DE1695384B - Rifamycin SV-Derivate und ein Verfahren zu ihrer Herstellung - Google Patents

Description

in der R ein Wasserstoffatom, ein niederer Alkyl- oder Hydroxyalkylrest, ein Benzyl- oder Phenyl^, rest. R'ein niederer Alkylrest, R" ein niederer Alkyl- oder Alkoxyrest. eine Aminogruppe, eine niedere Aikylamino- oder Dialkylaminogruppe oder ein Phenylaminrest ist.

2. 1 '.2' - Dimethyl - 3' - carbomethoxypyrrolo [3.2-c]-4-deoxyrifamycin SV.

3. 2' - Methyl - 3' - carba'thoxypyrrolo[3,2 - c] 4-dcoxyrifamycin SV.

4. 1 '^'-Dimethyl-S'-dimethylcarbamylpyrrolo-[3,2-c]-4-deoxyrifamycin SV.

5. r,2'-Dimethyl-3'-carbäthoxypyn-olo[3,2-c]·· 4-deoxyrifamycin.

6. Verfahren zur Herstellung der Rifamycin SV-Derivate gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Rifamycin S der Formel

HO

H₃C CH₃

CH₃O

H₃C O

mit einer mindestens äquimolekularen Menge einer Verbindung der allgemeinen Formel

R'

R — NH — C = CH — COR"

in einem organischen inerten Lösungsmittel bei Raumtemperatur 7 bis 70 Stunden umsetzt.

Die Erfindung betrifft Rifamycin SV-Derivate der allgemeinen Formel

H₃C CH₃

CH₃O

H₁C

in der R ein Wasserstoffatom, ein niederer Alkyl-oder 65 Aikylamino- oder Dialkylaminogruppe oder ein

Hydrnxyalkylrest. ein Henzyl- oder Phenylrest. R' Phenylaminorest ist, und ein Verfahren zu ihrer

ein niederer Alkylrest und R" ein niederer Alkyl- Herstellung, oder Alkoxyrest, eine Aminogruppe, eine niedere

Das Verfahren zur Herstellung der neuen Verbindungen besteht darin, daß man Rifamycin S der Formel

HO

CH

CH₃O

Verbindung der allgemeinen Formel
R'

R — NH — C = CH — COR"

II

mit einer mindestens äquimole'.cularen Menge einer in einem organischen inerten Lösungsmittel 7
70 Stunden bei Raumtemperatur umsetzt.

Die neuen Rifamycine sind gewöhnlich gut kristallisierte Substanzen; sie sind stabiler als die anderen Rifamycine und haben eine viel hellere Farbe — strohfarben bis Berngelb — als die Stammverbindungen. Sie besitzen in der Regel keinen gut definierten Schmelzpunkt und zersetzen sich oberhalb 150⁰C.

Sie sind in Chloroform, Methanol, Äthanol und vielen anderen üblichen organischen Lösungsmitteln löslich; sie sind schwerlöslich in Wasser bei einem pH-Wert nahe am Neutralpunkt. Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen eine hohe bakterizide Wirkung.

Vergleichsversuche, die an mit Staphylococcus aureus infizierten Mäusen durchgeführt wurden, ergaben die nachstehenden ED₅₀-Werte. Als Vergleichssubstanz diente Tetracyclin, das bei Staphylococcus-Infektionen weitgehende Anwendung findet.

	Verbindung	vclin	R"	ED5n. I	oral	^laus	LD50.	oral	Maus	i. p.
R	R-		OCH3	1,63	subkutan	1800	950
CH3	CH3	OC2H5	1,62	0.81	1450	680
H	CH3	N(CH3),	13,00	1,42	>3000	1050
CH3	CH3	OC2H5	3,25	3,9	1475	660
CH3	CH3	OC(CH3),	10	2,14	>3000	960
H-C3H7	CH3	OC(CH3),	2,32	8	2450	690
CH3	CH3	OCH,	0,76	4,92	„630	985
H	CH3	OC2H5	5.66	0,61	>3000	970
CH3	n-C,H~	OCH3	3,25	4,93	1890	860
CH5	CH,	NHC11H5	11.8	2.83	>3000	1300
CH3	CH3	CH3	4	12	1760	760
Q1H5	CH,	CH,	8,3	2,3	2210	923
Q1H5CH2	CH,	CH,	5.2	6,1	1660	740
HOC2H4	CH,		9,3	3.25	1950	250
Tctrac	2.6

Die Substanzen können zu therapeutischen Zwecken sowohl parenteral als auch lokal verabreicht werden.

Die mit den erfindungsgcmäßen Verbindungen erfolgreich behandelten Krankheiten sind solche. die durch pathogene Mikroorganismen hervorgerufen wurden. /.. B. Infektionskrankheiten, wie Lungenentzündung. Abszesse, Phlegmone. Furunkel. Ohrenentzündung. Knochenmarkentzündung. Blascnkatarrh. Gallenblascnentzündung und I.cbcrinfcktioncn.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele erläutert.

Bei s ρ i e I 1 <*>

r^'-Dimethyl-S'-carbomclhoxypyrrolo-[3,2-c]-4-deoxyrifamycin SV

Einer Suspension von 1,4 g (0,0020 Mol) Rifamycin S in 16 ecm Methanol werden 0.300 g (0,0023 Mol) f>5 Methyl-3-methyl-amino-crotonat, das in 4 ecm Methanol gelöst ist, zugesetzt. Die Suspension wird ciniee Minuten bis zur vollständigen Lösung gerührt.

Nachdem die Lösung 15 Stunden bei Raumtemperatur stand, wird sie in Vakuum auf die Hälfte des Volumens konzentriert. Bald setzen sich große Kristalle ab; nachdem die Lösung bei 4 bis 5' C 24 Stunden gekühlt wurde, ist die Ausfällung vollständig. Die zitronengelben Kristalle der Endverbindung werden abfiltriert, mit einer kleinen Menge kaltem Methanol gewaschen und bei 45 C im Vakuum getrocknet; Ausbeute: 1.23 g (75%); F. 210 bis 212"C (Zersetzung).

Analyse: C₄₃H₅₄N₂Oi₃ (Molekulargewicht: 806.92). Berechnet .. C 64,00. H 6,75, N 3,47%;
gefunden ... C 63.60, H 6.81. N 3,39%.

Adsorptionsspektrum:

?._max = 238 mix. E!?„ = 488

/. = 270 ma. E|" = 377

L = 31ImJx. Eli = 390

;.,„„ = 425 mix. E¹,* = 147

Dünnschichtchromatographie auf Kieselsäurepegel + 3% Zitronensäure; Aceton: Chloroform =1:1; Rf = 0.7 (gelber Fleck),

Beispiel 2

2'-Methyl-3'-carbäthoxypyrrolo[3,2-c]-4-deoxyrifamycin SV

Einer Menge von 7,0g (0,010MoI) Rifamycins, s die in 125 ecm Methanol suspendiert ist, wird eine Lösung von 2,0 g (0,015 Mol) Äthyl-3-amino-crotonat in 20 ecm Methanol unter Rühren zugesetzt, bis die vollständige Auflösung erreicht ist. Nachdem die Lösung 70Stunden bei 20 bis 22°C stand, wird sie auf ein Viertel ihres Volumens konzentriert. Die Flüssigkeit wird unter Rühren in 350 ecm einer 2%igen wäßrigen Ascorbinsäurelösung gegossen, um so eventuell noch vorhandenes Rifamycin S in die entsprechende reduzierte Form, d. h. in Rifamycin SV, zu überführen. Der pH-Wert wird auf 2 bis 3 eingestellt und die Rifamycine mit 400 ecm Äthyiacetat extrahiert. Die organische Phase wird mit pulverförmigem Natriumsulfat getrocknet, im Vakuum zur Trockne konzentriert und der Rückstand in 10 ecm Chloroform aufgenommen. Die Lösung wird auf einer Kieselsäuregelsäure Chromatographien und mit einem Chloroform-Äthanol-Gemisch im Verhältnis von 9:1 eluiert. Die ersten 100ecm der farbigen Fraktion werden verworfen, während die nächsten drei Fraktionen von je 100 ecm vereinigt und zur Trockne eingedampft werden. Der RücKstand wird in 30 bis 35 ecm Methanol gelöst. Aus dieser Lösung, die 2 bis 3 Stunden bei 0 bis 5 C gekühlt wird, fällt die Endverbindung in Form heller bernsteinfarbener Kristalle aus, die abgetrennt, mit Methanol gewaschen und im Vakuum bei 40 bis 45 C getrocknet werden; Ausbeute: 4,2g (52%); F. 162 bis 166 C (Zersetzung).

35

Analyse: ^4.,H₅₄N₂O₁₃ (Molekulargewicht 806.92). Dünnschicht-Chromiitographie auf Kieselsäuregel; Aceton-Chloroform 1:1; Rf ~ 0,4 (gelber Flecken).

Berechnet .. C 64.00. H 6.75. N 3.47%: gefunden ... C 63.38. H 6.66, N 3.60%.

Absorptionsspektrum:

>,„,„ = 232 ma, i:\\ = 559
,.„,„ = 310 ma, El'; = 334
/._m„_r = 422 ma. E'"I = 147

45

Beispiel 3

l\2'-Dimethyl-3'-dimethylcarbarnylpyrrolo-[3,2-c]-4-deoxyrifamycin SV

Einer Suspension von 1,6 g (0,002 Mol) Rifamycin S in 25 ecm Methanol werden 0,370 g (0,0028 Mol) S-Methylamino-crotonsäuredimethylamid, in 5 ecm Methanol gelöst, unter Rühren zugesetzt, bis völlige Auflösung erreicht ist. Die Lösung wird 26 Stunden bei 20 bis 22" C stehengelassen und dann im Vakuum auf etwa 20 ecm konzentriert. Nach Stehenlassen über Nacht bei etwa 5^aC setzen sich hellgelbe Kristalle der Endverbindung ab. Die Kristalle werden abgetrennt, mit Methanol gewaschtn und im Vakuum bei 40 bis 45°C getrocknet; Ausbeute: 1,58 g (80.0%); F. 183 bis 188° C (Zersetzung).

Analyse: C₄₄H₅₇N₃O₁₂ (Molekulargewicht 819.96).

Berechnet .. C 64,45, H 7,01, N 5,12%; gefunden ... C 63,93, H 7,10, N 5,20%.

Absorptionsspektrum:

_ai = 242 mil, Ei^ = 445

'•ma.

'■max = 310

m l = 344 /.„,„ = 425 ma, ElX = 151

Dünnschicht-Chromatographie auf Kieselsäuregel + 3% Zitronensäure; Aceton + Chloroform =1:1; Rf ~ 0,55 (zitronenfarbener Fleck).

40 Beispiele 4 bis 5

Nach den in den Beispielen I bis 3 angegebenen Verfahren wurden die in Tabelle II aufgezählten Verbindungen hergestellt, deren UV-Absorptionsspektren in Tabelle III angegeben sind:

Tabelle II

Ikispiel

CH,

n-CjH,

CH₃

CH,

C₂H,

CH,

n-CjH,

CH,

C₆H,

CJ)₅CH,

IK)C₂H₄

Verbindung

R'

CH,

CH,

CH,

CH,

n-C,H₇

CH,

CH.,

CFI,

CH,

CH,

CH.,

CH,

R"

OC₂H₅

OC₂H₅

OC(CH,),

OCH,

OC₂H₅

OCH,

NHCJI,

CH,

CH,

CH,

CH,

CH,

I ormcl

C₄Ji₆₀N₂O₁, C₄Ji₆₀N₂O₁, C₄₂H₅₂N₂O₁, C₄₆H_6nN₂O₁, C₄₄H₅₆N₂O₁, C₄JI₅₇N₃O₁₂ C₄₅H₅^N₂O₁₂ C₄JI₅₄N₂O₁₂ C₄JI₅₆N₂O₁₂ CH₅₁₁N₂O₁₂ C₄₄H₅₆N₂O₁, Schmelzpunkt, C
l/.erse'znng

i()9 bis 172
202 bis 205
225 bis 228
179 bis 181
200 bis ΙΓ4
204 bis 210
190 bis 200
186 bis 188
255 bis 256
210 bis 215
183 bis 185
214 bis 218

berechnet '	C	Il	N	gefunden %	C	H
64.37	6,88	3,41	64,60	6.S4
65,08 .	7,12	3,30	64. ΊΟ	6.99
65.08	7,12	3,3G	64.63	7.18
63.62	6.61	3,53	62,40	6.8H
65.08	7.12	3,30	64,80	7.40
64.37	6.87	3,41	63.68	7.17
66.42	6.62	4,84	65,78	6.78
66.00	7,14	3,42	65.69	7.28
65.29	6,89	3,54	65,22	6.92
67.59	6.61	3,28	67,51	6.52
67.88	6,74	3,23	67.79	6,36
64.37	6,88	3,41	64,49	6.80

3,2(1 3.50 3.36 3,68 3.27 3.07 4.49 3.60 3.70 3.60 3.59 3.30

	7	) 1	695 384	S
	Tabelle II!
	IV-Ahsorpli
		MKspeklren
Beispiel	238		B	IO
4	270	487
	310	358
	425	282
		150
	238		15
5	270	479
	310	356
	425	378	20
	240	151
	310	452
6	425	352
	233	139	25
7	310	565
	423	364
	269	135
8	309	347
	425	375
	141

Beispiel

10

14

15

I Λ -AhsnrptHMisspektren

310	390
425	157
310	362
425	139
240	450
270	362
307	360
428	157
240	153
278	301
311	370
428	153
240	495
276	312
311	397
428	165

2333

Claims (1)

1. Patentansprüche:
   1. Rifamycin SV-Derivate der allgemeinen

   Formel

   H₃C CH₃

   CH₃O

   H₃C O