KR0176015B1

KR0176015B1 - 치주질환 예방 및 치료제 조성물

Info

Publication number: KR0176015B1
Application number: KR1019960008393A
Authority: KR
Inventors: 정종평; 배기환; 정종근
Original assignee: 서치영; 주식회사대웅제약
Priority date: 1996-03-26
Filing date: 1996-03-26
Publication date: 1999-03-20
Anticipated expiration: 2016-03-26
Also published as: KR970064617A; WO1997035599A1; AU2180097A

Abstract

본 발명은 대추 추출물과 후박 추출물을 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 대추 추출물과 후박 추출물 함유 조성물은 특정의 배합비, 즉 중량기준으로 1 : 6내지 1 : 12, 특히는 1 : 8내지 1 : 10의 배합비에서 각각의 성분을 단독으로 사용한 경우에 비해 월등히 우수한 상승적 효과를 나타낼 뿐 아니라, 기존의 치주질환 예방 및 치료제에 비해서도 월등히 우수한 치주질환 치료효과를 나타낸다.

Description

치주질환 예방 및 치료제 조성물

본 발명은 치주질환 예방 및 치료제 조성물에 관한 것이다.

치과 질환은 치아우식증(충치)과 치주질환으로 크게 대별된다. 이중에서 치주질환은 구강질환중 성인에게서 가장 빈발하는 감염성 질환으로, 치은출혈과 종창, 치주낭의 형성 및 치조골의 파괴 등으로 인한 치아의 상실을 가져오는 것을 말한다. 치주질환의 발생기전을 살펴보면, 치태가 치주낭내에 기계적으로 축적되면 주변에 존재하는 세균들의 서식처가 되며 이러한 서식은 점차 호기성, 통기성 그람 양성세균에서 혐기성 그람 음성세균으로 점차 이행되고, 치주낭의 심부로 증식되게 된다. 이때 증식된 혐기성 그람음성세균의 독소 및 모든 산물은 직접 조직을 파괴하거나 면역계를 자극하여 자극된 면역계로부터 여러가지 작용에 의하여 치주조직 파괴와 더불어 염증을 유발하게 된다.

이러한 치주질환을 야기하는 원인균은 치아우식증의 경우와는 달리 구강내 미생물중 그람음성균인 포르피모나스 깅기발리스(Porphymonas gingivalis), 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia), 악티노바실러스 악티노미세템코미탄스(Actinobacillus actinomycetemcomitans) 등이다.

또한 이러한 치주질환이 주로 성인에게서 나타나는 이유는 치주조직이 나이가 들어감에 따라 점점 약화되기 때문이다.

따라서 치주질환을 예방 또는 치료하기 위하여는 상기 언급한 바와 같은 치주질환의 원인을 모두 해소시킬수 있는 , 즉 1) 약화되거나 파괴된 치주조직을 원상으로 회복시키고, 2) 치주질환 원인균의 독성산물인 염증을 제거하고, 3) 치주질환 원인균을 억제할 수 있는 방법을 이용하는 것이 가장 바람직하다.

치주질환 예방 및 치료제에 대한 연구는 1920 년대부터 진행되어 왔으며, 특히 구미 각국에서는 항생제 및 화학요법제(예를 들면, 클로르헥시딘, 세틸피리디늄)에 의한 항균효과를 이용하여 치태를 제거하는데 주력하여 왔다.

그러나 이러한 항생제 및 화학요법제들은 구강점막 궤양, 박리성 치은염 유발, 착색 등의 부작용이 있어 문제가 되고 있다.

또한, 항생제나 화학요법제 이외에 치태간질을 분해하는 효소제제, 세균이 치아표면에 흡작되는 것을 방지하는 불소제제 등도 치주질환의 치료를 위해 사용되었으나 효소들은 부작용과 적용방법에 있어 문제점이 있고, 불소제제는 항균효과가 미약해서 보편적 사용이 제한되고 있다.

이러한 항생제를 비롯한 합성의약품의 사용에 따른 단점을 해결하기 위하여 생약추출물을 이용하여 치주질환을 치료하는 약물을 개발하고자 하는 연구가 진행되었다. 그 결과, 몰약(Myrrha)은 치은염, 아구창에 효과가 있고, 상백피 추출물 성분인 상게논(Sanggenon) C는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 대사를 저해하여 치태형성의 제1단계인 균부착을 방해하는 것으로 밝혀졌으나, 몰약은 항균효과가 미약하고, 상백피 추출물은 치은섬유아세포의 증식을 상당한 수준으로 억제하는 단점이 있다.

그밖에도 상귀나리아 추출물(Sanguinaria extract)은 실험실 실험에서는 강력한 치태억제 및 항균효과를 나타내는 것으로 밝혀졌지만, 임상실험 결과로는 소망하는 효과를 얻을 수 없다는 단점이 있다.

또한, 옥수수[지 메이(Zea mays L.)]의 추출물도 현재 인사돌정(동국제약), 덴톨정(럭키) 등의 상표로 시판되고 있으며, 치주조직내의 염증을 억제할 목적으로 사용되어 왔다.

그러나 이러한 종래의 생약을 이용한 치주질환 치료제들은 부작용이 없다는 장점은 있으나, 치주질환으로 손상된 치주조직세포에 대한 재생력이 없거나, 치주질환을 야기하는 원인균에 대한 항균작용이 없다는 단점이 있어 바람직하지 못하였다.

이에 본 발명자들은 상기의 생약을 이용한 치주질환 치료제들의 단점을 극복한 우수한 치주질환 치료제를 개발하고자 여러가지 생약을 이용하여 집중적인 연구를 수행하였으며, 그 결과로 후박 추출물이 기존의 항생제와 같은 부작용이 없으면서 우수한 항염작용과 함께 치주질환의 원인균에 대한 강력한 항균작용을 나타내는 것을 밝혀내었으며(참조 : 한국특허공개 제94-6594호), 은행잎 추출물이 치주 조직에 대한 재생효과를 나타내는 것도 확인하였다(참조 : 한국특허출원 제94-13606호). 본 발명자들은 또한 후박 추출물과 은행잎 추출물을 배합한 조성물이 치주질환 전반에 우수한 효과가 있음을 확인하여 이들을 대상으로 하는 치주질환 치료제 조성물에 관하여 특허를 출원한 바 있다(참조 : 한국특허출운 제94-14117호) 그후 계속적인 연구의 결과로, 대추 추출물이 또한 치주조직의 재생에 우수한 효과를 나타냄을 확인하여 대추 추출물을 이용한 치주질환 치료제에 관하여도 특허출원을 하였다(참조 : 한국특허출원 제95-14541호).

그러나 후박 추출물은 우수한 함염, 항균효과가 있으나 고용량으로 갈수록 치주조직세포의 활성을 저하시키는 단점이 있으며, 대추 추출물과 은행잎 추출물은 우수한 조직재생효과가 있으나 항균효과가 미흡하다는, 즉 치주질환 예방 및 치료에 관한 여러 가지 기전중에서 단지 일부의 경로를 통해서만 효과를 나타낸다는 단점이 있다. 이에 본 발명자들은 상기의 요건을 충족시키는 치주질환 치료제를 개발하고자 이러한 연구결과들을 기초로하여 대추 추출물과 후박 추출물을 다양한 비로 배합하여 치주질환에 대한 예방 및 치료효과를 검색하여 보았으며, 그 결과 놀랍게도 이들 두성분의 배합물이 특정배합비에서 각각의 성분을 단독으로 사용할 때 보다 월등히 우수한 상승적 치주질환 치료효과, 즉 우수한 조직재생 및 항균, 항염효과가 있으며, 특히 고용량에서 치주조직세포의 활성을 억제하는 후박 추출물의 단점을 극복하여 우수한 조직재생효과를 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 대추 추출물과 후박 추출물을 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물은 치주질환 예방 및 치료제로서 특정한 배합비에서 치주질환의 예방 및 치료에 광범위한 효과, 즉 (1) 약화되거나 파괴된 치주조직에 대한 우수한 재생효과와 (2) 치주조직을 파괴하는 염증반응을 억제하며, (3) 치주질환 원인균에 대한 우수한 항균효과를 나타낼 뿐 아니라, 이들의 효과는 대추 추출물과 후박 추출물이 갖고 있는 각각의 효과보다 훨씬 우수한 것이며, 또한 기존의 항생제 사용시의 문제점인 부작용도 없다는 장점을 제공한다.

본 발명의 조성물에서 후박 추출물로는 후박을 알콜, 바람직하게는 에탄올과 같은 저급알칸올로 추출하여 수득한 후박 엑기스를 사용하는데, 바람직하게는 주성분인 마그놀롤(magnolol)을 5.0% 이상, 호노키올(honokiol)은 1.0% 이상 함유하는 것을 사용한다. 또한, 대추 추출물로는 대추(Ziziphi fructus)를 알콜, 바람직하게는 에탄올과 같은 저급알칸올로 수욕상에서 추출한 후 감압하에서 농축하여 수득한 대추 엑기스를 사용한다.

본 발명의 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물은 각 성분을 단독으로 사용할 때 보다 치주질환에 대해 더 우수한 상승적 치료효과를 나타내는데, 특히 이러한 상승적 효과는 이하의 실험예를 통하여 입증되는 바와 같이 대추 추출물과 후박 추출물을 중량기준으로 1 : 6 내지 1 : 12 의 비, 특히는 1 : 8 내지 1 : 10의 비로 배합하는 경우에 가장 뚜렷하게 나타난다.

따라서 본 발명의 조성물에서는 치주질환에 대한 상승적 치료효과를 극대화시키기 위하여 대추 추출물과 후박 추출물을 1 : 6 내지 1 : 12 의 중량비로, 특히 바람직하게는 1 : 8 내지 1 : 10 의 중량비로 배합하여 사용한다.

상기한 바와 같은 비로 대추 추출물과 후박 추출물이 배합된 본 발명의 조성물은 그대로 사용할 수도 있으나 바람직하게는 일반적으로 약제학적으로 허용되는 통상의 부형제를 첨가하여 약제학적 제제로 제형화시켜 이용할 수 있다. 이러한 목적으로 이용되는 제형으로는 정제, 연고제, 치약, 액제(가글), 분무제 등의 형태가 있는데, 예를 들면 본 발명의 조성물을 단독으로 치약조성물에 포함시키거나, 약제학적으로 허용되는 통상의 담체와 혼합하여 내복정제, 연고제 및 용액제로 제형화하여 치주질환의 예방 및 치료제로서 사용할 수 있다.

또한 통상적인 가글제에 포함시켜 양치질후에 입안을 헹구거나, 분사제를 포함시켜 압축용기에 포장한 분무제로서 치주질환 부위에 분무할 수도 있고 치약성분에 포함시켜 계속적으로 장기간 동안 사용함으로써 치주질환의 예방 및 치료효과를 얻을 수도 있다.

본 발명에 따르는 조성물의 유효용량은 사용목적이나 치료하고자 하는 치주질환의 중증도, 이용하는 제형 등에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로는 성인에게 대추 추출물과 후박 추출물의 배합물로서 1일에 50mg내지 1g 특히는 100내지 500mg의 양으로 사용하는 것이 바람직하다.

전체 조성물중의 대추 추출물과 후박 추출물의 배합물의 함량범위는 사용목적에 따라 다양하게 할 수 있으나, 농도가 너무 낮으면 효과가 급격히 떨어지고, 너무 높으면 대추 추출물 및 후박 추출물의 착색으로 인하여 상품성이 떨어지므로, 상기한 바와 같은 대추 추출물과 후박 추출물의 배합물의 유효용량 범위를 고려하여 정제의 경우에는 단위정제당 상기와 같은 비로 배합된 대추 추출물과 후박 추출물의 배합몰 50mg 내지 250mg을 함유하도록 제형화시키는 것이 바람직하고 연고제, 액제(가글), 치약, 분무제의 경우에는 배합몰이 0.2 내지 5.0중량%의 비로 함유되도록 제형화시키는 것이 바람직하다

한편, 대추 추출물과 후박 추출물은 마우스와 랫트에서 경구투여시 급성 독성의 기준치의 LD₅₀(50% 치사량 ) 이 각각 5000mg/Kg 이상으로 나타나 안전한 약물임이 밝혀졌다.

본 발명의 조성물에는 또한 치주질환의 치료 및 예방에 효과가 있는 것으로 공지되어 있는 생약성분, 예를 들면 은행잎 추출물, 몰약, 상백피 추출물, 상귀나리아 추출물, 옥수수 추출물 등의 성분을 추가로 포함시켜 목적하는 효과를 증가시킬 수도 있다.

본 발명은 이하의 실시예, 실험예 및 조성예에 의해 더욱 구체적으로 설명되나, 본 발명이 이들에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.

[실시예 1 : 후박으로부터 후박 추출물의 제조]

후박 (Magnoliae cortex) 500g을 얇게 절단하고 70% 에탄올 2.5ℓ씩을 사용하여 수욕상에서 환류하에 3시간씩 2회 추출하고, 추출물을 합하여 여과한 다음 여액을 농축시켜 후박 추출물 60g을 수득하였다.

[실시예 2 : 대추로부터 대추 추출물의 제조]

대추(Zizyphi fructus) 300g을 70% 에탄올 1.5ℓ씩을 사용하여 수욕상에서 환류하에 3시간씩 2회 추출하고, 추출물을 합하여 여과한 다음 여액을 농축시켜 대추 추출물 140g을 수득하였다.

본 발명의 대추 추출물과 후박 추출물의 배합조성물은 통상적인 약제학적 방법으로, 예를 들면 정제, 연고제, 치약 액제 (가글), 분무제의 제형으로 제조할 수 있으며, 대추 추출물과 후박 추출물의 배합비는 하기의 실험예들을 종합하여 바람직하게는 1:6 내지 1 : 12 중량비, 특히 바람직한 것은 1 : 8 내지 1 : 10 중량비이며, 그 조성물의 예를 들면 다음과 같다.

[조성예 1 : 필름 코팅정 - 1 정 (600mg)중]

대추 추출물 20mg

후박 추출물 200mg

유당 355mg

히이드록시프로필셀룰로오스 5mg

스테아린산마그네슘 3mg

글리세린 2mg

히드록시프로필메틸셀룰로오스 15mg

상기의 성분들을 이용하여 통상적인 정제의 제조방법에 따라 정제를 제조한다.

[조성예 2 : 연고제 (수치는 중량%)]

대추 추출물 0.04

후박 추출물 0.32

카르복시비닐폴리머 7.00

글리세롤 30.00

페퍼민트오일 0.006

프로필렌글리콜 30.00

정제수를 가하여 100으로 한다.

상기 성분들을 통상적인 연고제의 제조방법으로 혼합하여 연고제를 제조한다.

[조성예 3 : 치약 (수치는 중량%)]

대추 추출물 0.04

후박 추출물 0.40

알루미나 45.00

프로필렌글리콜 10.00

카르복시메틸셀룰로오스나트륨 2.00

스테비오사이드 0.30

라우릴황산나트륨 1.00

페퍼민트 0.50

정제수를 가하여 100으로 한다.

상기 성분들을 통상적인 치약 제조방법으로 혼합하여 치약을 제조한다.

[조성예 4 : 용액제 (수치는 중량%)]

대추추출물 0.08

후박추출물 0.96

폴리에틸렌글리콜 7.00

에탄올 5.00

페퍼민트오일 0.06

정제수를 가하여 100으로 한다.

상기 성분들을 통상적인 액제 제조방법으로 혼합하여 용해시키고, pH를 5.0으로 조절하여 용액제를 제조한다.

[조성예 5 : 분무제 (수치는 중량%)]

대추 추출물 0.04

후박 추출물 0.24

트리클로로모노플루오로메탄 40.00

디클로로디플루오로메탄 45.00

페퍼민트오일 0.15

에탄올 6.00

폴리에틸렌글리콜 8.65

상기 성분들을 통상적인 분무제 제조방법으로 혼합하고 압축용기에 충전 포장하여 분무제를 제조한다.

[실험예 : 대추 추출물 및 후박 추출물의 배합비 결정을 위한 실험]

[실험예 1 : 치은섬유아세포 활성도 측정]

대추 추출물과 후박 추출물의 배합물을 함유하는 본 발명의 조성물에서 최적의 조직재생효과를 나타내는 배합비를 위하여 조성물중의 두성분의 배합비를 변화시키면서 이들 배합물이 치은섬유아세포 활성에 미치는 영향을 측정하였다. 이 실험을 위한 치은섬유아세포는 서울대학병원에 치아의 교정치료를 위하여 내원한 환자를 대상으로 제일 소구치의 치은부위를 채취하여 이용하였다. 치은부위의 채취직전에 큐렛을 이용하여 치석 및 치태 등을 제거하고 생리식염수로 수회 세척하고, 국소마취를 실시한 후에 치간부위에 내사면 절제를 가하고 정상 치은조직을 채취하였다. 채취한 조직편을 페니실린 100U/㎖와 스트렙토마이신 100㎍/㎖ 및 100% FBS가 첨가된 α-MEN(GIBCO, In., Grand island, N,Y., U.S.A.) 배지중에서 배양하였으며, 3일 간격으로 배지를 동량의 새로운 배지로 교환해주면서 5회 계대배양시켰다. 배양시에 습도는 95%, 온도는 37C를 유지하면서 95% 공기와 5% CO₂를 계속 공급하였다. 계대배양한 치은섬유아세포를 0.25% 트립신-EDTA(에틸렌디아민테트라아세테이트)용액으로 처리한 후 1200rpm에서 원심분리하여 배양액중의 세포부유액을 얻고, 표준혈구계산기를 이용하여 96-웰 플레이트에 웰당 세포수가 1×10⁵개가 되도록 접종한 후 5% CO₂, 37℃에서 1일 동안 배양하였다. 다음날 배양액을 신선한 배양액으로 교환해 주고, 이틀째 되는 날 배양액을 제거한 후 HBSS(Hank's Balanced salt solution)로 세척하였다. 양성대조용 실험제제인 혈소판 유도성장인자(PDGF-BB(Genzyme, Co., Cambridge, MA., U.S.A.)는 증류수를 용매로 하고, 후박 추출물은 에탄올(EtOH)로, 대추 추출물 및 은행잎 추출물은 디메틸설폭사이드(DMSO)를 용매로 하여 용해시킨 다음, 이들을 각 실험물질의 농도가 하기 표에 언급된 바와 같은 농도가 되도록 배양액에 가하여 습도 95%, 온도 37℃를 유지하면서 95% 공기와 5% CO₂를 계속 공급하면서 24시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 후에 생리식염수에 용해된 MTT(메틸 티아졸-2-일-2,5-디페닐테트라졸리움 브로마이드, Sigma Co., St, Louis, M.O., U.S.A.) 용액 50㎕ 씩을 각 웰에 가하고 상기와 동일한 조건하에서 4시간 동안 더 배양한 후 MTT용액을 감압하에서 여과하여 제거하고, 생성된 포르마존(formazon) 결정을 용해시키기 위해 각 웰에 DMSO 50㎕씩을 첨가하였다. 플레이트를 잘 흔든 후에 ELISA판독기 (ELISA reader, Thermo max, molecular devices, Menlo Park C.A., U.S.A.)로 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 이 실험에서 대조군에는 매 실험마다 시험물질이 첨가되지 않은 α-MEN 배지 만을 사용하였다. 모든 실험결과는 대조군에 대한 백분율로 계산하여 표 1 내지 3에 나타내었다.

상기 표 1에 기재된 결과로부터, 대추 추출물은 용량이 증가할수록 세포활성도를 증가시키며, 10㎍/㎖이상의 농도에서 최대효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

상기 표 2에 기재된 결과로부터, 후박 추출물은 용량이 증가할수록 세포활성을 감소시키는 것을 알 수 있다.

상기 표 1 내지 3에 기재된 결과로부터 알수 있는 바와 같이, 대추 추출물과 후박 추출물을 각각 단독으로 사용하는 경우에는, 대추 추출물만이 치은섬유아세포의 활성을 증가시키는 효과가 있고 후박 추출물은 오히려 치은섬유아세포의 활성을 억제하나, 대추 추출물과 후박 추출물을 배합한 조성물을 사용하는 경우에는 이들의 배합비가 중량기준으로 1 : 6 내지 1 : 12 인 경우에 대추 추출물을 단독으로 사용할 때 보다 훨씬 더 우수한 치은섬유아세포 활성효과를 나타내었으며, 특히 중량기준으로 1 : 8 내지 1 : 10 의 배합비에서 치은섬유아세포의 활성이 크게 증가하였다. 이는 대추 추출물과 후박 추출물을 배합하여 사용함으로써 후박 추출물과 대추 추출물의 상호작용에 의하여 치은섬유아세포의 활성증가효과가 나타나는 결과이다. 또한 이러한 증가된 효과는 기존에 치은섬유아세포의 활성을 증가시키는 것으로 알려져 있는 대표적인 성분인 PDGF 및 은행잎 추출물과 후박 추출물의 조성물의 효과 보다 훨씬 우수한 것임을 알 수 있다. 따라서 본 발명에 따르는 후박 추출물과 대추 추출물의 조성물은 특정 배합비에서 각각의 성분을 단독으로 사용할 때 보다 상승효과가 있음을 알 수 있고, 또한 우수한 치주질환 치료제임이 명백함을 알 수 있다.

[실험예 2 : 항염효과 측정]

본 발명에 따르는 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물의 항염효과는 시험관내 시험으로 치은섬유아세포의 PGE생산억제효과를 측정함으로써 확인하였다. 5회 내지 7회 계대 배양된 치은섬유아세포를 24-웰 플레이트의 각웰중의 1% 항생제, 1% FBS 가 포함된 α-MEM(GIBCO, In. Grand island, N.Y.,U.S.A.) 배지 1㎖에 10세포의 농도로 분주한 후 rHUIL-1β(Genzyme, Co.,Cambridge,M.A.,U.S.A.) 1ng/㎖을 첨가하여 PGE생성을 유도하였다. 여기에 시험물질로서 후박 추출물은 에탄올(EtOH)로, 대추 추출물 및 은행잎 추출물은 디메틸설폭사이드(DMSO)를 용매로 하여 용해시킨 다음, 이들을 각 실험물질의 농도가 하기 표에 언급된 바와 같은 농도가 되도록 각 웰의 배양액에 가하고, 어떠한 시험물질도 첨가 하지 않은 웰을 대조군으로하여 5% CO, 37℃에서 48 시간 동안 무균적으로 배양하였다. 배양이 끝난 후에, 각 웰의 배지를 수집하여 배지내의 PGE를 효소면역분석시스템(PGEcnzymc immunoassay system, Amersham, In. Buckinghamshirc, U.K.)을 이용하여 ELISA 판독기로 450nm에서 비색정량하였으며, 그 결과를 표 4내지 6에 나타내었다.

상기 표 4에 기재된 결과로부터, 대추 추출물은 용량이 증가할수록 PGE의 생산을 억제하며, 10㎍/㎖ 이상의 농도에서 최대효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

상기 표 5에 기재된 결과로부터, 후박 추출물은 용량이 증가할수록 PGE의 생산을 억제하며, 그 효과는 100㎍/㎖ 이상에서 최대인 것을 알 수 있다.

상기 표 4내지 6의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 대추 추출물과 후박 추출물을 각각 단독으로 사용하는 경우에 대추 추출물은 염증반응을 매개하는 PGE의 생성을 미약하게 억제하고 후박 추출물은 PGE의 생성을 상당한 수준으로 억제한다. 그러나, 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물을 사용한 경우에는 중량을 기준으로 하여 1 : 6 내지 1 : 12 의 배합비에서 후박 추출물만을 단독으로 사용한 경우에 비하여 월등히 우수한 PGE생성억제효과를 나타내었으며, 그외의 배합비에서는 효과가 감소하였다. 이러한 결과는 후박 추출물과 대추 추출물을 배합함으로서 대추 추출물에 의하여 후박 추출물의 PGE생성억제효과가 증가됨으로써 나타나는 것이다. 또한, 이러한 증가된 효과는 기존에 치주질환 치료에 가장 우수한 것으로 알려져 있는 은행잎 추출물과 후박 추출물의 조성물에 의한 효과보다도 월등히 더 우수한 것이다. 따라서 본 발명에 따르는 후박 추출물과 대추 추출물의 조성물은 특정 배합비에서 각각의 성분을 단독으로 사용하는 경우에 비해 치주질환에 대해 명백한 상승적 효과가 있음을 알 수 있고, 우수한 치주질환 치료제임을 알수 있다.

[실험예 3 : 항균효과 측정]

본 발명에 따른 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물의 항균효과를 측정하기 위하여 치주병원균으로서 미국 뉴욕주립대학교 치과대학에서 기증받은 혐기성그람음성균인 포르피로모나스 깅기발리스(Porphyromonas gingivalis) W50, 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) ATCC 25611 및 통기성 그람음성균인 악티노바실러스 악티노미세템코미탄스(Actinobacillus actinomycetemcomitans) Y4를 사용하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

포르피로모나스 깅기발리스 W50(PG) 및 프레보텔라 인터메디아 ATCC 25611(PI) 은 헤민 5㎕ 및 메나디온 0.5㎕이 함유된 트립티카제 소이 아가(trypti-case soy agar) 한천혈액배지에 접종하여 37℃, 10% CO10% H및 80% N가든 혐기성 배양기에서 순수배양하였고, 악티노바실러스 악티노미세템코미탄스 Y4 가 (AA)는 트립티카제 소이 아가 한천혈액배지에 접종하여 통기성으로 10% CO가 든 세균배양기에서 순수배양하였다. 각각 4 내지 7 일간 순수배양된 균들을 각각 트립티카제 소이 브로스에 접종하여 48 내지 72 시간 동안 상기한 바와 같은 혐기성 및 통기성 배양기에서 배양하여 세균수가 10세포/㎖가 되도록 하였다. 이들 배양된 세균들은 다접종기(multi-inoculator)를 이용하여 각 실험물질이 하기 표에 언급된 바와 같은 농도로 배합된 혈액한천배지에 접종하였다. 이들 배지를 3내지 5일 동안 10% CO, 10% H및 80% N가 혼합된 혐기성 배양기에서 37℃에서 배양한 후 세균의 성장유무를 육안으로 확인하여 각 균주의 성장에 대한 최소억제농도(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)를 하기 표 7에 나타내었다.

상기 표 7의 결과로부터 알수 있는 바와 같이, 실험예 1의 치은섬유아세포 활성효과와 실험예 2의 항염효과 측정실험에서 상승효과를 나타내는 것으로 확인된 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물은 중량을 기준으로하여 1 : 6 내지 1 : 12 의 배합비에서 향균효과도 각각을 단독으로 사용한 경우에 비해 월등히 우수한 것으로 나타났다.

이는 대추 추출물 자체는 항균효과가 거의 없으나 후박 추출물과 배합함으로써 대추 추출물이 후박 추출물의 항균효과를 증가시킴으로써 나타나는 결과이다. 또한 이러한 증가된 효과는 기존에 치주질환 치료에 가장 우수한 것으로 확인된 은행잎 추출물과 후박 추출물의 조성물의 효과보다도 더 우수한 것이다. 따라서, 본 발명의 후박 추출물과 대추 추출물의 조성물은 각각의 성분을 단독으로 사용하는 경우에 비해 명백한 상승적 항균효과가 있음이 명백하다.

상기 실험예에서 입증되는 바와 같이, 본 발명의 대추 추출물과 후박 추출물의 조성물은 중량을 기준으로 하여 1 : 6내지 1 : 12의 배합비에서 각각의 성분을 단독으로 사용하는 경우에 나타나는 편중된 효과를 극복하여 치주질환 치료에 관한 다양한 치료효과를 나타내었고, 이러한 효과는 각각의 성분을 단독으로 사용할 때 보다 월등히 우수한 상승적 효과로 나타났다.

[실험예 4 : 안정성 시험]

상기 조성예 1내지 5에 따라 제조한 제제의 안정성을 알아보기 위하여 각 제제를 후술하는 보관조건하에서 보관한 다음에 각 제제중의 후박 추출물의 마그놀롤의 함량을 고속액체크로마토그라피(HPLC)법으로 UV 검출기의 254nm에서 분석하여 그 결과를 다음 표 8에 나타내었다.

[보관조건]

-시험재료 : 상기 조성예 1내지 5에 따라 제조한 시료를 유리병 또는 압축용기에 넣고 마개를 하여 밀봉시킨 후에 판지상자에 넣은 것을 사용하였다.

-보관조건 : 40℃ (± 10℃)

단 조성예 5의 분무제는 실온에서 보관하였다.

-측정시기 : 제조직후, 2개월후, 4개월후, 6개월후

-시험항목 :

조성예 1 (필름코팅정) : 성상, 붕해(인공위액), 함량

조성예 2 (연고제) : 성상, 함량

조성예 3 (치 약) : 성상, pH(10% 현탁액), 함량

조성예 4 (용액제) : 성상, pH, 함량

조성예 5 (분무제) : 함량

상기 표 8에 기재된 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 안정성 시험결과 40℃에서 6개월후의 정제, 연고제, 치약, 용액제, 분무제에서의 성상의 변화가 거의 없고, 후박 추출물중의 마그노롤의 함량도 제조직후에 비해 95%이상을 나타내어 안정된 제제로 판단되며 산업화하는데 안정성의 문제가 없는 것으로 사료된다.

Claims

대추의 알콜 추출물 및 후박의 알콜 추출물을 중량기준으로 1 : 6내지 1 : 12의 비로 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제1항에 있어서, 대추의 알콜 추출물 및 후박의 알콜 추출물을 중량기준으로 1 : 8내지 1 : 10의 비로 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제1항 또는 2항에 있어서, 대추와 후박의 알콜 추출물이 에탄올 추출물인 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제1항에 있어서,추가로 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하여 약제학적 단위제형으로 제도된 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제4항에 있어서, 약제학적 단위제형이 정제, 연고제, 치약, 액제(가글) 또는 분무제 형태인 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제5항에 있어서, 정제당 대추 추출물과 후박 추출물의 배합물 50㎎ 내지 250㎎을 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물.
제5항에 있어서, 연고제, 치약, 액제(가글),분무제 단위제제당 후박 추출물과 대추 출물의 배합물을 0.2 내지 5.0 중량% 함유하는 치주질환 예방 및 치료제 조성물.