portanto representam uma fonte renovável de paclitaxel e de seus derivados. 0 extracto em bruto foi testado pela primeira vez durante os anos 1960, e o seu princípio activo foi isolado em 1971 e a sua estrutura química foi identificada (M. C. Wani et al., J. Am. Chem. Soc., 93, 2325 (1971)). Para além disto, foi evidenciada 4 ΡΕ1680425 uma gama de actuação muito larga contra células de melanoma, leucemia, diversos carcinomas, sarcomas e linfomas não de Hodgkin, bem como sobre uma série de tumores sólidos em animais, usando testes adicionais. 0 Paclitaxel e os seus análogos têm sido produzidos por síntese parcial a partir de 10-desacetilbacatin III, um precursor obtido de agulhas e engaços de teixo, e por síntese total (Holton, et al., J. Am. Chem. Soc. 116: 1597-1601 (1994) e Nicolaou, et al., Nature 367: 630-634 (1994)). demonstrou-se que o Paclitaxel possuía actividade anti neoplásica. Mais recentemente, mostrou-se que a actividade anti tumoral do paclitaxel é devida à promoção de polimerização nos microtúbulos (Kumar, N., J. Biol. Chem. 256: 10435-10441 (1981); Rowinsky, et al., J. Natl. Câncer Inst., 82: 1247-1259 (1990); e Schiff, et al.,

Nature, 277: 665-667 (1979)). O Paclitaxel já demonstrou até hoje eficácia em diversos tumores humanos, em ensaios clínicos (McGuire, et al., Ann. Int. Med., 111: 273-279 (1989); Holmes, et al., J. Natl. Câncer Inst., 83 : 1797- 1805 (1991); Kohn et al., J. Natl. Câncer Inst., 86: 18-24 (1994); e A. Bicker et al., Anti-Cancer Drugs, 4, 141-148 (1993) . São utilizados clinicamente para tratar diversos cancros em seres humanos, dois agentes com um local de taxano (paclitaxel e docetaxel) e três agentes com um local de péptido vinca (vinblastina, vincristina, e vinorelbina). Os taxanos comprovaram ter maior utilidade contra tumores sólidos (por exemplo, do pulmão, da mama, do ovário) do que 5 ΡΕ1680425 o alcaloide da vinca, o que sugere que os agentes que promovem a formação de microtúbulos podem ser clinicamente superiores a aqueles que desestabilizam os microtúbulos. Não se utilizam tem terapia os agentes com local de colchicina.

Apesar da utilização clinica alargada de paclitaxel e de docetaxel, estes fármacos têm diversas limitações que criam uma necessidade de agentes melhorados. Em primeiro lugar, muitos tumores são, por si próprios, resistentes (por exemplo os tumores do cólon) ou tornam-se resistentes depois de múltiplos ciclos de tratamento, pelo menos em parte devido à expressão de transportadores de fármacos localizados nas membranas celulares cancerosas que bombeiam os fármacos para fora das células e portanto diminuem a sua eficácia (Gottesman, Μ. M. Mechanisms de câncer drug resistance. Annu. Rev. Med., 53: 615-627, 2002) . O mais bem conhecido destes transportadores é a P-glicoproteína. Existe portanto uma necessidade de novos agentes com efeitos semelhantes aos do taxano sobre a polimerização nos microtúbulos, que não sejam substratos da P-glicoproteina ou de outras bombas semelhantes e que portanto ultrapassem esta razão de ser da resistência ao taxano em pacientes.

Em segundo lugar, o paclitaxel e o docetaxel apresentam fracas solubilidades em água e têm que ser formulados em Cremophor EL, um veiculo que induz reacções de hipersensibilidade importantes (Li, C. L., Newman, R. 6 ΡΕ1680425 A., e Wallace, S. Reformulating paclitaxel, Science & Medicine, Jan/Feb: 38-47,1999). Os pacientes são tipicamente medicados primeiro com corticosteróides e com anti histamínicos, antes da administração do paclitaxel, para minimizar estas toxicidades. Existe portanto uma necessidade de novos agentes com efeitos semelhantes aos do taxano quanto à polimerização nos microtúbulos, e que sejam muito solúveis em água e possam ser administrados em soro fisiológico fisiológico ou em outro veiculo adequado e não tóxico.

Em terceiro lugar, o paclitaxel é um produto natural que possui uma estrutural muito complexa, e o docetaxel é um seu derivado semi-sintético com uma estrutura muito próxima da dele. Existe portanto uma necessidade de compostos que possam estar disponíveis por síntese, que sejam estruturalmente diferentes dos taxanos , e que apresentem efeitos semelhantes ao taxano quanto à polimerização nos microtúbulos.

Existe portanto ainda na técnica uma necessidade de agentes citotóxicos para utilização na terapia do cancro. Em especial, existe uma necessidade de agentes citotóxicos que inibam ou tratem o crescimento de tumores que tenham um efeito semelhante ao paclitaxel e interfiram com o processo de formação de microtúbulos. Existe também uma necessidade adicional na técnica, de agentes que acelerem a polimerização da tubulina e estabilizem os microtúbulos formados. 7 ΡΕ1680425

Será portanto vantajoso proporcionar novos compostos que nos fornecem um método para se tratar ou para inibir a proliferação celular, o crescimento neoplásico e o de tumores malignos em mamiferos, pela administração de compostos que tenham actividade contra o cancro semelhante à do paclitaxel.

Para além disto, seria vantajoso proporcionarem-se novos compostos que consubstanciem um método para se tratar ou para inibir o crescimento de tumores malignos que expressem resistência a múltiplos fármacos (MDR) ou que sejam resistentes por causa da MDR.

Para além disso, seria vantajoso proporcionarem-se novos compostos que consubstanciem um método para se tratar ou para inibir o crescimento de tumores cancerosos num mamifero ou a resistência adquirida a agentes quimio-terapêuticos e em especial a agentes anti mitóticos.

Está descrita na técnica a preparação e a utilização de triazolopirimidinas substituídas na agricultura, como fungicidas, nas Patentes US com os números: 5.593.996; 5.756.509; 5.948.783; 5.981.534; 5.612.345; 5.994.360; 6.020.338; 5.985.883; 5.854.252; 5.808.066; 5.817.663; 5.955.252; 5.965.561; 5.986.135; 5.750.766; 6.117.865; 6.117.876; 6.124.301; 6.204.269; 6.255.309; 6.268.371; 6.277.856; 6.284.762; 6.297.251; 6 .387.848; Publicações de Pedido de Patente US 2002/0045631 Al; US 2 0 02/0061882 Al; ΡΕ1680425 US 2003/0055069 Al e Publicações Internacionais Números: WO 98/46607; WO 98/46608; WO 99/48893; W= 99/41255; WO 00/18227; WO 01/35738 A2; WO 02/46195 Al; WO 02/067679 Al; WO 02/083676 Al; EP 0 834513 A2; EP 0 782997 A2; EP 0 550113 Bl; FR 2784381 Al; EP 0 989130 Al; WO 98/41496 ; WO 94/20501; EP 0 945453A1; EP 0 562615 Al; EP 0 562615B1; EP 0 550113 A2; EP 0 943241 Bl; EP 0 988790 Bl e tendo a seguinte fórmula geral:

Está descrita na publicação internacional WO 02/02563 a utilização de triazolopirimidinas como agentes contra o cancro.

Os compostos da invenção presente são uma nova classe de agentes semelhantes ao taxano, que cumprem as necessidades descritas acima neste documento, e que diferem de um modo significativo das classes anteriormente conhecidas de compostos anti microtubulares. Os compostos desta invenção ligam-se ao local vinca da β-tubulina, mas no entanto eles têm muitas das propriedades que são semelhantes às dos taxanos e diferentes das dos agentes do local vinca. Em particular, os compostos desta invenção aumentam a polimerização da proteína associada aos microtúbulos (MAP) - rica em tubulina, na presença de GTP, a baixos valores da razão molar de composto:tubulina, de uma forma semelhante à do paclitaxel e do docetaxel. Os 9 ΡΕ1680425 compostos desta invenção também induzem a polimerização de tubulina altamente purificada na ausência de GTP, em condições experimentais adequadas, uma actividade que é uma característica habitualmente considerada como denunciadora dos taxanos. Os compostos da invenção presente são potentemente citotóxicos para muitas linhas de células cancerosas de humanos em cultura, incluindo as linhas que sobre-expressam os transportadores de membrana MDR (P-glicoproteina), MRP, e MXR, o que os torna activos contra todas as linhas de células que são resistentes ai pacli-taxel e à vincristina. Em especial, os exemplos representativos desta invenção possuem uma solubilidade elevada em água e podem ser formulados em soro fisiológico. Os exemplos representativos desta invenção são activos como agentes anti tumorais em ratinhos atimicos portadores de xenotransplantes de tumores humanos de carcinoma do cólon e do pulmão, de melanoma, e de glioblastoma, quando doseados quer por via endovenosa que por via oral.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

De acordo com a invenção presente, proporcionam-se compostos representados pela Fórmula (I):

em que: ΡΕ1680425 10 R1 seja seleccionado de entre

Ri

N—-H , e cicloalquilo C6-C8 substituído opcionalmente com R8; R2 seja um grupo de entre o conjunto 15 L2 n seja um inteiro igual a 2, 3, ou 4; X seja Cl ou Br; Y seja O, S, CH2 ou NR4; Q seja seleccionado de entre -NR6R7 e -OH; F, Cl, L1 e L2 sejam cada um deles independentemente H, Br, ou CF3; R3 seja CF3 ou C2F5;

R4 e R5 sejam cada um deles independentemente H 11 ΡΕ1680425 ou alquilo C1-C3; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C1-C3; ou R6 e R7, quando forem tomados opcionalmente em conjunto com o átomo de azoto a que cada um deles se liga, formem um anel heterocíclico com 4 a 6 membros, contendo 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e opcionalmente substituído com R8; R8 seja alquilo Ci-C3; ou sais destes compostos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

DEFINIÇÕES 0 termo alquilo significa um grupo alquilo com cadeia linear ou ramificada, com 1 a 3 átomos de carbono. 0 termo t-BOC, tal como utilizado neste documento, significa terc-butoxicarbonilo. O termo aminoalcoxilo significa uma espécie com a fórmula 4 β6 5 ' V. 12 ΡΕ1680425 O termo aminoalquilo significa uma espécie com a fórmula 0 termo aminoalquiltio significa uma espécie com a fórmula

O termo com a fórmula aminoalquilamino significa uma espécie

-n O termo hidroalcoxilo significa uma espécie com a fórmula

O— A expressão hidróxido de metal alcalino inclui hidróxidos de litio, de potássio ou de sódi o. A expressão carbonato de metal alcalino inclui carbonatos de litio, de sódio ou de potássi o. A expressão hidreto de metal alcalino inclui hidreto de litio, de sódio e de potássio. A expressão base forte significa um hidróxido de 13 ΡΕ1680425 metal alcalino, um carbonato de metal alcalino, e um hidreto de metal alcalino (por exemplo hidreto de sódio).

Fenilo, tal como se utiliza neste documento, refere-se a um anel aromático com 6 membros.

Cicloalquilo, tal como se utiliza neste documento, significa um anel mono cíclico carbocíclico saturado contendo entre 6 e 8 átomos de carbono substituídos opcionalmente com alquilo C1-C3. Incluem-se nos exemplos não limitativos e representativos: ciclo-hexilo, ciclo-heptilo e ciclo-octilo.

Tal como se utiliza neste documento, um anel heterocíclico saturado é um anel com 4 a 6 membros contendo 1-2 átomos de azoto, 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre substituídos opcionalmente com alquilo C1-C3. Incluem-se nos exemplos representativos e não limitativos: morfolina, piperidina, pirrolidina, piperazina, azetidina e N-metil-piperazina. A invenção presente proporciona um método de tratar ou de inibir o crescimento de células cancerosas tumorais, e doenças associadas num mamífero, pela administração de uma quantidade eficaz dos compostos com a Fórmula (I) e dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico a quem deles necessite. A invenção presente também proporciona um método 14 ΡΕ1680425 de se tratar, ou de inibir o crescimento de células cancerosas tumorais e as doenças associadas em mamíferos que dele necessitem, pela interacção com a tubulina e com os microtúbulos, pela promoção da polimerização nos microtúbulos, e que inclui a administração ao mamífero referido de uma quantidade eficaz dos compostos com a Fórmula (I) e dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Também se proporciona um método para o tratamento ou a prevenção de tumores que expressem resistência a múltiplos fármacos (MDR) ou que sejam resistentes por causa de MDR, num mamífero que dele necessite, método esse que inclua administrar-se ao mamífero referido uma quantidade eficaz de tais compostos ou dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Esta invenção também proporciona um método de se promover a polimerização da tubulina num sistema que contenha tubulina, por se proporcionar o contacto entre o referido sistema contendo a tubulina e uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Para além disto esta invenção proporciona um método de estabilizar microtúbulos num sistema contendo tubulina, o qual inclui levar-se ao contacto o referido sistema contendo tubulina com uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) ou com um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. 15 ΡΕ1680425

Também se proporciona um método de tratar, de inibir o crescimento de, ou de eliminar, um tumor num mamífero que disso necessite, em que o tumor referido seja resistente a pelo menos um agente quimioterapêutico, o qual inclua administrar-se ao referido mamífero uma quantidade eficaz dos compostos com a Fórmula (I) e dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Num outro aspecto ainda, esta invenção proporciona um composto com a Fórmula (I) em combinação ou em associação com um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico. Em particular, a invenção presente propociona uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) e um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Os compostos desta invenção podem conter um átomo de carbono assimétrico e alguns dos compostos desta invenção podem conter um ou mais centros de quiralidade e podem portanto originar estereoisómeros, tais como enantiómeros e diastereómeros. Os estereoisómeros da invenção em preço são designados de acordo com o Sistema de Cahn-lngold-Prelog System. Embora seja mostrada sem respeito pela estereoquímica, na Fórmula (I), a invenção presente inclui todos os estereoisómeros individuais possíveis; bem como as misturas racémicas e outras misturas de estereoisómeros R e S (misturas escalémicas que são misturas de quantidades desiguais dos enantiómeros), e dos 16 ΡΕ1680425 seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Incluem-se no âmbito da invenção presente os isómeros (R) e (S) dos compostos com a Fórmula geral (I) contendo um centro quiral, e os seus racematos. A invenção presente inclui todos os estereoisómeros dos compostos, quer isentos dos outros estereoisómeros, quer misturados com outros estereoisómeros, em quaisquer proporções, e inclui portanto, por exemplo, misturas racémicas dos enantiómeros bem como as misturas diastereoméricas de isómeros. pode determinar-se a configuração absoluta de cada composto por cristalografia convencional de raios-X.

Podem obter-se isómeros ópticos sob forma pura, por técnicas de separação convencionais, ou por síntese específica de enantiómeros.

Também se incluem no âmbito desta invenção todos os polimorfos, hidratos e solvatos dos compostos da invenção presente.

Uma concretização preferida da invenção é o composto com a fórmula (Ia) tal como se ilustra adiante:

17 ΡΕ1680425 ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Uma concretização preferida da invenção é o composto coma fórmula (Ib) tal como se ilustra adiante: R3 r5':^xnh

R2 X ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. São também preferidos os compostos com a Fórmula (I) em que R2 seja

ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Também são preferidos os compostos com a Fórmula (I) em que R1 seja cicloalquilo C6-Cs substituído opcionalmente com R8 ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. 18 ΡΕ1680425

Entre o grupo mais preferido de compostos desta invenção de acordo com a Fórmula (Ia), incluindo os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, encontram-se aqueles que são seleccionados de entre os subconjuntos a) , e b) adiante: a) R2 seja

n=3; X seja Cl ou Br; Y seja O; R3 seja CF3; Q seja -NR6R7; R5 seja H ou metilo; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C1-C3; ou R6 e R7 quando forem opcionalmente tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual cada um deles se liga, formem um anel heterociclico saturado com 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e substituído opcionalmente com R8; ΡΕ1680425 19 R8 seja alquilo C1-C3; L1 seja F; L2 seja H ou F; ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, e b) R2 seja

n seja 3; X seja Cl; Y seja O; Q seja -NR6R7; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; L2 seja F; 20 ΡΕ1680425 ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Entre o grupo mais preferido de compostos desta de acordo com a Fórmula (I), incluindo os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, encontra-se o subgrupo adiante: R1 seja cicloalquilo C6-Cs; R2 seja

n seja 3; X seja Cl; Y seja O; Q seja -NR6R7; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; 21 ΡΕ1680425 L2 seja F; ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Entre o grupo mais preferido de compostos desta de acordo com a Fórmula (Ia), incluindo os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, encontra -se o subgrupo adiante: R1 seja cicloalquilo C6-C8; R2 seja

X seja Cl; n seja 3; Y seja O; Q seja -NR6R7; R3 seja -CF3; R5 seja H ou metilo; R6 seja metilo; 22 ΡΕ1680425 R7 seja H ou metilo; L1 seja F; L2 seja F; ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Entre o grupo mais preferido de compostos desta de acordo com a Fórmula (Ib), incluindo os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, encontra -se o subgrupo adiante: R1 seja cicloalquilo C6-Cs; R2 seja

X seja Cl; n seja 3; Y seja O; Q seja -NR6R7; 23 ΡΕ1680425 R3 seja -CF3; R5 seja H ou metilo; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; L2 seja F; ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. São compostos especificamente preferidos desta invenção de acordo com a Fórmula (I), os seguintes compostos ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico: 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)pro-poxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, - 24 - ΡΕ1680425 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)pro-poxi]fenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil)[1,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil)[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-aminopropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-l il)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluorof enil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{3-[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpropoxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 25 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-il-propoxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri azolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-azetidin-1-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil] 5-cloro-N-[(IS) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluo rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 26 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletόχι )fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 2- [4-(5-cloro-7-{ [ (15)-2,2,2-trifluoro-l-metilet il] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]etanol, 3- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{((15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[(1-5)-2,2,2-trifluoro-1-me-tiletil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenil]-N1, N3, N3-trimetilpropano-l,3-diamina, ^-^-(õ-cloro-l-í [(15)-2,2,2-trif luor o-1-met ilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-l, 3-diamina, 27 ΡΕ1680425 N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2,N2-dimetiletano-l,2-diamina, 5-bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi] - 2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 3 - [ 4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol, 3-[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N,N-dimetilpropan-1-amina, 28 ΡΕ1680425 3-[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N-metilpropan-1-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propo-xi]fenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, e 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propo-xi]fenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina. São compostos especificamente preferidos desta invenção de acordo com a Fórmula (Ib), os seguintes compostos ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico seleccionados de entre o conjunto de: 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil} -N- [ (lí?) —2,2,2-trif luoro-l-metiletil ] [1,2,4] — triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] f enil } -N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-aminopropoxi)-2,β-difluorofenil]-5-cloro-N—[(IR)—2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5- a]pirimidin-7-amina, ΡΕ1680425 29 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-1 il)propoxi]fenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4 —{3 —[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluorofenil)-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-il-propoxi)fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropo-xi) fenil ] -N- [ (1.R) —2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] [ 1,2, 4 ] triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 6- 4-(3-azetidin-1-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 30 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][ 1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-di-f luorof enil} -N- [ (1.R) - 2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] [1,2,4]-triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorof enil } -N- [ (1-R) —2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] [ 1,2, 4 ] tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletoxi) fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 2-[4-(5-cloro-7-{ [ (177)-2,2,2-trif luor o-1-met ilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]etanol, 31 ΡΕ1680425 3- [4-(5-cloro-7-{[ (1.R) - 2,2,2-trifluorο-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{((IR)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[(1-R)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-f luorofenil] -N1,!!3, N3-trimetilpropano-l, 3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{ [ (1.R) - 2,2,2-trif luor o-1-meti 1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-l, 3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{ [ (liR) - 2,2,2-trif luor o-1-meti 1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2,N2-dimetiletano-1,2-diamina, 5- bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorof enil} -N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amine, 32 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amine, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2, 6-di-fluorofenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-di-fluorofenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina e 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] f enil} -N- [ (1.R) —2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] [ 1,2, 4 ] triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina. São compostos especificamente preferidos desta invenção de acordo com a Fórmula (Ia), os seguintes compostos os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico: 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 33 ΡΕ1680425 6-[4-(3-aminopropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-1 il)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil } -N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{3-[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]tri azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpropo xi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 34 ΡΕ1680425 6-[4-(3-azetidin-l-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil] 5-cloro-N-[(15) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluorof enil } -N-[ (15) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluo rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo lo [ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletόχι )fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 35 ΡΕ1680425 2- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]etanol, 3- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-d- fluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil]-N1,N3,N3-trimetilpropano-l,3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metil-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2,N2-dimetiletanp-1,2-diamina, 5- bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 36 ΡΕ1680425 5-cloro-6-4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, e 5-cloro-6-3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo- lo[1,5-a]pirimidin-7-amina.

Os compostos mais especificamente preferidos desta invenção, consoante a Fórmula (Ia), são os seguintes compostos ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico: 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, e 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina. 37 ΡΕ1680425

Um composto especificamente preferido desta invenção, consoante a Fórmula (Ib), é o seguinte composto ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico: 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[3-(metilamino)propo-xi]fenil}-N-[(IR)-2, 2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina.

Incluem-se em mais compostos especificamente preferidos desta invenção: cloridrato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(meti lamino )propoxi]fenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metil-etil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[ (IS) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil ] [l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(lS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, di-hidrato do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amma, e 38 ΡΕ1680425 di-hidrato do sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina.

Os compostos mais especificamente preferidos da invenção são:

Sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina e

Di-hidrato do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[ (15) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina. São compostos preferidos adicionais desta invenção, consoante a Fórmula (I), os seguintes compostos ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico: 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] fenil } -N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 39 ΡΕ1680425 6-[4-(3-aminopropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pi-rimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-l il)propoxi]fenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluorof enil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4 —{3 —[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluorofenil)-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-il-propoxi)fenil]-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4] — triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropo-xi)fenil]-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 40 ΡΕ1680425 6 - [ 4-(3-azetidin-1-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil] 5-cloro-N-[1,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5 a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-fenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluorofenil} -N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorofenil} -N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-ileto-xi)fenil]-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-j3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 41 ΡΕ1680425 2- [4-(5-cloro-7-{[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenoxi]etanol, 3- [4-(5-cloro-7-{[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-f[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenil]-N1, N3, N3-trimetilpropano-1,3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenil] -N3,N3-dimetilpropano-l, 3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenil] -N2,N2-dimetiletano-l, 2-diamina, 5- bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 42 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluo-rofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, e 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

Podem preparar-se os compostos desta invenção a partir de: (a) matérias-primas disponíveis comercialmente; (b) matérias-primas conhecidas que se podem preparar utilizando processos tais como se encontram descritos na literatura, ou (c) novos intermediários descritos nos esquemas e nos procedimentos experimentais deste documento.

Levam-se a cabo as reacções num solvente adequado aos reagentes e aos materiais empregues e adequados para a transformação que pretende levar a cabo. É entendido pelos 43 ΡΕ1680425 especialistas da técnica da síntese orgânica que as diversas funcionalidades presentes na molécula devem ser consistentes com as transformações químicas propostas. Isto pode necessitar uma escolha criteriosa quanto à ordem relativa dos passos sintéticos. Deve levar-se em conta adequadamente a protecção dos grupos funcionais reactivos para se impedirem reacções laterais não pretendidas. Os substituintes nas matérias-primas podem ser incompatíveis com algumas das condições reaccionais. Esse tipo de restrições quanto aos substituintes que são compatíveis com as condições reaccionais, será aparente a uma pessoa com conhecimentos da técnica. Quando tal for apropriado, as reacções são levadas a cabo em atmosfera inerte.

Podem preparar-se os compostos desta invenção a que diz respeito a Fórmula (I), em que Y seja 0, S, ou NR4 e R1 seja R3

por um processo tal como ilustrado no Esquema I, o qual inclui tratar-se um composto com a Fórmula (II) (US 5.948.783, US 5.986.135, US 6.117.876, e US 6.297.251) no qual R1, R2, R3, R5, L1, L2, e X sejam tal como se definiram acima neste documento, e L represente um grupo de saída, que é um grupo removível, em especial um grupo fluoro, com 44 ΡΕ1680425 um composto com a fórmula HY-(CH2)nQ em que Q e Y sejam tal foram definidos acima neste documento, na presença de uma base forte incluindo um hidróxido de metal alcalino, um carbonato de metal alcalino e um hidreto de metal alcalino, por exemplo hidreto de sódio, na presença ou na ausência de um solvente. Incluem-se nos solventes adequados os solventes apróticos, tais como o sulfóxido de dimetilo, a dimetilformamida, e outros semelhantes. Leva-se a cabo a reacção de forma adequada, a uma temperatura na gama de entre cerca de 0°C e cerca de 100°C.

Esquema I:

V * O, S„ m m

Os compostos com a Fórmula (I) em que R1 seja

e Y seja CH2 podem ser preparados por um processo descrito no Esquema II adiante, em que R1, R2, R3, R5, R6, R7, L1, L2, X e n sejam tal como se definiram acima. ΡΕ1680425 45 II:

Esquema

Ht02C_£QtBt

lOL·*3 H POXj *3 R5™ m

N-HH

Tal como descrito no Esquema II, pelo tratamento do diéster (III) com 2-amino-l,3,4-triazole (IV) na presença de uma amina terciária tal como terc-butilamina, a uma temperatura de até 190°C, obtém-se o composto (V). Por halogenação do composto (V) com um dos agentes halogenantes POX3, PX3, ou PX5, tal como oxicloreto de fósforo ou oxibrometo de fósforo, obtém-se o composto 5,7-di-halo (VI), em que X foi definido acima neste documento. Por substituição do 5-bromo ou 5-cloro do composto 5,7-di-halo (VI) com uma amina (VII), num solvente aprótico adequado, tal como sulfóxido de dimetilo ou dimetilformamida, e outros semelhantes, na presença de uma base, por exemplo N,N-di-isopropiletilamina, obtêm-se compostos com a Fórmula (I) . 46 ΡΕ1680425

Pode preparar-se o diéster (III) por um processo catalisado por paládio no qual se acopla o trifluorometa-nossulfonato (XI) com um ácido aminoalquilborónico (XII).

Pode preparar-se o trifluorossulfonato (XI) acoplando o brometo (VIII) com dietilmalonato (US 5.981.534), para se obter o diéster (IX) seguindo-se uma desmetilação na presença de tribrometo de boro, para se obter o fenol (X) . Uma reacção ulterior do fenol (X) com anidrido tri-fluorometanossulfónico permite obter o trifluorometanos-sulfonato (XI) tal como se ilustra no Esquema III.

Esquema III:

(5Q3J

EtD^C^GOjBt ♦•I 1 Ti

TY (ΗΪ)

Podem preparar-se os compostos com a Fórmula (I) em que R1 seja cicloalquilo C6-Cs, Y seja 0, S, ou NR4, e Q seja OH, por um processo descrito no Esquema IV e no Esquema V adiante, em que L1, L2, L3, X e n sejam tal como se definiram acima. Faz-se reagir o éster (XIII) com o cloreto de acilo (XIV), preparado do ácido carboxilico correspondente em que R1 seja cicloalquilo C6-Cs, na - 47 - ΡΕ1680425 presença de di-isopropilamideto de lítio (LDA) , para se obter o cetoéster XV). Por uma reacção ulterior do cetoéster (XV) com 2-amino-l,3,4-triazole (IV) na presença de uma amina terciária como base, tal como a tributilamina, a uma temperatura de até 190°C, obtém-se o pirimidin-5-ol (XVI).

Esquema IV

Tal como se ilustra no Esquema V, faz-se reagir o pirimidin-5-ol (XVI) com o composto (XVII) na presença de uma base forte, nas quais se inclui um hidróxido de metal alcalino, um carbonato de metal alcalino, ou um hidreto de metal alcalino, por exemplo hidreto de sódio num solvente aprótico nos quais se incluem o sulfóxido de dimetilo, a dimetilformamida, e outros semelhantes, para se obter o éter (XVIII) . Por reacção do éter (XVIII) com um agente halogenante, P0X3, PX3, ou PX5, tal como oxicloreto de fósforo ou oxibrometo de fósforo, na presença de N,N-dietilanilina, obtém-se o composto (XIX) em que X já foi definido acima neste documento, o qual se faz por sua vez reagir com 2,3-dicloro-5,6-diciano-l,4-benzoquinona (DDQ), para se obter o álcool (XX), em que R1 é cicloalquilo C6-Cs. 48 ΡΕ1680425

Esquema V:

Com referência ao Esquema VI, faz-se reagir o pirimidin-5-ol (XVI), em que R1 é cicloalquilo Cç-Cq, com o composto (XXI), em que Y é 0, S, ou -NR4, e R6 e R7 não são H, na presença de uma base forte, nas quais se inclui um hidróxido de metal alcalino, um carbonato de metal alcalino, ou um hidreto de metal alcalino, por exemplo hidreto de sódio num solvente aprótico nos quais se incluem o sulfóxido de dimetilo, a dimetilformamida, e outros semelhantes, para se obter a amina (XXII) . Por reacção da amina (XXII) com um agente halogenante, POX3, PX3, ou PX5, tal como oxicloreto de fósforo ou oxibrometo de fósforo na presença de N,N-dietilanilina, obtém-se o composto (XXIII) em que X já foi definido acima neste documento, em que R1 é cicloalquilo C6-Cs, e R6 e R7 não são H.

Esquema VI:

49 ΡΕ1680425

Tal como se ilustra no Esquema VII, faz-se reagir o pirimidin-5-ol (XVI), em que R1 é cicloalquilo C6-Cs, com um composto amino (XXIV), em que Y é 0, S, ou -NR4, e R7 é H, na presença de uma base forte, nas quais se inclui um hidróxido de metal alcalino, um carbonato de metal alcalino, ou um hidreto de metal alcalino, por exemplo hidreto de sódio num solvente aprótico nos quais se incluem o sulfóxido de dimetilo, a dimetilformamida, e outros semelhantes, para se obter a amina (XXV). Por reacção da amina (XXV) com dicarbonato de di-terc-butilo obtém-se a amina bloqueada com terc-butoxi-carbonilo (XXVI). Por reacção da amina bloqueada com terc-butoxi-carbonilo (XXVI) com um agente halogenante, POX3, PX3, ou PX5, tal como oxicloreto de fósforo ou oxibrometo de fósforo obtém-se o composto (XXVII) em que X já foi definido acima neste documento, desbloqueia-se então o composto (XXVII) com ácido trifluoroacético (TFA) para se obter a amina (XXVIII).

Esquema VII:

50 ΡΕ1680425

Entende-se que a invenção inclui todas as formas cristalinas e hidratadas dos compostos com a Fórmula (I) e dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico dos compostos desta invenção são aqueles que são derivados de ácidos orgânicos e inorgânicos tais como os que formem sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, tais como: ácido láctico, cítrico, acético, tartárico, fumárico, succínico, maleico, malónico, clorídrico, bromídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metanossulfónico, benzenossulfónico, L-aspártico, R ou S-mandélico, palmítico e outros ácidos conhecidos como aceitáveis. Mais um sal ainda é o sal do ácido trifluoroacético (TFA). São preferidos especifi-camente os sais cloridrato, fumarato e succinato. A título de um exemplo representativo de formação de sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, o sal cloridrato de 5-cloro-6-{2, 6-difluoro-4-[3-(metilamino)-propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina é neutralizado com solução aquosa de um hidróxido de metal alcalino ou com solução aquosa de um carbonato de metal alcalino, e em seguida faz-se reagir com um ácido adequado formador de um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, tal como os que se descreveram acima neste documento, num solvente adequado, incluem-se nos solventes adequados que se podem utilizar: água, metanol, etanol, isopropanol ou uma combinação destes, e outros semelhantes. Um solvente preferido é a água. 51 ΡΕ1680425

De preferência, podem formar-se sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico aquecendo compostos com a Fórmula (I) num solvente adequado, a cerca de 30-100°C, de preferência a entre cerca de 65 e 75°C, até se formar uma solução límpida. Depois de arrefecer, pode separar-se o composto e secar-se.

Utilizando as condições descritas acima neste documento, produzem-se o sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2, 2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina e o sal fumarato de 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-me-tiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina. Em especial, podem formar-se di-hidratos por um contacto suplementar com uma atmosfera húmida com uma humidade relativa de entre cerca de 80-100%, durante 24 horas à temperatura ambiente. A invenção presente proporciona portanto uma composição farmacêutica que inclui um composto desta invenção em combinação ou em associação com um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico. Em especial, a invenção presente proporciona uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto desta invenção e um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Com base nos resultados dos procedimentos de teste farmacológicos que se descrevem neste documento, os 52 ΡΕ1680425 compostos desta invenção são úteis como agentes para tratar, inibir ou controlar o crescimento de células cancerosas tumorais e de doenças associadas num mamífero que necessite deles. Os compostos da invenção são úteis como agentes para tratar, para inibir ou para controlar o crescimento de células cancerosas tumorais e doenças associadas, num mamífero que deles necessite, interactuando com a tubulina e os microtúbulos e promovendo polimerização nos microtúbulos. Os compostos da invenção também são úteis para o tratamento ou a prevenção de tumores cancerosos que expressem resistência a múltiplos fármacos (MDR) ou que sejam resistentes por causa da MDR.

Em especial, quando do contacto de um sistema contendo tubulina com uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) resultar a promoção da polimerização nos microtúbulos e além disso forem estabilizados os microtúbulos, os compostos referidos com a Fórmula (I) são úteis como agentes para tratar, inibir ou controlar o crescimento de células tumorais cancerosas e doenças associadas. 0 sistema contendo tubulina pode estar numa célula tumoral, inibindo-se desta forma uma doença neoplásica pela administração de uma quantidade eficaz de um composto descrito na invenção presente. Podem tratar-se mamíferos e em especial seres humanos. Para além disso, o referido sistema contendo tubulina pode estar num paciente. No caso do tratamento do cancro, crê-se que muitas neoplasias tais como a leucemia, o cancro do pulmão, o cancro do cólon, o cancro da tiróide, o cancro do ovário, o cancro renal, o cancro da próstata e 53 ΡΕ1680425 o cancro da mama podem ser tratados pela administração eficaz de quantidades eficazes dos compostos com as fórmulas (I). Para além disto, os compostos com a Fórmula (I) são úteis para o tratamento ou a prevenção de tumores cancerosos que expressem resistência a múltiplos fármacos (MDR) ou que sejam resistentes por causa de MDR. tal como se utiliza neste documento, cancro refere-se a todos os tipos de cancros, ou neoplasmas ou tumores benignos ou malignos.

Os cancros preferidos para tratamento utilizando métodos proporcionados neste documento incluem carcinomas, sarcomas, linfoma, ou leucemia. Por carcinoma pretende significar-se um tumor epitelial benigno ou maligno, e inclui, mas sem que se limite a, carcinoma da mama, carcinoma da próstata, carcinoma de pulmão sem ser de células pequenas, carcinoma do cólon, carcinoma de tipo melanoma, carcinoma do ovário, ou carcinoma renal. Um hospedeiro favorito é um ser humano. A dosagem eficaz de ingrediente activo empregue pode variar consoante o composto especifico que se utilizar, o modo de administração e a severidade do estado que se pretende tratar. No entanto, são em geral obtidos resultados satisfatórios quando se administram os compostos da invenção em quantidades na gama de entre cerca de 0,10 e cerca de 100 mg/kg de massa corporal por dia. Um regime preferido para resultados óptimos seria de entre cerca de 1 mg e cerca de 20 mg/kg de massa corporal por dia e 54 ΡΕ1680425 empregam-se este tipo de unidades de dosagem de tal forma que se administre um total de entre cerca de 70 mg e cerca de 1.400 mg do composto activo a um sujeito com cerca de 70 kg de massa corporal, durante um período de 24 horas. O regime de dosagem para se tratarem mamíferos pode ser ajustado para proporcionar a reacção terapêutica óptima. Por exemplo, podem administrar-se diariamente diversas doses parciais ou pode reduzir-se a dose proporcionalmente tal como indicado pelas exigências da situação terapêutica. Uma vantagem claramente prática é que estes compostos activos podem ser administrados de uma qualquer forma conveniente, tal como pelas vias oral, intravenosa, intramuscular ou subcutânea.

Os compostos activos da invenção podem ser de preferência administrados por via oral, por exemplo, com um diluente inerte ou com um veículo comestível assimilável, ou eles podem ser incluídos em cápsulas de gelatina de superfície dura ou mole, ou eles podem ser comprimidos ou ser incorporados directamente nos alimentos da dieta. Para administração terapêutica por via oral, estes compostos activos podem ser incorporados com excipientes e utilizados sob a forma de comprimidos apropriados para ingestão, comprimidos bucais, trociscos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, hóstias e outros semelhantes. Tais composições e preparações deveriam conter pelo menos 0,1 % de composto activo. A percentagem nas composições e preparações pode, evidentemente, variar, e pode de forma conve- 55 ΡΕ1680425 niente ser de entre cerca de 2 % e cerca de 60 % do peso da unidade. A quantidade de composto activo em tais composições úteis em terapêutica é tal que uma dosaqem adequada seja obtida. As composições ou preparações preferidas de acordo com a invenção presente são preparadas de tal forma que uma unidade de dosaqem oral contenha entre 10 e 1000 mq do composto activo.

Os comprimidos, trociscos, pílulas, cápsulas e outros semelhantes também podem conter os sequintes: um liqante tal como goma de tragacanto, goma-arábica, amido de milho ou gelatina; excipientes tais como o fosfato dicálcico; um agente desintegrante tal como amido de milho, amido de batata, ácido algínico e outros semelhantes; um lubrificante tal como estearato de magnésio; e pode adicionar-se um agente edulcorante tal como sacarose, lactose, ou sacarina, ou um agente saborizante tal como hortelã-pimenta, óleo de gaultéria ou sabor de cereja. Quando a forma de unidade de dosagem for uma cápsula, ela pode conter, para além dos materiais do tipo acima, um veículo líquido. Podem estar presentes diversos materiais diferentes tais como revestimentos ou para de outra forma modificar a forma física da unidade de dosagem. Por exemplo, os comprimidos, pílulas ou cápsulas podem ser revestidos com shellac, açúcar ou ambos. Um xarope ou um elixir pode conter o composto activo, sacarose, como agente edulcorante, metilparabenos e propilbarabenos como conservantes, um corante e um agente saborizante tal como sabor a cereja ou a laranja. Como é evidente, qualquer 56 ΡΕ1680425 material utilizado na preparação de qualquer unidade de dosagem deverá ser puro do ponto de vista farmacêutico, e substancialmente não tóxico, nas quantidades em que seja utilizado. Para além disto, podem incorporar-se estes compostos activos em preparações e em formulações para libertação prolongada .

Estes compostos activos também se podem administrar por via parentérica ou intraperitoneal. Podem preparar-se soluções ou suspensões destes compostos activos sob a forma de base livre ou de sal farmacologicamente aceitável, em água com uma mistura adequada de um tensioactivo tal como hidroxipropilcelulose. Podem também preparar-se dispersões em glicerol, em polietilenoglicóis líquidos, e em misturas destes em óleos. Em condições normais de armazenagem e utilização, estas preparações podem conter um conservante para impedir o crescimento ou micro-organismos.

As formas farmacêuticas adequadas para utilização injectável incluem soluções ou dispersões aquosas estéreis e pós estéreis para a preparação prévia de soluções ou de dispersões estéreis injectáveis. Em todos os casos, a forma tem que ser estéril e deve ser fluida tanto quanto seja necessário para ser facilmente utilizada com uma seringa. Ela deve ser estável sob as condições de fabrico e de armazenagem e deve ser preparada contra a acção contaminante de micro-organismos tais como bactérias e fungos. 0 veículo pode ser um meio solvente ou de uma dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por 57 ΡΕ1680425 exemplo glicerol, propilenoglicol e polietilenoglicol líquido) , misturas adequadas destes compostos, e óleos vegetais . A administração endovenosa é um modo preferido de administração dos compostos da invenção. Para a administração endovenosa incluem-se nos exemplos não limitativos de veículos adequados, o soro fisiológico fisiológico, água bacteriostática, Cremophor ELTM (BASF, Parsippany, N. J.) ou soro fisiológico tamponizado com fosfato (PBS). A composição deve ser estéril e deve ser fluida tanto quanto seja necessário para se utilizar facilmente com uma seringa. Ela deve ser estável nas condições de fabrico e de armazenagem, e deve ser conservada contra a acção conta-minante de micro-organismos tais como bactérias e fungos. 0 veículo pode ser um meio solvente ou de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, propilenoglicol, e polietilenoglicol líquido, e outros semelhantes), e as misturas adequadas de todos estes. Pode conseguir-se a prevenção da actuação de micro-organismos com diversos agentes anti bacterianos e anti fúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, e outros semelhantes. Em muitos casos, será preferível incluir agentes de isotonicidade, por exemplo, açúcares, poli álcoois tais como manitol, sorbitol, e cloreto de sódio na composição. A absorção prolongada das composições injectáveis pode ser provocada incluindo na composição um agente que atrase a absorção, por exemplo, mono estearato de alumínio e gelatina. 58 ΡΕ1680425

Tal como se utiliza de acordo com esta invenção, a expressão "proporcionar uma quantidade eficaz de um composto" significa quer administrar directamente um tal composto, quer administrar um precursor, um derivado, ou um análogo que formará adentro do corpo uma quantidade eficaz do composto.

Para além das utilidades que se listaram acima, alguns dos compostos desta invenção são úteis para a preparação de outros compostos desta invenção.

Os exemplos desta invenção foram avaliados por intermédio de diversos procedimentos de teste farmacológico padrão, os quais evidenciaram que os compostos desta invenção possuem uma actividade significativa como promotores da polimerização nos microtúbulos, e são agentes anti neoplásicos. Com base na actividade evidenciada nos procedimentos de teste farmacológico padrão, os compostos desta invenção são portanto úteis como agentes contra o cancro. Seleccionam-se cancros associados de entre o grupo constituído pelos cancros da mama, do cólon, do pulmão, da próstata, o melanoma, da epiderme, a leucemia, do rim, da bexiga, da boca, da laringe, do esófago, do estômago, do ovário, do pâncreas, do fígado, da pele e do cérebro. Em especial, os compostos desta invenção possuem um efeito semelhante ao do Paclitaxel. os procedimentos de teste que se utilizaram e os resultados que se obtiveram são pormenorizados adiante. 59 ΡΕ1680425

PROCEDIMENTOS DE TESTES FARMACOLÓGICOS PADRÃO

Materiais e métodos 1. Meios de Cultura de Células e Reagentes 0 meio é RPMI-1640 com L-glutamina, suplementado com soro de feto de vitelo termicamente inactivado a 10 %, 100 unidades/mL de penicilina, e 100 μρ/ΐΓΛ de estrepto-micina (Gibco, Grand Island, NY) . Obtiveram-se tubulina rica em proteina associada a microtúbulos (MAP) , contendo cerca de 70 % de tubulina e 30 % de MAP (#ML113), e tubulina de elevado grau de pureza (pureza > 99%, #TL238), ambas provenientes de cérebro de bovino, na Cytoskeleton, Inc., Denver, CO. também se obtiveram o tampão PEM (ácido piperazina-N,N'-bis[2-etanossulfónico 80 mM] , com pH 6,9, ácido etilenoglicol-bis((3-aminoetil éter)-N,N,N',N'-tetra-acético 1 mM , cloreto de magnésio 1 mM) e o 5'-trifosfato de guanosina (GTP) na Cytoskeleton. O paclitaxel[3H] , com actividade especifica de 14,7 Ci/mmol, é adquirido na Moravek Biochemicals (Brea, CA). A vinblastina[3H] , com actividade especifica de 9,60 Ci/mmol e as colunas MicroSpin G-50 forma obtidas na Amersham Biosciences (Piscataway, NJ).A colchicine[3H] , com actividade especifica de 76,5 Ci/mmol, é obtida na New England Nuclear (Boston, MA) . Os restantes reagentes foram adquiridos na Sigma (St. Louis, MO). 60 ΡΕ1680425 2. Linhas de Células A não ser quando se afirme algo em contrário, as linhas de células cancerosas são obtidas da American Type Culture Collection (Rockville, MD) . Obtiveram-se a partir dos seus criadores as seguintes linhas de células mães sensíveis a fármacos, bem como as linhas semelhantes mas resistentes a fármacos, tal como se listam: (a) SI (linha de células mães proveniente de um sub clone da linha de carcinoma do cólon humano LS174T) e a derivada Sl-Ml-3.2 (doravante denominada Sl-Ml neste documento) que expressa a proteina de transporte de fármaco MXR, foram fornecidas pelos Dr. L. Greenberger, Wyeth Research (Rabindran, S. K., He, H., Singh, M., Brown, E., Collins, K. I., Annale, 1., e Greenberger, L. M. Reversal of a novel multidrug resistance mechanism in human colon carcinoma cells by fumitremorginC. Câncer Res., 58: 5850-5858,1998); (b) a linha de células mães HL-60 de leucemia promielocítica humana, bem como a e derivada HL-60/ADR, que expressa a proteina de transporte de fármaco MRP1, foram fornecidas pelo Dr. M. Center, University de Kansas (McGrath, T., e Center, M. S., Adriamycin resistance in HL60 cells in the absence of detectable P-glycoprotein. Biochem. Biophys. Res. Commun., 145: 1171-1176,1987), via Dr. L. Greenberger, Wyeth

Research; e (c) a linha de células mães KB-3-1 (doravante denominada KB neste documento, clonada a partir de carcinoma epidermóide humano) bem como as linhas derivadas KB-8-5 e KB-V1, que expressam respectivamente teores moderados e muito elevados da proteina de transporte de 61 ΡΕ1680425 fármacos MDR1 (P-glicoproteína) , foram fornecidas pelo Dr. M. Gottesman, National Câncer Institute (Shen, D. W., Cardarelli, C., Hwang, J., Cornwell, M., Richert, N., Ishii, S., Pastan, I., e Gottesman, Μ. M., Multiple drug-resistant human KB carcinoma cells independently selected for high-level resistance to colchicine, adriamycin, or vinblastine show changes in expression of specific proteins. J. Biol. Chem. , 261: 7762-7770,1986), através do Dr.L. Greenberger, Wyeth Research. 3. Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade 0 teste, que é comercializado sob a forma de um estojo pela Promega (Madison, WI ; CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay) , é baseado na transformação por células viáveis, mas não por células mortas, do sal de tetrazólio, MTS (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetra-zólio, sal interno), num formazan colorido solúvel em água, o qual é detectado por espectrofotometria. Testam-se os compostos a nove concentrações, para se determinarem valores de IC50. Para o procedimento do teste, colhem-se as células por tripsinização (ou, no caso de células não aderentes, por uma simples re-suspensão), lavaram-se, contaram-se e distribuíram-se pelos poços de placas de microtítulo com 96 poços e fundo plano, a 1000 células por poço, em 200 μΒ de meio. Para além disto, aplicou-se sobre uma fila de células de uma placa em separado, células tais como acima ("placa do instante 0"). Incubaram-se todas as 62 ΡΕ1680425 placas a 30°C em ar humidificado com 5 % de CO2 durante cerca de 24 horas.

No dia 2, diluem-se os compostos a testar e adicionam-se a poços. Dissolvem-se os compostos em DMSO a 10 mg/mL. Para cada composto, preparam-se nove diluições a 50% em série, em DMSO. Transfere-se 10 μύ de cada diluição em DMSO para 100 μΐϋ de meio, mistura-se bem, e depois transfere-se 5 μύ desta diluição, em quadriplicado, para poços que contêm células. A concentração final mais elevada de cada composto é tipicamente de 5 μΜ. As placas são de novo colocadas na incubadora durante três dias. No momento de se adicionar fármaco às placas experimentais, leva-se a cabo o teste MTS na placa de "período 0". Desta forma se obtém o "valor do instante 0", o qual seja relacionado com o número de células viáveis por poço na altura da adição do fármaco.

Passados três dias de cultura com os compostos em teste (no dia 5 da experiência), leva-se a cabo o teste MTS em todos os poços das placas da experiência, faz-se a média doa valores de absorvância das amostras de poços feitas em quadriplicado e dividiu-se pela média dos valores no "instante 0". 0 valor médio dos poços de controlo sem fármaco, dividido pelo valor médio do "instante 0", representa o aumento relativo máximo da taxa de cor no MTS que é devida ao crescimento celular durante os três últimos dias da cultura. A média dos poços de controlo com uma concentração elevada de fármaco, dividida pelo valor do 63 ΡΕ1680425 "instante 0", dá taxa de cor mínima para as células que são completamente mortas. Os nove valores para cada composto são representados em relação à concentração, e toma-se como valor de IC5o o da concentração a que corresponde uma taxa de cor relativa a meio entre o máximo e o mínimo. Os compostos mais potentes são os que apresentam valores de IC5o menores. 4. Procedimento de Teste Farmacológico Padrão para a Polimerização da Tubulina

Levam-se a cabo duas variações deste procedimento, uma delas utilizando tubulina rica MAP e a outra utilizando tubulina pura.

Dissolve-se tubulina rica em MAP em tampão PEM gelado contendo GTP 1 mM (tampão GPEM) a uma concentração de 1,3 mg/mL. Centrifuga-se a solução à velocidade máxima numa micro centrífuga Eppendorf, modelo 5415C (Brinkmann Instruments, Westbury, NY) , durante 10 min a 4°C, imediatamente antes de se utilizar. A solução de tubulina é adicionada aos poços de uma placa de 96 poços de Ιέ área (Costar No. 3696, Corning,Inc., Corning, NY), que já continha os compostos de interesse. Cada composto é testado em duplicado a uma concentração final de 0,3 μΜ, num volume de 110 μΕ por poço. A concentração final de DMSO em todos os poços é de 0,3 %. As reacções de controlo, que apenas receberam composto e solvente, são levadas a cabo em quadriplicado. A laca é colocada num leitor de placas 64 ΡΕ1680425

SpectraMax Plus (Molecular Devices Corp. Sunnyvale, CA), termostatizado a 24°C, e lê-se a absorvância de cada poço a 340 nm, uma medida do aparecimento da turvação devido à formação de polímero da tubulina, de minuto a minuto ao longo de 60 minutos. A absorvância para cada poço no instante 0 é subtraída de cada uma das leituras subsequentes de absorvância para esse poço, e então calcula-se a média dos duplicados. O procedimento com tubulina pura é semelhante excepto quanto às seguintes diferenças. Dissolve-se tubulina pura em tampão PEM frio contendo 10% de glicerol e nenhum GTP adicionado a uma concentração de 1,5 a 1,8 mg/mL (15 to 18 μΜ). Dispensa-se o sobrenadante, depois da centrifugação a uma placa de 96 poços que já contém os compostos. Testa-se cada composto em duplicado, a seis concentrações em diluições em série a 1/3, a partir de 24,3 μΜ. 0 leitor de placas está termostatizado a 35°C. 5. Procedimento de Teste Padrão Farmacológico de Ligação Competitiva

Estuda-se a ligação de exemplos desta invenção a tubulina muito purificada, por métodos de inibição competitiva. O heterodímero de αβ-tubulina contém locais de ligação às três classes principais de agentes farmacológicos activos nos microtúbulos: taxanos, agentes com locais peptídicos vinca, e agentes com locais de colchi-cina. Para estudar a competição possível nos locais de 65 ΡΕ1680425 péptido/vinca e de colchicina, levam-se a cabo incubações sob condições que não favorecem a polimerização porque a vinblastina e a colchicina ligam-se preferencialmente ao heterodímero não polimerizado. Para estudar uma possível competição no local do taxano, por outro lado, utiliza-se tubulina polimerizada (microtúbulos) porque o paclitaxel se liga preferencialmente aos microtúbulos.

Dissolve-se tubulina em tampão PEM sem GTP e utiliza-se a uma concentração final de entre 1,0 e 1,3 mg/mL (10 a 13 μΜ) . Adicionam-se à solução de tubulina diversas concentrações de exemplos desta invenção, até à concentração mais elevada de 100 μΜ, e respectivamente vinblastina [3H] ou colchicina [3H] às concentrações finais de, respectivamente, 100 nM ou 50 nM. Incubam-se estas soluções a 24°C durante lhe depois aplicam-se sobre colunas MicroSpin G-50 e centrifugam-se durante 2 min a 3000 rpm numa micro centrífuga Eppendorf 5415C. Mistura-se uma alíquota de efluente de cada coluna (contendo tubulina e um radioligando ligado)com fluido de cintilação, e conta-se num espectrómetro de cintilação líquida. Incluem-se nos controlos amostras sem competidor, e amostras com vincristina, colchicina, ou paclitaxel não marcados. A capacidade do competidor para inibir a ligação do radioligando é expressa sob a forma de uma percentagem de ligação ao controlo na ausência de qualquer competidor.

Para competição com paclitaxel[3H] , dissolve-se tubulina altamente purificada em tampão PEM contendo 66 ΡΕ1680425 glutamato 0,75 M e dideoxi-GTP 25 μΜ; a concentração final de proteína é de entre 0,25 e 0,35 mg/mL (2,5 a 3,5 μΜ) . Estas condições promovem a formação rápida de polímeros curtos e estáveis nos microtúbulos (Hamel, E., del Campo, A. A., e Lin, C. M. Stability of tubulin polymers formed with dideoxyguanosine nucleotides in the presence and absence of microtubule-associated proteins. J. Biol. Chem., 259: 2501-2508,1984). Incuba-se esta solução durante 30 min a 37°C para se permitir que se formem microtúbulos. Adicionam-se então paclitaxel[3H] (concentração final de 2,1 μΜ, 1,2 Ci/mmol) e competidor (concentração final de 20 μΜ, excepto que é de 5 μΜ para o paclitaxel não marcado) às aliquotas da solução de tubulina polimerizada, e continua a incubar-se a 37°C durante mais 30 min. Incluem-se nos controlos amostras sem competidor, e amostras com vincristina, colchicina, ou paclitaxel não marcados. Centrifugam-se então as misturas reaccionais à velocidade máxima numa micro centrífuga Eppendorf 5415C, durante 20 min à temperatura ambiente, para se obterem pastilhas da proteína dos microtúbulos. Misturam-se aliquotas de cada sobrenadante em triplicado com fluido de cintilação, e contam-se num espectrómetro de cintilação líquida. Da quantidade da radioactividade nos sobrenadantes e da radioactividade inicial medida, calcula-se a quantidade de paclitaxel[3 H] ligado à proteína dos microtúbulos na pastilha. Expressa-se a capacidade de cada competidor para inibir a ligação de radioligandos à proteína na pastilha sob a forma de uma percentagem aquela que se verifica nos controlos sem competidor. 67 ΡΕ1680425 6. Procedimento de Teste Padrão para Análise de Ciclo Celular

Recolhem-se células HeLa por tripsinização, lavam-se, contam-se e distribuem-se por poços de placas de 12 poços, a 125.000 células por poço, em 2 mL de meio. Cultivam-se as células de um dia para o outro, fazem-se diluições do composto em DMSO e adicionam-se aliquotas de 10 μΐ. a cada poço para se obterem as concentrações finais pretendidas. Continuam a cultivar-se as células durante 18 h depois da adição do composto, e depois recolhem-se as células de cada poço (tomando cuidado de recuperar tanto as células aderentes como as não aderentes) e processou-se utilizando o estojo CycleTEST PLUS (Becton Dickinson Immunocytometry Systems, San Jose, CA) . Levou-se a cabo a citometria de fluxo com um instrumento FACSort (Becton Dickinson). 7. Padrao de Actividade Antitumoral em Ratinhos Atimicos Portadores de Xenotransplantes de Tumores Humanos

Procedimento de Teste Farmacológico

Estuda-se no teste farmacológico padrão do xenotransplante no ratinho atimico, a capacidade dos compostos desta invenção para inibirem o crescimento de tumores. Obtêm-se ratinhos fêmea nu/nu com uma proveniência de linhagens albinas, junto dos Charles River Laboratories (Wilmington, MA) . Injectam-se os animais por via subcu- 68 ΡΕ1680425 tânea, nos flancos, com a suspensão de células tumorais pretendida. Diversos dias depois, seleccionam-se ratinhos com tumores de cerca de 150 mm3 a partir daqueles que haviam sido injectados, e (em estágio) e distribuem-se aleatoriamente or grupos de 5-10. Denomina-se dia 0 o dia em que os ratinhos são seleccionados. Administram-se aos animais os compostos da invenção, normalmente formulados em soro fisiológico (anotam-se as excepções nas tabelas), por injecção endovenosa ou por alimentação forçada por via oral, utilizando diversos protocolos de administração, a partir do dia 0 ou 1, tal como se anota nas tabelas. Doseia-se o grupo de controlo em cada experiência com veiculo, com igual periodicidade. Mede-se a dimensão do tumor a cada 3-7 dias, com um calibrador de corrediça, em duas direcções ortogonais e calcula-se o volume do tumor a partir da fórmula volume = [(comprimento X espessura2)/2] .

Obtém-se o rácio Tumor/Controlo (T/C) dividindo o valor médio do volume dos tumores no grupo tratado pelo valor médio do volume dos tumores no grupo de controlo, em cada dia em que são feitas as medições. Define-se uma dose de tratamento como sendo activa quando dela resulta um valor de T/C estatisticamente significativo, de 0,50 ou inferior a este valor. Um valor de p < 0,05, determinado por um teste t de Student, unilateral, é indispensável para a significância estatística. Define-se uma dose de tratamento como sendo tóxica se mais de 10 % dos animais morrer em consequência de toxicidade relacionada com o composto. 69 ΡΕ1680425

Resultados 1. Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade 1.1. Com Células COLO 205 COLO 205 é uma linha de células de carcinoma do cólon humano, que se utiliza para testes comparativos dos exemplos desta invenção e de diversos compostos de referência. Esta linha é sensível a paclitaxel e a vincristina. Tal como se mostra na Tabela 1, por exemplo, o Exemplo 32 tem um valor de IC5o de 6,6 nM.

Tabela 1

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade MTS com Células1 COLO 205

Exemplo ou Composto de Referência Sal IC50 (nM) DP n 1 41 13 8 la Sal de HC1 56 9 11 2 32 10 23 2a Sal de HC1 31 10 11 2c Sal Succinato 38 _ 1 3 25 9 7 3a Sal de HC1 29 7 3 70 ΡΕ1680425

Exemplo ou Composto de Referência Sal IC50 (nM) DP n 4a Sal de HC1 53 16 10 5 452 71 3 6 155 17 3 7 29 17 3 8 48 6 2 9 14 13 3 10 113 12 2 11 89 34 3 11a Sal de HC1 51 30 3 12 326 116 3 13 262 18 2 14 881 186 2 15 276 53 2 16 581 157 2 17 245 118 4 18 192 53 3 19 422 157 2 20 67 12 5 21 151 19 3 22 1671 34 2 23 719 185 2 24 1728 138 2 25 96 21 6 26 665 103 2 71 ΡΕ1680425

Exemplo ou Composto de Referência Sal IC50 (nM) DP n 27 1568 81 2 28 785 6 4 2 29 433 74 2 30 30 5 5 31 19 8 6 32 Sal de TFA 6,6 2 5 33 126 1 2 Paclitaxel 3,3 1 20 Vincristina 2,6 0,5 7 1 Os valores de IC50 e os desvios padrão provêm do número indicado de experiências independentes 1.2. Com Células KB, KB-8-5, e KB-V1

As linhas de células KB expressam quantidades diferentes da P-glicoproteína (MDR1) da bomba membranar de que resulta resistência à acção de muitos compostos citotóxicos, incluindo o paclitaxel e a vincristina. A linhagem KB não expressa qualquer P-glicoproteína, a KB-8-5 expressa teores moderados dessa proteína e a KB-V1 expressa teores muito elevados. A capacidade da P-glicoproteína para reconhecer e exportar um agente citotóxico potencial pode ser inferida partir da alteração dos valores de IC50 nestas linhagens (Loganzo, F., Discafani, C. M., Annale, 72 ΡΕ1680425 T., Beyer, C., Musto, S., Hari, M., Tan, X., Hardy, C., Hernandez, R., Baxter, M., Singanallore, T., Khafizova, G., Poruchynsky, M.S., Fojo,T., Nieman, J.A., Ayral-Kaloustian, S. , Zask, A., Andersen, R. J., e Greenberger, L. Μ., HTI-286, A synthetic analogue of the tripeptide hemiasterlin, is a potent antimicrotubule agent that circumvents P-glycoprotein-mediated resistance in vitro and in vivo. Câncer Res., 63: 1838-1845,2003). Quando um composto é reconhecido pela P-glicoproteína, o seu valor de IC5o aumentará substancialmente (várias centenas de vezes) quando se vai de KB para KB-8-5 e para KB-V1; quando um composto não é reconhecido, apresentará valores de IC5o (uma diferença igual ou inferior a 1:3) para todas as três linhagens. Por exemplo, tal como se mostra na Tabela 2, as células KB-8-5 são moderadamente resistentes ao paclitaxel (19 vezes), à vincristina (11 vezes), à colchicina (3,4 vezes) e à doxorrubicina (3,0 vezes). Os exemplos representativos desta invenção (Nos. 1, 2a, 4a, 20, 25, 30, 32) evidenciam uma alteração inferior a 2 vezes nos seus valores de IC50.

Mesmo pequenas interacções dos compostos com a P-glicoproteína podem ser determinadas com a linhagem KB-V1, que expressa um teor desta proteína mais elevado do que se encontra tipicamente nas amostras clínicas provenientes de uma série de tumores (Goldstein, L. J., Galski, H., Fojo, T. , Willingham, M., Lai, S.L., Gazdar, A., Pirker, R., Green, A., Crist, W., Brodeur, G. M., Lieber, M., Cossman, J., Gottesman, Μ. M., e Pastan, I., Expression of a 73 ΡΕ1680425 multidrug resistance gene in human cells. J. Natl. Câncer Inst. (Bethesda), 81: 116- 124, 1989). As células KB-V1 são altamente resistentes ao paclitaxel ( > 345 vezes), à vincristina ( > 156 vezes), à colchicina (116 vezes), à mitoxantrona (77 vezes), e à doxorrubicina ( > 130 vezes), e os exemplos representativos desta invenção (Nos. 20, 25, 30) evidenciam menos do que uma alteração de 3 vezes dos valores de IC5o em comparação com a linhagem KB. Isto indica que estes compostos não são reconhecidos de todo pela P-glicoproteina e portanto que estes compostos ultrapassam por completo a resistência mediada pela P-glicoproteína à morte celular. Os exemplos representativos da invenção (Nos. la, 2a, 3a, 4a, 32) mostram reconhecimento pela P-glicoproteina.

Tabela 2

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade MTS com Células KB, KB-8.5 e KB-VI.

Composto Exemplo ou de Referência Sal IC50 (nM)1 Rácio2 KB KB 8.5 KB VI 8,5/KB VI /KB la Sal de HC1 28 62 103 2,2 3, 7 2a Sal de HC1 24 64 1.117 2, 7 48 3a Sal de HC1 18 69 2.147 3,8 119 4a Sal de HC1 24 58 162 2,5 7 74 ΡΕ1680425

Composto Exemplo ou de Referência Sal IC50 (nM)1 Rácio2 KB KB 8.5 KB VI 8,5/KB VI /KB 20 57 66 73 1,2 1,3 25 59 67 165 1,1 2,8 30 72 127 97 1,8 1,3 32 Sal de TFA 11 15 108 1,4 9,9 Paclitaxel 2,9 56 >1.000 19 >345 Vincristina 8,4 72 >1.000 11 >156 Colchicina 18 59 2.038 3,4 116 Camptotecina 24 33 39 1,4 1,6 Mitoxantrona 25 27 1.927 1,1 77 Doxorrubicina 23 70 >3.000 3,0 >130 1

Os valores de IC50 são as médias de 2 experiências independentes. 2 Rácio = IC50 em células KB 8.5 ou KB VI / IC50 em células KB. Um rácio próximo de 1 indica ausência de resistência. 1.3. (Com Células HL-60 e HL-60/ADR)

As células HL-60/ADR cells sobre-expressam a proteína de resistência a múltiplos fármacos MRP1 que media a resistência a alguns quimioterapêuticos (Gottesman, M. M., Fojo, T., e Bates, S. E. Multidrug resistance in câncer: role of ATP-dependent transporters. Nature Rev. Câncer, 2: 48-58,2002). Os valores de IC50 de exemplos representativos desta invenção, bem como os dos compostos de referência, em HL-60/ADR, são comparados com valores da 75 ΡΕ1680425 linhagem sensível HL-60. Os resultados, ilustrados na Tabela 3, indicam que enquanto as células HL-60/ADR evidenciam resistência à vincristina (8,2 vezes), à colchicina (7,4 vezes), à mitoxantrona (17 vezes), e à doxorrubicina (93 vezes), estas células não evidenciam qualquer resistência a qualquer um dos exemplos representativos da invenção. Isto indica que os compostos desta invenção não são reconhecidos pela MRP1 e portanto ultrapassam a resistência celular mediada por este transportador.

Tabela 3

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade MTS com Células HL-60 e HL-60/ADR.

Composto Exemplo Sal IC50 (nM)1 Rácio2 ou de Referência HL-60 HL-60/ADR la Sal de HC1 71 63 0,89 2a Sal de HC1 43 47 1,1 3a Sal de HC1 26 21 0,81 4a Sal de HC1 52 34 0,65 20 155 74 0,48 25 104 68 0,65 30 55 52 0, 94 32 Sal de TFA 7,2 6,6 0,92 Paclitaxel 5, 7 6,4 1,1 Vincristina 2,5 20 8,2 Colchicina 9,3 69 7,4 76 ΡΕ1680425

Composto Exemplo Sal IC50 (nM)1 Rácio2 ou de Referência HL-60 HL-60/ADR Camptotecina 12 17 1,4 Mitoxantrona 9,5 161 17 Doxorrubicina 23 2.085 93

Os valores de IC5o são as médias de 2 experiências independentes. 2 Rácio = IC5o em células HL-6 0/ADR/IC50 em células HL-60. Um rácio próximo de 1 indica ausência de resistência. 1.4. Com Células SI e Sl-Ml

As células Sl-Ml sobre-expressam o transportador MXR que media a resistência a alguns agentes quimio-terapêuticos (Gottesman, Μ. M., Fojo, T., e Bates, S. E. Multidrug resistance in câncer: role de ATP-dependent transporters. Nature Rev. Câncer, 2: 48-58,2002). Os valores de IC50 de exemplos representativos desta invenção, bem como de compostos de referência, em Sl-Ml, são comparados com os valores na linhagem SI sensível. Os resultados, listados na Tabela 4, indicam que enquanto as células Sl-Ml evidenciam resistência à mitoxantrona ( > 300 vezes) e à doxorrubicina (74 vezes), elas não evidenciam resistência a exemplos representativos da invenção. Isto indica que os compostos desta invenção não são reconhecidos pela MXR e portanto ultrapassam a resistência celular mediada por este transportador. 77 ΡΕ1680425

Tabela 4

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Citotoxicidade MTS com Células SI e Sl-Ml.

Composto Exemplo Sal IC50 (nM)1 Rácio2 ou de Referência SI Sl-Ml Ia Sal de HC1 73 75 1,0 2a Sal de HC1 70 69 1,0 3a Sal de HC1 61 71 1,2 4a Sal de HC1 72 73 1,0 20 85 91 1,1 25 106 84 0,80 30 66 78 1,2 32 Sal de TFA 11 9,0 0,80 Paclitaxel 8,1 4, 4 0,54 Vincristina 5,6 4,6 0,82 Colchicina 18 60 3,3 Camptotecina 8,9 17 1,9 Mitoxantrona 10 >3.000 >300 Doxorrubicina 34 2.517 74

Os valores de IC50 são as médias de 2 experiências independentes. 2 Rácio = IC50 em células Si / IC50 em células Sl-Ml. Um rácio próximo de 1 indica ausência de resistência. 78 ΡΕ1680425 2. Efeitos dos Compostos sobre a Polimerização de Tubulina rica em MAP, e Tubulina Pura, in vitro

Neste teste, as reacções de controlo com tubulina rica em MAP evidenciam um perfil de absorvância em forma de S, caracterizado por três fases: em primeiro lugar, uma fase de atraso durante a qual não ocorre qualquer alteração da absorvância; em segundo lugar, uma fase de polimerização na qual a absorvância aumenta; e na terceira, uma fase de valor constante na qual a absorvância atingiu um valor elevado e não ocorre mais alteração ou apenas uma pequena alteração adicional. Os agentes que aumentam a polimerização, tais como o paclitaxel e o docetaxel, encurtam ou eliminam a fase do atraso, aumentam a taxa da fase de polimerização, e amiúde aumentam o valor constante que se atinge. Os inibidores de polimerização tais como a vincristina e a colchicina diminuem ou impedem o aumento de absorvância. Os compostos desta invenção têm um efeito sobre a reacção de polimerização semelhante ao do taxano. Isto foi expresso de forma quantitativa na Tabela 5, dividindo o valor médio da A340 de cada amostra aos 20 min, pelo valor médio da A340 do controlo aos 20 min, para se obter o número de vezes de aumento relativo ao do controlo. O paclitaxel evidencia um factor de aumento de 8,5 vezes. Os exemplos desta invenção evidenciam factores de aumento de até 8,1 vezes, tendo a sua maioria valores na gama de entre 5 e 6 vezes. A vincristina apresenta um factor de aumento de 0 porque ela inibe completamente a polimerização da tubulina rica em MAP. ΡΕ1680425 79

Tabela 5

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Polimerização de Tubulina com Tubulina rica em MAP.

Exemplo Sal A340 do Composto A34o do Controlo Ia Sal de HC1 6,1 2 5, 8 3 6, 7 4a Sal de HC1 8,1 6 6, 7 7 6,4 8 6,2 9 5, 8 10 6,3 11a Sal de HC1 co 12 2,9 13 5,4 14 1,5 15 5,5 16 2,4 17 4,8 18 CO LO 22 1,2 23 4,2 80 ΡΕ1680425

Exemplo Sal A340 do Composto A340 do Controlo 24 1,2 25 7,2 26 4,6 paclitaxel 8,5 Vincristina O O Controlo 1,0 A tubulina pura sem adição de GTP não evidencia qualquer polimerização nas reacções de controlo. O docetaxel, e muito menos eficientemente o paclitaxel, são capazes de induzir a polimerização da tubulina pura nestas condições. Alguns dos exemplos desta invenção também induzem a polimerização da tubulina pura sem GTP, de uma forma semelhante à do docetaxel. A Tabela 6 mostra a absorvância média em quatro pontos na escala de tempo, depois do inicio das reacções para uma única concentração de composto. A esta concentração (24,3 μΜ) , o docetaxel e os exemplos representativos la, 2a, 3a, 4a, 11 a, 25, e 32 provocam um aumento rápido da absorvância nos primeiros 5 min da reacção, atingindo-se um patamar. Todos os sete exemplos também provocaram um aumento menor e menos rápido a 8,1 μΜ, mas não tinham qualquer efeito a 2,7 μΜ. O docetaxel, por outro lado, induzia um pequeno aumento da absorvância mesmo a 0,1 μΜ. 81 ΡΕ1680425

Tabela 6

Actividade de Exemplos Representativos da Invenção, e de Compostos de Referência, no Procedimento de Teste Padrão de Polimerização de Tubulina com Tubulina pura. A340 aos 0 min 5 min 10 min 15 min 20 min Controlo 0 0 0 0 0 Exemplo la 0 0,22 0,23 0,22 0,21 Exemplo 2a 0 0,25 0,24 0,23 0,22 Exemplo 3a 0 0,19 0,20 0,20 0,20 Exemplo 4a 0 0,14 0,16 0, 16 0,15 Exemplo 11a 0 0,24 0,24 0,23 0,22 Exemplo 20 0 0,03 0,03 0,03 0,03 Exemplo 25 0 0,22 0,23 0,22 0,22 Exemplo 30 0 0,02 0,01 0,01 0,01 Exemplo 32 0 0,26 0,26 0,25 0,25 Paclitaxel 0 0 0 0,01 0,01 Docetaxel 0 0,20 0,20 0,20 0,20 Vincristina 0 0,01 0,01 0 0 Colchicina 0 0 0 0 0 3. Ligaçao de Compostos à Tubulina O local, na tubulina do cérebro altamente purificada, ao qual se ligam os compostos desta invenção, é 82 ΡΕ1680425 determinado por estudos de inibição competitiva com os ligandos radioactivos vinblastina[3H] , colchicina[3H] , e paclitaxel [3H] . Os resultados, listados na Tabela 7, indicam que todos os compostos testados inibiam a ligação de vinblastina [3H] ao heterodímero da tubulina (11-19% do controlo), mas não inibiam a ligação da colchicina [3H] ao heterodímero da tubulina nem a do paclitaxel [3H] aos microtúbulos. Isto é uma indicação forte de que estes compostos se ligam ao local de péptido vinca da tubulina e não nos locais da colchicina ou do taxano. A maior parte dos compostos testados aumentam de facto a ligação da colchicina [3H] de 12-34 % acima do nível no controlo. Isto sugere que a ligação destes compostos ao local do péptido vinca poderá induzir uma alteração conformacional na molécula de proteína da qual resulta uma maior ligação à colchicina. Esta alteração parece não ser induzida pela vincristina ela própria. Entre os compostos de controlo testados, a vincristina inibia a ligação da vinblastina[3H] mas não a da colchicina [3H] , e a colchicina inibia a ligação da colchicina [3H] mas não a da vinblastina [3H] . A vincristina e a colchicina também pareciam inibir a ligação do paclitaxel[3H] aos microtúbulos; no entanto, isto não se deve à competição pela ligação mas sobretudo à despolimerização dos microtúbulos aos quais se liga o paclitaxel [3H] . É claro que os compostos desta invenção não diminuem a ligação do paclitaxel [3H] aos microtúbulos, o que indica que eles nem competem com o paclitaxel[3H] pela ligação, nem despolimerizam os microtúbulos aos quais se liga o paclitaxel[3H] . ΡΕ1680425 83

Tabela 7

Actividade dos Exemplos Representativos da Invenção e de Compostos de Referência no procedimento Farmacológico Padrão de Teste de Ligação Competitiva1

Competidor Ligando Radioactivo Vinblastina [2H] Colchicina [2H] Paclitaxel [2H] Média3 DP3 Média3 DP3 Média3 DP3 Controlo 100 100 100 Exemplo la 12 1, 7 129 9, 7 108 5, 6 Exemplo 2a 11 1,1 122 17, 7 104 2,1 Exemplo 3a 11 0,5 134 12, 8 105 4,1 Exemplo 4a 15 3,6 134 15, 5 104 3,1 Exemplo 11a 12 1,1 121 9,7 107 0 Exemplo 20 19 1,5 98 2,9 104 3,1 Exemplo 25 14 1,5 126 12,6 99 5,9 Exemplo 30 14 1,5 112 4, 7 91 1,8 Exemplo 32 15 1,9 94 7,1 93 2,8 Vincristina 5 1,0 99 7,9 22 0,9 Colchicina 125 12,6 6 1,9 19 0,2 Paclitaxel 92 7,8 93 12,3 35 1,6 1

Os resultados são expressos sob a forma de uma percentagem da ligação ao controlo na ausência de competidor. 2

Os dados provêm de 1 a 4 experiências independentes (3 a 12 réplicas). 3

Os dados provêm de 1 (4 réplicas) ou de 2 (8 réplicas) experiências independentes. 84 ΡΕ1680425 4. Efeito dos Compostos sobre a Progressão do Ciclo Celular

Este procedimento mede as percentagens de células numa população, que se encontram nas fases Gl, S, e G2/M do ciclo celular. Utiliza o contraste de núcleos das células com iodeto de propidio, e uma análise por citometria de fluxo. 0 procedimento também permite obter uma estimativa da apoptose provocada pelo tratamento com fármacos, medindo-se o aparecimento de partículas com quantidades de ANF sub-Gl. A concentrações elevadas (isto é, mais elevadas do que cerca de 5 X a concentração IC50) os compostos activos para microtú-bulos caracteristicamente param as células na fase G2/M do ciclo celular por causa de deixarem de funcionar os micro-túbulos de que é constituída a roca mitótica. No entanto, a concentrações inferiores (a valores semelhantes aos do IC50) em algumas linhas de células, por exemplo, HeLa, taxanos tais como o paclitaxel e o docetaxel induzem apoptose substancial antes de se observar um bloqueio de G2/M (Jordan, Μ. A., Wendel, K., Gardiner, S., Derry, W. B., Copp, H., e Wilson, L., Mitotic block induced in HeLa cells by low concentrations of paclitaxel (Taxol) results in abnormal mitotic exit and apoptotic cell death. Câncer Res., 56: 816-825,1996); não é este o caso com os despolimerizadores de microtúbulos tais como a vincristina e a colchicina. Os exemplos representativos desta invenção são testados por este procedimento passadas 18 h de cultura com células a diversas concentrações, para se ver se elas seguem o comportamento do "estabilizador" (taxano) ou o do "desestabilizador" (vincristina, colchicina). Os resultados apresentados na Tabela 8 mostram que eles seguem o comportamento do "estabilizador". 85 ΡΕ1680425

Por exemplo, no exemplo la é aparente uma apopto-se de cerca de 70 % a 40 nM, próxima do seu valor de IC50 em células HeLa, sem aumento da fracção G2/M em comparação com o controlo não tratado. Quando a concentração aumenta acima de 40 nM, a fracção apoptótica decresce e a fracção G2/M aumenta. Observam-se comportamentos semelhantes com os exemplos 2a, 3a, e 4a, e com o docetaxel. No entanto, a vincristina e a colchicina denunciam um aumento em paralelo, tanto da fracção apoptótica como da fracção G2/M, e a extensão da apoptose às 18 h é muito inferior.

Tabela 8

Actividade dos Exemplos Representativos da Invenção e dos Compostos de Referência num Procedimento de Teste Padrão Farmacológico de Análise de Ciclo Celular com Células HeLa

Composto Cone. Percentagem na Fase do Ciclo Celular (nM) Apop1 G1 S G2/M >4N Exemplo la 0 5 61 20 14 1 20 13 54 18 14 2 30 38 35 12 14 1 40 71 7 8 13 1 50 63 6 9 20 2 60 52 5 10 32 3 70 26 3 9 57 4 80 24 4 9 58 5 90 22 5 10 58 6 100 24 4 10 58 5 110 24 6 13 53 5 120 28 6 14 48 5 86 ΡΕ1680425

Composto Cone. Percentagem na Fase do Ciclo Celular (nM) Apop1 G1 S G2/M >4N Exemplo 2a 0 4 62 20 14 1 20 28 41 14 16 2 30 62 12 10 16 2 40 44 5 9 39 2 50 25 5 9 58 4 60 24 4 9 58 4 70 22 6 11 57 4 80 26 7 11 52 4 90 30 7 13 46 4 100 34 7 15 41 4 110 37 9 14 37 4 120 39 8 15 36 4 0 6 69 14 11 1 Exemplo 3a 20 29 42 12 16 1 30 55 11 11 21 2 40 50 6 10 31 3 50 32 5 8 52 3 60 25 4 9 58 4 70 21 5 9 61 4 80 24 5 11 57 5 90 23 5 8 60 4 100 25 5 10 55 5 110 26 6 10 54 5 120 30 6 12 48 5 87 ΡΕ1680425

Composto Cone. Percentagem na Fase do Ciclo Celular (nM) Apop1 G1 S G2/M >4N Exemplo 4a 0 4 67 16 12 1 20 6 60 17 15 2 30 44 29 12 15 1 40 65 8 8 17 2 50 54 6 9 29 2 60 64 13 8 15 2 70 25 3 8 60 4 80 20 5 7 63 5 90 22 5 10 59 5 100 23 7 9 57 5 110 23 6 10 56 5 120 27 7 10 53 4 Docetaxel 0 6 55 19 18 2 0,25 8 58 17 16 2 0,5 19 48 18 14 2 1 35 35 15 14 2 2 48 19 18 14 2 3 52 15 17 14 2 4 49 12 16 22 2 5 42 9 17 31 3 6 37 10 17 33 4 8 29 7 11 48 4 10 35 9 16 37 4 20 38 8 12 40 3 88 ΡΕ1680425

Composto Cone. Percentagem na Fase do Ciclo Celular (nM) Apop1 G1 S G2/M >4N Vincristina 0 6 62 16 15 2 1 6 57 18 17 2 2 8 55 18 18 2 4 9 50 17 23 2 6 11 45 15 27 3 8 12 40 14 32 3 10 16 27 13 41 3 15 19 20 14 44 4 20 18 15 12 51 4 25 17 14 13 52 4 30 19 12 11 55 4 40 18 8 13 57 4 Colchicina 0 4 57 17 19 2 5 6 60 17 16 2 10 7 59 16 18 2 12,5 7 55 18 18 2 15 9 50 17 23 2 17,5 9 51 18 21 2 20 13 40 18 28 2 25 14 36 20 27 3 30 14 27 20 36 3 40 11 16 22 48 4 50 11 11 18 56 4 100 15 11 16 55 3 89 ΡΕ1680425 5. Actividade Anti Tumoral In Vivo dos Compostos

Levaram-se a cabo diversas experiências com xeno-transplantes de tumores humanos em ratinhos atimicos, para avaliar a capacidade de compostos desta invenção para inibirem o crescimento de tumores in vivo. A Tabela 9 mostra os resultados do exemplo 2a com ratinhos portadores de carcinoma do pulmão H157, de células não pequenas (NSCLC). 0 composto inibia o crescimento do tumor a 25, a 15 e a 7,5 mg/kg quando era doseado por via endovenosa nos dias 0 e 6. Noutra experiência com o NSCLC H157,o sal succinato do exemplo 2c é activo quando administrado por via endovenosa nos dias 0 e 7, a 20 e a 10 mg/kg (Tabela 10) . 0 exemplo 2a também inibia o crescimento de outro NSCLC, ο A549 (Tabela 11), a 25 e a 20 mg/kg, mas não a 15 mg/kg, quando doseado por via endovenosa nos dias 0, 6, 13, e 20. O exemplo 2a inibia o crescimento de xenotransplantes de carcinoma do cólon HT-29, tal como se mostra na Tabela 12, quando era administrado por via endovenosa a 25 mg/kg nos dias 1 e 7. Para além disso, o exemplo 2a inibia o crescimento do glioblastoma U87-MG quando era administrado por via oral, como uma dose única, no dia 0, a 30, a 20, e a 10 mg/kg, mas não a 5 ou a 2,5 mg/kg (Tabela 13) . O exemplo 2a também é activo contra o carcinoma do cólon HCT-15 a 20 mg/kg, quando doseado por via endovenosa nos dias 1, 8, e 15 (Tabela 14) . O HCT-15 sobre-expressa a P-glicoproteina e é resistente ao paclitaxel e à vincristina.

Testam-se os exemplos la, 2a, 3a, e 4a contra 90 ΡΕ1680425 xenotransplantes de melanoma LOX. Os resultados na Tabela 15 mostram que todos estes quatro compostos são activos a 6 e a 3 mq/kq, mas não a 1 mg/kg, quando doseados por via endovenosa nos dias 1, 5, 9, e 13. 0 exemplos la, 2a, 3a, e 4a também são testados contra a o carcinoma do cólon DLD1. Este tumor sobre-expressa a P-glicoproteina e é resistente ao paclitaxel e alcaloides vinca. 0 exemplo 1 a 15 mg/kg, e o exemplo 2 a 20 mg/kg, são activos quando doseados por via endovenosa nos dias 1, 5, 9, e 13 (Tabela 16).

Os exemplos 3a e 9 são testados contra xenotransplantes de glioblastoma U-87 MG (Tabela 17). Com doseamento por via oral, o exemplo 3a é activo a 40, a 20, e a 10 mg/kg, e o exemplo 9 é activo a 20 mg/kg. O exemplo 4 inibia o crescimento de carcinoma do pulmão A549 tal como se evidencia na Tabela 18, quando administrado por via endovenosa q4dX8 a 40 mg/kg, mas não a 20 ou a 10 mg/kg.

Por último, o exemplo 20 é activo contra xenotransplantes de carcinoma de cólon humano LoVo, quando é doseado por via oral nos dias 1, 7 e 14 a 50 e a 30 mg/kg (Tabela 19). Quando doseado de um modo idêntico, o exemplo 32 é activo a 50 mg/kg mas não a 30 mg/kg (Tabela 19). 91 ΡΕ1680425

Tabela 9

Actividade In Vivo do Exemplo 2a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma de Células Pão Pequenas Humano H157

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 11 14 Exemplo 0,6 EV 25 1,03 0,621 0,292 0,302 2a 15 1,02 0,552 0,44 0,422 7,5 1, 04 0,542 0,42 0,452 * = p <0,05 ** = p <0,01

Como veículo usa-se soro fisiológico normal.

Tabela 10

Actividade In Vivo do Exemplo 2c no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma de Células Pão Pequenas Humano H157

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 2 5 8 12 15 Exemplo 2c 0,7 EV 20 0,98 0,96 0,502 0,511 0,442 0,242 10 1,07 1, 09 1,00 0,96 0,491 0,381 1 = p <0,05 2 = p <0,01

Como veiculo usa-se soro fisiológico normal. ΡΕ1680425 92

Tabela 11

Actividade In Vivo do Exemplo 2a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma de Células Pão Pequenas Humano A549

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 14 21 27 35 Exemplo 0, 6, 13, 20 EV 25 0,99 0,72* 0,51** 0,57* 0, 48* 0,44* 2c 20 0,97 0, 79 0,55** 0,59* 0,50* 0, 49* 15 1, 01 0, 75* 0,61** 0,83 0,75 0,76 * = p <0,05 ** = p <0,01

Como veiculo usa-se soro fisiológico normal.

Tabela 12

Actividade In Vivo do Exemplo 2a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma do Cólon Humano HT-29

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 14 21 27 35 Exemplo 2a 1, 7 EV 25 1, 00 0,44** 0,34** 0,26** 0,43** 0,46** ** = p <0,01

Como veiculo usa-se soro fisiológico normal. ΡΕ1680425 93

Tabela 13

Actividade In Vivo do Exemplo 2 no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Glioblastoma Humano U87-MG

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 4 8 11 14 Exemplo 2 0 PO 30 0,95 0,411 0,241 0,191 0,231 0 PO 20 0,97 0,591 0,381 0,281 0,301 0 PO 10 1,00 0,601 0,511 0,401 0,411 0 PO 5 1,02 0,711 0,751 0,651 0,681 0 PO 2,5 1,00 0,84 0,821 0,741 0,741 * = p <0,05 ** = p <0,01

Como veículo usa-se soro fisiológico normal.

Tabela 14

Actividade In Vivo do Exemplo 2a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma do Cólon Humano HCT-15

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 13 20 Exemplo 2a 1, 8, 15 EV 25 1,00 0,78 0,60 0,44 20 1,00 0,86 0,502 0,432 10 1,00 0,81 1,03 0,75 1 = p <0,01

Como veículo usa-se soro fisiológico normal.

Nota: No grupo a 25 mg/kg morreram 2 de 5 ratinhos 2 = p <0,05 ΡΕ1680425 94

Tabela 15

Actividade In no Procedimento de Xenotransplantes de Portadores de Melanoma

Vivo dos Exemplos la, 2a, 3a e 4a Teste Farmacológico Padrão de Tumores Humanos, com Ratinhos Humano LOX

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 13 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 6 1,00 0,121 0,071 la 3 1,00 0,131 0,172 1 1,00 0,80 1,02 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 6 1,00 0,171 0,121 2a 3 1,00 0,311 0,36 1 1,00 0,81 0,95 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 6 1,00 0,221 0,071 3a 3 1,00 0,341 0,38 1 1,00 0, 77 0, 85 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 6 1,00 0,211 0,141 4a 3 1,00 0,201 0,191 1 1,00 0,80 0, 79 1 = p <0,01

Como veículo usa-se soro fisiológico normal. 2 = p <0,05 95 ΡΕ1680425

Tabela 16

Actividade In Vivo dos Exemplos la, 2a, 3a e 4a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma do Cólon Humano DLD1

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 14 21 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 20 1,00 0,311 Tóxico _ la 15 1,00 0,211 0,25 0,31 10 1,00 0,63 0,51 0,58 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 20 1,00 0, 462 0,33 0,53 2a 15 1,00 0,59 0,54 0, 74 10 1,00 0,66 0,65 0, 72 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 20 1,00 0,59 0, 46 0,60 3a 15 1,00 0,55 0,56 0, 73 10 1,00 0, 77 0, 75 0,84 Exemplo 1, 5, 9, 13 EV 20 1,00 0,63 0, 49 0,48 4a 15 1,00 0,55 0, 44 0,61 10 1,00 0,56 0,68 0, 74 1 = p <0,01

Como veículo usa-se soro fisiológico normal. 2 = p <0,05 ΡΕ1680425 96

Tabela 17

Actividade In Vivo dos Exemplos 3a e 9 no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Glioblastoma Humano U87-MG

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 3 7 10 13 17 Exemplo 3a 1, 5, 9 PO 40 1,02 0, 73 0,651 2 0,482 0,302 0,202 20 1, 01 0,90 0,73 0,632 0,422 0,392 10 0,99 1,08 0,85 0,692 0,522 0,512 Exemplo 9 1, 5, 9 PO 20 1,04 0,93 0,70 0,502 0,342 0,452 * = p <0,05 ** = p <0,01

Como veiculo usa-se soro fisiológico normal.

Tabela 18

Actividade In Vivo do Exemplo 4a no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xenotransplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma Pulmonar de Células Não Pequenas Humano A549

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 14 21 27 35 Exemplo 4a 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29 EV 40 0,97 0,71 0,532 0,462 0,522 0,472 20 0,99 0,86 0, 80 0, 72 0,78 0, 77 10 0,98 0, 81 0, 74 0,68 0,80 0, 79 1 = p <0,05 2 = p <0,01

Como veiculo usa-se soro fisiológico normal. ΡΕ1680425 97

Tabela 19

Actividade In Vivo dos Exemplos 20 e 32 no Procedimento de Teste Farmacológico Padrão de Xeno-transplantes de Tumores Humanos, com Ratinhos Portadores de Carcinoma do Cólon Humano LoVo

Composto Frequência de Administração (dias) Via Dose (mg/kg) T/C no dia 0 7 14 21 28 35 Exemplo 20 1, 7, 14 PO 50 1,00 0,27** 0,46** 0,33** 0,29** 0,31* 30 1,00 0,37** 0,35** 0,35 0, 28 0,39** Exemplo 32 1, 7, 14 PO 50 1,00 0,41 0, 44* 0,50** 0,31 0,45** 30 1, 00 0,55 0, 68 0,35 0, 43 0,53 * = p <0,05 ** = p <0,01

Como veiculo usa-se Metocel a 0,5% - Tween 80 a 0,4%

Os compostos desta invenção evidenciam actividade citotóxica importante contra diversas linhagens de células de cancros humanos em cultura, incluindo linhas que são resistentes ao paclitaxel e à vincristina por causa da sobre-expressão de transportadores. Os compostos da invenção aumentam a taxa inicial da polimerização de tubulina rica em MAP, de um modo reminiscente do dos taxanos e distinto do efeito inibitório dos despoli-merizadores tais como os alcaloides da vinca e colchicina. Os compostos da invenção também induzem a polimerização da 98 ΡΕ1680425 tubulina pura na ausência de GTP. Os compostos desta invenção também induzem a apoptose nas células alvo, a baixas concentrações (semelhantes às dos valores IC50 citotóxicos) sem bloqueio do ciclo celular, outra propriedade que é caracteristica dos taxanos, mas não das vincas ou da colchicina. Os compostos representativos da invenção inibem o crescimento de diversos xenotransplantes de tumores humanos em ratinhos atimicos, incluindo os tumores resistentes aos taxanos e aos alcaloides vinca.

Os seguintes exemplos de referência são úteis para a preparação dos exemplos representativos não limitativos dos compostos desta invenção que são úteis como promotores da polimerização nos microtúbulos e como agentes contra o cancro.

Exemplo de Referência 1

Cloridrato de (IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina

Prepara-se o produto, cloridrato de (IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina, de acordo com as condições descritas nas US 5.986.135 e US 6.204.269.

Exemplo de Referência 2

Cloridrato de (IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina

Prepara-se o produto, cloridrato de (IR)-2,2,2- 99 ΡΕ1680425 trifluoro-l-metiletilamina, de acordo com as condições descritas nas US 5.986.135 e US 6.204.269, usando ácido L-(+)-tartárico em vez de ácido D-(-)-tartárico.

Exemplo de Referência 3 5-Cloro-6-(2,4-difluorofenil)-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Prepara-se o produto, 5-cloro-6-(2,4-difluorofenil ) -N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[1,5-a]pirimidin-7-amina de acordo com as condições descritas na US 5.986.135, excepto que se utiliza a DMF como solvente no último passo, tal como se descreve neste documento, no Exemplo 1.

Exemplo de Referência 4 5-Cloro-6-(2,3,6-trifluorofenil)-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Prepara-se o produto, 5-cloro-6-(2,3,β-trifluoro-fenil)-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo-[1,5-a]pirimidin-7-amina, de acordo com as condições descritas na US 5.986.135, excepto que se utiliza a DMF como solvente no último passo, tal como se descreve neste documento, no Exemplo 1. 100 ΡΕ1680425

Exemplo de Referência 5 5,7-Dicloro-6-(2,4,6-trifluorofenil) [1,2,4]triazolo [1,5- a]pirimidina

Prepara-se o produto, 5,7-dicloro-6-(2,4,6-trifluorofenil) [ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina de acordo com as condições descritas na US 6.117.876 e na US 6.297.251.

Exemplo de Referência 6 5,7-Di-hidroxi-6-(2,4,6-trifluorofenil) [1,2,4]triazolo [1,5- a]pirimidina

Prepara-se o produto, 5,7-di-hidroxi-6-(2,4,6-trifluorofenil) [ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina, de acordo com as condições descritas na US 6.117.876, e na US 6.297.251.

Exemplo de Referência 7 2-(2,6-Difluoro-4-metoxifenil)malonato de etilo

Prepara-se o produto, 2-(2,6-difluoro-4-metoxi-fenil)malonato de etilo, de acordo com as condições descritas na US 5.981.534. 101 ΡΕ1680425

Exemplo de Referência 8 3-(Metilamino)propan-l-ol

Prepara-se o produto, 3-(metilamino)propan-l-ol, de acordo com as condições descritas em J. Org. Chem. 44, 2718 (1979) .

Exemplo de Referência 9 3-(Etilamino)propan-l-ol

Prepara-se o produto, 3-(etilamino)propan-l-ol, de acordo com as condições descritas nem J. Chem. Soc. B, 1300 (1971) .

Exemplo de Referência 10 3-[Etil(metil)amino]propan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-[etil(metil)amino]-propan-l-ol, de acordo comas condições descritas no J. Am. Chem. Soc. 54,2484 (1932).

Exemplo de Referência 11 3-Piperidin-l-ilpropan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-piperidin-l-ilpropan-l- 102 ΡΕ1680425 ol, de acordo com as condições descritas em Tetr. Lett. 35, 761 (1994), com a excepção de que se utiliza o produto em bruto, sem destilação.

Exemplo de Referência 12 3-Morfolin-4-ilpropan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-morfolin-4-ilpropan-l-ol, de acordo com as condições descritas no Tetr. Lett. 35, 761 (1994), com a excepção de que se utiliza o produto em bruto, sem destilação.

Exemplo de Referência 13 3-Pirrolidin-l-ilpropan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-pirrolidin-l-ilpropan-l-ol, de acordo com as condições descritas em Tetr. Lett. 35, 761 (1994), com a excepção de que se utiliza o produto em bruto, sem destilação.

Exemplo de Referência 14 3-Metilpiperazin-1-ilpropan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-metilpiperazin-l-ilpro-pan-l-ol, de acordo com as condições descritas em Tetr. Lett. 35, 761 (1994), com a excepção de que se utiliza o produto em bruto, sem destilação. 103 ΡΕ1680425

Exemplo de Referência 15 3-Azetidin-l-ilpropan-l-ol

Preparou-se o produto, 3-azetidin-l-ilpropan-l-ol, de acordo com as condições descritas em Tetr. Lett. 35, 761 (1994), com a excepção de que se utiliza o produto em bruto, sem destilação.

Exemplo de Referência 16 3-(Dimetilamino)propan-l-tiol

Preparou-se o produto, 3-/dimetilamino)propan-1-ol, de acordo com as condições descritas em J. Organomet. Chem. 480, 177 (1994).

Exemplo de Referência 17 3-[(4-Metoxibenzil)oxi]-1-propanol

Preparou-se o produto, 3-[(4-metoxibenzil)oxi]-1-propanol de acordo com as condições descritas em Tetrahedron 54, 1 (1998).

Os exemplos seguintes são exemplos representativos e não limitativos de compostos desta invenção. ΡΕ1680425 104 EXEMPLO 1 5-Cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5- a]pirimidin-7-amina

Passo A: 5-Cloro-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N- [(IS)—2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Agita-se à temperatura ambiente durante 13 h sob atmosfera de azoto uma mistura de 5,7-dicloro-6-(2,4,6-trifluorofenil) [1,2, 4]triazolo[1,5-a]pirimidina (3,0 g, 9,4 mmol), cloridrato de (IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina (4,2 g, 28,2 mmol), e N, N-di-isopropiletilamina (4,9 mL, 28,2 mmol), em 100 mL de N, N-dimetilf ormamida. Dilui-se a mistura reaccional com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com ácido clorídrico 1 N (2x) e com salmoura saturada (2x), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com acetato de etilo a 20 % em hexanos. Por concentração obtém-se a 5-cloro-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-1-meti1- 105 ΡΕ1680425 etil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, sob a forma de um sólido branco (3,56 g). MS: m/z 396,0 (M+H).

Passo B: 5-Cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Adiciona-se a uma solução de 5-cloro-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (600 mg, 1,5 mmol) e de 3-dimetilamino-l-propanol (1,03 g, 10 mmol) em 5 mL de sulfóxido de dimetilo à temperatura ambiente, boro-hidreto de sódio (a 60 % em óleo mineral, 400 mg, 10 mmol). Aquece-se a mistura a 50°C durante 30 minutos, e arrefece-se até à temperatura ambiente. Adiciona-se água para terminar a reacção, e extrai-se o produto com acetato de etilo (2x) . Lava-se o conjunto dos extractos orgânicos com solução saturada de cloreto de sódio (4x), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente desde acetato de etilo até 20 % de metanol em acetato d etilo. por concentração obtém-se 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina sob a forma de um óleo incolor (486 mg). MS: m/ 479,2 (M+H). 106 ΡΕ1680425 EXEMPLO la

Sal cloridrato de 5-cloro-6-4-[3-(dimetilamino)-propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Dissolve-se o produto do Exemplo 1, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina em cloreto de metileno (50 mL) e filtra-se. Borbulha-se gás clorídrico através do filtrado. Por concentração obtém-se o sal cloridrato de 5-cloro-6-{4-[3-(dime-tilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(IS)-2,2,2-tri-fluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina sob a forma de um sólido branco (540 mg). EXEMPLO 2 5-Cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5- a]pirimidin-7-amina

Adiciona-se a hidreto de sódio (a 60% em óleo mineral, 2,3 g, 57,6 mmol) em 20 mL de sulfóxido de dime- 107 ΡΕ1680425 tilo à temperatura ambiente, uma solução de 3- (metil-amino)propan-l-ol (5,14 g, 57,6 mmol) em 10 mL de sulfóxido de dimetilo. Agita-se a solução à temperatura ambiente durante 1 h, e adiciona-se-lhe 5-cloro-6-(2,4,6-trifluor-ofenil)-N-[ (IS) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina (5,7 g, 14,4 mmol).Aquece-se a mistura a 60°C durante 3 h, e arrefece-se à temperatura ambiente. Dilui-se a mistura reaccional com acetato de etilo, e lava-se com água e com salmoura saturada. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Tritura-se o resíduo com uma pequena quantidade de acetona, e depois com hexanos, e submete-se a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de desde 100 % de acetato de etilo até 100% de álcool metílico. Por concentração obtém-se a 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimi-din-7-amina sob a forma de um sólido branco (2,7 g) . MS: m/z 465,1 (M+H). EXEMPLO 2a

Sal cloridrato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Dissolve-se o produto do Exemplo 2 em álcool metílico, a 10 % em cloreto de metileno (150 mL) e filtrou-se. Borbulha-se gás clorídrico através do filtrado. Por 108 ΡΕ1680425 concentração obtém-se o sal cloridrato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina sob a forma de um sólido amarelo claro (2,92 g).

Exemplo 2b

Sal fumarato de 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil ] [l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Adiciona-se gota a gota, a uma suspensão de sal cloridrato de 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][ 1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (7,50 g, 15,0 mmol) em água (100 mL) , uma solução de hidróxido de sódio (10 N, 2,0 mL, 20 mmol). Em seguida, adiciona-se ácido fumárico (3,48 g, 30 mmol). Agita-se então a mistura durante cerca de 15-20 min e depois aquece-se até cerca de 65-75°C e agita-se até todo o sólido se dissolver. Filtra-se a solução e arrefece-se o filtrado até cerca de 0-5°C ao longo de cerca de 1 h. Agita-se a mistura durante lhe depois filtra-se, e lava-se o sólido separado com água fria e com isopropanol. Seca-se o sólido em vazio a cerca de 60°C/10 mm de Hg durante cerca de 20 h para se obter um sólido branco (6,54 g, 75 %) sob forma anidra. Coloca-se uma parte do composto numa placa de secagem, a uma humidade relativa (RH) de 80 a 100 % e à temperatura ambiente, durante cerca de 24 h. O composto absorveu 5,8 % de água formando um di-hidrato que 109 ΡΕ1680425 é estável à temperatura ambiente e a uma humidade relativa (RH) de 5-1 00 %. RMN de 1 H (CDC13 ): δ 8,43 (s, 1H), 6,86 (d, 2H, J = 10, 2 Hz) , 6,51 (s, 2H) , 5,8 4 (m, 1H) , 4,15 (t, 2H, J = 7,9 Hz ), 3,04 (t, 2H, J = = 7,2 Hz) , 2,57 (s, 3H), 2, 08 (m, 2H) , 1 ,33 (d, J = 6,7 Hz, 3H) .

Este composto absorve duas moles de água a uma RH de 5%-100%, para se transformar no seu di-hidrato. Di-hidrato do fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Exemplo 2c

Sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Agita-se durante cerca de 15 a 20 minutos uma mistura de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina (9,00 g, 19,4 mmol) e ácido succínico (2,75 g, 23,3 mmol) em água (90 mL) e depois aquece-se a cerca de 65-75°C. Filtra-se a solução e arrefece-se o filtrado até cerca de 0-5°C ao longo de cerca de 1 h. Agita-se a mistura durante cerca de 1 h e depois filtra-se e lava-se com água fria o sólido que se separara (2x9 mL) e com isopropanol frio (9 mL). Seca-se o sólido em vazio a cerca de 40°C/10 mm de Hg durante cerca de 20 h 110 ΡΕ1680425 para se obter um sólido branco sob forma anidra (6,6 g, 73 %) . Coloca-se uma parte deste composto numa placa de secagem a 80-100% de humidade relativa (RH) e à temperatura ambiente, durante cerca de 24 h. 0 composto absorve 5,8 % de água, formando um di-hidrato que é estável à temperatura ambiente e a 5-100 % de humidade relativa (RH) • RMN de 2η (cdci3) : δ 10, 2 (s ig, 1H) , 8,26 (s, 1H) , 6,80 (d, 2H, J = 10,5 Hz) , 5, 79 (m, 1H) , 4, 13 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3, 03 (t, 2H, J = 7,2 Hz) , 2,57 (s, 3H) , 2,35 (s, 4H), 2,07 (m, 2H) , 1,27 (d, J = = 6,0, 3H) .

Este composto absorve duas moles de água a 5%-100% de RH, para se transformar no seu di-hidrato.

Di-hidrato do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina.

Sintetizam-se os Exemplos 3-21 e os seus sais cloridratos de formas análogas ao Exemplo 1 e ao Exemplo la. EXEMPLO 3 5-Cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)-propoxi]fenil}-N (2,2,2-trifluoroetil)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7- amina; 451,2 (M+H). 111 ΡΕ1680425

EXEMPLO 3a

Sal cloridrato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina EXEMPLO 4 5-Cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7- amina; 465,2 (M+H)

EXEMPLO 4a

Sal cloridrato de 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil) -[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina ΡΕ1680425 112 EXEMPLO 5 6-[4-(3-Aminopropoxi)-2,β-difluorofenil]-5-cloro-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina; 451,5 (M+H)

EXEMPLO 6 5-Cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-l-il)pro-oxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][ 1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 534,4 (M+H)

EXEMPLO 7 5-Cloro-6-4-[3-(etilamino)propoxi]-2,β-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 479,1 (M+H)

113 ΡΕ1680425 EXEMPLO 8 5-Cloro-6-(4-3-[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluo-ofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 493,0 (M+H)

5-Cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpropoxi)fenil] N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 505,2 (M+H)

EXEMPLO 10 5-Cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpropoxi)fenil] N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina; 519,3 (M+H) 114 ΡΕ1680425

EXEMPLO 11 5-Cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropoxi)fenil]-N-[ (IS) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina; 521,1 (M+H)

EXEMPLO 11a

Sal cloridrato de 5-Cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropoxi)fenil]-N-[(1S)-2, 2,2-trifluoro-l-metil-etil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina EXEMPLO 12 6-[4-(3-Azetidin-l-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina; 489,1 (M-H) ΡΕ1680425 115

EXEMPLO 13 5-Cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluorofenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina; 461,2 (M+H)

o-cch^n CHj EXEMPLO 14 5-Cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]fenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina; 451,0 (M+H)

EXEMPLO 15 5-Cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluorofenil}-N [(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 493,1 (M+H) ΡΕ1680425 116

EXEMPLO 16 5-Cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 465,1 (M+H)

EXEMPLO 17 5-Cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletoxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 504,9 (M-H)

ΡΕ1680425 117 EXEMPLO 18 5-Cloro-6-(4-{ [3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilΙΕ 1 r 2 , 4 ] triazolo [ 1 , 5-a] pirimidin-7-amina; 495,2 (M+H)

EXEMPLO 19 2-[4-(5-Cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metiletil]amino}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]etanol; 438,1 (M+H)

EXEMPLO 20 3-[4-(5-Cloro-7-{[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol; 452,1 (M+H) 118 ΡΕ1680425

4-[4-(5-Cloro-7-{[(lS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butan-l-ol; 463,9 (M-H)

EXEMPLO 22 N1-[4-(5-Cloro-7-{ [(IS)—2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenil]-N1, N3, N3-trimetilpropano-l,3-diamina; 492, 1 (M+H)

Adiciona-se hidreto de sódio (100 mg, 2,5 mmol) uma mistura de 5-cloro-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N-[(IS) 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimi- 119 ΡΕ1680425 din-7-amina (200 mg, 0,51 mmol) em N,N,N'-trimetil-1,3-propanodiamina (3,0 g, 25,8 mmol). Aquece-se a mistura resultante a 100°C durante 16 h. Termina-se então adicionando água à mistura e extrai-se com acetato de etilo (x2). Lava-se o conjunto dos extractos orgânicos com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de desde 100 % de acetato de etilo a 50 % de álcool metálico em acetato de etilo, a 100 % de álcool metálico. Por concentração obtém-se N1-[4-(5-Cloro-7-{[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]amino}[l,2,4]triazolo-[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenil]-N1,N3,N3-trime-tilpropano-1,3-diamina (20 mg) sob a forma de um óleo amarelo. MS: m/z 492,1 (M+H).

Sintetizam-se os Exemplos 23-24 de forma análoga ao Exemplo 22. EXEMPLO 23 N1-[4-(5-Cloro-7-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluo-rofenil]-N3, N3-dimetilpropano-1,3-diamina; 478,2 (M+H)

ΡΕ1680425 120 EXEMPLO 24 N1-[4-(5-Cloro-7-{[ (IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-amino}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluo-rofenil]-N2, N2-dimetiletano-1,2-diamina; 464, 1 (M+H)

'Cl

N-^CHa&N CHj EXEMPLO 25 5-Bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo [1,5- a]pirimidin-7-amina

Passo A: 5,7-Dibromo-6-(2,4,6-trifluorofenil)- [l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidina

Aquece-se a 120°C durante 4 h uma mistura de 5,7-di-hidroxi-6-(2,4,6-trifluorofenil) [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina (282 mg, 1,0 mmol) e oxibrometo de fósforo 121 ΡΕ1680425 (2,0 g, 7,0 mmol) . Remove-se então em vazio o excesso de oxibrometo de fósforo. Volta a dissolver-se o resíduo em cloreto de metileno e lava-se com água e com salmoura saturada (x3) . Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtra-se através de silicato de magnésio, e concentra-se. sob a forma de um semi-sólido acastanhado (380 mg) . Este é utilizado directamente no passo seguinte sem purificação adicional. MS: m/z 408,9 (M+H).

Passo B: 5-Bromo-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N- [(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Agita-se à temperatura ambiente durante 18 h uma mistura de 5,7-dibromo-6-(2,4,6-trifluorofenil)[1,2,4]-triazolo[1,5-a]pirimidina (320 mg, 0,78 mmol), cloridrato de (IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina (235 mg, 1,57 mmol), e di-isopropiletilamina (260 mg, 2,0 mmol) em 5 mL de N,N-dimetilformamida. Adiciona-se água à mistura reaccional, e extraiu-se o produto com acetato de etilo. Lava-se o conjunto dos extractos orgânicos com salmoura saturada (x3), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de hexanos/acetato de etilo desde 9:1 a 2:1. Por concentração obtém-se a 5-bromo-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N- [ (1S) -2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimi-din-7-amina sob a forma de um sólido castanho claro (60 mg, p.f. 95-97°C) . MS: m/z 440, 0, 442, 0 (M+H). 122 ΡΕ1680425

Passo C: 5-Bromo-6-4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2, 6-difluorofenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina

Adiciona-se, a uma solução de 5-bromo-6-(2,4,6-trifluorofenil)-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (44 mg, 0,1 mmol) e 3-dimetilamino-l-propanol (51 mg, 0,5 mmol) em 1 mL de sulfóxido de dimetilo, à temperatura ambiente, hidreto de sódio (a 60 % em óleo mineral, 20 mg, 0,5 mmol). Aquece-se a mistura a 60°C durante 2 h, e arrefece-se até à temperatura ambiente. Adiciona-se água para terminar a reacção, e extrai-se o produto com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com salmoura saturada (x3), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o residuo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com a gradiente de desde acetato de etilo a 30 % de álcool metílico em acetato de etilo. Por concentração obtém-se a 5-bromo-6-4-[3-(dimetilamino)propoxi] -2,6-difluorofenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina sob a forma de um sólido castanho claro (41 mg, pf 40-42°C). MS: m/z 523,1, 525, 1 (M+H) . EXEMPLO 26 5-Cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorofenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5- a]pirimidin-7-amina 123 ΡΕ1680425

Passo A: 2-(2,6-Difluoro-4-hidroxifenil)malonato de dietilo

Adiciona-se gota a gota, a uma solução de 2-(2,6-difluoro-4-metoxifenil)malonato de dietilo (2,11 g, 7,0 mmol) em 60 mL de cloreto de metileno a -78°C, tribrometo de boro (2,65 mL, 28 mmol) . Agita-se então a mistura a -78°C durante 10 minutos, aquece-se a 0°C, e agita-se a 0°C durante 1 h. Adiciona-se lentamente uma solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5 %, para terminar a reacção. Extrai-se o produto com acetato de etilo. Lava-se o conjunto dos extractos orgânicos com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com a gradiente de desde 10 % de acetato de etilo em hexanos a 30 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 2-(2,6-difluoro-4-hidroxifenil)malonato de dietilo sob a forma de um óleo incolor (1,91 g). MS: m/z 287,2 (M-H).

Passo B: 2-(2,6-Difluoro-4-{[(trifluorometil) sulfonil]oxi}fenil)malonato de dietilo

Adiciona-se a uma solução de 2-(2,6-difluoro-4- 124 ΡΕ1680425 hidroxifenil)malonato de dietilo (288 mg, 1,0 mmol) e trietilamina (505 mg, 5,0 mmol) em 5 mL de cloreto de metileno à temperatura ambiente, anidrido trifluorometanos-sulfónico (1,41 g, 5,0 mmol). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 10 minutos. Adiciona-se-lhe lentamente uma solução de bicarbonato de sódio a 5 %, para terminar a reacção. Extrai-se o produto com acetato de etilo. Lava-se o conjunto dos extractos orgânicos com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de hexanos até 15 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 2-(2,6-difluoro-4-{[(trifluorometil)-sulfonil]oxi}fenil)malonato de dietilo sob a forma de um óleo incolor (361 mg). MS: m/z 419,2 (M-H).

Passo C: 2-[ 2,6-Difluoro-4-(4-hidroxibutil)fe-niljmalonato de dietilo

Adiciona-se gota a gota, a uma solução 0,5 M de 9-borabiciclo[3.3.1]nonano (9-BBN) em tetra-hidrofurano (95 mL, 47,6 mmol), 3-buteno-l-ol (4,1 mL, 47,6 mmol), e agita-se a mistura sob azoto, à temperatura ambiente, durante 6 h. Transfere-se então a solução resultante, por uma agulha com duas extremidades, para uma mistura de 2-(2,6-difluoro-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}fenil)malonato de dietilo (10,0 g, 23,8 mmol), fosfato de potássio (10,1 g, 47,6 mmol), e tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (825 mg, 0,714 mmol) em 40 mL de dioxano, sob pressão de azoto. 125 ΡΕ1680425

Aquece-se então a mistura a 90°C durante 8 h. Arrefece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente, e adiciona-se-lhe iV-óxido de trimetilamina (3,57 g, 47,6 mmol) . Aquece-se a mistura reaccional a 80°C durante lhe arrefece-se até à temperatura ambiente. Adiciona-se-lhe acetato de etilo para diluir a mistura reaccional. Lava-se a fase orgânica com salmoura saturada (x2), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre sili-cagel, eluindo com um gradiente de 10 % de acetato de etilo em hexanos até 50 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 2-[2,6-difluoro-4-(4-hidroxibutil)-fenil]malonato de dietilo sob a forma de um óleo castanho (3,5 g). MS: m/z 345,2 (M+H).

Passo D: 2-{4-[4-(Dimetilamino)butil]-2,6-difluo-rofenil]malonato de dietilo

Adiciona-se a uma solução de 2-[2,6-difluoro-4-(4-hidroxibutil)fenil]malonato de dietilo (2,0 g, 5,8 mmol) e trietilamina (2,43 mL, 17,4 mmol) em 15 ml de cloreto de metileno a 0°C, cloreto de metanossulfonilo (0,898 mL, 11,6 mmol). Deixa-se a mistura resultante aquecer até à temperatura ambiente em 1,5 h. Aquece-se a mistura com ácido clorídrico a 10 %, com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, e com salmoura saturada. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio e concentra-se a um óleo amarelo. Agita-se o óleo amarelo que dessa forma se obtém, com uma solução 2,0 M de dietilamina em tetra-hidrofurano (56 mL, 112 mmol), à temperatura ambiente, 126 ΡΕ1680425 durante 16 h, e em seguida concentra-se. Dilui-se o resíduo com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com água e com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de 100 % de acetato de etilo até 50 % de álcool metílico em acetato de etilo, e até 100 % de álcool metílico. Por concentração obtém-se 2-{4-[4-(dimetil-amino)butil]-2,6-difluorofenil]malonato de dietilo sob a forma de um óleo amarelo (1,2 g). MS: m/z 372,2 (M+H).

Passo E: 6-{4-[4-(Dimetilamino)butil]-2,6-difluo-rofenil}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidina-5,7-diol

Agita-se sob atmosfera de azoto e a 160°C durante 16 h uma mistura de 2-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6- difluorofenil]malonato de dietilo (1,0 g, 2,7 mmo 1) , 3 - amino-1,2, 4-triazole (250 mg, 3,0 mmol ) , e tributilamina (0,71 mL, 3,0 mmo 1) , e arrefece· -se até à temperatura ambiente. Agita-se a mistura com 20 mL de hexanos. Separam-se os precipitados por filtração, e lava-se com hexanos para se obter 6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorofenil }[ 1 , 2 , 4 ] triazolo [ 1 , 5-a] pirimidina-5 , 7-diol sob a forma de um sólido branco (795 mg). MS: m/z 362,1 (M-H).

Passo F: 5-Cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]- 2,6-difluorofenil}-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Aquece-se a 115°C durante 4 h uma mistura de 6- 127 ΡΕ1680425 {4-[4-(dimetilamino)butil]-2,β-difluorofenil}[l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidina-5,7-diol (795 mg, 2,19 mmol) em 4 mL de oxicloreto de fósforo. Retira-se em vazio o excesso de oxicloreto de fósforo, e seca-se o resíduo resultante em alto vácuo para se obter um sólido amarelo (1,13 g) que se utiliza sem purificação adicional.

Agita-se à temperatura ambiente durante 18 h uma mistura do sólido acima (300 mg, 0,75 mmol), cloridrato de (IS) -2,2,2-trifluoro-l-metiletilamina (675 mg, 4,51 mmol), e N,N-di-isopropiletilamina (0,787 mL, 4,51 mmol) em 4 mL de N,N-dimetilformamida . Dilui-se a mistura reaccional com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com solução saturada de bicarbonato de sódio e com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de 100 % de acetato de etilo a 50 % de álcool etílico em acetato de etilo e a 100 % de álcool metílico. Por concentração obtém-se 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorofenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina sob a forma de um óleo amarelo claro (44 mg). MS: m/z 477,2 (M+H).

Sintetizam-se os Exemplos 27-29 de forma análoga à utilizada no Exemplo 1, partindo de 5-cloro-6-(2,3,6-tri-fluorofenil)-N- [(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4] — triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina 128 ΡΕ1680425 EXEMPLO 27 5-Cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 465,1 (M+H)

EXEMPLO 28 5-Cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina; 479,1 (M+H)

5-Cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 493,1 (M+H)

ΡΕ1680425 129 EXEMPLO 30 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol;

Passo A: 3-Ciclo-heptil-3-oxo-2-(2,4,6-trifluorof enil)propanoato de etilo

Agita-se a 50°C durante 3 h uma mistura de ácido 2, 4,6-trifluorofenilacético (570 mg, 3,0 mmol), iodoetano (1,56 g, 10 mmol), e carbonato de potássio (1,38 g, 10 mmol) em 5 mL de sulfóxido de dimetilo, e arrefece-se até à temperatura ambiente. Retoma-se a mistura em água e éter dietílico. Lava-se a fase orgânica com água e com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e filtra-se através de silicato de magnésio hidratado. Concentra-se o filtrado para se obter 2,4, 6-trifluorofenilacetato de etilo sob a forma de um óleo amarelo claro (581 mg, 2,66 mmol).

Aquece-se ao refluxo durante 1 h uma mistura de ácido ciclo-heptanocarboxílico (5,0 g, 35,2 mmol) em 25 mL de cloreto de tionilo, e concentra-se. Utiliza-se o cloreto do ácido ciclo-heptanocarboxílico que dessa forma se obtém, em bruto, directamente no passo seguinte. 130 ΡΕ1680425

Arrefece-se até -78°C uma solução de 2,4,6-trifluorofenilacetato de etilo (436 mg, 2,0 mmol) em 3 mL de tetra-hidrofurano, adiciona-se-lhe gota a gota e sob agitação di-isopropilamideto de litio (2,0 M em heptano/tetra-hidrofurano/etilbenzeno, 1,0 mL, 2,0 mmol). Agita-se a mistura a -78°C durante 1 h, e adiciona-se-lhe gota a gota cloreto do ácido ciclo-heptanocarboxilico (321 mg, 2,0 mmol). Aquece-se a mistura até à temperatura ambiente e acidifica-se com 2 mL de ácido clorídrico 1,0 N. Extrai-se o produto com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica with salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de hexanos até 10% de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 3-ciclo-heptil-3-oxo-2-(2,4,6-trifluorofenil)propanoato de etilo sob a forma de um óleo incolor (410 mg). MS: m/z 341,2 (M-H).

Passo B: 7-Ciclo-heptil-6-(2,4,6-trifluorofenil)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol;

Agita-se sob atmosfera de azoto a 160°C durante 2,5 h uma mistura de 3-ciclo-heptil-3-oxo-2-(2,4,6-trifluorof enil)propanoato de etilo (342 mg, 1,0 mmol), 3-amino-1,2,4-triazole (84 mg, 1,0 mmol), e tributilamina (185 mg, 1,0 mmol), e arrefece-se até à temperatura ambiente. Dissolve-se a mistura em acetato de etilo e lava-se a fase orgânica com ácido clorídrico 1,0 N e com salmoura 131 ΡΕ1680425 saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se a um sólido. Lava-se o sólido que dessa forma se obtém com hexanos, para se obter 7-ciclo-heptil-6-(2,4,6-trifluoro-fenil) [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol em bruto, sob a forma de um sólido castanho claro (225 mg) . MS: m/z 363,2 (M+H).

Passo C: 5-Cloro-7-ciclo-heptil-6-(2,β-difluoro-4-{3-[(4-metoxibenzil)oxi]propoxi}fenil)[l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidina; A uma solução de 7-ciclo-heptil-6-(2,4,6-tri-fluorofenil)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol (362 mg, 1,0 mmol) e 3-[(4-metoxibenzil)oxi]-1-propanol (490 mg, 2,5 mmol) em 4,0 mL de sulfóxido de dimetilo à temperatura ambiente, adiciona-se hidreto de sódio (a 60% em óleo mineral, 120 mg, 3,0 mmol). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 h, e retoma-se em acetato de etilo e ácido clorídrico 1,0 N. Lava-se a solução orgânica com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de 66% acetato de etilo em hexanos até 5% de álcool metílico em acetato de etilo. Por concentração obtém-se 7-ciclo-heptil-6-(2,6-difluoro-4-{3-[(4-metoxi benzil) oxi]propoxi}fenil) [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol sob a forma de um óleo amarelo (820 mg).

Adiciona-se ao 7-ciclo-heptil-6-(2,6-difluoro-4- 132 ΡΕ1680425 {3-[(4-metoxibenzil)oxi]propoxi}fenil)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pirimidin-5-ol acima (820 mg), 5 mL de oxicloreto de fósforo e 2 mL de N,N-dietilanilina, e aquece-se a mistura ao refluxo durante 1 h. Remove-se o excesso de oxicloreto de fósforo em vazio, e retoma-se o resíduo resultante em cloreto de metileno e ácido clorídrico 1 N. Lava-se a fase orgânica with salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de hexanos até 20 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 5-cloro-7-ciclo-heptil-6-(2,6-difluoro-4-{3-[(4-metoxibenzil)oxi]propoxi}fenil)-[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina sob a forma de um óleo amarelo (180 mg). MS: m/z 557,2 (M+H).

Passo D: 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol;

Adiciona-se, a uma solução de 5-cloro-7-ciclo-heptil-6-(2,6-difluoro-4-{3-[(4-metoxibenzil)oxi]propoxi}-fenil)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina (56 mg, 0,1 mmol) em 4 mL de cloreto de metileno e 0,2 mL de água, 2,3-dicloro-5,6- diciano-1,4-bezoquinona (100 mg, 0,44 mmol). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 20 minutos, e depois lava-se com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (x2), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de 33 % de acetato de etilo em hexanos até 66 % 133 ΡΕ1680425 de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimi-din-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol sob a forma de um sólido amarelo claro (34 mg). MS: m/z 437,2 (M+H). EXEMPLO 31 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[l,5-a]pirimi-din-6-il) -3, 5-dif luorofenoxi] -N, iV-dimetilpropan-1-amina;

Adiciona-se a uma solução de 7-ciclo-heptil-6-(2,4,β-trifluorofenil)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol (396 mg, 1,1 mmol) e 3-dimetilamino-l-propanol (561 mg, 5,5 mmol) em 5 mL de sulf óxido de dimetilo à temperatura ambiente, hidreto de sódio (a 60 % em óleo mineral, 200 mg, 5 mmol). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 h, e retoma-se em acetato de etilo e água. Neutraliza-se a fase aquosa com ácido clorídrico 1 N, até pH 8. Algum do produto pretendido precipita da solução, e é separado por filtração. Lava-se a solução orgânica com salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Mistura-se o resíduo com o produto sólido para se obter 7-ciclo-heptil-6-{4-[3-(dimetil-amino)propoxi-2,6-difluorofenil}[1,2,4]triazolo[1,5-a]piri-midin-5-ol em bruto. MS: m/z 446,1 (M+H). 134 ΡΕ1680425

Adiciona-se ao 7-ciclo-heptil-6-{4-[3-(dimetil-amino)propoxi-2,6-difluorofenil}[l,2,4]triazolo[l,5-a]piri-midin-5-ol em bruto acima, 2 mL de oxicloreto de fósforo e 1 mL de N,N-dietilanilina, e aquece-se a mistura a 110°C durante 1 h. Remove-se o excesso de oxicloreto de fósforo em vazio, e retoma-se o resíduo resultante em acetato de etilo e solução aquosa de carbonato de sódio a 5 %. Lava-se a fase orgânica with salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre sili-cagel, eluindo com um gradiente de cloreto de metileno até 20 % de álcool metílico em cloreto de metileno. Por concentração obtém-se 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]tria-zolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N,N-dime-tilpropan-l-amina sob a forma de um sólido acastanhado (105 mg). MS: m/z 464,0 (M+H). EXEMPLO 32

Sal de ácido trifluoroacético de 3-[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-dif luorof enoxi ] -IV-metilpropan-l-amina

135 ΡΕ1680425

Passo A: 3-[4-(7-Ciclo-heptil-5-hidroxi[1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propil-(metil)carbamato de terc-butilo;

Adiciona-se a uma mistura de hidreto de sódio (a 60 % em óleo mineral, 334 mg, 8,35 mmol) em 10 mL de sulfóxido de dimetilo e à temperatura ambiente, 3-(metil-amino)propan-l-ol (744 mg, 8,35 mmol). Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 h, e adiciona-se-lhe uma solução de 7-ciclo-heptil-6-(2,4,6-trifluorofenil)[1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-5-ol (1,12 g, 3,1 mmol) em 10 mL de sulfóxido de dimetilo. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 6 h, e adiciona-se-lhe uma solução de dicarbonato de di-terc-butilo (1,82 g, 8,35 mmol) em 10 mL de sulfóxido de dimetilo. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 18 h e dilui-se com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com água (x2) e salmoura saturada, seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de 30 % acetato de etilo em hexanos até 70 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se 3-[ 4-(7-ciclo-heptil-5-hidroxi[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluoro-fenoxi]propil(metil)carbamato de terc-butilo sob a forma de um sólido amarelo (876 mg). MS: m/z 530,4 (M-H).

Passo B: 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propil(metil ) carbamato de terc-butilo; 136 ΡΕ1680425

Adiciona-se a 3-[4-(7-ciclo-heptil-5-hidroxi-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-propil(metil)carbamato de terc-butilo (876 mg, 1,64 mmol) 5,8 mL de oxicloreto de fósforo e 2,9 mL de N, N-dietil-anilina, e aquece-se a mistura a 90°C durante 3 h. Remove-se o excesso de oxicloreto de fósforo em vazio, e dilui-se o resíduo resultante com acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica with água gelada e com salmoura saturada (x2), seca-se sobre sulfato de magnésio, e concentra-se para se obter um resíduo. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre silicagel, eluindo com um gradiente de hexanos até 40 % de acetato de etilo em hexanos. Por concentração obtém-se o -[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,δη] pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propil(metil)carbamato de terc-butilo sob a forma de um óleo amarelo claro (452 mg). MS: m/z 550,1 (M+H).

Passo C: 3-[ 4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N-metilpro-pan-l-amina;

Adiciona-se a uma solução de 3-[ 4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]propil(metil)carbamato de terc-butilo (452 mg, 0,82 mmol) em 4 mL de cloreto de metileno, 2,3 mL de ácido trifluoroacético. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 18 h, e concentra-se em vazio, obtendo-se o 3 — [ 4 — (5-cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6- 137 ΡΕ1680425 il) -3,5-difluorofenoxi] -IV-metilpropan-1-amina sob a forma do seu sal de ácido trifluoroacético, um semi-sólido amarelo (400 mg). MS: m/z 450.2 (M+H). EXEMPLO 33 5-Cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazol[1,5-a]pirimidin-7-amina; 465,2 (M+H)

Sintetiza-se o produto, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(lP)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazol[1,5-a]pirimidin-7-amina, usando as condições do Exemplo 1 e substituindo o cloridrato de (15)- 2.2.2- trifluoro-l-metiletilamina pelo cloridrato de (1R)- 2.2.2- trifluoro-l-metiletilamina .

Podem sintetizar-se os Exemplos 34-37 de forma análoga à utilizada para o Exemplo 30. EXEMPLO 34 3-[4-(5-Cloro-7-ciclooctil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol 138 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 30 e substituindo o ácido ciclo-hepta-nocarboxílico pelo ácido ciclo-octanocarboxílico. EXEMPLO 35 3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-hexil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol;

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 30 e substituindo o ácido ciclo-heptanocarboxílico pelo ácido ciclo-hexanocarboxílico. EXEMPLO 36 2-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]etanol 139 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 30 e substituindo o 1,3-propanodiol pelo etilenoglicol. EXEMPLO 37 4-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butan-l-ol

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 30 e substituindo o 1, 3-propanodiol pelo 1,4-butanodiol.

Podem sintetizar-se os Exemplos 38-41 de forma análoga à utilizada no Exemplo 31. EXEMPLO 38 N-{3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-octil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propi}-N, N- dimetilamina 140 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 31 e substituindo o ácido ciclo-hepta-nocarboxílico pelo ácido ciclo-octanocarboxílico. EXEMPLO 39 N- {3-[4-(5-Cloro-7-ciclo-hexil[1,2,4]triazolo[1,5-a]piri-midin-6-il) -3,5-difluorofenoxi]propil} -N, iV-dimeti lamina

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 31e substituindo o ácido ciclo-hepta-nocarboxílico pelo ácido ciclo-hexanocarboxílico. EXEMPLO 40 N- {2-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]piri midin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]etil} -N, IV-dimeti lamina 141 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 31, e substituindo o 3-dimetilamino-l-propanol por 2-(dimetilamino)etanol. EXEMPLO 41 N— {4-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l, 5-a]piri-midin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butil}-N,N-dimetilamina)

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 31, e substituindo o 3-dimetilamino-l-propanol pelo 4-(dimetilamino)-1-butanol.

Podem sintetizar-se os Exemplos 42-45 de uma forma análoga à utilizada no Exemplo 32. EXEMPLO 42 N-{3- [4-(5-Cloro-7-ciclooctil[1,2,4]triazolo[1,5-a]piri-midin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propil}-N-metilamina 142 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 32 e substituindo o ácido ciclo-heptanocarboxílico pelo ácido ciclo-octanocarboxílico. EXEMPLO 43 N-{3 - [4-(5-Cloro-7-ciclo-hexil[1,2,4]triazolo[1,5-a]piri-midin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propil}-N-metilamina

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 32 e substituindo o ácido ciclo-heptanocarboxílico pelo ácido ciclo-hexanocarboxilico. EXEMPLO 44 N-{2-[4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]etil}-N-metilamina 143 ΡΕ1680425

Pode-se sintetizar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 32 e substituindo o 3-(metilamino)-propan-l-ol pelo 2-(metilamino)etanol. EXEMPLO 45 N-{4- [ 4-(5-Cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l, 5-a]piri-midin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butil}-iV-meti lamina)

Pode-se preparar o produto do Exemplo usando as condições do Exemplo 32 e substituindo o 3-(metilamino)-propan-l-ol pelo 4-(metilamino)-1-butanol. A medição de XRD de pós indica que as formas anidra e hidratada do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-di-fluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenilJ-N-[(lS)-2,2,2-tri-fluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina (Exemplo 2c) e as formas anidra e hidratada do sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}- 144 ΡΕ1680425 Ν-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (Exemplo 2b) que se obtiveram, são cristalinas e apresentam estruturas cristalinas distintas.

Utiliza-se um difractómetro de Raios-X Philips X'Pert PW3040 para obter os dados de difracção . Regista-se a intensidade de difracçao a cada 0,01° ou 0,02° entre os valores do ângulo 2-teta de 4 a 40. Utiliza-se um modo de varrimento normal Θ/2Θ. Na Tabela 20 listam-se as posições dos picos ou os ângulos 2-teta das figures de XRD de pós correspondentes.

Tabela 20. Posições de picos para o sal succinato (Exemplo 2c) e para o sal fumarato (Exemplo 2b) Ângulo 2-Teta (grau)* Succinato Succinato Fumarato Fumarato Anidro Hidratado Anidro Hidratado 5, 6 5,1 5,4 5, 1 7,4 7,5 7,3 7,5 10, 7 8,0 10, 7 7, 9 11, 0 9,9 14, 0 9, 8 13,6 10,2 14,3 (f) 10,2 14,1 (f) 11, 1 14, 6 11,2 14,6 (f) 13, 9 15, 0 13,8 (1) 14, 9 14,4 (f) 16,0 14, 4 15, 5 14, 7 16,2 14,6 16,0 15, 4 17,0 14, 8 r-\—1 15, 8 17,6 15,3 145 ΡΕ1680425

Tabela 20. Posiçoes de picos para o sal succinato (Exemplo 2c) e para o sal fumarato (Exemplo 2b) (continuação) Ângulo 2-Teta (grau)* Succinato Succinato Fumarato Fumarato Anidro Hidratado Anidro Hidratado 5, 6 5,1 5,4 5,1 16,9 16,6 (f) 18,6 15, 8 17, 4 17,2 19,1 16, 0 18,0 17,7 (f) 20, 1 16,3 (f) 18,4 18,5 21,2 16,5 (f) 19,3 19,5 21,6 17,2 20,1 (1) 19,8 22,0 17,6 (f) 20,5 20,5 22,3 18,4 20,7 (f) 20, 9 22, 7 19,4 22,2 21,5 23,2 19,6 22,5 (f) 22,4 23,5 19,8 (f) 22, 7 23,3 24, 6 20,5 23, 7 23, 9 25,3 20,8 24,6 (1) 25,1 (f) 25,6 21, 1 25,3 25, 4 26,1 21,5 25, 9 25, 7 27,1 (f) 22,0 26,2 (1) 26,5 27, 5 22,5 26,8 27,7 (1) 28,1 23,2 27, 8 28,4 28, 7 23,6 (f) 28,4 28, 8 29,6 24, 0 29,0 (f) 29, 8 29, 8 24,4 (f) 29,4 30,2 30,4 25,2 146 ΡΕ1680425

Tabela 20. Posiçoes de picos para o sal succinato (Exemplo 2c) e para o sal fumarato (Exemplo 2b) (continuação) Ângulo 2-Teta (grau)* Succinato Succinato Fumarato Fumarato Anidro Hidratado Anidro Hidratado 30,6 (f) 30,9 30, 7 25,8 31,2 (1) 31,9 31,1 26,1 32,0 32,6 31, 7 26, 7 32,4 33,0 32,2 27,4 (f) 32,0 33,5 (1) 32, 8 27,6 33,4 34,7 (1) 33,2 28,1 (f) 34,3 (1) 35,4 (f) 33, 7 28,3 (f) 35, 3 35, 8 34,2 (f) 28,6 36,6 36,3 (1) 34, 4 28,9 (1) 37,5 36,6 34,9 (1) 29,4 38,9 38,1 36,0 30,2 38,3 (1) 36, 7 30,5 (1) 39,2 37, 1 31,1 38,2(1) 31,6 39,1 32,2 39,7 (1) 32,4 32,8 33,2 33,9 34,7 (f) 34, 9 35,6 147 ΡΕ1680425

Tabela 20. Posições de picos para o sal succinato (Exemplo 2c) e para o sal fumarato (Exemplo 2b) (continuação) Ângulo 2-Teta (grau)* Succinato Anidro Succinato Hidratado Fumarato Anidro Fumarato Hidratado 36,2 36,5 37,2 37,6 (f) 38,3 (1) 39,4 * f = fraco, 1 = largo

Os picos muito fracos estão anotados como (f)

Os picos relativamente largos estão anotados como (1)

Lisboa, 6 de Fevereiro de 2007

Claims

ΡΕ1680425 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto com a Fórmula (I): R*

m em que: R1 seja seleccionado de entre R& N—-H ^ e cicloalquilo C6-Cs substituído opcionalmente com R8; R2 seja um grupo de entre o conjunto

n seja um inteiro igual a 2, 3, ou 4; X seja Cl ou Br; 2 ΡΕ1680425 Y seja Ο, S, CH2 ou NR4; Q seja seleccionado de entre -NR6R7 e -OH; L1 e L2 sejam cada um deles independentemente H, F, Cl, Br, ou CF3; R3 seja CF3 ou C2F5; R4 e R5 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo Ci-C3; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C1-C3; ou R6 e R7, quando forem tomados opcionalmente em conjunto com o átomo de azoto a que cada um deles se liga, formem um anel heterociclico com 4 a 6 membros, contendo 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e opcionalmente substituído com R8; R8 seja alquilo Ci-C3; ou um sal destes compostos aceitável do ponto de vista farmacêutico. 1 Um composto de acordo com a reivindicação 1, 2 em que R2 seja 3 ΡΕ1680425 í-WY"{CHái,Q t? f ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. 2 . Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindicação 2 em que Y seja 0.
3 . Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que n seja 3. 4. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, em que Q seja -NR6R7. 5. Um composto de acordo com a reivindicação 5, em que R6 seja H e R7 seja H ou metilo.
6 . Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que L1 seja F e L2 seja H ou F. 7. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, em que X seja Cl.
8. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em que R5 seja CF3. 4 ΡΕ1680425
9. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, em que R5 seja H ou metilo.
10. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R2 seja

n=3 ; X seja Cl ou Br; Y seja 0; R3 seja CF3; Q seja -NR6R7; R5 seja H ou metilo; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C1-C3; ou R6 e R7 quando forem opcionalmente tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual cada um deles se liga, formem um anel heterocíclico saturado com 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e substituído opcionalmente com R8; R8 seja alquilo C1-C3; 5 ΡΕ1680425 L1 seja F; L2 seja H ou F; ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
12. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R2 seja

n seja 3; X seja Cl; Y seja 0; Q seja -NR6R7; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; L2 seja F; 6 ΡΕ1680425 ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
13. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R2 seja

X seja Cl; n seja 3; Y seja 0; Q seja -NR6R7; R3 seja -CF3; R5 seja H ou metilo; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; 7 ΡΕ1680425 L2 seja F; ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
14. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, representado pela fórmula (Ia)

ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
15. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, representado pela fórmula (Ib)

(ib) ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico . ΡΕ1680425
16. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em que R1 seja cicloalquilo C6-Cs substituído opcionalmente com R8, ou os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.
17. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 seja cicloalquilo C6-Cs; R2 seja

n seja 3; X seja Cl; Y seja 0; Q seja -NR6R7; R6 seja metilo; R7 seja H ou metilo; L1 seja F; 9 ΡΕ1680425 L2 seja F; ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. 18. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, que seja um dos seguintes 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi] fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil) [1,2, 4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-(2,2,2-trifluoroetil)[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-aminopropoxi)-2,β-difluorofenil]-5-cloro-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5- a]pirimidin-7-amina, 10 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-l il)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluoro fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{3-[etil(metil)amino]propoxi}— 2,6 — difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropo-xi)fenil]-N-[(15) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-azetidin-l-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil ] 5-cloro-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 11 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-enil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[ 1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,β-difluo rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletoxi) fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 2-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]etanol, 12 ΡΕ1680425 3- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{((15)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[(1-S)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-f luorofenil] -N1,!!3, N3-trimetilpropano-l, 3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-l, 3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{ [ (15) - 2,2,2-trifluoro-1-meti1-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2,N2-dimetiletano-1,2-diamina, 5- bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorof enil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 13 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 3 - [ 4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]propan-l-ol, 3-[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N,N-dimetilpropan-1-amina, 3-[4-(5-cloro-7-ciclo-heptil[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]-N-metilpropan-1-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] f enil } -N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] fenil}-N-[2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo-[ 1,5-a]pirimidin-7-amina; 14 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] f enil} -N- [ (1.R) —2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] [ 1,2, 4 ] tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-aminopropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-1 il)propoxi]fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluo-rofenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4 —{3 —[etil(metil)amino]propoxi}-2,6-difluorofenil)-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 15 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-[2,β-difluoro-4-(3-morfolin-4-ilpropo-xi)fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 6- 4-(3-azetidin-1-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etoxi]-fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorof enil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 16 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[ 2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletoxi) fenil]-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo-lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 2- [4-(5-cloro-7-{ [ (177) - 2,2,2-trif luoro-l-met ilet il] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]etanol, 3- [4-(5-cloro-7-{[(IR)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{ ( (177)-2,2,2-trif luor o-1-met ilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{ [ (1-77) -2,2,2-trif luor o-1-met il etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil]-N1, N3, N3-trimetilpropano-l,3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{ [(177)-2,2,2-trif luoro-l-met ilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina, 17 ΡΕ1680425 N1-[4-(5-cloro-7-{[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2, N2-dimetiletano-l, 2-diamina, 5-bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil} -N- [(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorof enil} -N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo [ 1,5-a]pirimidin-7-amine, 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorof enil}-N-[(IR)-2, 2, 2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amine, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluo rofenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina e 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-[(IR)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina; 18 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5- cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4] — triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 6- [4-(3-aminopropoxi)-2,6-difluorofenil]-5-cloro N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(4-metilpiperazin-l il)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil]-[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(etilamino)propoxi]-2,6-difluorof enil } -N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{3-[etil(metil)amino]propoxi}— 2,6 — difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-pirrolidin-l-ilpro-poxi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 19 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(3-piperidin-l-ilpropo xi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2, 4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-[2, 6-difluoro-4-(3-morfolin-l-ilpropo-xi)fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 6 - [ 4-(3-azetidin-1-ilpropoxi)-2,6-difluorofenil] 5-cloro-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-fluoro-fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[2-(metilamino)etόχι] fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-difluorofenil } -N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorofenil} -N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 20 ΡΕ1680425 5-cloro-6-[2,6-difluoro-4-(2-morfolin-4-iletόχι )fenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]tri-azolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-(4-{[3-(dimetilamino)propil]tio}-2,6-difluorofenil)-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4] triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 2- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metilet il] amino][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]etanol, 3- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenoxi]propan-l-ol, 4- [4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-difluorofenoxi]butan-l-ol, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il]amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil]-N1, N3, N3-trimetilpropano-l,3-diamina, N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-1-metilet il ] amino}[l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N3,N3-dimetilpropano-l, 3-diamina, 21 ΡΕ1680425 N1-[4-(5-cloro-7-{[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metil-etil]amino}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3,5-di-fluorofenil] -N2,N2-dimetiletanp-1,2-diamina, 5-bromo-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2, 6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4-triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-4-[4-(dimetilamino)butil]-2,6-difluorof enil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[2-(dimetilamino)etoxi]-2,6-difluorof enil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazo lo[1,5-a]pirimidin-7-amina, 5-cloro-6-{3-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, e 5-cloro-6-{3-[4-(dimetilamino)butoxi]-2,6-di-fluorofenil]-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi] fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; 22 ΡΕ1680425 5-cloro-6-{4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2,6-di-fluorofenil}-N-[ (IS) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]-triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, ou 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi ] fenil}-N-[(1S)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]— triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina; ou um sal destes compostos aceitável do ponto de vista farmacêutico.
19. Um compostos de acordo com a Reivindicação 1, que seja um dos seguintes: cloridrato de 5-cloro-6-{2,β-difluoro-4-[3-(me-tilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[ (15) - 2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(15)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina, di-hidrato do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(lS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina, 23 ΡΕ1680425 ou di-hidrato do sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(lS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil][l,2,4]triazolo[l,5-a]pirimidin-7-amina.
20. Um polimorfo do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS) - 2.2.2- trifluoro-l-metiletil] [l,2,4]triazolo[l,5-a]piri-midin-7-amina 3, que apresente os valores de ângulos 2-teta de difracção de Raios-X (XRD) listados na Tabela 20.
21. Um polimorfo do sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(1S)- 2.2.2- trifluoro-l-metiletil][1,2,4]triazolo[1,5-a]piri-midin-7-amina, que apresente os valores de ângulos 2-teta de difracção de Raios-X (XRD) listados na Tabela 20.
22. Um polimorfo do di-hidrato do sal succinato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5- a]pirimidin-7-amina, que apresente os valores de ângulos 2-teta de difracção de Raios-X (XRD) listados na Tabela 20.
23. Um polimorfo do di-hidrato do sal fumarato de 5-cloro-6-{2,6-difluoro-4-[3-(metilamino)propoxi]fenil}-N-[(IS)-2,2,2-trifluoro-l-metiletil] [1,2,4]triazolo[1,5- 24 ΡΕ1680425 a]pirimidin-7-amina 3, que apresente os valores de ângulos 2-teta de difracção de Raios-X (XRD) listados na Tabela 20.
24. A utilização de uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) tal como se definiu em qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, para a preparação de um medicamento para tratar ou para inibir o crescimento de células tumorais cancerosas, e doenças associadas, num mamífero que dele necessite.
25. A utilização de uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) tal como se definiu em qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, para a preparação de um medicamento para promover a polimerização de tubulina num sistema que contenha tubulina.
26. A utilização de uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) tal como se definiu em qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, para a preparação de um medicamento para estabilizar os microtúbulos num sistema que contenha tubulina.
27. A utilização de uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) tal como se definiu em qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, para a preparação de um 25 ΡΕ1680425 medicamento para o tratamento ou a prevenção de tumores que expressem resistência a múltiplos fármacos (MDR), ou que sejam resistentes por causa de MDR, num mamífero que dele necessite.
28. A utilização de uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) tal como se definiu em qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou de um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, para a preparação de um medicamento para o tratamento, a inibição do crescimento ou a eliminação de um tumor num mamífero que dele necessite, no caso em que o tumor referido seja resistente a pelo menos um agente quimioterapêutico.
29. Uma composição farmacêutica que compreende um composto dem qualquer uma das reivindicações 1 a 23, ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, juntamente com um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico
30. Um processo para a preparação de um composto com a Fórmula (I)

em que: R1 seja ΡΕ1680425 26

R seja uma espécie

T % HjX. n seja um inteiro igual a 2, 3, ou 4; X seja Cl ou Br; Y seja O, S, ou NR4; Q seja seleccionado de entre -NR6R7 e -OH; L1 e L2 sejam cada um deles independentemente H, F, Cl, Br, ou CF3; R3 seja CF3 ou C2F5; R4 e R5 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo Ci-C3; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C3-C3; ou 27 ΡΕ1680425 R6 e R7, quando forem tomados opcionalmente em conjunto com o átomo de azoto a que cada um deles se liga, formem um anel heterocíclico com 4 a 6 membros, contendo 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e opcionalmente substituído com R8; R8 seja alquilo C1-C3; ou um sal destes compostos aceitável do ponto de vista farmacêutico, que inclua fazer-se reagir um composto com a fórmula (II)

em que L3 seja um grupo de saída com a fórmula HY- (CH2) nQ, na presença de uma base forte e opcionalmente na presença d um solvente aprótico, para se obter um composto com a Fórmula (I), e se tal se pretender para o isolar sob a forma de um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.
31. Um processo para a preparação de um composto com a fórmula (I) ΡΕ1680425 28

m em que: R1 seja

R2 seja uma espécie do conjunto

n seja um inteiro igual a 2, 3, ou 4; X seja Cl ou Br; Y seja CH2; Q seja -NR6R7; L1 e L2 sejam cada um deles independentemente H, F, Cl, Br, ou CF3; 29 ΡΕ1680425 R3 seja CF3 ou C2F5; R5 seja H ou alquilo C1-C3; R6 e R7 sejam cada um deles independentemente H ou alquilo C1-C3; ou R6 e R7, quando forem tomados opcionalmente em conjunto com o átomo de azoto a que cada um deles se liga, formem um anel heterociclico com 4 a 6 membros, contendo 1-2 átomos de azoto e 0-1 átomos de oxigénio ou 0-1 átomos de enxofre, e opcionalmente substituído com R8; R8 seja alquilo C1-C3; ou um sal destes compostos aceitável do ponto de vista farmacêutico, que inclua os passos de: (a) se fazer reagir o diéster (III)

com 2-amino-l,3,4-triazole (IV) na presença de uma base, para se obter um composto (V) com a fórmula 30 ΡΕ1680425

(b) se halogenar o composto (V) com POX3, para se obter um composto 5,7-di-halo (VI),

(c) se fazer reagir o composto 5,7-di-halo (VI) com uma amina (VII), n (VII) na presença de uma base e num solvente aprótico adequado, para se obter o composto correspondente com a Fórmula (I), em que Y é -CH2-, e se tal for pretendido, isolar um seu sal aceitável do ponto de vista terapêutico.
32. Um processo para a preparação de um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico de um composto com a Fórmula (I)

m ΡΕ1680425 31 em que: R1 seja

R2 seja uma espécie

n seja um inteiro igual a 3; X seja Cl; Y seja 0; Q seja -NR6R7; L1 e L2 sejam cada um deles F R3 seja CF3; R5 seja CH3; R6 seja H; ΡΕ1680425 32 R7 seja CH3 que inclua fazer-se reagir um composto com a Fórmula (I)

(Ϊ) em que R1, R2 e X sejam tais como se definiram acima neste documento, com um ácido formador de sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, opcionalmente na presença de uma base forte e num solvente, para se obter um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico do composto com a Fórmula (I). Lisboa, 6 de Fevereiro de 2007