CN106166164B - 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 - Google Patents
一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106166164B CN106166164B CN201610621671.9A CN201610621671A CN106166164B CN 106166164 B CN106166164 B CN 106166164B CN 201610621671 A CN201610621671 A CN 201610621671A CN 106166164 B CN106166164 B CN 106166164B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- reflux
- ginkgo
- collecting
- precipitate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000009429 Ginkgo biloba extract Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 70
- 241000218628 Ginkgo Species 0.000 claims abstract description 64
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 claims abstract description 64
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 claims abstract description 64
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 51
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 51
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 27
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 22
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000005484 gravity Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims abstract description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000006260 foam Substances 0.000 claims description 16
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 14
- YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N (Z)-6-[8-pentadecenyl]salicylic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N Ginkgoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N 0.000 claims description 12
- SVINQHQHARVZFF-UHFFFAOYSA-N Ginkgotoxin Chemical compound COCC1=C(CO)C=NC(C)=C1O SVINQHQHARVZFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- SQGLUEWZRKIEGS-UHFFFAOYSA-N Ginkgetin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(O)C=C(OC)C(C=3C(=CC=C(C=3)C=3OC4=CC(O)=CC(O)=C4C(=O)C=3)O)=C2O1 SQGLUEWZRKIEGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229930045534 Me ester-Cyclohexaneundecanoic acid Natural products 0.000 claims description 11
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims description 11
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims description 11
- AIFCFBUSLAEIBR-UHFFFAOYSA-N ginkgetin Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C(C=1)=CC=C(OC)C=1C1=C(O)C=C(O)C(C(C=2)=O)=C1OC=2C1=CC=C(O)C=C1 AIFCFBUSLAEIBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims description 9
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 claims description 9
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UFJORDZSBNSRQT-UHFFFAOYSA-N 3-(4-oxo-2-phenylchromen-3-yl)-2-phenylchromen-4-one Chemical compound O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(C=2C(C3=CC=CC=C3OC=2C=2C=CC=CC=2)=O)=C1C1=CC=CC=C1 UFJORDZSBNSRQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 8
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 8
- 229940068052 ginkgo biloba extract Drugs 0.000 claims description 7
- 235000020686 ginkgo biloba extract Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 229930184727 ginkgolide Natural products 0.000 claims description 5
- -1 diterpene lactone Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 238000009775 high-speed stirring Methods 0.000 claims description 2
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 claims 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 abstract description 3
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- MOLPUWBMSBJXER-YDGSQGCISA-N bilobalide Chemical compound O([C@H]1OC2=O)C(=O)[C@H](O)[C@@]11[C@@](C(C)(C)C)(O)C[C@H]3[C@@]21CC(=O)O3 MOLPUWBMSBJXER-YDGSQGCISA-N 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- SQFSKOYWJBQGKQ-UHFFFAOYSA-N kaempferide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 SQFSKOYWJBQGKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 4
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 4
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- GQODBWLKUWYOFX-UHFFFAOYSA-N Isorhamnetin Natural products C1=C(O)C(C)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 GQODBWLKUWYOFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 2
- IZQSVPBOUDKVDZ-UHFFFAOYSA-N isorhamnetin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 IZQSVPBOUDKVDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008800 isorhamnetin Nutrition 0.000 description 2
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 2
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000003443 Unconsciousness Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000003925 brain function Effects 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000003848 thrombocyte activating factor antagonist Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高纯度银杏叶标准提取物的制备方法，该制备方法包括如下步骤：称取原料，粉碎过筛，投入提取回流罐中；回流提取；回收酒精，真空浓缩至得到比重为1.0‑1.5的浸膏；将浸膏用纯水充分搅拌，高速离心除去沉淀，得到上清液；将上清液过大孔树脂，梯度洗脱，收集40‑60％酒精洗脱液，然后酸化，得到酸化液；将酸化液在0‑5℃温度下沉淀过夜，收集沉淀；对沉淀物用纯水充分洗涤，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物。本发明所采用设备简单，工艺简单可行，便于工业化生产；所用溶剂无毒无残留，不产生环境污染；本发明银杏叶提取物有害物除去率高，所生产标准提取物符合美国FDA要求。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，更具体涉及一种高纯度银杏叶标准提取物的制备方法及其制品。
背景技术
银杏标准提取物是广泛应用于心脑血管疾病用药，是最广泛的中药品种之一，随着对银杏提取物的深入研究，越来越发现银杏提取物中活性成分及其他一些成分对人体的副作用，银杏酚酸使人体皮肤发生过敏性皮炎，4-O-甲基吡哆醇导致抽搐和无意识作用。银杏提取物主要含有得生物活性黄酮有30多种，其中20余种的结构已经分析清楚，各种研究表明，银杏黄酮具有抑制血小板聚结，调节血脂、扩张血管、改善脑循环、提高大脑功能、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等广泛的生物活性；银杏内酯是二萜类化合物，主要有银杏内酯A,B,C,J,M及白果内酯这几种，银杏内酯是公认的血小板活化因子受体拮抗剂，对大脑神经传递、修复保护大脑组织方面作用巨大，对心脑血管拥有良好的开发前景。我国银杏是世界银杏主产地，占全世界70％的产量，但是银杏提取物在我国却大部分只有初级提取物，含量低，内酯含量达不到要求，而且其中的有毒有害成分无法分离，结果只能给国外提供初级产品，价值很低。银杏提取物提取工艺研究概况：银杏提取物生产厂家很多，大部分都是水提或者低浓度酒精提取，然后过大孔树脂D101，然后喷雾干燥所得。其他还处于实验室研究阶段，没有走入生产应用，譬如分子膜过滤法，反向液态色谱法、超临界CO2萃取等等，这样的报道很多。现在急需研发一种提高银杏黄酮含量的新方法。
发明内容
(一)要解决的技术问题
本发明要解决的技术问题就是如何提高银杏黄酮的含量，有效去除有害成分，而提供一种高纯度银杏叶标准提取物的制备方法及其制品。
(二)技术方案
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种高纯度银杏叶标准提取物的制备方法，该制备方法包括如下步骤(所用原料均市购得到)：
步骤一：准备：称取原料，粉碎过18-22目筛，晒干，然后将其投入提取回流罐中；
步骤二：回流提取：加入银杏叶重量8-12倍的60-75％酒精，回流温度控制在65-70℃，回流时间为2.5-3.5小时；
步骤三：二次回流提取：加入银杏叶重量4-6倍的60-75％酒精，温度控制在65-70℃，回流时间为1.5-2.5小时；
步骤四：浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至得到比重为1.0-1.5的浸膏；
步骤五：除泡：将浸膏用8-12倍重量的纯水充分搅拌，用KOH碱化至pH 8.0-10，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，并至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得到上清液；
步骤六：大孔树脂过滤：将上清液过大孔树脂，梯度洗脱，收集 40-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精，用8-12倍纯水充分搅拌，然后用盐酸酸化至PH3.5-4.5，得到酸化液；
步骤七：将步骤六得到的酸化液在0-5℃温度下沉淀过夜，收集沉淀；
步骤八：真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃温度下充分洗涤，pH 值为6.5-7.0，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物，银杏黄酮含量31％，银杏内酯11％，银杏酚酸低于1PPM、4-O-甲基吡哆醇低于 1PPM，双黄酮含量低于1PPM；收得率为2.3％。
优选地，在步骤一中，所述的筛为20目。
优选地，在步骤二和步骤三中，所述的回流温度为65℃。
优选地，在步骤四中，所述的回收酒精回收至酒精含量15％以下。
优选地，在步骤四中，所述的真空度为-0.08--0.09MPa；所述的比重为1.15-1.2。
优选地，在步骤六中，所采用的大孔树脂为D201大孔树脂。
优选地，所述制备方法包括如下步骤：
步骤一：准备：称取原料，粉碎过20目筛，晒干，然后将其投入提取回流罐中；
步骤二：回流提取：加入银杏叶重量10倍的65％酒精，回流温度控制在65℃，回流时间为3小时；
步骤三：二次回流提取：加入银杏叶重量5倍的65％酒精，温度控制在65℃，回流时间为2小时；
步骤四：浓缩：合并两次回流液体，回收酒精回收至酒精含量15％以下，真空浓缩至得到比重为1.15-1.2的浸膏；
步骤五：除泡：将浸膏用10倍重量的纯水充分搅拌，用KOH碱化至pH 9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，并至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得到上清液；
步骤六：大孔树脂过滤：将上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集40-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精，然后用10倍纯水充分搅拌，然后用盐酸酸化至PH4.0，得到酸化液；
步骤七：将步骤六得到的酸化液在0-5℃温度下沉淀过夜，收集沉淀；
步骤八：真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃温度下充分洗涤，pH 值为7.0，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物，银杏黄酮含量 31％，银杏内酯11％，银杏酚酸低于1PPM、4-O-甲基吡哆醇低于1PPM，双黄酮含量低于1PPM；收得率为2.3％。
本发明还提供了所述的高纯度银杏叶标准提取物的制备方法所制得的银杏叶标准提取物。
(三)有益效果
本发明所采用设备简单，工艺简单可行，便于工业化生产；所用溶剂无毒无残留，不产生环境污染；本发明银杏有害物除去率高，所生产标准提取物符合美国FDA要求。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。
下面所使用的溶剂、KOH、HCL均为食用级或者分析纯，不得使用工业级。
实施例1
1，取银杏叶(干)500KG，(HPLC检测含有银杏黄酮0.72％，萜二内酯0.29％)，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；
2，第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3，第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2 小时；
4，浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏173公斤。
5，除泡：173公斤浸膏加1730公斤纯水，KOH碱化至PH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1860公斤。
6，大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集 40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至PH4.0；
7，酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀39公斤；
8，洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，PH到 6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物，经HPLC 分析得银杏黄酮含量30.69％，银杏内酯11.72％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇，双黄酮含量均低于1PPM，收得银杏标准提取物11.36公斤。
实施例2
1，取银杏叶(干)500KG，(HPLC检测含有银杏黄酮0.76％，萜二内酯0.31％)，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；
2，第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3，第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2 小时；
4，浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏179公斤。
5，除泡：179公斤浸膏加1790公斤纯水，KOH碱化至PH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1910公斤。
6，大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集 40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至PH4.0；
7，酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀46公斤；
8，洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，PH到 6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物，经HPLC 分析得银杏黄酮含量30.27％，银杏内酯10.97％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇，双黄酮含量均低于1PPM，收得银杏标准提取物12.77公斤。
实施例3
1，取银杏叶(干)500KG，(HPLC检测含有银杏黄酮0.69％，萜二内酯0.25％)，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；
2，第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3，第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2 小时；
4，浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏165公斤。
5，除泡：165公斤浸膏加1650公斤纯水，KOH碱化至PH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1790公斤。
6，大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集 40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至PH4.0；
7，酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀33公斤；
8，洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，PH到 6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到标准银杏叶提取物，经HPLC 分析得银杏黄酮含量30.19％，银杏内酯11.05％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇，双黄酮含量均低于1PPM，收得银杏标准提取物10.15公斤。
对比例1
采用山东农业大学的银杏提取纯化工艺，乙醇浸提-树脂吸附法，工艺为：
银杏叶用70％酒精12倍叶子重量，55-60℃浸提3小时，浸提2 次，合并滤液，浓缩至比重1.2，10倍水加入浸膏稀释充分搅拌，高速离心沉淀，去上清液，过D101大孔树脂柱，水洗涤树脂至无色，再用70％酒精洗脱，得洗脱液，对洗脱液浓缩，喷雾干燥得银杏叶提取物。
具体用500公斤银杏叶(分析黄酮含量0.81％，内酯0.32％)以上工艺提取得银杏叶提取物16.7公斤.
实验例1
银杏总黄酮HPLC测定(食品科技2006，03王婧等北京营养元食品研究所)
1，检测方法：
1)材料与仪器
磷酸、盐酸、甲醇、标准品(山柰素、槲皮素、异鼠李素)、纯净水
WATER 2487型高压液相色谱、超声波震荡器、DHT磁力搅拌器
2)方法
色谱条件：色谱柱钻石C18(250*4.6 5微米)柱温40℃，检测波长370nm
流动相：甲醇：0.4％磷酸＝60：40(体积比)，流速1.0ML/MIN，进样量20UL
3)定量方法：外标法
4)计算：
总黄酮＝2.51槲皮素量+2.63山奈素量+2.39异鼠李素量
实验例2
银杏内酯检测
RP-HPLC测定银杏内酯含量的方法(崔大明，长春中医药科大学，吉林农业大学学报2013、35(4))
实验例3
4-O-甲基吡哆醇测定
GC-MS检测4-O-甲基吡哆醇
实验例4
银杏酚酸测定
RP-HPLC测定银杏酚酸含量的方法(严宏凤，江苏淮阴工学院学报2008 10)
表：检测结果
| 样品 | 银杏黄酮 | 银杏内酯 | 4-O-甲基吡哆醇 | 银杏酚酸 |
| 实施例1 | 30.69％ | 11.72％ | 小于1PPM | 小于1PPM |
| 实施例2 | 30.27％ | 10.97％ | 小于1PPM | 小于1PPM |
| 实施例3 | 30.19％ | 11.05％ | 小于1PPM | 小于1PPM |
| 对比例 | 24.9％ | 6.82％ | 15毫克/公斤 | 27毫克/公斤 |
表中结果表明：对比传统提取工艺，本发明在除去银杏提取物中有害物质有明显改进效果具有良好的推广应用意义。
以上实施方式仅用于说明本发明，而非对本发明的限制。尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，对本发明的技术方案进行各种组合、修改或者等同替换，都不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (4)
1.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
1)取干银杏叶500Kg，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；所述干银杏叶经HPLC检测含有银杏黄酮0.72％，二萜内酯0.29％；
2)第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3)第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2小时；
4)浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏173公斤；
5)除泡：173公斤浸膏加1730公斤纯水，KOH碱化至pH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1860公斤；
6)大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至pH4.0；
7)酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀39公斤；
8)洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，pH到6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到银杏叶提取物，经HPLC分析得银杏黄酮含量30.69％，银杏内酯11.72％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇、双黄酮含量均低于1ppm，收得银杏叶提取物11.36公斤。
2.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
1)取干银杏叶500Kg，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；所述干银杏叶经HPLC检测含有银杏黄酮0.76％，二萜内酯0.31％；
2)第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3)第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2小时；
4)浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏179公斤；
5)除泡：179公斤浸膏加1790公斤纯水，KOH碱化至pH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1910公斤；
6)大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至pH4.0；
7)酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀46公斤；
8)洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，pH到6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到银杏叶提取物，经HPLC分析得银杏黄酮含量30.27％，银杏内酯10.97％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇、双黄酮含量均低于1ppm，收得银杏叶提取物12.77公斤。
3.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
1)取干银杏叶500Kg，粉碎过20目筛，投入回流提取罐；所述干银杏叶经HPLC检测含有银杏黄酮0.69％，二萜内酯0.25％；
2)第一次回流提取：65％酒精5000公斤，温度控制在65℃回流时间3小时；
3)第二次回流：65％酒精2500公斤，温度控制在65℃，回流2小时；
4)浓缩：合并两次回流液体，回收酒精，真空浓缩至比重1.2的浸膏165公斤；
5)除泡：165公斤浸膏加1650公斤纯水，KOH碱化至PH9.0，加入0.2％吐温80，高速搅拌自动除去泡沫，至不产生泡沫，然后高速离心除去沉淀，得上清液1790公斤；
6)大孔树脂过滤：上清液过D201大孔树脂，梯度洗脱，收集40％-60％酒精洗脱液，5个BV洗脱液，回收酒精后用10倍水充分搅拌，然后盐酸酸化至pH4.0；
7)酸化液在0-5℃下沉淀过夜，收集沉淀33公斤；
8)洗涤真空干燥：对沉淀物用纯水在0-5℃下充分洗涤，pH到6.5-7.0即可，然后真空条件下干燥得到银杏叶提取物，经HPLC分析得银杏黄酮含量30.19％，银杏内酯11.05％，银杏酚酸、4-O-甲基吡哆醇、双黄酮含量均低于1ppm，收得银杏叶提取物10.15公斤。
4.权利要求1-3任一项所述的银杏叶提取物的制备方法所制得的银杏叶提取物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610621671.9A CN106166164B (zh) | 2016-07-29 | 2016-07-29 | 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610621671.9A CN106166164B (zh) | 2016-07-29 | 2016-07-29 | 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106166164A CN106166164A (zh) | 2016-11-30 |
| CN106166164B true CN106166164B (zh) | 2020-01-10 |
Family
ID=58065708
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610621671.9A Active CN106166164B (zh) | 2016-07-29 | 2016-07-29 | 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106166164B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106727746B (zh) * | 2017-04-07 | 2018-01-02 | 浙江新昌天然保健品有限公司 | 低酸水溶性银杏叶提取物的制备方法 |
| CN109718141A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-05-07 | 上海琴馨文化传播有限公司 | 一种含有银杏叶提取物的面膜 |
| CN111004335A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-04-14 | 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 | 一种从白芨根茎中提取得到的白芨低聚糖及其制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1481793A (zh) * | 2003-07-31 | 2004-03-17 | 郭东宇 | 一种银杏叶提取物及含有它的注射液 |
| CN101708195A (zh) * | 2009-12-03 | 2010-05-19 | 应维强 | 银杏提取物的生产工艺 |
| CN105267257A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-01-27 | 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 | 一种银杏叶提取物的制备方法 |
-
2016
- 2016-07-29 CN CN201610621671.9A patent/CN106166164B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1481793A (zh) * | 2003-07-31 | 2004-03-17 | 郭东宇 | 一种银杏叶提取物及含有它的注射液 |
| CN101708195A (zh) * | 2009-12-03 | 2010-05-19 | 应维强 | 银杏提取物的生产工艺 |
| CN105267257A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-01-27 | 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 | 一种银杏叶提取物的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 碱溶酸沉法提取银杏叶总黄酮;刘金香，等;《安徽农业科学》;20081231;第36卷(第26期);第11386-11388页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106166164A (zh) | 2016-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101391060B (zh) | 竹叶黄酮提取物的制备方法 | |
| Dong et al. | Efficient removal of ginkgolic acids from Ginkgo biloba leaves crude extract by using hydrophobic deep eutectic solvents | |
| CN105998109B (zh) | 一种芒果核多酚提取物及其制备方法 | |
| CN112791126B (zh) | 牡丹花蕊提取物及其制备方法与应用 | |
| CN101508711B (zh) | 从含羞草中分离纯化黄酮苷单体的方法 | |
| CN106166164B (zh) | 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 | |
| CN106109515A (zh) | 一种盐地碱蓬总黄酮的提取方法 | |
| JP2015202065A (ja) | 発酵処理物並びにノビレチン及びタンゲレチン高含有率物の製造方法 | |
| CN105061529A (zh) | 桑葚花色苷的提取工艺 | |
| CN105218695B (zh) | 一种黑果枸杞多糖提取物及其制备方法 | |
| CN102070411A (zh) | 一种精制和厚朴酚的方法 | |
| CN105153253A (zh) | 紫甘薯花色苷的提取工艺 | |
| CN103833718A (zh) | 原花青素衍生物的制备方法和应用 | |
| CN105175463A (zh) | 蓝莓花色苷的提取工艺 | |
| CN1173724C (zh) | 银杏叶提取物的系统分离方法及其制剂 | |
| CN114921110B (zh) | 一种乳化低共熔溶剂及其在提取枸杞色素中的方法 | |
| CN107163059B (zh) | 一种芒果核鞣花酸的制备方法 | |
| CN104262448B (zh) | 一种从甘草中提取甘草酸的方法 | |
| CN112043733A (zh) | 一种水溶性银杏叶提取物的生产方法 | |
| CN109793233B (zh) | 一种银杏果胚乳的深加工方法 | |
| CN113214233A (zh) | 一种从芒果核中提取纯化芒果苷的方法 | |
| DING | Studies on extraction and isolation of flavonoids from ginkgo leaves | |
| CN109939131B (zh) | 一种高纯度银杏总黄酮醇苷制备方法及其应用 | |
| CN114028437A (zh) | 一种水溶性银杏叶提取物节能环保式生产工艺 | |
| CN105925005A (zh) | 一种高纯度花色苷色素粉末的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: The invention relates to a preparation method of Ginkgo biloba extract and a product thereof Effective date of registration: 20210219 Granted publication date: 20200110 Pledgee: Hunan Jinxin Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: HUNAN NUTRAMAX Inc. Registration number: Y2021980001198 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20220228 Granted publication date: 20200110 Pledgee: Hunan Jinxin Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: HUNAN NUTRAMAX Inc. Registration number: Y2021980001198 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: The invention relates to a preparation method of Ginkgo biloba extract and a product thereof Effective date of registration: 20220307 Granted publication date: 20200110 Pledgee: Hunan Jinxin Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: HUNAN NUTRAMAX Inc. Registration number: Y2022980002217 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20231106 Granted publication date: 20200110 Pledgee: Hunan Jinxin Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: HUNAN NUTRAMAX Inc. Registration number: Y2022980002217 |