DE10233412A1

DE10233412A1 - Neue Verbindungen als Histondeacetylase-Inhibitoren

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Publication number: DE10233412A1
Application number: DE10233412A
Authority: DE
Inventors: Alexander B. Dr. Maurer; Sascha Hoevelmann; Elke Dr. Martin; Bernd Dr. Hentsch; Michael Dr. Gassen; Juergen Dr. Kraus; Rolf Dr. Krauss; Adam-Spencer Vincek
Original assignee: 4SC AG; G2M Cancer Drugs AG
Current assignee: 4SC AG; Topotarget Germany AG
Priority date: 2002-07-23
Filing date: 2002-07-23
Publication date: 2004-02-12
Also published as: WO2004009536A1; AU2003254371A1; JP4644829B2; CA2491131A1; EP1523470A1; JP2005533840A; CA2491131C

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der allgemeinen Formel (I) DOLLAR F1 oder pharmazeutisch geeignete Salze oder physiologisch funktionelle Derivate davon, worin: DOLLAR A n ein nicht aromatisches Ringsystem ist, das 2 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, worin das Ringsystem 1 oder 2 Doppelbindungen enthalten kann; DOLLAR A X C, CH oder CH¶2¶ ist; DOLLAR A Y unter C, CH, CH¶2¶, S, NR, CH¶2¶-CH¶2¶, DOLLAR A H¶2¶C- -CH, HC--CH¶2¶, C--CH¶2¶, H¶2¶C--C oder C--C ausgewählt ist; wobei ein oder mehrere der Wasserstoffatome gegebenenfalls durch einen oder mehrere der Substituenten R' substituiert sind; DOLLAR A wobei jede der gestrichelten Linien eine Einfachbindung, eine Doppelbindung oder eine Dreifachbindung bedeutet, wobei eine Kombination einer Dreifachbindung mit einer Dreifachbindung und einer Doppelbindung mit einer Dreifachbindung ausgeschlossen ist; DOLLAR A R' unabhängig H, -CN, Alkyl, Cycloalkyl, Aminoalkyl, Alkylamino, Alkoxy, -OH, -SH, Alkylthio, Hydroxyalkyl, Hydroxyalkylamino, Halogen, Halogenalkyl, Halogenalkoxy ist; DOLLAR A R H, eine Alkyl- oder Cycloalkylgruppe ist; DOLLAR A Z CH, C oder P ist; DOLLAR A p 0 oder 1 ist.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen als Inhibitoren von Enzymen mit Histondeacetylase-Aktivität, Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen und deren Verwendung für die Behandlung von Krankheiten, die mit der Hypoacetylierung von Histonen und/oder anderen Molekülen in Zusammenhang stehen, oder bei denen die Induktion der Hyperacetylierung eine nützliche Wirkung hat, beispielsweise durch Inhibition der Proliferation und/oder Induktion der Differenzierung und/oder Induktion der Apoptose in transformierten Zellen, wie bei Krebs. Außerdem sind die Verbindungen für die Behandlung anderer Proliferationskrankheiten, für die Therapie oder Prophylaxe von Zuständen nützlich, die mit einer abnormalen Genexpression zusammenhängen.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Die lokale Umlagerung von Chromatin ist ein wichtiger Schritt bei der Transkriptionsaktivierung von Genen. Dynamische Änderungen der nukleosomalen Verpackung von DNA müssen auftreten, damit die Transkriptionsproteine mit der DNA-Matrize in Kontakt gelangen können. Einer der wichtigsten Mechanismen, welche die Chromatinumlagerung und die Gentranskription beeinflussen, sind die posttranslationale Modifikation von Histonen und anderer zellulärer Proteine durch Acetylierung und nachfolgende Änderung der Chromatinstruktur (Davie, 1998, Curr Opin Genet Dev 8, 173–8; Kouzarides, 1000, Curr Opin Genet Dev 0, 40–8; Strahl und Allis, 2000, Nature 403, 41–4). Im Fall der Histonhyperacetylierung führen Veränderungen der elektrostatischen Anziehung für DNA und sterische Behinderungen, die durch die hydrophobe Acetylgruppe eingeführt werden, zur Destabilisierung der Wechselwirkung von Histonen mit DNA. Somit führt die Acetylierung von Histonen zum Auflösen der Nukleosomen und macht die DNA für die Transkriptionsmaschinerie zugänglich. Die Entfernung der Acetylgruppen ermöglicht es den Histonen, sich enger an die DNA und an die benachbarten Nukleosomen zu binden, so daß eine die Transkription unterdrückende Chromatinstruktur erhalten bleibt. Die Acetylierung wird durch eine Reihe von Enzymen mit Histonacetyltransferase-(HAT)-Aktivität vermittelt. Umgekehrt werden Acetylgruppen durch spezifische Histondeacetylase-(HDAC)-Enzyme entfernt. Die Störung dieser Mechanismen führt zu einer fehlerhaften Regulation der Transkription und kann zu einer tumorigenen Transformation führen.
Zusätzlich ändern andere Moleküle, wie Transkriptionsfaktoren, ihre Aktivität und Stabilität in Abhängigkeit von ihrem Acetylierungszustand. Beispielsweise inhibiert PML-RAR, das Fusionsprotein, das mit akuter promyelozytischer Leukämie (APL) zusammenhängt, p53 durch Vermittlung der Deacetylierung und durch Abbau von p53, so daß APL-Herde den p53-abhängigen Krebsüberwachungswegen nicht mehr unterliegen. Die Expression von PML-RRR in hämatopoietischen Vorläufern führt zur Repression der p53-vermittelten Transkriptionsaktivierung und zum Schutz vor der p53-abhängigen Apoptose, die durch genotoxischen Streß ausgelöst wird (Röntgenstrahlen, oxidativer Streß). Die Funktion von p53 wird jedoch in Anwesenheit von HDAC-Inhibitoren wiederhergestellt, was auf eine Aktivierung von HDAC gegenüber p53 durch PML-RAR als Mechanismus hindeutet, welcher der p53-Inhibition zugrundeliegt (Insinga et al. 2002, Manuskript eingereicht). Deshalb spielt die Faktoracetylierung eine entscheidende Rolle bei der Antitumoraktivität von HDAC-Inhibitoren.
Hormonrezeptoren im Kern sind ligandenabhängige Transkriptionsfaktoren, welche die Entwicklung und Homöostase sowohl durch positive als auch negative Kontrolle der Genexpression kontrollieren. Defekte in diesen regulatorischen Vorgängen sind die Ursache für viele Krankheiten und spielen eine wichtige Rolle bei der Entwicklung von Krebs. Viele Kernrezeptoren, einschließlich T3R, RAR und PPAR, können mit den Corepressoren N-CoR und SMRT in Abwesenheit von Liganden wechselwirken und dadurch die Transkription inhibieren. Außerdem wurde auch berichtet, daß N-CoR mit Antagonistenbesetzten Progesteron- und Östrogenrezeptoren wechselwirken. Es wurde gezeigt, daß N-CoR und SMRT in großen Proteinkomplexen vorkommen, die auch mSin3-Proteine und Histondeacetylasen enthalten (Pazin und Kadonaga, 1997; Cell 89, 325–8). Somit spiegelt das ligandeninduzierte Umschalten von Kernrezeptoren von Repression zu Aktivierung den Austausch des Corepressors und der Coaktivatorkomplexe mit antagonistischen enzymatischen Aktivitäten wider.
Der N-CoR-Corepressorkomplex vermittelt nicht nur. die Repression durch Kernrezeptoren, sondern wechselwirkt auch mit zusätzlichen Transkriptionsfaktoren, einschließlich Mad-1, BCL-6 und ETO. Viele dieser Proteine spielen eine Schlüsselrolle bei Störungen der Zellproliferation und Zelldifferenzierung (Pazin und Kadonaga, 1997; Cell 89, 325–8; Huynh und Bardwell, 1998, Oncogene 17, 2473–84; Wang, J. et al., 1998, Proc Natl Acad Sci USA 95, 10860–5). Beispielsweise wurde T3R ursprünglich auf Grundlage seiner Homologie mit dem viralen Oncogen v-erbA identifiziert, welches im Gegensatz zu dem Wildtyprezeptor Liganden nicht bindet und als konstitutiver Transkriptionsrepressor wirkt. Außerdem stehen Mutationen in RARs mit einer Anzahl von menschlichen Krebsarten in Verbindung, insbesondere mit akuter promyelozytischer Leukämie (APL) und mit hepatozellulären Karzinomen. In APL-Patienten ist an RAR-Fusionsproteinen, die sich aus chromosomalen Translokationen ergeben, entweder das promyelozytische Leukämieprotein (PML) oder das promyelozytische Zinkfingerprotein (PLZ F) beteiligt. Obwohl beide Fusionsproteine mit Komponenten des Corepressorkomplexes wechselwirken können, führt die Zugabe von Retinsäure zur Ablösung des Corepressorkomplexes von PML-RAR, während PLZF-RAR konstitutiv wechselwirkt. Diese Ergebnisse erklären, warum PML-RAR APL-Patienten nach Behandlung mit Retinsäure vollständig genesen, während PLZF-RAR APL-Patienten kaum ansprechen (Grignani et al., 1998, Nature 391, 815–8; Guidez et al., 1998, Blood 91, 2634–42; He et al., 1998, Nat Genet 18, 126–35; Lin et al., 1998, Nature 391, 8911–4). Außerdem wurde kürzlich ein PML-RAR-Patient, der mehrere Rückfälle nach Behandlung mit Retinsäure erlitten hatte, mit dem HDAC-Inhibitor Phenylbutyrat behandelt, was zu einer vollständigen Genesung von der Leukämie führte (Warrell et al., 1998, J, Natl. Cancer Inst. 90, 1621–1625).
Bislang wurden Versuche der klinischen Phase II mit dem eng verwandten Buttersäurederivat Pivanex (Titan Pharmaceuticals) als Monotherapie abgeschlossen, welches Aktivität in Stufe III/IV bei nicht kleinzelligem Lungenkrebs zeigte (Keer et al., 2002, ASCO, Abstract No. 1253). Es wurden mehrere HDAC-Inhibitoren identifiziert, wobei NVP-LAQ824 (Novartis) und SAHA (Aton Pharma Inc.) Mitglieder der Strukturklasse der Hydroxamsäuren sind, die in Versuchen der klinischen Phase I getestet wurden (Marks et al., 2001, Nature Reviews Cancer 1, 194–202). Eine andere Klasse umfaßt cyclische Tetrapeptide, wie Depsipeptid (FR901228 – Fujisawa), das erfolgreich in Versuchen der Phase II für die Behandlung von T-Zell-Lymphomen eingesetzt wurde (Piekarz et al., 2001, Blood 98, 2865–8). Außerdem wird derzeit MS-27-275 (Mitsui Pharmaceuticals), eine Verbindung, die der Klasse der Benzamide verwandt ist, in Versuchspatienten der Phase I mit hämatologischen Bösartigkeiten getestet.
In Int. J. Chem. Kinet. 1997, 29, 729–735 werden 3-Cyclopentyl-N-hydroxypropionamid, 4-Cyclohexyl-N-hydroxybutyramid und 2-Cyclohexyl-N-hydroxyacetamid beschrieben (vgl. auch Berndt et al., 1992, Int. J. Chem. Kinet., 24, 695–701).
Die Kristallstruktur eines histondeacetylaseähnlichen Proteins aus dem hyperthermophilen Bacterium aquifex aeolicus, das mit den zwei Inhibitoren TSA und SAHA cokristallisiert wurde, wird von Finnin et al., 1999, Nature, 401, 188–193 beschrieben.
Hydroxamsäuren mit mindestens einem aromatischen Ring oder Ringsystem als Histondeacetylaseinhibitoren werden von Lavoie et al., 2001, Bioorg. Med. Chem. Letters 11, 2847– 2850; Remiszewski et al., 2002, J. Med. Chem. 45, 4, 753–757; Massa et al., 2001, J. Med. Chem. 44, 2069–2072; Sternson et al. 2001, Org. Lett. 3, 26, 4239–4242; Mai et al., 2002, J. Med. Chem. 45, 1778–1784; Woo et al., 2002, J. Med. Chem. 45, 2877–2885, beschrieben.
In EP 1174438 , WO 0052033, WO 0118045, WO 0118171, WO 0138322, WO 0170675, WO 9735990, WO 9911659, WO 0226703, Wo 0230879 und WO 0226696 werden Hydroxamsäuren als Histondeacetylaseinhibitoren beschrieben.
In WO 9805635 und WO 9533709 werden Hydroxamsäuren als Matrixmetalloproteinaseinhibitoren beschrieben.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind Hydroxamsäuren, welche Inhibitoren von Enzymen mit Histondeacetylaseaktivität sind. Aufgrund ihrer HDAC-inhibitorischen Aktivität induzieren sie aus den folgenden drei Gründen die Differenzierung und/oder die Apoptose in vielen Krebszellen: (1) diese Enzyme sind in allen Zellen vorhanden, (2) Pilotstudien mit Modellverbindungen, wie Butyrat oder TSR, die sich von den erfindungsgemäßen unterscheiden, haben gezeigt, daß HDAC-Inhibitoren die Differenzierung in vielen Zellen induzieren, und (3) die klinische Wirksamkeit wurde für mehrere andere HDAC-Inhibitoren, welche mit den erfindungsgemäßen Verbindungen nicht verwandt sind, in der Behandlung von Krebspatienten gezeigt.
Die Aktivität zur Induzierung der Differenzierung und/oder der Apoptose in vielen transformierten Zellen ist eine viel komplexere biologische Aktivität als nur die Inhibition der Proliferation. Im letztgenannten Fall wäre nicht erkennbar, warum nur die Proliferation von transformierten Zellen (Tumorzellen), jedoch nicht von normalen Zellen inhibiert werden sollte. Die Induktion der Apoptose, die Differenzierung oder, genauer gesagt, die Redifferenzierung in entdifferenzierten Tumorzellen stellt eine Erklärung dafür dar, warum die erfindungsgemäßen Verbindungen durch Induktion der Differenzierung und/oder Apoptose eine vorteilhafte Wirkung auf eine große Bandbreite von Tumoren haben.
Die Histondeacetylase-inhibitorische Aktivität neuer Verbindungen kann mit einer Reihe von Technologien des Standes der Technik bestimmt werden, wie durch einen Transkriptionsrepressionstest, Western-Blot-Analyse, welche die Acetylierung von Histon H3 und/oder Histon H4 nachweist, oder durch einen enzymatischen in vitro-Test. Histondeacetylase-Inhibitoren können außerdem über ihre zytotoxischen und wachstumsinhibitorischen Wirkungen auf Tumorzellinien und ihre Fähigkeit zur Modulierung der Genexpressionsmuster in Zellen charakterisiert werden.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der allgemeinen Formel (I):
oder pharmazeutisch geeignete Salze oder physiologisch funktionelle Derivate davon, worin:
n ein nicht aromatisches Ringsystem ist, das 2 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, worin das Ringsystem 1 oder 2 Doppelbindungen enthalten kann;
X C, CH oder CH2 ist;
Y unter C, CH, CH₂, S, NR, CH₂-CH₂,
H₂C- -CH, HC--CH₂, C--CH₂, H₂C--C oder C--C ausgewählt ist; wobei ein oder mehrere der Wasserstoffatome gegebenenfalls durch einen oder mehrere der Substituenten R' substituiert sind;
wobei jede der gestrichelten Linien eine Einfachbindung, eine Doppelbindung oder eine Dreifachbindung bedeutet, wobei eine Kombination einer Dreifachbindung mit einer Dreifachbindung und einer Doppelbindung mit einer Dreifachbindung ausgeschlossen ist;
R' unabhängig H, -CN, Alkyl, Cycloalkyl, Aminoalkyl, Alkylamino, Alkoxy, -OH, -SH, Alkylthio, Hydroxyalkyl, Hydroxyalkylamino, Halogen, Halogenalkyl, Halogenalkoxy ist;
R H, eine Alkyl- oder Cycloalkylgruppe ist;
Z CH, C oder P ist;
p 0 oder 1 ist; und
mit der Maßgabe, daß die folgenden Verbindungen ausgeschlossen sind:
Eine Alkylgruppe, falls nicht anders angegeben, ist vorzugsweise eine lineare oder verzweigte Kette mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl-, t-Butyl-, Isobutyl-, Pentyl- oder Hexylgruppe, wobei eine Methyl-, Ethyl-, Isopropyl- oder t-Butylgruppe am stärksten bevorzugt sind.
Der Ausdruck "Alkyl", falls nicht anders angegeben, bedeutet auch, daß diejenigen Derivate von Alkyl umfaßt sind, die eingehender nachstehend als "ungesättigtes Alkyl" definiert sind. Eine ungesättigte Alkylgruppe ist eine mit einer oder mehreren Doppelbindungen oder Dreifachbindungen, vorzugsweise Vinyl, 2-Propenyl, Crotyl, 2-Isopentenyl, 2-(Butadienyl), 2,4-Pentadienyl, 3-(1,4-Pentadienyl), Ethinyl, 1- und 3-Propinyl, 3-Butinyl und die höheren Homologen und Isomeren.
Die Alkylgruppe in den Verbindungen der Formel (I) können gegebenenfalls mit einem oder mehreren der vorstehend definierten Substituenten R' substituiert sein.
Eine Cycloalkylgruppe bezeichnet ein nicht aromatisches Ringsystem, das 3 bis 8 Kohlenstoffatome enthält, wobei eines oder mehrere der Kohlenstoffatome in dem Ring durch eine Gruppe X ersetzt sein können, wobei X wie vorstehend definiert ist.
Eine Alkoxygruppe bezeichnet eine O-Alkylgruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Alkylthiogruppe bezeichnet eine S-Alkylgruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Hydroxyalkylgruppe bezeichnet eine HO-Alkylgruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Halogenalkylgruppe bezeichnet eine Alkylgruppe, die mit 1 bis 5, vorzugsweise 3 Halogenatomen substituiert ist, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist, wobei CF₃ bevorzugt ist.
Halogenalkyloxygruppe bezeichnet eine Alkoxygruppe, die mit 1 bis 5, vorzugsweise 3 Halogenatomen substituiert ist, wobei die Alkoxygruppe wie vorstehend definiert ist, wobei OCF₃ bevorzugt ist.
Eine Hydroxyalkylaminogruppe bezeichnet eine (HO-Alkyl)₂-N-Gruppe oder eine HO-Alkyl-NH-Gruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Alkylaminogruppe bezeichnet eine HN-Alkyl oder N-Dialkylgruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Aminoalkylgruppe bezeichnet eine H₂N-Alkylgruppe, Monoalkylaminoalkyl- oder Dialkylaminoalkylgruppe, wobei die Alkylgruppe wie vorstehend definiert ist.
Eine Halogengruppe ist Chlor, Brom, Fluor oder Iod, wobei Fluor bevorzugt ist.
Die Erfindung stellt auch eine Arzneimittelzusammensetzung bereit, die eine Verbindung der Formel (I) in freier Form oder in der Form von pharmazeutisch geeigneten Salzen und physiologisch funktionellen Derivaten oder Arzneimittelvorläufern zusammen mit einem pharmazeutisch geeigneten Verdünnungsmittel oder Träger dafür enthält.
Der Ausdruck "physiologisch funktionelles Derivat" bezeichnet Verbindungen, wie Ether, Ester, N-alkylierte oder acetylierte Hydroxamsäuren, 2,5-Dihydro-[1,2,4]-oxodiazolyl oder 4,5-Dihydro-[1,2,4]-oxodiazolyl, welche selbst nicht pharmazeutisch sind, die jedoch in vivo, d.h. in dem Patienten, dem die Verbindung verabreicht wird, in ihre pharmazeutisch wirksame Form überführt werden.
In einem weiteren Aspekt stellt die vorliegende Erfindung auch ein Verfahren zur Behandlung oder Prophylaxe eines Zustandes bereit, bei dem es vorteilhaft ist, die Histondeacetylaseaktivität zu inhibieren, wobei das Verfahren die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) und von physiologisch geeigneten Salzen oder physiologisch funktionellen Derivaten davon umfaßt.
Die Erfindung betrifft auch die Verwendung von Verbindungen der Formel (I) und ihrer pharmakologisch geeigneten Salze oder physiologisch funktionellen Derivate für die Herstellung eines Arzneimittels für die Prävention und Behandlung von Krankheiten, bei denen die Inhibition der Histondeacetylase vorteilhaft ist.
Zusätzlich stellt die vorliegende Erfindung Verfahren zur Herstellung der gewünschten Hydroxamsäuren der Formel (I) bereit.
Ein Verfahren zur Synthese der Verbindungen der Formel (I) umfaßt die Umwandlung einer Säure (Formel II) in das korrespondierende Säurechlorid (Formel III) und das Umsetzen des Säurechlorids mit Hydroxylamin (Watanabe et a1., 1989, J. Org. Chem., 54, 17, 4088–4097; Shishido et a1., 1992, J. Org. Chem., 57, 10, 2876–2883).
Kupplungsreaktionen von Säuren der Formel (II) mit Hydroxylamin, andere Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I), werden von Woo et al., 2002, J. Med. Chem. 45, 2877–2885; Knorr et al., 1989, Tetrahedron Lett., 30, 1927–1930, Carpino, 1993, J. Am. Chem. Soc., 115, 4397– 4398 und Albericio et al., 1998, J. Org. Chem , 63, 9678–9683 beschrieben.
Ein weiteres Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) ist die Reaktion des korrespondierenden Esters mit Hydroxylamin, wie von Stowell et a1., 1995, J. Med.
Chem , 38, 8, 1411–1413 beschrieben.
In einer bevorzugten Ausführungsform kann in den Verbindungen der Formel (I) der Ring n, einschließlich Z, Cyclopentyl; Cyclohexyl, Cycloheptyl, Cyclopent-1-enyl, Cyclohex-1-enyl, Cyclohept-1-enyl, Cyclopent-2-enyl, Cyclohex-2-enyl, Cyclohept-2-enyl, Cyclohex-3-enyl, Cyclohept-3-enyl sein.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist in den erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) der Ring, einschließlich Z, Cyclopentyl oder Cyclohexyl, und Y ist unter CH, CH₂, CH₂-CH2, S, NR ausgewählt, oder p = 0 und Z ist CH oder P.
In einer weiteren, stärker bevorzugten Ausführungsform ist in den erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) der Ring n, einschließlich Z, Cyclopentyl oder Cyclohexyl, Y ist unter CH, CH₂ und CH₂-CH₂ ausgewählt, oder p = 0 und Z ist CH.
In einer weiteren, stärker bevorzugten Ausführungsform ist keines der Kohlenstoffatome der Alkylgruppen durch eine Gruppe A ersetzt.
Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind:
3-Cyclohexyl-N-hydroxypropionamid;
2-Cycloheptyl-N-hydroxyacetamid.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) können mit anorganischen oder organischen Säuren oder Basen Salze bilden. Beispiele solcher Salze sind Alkalimetallsalze, insbesondere Natrium- und Kaliumsalze, oder Ammoniumsalze.
Die Verbindungen der Formel (I) können durch verschiedene Verfahren erhalten werden. In bevorzugten Ausführungsformen der erfindungsgemäßen Verfahren werden die zwei folgenden Syntheseverfahren eingesetzt.
Säuren oder Säurechloride von α-β-ungesättigten Verbindungen der Formel (I) können durch Hydrolyse des korrespondierenden Esters unter Bildung der Säure erhalten werden (Bojic et al., 1998, 354, 289–299), welche dann mit Chlorierungsmitteln (Oxalylchlorid, Thionylchlorid, Phosphorpentachlorid) in das Säurechlorid umgewandelt werden kann. ? -β-ungesättigte Ester können aus dem korrespondierenden Aldehyd durch Umsetzen mit (Carbethoxymethylen)triphenyl- phosph?ran (PhP=CHCOOEt) synthetisiert werden (Maryanoff et al., 1989, Chem. Rev. 89, 863–927).
Andere Verfahren zur Herstellung unterschiedlicher Säuren werden von Mancuso et al., 1981, Synthesis, 165–185; oder Bal et al., 1981, Tetrahedron, 37, 2091–2096 beschrieben.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können für verschiedene menschliche und tierische Krankheiten, vorzugsweise menschliche Krankheiten, eingesetzt werden, bei denen die Inhibition der Histondeacetylaseaktivität vorteilhaft ist.
Deshalb werden die erfindungsgemäßen Verbindungen und die Arzneimittel, die daraus hergestellt werden, im allgemeinen eingesetzt, um die Differenzierung und/oder Apoptose von Zellen, wie undifferenzierten Tumorzellen, zu induzieren. Die therapeutische Wirkung der Erfindung ergibt sich aus einem oder mehreren Mechanismen, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf die Regulation der Zellproliferation, Zellaktivierung, Zellüberleben, Zelldifferenzierung, Zellzyklus, Zellreifung und Zelltod, oder die Induzierung von systemischen Änderungen im Metabolismus, wie Änderungen im Zucker-, Lipid- oder Proteinmetabolismus, die Inhibition der Bildung neuer Blutgefäße (anti-Angiogenese), die Inhibition der Tumorverbreitung in andere Organe (anti-metastatisch), die Inhibition der Tumorausbreitung in benachbarte normale Strukturen (anti-invasiv) oder die Förderung des programmierten Zelltods (Apoptose).
Sie können auch eingesetzt werden, um die Zellbildung zu unterstützen, einschließlich das Blutzellwachstum und die Blutzellbildung (prohämotopoietische Wirkung) nach der Verringerung der Anzahl oder der Zerstörung der Zellen, welche beispielsweise durch toxische Mittel, Bestrahlung, Immuntherapie, Wachstumsdefekte, Fehlernährung, Malabsorption, Immunfehlregulation , Anämie und dergleichen verursacht werden, oder sie können eine therapeutische Kontrolle der Gewebebildung und des Gewebeabbaus und eine therapeutische Modifizierung der Zell- und Gewebeaufrechterhaltung und der Blutzellhomöostase bereitstellen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen und die Arzneimittel, die damit hergestellt werden, sind auch für die Behandlung von Krankheiten nützlich, die mit der genspezifischen Hypoacetylierung von Histonen oder anderen Molekülen, wie p53, in Zusammenhang stehen. Zusätzlich können die erfindungsgemäßen Verbindungen auch bei der Behandlung von Zuständen eingesetzt werden, bei denen die Unterdrückung von anti-apoptotischen Genen, wie BCL-XL und anderen Mitgliedern der BCL-Familie, oder die Induktion der Tumorsuppressoraktivität von Molekülen, wie p21 und/oder p53, erforderlich ist.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen und Arzneimittel, die damit hergestellt werden, sind auch für die Behandlung von Krankheiten geeignet, bei denen die Induktion der Hyperacetylierung von Histonen eine günstige Wirkung hat, was zur Differenzierung und/oder Apoptose von Tumorzellen in Patienten führt, wodurch eine klinische Verbesserung des Zustandes des Patienten bewirkt wird. Beispiele solcher Krankheiten umfassen, wobei sie jedoch nicht darauf beschränkt sind, Hautkrebs, Melanome, östrogenrezeptorabhängige und -unabhängige Brustkrebse, Eierstockkrebs, testosteronrezeptorabhängiger und -unabhängiger Prostatakrebs, Magenkrebs, Darm- und Dickdarmkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Blasenkrebs, Speiseröhrenkrebs, Magenkrebs, Harnwegekrebs, Magendarmkrebs, Gebärmutterkrebs, Astrocytome, Gliome, Basalzellkrebs und Schwammzellkrebs, Sarkome, wie das Kaposi's Sarkom und das Osteosarkom, Kopf- und Halskrebs, kleinzellige oder nicht kleinzellige Lungenkarzinome, Leukämie, Lymphome und andere Blutzellkrebsarten.
Die erfindungsgemäß kombinatorische Behandlung ist insbesondere für die Behandlung von minimal verbleibenden Tumorerkrankungen oder Tumormetastasen nützlich.
Zudem kann die Erfindung auch dadurch nützlich sein, daß eine unzweckmäßige Genexpression in Krankheiten, die auf einer von der gewöhnlichen Form abweichenden Rekrutierung der Histondeacetylaseaktivität beruhen, wie dem Thyroidresistenzsyndrom, oder bei anderen Zuständen, die mit abnormaler Genexpression zusammenhängen, umgekehrt wird, wie bei Entzündungskrankheiten, Diabetes, Thalassämie, Zirrhosen, Protozoeninfektionen oder dergleichen, und in allen Typen von Autoimmunkrankheiten, insbesondere bei rheumatischer Arthritis, rheumatischer Spondylitis, allen Formen des Rheumatismus, Osteoarthritis, Gichtarthritis, multipler Sklerose, insulinabhängigem Diabetes mellitus und nicht insulinabhängigem Diabetes, Arthritis, Schnupfen, Uveithis, Lupus erythematoidis, geschwürartiger Dickdarmentzündung, Morbus Crohn, entzündlicher Bauchkrankheit, sowie bei anderen chronischen Entzündungen und bei chronischem Durchfall.
Außerdem sind die erfindungsgemäßen Verbindungen und Arzneimittel, die damit hergestellt werden, für die Behandlung anderer proliferativer Krankheiten nützlich, wie Psoriasis, Fibrosis und anderer dermatologischer Störungen. Die Ausdrücke "proliferative Krankheit" und "Zellproliferation" werden hier gegenseitig austauschbar verwendet und betreffen eine unerwünschte oder unkontrollierte Zellproliferation von überschüssigen oder abnormalen Zellen, wie neoplastisches und hyperplastisches Wachstum, sei es in vitro oder in vivo. Beispiele von proliferativen Zuständen umfassen, wobei sie jedoch nicht darauf beschränkt sind, vorcanceröse und canceröse Zellproliferation, einschließlich bösartige Neoplasmen und Tumore, Krebse, Leukämien, Psoriasis, Knochenkrankheiten, fibroproliferative Störungen (beispielsweise des Bindegewebes) und Arteriosklerose. Jeder beliebige Zelltyp kann behandelt werden, einschließlich, jedoch nicht darauf beschränkt, Zellen der Lunge, des Darms, der Brust, der Eierstöcke, der Prostata, der Leber, der Bauchspeicheldrüse, des Gehirns und der Haut, und jede beliebige Behandlung von Störungen, die T-Zellen betreffen, wie aplastische Anämie und das DiGeorge-Syndrom und die Graves-Krankheit, kann durchgeführt werden.
Die Erfindung umfaßt auch Verbindungen der Formel (I), die im Patienten in eine Verbindung der erfindungsgemäßen Formel metabolisiert werden. Die in der vorliegenden Erfindung beschriebenen Ausführungsformen sind auch auf solche Verbindungen anwendbar.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch ein diagnostisches Verfahren zur Identifizierung von Tumoren, welches die Stufe umfaßt, bei der in vitro getestet wird, ob ein Tumor auf die Behandlung entweder mit Verbindungen der Formel (I) oder in Kombination mit etablierten Tumortherapeutika anspricht. Das Verfahren umfaßt vorzugsweise das Verfahren zur Identifizierung von Genen, die durch diese Behandlungen reguliert werden. In einer besonderen Ausführungsform umfaßt das diagnostische Verfahren die Verwendung der Nukleinsäuretechnologie, vorzugsweise die Hybridisierung oder die Polymerasekettenreaktion für den Nachweis. Andere Typen von Nukleinsäuretechnologien können jedoch auch eingesetzt werden. In einer weiteren Ausführungsform umfaßt das Verfahren für den Nachweis die Verwendung spezifischer Antikörper gegen unterschiedlich regulierte Proteine: Zu diesem Zweck werden Proteine, die von diesen Genen kodiert werden, welche hinsichtlich ihrer Expression bei kombinatorischer Behandlung unter Verwendung erfindungsgemäßer Formulierungen und Derivaten davon dereguliert sind, beispielsweise in rekombinanten Expressionssystemen exprimiert, und es werden Antikörper, die gegen diese Proteine gerichtet sind, erzeugt. Danach können solche Antikörper (oder Muster von Antikörpern) eingesetzt werden, um den Zustand eines Tumors oder von Tumorzellen für diagnostische und/oder prognostische Zwecke zu charakterisieren.
Im allgemeinen stellt die vorliegende Erfindung neue Möglichkeiten zur Behandlung verschiedener menschlicher Krankheiten bereit. Die Anmelder fanden, daß die HDAC-inhibitorische und zelldifferenzierungsinduzierende Aktivität der Verbindungen der Formel (I) erfolgreich in Kombination mit gut etablierten und klinisch untersuchten therapeutischen Arzneimitteln für die Behandlung von Tumorzellen unterschiedlichen Ursprungs eingesetzt werden können. Eine solche kombinatorische Behandlung auf Grundlage dieser Verbindungen führt zu besseren therapeutischen Erfolgen in menschlichen Tumorpatienten als bei den entsprechenden therapeutischen Arzneimitteln, die allein eingesetzt werden. Es ist ein erfindungsgemäßer Gegenstand, kombinatorische therapeutische Ansätze unter Einsatz der erfindungsgemäßen Verbindungen für die Behandlung von Krebs bereitzustellen. Solche kombinatorischen Behandlungen können zu einer Verringerung der therapeutischen Dosen von beispielsweise erforderlichen chemotherapeutischen Mitteln führen und können somit die derzeit beobachtbaren, teilweise erheblichen Nebenwirkungen von häufig eingesetzten Therapien begrenzen.
Aspekte der vorliegenden Erfindung sind die Kombination von Verbindungen der Formel (I) mit, jedoch nicht darauf beschränkt, therapeutischen Prinzipien, die derzeit in klinischer Verwendung oder in klinischer Entwicklung sind, wie

– chemotherapeutische oder zytotoxische Arzneimittel (wie 5-FU, Taxol, cisPlatin, Camptothecin, Gemcitabin, Doxorubicin, Irinothecan)
– Differenzierungs-induzierende Arzneimittel (wie Vitamin D, Retinirsäure, Cytokine, wie II-3, II-6, SCF, G-CSF, GM-CSF, TNF)
– Bestrahlungstherapie (wie Röntgenstrahlen oder gamma- Strahlen)
– immunologische Ansätze (Antikörpertherapie, Impfung)
– kombinierte immuntherapeutische/zytotoxische Ansätze (wie Antikörper konjugiert mit zytotoxischen Komponenten)
- anti-Angiogeneseansätze.

Die Verbindungen und Salze davon können als Arzneimittelzusammensetzungen (wie Flüssigkeiten, Suspensionen, Emulsionen, Pastillen, Gelatinekapseln, Ampullen, Zäpfchen, Pessars, Salben, Gele, Pasten, Sprays, Lotionen, Öle, große Pillen, Latwerge, Aerosole, Pulver, Granulate, Tabletten, Pillen, Kapseln, Spritzen, Lösungen, Schäume, Cremes, Einläufe und dergleichen) formuliert sein, welche mindestens eine solche Verbindung allein oder im Gemisch mit pharmazeutisch geeigneten Trägern, Korrigenzien und/oder Verdünnungsmitteln enthalten. Die Arzneimittelzusammensetzungen können gemäß herkömmlichen Verfahren formuliert sein.
Spezifische Dosiskonzentrationen werden für die individuellen Patienten in Abhängigkeit verschiedener Faktoren, einschließlich dem Alter, dem Körpergewicht, dem Allgemeinzustand, dem Geschlecht, der Diät und Vorerkrankungen, der Schwere der speziellen Krankheit des Patienten und der Aktivität der spezifisch eingesetzten Verbindungen, der Zeit der Verabreichung, dem Verabreichungsweg, der Exkretionsrate, der Behandlungsdauer, von anderen Drogen, von Verbindungen und/oder Materialien, die in Kombination eingesetzt werden, eingesetzt. Es wird gewürdigt, daß die geeignete Dosierung der aktiven Verbindungen und die Zusammensetzungen, welche die aktiven Verbindungen enthalten, von Patient zu Patient variieren können. Die Bestimmung der optimalen Dosierung erfordert im allgemeinen ein Gleichgewicht zwischen dem therapeutischen Nutzen und jeglichem Risiko oder schädlichen Nebeneffekten der erfindungsgemäßen Behandlungen.
Die Verabreichung in vivo kann in einer Dosis, kontinuierlich oder unterbrochen über die Behandlungsdauer durchgeführt werden. Verfahren zur Bestimmung der effektivsten Verfahren und Dosierungen zur Verabreichung sind dem Fachmann gut bekannt und variieren mit der für die Therapie eingesetzten Formulierung, dem Zweck der Therapie, der zu behandelnden Zielzelle und dem zu behandelnden Patienten. Einzelne oder mehrere Verabreichungen können mit Dosierungen und Dosierungsmustern durchgeführt werden, die von dem behandelnden Arzt ausgewählt werden.
Im allgemeinen ist eine geeignete Dosis der aktiven Verbindung im Bereich von etwa 0,1 bis etwa 500 mg pro kg Körpergewicht, vorzugsweise 0,1 bis 100 mg pro kg Körpergewicht des Patienten pro Tag. Wenn der aktive Bestandteil ein Salz, ein Ester, ein Vorläuferarzneimittel oder dergleichen ist, wird die verabreichte Menge auf der Grundlage der Ausgangsverbindung berechnet, so daß das tatsächlich eingesetzte Gewicht entsprechend ansteigt.
Assays
1. Transkriptionsreportergen-Assay
Der Transkriptions-Assay für die Repressoraktivität nutzt die Aktivierung und Derepression eines Gal4-abhängigen Reportergens aus (Hildebrand et al., 2001, J Biol Chem 276, 9889–95; Maurer et al., 2002, Blood 99, 2647–52). Dieser Assay wird mit speziell konstruierten permanenten Zellinien durchgeführt. Transkriptionsfaktoren, wie der Thyroidhormonrezeptor, PPARδ, Retinsäurerezeptor, N-CoR und AML/ETO, reprimieren die Transkription, wenn sie an einen Promotor, der UAS-Elemente enthält, als Fusionsproteine mit der heterologen DNA-Bindungsdomäne des Gal4-Proteins aus Hefe binden. In Abwesenheit des Gal4-Fusionsproteins hat das Reportergen aufgrund der Anwesenheit von Bindungsstellen für andere Transkriptionsfaktoren in dem Thymidinkinasepromotor eine hοhe basale Transkriptionsaktivität. Die Gal4-Fusionsproteine reprimieren diese Aktivität bis zu 140-fach. HDAC-Inhibitoren induzieren die Freisetzung von dieser Repression, was als Erhöhung in der Reportergenaktivität (beispielsweise durch den Luziferaseaktivitätsnachweis) nachgewiesen werden kann.
2. Induzierung der Histonhyperacetylierung
Histondeacetylaseinhibitoren induzieren die Akkumulierung von N-terminal hyperacetylierten Histonen H3 und H4. Diese acetylierten Histone können durch Western Blot-Analyse des Gesamtzellextrakts oder von Histonpräparationen aus Histondeacetylaseinhibitor-behandelten Zellen unter Einsatz von Antikörpern, die spezifisch für acetylierte N-terminale Lysinreste der Histone H3 und H4 sind, nachgewiesen werden (Göttlicher et al., 2001, EMBO J 20, 6969–78).
3. Messung der zellulären metabolischen Aktivität nach der Behandlung mit HDAC-Inhibitoren
sDie Lebensfähigkeit von Tumorzellinien nach der Behandlung mit verschiedenen Konzentrationen von Histondeacetylase-Inhibitoren kann durch einen Zelltiter 96® AQ_ueous Zellproliferationstest (Promega) bestimmt werden. Tumorzellinien, die in eine 96 Loch Mikrotiterplatte gegeben werden, werden mit Histondeacetylase-Inhibitoren während 48 Stunden behandelt. Nach der Zugabe des "One Solution Reagent" wird eine Tetrazoliumverbindung (MTS) in ein lösliches gefärbtes Farmazanprodukt durch die Dehydrogenaseenzyme in metabolisch aktiven Zellen bioreduziert. Die Lebensaktivität und metabolische Aktivität von Histondeacetylase-Inhibitor-behandelten Zellen kann im Vergleich zu unbehandelten Zellen berechnet werden, da der MTS-Umsatz direkt proportional zur Anzahl der lebenden Zellen in der Kultur ist.
4. Proteinexpressionsprofils
Histonhyperacetylierung hängt mit einer offenen, entfalteten Chromatinstruktur und Genaktivierung zusammen, während die Hypoacetylierung mit Chromatinverdichtung und Transkriptionsrepression in Zusammenhang steht. Die Behandlung von Tumorzellinien mit Histondeacetylase-Inhibitoren führt zu Histonhyperacetylierung und zur Transkriptionsregulierung von Zielgenen. Das Expressionsmuster, das durch Histondeacetylase-Inhibitoren induziert wird, kann durch Western Blot-Analyse aus Gesamtzellextrakten überwacht werden, beispielsweise durch die Induktion der Expression des Zellzyklus-Inhibitors/Tumorsuppressors p21 und die Suppression der Expression des anti-apoptotischen Moleküls BCL-X_L.
5. Messung der Histondeacetylaseaktivität
Die Inhibition der Histondeacetylaseaktivität in Zellkernextrakten durch Histondeacetylase-Inhibitoren kann durch enzymatische in vivo-Assays überwacht werden. Zellkernextrakte, Immunopräzipitate oder rekombinante Histondeacetylasen werden mit verschiedenen Konzentrationen von Histondeacetylase-Inhibitoren inkubiert. Die Histondeacetylaseaktivität wird durch Deacetylierung eines fluorogenen Substrats (Fluor de Lys, Biomol) beobachtet. Die ICSO-Werte können aus den Dosis-Ansprech-Kurven berechnet werden.
6. Wachstumsinhibition von Tumorzellinien
Die Reduktion der zellulären Biomasse wurde durch SRB-Assays gemessen. Für diesen Assay wurden Zellen in 96-Loch-Kulturplatten bei Dichten zwischen 3000 und 8000 Zellen pro Loch gegeben. Nach 24 Stunden wurden die Zellen 48 bis 72 Stunden in Abwesenheit oder Anwesenheit der angegebenen Konzentrationen an Verbindungen kultiviert. Die synergistische Verringerung der Gesamtzellbiomasse wurde durch einen SRB-Assay durch Zugeben von 1 bis 500 μM des chemotherapeutischen Mittels cisPlatin in Kombination mit den Verbindungen im Medium, oder durch Bestrahlung der Zellen mit Röntgen strahlen (2 Gray) 24 Stunden nach der Behandlung mit den Verbindungen und anschließender Kultivierung während 48 Stunden getestet.
Die Zellen wurden mit kaltem Trichloracetat (TCA) fixiert, wobei eine Endkonzentration an TCA von 10% erhalten wurde. Nach 1-standiger Inkubation bei 4°C wurden die Zellen 5 mal mit Wasser gewaschen und luftgetrocknet. Die fixierten Zellen wurden 30 Minuten mit 0,4% (Gew./Vol.) Sulforhodamin B (SRB), gelöst in 1 % Essigsäure, gefärbt und 4 mal mit 1 Essigsäure gewaschen, um nicht gebundenen Farbstoff zu entfernen. Nach dem Lufttrocknen wurde gebundener Farbstoff mit 10 mM ungepufferter Tris-Base (pH 10,5) während 5 Minuten aufgelöst. Die optischen Dichten (OD) wurden mit einem Molecular Devices Versa Max Mikroplattenlesegerät bei 520 bis 550 nm gelesen. Vier Testlöcher wurden für jedes dosisabhängige Ansprechen parallel mit 12 Kontrollöchern pro Zelllinie gesetzt. Die Messung der Zellpopulationsdichte zum Zeitpunkt 0 (T₀; der Zeitpunkt, an dem das Arzneimittel zugegeben wurde) wurde ebenfalls mit 12 Referenzlöchern für Zellen durchgeführt, die mit TCA unmittelbar vor der Arzneimittelzugabe zu den Testplatten fixiert wurden. Die optische Dichte des Hintergrunds des vollständigen Mediums mit 5 FBS, fixiert und gefärbt wie vorstehend beschrieben, wurde ebenfalls in 12 getrennten Löchern bestimmt. Aus den nicht verarbeiteten Daten der optischen Dichte für jede Mikrotiterplatte wurde die Messung der optischen Dichte des Hintergrunds (d.h. die optische Dichte des vollständigen Mediums einschließlich der Färbung und der optischen Dichte der Zellen zum Zeitpunkt T₀) abgezogen, wodurch die Verringerung der Zellbiomasse der Zellen erhalten wurde.
7. Zellzyklusanalyse
Die Analyse der Wirkung der Verbindungen auf die Zellzyklusverteilung wurde durch Fließzytometrie nach Propidium-Iodidfärbung von Krebszellinien durchgeführt. Zellen wurden in 6-Loch-Kulturplatten mit 100 000 Zellen/Loch gegeben. Am Tag danach wurden sie mit den Verbindungen behandelt und dann 48 oder 72 Stunden kultiviert. Die Zellen wurden mit Propidiumiodid nach der Permeabilisierung und Ethanolfixierung gefärbt. Die Ergebnisse der Zellzyklusanalyse sind als Prozentzahl (%) der Zellen in den Zellzyklusphasen G1, S, G2 + M und sub-G1 (apoptotische Zellen) angegeben. Alle diese Assays wurden doppelt durchgeführt.
8. Messung der Apoptose
Zellen wurden in 6-Loch-Kulturplatten mit 100 000 Zellen/Loch gegeben. Am Tag danach wurden sie mit den Verbindungen behandelt und dann 48 oder 72 Stunden kultiviert. Die Induktion der Apoptose wurde mit dem Vybrant® Apoptosis Assay Kit von Molecular Probes Inc. gemessen. Apoptotische Zellen wurden mit dem grünen fluoreszierenden Farbstoff Yo-Pro-1® und für den Ausschluß von nekrotischen Zellen mit Propidiumiodid gefärbt. Die Analyse der Fraktionen der lebensfähigen, apoptotischen und nekrotischen Zellen wurde durch Fließzytometrie durchgeführt.
Synthese von 3-Cyclohexyl-N-hydroxypropionamid
Zu einer Lösung von 3-Cyclohexylpropionylchlorid (12,1 ml, 12,6 g, 72,0 mMol) in Dichlormethan (50 ml) wurden Hydroxylaminhydrochlorid (5,00 g, 72,0 mMol) und Natriumbicarbonat (12,0 g. 144 mMol) gegeben. Nach 24-standigem Rühren bei Raumtemperatur wurde die Reaktion durch Zugabe einer gesättigten Ammoniumchloridlösung (50 ml) gestoppt. Die Schichten wurden getrennt. Die Wasserschicht wurde mit Ethylacetat (4 × 50 ml) extrahiert. Das Lösungsmittel der vereinten organischen Schichten wurde im Vakuum entfernt. Die Ausfällung des Rohprodukts aus Ethylacetat durch Zugabe von Petroleumether ergab Hydroxamat (7,21 g, 42 mMol, 58 %) als weißen Feststoff. ¹H-NMR (300 MHz, [D₆-DMSO]:δ = 0,95–1,12 (m, 2H) , 1, 38–1,69 (m, 6H) , 1,62–1,77 (m, 3H) , 1,94 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 8,58 (s, 1H) und 10,28 (s, 1H) (NH und OH); ¹³C-NMR (75 MHz, [D₆-DMSO]? = 25,0, 31,8, 32,0, 32,3, 39,5, 169,5 (C(=)NHOH) ; MS: m/z berechnet für (C₉H₁₇NO₂) [M+H]⁺172; gefunden 172.
Biologische Daten
Die aktiven Konzentrationen für eine beispielhafte erfindungsgemäße Verbindung, bestimmt unter Einsatz der vorstehend beschriebenen Assays, sind in der nachstehenden Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1

Claims

Verbindungen der allgemeinen Formel (I)
oder pharmazeutisch geeignete Salze oder physiologisch funktionelle Derivate davon, worin: n ein nicht aromatisches Ringsystem ist, das 2 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, worin das Ringsystem 1 oder 2 Doppelbindungen. enthalten kann; X C, CH oder CH₂ ist; Y unter C, CH, CH₂, S, NR, CH₂-CH₂, -H₂C- -CH, HC--CH₂, C--CH₂, H₂C--C oder C--C ausgewählt ist; wobei ein oder mehrere der Wasserstoffatome gegebenenfalls durch einen oder mehrere der Substituenten R' substituiert sind; wobei jede der gestrichelten Linien eine Einfachbindung, eine Doppelbindung oder eine Dreifachbindung bedeutet, wobei eine Kombination einer Dreifachbindung mit einer Dreifachbindung und einer Doppelbindung mit einer Dreifachbindung ausgeschlossen ist; R' unabhängig H, -CN, Alkyl, Cycloalkyl, Aminoalkyl, Alkylamino, Alkoxy, -OH, -SH, Alkylthio, Hydroxyalkyl, Hydroxyalkylamino, Halogen, Halogenalkyl, Halogenalkoxy ist; R H, eine Alkyl- oder Cycloalkylgruppe ist; Z CH, C oder P ist; p 0 oder 1 ist; und mit der Maßgabe, daß die folgenden Verbindungen ausgeschlossen sind:
Verbindung nach Anspruch 1, worin n Cyclopentyl oder Cyclohexyl ist.
Verbindung nach Anspruch 1, worin n Cyclopentyl oder Cyclohexyl ist und Z CH ist.
Arzneimittelzusammensetzung, welche eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 in freier Form oder in der Form von pharmazeutisch geeigneten Salzen oder physiologisch funktionellen Derivaten enthält.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, einschließlich der Verbindungen, die in Anspruch 1 ausgeschlossen sind, für die Verwendung als Arzneimittel.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 zur Herstellung eines Arzneimittels für die Verwendung in der Behandlung einer Krankheit oder einer therapeutischen Indikation als Inhibitoren von Enzymen mit Histondeacetylaseaktivität.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Verwendung in der Behandlung einer Krankheit oder einer therapeutischen Indikation, bei der die Inhibition der Histondeacetylaseaktivität nützlich ist.
Verwendung nach Anspruch 6, wobei die menschliche Histondeacetylase aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus HDACs 1–10 oder einem Mitglied der SIR2-Proteinfamilie besteht.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Induktion der Zelldifferenzierung.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Induktion der Differenzierung von transformierten Zellen.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Induktion der Apoptose von transformierten Zellen.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Inhibition der Proliferation von transformierten Zellen.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1 für die Inhibition von Histondeacetylaseaktivität.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels, wobei die Induktion der Hyperacetylierung von Histonen eine nützliche Wirkung hat.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Verwendung in der Behandlung einer Krankheit oder einer therapeutischen Indikation, die aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Hautkrebs, Melonen, östrogenrezeptorabhängigem oder -unabhängigem Brustkrebs, Eierstockkrebs, Prostatakrebs, Magenkrebs, Darmkrebs und Dickdarmkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Kopf- oder Halbkrebs, kleinzelligen oder nicht kleinzelligen Lungenkarzinomen, Leukämie und anderen Typen von Blutzellkrebs und endokrinen Krankheiten, die auf einer Veränderung der Histondeacetylase beruhen, wie das Thyroidresistenzsyndrom, besteht.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 5 bei der Herstellung eines Arzneimittels für die Verwendung in der Inhibition der abnormalen Genexpression, wie bei Entzündungskrankheiten, Diabetes, Thalassämie, Zirrhosen oder Protozoen-Infektion.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, welches die Stufe umfaßt, bei der eine Säure der Formel (II)
(worin n, X, Y, Z und p wie in Anspruch 1 definiert sind) oder ein Säurechlorid der Formel (III)
(worin n, X, Y, Z und p wie in Anspruch 1 definiert sind) mit Hydroxylamin umgesetzt wird.