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KR850006874A - 인간암회사인자 및 그를 코우드하는 dna의 제법 - Google Patents

인간암회사인자 및 그를 코우드하는 dna의 제법 Download PDF

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KR850006874A
KR850006874A KR1019850001374A KR850001374A KR850006874A KR 850006874 A KR850006874 A KR 850006874A KR 1019850001374 A KR1019850001374 A KR 1019850001374A KR 850001374 A KR850001374 A KR 850001374A KR 850006874 A KR850006874 A KR 850006874A
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polypeptide
ser
dna
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마사아끼 야마다
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후지와라 도미오
다이닛뽄 세이야꾸 가부시기가이샤
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Abstract

내용 없음

Description

인간암회사인자 및 그를 코우드하는 DNA의 제법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 DNA 단편 제조용의 제한 엔도뉴클레아 절단부위와, 인간 TNF 폴리펩티드를 코우드하는 클론화된 cDNA 의염기배열결정[실시예1~(9)]을 위한 배열방향을 도시한 것, 제2도는 형질발현 플라스미드pHTT26의 구축방법[실시예2~(1)]을 도시한 것, 제3도는 형질발현 플라스미드 pHTR91의 구축방법[실시예 2~(2)]을 도시한 것.

Claims (41)

  1. 인간 마크로파지를 도제와 함께 배양하는 단계와, 마크로파지로부터 인간 암회사인자 mRNA를 함유하는 분획을 분리하는 단계와, 이 분획으로부터 cDNA 라이브러리를 작성하는 단계와, 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분을 코우드하는 cDNA의 클로닝단계로 구성되는 것을 특징으로 하는, 인간 암회사인자 폴리펩티드 또는 그의 주요부분을 코우드하는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA의 제조방법.
  2. 인간 마크로파지를 유도제와 함께 배양하는 단계와, 마크로파지로부터 인간 암회사인자 mRNA를 함유하는 분획을 분리하는 단계와, 이분획으로부터 cDNA 라이브러리를 작성하는 단계와, 인간 암회사인자나 그의 주요부분을 코우드하는 cDNA의 클로닝단계와, 클론화된 cDNA 형질발현벡터에 삽입하는 단계와, 재결합 벡터를 숙주에 도입하여 그를 형질전환시키는 단계와, 형질전환주를 배양하는 단계와, 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분을 갖거나 함유하는 생성되는 폴리펩티드를 수집하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는, 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분을 갖거나 함유하는 폴리펩티드의 제조방법.
  3. 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분 또는 각개의 수식된 염기배열을 코우드하는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA를 형질발현 벡터에 삽입하는 단계와, 재결합 벡터로 숙주를 형질전환시키는 단계와, 숙주를 배양하는 단계와, 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분을 갖거나 함유하는 생성 폴리펩티드를 숙주로부터 수집하는 단계와, 다음에 요구에 따라서는 폴리펩티드를 수식하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는, 인간 암회사인자나 그의 주요부분, 또는 인간 암회사인자형의 물질이나 그의 주요부분, 또는 이들의 각기 수정된 물질을 갖거나 함유하는 폴리펩티드의 제조방법.
  4. (1)인간 마크로파지를 유도제와 함께 배양하는 단계,(2)인간 암회사인자 mRNA를 함유하는 분획을 마크로파지로부터 분리하는 단계,(3)역전사효소를 사용하여 mRNA로부터 단-쇄 cDNA를 제조한 다음 이것을 2중-쇄 cDNA로 전환하는 단계,(4)2중-쇄 cDNA를 벡터에 삽입하는 단계,(5)재결합벡터를 숙주에 도입시켜 그를 형질전환시키고 cDNA라이브러리를 구축하는 단계,(6)라이브러리로부터 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분을 코우드하는 cDNA를 클로닝하는 단계,(7)요구에 따라서는 클론화된 cDNA를 수식하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는, 인간 암회사인자 폴리펩티드나 그의 주요부분, 또는 이들의 각기 수식된 염기배열을 코우드하는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA의 제조방법.
  5. 제1또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅰ]로 표시되는 아미노산배열에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [Ⅰ]
    상기식에서 A는 1개이상의 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된, 다음 일반식[Ⅰa]의 폴리펩티드이고, B는 1개내지 3개의 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된, 다음 일반식[Ⅰb]의 펩티드이며, X는 폴리펩티드이며, Y는 Met이고, m,n및 p는 1 또는 0이다.
    일반식 Ia는 다음과 같다.
    Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala His Val Val Ala Asn Pro Gln Ala Glu Gly Gln Leu Gln Trp Leu Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu [Ia]
    일반식[Ib]는 다음과 같다.
    Ser-Ser-Ser-Arg [Ib]
  6. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅰ]로 표시되는 아미노산에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [Ⅰ]
    상기식에서 A,B,Y,m,n 및 p는 청구범위 5에서 정의한 바와같고, X는 다음 일반식[Ic]의 폴리펩티드 이다.
    Ser Thr Glu Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu Ala Leu Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gln Gly Ser Arg Arg Cys Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr Thr Leu Phe Cys Leu Leu His Phe Gly Val Ile Gly Pro Gln Arg Glu Glu Phe Pro Arg Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu Ala Gln Ala Val Arg [Ic]
  7. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 5항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 청구범위 5항에 기재한 일반식[Ib]의 펩티드이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 바와같고, X는 청구범위 6항에 기재한 일반식[Ic]의 폴리펩티드이며, m과 n은 1이다.
  8. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 5항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 청구범위 5항에 기재한 일반식[Ib]의 펩티드이며, m은 1이고,n은 0이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 것과 같다.
  9. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산배열에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 5항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, n과 m은 0이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 바와같다.
  10. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산배열에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 1개이상의 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 것과 같다.
  11. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 N-말단으로부터 제1위치에 있는 Thr,상기 제1위치의 Thr로부터 제6위치의 Pro까지의 아미노산, 상기 제1위치의 Thr로부터 제9위치의 His까지의 아미노산, 또는 상기 제1위치의 Thr로부터 제12위치의 Ala까지의 아미노산이 삭제된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 것과 같다.
  12. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산배열에 상응하는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 N-말단으로부터 제66위치 및 67위치의 Thr과 His가 His, Thr 또는 Tyr로 대치된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 5항에서 정의한 것과 같다.
  13. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 적어도 다음 일반식[Ia′]로 표시되는 아미노산배열, 또는 N-말단으로부터 제1위치의 Trp내지 제27위치의 Asp가 삭제된 일반식[Ia′]의 아미노산배열에 상응하는 염기배열을 갖는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu [Ia′]
  14. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 1제이상의 코든이 삭제되거나 또는 다른 코든으로 대치된 다음 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고, B′는 1내지 3개코든이 삭제되거나 다른 코든으로 대치된 다음 일반식[Ⅱb]의 염기배열이며, X′는 다음 일반식[Ⅱc]의 염기 배열이고, Y′는 ATG이며,m,n 및 p는 1이나 0이다.
    일반식[Ⅱa]는 다음과 같다.
    (5′)-ACC CCG AGT GAC AAG CCT GTA GCC CAT GTT GTA GCA AAC CCT CAA GCT GAG GGG CAG CTC CAG TGG CTG AAC CGC CGG GCC AAT GCC CTC CTG GCC AAT GGC GTG GAG CTG AGA GAT AAC CAG CTG GTG GTG CCA TCA GAG GGC CTG TAC CTC ATC TAC TCC CAG GTC CTC TTC AAG GGC CAA GGC TGC CCC TCC ACC CAT GTG CTC CTC ACC CAC ACC ATC AGC CGC ATC GCC GTC TCC TAC CAG ACC AAG GTC AAC CTC CTC TCT GCC ATC AAG AGC CCC TGC CAG AGG GAG ACC CCA GAG GGG GCT GAG GCC AAG CCC TGG TAT GAG CCC ATC TAT CTG GGA GGG GTC TTC CAG CTG GAG AAG GGT GAC CGA CTC AGC GCT GAG ATC AAT CGG CCC GAC TAT CTC GAC TTT GCC GAG TCT GGG CAG GTC TAC TTT GGG ATC ATT GCC CTG-(3′)
    일반식[Ⅱb]는 다음과 같다.
    (5′)-TCA0-TCT-TCT-CGA-(3′)
    일반식[Ⅱc]는 다음과 같다.
    (5′)-AGC ACT GAA AGC ATG ATC CGG GAC GTG GAG CTG GCC GAG GAG GCG CTC CCC AAG AAG ACA GGG GGG CCC CAG GGC TCC AGG CGG TGC TTG TTC CTC AGC CTC TTC TCC TTC CTG ATC GTG TCA GGC GCC ACC ACG CTC TTC TGC CTG CTG CAC TTT GGA GTG ATC GGC CCC CAG AGG GAA GAG TTC CCC AGG GAC CTC TCT CTA ATC AGC CCT CTG GCC CAG GCA GTC AGA-(3′)
  15. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 청구범위 14항에 기재한 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고, B′는 청구범위 14항에 기재한 일반식[Ⅱb]의 염기배열이며, m과 n은 1이고, X′,Y′ 및 p는 청구범위 14항에서 정의한 바와같다.
  16. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 청구범위 14항에 기재한 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고, B′는 청구범위 14항에 기재한 일반식[Ⅱb]의 염기배열이며, n는 0, m은 1이고, Y′와 p는 청구범위 14항에서 정의한 것과 같다.
  17. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 청구범위 14항에 기재한 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고, m과 n은 0이며, Y′와 p는 청구범위 14항에서 정의한 바와 같다.
  18. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A는 1개이상의 코든이 삭제되거나 또는 다른 코든으로 대치된 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고,m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 14항에서 정의한 것과같다.
  19. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 5′-말단으로부터 제1코든의 ACC, 상기 제1코든의 ACC내지 제6코든의 CCT까지의 코든, 상기 제1코든의 ACC내지 제9코든의 CAT까지의 코든, 또는 상기 제1코든의 ACC내지 제12코든의 GCA까지의 코든이 삭제된 일반식[Ⅱa]의 염기 배열이고, m과 n은 0이며, Y′와 p는 청구범위 14항에서 정의한 바와같다.
  20. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 다음 일반식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열, 또는 상기 배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는 염기배열을 갖거나 함유하는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y′)P-(X′)n-(B′)m-A′ [Ⅱ]
    상기식에서 A′는 5′-말단으로부터 제66 및 제67코든의 ACC와 CAT가 CAT,ACC 또는 TAC로 대치된 일반식[Ⅱa]의 염기배열이고, m과 n은 0이며, Y′와 p는 청구범위 14항에서 정의한 것과 같다.
  21. 제1 또는 4항에 있어서, DNA가 적어도 다음 일반식[Ⅱa′]로 표시되는 염기배열, 또는 5′-말단으로 부터 제1코든의 TGG내지 제27코든의 GAC까지의 코든이 삭제된 [Ⅱa′]의 염기배열을 갖는 DNA인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (5′)-TGG TAT GAG CCC ATC TAT CTG GGA GGG GTC TTC CAG CTG GAG AAG GGT GAC CGA CTC AGC GCT GAG ATC AAT CGG CCC GAC TAT CTC GACTTT GCC GAG TCT GGG CAG GTC TAC TTT GGG ATC ATT GCC CTG-(3′) [Ⅱa′]
  22. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 폴리펩티드 또는 그의 유도체나 그의 염인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 1개이상의 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된 다음 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 1내지 3개 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된 다음 일반식[Ib]의 펩티드이며, X는 폴리펩티드이고, Y는 Met이며, m,n 및 p는 1또는 0이다.
    일반식[Ia]는 다음과 같다.
    Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala His Val Val Ala Asn Pro Gln Ala Glu Gly Gln Leu Gln Trp Leu Asn Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Seu Ser Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu [Ia]
    일반식[Ib]는 다음과 같다.
    Ser-Ser-Ser-Arg [Ib]
  23. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 폴리펩티드 또는 그의 유도체나 그의 염인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A,B,Y,m,n 및 p는 청구범위 22항에서 정의한 바와같고, X는 다음 일반식[Ic]의 폴리펩티드이다.
    일반식[Ic]는 다음과 같다.
    Ser Thr Glu Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu Ala Leu Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gln Gly Ser Arg Arg Cys Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr Thr Leu Phe Cys Leu Leu His Phe Gly Val Ile Gly Val Ile Gly Pro Gln Arg Glu Glu Phe Pro Arg Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu Ala Gln Ala Val Arg [Ic]
  24. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 상기 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 상기 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ib]의 펩티드이며, X는 상기 청구범위 23항에 기재한 일반식[Ic]의 폴리펩티드이고, m과 n은 1이며, Y와 p는 상기 청구범위 22항에서 정의한 바와같다.
  25. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ib]의 펩티드이며, m은 1, n은 0이고, Y와 p는 청구범위 22에서 정의한 바와같다.
  26. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 22항에서 정의한 바와같다.
  27. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, B는 청구범위 22항에 기재한 일반식[Ib]의 펩티드이며, m은 1이고, n과 p는 0이다.
  28. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 청구범위 22항에 기재한 폴리펩티드이고, m, n 및 p는 0이다.
  29. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 폴리펩티드 또는 그의 유도체나 그의 염인 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 1개이상의 아미노산이 삭제되거나 또는 다른 아미노산으로 대치된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 22항에서 정의한 것과같다.
  30. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티된가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 N-말단으로부터 제1위치의 Thr,상기 제1위치의 Thr내지 제6위치의 Pro까지의 아미노산, 상기제1위의 Thr내지 제9위치의 His까지의 아미노산, 또는 상기 제1위치의 Thr내지 제12위치의 Ala까지의 아미노산이 삭제된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이고, m과 n은 0이며, Y와 p는 청구범위 22항에서 정의한 것과같다.
  31. 제2 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 다음 일반식[I]로 표시되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 A는 N-말단으로부터 제66원치 및 67위치의 Thr과 His,Thr또는 Tyr로 대치된 일반식[Ia]의 폴리펩티드이며, m과 n은 0이고, Y와 p는 청구범위 22항에서 정의한 것과 같다.
  32. 제3 또는 3항에 있어서, 폴리펩티드가 적어도 다음 일반식[a′]로 표시되는 폴리펩티드이거나, 또는 N-말단으로부터 제1위치의 Trp내지 제27위치의 Asp까지의 아미노산이 삭제된 일반식[Ia′]의 폴리펩티드인것을 특징으로 하는 제조방법.
    Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu [Ia′]
  33. 제2, 제3 또는 제22항 있어서, 인간 암회사인자 폴리펩티드 또는 그의 주요부분을 코우드하는 염기배열을 갖거나 함유하는 청구범위2 또는 3항의 DNA가 삽입되어 있는 형질발현 벡터로서는, 다음 일반식[I]로 표시되는 아미노산에 상응하는 염기배열을 포함하고, 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 가지며, 또한 이 염기배열은 전사(轉寫)조측매의 조절하에 있는 형질발현벡터를 사용하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    (Y)P-(X)n-(B)m-A [I]
    상기식에서 p는 1이고, A,B,X,Y,m 및 n은 청구범위 5항에서 정의한 바와같다.
  34. 제33항에 있어서, 전사 조촉매가trp조촉매 또는tac조촉매인 것을 특징으로 하는 제조방법.
  35. 제33항에 있어서, 상기 염기배열의 3′-말단에 종지코든을 갖는, 청구범위 33항에서 정의된 일반식[I]의 아미노산배열에 상응하는 상기 형질발현의 염기배열이 정확한 트랜슬레이션 판독품레임내에서, 융합될 단백질을 코우드하는 제2염기배열에 연결되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  36. 제35항에 있어서, 융합될 단백질을 코우드하는 제2 염기배열이phos유전자인 것을 특징으로 하는 제조방법.
  37. 제33내지 36항의 어느 하나에 있어서, 사용된 벡터는에스케리치아 콜리(Escherichia coli)내에서 증식할 수 있는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  38. 제37항에 있어서, 벡터가에스케리치아 콜리플라스미드인 것을 특징으로 하는 제조방법.
  39. 제38항에 있어서,에스케리치아 콜리플라스미드가 pBR322인 것은 특징으로 하는 제조방법.
  40. 제2,3 또는 22항에 있어서, 미생물이 숙주로서 사용되는 것을 특징으로 하는 방법.
  41. 제40항에 있어서, 미생물이에스케리치아 콜리인것을 특징으로 하는 제조방법.ㅊ
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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