DE2646033A1 - L-leucyl-p-aminoanilid-derivate, verfahren zu deren herstellung und ihre verwendung - Google Patents
L-leucyl-p-aminoanilid-derivate, verfahren zu deren herstellung und ihre verwendungInfo
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- C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
-
- G—PHYSICS
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Description
L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung
und ihre Verwendung
Die Erfindung betrifft neue L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate,
ein Verfahren zu deren Herstellung und die Verwendung der L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate als Substrate zur Messung1 der
Aktivität von Leucylaminopeptidase.
Leucylaminopeptidase, die im folgenden als LAP bezeichnet wird,
ist ein Enzym, das Leucin aus einem Peptid freisetzt, das Leucin als eine N-endständige Aminosäure enthält. Sie ist weit verbreitet
in jedem Gewebe eines lebenden Körpers, ist auch im
709817/1100
M/17248 - I -
-3.
Blutserum vorhanden und man weiß, daß ihre Aktivität in Abhängigkeit
von pathologischen Zuständen ansteigt. So wird die Aktivität von LAP im Falle einer Verletzung des Leberparenchyms,
einer Blockierung von Gallenwegen, einschließlich des Gallenganges in der Leber, bei Diabetes mellitus, Gastritis, Krebs und
Schwangerschaft, erhöht. Daher ist die Messung der Aktivität von LAP eine unerläßliche klinische, biochemische Untersuchung in
solchen Fällen und zwar nicht nur zur Diagnose einer Änderung zum krankhaften Zustand hin, sondern auch für die prognostische
Beobachtung.
Bisher wurden verschiedene Methoden zur Messung der Aktivität von LAP vorgeschlagen, die viele Vorteile, jedoch auch viele
Nachteile besitzen. Die gegenwärtig am häufigsten verwendete Methode ist die colorimetrische Bestimmung einer Aminverbindung,
die aus einem synthetischen Substrat durch LAP erzeugt wird. Bei dieser colorimetrischen Bestimmung wird bei Verwendung von L-Leucyl-p-nitroanilid
als synthetisches Substrat die gelbe Farbe des erhaltenen p-Nitroanilins bestimmt; es ist jedoch nicht möglich,
die Einflüsse von Serumkomponenten auszuschalten. Verwendet man das gegenwärtig häufig eingesetzte L-Leucyl-ß-naphthylamid als
synthetisches Substrat, so erhält man ein farbiges Produkt durch Kupplung des erhaltenen ß-Naphthylamins mit einem Diazoniumsalz
oder durch Diazotisieren des erhaltenen ß-Naphthylamins und anschließende Kupplung mit einer Verbindung, die zu einem Chromogen
werden kann, oder auch durch Kondensieren mit p-Dimethylaminobenzaldehyd
oder p-Dimethylaminozimtaldehyd oder dergleichen· Bei dieser colorimetrischen Bestimmung kann die Aktivität von
LAP auf einfache Weise und mit hoher Präzision gemessen werden, jedoch ist die Verwendung von ß-Naphthylamin als Standardsubstanz
problematisch. Es ist bekannt, daß ß-Naphthylamin carcinogen ist, seine Herstellung in Japan beispielsweise gesetzlich verboten ist
und vorsichtig unter Anwendung einer Schutzvorrichtung gehandh'abt werden sollte.
709817/1100
M/17248 - ? -
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde daher versucht, die
vorstehenden Nachteile üblicher Verfahren zur Messung der Aktivität von LAP auszuschalten und es wurde gefunden, daß neue
L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate wirksam als Substrat zur Messung
der Aktivität von LAP sind.
Die Erfindung betrifft daher ein neues L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivat
der Formel
V^ (ι)
R2 _
worin R^. und R~ unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder
eine niedrig-Alkylgruppe, die gegebenenfalls durch eine Hydroxylgruppe oder eine Methansulfonamidgruppe substituiert ist, bedeuten,
und R3. ein Wasserstoff atom oder eine niedrig-Alkylgruppe
ist.
In der vorstehenden Formel I bedeutet der Ausdruck "niedrig-Alkylgruppe"
eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, z.B. Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t.-Butyl und
dergleichen.
Die L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate der Formel I umfassen beispielsweise
folgende Verbindungen:
L-Leucyl-4-dimethylaminoanilid,
L-Leucyl—^-diäthylaminoanilid,
L-Leucyl—^-dipropylaninoanilid,
L-Leucyl-2-nethyl-L-aiäthylaminoanilid,
L-Leucyl-2-Eethyl-4-(N-äthyl-N-ß-methansulfonamidäthyl)-amihoanilid,
709817/1100
26Λ6033
M/17248 - Ä -
L-Leucyl-2-methyl-4-(F-äthyl-ir-ß-hydroxyäthyl)-aminoaiiilid.
Die L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate der Formel I können hergestellt
werden durch Umsetzung eines p-Phenylendiaminderivats der Formel
r~U V-If^ (JT)
worin R^, Ep und R, wie vorstehend definiert sind, mit L-Leucin,
worin die Aminogruppe durch eine Schutzgruppe geschützt ist und Entfernen der N-Schutzgruppe.
Die Kondensationsreaktion des p-Phenylendiaminderivats der Formel
II mit dem geschützten L-Leucin kann bei einer Temperatur von 0 bis 200C, vorzugsweise von 5 bis 100C, durchgeführt werden.
Falls erforderlich, kann die Umsetzung in einem Lösungsmittel, wie aliphatischen Kohlenwasserstoffen, aromatischen Kohlenwasserstoffen,
Estern, Äthern, Ketonen, Alkoholen oder Wasser, z.B. Methylenchlorid, Toluol, η-Hexan, Cyclohexan, Aceton, Äthylacetat,
Äthyläther, Äthylalkohol oder dergleichen, und einem Dehydratisierungsmittel,
wie N1 ,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, Ν',Ν"'-Di-p-toluoylcarbodiimid,
Tetraathylpyrrophosphit, 1-Äthyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimid«HCl,
1-Cyclohexyl-3-(2-morpholino)-carbodiimid, meso-p-Toluolsulfonat oder dergleichen durchgeführt
werden. Das Reaktionsprodukt kann, falls erforderlich, in üblicher Weise, wie Filtrieren, Waschen mit Wasser, Kondensieren
usw. behandelt v/erden, um nicht umgesetzte Reaktionskomponenten, Verunreinigungen, das Lösungsmittel usw. zu entfernen.
Die Entfernung der Ii-Schut ζ gruppe von dem Reaktionsprodukt kann
in üblicher Weise erfolgen, wie durch Einbringen des Reaktionsprodukts in ein"lösungsmittel, wie Äthylacetat, das Chlorwasser-
709817/1100
M/17248 - % -
stoff enthält. Bei dem Verfahren kann L-Leucin verwendet werden,
das mit jeglicher üblichen Schutzgruppe geschützt ist.
Das L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivat der Formel I kann wirksam als
Substrat zur Messung der Aktivität von LAP verwendet werden.
Das L-Eeucyl-p-aminoanilid-Derivat der Formel I wird durch die
Einwirkung von LAP zu dem p-Phenylendiaminderivat und L-Leucin
hydrolysiert. Zur Bestimmung der Aktivität von LAP kann eine verringerte Menge des Substrats oder eine erzeugte Menge des
p-Phenylendiaminderivats oder L-Leucins gemessen werden, jedoch
besteht die bevorzugteste Methode darin, eine erhaltene Menge des p-Phenylendiaminderivats zu bestimmen.
Die meisten erfindungsgemäßen L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate
zeigen im Vergleich mit L-Leucyl-ß-naphthylamid die gleiche oder
eine verbesserte Reaktivität mit LAP, wie aus der Tabelle 1 ersichtlich
ist. Selbst wenn die Substratreaktivität mit LAP nicht so groß ist wie in der Tabelle 1 gezeigt, können die erfindungsgemäßen
L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivate zur Messung der Wirksamkeit
von LAP verwendet werden.
Substrat umgesetzte Menge Verhält-
*1 (^uMoI x 10-4) nis (%)
L-Leucyl-4—dime thyl amino an i 1 i d
L-Leucyl-4~diäthylamino anilid
L-Leucyl-4-dipropylaminoanilid
Ir-Leucyl-2-methyl-4-diäthylaminoanilid L-Leucyl-2-methyl-^— (li-äthyl-K-ß-methan—
sulfonamidäthyl)-aminoanilid L-Leucyl-2-Eethyl-4-(:r-äthyl-N-ßhydroxyäthyl)-aminoani1id
(Vergleich)
L-Leucyl-ß-naphthylamid 1090 100
709817/1100
| 1090 | 100 |
| 1145 | 105 |
| 1090 | 100 |
| 1070 | 98 |
| 271 | 25 |
| 243 | 22 |
26A6033
M/17248 - 6 -
Anmerkung: *1 Die Menge an Substrat, zersetzt durch 0,05 ml
(etwa 600 GR-Einheiten) Serum bei 37°C während
15 Minuten.
Die Umsetzung eines Substrats mit LAP führt man vorzugsweise bei einem pH-Wert von 6,5 bis 8,0 bei einer Temperatur von 10
bis 45 C, vorzugsweise von 35 bis 4O0C, durch. TJm den pH-Wert
im bevorzugten Bereich zu halten, kann man einen Puffer,wie einen
Phosphatpuffer, einen tris-(Hydroxymethyl)-aminomethanpuffer,
einen Barbital- bzw. 5»5-Diäthylbarbitursäurepuffer, einen Boratpuffer,
einen Aminomethylpropanolpuffer und dergleichen verwenden.
Zur Bestimmung der Menge des gebildeten ρ-Phenylendiaminderivats
kann dieses in alkalischem Zustand oxidiert werden unter Bildung einer Verbindung, die eine rote Farbe entwickelt, oder kann vorzugsweise
ein Kupplungsmittel, wie Phenole und Naphthole zu dem p-Phenylendiaminderivat zugesetzt werden, um durch oxidative
Kondensation einen Farbstoff zu bilden. Als derartige Kupplungsmittel können Phenol, oi-Naphthol, ß-Naphthol und ihre Derivate,
z.B. Monosulfonsaurederivate, wie 1-Naphthol-2-sulfonsäure, 1-Naphthol-4~sulfonsäure, 2-Naphthol-7-sulfonsäure, 2-Naphthol-8-sulfonsäure
und dergleichen, Disulfonsäurederivate, wie 2-Naphthol-3»6-disulfonsäure,
2-Naphthol-6,8-disulfonsäure und dergleichen, Carbonsäurederivate, wie i-Naphthol-2-carbonsäure, Salicylsäure
und dergleichen, mehrwertige Phenole, wie Brenzkatechin, Pyrogallol und dergleichen, verwendet werden. Der zu einer roten
Farbe entwickelte Farbstoff kann in üblicher Weise bei 510 nm gemessen werden. Eine bevorzugtere Methode zur Messung liegt
darin, einen Farbstoff zu verwenden, den man zu einer blauen Farbe
entwickelt hat. Da alle Farbstoffe, die durch oxidative Kondensation des p-Phenylendiariinderivats und des Kupplungsmittels
hergestellt wurden, eine blaue Farbe annehmen, die eine maximale Absorption bei etwa 660 nn aufweisen und die Färbung bemerkenswert
stabil ist, kann die Kessung der Aktivität von LAP an Pro-
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M/17248
ben von lebenden Körpern vorteilhaft durchgeführt werden, ohne
daß andere Bestandteile der Proben einen Einfluß ausüben würden.
Die Färbentwicklung durch Oxidation wird unter Anwendung eines
Oxidationsmittels und Einstellen des pH-Werts auf 9-12 unter Anwendung eines üblichen alkalisch machenden Mittels, wie Natriumhydroxid,
Kaliumhydroxid, Natriumcarbonat oder dergleichen durchgeführt. Als Oxidationsmittel können übliche, wie Natriummetaperjodat,
Ammoniumpersulfat, Wasserstoffperoxid, Natriumhypochlorit, Kaliumferricyanid und dergleichen verwendet werden.
Insbesondere wird die Aktivität von LAP wie folgt gemessen. Zu
1,0 ml einer 0,1 m-Phosphatpufferlösung, die 1,0 mMol von beispielsweise
L-Leucyl-^-^N-diäthylaminoanilid enthält und einen
pH-Wert von 7,0 aufweist, fügt man 0,05 ml Blutserum und erwärmt die Mischung 15 Minuten lang in einem Thermostaten auf 37°C. Zu
der Reaktionslösung fügt man 1,0 ml einer 0,2 %-igen Phenollösung und 1,0 ml einer 0,5 %-igen Natriummetaperjodatlösung in
0,15 n-Kaliumhydroxid. Die Reaktionslösung nimmt sofort eine blaue Farbe mit einem Absorptionsmaximum bei 660 nm an. Die Absorption
bei 660 nm wird sowohl an einer Probe der resultierenden lösung , die das Serum enthält, als auch an einer Kontrollösung
gemessen, die Wasser anstelle des Serums enthält und in gleicher Weise wie vorstehend erwähnt hergestellt wurde. Außerdem
wird eine Kontrollösung, die ein Serum enthält, dessen LAP-Aktivität bekannt ist, in gleicher Weise wie vorstehend erwähnt,
hergestellt und seine Absorption gemessen. Die LAP-Aktivität der Serumprobe kann durch eine Dreisatzrechnung aus den erhaltenen
Daten berechnet werden.
Die mit der vorstehend genannten Methode erhaltenen Ergebnisse stimmen gut mit den nach der derzeit weit verbreitet verwendeten
Methode von Takenaka-Takahashi unter Anwendung von L-Leucyl-ßnaphthylamid
als Substrat (Igaku to Seibutsugaku 65, 74~78 (1962)
erhaltenen, überein, wie in der Tabelle 2 gezeigt.
709817/1100
M/17248 - g -
-a-
Probe Nr. erfindungsgemaße Takenaka-Takahashi-
Methode Methode
| 1 | 450 GR-Einheiten | 479 GR-Einheiten |
| 2 | 520 | 510 |
| 3 | 124 | 114 |
| Zt | 480 | 47O |
| 5 | 234 | 220 |
| 6 | 371 | 378 |
| 7 | 365 | 360 |
| 8 | 873 | 880 |
| 9 | 161 | 159 |
| 10 | 137 | 138 |
Anmerkung: Als Proben wurden menschliche Sera verwendet.
Da das erfindungsgemaße Substrat, wie in Tabelle 3 gezeigt, sehr
stabil ist, kann es als Lösung verwendet werden. Wird eine langzeitige Lagerung gewünscht, so kann es mit einem Quellmittel
vermischt und zu Tabletten geformt werden, oder kann es mit einem Puffer vermischt und unter Bildung von Feststoffen lyophilisiert
werden, die unmittelbar vor der Anwendung zur Auflösung in Wasser gelangen.
709817/1 100
cd
Zeitraum
unmittelbar nach nach nach nach danach 1 Woche 1 Monat 2 Monaten 3 Monaten
Kontrolluntersuchung *1
^a LAP-Aktivität des Serums
ο (GR-Kinhciten) *2
Erhaltung des Substrats (%)
0,020
0,020 0,020 0,022
0,025
| 137 | 138 | 137 | 136 | 137 |
| 100 | 100 | 100 | 99,9 | 99,9 |
Anmerkung: *1 L-Leucyl-4-N,N-diäthylaminoanilid wird in einer 0,1 m-Phosphat-
pufferlösung beim pH-Wert 7,0 bei 2 bis 100C gelagert.
*2 Die LAP-Aktivität des gleichen Serums wird zu verschiedenen
Zeiten nach der vorstehenden Methode gemessen.
Zeiten nach der vorstehenden Methode gemessen.
CD O CO CO
M/17248 -
Die Messung der LAP-Aktivität nach, dem erfindungsgemaßen Verfahren
zeichnet sich dadurch aus, daß "Verunreinigungen, die gewöhnlich in einer Probe aus einem lebenden Körper vorhanden
sind, praktisch keine Wirkung auf die Messung aufweist. Verwendet man L-Leucyl-ß-naphthylamid oder L-Leucyl-p-nitroanilid
als Substrat so wendet man Wellenlängen von 450 nm oder 410 nm
für die Messung an, so daß durch Absorptionen von Verunreinigungen
in der Probe bei 400-500 nm Irrtümer auftreten. Es ist daher notwendig, Kontrolltests mit dem Reagens und Kontrolltests
mit der Probe durchzuführen, wodurch die Messung kompliziert
wird. Da jedoch bei der erfindungsgemaßen Methode Wellenlängen
von 660 nm verwendet werden, wirken sich Farbstoffe in lebenden Proben praktisch nicht auf die Messung aus. Liegen darüberhinaus
in einer lebenden Probe reduzierende Substanzen, wie Harnsäure, Ascorbinsäure und dergleichen vor, so werden sie durch überschüssiges
Oxidationsmittel zerstört und beeinträchtigen die
Messung nicht. Wie aus der Tabelle 4 deutlich hervorgeht, können erfindungsgemäß genaue Daten erzielt werden, selbst wenn in der
Probe reduzierende Substanzen vorhanden sind.
| Tabelle 4 | LAP-Aktivität | |
| (GR-Einheiten) | ||
| Zusatz | Konzentration | 160 |
| (mg/dl) | 160 | |
| keiner | — | 160 |
| Ascorbinsäure | 7,5 | 159 |
| Creatinin | 25 | 158 · |
| Glukose | 500 | 160 |
| Harnsäure | 10 | 156 |
| Bilirubin | 5 | |
| Hämoglobin | 500 | |
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M/17248 -44--
Wie vorstehend erwähnt, können durch das erfindungsgemäße Verfahren
bei LAP-Aktivitätsmessungen an lebenden Proben genaue
Daten rasch und einfach und darüberhinaus vom gesundheitlichen Standpunkt her in sicherer Weise erzielt werden.
Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung.
Zu einer Suspension von 15*0 g tert.-Butoxycarbonyl-L-leucinhydrat
und 9»9 g Ν,Ν-Diäthyl-p-phenylendiamin in Methylenchlorid
wurde eine Lösung von 14,9 g !!,li'-Dicyclohexylcarbodiimid in
Methylenchlorid tropfenweise unter Rühren bei 5 bis 10 C während
1 bis 2 Stunden gefügt und das Lösungsmittel wurde durch Destillieren entfernt. Zu dem Rückstand wurde Äthylacetat, das 22 g
gasförmigen Chlorwasserstoff enthielt, getropft, wodurch man Kristalle erhielt. Durch Umkristallisieren aus Methanol erhielt
man 14,8 g (70,2 % Ausbeute) L-Leucyl-4-diäthylaminoanilid-dihydrochlorid
vom Έ = 278-2600C (Zers.) in Form von farblosen
Prismen.
Analyse C^6H27N5O.2HCl:
ber.: C 54,86 %, H 8,34 %, N 11,99 %
gef.: C 54,76 %, H 8,39 %, N 11,96 %
IR (Nujol) cm"1: 1690, 1620 (-CO-NH-)
max
Unter Anwendung der vorstehend in Beispiel 1 beschriebenen Methode,
jedoch unter Ersatz des N,N-Diäthyl-p-phenylendiamins
durch 3,6 g 2-Kethyl-^-diäthylaninoanilin erhielt man 3»1 g
(42,5 % Ausbeute) I^I^ucyl^-methyl^-diäthylaminoanilid-dihydro-
709817/1100
.Μ/1724-8 -
-Al.
chlorid vom F - 184-1860C in Form eines weißen Pulvers.
Analyse C^7H29N5O*2HCl:
ber.: C 56,04 %, H 8,58 %, N 11,53 %
gef.: C 55,74 %, H 8,41 %, N 11,27 %
IR (KBr) cm"1: 1685, 1620 (-CO-NH-)
/lH2° : 230 nm
max
Unter Anwendung der in Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise, jedoch unter Ersatz des Ν,Ν-Diäthyl-p-phenylendiamins durch.
5,4g 2-Methyl-4-(N-äthyl-N-ß-methansulfonamidäthyl)-aminoanilin,
erhielt man 5,0 g (54,6 % Ausbeute) L-Leucyl-2-methyl-4-(N-methyl-N-ß-methansulfonamidäthyl)-aminoanilid-dihydrochlorid
vom 0C als weißes Pulver (Äthanol-Äthyläther).
Analyse C^gH,^^0,S· 2HCl:'
ber.: C 47,26 %, H 7,49 %, N 12,25 %
gef.: C 46,98 %, H 7,51 %, N 12,36 %
IR (KBr) cm"1: 1685, 1620 (-CO-NH-), 1315, 11^5
Ϊ H2° : 263 nm
max
max
Reagentien:
Eine Pufferlösung des Substrats: 0,1 m-Phosphatpufferlösung,
pH-Wert 7,0, enthaltend 1,0 mMol L-Leucycl^-N^-dimethylamino-
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M/17248 -
-A.
anilid.
Oxidationslösung: 0,1 n-Kaliumhydroxidlösung, enthaltend 0,2 %
Natriummetaperjodat.
Arbeitsweise:
Zu 2,0 ml der Pufferlösung des Substrats wurden 0,05 ml menschliches
Serum unter ausreichendem Rühren gefügt und die Mischung wurde anschließend in einem Thermostaten 15 Minuten auf 37 C
erwärmt. Anschließend wurden 1,0 ml der Oxidationslösung zur Farbbildung zu der resultierenden Mischung gefügt. Außerdem wurde
die gleiche Arbeitsweise wiederholt, wobei man jedoch 0,05 ml
Wasser anstelle der Serumprobe zur Verwendung als Reagens für den Kontrolltest verwendete. Es wurde die Absorption dieser Testproben
bei 510 nm gemessen. Gleichzeitig wurde eine Kontrolllösung,
die Serum, dessen LAP-Aktivität bekannt war, enthielt, in gleicher Weise wie vorstehend erwähnt hergestellt und seine
Absorption wurde gemessen. Die LAP-Aktivität der Serumprobe erhielt man durch Dreisatzrechnung aus den vorstehenden Daten.
Reagentien:
Pufferlösung eines Substrats: 0,1 m-Phosphatpufferlösung, pH 7»0»
enthaltend 1,0 mMol L-Leucyl-4--N,N-diäthylaminoanilid und 0,1 %
Phenol.
Oxidationslösung: 0,1 η Kaliumhydroxidlösung, enthaltend 0,5 %
Natriummetaperjodat.
Arbeitsweise:
Zu 2,0 ml der Pufferlösung des Substrats wurden unter ausreichendem
Rühren 0,05 ml einer Probe von menschlichem Serum gefügt,
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.M/17248
worauf die Mischung in einem !Thermostaten 15 Minuten lang auf
37 C erwärmt wurde,. Anschließend wurden 1,0 ml der Oxidationslösung zu der resultierenden Mischung zur Farbbildung zugefügt.
Außerdem wurde die" Arbeitsweise -wiederholt, wobei jedoch 0,05 ml
Wasser anstelle der Serumprobe verwendet wurden, um ein Reagens für den Kontrolltest zu erhalten. I1Ur diese Testproben wurde die
Absorption bei 660 nm gemessen. Gleichzeitig wurde eine Kontrolllösung,
die Serum enthielt, dessen LAP-Aktivität bekannt war,
in gleicher Weise wie vorstehend erwähnt, hergestellt und ihre Absorption wurde ebenfalls gemessen. Die LAP-Aktivität in der
Serumprobe erhielt man durch Dreisatzrechnung aus den erhaltenen
Daten.
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ORIGINAL INSPECTED
Claims (4)
- Patentansprüche { ΛIy/ L-Leucyl-p-aminoanilid-Derivaie der Formelworin R,. und R^ unabhängig voneinander ein Wasserstoff atom oder eine niedrig-Alkylgruppe, die durch eine Hydroxylgruppe oder eine Methansulfonamidgruppe substituiert sein kann, bedeuten und R, ein Wasserstoffatom oder eine niedrig-Alkylgruppe ist.
- 2. L-Leucyl-4—dimethylaminoanilidt L-Leucyl-4-diäthylaminoanilid, L-Leucyl-4-dipropylaminoanilid, L-Leucyl-2-methyl-zi—diäthylaminoanilid, gemäß Anspruch 1.
- 3. Verfahren zur Herstellung eines L-Leucyl-p-aminoanilids gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein p-Phenylendiaminderivat der Pormel• RP R1-. w \ ■ (II)R2worin R>,, Rp und R, wie angegeben definiert sind, mit L-Leucin, in dem die Aminogruppe durch eine Schutzgruppe geschützt ist, umsetzt und die Schutzgruppe entfernt.
- 4. Verwendung der L-Leucyl-p-asinoanilid-Derivate gemäß Anspruch 1 zur Kessung der Aktivität von Leucylaminopeptidase.709817/1100
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12369875A JPS5248632A (en) | 1975-10-14 | 1975-10-14 | Process for preparation of novel l-leucyl-p-alakyaminoanilide homologu es |
| JP12810675A JPS5252691A (en) | 1975-10-24 | 1975-10-24 | Method of determining activity value of leucin amino eptidase |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2646033A1 true DE2646033A1 (de) | 1977-04-28 |
| DE2646033B2 DE2646033B2 (de) | 1978-11-02 |
| DE2646033C3 DE2646033C3 (de) | 1979-06-21 |
Family
ID=26460563
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE19762646033 Expired DE2646033C3 (de) | 1975-10-14 | 1976-10-12 | L-Leucin-p-aminoanilide, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung zur Messung der Aktivität von Leucylaminopeptidase |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE2646033C3 (de) |
| FR (1) | FR2347334A1 (de) |
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| DE2841380A1 (de) * | 1977-09-22 | 1979-04-05 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Ester von hoeheren fettsaeuren und ihre verwendung zur bestimmung der lipaseaktivitaet |
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| DE3331588A1 (de) * | 1982-09-01 | 1984-03-01 | Toyo Jozo K.K., Tagata, Shizuoka | Amidverbindungen |
| WO2024189382A1 (en) | 2023-03-16 | 2024-09-19 | University Of Sunderland | Wound dressing |
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- 1976-10-12 DE DE19762646033 patent/DE2646033C3/de not_active Expired
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