DE703400C

DE703400C - Verfahren zur Herstellung von Adenosinpolyphosphorsaeuren oder ihren Salzen

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Publication number: DE703400C
Application number: DE1939H0160350
Authority: DE
Original assignee: DR GEORG HENNING CHEM PHARM WERK GmbH
Current assignee: DR GEORG HENNING CHEM PHARM WERK GmbH
Priority date: 1939-08-05
Filing date: 1939-08-05
Publication date: 1941-03-07

Description

Verfahren zur Herstellung von Adenosinpolyphosphorsäuren oder ihren Salzen

Aus der Arbeit von N e e d h a m und v a n

I I e y n i n g e n in der Zeitschrift »Nature«.

London, Bd. 135 (1)35)e S.585, 586, ist es

bekannt, daß durch Zugabe von Phospho-

glycc#rinsäure und Adenylsäure zu

welcher Allcali enthält, Adenosintri-

hhosphorsäure gebildet wird. Das Arbeiten

mit Muskelextrakt ist jedoch in der Praxis zu

umständlich und kostspielig, zumal die hier-

hei erzielten Ausbeuten nicht befriedigen.

Aus der Arbeit von O s t c r n und T e r -

szakotve@ in Hoppe-Sevlers Zeitschrift für

ph@:ioloriischc Chemie, Bd. 250 (t937),

5. 155 bis 157, ist es weiterhin bekannt, (1a13

Adcnosin in Gegenwart von anorganischem

I'ltosphat unter der Einwirkung von Ilefe

teeben Adcn0siti-5-mottopltosphorsäurc auch

.\<lcnosintriphosphors#iurc bildet.

Gemäß der vorlie-enden 1'srfitlcttttt" gelingt

cs nun, statt des erwähnten Gemisches prak-

tisch nur Adenosintripltosphorsäure und -poly-

pltosphorsäuren in 75- bis loot?.oI;;cr Reitt-

licit frei von Adenosinntonophosphorsättre ztt

;et#:itinet@. . Dies ist deswegen von besonderer

Iledeututlg, weil nach neueren physiologischen

Untersuchungen gerade die Adenosintriphos-

pltorsäure und -polvphosphorsäuren für die

Beeinflussung des Kreislaufs von viel grü13e-

rer Bedeutung sind als die Adenosinmono-

phosphorsäure.

Als Ausgangsmaterial kann bei dem neuen

`'erfahren ebenso wie bei der bekannten Ar-

beitsweise Adenosin als solches oder irgend-

eine Verbindung verwendet werden, die sich,

wie z. B. Iietettucleittsäure, ixt Adenosin spalten

läl3t. Als Phosphat können ehensowohl an-

organische Phospltatpulierlösungen als auch

die bekannten Zuckerphosphorsäurcester, wie

z. B. die sog. Neuberg-, Robison-, Cori-, Ktnb-

den-, Ilardcn- und Young-Ester, verwendet

werden, ebenso auch I'hosphoglyccrinsäiurc ;

att<@Ii Mischun-en von organischem und an-

orgattiscltcnt Phosphat sind verwendbar. Diese

Ausgangsstolle »erden nun durch Einwirkung

von friscltcr IIcfe, Trockenhefe bzw. Ilefc-

cxtrakt oder IIefeplasrnolysat in Adenosintri-

bzw. -polyphosphorsäure übergeführt. Dahui

ist es von besonderer Bedeutung, (1a13 die Hefe

in vorge-orenetn Zustande, und zwar zweck-

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Beispiel 3 i kg Bierhefe wird mit 1 1 i o %iger G1 ucoselösung verrührt; nach Beginn der stürmischen Gärung werden 5 1 i o,'oiger Adenosinlösung, i5o g fructosediphosphorsaures Natrium in 3 1 Wasser oder die entsprechende Menge phosphoglycerinsautes Natrium und 3oo ccm Toluol zugesetzt. Es wird gerührt und die Temperatur auf 37° gehalten. Nach 30 Minuten wird nochmals i kg Bierhefe, die mit 11 1oofoiger Glucoselösung angegoren ist, zugegeben. W eiterverarbeitung wie in Beispiel 1. Beispiel i oo g Hefenucleinsäure werden bis zur vollständigen Spaltung mit Emulsin behandelt. Man entfernt das Guanosin, kocht das Reaktionsgemisch kurz auf, klärt die Lösung und unterwirft sie, wie im Beispiel i angegeben, der Gärung. Nach Beendigung der Phosphorylierung wird schnell kurz aufgekocht und die gebildete Adenosinpolyphosphorsäure in der Lösung durch Ermittlung der leicht abspaltbaren Phosphorsäure bestimmt. Will man die Adenosinpolyphosphorsäure isolieren, so fällt man sie als Bariumsalz, zentrifugiert ab und wäscht mit destilliertem Wasser aus. Zur weiteren Reinigung löst man in verdünnter Salpetersäure, klärt die Lösung u:-.d neutralisiert bis zu einem pH-Wert von 6. Die ausfallenden Bariumsalze werden, wie in Beispiel i angegeben,' weiterbehandelt. Die Bildung der Adenosinpolyphosphorsäure ist praktisch quantitativ. Die gleichzeitige Anwesenheit von Cytidin und Uridin beeinflußt die Phosphorylierung nicht. Beispiel 5 Man spaltet ioo g Hefenucleinsäure mit Pyridin, vertreibt das Pyridin durch Destillation mit Wasserdampf und verarbeitet die verbleibende Lösung, wie in Beispiel q. angegeben.

Claims

PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zum Herstellen von Adenosinpolyphosphorsäuren oder ihren Salzen durch Anlagerung von Phosphorsäureresten an Adenosin unter der Einwirkung von Hefe, gegebenenfalls in Gej#enwart von vergärbaren Zuckern, dadurch gekennzeichnet, daß man die Hefe in bereits vorgegorenem Zustande, zweckmäßig portions,-weise, mit der Adenosin und Phosphorsäurereste enthaltenden Reaktionsmischung zusammenbringt, das Gemisch nach erfolgter Phosphorylierung rasch zum Kochen bringt, rasch wieder abkühlt und die nach dem Versetzen der Lösung mit einer Erdalkaliverbindung erhaltenen Salze abtrennt. z. Verfahren nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, daß man die nach Anspruch i erhaltenen Salze der Adenosinpolyphosphorsäuren mit Mineralsäure zersetzt und aus der erhaltenen Lösung die Adenosinpolyphosphorsäuren mit Hilfe von Alkohol fällt.