KR920004818B1

KR920004818B1 - 세포 보호제 조성물

Info

Publication number: KR920004818B1
Application number: KR1019890017275A
Authority: KR
Inventors: 박수남; 부용출
Original assignee: 태평양화학 주식회사; 김만경
Priority date: 1989-11-28
Filing date: 1989-11-28
Publication date: 1992-06-18
Also published as: KR910009279A; JPH03170407A; JPH0714851B2; FR2655054B1; FR2655054A1

Abstract

내용 없음.

Description

세포 보호제 조성물

이 발명은 동물의 세포를 보호하는 제제에 관한 것으로 특히 생약 제제인 울금(Cureuma ionga L.)의 쿠르쿠미노이드(Curcuminoids)성분과 효소의 일종인 SOD(svperoxide dismvtase) 또는 아스코르빈산(ascorbic acid)를 함유하며, 특히 유해한 활성 산소류(actiuated oxygen species)로부터 세포를 보호하는 탁월한 활성을 가지며, 특히 빛에 노출이 많은 피부 세포를 보호하는 화장품의 원료로써 유용한 세포보호제에 관한 것이다.

세포 보호제는 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 제제로서 활성 산소류는 지질, 단백질, 헥산등의 생체 물질을 변질시켜 돌연변이, 발암, 노화의 원인이 되기 때문에(Leibouits, B.E.and Siegel, B.W. (1980), J.Geontel., 35 : 45)세포 보호제는 돌연변이, 발암, 노화의 원인을 근본적으로 제거하는 우수성을 갖는다.

생체에서 생성되는 활성 산소류로는¹O₂, O^- ₂, H₂O₂등이 있으며 이들은 생체내의 각종 효소반응에 의해 생성되어 생리활성 물질의 생합성, 면역기능, 약물의 대사등에서 매우 중요한 역할을 하지만 그 반응성이 매우 커서 이들이 과잉생성될 경우에는 오히려 생체에 손상을 가져올 수 있다.

한편 활성 산소류는 빛과 광증감 작용을 갖는 각종 약물로 인해서도 생성될 수 있는데 현대사회에서 각종 약물에 대한 접촉이 많아지면서 과잉의 유기 자유 라디칼과 활성 산소류에 의한 생체 폐해가 우려되는 실정이다.

그러나 아직까지는 이렇다할 세포 보호제가 나와 있지 않은 실정이며, 산화 방지제인 α-토코페롤이 세포 보호제로서 쓰이고 있는 예는 있으나 그 실질적 효능은 의심받고 있는 실정이다. 이에 강력한 세포 보호제의 필요성을 절실히 파악하게 된 발명자는 1차적으로 세포 보호제를 검색할 목적으로 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성을 간단하고 정확하게 측정하는 방법을 정립한 바 있으며, 2차적으로 각종 식물의 유용성분, 특히 강력한 항산화 효과가 보고되고 있는 성분들을 중심으로하여 검색 연구를 계속하여 오고 있다.

[표 1]

그 결과로 생약제제인 울금의 쿠르쿠미노이드 성분(표 1)인 쿠르쿠민(curcumin), HCFM(4-hydroxy cinnamoly(feruloyl) methane), BHCM(bis(4-hydroxy cinnamoyl) methane)등이 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 매우 강력함을 밝혀내었다(표 2).

[표 2]

울금은 인도, 서부 파키스탄, 남부 중국, 말레이지아등에서 재배되는 다년초로서 생강과에 속하며 생약으로서 이담제, 건위제등으로 사용되고 있으며 그 주성분은 쿠르쿠미노이드로서 쿠르쿠민, HCFM, BHCM 등이 있다. 이들 쿠르쿠미노이드 성분은 주황색의 식용 색소로 이용되고 있는 안전성이 매우 높은 물질이며 쿠르쿠민은 항염증작용(R.C.SRIMAL and B.N.DHAWAN, J.Pharm.Pharmc(1973), 25 ; 447-452)도 보고되어 있다.

본 발명자는 쿠르쿠미노이드 성분이 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 강력한 것이 항염증 작용과 밀접한 관련이 있는 것으로 판단하고 있다.

한편 본 발명자는 쿠르쿠미노이드 성분이 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 아스코르빈산의 첨가로 급격히 증대될 것으로 예측하여 여러가지로 실험한 결과 표 3에 기재한

[표 3]

바와 같이 아스코르빈산이 쿠르쿠민의 산화를 방지함으로써 상승적으로 세포를 보호하는 것으로 밝혀냈다. 즉 25μM의 쿠르쿠민에 대해 아스코르빈산을 100μM 첨가하였을 때 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 급격히 증대되었다.

한편 발명자는 쿠르쿠미노이드 성분이 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 SOD의 첨가로 급격히 증대될 것으로 예측하고 실험하였다.

SOD는 생물체의 세포질이나 미토콘드리아에 존재하며 유해한 활성 산소인¹O₂를 제거함으로써 산화적 손상으로부터 세포를 보호하는 효소이다.

본 발명에서 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성의 측정에 있어서 로즈벵갈(rose-bengal)을 광증감제로 이용하였는데 로즈벵갈은 광조사로¹O_g를 생성한다고 알려져 있다.

발명자는 쿠르쿠미노이드 성분이 유해한 활성 산소인¹O₂를 보다 덜 해로운 O^- ₂로 변환시킴으로써 세포를 보호하고 SOD는 다시 O^- ₂를 제거함으로써 세포를 상승적으로 보호할 것으로 예측하고 이를 실험한 바 표 4에 기재한 바와 같이 입증되었다.

[표 4]

즉 25μM의 쿠르쿠미노이드에 대해 SOD를 50-100μg/ml 첨가하였을 때 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 급격히 증대되었다.

이 발명은 이러한 연구 결과를 토대로 하여 쿠르쿠미노이드와 SOD 또는 아스코르빈산을 함유하는 세포보호제에 관한 것으로, 특히 빛에 노출이 많아서 활성 산소류로부터 피해를 입기 쉬운 피부 세포를 보호하는 제제로서 보다 큰 가치를 가질 수 있으며 특히 화장품의 원료로서 중요한 가치를 지닌다.

본 발명을 상세히 설명하면 울금의 쿠르쿠미노이드 성분, 구체적으로는 쿠르쿠민, HIFM, BHCM중에서 적어도 하나를 택하고 그것을 SOD 또는 아스코르빈산과 조합한 조성물로서의 세포 보호제에 관한 것이다.

본 발명에서 상기 두가지 유효성분의 조성비율은 구체적으로 한정되는 것은 아니지만 본 발명의 조성비율을 예를들어 설명하면 SOD 8g 또는 아스코르빈산 2.8g(16.0mmole)을 물 1.0리터에 용해시키고 여기에 쿠르쿠민 1.48g(4.0mmol), HCFM 1.36g(4.0mmole) 또는 BHCM 1.24g(4.0mmole)을 에탄올 20ml에 용해시킨 액을 첨가하고 혼화하여 세포 보호제를 제조한다. 이 발명의 세포 보호제는 유해한 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 매우 강력했다.

다음의 실시예로 이 발명을 보다 더 상세히 설명하겠다.

[실시예 1]

쿠르쿠민 1.48g(4.0mmole)을 에탄올 20ml에 용해하고, 따로 SOD 8g을 물 1.0리터에 용해한 후 두 용액을 서로 합하여 세포 보호제를 제조하였다.

[실시예 2]

HCFM 1.36g(4.0mmole)을 에탄올 20ml에 용해하고, 따로 아스코르빈산 2.8g(16mmole)을 물 1.0리터에 용해한 후 두 용액을 서로 합하여 세포 보호제를 제조하였다.

[실시예 3]

BHCM 1.24g(4.0mmole)을 에탄올 20ml에 용해하고, 따로 SOD 8g을 물 0.5리터에 용해하고, 따로 아스코르빈산 2.8g(16mmole)을 물 1.0리터에 용해한 후 세 용액을 모두 합하여 세포 보호제를 제조하였다.

[실시예 4]

쿠르쿠민, HCFM 또는 BHCM 4.0mmole을 각각 에탄올 1.0리터에 녹여서 각각 세포 보호제를 제조하였다.

[실시예 7-8]

SOD 8g 또는 아스코르빈산 2.8g(16mmole)을 각각 물 1.0리터에 녹여서 각각 세포 보호제를 제조하였다.

[비교예 1]

α-토코페롤 4.0mmole을 에탄올 1.0리터에 녹여서 세포 보호제를 제조하였다.

[시험 1]

세포 보호제가 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성을 비교

토끼로부터 채취된 혈액을 원심분리(3000rpm, 5분)하고 세척하여 얻은 적혈구를 생리 식염수에 희석하여 적혈구 현탁액(적혈구 6천만개/3.5ml)을 조제하였다. 직경 1.0cm의 10ml들이 파이렉스 시험관 6개를 준비하여 각각에 적혈구 현탁액 3.5ml씩을 넣었다. 6개의 시험관중 3개는 대조군으로서 에탄올 50μl씩을 첨가하고, 나머지 3개는 처리군으로서 세포 보호제를 50μl씩 첨가하고 암소에서 30분간 융화시켰다. 융화가 끝난 후, 광증감제로써 로즈벵갈(rose bergel)의 수용액(12μM) 0.5㎖를 첨가하고 입구를 파라필름으로 봉한 후 내부를 검게 칠한 50×20×25cm의 직육면체 상자안에 20w의 형광등을 장치하고, 형광등에서 5cm의 거리에 그 시험관을 배열시키고 15분간 광조사하였다. 강증감제를 첨가하고 광조사하는 것은 활성 산소류를 생성시키기 위한 것이다. 광조사가 끝난 후 그 시험관들을 암소에 두면서 15분간 간격으로 700mm에서의 투광도를 측정하였다. 이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적혈구 용혈에 비례한다.

이상의 모든 실험은 27℃이 항온실에서 실시하였으며 세포 보호제가 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성은 이상의 측정 조건에서 첨가된 적혈구의 50%가 광용혈되는데 소요되는 시간(분)으로 정의하였다.

그 결과를 표 4에 정리하였다.

이 발명의 세포 보호제들은 기존의 세포 보호제인 α-토코페롤에 비해 활성 산소류로부터 세포를 보호하는 활성이 매우 강력하였다.

[표 5]

Claims

쿠르쿠미노이드 성분(Curcuminoids) 4mmole과 SOD(Svperoxide dismvtase) 8g 또는 아스코르빈산(ascorbic acid) 16mmole을 유효성분으로 함유함을 특징으로 하는 세포보호제 조성물.
1 항에서 쿠르쿠미노이드 성분은 쿠르쿠민(Curcumin), HCFM(4-hydroxycinnamoyl(feruloyl) methane) 또는 BHCM(bis-(4-hydroxycinnamoyl methane)임을 특징으로 하는 세포보호제 조성물.