DK160818B

DK160818B - N-ring-holdige glycerolderivater, fremgangsmaade til fremstilling deraf, anvendelse deraf til fremstilling af et blodpladeaktiveringsfaktorhaemmende middel samt laegemidler indeholdende en saadan forbindelse

Info

Publication number: DK160818B
Application number: DK514284A
Authority: DK
Inventors: Richard Barner; Kaspar Burri; Jean-Marie Cassal; Paul Hadvary; Georges Hirth; Klaus Mueller
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1983-12-30
Filing date: 1984-10-26
Publication date: 1991-04-22
Also published as: FI82686C; FI82686B; DE3476661D1; EP0147768A2; AU571625B2; IL73920A0; DK200590D0; DK514284D0; ES547020A0; PH21482A; HU195775B; HUT37112A; NO844635L; ES8701138A1; PT79783B; NZ210633A; DK160818C; ES8603374A1; EP0147768A3; EP0147768B1

Description

i

DK 160813B

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte, N-ring-holdige glycerolderivater, en fremgangsmåde til fremstilling deraf samt lægemidler på basis af sådanne glycerolderivater.

5 De omhandlede N-ring-holdige glycerolderivater er forbindelser med den almene formel 1 CH2-CH -CH2 R1 R2 R3 10 hvor R1 betegner o-Ci_g-alkyl, såfremt R2 eller R3 betegner o-C10-26" alkyl, 0-Cio_26"alky1/ NH-C0-0-C9_25-alkyl, 15 NH-CO-C9_25-alkyl, 0-C0-NH-C9_25-alkyl eller 0-co-C9_25-alkyl, ét af symbolerne R2 og R3 betegner O-Ci-g-alkyl, 20 0-C1o-26"alky1' såfremt R1 betegner O-C^-g-alkyl, O-benzyl, NH-CO-o-Ci.g-alkyl, O-CO-NH-C-L^g-alkyl, O-CO-O-C^.g-alkyl eller 25 O-CO-Cj-s-alkyl, og det andet af symbolerne R2 og R3 betegner 0-CO-C2_g-alkylen-N+(Het)Q", 0-C0-0-C2_6-alkylen-N+(Het)Q", 0-C0-NH-C2_6-alkylen-N+(Het)Q“, 30 0-CH2-C2_6-alkylen-N+(Het)Q" eller NH-C0-0-C2_6-alkylen-N+(Het)Q“, 2 hvor

DK 160318 B

-N+(Het) betegner pyridinium, thiazolium eller 3-methyl-imidaz o1ium, 5 og Q“ betegner anionen af en stærk organisk eller uorganisk syre, idet dog højst én af grupperne R1, R2 og R3 er bundet via et N-atom, samt hydrater deraf.

I modsætning til de ovennævnte forbindelser indeholder 10 glycerolderivaterne omtalt i EP-ansøgning nr. 94 586 A2 ingen N-heterocyclisk ring, men i stedet en alkylaminogrup- pe. Endvidere er forbindelserne ifølge opfindelsen overlegne i forhold til denne kendte teknik. Ved forsøg, der blev udført som beskrevet nedenfor på side 8-9 (påvisning 15 af hæmmende virkning på PAF), med den af ovennævnte EP-ansøgning omfattede forbindelse 3-[[(R)-benzyloxy-3-(oc-tadecyloxy) propoxy] carbonyl ] trimethylammoniumchlorid blev fundet en ICsQ-værdi på 9 μΜ.

De i nærværende beskrivelse anvendte udtryk "alkyl" og 20 "alkenyl" betegner ligekædede eller forgrenede, mættede eller monoumættede grupper, fx methyl, ethyl, propyl, isopropyl, 2-propenyl, butyl, isobutyl, hexadecyl, heptade-cyl, octadecyl og octadecenyl, især methyl og octadecyl.

C- --alkylengrupper kan være ligekædede eller forgrenede.

O

25 Eksempler herpå er n-butylen, 2-methylpropylen og især ethylen og propylen.

Eksempler på anioner af stærke organiske eller uorganiske syrer er C1_4-alkylsulfonyloxy, phenylsulfonyloxy, tosyl-oxy, campher-10-sulfonyloxy og Cl , Br , J , C104 , S04 , 30 P04 og N03“.

Forbindelserne med formlen I kan være hydratiserede. Hydra-tiseringen kan foregå under fremstillingen eller ske lidt efter lidt som følge af hygroskopiske egenskaber i en i starten vandfri forbindelse med formlen I.

DK 160818B

3

Forbindelserne med formlen I indeholder mindst ét asymmetrisk carbonatom og kan derfor foreligge som optisk aktive enantiomerer, som diastereomerer eller som blandinger deraf, fx som racemater.

5 Foretrukne forbindelser med formlen I er sådanne, hvor R3 er den N-ring-holdige gruppe.

Foretrukne forbindelser med formlen I er endvidere sådanne, hvor R1 er octadecylcarbamoyloxy, R2 er methoxyformamido, methoxy eller især methoxycarbonyloxy, og/eller hvor R3 er 10 4-(l-pyridiniumchlorid)-n-butyryloxy, 4-(1-pyridiniumio- did)-n-butyryloxy, 4-(3-thiazoliumchlorid)-n-butyryloxy eller især 4-(3-thiazoliumiodid)-n-butyryloxy.

Eksempler på sådanne forbindelser er navnlig 3“[3-[ [ (R) -2- (methoxycarbonyloxy) -3-[ (octadecylcarbamoyl) -15 oxy]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumiodid samt 3-[3-[[(S)—2—[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarbamoyl) oxy]propoxy]carbonylJpropyl]thiazoliumiodid, 3-[3-[[(RS)-2-[(methoxycarbonyl)oxy)-3-[(octadecylcarbamoyl )oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid, 20 1-[3-[[(RS)-2-(1-methoxyformamido)-3-(octadecylcarbamoy loxy ]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumchlorid, l-[3-[[(S)-2-[(methocycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarbamoyl )oxy3 propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumiodid, 1-[3-[[(R)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba-2 5 moy1)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid og 3—[3—[[(RS)-2-methoxy-3-[(octadecylcarbamoyl)oxy]propoxy]-carbonyl]thiazoliumchlorid.

Forbindelserne med formlen I eller hydrater deraf kan ifølge opfindelsen fremstilles ved en fremgangsmåde, hvor 30 man

a) omsætter en forbindelse med den almene formel II

4

DK 160818 B

CH2-CH -CEj

III

R4 R5 R6 5 hvor R4, R5 og R6 har samme betydning som henholdsvis R1, R2 og R3, idet der dog i stedet for gruppen -N+(Het)Q~ forekommer en fraspaltelig enhed, 10 med en amin med formlen N(Het), eller

b) omsætter en forbindelse med den almene formel III

CH2-CH-CH2 III 111 15 R7 R8 r9 hvor R7, R8 og R9 har samme betydning som henholdsvis R3·, R2 og R3, idet der dog i stedet for én af grupperne med betegnelsen R1# R2 eller R3 ikke indeholdende 20 -N(Het)Q optræder en hydroxy- eller en aminogruppe, med en syre med den almene formel

Z1-(A1)n-COOH eller Z2-(A2)p-COOH IV

eller et reaktivt derivat deraf eller med et isocyanat med den almene formel

25 Z^-NCO eller Z2NCO V

eller et imidazolid med den almene formel

/^N /^N

Z1N(H)C(0)Nv^i;jl eller Ζ2Ν(Η)0(0)Ν^^Ι VI

30 hvor

DK 160818 B

s A1 og A2 betegner oxygen eller NH, n og p betegner 1 eller 0, Z1 betegner cg-25-alkyl, Z2 betegner c^g-alkyl eller phenyl, og 5 N(Het) og Q~ har den ovenfor anførte betydning.

Eksempler på i forbindelserne med formlen II værende fraspaltelige enheder er chlor, brom, iod, mesyloxy, phenyl-sulfonyloxy og tosyloxy. Omsætningen af en forbindelse II med en amin N(Het) kan foretages ved en temperatur på op 10 til reaktionsblandingens tilbagesvalingstemperatur, hensigtsmæssigt ved ca. 80°C, eventuelt i et opløsningsmiddel såsom acetonitril, nitromethan eller et aromatisk carbon-hydrid såsom toluen eller benzen.

Eksempler på reaktive derivater af syrerne med formlen IV 15 er syrebromider eller syrechlorider og anhydrider. Omsætningen af en sådan syre eller et af de reaktive derivater deraf med en forbindelse med formlen III kan foretages på i og for sig kendt måde. Et syrechlorid eller syrebromid kan omsættes i et opløsningsmiddel i nærværelse af en base ved 20 en temperatur på ca. 0-80°C med forbindelsen med formlen III. Et anhydrid kan omsættes i nærværelse af en katalysator, fx dimethylaminopyridin, hensigtsmæssigt i et opløsningsmiddel med forbindelsen med formlen III. Som opløsningsmiddel kan der anvendes halogenerede carbonhydrider 25 såsom chloroform eller dichlorethan, og som baser kan der anvendes organiske baser, fx triethylamin, quinolin eller pyridin, eller uorganiske baser, fx alkalimetal- eller jordalkalimetalhydroxider, -carbonater eller -hydrogen-carbonater, fx Na2C03, KHCO3 eller Ca2C03.

30 Omsætningen af en forbindelse med formlen III med et iso-cyanat med formlen V eller med et tilsvarende imidazolid med formlen VI kan foretages i et opløsningsmiddel, fx chloroform, acetone eller dimethylformamid, ved en temperatur på mellem ca. 0 og 100°C, fortrinsvis ved ca. 40-60°C, 35 hensigtsmæssigt i nærværelse af en katalysator, fx en 6

DK 160818 B

Lewis-base, fx triethylamin eller diisopropylethylamin. Reaktionen kan eventuelt også udføres uden tilsætning af opløsningsmiddel.

Forbindelserne med formlen II kan fremstilles ud fra for-5 bindeiser med formlen VIII eller IX, og forbindelserne med formlen III kan fremstilles ud fra forbindelser med formel VII ifølge nedenstående reaktionsskema:

II VII

10 CH2-CH-CH2 CH2-CH-CH2 i4 l5 R6 R10 R20 R30

t IX

CH2-CH-CH2 15 R14 r15 r16

VIII X

CH2-CH-CH2 CH2-CH-CH2 :ill r12 r13 ^ λ17 *18 *19 20 I forbindelserne med formlen VII har symbolerne R10, R20 og R30 samme betydning som symbolerne R1, R2 og R3, idet der dog foreligger en eventuel beskyttet hydroxy- eller amino-gruppe eller en azidogruppe i stedet for de grupper Rlf R2 25 og R3 ikke indeholdende -N+(Het)Q.

11 12 I forbindelserne med formlen VIII har symbolerne R , R og R samme betydning som symbolerne R1, R2 og R3, idet der dog forekommer en eventuelt beskyttet hydroxy- eller

DK 160818B

7 aminogruppe eller en azidogruppe i stedet for grupper 1¾ eller R3 indeholdende -N+(Het)Q.

I forbindelserne med formlen IX betegner ét af symbolerne 14 15 16 R , R og R en eventuelt beskyttet hydroxy- eller 5 aminogruppe eller en azidogruppe, et andet symbol betegner én af grupperne Rlf R2 og R3 ikke indeholdende -N+(Het)Q, og det sidste symbol betegner én af grupperne med betegnelsen r2 eller R3 og indeholdende -N+(Het)Q, hvori der i stedet for -N+(Het)Q- forekommer en fraspaltelig enhed.

10 I forbindelserne med formlen X betegner ét af symbolerne 17 18 19 R , R og R en eventuelt beskyttet hydroxy- eller aminogruppe eller en azidogruppe, et andet symbol betegner en eventuelt beskyttet hydroxygruppe, og det sidste symbol betegner én af grupperne med betegnelsen Rj_, R2 eller R3 15 ikke indeholdende -N+(Het)Q.

Eksempler på beskyttede hydroxy- og aminogrupper er ether-grupper såsom benzyloxy, trityloxy eller 2-tetrahydropyra-nyloxy og succinimid, phthalimid, benzyloxycarbonylamino eller tert.butoxycarbonylamino.

20 Til fremstilling af en forbindelse med formlen II kan man . 13 omsætte en forbindelse med formlen VIII, hvor fx R betegner hydroxy, med et halogenid med formlen Hal-T-ic2-e~ alkylen)-R, hvor R betegner en fraspaltelig enhed, Hal betegner et halogenatom, og T har den ovenfor anførte 25 betydning, i nærværelse af en base, fx pyridin, eller med et isocyanat med formlen 0=C=N-(C2_6~alkylen)-R.

Alternativt kan man omdanne en forbindelse med formlen IX, hvor fx R14 er hydroxy, til den tilsvarende forbindelse med formlen II, hvor R4 er én af grupperne med betegnelsen R1# 30 R2 eller R3 ikke indeholdende -N+(Het)Q, hvilket kan foretages på samme måde som beskrevet ovenfor for omdannelse af en forbindelse III til en forbindelse I. Analogt kan en . 17 19

forbindelse med formlen X, hvor fx R er hydroxy, og R

8

DK 160818 B

er en beskyttet hydroxy- eller aminogruppe, omdannes til den tilsvarende forbindelse med formlen VIII, hvor betegner én af grupperne med betegnelsen Rlf R2 eller R3 ikke indeholdende -N+(Het)Q.

5 En i en forbindelse med formlen VIII værende azidogruppe eller beskyttet hydroxy- eller aminogruppe, fx R , kan på i og for sig kendt måde omdannes til en fri hydroxy- eller aminogruppe. En benzylgruppe kan fraspaltes ved hydrogeno-lyse, fx over palladium, en tritylgruppe ved hjælp af 10 trifluoreddikesyre eller fortyndet saltsyre og en 2-tetra-hydropyranylgruppe ved hjælp af fortyndet saltsyre. En azidogruppe kan med et complext hydrid, fx lithiumalumi-niumhydrid, eller ved hjælp af H2/Pd-C omdannes til en aminogruppe. Analogt kan en i en forbindelse med formlen 15 VII, IX eller X værende azidogruppe eller beskyttet hydroxy- eller aminogruppe omdannes til en fri hydroxy- eller aminogruppe. På denne måde omdannes en forbindelse med formlen VII, hvor fx R10 er en beskyttet hydroxy- eller aminogruppe, til den tilsvarende forbindelse med formlen 20 III, hvor R7 er hydroxy.

Til fremstilling af en forbindelse med formlen IX, hvor fx 16 R er én af grupperne med betegnelsen R2 eller R3 og indeholdende -N+(Het)Q. i hvilken der forekommer en fraspaltelig enhed i stedet for -N+(Het)Q~, kan man behandle . . 19 25 den tilsvarende forbindelse med formlen X, hvor R er hydroxy, på samme måde som beskrevet ovenfor for omdannelse af en forbindelse VIII til en forbindelse med formlen II.

Omdannelsen af en forbindelse med formlen IX til en forbindelse med formlen VII kan foretages på samme måde som 30 beskrevet for omdannelse af en forbindelse II til en forbindelse I.

Forbindelserne med formlerne II, III og VII er hidtil ukendte.

DK 160818B

9

Forbindelserne med formlen I og hydrater deraf hæmmer blodpladeaktiveringsfaktoren (PAF) og kan anvendes til bekæmpelse eller forebyggelse af sygdomme såsom thrombose, apopleksi, hjerteinfarkt, angina pectoris, højt blodtryk 5 eller af allergi fremkaldt bronchialastma samt som betæn-delseshæmmere og som antirheumatika.

Den hæmmende virkning på PAF kan påvises på følgende måde:

Blodpladerigt plasma (PRP) blev fremstillet ved centrifugering af 1/10 volumen 90 millimol trinatriumcitratholdigt 10 kaninblod. Aggregationen af blodpladerne blev ved 37°C

under omrøring målt ved hjælp af et aggregometer. 2 minutter efter tilsætning af teststoffet til PRP blev blodplade-aggregationen udløst med en submaksimal dosis PAF (4 nanometer) . Den i nedenstående tabel angivne IC5Q-værdi (/mol) 15 svarer til den koncentration af teststoffet, som sænker med PAF udløste aggregation af blodpladerne til halvdelen.

Produkt ifølge eksempel: 1 3 7a 7b 10 11 12 15 16 20 IC50 (jumol) 1,6 3 2 1,6 3 0,6 2 3 1,5

Produkt ifølge eksempel: 19a 20b 21a 21b 21d 21e 21f 24 26 25 IC50 (/anol) 1,3 0,25 0,15 0,2 0,2 0,04 0,06 0,15 0,4

Som ovenfor nævnt udgør farmaceutiske præparater, der indeholder en forbindelse med formlen I eller et hydrat deraf, ligeledes et aspekt af den foreliggende opfindelse.

30 Et yderligere aspekt af opfindelsen angår anvendelse af én eller flere forbindelser med formlen I eller et hydrat deraf til fremstilling af et middel til hæmning af blodpladeaktiveringsfaktoren (PAF).

10

DK 160818 B

Lægemidlerne kan administreres enteralt, fx oralt i form af tabletter, overtrukne tabletter, dragéer, hårde og bløde gelatinekapsler, opløsninger, emulsioner eller suspensioner, eller rektalt, fx i form af suppositorier, eller som 5 spraymidler. Administrationen kan dog også foregå patenteralt, fx i form af injektionsopløsninger.

Til fremstilling af tabletter, overtrukne tabletter, dragéer og hårde gelatinekapsler kan aktivstoffet blandes med farmaceutisk inerte, uorganiske eller organiske excipien-10 ser. Som sådanne excipienser kan der til tabletter, dragéer og hårde gelatinekapsler fx anvendes lactose, majsstivelse eller derivater deraf, talkum, stearinsyre eller salte deraf. Til bløde gelatinekapsler kan der som excipienser fx anvendes vegetabilske olier, voksarter, fedtstoffer, 15 halvfaste og flydende polyoler; alt afhængig af aktivstoffets beskaffenhed er der dog ved bløde gelatinekapsler ikke behov for excipienser. Til fremstilling af opløsninger og syrupper kan der som excipienser fx anvendes vand, polyoler, saccharose, invertsukker og glucose, til injektionsop-20 løsninger kan der fx anvendes vand, alkoholer, polyoler, glycerol og vegetabilske olier, og til suppositorier kan der fx anvendes naturlige eller hærdede olier, voksarter, fedtstoffer og halvflydende eller flydende polyoler.

De farmaceutiske præparater kan derudover også indeholde 25 konserveringsmidler, opløsningsformidlere, stabilisatorer, befugtningsmidler, emulgatorer, sødestoffer, farvestoffer, aromatiseringsmidler, salte til ændring af det osmotiske tryk, puffere, overtræksmidler eller antioxidanter.

Doseringen af aktivstoffet kan varieres inden for vide 30 grænser og skal naturligvis i hvert enkelt tilfælde tilpasses de individuelle omstændigheder. Generelt skulle det til oral administration være passende med en dosis på ca.

0,1-20 mg/kg, fortrinsvis på ca. 0,5-4 mg/kg, pr. dag til 11

DK 160818 B

voksne, idet den således angivne øvre grænse dog også kan overskrides, hvis dette skulle vise sig nødvendigt.

Opfindelsen belyses nærmere ved nedenstående eksempler: EKSEMPEL 1 5 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) Til en til 0eC afkølet opløsning af 0,16 ml (1,35 milli-mol) 4-chlorsmørsyrechlorid i 1 ml chloroform dryppes en opløsning af 0,5 g (1,15 millimol) (S)-2-0-benzyl-l-Q“ octadecylglycerol og 0,16 ml (1,15 millimol) triethylamin i 10 2 ml chloroform. Reaktionsblandingen omrøres ved stuetem peratur, fortyndes med 5 ml chloroform og vaskes først med 5 ml IN NaOH og derefter tre gange med hver gang 10 ml vand. Den organiske fase tørres og inddampes. Remanensen chromatograferes på silicagel under eluering med hexan-15 ether (19:1). Der fås (R)-2-0-benzyl-l-0-(4-chlorbutyryl)-3-O-octadecylglycerol i form af en olieagtig remanens.

b) Til en opløsning af 0,4 g (0,74 millimol) (R)-2-0-ben-zyl-l-0-(4-chlorbutyryl)-3-O-octadecylglycerol i 20 ml iseddike sættes 0,120 g palladiumoxid og hydrogen. Kataly- 20 satoren fjernes ved sugefiltrering, og filtratet tørres under reduceret tryk. Der fås (R)-1-0-(4-chlorbutyryl)-3-O-octadecylglycerol , smeltepunkt 48“C.

c) Til en opløsning af 0,33 g (0,735 millimol) (R)-1-0-(4-chlorbutyryl)-3-O-octadecylglycerol i 10 ml dichlorethan 25 sættes 10 ml (168 millimol) methylisocyanat ved 80°C.

Opløsningen inddampes, og remanensen chromatograferes på silicagel under eluering med ether. Der fås (R)-1-0-(4-chlorbutyryl)-2-0-(methylcarbamoyl)-3-O-octadecylglycerol, smeltepunkt 61-62°C (sønderdeling).

B. Fremstilling af produktet 12

DK 16081 8 B

En opløsning af 0,2 g (0,395 millimol) (R)-1-0-(4-chlorbu-tyryl) -2-0- (methylcarbamoyl) -3-O-octadecylglycerol i 10 ml pyridin opvarmes til 80°C i 16 timer. Opløsningen inddam-5 pes, og remanensen behandles ved azeotrop destillation med toluen. Remanensen omkrystalliseres af ether. Der fås l-[3-[[(R)-2-[(methylcarbamoyl)oxy]-3-(octadecyloxy)propoxy]-carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 5 3-6 0 ° C (sønderdeling).

10 EKSEMPEL 2 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) Til en opløsning af 0,5 g (1,5 millimol) (S)-2-0-benzyl- 1-O-octadecylglycerol i 25 ml dichlormethan sættes 0,3 ml pyridin, og der afkøles til 0°C. Til opløsningen sættes 0,2 15 ml (1,99 millimol) chlormyresyre-2-bromethylester, der omrøres ved stuetemperatur, tilsættes 10 ml vand og syrnes med IN HC1 til pH 3. Den organiske fase vaskes vaskes med vand, tørres og inddampes. Remanensen chromatograferes på silicagel under eluering med ether-n-hexan (1:1). Der fås 20 (R)-2-0-benzyl-l-[(2-bromethoxy)carbonyl]-3-O-octadecylgly- cerol i form af en olie.

b) Analogt med det i eksempel lA.b) beskrevne fås ud fra (R) -2-O-benzyl-l-[ (2-bromethoxy) carbonyl] -3-O-octadecylgly-cerol (R) -1-[ (2-bromethoxy) carbonyl]-3-O-octadecylglycerol, 25 smeltepunkt 64-65°C troleumsether).

c) Til en opløsning af 0,26 g (0,52 millimol) (R)-l-[(2-bromethoxy)carbonyl]-3-O-octadecylglycerol i 5 ml dich-lorethan sættes en opløsning af 1 ml (10,5 millimol) eddi-kesyreanhydrid og 0,050 g (0,45 millimol) N,N-dimethylami- 30 nopyridin. Til reaktionsblandingen sættes mættet natrium-hydrogencarbonatopløsning, og der ekstraheres med dichlor- 13

DK 160818 B

methan. Den organiske fase vaskes med vand, tørres og inddampes. Ved chromatografi på silicagel under eluering med n-hexan-ether (1:1) fås (R)-2-O-acetyl-l-O-(2-bromethoxy)-3-O-octadecylglycerol i form af en olie.

5 B. Fremstilling af produktet

En opløsning af 0,37 g (0,688 millimol) (R)-2-O-acetyl-l-O-(2-bromethoxy)-3-0-octadecylglycerol i 10 ml pyridin opvarmes til 80°C i 3 timer. Opløsningen inddampes, og remanensen behandles ved azeotrop destillation med toluen.

10 Remanensen omkrystalliseres af acetone-ether. Der fås i-[2-[[[(R)-2-0-acetyl-3-(octadecyloxy)propoxy]carbonyl]oxy]et-hyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 55-60°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 3 A. Fremstilling af udgangsmaterialet 15 a) På med eksempel lA.c) analog måde omdannes (R)-l-O- octadecyl-3-O-tritylglycerol til (R)-2-0-(methylcarbamoyl)- l-O-octadecyl-3-O-tritylglycerol i form af en olie.

b) Til en opløsning af 0,57 g (0,91 millimol) (R)-2-0-(methylcarbamoyl) -l-O-octadecyl-3-O-tritylglycerol i 15 ml 20 dichlormethan sættes 0,5 ml trifluoreddikesyre. Opløsningen vaskes med vand og med natriumhydrogencarbonat, tørres og inddampes. Remanensen omkrystalliseres af dichlormethan-n-hexan. Der fås (S)-2-0-(methylcarbamoyl)-1-O-octadecylgly-cerol, smeltepunkt 68-69°C.

25 c) På med eksempel 2A.a) analog måde omdannes (S)-2-0-(methylcarbamoyl)-1-O-octadecylglycerol til (R)-l-0-[(2-bromethoxy)carbonyl]-2-0-(methylcarbamoyl)-3-0-octadecyl-glycerol, smeltepunkt 62-65°C.

DK 160818 B

B. Fremstilling af produktet 14

En opløsning af 0,15 g (0,27 millimol) (R)-1-0-[(2-bromet-hoxy)carbonyl]-2-0-(methylcarbamoyl)-3-0-octadecylglycerol i 5 ml pyridin opvarmes til 60°C i 20 timer. Opløsningen 5 inddampes, og remanensen behandles ved azeotrop destillation med toluen. Remanensen omkrystalliseres af acetone.

Der fås 1—[2—[[[(R)-2-[(methylcarbamoyl)oxy]-3-(octadecy-loxy) propoxy] carbonyl] oxy] ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 94°C (sønderdeling).

10 EKSEMPEL 4 På med eksempel 3 analog måde fås under anvendelse af thiazol i stedet for pyridin 3-[2-[[[(R)-2-[(methylcarbamoyl ) oxy] -3 - (octadecyloxy) propoxy] carbonyl ] oxy ] ethyl ] thia-zolium-bromid, smeltepunkt 75°C (sønderdeling).

15 EKSEMPEL 5 A. Fremstilling af udgangsmaterialet

Til en opløsning af 0,17 g (0,474 millimol) (S)-2-O-methyl- 1-0-octadecylglycerol i 10 ml dichlorethan sættes 1 ml (11,63 millimol) 2-chlorethylisocyanat, og der opvarmes til 20 80°C i 24 timer. Opløsningen inddampes, og remanensen chromatograferes på silicagel. Efter eluering med dich-lormethan-ether (9:1) fås (R)-1-0-[(2-chlorethyl)carbamoyl ]-2-0-methyl-3-0-octadecylglycerol i form af en olie.

B. Fremstilling af produktet 25 Til en opløsning af 0,035 g (0,075 millimol) (R)-l-0-[(2-chlorethyl)carbamoyl]-2-0-methyl-3-0-octadecylglycerol sættes 5 ml pyridin, og der opvarmes til 80°C i 3 dage. Opløsningen inddampes, og remanensen behandles ved azeotrop destillation med toluen. Remanensen omkrystalliseres af 30 acetone. Der fås l-[2-[l-[(R)-2-methoxy-3-(octadecyloxy)- 15

DK 160818 B

propoxy]formamido]ethyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 65°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 6 A. Fremstilling af udgangsmaterialet 5 På med eksempel 2A.a) analog måde omdannes (S)-2-O-methyl- 1- O-octadecylglycerol til (R) -1-0-[(2-bromethoxy)carbonyl]- 2- 0-methyl-3-0-octadecylglycerol i form af en olie.

B. Fremstilling af produktet På med eksempel 2B. analog måde omdannes (R)-1-0-[(2-bro-10 methoxy)carbonyl]-2-0-methy1-3-O-octadecylglycerol til 1-[2-[ [ [ (R)-2-methoxy-3-(octadecyloxy)propoxy] carbonyl] oxy-]ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 53°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 7 På med eksempel 5 og 6 analog måde fremstilles der ud fra 15 (RS)-2-0-methyl-l-0-octadecylcarbamoylglycerol henholdsvis a) l-[2-[l-[(RS)-2-methoxy-3-(octadecylcarbamoyloxy)propoxy] formamido]ethyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 59-60°C (ethylacetat), og b) l-[2-[ [ [ (RS) -2-methoxy-3-[ (octadecylcarbamoyl)oxy]pro-20 poxy]carbonyl]oxy]ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 85- 8 60 C (ethylacetat).

A. Fremstilling af udgangsmaterialet 16

DK 160818 B

EKSEMPEL 8

Til en opløsning af 0,3 g (0,745 millimol) (S)-2-0-(met-hoxycarbonyl)-1-O-octadecylglycerol i 15 ml dichlorethan 5 sættes 2 ml (23,36 millimol) 2-chlorethylisocyanat, og der opvarmes til 80°C i 24 timer. Opløsningen inddampes, og remanensen omkrystalliseres af acetone-ether. Der fås (R)- 1-0-[(2-chlorethyl)carbamoyl]-2-0-(methoxycarbonyl)-3-0-octadecylglycerol, smeltepunkt 77-78°C.

10 B. Fremstilling af produktet

En opløsning af 0,07 g (0,137 millimol) (R)-1-0-[(2-chlorethyl) carbamoyl]-2-0-(methoxycarbonyl)-3-0-octadecylgly-cerol i 10 ml pyridin opvarmes til 80°C i 3 dage. Opløsningen inddampes, og remanensen omkrystalliseres af aceto-15 ne-n-hexan. Der fås l-[2-[l-[ (R)-2-[ (methoxycarbonyl)oxy]- 3- (octadecyloxy) propoxy] formamido] ethyl ]pyridiniumchlor id, smeltepunkt 83°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 9 På med eksempel 8B. analog måde fås under anvendelse af 20 thiazol i stedet for pyridin 3-[2-[l-[(R)-2-[(methoxycarbonyl) oxy]-3-(octadecyloxy)propoxy]formamido]ethyl]thiazo-liumchlorid, smeltepunkt 72° C.

EKSEMPEL 10 A. Fremstilling af udgangsmaterialet 25 På med eksempel 2A.a) analog måde fås ud fra (S)-2-0-(methoxycarbonyl) -1-0-octadecylglycerol (R)-1-0-[(2-bromet- 17

DK 160818 B

hoxy) carbonyl] -2-0- (methoxycarbonyl) -3-O-octadecylglycerol i form af en olie.

B. Fremstilling af produktet På med eksempel 6B. analog måde fås ud fra (R)-l-0-[(2-5 bromethoxy)carbonyl]-2-0-(methoxycarbonyl)-3-O-octadecyl-glycerol 1—[2—[[(R)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-(octadecy-loxy)propoxy]carbonyl]oxy]ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 84-85°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 11 10 På med eksempel 10B. analog måde fås ud fra (R)-l-0-[(2-bromethoxy) carbonyl] -2-0- (methoxycarbonyl) -3-0- (octadecyl-carbamoyl)glycerol 1— [2—[[[(R)—2—[(methoxycarbonyl)oxy]-3-(octadecylcarbamoy1)oxy]propoxy]carbonyl]oxy]ethyl]pyri-diniumbromid, smeltepunkt 54°C (sønderdeling). Udgangs-15 materialet kan fremstilles analogt med eksempel 10A.

EKSEMPEL 12 På med eksempel 10B. analog måde fås under anvendelse af thiazol i stedet for pyridin 3—[2—[[[(R)-2-[(methoxycarbonyl) oxy]-3-(octadecyloxy)propoxy]carbonyl]oxy]ethyl]thia-20 zoliumbromid, smeltepunkt 147°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 13 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) På med eksempel 5A. analog måde fås ud fra (S)-2-0-benzyl-l-O-octadecylglycerol (R)-2-0-benzyl-l-0-[(2-chlor-25 ethyl)carbamoyl]-3-O-octadecylglycerol i form af en olie.

18

DK 160818 B

b) På med eksempel lA.b) analog måde fås ud fra (R)-2-0-benzyl-l-0-[ (2-chlorethyl) carbamoyl] -3-O-octadecylglycerol (R)-1-[(2-chlorethyl)carbamoyl]-3-O-octadecylglycerol, smeltepunkt 70°C.

5 c) På med eksempel lA.c) analog måde fås ud fra (R)-l-[(2-chlorethyl)carbamoyl]-3-O-octadecylglycerol (R)-1-0-[(2-chlorethyl)carbamoyl]-2-0-(methylcarbamoyl)-3-O-octadecyl-glycerol, smeltepunkt 91-92°C.

B. Fremstilling af produktet 10 På med eksempel 8B. analog måde fås ud fra (R)-l-0-[(2- chlorethyl) carbamoyl] -2-0- (methylcarbamoyl) -3-O-octadecylglycerol 1—[2—[1—[(R)-(2-methylcarbamoyl)-3-(octadecyloxy)-propoxy]formamido]ethyl]pyridiniumchlorid, MS:M+ = 550.

EKSEMPEL 14 15 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) Til en opløsning af 7,75 g (10,5 millimol) (RS)-l-O-octadecyl-2-0-tosyl-3-0-tritylglycerol i 75 ml tørt dimet-hylformamid blev sat 2 g natriumazid (30,8 millimol). Suspensionen blev omrørt i 3 timer ved 100°C under ude- 20 lukkelse af fugtighed. Efter filtrering af det faste stof blev opløsningsmidlet afdestilleret og remanensen chromato-graferet på silicagel med toluen-pyridin (99:1 volumenforhold). Efter krystallisation af n-hexan fik man 4,05 g (RS) -l-O-octadecyl-2 -deoxy-2 -az ido-3 -0-tr ity lglycerol 25 (63,3% af det teoretiske), smeltepunkt 58-59°C.

b) En opløsning af 3,6 g (5,88 millimol) (RS)-1-0-octade-cyl-2-deoxy-2-azido-3-0-tritylglycerol i 20 ml tør ether blev under udelukkelse af fugtighed dryppet til en suspension af 130 mg LiAlH4 (3,4 millimol) i 50 ml tør ether.

30 Efter endt N2-udvikling blev der omrørt i 10 minutter ved 19

DK 160818 B

stuetemperatur. Derefter blev der tilsat isklumper, og reaktionsblandingen blev omrørt i 30 minutter. Etherfasen blev fraskilt. Den faste fase blev vasket med ether, og de samlede etherfaser blev tørret. Efter afdestillation af 5 opløsningsmidlet blev remanensen chromatograferet på en silicagelsøjle med ether-methanol (volumenforhold 9:1).

Efter krystallisation af n-hexan fik man 3,1 g (RS)-l-O-octadecyl-2-deoxy-2-amino-3-0-tritylglycerol (90,1% af det teoretiske), smeltepunkt 56-57°C.

10 c) Til en til 95°C opvarmet opløsning af 4,65 g (7,94 millimol) (RS)-l-0-octadecyl-2-deoxy-2-amino-3-0-tritylgly-cerol i 100 ml dioxan blev sat 5 ml 25%'s vandigt HC1, og reaktionsblandingen blev holdt i 30 minutter ved 95°C.

Efter afkøling fik man 2,75 g (udbytte 87,4%) (RS)-l-O-15 octadecyl-2-deoxy-2-aminoglycerol-hydrochlorid, smeltepunkt 110-111°C.

d) Til en opløsning af 2,75 g (7,24 millimol) (RS)-l-O-octadecyl-2-deoxy-2-aminoglycerol-hydrochlorid i 30 ml methanol blev der under omrøring tildryppet 1,4 g KOH (25 20 millimol) i 5 ml vand. Derefter blev methanolet afdestil-leret. Til remanensen blev sat 10 ml vand og 100 ml di-chlormethan. Til blandingen blev der under omrøring dryppet 0,89 g (9,4 millimol) chlormyresyre-methylester. Efter 1 1/2 times omrøring ved stuetemperatur blev faserne skilt i 25 en skilletragt. Den organiske fase blev vasket med vand og tørret, og efter afdestillation af opløsningsmidlet og overskydende reagens blev remanensen krystalliseret af n-hexan. Man fik 2,90 g (RS)-l-0-octadecyl-2-deoxy-2-(l-methoxyformamido)glycerol (udbytte 100%), smeltepunkt 63-30 64° C.

e) Til en opløsning af 0,4 g (1 millimol) (RS)-1-O-octade-cyl-2-deoxy-2-(l-methoxyformamido)glycerol i 5 ml chloroform og 0,25 ml pyridin blev der i isbad dryppet 0,2 ml (1,4 millimol) chlormyresyre-2-chlorethylester i 2 ml 35 chloroform under udelukkelse af fugtighed. Reaktionsbian-

DK 160818B

20 dingen blev omrørt i 2 timer ved stuetemperatur. Efter oparbejdning af reaktionsblandingen blev der filtreret over silicagel med ether og produktet krystalliseret af n-hexan.

Man fik 0,475 g (RS)-1-0-[(2-chlorethoxy)carbonyl]-2-deoxy-5 2-(1-methoxyformamido) -3-0-octadecylglycerol (93,5% af det teoretiske), smeltepunkt 58-59°C.

B. Fremstilling af produktet, l-[2-[[[(RS)-2-(l-methoxyfor-mamido)-3-octadecyloxy]propoxy]carbonyloxy]ethyl]pyri-diniumchlorid 10 0,3 g (0,59 millimol) (RS) -1-0-[ (2-chlorethoxy) carbonyl]-2- deoxy-2- (1-methoxyformamido) -3-O-octadecylglycerol blev omsat med 5 ml tørt pyridin i 24 timer ved 80°C. Produktet blev chromatograferet på silicagel med chloroform-methanol (7:3) og derefter med chloroform-methanol-vand (60:35:5).

15 Det i methanol opløste produkt blev derefter underkastet perkolering gennem 10 ml af en anionbytter på Cl -form.

Man fik 125 mg af en beigefarvet forbindelse (36% af det teoretiske), smeltepunkt 152-154°C.

EKSEMPEL 15 20 A. Fremstilling af udgangsmaterialet På med eksempel 14A.e) analog måde blev (RS)-1-O-octadecyl- 2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)glycerol med 3-chlorpropio-nylchlorid omdannet til (RS)-l-0-(3-chlorpropionyl)-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3-0-octadecylglycerol, smelte-25 punkt 65-66°C.

B. Fremstilling af produktet På med eksempel 14B. analog måde blev (RS)-1-0-(3-chlorpro-pionyl)-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3-0-octadecylglycerol omdannet til 1-[2-[[(RS)-2-(1-methoxyformamido)-3- 21

DK 160818 B

(octadecyloxy)propoxy]carbonyl]ethyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 190-192°C.

EKSEMPEL 16 På med eksempel 15 analog måde blev (RS)-l-0-octadecyl-2-5 deoxy-2-(1-methoxyformamido)glycerol med 4-chlorbutyrylch-lorid omdannet til (RS)-l-0-octadecyl-2-deoxy-2-(l-methoxy-formamido)-3-0-(4-chlorbutyryl)glycerol, smeltepunkt 73-74°C, og denne forbindelse blev omdannet til l-[3-[[[(RS)- 2-(1-methoxyformamido)-3-(octadecyloxy)propoxy]carbonyl]-10 oxy]propyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 200°C (sønderdeling) .

EKSEMPEL 17 A. Fremstilling af udgangsmaterialet 0,75 g (1,87 millimol) (RS)-l-0-octadecyl-2-deoxy-2-(1-15 methoxyformamido)glycerol blev omsat i 2 timer ved 100°C med 1 ml 2-chlorethylisocyanat under udelukkelse af fugtighed. Efter endt reaktion blev overskydende reagens afdestilleret og remanensen krystalliseret af n-hexan. Man fik 0,88 g (92,8% af det teoeretiske) (RS)-1-0-[(2-chlorethyl)-20 carbamoyl]-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3-0-octadecylgly-cerol, smeltepunkt 73-74°C.

B. Fremstilling af produktet På med eksempel 14B. analog måde blev (RS)-1-0-[(2-chlorethyl) carbamoyl]-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3-0-octade-25 cylglycerol omdannet til 1-[2-[1-[(RS)-2-(1-methoxyformamido) -3-(octadecyloxy)propoxy]formamido]ethyl]pyridinium-chlorid, smeltepunkt 195-197°c.

22

DK 160818 B

EKSEMPEL 18 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) På med eksempel 14A.a) analog måde blev (RS)-l-O-oc-tadecyl-3-0-tosylglycerol omdannet til (RS)-1-0-octadecyl- 5 3-deoxy-3-azidoglycerolf smeltepunkt 42°C (n-hexan).

b) En opløsning af 5 g (RS)-l-O-octadecyl-3-deoxy-3-az idog-lycerol i 75 ml tetrahydrofuran blev hydrogeneret med 2f5 g 10%'s palladium/kul under atmosfæretryk ved stuetemperatur. Efter 3 timers forløb blev katalysatoren frafiltreret, 10 opløsningsmidlet afdestilleret og produktet (RS)-l-O-oc-tadecy1-3-deoxy-3-aminoglycerol krystalliseret af chloro-form-hexan. Man fik 4,1 g hvide krystaller (88,2% af det teoretiske), smeltepunkt 68°C.

c) Til en opløsning af 1,72 g (5 millimol) (RS)-l-O-oc- 15 tadecyl-3-deoxy-3-aminoglycerol i 20 ml dichlormethan blev sat 2 ml af en vandig opløsning af 0,5 g KOH. Under omrøring af 2-fasesystemet blev der tildryppet 0,7 ml chlor-myresyre-2-bromethylester (svarer til 1,035 g, 5,52 millimol) . Efter 1 times omrøring ved stuetemperatur blev faser-20 ne adskilt. Den organiske fase blev vasket med vand og tørret, opløsningsmidlet og overskydende reagens blev afdestilleret, og remanensen blev krystalliseret af n-hexan. Man fik 2,1 g (84,8% af det teoretiske) (RS)-l-O-octadecyl-3 -deoxy-3 - [ 1- (2-brom) ethoxyf ormamido] glycerol, 25 smeltepunkt 72-74°C.

d) 0,5 g (1,01 millimol) (RS)-l-0-octadecyl-3-deoxy-3-[l-(2-brom) ethoxyf ormamido] glycerol blev omsat med 2 ml methy-lisocyanat i nærværelse af 0,05 ml diisopropylethylamin ved 40°C (tilbagesvaling) i 2 timer. Derefter blev overskydende 30 reagens afdestilleret og remanensen krystalliseret af n-hexan. Man fik 0,49 g (87,9% af det teoeretiske) (RS)-l-O-octadecyl-2-0- (methylcarbamoyl) -3-deoxy-3- [1- (2-brom) ethoxyf ormamido] glycerol, smeltepunkt 91-92°C.

23

DK 160818 B

B. Fremstilling af produktet

Til en opløsning af 0,3 g (0,60 millimol) (RS)-1-O-octade-cyl-2-O- (methylcarbamoyl) -3-deoxy-3- [ 1- (2-brom) ethoxyforma-mido]glycerol i 1 ml nitromethan blev sat 2 ml tørt pyri-5 din. Blandingen fik lov at reagere i 24 timer ved 80°C. Oparbejdningen og rensningen blev foretaget analogt med eksempel 14B., bortset fra, at ionbytteren var på Br -form.

Man fik 0,1 g (26,1% af det teoretiske) l-[2-[[(RS)-2-[ (methylcarbamoyl)oxy]-3-(octadecyloxy)propyl]carbamoyloxy-10 ]ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 195°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 19

Der blev fremstillet a) analogt med eksempel 1 3-methyl-l-[3-[[(R)-[(methylcarbamoyl) oxy] -3- (octadecyloxy) propoxy] carbonyl]propylimi- 15 dazoliumchlorid i form af en voks, MS:M+ = 552; b) analogt med eksempel 3 l-[2-[[((S)-[(methylcarbonyl)-oxy] -3- (octadecyloxy) propoxy ] carbonyl] oxy ] ethyl ] pyridinium-bromid, smeltepunkt 96°C (sønderdeling); c) analogt med eksempel 6 1—[2—[[[3-methoxy-2(R)-(octadecy-20 loxy)propoxy]carbonyl]oxy]ethyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 47“C (af acetone) (sønderdeling); d) analogt med eksempel 5 og 16 l-[3-[[(R)-2-(benzyloxy)-3-(octadecyloxy)propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid i form af en voks, MS:M+ = 582; og 25 e) analogt med eksempel 8 1-[2-[1-[(R)-2-[(methoxycarbo-ny1)oxy]-1-[(octadecyloxy)methyl]ethoxy]formamido]ethyl]-pyridiniumchlorid, smeltepunkt 57 ° C.

DK 160818B

24 EKSEMPEL 20

Analogt med eksempel 7b og eksempel 15 blev der fremstillet a) l-[3-[ [ (RS) -2-methoxy-3-0-[ (octadecylcarbamoyl) oxy]pro-poxy] carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid i form af en farve- 5 løs voks, MS:M+ = 549; og b) 3—[3—[[(RS)-2-methoxy-3-[(octadecylcarbamoyl)oxy]pro-poxy]carbonyl]propyl]thiazoliumchlorid, smeltepunkt 60-62°C (af ethylacetat).

EKSEMPEL 21 10 Analogt med eksempel 11 og eksempel 16 blev der fremstillet a) 1- [3- [ [ (RS) -2-[ (methoxycarbonyl) oxy] -3- [ (octadecylcarbamoyl ) oxy ] propoxy ] carbonyl ] propyl ] pyr idiniumchlorid, smeltepunkt 51° C; b) l-[3-[[(R)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba-15 moy1)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid, smeltepunkt 55° C; c) 1-[3-[[(S)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarbamoyl) oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid, MS:M+ = 593; 20 d) l-[3-[[(S)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarbamoyl) oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumiodid, MS:M+ = 593; e) 3-[3-[[(R)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarbamoyl) oxy]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumiodid, smelte-25 punkt 64°C (sønderdeling); 25

DK 160818 B

f) 3-[3-[ [ (S)-2-[ (methoxycarbonyl)oxy]-3-[ (octadecylcarba-moyl)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumiodid, smeltepunkt 71° C.

EKSEMPEL 22 5 Analogt med de ovennævnte eksempler blev der fremstillet: a) 1~[4-[2-[(methylcarbamoyl)oxy]-3-(octadecyloxy)propoxy]-butyl]pyridiniumbromid, smeltepunkt 193“C; og b) 1-[3-[[(RS)-2-[(methylcarbonyl)oxy]-3-(octadecanoyloxy)-propoxy]carbonyljpropyl]pyridiniumchlorid i form af en 10 voks, MS:M+ = 564.

EKSEMPEL 23 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) 15,35 g (36,15 millimol) (RS)-l-O-benzyl-3-O-tritylgly-cerol (Helv. Chim. Acta 65, 1982, s. 1059) blev opløst i 75 15 ml chloroform. 10 ml pyridin blev tilsat efterfulgt af 10,5 g tosylchlorid. Efter 24 timer ved stuetemperatur blev chloroformet afdestilleret. Remanensen blev optaget i 50 ml pyridin, og der blev tilsat 10 ml vand og derefter 10 g KHCO3. Efter afdestillation af opløsningsmidlet blev rema-20 nensen optaget i toluen, den faste del blev fraskilt, hvorefter den organiske fase blev udrystet med vand, tørret og inddampet. Produktet krystalliserer af smelten ved afkøling, udbytte 95%, smeltepunkt 98-100°C.

b) Analogt med eksempel 14A.a)-14A.d) blev det vundne (RS)-25 l-0-benzyl-2-0-tosyl-3-0-tritylglycerol omdannet til (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-az ido-3-0-tritylglycerol, 26

DK 160818 B

(RS) -l-0-benzyl-2-deoxy-2-amino-3-0-tritylglycerol, smeltepunkt 67-69° C, (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-aminoglycerol-hydrochlorid, smeltepunkt 148-149°C, og endelig til 5 (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)glycerol.

c) Til 0,45 g (1,88 millimol) (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-(l-methoxyformamido)glycerol blev sat 0,6 g octadecylisocya-nat, og opløsningen blev opvarmet til 90°C i 1 time. Den blev chromatograferet på silicagel med en blanding af 10 toluen og ethylacetat (4:1). Efter krystallisation af n-hexan fik man 0,65 g (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-(l-methoxy-formamido)-3-0-(octadecylcarbamoyl)glycerol, smeltepunkt 65-67° C.

d) 4,9 g (RS)-l-0-benzyl-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3- 15 0-(octadecylcarbamoyl)glycerol opløst i 75 ml tetrahydro- furan blev hydrogeneret ved let overtryk af hydrogen i nærværelse af 1 g 10%'s palladium/kul. Man fik 4,05 g (RS)- 2-deoxy-2- (1-methoxyf ormamido) -1-0 - octadecy lcar bamoy lg ly-cerol, smeltepunkt 86°C (af n-hexan).

20 e) Til en opløsning af 2 g (4,5 millimol) (RS)-2-deoxy-2-(1-methoxyf ormamido)-l-O-octadecylcarbamoylglycerol i 20 ml chloroform og 0,7 ml triethylamin i isbad blev der dryppet 0,75 ml 4-chlorsmørsyrechlorid (6,68 millimol) i 5 ml chloroform under udelukkelse af fugtighed. Reaktionsblan-25 dingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Efter oparbejdning blev reaktionsproduktet filtreret på silicagel med dichlormethan/ether (1:1). Man fik 2,3 g (RS)-l- 0-(4-chlorbutyryl)-2-deoxy-2-(1-methoxyformamido)-3-0-(octadecylcarbamoyl)glycerol efter krystallisation af n-30 hexan, smeltepunkt 68-70°C.

27

DK 160818 B

B. Fremstilling af produktet

Analogt med eksempel 14B. blev der ud fra 0,4 g af det under A.e) vundne chlorid fremstillet 0,2 g l-[3-[[(RS)-2-(1-methoxyformamido)-3-(octadecylcarbamoyloxy)propoxy]-5 carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid (44% af det teoretiske), smeltepunkt 200°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 24

Analogt med eksempel 23B. fik man 3—[3—[[(RS)-2-(1-methoxy-f ormamido)-3-(octadecylcarbamoyloxy)propoxy]carbonyl]pro-10 pyljthiazoliumchlorid, smeltepunkt 180°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 25 A. Fremstilling af udgangsmaterialet a) Analogt med eksempel 14A.a) og b) blev (RS)-l-O-tosyl-3- O-benzylglycerol (Helv. Chim. Acta 65. 1982, s. 1059) via 15 (RS)-l-deoxy-l-azido-3-0-benzylglycerol omdannet til (RS)-l-deoxy-l-amino-3-0-benzylglycerol, smeltepunkt 76-77° C.

b) 0,33 g (RS)-l-deoxy-l-amino-3-O-benzylglycerol blev opløst i 20 ml dichlormethan og tilsat 0,8 g stearoylch- 20 lorid. Blandingen blev omrørt i nærværelse af en vandig KOH-opløsning. Det af den organiske fase vundne (RS)-1-deoxy-l-octadecanamido-3-0-benzylglycerol blev chromatogra-feret på silicagel med ether. Efter krystallisation af n-hexan fik man 0,5 g krystaller, smeltepunkt 72-73°C.

25 c) 0,45 g (1 millimol) (RS)-l-deoxy-l-octadecanamido-3-0-benzylglycerol blev acetyleret med 0,2 g eddikesyreanhydrid og 20 mg 4-dimethylaminopyridin som katalysator. Efter 28

DK 160818 B

oparbejdning, filtrering på silicagel med hexan/ether (1:1) og krystallisation i n-hexan fik man 0,49 g (RS)-l-deoxy-1-octadecanamido-2-O-acety1-3-O-benzylglycerol, smeltepunkt 53-55° C.

5 d) Analogt med eksempel 23A.d) og e) blev denne benzylether via (RS) -l-deoxy-l-octadecanamido-2-O-acetylglycerol, smeltepunkt 66-68°C (af n-hexan), omdannet til (RS)-2-O-acetyl-l-O-(4-chlorbutyryl)-3-deoxy-3-octadecana-10 midoglycerol, smeltepunkt 55-56°C.

B. Fremstilling af produktet

Analogt med eksempel 14B. fik man ud fra 0,3 g (RS)-2-O-acetyl-l-O- (4-chlorbutyryl) -3-deoxy-3-octadecanamidogly-cerol 0,16 g 1—[3—[[(RS)-2-acetoxy-3-octadecanamidopro-15 poxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid (46% af det teoere-tiske), smeltepunkt 220°C (sønderdeling).

EKSEMPEL 26 A. Fremstilling af udgangsforbindelsen a) Til en opløsning af 0,9 g (5 millimol) (RS)-l-deoxy-l-20 amino-3-O-benzylglycerol i 20 ml dichlormethan blev sat en vandig KOH-opløsning. Til blandingen blev der under omrøring dryppet en opløsning af 0,7 g chlormyresyre-octade-cylester i 10 ml dichlormethan. Efter 1 times omrøring ved stuetemperatur blev der oparbejdet, og den vundne forbin-25 delse blev chromatograferet på silicagel med n-hexan/ether (1:1). Efter krystallisation af n-hexan fik man 1,6 g krystaller, smeltepunkt 58-59°C.

DK 160818B

29 b) 2,2 g (RS)-1-deoxy-l-[l-(octadecyloxy)formamido]-3-0-benzylglycerol blev med chlormyresyre-methylester acyleret til dannelse af 2,15 g (RS)-1-deoxy-l-[1-(octadecyloxy)for-mamido]-2-0-methoxycarbonyl-3-0-benzylglycerol, smeltepunkt 5 52-54°C (af n-hexan).

c) Analogt med eksempel 23A.d) og e) blev der ud fra den vundne benzylether via (RS)-l-deoxy-l-[l-(octadecyloxy)formamido]-2-O-methoxycar-bonylglycerol, smeltepunkt 56-57°C (af n-hexan), fremstil-10 let (RS) -1-deoxy-l- [ 1- (octadecyloxy) f ormamido] -2-0-methoxycar-bonyl-3-O-(4-chlorbutyryl)glycerol.

B. Fremstilling af produktet

Analogt med eksempel 14B. blev 0,4 g (RS)-1-deoxy-l-[1-15 (octadecyloxy) f ormamido] -2-0-methoxycarbonyl-3-0- (4-chlor butyryl) glycerol omdannet til 0,15 g l-[3-[[(RS)-2-[(met-hoxycarbonyl)oxy]-3-[1-(octadecyloxy)formamido]propoxy]-carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid (31,8% af det teoretiske ), smeltepunkt 1680 C.

30

DK 160818 B

EKSEMPEL A

En forbindelse med formlen I kan som nedenfor anført anvendes som aktivstof til fremstilling af tabletter: 1 tablet indeholder 5 -

Aktivstof 200 mg

Mikrokrystallinsk cellulose 155 mg

Majsstivelse 25 mg

Talkum . 25 mg 10 Hydroxyprcpyliiethylællulose 20 mg 425 mg

Aktivstoffet blandes med halvdelen af den mikrokrystallin-ske cellulose og granuleres med en 10%'s opløsning af 15 hydroxypropylmethylcellulose i en blanding af isopropanol og methylenchlorid. Granulatet tørres, sigtes og blandes med resten af hjælpestofferne. Derefter presses det på en presse til biplane tabletter med 12 mm's diameter og forsynet med krydsbrudkærv.

20 EKSEMPEL B

En forbindelse med formlen I kan som nedenfor anført anvendes som aktivstof til fremstilling af kapsler: 1 kapsel indeholder 25 Aktivstof 100,0 mg

Majsstivelse 20,0 mg

Lactose 95,0 mg

Talkum 4,5 mg

Magnesiumstearat 0,5 mg 30 _ 220,0 mg

Claims

5 PATENTKRAV
1. N-ring-holdige glycerolderivater med den almene formel I CHp-CH - CHp I I R1 R2 R3 10 hvor R* betegner O-Ci-g-alkyl, såfremt R2 eller R3 betegner θ-α10_26” alkyl, 0^10-26-31^1' NH-C0-0-C9_25~alkyl,
15 NH-C0-C9.25-alkyl,
0-C0-NH-C9_25-alkyl eller
0-C0-C9_25*-alkyl, ét af symbolerne R2 og R3 betegner O-Ci.g-alkyl,
20 O-C10_26”alkyl, såfremt R1 betegner 0-C1-6-alkyl, O-benzyl, NH-CO-O-C^-alkyl, O-CO-NH-C^.g-alkyl, O-CO-O-Ci.s-alkyl eller 25 O-CO-Cj^.s-alkyl, og det andet af symbolerne R2 og R3 betegner
0-C0-C2-6“alkylen-N+(Het)Q”,
0-C0-0-C2-6-alkylen-N+(Het)Q",
0-C0-NH-C2_6-alkylen-N+(Het)Q“, 30 0-CH2-C2-6“alkylen-N+(Het)Q·" eller DK 160818 B NH-C0-0-C2-6“alkYlen-N+(Het)Q", hvor -N+(Het) betegner pyridinium, thiazolium eller 5 3-methyl-imidazolium, og Q” betegner anionen af en stærk organisk eller uorganisk syre, idet dog højst én af grupperne R1, R2 og R2 er bundet via et N-atom, samt hydrater deraf.
2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R3 er den N-ring-holdige gruppe.
3. Forbindelser ifølge krav l eller 2, kendetegnet ved, at R1 er octadecylcarbamoyloxy.
4. Forbindelser ifølge krav 1, 2 eller 3, kendetegnet ved, at R2 er methoxy eller methoxy-carbonyloxy.
5. Forbindelser ifølge krav 1, 2, 3 eller 4 kendetegnet ved, at R3 er 4-(l-pyridinium- 20 chlorid)-n-butyryloxy, 4-(1-pyridiniumiodid)-n-butyryloxy, 4-(3-thiazoliumchlorid)-n-butyryloxy eller 4-(3-thiazoliu-miodid)-n-butyryloxy.
6. Forbindelser ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5, kendetegnet ved, at R1 er octadecylcarbamoyloxy;
25 R2 er methoxy eller især methoxycarbonyloxy; og R3 er 4-(l-pyridiniumchlorid)-n-butyryloxy, 4-(1-pyridiniumiodid)-n-butyryloxy, 4-(3-thiazoliumchlorid)-n-butyryloxy eller især 4-(3-thiazoliumiodid)-n-butyryloxy. DK 160818 B
7. Forbindelser ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6, kendetegnet ved, at R1 er octadecylcarbamoyloxy, R2 er methoxycarbonyloxy, og R3 er 4-(3-thiazoliumiodid)-n-butyryloxy. 5 8. 3-[3-[[(R)-2-(Methoxycarbonyloxy)-3-[(octadecylcarba- moyl)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumiodid.
9. Forbindelse, kendetegnet ved, at den er valgt fra gruppen bestående af 10 3—[3—[[(S)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba- moy1)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumiodid, X— C 3—[[(RS)—2—[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba-moyl)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid, 3”[3-[[(RS)-2-(l-methoxyformamido)-3-(octadecylcarbamoy-15 loxy)propoxy]carbonyl]propyl]thiazoliumchlorid, 1-[3-[[(S)-2-[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba-moy1)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumiodid, l-[3-[[(R)—2—[(methoxycarbonyl)oxy]-3-[(octadecylcarba-moyl)oxy]propoxy]carbonyl]propyl]pyridiniumchlorid og 20 3-[3-[[(RS)-2-methoxy-3-[(octadecylcarbamoyl)oxy]propoxy]- carbonyl]propyl]thiazoliumchlorid.
10. Forbindelser ifølge et hvilket som helst af kravene 1-9 til anvendelse som terapeutisk aktivstof.
11. Forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1-9 25 til anvendelse som hæmmer af blodpladeaktiveringsfaktoren (PAF).
12. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man 30 a) omsætter en glycerolforbindelse med den almene formel II 5 DK 160818 B CH2-CH CH2 I II : l4 R5 R6 hvor R4, R5 og R6 har samme betydning som henholdsvis R1, R2 og R3, idet der dog i stedet for gruppen -N+(Het)Q~ forekommer en fraspaltelig enhed, 10 med en amin med formlen N(Het), eller b) omsætter en forbindelse med den almene formel III CH2-CH-CH2 I III
15 R7 R8 R9 hvor R7, R8 og R9 har samme betydning som henholdsvis R1, R2 og R3, idet der dog i stedet for én af grupperne med betegnelsen R^, R2 eller R3 ikke indeholdende 20 -N(Het)Q optræder en hydroxy- eller en aminogruppe, med en syre med den almene formel Z^-CA^On-COOH eller Z2-(A2)p-COOH IV eller et reaktivt derivat deraf eller med et isocyanat med den almene formel
25 Z^O eller Z2NC0 V eller et imidazolid med den almene formel /S /\ ΖΊΝ(Η)0(0)Ν^^| eller Z2N(H)C(0)N^J VI hvor A1 og A2 betegner oxygen eller NH, 30. og p betegner 1 eller 0, DK 160818B Z1 betegner Cg_2g”alkyl, Z2 betegner C1_5-alkyl eller phenyl, og N(Het) og Q~ har den ovenfor anførte betydning.
13. Farmaceutisk præparat, 5 kendetegnet ved, at det indeholder en forbindelse ifølge krav 1.
14. Anvendelse af forbindelser ifølge et hvilket som helst af kravene 1-9 til fremstilling af et middel til hæmning af blodpladeaktiveringsfaktoren (PAF).