CZ301048B6

CZ301048B6 - Deriváty streptograminu, zpusob jejich prípravy a kompozice, které je obsahují

Info

Publication number: CZ301048B6
Application number: CZ20014641A
Authority: CZ
Inventors: Achard@Daniel; Bacque@Eric; Barriere@Jean-Claude; Bouquerel@Jean; Desmazeau@Pascal; Grisoni@Serge; Leconte@Jean-Pierre; Ribeill@Yves; Ronan@Baptiste
Original assignee: Novexel
Priority date: 1999-06-30
Filing date: 2000-06-29
Publication date: 2009-10-21
Also published as: KR100742035B1; EA005199B1; DE60006958T2; CZ20014641A3; US7166594B2; ES2207535T3; EE200100706A; BRPI0012032B1; AU6288600A; YU89501A; CA2376698A1; GEP20063972B; KR20020020763A; NO329456B1; BG65786B1; WO2001002427A1; AP1392A; SI1187847T1; ATE255592T1; MXPA01012807A

Abstract

Deriváty streptograminu skupiny A obecného vzorce I, kde R.sub.1.n. je halogen, azidoskupina nebo thiokyanatoskupina; R.sub.2.n. je vodík, methyl nebo ethyl; R.sub.3.n. je vodík nebo zbytek alifatického, cykloalifatického, aromatického, arylalifatického, heterocyklického nebo heterocyklylalifatického esteru, který muže být substituovaný a vazba --- je jednoduchá vazba (stereochemie 27R) nebo dvojná vazba a jejich soli.

Description

Deriváty streptograminů, způsob jejich přípravy a kompozice, které je obsahují

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká derivátů streptograminu skupiny A obecného vzorce I:

a také jejich solí, které mají zvláště výhodnou antibakteriální aktivitu.

Dosavadní stav techniky

Ze známých streptograminů byl poprvé v roce 1955 izolován, prístinamycin (RP 7293), který je antibakterálním činidlem přírodního původu produkovaným Streptomyces pristinaespiralis.

Prístinamycin, prodávaný pod názvem Pyrostacine®, obsahuje hlavně prístinamycin IIA kombinovaný s pristinamycinem IA.

Jiné antibakteriální činidlo z třídy streptograminů, virginiamycin, bylo získáno z Streptomyces virginiae, ATCC 13161 [Antibiotics and Chemotherapy, 5, 632 (1955)]. Virginiamycin (Staphylomycine®) obsahuje hlavně faktor M| (VM1) kombinovaný s faktorem S (VS). Polosyntetické deriváty streptograminů vzorce:

kde n je 0 až 2 jsou popsány v patentech EP 135410 a EP 191 662. V kombinaci s polosyntetic25 kou složkou streptograminů skupiny B vykazují synergické působení a mohou se použít injekční cestou.

-1 V mezinárodní patentové přihlášce WO 99/05165 se popisují deriváty streptograminů skupiny A obecného vzorce:

CZ ^UIU48 B6

kde R| je skupina-NR'R nebo-NROR'”, R₂ je atom vodíku, methylová skupina nebo ethylo5 vá skupina, a vazba---íejednoduchá nebo dvojná vazba a tyto deriváty jsou antimikrobiálními činidly.

Prostřednictvím, těchto derivátů se však nedosahuje zvláště vysoké hladiny aktivity a dále nemají vždy požadované dostatečně široké spektrum působení.

Podstata vynálezu

Nyní bylo zjištěno, že deriváty streptograminů skupiny A obecného vzorce I, kde:

Ri je atom halogenu nebo azidoskupina nebo thiokyanatoskupina,

R₂ je atom vodíku nebo methylová skupina nebo ethylová skupina,

- R₃ je atom vodíku, nebo zbytek alifatického, cykloalifatického, aromatického, arylalifatického, heterocyklického nebo heterocyklylalifatického esteru, který může být substituovaný a vazba---je jednoduchá vazba (stereochemie 27R) nebo dvojná vazba, ajejich soli, pokud existují, vykazují zvláště silnou antibakteriální aktivitu, samotné nebo v kombinaci s deriváty streptograminů skupiny B a/nebo také vykazují rozšířené spektrum v porovnání s obvyklým spektrem účinnosti streptograminů.

Podle předkládaného vynálezu, když Rj je atom halogenu, může být vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu;

když je skupina R₃ zbytek alifatického, cykloalifatického, aromatického, arylalifatického, hydrocyklického nebo heterocyklylalifatického esteru, který může být substituovaný, může být vybrán ze skupiny, kterou tvoří například skupina R'₃-CO~, kde R'₃ je fenylová skupina nebo fenyl35 alkylová skupina, které jsou nesubstituovaná nebo které jsou substituované na fenylové skupině [jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina, popřípadě nesoucí skupinu NR'R, kde R' a R, které jsou stejné nebo různé, mohou být atomy vodíku nebo alkylové skupiny, které mohou společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tvořit tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklylový zbytek obsahující jiný hete40 roatom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, kdy tento heterocyklus samotný může být substituovaný jednou nebo více skupinami (alkylová skupina, hydroxyalkylová skupina, alky 1oxyalkylová skupina, alkyloxykarbony laiky lová skupina, ary lová skupina, heterocyklylová skupina, heterocyklylalkylová skupina, které jsou nasycené nebo nenasycené a obsahují 3 až 8 členů nebo skupina -CH₂-CO-NR'R”), nebo alternativně R' a/nebo R mohou být hydroxy45 alkylová skupina, fenylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklylalkylová skupina, skupina -CO-NR R”, kde NR'R je stejné, jako je definováno výše,

-2W*v-fk/ nebo alkylová skupina nebo acy lová skupina, které jsou substituované skupinou NR'R'která je definovaná výše] nebo alternativně R _₃ může být vybrána ze skupiny, kterou tvoří fenylová skupina nebo fenylalkylová skupina, které jsou substituované na fenylové skupině jednou nebo více skupinami [vybranými ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina, která může být substituo5 vana alkyloxyskupinou nebo alkylthioskupinou, které samotné popřípadě nesou karboxylovou skupinu nebo skupina NR'R'která je definovaná výše, nebo vybranými z acyloxyskupin, které mohou být substituované NR'R”, jak je definováno výše] nebo alternativně může být R'₃ vybraná ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina nebo cykloalkylová skupina, které jsou popřípadě substituované [skupinou vybranou ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, karboxyalkylio disulfanylová skupina nebo skupina NR'R, skupina-CHr-NR'R, nebo skupina -CO-NR R , nebo alkyloxykarbonylovou skupinou, alkyloxyskupinou nebo alkyldisulfanylovou skupinou, které jsou popřípadě substituované skupinou NR'R nebo skupinou -CO-NR'R^rř, kdeNR R ' je definovaná výše], nebo alternativně R'₃ může být vybrána z tříčlenných až osmičlenných nasycených nebo nenasycených heterocyklylových skupin, které jsou popřípadě substituované [alkylo15 vou skupinou nebo acylovou skupinou, které jsou samotné popřípadě substituované skupinou NR'R”].

Pokud není uvedeno jinak, v obecném vzorci I je alkylová skupina nebo acy lová skupina nebo jejich část přímá nebo rozvětvená a obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku, heterocyklylová skupina může být vybrána zejména ze skupiny, kterou tvoří pyrrolidinylová skupina, pyrrolylová skupina, furylová skupina, thienylová skupina, imidazolylová skupina, pyridylová skupina, piperidinylová skupina, piperazinylová skupina, morfolinylová skupina, thiomorfolinylová skupina, pyrizanylová skupina, pyrimidinylová skupina, pyridazinylová skupina a imidazolidinylová skupina, a arylové skupiny mohou být vybrány ze skupiny, kterou tvoří zejména popřípadě substituovaná fenylová skupina a výhodněji fenylová skupina, která je substituovaná aikylovou skupinou, alkyloxyskupinou nebo atomem halogenu, nebo skupinou -CH₂OH, -(CH^-NFh, -(CH₂)_n-Nhalogenkylovou skupinou nebo skupinou -{CH₂)_n-N(alkyl)2.

Deriváty streptograminu obecného vzorce I se mohou připravit pomocí halogenace, převedení na azid nebo převedení na thiokyanát, derivátu streptograminu obecného vzorce 1:

kde R₂ je definovaná výše, vazba je jednoduchá vazba (stereochemie 27R) nebo dvojná vazba, a kde hydroxylová funkční skupina v poloze 14 byla předem chráněná, potom následuje odstranění chránící skupiny a pokud je to vhodné za účelem získání derivátu obecného vzorce I, kde R₃ je jiná, než atom vodíku, zavedení alifatického, cykloalifatického, aromatického, arylalifatického, heterocykl ického nebo heterocyklylalifatického esterového zbytku, který může být substituovaný (R₃), prostřednictvím obvyklých postupů, které nemění zbytek molekuly.

Halogenacní reakce, reakce převádějící na azid nebo na thiokyanát se mohou provádět v přitom40 nosti aminosulfurtriťluoridu (například diethylaminosulfurtrifluoridu, bis(2-methoxyethyl)aminosulfurtrifluoridu (Deoxofluor®), morfolinosulfurtrifluoridu) nebo alternativně v přítomnosti fluoridu siřičitého, pomocí činidel, jako je tetraalkylamonium, trialkylbenzylamonium nebo trialkylfenylamonium halogenid, azid nebo thiokyanát nebo pomocí halogenidu, azidu nebo thiokyanátu alkalického kovu popřípadě doplněného crown etherem. Fluorační reakce se může také provádět pomocí fluoračního činidla, jako je fluorid síry [například morfolinosulfurtrifluorid,

-3CZ 301048 B6 sulfurtetrafluorid (J. Org. Chem., 40, 3 808 (1975)), diethylaminosulfurtrifluorid (Tetrahedron, 44, 2 875 (1988)), bis(2-methoxyethyl)aminosulfurtrifluorid (Deoxofluor*). Alternativně se může fluorační reakce provádět pomocí fluoračních činidel, jako je hexaťluorpropyldiethylamin (JP 2 039 546) nebo N-(2-chlor-l,l,2-trifluorethyl)diethylamin.

Když se použije tetraalkylamoniumhalogenid, azid nebo thiokyanát, může se vybrat ze skupiny, kterou tvoří tetramethylamonium, tetraethylamonium, tetrapropylamonium, tetrabutylamonium (například tetra—n—butylamoníum), tetrapentylamonium, tetracyklohexylamonium, trieíhy!methylamonium, tributylmethylamonium nebo trirnethylpropylamonium halogenidy, azidy nebo thiokyanáty.

Příprava se provádí v organickém rozpouštědle, jako je chlorované rozpouštědlo (například díchlormethan, dichlorethan nebo chloroform) nebo v etheru (například tetrahydrofuranu) při teplotě -78 až 40 °C (s výhodou 0 až 30 °C). Výhodné je provádět přípravu v atmosféře argonu nebo dusíku. Rozumí se, že použití hydroxylového derivátu s konfigurací (16S) vede k derivátu s konfigurací (16R).

Chránění a odstranění chránící skupiny z hydroxylové skupiny v poloze 14 se provádí pomocí obvyklých postupů, které neovlivňují zbytek molekuly, zejména pomocí způsobů popsaných v T.W. Greene a P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organíc Synthesis (druhé vydání), Λ. Wiley - Interscience Publication (1991), nebo v Mc Omie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press (1973). Například se příprava provádí s trialkylsilylovou, alkyldifenylsilylovou skupinou (například t-butyldifenylsilylovou a t-butyldimethylsilylovou skupinou) nebo allylovou skupinou, které se zavedou a odstraní tak, jak je popsáno v příkladech.

Pokud je to vhodné a pokud se to požaduje pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde Ráje alifatický, cykloalifatický, aromatický, arylalifatický, heterocyklícký nebo heterocyklylalifatický ester, který může být substituovaný, následná esterifikační reakce se provádí pomocí obvyklých postupů, které nemění zbytek molekuly. Přesněji se esterifikace provádí pomocí reakce kyseliny nebo reaktivního derivátu kyseliny (například chloridu kyseliny, reaktivního esteru nebo anhydridu), v přítomnosti kondenzačního činidla, jako je karbodiimid (například dicyklohexylkarbodiimid) a terciárního aminu (trialkylaminu, jako je triethylamin nebo diisopropy lethy laminu, nebo pyridinu nebo jejich deriváty) a popřípadě katalyzátoru, jako je 4-N-dimethylaminopyridin, při teplotě -40 až +80 °C, v organickém rozpouštědle, jako je amid (například dimethylformamid nebo N-methyl-2-pyrrolidinon), pyridin, halogenované rozpouštědlo (například díchlormethan, dichlorethan nebo chloroform) nebo ether (tetrahydrofuran, dioxan nebo dimethoxyethan). Rozumí se, že funkční skupiny, které jsou při prováděných reakcích nežádoucím způsobem reaktivní, se před reakcí chrání a po reakci se opět uvolní.

Použitá kyselina nebo derivát kyseliny se připraví podle postupů popsaných dále v příkladech nebo analogickým způsobem.

Di hydroxy lovaný derivát streptograminu skupiny A obecného vzorce II se může získat pomocí selektivní redukce přírodní pristinamycinové složky obecného vzorce III:

-4CL JUlUtO DU kde R₂ je definovaná výše a vazba---je jednoduchá vazba (stereochemie 27R) nebo dvojná vazba, po které následuje oddělení epimemí formy 16S.

Redukce se provádí s výhodou v přítomnosti redukčního činidla, jako je borohydrid alkalického kovu, například borohydrid sodný nebo triacetoxyborohydrid sodný, v organickém rozpouštědle vybraném z organických rozpouštědel (například dichlormethan, dichlorethan, chloroform), tetrahydrofuranu, kyseliny octové a alkoholů, jako je methanol, ethanol nebo 2-propanol, při teplotě -78 až 40 °C.

io Oddělení epimemí formy 16R a epimemí formy 16S se provádí pomocí obvyklých postupů; například se může oddělení epimerů provést pomocí chromatografie, velmi rychlé chromatografie, vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC), na chirální fázi, nebo pomocí odstředivé partiční chromatografie/CPC), ze směsi epimerů 16R a 16S, nebo pomocí krystalizace.

Zejména (I6S)-16-hydroxypristinamycin II_A se může připravit podle postupu popsaného v F. Le Goffic a kol.; Eur. J. Med. Chimica Therapeutica; leden - únor, - H>( l), 69-72 (1981).

Deriváty pristinamycinu obecného vzorce (III) odpovídají pristinamycinu II_A (ΡΠ_Α), pristinamycinu Ify (PII_B), pristinamycinu Il_c (Plic), pristinamycinu IId (PIId), pristinamycinu lip (PIL), a pristinamycinu II_G (PII_G), které jsou známými složkami přírodního pristinamycinu. Složky PII_Fa PII_G jsou popsány v evropském patentu EP 614910.

Pristinamycin líc (PHc) a pristinamycin II_D (PIId) se mohou získat podle postupu popsaného v J.C. Barriére a kol., Expert. Opin. Invest. Drugs, 3(2), 115-31 (1994).

Příprava a oddělení složek přírodních streptograminů skupiny A [streptograminy vzorce (III)] se provádí pomocí fermentace a izolace složek z fermentačního bujónu analogickým způsobem, jako je popsáno v J. Preuďhomme a kol., Bull. Soc. Chim. Fr., díl 2, 585 (1968) nebo v Evropském patentu EP 614910. Alternativně se může příprava přírodních složek skupiny A provádět pomocí specifické fermentace tak, jak je to popsáno v patentové přihlášce FR 2 689 518.

Deriváty streptograminů obecného vzorce I se mohou, pokud je to vhodné, čistit pomocí fyzikálních způsobů, jako je krystalizace, chromatografie nebo CPC.

Některé deriváty streptograminů obecného vzorce I se mohou pomocí známých postupů převést do formy adičních solí s kyselinami. Rozumí se, že tyto soli, pokud existují, tvoří také součást předkládaného vynálezu.

Jako příklady adičních solí s farmaceuticky přijatelnými kyselinami je možné uvést soli tvořené s anorganickými kyselinami (hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, nitráty, fosfáty) nebo s organickými kyselinami (sukcináty, fumaráty, tartráty, acetáty, propionáty, maleáty, citráty, methansulfonáty, ethansulfonáty, fenylsulfonáty, p-toluensulťonáty, isethionáty, naftylsulfonáty nebo karfsulfonáty nebo soli se substitučními deriváty těchto sloučenin).

Deriváty streptograminů podle předkládaného vynálezu mají antibakterální vlastnosti a vlastnosti synergizující antibakteriální aktivitu derivátů streptograminů skupiny B. Jsou zvláště výhodné, protože mají velmi silnou aktivitu, a to ať již samotné nebo v kombinaci.

Když se kombinují se složkou nebo derivátem streptograminů skupiny B, mohou být vybrány v závislosti na tom, zda se požaduje získat formu pro orální nebo parenterální podávání, z přírodních složek: pristinamycin I_A, pristinamycin I_B, pristinamycin I_c, pristinamycin I_D, pristinamycin I_E, pristinamycin I_F, pristinamycin I_G, virginiamycin S|, S₃ nebo S₄, vemamycin B nebo C, etamycin nebo z polosyntetických derivátů, které jsou popsány v patentech nebo patentových přihláškách US 4 618 599, US 4 798 827, US 5 326 782, EP 772630 nebo EP 770132, zejména derivátů streptograminů obecného vzorce A;

-5cz 301048 B6

kde,

1. Rb, Rc, Re a Rf jsou atomy vodíku, Rd je atom vodíku nebo dimethylaminoskupina, a Ráje s struktura vzorce -€H₂R'a, kde R a je 3-pyrrolidinylthioskupina nebo 3- nebo 4—piperidylthioskupina, která může být substituovaná aíkylovou skupinou, nebo alkylthioskupinou substituovanou 1 nebo 2 hydroxysulfonylovými skupinami, alkylaminoskupinami, dialkylaminoskupinami (které jsou samotné popřípadě substituované merkaptoskupinou nebo dialkylaminoskupinou), nebo substituovanou 1 nebo 2 popřípadě substituovanými piperaziio novými kruhy, morfolinoskupinami, thiomorfolinoskupinami, piperidinoskupinami, 1pyrrolidinylovými skupinami, 2-, 3™ nebo 4-piperidylovými skupinami nebo 2- nebo

3- pyrrolidinylovými skupinami (které mohou být substituovány aíkylovou skupinou), nebo alternativně Ráje skupina vzorce =CHR'a, kde R'a je 3-pyrrolidinyIaminoskupina, 3- nebo

4- piperidylaminoskupina, 3-pyrrolidinyloxyskupina, 3- nebo 4-piperidyloxyskupina, 315 pyrrolidinylthioskupina, 3- nebo 4-piperidylthioskupina, které mohou být substituované aíkylovou skupinou nebo R a je alkylaminoskupina, alkyloxyskupina nebo alkylthioskupina substituovaná 1 nebo 2 hydroxysulfonylovými skupinami, alkylaminoskupinami, dialkylaminoskupinami (které jsou samotné popřípadě substituované dialkylaminoskupinou), tríalkyl-amonioskupinami, 4- nebo 5-imidazolyIovými skupinami, nebo 1 nebo 2 popřípadě

2o substituovanými piperazinovými kruhy, morfolinoskupinami, thiomorfolinoskupinami, piperidinoskupinami, l-pyrrolidinylovými skupinami, 2- 3- nebo 4-piperidylovými skupinami nebo 2- nebo 3-pyrrolidinylovými skupinami (které mohou být substituované alkylovou skupinou), nebo

Ra je 3- nebo 4 -chinuklidinylthiomethylová skupina nebo alternativně

2. Ráje atom vodíku a

a) buď Rb, Re a Rf jsou atomy vodíku, Rd je skupina -NHCH₃ nebo skupina -N(CH₃)₂ a Rc je atom chloru nebo atom bromu, neboje to alkenylová skupina obsahující 3 až 5 atomů uhlíku [pokud Rd je skupina-N(CH₃)₂],

b) nebo Rb, Rd, Re a Rf jsou atom vodíku a Rc je~atom halogenu, nebo aminomonoalkylová skupina, aminodialkylová skupina, alkyloxyskupina, trifluormethyloxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo trihalogenmethylová skupina,

c) nebo Rb, Rc, Re a Rf jsou atom vodíku a Rd je atom halogenu, nebo ethylaminoskupina, diethylaminoskupina nebo methy lethy laminoskupina, alkyloxyskupina nebo trifluormethyl40 oxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, arylová skupina nebo trihalogenmethylová skupina,

-6ví. juiu*to υυ

d) nebo Rb, He a Rf jsou atom vodíku a Rc je atom halogenu nebo aminomonoalkylová skupina nebo aminodialkylová skupina, alkyloxyskupina nebo trifluormethyloxyskupina, thioalkylová skupina alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a Rd je atom halogenu nebo aminoskupina, aminomonoalkylová skupina nebo aminodialkylová skupina, alkyloxy5 skupina nebo trifluormethyloxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina obsahující až 6 atomů uhlíku nebo trihalogenmethylová skupina,

e) nebo Rc, Re a Rf jsou atom vodíku a Rb a Rd je methylová skupina;

io nebo alternativně z polosyntetických derivátů streptograminů skupiny B obecného vzorce B:

kde

Y je atom dusíku nebo skupina =CR3-,

Rí je atom vodíku, alkylová skupina (1 až 8 atomů uhlíku), alkenylová skupina (2 až 8 atomů uhlíku), cykloalkylová skupina (3 až 8 atomů uhlíku), nasycená nebo nenasycená heterocyklyíová skupina (3 až 8 členů), fenylová skupina, fenylová skupina, která je substituovaná [jedním nebo více atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, alkylovou skupinou, alkyloxyskupinou, alkylthíoskupinou, alkylsulfinylovou skupinou, alkylsulfonylovou skupinou, aminoskupinou, alkylaminoskupinou nebo dialkylaminoskupínou] nebo skupina NR'R kdy R' a R, které jsou stejné nebo různé, mohou být atomy vodíku nebo alkylové skupiny (1 až 3 atomy uhlíku) nebo mohou tvořit společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tříčlenný až osmičlenný heterocyklus popřípadě obsahující jiný heteroatom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, který je popřípadě substituovaný [alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou (2 až 8 atomů uhlíku), cykloalkylovou skupinou (3 až 6 uhlíků), nasycenou nebo nenasycenou heterocyklylovou skupinou (4 až 6 členů), benzylovou skupinou, fenylovou skupinou nebo fenylovou skupinou, která je substituovaná tak, jak je definováno výše v definici] nebo alternativně, když Y je skupina =CR₃- Ri může také být halogenmethylová skupina, hydroxymethylová skupina, alkyloxymethylová skupina, alkylthiomethylová skupina, kde alkylová část je popřípadě substituovaná NR'R , alky Isulfinylmethy lová skupina, alky lsulfony Imethylová skupina, acyloxymethylová skupina, benzoyloxymethylová skupina, cyklopropylaminomethylová skupina nebo skupina -fCH₂)_nNR'R' (n je celé číslo 1 až 4 a R' a R jsou stejné, jako bylo definováno výše) nebo alternativně pokud R₃ je atom vodíku, Ri může také být formylová skupina, karboxylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina nebo skupina -CONRR, kde R' a R jsou stejné, jako bylo definováno výše, nebo alternativně, když Y je atom dusíku, Ri může také být skupina -XR°, kde Xje atom kyslíku nebo atom síry, sulftnylová skupina nebo sulfonylová skupina, nebo skupina NH a R° je alkylová skupina (1 až 8 atomů uhlíku), cykloalkylová skupina (3 až 6 atomů uhlíku), nasycená nebo

-7CZ 301048 B6 nenasycená heterocyklylová skupina (3 až 8 členů), heterocyklylmethylová skupina (3 až 8 členů), kde heterocyklylová část je vázána k methylové skupině prostřednictvím atomu uhlíku, fenylová skupina, fenylová skupina, která je substituovaná [jedním nebo dvěma atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, alkylovou skupinou, alkyloxyskupinou, alkylthioskupinou, alkylsulfiny5 lovou skupinou, alkylsulfonylovou skupinou, aminoskupinou, alkylaminoskupinou nebo dialkylaminoskupinou] nebo skupina -<Clb)_nNR'R, kde R' a R jsou stejné, jako bylo definováno výše a n je celé číslo 2 až 4, nebo alternativně, pokud X je skupina NH, R° může být také atom vodíku io R₂ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R₃ je atom vodíku nebo alkylová skupina, karboxylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina nebo karbamoylová skupina struktury -CO-NR R kde R' a R” jsou stejné, jako bylo definováno výše,

Ra je methylová skupina nebo ethylová skupina a Rb, Rc a Rd mají definice uvedené níže:

1) Rb a Rc jsou atomy vodíku a Rd je atom vodíku nebo methy lam inoskupina nebo dimethylaminoskupina,

2) Rb je atom vodíku, Reje atom vodíku, chloru nebo bromu, neboje to alkenylová skupina (3 až 5 atomů uhlíku), a Rd je skupina -NMe-R kde R” je alkylová skupina, hydroxyalkyl ová skupina (2 až 4 atomy uhlíku), nebo alkenylová skupina (2 až 8 atomy uhlíku), která je popřípadě substituovaná fenylovou skupinou, cykloalkylmethylovou skupinou obsahující vcyklo25 alkylové části 3 až 6 atomů uhlíku, benzylovou skupinou, benzylovou skupinou, která je substituovaná [jedním nebo více atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, alkylovou skupinou, alkyloxyskupinou, alkylthioskupinou, alkylsulfinylovou skupinou, alkylsulfonylovou skupinou, aminoskupinou, alkylaminoskupinou nebo dialkylaminoskupinou], heterocyklylmethylovou skupinou nebo heterocyklylethylovou skupinou, kde heterocyklylová část je nasycená nebo nena30 sycená a obsahuje 5 až 6 členů a jeden nebo dva heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku nebo dusíku, která je popřípadě substituovaná [alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou (2 až 8 atomů uhlíku), cykloalkylovou skupinou (3 až 6 atomů uhlíku), nasycenou nebo nenasycenou heterocyklylovou skupinou (4 až 6 členů), fenylovou skupinou, fenylovou skupinou, která je substituovaná tak, jak je definováno výše v definici R| nebo benzylovou skupinou], nebo alternativně

R ^P' je kyanomethylová skupina nebo skupina -CH₂CORe, kde buď Re je skupina -OR'e, R'e je atom vodíku, alkylová skupina (1 až 6 atomů uhlíku), alkenylová skupina (2 až 6 atomů uhlíku), benzylová skupina, nebo heterocyklylmethylová skupina, kde heterocyklylová část obsahuje 5 až 6 členů a 1 nebo 2 heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku nebo dusíku nebo Re je alky 1aminoskupina, alkylmethylaminoskupina, heterocyklylaminoskupina nebo heterocyklylmethyl40 aminoskupina, kde heterocyklylová část je nasycená a obsahuje 5 až 6 členů a jeden nebo dva heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku nebo dusíku popřípadě substituovaná alkylovou skupinou, benzylovou skupinou nebo alkyloxykarbonylovou skupinou,

3) Rb je atom vodíku, Rd je skupina -NHCH₃ nebo skupina -N(CH₃)₂ a Rc je atom chloru nebo bromu, nebo je to alkenylová skupina (3 až 5 atomů uhlíku), [pokud Rd je skupina

-N(CH₃)₂],

4) Rb a Rd jsou atomy vodíku a Reje atom halogenu, nebo alky lam inoskupina nebo dialkylaminoskupina, alkyloxyskupina, trifluormethoxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina (1 až 6 atomů uhlíku) nebo trihalogenmethylová skupina,

5) Rb a Rc jsou atomy vodíku a Rd je atom halogenu, nebo ethylaminoskupina, diethylaminoskupina nebo methy lethylaminoskupina, alkyloxyskupina nebo trifiuoromethoxyskupina, alkylthioskupina, alkylsulfinylová skupina, alkylsulfonylová skupina, alkylová skupina (1 až 6 atomů uhlíku), fenylová skupina nebo trihalogenmethylová skupina,

-XVí. JUlUtO UU

6) Rb je atom vodíku a Rc je atom halogenu nebo alkylaminoskupina nebo dialkylaminoskupina, alkytoxyskupina nebo trifluormethoxyskupina, thioalkylová skupina nebo alkylová skupina (t až 3 atomy uhlíku) a Rd je atom halogenu nebo aminoskupina, alkylaminoskupina nebo dialkylaminoskupina, alkyloxyskupina nebo trifluormethoxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina (1 až 6 atomů uhlíku) nebo trihalogenmethylová skupina,

7) Reje atom vodíku a Rb a Rd jsou methylová skupina, ío a také jejich soli.

Rozumí se, že kombinace derivátů podle předkládaného vynálezu a streptograminů skupiny B jsou také součástí předkládaného vynálezu.

Deriváty streptograminů skupiny B struktury b se mohou připravit podle způsobů popsaných v Mezinárodní patentové přihlášce WO 99/43699.

Při in vitro testech na Staphylococcus aureus 209P se potvrdilo, že deriváty streptograminů podle předkládaného vynálezu jsou aktivní při koncentracích 0,015 až 32 pg/ml samotné nebo v kombi20 naci s deriváty skupiny B, jako je pristinamycin I_B, a při koncentraci 0,015 až 32 pg/ml na Staphylococcus aureus Schiclia (rezistentní vůči meticillinu) samotné nebo v kombinaci s prístinamycinem Í_B; in vivo, synergizují antimikrobiální aktivitu pristinamycinu I_B při experl· mentální infekci myší Staphylococcus aureus IP8203 při dávkách 5 až 150 mg/kg subkutanní cestou (CD₅₀) a většina z nich také orální cestou při dávkách 30 až 150 mg/kg (CD_S0).

Konečně jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu zvláště výhodné, protože mají nízkou toxicitu. Žádné z produktů nejsou toxické při dávce 150 mg/kg na Staphylococcus aureus IP8203, dvakrát denně subkutánní cestou nebo orální cestou u myší.

Zvláště výhodné jsou sloučeniny vzorce I, kde:

Rj je atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu nebo azidoskupina nebo thiokyanatoskupina,

R₂ je methylová skupina,

R₃ je atom vodíku nebo skupina R'₃-CO-, kde R'₃ je fenylová skupina nebo feny laiky lová skupina, které jsou substituované nebo nesubstituované na fenyiové skupině [jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina, popřípadě nesoucí skupinu NR'R, kde R^f a R, které jsou stejné nebo různé, mohou být atomy vodíku nebo alkylové skupiny, které mohou tvořit společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklylový zbytek popřípadě obsahující jiný heteroatom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, přičemž samotný tento heterocyklus může být substituovaný jednou nebo více skupinami (alkylová skupina, hydroxyalkylová skupina, alkyloxyalkylová skupina, alkyloxykarbonylalkylová skupina, arylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklylová skupina nebo heterocyklylalkylová skupina, nebo skupina -CH₂-CO-NR'R), nebo alternativně R' a/nebo R může být hydroxyalkylová skupina, fenylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklylalkylová skupina, skupina -€O-NR'R, kde NR'R je definováno výše, nebo alkylová skupina nebo acylová skupina, které jsou subsfi50 tuované skupinou NR'R a definovanou výše], nebo alternativně R'₃ může být fenylová skupina substituovaná jednou nebo více skupinami [vybranými ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina, která může být substituovaná alkyloxyskupinou nebo alkylthioskupinou, která je samotná popřípadě substituovaná karboxylovou skupinou nebo skupinou NRR která je definovaná výše, nebo vybraná z acyloxyskupiny, která může být substituovaná skupinou NR R, která je definovaná výše], nebo alternativně R'₃ může být vybraná ze

-9cz 301048 B6 skupiny, kterou tvoří alkylová skupina nebo cykloalkylová skupina, které jsou popřípadě substituované [karboxylovou skupinou nebo karboxyalkyldisulfanylovou skupinou nebo skupinou NRR”, skupinou -CH2-NRR” nebo skupinou -CO-NRR”, nebo alkyloxykarbonylovou skupinou, alkyloxyskupinou nebo alkyldisulfanylovou skupinou, která je popřípadě substituovaná skupinou NR R” nebo -CO-NR R kde NR R” je definovaná výše], nebo alternativně R'i může být vybraná ze skupiny, kterou tvoří tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklický zbytek, který je popřípadě substituovaný [alkylovou skupinou nebo acylovou skupinou, které jsou samotné popřípadě substituované skupinou NR'R”], přičemž se rozumí, že heterocykly jsou vybrány ze skupiny, kterou tvoří io pyrrolidinylová skupina, imidazolylová skupina, pyridylová skupina, piperidinylová skupina, piperazinylová skupina nebo morfolinylová skupina, a vazba---je jednoduchá vazba (stereochemie 27R) nebo dvojná vazba, a také jejich soli, pokud existují; a z těchto sloučenin zejména:

(167?)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycin 1|_B;

- (167ř)-16-deoxo-l6-thiokyanatopristinamycin II_B;

(167ř)-l 6-deoxo-l 6-chlorpristinamycin II_B;

- (167?)-16-azido-l 6-deoxopristÍnamycin II_B;

- (167ř)-l 6-deoxo-l 6-fluorpristinamycin II_A.

Vynález bude dále ilustrován pomocí příkladů, které v žádném ohledu neomezují jeho rozsah.

Příklady provedení vynálezu

V následujících příkladech znamená nomenklatura 16-deoxopristinamycinu H_A (nebo II_B), že se ketonová funkční skupina v poloze 16 nahradí 2 atomy vodíku. Jak chromatografíe postupuje, všechny frakce se analyzují pomocí chromatografíe na tenké vrstvě (TLC), na silikagelových destičkách Merck 60F254, Frakce odpovídající stejné skvrně na TLC se spojí a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (30 °C; 2,7 kPa). Takto získané zbytky se analyzují pomocí běžných spektroskopických technik (NMR; IČ; MS), které umožňují identifikovat produkt.

Příklad 1 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluorpristÍnamycin II_B

0,2 ml kyseliny octové a 0,6 g trihydrátu tetra-n-butylamoniumfiuoridu se přidá pri 20 °C v dusíkové atmosféře k 1,12 g (167?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycÍnu IIb rozpuštěného v 10 ml tetrahydrofuranu. Po 168 hodinách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1 g hnědého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (90/5/5 objemově)]. Získá se 0,3 g (16/?)--16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B ve formě světle béžové pevné látky o teplotě tání 125 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCI₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,55 až 2,05 (mt: 5H); 1,83 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,76

- 10C£j «/V1V-TU UV (mt: IH); 2,98 (mt: IH); 3,21 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,55 (mt: IH); 4,75 až 4,90 (mt: 3H); 5,14 (dekaplovaný dublet Jhf = 48 Hz: IH); 5,39 (d, J = 9 Hz: 1H); 5,71 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,21 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

(16/?)-16-Deoxo-l6-fluor-l4-0-4terc-butyldifenylsÍlyl)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

0,464 mi diethyiaminosuifuríriíiuOridú se pří 20 °C, v argonové atmosféře pomalu přidá k 2 g to (165>-16-hydroxy“14-0-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B rozpuštěného v 50 ml dichlormethanu. Po 2 hodinách míchání se reakční směs nalije do 100 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se slije, promyje se dvakrát 100 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 2,1 g okrově zbarvené pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie (mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/acetonitril/methanol (100/0/0; 99/0,5/0,5 a potom 98/1/1 objemově)]. Získá se 1,35 g (167? )-16-deoxo-16-fluor-l 4-0-4 tercbutyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B ve formě bílé pevné látky o teplotě tání okolo 116 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 až 1,15 (mt: 12H); 1,29 (s: 3H); 1,55 až 1,95 (mt: 4H); 1,96 (mt: IH); 2,13 (mt: IH); 2,24 (mt: IH); 2,76 (mt: IH); 2,85 (mt: IH); 3,03 (mt: IH); 3,39 (mt: IH); 3,80 (mt: IH); 4,01 (mt: IH); 4,57 (mt: IH); 4,72 (mt: IH); 4,75 až 4,85 (mt: 2H); 5,01 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,38 (d, J = 9 Hz: IH); 5,50 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,97 (mt: IH);

6,10 (d, J = 15,5 Hz: IH); 6,49 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,30 až 7,50 (mt: 6H); 7,63 (široký d, J =

Hz: 2H); 7,68 (široký d, J = 7 Hz: 2H); 8,08 (s: 1H).

(165)-16-Hydroxy-14-O-4terc-butyldifenylsilyl)pristinamycin Π_Β se může připravit následujícím způsobem:

JO

K22g (16S)-16-hydroxypristinamycinu II_B rozpuštěného v 200 ml dichlormethanu, se při 20 °C, v atmosféře argonu přikape 29 ml diisopropylethylaminu, 43,2 ml terc-butyldifenylchlorsilanu, a 1,01 g 4-dimethylaminopyridinu. Po 22 hodinách míchání se reakční směs nalije do 600 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná vrstva se slije a potom se extrahuje dvakrát 100 ml dichlormethanu. Organické vrstvy se spojí, promyjí se 400 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 70,6 g oranžového viskózního oleje, který se 16 míchá v 600 ml di isopropyletheru. Po filtrací a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C, se získá 28 g (165)-16-hydroxy-14-0-4terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu Hb ve for40 mě růžové pevné látky o teplotě tání okolo 133 °C (za rozkladu).

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 až 1,05 (mt: 9H); 1,08 (s: 9H); 1,40 až 1,80 (mt: 3H); 1,90 až 2,15 (mt: 3H); 2,23 (široký d, J - 14 Hz: IH); 2,75 (mt: IH); 2,83 (dd, J = 17 a 11 Hz: IH); 3,10 (dd, J = 17 a 2,5 Hz: IH); 3,25 (mt: IH); 3,60 až

3,75 (mt: 2H); 4,49 (mt: IH); 4,56 (mt: IH); 4,60 až 4,70 (mt: 2H); 4,87 (mt: IH); 5,49 (mt: 1H);

5,74 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,78 (d, J = 9 Hz: IH); 5,95 (mt: IH); 6,04 (d, J = 16 Hz: IH); 6,41 (dd, J = 17 a 4 Hz: IH); 7,30 až 7,50 (mt: 6H); 7,64 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 7,69 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 8,11 (s: IH).

(165)-16-Hydroxypristinamycin I1_B se může připravit následujícím způsobem:

Suspenze 11,35 g tetrahydridoboritanu sodného v 550 ml dichlormethanu se zahřívá 20 minut k varu. Potom se během 30 minut pří kape 68,6 ml kyseliny octové a potom během 45 minut roztok 52,75 g pristínamycinu II_B v 230 ml dichlormethanu předem vysušený nad síranem sodným.

Reakční směs se míchá 4,5 hodiny za varu pod zpětným chladičem a potom 16 hodin při 20 °C.

- 11 CZ 301048 B6

Potom se k reakční směsi přidá 500 ml dichlormethanu a 1 500 ml vody. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje 500 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí a pH se upraví na 8 pomalým přidáním 1000 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická fáze se promyje postupně 1000 ml vody a 1000 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a potom se zpracuje rostlinným uhlím 3S, suší se nad síranem sodným, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku do sucha (2,7 kPa) za získání 50 g světle žluté pevné látky. K pevné látce rozpuštěné v 900 ml dichlormethanu se při 20 ^QC přidá 378 ml 0,5M vodného roztoku hydroxidu amonného. Po 16 hodinách míchání při 20 °C se organická fáze slije, promyje se 1000 ml vody a potom 1000 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, suší se io nad síranem sodným, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 46 g světle žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (98/2 a 97/3 objemově)]. Získá se 31,68 g (165)-16hydroxypristinamycinu 11_B ve formě bělavé pevné látky o teplotě tání okolo 131 °C (za rozkladu).

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCI,, 8 v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,02 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,07 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 až 1,90 (mt: 3H); 1,76 (s: 3H); 1,97 (mt: 2H); 2,12 (mt: IH); 2,26 (široký d: 14,5 Hz: IH); 2,56 (d, J = 3 Hz: IH); 2,76 (mt: IH); 2,90 (dd, J = 16 a 10 Hz: IH); 3,08(dd, J = 16a3 Hz: 1H); 3,35 (mt: IH); 3,82 (mt: 2H); 3,99(d, J = 2,5 Hz: IH); 4,40až 4,55 (mt: 2H); 4,65 až 4,75 (mt: 2H); 5,03 (mt: IH); 5,65 až 5,85 (mt: 3H); 6,01 (mt: IH); 6,21 (d, J = 16 Hz: IH); 6,46 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 2 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluorpristinamycin II_B

970 ml trihydrofluoridu triethylaminu se během 40 minut při 40 °C, v atmosféře argonu pomalu přidá k257g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-(terc-butyldÍmethylsilyl)pristinamycinu 1I_B rozpuštěného v 2 500 mí dichlormethanu. Po 2 hodinách při 40 °C se reakční směs ochladí na 8 °C a potom se hydrolyzuje pomalým přidáním 1 940 ml vody během 25 minut. Po 10 minutách míchání se organická a vodná vrstva slijí a mléčná mezivrstva se převede do 4000 ml vody a 1000 ml dichlormethanu. Po promíchání obou fází se organická fáze slije a vodné fáze se spojí a potom se extrahují 1500 ml vody. pH vodné fáze se pomalým přidáním 400 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného během 15 minut při 10 °C upraví na 7. Organická fáze se slije, zředí se 1500 ml ethylacetátu a potom se promyje 1000 ml vody. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje dvakrát 1 500 ml ethylacetátu a potom se filtruje přes Celíte® sintrovaný skleněný filtr. Celíte® se potom propláchne třikrát 400 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem sodným a potom se filtrují přes Celíte® přes filtr ze sintrovaného skla. Celíte® se potom propláchne čtyřikrát 800 ml ethylacetátu. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) a suší se do konstantní hmotnosti při 25 °C a získá se 218,5 g (167?)-16-deoxo-i6-fluorpristinamycinu II_B ve formě bílého krystalického prášku tajícího při teplotě okolo 133 °C (za rozkladu).

'HNMRspektrum (400 MHz, CDCI₃, Svppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,55 až 2,05 (mt: 5H); 1,83 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,98 (mt: IH); 3,21 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,55 (mt: IH); from 4,75 to 4,90 (mt: 3H); 5,14 (dekaplovaný dublet, Jhf ~ 48 Hz: IH); 5,39 (d, J = 9 Hz: IH); 5,71 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,21 (d, J=16Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

(16/?)-16-Deoxo-16-fluor-]4-0-(terc-butyldimethylsiIyl)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 1 se k 22 g (165)-1 ó hvdroxy 55 14-0-(terc-butyldimethylsilyl)prístinamycinu II_B rozpuštěného v 500 ml dichlormethanu poma- 12CZj JUllPtO OO lu, při 20 °C, pod argonovou atmosférou přidá 6,7 ml diethylaminosulfurtrifluoridu. Po 4 hodinách míchání se reakční směs zpracuje stejným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1. Získá se

1,25 g oranžového oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (100/0/0; 99/0,5/0,5 až 96/2/2 objemově)]. Získá se 6,6 g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-(terc-butyldimethylsilyl)pristinamycinu Π₀ ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 128 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,04 (s: 3H); 0,07 (s: 3H); 0,89 (s: 9H); 0,96 (d,

J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,09 (a, J = 6,5 Hz: 3H); i,50 až 2,05 (int: 5H), 1,79 (s: io 3H); 2,10 až 2,25 (mt: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,90 (mt: IH); 3,15 (mt: IH); 3,43 (mt: IH); 3,88 (mt:

IH); 4,09 (mt: IH); 4,59 (mt: IH); 4,75 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,84 (dd, J = 9 a3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,34 (d, J = 9 Hz: IH); 5,64 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,99 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,09 (s: IH).

(16S)-16-Hydroxy-14-O-(terc-butyldÍmethylsilyl)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

44,4 ml diisopropylethylaminu a 39,6 g terc-butyldimethylchlorsilanu rozpuštěného v 140 ml 20 dichlormethanu se při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k27g (165)-16-hydroxypristinamycínu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 270 ml dichlormethanu. Po 17 hodinách míchání se reakční směs promyje třikrát 300 ml vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání oranžového oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní 25 fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (100/0/0; 99/0,5/0,5 až 96/2/2 objemově)]. Získá se 24 g (165^-16-hydroxy-14-O-(terc-butyIdimethylsilyl)pristinamycinu Π_Β ^ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 139 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,05 (s: 3H); 0,10 (s: 3H); 0,91 (s: 9H); 0,96 30 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,02 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,06 (d, J = 6,5 Hz: 3H); from 1,70 to 2,05 (mt: 5H);

1,71 (s: 3H); 2,12 (mt: IH); 2,31 (široký d, J= 14 Hz: IH); 2,70 až 2,80 (mt: IH); 2,80 (dd,

J = 17 a 11 Hz: 1H); 3,06 (dd, J = 17 a 2,5 Hz: 1H); 3,30 (mt: 1H); 3,79 (mt: 2H); 4,47 (široký t,

J - 10 Hz: 1H); 4,52 (s: 1H); 4,54 (mt: 1H); 4,65 až 4,75 (mt: 2H); 4,99 (mt: 1H); 5,69 (mt: 1H);

5,76 (dd, J = 17 a 2 Hz; IH); 5,78 (d, J = 9 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,20 (d, J - 16 Hz: IH); 6,43 35 (dd, J - 17 a 4 Hz: IH); 8,12 (s; 1H).

Příklad 3 (16/ř)— 16-Deoxo-l 6-fluorpristinamycin II_B

0,5 ml IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové se při 0 °C v atmosféře argonu přidá k suspenzi 0,09 g para-toluensulfinátu sodného v 6 ml dichlormethanu. Po 15 minutách míchání při 20 °C se organická fáze slije, suší se nad síranem hořečnatým a filtruje se. V atmosféře argonu se při 20 °C k filtrátu přidá 0,26 g (16Aj-14-O-allyl-16-deoxo-16-řluorpristinamycinu II_B a 0,04 g tetrakis(trifenyifosfin)panadia. Po 2 hodinách míchání se přidá 0,01 g triethylaminu. Po dalších 30 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha a potom se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (90/5/5 objemově)] za získání 0,2 g (16/í)-16-deoxo-l6-fluorpristinamycinu II_B.

‘H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,50 až 2,05 (mt: 5H); 1,62 (d, J = 4 Hz: IH); 1,83 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,77 (mt: IH); 2,98 (mt: IH); 3,21 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,06 (mt: 1H); 4,55 (mt: IH); 4,75 až4,85 (mt: 3H); 5,14 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,39

-13CZ 301048 B6 (d, J = 9Hz: IH); 5,72 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a2 Hz: IH); 5,98 (mt: IH); 6,21 (d,J = 16Hz:

IH); 6,51 (dd, J - 16 a 5 Hz; IH); 8,11 (s: IH).

(16/?)-14-O-allyl-16-deoxo-16-fluorpristinamycin II_B se může připravit následujícím způso5 bem:

0,28 ml diethylaminosulfurtrifluoridu rozpuštěného v 5 ml dichlormethanu se přikape při 0 °C v atmosféře argonu k 0_?8 g (165)—14—Q-ally!-16—hydroxypristinamycinu !!₅ rozpuštěného v 25 ml dichlormethanu. Po 45 minutách míchání při 0 °C a potom ohřátí zpět na 20 °C se io reakční směs nalije do 70 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného o teplotě

0°C. Získaná směs se extrahuje 100 ml dichlormethanu. Organická fáze se postupně promyje ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 70 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a potom se suší nad síranem hořečnatým. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C, se získá 0,8 g (16/?)-14-O-ally 1-16-deoxo-l 615 fluorpristinamycinu Il_B ve formě krémově zbarvené pevné látky.

'HNMRspektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d,J = 6,5 Hz:

3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,50 až 2,05 (mt: 5H); 1,81 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,29 (mt: IH);

IH); 2,76 (mt: IH); 2,93 (mt: IH); 3,18 (dt, J = 17 a 7 Hz: IH); IH); 3,45 (mt: IH); 3,80 až 3,95 20 (mt: 2H); 4,00 až 4,15 (mt: 2H); 4,47 (db J = 9,5 a 4 Hz: 1H); 4,59 (mt: 1H); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,05 až 5,35 (mt: 4H); 5,69 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz; IH); 5,90 (mt: IH); 6,00 (mt: IH); 6,25 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH);

8,11 (s: IH).

(165)-14-O-ally 1-16-hydroxypristínamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

g uhličitanu draselného a 31,5 ml allylbromidu se přidá k 10,6 g (165)-16-hydroxypristinamycinu I1_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 500 ml 2butanonu. Reakční směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem 90 hodin. Po ochlazení na

20 °C a filtraci se reakční směs odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se převede do 100 ml destilované vody a 300 ml dichlormethanu. Organická fáze se slije s potom se promyje 100 ml destilované vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa), a získá se 12,5 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v diethyletheru, filtruje se a suší (2,7 kPa) při 20 °C, za získání 1,4 g (165)-14-O-ally 1—16— hydroxypristinamycinu II_B ve formě bílého prášku.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm): 0,97 (d, J -= 6,5 Hz: 3H); 1,04 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,07 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 až 2,05 (mt: 5H); 1,75 (s: 3H); 2,12 (mt: IH); 2,34 (široký d,

J = 16 Hz: IH); 2,77 (mt: IH); 2,85 (dd, J = 16 a 10 Hz: IH); 3,09 (dd, J = 16 a 3 Hz: IH); 3,32 (mt: 1H); 3,75 až 3,90 (mt: 3H); 4,05 až 4,15 (mt: 2H); 4,42 (mt: 1H); 4,53 (mt: 1H); 4,65 až 4,75 (mt: 3H); 5,15 až 5,30 (mt: 2H); 5,65 až 5,80 (mt: IH); 5,70 (široký d, J = 9Hz: IH); 5,80 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 5,79 (mt: IH); 5,98 (mt: IH); 6,25 (d, J = 16 Hz: IH); 6,45 (dd, J= 16 a4 Hz: IH); 8,14 (s: IH).

Příklad 4 (167?)— 16-Deoxo-16-thiokyanatopristÍnamycin II_B ml trihydrofluoridu triethylaminu se pri 20 °C přidá k 0,85 g (167?)— 16-deoxo-l 6-thiokyanato~ 14-O-(terc-butyldifenylsilyl)pristmamycÍnu II_B rozpuštěného v 40 ml dichlormethanu. Po 20 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se přidají 3 ml trihydrofluoridu triethylaminu a směs se zahřívá k varu další 3 hodiny. Reakční směs se potom nalije do 80 ml vody a potom se neutralizuje pomalým přidáním hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se slije,

-14uz. juiwru uu suší se nad síranem horečnatým, filtruje se a odpaří se za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,61 g pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (96/4 objemově)]. Získá se 0,36 g (16/2)-16-deoxo-16-thiokyanatopristÍnamycinu IÍ_B ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 140 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,85 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,77 (mt: 1H); 3,15 (dd, J - 17 a 7 Hz: IH); 3,40 (dd, J = 17 a 7 Hz: 1H); 3,52 (mt: IH); 3,62 (mt: IH); 3,83 (mt: ÍH); 4,02 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,75 až 4,85 (mt: 2H); 4,77 (dd, J = 10 a2 Hz: io IH); 5,36 (d, J = 9 Hz: IH); 5,77 (mt: IH); 5,81 (dd, J - 16 a 2 Hz: IH); 6,05 (mt: IH); 6,21 (d,

J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J - 16 a 5Hz; IH); 8,14 (s: IH).

(16/2)-16-deoxo-16-thiokyanato-14-O-(terc-butyldifenylsilyl)prístinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

K 5,85 g tetra-n-butylamoniumthiokyanátu rozpuštěného v 70 ml dichlormethanu se při 20 °C v argonové atmosféře přidá 2,6 g (165)-16-4iydroxy-14-Q-(terc-butyldifeny1 silyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu l) a potom se přikape 1,56 ml diethy 1aminosulfurtrifluoridu. Po 10 minutách míchání se reakční směs zředí 100 ml dichlormethanu.

Získaný roztok se postupně promyje dvakrát 100 ml vody a 100 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a potom se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 7,6 g tmavě žlutého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: cyklohexan/ethylacetát (6/4 objemově)]. Získá se 0,87 g (16/?)— 16-deoxo-16-thiokyanato-14-0-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,05 až 1,10 (mt: 3H); 1,06 (s: 9H); 1,28 (s: 3H); 1,70 až 1,95 (mt: 4H); 1,96 (mt: IH); 2,10 až 2,25 (mt: 2H); 2,77 (mt: IH); 3,04 (dd, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,27 (dd, J = 17 a 8 Hz: IH); 3,40 až 3,50 (mt: 2H); 3,75 (mt: IH); 3,95 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,67 (mt: IH); 4,75 až 4,85 (mt: 2H); 5,35 (d, J = 9 Hz: IH); 5,56 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,04 (mt: IH); 6,11 (d, J=16Hz: IH); 6,49 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,30 až 7,50 (mt: 6H); 7,63 (široký d, J = 7 Hz: 2H); 7,69 (mt: 2H); 8,12 (s: IH).

Příklad 5 (16/2)-16-Deoxo-l 6-brompristinamycin II_B

Podle postupu pospaného v příkladu 4, se k 1,2 g (16R)~ 16-deoxo-16-brom-14-O-(terc-buty 1difenyisilyl)pristinamycinu II_B rozpuštěného v 30 ml dichlormethanu při 20 °C přidá trihydrofluorid triethylaminu. Po 25 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se směs zpracuje podobně, jako je popsáno v příkladu 4, získá se oranžová pevná látka, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Získá se 0,78 g bílé, pevné látky, která se rekrystalizuje z 5 ml acetonitrilu za získání 0,48 g (16/2)-16-deoxo16-brompristinamycinu II_B ve formě bělavých krystalů o teplotě tání 146 °C (za rozkladu).

’H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,90 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,32 (mt: IH);

2,77 (mt: IH); 3,22 (dd, J = 17 a 7 Hz: 1H); 3,44 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 3,52 (mt: IH); 3,83 (mt: IH); 4,09 (mt: IH); 4,37 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,75 až 4,90 (mt: 2H); 4,79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 5,34 (d, J = 9 Hz: 1H); 5,75 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 6,03 (mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz; IH); 8,11 (s: IH).

-15CZ 301048 B6 (16/?)-16-deoxo-16-brom-I4-O-(terc-butyldifenyIsilyl)pristínamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 4 se 5,25 g tetra-n-butylamoniumbromidu rozpuštěného v 60 ml dichlormethanu, přidá při 20 °C, v argonové atmosféře k 2,5 g (165)-16-hydroxy-14O~(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) a potom se pomalu přidá 1,5 ml diethylaminosulfurtrifluoridu. Po 10 minutách míchání se směs zpracuje podle postupu popsaného v příkladu 4 a získá se 4,6 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: cyklohexan/ethylacetát (6/4 objemově)], io Získá se 1,38 g (16A)-16-deoxo-16-brom-14-0-(terc-butyldifeny'lsilyl)pristinamycinu II_B ve formě bílé pevné látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,07 (s: 9H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: IH); 1,37 (s: 3H); 1,70 až 2,05 (mt: 5H); 2,14 (mt: IH);

2,31 (mt: lH);2,77(mt: IH); 3,12 (dd, J = 17 a 5,5 Hz: IH); 3,30 (dd, J = 17 a 8 Hz: 1H);3,45 (mt: lH);3,77(mt: IH); 4,03 (mt: 1H); 4,23 (mt: 1H);4,55 (mt: IH); 4,75 až4,85 (mt: 3H); 5,33 (d, J = 9Hz: IH); 5,54 (mt: IH); 5,82 (široký d, J=16Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,12 (d, J - 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,30 až 7,45 (mt: 6H); 7,63 (široký d, J = 7 Hz: 2H); 7,69 (široký d, J - 7 Hz: 2H); 8,08 (s: IH).

Příklad 6 (16/ř)-l 6-Deoxo-l 6-chlorpristinamycin Π_Β

Podle postupu popsaného v příkladu 4, se 1,4 g (16/?)-16-deoxo-16-chlor-í4-O-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B rozpuštěného v 35 ml dichlormethanu přidá při 20 °C k 11 ml trihydrofluoridu triethylaminu. Po 20 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se směs zpracuje podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 4 a získá se oranžová pevná látka, jo která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie (mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Získá se 1 g bílé pevné látky, ke které se přidá 0,5 g látky získané při stejném pokusu. Po rekrystalizaci z 10 ml acetonitrilu se získá 1,12 g (ló/ř)-16-deoxo-t6-chlorpristinamycinu II_B ve formě bílých krystalů o teplotě tání 142 °C (za rozkladu).

¹H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, 6 v ppm): 0,96 (d, J ~ 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,88 (s: 3H); 2,10 až 2,25 (mt: 2H); 2,75 (mt: IH); 3,10 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 3,30 (dd, J = 17 a 6,5 Hz: IH); 3,53 (mt: IH); 3,84 (mt:

IH); 4,06 (mt: IH); 4,37 (mt: IH); 4,49 (mt: IH); 4,75 až 4,90 (mt: 3H); 5,35 (d, J = 9 Hz: IH);

5,76 (mt: IH); 5,83 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,99 (mt: IH); 6,22 (d, J = 15,5 Hz: IH); 6,51 (dd, 40 J= 17 a 5 Hz: lH);8,09(s: IH).

(16/?)-16-deoxo-16-chlor-l 4-0-( tcrc-butyldi feny Isily l)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 4 se 7,27 g tetra-n-butylamoniumchloridu rozpuštěného v 50 ml dichlormethanu přidá při 20 °C v atmosféře argonu k4g (165)-16-hydroxy-14-0(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu IIb (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) a potom se přikape 2,44 ml diethylaminosulfurtrifluoridu. Po 10 minutách míchání a zpracování podle postupu popsaného v příkladu 4, se získá 4,45 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: cyklohexan/ethylacetát (55/45 objemově)]. Získá se 0,51 g (16R)~ 16-deoxo-16-chlor-14-O (terc butyIdifenyIsi lyl)pristinamycinu Π_Β ve formě bílé, pevné látky.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,07 (s: 9H); 1,10 (d, 3 = 6,5 Hz: 3H); 1,33 (s: 3H); 1,70 až 1,90 (mt: 4H); 1,96 (mt: IH);

- 16 VX VU1V1U v

2,05 až2,25 (mt: 2H); 2,77 (mt: IH); 2,98 (dd, J - 17 a 5,5 Hz: IH); 3,16 (dd, J = 17 a 8 Hz: 1H);

3,45 (mt: IH); 3,76 (mt: IH); 4,03 (mt: IH); 4,25 (mt: IH); 4,55 (mt: IH); 4,75 až4,85 (mt: 3H);

5,34 (d, J = 9Hz: IH); 5,54 (mt: IH); 5,82 (dd, J= 16 a 2 Hz: IH); 5,99 (mt: IH); 6,11 (d,

J = 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,30 až 7,45 (mt: 6H); 7,63 (dd, J = 7 a 1, 5 Hz:

2H); 7,68 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 8,08 (s: IH).

Příklad 7 ίο (16/?)-16-Deoxo-16-jodpristinamycin IÍ_B

Podle postupu popsaného v příkladu 4 se 0,83 g (16/ř)-16-deoxo-16-jod-14-0-(terc-butyldifenytsilyl)pristinamycinu II_B rozpuštěného v 15 ml dichlormethanu přidá při 20 °C k 6,2 ml trihydrofluoridu triethylaminu. Po 23 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem v podobíš ném zpracování, jako je uvedeno v příkladu 4 se získá 0,9 g bělavé pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (98/1/1 objemově)]. Získá se 0,41 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie na silikagelové koloně 5 μΙ Kromasil®C18 (průměr kolony = 2 cm, délka kolony

- 25 cm) [mobilní fáze: gradient voda/acetonitril (80/20 až 60/40 objemově)]. Získá se 0,18 g bílé pevné látky, ke které se přidá 0,12 g látky získané při stejných pokusech a získá se 0,3 g (16/?)-l6-deoxo-16-jodpristinamycinu ÍI_B, ve formě béžové pevné látky o teplotě tání 140 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,67 (d, J = 3 Hz: IH); 1,73 (mt: IH); 1,80 až 2,05 (mt: 4H); 1,94 (s: 3H); 2,17 (mt: IH); 2,36 (mt: IH); 2,77 (mt: IH); 3,31 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 3,45 až 3,60 (mt: IH); 3,53 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 3,85 (mt: IH); 4,10 (mt: IH); 4,32 (mt: IH); 4,53 (mt: 1H); 4,75 až 4,85 (mt: 3H); 5,31 (d, J = 9 Hz: IH); 5,76 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,21 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,11 (s: IH).

(16/?)-16-deoxo-16-jod“14-0-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 4 se 7,2 g tetra-n-butylamoniumjodidu rozpuštěného v 60 ml dichlormethanu při 20 °C přidá v argonové atmosféře k 3 g (16S)-16_hydroxy-14-O(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) a potom se pří 0 °C přikape 1,8 ml diethylaminosuiťurtrifluoridu. Po 20 minutách míchání při 0 ^ŮC a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 4, se získá 10,5 g oranžového oleje, který se 15 minut míchá v 30 ml směsi cyklohexan/ethylacetát (60/40). Po filtraci a odpaření filtrátu za sníženého tlaku (2,7 kPa), se získá 5,5 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: cyklohexan/ethylacetát (60/40 objemově)]. Získá se 1,81 g (16/ř)-16-deoxo-16-jod-14-O-(terc-butyldifenyIsilyl)pristinamycinu II_B ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 105 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDCI₃, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,05 (s: 9H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,41 (s: 3H); 1,70 až 1,95 (mt: 4H); 1,96 (mt: IH); 2,14 (mt: IH); 2,33 (mt: IH); 2,77 (mt: IH); 3,20 (dd, J= 17 a 6 Hz: IH); 3,38 (dd, J = 17 a 8 Hz: IH); 3,45 (mt: IH); 3,79 (mt: IH); 4,03 (mt: IH); 4,17 (mt: IH); 4,54 (mt: IH); 4,71 (dt, J - 9 a 3 Hz: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 2,5 Hz: 1H); 4,75 až 4,85 (mt: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz:

IH); 5,55 (mt: IH); 5,81 (dd, J= 17 a 2 Hz: IH); 5,99 (mt: IH); 6,11 (d, J = 16 Hz: IH); 6,49 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,30 to 7,45 (mt: 6H); 7,63 (dd, J = 7 a 1, 5 Hz: 2H); 7,69 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 8,08 (s: IH).

- 17CZ 301048 B6

Příklad 8 (1672)-16-Deoxo-l 6-fluorpristinamycin 1I_A

0,2 ml kyseliny octové a 0,6 g trihydrátu tetra-n-butylamoniumfluoridu se při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k0,97g (1672)-16-deoxo-16-fluor-14-0-(terc-butyldifenylsilyl)pnstÍnamycinu Ha rozpuštěného v 8 ml tetrahydrofyrany. Po 168 hodinách míchání ss reakční směs nalije do 50 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se slije a vodná ío fáze se extrahuje 30 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší nad síranem hořečnatým, filtrují a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze; dichlormethan/methanol/acetonitril (95/2,5/2,5 objemově)]. Získá se 0,38 g žluté pevné látky, ke které se přidá 0,21 g látky ze stejného experimentu. Po míchání v etheru, filtraci a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při

20 °C se získá 0,58 g (167?)—16-deoxo-16-fIuor-pristinamycinu II_A ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 110 °C (za rozkladu).

'HNMRspektrum (400 MHz, CDCIj, δ v ppm): 0,99 (mt: 6H); 1,14 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,77 (s: 3H); 1,85 až 2,10 (mt: 2H); 2,28 (mt: IH); 2,65 až 2,90 (mt: 3H); 3,08 (mt: IH); 3,25 (mt:

1H); 3,98 (široký d, J = 17 Hz; 1H); 4,10 až 4,25 (mt: 2H); 4,31 (mt: 1H); 4,55 až 4,80 (mt: 2H);

4,90 až 5,00 (mt: 2H); 5,69 (mt: 1H); 5,96 (d, J = 16 Hz: 1H); 5,99 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,17 (Siroký t, J = 3 Hz: 1H); 6,61 (dd, J = 16 a 7 Hz: IH); 7,06 (mt: IH); 7,93 (s: IH).

(I67?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-{^tei*c-butyIdifenylsilyl)pnstinamycÍn Π_Α se může připravit následujícím způsobem;

20,5 ml diethylamÍnosulfurtrifluoridu se pomalu, při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k 65 g of (165)-16-hydroxy-14-C-(terc-butyIdifenylsilyl)prisťmamycinu II_A rozpuštěného v 700 ml dichlormethanu, Po 3 hodinách míchání se reakční směs pomalu nalije do 1000 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje dvakrát 500 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí a suší se nad síranem hořečnatým, filtrují a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 67,62 g oranžové pevné látky. Po míchání této pevné látky v pentanu, filtraci a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 65,55 g (1672)-16-deoxo-16-fluor-l4-0-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycinu I1_A ve for35 mě oranžové pevné látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,95 až 1,05 (mt: 6H); 1,05 (s: 9H); 1,13 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,28 (s: 3H); 1,80 až 2,10 (mt: 2H); 2,10 až 2,30 (mt; IH); 2,65 až 2,85 (mt: 3H); 2,90 až 3,15 (mt: 2H); 3,95 až 4,10 (mt: 2H); 4,16 (mt: 1H); 4,28 (mt: 1H); 4,40 až 4,60 (mt:

2H); 4,99 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 5,05 (d, J = 9 Hz: 1H); 5,50 (mt: IH); 5,90 (d, J - 16 Hz:

IH); 6,00 (široký d, J - 17 Hz: IH); 6,16 (t, J = 3 Hz: IH); 6,61 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 7,02 (t, J - 5,5 Hz: IH); 7,25 až 7,50 (mt: 6H); 7,58 (široký d, J = 7 Hz: 2H); 7,67 (široký d, J = 7 Hz: 2H); 7,89 (s: IH).

(165)-16-hydroxy-14-0-(terc-butyldifenylsilyl)pristinamycin Il_A se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 1 se 10 g (165}-16-hydroxypristinamycinu II_A rozpuštěného ve 100 ml dichlormethanu přikape při 20 °C, v atmosféře argonu k 13,2 ml diisopropylethyl50 aminu, 19,7 ml terc-butyldifenylchlorsilanu a 0,46 g 4-dimethylaminopyridinu. Po 20 hodinách míchání a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 1, se získá 35 g hnědého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (96/2/2 objemově)]. Získá se 10,5 g(16S}-16~hydroxy-14-0-(terc-butyldifenyIsilyl)pristjnarnycínu II_A ve formě béžové pevné látky.

- 18'HNMR spektrum (400 MHz, CDCb, 5 v ppm): 0,90 az 1,05 (mt: 6H); 1,05 až 1,15 (mt; 15H);

1,90 až 2,05 (mt: 3H);2,54(mt: lH);2,66(mt: lH);2,76(mt: IH);2,82(dd, 16a 11 Hz: IH);

3,11 (dd, J = 16 a 3 Hz: IH); 3,28 (mt: IH); 3,83 (široký s: IH); 4,00 až 4,15 (mt: 2H); 4,50 (mt:

IH); 4,57 (mt: IH); 4,81 (mt: lH); 4,94 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 5,38 (mt: IH); 5,63 (d, J = 9 Hz:

IH); 5,88 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 5,94 (d, J = 16 Hz: IH); 6,01 (t, J = 3 Hz: IH); 6,34 (mt: IH); 6,47 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,25 až 7,50 (mt: 6H); 7,62 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 7,68 (dd, J = 7 a 1,5 Hz: 2H); 8,06 (s: IH).

(í65>-i6-HydroxyprisíinamyGii lí_A se může připravit podle postupu pospaného v F. Le Goffic a koL; Eur. J, Med. - Chimica Therapeuticai Leden - únor, -j6( 1), 69-72 (1981).

Příklad 9

Methansulfonát (16/?)-16-Deoxo-16-fluor-14~0-[4-(morfoIin-4-ylmethyI)benzoyl]pristinamycinu II_B ml 0,lN ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k0,15 g (16Λ)16-deoxo-l ó-fluor-14-O-[4-(morfolin“4_ylmethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 5 ml methanolu. Po 10 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání bílého zbytku, který se míchá v 10 ml etheru. Po filtraci, propláchnutí pevné látky 10 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,15 g methansulfonátu (16Á)-1 ó-deoxo 16-fIuor-14-0-[4™(morfolin-4-ylmethyl)benzoyl]pristinamycinu II_Bve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 150 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d₆, δ v ppm): 0,85 (d, J = 6,5Hz: 3H); 0,95 (d,J = 6,5 Hz: 3H); 1,05 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,54 (mt: IH); 1,75 až 2,00 (mt: 3H); 1,86 (s: 3H); 2,05 až 2,25 (mt: 2H); 2,30 až 2,45 (mt: IH); 2,32 (s: 3H); 2,78 (mt: IH); 3,05 až 3,45 (mt: 6H); 3,55 až 3,70 (mt: 3H); 3,72 (mt: 1H); 3,84 (mt: IH); 3,90 až 4,05 (mt: 3H); 4,47 (nerozlišený komplex:

2H); 4,70 až 4,80 (mt: 2H); 5,18 (dekaplovaný dublet, Jhf ⁼ 48 Hz: lH); 5,55 (d, J = 9,5 Hz: IH);

5,66 (mt: IH); 5,81 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,21 (d, J = 16 Hz: IH); 6,64 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,68 (široký d, J = 7,5 Hz: 2H); 8,08 (široký d, J - 7,5 Hz: 2H); 8,16 (mt: IH); 8,55 (s: IH); 9,95 (nerozlišený komplex: IH).

(16/?)-16-Deoxo-16-fluor-44-0-[4-(morfolin-4-ylmethyl)benzoyl]pristínamycin Π_Β se může připravit následujícím způsobem:

0,44 g jodidu sodného a 0,5 ml morfolinu se při 20 °C přidá k 2 g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-140-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu Il_B rozpuštěného v 50 ml tetrahydrofuranu. Po 17 ho40 dinách míchání za varu se reakční směs nalije do 50 ml vody a potom se extrahuje dvakrát 50 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, promyjí se dvakrát 100 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 2,5 g zbytku, který se Čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (100/0, 99/1 a 98/2 objemově)]. Pevná látka, která se získá, se míchá v pentanu, filtruje a suší (90 Pa) při 30 °C za získání 1,69 g (16Á)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[4-(niorfolín-4ylmethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě bělavé pevné látky o teplotě tání 120 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,30 až 2,50 (mt: IH); 2,44 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 3,05 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,55 (s: 2H); 3,71 (mt: 4H); 3,89 (mt: IH); 4,09 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,79 (široký d, J = 10 Hz: 1H); 4,83 (dd, J - 9 a 3 Hz: 1H); 5,18 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: 1H); 5,45 (d, J = 9,5Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: IH); 5,82 (Široký d, J = 17 Hz: IH); 5,94 (mt: IH); 6,06 (dt,

-19CZ 301048 B6

J = 9,5a5Hz: IH); 6,22 (d, J - 16Hz: IH); 6,52 (ddj = 17 a 5 Hz: IH); 7,41 (d, J = 8 Hz: 2H);

7,98 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

(167?)-16-deoxo-l6-fluor-14-0-[4_(chlonnethyl)benzoyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

2,84 g 4-(chlormethyl)benzoylchloridu a 0,095 g 4-dimethylaminopyridinu se při 10^QC přidá lf S 37 tr í 1 1 ή—dprvm—1 A~flnnmrietÍnamvrin IK fnřínravpnÁhn nnrllp· nncfnnii nnnsflnphn

---C \----/ ------ ·“ -----I------------J ~.....D \r' Τ' -·-· - I----- I------r r~I--------v příkladu 1) rozpuštěného v 150 ml dichlormethanu a 2,1 ml triethylaminu. Po 20 hodinách ío míchání při 20 °C se reakční směs postupně promyje 50 ml vody, 50 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 30 ml vody a 30 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného.

Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 7,2 g béžového zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (99/0,5/0,5 a 98/1/1 objemově)]. Získá se 4,5 g (16/?)-16-deoxo--16-fluor-14-0-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycínu II_B ve formě žluté, pevné látky.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: 1H); 2,40 (mt: IH);

2,76 (mt: IH); 3,04 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,88 (mt: IH); 4,09 (mt; IH); 4,53 (mt; 1H); 4,62 (s: 2H); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: 1H); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,44 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,82 (dd, J - 17 a 2 Hz: IH); 5,94 (mt: IH); 6,06 (dt, J = 9,5 a 5 Hz; IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: 1H); 7,47 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,02 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s: 1H).

Příklad 10 (16/?)—l6-DeoxO”l6-fluor-14-G-[4-{imidazol-1-yImethyl)benzoyl]pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 9 se 0,499 g (16/ř)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[4-(chIormethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuštěného v 30 ml tetrahydrofuranu přidá pri 20 °C k 0,11 g jodidu sodného a 0,099 g imidazol. Po 17 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsá35 no v příkladu 9, se získá 0,5 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v etheru, filtruje se a suší (90 Pa) při 20 °C, za získání 0,289 g(16Á)-16-deoxo-16-fluor-14-0[4-(imidazol-l-ylmethyl)benzoyl]pristinamycinu II₀ ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 136 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCI,, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,39 (mt: IH);

2,76 (mt: IH); 3,04 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,28 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,08 (mt: IH); 4,53 (mt: 1H); 4,78 (široký d, J = 10 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,17 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48Hz: IH); 5,19 (s: 2H); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,78 (mt: 1H); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,94 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 6,90 (s: IH); 7,13 (s: IH); 7,20 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,58 (s: IH); 8,01 (d, J = 8 Hz: 2H);8,l4(s: IH),

-20Příklad 11 (16/ř)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-( 4-methylpiperazin-l-y Imethy l)benzoyl]pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu g se 2g (16/ř)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuštěného v 90 ml tetrahydrofuranu přidá při 20 °C k 0,44 g jodidu sodného a 0,65 ml methylpiperazinu rozpuštěného v 10 ml tetrahydrofuranu. Po 20 hodinách míchání za varu pod zpětným io chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 7, se získá 2,4 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze:, dichlormethan/methanol (99/1 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v 15 ml etheru, filtruje se a suší (90 Pa) při 20 °C za získání 1 g (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[4-(4-methyl piperazin-1-ylmethy l)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě světle žluté, pevné látky o teplotě tání 160 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,25 (mt: 6H); 1,95 (s: 3H); 2,30 až 2,50 (mt: IH); 2,40 (s: 3H); 2,62 (nerozlišený komplex: 8H); 2,76 (mt: IH); 3,04 (dt, J= 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,59 (s: 2H); 3,88 (mt: IH); 4,08 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,79 (široký d, J = 10 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,18 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,44 (d,J = 9,5Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,95 (mt: 1H); 6,05 (dt, J = 9,5 a 6 Hz: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,40 (d, J = 8, 5 Hz: 2H); 7,97 (d, J = 8,5 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

Příklad 12 (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4—(diethylaminomethyl)benzoyl]pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu g se 0,55 g (16/?)- 16-deoxo-l 6-fluor-l4-O-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu Π_Β (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuštěného v 30 ml tetrahydrofuranu, přidá při 20 °C k 0,12 g jodidu sodného a 0,17 ml diethylaminu. Po 15,5 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá zbytek, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Získaná pevná látka se míchá v 20 ml pentanu, filtruje se a suší se (90 Pa) při 20 °C za získání 0,14 g (16/ř)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4(diethylaminomethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 150 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,03 (mt: 9H); 1,09 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,40 (mt: IH); 2,52 (q, J = 7 Hz: 4H); 2,77 (mt: IH); 3,05 (td, J = 17 a 6 Hz: 1H); 3,28 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,61 (s: 2H); 3,89 (mt: 1H);4,O9 (mt: IH); 4,53 (mt; IH); 4,79 (široký d, J= 10Hz: IH); 4,82 (dd,J = 9a3Hz: IH); 5,17 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,44 (d, J = 9 Hz: IH); 5,77 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,92 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6,21 (d, J = 6 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,42 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,96 (d, J - 8 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

Příklad 13 (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4~0-{4-[(2S)-2~hydroxymethyl)pyrrolidin-l -ylmethyljbenzoyl} pristinamycin II_B

Podle postupu pospaného v příkladu g se lg (16/ř)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[4-{chlor55 methyl)benzoyl]pristinamycinu II_B (připraveného podle příkladu 9) rozpuštěného v 45 ml tetra-21CZ 3U1U48 B6 hydrofuranu přidá při 20 °C k 0,22 g jodidu sodného a 0,29 ml 1-prolinolu rozpuštěného v 5 ml tetrahydrofuranu, Po 12 hodinách míchání za varu pod zpětným a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 1,25 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (98/2 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v 10 ml etheru, filtruje se a suší se (90 Pa) při 20 °C, za získání 0,4 g (1672)-16-deoxo-l 6-fluor14-O- {4-[((2X)-2-hydroxy methy 1 )pyrrolid i n- 1-y lmethyl] benzoy 1} pristinamyc i nu Ur, ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 158 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCh, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J - 6,5 Hz; io 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,55 až 2,05 (mt: 8H); 1,96 (s: 3H); 2,17 (mt: lH);2,29(mt: IH);

2,41 (mt: IH); 2,77 (mt: 2H); 2,96 (mt: IH); 3,05 (td, J - 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,40 až 3,55 (mt: 3H); 3,66 (dd, J = 11 a 4 Hz: IH); 3,88 (mt: IH); 4,02 (d, J = 13 Hz: IH); 4,09 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,83 (dd, J-9 a 3 Hz: IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,45 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,82 (dd, J - 16 a 2 Hz: IH); 5,95 (mt: lH);6,05(mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,38 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,98 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

Příklad 14 (1672)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(2-picolylaminomethyl)benzoyl]pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 9 se 2 g (1672)-16-deoxo-16--fluor_14-0-[4-(chlormethyl)benzoyl] pristinamyc inu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuš25 těného v 20 ml tetrahydrofuranu při 20 °C přidá k 0,44 g jodidu sodného a 1,2 ml 2-(aminomethyl)pyridinu. Po 17 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 2,1 g tmavě žluté pevné látky, která se čistí pomocí dvou po sobě následujících chromatografií [mobilní fáze: v tomto pořadí dichlormethan/methanol/acetonitril (92/4/4 a 95/2,5/2,5, objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v etheru, filtruje a suší (90 Pa) při 20 °C, za získání 1,59 g (1672)-16-deoxo-16-fluor-14-C~[4(2-p i ko ly lam inomethy l)benzoyl] pristinamyc inu Ur ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 106 °C (za rozkladu).

'HNMRspektrum (400MHz, CDCl,, Svppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5B); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,40 (mt: IH);

2,77 (mt: IH); 3,05 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,90 (mt: IH); 3,92 (s: 2H); 3,93 (s: 2H); 4,10 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3,5 Hz: IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,45 (d, J = 9 Hz: IH); 5,79 (mt: IH); 5,82 (dd, J= 16 a 2 Hz: IH); 5,92 (mt: IH); 6,06 (mt: IH); 6,22 (d, J= 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,18 (dd, J = 8 a 5 Hz: 1H); 7,30 (d, J = 8 Hz: IH); 7,45 (d, J = 9 Hz: 2H); 7,65 (dt, J = 8 a 2 Hz: IH); 7,99 (d, J = 8Hz: 2H); 8,14 (s: IH); 8,58 (široký d, J = 5 Hz: IH).

Příklad 15 (1672)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[4-(pyrrolidin-1-yl)benzoyl]přistinamycin II₀

Podle postupu popsaného v příkladu g se Ig (1672)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[4—(chlor50 methyl)benzoyl]pristinamycinu Ur (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuštěného v 50 ml tetrahydrofuranu při 20 °C přidá k 0,22 g jodidu sodného a 0,24 ml pyrrolidinu.

Po 7 hodinách za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá zbytek, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze; dichlormethan/methanol (99/1 objemově)]. Po 10 minutách míchání v pentanu, filtraci a sušení (90 Pa)

-22při 20 °C se získá 0,4 g (!67?)-16-deoxo-16-fIuor-14-0-[4-(pyrrolidin-l-yl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 170 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 až 2,05 (mt: 5H); 1,81 (mt: 4H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,40 (mt: IH); 2,53 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 3,04 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,28 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,68 (s: 2H); 3,88 (mt: lH);4,09(mt: 1H);4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 1 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,17 (dekaplovaný dublet, Jhf - 48 Hz: IH); 5,45 (d, J = 9,5 Hz: 1H);

5,77 (mi. IH), 5,81 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,95 (mt: 111); 6,05 (mí: 1H); 6,22 (d, J - 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,42 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,97 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

Příklad 16 (16Á)-16-Deoxo-16-fluor-14-O-[4-(piperidin-l-yl)benzoyl]pristinamycin I1_B

Podle postupu popsaného v příkladu 9 se 0,75 g (167?)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B (připraveného podle příkladu 9) rozpuštěného v 20 ml tetrahydrofuranu při 20 °C přidá 0,16 g jodidu sodného a 0,22 ml piperidinu. Po 15 hodinách míchání při 66 °C a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 1 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Po míchání v diethyletheru a potom v pentanu, filtraci a sušení (90 Pa) při 20 °C se získá 0,33 g of (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-Ó-[4-(piperidin-l-yl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 110 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,35 až 1,70 (mt: 6H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,30 až 2,50 (mt: 5H); 2,76 (mt: IH); 3,05 (td, J= 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH);3,49 (mt: IH); 3,52 (s: 2H); 3,89 (mt: IH); 4,09 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J= 10 a 1,5 Hz: to IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,18 (dekaplovaný dublet, Jhf - 48 Hz: 1H); 5,45 (d, J = 9,5 Hz:

IH); 5,77 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 5,93 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6,22 (d, J =

Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,40 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,97 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s:

IH).

Příklad 17 (16Λ)-16-Deoxo-l 6-fluor-14-0-{4-[(2-hydroxyethyl)aminomethyIJbenzoyI} pristinamycin U_B

Podle postupu popsaného v příkladu g se 0,8 g (16/?)-16-deoxcN 6-fluor-14-O-[4-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu II₈ (připraveného podle příkladu 9) rozpuštěného v 20 ml tetrahydrofuranu, při 20 °C přidá k 0,17 g jodidu sodného a 0,14 mt ethanolaminu a po 16 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 0,8 g béžové, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (95/5 a 90/10 objemově)]. Po míchání v etheru, filtraci a sušení (90 Pa) se získá 0,36 g bílé, pevné látky, která se čistí pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie na koloně 5 pm Hypersil® (průměr kolony = 2 cm, délka kolony = 25 cm) [mobilní fáze: gradient dichlormethan/ methanol (97/3 objemově)]. Získá se 0,129 g(l67?)—16— deoxo-16-fluor-14-0-{4-[(2-hydroxyethyl)aminomethyl]benzoyl)pristinamycin II_B ve formě so bílé, pevné látky o teplotě tání 194 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 az 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,39 (mt: IH);

2,76 (mt: IH); 2,81 (t, J = 5,5 Hz: 2H); 3,04 (td, J = 17 a6 Hz: lH);3,28(mt: lH);3,48(mt: IH);

3,67 (t, J = 5,5 Hz: 2H ); 3,85 až 3,95 (mt: IH); 3,88 (s: 2H); 4,09 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78

-23CZ 301048 B6 (široký d, J = 10 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,17 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,44 (d,J-9,5 Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,81 (široký d, J - 16 Hz: IH); 5,93 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6.22 (d, J = 16 Hz: IH); 6.51 (dd, J = 16 ad 5 Hz: IH); 7,40 (d, J = 8 Hz: 2H); 7.99 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,13 (s: IH).

Příklad 18 (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-14-0-{ 4-[(2-diethylamino)ethylthiomethyl] benzoyl }pristinamycin n_B

0,82 ml roztoku butyllithia (2,5M v hexanu) se při 0 °C přidá k 0,46 ml 2-diethylaminoethanthiolu rozpuštěného v 10 ml tetrahydrofuranu. Po 15 minutách míchání se během 15 minut přikape 1,4 g (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[4-(chlormethyl)benzoyl]prÍ5tinamycinu II_B (při15 praveného podle příkladu 9) rozpuštěného v 15 ml tetrahydrofuranu. Po 6,5 hodinách míchání při 0 °C a 15 hodinách míchání při 20 ^ŮC se přikape roztok, který se připraví stejně, jako bylo uvedeno výše, ale z 0,153 ml 2-diethylaminoethananthiolu a 0,205 ml roztoku butyllithia (2,5M v hexanu) v 0,5 ml tetrahydrofuranu. Po 3,5 hodinách míchání při 20 °C se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 20 ml dichlormetha20 nu. Tento roztok se promyje 50 ml vody a potom se po usazení oddělí. Vodná fáze se extrahuje 20 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, promyjí se 70 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,6 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (92/4/4 objemově)]. Po míchání v pentanu, filtraci a sušení (2,7 kPa) při

20 °C se získá 0,926 g (16/ř)-16-deoxo-16-fluor-14-O-{4-[(2-diethylamino)ethylthiomethyl]benzoyljpristinamycinu II_B ve formě béžové, pevné látky o teplotě tání 84 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCl,, 8 v ppm): 0,90 až 1,05 (mt: 12H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,96 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,40 (mt: IH); 2,50 (mt: 6H); 2,62 (mt: 2H); to 2,76 (mt: IH); 3,05 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,77 (s: 2H); 3,89 (mt: 1H); 4,09 (mt: 1H); 4,53 (mt: 1H); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: i H); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz:

IH); 5,17 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48Hz: IH); 5,45 (d, J = 9Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,92 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,40 (d, J = 8,5 Hz: 2H); 7,97 (d, J = 8,5Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

Příklad 19 (16/?>-16-Deoxo-l6- ffuor-l4-0-[4-(karboxymethyIthiomethyl)benzoyl]pristinamycin II_B

4,64 ml roztoku butyllithia (2,5M hexanu) se při 0 °C přidá k 0,4 ml merkaptooctové kyseliny v 10 ml tetrahydrofuranu. Po 15 minutách míchání se teplota reakční směsi sníží na -50 °C a pomalu se příkapou 2g (167?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[4-<chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 9) rozpuštěného v 10 mi tetra45 hydrofuranu. Po 3 hodinách míchání při -50 °C a 15 hodinách při 20 °C se teplota reakční směsi opět sníží na -50 °C a přikape se roztok, který byl připraven tak, jak je uvedeno výše pří -50 °C, ale z 0,2 ml merkaptooctové kyseliny a 2,32 ml roztoku butyllithia (2,5M v hexanu) v 5 ml tetrahydrofuranu. Po 5 hodinách míchání při -50 °C se reakční směs nalije do 100 ml vody a pH se pomocí přidání 0,lN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové upraví na 3 až 4.

Po přidání 20 ml dichlormethanu a 20 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného se organická fáze slije a vodná fáze se extrahuje 20 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 2,1 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (90/5/5 objemově)]. Po míchání v etheru, filtraci a sušení (90 Pa) při

-2420 °C se získá 0,21 g (16/ř)-l 6-deoxo-l 6-fluor-14-O-[4-(karboxymethy Ithiomethy l)benzoyl]pristinamycinu IIb ^ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 142 °C (za rozkladu).

^lH NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 5 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,17 (mt: lH);2,39(mt: IH);

2,76 (mt: IH); 3,05 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,08 (s: 2H); 3,28 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,88 (mt: IH); 3,88 (s: 2H); 4,10 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,83 (dd, J - 9 a3,5 Hz: IH); 5,19 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: 1H); 5,44 (d, J = 9 Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,83 (dd, J = ió a 2 Hz: iH); 6,00 (mt: IH); 6,05 (ml· IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, io J = 16 a 5 Hz: IH); 7,41 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,97 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,16 (s: IH).

Příklad 20 (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-{4-[(2-diethy lam ino)ethoxy methyl] benzoyl} prístinamycin

II_B

0,6 g 4-((2-diethylamino)ethoxymethyl)benzoové kyseliny, 0,05 g 4-dimethylaminopyridínu, 0,43 g N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a 2 g síranu hořečnatého se při 20 °C přidají k 1 g (16A)-16-deoxo-í6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 15 ml dichlormethanu. Po 40 hodinách pri 20 °C se přidá 0,24 g 4-(2diethylamino)ethoxymethyl)benzoové kyseliny, 0,025 g 4-dimethylaminopjlridinu a 0,2 g N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu. Po dalších třech hodinách míchání pri 20 °C se reakční směs filtruje a nerozpustná látka se propláchne 20 ml dichlormethanu. Filtrát se promyje třikrát 100 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,5 g béžové pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: gradient dichlormethan/methanol/acetonitril (90/5/5 a 84/8/8 objemově)]. Potom se míchá v 20 ml etheru, filtruje se a suší za získání 0,86 g bílé, pevné látky, která se rozpustí v 20 ml dichlormethanu. Získaný roztok se promyje dvakrát 50 ml nasyceného vodného roztoku hydro30 genuhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C za získání 0,67 g (16A)-16-deoxo-l 6-fluor-14-0-{4-[(2-diethylamino)ethoxymethyl]benzoyl}pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 76 °C (za rozkladu).

’H NMR spektrum (400 MHz, CDCI₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,05 (t, J = 7 Hz: 6H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,40 (mt: IH); 2,60 (q, J = 7 Hz: 4H); 2,72 (t, J = 6,5 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); 3,04 (dt, J = 17,5 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,59 (t, J = 6,5 Hz: 2H); 3,89 (mt: IH); 4,09 (mt: 1H); 4,53 (mt: IH); 4,59 (s: 2H); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: 1H); 4,83 (dd, J = 9 a 3,5 Hz:

IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, J_Hf = 48Hz: IH); 5,45 (d, J = 9Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,92 (mt: IH); 6,05 (mt: IH); 6,22 (d, J-16Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,41 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,99 (d, J = 8 Hz: 2H); 8,14 (s: IH).

4-[(2-Diethylamino)ethoxymethyl]benzoová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se pří 20 °C přidá k 3,67 g methyl-4-[(2-diethylamino)ethoxymethyl]benzoátu rozpuštěného v 50 mí methanolu. Po 2,5 hodinách míchání pri 20 °C se pH reakční směsi upraví na 5 přidáním 29 ml IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 50 ml methanolu. Po filtraci nerozpustné látky se filtrát odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 50 ml dichlormethanu. Po odfiltrování nerozpustné látky se filtrát odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 3,5 g 4[(2-diethylamino)ethoxymethyl]benzoové kyseliny ve formě žlutého oleje.

-25CZ .301048 B6 'H NMR spektrum (300 MHz, (CD,)₂SO d6, δ v ppm): 1,07 (t, J = 6,5 Hz: 7,5 Hz: 6H); 2,79 (q,

J = 7,5 Hz: 4H); 2,93 (t, J = 6,5 Hz: 2H); 3,66 (t, J - 6,5 Hz: 2H); 4,57 (s: 2H); 7,42 (d, J = 8 Hz:

2H): 7.92 (d. J = 8 Hz: 2H).

Methvl-4-[( 2-d i ethylam i no)eth oxy methyl] benzoát se může připravit následujícím způsobem:

2,64 g hydridu sodného (60% disperze v kapalném parafinu) se při 0 °C přidá k 5,8 ml N,Ndiethy! ethan cl aminu rozpuštěného v 15 m! uÍmethylfcrmuímdu. Po 1 hodině míchaní ρπ 0 C se během 20 minut přikape 10 g methy 1-4-( brommethyl)benzoátu rozpuštěného v 10 ml dimethylio formamidu, a potom 50 ml dimethylformamidu. Po 17 hodinách při 20 °C se přidá 100 ml methanolu a potom se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání žlutého oleje, který se zředí 200 ml ethylacetátu. Získaný roztok se promyje 300 mí vody. Vodná fáze se oddělí a potom se extrahuje 100 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, promyjí se dvakrát

500 ml vody, suší se nad síranem hořeěnatým, filtrují se a odpaří do sucha za sníženého tlaku 15 (2,7 kPa) za získání 10 g žlutého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsí dichlormethan/methanol (96/4 a 90/10 objemově)]. Získá se 3,67 g methyl-4-[(2-diethylamino)ethoxymethyl]benzoátu ve formě žlutého oleje.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 1,02 (t, J = 7,5 Hz: 6H); 2,58 (q, J - 7,5 Hz: 20 4H); 2,70 (t, J - 6 Hz: 2H); 3,57 (t, J = 6 Hz: 2H); 3,88 (s: 3H); 4,56 (s: 2H); 7,38 (d, J = 8 Hz:

2H); 7,99 (d,J = 8Hz: 2H).

Příklad 21 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[3-(morfolin^l—ylmethyl)benzoyl]pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu g se lg (l67?)-16-deoxo-16-ťluor-14-0-[3-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 25 ml tetrahydrofuranu přidá při 20 °C k 0,212 g jodidu sodného a 0,253 ml morfolinu. Po 16 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 1 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (100/0/0 a potom 98/1/1 objemově)]. Získá se 0,8 g žluté, pevné látky, která po míchání v 10 ml etheru, filtraci a sušení (90 Pa) při 20 °C poskytne 0,68 g (167ř)-16-deoxo35 16-fluor-14~0-[3-(morfolin-4-ylmethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 198 °C (za rozkladu).

'HNMRspektrum (400 MHz, CDC1₃, 5 v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,96 (s: 3H); 2,17 (mt; IH); 2,35 až 2,50 (mt: IH); 2,46 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 3,05 (td, J - 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,45 až 3,60 (mt: IH); 3,54 (s: 2H); 3,72 (mt: 4H); 3,88 (mt: IH); 4,10 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4, 79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,45 (d, J = 9Hz: IH); 5,79 (mt: IH); 5,82 (dd, J - 17 a2 Hz: 1H); 5,93-(mt: lH);ó,06(mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J - 17 a 5 Hz: IH); 7,40 (t, J = 8 Hz: IH); 7,56 (široký d,

J = 8 Hz: IH); 7,92 (široký d, J - 8 Hz: IH); 7,96 (široký s: IH); 8,14 (s: IH).

(167?)-]6-Deoxo-16-fluor-14-0-[3-(chlormethyl)benzoyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

2 ml triethylaminu, 2 ml 3-(chlormethyl)benzoylchloridu a 0,23 g 4-dimethylaminopyridinu se při 20 °C přidá k 5 g (16R)~ 16-deoxo-l6-fluorpristinamycinu I1_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 250 ml dichlormethanu. Po 24 hodinách míchání při 20 °C se reakční směs promyje třikrát 120 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání žluté, pevné látky, která se míchá v 50 ml etheru. Po filtraci, promytí pevné látky dvakrát 10 ml etheru a sušení za sníženého

-26Cí JUIUIO UU tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 5,56 g (16Λ)-16-deoxo-l 6-fluor-14-0-[3-(chlonnethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 190 o C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 5 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,80 až 2,05 (mt: 5H); 1,96 (s: 3H); 2,17 (mt: lH);2,40(mt: IH);

2,76 (mt: IH); 3,05 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,88 (mt: IH); 4,10 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,63 (s: 2H); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,84 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH);

5,18 (dekaplovaný dublet, = 48 Hz: 1H); 5,45 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,82 (dd, J = ió a 1,5 Hz: iH); 5,92 (mt: IH); 6,07 (dt, J - 9,5 a 5 Hz: IH); 6,23 (d, J = 16 Hz: 1H); to 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,46 (t, J = 8 Hz: IH); 7,61 (široký d, J = 8 Hz: IH); 7,99 (široký d,

J = 8 Hz: IH); 8,04 (široký s: IH); 8,14 (s: IH).

Příklad 22

Methansulfonát (16Λ)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[3-(imidazol-l-y lmethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B

6,28 ml 0,lN ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k 0,450 g (16A)_16-deoxo-l 6-ťluor-14-O-[3-(imidazo 1-4-yImethyl)benzoy!]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 10 ml ethanolu. Po 10 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 7 ml etheru. Po filtraci, promytí pevné látky dvakrát 2 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 0,479 g methansulfonátu (]6A)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[3-(imidazol-l-ylmethyI)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 160 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,96 (s: 3H); 2,17 (mt: IH); 2,37 (mt: IH);

2,77 (mt: IH); 2,86 (s: 3H); 3,05 (mt: IH); 3,29 (mt: IH); 3,53 (mt: IH); 3,85 (mt: IH); 4,11 (mt:

IH); 4,53 (mt: IH); 4,80 (široký d, J = 10 Hz: IH); 4,84 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,18 (dekaplovaný dublet, J_hf = 48 Hz: 1H); 5,35 až 5,50 (mt: 3H); 5,82 (mt: 1H); 5,86 (široký d, J = 17 Hz: IH); 6,07 (mt: IH); 6,11 (mt: IH); 6,22 (d, J= 16 Hz: IH); 6,55 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 7,10 (široký s: IH); 7,43 (široký s: 1H); 7,54 (mt: 2H); 7,95 (široký s: IH); 8,09 (mt: IH); 8,12 (s: IH); 9,11 (široký s: IH).

(16/?)-16-Deoxo-16-fiuor-14-0-[3-<imidazol-l-ylmethyl)benzoyl]pristÍnamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 9 se 1,2 g (16/?)—16-deoxo-l 6-fluor-l4-O-[3-(chlor40 methyl)benzoyIJpristinamycinu It_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 21) rozpuštěného v 30 ml tetrahydrofuranu přidá při 20 °C k 0,263 g jodidu sodného a 0,238 g imidazolu. Po 16 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 0,9 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (98/1/1 gradient a potom

96/2/2 a potom 90/5/5 objemově)). Získá se 0,53 g (16/?)—16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[3-(imidazol- 1-y Imethy l)benzoy IJpristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 125 °C (za rozkladu).

1H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,95 (s; 3H); 2,16 (mt: IH); IH); 2,38 (mt:

IH); 2,76 (mt: IH); 3,04 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,28 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,86 (mt: IH); 4,10 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 4 Hz: IH); 5,17 (s: 2H); 5,17 (dekaplovaný dublet, J_iiř- 48 Hz: IH); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,79 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 5,97 (mt; IH); 6,06 (mt: IH); 6,22 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,91 (nerozlišený komplex: IH); 7,11 (široký s: IH); 7,32 (široký d, J = 8 Hz: IH);

-27CZ 301048 B6

7,44 (t, J = 8 Hz: IH); 7,57 (široký s: 1H); 7,88 (široký s: IH); 7,99 (široký d, J = 8 Hz: IH); 8,14 (s: IH).

Příklad 23 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[3-(diethy lam inomethy l)benzoyl)pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu g se lg (167?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[3-(chIor10 methyl)benzoyl]pristinamycinu Hb (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 21) rozpuštěného v 25 ml tetrahydrofuranu při 20 °C přidá k 0,217 gjodidu sodného a 0,3 ml diethylaminu. Po 16 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 9, se získá 1 g světle žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (100/0/0 apo15 tom 98/1/1 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v pentanu, filtruje se a suší (2,7 kPa) při 20 °C za získání 0,313 g(167?)-16-deoxo-I6-fluor-14-0-[3-(diethylaminomethyl)benzoyl]pristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 115 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, COC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,05 až 1,15 (mt: 9H); 1,75 až 2,05 (mt: 5H); 1,97 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,41 (mt: IH);

2,56 (mt: 4H); 2,77 (mt: IH); 3,05 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,29 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,64 (široký s: 2H); 3,89 (mt: IH); 4,10 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,19 (dekaplovaný dublet, J_Hf = 48 Hz: 1H); 5,46 (d, J = 9,5 Hz: 1H); 5,78 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 5,94 (mt: IH); 6,06 (mt: IH); 6,23 (d, J = 16 Hz: IH);

6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,40 (t, J = 8 Hz: IH); 7,62 (mt: IH); 7,91 (d, J = 8 Hz: IH); 7,97 (široký s: IH); 8,14 (s: IH).

Příklad 24 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(morfolin~4~ylmethyl)fenylacetyl]pristinamycÍn II_B

0,25 ml morfolinu a několik krystalů jodidu sodného se při 20 °C přidá k 0,87 g (167?)-I6-deoxo- 16-fluor-14-0-[4-(halogenmethyl)fenylacetyl]pristinamyčinu II_B (směs chlorovaného a hromovaného derivátu) rozpuštěného v 5 ml dimethylformamidu. Po 15 minutách míchání při ^ŮC se reakční směs nalije do vody. Vodná fáze se oddělí po usazení a potom se extrahuje dvakrát 50 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, postupně se promyji 30 ml vody a 30 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a potom se suší nad síranem hořečnatým, filtrují a odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 0,91 g oranžově hnědé pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (92/4/4 objemově)] za získání 0,46 g žluté, pevné látky, která se převede do 5 ml dichlormethanu. Po filtraci přes Celíte®, se Celíte* propláchne dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,42 g žluté, pevné látky, která se míchá 15 minut v 5 ml vody. Po filtraci a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,38 g (167?)-l 6-deoxo~

16-fluor-l4-O-[4~(morfolin^4-ylmethyl)fenylacetyIJpristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 100 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,60 až 2,05 (mt: 5H); 1,85 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,44 so (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,97 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,22 (mt: IH); 3,40 až 3,55 (mt: IH); 3,48 (s: 2H); 3,59 (s: 2H); 3,71 (mt: 4H); 3,85 (mt: IH); 4,04 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78 (široký d,

J = 10 Hz: 1H); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,06 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: 1H); 5,31 (d,

J = 9 Hz: 1H); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,81 (široký d, J = 17 Hz: 1H); 5,93 (mt:

1H); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a 4 Hz: IH); 7,22 (d, J = 8 Hz: 2H); 7,29 (d, J = 55 8 Hz: 2H); 8,12 (s: IH).

UUXU*VO L>V (16R)-16-Deoxo-16-fluor-l4-0-[4-(halomethyl)fenylacetyl]pristinamycin 1I_B (směs chlorovaného a hromovaného derivátu) se může připravit následujícím způsobem:

1,3 ml diisopropylethylaminu a 1,75 g 4~(brommethyl)fenylacetylchloridu se během 5 minut při °C, v atmosféře argonu přidá k2g (1672)-16-deoxo-1 ó-fluorpristínamycmu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 60 ml dichlormethanu. Po 16 hodinách míchání při 20 °C se reakční směs postupně promyje dvakrát 25 ml vody a 25 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného á potom se suší nad síranem horečnatým, filtruje se io a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 2,79 g oranžové, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)] za získání 1,3 g žluté, pevné látky, která se převede do 50 ml ethylacetátu. Získaný roztok se dvakrát promyje 25 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání

1,04 g (16/2)-16-deoxo-l 6-fluor-l4-0-[4~(halomethyl)fenylacetyl]pristÍnamycinu II_B (směs chlorovaného a hromovaného derivátu) ve formě žluté, pevné látky.

4-(Brommethyl)fenylacetyIchloríd se může připravit podle postupu popsaného v patentové přihlášce EP 274 999.

Příklad 25

Methansulfonát (1672)-16-deoxo-l 6-fluor-14-0-[(2-imídazol-l-ylethoxy)acetyI]prístinamyci25 nu 1I_B

0,26 ml 1,09 N ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se pri 20 °C přidá k 0,19 g (1672)-16-deoxo-l 6-fluor-l4-O-[(2-Ímidazol-l-ylethoxy)acetyl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 8 ml ethanolu. Po 10 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání olejovitého zbytku, který se míchá v 5 ml diethyletheru. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Takto získaná pevná látka se míchá v 5 ml diethyletheru a potom se filtruje, promyje se diethyletherem a suší se za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,189 g methansulfonátu (16R)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[(2-imidazol-1 -ylethoxy)acety 1]pristinamycinu II_B ve formě béžového prášku o teplotě tání 115 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,95 (mt: 6H); 1,12 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,50 až 2,25 (mt: 7H); 1,86 (s: 3H); 2,79 (mt: IH); 2,83 (s: 3H); 3,02 (mt: 1H); 3,26 (mt: IH); 3,58 (mt: 1H); 3,72 (mt: IH); 3,80 až 3,90 (mt: 2H); 4,00 až 4,15 (mt: 3H); 4,34 (mt: 1H); 4,50 až 4,60 (mt: 2H); 4,80 až 4,90 (mt: 2H); 4,90 až 5,00 (mt: IH); 4,94 (široký d, J = 10 Hz: IH); 5,75 až 5,95 (mt: 2H); 6,06 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,12 (d, J = 16 Hz: IH); 6,65 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,95 (mt: IH); 7,30 (široký s: IH); 7,36 (široký s: IH); 8,12 (s: IH); 9,18 (široký s: IH); 14,73 (široký nerozlišený komplex: IH).

(16/2)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4~0-[(2-Ímidazol-l-ylethoxy)acetyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

0,41 g imidazolu a několik krystalů jodidu sodného se při 20 °C přidá k 1,3 g (16/2)-16-deoxo16-fluor-14-0-[2-chlorethoxyacetyl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 6,5 ml dimethylsulfoxidu. Po 4 hodinách míchání při 60 °C se přidá 0,3 g jodidu sodného. Po dalších 4 hodinách míchá50 ní při 60 °C, po 72 hodinách při 85 °C a potom po 60 hodinách při 20 °C se reakční směs nalije do směsi 35 ml vody a ledu a potom se přidá 0,17 g hydrogenuhličitanu sodného. Po filtraci a promytí pevné látky vodou a potom sušení vzduchem se získá olejovitý zbytek, který se zředí 30 ml dichlormethanu. Po odpaření za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 1,23 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu 20-40 Á Amicon® [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (88/6/6 objemově)]. Takto se získá 0,64 g (167?)— 16-de-29CZ 301048 B6 oxo-16-fluor^l4-()-[(2-imidazol- l ylethoxy)acetyl]pristinamycinu II_B ve formě světle žluté pevné látky.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,89 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,76 (mt: 1H); 2,99 (dt, J = 17 a 6,5 Hz; 1H); 3,24 (mt: 1H); 3,51 (mt: 1H); 3,75 až 3,90 (mt: 3H); 4,03 (limitovaný AB: 211); 4,07 (mt: IH); 4,17 (t, J = 5 Hz: 2H); 4,55 (mt: IH); 4,75 až4,85 (mt: 2H);

s in rl.ikUt 1..- = /12 Iiv IU\. < ή /a i - n u₇. iuy 5 70

-Uf- . .... 111/, τ J 7 11/., 111/, v V

Ln, c en n4 < 111/, 11110 (mt: IH); 5,87 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,31 (mt: IH); 6,56 (dd, J - 16 a 5 Hz: IH); 7,01 (s: IH); 7,08 (s: IH); 7,59 (s: IH); 8,12 (s: IH).

(167?)—16-Deoxo-l 6-fluor-14-0-[2-chlorethoxyacetyl]pristinamycin IÍ_B se může připravit následujícím způsobem:

3,1 g N,N^F-dicyklohexylkarbodiimidu, 0,61 g 4-dimethylaminopyridinu a 2,08 g of 2-chlorethoxyoctové kyseliny rozpuštěné v 20 ml dichlormethanu se při 20 °C přidá k 5,32 g (167?)—16— deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 130 ml dichlormethanu. Po 1 hodině míchání pří 20 °C se reakční směs filtruje a zbytek se potom propláchne dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku za získáni oranžové pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie na silikagelu 20-40 Á Amicon® [mobilní fáze: dichlormethan/ethylacetát (50/50 objemově)]. Získá se 4,68 g (167?)—16— deoxo~16-fluor-14-0“[2-chlorethoxyacetyl]pristinamycinu 1I_B ve formě bílého prášku.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 25 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 až 2,05 (mt: 5H); 1,90 (s: 3H); 2,15 (mt: 1H); 2,26 (mt: IH);

2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,24 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,67 (t, J = 6 Hz: 2H); 3,80 až 3,90 (mt: IH); 3,83 (t, J - 6 Hz: 2H); 4,05 (mt: IH); 4,14 (limitovaný AB, J = 13 Hz: 2H); 4,52 (t, IH); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,31 (široký d, J = 9 Hz: IH); 5,78 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2Hz:

IH); 5,85 až 5,95 (mt: 2H); 6,19 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: lH);8,12(s: IH).

2-Chlorethoxyacetic acid se může připravit podle postup.u popsaného v E. J. Corey a Christopher J. Helal, Tetrahedron Letters, díl 37, č. 28, strany 4 837-4 840, 1996,

Příklad 26 (l6Á)-14-0-{3,3-Dimethyl-3-[4,6-dimethyl-2-(4-morfolin-4-ylbutyryloxy)fenyl]propionyl}-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycin II_B

0,48 ml morfolinu se při 20 °C a v atmosféře argonu přidá k 1,6 g (167?)-14-0-{3-[2-(4-brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropionyl}-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_Brozpuštěného v 8 ml dimethylsulfoxidu. Po 30 minutách míchání při 60 °C se reakční směs nalije do 300 ml směsi vody a ledu. Sraženina se izoluje filtrací, dvakrát se promyje 20 ml destilované vody a potom se rozpustí ve 150 ml dichlormethanu. Získaný roztok se promyje třikrát 20 ml destilované vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,7 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (94/6 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v diisopropyletheru, filtruje se a suší (2,7 kPa) při 20 °C za získání 0,52 g (16A)-14-O50 {3,3-dimethyI-3-[4,6-dimethy 1-2-(4-morfol ín^4-ylbutyryloxy )fenyl] propionyl }-16-deoxo16-fluorpristinamycinu II₀ ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 88 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,40 až 1,60 (mt: IH); 1,56 (s: 3H); 1,58 (s: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 7H); 1,80 (s: 3H); 2,14 (mt: IH); 2,25 (s: 3H); 2,40 až 2,50 (mt: 6H); 2,54 (s: 3H); 2,63 (t,

-40V Z. juniio do

J = 7,5 Hz: 2H); 2,70 až2,80 (mt: IH); 2,75 (d, J = 15 Hz: IH); 2,85 (d, J = 15 Hz: IH); 2,91 (mt:

IH); 3,15 (mt: IH); 3,45 (mt: IH); 3,73 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,86 (mt: IH); 4,01 (mt: IH); 4,53 (mt:

IH); 4,70 až 4,95 (mt: IH); 4,77 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,80 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,11 (d,

J - 9 Hz: IH); 5,66 (mt: IH); 5,71 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,93 (mt: IH); 6,12 (d, ₅ J= 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 6,61 (d, J= 1,5 Hz: IH); 6,81 (široký s: IH); 8,12 (s: IH).

(16/2)-14-0-{3-[2-{4-Brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethyl-propionyl} -16-deoxo-ió-řiuorprisiinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

1,2 g N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu, 2,06 g (16R)~ 16-deoxo- 16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) a 0,07 g 4-dimethylaminopyridinu se při 20 °C v atmosféře argonu přidá k 2,7 g 3-[2-(4-brombutyryloxy-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropionové kyseliny rozpuštěné v 150 ml dichlormethanu. Po 18 hodinách míchání se reakční směs filtruje za odstranění nerozpustných látek. Filtrát se promyje čtyřikrát 25 ml destilované vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 4,6 g zbytku, který se čistí pomocí dvou po sobě následujících velmi rychlých chromatografií (mobilní fáze: dichlormethan/methanol, 96/4 a potom 97/3 objemově). Získá se 1,6 g (16/2)~14-0-{3-[2-(4-brombutyryloxy)4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethyIpropionyl}20 16-deoxo-16-fluorpristinamycinu IIb ve formě krémově zbarvené pevné látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCh, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,45 až 2,05 (mt: 12H); 1,79 (s: 3H); 2,13 (mt: IH); 2,24 (s: 3H); 2,29 (mt: 2H); 2,54 (s: 3H); 2,70 až 2,90 (mt: 5H); 2,91 (mt: IH); 3,15 (mt: IH); 3,45 (mt: IH);

3,56 (t, J - 6,5 Hz: 2H); 3,86 (mt: 1H); 4,01 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,75 až 4,95 (mt: IH); 4,77 (dd, J = 10 a 2 Hz; IH); 4,80 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (d, J = 9 Hz: IH); 5,60 až 5,75 (mt: 2H); 5,81 (dd, J - 16 a 2 Hz: IH); 5,92 (mt: IH); 6,13 (d, J = 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,59 (d, J = 1,5 Hz: IH); 6,82 (d, J = 1,5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

3-[2-(4-Brombutyryloxy)-4,6-<limethylfenyl]-3,3-dimethylpropionová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

Roztok 1 g manganistanu draselného ve směsi s 46 ml destilované vody a 30 ml acetonu se přikape při 20 °C k 2,3 g 3-[244~brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dÍmethylpropanalu rozpuštěného v 200 ml acetonu. Po 24 hodinách míchání se k reakční směsi přidá 100 ml destilované vody, okyselí se na pH 1 až 2 pomocí přidání IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom se extrahuje pětkrát 100 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). 2,7 g 3—[2—(4— brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropÍonové kyseliny ve formě bezbarvého to oleje.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCh, 8 v ppm); (2 konforméry v poměru 80-20): 1,58 a 1,59 (2 s: 6H celkem); 2,23 a 2,24 (2 s; 3H celkem); 2,29 (mt: 2H); 2,54 a 2,55 (2 s: 3H celkem); 2,78 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,84 a 2,87 (2 s: 2H celkem); 3,55 (t, J = 6,5 Hz: 2H); 6,57 a 6,59 (2 široký s:

IH celkem); 6,81 a 6,83 (2 široký s: IH celkem).

3-[2-<4-Brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropanal se může připravit následujícím způsobem:

2,5 g 3-[2-(4-brombutyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-diinethylpropan-i-olu rozpuštěného v 160 ml dichlormethanu se při 24 °C přikape k 3,1 g pyridiniumchlorochromiátu suspendovaného v 900 ml dichlormethanu. Po 2 hodinách míchání při 24 ^ŮC se reakční směs filtruje na 630 g silikagelu (velikost částic 0,063-0,2 mm) za eluce postupně čistým dichlormethanem a potom směsí dichlormethanu a ethylacetátu (80/20 objemově). Získá se 2,4 g 3-[2-<4-broin55 butyryloxy)-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropanalu ve formě bezbarvého viskózního oleje.

-31 CZ 301048 B6 'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm); (2 konforméry v poměru 80-20): 1,57 (s: 6H);

2,25 (s: 3H); 2,29 (mt: 2H); 2.55 (s: 3H); 2,78 (t, J - 7 Hz: 2H); 2,80 až 2,90 (mt: 2H); 3,56 (t, J = 6 Hz: 2H); 6,59 a 6,61 (2 široký s: IH celkem); 6,85 a 6,87 (2 široký s: IH celkem); 9,55 s (široký s: 1H).

3- [2-(4-Brombutyryloxy}-4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropan-l-ol se může připravit následujícím způsobem;

ío 2,24 ml trihydrofluoridu triethylaminu se při 0°C, v atmosféře argonu přikape k5,4g

4- brombutyrátu 2-{3-(terc-butyldÍmethylsilyloxy])-l,I-dimethylpropyl}-3,5-dimethylfenolu rozpuštěného v 60 ml dichlormethanu. Po 42 hodinách míchání při 20 °C se reakční směs filtruje na 750 g silikagelu (velikost částic 0,063-0,2 mm) za eluce postupně dichlormethanm a potom směsí dichlormethan/ethylacetát (90/10 objemově). Získá se 2,6 g 3-[2-(4-brombutyiyloxy)15 4,6-dimethylfenyl]-3,3-dimethylpropan-l-olu ve formě bezbarvého, viskózního oleje.

’H NMR spektrum (400 MHz, CDCl_3f δ v ppm); (2 konforméry v poměru 80-20): 1,50 a 1,52 (2 s: 6H celkem); 2,00 až 2,10 (mt; 2H); 2,23 a 2,24 (2 s: 3H celkem); 2,30 (mt: 2H); 2,54 (s: 3H); 2,78 (t, J = 7 Hz: 2H); 3,50 až 3,60 (mt: 4H); 6,55 a 6, 5 6 (2 široký s: IH celkem); 6,82 a 6,84 (2 široký s: 1H celkem).

4-brombutyrát 2-{3-(terc-butyldimethylsilyloxy)-l,l-dimethylpropyl}-3,5-dimethylfenolu se může připravit následujícím způsobem:

K3,22 g2-{3-(terc-butyldimethylsilyloxy)-l,l-dimethyIpropyl}-3,5-dimethylfenolu rozpuštěného v 60 ml tetrahydrofuranu se při 20 °C, pod argonem a po malých množstvích přidá k 0,32 g hydridů sodného (75% disperze v minerálním oleji) a potom po 15 minutách se přidá 1,16 ml 4-brombutyrylchloridu. Po 40 minutách míchání se přidá 100 ml etheru, 10 ml destilované vody a 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po míchání se organická fáze slije, suší se nad síranem hořečnatým a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se filtruje na 75 g silikagelu (velikost částic 0,063-0,2 mm), za eluce postupně cyklohexanem a potom směsí cyklohexan/ethylacetát (90/10 objemově). Získají se 2 g 4-brombutyrátu 2-{3-{terc-butyldimethylsÍlyloxy)-l,l-dimethylpropyl}-3,5-dimethylfenolu ve formě bezbarvého oleje.

’H NMR spektrum (300 MHz, CDC1₃, 5 v ppm); (2 konforméry v poměru 80-20): 0,00 a 0,03 (2 s: 6H celkem); 0,87 a 0,89 (2 s: 9H celkem); 1,45 až 1,55 (mt: 6H); 2,05 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,24 a 2,25 (2 s: 3H celkem); 2,31 (mt: 2H); 2,54 (s: 3H); 2,77 (t, J - 7,5 Hz: 2H); 3,40 až 3,65 (mt: 4H); 6,56 a 6,58 (2 široký s: IH celkem); 6,81 a 6,83 (2 široký s: IH celkem).

2-{3-(terc-ButyÍdimethylsilyloxy)-l,l-diínethylpropyl}-3,5-dimethylfenol se může připravit pomocí postupu popsaného v Amsberry K. L., Gerstenberger A. E., Borchardt R. T., Pharm. Res. 1991,8(4), 455-61.

Příklad 27

Methansulfonát (16/?H 6-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4~(morfolin-4-y I )butyry1 Jpri st inamyc inu II_B

6,58 ml 0,1 N ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k 0,453 g (16/ř)-l 6-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[4-(morfolin-4-yl)butyryl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 10 ml ethanolu. Po 10 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 10 ml ethyletheru. Po filtraci, promytí pevné látky 4 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,506 g methansulfo-32JU1U7U UU nátu (16R)~ 16-deoxo-16-fluor-l 4-0-[4-(morfolin-4-yl)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání okolo 122 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J - 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,60 až 2,00 (mt: 5H); 1,89 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 4H); 2,48 (t,

J = 7 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); 2,82 (s: 3H); 2,88 (mt: 2H); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,13 (mt: 2H); 3,23 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,45 až 3,60 (mt: 3H); 3,82 (mt: IH); 3,95 až 4,20 (mt: 5H); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3,5 Hz: IH); 5,11 (dekaplovaný dublet, Jhf ~ 48 Hz: i H); 5,28 (a, J = Í0 Hz: IH); 5,75 až 5,85 (mí: 2H); 5,84 (du, J - 17 a 2 Hz:

ío IH); 6,09 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,53 (dd, J - 17 a 5 Hz: IH); 8,11 (s: IH), (167?)-16-Deoxo-16-fluor-l4-0-[4-(morfolin-4-yl)butyryl]pristinamycÍn II_B se může připravit následujícím způsobem:

0,512 g hydrochloridu 4-(morfolin-4-yl)butanové kyseliny a 0,343 ml triethylaminu rozpuštěného v 35 ml dichlormethanu, 0,503 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,03 g 4-dimethylaminopyridinu se při 20 °C přidá k 1,3 g (167?)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 35 ml dichlormethanu. Po 16 hodinách míchání pri 20 °C se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se potom převede do 10 ml dichlormethanu a potom se filtruje. Filtrát se potom zředí 40 ml dichlormethanu, promyje se 50 ml vody a potom se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1 g žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (98/1/1 a potom 96/2/2 a potom 94/3/3 objemově)]. Takto se získá 0,584 g bílé, pevné látky, která se převede do 20 ml dichlormethanu. Získaný roztok se promyje 20 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) a po míchání v pentanu, filtraci a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,524 g (16/ř)-16deoxo-16-fluor-14-0-[4-(moďolin-4-yI)butyryl]pristinamycinu II_B, ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 100 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,60 až 2,05 (mt: 7H); 1,89 (s: 3H); 2,16 (mt: IH); 2,23 (mt: IH); 2,35 (mt: 4H); 2,43 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,24 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,71 (mt: 4H); 3,85 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,54 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz:

1H); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,11 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz:

IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,76 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 5,95 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

Hydrochlorid 4~(morfolin-4-yl)butanové kyseliny se může připravit podle postupu popsaného v Raj K. Razdan, Barbara Zítko Terris, Hany G, Pars, J. Med. Chem. 1976,19 (4), 454 - 461.

Příklad 28 (16/?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-{4-imidazol-l-ylbutyryI)pristinamycin II_B

150 mg imidazolu se přidá k 600 mg (16/ř)—14-0-(4-brombutyryl)-l 6-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu 1I_B rozpuštěného v 2,5 ml dimethylformamidu. Po 4 hodinách míchání při 60 °C se přidá dalších 0,5 g imidazolu a míchání pokračuje 2 hodiny pri 65 ^ŮC. Směs se odpaří za sníže50 ného tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 20 ml destilované vody a 25 ml dichlormethanu. Organická fáze se slije a potom se promyje dvakrát 120 ml destilované vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,13 g pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (98-2 objemově a potom 95-5 objemově)]. Získá se 325 mg produktu, který se míchá v diethyletheru, filtruje se a potom se suší při 20 °C (90 Pa)

-33CZ 5U1U48 B6 za získání 248 mg (167?)-l6-deoxo-16-fluor-14-O-(4-imidazoi-l-ylbutyryl)pristinamycinu

II_B, ve formě béžové, pevné látky o teplotě tání 125 °C.

io

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,60 až 2,05 (mt: 5H); 1,90 (s: 3H); 2,00 až 2,35 (mt: 2H); 2,08 (mt: 2H); 2,26 (mt: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6,5 Hz: IH); 3,24 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,94 (mt: IH); 4,01 (t, J = 7 Hz: 2H); 4,06 (mt: IH); 4,54 (mt: ÍH); 4,79 (dd, J = 10 a2 Hz: 1H): 4.82 (dd_; .1 = 9 a 3 Hz: IH); 5,1! (dekaplovaný dublet, J_Hř = IS Hz: ÍH); 5,28 (d, J - 9 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,78 (mt: IH); 5,84 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,09 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,53 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,91 (s: IH); 7,07 (s: IH); 7,44 (s: IH); 8,12 (s: IH).

(167?)-14-O-(4-Brombutyryl)-l 6-deoxo-16-fluorpristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

2,64 ml triethylaminu a potom 2,3 ml chloridu 4-brombutanové kyseliny se přidá k 5 g (167?)16-deoxo- 16-fluorprístinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 150 ml dichlormethanu. Po 18 hodinách míchání při 25 °C se přidá dalších 1,32 ml ethylaminu a 1,15 ml chloridu 4-brombutanové kyseliny, Reakční směs se míchá 2 hodiny při

25 °C a potom se dvakrát promyje 100 ml destilované vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 8,19 g hnědého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: díchlormethanmethanol (97-3 objemově)]. Získá se 3,4 g produktu, který se míchá v di isopropy letheru, filtruje se, suší se a potom se znovu čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlor25 methan-methanol (98-2 objemově)]. Po míchání v diisopropy letheru, filtraci a sušení při 20 °C (90 Pa) se získá 1,32 g (167?)- 14-0-( 4-brombutyryl)-l 6-deoxo- 16-fluorpristinamycinu ll_B ve formě bílé, pevné látky, která se použije tak, jakje.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,89 (s: 3H); 2,10 až 2,35 (mt: 2H); 2,17 (mt: 2H); 2,49 (mt: 2H); 2,77 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,24 (mt: IH); 3,45 až 3,55 (mt: IH); 3,47 (t, J = 6,5 Hz: 2H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,54 (mt: 1H); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,82 (dd, J - 9 a 3 Hz: IH); 5,13 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,31 (d, J = 9 Hz: IH);

5,75 až 5,90 (mt: ÍH); 5,77 (mt: IH); 5,82 (dd, J= 16 a 2 Hz: IH); 5,93 (mt: IH); 6,20 (d,

J= 15 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

Příklad 29 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluor-14-0-{4-[4-(pynOlidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-yl]butyryljpristinamycin II_B

590 mg l-(pyrrolidinokarbonylmethyl)piperazinu se přidá k 680 mg (167?)-14-O-(4-brombutyryl}-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkla45 du 28) rozpuštěného v 3 ml dimethylformamidu. Po 4 hodinách míchání při 60 °C se směs odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 40 ml destilované vody a 20 ml dichlormethanu. Po přidání chloridu sodného se vodná fáze po usazení oddělí a extrahuje se dvakrát 20 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání I g hnědé, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: díchlormethan-methanol (95/5 objemově)]. Získá se 650 mg produktu, který se míchá jednu hodinu v diethyletheru, filtruje se a potom se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 413 mg (167?)-16-deoxo-16-fluor~14_O-{4-[4(pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-yl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě bělavé, pevné látky o teplotě tání 128 °C.

-34υυιυιυ uu ‘HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J ^=6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,60 až 2,05 (mt: 1 IH); 1,88 (s: 3H); 2,10 až 2,35 (mt: 2H); 2,32 (t,

J = 7,5 Hz: 2H); 2,40 (nerozlišený komplex: 2H); 2,50 až 2,70 (nerozlišený komplex: 8H); 2,75 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,12 (s: 2H); 3,24 (mt: IH); 3,40 až 3,55 (mt: 5H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: ÍH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,09 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,29 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH);

5,75 (mt: IH); 5,83 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 6,05 (mt: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 17 a 5Hz; IH); 8,12 (s: IH).

to

Příklad 30

Methansulfonát (16R)-16-Deoxo-16-fluor-14-0-[5-(morfol in-4-yl)pentanoyl]pristinamyci nu IIb ml 0,1 N ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k0,79g (16R)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[5-{morfolin-4-yl)pentanoyl]pristinamycinu Il_n rozpuštěného v 15 ml ethanolu. Po 20 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 10 ml etheru. Po filtraci, promytí pevné látky 5 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,89 g methansulfonátu (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[5-(morfolin-4-yl)pentanoyl]pristinamycÍnu II_B ve formě bělavé, pevné látky o teplotě tání 120 °C (za rozkladu).

‘HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,85 (d, J = 6,5Hz: 3H); 0,94 (d,

J - 6,5 Hz: 3H); 1,03 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,45 až 1,70 (mt: 5H); 1,70 až 2,25 (mt: 6H); 1,77 (s: 3H); 2,32 (s: 3H); 2,39 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); 2,95 až 3,50 (mt: 8H); 3,50 až 3,70 (mt: 4H); 3,80 (mt: IH); 3,90 až 4,05 (mt: 3H); 4,70 až 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,42 (d, J - 9,5 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); 5,75 (mt: 1H); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16a4 Hz: IH); 8,15 (mt: IH); 8,52 (s: IH); 9,46 (širo30 ký nerozlišený komplex: IH).

(l6/?)-16-Deoxo-16-fluor-14_0-[5-(morfolin-4-yl)pentanoyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

0,46 g jodidu sodného a 0,54 ml morfolinu se při 20 °C přidá k 2 g (1672)-16-deoxo-l 6-řluor14-0-(5-chlorpentanoyl)pristinamycinu II_B rozpuštěného v 30 ml tetrahydrofuranu. Po 27 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se přidá dalších 0,54 ml morfolinu. Po dalších 16 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se přidá l ml dimethylformamidu a 0,54 ml morfolinu. Po dalších 24 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se reakční směs zředí

20 ml dichlormethanu a promyje se 50 ml vody. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, promyjí se třikrát 150 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 2 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (92/4/4 objemově)]. Po míchání v pentanu, filtrací sušení (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,81 g (16/?)-l6-deoxo-16-fluor-14-O-[5-(morfolin^-yl)pentanoyl]pristinamycinu II_B ve formě béžové, pevné látky.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCl₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,-5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,52 (mt: 2H); 1,55 až 2,05 (mt: 7H); 1,89 (s: 3H); 2,10 až 2,35 (mt: 2H); 2,32 (mt: 4H); 2,42 (nerozlišený komplex: 4H); 2,76 (mt: 1H); 2,99 (dt, J - 17 a 6 Hz: IH); 3,24 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,72 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,86 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,53 (mt: 1H); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,11 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: 2H); 5,82 (dd, J = 16,5 a 2 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16,5 a5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

-35CZ 301048 B6 (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-14-O-(5-chlorpentanoyl)pristinamycin 1I_B se může připravit následujícím způsobem:

2,1 ml triethylaminu, 2 ml 5-cblorpentanoylchloridu a 0,18 g 4-dimethylaminopyridinu se při

28 °C přidá k4g (16/?)-16-deoxo-l6-f1uorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Po 2 hodinách míchání při 28 °C se reakční směs nalije do 100 ml vody. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje !00m! dichlormethanu. Organické fáze se spojí, promyjí se dvakrát 200 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získá10 ní 6g hnědé, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (98/2 objemově) ]. Po míchání v pentanu, filtrací a sušení (2,7 kPa) při 20 °C se získá 3,77 g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-(5-chlorpentanoyl)pristinamycÍnu II_B ve formě bílé, pevné látky.

IS 'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 9H); 1,89 (s: 3H); 2,15(mt: IH); 2,24(mt: IH); 2,33 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,24 (mt: IH); 3,49 (mt: IH); 3,55 (t, J = 7 Hz: 2H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78 (dd, J= 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,11 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 až

5,85 (mt: IH); 5,76 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz:

IH); 6,51 (dd, J = 17 a5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 31

Methansulfonát (16/0-16-deoxo-16-fluor-14~0-[5-(imidazol-l-yI)pentanoyl]pristÍnamycinu

IIb

10,2 ml 0,095N ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k0,66g 30 (16/?)-16-deoxo-t6-fluor- 14-0-[5-(imidazol-l-yl)pentanoyl]pristinamycinu Il_B rozpuštěného v 10 ml ethanolu. Po 10 minutách se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá ve 20 ml etheru. Po filtraci, promytí pevné látky 5 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 0,712 g (16/?)-I6-deoxo-16-fluor-14-0[5-(imidazol-l-yl)pentanoyl]pristinamycinu II_B ve formě žlutého oleje tajícího při teplotě 35 126 °C (za rozkladu).

'HNMRspektrum (400 MHz, (CO₃)₂SO dó, δ v ppm): 0,85 (d, J-6,5 Hz: 3H); 0,94 (d,J =

6,5 Hz: 3H); 1,03 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,40 až 1,60 (mt: 3H); 1,70 až 2,30 (mt: 8H); 1,76 (s: 3H);

2,32 (s: 3H); 2,37 (t, J - 7 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); 3,10 až 3,40 (mt: 2H); 3,58 (mt: IH); 3,67 w (mt: IH); 3,80 (mt: IH); 3,97 (mt: IH); 4,21 (t, J = 7 Hz: 2H); 4,65 až 4,80 (mt: 2H); 5,08 (dekaplovaný dublet, Jhf 48Hz: IH); 5,40 (d, J = 9 Hz: IH); 5,61 (mt: IH); 5,73 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 16 Hz: 4 Hz: IH); 7,72 (široký s:

IH); 7,80 (široký s: IH); 8,15 (t, J - 6 Hz: IH); 8,52 (s: IH); 9,14 (široký s: IH).

(16/?)-16-Deoxo-l 6-fluor-14-O-[5~(imidazo 1-1 -yl)pentanoyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

0,29 g imidazolu a 0,32 g jodidu sodného se při 20 °C přidá k 1,4 g (16/ř)-16-deoxo-16-fluor14—0-(5^chlorpentanoyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příklaso du 30) rozpuštěného v 20 ml tetrahydrofuranu. Po 20 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se přidá 1 ml dimethylformamidu a 0,29 g imidazolu. Po dalších 8,5 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se přidá 0,29 g imidazolu. Po dalších 15,5 hodinách míchání za varu pod zpětným chladičem se reakční směs zředí 50 ml dichlormethanu a potom se promyje

100 ml vody. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje 50 ml dichlormethanu. Organické 55 fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého

- ΊήCL JVIUW DO tlaku (2,7 kPa) za získání 1,6 g oranžové pevné látky, která se čistí pomocí dvou po sobě následujících chromatografií [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Po míchání v ethyletheru, filtraci a sušení (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,66 g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-140-[5-(itnidazol-l-yl)pentanoyl]pristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz;

3H); 1,11 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,60 až 2,05 (mt: 9H); 1,90 (s: 3H); 2,10až2,25 (mt: 2H); 2,31 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 3,00 (mt: IH); 3,25 (dt, J = 17 a 5,5 Hz: IH); 3,51 (mt: IH); 3,84 (mt: IH); 3,94 (t, J = 7Hz: 2H); 4,06 (mt: ÍH); 4,56 (mt: IH); 4,75 až 4,90 (mt: 2H); 5,06 io (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,24 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: 2H); 5,90 (dd,

J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,17 (d, J = 15 Hz: IH); 6,52 (mt: IH); 6,57 (dd, J = 16 a 5 Hz: 1H); 6,89 (s: IH); 7,06 (s: IH); 7,45 (s: IH); 8,10 (s: IH).

Příklad 32 (16R)~ 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-{5-[4-(pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-yl]pentanoyl}pristinamycin II_B

1,1 g (pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazÍnu a 0,42 g jodidu sodného se při 20 °C přidá k 1,8 g (l6/?)-l 6-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-(5-chlorpentanoyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 30) rozpuštěného v 20 ml dimethylformamidu. Po 27,5 hodinách míchání při 50 °C se přidá 0,55 g (pynOlidin-l-ylkarbonyltnethyl)piperazinu, Po dalších

27,5 hodinách při 54 °C se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se zředí 100 ml dichlormethanu. Získaný roztok se promyje čtyřikrát 300 ml vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,61 g žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Po míchání v pentanu, filtraci a sušení (2,7 kPa) se získá 0,726 g (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-{5-[4-(pyrrolidin-l30 ylkarbonylmethyl)piperazin-l-yl]pentanoyl}pristinamycinu II_B ve formě béžové, pevné látky o teplotě tání 100 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCl·,, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,51 (mt: 2H); 1,55 až 1,80 (mt: 3H); 1,75 až 2,05 (mt: 8H); 1,88 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,23 (mt: IH); 2,25 až 2,40 (mt: 4H); 2,50 (nerozlišený komplex: 4H);

2,58 (nerozlišený komplex: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,11 (s: 2H); 3,24 (mt: IH); 3,45 až 3,55 (mt: 5H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a3 Hz: IH); 5,09 (dekaplovanýdublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,83 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 6,04 (mt: IH);

6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,53 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

Příklad 33 (16R)~ 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[(/?/?_ř5'5)-/^,ra7w-24morfoÍinomethyl)-l-cyklopropankarbonyl]pristinamycin II_B, směs dvou diastereoizomerů v poměru 50/50.

1,1 g (/?/?,S5)-řrarts-2-(rnorfolinomethyl)-l-cyklopropankarboxylové kyseliny, 1,24 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,73 g 4-dimethylaminopyridinu se při 20 °C pod argonem přidá k2,1 g (16/?)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 80 ml dichlormethanu. Po 16 hodinách míchání se reakční směs filtruje za odstranění nerozpustné látky a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 4,2 g zbytku, který se Čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (98/2 až 95/5 objemově)]. Získá se pevná látka, která se míchá v diisopropy letheru, filtruje se a suší se (2,7 kPa) při 20 °C za získání 1,5 g (!6/?)-tó-deoxO“l6-37CZ 301048 B6 fluor-14-0-[(/2/?,S.S)-/rans-2~(morfolinomethy I)-1-cyklopropankarbonyl] pristinamyc inu II₀ ve formě směsi dvou diastereoizomerů v poměru 50/50, jako bělavého prášku.

io ^fH NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, Svppm). Zjistila se přítomnost dvou diastereoizomerů v poměru 50-50: 0,77 (mt: IH); 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J =

6,5 Hz; 3H); 1,24 (mt: IH); 1,41 (mt: IH); 1,52 (mt: IH); 1,60 až 2,05 (mt: 5H); 1,87 (s: 3H); 2,05 až 2,45 (mt: 4H); 2,50 (nerozlišený komplex: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,24 (mt:

HV Ί 40 (mt· 1 Uí 7 77 /t I = S Ur· 4UV 7 24 1 UV 4 Λή /™t- 1 UV 4 Í7 /mt· 1 UV 4 7Í nž * * */1 ' V*- * * 7» -'t ' »» >/, ytnv. 111/, -r,w γ.,ιν. t * « }, ~f -> \.. *··. * > /, ·, ' ->

4,85 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, J_Hf ~ 48 Hz: 1H); 5,30 (mt: 1H); 5,70 až 5,85 (mt: 3H); 5,96 a 6,03 (2 mt: IH celkem); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (mt: IH); 8,12 (s: IH).

(RR,SS)~trans-2-(Morío\inomethyl)-l-cyklopropankarboxylová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

10 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se při 20 °C přidá k 1,0 g ethy\-(RR,SS)-trans-2(morfolinomethyl)-l-cyklopropankarboxylátu rozpuštěného v 50 ml ethanolu. Po 2 hodinách míchání při 80 °C se ethanol odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) a zbývající vodná fáze se promyje 50 ml ethylacetátu. Vodná fáze se přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové okyselí na pH 6 a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se dvakrát převrství

50 ml toluenu a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se převede při 50 °C do ml ethanolu, nerozpustné látky se odfiltrují a filtrát se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 0,9 g (RR,SS)-trans-2-(morfo[inomethyl)-t--cyklopropankarboxylové kyseliny ve formě žlutého oleje.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCl,, δ v ppm): 0,68 (mt: IH); 1,20 (mt: IH); 1,46 (mt: IH); 1,56 (mt: IH); 2,28 (dd, J = 13 a 8 Hz: IH); 2,60 (dd, J = 13 a 5 Hz: IH); 2,66 (nerozlišený komplex: 2H); 2,77 (nerozlišený komplex: 2H); 3,78 (t, J = 5 Hz: 4H).

Ethyl-(/2/ř,SS)-/ra/n-2-(morfolinomethyl)-l-cyklopropankarboxylát se může připravit následu30 jícím způsobem:

1,74 ml morfolinu a 6,36 g tris(aceto)hydridoborátu sodného se při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k 2,82 g ethyl-(/2/2,55)-ZraM5-2-formyl-l-cyklopropankarboxylátu rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Po míchání se organická fáze slije a potom se promyje 100 ml destilované vody.

Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 1,1 g ethy l-(/2/2, SS)-zrí7/M-2-(morfolinornethyl)-l-cyklcipropankarboxylátu ve formě žlutého oleje.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCl,, δ v ppm): 0,76 (mt: IH); 1,20 až 1,35 (mt: 4H); 1,44 (mt: 1H); 1,54 (mt: IH); 2,31 (dd, J = 13 a 7 Hz: 1H); 2,36 (dd, J = 13 a 7 Hz: 1H); 2,50 (široký t, J = 5Hz: 4H); 3,73 (t, J = 5Hz: 4H); 4,13 (mt: 2H).

Příklad 34 (16/2)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[6-(imidazol-1 -yl)hexanoyl]pristinamycin II_B

0,34 g imidazolu a několik krystalů jodidu sodného se při 20 °C přidá k 1,42 g(16/2)-16-deoxo16-fluor-l 4-0-(6-bromhexanoyl)pristinamycinu 1I_R rozpuštěného v 7 ml dimethylsulfoxidu.

Po 2 hodinách míchání při 53 ^ŮC a potom po 16 hodinách při 20 °C se reakční směs nalije do 35 ml vody a filtruje se na filtru ze sintrovaného skla. Nerozpustná látka se promyje vodou a rozpustí se v 70 ml ethylacetátu. Vznikající roztok se extrahuje 25 ml 0,1 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se slije, extrahuje se 10 ml ethylacetátu a potom se neutralizuje 0,5 ml 5N vodního roztoku hydroxidu sodného. Vodná fáze se potom extrahuje dvakrát 25 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpa-38h/uivrw ří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1 g světle žluté, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie (mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (88/6/6 objemově)]. Získá se 0,59 g bílé, pevné látky, která se převede do 5 ml dichlormethanu.

Organická fáze se filtruje přes Celíte*. Celíte® se promyje dichlormethanem. Filtrát se potom odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 0,58 g (16/?)-16-deoxo-l 6~ fluor-14-0-[6-(imidazol-l-yl)hexanoyl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 90 °C (za rozkladu).

’H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, 5 v ppm); 0,95 (d, J - 6,5 Hz: 3H), 0,99 (d, J = 6,5 Hz: io 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,27 (mt: 2H); 1,60 až 2,10 (mt: 5H); 1,63 (mt: 2H); 1,78 (mt: 2H);

1,88 (s: 3H); 2,10 až 2,25 (mt: 2H); 2,27 (t, J = 7 Hz:-2H); 2,75 (mt: IH); 3,00 (mt: IH); 3,25 (dt, J - 17 a 5 Hz: IH); 3,51 (mt: IH); 3,82 (mt: IH); 3,94 (t, J = 7 Hz: 2H); 4,08 (mt: IH); 4,58 (mt: IH); 4,75 až 4,85 (mt: 2H); 5,07 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,20 (d, J = 9 Hz: IH);

5,75 až 5,85 (mt: 2H); 5,90 (dd, J - 16 a 1,5 Hz: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,56 (dd, J = 16 a5 Hz: lH);6,77(mt: lH);6,90(s: IH); 7,10(s: IH); 7,45 (s; IH); 8,12 (s: IH).

(16/?)-16-Deoxo-16-fluor-14-O-(6-bromhexanoyl)pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

1,7 ml triethylaminu a 1,8 ml 6-bromhexanoylchloridu se při 28 °C přidá k 5,32 g (16/?)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu l) rozpuštěného v 150 ml dichlormethanu. Po 21,5 hodinách při 23 °C se přidá 0,43 ml triethylaminu a 0,45 ml 6-bromhexanoylchloridu. Po dalších 21 hodinách míchání při 28 °C se reakční směs nalije do 50 ml vody. Organická fáze se slije, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 8,05 g hnědé, pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (96/2/2 objemově). Získá se 5,6 g (l6/?)-16-deoxo-Í6-fluor-l4-0-4 6-bromhexanoyl)pristinamycinu II_B ve formě světle žluté pevné látky.

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,48 (mt: 2H); 1,60 až 2,05 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,24 (mt: IH); 2,31 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,24 (mt: 1H); 3,41 (t, J = 7 Hz: 2H); 3,49 (mt: IH); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: 1H); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,11 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: 1H); 5,31 (d, J = 9 Hz;

IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: IH); 5,95 (mt: IH); 6,19 (d, J=I6Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a4 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 35 (16/ř)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[6-(4-methylpiperazin-l-yl)hexanoyl]pristinamycin II_B

0,67 ml N-methylpiperazinu se při 20 °C přidá k 1,42 g (16/?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-(6bromhexanoyl)pristinamycmu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 34) rozpuš45 těného v 7 ml dimethylsulfoxidu. Po 0,5 hodinách míchání při 60 °C se reakční směs nalije do 35 ml ledově studené vody a extrahuje se 50 ml dichlormethanu. Organická fáze se promyje 25 ml nasyceného, vodného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,2 g oranžové, pevné látky, která se rozpustí v 30 ml ethylacetátu. Získaný roztok se postupně extrahuje 20 ml 0,1 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a 10 ml vody. Vodné fáze se spojí a neutralizují se 0,4 ml 5N vodného roztoku hydroxidu sodného. Vodná fáze se extrahuje dvakrát 25 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,94 g žluté, pevné látky, která se Čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (90/10 objemově)]. Získá se 0,27 g bílé, pevné látky, která se převede do 5 ml dichlormethanu. Organická fáze se filtruje přes Celíte®. Celíte® se pro-39cz 301048 B6 myje dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C za získání 0,26 g (16/?)-l 6-deoxo-i 6-fluor-I4-0-[6-(4-methylpiperazin-l-yl)hexanoyl]pristinamycinu II_B, ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 95 °C (za rozkladu).

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCh, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d,J = 6,5 Hz: 3H); 1,33 (mt: 2H); 1,51 (mt: 2H); 1,55 až 2,05 (mt: 7H); 1,88 (s:3H); 2,10 až 2,65 (mt: 14H); 2,29 (s: 3H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: 1H); 3,24 (mt: IH); 3,48 (mt: IH); 3,86 (mt: 1H); 4,06 (mt: ! H); 4,53 (mt: ! H); 4,78 (dd, J = ! 0 a 2 Hz: 1H); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,10 (dekaplovaný dublet, J_Hf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH);

5,75 (mt: 1H); 5,82 (dd, J = 17 a 2 Hz: 1H); 5,98 (mt: 1H); 6,19 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 36 (16/?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-14-0- {6-[4-(pyrrol idin-1-y lkarbony lmethyl )piperazin-l-yl ]hexanoyl} prístinamycin II_B

1,18 g (pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazinu se při 20 °C přidá k 1,35 g (167?)-16-deoxo20 16-fluor-l 4-0-(6-bromhexanoyl)pristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 34) rozpuštěného v 7 ml dimethyIsulfoxidu. Po 3 hodinách míchání při 60 ⁵C se reakční směs nalije do 35 ml ledově studené vody a potom se extrahuje dvakrát 25 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem horečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,53 g gumovitého zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografíe [mobilní fáze: dichlormethan/ methanol (90/10 objemově)]. Získá se 0,96 g lepivé gumy, která se převede do 10 ml dichlormethanu. Roztok se filtruje přes Celíte®. Celíte® se propláchne dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání gumy, která se postupně míchá v diethyletheru a pentanu. Po filtraci a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 0,78 g of (167?)-16-deoxo-l 6-fluor-!4-0-{6-[4-(pyrrolidin30 l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-yl]hexanoyl}pristinamycinu II_B ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 80 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,32 (mt: 2H); 1,50 (mt: 2H); 1,60 až 2,05 (mt: 1 IH); 1,88 (s: 3H);

2,10 až 2,40 (mt: 6H); 2,50 (nerozlišený komplex: 4H); 2,59 (nerozlišený komplex: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,12 (s: 2H); 3,24 (mt: IH); 3,40 až 3,55 (mt: 5H); 3,86 (mt: IH); 4,05 (mt: lH);4,52(mt: 1H); 4,78 (dd, J - i0a2 Hz: lH); 4,82 (dd, J = 9a3 Hz: IH); 5,10 (dekaplovaný dublet, J_hf = 48 Hz: 1H); 5,30 (d, J = 9 Hz: 1H); 5,75 až 5,90 (mt: 1H);5,75 (mt: 1H); 5,82 (dd, J = 17 a2 Hz: IH); 6,02 (mt: IH); 6,19 (d, J - 16Hz: IH); 6,52 (dd, J - 17 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 37

Methansulfonát (16/?)— 16-deoxo-16-fluor-14-O-[7-(Ímidazol-l -y l)heptanoy l]pristinamyeínu

Πβ

2,7 ml IN ethanolického roztoku methansulfonové kyseliny se při 20 °C přidá k 1,96 g (16/?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[7-(imidazol-l-yl)heptanoyl]pristinamycinu II_B rozpuštěného v 10 ml ethanolu. Po 10 minutách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se míchá v 10 ml etheru. Po filtraci, promytí pevné látky 5 ml diethyletheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 2,13 g methansulfonátu (167?)-16deoxo-l6-fluor-l4-0-(7-(imidazol-l~yl)heptanoyl]pristinamycinu II_B ve formě krémově zbarvené pevné látky o teplotě tání 110 °C (za rozkladu).

-40Vi. ^UIVTO UV 'HNMR spektrum (400 MHz, CDCl₃, 5 v ppm): 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,98 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,09 (d, J - 6,5 Hz; 3H); 1,25 až 1,45 (mt: 4H); 1,55 až 2,05 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); 2,10 až

2,30 (mt: 2H); 2,28 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,85 (s: 3H); 3,00 (dt, J = 17 a 6 Hz: 1H);

3,24 (mt: IH); 3,51 (mt: 1H); 3,84 (mt: IH); 4,05 (mt: IH); 4,18 (t, J = 7,5 Hz; 2H); 4,49 (mt:

IH); 4,78 (dd, 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,09 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48Hz: IH); 5,28 (d,J = 9,5Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: 2H); 5,84 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 6,13 (mt: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,53 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,13 (s: IH); 7,41 (s: IH); 8,12 (s: IH); 8,92 (s: IH).

io (16R)~ 16-Deoxo-16-fluor-14-O-[7-(imidazol-1 -yl)heptanoy I]pristinamyctn II_B se může připravit následujícím způsobem:

1,49 g N,N '-dicyklohexylkarbodiimidu, 0,075 g 4-dimethylaminopyridinu, 1,68 g hydrochloridu 7-(imidazol-l-yl) heptanové kyseliny a 1 ml triethylaminu se při 23 °C přidá k 3,2 g (16/?)—16— deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Po 84 hodinách míchání při 23 °C se reakční směs filtruje a nerozpustná látka se promyje dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání olejovitého zbytku, který se rozpustí ve 100 ml ethylacetátu. Vznikající roztok se postupně promyje dvakrát 40 ml vody a 40 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a potom se extrahuje 60 ml 0, IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, okyselená vodná fáze se potom extrahuje 20 ml ethylacetátu a zalkalizuje se přidáním 6 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného na pH 8 a potom se extrahuje dvakrát 40 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 3,05 g světle žluté pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol/acetonitril (86/7/7 objemově)]. Získá se 2,58 g pevné látky, která se převede do 10 ml dichlormethanu. Tento roztok se filtruje přes Celíte®. Celíte® se promyje dichlormethanem. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 2,58 g (167?)-16deoxo-16-fluor-l 4-O-[7-(imidazol-l-yl)heptanoyI]pristÍnamycinu II_B ve formě bílé, pevné lát30 ky o teplotě tání 80 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,25 až 1,40 (mt; 4H); 1,55 až 2,05 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,27 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 2, 99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,24 (mt:

IH); 3,48 (mt: IH); 3,85 (mt: IH); 3,93 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 4,06 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,09 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,29 (d, J = 9 Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: 2H); 5,83 (dd, J = 16,5 a 2 Hz: IH); 6,17 (mt: IH); 6,19 (d, J = 15 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16,5 a 5 Hz: IH); 6,90 (s: IH); 7,06 (s: IH); 7,45 (s: IH); 8,12 (s: IH).

Hydrochlorid 7-(imidazoI-I-yl)heptanoové kyseliny se může připravit podle postupu popsaného v Kinji Iizukaakol., J. Med. Chem., díl 24, č. 10, strany 1 139 až 1 148 (1981).

Příklad 38 (16Rý-16-Deoxo-l 6-fluor-l4-0-(4-methylpiperazin-l-yl)karbonyIacetylpristinamycin IÍ_B

1,74 g 4-methylpiperazin-l-ylkarbonyloctové kyseliny, 1,44 g Ν,Ν'-dícykIohexylkarbodiimidu 50 a 0,09 g 4-dimethylaminopyridinu se při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k 2,5 g (167?)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Po 18 hodinách míchání se k reakční směsi přidá 50 ml dichlormethanu, filtruje se za odstranění nerozpustných podílů a potom se čtyřikrát promyje 50 ml destilované vody. Organická fáze se slije, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek (3,4 g) se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní

-41 cz 301048 B6 fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (97/3 a 92/8 objemově)]. Získá se bílá, pevná látka, která se míchá v diethyletheru, filtruje se a suší (2,7 kPa) za získání 1,3 g (16/?)-16-deoxo-16fluor-14-0-{4-methylpiperazin-l-yl)karbonyIacetylpristinamvcinu II_B ve formě bílé, pevné látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,70 až 2,00 (mt: 5H); 1,89 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,25 až 2,35 tmt· iHvni

UV 1 01 /At ϊ = 1 Λ η Λ U-T. 1 UV Ί Λ ¹ * . v u v hl. my, _v

UV “‘V

3,40 až3,55 (mt: 5H); 3,66 (mt: 2H); 3,87 (mt: 1H);4,O5 (mt: lH);4,53(mt: IH); 4,78 (široký d, J- 10 Hz: IH); 4,82 (dd,J = 9a3 Hz: 1H); 5,14 (dekaplovanýdublet, Jhf-48 Hz: IH); 5,34 (d, J = 9,5 Hz: 1H); 5,77 (mt: 1H); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz: 1H); 5,88 (dt, J = 9,5 a 5 Hz: 1H); 5,95 (mt: 1H); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16a4 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

4-Methylpiperazin-l-yIkarbonyloctová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

ml 0,1 N vodného roztoku hydroxidu sodného se pri 20 °C přidá k 4,5 g ethyM-methylpiperazin-l-ylkarbonylacetátu v 100 ml ethanolu. Po 24 hodinách míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získaný zbytek se převede do 50 ml destilované vody a roztok se promyje čtyřikrát 50 ml dichlormethanu. Vodná fáze se okyselí na pH 5 až 6 přidáním IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, extrahuje se dvakrát 50 ml dichlormethanu a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Třikrát se zbytek převede do 100 ml toluenu a znovu se suší za stejných podmínek. Získá se 4,6 g pastovitého zbytku, který se míchá v 50 ml ethanolu pri teplotě 60 °C. Nerozpustná látka se odfiltruje a filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 3,5 g 4-methyIpiperazin-l-ylkarbonyloctové kyseliny ve formě hygroskopické lepkavé-hmoty, která se použije tak, jak je.

'H NMR spektrum (300 MHz, (CDj^SO d6, δ v ppm): 2,21 (s: 3H); 2,29 (t, J = 5 Hz: 2H); 2,34 (t, J = 5 Hz: 2H); 3,30 až 3,50 (mt: 4H); 3,39 (s: 2H).

EthyM-methylpiperazin-1-ylkarbonylacetát se může připravit podle postupu popsaného v Morren H., Trolin S., Denayer R., Grivsky E., Bull. Soc. Chim. Belg. 1950, 59,228-232.

Příklad 39 (1 óA)-l 4-0-(4-Karboxybutyryl)-l 6-deoxo-l 6-fluorprÍstinamycin II_B

258 mg anhydridu kyseliny glutarové a 84,5 mg 4-dimethylaminopyridinu se pri 20 °C přidá k400 mg (16/0-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 2 ml pyridinu. Po 20 hodinách míchání se pyridin odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) a získaný olej se převede do 20 ml ethylacetátu. Získaný roztok se dvakrát promyje 10 ml destilované vody a potom 0,lN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se extrahuje ethylacetátem a potom se oddělí stáním. Organická fáze se promyje destilovanou vodou a potom dvakrát 2 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Orga45 nická fáze se slije, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání žluté, pevné látky, která se míchá v 20 ml diethyletheru, filtruje se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 363 mg pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (97-3 objemově)] za získání 100 mg (16/?)-14-()-(4-karboxybutyryl)-l 6-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 98 °C.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDCI₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,55 až 2,05 (mt: 7H); 1,89 (s: 3H); 2,17 (mt: IH); 2,25 (mt: IH); 2,37 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,42 (t, J - 7 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); 3,00 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,25 (mt: IH); 3,50 (mt: 1H); 3,86 (mt: IH); 4,08 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J - 10 a 1,5 Hz:

-42IH); 4,82 (dd, J = 9 a3 Hz: IH); 5,13 (dekaplovaný dublet, Jhf- 48 Hz: IH); 5,31 (d, J = 9,5 Hz:

IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,77 (mt: IH); 5,83 (dd, J - 17 a 2 Hz: IH); 5,97 (mt: IH); 6,19 (d,

J = 16Hz: IH); 6,53 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,14 (s: IH).

CC hfVXV*TV uu

Příklad 40

Hydrochlorid (16Á)-16-deoxo-16-fluor-l 4-O-[3-(4-methy lpiperazin- 1-y lkarbonyl)propionyl]pristinamycinu II_B to

3N roztok chlorovodíku v etheru se přidává k 615 mg (16Á)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[3-(4methylpiperazin-1-ylkarbony l)propiony l]pristinamycinu II_B rozpuštěného 6 ml methylisobutylketonu dokud vzniká sraženina. Sraženina se filtruje, dvakrát se promyje 2 ml methylisobutylketonu a potom třikrát 10 ml diethyletheru. Po sušení při 50 °C (90 Pa) se získá 600 mg hydro15 chloridu (16R)~ 16-deoxo-16-fluor-l 4-O-[3-(4-methy lpiperazin-1 -ylkarbony l)propionyl]pristinamycinu II_B ve formě bílého prášku o teplotě tání 160 °C.

(16/ř)-l 6-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[3-{4-methy lpiperazin-l-y lkarbonyl)propionyl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

450 mg 4-(4-methylpiperazin-l-yl)-4-oxobutanové kyseliny, lg (167?)— 16-deoxo- 16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 470 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu, 140 mg 4-dimethylaminopyridinu a potom 20 ml dichlormethanu se v dusíkové atmosféře umístí do tříhrdlé baňky. Reakční směs se míchá 48 hodin při 20 °C. Reakční směs se potom zředí 10 ml dichlormethanu a potom se nalije do 50 ml destilované vody. Reakční směs se filtruje přes zátku z vaty. Organická fáze se slije a vodná fáze se extrahuje dvakrát 5 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,66 g směsi, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethanmethanol (95-5 objemově)]. Získá se 975 mg produktu, který se míchá v 10 ml diethyletheru, slije se a potom se znovu čistí pomocí chromatografie [mobilní fáze: ethylacetát-methanol (93-7 objemově)]. Frakce se odpaří za získání pevné látky, která se převede do 10 ml diethyletheru a míchá se 30 minut. Získá se bílá, pevná látka, která se promyje diethyletherem a potom se suší při 50 °C (90 Pa) za získání 500 mg (16/ϋ)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[3-(4-methy lpiperazin-1 -ylkarbony l)propionyl]pristin35 amycinu II_B ve formě bílého prásku o teplotě tání 130 °C.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCh, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,88 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,20 až 2,45 (mt: 5H); 2,31 (s: 3H); 2,50 až 2,75 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 3,00 (mt: IH); 3,23 (mt: IH); 3,40 až 3,55 (mt: 1H); 3,50 (mt: 2H); 3,63 (mt: 2H); 3,87 (mt: IH); 4,06 (mt: 1H); 4,53 (mt: 1H); 4,78 (široký d, J = 10 Hz; IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,14 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,33 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,81 (široký d, J = 16 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16a5Hz: IH); 8,12 (s: IH).

4—(4-Methylpiperazin-1 -yl)-4-oxobutanová kysel ina se může připravit následuj ícím způsobem:

1,17 g anhydridu kyseliny jantarové a potom 1,19 ml N-methylpiperazinu se přidá do 20 ml dioxanu. Po 18 hodinách míchání při teplotě místnosti se vznikající sraženina odfiltruje a potom se postupně promyje minimálním množstvím dioxanu, dvakrát 10 ml acetonu a 10 ml diethyl50 etheru. Po sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C se získá 1,09 g 4-(4-methylpiperazin-1ylý-4-oxobutanové kyseliny ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 114 °C.

-43CZ 301048 B6

Příklad 41 (16A>—16-Deoxo-16-fluor-l 4-0-{3-[4-(pyridin-2-yl)piperazin-1 -ylkarbony l]propionyl} 5 pristinamycin IÍ_B

Podle postupu popsaného v příkladu 40 se reaguje 240 mg 4-oxo-4-[4-(pyridín-2-yI)piperazin1-yl)lhntanové kyseliny, 400 mg (! 6R)-16 -deoxo-16 flucrpristinamycinu ÍI_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 190 mg N,N'—dicyklohexylkarbodiimidu, 46 mg 4-diio methy lam inopyri dinu a potom 6 ml dichlormethanu. Po 66 hodinách míchání se a podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 40, se získá 655 mg pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (95-5 objemově)]. Izoluje se pevná látka, která se míchá 20 minut ve 4 ml diethyletheru. Získaná bílá, pevná látka se filtruje, promyje se diethyletherem a potom se suší při 50 °C (90 Pa) za získání 308 mg (16/2)-1615 deoxo-16-fluor-14-O-{ 3-[4-{pyridin-2-y l)piperazin-1 -ylkarbony l]propionyl} pristinamycinu

II_B ve formě bílého prášku o teplotě tání 140 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, 8 v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,88 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,30 (mt: IH);

2,55 až 2,80 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 3,00 (mt: IH); 3,23 (mt: IH); 3,46 (mt: IH); 3,51 (mt: 2H);

3,63 (mt: 4H); 3,75 (mt: 2H); 3,87 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,14 (dekaplovaný dublet, J_w = 48 Hz: IH); 5,34 (d, J - 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,81 (dd, J = -16 a 1,5 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,60 až 6,70 (mt: 2H); 7,52 (mt: IH);

8,12 (s: IH); 8,21 (dd, J = 5 a 1,5 Hz: IH).

4_Oxo-4-[4~(pyridin-2-yl)piperazin-l-yl)]butanová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

0,97 g anhydridu kyseliny jantarové a potom 1,5 mi 1—(2—pyridyl) piperazinů se přidá k 15 ml dioxanu. Po 4,5 hodinách míchání při 20 °C se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a získá se pevná látka, která se rekrystalizuje z 33 ml horkého acetonu. Po filtraci se pevná látka postupně promyje malým množstvím acetonu a diethyletheru a potom se suší za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 986 mg 4-oxo-4-[4~{pyridin-2-yl)piperazin-l35 yl)]butanové kyseliny ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 134 °C.

Příklad 42 (16R)-16-Deoxo-16-fluor-l 4-0-{3-[4-(pynOlidm-l-yl-karbonylmethyl)piperazin-1-ylkarbony Ijpropionyl } pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 40 se reaguje 750 mg 4-oxo-4-[4-(2-oxo-2- pyrrolidin-l ylethyl)piperazin-l-yl)]butanové kyseliny, lg (16R)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 190 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu, 60 mg 4-dimethylaminopyridinu a potom 20 ml dichlormethanu. Po 25 hodinách míchání se přidá dalších 95 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 95 mg 4-dimethylaminopyridinu a potom míchání pokračuje dalších 19 hodin. Po zpracování se získá 1,54 g pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (95/5 objemově)].

Frakce se odpaří za získání 530 mg pevné látky, která se převede do 5 ml diethyletheru. Získaná bílá, pevná látka se filtruje, promyje se diethyletherem a potom se suší při 50 °C (90 Pa) za získání 480 mg (16,8)-16—deoxo—16—fluor—14—O-{3-[4—(pyrrol ídin—1-y Ikarbony I methy Úpiperazin— l-ylkarbonyl]propionyl}pristinamycinu II_B ve formě bílého prášku o teplotě tání 132 °C (za rozkladu).

-44VZ, JUIVTO MU *H NMR spektrum (400 MHz, CDCft, δ v ppm): 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); 2,14 (mt: IH); 2,28 (mt: IH);

2,45 až 2,75 (mt: 8H); 2,76 (mt: IH); 3,00 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,14 (s: 2H); 3,25 (mt: IH);

3,40 až 3,55 (mt: 7H); 3,66 (mt: 2H); 3,87 (mt: IH); 4,05 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78 (dd, J «

10 a 1,5 Hz: IH); 4,81 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,33 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,74 (mt: IH); 5,75 až 5,85 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,51 (dd, J - 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

4-Oxo-4-[4-(2-oxo-2-pyrroÍidin-Í-yÍethy'í)piperazin-i-yljbuíanuvá kyselina se může připraio vit následujícím způsobem:

0,72 g anhydridu kyseliny jantarové a potom 1,5 ml 95% l-(pyrrolidinokarbonylmethyl)piperazinu se v dusíkové atmosféře přidá k 20 ml dioxanu v baňce s kulatým dnem. Po 4,75 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 2,4 g 4-oxo-4-[4-(2-oxo-2-pyrrolidin-l-ylethyl)piperazin-l-yl]butanové kyseliny ve formě světle žluté pasty, která se použije bez dalšího čištění.

Příklad 43 (167?)-16-Deoxo-l 4-O-[3-(2-dimethylaminoethylkarbamoyl)propionvl]-l 6-fluorpristinamycin n_B

Podle postupu popsaného v příkladu 40 se reaguje 170 mg N-(2-dimethylaminoethyl)25 sukcinamové kyseliny, 400 mg (167?)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 190 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu, 46 mg 4-dimethylaminopyridinu a potom 6 ml dichlormethanu. Po 18 hodinách míchání a zpracování podle postupu popsaného v příkladu 40 se získá 580 mg pevné látky, která se převede do 15 ml dichlormethanu a 100 ml destilované vody. Přidá se 0,lM kyselina chlorovodíková a pH směsi se tak upraví na 4. Vodná fáze se extrahuje dvakrát 5 ml dichlormethanu a potom se upraví pH na 7 pomocí přidání roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po slití se vodná fáze extrahuje třikrát 10 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, suší se nad síranem sodným, filtruji se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání pevné látky, která se míchá v 5 ml diethyletheru, filtruje se a potom se suší při 50 °C (90 Pa). Získá se 112 mg (167?)-16-deoxo-l 435 O-[3-(2-d i methy laminoe thy Ikarbamoy 1)] propiony 1-16-fluorpristinamy cínu II_B ve formě bílého prášku o teplotě tání 114 °C (za rozkladu).

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, 8 v ppm): 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,88 (s: 3H); 2,10 až 2,35 (mt: 2H); 2,24 (s: 6H); 2,35 až 2,75 (mt: 4H); 2,41 (t, J = 6 Hz: 2H); 2,77 (mt: 1H); 3,00 (td, J = 17 a 6 Hz: 1H);

3,23 (mt: 1H); 3,33 (q, J = 6 Hz: 2H); 3,47 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,54 (mt: IH); 4,78 (široký d, J = 10 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,13 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,32 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,82 (široký d, J 17 Hz: IH); 5,98 (mt: IH); 6,10 až 6,25 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J -17 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

N-(2-DimethylaminoethyI)sukcinamová kyselina se připraví následujícím způsobem:

1,4 g anhydridu kyseliny jantarové a potom 1,5 ml 2-dimethylaminoethylaminu se přidá k 15 ml dioxanu. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání zbytku, který se převede do 40 ml horkého methylethylketonu. Po ochlazení se solubilizovaná frakce oddělí. Gumovitá zbytek se krystalizuje z 15 ml horkého acetonu. Po filtraci se pevná látka promyje malým množstvím acetonu a potom diethyletherem a suší se za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 2,03 g N-(2-dimethylaminoethyl)sukcinamové kyseliny ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 155 °C.

-45CZ 301048 B6

Příklad 44 (16tf)-l4-O-(3-Karboxypropiony 1)— 16-deoxo-l 6-fluorprÍstinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 39 se reaguje 5 g (16Λ)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu 1I_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 2,82 g anhydridu kyseliny jantarové, 1,15 g 4-dimethylaminopyridinu a 25 m! pyridinu a po 4 hodinách 50 minutách míchání se získá oranžově žlutý olej, který se míchá 18 hodin v diethyletheru za získání bělavého prášku. Pevná látka se odfiltruje a potom se míchá v diethyletheru, filtruje se a suší se při 30 °C (90 Pa) za získání 4,96 g pevné látky. Jeden gram této pevné látky se míchá jednu hodinu v 10 ml dichlormethanu, filtruje se a potom se promyje diethyletherem. Získaná pevná látka se třikrát promyje destilovanou vodou a potom diethyletherem za získání 820 mg (16A)-14-0-[3-karboxypropionyl)—16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B, ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 192 °C.

¹H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,55 až2,05 (mt: 5H); 1,89 (s:3H); 2,16(mt: IH); 2,27 (mt: IH); 2,55 až 2,70 (mt: 4H); 2,77 (mt: IH); 3,00 (td, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,25 (mt: IH); 3,50 (mt: IH); 3,87 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,12 (dekaplovaný dublet, J_BF = 48 Hz: IH); 5,33 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,75 až 5,90 (mt: IH); 5,77 (mt: IH); 5,83 (široký d, J = 17 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,53 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 45

Hydrochlorid (16/?)~l 6-deoxo-l 6-fluor-l4-0-[4-(2-morfolinoethylkarbamoyl)butyryl)pristiňamycinu II_B

0,2 ml 3M etherického roztoku chlorovodíku se při 4 °C přidá k 280 mg (ló/?)-16-deoxo-16fluor-14-0-[4-(2-morfolinoethylkarbamoyl)butyryl]pristinarnycinu II_B rozpuštěného ve 3 ml methylisobutylketonu. Vznikající sraženina se filtruje přes filtr ze šmírovaného skla číslo 4, několikrát se promyje methy li sob uty Iketonem a potom diethyletherem. Získaný bílý prášek se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 268 mg hydrochloridu (16Λ)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(235 morfolinoethylkarbamoyl)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 134 °C.

(16/Í}-16-Deoxo-] 6-fluor-l4-0-[4-(2-morfolinoethylkarbamoyl)butyryl]pristinamycin II_B se může připravit následujícím způsobem:

459 mg (16Á)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu I), 388 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a potom 23 mg 4-dimethylaminopyridinu se přidá k 1 g 5-(2-morfolinoethylamino)-5-oxopentanové kyseliny rozpuštěné v 40 ml dichlormethanu. Reakční směs se míchá 48 hodin pri 20 °C. Vznikající dicyklohexylmočovina se potom odfiltruje přes filtr ze sintrovaného skla číslo 4 a potom se promyje ethylacetátem. Filtrát se potom odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,35 g pevné látky, která se Čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (95-5 objemově)]. Získá se 490 mg produktu, který se znovu čistí pomocí velmi rychlé chromatografie na alumině [mobilní fáze: ethylacetát-methanol (98-2 objemově)]. Frakce se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání pevné látky, která se převede do diethyletheru a míchá se 18 hodin. Získaná bílá, pevná látka se filtruje, promyje se dvakrát diethyletherem a potom se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 294 mg (16/?)— 14-O-[4-(2-morfolinoethylkarbamoyl)butyryl]-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B ve formě bílého prášku.

-46Ví. juiuto ου

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,65 až 2,05 (mt: 5H); 1,90 (s: 3H); 1,95 (mt: 2H); 2,10 až 2,30 (mt: 2H); 2,25 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,37 (mt: 2H); 2,47 (mt: 6H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: 1H); 3,24 (mt: IH); 3,36 (dt, J = 7 a 6 Hz: IH); 3,48 (mt: 1H); 3,71 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,85 (mt: IH); 4,07 (mt: IH); 4,54 (mt: IH); 4,79 (široký d, J - 10 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,70 až 5,85 (mt: 2H); 5,82 (široký d, J = 17 Hz: IH); 6,00 (mt: 2H); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J - 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

ío 5-(2-Morfolinoethylamino)-5-oxopentanová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

Do baňky se umístí 10 ml dioxanu, 1,517 g anhydridu glutarové kyseliny a potom se přikape 1,75 ml N-(2-aminoethyl)morfolinu. Směs se míchá 0,75 hodiny při 20 °C, Vznikající bílá, pevná látka se filtruje, promyje se postupně dioxanem a diethyletherem a potom se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 1,94 g 5-(2-morfolinoethyIamino)-5-oxopentanové kyseliny ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 96 °C.

Příklad 46

Hydrochlorid (16R)-16-deoxo-l 6-fluor-14-0-{(3R5)-3-methyl^l-[4-(pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl} pristinamycinu II_B g (16J?)-16-deoxo-l6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v pří25 kladu 1) a 40 ml dichlormethanu se umístí v dusíkové atmosféře do baňky s kulatým dnem. Směs se zahřívá dokud se nerozpustí pevné podíly a potom se při 20 °C přidá 620 mg 3-methyl-5oxo-5-[4-(2-oxO“2-pyaoIidin- 1-y lethy l)piperazin-í-yl]pentanové kyseliny, 389 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a potom 45 mg 4-dimethylaminopyridinu, Po 24 hodinách mícháni při 20 °C se přidá dalších 124 mg 3-methyl-5-oxo-5-[4-(2-oxo-2-pyrroIidin-l-ylethyl)piperazin30 l-yl]pentanové kyseliny, 78 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 9 mg 4-dimethylaminopyridinu. Reakční směs se míchá 24 hodin při 20 °C a potom se filtruje, promyje se ethylacetátem a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se míchá 1 hodinu ve směsi 30 ml ethylacetátu a 6 ml dichlormethanu. Nerozpustná látka se odfiltruje a promyje se ethylacetátem. Filtráty se spojí a promyjí se postupně dvakrát 5 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sod35 ného a 10 ml vody nasycené chloridem sodným. Vznikající organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získaná žlutá, pevná látka se 18 hodin míchá ve 40 ml diethyletheru, filtruje se a potom se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (95-5 objemově)]. Takto získaný produkt se míchá v diethyletheru, filtruje se a potom se suší při 30 °C (90 Pa) za získání 610 mg (16/f)-] 6-deoxo-l 6-fluor-14-O-{(3RS)-3-methyM-[4--(pynOlidin-l-yl-karbonylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě bílého prášku. Ktéto pevné látce rozpuštěné v 3 ml absolutního ethanolu se přidá 0,25 ml 3M etherického roztoku chlorovodíku a potom 10 ml diethyletheru. Rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku a vznikající pevná látka se promyje 20 ml diethyletheru. Po filtraci a sušení při 25 °C (90 Pa) se získá 610 mg hydro45 chloridu (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-0-{(3R5)-3-methyl-4-[4-(pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butytyl} pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 180 °C.

Ή NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,88 (d, J = 6,5Hz: 3H); 0,90 až 1,00 (mt: 6H); 1,06 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,58 (mt: IH); 1,70 až 2,50 (mt: 15H); 1,80 (s: 3H); 2,78 (mt: IH); 3,00 až 3,50 (mt: 10H); 3,40 (mt: 4H); 3,65 (mt: IH); 3,72 (mt: IH); 3,81 (mt: IH); 3,95 (mt: IH); 4,15 (nerozlišený komplex: 2H); 4,70 až 4,80 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,66 (mt: IH); 5,76 (mt: 1H); 5,83 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,20 (d, J - 16 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); 8,04 (t, J = 6 Hz: IH); 8,48 (s: IH);

9,85 až 10,50 (velmi široký nerozlišený komplex: IH).

-47CZ 301048 B6 {3R5)-3 -Methyl-5-oxo-5 -[4-(2-Ox^2 pyrrolidin-l-ylethyl)piperazin-l-yl]pentanová kyselina se může připravit následujícím způsobem;

1,6 g anhydridu 3-methylglutarové kyseliny a potom 2,62 g pyrrolidinokarbonylmethylpiperazinu se přidá k 10 ml dioxanu. Po 8 hodinách míchání se přidá dalších 320 mg anhydridu 3methylglutarové kyseliny a míchání pokračuje 18 hodin při 20 °C. Rozpouštědlo se potom odpaří za sníženého tlaku a potom se získaný olej suš: při 45 °C (90 Pa) za získání 4,5 g (3ÍÍS>3methy 1—5—oxo-5-[4-(2-oxo-2-pyrrolidin-l~yIethyl)piperazin-l-yl]pentanoové kyseliny ve formě oranžového oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 47

Hydrochlorid (167?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(4-methylpiperazin-1-ylkarbonyl)butyryI]pristinamycinu II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 45 se reaguje 580 mg 5-(4-methylpiperazin-l-yl)-5-oxopentanové kyseliny, 1,21 g (167ř)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 700 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu, 170 mg 4-dímethylaminopyridinu v 25 ml dichlormethanu. Získá se pevná látka, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Po odpaření frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 1,45 g (16A)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0[4-(4-methylpiperazin-I-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu II_B. Ktéto pevné látce rozpuštěné v 8 ml methylisobutylketonu se přidává 3N etherický roztok chlorovodíku, dokud probíhá srážení. Získaná pevná látka se filtruje, promyje se postupně třikrát 2 ml methylisobutylketonu a třikrát 10 ml diethyletheru a potom se suší (90 Pa) při 50 °C za získání 1,24g hydrochloridu (167?)16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 165 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,86 (mt: 3H); 0,94 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,04 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,52 (mt: 1H); 1,65 až 2,15 (mt: 7H); 1,77 (s: 3H); 2,20 (mt: IH); 2,25 až 2,45 (mt: 4H); 2,70 až 2,80 (mt: IH); 2,76 (s: 3H); 2,80 až 3,10 (mt: 3H); 3,10 až 3,50 (mt: 5H); 3,60 (široký d, J = 14 Hz: IH); 3,68 (mt: IH); 3,81 (mt: IH); 3,90 až 4,10 (mt: 2H);

4,43 (nerozlišený komplex: IH); 4,70 až 4,80 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz:

IH); 5,43 (d,J = 9Hz: IH); 5,61 (mt: IH); 5,74 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,19 (d, J= 16 Hz: IH); 6,62 (dd, J= 16 a 4 Hz: IH); 8,17 (mt: IH); 8,52 (s: IH); 10,91 (nerozlišený komplex: IH).

5-{4-MethylpÍperazin-l-yl)-5-oxopentanová kyselina se může připravit následujícím způsobem:

1,6 g anhydridu 3-methylglutarové kyseliny a potom 2,62 g piperazin-1-yIkarboxymethylpyrrolidinu se přidá k 20 ml dioxanu. Po 8 hodinách míchání se přidá dalších 320 mg anhydridu

3-methylglutarové kyseliny a potom míchání pokračuje dalších 18 hodin při 20 °C. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získaný olej se potom suší při 45 °C (90 Pa) za získání 4,5 g 5-(4-methylpiperazin-1-yl)-5-oxopentanovč kyseliny ve formě oranžové pevné látky, která se použije bez dalšího Čištění.

-4«.

CL JV1V1O UU

Příklad 48

Hydrochlorid (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[4-(4-ethylpÍperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu II_B

Při teplotě 20 °C se k roztoku 390 mg (167?)-16-deoxo-l 6-íluor-14-0-[4-(4-ethy lpiperazin-1ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu ÍI_B v 5 mí methylisobutylketonu přidá 0,35 ml 3M roztoku chlorovodíku v etheru. Vzniklá sraženina se filtruje, postupně se promyje minimálním množstvím methylisobutylketonu a diethyletheru a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 340 mg io hydrochloridu (16/2)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-( 4-ethylpiperazin-1-y Ikarbony l)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky s teplotou tání kolem 150 °C (rozklad).

'HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,87 (mt: 3H); 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H);

1,05 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,25 (široký t, J = 7 Hz: 3H); 1,53 (mt: IH); od 1,65 do 2,15 (mt: 7H); 15 1,79 (s: 3H); 2,20 (mt: IH); od 2,30 do 2,45 (mt: 4H); 2,77 (mt: IH); od 2,80 do 3,55 (mt: 10H);

3,61 (široký d, J = 15 Hz: IH); 3,69 (mt: IH); 3,82 (mt: 1H); 3,96 (mt: IH); 4,04 (široký d, J =

13,5 Hz: IH); 4,48 (široký d, J = 13,5 Hz: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 16 a4 Hz: IH); 8,15 (mt: IH); 8,51 (s: IH);

10,16 (široký nerozlišený signál: 1H), (16/2)-16-Deoxo-16-ťluor-14-O-[4-(4-ethylpiperazin-1 -y Ikarbony l)butyryl] pristinamycin II_Blze připravit následujícím způsobem:

Postupuje se podle příkladu 45, ale vychází se z 430 mg 5-(4-ethylpiperazin-l-yl)-5-oxopentanové kyseliny, 1 g (16/2)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraví se podle příkladu 1), 390 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu, 23 mg 4-dimethylaminopyridinu ve 40 ml dichlormethanu, a po přidání 50 mg síranu hořečnatého se po míchání trvajícím 27 hodin přidá dalších 43 mg 5-(4-ethylpiperazin-l-yl)-5-oxopentanové kyseliny, 39 mg N,N'-dicykJohexylkarbodi30 imidu a 2,3 mg 4—dimethylaminopyridinu. Směs se nechá reagovat další 4 hodiny a po zpracování se získá 1,16 g pevné látky, která se chromatograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (95/5 objemově)]. Po zahuštění frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá 260 mg čistého produktu a 420 mg pevné látky, která se čistí dvěmi semipreparativními HPLC chromatografiemi [5 μΜ Hypersil silikagel, mobilní fáze: dichtor35 methan/methanol (95/5 objemově) a pak gradient dichlormethan/methanol (97/3 a pak 95/5 objemově)]. Oba takto získané podíly se spojí za získání 390 mg (16/?)-16-deoxo-l 6-fluor-l4O-[4-( 4—ethy lpiperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamyc inu 11_B ve formě pevné bílé látky.

5-{4~Ethylpiperazin-l-~yl)-5-oxopentanovou kyselinu lze připravit následujícím způsobem:

Do 10 ml dioxanu se v atmosféře argon i přidá roztok 1,5 g 1-ethylpiperazinu a 1,5 g glutaranhydridu v 5 ml dioxanu. Směs se míchá 19 hodin při 25 °C. Rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání hnědého oleje, který se míchá v ethyletheru. Získaná pevná látka se filtruje, promyje diethyletherem a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 1,95 g 5-(445 ethylpiperazin-l-yl)-5-oxopentanové kyseliny ve formě hygroskopické růžové pevné látky, která se použije bez dalšího čištění.

Příklad 49 (16/2)-16-Deoxo-l 4-O-[4~(4--ethoxy karbony 1 methy lpiperazin-1 -y Ikarbony l)butyryl]-l 6fluorpristinamycin II_B

Do kulaté baňky se v atmosféře dusíku předloží 1 g (16/2)-16-deoxo-16-fluorpristinamyčinu II_B (připraví se podle příkladu 1) a 30 ml dichlormethanu. Směs se zahřívá, dokud nedojde k rozpuš-49CZ 301048 B6 tění a pak se ochladí. Pak se při 20 °C přidá roztok 540 mg 5-[4-(ethoxykarbonyImethy lpiperazin-l-yl)]-5-oxopentanové kyseliny v 10 ml dichlormethanu, 23 mg 4-dimethylaminopyridinu a pak 390 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs se míchá 18 hodin při 20 °C a pak se přidá dalších 54 mg 5-[4- (ethoxy karbony Imethy lpiperazin-l-yl)]-5-oxopentanové kyseliny, 39 mg N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a 2,3 mg 4-dimethylaminopyridinu. Reakční směs se míchá 2 dny pří 20 °C a pak se filtruje, promyje dichlormethanem a zahustí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Výsledná pevná látka se míchá 20 hodin ve 40 ml diethyletheru, směs se pak filtruje, vysuší při 20 °C (90 Pa) a zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: dŠchlor methan-methanol (98-2 objemově)]. Takto získaný produkt se míchá v diethyletheru, filtruje a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 640 mg (167?>-16-deoxo-14-0-[4-(4-ethoxykarbonylmethylpiperazin-1-ylkarbonyl)butyryl]-t 6-fluorpristinamycinu II_B ve formě bílého prášku.

Získaná pevná látka se rozpustí v 7 ml methylethylketonu a přidá se 0,35 ml 3M roztoku chloro15 vodíku v etheru. Vzniklá sraženina se oddělí filtrací na fritě číslo 3, třikrát se promyje 10 ml methylethylketonu a pak třikrát 15 ml diethyletheru. Po vysušení při 20 ^qC (90 Pa) se získá 450 mg hydrochloridu (167?)— 16-deoxo-14-O-[4-(4-ethoxykarbonyImethylpiperazin-1 ylkarbonyl)butyryl]-l 6-fluorpristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky s teplotou tání 156 °C.

‘H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,88 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,96 (d, J =

6,5 Hz: 3H); 1,06 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,27 (t, J - 7 Hz: 3H); 1,57 (mt: IH); od 1,70 do 2,35 (mt: 8H); 1,79 (s: 3H); 2,37 (mt: 4H); 2,78 (mt: IH); od 2,90 do 3,50 (mt: 12H); 3,65 (mt: IH); 3,72 (mt: IH); 3,81 (mt: IH); 3,95 (mt: IH); 4,23 (kv, J = 7 Hz: 2H); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf= 48 Hz: IH); 5,42 (d, J = 9 Hz: IH); 5,66 (mt: IH); 5,76 (mt: IH); 5,82 (dd, J - 16 a 1,5 Hz: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); 8,03 (t, J = 6 Hz: IH); 8,48 (s: IH).

5-[4-(Ethoxykarbonylmethy|piperazin-l-yI)]-5-oxopentanovou kyselinu lze získat následujícím způsobem:

Do 10 ml dioxanu umístěného do kulaté baňky se v argonové atmosféře přidá 1,5 g glutaranhydridu a pak roztok 2,26 g N-ethoxykarbonylmethylpiperazinu v 5 ml dioxanu. Směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 3,66 g 5-[4(ethoxykarbonylmethylpiperazin-l-yl)]-5-oxopentanové kyseliny ve formě oranžového oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 50 (16/?)-16-Deoxo~16-fluor-14-0-{4-[4-(pyaolidin“l-ylkarbonylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycin II_B

Postupuje se podle příkladu 46, ale vychází se z 1,75 g 5-oxo-5-[4-(2-oxo-2-pyrrolidin-l-ylethyl)píperazin-l-yl]pentanové kyseliny, 2,5 g (167ř)-16-deoxo-16-fluorpnstinamycinu II_B (připraví se podle příkladu 1), 1,16 g Ν,Ν'-dicykIohexylkarbodiimidu a 113 mg 4-dimethylaminopyridinu ve 100 ml dichlormethanu. Směs se 4 hodiny míchá při 20 °C a pak se zpracuje podobně jako v příkladu 46. Získá se pevná látka, která se chromatograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: dichlormethanmethanol (95/5 objemově)]. Po zahuštění frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získaná pevná látka míchá 18 hodin v diethyletheru. Po filtraci a zahuštění (90 Pa) při 20 °C se získá 2,46g (167?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-{4~[4-(pyrrolidin-l-yl-karbonylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě světle žlutého prášku s teplotou tání 135 °C.

‘H NMR spektrum (500 MHz, CDClj, 6 v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz:

3 H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3 H); od 1,65 do 2,05 (mt: 11H); 1,89 (s: 3H); od 2,10 do 2,30 (mt: 2H);

-50VZ. JViUYO DO

2,37 (mt: 4H); 2,54 (t, J = 5 Hz: 2H); 2,57 (t, J = 5 Hz: 2H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a6 Hz: IH); 3,14 (s: 2H); 3,23 (mt: IH); 3,48 (mt: 7H); 3,66 (t, J = 5 Hz: 2H); 3,86 (mt: IH);

4,06 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); od 5,70 do 5,85 (mt; 3H); 6,06 (mt: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16, 5 a 5 Hz: IH); 8, 12 (s: IH).

5-Oxo-5-[4-(2-oxo-2-pynOlidin-l-ylethyl)piperazin-l-yl]pentanovou kyselinu lze připravit následujícím způsobem:

io Do 10 ml suchého didoxanu se přidá 1,52 g glutaranhydridu a pak 2,62 g pyrrolidinokarbonylmethylpiperazinu. Směs se míchá 4 hodiny, vzniklá sraženina se zředí 10 ml dioxanu a pak míchá 1 hodinu. Pevná látka se oddělí filtrací na fritě číslo 4, několikrát se promyje diethyletherem a pak se vysuší (90 Pa) při 20 °C za získání 3,36 g 5-oxo-5-[4-(2-oxo-2-pynolidin-l-ylethyl)piperazin-l-yl]pentanové kyseliny ve formě pevné bílé látky.

Příklad 51

Hydrochlorid (167? )-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-()-[4—(cis-3.5-dimethylpiperazin-l-ylkarbonyl)20 butyryl]pristinamycinu II_B

Do roztoku 680 mg (167?)-16-deoxo-16-fluor-t4-O-[4-(cis-3,5-dimethylpiperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu ií_B ve 12 ml methylisobutylketonu a ethanolu, jehož množství je právě takové, aby se produkt za tepla rozpustil, se při 20 °C přidá 0,58 ml 3M roztoku chloro25 vodíku v etheru. Směs se zahustí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a získaná pevná látka se míchá 1,5 hodiny v 10 ml diethyíetheru. Pevná látka se oddělí filtrací na fritě číslo 4 a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 650 mg hydrochloridu (167?)-16-deoxo-16-fluor-14O-[4-(cÍs-3,5-dimethy lpiperazm-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycÍnu II_B ve formě pevné bílé látky s teplotou tání 205 °C.

'H NMR spektrum (600 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,87 (mt: 3H); 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,05 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,27 (d, J = 6,5 Hz: 6H); 1,53 (mt: IH); od 1,65 do 1,85 (mt: 3H); 1,78 (s: 3H); od 1,85 do 2,00 (mt: 3H); 2,11 (mt: IH); 2,21 (mt: 1H); od 2,25 do 2,50 (mt: 5H); 2,61 (mt: IH); 2,78 (mt: IH); od 3,05 do 3,30 (mt: 4H); 3,61 (široký d, J = 15 Hz: IH); 3,69 (mt: IH);

3,82 (mt: IH); od 3,90 do 4,05 (mt: 2H); 4,50 (široký d, J = 13,5 Hz: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,11 (dekaplovanýdublet, Jhf = 48 Hz: 1H); 5,44 (d, J = 9 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,81 (široký d, J = 15,5 Hz: IH); 6,20 (d, J = 15 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 15,5 a 4 Hz: IH); 8,17 (t, J = 6 Hz: IH); 8,52 (s: IH); 9,14 (mt: IH); 9,56 (mt: IH).

(167?)— 16-Deoxo-16-fluor-14-O-[4-(3,5-dimethy lpiperazin- l-ylkarbamoyl)butyryl]pristinamycin II_B lze připravit následujícím způsobem:

Postupuje se podle příkladu 45, ale vychází se ze 470 mg 5—(3,5-dimethy lpiperazin- 1-y l)-5oxopentanové kyseliny, lg (167?)- 16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B (připraví se podle příkladu 1), 430 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu, 23 mg 4-dimethylaminopyridinu, ale pracuje ve směsi 40 ml dichlormethanu a 5 ml dimethylformamidu a po míchání po dobu 60 hodin se izoluje 2,5 g hnědého oleje, který se chromatograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (97-3 objemově)]. Po zahuštění frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získaná pevná látka míchá v 10 ml diethyíetheru, pak se oddělí filtrací a vysuší (90 Pa) při 50 °C. Získá se 680 mg (167?)- 16-deoxo-l 6-fluor-14—O—[4—(3,5-dimethylpiperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

5-(3,5-dimethylpiperazin-l-yl)-5-oxopentanovou kyselinu lze připravit následujícím způsobem:

-51 CZ 301048 B6

V atmosféře argonu se do směsi 30 ml dioxanu a 5 ml dichlormethanu přidá 1,5 g 2,6-dimethylpiperazinu. Směs se míchá a zbylý nerozpustný materiál se odstraní filtrací a filtrát se převede do trojhrdlé baňky. Pak se po kapkách přidá roztok 1,5 g glutaranhydridu v 10 ml dioxanu a míchání pokračuje při 25 °C 2 hodiny. Rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání a pevné látky, která se převede do 100 ml diethyletheru, filtruje, promyje díethyletherem a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 2,19 g 5~(3,5-dimethyIpiperazin-l-yl)~5-oxopentanové kyseliny ve formě pevné bílé látky, která se použije bez dalšího čištění.

io Příklad 52

Hydrochlorid (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-0-(methy Ifeny lkarbamoy lmethyl)piperazin1 -y lkarbony l]buty ryl}pristinamycinu I1_B

Do roztoku 470 mg (16/?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-{4-[4-(methylfenylkarbamoylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl)]butyryl} pristinamycinu II_B v 5 ml methylisobutylketonu se při 4 °C přidá 0,3 ml 3M roztoku chlorovodíku v etheru. Směs se míchá jednu hodinu, vzniklá sraženina se oddělí filtrací na fritě číslo 4 a pak se promyje postupně minimálním množstvím methyl isobutylketonu a diethyletheru. Získaná pevná látka se vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 463 mg hydro20 chloridu (16/?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-{4-[4-(methylfenylkarbamoylmethyl)piperazin-lylkarbonyl)]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky s teplotou tání 155 °C.

'HNMR spektrum (500 MHz, (CD^SO d6, δ v ppm): 0,87 (mt: 3H); 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,05 (d, J =6,5 Hz: 3H); 1,53 (mt: IH); od 1,65 do 1,85 (mt: 3H); 1,77 (s: 3H); od 1,85 do 2,05 (mt: 3H); 2,11 (mt: ÍH); 2,19 (mt: IH); 2,34 (mt: 4H); 2,78 (mt: IH); od 2,85 do 3,55 a od 3,80 do 4,05 (mt: 1 IH v total); 3,26 (s: 3H); 3,60 (široký d, J = 15 Hz; IH); 3,69 (mt: IH); 3,81 (mt: IH); 3,95 (mt: IH); od 4,25 do 4,60 (nerozlišený signál: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); 5,42 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); 5,74 (mt: IH); 5,81 (dd, J - 16 a 2 Hz: IH); 6,19 (d, J = 15,5 Hz: IH); 6,63 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); od 7,25 do

7,60 (mt: 5H); 8,14 (mt: IH); 8,52 (s: IH); 10,13 (široký nerozlišený signál).

(16/?)-l 6-Deoxo-l 6-fluor-l4-C-{4-[4-(methylfenylkarbamoylmethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycin Π_Β lze připravit následujícím způsobem:

Postupuje se podle příkladu 45, ale vychází se z 653 mg 5-[4-(methy Ifeny lkarbamoy Imethy 1)piperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny, 1 g (16/?)-16-deoxo~16-fluorpristinamycinu I1_B(připraví se podle příkladu 1), roztoku 388 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu v 10 ml dichlormethanu, který se přidá po kapkách během 3 hodin a roztoku 23 mg 4—dimethylaminopyridinu v 50 ml dichlormethanu. Směs se míchá 22 hodin, získá se 1,49 g pevné látky, která se chroma40 tograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (97-3 objemově)]. Po zahuštění frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získaná pevná látka míchá v diethyletheru, oddělí se filtrací a vysuší (90 Pa) při 50 °C. Tak se získá 470 mg (16A)~16-deoxo-16-fluor-14-0-{4-[4-(methylfenylkarbamoyl-methyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

5-{4-<Methy lfenylkarbamoy Imethy l)piperazin-l-yl]-5-oxopentanovou kyselinu lze získat následujícím způsobem:

Do 15 ml dioxanu se přidá 1,517 g glutaranhydridu a pak 1,715 g N-[2-(piperazin-l-y|)acetyl]50 N-methylanilínu. Směs se míchá 19 hodin při 25 °C, vzniklá bílá sraženina se oddělí filtrací na fritě číslo 4, promyje dioxanem a díethyletherem a pak se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 2 g 5-[4-(methy Ifeny lkarbamoy Imethy I)piperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny ve formě pevné bílé látky, která se použije bez dalšího čištění.

-52JUlU*tO DU

Příklad 53 (16R)~ 16-Deoxo-16-fluor-14-O-{4-[4—(2-methoxyethyl)piperazin-1 -ylkarbony 1] buty ryl} pristinamycin II_B

Do kulaté baňky se v atmosféře dusíku předloží 1 g (16Α)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B(připraví se podle příkladu 1) a 40 ml dichlormethanu. Směs se zahřívá do rozpuštění a pak se ochladí. Pak se při 20 °C přidá 485 mg 5-[4-(2-methoxyethyl)piperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny a pak 45 mg 4-dimethylaminopyridinu. rak se po kapkách během 3 hodin přidá roztok ío 388 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu v 10 ml dichlormethanu. Směs se míchá 18 hodin při °C a pak se přidá roztok dalších 48 mg 5-[4-(2-methoxyethyl)piperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny a 38 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu v 5 ml dichlormethanu. Reakční směs se míchá 3 hodiny při 20 °C a pak se filtruje, koláč se promyje ethylacetátem a filtrát se zahustí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získaný zbytek se míchá 0,5 hodiny ve 40 ml ethylacetátu a směs se pak filtruje. Koláč se promyje ethylacetátem, filtráty se spojí a pak promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, filtrují a zahustí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získaná pevná látka se nejdřív míchá 18 hodin ve 40 ml diisopropyletheru a pak se oddělí filtrací a opět se míchá ve směsi 40 ml diisopropyletheru a 10 ml ethyletheru. Výsledná pevná látka se oddělí filtrací a chromatograficky se Čistí na silika20 gelu [mobilní fáze: dichlormethan-methanol (97-3 objemově)]. Získaný produkt se míchá ve 40 ml diisopropyletheru, pak se oddělí filtrací a pak se vysuší při 30 °C (90 Pa) za získání 815 mg (16R)~ 16-deoxo-16-fluor-14-O-{4-[4-(2-methoxyethy I)piperazin- 1-ylkarbony IJbutyry 1} pristinamycinu II_B ve formě bílého prášku.

K roztoku této látky ve 4 ml absolutního ethanolu se přidá 0,35 ml 3M roztoku chlorovodíku v etheru a pak pomalu 20 ml diethyletheru, Rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku a výsledná pevná látka se míchá ve 20 ml diethyletheru. Po filtraci a vysušení při 20 °C (90 Pa) se získá 800 mg hydrochloridu (16/?)-16-deoxo-16-fluor-l4-0-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazÍn-lylkarbonyl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky s teplotou tání 170 °C.

Ή NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,86 (d, J = 6,5Hz: 3H); 0,95 (d,J =

6,5 Hz: 3H); 1,04 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,52 (mt: IH); od 1,65 do 2,05 (mt: 6H); 1,77 (s: 3H); od 2,05 do 2,30 (mt: 2H); 2,37 (mt: 4H); 2,78 (mt: IH); od 2,85 do 3,55 (mt: 13H); 3,59 (mt: IH); od 3,65 do 3,75 (mt: 3H); 3,81 (mt: IH); od 3,90 do 4,10 (mt: 2H); 4,42 (široký d, J = 13 Hz:

IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,61 (mt: IH); 5,74 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,64 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); 8,18 (t, J = 6 Hz: IH); 8,52 (s: IH); 10,46 (široký nerozlišený signál: IH).

5-[4-(2-Methoxyethyl)piperazin-l-yl]-5-oxopentanovou kyselinu lze získat následujícím způsobem:

Do 13 ml dioxanu se přidá 1,52 g glutaranhydridu a pak roztok 1,92 g l-(2-methoxyethyl)piperazinu v 3 ml dioxanu. Směs se míchá 5 hodin při teplotě místnosti a pak se přidá dalších

300 mg glutaranhydridu a míchání pak pokračuje při 20 °C dalších 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a výsledný olej se vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 3,4 g 5—[4—(2— methoxyethyI)piperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny ve formě oranžové kapaliny, která se použije bez dalšího čištění.

-53CZ 301048 B6

Příklad 54 (16R}~ 16-Deoxo-16-fluor-14-0[4-(4-propy Ipiperazin-1 -y lkarbony l)butyry l]pristinamycin 5 IIb

Postupuje se podle příkladu 46, ale vychází se z0,5g 5-oxo-5-(4~propylpiperazin-l-yl)pentanové kyseliny, 1 g (167?)—16—deoxo—!6—fluorpristinamycínu (připraví se podle přikladl*

1), 430 mg Ν,Ν'-dicyklohexyIkarbodiimidu a roztoku 23 mg 4-dimethylaminopyridin v 50 ml io dichlormethanu. Po 4 hodinách míchání při 20 °C a po filtraci a odpaření rozpouštědla do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C se získá pevná látka, která se chromatograficky čistí na silikagelu [mobilní fáze: díchlormethan-methanol (97/3 objemově)]. Po zahuštění frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a míchání získané pevné látky v diethyletheru, filtraci a vysušení (90 Pa) při 20 °C se získá 960 mg (167?)-16-deoxo-16-fluor-l4^O-[4-(4~ propylp Íperaztn-1-y lkarbony l)butyryl]pristinamycinu H₀ ve formě bílého prášku.

Ktéto pevné látce rozpuštěné v 10 ml methylethylketonu se přidá 0,75 ml 3M etherického roztoku chlorovodíku. Získaná sraženina se filtruje na fritě číslo 3, promyje se dvakrát 10 ml methylethylketonu a potom dvakrát 15 ml diethyletheru. Po filtraci a sušení při 20 °C (90 Pa) se získá 700 mg hydrochloridu (167?)-16-deoxo-16—fluor—14-C-[4-(4-propyIpiperazin- 1-ylkarbonyl)butyryl]pristÍnamycinu II_B ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 145 °C.

‘HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,86 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 0,90 do 1,00 (mt: 6H); 1,04 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,54 (mt: IH); od 1,60 do 2,25 (mt: 10H); 1,78 (s: 3H); od

2,30 do 2,45 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); od 2,80 do 3,10 (mt: ÓH); 3,21 (mt: IH); od 3,40 do 3,55 (mt: 3H); 3,60 (mt: IH); 3,68 (mt: IH); 3,82 (mt: IH); od 3,90 do 4,10 (mt: 2H); 4,45 (široký d, J - 14 Hz: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48Hz: IH); 5,41 (d, J = 9 Hz: IH); 5,61 (mt: IH); 5,74 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,19 (d, J = 15,5 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); 8,14 (široký t, J = 5,5 Hz: IH); 8,48 (s: IH); 10,41 (široký nerozlišený signál: IH).

5-Oxo-5-(4-propylpiperazm-l-yl)pentanové kyselina se získá následujícím způsobem:

1,5 g anhydridů glutarové kyseliny a pak 1,66 g N-propylpiperazinu rozpuštěného v 5 ml dioxa35 nu se přidá do 10 ml dioxanu v baňce s kulatým dnem pod argonovou atmosférou. Po 2,5 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a potom se ke získanému oleji přidá 100 ml diethyletheru. Směs se míchá jednu hodinu, získaná pevná látka se filtruje, vysuší pri 20 °C (90 Pa) za získání 2,47 g 5-oxo-5-(4-propyIpiperazin-l-yI)pentanové kyseliny ve formě pevné bílé látky, která se použije bez čištění.

Příklad 55 (167?)-16-Deoxo-16-fl uor-14-O-{4-[4-(3-im idazol-1-y lpropyl)piperazin-1-y lkarbony 1] 45 butyryl}pristinamycin 1I_B

1,42 g (167?)-14-0-{4-[4-(3-chlorpropyl)piperazin-l-yIkarbonyl]butyryl}-l 6-deoxo-16fluorpristinamycinu II_B, 6 ml dimethylformamidu, 0,24 g imidazolu a 10 mg jodidu sodného se přidá do baňky s kulatým dnem umístěné v atmosféře dusíku. Směs se zahřívá na 75 °C 5 hodin a pak se míchá 60 hodin pri 20 °C. Při 20 °C se přidá dalších 0,12 g imidazolu rozpuštěného v 2 ml dimethylformamidu a míchání pokračuje 4 hodiny při 75 °C a potom 18 hodin pri 20 °C. Získaná směs se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Výsledná pevná látka se převede do 50 ml dichlormethanu a získaný roztok se promyje dvakrát 40 ml destilované vody. Organická fáze se slije, vysuší nad síranem hořečnatým, filtruje a pak odpaří do sucha za sníženého tlaku za získání 1,14 g pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze:

-54vr juiuío do dichlormethan-methanol (gradient 95-5 a pak 90-10 objemově)]. Takto získaná pevná látka se míchá v diethyletheru 40 hodin, filtruje a pak vysuší pri 20 °C (90 Pa) za získání 290 mg (167?)16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-{4-[4-(3-imidazol-1-yIpropyl)piperazin-1-ylkarbonyljbutyry 1}pristinamycinu II_B ve formě bělavé pevné látky o teplotě tání 122 °C.

^lH NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,45 do 2,05 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); od 2,10 do 2,30 (mt: 2H); 2,29 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,37 (mt: 8H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (mt: IH); 3,23 (mt: IH); od 3,40 do 3,55 (mt: 3H); 3,62 (mt: 2H); 3,86 (mt: IH); od 4,00 do 4,10 (mt: IH); 4,05 (t, J = Ί Hz: 211); io 4,53 (mt: IH); 4,78 (dd, J= 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, J_Hf = 48Hz: IH); 5,31 (d, J = 9Hz: IH); 5,75 (mt: IH); od 5,75 do 5,85 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 6,00 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 6,93 (nerozlišený signál: IH); 7,08 (široký s: IH); 7,50 (široký s: IH); 8,12 (s: IH).

(167?)-l <PO-{4-[4-(3^Chlorpropyl)piperazm-l-ylkarbonyl]butyryl}-l 6-deoxo-l 6-fluorprístinamycin IIb se získá podle postupu popsaného v příkladu 46, ale za použití 0,94 g 5—[4—(3— chlorpropyl)piperazin-l-yí]-5-oxopentanové kyseliny, 1,5 g (167?)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 460 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a 23 mg 4-dimethylaminopyridinu v 40 ml dichlormethanu. Takto se po 23 hodi20 nách míchání pri 20 °C získá suspenze, která se filtruje. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C, za získání pevné látky, která se míchá v diisopropyletheru, filtruje a pak rozpustí v 50 ml dichlormethanu. Získaný roztok se promyje 30 ml destilované vody, slije se, vysuší nad síranem hořečnatým, filtruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C za získání 1,42 g (167?)-14-O-{4-[4-^3-chlorpropyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}-1625 deoxo-l 6-fluorpristinamycin II_B, ve formě a žluté pevné látky, která se použije bez dalšího čištění.

5-[4-(3-ChlorpropyI)piperazin-I-yl]-5-oxopentanová kyselina se získá následujícím způsobem:

1,5 g anhydridu giutarové kyseliny a pak 2,13 g N-(chlorpropyl)piperazinu rozpuštěného v 5 ml dioxanu a 1 ml dichlormethanu se přidá k 15 ml dioxanu v baňce s kulatým dnem v atmosféře argonu. Směs se míchá 2 hodiny pri 20 °C, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C za získání 3,75 g 5-[4-(3-chlorpropyl)pÍperazin-l-yl]-5-oxopentanové kyseliny ve formě a žlutého oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 56

Hydrochlorid (167?)— 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[4-(2-morfo linoethoxy karbony l)]buty ryl}pristinamycinu II_B

0,42 ml 3M etherického roztoku chlorovodíku se přidá pri 4 °C, k 550 mg (167?}-16-deoxo-16fluor-14-0-[4-(2-morfolinoethoxykarbonyl)]butyryl}pristinamycinu H_b rozpuštěného v 5,5 ml methy lisobutylketonu. Směs se míchá jednu hodinu, vznikající sraženina se oddělí filtrací na fritě číslo 4, promyje se postupně methylisobutylketonem a diethy 1 ether a pak vysuší při 20 °C (90 Pa) za získání 458 mg (167?)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-G-[4-(2-morfoÍinoethoxykarbonyl)]butyryl} pristinamycinu II_B, ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 168 °C.

’H NMR spektrum (500 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm) 0,85 (mt; 3H); 0,94 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,03 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,50 (mt: IH); od 1,70 do 1,85 (mt: 3H); 1,77 (s: 3H); od 1,85 do 2,05 (mt: 3H); 2,09 (mt: IH); 2,19 (mt: IH); 2,38 (mt: 2H); 2,42 (t, J = 7 Hz: 2H); 2,77 (mt: IH); od 3,10 do 3,50 (mt: 8H); 3,58 (široký d, J = 15 Hz: IH); 3,68 (mt: IH); od 3,70 do 3,85 (mt: 3H); od 3,90 do 4,00 (mt; 3H); 4,39 (mt: 2H); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet,

J^ = 48 Hz: IH); 5,42 (d, J - 9 Hz: IH); 5,60 (mt: IH); 5,74 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz:

-55cz 301048 B6

IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16 a 4 Hz: IH); 8,17 (mt: IH); 8,52 (s: IH); 10,50 (široký nerozlišený signál: IH).

(16/2)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(2-morfolinoethoxykarbonyl)]butyryl} pristinamycin II_B se 5 získá následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 45 se reaguje 461 mg (2-morfolÍnoethyl)monoe$teru glutarové kyseliny, 1 g (16/?)—16—deoxo—16—fluorpristÍnamycinu lig (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 388 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu, 23 mg 4-dimethylaminoio pyridinu v 40 ml dichlormethanu, a směs se míchá 22 hodin. Získá se 1,33 g pevné látky, která se čistí pomocí dvou po sobě následujících chromatografií [mobilní fáze: postupně dichlormethan/methanol (97/3 objemově) a dichlormethan/methanol (98/2 objemově)]. Po odpaření frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa), se pevná látka míchá v diethyletheru, filtruje a suší (90 Pa) při 20 ^PC a získá se 550 mg (16/2)-16-deoxo-16-fluor-l4-O-[4-(2-morfolinoethoxykarbony 1)]15 butyryl} pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

(2-morfolinoethyl)monoester glutarové kyseliny se získá následujícím způsobem:

1,517 g anhydridu glutarové kyseliny a pak 1,61 ml N-2-hydroxyethylmorfolinu se přidá k 10 ml 20 dioxanu. Směs se míchá 19 hodin při 25 °C, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) a získaný produkt se vysuší při 55 °C (90 Pa) za získání 3, 18 g (2-morfolin-4-ylethyl)monoesteru glutarové kyseliny ve formě a hnědého oleje, který se použije bez dalšího čištění.

Příklad 57 (16/?)-16-Deoxo-16-fluor-14-0-{4-[4-(2-morfolinoethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl}pristinamycin II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 46 se reaguje 0,7 g 5-[4-(2-morfol i noethyl piperazin-1yl)]-5-oxopentanové kyseliny, lg (16/?)-l 6-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu 1I_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 460 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a 23 mg 4dimethylaminopyridinu v 40 ml dichlormethanu. Po 4 hodinách míchání při 20 °C se získá suspenze, která se filtruje. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a získá se béžový prášek, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan-methano! (96—4 objemově)]. Po odpaření frakcí dc sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C, a pak míchání získané pevné látky v di i sopropy letheru 36 hodin, filtraci a sušení (90 Pa) při 20 °C se získá 750 mg pevné látky. Tato pevná látka se znovu míchá ve směsi 20 ml diisopropyletheru a 10 ml diethyletheru 60 hodin. Po filtraci a sušení (90 Pa) při

20 °C se získaná pevná látka míchá 1,5 hodiny při 60 °C v 60 ml diisopropyletheru a pak filtruje a vysuší (90 Pa) při 20 °C za získání 0,55 g(16/2)-16-deoxo-16-fluor-l^zkO-{4-[4-(2-morfolinoethyl)piperazin-l-ylkarbonyl]butyryl} pristinamycinu II_B ve formě světle žlutého prášku o teplotě tání 116 °C.

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,55 do 2,05 (mt: 7H); 1,89 (s: 3H); od 2,10 do 2,30 (mt: 2H); 2,38 (mt: 4H); od 2,40 do 2,60 (mt: 12H); 2,76 (mt: IH); 2,98 (mt: IH); 3,23 (mt: IH); od 3,40 do 3,55 (mt: 3H); 3,61 (mt: 2H); 3,72 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,54 (mt: IH); 4,79 (dd, J = 10 a 1,5 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,12 (dekaplovaný dublet, so Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); 5,75 (mt: IH); od 5,75 do 5,85 (mt: IH); 5,82 (dd, J = 17a 1,5 Hz: IH); 5,96 (mt: IH); 6,19 (d, J - 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s:

IH).

-56CL· OU±U*tO DD

5-[4-(2-Morfolinoethylpiperazin-l-yl)]-5-oxopentanová kyselina se získá následujícím způsobem:

1,5 g anhydridu glutarové kyselina a pak 2,62 g l-(2-morfolinoethyI)piperazinu rozpuštěného v 10 ml dioxanu se v atmosféře argonu přidá k 10 ml dioxanu v baňce s kulatým dnem. Směs se míchá 60 hodin při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Výsledný olej se doplní 100 ml diethyletheru. Po ochlazení na -40 °C produkt ztuhne. Míchání potom pokračuje další i hodinu při 20 ^CC. Získaná pevná látka se filtruje, promyje se diethyletherem a pak suší při ío 20 °C (90 Pa) za získání 3,57 g 5-[4~(2-morfolÍnoethylpiperazin-1 -yl)]-5-oxopentanové kyseliny ve formě pevné bílé látky, která se použije bez dalšího čištění.

Příklad 58

Hydrochlorid (167?>-16-deoxo-16-fluor-14-O-[(3RS)-3-methyl-4~(4-methylpiperazin-1 -y 1karbonylbutyryl]pristinamycinu II_B

Podle postupu popsaného v příkladu 46 se reaguje 516 mg 3-methy 1-5-(4-methylpiperazin-120 yl)-5-oxopentanové kyseliny, lg (16Λ)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu ÍI_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 467 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 54 mg 4-dimethylaminopyridinu v 40 ml dichlormethanu. Získá se 1,25 g pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Po odpaření frakcí do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a pak míchání získané pevné látky v diisopropyletheru 18 hodin, filtraci a sušení (90 Pa) při 20 °C se získá 730 mg (16A)-16-deoxo-16-fluor-14-0-((3 RiS)-3-methy M-(4-methy lpiperazin- 1-y Ikarbonylbutyry ljpristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky. Tato látka se rozpustí v 3,5 ml absolutního ethanolu, ke kterému se přidá 0,34 ml 3 M etherického roztoku chlorovodíku. Potom se přidá 35 ml diethyletheru a suspenze se míchá 2 hodiny při 20 °C. Pevná látka se filtruje, promyje se diethyletherem a potom se suší při 45 °C (90 Pa) za získání 645 mg hydrochloridu (167?)-16-deoxo-l 6-fluor14-O-[(3KS)-3-methyl-4-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)butyryl]pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 185 °C.

Ή NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,85 (d, J = 6,5 Hz; 3H); od 0,90 do 1,00 (mt: 6H); 1,03 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,51 (mt: IH); od 1,70 do 2,45 (mt: 1 IH); 1,77 (s: 3H); od

2.70 do 3,50 (mt: 9H); 2,77 (široký s: 3H); 3,59 (mt: IH); 3,68 (mt: IH); 3,80 (mt: IH); od 3,90 do 4,20 (široký nerozlišený signál: IH); 3,97 (mt: IH); 4,44 (široký nerozlišený signál: IH); od

4.70 do 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,61 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: 1H); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16 a 4 Hz: 1H); 8,17 (t, J - 5,5 Hz: IH); 8,52 (s: IH); 10,49 (široký nerozlišený signál: IH).

(3RS)-3-Methyl-5-(4-methylpiperazin-l-yl)-5-oxopentancvá kyselina se získá následujícím způsobem:

1,6 g anhydridu 3-methylglutarové kyseliny a pak 1,48 ml N-methy lpíperazinu se přidá k 20 ml dioxanu. Směs se míchá 4 hodiny, přidá se dalších 320 mg anhydridu 3-methylglutarové kyseliny. Míchání pokračuje 18 hodin při 20 °C. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 50 °C. Výsledný olej se suší při 50 °C (90 Pa) za získání 3,1 g (3 RÓ)-3-methy 1-5-( 4-methy 1piperazin-l-yl)-5-oxopentanové kyseliny ve formě žlutého skla, které se použije bez dalšího so čištění.

-57CZ 301048 B6

Příklad 59 (16R)~ 16-Deoxo-l 6-fluor-14-0-[(RR,SS)-trans-2-( 4-methy lpiperazin-1 -ylkarbony 1)15 cyklobutankarbonyljpristinamycin II_B (50/50 směs dvou diastereoizomerů)

2,0 g (/ř/?,SiY)-/rafl.s~2-(4-methylpiperazin-l-yIkarbonyl)-l-cyklobutankarboxylové kyseliny,

0/1 rt Ní M ^ř rl JrtlfUrtbiAvx/iVnt-KrkrlJiTVM/lii /i Λ /10 rr 4 /liTna+hirlnmiriAni ort nrí 0Λ w nrrrrmr\ i WIVJ IMV4IVAJ UVUUUIÍUM 14- V^^T-S £6j“T VI i i i i WL11J¹ 1(41 J i 11 j 1 1VI i li 14 JV |J1 1 M V T 141 £^V11V/^- vé atmosféře přidá k2,lg (16R)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle io postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Po 24 hodinách míchání se reakční směs filtruje za odstranění nerozpustných látek. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 5,2 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (97/3 a pak 95/5 objemově)]. Po míchání v diisopropyletheru se získá 0,26 g (167?)—16-deoxo-16-fluor- 14O-[(/ř/ř,Sfy-trart$-2-(415 methylpiperazin-l-ylkarbonyl)-l-cyklobutankarbonyl]pristinamycinu II_B (50/50 směs dvou diastereoizomerů) ve formě bělavého prášku.

'HNMRspektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm); (2 diastereoizomery v poměru 50-50): 0,96 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,55 do 2,45 (mt: 15H);

1,90 (s: 3H); 2,29 a 2,30 (2 s: 3H celkem); 2,77 (mt: IH); 2,98 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,23 (mt: IH); od 3,30 do 3,75 (mt: 7H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,55 (mt: IH); od 4,75 do 4,85 (mt: 2H); 5,11 (dekaplovaný dublet, = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9 Hz: IH); od 5,70 do 5,85 (mt: 3H); 5,96 a 6,02 (2 mt: IH celkem); 6,20 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (mt: IH); 8,12 (s; IH).

(/?Á,.557-ZrtíW-2-(4-Methy lpiperazin-l-yl-karbonyl)-l-cyklobutankarboxy lová kyselina se připraví následujícím způsobem:

1,1 ml 1-methylpiperazinu se přidá po kapkách, při 25 °C, pod argonovou atmosférou, k roztoku 1,8 g dichloridu (7^ SS)-/ra«5-l,2-cyklobutand i karboxylové kyseliny v 50 ml dichlormethanu. Směs se míchá 4 hodiny a přidá se 10 ml destilované vody. Po 1 hodině míchání se reakční směs odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 20 ml destilované vody. Tento roztok se zalkalizuje na pH 10 přidáním IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Získaný roztok se extrahuje 50 ml ethylacetátu, převede se na pH 5 až 6 přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se dvakrát převrství 50 ml toluenu a suší se za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se při ίΠΟΓ CA—I -4.1----).. _________i 1^*1... -- --·.; ~ -- -J..-y.: J- -...1,- __ uu -v ^/iwvuv uu uu uu uuiauuiu, nviucjpuauiv laiftj av uuuiuuji a umal av vupaxi uu auviia xa sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 2,4 g (/ř/?_J5'_iS)-n-ans-2-(4-methylpiperazin-l-ylkarbony 1)-1cyklobutankarboxylové kyseliny ve formě žlutého oleje.

Dichlorid (/ř/?,Sy)-ř?Y/«s-l,2-cyklobutandÍkarboxylové kyseliny se připraví následujícím způsobem:

2,2 ml sulfonylchlorid se při 20 °C přidá k 1,5 g (AÁ.5\S)-^^-l,2-cyklobutandikarboxyiové kyseliny a pak se směs zahřívá 2 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se potom odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se dvakrát převrství 50 ml dichlormethanu a suší za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 1,8 g dichloridu (R/?₍SS>/rtíws-l,2-cyklobutandÍkarboxylové kyseliny ve formě žlutého oleje.

- SXVZj JWiUTO DU

Příklad 60

Methansulfonát (167?)— 16-deoxo-l 6-fluor-l 4-CK l-methylpiperidin-4-ylkarbonyl)pristin5 amycinu II_A

0,516 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu se přidá při 20 °C k 1,06 g (167?)—16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_A (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 8), 0,23 g l-methyl-4piperidinkarboxyiové kyseliny a 0,123 g 4-dimethylaminopyridinu rozpuštěného v 40 ml io dichlormethanu. Směs se míchá 24 hodin, promyje se 50 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje a pak odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)].

Získá se produkt, kteiý se převede do 35 ml ethanolu a 13,4 ml 0,lN vodného roztoku methansulfonové kyseliny a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa), míchá se v diethy 115 etheru, filtruje, a odpaří se za získání zbytku, který se míchá v 25 ml dichlormethanu a 10 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se potom oddělí a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 20 ml ethanolu a 10 ml 0,1 N vodného roztoku methansulfonové kyseliny. Roztok se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) pri 20 °C za získání 0,65 g methansulfonátu (16A)-16-deoxo-l 6-fluor-l4-020 (l-methylpiperidin-4-yl-karbonyl)pristinamycÍnu II_A ve formě krémově zbarvené pevné látky.

'HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6 při teplotě 383 K (110°C), δ v ppm): 0,93 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,13 (d, J - 6,5 Hz: 3H); od 1,75 do 2,30 (mt: 7H); 1,84 (s: 3H); 2,40 (s: 3H); od 2,55 do 2,85 (mt: 4H); 2,81 (s: 3H); od 2,90 do 3,55 (mt: 6H); 3,79 (široký d, J = 16,5 Hz: IH); 3,94 (dt, J - 16,5 a 6,5 Hz: IH); od 4,05 do 4,25 (mt: 2H); 4,81 (dd, J - 9 a 3 Hz: 1H); 4,99 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,33 (d, J = 9,5 Hz: 1H); 5,75 (dt, J - 9,5 a 5 Hz: IH); 5,81 (mt: IH); 5,92 (dd, J = 16 a 1,5 Hz: IH); 6,10 (d, J = 16 Hz: IH); 6,28 (t, J - 3 Hz: IH); 6,63 (dd, J - 16 a 6,5 Hz: IH); 7,43 (nerozlišený signál: IH); 8,45 (s: IH); od 8,85 do 9,45 (velmi široký nerozlišený signál: IH).

l-Methyl-4-piperidinkarboxylová kyselina se připraví následujícím způsobem:

12,5 ml 4N vodného roztoku hydroxidu sodného se při 20 °C přidá k 7,60 g ethyl-1-methy Mpiperidinkarboxylátu rozpuštěného v 35 ml ethanolu. Směs se míchá 20 hodin, zahustí se na men35 ší objem a potom se neutralizuje 12,5 ml 4N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a nakonec se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se míchá v 60 ml bezvodého ethanolu, a pak se filtruje. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a získá se 6,3 g 1 -methyM-piperidinkarboxylové kyseliny ve formě pevné bílé látky.

'HNMR spektrum (300 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 1,56 (mt: 2H); 1,78 (mt: 2H); 1,98 (dt, J = 11,5 a 2,5 Hz: 2H); 2,13 (mt: IH); 2,18 (s: 3H); 2,74 (široký d, J = 11,5 Hz: 2H).

Ethyl-I-methy M-piperidinkarboxy lát se připraví následujícím způsobem:

12,5 ml 4N vodného roztoku hydroxidu sodného se při 20 °C přidá k 9,2 g hydrochloridu ethyl—

4-piperidinkarboxylátu v 80 ml dichlormethanu. Směs se míchá 5 minut, organická fáze se vysuší nad síranem hořečnatým, filtruje a pak ochladí na 5 °C. Pak se pod argonem přidá 7,0 ml formaldehydu a 14,2 g (přidáno ve dvou částech) triacetoxyborhydridu sodného. Po jedné hodině intenzivního míchání při 20 °C se reakční směs zředí 50 ml vody, zalkalizuje se 4N roztokem so hydroxidu sodného a potom se slije. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 7,6 g l-methyl-4piperidinkarboxylátu ve formě bezbarvého oleje.

'H NMR spektrum (250 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 1,24 (t, J = 7 Hz: 3H); od 1,65 do 2,05 (mt: 6H);

od 2,15 do 2,30 (mt: IH); 2,25 (s: 3H); 2,81 (široký d, J = 11,5 Hz: 2H); 4,13 (kv, J = 7 Hz: 2H).

-59CZ 301048 B6

Příklad 61 (16/?)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[ 1-(dimethy laminoacetyl)piperidin-4-karbonyÍ] příst inamycin Hb

0,51 g l-(dimethylaminoacetyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny, 0,5 g N,N'-dicyklohexylλ., _n η i < .. λ „—a: ......---xv---------i. i i nui V>wi>n>iuw u. v, i J £, ~r VIIHIV.111 j itimhk/jjJ'1 IMU 1U JU JJ* ¹ \^, ^v Í1LUIU31UJL aigunu JJI 1U<2 Pt 1,1 (16Á)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příklaio du 1) rozpuštěného v 50 ml dichlormethanu. Směs se míchá 48 hodin a přidá se dalších 0,5 g

Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,1 g 4-dimethylaminopyridinu. Po 48 hodinách míchání se reakční směs filtruje a odstraní se nerozpustné látky. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,8 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (97/3 a pak 95/5 objemově)]. Po míchání v diethyl15 etheru se získá 0,38 g (16/?)~16-deoxo-l 6-fluor-l4-O-[l-(dimethylaminoacetyl)piperidin—4karbonyl]pristinamycinu I1_B ve formě pevné bílé látky.

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,50 do 2,05 (mt: 9H); 1,89 (s: 3H); od 2,10 do 2,35 (mt: 2H);

2,28 (s: 6H); 2,52 (mt: IH); 2,77 (mt: IH); 2,80 (mt: IH); 3,00 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); od 3,05 do

3,20(mt: IH); 3,10 (AB, J = 14 Hz: 2H); 3,25 (mt: lH);3,5O(mt: IH); 3,85 (mt: IH); od4,00do 4,10 (mt: 2H); 4,38 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); 4,78 (široký d, J= 10 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf - 48 Hz: 1H); 5,29 (d, J = 9 Hz: IH); od 5,70 do 5,90 (mt: 3H); 5,93 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,52 (dd, J = 16a4Hz: IH); 8,12 (s: IH).

l-(Dimethylaminoacetyl)piperidin-4-karboxylová kyselina se připraví následujícím způsobem:

ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se přidá při 20 °C k4,5g ethyl-l-(dimethylaminoacetyl)piperidin-^l-karboxylátu rozpuštěného v 50 ml ethanolu. Směs se míchá 16 hodin při 50 °C, ethanol se odstraní za sníženého tlaku (2,7 kPa) a zbývající vodná fáze se extrahuje 50 ml ethylacetátu. Vodná fáze se potom okyselí na pH 6 přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se dvakrát převrství 50 ml toluenu a potom se suší za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se převede do 50 ml ethanolu pří 50 °C a nerozpustné látky se odfiltrují. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získá35 ní 4,2 g l-(dimethylaminoacetyÍ)piperidin-4-karboxylové kyseliny ve formě žlutého oleje.

Ή NMR spektrum (300 MHz, CDC1₃, δ v ppm): od 1,50 do 1,80 (mt: 2H); 1,93 (mt: 2H); od 2,40 do 2,60 (mt: IH); 2,51 (s: 6H); 2,78 (mt: IH); 3,07 (mt: IH); 3,25 (d, J = 14,5 Hz: IH); 3,55 (d, J = 14,5 Hz: IH); 3,84 (široký d, J = 14 Hz: 1H); 4,39 (široký d, J = 14 Hz: IH).

Ethyl-l-(dimethylaminoacetyl)piperidin^l-karboxylát se připraví následujícím způsobem:

4,6 g hydrochloridu N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu se přidá, při 20 ^ŮC v atmosféře argonu k roztoku 2,3 g N,N-dimethylglycÍnu, 3,2 ml ethyl-4~piperidinkarboxylátu,

3,4 ml triethylaminu a 0,27 g hydrátu hydroxybenzotriazolu v 100 ml dichlormethanu. Směs se míchá 18 hodin, promyje se dvakrát 100 ml destilované vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 4,6 g ethyl-1 (dimethylaminoacetyl)piperidin-4-karboxylátu ve formě žlutého oleje.

'Η NMR spektrum (250 MHz, (CD₃)₂SO d6 s přidáním několika kapek CD₃COOD d4, δ v ppm): 1,22 (t, J = 7 Hz: 3H); 1,55 (mt: 2H); 1,88 (mt: 2H); 2,37 (s: 6H); 2,60 (mt: IH); od 2,90 do 3,15 (mt: 2H); 3,34 (s: 2H); od 3,90 do 4,15 (mt: 2H); 4,11 (kv, J = 7 Hz: 2H).

-ΛΩVi, JUlWtO DU

Příklad 62 (167?)-16-Deoxo-16-fluor-l 4-O-[ l-{inudazol-l-ylacetyl)piperidin-4-karbonyl]pristÍnamycin

II_B

0,15 g imídazolu a 0,18 g jodidu sodného se přidá při 20 °C, v atmosféře argonu přidá k 0,8 g (167?}-16-deoxo-1 ó-fluor-14-O-( 1 -chloracetylpiperidin-4-karbonyl)pristinamycinu fi_B rozpuštěného v 20 mi dimethylformamidu. Směs se míchá 16 hodin, přidá se 100 ml dichlormeíío hanu. Získaná směs se promyje 50 ml 0,lN vodného roztoku hydroxidu sodného. Organická fáze se slije, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,9 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Po míchání v isopropyletheru, filtraci a sušení (2,7 kPa) při 20 °C se získá 0,38 g (167?)-16-deoxo-16-fluor-14-0-[l-(imidazol-l-ylacetyl)15 piperidin-4-karbonylJpristinamycinu 1I_B ve formě bílého prášku.

'H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,86 (d, J = 6,5Hz: 3H); 0,95 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,04 (d, J - 6,5 Hz: 3H); od 1,35 do 2,30 (mt: 1 IH); 1,78 (s: 3H); 2,67 (mt: IH); od 2,75 do 2,85 (mt: 2H); od 3,10 do 3,35 (mt: 3H); 3,61 (široký d, J = 15 Hz: IH); 3,70 (mt:

IH); 3,81 (mt: 2H); 3,97 (mt: IH); 4,18 (mt: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); od 4,95 do 5,20 (mt: IH); 5,00 (limiting AB: 2H); 5,43 (d, J = 9 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); od 5,70 do 5,80 (mt: IH); 5,80 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,63 (dd, J - 16 a 4 Hz: 1H); 6,86 (s: IH); 7,05 (s: IH); 7,52 (s: 1H); 8,13 (mt: IH); 8,52 (s: IH).

(167?)-16-Deoxo-l6-fluor-l4-0-(1-chloracetylpiperidin-4-karbonyl)pristinamycin II_B se připraví následujícím způsobem:

0,62 g l-chloracetylpiperidin-4-karboxylové kyseliny, 0,62 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,24 g 4-dimethylaminopyridinu se přidá při 20 °C, v atmosféře argonu, k 1,1 g (167?)-16-de30 oxo-16-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 50 ml dichlormethanu. Směs se míchá 16 hodin při 20 °C, filtruje se za odstranění nerozpustných látek. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,8 g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)]. Získá se 0,25 g (167?)—16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-(1 -chloracety lpiperidin-435 karbonyl)pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,70 do 2,05 (mt: 9H); 1,89 (s: 3H); od 2,10 do 2,30 (mt: 2H); 2,55 (mt: IH); 2,77 (mt: IH); od 2,90 do 3,05 (mt: 2H); od 3,15 do 3,35 (mt: 2H); 3,51 (mt: 1H);

od 3,75 do 3,90 (mt: 2H); od 4,00 do 4,15 (mt: IH); 4,07 (s: 2H); 4,31 (mt: IH); 4,52 (mt: IH); 4,78 (široký d, J= 10 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a 3 Hz: IH); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,29 (d, J = 9 Hz: IH); od 5,75 do 5,90 (mt: 3H); 5,92 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

1-Chloracetylpiperidin^l-karboxylová kyselina se připraví následujícím způsobem:

ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se při 20 °C v atmosféře argonu přidá k 2,3 g ethyl-1 -chloracetylpiperidin-4-karboxylátu rozpuštěného v 25 ml ethanolu. Směs se míchá 16 hodin, ethanol se odstraní za sníženého tlaku (2,7 kPa). Potom se ke zbytku přidá 30 ml desti50 lované vody a IN vodný roztok kyseliny chlorovodíkové do pH 4. Získaný roztok se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se dvakrát převrství toluenem a suší se za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získají se 3 g 1-chloracetylpiperidin-4—karboxylové kyseliny ve formě bílé pasty.

-61CZ 301048 B6 'H NMR spektrum (250 MHz, (CD,)₂SO d6, δ v ppm): od 1,25 do 1,65 (mt: 2H); od 1,70 do 1,95 (mt: 2H); 2,40 (mt: IH); 2,79 (mt: IH); 3,11 (mt: IH); 3,75 (široký d, J = 14 Hz: IH); od 4,05 do

4,25 (mt: IH); 4,36 (limitovaný AB, J = 13 Hz: 2H).

Ethy 1-1 -chloracetylpiperidin-4—karboxy lát se připraví následujícím způsobem:

ml chloracetylchloridu se přikape během 10 minut, při 0°C pod argonem k 15,7 g ethyMp: per; din karboxy latu rozpuštěného v 200 mí diCiilúniičiiianu a 14 mi u ičihylammu. Směs se míchá 18 hodin při 20 °C, potom se postupně promyje 100 ml destilované vody, 100 ml nasyceio ného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 100 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 22 g ethy 1-1-chloracety lpi peridin-4-karboxy latu ve formě žlutého oleje.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDClj, δ v ppm): 1,29 (t, J = 7 Hz: 3H); od 1,60 do 1,85 (mt: 2H); 1,95 (mt: 2H); 2,54 (mt: IH); 2,89(mt: IH); 3,19(mt: IH); 3,81 (širokýd, J = 14 Hz: IH); 4,05 (limitovaný AB, J = 12 Hz: 2H); 4,13 (kv, J = 7 Hz: 2H); 4,31 (široký d, J = 14 Hz: 1H).

Příklad 63 (167?)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[l-(4-morfol in-4-ylbutyry l)piperidin—4—karbonyl]pristinamycin 1I₀:

Podle postupu popsaného v příkladu 60 se reaguje 1,80 g (167?)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu I1_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 1,20 g l-(4-morfolÍn-4— ylbutyryl)piperidin-4-karboxylové kyseliny, 0,24 g 4-dimethylaminopyridinu, 30 ml dimethylformamidu a 0,82 g Ν,Ν'-dicykIohexylkarbodiimidu. Po zpracování se surový produkt čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (97/3 objemově)] ao a pak pomocí dvou chromatografii na koloně aluminy CBT1 [mobilní fáze: postupně ethylacetát/methanol (98/2 objemově) a acetonitril/diisopropylether (50/50 objemově)] za získání 0,12 g (167?)-l 6-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[l-(4-iTiorfolin-4-ylbutyryl)piperidin^l-karbonyl]pristinamycinu formě pevné bílé látky.

’H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm). Pozoruje se přítomnost rotamerů v poměru 60-40: 0,87 (mt: 3H); 0,95 (a, J = ó,5 Hz: 3H); i,04 (mt: 3H); od í,20 do 2,30 (mt: I3H); 1,70 a 1,78 (2 s: 3H celkem); 2,27 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,33 (mt: 6H); 2,62 (mt: IH); od 2,70 do 2,80 (mt: 2H); 3,10 (mt: IH); 3,24 (mt: IH); od 3,50 do 4,00 (mt: 6H); 3,57 (mt: 4H); 4,22 (mt: IH); od 4,70 do 4,90 (mt: 2H); 5,09 a od 5,40 do 5,55 (v tomto pořadí dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz a mt: IH celkem); od 5,40 do 5,70 (mt: 2H); od 5,70 do 5, 85 (mt: 2H); 6,19 a 6,24 (2 d, J = 16 Hz: IH celkem); 6,63 (dd, J = 16 a 4,5 Hz: IH); 8,12 a 8,22 (v tomto pořadí mt a t, J = 6 Hz: IH celkem); 8,47 a 8,51 (2 s: IH celkem), l-(4-Morfolin^-l-ylbutyryl)piperidm—4-karboxylová kyselina se připraví následujícím způso45 bem:

6,0 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se přidá k 1,30 g ethy 1-1 -(4-morfolin^E-yIbutyryl)piperidin-4-karboxylátu rozpuštěného v 20 ml ethanolu. Směs se míchá 1,5 hodin při 50 °C, zahustí se téměř do sucha, zředí se 20 ml vody, pH se upraví pomocí přidání IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové na 5, Po odpaření do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 1,6 g l-(4-morfolin^1-y lbutyryl)-4-piperidÍnkarboxylové kyseliny ve formě bělavé pasty.

‘HNMRspektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO dó, δ v ppm): 1,33 (mt: IH); 1,46 (mt: IH); 1,64 (mt: 2H); 1,80 (mt: 2H); od 2,20 do 2,40 (mt: 8H); 2,43 (mt: IH); 2,69 (mt: IH); 3,05 (mt: IH);

3,55 (t, J = 4,5 Hz: 4H); 3,79 (široký d, J = 13,5 Hz: IH); 4,20 (široký d, J = 13,5 Hz: IH).

.6? Ethyl-l-(4-morfclin-4-ylbutyryl)piperidin-4-karboxylát se připraví následujícím způsobem:

0,95 g N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu rozpuštěného v 20 ml dichlormethanu se při 0°C se přidá k 1,0 g 4-morfolinobutanové kyseliny, 0,78 g ethylisonipekotátu, 2,1 ml triethylaminu a 20 mg hydrátu hydroxybenzotriazolu rozpuštěného v 80 ml dichlormethanu. Směs se mícha 20 hodin při 20 °C, promyje se 20 ml vody. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání světle žlutého oieje, který se čistí pomocí chromatografie na aluminové koloně CBT1 [mobilní fáze: dichlorío methan/methanol (97/3 objemově)]. Získá se 1,30 g ethy 1-1-(4-morfolin-4-ylbutyryl)-4piperidinkarboxylátu ve formě světle žlutého oleje.

'HNMR spektrum (300 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 1,20 (t, J = 7Hz: 3H); od 1,25 do 1,60 (mt: 2H); 1,65 (mt: 2H); 1,84 (mt: 2H); od 2,20 do 2,40 (mt: 8H); 2,59 (mt: IH); 2,70 (mt: IH);

3,08 (mt: 1H); 3,57 (t, J - 5 Hz: 4H); 3,82 (široký d, J = 14 Hz: IH); 4,08 (kv, J - 7 Hz: 2H);

4,24 (široký d, J = 14 Hz: IH).

4-Morfolinobutyrová kyselina se připraví podle postupu popsaného v P. A. Cruickshank, a kol., J. Amer. Chem. Soc., 83, 2 891 (1961).

Příklad 64 (16R)~ 16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[c/5-4-(4-morfolinobutyry lamino)-1-cyklohexankarbonyl]25 pristinamycin II_B:

Podle postupu popsaného v příkladu 60 se reaguje 3,2 g (167?)—16-deoxo-l6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 2,0 g cúM-(4-morfolinobutyrylamínojFl-cyklohexankarboxylové kyseliny, 0,40 g 4-dimethylaminopyridinu, 75 ml dimethylformamidu a 1,50 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu. Po zpracování se surový produkt čistí pomocí chromatografie na aluminové koloně CBT1 [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (100/0 a pak 98/2 objemově)], a pak pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol (100/0; 98/2; 95/5 a pak 90/10 objemově)] a znovu pomocí chromatografie na koloně aluminy CBT1 [mobilní fáze: ethylacetát/methanol (99/1 objemově)]. Získá se 0,40 g (16R)-16-deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[cw-4-{4-morfolinobutyiy 1amino)-l-cyklohexankarbonyl]pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

'HNMR spektrum (500 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,86 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,94 (d, J =

6.5 Hz: 3H); 1,04 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,35 do 1,70 (mt: 8H); od 1,75 do 2,25 (mt: 9H); 1,78 (s: 3H); 2,08 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,22 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,31 (nerozlišený signál: 4H); 2,48 (mt:

IH); 2,77 (mt: IH); od 3,15 do 3,30 (mt: 2H); 3,56 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,62 (široký d, J = 15 Hz: IH); od 3,65 do 3,75 (mt: 2H); 3,82 (mt: IH); 3,95 (mt: IH); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 5,09 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,42 (d, J -9,5 Hz: IH); 5,62 (mt: IH); 5,75 (mt: IH); 5,80 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 7,65 (d, J =

4$ 7,5 Hz: IH); 8,12 (t, J - 6 Hz: IH); 8,51 (s: IH).

cw-4-(4-Morfolinobutyiylamino)-l-cyklohexankarboxylová kyselina se připraví následujícím způsobem:

so 6,0 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného se přidá k 1,30 g methyl-cís-4-(4-morfolinobutyrylamino)-l-cyklohexankarboxylátu rozpuštěného v 20 ml ethanolu. Směs se míchá

1.5 hodiny při 50 °C, zahustí se téměř do sucha, pak se zředí v 20 ml vody a pomocí přidání IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové se pH upraví na 5. Po odpaření do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 1,5 g c/s-4-(4-morfolinobutyrylamino)-l-cyklohexankarboxylové kyseliny ve formě bělavé pasty, která se použije v dalším kroku.

-63CZ 301048 B6 ’Η NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): od 1,50 do 1,75 (mt: 6H); od 1,85 do 2,00 (mt: 4H); 2,25 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,44 (mt: IH); 2,61 (t, J - 7,5 Hz: 2H); 2,72 (nerozlišený signál: 4H); 3,80 (mt: 4H); 3,96 (mt: IH); 6,72 (d, J = 8 Hz: IH).

Methyl-c/5-4-(4-morfolinobutyrylamino)-l-cykIohexankarboxylát se připraví následujícím způsobem:

Podle postupu popsaného v příkladu 63 se reaguje 4,20 g hydrochloridu methyl-cř5-4-aminoio cyklohexan-l-karboxylátu, 4,0 g 4-morfolinobutanové kyseliny, 50 mg hydrátu hydroxybenzotriazolu, 11,2 ml triethylaminu, 200 ml dichlormethanu a 4,2 g hydrochloridu N-(3-dimethy 1aminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu. Po zpracování podle postupu popsaného v příkladu 60 se surový produkt čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)] za získání 5,0 g methy4-morfolinobutyrylamino>-l-cyklohexan15 karboxylátu ve formě žlutého oleje.

1H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): od 1,40 do 2,00 (mt: 10H); 2,10 (t, J - 7,5 Hz: 2H); 2,25 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,34 (nerozlišený signál: 4H); od 2,45 do 2,60 (mt: IH); 3,59 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,65 (s: 3H); 3,72 (mt: IH); 7,68 (d, J = 7 Hz: IH).

Hydrochlorid methy 1-cis-4-aminocyklohexan-l-karboxylátu se připraví následujícím způsobem:

ml sulfonylchloridu se přikape do 50 ml methanol ochlazeného na -10 °C. Směs se míchá

10 minut při 20 °C a po částech se pomalu přidá 5,0 g c/s-4-aminocyklohexan-l-karboxylové kyseliny. Směs se míchá 2 hodiny při 20 °C, zahustí se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C a získá se 7,5 g hydrochloridu methyl </5^l-aminocyklohexan-l -karboxylátu ve formě bílého prášku.

*H NMR spektrum (500 MHz, (CD₃)₂SO d6 při teplotě 373 K (100 °C) (100 °C), δ v ppm). Je přítomna směs diastereoizomerů v poměru 80-20: 1,46 a od 1,60 do 1,70 (2 mt: 4H celkem); 1,85 a od 1,95 do 2,15 (2 mt: 4H celkem); 2,30 a 2,60 (2 mt: IH celkem); 3,00 a 3,13 (2 mt: IH celkem); 3,64 a 3,67 (2 s: 3H celkem); 8,12 (nerozlišený signál: 3H).

nvn i » ✓* r riiMau oj (16/?)-l 6-Deoxo-l 6-fluor-14-O-[N-(4-methy lpi perazin-l-ylkarbonyl)glycinyl {pristinamycin IIb

1,21 g N,N'-dicykIohexylkarbodiimidu, 1,07 g N-(4-methylpiperazín-l-ylkarbonyl)glycinu a0,13 g 4-dimethylaminopyridinu se přidá, při 20 °C, k3g (16^)-16-deoxo-16-fluorpristinamycinulI_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 100 ml dichlormethanu. Směs se míchá 24 hodin při 20 °C a přidá se 0,6 g N,N'-dicyklohexylkarbodi45 imidu a 0,065 g 4-dimethylaminopyridinu. Směs se míchá dalších 24 hodin při 20 °C, reakční směs se filtruje a nerozpustná látka se promyje 70 ml dichlormethanu. Po dvou dalších cyklech promytí a filtrace se filtrát odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Zbytek se rozpustí v 50 ml ethanolu, pH se přidáním methansulfonové kyseliny upraví na 2. Po odpaření za sníženého tlaku (2,7 kPa), se zbytek převede do 50 ml vody a extrahuje se dvakrát 50 ml ethyl50 acetátu. Vodná fáze se slije, pH se pomocí IN vodného roztoku hydroxidu sodného upraví na 8/9 a potom se extrahuje třikrát 60 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, promyjí se 50 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 2 g a červeného oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: gradient směsi dichlormethan/methanol/acetonitril (90/5/5 do 80/10/10 objemově].

Získá se 0,222 g žluté pevné látky, která se míchá dvě hodiny ve 20 ml diethyletheru a po filtraci, .ή! .

GL· ouiwta do promytí dvakrát 10 ml diethyíetheru a sušení za sníženého tlaku (2,7 kPa) se získá 0,181 g (16R)~16-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[N-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)glycinyl]pristinamycinu

II_B ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 140 °C (za rozkladu).

'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,60 do 2,05 (mt: 5H); 1,89 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); od 2,20 do

2.35 (mt: IH); 2,31 (s: 3H); 2,40 (mt: 4H); 2,76 (mt: IH); 2,99 (dt, J = 17 a 6 Hz: IH); 3,23 (mt: IH); 3,43 (mt: 4H); 3,49 (mt: IH); 3,85 (mt: IH); 3,94 (dd, J = 18 a 5 Hz: IH); 4,00 do 4,10 (mt: 2H); 4,54 (mt: IH); 4, 78 (široký d, J = 10 Hz: ÍH); 4,82 (dd, j = 9 a 3 Hz: IK), 4,91 (mí:

IH); 5,13 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48Hz: IH); 5,32 (d, J = 9Hz: IH); 5,77 (mt: IH); 5,82 (široký d, J = 17 Hz: IH); 5,86 (mt: IH); 5,95 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH); 6,51 (dd, J = 17 a4Hz: IH); 8,12(s: IH).

N-(4-Methylpiperazin-l-ylkarbonyl)glycin se připraví následujícím způsobem:

2.36 g benzyl-N-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)glycinátu se přidá, při 20 °C, v atmosféře argonu, kO, 15 g 5% paladia na uhlí suspendovaného ve 100 ml methanolu. Směs se míchá

2,5 hodiny při 22 °C při tlaku vodíku 0,16 MPa, přidá se 50 ml vody a směs se filtruje přes Clarcel. Filtrační koláč se třikrát promyje 70 ml vody o teplotě 60 °C. Filtrát se pak odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 50 °C. Zbytek se suší za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 50 °C za získání 1,5 gN-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)glycinu.

'HNMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6 s přidáním několika kapek CD₃COOD d4, δ v ppm): 2,65 (s: 3H); 2,98 (mt: 4H); 3,51 (mt: 4H); 3,68 (s: 2H).

Benzy l-N-(4-methylpiperazin-1-y lkarbonyl)glycinát se připraví následujícím způsobem:

4,2 ml triethylaminu a 3,02 g hydrochloridu benzylglycinátu se přidá při 20 °C ke 3 g hydrochloridu 4-methylpiperazin-l-ylkarbonylchloridu rozpuštěného v 150 ml tetrahydrofuranu.

Směs se míchá 16 hodin při 60 °C, odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) a zbytek se převede do 70 ml dichlormethanu. Organická fáze se postupně promyje dvakrát 100 mí nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 70 ml vody a potom se suší nad síranem hořečnatým, filtruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,9 g benzyl-N(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)glycinátu ve formě pevné bílé látky.

’H NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO dó, δ v ppm): 2,18 (s; 3H); 2,25 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,30 (t, J = 5 Hz: 4H); 3,80 (d, J = 6 Hz: 2H); 5,13 (s: 2H); 7,02 (t, J = 6 Hz: IH); od 7,30 do 7,45 (mt: 5H).

Příklad 66 (167?)-1 6-Deoxo-16-fluor-l 4-O-{4-[(3-karboxy)propyldisulfanyi]butyryl} pristinamycin II_B

1,25 g 4,4'-dithiodibutanové kyseliny, 1,03 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,06 g 4-dimethylaminopyridinu se přidá při 20 °C v atmosféře argonu k 1,75 g (167?)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1) rozpuštěného v 50 ml dichlormethanu. Směs se míchá 18 hodin, přidá se 70 ml dichlormethanu a pak se filtruje za odstranění nerozpustných látek. Filtrát se pak odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 3,3 g zbytku, který se čistí pomocí dvou po sobě následujících velmi rychlých chromatografií [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (96/4 a 97,5/ 2,5 objemově)]. Získá se zbytek, který se převede do 25 ml destilované vody a potom se rozpustí pomocí přidání nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze o pH 7-8 se promyje čtyřikrát 50 ml ethylacetátu a potom se okyselí IN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové na pH 2 až 3. Vznikne pastovítá sraženina, která se rozpustí přidáním 250 ml dichlormethanu. Organická fáze se oddělí,

-65CZ 301048 B6 suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 0,7 g (16/?)-16-deoxo-l6-fluor-14-0-{4-[(3-karboxy)propyldisulfanyl]butyryljpristinamvcinu II_B ve formě pevné bílé látky.

io

Ή NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,50 do 2,30 (mt: 1 IH); 1,90 (s: 3H); od 2,35 do 2,55 (mt: 4H); od 2,65 do 2,85 (mt: 5H); 3,04 (mt: IH); 3,26 (dt, J = 17 a 5 Hz: IH); 3,56 (mt: IH); 3,85 (mt: !H); 4,07 (mt: IH); 4,53 (mí: Hí); od 4,75 do 4,85 (mt: 2H), 5,08 (dekapiuvaiiý dublet, j'hf48 Hz: IH); 5,29 (d, J = 9 Hz: 1H); od 5,75 do 5,90 (mt: 1H); 5,79 (mt: 1H); 5,88 (dd, J = 16 a

1,5 Hz: IH); od 6,10 do 6,25 (mt: IH);· 6,17 (d, J = 15,5 Hz: IH); 6,58 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 8,13 (s: IH).

Příklad 67 (16/?)— 16-Deoxo-16-fluor-14-0-{4-[3-(4-rriethy Ipiperazin-1 -y lkarbony l)propyldisulfanyl]butyryljpristinamycin II_B

0,97 g Ν,Ν-dicyklohexylkarbodiimidu, 0,5 ml 1-methylpiperazinu a 0,08 g 4-di methy lam ino20 pyridinu se přidá pri 20 °C v atmosféře argonu k 1 g (16/?ý-16-deoxo-16-fluor-14-O-{4-[(3karboxy)propyldisulfanyl]butyryl}pristinaniycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 70) rozpuštěného v 93 ml dichlormethanu. Směs se míchá 96 hodin, filtruje se za odstranění nerozpustných látek. Filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání g zbytku, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/ methanol (96/4 objemově)]. Získá se 0,5 g (16/ř)-l 6-deoxo-16-fluor-l 4-O-{4-[3-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)propyldisulfanyl]butyryl}pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

'H NMR spektrum (400 MHz, CDCb, δ v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,65 do 2,10 (mt: 9H); 1,88 (s: 3H); 2,15 (mt: IH); 2,24 (mt:

IH); 2,32 (s: 3H); od 2,35 do 2,50 (mt: 8H); od 2,70 do 2,80 (mt: IH); 2,71 (t, J = 7,5 Hz: 2H); 2,75 (t, J = 7 Hz: 2H); 3,00 (mt: IH); 3,24 (mt: IH); od 3,40 do 3,55 (mt: 3H); 3,64 (t, J = 5 Hz: 2H); 3,86 (mt: IH); 4,06 (mt: IH); 4,55 (mt: IH); 4,78 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 4,82 (dd, J = 9 a

Hz: IH); 5,11 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,30 (d, J = 9,5 Hz: IH); od 5,75 do 5,85 (mt: IH); 5,76 (mt: IH); 5,81 (dd, J = 16 a 2 Hz: IH); 6,01 (mt: IH); 6,19 (d, J = 16 Hz: IH);

6,52 (dd, J = 16 a 5 Hz: IH); 8,12 (s: IH).

Příklad 68 (16/?)-14-0-(3-Karboxy prop iony 1)-16-deoxo- 16-fluorpristinamycin II_A

560 mg (16/?)-ló- Deoxo-16-fluorpristinamycinu IIa (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 8) rozpuštěného v 3 ml pyridinu se umístí do tříhrdlé baňky a pak se při 20 °C přidá 286 mg anhydridů kyseliny jantarové a pak 120 mg 4-dimethylaminopyridinu. Směs se míchá

18 hodin, nalije se do 50 ml destilované vody a 10 ml dichlormethanu. Přidá se 0,lN vodný roztok kyseliny chlorovodíkové a pH se tak upraví na 4. Směs se filtruje přes zátku z vaty za odstranění nerozpustných látek a potom se slije. Vodná fáze se promyje dvakrát 10 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí, přidá se k nim methanol až do dokončení rozpouštění, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 670 mg pevné látky, která se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: díchlormethan-methanol (97-3 objemově)]. Získá se 530 mg produktu, který se znovu čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: díchlormethan-methanol (95-5 objemově)] za získání pevné bílé látky, která se míchá 15 minut v 5 ml diethyletheru, filtruje se a pak suší pri 50 °C (90 Pa). Získá se 147 mg (16R)-14-0-(3-karboxypropionyl)-l 6-deoxo-16-fluorpristinamycinu II_A ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 156 °C (za rozkladu).

C/L JUímo DU 'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,99 (mt: 6H); 1,13 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,83 (s: 3H); od 1,90 do 2,10 (mt: 2H); 2,27 (mt: IH); od 2,50 do 2,90 (mt: 7H); 3,08 (mt: 1H); 3,28 (mt: IH); 4,00 (široký d, J = 18 Hz: IH); 4,12 (mt: IH); 4,20 (mt: IH); 4,30 (mt: IH); 4,72 (dekaplovaný dublet, Jhf ⁼ 48 Hz: IH); od 4,85 do 5,00 (mt: 2H); 5,67 (mt: IH); 5,71 (mt: IH); 5,96 (d, J = 16 Hz: IH); 5,98 (d, J = 17 Hz: IH); 6,18 (široký t, J = 2 Hz: IH); 6,61 (dd, J = 17 a 7 Hz: IH); 7,02 (mt: IH); 7,96 (s: IH).

io Příklad 69

Hydrochlorid (16/2)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[3-(4-methy lpiperazin-1 -y Ikarbony 1)propionyljpristinamycinu II_A

K 355 mg (16/2)-16-deoxo-16-fluor-14-O-[3-(4-niethy lpiperazin-1 -ylkarbonyl)propionyl]pristinamycinu 11_A rozpuštěného v 3,5 ml absolutního ethanolu se přidá 0,167 ml 3M etherického roztoku chlorovodíku a potom pomalu 7 ml diethyletheru, dokud se produkt sráží. Směs se míchá 15 minut, produkt se filtruje, promyje se minimálním množstvím směsi ethanol-ether (1/2) a pak se suší při 20 °C (90 Pa) za získání 305 mg hydrochloridu (16/2)-16-deoxo-16-fluor-14—0—[3— (4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)propionyl]pristinamycinu II_A ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 192 °C.

Ή NMR spektrum (400 MHz, (CD₃)₂SO d6, δ v ppm): 0,87 (d, J = 6,5 Hz; 3H); 0,96 (d,J =

6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,78 (s: 3H); 1,93 (mt: IH); 2,02 (mt: IH); 2,18 (mt: IH);

od 2,50 do 2,8 o (mt: 7H); 2,78 (s: 3H); od 2,80 do 3,55 (mt: 8H); 3,66 (široký d, J = 16 Hz: IH); od 3,90 do 4,25 (mt: 3H); 4,14 (mt: IH); od 4,25 do 4,55 (nerozlišený signál: IH); 4,77 (dd, J = 9 a 1,5 Hz: IH); 5,05 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,38 (d, J = 9,5 Hz: IH); 5,71 (mt: 2H); 5,88 (d, J = 16 Hz: IH); 6,12 (d, J = 16 Hz: IH); 6,36 (široký t, J = 2 Hz: IH); 6,62 (dd, J = 16 a 5,5 Hz: IH); 8,03 (mt: IH); 8,61 (s: IH); 10,58 (nerozlišený signál: IH).

(16/2)-16-Deoxo-l 6-fluor-l 4-0-[3-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)propionyl]pristinamycÍn 1I_A se připraví následujícím způsobem:

848 mg (16/2)-16-deoxo-l 6-fluorpristinamy činu II_A (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 8), 24 ml dichlormethanu a 352 mg 4-(4-methylpiperazin-l-yl)-4~oxobutanové kyseliny se uvede do baňky s kulatým dnem umístěné v atmosféře dusíku. Získaná směs se zahřívá dokud se nedosáhne rozpuštění a potom se při teplotě místnosti přidá 360 mg N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a 20 mg 4-dimethylaminopyridinu. Směs se míchá 18 hodin při 20 °C, přidá se dalších 36 mg Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 20 mg 4-dimethylaminopyridinu,

Reakční směs se potom míchá 1 týden při 20 °C, promyje se ethylacetátem a odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se hustý olej, který se převede do 15 ml ethylacetátu a 30 ml dichlormethanu. Organická fáze se promyje třikrát 30 ml destilované vody, slije se, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 1,05 g žlutého oleje, který se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze:

dichlormethan-methanol (95-5 objemově)]. Získá se 840 mg produktu, který se míchá 18 hodin v 16 ml diethyletheru, filtruje se a pak suší při 20 °C (90 Pa) za získání 640 mg (16/2)-16-deoxo16-fluor-l 4~Q-[3-(4-methylpiperazin-l-y lkarbonyl)propionyl]pristinamycinu II_A ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 130 °C.

4-(4-Methylpiperazin-1 -yl)-4~oxobutyrová kyselina se připraví následujícím způsobem:

1,17 g anhydrid kyseliny jantarové a pak 1,19 ml N-methylpiperazinu se přidá k 20 ml dioxanu. Směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti, získaná sraženina se filtruje, promyje se minimálním množstvím dioxanu a pak, postupně, dvakrát 10 ml acetonu a 10 ml diethyletheru. Po sušení

-67CZ 301048 B6 za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 ⁹C se získá 1,09 g 4-(4—methylpiperazin-l-yl}-4-oxobutanové kyseliny ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 114 °C.

Příklad 70 (167Ž)-14-0-(4-Karboxybutyryl)-16-deoxo-16-fluorpristinamycin 1I_A

0,68 g anhydridu giutarové kyseliny a 0,24 g 4-dimethylaminopyridinu se přidá pri 20 °C io v atmosféře argonu k 1,05 g (167?)-16-deoxo-l6-fluorpristinamycmu II_A (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 8) rozpuštěného v 5,5 ml pyridinu. Směs se míchá 24 hodin, odpaří se do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání zbytku, který se převede do 110 ml ethylacetátu a 55 ml destilované vody. Organická fáze se slije, promyje se postupně dvakrát 55 ml destilované vody, 55 ml 0,lN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, dvakrát 55 ml destilo15 vane vody a dvakrát 55 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým a filtraci se organická fáze odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 0,95 g zbytku, který se rozpustí v 100 ml dichlormethanu a extrahuje se 100 ml 1% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Ke získané emulzi se přidá 500 ml ethylacetátu, což umožní slití. Vodná fáze se oddělí, promyje se znovu třikrát 100 ml ethylacetátu, okyselí se IN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové do pH okolo 2 a potom se extrahuje třikrát dichlormethanem (200, 100 a 100 ml). Organické fáze se spojí, suší se nad síranem horečnatým, filtrují se a pak se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa). Získá se 0,33 g (167?)-14-O-(4-karboxybutyryl)16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu II_A ve formě béžové pevné látky o teplotě tání 116 °C (za rozkladu).

'HNMR spektrum (400 MHz, CDC1_S, δ v ppm): 0,98 (mt: 6H); 1,12 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,80 do 2,10 (mt: 4H); 1,82 (s: 3H); od 2,15 do 2,45 (mt: 5H); od 2,65 do 2,90 (mt: 3H); 3,08 (mt: IH); 3,26 (dt, J = 16 a3,5 Hz: IH); 3,99 (široký d, J = 18 Hz: IH); od4,05 do4,35 (mt: 3H); 4,71 (dekaplovaný dublet, J_HF = 48 Hz: IH); od 4,85 do 5,00 (mt: 2H); od 5,60 do 5,75 (mt: 2H);

5,96 (d, J = 16 Hz: IH); 5,98 (široký d, J = 16 Hz: 1H); 6,18 (t, J - 3 Hz: IH); 6,61 (dd, J = 16 a 7 Hz: IH); 7,09 (t, J = 5,5 Hz: IH); 7,95 (s: IH).

Příklad 71 (16/?)— I 6—Dcoxo— 1 u—fíuoí— i 4—čť—[4—(4—iiieiiiyipipcrazin— i—yiKaroonyi^Duiyryijpnsnnamycin

Ha

0,48 g 4-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)butanové kyseliny, 0,48 g Ν,Ν'-dicyklohexylkarbo40 diimidu a 0,14 g 4-dimethylaminopyridinu se přidá při 20 °C v atmosféře argonu k 1 g (16/?)16-deoxo-l 6-fluorpristinamycinu IÍ_A (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 8) rozpuštěného v 30 ml dichlormethanu. Směs se míchá 20 hodin pri 20 ^ŮC, naiije se do 50 ml destilované vody a 10 ml dichlormethanu. Výsledná směs se filtruje za odstranění nerozpustných látek. Organická fáze se slije a vodná fáze se potom extrahuje dvakrát 10 mt dichlormethanu. Organic45 ké fáze se spojí, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a potom se odpaří do sucha za sníženého tlaku (2,7 kPa) za získání 1,6 g zbytku, který se čistí pomocí dvou po sobě následujících chromatografií [mobilní fáze: dichlormethan/methanol (95/5 objemově)]. Po míchání v diethyletheru, filtraci a sušení (2,7 kPa) se získá 0,6 g (16/?)-l 6-deoxo-l 6-fluor-l 4-O-[4-(4-methylpiperazin-l-ylkarbonyl)butyiyl]pristinamycinu II_A ve formě pastovité pevné látky o teplotě tání so 120 °C.

'HNMR spektrum (500 MHz, CDClj, δ v ppm): 0,99 (mt: 6H); 1,13 (d, J = 6,5Hz: 3H); 1,84 (s: 3H); od 1,90 do 2,10 (mt: 2H); 1,92 (mt: 2H); od 2,15 do 2,45 (mt: 9H); 2,30 (s: 3H); od 2,65 do 2,90 (mt: 3H); 3,07 (mt: IH); 3,27 (dt, J = 15 a 3,5 Hz: IH); 3,46 (mt: 2H); 3,63 (mt: 2H);

3,99 (široký d, J = 17,5 Hz: IH); od 4,10 do 4,25 (mt: 2H); 4,30 (mt: IH); 4,71 (dekaplovaný

CZ JUUPtO DU dublet Jhf = 48 Hz: IH); 4,90 (d, J = 9,5 Hz: IH); 4,95 (dd, J = 10 a 2 Hz: IH); 5,65 (dt, J = 9,5 a 4 Hz: IH); 5,72 (mt: IH); 5,96 (d, J = 16 Hz: IH); 5,98 (široký d, J - 16,5 Hz: IH); 6,17 (t,

J = 3 Hz: 1H); 6,60 (dd, J = 16,5 a 7Hz: IH); 7,02 (t, J = 5,5Hz: IH); 7,94 (s: IH).

4-(4-Methylpiperazin- 1-y lkarbony l)butanová kyselina se připraví podle postupu popsaného vDE 78-2851953.

Příkiad 72 io (16/0-16-Deoxo-16-fluor-14-0-{(//?,2/?H2-(4-methylpiperazin-l-yl)karbonyl]-l-cyklohexankarbonyl} pristinamycin ÍÍ_B:

Podle postupu popsaného v příkladu 60 se reaguje 0,83 g (16R)-l6-deoxo-ló-fluorpristin15 amycinu II_B (připraveného podle postupu popsaného v příkladu 1), 0,40 g (//ř,2/?)-2-[(4-methylpiperazin-l-yl)karbonyl]-l-cyklohexankarboxylové kyseliny, 0,10 g 4-dimethylaminopyridiny, 30 ml dichlormethany a 0,40 g N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu. Po podobném zpracování, jako je popsáno v příkladu 60 se surový produkt čistí pomocí velmi rychlé chromatografie [mobilní fáze: dichlormethan/acetonitril/methanol (90/5/5 objemově)] a pak pomocí chromatografie na aluminové koloně CBT1 [mobilní fáze: ethylacetát/methanol (98/2 objemově)] za získání 0,40 g (16/0-1 6-deoxo-l 6-fluor-14-O-{(//<2/?)-[2-(4-rnethylpiperazin-l-yl)karbonyl]-l-cyklohexankarbonyl} pristinamycinu II_B ve formě pevné bílé látky.

’H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): 0,95 (d, J - 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,09 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,20 do 1,45 (mt: 4H); od 1,55 do 2,45 (mt: 17H); 1,83 (s: 3H);

2,50 (mt: IH); od 2,70 do 2,85 (mt: 3H); 3,00 (mt: IH); 3,22 (mt: IH); 3,44 (mt: IH); od 3,45 do 3,65 (mt: 4H); 3,88 (mt: IH); 4,04 (mt: IH); 4,53 (mt: IH); od 4 ;70 do 4,85 (mt: 2H); 5,10 (dekaplovaný dublet, Jhf = 48 Hz: IH); 5,29 (d, J = 10 Hz: IH); od 5,65 do 5,80 (mt: 2H); 5,81 (široký d, J = 16 Hz: IH); 6,02 (mt: IH); 6,18 (d, J = 16 Hz: IH); 6,50 (dd, J = lóa 4 Hz: IH);

8,12 (s: IH).

(//?,2/?)-2-[(4-Methylpiperazin-l-yl)karbonyI]-l-cyklohexankarboxylová kyselina se připraví následujícím způsobem:

0,37 ml N-methylpiperazinu rozpuštěného v 5 ml dioxanu se přidá v atmosféře argonu, při 15 °C k 0,50 g anhydridu (-)-/ra«5-l,2-cyklohexandikarboxylové kyseliny rozpuštěné v 20 ml dioxanu. Po 1,25 hodiny při 20 °C se reakční směs filtruje, pevná látka se promyje 20 ml diethyletheru, rozpouštědlo se odstraní a pak se suší za sníženého tlaku (2,7 kPa) při 20 °C za získání 0,65 g (//?,2/?)-2-(4-methylpiperazin-l-yl)karbonyl]-l-cyklohexankarboxylové kyseliny ve formě pevné bílé látky.

*H NMR spektrum (400 MHz, CDC1₃, δ v ppm): od 1,20 do 1,60 (mt: 4H); od 1,65 do 1,90 (mt: 3H); od 2,05 do 2,35 (mt: 3H); 2,37 (s: 3H); od 2,70 do 2,95 (mt: 5H); 3,43 (mt: IH); 3,84 (široký d, J = 13,5 Hz: IH); 4,30 (d, J - 12,5 Hz: IH).

Příklad 73 (16/0-16-Azido-l 6-deoxopristinamycin Π_Β

Podle postupu popsaného v příkladu 4 se reaguje tetra-n-butylamoniumazid a získá se (167?)— 16-azido-l 6-deoxopristinamycin IÍ_B ve formě pevné bílé látky o teplotě tání 135 °C (za rozkladu).

-69CZ 301048 B6 'H NMR spektrum (400 MHz, CDC1,, 8 v ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,01 (d, J = 6,5 Hz:

3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); od 1,50 do 1,65 (mt: IH); od 1,75 do 2,05 (mt: 5H); 1,88 (s: 3H);

2.15 (mt: 1H); 2,77 (mt: IH); 2,90 (dd, J = 17 a 6 Hz: 1H); 3,15 (dd, J = 17 a 7 Hz: 1H); 3,49 (mt: IH); 3,88 (mt: 1H); od 3,95 do 4,15 (mt: 2H); 4,54 (mt: 1H); od 4,70 do 4,80 (mt: 2H); 4,83 (dd, J = 9 a 3 Hz: 1H); 5,37 (d, J = 9,5 Hz: 1H); 5,75 (mt: 1H); 5,82 (dd, J = 17 a 1,5 Hz: 1H); 5,97 (mt: 1H); 6,22 (d, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 17 a 5 Hz: 1H); 8,15 (s: IH).

D rarl 1/1Λ rl n nv

1VUI\1UUUUJ /'t írtA 1 Λτ r jr uuivzu t-nlrQ ·Ρη nnnníl lz x* rtUnnkitt aninL trtrlriM rJrttmrZi luav íM-» luuvvwuviKjvu ivviiiv uvaauujIVIVil HtJlIlVltV JVUVII UVII ναι streptograminu podle předkládaného vynálezu v čistém stavu, v kombinaci s nejméně jedním derivátem streptograminu skupiny B, pokud je to vhodné, ve formě soli, a/nebo ve formě kombinace s jedním nebo více kompatibilními farmaceuticky přijatelnými ředidly nebo adjuvanty.

Kompozice podle předkládaného vynálezu se mohou použít orální, parenterální, místní nebo rektální cestou nebo ve formě aerosolů.

Jako pevné kompozice pro orální podávání se mohou použít tablety, pilulky, želatinové tobolky, prášky nebo granule. V těchto kompozicích je obvykle aktivní látka podle předkládaného vynálezu, obvykle ve formě kombinace, smísena s jedním nebo více inertními ředidly nebo adjuvanty, jako je sacharóza, laktóza nebo škrob. Tyto kompozice mohou obsahovat látky jiné, než ředidla, například lubrikanty, jako je stearát horečnatý nebo povlaky určené pro kontrolované uvolňování.

Jako kapalné kompozice pro orální podávání se mohou použít roztoky, které jsou farmaceuticky přijatelné, suspenze, emulze, sirupy a elixíry obsahující inertní ředidla, jako je voda nebo parafinový olej. Tyto kompozice mohou také obsahovat látky jiné, než ředidla, například smáčedla, sla25 didla nebo příchutě.

Kompozicemi pro parenterální podávání mohou být emulze nebo sterilní roztoky. Jako rozpouštědla nebo vehikula se mohou použít propylenglykol, polyethylenglykol, rostlinné oleje, zejména olivový olej nebo injektovatelné organické estery, například ethyloleát. Tyto kompozice mohou také obsahovat adjuvanty, zejména smáčedla, isotonizující látky, emulgátory, dispergační Činidla a stabilizační činidla.

Sterilizace se může provádět pomocí několika způsobů, například pomocí bakteriologického filtru, pomocí ozáření nebo zahřívání. Tyto kompozice se mohou také připravit ve formě sterilních pevných kompozic, které se mohou rozpustit těsně před použitím ve sterilní vodě nebo v jakémI\VJJ JIIJVlll 1IIJ ViUVV ULV1UVI1I OLV1 liliím IIIVUIU»

Kompozicemi pro místní podávání mohou být například krémy, masti, vody nebo aerosoly.

Kompozicemi pro rektální podávání jsou čípky nebo rektální tobolky, které obsahují kromě aktivní látky přísady, jako je kakaové máslo, polosyntetické glyceridy nebo polyethylenglykoly.

Kompozicemi mohou být také aerosoly, Pro použití ve formě kapalných aerosolů mohou být kompozicemi stabilní sterilní roztoky nebo pevné kompozice, které se rozpustí těsně před použi45 tím v apyrogenní sterilní vodě, šalinu nebo jakémkoli jiném farmaceuticky přijatelném vehikulu. Pro použití ve formě suchých aerosolů určených pro přímou inhalaci může být aktivní látka jemně rozetřená a kombinovaná s pevným ředidlem nebo vehikulem rozpustným ve vodě o distribuci velikosti částic 30 až 80 μπι, například s dextranem mannitolem nebo laktózou.

so V humánní terapii jsou nové deriváty streptograminu podle předkládaného vynálezu zvláště vhodné při léčbě infekcí bakteriálního původu. Dávky závisí na požadovaném účinku a trvání léčby. Lékař určí nej vhodnější dávku v závislosti na léčbě, v závislosti na věku, hmotnosti a stupni infekce a dalších faktorech, které jsou specifické pro léčeného pacienta. Obecně se budou dávky pro dospělého člověka pohybovat mezi 0,5 až 3 g aktivní látky ve 2 až 3 dávkách za den orální nebo parenterální cestou.

-70CL JUlU<tO DO

Příklad

Pomocí běžných postupů se připraví tablety obsahující dávku 250 mg aktivní látky, které mají následující složení:

- (167?}-16-deoxo-16-fluorpristinamycin I1_B 175 mg

- pristinamycin I_B 75 mg

- excipient: škrob, hydratovaná silika, dextrin, želatina, stearát hořečnatý: qs 500 mg

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát streptograminu skupiny A obecného vzorce I:

kde:

20 - Ri je atom halogenu nebo azidoskupina nebo thiokyanatoskupina,

- R₂ je atom vodíku nebo methylová skupina nebo ethylová skupina,

- R₃ je atom vodíku, skupina R'₃-CO-, kde R'₃ je fenylová skupina nebo fenylalkylová skupi25 na, které jsou nesubstituované nebo které jsou substituované na fenylové skupině jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří (Ci^C₎₂)alky{ová skupina, popřípadě nesoucí skupinu NR'R, kde R' aR, které jsou stejné nebo různé, mohou být atomy vodíku nebo alkylové skupiny, které mohou společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tvořit tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklylový zbytek popřípadě obsahující jiný hetero30 atom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, kdy tento heterocyklus samotný může být substituovaný jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří (Ci-Ci₂)alkylová skupina, hydroxy(Ci-C_l2)alkylová skupina, (Ci^C|₂)alkyloxy(Ci-Ci₂)alkylová skupina, (CiCi₂)alkyloxykarbonyl(Ci-C|₂)alkylová skupina, arylová skupina, heterocyklylová skupina, heterocyklyl(Ci^Ci₂)alkylová skupina, které jsou nasycené nebo nenasycené a obsahují 3 až 8 členů

35 nebo skupina -CH₂-CO-NR'R, nebo alternativně R' a/nebo R mohou být hydroxy(Ci-C|₂)alkylová skupina, fenylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklylaikylová skupina, skupina ^CO-NR'R, kde NR'R je stejné, jako je definováno výše, nebo (Ci-Ci₂)alkylová skupina nebo (Ci-C_]2)acylová skupina, které jsou substituované skupinou NR'R, která je definovaná výše; nebo alternativně R'₃ může být vybrána ze skupiny, kterou

40 tvoří fenylová skupina nebo fenyl(Ci-C_i2)alkylová skupina, které jsou substituované na fenylové skupině jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří (Ci-Ci₂)alkylová skupina, která může být substituovaná (Ci-Ci₂)alkyloxyskupinou nebo (C|-Ci₂)alkylthioskupinou, které samotné popřípadě nesou karboxylovou skupinu nebo skupina NR'R, která je definovaná výše, nebo vybranými z (CrC|₂)acy loxy skupin, které mohou být substituované NR'R, jak

45 je definováno výše; nebo alternativně může být R^f3 vybraná ze skupiny, kterou tvoří (Ci—Ci₂)alkylová skupina nebo cykloalkyiová skupina, které jsou popřípadě substituované skupinou

-71 CZ 301048 B6 vybranou ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, karboxy(C)-Ci₂)alkyldisulfanylová skupina nebo skupina NRR, skupina -CH₂-NR'R, nebo skupina -CO-NR R , nebo (CjC_]2)aikyloxykarbony lovou skupinou, (C)-C_!2)alkyloxyskupinou nebo (C,-C_l2)alky ldisulfany lovou skupinou, které jsou popřípadě substituované skupinou NRR nebo skupinou -CO-NRR”,

5 kde NRR” je definovaná výše; nebo alternativně R'₃ může být vybrána z tříčlenných až osmičlenných nasycených nebo nenasycených heterocyklylových skupin, které jsou popřípadě substituované (Ci~C_]2)aIkylovou skupinou nebo (C,-C₁₂)acy lovou skupinou, které jsou samotné nnnřínadř Íithstitimvané cVnnirtnn r~r i----------------------_r-----* ,

10 - vazba---ie jednoduchá vazba, která má stereochemii 27R, nebo dvojná vazba, ajeho soli, pokud existují.

2, Derivát streptograminu skupiny A podle nároku 1 vzorce I, ve kterém:

Rj je tom fluoru, chloru, bromu nebo jodu nebo azídoskupina nebo thiokyanatoskupina,

- R₂ je methylová skupina,

- R₃ je atom vodíku nebo skupina RN-CO-, kde R'₃ je fenylová skupina nebo fenyl(C]-C₁₂)alkylová skupina, které jsou substituované nebo nesubstituovaná na feny lové skupině jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří (C[-Ci₂)alkylová skupina, popřípadě nesoucí skupinu NRR, kde R' a R. které jsou stejné nebo různé, mohou být atomy vodíku nebo (C|-Ci₂) alkylové skupiny, které mohou tvořit společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklylový zbytek popřípadě obsahující jiný heteroatom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, přičemž samotný tento heterocyklus může být substituovaný jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří (C]-Ci₂)alkylová skupina, hydroxy(Ci-C₎₂)alkylová skupina, (Ci-C|₂)alkyloxy(C)-Ci₂)alkylová skupina, (C|-Ct₂)alkyloxykarbonyl(C]-Ci₂)skupina, arylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklylová skupina nebo heterocyklyl alky lová skupina, nebo skupina -Chh-CO-NR R'; nebo alternativně R' a/nebo R může být hydroxy(Ci-C|₂)alkylová skupina, fenylová skupina, tříčlenná až osmičlenná nasycená nebo nenasycená heterocyklyl(Ci-C_]2)alkylová skupina, skupina -CO-NRR, kde NRR je definováno výše, nebo (Cj~C,₂)alkylová skupina nebo (Ci-Ci₂)acylová skupina, které jsou substituované skupinou NR'R definovanou výše; nebo alternativně R'₃ může být fenylová skupina substituovaná jednou nebo více skupinami vybranými 'ra fUímÍniř

ItlVlVU UVII ν'—'1 r· A i-*—χ —λλv|7/wmjiVTtt ortupincij rtxvia itiu^V být substituovaná (Ci~Ci₂)alkyloxyskupinou nebo (Ci^Ci₂)alkylthioskupinou, která je samotná popřípadě substituovaná karboxylovou skupinou nebo skupinou NR^řR která je definovaná výše, nebo vybraná z (C|-C)₂)acyloxyskupiny, která může být substituovaná skupinou NRR', která je definovaná výše; nebo alternativně R₃ může být vybraná ze skupiny, kterou tvoří (C)-C|₂)alkylová skupina nebo cykloalkylová skupina, které jsou popřípadě substituované karboxylovou skupinou nebo karboxy(C|-Ci₂)alky ldisulfany lovou skupinou nebo skupinou NR'R, skupinou -CHr-NR R nebo skupinou -CO-NRR, nebo (Cj-Ci₂)alkyloxykarbonylovou skupinou, (Ci-C|₂)alkyloxyskupinou nebo (C[-C|₂)alkyldisulfanylovou skupinou, které jsou popřípadě substituované skupinou NR'R nebo -CO-NR'R, kde NRR je definovaná výše; nebo alternativně R₃ může být vybraná ze skupiny, kterou tvoří tříčlenný až osmičlenný nasycený nebo nenasycený heterocyklický zbytek, který je popřípadě substituovaný (C]^C|₂)alkylovou skupinou nebo (C|-C₁₂)acylovou skupinou, které jsou samotné popřípadě substituované skupinou NR'R; přičemž se rozumí, že heterocy kly jsou vybrány ze skupiny, kterou tvoří pyrrolidinylová skupina, imidazolylová skupina, pyridylová skupina, piperidinylová skupina, piperazinylová skupina nebo morfolinylová skupina a

- vazba---je jednoduchá vazba, která má stereochemii 27R, nebo dvojná vazba,

55 ajeho soli.

.72ví. «τνχν*τσ υυ

3. Derivát streptograminů skupiny A podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kterým je (167?)- 16-deoxo-16-fluorpristinamycin 1I_B.

5 4. Derivát streptograminů skupiny A podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kterým je (16/ř)— 16-deoxo-l 6-thiokyanatopristinamycin II_B.

5. Derivát streptograminů skupiny A podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kterým je (167?)-16-deoxo- i ó-chiorpristinamyvin II_B,

6. Derivát streptograminů skupiny A podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kterým je (167?)—16— azido-16-deoxopristinamycin II_B.

7. Derivát streptograminů skupiny A podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kterým je (16/?)—16—de15 oxo-16-fluorpristinamycin II_A.

8. Způsob přípravy derivátu streptograminů skupiny A podle nároku 1, vyznačující se tím, že se derivát streptograminů obecného vzorce II:

20 kde R.2 je definovaná výše, vazba---je jednoduchá vazba se stereochemií 27R, nebo dvojná vazba, a kde hydroxylová funkční skupina v poloze 14 se předem ochrání, v poloze 16 halogenuje, převede na azid nebo převede na thiokyanát, potom následuje odstranění chránící skupiny a pokud je to vhodné za účelem získání derivátu streptograminů skupiny A podle nároku 1, kde R₃ je jiná, než atom vodíku, se do polohy 14 zavede alifatický, cykloalifatický, aromatický, aryl25 alifatický, heterocyklický nebo heterocykiylalifatický esterový zbytek, který může být substituovaný (R₃) a popřípadě se převede na sůl.

9. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že se provádí v přítomnosti aminosulfurtrifluoridu nebo v přítomnosti fluoridu siřičitého pomocí činidla, jako je tetra(C]-C|₂)alkyl30 amonium, trí^-C^jalkylbenzylamonium nebo tri(Ci-Ci2)alkylfeny lamonium halogenid, azid nebo thiokyanát nebo pomocí halogenidu, azidu nebo thiokyanátu alkalického kovu doplněného crown etherem.

10. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že se provádí v případě fluorace

35 působením fluoračního činidla vybraného ze fluoridu síry, hexafluorpropyldíethy laminu nebo N(2-chlor-l, 1,2-trifluorethyldiethylaminu.

11. Způsob podle kteréhokoli z nároků 8,9 nebo 10, vyznačující se tím, že se esterifikace provádí pomocí jakéhokoli známého způsobu, který nemění zbytek molekuly.

12. Způsob podle kteréhokoli z nároků 8, 9 nebo 11, vyznačující se tím, že aminosulfurtrifluorid může být vybrán z diethylaminosulfurtrifluoridu, bis-{2-methoxyethyl)aminosulfurtrifluoridu nebo morfolinosulfurtrifluoridu.

-73CZ 301048 B6

13. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje derivát streptograminu skupiny A podle nároku 1, v čistém stavu nebo ve formě směsi s nejméně jedním derivátem streptograminu skupiny B, pokud je to vhodné, ve formě soli, a/nebo ve formě směsí s jedním nebo více kompatibilními farmaceuticky přijatelnými ředidly nebo adjuvanty.

14. Farmaceutická kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že derivát streptograminu skupiny B je vybrán z přírodních složek: pristinamycinu I_A, pristinamycinu I_B, nnstinarnyrinu !_c, pristinamycinu 1_D, pristinamycinu 1_E, pristinamycinu Í_F, pristinamycinu virginiamycinu S|, S₃ nebo S4, vemamycinu B nebo C, etamycinu nebo z polosyntetických deri10 vátů obecného vzorce A:

kde:

1. Rb, Rc, Re a Rf jsou atomy vodíku, Rd je atom vodíku nebo dimethylaminoskupina, a Ráje

15 struktura vzorce -CH₂R' a, kde R'a je 3-pyrrolidinyíthioskupina nebo 3- nebo 4-piperidylthioskupina, která může být substituovaná (C|-C₁₂)alkylovou skupinou, nebo (C|—Ci₂)alkylthíoskupinou substituovanou 1 nebo 2 hydroxysulfonylovými skupinami, (Cj—Ci₂)alkylaminoskupinami, di(C|-Ci₂)alkylammoskupinami, které jsou samotné popřípadě substituované merkaptoskupinou nebo dialkylaminoskupinou, nebo substituovaná 1 nebo 2 popřípadě

20 substituovanými piperazinovými kruhy, morfolinoskupinami, thiomorfolinoskupinami, piperidinoskupinaml, l-pymflidinylovými skupinami, 2 3- nebo 4-piperidylovými skupinami nebo 2- nebo 3-pyrrolidinylovými skupinami, které mohou být substituovány alkylovou skupinou; nebo alternativně Kaje skupina vzorce =CHKa, kde Kaje J-pyrrohdinylaminoskupina, 3- nebo 4_piperidy (aminoskupina, 3-pyrrolidinyloxyskupina, 3- nebo 425 piperidyloxyskupina, 3-pyrrolidinylthioskupina, 3- nebo 4-piperidylthioskupina, které mohou být substituované alkylovou skupinou, nebo R a je alkylaminoskupina, (Ci—C_I2)alkyloxyskupina nebo (Ci-Ci₂)alkylthioskupina substituovaná 1 nebo 2 hydroxysulfonylovými skupinami, (C)-Ci₂)alkylaminoskupinami, dÍ(Ci~C₁₂)alkylaminoskupinami, které jsou samotné popřípadě substituované di(C]-C₁₂)aIkyIaininoskupinou; tri(Ci^C|₂)alkylamonio30 skupinami, 4-nebo 5-imidazolylovými skupinami, nebo 1 nebo 2 popřípadě substituovanými piperazinovými kruhy, morfolinoskupinami, thiomorfolinoskupinami, piperidinoskupinami, 1-pyrrolidinylovými skupinami, 2-, 3- nebo 4-piperidylovými skupinami nebo 2nebo 3-pyrrolidinylovými skupinami, které mohou být substituované alkylovou skupinou, nebo

Ra je 3- nebo 4-chinuklidinylthiomethylová skupina nebo alternativně

2. Ra je atom vodíku a

40 a) buď Rb, Re a Rf jsou atomy vodíku, Rd je skupina -NHCH₃ nebo skupina -N(CH₃)₂ a Rc je atom chloru nebo atom bromu, neboje to alkenylová skupina obsahující 3 až 5 atomů uhlíku, pokud Rdje skupina-N(CH₃)₂,

- 74 GL· JU1V*»O DU

b) nebo Rb, Rd, Re a Rf jsou atom vodíku a Rc je atom halogenu, nebo aminomono(C|-C_!2)alkylová skupina, aminodi(CH2i₂)alkylová skupina, (Ci-C|₂)alkyloxyskupina, trifluormethyloxyskupina, thioalkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku

5 nebo trihalogenmethylová skupina,

c) nebo Rb, Rc, Re a Rf jsou atom vodíku a Rd je atom halogenu, nebo ethylaminoskupina, diethylaminoskupina nebo methy lethy laminoskupina, (C|-Ci₂)alkyloxyskupina nebo trifluormethyioxyskupina, thio(Ci-Ci₂)alkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až io 6 atomů uhlíku, arylová skupina nebo trihalogenmethylová skupina,

d) nebo Rb, Re a Rf jsou atom vodíku a Rc je atom halogenu nebo aminomono(Ci-Ci₂)alkylová skupina nebo aminodi(Ci^Ci₂)alkylová skupina, (C_t—Ci₂)alky loxy skupina nebo trifluormethyloxyskupina, thio(C₁-C_t2)alkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy

15 uhlíku, a Rd je atom halogenu nebo aminoskupina, aminomono(Ci-Ci₂)alkylová skupina nebo aminodi(Ci-Ci₂)alkylová skupina, (Ci-Ci₂)alkyloxyskupina nebo trifluormethyloxyskupina, thio<Ci-C₁₂)alkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo trihalogenmethylová skupina,

20 e) nebo Rc, Re a Rf jsou atom vodíku a Rb a Rd je methylová skupina;

nebo alternativně z polosyntetických derivátů streptograminů skupiny B obecného vzorce B:

kde

Y je atom dusíku nebo skupina =CR₃Rj je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 8 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, nasycená nebo

30 nenasycená heterocyklylová skupina obsahující 3 až 8 členů, fenylová skupina, fenylová skupina, která je substituovaná jedním nebo více atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, (C_t-Ci₂)alkylovou skupinou, (Ci-CjJalky loxy skupinou, (Ci-Ci₂)alkylthioskupinou, (Ci-Ci₂)alkylsulfinylovou skupinou, (Cj-Cpjalkylsulfonylovou skupinou, aminoskupinou, (Ci-C_l2)alkylaminoskupinou nebo di(Ci-C₁₂)alkylaminoskupinou; nebo skupina NR'R, kdy R' a R, které jsou

35 stejné nebo různé mohou být atomy vodíku nebo alkylové skupiny obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo mohou tvořit společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tříčlenný až osmičlenný heterocyklus popřípadě obsahující jiný heteroatom vybraný z atomu kyslíku, síry nebo dusíku, který je popřípadě substituovaný (Ci~Ci₂)alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou obsahující 2 až 8 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 uhlíků, nasycenou

40 nebo nenasycenou heterocyklylovou skupinou obsahující 4 až 6 členů, benzylovou skupinou, fenylovou skupinou nebo fenylovou skupinou, která je substituovaná tak, jak je definováno výše v definici Ri;

-75CZ 301048 B6 nebo alternativně, když Y je skupina -CR₃- Rj může také být halogenmethylová skupina, hydroxymethylová skupina, (Ci-Ci₂)alkyloxymethylová skupina, (C[-C₁₂)alkylthiomethylová skupina, kde alkylová část je popřípadě substituovaná NR'R, (Ci-C_t2)alkylsulfinylmethylová

5 skupina, (Ci-C|₂)alkylsulfonylmethylová skupina, (C|C₁₂)acyloxymethylová skupina, benzoyloxymethylová skupina, cyklopropy lam inomethy lová skupina nebo skupina 4CH₂)_nNR'R, kde n je celé číslo 1 až 4 a R' a R jsou stejné, jako bylo definováno výše nebo alternativně pokud R₃je atom vodíku, R- může také být formylová skupina, karboxylové skupina, (C, C,₂) alkyloxykarbonylová skupina nebo skupina -CONR R , kde R'a R jsou stejné, jako bylo definováno ío výše, nebo alternativně, když Y je atom dusíku, Ri může také být skupina -XR°, kde X je atom kyslíku nebo atom síry, sulfinylová skupina nebo sulfonylová skupina, nebo skupina NH a R je alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku,

15 nasycená nebo nenasycená heterocyklylová skupina obsahující 3 až 8 členů, heterocyklylmethylová skupina obsahující 3 až 8 členů, kde heterocyklylová část je vázána k methylové skupině prostřednictvím atomu uhlíku, fenylová skupina, fenylová skupina, kteráje substituovaná jedním nebo dvěma atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, (C|-Ci₂)alkylovou skupinou, (C,-Ci₂)alkyloxyskupinou, (Ci-C|₂)alkylthioskupinou, (Cj-O^alkylsulfinylovou skupinou,

20 (Ci-Ci₂)alkv lsulfony lovou skupinou, aminoskupinou, (Ci-Ci₂)alkylaminoskupinou nebo di (CiC₁₂)alkylaminoskupÍnou; nebo skupina -(CH₂)_nNR'R , kde R' a R' jsou stejné, jako bylo definováno výše a n je celé číslo 2 až 4, nebo alternativně, pokud X je skupina NH, R může být také atom vodíku,

25 R₂ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R₃ je atom vodíku nebo (Ci-C_!2)alkylová skupina, karboxy lová skupina, (C]^C|₂)alkyloxykarbonylová skupina nebo karbamoylová skupina struktury -CO-NR'R , kde R' a R jsou stejné, jako bylo definováno výše,

Ra je methylová skupina nebo ethylová skupina a Rb, Rc a Rd mají definice uvedené níže:

35 1) Rb a Rc jsou atomy vodíku a Rd je atom vodíku nebo methylaminoskupina nebo dimethyl3ΠΊΐηηβΗιηΐηα

............1-----7
2) Rb je atom vodíku, Rc je atom vodíku, chloru nebo bromu, nebo je to alkenylová skupina obsahující 3 až 5 atomů uhlíku, a Rdje skupina ~NMe-R , kde R'' je (C|^C|₂)alkylová skupi40 na, hydroxyalkylová skupina obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, nebo alkenylová skupina obsahující 2 až 8 atomy uhlíku, kteráje popřípadě substituovaná fenylovou skupinou, cykloalkylmethylovou skupinou obsahující v cykloalkylové části 3 až 6 atomů uhlíku, benzylovou skupinou, benzylovou skupinou, která je substituovaná jedním nebo více atomy halogenu nebo hydroxylovou skupinou, (C]-C_l2)alkylovou skupinou, (C|-Ci₂)alkyloxyskupinou, (Ci-Ci₂)alkylthioskupinou,

45 (Ci-C|₂)alkylsulfinylovou skupinou, (Ci-Ci₂)alkylsulfonylovou skupinou, aminoskupinou, (CjC|₂)alkylaminoskupinou nebo di(Ci^C|₂)alkylaminoskupinou; heterocykly Imethy lovou skupinou nebo heterocyklylethylovou skupinou, kde heterocyklylová část je nasycená nebo nenasycená a obsahuje 5 až 6 členů a jeden nebo dva heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku nebo dusíku, kteráje popřípadě substituovaná (Ci-C|₂)alky lovou skupinou, alkeny lovou skupinou obsahující 2

50 až 8 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, nasycenou nebo nenasycenou heterocykly lovou skupinou obsahující 4 až 6 členů, fenylovou skupinou, fenylovou skupinou, kteráje substituovaná tak, jak je definováno výše v definici R| nebo benzylovou skupinou; nebo alternativně R^{r r} je kyanomethylová skupina nebo skupina -CH₂CORe, kde buď Re je skupina -ORe, R e je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová

55 skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, benzylová skupina, nebo heterocykly Imethy lová skupina,

- 7ή cl juivtu uu kde heterocyklylová část obsahuje 5 až 6 členů a 1 nebo 2 heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku nebo dusíku nebo Reje (Ci^C₁₂)alkylaminoskupina, (Ci-Ci₂)alkylmethylaminoskupina, heterocyklylaminoskupina nebo heterocyklylmethylaminoskupina, kde heterocyklylová část je nasycená a obsahuje 5 až 6 členů a jeden nebo dva heteroatomy vybrané z atomu síry, kyslíku

5 nebo dusíku popřípadě substituovaná (C]-Ci₂)alkylovou skupinou, benzylovou skupinou nebo (Ci-C_]2)alkyloxykarbonylovou skupinou,
3) Rb je a tom vodí ku, Rd je skupina -NHCH₃ nebo skupina -N(CH₃)2 a Rc je a tom chloru nebo bromu, neboje to alkenylová skupina obsahující 3 až 5 atomů uhlíku, pokud Rd je skupina ío -N(CH₃)₂,
4) Rb a Rd jsou atomy vodíku a Rc je atom halogenu, nebo (Ci-C|₂)alkylaminoskupina nebo di(Ci-Ci₂)alkylaminoskupina, (Ci-Ci₂)alkyloxyskupina, trifluormethoxyskupina, thio(C|—Cn)alkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo trihalogenmethylová

15 skupina,
5) Rb a Rc jsou atomy vodíku a Rd je atom halogenu, nebo ethylaminoskupina, diethylaminoskupina nebo methylethylaminoskupina, (C|-C_]2)alky loxy skupí na nebo trifluormethoxyskupina, (Ci-C₎₂)alkylthioskupina, (Ci-C_!2)alkylsulfinylová skupina, (Ci-Ci₂)alkylsulfonylová skupina,

20 alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, fenylová skupina nebo trihalogenmethylová skupina,
6) Rb je atom vodíku a Reje atom halogenu nebo (Ci-Ci₂)alkylaminoskupina nebo di(C]-Ci₂)alkylaminoskupina, (Ci-Ci₂)alky loxy skupina nebo trifluormethoxyskupina, thio(C]-Ci₂)alkylová

25 skupina nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a Rd je a tom halogenu nebo aminoskupina, (C|-Ci₂)alkylaminoskupina nebo di(Ci-Ci₂)alkylaminoskupina, (Ci-€i₂)alkyloxyskupina nebo trifluormethoxyskupina, thio(Ci-Ci₂)alkylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo trihalogenmethylová skupina,

30 7) Rc je atom vodíku a Rb a Rd jsou methylová skupina, a jejich soli.