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JP2002536005A - 飼料酵素含有粒状物 - Google Patents

飼料酵素含有粒状物

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Publication number
JP2002536005A
JP2002536005A JP2000598019A JP2000598019A JP2002536005A JP 2002536005 A JP2002536005 A JP 2002536005A JP 2000598019 A JP2000598019 A JP 2000598019A JP 2000598019 A JP2000598019 A JP 2000598019A JP 2002536005 A JP2002536005 A JP 2002536005A
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JP
Japan
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granules
enzyme
feed
phytase
polyethylene glycol
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Application number
JP2000598019A
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English (en)
Inventor
カルル シドニウス マリア アンデラ
ホルケンボルグ アウグスティヌス ベルナルデュス マリア クレイン
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Koninklijke DSM NV
Original Assignee
DSM NV
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Publication date
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    • A23K20/10—Organic substances
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Abstract

(57)【要約】 酵素含有粒状物の製造方法であって、水性酵素含有液体が、固体担体及び任意に添加剤成分と混合され、機械的に粒体に加工され、乾燥され、次いでポリエチレングリコールで被覆される方法。固体担体は、好ましくは食用炭水化物ポリマーから成る。粒体の組成物中に更に導入することの出来る添加剤成分は、ポリビニルアルコールの様なゲル形成或いは緩慢溶解化合物、二価カチオンを含む水溶性無機塩及びトレハロースである。この酵素粒状物は、飼料成分と粒状物を混合し、スチームで処理し、ペレット化することによって動物飼料組成物を製造するのに適する。組成物は、ペレット化工程及び貯蔵中における改善された酵素安定性を示す。同時に、粒状物の溶解時間が極めて短くなり、その結果、酵素の動物への生体利用度が改善される。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、酵素、好ましくは飼料酵素の粒状物組成物に関する。これらの（食
用）粒状物は、次いで、動物飼料で使用することが出来る。
【従来の技術】
動物飼料は、家畜及び其の他の動物の飼育において最も費用の掛かるものの一
つである。動物、例えば、家畜の飼料に様々な酵素を使用することは、殆ど日常
的なものとなってきている。これらの酵素は、通常、工業的酵素製造業者によっ
て操業される大規模な発酵槽で微生物を培養することによって製造される。発酵
の最後で、得られた「ブロス」は、通常、一連の濾過工程に掛けられて、（溶液
状態にある）所望の酵素から生物資源（微生物）が分離される。次いで、この酵
素溶液は濃縮され、（様々な安定剤の添加後に）液体として或いは乾燥組成物に
処理される。
【０００２】 液体及び乾燥酵素組成物は、飼料工業で商業規模で使用される。液体酵素組成
物は、ペレット化工程中に起る酵素の熱失活を避ける為に、ペレット化後に飼料
に添加されても良い。然しながら、最終飼料製品中の酵素の量は、通常、極めて
少量であり、飼料中での酵素の均質な分散を達成することが困難であり、液体は
、乾燥成分よりも更に飼料中に均等に混合することが困難であることは周知の通
りである。更に、（余分な費用が掛かる為に）殆どの飼料ミルでは現在利用され
ないペレット化後に、液体を飼料に添加する為には特殊な（高価な）装置を必要
とする。 乾燥酵素組成物は、ペレット化前に飼料に添加しても良く、従って、ペレット
化中に熱失活を受け易い。飼料工業における好ましい製造手順は、飼料がペレッ
ト化される前にスチーム噴射に掛けられるスチームペレット化、所謂コンデショ
ニングと言われる工程を含む。その後のペレット化工程では、飼料はダイに通さ
れ、得られたストランドが様々な長さの適当なペレットに切断される。ペレット
化直前の水分含量は、一般に、１３％〜１６％である。このコンデショニング工
程中に温度は６０〜９５℃に上昇するかも知れない。高水分含有と高温との組合
せ効果は、殆どの酵素にとって有害である。これらの欠点は、又、その他のタイ
プの熱機械的処理、例えば、押出し及び発泡でも生じるものである。
【０００３】 これらの問題を解消する為に、ＥＰＡ−２５７９９６は、飼料処理における酵
素の安定化が、酵素含有溶液を小麦粉から成る粒状担体に吸収させる酵素「プレ
ミックス」を調製し、このプレミックスを、次いでペレット化し乾燥することに
よる酵素「プレミックス」の調製によって増加出来る事を示唆している。然しな
がら、これらの小麦粉から成るプレミックスは、（練り粉状プレミックスを）粒
状物へ処理する為のより穏やかな方法、例えば、低圧押出し或いは高剪断粒状化
には、小麦粉から成るプレミックスの粘着性の故に適さない。 ペレット化中及び貯蔵中の乾燥酵素製品の安定化を改善する為に、様々な酵素
製造業者は代替の製造方法を開発してきた。 ＥＰＡ−５６９４６８は、ペレット化条件への抵抗性を改善する為として、高
融点ワックス又は脂肪で被覆した酵素含有粒状物から成る組成物を開示している
。この粒状物は、高剪断造粒機中で乾燥無機担体（例えば、硫酸ナトリウム）と
酵素溶液とを混合することによって製造される。脂肪被覆の結果として、粒状物
の溶解時間が長くなる（約１時間）。従って、酵素の動物への生体利用度が減少
する。更に、粒状物は広い粒度分布を有する。この事は、小さい粒子が大きい粒
子に比べて比較的多量の被覆剤を吸収する事から、被覆後に、均等に分布した酵
素濃度を得る事を困難にする。ＥＰＡ−５６９４６８は、更に、ペレット化の安
定性に関する被覆の有効な効果は、この場合、硫酸ナトリウム担体をベースとし
て被覆された粒状物のタイプに固有のものである事を教示している。然しながら
、これら（硫酸ナトリウム）の担体の吸収能力は、更に濃縮された酵素含有粒状
物を製造するのには不適当な小麦粉の様な担体の吸収能力よりも少ない。
【０００４】 ＷＯ９７／３９１１６は、水を少なくとも５０％吸収することの出来る予備成
形粒体から成る組成物を開示している。然しながら、これらの組成物では、十分
な溶解速度は、極めて強力な混合によってのみ達成される。従って、その様な組
成物は、洗剤分野では有効かも知れないが、動物の腸管では有効ではないかも知
れない。 ＷＯ９８／５４９８０は、食用炭水化物、好ましくは澱粉を含む酵素含有粒体
を開示している。これらの組成物は水に容易に溶解し、良好な生体利用度を確実
にし、これら澱粉から成る粒状物のペレット化安定性は、上述の脂肪被覆粒状物
で得られる安定性よりも低い。 ＷＯ９８／５５５９９は、製造が安価な高濃度フィターゼ組成物が、安定性、
特に動物飼料（ペレット）の製造でのペレット化工程中の安定性の増加を示すこ
とを証明している。然しながら、これらの組成物のペレット化安定性は、又、上
述の脂肪被覆粒状物で得られる安定性よりも未だ劣るものである。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従って、十分なペレット化安定性と良好な生体利用度を組合せた、そして最適
な貯蔵安定性を有する、製造が安価な、動物飼料に使用する為の安定な酵素組成
物に対する要望が尚存在する。
【課題を解決するための手段】
本発明は、動物飼料における使用に適した酵素含有粒状物の製造方法を提供す
るものであり、本発明方法は、酵素、固体担体、任意に添加剤及び水を適当な相
対的量で混合して酵素含有粒体を得、その粒体を乾燥し、そして乾燥した粒体を
ポリエチレングリコールで被覆する事を含む。 粒体をポリエチレングリコールで被覆することの利点は、第一に、この被覆が
、塵の形成を効果的に防ぐ点にある。更に、ポリエチレングリコール被膜は水溶
性である。被覆粒体の溶解時間は、未被覆の粒体に比べて増加するが、脂肪タイ
プの被膜で皮膚された粒体の溶解時間よりは尚短い（２０倍）。短い溶解時間は
、動物に対する酵素の生体利用度を著しく改善する。最後に、ポリエチレングリ
コール被膜は、粒体の良好なペレット化安定性を用意する。驚くべき事に、ポリ
エチレン被膜は、被膜が水溶性であるにも拘わらずスチーム及び水に対して良好
な保護を用意する。
【０００６】
【発明の実施の態様】
粒体を被覆する為に使用されるポリエチレングリコールは、少なくとも４，０
００ダルトンの（平均）分子量を有する。更に好ましいポリエチレングリコール
は、６，０００〜２０，０００ダルトンの分子量を持ち、融点が６０℃近辺のポ
リエチレングリコールである。 本明細書を通して使用される割合は、質量％であり、最終乾燥粒状物（最終製
品）の質量を基準とするものである（特に指示がない限り）。 ポリエチレングリコール被膜は、粒体の質量の１〜２０％、更に好ましくは５
〜１５％、最も好ましくは約８〜１２％で適用される。 本発明の好ましい実施態様では、ポリエチレングリコールは、粒体を被覆する
為に適用される前に水に５０％（ｗ／ｗ）の濃度で溶解される。 又、付加的性質（例えば、芳香）或いは低ダスト含有量の様な性質、着色、周
りの環境からの酵素の保護、一つの粒状物或いはそれらの組合せで異なる酵素活
性を与える為に、粒状物に追加の被膜が適用されても良い。粒体は、更に、脂肪
、ワックス、ポリマー、塩、軟膏及び／又は軟膏剤又は（第二）酵素又はそれら
の組合せを含む被膜（例えば、液体）で被覆することが出来る。所望ならば、幾
つかの（異なる）層の被膜を適用することが出来る事は明らかである。
【０００７】 本発明の粒状物を製造する為に使用される固体担体は、粒体状に成形すること
の出来る粉末である。使用される固体担体は、５〜２０μｍの範囲の平均粒径を
有するのが好ましい。 本発明の好ましい実施態様では、固体担体は、食用炭水化物ポリマーから成る
。食用炭水化物ポリマーの使用の数々の利点は、ＷＯ９８／５４９８０において
示されている。 食用炭水化物ポリマーは、飼料添加剤としての使用が許されている炭水化物ポ
リマーである。食用炭水化物ポリマーは、飼料を与える動物が食べられ、出来れ
ば十分に消化できるものが選ばれなければならない。ポリマーは、ヘキソースポ
リマー単位、更に好ましくはグルコースポリマー単位を含むのが好ましい。最も
好ましい炭水化物ポリマーは、α−Ｄ−グルコピラノース単位、アミロース（線
状（１→４）α−Ｄ−グルカンポリマー）及び／又はアミロペクチン（α−Ｄ−
（１→４）及びα−Ｄ−（１→６）結合を持つ分岐Ｄ−グルカン）を含む。澱粉
は、好ましい炭水化物ポリマーである。澱粉に代わって或いは追加して使用でき
る其の他の適当なヘキソース含有ポリマーとしては、α−グルカン、β―グルカ
ン、（プロト−ペクチンの様な）ペクチン及びグリコーゲンが挙げられる。又、
これらの炭水化物ポリマーの誘導体、例えば、それらのエーテル及び／又はエス
テルも考慮される。ゼラチン化澱粉は最も避けられるもので、従って、存在して
はならない。適当な炭水化物ポリマーは、水不溶性である。
【０００８】 ここに開示される実施例においては、コーン、ポテト及び米の澱粉が使用され
る。然しながら、他の（例えば、野菜或いは作物の様な植物）原料、例えば、タ
ピオカ、キャッサバ、小麦、トウモロコシ、サゴ、ライ麦、オート麦、大麦、山
芋、ソルガム(sorghum)、又はクズウコンも等しく適用できる。同様に、本発明
では、天然又は変性（例えば、デキストリン）タイプ両方の澱粉が使用できる。
好ましくは、炭水化物（例えば、澱粉）は、タンパク質を殆ど或いは全く含まず
、好ましくは５％（ｗ／ｗ）未満、更に好ましくは２％（ｗ／ｗ）未満、最も好
ましくは１％（ｗ／ｗ）未満である。 本発明の其の他の実施態様では、例えば、粒状物の加工補助及び／又はペレッ
ト化安定性及び／又は貯蔵安定性の改善の為に、一種以上の添加成分が粒状物に
導入されても良い。多くのその様な添加剤が以下で検討される。 本発明の一実施態様では、添加剤は、（ＥＰＡ−０７５８０１８で示唆されて
いる様な）水溶性無機塩を含む。好ましくは、粒体は、二価のカチオン、より好
ましくは亜鉛を含む水溶性無機塩を少なくとも０．１％含む。最も好ましくは、
無機塩は、硫酸亜鉛である。最終生成物は、最終生成物１ｋｇ当り、５００〜１
，５００ｍｇＺｎ、更に好ましくは７００〜１，３００ｍｇＺｎ、最も好ましく
は９００〜１，１００ｍｇＺｎを含む。二価カチオンが好ましく、それらは、最
高の貯蔵並びに加工安定性を用意する。最高の乾燥収量を与える点で、アニオン
としては硫酸塩が好ましい。塩は固体形態で（例えば、混合物に）添加されても
良い。 或いは、塩は、固体担体と混合する前に、水或いは酵素含有液体に溶解
しても良い。
【０００９】 ペレット化安定性の更なる改善は、疎水性の、ゲル形成又は緩慢溶解化合物を
組成物中に導入することによって得ても良い。これらは、粒体に加工される混合
物に対して所望の化合物を（水及び固体担体成分の質量を基準にして、ｗ／ｗ）
少なくとも０．１％、好ましくは少なくとも０．５％、更に好ましくは少なくと
も１％添加することによって用意されても良い。適当な物質としては、誘導体化
されたセルロース、例えば、ＨＰＭＣ（ヒドロキシ−プロピル−メチル−セルロ
ース）、ＣＭＣ（カルボキシ−メチル−セルロース）、ＨＥＣ（ヒドロキシ−エ
チル−セルロース）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、及び／又は食用油が挙
げられる。加工助剤として、食用油、例えば、大豆油又はアブラナ油が（例えば
、粒状化される混合物に）添加されても良い。 本発明の尚他の実施態様では、組成物は、トレハロースを含む。好ましくは、
トレハロースは０．１〜２．５％（ｗ／ｗ最終生成物）の濃度で、更に好ましく
は０．２５〜１％の濃度で、最も好ましくは０．４〜０．５％の濃度で適用され
る。
【００１０】 本発明方法では、酵素及び水は、微生物発酵方法からの、或いは、由来の酵素
含有（好ましくは水性）液体、例えば、溶液又はスラリーとして用意されるのが
好ましい。この発酵方法は、通常、酵素が産生される方法である。この発酵方法
は、微生物（所望の酵素を産生する）及び水性溶液を含むブロスが得られるもの
であっても良い。微生物から一旦分離された（例えば、濾過によって）この水性
溶液は、本発明で使用される酵素含有水性液体である事が出来る。従って、好ま
しい実施態様では、酵素含有水性液体は濾過物である。通常、酵素は活性形態で
存在する。好ましくは、液体は濃縮形態、例えば、限外濾過物（ＵＦ）の様な濃
縮形態にあって、所望の活性水準を持つ粒状物の産生を可能とする。 担体上に吸収されることの出来る酵素含有液体（及び酵素）の量は、吸収され
ることの出来る水の量によって通常制限される。酵素溶液は、約２５％（ｗ／ｗ
）の乾燥物質を含んでも良い。固体担体に添加される水の量は、水性液体中の（
実質的に）全ての水が、固体担体中に存在する全ての成分によって吸収される量
である。又、多量の酵素含有液体を吸収する為の高温の使用も本発明によって考
慮され、事実、熱安定性酵素を処理する時に特に好ましい。従って、これらの酵
素に対して、固体担体と液体（又は酵素と水）との混合は、３０℃以上、好まし
くは４０℃以上、更に好ましくは５０℃以上の温度で行われる。別途、或いは更
に、液体はこの温度で用意されても良い。一般に、固体担体の非膨潤条件（低温
度での）は、高温での酵素の不安定性（熱感応性）から生じる損失を最小にする
為に好ましい。
【００１１】 水又は酵素含有液体は、一種以上の酵素を含んでも良い。適当な酵素は、動物
飼料（ペットフードを含めて）に含まれる飼料酵素である。これらの飼料酵素の
機能は、例えば、或る種の飼料化合物の粘度を減少させるか或いは抗栄養性効果
を減少させるかして、飼料転換速度を改善することにある。飼料酵素（例えばフ
ィターゼ）は、又、肥料環境にとって有害な化合物の量を減少させる為に使用さ
れても良い。 好ましい実施態様では、飼料酵素を高濃度で含有する粒体が、本発明によって
製造される。 高濃度のフィターゼ組成物の製造の利点は、既にＷＯ９８／５５５９９におい
て記載されている。 飼料酵素としては、フィターゼ（３−フィターゼ及び６−フィターゼの両方）
の様なホスファターゼ及び／又は酸ホスファターゼ；デンプン分解酵素の様なカ
ルボヒドラーゼ及び／又は、β−グルカナーゼの様なセルラーゼ及び／又はキシ
ラナーゼの様なヘミセルラーゼ又はグルカナーゼを含む植物細胞壁分解酵素；プ
ロテアーゼ又はリゾチームの様なペプチダーゼ；ガラクトシダーゼ、ペクチナー
ゼ、エステラーゼ、リパーゼ、好ましくは哺乳類の膵臓ホスホリパーゼＡ２の様
なホスホリパーゼ及びグルコースオキシダーゼが挙げられる。好ましくは、飼料
酵素は、中性及び／又は酸性ｐＨの最適条件を有する。更に好ましくは、飼料酵
素は、フィターゼ、キシラナーゼ、ホスホリパーゼ及びグルコースオキシダーゼ
から成る群から選ばれる少なくとも一種の酵素を含む。最も好ましくは、飼料酵
素は、フィターゼ及びキシラナーゼから成る群から選ばれる少なくとも一種の酵
素を含む。
【００１２】 酵素がフィターゼである時は、最終粒状物は、好ましくは、４，０００〜２０
，０００ＦＴＵ／ｇ、更に好ましくは５，０００〜２０，０００ＦＴＵ／ｇ、最
も好ましくは５，０００〜１５，０００ＦＴＵ／ｇの範囲のフィターゼ活性を有
しても良い。１フィターゼ単位（ＦＴＵ）は、フィターゼ活性が「ＩＳＬ方法６
１６９６（バナデートアッセー便覧）」手順により決定された条件下で、温度３
７℃でｐＨ５．５で、ナトリウムフィテート（０．００５１モル／ｌ）から毎分
１モルの無機燐酸塩を遊離させる酵素の量と定義される。 酵素がキシラナーゼである時は、最終粒状物は、好ましくは、５，０００〜１
００，０００ＥＸＵ／ｇ、更に好ましくは１０，０００〜１００，０００ＥＸＵ
／ｇ、最も好ましくは１５，０００〜１００，０００ＥＸＵ／ｇの範囲のキシラ
ナーゼ活性を有しても良い。１エンド−キシラナーゼ単位（ＥＸＵ）は、「ＩＳ
Ｌ方法６１７３１」手順の条件下で、毎分、キシロース当量として測定される４
．５３μｍｏｌの還元糖を遊離させる酵素の量と定義される。 ＩＳＬ方法は、ＤＳＭ，Ｆｏｏｄ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ，Ａｇｒｉ Ｉ
ｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，Ｗａｔｅｒｉｎｇｓｅｗｅｇ １，Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ
１， ２６００ ＭＡ， Ｄｅｌｆｔ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓへ請求
することによって入手できる。
【００１３】 これらの飼料酵素に加えて、本発明では、ワクチン及び／又は必須アミノ酸の
含有量を増加させる為に加工されたポリペプチドとして使用される為の抗原性決
定因子の様な生物活性を持つ非酵素的ポリペプチドも等しく適用できる。これら
の非酵素的ポリペプチドの生物活性は、熱失活に対して敏感であっても良い。 本発明の好ましい方法は、 ａ．酵素を含む水性液体、食用炭水化物ポリマーから成る固体担体及びポリ
ビニルアルコールの様なゲル形成或いは緩慢溶解化合物、二価カチオンから成る
水溶性無機塩及びトレハロースから成る群から選ばれる一種以上の添加成分を混
合する工程、 ｂ．その混合物を、混合と同時に又は混合に続いて機械的に処理して粒体を
得る工程、 ｃ．粒体を乾燥する工程、 ｄ．粒体を流動床コーターでポリエチレングリコールで被覆する工程、 を含む。
【００１４】 酵素、水（例えば、酵素含有液体）、固体担体及び、任意に、添加剤の混合物
を調製及び／又は粒状化の為の本発明で使用される機械的処理は、食品、飼料及
び酵素形成工程で頻繁に使用される公知の方法を含む。この機械的処理は、例え
ば、押出し、発泡、球状化、ペレット化、高剪断粒状化、ドラム粒状化、流動床
凝集又はそれらの組合せを含む。これらの方法は、通常、例えば、スクリュー又
は混合機構の回転、ペレット化装置の回転機構の圧力、流動床凝集機の回転底板
による粒子の移動、或いはガス流による粒子の移動或いはそれらの組合せの様な
機械的エネルギーの入力によって特徴付けられる。これらの方法は、固体担体（
例えば、粉末状態にある）と、酵素及び水、例えば、酵素含有液体（水性溶液又
はスラリー）との混合と引続く粒状化を可能とする。或いは、固体担体は、水、
例えば、（粒状化液体として作用することの出来る）液体（又はスラリー）が次
いで添加される酵素（例えば、粉末形態にある）と混合することが出来る。 本発明の尚更なる実施態様では、粒状物（例えば、凝集体）は、例えば、流動
床凝集機中で、酵素含有液体を担体上に噴霧或いは被覆することによって形成さ
れる。ここで得られた粒体は、流動床凝集機で製造される様な凝集体を含むこと
が出来る。好ましくは、酵素含有液体と固体担体との混合は、更に、混合物の混
練を含む。これは、混合物の可塑性を改善して粒状化を促進するかも知れない。
【００１５】 粒状物が押出しで形成される時は、低圧で行うのが好ましい。これは、押出さ
れている混合物の温度が増加しないか或いは極僅か増加すると言う利点を提供す
るかも知れない。低圧押出しとしては、例えば、バケット又はドーム押出機のＦ
ｕｊｉ Ｐａｕｄａｌ−ｔｙｐｅでの押出しが挙げられる。 得られた粒体は、例えば、Ｍａｒｕｍｅｒｉｓｅｒでの造粒（例えば、球状化
）および／又は圧縮に掛けることが出来る。粒体は、最終粒状物のダスト形成を
減少させ、粒状物の被覆を促進させるかも知れないので、乾燥前に球状化するこ
とが出来る。 次いで、粒体は、例えば、流動床乾燥機で乾燥する事が出来、或いは、流動床
凝集の場合には、（凝集機中で）直ちに乾燥して（固体乾燥）粒状物を得る事が
出来る。食品、飼料又は酵素工業における粒体乾燥用の其の他の公知の方法が、
当業者によって使用出来る。適当に、粒状物は流動的である。乾燥は、２５〜６
０℃、好ましくは３０〜５０℃の生成物温度で生起するのが好ましい。一般に、
乾燥粒体は約５〜９％の湿分を含む。 粒状物上にポリエチレングリコール及び任意に其の他の被膜を適用する為には
、流動床、高剪断粒状機、混合粒状機、或いは、Ｎａｕｔａ−ｔｙｐｅの混合機
の使用を含めた多数の公知の方法が利用できる。ポリエチレングリコールを粒状
物上に適用する為の好ましい方法では、ポリエチレングリコールは、被覆される
粒体の流動床上に、ポリエチレングリコールの融点を超える温度で、例えば、好
ましくは６０℃以上の温度で噴霧される。次いで、流動床の温度を下げてポリエ
チレングリコール被膜を固化させる。この被覆工程は、水に溶解したポリエチレ
ングリコールが適用される同時乾燥工程を含んでも良い。
【００１６】 粒体の被覆は、乾燥工程中に既に始めても良い。或いは、粒体の被覆は乾燥に
続いて行っても良い。好ましくは、乾燥と被覆は同じ装置で行われる。 好ましくは、粒体は、相対的に狭い粒度分布（例えば、それらは単分散である
）を有する。これは、飼料ペレットでの酵素粒状物の均質分散を促進することが
出来る。本発明方法は、狭い粒度分布を持つ粒状物を製造する傾向にある。粒状
物の粒度分布は、１００μｍ〜２，０００μｍ、好ましくは２００μｍ〜１，８
００μｍ、更に好ましくは４００μｍ〜１，６００μｍ、最も好ましくは７００
〜１，０００μｍが適当である。粒状物は、不規則な（然し、好ましくは規則的
な）形状、例えば、略球状の形状であっても良い。 若し必要であれば、粒体の粒度分布を更に狭くする為に、この方法に追加の工
程、例えば篩分け工程を含めても良い。例えば、この追加篩分け工程は、０．７
〜１ｍｍの粒度分布を持つ粒体を選択する。 これらの方法（本発明の別の観点を形成する）によって得る事の出来る酵素含
有粒状体は、従来技術において直面する問題を解決或いは少なくとも緩和するも
のである。粒体の溶解時間は極めて短く（２〜３分）、従って、動物への酵素の
生体利用度は、脂肪被覆粒体に比較して改善される。酵素濃度は高く、そうする
ことによって、粒体が安価に製造され、ペレット化及び貯蔵安定性が改善される
。最後に、粒状物は、食用であり、又、好ましくは消化できると言う理由で、石
鹸、界面活性剤、漂白或いは漂白する化合物、ゼオライト、結合剤を含まない。
【００１７】 従って、本発明は、上記方法によって得る事の出来、以下の特徴を有する酵素
含有粒状物を提供する。この粒状物は、飼料酵素、固体担体及び、任意に、一種
以上の添加剤を含むポリエチレングリコール被覆粒体から成る。好ましくは、前
記添加剤は、少なくとも一種のゲル形成或いは緩慢溶解化合物、例えば、ポリビ
ニルアルコール、水溶性無機塩及びトレハロースを含む。 本発明の粒状物は、動物飼料の製造での使用に適する。その方法において、粒
状物は飼料物質と、例えば、プレミックスの一部として、或いは動物飼料の前駆
体として混合される。本発明の粒状物の特徴は動物飼料として十分に適した混合
物で、特にその混合物がスチーム処理され、次いでペレット化され任意に乾燥さ
れる混合物の一成分としての使用を可能とするものである。 従って、本発明の更なる観点は、動物飼料、又は動物飼料のプレミックス又は
前駆体の製造方法であって、本発明によって用意された粒状物を一種以上の動物
飼料物質又は成分と混合することを含む方法に関する。 又、本発明は、動物の成長を促進する方法であって、本発明によって用意され
た粒状物を含む食餌を動物に給餌することを含む方法に関する。ここで、動物の
食餌としては、粒状物それ自体を、或いは飼料中に存在する粒状物を含むことが
出来る。適当な動物としては、家畜の様な動物、豚及び家禽が挙げられる。
【００１８】 従って、本発明の其の他の観点は、本発明の粒状物を含む組成物に関し、好ま
しくは動物飼料の様な食用飼料組成物に関する。 本発明の尚其の他の観点は、動物飼料における、或いは動物飼料の一成分とし
ての、或いは、動物の食餌における使用の為の本発明の粒状物の使用に関する。 本発明の一つの観点の好ましい特色並びに特徴は、必要な変更を加えて、其の
他のものに等しく適用できる。 以下の実施例は、単に本発明を例示する為に提示されるのであって、限定する
ものでもなければ、限定されるものとみなされるものでもない。
【実施例】
実施例 一般的方法 コンデショニング工程： ５０ｇの粒体を、１０ｋｇの選択したプレミックス飼料に混合し、テスト直前
に、同じプレミックス飼料２４０ｋｇと混合した。この２５０ｋｇの混合物を、
６００ｋｇ／ｈの速度で、投与スクリューによって、直接スチームによって５５
〜８０℃まで加熱された混合機／コンデショナーに投与した。滞留時間は約１０
〜１５秒であり、次いで、このホット混合物をペレット化プレス中に押し込んだ
。ダイから出たペレットは７５〜８２℃であり、冷却ベルト上に落とされた。こ
のベルトから、安定性測定用のサンプルを採取した。
【００１９】実施例１：豚の飼料でのフィターゼのペレット化安定性 Ｇｌａｔｔ ＶＧ２５混合機中で、３０００ｇのコーンスターチ（Ｃ−ｇｅｌ
、Ｃｅｒｅｓｔａｒ社製）を、純粋酵素含有量が１８．０％のフィターゼUltra-
Filtrate(UF)１３８０ｇと混合した。混合後、この混合物を、NICA E-220押出機
で押出し、Fuji Paudal QJ-400G球状化機で球状化した。得られた粒子を、Glatt
GPCG 1,1 流動床乾燥機で乾燥した（Ａ）。第二バッチ（Ｂ）は、７０ｇのグリ
セロールを１４２０ｇのＵＦ（２７％グリセロールで純粋酵素に相当する）に添
加して調製し、澱粉と混合した。第三バッチ（Ｃ）は、２１０ｇのソルビトール
を１４９０ｇのＵＦ（７８％ソルビトールで純粋酵素に相当する）に添加して調
製し、澱粉と混合した。第四バッチ（Ｄ）は、２１０ｇのイノシトールを１４９
０ｇのＵＦ（７８％イノシトールで純粋酵素に相当する）に添加して調製し、澱
粉と混合した。対象サンプルは、高速粒状物Phytase Novo CTである。
【００２０】
【表１】 表１．５５／７５℃でのコンデショニング／ペレット化後の豚飼料中の残留フィ
ターゼ活性（％） ポリオールは、一般に、タンパク質の安定性を増加させることは公知である。
この実施例において、然しながら、テストされたポリオールの何れも、フィター
ゼのペレット化安定性を顕著に改善しなかったことが観察された。なおかつ、グ
リセロールは、フィターゼのペレット化安定性を著しく低下させた。 ペレット化安定性ｎｏ為に使用された豚飼料（飼料プレミックス）は次のもの
から成る：コーン（２０．７％）、大麦（４０％）、キャッサバ（１０％）、オ
ート麦（１０％）、大豆（１３％）、魚粉（３％）、小麦二級品（０．８４％）
、大豆油（０．５％）、石灰（１．２％）、塩（０．２％）、微小成分（０．０
６％）、メチオニン（０．０５％）、５０％塩化コリン（０．０５％）、及びプ
ロピオン酸カルシウム（０．４％）、合計１００％。
【００２１】実施例２：ブロイラー飼料でのフィターゼのペレット化安定性 実施例１と同様の方法で、以下のサンプルを、純粋酵素含有量が１８．４％の
フィターゼＵＦで調製した。第一バッチ（Ｅ）は、１３００ｇのフィターゼＵＦ
と澱粉とで調製した。第二バッチ（Ｆ）は、１３ｇのキサンタンガムを１３１０
ｇのＵＦ（５．４％キサンタンガムで純粋酵素に相当する）に添加して調製し、
澱粉と混合した。
【００２２】
【表２】 表２：８０／８２℃でのコンデショニング／ペレット化後のブロイラー飼料中の
残留フィターゼ活性（％） 再度、フィターゼのペレット化安定性の改善は観察されなかった。 ブロイラー飼料は次のものから成る： トウモロコシ（５０％）、エンドウ豆（３．５％）、大豆粉（２８％）、タピ
オカ（２．４％）、肉粉（３．６％）、魚粉（１％）、フェザーミール（１％）
、大豆油（１．８％）、動物性脂肪（３．５％）、ビタミン／ミネラルプレミッ
クス（０．９％）、石灰（０．８％）、モノカルシウムホスフェート（０．９％
）、塩（０．３％）、メルビット３９４（Premervo, Utrecht, The Netherlands
）（０．７％）、メルビット３９３（１．５％）、合計１００％。
【００２３】実施例３：ブロイラー飼料でのフィターゼのペレット化安定性 実施例１と同様の方法で、以下のサンプルを、純粋酵素含有量が１７．３％の
フィターゼＵＦで調製した。第一バッチ（Ｇ）は、１４７０ｇのフィターゼＵＦ
と澱粉とで調製した。第二バッチ（Ｈ）は、１５ｇのトレハロース（二水和物、
Fluka社製）を１４８０ｇのＵＦ（５．９％トレハロースで純粋酵素に相当する
）に添加して調製し、澱粉と混合した。
【表３】 表３：８０／８２℃でのコンデショニング／ペレット化後のブロイラー飼料中の
残留フィターゼ活性（％） 驚くべき事に、ポリオールトレハロースの添加は、酵素のペレット化安定性を
改善した。
【００２４】実施例４：ブロイラー飼料でのフィターゼのペレット化安定性 実施例１と同様の方法で、以下のサンプルを、純粋酵素含有量が１８．６％の
フィターゼＵＦで調製した。第一バッチ（Ｉ）は、１３３０ｇのフィターゼＵＦ
と澱粉とで調製した。第二バッチ（Ｊ）は、２７ｇのトレハロースを１３３０ｇ
のＵＦ（１０．９％トレハロースで純粋酵素に相当する）に添加して調製し、澱
粉と混合した。第三バッチ（Ｋ）は、６６ｇのトレハロースを１３３０ｇのＵＦ
（２６．７％トレハロースで純粋酵素に相当する）に添加して調製し、澱粉と混
合した。第四バッチ（Ｌ）は、１３ｇのトレハロース、１３ｇのＰＶＡ（５１−
０５、Dupont社製）及び１３ｇのＺｎＳＯ4・７Ｈ2Ｏを１３３０ｇのＵＦ（５．
３％トレハロースとＰＶＡ及び２．８％の乾燥塩で純粋酵素に相当する）に添加
して調製し、澱粉と混合した。この後のサンプルを、流動床コーターで、１０％
ＰＥＧ６０００で、ＰＥＧと混合された粒状物を６２℃まで加熱して被覆し、再
度冷却した（Ｍ）。同様に、バッチ（Ｌ）のサンプルを、流動床コーター中で、
６２℃で、１０％ＰＥＧ２０，０００（粘度を下げる為に水１：２で希釈された
）を粒状物上に噴霧して被覆し、乾燥し、次いで冷却した（Ｎ）。
【表４】 表４：８１／８０℃でのコンデショニング／ペレット化後のブロイラー飼料中の
残留フィターゼ活性（％） 最も高いペレット化安定性は、トレハロース、ＺｎＳＯ4及びＰＶＡを含む、
ＰＥＧ被覆粒状物で得られた。
【００２５】実施例５：ブロイラー飼料でのフィターゼのペレット化安定性 実施例１と同様の方法で、以下のサンプルを、純粋酵素含有量が１８．０％の
フィターゼＵＦで調製した。第一バッチ（Ｏ）は、１３６８ｇのフィターゼＵＦ
と１４ｇのＺｎＳＯ4・６Ｈ2Ｏ及び１４ｇのＰＶＡ５／８８（ERKOL SA.）とで
調製した（純粋酵素に対して、乾燥塩の３％及びＰＶＡの５．３％が相当する）
。第二バッチ（Ｐ）は同様の方法で調製したが、そのレシピでは１４ｇのトレハ
ロースを余分に配合した（純粋酵素に対して５．３％のトレハロース）。両方の
レシピを流動床コーター（STREA、NIRO-AEROMATIC）で、１０％ＰＥＧ６０００
で被覆し、同量の水に溶解し、サンプルＱ及びＲとした。四つのサンプルをペレ
ット化試験でテストした。
【表５】 表５：８０／８０℃でのコンデショニング／ペレット化後のブロイラー飼料中の
残留フィターゼ活性（％） ポリエチレングリコール被膜は、サンプルのペレット化安定性を著しく改善し
た。
【００２６】実施例６：フィターゼ含有粒状物の溶解時間 先の実施例において調製した幾つかのサンプルを緩衝液に溶解し、一定間隔で
サンプルを採取した。粒状物の溶解時間は、ＰＥＧ被膜の結果として、増加しな
いか、僅かに増加しただけであった。
【表６】 表６：ｘ分後に溶解した割合（％）として表示される溶解時間 Hsgranは、Phytase Novo CTである。
【００２７】実施例７：フィターゼ含有粒状物の安定性 粒状物の棚安定性の分析の為に、幾つかのサンプルを密封バイアル中で、３５
℃でテストした。
【表７】 表７：異なるサンプルの棚安定性
【００２８】実施例８：異なる組成物を使用してのフィターゼの生体利用度 以下のフィターゼ組成物とモノカルシウムホスフェート（ＭＣＰ）を、標準コ
ーン／大豆ブロイラー飼料に、三つの異なる投与量（７５、１５０及び２２５Ｆ
ＴＵ／ｋｇ）で添加し、２８日間ブロイラーに給餌した。又、このブロイラー飼
料は、内在的フィターゼ活性を含んでいた。* Natuphos 5000 G（標準製品） 組成： フィターゼ ＵＦ ９４．４９ｇ トレハロース ０．９１ｇ ポリビニルアルコール ０．９１ｇ ZnSO4・6H2O ０．９７ｋｇ 澱粉 ２００．００ｋｇ 添加水 ７．１１ｋｇ 合計 ３０４．３９ｋｇ 乾燥製品の合計 ２１５．０２ｋｇ* Natuphos 5000 G（ＰＥＧ被覆） 組成： フィターゼＳＤ １１．５４ｋｇ フィターゼＵＦ ９９．８８ｋｇ トレハロース １．１４ｋｇ ポリビニルアルコール １．１４ｋｇ ZnSO4・6H2O １．１４ｋｇ 澱粉 ２００．００ｋｇ 添加水 ７．１０ｋｇ 合計 ３０６．８５ｋｇ 乾燥製品の合計 ２２８．８２ｋｇ １０％ １／１／２溶液（ＰＥＧ６０００／ＰＥＧ２００００／Ｈ２Ｏ）で被
覆した。 （フィターゼＳＤ：フィターゼ噴霧乾燥粉末）。 ＊Phytase Novo CT、対象製品、脂肪被覆。 ＊ＭＣＰ：正の対照基。 ２８日後に、動物の成長を決定した（表８）。フィターゼ組成物（表９）当り
の成長の比較が出来る様に、回帰分析を適用し、成長を次の様にして計算した： 成長＝切片＋回帰係数＊フィターゼ活性（ＦＴＵ／ｋｇ）。
【００２９】
【表８】 表８：２８日後のブロイラーの成長 1 決められたフィターゼ活性。
【表９】 表９： 切片：１３０２。 推定 ％ ＭＣＰ − NPHG518RE1(ZnSO4) 0.583 100 NPHG518RE2(ZnSO4+PEG) 0.649 111 Phytaze Novo CT 0.434 74 ポリエチレングリコールで被覆した組成物におけるフィターゼの生体利用度は
、脂肪被覆を含む組成物におけるフィターゼの生体利用度よりも高いことが結論
付けられた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 クレイン ホルケンボルグ アウグスティ ヌス ベルナルデュス マリア オランダ エヌエル−2614 ウェーセー デルフト ゾーメルパッド 15 Ｆターム(参考） 2B150 AA01 AB20 AE05 DC13 DF09 DH09 DJ01 DJ10 DJ24 DJ25 DJ30

Claims (25)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 動物の飼料としての使用に適する酵素含有粒状物の製造方法
    であって、飼料酵素、固体担体、水及び任意に添加剤を適当な量で処理して酵素
    含有粒体を得る工程、該粒体を乾燥する工程及び乾燥した粒体をポリエチレング
    リコールで被覆する工程を含む事を特徴とする方法。
  2. 【請求項２】 該ポリエチレングリコールが、４，０００〜２０，０００ダ
    ルトン、好ましくは６，０００〜２０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する
    、請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】 該ポリエチレングリコールが、該粒体の質量の１〜２０％、
    更に好ましくは５〜１５％、最も好ましくは８〜１２％で適用される、請求項２
    に記載の方法。
  4. 【請求項４】 該粒体を被覆する為に使用される該ポリエチレングリコール
    が、最初、５０％（ｗ／ｗ）の濃度で水に溶解される、請求項３に記載の方法。
  5. 【請求項５】 該水及び酵素が、酵素含有水性液体として用意される、請求
    項１〜４の何れか一項に記載の方法。
  6. 【請求項６】 該液体が、該酵素を製造する発酵方法からの濾過物である、
    請求項５に記載の方法。
  7. 【請求項７】 該固体担体が、食用炭水化物ポリマーから成る、請求項１〜
    ６の何れか一項に記載の方法。
  8. 【請求項８】 該添加剤が、少なくとも０．１％のポリビニルアルコールを
    含む、請求項１〜７の何れか一項に記載の方法。
  9. 【請求項９】 該添加剤が、二価カチオンを含む水溶性無機塩を少なくとも
    ０．１％含む、請求項１〜８の何れか一項に記載の方法。
  10. 【請求項１０】 該無機塩が、最終生成物の１ｋｇ当り、好ましくは５００
    〜１，５００、更に好ましくは７００〜１，３００、最も好ましくは９００〜１
    ，１００ｍｇＺｎを有する硫酸亜鉛である、請求項９に記載の方法。
  11. 【請求項１１】 該添加剤が、少なくとも０．１％（ｗ／ｗ）のトレハロー
    スを含む、請求項１〜１０の何れか一項に記載の方法。
  12. 【請求項１２】 該飼料酵素が、フィターゼ、キシラナーゼ、ホスホリパー
    ゼ及びグルコースオキシダーゼから成る群、好ましくはフィターゼ及びキシラナ
    ーゼから成る群から選ばれる酵素を少なくとも含む、請求項１〜１１の何れか一
    項に記載の方法。
  13. 【請求項１３】 該粒体が、４，０００〜２０，０００ＦＴＵ／ｇ、好まし
    くは５，０００〜２０，０００ＦＴＵ／ｇ、更に好ましくは５，０００〜１５，
    ０００ＦＴＵ／ｇの範囲のフィターゼ活性を有する、請求項１２に記載の方法。
  14. 【請求項１４】 該方法が、 （ａ）該酵素を含む水性液体を、該固体担体と、ポリビニルアルコール、二価カ
    チオンを含む水溶性無機塩及びトレハロースを含む一種以上の添加剤と混合する
    工程、 （ｂ）（ａ）で得られた混合物を混合と同時に又はそれに続いて機械的に処理し
    て粒体を得る工程、 （ｃ）（ｂ）で得られた該粒体を乾燥する工程、 （ｄ）（ｃ）で得られた該粒体を、流動床コーター中でポリエチレングリコール
    で被覆する工程を含む、請求項１〜１３の何れか一項に記載の方法。
  15. 【請求項１５】 該機械的処理が、押出し、ペレット化、高剪断粒状化、発
    泡、流動床凝集又はそれらの組合せを含む、請求項１４に記載の方法。
  16. 【請求項１６】 該機械的処理が、低圧及び／又はバスケット或いはドーム
    押出機で行われる押出しである、請求項１５に記載の方法。
  17. 【請求項１７】 酵素含有水性液体及び該固体担体が混合され、得られた混
    合物が粒状化前に混練される、請求項１４〜１６の何れか一項に記載の方法。
  18. 【請求項１８】 得られた該粒体が乾燥前に球状化される、請求項１４〜１
    ７の何れか一項に記載の方法。
  19. 【請求項１９】 該粒体の粒度分布が、１００〜２，０００μｍ、好ましく
    は２００〜１，８００μｍ、更に好ましくは４００〜１，６００μｍ、最も好ま
    しくは７００〜１，０００μｍの範囲である、請求項１〜１８の何れか一項に記
    載の方法。
  20. 【請求項２０】 請求項１〜１９の何れか一項に記載の方法によって得る事
    の出来るポリエチレングリコールで被覆された酵素含有粒状物。
  21. 【請求項２１】 動物飼料又は動物飼料の為のプレミックス又は前駆体の製
    造方法であって、請求項２０の粒状物を一種以上の動物飼料物質又は成分と混合
    することを特徴とする方法。
  22. 【請求項２２】 飼料物質及び粒状物の混合物が、スチームで処理され、ペ
    レット化され、任意に乾燥される、請求項２１に記載の方法。
  23. 【請求項２３】 請求項２０の粒状物を含む飼料組成物。
  24. 【請求項２４】 動物の成長を促進する方法であって、請求項２０の粒状物
    又は請求項２３の組成物を含む食餌を動物に給餌することを特徴とする方法。
  25. 【請求項２５】 動物飼料での、又は動物飼料の成分としての、或いは、動
    物の食餌での使用の為の請求項２０の粒状物の使用。
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