[go: up one dir, main page]

FI102974B - Menetelmä optisesti aktiivisten trans-3-fenyyliglysidihappoestereiden entsymaattiseksi valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä optisesti aktiivisten trans-3-fenyyliglysidihappoestereiden entsymaattiseksi valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI102974B
FI102974B FI935712A FI935712A FI102974B FI 102974 B FI102974 B FI 102974B FI 935712 A FI935712 A FI 935712A FI 935712 A FI935712 A FI 935712A FI 102974 B FI102974 B FI 102974B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
ester
trans
process according
hydrolyzed
optically active
Prior art date
Application number
FI935712A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI935712A0 (fi
FI935712L (fi
FI102974B1 (fi
Inventor
Joannes Gerardus Theo Kierkels
Wijnand Peter Helena Peeters
Original Assignee
Dsm Nv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dsm Nv filed Critical Dsm Nv
Publication of FI935712A0 publication Critical patent/FI935712A0/fi
Publication of FI935712L publication Critical patent/FI935712L/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI102974B publication Critical patent/FI102974B/fi
Publication of FI102974B1 publication Critical patent/FI102974B1/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/48—Compounds containing oxirane rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)

Description

102974
Menetelmä optisesti aktiivisten trans-3-fenyyIiglysidihappoestereiden entsy-maattiseksi valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää sellaisen trans-3-fenyyliglysidihapon optisesti aktiivisen esterin valmistamiseksi, joka on yleisen kaavan
Chrr 10 mukainen, jossa Ri on alkoholista johdettu ryhmä, esim. substituoitu tai substituoi-maton alkyyliiyhmä; ja A on aromaattinen rengas, esim. fenyylirengas, joka voi olla substituoitu tai substituoimaton, jossa menetelmässä trans-3-fenyyliglysidihappo-esterin kahden enantiomeerin seos hydrolysoidaan stereoselektiivisesti entsyymillä, joka on peräisin Candida-suvusta, ja hydrolysoimaton esteri erotetaan pois reaktio-15 seoksesta.
Patentissa EP-A-362 556 paljastetaan raseemisen trans-metyyli-3 -(4-metoksifenyy-li)glysidihappoesterin stereoselektiivinen entsymaattinen hydrolyysi käyttäen suurta lukumäärää entsyymejä Candida cvlindracea -laji mukaan luettuna. Hakemuksen 20 tekijä on havainnut, että Candida cvlindracea -laji menettää aktiivisuutensa ja ste-reoselektiivisyytensä 50 °C:n tai korkeammissa lämpötiloissa.
Myös patentissa WO-A 9 004 643 paljastetaan trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)-glysidihappoesterin kahden enantiomeerin raseemisen seoksen entsymaattinen hyd-25 rolyysi käyttäen suurta lukumäärää entsyymejä, mukaan luettuna Candida cvlindracea -lajista eristetty entsyymi. Kuvauksesta käy ilmi, että entsymaattinen hydrolyysi käyttäen Candida cvlindracea -entsyymiä antaa tavallisesti pienen e.e.-arvon (enan-tiomeerinen ylimäärä) samalla kun lisäksi entsyymi osoittautuu hyvin herkäksi vali-• * tulle liuottimelle.
30
On olemassa suuri tarve löytää sopiva entsyymi näiden kiraalisten yhdisteiden valmistamiseksi. Tämän keksinnön tavoitteena on saada aikaan menetelmä, jolla ei ole edellä mainittuja haittoja ja jossa trans-fenyyliglysidihappoestereiden raseeminen seos hydrolysoidaan selektiivisesti ja entsymaattisesti suhteellisen lyhyessä reaktio- 2 102974 ajassa, jossa menetelmässä jäännösesteri voidaan saada suurella saannolla ja suurella e.e.-arvolla.
Tämän keksinnön mukaisesti tämä saavutetaan käyttäen entsyymiä, joka on peräisin 5 Candida antarctica -lajista. Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.
Esillä oleva keksintö perustuu trans-3-fenyyliglysidiesterin kahden enantiomeerin seoksen enantioselektiiviseen entsymaattiseen hydrolyysiin käyttäen Candida an-10 tarctica -lajista peräisin olevaa entsyymiä. On havaittu, että entsymaattinen hydro-lyysi voidaan suorittaa stereoselektiivisesti korkeammissa lämpötiloissa kuin kiijal-lisuudessa on toistaiseksi osoitettu, esim. jopa 80 °C:n lämpötiloissa. Tämän seurauksena reaktioaikaa voidaan lyhentää huomattavasti. Sitä paitsi entsyymi näyttää olevan vähemmän herkkä valitulle liuottimelle, mikä merkitsee, että hyvät selektiivi-15 syydet saavutetaan eri liuottimissa.
Kaavan I mukainen trans-3-fenyyliglysidihappoesteri voi valinnaisesti sisältää yhden tai useampia substituentteja aromaattisessa renkaassa A, esim. 4-asemassa. Substituentit voidaan valita esim. hydroksi-, 1-6 C-atomia sisältävistä alkoksi-, 1-6 20 C-atomia sisältävistä alkyyli- ja halogeeniryhmistä. Aromaattinen rengas A voi olla myös polysyklinen. Alkoholista johdettu ryhmä Rj, joka on esterijäännös, on useimmiten 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä; edullisesti se on metyyli-, etyyli-, iso-propyyli- tai isobutyyliryhmä.
25 Enantiomeerinen ylimäärä, joka on enantiomeerisen puhtauden mitta ja jota merkitään tavallisesti lyhenteellä "e.e.", on usein käytetty suure. Lyhyesti sanoen enantiomeerinen ylimäärä on yhtä kuin enantiomeerien määrien välinen erotus jaettuna enantiomeerien määrien summalla, joka osamäärä voidaan ilmoittaa prosentteina, kun se on kerrottu 100:11a.
30 ·' Edellä esitetyn kaavan I trans-3-fenyyliglysidihapon esterit voidaan valmistaa esim.
Darzens-kondensaatiolla tai epoksoimalla trans-kanelihapon estereitä.
Kaavan I mukaisilla trans-3-fenyyliglysidihapon estereillä on kaksi kiraalista kes-35 kusta. Molekyyleillä, joissa on n kpl kiraalisia keskuksia, on periaatteessa 2" kpl ste-reoisomeereja. Tämän vuoksi 3-fenyyli-glysidihapon estereiden osalta on kuviteltavissa 4 stereoisomeeria, jotka esiintyvät kahtena D,L-parina, jotka ovat keskenään 3 102974 diastereoisomeereja. 3-fenyyliglysidihapon estereiden kaksi diastereoisomeerista muotoa ovat cis- ja trans-muoto. Trans-muodossa olevalla kahdella enantiomeerilla on (2R, 3S)- ja (2S; 3R)-konfiguraatio. Cis-muodon konfiguraatiot ovat vastaavasti (2R, 3R) ja (2S, 3S). Bentsotiatsepiinin ja bentsatsepiinin valmistukseen käytetään 5 enimmäkseen enantiomeeria, jolla on (2R, 3S)-konfiguraatio.
Tämä keksintö koskee myös optisesti aktiivisen esterin käyttöä välituotteena farmaseuttisten aineiden, esim. bentsotiatsepiinin, kuten naltiatseemin, klentiatseemin ja diltiatseemin, bentsatsepiinin ja taksolin valmistuksessa.
10
Diltiatsemi on kaupallinen nimi 2-(4'-metoksifenyyli)-3-asetyylioksi-5-[2-(dimetyy-liamino)etyyli]-2,3-dihydro-l,5-bentsotiatsepin-4-(5H)-onille ja se tunnetaan esim. patentista US-A-3 562 257. Diltiatseemi on kalsiumin vasta-aine, jota käytetään sy-dän veri suoni tauteihin, kuten angina pectoris -tautiin. Lisäksi sitä käytetään sydämen 15 lyöntinopeusongelmien tapauksessa ja korkeaa verenpainetta vastaan. Jos on määrä valmistaa diltiatseemia, trans-3-fenyyliglysidihapon esteri sisältää para-metoksife-nyylirenkaan ryhmässä A, kun taas Ri on tällöin enimmäkseen metyyliryhmä.
Raseemisten estereiden entsymaattinen hydrolyysi, jollaista käytetään esillä olevas-20 sa keksinnössä trans-3-fenyyliglysidaattiesterin hydrolyysiin, on tunnettu. 50 %:n konversiolla täysin stereoselektiivinen entsyymi tuottaa sekä optisesti puhdasta tuotetta että optisesti puhdasta jäännösainetta. Käytännössä entsyymit eivät kuitenkaan ole täysin selektiivisiä. Tämän vuoksi mikäli käytännössä halutaan saada enantiose-lektiivisen entsymaattisen konversion tuote, jolla on korkea enantiomeerinen puh-• 25 tausaste, konversio on edullista päättää alle 50 %:iin.
Mikäli toisaalta halutaan saada jäännösaine (esillä olevassa tapauksessa esteri), jolla on korkea enantiomeerinen puhtausaste, on edullista jatkaa konversiota yli 50 %:n konversioasteeseen, kunnes haluttu enantiomeerinen ylimäärä saavutetaan.
30 : Entsymaattisen, enantioselektiivisen konversion selektiivisyys ja hyötysuhde, toisin sanoen enantioselektiivisyys, kasvaa enantiomeerien välisen konversionopeuseron kasvaessa. Konversionopeuksien eroon tietyn tyyppisen entsyymin läsnäollessa voidaan tietyssä määrin vaikuttaa prosessiparametrien sopivalla valinnalla. On luon-35 nollista, että yritetään optimoida prosessiparametrien valinta kulloinkin käytettävälle entsyymille. Alaan perehtynyt kykenee määrittämään yksinkertaisesti nämä parametrit kyseiseen tarkoitukseen suunniteltujen kokeiden perusteella.
. 102974 4
Kuten on kuvattu esim. julkaisussa Ching-Shih Chen et. ai., J. Am. Chem. Soc. 104 (1982), 7294-7299, useimmissa tapauksissa suurempi enantiomeerinen puhtaus voi daan toteuttaa jäännösaineessa kuin muodostuneessa tuotteessa.
5 Esillä olevan keksinnön mukaisesti käytetty entsyymi on lipaasi, joka on peräisin Candida antarctica -lajista lipaasi voidaan valmistaa esim. uudelleenyhdistetyn DNA:n tekniikalla. Kyseisen lipaasin geenikoodi on heterologisesti ilmaistuna isän-tämikro-organismissa, esim. Aspergillus oryzae -lajissa. Tätä entsyymiä on kaupallisesti saatavissa esim. NOVO-yhtiöltä tavaramerkillä SP 435 ja SP 535.
10
Trans-3-fenyyliglysidihappoesterin entsymaattisella hydrolyysillä Candida artarctica -lipaasin avulla trans-3-fenyyliglysidihappoesterin (2S, 3R)-enantiomeeri hydrolysoidaan erittäin selektiivisesti niin, että (2R, 3S)-enantiomeeri voidaan saada suurella e.e.-arvolla.
15
Enantiomeerien reaktionopeudet näyttävät eroavan toisistaan huomattavasti niin, että lähtien raseemisesta seoksesta alle 53 %:n konversiolla voidaan jo saada yli 95 %:n enantiomeerinen ylimäärä (2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)-glysidiesterienan-tiomeeria. Yli 98 %:n enantiomeerinen ylimäärä saadaan jo noin 55 %:n konversiol-20 la lähtien jälleen raseemisesta seoksesta. Kun käytetään hyväksi seoksia, jotka on rikastettu tavoite-enantiomeerilla, saadut tulokset ovat parempia samalla, kun entsyymi säilyttää selektiivisyytensä.
Tämän keksinnön mukaista entsyymiä on edullista käyttää sen liikkumattomaksi 25 tehdyssä muodossa, ts. kiinteän faasin pinnalla, mm. mikrohuokoisten hiukkasten, geelityyppisten hiukkasten ja ioninvaihtohartsien pinnalla. Tämä helpottaa entsyymin talteenottoa samalla, kun se tekee mahdolliseksi entsyymin uudelleenkäytön. On havaittu, että suuri aktiivisuus ja selektiivisyys saavutetaan myös, kun entsyymiä käytetään liikkumattomaksi tehdyssä muodossa, joka aktiivisuus ja selektiivisyys 30 säilyvät sen jälkeen, kun entsyymiä on kierrätetty useita kertoja.
Stereoselektiivinen hydrolyysi on edullista suorittaa kaksifaasisysteemissä, joka koostuu vesifaasista ja orgaanisesta faasista, joka sisältää orgaanista liuotinta. Esimerkkejä tällaisesta liottimesta ovat liuottimet, jotka eivät ole tai ovat vain vähäises-35 sä määrin liukenevia veteen, kuten kloroformi, isopropyylieetteri, 3-pentanoni, dikloorimetaani, trikloorietaani, bentseeni, tolueeni, ksyleeni, metyyli-t-butyylieette-ri, metyyli-isobutyyliketoni, sykloheksanoni, iso-oktaani, etyyliasetaatti ja muut.
5 102974
Yllättäen tämän keksinnön mukaisen entsyymin selektiivisyys on lähes riippumaton valitusta liuottimesta ja useimmissa tapauksissa on mahdollista saavuttaa yli 95 %:n e.e.-arvo alle 53 %:n konversiolla. Tämän keksinnön mukainen hydrolyysi voidaan suorittaa huoneenlämpötilassa tai korotetussa lämpötilassa. Ylärajan määrää aineen 5 stabiilius ja käytännössä se on noin 80 °C. On edullista käyttää 20-60 °C:n ja erityi sesti 30-50 °C:n lämpötilaa. Korkeampien lämpötilojen käytöstä on se etu, että reaktio tapahtuu nopeammin.
Hydrolyysin aikana pH pidetään arvossa 5-10, edullisesti 7-9 ja erityisesti noin 8 10 esim. lisäämällä emästä. Jäännösesteri, ts. enantiomeeri, jota ei ole hydrolysoitu, voidaan esim. ottaa talteen erottamalla orgaaninen liuotin, johon esteri on liuotettu ja ottamalla sen jälkeen esteri talteen liuoksesta.
Esillä olevan keksinnön mukaisesti (2R, 3S)-3-(4-alkoksifenyyli)glysidihapon, edul-15 lisesti (2R, 3S)-4-(4-metoksifenyyli)glysidihapon esteri saadaan yli 95 %:n, edullisesti yli 98 %:n e.e.-arvolla.
Tätä keksintöä selvitetään esimerkkien perusteella rajoittumatta niihin.
20 (2R,3S)-esterin enantiomeerinen ylimäärä (e.e.) määritettiin HPLC-analyysillä käyttäen Chiracel OD-kolonnia (Daicel Chemical Industries Ltd; liuotin, heksaani/iso-propanoli = 70/30).
Esimerkki I
25 20 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia liuotettiin 180 ml:aan metyyli-isobutyyliketonia, minkä jälkeen lisättiin 180 ml 50-mM Tris (tris(hydroksi-metyyli)aminometaani)/HCl-puskuria, pH 8. Sen jälkeen, kun oli lisätty 100 mg Candida antarctica -lipaasia (SP 525), pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla 30 automaattisesti 2-N NaOH:n vesiliuoksella. Lämpötila pidettiin 30 °C:ssa. Reaktio-seoksen analyysi 7,5 tunnin hydrolyysin jälkeen paljasti (2R, 3S)-esterin 97 %:n enantiomeerisen ylimäärän.
Esimerkki II
Sen jälkeen, kun oli liuotettu 10 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)gly-sidaattia 75 ml:aan tolueenia ja lisätty 75 ml 50-mM kaliumfosfaattipuskuria, jonka 35 6 102974 pH oli 7, lisättiin 200 mg Candida antrarctica -lipaasia (SP 525). Kolmen tunnin reagoinnin jälkeen 30 °C:ssa pitäen pH vakiona titraamalla 2-N NaOH:lla mitattiin 99 %:n enantiomeerinen ylimäärä.
5 Esimerkki III
Esimerkki II toistettiin pitäen nyt pH vakiona arvossa 8. Kahden tunnin reagoinnin jälkeen mitattiin 97 %:n enantiomeerinen ylimäärä.
10 Esimerkki IV
Esimerkki II toistettiin suorittaen nyt reaktio 50 °C:ssa. Kun hydrolyysiä oli tapahtunut 1 tunnin ajan, mitattiin 97 %:n enantiomeerinen ylimäärä.
15 Esimerkki V
Sekoittaen lisättiin 20 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia 60 ml:aan orgaanista liuotinta, kuten taulukossa 1 esitettiin. Sen jälkeen lisättiin 60 ml 50-mM Tris/HCl-puskuria, pH 8. Sen jälkeen, kun oli lisätty 2 g liikkumatto-20 maksi tehtyä Candida antarctica -lipaasia (SP 435), pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla automaattisesti 2-N NaOH:lla. Reaktio suoritettiin 30 °C:ssa.
Tulokset esitetään taulukossa 1.
25 Taulukko 1
Orgaaninen Aika e.e.
liuotin (min) (%) 30 Metyyli-t-butyylieetteri 250 99 : Etyyliasetaatti 400 93
Sykloheksanoni 500 97
Metyyli-isobutyyliketoni 370 99
Iso-oktaani 500 85 35 3-pentanoni 500 97
Isopropyylieetteri 240 96 7 102974
Esimerkki VI
20 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia liuotettiin 60 ml:aan metyyli-isobutyyliketonia. Tämän jälkeen lisättiin 60 ml 50-mM Tris/HCl-puskuria 5 pH-arvolla 8. Sen jälkeen, kun oli lisätty 4 g liikkumattomaksi tehtyä Candida an-tarctica -lipaasia (SP 435), pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla automaattisesti 2-N NaOHilla. Hydrolyysi suoritettiin 30 °C:ssa.
Viiden tunnin kuluttua reaktio pysäytettiin suodattamalla reaktioseos, jolloin bioka-10 talyytti jäi jäännöksen taakse. Biokatalyytti pestiin 2 x 40 ml.lla metyyli-isobutyyliketonia. Sen jälkeen, kun vesifaasi oli erotettu pois, talteen kerätty orgaaninen faasi pestiin kahdesti 30 ml:lla natriumbisulfiitin 20-prosenttista liuosta ja sitten 2 x 20 ml.lla natriumbikarbonaatin 5-prosenttista liuosta. Orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla ja haihdutettiin. Kiteyttämällä metolissa (MeOH) saatiin 7,5 g (2R,3S)-3-15 (4-metoksifenyyli)glysidaattiesteriä. [a]2°o = -203° (c = 1 MeOH). Sulamispiste 84 -87 °C.
Esimerkki VII
20 Esimerkki VI toistettiin ja esimerkistä VI talteenotettua, liikkumattomaksi tehtyä biokatalyyttiä käytettiin uudelleen samoissa olosuhteissa. Kuuden tunnin hydrolyy-sin jälkeen eristettiin trans-(2R, 3S)-esteriä esimerkissä VI kuvatulla tavalla. Saatiin 7,0 g (2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattiesteriä. [a)20D = -204° (c = 1 MeOH). Sulamispiste 84-87 °C.
25
Esimerkki VIII
Esimerkki VI toistettiin käyttäen nyt hyväksi 2 g Candida antarctica -lipaasia (SP 435). (2R, 3S)-esterin enantiomeerinen ylimäärä mitattuna 6 tunnin hydrolyysin jäl-30 keen oli 99 %.
Esimerkki IX
10 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia liuotettin 60 ml.aan 35 metyyli-t-butyylieetteriä, minkä jälkeen lisättiin 60 ml 50-mM Tris/HCl-puskuria, pH 8. Tämän jälkeen lisättiin 4 g liikkumattomaksi tehtyä Candida antarctica- g 102974 lipaasia (SP 435) ja pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla automaattisesti 2-N NaOH:lla. Hydrolyysi suoritettiin 60 °C:ssa.
Kolmen tunnin hydrolyysin jälkeen (2R, 3S)-esterille mitattiin 90 %:n enantiomee-5 rinen ylimäärä.
Esimerkki X
5 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)-glysidaattia liuotettiin 60 ml:aan 10 iso-oktaania, minkä jälkeen lisättiin 60 ml 50-mM Tris/HCl-puskuria, pH 8. Sen jälkeen, kun oli lisätty 2 g liikkumattomaksi tehtyä Candida antarctica -lipaasia (SP-435), pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla automaattisesti 2-N NaOH:lla. Hydrolyysi suoritettiin 80 °C:ssa.
15 150 minuutin hydrolyysin jälkeen niitattiin 95 %:n enantiomeerinen ylimäärä.
Esimerkki XI
1,5 g raseemista trans-metyyli-3-(4-metoksifenyyli)-glysidaattia liuotettiin 20 60 ml:aan kloroformia, minkä jälkeen lisättiin 60 ml 50-mM Tris/HCl-puskuria, pH
8. Sen jälkeen, kun oli lisätty 4 g liikkumattomaksi tehtyä Candida antarctica -lipaasia (SP 435), pH pidettiin vakiona arvossa 8 titraamalla automaattisesti 2-N NaOH:lla. Hydrolyysi suoritettiin 50 °C:ssa.
25 240 minuutin kuluttua (2R,3S)-esterin enantiomeerinen ylimäärä oli 96 %.

Claims (9)

  1. 9 102974
  2. 1. Menetelmä trans-3-fenyyliglysidihapon optisesti aktiivisen (2R, 3S)-esterin valmistamiseksi, jolla on kaava 5 /(A J )— CH-CH-C-ORi yJ/Y Ä jossa Ri on alkoholista johdettu ryhmä, A on aromaattinen rengas, 10 jossa menetelmässä trans-3-fenyyliglysidihappoesterin kahden enantiomeerin seosta hydrolysoidaan stereoselektiivisesti käyttäen Candida-suvun entsyymiä ja hydroly-soitumaton (2R, 3S)-esteri erotetaan pois reaktioseoksesta, tunnettu siitä, että käytetty entsyymi on peräisin Candida antarctica -lajista.
  3. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hydrolysoitu- maton esteri on (2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)-glysidihapon metyyliesteri.
  4. 3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsy-maattinen hydrolyysi suoritetaan yli 30 °C: n lämpötilassa. 20
  5. 4. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hydrolyysiä käytetään kaksifaasisysteemissä, joka koostuu vedestä ja orgaanisesta liuottimesta, joka ei ole tai on vain vähäisessä määrin liukoinen veteen.
  6. 5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että orgaaninen liuotin on valittu ryhmästä, jonka muodostavat kloroformi, metyyli-isobutyyliketoni, etyyliasetaatti, 3-pentanoni, sykloheksaani, iso-oktaani, isopropyylieetteri, metyyli-t-butyylieetteri, dikloorimetaani, trikloorimetaani, bentseeni, tolueeni ja ksyleeni.
  7. 6. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että (2R, 3S)-3-fenyyliglysidihapon optisesti aktiivista esteriä saadaan yli 98 %:n e.e.-arvolla. :: 7. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 35 että entsyymi on immobilisoitu. 10 102974
  8. 8. Minkä tahansa patenttivaatimuksen l-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hydrolysoitumaton (2R, 3S)-esteri muutetaan vielä bents(oti)atsepiiniksi.
  9. 9. Menetelmä bents(oti)atsepiinien valmistamiseksi, tunnettu siitä, että valmiste-5 taan minkä tahansa patenttivaatimuksen l-7 mukaisesti trans-3-fenyyliglysidihapon optisesti aktiivinen (2R, 3S)-esteri, ja sitten hydrolysoimaton (2R, 3S)-esteri saatetaan paritusreaktioon tiofenolin kanssa ja valinnaisesti alkyloidaan ja/tai asyloidaan.
FI935712A 1992-12-18 1993-12-17 Menetelmä optisesti aktiivisten transglysidihappoestereiden entsyaattiseksi valmistamiseksi FI102974B1 (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL9202208A NL9202208A (nl) 1992-12-18 1992-12-18 Werkwijze voor de enzymatische bereiding van optisch aktieve glycidezure esters.
NL9202208 1992-12-18

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI935712A0 FI935712A0 (fi) 1993-12-17
FI935712L FI935712L (fi) 1994-06-19
FI102974B true FI102974B (fi) 1999-03-31
FI102974B1 FI102974B1 (fi) 1999-03-31

Family

ID=19861657

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI935712A FI102974B1 (fi) 1992-12-18 1993-12-17 Menetelmä optisesti aktiivisten transglysidihappoestereiden entsyaattiseksi valmistamiseksi

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5407828A (fi)
EP (1) EP0602740B1 (fi)
JP (1) JP3781788B2 (fi)
AT (1) ATE176931T1 (fi)
CA (1) CA2111595C (fi)
DE (1) DE69323600T2 (fi)
DK (1) DK0602740T3 (fi)
ES (1) ES2129491T3 (fi)
FI (1) FI102974B1 (fi)
IL (1) IL108029A (fi)
NL (1) NL9202208A (fi)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1249777B (it) * 1990-05-17 1995-03-18 Zambon Spa Processo per la preparazione di intermedi per la sintesi del diltiazem
JP3610600B2 (ja) * 1994-08-22 2005-01-12 チッソ株式会社 光学活性エンド−２−ノルボルネオール類の製造方法
ES2216495T3 (es) 1998-02-17 2004-10-16 G.D. SEARLE & CO. Procedimiento para la resolucion enzimatica de lactamas.
IT1302261B1 (it) * 1998-09-24 2000-09-05 Zambon Spa Processo per la risoluzione cinetica enzimatica di 3-fenilglicidatiper transesterificazione con amminoalcoli
CN101027277A (zh) * 2004-07-23 2007-08-29 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 (2r,3r)－2－羟基－3－氨基－3－芳基－丙酰胺和(2r,3r)－2－羟基－3－氨基－3－芳基－丙酸烷基酯的制备方法
CN107446960A (zh) * 2017-09-30 2017-12-08 湖南理工学院 一种采用生物酶催化立体选择性拆分2,3‑二苯基丙酸对映体的方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE117018T1 (de) * 1986-10-17 1995-01-15 Novo Nordisk As Positionsmässig nicht spezifische lipase von candida-arten; verfahren für ihre herstellung und ihre verwendung.
US5273898A (en) * 1986-10-17 1993-12-28 Noro Nordisk A/S Thermally stable and positionally non-specific lipase isolated from Candida
JP2641935B2 (ja) * 1987-09-28 1997-08-20 ノボ‐ノルディスク アクティーゼルスカブ リパーゼの固定化方法
NL8801311A (nl) * 1988-05-20 1989-12-18 Stamicarbon Fenylglycidaatstereoisomeren, omzettingsprodukten daarvan met 2-nitrothiofenol en de bereiding van diltiazem.
IL91453A0 (en) * 1988-09-02 1990-04-29 Tanabe Seiyaku Co Preparation of optically active 3-phenyl-glycidic acid esters
US6521445B1 (en) * 1988-10-26 2003-02-18 Sepracor, Inc. Process for preparing optically active glycidate esters
US5244803A (en) * 1989-09-13 1993-09-14 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters
FR2672600B1 (fr) * 1991-02-08 1994-10-14 Synthelabo Procede de preparation du (-)-(2r,3s)-2,3-epoxy-3-(4-methoxyphenyl) propionate de methyle.

Also Published As

Publication number Publication date
JP3781788B2 (ja) 2006-05-31
CA2111595A1 (en) 1994-06-19
FI935712A0 (fi) 1993-12-17
FI935712L (fi) 1994-06-19
US5407828A (en) 1995-04-18
JPH06335399A (ja) 1994-12-06
DK0602740T3 (da) 1999-09-27
DE69323600D1 (de) 1999-04-01
IL108029A (en) 1998-09-24
IL108029A0 (en) 1994-04-12
EP0602740A1 (en) 1994-06-22
NL9202208A (nl) 1994-07-18
DE69323600T2 (de) 1999-09-23
ES2129491T3 (es) 1999-06-16
ATE176931T1 (de) 1999-03-15
EP0602740B1 (en) 1999-02-24
CA2111595C (en) 2004-12-14
FI102974B1 (fi) 1999-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0343714B1 (en) Phenylglycidate stereoisomers, conversion products thereof with e.g. 2-nitrothiophenol and preparation of diltiazem
FI102974B (fi) Menetelmä optisesti aktiivisten trans-3-fenyyliglysidihappoestereiden entsymaattiseksi valmistamiseksi
US6346632B1 (en) Process for the preparation of intermediates useful for the synthesis for benzothiazepines
CZ284495B6 (cs) Enancioselektivní způsob výroby S-enanciomerů opticky aktivních kyanhydrinů
JP2693248B2 (ja) 光学活性グリシド酸エステルの製法
WO2014030106A2 (en) Process for preparation of optically active (2r,3s)-3-(4- methoxyphenyl)glycidic acid methyl ester and cis lactam and uses thereof
CA2161849A1 (en) Production of optically active compounds
JPH0576389A (ja) （−）−（２ｒ，３ｓ）−２，３−エポキシ−３−（４−メトキシフエニル）プロピオン酸メチルの製造方法
EP0237983A2 (en) Process for the biotechnological preparation of L (-)-carnitine chloride
US5302528A (en) Process for the enzymatic separation of the optical isomers of alpha-substituted carboxylic acids using esterase from Brevibacterium imperiale
WO2004003001A1 (en) Process for the enzymatic resolution of 1,3-dioxolane-4-carboxylates
US5274300A (en) Enzymatic hydrolysis of glycidate esters in the presence of bisulfite anion
ES2249027T3 (es) Proceso para la resolucion cinetica enzimatica de 3-fenilglicidatos por transesterificacion con aminoalcoholes.
US6153414A (en) Method for racemic biochemical resolution of CIS-and trans-pyprolopiperidine
US5883264A (en) Process for preparing optically active trans-3-phenylglycidamide compounds
SK69793A3 (en) Enzymatic process of separation of racemic delta-valerolactones mixtures
EP2817412B1 (en) Process for resolving cyclopropyl diesters
US5248601A (en) Process for preparing L(-)-carnitine chloride
JP2000072761A (ja) 光学活性グリシッド酸エステル化合物の製法
JPH09299099A (ja) 光学活性トランス−３−フェニルグリシッドアミド類化合物の製法
WO1994013828A1 (en) Chiral arylpropionates and their use
HUP0500622A2 (en) New intermediates and process for producing them
CN1163269A (zh) 制备光学活性反式-3-苯基环氧丙酰胺类化合物的方法
JPH07107994A (ja) 光学活性なα−トコフェロール化合物の製造法
JPH05111392A (ja) 光学活性含硫黄化合物の製造法