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CN108192814A - 用于菌落计数的方法和装置 - Google Patents

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CN108192814A
CN108192814A CN201810058275.9A CN201810058275A CN108192814A CN 108192814 A CN108192814 A CN 108192814A CN 201810058275 A CN201810058275 A CN 201810058275A CN 108192814 A CN108192814 A CN 108192814A
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Abstract

本发明涉及一种装置(6),包括:包括布置成接收样品的位置的存储装置(2),这些样本包括布置成容纳平板培养基的培养基支撑件,操作系统(7),布置为输送多个待分析的样本以从多个位置到分析区域(5);成像装置(8),其被配置为采集分析区域的多个图像,被布置为容纳多个待分析的样品;处理单元,其被配置为针对每个待分析的样本执行:检测步骤,通过待分析的样品的多个图像中的一个图像来检测集落的存在,确定步骤,以确定待分析的样本中存在的菌落数目。

Description

用于菌落计数的方法和装置
技术领域
本发明属于生长培养基中微生物的检测领域。本发明特别适用于微生物分析和质量控制。此外,这种装置可以在环境、农业食品、药理学、化妆品和研究和开发领域实施。
本发明特别涉及在一组样品的培养基中进行细菌菌落的早期计数和正在进行的样品分析的自动管理的装置和方法。
背景技术
通过手工计数在平板培养基(plated culture medium)中肉眼观察到的菌落,仍然可以实现今天的菌落计数。
在现有技术中,在处理图像以确定菌落之前,有基于样品的图像采集的菌落计数装置,其包括预先涂覆的培养基。
因此,我们具有文献EP2807484的知识,该文献描述了用于微生物的检测装置,该检测装置包括传感系统,特别是扫描仪,被布置成扫描一组接种样品的上表面的区域,这些样品被并排定位一个盘子的表面。然后通过图像处理软件分析图像以鉴定和计数菌落。这种装置的一个缺点是每个待分析的样品在采集方法所需的时间内被暴露于光线。因此,当计数光敏微菌落或者当使用光敏标记时,不能使用这种类型的装置。
这种装置的另一个缺点是,如果该装置没有配备光学系统以允许调节焦距,则有必要对所有样品使用相同的培养基支撑件。如果该装置配备了光学系统来调整焦距,则采集所有样品所需的时间将显着增加。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种旨在至少部分解决上述各种缺点的装置和方法。
本发明的另一目的是减少计数样品的平板培养基中存在的菌落的最终数目所需的时间。
本发明的另一个目的是减少计数错误率。
本发明的另一个目的是提供一种装置,其允许装载或卸载样品而不中断或干扰正在进行的其他样品的分析。
在这方面,本发明提供了一种用于对存在待分析的样品组中的菌落进行计数的方法,将待分析的该组的每个样品存储在储存装置的位置中,待分析的样品组中的每个样品包括培养基支撑件以容纳平板培养基,该方法包括对待分析的样品组中的每个样品进行:
-从其位置到分析区域的称为向外输送的样品的输送步骤;
-从分析区域到一个位置的称为返回输送的样品的输送步骤;
-采集步骤,在所述的采集步骤中采集已经定位样品的分析区域的多个图像或者仅部分分析区域的多个图像;
-检测存在于样品中的菌落的步骤,包括分析样品的图像组;
-通过计数在检测步骤中检测到的菌落来确定样品中存在的菌落数目的步骤。
根据本发明的方法步骤的总和可以在根据预设的温度指南规定管理的相同的腔室中执行。
每个储存位置都可以被编号。
每个样品都可以在储存装置中具有专用位置。
每个样品都可以通过其位置编号来识别。
存储在储存装置中的样品的位置可以由其位置编号来确定。
存储在储存装置中的样品可能不会被分析。
优选地,分析区域意为一体积的空间。
可以采集形成分析区域的整个体积的空间的图像。
可以仅采集整个体积的空间的一部分的图像。
不管支撑件是否有盖子,都可以采集样品所在的分析区域或分析区域的一部分的图像。
本发明的方法可以包括通过图像处理软件进行的图像处理,并且可以被执行以放大图像或图像的一部分。
图像放大可以在检测步骤之前进行,在此期间检测样品中菌落的存在,或者在确定样品中存在的菌落数目的步骤之前进行。
优选地,可以在检测样品中菌落的存在的检测步骤之前进行放大。
图像处理软件可以从本领域技术人员已知的所有图像处理软件中选择。
可以优选以规则的时间间隔采集样品的图像。
根据本发明并且借助于图像采集装置,可以对在最大时间间隔内装载的样品连续进行位于分析区域内的待分析样品的第一图像的第一次采集。
在最大时间间隔期间可以采集样品的第一图像,最大时间间隔可以包括10至120分钟,优选20至60分钟。
该方法可以包括从待分析的样品的多个图像中制作的视频。
优选地,用于实施该方法的培养基可以为固体培养基。
特别地,用于实施该方法的培养基可以是琼脂培养基或凝胶培养基。
当位于分析区域时,待分析的样品可以占据分析区域的整个空间体积。
当位于在分析区域时,待分析的样品可以仅占据分析区域的一部分空间体积。
当位于在分析区域时,待分析的样品可以放置在分析区域的表面以外的地方;在这种情况下,采集是在操作系统携带样品的同时进行的。
优选地,多个图像不是在单一的采集步骤期间采集的而是在多个后续的图像采集步骤期间采集的。
优选地,多个图像不是在单一的采集步骤期间采集的,而是在多个空间区域的多个后续的图像采集中采集的。
根据本发明,可以在待分析的样品组的另一个样品的返回输送步骤之前,执行待分析的样品组的一个样品的向外输送步骤。
多个待分析的样品可以同时位于分析区域,或者也可以不同时。
可以在分析区域存放多个待分析的样品。
可以在分析区域存放多个待分析的样品,并且可以将一个或多个待分析的其他样品放置分析区域中而不存放。
根据本发明,在输送系统从分析区域至储存装置运送另一个待分析的样品和/或从储存装置到分析区域运送另一个待分析的样品的时间范围,成像装置可以对整个分析区域或其中放置有一个/多个待分析的样品的一部分的分析区域成像。
根据本发明,该方法可以包括所有步骤的迭代或该方法的每个步骤的迭代(iteration)。
其中一个步骤的迭代次数可能与另一个迭代次数不同。
其中一个步骤的迭代次数可以与其他几个步骤的迭代次数不同。
其中一个步骤的迭代次数可以不同于其他几个步骤的几次迭代次数。
其中一个步骤的迭代次数可以与所有其他步骤的迭代次数不同。
每一步骤可能有相同的迭代次数。
该方法步骤可以在随后的一个或多个预设顺序之后进行。
该方法的步骤顺序(sequence of steps of the process)可以细分为多个步骤子顺序。
该方法的步骤可以以这样的方式迭代,即向外输送步骤、返回输送步骤和采集步骤具有相同的迭代次数,而检测和确定菌落的步骤具有相同的迭代次数,但是不同于向外输送步骤和返回输送步骤的迭代次数。
该方法的步骤可以以这样的方式迭代,即向外输送步骤、返回输送步骤和采集步骤具有相同的迭代次数,而检测和确定菌落的步骤具有的迭代次数使得:
●检测步骤的迭代次数与检测步骤的迭代次数相同,该次数不同于向外输送、返回输送和采集步骤的迭代次数;或者
●检测步骤的迭代次数和检测步骤的迭代次数是不同的,向外输送、返回输送和采集步骤的迭代次数:
○等于检测步骤的迭代次数;或者
○等于确定步骤的迭代次数;或者
○与检测和确定阶段的迭代次数不同。
该方法可以包括该方法的步骤顺序。
该方法可以包括该方法的步骤顺序的迭代。
该方法可以包括该方法的多个不同的步骤顺序的迭代。
优选地,菌落计数方法可以包括向外输送步骤的多次迭代以及返回输送步骤的多次迭代。
在同一步骤顺序中可以迭代相同的步骤顺序中的一个或多个步骤。
在同一步骤顺序中可以迭代相同的步骤顺序中的每一个步骤。
作为步骤顺序的一部分的一个步骤的迭代次数可以不同于这个步骤顺序的另一步骤的其他迭代次数。
作为步骤顺序的一部分的一个步骤的迭代次数可以不同于这个步骤顺序的多个其他步骤的多个其他迭代次数。
步骤顺序中的步骤的迭代次数可以相同。
步骤顺序中的一个步骤的迭代次数可以不同于另一个步骤顺序中该步骤的迭代次数。
针对待分析的该样品实施的步骤顺序可以不同于针对另一个待分析的样品实施的步骤顺序。
根据本发明,检测菌落存在的检测步骤可以包括:
-第一步骤,识别多个图像中的一个图像上的项目;
-第二步骤,分析多个图像中的一个或多个图像上的所识别的项目的尺寸的变化;
-如果项目的大小变化,则鉴定菌落的存在。
识别一个图像上的项目的步骤可以通过本领域技术人员已知的任何图像分析技术来执行。
可以借助本领域技术人员已知的任何图像分析技术来执行分析在一个或多个图像上识别的项目的尺寸变化的步骤。
在一个或多个图像上识别的项目的尺寸变化的分析可以是时间的函数。
在一个或多个图像上识别的项目的尺寸变化的分析可以是任何时间相关变体的函数,例如一个或多个步骤的迭代次数或一个或多个顺序的迭代次数。
优选地,可以在每个采集步骤之后执行对在一个或多个图像上识别的项目的尺寸变化的分析。
识别的项目的尺寸的变化可以从待分析的样品的两个连续的图像中确定。
识别的项目的尺寸的变化可以从待分析的样品的两个非连续的图像中确定。
识别的项目的尺寸的变化可以从待分析的样品的多个连续的图像中确定。
识别的项目的尺寸的变化可以从待分析的样品的多个非顺序图像中确定。
有利地,检测菌落存在的步骤可以包括:
-第一步骤,识别多个图像中的一个图像上的项目;
-第二步骤,分析在多个图像的一个或多个其他图像上识别的项目的尺寸的变化;
-当项目的尺寸变化值在51和1000μm之间,优选在100和200μm之间时,鉴定菌落的存在。
检测到的菌落的最小尺寸可以是51μm。
该方法可以包括确定样品中存在的菌落数目的步骤,称为“最终的”,该步骤包括:
-分析在确定步骤中确定的样品中存在的菌落数目的变化;
-当菌落数目超过预设值的时间周期稳定时,确定菌落的最终数量。
在确定步骤中确定的菌落数目变化的分析可以是时间的函数。
在确定步骤中确定的菌落数目变化的分析可以是任何时间相关变体的函数,例如一个或多个步骤的迭代次数或一个或多个顺序的迭代次数。
优选地,可以在每个确定步骤之后实施在确定步骤中确定的菌落数目变化的分析。
预设时间值可以在6至72小时之间,优选在8至48小时之间,在此期间在确定样品中菌落数目的步骤中已经确定菌落数目。
菌落的最终数目的确定可以是时间的函数。
菌落的最终数目的确定可以是任何时间相关变体的函数,例如一个或多个步骤的迭代次数或一个或多个顺序的迭代次数。
优选地,当在确定样品中菌落数目的步骤期间确定菌落数目时可以确定菌落的最终数目的确认,在该步骤的两次迭代期间,优选四次时,为恒定的。
根据样品支撑件中包含的培养基,另外确定在菌落数目必需为恒定的使得它可以被认为是最终的期间的持续时间的预设值。
根据细菌菌株,可以另外确定菌落数目必须恒定使得它可以被认为是最终的持续时间的预设值。
任何时间相关的变量,例如一个或多个步骤的迭代次数或一个或多个顺序的迭代次数,例如,可以由菌落数目必须是恒定以使得最终属性可以归于菌落数目来代替。
根据本发明,一旦实现菌落的最终数目的确定步骤,就可以从待分析的该样品组中抽取样品。
在确定待分析的样品中菌落的最终数目之后,样品可以不被认为是待分析的样品,而是可以保持存储在储存装置中。
确定待分析的样品中存在的菌落的最终数目可以与该样品的方法实施的结束一致。
如果在预设持续时间之后,在确定菌落存在的检测步骤期间在一个样品的多个图像中的任何图像上没有识别项目,则样品中存在的菌落的最终数目被视为无效。
有利地,该方法可以包括:
-通过将该样品装载到储存装置中,将样品添加到待分析的该样品组中;和/或
-通过从储存装置卸载该样品来将样品移除待分析的该样品组;
该添加和/或移除与该方法的任何步骤同时执行。
另外,装置中的样品的装载和/或卸载可以由操作员执行。
装载和卸载可以同时进行。
当将样品装载到储存装置的位置时,处理单元可以被配置为使得储存装置在操作员之前引入空的位置。
当从储存装置的位置卸载样品时,处理单元可以被配置为使得储存装置在操作者之前引入存储该样品的位置。
当装载和/或卸载样品和步骤同时被执行时,处理单元可以在执行装载或卸载的同时将步骤搁置。
当装载和/或卸载样品时,处理单元可以被配置使得:
-将储存装置操作系统放置一边;和/或
-固定操作系统。
该方法可以包括:
-计算步骤,用于计算待分析的该样品组的样品采集顺序;
-根据所计算的采集顺序确定该组的输送顺序。
对于待分析的每个样品,通过处理单元可以计算应用于该样品的方法的步骤顺序,具体取决于待分析的样品的采集顺序。
输送顺序由处理单元确定,以便遵循采集顺序。
样品的分析顺序可以被定义为从第一向外传递步骤到最终返回输送步骤的应用于样品的总步骤次数。
在样品的最后返回输送步骤之后,并且在确定样品中存在的菌落的最终数目的确定步骤之后,可以完成样品的分析顺序。
根据本发明,所述方法可以包括待分析的整组样品的修改,可以在修改待分析的整组样品之后执行采集顺序的计算步骤以及输送步骤的确定。
通过样品组的修改,我们可以表示如下:
-装载一个或多个样品;或者
-卸载一个或多个样品;或者
-确定待分析的样品中存在的菌落的最终数目。
有利地,可以在对待分析的样品组的每个修改之后执行采集顺序的计算步骤和输送顺序的确定步骤。
该方法的一个或多个步骤的任何迭代次数可以通过处理单元在方法的实施中重新定义。
在方法的执行期间通过处理单元可以重新定义一个或多个步骤顺序。
一个或多个步骤顺序的任何迭代次数可以在方法的执行期间由处理单元重新定义。
对于待分析的每个样品,可以在方法的执行期间通过处理单元重新定义一个或多个顺序之后迭代方法步骤。
根据本发明,对于待分析的样品组中的每个样品,采集步骤的迭代频率可以高于预设频率,优选地,该预设频率包括在每10分钟至每120分钟之间。
待分析的样品的采集步骤的迭代频率可能与另一个待分析的样品的迭代频率不同。
待分析的样品的采集步骤的迭代频率可以因时间因素而异。
优选地,当在确定步骤期间确定的样品中存在的菌落数目的变化在增加之后减小,样品的采集步骤的迭代次数可以增加。
输送装置的最大输送速度可以需要重新定义该样品组的输送顺序,以便遵守样品采集组的最小迭代频率。例如,可以将一个或多个样品放置在该区域中,以便从应用于样品步骤的顺序或子顺序中移除返回输送步骤。
根据本发明的另一方面,提出了一种菌落计数装置,其包括:
-储存装置,其包括被设置成容纳样品的位置,这些样品包括被设置成容纳平板培养基的培养基支撑件;
-操作系统,其设置为将一个或多个待分析的样品从一个或多个位置输送到分析区域,并从该分析区域输送到一个或多个位置;
-成像装置,被配置为使得对于每个待分析的样品;执行:
●检测步骤,通过对待分析的样品的多个图像之间的图像分析来检测菌落的存在;
·确定步骤,通过对在检测步骤中检测到存在的菌落进行计数来确定待分析的样品中存在的菌落数目。
有利地,该装置可以包括封闭室,储存装置、操作系统和成像装置设置在封闭室中。
有利地,封闭室可以是培养箱,其允许:
-温度控制;和/或
-湿度测量控制;和/或
-CO2控制。
根据本发明,该装置可以包括用于点亮分析区域的装置。
支撑件可能是一个盒子。
支撑件可以是带盖子的盒子。
支撑件可以是本领域技术人员已知的任何类型的支撑件,例如有盖培养皿。
培养基可以是适合一种或几种特定微生物繁殖的任何类型的培养基。
培养基可以是适合一种或几种普通微生物繁殖的任何类型的培养基。
培养基可以是本领域技术人员已知的任何类型的精制培养基或工业培养基。
优选地,每个位置可以优选地被布置为一次只容纳一个样品。
优选地,可以优选地编号多个位置。
操作系统可以被配置成随后输送多个样品。
操作系统可以被配置成同时输送多个样品。
储存装置可以是移动的。
储存装置可以相对于操作系统运动。
成像装置可以包括本领域技术人员已知的任何类型的光敏计算器。
成像装置可以包括光学装置。
全部或部分成像装置可以是移动的。
成像装置可以执行32倍的放大。
成像装置可以包括光学装置,该光学装置例如透镜被配置成执行全部或部分分析区域的放大。
成像装置能够通过多次采集来成像构成分析区域的整个空间体积。
成像装置可以被配置为独立地对分析区域的多个部分进行成像。
由成像装置采集的数字图像的分辨率可以包括在500×500像素和3000×3000像素之间。
根据本发明,处理单元可以另外被配置为对于待分析的每个样品实施:
-分析在待分析的样品中存在的且在确定步骤期间确定的菌落数目的变化;
-当菌落数目超过预设值的时间周期内恒定时,确定待分析的样品中存在的且称为最终的菌落数目。
该装置可以包括警报器和/或通信装置,该警报器和/或通信装置被设置成警告操作者确定存在于样品和/或样品组中菌落的最终数目。
警报器和/或通信装置配置成警告和/或通知操作员样品和/或样品组可以从储存装置中卸载。
警报器装置可以是能够发出本领域技术人员已知的信号的任何技术手段。
警报器装置可以另外发出可见或可听的信号。
通信装置可以是能够传输信号并且是本领域技术人员已知的任何技术手段。
通信装置可以另外能够发送电子消息和/或文本消息和/或电话。
操作系统可以包括机械手臂,该手臂包括夹具抓握器,该夹具抓握器配置成通过夹持抓住待分析的样品。
机械手臂可以围绕中心部件铰接。
机械手臂可以围绕枢轴旋转。
夹紧抓握器可以沿机械手臂移动。
操作系统可以包括多个机械手臂。
有利地,储存装置可以是转盘(carousel),该转盘包括围绕转盘的中心轴线布置的一组编号储存位置,优选地,为列和/或行的形状。
样品可以通过在处理单元中输入它们的编号来引用。
样品可以通过其被存储的位置编号来识别。
样品可以通过其被存储的位置编号来定位。
通过圆盘(carousel),我们指的是包括围绕着一组储存位置布置的中心轴的任何设备。
一个位置可以相对于中心轴和另一个位置运动。
一个位置可以相对于中心轴和其他多个位置运动。
一个位置可以相对于中心轴和所有其他位置运动。
相对于转盘的中心轴可以设置多个储存位置。
所有位置都可以相对于转盘的中心轴共同运动。
储存位置可以围绕转盘的中心轴旋转运动。
所有的位置都可以围绕转盘的中心轴旋转运动。
根据本发明,处理单元另外可以被设置成:
-计算待分析的样品的采集顺序;
-通过所计算的采集顺序计算待分析的样品的输送顺序。
优选地,储存装置可以具有与操作系统的输送速度相适应的最大数量的位置,使得样品的最小分析频率高于每小时2次分析。
处理单元可以另外被配置为计算以下样品获取和输送步骤:
-通过将样品装载到储存装置中,将样品添加到待分析的样品组中;和/或
-通过从储存装置卸载该样品来从待分析的样品组中移除样品;和/或
-确定步骤的每个实施,以确定存在于一个待分析的样品中的菌落数目。
根据本发明,夹具抓握器可以包括力传感器,该力传感器被布置成限制当夹持样品时由该夹具抓握器施加的最大作用力,使得该夹具抓握器能够通过抓住样品的任何部分抓取样品,特别是抓取有盖培养皿,其大小在50和100mm之间。
有利的是,夹持抓握器可以布置成通过其侧面边缘抓住样品。
夹紧抓握器可以被布置成通过位于已经放置有样品的位置表面的侧面上的横向边缘来抓取样品。
夹紧抓握器可以被布置成通过位于已经放置有样品的位置表面的附近的横向边缘来抓取样品。
转盘可以包括存储塔,这些存储塔包括叠加位置并且围绕转盘的中心轴线定位设置。
存储塔可以设置为相对于转盘的中心轴线运动。
存储塔可以相对于转盘的中心轴共同运动。
存储塔可以围绕转盘的中心轴旋转运动。
存储塔可以围绕转盘的中心轴共同旋转运动。
转盘可以包括存储容器,这些容器包括并置的位置且围绕转盘的中心轴线定位。
转盘可以包括导轨,这些导轨布置成使得存储塔和/或存储容器在运动时可以滑入导轨中。
附图说明
本发明的其他特征和优点将在阅读对实施例和实施方式的详细描述中,非限制,附图中:
图1和2为图表,其中每个图表说明不同菌落的计数方法中的步骤顺序;
图3为菌落计数装置的示意图。
具体实施方式
此后描述的实施例不受限制;我们可以特别想象到本发明的变体,其将仅包括随后描述的特征的选择与其他描述的特征(即使该选择被隔离在包括这些其他特征的短语中),因为这种特征的选择被证明为提供技术上的益处或者就现有技术而言区分本发明。该选择包括至少一个没有结构特性的优选的功能特征,或者仅具有一部分的结构细节,如果该单一部分足以提供技术优势或者就现有技术而言区分本发明。
参照图1和图3,描述了本发明的方法的第一实施例,一种用于对存在于待分析的样品组中的菌落进行计数的方法,将待分析的该样品组中的每个样品2存储在储存装置4的一个位置3中,待分析的样品组中的每个样品2包括培养基支撑件,该培养基支撑件设置成容纳平板培养基。对于待分析的样品组中的每个样品2,该方法包括以下顺序的步骤:
-从其位置3到分析区域5的称为向外输送101的样品的输送步骤,
-采集步骤102,在该步骤102中采集分析区域5的多个图像或样品所处的分析区域的一部分,
-从分析区域5到位置3的称为返回输送的样品的输送步骤102,
-检测步骤104,检测样品中菌落的存在并且包括来自样品的多个图像的图像分析,
-确定步骤105,通过对在检测步骤104期间检测到的存在的菌落进行计数来确定样品中存在的菌落数目。
采集待分析的样品2的两个后续图像的时间低于30分钟。当储存位置4的所有位置3都被待分析的样品2填充时,达到该最小采集频率。当存储在储存装置5中的待分析的样品的数量减少时,增加采集频率。根据该实施例,在分析区域5中不能同时存在多个样品2。
在与图1所示相同步骤顺序的迭代中,向外输送101和返回输送103步骤具有相同的迭代次数。
如果迭代顺序与图1所示的迭代顺序相同,则向外输送101和返回输送103步骤具有相同的迭代次数。在独立于其他步骤的情况下,在图1所示的步骤顺序的迭代之后迭代步骤102、104和105中的每一个。
根据本发明,在根据本发明的第二实施方式中,仅针对与第一实施方式的区别来描述,检测步骤104和确定步骤105形成在如图1所示的步骤顺序的迭代之后迭代的第一子顺序[104,105],独立于其他步骤。在与图1所示相同的步骤顺序的迭代中,向外输送101和返回输送103的步骤具有相同的迭代次数。在独立于其他步骤和第一子顺序的情况下,采集步骤102在如图1所示的步骤顺序的迭代之后迭代。采集步骤102的迭代次数是:
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且与第一子顺序[104,105]的迭代次数相同,或者
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且不同于第一子顺序[104,105]的迭代次数,或者
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且与第一子顺序[104,105]的迭代次数相同,或者
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且不同于第一子顺序[104,105]的迭代次数。
根据本发明,接下来描述该方法的第三种实施例,仅针对与第一实施方式的不同之处描述,在图1中所描绘的步骤顺序的迭代之后迭代来自第二子顺序[101,102,103]的步骤101、102和103,独立于第一子顺序[104,105]。第一子顺序[104,105]的迭代次数不同于第二子顺序的迭代次数。
根据本发明,描述该方法的第四实施例,完全迭代图1中显示的步骤顺序,如果以与步骤顺序相同的方式迭代,则顺序的每个步骤具有相同的迭代次数。
参照图2和图3,描述根据本发明的菌落计数方法的步骤顺序,接着描述根据本发明的方法的第五实施例,仅描述其与第一实施例的不同之处。对于待分析的每个样品2,按照以下步骤的顺序执行该方法:
-步骤101,然后
-步骤102,然后
-步骤104,然后
-步骤105,然后
-步骤103。
向外输送101和返回输送103在图2所示的步骤顺序的迭代之后迭代,具有相同数量的迭代。在独立于其他步骤的情况下,在图2所示的步骤顺序的迭代之后迭代步骤102、104和105中的每一个。
在根据本发明的方法的第六实施例中,仅针对其与第一实施例的差别进行描述,步骤102和104形成第一迭代的子顺序[102,104],在图2所示的步骤顺序的迭代之后,独立于这个步骤顺序的其他步骤。具有如图2所示的迭代的步骤顺序的步骤101和103具有相同的迭代次数。步骤105的迭代次数为:
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且不同于第一子顺序[102,104]的迭代次数,或者
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且与第一子顺序[102,104]的迭代次数相同,或者
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且不同于第一子顺序[102,104]的迭代次数,或者
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且与第一子顺序[102,104]的迭代次数相同。
在根据本发明的方法的第七实施例中,仅针对其与第一实施例的差别进行描述,步骤104和105形成在图2所示的步骤顺序的迭代之后迭代的第二子顺序[104,105],独立于这个步骤顺序的其他步骤。具有如图2所示的迭代的步骤顺序的步骤101和103具有相同的迭代次数。步骤102的迭代次数为:
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且不同于第一子顺序[104,105]的迭代次数,或者
-与步骤101和103的迭代次数不同,并且与第一子顺序[104,105]的迭代次数相同,或者
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且不同于第一子顺序[104,105]的迭代次数,或者
-与步骤101和103的迭代次数相同,并且与第一子顺序[104,105]的迭代次数相同。
在根据本发明的方法的第八实施例中,仅针对与第一实施例的差别进行描述,步骤102、104和105形成在图2所述的步骤顺序的迭代之后迭代的第三子顺序[102,104,105],独立于步骤101和103,具有如图2所示的迭代的步骤顺序,具有相同的迭代次数。当迭代如图2所示的步骤顺序时,第三子顺序的迭代次数不同于步骤101和103的迭代次数。
在根据本发明的方法的第九实施方式中,仅针对其与第一实施方式的不同之处进行描述,图2中显示的步骤顺序被完全迭代,该顺序的每个步骤对于其顺序具有如图2所示的相同数量的迭代。
参照图3,提出了根据本发明的菌落计数装置6的实施例,该装置包括:
-包括位置3的储存装置4,所述位置3被设置为容纳待分析的样品2,这些样品包括被设置成容纳平板培养基的培养基支撑件,
-操作系统7,其被设置为从一个或多个位置3到分析区域5并且从分析区域5到一个或多个位置3输送一个或多个待分析的样品2,
-成像装置8,被配置为采集全部或部分分析区域5的多个图像,后者被设置为容纳一个或多个待分析的样品2,
-处理单元(未示出),被配置为针对待分析的每个样品执行:
·检测步骤,通过分析来自待分析的样品的多个图像中的图像来检测菌落的存在,
·确定步骤,通过计数在检测步骤期间检测到其存在的菌落,确定待分析的样品中存在的菌落数目。
储存装置4为包括一组存储塔11的转盘,存储塔11连接到中心元件10,中心元件10包括旋转轴线12,中心元件10借助于致动器(未示出)被设置成旋转运动13。连接元件14将存储塔11连接到中央元件10,使得当中央元件10被设定为旋转运动时,它们使存储塔11旋转运动。每个存储塔11包括十个叠覆位置3。储存装置4包括十个存储塔11,这十个存储塔位于中心轴线10的相等距离处并且围绕旋转轴线12成角度地分布。
操作系统7包括与机械手臂16连接的枢轴15。枢轴15包括旋转轴线17,可围绕旋转轴线17被设定为旋转运动18。枢轴15的旋转运动18直接传递到机械手臂16。借助于致动器(未示出),机械手臂16相对于枢轴15被设定为垂直平移运动19。夹紧抓握器9相对于枢轴15位于机械手臂16的远端附近。夹紧抓握器9配备有两个相对于彼此沿相反方向平移运动的手臂。手臂以对称协调的方式平移运动。手臂平移运动旨在使臂彼此靠近以夹紧样品2或将它们分开以便释放样品2。每个分支臂都具有优化的圆形以抓取圆形培养基支撑件和值得注意的培养皿。每个手臂之间的最大距离为15厘米。夹紧抓握器9包括力传感器,该力传感器设置成限制臂在抓取样品时施加在样品上的夹紧力。由臂施加的作用力为5牛顿。力传感器允许夹紧抓握器9抓取任何尺寸小于10厘米的圆形物品。
成像装置8为静止的并且包括5兆像素CCD照相机20。
分析区域5的宽度为10cm,长度为10cm,相机距离待分析的样品2大约25cm,目前25cm。
当然,本发明不限于前面描述的例子,并且在这些例子中可以实现许多配置而不超出本发明的框架。
此外,本发明的各种特征、形状、变型和实施例可以以各种组合结合在一起,因为它们彼此并不是不相容或相互排斥的。

Claims (20)

1.一种用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,将所述的待分析的样品组中的每个样品存储在储存装置的位置中,所述的待分析的样品组中的每个样品包括设置成容纳平板培养基的培养基支撑件,并且该方法包括,对于每个待分析的样品:
-从其位置到分析区域的称为向外输送的样品的输送步骤;
-从分析区域到位置的称为返回输送的样品的输送步骤;
-采集步骤,在所述的采集步骤中采集样品位于全部或部分的分析区域的多个图像;
-确定步骤,通过对在检测步骤期间检测到的存在的菌落进行计数来确定样品中存在的菌落数目;
所有的步骤均是在遵循预设的温度指南的同一管理室中进行。
2.根据权利要求1所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,在所述方法期间在所述待分析的样品组中的另一样品的返回输送步骤之前,执行所述待分析的样品组中的样品的向外输送步骤。
3.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,包括所述方法的全部步骤或每个步骤的迭代。
4.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,在所述方法中,检测菌落存在的检测步骤包括:
-第一步骤,识别多个图像中的图像上的项目;
-第二步骤,使用所述多个图像中的一个或多个其他图像来分析所识别的项目的尺寸的变化;
-当所识别的项目的尺寸变化时,鉴定菌落的存在。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,检测菌落存在的检测步骤包括:
-第一步骤,识别多个图像中的一个图像上的项目;
-第二步骤,分析所述多个图像中的一个或多个其他图像上的所识别的项目的尺寸的变化;
-当所识别的项目的尺寸在51至1000μm、优选100至200μm的范围内变化时,鉴定菌落的存在。
6.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,包括确定存在于所述样品中的菌落数目的称为最终数目的步骤,所述步骤包括:
-分析在确定步骤中确定的且存在所述的样品中的菌落数目的变化;
-当菌落数目在超过预设值的周期稳定时,确定菌落的最终数目。
7.根据权利要求6所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,一旦实现了确定菌落的最终数目的步骤,则从待分析的样品组中取出所述的样品。
8.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,包括:
-通过将样品装载到储存装置中,将样品添加到所述的待分析的样品组中,和/或
-通过从所述储存装置卸载所述样品来从所述的待分析的样品组中移除样品;
并且添加和/或移除与所述的方法中的任何其他步骤同时进行。
9.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,包括:
-计算待分析的样品组中的样品采集顺序的步骤;
-基于所计算的采集顺序来确定所述组的输送顺序。
10.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,包括所述的待分析的样品组的修改,并且在此期间,在对所述的待分析的样品组进行修改之后,执行采集步骤的计算步骤和确定输送顺序的步骤。
11.根据前述任一项权利要求所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,在对所述待分析的样品组进行每次修改之后,执行所述采集顺序的计算步骤和确定所述输送顺序的步骤。
12.根据权利要求3至11中任一项所述的用于计数存在于待分析的样品组中的菌落数目的方法,其特征在于,在所述方法中,对于所述的待分析的样品组中的每个样品,所述采集步骤的迭代频率高于预设频率,所述的预设频率优选地包括在每10分钟到每120分钟之间。
13.一种菌落计数装置(6),包括:
-储存装置(2),包括配置成容纳样品的位置,这些样品包括被设置为容纳平板培养基的培养基支撑件;
-操作系统(5),被配置为从一个或多个位置到分析区域(5)且从分析区域到一个或多个位置输送一个或多个待分析的样品;
-成像装置(8),被配置为采集配置成容纳一个或多个待分析的样品的全部或部分分析区域的多个图像;
-处理单元,被配置为针对待分析的每个样品执行:
·检测步骤,通过分析待分析的样品的多个图像中的一个图像来检测菌落的存在;
·确定步骤,通过对在检测步骤期间检测到的存在的菌落进行计数来确定待分析的样品中存在的菌落数目。
14.根据权利要求13所述的菌落计数装置,其特征在于,所述处理单元另外被配置为对于待分析的每个样品执行:
-分析待分析的样品中存在的且在确定步骤中确定的菌落数目的变化;
-在超过预设值的时间周期内菌落数目稳定,确定待分析的样品中存在的称为最终数目的菌落的数目。
15.根据权利要求14所述的菌落计数装置,其特征在于,包括警报器和/或通信装置,所述警报器和/或通信装置被配置成警告操作员已经确定了存在于样品和/或样品组中的菌落的最终数目。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的菌落计数装置,其特征在于,所述操作系统包括机械手臂,所述手臂包括夹紧抓握器,所述夹紧抓握器配置成通过夹紧待分析的样品来抓取。
17.根据权利要求13至16中任一项所述的菌落计数装置,其特征在于,所述储存装置为转盘,所述转盘包括围绕所述转盘的中心轴线分布的所识别的储存位置组,并且所识别的储存位置组优选地成列和/或成行地成形。
18.根据权利要求13至17中任一项所述的菌落计数装置,其特征在于,所述处理单元另外被配置为:
-计算待分析的样品的采集顺序;
-根据所计算的采集顺序计算待分析的样品的输送步骤。
19.根据权利要求18所述的菌落计数装置,其特征在于,所述处理单元另外被配置为在以下之后计算所述待分析的样品的采集顺序和输送顺序:
-通过将样品装载到储存装置中,将样品添加到待分析的样品组中;和/或
-通过从储存装置卸载该样品来从待分析的样品组中移除样品;和/或
-确定待分析的样品中存在的菌落数目的每个步骤的实施。
20.根据权利要求16至19中任一项所述的菌落计数装置,其特征在于,所述夹紧抓握器包括力传感器,所述力传感器被配置成限制当抓取样品时由所述夹紧抓握器施加的最大夹紧力,使得所述夹紧抓握器能够通过夹紧一个样品的任何部分进行抓取,特别是一个有盖培养皿,其直径大小在50和100mm之间。
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