DE2328896A1

DE2328896A1 - Quaternaere phenylcycloalkylammoniumverbindungen und daraus hergestellte arzneipraeparate

Info

Publication number: DE2328896A1
Application number: DE2328896A
Authority: DE
Inventors: John William Lewis; Michael John Readhead
Original assignee: Reckitt and Colman Products Ltd
Current assignee: Reckitt Benckiser Healthcare UK Ltd
Priority date: 1972-06-07
Filing date: 1973-06-06
Publication date: 1973-12-20
Also published as: GB1430298A; FR2187984A1; AU5626973A; AU470457B2; US3998843A; BE800623A; FR2187297A1; NL7307885A; DE2326364A1; NL7307860A; FR2187297B1; CA1002260A; FR2187984B1; GB1395236A; BE800523A; AU5546273A; US3762862A; CA996940A; AT323151B

Description

Patentanwälte Di ι l. - ing. ι! Ψειοκμλνν,

Dipl.-Ing. H. Weickmann, Dipl.-Phys. Dr. K. Fincke Dipl.-Ing. R A.V/kickmann, Dipl.-Chem. B. Huber

8 MÜNCHEN 86, DKN

POSTFACH 860 S20

MOHl.STRASSE 22, RUFNUMMER 98 39 21/22

FA 6463/439
Η/ΒΛ/bgr

RECKITT & COLMAN PRODUCTS LIMITED Dansom Lane, Hull, Yorkshire, England

Quaternäre Phenylcycloalkylarrunoniumverbindungen und
daraus hergestellte Arzneipräparate

Die Erfindung betrifft neue Phenylcycloalkylammoniumverbindungen der allgemeinen Formel I

1 2 R R

⁺ \ 3 CH R

CH

3 0 9 8 B 1 / 1 1 8

in der η eine ganze Zahl von 3 bis 5 ist, R einen C -Alkyl-

rest bedeutet, R ein Wasserstoff- oder Chloratom, eine Hydroxylgruppe oder einen C₁ --Alkylrest oder einen Rest OR darstellt,

6 ¹~·³
in dem R eine Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-, Carbamoyl-, Methylcarbamoyl-, Äthylcarbamoy1-, Propylcarbamoyl-, Dimethylcarbamoyl-, Diäthylcarbamoyl- oder Diphenylcarbamoylgruppe

5 4

ist, R ein Wasserstoffatom ist oder - falls R eine Hydroxylgruppe darstellt - auch ein Chloratom oder eine Hydroxyl-

2 3
bzw. Methylgruppe sein kann, NR R ein Pyrrolidin- oder

4
Piperidinrest ist oder - falls R eine Hydroxylgruppe ist auch eine Dimethylamino- oder Diäthylaminogruppe sein kann und A ein pharmazeutisch verträgliches Anion bedeutet.

In bevorzugten Verbindungen der allgemeinen Formel I ist η

1 2 3

die Zahl 4, R eine Methylgruppe, NR R ein Pyrrolidinrest,

4 5

R eine 3-Hydroxygruppe, R ein Wasserstoffatom oder eine 6-Hydroxygruppe, R eine Acetyl-, Propionyl-, Butyryl- oder Dimethylcarbamoylgruppe und/oder A ein Brom- oder Jodatom.

Spezielle Beispiele für pharmazeutisch verträgliche Anionen sind das Chlorid-, Bromid-, Jodid-, Methylsulfat- und p-Toluolsulfonat-Anion.

In den Verbindungen der Erfindung stehen der Arylrest und die quaternären Ammoniumgruppen in cis-Stellung zueinander.

Gegenstand der Erfindung sind ferner Arzneipräparate, die gekennzeichnet sind durch einen Gehalt an einer Verbindung der allgemeinen Formel I sowie üblichen pharmazeutischen Trägerstoffen, Verdünnungsmitteln und/oder Hilfsstoffen. Die Verbindungen der Erfindung sind wirksame Acetylcholinesterase-Inhibitoren und können bei Krankheitserscheinungen eingesetzt werden, die auf einen Mangel des Nervenimpulsüberträgers Acetylcholin zurückzuführen sind.

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- 3 - 23^8896

Die Verbindungen der Erfindung können dadurch hergestellt werden, daß man ein Alkylhalogenid oder -sulfat R-X, in dem R die vorstehende Bedeutung hat, mit einer Base der allgemeinen Formel II umsetzt

II

2 3 4 5

in der η, R , R , R und R die vorstehende Bedeutung haben, und gegebenenfalls die erhaltene quaternäre Ammoniumverbindung auf übliche Weise in ein anderes quaternäres Salz überführt.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

cis-2-Phenyl-l-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-jodid

Eine Lösung von 5,0 g cis-2-Phenyl-l-pyrrolidylcyclohexan und 10 g (3 Mol) Methyljodid in 50 ml Diäthyläther wird 96 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Der abgeschiedene Feststoff (5,5 g) wird dann gesammelt und aus Äthylacetat/ Äthanol umkristallisiert, wobei 4,5 g des gewünschten Produkts, F. 178 - 18O°C, erhalten werden.

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Analyse C,-,H_n^JN CHN J

ber. 55,0 7,1 3,8 34,2 %

gef. 55,0 7,0 3,9 33,7 %

Beispiel 2

cis-2-(3-HydroxyphGnyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexanbromid

a) 30 g 2-(3-Methoxyphenyl)-cyclohexanon, 20 g Pyrrolidin und 20 g einer 98- bis lOOprozentigen Ameisensäure werden 18 Stunden bei 130 bis 140 C unter Rückfluß gekocht. Hierauf wird das Gemisch abgekühlt und in verdünnte Salzsäure gegossen, mit Äther gev/aschen, basisch gemacht und mit Äther extrahiert, Der getrocknete Extrakt wird schließlich eingedampft, wobei 19 g cis-2-{3-Methoxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan als farbloses öl erhalten werden. Die Probe destilliert bei 150 bis 154°C/1 Torr; das Hydrochlorid schmilzt bei 145 bis 147°C.

Analyse: C₁₇H₂₅NO C H N Cl

ber.	69	,0	8	/9	4	,7	11	,9
gef.	68	,7	8	,8	4	,7	12	,4

(bl) 19 g des erhaltenen Öls werden 6 Stunden in 60 ml 47prozentiger Bromwasserstoffsäure gekocht. Die gekühlte Lösung wird dann mit Wasser verdünnt, mit Äther gewaschen, basisch gemacht und mit Äther extrahiert. Der getrocknete Extrakt wird eingedampft, der Rückstand mit Petroläther (Kp. 40 bis 6O⁰C) digeriert und aus Petroläther (Kp. 60 bis 8O⁰C)/Äthylacetat umkristallisiert, wobei 12 g cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan, F. 124 bis 126°C, erhalten v/erden.

Analyse: C₁₆H₃₃NO CHN

ber. 78,2 9,5 5,7 % gef. 77,7 9,6 5,5 %

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(b2) Eine Lösung von 2,5 g cis-2-(3-Methoxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan in Methylenchlorid v/ird vorsichtig zu einer eisgekühlten Lösung von 3 ml Bortribromid in 15 ml Methylenchlorid gegeben. Das Gemisch wird 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen und hierauf mit Wasser hydrolysiert. Die wäßrige Phase wird mit Ammoniak alkalisch gemacht und mit Äther extrahiert. Die .Ätherextrakte werden gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Beim Umkristallisieren des Rückstands aus wäßrigem Äthanol werden 2,0 g cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan, F. 125 bis 127 C, erhalten, das mit dem Produkt aus (bl) identisch ist.

(c) Eine Lösung von 0,6 g cis-2-(3-Hydroxypheny1)-1-pyrrolidylcyclohexan in Äthylmethylketon wird in einem Eisbad gekühlt und mit 1,5 ml Methylbromid versetzt. Der Kolben v/ird dicht verschlossen und 72 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Hierauf v/ird der erhaltene Feststoff (0,7 g) gesammelt und aus Äthylacetat/Äthanol umkristallisiert, v/obei 0,4 g cis-2-

(3-Hydroxyphenyl) -1- (N-methylpyrrolidinium) -cyclohexan-broinid , F. 189 bis 192°C, erhalten werden.

Analyse: C _?H	26	BrNO	B	C	H	N	3	,1	Br
		ber.	59,9	7,7	4		,1	23,5 %
		gef.	59,8	7,6	4		23,4 %
		e i s ρ	i e 1
cis-2-Phenyl-	1-	(N-methylpyrrolidinium)	-cyclohexan-chlorid

Eine wäßrige Lösung von 0,5 g cis-2-Phenyl-l-pyrrolidylcyclohexan wird 3 Stunden bei 80 bis 100°C mit 0,5 g aus Silbernitrat frisch hergestelltem Silberchlorid gerührt, gekühlt und filtriert. Das Filtrat wird eingeengt und der Rückstand mit Äthylacetat digeriert, v/obei 0,2 g des Methylammoniumchlorids,

ο
F. 193 bis 197 C, erhalten werden.

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Analyse: C₁₇H₃ ClN.1/2 H	B e	2°	7	P i	H	,4	N	4	,9	Cl	,3 %
	cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-	C	2		9,	'²	4,		rO	12	,2 %
ber.	chlorid	70,	9,	1	UI			12
gef.	71,	ι e				-cyclohexan-
i s		1-(N-methylpyrrolidinium)

Eine wäßrige Lösung von 1,0 g cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium) -cyclohexan-jodid wird 3 Stunden bei 80 bis 100°C mit 1,0 g aus Silbernitrat frisch hergestelltem Silberchlorid gerührt, gekühlt und filtriert. Das Filtrat wird eingedampft und der Rückstand mit Äthylacetat digeriert, v/obei 0,5 g des Methylammoniumchlorids,F. 135 bis 140⁰C, erhalten werden.

Analyse: C. .,H₀^ClNO-H₀O

1 / ZO c.

	B e	C	1	P	i	H	,0	5	N	5	Cl	3
ber.	65,	8		9	,8	4,	3	11,	1
gef.	65,		8	1	4,		11,
i s		e

cis-2-(3-Butyryloxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexaniodid

4 g Butyrylchlorid v/erden vorsichtig bei Raumtemperatur zur einer Lösung von 5 g cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan und 10 ml Triäthylamin in Methylenchlorid gegeben. Nach 4 8stündigem Stehen des Gemisches bei Raumtemperatur wird dieses mit Wasser gewaschen, die organische Phase abgetrennt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an einer Aluminiumoxidsäule (neutral; Grad 1) mit Äthylacetat/Petroläther (Kp. 60 bis 8O⁰C) (1:4) als Laufmittel chromatographiert.

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Beim Einerigen des Lösungsmittels erhält man 5,5 g eines Öls. 5,0 g dieses Öls werden in Äther gelöst und mit 10 g Methyljodid versetzt. Man läßt das Gemisch 48 Stunden bei Raumtemperatur stehen, sammelt dann den erhaltenen Feststoff und kristallisiert diesen aus Äthylacetat/Äthanol um, wobei 3,8 g des Methylammoniumjodids, F. 166 bis 167°C, erhalten

v/erden.	B e	C	1	P i	H	, 1	6	N	J
		55,	1		7,	,8	1-	3,	,1 27,8 %
Analyse: C H JNO₃	55,	6,	1		2,	,9 27,9 %
	i s	. e	cis-2-(3-Dimethylcarbamoyloxyphenyl)-
			cyclohexan-jodid		(N-methylpyrrolidinium)-

ber.
ge f.

6 g cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-pyrrolidylcyclohexan, 10 g Triäthylamin und 5,3 g Dimethylcarbamoylchlorid werden 5 Stunden in siedendein Xylol unter Rückfluß erhitzt. Das gekühlte Gemisch wird in Wasser gegossen und mit Äther extrahiert. Die Ätherextrakte werden gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der erhaltene Rückstand (7,9 g) wird an einer Säule, die 400 g neutrales Aluminiumoxid (Grad 1) enthält, mit Äthylacetat/Petroläther (Kp. 60 bis 80°C) (1:9) als Laufmittel chromatographiert. Beim Eindampfen des Lösungsmittels erhält man 5,0 g eines öl. Dieses wird in Äther ge-

mit
löst und 7 g Methyljodid versetzt. Man läßt das Gemisch 24 Stunden bei Raumtemperatur stehen, sammelt den erhaltenen Feststoff und kristallisiert ihn aus Äthylacetat/Äthanol um,· wobei 4,2 g des Methylammoniumjodids, F. 184 bis 186°C, erhalten werden.

Analyse:	^C2O^H31^JN2°2	C	4	H	,8	N	1	J	,7
	ber.	52,	4	6	,9	6,	2	27	,1
	gef.	52,	6	6,	28

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In der folgenden Tabelle sind weitere Beispiele für Verbindungen der allgemeinen Formel I wiedergegeben, in denen R eine Methylgruppe und R ein Wasserstoffatom ist, mit Ausnahme von Beispiel 16, wo R eine 6-Hydroxylgruppe ist, und von Beispiel 18, wo R eine Äthylgruppe ist. In den Beispielen 7 bis 18 v/ird nach dem Verfahren von Beispiel 1 gearbeitet, in den Beispielen 19 und 20 nach dem Vorfahren von Beispiel 6.

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TABELLE

	Bei spiel	R² R³	A	r*	η	Ausbeute	F. (⁰C)	Ana	C	lyse {%) gef.	N	Summenformel	Ana	C	lyse {%) ber.	N	3,8
	7	\^ *} ' I	J	4-CH₃	4	40	124-127	56,0	H	3,6	^C18^H28^JN	56,2	H	3,6	4,8 5,8
	8	-(CH₂),-	J	3-CH₃	4	50	176-178	55,7	7,4	3.7	C₁₈H₂₈JN	56,2	7,3	3,6
	9	— (r* u ^	J	3-C1	4	45	160-162	49,8	7,2	3,2	C₁₇H₂₅ClJN	50,3	7,3	3,5
	10	-(CH₂),	J	4-Cl	4	50	187-189	50,3	6,2	3,3	C₁₇H₂₅CUN	50,3	6,2	3,5
O tt\	11 12	/pit \ _ _β /pn \ _	J J	3-OH 4-OH	4 4	75 70	160-164 232-233	52,5 52,7	6,0	3.6 4,0	C₁₇H₂₆JNO C₁₇H₂₆JNO	52,7 52,7	6,2	3,6 3,6
%AJ CO cn	13	"(CH₂)₅-	J	H	4	55	212-214	56,1	6,8 6,8	3,6	C₁₈H₂₈JN	56,1	6,8 6,8	3,6
	14		J	3-OH	3	90	125-127	51,3	7,4	3,8	C_l6H₂,JN0	51,5	7,3	3,8
->	15	-(CH₂),-	J	3-0C0CH	4	50	152-154	53,0	6,5	3,2	C₁₉H₂₈JNO₂	53,1	6,5	3,3
	16	-(CH₂),-	J	3-OH	4	50	195-197	50,7	6 Λ	3,7	C₁₇H₂₆JNO₂	50,6	6,6	3,5
	17	-(CH₂),-	J	3-OH	5	30	180-185	53,7	6,5	3,2	C₁₈H₂₃JNO	53,9	6,5	7,0 3,5
	18	CH CH	J	3-OH	4	50	136-141	51,4	7,2	3,8	^C16^H26^JNO	51,2	7,0
	19 20 ■	-(CH₂),- -(CH₂),-	J J	CM CM LA LA *ZC ZC* vO CM CJ CJ Z Z O O O CJ O O I I CA CA	4 4	65 55	208-211 198-201	61,9 53,8	6,9	4,7 5,7	CM CM O O CM CM Z Z LA LA ΓΑ CA 3: ZiZ O CM ΓΑ CM CJ O	61,9 54,2	6,1 7,2
	6,1 7.1

?3?8896

Beispiel 21

N- (cis-2-Phenylcyclohexyl)-(N-methylpyrrolidinium)-p-toluolsulfonat

2,3 g cis-2-Phenyl-l-pyrrolidylcyclohexan und 1,9 g Methylp-toluolsulfonat werden 18 Stunden in siedendem Xthylacetat unter Rückfluß gekocht. Es bildet sich ein öl, das beim Abkühlen schnell kristallisiert. Durch Umkristallisieren aus Äthanol/Sthylacetat werden 3,0 g des quaternären Ammoniumsalzes, F. 146 bis 148°C, erhalten.

Analyse:	C₂₄H₃₃NO₃S.1/2	H₂O	,8	H	1	N	3	S	5
		C	,0	8,	3	3,	2	7,	6
	ber.	67		8,		3,		7,
	gef.	68

Die Bestimmung der Anticholinesterase-Aktivität erfolgt in vitro nach dem Verfahren von Michel, J.Lab.Clin.Med. Bd. 34, (1949) S. 1564, unter Verwendung von Acetylcholin als Substrat und gewaschenen menschlichen Erythrozyten ("red cells") als Quelle für die Acetylcholinesterase. In der folgenden Tabelle sind die zu etwa 50prozentigen Inhibierung der Acetylcholinesterase erforderlichen Arzneimittelkonzentrationen angegeben :

Beispiel Konzentration

1 2 5 7 8

10 11 14 16

Edrophonium Neostigmin

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2	X	ίο"⁷	in
2	X	10"⁸	m
2	X	10" ⁸	m
		10" ⁶	m
6	X	ίο"⁶	m
2	X	ίο"⁷	m
2	X	10" ⁸	m
		ΙΟ"⁷	m
		10"*	m
5	X	ΙΟ" ⁵	m
4	X	io"⁷	m

2 3^8896

Die Angaben für Edrophonium und -Neostigmin dienen zum Vergleich. Die angegebenen Werte zeigen, daß die Verbindungen der Erfindung eine Anticholinestereise-Wirkung entfalten, die der von Neostigmin, einem klinisch eingesetzten Präparat, vergleichbar und in manchen Fällen überlegen ist. Die entsprechende Inhibitorkonzentration für trans-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-jodid (dem entsprechenden trans-Isomeren der Verbindung von Beispiel 11)

-4

beträgt dagegen 10 m; d.h. das cis-Isomere ist etwa 5000mal

aktiver als das trans-Isomere.

Acetylcholinesterase-Inhibitoren werden zur Behandlung klinischer Syndrome eingesetzt, die durch mangelnden Tonus der Skelett- oder glatten Muskulatur gekennzeichnet sind, z.B. der Myasthenia gravis, des paralytischen Heus, der Harnretention und des Glaukoms. Sie können auch zur Aufhebung der während der Operation durch nichtpolarisierende Skele.ttmuskelrelaxantien, wie D-Tubocurarin, induzierten Muskelerschlaffung eingesetzt werden.

D-Tubocurarin wird klinisch zur Entspannung der Skelettmuskeln bei gewissen Operationen verwendet. Nach beendeter Operation setzt man Antiacetylcholinesterasen sein, um die Relaxation aufzuheben.

Die Fähigkeit der Verbindungen der Erfindung zur Aufhebung der Tubocurarin-induzierten Muskelblockade bei Ratten und Katzen wurde experimentell geprüft. Hierbei wurde nach der von E. Zaimis in J. Physiol., Bd. 122 (1953) S. 238, beschriebenen Methodeverfahren, bei der die Tiere betäubt werden und der rechte Hinterfuß in horizontaler Stellung festgeschnallt wird, wobei die Sehne des m.tibialis anterior an einem Flachfedermyographen befestigt ist. Durch überschwellige elektrische Stimulation des n.tibialis werden Kontraktionen

5 1/1-18

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des m.tibialis anterior induziert und mit Hilfe eines Streifenrecorders registriert. Hierauf injiziert man die in 0,9prozentiger Kochsalzlösung gelösten Arzneistoffe in die Femoral-Vene In einem Experiment wird die zur teilweisen Blockade (80 bis 90%) der neuromuskulären Übertragung erforderliche Tubocurarindosis ermittelt und die Anticholinesterasen werden hierauf zum Zeitpunkt der maximalen Blockade injiziert. Die Erholungsphase nach Verabfolgung der Antiacetylcholinesterasen wird mit der nach alleiniger Verabfolgung von Tubocurarin verglichen. Die für die Verbindungen der Beispiele 1 und 11 erzielten Ergebnisse sind zusammen mit den für Neostigmin, einem klinisch eingesetzten Präparat, im folgenden zusammengestellt.

Beispiel Zur Erzielung des maximalen Anticurare-Effekts

erforderliche Dosis (yg/kg)

11
Neostigmin

Für drei der genannten Verbindungen wurde die intravenöse LD₁. an Ratten ermittelt und hieraus der therapeutische Quotient errechnet (definiert als das Verhältnis der LD₅₀ ^zu jener Dosis, die eine maximale Tubocurarin-Aufhebwirkung ergibt):

Beispiel LD_r_ (mg/kg) Therapeutische Quotient

1 1,5 7,2

11 0,18 15

Neostigmin 0,2 2

Die Ergebnisse zeigen, daß die Verbindungen der Beispiele 1

Katze	Ratte
100	100
30	25
100	100

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? 3 '> 8 8 9 6

und 11 in der Humanmedizin einen breiteren Sicherheitsbereich erv/arten lassen.

In der klinischen Anwendung appliziert man Neostigmin intravenös in einer Dosis von 2,5 bis 3,0 mg, um die neuromuskulären Effekte des Tubocurarins aufzuheben. Bei Zugrundelegung der oben genannten Ergebnisse dürfte die entsprechend v/irksame intravenöse Dosis beim Menschen für cis-2-Pheny1-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-bromid bei etwa 1,0 bis 3,0 mg liegen, während für cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-bromid ein Wert von 0,5 bis 1,0 mg zu erwarten ist. Neostigmin hat in der Humanmedizin den Nachteil, daß es eine Vordosierung mit Atropin (1 mg) erfordert, um unerwünschte Muscarineffekte zu vermeiden (z.B. Salivation und gesteigerte Darmmotilität). Tierversuche mit den Verbindungen der Beispiele 1 und 11 zeigen, daß diese weniger ausgeprägte Muscarinaktivität besitzen und daher keine Vorbehandlung des Patienten mit Atropin erfordern.

Ein Teil dieser Aussagen stützt sich auf Ergebnisse von Versuchen am Menschen. In diesen Versuchen wurden Kontraktionen der vorderen Beinmuskulatur durch überschwellige Stimulation des n.popliteus lateralis induziert. Nachdem zunächst die Kontrollaktivität registriert wird, verabfolgt man durch langsame intravenöse Infusion solange Tubocurarin, bis die Amplitude der Muskelkontraktion auf etwa 5O% des Kontrollniveaus reduziert ist. Nach 3 Minuten verabfolgt man die Anticholinesterase intravenös als Kochsalzlösung und mißt die Kontraktionsamplitude solange, bis das Kontrollniveau wieder erreicht ist. Der durch 2,5 mg Neostigmin nach vorangehender Verabfolgung von 1,2 mg Atropin hervorgerufene Erholungseffekt wird mit dem durch 0,6 bis 0,8 mg cis-2-(3-Hydroxyphenyl) -1- (N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-bromid bewirkten Erholungseffekt verglichen. In beiden Fällen beobachtet man

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ORIGINAL INSPECT!

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sofortige Erholung, · jedoch sind die von der erfindungsgemäßen Verbindung hervorgerufenen Muscarineffekte weniger ausgeprägt als die der Neostigmin/Atrcpin-Kombination.

Myasthenie ist das Syndrom der gesteigerten Ermüdbarkeit der quergestreiften Muskulatur. Ein charakteristisches Kennzeichen, von dem sich der Name dieser Krankheit ableitet, ist die außerordentliche Schwäche der willkürlichen Muskeln sofort nach Beanspruchung, die aber nach kurzer Ruhepause wieder behoben ist. Obwohl diese Schwäche jeden Muskel befallen kann, , sind meist die Augenlider, die extraokularen Muskeln, die Bulbusmuskeln, die Nackenmuskeln und die proximalen Muskeln der oberen Extremitäten betroffen. Die Muskeln der Hand, der unteren Extremitäten und des Körpers tainms v/erden gewöhnlich erst später einbezogen. Acetylcholin wirkt bekanntlich als Überträger der Nervenirr.pulse an der neuromuskulären Synapse. Bei Auftreten der Myasthenie ist nun die Freisetzung des Acetylcholins am Nervenende gestört, so daß die neuromuskuläre Übertragung verschlechtert wird. Den durch diesen Effekt bedingten Symptomen kann dadurch entgegengewirkt werden, daß man die Acetylcholinesterase blockiert, also das Enzym, 'welches normalerweise für den Acetylcholinmetabolismus verantwortlich ist.

Es gibt derzeit kein anerkanntes Tiermodell für Myasthenia

Arzneimittel
gravis; neu eingeführte_Awerden daher zunächst auf ihre Antiacetylcholinesterase-Aktivität geprüft und weniger auf ihre Antimyasthenie-Aktivität. Bei den Antiacetylcholinesterase-Tests unterscheidet man in vitro-und in vivo-Tests.

Die in vitro-Prüfung der Verbindungen wurde nach der Methode von Ellmann, Biochem.Pharmacol,Bd. 7, (1961) S. 88 mit Acetylthiocholin als Substrat und Acetylcholinesterase aus Rinder erythrozyten als Enzym durchgeführt. Die Reaktionsgeschwindigkeiten wurden mit und ohne Inhibitor unter Konkurrenzbedingungen

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ORIGINAL INSPECTED

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ermittelt, d.h. das Substrat v/urde vor dem Inhibitor zugegeben. Die Ergebnisse wurden nach der Methode von Lineweaver-Burk aufgetragen und zur Ermittlung der Inhibitorkonstanten (K.-Werte) herangezogen. Im folgenden sind die Ergebnisse für Verbindungen der Beispiele 1 und 11 sowie für Neostigmin als Vergleichsverbindung zusammengestellt:

Beispiel	K.	-Wert	10"⁹	m
1	7.7	X	ΙΟ"⁹	m
11	7.3	X	1(T⁸	m
Neostigmin	3,0	X	10"⁶	m
Pyridostigmin	4,8	X

Ein kleiner K.-Wert bedeutet hohe Antiacetylcholinesterase-Aktivität; die Ergebnisse zeigen somit, daß die Verbindungen der Beispiele 1 und 11 wirksamer als Neostigmin sind.

Die in vivo-Prüfung erfolgte nach dem von R. Schneider, J.Pharm.Pharmacol., Bd. 22 (1970) S.298 ausgearbeiteten Miosis-Test an Mäusen, bei dem Antiacetylcholinesterasen eine Einengung der Pupille im Auge der Mäuse hervorruft, sowie nach dem von A.S.V.Burgen, Brit.J.Pharmacol., Bd. 4 (1949), S. 185, ausgearbeiteten Chromodacryorrhoea-Test an Ratten, bei dem Antiacetylcholinesterasen die Fähigkeit von Acetylcholin verstärken, rote Tränen bei Ratten hervorzurufen. Beide Tests erlauben es, die Wirksamkeit und Wirkungsdauer der Antiacetylcholinesterasen abzuschätzen. In der folgenden Tabelle ist die Wirksamkeit verschiedener Arzneistoffe mit der von Neostigmin, einem klinisch angewandten Präparat, verglichen.

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Claims

Patentansprüche

1, Quaternäre Phenylcycloalkylammoniumverbindungen der allge·

meinen Formel I

(CH_o)n

in der η eine ganze Zahl von 3 bis 5 ist, R einen C₁ '_-

4 Alkylrest bedeutet, R ein Wasserstoff- oder Chloratom,

eine Hydroxylgruppe oder einen C .,-Alkylrest oder einen

6 6

Rest OR darstellt, in dem R eine Acetyl-, Propionyl-,

Butyryl-f Carbamoyl-, Methylcarbamoyl-, Xthylcarbamoyl-, Propylcarbamoyl-, Dimethylcarbamoyl-, Diäthylcarbamoyl-

oder Diphenylcarbamoylgruppe ist, R ein Wasserstoffatom

4 ist, oder - falls R eine Hydroxylgruppe darstellt - auch

ein Chloratom oder eine Hydroxyl- bzw. Methylgruppe sein

2 3
kann, NR R ein Pyrrolidin- oder Piperidinrest ist oder

4
- falls R eine Hydroxylgruppe darstellt - auch eine

Dimethylamine- oder Diäthylaminogruppe sein kann und A ein pharmazeutisch verträgliches Anion bedeutet.

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ORiGWAL INSPECTED

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2. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,

daß in der allgemeinen Formel I R eine Acetyl-, Propionyl-, Butyryl- oder Dimethylcarbamoylgruppe ist.
3. Verbindungen nach den Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß in der allgemeinen Formel I η die Zahl 4

1 2 3

ist, R eine Methylgruppe, NR R einen Pyrrolidinrest,

4 5

R eine Hydroxylgruppe in 3-Stellung, R ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe in 6-Stellung und A ein Bromid- oder Jodidion bedeutet.
4. Verbindungen nach den Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß in der allgemeinen Formel I a ein Chlorid-, Bromid-, Jodid-, Methylsulfat- oder p-Toluolsulfonation bedeutet.
5. cis-2-Phenyl-l-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-jodid.
6. eis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-eyelohexanbromid.
7. cis-2-Phenyl-l-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-chlorid.
8. cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexanchlorid.
9. cis-2-(3-Butyryloxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-jodid.
10. cis-2-(3-Dimethylcarbamoyloxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium) cyclohexan-jodid.
11. cis-2-(3-Hydroxyphenyl)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexanjodid.

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12. K-(cis-2-Phenylcyclohexyl)-N-methylpyrrolidinium-ptoluolsulfonat.
13. cis-2-(3,6-Dihydroxypheny1)-1-(N-methylpyrrolidinium)-cyclohexan-jodid.
14. Arzneipräparate, gekennzeichnet durch einen Gehalt an mindestens einer Verbindung der allgemeinen Formel I, sowie üblichen pharmazeutisch verträglichen Trägerstoffen, Hilfsstoffen und/oder Verdünnungsmitteln.
15. Arzneipräparate nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß sie für die orale Verabreichung etwa 1 bis 20 mg einer Verbindung der allgemeinen Formel I enthalten.
16. Arzneipräparate nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß sie für die parenterale Verabfolgung etwa 0,5 bis 5,0 mg einer Verbindung der allgemeinen Formel I enthalten.