CZ200121A3 - Extrakty ze Zanthoxylum bungeanum a farmaceutické a kosmetické prostředky je obsahující - Google Patents

Description

Extrakty ze Zanthoxylum bungeanum a farmaceutické a kosmetické prostředky je obsahující

Oblast techniky

Předložený vynález se týká nových extraktů získaných z extrakcí perikarpu Zanthoxylum bungeanum a farmaceutických a kosmetických prostředků, které je obsahují. Tyto extrakty mají protizánětlivé a analgetické účinky a mohou se používat pro léčení svědění.

Dosavadní stav techniky

Perikarp ze Zanthoxylum bungeanum je obvykle používán v Číně jako koření pro sezónní potravu. Navíc se v čínském a indickém lidovém lékařství tato část rostliny používá jako místní anestetikum a pro léčení úplavice střevní. Je popsáno, že eterický olej, který obsahuje řady monoterpenů, jako je 1,8-cimol, linalol, 4-terpinol, karyofylen, limonen a podobné, jsou silnými repelenty hmyzu.

Evropský patent 568 001 nedávno popsal protivirovou aktivitu slupky tohoto ovoce.

V USA patentu 5 137 912 bylo popsáno, že chelcrythrin extrahovaný z kůry kořenů Zanthoxylum simulans (synonymum bungeanum) je aktivní pri prevenci trombózy. Podle japonského patentu 01 294 657 extrakce perikarpu organickými rozpouštědly poskytuje extrakt obsahující isobutylamidy vykazující místní anestetický účinek již 30 vteřin po aplikaci na jazyk a trvající až 20 až 80 minut.

Podstata vynálezu

Nyní bylo překvapivě objeveno, že extrakt perikarpu Zanthoxylum bungeanum, vyrobený extrakcí oxidem uhličitým za superkritických podmínek, má významnou ·· · ·« ·· ·· • · · · · · · · · · · analgetickou aktivitu aniž by vykazoval místní anestetickou aktivitu charakteristickou pro extrakty získané pomocí rozpouštědel. Produkt podle předloženého vynálezu se vyrábí extrahováním perikarpu Zanthoxylum bungeanum jemně rozemletého nebo převedeného na pelety oxidem uhličitým za tlaku v rozmezí od 15 do 30 MPa, s výhodou 18 až 23 MPa, za teploty v rozmezí od 35 do 55 °C, s výhodou 35 až 40 °C.

Výsledný extrakt může být použit buď jako takový, po odstranění extrakční vody, nebo může být dále vyčištěn roztřepáním s nemísitelnými rozpouštědly, jako jsou alifatické alkoholy a alifatické uhlovodíky, s výhodou hexan nebo petrolether.

Bylo prokázáno, že výsledné extrakty vykazují významnou analgetickou aktivitu, jestliže se aplikují perkutánně na člověka; jsou tedy cennými pro použití jak ve farmaceutické tak kosmetické oblasti.

Ve farmaceutické oblasti jsou užitečné pro zmírnění bolesti při diabetické mikroangiopatii, u hemeroidních bolestí, u popálenin a u jakékoliv formy místní bolesti. Další aplikací extraktů podle vynálezu je léčení svědění.

V kosmetické oblasti jsou extrakty podle vynálezu užitečné v depilačních krémech, u prostředků používaných po opalování na sluníčku, v lotionech a krémech používaných po holení a u všech ošetřeních pokožky vyžadujících lokální analgetickou a protisvědivou účinnost.

Protisvědivá účinnost extraktů podle vynálezu byla vyhodnocována elektrofýsiologickým měřením použitím experimentálního modelu krysího ischiatického nervu - dlouhého natahovače prstu (EDL) připraveného in vitro.

Byly používány dospělé krysy Sprague-Dawley zabité intrakardiálním předávkováním Penthotalem. EDL sval s dlouhým úsekem ischiatického nervu byl odebrán a umístěn do nádoby pro elektrofýsiologii s Ringerovým roztokem, který byl vyměňován každých 10 minut. Testované extrakty, s výhodou přidávané s povrchově aktivním

činidlem, byly dispergovány v různých koncentracích, takže přicházely do kontaktu s nervovými vlákny, neuromuskulámími spoji a svalem. U elektrofysiologických testů byla intracelulámí mikroelektroda naplněná 3M KCI umístěna do svalových buněk pro zaznamenávání elektrického jevu (miniaturní potenciály na ukončení motorického nervu, potenciály na ukončení motorického nervu, membránové potenciály svalové buňky) jak spontánní tak indukované stimulací nervu. Pro tyto účely byl nerv spojen se stimulátorem a popřípadě stimulován jednou za vteřinu. Elektrické události ve svalových buňkách byly detegovány mikroelektrodou napojenou na násobič signálu a zviditelněny digitálním osciloskopem.

Extrakty podle vynálezu, když byly testovány v koncentračním rozmezí od 0,0005 do 0,002 % hmotn., vykazovaly silný, dočasný aktivující účinek na neuromuskulámí synaptickou transmisi, což bylo prokázáno zvýšením frekvence miniaturních potenciálů na ukončení motorického nervu a objevením se spontánních potenciálů na ukočení motorického nervu. Obráceně - extrakty získané z rozpouštědel, které mají lokální anestetickou aktivitu, snižují a inhibují transmisi nervového impulsu.

Analgetická aktivita testovaných extraktů byla vyhodnocována u 10 zdravých dobrovolníků vyhodnocením studie tepelné citlivosti pokožky.

Progresivně zahřívaná tepelná sonda byla umístěna na skapulámí oblast subjektu 30 minut po ošetření testovaným produktem nebo odpovídajícím placebo. Byla měřena hodnota teploty, kterou subjekt považoval za bolestivou. Podáváno bylo 0,5 ml emulze vyrobené podle příkladu 7, která obsahovala 0,5 % extraktu Zanthoxylum bungeanum vyrobeného podle příkladu 1. Dále uvedené výsledky ukazují analgetickou aktivitu testovaného extraktu.

ošetření	To	T30 minut
placebo	45,7±1,0	45,3±0,4
extrakt	46,0±0,8	47,2±0,4

Extrakty podle vynálezu se mohou připravovat ve formě krémů, lotionů, pěn, gelů, přípravků pro podávání na pokožku nebo mukózu, tobolek z měkké želatiny, tobolek z tvrdé želatiny, tablet nebo čípků; s výhodou se extrakt podle vynálezu připravuje ve formě krémů nebo pěn pro kutánní ošetření nebo ve formě tobolek z měkké želatiny, žvýkatelných tablet nebo čípků pro systémové použití.

Přesná dávka v přípravcích je v rozmezí mezi 5 a 100 mg na dávku v přípravcích pro systémové použití, zatímco v místních přípravcích se pohybuje od 0,05 do 1 % hmotn.

Příklady popsané níže dále ilustrují tento vynález bez jeho omezení.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava lipofilního extraktu ze Zanthoxylum bungeanum kg perikarpu Zanthoxylum bungeanum se extrahuje podle níže popsaného postupu ve 25I extrakčním zařízení pro superkritický plyn, který je spojen se dvěma odlučovači jako chladiči frakcionujícího extraktu.

·· · ·« ·· ·· • · · t · · · · 9 « · • · ♦ ··· · · · ·· ··· ·♦ ···· ·· ··· kg perikarpu mechanicky vysušeného po sklizni za teploty nepřevyšující 60 °C bylo vylisováno do krychliček a extrahováno oxidem uhličitým za supekritických podmínek za následujících experimentálních podmínek:

teplota v extraktoru 35 °C, 30 °C v prvním odlučovači a 20 °C ve druhém odlučovači a tlak 18 MPa v extraktoru, 10 MPa v prvním odlučovači a 5 MPa v druhém odlučovači.

Tok oxidu uhličitého byl 101 za minutu po dobu 45 minut. Extrakt byl zahuštěn ve druhém odlučovači, při čemž většina vody přítomná v rostlinné matrici byla zahuštěna v prvním odlučovači. Po vysušení extraktu v druhém odlučovači ve vakuu při teplotě nepřevyšující 40 °C bylo získáno 1,5 kg pastovitého extraktu, který byl nepatrně zabarven do žlutá, intenzivně voněl a obsahoval kolem 25 % hmotn. isobutylamidů. HPLC analýza byla prováděna na Hibar RT LiChrospher 100RP-18 koloně s elučním profilem (1 ml/min) popsaným v tabulce. Injektované množství bylo 5 ml roztoku o koncentraci 2 mg/ml. Chromatogram je popsán na obrázku.

Tabulka

doba	voda	acetonitril	počet gradientových
(min)	(% hmotn.)	(% hmotn.)	kňvek
0	60	40	-
20	60	40	6
30	10	90	6
35	60	40	6
40	60	40	6

AA A e · ··	•	AA *	·· ♦ A	• A 9 A	A ·
A	• 9	•	•	•	• ·
·♦	♦ A A		·♦	• ••A	• A	• A

Příklad 2

Příprava lipofilního extraktu ze Zanthoxylum bungeanum kg perikarpu mechanicky vysušeného po sklizni za teploty nepřevyšující 60 °C bylo vylisováno do krychliček a extrahováno oxidem uhličitým za supekritických podmínek za následujících experimentálních podmínek:

teplota v extraktoru 40 °C, 30 °C v prvním odlučovači a 20 °C ve druhém odlučovači a tlak 20,5 MPa v extraktoru, 10 MPa v prvním odlučovači a 5 MPa v druhém odlučovači.

Tok oxidu uhličitého byl 101 za minutu po dobu 45 minut. Extrakt byl zahuštěn ve druhém odlučovači, při čemž většina vody přítomná v rostlinné matrici byla zahuštěna v prvním odlučovači. Po vysušení extraktu v druhém odlučovači ve vakuu při teplotě nepřevyšující 40 °C bylo získáno 1,5 kg pastovitého extraktu, který byl nepatrně zabarven do žluto/zelena, měl stejné chemicko-fyzikální znaky jako extrakt z příkladu 1 a obsahoval kolem 20 % hmotn. isobutylamidů.

Příklad 3

Příprava lipofilního extraktu ze Zanthoxylum bungeanum kg perikarpu mechanicky vysušeného po sklizni za teploty nepřevyšující 60 °C bylo vylisováno do krychliček a extrahováno oxidem uhličitým za supekritických podmínek za následujících experimentálních podmínek: teplota v extraktoru 40 °C a tlak 23 MPa. Poměr oxidu uhličitého použitého pro extrakci léčiva, které má být extrahováno, byl 27 až 54 kg na kg léčiva. Extrakt byl zahuštěn v odlučovači při 5 MPa a 20 °C. Po vysušení ve vakuu při teplotě nepřevyšující 40 °C bylo získáno 1,3 kg pastovitého extraktu, který byl nepatrně zabarven do žluto/zelena a měl stejné chemicko-fyzikální znaky jako extrakt z příkladu 1.

♦ ·

Příklad 4 ·· ··· ·· ···· ·· ···

Příprava vyčištěného lipofilního extraktu ze Zanthoxylum bungeanum

0,5 kg lipofilního extraktu perikarpu Zanthoxylum bungeanum vyrobeného podle příkladu 1 bylo rozpuštěno ve 2,5195% vodného methnaolu a extrahováno třikrát 0,5l dávkami hexanu. Hexanová fáze byla protiproudně extrahována methanolem použitím isobutylamidů, které by měly zůstat v methanolové fázi, jako markéru. Neaktivní hexanová fáze byla odstraněna, zatímco methanolové fáze byly spojeny, zředěny 0,6 I vody a reextrahovány dvakrát 0,6 I hexanu. Spojené hexanové fáze byly odbarveny 0,3 % hmotn. aktivního uhlí, vysušeny nad síranem sodným a zahuštěny na olej za teploty nepřevyšující 40 °C ve vakuu. Získá se tak 0,22 kg olejovitého extraktu medovité konzistence, který měl obsah isobutylamidů kolem 50 % hmotn.

Příklad 5

Alkoholický roztok Zanthoxylum bungeanum

100 ml alkoholického roztoku Zanthoxylum bungeanum obsahuje:

20% (hmotn.) roztok Zanthoxylum bungeanum v oleylalkoholu cyklomethikon alkohol

0,50 g 20,00 g 100,0 ml

< · • · • ·

Příklad 6

Nealkoholický roztok Zanthoxylum bungeanum

100 ml nealkoholického roztoku Zanthoxylum bungeanum obsahuje:

20% (hmotn.) roztok Zanthoxylum bungeanum v oleylalkoholu 0,50 g

PPG-26 Buteth 26 a PEG-40 hydrogenovaný ricinový olej methyl-chlorisothiazolinon a methyl-isothiazolinon

5,00 g 0.10 g

vyčištěná voda q.s. do 100,0 ml

Příklad 7

Emulze Zanthoxylum bungeanum

100 g emulze Zanthoxylum bungeanum obsahuje:

20% (hmotn.) roztok Zanthoxylum bungeanum v oleylalkoholu	0,50 g
isohexadekan	5,00 g
glycerin	4,00 g
alkyl(s 12 až 15 atomy uhlíku)benzoát	2,00 g
cyklomethikon	2,00 g
PEG-20 glycerylstearát a glycerylstearát	2,00 g
lanolinový vosk	1,00 g
zesíťovaný polymer akryláty/alkyl(Cio-3o)akryláty	0,50 g
cetylakohol	0,50 g
imidazolidinylmočovina	0,30 g
fenoxyethanol	0,50 g
methylparaben	0,20 g
tokoferol	0,10 g
dvojsodná sůl EDTA	0,10 g
voda	q.s. do 100,01

• · • 4

4

Příklad 8

Kapalná emulze Zanthoxylum bungeanum

100 g kapalné emulze Zanthoxylum bungeanum obsahuje:

20% (hmotn.) roztok Zanthoxylum bungeanum v oleylalkoholu 0,50 g

PEG-20 glycerylstearát a glycerylstearát 10,00 g triglyceridy s 10 až 18 atomy uhlíku 10,00 g glycerin 5,00g olej z pšeničných klíčků 2,00g dimethikon 2,00g

PPG-25 Laureth-25 2,00g cetylakohol 1,00 g hydroxylovaný lanolin 0,50g imidazolidinylmočovina 0,30g hydroxyethyl-hektorit (e) 0,50g fenoxyethanol, methylparaben, ethylparaben, propylparaben a butylparaben 0,50g tokoferol 0,10g voda q.s. do 100,0 g

Claims (5)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Extrakty ze Zanthoxylum bungeanum, vyznačující se tím, že se získávají extrakcí perikarpu superkritickým oxidem uhličitým.
2. 2. Extrakty podle nároku 1,vyznačující se tím, že se získávají extrakcí oxidem uhličitým za teplot v rozmezí od 35 do 55 °C a tlaků v rozmezí od 15 MPa do 30 MPa.
3. 3. Extrakty podle nároku 1a 2, vyznačující se tím, že mají obsah isobutylamidů v rozmezí od 20 do 50 % hmotn.
4. 4. Farmaceutické prostředky, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahují extrakt podle nároků 1 až 3 ve směsi s vhodnými ředidly.
5. 5. Kosmetické prostředky, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahují extrakt podle nároků 1 až 3 ve směsi s vhodnými ředidly.