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JP2005218379A5 - - Google Patents

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上記目的を達成する本発明の培養細胞の状態計測方法は、照明光学系と、観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理した画像を形成し、得られた差演算処理した画像から、観察範囲内の細胞数、細胞の占有面積、細胞の存在分布、細胞の存在密度、細胞の形態、細胞核の分布、細胞の散乱分布の少なくとも何れか1つを計測すること特徴とする方法である。
この場合に、差演算処理した画像の強度分布から、その強度値が0値近傍の部分を抽出して細胞の存在しない部分とし、それ以外の部分を細胞の存在する部分として、細胞の存在する部分と存在しない部分を分離することが望ましい。
また、差演算処理した画像の強度分布から、その強度値が0値近傍の部分を抽出して強度値を1つの値に割り当て、それ以外の部分を別の1つの強度値を値に割り当てて2値化するようにしてもよい。
本発明の別の培養細胞の状態計測方法は、照明光学系と、観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行った2つの画像を形成し、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞の厚み分布及び細胞の位相分布を計測すること特徴とする方法である。
本発明の培養細胞の状態計測装置は、照明光学系と、観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡と、前記顕微鏡によって位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理した画像を形成し、得られた差演算処理した画像から、観察範囲内の細胞数、細胞の占有面積、細胞の存在分布、細胞の存在密度、細胞の形態、細胞核の分布、細胞の散乱分布の少なくとも何れか1つを計測する処理ユニットとを有すること特徴とするものである。
この場合に、差演算処理した画像の強度分布から、その強度値が0値近傍の部分を抽出して細胞の存在しない部分とし、それ以外の部分を細胞の存在する部分として、細胞の存在する部分と存在しない部分を分離処理する分離処理ユニットを有することが望ましい。
また、差演算処理した画像の強度分布から、その強度値が0値近傍の部分を抽出して強度値を1つの値に割り当て、それ以外の部分を別の1つの強度値を値に割り当てて2値化する2値化処理ユニットを有するようにしてもよい。
本発明のもう1つの培養細胞の状態計測装置は、照明光学系と、観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡と、前記顕微鏡によって位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行う演算ユニットと、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞の厚み分布及び細胞の位相分布を計測する厚み計測ユニットと有すること特徴とするものである。

Claims (16)

  1. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理して画像を形成し、得られた差演算処理した画像から、観察範囲内の細胞数、細胞の占有面積、細胞の存在分布、細胞の存在密度、細胞の形態、細胞核の分布、細胞の散乱分布の少なくとも何れか1つを計測することを特徴とする培養細胞の状態計測方法。
  2. 差演算処理した画像の強度分布から、その強度値0値近傍の部分を抽出して細胞の存在しない部分とし、それ以外の部分を細胞の存在する部分として、細胞の存在する部分と存在しない部分を分離することを特徴とする請求項1記載の培養細胞の状態計測方法。
  3. 差演算処理した画像の強度分布から、その強度値0値近傍の部分を抽出して強度値を1つの値に割り当て、それ以外の部分を別の1つの強度値を値に割り当てて2値化することを特徴とする請求項1記載の培養細胞の状態計測方法。
  4. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行った2つの画像を形成し、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞の厚み分布及び細胞の位相分布を計測することを特徴とする培養細胞の状態計測方法。
  5. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理して画像を形成し、得られた差演算処理した画像から、観察範囲内の細胞数、細胞の占有面積、細胞の存在分布、細胞の存在密度、細胞の形態、細胞核の分布、細胞の散乱分布の少なくとも何れか1つを計測する処理ユニットを有することを特徴とする培養細胞の状態計測装置。
  6. 差演算処理した画像の強度分布から、その強度値0値近傍の部分を抽出して細胞の存在しない部分とし、それ以外の部分を細胞の存在する部分として、細胞の存在する部分と存在しない部分を分離処理する分離ユニットを有することを特徴とする請求項5記載の培養細胞の状態計測装置。
  7. 差演算処理した画像の強度分布から、その強度値0値近傍の部分を抽出して強度値を1つの値に割り当て、それ以外の部分を別の1つの強度値を値に割り当てて2値化する2値化ユニットを有することを特徴とする請求項5記載の培養細胞の状態計測装置。
  8. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行った2つの画像を形成し、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞の厚み分布及び細胞の位相分布を計測するユニットを有することを特徴とする培養細胞の状態計測装置。
  9. 前記照明光学系の略瞳位置に開口が配置されており、前記観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系が、前記照明光学系の前記開口を通過した光により照明された観察物体の像を合焦位置から近点側及び遠点側のずれた位置各々で前記撮像素子により取り込むように構成された観察光学系からなることを特徴とする請求項5から8、及び、請求項14から16の何れか1項記載の培養細胞の状態計測装置。
  10. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理して画像を形成することにより、観察範囲内の照明光ムラ、対象とする細胞以外の異物の影響を取り除くことを特徴とする請求項1記載の培養細胞の状態計測方法。
  11. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行った2つの画像を形成し、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞核の高さ、細胞核の面積、細胞核の扁平率の少なくとも何れか1つを計測することを特徴とする培養細胞の状態計測方法。
  12. 差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算した画像に、閾値を設定し、画像情報が閾値内の領域と閾値を越える領域に分離することを特徴とする請求項4及び請求項11記載の培養細胞の状態計測方法。
  13. 前記照明光学系の略瞳位置に開口が配置されており、前記観察像を干渉によるコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系が、前記照明光学系の前記開口を通過した光により照明された観察物体の像を合焦位置から近点側及び遠点側のずれた各々の位置で前記撮像素子により取り込まれた2つの画像から差画像を形成することを特徴とする請求項1から3、及び、請求項10から12の何れか1項記載の培養細胞の状態計測方法。
  14. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算を行って差演算処理して画像を形成することにより、範囲内の照明光ムラ、対象とする細胞以外の異物の影響を取り除く機能を有することを特徴とする請求項5記載の培養細胞の状態計測装置。
  15. 照明光学系と、観察像を干渉によってコントラスト像に変換するユニットを含む観察光学系と、観察像の干渉の際の位相差の符号が反対のコントラスト像を取り込む撮像素子とを有する顕微鏡によって、位相差の符号が反対の2つのコントラスト像からなる画像を取り込み、取り込まれた2つの画像の差演算と和演算をそれぞれ行った2つの画像を形成し、差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算し、観察範囲内の細胞核の高さ、細胞核の面積、細胞核の扁平率の少なくとも何れか1つを計測するユニット有することを特徴とする培養細胞の状態計測装置。
  16. 差演算処理した画像を和演算処理した画像で割り算した画像に、閾値を設定し、画像情報が閾値内の領域と閾値を越える領域に分離する機能を有することを特徴とする請求項8又は15記載の培養細胞の状態計測装置。
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