CN103827120A

CN103827120A - 6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂*

Info

Publication number: CN103827120A
Application number: CN201280041332.3A
Authority: CN
Inventors: N·施梅斯; J·库恩克; B·亨德勒; P·利瑙; A·E·费尔南德斯-蒙塔尔万; P·勒热纳; S·西格尔; W·斯科特
Original assignee: Bayer Intellectual Property GmbH
Current assignee: Bayer Intellectual Property GmbH
Priority date: 2011-09-01
Filing date: 2012-08-27
Publication date: 2014-05-28
Also published as: WO2013030150A1; UY34308A; US20140213575A1; AR087754A1; TW201313725A; EP2751114A1; CA2846692A1; JP2014525421A; DE102011082013A1

Abstract

本发明涉及6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂特别是用于治疗目的的6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

Description

6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂*

本发明涉及新型6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

，特别是用于治疗目的的6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

、包含本发明的化合物的药剂及其在治疗中的用途，特别是其预防和/或治疗肿瘤疾病的用途。

生物背景

人BET家族(布罗莫结构域和C端外结构域家族，bromodomain andextra C-terminal domain family)有4个成员(BRD2、BRD3、BRD4和BRDT)，其包含两个相关联的布罗莫结构域和一个外端(extraterminal)结构域(Wu和Chiang,J.Biol.Chem.,2007,282:13141-13145)。布罗莫结构域为识别乙酰化赖氨酸残基的蛋白区域。经常在组蛋白(例如组蛋白3或组蛋白4)的N-末端发现这些乙酰化赖氨酸，并且其具有开放的染色质结构和活动的基因转录的特征(Kuo和Allis,Bioessays,1998,20:615-626)。此外，布罗莫结构域可识别其它乙酰化蛋白。例如，BRD4结合RelA，这导致NF-κB的兴奋和炎症基因的转录活性(Huang等人,Mol.Cell.Biol.,2009,29:1375-1387)。BRD2、BRD3和BRD4的外端结构域与数种具有染色质调整和基因表达调节作用的蛋白质相互作用(Rahman等人,Mol.Cell.Biol.,2011,31:2641-2652)。

从机制上讲，BET蛋白在细胞生长和细胞周期中起重要作用。它们与有丝分裂染色体相关，表明其在表观遗传记忆中的作用(Dey等人，Mol.Biol.Cell,2009,20:4899-4909;Yang等人,Mol.Cell.Biol.,2008,28:967-976)。BRD4对于转录延伸和延伸复合物P-TEFb(由CDK9和细胞周期蛋白T1组成)的募集是重要的，这导致RNA聚合酶II的活化(Yang等人,Mol.Cell,2005,19:535-545)。因此刺激在细胞增殖中涉及的基因(例如c-Myc和AuroraB)的表达(You等人,Mol.Cell.Biol.,2009,29:5094-5103;Zuber等人,Nature,2011,doi:10.1038)。BRD2和BRD3与高度乙酰化的染色质区域中的转录的基因结合，并且通过RNA聚合酶II促进转录(LeRoy等人,Mol.Cell,2008,30:51-60)。

在多种细胞系中敲低(knock-down)BRD4导致G1阻滞(Mochizuki等人,J.Biol.Chem.,2008,283:9040-9048)。已证明BRD4与数种在G1期活化的基因(例如细胞周期蛋白D1和D2)的启动子区域结合(Mochizuki等人,J.Biol.Chem.,2008,283:9040-9048)。

BRD2和BRD4敲除小鼠在胚胎发育早期死亡(Gyuris等人,Biochim.Biophys.Acta,2009,1789:413-421;Houzelstein等人,Mol.Cell.Biol.,2002,22:3794-3802)。杂合的BRD4小鼠具有多种生长缺陷，这可归因于降低的细胞增殖(Houzelstein等人,Mol.Cell.Biol.,2002,22:3794-3802)。

BET蛋白在多种肿瘤中发挥重要作用。BET蛋白(BRD3或BRD4)和NUT(通常仅在睾丸中表达的蛋白)之间的融合导致鳞状细胞癌的侵袭性形式，其称作NUT中线癌(French,Cancer Genet.Cytogenet.,2010,203:16-20)。该融合蛋白阻止细胞分化并促进增殖(Yan等人,J.Biol.Chem.,2011,286:27663-27675)。由此得到的体内模型的生长被BRD4-抑制剂抑制(Filippakopoulos等人,Nature,2010,468:1067-1073)。在急性髓性白血病(AML)细胞系中的治疗靶点的筛选证明BRD4在该肿瘤中具有重要作用(Zuber等人,Nature,2011,doi:10.1038)。BRD4表达的降低导致细胞周期的选择性阻滞，并导致凋亡。用BRD4-抑制剂治疗阻止AML异种移植物在体内的增殖。在原发性乳腺肿瘤中检测到包含BRD4基因的DNA区域的扩增(Kadota等人,Cancer Res,2009,69:7357-7365)。也有关于BRD2在肿瘤中作用的数据。在B细胞中选择性过表达BRD2的转基因鼠产生B细胞淋巴瘤和白血病(Greenwall等人,Blood,2005,103:1475-1484)。

在病毒感染中也涉及BET蛋白。BRD4与多种乳头状瘤病毒的E2蛋白结合，并且其对于潜伏性感染细胞中的病毒的存活是重要的(Wu等人,Genes Dev.,2006,20:2383-2396)。引起卡波西肉瘤的疱疹病毒也与多种BET蛋白相互作用，这对于疾病抵抗力是重要的(Viejo-Borbolla等人,J.Virol.,2005,79:13618-13629;You等人,J.Virol.,2006,80:8909-8919)。BRD4通过与P-TEFb结合，在HIV复制中也有重要作用(Bisgrove等人,Proc.NatlAcad.Sci.USA,2007,104:13690-13695)。

此外，BET蛋白参与炎症过程。BRD2-亚等位基因(hypomorphic)小鼠在脂肪组织中表现减少的炎症(Wang等人,Biochem.J.,2009,425:71-83)。在BRD2-缺陷小鼠中的白脂肪组织中的巨噬细胞浸润也降低(Wang等人,Biochem.J.,2009,425:71-83)。也已证明BRD4调节许多在炎症中涉及的基因。在LPS-刺激的巨噬细胞中，BRD4-抑制剂阻止炎症基因(例如IL-1或IL-6)的表达(Nicodeme等人,Nature,2010,468:1119-1123)。

这些数据提供BET蛋白在多种病理中具有重要作用的证据。因此，发现阻止BET蛋白和乙酰化蛋白质之间相互作用的有效和选择性抑制剂是重要的。这些新抑制剂也应具有适合的药物代谢动力学性质，使其能够抑制患者中的这些相互作用。

基于以下对环系的编号检索本领域中该结构的状态。

除了其余内容，EP0638560公开了6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

用于治疗骨质疏松症。在环系的6位也提供取代的酯和酰胺，未公开作为取代基的桥元素或螺元素。

US5,712,274公开了6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

用于治疗炎症。在环系的6位也提供用杂环取代的酰胺，或者通过酰胺氮环合。例如，实施例50公开通过酰胺氮环合为吗啉。其未包含或公开桥元素或螺元素。未公开US5,712,274的结构对BRD家族蛋白的抑制效应或者可能在癌症中的用途。

EP0934940公开了6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂用于治疗炎症。在环系的6位也提供取代的酯和酰胺，未公开作为取代基的桥元素或螺元素。

EP0989131请求保护具有羧烷基侧链的6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

在环系的6位具有酰胺官能团，其中氮原子上具有氢原子和基团R³。R³也可表示芳族基团或杂芳族基团。未设想R³表示通过酰胺氮的杂环、桥元素或螺元素。公开化合物用于其中细胞粘附具有作用的炎性疾病或过敏性疾病中。

EP1887008公开了在环系的6位具有取代的C₁-C₆烷基酯的6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

，其中所述烷基酯通过亚烷基与环系连接。也设想例如吗啉的杂环作为烷基酯的取代基。未包含或公开6位的酰胺、通过酰胺氮的环合、桥元素或螺元素。所记载的化合物的应用为在炎性疾病的领域中。

EP2239264公开了6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂用于治疗癌症。说明其作用机制为抑制BRD蛋白家族。在环系的6位(R⁴)仅仅设想为伯酰胺，即酰胺氮上有氢原子。R⁹为酰胺氮上可能的取代基。然而，R⁹不包括桥元素、螺元素或通过酰胺氮的环合的定义。

在Nature 2010,Vol.468,p1067ff(P.Filippakopoulos等人)中记载了JQ-1，其以BET蛋白家族的强结合剂的形式起作用，并且具有由此介导的抗增殖性质。在本申请中JQ1为比较例V1。本申请将JQ1作为最接近的现有技术，因为JQ1与本发明的物质涉及相同的靶点和相同的适应症。

WO2011/054553、WO2011/054843、WO2011/054844和WO2011/054845公开作为布罗莫结构域抑制剂的4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂

WO2011/054553的公开涉及独特的(individual)苯并二氮杂及其在多种疾病中的用途。未公开噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

WO2011/054843的公开涉及多种独特的物质(也包括苯并二氮杂

)及其在炎性疾病或自身免疫病中的用途。未公开噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

本发明的化合物与WO2011/054844中的化合物的区别在于环系6位的必要伯酰胺基团与二氮杂

环直接连接，而不是通过亚甲基连接。在WO2011/054844中环系的6位未设想桥元素或螺元素。

本发明的化合物与WO2011/054845中的化合物的区别在于稠合(annelated)在二氮杂

上的苯用噻吩代替，并且在二氮杂

的6位提供酰胺基团，其包含至多一个环。在WO2011/054845中环系的6位未设想桥元素或螺元素。

本发明的化合物与最接近的现有技术(WO2009/084693中作为BRD4抑制剂公开的6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

)的区别在于它们包含具有螺元素和/或桥元素的饱和的，任选地取代的碳环酰胺或杂环酰胺。

从这一现有技术出发，本发明要解决的问题是提供用于治疗人和动物疾病的新型结构。

特别地，本发明的结构应适合预防和治疗肿瘤疾病，并且应比现有技术中已知的结构具有优势。

特别地，本发明的结构应具有对于预防和治疗肿瘤疾病适合的药物代谢动力学，并且应比现有技术中已知的结构具有药物代谢动力学上的优势。令人惊奇地发现，本发明式(I)的化合物可具有有利的药物代谢动力学性质。

优选地，应使结构可用于治疗疾病，并且具有以下性质中的一个，优选数个或最优选甚至全部：

-在体内，它们比现有技术中的结构更耐受，特别是在所描述的小鼠模型中；

-它们比现有技术中的结构更有效地抑制多于一种或多种癌症细胞系；

-它们具有比现有技术中的结构更高的剂量标准化未结合暴露(dose-normalized unbound exposure)，特别是在所描述的小鼠模型中。

现在，令人惊奇地发现，式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐特别适合用于治疗疾病，并且解决本发明的问题，

其中

或者

X表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团，并且

R¹和R²相互独立地表示氢原子或C₁-C₆烷基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

如对式(I)的化合物所定义，如果R^b1和R^b2形成桥，则m、n、o和p的和至少为2，并且

R^S1和R^S1相互独立地表示氢原子或C₁-C₆烷基，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，

或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的3元至8元碳环或杂环，其任选地

(i)可被卤素、羟基、氰基、硝基和/或被C₁-C₃烷基、卤代-C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代-C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆-烷氧基-C₁-C₆烷基和/或C₁-C₆烷基羰基相同地或不同地取代一次或多次，和/或

(ii)可包含酮基-C(O)-，并且

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成由-O-、-C(O)-、-NR³-、-NR⁴-CHR⁵-或-CHR⁶-CHR⁷-中的一个基团组成的桥，

其中R³、R⁴、R⁵、R⁶和/或R⁷相互独立地表示氢、C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷氧基，

条件是，

或者

如对式(I)的化合物所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的3元至8元碳环或杂环，

或者

如对式(I)的化合物所定义，R^b1和R^b2形成桥，

并且

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的3元至8元碳环或杂环。

据申请人所知，现有技术中的结构在环系6位的侧链中不具有桥元素或螺元素。

从上述现有技术出发，没有理由对现有技术中的结构进行修饰，因为对于此类结构未公开该环系6位侧链中的桥元素和螺元素，更不用说对BRD家族蛋白具有抑制效应的结构。

令人惊奇地，本发明的化合物阻止BRD4和乙酰化组蛋白4肽之间的相互作用，并且抑制癌症细胞的生长。因此，它们代表治疗人和动物疾病，特别是癌症的新型结构。

本发明基于以下定义：

烷基：

烷基表示线性的或支化的，饱和的单价烃基，一般具有1-6个碳原子(C₁-C₆烷基)，优选1-4个碳原子(C₁-C₄烷基)，并且特别优选1-3个碳原子(C₁-C₃烷基)。

例如并且优选地，我们可能提到：

甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基

特别优选的为甲基、乙基、丙基或异丙基。

烷氧基：

烷氧基表示线性的或支化的，饱和的式-O-烷基的烷基醚基团，一般具有1-6个碳原子(C₁-C₆烷氧基)，优选1-4个碳原子(C₁-C₄烷氧基)，并且特别优选1-3个碳原子(C₁-C₃烷氧基)。

例如并且优选地，我们可能提到：

甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。

烷氧基烷基：

烷氧基烷基表示被烷氧基取代的烷基。

C_n-烷氧基-C_m-烷基意指烷氧基具有n个碳原子，并且该基团所连接的烷基具有m个碳原子。

例如并且优选地，我们可能提到：

甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基甲基和乙氧基乙基。

烷基羰基：

烷基羰基表示-C(O)-烷基，在烷基部分中一般具有1-6个碳原子，优选1-4个碳原子，并且特别优选1-3个碳原子。

作为实例我们可能提到：

乙酰基和丙酰基。

杂原子：

杂原子要理解为氧原子、氮原子或硫原子。

碳环：

碳环表示单环饱和的烃环，一般具有3-8个碳原子，优选4-6个碳原子。

杂环：

杂环表示具有3-8个环原子的非芳族单环，其中至少一个环原子为杂原子或杂基团(heterogroup)。氮原子、氧原子和/或硫原子可作为杂原子的形式呈现。-S(O)-、-S(O)₂-或-N⁺(O^-)-可作为杂基团的形式呈现。

优选4-6个环原子。

卤素：

指定的卤素包括氟、氯、溴和碘。

优选氟和氯。

卤代烷基：

卤代烷基表示具有至少一个卤素取代基的烷基。

例如并且优选地，我们可能提到：

二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、5,5,5,4,4-五氟戊基或5,5,5,4,4,3,3-七氟戊基。

优选全氟化的烷基，例如三氟甲基或五氟乙基。

卤代烷氧基：

卤代烷氧基表示具有至少一个卤素取代基的烷氧基。

优选氟烷氧基。

例如并且优选地，我们可能提到：

二氟乙氧基、三氟甲氧基或2,2,2-三氟乙氧基。

环：

环包括碳环和杂环。

由式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐形成优选的亚组，

其中

或者

X表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团，并且

R¹和R²相互独立地表示氢原子或C₁-C₃烷基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

如对式(I)的化合物的优选亚组所定义，如果R^b1和R^b2形成桥，则m、n、o和p的和至少为2，并且

R^S1和R^S1相互独立地表示氢原子或C₁-C₃烷基，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或杂环，其任选地

(i)可被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基、卤代-C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、卤代-C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃-烷氧基-C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷基羰基相同地或不同地取代一次或多次，和/或

(ii)可包含酮基-C(O)-，并且

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成由-O-、-C(O)-、-NR³-、-NR⁴-CHR⁵-或者-CHR⁶-CHR⁷-中的一个基团组成的桥，

其中R³、R⁴、R⁵、R⁶和/或R⁷相互独立地表示氢、C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基，

条件是，

或者

如对式(I)的化合物的优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或杂环，

或者

如对式(I)的化合物的优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

并且

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或杂环。

由式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐形成更优选的亚组，

其中

或者

X表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团，并且

R¹和R²表示C₁-C₃烷基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

如对式(I)的化合物的更优选亚组所定义，如果R^b1和R^b2形成桥，则m、n、o和p的和至少为2，并且

R^S1和R^S1表示氢，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或氧原子作为杂原子的杂环，其可任选地被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷氧基相同地或不同地取代一次或多次，并且

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成由-O-、-NR³-或-CHR⁶-CHR⁷-中的一个基团组成的桥，

其中R³、R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基，

条件是，

或者

如对式(I)的化合物的更优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或氧原子作为杂原子的杂环，

或者

如对式(I)的化合物的更优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

并且

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或氧原子作为杂原子的杂环。

其中

X表示键，并且Y表示氮原子，并且

R¹和R²表示甲基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元的氧原子作为杂原子的杂环，其可任选地被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷氧基相同地或不同地取代一次或多次，并且

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成桥-CHR⁶-CHR⁷-，

其中R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基，

条件是，

或者

如对式(I)的化合物的更优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元的氧原子作为杂原子的杂环，

或者

如对式(I)的化合物的更优选亚组所定义，R^b1和R^b2形成桥，

并且

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元的氧原子作为杂原子的杂环。

下列化合物是特别优选的：

-8-{2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰基}-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮，

-2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)乙-1-酮，

-(1R,5S)-3-({2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰基}氨基)-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯，

-N-[(1R,5S)-9-氮杂双环[3.3.1]壬-3-基]-2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰胺，

-2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]-1-(8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-6-基)乙-1-酮。

在通式(I)中

X可表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团。

在通式(I)中

X优选表示键，并且Y表示氮原子。

在通式(I)中

R¹和R²可相互独立地表示氢或C₁-C₆烷基。

在通式(I)中

R¹和R²优选相互独立地表示氢或C₁-C₃烷基。

在通式(I)中

R¹和R²更优选表示C₁-C₃烷基。

在通式(I)中

R¹和R²非常优选表示甲基。

在通式(I)中

m、n、o和p可为0或1，

其中如对式(I)的化合物所定义，如果R^b1和R^b2形成桥，则m、n、o和p的和至少为2。

在通式(I)中

R^S1和R^S1可相互独立地表示氢或C₁-C₆烷基，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，

或者

(ii)可包含酮基-C(O)-。

在通式(I)中

R^S1和R^S1优选相互独立地表示氢原子或C₁-C₃烷基，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

(ii)可包含酮基-C(O)-。

在通式(I)中

R^S1和R^S1更优选地表示氢，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元碳环或氧原子作为杂原子的杂环，其可任选地被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷氧基相同地或不同地取代一次或多次。

在通式(I)中

R^S2和R^S1共同非常优选地形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同非常优选地形成饱和的4元至6元的氧原子作为杂原子的杂环，其可任选地被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷氧基相同地或不同地取代一次或多次。

在通式(I)中

R^b1和R^b2可表示氢，或者

R^b1和R^b2可形成由-O-、-C(O)-、-NR³-、-NR⁴-CHR⁵-或-CHR⁶-CHR⁷-中的一个基团组成的桥，

其中R³、R⁴、R⁵、R⁶和/或R⁷相互独立地表示氢、C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷氧基。

在通式(I)中

R^b1和R^b2优选表示氢，或者

其中R³、R⁴、R⁵、R⁶和/或R⁷相互独立地表示氢、C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基。

在通式(I)中

R^b1和R^b2更优选地优选表示氢，或者

其中R³、R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基或基团-C(O)-R⁸，R⁸表示C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基。

在通式(I)中

R^b1和R^b2非常优选地表示氢，或者

R^b1和R^b2形成桥-CHR⁶-CHR⁷-，

其中R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基。

在基团的各个组合或优选组合中详细给出的基团的定义也任意地用不依赖于各个所述基团组合的一些其它组合的基团定义替换。

特别优选两个或更多个上述优选范围的组合。

本发明的化合物为式(I)的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，由式(I)涵盖的下述式的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，以及由式(I)涵盖且在以下作为实施例描述的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，条件是，由式(I)涵盖且在以下描述的化合物尚不是盐、溶剂合物和盐的溶剂合物。

也认为本发明涵盖本发明的化合物的盐的用途。

在本发明上下文中的盐优选本发明的化合物的生理上无害的盐。然而也包括自身不适合药用，但是可用于例如分离或纯化本发明的化合物的盐。

本发明的化合物的生理上无害的盐包括无机酸、羧酸和硫磺酸(sulphonic acid)的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。

本发明还涉及包含本发明的化合物以及至少一种或多种其它活性物质(特别是用于预防和/或治疗肿瘤疾病的活性物质)的药品。

在本发明的上下文中将溶剂合物定义为通过与溶剂分子络合形成固体或液体状态的络合物的本发明化合物的形式。水合物为溶剂合物的特殊形式，其中络合作用与水发生。在本发明的上下文内，水合物为优选的溶剂合物。

根据本发明的化合物的结构，它们可以多种立体异构体形式存在，即以构型异构体的形式存在或任选地也以构象异构体的形式存在。在本发明化合物的6位具有相同构型的不对称中心。因此，当式(I)中描述的一个或多个取代基包含另外的不对称元素(例如手性碳原子)，它们可为纯非对映异构体或其混合物的形式。因此，本发明也包括非对映异构体及其各自的混合物。可从这样的混合物中以已知的方式立体异构地分离纯的非对映异构体；对于此优选使用色谱技术，特别是在非手性相或手性相中的HPLC色谱法。

如果本发明的化合物可以互变异构的形式存在，则本发明涵盖所有的互变异构形式。

本发明还包括本发明化合物的所有适合的同位素变体。本发明化合物的同位素变体意指其中将本发明化合物中的至少一个原子用相同原子数的，但是具有与天然通常存在或主要存在的原子质量不同的其它原子交换的化合物。可以被引入本发明的化合物的同位素的实例为氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，例如²H(氘)、³H(氚)、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁹I和¹³¹I。本发明化合物的特定同位素变体(例如特别是其中引入一个或多个放射性同位素的那些)可用于例如研究活性物质在体内的作用机制或分布，由于用³H-或¹⁴C-同位素标记的化合物的制备或检测比较容易，它们对于上述应用是特别适合的。此外，由于化合物的更高的代谢稳定性，引入同位素(例如氘)可引起特定治疗益处，例如在在体内更长的半衰期或者所需有效剂量的降低；因此，本发明化合物的所述修饰也可任选地代表本发明的优选实施方案。可用本领域技术人员已知的方法制备本发明化合物的同位素变体，例如由以下描述的方法并根据在实施例中提供的说明，使用相应的代表性试剂和/或起始化合物的同位素修饰。

此外，本发明还包括本发明化合物的前药。术语“前药”包括可自身为生物学活性或无活性的化合物，然而，在它们在体内的停留时间期间，将它们转化(例如通过代谢或水解)为本发明的化合物。

本发明的化合物可具有全身的作用和/或局部的作用。为了该目的，它们可以适合的方法施用，例如口服、肠胃外、经肺、鼻、舌下、舌、颊、直肠、皮肤、经皮、结膜、耳、或以植入物或支架的形式施用。

对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的化合物。

适合口服施用的剂型为根据现有技术用于本发明化合物的快速和/或修饰释放起作用，包含结晶和/或无定形和/或溶解形式的本发明的化合物的剂型，例如片剂(未包衣或包衣片剂，例如肠溶衣或延迟溶出的包衣或不溶性包衣，其控制本发明的化合物的释放)、在口腔中快速崩解的片剂或膜剂/薄片(wafer)、膜剂/冻干产物、胶囊剂(例如硬明胶胶囊剂或软明胶胶囊剂)、糖包衣丸剂、颗粒剂、丹剂、散剂、乳剂、混悬剂、气雾剂或溶液剂。

肠胃外施用可在避免吸收步骤下进行(例如静脉内、动脉内、心内、脊柱内或腰髓内施用)，或在包括吸收步骤下进行(例如肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内施用)。适合肠胃外施用的剂型包括溶液剂、混悬剂、乳剂、冻干产物、无菌散剂形式的注射和输注制剂。

适合其它给药途径的剂型为例如用于吸入的药物剂型(包括干粉吸入装置、喷雾器)、滴鼻剂、溶液剂、喷雾剂；用于舌、舌下或颊施用的片剂、膜剂/薄片或胶囊剂、栓剂、耳制剂或眼制剂、阴道胶囊剂、水性混悬剂(洗剂、振荡合剂(shaking mixture))、亲脂混悬剂、软膏剂、乳膏剂、透皮治疗系统(例如贴剂)、乳剂(milk)、糊剂、泡沫剂、撒布剂(dusting powder)、植入物或支架。

可将本发明的化合物转化为上述剂型。这可以本质上通过与惰性的、无毒的、药学上适合的赋形剂混合而以已知的方式进行。这些赋形剂包括载体(例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或润湿剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧基山梨聚糖油酸酯)、粘合剂(例如聚乙烯基吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂、如抗坏血酸)、着色剂(例如无机色素，如氧化铁)和调味剂和/或矫味剂(odour correctant)。

本发明还涉及包含本发明的化合物(通常连同与一种或多种惰性的、无毒的、药学上适合的赋形剂)的药品，及它们用于上述目的的用途。

配制本发明的化合物以制备药物制剂以本质上已知的方式进行，其中将所述一种或多种活性物质与药物生产中常用的赋形剂转化为期望的剂型。

可使用的赋形剂为例如载体、填充剂、崩解剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂、吸收剂和吸附剂、稀释剂、溶剂、共溶剂(cosolvent)、乳化剂、助溶剂、矫味剂(flavour correctant)、着色剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、改变渗透压的盐或缓冲剂。

可参考Remington's Pharmaceutical Science,15th ed.Mack PublishingCompany,East Pennsylvania(1980)。

所述药物制剂可为：

固体形式：例如片剂、糖包衣丸剂、丸剂、栓剂、胶囊剂、透皮系统，或者

半固体形式：例如软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、栓剂、乳剂，或者

液体形式，例如溶液剂、酊剂、混悬剂或乳剂。

从本发明的意义上说，赋形剂可为例如盐、糖(单糖、二糖、三糖、寡糖和/或多糖)、蛋白质、氨基酸、肽、脂肪、蜡、油、烃及其衍生物，其中所述赋形剂可为天然来源或可由合成或部分合成获得。

对于口服或经口施用可特别考虑片剂、糖包衣丸剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、锭剂、混悬剂、乳剂或溶液剂。

对于肠胃外施用可特别考虑混悬剂、乳剂，特别是溶液剂。

本发明涉及本发明的化合物。

它们可用于预防和治疗人的疾病，特别是肿瘤疾病。

本发明的化合物可特别用于抑制或降低细胞增殖和/或细胞分裂和/或诱导凋亡。

本发明的化合物特别适合用于预防和/或治疗过度增殖性疾病，例如

-银屑病，

-侵袭皮肤的瘢痕疙瘩和其它增生，

-良性前列腺增生症(BPH)，

-实体肿瘤，和

-血液肿瘤。

根据本发明可治疗的实体肿瘤为例如以下部位的肿瘤：乳腺、呼吸道、脑、生殖器官、胃肠道、泌尿生殖道、眼、肝、皮肤、头和颈、甲状腺、副甲状腺、骨和结缔组织，以及这些肿瘤的转移。

作为血液肿瘤，例如以下为可治疗的：

-多发性骨髓瘤，

-淋巴瘤，或者

-白血病。

作为乳腺肿瘤，例如以下为可治疗的：

-阳性激素受体状态的乳腺肿瘤

-阴性激素受体状态的乳腺肿瘤

-Her-2阳性乳腺癌

-激素受体和Her-2阴性乳腺癌

-BRCA相关乳腺癌

-炎性乳腺癌

作为消化道肿瘤，例如以下为可治疗的：

-非小细胞支气管癌，和

-小细胞支气管癌

作为脑部肿瘤，例如以下为可治疗的：

-神经胶质瘤，

-胶质母细胞瘤，

-星形细胞瘤，

-脑膜瘤，和

-髓母细胞瘤。

作为雄性生殖器官肿瘤，例如以下为可治疗的：

-前列腺癌，

-恶性附睾肿瘤，

-恶性睾丸肿瘤和

-阴茎癌。

作为雌性生殖器官肿瘤，例如以下为可治疗的：

-子宫内膜癌

-宫颈癌

-卵巢癌

-阴道癌

-外阴癌

作为胃肠道肿瘤，例如以下为可治疗的：

-结直肠癌，

-肛门癌

-胃癌

-胰腺癌

-食管癌

-胆囊癌

-小肠癌

-唾液腺癌

-神经内分泌瘤

-胃肠道间质肿瘤

作为泌尿生殖道肿瘤，例如以下为可治疗的：

-膀胱癌

-肾细胞癌

-肾盂和下泌尿道的癌症

作为眼部的肿瘤，例如以下为可治疗的：

-视网膜母细胞瘤

-眼内黑色素瘤

作为肝部的肿瘤，例如以下为可治疗的：

-肝细胞癌

-胆管细胞癌

作为皮肤肿瘤，例如以下为可治疗的：

-恶性黑色素瘤

-基底细胞癌

-棘细胞(prickle-cell)癌

-卡波西肉瘤

-Merkel细胞癌

作为头和颈的肿瘤，例如以下为可治疗的：

-喉癌

-咽癌和口腔癌

作为肉瘤，例如以下为可治疗的：

-软组织肉瘤

-骨肉瘤

作为淋巴瘤，例如以下为可治疗的：

-非霍奇金氏淋巴瘤

-霍奇金氏淋巴瘤

-皮肤淋巴瘤

-中枢神经系统淋巴瘤

-AIDS相关淋巴瘤

作为白血病，例如以下为可治疗的：

-急性髓性白血病

-慢性髓性白血病

-急性淋巴性白血病

-慢性淋巴性白血病

-毛样细胞白血病

本发明的化合物可有利地用于预防和/或治疗白血病(特别是急性髓性白血病)、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性乳腺癌或BRCA相关乳腺癌)、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、黑色素瘤和其它皮肤肿瘤、非小细胞支气管癌、子宫内膜癌和结直肠癌。

本发明的化合物可特别有利地用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是雌激素-α-阳性乳腺癌和雌激素-α-阴性乳腺癌)、多发性骨髓瘤或黑色素瘤。

本发明的化合物也适合用于预防和/或治疗良性过度增殖性疾病，例如子宫内膜异位症、平滑肌瘤和良性前列腺增生症。

本发明的化合物也适合用于预防和/或治疗全身性炎性疾病，特别是LPS-诱导的内毒素性休克和/或细菌诱导的败血症。

本发明的化合物也适合用于预防和/或治疗炎症或自身免疫病，例如：

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的肺部疾病：任何起因的慢性阻塞性肺疾病，特别是支气管哮喘；多种起因的支气管炎；所有形式的限制性肺疾病，特别是变应性肺泡炎；所有形式的肺水肿，特别是毒性肺水肿；结节病和肉芽肿病，特别是伯克结节病。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的风湿性疾病/自身免疫病/关节疾病：所有形式的风湿性疾病，特别是风湿性关节炎、急性风湿热、风湿性多肌痛；反应性关节炎；其它起因的炎症性软组织疾病；变性关节病的关节炎症状(关节病)；外伤性关节炎疹；任何起因的胶原性疾病，例如，系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格伦（

）综合征、斯蒂尔(Still)综合征、费尔蒂(Felty)综合征。

-伴随有炎症性和/或增殖性过程的变态反应：所有形式的变态反应，例如昆克(Quincke)水肿、花粉症、毒虫螫伤、对药品、血衍生物、造影剂等的变态反应、过敏性休克、荨麻疹、接触性皮炎。

-血管炎症(血管炎)：结节性全身动脉炎、颞动脉炎、结节性红斑。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的皮肤病：特应性皮炎；银屑病；毛发红糠疹；由多种病因(例如辐射、化学品、烧伤等)触发的红斑病(erythematous diseases)；大疱性皮肤病；苔癣样(lichenoid type)的疾病；瘙痒；脂溢性湿疹；酒渣鼻；寻常型天疱疮；渗出性多形性红斑；阴茎头炎；外阴炎、例如斑秃的脱发；皮肤T细胞淋巴瘤。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的肾疾病：肾病综合征；所有的肾炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的肝病：急性肝细胞崩解(disintegration)；多种起因(例如病毒、中毒、药物诱导)的急性肝炎；慢性攻击性和/或慢性间歇性肝炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的胃肠道疾病：局限性肠炎(克罗恩氏病)；溃疡性结肠炎；胃炎；回流性食管炎；其它起因(例如腹部疾病)的胃肠炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的直肠疾病：肛门湿疹；肛裂；痔疮；原发性直肠炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的眼部疾病：过敏性角膜炎、葡萄膜炎、虹膜炎、结膜炎；睑缘炎；视神经神经炎；脉络膜炎；交感性眼炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的ENT疾病：过敏性鼻炎、花粉症、例如由接触性湿疹、感染引起的外耳炎；中耳炎。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的神经系统疾病：脑水肿、特别是肿瘤诱导的脑水肿；多发性硬化；急性脑脊髓炎、脑膜炎；多种形式的发作，例如salaam发作。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的血液疾病：获得性溶血性贫血；特发性血小板减少。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的肿瘤疾病：急性淋巴性白血病；恶性淋巴瘤；淋巴肉芽肿病；淋巴肉瘤；特别是在乳腺癌、支气管癌和前列腺癌的广泛转移。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的内分泌疾病：内分泌眶病；甲状腺毒性危象；de Quervain甲状腺炎；桥本甲状腺炎；巴塞多病。

-器官和组织移植物，移植物抗宿主病

-严重休克，例如过敏性休克、全身性炎性反应综合征(SIRS)。

-在以下中的替代治疗：先天性原发性肾上腺皮质功能不全，例如先天性副肾生殖器综合征；获得性原发性肾上腺皮质功能不全，例如阿狄森病、自身免疫性肾上腺炎、感染后(postinfectious)、肿瘤、转移等；先天性继发性肾上腺皮质功能不全，例如先天性垂体机能减退；获得性继发性肾上腺皮质功能不全，例如感染后，肿瘤等。

-伴随有炎症性、过敏性和/或增殖性过程的呕吐，例如在细胞增殖抑制药诱导的呕吐中与5-HT3拮抗药组合。

-炎症起因的疼痛，例如腰痛。

本发明的化合物也适合用于治疗病毒性疾病，例如由乳头状瘤病毒、疱疹病毒、Epstein-Barr病毒、肝炎B病毒或肝炎C病毒和人类免疫缺陷病毒引起的感染。

本发明的化合物也适合用于治疗动脉粥样硬化、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、外周血管疾病、心血管疾病、心绞痛、缺血、中风、心肌梗塞、血管成形术(angioplastic)的再狭窄、高血压、血栓形成、肥胖、内毒素血症。

本发明的化合物也适合用于治疗神经变性疾病，例如多发性硬化、阿尔茨海默病和帕金森病。

这些疾病在人中很好的表征，但也在其它哺乳动物中发生。

本发明涉及本发明式(I)的化合物，特别是下列化合物：

-6-基]乙酰基}-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)乙-1-酮，

-6-基]乙酰基}氨基)-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯，

-6-基]乙酰胺，

-6-基]-1-(8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-6-基)乙-1-酮，

-(S)-1-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]乙酮，

-(S)-1-(2-氮杂双环[2,2,2]辛-7-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酮。

本发明还涉及用作药品，特别是用作预防和/或治疗肿瘤疾病的本发明的化合物。

本发明还涉及用于预防和/或治疗白血病(特别是急性髓性白血病)、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性乳腺癌或BRCA相关乳腺癌)、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、黑色素瘤和其它皮肤肿瘤、非小细胞支气管癌、子宫内膜癌和结直肠癌的本发明的化合物。

本发明还涉及用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是雌激素-α-阳性乳腺癌和雌激素-α-阴性乳腺癌)、多发性骨髓瘤或黑色素瘤的本发明的化合物。

本发明还涉及本发明的化合物用于制备药品的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于制备预防和/或治疗肿瘤疾病的药品的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于制备预防和/或治疗白血病(特别是急性髓性白血病)、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性乳腺癌或BRCA相关乳腺癌)、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、黑色素瘤和其它皮肤肿瘤、非小细胞支气管癌、子宫内膜癌和结直肠癌的药品的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于制备预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是雌激素-α-阳性乳腺癌和雌激素-α-阴性乳腺癌)、多发性骨髓瘤或黑色素瘤的药品的用途。

本发明还涉及所述化合物用于预防和/或治疗肿瘤疾病的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于预防和/或治疗白血病(特别是急性髓性白血病)、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性乳腺癌或BRCA相关乳腺癌)、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、黑色素瘤和其它皮肤肿瘤、非小细胞支气管癌、子宫内膜癌和结直肠癌的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是雌激素-α-阳性乳腺癌和雌激素-α-阴性乳腺癌)、多发性骨髓瘤或黑色素瘤的用途。

本发明还涉及包含本发明的化合物中的一个的片剂形式的药物制剂，其用于预防和/或治疗白血病(特别是急性髓性白血病)、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性乳腺癌或BRCA相关乳腺癌)、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、黑色素瘤和其它皮肤肿瘤、非小细胞支气管癌、子宫内膜癌和结直肠癌。

本发明还涉及包含本发明的化合物中的一个的片剂形式的药物制剂，其用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌(特别是雄激素受体阳性前列腺癌)、宫颈癌、乳腺癌(特别是雌激素-α-阳性乳腺癌和雌激素-α-阴性乳腺癌)、多发性骨髓瘤或黑色素瘤。

本发明还涉及本发明的化合物用于治疗伴随有增殖过程的疾病的用途。

本发明还涉及本发明的化合物用于治疗良性增生、炎性疾病、自身免疫病、败血症、病毒感染、血管疾病和神经变性疾病的用途。

本发明的化合物可单独使用，或者(如果需要)与一种或多种其它药理学有效物质组合使用，条件是，该组合不引起不期望和不可接受的副作用。因此，本发明还涉及包含本发明的化合物以及一种或多种其它活性物质(特别是用于预防和/或治疗上述疾病的活性物质)的药品。

例如，可将本发明的化合物与已知的抗过度增殖、细胞增殖抑制物质或细胞毒物质组合用于治疗癌症。特别说明将本发明的化合物与其它用于癌症疗法的常见物质组合，或者也与放射疗法组合。

作为适合的组合活性物质，我们可能提到例如：

依维莫司(Afinitor)、阿地白介素、阿仑膦酸、α-干扰素(Alfaferone)、阿利维A酸、别嘌呤醇、注射用别嘌呤醇钠(Aloprim)、盐酸帕洛诺司琼(Aloxi)、六甲蜜胺、氨鲁米特、氨磷汀、氨柔比星、安吖啶、阿那曲唑、多拉司琼(Anzmet)、阿法达贝泊汀注射剂(Aranesp)、Arglabin、三氧化二砷、依西美坦片、5-氮杂胞苷、硫唑嘌呤、BCG或Tice BCG、乌苯美司(bestatin)、醋酸倍他米松、倍他米松磷酸钠、贝沙罗汀、硫酸博来霉素、溴尿苷、硼替佐米、白消安、降钙素、阿仑单抗(Campath)、卡培他滨、卡铂、比卡鲁胺、Cefesone、西莫白介素、柔红霉素、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉立滨、氯屈膦酸、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素D、枸橼酸柔红霉素脂质体(DaunoXome)、地卡特隆、地塞米松磷酸钠、戊酸雌二醇、地尼白介素2(denileukin diftitox)、甲基氢化泼尼松、地洛瑞林、右雷佐生、己烯雌酚、氟康唑、多西他赛、去氧氟尿苷、多柔比星、屈大麻酚、DW-166HC、醋酸亮丙瑞林(Eligard)、Elitek、盐酸表柔比星(Ellence)、阿瑞吡坦胶囊(emend)、表柔比星、促红素α(epoetin alfa)、重组人促红素(Epogen)、艾铂、左旋咪唑、雌二醇制剂(Estrace)、雌二醇、雌莫司汀磷酸钠、炔雌醇、氨磷汀、依替膦酸、依托泊苷注射剂、依托泊苷、法罗唑、法乐通、非格司亭、非那雄胺、氟尿苷、氟康唑、氟达拉滨、单磷酸5-氟脱氧尿苷、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟甲睾酮、氟他胺、福美坦、Fosteabin、福莫司汀、氟维司群、γ-球蛋白(Gammagard)、吉西他滨、吉妥珠单抗、格列卫、卡氮芥糯米纸胶囊剂(Gliadel)、戈舍瑞林、盐酸格拉司琼、组氨瑞林、托泊替康(Hycamtin)、氢化可的松、赤羟基壬基腺嘌呤(eyrthro-hydroxynonyladenine)、羟基脲、替伊莫单抗、伊达比星、异环磷酰胺、α干扰素、α-2干扰素、α-2α干扰素、α-2β干扰素、α-n1干扰素、α-n3干扰素、β干扰素、γ-1α干扰素、白介素-2、干扰素α(Intron A)、吉非替尼片(Iressa)、伊立替康、格拉司琼注射液、拉帕替尼、硫酸香菇多糖、来曲唑、Leukorganoin、亮丙瑞林、醋酸亮丙瑞林、左旋咪唑、左亚叶酸钙盐(Levofolinic acid-calcium salt)、左甲状腺素钠、左甲状腺素钠制剂(Levoxyl)、洛莫司汀、氯尼达明、屈大麻酚、氮芥、甲钴胺、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、酯化雌激素片(Menest)、6-巯基嘌呤、美司钠、甲氨喋呤、美特维克、米替福新、米诺环素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、曲洛司坦、Myocet、奈达铂、聚乙二醇化非格司亭(Neulasta)、重组人白介素11(Neumega)、优保津(Neupogen)、尼鲁米特、他莫昔芬、NSC-631570、OCT-43、奥曲肽、盐酸昂丹司琼、Orapred、奥沙利铂、紫杉醇、paediapred、培门冬酶、派罗欣、喷司他丁、毕西巴尼(picibanil)、盐酸毛果芸香碱、吡柔比星、普卡霉素、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、泼尼松龙、泼尼松、倍美力、丙卡巴肼、重组人类红细胞生成素α、雷替曲塞、RDEA119、重组人干扰素β1a注射液(Rebif)、瑞戈非尼、铼-186-依替膦酸二钠(rhenium-186-etidronat)、利妥昔单抗、罗扰素(Roferon-A)、罗莫肽、盐酸毛果芸香碱(Salagen)、奥曲肽、沙格司亭、司莫司汀、西佐喃、索布佐生、甲强龙、链佐星、氯化锶-89、左甲状腺素钠、他莫昔芬、坦索罗辛、他索纳明、睾内酯、多西他赛注射液(taxotere)、替西白介素、替莫唑胺、替尼泊苷、丙酸睾酮、甲睾酮、硫鸟嘌呤、塞替派、促甲状腺素、替鲁膦酸、托泊替康、托瑞米芬、托西莫单抗、曲妥珠单抗、曲奥舒凡、维A酸、甲氨蝶呤(Trexall)、三甲基三聚氰胺、三甲曲沙、醋酸曲普瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、UFT、尿苷、戊柔比星、维司力农、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、维鲁利秦、右雷佐生(Zinecard)、净司他丁酯、昂丹司琼(Zofran)、ABI-007、阿考比芬、干扰素γ-1b(Actimmune)、Affinitak、氨基蝶呤、阿佐昔芬、阿索立尼、阿他美坦、阿曲生坦、BAY43-9006(索拉非尼)、阿瓦斯丁(Avastin)、CCI-779、CDC-501、西乐葆、西妥昔单抗、克立那托、醋酸环丙孕酮、地西他滨、DN-101、多柔比星-MTC、dSLIM、度他雄胺、艾特咔林、依氟鸟氨酸、依沙替康、芬维A胺、二盐酸组胺、组氨瑞林水凝胶植入剂、钬-166-DOTMP、伊班膦酸、γ干扰素、Intron-PEG、伊沙匹隆、钥孔戚血蓝素(keyhole limpet hemocyanin)、L-651582、兰瑞肽、拉索昔芬、libra、法尼醇蛋白转移酶抑制剂(lonafarnib)、米泼昔芬、米诺膦酸(minodronate)、MS-209、MTP-PE脂质体、MX-6、那法瑞林、奈柔比星、新伐司他、诺拉曲赛、奥利美生、onco-TCS、osidem、聚谷氨酸紫杉醇、帕米膦酸二钠、PN-401、QS-21、夸西泮、R-1549、雷洛昔芬、豹蛙酶、13-顺式-视黄酸、沙铂、西奥骨化醇、T-138067、盐酸厄洛替尼片(Tarceva)、taxoprexin、α-1胸腺素、噻唑羧胺核苷、替吡法尼、替拉扎明、TLK-286、托瑞米芬、TransMID-107R、戊司泊达、伐普肽、伐拉尼布、维替泊芬、长春氟宁、Z-100、唑来膦酸和它们的组合。

在一优选实施方案中，可将本发明的组合物与抗过度增殖药组合，所述抗过度增殖药可为例如(该列表不是详尽的)：

氨鲁米特、L-天门冬酰胺酶、硫唑嘌呤、5-氮杂胞苷、博来霉素、白消安、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、门冬酰胺酶、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素、己烯雌酚、2',2'-二氟脱氧胞苷、多西他赛、多柔比星(注射用盐酸多柔比星(Adriamycin))、表柔比星、爱波喜龙及其衍生物、赤-羟基壬基腺嘌呤(erythro-hydroxynonyladenine)、炔雌醇、依托泊苷、磷酸氟达拉滨、5-氟脱氧尿苷、5-氟脱氧尿苷单磷酸盐、5-氟脲嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、六甲基三聚氦胺、羟基脲、己酸羟孕酮、伊达比星、异环磷酰胺、干扰素、伊立替康、leukorganoin、洛莫司汀、氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、6-巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、紫杉醇、喷司他丁、N-膦酰基乙酰基-L-天冬氨酸(PALA)、普卡霉素、泼尼松龙、泼尼松、丙卡巴肼、雷洛昔芬、司莫司汀、链佐星、他莫昔芬、替尼泊苷、丙酸睾酮、硫鸟嘌呤、塞替派、托泊替康、三甲基三聚氰胺、尿苷、长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨。

有希望地，也可将本发明的化合物与生物治疗剂组合，所述生物治疗剂例如抗体(如Avastin、B细胞单克隆抗体(Rituxan)、爱必妥、赫赛汀)和重组蛋白质。

本发明的化合物也可与其它治疗剂(例如Avastin、阿昔替尼、瑞戈非尼、Recentin、索拉非尼或舒尼替尼)组合在针对血管发生中实现积极效应。由于其有利的副作用性质，与蛋白酶体抑制剂和mTOR的抑制剂以及抗激素药和甾体代谢酶抑制剂组合是特别适合的。

一般而言，将本发明的化合物与其它具有细胞增殖抑制或细胞毒作用的药剂组合可实现以下目的：

·与用单一活性物质的治疗相比，提高在减缓肿瘤生长、减小肿瘤大小或者甚至使其完全消除的有效性；

·比单一疗法使用更低剂量的化学治疗剂的可能性；

·与单独给药相比，具有更少副作用的更好耐受的疗法的可能性；

·治疗多种肿瘤疾病的可能性；

·达到对疗法响应的更高速率；

·与当前标准疗法相比，患者更长的存活时间。

此外，也可将本发明的化合物与放射疗法和/或手术联合使用。

1.式(I)的化合物的合成路线

合成的说明

已记载[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酸叔丁酯的合成(Nature 2010,Vol.468,p1067ff,P.Filippakopoulos等人)。可使用强酸(如三氟乙酸或盐酸)使叔丁酯断裂。然后由本领域技术人员已知的肽偶联方法得到实施例化合物。在这些情况中，将(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)用作试剂。这仅是一个本领域技术人员已知的试剂的实例(J.American ChemSoc.1993,115,4397)。在WO1998/11111中记载了制备在制备本发明的化合物中使用的羧酸在各个情况下R¹、R²和卤素的变化。合成时获得的酯为外消旋体形式，并且通过适合的分离方法分为对映异构体。对此应用本领域技术人员熟悉的HPLC技术，使用手性固定相进行。优选地，制备各个叔丁酯，并分离为它们的对映异构体。

缩写和简称：

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO-d6 氘化二甲基亚砜

DMSO 二甲基亚砜

HATU (7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐

RP-HPLC 反相高效液相色谱法

RT 室温

tert 叔

NMP N-甲基吡咯烷酮

ACN 乙腈

HCl 盐酸

2.比较例和实施例的制备

起始化合物和中间体：

前体：

6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-8-鎓盐酸盐

将1.6g(3.5mmol)的25ml HCl中的[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]乙酸叔丁酯在二氧杂环己烷(4N)中的溶液在室温下搅拌过夜。在真空下将溶剂完全移除，获得固体形式的标题化合物1.53g。

¹H-NMR(400MHz,RT,DMSO-d6):δ=1.6(s,3H),2.39(s,3H),2.61(s,3H),3.31(dd,1H),3.41(dd,1H),4.46(t,1H),4.56(bs),7.41(d,2H),7.47(d,2H)

比较例：

使用[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酸叔丁酯(V1)作为比较化合物。

V1的制备在Nature 2010,Vol.468,p1067ff(P.Filippakopoulos等人)中记载。

实施例：

实施例1：

8-{2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰基}-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮

将0.65g2HATU、0.4ml三乙胺和221.7mg3-氧代-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷盐酸盐加入到0.5g(1.14mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在10ml DMF中的溶液，在室温下搅拌3小时。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用硫酸镁干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)和RP-HPLC(XBridge C185μm100x30mm，洗脱液：梯度的水/乙腈，0.2%饱和氨溶液作为添加剂)分离后获得标题化合物。得到0.22g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,CDCl₃):δ=1.67(d,3H),1.70-2.40(m,5H),2.41(s,3H),2.43-2.56(m,1H),2.68(d,3H),2.77(bdd,1H),3.07(dd,1H),3.71(ddd and d,1H+1H),4.77-4.90(m,1.5H),4.90-5.03(m,1.5H),7.28-7.45(m,4H)

旋光：[α_D]=20.9°(甲醇,c=1g/100ml)

实施例2：

2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)乙-1-酮

将0.65g HATU、0.47ml三乙胺和0.2g二(2-氧杂-6-氮鎓双环[3.3]庚烷)草酸盐加入到0.5g(1.14mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在12.5mlDMF中的溶液，在室温下搅拌2小时。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用硫酸镁干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)和RP-HPLC(XBridge C185μm 100x30mm，洗脱液：梯度的水/乙腈，0.1%甲酸作为添加剂)分离后获得标题化合物。得到0.13g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,CDCl₃):δ=1.65(s,3H),2.39(s,3H),2.66(s,3H),3.24(dd,1H),3.41(dd,1H),4.2(s,2H),4.52(d,1H),4.68(t,1H),4.73-4.93(m,5H),7.32(d,2H),7.36(d,2H)

旋光：[α_D]=26.6°(甲醇，c=1g/100ml)

实施例3：

(1R,5S)-3-({2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]乙酰基}氨基)-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯

将0.39g HATU、0.19ml三乙胺和0.2g(1R,5S)-3-氨基-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯加入到0.3g(0.69mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在5ml DMF中的溶液。将溶液倒入水中，使标题化合物结晶。过滤并在真空中干燥，然后得到0.35g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,DMSO-d6，选择的信号):δ=1.38(s,9H),1.67(s,3H),1.72-1.94(m,3H),2.37(s,3H),2.55(s,3H),3.06-3.23(m,2H),4.14(bs,1H),4.45(t,1H),4.48-4.62(m,1H),7.38(d,2H),7.47(d,2H)

实施例4：

N-[(1R,5S)-9-氮杂双环[3.3.1]壬-3-基]-2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰胺

将1ml三氟乙酸加入到0.35g(0.56mmol)的3-({[2-(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酰基}氨基)-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯在10ml二氯甲烷中的溶液，在室温下过夜搅拌。通过真空蒸发将反应混合物浓缩，加入水并用饱和碳酸钠溶液使其为碱性。将其用二氯甲烷萃取。将溶剂在真空下移除，并将残渣通过RP-HPLC(XBridge C185μm100x30mm，洗脱液：梯度的水/乙腈，0.1%甲酸作为添加剂)纯化。将粗产物通过硅胶色谱法(洗脱液：梯度的己烷/乙酸乙酯)纯化后得到12mg的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,DMSO-d6，选择的信号):δ=1.67(s,3H),1.60-1.72(m,3H),1.73-1.98(m,3H),2.38(s,3H),2.56(s,3H),3.06-3.35(m,6H),4.40-4.55(m,2H),7.38(d,2H),7.47(d,2H),7.99(d,1/3H),8.05(d,2/3H)

实施例5：

2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]-1-(8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-酮

将0.199g HATU、0.15ml三乙胺和0.063g8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷盐酸盐加入到0.14g(0.35mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在3mlDMF中的溶液，在室温下搅拌过夜。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤。将其用硫酸钠干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)分离后获得标题化合物。得到0.088g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,CDCl₃):δ=1.67(s,3H),1.7-2.1(m,4H),2.39(s,3H),2.67(s,3H),3.01(t,1H),3.58(ddd,1H),3.52-3.63(m,2H),3.88(dd,1H),4.20(d,1H),4.42(bs,2H),4.82(t,1H),7.32(d,2H),7.40(dd,2H)

旋光：[α_D]=46.0°(CHCl₃,c=1g/100ml)

实施例6：

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)乙-1-酮

将0.185g HATU、0.14ml三乙胺和0.044g2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛烷加入到0.15g(0.35mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在5ml DMF中的溶液，在室温下搅拌过夜。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤。将其用硫酸钠干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)分离后获得标题化合物。得到0.11g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,DMSO-d6):δ=1.67(s,3H),2.09(t,1H),2.22(t,1H),2.37(s,3H),2.55(d,3H),3.20-3.35(m,2H),3.43(dd,1H),3.51(d,1H),3.65(dt,1H),3.90(dd,1H),4.43-4.54(m,4H),4.59(dd,1H),7.38(dd,2H),7.46(dd,2H)

旋光：[α_D]=30.5°(CHCl₃,c=1g/100ml)

实施例7：

-6-基]-1-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-6-基)乙-1-酮

将0.185g HATU、0.14ml三乙胺和0.049g2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷加入到0.15g(0.35mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在5ml DMF中的溶液，在室温下搅拌过夜。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤。将其用硫酸钠干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)分离后获得标题化合物。得到0.115g的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,DMSO-d6):δ=1.67(s,3H),1.63-1.71(m,2H),1.81-1.88(m,2H),2.38(t,3H),2.55(s,3H),3.33-3.41(m,3H),3.52(bt,2H),3.58(dd,1H),4.27-4.36(m,4H),4.52(t,1H),7.38(d,2H),7.45(d,2H)

旋光：[α_D]=37.8°(CHCl₃,c=1g/100ml)

实施例8：

(S)-1-(2-氮杂双环[2,2,2]辛-2-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酮

将0.124g HATU、0.12ml三乙胺和38.5mg2-氮杂双环[2,2,2]壬烷盐酸盐加入到100mg(0.22mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在4.4mlDMF中的溶液，在室温下搅拌过夜。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤。将其用硫酸钠干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)分离后获得标题化合物。得到46mg的标题化合物。

¹H-NMR(300MHz,RT,CDCl₃):δ=1.67(s,3H),1.63-1.78(m,6H),1.80-1.93(m,1H);1.95-2.08(m,2H);2.39(t,3H),2.66(s,3H),3.43-3.63(m,3H),3.81(dd,1H);4.37(d,1H);4.83(t,1H),7.32(dd,2H),7.40(d,2H)

实施例9：

(S)-1-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酮

将0.124g HATU、0.12ml三乙胺和34.8mg7-氮杂双环[2,2,1]庚烷盐酸盐加入到100mg(0.22mmol)的(S)-6-(羧甲基)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-8-鎓盐酸盐在4.4mlDMF中的溶液，在室温下搅拌过夜。加入水并将其用乙酸乙酯萃取。将有机相用水和盐水洗涤。将其用硫酸钠干燥，并将溶剂在真空下移除。硅胶色谱法(洗脱液：梯度的二氯甲烷/甲醇)分离后获得标题化合物。得到50mg的标题化合物。

¹H-NMR(400MHz,RT,CDCl₃):δ=1.42-1.63(s,4H),1.67(s,3H),1.74-1.90(m,2H),1.90-2.06(m,2H);2.39(t,3H),2.66(s,3H),3.56(d,2H);4.57(t,1H);4.68(t,1H);4.78(t,1H),7.31(dd,2H),7.39(d,2H)

3.测定法

3.1蛋白质-蛋白质相互作用测定法

BRD4/乙酰化肽H4("PRQ")的结合测定法

为了评估本申请中描述的物质的BRD4结合强度，定量分析它们对于BRD4和乙酰化组蛋白H4之间的相互作用的剂量依赖性抑制的能力。

为了该目的，使用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定法，其测量N端His₆-标记的BRD4(1)(氨基酸44-168)和合成的具有序列GRGK(Ac)GGK(Ac)GLGK(Ac)GGAK(Ac)RHGSGSK-生物素的乙酰化组蛋白H4(Ac-H4)肽的结合。将重组BRD4蛋白(内部制备)在大肠杆菌(E.coli)中表达，并且通过(Ni-NTA)亲和色谱法和(Sephadex G-75)尺寸排阻色谱法纯化。Ac-H4肽可购自例如Biosyntan(柏林，德国)

在该测定法中，在相同的微孔板上通常一式两份测量各个物质的11种不同浓度(0.1nM、0.33nM、1.1nM、3.8nM、13nM、44nM、0.15μM、0.51μM、1.7μM、5.9μM和20μM)。对于此，在澄清384-孔微孔板(GreinerBio-One,Frickenhausen，德国)中通过将2mM储备溶液系列稀释(1:3.4)制备DMSO中的100倍浓溶液。从此将50nl转移至黑色测定板(Greiner Bio-One,Frickenhausen，德国)。通过向测定板中的物质提供2μl在水性测定缓冲液[50mM HEPES pH7.5、50mM氯化钠(NaCl)、0.25mM CHAPS和0.05%血清白蛋白(BSA)]中的2.5倍浓BRD4溶液(在5μl反应物体积中通常终浓度为10-50nM)，来起始测定。然后为了BRD4和所述物质之间的假定复合物的预平衡，进行在22℃下孵育10分钟的步骤。然后加入3μl由Ac-H4肽(83.5nM)和TR-FRET检测试剂[16.7nM抗-6His-XL665和3.34nM抗生蛋白链菌素穴状化合物(cryptate)(均来自Cisbio Bioassays,Codolet，法国)，加上668mM氟化钾(KF)]组成的1.67倍浓溶液(在测定缓冲液中)。

然后将混合物在黑暗中，于22℃下孵育一小时，然后在4℃过夜孵育。通过测量在反应物中存在的从抗生蛋白链菌素-Eu-穴状化合物向抗-6His-XL665抗体的共振能量转移来测定BRD4/Ac-H4复合物的形成。对于此，在TR-FRET测量仪(例如Rubystar或Pherastar(均来自BMG LabTechnologies,Offenburg，德国)或Viewlux(Perkin-Elmer))中在330-350nm下激发后测量620nm和665nm下的荧光发射。将在665nm下和在622nm下的发射的比例作为BRD4/Ac-H4复合物形成的量的标识。

将所获得的数据(比例)标准化，其中0%抑制对应于一组对照(通常32个数据点)的测量值的平均值。所述对照中包含所有试剂，使用50nl DMSO(100%)代替测试物质。100%抑制对应于一组其中包含除了BRD4的所有试剂的对照(通常32个数据点)的测量值的平均值。使用Bayer自有的分析软件，基于4-参数方程(最小值、最大值、IC50,Hill;Y=最大值+(最小值-最大值)/(1+(X/IC50)^Hill)，通过回归分析测定IC50值。

3.2细胞测定法

细胞增殖测定法

根据本发明，测定物质抑制多种细胞系的增殖的能力。通过

试剂(Invitrogen)测定细胞活力。将细胞以不同的密度接种(MOLM-13、LAPC-4、MDA-MB-231和MOLP-8：4000细胞/孔；VCaP：16000细胞/孔；LNCaP：2000细胞/孔；MCF-7和HeLa-MaTu：1000细胞/孔；B16F10:400细胞/孔)在96孔微孔板中的100μl生长培养基中。在37℃下过夜孵育，然后测定荧光值(CI值)。然后将板用多种物质稀释物处理，并且在37℃下孵育96小时(MOLM-13、MCF-7、MDA-MB-231、HeLa-MaTu和B16F10细胞)、120小时(MOLP-8细胞)或者168小时(LAPC-4、VCaP和LNCaP细胞)。然后测定荧光值(CO值)。对于数据处理，从CO值扣除CI值，并且将用多种物质的稀释物处理的或仅用缓冲溶液处理的细胞的结果进行比较。从这些结果计算IC50值(抑制50%的细胞增殖所需的物质的浓度)。

将物质在表1中的例如代表所述适应症的细胞系中研究：

表1

3.3通过平衡透析测定血浆蛋白结合

通过平衡透析，用由Teflon和半透膜(再生纤维素，MWCO12-14K)制成的Ht-透析仪(96孔)测定测试物质与血浆蛋白的结合。这分离150μl的各个血浆测和缓冲液侧(50mM磷酸盐缓冲液)。将测试物质以2种浓度(通常3μM和0.3μM)加入至血浆侧，并与血浆蛋白结合。测试物质的未结合部分通过膜，并在各侧分布，直到达到平衡(在37℃，大约6-8h后)。通过LC-MS分析测定缓冲液侧和血浆测的物质浓度。对于此，通过用缓冲液或血浆稀释，使两侧为相同的基质(10%血浆)，然后用甲醇沉淀。由缓冲液和血浆浓度的商(quotient)计算游离(未结合)的部分(fu)。同时进行稳定性试验和回收试验作为对照。此外，将缓冲液中的物质与缓冲液透析，以检查向仪器和膜的非特异性结合，并建立平衡。因为在孵育期间，血浆蛋白的渗透压引起血浆的稀释(体积变化)，通过称重空白血浆样品来测定这一可能的误差，并将其包含在fu的计算中。平衡的建立和血浆稳定性应具有不低于80%的值，并且回收应为至少30%。将<1%的游离部分看做高血浆蛋白结合，1-10%看做中等血浆蛋白结合，>10%看做低血浆蛋白结合。

3.4从体内试验测定血浆浓度，并计算PK参数(通过PK计算软件，例如

)

将ACN+内标(1:5(v/v))加入到施用活性物质后适合的时间点获得的小鼠血浆中，将其摇晃并在-20℃下冷冻，持续大约12个小时(过夜)。使其融化并摇晃，然后将样品在4℃离心，持续20分钟，并且大约2000x g。将上清液的等分部分(大约25μL)通过LC-MS分析测量。如果预期高血浆或组织水平(>ULOQ，一般为5μM)，将沉淀样品另外用ACN/H₂O(80/20,v/v)+内标以1:100稀释，并且通过LC-MS测量相应的等分部分。对于此，以5-9个对应于分析方法的测定范围的浓度将测试物质加入到对照基质(校准样品)中，例如0nM、1nM、10nM、100nM、1000nM、5000nM。对于此，将一部分固体称重并将其在DMSO中溶解(一般为1mM储备溶液)。将该储备溶液进一步用DMSO(100μM)1:10稀释。然后将1:5(v/v)ACN+内标(soln.A)加入到校准样品，并进一步如用血浆样品处理。溶液中的校准系列以与所述血浆校准相似地进行。在此情况下，在ACN/H₂O(50/50,v/v)中制备测试物质，然后将1:5(v/v)ACN+内标加入到样品。该系列用于校准稀释的样品。从这些所获得的浓度-时间曲线计算下列PK参数：

AUC_(0-t最后)：

从时间0点至血浆浓度可测量的所研究的最后时间点(例如24h)的血浆浓度-时间曲线下的积分面积。

t最后：

血浆浓度可测量的所研究的最后时间点(例如24h)。

AUC_{(0-t最后),norm}：

从时间0点至血浆浓度可测量的所研究的最后时间点(例如24h)的血浆浓度-时间曲线下的积分面积，除以对于体重标准化的剂量(以kg*L/h计)。

AUC_{(0-t最后),norm,u}：

AUC_{(0-t最后),norm}乘以所研究物种的游离部分(fu)。

3.5小鼠中的体内耐受性

将物质在NMP/PEG300(1/9V/V)中配制。将它们以10ml/kg的量向雌性NMRI裸鼠(6-8周大；每组3只动物)口服给药，每天一次或两次，持续5-7天的时间。各个物质的剂量和剂量方案在表中显示。每天监测小鼠的体重和死亡率，直到研究结束。按以下定义毒性：≥10%的物质诱导的死亡或≥20%的体重损失。

3.6体内抗增殖活性

3.6.1MOLM-13急性单核细胞白血病肿瘤模型

在第0天，在NMRI裸鼠右侧皮下接种在0.1ml Matrigel中的2x10⁶MOLM-13细胞。在肿瘤接种后第3天，开始用比较例V1和实施例1或2处理。将比较例V1在盐水(在水中的0.2%NaCl)中的20%HPβ环糊精中溶解。将实施例1和实施例2在40%PEG400、5%乙醇、25%Solutol中溶解。将物质每天口服给药，持续11天(第3-14天)。将比较例V1以每天70mg/kg(最大耐受剂量)或40mg/kg的剂量给药。将实施例1和2以每天200(最高使用剂量)、120或70mg/kg的剂量施用。

3.6.2B16F10黑色素瘤肿瘤模型

在第0天将在0.1ml培养基中的0.5x10⁶细胞接种于C57BL/6小鼠右侧皮下。在肿瘤接种后第2天，开始用比较例V1、实施例2处理。将比较例V1在盐水(在水中的0.2%NaCl)中的20%HPβ环糊精中溶解，并且将实施例2在40%PEG400、5%乙醇、25%Solutol中溶解。将物质口服给药，持续10天(第2-11天)。将比较例V1以70mg/kg(最大耐受剂量)或55mg/kg的剂量施用。将实施例2以160mg/kg或120mg/kg的剂量施用。

4.结果：

4.1结合测定法

表2显示结合测定法的结果。

表2

4.2细胞测定法

表3a、3b和3c显示细胞增殖测定法的结果。

表3a

表3b

表3c

4.3通过平衡透析测定血浆蛋白结合

表4显示血浆蛋白结合的测定结果

表4

实施例	蛋白结合，以%fu给出
		V1	1.5
1	12
		2	25

4.4.从体内试验和PK参数测定的血浆浓度(通过PK计算软件，例如

)

表5显示在体内试验(小鼠)测定的血浆浓度，表6显示测定的药物代谢动力学参数。

表5

表6

		1	2	V1
					剂量	(mg/kg)	100	50	60
AUC_(0-t最后).	(mg*h/kg)	4.9	10	7.1
					t最后	(h)	24	6.0	7.0
AUC_{(0-t最后),norm}	(kg*h/L)	0.05	0.20	0.12
					fu	(%)	12	25	1.5
AUC_{(0-t最后),norm,u}	(kg*h/L)	0.006	0.050	0.002

AUC_{(0-t最后),norm,u}表明与比较例V1相比，单次口服给药后，本发明的实施例1和2在有效物种小鼠中具有较高的未结合暴露。因此在小鼠中，具有更高的剂量标准化游离血浆浓度，使得预计在相同剂量下，在小鼠中有提高的有效性。

4.5小鼠中的体内耐受性

表7显示体内耐受性试验(小鼠)的结果。

比较物质V1以每天100mg/kg的剂量，持续7天是耐受的。在处理的第9天，重量损失最高(10%)。100mg/kg的物质每天给药两次是不耐受的，因为在处理的第6天观察到2例物质诱导的死亡。5天后的最大耐受处理剂量(MTD)为每天两次50mg/kg，最大体重损失为第6天的7%。

实施例1和2在测试的每天给药一次或两次的所有剂量都良好耐受。最大耐受处理剂量≥200mg/kg每天或处理5天后≥100mg/kg每天两次。在所有组中体重损失小于3%。

总之，在小鼠中实施例1和2比比较物质V1表现更好的耐受性。每天单次处理最大耐受治疗剂量对于实施例1和2为≥200mg/kg，对于比较物质V1为100mg/kg。每天给药两次中最大耐受处理剂量对于实施例1和2为≥100mg/kg，对于比较物质V1为50mg/kg。

表7

MTD=最大耐受处理剂量，HDT=最大测试剂量

4.6体内抗增殖作用

4.6.1MOLM-13急性单核细胞白血病肿瘤模型

研究期间动物体重的增加。在用实施例2处理的组中有1例未解释的死亡。

比较例V1的最高剂量为生物学活性的，因为在第14天测量到20%T/C。低剂量是无活性的，并且具有54%的T/C值。实施例1的最高剂量(200mg/kg)抑制肿瘤生长(T/C值39%)，120mg/kg的剂量也显示活性(T/C值46%)，并且最低剂量是无活性的(T/C值58%)。实施例2的最高剂量(200mg/kg)是活性的，并且具有23%的T/C值。较低剂量(120mg/kg和70mg/kg)也显示对肿瘤生长的效应(T/C值46%)，但是这些没有统计学上显著性。统计学上显著性定义为P<0.05。

4.6.2B16F10黑色素瘤肿瘤模型

用比较例V1处理，在160mg/kg或120mg/kg的剂量下分别导致6%或2%的重量损失。用实施例2处理，在160mg/kg或120mg/kg的剂量下分别导致5%或2%的重量损失。在用比较例V1处理的两个组中在第12天都有一只(12只中的)小鼠死亡。在用70mg/kg的实施例2处理的组中，在第10天不得不处死一只重量损失高于20%的小鼠。对于两种物质的最高剂量，由于一些小鼠表现高于10%的重量损失，因此在一些天，治疗不得不停止。对于比较例V1，最高耐受剂量(MTD)为55mg/kg，对于实施例2，最高耐受剂量为120mg/kg。在这些剂量下，两种物质都有显著活性。比较例V1表现33%的T/C值，实施例2表现27%的T/C值。

Claims

1.式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐：

其中

或者

X表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团，并且

R¹和R²相互独立地表示氢原子或C₁-C₆烷基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

R^S1和R^S1相互独立地表示氢原子或C₁-C₆烷基，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，

或者

(ii)可包含酮基-C(O)-，并且

R^b1和R^b2表示氢，或者

条件是，

或者

如对式(I)的化合物所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

如对式(I)的化合物所定义，R^b1和R^b2形成桥，

并且

2.权利要求1的式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，其特征在于：

X表示键，并且Y表示氮原子。

3.权利要求1的式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，其特征在于：

R¹和R²表示甲基。

4.权利要求1的式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，其特征在于：

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^S2与R^S1以及R^S1和R^S2所连接的碳原子共同形成饱和的4元至6元的氧原子作为杂原子的杂环，其可任选地被卤素、羟基和/或被C₁-C₃烷基和/或C₁-C₃烷氧基相同地或不同地取代一次或多次。

5.权利要求1的式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，其特征在于：

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成桥-CHR⁶-CHR⁷-，

其中R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基。

6.式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，

其中

或者

X表示键，并且Y表示氮原子，或者

X表示-NH-基团，并且Y表示-CH-基团，并且

R¹和R²表示C₁-C₃烷基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

如根据本权利要求对式(I)的化合物所定义，如果R^b1和R^b2形成桥，则m、n、o和p的和至少为2，并且

R^S1和R^S1表示氢，或者

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^b1和R^b2表示氢，或者

条件是，

或者

如根据本权利要求对式(I)的化合物所定义，R^b1和R^b2形成桥，

或者

并且

7.式(I)的化合物及其非对映异构体、外消旋体和生理学相容的盐，

其中

X表示键，并且Y表示氮原子，并且

R¹和R²表示甲基，并且

m为0或1，并且

n为0或1，并且

o为0或1，并且

p为0或1，

其中

R^S2和R^S1共同形成酮基-C(O)-，或者

R^b1和R^b2表示氢，或者

R^b1和R^b2形成桥-CHR⁶-CHR⁷-，

其中R⁶和/或R⁷表示氢或C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基，

条件是，

或者

并且

8.化合物

-6-基]乙酰基}-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)乙-1-酮，

-(1R,5S)-3-({2-[(S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂-6-基]乙酰基}氨基)-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-羧酸叔丁酯，

-6-基]乙酰胺，

-6-基]-1-(8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)乙-1-酮，

-6-基]-1-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-6-基)乙-1-酮，

-(S)-1-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酮，

-(S)-1-(2-氮杂双环[2,2,2]辛-2-基)-2-[(6S)-4-(4-氯苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮杂

-6-基]乙酮。

9.权利要求1-8中任一项的化合物，其用作药品。

10.权利要求9的化合物，其用于预防和/或治疗肿瘤疾病、良性增生、炎性疾病、自身免疫病、败血症、病毒感染、血管疾病和神经变性疾病。

11.权利要求10的化合物，其用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌、多发性骨髓瘤或黑色素瘤。

12.权利要求1-8中任一项的式(I)的化合物制备药品的用途。

13.权利要求12的式(I)的化合物的用途，其用于制备预防和/或治疗肿瘤疾病、良性增生、炎性疾病、自身免疫病、败血症、病毒感染、血管疾病和神经变性疾病的药品。

14.权利要求13的用途，其用于制备预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌、多发性骨髓瘤或黑色素瘤的药品。

15.权利要求1-8中任一项的式(I)的化合物用于预防和/或治疗人或一些其它哺乳动物的疾病的用途。

16.权利要求15的用途，其用于预防和/或治疗肿瘤疾病、良性增生、炎性疾病、自身免疫病、败血症、病毒感染、血管疾病和神经变性疾病。

17.权利要求16的用途，其用于预防和/或治疗急性髓性白血病、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌、多发性骨髓瘤或黑色素瘤。

18.权利要求1-8中任一项的式(I)的化合物，其与其它活性物质组合。

19.药物制剂，其包含权利要求1-8中任一项的式(I)的化合物的。