DE60026540T2

DE60026540T2 - Mutilin-derivate und ihre anwendung als antibakterielle mittel

Info

Publication number: DE60026540T2
Application number: DE60026540T
Authority: DE
Inventors: Gerd Ascher; Heinz Berner; Johannes Hildebrandt
Original assignee: Nabriva Therapeutics Forschungs GmbH
Current assignee: Nabriva Therapeutics AG
Priority date: 1999-07-30
Filing date: 2000-07-28
Publication date: 2007-01-18
Anticipated expiration: 2020-07-29
Also published as: DE60045321D1; HK1047087B; US6784193B1; GB9918037D0; PL352940A1; EP1666466A3; MY133731A; DE60026540D1; ECSP003591A; EP1666466B1; TR200103764T2; RU2276135C2; BRPI0017527B1; BR0012880A; TWI281468B; US20040235910A1; EP1198454B1; AU757799B2; JP4711580B2; HU229483B1

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf Verbindungen mit beispielsweise einer antimikrobiellen Wirksamkeit, wie einer antibakteriellen Wirksamkeit, und betrifft spezieller Mutiline.
Mutiline können Verbindungen der folgenden Formel sein
worin
R₁ eine Gruppe der folgenden Formel ist
worin
X steht für Schwefel, Sauerstoff, NR₁₀, worin R₁₀ für Wasserstoff oder Alkyl steht, oder für N⁺(R'₁₀)₂, worin
R'₁₀ für Alkyl in Gegenwart eines geeigneten Anions steht,
R₉ für Amino, Alkyl, Alkoxy, Aryl, Heterocyclyl oder Mercapto steht und, falls X Sauerstoff ist, R₉ zusätzlich für Wasserstoff steht,
R₄ für Wasserstoff oder Alkyl steht,
R₅ für Wasserstoff oder Alkyl steht,
R₃ und R'₃ für Wasserstoff oder Deuterium stehen,
R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff oder Deuterium stehen,
R und R₂ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein nicht aromatisches Heterocyclen bilden, und R₁ für eine Gruppe der folgenden Formel steht
worin X und R₉ wie oben definiert sind.
R₁ steht für eine Gruppe der Formel -C(=X)R₉, beispielsweise eine Gruppe der Formel -C(=X)R₉.
X steht für Schwefel, Sauerstoff, NR₁₀, worin R₁₀ für Wasserstoff oder Alkyl steht, beispielsweise für (C₁-C₄)-Alkyl, oder für N⁺(R'₁₀)₂, worin R'₁₀ für Alkyl steht, beispielsweise für (C₁-C₄)-Alkyl, in Gegenwart eines geeigneten Anions, vorzugsweise Sauerstoff.
R₉ steht für Amino, Alkyl, Alkoxy, beispielsweise (C₁-C₄)-Alkoxy, für Aryl, Heterocyclyl oder Mercapto, beispielsweise für eine Gruppe der Formel -S-R₁₂, worin R₁₂ für Alkyl, beispielsweise für (C₁-C₄)-Alkyl, steht und, falls X für Sauerstoff steht, R₉ dann zusätzlich für Wasserstoff steht.
Vorzugsweise steht R₉ für Alkyl, beispielsweise für (C₁-C₈)-Alkyl, wie (C₁-C₄)-Alkyl, beispielsweise für unsubstituiertes oder auch substituiertes Alkyl, das beispielsweise substituiert ist durch in der Chemie der Pleuromutiline herkömmliche Gruppen, wie durch eine oder mehrere Aminogruppen, Halogene, wie Fluor, beispielsweise Trifluoralkyl, wie Trifluormethyl, Guanidinyl, Hydroxy, Heterocyclyl, beispielsweise unter Einschluss eines 5- oder 6-gliedrigen Rings mit ein oder zwei Stickstoffatomen, wie Imidazolyl. Steht R₉ für durch Amino substituiertes Alkyl, dann ist R₉ vorzugsweise der Rest einer Aminosäure, beispielsweise unter Einschluss von Valin, Histidin, Arginin, Pipecolinsäure, wobei dieser Rest beispielsweise den Teil einer Aminosäure einschließt, der nach Abspaltung der Carboxylgruppe übrig bleibt.
Vorzugsweise steht R₉ für Heterocyclyl, beispielsweise für 5- oder 6-gliedriges Heterocyclyl, das beispielsweise ein oder zwei Heteroatome enthält, die beispielsweise aus Stickstoff ausgewählt sind, wobei dieses Heterocyclyl beispielsweise mit einem weiteren Ring(system) kondensiert ist, der (oder das) beispielsweise Phenyl einschließt, vorzugsweise Piperidinyl, Pyrrolidinyl, Pyrrolyl, Pyridinyl, Benzimidazolyl, Chinolinyl oder Triazolyl, beispielsweise unsubstituiertes Heterocyclyl oder substituiertes Heterocyclyl, das beispielsweise substituiert ist durch ein oder mehrere Alkylgruppen, wie Methyl, durch Hydroxy, Amino, Nitro oder eine Gruppe COOR₁₃, worin R₁₃ für Alkyl, beispielsweise für (C₁-C₄)-Alkyl, steht, wie tert.-Butyl, das beispielsweise und vorzugsweise substituiert ist durch ein oder mehrere Alkyl-, Hydroxy-, Amino- oder Nitrogruppen.
Steht R₉ für Heterocyclyl, beispielsweise für Piperidinyl, dann können Wasserstoffatome des Heterocyclylrings, beispielsweise im Piperidinyl, wie das an das Stickstoffatom des Ringsystems gebundene Wasserstoffatom, auch durch Deuterium ersetzt sein.
Amino in der Bedeutung von R₉ beinhaltet ua eine freie Amingruppe, ein Alkylamin, ein Dialkylamin und ein durch -COOR₁₁ substituiertes Amin, worin R₁₁ für Alkyl, vorzugsweise für (C₁-C₄)-Alkyl, steht.
Steht R₁ für eine Gruppe der Formel -C(=X)-R₉, dann können R und R₂ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein nicht aromatisches Heterocyclen bilden, das beispielsweise 5 oder 6 Ringglieder und ein Heteroatom enthält, wie Stickstoff, vorzugsweise unter Einschluss von Piperidinyl und Pyrrolidinyl, wobei Piperidin bevorzugt ist. Dieses Heterocyclen ist vorzugsweise an die Schwefelgruppe und an die -N(R₁)-Gruppe in einer Verbindung der Formel I über Heterocylenkohlenstoffatome gebunden.
Ohne eine andere Definition beinhaltet hierin Heterocyclyl oder Heterocyclen einen 5- oder 6-gliedrigen Ring mit 1 bis 4 Heteroatomen, die ausgewählt sind aus S, O und N, beispielsweise aus N, wobei diese Ringe optional mit einem weiteren Ring (Ringsystem) kondensiert sind, beispielsweise mit einem Phenylring, oder beispielsweise mit einem Heterocyclylring, unter Einschluss von beispielsweise Chinolin oder Purin. Heterocyclyl oder Heterocyclen schließen unsubstituiertes oder substituiertes Heterocyclyl oder Heterocyclen ein, welche beispielsweise durch in der Chemie der Pleuromutiline herkömmliche Gruppen substituiert sind, beispielsweise unter Einschluss von Alkyl, Hydroxy, Amino, Nitro oder eine Gruppe COOR₁₃, worin R₁₃ für Alkyl steht. Alkyl beinhaltet auch (C₁-C₈)-Alkyl, wie (C₁-C₄)-Alkyl. Aryl schließt auch Phenyl ein.
Mutiline können auch Verbindungen der Formel I sein, worin
R₁ für eine Gruppe der folgenden Formel steht
worin
X steht für Schwefel, Sauerstoff, NR₁₀, worin R₁₀ für Wasserstoff oder Alkyl steht, oder für N⁺(R'₁₀)₂, worin
R'₁₀ für Alkyl in Gegenwart eines geeigneten Anions, wie Cl^–, steht,
R₉ für Amino, Alkyl, Alkoxy, Heterocyclyl oder Mercapto steht und, falls X Sauerstoff ist, R₉ zusätzlich für Wasserstoff steht,
R₄ für Wasserstoff oder Alkyl steht,
R₅ für Wasserstoff steht,
R₃ und R'₃ für Wasserstoff stehen,
R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff oder Deuterium stehen,
R und R₂ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein nicht aromatisches Heterocyclen bilden und
R₁ für eine Gruppe der folgenden Formel steht
worin X für Sauerstoff steht und R₉ für Alkyl steht.
Ein Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine Verbindung der Formel Iss
worin R_3ss, R_4ss und R_5ss für Wasserstoff oder Deuterium stehen.
Eine Verbindung der Formel I beinhaltet auch eine Verbindung der Formel Iss.
Zu einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung gehört eine Verbindung der Formel Iss in Form eines Salzes oder in Form eines Salzes und in Form eines Solvats oder in Form eines Solvats.
Ein wiederum weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung bezieht sich auf
14-O-(1-(2-Aminoisobutylcarbonyl)piperidin-3-ylsulfanylacetyl)mutilin, beispielsweise in freier Form oder in Form eines Salzes, beispielsweise mit Chlorwasserstoffsäure, und
14-O-(1-(2-Aminoisobutylcarbonyl)piperidin-3-ylsulfanylacetyl)-2,2,4-trideuteromutilin, beispielsweise in freier Form oder in Form eines Salzes, beispielsweise mit Chlorwasserstoffsäure oder mit Deuterochlorwasserstoffsäure.
Ein Salz einer Verbindung der Formel I beinhaltet ein pharmazeutisch annehmbares Salz, beispielsweise einschließlich eines Metallsalzes oder eines Säureadditionssalzes. Zu Metallsalzen gehören beispielsweise Alkalisalze oder Erdalkalisalze. Zu Säureadditionssalzen gehören beispielsweise Salze einer Verbindung der Formel I mit einer Säure, wie Hydrogenfumarsäure, Fumarsäure, Naphthalin-1,5-sulfonsäure, Chlorwasserstoffsäure, Chlordeuterosäure, wobei Chlorwasserstoffsäure und Chlordeuterosäure bevorzugt sind.
Eine Verbindung der Formel I in freier Form kann in eine entsprechende Verbindung in Form eines Salzes umgewandelt werden und umgekehrt. Eine Verbindung der Formel I in freier Form oder in Form eines Salzes und in Form eines Solvats kann in die entsprechende Verbindung in freier Form oder in Form eines Salzes in nicht solvatisierter Form umgewandelt werden und umgekehrt.
Eine Verbindung der Formel I unter Einschluss einer Verbindung der Formel Iss kann in Form von Isomeren und Gemischen hiervon vorliegen, sodass eine Verbindung der Formel I beispielsweise asymmetrische Kohlenstoffatome enthalten und daher in Form von Diastereoisomeren oder Gemischen hiervon vorliegen kann. Isomere oder diastereoisomere Gemische können geeignetenfalls aufgetrennt werden, beispielsweise unter Anwendung herkömmlicher Verfahren, wodurch man zu reinen Isomeren oder Diastereoisomeren gelangt. Zur vorliegenden Erfindung gehören daher auch Verbindungen der Formel I in irgendeiner isomeren und diastereoisomeren Form und in Form irgendeines isomeren und diastereoisomeren Gemisches.
Vorzugsweise ist die Konfiguration im Mutilinring einer Verbindung der Formel I gleich wie bei natürlich produziertem Mutilin.
Mutiline können vorzugsweise hergestellt werden durch ein Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel I gemäß obiger Definition, das die folgenden Stufen umfasst, nämlich
Entweder

a1. Umsetzung einer Verbindung der Formel II
worin R₃, R'₃, R₄ und R₅ wie bei der Formel I definiert sind und R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff stehen, mit einer Verbindung der Formel N(R)(R₁)-R₂-SH, worin R, R₁ und R₂ wie in der Formel I definiert sind, unter Erhalt einer Verbindung der Formel I, worin R, R₁, R₂, R₃, R'₃, R₄ und R₅ wie in der Formel I definiert sind und R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff stehen, und gewünschtenfalls
b1. Einführung von Deuterium in eine Verbindung der gemäß Stufe a1. erhaltenen Formel I unter Bildung einer Verbindung der Formel I, worin R₆, R₇ und R₈ für Deuterium stehen und R, R₁, R₂, R₃, R'₃, R₄ und R₅ wie in der Formel I definiert sind, oder
a2. Umsetzung einer Verbindung der Formel II gemäß Definition in der Stufe a1. mit Thioharnstoff und anschließende Reduktion unter Erhalt einer Verbindung der Formel III
worin R₃, R'₃, R₄ und R₅ wie in der Formel I definiert sind und R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff stehen,
b2. Umsetzung einer Verbindung der Formel III gemäß Definition in der Stufe a2. mit einem nicht aromatischen heterocyclischen Ring, der eine Gruppe der Formel -C(=X)R₉ trägt, worin X und R₉ wie in der Formel I definiert sind, in Form eines reaktiven Derivats, beispielsweise eines Mesylats oder eines Tosylats, unter Erhalt einer Verbindung der Formel I, worin R₂, R₃, R'₃, R₄ und R₅ wie in der Formel I definiert sind und R₆, R₇ und R₈ für Wasserstoff stehen,
c. Einführung von Deuterium in eine Verbindung der Formel I gemäß obiger Definition in der Stufe unter Erhalt einer Verbindung der Formel I, worin R, R₁, R₂, R₃, R'₃, R₄, R₅, R₉ und X wie in der Formel I definiert sind und R₆, R₇ und R₈ für Deuterium stehen.

Eine Verbindung der Formel I, die beispielsweise eine Verbindung der Formel Iss einschließt, kann in zweckdienlicher Weise hergestellt werden, beispielsweise nach einem herkömmlichen Verfahren oder nach einem hierin beschriebenen Verfahren. Jede Verbindung der Formel Iss kann beispielsweise in Analogie zu einem Verfahren für die Herstellung einer Verbindung der Formel I hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel II sind entweder bekannt oder lassen sich nach herkömmlichen Verfahren herstellen.
Ein Austausch von Wasserstoffatomen bei einer Verbindung der Formel I, die beispielsweise in Form eines Salzes vorliegt, durch Deuteriumatome kann in zweckdienlicher Weise durchgeführt werden, beispielsweise unter Anwendung eines herkömmlichen Verfahrens oder eines hierin beschriebenen Verfahrens, beispielsweise durch Behandlung einer Verbindung der Formel I, beispielsweise einschließlich einer Verbindung der Formel Iss, mit Chlordeuterosäure (DCl) in einem geeigneten Lösemittel (System) und Isolierung einer Verbindung der Formel I, beispielsweise in Form eines Salzes, worin Wasserstoffatome, beispielsweise in den Bedeutungen von R₆, R₇ und R₈, durch Deuteriumatome ersetzt sind.
Die Verbindungen der Formel I, beispielsweise unter Einschluss einer Verbindung der Formel Iss, welche hierin als die erfindungsgemäßen Wirkstoffe bezeichnet werden, verfügen über eine pharmazeutische Wirksamkeit und eignen sich daher als Pharmazeutika. So zeigen die erfindungsgemäßen Wirkstoffe beispielsweise eine antimikrobielle Wirksamkeit, wie eine antibakterielle Wirksamkeit, eine Wirksamkeit gegen gramnegative Bakterien, wie Escherichia coli, und gegen grampositive Bakterien, wie Staphylococcus eureaus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Mycoplasmen, Chlamydien und obligatorische Anaerobien, beispielsweise Bacteroides fragilis, in vitro beim Agarverdünnungstest oder beim Mikroverdünnungstest gemäß den National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), Dokument M7-A4, Band 17, Nr. 2, Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically, Approved Standard, 4. Auflage, 1997, und beispielsweise in vivo gegen systemische Infektionen an der Maus.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe zeigen auch eine antibakterielle Wirksamkeit in vitro (MHK Werte in μg/ml) beim Agarverdünnungstest und beim Mikroverdünnungstest von etwa ≤ 0,01 μg/ml bis 25 μg/ml, beispielsweise gegen die oben erwähnten Bakterienarten, und sind auch wirksam gegen Mycoplasmen und Chlamydien, wobei die Abkürzung MHK die minimale Hemmkonzentration bedeutet.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe sind auch wirksam bei systemischen Infektionen von Mäusen, beispielsweise gegen Staphylococcus aureus, wie dem Stamm ATCC 49951, beispielsweise bei parenteraler oder oraler Verabreichung in Dosen von beispielsweise etwa 8 bis 150 mg/kg Körpergewicht, wobei sich für die Verbindung des Beispiels 23 nach subkutaner Verabreichung beispielsweise ein ED₅₀ Wert von 7,55 mg/kg Körpergewicht ergibt und sich nach oraler Verabreichung beispielsweise ein ED₅₀ Wert von 7,72 mg/kg Körpergewicht zeigt.
Der ED₅₀ Wert entspricht der Effektivdosis in mg/kg Körpergewicht pro Anwendung, bei welcher 50% der behandelten Tiere vor einem Tod geschützt werden, was durch eine so genannte Probit Analyse (n = 8 Tiere/Gruppe) errechnet wird. Hierbei haben sich beispielsweise für die Verbindung der Beispiele 1 und 23, beispielsweise gegen Staphylococcus aureus, wie gegen die Stämme ATCC 10390, ATCC 29213, ATCC 29506, ATCC 49951 oder ATCC 9144, MHK Werte von etwa ≤ 0,0125 μg/ml bei 90% der behandelten Tiere ergeben, während beispielsweise die MHK Werte für im Handel erhältliches Erythromycin A bei etwa 0,2 bis 0,4 μg/ml für 90% der behandelten Tiere liegen.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe zeigen ein überraschendes Gesamtwirkungsspektrum. So hat sich beispielsweise gezeigt, dass die erfindungsgemäßen Wirkstoffe in vitro überraschend wirksam sind gegen Enterococcus faecium unter Einschluss von gegen Vancomycin resistenten Stämmen, von gegen Staphylococcus aureus unter Einschluss von gegen Methicillin sensitiven Stämmen (MSSA) und von gegen Methicillin resistenten Stämmen (MRSA), sowie von gegen Staphylococcus pneumoniae unter Einschluss von gegen Penicillin resistenten Stämmen, wie beispielsweise im Agarverdünnungstest gezeigt werden konnte oder im Mikroverdünnungstest in Mueller-Hinton-Agar oder in Mueller-Hinton-Brühe mit oder ohne Supplementierung gemäß der Approved Standard Reference Methods des National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), Dokument M7-A4 für aerobe Bakterien.
So hat sich beispielsweise für die Verbindungen der Beispiele 1 und 52, welche jeweils in Form eines Hydrochlorids geprüft worden sind, gegen beispielsweise Staphylococcus aureus für MSSA ein MHK Wert von etwa 0,025 μg/ml ergeben, während für im Handel erhältliches Azithromycin der MHK Wert bei etwa 1,6 μg/ml liegt, wobei sich für die Verbindung von Beispiel 1 gegen beispielsweise Staphylococcus aureus bei MRSA ein MHK Wert von ≤ 0,0125 gezeigt hat, während für im Handel erhältliches Azithromycin der MHK Wert bei etwa > 25,6 liegt und für die Verbindungen der Beispiele 1 und 52, beispielsweise für gegen Penicillin resistenten Streptococcus pneumoniae, der MHK Wert etwa ≤ 0,0125 beträgt, während für im Handel erhältliches Azithromycin der MHK Wert bei etwa > 2,56 liegt und für die Verbindungen der Beispiele 1 und 52 der MHK Wert beispielsweise für gegen Vancomycin resistenten Enterococcus faecium, etwa ≤ 0,0125 bis 0,025 beträgt.
Nach einem weiteren Aspekt beizieht sich die vorliegende Erfindung daher auf eine Verbindung der Formel I zur Verwendung als Pharmazeutikum, vorzugsweise als antimikrobielles Mittel, wie als Antiaerobikum.
Nach einem wiederum weiteren Aspekt bezieht sich die vorliegende Erfindung auf eine Verbindung der Formel I zur Verwendung bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung mikrobieller Erkrankungen, beispielsweise von Erkrankungen, die durch Bakterien verursacht werden, welche beispielsweise ausgewählt sind aus Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Mycoplasmen, Chlamydien und obligatorischen Anaerobiern unter Einschluss von beispielsweise gegen Penicillin resistenten Stämmen oder von gegen Multiarzneimittel resistenten Stämmen, wie Streptococcus pneumoniae; beispielsweise unter Einschluss von gegen Vancomycin resistenten Stämmen, wie Enterococcus faecium, und unter Einschluss von beispielsweise gegen Methicillin resistenten Stämmen, wie Staphylococcus aureus.
Ein wiederum weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Behandlung mikrobieller Erkrankungen durch Verabreichung einer wirksamen Verbindung der Formel I, beispielsweise in Form einer pharmazeutischen Zusammensetzung, an einen behandlungsbedürftigen Patienten.
Bei einer antimikrobiellen Behandlung schwankt die geeignete Dosis für den jeweils verwendeten erfindungsgemäßen Wirkstoff in Abhängigkeit vom Wirt, der Art der Verabreichung und der Natur sowie der Strenge des zu behandelnden Zustands. Im Allgemeinen lassen sich bei größeren Säugetieren, wie Menschen, jedoch zufrieden stellende Ergebnisse erhalten mit einer indizierten Tagesdosis im Bereich von etwa 0,5 bis 3 g erfindungsgemäßem Wirkstoff, und zwar zweckmäßigerweise durch Verabreichung in unterteilten Dosen von bis zu viermal täglich. Ein erfindungsgemäßer Wirkstoff kann auf jedem herkömmlichen Weg verabfolgt werden, beispielsweise oral, wie in Form von Tabletten oder Kapseln, oder parenteral, wie in Form injizierbarer Lösungen oder Suspensionen, beispielsweise in analoger Weise zu Erythromycinen, wie Azithromycin.
Die Verbindungen der Beispiele 1, 12, 21, 23, 35 und 52 sind für die Anwendung als antimikrobielle Mittel bevorzugte Verbindungen.
So haben sich beispielsweise für die Verbindungen der Beispiele 1 und 52 jeweils bei Prüfung in Form eines Hydrochlorids, beispielsweise gegen den Stamm ATCC 29212 von Enterococcus faecalis MHK Werte von etwa 0,8 bis 6,4 μg/ml ergeben, während im Handel erhältliches Erythromycin A hierbei einen MHK Wert von etwa 1,6 μg/ml zeigt. Es ist daher indiziert, dass für die Behandlung mikrobieller Krankheiten und bakterieller Krankheiten die bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen an größere Säugetiere, wie Menschen, auf ähnliche Art und in ähnlichen Dosen verabreicht werden können, wie Erythromycine, beispielsweise Erythromycin A oder Azithromycin.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe können in Form eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, wie eines Säureadditionssalzes oder eines Metallsalzes, oder in freier Form oder optional auch in Form eines Solvats verabreicht werden. Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe in Form eines Salzes zeigen größenordnungsmäßig die gleiche Wirksamkeit wie die freien Formen dieser Wirkstoffe.
Zur Erfindung gehört auch eine pharmazeutische Zusammensetzung, welche eine Verbindung der Formel I in freier Form oder in Form eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, und/oder in Form eines Solvats in Assoziation mit wenigstens einem pharmazeutischen Träger oder Verdünnungsmittel enthält.
Solche Zusammensetzungen können nach herkömmlichen Verfahren hergestellt werden. Einheitsdosierungsformen können beispielsweise etwa 100 mg bis etwa 1 g enthalten.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe eignen sich ferner auch als Tierarzneimittel, beispielsweise als veterinärwirksame Verbindungen, beispielsweise zur Prophylaxe und Behandlung mikrobieller Erkrankungen, beispielsweise bakterieller Erkrankungen, bei Tieren, wie Hühnern, Schweinen und Kälbern, beispielsweise zur Verdünnung von Flüssigkeiten für eine künstliche Besamung oder zum Tauchen von Eiern.
Zu einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung gehört daher auch eine Verbindung der Formel I zur Verwendung als Tierarzneimittel.
Ein wiederum weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist eine Verbindung der Formel I zur Herstellung einer Veterinärzusammensetzung, die als veterinäres Mittel geeignet ist.
Zur vorliegenden Erfindung gehört daher auch ein Veterinärverfahren zur Prophylaxe und Behandlung mikrobieller Erkrankungen, beispielsweise bakterieller Erkrankungen, durch Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I, beispielsweise in Form einer Veterinärzusammensetzung, an ein behandlungsbedürftiges Tier.
Zur Anwendung der erfindungsgemäßen Wirkstoffe als ein Tierarzneimittel schwankt die Dosis natürlich in Abhängigkeit von der Größe und dem Alter des jeweiligen Tiers und des gewünschten Effekts. So würden beispielsweise für eine prophylaktische Behandlung verhältnismäßig niedrige Dosen während einer längeren Zeitdauer, beispielsweise während 1 bis 3 Wochen, verabreicht werden. Bevorzugte Dosen im Trinkwasser liegen bei einem Gewichtsvolumen von 0,0125 bis 0,05, insbesondere von 0,0125 bis 0,025, und betragen im Futter 20 bis 400 g/t, vorzugsweise 20 bis 300 g/t. Bevorzugt ist eine Verabreichung der erfindungsgemäßen Wirkstoffe als Veterinärarzneimittel an Hennen im Trinkwasser, an Schweine im Futter und an Kälber oral oder parenteral, beispielsweise in Form oraler oder parenteraler Präparationen.
Die in den folgenden Beispielen, welche die Erfindung weiter erläutern, gemachten Temperaturangaben beziehen auf Grad Celsius.
Im Übrigen werden darin die folgenden Abkürzungen verwendet

DCC: Dicyclohexylcarbodiimid
DIEA: Diisopropylethylamin
BOC: tert.-Butoxycarbonyl
PyBOP: (Benzotriazol-1-yloxy)tripyrrolidinophosphoniumhexafluorphosphat
HMPT: Hexamethylphosphortriamid
DCl: Deuterochlorwasserstoffsäure

Die in den Beispielen angegebene Nummerierung des Mutilinrings entspricht der folgenden Formel
Beispiele, die in der Definition der Formel Iss eingeschlossen sind, sind als Referenzbeispiele gekennzeichnet.
Beispiel 1
14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
Man gibt 206 mg DCC zu einer Lösung von 229 mg N-BOC-(R)-Pipecolinsäure und 485 mg 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)acetyl]mutilin in 20 ml Dichlormethan bei Raumtemperatur und rührt das erhaltene Gemisch etwa 12 h bei dieser Temperatur. Der ausgefallene Harnstoff wird abfiltriert und das Filtrat unter verringertem Druck eingeengt. Sodann wird das erhaltene Konzentrat über Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan/Ethylacetat (1/1) chromatographiert, worauf das dabei erhaltene 14-O-[(3-(N-BOC-(R)-Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilin mit etherischer Chlorwasserstoffsäure bei Raumtemperatur während etwa 1 h behandelt wird. Sodann wird das Lösemittel unter verringertem Druck vom Gemisch entfernt und der erhaltene Rückstand aus Ethylacetat/Hexan chromatographiert, wodurch man zu 14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids gelangt.
Beispiel 2
14-O-[(2,6-Dimethyl-3-(piperidin-2(R)-carbonylamino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
Eine Lösung von 200 mg 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-aminophenyl)sulfanylacetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids, 84 mg N-BOC-(R)-Pipecolinsäure, 190,1 mg PyBOP und 143 mg DIEA in 20 ml Dioxan wird etwa 24 h auf etwa 40°C gehalten. Sodann wird das erhaltene Gemisch mit Wasser verdünnt und mit Ethylacetat extrahiert. Hierauf wird die organische Phase mit 0,1 N Natriumhydroxid, 0,1 N Chlorwasserstoffsäure und Kochsalzlösung reextrahiert. Sodann wird die organische Phase konzentriert und das Konzentrat unter Verwendung von Silicagel und Toluol/Ethylacetat (1,5/1) chromatographiert, wodurch man zu 14-O-[(2,6-Dimethyl-3(N-BOC-(R)-piperidin-2(R)-carbonylamino)phenylsulfanyl)-acetyl]mutilin gelangt. Hierauf wird das BOC in einem Gemisch aus 10 ml Dioxan und 10 ml etherischer Chlorwasser stoffsäure abgespalten, wodurch man 14-O-[(2,6-Dimethyl-3-(piperidin-2(R)-carbonylamino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids gelangt.
Beispiel 3
14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)-2(R*)-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
Man gibt 206 mg DCC zu einer Lösung von 229 mg N-BOC-(R)-Pipecolinsäure und 499 mg 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids in 20 ml Dichlormethan bei Raumtemperatur und rührt das Gemisch etwa 12 h bei dieser Temperatur. Der ausgefallene Harnstoff wird abfiltriert und das Filtrat unter verringertem Druck eingeengt. Sodann wird das Konzentrat unter Verwendung von Silicagel und Cyclohexan/Ethylacetat (1/1) chromatographiert, worauf das erhaltene 14-O-[(3-(N-BOC-(R)-Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)-2(R*)-propionyl]mutilin mit etherischer Chlorwasserstoffsäure bei Raumtemperatur während etwa 1 h behandelt wird. Das Lösemittel wird vom erhaltenen Gemisch entfernt und der Rückstand aus Ethylacetat/Hexan kristallisiert, wodurch man zu 14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)-2(R*)-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids gelangt.
Nach dem in den Beispielen 1 bis 3 beschriebenen Verfahren, aber unter Verwendung des entsprechenden Ausgangsmaterials, werden auch weitere Verbindungen der Formel I hergestellt, wofür die folgenden Hinweise gelten.
R, R₃, R'₃ und R₅ stehen jeweils für Wasserstoff.
R₄ steht bei den Beispielen 37 und 38 für Methyl und bei allen anderen Beispielen für Wasserstoff.
R₁ steht bei den Beispielen 1 bis 35 und 43 bis 49 jeweils für eine Gruppe der Formel -C(=X)R₉ und bei den Beispielen 36 bis 42 jeweils für Wasserstoff.
X steht bei den Beispielen 1 bis 45 für O, bei den Beispielen 46 und 47 für S, beim Beispiel 48 für N-CH₃ und beim Beispiel 49 für N⁺(CH₃)₂Cl^–.
R₆, R₇ und R₈ stehen bei den Beispielen 1 bis 11, 13 bis 24, 26 bis 28, 30, 32 bis 39 und 41 bis 49 jeweils für Wasserstoff und bei den Beispielen 12, 25, 29, 31 und 40 für Deuterium.
R₂ und R₃ haben die in der folgenden Tabelle jeweils angegebenen Definitionen
Tabelle 1
Beispiel 50
Ersatz von Wasserstoffatomen durch Deuteriumatome in einer Verbindung der Formel I
Eine Lösung von 300 mg 14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonyl)amino)phenylsulfanyl)acetyl]mutilinhydrochlorid in 30 ml Dioxan und 5 ml DCl (20% in D₂O) wird während 6 Tagen auf Raumtemperatur gehalten, wonach das Gemisch unter verringertem Druck eingeengt und lyophilisiert wird. Hierdurch gelangt man zu 14-O-[(3-(Piperidin-2(R)-carbonylamino)phenylsulfanyl)acetyl]-2,2,4-trideuteromutilin in Form eines Deuterochlorids.
NMR (CDCl₃): Im Vergleich zu den NMR Daten der Verbindung von Beispiel 1 fehlen bei dieser Verbindung die Signale der 2-, 2'- und 4-Protonen im tricyclischen Rest.
Nach dem im Beispiel 50 beschriebenen Verfahren wird eine Verbindung der Formel I hergestellt, worin R, R₃, R'₃, R₄ und R₅ jeweils für Wasserstoff stehen, R₁ eine Gruppe der Formel -C(=X)R₉ ist, worin X für O steht, R₆, R₇ und R₈ jeweils Deuterium sind und R₂ sowie R₉ die in der folgenden Tabelle 2 angegebenen Bedeutungen haben, und zwar in Form eines Deuterochlorids.
Tabelle 2
Beispiel 52
14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)acetyl]mutilin
Man gibt eine Lösung von 0,92 g Natrium und 5 g 3-Aminothiophenol in 100 ml trockenem Ethanol unter kontrollierter Raumtemperatur zu einer Lösung von 21,3 g 22-O-Tosylpleuromutilin in 250 ml Ethylmethylketon. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird während etwa 15 h auf Raumtemperatur gehalten und dann filtriert und unter verringertem Druck zur Trockne eingeengt. Durch Chromatographie mit Silicagel und Cyclohexan/Ethylacetat (1/1) des Rückstands gelangt man zu 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)acetyl]mutilin.
Herstellung von Ausgangsmaterialien
A. 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)acetyl]mutilin siehe Beispiel 52
B. 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-aminophenyl)sulfanylacetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
B.a 14-O-[(Carbamimidoylsulfanyl)acetyl]mutilintosylat
Eine Lösung von 15,2 g Thioharnstoff und 106,4 Pleuromutilin-22-O-tosylat in 250 ml Aceton wird 1,5 h auf Rückflusstemperatur gehalten, worauf man das Lösemittel unter verringertem Druck entfernt und 100 ml Hexan zusetzt. Der sich bildende Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet, wodurch man zu 14-O-[(Carbamimidoylsulfanyl)acetyl]mutilintosylat gelangt.
B.b 14-Mercaptoacetylmutilin
Eine Lösung von 4,7 g Natriumpyrosulfit (Na₂S₂O₅) in 25 ml H₂O gibt man zu einer Lösung von 12,2 g 14-O-[(Carbamimidoylsulfanyl)acetyl]mutilintosylat in einem Gemisch aus 20 ml Ethanol und 35 ml H₂O (erwärmt auf etwa 90°C). Sodann wird das erhaltene Reaktionsgemisch mit 100 ml CCl₄ versetzt und das Gemisch etwa 2 h unter Rückflusstemperatur gehalten. Das aus zwei Phasen bestehende System wird aufgetrennt, wonach durch Trocknung der organischen Phase und Verdampfung des Lösemittels 14-Mercaptoacetylmutilin erhalten wird.
B.c 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-nitrophenyl)sulfanylacetyl]mutilin
Eine Lösung von 0,98 g 2,4-Dinitroxylol in 30 ml HMPT gibt man zu einer Lösung von 3,94 g 14-Mercaptoacetylmutilin und 115 mg Natrium in 15 ml Methanol. Das Reaktionsgemisch wird etwa 1 h auf etwa 120°C erhitzt, dann weitere 12 h auf Raumtemperatur gehalten und schließlich auf Eis gegossen. Das erhaltene Gemisch wird mit Toluol extrahiert, worauf die organische Phase getrocknet und das Lösemittel verdampft wird. Der erhaltene Rückstand wird unter Verwendung von Silicagel und Toluol/Ethylacetat (2/1) chromatographiert, wodurch man zu 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-nitrophenyl)sulfanylacetyl]mutilin gelangt.
B.d 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-aminophenyl)sulfanylacetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
Man gibt 2,5 g Zinnpulver zu einer Lösung von 202 mg 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-nitrophenyl)sulfanylacetyl]mutilin in 10 ml Dioxan, 1,5 ml Ameisensäure und 0,1 ml H₂O und erhitzt das erhaltene Reaktionsgemisch während etwa 5 h unter Rückflusstemperatur. Sodann wird das Gemisch filtriert und das Lösemittel vom erhaltenen Filtrat verdampft. Der erhaltene Rückstand wird mit einem Gemisch von 5 ml Dioxan und 10 ml etherischer Chlorwasserstoffsäure versetzt, worauf das Lösemittel vom erhaltenen Gemisch verdampft wird. Der Rückstand wird unter Verwendung von Ethylacetat/Hexan kristallisiert, wodurch man zu kristallinem 14-O-[(2,6-Dimethyl-5-aminophenyl)sulfanylacetyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids gelangt.
C. 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
C.a 14-O-(2(R/S)-Brompropionyl)mutilin
Eine Lösung von 3,2 g Mutilin, 2 g N-Methylmorpholin und 4,3 g 2-Brompropionylbromid in 50 ml Tetrahydrofuran wird etwa 24 h auf Raumtemperatur gehalten. Sodann wird das Gemisch unter verringertem Druck eingeengt und der Rückstand in ein Gemisch aus Wasser und Ethylacetat gegossen. Hierauf wird das aus zwei Phasen bestehende System in seine beiden Phasen aufgetrennt. Die organische Phase wird mit 1 N HCl und Kochsalzlösung extrahiert und dann unter Verwendung von Silicagel und Cyclohexan/Dioxan (6/1) chromatographiert, wodurch man zu 14-O-(2(R/S)-Brom-propionyl)mutilin gelangt.
C.b 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2(R*)-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids und 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2(S*)-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids
Eine Lösung von 45 mg 14-O-(2(R/S)-brompropionyl)mutilin, 125 mg 3-Aminothiophenol und 24 mg Natrium in 10 ml Ethanol und 5 ml Ethylmethylketon wird etwa 12 h auf Raumtemperatur gehalten. Sodann wird das Lösemittel vom erhaltenen Gemisch verdampft und der Rückstand mit 50 ml Ethylacetat versetzt. Die erhaltene organische Phase wird mit Kochsalzlösung extrahiert und unter Verwendung von Silicagel und Cyclohexan/Dioxan (6/1) chromatographiert, wodurch sich ein Diastereoisomergemisch von 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2(R/S)-propionyl]mutilin ergibt. Durch anschließende Auftrennung der Diastereoisomeren mittels einer präparativen HPLC-Chromatographie unter Verwendung von Cyclohexan/Dioxan (8/1) und Behandlung mit Chlorwasserstoffsäure gelangt man zu 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2(R*)-propionyl]mutilin in Form eines Hydrochlorids und zu 14-O-[(3-Aminophenylsulfanyl)-2(S*)-propionyl]mutilin ebenfalls in Form eines Hydrochlorids.

Im Folgenden werden die ¹H-NMR-Spektren der Verbindungen der angeführten Beispiele angegeben, welche in CDCl₃ gemessen sind, sofern nichts anderes gesagt ist:

Beispiel
1	3,1, 3,5 (2 × m, 2H, ε,ε'H, Piperidin), AB-System (v_A = 3,57, v_B = 3,62, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), 4,42 (b, 1H, α-H, Piperidin), 7,03 (d, 1H, arom. H₆, J = 7,7 Hz), 7,13 (t, 1H, arom. H₅, J = 5,9 Hz), 7,49 (d, 1H, arom. H₄, J = 7,7 Hz), 7,85 (s, 1H, arom. H₂), 10,7 (s, 1H, NH).
2	2,48, 2,52 (2 × s, 6H, 2 × arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,3, v_B = 3,38, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz), 4,5 (b, 1H, α-H, Piperidin), 3,1, 3,3 (2 × b, 2H, ε,ε'-H, Piperidin, 7,0, 7,4 (2 × m, 2H, arom. H₄, H₅), 8,45, 9,6 (2 × b, 2H, NH₂), 9,9 (b, 1H, NH).
3	(d₆-DMSO): 1,48 (d, 3H, C₂₂-CH₃, J = 7,2 Hz), 2,75, 3,05 (2 × b, 2H, ε,ε'-H-Piperdin), 3,38 (d, 1H, H₁₁, J = 6,35 Hz), 3,82 (q, 1H, H₂₂, J = 7,2 Hz), 7,2 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,8 Hz), 7,15 (ddd, 1H, arom. H₆, J = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2,8 Hz), 7,55 (ddd, 1H, arom. H₄, = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2 Hz), 7,6 (t, 1H, arom. H₂, J = 1,8 Hz), 8,9 (s, 1H, NH).

4	3,5 (s, 2H, H₂₂), 2,7, 3,4, 3,7, 4,6, (4 × m, 5H, Piperidin-H), 8,1, 9,7, 10,3 (3 × b, 2 × NH, OH), 7,45 (d, 2H, arom. H, J = 6,2 Hz), 7,52 (d, 2H, arom. H, J = 6,2 Hz).
5	1,08 (d, 6H, CH(Me)₂, J = 6,2 Hz), AB-System (v_A = 3,5, v_B = 3,58, 2H, H₂₂, J = 15,1 Hz), 3,92 (d, 1H, α-H, J = 5,7 Hz), 7,7 (d, 2H, arom. H, J = 6,2 Hz), 7,51 (d, 2H, arom. H, J = 6,2 Hz).
6	3,5 (s, 2H, H₂₂), 2,7, 3,4, 3,7, 4,6, (4 × m, 5H, Piperidin-H), 8,1, 9,7, 10,3 (3 × b, 2 × NH, OH), 7,01 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,18 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 7,4 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz) 7,6 (d, NH, J = 6 Hz).
7	3,6 (s, 2H, H₂₂), 5,01 (m, 1H, α-H), 7,1 (d, 1H, arom. H4, J = 8,2 Hz), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 8,2 Hz), 7,49 (d, 1H, arom. H₆, J = 8,2 Hz), 7,82 (s, 1H, arom. H₂), 7,6, 10,8 (2 × b, 2 × NH).
8	1,1 (d, 6H, (CH(Me)₂), J = 6,5 Hz), AB-System (v_A = 3,6, v_B = 3,65, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), 3,92 (d, 1H, α-H, J = 6,2 Hz), 7,12 (dd, 1H, arom. H₆, J = 7,9 Hz, J = 2,1 Hz), 7,25 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,42 (dd, 1H, arom. H₄, J = 7,9, J = 2,1 Hz), 7,75 (d, 1H, arom. H₂, J = 2,1 Hz).
9	1,08 (d, 6H, (CH(Me)₂), J = 7 Hz), AB-System (v_A = 3,42, v_B = 3,5, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), 3,45 (d, 1H, α-H, J = 4,1 Hz), 7,0, 7,35, (2 × m, arom. H₃, H₄), 7,51 (d, 1H, arom. H₂, J = 7,5 Hz), 8,48 (d, 1H, arom. H₆, J = 7,5 Hz), 10,55 (s, 1NH, NH).
10	AB-System (v_A = 3,58, v_B = 3,6, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz), AB-System (v_A = 3,58, v_B = 3,59, CH2-OH, J = 14,2 Hz), 3,67 (d, b, α-H, 4,9 Hz), 7,08 (dd, 1H, arom. H₆, J = 7,9 Hz, J = 2,1 Hz), 7,22 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,45 (dd, 1H, arom. H₄, J = 7,9, J = 2,1 Hz), 7,65 (d, 1H, arom. H₂, J = 2,1 Hz), 9,54 (b, 1H, NH):
11	3,62 (s, 2H, H₂₂), 6,75 (d, 1H, Pyrrol-H, J = 4,5 Hz), 7,12 (d, 1H, Pyrrol-H, J = 4,5 Hz), 7,18 (dd, 1H, arom. H₆, J = 6,3 Hz, J = 1,5 Hz), 7,28 (t, 1H, arom. H5, J = 6,3 Hz), 7,5 (dd, 1H, arom. H₄, J = 6,3 Hz, J = 1,5 Hz), 7,62 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 7,95 (s, 1H, NH).
12	Im Vergleich zu den NMR Daten von Beispiel 2 fehlen hier die Signale der 2.2'- und 4-Protonen des tricyclischen Rests. MS m/e 626 (MH)⁺.
13	3,65 (s, 2H, H₂₂), 7,3, 7,4, 7,8 (3 × m, arom. H), 8,15 (s, 1H, arom. H2), 8,05, 8,8, 9,2, 10,4 (4 × b, Pyridin-H), 10,9 (b, 1H, NH).
14	3,65 (s, 2H, H₂₂), 7,18 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1 Hz, J = 7,7 Hz,), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,98 Hz), 7,73 (dd, 1H, arom. H6, J = 1 Hz, J = 7,7 Hz), 8,03 (d, 1H, arom. H₂, J = 2 Hz), 7,82, 8,3 (2 × m, Pyridin-H₄, H₅), 8,6 (d, 1H, Pyridin-H₆, J = 7,75 Hz), 8,73 (d, 1H, Pyridin-H₃, J = 4,5 Hz), 11,95 (s, 1H, NH).
15	3,6 (s, 2H, H₂₂), 7,10 (dd, 1H, arom. H₄, J = 7,3 Hz, J = 1,5 Hz), 7,24 (t, 1H, arom. H₅, J = 8 Hz), 7,48 (dd, 1H, arom. H₆, J = 7,3 Hz, J = 1,5 Hz), 7,65 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 6,3, 6,71, 7,0 (3 × m, 3H, Pyrrol-H), 7,62 (s, 1H, NH), 9,65 (s, 1H, NH).
16	AB-System (v_A = 3,6, v_B = 3,68, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), 6,52, 6,83, 7,48 (3 × m, 3H, Pyrrol-H), 7,08 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 7,7 Hz), 7,23 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,52 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 7,7 Hz), 7,65 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 7,42 (s, 1H, NH), 8,55 (b, 1H, NH).

17	3,62 (s, 2H, H₂₂), 7,15 (dd, 1H, arom. H₆, J = 2 Hz, J = 7,8 Hz), 7,34 (t, 1H, arom. H₅, J = 8,2 Hz), 7,54 (dd, 1H, arom. H₄, J = 2 Hz, J = 7,8 Hz), 7,01, 7,18, 7,3, 7,45, 7,7 (5 × m, Indol-H), 7,88 (s, 1H, NH), 9,43 (s, 1H, NH).
18	AB-System (v_A = 3,52, v_B = 3,58, 2H, H₂₂, J = 14,9 Hz), 6,8, 7,2, 7,4, 7,82, 7,9 (5 × m, 6H, arom. H + Chinolin-H), 7,83 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,7 Hz), 8,5 (d, 1H, Chinolin-H₁), 8,75 (d, 1H, Chinolin-H₇).
19	3,55 (sb, 2H, H₂₂), 7,03, 7,2, 7,55 (3 × m, 3H, arom. H₄, H₅, H₆), 7,75 (s, 1H, arom. H₂), 7,7–8,1 (b, NH₂, NH), 9,6 (b, 1H, NH).
20	3,65 (s, 2H, H₂₂), 7,15 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,32 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,65 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 7,7 Hz), 7,8 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 8,22 (dd, 1H, Pyridin-H₅, J = 2,2 Hz, J = 5,3 Hz), 8,95 (dd, 1H, Pyridin-H₆, J = 0,8 Hz, J = 5,3 Hz), 8,99 (d, 1H, Pyridin-H₃, J = 2,2 Hz), 9,82 (s, 1H, NH).
21	1,45, (s, 9H, arom. tert.-Butyl), AB-System (v_A = 3,65, v_B = 3,75, 2H, H₂₂, J = 14,8 Hz), 4,4 (b, 1H, α-H, Piperidin), 3,1, 3,5 (2 × b, 2H, ε-H, Piperidin), 7,18, 7,28 (2 × m, 2H, arom. H₄, H₃), 7,7 (b, 1H, arom. H₆), 10,4 (b, 1H, NH).
22	2,48, (s, 3H, arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,2, v_B = 3,36, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz), 4,4 (b, 1H, α-H, Piperidin), 3,1, 3,5 (2 × b, 2H, ε-H, Piperidin), 7,0, 7,4 (2 × m, 2H, arom. H₄, H₃), 7,8 (b, 1H, arom. H₆) 8,45, 9,6 (2 × b, 2H, NH₂), 10,4 (b, 1H, NH).
23	Rotamere: 1,48 (s, 9H, tert.-Butyl), AB-System (v_A = 3,61, v_B = 3,68, 1,2H, J = 15 Hz, v_A = 3,64, v_B = 3,66, 0,8H, J = 14,5 Hz), 7,1–7,5 (m, 2H, arom. H₃, H₄), 8,35 (d, 1H, arom. H₆, J = 2 Hz), 8,65 (d, 0,8H, Formyl-H, J = 11 Hz, 8,67 (sb, 0,2H).
24	Rotamere: 2,5, 2,55 (2 × s, 6H, arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,30, v_B = 3,4, 1,2H, J = 15 Hz, v_A = 3,34, v_B = 3,4, 0,8H, J = 14,5 Hz), 7,05 (d, 0,5H, arom. H₄, J = 8 Hz), 7,78 (d, 0,5H, arom. H₄, J = 8 Hz), 7,1 (d, 1H, arom. H₅, J = 8 Hz), 8,42 (d, 0,8H, Formyl-H, J = 11 Hz, 8,67 (sb, 0,2H), 6,9 (b, 1H, NH).
26	In Form eines Dihydrochlorids: 7,52 (s, 1H, Imidazol-H), 9,03 (s, 1H, Imidazol-H), 8,65 (b, 2H, NH₂), 7,16 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,42 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,73 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 11,4 (s, 1H, NH), 4,45 (m, 1H, α-H, Aminosäure), 3,8 (s, 3H, N-CH₃) AB-System (v_A = 4,4, v_B = 3,48, 2H, CH₂CH, J = 15,2, 7,8 Hz, AB-System (v_A = 3,75, v_B = 3,65, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz, 2,25 (s, 3H, arom. CH₃).
27	In Form eines Dihydrochlorids: (d6-DMSO, 350K): 11,8 (s, 1H, Imidazol-H), 9,03 (s, 1H, Imidazol-H), 8,65 (b, 2H, NH₂), 7,16 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,38 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,73 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 7,54 (s, 1H, NH), 4,45 (m, 1H, α-H, Aminosäure), 3,3 (s, 3H, N-CH₃) AB-System (v_A = 3,25, v_B = 3,4, 2H, CH₂CH, J = 15,2, 7,8 Hz, AB-System (v_A = 3,78, v_B = 3,68, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz, 2,25 (s, 3H, arom. CH₃).
28	In Form eines Dihydrochlorids: 9,7 (s, 1H, NH), 8,82 (s, 1H), Imidazol-H), 7,48 (s, 1H, Imidazol-H), 8,45 (b, 3H, NH₃), 6,83 (d, 1H, arom. H₄, J = 8,4 Hz), 7,25 (d, 1H, arom. H₅, J = 8,4 Hz), 4,85 (m, 1H, α-H, Aminosäure), 3,38–3,5 (m, 2H, CH₂CH, Aminosäure), 2,3, 2,38 (2 × CH₃, arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,08, v_B = 3,18, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), MS m/e 651 (MH)⁺.
29	Im Vergleich zu den NMR Daten von Beispiel 28 fehlen hier die 2.2'- und 4-Protonen des tricyclischen Rests. MS m/e 684 (MH)⁺.

30	In Form eines Dihydrochlorids: (d6-DMSO): 11,8 (s, 1H, Imidazol-H), 9,03 (s, 1H, Imidazol-H), 8,6 (b, 2H, NH₂), 7,09 (dd, 1H, arom. H6, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,27 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,43 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,64 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 7,54 (s, 1H, NH), 4,43 (m, 1H, α-H, Aminosäure), 3,2–3,4 (m, 2H, CH₂CH, Aminosäure).
31	In Form eines Dideuterochlorids: Im Vergleich zu den NMR Daten von Beispiel 30 fehlen hier die 2.2'- und 4-Protonen des tricyclischen Rests. MS m/e 625 (MH)⁺.
32	In Form eines Hydrochlorids: (d6-DMSO): 7,52 (s, 1H, Imidazol-H), 9,03 (s, 1H, Imidazol-H), 7,8 (m, 1H, NH₂), 10,95 (s, 1H, NH), 8,45 (s3H, NH₃) 7,16 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,42 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 8,3 Hz), 7,73 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 4,05 (m, 1H, α-H, Aminosäure), 3,8 (s, 3H, N-CH₃), AB-System (v_A = 4,4, v_B = 3,48, 2H, CH₂CH, J = 15,2, 7,8 Hz, AB-System (v_A = 3,78, v_B = 3,68, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz, 2,25 (s, 3H, arom. CH₃).
33	In Form eines Hydrochlorids: (d6-DMSO): 10,2 (b, 1H, NH), 8,5 (b, 3H, NH₃), 7,15 (d, 1H, arom. H₄, J = 8,2 Hz), 7,25 (d, 1H, arom. H₅, J = 8,2 Hz), 4,13 (t, 1H, α-H, Aminosäure, J = 6,6 Hz), 3,4 (m, 2H, δ-H, Aminosäure), AB-System (v_A = 3,5, v_B = 3,36, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz), 2,41, 2,44 (2 × s, 6H, 2 × CH₃).
34	NMR (d6DMSO, 350K): 10,9 (b, 1H, NH), 8,6 (b, 4H, NH), 7,10 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,27 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,50 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 3 Hz), 7,74 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 4,13 (t, 1H, α-H, Aminosäure, J = 6,6 Hz), 3,4 (m, 2H, δ-H, Aminosäure), AB-System (v_A = 3,6, v_B = 3,68, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz).
35	In Form eines Hydrochlorids: (d6-DMSO, 350K): 8,03 (b, 3H, NH₃), 4,25 (d, 1H, α-H, Aminosäure, J = 4,6 Hz), AB-System (v_A = 3,45, v_B = 3,32, 2H, H₂₂, J = 15,2 Hz 0,85, 0,95 (2 × d, CH(CH₃)₂, J = 5,9 Hz), 4,0 (m, 2H, NCH₂CH₂), MS m/e 577 (MH)⁺.
36	7,26 (d, 2H, arom. H, J = 8,6 Hz), 6,58 (d, 2H, arom. H, J = 8,6 Hz) AB-System (v_A = 3,42, v_B = 3,38, 2H, H₂₂, J = 14,4 Hz), Ms m/e 621 (M⁺ + Na).
37	Verbindung (22-R*): (d₆-DMSO/CDCl₃ 1:3)): 7,37 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,27 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,34 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,48 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 3,82 (q, 1H, CHCH₃, J = 7,2 Hz), 1,49 (d, 3H, CHCH₃, J = 7,2 Hz).
38	Verbindung (22-S*): (d₆-DMSO/CDCl₃ 1:3)): 7,37 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,27 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,9 Hz), 7,34 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 7,3 Hz), 7,48 (d, 1H, arom. H₂, J = 1,5 Hz), 3,76 (q, 1H, CHCH₃, J = 7,2 Hz), 1,52 (d, 3H, CHCH₃, J = 7,2 Hz).
39	Siehe Daten im Beispiel A, unten.
40	Im Vergleich zu den NMR Daten der Verbindung 39 (in Form eines Hydrochlorids) fehlen hier die Signale der 2.2'- und 4-Protonen im tricyclischen Rest. MS m/e 489 (M + 1)⁺.
41	7,45 (m, 1H, arom. H), AB-System (v_A = 3,57, v_B = 3,63, 2H, H₂₂, J = 14,8 Hz).
42	6,88 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,32 (dd, 1H, arom. H₅, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,4 (m, 1H, arom. H₃) 3,59 (s, 2H, H₂₂).
43	7,38 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,2 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 7,05 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,5 (m, 1H, arom. H₂), 3,4 (s, 2H, H₂₂), 2,18 (s, 3H, COCH₃).

44	7,9 (b, 1H, NH), 7,22 (dd, 1H, arom. H₆) J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz,), 7,43 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 62 Hz), 7,56 (m, 1H, arom. H₂), 3,62 (s, 2H, H₂₂).
45	7,48 (s, 1H, CH-O), 6,80 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,14 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 6,98 (dd, 1H, arom. H4, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 6,94 (m, 1H, arom. H₂), 3,58 (s, 2H, H₂₂).
46	3,62 (s, 2H, H₂₂), 7,23 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 7,48 (dd, 1H) arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,75 (m, 1H, arom. H₂), 11,48, 8,05 (2 × b, NH), 4,3 (q, 2H, OCH₂CH₃, J = 7,2 Hz), 1,38 (t, 3H, OCH₂CH₃, J = 7,2 Hz).
47	7,72 (s, 1H, NH), 6,45 (q, 1H, NH, J = 3,2 Hz), AB-System (v_A = 3,52, v_B = 3,6, 2H, H₂₂, J = 14,8 Hz), 6,99 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 7,3 (m, 2H, arom. H₄, H₂), 3,28 (d, 3H, NCH₃, J = 3,2 Hz).
48	7,72 (s, 1H, NH), 6,45 (q, 1H, NH, J = 3,2 Hz), AB-System (v_A = 3,62, v_B = 3,66, 2H, H₂₂, J = 14,9 Hz), 7,75 (m, 1H, arom. H₂), 7,32 (m, 3H, arom. H₆, H₅, H₄), 3,18 (b, 3H, C = NCH₃). 2,78 (s, 3H, SCH₃).
49	7,48 (s, 1H, NHCH=N), 6,8 (dd, 1H, arom. H₆, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 7,15 (t, 1H, arom. H₅, J = 6,2 Hz), 6,99 (dd, 1H, arom. H₄, J = 1,5 Hz, J = 6,2 Hz), 6,95 (m, 1H, arom. H₂), 3,4 (s, 2H, H₂₂), 3,01 (s, 6H, N(CH₃)₂).

Beispiel
A	0,58 (d, 3H, H₁₆, J = 7,2 Hz), 0,81 (d, 3H, H₁₇, J = 7,3 Hz), 1,02 (s, 3H, H₁₈), 1,32 (s, 3H, H₁₅), ABX-System (v_A = 1,2, v_B = 1,88, H_13a, H_13b, J = 16,1 Hz, J = 9,1 Hz), 2,08 (d, 1H, H₄, J = 2,1 Hz), ABXY-System (v_A = 2,23, v_B = 2,19, H_2a, H_2b, J = 16,2 Hz, J = 9,1 Hz, J = 1,8 Hz), 2,3 (m, 1H, H₁₀), 3,4 (d, 1H, H₁₁, J = 5,98 Hz), AB-System (v_A = 3,81, v_B = 3,89, 2H, H₂₂, J = 14,1 Hz), 5,18 (dd, 1H, H_20a, J = 17,5 Hz, J = 1,6 Hz), 5,29 (dd, 1H, H_20b, J = 11 Hz, J = 1,6 Hz), 5,51 (d, 1H, H₁₄, J = 8,3 Hz), 6,05 (dd, 1H, H₁₉, J = 11 Hz, J = 17,5 Hz), 7,0 (m, 1H arom. H), 7,18 (m, 2H) arom. H), 7,3 (t, 1H, arom. H₅, J = 8 Hz).
B.a	AB-System (v_A = 3,7, v_B = 3,82, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz), 7,2 (d, 2H, arom. H, J = 8 Hz), 7,75 (d, 2H, arom. H, J = 8 Hz), 8,4, 9,8 (2 × b, 4H, 2 × NH₂).
B.b	ABX-System (v_A = 3,15, v_B = 3,22, v_x = 1,92, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz, J = 8,2 Hz).
B.c	2,43, 2,48 (2 × s, 6H, 2 × arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,22, v_B = 3,4, 2H, H₂₂, J = 13,8 Hz), 6,7, 6,95 (2 × d, 2H, arom. H₄, H₅).
B.d	2,61, 2,74 (2 × s, 6H, 2 × arom. CH₃), AB-System (v_A = 3,31, v_B = 3,43, 2H, H₂₂, J = 15,8 Hz), 7,2, 7,7 (2 × d, 2H, arom. H₄, H₅).
C.b(R)	(d₆-DMSO): 1,35 (d, 3H, C₂₂-CH₃, J = 7,2 Hz), 3,25 (d, 1H, H₁₁, J = 6,35 Hz), 3,75 (q, 1H, H₂₂, J = 7,2 Hz), 7,18 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,8 Hz), 7,24 (ddd, 1H, arom. H₆, J = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2,8 Hz), 7,28 (ddd, 1H, arom. H₄, = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2 Hz), 7,43 (t, 1H, arom. H₂, J = 1,8 Hz).
C.b(S)	(d₆-DMSO): 1,48 (d, 3H, C₂₂-CH₃, J = 7,2 Hz), 2,4–3,2 (b, 2H, NH₂), 3,38 (d, 1H, H₁₁ = 6,35 Hz), 3,82 (q, 1H, H₂₂, J = 7,2 Hz), 7,28 (t, 1H, arom. H₅, J = 7,8 Hz), 7,34 (ddd, 1H, arom. H₆, J = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2,8 Hz), 7,36 (ddd, 1H, arom. H₄, J = 7,8 Hz, J = 1,5 Hz, J = 2 Hz), 7,49 (t, 1H, arom. H₂, J = 1,8 Hz).

Claims

Verbindung der Formel
worin R_3ss, R_4ss und R_5ss für Wasserstoff oder Deuterium stehen.
Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 14-O-(1-(2-Aminoisobutylcarbonyl)piperidin-3-ylsulfanylacetyl)mutilin oder 14-O-(1-(2-Aminoisobutylcarbonyl)piperidin-3-ylsulfanylacetyl)-2,2,4-trideuteromutilin.
Verbindung nach Anspruch 1 oder 2 in Form eines Salzes oder in Form eines Salzes und in Form eines Solvats oder in Form eines Solvats.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Verwendung als Pharmazeutikum oder als Tierarzneimittel.
Verbindung nach Anspruch 4 zur Verwendung als Antimikrobikum.
Verwendung einer Verbindung der Formel Iss zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung mikrobieller Erkrankungen.
Zusammensetzung, die eine Verbindung der Formel Iss in freier Form oder in Form eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes enthält.