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CN101815500A - 一种新型天然试剂在化妆品组合物中的应用 - Google Patents

一种新型天然试剂在化妆品组合物中的应用 Download PDF

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CN101815500A CN200880108734A CN200880108734A CN101815500A CN 101815500 A CN101815500 A CN 101815500A CN 200880108734 A CN200880108734 A CN 200880108734A CN 200880108734 A CN200880108734 A CN 200880108734A CN 101815500 A CN101815500 A CN 101815500A
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Abstract

本发明涉及含有以甘露糖蛋白为活性成分和/或佐剂的化妆品或皮肤病学组合物，还涉及所述化妆品或皮肤病学组合物的应用和化妆处理方法。

Description

一种新型天然试剂在化妆品组合物中的应用
技术领域
本发明的主题是一种新型天然试剂在化妆品组合物以及皮肤病学组合物中的应用。
背景技术
甘露糖蛋白是键合在蛋白质上的甘露糖，特别存在于酵母的细胞壁，在此它们具有结构和/或抗原功能。
甘露糖蛋白通常用于酿酒，特别用于稳定白酒(参见例如国际专利WO 96/013571，WO 01/046380和WO 06/067147)。甘露糖蛋白减少酒精饮料呈雾水平(haze level)的应用在专利申请WO 07/034986中有所述。
在专利申请EP 0790316中，甘露糖蛋白作为乳化剂在饮料和食品中使用。
在专利申请WO 01/066574中，新型隐球菌(cryptococcus neoformans)的甘露糖蛋白用于制备通过全身给药的方式治疗炎症或感染的药物。甘露糖蛋白因而可以抑制中性粒细胞的迁移。
另外，甘露糖蛋白被描述为活性成分的佐剂，即，可以改善或加强活性成分的治疗作用的化合物。
因此，在国际专利申请US 2005/0226822中，甘露糖蛋白被用作口腔护理组合物中的卵粘蛋白佐剂。
国际专利申请WO 06/036817描述了甘露糖蛋白作为一种佐剂在包含真菌细胞或被基因修饰的细胞提取物的药物组合物中的应用，以便形成至少一个改变的成丝特性(filamentation property)。该甘露糖蛋白的免疫特性被用来改善所述组合物的免疫反应。这种应用是基于抗真菌特别是假丝酵母属(Candida)的真菌感染的疫苗接种原则。
在专利申请US 2005/0191268中，甘露糖蛋白作为化妆品制品中的多酚佐剂使用，该化妆品制品包含葡萄酒酿造过程残留物的提取物和一种或更多种化妆品添加剂或佐剂。所述残留物是发酵完成后葡萄酒被泵出后留在酒桶里的沉淀物。所述残留物提取物包含一种或多种多酚和一种或多种蛋白质如甘露糖蛋白，作为缔合物。
在化妆品领域内，多功能试剂是有用的，特别地，这有可能缩小制备不同化妆品组合物所需的原料的范围和/或简化制备化妆品产品的方法。
此外，消费者正在搜寻包含源自天然的组分的天然化妆品，因此，用于制备化妆品的天然功能试剂是有用的。
发明内容
本发明的主题提供了一种用于化妆品或皮肤病学领域的新型的多功能天然试剂。
本发明的主题还提供了一种新型的化妆品或皮肤病学的组合物。
本发明的另一个主题涉及用于皮肤和/或皮肤附属物的化妆或皮肤病学处理的方法。
本发明的主题是一种包含甘露糖蛋白的化妆品或皮肤病组合物，甘露糖蛋白作为活性成分和/或添加剂。
本发明是基于甘露糖蛋白实际上是一种活性成分的发现，从而不需要将它与其它成分结合，特别是在化妆品和/或皮肤病学组合物的局部(topical)应用。
本发明还基于甘露糖蛋白在这些化妆品和/或皮肤病学组合物中有纹理作用(texturizing effects)的发现，这可以有利地使用。
具体实施方式
本发明的一个具体主题是一种包含作为活性成分和/或添加剂的甘露糖蛋白的化妆品或皮肤病学组合物，其特征在于它不含多酚。
本发明的一个具体主题是一种如上所述的组合物，其特征在于，甘露糖蛋白源自酵母，特别源自酵母属(Saccharomyces)，克鲁维酵母属(Kluyveromyces)，圆酵母属(Torula)或假丝酵母属，优选酵母属。
本发明的一个具体主题是一种如上所述的组合物，其特征在于，甘露糖蛋白源自酿酒酵母种(Saccharomyces cerevisiae)。
所谓“化妆品组合物”表示一种在局部应用的情况下用于获得化妆作用的组合物。
所谓“皮肤病学组合物”表示一种用于获得局部治疗作用的组合物。
在这两种情况下，如本领域技术人员所理解的，所述组合物包含水和甘露糖蛋白，以及化妆品或皮肤病学应用所需的所有化合物(特别是赋形剂及添加剂)。
术语“局部(的)”表示所述组合物在其应用于皮肤、皮肤附属物或粘膜上的某点上是活性的。根据本发明的组合物能够同时达到表皮的表层、表皮和/或真皮。
本发明的一个具体主题是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，所述化妆品或皮肤病学组合物用于皮肤和/或皮肤附属物，不包括黏膜。
术语“皮肤附属物”通常指覆盖在身体上的任何东西，具体而言，指头发、指甲、胡须、睫毛。
术语“皮肤”包括头皮。
根据本发明的甘露糖蛋白采用本领域技术人员所熟知的方法制备。
具体而言，甘露糖蛋白从真菌的细胞壁提取，特别是从酵母的细胞壁提取。
甘露糖蛋白从细胞壁的提取可通过甘露糖蛋白的选择性溶解，经化学的、酶的或物化的途径水解实现。优选地，在温度的作用下实现选择性溶解。
不溶性流分移除，并将含有甘露糖蛋白的可溶流分回收。随后可溶流分中的甘露糖蛋白可以沉淀或浓缩和任选地干燥。
优选地，在分离不溶性流分后进行甘露糖蛋白的纯化步骤。
获得可溶甘露糖蛋白的方法描述在例如申请人的专利申请EP1094117以及WO-A-96/13571和WO-A-97/49794中。
可以使用任何类型的起始产品，并且特别地酵母菌株。特别地，优选源自酵母属、克鲁维酵母属、圆酵母属或假丝酵母属，特别地酵母属，的甘露糖蛋白。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物能够用干燥形式的甘露糖蛋白制备，特别地所述甘露糖蛋白是粉末形式、或溶液形式，如水溶液。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物包括至少一种化合物作为活性成分、至少一种化合物作为添加剂和至少一种化合物作为赋形剂，同样的化合物能够以几种方式使用。
所谓“活性成分”指在化妆品组合物中起到化妆作用的物质，或在皮肤病学组合物中起到治疗作用的物质。
所谓“添加剂”指在化妆品或皮肤病学组合物中起到防腐的螯合剂、着色剂、UV过滤剂(可以保护原材料)、pH调节剂(酸或碱)、纹理剂(texturizer)、香料和/或抗氧化剂作用的试剂。
所谓“需保护的原材料”指化妆品或皮肤病学组合物中能够被光降解的任何成分。
所谓“赋形剂”指构成水相的亲水性化合物、构成油相的疏水性化合物或表面活性剂。
水相的亲水性化合物特别地选自水、醇或多元醇。
油相的疏水性化合物特别地选自烃、脂肪酸、脂肪醇、酯、甘油酯、cerides、磷脂和硅胶。
表面活性剂是能够通过降低界面张力维持通常彼此不互溶的两种介质在一起的两性分子。表面活性剂是离子的(阴离子的、阳离子的或两性的)或非离子的。
因此，所述甘露糖蛋白构成一种新型多功能天然试剂，特别用于化妆品或皮肤病学组合物的制备。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物不含多酚。特别地，根据本发明的组合物不含苯二酚、邻苯三酚、间苯三酚、花青素、花青素原、黄酮、儿茶酚、也不含单宁。
本发明的主题也是如上面定义的化妆品或皮肤病学组合物，其特征在于，它不包含任何卵粘蛋白。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物除了如上定义的甘露糖蛋白外，可以包含其他酵母成分。
本发明的主题也是如上面定义的化妆品或皮肤病学组合物，其特征在于，它不包含任何具有改变的成丝性质的丝状真菌，特别是，从编码CRV1蛋白的基因改变产生的丝状真菌，也不包含所述丝状真菌的细胞提取物。
在另一个优选实施方案中，本发明的主题是如上面定义的化妆品或皮肤病学组合物，其特征在于，除了甘露糖蛋白它不包含从真菌细胞中提取的组分。
本发明特定的主题是如上面定义的化妆品或皮肤病学组合物，其中所述活性成分具有保湿作用和/或紧致作用和/或抗衰老作用和/或抗皮脂溢出作用和/或抗痤疮作用和/或头发修复作用和/或对头发的光泽和/或柔软性和/或生长的作用。
所述“保湿作用”是指通过闭塞现象或通过用活性成分、活性成分的保湿或吸湿作用和/或胞间粘合质中脂肪的固定性质固定水减少其从皮肤蒸发。
根据本发明的组合物的保湿作用特别地导致在表皮水平脂质合成的活化，特别是磷脂和中性脂肪，以及透明质酸的合成。
如实施例1所述，通过研究角质形成细胞合成脂质和透明质酸可以在体外证明根据本发明的组合物的保湿作用。
当所述组合物应用到头皮时，根据本发明的组合物的保湿作用还包括抗头皮屑作用。
如实施例3所述，通过根据本发明的组合物处理的主体的头皮屑在数量上的减少可以证明抗头皮屑作用。
所述“紧致作用”是指皮肤光滑紧致的外观，这源于它的机械支撑特别是胶原质和弹性蛋白纤维提供的机械支撑。
根据本发明的组合物特别地可改善胶原晶格收缩，以激活弹性蛋白和胶原成熟的合成。
胶原晶格对应胶原纤维(fibres)或纤维(fibrils)的缠结。
如实施例1所述，根据本发明的组合物的紧致作用可以体外证明。
“抗衰老作用”或“抗老效应”是指减慢皮肤老化迹象出现的预防作用和减少衰老迹象的即时作用。根据本发明的组合物特别地具有对抗年龄相关的衰老的作用，以及对抗光引起的衰老的作用。
皮肤的年龄相关的衰老的可见迹象特别地是皮肤干燥、细纹和皱纹的出现、皮肤厚度的降低、以及皮肤光滑度的丧失。
皮肤的年龄相关的衰老也涉及胶原数量的减少、它们溶解度的降低以及它们合成的减少，弹性蛋白和微纤维数量的减少、糖胺聚糖的减少和成纤维细胞失活。
根据本发明的组合物的抗衰老作用特别地源自从真皮中成纤维细胞增殖的提高、胶原和粘多糖合成的活性的提高。
如实施例1所述，通过真皮成纤维细胞的胶原和糖胺聚糖合成的提高可以体外证明抗年龄相关的衰老作用。
皮肤的光引起的衰老的迹象，特别地是深皱纹、厚且粗糙的皮肤的出现。
皮肤的光引起的衰老特别地涉及胶原数量和溶解性的降低、弹性蛋白和微纤维数量的提高、糖胺聚糖的提高、在炎症细胞的增加。
本发明的主题也是如上文所述的化妆品或皮肤病学组合物，其特征在于，所述活性成分有结瘢(cicatrizant)作用，特别用于修复损伤和/或烧伤。甘露糖蛋白的结瘢作用特别地与透明质酸合成的激活联系在一起。
所述“抗皮脂溢出作用”指调节皮脂腺分泌的作用、调节皮脂的吸收和/或收敛作用使得收紧皮肤的毛孔。
根据本发明的组合物可以减少皮脂分泌。
根据本发明的组合物特别地通过脂质吸收调剂皮脂吸收。
在面部的过油(hyperseborrhea)和/或导致所谓的“油性”头发的头皮过油的情况下，根据本发明的组合物因而特别地有用。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物具有抗皮脂溢出作用，这对油性皮肤和/或有产生粉刺的倾向的皮肤有用。
所谓“抗痤疮作用”是指有利于对抗痤疮的作用。
特别地，根据本发明的皮肤病学组合物的在痤疮方面的有利作用与与皮脂腺分泌的调控联系在一起。
所谓“修复作用”是指获得头发光滑的外观。头发的外层，称为角质层，是由发鞘(scales)相互重叠组成。修复作用导致角质层的光滑作用，而受损头发具有大体的作用。
根据本发明的组合物特别地对头发具有覆盖作用。
如实施例3所述，可通过测量头发的表面证明所述头发的修复作用。
所谓“光泽作用”是指头发反射光的能力，从而使头发具有光亮的作用。
所谓“柔软作用”是指对头发的柔软度的触觉感觉。
所谓“头发生长的作用”是指头发生长动力学的提高。
如实施例3所述，通过测量头发生长动力学的测试可以证明头发生长的作用。
本发明特定的主题是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，其中，所述添加剂具有纹理作用。
所谓“纹理作用”是指能够提高水相粘度的试剂，该试剂分散在所述水相中，所述提高是有利地很高。
根据情况而定，纹理剂是增稠剂和/或胶凝剂。
所谓“增稠剂”是指一种无须形成三维网络便可获得粘稠溶液的物质，特别地与胶凝剂相反。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物可以包含多种活性成分、添加剂和/或赋形剂。
本发明的主题也是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，其中甘露糖蛋白作为活性成分和添加剂使用。
在一个有利的实施方案中，甘露糖蛋白其到化妆品或皮肤病学作用和纹理作用。
本发明特定的主题是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，其中甘露糖蛋白作为表面活性剂存在，尤其是作为乳化剂。
所谓“乳化试剂”或“乳化剂”是指引入乳液的组合物中的表面活性剂，所述乳液也包括亲脂相和亲水相。乳液是一种液体分散在另一种液体中，两种液体彼此不互溶。
本发明的主题是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，包括作为活性成分和赋形剂的甘露糖蛋白。
本发明的主题是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，包括作为添加剂和赋形剂的甘露糖蛋白。
本发明的主题也是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，包括作为活性成分、添加剂和赋形剂的甘露糖蛋白。
在本发明的另一个实施方案中，甘露糖蛋白在化妆品或皮肤病学组合物中没有赋形剂的作用。特别地，本发明的主题也是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物，其中甘露糖蛋白没有表面活性剂作用，特别地没有乳化作用。
本发明的主题是如上所述的，以溶液(单相)、分散液(特别地乳液、悬浮液、泡沫或气溶胶)、凝胶、油、棒、粉末、纸巾(wipes)或贴片形式的化妆品或皮肤病学组合物。
所谓“乳液”是指任何类型的乳液，特别是宏观乳液、微乳液、纳米乳液、简单乳液、多重乳液(multiple emulsion)。
乳液是一种液体分散到另一种液体中，两种液体不互溶。乳液包括亲脂相和亲水相和乳化剂。
乳液特别地包括奶、乳(lotion)、霜(cream)等。
纳米乳液是分散颗粒的尺寸直径小于1000纳米的分散液，特别是从10纳米到100纳米。
微乳液是分散颗粒的尺寸直径小于1000μm的分散液，特别是从10μm到100μm。
纳米乳液和微乳液是透明介质。
根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物特别地适于皮肤或毛细血管应用。
用于毛细血管应用的根据本发明的组合物特别地是香波、乳、面膜、喷雾的形式。
本发明的主题是如上所述的组合物，包括从0.01％至20％甘露糖蛋白，特别地从0.01％到15％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至10％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至3％甘露糖蛋白。
给出的百分比是重量/重量。
本发明特定的主题是如上所述的组合物，包括从0.01％至3％甘露糖蛋白，从0.01％到2％甘露糖蛋白，作为活性成分。
本发明特定的主题是如上所述的组合物，包括从0.01％至20％甘露糖蛋白，特别地从1到20％甘露糖蛋白，特别地从10％至20％甘露糖蛋白，特别地从15％至20％甘露糖蛋白，作为添加剂。
本发明的主题也是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物的制备方法，包括混合甘露糖蛋白和可接受的化妆品或皮肤病学的载体的步骤。
可接受的化妆品或皮肤病学载体特别地从上述添加剂和/或赋形剂中选择。
本发明的主题也是如上所述的化妆品或皮肤病学组合物的制备方法，包括混合甘露糖蛋白和可以接受的化妆品或皮肤病学的载体以及至少一种非甘露糖蛋白的活性成分的步骤。
本发明的主题是化妆处理方法，包括如上所述的化妆品组合物或如上所述方法制备的化妆品组合物与皮肤和/或皮肤附属物接触的步骤。
术语“接触”也指下文中的“应用”。
所述处理方法可包括每日一次到几次的应用，最好每日1到3次应用。
所述化妆品组合物应用的频率在整个处理过程中可能会降低。
所述化妆处理方法可由一到几个星期的短期处理，或连续数年的长期治疗构成。所述处理方法还由每年重复处理过程的形式处理或一年多次的形式构成。
本发明特定的主题是如上所述的化妆处理方法，意于保湿表皮、紧致真皮、打击皮肤衰老、调节皮脂分泌、修复头发和/或提高头发生长。
表皮保湿既是为了重新建立皮肤屏障的质量，即限制水分蒸发的抗渗力，也是为了促进水俘获分子的存在，特别是糖胺聚糖，包括透明质酸。
根据本发明的化妆处理方法特别地用于处理和/或预防皮肤干燥和头皮屑。
真皮的紧致是为了维持或加强真皮紧致性，特别是通过激活弹性蛋白的合成、胶原的合成和成熟和胶原晶格收缩。
抗皮肤衰老是减缓和/或减少衰老的迹象的目标。
本发明的一个有利的实施方案中，所述处理旨在打击皮肤衰老并保湿表皮。
根据本发明的化妆处理方法特别推荐给20岁以上的主体、特别地30岁、特别地40岁、特别地50岁。
皮脂分泌的调节特别目的在于减少皮脂分泌。
根据本发明的化妆处理方法对调节油性皮肤脂溢特别有用，特别是所谓“问题”油性皮肤或“有长粉刺倾向的”皮肤，和/或所谓“油腻”头发。
头发的修复在于头发的修复，特别是通过平滑头发的角质层和/或恢复头发的光泽和/或柔软。
根据本发明的化妆处理方法特别是于头发受损的主体，特别是暴露于阳光、海、过于频繁的清洗、染色、挑染、烫发等。
头发生长的改善旨在提高头发生长动力学，也称为头发的生长。
根据本发明的化妆处理方法特别适于缓慢的头发生长动力学的主体和/或正常脱发的情况。
所谓正常脱发特别地对应男性脱发、内分泌脱发、或与年龄有关的脱发。
在一个有利的实施方案中，根据本发明的化妆处理方法适合用于面部，特别地眼睛周围、鼻子、额头、下巴，身体，特别地手、脚、背，头发和/或头皮。
本发明的主题也是甘露糖蛋白在制备如上述所的皮肤病学组合物或由上述制备方法获得的皮肤病学组合物中的用途，旨在处理和/或预防皮肤干燥和/或过油和/或粉刺和/或脱发。
如上所述的用途旨在所述皮肤病学组合物在皮肤和/或皮肤附属物的局部应用。
所述用途可包括每日一次到几次的应用，最好每日1到3次应用。
所述皮肤病学组合物应用的频率在整个处理过程中可能会降低。
所述皮肤病学处理方法可由一到几个星期的短期处理，或连续数年的长期治疗构成。所述处理方法还由每年重复处理过程的形式处理或一年多次的形式构成。
在一个有利的实施方案中，所述皮肤病学组合物包括作为活性成分的甘露糖蛋白，与至少一种其他活性成分结合。
根据本发明的皮肤病学组合物处理皮肤的病理学皮肤干燥，也称为干皮症，特别地有用，特别地在鱼鳞病的情况下，与湿疹、牛皮癣或头皮病理学干燥相关的皮肤干燥，特别地与头皮屑相关的皮肤干燥。
根据本发明的皮肤病学组合物也用于处理病理学的过油，特别地与荷尔蒙失调有关的，特别地在青少年和孕妇或更年期妇女中。
根据本发明的皮肤病学组合物也用于处理病理学痤疮，特别地青少年痤疮或与过油相关的痤疮。
根据本发明的皮肤病学组合物也用于处理病理学脱发，也被称为斑秃，斑秃是情感冲击、甲状腺功能异常和/或导致脱发的治疗的副作用(例如抗癌治疗)造成的。
在优选的实施方案中，甘露糖蛋白在制备如上述所的皮肤病学组合物中的用途，不适合处理涉及中性粒细胞迁移的疾病治疗，特别是与IL-8有关的疾病。
本发明的主题也是如上所述化妆品组合物或皮肤病学组合物的用途，旨在处理其他治疗的副作用或不适症状。
特别地，所述副作用或不适症状包括皮肤干燥、例如与湿疹、过油或脱发有关的。
产生所述副作用或不适症状的处理是例如涉及中性粒细胞迁移的疾病的治疗，特别是治疗炎症疾病或涉及由IL-8(白细胞介素8)、fMLP(N-甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸)、PAF(血小板活化因子)、C5a(糖蛋白，从断裂的N-末端补体部分的文件)、TNFα(肿瘤坏死因子α)，L-外源凝集素(L-selectin)调节的感染。
本发明的主题也是甘露糖蛋白作为纹理剂在所述化妆品和/或皮肤病学组合物中的应用。
本发明的主题也是如上所述的组合物，其中甘露糖蛋白与另一种纹理产品，特别是黄原胶，组合存在。所述甘露糖蛋白能够协同地提高其他纹理产品，特别地黄原胶，的纹理作用(特别是提高粘度的能力)。甘露糖蛋白与黄原胶的质量比在1∶5和1∶3之间，提供最佳的协同效应。更特别地优选方式中，该质量比约为1∶4。
本发明还涉及使用这些组合物的如上所述的化妆治疗方法。
实施例：
下面的实施例说明但不限制本发明。
实施例1：甘露糖蛋白的保湿、抗衰老和紧致性能
材料和方法
(一)甘露糖蛋白
根据专利EP 1094117描述的方法获得的甘露糖蛋白投入水溶液中，并且在浓度为0.04毫克/毫升、0.08毫克/毫升、0.016毫克/毫升或0.032毫克/毫升下测试。
(二)保湿作用
在KSFM介质(无血清)中96孔微孔板中种入正常人表皮角质形成细胞NHEKs进行该项测试。在脂质的合成和透明质酸的合成在不同浓度的甘露糖蛋白存在评价。每个条件下产生三个培养孔。
钙是用来作为脂质合成的阳性对照，并且视黄酸作为透明质酸合成的阳性对照。
阴性对照是单由培养基组成。
根据制造商的说明(研发系统DY3614)，由标准ELISA法在孵化结束(72小时在37℃和5％二氧化碳)上清液中评价透明质酸的合成。
荧光成像分析脂类的合成，和在介质中释放透明质酸的浓度的测量评价透明质酸的合成。
(三)抗衰老作用
正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)和老化正常人皮肤成纤维细胞(AgNHDF)种到有DMEM培养液+10％FCS的96孔微孔板的孔中。这些测试在DMEM培养液+1％FCS中进行。这两个介质还补充了2mM的L-谷氨酰胺、50UI/毫升的青霉素和50微克/毫升的链霉素。所述FCS(胎儿小牛血清)、L-谷氨酰胺、青霉素、链霉素从Invitrogen公司得到。培养是在37℃和5％二氧化碳下进行。正常成纤维细胞是第8通道的池F2中的成纤维细胞，老化成纤维细胞是第18通道的池F2中的成纤维细胞。
在成纤维细胞的增殖测试和糖胺聚糖和胶原合成测试在不同浓度的甘露糖蛋白存在下进行。每个条件下产生三个培养孔。
阴性对照是单由培养基组成。
增殖测试在播种细胞后24小时进行。[3H]-胸腺嘧啶被添加到培养液中。EGF用作阳性对照。
糖胺聚糖及胶原的合成在80％聚集(confluence)的细胞中评价，[3H]-葡萄糖或[3H]-脯氨酸分别加入其中。视黄酸然后用作阳性对照。
经过72小时孵化，提取大分子和测量放射性前体的掺入。至于脯氨酸的掺入，上清液(可溶流分)中和细胞内的沉积的流分中掺入之间有显著区别。
(四)紧致作用
老化正常人皮肤成纤维细胞(AgNHDF)上进行了这些测试。
在不同浓度甘露糖蛋白存在下瓶中细胞预培养8天后，评估胶原的合成及成熟。阴性对照单由培养基组成，并且阳性对照组由TGFβ和维生素C组成。然后细胞播种到培养室。在聚集前，细胞是用甲醇固定和使用针对胶原I的特定的抗体和荧光二级抗体的免疫组化检测胶原的存在。在细胞内和细胞外胶原的表达水平及其在矩阵周围的位置用显微镜分析。
在不同浓度甘露糖蛋白存在下瓶中细胞预培养8天后，评估胶原晶格收缩。阴性对照单由培养基组成，并且阳性对照组由TGFβ组成。所得的细胞悬液然后在控制pH值下与胶原I溶液一起。几个小时后，该溶液成凝胶，以获得轮廓明确定义的等同真皮。每个等同真皮的细胞数目和直径根据定义的动力学测定。
在不同浓度甘露糖蛋白存在下瓶中细胞预培养8天后，弹性蛋白的合成。阴性对照单由培养基组成，并且阳性对照组由维生素C组成。然后细胞播种到培养室。在聚集前，细胞是用甲醇固定和使用针对胶原I的特定的抗体和荧光二级抗体的免疫组化检测弹性蛋白的存在。弹性蛋白的表达水平用显微镜分析。
(五)统计
使用杜奈特多重比较试验通过方差分析(ANOVA)进行组间比较。
结果
i)评价表皮保湿作用
在甘露糖蛋白溶液存在下，与阴性对照相比，通过角质形成细胞的脂质和透明质酸的合成被激活。
特别地，与阴性对照相比，当角质形成细胞经受了0.032毫克/毫升的甘露糖蛋白时，获得151％刺激的透明质酸生产(测试被显著判断，因为p值小于0.05)。
2)评价真皮抗衰老作用
在甘露糖蛋白溶液存在下，观察到细胞增殖的激活和细胞外矩阵的主要成分的合成的提高(相对于阴性对照组)。
特别地，针对胶原的合成，结果显示在下面表1中：
表1-甘露糖蛋白(MP)存在下观察到的胶原的合成
  测试条件   相对于阴性对照组，胶原合成的变化   p值
  NHDF，80μg/mL MP，在上清液测量   +7％   ＜0.05
  NHDF，400μg/mL MP，在上清液测量   +8％   ＜0.05
  AgNHDF，16μg/mL MP，在上清液测量   +12％   ＜0.05
  测试条件   相对于阴性对照组，胶原合成的变化   p值
  AgNHDF，80μg/mL MP，在上清液测量   +10％   ＜0.05
  AgNHDF，400μg/mL MP，在上清液测量   +26％   ＜0.01
  AgNHDF，16μg/mL MP，在沉积物测量   +1％   ＜0.05
  AgNHDF，80μg/mL MP，在沉积物测量   +5％   ＜0.05
  AgNHDF，400μg/mL MP，在沉积物测量   +7％   ＜0.05
此外，关于糖胺聚糖(GAG)的合成，得到列于下面表2的结果：
表2-甘露糖蛋白(MP)存在下观察到的糖胺聚糖合成
  测试条件  相对于阴性对照组，GAG合成的变化   p值
  NHDF，80μg/mL MP   +6％   ＜0.05
  AgNHDF，80μg/mL MP   +22％   ＜0.05
  AgNHDF，400μg/mL MP   +10％   ＜0.05
(三)评价真皮紧致作用
在甘露糖蛋白溶液存在下，相对于阴性对照，观察到胶原的表达水平的提高，以及其在矩阵周围的沉积所揭示的胶原的成熟。等同真皮密度的增加(直径与细胞数目比例比阴性对照组低)导致更好的胶原晶格收缩。此外，相对于阴性对照，成纤维细胞的弹性蛋白合成被激活。所有这些因素表明甘露糖蛋白提高真皮的方面生物力学品质(特别是弹性和压缩力)。
实施例2：抗皮脂溢出和抗痤疮性能
材料和方法
甘露糖蛋白溶液适用于分别地具有过油皮肤或头皮的主体的皮肤或头皮。
然后通过将皮脂吸收贴片用于处理过的皮肤部分评估皮脂分泌。然后分析该贴片，以量化皮脂分泌。
处理后的分泌与同一主体的治疗前的分泌相比。
结果
甘露糖蛋白溶液可以减少皮脂分泌量。
实施例3：毛细血管应用
材料和方法
(一)甘露糖蛋白
根据专利EP 1094117描述的方法获得的甘露糖蛋白投入水溶液中。
(二)抗头皮屑作用
甘露糖蛋白溶液用于遭受头皮屑的主体的头皮。用甘露糖蛋白溶液处理后，将贴片仅用于处理过的区域，以回收头皮头皮屑。
比较处理前后贴片上回收的头皮屑的数量。
(三)头发生长
头发生长动力学评价如下进行：处理前，一缕主体的头发从发根染色2-3厘米；甘露糖蛋白溶液然后应用到头皮；测量从发根到染色起始位置之间的距离。
处理主体的处理后的生长动力学与未处理的主体进行比较。
(四)头发的光泽
通过测量头发反射的光的数量和强度决定头发的光泽。为此，摄取头发交叉极化和非极化的照片。这然后转换两个照片至灰度，并且由两个照片的光线相减获得头发的光泽。
比较应用甘露糖蛋白溶液前后头发的光泽。
(五)头发的柔软性
由评审团的感官分析评估头发的柔软性，合格的触摸头发评估头发柔软性的三个人组成评审团。
头发的柔软性是从0到10判定，0对应没有柔软性，10对应非常好的柔软性。
比较应用甘露糖蛋白溶液前后头发的柔软性。
(六)头发的修复
使用干涉显微镜测量头发的表面形貌评价头发的修复。
可确定沿头发角质层发鞘的状况的参数如下：
发鞘开口，
发鞘的长度和
表面拓扑结构，即粗糙度。
分析的表面是120×30微米。
比较应用甘露糖蛋白溶液前后头发的修复。
结果
甘露糖蛋白溶液的毛细血管应用可获得抗头皮屑作用和头发生长的提高。
甘露糖蛋白溶液对头发还有补救作用，从而能够改善头发的光泽，柔软性和修复。特别地，观察到角质层发鞘开口的数量减少，发鞘长度增加和减少的粗糙度降低。
实施例4：织添加剂和辅料乳化作用
材料与方法
(一)甘露糖蛋白
根据专利EP 1094117描述的方法获得的甘露糖蛋白投入水溶液中。
(二)纹理特性
甘露糖蛋白的纹理特性和成膜性能用不同的方法评价：由激光光散射测量的颗粒尺寸分析、流变学研究(屈服值、粘度和tan d(也称为的DMA))、在不同温度和持续时间的稳定性试验(导电性、粒度、粘度、颜色和香味)，显微镜和扫遍皮肤。
在水溶液制剂中的甘露糖蛋白的纹理作用与黄原胶(天然多糖)和卡波姆(carbomers)比较。
不同的乳化系统中甘露糖蛋白兼容性进行了测试。这些乳化系统：
阴离子系统：Ceralution H，
非离子系统：Tego care 450，
二氧化钛的阳光过滤乳液，基于非离子体系，和
凝胶。
该凝胶体系可以测试甘露糖蛋白的乳化性能。
结果
高分子纹理剂广泛用于化妆品制剂。这些纹理剂是生产霜、凝胶和乳型制剂等的关键产品。在众多化学添加剂存在下，纹理剂必须保留其属性。
使用甘露糖蛋白水制剂与使用标准纹理剂(亲水性添加剂如黄原胶或卡波姆)比较。该甘露糖蛋白也在不同的乳化体系中进行了测试。
甘露糖蛋白具有纹理性能，并与标准的乳化系统兼容。该甘露糖蛋白也能够形成薄膜并作为高分子乳化剂起作用。
而且已经注意到，甘露糖蛋白与具体的其他纹理产品，如黄原胶，具有协同的纹理效应。下面表3提供了包括水、黄原胶和不同浓度甘露糖蛋白的溶液的粘度测量结果。
表3-水/黄原胶(XG)和甘露糖蛋白(MP)的溶液的流变学
  测试的溶液的组成   粘度mPas
  0％MP+1％XG+99％水   4460
  0.2％MP+0.8％XG+99％水   8752
  0.5％MP+0.5％XG+99％水   4127
  0％MP+0.5％XG+99.5％水   2460
  0.1％MP+0.4％XG+99.5％水   2995
  0.25％MP+0.25％XG+99.5％水   1022

Claims (15)

1.化妆处理方法，旨在保湿表皮、改善真皮紧致度、对抗皮肤衰老、调节皮脂分泌、修复头发和/或改善头发的生长，该方法包括将包含甘露糖蛋白的组合物与皮肤和/或皮肤附属物接触的步骤，所述甘露糖蛋白提取自真菌的细胞壁，所述组合物不含多酚。
2.根据权利要求1所述的化妆处理方法，其中所述甘露糖蛋白源自酵母属、克鲁维酵母属、圆酵母或假丝酵母属，优选酵母属，有利地酿酒酵母种。
3.根据权利要求1或2所述的化妆处理方法，其中所述甘露糖蛋白具有保湿作用和/或紧致作用和/或抗衰老作用和/或抗皮脂溢出作用和/或头发修复作用，和/或对头发的光泽和/或柔软性和/或生长的作用。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的化妆处理方法，其中所述甘露糖蛋白具有纹理作用。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化妆处理方法，其中所述甘露糖蛋白还作为表面活性剂，特别地作为乳化剂存在。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化妆处理方法，其中所述组合物包括从0.01％至20％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至15％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至10％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至3％甘露糖蛋白。
7.从真菌的细胞壁提取的甘露糖蛋白在制备皮肤病学组合物中的用途，所述皮肤病学组合物旨在处理和/或预防病理学皮肤干燥、病理学过油、痤疮和/或病理学脱发。
8.化妆品或皮肤病学组合物，包括从真菌细胞壁提取的甘露糖蛋白，特别地作为活性成分和/或添加剂，其中所述活性成分具有保湿作用和/或紧致作用和/或抗衰老作用和/或抗皮脂溢出作用和/或抗痤疮作用和/或头发修复作用，和/或对头发的光泽和/或柔软性和/或生长的作用，其特征在于它既不含多酚也不含卵粘蛋白。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于所述甘露糖蛋白源自酵母属、克鲁维酵母属、圆酵母属或假丝酵母属，优选酵母属，有利地酿酒酵母种。
10.根据权利要求8或9所述的组合物，其中所述添加剂具有纹理作用。
11.根据权利要求8-10中任一项所述的组合物，其中所述甘露糖蛋白还作为表面活性剂，特别地作为乳化剂存在。
12.根据权利要求8-11中任一项所述的组合物，包括从0.01％至20％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至15％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至10％甘露糖蛋白，特别地从0.01％至3％甘露糖蛋白。
13.根据权利要求8-12中任一项所述的组合物，还包括黄原胶，甘露糖蛋白与黄原胶的质量比优选在1∶5和1∶3之间，并且更特别优选地约为1∶4。
14.从真菌细胞壁提取的甘露糖蛋白作为纹理剂在化妆品或皮肤病学组合物中的用途。
15.根据权利要求14的用途，其中所述组合物是根据权利要求8-13中任一项所述的组合物。
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