DE2126127C2

DE2126127C2 - Freifließende Kristalle des Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalzes von PGF↓2↓↓a↓ sowie ein Verfahren zu deren Herstellung

Info

Publication number: DE2126127C2
Application number: DE2126127A
Authority: DE
Inventors: Walter Kalamazoo Mich. Morozowich
Original assignee: Upjohn Co
Current assignee: Pharmacia and Upjohn Co
Priority date: 1970-06-01
Filing date: 1971-05-26
Publication date: 1981-11-12
Also published as: NO132194C; SU384228A3; PL81549B1; GT197129402A; JPS5523825B1; PH9218A; NO142499C; GB1288174A; FR2100712B1; SE377459B; FI53308B; ZA713181B; CH563330A5; NO142499B; SE411345B; IL36860A; DE2126127A1; US3657327A; NL7107062A; DK142698B

Description

Die Erfindung betrifft freifließende Kristalle des Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalzes von PGF_:,. der Formel

OH

CH₂OH

COO⁸H₃N-C-CH₂OH

i
CH,OH

sowie ein Verfahren zur Herstellung derselben, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine verdünnte Lösung von PGF₂,* in Acetonitril von 65 bis 85°C mit einer konzentrierten wäßrigen Lösung einer äquivalenten Menge Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan mischt, das erhaltene Gemisch auf 20 bis 30⁰C abkühlt, bei dieser Temperatur hält, bis sich Kristalle gebildet haben, die Kristalle abtrennt und gewünschtenfalls aus wäßrigem Acetonitril umkristallisiert.

PGF₂* ist bekanntlich für verschiedene pharmakologische und medizinische Zwecke brauchbar, beispielsweise zur Einleitung der Wehen und der Geburt bei tragenden Tieren einschließlich Menschen, zur Menses-Regulierung bei tragenden und nichttragenden Tieren einschließlich Menschen. Für diese Zwecke wird die Verbindung gewöhnlich intravenös injiziert oder infundiert, obgleich zur Einleitung von Wehen auch orale Verabreichung erfolgt sowie vaginale und intrauterine Verabreichung zur Regulierung der Menstruation.

Es ist schwierig, mit dieser Carbonsäure für pharmakologische und medizinische Zwecke geeignete Zusammensetzungen zu formulieren. Die Verbindung löst sich beispielsweise nur schwer in Wasser oder in für intravenöse Injektionen und Infusionen erforderlichen isotonischen Lösungen. Gewöhnlich muß eine Vorbehandlung des Prostaglandins mit einem mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel und/oder einer wäßrigen Lösung einer Base, beispielsweise Natriumhydroxid oder Natriumcarbonat, erfolgen, ehe man eine isotonische wäßrige Lösung der geeigneten Konzentration herstellen kann. f'GF_2a ist außerdem ein niedrigschmelzender, wachsrtrtiger Feststoff, welcher nur langsam fest wird und !schwierig zu reinigen ist, und der sich langsam in wäßrigen basischen Lösungen löst.

PGFj* ist eine Carbonsäure, und bei den bekannten Formulierungsverfahren erfolgt zunächst Salzbildung, wenn PGF_2a in wäßrig-basischen Lösungen gelöst wird, siehe z. B. GB-PS 10 40 544, welche die pharmakologi-

sehe und medizinische Verwendung von PGF), in Form pharmakologisch zulässiger Salze beschreibt. Unter den vorgeschlagenen Kationen befinden sich diejenigen der Alkali- und Erdalkalimetalle, von Ammoniak und verschiedenen Aminen.

In der DE-OS 14 43 474 wird neben einer Vielzahl anderer Verbindungen, die mit PGF₂* ein pharmazeutisch verträgliches Salz zu bilden vermögen. Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan genannt.

Versuche, dieses Salz herzustellen, führten jedoch immer nur zu öligen Produkten.

Es wäre nun vorteilhaft, PGF₂, in Form eines stabilen, kristallinen, hochschmelzenden Salzes zur Hand zu haben, welches sich rasch in Wasser oder in den für intravenöse Verabreichungen erforderlichen isotonischen Lösungen löst. Derartige Salze wären auch brauchbar zur Herstellung von Formulierungen für andere Verabreichungsarten, beispielsweise zur oralen, buccalen, intravaginalen und intra-uterinen Verabreichung. Zur Herstellung von Präparaten von gewünschtem Reinheitsgrad sollten diese Salze umkristallisierbar sein. Dies würde einen großen Vorteil bedeuten, da diese Verbindung, wie bereits erwähnt, als freie Säure nur schwer zu reinigen ist.

Aufgabe der Erfindung war es somit, das bisher nur in öliger Form bekannte PGF_2l% oder dessen Salze in eine Substanz umzuwandeln, deren physikalische Eigenschaften derart sind, daß sie sich für pharmazeutische Formulierungen und Verabreichung an Menschen besser eignet, ohne dabei jedoch die höchst wünschenswerten medizinischen Eigenschaften der bekannten Verbindungen zu verändern.

Diese Aufgabe konnte mit Hilfe der erfindungsgemäßci freifließenden Kristalle des Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalzes von PGF₂* sowie eines Verfahrens zu deren Herstellung gelöst werden. Die erfindungsgemäßen Salzkristalle sind nicht hygroskopisch, leicht zu trocknen, frei von Solvatwasser bzw. -acetonitril und

umkristallisierbar. Sie lösen sich rasch und vollständig in Wasser und in den üblichen isotonischen Lösungen; sie sind für die gleichen pharmakologischen und medizinischen Zwecke wie PG F?-» anwendbar.

Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens empfiehlt es sich, äquivalente Mengen an Prostaglandin und Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan einzusetzen. Die zuletzt genannte Verbindung ist in Acetonitril fast unlöslich, und ein Überschuß fällt daher mit den gewünschten Salzen aus und verunreinigt diese. Bei Verwendung von weniger als 1 Äquivalent des Amins bleibt ein Teil des Prostaglandins im Acetonitril zurück.

Wie bereits erwähnt, erfolgen Salzbildurg und Kristallisation in einem Gemisch aus Acetonitril und Wasser. Es ist wichtig, daß das Verhältnis Acetonitril zu Wasser derart ist, daß die maximale Salzmenge aus dem Lösungsmittelgemisch auskristallisiert. Selbstverständlich muß man genügende Wassermengen verwenden, um das Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan in eine homogene Lösung zu bringen und in dieser Form der Acetonitrülösung des Prostaglandins einzuverleiben. Verwendet man jedoch wesentlich mehr Wasser als die oben angegebene Mindestmenge, so werden überschüssige Mengen an Acetonitril benötigt. Für jedes Volumenteil Wasser sollten etwa 100 bis 200 Volumenteile Acetonitril eingesetzt werden. Mit wesentlich weniger Acetonitril erhält man ein Gemisch aus Acetonitril und Wasser, welches das gewünschte Salz unnötigerweise in Lösung hält. Die Verwendung größerer Mengen an Acetonitril ist unnötig und führt zu unnötigem Verbrauch dieses Lösungsmittels. Eine zweckmäßige und geeignete Wassermenge liegt bei etwa 3 rn! pro Gramm Tris-(hydroxymethyl)-arninorncthan. Wegen der Löslichkeit dieses Amins in Wasser (etwa 0,5 g/ml bei 25°C) kann nicht wesentlich weniger Wasser eingesetzt werden. Bei Verwendung von größeren Wassermengen benötigt man dann auch größere Mengen an Acetonitril.

Die Acetonitrülösung des Prostaglandins sollte beim Mischen mit der wäßrigen Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan-iösung eine Temperatur von 65 bis 85⁼C aufweisen. Zweckmäßig wird die Acetonitrülösung auf etwa den Siedepunkt, d. h. circa 80° C bei Normaldruck, erwärmt. Um Zersetzung des Prostaglandins so niedrig wie möglich zu halten, sollte rasch erwärmt werden, und das Vermischen mit der wäßrigen Aminlösung sollte sofort erfolgen, nachdem die Acetonitrülösung die gewünschte Temperatur erreicht hat. Es ist zweckmäßig, wenn auch nicht unbedingt erforderlich, die wäßrige Aminlösung vor dem Mischen auf 50 bis 80⁰C zu

Die wäßrige Aminlösung wird vorzugsweise langsam und unter kräftigem Rühren der heißen Acetonitrülösung zugegeben. Das erhaltene heiße Gemisch wird dann auf Raumtemperatur (etwa 20 bis 30° C) abgekühlt.

Beim ersten Ansatz empfiehlt es sich, in einem Glasgefäß zu arbeiten und die Innenwand kräftig mit einem Glasstab zu reiben, sobald das Gemisch trübe wird. Dadurch wird die Kristallbildung beschleunigt Bei späteren Ansätzen können einige Kristalle aus der ersten Kristallisation als Kristallkeime zum Zeitpunkt der Trübung zugesetzt werden, um die Kristallbildung zu beschleunigen.

Nach dem ersten Abkühlen wird das Gemisch bei Raumtemperatur (ca. 20 bis 30"C) gehalten, bis keine weitere Kristallisation mehr erfolgt. Die Kristalle werden dann in üblicher Weise gesammelt z. B. durch Filtrieren oder Zentrifugieren, und mit wenig Acetonitril gewaschen. Die Hauptmenge des Acetonitrile wird entweder bei vermindertem Druck oder in einem Strom warmen Stickstoffs oder Argons entfernt. Die Kristalle ι werden dann gegebenenfalls auf eine geringe Teilchengröße vermählen, und anschließend wird die Trocknung bei 50 bis 75°C beendet.

Will man das Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalz von PGF.n Umkristallisieren, so löst man das Produkt

in zweckmäßig in einer geringen Wassermenge (1 bis 3 ml Wasser pro Gramm Salz), dann wird die Lösung unter kräftigem Rühren zu heißem Acetonitril (65 bis 85°C, etwa 200 ml/g Salz) zugegeben, danach wird das erhaltene Gemisch auf Raumtemperatur (20 bis 30⁰C)

r. abgekühlt, wobei zweckmäßig am Trübungspunkt einige Kristalle zugesetzt werden, um eine rasche Kristallisierung sicherzustellen. Die Kristalle werden dann gesammelt, gewaschen und wie oben beschrieben, getrocknet.

:o Obgleich gewöhnlich befriedigende Ergebnisse erzielt werden, wenn man das gesamte Verfahren bei Temperaturen zwischen 20 und 3O⁰C durchführt, erweist sich eine vorübergehende Abkühlung in der zweiten Verfahrensstufe unterhalb 20⁰C, vorzugsweise

j) unterhalb 0⁰C oder bis zu — 20⁰C, häufig als vorteilhaft. Anschließend erwärmt man das abgekühlte Gemisch langsam auf 20 bis 30⁰C. Durch mindestens einmaliges und gelegentlich zwei- oder mehrmaliges Abkühlen in dieser Weise kann man die Kristallisation beschleuni-

si > gen.

Nach beendeter Kristallbildung wird das Salz gesammelt, gewaschen und wie vorstehend beschrieben, getrocknet.
Will man PGF?v aus den Tr;s-(hydroxymethyl)-amino-

;·, methansalzen zurückgewinnen, so löst man das Salz in Wasser (10ml pro Gramm Salz), stellt den pH-Wert der Lösung auf 6 bis 7 ein und extrahiert wiederholt mit Äthylacetat. Die Äthylacetatextrakte werden vereinigt, nacheinander mit Wasser und gesättigter wäßriger

au Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft, wobei man PG Fix erhält.

Beispiel

Eine Lösung von 1.645 g Tris-(hydroxymethyl)-amij nomethan in 3,0 ml Wasser von 60⁰C wird unter kräftigem Rühren zu einer Lösung von 5,00 g PGF₂, in 700 ml Acetonitril, die eben zum Sieden gekommen ist, zugesetzt. Das Gefäß, in dem sich zuvor die wäßrige Aminlösung befand, wird 3 χ mit jeweils 0,66 ml Wasser Vi ausgespült, wobei diese Wassermengen unter kräftigem Rühren der Acetonitrülösung zugegeben werden. Dann !äßt man Has Ormkch rfnrrh Eintauchen in Wasser auf etwa 55°C abkühlen, anschließend langsam auf 25°C. Am Trübungspunkt (etwa 50⁰C) wird die Innenwand des > Glasgefäßes kräftig mit einem Glasstab gerieben. Dann wird das Gemisch 12 Stunden lang bei 25° C stehengelassen. Die erhaltenen Kristalle werden unter Stickstoff abfiltriert, auf dem Filter mit 50 ml Acetonitril gewaschen und dann getrocknet, indem man Stickstoff

■ίι bei 50"C 1 Stunde lang durch den Filter strömen läßt. Anschließend werden sie noch 2 Stunden in einem Trockenschrank bei 70⁰C getrocknet Man erhält 5,965 g Tris-(hydroxymethy!)-aniinomethansalzes von PGF2* in Form freifließender Kristalle, Schmelzpunkt

ιϊ lOObis lOrC.Molekulargewicht:475,61.

Wiederholt man das Verfahren, jedoch unter Verwendung weniger Kristalle aus dem Produkt als Keime (anstelle des Reibens mit dem Glasstab), so

erhält man das gleiche Salz in freifließender kristalliner Wasser von über 500 mg/ml. Form vom gleichen Schmelzpunkt. Das NMR-Spektrum ist wie folgt:

Das erfindungsgemäße Salz besitzt eine Löslichkeit in

NMR-Spcklrum von PGF₁,, TIIAM-SaIz in d.,-Mclhanol

Chemische
Verschiebung, ö

0,92
1,1-2,0

2,0-2,7

3,37

3,7

3,6-4,3

5,05

5,2-5,9

Bereich

Ty»

3 C-Methyl

13 Methylen- und Mcthin-H

7 AIIyI-H

1 rückständiges Lösungs-

6 mittel Carbinolmethylen

3 Carbinol-H

10 austauschbares H von NH und OH

4 Vinyl-H

Protonen

20,20,20

3,3,8,10,10,16,16,
17,17,18,18,19,19
2,2,4,4,7,7,12

THAM
9,11,15
1,9,11,15 + THAM

5,6,13,14

(vgl. auch Fig. 1), während das IR-Spektrum folgende Bandfrequenzen und -Intensitäten aufweist:

Band-	Intensität	S	Band-	Intensität
I'requcnz		S	Frequenz
(cm ')		S	' (cm"¹)
3260		S	1286	M
3020	(sh)	S	1257	M
2920	(N)	S	1216	W
2860	(N)	W	1201	W
2720		M	1156	W
2580		M	1140	M
2100		S	1122	M
1650	(sh)	S	1079	S
1640		S	1040	S
1620		S	1018	M
1552		S	995	W
1460	(N)	S	977	M
1437		S	964	M
1397		M	915	M
1388		% a ]VI	905	W
1375	(N)	S	867	M
1354	(sh)		822	M
1345			805	W
1296			722	(N) M
N =Nujol
S = stark
M = mittel
W = schwach
sh = Schulter
(vgl. F ig. 2)
		Vergleichsbeispiel

Zum Nachweis darüber, daß es sich bei dem bisher bekannten öligen Salz und dem erfindungsgemäßen kristallinen Salz nicht um Stoffe mit unterschiedlicher Reinheit handelt, sondern daß tatsächlich unterschiedliche physikalische Erscheinungsformen vorliegen, d.h.

also, daß kein feststellbarer Unterschied in der Reinheit zwischen dem freifließenden, kristallinen • PGF2« · THAM-SaIz und der flüssigen oder öligen Form dieses Salzes besteht, wurden folgende Versuche durchgeführt:

Zunächst wurde die ölige oder flüssige Form dieses

jo Salzes auf zwei verschiedenen Wegen hergestellt.

Eine Lösung von 100 mg (0,282 mMol) gereinigtem PGF₂, in 5 ml Methanol wurde mit 36,95 mg (0,282 mMol)Tris-(hydroxyinethyl)-amin<)incthan versetzt. Die Hälfte der dabei erhaltenen Lösung wurde bei 45° C

Yt unter vermindertem Stickstoffdruck eingedampft, wobei sich ein klares viskoses Öl bildete. Dieses Öl wird im nachstehenden mit A bezeichnet. Die andere Hälfte der Lösung wurde bei 45⁰C unter vermindertem Stickstoffdruck auf ein Volumen von 0,5 ml eingeengt. Diese konzentrierte Lösung wurde mit 14 ml Acetonitril verdünnt, und die dabei erhaltene ölige Suspension wurde zentrifugiert. Die dabei entstehende schwere Ölschicht wurde von der darüber stehenden Schicht abgetrennt. Dieses öl wird im nachstehenden mit B bezeichnet.

Ein nach dem erfindungsgemäßen Beispiel hergestelltes freifließendes, kristallines Salz wird nachstehend mit C bezeichnet Alle drei Salze, öl A, Öl B und Kristalle C, sind somit Salze aus PGF:, und Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan.

Analytische Versuche

Für diese Versuche wurde ein Gaschromatograph vom Typ Hewlett-Packard 402B verwendet mit einer 1,80 m χ 0,635 cm großen U-förmigen Glassäule mit 3°/oigem UC-W 98 (ein flüssiges Methylphenylsiliconpolymer) auf Gas Chrom Q (eine Diatomeenerde mit einer lichten Maschenweite von 125 bis 149 μ), mit einem Detektor von 320⁰C und einer Injektionsöffnung von

wi 246° C Portionen der Salze A, B und C wurden getrennt in Trimethylsilylderivate überführt durch übliche Behandlung mit einem Gemisch aus Bis(trimethylsiryl)acctamid. Pyridin und Trimethylchlorsilan (5:5:2). Die Silylierungsmittel lagen in molekularem Überschuß vor. Die silylierten Salze A, B und C (in Form einer Portion des silylierten Reaktionsgemische einschließlich überschüssigem Silylierungsmittel und Pyridin) wurden getrennt gaschromatographiert unter Anwendung einer

Säulentemperatur von 246°C. Die Ergebnisse sind aus den anliegenden Fig. 1,2 und 3 ersichtlich. Der scharfe vertikale Peak in der Mitte jedes Chromatogramms stammt von dem silylierten PGF2_X-Anteil jedes Salzes. Es kann leicht festgestellt werden, daß alle drei Salze identische Chromatogramme ergaben. Es bestehen somit keine Unterschiede in der Reinheit zwischen den öligen Salzen A und B und dem kristallinen Salz C, die mit dieser Methode festgestellt werden könnten.

Die Chromatographierbedingungen, die zur Erzeugung der in den Figuren gezeigten Chromatogramme angewendet wurden, sind jedoch derart, daß die silylierten Salze dissoziieren, und der silylierte PGF2*- Anteil sich wesentlich langsamer durch die Chromatographiersäule bewegt als es der silylierte Tris(hydroxymethyI)aminomethan-Anteil tut. Unter diesen Chromatographierbedingungen bewegt sich der letztere durch die Säule ungefähr genauso schnell wie die überschüssigen Silylierungsmittel und Pyridin, wobei das entsteht, was man als »Lösungsmittelfront« bezeichnet (ganz links in jedem Chromatogramm der Fig. 1, 2 und 3 ersichtlich), als eine steile vertikale Linie. Um zu zeigen, daß kein Unterschied in der Reinheit zwischen den Salzen A, B und C bezüglich des Tris(hydroxymethyl)-aminomethan-Anteils jedes Salzes besteht, wurde eine weitere Reihe von chromatographischen Analysen durchgeführt. Für diesen Zweck wurde der Ofen, der der Ummantelung der Chromatographiersäu-Ie warme Luft zuführt, auf eine Anfangstemperatur von 132° C eingestellt, und man ließ die Säule zu einem thermischen Gleichgewicht kommen. Danach wurde jeweils eine Probe eines der silylierten Salze A, B oder C in die Säule eingespritzt, wie es für die aus den F i g. 1, 2 und 3 ersichtlichen Chromatogramme erfolgt war. 2 Minuten nach der Einspritzung wurde die Ofentemperatur auf 280° C erhöht und auf dieser Höhe für den Rest der Chromatographie gehalten. Die tatsächliche Temperatur der Säule stieg selbstverständlich nach und nach an und nicht plötzlich während des Restes des Chromatographierens. Die Ergebnisse werden in den anliegenden Fig.4, 5 und 6 gezeigt. In jeder Figur stammt Peak A vom silylierten Tris(hydroxymethyl)aminomethan-Anteil des Salzes und Peak B vom silylierten PGF₂*-Anteil des Salzes. Die vertikale Feinstruktur ganz links in jeder der F i g. 4, 5 und 6 (in der Nähe der Ordinate) stammt von überschüssigen Silylierungsmitteln und Pyridin.

Es kann ohne weiteres festgestellt werden, daß die Chromatogramme der Fig.4, 5 und 6 identisch sind innerhalb der Fehlergrenzen der Aufzeichnungsinstrumente. Zwar weisen die Chromatographenlinien einige winzige Unregelmäßigkeiten auf, die jedoch das Gesamtkonzept, nämlich daß alle drei Salze A, B und C im Hinblick auf Reinheit gleich sind, nicht beeinflussen.

Neben den vorstehend beschriebenen Versuchen wurden noch zwei weitere kleinere Versuche durchgeführt, und zwar wurden chromatographisch reines PGF_2% und chromatographisch reines THAM auf konventionelle Weise kombiniert, wobei ein öliges Salz entstand.

Es wurde außerdem das erfindungsgemäße kristalline

•j Salz wieder in die freie Säureform des PGF₂, überführt und diese dann erneut nach konventionellem Verfahren mit reinem THAM kombiniert, wobei auch wieder nur ein Öl entstand.

Vorstehende Versuche lassen deutlich erkennen, daß

ι» es sich bei dem bisher bekannten öligen Salz und dem erfindungsgemäßen kristallinen Salz nicht um Stoffe mit unterschiedlicher Reinheit handelt, sondern daß tatsächlich unterschiedliche physikalische Erscheinungsformen vorliegen, d. h. der freifließende kristalline Stoff eine bislang noch nicht bekannte Erscheinungsform betrifft.

Vergleichsversuch
Antifertilitätstest

Zum Nachweis darüber, daß die erfindungsgemäßen kristallinen PGF^-THAM-Salze keine ungünstigeren Wirkungs- und Toxozitätseigenschaften aufweisen als das PGF₂*, wurden nachstehende Vergleichsversuche an Goldhamstern durchgeführt (Goldhamster sind

2> Standardversuchstiere zur Bestimmung der Antifertilitätswirkung von Prostaglandinen).

Es wurden Lösungen aus PGF₂,* und PGF_2il-THAM-SaIz hergestellt, indem man jede Verbindung in Ethanol löste (0,05 ml Ethanol je mg der Verbindung) und diese

ίο Lösungen mit einer physiologischen Kochsalzlösung so weit verdünnt, bis 0,5 ml der dabei entstehenden Lösung die jeweils gewünschte Menge der Verbindung enthielt. Jede Lösung wurde subkutan in einer Einzeldosis von 0,5 ml jedem der sechs trächtigen Goldhamsterweib-

j^r) chen am vierten Tage ihrer Trächtigkeit injiziert. Am achten Tag wurde jedes der sechs Tiere durch cervicale Dislocation getötet, der Uterus entfernt und die Gegenwart oder Abwesenheit in Implantationsstellen in beiden Uterushörnern beobachtet. Bei dieser Methode

4i) zeigen Kontrolltiere (die nur den Trägerstoff injiziert bekamen) gewöhnlich 12 bis 14 Implantationsstellen.

EDioo bedeutet, daß die Tiere keine Implantationsstellen aufweisen.

Die dabei erzielten Ergebnisse werden nachstehend wiedergegeben. Diese Ergebnisse basieren auf gleichen PGF2«-Mengen. 50 mcg PGF₂A entsprechen somit 67 meg PGF₂»-THAM-Salz.

Verbindung

ED₁,,,,

LD₅,,

PGF,

PGF₂₁,
THAM-SaIz

50 mcg Prostaglandin/
80 g Hamster
50 mcg Prostaglandin/
80 g Hamster

>300 mg/kg

914 mg/kg

Hierzu 8 Blatt Zeichnungen

Claims

21 26 127 OH CH₂OH CH₂ :■■ Bereich δ 3 Typ Methin-H H von Intensität W = schwach -CH₃ M 2 /\/V =/V/V_C O O ⁹ H₃N — ( 13 sh = Schulter OH M Patentansprüche: v/V/" yw 100 bis 101⁰C, ξ C-Methyl W PGF_2n der Formel OH OH 7 Methylen- und rückstandiges Lösungs mit folgenden Bandfrequenzen und -Intensitäten: S eine W 1 durch einen Schmelzpunkt von 1 mittel Carbinolmethylen Band- (Sh) S W OH NMR-Spektrum I NMR-Spektrum von PGF₂„ THAM-SaIz in d₄-Methanol 6 Allyi-H Carbinol-H Frequenz (N) S M 1. Freifließende Kristalle des Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalzes von p Chemische 3 austauschbares (cm ') (N) S M te Verschiebung, 10 NH und OH 3260 S S Löslichkeit in Wasser von über I 0,92 Vinyl-H 3020 S S N 1,1-2,0 4 2920 W M f. ' ' 2860 (sh) M W 1 gekennzeichnet -■ 2,0-2,7 2720 M M Protonen I 500 mg/ml, folgendes =■■: 3,37 2580 S M S 2100 S M 20,20,20 Ii 3,6-4,3 1650 (N) S W 3,3,8,10,10,16,16, I 5,05 1640 S M 17,17,18,18,19,19 1620 S M 2,2,4,4,7,7,12 ;;■ 5,2-5,9 1552 S W - und ein IR-Spektrum 1460 (N) S M THAM 1437 (sh) M 9,11,15 1397 M Band- Intensität 1,9,11,15 + THAM 1388 S Frequenz 1375 (cm ') 5,6,13,14 1354 1286 1345 1257 1296 1216 N = Nujol 1201 S = stark 1156 M = mittel 1140 1122 1079 1040 1018 995 977 964 915 905 867 822 805 722 (N)

3 4

2. Verfahren zur Herstellung freifließender Kristalle des Tris-(hydroxymethyl)-aminomethansalzes von PGF_2u der Formel

OH

CH₂OH

1 , f \s ^NCOO^aH₃N — C- -CH₂OH /^ CH ₂0H OH OH

dadurch gekennzeichnet, daß man eine verdünnte Lösung von PGF₂„ in Acetonitril von 65 bis 85°C mit einer konzentrierten wäßrigen Lösung einer äquivalenten Menge Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan mischt, das erhaltene Gemisch auf 20 bis 30⁰C abkühlt, bei dieser Temperatur hält, bis sich Kristalle gebildet haben, die Kristalle abtrennt und gewünschtenfalls aus wäßrigem Acetonitril umkristallisiert.