CN107835811B

CN107835811B - 苯胺嘧啶衍生物及其用途

Info

Publication number: CN107835811B
Application number: CN201680041201.3A
Authority: CN
Inventors: 朱岩; 赵娜; 商现星; 胡远东; 彭勇; 张慧; 刘波; 罗鸿; 韩永信; 杨玲; 徐宏江
Original assignee: Centaurus Biopharma Co Ltd; Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd; Lianyungang Runzhong Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Centaurus Biopharma Co Ltd; Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd; Lianyungang Runzhong Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-07-16
Filing date: 2016-07-15
Publication date: 2019-11-08
Anticipated expiration: 2036-07-15
Also published as: US20180208581A1; KR102666414B1; KR20180030190A; HK1250164A1; JP6970081B2; TWI739753B; EP3323817B1; TW201703768A; CA2992317A1; AU2016292450B2; CN107835811A; JP2018520190A; RU2018102963A; WO2017008761A1; US10329277B2; EP3323817A4; AU2016292450A1; RU2018102963A3; EP3323817A1; RU2734849C2

Abstract

本公开涉及作为EGFR抑制剂的苯胺嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐，具体涉及式（Ⅰ）所示化合物或其药学上可接受的盐、其药物组合物、及其用于治疗EGFR介导的疾病的方法和用途。

Description

苯胺嘧啶衍生物及其用途

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年07月16日向中国国家知识产权局提交的第201510419018.X号中国专利申请的优先权和权益，所述申请公开的内容通过引用整体并入本文中。

技术领域

本申请涉及作为EGFR抑制剂的苯胺嘧啶衍生物、其药学上可接受的盐、其药物组合物、及其用于治疗EGFR介导的疾病的方法或用途。

背景技术

EGFR(Epidermal Growth Factor Receptor)是上皮生长因子(EGF)细胞增殖和信号传导的受体，也被称作HER1、ErbB1。EGFR属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR(ErbB-1)，HER2/c-neu(ErbB-2)，HER3(ErbB-3)和HER4(ErbB-4)。EGFR是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，细胞膜贯通，分子量170KDa。

EGFR位于细胞膜表面，靠与配体结合来激活，包括EGF和TGFα，激活后，EGFR由单体转化为二聚体。所述二聚体既包括两个同种受体分子的结合(同源性二聚作用)，也包括人类EGF相关性受体(HER)酪氨酸激酶家族中的不同成员的结合(异源性二聚作用)。EGFR二聚后可以激活它位于细胞内的激酶通路，包括胞内域中关键酪氨酸残基的磷酸化，并且导致对参与细胞增殖和生存的许多细胞内信号传导通路的刺激。

在许多实体肿瘤中存在EGFR的高表达或异常表达。EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。其可能机制有：EGFR的高表达引起下游信号传导的增强；突变型EGFR受体或配体表达的增加导致EGFR的持续活化；自分泌环的作用增强；受体下调机制的破坏；异常信号传导通路的激活等。EGFR的过表达在恶性肿瘤的演进中起重要作用，例如，在胶质细胞、肾癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等组织中都已发现有EGFR的过表达。

EGFR和Erb-B2的异常表达在肿瘤的转化与增长中起着关键性的作用。以肺癌为例，EGFR在50％的非小细胞肺癌(NSCLC)病例中有表达，而且其表达与愈后不佳相关。这两个因素使得EGFR及其家族成员成为开展靶向治疗的主要候选者。两种靶向EGFR的小分子抑制剂，吉非替尼和厄洛替尼，得到了美国FDA的快速批准用于治疗晚期NSCLC患者，所述患者对常规化疗失去了反应。

早期的临床数据表明，10％的NSCLC患者对吉非替尼和厄洛替尼有反应。分子生物学分析表明，在多数情况下，对药物有反应的患者在编码EGFR基因上带有特定的突变：第19外显子的第747～750位氨基酸的缺失占突变的45％，还有10％的突变发生在第18和第20外显子。最常见的EGFR激活突变(L858R和delE746_A750)导致相对于野生型(WT)EGFR而言，对小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的亲和力增加、以及对三磷酸腺苷(ATP)亲和力下降。T790M突变是EGFR第20外显子中的一个点突变，其产生对吉非替尼或厄洛替尼治疗的获得性抗性。最新研究显示，L858R合并T790M突变对ATP的亲和力比单纯L858R强，而TKI是ATP竞争性激酶抑制剂，故导致TKI与激酶区结合率降低。

发明内容

本申请的第一个方面，提供了式(I)所示化合物或者其药学上可接受的盐：

其中：

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、卤素、C_1-4烷基和氰基；

R³选自C_1-4烷基和C_1-4烷氧基；

R⁴选自[2-(二甲氨基)乙基](甲基)氨基、(2-羟基乙基)(甲基)氨基和吗啉-4-基；

R⁵选自氢、C_1-4烷基和C_1-3烷氧基C_1-3烷基；

R⁶选自氢和C_1-4烷基。

在本申请的一个实施方式中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、卤素和C_1-4烷基；

R³选自C_1-4烷氧基；

R⁵选自氢、C_1-4烷基和C_1-3烷氧基C_1-3烷基；

R⁶选自氢和C_1-4烷基。

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、氯、溴、氟和甲基；

R³为甲氧基；

R⁵选自氢和甲氧基甲基；

R⁶选自氢和甲基。

在本申请的一个实施方式中，本申请所述式(I)化合物包括如下化合物或其药学上可接受的盐：

本申请的另一方面提供了一种药物组合物，其包含本文公开的式(I)化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。任选地，本申请的药物组合物可以进一步含有一种或多种额外的治疗剂。

本申请的另一方面提供了一种治疗EGFR介导的疾病的方法，所述方法包括给予有需要的个体本申请所述的式(I)化合物或者其药学上可接受的盐或其药物组合物。

本申请的另一个方面提供了本申请所述的式(I)化合物或者其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备治疗EGFR介导的疾病的药物中的用途。

在本申请的一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病选自EGFR-L858R激活突变介导的疾病。

在本申请的一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病选自EGFR-T790M激活突变介导的疾病。一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病选自EGFR-L858R合并EGFR-T790M双突变激活介导的疾病。

实施方式的详细描述

定义：

除非另有说明，本文所用的下列术语和短语具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。

本文所用的C_m-n指该部分中具有m-n个碳原子。例如，“C_1-4烷基”指该烷基具有1-4个碳原子。

本文中的数字范围，是指给定范围中的各个整数。例如“C_1-4”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子或4个碳原子。

术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

术语“氰基”指-CN基团。

术语“烷基”是指由碳原子和氢原子组成的直链或支链的饱和的脂肪烃基团，其通过单键与分子的其余部分连接。烷基的非限制性实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基或叔丁基等。

术语“烷氧基”是指“-O-烷基”基团。

术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

作为药学上可接受的盐，例如，与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与酸性氨基酸形成的盐等。

本申请的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离碱形式的这些化合物与化学计量的适当酸反应来制备。

本申请的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本申请的范围之内。本申请的某些化合物可以以多晶或无定形形式存在。

本申请的某些化合物可以具有不对称碳原子(光学中心)或双键。外消旋体、非对映异构体、几何异构体和单个的异构体都包括在本申请的范围之内。

本文中消旋体、ambiscalemic、scalemic或者对映体纯的化合物的图示法来自Maehr，J.Chem.Ed.1985，62：114-120。除非另有说明，用楔形键和虚线键表示一个立体中心的绝对构型。当本文所述化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心，除非另有规定，它们包括E、Z几何异构体。同样地，所有的互变异构形式均包括在本申请的范围之内。

本申请的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本申请设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本申请的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本申请的范围之内。

可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本申请某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的分步结晶法或色谱法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。

本申请的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，氘(D)，氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)等。本申请的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本申请的范围之内。

术语“药学上可接受的载体”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些载体。“药学上可接受的载体”是指与活性成份一同给药的、有利于活性成份给药的惰性物质，包括但不限于国家食品药品监督管理局许可的可接受的用于人或动物(例如家畜)的任何助流剂、增甜剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、矫味增强剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、崩解剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。所述载体的非限制性实例包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖和各类淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇等。关于载体的其他信息，可以参考Remington：The Science and Practice ofPharmacy，21st Ed.，Lippincott，Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。

术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。

针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本申请中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。

术语“患者”或“个体”包括人和动物，例如，哺乳动物(如灵长类动物，牛，马，猪，狗，猫，小鼠，大鼠，兔，山羊，绵羊以及禽类等)。

具体实施方式

其中：

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、卤素、C_1-4烷基和氰基；

R³选自C_1-4烷基和C_1-4烷氧基；

R⁵选自氢、C_1-4烷基和C_1-3烷氧基C_1-3烷基；

R⁶选自氢和C_1-4烷基。

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、卤素和C_1-4烷基；

R³选自C_1-4烷氧基；

R⁵选自氢、C_1-4烷基和C_1-3烷氧基C_1-3烷基；

R⁶选自氢和C_1-4烷基。

X选自NR⁶或O；

R¹、R²独立地选自氢、氯、溴、氟和甲基；

R³为甲氧基；

R⁵选自氢和甲氧基甲基；

R⁶选自氢和甲基。

在本申请的一些实施方式中，本申请所述式(I)化合物包括如下化合物或其药学上可接受的盐：

在本申请的一些实施方式中，本申请所述式(I)化合物的药学上可接受的盐包括如下化合物的盐酸盐：

本申请的另一方面提供了一种药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。本申请的药物组合物可以进一步含有一种或多种额外的治疗剂。

在本申请的一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病选自EGFR-T790M激活突变介导的疾病。

在本申请的一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病选自EGFR-L858R合并EGFR-T790M双突变激活介导的疾病。

在本申请的一些实施方式中，所述EGFR介导的疾病是癌症；所述癌症选自卵巢癌、宫颈癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃癌、胃肠道间质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、肾癌、间变性大细胞淋巴瘤、急性髓细胞白血病、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、间皮瘤；所述肺癌可以选自非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌。

本申请的药物组合物可通过将本申请的化合物或其盐与适宜的药学上可接受的载体组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂或微球及气溶胶等。

给予本申请的化合物或其药物可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、透黏膜、经肠给药，或者局部、经皮、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下或静脉内给药。

本申请的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法和冷冻干燥法等。

对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的载体混合来配制该药物组合物。这些载体能使本申请的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂或悬浮剂等，用于对患者的口服给药。

可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服组合物。例如，可通过下述方法获得：将所述的活性化合物与固体赋形剂混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需要则加入其它合适的辅剂，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合的辅料包括但不限于：粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂和/或矫味剂等。如微晶纤维素、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和/或淀粉糊；滑石、淀粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙和/或硬脂酸；乳糖、蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇和/或磷酸二钙；二氧化硅；交联羧甲基纤维素钠、预交化淀粉、淀粉羟乙酸钠、藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、甲基纤维素、琼脂、羧甲基纤维素和/或交联聚乙烯吡咯烷酮等。可以根据通常药物实践中公知的方法任选地对糖衣剂的核心进行包衣，尤其使用肠溶包衣。

药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或冻干产品。

在一些实施方式中，本文所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以通过任何适用的途径和方法给药，例如通过口服或肠胃外(例如，静脉内)给药。式(I)化合物的治疗有效量为从约0.0001到20mg/Kg体重/天，例如从0.001到10mg/Kg体重/天。

在一些实施方式中，式(I)化合物的剂量频率由患者个体的需求决定，例如，每天1次或2次，或每天更多次。给药可以是间歇性的，例如，其中在若干天的期间内，患者接受式(I)化合物的每日剂量，接着在若干天的期间，患者不接受式(I)化合物的每日剂量。

本申请的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，具体的实施方式包括但不限于本申请的实施例。

本申请具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本申请的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本申请的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。

在一个具体的实施方式中，本申请的部分式(I)所示化合物可以由有机合成领域技术人员通过路线1用本领域的标准方法来制备：

从式(II)化合物和式(III)化合物出发，先发生式(II)化合物的苯环氨基和式(III)化合物的嘧啶氯原子的取代反应，然后式(IV)化合物构建羰基并形成环结构得式(V)化合物，式(V)化合物与R⁶连接得式(VI)化合物，式(VI)化合物的嘧啶环氯原子与式(VII)化合物苯环上氨基反应得式(VIII)化合物，式(VIII)化合物与侧链R⁴连接得式(IX)化合物，式(IX)化合物的硝基还原得氨基然后与式(XI)化合物成酰胺键得终产物式(I-a)化合物。

本申请的部分式(I)所示化合物也可以由有机合成领域技术人员通过路线2用本领域的标准方法来制备：

从式(XII)化合物和式(III)化合物出发，先发生式(XII)化合物的苯环氨基和式(III)化合物的嘧啶氯原子的取代反应，然后式(X III)化合物脱除甲基得式(X IV)化合物，式(X IV)化合物构建羰基并形成环结构得式(X V)化合物，式(X V)化合物的嘧啶环氯原子与式(VII)化合物苯环上氨基发生取代反应得式(X VI)化合物，式(X VI)化合物与侧链R⁴连接得式(X VII)化合物，式(X VII)化合物的硝基还原得氨基然后与式(XI)化合物成酰胺键得终产物式(I-b)化合物。

在本申请的部分实施方式中，本领域的技术人员可以依据而非严格按照路线1或路线2的步骤进行制备，根据终产物的结构，可以对路线1或路线2进行增加、减少或者改变各个步骤的顺序，这也属于本申请的范围。

为清楚起见，本申请进一步用实施例来阐述。但是实施例不局限于定义或者指定发明范围。

本申请所使用的所有溶剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。涉及对水和/或氧气敏感的实验的所有操作都在预干燥玻璃仪器中于氮气氛下进行。除非另有说明，所有原料均为商业原料，并且在使用前未作进一步纯化。本申请所用柱层析采用的是青岛海洋化工所生产的硅胶(200-300目)。薄层色谱采用默克公司(E.Merck)预涂色谱板(硅胶60PF254，0.25毫米)。核磁共振光谱分析使用的仪器为瓦里安VNMRS-400共振光谱仪，化学位移以四甲基硅烷(TMS＝δ0.00)为内标，核磁共振氢谱数据的记录格式为：质子数，峰型(s，单峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰)，耦合常数(以赫兹Hz为单位)。

本申请采用下述缩略词：DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；NMP代表N-甲基吡咯烷酮；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；EA代表乙酸乙酯；MeOH代表甲醇；Pd₂(dba)₃代表三(二亚苄基丙酮)二钯；TsOH代表对甲苯磺酸；BINAP代表(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘。

化合物经手工或者软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。

实施例

下面的具体实施例，其目的是使本领域的技术人员能更清楚地理解和实施本申请。它们不应该被认为是对本申请范围的限制，而只是本申请的示例性说明和典型代表。

实施例1 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐。

步骤1：N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺

将邻苯二胺(3.24g，30mmol)和2，4-二氯嘧啶(4.47g，30mmol)分散于无水乙醇(60mL)中，加入二异丙基乙基胺(7.74g，60mmol)，加热回流3小时。真空浓缩去除溶剂，残余物溶于二氯甲烷(100mL)中，水洗，饱和食盐水洗，真空浓缩去除溶剂。残余物经柱层析(EA∶PE＝1∶2)分离得标题所示化合物(5.32g，80％)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.08(1H，d，J＝5.6Hz)，7.20-7.12(2H，m)，6.85-6.78(2H，m)，6.74(1H，s)，6.24(1H，d，J＝5.6Hz)，3.82(2H，br)。

步骤2：1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯基-1，2-二胺(2.21g，10mmol)溶于DMF(15mL)中，加入羰基二咪唑(2.43g，15mmol)，室温搅拌1小时，倾入水(50mL)中，继续搅拌10分钟。抽滤，水洗(30mL*3)，干燥得标题所示化合物(2.23g，90％)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.64(1H，br)，8.78(1H，d，J＝5.6Hz)，8.43(1H，d，J＝5.6Hz)，8.26(1H，d，J＝7.6Hz)，7.22-7.10(3H，m)。

步骤3：1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(600mg，2.43mmol)分散于无水DMF(10mL)中，冰水浴冷却。加入氢化钠(116mg，60％，2.90mmol)，搅拌1小时，滴加碘甲烷(345mg，2.43mmol)，继续搅拌1小时。将反应液倾入水(50mL)中，搅拌30分钟，抽滤，水洗(30mL*3)，干燥得标题所示化合物(459mg，72％)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.79(1H，d，J＝5.6Hz)，8.44(1H，d，J＝6.0Hz)，8.29(1H，d，J＝8.0Hz)，7.30-7.28(2H，m)，7.24-7.19(1H，m)，3.39(3H，s)。

步骤4：1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(459mg，1.76mmol)，4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(360mg，1.93mmol)和对甲苯磺酸一水合物(551mg，2.89mmol)分散于2-戊醇(10mL)中，反应在105℃下搅拌过夜。冷却后抽滤，滤饼用少量2-戊醇洗三次，干燥得标题所示化合物(440mg，43％)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ10.95(1H，br)，8.49(1H，d，J＝7.6Hz)，8.39(1H，d，J＝7.2Hz)，8.21(1H，d，J＝7.2Hz)，7.87(2H，d，J＝8.4Hz)，7.68(1H，d，J＝8.4Hz)，7.28-7.23(2H，m)，7.04(2H，d，J＝7.6Hz)，6.91-6.85(2H，m)，3.92(3H，s)，3.46(3H，s)，2.38(3H，s)。

步骤5：1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐(440mg，0.76mmol)溶于NMP(5mL)中，加入二异丙基乙基胺(206mg，1.59mmol)和N¹，N¹，N²-三甲基乙烷-1，2-二胺(116mg，1.14mmol)，反应在85℃下搅拌过夜。反应液冷却后倾入水(50mL)中，抽滤，少量甲醇冲洗，干燥得标题所示化合物(326mg，88％)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.92(1H，s)，8.51(1H，d，J＝5.6Hz)，8.27(1H，d，J＝7.6Hz)，7.82(1H，d，J＝5.6Hz)，7.47(1H，s)，7.29-7.19(1H，m)，7.17-7.13(1H，m)，7.04(1H，d，J＝7.6Hz)，6.69(1H，s)，3.98(3H，s)，3.47(3H，s)，3.27(2H，t，J＝7.2Hz)，2.89(3H，s)，2.88(2H，t，J＝7.2Hz)，2.26(6H，s)。

步骤6：1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(326mg，0.66mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入Pd/C(10％，30mg)，氢气置换三次，体系在氢气氛下搅拌过夜，抽滤，产品易于氧化，所得滤液快速真空浓缩，直接投入下步反应。

步骤7：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

将上步反应所得1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮溶于无水二氯甲烷(10mL)中，加入二异丙基乙基胺(129mg，1.00mmol)，冰水浴冷却。将溶有丙烯酰氯(60mg，0.66mmol)的无水二氯甲烷(2mL)溶液缓慢滴加入体系中，用时15分钟。继续搅拌15分钟后，将反应液倾入石油醚(50mL)中，搅拌10分钟。抽滤，石油醚冲洗滤饼。所得粗品经柱层析(DCM∶MeOH＝20∶1)分离得标题所示化合物(164mg，两步合并收率45％)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.15(1H，br)，9.72(1H，br)，8.70(1H，s)，8.41(1H，d，J＝5.6Hz)，8.16-8.12(2H，m)，7.67(1H，d，J＝5.6Hz)，7.22-712(2H，m)，6.99-6.92(3H，m)，6.19(1H，dd，J＝2.0Hz，17.2Hz)，5.68(1H，dd，J＝2.0Hz，10.4Hz)，3.77(3H，s)，3.34(3H，s)，3.28(4H，br)，2.72(6H，s)，2.60(3H，s)。

实施例2 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.47(1H，s)，9.12(1H，s)，8.62(1H，d，J＝8.4Hz)，8.50(1H，d，J＝5.6Hz)，8.16-8.14(1H，m)，7.82(1H，d，J＝5.6Hz)，7.47-7.40(3H，m)，7.15-7.09(3H，m)，7.04(1H，d，J＝7.6Hz)，6.95-6.91(1H，m)，3.96(3H，s)，2.27(3H，s)。

步骤2：1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.39(1H，s)，8.72(1H，s)，8.42(1H，d，J＝5.6Hz)，8.12-8.03(2H，m)，7.68(1H，d，J＝5.6Hz)，7.11-7.07(1H，m)，7.02-7.00(1H，m)，6.88-6.84(1H，m)，6.81(1H，s)，3.87(3H，s)，3.28(2H，t，J＝6.8Hz)，2.85(3H，s)，2.46(2H，t，J＝6.8Hz)，2.15(6H，s)。

步骤3：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(MeOD)：δ8.46(1H，d，J＝5.6Hz)，8.28(1H，s)，8.14(1H，d，J＝8.4Hz)，7.70(1H，d，J＝5.6Hz)，7.12-7.06(2H，m)，7.03-7.99(1H，m)，6.97(1H，s)，6.51-6.38(2H，m)，5.83-5.80(1H，m)，3.97(3H，s)，3.45(2H，br)，3.21(2H，br)，2.81(6H，s)，2.71(3H，s)。

实施例3 N-(5-(5-氯-4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：N¹-(2，5-二氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由2，4，5-三氯嘧啶和邻苯二胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.18(1H，s)，7.46(1H，dd，J＝1.6Hz，7.2Hz)，7.15-7.11(2H，m)，6.91-6.86(2H，m)，3.67(2H，br)。

步骤2：1-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将N¹-(2，5-二氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺(100mg，0.39mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中，加入二异丙基乙基胺(151mg，1.17mmol)，冰水浴冷却。分批加入三光气(71mg，0.24mmol)，自然升至室温，继续搅拌1小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)，继续搅拌10分钟，乙酸乙酯萃取(20mL*2)，合并有机相。有机相用饱和食盐水洗，真空浓缩去除溶剂得标题所示化合物(105mg，95％)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.44(1H，br)，9.16(1H，s)，7.20-7.04(4H，m)。

步骤3：1-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤3中所描述的方法由1-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.80(1H，s)，7.27-7.23(2H，m)，7.18-7.16(1H，m)，7.06(1H，d，J＝8.0Hz)，3.48(3H，s)。

步骤4：1-(5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将1-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(50mg，0.17mmol)、4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(63mg，0.34mmol)、BINAP(11mg，0.017mmol)和碳酸铯(110mg，0.34mmol)分散于无水甲苯(5mL)中，氮气鼓泡20分钟后加入Pd₂(dba)₃(8mg，0.008mmol)。体系在微波反应器中(100W，100℃)反应1小时，真空浓缩去除溶剂。所得残余物经柱层析(DCM to DCM∶EA＝20∶1)分离得到标题所示化合物(54mg，72％)。

¹H NMR(CDCl₃)：9.31(1H，s)，8.02(1H，s)，8.55(1H，d，J＝8.2Hz)，7.33(1H，d，J＝13.6Hz)，7.25(1H，d，J＝7.2Hz)，7.21-7.16(2H，m)，6.78(1H，d，J＝12.0Hz)，3.97(3H，s)，3.43(3H，s)。

步骤5：1-(5-氯-2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.88(1H，s)，8.59(1H，s)，7.69(1H，s)，7.25-7.19(2H，m)，7.16-7.14(1H，m)，7.05(1H，d，J＝7.2Hz)，6.65(1H，s)，3.95(3H，s)，3.49(3H，s)3.25(2H，t，J＝7.2Hz)，2.56(3H，s)，2.54(2H，t，J＝7.2Hz)，2.25(6H，s)。

步骤6：1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)-5-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将1-(5-氯-2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(320mg，0.61mmol)、铁粉(139mg，2.48mmol)和氯化铵(50mg，0.93mmol)分散于乙醇/水(8mL/4mL)的混合溶液中。体系在80℃下剧烈搅拌3小时，冷却后过滤，真空去除有机溶剂。所得物加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL*3)。所得有机相用饱和食盐水洗，真空浓缩去除溶剂得到标题所示化合物，直接用于下步反应。

步骤7：N-(5-(5-氯-4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤7中所描述的方法由1-(5-氯-2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.15(1H，br)，9.68(1H，br)，9.05(1H，s)，8.66(1H，s)，8.11(1H，s)，7.23-7.20(1H，m)，7.15-7.09(2H，m)，7.05-6.99(2H，m)，6.89(1H，s)，6.41(1H，dd，J＝2.0Hz，16.8Hz)，5.70(1H，dd，J＝2.0Hz，10.0Hz)，3.79(3H，s)，3.35(3H，s)，3.28(2H，br)，2.65(6H，s)，2.55(5H，s)。

实施例4 N-(5-(5-氯-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：1-(5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例3步骤4中所描述的方法由1-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：9.24(1H，d，J＝8.0Hz)，8.68(1H，s)，8.45(1H，s)，7.83(1H，s)，7.34(1H，s)，7.22-7.10(3H，m)，6.78(1H，d，J＝12.0Hz)，4.02(3H，s)。

步骤2：1-(5-氯-2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.94(1H，s)，8.66(1H，s)，8.38(1H，br)，7.84(1H，s)，7.23-7.13(4H，m)，4.05(3H，s)，3.56(2H，br)，3.08(2H，br)，2.89(3H，s)2.69(6H，s)。

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

步骤3：N-(5-(5-氯-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氦基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例3步骤6，7中所描述的方法由1-(5-氯-2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ12.20(1H，br)，9.35(1H，br)，9.17(1H，br)，8.64(1H，s)，8.41(1H，br)，7.69(1H，s)，7.21-7.16(1H，m)，7.13-7.07(3H，m)，6.67(1H，s)，6.42(1H，dd，J＝1.6Hz，16.8Hz)，5.71(1H，d，J＝11.6Hz)，3.84(3H，s)，3.24(2H，br)，3.08(2H，br)，2.72(9H，br)。

实施例5 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：2-氯-N-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由邻甲氧基苯胺和2，4-二氯嘧啶合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.14(1H，d，J＝5.6Hz)，7.83(1H，br)，7.27(1H，m)，7.17-7.13(1H，m)，7.04-6.99(1H，m)，6.96-6.94(1H，m)，6.63-6.62(1H，d，J＝6.0Hz)，3.89(3H，s)。

步骤2：2-(2-氯嘧啶-4-基氨基)苯酚

将2-氯-N-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺(100mg，0.42mmol)溶于无水二氯甲烷(3mL)中，冰水浴冷却。缓慢滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(2.5mL，2.12mmol)，自然升至室温，继续搅拌2小时。加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取(20mL*3)，合并有机相并用饱和食盐水洗，真空去除溶剂得标题所示化合物(84mg，89％)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ9.85(1H，s)，9.31(1H，s)，8.07(1H，d，J＝6.0Hz)，7.57(1H，br)，7.05-7.01(1H，m)，6.93(1H，d，J＝8.0Hz)，6.84-6.80(1H，m)，6.66(1H，br)。

步骤3：3-(2-氯嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮

以类似于实施例3步骤2中所描述的方法由2-(2-氯嘧啶-4-基氨基)苯酚合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.87(1H，d，J＝5.6Hz)，8.25-8.19(2H，m)，7.49(1H，d，J＝7.6Hz)，7.39-7.30(2H，m)。

步骤4：3-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由3-(2-氯嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.83(1H，br)，9.23(1H，s)，8.59(1H，d，J＝5.6Hz)，8.24(1H，br)，7.64(1H，d，J＝5.6Hz)，7.47-7.43(4H，m)，7.31-7.24(1H，m)，7.19-7.14(1H，m)，7.11(2H，d，J＝8.0Hz)，3.97(3H，s)，2.28(3H，s)。

步骤5：3-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由3-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.86(1H，s)，9.23(1H，s)，8.57(1H，d，J＝5.6Hz)，8.24-8.22(1H，m)，7.74(1H，d，J＝5.6Hz)，7.48(1H，s)，7.29-7.25(2H，m)，6.72(1H，s)，4.01(3H，s)，3.29(2H，t，J＝7.2Hz)，2.89(3H，s)，2.57(2H，t，J＝7.2Hz)，2.27(6H，s)。

步骤6：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由3-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)苯并[d]恶唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ12.21(1H，br)，9.51(1H，br)，9.22(1H，s)，8.55(1H，d，J＝5.6Hz)，8.25(1H，d，J＝8.0Hz)，7.51(1H，s)，7.26(1H，s)，7.23-7.16(4H，m)，6.72(1H，s)，6.31(1H，dd，J＝2.0Hz，16.8Hz)，5.67(1H，dd，J＝2.0Hz，10.4Hz，)，3.90(3H，s)，3.29(2H，br)，3.13(2H，br)，2.76(9H，br)。

实施例6 N-(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺

步骤1：1-(2-(4-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由2-(甲基氨基)乙醇合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.97(1H，s)，8.52(1H，d，J＝6.0Hz)，8.26(1H，J＝7.2Hz)，7.83(1H，d，J＝5.6Hz)，7.56(1H，s)，7.27-7.23(1H，m)，7.18-7.16(1H，m)，7.04(1H，J＝7.2Hz)，6.70(1H，s)，4.00(3H，s)，3.79-3.76(2H，m)，3.48(3H，s)，3.40(2H，t，J＝7.2Hz)，2.84(3H，s)。

步骤2：N-(2-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(4-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ9.30(1H，s)，9.03(1H，s)，8.52(1H，d，J＝5.6Hz)，8.32(1H，d，J＝8.0Hz)，7.80(1H，d，J＝5.6Hz)，7.46(1H，s)，7.18-7.14(1H，m)，7.08-7.03(1H，m)，7.01-6.95(1H，m)，6.77(1H，s)，6.34-6.32(2H，m)，5.65-5.63(1H，m)，3.87(3H，s)，3.77-3.74(2H，m)，3.45(3H，s)，2.99(2H，t，J＝4.8Hz)，3.75(3H，s)。

实施例7(E)-N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-甲氧基丁-2-烯酰胺

以类似于实施例1步骤7中所描述的方法由1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和(E)-4-甲氧基丁-2-烯酰氯合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ12.32(1H，br)，9.24(1H，br)，9.17(1H，br)，8.52(1H，d，J＝5.6Hz)，8.31(1H，d，J＝8.0Hz)，7.80(1H，d，J＝5.6Hz)，7.49(1H，br)，7.19-7.10(2H，m)，6.99-6.96(2H，m)，6.90-6.84(1H，m)，6.72(1H，s)，4.14(2H，d，J＝3.2Hz)，3.90(3H，s)，3.45(3H，s)，3.40(3H，s)，3.38-3.35(2H，m)，3.12-3.08(2H，m)，2.80(6H，s)，2.74(3H，s)。

实施例8 N-(4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氯苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-吗啉基苯基)丙烯酰胺

步骤1：1-(2-(2-甲氧基-4-吗啉-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐和吗啉合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ9.10(1H，s)，8.54(1H，d，J＝5.6Hz)，8.27(1H，d，J＝8.0Hz)，7.85(1H，d，J＝5.6Hz)，7.59(1H，s)，7.27-7.24(1H，m)，7.19-7.17(1H，m)，7.05(1H，d，J＝8.0Hz)，6.65(1H，s)，4.04(3H，s)，3.91-3.89(4H，m)，3.49(3H，s)，3.10-3.08(4H，m)。

步骤2：N-(4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-吗啉基苯基)丙烯酰胺

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(2-甲氧基-4-吗啉-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ9.37(1H，s)，8.55(1H，d，J＝5.6Hz)，8.48(1H，s)，8.34(1H，d，J＝8.0Hz)，7.81(1H，d，J＝5.6Hz)，7.46(1H，s)，7.20-7.16(1H，m)，7.10-7.06(1H，m)，7.01-6.99(1H，m)，6.79(1H，s)，6.36-6.22(2H，m)，5.75-5.72(1H，m)，3.91-3.88(7H，m)，3.46(3H，s)，2.90(4H，t，J＝4.8Hz)。

实施例9 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氦基)-4-甲氧基-5-(4-(5-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：N¹-(2-氯嘧啶-4-基)-4-甲基苯-1，2-二胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由4-甲基苯-1，2-二胺和2，4-二氯嘧啶合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.06(1H，d，J＝6.0Hz)，7.00(1H，d，J＝8.0Hz)，6.77(1H，s)，6.66(1H，s)，6.62(1H，d，J＝8.0Hz)，6.21(1H，d，J＝6.0Hz)，3.79(2H，br)，2.31(3H，s)。

步骤2：1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤2中所描述的方法由N¹-(2-氯嘧啶-4-基)-4甲基苯-1，2-二胺和羰基二咪唑合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.62(1H，d，J＝5.6Hz)，8.47(1H，d，J＝5.6Hz)，8.34(1H，d，J＝8.4Hz)，7.97(1H，s)，7.03(1H，d，J＝8.4Hz)，6.91(1H，s)，2.42(3H，s)。

步骤3：1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.39(1H，s)，9.04(1H，s)，8.61(1H，d，J＝8.4Hz)，8.49(1H，d，J＝5.6Hz)，8.04-8.02(1H，m)，7.82(1H，d，J＝5.6Hz)，7.49-7.41(3H，m)，7.11(2H，d，J＝8.0Hz)，6.93(1H，s)，6.87(1H，s)，6.76-6.74(1H，m)，3.97(3H，s)，2.33(3H，s)，2.29(3H，s)。

步骤4：1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐和二异丙基乙基胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.92(1H，s)，8.50(1H，d，J＝5.6Hz)，8.30(1H，br)，8.11(1H，d，J＝8.0Hz)，7.78(1H，d，J＝5.6Hz)，7.45(1H，s)，6.94(1H，d，J＝8.0Hz)，6.89(1H，s)，6.70(1H，s)，3.98(3H，s)，3.31(2H，t，J＝6.8Hz)，2.88(3H，s)，2.61(2H，t，J＝6.8Hz)，2.40(3H，s)，2.31(6H，s)。

步骤5：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(5-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(MeOD)：δ8.32(1H，d，J＝6.0Hz)，7.91(1H，d，J＝8.0Hz)，7.61(1H，d，J＝5.6Hz)，6.87-6.84(2H，m)，6.78(1H，s)，6.70(1H，d，J＝8.0Hz)，6.40-6.26(2H，m)，5.73-5.70(1H，m)，3.86(3H，s)，3.26(2H，br)，2.93(2H，br)，2.61(3H，s)，2.59(6H，s)，2.22(3H，s)。

实施例10 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：N¹-(2-二氯嘧啶-4-基)-4-氟苯-1，2-二胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由2，4-二氯嘧啶和4-氟苯-1，2-二胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.06(1H，d，J＝6.0Hz)，7.06-7.03(1H，m)，6.71(1H，s)，6.52-6.44(2H，m)，6.14(1H，d，J＝6.0Hz)，3.94(2H，br)。

步骤2：1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤2中所描述的方法由N¹-(2-二氯嘧啶-4-基)-4-氟苯-1，2-二胺和羰基二咪唑合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.81(1H，s)，8.77(1H，d，J＝6.0Hz)，8.40(1H，d，J＝6.0Hz)，8.24-8.21(1H，m)，7.03-6.96(2H，m)。

步骤3：1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤3中所描述的方法由1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.77(1H，d，J＝5.6Hz)，8.38(1H，d，J＝5.6Hz)，8.23-8.19(1H，m)，7.29(1H，d，J＝8.8Hz)，7.04-7.00(1H，m)，3.36(3H，s)。

步骤4：5-氟-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物，直接用于下步反应。

步骤5：1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由5-氟-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.86(1H，s)，8.50(1H，d，J＝5.6Hz)，8.24-8.21(1H，m)，7.81(1H，d，J＝5.6Hz)，7.42(1H，s)，6.86-6.81(1H，m)，6.76(1H，dd，J＝2.8Hz，8.0Hz)，6.69(1H，s)，3.98(3H，s)，3.44(3H，s)，3.29(2H，t，J＝7.2Hz)，2.89(3H，s)，2.57(2H，t，J＝7.2Hz)，2.27(6H，s)。

步骤6：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氦基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.26(1H，s)，9.78(1H，s)，8.74(1H，s)，8.43(1H，d，J＝6.0Hz)，8.17(2H，s)，7.70(1H，d，J＝6.0Hz)，7.22(1H，dd，J＝2.4Hz，8.8Hz)，7.06-6.99(1H，m)，6.97(1H，s)，6.79-6.75(1H，m)，6.21(1H，dd，J＝2.0Hz，16.8Hz)，5.71-5.68(1H，m)，3.80(3H，s)，3.63-3.57(2H，m)，3.34(3H，s)，3.16-3.09(2H，m)，2.75(6H，s)，2.63(3H，s)。

实施例11 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-(4-(5-氟-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：5-氟-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由1-(2-氨嘧啶-4-基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.68(1H，s)，9.24(1H，s)，8.64(1H，d，J＝8.0Hz)，8.51(1H，d，J＝6.0Hz)，8.23(1H，br)，7.83(1H，d，J＝6.0Hz)，7.48(2H，d，J＝8.0Hz)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz)，7.12(2H，d，J＝8.0Hz)，6.94-6.91(1H，m)，6.80-6.75(1H，m)，3.98(3H，s)，2.29(3H，s)。

步骤2：1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由5-氟-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.83(1H，s)，8.47(1H，d，J＝5.6Hz)，8.26(1H，s)，8.23-8.17(1H，m)，7.77-7.68(2H，m)，6.99-6.94(2H，m)，6.77-6.72(1H，m)，3.99(3H，s)，3.63(2H，m)，3.19-3.15(2H，m)，2.88(3H，s)，2.66(6H，s)。

步骤3：N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-5-(4-(5-氟-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CD₃OD)：δ8.45(1H，dd，J＝2.4Hz，5.6Hz)，8.17-8.12(1H，m)，7.73-7.69(2H，m)，7.22(1H，d，J＝8.0Hz)，6.95(1H，d，J＝3.6Hz)，6.88-6.83(1H，m)，6.77-6.71(1H，m)，6.44-6.42(1H，m)，5.84-5.81(1H，m)，3.97(3H，s)，3.49-3.46(2H，m)，3.23(2H，m)，2.84(6H，s)，2.71(3H，s)。

实施例12 N-(4-甲氧基-2-(甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：叔丁基2-((5-甲氧基-4-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2硝基苯基)(甲基)氨基)乙基(甲基)氨基甲酸酯

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮对甲苯磺酸盐和2-(甲基氨基)乙基氨基甲酸叔丁酯合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.94(1H，s)，8.51(1H，d，J＝5.6Hz)，8.26(1H，d，J＝7.2Hz)，7.80(1H，d，J＝5.6Hz)，7.48(1H，s)，7.24-7.22(1H，m)，7.17-7.15(1H，m)，7.03(1H，d，J＝7.2Hz)，6.76(1H，s)，4.01(3H，s)，3.47-3.37(5H，m)，3.31-3.23(2H，m)，2.91(3H，s)，2.83(3H，s)，1.44(9H，s)。

步骤2：叔丁基2-((2-丙烯酰胺-5-甲氧基-4-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)(甲基)氨基)乙基(甲基)氨基甲酸酯

以类似于实施例1步骤6，7中所描述的方法由叔丁基2-((5-甲氧基-4-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2硝基苯基)(甲基)氨基)乙基(甲基)氨基甲酸酯合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ9.37(1H，br)，8.67(1H，br)，8.54(1H，d，J＝5.6Hz)，8.34(1H，d，J＝7.6Hz)，7.79(1H，d，J＝5.6Hz)，7.43(1H，s)，7.19-7.15(1H，m)，7.08-7.04(1H，m)，6.98(1H，d，J＝7.6Hz)，6.79(1H，s)，6.35(2H，d，J＝2.4Hz)，5.69-5.72(1H，m)，3.89(3H，s)，3.45(3H，s)，3.40-3.37(2H，m)，3.00-2.85(2H，m)，2.85(3H，s)，2.70(3H，s)，1.47(9H，s)。

步骤3：N-(4-甲氧基-2-(甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺盐酸盐

将乙酰氯(0.3mL，1.7mmol)缓慢滴加到外置冰水浴冷却的无水甲醇(3mL)中，继续搅拌1小时。将叔丁基2-((2-丙烯酰胺-5-甲氧基-4-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)(甲基)氨基)乙基(甲基)氨基甲酸酯(100mg，0.166mmol)分散于无水甲醇(2mL)中，然后加入到前述氯化氢甲醇溶液中。体系自然升至室温并搅拌过夜，真空浓缩去除溶剂，硅胶柱层析(DCM∶MeOH＝20∶1)得标题所示化合物(78mg，93％)。

¹H NMR(CD₃OD)：δ8.45(1H，d，J＝5.6Hz)，8.19(2H，d，J＝6.0Hz)，7.77(1H，d，J＝5.6Hz)，7.21-7.16(2H，m)，7.09-7.05(1H，m)，6.95(1H，s)，6.50-6.36(2H，m)，5.80(1H，dd，J＝2.0Hz，6.0Hz)，3.96(3H，s)，3.45(3H，s)，3.35(4H，br)，2.73(3H，s)，2.72(3H，s)。

实施例13 N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)丙烯酰胺

将实施例1步骤6所得1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(82g)加入THF(800mL)和水(80mL)中，搅拌溶解，滴加3-氯丙酰氯(24.8g)。TLC显示原料消失后，加入三乙胺(358.2g)，升温至65℃反应。反应结束后，将反应液浓缩至干，加入1L二氯甲烷溶解，水(500mL)分液两次，收集有机相浓缩得到88g粗品。所得粗品经柱层析(DCM∶MeOH＝20∶1)分离得标题所示化合物62.5g。

ESI-MS[M+H]⁺：517.2677。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.05(1H，s)，8.67(1H，s)，8.5(1H，s)，8.44(1H，d，J＝5.6Hz)，8.12(1H，d，J＝7.6Hz)，7.13(2H，m)，6.9(1H，t，J＝6.4Hz)，7.7(1H，d，J＝5.6Hz)，7.05(1H，s)，6.4(1H，dd，J＝10.15Hz，16.9Hz)，6.21(1H，dd，J＝1.6Hz，16.9Hz)，5.72(1H，brd，J＝11.50Hz)，3.77(3H，s)，3.35(3H，s)，2.91(2H，t，J＝5.65Hz)，2.75(3H，s)，2.34(2H，t，J＝5.7Hz)，2.21(6H，s)。

实施例14 N-(5-(4-(5-氯-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：4-氯-N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由2，4-二氯嘧啶和4-氯-1，2-苯二胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ9.14(1H，s)，8.05(1H，d，J＝6.0Hz)，7.06(1H，d，J＝8.4Hz)，6.80(1H，s)，6.56(1H，dd，J＝2.8Hz，8.0Hz)，6.35(1H，s)，5.32(2H，br s)。

步骤2：5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤2中所描述的方法由4-氯-N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺和N，N′-羰基二咪唑合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.79(1H，br s)，8.79(1H，d，J＝5.6Hz)，8.39(1H，d，J＝6.0Hz)，8.21(1H，d，J＝8.8Hz)，7.23(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，7.12(1H，s)。

步骤3：5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤3中所描述的方法由5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.78(1H，d，J＝5.6Hz)，8.38(1H，d，J＝5.6Hz)，8.19(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，s)，7.23(1H，d，J＝8.8Hz)，3.36(3H，s)。

步骤4：5-氯-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：9.23(1H，s)，8.61(1H，d，J＝8.0Hz)，8.54(1H，d，J＝5.6Hz)，8.22(1H，d，J＝8.0Hz)，7.82(1H，d，J＝5.6Hz)，7.44-7.41(2H，m)，7.02(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，3.97(3H，s)，3.37(3H，s)。

步骤5：5-氯-1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由5-氯-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.84(1H，s)，8.49(1H，d，J＝5.6Hz)，8.19(1H，d，J＝8.4Hz)，7.79(1H，d，J＝5.6Hz)，7.42(1H，s)，7.09(1H，dd，J＝2.4Hz，8.8Hz)，7.00(1H，s)，6.69(1H，s)，3.98(3H，s)，3.43(3H，s)3.29(2H，t，J＝7.2Hz)，2.89(3H，s)，2.56(2H，t，J＝7.2Hz)，2.27(6H，s)。

步骤6：1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将5-氯-1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1.00g)和锌粉(1.24g，18.97mmol)分散于二氯甲烷/甲醇(15mL/15mL)的混合溶液中，室温下滴加20mL饱和氯化铵溶液，搅拌十分钟后过滤，滤液中加入水(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL*3)。所得有机相用饱和食盐水洗，真空浓缩去除溶剂得到标题所示化合物，直接用于下步反应。

步骤7：N-(5-(4-(5-氯-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤7中所描述的方法由1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.42(1H，br s)，9.82(1H，s)，8.78(1H，s)，8.44(1H，d，J＝5.6Hz)，8.18(1H，s)，8.13(1H，s)，7.66(1H，d，J＝5.6Hz)，7.38(1H，d，J＝2.4Hz)，7.13-7.06(1H，m)，6.99-6.96(2H，m)，6.20(1H，dd，J＝2.0Hz，16.8Hz)，5.69(1H，dd，J＝2.0Hz，10.0Hz)，3.80(3H，s)，3.36-3.30(7H，m)，2.75(6H，s)，2.63(3H，s)。

实施例15 N-(5-(4-(5-溴-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

步骤1：4-溴-N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺

以类似于实施例1步骤1中所描述的方法由2，4-二氯嘧啶和4-溴-1，2-苯二胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ9.13(1H，s)，8.05(1H，d，J＝6.0Hz)，7.01(1H，d，J＝8.8Hz)，6.94(1H，d，J＝2.4Hz)，6.69(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，6.38(1H，s)，5.31(2H，br s)。

步骤2：5-溴-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤2中所描述的方法由4-溴-N¹-(2-氯嘧啶-4-基)苯-1，2-二胺和N，N′-羰基二咪唑合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.81(1H，br s)，8.79(1H，d，J＝5.6Hz)，8.40(1H，d，J＝5.6Hz)，8.17(1H，d，J＝8.8Hz)，7.37(1H，dd，J＝2.0Hz，8.8Hz)，7.26(1H，d，J＝2.0Hz)。

步骤3：5-溴-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤3中所描述的方法由5-溴-1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ8.81(1H，d，J＝6.0Hz)，8.42(1H，d，J＝8.0Hz)，8.19(1H，d，J＝8.4Hz)，7.60(1H，d，J＝2.0Hz)，7.41(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，3.40(3H，s)。

步骤4：5-溴-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤4中所描述的方法由5-溴-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：9.22(1H，s)，8.61(1H，d，J＝8.4Hz)，8.54(1H，d，J＝5.6Hz)，8.17(1H，d，J＝8.0Hz)，7.82(1H，d，J＝5.6Hz)，7.53(1H，d，J＝2.0Hz)，7.43(1H，d，J＝13.2Hz)，7.44-7.41(2H，m)，7.14(1H，dd，J＝2.0Hz，13.2Hz)，3.97(3H，s)，3.37(3H，s)。

步骤5：5-溴-1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

以类似于实施例1步骤5中所描述的方法由5-溴-1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.85(1H，s)，8.50(1H，d，J＝5.6Hz)，8.15(1H，d，J＝8.4Hz)，7.79(1H，d，J＝6.0Hz)，7.42(1H，s)，7.24(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，7.15(1H，d，J＝2.0Hz)，6.69(1H，s)，3.98(3H，s)，3.44(3H，s)3.30(2H，t，J＝6.8Hz)，2.90(3H，s)，2.58(2H，t，J＝7.2Hz)，2.28(6H，s)。

步骤6：1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-溴-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮

将5-溴-1-(2-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基-5-硝基苯基氨基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1.00g)和锌粉(1.24g，18.97mmol)分散于二氯甲烷/甲醇(15mL/15mL)的混合溶液中，室温下滴加20mL饱和氯化铵溶液，搅拌十分钟后过滤，滤液中加入水(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL*3)。所得有机相用饱和食盐水洗，真空浓缩去除溶剂得到标题所示化合物，直接用于下步反应。

步骤7：N-(5-(4-(5-溴-3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺盐酸盐

以类似于实施例1步骤7中所描述的方法由1-(2-(5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基氨基)嘧啶-4-基)-5-溴-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮合成标题所示化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.23(1H，br s)，9.82(1H，br s)，8.75(1H，s)，8.44(1H，d，J＝5.2Hz)，8.20(1H，s)，8.05(1H，s)，7.65(1H，d，J＝5.2Hz)，7.49(1H，d，J＝2.0Hz)，7.08(1H，d，J＝8.4Hz)，7.00-6.96(2H，m)，6.21(1H，dd，J＝2.0Hz，17.2Hz)，5.71(1H，dd，J＝1.6Hz，10.4Hz)，3.80(3H，s)，3.36(3H，s)，3.29-3.24(2H，m)，3.16(3H，s)，2.76-3.68(2H，m)，2.65(6H，s)。

体外活性试验

1.体外酶学检测方法

EGFR，EGFR(T790M，L858R)激酶通过昆虫表达系统表达纯化得到或购买市售产品得到。

采取Cisbio公司的匀相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了EGFR，EGFR(T790M，L858R)的激酶活性检测平台，进行化合物活性的测定。将化合物从1μM开始用100％DMSO进行10倍梯度稀释，每个浓度取4μl加入到96μl的反应缓冲液中(50mM HEPES(pH 7.0)，0.02％NaN₃，0.01％BSA，0.1mM Orthovanadate，5mM MgCl₂，50nM SEB，1mM DTT)，取2.5μl加入到384孔板(OptiPlate-384，PerkinElmer)，然后加入2.5μl的激酶，离心混匀，再加入5μl的ATP和TK Substrate-biotin启动反应。将384孔板放于孵育箱中23℃反应一定时间后，加入5μl的Eu³⁺-Cryptate标记的TK-Antibody，5μl的streptavidin-XL665终止反应。在孵育箱中孵育1小时后，在Envision(PerkinElmer)上读取荧光值。化合物的IC₅₀值使用GraphPadPrism 5.0软件计算得到。

2.细胞增殖试验

人非小细胞肺癌NCI-H1975在细胞培养箱(37℃，5％CO₂)中用RPMI-1640培养基(加入10％胎牛血清和1％青链霉素)进行培养。按照每孔2000个细胞(体积：195ul)接种96孔板培养过夜。第二天加入化合物，化合物从10mM进行3倍梯度稀释，每个浓度取4μl加入到96μl的培养基中，然后取5μl加入到细胞培养液中(DMSO终浓度为0.1％，v/v)，处理72小时后，吸去培养基并加入30μl(Promega)试剂，在Envison(Perkin Elmer)上读取荧光信号，使用GraphPad Prism 5.0计算化合物对细胞增殖抑制的IC₅₀值。

人皮肤鳞癌细胞系A431在细胞培养箱(37℃，5％CO₂)中用DMEM加10％胎牛血清和1％的青链霉素进行培养。在化合物的检测中，底层基质浓度为0.6％，细胞用0.3％的低熔点琼脂重选后，2000个细胞每孔(100μl)铺于96孔板中。化合物从10mM进行3倍梯度稀释，每个浓度取2μl加入到98μl的培养基中，然后取5.3μl加入到细胞培养液中(DMSO终浓度为0.1％，v/v)，处理一周(7天)后，加入20μl(Promega)试剂，37℃孵育4个小时，在Envison(Perkin Elmer)上读取荧光信号，使用GraphPad Prism 5.0计算化合物对细胞增殖抑制的IC₅₀值。

表1：生物活性列表

NT：未测试；AZD9291根据WO2013014448实施例28制得。

从上述实验结果可知，酶活性方面，本申请化合物针对EGFR，尤其是EGFR-L858R/T790M双突变型具有良好的抑制效果，并且WT/DM数据显示出本申请化合物具有良好的选择性。细胞活性方面，本申请化合物在人非小细胞肺癌NCI-H1975和人皮肤鳞癌细胞系A431的实验结果显示出良好的抑制效果。

药代动力学评价

受试化合物使用健康成年雄性大鼠，单剂量灌胃给药，辅剂为20％的磺丁基醚-β-环糊精，剂量为10mg/kg。灌胃给药的动物在实验前禁食过夜，禁食时间从给药前10小时至给药后4小时，在灌胃给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小时采血。通过眼眶静脉丛采集约0.3mL全血，放于肝素抗凝管中，样品于4℃、4000rpm离心5min，血浆转移至离心管中，并放于-80℃保存直到分析。血浆样品中受试品浓度分析使用非确证的液相色谱-串联质谱联用方法(LC-MS/MS)。个体动物的血浆浓度-时间数据用WinNonlin(专业版，版本6.3；Pharsight公司)软件进行分析。非房室模型被用于浓度分析。计算受试化合物的药代动力学参数。

表2.

Claims

1.下式表示的化合物的盐酸盐：

2.药物组合物，其包含权利要求1所述化合物的盐酸盐以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

3.权利要求2所述的药物组合物，其进一步含有一种或多种额外的治疗剂。

4.权利要求1所述化合物的盐酸盐、或者权利要求2或3所述的药物组合物在制备治疗EGFR介导的疾病的药物中的用途。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述EGFR介导的疾病选自EGFR-L858R激活突变、EGFR-T790M激活突变或者EGFR-L858R合并EGFR-T790M双突变激活介导的疾病。

6.根据权利要求4所述的用途，其中所述EGFR介导的疾病包括癌症。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述癌症选自肺癌。

8.根据权利要求7所述的用途，其中所述肺癌包括非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌或肺鳞癌。