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CN107406420B - 取代的三唑及与其相关的方法 - Google Patents

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Abstract

公开了可用于治疗各种神经障碍的取代的1,2,3‑三唑化合物。本文提供的所述化合物具有以下通用结构：
Figure DDA0001412868620000011
其中R1、R2、R3和n如本文所定义，包括所述化合物的立体异构体、酯、溶剂化物和药物可接受的盐。还公开了含有与药物可接受的载体组合的本文提供的化合物的组合物，以及与所述组合物在有需要的对象中用于治疗神经障碍的用途有关的方法。

Description

取代的三唑及与其相关的方法
发明背景
技术领域
本公开通常总体上涉及取代的1,2,3-三唑化合物、在其制备中所用的方法和中间体、含有所述1,2,3-三唑化合物的组合物以及通过将此类化合物施用于有需要的温血动物来治疗神经障碍的方法。
相关技术的描述
特发性震颤(ET)是越发常见的震颤病症之一以及越发常见的神经疾病之一。尽管疾病通常被称为是“良性的”，但是这种姿势性震颤和/或动作性震颤经常对诸如书写、倾诉和进食的日常工作造成困难。ET的患病率与癫痫的患病率相当并且高于帕金森病和阿尔茨海默病的患病率。ET的发病率随着年龄增加而升高，并且ET的家族史似乎与年轻化疾病发作有关。由于效果可变、发生副作用以及对疾病的病理生理学缺少理解，因此这种病症的药物治疗受到限制。
ET具有可变的临床表现，其特征在于具有4Hz至12Hz的频率范围的姿势性震颤和/或运动性震颤。震颤频率通常随时间降低，但振幅增加。约90％患者在其上肢患有震颤，30％患有头部震颤，20％患有声音震颤，10％患有面部震颤或颌部震颤以及10％患有下肢震颤。另外，最近的研究表明，与正常对照相比，在ET患者中，轻度认知变化、抑郁、焦虑、社交恐惧症以及嗅觉和听觉缺陷的比率较高(参见，例如，Zesiewicz等人，NeuropsychiatricDisease and Treatment,2010:6,401-408)。
ET处理中的最早的抗震颤源试剂为乙醇。虽然显示出了一些有益效果，但是由于在长期使用乙醇的情况下存在成瘾问题和严重的缺陷，因此这种治疗是不实用的(参见，例如，Iseri等人，Neuropharmacology,2011,61:715-723)。
尽管已经测试了许多药物，但是ET的药理学治疗不是最佳的。两种药物被认为是一线治疗：普萘洛尔(propranolol)，一种非选择性β阻滞剂，其是唯一被FDA批准用于ET的试剂；以及普里米酮(primidone)，一种抗癫痫药。除了对于普萘洛尔而言包括支气管狭窄、心动过缓、低血压、抑郁和疲劳的副作用以及对于普里米酮而言包括镇静、头晕、疲劳、恶心和抑郁的副作用以外(参见，例如，Abboud等人，Cleveland Clinic Journal of Medicine,2011 78:12:821-828)，两种药物既不使震颤水平降低至无症状水平，也不会在超过约一半患有疾病的患者中有效果。
除了上文所述的用于ET的一线治疗以外，在过去的十年内，已经研究了若干其他治疗，其中大多数是改用于ET的较早药物，所述药物例如抗癫痫剂、加巴喷丁、托吡酯、唑尼沙胺、左乙拉西坦(levitiracetam)、苯巴比妥、普瑞巴林和拉科酰胺；钙拮抗剂氟桂利嗪和尼卡地平(nicarpine)；诸如阿普唑仑的苯并二氮卓类；抗抑郁剂米氮平；以及诸如羟丁酸钠、T-2000和1-辛醇的试剂。另外的肉毒杆菌毒素注射液已经成为若干小型研究的对象，并且可以用于顽固性头部震颤和声音震颤(参见，例如，Shill,Clinical Medicine:Therapeutics(2009)1:613-620,Sadeghi等人，Drugs 2010；70(17):2215-2228)。
手术程序也可以对严重且难治的ET提供治疗。丘脑腹中间的深度脑刺激涉及植入电极和脉冲发生器的手术。丘脑切开术是在丘脑的腹中间核产生损伤的立体定位程序。副作用和不良事件使这种手术限于对药物疗法无响应的患者(参见，例如，Zesiewicz等人，Neuropsychiatric Disease and Treatment,(2010)6:401-408)。
癫痫为以周期性和不可预知的痉挛为特征的脑部病症。人类患者中的癫痫性发作的行为表现从手足的轻度颤搐至意识丧失和不可控制的惊厥。高达1％的人群受到折磨，使得癫痫成为最常见的神经性问题之一并且对社会造成相当大的经济负担。尽管我们对痉挛和癫痫的病理生理学和药物治疗的了解取得相当大的进步，但是人类癫痫的细胞基础依然是个谜。在缺少病因学理解的情况下，药物治疗的方法涉及症状的控制；即，抑制痉挛。更关心的是目前抗癫痫药不能中断病症的潜在自然进展。
多年以来，在新型抗癫痫药(AED)连同新的改进制剂的发展中取得了相当大的成功。这些包括较早的“第一代”药物以及较新的“第二代”药物，所述“第一代”药物例如卡马西平、苯巴比妥、丙戊酸，所述“第二代”药物例如拉莫三嗪、氨己烯酸、噻加宾、托吡酯、加巴喷丁和左乙拉西坦(参见，例如，Brazil等人，Ann.Rev.Med.,1998,49:135-162；McCabe PH.,Expert Opinion.Pharmacother.,2000,1:633-674]。用于治疗的抗癫痫药的选择依据其对特定类型的痉挛的功效、耐受性和安全性(参见，例如，Regesta等人，Epilepsy Res.,1999,34:109-122；Kwan等人，Engl.J.Med.,2000,342:314-319)。
癫痫持续状态(SE)是威胁生命的病况，其特征在于延长的持续惊厥状态，导致显著的发病率和死亡率。SE被定义为持续30分钟或更长时间而未恢复意识的痉挛活动。治疗应立即开始，因为延长的SE可以导致死亡、进行性脑损伤或者发展成难以治疗的难治性SE。在美国每年有多达200,000人受到影响，并且多达55,000人死亡。SE的起因包括急性健康问题和慢性过程，所述急性健康问题例如中风、代谢障碍、感染、头部创伤和药物相互作用，所述慢性过程例如已有的癫痫、药物治疗的中止和中枢神经系统肿瘤(参见，例如，Deshpande等人，Front Neurol(2014,5:11)。
SE被归类为惊厥或非惊厥，其中两者均需要迅速治疗以防止死亡和脑损伤。SE的病理生理学的理解尚不清楚。在患者经医疗稳定后，一线治疗涉及静脉内或肌内施用苯并二氮卓，例如咪达唑仑、地西泮或劳拉西泮。二线治疗涉及额外施用苯妥英、磷苯妥英、苯巴比妥或丙戊酸。约40％的SE病例不能由这种治疗解决并且被称为是难治的。难治性SE通常用诸如丙泊酚或苯巴比妥的麻醉药进行治疗(参见，例如，Reddy等人，Int.J.Mol.Sci.2013,14:18284-318)。
神经毒剂抑制乙酰胆碱酯酶，导致在神经系统中乙酰胆碱水平升高。随后在受影响的个体中的心肺抑制和癫痫持续状态可以导致死亡或脑损伤(参见，例如，Apland等人，JPharmacol Exp Ther 2013,344:133-40)。
尽管在本领域已经取得了显著进步，但是仍然需要在神经障碍和神经疾病(尤其是特发性震颤、癫痫、癫痫持续状态和/或神经毒剂暴露)的治疗中的有效的小分子。这些小分子可以减少当前药物治疗的一些副作用和局限性，例如难治性患者的治疗，减少的镇静作用，认知和行为影响，药物/药物互相作用以及致畸性/基因毒性问题。本公开实现了这些需求并且提供了其他相关优势。
发明概述
简而言之，本发明通常涉及1,2,3-三唑类似物以及其制备和使用方法，并且涉及含有此类化合物的药物组合物。更具体地，本文所述的1,2,3-三唑类似物为具有以下结构(A)的化合物：
Figure GDA0002361142230000041
包括其立体异构体、酯、溶剂化物和药物可接受的盐，其中R1、R2、R3和n如本文所定义。
在另一实施方案中，提供了药物组合物，其包含与药物可接受的载体和/或稀释剂组合的上文和本文所述的化合物中的任何一种化合物。
在另一实施方案中，提供了通过向有需要的对象施用上文和本文所述的化合物(或者包含所述化合物的药物组合物)，用于治疗该对象的病况的方法，其中所述病况为特发性震颤、癫痫、癫痫持续状态和/或神经毒剂暴露。
在另一实施方案中，提供了通过向有需要的对象施用上文和本文所述的化合物(或者包含所述化合物的药物组合物)，用于治疗该对象的神经病况或神经障碍的方法。
参考以下详细描述，本发明的这些以及其他方面将是显而易见的。为此，本文列出了各种参考文献，其更详细地描述了某些背景信息、程序、化合物和/或组合物，并且每一篇参考文献通过引用整体并入本文。
发明详述
在以下描述中，阐明了某些具体细节，以便提供对各种实施方案的全面理解。然而，本领域技术人员将理解，本发明的化合物可以在没有这些细节的情况下制备和使用。在其他情况下，未详细示出或描述众所周知的结构，以避免不必要地使实施方案的描述变得模糊。除非上下文另外要求，否则在说明书和权利要求书全文中，词语“包含/包括(comprise)”及其变体例如“包含/包括(comprises)”和“包含/包括(comprising)”被解释为开放式的、包容性的含义，即，解释为“包括，但不限于”。此外，术语“包含/包括(comprising)”(以及相关术语例如“包含/包括(comprise)”或“包含/包括(comprises)”或“具有(having)”或“包括/包含(including)”)并不旨在排除在其他某些实施方案中，例如，本文所述的物质的任何组成、组合物、方法或过程等的实施方案可以由所述特征“组成”或“基本上组成”。本文所提供的标题仅为了方便起见，而不是解释所要求保护的实施方案的范围和含义。
在说明书全文中提及的“一个实施方案”或者“实施方案”，意指结合该实施方案所述的特定的特征、结构或特性被包括在至少一个实施方案中。因此，在说明书全文的不同地方出现的短语“在一个实施方案中”或者“在实施方案中”不必全部指相同的实施方案。此外，特定的特征、结构或特性可以以任何适合的方式组合在一个或者多个实施方案中。
此外，如在本说明书和所附权利要求中所用，单数形式“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“所述”包括复数指示物，除非上下文另外明确规定。因此，例如，提及的“非人类动物”可以是指一种或多种非人类动物或者多个此类动物，并且提及的“细胞”或“所述细胞”包括提及的一个或多个细胞以及本领域技术人员已知的其等同物(例如，多种细胞)等。当描述或者要求保护方法的步骤，并且所述步骤被描述为以特定顺序发生时，如果将第一步骤在第二步骤“之前”(即，以前)发生(或者进行)的描述改写为第二步骤“随后于”第一步骤发生(或者进行)的陈述，那么它们具有相同的含义。当提及数字或数值范围时，术语“约”意指提及的数字或数值范围为实验变化性内(或者在统计实验误差内)的近似值，因此，数字或数值范围可以在所述数字或数值范围的1％至15％变化。还应当注意的是，术语“或”通常以其包括“和/或”的含义使用，除非上下文另外明确规定。例如，当提及至少一种化合物或至少一种组合物时，术语“至少一种”具有与术语“一种或者多种”相同的含义和理解。
本文未明确定义的术语应具有由本领域技术人员根据本公开内容和上下文对其所给出的定义。然而，如说明书中所用，除非作出相反说明，否则术语具有所指定的含义。
本文描述了用于治疗神经疾病和/或神经障碍的化合物，所述化合物具有以下结构(A)：
Figure GDA0002361142230000061
或其立体异构体、酯、溶剂化物或药物可接受的盐，
其中：
R1为H或C1-4烷基；
R2为C1-4烷基、-C(＝O)OR4、-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH2、-C(＝O)NR5R5或-C(＝O)R6，其中所述C1-6亚烷基被选自-NH-C(＝NH)NH2、-CO2H、-CO2CH3、-SH、-C(＝O)NH2、-NH2、-SCH3、苯基、-OH、-OC1-4烷基、4-羟基-苯基、环己基、咪唑基和吲哚基的基团任选取代；
或者R1和R2与和它们所连接的N一起形成5元至6元非芳香族杂环，其中所述5元至6元非芳香族杂环可以被0至3个R4取代；
R3每次出现时独立地为Cl、F、C1-4烷基、-OC1-4烷基或三氟甲基；
R4每次出现时独立地为C1-4烷基；
R5每次出现时独立地为H或C1-4烷基；
R6为C1-4烷基、5元至6元非芳香族杂环或5元至6元杂环C1-4烷基，其中5元至6元杂环C1-4烷基被OH、Cl、F、C1-4烷基、-OC1-4烷基或三氟甲基任选取代；以及
n为0至3。
在结构(A)的一个实施方案中，R1为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R1为甲基。
在结构(A)的一个实施方案中，R1为乙基。
在结构(A)的一个实施方案中，R1为H。
在结构(A)的一个实施方案中，R1和R2均为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R2为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R2为-C(＝O)OR4。
在结构(A)的一个实施方案中，R2为-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH2。在更具体的实施方案中，C1-6亚烷基被选自-NH-C(＝NH)NH2、-CO2H、-CO2CH3、-SH、-C(＝O)NH2、-NH2、-SCH3、苯基、-OH、-OC1-4烷基、4-羟基-苯基、环己基、咪唑基和吲哚基的基团任选取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-NH-C(＝NH)NH2取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-CO2H取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-CO2CH3取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-SH取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-C(＝O)NH2取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-NH2取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-SCH3取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被苯基取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-OH取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被-OC1-4烷基取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被4-羟基-苯基取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被环己基取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被咪唑基取代。在某些实施方案中，C1-6亚烷基被吲哚基取代。
在结构(A)的一个实施方案中，R2为-C(＝O)NR5R5。
在结构(A)的一个实施方案中，R2为-C(＝O)R6。
在结构(A)的一个实施方案中，R3为Cl。
在结构(A)的一个实施方案中，R3为F。
在结构(A)的一个实施方案中，R3为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R3为-OC1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R3为三氟甲基。
在结构(A)的一个实施方案中，R4为甲基。
在结构(A)的一个实施方案中，R4为乙基。
在结构(A)的一个实施方案中，R5为H。
在结构(A)的一个实施方案中，R5为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R6为C1-4烷基。
在结构(A)的一个实施方案中，R6为5元至6元非芳香族杂环。
在结构(A)的一个实施方案中，R6为5元至6元杂环C1-4烷基，其中5元至6元杂环C1-4烷基被OH、Cl、F、C1-4烷基、-OC1-4烷基或三氟甲基任选取代。在更具体的实施方案中，5元至6元杂环C1-4烷基被OH取代。在特定的实施方案中，5元至6元杂环C1-4烷基被Cl、F或三氟甲基取代。在特定的实施方案中，5元至6元杂环C1-4烷基被C1-4烷基或-OC1-4烷基取代。
在结构(A)的一个实施方案中，n＝1。
在结构(A)的一个实施方案中，n＝2。
在结构(A)的一个实施方案中，n＝3。
在结构(A)的一个实施方案中，R1和R2与和它们所连接的N一起形成5元至6元非芳香族杂环，其中所述5元至6元非芳香族杂环可以被0至3个R4取代，如结构(B)所示：
Figure GDA0002361142230000081
或其立体异构体、酯、溶剂化物和药物可接受的盐；其中R3和R4以及n如上文对于结构(A)所定义。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环还包含至少一个选自N、S和O的其他杂原子，或者还包含至少一个选自N和O的其他杂原子。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为F或Cl。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为F。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为Cl。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为C1-4烷基。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为-OC1-4烷基。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R3为三氟甲基。
在结构(B)的一个实施方案中，n为2。
在结构(B)的一个实施方案中，n为2并且R3每次出现时为F。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R4为甲基。
在结构(B)的一个实施方案中，n为1并且R4为乙基。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环(即，R1和R2一起)为哌嗪。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环(即，R1和R2一起)为吗啉。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环(即，R1和R2一起)为哌嗪(piperizine)。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环(即，R1和R2一起)为噁唑烷。
在结构(B)的一个实施方案中，5元至6元非芳香族杂环(即，R1和R2一起)为吡咯烷。
在某些具体的实施方案中，化合物选自以下化合物之一，包括它们的药物可接受的盐：
(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺；
(3S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺；
(3R)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-甲氧基丙酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺；
N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-3-基-丙酰胺；
3-(3-氯苯基)-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}丙酰胺；
(2S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-2-(2-氧代吡咯烷-1-基)丁酰胺；
[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺；
[1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺；
4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-4-(吡咯烷-1-基)-1H-1,2,3-三唑；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-乙基-1H-1,2,3-三唑-4-胺；
2-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基)乙-1-醇；
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吡咯烷-2-酮；
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1,3-噁唑烷-2-酮；或者
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}咪唑烷-2-酮。
本文所示的某些化学结构，特别是在实施例部分的范围中，可以不描述所有氢原子。例如，“-NH2”(即，胺基团)可以描述为“-N”(即，缺少两个氢原子)，二价的胺(“-NH-”)可以描述为-“N”-(即，缺少一个氢原子)，并且醇(“-OH”)可以描述为“-O”(即，缺少一个氢原子)。这些和其他的简化符号是本领域技术人员很好理解的。
此外，由表明在所示化学基团中找到的碳原子总数的简化符号在前面标示本文中命名的某些化学基团。例如，C1-C4烷基描述如下文所定义的具有总共1个至4个碳原子的烷基基团，并且C4-C12环烷基烷基描述如下文所定义的具有总共4个至12个碳原子的环烷基烷基基团。简化符号中的总碳数不包括可能存在于所述基团的取代基中的碳。
如说明书和所附权利要求中所用，除非作出相反说明，否则以下术语具有所指定的含义。
“C1-C6烷基”是指如下文定义的含有一个至六个碳原子的烷基基团。C1-C6烷基基团可以如下文对于烷基基团所定义进行任选取代。“C1-C4烷基”是指如下文定义的含有一个至四个碳原子的烷基基团。C1-C4烷基基团可以如下文对于烷基基团所定义进行任选取代。“烷基”是指仅由碳原子和氢原子组成的不含有不饱和键的直链或支链的烃链基团，其具有一个至十二个碳原子、一个至八个碳原子或一个至六个碳原子或者一个至四个碳原子，并且其通过单键与分子的其余部分连接，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、正己基等。饱和的支链烷基包括异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、异戊基、3-甲基己基、2-甲基己基等。代表性的饱和的环状烃基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、-CH2-环丙基、-CH2-环丁基、-CH2-环戊基、-CH2-环己基等。
“烯基”是指仅由碳原子和氢原子组成的含有至少一个双键的直链或支链的烃链基团，其具有两个至十二个碳原子，优选地具有两个至八个碳原子，并且其通过单键与分子的其余部分连接。代表性直链和支链的烯基包括乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基等；而代表性直链和支链的炔基包括乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基等。
不饱和的环状烃基包括环戊烯基和环己烯基等。环状烃基(也被称为“同素环”)包括二同素环和多同素环，例如十氢化萘和金刚烷基。不饱和的烃基含有至少一个在相邻碳原子之间的双键或叁键(分别被称为“烯基”或“炔基”)。
“C1-6亚烷基”意指从相同碳原子或不同碳原子上去掉两个氢原子的二价C1-6烷基，例如-CH2-、-CH2CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2CH2-、-CH(CH3)CH2CH2-、-CHCH(CH3)2-、-CH2C(CH3)2CH2-等。
“杂芳基”意指5元至10元并且具有至少一个选自氮、氧和硫的杂原子的芳香族杂环，并且其中氮杂原子和硫杂原子可以被任选氧化，并且包含至少1个碳原子，包括单环和二环系统。代表性杂芳基包括(但不限于)呋喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、苯并噁唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、噌啉基、酞嗪基和喹唑啉基。
“杂环”(在本文也被称为“杂环(heterocycle ring)”)意指5元至7元单环杂环或7元至14元多环杂环，其是饱和的(非芳香族的)、不饱和的或芳香族的，并且其含有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子，并且其中氮杂原子和硫杂原子可以被任选氧化，并且氮杂原子可以被任选地季铵化，所述杂环包括其中上述杂环中的任何一个与苯环稠合的二环或三环(以及更多环)杂环。杂环可以经由任何杂原子或碳原子连接。杂环包括如上文定义的杂芳基。因此，除了上文所列的芳香族杂芳基以外，杂环还包括(但不限于)吗琳基、吡咯烷酮基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、乙内酰脲基、戊内酰胺基、环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、氧代吡咯烷基、咪唑烷酮(imidazolidinone)等。
除非在说明书中另外明确说明，烷基基团、烯基基团、环状烃基、C1-6亚烷基和杂环中的每一个可以被以下基团之一任选取代：烷基、烯基、卤素、卤代烯基、氰基、硝基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、氧代、三甲基甲硅烷基、-OR40、-OC(O)-R40、-N(R40)2、-C(O)R40、-C(O)OR40、-C(O)N(R40)2、-N(R40)C(O)OR42、-N(R40)C(O)R42、-N(R40)S(O)tR42(其中t为1至2)、-S(O)tOR42(其中t为1至2)、-S(O)pR42(其中p为0至2)和-S(O)tN(R40)2(其中t为1至2)，其中各个R40独立地为氢、烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基；并且各个R42为烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
“卤代烷基”意指至少一个氢原子被卤素替代的烷基基团，例如三氟甲基等。
“卤素”意指氟、氯、溴或碘，通常为氟或氯。
“羟基”意指-OH。
“烷氧基”意指通过氧桥连接的烷基部分(即，-O-烷基)并且包括诸如甲氧基和乙氧基的基团。
本文所述的化合物通常可以作为游离酸或游离碱使用。可选地，所述化合物可以以酸加成盐或碱加成盐的形式使用。可以通过本领域众所周知的方法制备本文所述的游离氨基化合物的酸加成盐，并且可以由形成无毒性盐的有机酸和无机酸形成。适合的有机酸包括马来酸、富马酸、苯甲酸、抗坏血酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、水杨酸、柠檬酸、葡萄糖酸、乳酸、扁桃酸、肉桂酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、乙醇酸、谷氨酸和苯磺酸。适合的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。碱加成盐包括与羧酸根阴离子形成的那些盐并且包括由有机阳离子和无机阳离子例如选自碱金属和碱土金属(例如，锂、钠、钾、镁、钡和钙)、以及铵离子及其取代的衍生物(例如，二苄基铵、苄基铵、2-羟基乙铵等)形成的盐。因此，式(I)的术语“药物可接受的盐”旨在涵盖任何和所有可接受的盐形式。
关于立体异构体，本文所述的化合物可以具有一个或多个手性(或非对称的)中心，并且因此可以产生对映体、非对映体以及根据绝对立体化学可以被定义为(R)-或(S)-的其他立体异构形式。当本文所述的化合物含有烯双键或其他几何不对称中心时，并且除非另外指明，否则这意味着化合物包括E和Z几何异构体(例如，顺式或反式)。同样地，除非另外说明，还旨在包括所有可能的异构体、以及其外消旋形式和光学纯的形式以及所有互变异构形式。因此，可以预期各种立体异构体及其混合物包括“对映体”，所述对映体是指其分子为彼此不可叠加的镜像的两种立体异构体。因此，化合物可以以任何异构形式出现，包括外消旋体、外消旋混合物，并且作为单独的对映体或非对映体。
“前药”意指表示可以在生理条件下或通过溶剂分解转化为本文所述的生物活性化合物的化合物。因此，术语“前药”是指药物可接受的本文所述化合物的代谢前体。当向有需要的对象施用时，前药可以是无活性的，但是在体内转化为如本文所述的活性化合物。前药通常例如通过在血液中的水解而在体内快速转化以产生本文所述的母体化合物。前药化合物通常在哺乳动物有机体中提供溶解性、组织相容性或延迟释放的优点(参见，例如，Bundgard,H.,Design of Prodrugs(1985)，第7-9页，第21-24页(Elsevier,Amsterdam)。在Higuchi,T.,等人，“Pro-drugs as Novel Delivery Systems,”A.C.S.Symposium Series,第14卷，以及在Bioreversible Carriers in Drug Design，Edward B.Roche编辑,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987中提供了前药的讨论，两者通过引用全部并入本文。
术语“前药”还意指包括任何共价键合的载体，当将此类前药向哺乳动物对象施用时，所述共价键合的载体在体内释放本文所述的活性化合物。可以通过以一定方式修饰存在于本文所述化合物中的官能团来制备本文所述化合物的前药，使得该修饰在常规操作中或在体内断裂成本文所述的母体化合物。前药包含本文所述的化合物，其中羟基、氨基或巯基基团与任何基团连接，当将化合物的前药向哺乳动物对象施用时，基团断裂分别形成游离羟基、游离氨基或游离巯基基团。前药的实例包括但不限于本文所述化合物中的羟基、羧基、巯基或氨基官能团的酯和酰胺衍生物等。
本文所述的化合物可以以完全无定形至完全结晶的固态连续体存在。此外，结构(A)或(B)的化合物的一些晶体形式可以以多晶型存在。此外，结构(A)或(B)的一些化合物还可以与水或其他有机溶剂形成溶剂化物。术语溶剂化物在本文中用于描述包含本文所述化合物和一种或多种药物可接受的溶剂分子的分子复合物。此类溶剂化物同样包括在本公开的范围内。
在某些实施方案中，所述化合物包括结构(A)或(B)的所有药物可接受的同位素标记的化合物，其中一个或者多个原子被具有相同原子序数而不同原子质量的原子所替代。实例包括对于氢而言的2H(氘)和3H(氚)，对于碳而言的11C、13C和14C，对于氯而言的36Cl，对于氟而言的18F，对于碘而言的123I和125I，对于氮而言的13N和15N以及对于硫而言的35S。
正如本领域技术人员将理解，任何前述化合物可以并入放射性同位素。因此，还考虑使用与本文所述化合物相同的同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有与通常自然界中所发现的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。可以并入这些化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于分别为2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。某些同位素标记的化合物，例如并入放射性元素(例如3H和14C)的那些化合物，还用于药物或底物组织分布测定。特别优选氚化氢(3H)和碳-14(14C)同位素，是因它们容易制备和可检测。较重的同位素(例如氘(2H))的取代可以提供某些治疗优势，产生较高的代谢稳定性，例如体内半衰期增加或者剂量需求降低，因此，在一些情况下可以是优选的。通常可以通过进行本领域中常规实践的程序来制备同位素标记的化合物。
化合物合成
可以通过已知的有机合成技术来制备本文所述的化合物，所述有机合成技术包括在实施例中更详细描述的方法。通常，可以通过以下反应方案制备上文结构(A)和(B)的化合物，其中所有取代基如上文所定义，除非另外指明。
方案1
Figure GDA0002361142230000151
可以在溶剂(例如乙腈、乙醇或DMF)中，任选地在碘化钠、碘化钾或四正丁基碘化铵存在下，在室温至溶剂沸点的温度下，式(I)的苄基卤代物(其中X为卤代物)与叠氮化钠反应，以得到式(II)的叠氮化物。式(II)的叠氮化物可以在诸如乙醇的溶剂中于室温至90℃的温度下与丙炔酸乙酯反应，以得到式(III)的的三唑。
可选地，可以用诸如氢氧化锂或氢氧化钾的碱，在诸如甲醇和H2O或者二噁烷和H2O的溶剂混合物中，于室温至溶剂混合物的沸点的温度下处理式(III)的三唑，以得到式(V)的酸。
方案2
Figure GDA0002361142230000161
式(III)的三唑可以在乙醇中于室温至80℃的温度下与水合肼反应，以得到式(VII)的酰肼。
可选地，可以用诸如氢氧化锂或氢氧化钾的碱，在诸如甲醇和H2O或二噁烷和H2O的溶剂混合物中，于室温至溶剂混合物的沸点的温度下处理式(III)的三唑，以得到式(V)的酸。
式(VII)的酰肼可以在盐酸水溶液中于0℃至室温的温度下与亚硝酸钠反应，以得到式(VIII)的叠氮化物。所得的式(VIII)的叠氮化物可以在乙醇中于85℃下反应，以得到式(IX)的化合物。
可选地，式(VIII)的叠氮化物可以在诸如四氢呋喃、二噁烷或DMF的溶剂存在下，于室温至溶剂沸点的温度下，与式HO-R4的醇反应，以得到式(XIV)的氨基甲酸酯。
通过用诸如氢氧化钠、氢氧化锂或氢氧化钾的碱，在乙醇和水中于室温至85℃的温度下处理式(IX)的化合物，产生式(X)的氨基三唑。
可以使用标准偶联条件，使用诸如HATU的偶联剂，在诸如N,N-二异丙基乙胺或三乙胺的碱存在下，在诸如二氯甲烷或DMF的溶剂中于室温下用式HOOC-R5的酸处理式(X)的氨基三唑，以得到式(XI)的化合物。其他适合的偶联条件包括在室温下在4-二甲基氨基吡啶和诸如二氯甲烷的溶剂存在下N,N’-二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺。可选地，可以在诸如三乙胺、吡啶或N,N-二异丙基乙胺的碱存在下，在诸如二氯甲烷、四氢呋喃或二噁烷的溶剂中于室温至溶剂沸点的温度下，用式ClOC-R5的酰基氯处理式(X)的氨基三唑，以得到式(XI)的化合物。
可以通过首先使式(X)的氨基三唑与诸如吡啶、三乙胺或N,N-二异丙基乙胺的碱以及三光气或光气在诸如二氯甲烷的溶剂中于0℃至室温的温度下反应，获得式(XII)的脲。随后，在室温下添加式H2N-R5的胺。
此外，可以在诸如三乙胺或N,N-二异丙基乙胺的碱存在下，于诸如叔丁醇的溶剂中在室温至90℃的温度下，式(V)的酸与二苯基磷酰基叠氮化物反应，以得到式(XIII)的异氰酸酯，在将式(XIII)的异氰酸酯用乙醇处理时可以得到化合物(IX)，或者在将式(XIII)的异氰酸酯用适合的胺处理时得到化合物(XII)。
可以通过用适当的双亲电体(例如二卤化物、二甲磺酸酯、二甲苯磺酸酯等)和适当的碱(例如DIEA或碳酸钾)的烷基化由式(X)的胺获得式(XVI)的化合物，其中R1和R2一起形成杂环。式(X)和醛可以经历还原胺化以得到其中R1＝R2的(XV)。可选地，可以经由式(XVII)的化合物与适当的醛的还原胺化而合成化合物(XV)，其中R1可以与R2相同或不同。可以通过化合物(XI)的硼氢化还原来合成式(XVII)的化合物。通常，可以根据本领域技术人员已知的有机合成技术，以市售化学品和/或化学文献中描述的化合物开始，制备本文所述的反应中使用的化合物。可以由标准商业来源获得“市售化学品”，所述标准商业来源包括Acros Organics(Pittsburgh PA)、Aldrich Chemical(Milwaukee WI，包括SigmaChemical和Fluka)、Apin Chemicals Ltd.(Milton Park UK)、Avocado Research(Lancashire U.K.)、BDH Inc.(Toronto,Canada)、Bionet(Cornwall,U.K.)、ChemserviceInc.(West Chester PA)、Crescent Chemical Co.(Hauppauge NY)、Eastman OrganicChemicals、Eastman Kodak Company(Rochester NY)、Fisher Scientific Co.(Pittsburgh PA)、Fisons Chemicals(Leicestershire UK)、Frontier Scientific(LoganUT)、ICN Biomedicals,Inc.(Costa Mesa CA)、Key Organics(Cornwall U.K.)、LancasterSynthesis(Windham NH)、Maybridge Chemical Co.Ltd.(Cornwall U.K.)、ParishChemical Co.(Orem UT)、Pfaltz&Bauer,Inc.(Waterbury CN)、Polyorganix(HoustonTX)、Pierce Chemical Co.(Rockford IL)、Riedel de Haen AG(Hanover,Germany)、Spectrum Quality Product,Inc.(New Brunswick,NJ)、TCI America(Portland OR)、Trans World Chemicals,Inc.(Rockville MD)以及Wako Chemicals USA,Inc.(RichmondVA)。
可以通过各种参考书和数据库识别本领域普通技术人员已知的方法。适合的参考书和论文，其详述用于制备本公开的化合物的反应物的合成或提供对描述该制备的文章的参考，包括例如“Synthetic Organic Chemistry,”John Wiley&Sons,Inc.,纽约；S.R.Sandler等人，“Organic Functional Group Preparations,”第2版，Academic Press,纽约,1983；H.O.House,“Modern Synthetic Reactions”,第2版，W.A.Benjamin,Inc.MenloPark,Calif.1972；T.L.Gilchrist,“Heterocyclic Chemistry”，第2版，John Wiley&Sons,纽约,1992；J.March,“Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms andStructure,”第4版，Wiley-Interscience,纽约,1992。其他适合的参考书和论文，其详述用于制备本公开的化合物的反应物的合成或提供对描述制备的文章的参考，包括例如Fuhrhop,J.和Penzlin G.“Organic Synthesis:Concepts,Methods,StartingMaterials”，第2次修改和增订版(1994)John Wiley&Sons ISBN:3-527-29074-5；Hoffman,R.V.“Organic Chemistry,An Intermediate Text”(1996)Oxford University Press,ISBN0-19-509618-5；Larock,R.C.“Comprehensive Organic Transformations:A Guideto Functional Group Preparations”第2版(1999)Wiley-VCH,ISBN:0-471-19031-4；March,J.“Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure”第4版(1992)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-60180-2；Otera,J.(编者)“Modern CarbonylChemistry”(2000)Wiley-VCH,ISBN:3-527-29871-1；Patai,S.“Patai's 1992Guide tothe Chemistry of Functional Groups”(1992)Interscience ISBN:0-471-93022-9；Quin,L.D.等人“A Guide to Organophosphorus Chemistry”(2000)Wiley-Interscience,ISBN:0-471-31824-8；Solomons,T.W.G.“Organic Chemistry”第7版(2000)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-19095-0；Stowell,J.C.,“Intermediate Organic Chemistry”第2版(1993)Wiley-Interscience,ISBN:0-471-57456-2；“Industrial Organic Chemicals:Starting Materials and Intermediates:An Ullmann’s Encyclopedia”(1999)JohnWiley&Sons,ISBN:3-527-29645-X，以8卷计；“Organic Reactions”(1942-2000)JohnWiley&Sons,以超过55卷计；以及“Chemistry of Functional Groups”John Wiley&Sons，以73卷计。
还可以通过由美国化学学会(American Chemical Society)的化学文摘服务(Chemical Abstract Service)编制的已知化学品的索引来识别特定和类似的反应物，所述索引可以在大多数公共图书馆和大学图书馆中以及通过在线数据库(美国化学学会,华盛顿,D.C.，可以获得更多细节)获得。可以通过定制化学合成机构来制备在目录中已知但不可商购获得的化学品，其中许多标准化学品供应机构(例如，上文所列的那些)提供定制合成服务。本公开的药物盐的制备和选择的参考文献为P.H.Stahl&C.G.Wermuth“Handbookof Pharmaceutical Salts,”Verlag Helvetica Chimica Acta,Zurich,2002。
用于表征和鉴定化合物的方法
可以通过各种测定技术来确定化合物作为用于神经障碍的治疗的效果。通过在高度预测性和标准化测定中提供用于评估新型候选者的筛选服务和其他服务，神经疾病和中风国家研究院的抗惊厥剂筛选项目(ASP)促进新的抗惊厥药物的发展。在ASP的一种或多种测定中测试了许多本文所述的化合物。
纳入抗惊厥剂筛选的标准模型包括最大电休克试验(MES)、皮下戊四氮试验(scMET)和毒性评估(最小运动障碍，MMI)。另外的模型包括以下：由其他化学惊厥剂诱导的痉挛；小鼠中的最小阵挛性痉挛(6Hz试验)；海马点燃的大鼠；在红藻氨酸治疗的大鼠中耐药的体外自发性突发模型；耐拉莫三嗪的杏仁核点燃的大鼠；角膜点燃的小鼠中的局灶性痉挛；大鼠中的毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态；以及Frings听源性痉挛敏感小鼠。
最大电休克试验(MES)
MES为全身性强直阵挛性痉挛的模型并且提供在脑部的所有神经元回路活跃程度最大时化合物预防痉挛蔓延的能力的指征。这些痉挛是可高度再现的并且在电生理学上与人类痉挛一致。
皮下戊四氮痉挛阈值试验(scMET)
兴奋性和抑制性神经传递在介导正常的神经元信号传导中起关键作用，并且这两种途径之间的不平衡可以导致痉挛的发作，并且最终癫痫发生。在化学上破坏这种微调的平衡可以人工诱导痉挛。惊厥剂戊四氮的皮下注射在实验动物中产生阵挛性痉挛。scMET试验测定出测试化合物引起动物的痉挛阈值的能力，并且因此使其免于表现出阵挛性痉挛。
急性毒性-最小运动障碍(MMI)
为了评估化合物的不期望的副作用(毒性)，监测动物受损的神经或肌肉功能的明显迹象。在小鼠中，将旋转棒程序用于公开最小的肌肉或神经损伤。当将小鼠放置于以6rpm的速度旋转的棒上时，该动物可以长时间维持其平衡。如果动物在1min时段期间从这种旋转棒上掉落三次，则认为该动物出现运动障碍。在大鼠中，通过共济失调来表示最小运动缺陷，其显示出异常的、不协调的步态。在施用测试药物之前检查用于评估毒性的大鼠，因为各个动物可以在步态、平衡、放置反应等中具有独特性，其可能错误地归因于测试物质。除了MMI以外，动物可以表现出圆形或Z字形的步态、异常的身体姿势和腿部的伸展、震颤、多动、缺少探索行为、嗜睡、昏迷、僵住症、放置反应丧失以及肌肉张力变化。
其他化学惊厥剂试验
除了静脉内scMET试验以外，可以采用其他化学惊厥剂以测试抗惊厥活性。GABAA拮抗剂(毕枯枯灵(bicuculline))和GABAA氯化物通道阻断剂(木防己苦毒素)两者都通过阻断GABAA受体功能而破坏正常抑制性神经传递(即，使突触抑制变弱)来诱导痉挛。将这两种药物用作急性痉挛模型，用于快速评估潜在的抗惊厥剂。
最小阵挛性痉挛试验
一些临床有用的AED在标准MES和scMET试验中是无效的，但是在体内仍具有抗惊厥活性。为了鉴定具有这种性质的潜在的AED，可以在最小阵挛性痉挛(6Hz或‘精神运动’)试验中测试化合物。与最大电休克(MES)试验相同，将最小阵挛性痉挛试验用于评估化合物对电诱导性痉挛的功效，但是使用较低的频率(6Hz)和较长的刺激持续时间(3s)。小鼠将表现出特征在于最小阵挛期的痉挛，随后表现出被描述为与患有部分性痉挛的人类患者的先兆类似的刻板、自动行为。未表现出这种行为的动物被认为受到保护。这种试验还可以在22mA和44mA下进行，并且44mA对于治疗是更难治的。
海马点燃的大鼠模型
海马点燃的大鼠提供变为继发全身性的局灶性痉挛的实验模型。这种大鼠模型不仅用于鉴定化合物对部分性痉挛的有效性，而且还允许调查可以导致痉挛从病灶蔓延和全身化的脑部网络。此外，这种模型提供了在局灶性痉挛模型中用于评估药物功效的时间框架。具体地，各个动物的不应期足够短，以允许在短时间间隔内重复刺激。其次，可以利用这种点燃的大鼠模型以评估研究性化合物阻断由电刺激诱发的完全点燃的痉挛的能力。最终，还可以将海马点燃的大鼠模型用于评估研究性化合物提高病灶点燃的阈值的能力。
耐药性的体外自发性突发模型
从红藻氨酸(KA)治疗的动物中获得的内侧内嗅皮质海马(mEC-HC)切片为旨在鉴定化合物的体外筛选，所述化合物在耐药性癫痫中可以是有效的。KA治疗是被接受的颞叶癫痫(TLE)的动物模型，具有导致癫痫持续状态的初始损害，然后是持久的潜伏期，随后被自发性痉挛的发展所替代。从KA治疗的大鼠收集的mEC-HC切片表现出对传统AED具有耐药性的自发性电图“发作间期”事件。此外，从KA治疗的大鼠获得的mEC-HC切片早在KA诱导SE后一周就在正常的人造脑脊液(ACSF)溶液中是过度兴奋的。当与从对照大鼠获得的低Mg2+mEC-HC切片相比时，这种来自KA治疗的大鼠的切片的过度兴奋显著降低了待引发的自发性突发(SB)放电所耗费的时间。
耐拉莫三嗪(LTG)的杏仁核点燃的大鼠模型
在痉挛的发展期间添加LTG最终损害LTG对完全表达的点燃痉挛的效果。因此，在点燃获取阶段期间(通过刺激植入大鼠的杏仁核中的电极)添加低剂量LTG产生能够区分常规抗惊厥剂与有效阻断完全表达的点燃痉挛发作的研究性药物的模型，并且因此可以在患有顽固性癫痫的患者中是有效的。
角膜点燃的小鼠中的局灶性痉挛
在这种模型中，将视神经用于以非侵入性方式使跨角膜电刺激递送至脑部。角膜点燃的小鼠表现出与海马点燃的小鼠模型和人类部分性癫痫一致的药理学性质。程序的非手术性质允许对这种条件的研究性药物作出快速评估。
毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态
毛果芸香碱模型是癫痫持续状态(SE)的良好表征模型。这种模型与诱导痉挛发作的神经毒剂共享许多特性，是因为导致两种模型的痉挛是胆碱能介导的。在急性剂量的毛果芸香碱后，临床表现包括共济失调、运动不能和面部自动症。这些症状快速发展成可以持续长达十二小时的全面SE。这种活性可以与电图痉挛活动密切相关。经受急性损伤后存活下来的大鼠表现出自发性复发痉挛和苔藓纤维出芽。
Frings听源性痉挛-(AGS)敏感的小鼠模型
Frings AGS敏感的小鼠对声音诱导的反射性痉挛在遗传学上是敏感的。其具有充分确认的癫痫表型并且特别地用作筛选模型。在约21天龄开始，Frings AGS敏感的小鼠在响应于高强度声音刺激时表现出突出的痉挛活动。然后它们在其一生中都对声音保持敏感。其痉挛表型的特征在于，在响应于高强度声音刺激时，会疯狂奔跑、翻正反射丧失、强直性屈曲和强直性伸展。与其他痉挛模型相反，Frings AGS敏感的小鼠对于临床的抗惊厥药物种类是非差别对待的。出于这个原因，将这种模型用于筛选新型研究性化合物，并且还可以帮助鉴定和表征对遗传性癫痫形式有效的化合物。
对于用于神经障碍的新型化合物的功效的其他试验包括大鼠中的索曼(soman)诱导的痉挛模型以及小鼠中的骆驼蓬灵(harmaline)诱导的震颤模型。
索曼诱导的痉挛
有机磷酸酯神经毒剂索曼通过酶乙酰胆碱酯酶的不可逆灭活诱导痉挛，导致脑部和外周组织中的胆碱能张力大幅增加。可以将暴露于索曼气体的大鼠用作有机磷酸酯中毒的模型。暴露于索曼的大鼠快速进入惊厥状态，其中可以通过EEG记录强烈的猝发活动。在痉挛发作后，将测试化合物在不同时间经肌内或皮下注射。由于在紧急大规模伤亡情况下，人类受害者在初始暴露后长时间不大可能获得治疗，因此当在痉挛诱发后的稍后时间施用时，能够阻断痉挛活动的那些化合物可能是最有效的且实用的。
骆驼蓬灵诱导的震颤
特发性震颤(ET)是人类中最常见的运动障碍。尽管已经对ET提出了若干机制和遗传动物模型，但向小鼠施用β-咔啉衍生物骆驼蓬灵被认为是对于这种病症的标准模型。骆驼蓬灵引起全身性震颤，频率为11Hz-14 Hz，与ET的震颤频率相同。用目前诸如普萘洛尔(β-阻断剂)和普里米酮(抗癫痫剂)的抗ET治疗进行预治疗使得小鼠中的骆驼蓬灵诱导的震颤变弱。
如以下实施例所示的本文所述的化合物(包括一些化学中间体)通常在一个或多个所示测定中测试。本领域技术人员易于理解，使用适当的对照进行体外测定和方法以及体内动物模型。
本文所述的化合物在宽范围的治疗应用中具有实用性，并且可以通常用于治疗人(男性和女性)以及哺乳动物(在本文中也被称为“对象”)中的各种神经障碍。例如，可以将结构(A)和(B)的化合物(以及本文公开的具体化合物)用于治疗或预防神经障碍和神经疾病，尤其是特发性震颤、癫痫、癫痫持续状态和神经毒剂暴露。可以将此类化合物与其他抗惊厥剂组合使用和/或与深度脑刺激(DBS)组合使用。
如医学领域的技术人员所理解，术语“治疗(treat)”和“治疗(treatment)”是指对象(即，患者、个体)的疾病、病症或者病况的医学管理(参见，例如，Stedman’s MedicalDictionary)。通常，适当的剂量(即，有效量、治疗量)和治疗方案提供了足以提供治疗和/或预防益处的量的化合物。施用本文所述化合物的对象的治疗益处包括，例如，改善的临床结果，其中目的为预防或减缓或阻止(减轻)与疾病相关的不期望的生理变化，或者预防或减缓或阻止(减轻)此类疾病的发展或严重性。如本文所讨论，一种或多种化合物的效果可以包括有益的或期望的临床结果，其包括但不限于减少、减轻、或减缓由待治疗的疾病引起的或与待治疗的疾病有关的症状；降低的症状发生率；改善的生命质量；较长的无病状态(即，根据症状作出疾病的诊断，降低对象呈现所述症状的可能性或倾向性)；疾病程度的减小；稳定的(即，不恶化)疾病状态；疾病进展的延缓或减缓；疾病状态的改善或减轻；以及缓解(无论部分还是全部)，无论是可检测的或不可检测的；和/或总生存期。
在与如果对象不接受治疗的预期生存期相比时，“治疗(treatment)”还可以意指延长生存期。需要治疗的对象包括已经患有疾病或病症的那些以及倾向于患有疾病或病症或处于发展疾病或病症的风险中的对象，以及其中待预防疾病、病况或病症(即，降低疾病或病症发生或复发的可能性)的对象。
需要用本文所述的化合物治疗的对象(即，患者、个体)可以是人或可以是非人的灵长类或其他动物(即，兽医用途)，即，他/她/它已经发展出包括震颤和痉挛在内的神经元功能障碍和神经元控制的症状，或者处于发展神经疾病或神经病症的风险、并且更具体地处于包括震颤或痉挛在内的神经元功能障碍和神经元控制的症状的风险。可以治疗的非人的动物包括哺乳动物，例如，非人的灵长类(例如，猴、黑猩猩、大猩猩等)、啮齿动物(例如，大鼠、小鼠、沙鼠、仓鼠)、兔类动物、猪(例如，仔猪(pig)、小型猪)、马、犬、猫、牛、大象、熊以及其他家畜动物，农场动物和动物园动物。
药物组合物
本公开还提供包含本文所述的化合物(结构(A)和(B)的化合物，包括本文所述的具体化合物)中的任何一种化合物和药物可接受的赋形剂的药物组合物，用于治疗神经障碍和神经疾病(尤其是特发性震颤、癫痫、癫痫持续状态和神经毒剂暴露)的方法中。药物可接受的赋形剂是生理学和药学上合适的无毒且非活性的材料或者成分，所述材料或者成分不会干扰活性成分的活性；赋形剂还可以被称为载体。
为了向对象施用的目的，可以将本文所述的化合物配制成包含化合物和药物可接受的赋形剂(载体和/或稀释剂)的药物组合物。所述化合物以有效治疗特定病症并且优选具有对患者可接受的毒性的量存在于组合物中。可以由本领技术人员容易地确定适当的浓度和剂量。
药物可接受的赋形剂、载体和稀释剂为本领域技术人员所熟悉的。对于配制为液体溶液的组合物，可接受的载体和/或稀释剂包括盐水和无菌水，并且可以任选地包括抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和其他常见添加剂。还可以将组合物配制成丸剂、胶囊、颗粒剂或片剂，其除了含有化合物以外，还含有稀释剂、分散剂和表面活性剂、粘合剂和润滑剂。本领域技术人员还可以以适当的方式以及根据认可惯例配制化合物。药物可接受的赋形剂在药物领域是众所周知的并且在以下文献中进行了描述，例如，Rowe等人，Handbook ofPharmaceutical Excipients:A Comprehensive Guide to Uses,Properties,andSafety,第5版，2006,以及Remington:The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro,第21版，Mack Pub.Co.,Easton,PA(2005))。药物可接受的赋形剂的实例包括处于生理学pH的无菌盐水和磷酸盐缓冲盐水。可以将防腐剂、稳定剂、染料、缓冲剂等提供在药物组合物中。此外，还可以使用抗氧化剂和助悬剂。
可以通过本领域常规实施的若干施用方法中的任一种，包括全身性施用，将化合物和包含所述化合物的药物组合物递送至对象。如本文所用，全身性施用包括的口服施用方法和肠胃外施用方法。
对于口服施用，适当的药物组合物包括粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、锭剂、咀嚼剂、凝胶剂和胶囊以及液体、糖浆、悬浮液、酏剂和乳液。还可以以快速溶解剂型、快速崩解剂型使用本文所述的化合物。这些组合物还可以包含抗氧化剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、增稠剂和乳化剂、着色剂、芳香剂和其他药物可接受的添加剂。可以将口服施用的制剂配制成立即释放或修饰释放，其中修饰释放包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程控释放。
对于肠胃外施用，将本文所述的化合物经由静脉内、动脉内、腹膜内、肌内、皮下或其他注射或输注直接施用进入血液流、肌肉或内脏器官。可以在注射水溶液中制备肠胃外制剂，所述注射水溶液除了含有化合物以外，还可以含有缓冲液、抗氧化剂、抑菌剂、盐、碳水化合物和常用于此类溶液中的其他添加剂。肠胃外施用可以是立即释放或修饰释放(例如注射或植入的储库)。
还可以将本文所述的化合物和化合物的药物组合物经局部、(皮内)真皮或经皮施用于皮肤或粘膜。典型的制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、霜剂、软膏剂、敷料剂、泡沫、皮肤贴剂、晶片、植入物和微乳液。也可以将化合物经由吸入或鼻内施用，例如以干燥粉末、气溶胶喷雾剂或滴剂进行施用。用于本文所述化合物的另外的施用途径包括阴道内和直肠(通过栓剂、阴道栓剂或灌肠剂)和眼部以及耳朵。
提供以下实例是为了示例目的，并非进行限制。总之，可以通过实施例17至实施例29中所公开的一般方法测定化合物。以下实施例1至实施例16公开了结构(A)和(B)的代表性化合物的合成。
实施例
用于分析样品的HPLC方法(保留时间，tR，以分钟计)
方法1：平台：Agilent 1100系列，配备有自动进样器、UV检测器(220nm和254nm)、MS检测器(APCI)；HPLC柱：Phenomenex Synergi-Max-RP 2.0×50mm；HPLC梯度：1.0mL/min，在13.5min中从5％乙腈水溶液至95％乙腈水溶液，在95％维持2min。乙腈和水都具有0.025％TFA。
方法2：平台：Dionex，配备有自动进样器、UV检测器(220nm和254nm)、MS检测器(APCI)；HPLC柱：Waters XBridge C18,3.0×100mm；HPLC梯度：1.4mL/min，在7.8min中从5％乙腈水溶液至99％乙腈水溶液，在99％维持1.6min。乙腈和水都具有0.04％NH4OH。
方法3：平台：Agilent，配备有自动进样器、UV检测器(220nm和254nm)、MS检测器(APCI)；HPLC柱：Waters XTerraMS C18,3.0×250mm；HPLC梯度：1.0mL/min，在46min中从10％乙腈水溶液至90％乙腈水溶液，在90％维持7.0min。乙腈和水都具有0.025％TFA。
方法4：平台：Agilent 1100系列，配备有自动进样器、UV检测器(220nm和254nm)、MS检测器(APCI)；HPLC柱：Phenomenex Synergi:MAX-RP,2.0×50mm柱；HPLC梯度：1.0mL/分钟，在2.5分钟中从10％乙腈水溶液至90％乙腈水溶液，在90％维持1分钟。乙腈和水都具有0.025％TFA。
实施例1
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-胺
Figure GDA0002361142230000271
步骤1A：2,6-二氟苄基叠氮化物
将2,6-二氟苄基溴(4.0g,19.3mmol)、碘化钠(2.9g,19.3mmol)和叠氮化钠(3.8g,57.9mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在70℃下搅拌12小时。将溶液用饱和碳酸氢钠溶液稀释并且将混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，并且在减压下去除溶剂以得到呈浅棕色油状的2,6-二氟苄基叠氮化物1a(65％)。
步骤1B：1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸乙酯
向1a(2.2g,13.0mmol)在乙醇(10.0mL)中的溶液添加丙炔酸乙酯(1.40g,14.3mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌5小时。在冷却时，产物结晶出来。将产物晶体过滤并且用乙醇洗涤。从热的甲醇中重结晶得到呈灰白色晶体状的1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸乙酯1b(45％)。LCMS(APCI)m/z 268.0(MH+)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),7.47-7.57(m,1H),7.14-7.22(m,2H),5.74(bs,2H),4.29(q,J＝7.5Hz,2H),1.28(t,J＝7.5Hz,3H)。
步骤1C：1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸
向在甲醇(5.0mL)与H2O(5.0mL)的1:1溶液中搅拌的1b(2.0g,7.5mmol)添加氢氧化锂(0.888g,37mmol)。将反应混合物加热至50℃持续2小时。在冷却时，将溶液用1N HCl水溶液酸化至～3.0的pH。将沉淀物过滤并且用H2O(30mL)洗涤，并且在真空烘箱中干燥，以得到呈灰白色固体状的1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸1c(85％)。LCMS(方法4)m/z 239.7[MH+],tR＝1.99min。
步骤1D：1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-碳酰氯
向1c(20g)添加亚硫酰氯(60mL)并且将混合物回流1h。将溶液在真空下浓缩和干燥，以得到呈白色固体状的酰基氯1d。
步骤1E：1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-羰基叠氮化物
将酰基氯1d溶于丙酮(120mL)，并且缓慢添加叠氮化钠(8.2g)在水(100mL)中的混合物，保持内部温度低于10℃。将混合物升温至室温过夜。将产物作为固体滤出，用水洗涤，并且在真空干燥器中经NaOH颗粒干燥过夜，以得到呈白色固体状的叠氮化物1e(21.6g)。
步骤1F：1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-胺
将叠氮化物1e在无水乙醇(100mL)中回流过夜。小心添加NaOH(4M水溶液，20mL)并且持续回流过夜。将混合物冷却至室温，并且缓慢添加HCl(12N)以酸化至pH 1。在真空中去除乙醇并且添加水和DCM。将产物萃取至水层，用DCM洗涤水层并且弃去有机萃取物。通过缓慢添加NaOH(12M，水溶液)使水相达到pH 10，并且在搅拌下沉淀产物。在搅拌30分钟后，将产物滤出，用水洗涤若干次，以得到呈灰白色固体状的胺产物1f(12.3g)。在硅胶上进行色谱法，用乙酸乙酯/己烷洗脱，得到较纯的样品用于测试。LCMS(方法4)m/z 211.1[MH+],tR＝1.46min。
实施例2
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-胺
Figure GDA0002361142230000291
步骤2A：1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸酰肼
向1b(1.6g,6.0mmol)添加水合肼(0.9g,18.0mmol)和乙醇(5mL)。将反应混合物在密封容器中加热并且在80℃下加热1小时。将混合物用H2O(20mL)稀释并且使用H2O过滤以清洗滤饼，以得到呈灰白色固体状的1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-甲酸2a，其无需经另外纯化而用于下一步。LCMS(方法4)m/z 254.1[MH+],tR＝1.81min。
步骤2B：1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-羰基叠氮化物
于0℃的冰浴中将2a(1.0g,3.9mmol)与亚硝酸钠(0.54g,7.8mmol)的混合物在2NHCl水溶液(5.0mL)中搅拌。使混合物升温至室温并且搅拌5小时。将混合物用H2O(50mL)稀释并且使用冷的H2O过滤以清洗滤饼，以得到呈白色固体状的1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-羰基叠氮化物1e(80％，经两步)。LCMS(方法4)m/z 265.1[MH+],tR＝2.45min。
步骤2C：[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-氨基甲酸乙酯
将乙醇(5.0mL)添加至1e(1.37g,5.2mmol)，并且将混合物在85℃下搅拌12小时。将混合物在真空下浓缩，以得到[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-氨基甲酸乙酯2c(95％收率)。LCMS(方法4)m/z 283.0[MH+],tR＝2.08min。
步骤2D：1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基胺
向2c(1.39g,4.9mmol)添加2N NaOH/EtOH的1:1水溶液(5mL的2N NaOH，5mL的EtOH)。将反应混合物在密封容器中于85℃下搅拌1小时。在冷却时，使用1N HCl水溶液将反应混合物中和至pH7.5。将溶液用盐水稀释并且用5％MeOH/DCM(3×50mL)洗涤。将合并的有机萃取物进行干燥(Na2SO4)，并且在减压下去除溶剂，以得到呈灰白色固体状的1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基胺1f(90％)。LCMS(方法1)m/z 211.0[MH+],tR＝2.03min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.33(m,1H),6.40(m,3H),5.48(s,2H),3.56(s,2H)。
按照这种程序制备的其他化合物包括：
1-(4-氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基胺，2e，LCMS(方法1)m/z 192.8[MH+],tR＝1.89min；
1-(4-三氟甲基-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基胺，2f，LCMS(方法4)m/z 243.1[MH+],tR＝1.79min；
1-(3-氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基胺，2g，LCMS(方法4)m/z 193.1[MH+],tR＝1.48min；以及
1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-胺，2h，LCMS(方法4)m/z 175.1[MH+],tR＝1.40min。
实施例3
(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺
Figure GDA0002361142230000301
步骤3A：(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯 基丙酰胺
将氨基三唑1f(1.4g)、Boc-L-Phe-OH(1.8g)和DIEA(1.75mL)在DCM(10mL)和DMF(10mL)中合并。在10分钟内于搅拌下缓慢添加HATU(3.6g)，然后在室温下搅拌过夜。添加EtOAc和DCM，并且将有机层用0.5M NaOH、1M乙酸和盐水洗涤，经MgSO4干燥并且浓缩以得到固体。将所述固体再溶于热的DCM中，并且添加乙醚以使产物结晶。将所得的固体过滤，用乙醚洗涤并且通过抽吸干燥，以得到呈灰白色固体状的Boc-胺产物(2.26g)。将固体溶于DCM(20mL)中并且添加HCl(4M，在二噁烷中，20mL)，并在室温下搅拌2h。在真空下去除约80％的溶剂，添加乙醚并剧烈搅拌，以缓慢沉淀作为HCl盐的产物胺。将固体在N2流下过滤出来，用乙醚洗涤，在N2流下通过抽吸干燥，并且然后在真空干燥器中经NaOH颗粒干燥过夜。获得呈白色粉末状的产物胺3a(1.9g)。LCMS(方法3)m/z 358.2[MH+],tR＝19.65min。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.58(brs,2H),8.20(s,1H),7.43(m,1H),7.16-7.29(m,7H),5.67(s,2H),4.23(brm,1H),3.14(d,J＝6.9Hz,2H)。
Figure GDA0002361142230000311
步骤3B：(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯 基丙酰胺
向1f(0.700g,3.3mmol)在DCM(2.0mL)与DMF(2.0mL)的1:1溶液中添加N-boc-D-苯丙氨酸(1.3g,5.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.645g,5.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后添加HATU(1.60g,4.3mmol)，并且将混合物在室温下搅拌5小时。将混合物用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)稀释并且用DCM(3×100mL)洗涤。将合并的有机层用饱和氯化铵溶液(100mL)洗涤，然后干燥(Na2SO4)并且在减压下去除溶剂。通过硅胶柱色谱纯化，用2％MeOH/DCM洗脱，得到Boc-胺产物，然后用DCM(3.0mL)稀释并且与2N HCl的乙醚溶液(4.95mL,9.9mmol)于室温下搅拌1小时。将所得的沉淀物过滤，用DCM研磨并且再次过滤。在减压下干燥滤饼，得到呈白色固体状的胺3b(63％)(HCl盐)。LCMS(方法3)m/z 358.2[MH+],tR＝19.61min。
使用这种程序制备的其他化合物包括：
(3S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺,3c,LCMS(方法3)m/z 324.2[MH+],tR＝12.52min；
(3R)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺,3d,LCMS(方法3)m/z 324.2[MH+],tR＝12.52min；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-甲氧基丙酰胺,3e,LCMS(方法3)m/z 312.2[MH+],tR＝9.90min。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.50(brs,1H),8.21(s,1H),7.52(m,1H),7.16-7.22(m,2H),5.68(s,2H),4.18-4.20(m,1H),3.75-3.79(m,2H),3.28(s,3H)；
(2S)-2-氨基-N-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-甲氧基丙酰胺,3f,LCMS(方法4)m/z 276.1[MH+],tR＝1.40min；
(2S)-2-氨基-N-{1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-甲氧基丙酰胺,3g,LCMS(方法4)m/z 294.1[MH+],tR＝1.43min；
(2S)-2-氨基-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-甲氧基丙酰胺,3h,LCMS(方法4)m/z 294.1[MH+],tR＝1.43min；
(2S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酰胺,3i,LCMS(方法4)m/z 344.1[MH+],tR＝1.62min；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺,3j,LCMS(方法1)m/z 298.1[MH+],tR＝1.66min；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺,3k,LCMS(方法4)m/z 280.1[MH+],tR＝1.32min；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺,3l,LCMS(方法4)m/z 280.2[MH+],tR＝1.34min；
(2R)-2-氨基-N-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基丙酰胺,3m,LCMS(方法4)m/z 262.1[MH+],tR＝1.24min；
(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺,3n,LCMS(方法1)m/z 298.1[MH+],tR＝1.72min；
(2S)-2-氨基-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺,3o,LCMS(方法4)m/z 280.1[MH+],tR＝1.33min；
(2S)-2-氨基-N-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基丙酰胺,3p,LCMS(方法4)m/z 262.1[MH+],tR＝1.25min；以及
(2S)-2-氨基-3-羟基-N-(1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酰胺,3q,LCMS(方法4)m/z 330.1[MH+],tR＝1.57min。
实施例4
2-(1-氨基甲基-环己基)-N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-乙酰胺
Figure GDA0002361142230000331
步骤4A：[1-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-环己基]-乙酸
向在THF(10.0mL)和H2O(10.0mL)中搅拌的加巴喷丁(2.0g,12mmol)溶液添加三乙胺(4.9mL,36mmol)和boc酸酐(5.2g,24mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。使用2NNaOH水溶液将混合物碱化至pH～8，并且用乙酸乙酯(3×100mL)洗涤。使用1N HCL水溶液将水层酸化至pH～5，然后用乙酸乙酯(3×100mL)洗涤。将从酸性洗液中合并的有机层进行干燥(Na2SO4)并且在减压下去除溶剂，以得到呈无色油状的[1-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-环己基]-乙酸4a(90％)。
步骤4B：2-(1-氨基甲基-环己基)-N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4- 基]-乙酰胺
根据步骤3B的程序，使用中间体4a替代N-boc-D-苯丙氨酸制备化合物4b。通过用硅胶的柱色谱法，用2％MeOH/DCM洗脱，来纯化粗制的boc保护的产物。然后将boc保护的产物用DCM(3.0mL)稀释并且与2N HCl的乙醚溶液(4.95mL,9.9mmol)于室温下搅拌1小时。将所得的沉淀物过滤，用DCM研磨并且再次过滤。在减压下干燥滤饼，得到呈白色固体状的2-(1-氨基甲基-环己基)-N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-乙酰胺4b(83％)(HCl盐)。LCMS(方法3)m/z 364.3[MH+],tR＝14.41min。
实施例5
N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-4-基-丙酰胺
Figure GDA0002361142230000332
步骤5A：N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-4-基-丙酰胺
向在DCM(2.0mL)与DMF(2.0mL)的1:1溶液中的1f(0.700g,3.3mmol)添加3-(4-吡啶基)丙酸(0.755g,5.0mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.645g,5.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后添加HATU(1.60g,4.3mmol)。将混合物在室温下搅拌5小时，用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)稀释并且用DCM(3×100mL)洗涤。将合并的有机层用饱和氯化铵溶液(100mL)洗涤，然后干燥(Na2SO4)并且在减压下去除溶剂以得到白色固体。将固体用甲醇研磨并且过滤，以得到呈白色固体状的N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-4-基-丙酰胺5a(44％)。LCMS(方法3)m/z 344.2[MH+],tR＝11.31min。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.97(s,1H),8.46(d,J＝6.0Hz,2H),8.11(s,1H),7.52(m,1H),7.16-7.28(m,4H),5.64(s,2H),2.91.(t,J＝7.5Hz,2H),2.68(t,J＝7.5Hz,2H)。
根据这种程序制备的其他化合物包括：
N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-3-基-丙酰胺，5b,LCMS(方法3)m/z 344.2[MH+],tR＝11.14min；
3-(3-氯苯基)-N-[1-(4-氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-丙酰胺，5c,LCMS(方法3)m/z 359.2[MH+],tR＝27.39min。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.90(s,1H),8.18(s,1H),7.18-7.43(m,8H),5.54(s,2H),2.88(t,J＝7.5Hz,2H),2.64(t,J＝7.5Hz,2H)；
N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺,5d,LCMS(方法4)m/z 343.1[MH+],tR＝2.15min；
3-(3-氯苯基)-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}丙酰胺,5e,LCMS(方法4)m/z 359.1[MH+],tR＝2.27min；
N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺,5f,LCMS(方法4)m/z 325.1[MH+],tR＝2.16min；
N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-(吡啶-3-基)丙酰胺,5g,LCMS(方法4)m/z 326.1[MH+],tR＝1.49min；以及
(2S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-2-(2-氧代吡咯烷-1-基)丁酰胺,5h,LCMS(方法3)m/z 364.2[MH+],tR＝18.07min。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.10(s,1H),7.52(m,1H),7.16-7.23(m,7H),5.63(s,2H),4.59(m,1H),3.58(m,1H),3.2(m,1H),2.23-2.28(m,2H),1.61-1.98(m,4H),0.82(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例6
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1-(吡啶-3-基甲基)脲
Figure GDA0002361142230000351
步骤6A：3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1-(吡啶-3-基甲 基)脲
向在DCM(0.5mL)中搅拌的1f(0.030g,0.14mmol)添加吡啶(0.055g,0.70mmol)和三光气(0.038g,0.13mmol)。将反应混合物在0℃冰浴中搅拌30分钟，然后添加3-(氨基甲基)吡啶(0.075g,0.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过制备型HPLC-MS纯化，得到作为TFA盐的1-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-3-基甲基-脲6a(35％)。LCMS(方法5)m/z 345.1[MH+],tR＝3.54min。
根据以上程序制备的其他化合物包括：
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1-(吡啶-2-基甲基)脲，6b,LCMS(方法2)m/z 345.4[MH+],tR＝2.72min；以及
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1-(吡啶-4-基甲基)脲，6c,LCMS(方法5)m/z 345.1[MH+],tR＝2.65min。
实施例7
[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-氨基甲酸苄酯
Figure GDA0002361142230000352
步骤7A：[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-氨基甲酸苄酯
向含叠氮化物1e(0.40g,1.5mmol)的DMF(3.0mL)添加苄醇(0.486g,4.5mmol)。将反应混合物加热至80℃持续24小时。在冷却时，将混合物用盐水稀释并且用DCM(3×100mL)洗涤。将合并的有机层进行干燥(Na2SO4)并且在减压下去除溶剂。通过用硅胶的柱色谱法纯化，用2％MeOH/DCM洗脱，得到[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-氨基甲酸苄酯7a(87％)。LCMS(方法2)m/z 345.2[MH+],tR＝5.36min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.92(s,1H),7.15-7.57(m,8H),5.63(s,2H),5.14(s,2H)。
实施例8
[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺
Figure GDA0002361142230000361
步骤8A：[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺
向1f(1.5g,7.1mmol)添加乙酸(20mL)、多聚甲醛(2.1g,71mmol)和氰基硼氢化钠(1.4g,21.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时。将反应物用1N NaOH水溶液碱化，同时在冰上搅拌，并且用DCM(3×200mL)洗涤。将合并的有机层进行干燥(Na2SO4)，并且在减压下去除溶剂。通过用硅胶的柱色谱法纯化，用5％MeOH/DCM+0.5％TEA洗脱，得到[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺8a(35％)。LCMS(方法3)m/z 239.2[MH+],tR＝15.82min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.03(s,1H),7.42(m,1H),6.96-7.04(m,2H),5.64(s,2H),3.21(s,6H)。
使用以上程序制备的其他化合物包括：
[1-(4-氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺,8b,LCMS(方法4)m/z 221.1[MH+],tR＝1.82min；
[1-(3-氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺,8c,LCMS(方法4)m/z 221.1[MH+],tR＝1.84min；
[1-(4-三氟甲基-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺,8d,LCMS(方法4)m/z271.1[MH+],tR＝2.06min；
[1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺,8e,LCMS(方法4)m/z203.1[MH+],tR＝1.77min；以及
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N,N-二乙基-1H-1,2,3-三唑-4-胺，8f,LCMS(方法1)m/z 267.0[MH+],tR＝5.27min。1H NMR(HCl盐；300MHz,CDCl3):δ8.29(brs,1H),7.41(m,1H),7.00(t,2H),5.68(s,2H),3.60(m,4H),1.28(m,6H)。
实施例9
1-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-4-甲基-哌嗪
Figure GDA0002361142230000371
步骤9A：1-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-4-甲基-哌嗪
向在甲苯(0.400mL)与DMF(0.200mL)的2:1溶液中的1f(0.030g,0.14mmol)添加氮芥盐酸盐(0.025g,0.13mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.072mg,0.56mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌12小时。通过制备型HPLC-MS纯化得到作为TFA盐的1-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-4-甲基-哌嗪9a(30％)。LCMS(方法2)m/z294.3[MH+],tR＝2.65min。
实施例10
4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉
Figure GDA0002361142230000372
步骤10A：4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉
向胺1f(1.0g)在乙腈(20mL)中的溶液添加碳酸钾(2g，粉末)和1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(1.3g)，并且将反应物在微波炉中于120℃下加热1.5h。添加额外的1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(1.3g)，并且在120℃下再加热1.5h。将混合物过滤，用DCM洗涤，将滤液浓缩并通过在硅胶上进行色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷洗脱，然后进一步通过在硅胶上进行色谱法纯化，用丙酮/己烷洗脱，以得到呈灰白色固体状的4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉10a(495mg)。LCMS(方法1)m/z 280.9[MH+],tR＝4.14min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.36(m,1H),6.96(t,2H),6.79(s,1H),5.53(s,2H),3.82(m,4H),3.16(m,4H)。
使用以上程序制备的其他化合物包括：
4-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉,10b,LCMS(方法2)m/z263.1[MH+],tR＝1.79min；
4-{1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉,10c,LCMS(方法2)m/z263.1[MH+],tR＝1.80min；
4-{1-[(4-三氟甲基苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉,10d,LCMS(方法2)m/z 313.1[MH+],tR＝2.02min；
4-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吗啉,10e,LCMS(方法2)m/z 245.2[MH+],tR＝1.74min；以及
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-4-(吡咯烷-1-基)-1H-1,2,3-三唑，10f,LCMS(方法1)m/z 265.0[MH+],tR＝5.11min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.35(m,1H),6.96(t,2H),6.71(s,1H),5.51(s,2H),3.27(m,4H),1.92(m,4H)。
实施例11
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺
Figure GDA0002361142230000381
步骤11A：N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}甲酰胺
向胺1f(1.3g)在乙腈(12mL)中的溶液添加甲酸铵(5g)，并且将反应物在密封容器中于130℃下加热过夜。添加另外的甲酸铵(2g)，并且在130℃下持续加热3h。在冷却至室温并且浓缩后，添加水并且过滤出固体，用水洗涤，以得到呈白色固体状的甲酰胺11a(1.22g)。LCMS(方法4)m/z 310.9[MH+],tR＝2.24min。
步骤11B：1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺
向甲酰胺11a(1.22g)在THF(40mL)中的溶液添加硼烷的溶液(18.5mL,1M在THF中)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。小心添加甲醇(20mL)，然后添加HCl(10mL,1N水溶液)并且在室温下搅拌过夜。将反应物进行浓缩，用DCM稀释并且用NaOH(50mL,2N水溶液)和水洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，浓缩并通过硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷洗脱，以得到呈白色固体状的1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺11b(0.67g)。LCMS(方法4)m/z 225.0[MH+],tR＝2.03min。
实施例12
N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}乙酰胺
Figure GDA0002361142230000391
步骤12A：N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}乙酰胺
向胺1f(1.0g)在DCM(40mL)中的浆料添加三乙胺(0.86mL)，随后缓慢添加乙酰氯(0.37mL)，在冰浴中冷却。升温至室温并且浓缩，得到粗制酰胺12a。LCMS(方法4)m/z 252.9[MH+],tR＝1.95min。
使用以上程序制备的其他化合物包括：
N-{1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}乙酰胺，12b,LCMS(方法4)m/z235.1[MH+],tR＝1.70min；
N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}乙酰胺，12c,LCMS(方法4)m/z235.1[MH+],tR＝1.70min；
N-(1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙酰胺，12d,LCMS(方法4)m/z 285.1[MH+],tR＝1.92min；
N-(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酰胺,12e,LCMS(方法4)m/z231.1[MH+],tR＝1.76min；
N-{1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}丙酰胺,12f,LCMS(方法4)m/z249.1[MH+],tR＝1.81min；以及
N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}丙酰胺,12g,LCMS(方法4)m/z249.1[MH+],tR＝1.81min。
Figure GDA0002361142230000401
步骤12B：1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-乙基-1H-1,2,3-三唑-4-胺
向粗制酰胺12a在THF(20mL)中的浆料添加氢化铝锂(1M在THF中，8.3mL)，并且将混合物在室温下搅拌3天。通过添加Rochelle盐(饱和水溶液)淬灭反应，并且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机相用HCl(1N，水溶液)萃取并且弃去有机相。将水相用NaOH(2N，水溶液)碱化至pH 8，并且将产物萃取至乙酸乙酯(2×30mL)中。将有机物用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩，以得到呈白色固体状的1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-乙基-1H-1,2,3-三唑-4-胺12h。LCMS(方法4)m/z 211.0[MH+],tR＝2.11min。
实施例13
2-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基)乙-1-醇
Figure GDA0002361142230000402
步骤13A：({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基甲酰基)甲基乙 酸酯
向胺1f(1.3g)在DCM(40mL)中的浆料添加三乙胺(1.1mL)，随后在室温下缓慢添加乙酰氧基乙酰氯(0.73mL)，并且搅拌1h。在用饱和碳酸氢钠和水洗涤后，将有机物经硫酸钠干燥并且浓缩，以得到呈白色固体状的({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基甲酰基)甲基乙酸酯13a(1.9g)。LCMS(方法4)m/z 310.9[MH+],tR＝2.24min。
步骤13B：2-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基)乙-1-醇
向酰胺13a(1.9g)在THF(40mL)中的浆料添加硼烷的溶液(18.5mL,1M在THF中)，并且回流8h。小心添加甲醇(20mL)，随后添加HCl(6N，水溶液)，并且将混合物在60℃下搅拌过夜。在冷却后，将混合物浓缩，用DCM稀释并且用NaOH(50mL,2N水溶液)和水洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，浓缩并且通过硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷洗脱，以得到呈白色固体状的2-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基)乙-1-醇13b(0.91g)。LCMS(方法4)m/z254.9[MH+],tR＝1.92min。
实施例14
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吡咯烷-2-酮
Figure GDA0002361142230000411
步骤14A：1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吡咯烷-2-酮
向胺1f(400mg)在DCM(8mL)中的溶液添加DIEA(0.41mL)，随后添加4-氯丁酰氯(0.23mL)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物干燥，并且添加DMF(2mL)，并再次干燥反应物，然后再溶于DMF中。在搅拌下添加NaH(169mg,60％在油中)并且将反应物在60℃下加热过夜。添加额外的NaH(60mg,60％在油中)，并且再次在60℃下加热过夜以完成反应。添加DCM和氯化铵，分离有机相，并经硫酸镁干燥并且浓缩。在硅胶上进行色谱法，用乙酸乙酯/己烷洗脱，得到呈白色固体状的内酰胺1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吡咯烷-2-酮14a(230mg)。LCMS(方法1)m/z 279.1[MH+],tR＝4.50min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.13(s,1H),7.35(m,1H),6.96(t,J＝7.0Hz,2H),5.60(s,2H),4.07(t,J＝7.8Hz,2H),2.55(t,2H),2.21(app qn,J＝7.4Hz,2H)。
实施例15
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1,3-噁唑烷-2-酮
Figure GDA0002361142230000421
实施例15A：3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1,3-噁唑烷-2- 酮
向粗制胺13b(1.3g，未经纯化)在DCM(100mL)中的溶液添加三乙胺(1.8mL)，然后添加三光气(0.65g)。将混合物在室温下搅拌过夜。添加另外的三光气(0.06g)并且搅拌过夜。将反应物用水、饱和碳酸氢钠洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。在硅胶上进行色谱法，用乙酸乙酯/己烷洗脱，得到呈白色固体状的氨基甲酸酯3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1,3-噁唑烷-2-酮15a(0.65g)。LCMS(方法1)m/z 281.1[MH+],tR＝4.36min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.91(s,1H),7.38(m,1H),6.97(t,1H),5.62(s,2H),4.56(t,2H),4.23(t,2H)。
实施例16
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}咪唑烷-2-酮
Figure GDA0002361142230000422
步骤16A：1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}咪唑烷酮-2-酮
向胺1f(5.0g,23.8mmol)和Boc-甘氨酸(5.0g,28.6mmol)在DCM(40mL)和DMF(40mL)中的溶液添加DIEA(6.2mL)，随后添加HATU(12.7g)，并且将混合物在室温下搅拌3天。将反应物进行浓缩以去除DCM，然后添加过量的水。将固体滤出，用水洗涤，并且在真空下干燥以得到呈灰白色固体状的酰胺(8.6g)。将酰胺产物溶于DCM(40mL)中并且添加HCl(4M在二噁烷中，40mL)，并在室温下搅拌1h。小心添加NaOH(4M水溶液)以进行碱化并且添加另外的DCM。将有机层经硫酸镁干燥并且浓缩，以得到粗制胺。将胺溶于THF(20mL)中，并且添加硼烷(1M在THF中,72mL)，并将溶液在60℃下加热16h。在60℃快速搅拌下，小心添加MeOH(20mL)，随后小心添加HCl(4M在二噁烷中，35mL)，然后回流1.5h。将反应物冷却，浓缩(去除约80％溶剂)，并且添加乙醚以沉淀作为HCl盐的二胺。将产物在氮气流下过滤，用乙醚洗涤，并且在氮气流下通过抽吸干燥，以得到白色固体(6.95g，假设为二HCl盐)。将二胺(6.95g)溶于含有过量DIEA(15mL)的DCM(200mL)中，并且在室温下缓慢添加三光气(2.12g在50mL DCM中)。在1h后，将反应混合物用HCl(1M水溶液，2×50mL)、NaOH(2M水溶液，50mL)、水和盐水洗涤，并且经硫酸镁洗涤干燥以及浓缩，以得到白色固体。将固体再溶于DCM(最小量以溶解)并且通过添加乙醚进行沉淀。将固体滤出，用乙醚洗涤，以得到呈白色固体状的1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}咪唑烷-2-酮16a(3.45g)。LCMS(方法1)m/z 280.0[MH+],tR＝3.42min。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.95(s,1H),7.50(m,1H),7.18(t,2H),7.07(s,1H),5.62(s,2H),3.87(t,2H),3.43(t,2H)。
实施例17
最大电休克试验
在雄性啮齿动物(白化Carworth Farms第1号(CF-1)小鼠，或白化Sprague-Dawley大鼠)中进行本文所述的所有动物模型实验。根据“实验室动物护理和使用指南(Guide forthe Care and Use of Laboratory Animals)”中含有的推荐规范进行饲养、处理和进食。通过神经疾病和中风国家研究院的抗惊厥剂筛选项目(ASP)进行许多以下实验。健康与人类服务部(Department of Health and Human Services)最近扩大了ASP的范围以包括暴露于神经毒剂的应对措施。
通过最大电休克(MES)试验测量体内的抗痉挛活动。将成年雄性CF-1白化小鼠(18g-25g)或Sprague-Dawley大鼠(100g-150g)用于这些实验。通过角膜电极递送60Hz的交流电(在小鼠中50mA，在大鼠中150mA)持续0.2秒，所述角膜电极已经用含0.5％丁卡因HCl麻醉剂的电解质溶液触发。免受MES诱导的痉挛的终点为消除痉挛的后肢强直性伸肌组成部分。通过腹膜内施用给予测试化合物的剂量，使用每克小鼠0.01ml的体积，之后在各种时间间隔下测试小鼠，并且用0.04ml/g(腹膜内和口服)筛选大鼠。示出了表1所列的化合物在规定的单剂量下具有活性，或者如果测试多剂量，则具有ED50(数据为对于腹膜内施用的小鼠和对于口服施用的大鼠而言所得，mpk＝mg/kg)。
表1
化合物 小鼠(IP) 大鼠(PO)
3a 在100mpk时MES活跃 MES ED<sub>50</sub> 25mpk
3b MES ED<sub>50</sub> 56mpk MES ED<sub>50</sub> 24mpk
3c MES ED<sub>50</sub> 20mpk 在15mpk时MES活跃
3d MES ED<sub>50</sub> 73mpk MES ED<sub>50</sub> 24mpk
3e MES ED<sub>50</sub> 40mpk 在30mpk时MES活跃
3j 在100mpk时MES活跃 MES ED<sub>50</sub> 29mpk
5b 在300mpk时MES活跃 ---
5e 在100mpk时MES活跃 ---
5h 在300mpk时MES活跃 ---
8a MES ED<sub>50</sub> 27mpk MES ED<sub>50</sub> 9mpk
8e 在100mpk时MES活跃 ---
10a MES ED<sub>50</sub> 31mpk MES ED<sub>50</sub> 44mpk
10f MES ED<sub>50</sub> 73mpk 在30mpk时MES活跃
11b 在100mpk时MES活跃 在30mpk时MES活跃
12h 在100mpk时MES活跃 在30mpk时MES活跃
13b 在30mpk时MES活跃 在30mpk时MES活跃
14a 在100mpk时MES活跃 MES ED<sub>50</sub> 28mpk
16a MES ED<sub>50</sub> 8mpk MES ED<sub>50</sub> 7mpk
实施例18
皮下戊四氮痉挛阈值试验
如MES试验一样，将动物用各种剂量的测试化合物进行预处理。将在97％的对照动物(85mg/kg小鼠)中诱导惊厥的戊四氮的剂量注入颈部中线的松弛的皮肤褶皱中。为了使紧张性最小，将动物置于隔离笼中并且在接下来的30min观察痉挛是否存在。持续观察使得各种药物到达峰值效应的时间(TPE)得以确定。将前肢和/或后肢、颌或触须的阵挛性痉挛的发作(持续约3s-5s)当作终点。不符合这种标准的动物被认为是受到保护的。
实施例19
急性毒性-最小运动障碍
监测动物受损的神经或肌肉功能的明显迹象。在小鼠中，使用旋转棒试验。当将未处理的小鼠放置于以6rpm的速度旋转的棒上时，所述未处理的小鼠可以长时间维持平衡。如果小鼠在1min时段中从该旋转棒掉落三次，则认为测试化合物有毒性。在大鼠中，通过共济失调指示最小运动缺陷(其通过异常的、不协调的步态来表现)。除了最小运动障碍以外，观察动物的其他异常迹象，包括异常的身体姿势、震颤、多动、缺乏探索行为或嗜睡。可以产生毒性的剂量响应曲线，以确定50％的动物中毒的剂量(TD50)。
实施例20
化学惊厥剂诱导的痉挛
以TD50剂量或低于TD50剂量给予测试化合物，并且在皮下施用戊四氮到达峰值效应的时间(TPE)进行测试。这种试验测量了测试物质预防通过皮下注射毕枯枯灵(2.7mg/kg)或木防己苦毒素(2.5mg/kg)产生的阵挛性痉挛的能力。在施用毕枯枯灵之后，将CF-1小鼠置于隔离笼中并且观察30min是否存在痉挛；对接受木防己苦毒素的那些对象观察45min，是因为这种惊厥剂的吸收较慢。痉挛通常由前肢和后肢、颌和触须的阵挛性痉挛的发作组成。毕枯枯灵诱导的阵挛性痉挛通常跟随着后肢的强直性伸展以及死亡。如果在整个观察期不存在痉挛，则认为化合物是保护性的。
实施例21
最小阵挛性痉挛试验
用30mg/kg、100mg/kg和300mg/kg测试化合物腹膜内预处理二十只CF-1小鼠。在处理后的不同时间(0.25h、0.5h、1h、2h和4h)，将每只小鼠(每个时间点四只)施用0.5％丁卡因盐酸盐的滴眼剂，并且用通过角膜电极递送的足够的电流(在6Hz下32mA，持续3s)激发，以引起精神运动性痉挛。通常，这种痉挛的特征在于最小阵挛期，随后是最初描述为与具有部分性痉挛的人类患者的先兆类似的刻板和自动行为(Toman,Neurology,1951.1:444-460)。不表现出这种行为的动物被认为受到保护。
实施例22
海马点燃的大鼠试验(局灶性痉挛)
将电极植入麻醉大鼠的海马内，然后使所述大鼠恢复1周。在快速点燃方案后(Lothman等人，Brain Res.,1994.649:71-84)，将大鼠每隔一天用200mA(50Hz)每30min刺激10s，持续6h，直至它们被完全点燃(4至5个刺激日)。在休息1周之后，给予动物相同的电刺激，这作为基线。将动物用测试化合物进行预处理(通过腹膜内注射)，然后在各种间隔进行测试。在每个时间点，记录行为学痉挛评分和后放电时程。根据以下标准对行为学痉挛评分进行评判(Racine,Electroencephalogr Clin Neurophysiol,1972.32(3):281-94)：1级-嘴和面部阵挛；2级-1级加上点头；3级-2级加上前肢阵挛；4级-3级加上直立(rearing)，以及5级-4级加上重复的直立和跌倒。还可以在点燃的大鼠中测量后放电阈值(ADT)。将ADT定义为引起至少4s的后放电时的最低电流。在试验当天，通过以逐步方式增加电流强度来确定每只大鼠各自的ADT，直至大鼠表现出至少4s的持续时间的电图后放电。以20μA的强度进行初始刺激，每隔1分钟至2分钟具有10μA增量，直至引起后放电。在确定前药阈值后十五分钟，将单剂量的测试物质以0.04ml/10g体重的体积向2只动物施用。以这种方式，动物充当自身的对照。然后，在药物施用后，在不同的时间(即，0.25h、1h、2h和4h)确定各只大鼠ADT。这种测定的结果示于表2中。
表2
化合物 大鼠
3a 在200mpk活跃
3c 在50mpk活跃
3d ED<sub>50</sub> 79mpk
8a ED<sub>50</sub> 25mpk
10a ED<sub>50</sub> 32mpk
16a 在100mpk活跃
实施例23
耐药性的体外自发性突发模型
系统性红藻氨酸(KA)治疗：KA治疗由以先前所述的改进方案进行多次系统性注射KA组成(Hellier等人，Epilepsy Research,1998.31:73-84)。将Sprague-Dawley大鼠从其饲养笼(home cage)中取出，称重，并且分别放置于普列克斯玻璃桶中用于注射和监测。基于Racine分级在实验期间对痉挛评分(Racine,Electroencephalogr Clin Neurophysiol,1972.32(3):281-94)。每小时施用一次介质(0.9％盐水)或KA(5mg/kg，腹膜内)，直至动物开始表现出与早期痉挛(1级至3级)一致的行为。一旦动物开始痉挛，对动物停止给药或减少至2.5mg/kg(腹膜内)，直至观察到每小时至少一次4级/5级痉挛。记录痉挛的次数和级数，直至动物已经表现出4级或5级痉挛持续3.5小时。分析中不包括每小时不具有至少一次4级或5级痉挛的动物。在监测3.5小时后，对大鼠给予腹膜内注射0.9％盐水(1mL至2mL)用于水化并且返回至其饲养笼中。在用戊巴比妥(35mg/kg)麻醉下，从大鼠中获得组合的内嗅皮质/海马切片。在快速处死后，取出脑部并且在冰冷的充氧(95％O2/5％CO2)林格氏溶液中放置一分钟，所述林格氏溶液含有(以mM计)：蔗糖(125.0)、KCl(3.0)、NaH2PO4(1.2)、MgSO4(2.0)、NaHCO3(26.0)、葡萄糖(10.0)和CaCl2(2.0)(Scharfman,J Neurophysiol,1997.78(2):1082-95)。然后将脑部阻断并且皮质朝下粘合至振动切片机的卡盘上。取出含有内嗅皮质和海马的水平切片(400μm)并且放置在保持室中至少一小时，然后开始记录。保持室中用于记录的充氧林格氏溶液具有替代蔗糖的NaCl(126mM)，pH＝7.4并且摩尔渗透压浓度为300mOsm至310mOsm。
用填充有正常林格氏溶液或3M NaCl的硼硅酸盐玻璃电极(3MΩ至6MΩ)，在内侧内嗅皮质(mEC)的第II层中进行细胞外场电位记录(在31±1℃下)。将以角束(angularbundle)放置的同轴双极刺激电极用于引起场电位响应。将信号在3kHz下过滤，在10kHz下取样，并且使用Digidata 1440A AD转换器(Axon Instruments)获取用于计算机存储。确定刺激输入/输出(I/O)曲线，以建立稳定的基线响应并且确定阈值和最大响应。使用刺激隔离器单元引发1V至20V的电压脉冲。仅接受在整个基线记录期产生稳定的I/O响应的切片。然后将细胞外溶液转换成含有6mM KCl和0.1mM Mg2+的溶液，以便引起自发的、电图突发活性(SB)。
将用研究性物质获得的结果与用“常规”(例如，苯妥英、卡马西平)和“非常规”(例如，瑞替加滨)抗惊厥剂获得的结果相比。测量的因变量包括在存在和不存在AED时的突发的频率和持续时间。发现化合物(100μM)基本上阻断自发性突发，所述化合物在该浓度时被认为是有效的。通过具有被限定为p<0.05的统计显著性的学生t-检验比较结果。
实施例24
耐拉莫三嗪(LTG)的杏仁核点燃的大鼠模型
向两组(LTG和媒介物处理的，n＝8至10只大鼠/组)雄性Sprague-Dawley大鼠(250g至300g)在左侧杏仁核(离耳内为零处，AP+5.7mm,ML+4.5,DV+2.0)在氯胺酮-甲苯噻嗪麻醉下定向性地植入电极。然后使动物恢复一周，之后开始点燃(Postma等人，Epilepsia,2000.41:1514-21)。在点燃刺激前一小时，大鼠接受媒介物(0.5％甲基纤维素(MC))或LTG(5mg/kg在0.5％MC中)的单一腹膜内剂量。点燃程序由每天递送200μAmp刺激物(超阈值)组成，直至两个处理组中的所有动物符合如由Racine评定分级进行评分的4级或5级痉挛。在所有动物都被点燃后一周，动物在受到刺激之前接受激发剂量的LTG(15mg/kg，腹膜内)，以确认媒介物处理的对照动物的LTG敏感性以及LTG处理组的LTG抗性。然后使动物进行3天的清洗。在清洗的第3天，预刺激动物以确保恢复完全点燃的痉挛。在第4天，用单一剂量的研究性AED(产生最小运动障碍的剂量)激发两个处理组中的大鼠。然后用点燃刺激物在研究性AED的预定TPE下激发两个处理组中的大鼠。当观察到药物处理至显著较低的痉挛评分并且后放电降低时，可以进行剂量-响应研究。对于这种研究，通过改变0至100％效果的剂量来定量候选物质降低后放电持续时间(ADD)和痉挛严重性的能力。将结果表示为受保护动物的数目(即，不显示继发全身性边缘痉挛)除以测试动物的数目。通过Mann-Whitney U-检验分析痉挛评分，并且通过学生t-检验分析ADD(±S.E.M.)，并且p<0.05确定为统计显著性。然后通过概率单位分析计算半数有效剂量和95％置信区间。
实施例25
角膜点燃的小鼠中的局灶性痉挛
将成年雄性CF-1小鼠(n＝8只/组，18g至25g)根据先前所述的角膜点燃方案点燃至5次连续性继发全身性痉挛的标准(Racine 4级或5级)(Rowley等人，Epilepsy Res,2010.92(2-3):163-69；Matagne等人，Epilepsy Res,1998.31(1):59-71)。向每只眼每天施用两次0.5％丁卡因盐酸盐溶液，并且通过角膜电极刺激视神经(3mA,60Hz,3秒)。在接受每天两次角膜刺激后，CF-1小鼠通常在约10天至14天达到第一次5级痉挛。继续对各只小鼠每天两次刺激，直至小鼠达到5次连续5级痉挛的标准，由此其被认为“完全点燃”。然后每隔一天至每隔3天刺激完全点燃的小鼠，直至组内的所有其他小鼠达到5次连续性5级痉挛的标准。在接受最后的刺激后至少5天至7天开始测试研究性化合物。对于鉴定研究，向五个组(每组4只完全点燃小鼠)经腹膜内施用100mg/kg的测试化合物。然后在给药后的各个时间点(0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时)测试各个组中的小鼠。显示痉挛评分<3的小鼠被认为受到保护。大多数动物受到保护的时间点被认为是研究性化合物的峰值效应时间(TPE)。还可以在TPE进行定量差异研究。在8只至10只完全点燃小鼠的组中评估足以如上述鉴定研究中先前确定的0％至100％保护的至少3种剂量。在测试后，将角膜点燃的动物返回其饲养笼中，并且使得在测试之间至少隔3天至4天以“清洗”测试后的任何研究性化合物。研究性药物阻断完全点燃的行为性痉挛的能力是对继发全身性部分性痉挛的活性的表现。为了在角膜点燃模型中对保护进行定量，使用概率单位分析计算50％的小鼠受保护时的有效剂量(ED50)、95％置信区间(95％C.I.)以及斜率+S.E.M.。
实施例26
毛果芸香碱大鼠模型
评估化合物中断毛果芸香碱诱导的惊厥性癫痫持续状态(SE)的能力。为了鉴定用于SE测试的药物剂量，在腹膜内(i.p.)施用以100mg/kg和300mg/kg起始的剂量后，评估急性运动损伤。评估单只Sprague Dawley大鼠在施用测试化合物后若干时间点的急性毒性。从这种初始研究中获得的结果确定是否需要任何剂量调整。在四小时内紧密观察和记录动物的行为。通常，将最小数目的四只大鼠(每一剂量两只)用于这种急性筛选中。
为了确定是否测试物质可以中断急性毛果芸香碱诱导的状态，进行初始的定性功效筛选。经腹膜内施用激发剂量的毛果芸香碱(50mg/kg)并且观察动物，直至第一次惊厥(例如，3级、4级或5级)痉挛(时间零点)。使用Racine分级确定痉挛严重性。此时，将最小毒性剂量的候选药物经由腹膜内施用途径施用于8只雄性白化Sprague Dawley大鼠(150g至180g)的组。通过研究性药物中断毛果芸香碱诱导的惊厥性痉挛(例如，3级、4级或5级)的进一步表达的能力来定义功效。发现在时间零点(从第一次3级、4级或5级痉挛的时间)具备显著保护的化合物可以继续进一步评估持续状态模型。在这种测试中，在第一次观察到惊厥性痉挛后30分钟施用研究性药物。这是对候选者中断诱导状态的能力的更严格试验。发现具备显著活性的化合物对于定量可以是高级的，其中确定ED50和TD50以及相应的95％置信区间。将具有至少8只大鼠/剂量的最少4剂量用于定性研究中。
在毛果芸香碱测定(初始的定性功效筛选)中测试表3的化合物，并且在痉挛发作后施用时在所示剂量示出的活性。
表3
化合物 剂量
3a 200mpk
3d 450mpk
8a 65mpk
10a 65mpk
10f 65mpk
实施例27
Frings声源性痉挛(AGS)敏感的小鼠
将雄性和雌性Frings声源性痉挛敏感的小鼠(18g至25g)用于这种研究中。对于各个筛选试验，用各种剂量的研究性化合物经腹膜内处理每组8只小鼠的组。在如MES试验(在CF-1小鼠中)中确定的峰值效应时间时，将各只小鼠置于圆形普列克斯玻璃罐(直径为15cm；高度为18cm)并且暴露于110分贝(11kHz)的声音刺激中持续20秒。观察小鼠25秒是否存在后肢强直性伸展。未表现出后肢强直性伸展的小鼠被认为受到保护。还可以通过对观察到的响应指定数字计分来定量痉挛的严重性，例如，无响应-0；疯狂奔跑<10秒–1；疯狂奔跑>10秒–2；阵挛性痉挛-3；前肢伸展/后肢屈曲-4；强直性痉挛-5。可以通过从不同剂量收集的结果来定量测试物质阻断声源性痉挛的能力，所述剂量具有用于计算ED50的0％至100％的保护。定量在这种模型中提供保护的测试物质的抗惊厥剂活性，并且通过概率单位分析计算ED50和95％置信区间。
实施例28
索曼大鼠模型
在测试前一周用皮质电极通过手术准备大鼠，以记录脑电图(EEG)活动。在测试当天，将动物连接到记录设备并且持续记录EEG。在记录基线后，将动物用肟HI-6(125mg/kg，腹膜内)预处理，以降低神经毒剂攻击的立即致死作用。在HI-6后三十分钟，用180μg/kg(皮下)神经毒剂索曼攻击动物，并且在1min后，对其施用2.0mg/kg硝酸甲基阿托品(i.m.)。在100％的测试动物受到索曼攻击后，这种处理方案在5min至8min内引起持续性痉挛活动。将EEG和神经病理学技术用于评估抗惊厥剂治疗的效果。在痉挛发作后，在逐渐更长的治疗延迟时间(5min、20min或40min)时，对动物施用标准药物对策(0.45mg/kg硫酸阿托品与25mg/kg 2-PAM、2.2mg/kg地西泮混合)连同辅助测试药物。确定抗惊厥剂效果的剂量-效果曲线。
实施例29
骆驼蓬灵诱导的震颤测定
骆驼蓬灵诱导的震颤测定为诱导震颤的主要临床前模型。将雄性ICR小鼠(10周龄)用于本研究中。将小鼠群居饲养在OPTI小鼠通风笼中。在研究持续期间，所有动物保持群居饲养。在测试前使所有小鼠适应聚居室(colony room)至少一周。在适应期间，定期检查小鼠，处理和称重，以确保足够健康和适合。将小鼠维持12/12亮/暗循环。将室温维持在20℃至23℃并且相对湿度维持在30％至70％。在研究期间任意提供食物和水。在各测试中，将动物在处理组之间随机分配。
在各组中测试十只小鼠。通过经口管饲法以10mL/kg的剂量体积施用所有化合物：
在无菌盐水中制备骆驼蓬灵(30mg/kg)并且皮下施用。
将普萘洛尔HCl(10mg/kg)溶于无菌盐水中并且在施用骆驼蓬灵前20分钟经腹膜内施用。
将测试化合物悬浮于0.5％甲基纤维素中并且在施用骆驼蓬灵前20分钟经腹膜内施用。
将群居饲养的小鼠在测试前带至实验室适应至少1h。向小鼠注射骆驼蓬灵(30mg/kg)，然后向小鼠注射无菌媒介物、普萘洛尔或测试化合物，并且放置在分离的保持笼(holding cage)中持续20分钟，并且置于震颤监测(San Diego Instruments,SDI)室中持续10分钟适应期。在习惯后，对小鼠的震颤活动测量约8min。通过电子方式捕获记录的活动频率(1Hz至64Hz)以及震颤事件的数目。
通过震颤监测软件(San Diego Instruments)以两部分过程分析数据。使用快速傅里叶变换(FFT)，提供输出，示出了在各频率下记录的活动(能量)的百分比。选择14Hz至15Hz的活动中心频率以及10Hz的带宽。使用这些参数，将震颤事件制成短的、长的和总的事件的表格。将长的事件定义为持续时间大于0.5秒，并且将短的事件定义为持续时间为0.3秒至0.5秒。
通过方差分析(ANOVA)，然后通过Fisher PLSD事后分析来分析数据。如果p<0.05，则认为效果是显著的。从最终分析中去除统计离群点，所述离群点高于或低于三个测量值中任一种的平均值2个标准偏差。
将表4中所列的化合物在骆驼蓬灵测定中进行测试并且在所述的口服剂量(mpk＝mg/kg)时显示出总震颤的显著降低。
表4
化合物 剂量
8a 50mpk、150mpk
10a 5mpk、15mpk、50mpk、150mpk
11b 15mpk、50mpk
14a 50mpk
15a 50mpk
16a 50mpk、150mpk
将2015年1月30日提交的序列号为62/110,415的美国临时专利申请、2015年11月24日提交的序列号为62/259,314的美国临时专利申请的公开内容整体并入本文。
可以将上文所述的各种实施方案进行组合以提供另外的实施方案。本说明书所提及的和/或申请数据表中所列的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、国外专利、国外专利申请和非专利公开通过引用整体并入本文。如果需要采用各种专利、申请和公开的构思以提供另外的实施方案，可以对实施方案的方面进行修改。
可以根据上文详细描述对实施方案作出这些和其他改变。通常，在权利要求书中，所使用的术语不应被解释为将权利要求局限于本说明书和权利要求书中所公开的具体实施方案，而是应解释为包括所有可能的实施方案连同该权利要求所授权的全部范围的等同物。因此，权利要求不局限于本公开内容。

Claims (34)

1.化合物，具有以下结构(A)：
Figure FDA0002544003840000011
或其立体异构体或药物可接受的盐，
其中：
(i):
R1为H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；
R2为C1-4烷基、-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH2、或-C(＝O)R6，其中所述C1-6亚烷基被选自苯基、-OH、和-OC1-4烷基的基团任选取代；
R3每次出现时为Cl、F、或三氟甲基；
R6为C2-4烷基、吗啉基或吡啶基-C2-4烷基-；以及
n为0至2；或者
(ii):
R1和R2与和它们所连接的N一起形成5元至6元非芳香族杂环，其中所述5元至6元非芳香族杂环被0至3个R4取代；
R3每次出现时为Cl、F、或三氟甲基；
R4每次出现时为C1-4烷基；以及
n为1或2；
其中R2和R4的每个C1-4烷基任选地被OH取代。
2.如权利要求1所述的化合物，其中n为1。
3.如权利要求1所述的化合物，其中n为2。
4.如权利要求1所述的化合物，其中R1为H。
5.如权利要求1所述的化合物，其中R1为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。
6.如权利要求1所述的化合物，其中R2为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、或-C(＝O)R6。
7.如权利要求1所述的化合物，其中R2为-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH2，其中所述C1-6亚烷基被选自苯基、-OH和-OC1-4烷基的基团任选取代。
8.如权利要求1所述的化合物，其中R1和R2均为C1-4烷基。
9.如权利要求1所述的化合物，其中R3为三氟甲基。
10.如权利要求1所述的化合物，其中n为1或2，并且R3为F。
11.如权利要求1所述的化合物，其中：
R1为H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；以及
R2为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、-C(＝O)-C1-6亚烷基-NH2、或-C(＝O)R6，其中所述C1-6亚烷基被选自苯基、-OH、和-OC1-4烷基的基团任选取代。
12.如权利要求1所述的化合物，其中R6为吗啉基。
13.如权利要求1所述的化合物，其中R6为吡啶基-C2-4烷基-。
14.如权利要求1所述的化合物，其中R1和R2一起形成5元至6元非芳香族杂环，并且所述化合物具有以下结构(B)：
Figure FDA0002544003840000031
15.如权利要求14所述的化合物，其中n为1。
16.如权利要求15所述的化合物，其中R3为F。
17.如权利要求14所述的化合物，其中n为2。
18.如权利要求17所述的化合物，其中R3每次出现时为F。
19.如权利要求14所述的化合物，其中R3为三氟甲基或Cl。
20.如权利要求14所述的化合物，其中由R1和R2一起形成的所述杂环为哌啶。
21.如权利要求14所述的化合物，其中由R1和R2一起形成的所述杂环为吗啉。
22.如权利要求14所述的化合物，其中由R1和R2一起形成的所述杂环为哌嗪、咪唑烷酮、吡咯烷酮或吡咯烷。
23.如权利要求14所述的化合物，其中R4为甲基或乙基。
24.化合物，其为：
(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺；
(3S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺；
(3R)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-甲氧基丙酰胺；
(2R)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-羟基丙酰胺；
N-[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-3-吡啶-3-基-丙酰胺；
3-(3-氯苯基)-N-{1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}丙酰胺；
(2S)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-2-(2-氧代吡咯烷-1-基)丁酰胺；
[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺；
[1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺；
4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-4-(吡咯烷-1-基)-1H-1,2,3-三唑；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺；
1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N-乙基-1H-1,2,3-三唑-4-胺；
2-({1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}氨基)乙-1-醇；
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吡咯烷-2-酮；或者
3-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-1,3-噁唑烷-2-酮；或者
1-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}咪唑烷-2-酮；
或其药物可接受的盐。
25.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物为(2S)-2-氨基-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}-3-苯基丙酰胺。
26.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物为(3R)-N-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉-3-甲酰胺。
27.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物为[1-(2,6-二氟-苄基)-1H-[1,2,3]三唑-4-基]-二甲基-胺。
28.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物为4-{1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}吗啉。
29.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物为1-[(2,6-二氟苯基)甲基]-4-(吡咯烷-1-基)-1H-1,2,3-三唑。
30.药物组合物，包含权利要求1至29中任一项所述的化合物或其药物可接受的盐以及药物可接受的载体或稀释剂。
31.权利要求1至29中任一项所述的化合物或其药物可接受的盐在制备用于治疗有需要的对象的神经病况的药物中的用途。
32.权利要求30所述的药物组合物在制备用于治疗有需要的对象的神经病况的药物中的用途。
33.如权利要求31或32所述的用途，其中所述病况为特发性震颤、癫痫、癫痫持续状态或神经毒剂暴露。
34.如权利要求33所述的用途，其中所述病况为特发性震颤。
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