DE1960643A1

DE1960643A1 - Verfahren zur Herstellung neuer Derivate der 7-Aminocephalosporansaeure

Info

Publication number: DE1960643A1
Application number: DE19691960643
Authority: DE
Inventors: Fechtig Dr Bruno; Bickel Dr Hans; Peter Dr Heinrich; Mueller Dr Johannes; Bosshardt Dr Rolf
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1968-12-12
Filing date: 1969-12-03
Publication date: 1970-07-02
Also published as: FR2025939A1; US3686172A; FR2025939B1; DK130218C; BE743014A; ES374426A1; DK130218B; GB1288967A; JPS4932872B1; JPS4931996B1; NL6918611A

Description

CIBA AKTIENGESELLSCHAFT, BASEL (SCHWEIZ) Case 6620/1+2
Deutschland

Verfahren zur Herstellung neuer Derivate der 7-Aminocephalosporansäure

Gegenstand der Erfindung ist die Herstellung neuer therapeutisch wirksamer Derivate der 7-Aminocephalosporansäure (ACA) der Formel I

COOH

009827/2012

- 2 - - - . 1980643

■worin PL einen 5-Aminotetrazolylrest be-' ' deutet und Rp Wasserstoff oder eine freie oder .

durch eine Carbonsäure veresterte Hydroxylgruppe, in der E.stersauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können^ eine gegebenenfalls N-substituierte Carbamoyloxygruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können, oder eine quaternäre Aminogruppe ist, und ihrer gegebenenfalls inneren Salze.-

Eine veresterte Hydroxylgruppe PU, in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können, leitet sich von einer Carbonsäure ab und ist beispielsweise eine gegebenenfalls z.B. durch Halogenatome, besonders Chlor, substituierte Niederalkanoyloxygruppe wie Formyloxy, Propionyloxy. Butyryloxy, Pivaloyloxy, Chloracetoxy, ins-.besondere Acetoxy, oder eine gegebenenfalls z.B. durch · Niederalkyl-, Niederalkoxy- oder Niederalkylmercaptoreste, Halogenatome oder die Nitrogruppe substituierte mono- oder dicyclische Arylcarbonyloxy- oder -thiocarbonyloxy-, Arylcarbonylmercapto- oder -thiocarbonylmercaptogruppe, insbesondere die Benzoylmercaptogruppe.

R₂ kann auch eine gegebenenfalls substituierte Carbamoyloxygruppej z.B. eine Gruppe der Formel -O-CO-NH-R

tisch aromatischer , araliphatischer oder heterocyclischer

sein, worin R, für V/asserstoff steht oder ein aliphatischer,

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Rest, besonders ein unsubstituierter oder substituierter, vorzugsweise durch eine oder mehrere Niederalkoxygruppen oder Halogenatome substituierter, gerader oder verzweigter Niederalkylrest, wie der Methyl-, Aethyl-, vor allem aber der ß-Chloräthylrest, ist.

Rp kann .weiter eine Thiocarbamoylmercaptogruppe der Formel

-S-CS-

sein, worin R, die oben, angegebene Bedeutung hat und Rj, für Vfasserstoff oder R., steht.

R₂ bedeutet ferner eine quaternäre Aminogruppen in der das quaternäre Stickstoffatom.z.B. Teil eines aromatischen Ringes, wie eines Ghinolin-, Isochinolin- oder Pyrimidinringes, insbesondere aber eines unsubstituierten oder substituierten Pyridinringes, z.B. der Formel

-N

worin R(- für Wasserstoff oder eine oder mehrere Niederalkyl-, Niederalkoxycarbonyl-, Carbamoyl- oder Carboxylgruppen oder

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ein oder mehrere Halogenatome steht.

Die Salze der neuen Verbindungen sind Metallsalze, vor allem solche von therapeutisch anwendbaren Alkali- oder Erdalkalimetallen, wie Natrium, Kalium, Ammonium, Calcium, oder Salze mit organischen Basen, z.B. Triäthylamin, N-Aethylpiperidin, Dibenzylamin, N-Benzylß-phenetylamin, N,N¹-Dlbenzyläthylendiamin, Procain, Ephenamin. Ist Rp basisch, so können sich innere Salze bilden.

Die neuen Verbindungen weisen eine besonders gute antibakterielle Wirkung auf. Sie sind sowohl gegenüber grampositiven wie vor allem auch gegenüber gram-negativen Bakterien wirksam, z.B. gegen Staphylococcus aureus penicillin-resistent, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhosa und Bacterium proteus, wie sich auch im Tierversuch, z.B. an Mäusen, zeigt. An diesen sind bei subcutaner Anwendung, je nach Art der bakteriellen Infektion,0,1-1CO mg/kg chemotherapeutisch wirksam. Die Verbindungen können daher zur Bekämpfung von Infektionen, die durch solche Mikroorganismen hervorgerufen werden, verwendet werden, ferner als Futtermittelzusätze, zur Konservierung von Nahrungsmitteln oder als Desinfektionsmittel. Besonders wertvoll sind Verbindungen, in denen R_ die Acetoxygruppe, die ß-Chloräthylcarbamoyl- oder eine unsubstituierte oder, wie oben angegeben," substituierte Pyridiniogruppe ist 009827/20 12.

Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können nach an sich bekannten *ithoden hergestellt werden. So werden sie erhalten, wenn man
a) eine Verbindung der Formel II

Z-XH-CH CH

II

C H" C-CH₀-R₀ II ,

// \ f ^{2 2}

COOH

worin Z für einen Halogenacetylrest wie den Fluor-, Chlor-, Jod- oder vor allem Bromacetylrest steht und Rp Wasserstoff oder eine freie oder veresterte Hydroxylgruppe ist (wobei in der Estergruppe Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können), mit 5-Aminotetrazol umsetzt oder b) eine Verbindung der Formel II, worin Z für Wasserstoff steht und Rp Wasserstoff oder eine freie oder veresterte Hydroxylgruppe ist (wobei in der Estergruppe Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können), durch die Gruppe R,-CK₂-C0-, worin R, die angegebene Bedeutung hat, acyliert und, wenn erwünscht, erhaltene Verbindungen, in denen Rp für die Acetoxygruppe steht, in Verbindungen mit freier Hydroxylgruppe Rp und Verbindungen, mit freier Hydroxylgruppe Rp in Verbindungen, welche eine andere Estergruppe als die Acetoxygruppe enthalten (in der gegebenenfalls Sauerstoffatome

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ORlGlHAL INSPECTED

durch Schwefelatome ersetzt sein können) oder in eine gegebenen falls N-suhstituierte Carbamoyloxygruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können, überführt ■ und, wenn erwünscht, in erhaltenen Verbindungen, in denen R« für eine durch eine Carbonsäure veresterte Hydroxylgruppe steht (in der Estersauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können), diese Gruppe durch eine quaternäre Aminogruppe ersetzt, und gegebenenfalls, wenn erwünscht, die erfc haltenen Verbindungen in ihre therapeutisch verwendbaren Metall-, wie Alkali- oder Erdalkalimetallsalze, oder Salze mit Ammoniak oder organischen Basen überführt oder aus erhaltenen Salzen die freien Carbonsäuren oder gegebenenfalls inneren Salze bildet. . . '

Die Umsetzung der Verbindung II, worin Z für eine Halogenacetylgruppe steht, mit 5-Aminotetrazol findet bei Zimmertemperatur oder bei leicht erhöhter oder erniedrigter Temperatur, vorzugsweise bei 20-^0 C, statt. Sie wird vorzugsweise in einem inerten organischen Lösungsmittel wie Methylenchlorid, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid oder Acetonitril in Gegenwart eines halogenwasserstoffbindenden Mittels, z.B. einer schwachen anorganischen Base wie eines Alkalicarbonates, -bicarbonates oder -acetates oder eines tertiären Amins, besonders eines Triniederalkylamlns, vorzugsweise Diisopropyläthylamin (Hünigbase) vorgenommen.

.· . . QO 9827/20.12' . · .

* ^0RKä*NAL JNSPECTEÖ

Die Acylierung der Verbindung II, worin Z für Wasserstoff steht, wird in der für die Acylierung von Aminosäuren bekannten Weise, z.B. mittels eines Säurehalogenids, besonders SäureChlorids, oder Säureazids oder eines Säureanhydrids, insbesondere eines gemischten Anhydrids, z.B. eines mit monoveresterter Kohlensäure, Pivallnsäure oder Trichloressigsäure gebildeten gemischten Anhydrids, oder mit der freien Säure selbst in Gegenwart eines Kondensationsmittels wie eines Carb'odiimids, z.B. des · ' Dicyclohexylcarbodiimids, vorgenommen. Man kann die Acylierung der Verbindung II auch in der Weise vornehmen, dass man die Verbindung II, worin Z für Wasserstoff steht, zunächst silyliert oder stannyliert, das Silylierungs- bzw. Stannylierungsprodukt" mit der Säure oder einem reaktions-· fähigen Säurederivat, welches die Gruppe R₁-CHp-CO- ent-" · ··' hält, acyliert und gegebenenfalls vorhandene Silyl- oder" Stanny!gruppen durch Alkohol oder Wasser abspaltet, vgl. z.B.* das britische Patent 1 O73 53O und die holländische Anmeldung 67,17107. · . '

Die als Ausgangsstoffe verwendeten Cephalosporinderivate sind bekannt oder können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt' werden. Verbindungen der Formel II, worin Z für Wasserstoff steht und R eine andere Estergruppe als die Acetoxygruppe ist, werden vorteilhaft nach dem

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• · ORIGINAL INSPECTED

in der Schweizer Anmeldung Ges. Nr. 8379/68 (Case 63OO/6217) beschriebenen Verfahren hergestellt.

Die Ueberführuns der Verbindung der Formel I, worin R für die Acetoxygruppe steht, in eine Verbindung mit freier Hydroxylgruppe und deren Veresterung mit anderen Säuren als Essigsäure oder deren Ueberführung in Carbamoylderivate oder Verbindungen, worin R eine

■ #

quaternäre Aminogruppe ist, erfolgt in an sich bekannter

P Weise. " ·

Die Erfindung betrifft auch diejenigen Aus-. führungsformen des Verfahrens, nach denen man von einer auf irgendeiner Stufe des-Verfahrens als Zwischenprodukt erhältlichen Verbindung ausgeht und die fehlenden Verfahrensschritte durchführt, oder das Verfahren auf irgendeiner Stufe abbricht, oder bei denen man die Ausgangsstoffe unter den Reaktionsbedingungen bildet, oder bei · ^v '

. _t denen die Reaktionskomponenten gegebenenfalls in Form ihrer Salze vorliegen. « ' ■ ·

Die neuen Verbindungen können als Heilmittel, z.B. in Form pharmazeutischer Präparate, Verwendung finden. Diese enthalten die Verbindungen in Mischung mit einem für die enterale, topicale oder parenterale Applikation geeigneten pharmazeutischen organischen oder anorganiseilen, festen oder flüssigen Trägermaterial Für die Bildung desselben-kommen solche Stoffe in Frage, die mit den

. 009827/2012 . .

neuen Verbindungen nicht reagieren, wie z.B. V/asser, Gelatine, Lactose, Stärke, Stearylalkohol, Magnesiumstearat, Talk, pflanzliche OeIe, Benzylalkohole, Gummi, Propylenglykol, Polyalkylenglykole, Vaseline, Cholesterin ode andere bekannte Arzneimittelträger. Die pharmazeutischen Präparate können z.B. als Tabletten, Dragees, Salben, Cremen, Kapseln oder in -flüssiger Form als Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen vorliegen. Gegebenenfalls sind sie sterilisiert und/oder enthalten Hilfsstoffe, wie Konservierungs-, Stabilisierungs-, Netz- oder Emulgiermittel, Lösungsvermittler oder Salze zur Veränderung des osmotischen Druckes oder Puffer. Sie können auch andere therapeutisch wertvolle Substanzen enthalten. Die Präparate werden nach üblichen Methoden erhalten.

- "·. Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen"· beschrieben. Die Temperaturen sind in Celsiusgraden angegeben. · · ·

In der DünnschichtChromatographie auf Silicagelplatten werden die folgenden Systeme verwendet: System 52 = n-Butanol-Eisessig-Wasser (75:7,5:21) System 101 A = n-Butanol-Pyridin-Eisessig-Wasser

(42:24:^:30).

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' ORIGINAL INSPECTED

• · Beispiel 1

7,86 g Bromacetylaminocephalosporansäure werden unter Zugabe von 6,9 ^ml Ν,Ν-Diisopropyläthylamin in hO ml ' Methylenchlorid gelöst. Dazu gibt man eine Lösung, die durch Auflösen von 2,46 g 5-Aminotetrazol-Monohydrat in 20 ml Dimethylformamid und anschliessendes Verdünnen mit J)O ml Methylenchlorid hergestellt worden ist. Mit fc 10 ml Methylenchlorid wird nachgespült.

Nach 45 Stunden wird das Methylenchlorid im Wasserstrahlvakuum und das Dimethylformamid bei 0,3 Elia Vakuum und einer Temperatur von J>0 möglichst vollständig abdestilliert. Das zurückbleibende dicke OeI wird in 100 ml Wasser gelöst, mit 200 ml Essigester überschichtet und das pH der wässerigen Phase unter wiederholtem Schütteln mittels 2n-Natriumcarbonatlösung auf" 5,4 eingestellt. Nach der Abtrennung wird die wässerige Phase ein zweites Mal mit 200 ml Essigester extrahiert. Die organischen Phasen werden zweimal mit je 20 ml Puffer von pH6 gewaschen und dann verworfen. Die vereinigten wässerigen Lösungen überschichtet man mit 800 ml Essigester und stellt das pH unter Schütteln mittels " 2n-Salzsäure auf 1,8 ein. Nach der Phasentrennung wird die wässerige Phase mit 400 ml Essigester überschichtet, mit Kochsalz gesättigt und später nochmals mit 200 ml

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ORiGJNALlNSPECTED

Essigester nachextrahiert. Die Essigesterlösungen werden mit 40 ml gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, mit Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. 6,3 g dieses Rohproduktes werden in 3°" ml Methanol suspendiert und durch Zugabe von 7>7 ml 3m·- methanolischer Natrium-a-äthylhexanoatlösung gelöst. Unter gutem Rühren werden 4,5 ml abs. Aethanol eingetropft. Das unreine Präcipitat wird abfiltriert und verworfen. Das Filtrat wird in gleicher Weise mit ySO ml.

abs. Aethanol versetzt, abgekühlt und ^O Minuten bei -10° stehen gelassen. Man nutscht ab, wäscht mit 40 ml Aethanol und erhält das Natriumsalz der 7-[5-Aminotetrazo-IyI -acetylaminoj-cephalosporansäure. Die dazu gehörige Säureform lässt sich durch Rückextraktion in Essigester bei pH 2 gewinnen. · - · ■ _ Rf₅₂ =0,13 , Rf_101A « 0,36; · /■-·■ [a]_D = + l48° + 1° (c = 1, in Wasser, als Natriumsalz) U.-V.-Spektrum in Wasser als Natriumsalz: } max : 227 ΐημ (£ = 8350) und 260 ηιμ ('£. =■ 8200) ;

ΝΓ-iR-Spektrum in Deutero-Dimethylsulfoxyd (lOO Mc) ; Ausser den für die 7-ACA charakteristischen Signalen tritt ein Singlett bei δ = 4,92 ppm auf, welches der -CHp-Gruppe des Aminotetrazolylacetylrestes zugeordnet werden kann, und ein Singlett mit breiter Basis bei δ = 6,7 ppm für die am Kohlenstoff des Tetrazolringes stehende NH₀-Gruppe.

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BAD OBlGMAi. Beispiel 2

9Λ'Ζ g 3-(^Desacetoxymethyl)-3-benzoylthiomethyl-7-bromacetylamino-cephalosporansäure werden unter Zugabe von 7,0 ml Ν,Ν-Diisopropyläthylamin in 60 ml Dimethylformamid gelöst. Dazu gibt man eine Lösung von 2,46 g 5-Aminotetrazol-Monohydrat in 20 ml Dimethylformamid. Mit 13 ml Dimethylformamid wird nachgespült.

Nach 36-stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird das Lösungsmittel bei 0,3 mm Vakuum gegen einen ■ Kühler von -βθ abdestilliert. Das zurückbleibende OeI wird in ein stark gerührtes Zweiphasensystem aus 5OO ml Essigester und 250 ml Phosphatpuffer pH 6,5 eingetragen. Durch Zugabe von wenig 2n-Natriumcarbonat-Lösung wird die wässerige Phas'e anschliessend auf pH 6,5 eingestellt. Man trennt sofort die Phasen und extrahiert die wässerige Phase nochmals mit 20 ml Essigester. Die organischen * Phasen werden nacheinander mit 50 ml Phosphatpuffer von* pH 6,5 gewaschen und verworfen.

Nun werden die vereinigten wässerigen

Lösungen unverzüglich mit 500 ml Essigester überschlchbet und das pH wird unter starkem Rühren durch Zugabe von 2n-Salzsäure auf 2 eingestellt. Ein dabei gebildetes Präcipitat lässt sich durch Filtration entfernen. Nach der Phasentrennung wird die wässerige Lösung mit Kochsalz

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gesättigt und mit 300 ml und 200 ml Essigester nachextrahiert. Die organischen Fräsen werden nacheinander· zweimal mit je 50 ml gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, mit Natriumsulfat getrocknet und durch eine Säule (Durchmesser. 4,5 cm) von 60 g Silicagel filtriert. Das "gesammelte Piltrat dampft man im Vakuum ein. Der Rückstand wird in 30 ml Tetrahydrofuran aufgelöst und mit soviel . Methanol versetzt (ca. 100 ml), dass eine leichte Färbung entsteht. Durch leichtes Erwärmen im Luftbad und Abblasen im Stickstoffstrom wird die Lösung dann langsam konzentriert, wobei man die kristalline 3-(Desacetoxymethyl)-3-benzoylthiomethyl-7-[5-aminotetrazolylaeetylamino]-cephalosporansäure erhält. P. 19O-I93⁰ (Zers.). Rf₅₂ =0,40 , Rf_a01A = 0,55. ■ U-V.-Spektrum (in.0,1.mol Natriumbicarbonat): ' ^ max bei 240 ΐημ (£ = 16500) und bei 276 ΐημ (£ = 199ΟΟ)

Das Ausgangsmaterial kann wie folgt hergestelltwerden: Eine Lösung von 17,5 g 3-(Desacetoxymethyl)-3-benzoylthiomethyl)-7-amino-cephalosporansäure (vgl. belg. Patent 650 444) und 12,5 ml Triäthylamin in 1 1 Dimethylformamid wird während einer Stunde in eine gut gerührte und bei -I3 bis -15 gehaltene Lösung von 9>2 ml Bromacetylbromid in 100 ml Methylenchlorid eingetropft (Stickstoff atmosphäre) . Man lässt die Temperatur während

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' ORlQlNAL INSPECTED

■·■ . , 1960843

1/2 Stunden langsam auf 10° steigen und hält sie dort noch während einer halben Stunde. Dann wird der grosste Teil der Lösungsmittel im Vakuum bei 0,5-1 mm Hg gegen einen Kühler von Trockeneis-Aceton abdestilliert. Das ölige Produkt wird auf einen Phosphatpuffer von pH 6 gegossen und mit 1-1 Essigester geschüttelt. An der Grenze der beiden·Phasen entsteht ein Präcipitat, das durch Filtration oder Zentrifugieren abgetrennt wird. Dann stellt man das pH der wässerigen Phase auf 2 ein, sättigt diese mit.Kochsalz und trennt die organische Phase ab. Die wässerige Phase wird mit 600 und 400 nil . Essigester nachextrahiert. Nach dem Waschen mit gesättigter Kochsalzlösung werden die organischen Phasen über Natriumsulfat getrocknet und nacheinander durch eine Säule von · 100 mg Silicagel filtriert.-Die Filtrate werden im Vakuum-·· zur Trockne eingeengt, der Rückstand mit ^O ml Aethanol versetzt und bei -20° auskristallisiert. Man erhält 7,8 g 3- (Desacetoxymethyl) ^-benzoylthiomethyl^-bromacetylamino-cephalosporansäure vom Schmelzpunkt 137-138 · Rff-g = 0,55. Das Natriumsalz zeigt im U-V.-Spektrum in Wasser:

λ max 243 πιμ (£ = ΐ68θθ) und
275 ηιμ (£.= 20600),

[α]_β = -47 + 1° (c - 1; in 0,1 mol. Natriumbicarbonat-Aceton

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. ι

Beispiel 3

2,51 g 3-(Desacetoxymethyl)-3-benzoylthioraethyl-7-[5-aminotetrazolyl-acetylamino]-cephalosporan- säure werden in 4l,5 ml eines Gemisches aus gleichen Teilen Dioxan und Pyridin gelöst, mit 12,2 ml 40#iger wässeriger Quecksil-berperchloratlösung versetzt und während 45 Minuten bei 45° und 45 KHz Ultraschall unter Stickstoff reagieren gelassen. Man kühlt ab, versetzt mit 6,5 ml Thiobenzoesäure und schüttelt 5 Minuten. Die Lösungsmittel werden im Vakuum abdestilliert und eine Lösung des Rückstandes in 65 ml Wasser wird durch "Celite" abfil€riert. Das Piltrat wird nacheinander mit 50 ml Toluol, zweimal mit je 33 ml "AmberIite" LA-2 in 66 ml Toluol und zweimal mit je 50 ml Toluol gewaschen. An-. schliessend filtriert man die wässerige Phase durch eine Säule, die von unten nach oben 4,1 ml "Sephadex" CM C-25 (H⁺-form), l6,5 ml "Alox", 4,1 ml "Zeo-Karb" 226 (H⁺-form), 16",5 ml "Alox", 4,1 ml "Dowex l" (Acetatform) und 4,1 ml "Sephadex" CM C-25 (H⁺-form) enthält. "Celite", organische Phasen und die Säule werden zweimal mit je 15 ml Wasser nachextrahiert, die Säule zudem mit weitere» 150 ml Wasser eluiert. Man engt die vereinigten Eluate im Vakuum ein, entfernt eine kleine Menge von Präcipitat; durch Filtration^und dampft zur Trockne ein. Der

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Rückstand wird mit ca. 50 ml abs. Aethanol digeriert und ergibt die reine 3-(Desacetoxymethyl)-3-pyridiniomethyl-7-[5-Aminotetrazolyl-acetylamino]-cephalosporansäure.

[a]jj°_= + 60° + 1° (c = 1 in Wasser),

U-V.-Spektrum: ^max 256' πΐμ (t = ll600) j Rf₅₂ =0,01 ; Rf_lOlA =0,10.

NMR-Spektrum in Deutero-Dimethylsulfoxyd (l00 Mc)i Ausser den für den Grundkörper charakteristischen Signalen tritt ein Singlett bei δ = 4,96 ppm auf, welches der -CHp-Gruppe der Aminotetrazolylacetylrestes zugeordnet werden kann, und ein Singlett mit breiter Basis bei δ = 6,76 ppm für die am Kohlenstoff des Tetrazolringes stehende -NHp-Gruppe.

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Beispiel 4 "

10,8 g Natriumsalz von 7-(5-Aminotetrazolyl)-acetylamino-cephalosporansäure werden in 300 ml Wasser gelöst, auf 37 erwärmt und mittels 0,2 n. Natronlauge auf pH 7,6 eingestellt. Dann gibt man eine Aufschlämmung von 240 mg Acetylesterase (aus Bacillus subtilis ATCC 6633, vgl. belgisches Patent 1 080 904) in ca. 5 ml Wasser dazu und neutralisiert die gebildete Essigsäure laufend mit 0,2 n. Natronlauge (Einstellung auf pH 7*6, Temperatur 37 )· Nach 5 Stunden ist die Reaktion beendet. Man stellt das pH auf 6,5 ein, filtriert die Lösung durch eine Glasfritte g4 und lyophilisiert. Es resultieren 11,88 g eines gelblichen Harzes von 7-(5-AminotetrazolylJ-acetylamino-O-desaeetyl-cephalosporansäure.

9,92 g dieses Rohproduktes werden in 150 ml absolutem Dimethylformamid suspendiert und mit 0,15 ml (Bu_.Sn)_p0 (Tributylzinnoxyd) versetzt. Dann tropft man während 15 Minuten eine Lösung von 10,6 ml ß-Chloräthylisocyanat in ^5 ml Dimethylformamid ein und rührt noch 1 1/4 Stunden weiter. Das Reaktionsgemisch wird filtriert und das Piltrat im Hochvakuum zur Trockne eingedampft. Der harzartige Rückstand wird dreimal mit je 500 ml abs. Aether verrieben(der ätherlösliche Anteil abgetrennt und verworfen) und dann in 250 ml 1Obigem Phosphatpuffer vom pH 6,7 aufgenommen.

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■ · - 18 -

Man extrahiert nacheinander mit 1,5 Liter und 0,5 Liter Essigester. Die organischen Phasen werden zweimal mit je 100 ml Puffer pH 6,7 rückextrahiert und dann verworfen. Die wässerigen Phasen werden vereinigt, mit mit 1,5 Liter Essigester überschichtet, durch Zugabe von 2 n. Salzsäure und Schütteln auf pH 2,4 eingestellt und die Phasen getrennt. Nach Sättigung mit Kochsalz wird die wässerige Phase noch zweimal mit je 1 Liter

fc Essigester extrahiert, die organischen Phasen sukzessive mit zweimal je 200 ml gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, mit Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Man erhält 8,0 g eines amorphen Rückstandes, woraus sich mittels Natrium-a-äthylhexanoat ein Rphkristallisat des Natriumsalzes gewinnen lässt. Dieses wird durch Ansäuern und Extraktion mittels Essigester in die kristalline Säureform zurüökgeführt. Daraus lässt sich auf die oben beschriebene Weise das reine kristalline Natriumsalz der O-Desaeetyl-0-

™ (β-chloräthyl-carbamoyl)-7-(5-Aminotetrazolyl)-aeetylaminocephalosporansäure gewinnen. UV-Spektrum <f 258mn (8 = 8'500). Optische Drehung [ct]^° = 116° + 1°. Dünnschicht chromatogramm an Silicagel : Rf₆-O = °ί²3ί ^Rfl01 A ⁼ °'5-

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Claims

Patentansprüche

1. Verfahren zur Herstellung neuer Derivate der 7-Aminocephalosporansäure, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der Formel I

COOH'

worin R, einen 5-Aminotetrazoly/lrest bedeutet und Rp Wasserstoff oder eine freie oder durch eine Carbonsäure- veresterte Hydroxylgruppe, in der Estersauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können, eine gegebenenfalls N-substituierte Carbamoyloxygruppe, . in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können* oder eine quaternäre Aminogruppe ist, oder ihre gegebenenfalls inneren Salze nach an sich bekannten Methoden herstellt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man
a) eine Verbindung der Formel II

Z-BH-CH CH CH₀

I I I ²

COOH
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worin Z für einen Halogenacetylrest steht und Rp Wasser_r stoff oder eine freie oder veresterte Hydroxylgruppe ist (wobei in der Estergruppe Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können), mit 5-Aminotetrazol umsetzt oder

b) eine Verbindung der Formel II, worin Z für Wasserstoff steht und R₂ Wasserstoff oder eine freie oder veresterte Hydroxylgruppe ist (wobei in der Estergruppe Sauerstoff-' atome durch Schwefelatome ersetzt sein können), durch die | Gruppe R₁-CH₂-CO-, worin R, die angegebene Bedeutung ■ hat, acyliert

und, wenn erwünscht, erhaltene Verbindungen, in denen R₂ für die Acetoxygruppe steht, in Verbindungen mit freier Hydroxylgruppe R₂ und Verbindunger mit freier Hydroxylgruppe R₂ in Verbindungen, welche eine andere Estergruppe als.die Acetoxygruppe enthalten (in der gegebenenfalls Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können) oder in eine gegebenenfalls N-substituierte Carbamoyloxygruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können, überführt ■ . "

und, wenn erwünscht, in erhaltenen Verbindungen, in denen R₀ für eine durch eine Carbonsäure veresterte' ' Hydroxylgruppe steht (in der Estersauerstoffatome durch •Schwefelatome ersetzt sein können), diese Gruppe durch eine quaternäre Aminogruppe ersetzt, und gegebenenfalls, • wenn erwünscht, die erhaltenen Verbindungen in ihre therapeutisch verwendbaren,, .aegehenenfalls inneren Salze

UUaoZ Γ/ζ Ul ζ

OfilGtlMAL INSPECTED

überführt oder aus erhaltenen Salzen die freien Carbonsäuren bildet. ·

3· Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man von einer Verbindung der Formel II ausgeht, worin Z für den Bromacetylrest steht.

4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und Rp für die Acetoxygruppe steht. · .

5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und Rp für eine gegebenenfalls substituierte Pyridinio- '

. . * . · ■ . · .·. . · gruppe steht. ' - '. - ■

6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* "· ■ dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und R₂ für die Pyridiniogruppe steht.

7· Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und Rg für eine Niederalkylcarbamoyloxygruppe steht.

0 0 9827/2012 . " . -QRiGiNAL inspected

8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und R^ eine Carbamoyloxygruppe der Formel ·

• · -0-CO-NH-R-.

j ·

ist, worin R^, ein- durch ein oder mehrere Niederalkoxygruppen oder Halogenätome substituierter Niederalkylrest ist . ' ....

9· Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R.. die angegebene Bedeutung hat und Rp eine Carbamoyloxygruppe der Formel · ■

: -O-CO.-NH-R-. ■"'-.-

ist, worin R_x ein durch ein oder mehrere Chloratome sub- j . ■ . ·

. stituierter Niederalkylrest ist.. · '-

10. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-3* dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel I herstellt, worin R, die angegebene Bedeutung hat und Rg die ß-Chloräthylcarbamoyloxygruppe ist.

11. Verfahren zur Herstellung von 7-Aminotetrazolylacetylamino-cephalosporansäuren wie in den Beispielen beschrieben. ...

• · 009827?2012 ·

• . · . . . ORIGINAL INSPECTEÖ

12. Verbindungen der Formel I

-CH₂-CO-NH-

worin R einen 5-Aminotetrazolylrest bedeutet und Rg Wasserstoff oder eine freie oder durch eine Carbonsäure veresterte Hydroxylgruppe, in der Estersauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können, eine gegebenenfalls N-substituierte Carbamoyloxygruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können, oder eine quaternäre Aminogruppe ist und ihre gegebenenfalls inneren Salze.

13. - Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12 gezeigt, worin R₁ die dort angegebene Bedeutung hat und R₀ für die Acetoxygruppe steht, und.ihre gegebenenfalls inneren Salze. .

14. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12 gezeigt, worin R, die dort angegebene Bedeutung hat und Rg für eine gegebenenfalls substituierte Pyridiniogruppe * * steht, und ihre inneren Salze·

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15. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12 gezeigt, worin FL die dort angegebene Bedeutung hat und R für die Pyridiniogruppe steht, und ihre inneren Salze.

16. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12 gezeigt, worin R^ die dort angegebene Bedeutung hat und Rg für eine Niederalkylcarbamoyloxygruppe steht, und ihr« Salze.

17. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12

- t

gezeigt, worin R, die dort angegebene Bedeutung hat und R₂ eine Carbamoyloxygruppe der Formel

-0-CO-NH-R

ist, worin R_x ein durch ein oder mehrere Niederalkoxyj

gruppen oder.Halogenatome substituierter Niederalkylrest ist, und ihre Salze.

™

l8. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12 gezeigt, worin R. die dort angegebene Bedeutung hat und Rg eine Carbamoyloxygruppe der Formel

-Q-CO-NH-R-

ist, worin R-, ein durch ein oder mehrere Chloratome substituierter Niederalkylrest ist und ihre Salze.

19. Verbindungen der Formel I wie in Anspruch 12

gezeigt, worin R. die -dort angegebene Bedeutung hat üncl

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Rp die ß-Chloräthylcarbamoyloxygruppe ist und ihre Salze.

20. Die in den Beispielen beschriebenen Verbindungen

21. Pharmazeutische Präparate enthaltend Cephalosporansäurederivate gemäss den Ansprüchen 12-20.

22. Tierfutter- und Zusatzmittel enthaltend Verbindungen gemäss den Ansprüchen 12-20.

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